FR 2099701 A1 19720317 FR 7120665 A 19710608 7120665 2099701 Les enzymes, en particulier les protéases ..et/ou les amy-lases, sont obtenues lors de leur préparation sous forme de solutions aqueuses qui, dans cet état, n'ont qu'une conservation limitée. Si l'on tient à obtenir des préparations enzymatiques stables 5 à la conservation, on isole les substances actives enzymatiques de ces solutions aqueuses par des procédés en eux-mêmes connus et on les convertit en produits secs, ces produits secs contenant non seulement les enzymes proprement dites mais souvent, en outre, des impuretés sans activité enzymatique. Ces compositions enzymatiques 10 solides sont incorporées comme constituant enzymatique à des détergents et agents de rinçage solides pour textiles, à des agents de nettoyage des mains et du corps, à des détergents pour surfaces autres que textiles et à des produits cosmétiques ou elles sont relativement stables. 15 On a grand besoin de préparer aussi, sous forme stable, des compositions enzymatiques liquides destinées aux applications citées ; on peut partir, soit des solutions liquides plus ou moins purifiées d'enzymes que l'on obtient tout d'abord dans la prépara-. tion des enzymes, soit encore de produits liquides de t'ransforma-20 tion de ces solutions d'enzymes, en particulier de concentrés liquides d'enzymes ou de produits liquides que l'on a préparés en introduisant dans de l'eau des compositions solides d'enzymes. On peut mettre sur le marché ces agents liquides sans ajouter d'autres substances actives afin de les utiliser pour les applications men-25 tionnées plus haut ; mais ils peuvent aussi contenir des substances actives comme celles qui se trouvent habituellement dans les détergents, agents de rinçage ou produits cosmétiques ci-dessus. L'invention concerne des compositions enzymatiques stabilisées liquides qui peuvent être aussi sous forme de détergents et 30 agents de rinçage et sous forme de produits cosmétiques. Ces compositions enzymatiques sont caractérisées par le fait qu'elles contiennent, en poids : A) 100 à 1 % et de préférence- 100 à 5 % d'un constituant enzymatique formé d'une solution aqueuse des substances suivantes : 35 1) des protéases et/ou des amylases en quantités telles que l'activité de la composition enzymatique stabilisée soit comprise entre 1 000 et 800 000, de préférence entre 10 000 et 800 000 unités de protéase par millilitre (on dira ci-après PE/ml) et/ou entre 10 et 10 000 et de préférence entre 200 et 10 000 40 unités Sandstedt, Kneen et Blish par millilitre (on dira 7120665 2 2099701 ci-après SKBE/ml). 2) 1 à 45 % d'au moins un des composés organiques hydrosolubles cités en a) à d) : a) alcools aliphatiques contenant 2 à 6 groupes OH et au ma-5 ximum 8 atomes de carbone, de préférence au maximum 6 atomes de carbone par molécule et/ou polyéthers de ces polyalcools et/ou éthers partiels formés par ces polyalcools avec des monoalcools en à et contenant au moins un groupe hy-droxyle par molécule, 10 b) alkylamides ou hydroxyalkylamides d'acides carboxyliques ou d'acide phosphorique, contenant 2 à 8 et de préférence 2 à 6 atomes de carbone par molécule, c) composés hétérocycliques éventuellement hydroxylés contenant au maximum 8 atomes de carbone par molécule et contenant 15 des hétéroatomes d'oxygène et/ou d'azote, d) sulfoxydes de dialkyle contenant 1 à 4 atomes de carbone dans les radicaux alkyle, 3) 1 à 30 I d'au moins un des composés organiques hydrosolubles cités en e) à g) : 20 e) aminés aliphatiques ou alicycliques polyfonctionnelles contenant au maximum 8 atomes de carbone par radical hydrocarbure et contenant, comme autre groupe fonctionnel, au moins un deuxième atome d'azote basique et/ou un groupe hy-droxyle éventuellement éthérifié par des alcools en à C^, 25 f) composés contenant au maximum 8 atomes par molécule et contenant un hétéroatome d'azote ou d'oxygène, g) alkylamides ou hydroxyalkylamides d'acides carboxyliques ou d'acide phosphorique contenant 2 à 8; et de préférence 2 à 6 atomes de carbone par molécule, 30 un composé du groupe 2b ne pouvant toutefois être associé qu'à un composé des groupes 3e ou 3f et un composé du groupe 2c ne pouvant être associé qu'à un composé des groupes 3e ou 3g, 4) 0 à 30 % et de préférence 1 à 30 % d'un acide carboxylique 35 ou hydroxycarboxylique contenant au maximum 6 atomes de carbone ou d'un sel hydrosoluble formé par cet acide avec des cations organiques ou minéraux. B) 0 à 99 % et de préférence 0 à 95..% d'autres constituants usuels de détergents et éventuellement d'eau, 7120665 3 2099701 les compositions enzymatiques, ou les détergents qui les contiennent , ayant un pH de 3 à 10. Les pH des compositions selon l'invention se situent de préférence "entre 5 et 10. Dans les compositions de ce genre, les 5 acides carboxyliques ou sels de ceux-ci, incorporés éventuellement selon A4), peuvent jouer le rôle de tampons. L'activité des protéases est indiquée en unités de pro-téase ("PE") ; on la détermine selon un procédé décrit par H.G. van Raay, H. Saran et H. Verbeek, dans la revue "Tenside", 7. 10 (1970), pages 125 à 132. Les amylases et/ou protéases présentes dans les compositions enzymatiques liquides selon l'invention peuvent être de provenance végétale, animale ou bactérienne ; mais des enzymes de ce genre peuvent aussi être extraites des champignons ou des algues. 15 Comme sources d'amylases et protéases bactériennes, on peut utiliser par exemple les espèces suivantes de bactéries : les bacilles tels que le B. cereus, le B. licheniformus, le B. mesen-tericus, le B. brevis, les bactéries lactiques, les microcoques, le pseudomonas, l'arthrobaeter, la klebsiella, les espèces de coli, 20 proteus et serratia. Comme source d'amylases et de protéases de champignons, on peut utiliser.: les actinomycètes, les strepto-mycètes, les alternaria, les sporanges, les espèces de microspora, de pénicillium, de cephalosporium, de rhizopus, de keratinomyces, d'aspergillus, de mucor, de gliocladeum, de mortierella, ainsi que 25 les levures (candida, saccharomyces). l'amidon et/ou des amylases saccharogènes que l'on peut aussi obtenir à partir de grains de céréales. Des amylases utilisables selon l'invention sont par exemple les produits commerciaux sui- Les amylases sont de préférence des amylases liquéfiant 30 vants : a-Amylase Midwest Biochemical Company, Milwaukee, Wisconsin (Etats-Unis d'Amérique) Miles Chemical Company, Elkhart, Indiana, (Etats-Unis d'Amérique) Nagase & Co., Osaka (Japon) Novo Industri, Copenhague (Danemark) Wallerstexn Company, Staten Island, New-York (Etats-Unis d'Amérique) Société Rapidase (France) a-Amylase 35 a-Amylase a-Amylase a-Amylase Amylase 1000 7120665 2099701 Composition d'amy-lase 2205/2209 Anamyl Bacterial Amylase 5 Bacterial Amylase Bakterienamylase A Biokleistase M16 10 D 200 Diazyme MAS-10+/20 15 Disstatic H 39 Enzym D 200 Rohm & Haas GmbH, Darmstadt (Allemagne Fédérale) Organon Miles Chemical Company, Elkhart, Indiana, (Etats-Unis d'Amérique) Novo Industri, Copenhague (Danemark) Rohm & Haas GmbH, Darmstadt (Allemagne Fédérale) Kaiwa Kasei KK, Osaka (Japon) Koninklijke Nederlandsche Gist- en Spiritus-fabriek N.V., Delft (Pays-Bas) Matsutani Chemical & Co., Ltd., Mitsubishi (Japon) Rohm & Haas, Philadelphie (Etats-Unis d'Amérique) Koninklijke Nederlandsche Gist- en Spiritus-fabriek N.V., Delft (Pays-Bas) idem Schweizerische Ferment AG., Bâle (Suisse) Société Rapidase (France) Rohm & Haas, Philadelphie (Etats-Unis d'Amérique) Novo Industri, Copenhague (Danemark). Comme protéases, on peut utiliser les peptidylpeptihydr 25 lases (comme la leucinaminopeptidase), les aminopeptidases, les carboxypeptidases, les dipeptidases et tripeptidases, la pepsine, la rennine, la trypsine, la chymotrypsine, la peptidase de pancréas, 1'entéropeptidase, la cathepsine, la collagenase, l'élas-tase, la papaîne, la chymopapaîne, la ficine, les subtilopeptida-30 ses, les aspergillopeptidases, les streptococcopeptidases, les clostridiopeptidases, la thermolysine, les peptidases de strepto-myces, la bromélaïne et les kératinases. Comme exemples de proté ases utilisables aux fins