FR 2120068 A1 19720811 FR 7146998 A 19711228 71 46998 -1- 2120068 la présente invention concerne de nouvelles compositions de matière utiles dans des applications agricoles et industrielles comme agents antimicrobiens (fongicides, "bactéricides et "algicides"). Plus particulièrement, elle concerne des composi-5 tions antimicrobiennes contenant, comme principe actif essentiel, un 2-halogéno-2-halogénométhylglûtaronitrile et des procédés pour utiliser de telles compositions comme agents antimicrobiens dans des applications agricoles et industrielles-. Les domaines de technologie dans lesquels le développe-10 ment des champignons, des bactéries et des algues a une influence défavorable sont nombreux et comprennent, par exemple, les industries des peintures, du bois, des textiles, des produits de beauté, du cuir, du tabac, de la fourrure, des cordes, du papier, de la pâte, des matières plastiques, des combustibles, des huiles 1? et du caoutchouc. Des fongicides et bactéricides sont utilisés aussi pour des applications dans l'agriculture, par exemple pour empêcher ou réduire au minimum le développement de champignons nuisibles et/ou de bactéries sur des plantes, des arbres, des fruits, des graines ou dans 1q«o1. la présente invention est 20 basée sur la découverte que les 2-halogéno-2-halogénométhyl- glutaronitriles décrits ci-après sont des agents antimicrobiens efficaces quand ils sont utilisés dans ces applications et dans d'autres. Tels qu'ils sont utilisés dans la description de la 25 présente invention, les termes "antimicrobien", "fongicide", "bactéricide", "algicide" et les termes du même genre doivent être compris comme englobant la lutte contre les champignons, les bactéries (tant aérobies qu'anaérobies) et les algues d'une manière générale et comme comprenant la destruction aussi bien 30 que l'inhibition de la croissance de ces organismes. Selon son aspect composition, par conséquent, la présente invention peut être décrite comme résidant dans le concept de compositions antimicrobiennes contenant comme principe actif essentiel une quantité antimicrobienne efficace d'un 2-halogéno-35 2-halogénométhylglutaronitrile de formule : CH2X ira - G - CH0 - 0Ho - GIT X 71 46998 — £1 — 2120068 dans laquelle X représente du chlore ou du brome. Il est envisagé que des compositions antimicrobiennes contenant une quantité efficace de tels. 2-halogéno-2-halagénométhylglutaronitriles seront utilisées comme agents antimicrobiens dans des applications 3 industrielles et agricoles. Comme indiqué ci-dessus, la présente invention est basée sur la découverte que les 2-halogéno-2-halogénométhylglutaro-nitriles décrits ci-dessus sont efficaces pour lutter contre le développement de bactéries, de champignons et d'algues dans di-10 verses applications industrielles et agricoles. On a trouvé, par exemple, que ces composés'sont des agents antimicrobiens efficaces pour la destruction ou la régulation des champignons et bactéries infestant le sol et pour la protection de graines, de bulbes et de plantes. Ce sont aussi des algicides efficaces 15 dans le traitement d'étangs et de mares, de circuits~d'eau de refroidissement, etc. L'utilité des 2-halogéno-2~halogénométhyl-glutaronitriles de la présente, invention est montrée non seulement par leur activité contre les bactéries et les champignons responsables du rabougrissement, et même de la destruction.de 20 nombreux types de plantes produisant des récoltes, mais aussi contre ceux provoquant la dégradation et la détérioration de nombreux types de produits industriels comprenant, par exemple, le papier, le cuir, les textiles, des systèmes aqueux tels que des adhésifs, des résines, des fluides de forage, des dispersions 25 de pigments