FR 2110380 A1 19720602 FR 7136657 A 19711012 71 35657 2110380 La présente invention, est relative à des composés bactéricides nouveaux et utiles ei» à leurs procédés de préparation, et plus particulièrement à des composés représentés par la formule générale : 5 ^^-■pCONHA (I) nh2 /dans laquelle A est un groupe qui forme l'acide 6-aminopéniciIla-10 nique (désigné ci-après plus brièvement sous le nom de 6-APA),. l'acide 7-aminocéphalosporanique (désigné ci-après plus brièvement sous le nom de J-ACA) ou l'acide 7-aminodésacétoxycéphalos-poranique (désigné ci-après plus brièvement sous le nom de 7-ADCA), lorsqu'on introduit un groupe amino7 ou est relative à des sels 15 de ces composés, ou à des produits d'addition de ces composés avec l'acétone et à leurs procédés de préparation. Bien qu'on sache que les a-aminobenzyl-pénicilline et -céphalosporine présentent un spectre large d'activité antibac-térlenne vis-à-vis des bactéries à la fois gram-positives et gram-20 négatives, on sait aussi que ces composés n'ont pas une activité suffisante à l'égard d'Escherichia coli, etc. A la suite d'études et de recherches, la demanderesse a trouvé que les composés (i) ont non seulement un spectre large d'activité antibactérienne égal à celui de dérivés a-aminobenzylés, mais possèdent aussi une ac-25 tion extrêmement forte sur Escherichia coli. La présente invention a été réalisée sur la base de cette découverte. Le principal objet de la présente, invention est de fournir des composés bactéricides (i) nouveaux et utiles. Un autre objet de la présente invention est de four-30 nir des produits d'addition des composés (i) avee l'acétone, qui ont une activité prolongée. Un autre objet est de produire la 1-cyclohexényl-glycine qui peut être employée comme intermédiaire pour la préparation.des composés (I). 35 Un autre objet est d'élaborer des procédés de pré paration des composés (i) ou de sels de ces composés, ou des produits d'addition de ceux-ci avec l'acétone, et de la 1-cyclohexé-nylglycinë. D'autres caractéristiques et avantages de la pré-40 sente invention apparaîtront au cours de la description. 71 35657 2110380 Dans la formule générale (i)'mentionnée ci-dessus, A est un groupe qui forme les acides 6-APA, 7-ACÂ ou 7-ADCA lorsqu'on introduit un groupe amino, ou des sels de ces acides. Ces composés (i) peuvent former des sels correspon-5 dants avec des métaux alcalins ou des métaux alcalino-terreux, tels que le sodium, le potassium, le calcium ou l'aluminium ou avec des aminés organiques telles que la triméthylamine, la tri-éthylamine, la tributylamine, la Hrridine ou les produits similaires. Les composés (i) peuvent en outre être transformés en produits 10 d'addition avec l'acétone, représentés par la formule générale : Or! HN N - A 15 CIL 3 3 dans laquelle le symbole A a la même signification que ci-dessus. Les composés (i) ou leurs sels peuvent, par exemple, être obtenus par réaction de la 1-cyclohéxénylglycine ou de 20 ses dérivés réactifs avec les acides 6-APA, 7-ACA ou 7-ADCA. Dans ce cas, chacun des acides 6-APA, 7-ACA ou 7-ADCA précités -peut être employé sous forme de ses sels appropriés ou de ses esters facilement hydrolysables et, lorsqu'on emploie des esters facilement hydrolysables, on soumet, si néces-25 saire, le produit de réaction à l'hydrolyse pour obtenir les composés de la présente invention (i) ou leurs sels'. Dans ce procédé d'acylation, la l-cyclohejcényl-glycine est employée habituellement sous forme de ses dérivés réactifs, par exemple, d'halogénures d'acides tels que les chlorures 30 d'acides, les bromures d'acides, etc., d'azides d'acides, d'anhydrides d'acides, d'anhydrides mixtes d'acides alkylphosphoriques ou alkylcarboniques, d'esters actifs, par exemple les esters correspondants obtenus avec la 2,5-oxazolidinedione 4-substituée, le pentaehlorophénol, le N-hydroxysuccinimide etc., et les produits 35 similaires. Si nécessaire, on peut employer des agents de condensation tels que le cyclohexylcarbodiimide, le chlorure de phospho-ryle, le N,N'-earbonyl-bis-imidazole, etc. Il est préférable que le groupe amino; de la 1-cyclohexénylglycine soit protégé avec, par exemple, de l'acide chlorhydrique, un aldéhyde organique, l'o-40 nitrothiophényle, un composé de p-dicétone (par exemple acétylacé- 71 35657 3 2110380 tone ou ester acétylacétique), avec un azide, ou avec un groupe tel que les groupes carbobenzoxy, p-toluènesulfonyle, phényl-thiocarbonyle, aryloxy ou phtalyle, isobornyloxycarbonyle, (5 -méthylsulf onyléthoxycarbonyle. 5 Les acides 6-APA, 7-ACA ou 7-ADCA peuvent être employés sous forme de l'ester correspondant facilement hydroly-sable, obtenu avec un agent de silylation tel que le triméthyl-chlorosilane, le triméthoxychlorosilane, etc., ou avec un agent similaire tel que le diméthyldichlorosilane ou le diméthoxy-10 dichlorosilane ou aussi avec l'oxyde de tri-n-butyl-étain, le triphénylchlorure, le bis-(p-méthoxyphényl)méthylchlorure, le méthoxyméthylchlorure, le p-méthylthioéthylchlorure, etc. Ces réactions peuvent être effectuées dans un solvant. Cependant, lorsqu'on emploie un ester facilement hydro-15 lysable, on doit veiller à empêcher l'entrée de l'humidité dans le système réactionnel. Comme solvants utiles, on cite l'eau, les alcools, tels que l'éthanol, le méthanol, etc., l'acétone, le dioxane, le tétrahydrofuranne, la triét.ljylamine, les hydrocarbures halogénés tels que le chlorobenzène, le chloroforme, le 20 chlorure de méthylène, etc., et les solvants organiques tels que l'acétate d'éthyle, l'éther, 1'acétonitrile et les produits similaires. Bien que la température de réaction soit en fait indéterminée, la réaction est souvent effectuée en refroidissant ou à la température aitoiante. 