FR 2118103 A1 19720728 FR 7145113 A 19711215 71 45113 1 2118103 L' invention a pour objet l'acide i;-f ructose-l,S-diphospho-ri'iue triï.ouique octar.ydrat-'- cristallisé et un proc-''d-' pour le fa-'-riTuer. L' acide J-fructo^c- l ,6-d.iphosphorique ) u isolé ué- 5 jà en *'!->09 pur Young. en l'utilise sur-tout sous forme de son sel sodique jour le traitement de troubles du métabolisme les plus aivers. Bien qu'on connaisse et qu'on fabrique industriellement le sel sodique de FD± déjà depuis fort longtemps, il n'a pas été pos-10 sible jusqu'à présent d'obtenir ce sel sous forme cristallisée. Du fait que dans tous les procédés de fabrication le FDi sodique se présente dans l'étape finale sous la forme d'une solution, il était jusqu'alors nécessaire d'amener le.composé à l'état solide par des techniques adéquates, telles que par exemx.-le la précipi-15 tation avec des solvants organiques, le séchage par pulvérisation ou la lyophilisation, lourtant, le produit amorphe, obtenu selon l'un quelconque de ces procèdes connus est extrêmement hygrosco-pique et, exposé à l'air, forme des grumeaux ou devient déliquescent. Ces propriétés du produit créent pour le "stockage, le trans-20 port et la mise en oeuvre, des difficultés considérables, surtout quand il s'agit de fabriquer des préparations galéniques à l'état solide. On vi-.;nt de trouver de façon inattendue qu'il est possible d'obtenir, sous certaines conditions, le FDjr-I-Ja^ à l'état d'oc-25 tahydrate cristallisé. L'invention a donc pour objet l'acide-i)-fructose-1,6-diphosphorique trisodique octahydraté cristallisé. Les cristaux conformes à l'invention appartiennent au système monocliniaue et présentent le groupe , les dimensions de maille: a = 15,8 £., b = 11,65 -S-, c = 7,1 et un angle p = 108°. 50 Le FDl-Na-,.8 E,.0 selon l'invention n'est pas hygroscopique et présente, comparativement au produit amorphe connu jusqu'à présent, une stabilité sensiblement plus grande. L'invention a également pour objet un procédé de fabrication d'acide D-fructose-1,6-diphosphorique trisodique octahydraté, 55 lequel procédé consiste à amener le pK d'une solution aqueuse diluée d'acide D-fruetose-1,6-diphosphorique sous forme de sel sodique à une -'"aleur comprise entre ^,5 et 6,5, de préférence entre >,9 et 6,1, à ajouter, à une température de 15 à 4-5°C, un alca-nol inférieur jusqu'à l'apparition d'un trouble, à refreidir le 40 mélange jusqu'à commencement de cristallisation, à ajouter une 71 45113 2118103 nouvelle quanti te' d'alcanol pouvant atteindre un volume de 2 à 5 fois celui de la ^olu-ion initiale et à rendre la cristallisation complète par refroidissement. La solution aqueuse initiale présente une teneur en sel so-5 dique de i'Li de préférence de 7 à 15... iour l'ajustement du pli, on utilise de préférence l'hyciroxyde de sodium ou un acide dont le sel sodique soit au moins partiellement soluble dans l'alca-nol mis en oeuvre. L'acide acétique par exemple convient parfaitement. Après le réglage du pH, on filtre la solution, si 10 c'est nécessaire, pour la rendre limpide. far alcanols inférieurs on entend ceux qui comportent - de 1 à 5 atomes de carbone, i-armi eux, on préfère l'éthanol, mais on peut réaliser le procédé également avec du méthanol, avec du n-propanol et avec de 11isopropanol. Avec ces derniers alcools tou-15 tefois, la formation des cristaux est plus irrégulière, le rendement est inférieur et le produit de réaction comprend souvent des parties amorphes hygroscopiques. On ajouue l'alcool de préférence à la température ambiante et en une quantité suffisante pour provoquer un faible trouble. On 20 continue ensuite à refroidir jusqu'à ce qu'on distingue le commencement d'une cristallisation. Dès l'apparition des premiers cristaux visibles, on ajoute, avec précaution,un volume supplémentaire d'alcanol allant jusqu'à 1,5 fois le volume initial de la solution aqueuse. 25 .tour achever la cristallisation, on poursuit le refroidis sement, par exemple en disposant le mélange dans une armoire frigorifique. En opérant à une température d'environ 0°G et en ajoutant de l'éthanol en un volume environ 1,5 fois le vblume de la solution aqueuse initiale, la cristallisation est terminée dans 50 un délai d'environ 20 à 4-0 heures. Pour la séparation, le lavage avec de l'alcool et le séchage du produit cristallisé, on peut appliquer les techniques correspondantes habituelles. La solution-mère ne retient, au plus, que 4 à 9/i du sel de Fu-r mis en oeuvre. 