FR 2132893 A1 19721124 FR 7212955 A 19720413 72 12955 1 2132893 10 La présente invention a trait au nouveau composé antiprotozoaire 5,6-dihydro-8,8-diméthyl-3-nitro-8H-imidazo [ 2,1-c ][1,4]-oxazine, à ses sels pharmaceutiquement acceptables et à sa préparation. Le composé actif de l'invention présente une utilité pharmaceutique intéressante dans le traitement d'infections due3 à des protozoaires pathogènes. 5,6-dihydro-8,8-diméthyl-3-nitro-8H-imidaso[2,1-c][l,4]oxazine, peut être préparée par chauffage du, 2-isopropényl-4-(ou 5)nitro-imidazole avec un excès d'un monoalcoyl (ou monoaryl)-sulfonyl-glycolate. Comme exemples de groupes alcoylsulfonyle et arylsulfonyle on peut citer les groupes mésyl(méthylsulfonyle), phénylsulfonyle ou tosyl'( p-toluènesulfonyle ). Le 2-isopropényl-4(ou 5)nitroimidazole est transformé en la 5,6-dihydro-8,8-diméthyl-3-nitro-8H-imidazo[2,1-c][1,4]oxazine suivant le schéma réactionnel suivant : Le nouveau composé actif de l'invention, à savoir la N + II R ■N + R = alcoyle ou aryle 72 12955 2 2132893 la réaction est effectuée de préférence dans un solvant organique inerte, tel que des alcanols-, par exemple le méthanol, l'éthanol etc.; des hydrocarbures, tels que le benzène, le xylène etc. ; le tétrahydrofurane, le dioxane etc.j et de préférence 5 à une température élevée, c'est-à-dire une température entre environ 100 et 150°, de préférence entre environ 120° et 135°. La substance de départ, c'est-à-dire le 2-isopropényl-4-(ou 5)nitroimidazole peut être préparé selon la synthèse suivante Initialement, un aldéhyde représenté par la formule générale f3 OCH — C OX III CEL 10 dans laquelle X représente un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, est traité avec le glyoxal et l'ammoniac à une température entre environ 0° et environ 80° et le mélange réactionnel est laissé au repos pendant environ 48 heures. Le produit, qui est repré-15 sente par la forraule générale -H CH, i 11" 3 0 OZ IV CH.. 3 dans laquelle X a la raêne signification que ci-dessus, est alors iode Rtir des méthodes conventionnelles connues du sréci 72 12955 3 2132893 liste de manière à fournir des composés diiodo représentés par la formule V dans laquelle X a la même signification que ci-dessus. Les composés diiodo sont alors nitrés par des processus 5 conventionnels, de préférence par un mélange égal d'acide nitrique concentré et d'acide sulfurique concentré à la température ambiante ou sous la température ambiante, de manière à fournir les nitro-iodoimidazols représentés par la formule générale dans laquelle X a la même signification que ci-dessus. 10 Les nitro-iodoiniidazols sont alors traités avec le borbj-- drure de sodium dans un milieu alcalin aqueux ou alcoolique à une température entre environ -25° et environ 60° de manière à fournir les composés représentes par la formule générale 72 12955 4 2132893 X est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, de manière à former le 2-isopropényl-4(ou 5)-nitroimidazol. Cette étape est effectuée, par exemple par chauffage du nitroimidazol à une température entre environ 70° et environ 100° en présence d'un 5 acide minéral fort, tel que, par exemple, l'acide sulfurique. Alternativement, on traite les nitro-iodoimidazols comme décrit ci-dessus pour éliminer une molécule d'eau ou de méthanol, selon que X représente un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, de manière à former un composé intermédiaire représenté par -la 10 formule générale c^0H2 VIII XCH, i qui est alors traité avec le borhydrure de sodium comme décrit ci-dessus de manière à fournir le 2-isopropényl-4(ou 5)-nitroimidazol. le composé actif de la présente invention, c'est-à-dire 15 la 5»6-dihydro-8,8-diméthyl-3-nitro-8H-imidazo[2,l-c][1,4]- oxasine peut, le cas échéant, être transformée en les sels