et des peintures au latex et revêtements oléorésineux dont les pellicules sont particulièrement vulnérables à l'action destructrice des champignons. Les pertes économiques importantes rencontrées dans les opérations de fabrication du papier comme conséquence de l'accumulation de boues bactériennes et fongiques 30 dans diverses parties du système peuvent être éliminées dans une mesure notable par utilisation des composés décrits ici. On a confirmé l'activité antimicrobienne des composés décrits ci-dessus en utilisant des techniques normalisées de laboratoire. Ces composés se sont révélés efficaces, par exemple, 35 pour inhiber des bactéries comprenant des espèces Aerobacter comme Aj_ aerogenés, des espèces Bacillus comme mycoides, des espèces Pseudomonas comme aeruginosa, des espèces Staphylo-coccus comme aureus, des espèces Escherichia comme Ej_ çoli, 71 46998 ~5~ 2120068 des espèces Cellulomonas comme biazotea, des espèces Proteus comme P^ mirabilis et des bactéries réduisant les sulfates comprenant des espèces Desulfovibrio comme Dj_ desulfuricans. Ils se sont révélés efficaces aussi contre des champignons comprenant 5 des espèces Bhodotorula, des espèces Alternaria, des espèees Aspergillus comme A^ niger, des espèces Pullularia comme P. pul-lulans, des espèces Pénicillium comme I\_ luteum, des espèces Chaetomium comme globosum, des espèces Trichoderma comme T. viride, des espèces Rhizoctonia comme solani. Ces bacté-10 ries et/ou champignons sont couramment présents sur des produits céréaliers, sur des huiles, sur des fruits et légumes et sur des produits de beauté, du cuir, de l'isolation, électrique, des textiles et de nombreuses autres matières capables d'entretenir leur croissance. Egalement, on peut trouver de telles bactéries 15 et/ou de tels champignons sur des plantes, des graines, de la fourrure et du bois et dans des sols. De plus, on peut utiliser les composés pour lutter contre un développement excessif d'algues comme des espèces Chlore 11 a, y compris C_j_ pyrenoidosa. Les 2-halogéno-2-halogénométhylglutaronitriles de la 20 présente invention peuvent être préparés commodément à partir de 2-méthylèneglutaronitrile, un composé disponible dans le commerce, par halogénation.On peut effectuer 1'halogénation en mettant intimement en contact le 2-méthylèneglutaronitrile avec un halogène, du chlore ou du brome, de préférence à des tempéra-25 tures au-dessous de 30°C environ et en l'absence de solvant. On continue l'addition de l'halogène au mélange réactionnel ôus_ qu'à ce qu'une quantité équimolaire d'halogène soit absorbée, ce qui demande habituellement de 8 à 72 heures environ. Quand le 2-halogéno-2-halogénométhylglutaronitrile ainsi formé est un 30 liquide, il peut être purifié par distillation sous pression réduite. S'il est solide, le produit peut être recueilli par extraction au solvant suivie de 1'évaporation du solvant et d'une recristallisation classique du résidu brut. En variante, 1'halogénation du 2-méthylèneglutaronitrile 35 peut être conduite en présence d'un solvant organique approprié comme le chlorure de méthyle, l'hexane, le benzène, le sulfure de carbone, le tétrachlorure de carbone, l'acétate d'éthyle, etc. La réaction est habituellement conduite avec la température de 71 46998 2120068 réaction maintenue au-dessous de 30° C environ en utilisant un refroidissement externe. Après absorption d'une quantité équi-molaire d'halogène, les produits de réaction peuvent être recueillis comme indiqué ci-dessus. 