FR 2470771 A1 19810612 FR 8011568 A 19800523 - I - L'invention se rapporte à un procédé de préparation de dérivés de l'acide 7-amino-desacétoxy céphalosporanique ayant la formule: 0 R R X CH-h-MN Xa oN NH2 - N- CH3 (1) C OH dans laquelle R est -H ou -OH. Le brevet américain 3.985.741 décrit la préparation du composé de formule I, dans laquelle R est -OH, (couramment désigné sous le nom de "céphadroxyle"), selon un procédé suivant lequel on fait réagir l'acide 7-amino-désacétoxy-céphalosporanique (couram- ment désigné sous le nom de 7-ADCA) avec un anhydride mixte obtenu par réaction du méthyl-sodium de sel de Dane p-hydroxy-phénylgly- cine avec de l'éthyl-chloroformiate en présence de N-méthylmor- pholine. Suivant un tel procédé, on obtient des rendements très faibles sans intérêt industriel et avec un produit de faible pureté, comme le reconnaît le cessionnaire dans son brevet belge ultérieur n 853.974 (à la page 2). Ce brevet belge décrit également un procédé de produc- tion de céphadroxyle, suivant lequel on fait réagir l'ester sili- cique de 7-ADCA avec du solvate p-hydroxy-phényl-glycine chlorure chlorohydrate en présence de diméthylaniline comme accepteur de l'acide chlorydrique: tout en ayant de bons rendements, ce pro- cédé présente l'inconvénient de fournir un composé final ayant en tant qu'impuretés de la diméthylaniline et des dérivés organiques du silicium, tels l'hexaméthyldisiloxane. En outre, l'usage de chlorure chlorohydrate de p-hydroxy-phénylglycine a l'inconvénient de donner naissance à des matières polymères qui se présentent comme des impuretés qui peuvent donner des caractéristiques aller- gologiques, du fait qu'elles sont la cause principale de la nais- sance de phénomènes allergiques au cours de l'emploi en thérapie sur des êtres humains. La demande de brevet européen n 1133 décrit un procédé de production de céphadroxyle, suivant lequel on fait réagir un - 2 - anhydride mixte obtenu par réaction de méthyl-potassium sel de Dane p-hydroxyphénylglycine avec du méthyl-chloroformiate en présence de Nméthylmorpholine et dans un mélange de solvant comprenant du chlorure de méthylène et le cétone méthylisobutyle et autres co-solvants, avec des esters siliciques de 7-ADCA. Le céphadroxile obtenu par ce procédé présente des im- puretés résultant de l'emploi de dérivés silile de 7-ADCA (tels que l'héxaméthyldisiloxane); qui sont très difficiles à enlever par suite de leur insolubilité dans l'eau: le recours à la tech- nique des silanes constitue un élément important qui grève les coûts de production. Le composé de formule I, dans laquelle R est -H (couram- ment désigné sous le nom de céphalexine), est en soi bien connu et on connaît une série de brevets qui en décrivent la préparation, parmi lesquels les brevets américains suivants peuvent être men- tionnés: n 3.507.861, 3.671.449, 3.634.416 et 3.676.437. Suivant l'invention, pour la préparation de dérivés de l'acide 7-aminodésacétoxy céphalosporanique ayant la formule R- CH-INH S R X 2 0 (I) COOHN on ajoute un anhydride mixte de formule 0 0 Il il AR,./ CH-C-O-C-OR1 ri CH H -(II) CH3cOR - r CH3 CH-COR2 J3 - 3 - dans laquelle R est -H ou -OH; R1 est le méthyle, l'éthyle ou l'isobutyle; et R2 est le méthoxyle ou l'éthoxyle, à une tempé- rature comprise entre -60 C et -10 C, à une solution obtenue par salification de 7-ADCA avec de la triéthylamine en quantité com- prise entre 1,05 et 1,25 moles par rapport à 7-ADCA, dans un solvant pris dans le groupe comprenant le sulfoxyde de diméthyle, le dimé- thylacétamide, la formamide, le diméthylformamide et le dioxane, en présence d'eau et à une température comprise entre 0 C et +20 C, l'anhydride mixte étant au moins