de l'invention, on citera 1'aspergillopeptidase A et 1'aspergillopeptidase B ainsi que les enzymes pro-35 téolytiques que l'on isole à partir d'espèces de streptomyces. D préférence, on utilise comme protéases la subtilisine, la BPN' et les protéases isolées drespèces de streptomyces. Aux fins de l'invention, on peut aussi utiliser des pro duits commerciaux de protéase. Les produits enzymatiques commerMaxamyl Pilzamylase 20 Rapidase 75 Rhozym H 39 Termozym 7120665 5 2099701 ciaux qui contiennent des protéases et souvent aussi certaines quantités d'amylases, sont en général vendus sous forme- pulvérulente ; ils sont formés d'enzymes actives associées à des constituants relativement inertes tels que le sulfate de sodium ou de 5 calcium ou le chlorure de sodium. On trouve par exemple dans le commerce les protéases suivantes : Alcalase Novo Industri, Copenhague (Danemark) Alkaline Protease N.V. Organon, Oss (Pays-Bas) Alkaline Protease Takeda Chemical Industries (Japon) 10 200+/290 Bioprase (contenant Nagase & Co., Ltd., Osaka (Japon) un peu d'à-amylase) Bioprase con. idem Bromelaïn Takamine Clifton, New Jersey (Miles) 15 CRD-Protease (con- Monsanto Company, St. Louis, Missouri d^a-amylase)U CBtats-Unis d'Amérique) Embiozyme SR 500000 Dumman World Trade Co., Milwaukee (Etats- Unis d'Amérique) Enzym AG-22 Monsanto Company, Missouri (Etats-Unis 20 d'Amérique) Enzyme A/BE Kali-Chemie, Hanovre (Allemagne Fédérale) Enzyme AP densified Monsanto Company, Missouri (Etats-Unis d'Amérique) Enzyme P+/PM Premier Malt Products Inc., Milwaukee, 25 (Etats-Unis d'Amérique) Ficin Takamine Clifton, New Jersey . (Miles) HT enzyme protéo- Miles Chemical Company, Elkhart, Indiana, lytique 200 (Etats-Unis d'Amérique) HT enzyme protéo- idem lytique 7XB 30 Matsulase MGI-10 Matsutanie Chemical & Co., Ltd., Mitsubishi +/20 ,T (Japon Maxatase Koninklijke Nederlandsche Gist- en Spiritus- fabriek N.V. , Delft (Pays-Bas) Concentré P-11 Rohm & Haas, Philadelphie, Pennsylvanie 35 (Etats-Unis d'Amérique) Pronase-E Kaken Chemical Company (Japon) Pronase-P idem Pronase-AS idem Pronase-AF idem 7120665 2099701 Protease 2200 A Protease AP 10 x Protease B-4000 Protease Hoechst 1549-1 5 Protease S10 D Protin A Protin AS 10 Protin AS 20 10 Rapidase 75 Rapidase 400 Rapidase ATP 120 Rhozym J-25 15 Rhozym PF Rhozyme H-39 Sandoz AP Sandoz AP 2100 Thermozym 264 20 Wallerstein 627-P Rohm & Haas, Darmstadt (Allemagne Fédérale) Schweizerische Ferment AG., Bâle (Suisse) Sandoz, Bâle (Suisse) Farbwerke Hoechst, Francfort (Allemagne Fédérale) Enzymes Inc. Cherry Hill, New Jersey (Etats-Unis d'Amérique) Bergazyme GmbH, Berlin Daiwa Kasei KK, Osaka (Japon) idem Société Rapidase (France) Rapidase, Seclin (France) idem Rohm & Haas, Philadelphie, Pennsylvanie (Etats-Unis d'Amérique) idem idem Sandoz, Bâle (Suisse) idem Novo Industri, Copenhague (Danemark) Wallerstein Company, Staten Island, New York (Etats-Unis d'Amérique). Toutes ces enzymes peuvent être utilisées sous la forme de solutions aqueuses brutes d'origine technique ou sous forme transformée, pour la préparation des compositions enzymatiques li-25 quides stabilisées selon l'invention. Ainsi par exemple, on peut utiliser directement les solutions aqueuses qui sont obtenues en tant que sécrétions organiques ou après séparation de microorganismes formateurs d'enzymes. Mais de préférence on les purifie, par exemple par des procédés d'ultra-filtration ou d'échange 30 d'ions et on les concentre. Toutefois, il est possible aussi de transformer directement en solutions selon l'invention, sans séchage intermédiaire, les tourteaux encore humides que l'on obtient en filtrant des enzymes précipitées. Si l'on part de compositions enzymatiques solides, on dissout celles-ci dans de l'eau ou des 35 solutions tampons aqueuses. Les impuretés sans activité enzymatique qui sont le plus souvent contenues dans les compositions enzymatiques commerciales en plus de la substance active enzymatique proprement dite et qui peuvent être aussi bien des substances protéiniques ou d'autres 40 substances provenant de la préparation ou du traitement que, par 7120665 7 2099701 exemple, des sels minéraux, peuvent toutefois rester aussi dans la solution car elles ne sont pas gênantes dans la plupart des applications des enzymes. Les activités d'amylase de 10 à 10 000 SKBE/ml et les 5 activités de protéase de 1 000 à 8 00 000 PE/ml indiquées plus haut résultent des activités des préparations enzymatiques qui, à la date de la demande, apparaissaient intéressantes économiquement pour l'utilisation dans les détergents ou dans le secteur cosmétique. Du point de vue chimique, on peut augmenter au besoin les 10 activités enzymatiques des compositions de sorte que les activités des protéases et amylases peuvent être portées par exemple à 5 fois les valeurs maximales indiquées ci-dessus. Par suite, si à l'avenir on dispose de compositions ayant une activité aussi élevée et qui apparaissent appropriées aussi au point de vue économique à 15 l'utilisation dans les domaines d'application indiqués plus haut, on peut préparer des produits ayant des activités enzymatiques d'autant plus élevées. Parmi les substances utilisables comme stabilisants des enzymes en association entre elles, selon la définition prévue par 20 l'invention, on choisit de préférence les composés qui sont liquides à la température ambiante .et qui, le plus souvent, ont aussi une excellente solubilité dans l'eau ; en particulier, on utilise les composés miscibles à l'eau de façon illimitée ou dans un rapport compris entre 20:1 et 1:20 ; toutefois, si certains composés 25 ne sont pas miscibles dans cette proportion ou présentent des solubilités moindres, il suffit que la quantité dissoute dans la composition enzymatique stabilisée liquide se situe chaque fois entre les limites indiquées plus haut. Les alcools aliphatiques contenant 2 à 6 groupes OH com-30 prennent par exemple 1'éthylèneglycol, les propylèneglycols (1,2 et 1,3), les butylèneglycols (1,2 ou 1,3 ou 1,4), les dihydroxy-pentanes tels que le néopentylèneglycol, le glycérol, les alcools-sucres tels que le dulcitol, le mannitol, le xylitol, le sorbitol, etc. 35 Des éthers ou po-lyêthers de ces polyalcools sont par exemple le diéthylêneglycol, le triéthylëneglycol ou les polyéthy-lèneglycols,. les polyglycérols, en particulier dans la mesure où ces polyéthers sont encore liquides à la température ambiante. Les éthers partiels formés par ces polyalcools ou par 40 leurs éthers ou polyéthers avec des monoâlcools en à et 7U0665 8 2099701 contenant au moins un groupe hydroxyle par molécule comprennent par exemple les éthers méthylique, êthylique, propylique ou buty-lique de 1'éthylèneglycol, du diéthylèneglycol ou du triéthylène-glycol ou du glycérol ; on a trouvé que les éthers correspondants 5 du glycérol, en particulier l'éther a-monométhylique du glycérol ou l'éther isopropylidénique du glycérol étaient particulièrement efficaces. Les alkylamides d'acide carboxylique ou d'acide phosphorique contenant 2 à 8 et de préférence 2 à 6 atomes de carbone par 10 molécule comprennent, outre les carboxamides non substituées sur l'azote, les monoalkylamides et dialkylamides d'acides carboxyliques de 1 à 4 atomes de carbone, par exemple la formamide, la mono-méthylformamide, la diméthylformamide, la monoéthylformamide, la diéthylformamide, la monométhylacétamide, la dimêthylacêtamide, le 15 propionamide, la butyramide, les monoalkylurées, dialkylurées, trialkylurées et tétraalkylurées, les esters carbamate comme le carbamate de méthoxyéthyle, les N-hexaalkyltriamides d'acide phosphorique, les radicaux alkyle de tous ces composés pouvant contenir 1 à 4 atomes de carbone ou être remplacés totalement ou par-20 tiellement par des radicaux monohydroxyalkyle ou dihydroxyalkyle en C2 à C^. Des exemples de substances de ce genre sont la formamide, la diméthyl-formamide, la monométhylformamide, la monoéthylformamide, 1'acêtamide, la méthylacëtamide, la dimêthylacêtamide, le carbonate de méthoxyéthyle, la N,N', N"-hexaméthyltriamide 25 d'acide phosphorique, etc... Les composés hétêrocycliques éventuellement hydroxylês