FR 2485527 A1 19811231 FR 8112293 A 19810623 La présente invention concerne des analogues de l'ocyto- cine et un procédé de leur préparation. Plus particulièrement l'invention concerne un procédé pour préparer des désamino carba-6 ocytocines ayant un amino- acide modifié en position 2 et les analogues de l'ocytocine ainsi produits. On sait que certaines des nombreuses activités de l'hor- mone neurohypophysaire qu'est l'ocytocine peuvent être augmen- tées ou réduites par modification chimique de la molécule et que l'obtention d'effets biologiques est une condition néces- saire à une application clinique couronnée de succès. Ainsi par exemple des études ont révélé que le remplacement d'un radical tyrosine en position 2 d'une molécule de désamino carba-6 ocytocine par un radical phénylalanine ou phénylala- nine substitué en position para forme des composés ayant un effet natriurétique élevé et spécifique que l'on peut utili- ser de façon appropriée pour le traitement de l'insuffisance rénale et cardiaque ou dans certains cas d'hypertension. Les spécialistes de ce domaine (Fraser, A.M. J. Pharmacol. Ex. Therapy 60, 89 (1937)) ont depuis longtemps établi que 1' ocytocine avait un effet natriurétique. Malheureusement cet effet est très faible et généralement associé à une activité antidiurétique importante. La désamino carba-6 ocytocine a un effet natriurétique nettement-supérieur mais cependant com- biné à d'autres activités biologiques importantes telles qu' une activité ocytocique, galactagogue et vasomotrice, qui em- pêchent l'emploi de l'effet natriurétique du composé dans les applications cliniques. L'importance absolue de l'effet natri- urétique et la spécificité de l'effet du rapport des activités différentes ne rendent pas ces composés intéressants. De plus on ne peut pas exclure a priori que chez des ani- maux différents (y compris l'homme) la valeur ainsi que la spécificité de l'effet natriurétique puisse être différentes. L'invention supprime de façon efficace ces limitations de l'art antérieur grâce à de nouveaux analogues de l'ocyto- cine répondant à la formule générale CHi- S CH CHH2 CH 2-CO-X-Ile-Gln-AsnNH-CH-CO-Pro-Leu-Gly-NH2 (I) o les amino-acides appartiennent à la série L et X représente l'amino-acide phénylalanine ou une phénylalanine substituée en position para par un radical alkyle, éthoxy, amino ou amino substitué ou nitro. On peut de façon pratique préparer les nouveaux analogues d'ocytocine (I) décrits, par cyclisation entre un radical amino de l'amino-acide X-et le radical carboxy du reste S-carboxyéthylhomocystéine d'un peptide linéaire de formule générale (II): CH2- S - CH2 (II) CH2CO-Act X-Ile-Gln-Asn-NH-CH-CO-Pro-Leu-Gly-NH2 o X représente l'amino-acide phénylalanine ou une phénylala- nine substituée en position para par un radical alkyle, éthoxy, amino ou amino substitué ou nitro et Act représente un activa- teur du groupe carboxylique tel qu'un groupe ester actif. On peut de façon pratique préparer l'analogue de l'ocy- tocine répondant à la formule générale (III) suivante: CH2 S CH2 CH2 (III) CH2-CO-NH-CH-CO-Ile-Gln-Asn-NH-CH -CO-Pro-Leu-Gly-NH2 CH2 NH2 soit (a) par réduction de la/p-nitrophényl-2 alanine] désamino carba6 ocytocine par le sodium dans l'ammoniac liquidé soit (b) à partir de la Zp-benzyloxycarbonylaminophényl-2 alanine7 désamino carba-6 ocytocine par clivage du groupe protecteur par l'acide bromhydrique dans l'acide acétique. Certaines activités biologiques des analogues