5 On comprendra que les 2-halogéno-2-halogénométhylgluta- ronitriles décrits ci-dessus peuvent être utilisés dans diverses compositions, qui peuvent être solides, comprenant des poudres finement divisées et des matières granulaires, aussi bien que liquides, comme sous la forme de solutions, d'émulsions, de 10 suspensions, de concentrés, de concentrés émulsionnables, de bouillies, etc, suivant l'application envisagée et les milieux de composition désirés. De plus, quand le 2-halogéno-2-halogéno-méthylglutaronitrile est liquide, il peut être utilisé pur.ou peut être incorporé dans diverses compositions, tant solides que 15 liquides, comme par adsorption sur des supports inertes appropriés tels que du talc, des argiles, de la terre d'infusoires, etc. Ainsi, on comprendra que le 2-halogéno-2-halogénométhyl- • glutaronitrile peut être utilisé pour former des compositions 20 antimicrobiennes contenant de tels composés comme ingrédient actif essentiel, ces compositions pouvant contenir aussi diverses matières jouant le rôle de véhicule et adaptables à des applications industrielles et agricoles, comprenant des diluants secs finement divisés ou liquides, des extendeurs, des argiles, de la 25 terre d'infusoires, du talc, etc, ou de l'eau et divers liquides organiques tels que des alcanols inférieurs, du kérosène, du benzène, du toluène et d'autres fractions de distillation de pétrole ou leurs mélanges. On comprendra aussi que les 2-halogéno-2-halogénométhyl-30 glutaronitriles actifs décrits ci-dessus peuvent être utilisés en combinaison les uns avec les autres aussi bien qu'avec d'autres matières antimicrobiennes. Par exemple, ces composés peuvent être combinés avec d'autres fongicides et bactéricides tels que le 2-(4'-thiazolyl)benzimidazole, l'acide sorbique, l'acide 35 propionique, la mycostatine, le diacétate de sodium, la tricho-mycine, l'amphotéricine, la griséofulvine, l'acide undécylénique, des esters d'acide parahydroxybenzoïque, le chlorquinaldol, la 5,7-dichloro-8-hydroxyquinoléine, 1'o-phényl-phénate de sodium, 71 46998 -5- 2120068 11 o-phénylphénol, le biphényle, des phénols chlorés, le benzoate de sodium dans des concentrations appropriées et dans des cas appropriés de manière à combiner l'action de.chacun pour obtenir des résultats particulièrement utiles. De telles combinaisons 5 peuvent trouver une application particulière dans la préparation de savons germicides, dans la production de produits de beauté et de revêtements aqueux et dans la lutte contre les accumulations de boue dans les papeteries^. Il est bien évident aussi que les 2-halogéno-2-halogénométhylglutaronitriles peuvent être 10 combinés avec d'autres agents algicides tels.que des chlorures de benzalkonium et d'autres composés d1ammonium.quaternaire pour donner des compositions particulièrement appropriées pour des problèmes spéciaux de lutte contre les algues. Comme indiqué ci-dessus, on a trouvé, que le développe-15 ment de divers champignons et bactéries nuisibles existant dans la terre est éliminé ou limité par 1'utilisation de compositions contenant les 2-halogéno-2-halogénométhylglutaronitriles décrits ici. le terme "terre", tel qu'il est utilisé ici, doit être compris comme englobant tous les milieux capables d'entretenir la 20 croissance de plantes et pouvant comprendre de l'humus, du sable, de l'engrais, du compost, des solutions pour croissance de plantes créées artificiellement, etc. Les 2-halogéno-2-halogénométhylglutaronitriles décrits ci-dessus ont une activité contre les bactéries, les champignons 25 et les algues quand ils sont utilisés à des niveaux appropriés de concentration et ils peuvent être utilisés pour inhiber le développement de ces organismes. Il sera évident pour l'homme de l'art que la concentration effective nécessaire variera avec les organismes particuliers et dans des applications particulières. 