FR 2473519 A1 19810717 FR 8100378 A 19810112 La présente invention concerne des terpénoides conte- nant deux groupes fonctionnels et répondant à la formule gé- nérale (I): CH CH 3 3 R_--CH-CH,+CH.- H-CH2 n 0A (I) dans laquelle n est un entier de 1 à 5, R représente un grou- pe hydroxyméthyle, formyle ou carboxyle, et A représente l'hy- drogène, ou un groupe 2-tétrahydropyranyle, benzyle, méthoxy- méthyle ou méthoxyéthoxyméthyle, sous réserve que lorsque A est un des groupes autres que l'hydrogène, R représente un groupe carboxyle, un procédé de préparation de ces terpénoY- des par oxydation d'un composé répondant & la formule (I) dans laquelle R est un groupe méthyle et A est un groupe 2-tétra- hydropyranyle, benzyle, méthoxyméthyle ou méthoxyéthoxyméthyle, avec un microorganisme, et une composition anti-ulcéreuse con- tenant un tel terpénolde. Les publications de demandes de brevets japonais NOS 54 (1979) - 70430 et 54 (1979) - 76513 indiquent respectivement que certains terpénoúdes à structure du type en chatne (acy- cliques) contenant un groupe hydroxyle a une extrémité et les esters de ces terpénoldes ont une activité hypotensive. Conformément à l'invention, on a trouvé qu'un composé répondant à la formule générale (I), dans lequel A est l'hy- drogène, est actif comme agent anti-ulcéreux. Conformément & un autre aspect de l'invention, on a trou- vé qu'un composé répondant à la formule générale (I) était uti- le comme intermédiaire pour la préparation de composés pharma- ceutiquement actifs tels que l'alcool polyprénylique. L'alcool polyprénylique est intéressant d'une part comme agent hypotensif, et d'autre part, pour former la chaine laté- rale du coenzyme Q pharmaceutiquement actif. L'alcool polypré- nylique peut se préparer à partir d'un composé répondant à la formule générale (I) dans laquelle R est le groupe hydroxymé- thyle,et A est un groupe protecteur du groupe hydroxyle tel que les groupes 2-tétrahydropyranyle, benzyle, méthoxymethyle ou méthoxyéthoxynméthyle, par la réaction de prolongation de la cha ne carbonée représentée ci-dessous: HO bromation Br { mO-Y H SQ2 R --> H "iy SO2R désulfination réductrice _. _ _ >N HÀú +m._0 elimination du groupe protecteur Dans les 6quations ci-dessus, i et m sont des entiers et Y représente le groupe protecteur du groupe hydroxyle. R1 est un groupe alkyle en C en C ou un groupe aryle tel que 1. 4 benzène ou toluène. En conséquence, un composa répondant à la formule gén6- raie (I) peut être utilisé en sol, com.ne intermédiaire pour H 0OR _Iî +M la préparation de l'alcool polyprénylique, sous réserve que dans le composé de départ répondant à la formule générale (I), R représente le groupe hydroxyméthyle et A représente un grou- pe 2-tétrahydropyranyle, benzyle, méthoxyméthyle ou méthoxy- éthoxyméthyle. Un composé répondant à la formule générale (I), dans laquelle R représente un groupe formyle ou carboxyle et/ ou A représente l'hydrogène peut aussi être utilisé comme in- termédiaire si le groupe formyle ou le groupe carboxyle est réduit pour former le groupe hydroxyméthyle et/ou si l'atome d'hydrogène est protégé par un groupe protecteur approprié. Comme procédé d'oxydation d'un groupe terminal d'un terpénorde du type à structure en chatne ayant un groupe fonc- tionnel à l'autre extrémité, il est indiqué dans la publica- tion de la demande de brevet japonais N0 53 (1978) - 103445, qu'un terpénolde & structure en chaîne ayant à une extrémité un groupe hydroxyle protégé par un groupe protecteur, peut ê- tre oxydé par l'oxyde de sélénium pour transformer l'autre groupe terminal en un groupe formyle, puis être réduit. Ce procédé donne