en quantité équimolaire par rap- port à 7-ADCA, puis on enlève le groupe énaminique par abaissement du pH du mélange de réaction à une valeur comprise entre 0,8 et 2,5, par addition d'une solution aqueuse d'un acide inorganique et, finalement, on isole le produit fini suivant des techniques connues. De préférence, l'anhydride mixte de formule II est ob- tenu en faisant réagir les sels de Dane correspondants, o R est -H ou -OH et R2 est le méthoxyle, avec un chloroformiate (de pré- férence le chloroformiate d'éthyle) dans l'acétone, en présence de Nméthyl-morpholine à une température comprise entre -60 C et -20 C, par exemple comme le décrit le brevet américain 3.985.741. Toujours de préférence, les solvants de 7-ADCA sont en quantité d'environ 10 à 25 moles par mole de 7-ADCA. - L'anhydride mixte de formule II est un composé en soi bien connu décrit, par exemple, dans le brevet américain 3.985.741 et le brevet britannique 1.327.270. Pour la préparation des composés de formule I, on a essayé de faire réagir 7-ADCA en solution aqueuse avec de l'anhy- dride de formule II dans l'acétone ou dans un mélange d'acétone et des solvants utilisés suivant l'invention; mais, dans les deux cas, on a trouvé que les rendements en produit final étaient très faibles et sans intérêt industriel. De manière surprenante, on a trouvé qu'en dissolvant 7-ADCA dans un mélange aqueux de l'un des solvants mentionnés ci-dessus et en ajoutant une telle solution à la solution de l'anhydride mixte de formule II, les rendements en produit final sont très élevés et présentent un intérêt industriel important. De manière surprenante, on a également trouvé que la quantité de triéthylamine (située entre 1,05 et 1, 25 moles par _ rapport à 7-ADCA) utilisée dans la réaction est critique, du fait que, lorsqu'on sort de la gamme spécifiée, les rendements en -4- produit final sont considérablement réduits. Dans le cas de composés de formule I, o R est -OH, une opération de filtrage est requise, selon le brevet américain no 3.985.741, à la fin de la réaction de synthèse, afin d'enlever le 7-ADCA non-réagi, ce qui explique ainsi le rendement bas auto- risé par le procédé du brevet et l'exigence résultant d'une purification du produit final, de faible pureté. Contrairement à ce qui se passe dans le cas ci-dessus, dans le procédé suivant l'invention, le composé 7-ADCA réagit complètement, d'o résulte l'obtention d'un produit final de pureté élevée et avec des rende- ments importants. Finalement, on peut faire observer que tous les réactifs du procédé suivant l'invention sont de faible coût, ce qui les distingue des techniques connues qui comportent l'emploi de réactifs extrêmement coûteux, tels que par exemple les agents sililatants décrits dans le brevet européen no 1133 et lesdits agents sililatants et le p-hydroxy phénylglycine chlorure chloro- hydrate décrit dans le brevet belge no 853.974. Pour la production de composés de formule I, o R est H, suivant des procédés connus (tels que décrits dans les brevets américains 3.507.861, 3.671.449, 3.634.416 et 3.676.437), un pro- duit final de faible pureté est obtenu par suite de la nécessité d'enlever les groupes protecteurs de 7-ADCA (tels que 2,2,2-tri- chloroéthyl-p-nitrobenzyle ou triméthylsilile). L'emploi d'agents sililatants autorisant l'enlèvement de la protection de chlorure chlorohydrate de D(-)phénylglycine est décrit, par exemple, dans le brevet néerlandais no 7.304.227. D'autre part, on fait appel au brevet britannique no 1.327.270 et au brevet américain 3.694.437 pour l'emploi des techniques des sels de Dane et, par conséquent, des anhydrides mixtes. Le brevet mentionné en dernier lieu associe les