30 En général, toutefois, on obtient une réponse fongicide, bactéricide et algicide effective quand les 2-halogéno-2-halogéno-méthylglutaronitriles sont utilisés à des concentrations comprises entre 0,5 et 1000 ppm (parties par million). Les exemples non limitatifs suivants montreront bien 35 comment l'invention peut être mise en oeuvre. EXEMPLE 1 2-chloro-2-chloromé thylglutaronitri1e On place ^106 g de 2—méthylèneglutaronitrile dans un 71 46998 2120068 ballon équipé d'un agitateur, d'un tube desséchant au chlorure de calcium et d'un tube d'amenée de gaz au-dessous de la surface. On refroidit à 15-20°C et on ajoute du chlore gazeux en agitant de manière que la température ne dépasse pas 20°G. Quand une 5 quantité équimolaire de chlore est absorbée, on cesse l'addition du chlore gazeux et on continue l'agitation pendant une heure supplémentaire. On purifie le produit par distillation sous pression réduite pour obtenir du 2-chloro-2-chlorométhylglutaro-nitrile (point d'ébullition 136-138°C sous 1,5 mm). 10 EXEMPLE 2 2-bromo-2-bromomé thy1glutaroni tri1e On combine 106 g de 2-méthylèneglutaronitrile et 160 g de brome liquide et on agite à une température de 25-27°C pendant 72 heures. On traite le mélange de réaction avec du bisul- 15 fite de sodium aqueux et le traite ensuite par extraction avec ■x trois portions de 100 cnr d'oxyde d'éthyle. On lave les extraits 3 éthérés avec trois portions de 50 cm de bicarbonate de sodium aqueux et on les sèche avec du sulfate de magnésium anhydre. On élimine le sulfate de magnésium par filtration et on évapore l'é-20 ther. On purifie le résidu brut par recristallisation à partir d'isopropanol pour obtenir du 2-bromo-2-bromométhylglutaronitrile (point de fusion 51,2-52,5°C). EXEMPLE 3 2-bromo-2-bromométhylRlutaronitrile 25 On ajoute 424,5 g de 2-méthylèneglutaronitrile dans 400 cm^ de chlorure de méthylène dans un ballon de 3 litres à fond rond et à 3 tubulures équipé d'un agitateur, d'un thermomètre, d'un condenseur et d'une ampoule à brome. On place dans l'ampoule à brome 639,3 g de brome dans 400 cm^ de chlorure de 30 méthylène. On refroidit la solution de méthylèneglutaronitrile en agitant à 15°G sur un bain de glace. On ajoute la solution de brome goutte à goutte dans le ballon à réaction en 1,5 heure environ en maintenant la température de réaction à 15-20°G. On fait vieillir en agitant à 20°C pendant 3 heures et on continue 35 l'agitation à la température ambiante pendant 60-70 heures. On chasse le solvant par distillation sous vide à 40°C environ en maintenant le volume constant par addition continuelle d'éthanol. On refroidit la solution alcoolique à -4°C et on sépare le pro 71 46998 -7- 2120068 duit par filtration. On lave le gâteau de filtration avec de l'alcool froid et on le sèche sous vide. On recristallise le produit à partir d'éthanol pour obtenir du 2-bromo-2-bromo-méthylglutaronitrile. 5 EXEMPLE 4 Pour déterminer le spectre antimicrobien, on utilise les techniques suivantes : Activité antibactérienne - Une solution de réserve de l'échantillon à essayer est préparée dans du méthanol à 25 %• 10 Des dilutions de la solution de réserve sont incorporées dans de la gélose Tryptone Glucose Extract Agar (Difco) et on verse la gélose dans des boîtes de Pétri stériles. Après durcissement, les plaques sont ensemencées par striage avec une suspension aqueuse de l'organisme d'essai. Les plaques inoculées sont mises 15 en incubation à 35-37°C et examinées après 24 heures en ce qui concerne la présence ou l'absence de développement. La plus basse concentration à laquelle il ne se produit pas de développement est rapportée comme "concentration inhibitrice". Activité antifongique - Une solution de réserve de 20 l'échantillon est préparée dans du méthanol à 25 %. Des dilutions de la solution de réserve