cependant un mauvaisrendement au stade de l'oxy- dation. Cette tendance est remarquable, en particulier dans le cas de la réaction d'un composé ayant une cha ne carbonée plus longue. On notera en outre que l'opération d'oxydation fournit intrinsèquement un composé organique du sélénium comme sous- produit. La séparation du sous-produit ainsi formé du composé désiré est très difficile même par un procédé tel que la chro- matographie sur colonne ou la distillation. Le composé organi- que du sélénium est connu pour être toxique pour l'homme. Par conséquent, le procédé ci-dessus n'est pas préféré comme pro- cédé de préparation d'un intermédiaire pour la synthèse d'un composé pharmaceutiquement actif. Compte-tenu du problème ci-dessus, la Demanderesse a étudié un procédé utilisant un microorganisme et elle a décou- vert qu'une oxydation par les microorganismes, utilisant un microorganisme appartenant au genre Nocardia, peut être employé pour la préparation du composé désiré, ce qui supprime le pro- 24735-19 blême décrit ci-dessus. Le procédé de l'invention utilisant le microorganisme Nocardia, peut être utilisé pour la production de masse du composé désiré en augmentant la taille du système de culture. En outre, le réactif n'ayant pas réagi peut aisé- ment être récupéré et réutilisé comme réactif de départ. Une souche représentative du genre Nocardia et qui est avantageusement utilisée dans l'invention est celle nommée BPM 1613 qui a été déposée au Fermentation Research Institute, the Agency of Industrial Science and Technology à 1-1-3, Hi- gashi, Tsukuba-Yatabe-machi, Ibaraki-prefecture, Japon, et qui a été ajoutée à sa collection de microorganismes sous la dési- gnation FERM-P N 1609. Les caractéristiques mycologiques de la souche représentative nommée BPM 1613 sont données ci-des- sous. La couleur est exprimée selon le "Color Standard" pu- blié par le Nippon Shikisai Kenkyusho (Japan Color Research Center), Japon. A. Forme des cellules La souche de l'invention présente une couleur caracté- ristique orangée à rose dans presque tous les milieux de cul- ture, comme le montrent les caractéristiques de culture ci- après. Une jeune cellule végétative croit sous une forme mycé- loide, on observe rarement une ramification. Dans un système cultivé âgé, l'hyphe est divisée pour former un bacille (0,4 - 0,6 x 1,8 à 2,4 mm). Gram positif. Pas de flagelle. Négatif à la coloration acide-rapide selon la méthode de Ziehl-Neelsen. On n'observe pas de mycélium aérien. B. Caractéristiques de culture sur divers milieux (1) milieu gélose au saccharose-nitrate (30 C): faible développement, colonie colorée en rose, pas de pigment diffusant (2) milieu gélose au glucose-asparagine (30 C) : aucun développement (3) milieu gélose au glycérol-asparagine (30 C): faible développement, colonie colorée en rose, pas de pigment diffusant (4) milieu gélose & l'amidon (30 C): aucun développement (5) milieu gélose à la tyrosine (30 C): faible développement, colonie de couleur blanc-gri sâtre, pas de pigment diffusant (6) milieu gélose nutritif (30 C): développement modéré, colonie de couleur orangée, pas de pigment diffusant (7) milieu gélose à la levure-malt (30 C): fort développement, colonie de couleur orangée, pas de pigment diffusant (8) milieu gélose à la farine d'avoine (30 C): développement modéré, colonie de couleur orangée, pas de pigment diffusant. (9) milieu gélose au malate de calcium (27 C): développement modéré, colonie de couleur rose (10) milieu ovalbumine (incliné, 27 C): faible développement, colonie blanche (11) milieu pomme de terre coupée (27 C): développement modéré, colonie orangée clair (12) milieu