tech- niques des sels de Dane avec l'emploi *des agents sililatants pro- tégeant le composé 7-ADCA. Les caractéristiques du procédé de l'invention seront mieux comprises à l'aide d'un certain nombre de modes d'exécution donnés à titre d'exemple non limitatif et que l'on va maintenant décrire. - 5 - Exemple 1 a) Pré2aration de l'acétate éthox_ carbonyl (D-o On introduit dans un flacon de réaction de 2 1, 250 ml d'acétone anhydre, puis on refroidit à -40 C et on ajoute 45,5 g (0,15 moles) de sel de Dane de méthyle potassium de D(-)-p-hydro- xyphénylglycine; toujours à -40 C, sous agitation, on ajoute 16,7g (0,1545 moles) de chloroformiate d'éthyle et 0,4 ml de N-méthyl- morpholine. L'exothermie est maintenue à -35 C et la réaction s'- effectue à -35 C pendant 2 heures. Le mélange de réaction est refroidi à -55 C. b) Dissolution de 7-ADCA Dans un flacon de réaction de 1 l., on introduit 75 ml d'eau déionisée et 32,1 g. (0,15 moles) d'acide 7-amino desacétoxy céphalosporanique (7-ADCA) et 135 ml. de diméthyle sulfoxyde à - 15 C; puis on ajoute 16,9 g. (0,167 moles) de triéthylamine (TEA) pendant 15 minutes. Le 7-DCA est dissous (le pH ne doit pas être supérieur à 10), puis la solution ainsi obtenue est refroidie à 0 C. c) éphadroxylesolvate de diméthle formamide _lDMF) On ajoute la suspension d'anhydride mixte préparée en (a) et refroidie à -55 C à la solution de 7-ADCA préparé en (b). L'exothermie est maintenue à -25 C. Puis le mélange est agité à -25 C pendant 1 heure. On prélève 1 ml du mélange de réaction et le contrôle suivant est effectué: Le mélange est dilué à 10 ml avec H20; sur une plaque GF 254 on place 30, 50, 100 ml en compa- raison avec un échantillon normalisé de 7-ADCA et un échantillon normalisé de céphadroxyle et l'élution est effectuée dans 25 ml de CH3CN: 4 ml de H20: 2 ml de HCOOH. On effectue la détection avec de la ninidrine en observant la disparition de 7-ADCA et l'apparition d'un spot de céphadroxyle. La température est élevée à 0 ' C et l'hydrolyse de l'énamine est déclenchée par addition d'- une solution de 37% HCl à un pH constant 1,8. A pH constant de 1,8, on ajoute 260 ml de chlorure de méthylène, on agite pendant 10 minutes et on décante; la phase inférieure contenant du chlorure de méthylène et de l'acétone est éliminée, tandis que la phase supérieure contenant le cépha- droxyle est analysée par HPLC et révèle une transformation de 97% par rapport au rendement théorique. Les eaux riches ainsi obtenues - 6 - sont additionnées à 250 ml. de formamide de diméthyle (DMF) et ml d'acétone et, à 0 C, on ajoute goutte à goutte de la trié- thylamine à pH 6,5; puis la cristallisation est amorcée ou obte- nue par ensemencement avec 0,5 g de solvate céphadroxyle DMF, 1'- on obtient ainsi un produit cristallin qui, après 2 heures à 0 C, est filtré, lavé sur le filtre avec un mélange de 100 ml de DMF et H20 (1: 1), puis avec 100 ml d'acétone. Le produit obtenu est séché à 40 C. On obtient 58,8 g. de solvate de céphadroxyle DMF, ce qui équivaut à 90% du rendement théorique. Spot unique TLC CJ_D = +122 à l'état sec, KF = 1,8%, DMF (avec GLC) + 16,2%. d) Préparation de monohydrate de céE!hadroxle Le solvate obtenu en (c) est ajouté à 100 ml de H20, sous agitation et à 40 C. Apres 30 minutes à 40 C, le mélange est refroidi à 0 C et, après 2 heures de cristallisation, filtré, lavé avec 30 ml d'eau glacée, séché à 40 C et l'on obtient 41,5 g de monohydrate de céphadroxyle. K.F. = 5,8%,/_-D = +168 à l'état sec, titre microbiologique 933 mcg/mg. Les liqueurs mères de filtrage ont été diluées avec 250 ml de DMF; le produit étant cristallisé et filtré, on a obtenu 3,6 g. de solvate DMF de céphadroxyle qui, lors de la