FR 2120009 A1 19720811 FR 7146470 A 19711223 7146470 1 2120009 La présenta invention concerne un mannane de konjac sensiblement pur et soluble dans l'eau ainsi" que son procédé de préparation* L'invention se rapporte aussi à une composition pharmaceutique contenant le dit mannane de konjac 5 comme ingrédient actif. L'invention se rapporte en outre au traitement d'animaux à sang chaud, l'homme y compris, par le mannane de konjac soluble dans 1'eau en vue de diminuer le taux de cholestérol dans le sérum. Le konjao (Amorphophalus Konjac C. Koch) est 1C une plante vivace appartenant aux aracées. Le ''Konnyaku". qui est fait à partir du tubercule de cette plante est traditionnel-- lement utilisé On connaissait jusqu'à maintenant une méthode de séparation du mannane de konjac à partir de la farine de konjac suivant laquelle la farine de konjac ayant bouilli dans 20 l'eau est-traitée par la liqueur de Fehling pour faire passer le mannane en son complexe avec le cuivre, ce dernier complexe étant décomposé de nouveau en mannane après purification, comme décrit dans J. Agr. Chem. Soc. Japan, 6, 991-995, (1930). On connaît aussi une méthode suivant laquelle on extrait à 11 eau 25 la farine de konjac, enlève les impuretés en répétant plusieurs fois des traitements alternatifs de précipitation à l'éthanol et de redissolution du précipité dans l'eau, et en séchant le précipité finalement obtenu pour obtenir le mannane dé konjac pur comme décrit dans le Bull, Chem. Soc. Japan h%, 298-322 (1927). 30 Cependant, le mannane de konjac obtenu par ces procédés n'est plus soluble dans l'eau et n'a plus la possibilité de former Tin gel de konjac. Ceci est probablement dû à une sorte de dénaturation pendant le traitement comme on l'a observé dans le cas de l'amylose en solution alcaline, J. Amer. Chem. 35 Soc., 26, 4595 (195*0. Comme résultat des recherches sur une méthode de séparation du mannane de konjac sous une forme sensiblement pure sans perte des qualités inhérentes, on a trouvé que l'on peut obtenir un mannane de konjac sensiblement pur et soluble ko dans l'eau par extraction à l'eau de la poudre de tubercule séché 71 k6k70 2 2120009 de konjac (Amorphophalus konjac), an éliminant de l'extrait les matières insolubles, en dialysant cet extrait à l'eau et ensuite en lyophilisant la matière dialysée. Le mannane de konjac soluble dans l'eau ainsi 5 obtenu est utile comme médicament car il a une action qui réduit le taux de cholestérol dans le sérum. Etant donné que le mannane de konjac insoluble dans l'eau préparé par les méthodes conventionnelles connues n'a pas cette activité pharmacologiqu.e, il est tout à fait surprenant que le mannane de konjac préparé par le 10 - >cSdé de l'invention ait une action sur l'abaissement du taùx de cholestérol dans le sérum. Ainsi, un but de l'invention est de procurer un mannane de konjac sensiblement pur et soluble dans 11 eau ' qui n'a jamais été préparé. Un autre but de l'invention est de 15 procurer une composition pharmaceutique contenant comme ingrédient actif ^e mannane de konjac sensiblement' pur et soluble dans l'eau. Un autre but de l'invention est encore de réaliser un traitement médical pour les animaux à. sang chaud présentant des symptômes d'hypertension, dans lequel on administre aux 20 animaux une dose efficace du mannane de konjac sensiblement pur et soluble dans l'eau. Ces buts et d'autres buts de l'invention ressortiront de la description qui va suivre. Conformément au procédé de l'invention, la farine de konjac est mélangée à l'eau sous agitation pour en 25 faire une solution colloïdale et la solution qui en résulte est séparée des matières insolubles par filtration, centrifuga-tion ou par d'autres moyens convenables, soumise en suite à un traitement de dialyse et finalement à la lyophilisation pour donner un mannane de konjac sensiblement pur. 30 La farine de konjac utilisée comme produit de départ dans la présente invention est généralement préparée,soit par broyage des tubercules séchés d'une plante appartenant à la colocase, de préférence 1'amorphophalus konjac C. Koch ou en enlevant l'amidon, les fibres, les