25 Lorsque la réaction conforme à la présente inven tion donne naissance à un acide comme sous-produit, un réactif basique tel qu'un alcali, par exemple un hydrogénocarbonate alcalin, un carbonate alcalin ou un hydroxyde alcalin ou une aminé organique, par exemple la triéthylamine ou la pyridine, est avan-30 tageusement présent dans le système réactionnel. Dans 3e cas d'un ester facilement hydrolysable, le produit est hydrolysé de la façon habituelle puis, est séparé par des techniques classiques, par exemple par concentration, transfert de phase, chromatographie, etc. Si nécessaire, le produit peut être purifié, par exemple par 35 recristallisation. Il est entendu que les formes isomères des composés (i) ainsi que leurs mélanges sont inclus dans le cadre de la présente .invention. Les composés (i) ainsi obtenus peuvent, par réac-40 tion avec l'acétone, être transformés en leurs produits d'addition 71 35657 4 2110380 avec l'acétone, qui présentent une activité plus prolongée que les composés originaux (i). Dans cette réaction, le volume d'acétone correspond de préférence à plus d'une mole pour une mole de dérivé de 5 cyclohexénylglycinamide (i).. Cette réaction s'effectue généralement facilement dans un solvant tel que, par exemple, le chlorure de méthylène, le diméthylformamide,, l'eau, le chloroforme ou l'acétone. Le pH du mélange réactionnel est de préférence maintenu à une valeur comprise entre 5*5 et 9*5 et peut être contrôlé avec 10 un alcali minéral, par exemple l'hydroxyde de sodium, le carbonate de sodium, l'hydroxyde de potassium ou le carbonate de potassium, avec une aminé organique par exemple la triéthylamine ou avec un acide par exemple l'acide chlorhydrique ou phcqphorique. On effectue la réaction à température ambiante ou en chauffant. 15 La 1-cyclohexénylglyeine utilisée comme substance de départ peut être obtenue à l'aide de procédés connus," par exemple par réaction du 1-cyclohexène-l-aidéhyde avec un cyanure alcalin et une substance produisant de l'ammoniac suivie d'une hydrdyse. 20 La réaction est avantageusement effectuée dans un solvant hydrophile tel que l'eau, les alcools (l'alcool méthyli-que, l'alcool éthylique) ou un mélange de ceux-ci. La réaction est générailement effectuée à 0°-80°C, de préférence à une température comprise entre 30° et 40°C. 25 Le cyanure alcalin (par exemple cyanure de sodium, cyanure de potassium) et la substance produisant de l'ammoniac, (par exemple chlorure d'ammonium, carbonate d'ammonium) peuvent généralement être employés en quantités allant de 1 à 1,5 moles, respectivement, pour 1 mole de 1-cyclohexène-l-aldéhyde., 30 La réaction est généralement effectuée en 1 à 4 heures. Lorsqu'on utilise du chlorure d'ammonium comme substance produisant de l'ammoniac, on produit un composé d'aminonitrile, alors que lorsqu'on emploie du carbonate d'ammonium, on obtient ion composé d'hydantoïne. Bien que le composé d'aminonitrile ou 35 le composé d'hydantoïne puissent être isolés, ils peuvent être soumis à l'hydrolyse sans avoir été isolés. L'hydrolyse est généralement effectuée en traitant le produit de réaction ci-dessus avec par exemple, de l'acide chlorhydrique, de l'acide sulfurique, de l'hydroxyde de.sodium, de l'hydroxyde de potassium ou de l'hy-40 droxyde de baryum. Lorsqu'un composé d'aminonitrile est produit, 71 35657 5 2110380 l'hydrolyse est avantageusement effectuée dans des conditions acides, généralement en employant un acide environ 3-12N. La réaction est avantageusement effectuée à une température comprise entre" environ'la température ambiante et 100°C. Par contre, lors-5 qu'on emploie un composé d'hydantoïne, la réaction est avantageusement effectuée dans des conditions alcalines et généralement à la température de reflux. La réaction peut aussi être effectuée sous pressicn élevée, si on le désire. Lorsque la réaction est terminée, le mélange réactionnel peut être employé comme substance de départ sans 10 avoir été isolé, mais il peut être purifié d'une façon connue, telle que la concentration^ le transfert de phase, la recristallisation, la chromatographie. La 1-cyclohéxénylglycine peut également être obtenue par l'intermédiaire d'un composé de 1-cyclohexényle représen-15 té par la formule générale (II) ^^r-CH2-B (II) dans laquelle B est un groupe carboxyle ou cyano protégé ou non-20 protégé. Lorsque B représente un groupe carboxyle non protégé, on obtient le composé de la présente invention en soumettant le composé (il) à une nitrosation, suivie d'une réduction. Lorsque B représente un groupe carboxyle ou cyano protégé, on obtient le composé de la présente invention en soumettant le composé (II) 25 à une nitrosation, puis à une réduction et à une hydrolyse, n'importe laquelle des deux pouvant être effectuée la première. Parmi les groupes carboxyle protégés on cite, par exemple le groupe alkyloxycarbonyle tel que les groupes mé-thoxycarbonyle, éthoxycarbonyle, n-(ou i-)-propoxycarbonyle, Qu 30 nT(i-s- ou t-')-butoxycarbonyle, n- (ou -t)-amyloxycarbonyle,/un groupe phénoxycarbonyle substitué ou non substitué, tel que les groupes phénoxycarbonyle, p-nitrophénùxycarbonyle, pentachlorophé-noxycarbonyle ou alcoxycarbonyloxycarbonyle inférieur tel que le t-butoxycarbonyloxycarbonyle, 1'éthoxycarbonyloxycarbonyle, etc. 35 -- La nitrosation est effectuée d'une façon connue par exemple par réaction du composé de 1-cyclohexényle (II) avec des nitrites ou un ester de nittite en présence d'un acide, (par exemple un acide minéral, tel que l'acide chlorhydrique, un acide carboxylique organique tel que l'acide acétique) ou d'une 71 35657 6 v. 2110380 base (par exemple Jiydrure de sodium, aLcoolate de métal alcalin ou amide de métal alcalin correspondant avec du sodium ou dû cal-eiuni). Comme exemple de nitrites, on cite le nitrite de sodium, le nitrite de potassium, etc., et comme ester de nitrite, on cite 5 l'ester de nitrite alkylé tel que le nitrite de méthyle, le nitrite d'éthyle, le nitrite de n-butyle, le nitrite de t-butyle, le nitrite d'i-amyle, etc. La? réaction est généralement effectuée à une température comprise entre 5° et 60°C -ét se poursuit doucement dans 10 un solvant approprié (par exemple les alcools tels que le métha-nol, l'éthanol, les hydrocarbures aromatiques tels que le benzène, le xylène, les hydrocarbures halogénés tels que le chloroforme, le tétrachlorure de carbone, les éthers tels que l'éther éthyli-que, le tétrahydrofuranne). Le réactif de nitrosation peut généra-15 lement être employé en quantité allant d'environ 1 à 1,2 mole pour 1 mole de composé de 1-cyclohexényle (II), mais non nécessairement limitée à ce domaine. La réaction s'effectue généralement en environ 0,5 à 2 heures. Le composé 1-cyclohexényl-oc-nitrosoacétique ainsi 20 obtenu est ensuite réduit pour transformer son groupe a-nitroso en groupg amino. . t* * 1 M | A ce propos, on a trouvé que les procédés de réduction connus pour convertir un groupe nitroso en groupe amino peuvent être employés pour la réduction ci-dessus sans agir sur 25 la double liaison du groupe 1-cyclohexényle. Parmi ces procédés, on cite par exemple les procédés employant des métaux (par exemple fer, étain, zinc) ou le chlorure stanneux ou les produits similaires en présence d'un acide (par exemple acide chlorhydri-que), employant un amalgame tel que l'amalgame d'aluminium, em-30 ployant le sulfure d'hydrogène, un sel de celui-ci (par exemple sulfure ou polysulfure de sodium) dans des conditions acides, neutres ou alcalines. Ces réactions peuvent être effectuées dans un solvant tel que l'acide acétique glaeial, les alcools tels que le méthanol, l'éthanol, etc. 35 Les composés ainsi obtenus, lorsque B représente un groupe carboxyle ou cyano protégé, sont soumis à une hydrolyse pour obtenir la 1-cyclohexénylglycine. L'hydrolyse peut être effectuée par les procédés établis, par exemple en traitant le composé (II) avec un acide minéral tel que l'acide chlorhydrique, 40 l'acide sulfurique avec une base minérale telle que l'hydroxyde 71 36657 2110380 . de sodium, le carbonate de potassium, etc. Ces acides ou bases sont généralement utilisés en concentration allant de 3 à 6N, mais non nécessairement limitée à ce domaine. 