carotte coupée (27 C): développement modéré, colonie orangé clair C. Caractéristiques physiologiques (1) Intervalle de températures de développement (sur milieu gélose nutritif, incliné): 20 - 42 C (2) Liquéfaction de la gélatine: négative (3) Hydrolyse de l'amidon: négative (4) Coagulation du lait écrémé, peptonisation: négati' (5) Lait de tournesol: inchangé (6) Production de pigment mélanoide: négative (7) Réduction du nitrate: positive (8) Aucune production de gaz ou d'acide à partir de L-arabinose, D-xylose, D-glucose, D-fructose, su- crose, D-mannitol, glycérol, lactose, D-galactose, D-mannose, maltose, tréhalose, amidon ve i- (9) Essai à la catalase: négatif (10) Production d'indole: négative (11) Production d'hydrogène sulfuré: négative D. Capacité d'assimilation de diverses sources de carbone (milieu gélose de Pridham-Gottlieb, 30 OC, 7 jours) L-arabinose (+), D-xylose (4), Dglucose (++), D-fructose (++), sucrose (++), inositol (+), L-rham- nose (-), raffinose (+), D-mannitol (+) (dans ce qui précède, (++) signifie développement modéré, (+) développement faible et (-) aucun développement). La souche identifiée ci-dessus, cultivée sur le milieu Glycérol Kelner Morton conformément au procéd6 d'Arai et al. décrit dans Journal of General Applied Microbiology, 9, 119 (1963): The actinomycetales, The Jena International Symposium on Taxonomy, 273 (1968) donne les bandes d'absorption IR ca- ractéristiques du genre Nocardia, à savoir I: types C et E. II: type C, III: type C, IV: type D. L'étude des caract6ristiques de la souche d6crites ci- dessus en se référant à l'ouvrage de Bergey:: Manual of Deter- minative Bacteriology, 7è édition, et à l'ouvrage de Waksman "The Actinomycetes", Vol.2, montre que la souche appartient au genre Nocardia. On décrira à présent un procédé de préparation du com- posé de l'invention. Dans un premier stade, on cultive un microorganisme ap- partenant au genre Nocardia et présentant une activité oxydan- te pour un compos6 répondant à la formule générale (II): CH CH3 1 3 (1I) CH3-C=CH-CH2fCH2-C=CH-CH2)nO-A (II) dans laquelle A' représente un groupe 2-tétrahydropyranyle, benzyle, méthoxyméthyle ou méthoxyéthoxyméthyle, et n est un entier de 1 à 5, dans un milieu de culture contenant un compos6 répondant à la formule générale (II) comme source de carbone. Puis on recueille dans le milieu de culture le com- posé ainsi produit répondant à la formule générale (III) CH CH 3 1 3 R-C=CH-CH2fCH2-C=CH-CH2nO-A' (III) dans laquelle R représente un groupe hydroxyméthyle, formyle ou carboxyle, et n et At ont les mêmes significations que ci- dessus. Enfin on élimine le groupe protecteur du composé ré- pondant à la formule générale III pour obtenir un composé ré- pondant à la formule générale (IV): CH3 CH3 R-C=CH-CH,(CH2-C=CH-CH, V (IV) dans laquelle R et n ont les mêmes significations que précé- demment. Il n'existe pas de limitation spéciale au microorganisme de l'invention appartenant au genre Nocardia, pourvu qu'il ait une activité oxydante sur un composé répondant à la formule générale (II). Comme exemples de ces microorganismes, on cite- ra la souche de BPM 1613, FERM-P N0 1609, spécifiée précédem- ment. Les modes opératoires de culture détaillés sont les sui- vants. En plus du composé répondant à la formule générale II incorporé comme source de carbone, on peut choisir des sources d'autres agents nutritifs pour la culture parmi les sources classiques. Comme source d'azote, on peut citer des nitrates comme le nitrate de potassium, le nitrate de sodium et le ni- trate d'ammonium, des sels d'ammonium comme le chlorure d'am- monium, le sulfate d'ammonium et le phosphate