contenant un hêtéroatome d'oxygène et/ou d'azote et au maximum 8 atomes de carbone par molécule comprennent, par exemple, la 2-hy-droxypyridine, la pyridone (2), la pyrrolidone (2), la pipéridone 30 (2), la N-(3-hydroxypropyl)-pyrrolidone (2), la morpholine, la N-(2-hydroxyéthyl)-morpholine, la N-formyl-morpholine, la N-formyl-hexaméthylène-imine, la propylène-urée, la N-(2-hydroxyméthyl)-pipêridine et la N-(2-hydroxyéthyl)-pipéridine ainsi que les pipé-razines, pyridines, pyrrolidines et morpholines correspondantes, 35 la 1-hydroxyéthylpipéridine, la 2-hydroxypipêrid-ine, la 3-hydroxy-pipéridine, 1'hydroxymêthyl-tétrahydropyrane, etc... Comme composé soufré du type des sulfoxydes de dialkyle, on peut envisager surtout le suifoxyde de dimêthyle. Les aminés aliphatiques ou alicycliques polyfonctionnel-40 les contenant au maximum 8 atomes de carbone par radical hydro 7120665 9 2099701 carbure et qui contiennent comme autre groupe fonctionnel au moins un deuxième atome d'azote basique et/ou un groupe hydroxyle éventuellement éthêrifié par des alcools en à comprennent deux groupes de composés : 5 des hydroxyalkylaminés aliphatiques ou alicycliques contenant, par radical hydrocarbure, au maximum 8 et de préférence 6 atomes de carbone, ainsi que les éthers formés par celles-ci avec des alcools en à C^, et/ou des diamines ou polyamines non hydroxylées hydrosolubles ou 10 des diamines ou polyamines hydroxylées aliphatiques ou alicy cliques. Le premier groupe comprend .la monoéthanolamine, la dié-thanolamine et la triëthanolamine ainsi que les propanolamines et isopropanolamines correspondantes et les dérivés contenant au moins 15 un groupe hydroxyle par molécule et formés par remplacement des radicaux alkylol de ces composés par des radicaux alkyle en à ou par des groupes cyclohexyle ou cyclopentyle,.par exemple la N-méthyl-diéthanolaminé, la N,N-dibutyl-éthanolamine, la N~(2-hy-droxypropyl)-butyl(1)-aminé, la N,N-bis-(2-hydroxypropyl)-butyl-20 aminé, la N,N-bis-(2-hydroxyéthyl)-cyclohexylamine, la N-(2-hydro-xypropyl)-butylamine, la N-(1-hydroxypropyl)-diméthylamine, la méthoxyéthylaminé, la 3-méthoxy-propylamine, la 3-éthoxy-propyl-amine, l'éthoxyéthylamine, la méthoxyéthyl-propylamine, l'éthoxy-éthyl-propylamine, la 1-diéthylaminopentanone(4), la N-C2-hydroxy-25 éthyl)-cyclohexylamine. Les composés du deuxième groupe-à l'exception des diami-■ nés ou polyamines non hydroxylées hydrosolubles - peuvent être considérés comme des dérivés des premiers types de composés mentionnés qui contiennent en outre au moins un autre atome d'azote 30 basique. Ces autres atomes d'azote basiques peuvent être de nature primaire, secondaire ou tertiaire. Comme dans les composés correspondants du premier groupe, les radicaux alkyle, alkylè.ne, cyclo-alkyle ou cycloalkylène contenus dans les composés du deuxième groupe peuvent contenir jusqu'à.6 atomes de carbone en chaîne inin-35 terrompue. On trouve aux exemples 10 à 12 un choix de substances utilisables selon l'invention. . . - Les composés contenant au maximum 8 atomes de carbone par molécule et contenant un hétéroatome d'oxygène ou d'azote comprennent les composés hétérocyçliques déjà cités plus haut. Ceux-ci 40 peuvent être remplacés totalement ou partiellement par des composés 7120665 1» 2099701 hétérocycliques correspondants que l'on peut considérer comme leurs dérivés et qui contiennent en outre au moins un autre atome d'azote basique. Ces autres atomes d'azote basiques peuvent être de nature primaire, secondaire ou tertiaire et faire partie d'un 5 système hêtérocyclique. Ici encore, on trouve à l'exemple 13 un choix de composés utilisables selon l'invention. Les types de composés à utiliser selon l'invention comme constituants stabilisants comprennent chacun un grand nombre de composés particuliers et différents composés appartenant à un même 10 type n'ont pas toujours la même action stabilisante. En général, on s'efforce d'utiliser les composés ayant la plus forte action stabilisante ; mais étant donné que beaucoup de constituants individuels qui n'ont pas une activité optimale sont plus facilement accessibles techniquement que les constituants ayant une action 15 stabilisante optimale, certains composés moins actifs et plus faci lement accessibles peuvent avoir en pratique, surtout pour des rai sons économiques, une plus grande importance que des composés plus difficilement accessibles et de plus grande activité. En même temps que les aminés selon la subdivision A3e 20 servant de constituants stabilisants, il est à recommander d'incor porer aux produits des acides carboxyliques selon la subdivision A4 ou d'autres substances à réaction acide. Comme acides, on peut utiliser des acides minéraux forts par exemple des acides minéraux ou de préférence organiques conte-25 nant 1 à 6 atomes de carbone, par exemple les acides chlorhydrique sulfurique, phosphorique, nitrique, formique, acétique, propioni-que, butyrique, pivalique, oxalique, malonique, maléique, succini-que, glutarique, glycolique, lactique, hydroxybutyrique, pyruvique tartrique, citrique, salicylique, etc... Mais comme acides, on 30 peut aussi utiliser les surfactifs anioniques mentionnés plus loin Tous ces acides peuvent aussi être introduits sous la forme de leurs sels formés avec les constituants de stabilisant à réaction alcaline mentionnés plus haut. Il est apparu que des compositions enzymatiques liquides 35 particulièrement avantageuses étaient celles qui contiennent 10 à 50 % en poids d'une association comprenant 1 partie en poids des polyalcools ou éthers partiels de ceux-ci selon la subdivision A2a et 1,5 à 5 parties en poids des hydroxyalkylamines ou éthers de celles-ci selon la subdivision A3e. De préférence, ces concentrés 40 contiennent en outre l'un des acides carboxyliques selon la subdi 7120665 n 2099701 vision A4, la quantité d'acides carboxyliques étant à peu près aussi grande que celle des aminés présentes. Dans la mesure où au moyen des aminés et/ou acides carboxyliques mentionnés on n'atteint pas le pH désiré, on utilise, 5 surtout pour amener le pH dans la gamme alcaline, des sels à réaction alcaline de bases minérales fortes, notamment de sodium ou de potassium, par exemple les sels à réaction alcaline que l'on incorpore souvent, sous le nom d'"adjuvants actifs", aux détergents solides ou liquides. On fait ici rentrer aussi dans les adjuvants 10 actifs des complexants minéraux ou organiques. En même temps que ceux-ci, on peut aussi ajouter de petites quantités de lessive de soude ou de potasse. Pour protéger les enzymes contenues dans les produits selon l'invention contre l'action nuisible des microorganismes, il 15 est avantageux d'ajouter aux concentrés enzymatiques liquides des substances antimicrobiennes. Parmi les nombreuses substances antimicrobiennes utilisables, on citera par exemple les suivantes : le 2,4,6-trichlorophénol ou son isomère 2,4,5, le 2-hydroxybiphé-nyle, le p-benzylphénol, le p-phénylphénol, le p-chloro-méta-20 crésol, la 1 -h.ydroxypyridineth.ione(2) (sel de Zn ou Na) , le 2,2'-dihydroxy-dichloro-diphénylméthane, l'acide 4-hydroxybenzoîque, le bis-(2-hydroxy-3,5,6-trichlorophényl)-méthane, la tribromosalicyl-anilide, l'azoture de sodium, le S-éthylmercuri-4-carboxy-thiophé-nol, le 1,6-bis-(4-chlorophénylbiguanido)-hexane. 