FR 2467188 A1 19810417 FR 8021867 A 19801013 Sels de lysine et d'arginine de l'acide 5-(2,4-difluoro- phényl)-2-h.ydroxy benzoïque et compositions pharmaceutiques les renfermant. Ia présente invention concerne de nouveaux sels de l'acide 5-(2,4difluorophényl)-2-hydroxybenzolque, ainsi que des compositions phamaceutiques les renfermant en tant que principes actifs. Plus particulièrement, l'invention se réfère aux sels de lysine et d'arginine de l'acide 5-(2,4-difluo- rophényl)-2-hydroxybenzoïque et à des compositions pharmaceutiques pour l'administration orale, rectale, parentérale ou topique. Le brevet français 1 522 570, le brevet USA 3 714 226 et le brevet en Afrique du Sud 67/1031 revendi- quent des acides phénylbenzoïques ayant une activité anti-inflammatoire, ainsi que leurs sels pharmaceutique- ment acceptables. Lesdits brevets indiquent leacide -(2,4-difluorophényl)2-hydroxybenzolque sans cependant en donner les caractéristiques physico-chimiques ni d'exem- ple de préparation. Les mêmes brevets indiquent aussi, en général, les sels des acides phénylbenzoiques avec la choline et la S-méthylméthionine sans cependant indiquer ni suggérer de sels de l'acide 5-(2,4-difluorophényl)-2- hydroxybenzolque avec des acides aminés. De même, le brevet français 2 288 729 décrit et revendique un procédé pour la préparation de l'acide -(2,4-difluorophényl)-2-hydroxybenzolque, mais ledit brevet ne décrit ni suggère aucun sel avec des acides aminés. Le brevet français 1 295 304 décrit le sel de l'acide acétylsalicylique avec la lysine qui a l'avantage, par rapport à l'acide acétylsalicylique, d'être soluble dans l'eau et de permettre ainsi une administration parentérale de l'acide acétylsalicylique. La salification ne modifie cependant pas l'activité de l'acide acétylsalicylique. On a maintenant trouvé d'une façon surprenante que les sels de lysine et d'arginine de l'acide -(2,4-difluorophényl)-2-hydroxybenzoïque non s eulement permettent une administration parentérale de l'acide 5-(2,4difluorophényl-2-hydroxybenzoique mais permettent aussi d'obtenir, après administration orale, des taux sanguins plus élevés que ceux que l'on obtient par administration orale de l'acide libre correspondant en démontrant ainsi une meilleure biodisponibilité des sels de lysine et d'arginine par rapport à l'acide libre. On a aussi trouvé que les sels d'arginine et -de lysine de l'acide 5-(2,4-difluorophényl)-2-hydroxy- benzoique sont moins ulcérogènes que l'acide libre correspondant lorsqu'ils sont administrés par voie orale. Ainsi selon un de ses aspects, la pré7ei- e invention concerne les sels de lysine et d'arginine de l'acide 5-(2,4-difluorophévi)-2-hydroxybenzo-que caracté- risés par la formule suivante: COO- F OHX OH NX-CH CH CH r'Q0 F dans laquelle X représente un groupe -CH2- cu aÄ1 groupe -C(NI)-NH. Les acides aminés lysine et argirnine salifiant l'acide 5-(2,4difluorophényl)-2-hydroxvbenzo!que peuvent être dans la forme Li naturelle ou dans la forme D, ainsi que dans la forme racémique DL. Les nouveaux sels de la présente invention sont préparés par salification directe de l'acide 5-(2,4- difluorophényl)-2-hydroxybenzoique COOR F X IOH avec l'acide aminé de formule H2N-X-CH2 CH2CH 01H-000 NH22 o X a la signification donnée ci-dessus. L'acide 5-(2,4-difluorophényl)-2-hydroxybenzol- que II, qui est insoluble dans l'eau, est ajouté à l'état solide et à petites portions à une solution aqueuse de l'acide aminé III en quantités stoéchiométriques. le sel de formule I ainsi obtenu peut être isolé selon les techniques habituelles, par exemple par lyophilisation ou par précipitation avec des solvants appropriés. la salification peut également être effectuée en présence d'un excès d'un solvant organique, tel que le benzène, le toluène, l'acétone, le chlorure de méthylène et similaires et le sel I qui se forme précipite et peut être isolé par simple filtration ou bien il cristal- lise dans le mélange eau/solvant organique. Les nouveaux composés de la présente invention montrent une activité antiinflammatoire et analgésique