5 La réaction est généralement effectuée en solu tion aqueuse et, par addition d'alcools tels que le méthanol, l'éthanol, elle peut être effectuée avec une concentration élevée de composé (il). La réaction peut généralement être effectuée à une température comprise entre 40 La 1-cyclohexénylglycine ainsi obtenue possède elle-même une action antibactérienne relativement forte et, par conséquent, elle peut être utilisée comme fongicide. D'autre part, comme la 1-cyclohexénylglycine a un carbone asymétrique, 15 elle est généralement obtenue sous forme d'un composé racémique qui peut être-soumis, si nécessaire, à une résolution optique par les procédés connus. Par exemple, il existe des procédés employant un acide optiquement actif tel que l'acide L-tartrique et l'acide D-camphosulfonique ou une base optiquement active tel-20 le que la cinchonine ou synthétisant le composé N-acylé de la 1-cyclohexénylglycine et 1'hydrolysant avec un enzyme tel qu'une diastase. Les composés (i) de la présente invention et leurs produits d'addition avec l'acétone ont une forte action inhibitrice à l'égard des bactéries gram-positives et gram-négatives. 25 Ils peuvent être facilement absorbés par adminis tration orale par l'intestin grêle, et par administration paren-térale ; ils pénètrent rapidement dans les tissus et ont une bonne affinité pour ceux-ci. Par conséquent, les composés (i) de la présente invention sont utiles comme agents bactéricides. 30 A cet effet, les composés (i) ainsi que leurs sels pharmaceutiquement acceptables (par exemple sels de sodium, de potassium) et leurs produits d'addition avec l'acétone.peuvent être administrés oralement ou parentéralement tels quels ou sous une forme appropriée telle que poudres, granulés, comprimés ou 35 solutions injectables, associés à des excipients, diluants ou adjuvants pharmaceutiquement acceptables. Les composés de la présente invention (i), leurs sels ou leurs produits d'addition avec l'acétone, peuvent être utilisés contre pratiquement la même maladie que celle qui est soignée par l'a-aminobenzylpénicilline ou 40 -céphalosporine, aussi bien que contre les maladies causées par 71 36657 2110380 Escherichia coli ou les organismes similaires. Bien que la dose à administrer de composés (I) ou de leurs produits d'addition avec l'acétone varie selon les types de composés, la gravité de la maladie etc., elle se situe 5 généralement entre environ 5 et 500 mg/kg et par jour, de préférence entre environ 10 et 200 mg/kg et par jour. Il est entendu que les exemples suivants sont donnés uniquement dans un but d'illustration et ne peuvent pas être considérés comme limitatifs de la présente invention, et qu'on 10 peut y apporter de nombreuses modifications sans sortir de l'esprit et de la portée de la présente invention. Dans la description, "partie" signifie "partie en poids" si rien d'autre n'est indiqué, et la relation entre "partie (s) et "partie (s) en volume" correspond à celle entre gramme(s) 15 et millilitre (s). exemple 1 Ori charge un réacteur, dans lequel l'air est remplacé par de l'azote sec, avec 250 parties en volume d'alcool t-butylique et ensuite avec 12 parties de potassium métallique. 20 Le mélange est agité vigoureusement sous reflux en atmosphère d'azote sec pour l'amener complètement à l'état de solution. Puis on ajoute à la solution 100 parties en volume de benzène sec, et on refroidit le mélange à 5°C puis on ajoute à la même température 33,6 parties de 1-cyclohexénylacétate 25 d'éthyle, puis 35*2 parties de nitrite d'isoamyle en 30 minutes. On laisse reposer le mélange réactionnel de façon que sa température atteigne la température ambiante, puis on agite pendant encore une heure à température ambiante. On dilue le mélange réactionnel avec 200 parties 30 en volume d'alcool et on ajoute au mélange résultant j8 parties de zinc en poudre puis, goutte à goutte, 250 parties en volume d'acide chlorhydrique concentré tout en agitant et en maintenant le mélange à une température inférieure à 30°C en refroidissant avec de la glace. 35 On soumet le mélange réactionnel à une filtration et on lave les insolubles séparés par filtration avec de l'alcool. On ajoute le produit de lavage au filtrat et on concentre le mélange sous pression réduite, puis on ajoute environ 150 parties d'hydrogénocarbonate de sodium pour séparer une substance huileu-40 se. On extrait la substance huileuse avec de l'éther et on éli 71 36657 2110380 mine l*éther par distillation. On ajoute au résidu 130 parties en volume d'une solution aqueuse à 10$ d'hydroxyde de sodium et le même volume d'alcool éthylique, puis on concentre à 70°C. Après deux heures, on filtre le mélange réactionnel pour éliminer la substance 5 insoluble et on ajuste le filtrat à environ pH 5,0 avec de l'acide chlorhydrique concentré, à la suite de quoi la 1-cyclohexénylglycine est précipitée sous forme de cristaux. Après refroidissement, on recueille les cristaux et on les lave successivement avec de l'eau, de l'alcool et de l'éther, puis on les sèche et on obtient 16 par-10 ties de 1-cyclohexénylglycine fondant à 24l°C (décomposition). Analyse élémentaire : Calculé pour CgH-^NOg : C 61,91 ; H 8,44 ; N 9*03$ Trouvé : C 61,66 ; H 8,49 ; • N 8,86% Spectre d'absorption IR (KBr, cm-1) 15 3160, 2600,' 1600, 1490, 1400, 1341, 1143, 1108, 718. On obtient également la 1-cyclohexénylglycine de la même manière que ci-dessus sauf qu'on emploie l'anhydride de 1-cy- clohexénylglycine-éthoxycarbonate au lieu de 1-cyclohexénylacétate d'éthyle. 