conversion effectuée comme ci-dessus, produit 2,5 g de monohydrate de cépha- droxyle avec __D = +165Q à l'état sec. Avec les 41,5 g préala- blement obtenus, on obtient 45 g, ce qui équivaut à un rendement de 78,7% sur le 7-ADCA de départ. Exemple 2 a) Prétaration d'éthoxy carbonyl D- -_ll-carbométhoxy:peropényle_ amino phdroxyb phény _acétate On introduit 280 ml d'acétone anhydre dans un flacon de réaction et, après refroidissement à -45 C on ajoute 47,6 g. (0,157 moles) de méthyle potassium sel de Dane D(-)p-hydroxy-phényl- glycine; toujours à -45 C, on ajoute 17,57 g (0,162 moles) de chloroformiate d'éthyle et 0,4 ml de N-méthyle morpholine. L'exothermie est maintenue à -30 C, et la réaction s'- effectue à -30 C pendant 2 heures. Le mélange de réaction est refroidi à -50 C. b) Dissolution de 7-ADCA Le même procédé est suivi et les mêmes quantités de réactifs sont utilisées comme en (b) de l'exemple 1, à l'excep- -7 tion de l'utilisation de 130 ml de formamide au lieu du DMSO. c) Solvate céPhadrox2le de DMF On utilise les mêmes procédés et réactifs qu'en (c) de l'exemple 1. La solution des eaux riches est analysée par HPLC avec un taux de transformation de 97%. 59,5 g. de solvate DMF de cépha- droxyle sont isolés avec un rendement de 90,9%.L7D = +122 ; K.F. = 2%. d) Préparation de mo nohydra te de cé 2hadroxyle En suivant le même procédé et en utilisant les mêmes quantités décrites en (d) à l'exemple 1, une quantité totale de ,5 g. de céphadroxyle sera obtenue; titre microbiologique - 928 mcg/mg;' --\D = +173 à l'état sec, avec un rendement de 79,6%. Exemple 3 On a utilisé le même procédé et les quantités décrites à l'exemple 1, à l'exception du fait que, dans l'étape (b) on utilise ml de formamide de diméthyle (DMF) au lieu du DMSO. On obtient 44 g. de monohydrate de céphadroxyle. /L çD = +170 à l'état sec; K.F. = 5,8%, titre microbiologique 932 mcg/mg. Exemple 4 a) Préparation d'éthoxy-carbonyl O v( {1 carbométhox.y-2ropênyl1 aminophydroxyphénlacétate On utilise le même procédé et les quantités décrits en (a) à l'exemple 1. La suspension d'anhydride mixte est refroidie à -45 C. b) Dissolution de 7-ADCA On utilise le même procédé et les quantités décrits en (b) à l'exemple 1, à l'exception de l'emploi de 130 ml de dimé- thyle acétamide au lieu de DMSO. c) Préparation de monohydrate de c_éhadroxyle La solution de 7-ADCA préparée en (b) est ajoutée à la suspension d'anhydride mixte préparée en (a), refroidie à -45 C. L'exothermie est maintenue à -25 C. La réaction s'effectue à - 25 C pendant 1 heure sur une partie de solution montrant la formation de céphadroxyle et l'absence de 7-ADCA de départ. La température est alors élevé à 0 C et l'hydrolyse de l'anamine est déclenchée par addition d'une solution de 37% HCl à pH constant 2,0 (toujours à O0 C). - 8 - A pH constant 2,0, on ajoute 260 ml de chlorure de méthy- lène, puis on mélange pendant 10 minutes et on décante, La phase inférieure contenant le chlorure de méthylène et l'acétone est éliminée, tandis que la phase supérieure contenant le céphadroxyle est analysée par HPLC; un rendement de conversion de 95% a été trouvé. Les phases aqueuses ainsi obtenues sont filtrées sur dicalite à +25 C, le pH est amené à 5 avec de la triéthylamine, la cristallisation est déclenchée avec 0,5 g de monohydrate de céphadroxyle et, après 2 heures sous agitation, on filtre et on obtient 23 9 de monohydrate de céphadroxyle;/'rç D = +1720 à l'état sec; K.F. = 6,2%, titre microbiologique 929 mcg/mg; rendement 40,2%. Les liqueurs mères de filtrage sont additionnées avec 300 ml de DMF; le solvate formamide diméthyle céphadroxyle est cristallisé et collecté par filtrage, puis séché, ce qui donne 