d'addition d'acide pharmaceutiquement acceptables par réaction avec un acide pharmaceutiquement acceptable. Comme acides appropriés on peut citer, par exemple, des acides inorganiques, 20 tels que des acides halogènehydriques, l'acide phosphoriques, l'acide sulfurique, etc., et des acides organiques, tels que l'acide acétique, l'acide maléique, l'acide tartrique, l'acide citrique, l'acide succinique etc. Un sel préféré est le chlorhydrate qui est formé, par exemple, par dissolution de la 25 5,6~difcydro-8,8-dinéthy l-3-nitro-8H-ia.idazo [ 2,1-c ] [ 1,4 ] oxazine dans un solvant organique approprié et par addition d'acide ehlorhydrique alcoolique. Le nouveau composé thérapeutique de la présente invention, à savoir la 5,6-dihydro-8,8-diaéthyl-3-nitro-8H-ijniàazo[2,1-e j L 2,4 J- 72 12955 5 2132893 oxazine, et ses sels d'addition d'acide pharmaceutiquement acceptables sont utiles comme agents chimiothérapiques. En particulier, ils sont utiles dans le traitement d'infections dues à des protozoaires pathogènes, tels que certaines espèces d'amibes, 5 par exemple., E, histolytica. et comme trichomonacides contre, par 'exemple.;Trichomonas vaginalis et Trichomonas foetus. la 5,6-dihydro-8,8-diméthyl-3-nitro-8H-imidazo[2,l-c][l,4]-oxazine est testée contre Trichomonas vaginalis et Trichomonas foetus de la manière auivante : 10 a) Trichomonas vaginalis (local) : Des groupes de 8 souris ont été infectés avec environ 500 000 cellules par voie sous- cutanée (abdominale). Les animaux ont été traités à l'endroit de l'infection par voie scus-cutaiiée .avec une dose de 1000 7 (solution de 1 ml) de la solution du composé I le jour de 15 l'infection et le jour suivant. Le troisième jour, on a observé chez les souris les lésions à l'endroit de l'infection. Le groupe témoin était un groupe de 8 souris infectées mais non traitées, La DCç-q (dose curative) a été calculée d'après la méthode de Reed et Muench, Amer. Jour. Hygiene 27, 493» (1938) et elle est 20 donnée en y/ml. Cette valeur comporte pour le composé I 0,9 y/ml et peut être considérée comme très élevée. Des souris infectées de la même manière ont été traitées per os le jour de l'infection et les trois jours suivants avec des quantités variables du composé I. Le septième jour (après l'infection) les animaux 25 ont été tués et on a examiné l'apparition éventuelle de lésions à l'endroit de l'infection. Lçi DCr,, (dose curative) trouvée 5U était de 5,3 Kg/kg. b) Activité envers Trichomonas foetus : des groupes de 8 souris ont été infectés par voie intraperitonéale avec une solution 30 de 1,0 ml d'une culture ne a dilue e de niicroor.iraniGxr.es contenant environ 7 000 003 de cellules. Les animaux ont été traités ensuite pendant 7 jours per os avec la quantité i&aniinale tolérée du conposé ï ; après 14 jours les animaux ont été tués. les aair.au;:: témoins non traités infectes son.! morts habituellement dans 35 l'espace de 7 jours après l'infection. Le taxu: de accès a été 72 12955 e 2132893 choisi comme critère pour l'activité du composé I. La a été calculée d'après-la méthode susmentionnée. Elle comporte pour Trichomonas foetus 7,4 mg/kg (per os) et peut donc être considérée comme élevée. On remarquera encore que le composé I 5 est très "bien supporté, car la DL^q (dose létale) est supérieure à 500 mg/kg (per os). Le composé I et ses sels d'addition d'acide peuvent être administrés par voie systémique, par exemple par voie orale, locale, par exemple topique ou sous-cutanée. Les doses dépendent 10 de l'individu. Elles comportent habituellement environ 50 à environ 500 mg du composé I ou d'une quantité équivalente d'un sel d'addition d'acide correspondant, ces quantités pouvant être administrées une ou deux fois par jour. Pour la préparation de telles formes de dosage le composé I ou ses sels d'addition 