d'ammonium, l'ammoniaque et l'urée. On peut aussi incorporer au milieu, si nécessaire, d'autres sels minéraux tels que le phosphate de potassium, le phosphate de sodium, le sulfate de magnésium, 24735 19 le sulfate ferrique et le sulfate de manganèse, et d'autres sources d'agents nutritifs organiques tels que des vitamines, des axino-acides, des extraits de levures, des liqueurs de macération de mais et des extraits de malt contenant ces a- gents nutritifs. Le milieu est de préférence ajusté à un pH alcalin, par exemple dans l'intervalle de 7 à 10. La culture s'effectue commodément à une température de 20 à 40 OC, pen- dant 3 à 5 jours et en aérobie, par exemple en effectuant la culture avec aération et sous agitation. Lorsque la culture est terminée, on extrait le milieu de culture par un solvant organique pour récupérer un composé répondant à la formule générale (III). Comme solvant d'extrac- tion, on peut utiliser l'éther éthylique, le benzène, le chlo- roforme etc... Le composé répondant à la formule générale (III) peut être séparé et purifié sur une colonne de gel de silice. Les réactifs n'ayant pas réagi peuvent être récupérés par le mode opératoire dtextraction indiqué ci-dessus et par chromatographie sur colonne, avec un rendement d'environ 80 à 90 % et réutilisés comme réactifs pour un autre cycle. On peut obtenir un composé portant un groupe hydroxymé- thyle, formyle ou carboxyle à son extrémité suivant le degré de l'oxydation microbiologique. En outre, on peut faire varier la configuration du produit obtenu en modifiant les conditions de culture, le groupe protecteur du groupe hydroxyle du com- posé de départ etc... L'élimination du groupe protecteur d'un composé répon- dant à la formule générale (III) peut s'effectuer d'une maniè- re classique, suivant le groupe protecteur à éliminer. Par e- xemple, on peut éliminer les groupes tétrahydropyranyle, mé- thoxyméthyle et méthoxyéthoxyméthyle en milieu acide, et le groupe benzyle en milieu réducteur. Les résultats des essais pharmacologiques et toxicologi- ques effectués sur le composé de l'invention sont les suivants: (1) Effet sur l'ulcère de stress induit par contrainte à froid L'effet inhibiteur du composé d'essai sur l'ulcère de stress induit par contrainte à froid a été déterminé par la méthode de Levine (Proc. Soc. Exptl. Biol. Med, vol. 124 p.1221 (1967) en utilisant des rats (famille SD, femelles, pesant environ 170 9, âgées de 8 à 10 semaines). Les composés d'essai sont les suivants: Acide 12-hydroxy-2,6-10-triméthyl-2,6,10-dodécatrienor- que ----- (Composé A) 2,6,10,14-tétraméthyl-2,6,10,14-hexadécatétraène-1,16- diol -- (Composé B) Acide 16-hydroxy-2,6,10,14-tétraméthyl-2,6,10,14-hexa- décatétraenorque ----- (Composé C) Acide 20-hydroxy-2,6,10,14,18-pentaméthyl-2,6,10,14,18- eicosapentaènolque -- (Composé D) Les taux d'inhibition de l'apparition de l'ulcère de stress induit par contrainte à froid obtenus par les modes opératoires de l'invention sont indiqués dans le tableau 1. O6c Composé d'essai Taux d'inhibition (%) Composé A 74,6 B 70,8 C 79,2 D 49,5 (2) Essai toxicologique On a administré par voie orale à un rat (famille SD, femelle, pesant environ 200 9) chacun des composés B et C à la dose de 5 000 mg/kg. Aucune mort n'a été observée dans au- cun essai. Comme il ressort de ces essais pharmacologiques et toxi- cologiques, le composé de l'invention est intéressant comme agent antiulcéreux. Lorsque le composé de l'invention est destiné & être utilisé comme agent anti-ulcéreux, on l'admi- nistre généralement à l'homme par voie orale ou parentérale à la dose de 50 à 1 000 mg/jour, pour un adulte. L'adminis- tration