32,5 g de solvate diméthyle formamideKlc_ D = +121 ; K.F. = 1,8%. Par conversion, en suivant le procédé décrit en (d) de l'exemple 1, on obtient 22,9 de monohydrate de céphadroxylef---7D = +1730; K.F. = 5,8%, titre microbiologique 928 mcg/mg. Le rendement total est 45,9 g, c'est-à-dire 80,3% par rapport au rendement théo- rique. Exemple 5 On utilise le même procédé avec les mêmes quantités de réactifs décrits à l'exemple 1, à l'exception du fait que dans 1'- opération (b) on utilise 18,75 g (0,185 moles) de triéthylamine pour la dissolution de 7-ADCA. - On obtient 44 g de monohydrate de céphadroxyle; rende- ment 76,9Lc D: +171 C à l'état sec; K.F. = 6%; titre HPLC 98,9% à l'état sec. Exemple 6 On utilise le même procédé et les mêmes quantités de réactifs qu'à l'exemple 1, à l'exception du fait qu'à l'opération (b) 16,2 g (0,160 moles) de triéthylamine sont utilisés pour la dissolution de 7-ADCA. On obtient 44,5 g. de monohydrate céphadroxyle; rende- ment 77,8%, titre microbiologique 930 mcg/mg. Dans les exemples précédents, le monohydrate de cépha- droxyle est obtenu avec les caractéristiques analytiques moyennes suivantes: Apparence: I.R. Humidité: pH 100 mg/ml: Titre siodométrique Titre spectrophotométrique 260 lu Titre H.P.L.C. Rotation spécifique/- identification positive en compa- raison avec l'étalon 6,1 % 4,5 98,5% sur matériau sec 99,2% " 99,8% " + 172 ,, ,5% " 99% " 930 mcg/mg non toxique Il il il Il il Il Il il : 922 mcg/mg : non décelable : 0,06% : 0,05% 0,1% Exemple 7 a) Préparation d'éthoxycarbonyl D- i -(1-carbométhoxyproeénïl) aminophénïl acétate- On introduit dans un flacon de réaction 250 ml d'acétone anhydre, K.F. 0, 1%, puis 43 g (0,15 moles) de sel de Dane méthyle potassium de D(-)phényl-glycine. Le mélange est refroidi à -40 C, additionné de 16,7 g (0,1545 moles) de chloroformiate d'éthyle, puis de 0,3 ml N-méthyl morpholine. L'exothermie est comprise dans les limites de -30 C; le mélange est agité à -30 C pendant 2 heures. La suspension d'anhydride mixte est refroidie à -50 C. b) Dissolution de 7-ADCA 8Oml d'eau déionisée sont introduits dans un flacon de réaction, puis on introduit 32,1 g. (0,15 moles) de 7-ADCA et ml de DMSO. A 14 C, on ajoute 16,9 g (0,167 moles) de trié- thylamine avec une solution de 7-ADCA; le pH de la solution est contrôlé à 10 et le mélange est alors refroidi à 0 C. - 10 - c) Monohydratede cé2haléxine La suspension d'anhydride mixte préparée en (a) et refroidie à -50 C est rapidement ajoutée à la solution de 7-ADCA préparée en (b). L'exothermie est maintenue à -30 C. Le mélange est agité à -30 C pendant 1 heure. Une partie de la solution a été prélevée et contrôlée avec TLC (en utilisant comme éluant 25 ml de CH3CN: 4 ml de H20: 2 ml HCOOH); 1 ml de solution a été dilué à 10 ml avec de l'eau déionisée; 30, 50, 100 ml sont placés sur une plaque GF 254 avec comparaison d'un étalon de 7-ADCA et céphaléxine; l'élution s'- effectue et la détection est faite avec de la ninidrine. La for- mation de céphaléxine et l'absence de 7-ADCA sont observées. La température est élevée à 0 C, puis l'hydrolyse de l'énamine est déclenchée par addition d'une solution de 37% d'- acide chlorhydrique à pH 1,8. A l'achèvement de l'hydrolyse et à un pH constant de 1,8, on ajoute 200 ml de chlorure de méthylène et on agite pendant 10 minutes, puis on décante pendant 30 minutes. La phase inférieure contenant le chlorure de méthylène plus l'acé- tone est éliminée, tandis que sur la phase supérieure contenant les eaux riches, HPLC est prélevé, montrant un degré de conversion de 97% en monohydrate de céphalexine. La phase aqueuse est alors ajoutée à 50 ml de méthanol, chauffée à 30 C, le pH est réglé à 4,3 