d'ocytocine de formule générale (I) figurent dans le tableau I relative- ment à l'ocytocine. TABLEAU I page suivante TABLEAU I Composé I Activités biologiques (chez le rat) X Urétonique Galacta- vaso- natri- gogue motrice urétique (a) (a) (a) (b) Ocytocine 450 450 3,0 100 NH-CH(CH2-C6H5)-CO 70 170 0,9 143 NH-CH(CH2-C6H4-CH3)CO 45 35 1 326 NH-CH(CH2-C6H4-C2H5)-CO 27 1,4 NH-CH(CH2-C6H4-OC2H5)-CO NH-CH(CH2-C6H4-NH2)-CO 15 7 NH-CH(CH2-C6H4-N(CH3)2)-CO 40,14 4,-5 0,2 75 NH-CH(CH2-C6H4-NH-CO2CH2. C6H5)-CO 0,07 0,2 10 NH-CH(CH2-C6H4-N02)-CO 40,001 1,4 40,2 66 (a) Unités internationales par mg; (b) pourcentage d'activité par rapport à l'ocytocine Le procédé de préparation des analogues de l'ocytocine est de plus illustré par les exemples non limitatifs suivants; EXEMPLE 1 Cet exemple décrit la préparation de la [p-nitrophényl-2 alanine] désamino carba-6 ocytocine. Avant de commencer la préparation on prépare de la façon suivante un octapeptide de formule (II): On ajoute 0,29 g de trichloro-2,4,5 phénol et 0,33 g de dicyclohexylcarbodiimide a une solution d'o-nitrobenzène- -sulfényl p-nitrophénylalanine (0,53 g) dans un mélange de 15 ml de dichlorométhane et 15 ml de diméthylformamide refroidi à -10 C. On agite le mélange obtenu pendant une heure à -10 C puis pendant 12 heures à la température ordinaire. Ensuite on concentre le mélange sous vide pour obtenir des cristaux qu'on filtre en s'aidant du vide. On lave ensuite le gâteau de filtre ainsi produit avec du dichlorométhane et on évapore le filtrat àsec (avec un bain à 20 C). On triture ensuite plu- sieurs fois l'huile jaune obtenue avec de l'éther de pétrole et on dissout dans 12 ml de diméthylformamide. On met ensuite l'amide de l'isoleucyl-glutaminyl-asparaginyl-S-(carboxy-2 éthyl)homocystéinyl-prolyl-leucyl-glycine (0,8 g) en suspen- sion dans cette solution et après avoir agité la solution pendant 135 heures à la température ambiante, on évapore à sec (avec un bain à 35 C). Le produit huileux obtenu cristal- lise lorsqu'on le triture avec de l'éther de pétrole et on le lave ensuite sur une plaque de verre fritté successivement avec de l'eau, de l'acide sulfurique 0,05 M, de l'eau et de l'éther pour obtenir 720 mg d'un octapeptide fondant à 215- 219 C et ayant les caractéristiques qui figurent dans le ta- bleau II ci-après TABLEAU II page 5 On ajoute ensuite 0,7 g de sulfite de bis(p-nitrophényle) à une solution de 200 mg de l'octapeptide ainsi obtenu dans 7 ml de diméthylformamide et 7 ml de pyridine o on a fait barboter de l'azote. Apres 9 heures d'agitation à la tempéra- ture ordinaire, on rajoute 0,7 g de sulfite et après avoir agité pendant encore 12 heures, on rajoute 0,35 g de sulfite, Après 4 heures, on concentre le mélange réactionnel sous vide et on précipite le produit par l'éther, on filtre en s'aidant du vide et-on lave à fond à l'éther. On sèche ensuite le pro- duit, on dissout dans 7 ml de diméthylformamide et on ajoute de l'acide chlorhydrique 2,26 M dans 0,52 ml d'éther. On lais- se reposer pendant 7 minutes le mélange ainsi obtenu et on le dilue avec 100 ml d'éther. On filtre en s'aidant du vide le chlorhydrate du composé de formule (II) qui précipite, on le lave à l'éther et on le sèche sous vide. On effectue la cyclisation pour former une liaison pep- tidique de la façon suivante: on dissout le chlorhydrate pré- paré comme précédemment décrit dans 7 ml de diméthylformamide et on ajoute à la solution à un débit de 2 ml/h un mélange énergiquement agité