s'effectue classiquement sous forme de granulés, com- primés, capsules ou solutions injectables. Ces formes pharma- ceutiques de doses unitaires peuvent se préparer de la maniè- re habituelle en utilisant des supports pharmaceutiques clas- siques. Les exemples non limitatifs suivants sont donnés à titre d'illustration de l'invention. EXEMPLE Préparation du composé de départ CH3 CH3 CH3-C=CH-CH2fCH2-C=CH-CH2 n0O-At 1) éther tétrahydropyranylique (A' = tétrahydropyranyle) Dans du chlorure de méthylène on dissout 15 g de 3,7, 11,15-tétraméthyl-2,6,10,14-hexadecatétraène-l-ol et 1,5 g d'acide ptoluènesulfonique, et on ajoute goutte à goutte à la solution, en agitant, 8,7 g de 2,3-dihydropyrane, à une température de O à 5 C et sur une durée de 30 min. On agite encore la solution obtenue pendant 30 min, puis on la lave avec une solution aqueuse de carbonate de sodium dans une ampoule à décantation. Après le lavage, on concentre la solution, et on purifie la solution concentrée sur une colon- ne de gel de silice ce qui fournit 13 g de 1-(2-tétrahydropy- ranyl)oxy-3,7,11,15-tétraméthyl-2,6,10,14-hexadécatétraène, (rendement 68 %). D'autres éthers tétrahydropyranyliques ont été préparés de la même manière que ci-dessus. 2) Ether benzylique (A' = benzyle) A 100 ml de chlorure de benzyle, on ajoute 15 g de 3,7,11,15-tétraméthyl-2,6,10,14-hexadécatétraène-l-ol et 6, 0 g d'hydroxyde de potassium finement divisé, et on chauffe sous reflux le mélange obtenu en agitant pendant 2 heures. On refroidit le mélange, puis on lui ajoute it d:hexane. On la- ve ensuite à l'eau la solution dans l'hexane et on la concen- tre. On purifie le concentré sur une colonne de gel de silice, et l'on obtient 12 g de 1-benzyloxy-3,7,11,15-tétraméthyl-2, 6,10,14-hexadécatétraène (rendement 61 %). D'autres éthers benzyliques ont été préparés de la même manière que cidessus. Les rendements et les spectres de RMN des éthers tétra- hydropyranyliques et benzyliques ainsi obtenus sont rassemblés dans le tableau 2. (L=. ': 'HI) SE'S '(9 q 'HS) OT'S (1 q 'HT) T9't, '(HP) 9E'IE'E(HOZ) ZE'Z8L'1 8L r- s (s 'H9) 89'1 '(s 'HSI) 09'T '(H9) 9L 'I-ZE'IT ú (L=ú '4 'lHT) 9E'S T '(-.q 'HH)) r9r'1( q ' H) 9'E '(I 9E-8ú'E '(H91)IL (Y T 8Z'E8L'1 '(S 'H9) 69I '(s 'HZI) Z9' '(H9) 08'1-lZ'I (L=ú2 '4 'IT) 8E'S (I q 'lIE) ZEIS ' (: q 'HI) 09'I7 ' (HIt) SE '-OP'E '(HZI)89 ú OúE'Z08' '(s '119) OL'I '(s 'H6) Z9'T '(H9) 08'T-EI'IT (L=2 '4 'HT) úSE'S O ( q 'HZ) OT'S '(: q 'HT) 19''(HP) 9E',-Zú'E '(H8)9L Z Zú'ZE8'i '(s 'H19) 89'1 '(s 'H9) 19'1 '(H9) P8'-OZ'I (L=D '4 'HT) 9E'S (. qC 'lII) TIS ' (a q 'Hl) T9'b ' (HI) 9E'b'SE'E ' (HP)Z8 T EE'Iv8'T '(s 'H9) 891'T '(s 'HE) T9'T '(H9) P8'T-Z'T. ( E6Da3 ' 9) N (%)uM p VU V-oU- EHD-HD=D-ZHO>-IID-HD--D:-H iD útD II nvalavi ON v.- Ln Cm -q o1 v.- U'J rn Pc- (aTns) II avariv (H5) LP'L-ZI'L '(L=r 'q 'HIT) Ob'5S '(.( q 'HI) ú1'S ' EXEMPLE 1 CH CH3 R-CuCH-CH2 préparé dans l'exemple de préparation du composé de départ ci- dessus, 0,25 % de NH4N03, 0,15 % de KH2P04, 0,15 % de Na2HP04, 0,05 % de MgS04, 7H20, 0,001 % de FeSO4, 7H20, 0,001 % de Cac12, 2H20 et 0,002 % d'extrait de levure, on inocule dans un rapport volumique de 8 %, une solution de culture dans la- quelle la souche appartenant au genre Nocardia (BPM-1613, FERM-P N 1609) a été cultivée avec secousses à 30 OC pendant 2 jours sur un milieu de culture (ce dernier milieu ayant la même composition que le premier milieu cité, excepté que 1 % du compos6 de départ ont été remplacés par 0,5 % de n-paraf- fine). Le milieu ainsi inoculé est cultivé avec secousses à C pendant 5 jours dans un ballon à épaulement de 500 ml. Lorsque la culture est terminée, on extrait le