FR 2059522 A1 19710604 FR 7026174 A 19700716 70 26174 2059522 la présente invention concerne l'utilisation de la sulfa- faire guanidine pour réduire la mortalité et/décroître l'apparition de lésions chez des volailles exposées à la maladie de Marek, ainsi qu'une composition contenant de la sulfaguanidine comme ingré-5 dient actif essentiel. Plus particulièrement- la présente invention concerne l'utilisation de sulfaguanidine et de ses sels d'addition d'acides acceptables du point de vue pharmaceutique pour le traitement de la maladie de Marek et pour lutter contre cette maladie. 10 Selon un autre de ses aspects, l'invention concerne l'uti lisation de sulfaguanidines substituées, en particulier de sulfaguanidine s substituées sur les atomes d'azote, en position 2 et/ou 4-. L'invention concerne également l'utilisation de. certains sulfanilamides et de sulfanilamides substitués sur les atomes d'azote 15 en position 4 et/ou 1. Ces composés peuvent également servir sous la forme d'un sel acceptable du point de vue pharmaceutique pour traiter et combattre la maladie de Marek. la maladie-de Marek est un.trouble hautement infectieux, se propageant par voie lymphatique, qui atteint les volailles, en 20 particulier les poulets, la maladie de Marek est également connue sous le nom de leucose neurale,neurolymphomatose, leucose aviaire aiguë, et leucose de la peau. Le ou les agents pathogènes sont des virus, un virus du type herpès associé aux cellules étant nettement impliqué comme facteur étiologique. la maladie de Marek est 25 habituellement cliniquement évidente chez les oiseaux avant la maturité sexuelle, c'est-à-dire avant la ponte du premier oeuf, les manifestations cliniques peuvent présenter un ou plusieurs des signes suivants : paralysie régionale ou généralisée, diarrhée avec coloration fécale des plumes abdominales postérieures, perte de 30 poids, dyspnée, cécité, abdomen élargi, ou mort. les lésions évidentes ne sont pas nécrotiques et elles comprennent une ou plusieurs des lésions suivantes ; infiltration de lymphocytee les nerfs périphériques et/ou les follicules des plumes ; foyers de prolifération de tissus lymphatiques, de 35 dimension microscopique jusqu'à plusieurs millimètres, dans n'importe quel tissu de l'organisme mais principalement dans le foie, la rate, le rein, les gonades, le coeur, le préventricule, le mus- 70 26174 cle du bréchet, la peau et les nerfs. Le Ministère de l'Agriculture des Stats-Ohis d'Amérique estime que la maladie de Marek provoque une perte annuelle de 200 millions de dollars (un milliard de francs) pour l'élevage améri-5 cain des volailles et l'industrie qui s*y rattache. Cette perte est due à la mortalité et au fait que l'on rejette comme'impropres à la consommation humaine les carcasses des oiseaux abattus. Ce rejet est dû à la présence de foyers de prolifération lymphatique. Les sulfaguanidines et leurs dérivés substitués, et les sul-10 fanilamides substitués et non substitués ont été décrits dans la littérature. On trouve des synthèses et des descriptions de nombreux composés de ces séries dans E. H. ÎTorthey, Suifonaraides o monographie A.O.S. U° 106 (New-York, 1948). En outre, la littérature étudie et discute 1* utilisation de 15 certains composés particuliers du type sulfa pour le "traitement d'une maladie virale des poulets. Voir F.D. Asplin, Batur-c, 3~7C (26 Février 1966), page 253. Asplin a trouvé que la sulfadiazine évite le développement de lésions macroscopiques de la paralysie aviaire lorsqu'on administre par voie orale à des poulets ce com-20 posé à la dose de 0,7 /& à 2,2 % dans leurs aliments (lé pourcentage étant exprimé sur base pondérale). Asplin a trouvé que le sulfanil— amide est toxique à ces doses, et que la sulfaguanidine est le composé le moins actif parmi les six composés soumis aux essais. Les doses d'administration décrites par Asplin sont trop 5 élevées pour être intéressantes du point de vue commercial ou .industriel et, en outre, il y a de sérieux problèmes de résidus lcrs-" que l'on administre par voie orale à des volailles des quantités relativement importantes de sulfaguanidine. Les volailles ainsi traitées peuvent alors -ne pas convenir à la consommation humaine» 30 Les buts de la présente