protéines, etc. et les matières 35 solubles dans 1'éthanol d'une bouillie des tubercules broyés. La farine de konjac disponible dans le commerce vendue en vue de la préparation du konnyaku comestible peut également être utilisée sans autre traitement. Un mode de réalisation préféré de 1'invention kO consiste à agiter un volume de la dite farine de konjac mélangé 71 46470 3 2120009 à 10 à 200 volumës d.' eau ou une partie en poids du tubercule brut broyé avec 10 à 100 parties en poids d'eau, ce grâce à quoi les composants solubles dans l'eau de la farine de konjac tels que le mannane de konjac, les impuretés à faible poids 5 moléculaire et les sels minéraux sont dissous dans l'eau, tandis que les composants insolubles dans l'eau tels que les particules d'amidon, la peau des tubercules et les matières fibreuses sont précipitées. Les composants insolubles sont enlevés par filtration ou centrifugàtion, ce que l'on peut 10 faire par* toute méthode courante connue. La solution aqueuse colloïdale qui en résulte est alors dialysée par les procédés ordinaires, par exemple à travers une membrane semi-perméable • en présence d'eau du robinet pendant 24 à 48 heures. Grâce à ce traitement, les impuretés solubles dans l'eau et les 15 matières minérales contaminant le mannane de konjac sont presque complètement éliminées. Finalement, l'élimination par lyophilisation de l'eau de la solution laisse un mannane de konjac sensiblement pur et soluble dans l'eau sous forme d'un, produit d'un blanc 20 pur, cotonneux présentant les propriétés intrinsèques du mannane de,konjac î être facilement soluble dans l'eau et avoir la faculté de former du konnyaku lorsqu'il est chauffé sous forme de solution aqueuse colloïdale en présence d'un alcali. A la différence du mannane de konjac préparé par les procédés 25 courants connus, le mannane de konjac préparé par le procédé de l'invention conserve ses propriétés intrinsèques parce qu'il n'est exposé à aucun traitement sévère. Le mannane de konjac sensiblement pur et soluble dans l'eau préparé par le procédé décrit ci-dessus est une 30 substance nouvelle inconnue dans la littérature et faisant preuve d'une forte activité pour l'abaissement du taux de cholestérol dans le sang lorsqu'elle est administrée aux animaux à sang chaud tels que l'homme, le bétail et les autres animaux domestiques. Cette substance peut donc être efficacement utilisée dans le 35 traitement médical de maladies telles que l'hypertension humaine et l'artériosclérose des volailles causées par un accroissement du taux de cholestérol dans le sérum. En outre, il est certain que cette substance possède une activité antitumorale. Le mannane de konjac sensiblement pur et soluble 40 dans l'eau peut être administré tel quel ou, si nécessaire, sous 71 46470 k 2120009 forme de mélange avec un vecteur habituellement utilisé pour les médicaments à usage interne. Lorsqu'il est administré au bétail ou aux autres animaux domestiques le mannane de konjac est avantageusement incorporé à leur nourriture. La dose varie ■ 5 suivant la nature de l'animal mais on l'administre généralement en plusieurs fois à la dose quotidienne de 0,1 g à 10 g par kilogramme de poids du corps. On peut utiliser comme vecteurs'pharmaceutique-me,nt acceptables, le glucose, le lactose, la gomme arabique, 10 la gélatine, le mannitol, la pâte d'amidon, le trisilicate de magnésium, le talc, 1*amidon de pin, l'amidon de pomme de terre, la kératine, la silice colloïdale, etc. La composition pharmaceutique suivant l'invention peut être formulée sous une forme quelconque souhaitée, poudre, 15 cachet, pastille, solution, etc. L'invention sera mieux comprise à l'aide des exemples non limitatifs suivants : Exemple 1 On prépare une solution colloïdale par dissolu-20 tion de 0,5 g d'une farine de konjac disponible dans le commerce dans 100 ml d'eau. Après deux heures de repos, on filtre la solution à travers un filtre en toile de nylon à 150 mailles et ensuite à travers un filtre en verre fritte pour éliminer complètement les matières insolubles. Cinquante millilitres du 25 filtrat clair sont enfermés dans un tube de cellophane et