milieu avec de l'éther diéthylique en milieu acide sulfurique (pH 2). On fait ensuite évaporer le solvant, et on purifie le résidu sur une colonne de gel de silice. Le développement est effec- tué avec de 1'hexane et de l'éther diéthylique. Les produits obtenus de la manière décrite ci-dessus sont énumérés dans le tableau 3, avec des données telles qu' état physique, rendement, spectre de masse et spectre de RMN. Les produits d'oxydation se révélant être des mélanges de l'al- cool, de l'aldéhyde et de l'acide carboxylique, d'après les résultats de la chromatographie sur couche mince de gel de silice. Dans le tableau 3, seuls les produits principaux sont énumérés. Les données de spectre de RMN pour les acides carbo- xyliques sont indiquées sur la base de la mesure effectuée sur des esters méthyliques des acides carboxyliques. TABLEAU III CH CH R-C1 1CH-CH 2CH2-C=CI-CH 2O-A R-UMUK-UH2tuiCH2-u=L;llCH2+n0A Etat sse n A' R physique (M+) MN (6, CDCL3) Renderent (%) Oil (as methyl ester) 1,40-1,75 (6H), 1,70 (311, s), 1,83 HOOC- 268 (3H, s), 2,06-2,50 (4H), 3,364,36 (4H), 4,63 (1H, br), 8,00 5, 39 (11H, t, J=7), 6,87 (1H, t, Jm7), 10,48 (1H, br) 14J Oil 1,40-1,88 (6H) , 1,68 (3H, s), 1,75 (3H, s), 1,96-2,36 OHC- 252 (4H), 3,37-4,32 (4H), 4, 60 (1H, br), 5,30 (F1H, t, J=7), 1,2 6,46 (1H, t, J=6), 9,38 (1H, s) (as methyl ester) 1,20-1,90 (6H), 1,60 (3H, s), 1,68 2 (EI5-ES)- 7L '(L=R '4 H' [) IL 9 (L=ú' HI) ')8: ' (L=Q ': 'Hl) ETi ' (s 'HZ) 6P '(L=ú l) 'HZ) I0(' ' (s 'HE) EL'ú '(H8) 0996'T '(s 'EIE) EZ'1 '(5 'HE) t9'T '(5 'HE) I9t'[ (asGIG TAXql se) ) 9L'IO0'I (a:se IAqtui se) ( Ei 1;); 9aQ) DUiqu (aqTns) III nva-Mvl b) Elimination du groupe protecteur (1) Ether tétrahydropyranylique A 6 ml de pyridine, on ajoute 2,35 g d'acide p-toluène- * sulfonique et on agite le mélange à la température ambiante pendant 20 min. On fait évaporer le solvant, on lave le rési- du avec de l'acétone et on le dissout dans de l'eau (3,15 mg/ml) - A 100 mg de l'acide 20-(2tétrahydropyranyl)-oxy-2, 6,10,14,18-pentaméthyl-2,6,10,14,18eicosapentaènoique obtenu comme il a été décrit au paragraphe a) cidessus, on ajoute 4 ml de la solution aqueuse obtenue comme il a été décrit ci- dessus. On agite ensuite le mélange à 55 C pendant 3 heures et on le refroidit. Puis on extrait le mélange avec 50 ml d'é- ther diéthylique et on fait évaporer l'extrait pour éliminer le solvant, ce qui fournit 82 mg d'acide 20-hydroxy-2, 6,10, 14,18-pentaméthyl-2,6,10,14,18-eicosapentaénoique. D'autres éthers tétrahydropyranyliques obtenus au para- graphe a) ci-dessus ont été traités de la même manière pour éliminer les groupes protecteurs. (2) Ether benzylique A 150 ml d'éthylamine, on ajoute morceau par morceau 1,7 g de lithium métallique en fils (contenant 1 % de sodium) A -78 C dans un courant d'azote. On laisse le mélange at- teindre -20 C de façon que le lithium métallique ajouté s'y dissolve complètement. Puis on refroidit à nouveau la solution à -78 C. Dans 50 ml de tétrahydrofurane, on dissout 5 g de l'aci- de 16-benzyloxy-2,6,10,14-tétraméthyl-2,6,10,14-hexadécatétra- eno!que obtenu comme il a été décrit au paragraphe a) ci-dessus. On ajoute goutte à goutte cette solution à la solution de li- thium préparée ci-dessus sur une durée de 30 min. On agite le mélange pendant 30 min, et on y introduit du 1,3-butadiène jusqu'à ce que sa couleur (bleue) s'affaiblisse. A la solution jaune obtenue, on ajoute du méthanol jusqu'à ce que la colora- tion jaune s'affaiblisse. Puis on la laisse reposer jusqu'à ce qu'elle atteigne la température ambiante. On recueille le pro- duit solide ainsi obtenu sur un filtre, puis on le dissout dans de l'eau. On