supérieure à celle de l'acide libre correspondant. Leur activité anti-inflammatoire a été évaluée chez le rat dans le test classique de l'oedème à la carragénine. Les produits ont été administrés par voie sous-cutanée à des rats Sprague Dawley pesant 150-200 g. L'acide 5-(2,4-difluorophényl)-2-hydroxybenzoique a été utilisé comme produit de référence. Les résultats de cet essai sont résumés dans le tableau I o l'activité de deux composés représentatif de la présente invention, le 5-(2,4-difluorophényl)-2- hydroxybenzoate de DL-lysine et le 5-(2,4-difluorophényl)- 2-hydroxybenzoate de DI-arginine est comparée à celle de l'acide libre. De ce tableau, il ressort que les produits représentatifs de la présente invention et l'acide libre de référence inhibent l'oedème provoqué à la patte du rat par la carragénine à de doses à peu près égales, avec un index thérapeutique nettement en faveur des sels de lysine et d'arginine. TABLEAU I produit DL DE50 I.T. activité mg/kg5rat/os mg/kg rat relative acide 5-(2,4-difluoro- phényl)-2-hydroxy- - benzo!que 710,6 9,6 74,02 1 -(2,4-difluorophényl)-2- hydroxybenzoate de D, L-lysine 1059,2 10,8 98,07 1,3 -(2,4-difluorophényl)-2- hydroxybenzoate de D,L- arginine 1267,4 11,2 113,16 1,52 L'activité analgésique a été évaluée dans le test de Randall et Selitto basé sur l'implantation dans la patte du rat de 0,05 ml d'une suspension de levure de bière à 5%. Au temps 0 et après 30, 60, 120, 180 minutes on a mesuré la pression appliquée à la patte douloureuse nécessaire à provoquer la réponse (le cri). Les produits sous examen ont été administrés en même temps que l'agent phlogistique. Un produit représentatif de la présente invention, le 5-(2,4difluorophényl)-2-hydroxybenzoate de DL-lysine, a été administré à la dose de 4,75 mg/kg, correspondant à une dose de 3 mg/kg d'acide 5-(2,4-difluo- rophényl)-2-hydroxybenzolque. Comme produits de référence on a utilisé l'acide -(2,4-difluorophényl)-2hydroxybenzoïque à une dose de 3 mg/kg, l'acide acétylsalicylique à une dose de 30 mg/kg et l'acétylsalicylate de lysine à une dose de 54 mg/kg correspondant à 30 mg/kg d'acide acétylsalicylique. Le tableau II montre la variation, par rapport aux contrôles, de la pression effectuée sur la patte inflammée nécessaire à provoquer la réponse à la douleur. TABLEAU II oduit voie d'ad- dose variation% après min. prodUi ministra- mg/kg 30 60 120 180 acide 5-(2,4- difluorophényl)- 2-hydroxyben- os 3 +14,6 +41,8 +64,3 +52,5 zoicue -(2,â-difluoro- os 4,75 +26,3 +48,2 +64,1 +54,0 phÈyl7o.)-2- i.m. 4,75 +51,0 +66,6 +62,0 +53,4 hydroxy-benzoate e.v. 4,75 +52,1 +73,5 +79,0 +56,9 de DL-lysine acide acétyl- os 30 +15,8 +43,7 +65,9 +57,5 salicylique acétylsalicylate de lysine i.m. 54 +45,0 +51,8 +63,5 +55,8 N.B. les données ci-dessus sont statistiquement significatives De ce tableau il ressort que le produit représentatif de la présente invention montre un début de l'activité plus rapide que celle des produits de référence quand il est administré par voie orale. En fait, déjà à la première demi-heure, il montre une activité presque double par rapport à l'acide libre correspondant ainsi qu'à l'acide acétylsalicylique. Il est également plus actif que l'acétylsalicylate de lysine, par administration parentérale. En outre les nouveaux sels de la présente invention sont moins ulcérogènes de l'acide libre correspondant. Il est connu que beaucoup de médicaments antiphlogistiques provoquent des phénomènes irritatifs et ulcératifs Sur la muqueuse du tractus gastro-intestinal. Chez le rat, ils se montrent comme de petites zones hémorragiques dans l'estomac jusqu'à de vraies érosions du type ulcératif-perforant. L'acide 5-(2,4-difluoro- phényl)-2-hydroxybenzolque ne provoque pas de phénomènes ulcératifs à la dose de 250 mg/kg, alors que de tels phénomènes deviennent évidents à la dose de 500 mg/kg. Au contraire, les sels de lysine et d'arginine commencent à devenir ulcérogènes à des doses très élevées. Par exemple, les sels de DL-lysine et de DL-arginine de l'acide -(2,4-difluorophényl)-2-hydroxybenzoique