15 d'acide peut être mélangés avec les supports pharmaceutiques organiques ou inorganiques habituels, par exemple l'amidon, le lactose, le sucrose, la gélatine, le stéarate de magnésium, le talc, les huiles végétales, la gomme arabique etc. De telles préparations pharmaceutiques peuvent contenir encore d'autres 20 substances précieuses du point de vue thérapeutique ou encore des substances auxilliaires, telles que des agents de conservation, de stabilisation, de mouillage ou d'émulsification. Les préparations pharmaceutiques peuvent être utilisées sous forme solide, par exemple de comprimés, dragées, capsules etc., sous 25 forme liquide, par exemple de suspensions, d'émulsions etc., ou cornue suppositoires, comprimés vaginaux etc. Le cas échéant ils sont stérilisés. Exemple 1 A 125 ml d'ammoniac, aqueux concentré, on ajoute d'abord 30 45 g d'aldéhyde a~hydro;iyisobvt-yi-icne, puis doucement, avec agitation, 70 ml d'une solution eocnorciale de giyoxal à 4C?', On laisse le mélange réactionnel au repcs pendant 4c heures à la température ambiante. Le nrecitîité formé est séparé nar filtration, 72 12955 7 2132893 puis le filtrat est extrait pendant 48 heures à l'aide d'un extracteur liquide-liquide avec utilisation d'acétate d'éthyle. l'extrait est concentré sous vide et le résidu est mis en suspension dans l'éther, et cette solution éthérée est dissoute 5 dans 200 ml de méthanol avec le précipité précédent, la solution est'traitée avec du charbon actif, filtrée, le filtrat est concentré et le précipité obtenu est mis en suspension dans l'éther. De cette manière on obtient le 2-(1-mé thyl-l-hydroxy-éthyl)imidazol fondant à 202°-203°. 10 2,5 g de ce produit sont dissous dans 250 ml d'eau dis tillée chaude. La solution est refroidie sous agitation à 10-20° et une solution de 10 g d'iode, dissous dans 60 ml d'une solution aqueuse à 30?° d'iodure de sodium , est ajoutée lentement avec 6 g de carbonate de sodium. le produit cristallin obtenu, 15 à savoii* le 2-(1-méthyl-l-hydroxyéthyl )-4,5-diiodimidazol est filtré et purifié par dissolution dans l'éthanol et précipitation avec de l'eau distillée, le point de fusion du produit se situe à 188°. 6 g de 2-(l-raéthyl-l-hydroxyéthyl)-4,5-diiodimidasol sont 20 ajoutés par portions à un mélange agité de 10 ml d'acide nitrique (d = 1,5) et de 10 ml d'acide sulfurique concentré. La température est maintenue à 0° pendant l'addition de même que pendant encore 2 heures. On laisse alors le mélange atteindre la température ambiante, verse sur de la glace, filtre, évapore partiel-25 lement, neutralise à un pli de 2-4 en utilisant de l'ammoniac et extrait avec l'acétate d'éthyle. A partir de cette solution on obtient par évaporation sous vide et recristallisation dans de l'eau distillée le 2-(l-néthyl-l-hyaroxyéthyl)-4'.ou 5)iodo-5(ou 4)nitroimidazol fondant à 183°« 30 119 g de 2-(l~néthy.l-l-hydro:-:yét}ayI)"4 (ou 5)icdo-5(ou 4}- nitroimidazol sont dissous dans 500 ml d'une solution de soude 3îï et la solution est ensiiite refroidie à 0-5°. A cette température on ajoute sous agitation 7,6 s de borhydrure de soâivx. Pendant encore 6 à 8 heures, on ajouta encore ur-e fois par portions 35 2,4 g de borhydrure de scdiura. Cn ne peut alors plus déceler de 72 12955 8 2132893 substance de départ. ; c'est pourquoi on ajoute 130 ml d'acide acétique à 0° au mélange réactionnel. la solution est neutralisée et extraite avec un extracteur liquide-liquide à l'aide d'acétate d'éthyle. L'extrait est traité avec du charbon actif et évaporé 5 à sec. Le résidu est recristallisé dans 150 ml d'eau distillée j on obtient ainsi le 2-(l-méthyl-l-hydrozyéthyl)-4(ou 5)nitroimi- ' dazol avec un point de fusion de 192-193°. 