sont incorporées dans de la gélose Sabouraud Maltose Agar (Difco) et on verse la gélose dans des boîtes de Pétri stériles. Après durcissement, les plaques sont inoculées par striage avec une suspension-aqueuse de spores de 25 l'organisme d'essai. On n'utilise pas d* agent mouillant dans la préparation de la suspension. Les plaques inoculées sont mises en incubation à 28-30°C et examinées après sept jours en ce qui concerne la présence ou l'absence de développement. La plus basse concentration à laquelle il ne se produit pas de développe-30 ment est appelée "Concentration inhibitrice". En utilisant les techniques décrites ci-dessuss on essaie le 2-bromo-2-bromométhylglutaronitrile à 1, 10, 50 et 100 ppm contre les organismes et on obtient les résultats indiqués dans le tableau suivant. 71 46998 -8- 212Q068 TABLEAU I ORGANISME JOSCEI-TTRATIO'-T INHIBITRICE Bactéries : Aerobacter aerogenes 50 5 Bacillus mycoides 10 Pseudomonas aeruginosa 50 Staphylococcus aureus 50 Esch.erich.ia coli 10 Cellulomonas biazotea 10 10 Proteus mirabilis 10 Champignons:Saccharomyces cerevisiae 50 Shodotorula sp. 100 Alternaria sp. 100 Aspergillus niger • 100 15 Pulluiaria pullulans 100 Pénicillium luteum 100 Chaetomium globosum 100 Trichoderma viride 100 Rhizoctonia solani 50 20 EXEiiIPLE 5 On essaie le 2-bromo-2-bromométhylglutaronitrile en ce qui concerne son activité bactéricide par la méthode temps-destruction. L'essai consiste à inoculer une culture d'Aerobacter aerogenes dans de l'eau stérile, à ajouter des concentrations 25 connues du produit chimique essayé et à laisser les deux en contact pendant un laps de temps connu. On effectue des comptages bactériens après le temps de contact choisi. On détermine l'efficacité du produit: chimique essayé en comparant les résultats du comptage à ceux d'un comptage sur un témoin contenant seulement 30 de l'eau stérile et les bactéries effectué à 0 heure. Les résultats de l'essai sont résumés dans le tableau suivant. 71 46998 2120068 TABLEAU II COMPOSE 20 Concen- Temps de Destruction tration contact . (%) (ppm) (heures) 5 2-bromo-2-bromométhylglutaro- • nitrile 25 3 91 20 3 86 10 3 82 , 5 3 74 10 1 3 75 EXEMPLE 6 L'efficacité du 2-bromo-2-bromométhylglutaronitrile comme agent de lutte contre les boues des papeteries est évalué par la technique suivante. 15 On prépare une eau blanche artificielle de papeterie comprenant les matières suivantes dans de l'eaTj&u robinet : TAPPI Standard Sulfite Pulp 0,05 % Technical Association of the Pulp and Paper Industry, New York, New York Trypticase Soy Broth, stérile 0,05 % Solution saturée d'alun, complément au pH 4,5 Suspension d'Aerobacter aerogenes 0,1 % Des portions (100 cm^) de l'eau blanche sont placées dans des récipients de capacité plus grande utilisables sur un 25 appareil à secousses (par exemple des flacons, des ballons). Le composé essayé est ajouté à ces portions de manière à produire les concentrations d'essai désirées. Un témoin non inhibé est inclus dans chaque essai. On effectue des comptages de plaques sur la portion non inhibée à l'instant zéro et sur les portions trai-30 tées 1 heure, 4 heures et 24 heures après le début de l'essai. Le pourcentage de réduction dans le résultat du comptage pour chaque concentration de l'inhibiteur et pour chaque intervalle de temps est calculé en comparant la population bactérienne de chaque échantillon à celle du témoin non inhibé. Pour être consi-35 déré comme intéressant, le pourcentage de réduction obtenu grâce au composé essayé doit être d'au moins 90 %, et de préférence 99 %•, en quatre heures. Les résultats de cette expérience en utilisant le 2-bromo-2-bromométhylglutaronitrile sont résumés dans le tableau suivant. 