invention sont de fournir t ~ une composition qui, administrée par voie orale- aux volailles, réduit la mortalité et diminue lsapparition des lésions chez les volailles exposées à la maladie de Marek -j - une composition contenant une dose spécifique - de sulfagpa— 35 nidine qui réalise un soulagement certain sans provoquer d'effets nuisibles dus à la présence d'une action résiduelle ou à une tonicité 5 • - • 70 26174 -3- 2059522 - une composition contenant de la sulfaguanidine qui favorise la;croissance des volailles lorsque l'on administre ce composé par voie -orale ; - - - - une nouvelle application vétérinaire de la sulfaguanidine 5 comme agent favorisant la croissance des volailles. Comme ingrédient actif présent dans les formules des compositions selon la présente invention, on utilise la sulfaguanidine répondant à la formule : 15 et les dérivés de substitution de la sulfaguanidine portant des substituants sur les atomes d'azote K" (4) et/ou ÎT (2), ainsi que leurs sels d'addition d'acides^âcceptables du point de vue pharmaceutique. On envisage l'administration de doses unitaires contenant de telles suifaguanidines, par voie orale ou par injection, 20 aux volailles pour le traitement de la maladie de Marek et pour combattre cette maladie. De préférence, on administre le composé par voie orale. - Dans le meilleur mode de réalisation de la présente invention, la sulfaguanidine elle-même constitue l'agent actif contre 25 la maladie de Marek. les suifaguanidines substituées qui font également preuve d'une certaine activité pour combattre la maladie font partie de la présente invention, mais constituent des modes moins préférés de réalisation. Comme exemples illustrant les groupes de substituants qui 30 peuvent être présents sur l'atome d'azote 1T (2) dans les sulfa-guanidines actives de la présente invention, on peut citer, par exemple, un ou deux groupes tels que des groupes alkyle inférieur comprenant des groupes alkyle inférieur à chaîne linéaire ou ramifiée, saturés ou non saturés, contenant 1 à 6 atomes de carbone^ 35 comme les groupes méthyle, éthyle, isopropyle, propényle, propynyle, allyle et n-hexyle ; des groupes alcanoyle inférieur contenant 1 à 6 atomes de carbone comme les groupes formyle, acétyle, ou hexanoyle ; ^ 70 26174 des groupes aryle comme le groupe phényle, des groupes phényle substitué comprenant, par exemple, des groupes (alkyl inférieur)-phényle où. le fragment alkyle inférieur peut être linéaire ou ramifié, saturé ou non saturé et contient 1 à 6 atomes de carbone 5 comme les groupes méthylphényle, propénylphényle Les substituants préférés fixés sur l'atome d'azote F (2) 15 sont les groupes alcanoyle inférieur et guanyle. Des groupes de substituants qui peuvent être présents sur l*atome d'azote H (4) vont comprendre, par exemple, un ou plusieurs groupes comme des groupes alcanoyle inférieur et amino-alcanoyle inférieur, qui peuvent être linéaires ou ramifiés, saturés ou non 20 saturés, contenant 1 à 6 atomes de carbone comme les groupes for-myle, acétyle? propionyle, isobutyryle, crotonyle, acryle, alanyle, et valyle ; des groupes alcoxy-carbonyle qui peuvent être linéaires ou ramifiés, saturés ou non saturés, contenant 1 à 6 atomes i de carbone dans le fragment alcoxy comme les groupes méthoxycar-25 bonyle, éthoxy-carbonyle, isopropoxycarbonyle et n-butoxycarbonyle j les groupes carboxyalcanoyle inférieur et leurs esters alkyliques inférieurs dans lesquels les fragments alcanoyle inférieur et alkyle inférieur peuvent être linéaires ou ramifiés, saturés ou non saturés, contenant 1 à 6 atomes de carbone comme les groupes carboxy-30 acétyle, carboxypropionyle s carboxybutyryle, carboéthoxypropionyle, et carbométhoxyacétyle ; des groupes aroyle corme les groupes ben-zoyle et salicyle ; des groupes carboxyaroyle et les esters aliryli-ques inférieurs qui en dérivent et dont le fragment alkyle inférieur peut être linéaire ou ramifié, saturé ou non saturé, conte-35 nant 1 à 6 atomes de carbone conme dans le cas des groupes carboxy-benzoyle, méthylphtaloyle et n-hexylplxtaloyle $ le groupe carbamoyle et ses dérivés mono- et di-alkyliques inférieurs dont le BAD ORIGINAL ê 70 26174 -5- 2059522 fragment alkyle inférieur peut être linéaire