avec de la triéthylamine en provoquant la cristallisation du produit; on ajoute 200 ml d'acétone, le mélange est refroidi à 15 C et, après agitation pendant 2 heures, filtré, lavé avec ml d'eau: acétone 1: let séché à 40 C. On obtient 45 g. de monohydrate de céphalexine; K.F. = 5,8%, -7D = +156 à l'état sec, titre microbiologique 928 mcg/mg, avec un rendement de 82% sur 7-ADCA. Exemple 8 a) Préparation d'éthoxy carbonvl D- o& 1-carbométhoxypropényli amino _hén.l acétate. On utilise le même procédé et les mêmes quantités de réactifs décrits en (a) à l'exemple 7. La suspension d'anhydride mixte est refroidie à -55 C. b) Dissolution de 7-ADCA On utilise le même procédé et les mêmes quantités de réactifs qu'en (b) à l'exemple 7, à l'exception du fait qu'on - 11 - utilise 120 ml de diméthyle formamide (DMF) au lieu de 130 ml DMSO. c) éb!i!ne diméthl formamide solvate_ _-__-__ _ _ _ _ _f__ _ _ _- - - - - - - - - - - La suspension d'anhydride mixte preparée en (a) et re- froidie à - 55 C, est rapidement ajoutée à la solution de 7-ADCA préparée en (b). L'exothermie est comprise à l'intérieur de -30 C et l'on fait alors réagir le mélange à -30 C pendant i heure. On effectue un TLC revelant l'absence de 7-ADCA non- réagi. La température est élevée à 0 C, puis l'hydrolyse de l'énamine est déclenchée par addition d'une solution de 37% d'- acide chlorhydrique à pH 2,2. A l'achèvement de l'hydrolyse à pH constant 2,2, on ajoute 200 ml de chlorure de méthylene, puis on agite pendant 10 minutes et on déocante pendant 30 minutes.La phase inférieure contenant le chlorure de méthylène plus l'acetone est éliminée, tandis que HPLC est effectué sur la phase supérieure contenant les eaux riches, montrant un taux de conversion de 96% en monohydrate de céphalexine. La phase aqueuse est alors additionnée à 250 ml de DMF et 100 ml d'acétone, le mélange est chauffé à +30 C et on commence l'addition de triéthylamine à pH 5. On ajoute 0,5 g de solvate DMF céphalexine et le produit est cristallisé. Apres 30 minutes, on ajoute de nouveau TEA à pH 7 et, après 2 heures à 30 C, le produit est filtre, lavé avec une solution de 100 ml DMF: H20 9: 1, puis avec de l'acetone et finalement séché à 40 C. On obtient 56,7 g de solvate DMF de céphalexine; K.F. = 1,3%; [C7]D = +110 à l'état sec. DMF (G.L.C.) = 16%. d) lonohdrate de chalxine Le solvate DMF céphalexine obtenu comme cidessus est ajouté à 150 ml de H20, refroidi à 0 C en des portions de 5 g chacune. Quand cette addition est terminee, 300 ml d'acétone sont additionnés et on laisse le mélange cristalliser à 0 C pendant 3 heures. On filtre le produit obtenu, on le lave avec 200 ml d'un mélange H20: acetone: 1: 1, puis avec de l'acetone, le produit est séché à 40 C et on obtient 44,2 g de monohydrate de cephalexine; rendement 80,7%, pureté microbiologique 928 mcg/mg. - 12 - * K.F. = 5,5%. LcG7D = +155 à l'état sec. Exemple 9 a) Prêparation d'acétate amino 2hényl d'éthoxy carbonyl-D-oX- il-carbométhoxï2r2pény!e2 On introduit dans un flacon de réaction 230 ml d'acétone anhydre et 43 g (0,15 moles) de sel de Dane de méthyl potassium D(-)phényl glycine. Le mélange est refroidi à -45 C, puis on ajoute 16,7 g (0,1545 moles) d'éthyl chloroformiate et 0,3 ml N-méthyl morpholine. L'exothermie est maintenue à -25 C. Le mélange est agité à -25 C pendant 2 heures. La suspension d'anhydride mixte est refroidie à -55 C. b) Dissolution de 7-ADCA On introduit dans un flacon de réaction 80 ml d'eau déionisée et ensuite 32,1 g (0,15 moles) de formamide. On ajoute 16, 9 g (0,167 moles) de triéthylamine à 15 C avec dissolution de 7-ADCA en 15 minutes. Le mélange est alors refroidi à 0 C. c) Solvate formamide cébhlaTéxine La