de 200 ml de pyridine et 50 p1 de N-éthyl- -pipéridine o on a fait barboter de l'azote et qu'on a chauf- fé à 50 C. Lorsque l'addition est achevée, on chauffe le mé- lange à 50 C pendant 4 heures et on laisse reposer a la tem- pérature ambiante pendant 12 heures. On concentre ensuite la solution sous un faible volume (avec un bain à 30 C) et on précipite le produit par l'éther. On obtient 170 mg d'une ma- tière microcristalline. On dissout ensuite 100 mg du produit TABLEAU II Certaines des caractéristiques d'octapeptides de formule générale: CH2CH25CH2CH2COOH Nps-X-Ile-Gln-Asn-NH-CH-Co-Pro-Leu-Gl1-N H2 - EHis RF Formule moléculaire Analyse théorique *5.7 (poids trouvée Asp Gl u Pro G1/ S1lzS S2 moléculaire) %C H N Io LuCOO) 2.4 63 S4 Phc(N02) 0,14 0>37 0107 C50H71N13016S2. 51y15 6109 15,51 ilt05 1t04 1l05 1107 0,57 0y49 0162 (1174) 51].0 6y29 15121 0t91 1107 0195 0102 Phe(OEt) 0,14 0?36 0107 C52l 76N12015S2. 52>03 6t63 14 00 l107 1102 1107 1103 0,56 0148 0>62 1.5 l20 (1200) 51y97 6,55 12598 Or92 1107 0Oi6 0185 Pho 0,10 0940 0)17 C50H72N12014S2. 50,72 6164 14119 1,05 1,01 1,01 1 04 0,66 019 0965 3 H20 (1183) 50 169 6,38 14131 0,93.1 02 0,95 0199 Phe(NHZ) 0,11 047 07 19 C58H79N13016S2. 53,00 6>36 13 85 11 07 1r06 0198 1.08 0157 0,69 2 FH20 (1315) 53103 6145 14 09 0193 1]10 0186 0189 Phe(Me) 0,11 0,35 0,07 C51H74N12014S2. 52,74 6,60 14,47 1/04 1.10 0,87 1o06 0168 0>49 066 lH20 (11.61) 52175 6167 14.66 0 91 1105 1103 0195 CP6807> ?- 1 1 y yI f Phe(Et) 009 0?48 OtlO C52H76N12014S2. 52134 6,76 14108 100 1,02 099 101 0161 0,41 0,69 2 H20 (1193) 52148 6150 13t81 0190 1101 1tOO 0,84 Phe(lNMe2) 0,21 0,11 0i06 C52H77N1301462 51,69 6,75 15,07 1,08 1101 1110]106 01 96 01 10 01 66 2 14H20 (1208) 5181 6 156 14198 1,00 1 07 0 174 0 184 a La somme Tyr + Phe(OEt) est indiquée pour les composés contenant Phe(OEt) on a déterminé Phe(NH2) pour le composé contenant Phe(NHZ) Z = C6H5CH20C00- Ln co Ln Ln 1r - dans 4 ml d'acide acétique 3 M et on applique à une colonne garnie de gel de polyacrylamide fBio-gel-P-4 (100 x 1 cm)]. On lyophilise les fractions correspondantes pour obtenir 70 mg d'un composé que l'on dissout dans 3 ml d'acide acétique 3 M et qu'on applique à une colonne garnie comme précédemment décrit. On lyophilise les fractions correspondantes pour ob- tenir 42 mg d'un composé. On dissout 15 mg de ce produit dans 2 ml d'un mélange 2/3 de méthanol et d'eau et on applique la solution à une colonne garnie d'un gel de silice modifié (Separon SI-C 18, 15 x 0,6 cm). On élue avec un mélange 44/56 de méthanol et d'eau sous une pression de 20 MPa. On concentre sous vide et on lyophilise la fraction de k' = 8,2 pour obte- nir 6,3 mg du composé dont les caractéristiques figurent dans le tableau III ci-après. EXEMPLE 2 Cet exemple décrit la préparation de la [p-éthoxyphényl- 2 alaninel désamino carba-6 ocytocine. On prépare le composé de départ de formule (II) comme décrit dans l'exemple 1. On agite ensuite 0,23 g d'une suspension du sel de dicyclohexyl- -ammonium de l'o-nitrobenzènesulfényl p-éthoxyphénylalanine dans 50 ml d'acétate d'éthyle avec de l'acide sulfurique 0,05 M et on sèche la solution obtenue sur sulfate de sodium puis on évapore à sec. On dissout ensuite l'huile ainsi formée dans du dichlorométhane et on prépare l'ester actif comme dé- crit dans l'exemple 1. On effectue de la même façon la conden- sation avec 0,25 g de l'heptapeptide pour obtenir 200 mg d'un composé ayant un point de fusion de 215-2180C et présentant les