ou ramifié, saturé ou non saturé, contenant 1 à 6 atomes de carbone comme les groupes N-méthylcarbamoyle, îr,ÏT-diéthylcarbamoyle et K-butylcarbamoyle ; et les groupes alkylidényle inférieur et arylidényle provenant 5 d'aldéhydes comme l'acétaldéhyde, le propionaldéhyde, le n-valé-raldéhyde, le benzaldéhyae, le £-chlorobenzaldéhyde, l'o-hydroxy-benzaldéhyde, le m-méthoxy-£-hydroxybenzaldéhyde et le furfural-déhyde. Entrent également dans le cadre de la présente invention les II (4)-bis-sulfaguanidines dérivées d'acides dicarboxyliques et 10 de di-aldéhydes. les substituants fixés sur l'atome d'azote ÎT(4) que l'on préfère le plus sont les groupes alcanoyle inférieur,et'l'on préfère particulièrement les groupes acétyle et formyle. On peut également utiliser des composés comportant divers 15 types de substituants fixés sur les atomes d'azote N(2) et ÎT(4) j par exemple, un composé préféré est un composé dans lequel les deux substituants fixés chacun sur les atomes d'azote IsT(2) et N(4) sont des groupes alcanoyle inférieur. Un composé particulier porte des groupes acétyle fixés comme substituants sur les deux atomes 20 d'azote N(2) et 11(4). la sulfaguanidine et les sulfaguanidines substituées du type décrit ci-dessus sont les composés connus et sont disponibles à l'échelle industrielle ou bien ces composés peuvent être préparés par des procédés qui ont déjà., été entièrement décrits dans ce do-25 maine de la pratique. On vérifie in vivo leur efficacité pour traiter et combattre la maladie de Marek en utilisant des poulets qui ont été infectés par des lymphoblastes contenant des virus et obtenus à l'origine à partir d'un poulet présentant un cas typique de la maladie de Marek. Voici le mode opératoire de l'essai : 30 on place dans des cages dont la base est constituée par des fils métalliques des poulets "Athens-Canadian"(A-C) élevés au hasard, par groupes de cinq chacun. Ces poulets se nourrissent à volonté d'une ration classique pour les volailles dans laquelle on a incorporé par mélange, juste avant l'utilisation, des concentrations 35 diverses de sulfaguanidine. On fournit la ration basale d'alimentation ne contenant pas de composé d'essai à des animaux témoins normaux et à des animaux témoins infectés. Après 24 heures de trai- 70 26174 -6- ZUD^DZZ tement, on injecte aux poulets un inoculum dangereux du virus de la maladie de Marek. L'inoculum a été obtenu à l'origine à partir d'un cas typique de maladie de Marek constatée dans des rôtisseries industrielles, L'inoculum produit de façon caractéristique des 5 tumeurs lymphoïdes du foie, de la rate, du rein et des gonades. On continue pendant toutes les expériences, à un pourcentage du régime alimentaire indiqué, l'administration orale du médicament dans les aliments. Après une période expérimentale appropriée, où plus de 50 fo des témoins infectés, mais non traités par le mé-10 dicament, succombent, tous les oiseaux survivants sont sacrifiés. On effectue l'autopsie de tous les animaux morts et sacrifiés et l'on enregistre l'apparition des lésions- Selon la présente invention, on utilise la sulfaguanidine pour combattre la maladie de Marek en administrant la sulfaguanidi-15 ne ou ses dérivés à des volailles sensibles à la maladie ou exposées à la maladie, l'administration s'effectuant dans l'eau de boisson, l'alimentation ou par voie parentérale. Le mode préféré d'administration est par voie orale, dans l'eau de boisson ou dans les aliments. 20 On préfère surtout disperser la sulfaguanidine dans la forme finale des aliments présentés aux animaux, et administrer à volonté aux oiseaux les aliments comportant le médicament. On obtient de bons résultats dans la lutte contre la maladie de Marek avec des aliments contenant environ 0,002 ^ à 0,1 fo en poids de la sulfa-25 guanidine. les concentrations du produit médicamenteux peuvent également se situer dans la gamme large de 0,0002 à 0,2 fo dans les aliments. La gamme préférée se situe entre 0,01 i<> et 0,-1 $ dans les aliments. Les doses utilisées dans l'alimentation des volailles sont ici exprimées par une concentration indiquée en pourcentage 30 en poids. On peut utiliser les doses supérieures pour traiter une apparition bien établie de la maladie de larek, mais l'on ne préfère pas les doses supérieures pour un traitement prophylactique où l'on administre continuellement aux volailles des aliments contenant 35 un médicament. Les experts en la matière comprendront que ces faibles doses ou faibles concentrations vont éliminer tous les problèmes éventuels de toxicité ou d'action résiduelle qui proviennent 70 26174 _7_. 