1 20 EXEMPLE 2 On ajoute 24,2 parties de 1-cyclohexénylacétoni-trile sous courant d'azote, à une solution refroidie de 12 parties de potassium métallique dans 350 parties en volume de t-butanol puis on ajoute 35*2 parties de nitrite d'isoamyle à 30°C et on agite 25 pendant 2 heures. On verse le mélange réactionnel dans l'eau glacée et on l'agite avec 300 parties en volume d'éther. Après avoir été séparée et lavée avec l'éther, la couche aqueuse est acidifiée avec 19 parties en volume d'acide acétique pour séparer la substance huileuse. On extrait la substance huileuse avec de l'éther 30 et on lave l'extrait avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium. Après séchage, .on concentre la couche d'éther et on obtient des cristaux de 1-cyclohexényl-a-nitroso-acétonitri-le. On couvre un amalgame d'aluminium préparé à par-35 tir de 10 parties d'aluminium en ruban avec 200 parties en volume d'une solution à 10% dans l'éther d'alcool méthylique et on y ajoute par portions 100 parties en volume d'une solution dans l'éther du composé a-nitroso obtenu ci-dessus puis on laisse reposer toute la nuit. Après avoir éliminé du mélange réactionnel le métal n'a-40 yant pas réagi, on extrait le filtrat avec de l'acide chlorhydrique 6N. On chauffe l'extrait à reflux pendant 2 heures, puis on le concentre sous pression réduite jusqu'à 1/3 de son volume initial. On neutralise le concentré avec un alcali pour 45 séparer les cristaux. Après lavages successifs avec de l'alcool éthylique, de l'éther, puis de l'eau, on dissout les cristaux dans une solution aqueuse IN d'hydroxyde de sodium, puis on l'ajuste au pH correspondant au point isoélectrique de la 1-cyclohexénylglycine avec de l'acide chlorhydrique IN, à la suite de 50 quoi on obtient 9,5 parties de 1-cyclohexénylglycine fondant à 24l°C (décomposition). Le produit résultant est identique au 71 35657 10 2110380 produit obtenu dans 1 'exenipl|^l^^ ^ On dissout 1,5 partie de 1-eyclohexényl-a-nitroaeé-tonitrile obtenu dans l'exemple 2, dans 20 parties en volume d'alcool éthylique et on ajoute à la solution 10 parties de poudre de 5 zinc. On refroidit le mélange à 5°C. On lui ajoute goutte à goutte 10 parties en volume d'acide chlorhydrique concentré, tout en maintenant la température interne à 10°C, en agitant vigoureusement, puis on agite pendant 30 minutes à'température ambiante. On élimine les insolubles du mélange réactionnel par 10 filtration et on les lave à l'éther. On réunit le filtrat et le produit de lavage, et on concentre,le mélange en solution sous pression réduite. On ajoute au concentré 10 parties en volume d'acide chlorhydrique concentré et on chauffe reflvuj: le mélange en solution pendant 1 heure 1/2, puis on ajuste son ^H à £jj,0 avec une so-15 lution aqueuse d'ammoniaque, à la suite de quoi on obtient 0,7 partie de 1-cyclohexénylglycine. EXEMPLE 4 * Après dissolution de, 13*8 parties dè sodium mé- ■ tallique dans 200 parties' en volume d'alcool méthylique sôuë cou-20 rant d'azote, on élimine l'alcool iqéthylique par distillation. On met le résidu en suspension dans 200 parties en volume de benzène sec. On refroidit la solution jasqu'à une température de 0°C-5°C. On ajoute à la solution 48,4 parties de 1-cyclohexénylacétonitrile en agitant vigoureusement, puis 70,4 parties de nitrate d'isoamyle 25 à la même température. On agite la solution à la température de 10°C pendant 1 heure, à la suite de quoi le sel de sodium du composé nitroso se sépare. On dissout le sel\dans 200 parties en volume d'eau. On extrait la solution avec dû benzène. On'extrait ensuite la couche de benzène deux fois avec 200 parties en volume 30 d'eau. On réunit les couches aqueuses et on les agite avec 200 parties en volume d'éther. On sépare la couche aqueuse et on l'ajoute goutte à goutte pendant 2 heures, en agitant vigoureusement, à une solution aqueuse bouillante de 60 parties d'hydroxyde de sodium dans 200 parties en volume d'eau. On agite ensuite la solu-35 tion de la réaction pendant 3 heures, tout en éliminant l'ammoniaque produit par distillation. On neutralise la solution restante avec 170 parties en volume d'acide chlorhydrique concentré et on obtient l'acide a-nitroso-l-cyclohexénylacétique sous forme de .cristaux fondant à 136-137°C. 40 On mélange le précipité avec 104 parties de poudre 71 36657 11 2110380 de zinc. On ajoute goutte à goutte au mélange résultant, en agitant vigoureusement, à une température non supérieure à 30°e, 320 parties en volume d'acide chlorhydrique concentré, puis on agite pendant 30 minutes. On sépare le zinc qui n'a pas réagi par fil-5 tration. On concentre le filtrat jusqu'à la moitié de son volume initial. On ajuste le concentré à pH 6 avec une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium, puis on recueille et on lave les cristaux bruts précipités. On dissout les cristaux dans une solu-10 tion aqueuse IN d'hydroxyde de sodium. Puis on ajuste le pH de la solution à environ 5 avec de l'acide chlorhydrique, à la suite de quoi on obtient la 1-cyclohexénylglycine sous forme de cristaux fondant à 24l°C, qui sont identiques au produit obtenu dans l'exemple 1. 15 EXEMPLE 5 On ajoute une solution de 4,4 parties de 1-cyclo-hexényl-1-aldéhyde dans 8 parties en volume de méthanol à une solution de 2 parties de cyanure de sodium et de 2,36 parties de chlorure d'ammonium dans 8 parties en volume d'eau et on agite 20 le mélange à température ambiante péndant 2 heures, à la suite de quoi on ajoute 20 parties en volume d'eau. On extrait le composé d'aminonitrile résultant avec 20 parties en volume de benzène. On extrait la couche benzéniqtste trois fois avec des portions de 10 parties en volume d'acide chlorhydrique 6n, respectivement, et on 25 chauffe à reflux la couche aqueuse pendant 2 heures. On élimine la substance résineuse avec du carbon activéj on concentre le filtrat jusqu'à environ 15 parties en volume et on l'amène à environ pH 5,0 avec une solution aqueuse concentrée d'ammoniaque (28$), à la suite de quoi des cristaux bruts de DL-l-cyclohexénylglycine 30 se séparent par précipitation. On récupère les cristaux par filtration et on les dissout dans une solution aqueuse in d'hydroxyde de sodium. On ajoute à la solution du charbon activé et on soumet le mélange à me filtration. On ajoute au filtrat de l'éthanol (un volume égal à la moitié de celui du filtrat) et on porte le mé-35 lange à ébullition, puis on ajuste son pH à environ 5*0 avec de l'acide chlorhydrique, à la suite de quoi on obtient 1,1 partie de DL-1-cyclohexénylglycine sous forme de flocons incolores fondant à 242-243°Ci Spectre IR(KBr, cm-1) ^0 3160, 2960, 1605, 1490, 1400, 13^5, 1274, 1145, 720. 