25 Les substances antimicrobiennes utilisables à cet effet ont des activités très différentes, ainsi que l'homme de l'art le voit déjà par 1'énumération ci-dessus ; par suite, les quantités utilisées peuvent aussi varier entre de larges limites, par exemple entre 0,0005 et 1 % en poids, de préférence entre 0,05 et 0,5 % 30 en poids. L'invention peut aussi servir en particulier à stabiliser les solutions aqueuses formées dans la fabrication technique d'enzymes, en vue de leur transport vers une nouvelle transformation. Il est avantageux d'appliquer une purification préalable et 35 une concentration par des procédés d'ultra-filtration ou d'échange d'ions. Les solutions d'enzyme stabilisées selon l'invention et obtenues à partir des produits enzymatiques ainsi traités sont stables au stockage et au transport et peuvent servir à la fabri 7120665 12 2099701 cation de détergents ; à cet effet, on les pulvérise sur des^sels hydratables ou des mélanges qui contiennent de tels sels, de sorte qu'avec combinaison de l'eau sous forme d'eau de cristallisation, il se forme des produits solides. Ces mélanges, qui con-5 tiennent des sels hydratables, peuvent être aussi des détergents séchés à chaud ou des intermédiaires de détergent séchés à chaud. Pour beaucoup de modes d'application, il est avantageux d'incorporer aux produits selon l'invention des surfactifs au lieu des adjuvants actifs à réaction alcaline déjà mentionnés ou en 10 même temps que ceux-ci. C'est en particulier le cas pour les détergents liquides. Par suite, les produits de ce genre peuvent contenir : 0 à 25 % et de préférence 1 à 15 5 en poids de surfactifs, 0 à 35 % et de préférence 0,5 à 25 % en poids d'adjuvants 15 actifs, en particulier de complexants minéraux ou organiques ; en outre, les produits selon l'invention peuvent encore contenir d'autres constituants usuels dans leur application, par exemple des substances antimicrobiennes, que l'on peut toutefois utiliser alors en plus grandes quantités qu'il n'est indiqué ci-dessus, 20 des azurants, etc... Les produits selon l'invention peuvent être sous la forme de solutions plus ou moins limpides ou troubles mais aussi sous forme de suspensions de solides non dissous dans une solution des constituants de stabilisant et éventuellement d'une partie des au-25 très constituants. En général, les concentrés selon l'invention contiennent 1 à 50 % et de préférence 5 à 30 I en poids de solvant ; dans le cas des détergents, le total des surfactifs et adjuvants actifs est généralement de 1 à 55 % et de préférence de 5 à 30 % en poids. 30 On donne ci-après une liste des surfactifs et adjuvants actifs. Avec les surfactifs, on mentionne aussi le savon ; toutefois, il faut signaler que pour la préparation de compositions liquides, en particulier de détergents liquides, le savon n'a pas la même importance que les surfactifs synthétiques, en particulier 35 les surfactifs anioniques synthétiques. Les surfactifs anioniques, amphotères ou non ioniques contiennent par molécule au moins un radical hydrophobe qui contient le plus souvent 8 à 22, de préférence 10 à 18 et en particulier 10 § 16 atomes de carbone et au moins un groupe hydrosolubi-40 lisant anionique, non ionique ou amphotère. Le radical hydrophobe 7120665 13 2099701 de préférence saturé est le plus souvent de nature aliphatique, éventuellement aussi alicyclique ; il peut être relié aux groupes hydrosolubilisants directement ou par des chaînons intermédiaires Comme chaînons intermédiaires, on peut envisager par exemple des 5 noyaux benzène, des groupes ester carboxylate ou carboxamide, des radicaux de polyalcools éthérifiés ou estérifiés, par exemple ceux de 1*éthylèneglycol, du propylèneglycol, du glycérol ou des radicaux correspondants de polyéther. Le radical hydrophobe est de préférence un radical hy-10 drocarbure aliphatique mais selon la nature du surfactif on peut s'écarter des gammes préférentielles ci-dessus. Comme surfactifs anioniques, on peut utiliser des savons tirés d'acides gras naturels ou synthétiques, éventuellement aussi d'acides résineux ou naphténiques, en particulier si 15 ces acides ont des indices d'iode de 30 au maximum et de préférence inférieurs à 10. Parmi les surfactifs anioniques synthétiques, les sulfonates et sulfates ont une importance pratique particulière. Les sulfonates comprennent par exemple les alkylarène-20 sulfonates, en particulier les alkylbenzènesulfonates que l'on peut obtenir entre autres à partir d'hydrocarbures aliphatiques de préférence à chaîné droite de 9 à 15 et en particulier de 10 à 14 atomes de carbone, par chloration et alkylation du benzène ou à partir d'oléfines correspondantes terminales ou non, par al-25 kylation du benzène et sulfonation des alkylbenzènes obtenus. En outre, des sulfonates aliphatiques sont intéressants, par exemple ceux que l'on peut obtenir à partir d'hydrocarbures de préférence saturés contenant 8 à 18 et de préférence 12 à 18 atomes de carbone par molécule, par sulfochloration au moyen d'anhy-30 dride sulfureux et de chlore ou par sulfoxydation au moyen d'anhydride sulfureux et d'oxygène et conversion en sulfonates des produits obtenus. Comme sulfonates.aliphatiques, on peut aussi utiliser des mélanges contenant dès alcènesulfonates, des hydro-xyalcanesulfonates. et disulfonates et que l'on peut obtenir par 35 exemple à partir d'oléfines terminales ou non en C8 à C18 et de préférence en C^ à C^g> par sulfonation au moyen d'anhydride sulfurique et par hydrolyse acide ou alcaline des produits de sulfonation. Dans les sulfonates aliphatiques ainsi obtenus, le. groupe sulfonate se trouve souvent sur un atome de carbone secon— 40 daire ; mais on peut aussi utiliser des sulfonates à groupe 7120665 2099701 sulfonate terminal que l'on obtient en faisant réagir des oléfi-nes terminales sur un bisulfite. Les sulfonates utilisables selon l'invention comprennent aussi des sels, de préférence des sels dialcalins d'oc-sulfo-5 acides gras, ainsi que des sels formés par des esters de ces acides avec des monoalcools ou polyalcools contenant 1 à 4 et de préférence 1 ou 2 atomes de carbone. D'autres sulfonates utilisables sont des sels formés par des esters d'acide gras de l'acide hydroxyéthanesulfonique ou 10' de l'acide dihydroxypropanesulfonique, les sels des esters formés par des alcools gras avec des acides sulfomonocarboxyliques ou sulfodicarboxyliques aliphatiques ou aromatiques inférieurs contenant 1 à 8 atomes de carbone, les sulfonates d'éther alkylique de glycérol ainsi que les sels des produits de condensation du 15 type amide formés par des acides gras ou des acides sulfoniques avec l'acide aminoéthanesulfonique. Comme surfactifs du type des sulfates, on citera les sulfates d'alcool gras, en particulier ceux que l'on prépare à partir d'alcools gras de coco, d'alcools gras de suif ou d'alcool 20 oléylique. A partir d'oléfines terminales ou non en C8 à C18' on peut aussi obtenir des produits de sulfonation utilisables du type des sulfates. En outre, ce groupe de surfactifs comprend des alkylolamides sulfatées d'acide gras ou des monoglycérides sulfatés d'acides gras, ainsi que des produits d'alcoxylation 25 sulfatés d'alkylphénols (alkyle en Cg à C^, d'alcools gras, d'amide d'acide gras ou d'alkylolcunides d'acide gras qui peuvent contenir, par molécule, 0,5 à 20, de préférence 1 à 8 et en particulier 2 à 4 radicaux d'éthylèneglycol et/ou de propylèneglycol. Comme surfactifs anioniques du type des carboxylates, 30 on peut utiliser par exemple les esters d'acide gras ou éthers d'alcool gras des acides hydroxycarboxyliques ainsi que les produits de condensation du type amide formés par des acides gras ou acides sulfoniques avec des acides aminocarboxyliques, par exemple avec la glycine, la sarcosine ou avec des hydrolysats de 35 protéines. Les surfactifs non ioniques comprennent des produits qui doivent leur hydrosolubilité à la présence de chaînes polyéther, de groupes oxyde d'aminé, suifoxyde ou oxyde de phosphine, de groupements alkylolamide et tout à fait généralement à une accumulation de groupes hydroxyle. 7120665 2099701 Des produits particulièrement intéressants pratiquement sont ceux que l'on peut obtenir par addition d'oxyde d'éthylène et/ou de glycide à des alcools gras, alkylphénols, acides gras, aminés grasses, amides d'acide'gras ou d'acide sulfonique et qui 5 peuvent contenir par molécule 4 à 100, de préférence 6 à 40 et en particulier 8 à 20 radicaux éther, surtout des radicaux éther d*éthylèneglycol. En outre, dans ces chaînes polyéther ou à leur extrémité peuvent se trouver des radicaux éther de propylèneglycol ou de butylèneglycol ou des chaînes polyéther corres— 10 pondantes. En outre, les surfactifs non ioniques comprennent les produits connus sous les désignations commerciales "Pluronics" et "Tetronics". On les obtient à partir de polypropylèneglycols qui sont en eux-mêmes insolubles dans l'eau ou à partir de pro-15 duits de propoxylation insolubles dans l'eau d'alcools aliphatiques inférieurs contenant 1 à 8 et de préférence 3 à 6 atomes de. carbone ou à partir d*alkylènediamines propoxylées insolubles dans l'eau. Ces dérivés insolubles dans l'eau Cc'est-à-dire hy-drophobes) d'oxyde de propylène se convertissent en surfactifs 20 non ioniques lorsqu'on les éthoxyle jusqu'à ce que le produit soit soluble dans l'eau. Enfin, comme surfactifs non ioniques, on peut encore utiliser les produits, dans certains cas encore hydrosolubles, donnés par la réaction des alcools aliphatiques ci-dessus sur l'oxyde de propylène et appelés "Ucon—Fluid". 