caractéristiques indiquées dans le tableau II. On effectue ensuite la cyclisation décrite dans l'exem- ple 1. On obtient à partir de 200 mg de peptide protégé, 196 mg de produit de cyclisation. On purifie une partie du mélange réactionnel par plusieurs filtrations sur gel pour obtenir 8,3 mg d'un composé pur ayant les caractéristiques indiquées dans le tableau III suivant. TABLEAU III pages 7 et 8 TABLEAU III Certaines des caractéristiques des cyclopeptides de formule générale: 0H 2 S.....CH2... CH2 -S---- CH2 CH2 CH2-CO-X-lie-Gln-Asn-NH-CH-CO-Pro-Leu-Gly-NH2 R Formule Analyse b RF moléculaire théôrique Asp Glu Pro Gly systeme XS 2 (Poids trouvde.a Il S3 S4 moléculaire) %C %l l le Leu X (CHCO) (2H4COH PhlO(N02) 0, 19 0 24 Phe(OEt) 0118 01 22 Pho 0/15 0,15 Phle(NJI-IZ) 0133 0 21 Phe(ile) 0)28. 0 23 Pho(Et) 0127 0 12 0,].2 0t 14 0 169 C44H66 N12013S. 6 H20 (1111) C45671Nll 12S. 2 C2H402(1122) C44H67NllOllS. 2 Il20 (994.2) C521474N12013S. 3 Il20 (1161) C45H69N1lOll S. 4 H20 (1044) C46 71 Nil ilS. 0122 0170 0.5 H20 (995.2) 47f56 7'07 151 12 47158 6t63 14,80 53751 7110 13173 53 25 7122 13175 53f15 7 20 15r50 52190 6195 15f26 53y79 6143 14148 53195 6y32 14,30 51176 7143 14y75 51189 7715 14173 55152 7729 15148 56,03 7133 15108 1S06 0 97 1l 08 1t03 0,96 1 007 1,04 0199 1104 0y89 1,04 0y94 1.,07 0,89 1t01 1102 1,06 1i01 1,00 01 95 1100 0182 1,01 0,94 1705 1,08 1,00 1,04 1,00 1, 09 1 05 0 95 1,00 if 00 01 97 1,01 1 04 1.100 1,03 0 90 0y99 0,96 4f23 leCHH20 1:1 2,27 MeOH-tampon pH 4f2 3:2 7,00 MeCH-H20 3:2 3,56 MeOI-H-tampon. pH 4,2 3:2 4115 MeOH-tamon pli 4t4 3:2 4 50 MeOI -tampon pH 414 13:7 -.. IN) Co V1 n- i TABLEAU III (suite) Phe ( NNe2) 0, 1.0 0,5 Phe(NHI2) () , 08 O o05 0o 32 0,61 f0, (5 0o 57 C46 1721 '1201 1S. 2:20 (1037) 44 {68N12011 S. 4 H20 (1045) 53, 28 52f 89 , 57 90 7, 00 61 80 6,56 6, 39 16, 21 , 81 16 09 70 1 09 0f97 01 96 1 03 1104 1109 1,04 2,62 MeOH-tampon pHl 4T4 3:2 1,08 0 83 0,81 44 32 1,10 0,96. 1;02 0X71 MeOH-tampon pHi 1.,1.2 0,79 0,95 4!4 3:2 a - Même signification b - Le tampon à pH 4,2 le tampon à pH 4,4 que dans le tableau II est une solution à 1% d'acide trifluoroac'tique additionnée de tri6thylamine; est du phosphate de sodium 0,015 M. co 4- o$ V1 ro EXEMPLE 3 Cet exemple décrit la préparation de la Zphényl-2 alani- ne] désamino carba-6 ocytocine. On prépare le composé de dé- part de formule (II) comme indiqué dans l'exemple 1. Ensuite on ajoute l'ester trichloro-2,4,5 phénylique de l'o-nitro- benzènesulfénylphénylalanine à 0,8 g d'une suspension de 1' heptapeptide libre dans 15 ml de diméthylformamide. Apres 96 heures d'agitation à la température ambiante, on traite le mélange réactionnel comme décrit dans l'exemple 1. On obtient 1 g (85 %) d'un composé ayant un point de fusion de 223-225 C dont les caractéristiques figurent dans le tableau II. On effectue ensuite la cyclisation comme décrit dans l'exemple 1. On dissout le produit qui contient une matière donnant une réaction positive avec la nynhydrine dans un mé- lange 1/1 de méthanol et d'eau et on filtre sur une colonne d'échangeur de cations de type sulfonate (Dowex 50 en cycle H+; 5 ml). On concentre et on lyophilise pour obtenir 125 mg d'un composé que l'on purifie ensuite par filtration sur gel. On chromatographie 15 mg du produit ainsi obtenu sur une co- lonne de gel de silice modifié (Séparon SI C18; 15 x 0,6 cm) dans un mélange 3/2 de méthanol et d'eau. On concentre la fraction de k' = 7,0 et on la lyophilise pour obtenir 4,2 mg