71 36657 2110380 Spectre RMN (solvant s NaOD-irç) 1,5 -2,4 (multiplet, 8H) 3,81 (singlet, 1H., - CH - COOH) 5,84 (multiplet, 1H, - CH := C - ) 5 EXEMPLE 6 On ajoute à une solution de 13 parties de cyanure de potassium, 11 parties de l-cyclohexénp-l-a3,déhyde, 38,4 parties de carbonate d'ammonium et 100 parties en volume d'alcool éthylique (50$) et on agite le mélange à 60^65°C pendant 2 heures, à la 10 suite de quoi on élimine l'alcool éthylique par distillation sous pression réduite. On acidifie le résidu avec de l'acide chlorhydrique dilué pour précipiter les cristaux. On hydrolyse 5 parties des cristaux pour obtenir 2,7 parties de 1-cyclohexénylglycine. L'examen de cette substance mélangée au produit obtenu dans l'exem-15. pie 1 ne montre pas d'abaissement du point de fusion. ' • EXEMPLE 7 (l) On dissout 5 parties de 1-cyclohexénylglycine dans 33,2 parties en volume d'une solution aqueuse IN d'hydroxyde de sodium. On ajoute à la solution alternativement une solution 20 aqueuse IN d'hydroxyde de sodium et du chlorure de chloro-acétyle tout en maintenant un pH alcalin efe en refroidissant avec de la glace, jusqu'à ce que la quantité totale de la solution d'hydroxyde atteigne 39,2 parties en volume et celle du chlorure atteigne 4,2 parties en volume. On laisse reposer le mélange réactionnel et 25 sa température s'élève jusqu'à la température ambiante, puis on agite pendant 2 heures à la même température. Après ajustement du pH à 8,0, on agite le mélange résultant avec de l'éther. On ajuste la couche aqueuse à pH 2,5 avec de l'acide chlorhydrique 2N et on extrait 3 fois avec de. l'éther la suspension résulteinte. On lave 30 les extraits éthérés réunis deux fois avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, puis on sèche. On soumet la solution éthérée à une distillation pour obtenir des cristaux qu'on recristallise dans un mélange benzène-éther, à la suite de quoi on obtient 4,5 parties en volume 35 de N-chloroacétyl-1-cyclohexénylglycine fondant à 137"l40°C. Analyse élémentaire s Calculé pour C^H^NO^Cl s C 51,84, H 6,09, N 6,04 $, Cl 15,30, $ Trouvé C 51,78, H 5,86, N 5,83$ 40 Cl 15,52. $ 71 36657 « 2110380 Spectre IR (KBr cm"*1) 3360, 2650, 1730, 1625, 1545, 1410, 1255, 1210, 1155, 1010, 805, 785. 2) On met en suspension 1 partie de N-chloroacétyl-5 1-cyclohexénylglycine ainsi obtenu dans 25 parties en volume d'eau et on ajoute à la suspension 4,5 parties d'une solution aqueuse IN d'hydroxyde de sodium jusqu'à obtenir une solution homogène. On ajoute à la solution yne solution de 5 parties de diastase dissoute dans 40 parties en volume~d'eau, et on ajuste la solution à pH 10 7,2 avec une solution aqueuse IN d'hydroxyde de sodium, puis on agite pendant 115 heures à 37°C. On filtre le mélange réactionnel pour éliminer les dépSts et on ajuste.le filtrat à pH 2,5 avec de l'acide chlorhydrique 2N, puis on extrait à l'acétate d'éthyle. On lave l'extrait d'acétate d'éthyle avec une solu-15 tion saturée de chlorure de sodium, on le sèche et on le concjentre pour séparer les cristaux. Trois recristallisations successives dans l'acétate d'éthyle donnent 0,2 partie de D(-)-N-chloroacétyl-1-cyclohexénylglycine fondant à 137-138cC sous forme de cristaux poudreux incolores. 20 &_7d= -136° (EtOH C=l,0jO Analyse élémentaire 2 Calculé pour C-^qH-^NO^CI s C 51,84, H 6,09, N 6,04, Cl 15,30, $ trouvé C 52,03, H 5,71, N 5,97, Cl 15,30 $. 25 3) On chauffe à reflux pendant 15 minutes une sus pension de 0,1 partie de D(~)-N=chloroacétyl-1-cyclohexénylglycine dans 4 parties en volume d'acide chlorhydrique 6N. On concentre le mélange réactionnel jusqu'à environ 1 partie en volume, puis on ajuste le pH du concentré à 5^0 avec une solution aqueuse d'ammo-30 niaque 7N pour séparer les cristaux. On lave les cristaux à l'eau froide et on les sèche1 on obtient 0,03 partie' de D(-)-l-cyclofcexé-nylglycine fondant à 224-225°Co /O/JJ = -147,7° (HC1-1N, C=1,0$) 4) On ajuste la couche aqueuse obtenue ci-dessus 35 (2) à pH 5,0 avec une solution aqueuse IN d'hydroxyde de sodium et on la concentre sous pression réduite. La solution concentrée est adsorbée sur 20 parties en volume d'Amberlite IR-120B (fabriquée par ROHM et HAAS CO., E.U.A.). On recueille la résine par filtration et on la lave 40 avec 500 parties en volume d'eau, on effectue ensuite une extrac- 71 35657 2110380 tion avec une solution aqueuse d'ammoniaque 1,5N. On concentre l'extrait pour séparer les cristaux, à la suite de quoi on obtient 0,15 partie de L(+)-1-cyclohexénylglycine. 5 = +1^7° (HC1-1N C=1,0$) EXEMPLE 8 1 On agite à 60°C pendant 3.heures une solution de 0,63 partie de 1-cyclohexénylglycinate de sodium et de 0,42 par- j tie d'acétylacétate de méthyle dans 40 parties en volume de mé-10 thanol. On concentre la solution réactionnelle et on sèche bien le composé d'énamine résultant puis on le dissout dans 25 parties en volume de chloroforme sec. On refroidit la solution à -20°C, " et on lui ajoute en 5 minutes une solution de 0,49 partie de ehlo-roearbonate d'isobutyle dans 10 parties en volume de chloroforme. 15 On agite le mélange à une température comprise entre -20°C et -8°C pendant 2 heures. Puis, à -10°C, on ajoute une solution contenant 0,78 partie d'acide 6-aminopénicillanique, 0,4 partie de triéthyl-amine et 30 parties en volume de chloroforme; puis on agite à une température comprise entre -5° et +5°C pendant 2 heures. On con-20 centre le mélange réactionnel et on dissout le résidu dans une solution de 0,75 partie d'hydrogénocarbonate de sodium dans 50 parties en volume d'air. Après lavage à l'éther, on récupère la couche aqueuse et on ajuste son pH à 2,5 avec de l'acide chlorhydrique 2N. On agite la couche à température ambiante pendant 30 25 minutes et on extrait la substance huileuse séparée deux fois avec de l'éther. On rejette la couche éthérée et on ajuste la couche aqueuse à pH 4,0 avec de 1'hydrogénocarbonate de sodium, puis on sèche par congélation. Le produit brut résultant est purifié par chromatographie sur colonne, à la suite de quoi on obtient 3° 0,3 partie d'acide 6-/T'-cyclohexénylglycinamido7-pénicillanique à partir de l'éluat (4:1) eau=éthanol. Spectre IR(KBr) 3400 cm"1, 3350 cm"1, 1775 cm"1, 1685 cm"1, 1600 cm"1, 1530 cm"1, 1510 cm"1, 1200 cm"1. Le tableau suivant montre les concentrations minimales inhibitrices de croissance de l'acide 6-(l'-cyclohexénylgly-cinamido)pénicillanique 71 36657 2110380 (jlg/ml) Staphylococcus aureus 209P Baciïlus subtilis Sarcxa lutea ^0,2 5 Escherichia coli 0,5 Prolfceus morganli Eb54 1 EXEMPLE 9 On charge un réacteur, dans lequel on a remplacé l'air par de l'azote, avec 5,2 parties d'acide 6-aminopénicilla- 9 10 nique sec et 51 parties en volume de chlorure de méthylène sec v puis on agite énergiquement. On ajoute au mélange 7,3 parties en volume de triéthylamine et 3,4 parties en volume de N,N-diméthyl-ahiline. Puis on ajoute au