25 Les surfactifs non ioniques comprennent aussi des al- kylolamides d'acide gras ou d'acide sulfonique qui sont dérivées par exemple de la monoéthanolamine ou de la diéthanolamine, de la dihydroxypropvlamine ou d'autres polyhydroxyalkylamines, par exemple des glycamines. On peut les remplacer par des amides 30 dérivées d'alkylamines primaires ou secondaires supérieures et d'acides polyhydroxycarboxyliques. Les oxydes d'aminé surfactifs comprennent par exemple les produits dérivés d*aminés tertiaires supérieures contenant un radical alkyle hydrophobe et deux radicaux alkyle et/ou alky-35 loi plus courts contenant jusqu'à 4 atomes de carbone chacun. Les surfactifs amphotères contiennent dans leur molécule des groupes hydrophiles aussi bien acides que basiques. Les groupes acides comprennent les groupes carboxyle, acide sulfonique, semi-ester sulfate, ester partiel phosphonate et phos-40 phate. Comme groupes basiques, on peut envisager les groupements 7120665 2099701 ammonium primaires, secondaires, tertiaires et quaternaires. Des composés amphotères à groupes ammonium quaternaire appartiennent au type des bétaïnes. Les bétaïnes carboxylées, sulfatées et sulfonées, vu 5 leur bonne compatibilité avec d'autres surfactifs, sont particulièrement intéressantes pratiquement. On obtient par exemple des sulfobétaïnes appropriées en faisant réagir des aminés tertiaires contenant au moins un radical alkyle hydrophobe sur des sultones, par exemple la propanesultone ou la butanesultone. 10 On obtient des carboxybétaïnes correspondantes en faisant réagir les aminés tertiaires mentionnées sur l'acide chloracétique, ses sels ou des esters chloracétates et en rompant la liaison ester. On peut augmenter ou diminuer le pouvoir moussant des surfactifs en associant des types appropriés de surfactifs, de 15 même que l'on peut le modifier en ajoutant des substances organiques non surfactives. Comme stabilisants de mousse, on peut utiliser surtout, dans le cas de surfactifs du type sulfonate ou sulfate, des carboxybétaïnes ou sulfobétaïnes surfactives ainsi que les surfac-20 tifs non ioniques mentionnés du type alkylolamide ; en outre, des alcools gras ou des diols terminaux supérieurs ont été proposés à cet effet. Les produits à pouvoir moussant diminué sont surtout destinés à servir dans des machines à laver le linge et la vais-25 selle et souvent, une inhibition limitée de la mousse suffit tandis que dans d'autres cas une inhibition plus forte de la mousse peut être désirable. On obtient en général l'inhibition de la mousse en associant des surfactifs anioniques à des savons, en particulier à des savons d'acides gras saturés contenant 16 à 22 30 atomes de carbone et/ou à des surfactifs non ioniques peu moussants. Comme surfactifs non ioniques particulièrement peu moussants qui peuvent servir aussi bien isolément qu'en association avec des surfactifs anioniques, amphotères et non ioniques et qui 35 diminuent le pouvoir moussant de surfactifs plus moussants, on peut utiliser des produits formés par addition d'oxyde de propylène aux éthers surfactifs de polyéthylèneglycol décrits plus haut, ainsi que les types "PluronicsM, "Tetronics" et "Ucon-Fluid" mentionnés également plus haut. 40 Comme adjuvants actifs, on peut utiliser des sels miné 7120665 2099701 raux ou organiques à réaction faiblement acide, neutre ou alcaline en particulier des complexants minéraux ou organiques. Des sels à réaction faiblement acide, neutre ou alcaline qui peuvent servir selon l'invention sont par exemple les bicarbo-5 nates, carbonates, borates ou silicates des métaux alcalins ainsi que les orthophosphates monoalcalins, dialcalins ou trialcalins, les pyrophosphates dialcalins ou tétraalcalins, les métaphosphates connus comme complexants, les sulfates alcalins et aussi les sels alcalins d'acides organiques sulfoniques, carboxyliques et sulfo-10 carboxyliques non surfactifs contenant 1 à 8 atomes de carbone. Ils comprennent par exemple des sels hydrosolubles des acides ben-zènesulfonique, toluènesulfonique ou xylènesulfonique, les sels hydrosolubles des acides sulfoacétique et sulfobenzolque ou les sels d'acides sulfodicarboxyliques, ainsi que les sels des acides 15 acétique, lactique, citrique et tartrique. D'autres corps qui conviennent comme adjuvants actifs sont les sels hydrosolubles d'acides polycarboxyliques à poids moléculaire élevé, en particulier des produits de polymérisation des acides maléique, itaconique, mésaconique, fumarique, aconitique, 20 méthylènemalonique et citraconique. On peut aussi utiliser des produits de copolymérisation formés par ces acides entre eux ou avec d'autres substances polymérisables, par exemple avec l'éthy-lène, le propylène, les acides acrylique,méthacrylique, crotonique 3-butènecarboxylique, 3-mêthyl-3-butènecarboxylique ainsi qu'avec 25 l'éther vinyl-méthylique, l'acétate de vinyle, 1'isobutylène, l'acrylamide et le styrène. Comme adjuvants actifs complexants, on peut aussi utiliser les métaphosphates à réaction faiblement acide ainsi que les polyphosphates à réaction alcaline, en particulier le tripolyphos-30 phate. On peut les remplacer totalement ou partiellement par des complexants organiques. Les complexants organiques comprennent par exemple les acides nitrilotriacétique, éthylènediaminetétraacétique, N-hydroxy-éthyl-éthylènediaminetriacétique, polyalkylènepolyamine-N-carboxy-35 liques et d'autres complexants organiques connus et on peut aussi utiliser des associations de différents complexants. Les autres complexants connus comprennent aussi des acides diphosphonique et polyphosphonique présentant les constitutions suivantes : 7120665 2099701 î: « X 0=P - c t I OH H OH I P=0 I OH OH X I I 0=P - C I I OH Z OH I P=0 A H R-N: \ X t OH 1 1 c - 1 P=0 1 Y OH. 5 X 1 OH i HO X 1 I 1 - C 1 - P=0 t 1 1 0=P - c - t 1 1 Y OH . 3 1 1 HO Y J 2 N - R» - X I - C l Y OH I P=0| 6H ->2 dans lesquelles R désigne des radicaux alkyle et R* des radicaux 10 alkylène de 1 à 8 et de préférence 1 à 4 atomes de carbone, X et Y des atomes d'hydrogène ou des radicaux alkyle de 1 à 4 atomes de carbone et Z désigne les groupes -OH, -N^ ou —NXR. Pour l'utilisation pratique, on peut surtout envisager les composés suivants : les acides méthylènediphosphonique, 1-hydroxyéthane-15 1,1-diphosphonique, 1-aminoéthane-l,1-diphosphonique, amino-tris-(méthylènephosphonique), méthylamino-bis-(méthylènephosphonique), éthylamino-bis-(méthylènephosphonique) et éthylènediamine-tétra-kis-(méthylènephosphonique). Tous ces complexants peuvent être sous forme d'acides libres, de préférence sous forme de sels al-20 câlins. Exemples Les exemples suivants décrivent quelques compositions selon l'invention et aussi, aux fins de comparaison, quelques compositions qui n'en font pas partie. Les abréviations employées 25 dans les exemples et dans les tableaux ont la signification suivante : - "ABS" un acide alkylbenzènesulfonique contenant 10 à 15 et de préférence 11 à 13 atomes de carbone dans la chaîne alkyle et obtenu par condensation d'oléfines à chaîne droite avec le 30 benzène et sulfonation de 1*alkylbenzène ainsi formé ; - "814-SH l'ester sulfate acide d'un mélange d'alcools gras contenant 8 à 14 atomes de carbone ; - MKASW et wKAS(Na)H, respectivement l'èster sulfate acide d'un mélange d'alcools gras obtenu par réduction d'acide gras de 35 coco et le sel de sodium de cet ester sulfate acide ; - HKA—XO—SM 1*ester sulfate acide d'un produit formé par addition-de 2 moles d'oxyde d'éthylène à 1 mole d'un mélange d'alcools gras préparé par