d'un composé dont les caractéristiques figurent dans le ta- bleau III. EXEMPLE 4 Cet exemple décrit la préparation de la [p-benzyloxy- -carbonylaminophényl-2 alanine] désamino carba-6 ocytocine. On prépare le composé de départ de formule (II) comme indiqué dans l'exemple 1. On libère l'o-nitrobenzènesulfényl p-benzyl- -oxycarbonylaminophénylalanine à partir de 1,05 g de son sel de diocyclohexyl-ammonium, comme décrit dans l'exemple 2 et on forme l'ester actif comme décrit dans l'exemple 1. Par tri- turation avec de l'éther de pétrole, on obtient 1,0 g d'un composé cristallin ayant un point de fusion de 54-57 C. On ajoute 0,8 g de l'ester actif à une suspension de 0,6 g de 1' heptapeptide dans 15 ml de diméthylformamide et on traite comme décrit dans l'exemple 1. On obtient 0,53 g (55%) d'un composé fondant à 220-222 C et ayant les caractéristiques in- diquées dans le tableau 2. On effectue la cyclisation comme décrit dans l'exemple 1 à partir de 200 mg. On obtient 155 mg d'un produit dont on purifie 30 mg par filtrations répétées sur gel. On effectue une purification complémentaire par chromatographie sur une colonne en phase inverse (gel de silice modifié Séparon SI C18; 15 x 0,6 cm) dans un mélange 3/2 de méthanol et de tam- pon trifluoroacétate à pH 4,4. On lyophilise la fraction con- tenant le composé de k' = 3,56 et on obtient 4,2 mg d'un pro- duit ayant les caractéristiques indiquées dans le tableau III. EXEaMPLE 5 Cet exemple décrit la préparation de la Zp-aminophényl-2 alaninej désamino carba-6 ocytocine. On ajoute du sodium à 3,6 mg d'une solution de Zp-nitro- -phényl-2 alanine? désamino carba-6 ocytocine dans 5 ml d'am- moniac liquide jusqu'à obtention d'une coloration bleue per- sistant pendant 30 secondes. On décolore ensuite la solution par ad- dition d'acide acétique et, après évaporation de l'ammoniac, on purifie le résidu par filtration sur gel. La fraction cor- respondante recueillie donne par lyophilisation 2,1 mg d'un composé dont les caractéristiques figurent dans le tableau III. EXEMPLE 6 On ajoute une suspension d'acide bromhydrique dans l'aci- de acétique (35%; 1 ml) à une suspension de 30 mg de [p- benzyloxycarbonylaminophényl-2 alanine] désamino carba-6 ocytocine dans 1 ml d'acétone et on laisse la solution formée reposer pendant 1 heure à la température ambiante. Après avoir plusieurs fois évaporé dans l'acétone et reprécipité dans le méthanol avec de l'éther, on dissout le produit dans 3 ml d'acide acétique 3 M et on purifie par filtration sur gel. Par lyophilisation, on obtient 8,7 mg d'un composé dont les pro- priétés correspondent à celles du produit de l'exemple 5. EXEMPLE 7 Cet exemple décrit la préparation de la p-méthylphényl-2 alani- ne7 désamino carba-6 ocytocine. On prépare l'ester actif de l'onitrobenzènesulfényl p-méthylphénylalanine à partir de 0,7 g du sel de dicyclohexylammonium correspondant, comme dé- crit dans l'exemple 4. On obtient 0,58 g d'un composé fondant à 127-133 C. On ajoute cet ester actif à une suspension de 0,65 g de l'heptapeptide dans 13 ml de diméthylformamide et on obtient de la même façon que dans l'exemple 1, 0,83 g d'un composé ayant un point de fusion de 220-226 C; les caracté- ristiques de ce composé figurent dans le tableau II. On cyclise 200 mg du peptide de la même façon que dans l'exemple 1. On obtient 180 mg de produit dont on purifie 50 mg par filtration sur gel et chromatographie sur colonne (Separon SI C18) dans un mélange 3/2 de méthanol et