71 46998 -10- 2120068 TABLEAU III COMPOSE Concentration (ppm) REDUCTION (%) 1 4 24 heure heures heures 10 15 2-bromo-2-bromométhylglutaro-nitrile 50 99,99 99,99 99,99 25 99,99 99,99 99,99 10 99,0 99,9 99,99 5 99,0 99,99 49x105 1,1x108 3x108 20 Témoin (bactéries/cm^) EXEMPLE 7 L'efficacité du 2-"bromo-2-bromométhylglutaronitrile comme agent de conservation pour peintures durant le stockage, tant isolément qu'en présence'd'un agent anti-pourriture ajouté, le 2-(4'-thiazolyl)benzimidazole, est évalué par la méthode suivante . Des peintures acryliques pour l'intérieur et à l'acétate de polyvinyle pour l'extérieur ayant les formules indiquées dans les Tableaux IV et V sont préparées pour des essais. TABLEAU IV (Composition - parties en poids) VI M DI3PERSEUR DE COWLES 1 2 3 4 5 Eau 140 140 140 140 140 ■C* ^ OV^ VQ7 vo 00 Daxed 30 Sel de Na d'acide carboxylique polymérisé, W.R. Grâce Co 6 6 6 6 6 Tripolyphosphate de potassium 1 1 1 1 1 Igepal Co-630 Nonylphénoxypoly-(éthylèneoxy)éthanol General Aniline and Film Co. 1,5 1,5 1,5 ■ 1,5 1,5 Polyéthylène-glycol 2 2 2 2 2 Solution de méthylcellulose (3 %) 70 70 70 70 70 I Antimousse 1 1 1 1 1 -A 2-bromo-2-'bromométhylglutaronitrile (DBGN) 0 1,1 (0,1? 2,75 0 (0,25%) 1,1 (0,1%) 0,55 (0,05%) I 2(4*-thiazolyl)"benzimidazole (TBZ) 0 1,1 .(0,1? 1,1 0 (0,1%) 2 75 (0,25%) 2,75 (0,25%) Dioxyde de titane 250 250 250 250 250 DISPERSION 10 MINUTES A 4800 TOUES/MINUTE Talc DISPERSION 10 MINUTES A 4800 TOURS/MINUTE 75 75 75 75 75 REDUCTION ro Solution de méthylcellulose (3 %) 68,5 68,5 68,5 68,5 68,5 IO Méthyl-carbitol 20 20 20 20 20 O Ethylène-glycol 40 • 40 40 40 40 ON 00 Emulsion d'acétate de polyvinyle 425 425 425 425 425 TABLEAU IV (Suite) (Compositi on - parties en poids) DISPEESEUR DE 00WLES 6 7 8 9 10 Eau 140 140 140 140 140 Daxed 30 Sel de Na d'acide carboxylique polymérisé, W.E. Grâce Co 6 6 6 6 6 Tripolyphosphate de potassium 1 1 1 1 1 Igepal Co-630 Nonylphénoxypoly-(éthylèneoxy)éthanol General Aniline and Film Co. 1,5 1,5 1,5 1,5 1,5 Polyéthylène-glycol 2 2 2 2 2 Solution de méthylcellulose (3 %) 70 70 70 70 ' 70 Antimousse 1 1 1 1 1 2~bromo-2-bromométhylglutaronitrile (DBGN) 0,825 (0,075%) 0,0275 (0,025%) 0,55 (0,05%) 0,825 (0,05%) 1,1 (0,1%: 2(4'-thiazolyl)benzimidazole (TBZ) 2,75 (0,25%) 0 0 0 0 Dioxyde de titane 250 250 250 250 250 DISPERSION 10 MINUTES A 4800 TOUES/MINUTE Ta.1 c DISPERSION 10.,MINUTES A 4800 TOURS/MINUTE 75 75 75 75 REDUCTION Solution de méthylcellulose (3 %) 68,5 68,5 68,5 68,5 68,5 Méthyl-carbitol 20 20 20 20 20 Ethylène-glycol 40 40 40 40 40 Emulsion d'acétate de polyvinyle 425 425 . 425 425 425 »-* On KO VO 00 i _!> ro IO M ro o o ON 05 TABLEAU V Peintures acryliques pour l'intérieur VI (Composition - parties en poids) I-* DISPERSEUR DE COWLES 1 2 3 4 5 Eau 450 450 450 450 450 "jbiéthylène-glycol 30 30 30 30 30 (méthylcellulose 4000 cPo 5 5 5 5 5 Tripolyphosphate de potassium 1 ,66 1,66 1,66 1,66 1,66 Lécithine 4 4 4 ,4 4 Antimousse .3 3 3 . 3 3 2-bromo-2-h romoé thylglutaroni tri1e (DBGM) 0 1,08 (0,1%) 2,7 (0,25%) 1,08 (0,1%) 0,54 (0,05%) 2-(4'-thiazolyl)-enzimidazole (TBZ) 0 1-,08 0,1%) 1 ,08 (0,1%) 2,7 (0,25%) 2,7 (0,25%) Dioxyde de titane 125 125 125 125 125 DISPERSION 1,0 MINUTES A 4800 TOURS/MINUTE TALC 250 250 250 250 250 Silicate de calcium 5 5 5 5 5 DISPERSION 10 MINUTES A 4800 TOURS/MINUTE REDUCTION Emulsion de résine acrylique 208 208 208 .208 . 208 Mélanger à l'avance le diéthylène-glycol et la méthylcellulose avant de les ajouter à l'eau. ■P-On \o vo oo I I IS3 h* A) O O ON oo TABLEAU V (Suite) Peintures acryliques pour l'intérieur (Composition - parties en poids) PISPERSEUH DE COWLES 6 7 8 9 10 Eau 450 450 450 450 450 ♦piéthylène-glycol 30 ' 30 30 30 30 (Méthylcellulose 4000 cPo 5 • . 