mélange, goutte à goutte, 6,9 parties en volume de triméthylchlorosilane, à une température comprise 15 entre 0 et 5°Cî on agite le mélange réactionnel à 10°C pendant 30 minutes. Puis on laisse le mélange réactionnel s'échauffer jusqu'à la température'ambiante et on l'agite pendant 2 heures 1/2. On ajoute à ce mélange 5,05 .parties de chlorhydrate de chlorure de 1-cyclohexénylglycine à v|ne température de 0°-5°C et on agite 20 à 0-10°C pendant 30 minutes à 10°-15°C pendant 1 heure 1/2 et à 15°-17°C pendant 1 heure 1/2. On verse le mélange réactionnel dans 144 parties en volume d'eau froide et on agite à une température de 0°-5°C pendant 30 minutes. Après addition de 0,7 partie de Célitè, on 25 filtre le mélange et on le lave à l'eau froide. On réunit-le filtrat et lej liquide de lavage j on sépare et on lave la couche aqueuse avec de l'acétate d'éthyle. On sépare la couche aqueuse-et on ajuste son pH à 4,0 avec du bicarbonate de sodium, à la suite de quoi on obtient de l'acide 6-Cl'-cyclohexénylglycinamido) 30 * pénicillanique sous forme de précipité blLanc. EXEMPLE 10 On agite à 60°C pendant 2 heures une solution de 0,51 partie de D(-)=l-cyclohexénylglycinate de sodium et de 0,37 partie d'acétylacétate de méthyle dans 30 parties en volume 35 d'alcool méthylique. On concentre la solution réactionnelle pour obtenir im composé d'énamine. Après séchage, on dissout le composé d'énamine dans 25 parties en volume de chloroforme sec. On ajoute à la solution une solution de 0,5 partie de chloroca^bonate d'isobutyle danp 10 parties en volume de chloroforme à -20 °C 40 puis on agite pendant 2 heures à une température comprise entre 71 35657 lb . 2110380 -15°C et -8°C. On ajoute ai mélange réactionnel une solution de 0,63 partie d'acide 6-aminopénicillanique et de 0,3 partie de triéthylamine dans 30 parties en volume de chloroformé à la même t 5 température que ci-dessus, puis on agite pendant 2 heures à une tempéVature comprisë entre -2°C et 5°C. On concentre le mélange réactionnèl et on dissout le résidu dans une solution de 1 paàtie d'hydrogénocarbonate de sodium dans 100 parties en volume d'eau. On ajuste la solution 10 à pH 2,6 avec de l'acide chlorhydrique 2N et on agite pendant 30 minutes. On agite le mélange réactionnel avec de l'éther et on ajuste la couche aqueuse à pH 4,0 puis on la purifie par chromatographie pour obtenir 0,2 partie d'acide 6-^D(-)-a-amino-15 1'-cyclohexénylacétylamido/pénicillanique. Œ-J-a = +225,2° (HC1 IN, C=©,55$) Spectre IR(KBr cm-1)j 1780, I69O, 1605, 1510, 1390, 1310, 1245, 1127. Valeur de Rf s 0,6 (solvant1 alcool n-butylique s acide acétique s 20 eau = 3 s 1 ; l). EXEMPLE 11 On charge un réacteur, dans lequel on remplace l'air par de l'azote, avec 5,2 parties d'acide 6-aminopénicilla-nique sec, 51 parties en volume de chlorure de méthylène' sec, 25 6,8 parties en volume de triéthylamine et 3,36 parties en volume de, N,N-diméthylaniline, puis on agite. On ajoute au mélange 3,1 parties de diméthyldichlorosilane, goutte à goutte, à -une température comprise entre 10° et 15°C en 20 minutes. Puis on laisse le mélange réactionnel s'échauffer et on l'agite à 25°C pendant 1 30 heure 1/2. On ajoute à la solution résultante 5,05 parties de chlorhydrate de chlomire de 1-cyclohexénylglycine à une température comprise entre 0° et 5°C en 45 minutes, puis on agite à 0-5°C pendant 15 minutes, à 5-10°C pendant 1 heure 1/2 et à 10°C pendant 1 heure 1/2. On verse le mélange réactionnel dans 144 par-35 ties en volume d'eau froide et on agite le mélange à une température de 5=10°C pendant 15 minutes. On soumet le mélange réactionnel à une filtration après avoir ajouté 0,7 partie de Célite. On lave le gâteau de filtre à l'eau froide et on réunit les liquides de lavage avec le filtrat obtenu ci-dessus. On ajoute à la couche aqueuse 20 parties en volume d'acétate d'éthyle, 40 71 35657 2110380 et on ajoute au mélange goutte à goutte, une solution de 5,62 parties en volume d'acide diphénylsulfonique dans 15 parties en volume d'eau, à une température de 0-5°C à pH 1^5, ainsi qu'une solution aqueuse 5N d'hydroxyde de sodium, à la suite de 5 quoi le diphénylsulfonate de l'acide 6-(l-cyclohexénylglycina-mido)-pénicillanique se sépare par précipitation. Après agitation pendant 6 heures à 5°C, on filtre le mélange réactionnel et on lave le gâteau de filtre avec 30 parties en volume d'eau froide à pH 1,5 à 2,0 et avec 30 parties 10 en volume d'acétate d'éthyle. On lave ensuite le gâteau de filtre deux fois avec chaque fois 6 parties en volume d'acétate d'éthyle, puis on le soumet à un essorage à sec et on obtient 15 parties de diphénylsulfonate d'acide 6-(l-cyclohexénylglycinamido)-péni-cillanique. On met le sel en suspension dans 17 parties en volume 15 d'alcool isopropylique à 85$ et on ajoute au mélange 17 parties en volume de triéthylamine, puis on agite pendant 45 minutes à une température de 60-70°C, à la suite de quoi il se forme un précipité. On recueille le précipité par filtration eh chauffant, et on le lave trois fois avec chaqUe fois 5 parties en volume 20 d'alcool Isopropylique à 85$, puis on lè sèche sur du pentoxyde de phosphore sous pression réduite, et on obtient 2,0 parties d'anhydride d'acide 6-(1-cyclohexénylglycinamido)-pénicillanique, sous forme de poudre blanche. Ce produit présente des absorptions IR caractéristiques à 3340 cm"1 (NH, ), à 1760 cm"1 ((3-lactamecar-25 bonyle), à 1690 cm"1 (amido carbonyle), à 1600 cm-1 (carboxylate) et à 1510 cm"1 (amide). ; . ' La concentration minimale inhibitrice de croissance est de 0,2 jig/ml à l'égard du Staphylococcus pyogenes var. aureus et 0,8 jig/ml à l'égard de Escherichia coli. 30 EXEMPLE 12 On charge un réacteur, dans lequel on remplace l'air par de l'azote, avec 5,2 parties d'acide 6-aminopénicilla-nique sec et ensuite avec 51 parties en volume de chlorure de mé- 1 thylène sec. Puis on ajoute 6,8 parties en volume de triéthylamine 35 et 3,36 parties en volume de N,N-diméthylaniline. On agite le mélange, puis on ajoute goutte à goutte 3,1 parties de diméthyldichlorosilane à "une température de 10-15°C en 20 minutes. On laisse ce mélange réactionnel s'échauffer et, à 25°C, on l'agite pendant 1 heure 1/2. On ajoute à la solution ainsi obtenue 5,05 40 parties de chlorhydrate de chlorure de 1-cyclohexénylglycine à 71 35657 2110380 une température de 0-5°C pendant 45 minutes. On agite le mélange & 0-5°C pendant 15'minutes, à 5-10°C pendant 1 heure 1/2 et à 10°C pendant 1 heure 1/2. On verse ce .mélange réactionnel dans 144 parties en volume d'eau froide, puis on agite à 5-10°C pendant 5 15 minutes. Après addition