réduction d'acide gras de coco ; - "I;214~8i0—S* l'ester sulfate acide d'un produit formé par addi-40 tion de 2 moles d'oxyde d'éthylène à 1 mole d'un mélange d'al 7120665 19 2099701 cools laurylique et myristylique ; - "TA-XO-S" l'ester sulfate acide d'un produit formé par addition de 2,5 moles d'oxyde d'éthylène à 1 mole d'un mélange d'alcools gras formé par réduction d'acide gras de suif ; 5 — "NP 9" le produit d'addition de 9 moles d'oxyde d'éthylène à 1 mole de nonylphénol. La solution tampon phosphate aqueuse pH = 6,5 utilisée a la composition suivante : 11,25 g/1 de KH2PC>4 10 20,00 g/1 de Na2HP04.12H20. Pour préparer les concentrés enzymatiques décrits dans les exemples, si le contraire n'est pas indiqué expressément, on dissout dans la solution tampon aqueuse mentionnée un concentré non dilué d'enzyme obtenu dans la fabrication technique d'enzymes ("Protin 15 A stock enzyme" de la firme Daiwa Kasei, Japon). Dans la mesure où ces compositions contiennent des aminés, on commence par ajouter aux aminés, en présence d'un peu d'eau, suffisamment d'acide acétique pour que le pH de ce mélange soit également de 6,5. On mélange alors les deux solutions, la solution d'enzyme et la so— 20 lution d'aminé, en ajoutant les autres constituants. Pour démontrer l'effet de stabilisation obtenu selon l'invention, on utilise des solutions de comparaison dans lesquelles au moins un des constituants stabilisants nécessaires selon l'invention est remplacé par la même quantité de solution tampon 25 aqueuse de sorte que toutes les solutions à comparer entre elles ont la même concentration d'enzyme et le même pH. On mesure toujours le pH sur les concentrés non dilués. Pour vérifier leur stabilité au stockage, on ajoute à 30 ml de ces solutions 0,1 ml de toluène et on les conserve un 30 certain temps à 37°C dans un flacon bouché à l'émeri. Ensuite, on détermine l'activité enzymatique ; les résultats sont indiqués par les tableaux. Dans la fabrication technique des produits selon l'invention, on remplace de préférence le toluène par des quantités 35 correspondantes de substances antimicrobiennes en elles-mêmes connues, par exemple par celles qui sont indiquées dans la description. Les recettes indiquées ci-dessous contiennent le plus souvent de l'acide acétique, en particulier quand une aminé est 40 présente comme constituant stabilisant. Toutefois, aux composi— 7120665 2099701 tions exemptes d'aminés examinées aux fins de comparaison, on n'ajoute pas d'acide acétique ; seulement dans l'exemple 1, on ajoute à une composition de comparaison, au lieu de l'acide acétique, la quantité équivalente d'acétate de sodium. Pour toutes 5 les compositions comparées, avec ou sans acide acétique, le pH est de 6,5. Dans les recettes, le complément à 100 % en poids est formé d'eau. Exemple 1 : 10 Un concentré enzymatique liquide présente la composi tion suivante en poids : 2 % de composition enzymatique sèche correspondant à une activité de 50 000 PE/g de composition enzymatique liquide 30 % d*éther a-monométhylique de glycérol ^C^H^qO^) 15 10 % de triéthanolamine 10 % d'acide acétique 15 % de solution tampon phosphate aqueuse 0,33M, pH = 6,5. Le tableau suivant donne des indications sur la stabilité de ce concentré enzymatique et d'autres concentrés qui ne 20 rentrent pas dans l'invention : Activité caséinolytique rési Constituant stabilisant selon duelle, %de la valeur initiale la définition de l'invention après x semaines de stockage à 37°C 25 A 2 a A 3 e x = 3 x = 6 x = 24 C4H10°3 Triéthanolamine 96 90 76 C4H10°3 (,) (*) 78 63,6 - — Tri éthano1aminé 45 25,6 — 30 (**) (**) 32 17,8 — ( * ) (*) 26 13,6 3,6 (*) = pas d'addition d'acide acétique (**> = addition de quantités équivalentes d'acétate de sodium. 35 Exemple 2 : Un concentré enzymatique liquide présente la composition suivante, en poids : 2 % de composition enzymatique sèche correspondant à une activité de 50 000 PE/g de composition enzymatique liquide 7120665 2099701 30 % d*éther a-monométhylique de glycérol (= Le tableau suivant contient des indications sur la stabilité de ce concentré enzymatique et de celle d'autres concentrés ne rentrant pas dans l'invention. Constituant stabilisant Activité caséinolyti selon la définition de que résiduelle au bout 1' invention Surfactif de 504 heures à 37°C A 9 a A O **■» % de la % de la com A C* ci A w 6 valeur position de initiale comparaison C4H10°3 Triéthanolamine 96 370 C4H10°3 Triéthanolamine 5,6 % ABS - 94 362 W3 Tri éth ano1aminé 5,6 % NP-9 96 370 W3 Triéthanolamine 2,8 % KA-X0-S' 95 366 C4H10°3 - - 5,6 % ABS 55 212 W3 - 5,6 %-NP—9 _ 82 314 C4H10°3 - 2,8 % KA-X0-S 87 335 Triéthanolamine 5,6 % ABS 25,3 98 - Triéthanolamine 5,6 % NP-9 36,0 139 - Triéthanolamine 2,8 % KA-XO-S 30,3 117 1 - - - • - 26 100 Les valeurs de stabilité de la composition de comparaison sont indiquées à la dernière ligne du tableau. Exemple 3 : 30 Un concentré enzymatique liquide présente la composi tion suivante, en poids : 2 % de composition enzymatique sèche correspondant à une activité de 50 000 PE/g de composition enzymatique liquide 30 % d*éther a-monométhylique de glycérol (= C^H^O^) 35 1,5 à 3,5 % d"alkylolamine .6,5 à 8,5 % de surfactif 15 % de solution tampon phosphate, aqueuse 0,33M, pH = 6,5. - , Le tableau suivant contient des indications sur la •stabilité de ces concentrés enzymatiques ët sur celle d'une com— . ^O position de comparaison ne rentrant pas dans l'invention. 7120665 2099701 Constituant stabilisant selon la définition de 1»invention Surfactif Activité caséinolyti-que résiduelle au bout de 72 heures 5 A 2 a A 3 e % de la valeur initiale % de la composition de comparaison C4H10°3 1,5 % en poids de monoéthanol-amine 8,5 % en poids de 1214—XO—S 98 177 10 C4H10°3 3,5 % en poids de triéthanolamine 6,5 % en poids de 814—S 100 182 - - . - 55 100 Les valeurs de stabilité de la composition de compa-15 raison sont indiquées à la dernière ligne du tableau. Exemple 4 : Un concentré enzymatique liquide présente la composition suivante en poids : 20 2 % de composition enzymatique sèche correspondant à une activité de 50 OOO PE/g de composition enzymatique liquide 30 % de constituant stabilisant selon la définition A2 de 1'invention 25 10 % de triéthanolamine 10 % d'acide acétique 15 % de solution tampon phosphate aqueuse 0,33M, pH = 6,5. Le tableau suivant contient des indications sur la stabilité de ces concentrés enzymatiques. 7120665 23 2099701 5 10 Constituant stabilisant selon la définition de 1'invention Activité caséinolytique résiduelle au bout de x heures à 37°C, % .de la composition de comparaison (*) A 2 x = 94 2 = 504 x = 1 008 éther a—monométhylique du glycérol 214 756 1 530 sulfoxyde de diméthyle 215 796 1 570 diacétone-alcool 185 2—hydroxyméthyl-tétrahydro-pyrane 139 tris-(hydroxyméthyl)-propane 197 624 1 020 néopentylèneglycol 204 632 1 100 butylèneglycol(1,3) 206 635 éthylèneglycol 206 1 430 butylèneglycol(1,3) 220 1 490 4 15 (») La composition de comparaison ne contient aucun des deux constituants stabilisants et ne contient pas d'acide acétique ; elle est préparée avec utilisation de la solution tampon phosphate seulement. 20 Exemple 5 : Un concentré enzymatique liquide présente la composition suivante, en poids : 2 % de composition enzymatique sèche correspondant à une activité de 50 000 PE/g de composition enzymatique 25 liquide 10 à 30 % d'éther a-monométhylique du glycérol ( =^*4H^o^3 ^ 3,3 à 16 % de triéthanolamine 3,3 à 16 % d'acide acétique 15 % de solution tampon phosphate aqueuse 0,33M, pH = 6,5. 30 Le tableau suivant contient des indications sur la sta bilité de ce concentré enzymatique. 7120665 24 2099701 Constituant stabilisant Activité caséinolytique rési selon la définition de duelle, % de la composition de 1'invention comparaison ( * ) au bout de x A 2 a A 3 e semaines de stoc :kage à 37°C x = 3 x = 24 30 % C4H 0 10 % triéthanol 683 3 870 amine 30 % n 6,6 % tt 710 3 480 30 % n 3,3 % tt 664 2 840 20 % H 10 % 1! 