ne provoquent aucun dommage ulcérogène à la dose de 700 mg/kg. Ainsi, les composés de la présente invention peuvent être administrés par voie orale, parentérale ou rectale seuls ou sous forme de compositions pbrmaceuti- ques même associés avec d'autres ingrédients Utas-sé dans des conditions phlogistiques, tels que la vitamine C ou les corticostéroïdes. Selon un aspect ultérieur de la prsenrte invention, les composés de formule I ci-dessus sont inclus dans des compositions pharmaceutiques en mélange avec des excipients pharmaceutiquement acceptables. Les compositions pharmaceutiques de la présente invention peuvent se présenter sous forme de comprimés, poudres, granules, gélules, suspensions, sirops, suppositoires ou solutions pour injection. Pour l'administration parentérale, on peut préparer des unités de dosage fluides. Pour préparer la forme parentérale, on introduit dans une ampoule, une quantité déterminée de l'ingrédient actif et l'ampoule, avec son contenu, est stérilisée et scellée. On prévoit une ampoule additionnelle d'eau stérile pour injection comme véhicule. Il peut être avantageux de dissoudre dans l'eau stérile un anesthésique local et un tampon. Une prépara- tion parentérale peut aussi être préparée en dissolvant l'ingrédient actif dans de l'eau stérile pour injection avec ou sans adjuvants et stérilisant après avoir introduit la solution dans des ampoules. Les préparations pharmaceutiques destinées à l'administration par voie orale contiennent, outre la substance active, un ou plusieurs excipients organiques ou minéraux acceptables du point de vue pharmaceutique et compatibles avec le principe actif, ainsi que des édulcorants, des aromatisants, des colorants, des agents de conservation et similaires. Pour la préparation des comprimés, on pourra utiliser, comme excipients, des diluants inertes, comme le carbonate de calcium, le carbonate de sodium, le lactose, le talc, des agents de granulation comme l'amidon et l'acide alginique, des liants comme l'amidon, la gélatine et la gomme arabique, des agents lubrifiants comme le stéarate de magnésium et l'acide stéarique. Les comprimés peuvent être recouverts ou non. Les gélules peuvent contenir la substance active soit seule, soit en mélange avec des diluants inertes solides comme, par exemple, le carbonate de calcium, le phosphate de calcium et le kaolin. On prépare des granules destinés à la reconsti- tution d'une préparation liquide orale en utilisant des diluants solubles dans l'eau. On mélange le composé actif avec le diluant soluble dans l'eau tel que saccharose, glucose et similaires, avec un liant tel que mucillane d'acacia, solution de gélatine, solution de méthyl- cellulose et on fait passer sur un tamis pour former des granules que l'on fait sécher. Le cas échéant, on introduit dans la composition un agent de mise en suspension comme la gomme adragante. D'une façon similaire, des solutions, suspensions, 2467188? sirops et élixirs peuvent renfermer l'ingrédient actif avec les excipients conventionnels utilisés pour de telles compositions, par exemple des agents de mise en suspension tels que la méthylcellulose, la gomme adragan- te et l'alginate de sodium, des agents mouillants tels que la lécithine ou le polyoxyéthylènesorbitane et des agents de conservation comme le parahydroxybenzoate d'éthyle. Les préparations liquides sont administrées sous forme d'unités de dosage par exemple une cuillère à thé, correspondant à 5 ml, renfermant la quantité calculée d'ingrédient actif. Les préparations liquides peuvent - être administrées aussi en unités de dosage sous forme d'une solution aqueuse obtenue en dissolvant dans l'eau une unité de dosage de composition renfermant une quantité prédéterminée d'ingrédient actif. - Les compositions de la présente invention peuvent renfermer un ou plusieurs adjuvants communs, tels que des édulcorants, des aromatisants, des colorants pour obtenir des piréparations Iégantes et acceptables du point de vue du goût. Les compositions de la présente invention contiennent d'environ 100 à environ 2000 