20'59522 de l'ingestion de doses élevées de sulfaguanidine de l'alimentation des volailles. La forme finale des aliments dans lesquels on utilise les doses ou concentrations décrites ci-dessus de suifaguanidine est 5 une forme appropriée du point de vue nutritif,contenant des sources d'hydrates de carbone, de protéines, de matières grasses, de vitamines, de substances minérales et autres facteurs nutritifs communément utilisés dans 1!élevage industriel des volailles. En outre, on peut utiliser dans les compositions d'autres additifs 10 pour aliments pour volailles comme des coccidiostatiques, par exemple lt"amprolium1,1 1'"éthopabate", la "nicarbazine". En plus de l'administration par les aliments solides, on peut administrer aux volailles la sulfaguanidine en incorporant ce composé dans l'eau de boisson. Les niveaux préférés des doses 15 incorporées dans l'eau de boisson se situent habituellement à une valeur un peu inférieure aux doses utilisées dans un aliment solide, du fait que les volailles boivent environ le double de la quantité qu'elles mangent. La gamme large de concentration dans l'eau de boisson se situe entre 0,0001 fc et 0,1 f en poids de sul-20 faguanidine et la gamme préférée se situe entre 0,005 ^ et 0,1 f en poids. L'administration par l'intermédiaire de l'eau de boisson est avantageuse lorsque l'on utilise le composé pour un traitement thérapeutique plutôt que pour un traitement prophylactique. A cette fin, il est commode de préparer des poudres aptes à la disper-25 sion ou à la dissolution dans l'eau, où la sulfaguanidine est intimement dispersée dans un support solide ou liquide approprié, soluble dans l'eau ou apte à la dispersion dans l'eau comme le dextrose, le saccharose, le diméthylsulfoxyde} ou d'autres supports appropriés et non toxiques, à des côncentrations comprises entre 30 environ 0,03 f> et environ 25 f° en poids» L'éleveur de volailles peut ensuite ajouter commodément ces solides à l'eau de boisson des volailles. Une formule typique d'eau de boisson composée contient 0?3 f° de sulfaguanidine ; 9,6 f> de chlorhydrate de chlorure de 1 -(2-n-55 propyl-4-amino-5-P3?rimidinyl-méthyl)-=-2«=méthyl-=pyridinium ; 30 f> de dextrose ; 20 fo de propylène-glycol Q?002 fo de diméthylpoly-siloxane ; 0,2 f de mono-oléate de polyoxyéthylène=sorbitanne j l'eau constituant le complément à 100 fo bad original 70 26174 2059522 Selon un autre aspect de la présente invention, la Demanderesse fournit des compositions comprenant des suppléments ou additifs pour l'alimentation des volailles contenant la sulfaguanidine précédemment décrite comme agent efficace contre la maladie de 5 Marek., Dans de telles compositions, le composé est mélangé ou dispersé dans un véhicule de support ingérable par voie bràlë, qui n'est pas toxique pour les volailles et qui est compatible avec la forme finale des aliments. Ces suppléments pour aliments contiennent un pourcentage nettement plus élevé de sulfaguanidine 10 que la forme finale des aliments, et on les mélange ou on les incorpore dans les aliments avant l'administration aux volailles. Afin d'assurer une distribution uniforme du composé dans la forme finale des aliments, il est habituel d'utiliser un stade de dilution intermédiaire où. l'on mélange le supplément avec une portion 15 de l3aliment final? et l'on a.joute ensuite ce "mélange intermédiaire" au reste des aliments tout en effectuant un malaxage adéquat. On peut donner à la sulfaguanidine décrite- ci-dessus la forme de compositions de suppléments pour aliments contenant environ 0S05 fo à environ 50 % en poids de composés médicamenteux. On pré-20 fère dans l'industrie utiliser environ 0,5 à 2^5 kg d'un tel supplément par tonne d'aliments. On comprendra donc que la concentration préférée présente dans le supplément va dépendre dans une large mesure de la concentration finale souhaitée pour