55 On effectuera le séchage^de préférence en évitant des tempé ratures supérieures à 50°G afin d'empêcher toute perte d'eau de cristallisation ou la destruction de la structure cristalline.Le même il est préférable de renoncer à l'utilisation de desséchants à effet déshydratant énergique, tels que par exemple le pentoxy-'+0 de de phosphore. 71 45113 3 2118103 L'exemple suivant décrit l'invention avec plus de détails : Exemple. On dissout IGCg de FJlr-i;a. amorphe dans S;0O ml d'eau 'j 5 distillée, on ajuste le pH de la solution a 6,0 par addition d'acide acétique et on la filtre à travers un filtre à pcres fins, puis on ajoute de l'éthanol en mince filet jusqu'à l'apparition d'un trouble nettement perceptible, phénomène qui se produit après l'addition d'environ yOO ml d'éthanol. On dispose la so-10 lution dans une armoire frigorifique à la température de +2°C.La cristallisation commence après un délai de 4 heures. On ajoute alors, en agitant, à nouveau 800 ml d'alcool. Après un délai de 40 heures, on essore sur un entonnoir-filtre la bouillie cristalline qui s'est formée enlr&tenps, 15 on met le produit d'ejsorage, en a;itant, en suspension dans 500 ml d'alcool, on essore à nouveau et on sèche en l'absence de tout déshydratant dans une étuve à vide à la température de 25°G. Le rendement est de 105g de FD-t-Ea*. 8 H-G. La solution-mère con- y ^ tient encore 6g de FUr-fta^, décelable par un essai enaymatique. 20 Propriétés du produit: Formule brute C^H^, C„ DP, Na_, . 8 H 0 6 11 12 2 5 2 Joint de fusion 125°C poids moléculaire 550,^ Analyse Valeur théorique en /o trouvée Acide fructose-1,6-diphosphorique (dosage enzymatinue selon S.G.Slatcr, Biochem. J. 53, 157, '1953) 61,7 62,4 sodium (par photométrie de flamme) 1^,5 1c,2 H^O 26,1 phosphore 11,3 11,2 30 PT Pouvoir rotatoire + ^,6 (lOmg/ml d'eau). Caractéristiques cristallographiques: Système cristallin monoclinique groupe r 2 dimensions ce maille a='l3,S Â, b=11,ô5 &, c= 7,1 S. angle ^ 1CS°. Le FDP-Na^.8H^0 rripta1 1 isé s^lon l'invention p?t uti— 40 lisible noijr la fabrication d 35 71 45113 4 2118103 we troubles du métabolisme 1er; "lu? divers, de 1 * nôme iranière nue Te sei sodimj» ^no^nhe correspondant dé^à connu. r^rnine il vf> de soj., et comm^ il résulte d'ailleurs déjà ce nui nrécède, ] 'invention ne se limite, nul 1 «ment à ceux de srtC? mod"s d'"ppl ication et de réalisation oui ont été r>lus st?4cia' 1 °n°nt en1'].?gnéc ; e!1 e en onbrasp", nu contraire, toutes va — ri^ntpf, 71 45113 5 2118103 î.v iJ J IL \jii. i Oi'io 'l.- Acide D-i ructose-l ,6-di ."'hoc: 'ïo-iaue brisodj nue octa hydraté cristal Lis-1. Cristaux- selon la rev?n îi cat-ion 'i, carnet; irrioés ^ar 3 le fait qu'ils appartiennent au oyst-me cristallin monoclinique, qu'ils présentent le groupe 1 2^ et que les dimensions de maille sont a = 15,8 Â, b = 11,65 -^5 c = 7,'î 1 et l'anglej9 = 108°. 3.- Irocodé de fabrication d'un cristal selon la revendication 1, caractérisé par le Êât qu'ai amène le pH d'une solution 10 aqueuse diluée du sel sodique de l'acide D-fructose-1,6-diihos-phorique à une valeur de pil comprise entre 4,5 et 6,5, de préférence entre 5,9 et 6,1, qu'on ajoute, à une température de 15 à 45°G, un alcanol inférieur jusqu'à l'apparition d'un trouble, qu'on refroidit le mélange jusqu'au commencement de cristallisa-15 tion, qu'on ajoute une nouvelle quantité d'alcanol jusqu'à un volume pouvant atteindre 2-3 fois le volume de la solution initiale et qu'on achève la cristallisation par refroidissement. 4.- Procédé selon la revendication 3, caractérisé par le fait qu'on ajuste la valeur du pH à l'aide d'hydroxyde de sodium 20 ou d'un acide dont le sel sodique est solubls dans 1'alcanol mis en oeuvre. 5.- i criTpnt 7 p ^° i"b1 ^IJ i j c-mo, r?r le fait ou" il c"* ntn^nt °n tant — t^nC° PCtlV0 Un° o-P-Z j H » I}_-Pri]"fnc: . £ — ^ i ^ llO ^ f vH-j i^nîio o r* +- -j cf 1 -j c ^ » bad original