mg d'ingrédient actif par unité de dosage. Des unités de dosage préfé- rentielles renferment de 250 à 750 mg d'ingrédient actif. Pour donner une analgésie ou une rémission de l'inflammation chez les mammifères, les sels de lysine et d'arginine de l'acide 5-(2,4-difluorophényl)-2- hydroxybenzoique de formule I ci-dessus sont administrés aux mammifères à une dose journalière qui peut varier entre environ 200 et environ 2000 mg. De préférence, une composition pharmaceutique telle que décrite ci-dessus renfermant d'environ 350 à environ 500 mg d'ingrédient actif sous forme d'unité posologique peut être administrée par voie orale deux 2467188; fois par jour pour avoir un degré d'activité satisfaisant. Dans le cas de douleur plus forte ou dans le cas d'états inflammatoires particulièrement graves, une composition pharmaceutique telle que décrite ci-dessus renfermant d'environ 250 mg à environ 750 mg d'ingrédient actif sous forme d'unité posologique peut être administrée par voie intramusculaire deux ou trois fois par jour pour atteindre un résultat satisfaisant du point de vue thérapeutique. Des compositions analogues peuvent être administrées par voie intraveineuse ou rectale. Les exemples suivants illustrent l'invention sans cependant la limiter. EXENILE I A une solution de 50 g d'acide 5-(2,4-difluoro- phényl)-2-hydroxybenzoîque dans 500 ml d'éthanol on ajoute une solution aqueuse de 29,2 g de DL-lysine sous agitation àla température ambiante (200C environ) et on maintient le mélange réactionnel sous agitation pendant environ trois heures, jusqu'à salification complète. On refroidit à environ 5 C, on filtre le précipité qui se forme, on lave avec de petites portions d'éthanol et l'on sèche sous pression réduite. On obtient 75 g de 5-(2,4-difluorophényl)-2-hydroxybenzoate de DL-lysine sous forme de poudre microcristalline. Poids moléculaire = 396,40 Analyse pour C19H22F2N205 C% H% N5 calculé 57, 57 22,18 7,07 trouvé 57,55 22,20 7,09 -1 I.R.:pics caractéristiques à 1600 et 1390 cm 1 De la même façon, on prépare les 5-(2,4-difluoro- phényl)-2-hydroxybenzoates de D-lysine et de L-lysine. EXEMPLE 2 A une solution de 12,5 g d'acide 5-(2,4-difluoro- phényl)-2-hydroxybenzolque dans un mélange de 100 ml d'acétone et 50 ml d'eau, on ajoute à petites portions et sous agitation à la température ambiante (environ 200C) une solution aqueuse de 8,71 g de DL-arginine et on maintient le mélange réactionnel sous agitation pendant 3 heures en remplaçant éventuellement l'acétone qui s'évapore. Après achèvement de la salification, on filtre, on lave plusieurs fois avec de lacétone et l'on sèche sous pression réduite. On obtient ainsi 20 g de 5-(2,4- difluorophényl)-2-hydroxybenzoate de DL-arginine sous forme d'une poudre microcristalline incolore. Poids moléculaire = 424,42 6 Analyse pour CigH22F2N405 C% H% N% calculé 53,77 5,22 13,20 trouvé 53,75 5,23 13,22 De la m9me façon, on obtient le 5-(2,4-difeluoro- phényi)-2-hydroxybenzoate de D-arginine et le 5-(2,4- difluorophényl)-2-hydroxybenzoate de 1-arginine. EXEIPILE 3 Comprimés -(2,4-difluorophényl)-2-hydroxy- benzoate de DI-lysine 250 g lactose 197,5 g amidon de mais 25 g silice colloïdale 10 g amidon soluble 15 g stéarate de magnésium 2,5 g On mélange la substance active avec une partie des adjuvants et on granule le mélange avec une solution d'amidon soluble dans l'eau. Après séchage du granulat on ajoute le reste des adjuvants et on forme des tablettes par compression. On obtient ainsi 1000 comprimés pesant 500 mg et renfermant 250 mg d'ingrédient actif ou environ 700 comprimés pesant 700 mg et renfermant 350 mg d'ingrédient actif. D'une façon similaire on prépare des tablettes contenant de la DL-arginine. Gélules -(2,4-difluorophényl)-2-hydroxy- benzoate de DL-lysine 400 mg excipient solide inerte (amidon, lactose, kaolin) 500 mg D'une façon similaire on prépare des gélules contenant 425 mg de 5-(2,4-difluorophényl)-2-hydroxy- benzoate de DL-arginine. EXEMPLE 5 Substance pour 1000 suppositoires: -(2,4-difluorophényl)-2-hydroxybenzoate de DL-lysine 500 mg