d'eau. On lyophilise la fraction de k' = 5,03 pour obtenir 13, 6 mg d'un composé dont les caractéristiques figurent dans le tableau III. EXEMPLE 8 Cet exemple décrit la préparation de la [p-éthylphényl-2 alanine] désamino carba-6 ocytocine. On prépare l'octapeptide protégé comme décrit dans l'exemple 1 à partir de 0,4 g d'o- nitrobenzènesulfényl p-éthylphénylalanine et de 0,3 g de 1' heptapeptide libre. On obtient 0,23 g d'un composé fondant à 218-224 C dont les propriétés figurent dans le tableau II. On cyclise et purifie l'octapeptide comme dans l'exemple 7. On obtient 8, 3 mg d'un composé (k' = 7,4; mélange 3/2 de méthanol et d'eau) ayant les caractéristiques indiquées dans le tableau III. EXEMPLE 9 Cet exemple décrit la préparation de la [p-diméthylamino- -phényl-2 alaninej désamino carba-6 ocytocine. On prépare 1' ester actif de l'o-nitrobenzènesulfényl p-diméthylaminophényl- -alanine à partir de 0,5 g du sel de dicyclohexylammonium de la même façon que dans l'exemple 4. On obtient 405 mg d'un composé ayant un point de fusion de 113-117 C. On ajoute cet ester actif à une suspension de 0,3 g de l'heptapeptide dans le diméthylformamide et on obtient 0,43 g d'un composé fondant entre 201 et 204 C selon le même mode opératoire que dans 1' exemple 1 (mais sans lavage par l'acide sulfurique dilué). Les caractéristiques du composé figurent dans le tableau II. On effectue la cyclisation de la même façon que dans 1' exemple 1 pour obtenir 190 mg d'un produit qu'on purifie par filtration sur gel. On dissout le produit obtenu par lyophili- sation (100 mg) dans de l'acide acétique à 20% et on purifie par électrophorèse libre. On obtient 54 mg de composé qu'on purifie par filtration sur gel. Les caractéristiques du pro- duit (28 mg) figurent dans le tableau III. REVENDICATIONS 1. Analogues de l'ocytocine caractérisée en ce qu'ils répondent à la formule générale: CH2 S CH2 CH2 CH2-CO-X-Ile-Gln-Asn-NH-CH-CO-Pro-leu-Gly-NH2 o les amino-acides appartiennent à la série L et X représente la phénylalanine ou la phénylalanine substituée en position para par un radical choisi parmi (a) les radicaux alkyles, (b) le radical éthoxy, (c) le radical amino ou un radical amino substitué et (d) le radical nitro. 2. Procédé pour préparer des analogues de l'ocytocine selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il consiste à cycliser une peptide linéaire de formule: CH2 S- CH CH2 1 21 CH2-CO-Act X-Ile-Gln-Asn-NH-CH-CO-Pro-Leu-Gly-NH2 o X représente un amino-acide constitué par la phénylalanine ou la phénylalanine substituée en position para par un radical choisi parmi (a) un radical alkyle, (b) le radical éthoxy, (c) le radical amino ou un radical amino substitué et (d) le radical nitro, et Act représente un activateur du radical carboxy, la cyclisation s'effectuant entre le radical amino de l'amino-acide X et le radical carboxy du reste S-carboxy- -éthylhomocystéine. 3. Procédé pour préparer un composé de formule: CH2 S CH2- - CH2 I I CH2-CO-NH-CH-CO-Ile-Gln-Asn-NH-CH-CO-Pro-Leu-Gly-NH2 C L NH2 caractérisé en ce qu'il consiste à réduite la Zp-nitrophényl- 2 alaninej désamino carba-6 ocytocine par le sodium dans 1' ammoniac liquide. 4. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'activateur est un ester. 5. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'on clive le groupe protecteur de la Zp-benzyloxycarbonyl- -aminophényl-2 alanine] désamino carba-6 ocytocine par l'ac- tion de l'acide bromhydrique dans l'acide acétique.