680 3 080 10 % tt 10 % tt 560 1 330 20 % n 6,6 % tt 640 2 240 10 % n 16 % tt 650 2 600 (») La composition de comparaison ne contient aucun des deux constituants stabilisants et ne contient pas d'acide acétique ; elle est préparée avec utilisation de la solution tampon phosphate seulement. Exemple 6 : Un concentré enzymatique liquide présente la composition suivante, en poids : 2,0 % de composition enzymatique sèche correspondant à une activité enzymatique de 50 000 PE/g de composition enzymatique liquide 33,0 % de constituant stabilisant selon la définition À 2 a de 1'invention 5,0 % de triéthanolamine 5,0 % d'acide acétique 15,0 % de solution tampon phosphate aqueuse 0,33M, pH = 6,5. Le tableau suivant contient des indications sur la stabilité de ces concentrés enzymatiques. 7120665 2099701 Constituant stabilisant selon la définition de 1'invention A 2 a Activité caséinolytique résiduelle, % de la composition de comparaison (*) au bout de x heures de stockage à 37°C x = 408 x = 770 butylèrteglycol( 1,3) 455 903 éthylèneglyco1 465 980 glycérol 407 775 propylèneglycol(1,2) 490 1 100 diéthylèneglycol 485 1 063 (*) La composition de comparaison ne contient aucun des deux constituants stabilisants et ne contient pas d'acide acétique ; elle est préparée avec utilisation de la solution tampon phos-15 phate seulement. Exemple 7 ; Un concentré enzymatique liquide présente la composition suivante, en poids : 20 2,0 % de composition enzymatique sèche correspondant à une activité de 50 000 PE/g de composition enzymatique liquide 33,0 % de constituant stabilisant selon la définition A 2 a de l'invention 25 5,0 % de monoéthanolamine 5,0 % d'acide acétique 15,0 % de solution tampon phosphate aqueuse 0,33M, pH = 6,5. Le tableau suivant contient des indications sur la stabilité de ces concentrés enzymatiques. 7120665 2099701 Constituant stabilisant selon la définition de 1'invention A 2 a Activité caséinolytique résiduelle, % de la composition de comparaison (*) au bout de x heures de stockage à 37°C x = 456 x = 700 éthylèneglycol 480 985 glycérol 496 780 éther a-monométhylique du glycérol 498 1 210 butylèneglycol(1,3) 538 1 200 éther isopropylidéniquê du glycérol 438 885 propylèneglycol ( 1,2) 503 1 220 diéthylèneglycol 507 1 200 15 (•) La composition de comparaison ne contient aucun des deux constituants stabilisants et ne contient pas d'acide acétique ; elle est préparée avec utilisation de la solution tampon phosphate seulement. 20 Exemple 8 : Un concentré enzymatique liquide présente la composition suivante, en poids : 2 % de composition enzymatique sèche correspondant à une activité de 50 000 PE/g de composition enzymatique 25 liquide 30 % de l'association de stabilisants selon la définition A 2 a de l'invention 10 % de constituant stabilisant selon la définition A 3 de 1* invention 30 10 % d'acide acétique 15 % de solution tampon phosphate aqueuse 0,33M, pH = 6,5. Le tableau suivant contient des indications sur la stabilité de concentrés enzymatiques de ce genre et d'un autre concentré enzymatique qui ne rentre pas dans l'invention. 7120665 27 2099701 Constituant stabilisant selon Activité caséinolytique rési la définition de l'invention duelle, % de la composition de comparaison ( ) , au bout de x A 2 a A 3 heures de stockage a 3 7°C x = 480 x = 1 008 éthylène monoéthano1aminé 576 2 080 glycol tt N-méthylacétamide 580 1 600 ft hexaméthyltriamide 508 1 780 d'acide phosphori que C4H10°3 mono éthano1aminé 630 2 400 n N—méthylacétamide 494 1 870 (*) La composition de comparaison ne contient aucun des deux constituants stabilisants et ne contient pas d'acide acétique ; 15 elle est préparée avec utilisation dë la solution tampon phosphate seulement. Exemple 9 : Un concentré enzymatique liquide présente la composi-20 tion suivante, en poids : 2,0 % de composition enzymatique sèche correspondant à une activité de 50 000 PE/g de composition enzymatique liquide. 30,0 % d'éther a-monométhylique de glycérol (= 25 10,0 % de triéthanolamine 10,0 % d'acide acétique 1,0 % de complexants (sels de Na) 15,0 % de solution tampon phosphate aqueuse 0,33M, pH = 6,5. Le tableau suivant contient des indications sur la 30 stabilité des concentrés enzymatiques de ce genre ainsi que d'un autre concentré enzymatique ne rentrant pas dans l'invention 7120665 28 2099701 5 Complexant Activité caséin au bout % de la valeur initiale olytique résiduelle de 72 heures % de la composition de comparaison ( * ) NTA EDTA 92,4 96 55 168 174 100 10 (*) La composition de comparaison ne contient aucun des deux constituants stabilisants et ne contient pas d'acide acétique ; elle est préparée avec utilisation de la solution tampon phosphate seulement. Les valeurs de stabilité de cette composition de comparaison sont indiquées à la dernière ligne du tableau. 15 Exemple 10 : Une composition enzymatique liquide présente la composition suivante, en poids : 2 % de composition enzymatique sèche correspondant à une 20 activité de 50 000 PE/g de composition enzymatique liquide 11 % d*éther a—monométhylique de glycérol 11 % de diaminé ou polyaminé 10 % d'acide acétique 25 15 % de solution tampon phosphate aqueuse 0,33M, pH = 6,5. Le tableau suivant contient des indications sur la stabilité de ce concentré enzymatique et d'autres concentrés enzymatiques ne rentrant pas dans l'invention. 7120665 29 2099701 5 10 15 20 25 Diaminé ou polyaminé Activité caséinolytique résiduelle, % de la composition de comparaison, au bout de x semaines de stockage à ~ 37°C x = 6 CM II XI 1-cyclohexy1amino—3-aminoprop ane 91 86 1-aminométhyl—2-aminocyclopentane 91 83 tripropylènetétr aminé 88 76 N,N-diméthyl—éthylènediamine 83 71 tétrapropylènepentamine 82 68 cyclohexane—1,2—diaminé 80 74 propylène-1,2—di aminé ( + ) 80 - pentaméthylènediamine 79 - l-méthylamino-3-aminopropane 76 77 polyéthylènepolyaminé (poids moléculaire 600) 76 77 bis-(3-aminopropyl)-méthylamine(+) 74 75 polyéthylènepolyamine (poids moléculaire 1 000) 82 70 N—(4—hydroxybutyry1)-diéthylène-triaminé 76 64 N-hydroxy-éthylènediaminé (+) J72 53 1-diéthylaminopropy1-3—aminé (+) 70 51 1,4—di aminobutane 67 52 N,N—bis—(2—hydroxyéthyl)—1,3-dia— minopropane 63 40 sans additif aminé 6 3 Exemple 11 : Un concentré enzymatique liquide présente la composi-30 tion suivante, en poids : 2 % de composition enzymatique sèche correspondant à une activité de 50 000 PE/g de composition enzymatique liquide 33 % d*éther a-monométhylique de glycérol 35 11 % de diaminé ou polyaminé 10 % d'acide acétique 15 % de solution tampon phosphate aqueuse 0,33M, pH = 6,5. Le tableau suivant contient des indications sur la stabilité de ce concentré enzymatique et d'autres concentrés en- 7120665 30 2099701 zymatiques ne rentrant pas dans l'invention. 5 Diamine ou polyamine Activité caséinolytique résiduelle, % de la composition de comparaison, au bout de x semaines de stockage a 37*C x = 3 x = 6 diéthylènetriamine 97 94 triéthylènetétraminé 98 90 10 tétraéthylènepentamine 98 98 sans additif aminé 11 6 Exemple 12 : Un concentré enzymatique liquide présente la composi-15 tion suivante, en poids : 2 % de composition enzymatique sèche correspondant à une activité de 50 000 PE/g de composition enzymatique liquide 11 % d*éther a-monométhylique de glycérol 20 5,5 % de diaminé ou polyaminé 10 % d'acide acétique 15 % de solution tampon phosphate aqueuse 0,33M, pH = 6,5. Le tableau suivant contient des indications sur la stabilité de ce concentré enzymatique et d'autres concentrés enzyma-25 tiques ne rentrant pas dans l'invention. 7120665 2099701 Diamine ou polyamine Activité caséinolytique résiduelle, % de la composition de comparaison, au bout de x semaines de stockage à 37°C x = 6 x = 12 5 l-cyclohexylamino-3—amino-propane 64 41 cyclohexane-1,2-diamine 59 40 1,4-diaminobutane 51 34 N,N—diméthyl—éthylènediaminé 48 27 10 1—aminométhyl—2—aminocyclo— pentane 47 28 l-méthylamino-3-aminopropane 46 31 l-diméthylamino-3-amino-propane (+) 38 25 triéthylènetétramine (+) 30 19 15 diéthylènetriamine (+) 26 17 tétraéthylènepentaminé (+) 32 19 sans additif aminé 6 5 Exemple 13 : 20 Un concentré enzymatique liquide présente la composi tion suivante, en poids : 2 % de composition enzymatique sèche correspondant à une activité de 50 000 PE/g de composition enzymatique liquide 25 11 % d'éther a-monométhylique de glycérol 5,5 % et 11 % respectivement de diamine et de polvamine 10 % d'acide acétique 15 % de solution tampon phosphate aqueuse 0,33M, pH = 6,5. Le tableau suivant contient des indications sur la sta-30 bilité de ce concentré enzymatique et d'autres concentrés enzymatiques ne rentrant pas dans l'invention. 