l'utilisation, Avec les composés de la présente invention, on préfère des compo-25 sitions de suppléments pour aliments contenant environ 1,0 $ à environ 20 fo en poids de. l'ingrédient actif. Des diluants ou véhicules 'de support que l'on peut uti3,iser dans ces suppléments pour aliments pour volailles sont des additifs solides pour aliments peur volailles, ingérables par voie 30 orale, comme la farine de maïs, des grains séchés de distillerie, de la coquille d'huître broyée9 des résidus de fermentation de farine de citron, des remoulages ou issues de blendes extraits sc~ lubles de mélasse, de l'aliment à base de gluten de maïsy de la farine de soya, de la farine de soya décortiqué, du calcaire con-35 cassé, des mycéliums de fermentation? des substances végétales comestibles, etc. On préfère des supports nutritifs puisque cela augmente 1'intérêt de la forme finale des aliments. BAD ORIGINAL 70 26174 -9- 2059522 Voici des exemples de suppléments typiques pour aliments contenant le composé selon la présente invention : U) kg 5 Sulfaguanidine 1 » 5 "Amprolium" 25,0 Issues de blé 73 >5 (B) Sulfaguanidine 5»0 10 Aliment à base de gluten de maïs 95>0 (C) Sulfaguanidine 2,0 Farine de germe de maïs 40,0 Grains de distillerie de maïs 58,0 15 (D) Sulfaguanidine 1,0 Grains séchés de distillerie de maïs 99»0 (E) Sulfaguanidine 2,0 20 Grains séchés de distillerie 97»5 la présente invention est décrite ci-dessus en se référant à l'utilisation de la sulfaguanidine. La Demanderesse a également décrit des dérivés de la sulfaguanidine qui peuvent porter des substituants fixés sur les positions N(2) et/ou N(4). La Demande-25 resse a également trouvé que la sulfaguanidine peut présenter des substituants fixés sur le noyau benzénique de la sulfaguanidine. On a décrit dans la littérature des substituants fixés sur le noyau, en particulier des groupes alkyle inférieur, hydroxyle ou des atomes d'halogène, ou bien diverses combinaisons de ces substi-30 tuants. On peut également mettre en oeuvre la présente invention en utilisant certains sulfanilamides autres que les sulfaguanidi-nes décrites ci-dessus. Des exemples typiques de ces sulfanilamides sont ceux dans lesquels l'atome d'azote ÏF(4) porte un ou plusieurs 35 substituants comme, par exemple, un atome d'hydrogène, ou des groupes alkyle inférieur, alcanoyle inférieur et/ou carbamoyle et/ou ceux dans lesquels l'atome d'azote U(1) porte un ou plusieurs substi 70 26174 —10— 2059522 tuants comme, par exemple, un atome d*hydrogène, un ou des groupes alkyle inférieur, alcanoyle inférieur, aroyle, comme benzoyle, hétéroaroyle, carboxyalcanoyle, carboxyaroyle, halogénoalcanoyle, aryle comme benzyle et phényle, carboxyalkyle, carboxyaryle, ha-5 logénoalkyle, et hétéroaryle, comme un noyau hétéroaromatique monocyclique pentagonal ou hexagonal comportant 1 à 3 hétérô-ato-mes choisis dans le groupe constitué par l'oxygène, l'azote et le soufre, et qui peuvent, éventuellement, porter comme substituantes) un ou plusieurs groupes comme, par exemple, des radicaux 10 alkyle inférieur, alcoxy inférieur, alcényloxy, alcanoyle inférieur, ' halogènes, amino» alkylamino inférieur, alcanoylamino inférieur et alkyl(inférieur)-suifonate. Des sulfanylamides à substituants hétéroaryliques particuliers comprennent la sulfa-quinoléine, la suifaquinoxaline, la suifapyridine, la sulfapyri-15 midine et le suifathiadiazole. 70 26174 2059522 -11- REVEMDICATIONS 1. Une composition caractérisée en ce qu'elle comprend un aliment pour les volailles, dans lequel est incorporé environ 0,0002 /o à 0,2 ^ en poids de sulfaguanidine ou d'un de ses sels. 5 2. Une composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle contient 0,01 ?» à 0,1 f» en poids de sulfaguanidine ou d'un de ses sels. 3. Une composition selon la revendication 2, caractérisée en ce qu'elle contient 0,002 % a G, 1 en poids de sulfaguanidine 10 ou d'un de ses sels. 4. Application à titre de médicament de la composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3= 5. Application de la composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée par le fait qu'on utilise cet- 15 te composition comme produit vétérinaire* notamment pour combattre la maladie de J'îarek chez les volailles. bad original