dia-lysés à l'eau distillée pendant 48 heures. La solution ainsi .traitée est transférée dans vin cristallisoir bien nettoyé et lyophilisée à 20° C pendant environ 30 heures de la façon habituelle. On a ainsi préparé 0,4 gramme de mannane d'un blanc 30 pur et ayant l'aspect du coton. Résultats de l'analyse : calculé pour (CgH^O^l/8 H20)n ; C, 43,83 % ; H, " 6,28 % ; trouvé : C, 43,87 % ; H, 6,22 % ; N, trace. Les propriétés du mannane de konjac ainsi préparé apparaissent sur le tableau suivant où l'on montre aussi 35 à titre de comparaison celle de la farine de konjac de départ et celle du mannane de konjac purifié par les méthodes courantes connues. 71 46470 5 2120009 TABLEAU 1 Mannane de Farine de konjac Mannane de konjac konjac préparé de départ du préparé par une mé- dans l'exemple 1 commerce thode courante connue* Solubilité Soluble dans 11 eau Gélification conservée Solubilité 10 dans NaOH à 20 % insoluble Soluble Conservée insoluble insoluble perdue soluble Pouvo ir réducteur nul Réaction 15 Iodo-amidonnée négative présent positive nul négative * J. Agr. Chem. Soc. Japan 6_, 991-995, (1930) 20 25 30 Exemple 2 15 rats mâles pesant environ 100 g,' de souche Wister ont été divisés en trois groupes et les rats de chaque groupe ont été alimentés avec des rations basiques (normales), hypercholestérolémiques (de contrôle), ou avec 3 rations hyper-cholestérolémiques additionnées de 5 % de mannane de konjac de différentes puretés. On a donné de la nourriture fraîche à volonté chaque matin. A la fin de la période d'essai^les animaux ont été anesthésiés par injection intrapéritonéale d'une solution à 5 % de pentobarbital. On a prélevé dans une seringue hépariniséë au moyen d'une piqûre au coeur du sang que l'on a centrifugé. Les taux individuels de cholestérol dans le plasma ont été mesurés par la méthode de Pearson et coll. Les résultats des valeurs moyennes de chaque groupe sont donnés dans le tableau 2. 71 46470 6 2120009 TABLEAU 2 Effet de la purification sur l'activité hypocholesté-rolémique du' mannane de konjac 5 Groupe Normal 10 Contrôle Prise de nourriture g/8 jours 13^ + 5,9 132 + 3,2 Gain de poids Cholestérol dans brut g/8jours 56,6 + 2,7 58,0 + 2,2 le plasma Mg/100ml 110 + 4,9 176 +9,7 20 25 Far'ine de konjac de départ du commerce 115 + 3,0 45,7 + 2,2 Extrait par l'alcool 15 de la farine de 126 + 2,0 konjac * ' ' -Mannane de konjac préparé suivant 128 + 1,9 l'exemple 1 56,3 + 2,1 55,1 + 3,1 162 + 14,6 142 + 10,1 133 + 5,5 Il est évident d'après le tableau ci-dessus que le mannane de konjac préparé conformément à la présente invention a une excellente action sur l'abaissement du taux de cholestérol dans le sérum» Bien entendu, l'invention n'est pas limitée aux exemples de réalisation ci-dessus décrits, à partir desquels on pourra prévoir d'autres modes et d'autres formes de réa-« » lisation,- sans pour cela sortir du cadre de l'invention. 71 46470 7 2120009 REVENDICATIONS 1°) Mannane de konjac sensiblement pur et soluble dans l'eau caractérisé en ce qu'il est préparé en soumettant d'abord un extrait aqueux de farine de konjac à la 5 dialyse à l'eau et ensuite l'extrait ainsi dialyse à la lyophilisation. 2°) Procédé de préparation d'tin mannane de konjac sensiblement pur et soluble dans l'eau caractérisé en ce que l'on agite bien de la farine de konjac ntélangée à l'eau 10 ou des tubercules bruts broyés avec de l'eau, que l'on élimine les matières insolubles par filtration ou centrifugation, que l'on dialyse la solution colloïdale aqueuse qui en résulte • pour en éliminer les impuretés solubles, et qu'ensuite on lyophilise cette solution. 15 3°) Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient du mannane de konjac sensiblement pur et soluble dans l'eau et un vecteur inerte, non toxique et pharmaceutiquement tolérable . 4°) Méthode de réduction de la pression 20 sanguine et d'abaissement du taux de cholestérol dans le sérum caractérisée en ce que l'on administre aux animaux souffrant d'hypercholesterolemie et d'hypertension une dose thérapeutique ment efficace de mannane de konjac sensiblement pur et soluble dans l'eau conforme à la revendication 1.