de 0,7j partie de Célite, on filtre le mélange. On lave le gâteau de filtre à l'eau froide et on réunit le*filtrat et le liquide de lavage. On lave la couche aqueuse a*fcû de l'acétate d'éthyle. A une température de 0-5°C, on ajuste la C0UÙhe aqueuse à pH 4,0 avec du bicarbonate de sodium, à la 10 suite de quoi on obtient l'acide 6-(l'ocyclohexénylglycinaœldo)-péîllcillanique sous forme de précipité blanc. EXEMPLE 13 On dissout 0,72 partie de 1-cyclohexénylglycinate de sodium dans 20 parties'ôn volume de méthanol et on ajoute à la 15 solution 0,47 partie d'acétylacétate de méthyle. On agite le mélange à 50°C pendant 2 heures, puis on le concentre jusqu'à sic-cité. On dissout directement le composé d'énamine ainsi obtenu dans 25 parties en volume de chloroforme et, à -15°C, on ajoute une solution de 0,55 partie de chlorocarbonate d'isobutyle dans 20 10 parties en volume de chlojtforme. On agite le mélange à -8°C pendant 90 minutes. Puis, on ajoute goutte à goutte à -5°C en 10 minutes une solution de 1,08 parties d'acide 7-aminocëphalospo-ranique et de 0,41 partie de triéthylamine dans 30 parties en volume de chloroforme, puis on agite à une température de 0-5°C 25 pendant 2 heures. On concentre le mélange et on dissout le résidu dans 100 parties en volume d'une solution aqueuse à 1% d'hydro-génocarbonate de sodium. Après' avoir ajusté la solution à pH 2,5 avec de l'acide chlorhydrique 2N et l'avoir agité pendant 30 minutes, on l'agite avec de l'éther. On ajuste la couche aqueuse 30 à pH 3,8 avec de l'hydrogénocarbonate de sodium, puis on la concentre et on obtient l'acide 7-(l'-cyclohexény^Lycinamido)-Gépha-losporanique. EXEMPLE 14 On met en suspension 2,16 parties d'acide 7-amino-35 céphalosporanique' dans uri mélange de 20 parties en volume d'acétate d'éthyle et de 1,64 partie de triéthylamine et, on ajoute à la suspension 0,87 partie de chlorure de triméthylsilyle à une température de 0-10°G. La température s'élève progressivement et, à la température ambiante, on agite ensuite le mélange pendant 40 3 heures. 71 36657 ly 2110380 Puis, en refroidissant avec de la glace, on ajoute - • au mélange réactionnel 1,05 partie de quihoïéine, puis une solution de 1,68 partie de chlorure de 1-cyclohexénylglycine.dans 20 parties en volume d'acétate d'éthyle. On agite le mélange a température 5 ambiante pendant 3 heures. On concentre le mélange réactionnel et, on le dissout ensuite dans 160 parties en volume d'une solution aqueuse à 1$ d'hydrogénocarbonate de sodium. On lave la solution avec de l'éther, on ajuste la couche aqueuse à pH 3,8 avec de l'acide 10 chlorhydrique 2N, et'on la concentre. On purifie le concentré par chromatographie sur colonne et on obtient l'acide 7-(l'-cyclohexé-nylglycinamido)-céphalosporanique. Point de fusion s 195-200°C (décomposition) Valeur de Rf : 0,25 (n-BuOH : H^O : tétrahydrofuranne 15 =3:1:1) 0,57 (n-BuOH s H20 s acide acétique = 3 s 1 J 1) Analyse élémentaire s Calculé pour c18H23N3S06'H20' 20 C 50,57, H 5,89, N 9,82, S 7,50, % Trouvé C 50,24> H 5,74, N 9,83, S 7,54 % Spectre d'absorption UV (dans H20) : 258 m)i (£ = 7-737). EXEMPLE 15 25- On met en suspension 1,8 partie de 1-cyclohexényl- glycinate de sodium dans 40 parties en volume d'alcool éthylique, et on ajoute 1,45 partie d'acétylacétate d'éthyle. On chauffe le mélange à reflux pendant 3 heures à 65°C et on soumet le mélange réactionnel à une distillation pour éliminer l'alcool éthy-30 lique, puis on le sèche. On dissout le résidu (composé d'énamine) dans 50 parties en volume de chloroforme et on ajoute à la solution 1,36 partie en volume, de chlorocarbonate d'isobutyle dissous dans 10 parties en volume de chloroforme, à une température comprise entre -15 et -10°C, puis on agite pendant 2 heures à la 35 même température. On ajoute goutte à goutte au mélange résultant une solution de 2,14 parties d'acide 3-désacétoxy-7-aminocéphalo-sporanique et de.1,1 partie de triéthylamine dans 100 parties en volume de chloroforme à -5°C, puis on agite pendant 2 heures 40 à une température comprise entre -5 et 0°C. 71 35657 2110380 On concentre le mélange réactionnel et on dissout le résidu dans une solution aqueuse de 2 parties d'hydrogénocarbonate de sodium dans 100 parties en volume d'eau, puis on extrait avec de l'acétate d'éthyle. On ajuste la couche aqueuse à 5 pH 2,5 avec de l'acide chlorhydrique 2N et on agite pendant 30 minutes. On la secoue avec;de l'acétate d'éthyle, on ajuste la coyche aqueuse à pH 4,5 et on la concentre. On purifie le concentré par chromatographie et on obtient l'acide 3-désacétoxy-7-(l'-cyclohexénylglycinamido)-céphalosporanique. 10 EXEMPLE 16 On met en suspension 1,1 partie d'acide 7-amino-désacétoxycéphalosporanique dans 25 parties en yolume de chlorure de méthylène sec. On ajoute ensuite à la suspension ci-dessus 1,1 partie de triéthylamine sèche, puis on ajoute 0,63 partie de 15 N,N-diméthylaniline. On agite bien le mélange et, en refroidissant avec de l'eau glacée, on y ajoute goutte à goutte 0,65 partie de diméthyldichlorosilane à 10°C. On agite le mélange à température ambiante pendant 2 heures. On ajoute au mélange par petites portions 1,1 partie 20 de chlorhydrate de chlorure de D(-)1-cyclohexénylglycine en poudre à une température inférieure à 10°C. On agite le mélange à 10°C pendant 1 heure, à 10-15°C pendant 1 heure 1/2 et à 15-17°C pendant 1 heure 1/2. Puis on verse le mélange réactionnel dans 30 parties en volume d'eau glacée. On ajuste le pH de la 25 solution à 1,3. On agite la solution pendant 15 heures et on lui ajoute ensuite 1,0 partie de Célite. On agite ensuite le mélange pendant encore 10 minutes, puis on filtre. On amène lo filtrat à pH 4,7 avec KOH IN, on le sèche par congélation et obtient 3,0 parties de poudre jaune pâle. On soumet la poudre 30 à une chromatographie sur couche mince en utilisant un système de solvant acide acétique s n-BuOH ; HgO (1:3:1). On constate que ce produit est un mélange de quatre composés différents. On ajoute 2,0 parties de ladite poudre à 20 parties en volume d'eau, puis on ajoute une solution aqueuse' 35 IN d'hydroxyde de potassium pour amener le pH à 6,9. On purifie la solution résultante à l'aide d'une colonne d'Amberlite XAD II (fabriquée par Rohm et Haas & Co., E.U.A.) et on sèche par congélation la fraction obtenue avec de l'alcool éthylique à 10$ (réactions positives dans la ninhydrine et le chlorure de palla-40 dium), à la suite de quoi on obtient 0,85 partie d'acide 7 71 36657 21 2110380 1'-cyclohexénylglycinamido^désacétoxycéphasporanique sous forme de cristaux blancs ayant l'aspect de plumes. Ce produit présente un spectre d'absorption infrarouge caractéristique à 1770 cm"1, -1 -1 -1 1690 cm , 1600 cm (bande) et 1520 cm . 