5 5 5 5 Tripolyphosphate de potassium 1,66 1,66 1,66 1,66 1,66 Lécithine 4 4 4 4 4 Antimousse 3 3 3 5 3 2-bromo-2-bromoéthylglutaronitrile 0,81 0,27 0,54 0,81 1,08 (DBGM) (0,075%) (0,025%) (0,05%) (0,075%) (0,1%) 2-(4'-thiazolyl)-enzimidazole (TBZ) 2,7 (0,25%) 0 0 0 0 Dioxyde de titane 125 125 125 125 125 DISPERSION 10 MINUTES A 4800 TOURS/MINUTE . TALC 250 250 250 250 250 Silicate de calcium 5 • 5 5 5 ; 5 DISPERSION 10 MINUTES A 4800 TOURS/MINUTE REDUCTION Emulsion de résine acrylique 208 208 208, 208 208 * Mélanger à l'avance le diéthylène-glycol et la méthylcellulose avant de les ajouter à 1eau. VJ M ON vo vo cd i -a -t* i ro èr* IN> O O ON oo 71 46998 -15" 2120068 Des portions de chaque échantillon de peinture sont placées dans des récipients stériles. Chaque échantillon est appliqué par striage sur la surface de plaques de gélose Tryptone Glucose Extract Agar (TGE) pour contrôle de son état "bactérien. 5 Aux échantillons exempts de "bactéries, on inocule ensuite une culture en bouillon vieille de 24 heures de Pseudomonas aerugino-sa ATCC 10145 (American Type Culture Collection) à raison de 1 cnr de culture par 100 g d'échantillon. Les échantillons inoculés sont mis en incubation à 28-30°C. L'état microbiologique de 10 chaque échantillon est examiné après 24, 48 et 72 heures et sept jours par application en stries sur la surface des plaques de TGE. Ces plaques sont mises en incubation à 28-30°C pendant 7 jours et examinées en ce qui concerne le développement. Sept jours après la première inoculation, les échantillons sont inoculés de nou-15 veau avec Pj_ aeruginosa ATCC 10145 et appliqués en stries sur de la gélose TGE à 24, 48, 72 heures et sept jours après la réinoculation. Les échantillons qui arrivent à la stérilité dans les 48 heures après l'inoculation et la réinoculation et qui sont encore stériles sept jours après l'inoculation et la réinoculation 20 sont considérés comme suffisamment protégés. Les résultats obtenus avec les échantillons d'essai indiqués ci-dessus sont résumés dans le Tableau VI. TABLEAU 71 TEMPS DANS LEQUEL LA STEEILITE EST ATTEINTE (Heurts) * * DBGN = 2-bromo-2-bromométhylglutaronitrile TBZ = 2~(4'-thiazolyl)benzimidazole. Echantillon n° DBGN* % TBZ** 0/ 70 PVA Acrylique Inoculation Réinoculation Inoculation Réinoculation 7 0,025 0 48 48 24 72 8 0,05 V 48 48 24 24 9 0,075 0 24 24 24 24 10 0,1 0 24 24 24 24 ! 5 0,05 c,25 24 24 24 ' 24 | 6 0,075 0,25 . 24 24 24 24 i 4 0,1 0,25 24 24 24 24 2 0,1 0,1 24 24 24 24 3 0,25 0,1 24 24 4 4 ! 1 0 0 DEGRADATION COMPLETE | ! VI }-A o\ 00 _A en i 1\2 M o o o\ 00 71 46998 -17" 2120068 EXEMPLE 8 On essaie le 2-bromo-2-bromométhylglutaronitrile en ce qui concerne ses propriétés algicides en utilisant la technique suivante : 5 Une culture de Chlore11a sp. se développant activement est préparée dans un milieu "Allen"s Liquid Media" modifié. Diverses concentrations du produit chimique à essayer sont ajoutées à des portions de 50 cm^ de la culture. Chaque échantillon est ensuite mis en incubation à 22°C pendant 2 semaines. Chaque 10 échantillon durant la période d'essai est éclairé avec une source à lampe fluorescente fournissant environ 540 lux à la base de chaque ballon. La lampe est allumée pendant 16 heures et éteinte pendant 8 heures chaque jour de la période d'incubation. A la fin de la période d'essai, on examine au microscope chaque échan-15 tillon pour se rendre compte du développement•des algues. Les résultats de cette expérience sont résumés dans le tableau suivant. TABLEAU VII 20 Concentration de DBGN* Examen au microscope (ppm) 3000 Toutes les cellules mortes 2000 Toutes les cellules mortes 1000 Toutes les cellules mortes 800 Toutës les cellules mortes 25 600 Toutes les cellules mortes 400 Toutes les cellules mortes 200 50 % des cellules mortes 50 % de même que le témoin *DBGN = 2-bromo-2-bromométhylglutaronitrile 30 EXEMPLE 9 Pour évaluer l'efficacité du 2-bromo-2-bromométhyl-glutaronitrile contre les bactéries réduisant les sulfates, tant dans l'eau douce que dans de l'eau salée, on utilise la technique suivante : 35 Organisme : Desuifovibrio desulfuricans (souche A du Midcontinent^ Department of Biology, Université de Houston, Houston, Texas). 