acidifie faiblement la solution aqueuse par addition d'acide chlorhydrique 1 N en refroidissant à la glace et on l'extrait avec du n-hexane. On lave successivement l'ex- trait avec de l'eau et une solution aqueuse saturée de chlo- rure de sodium, puis on le sèche sur sulfate de magnésium. On concentre l'extrait séché et on purifie le concentré ainsi obtenu sur une colonne de gel de silice, ce qui donne 3,3 g d'acide 16-hydroxy-2,6,10,14-tétraméthyl-2,6,10,14-hexadécaté- traènoique. D'autres éthers benzyliques obtenus comme il a été dé- crit au paragraphe a) ci-dessus ont été traités de la meme ma- nière pour éliminer les groupes protecteurs. Les produits obtenus de la manière décrite ci-dessus sont énumérés dans le tableau 4, en même temps que des données telles que l'état physique, le spectre de masse et le spectre de RMN. Dans le tableau 4, les rendements marqués d'une asté- risque sont ceux de réactions d'élimination des groupes pro- tecteurs des éthers benzyliques obtenus au paragraphe (2) ci- dessus, tandis que les rendements sans astérisque sont ceux des réactions d'élimination des groupes protecteurs des éthers tétrahydropyranyliques du paragraphe (1) ci-dessus. TABLEAU IV H3 CH 3 I CH3 R-C=CH-HCH2-C:CH-nCCi2'nOH Etat asse n R physique ss RMN (6, CDC Rendenment(%) (M+) 3 Oil 1,69 (3H, s), 1,84 (3H, s), 2,02-2,50 (4H, m), 4, 18 (2H, d, J=7), 1 HOOC- 98 184 5,32 (1H, t, J=7), 6,86 (1H, t, J-6), 7, 02 (2H, br) Oil 168 1,67 (3H, s), 1,75 (3H, s), 1,96-2,30 (5H, m), 4,20 (2H, d, J=7), 1OHC- 1899 5,30 (1H, t, J=7), 6,46 (1Ht, t, J=6), 9,50 (1H, s) Oil 1,62 (3H, s), 1,69 (3H, s), 1,84 (3H1, s), 1,90-2,40 (8H), 4,14 2 HOOC- 96 252 (2H, d, J=7), 5,12 (1H, t, J=6), 5,42 (1H, t, J=7), 6,80 (2H, *77 br), 6,87 (1H, t, J=6) 3HOH C Oil 36 1,60 (6H, s), 1,67 (6H, s), 1, 92-2,45 (14H), 3,97 (2H, s), 4,16 2 96HC 396 (2H, d, J=7), 5,10 (2H, br), 5,40 (2H, br) Oil 1,60 (6H, s), 1,67 (3H, s), 1,83 (3H, s), 1,90-2,40(12H), 4,15 3 HOOC- 97 320 (2H, d, J-7), 5,10 (2H, br), 5,41 (1H, t, J=7), 6,76 (2H, br), *85 6,85 (1H, t, J=6) Oil 1,60 (911, s), 1,67 (3HI, s), 1, 83 (3H, s), 1,87-2,44 (16H), 4,14 4 HOOC- 100 388 (2H, d, J=7), 5,10 (3H11, br), 5,40 (1H, t, J=7), 6,80 (2H, br), *82 6186 (1H, t, J=6) 4 HOH C- Oil 374 1,62 (9H, s), 1,67 (6H, s), 1,87-2,35 (18H), 3,98 (2H, s), 4, 15 H2 97 (2H, d, J=7), 5,11 (311, br), 5,40 (2H1, br) Oit 1,61 (12H, s), 1,68 (3H, s), 1,83 (3H, s), 1,83-2,40 (2011H), 4,13 HOOC- 98 456 (2H, d, J=7), 5,10 (41I, br), 5,42 (1H,.t, J=7), 6,80 (211, br), 6 86 (1H, t, J=6) HOH C- Oil 442 1,61 (12H, s), 1,68 (6H, s), 1.76-2,32 (22H), 3,96 (2H, s) , 4,13 ___ 2 97 (2H, d, J=7), 5,10 (41H, br), 5.42 (2H, br) r% u' ui %o EXE1PLE 2 Capsule Acide 16-hydroxy-2,6,10,14- tétraméthyl-2,6,10,14- hexadécatétraènoique 5 g Cellulose microcristalline 80 g Amidon de mais 20 g Lactose 22 g Polyvinylpyrrolidone 8 g On granule les constituants cidessus de la manière ordinaire et on les introduit dans des capsules de gélatine dure. Une capsule contient 10 mg de l'agent actif principal. R EV E N DI C AT I 0 N S 1 - Composé répondant à la formule (1): CH3 CH3 1 3I R-C=CH-CH2fCH2-C=CH-CH2n 0-A (I) dans laquelle n est un entier de 1 à 5, R est un groupe hydro- xyméthyle, formyle ou carboxyle, et A est l'hydrogène, un grou- pe 2-tétrahydropyranyle, benzyle, méthoxyméthyle ou méthoxy- éthoxyméthyle. 2 - Composé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que A est l'hydrogène. 3 - Composé choisi parmi les suivants: Acide 8-hydroxy-2,6-diméthyl-2,6-octadiénoique. 