5 EXEMPLE 17 On agite à température ambiante pendant 16 heures iin mélange en solution de 6,0 parties d'acide 6-(l'-cyclohexényl-glycinamido)pénicillanique, 1,1 partie d'eau, 4,9 parties en volume de triéthylamine et 35 parties en volume d'acétone. On verse le 20 mélange réactionnel résultant dans 50 parties en volume d'eau glacée et, simultanément, on ajoute de l'acide chlorhydrique 2N. En refroidissant avec de la glace, on agite le mélange dans un domaine de pH allant de 2,5 à 3,0 pèndant 2 heures. On lave le précipité avec de l'acide chlorhydrique froid (pH 2,5) et on le sèche: 15 dans un dessiccateur sous vide sur du pentoxyde de phosphore. À la suite de quoi on obtient l'acide 6-(2',2'-diméthyl-4'-(l"-cyclo-hexényl)-5'-oxo-1'-imidazolidinyl/pénicillanique sous forme de poudre blanche. Le spectre d'absorption infrarouge de ce produit présente uneabsorption correspondant au noyau de (3-lactame à 20 1785 cm"1 et une absorption correspondant au noyau de -lactame à 1720 cm"1. Analyse élémentaire Calculé pour C^H^N^O^S : C 57,99, H 6,92, N 10,68, S 8,15, % 25 Trouvé C 57,50, H 6,99, N 10,65, S 7,60 % EXEMPLE 18 On met en suspension 3,5 parties d'acide 7-^Ê>(-) l-cyclohexénylglycinamidç7désacétoxycéphalosporanique dans 25 parties en volume d'acétone et on ajoute 1,5 partie en volume de 30 triéthylamine. On agite le mélange à température ambiante pendant 20 heures, à la suite de quoi on le filtre. On concentre le filtrat sous pression réduite et on élimine l'acétone par distillation. On ajoute au résidu 25 parties en volume d'eau glacée, et en refroidissant avec de la glace et en agitant, on ajuste le mélange 35 à pH 3,0 avec de l'acide chlorhydrique IN, à la suite de quoi il se forme un précipité. En refroidissant avec de la glace, on agite le mélange pendant 2 heures et on recueille le précipité par filtration, on le lave à l'eau froide, puis avec de l'acétone, et on le sèche dans un dessiccateur sous vide sur du pentoxyde de 40 phosphore, à la suite de quoi on obtient 2,4 parties d'acide 71 35657 2110380 7-/2'2'-diméthyl-4'-/p(-} l"-cyclohexényl)-5'-oxo-1 '-Imidazoli-dinjrl7dé s ac é t oxy c éphalosporani que sous forme de poudre blanche. Ce produit présente des absorptions caractéristiques dans la région infrarouge du spectre à 1785 cm"1 ((3-lac-5 tame carbonyle) et à 1700 cm"1 (bande) (noyau imidazolidinyle-CO). Les bandes d'absorption de l'amirie à 1680 et 1520 cm"1 sont absentes. EXEMPLE 19 On dissout 2,0 parties d'acide 7-/p(-)l'-cyclo-10 hexénylglycinamidç>7céphalos.poranique dans 8 parties, en volume de diméthylformamide sec, et on mélange la solution avec 0,7 partie en volume de triéthylamine, Puis, à 10°C, on ajoute goutte à goutte 0,5 partie de sulfure de méthylchlorométhyle. On agite le mélange à température ambiante pendant 4 heures, à la suite de quoi 15 on le filtre. On concentre le filtrat sous pression réduite pendant un certain temps, et on le verse ensuite dans 400 parties en volume d'eau glacée. Après avoir ajusté le mélange à pH 7,0, on recueille les insolubles par filtration, on les lave avec 2 parties d'eau glacée et on les sèche dans un dessinateur sous 20 vide sur P2°5, à. la suite de quoi on obtient l'ester méthylsul-phénylméthylique de l'acide 7-/ÏÏ(-)l'-cyclohexénylglycinamido7 céphalosporanique brut, sous forme d'une poudre jaune pâle. On dissout la poudre dans 10 parties en volume d'acétone et on agite la solution à température ambiante pendant 16 heures. On élimine 25 l'acétone par distillation sous pression réduite et on ajoute le résidu sirupeux à 20 parties en volume d'eau glacée, puis on agite pendant un moment. On amène ensuite le mélange à pH 3,0 avec HC1 IN et on recueille les cristaux précipités par filtration, on les 30 lave avec de l'eau glacée et on les sèche dans un dessiccateur sous vide sur dx pentoxyde de phosphore, à la suite de quoi on obtient l'acide 7-/21,2*-diméthyl-4'-/p(-)-l"-cyclohexényl)-5'-oxo-1'-Imidazolidinyl7céphalosporalque sous forme de poudre blanche. 35 71 36657 23 2110380 REVENDICATIONS 1. Composé caractérisé par le fait qu'il est de formule générale o —CHCONHA 5 nh2 /dans laquelle A est un groupe qui forme l'acide 6-aminopénicilla nique, l'acide 7-aminocéphalosporanique ou l'acide 7-aminodésa-cétoxyeéphalosporanique lorsqu'on introduit un groupe amino7 ou S 10 sel de ce composé. 2. Composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il est l'acide 6-(1'-cyclohexénylglycinamido) pénicillanique. 3. Composé selon la revendication 1, caractéri- 15 sé par le fait qu'il est l'acide 7-(1'-cyclohexénylglycinamido) céphalosporanique. 4. Composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il est l'acide 7-(1'-cyclohexénylglycinamido) désacétoxycéphalosporanique. 20 5. 1-cyclohexénylglycine. 6. Procédé de préparation d'un composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'il comprend la réaction de la 1-cyclohexénylglycine ou de ses dérivés avec l'acide 6-aminopénicillanique, l'acide 7-aminocéphalosporanique ou 25 l'acide 7-aminodésacétoxycéphalosporanique ou avec un sel ou un ester facilement hydrolypable de ces acides «t, si nécessaire, l'hydrolyse du produit de la réaction. 7. Procédé de préparation d'un produit d'addition avec l'acétone représenté par la formule générale 30 O 0 ^-ch - c HN. Jï - H,C^\CH, 3 3 35 /dans laquelle A est un groupe qui forme l'acide 6-aminopénicïL-lanique, l'acide 7-aminocéphalosporanique ou l'acide 7-aminodésa-cétoxycéphalosporanique lorsqu'on introduit un groupe amino>7 ou d'un sel de ce composé, procédé caractérisé par le fait qu'il com prend la réaction d'un composé représenté par la formule géné-40 raie 71 36657 2110380 O —CHCONHA niî2 /dans laquelle le symbole A a la même signification que ci-dessus/ avec de l'acétone. 8. Procédé de préparation de 1-cyclohexénylglycine, caractérisé par le fait qu'il comprend la réaction du 1-cyclohexène-l-aldéhyde avec un cyanure alcalin et une substance produisant de l'ammoniac, et l'hydrolyse du produit de réaction, 9. Procédé de prépration de 1-cyclohexénylglycine^ caractérisé par le fait qu'il comprend la nitrosation d'un composé représenté par la formule générale /dans laquelle B est un groupe carboxyle protégé ou non protégé ou un groupe cyano/, puis la réduction du produit de nitrosation quand B représente un groupe carboxyle non protégé, et, lorsque B représente vin groupe carboxyle ou cyano protégé, la réduction et l'hydrolyse, qui peuvent être effectuées dans un ordre quelconque .