suspension d'anhydride mixte préparée en (a) et refroidieà - 55 C est rapidement ajoutée à la solution de 7-ADCA préparée en (b). L'exothermie est maintenue à -25 C et on laisse le mélange réagir à -25 C pendant 1 heure. On effectue TLC qui révèle l'absence de 7-ADCA. La température est élevee à 0 C, puis l'hydrolyse de l'énamine est déclenchée par addition d'une solution de 37% d'- acide chlorhydrique à pH 1,6. A l'achèvement de l'hydrolyse et à pH constant 1,6, on effectue HPLC, révélant une conversion de 97% du rendement thé- orique. Les eaux riches sont filtrées sur dicalite, puis on chauffe à + 30 C et on ajoute goutte à goutte de la triéthylamine à pH 5. Le produit est cristallisé, on le laisse reposer à 30 C pendant 1 heure, puis on refroidit à O0 C et, après 2 heures à cette température, on le filtre, on le lave avec de l'acétone et on le sèche à 40 C. On obtient 53 g de solvate formamide céphalexine; &-cID = +100 à l'état sec; K.F. = 2,1%, formamide = 10,5% (G.L.C.). - 13 - Selon le demandeur, ce solvate est un composé nouveau qui n'est pas décrit dans la littérature. d) Monohydrate de céphaléxine Le solvate de formamide obtenu ci-dessus est transformé en céphalexine en suivant le même procédé que décrit en (d) à l'exemple 8. On obtient 43,8 g, avec un rendement de 80% sur 7-ADCA. L _7D = +154 à l'état sec; titre microbiologique 927 mcg/mg. Exemple 10 a) Préearation d'acétate _hényl amino éthox carbon! D-_ -l- car- _ - - -- - - - _ __ __ _ in_ _ th_ _q bq y _Q _ _ _ar bométhoxyEroEEénle) On introduit dans un flacon de réaction 250 ml d'acétone anhydre K.F. = 0,1% et 45,9 g (0,160 moles) de sel de Dane de méthyl potassium de D(-) phénylglycine. Le mélange est refroidi à -40 C, puis additionné à 17,9 g (0,165 moles) d'éthyl chloro- formiate et 0,3 ml de N-méthyl morpholine.L'exothermie est main- tenue à -35 C. Le mélange est alors agité à une température de -35 C pendant 2 heures. La suspension est refroidie a -50 C. b) Dissolution de 7-ADCA On introduit dans un flacon de réaction 80ml d'eau dé- ionisée et ensuite 32,1 g (0,15 moles) de 7-ADCA et 135 ml de diméthylacétamide (DMAC). A 15 C, on ajoute 16,9 g (0,167 moles) de triéthylamine. 7-ADCA est dissous, cependant que l'on contrôle le pH de la solution à environ 10; puisl'on refroidit à 0 C. c) Pré2aration de monohydrate de céEhalexine On suit le même procédé avec les quantités de réactifs décrits en (c) à l'exemple 7. On obtient 43 g de monohydrate de céphalexine avec un rendement de 78,5%. K.F. = 5,85% Li /D = +155 à l'état sec; titre spectrophotométrique 98,8%. Exemple 11: a) Préparation d'acétate de _hényl amino éthoxy carbonyl D- i - ( 1-carbom ét ho xy -jr o én On introduit dans un flacon de réaction 220 ml d'acétone anhydre K.F. = 0,1 %, puis 43 g (0,15 moles) de sel de Dane de méthyle potassium de D(-)phénylglycine. Le mélange est refroidi à -35 C et l'on ajoute 16,7 g (0,1545 moles) d'éthyle chlorofor- miate, puis 0,4 ml N- éthyle morpholine. - 14 - L'exothermie est maintenue à -30 C. Le mélange est agité à -30 C pendant 2 heures. La suspension d'anhydride mixte est refroidie à -55 C. b) Dissolution de 7-ADCA On introduit dans un flacon de réaction 80 ml d'eau dé- ionisée, puis 32,1 g (0,15 moles) de 7-ADCA et 130 ml de DMSO. A 15 C, on ajoute 18,75 g (0,185 moles) de triéthylamine avec dissolution de 7-ADCA et, après mélange pendant 30 minutes, la solution est refroidie à 0 C. c) Monohydrate de ceéhalex me En suivant le même procédé et en utilisant les mêmes quantités de réactifs qu'en (c) de l'exemple 7, on obtient 43,5 g de monohydrate de céphalexine; rendement 79,4%, titre microbio- logique 928 mcg mg. K.F. = 6,3%. Exemple 12 a) Pré2aration de