8-hydroxy-2,6-diméthyl-2,6-octadiène-l-al Acide 12-hydroxy-2,6,10triméthyl-2,6,10-dodécatrièno3que 2,6,10,14-tétraméthyl-2,6,10,14hexadécatétraène-l,16-diol Acide 16-hydroxy-2,6,10,14-tétraméthyl-2,6,10,14-hexadéca- tétraènofque Acide 20-hydroxy-2,6,10,14,18-pentaméthyl-2,6,10,14,18- eicosapenta&noique Acide 24-hydroxy-2,6,10,14,18,22-hexaméthyl-2,6,10,14,18,22- tétracosahexaëno:que 2,6,10,14,18,22-hexaméthyl-2,6,10,14,18-tétracosahexaène- 1,24-diol 4 - Composé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que A est un groupe benzyle ou 2-tétrahydropyranyle. - Composé choisi parmi les suivants: Acide 8-(2-tétrahydropyranyl)oxy-2,6-diméthyl-2,6-octadiènoi- que Acide 12-(2-tétrahydropyranyl)oxy-2,6,10-triméthyl-2,6,10- dodécatriènoique. Acide 12-benzyloxy-2,6,10-trJimthyl-2,6,10dodécatrièno5que Acide 16-(2-tétrahydropyranyl)oxy-2,6,10,14-tétraméthyl2,6, ,14-hexadécatétraènoique. Acide 16-benzyloxy-2,6,10,14-tétraméthyl-2,6,10,14-hexadéca- tétraënoïque Acide 20-(2-tétrahydropyranyl)oxy-2,6,10,14,18-pentaméthyl- 2,6,10,14,18-eicosapentaènoique Acide 20-benzyloxy-2,6,10,14,18-pentaméthyl-2,6,10,14,18- eicosapentaènoique Acide 24-(2-tétrahydropyranyl)oxy-2,6,10,14,18,22-hexaméthyl- 2,6,10,14,18,22_tétracosahexaènoïque 6 - Procédé de préparation d'un composé répondant à la formule (IV): CH CH 1 3 o R-C=CH-CH2fCH2-C=CH-CH2+nOH (IV) dans laquelle n est un entier de 1 à 5, et R est un groupe hydroxyméthyle, formyle ou carboxyle, caractérisé en ce qu'on cultive un microorganisme appartenant au genre Nocardia et ayant une activité oxydante pour un composé répondant à la for- mule (II): CH3 CH3 l l CH3 -C=CH-CH2.CH2-C-CH-CH2n 0-A' (II) dans laquelle A' est un groupe 2-tétrahydropyranyle, benzyle, méthoxyméthyle ou.méthoxyéthoxyméthyle, et n a la même signi- fication que ci-dessus, dans un milieu de culture contenant un composé répondant à la formule (II) comme source de carbone, pour produire un composé répondant à la formule (III): CH3 CH3 R-CCH-CH2 CH2-C=CH-CH3O-A' (III) R-C=CH-CH 2icH2-c=CH-CH3+nO-Al II dans laquelle n, A' et R ont les mêmes significations que ci- dessus, on récupère le composé répondant A la formule (III) dans le milieu de culture; et on élimine le groupe protecteur A' du composé répondant à la formule (III) ainsi récupérée pour obtenir le composé répondant & la formule (IV). 7 - Procédé de préparation d'un composé répondant & la formule (V): CH CH 3 R-C-CCH-H2CH2-CC=CHC2}nO -A (V) dans laquelle n est un entier de 1 A 5, A' est un groupe 2 té- trahydropyranyle, benzyle, méthoxyméthyle ou méthoxyéthoxy- méthyle et R est un groupe hydroxyméthyle, formyle ou carbo- xyle, caractérisé en ce qu'on cultive un microorganisme ap- partenant au genre Nocardia et ayant une activité oxydante pour un composé répondant à la formule (II): CH3 CH3 I l CH3-C=CH-CH2kCH2-C=CH-CH2 nO-A' (II) dans laquelle n et A' ont les mêmes significations que ci- dessus, dans un milieu de culture contenant un composé ré- pondant A la formule générale (II) comme source de carbone; puis on recueille le composé répondant à la formule générale (V) ainsi produit. 8 - Composition thérapeutique ayant notamment une ac- tivité antiulcéreuse, caractérisé en ce qu'elle contient à titre de principe actif, un composé répondant à la formule (IV): CH3 CH i 3 1 R-C=CH-CH2CH2_C=CH-CH2nOH (IV) dans laquelle n est un entier de 1 à 5 et R est un groupe hydroxyméthyle,; formyle ou carboxyle, et un support pharma- cologiquement acceptable. 9 - Composition suivant la revendication 8, caractéri- sée en ce que R est un groupe carboxyle. - Composition suivant la revendication 8, caractéri- sée en ce que R est un groupe hydroxyméthyle. 11 - Composé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que R est un groupe carboxyle lorsque A n'est pas l'hydro- gène.