71 46998 2120068 On cultive les bactéries dans un milieu nutritif stérile contenant du lactate de sodium, de l'extrait de levures, du sulfate de magnésium, du sulfate ferreux ammoniacal et d'autres ingrédients comme décrit dans 1*American Petroleum Insti-5 tute Booklet RP-3S, 2ème édition (1965) sous le titre "Recommen-ded Practice for Biological Analysis of Subsurface Injection Waters". Eau douce : L'inoculum bactérien est mélangé avec le milieu 3 3 de culture dans le rapport de 10 cm /500 cm . On introduit en-10 suite un volume de ce mélange dans des tubes stériles à bouchon vissé et on le mélange avec un volume égal d'une solution contenant le produit chimique essayé au double de la concentration d'essai désirée. On remplit ensuite les tubes jusqu'à ce qu'ils débordent avec du mélange d'essai supplémentaire de manière à 15 éliminer l'air. Chaque échantillon est mis en incubation à 35°C pendant 3 semaines et examiné en ce qui concerne le développement des bactéries. On note facilement le développement des bactéries par la formation de sulfure ferreux noir par l'hydrogène sulfuré produit bactériennement et les sels ferreux. 20 Eau salée : Pour des essais dans l'eau salée, le milieu nutritif et le milieu d'essai sont modifiés par l'addition de chlorure de sodium de manière que l'on obtienne une concentration approximative en chlorure de 15-000 parties par million. Les résultats de cette expérience sont résumés dans le 25 tableau suivant : TABLEAU VIII Concentration de Eau douce Eau salée DBGN* (ppm) 50 Pas de développement Pas de développement 30 25 Sulfure ferreux visible Pas de développement 10 Sulfure ferreux visible Pas de développement 5 Sulfure ferreux vLsLble Sulfure ferreux visible 1 Sulfure ferreux visible Sulfure ferreux visible *DBGN = 2-bromo-2-bromométhylglutaronitrile. 71 46998 2120068 - revendication - 1 - Un procédé de lutte contre le développement microbien dans des milieux susceptibles de développement microbien, caractérisé en ce qu'on met en contact les milieux à protéger 5 avec une quantité antimicrobienne efficace d'un 2-halogéno-2-halogénométhylglutaronitrile ayant la formule : h h-c-x nc-c-ch2-ch2-cn 10 X dans laquelle X est du chlore ou du brome. 2 - Un procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le 2-halogéno-2-halogénométhylglutaronitrile est du 2-bromo-2-bromométhylglutaronitrile. 15 5 - Un procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le 2-halogéno-2-halogénométhylglutaronitrile est du 2-chloro-2-chloromé thylglut aronitrile. 4 - Une composition antimicrobienne caractérisée en ce qu'elle comprend une quantité antimicrobienne efficace d'un 20 2-halogéno-2-halogénométhylglutaronitrile ayant la formule : h h-c-x nc-c-ch2-ch2-cn X 25 dans laquelle X est du chlore ou du brome, et un véhicule inerte. 5 - Une composition selon la revendication 4, caractérisée en ce qu'elle comprend de 0,5 à 1000 ppm du 2-halogéno-2-halogénométhylglutaronitrile. 6 - Une composition selon la revendication 5, caracté- 30 risée en ce que le 2-halogéno-2-halogénométhylglutaronitrile est du 2-bromo-2-bromométhylglutaronitrile. 7 - Une composition selon la revendication 5? caracté» risée en ce que le 2-halogéno-2-halogénométhylglutaronitrile est du 2-chloro-2-chlorométhylglutaronitrile.