beurre de cacao q.s.p. 2000 mg On suspend de façon homogène la substance active, triturée aussi fine que possible, dans la masse fondue de l'excipient. On obtient 1000 suppositoires pesant chacun 2 g et renfermant 500 mg d'ingrédient actif. D'une façon similaire on prépare des suppositoires contenant de la DL-arginine. EXEMPLE 6 Ampoules a) 5-(2,4-difluorophényl)-2-hydroxy- benzoate de DL-lysine 250 mg chlorure de sodium 15 mg eau bidistillée q.s. p. 2,5 ml b) 5-(2,4-difluorophényl) -2-hydroxy- benzoate de DL-lysine 350 mg chlorure de sodium 15 mg eau bidistillée q.s. p. 3 ml c) 5-(2,4-difluorophényl)-2-hydroxy- benzoate de DL-lysine 395 mg chlorure de sodium 15 mg eau bidistillée q.s. p. 3 ml 2467 8 'i d) 5-(2,4-difluorophényl)-2-hydroxy- benzoate de DL-arginine 425 ce chlorure de sodium 15 me eau bidistillée q. s.p. 3 el EXEMPLE 7 Gélules -(2,4-difluorophényl) -2-hydroxy- benzoate de DL-lysine 600 mg excipient solide (amidon, lactose, kaolin) 400 mg D'une façon similaire on prépare des gélules contenant 635 mg de 5-2,4-difluorophényl)-2- hydroxybenzoate de DL-arginine. EXEMPLE 8 On prépare des granules pour la reconst tu._-tc d'une préparation liquide orale ayant la composition suivante: -(2,4-difluorophényl) -2-hydro xybenzoate de DL-lysine CC400 zz saccharose 5200 _g acide citrique 10 citrate trisodique parahydroxybenzoate de sodium 25 -z édulcorant (saccharine) - - aromatisant (orange) 5C =g On introduit les granules préparés de la manière usuelle dans des sachets ainsi conter.t Shawun 400 mg d'ingrédient actif. Le contenu d'un sachet, disscs dans de l'eau est une unité de dosage convenable D. administrée à un être humain adulte souffrant our ues douleurs (mal à la tête, douleur articulaire) c: p un état inflammatoire, donne une analgésie satisfaisan:te es une rémission de l'état inflammatoire. Une administration deux fois far Ok d'" e telle composition donne de très bons résultats. D'une façon analogue, on obtient une composition pharmaceutique renfermant 600 mg de 5-(2,4-difluorophényl)- 2-hydroxybenzoate de DI-lysine. EXEMPLE 9 En opérant comme décrit à l'exemple 8, on prépare des sachets contenant desgranules pour la recons- titution d'une préparation liquide orale et renfermant 425 mg et, respectivement 635 mg de 5-(2,4-difluorophényl)- 2-hydroxybenzoate de DL-arginine. Une administration deux fois par jour des compositions ci-dessus à des êtres humains adultes souffrant pour des douleurs ou pour un état inflammatoire donne une analgésie satisfaisante et une rémission de l'état inflammatoire. REVENDICATIONS 1. Les sels de lysine et d'arginine de l'acide -(2,4-difluorophényl)-2hydroxybenzolque de formule COO F / \ OH +H3N-X-CH2 CH2 CH CH-COOH - - 322 2 F NH2 dans laquelle X représente un groupe -CH2 ou un groupe -C(NH)-HE. 2. Le 5-(2,4-difluorophényl)-2-hydroxybenzoate de DL-lysine. 3. Le 5-(2,4-difluorophényl)-2-rhydrcxybenzoate de DL-arginine. 4. Procédé pour la préparation des c:C3cs selon la revendication 1 caractérisa en ce quon ajoute l'acide 5-(2,4-difluorophényl)-2-hydroxybenzo rue d- formule COOH F -- OH F à l'état solide à une solution aqueuse d'un acide aminé de formule H2N-X-CH2CH2CH 2CH-COOH 1 NH2 dans laquelle X représente un groupe CH2 ou un groupe -C(NH)-NH- en quantité stoechiométrique. 5. Procédé selon la revendication 4 caractérisé en ce que la réaction est conduite en présence d'un excès d'un solvant organique. 6. Composition pharmaceutique renfermant, en tant qu'ingrédient actif, un composé tel que revendiqué dans les revendications 1 à 3 en mélange avec un excipient pharmaceutique. 7. Composition pharmaceutique selon la revendication 6 caractérisée en ce que l'ingrédient actif est le 5-(2,4-difluorophényl)-2-hydroxybenzoate de DL-lysine. 8. Composition pharmaceutique selon les revendications 6 et 7 caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme d'unité de dosage. 9. Composition pharmaceutique selon la revendication 8 caractérisée en ce qu'elle contient de à 2000 mg d'ingrédient actif par unité de dosage en mélange avec un excipient pharmaceutique.