l'acétate hényl amino ethoxy_ carbonïl!D-s_-_ lcarbométhox_ progEgp9nl On utilise le même procédé, avec les quantités de réac- tifs décrits en (a) à l'exemple 11. La suspension d'anhydride mixte est refroidie à -50 C. b) Dissolution de 7-ADCA On introduit dans un flacon de réaction 85 ml d'eau déionisée, puis 32,1 g (0,15 moles) de 7-ADCA et 135 ml de diméthylacétamide. A 15 C, on commence l'addition de 16,2 g (0,160 moles) de triéthylamine. L'addition se termine en 10 minu- tes avec un pH d'environ -10 et une dissolution complète de 7-ADCA. La solution obtenue est refroidie à 0 C. c) Monoh9drate de céhalexine On utilise le même procédé avec les quantités de réactifs décrits en (c) à l'exemple 7. On obtient 44,2 g de monohydrate de céphalexine; rendement 80,7%; /-,-_D = +155 à l'état sec. K.F. = 6,5% Dans tous les exemples décrits ci- dessus, les solvants ont été utilisés pour dissoudre 7-ADCA. Si, au lieu de les utili- ser pour la dissolution de 7-ADCA, on utilisait les solvants pour la dissolution d'un anhydride mixte au cours de sa préparation, on obtiendrait une réduction très importante des rendements en produit final, tout en suivant les mêmes procédés que ceux qui ont été décrits. - 15 - Dans les exemples décrits ci-dessus, le monohydrate de céphalexine est obtenu avec les caractéristiques suivantes de nature analytique: Apparence: I.R. Humidité KF. pH 100 mg/ml Titre Iodométrique Titre spectrophotométrique Titre HPLC Titre acidimétrique Titre amino Rotation spécifique /c,?D Titre microbiologique Toxicité Stabilité 65 pendant 7 jours Solvants déterminés pour GLC: Diméthylaniline Chlorure de méthylène Triéthylamine Acétone : Poudre cristalline blanche : Identification positive en comparaison de l'étalon : 6,1% : 4,2 : 99,2% sur du matériau anhydre : 98,8% : 98,5% : 100,8% : 99,2% : +155 l : 932 mcg/mg : non toxique : 920 mcg/mg : non décelable : 0,04% : 0,05% : 0,1% - 16 - REVENDICATIONS: 1. Procédé de préparation de dérivés de l'acide 7-amino désacétoxy céphalosporanique de formule: R - CH-C-liH NH2 o0 COOH - dans laquelle R est -H ou -OH, caractérisé en ce qu'on ajoute un anhydride mixte ayant la formule: 0 0 R / -CH-kO-k-OR1 NH (II) C3 CH-COR2 dans laquelle R est -H ou -OH, R1 est le méthyle, l'éthyle ou l'- isobutyle et R2 est le mé-thoxyle ou l'éthoxyle, à une température comprise entre -60cC et -10 C, à une solution obtenue en sali- fiant 7-ADCA avec la triéthylamine, en quantité comprise entre 1,05 à 1, 25 moles par rapport à 7-ADCA, dans un solvant pris dans le groupe comprenant le sulfoxyde diméthyle, la diméthylacétamide, la formamide, la diméthylformamide et le dioxane, en présence d'- eau et à une température comprise entre 0 C et +20 C, l'anhydride mixte étant en quantité au moins équimolaire par rapport à la quantité de 7-ADCA, puis l'on enlève le groupe énamine en abais- sant le pH du mélange de réaction à une valeur comprise entre 0,8 et 2,5 par addition d'une solution aqueuse d'un acide inorganique, et, finalement, l'on isole le produit fini- - 17 - 2- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que les solvants de 7-ADCA sont en quantité comprise entre 10 et 25 moles par mole de 7-ADCA. 3- Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'après addition, à la phase aqueuse obtenue par ajout d'une solution aqueuse d'un acide inorganique au mélange de réaction, d'un mélange de DMF et d'acétone et traitement à la triéthylamine, les solvates des produits ainsi formés avec la diméthylformamide sont cristallisés et traités finalement à l'eau pour obtenir, après addi- tion d'acétone, les monohydrates purs des produits déri- vés et qui finalement sont isolés conformément à des tech- niques connues.