34,2 g de cette substance sont ajoutés à 50 ml d'acide sulfurique concentré et le mélange réactionnel est maintenu 10 pendant 1 heure sur un bain de vapeur. Ensuite on le verse sur 200 g de glace et neutralise le mélange obtenu à l'aide d'ammoniac concentré à un pH de 2,5 (avec refroidissement). Il se forme rapidement un précipité de 2-isopropényl-4(ou 5)nitroimidazol ; celui-ci est filtré et desséché ; le point de fusion se situe 15 à 197-198°. Exemple 2 Dans un récipient approprié on verse 17 g de 2-isopropényl-4(ou 5)nitroimidazol et 32 g de glycolate de monotosyle. Après addition de 100 ml de xylène, le mélange est maintenu sous reflux 20 pendant 5 heures (130-135°). On laisse refroidir et décante la couche supérieure des deux couches formées. La couche inférieure est syrupeuse, elle est reprise dans 200 ml de chlorure de méthylène lavée encore une fois avec de la soude caustique 1IT aqueuse, puis lavée avec de l'eau et desséchée finalement sur du sulfate de 25 magnésium anhydre. Le solvant est évaporé et le réeiau est mis en suspension dans l'éther de pétrole. On obtient ainsi la 5,6-dihydro-8,8-diméthyl-3-nitro-8H-iiaidasô [2,1-c ] [ 1,4] oxazine sous forme de cristaux. On cristallise dans 400 rai d'eau et obtient un produit fondant a 7S-790. 72 12955 9 2132893 Exemple 3 On prépare des suppositoires vaginaux contenant les ingrédients suivants : pour 1,3 g de 5 Ingréd je nts suppositoire 5,6-dihydro-8,8-diméthyl-3-nitro-8H~imidazo- [2,l-c][l,4]oxazine 0,100 g huile de noix de coco hydrogénée 1,155 g cire végétale 0,045 g 10 On fond l'huile de noix de coco hydrogénée et la cire végétale dans un récipient en verre, on mélange bien et on refroidit à 45°. la 5,6-dihydro-8,8-diméthyl-3-nitro-8H~imidazo-[2,1-c][l,4]oxazine est ajoutée sous forme de poudre fine et bien répartie par agitation. A partir de cette masse, on prépare 15 selon des méthodes connues, des suppositoires ayant un poids de 1,3 S- Exemple 4 On prépare des comprimés contenant les ingrédients suivants Ingrédients par comprimé 20 5,6-dihydro-8,8-diînéthyl-3-aitro-8iî-imidaso~ [2,l-c][lr4]oxazine 100 mg phosphate dicalcique 60 r.g amidon de nais 157 mg stéarate de magnésium 3 ng 25 Total 320 mg 72 12955 10 2132893 On prépare des capsules contenant les ingrédients suivants Ingrédients Par capsule 516-dihydro-8,8-diméthyl-3-nitr0-8H-imidaz0' [2,1-c][l,4]oxazine 250 mg lactose 50 mg amidon de maïs 45 mg .stéarate de magnésium 5 mg Total 350 mg 72 12955 11 2132893 REVENDIGATIONS 1. La 5,6-âihydro-8,8-diméthyl-3~nitro-SH-iinida2o-[2,l-c]- [l,4]oxazine et ses sels d'addition d'acide. 2. Procédé pour la préparation de 5,6-dihydro-8,8-dinéthyl-3-nitro-8H-imidazo[2,l-c][l,4]oxazine et de ses sels d'addition 5 d'acide, caractérisé en ce qu'on transforme le 2-risopropényl-4-(ou 5)nitroimidazol avec un excès d'un monoalcoyl (ou monoaryl)-sulfonyl-glycolate et en ce qu'on transforme, le cas éché ant, le produit obtenu en un sel d'addition d'acide. 3. Procédé suivant la revendication 2, caractérisé en ce 10 qu'on chauffe le 2-isopropényl-4(ou 5)nitroimidazol avec du glycolate de monotosyle. d'une 4. Les produits obtenus suivant le procédé/des revendications 2 et 3. 5. Composition efficace contre les protozoaires, carac-15 térisees en ce qu'elle contient la 5,6-dihydro-8,8-diiaéthyl-3- nitro-8H-imidazo[2,l~c][l,4]oxazine ou un sel d'addition d'acide correspondant et un support. 6. Procédé pour la préparation de compositions efficaces contre les protozoaires, caractérisé en ce qu'on mélange la 5,6- 20 dihydro-8,8-diméthyl-3-nitro-8H-imidazo[2,1-c][1,4]oxazine ou un sel d'a.ddition d'acide correspondant comme composante active avec des supports solides ou liquides, non-toxiques, inertes, appropriés à 1'administration thérapeutique tels qu'ils sont usités dans ce genre de préparation, et/ou des excipients. 25 7- Utilisation du composé suivant la revendication 1, comme agent actif contre les protozoaires.