7120665 2099701 Diamine ou polyamine % en poids Activité caséinolytique résiduelle, % de la composition de comparaison, au bout de x semaines de stockage à 37°C x = 6 x = 12 11 % de N—méthylimidazole 88 81 11 % de 2-méthylimidazole 88 79 11 % de N-hydroxyéthylpipérazine 85 75 11 % de l-(3-aminopropyl)-pipéridine 83 76 11 % de 4-(3-aminopropyl)-morpholine (+) 78 63 11 % de N-hydroxyéthylpipérazine 77 64 11 % de 1,4—bis-(2-hydroxypropyl)-pipérazine 72 68 11 % de N,N-bis-(3—aminopropyl)-pipérazine 73 59 5,5% de l-(3-aminopropyl)-pipéridine 59 37 5,5% de 2—méthylimidazole 58 36 5,5% de N-méthylimidazole 53 32 sans additif aminé 6 5 7120665 33 2099701 REVENDICATIONS 1.- Compositions enzymatiques liquides stabilisées caractérisées par le fait qu'elles contiennent, en poids : A) 100 à 1 % et de préférence 100 à 5 % d'un constituant enzymati— 5 que formé d'une solution aqueuse des substances suivantes : 1) des protéases et/ou des amylases en quantités telles que l'activité de la composition enzymatique stabilisée soit comprise entre 1 000 et 800 000, de préférence entre 10 000 et 800 000 unités de protéases par millilitre et/ou entre 10 10 et 10 000, de préférence entre 200 et 10 000 unités Sandstedt, Kneen et Blish par millilitre ; 2) 1 à 45 % d'au moins un des composés organiques hydrosolubles cités en a) à d) : a) alcools aliphatiques contenant 2 à 6 groupes OH et au 15 maximum 8 atomes de carbone, de préférence au maximum 6 ato mes de carbone par molécule et/ou polyéthers de ces polyalcools et/ou éthers partiels formés par ces polyalcools avec des monoalcools en C^ à C^ et contenant au moins un groupe hydroxyle par molécule, 20 b) des alkylamides ou hydroxyalkylamides d'acides carboxy liques ou d'acide phosphorique, contenant 2 à 8 et de préférence 2 à 6 atomes de carbone par molécule, c) composés hétérocycliques éventuellement hydroxylés contenant au maximum 8 atomes de carbone par molécule et conte- 25 nant des hétéroatomes d'oxygène et/ou d'azote, d) suifoxydes de dialkyle contenant 1 à 4 atomes de carbone dans les radicaux alkyle, 3) 1 à 30 % d'au moins un des composés organiques hydrosolubles cités en e) à g) : 30 e) aminés aliphatiques ou alicycliques polyfonctionnelles contenant au maximum 8 atomes de carbone par radical hydrocarbure et contenant, comme autre groupe fonctionnel, au moins un deuxième atome d'azote basique et/ou un groupe hydroxyle éventuellement éthérifié par des alcools en C^ à C^, 35 f) composés contenant au maximum 8 atomes de carbone par molécule et contenant un hétéroatome d'azote ou d'oxygène, g) alkylamides ou hydroxyalkylamides d'acides carboxyliques ou d'acide phosphorique contenant 2 à 8 et de préférence 2 à 6 atomes de carbone par molécule, 34 7120665 2099701 un composé du groupe 2b ne pouvant toutefois être associé qu'à un composé des groupes 3e ou 3f et un composé du groupe 2c ne pouvant être associé qu'à un composé des groupes 3e ou 3g, 4) O à 30 % et de préférence 1 à 30 % d'un acide carboxylique 5 ou hydroxycarboxylique contenant au maximum 6 atomes de car bone ou d'un sel hydrosoluble formé par cet acide avec des cations organiques ou minéraux, B) O à 99 % et de préférence 0 à 95 % d'autres constituants usuels de détergents et éventuellement d'eau, 10 les compositions enzymatiques, ou les détergents qui les contiennent, ayant un pH de 3 à 10. 2.- Compositions selon la revendication 1, caractérisées par le fait qu'elles ont un pH de 5 à 10. 3.- Compositions selon les revendications 1 et 2, caracté— 15 risées par le fait que comme protéases, elles contiennent celles qui sont tirées du Bacillus subtilis. 4.- Compositions selon les revendications 1 à 3, considérées dans leur ensemble, caractérisées par le fait que comme constituant stabilisant A2a, elles contiennent 1'éthylèneglycol, le 20 diéthylèneglycol, le triéthylèneglycol, le propylèneglycol(1,2) ou (1,3), le butylèneglycol(l,3) ou (1,4) ou l'éther a-monométhylique du glycérol. 5.- Compositions selon les revendications 1 à 4, considérées dans leur ensemble, caractérisées par le fait que comme cons- 25 tituant stabilisant A2b ou A3g, elles contiennent la N-méthylfor-mamide, la N-méthylacêtamide, la propionamide, la butyramide, la N,N',Nn-hexaméthyltriamide d'acide phosphorique. 6.- Compositions selon les revendications 1 à 5, considérées dans leur ensemble, caractérisées par le fait que comme cpns- 30 tituant stabilisant A2c ou A3f, elles contiennent la morpholine, l'a-pyrrolidone, le 2-hydroxyméthyl-tétrahydropyrane, la N-formyl-morpholine, la N-(2-hydroxyéthyl)-pipéridine, la N-(2-hydroxy-éthyl)-pipérazine, la N-formyl-hexaméthylène-imine, la N-(2-hydro-xyéthyl)-morpholine ou la 2-hydroxypyridine. 35 7.- Compositions selon les revendications 1 à 6, considé rées dans leur ensemble, caractérisées par le fait que comme constituant stabilisant A3e, elles contiennent la monoéthanolamine, la diéthanolamine, la triéthanolamine, la méthyl-diéthanolamine, la N,N'-dibutyl-aminoéthanol, la méthoxyéthylamine, la triiso- 40 propanolamine, la 3-méthoxypropylamine, la 3-éthoxypropylamine, 35 7120665 2099701 le 1-buty1aminopropano1 (2) ou la N-cyclohexyl-diéthanolamine. 8.- Compositions selon les revendications 1 à 7, considérées dans leur ensemble, caractérisées par le fait que comme constituant stabilisant A3e, elles contiennent des diamines ou 5 polyamines non hydroxylées hydrosolubles ou des diamines ou polyamines aliphatiques ou alicycliques contenant des groupes hydro-xyalkyle. 9.- Compositions selon les revendications 1 à 8, considérées dans leur ensemble, caractérisées par le fait que comme 10 constituant stabilisant 3f, elles contiennent des composés hété-tocycliques éventuellement hydroxylés contenant au maximum 8 atomes de carbone par molécule et contenant un hétéroatome d'oxygène et/ou d'azote. 10.- Compositions selon les revendications 1 à 9, considé- 15 rées dans leur ensemble, caractérisées par le fait que comme constituant stabilisant A3e, elles contiennent des composés du type du l-cyclohexylamino-3-aminopropane, du l-aminométhyl-2-aminocyclopentane, de la propylène—1,2-diaminé, de la 1-diméthyl— aminopropyl-3-amine, de la 1-diéthylaminopropy1-3—aminé, de la 20 bis-(3—aminopropyl)-méthylamine, de la diéthylènetriamine, de la triéthylènetétraminé, de la tétraéthylènepentamine ou de la N— hydroxyéthyl-éthylènediamine. 11.— Compositions selon les revendications 1 à 10, considérées dans leur ensemble, caractérisées par le fait que comme 25 constituant stabilisant A3f, elles contiennent des composés du type du N-méthylimidazole ou du 2-méthylimidazole. 12.- Compositions selon les revendications 1 à 11, considérées dans leur ensemble, caractérisées par le fait qu'elles contiennent 10 à 50 % en poids d'une association comprenant 1 partie 30 en poids des polyalcools ou éthers partiels de ceux-ci selon la revendication 1, A2a et 1,5 à 5 parties en poids des hydroxyalky-lamines ou éthers de celles—ci selon la revendication 1, A3e. 13.- Compositions selon la revendication 12, caractérisées par le fait qu'elles contiennent environ 1 partie en poids d'aci— 35 des carboxyliques selon la revendication 1, A4. 14.— Compositions selon les revendications 1 à 13, considérées dans leur ensemble, utilisables comme détergents et caractérisées par le fait qu'elles contiennent, en poids, O à 25 % et de préférence 1 à 15 % de surfactifs et O à 25 % et de préférence 40 0,5 à 25 % d'adjuvants actifs, en particulier de complexants 7120665 2099701 minéraux ou organiques. 15.— Compositions selon la revendication 14, caractérisées par le fait que le total des surfactifs et des adjuvants actifs est de 1 à 55 %, de préférence de 5 à 30 % en poids. 16.- Compositions selon les revendications 1 à 15, considérées dans leur ensemble, caractérisées par le fait qu'elles contiennent 1 à 50 % et de préférence 5 à 30 % en poids de solvants.