FR 2101060 A1 19720331 FR 7030026 A 19700814 70 30026 1 2101060 l'invention^ à^lg^réglis aipon de laquelle ont participé Messieurs .• -GIR&ÏÏLT Pierre/ a pour objet a titre de médicaments des dérivés de la pyrazolone. Elle concerne plus particulièrement à ce titre, la 3-amino 4,4-dichloro 5-pyrazolone, de formule I : NTT et ses sels avec un acide minéral ou organique thérapeutiquement compatible. Ces composés sont doués de propriétés antibactériennes et antifongiques intéressantes, utilisables en thérapeutique. Ils sont aptes 1 0 à être utilisés plus particulièrement dans le traitement des staphylococcies telles que, staphylococcies malignes de la face, staphylococcies cutanées, pyodermites, plaies septiques et suppurantes anthrax, phlegmons, érésypèle, staphylococcies aiguës»primitives ou post grippales. 1 5 Leurs propriétés antifongiques permettent de les employer dans le cas de dermatoses cutanées et fongiques, mycoses des pieds, intertrigos mycosiques, eczémas mycosiques, vaginites mycosiques, impétigos, pyodermites, dermites eczématiformes, épidermomycoses, dysidroses, onychomycoses. 20 Ces composés sont utilisés par voie locale en application, topique sur la peau et les muqueuses. Ils peuvent être présentés sous forme de poudres, crèmes, pommades, préparations en aérosols, lotions, solutions, suspensions, poudres ou granulés pour préparations extemporanées, collyres, 25 préparations ophtalmiques, gouttes nasales, gouttes auriculaires. Ces formes,d'utilisation pharmaceutique,sont préparées selon les procédés usuels. Ces composés peuvent également entrer dans la composition de préparations à usage cosmétique notamment crèmes et produits d!hygièna 30 les concentrations utiles de ces composés en application topique sur la peau ou les muqueuses, s1 échelonnent entre 0,1 et 2 la préparation de la 3-amino 4,4-dichloro 5-pyrazolone est décrite dans la demande de brevet français, déposée par la société (I) 5 0 70 30026 2 2101060 demanderesse, le 7 Uoveribre/sous le numéro PV> 172 931 , intitulée lytjb/ "Nouvelles pyrazolones substituées et procédé de préparation". Elle consiste essentiellement en ce que l'on fait réagir du chlore gazeux sur la 3-amino 5-pyrazolone en milieu acide acétique. 5 Exemple : Préparation de la 3-amino 4.4-dichloro 5-pyrazolone• Dans 300 cm3 d'acide acétique, on introduit 1 00 g de 3-amino 5-pyrazolone, puis fait barboter, dans le mélange réactionnel, 150 g de chlore gazeux, tout en agitant pendant une heure à tempé-10 rature ambiante. On isole par essorage le précipité formé, le lave à l'eau, le sèche et obtient 143 g de 3-amino 4,4-dichloro 5-pyrazolone, P. = 2202 - 2222C (avec décomposition). Un échantillon de ce produit est cristallisé dans le méthanol, P. = 2202 _ 22220 (avec décomposition). 15 Etude pharmacologique de la 3-amino 4.4-dichloro 5-pyrazolone. V Activité antifongique in vitro A. Activité en milieu liquide : la concentration minimale inhibitrice a été déterminée en milieu Sabouraud liquide Oxoïd sur Oandida albicans. Au bout de 20 vingt-quatre heures, elle est de 150 |ig/ml. B. Activité par diffusion en milieu gélosé : Un milieu gélosé Sabouraud dextrose agar Oxoïd(pH=5,6) est ensemencé par le microorganisme étudié. On découpe des- cupules de 1 cm de diamètre dans ce milieu, et on incorpore dans les cavités ainsi 25 obtenues, le produit étudié sous forme d'une pommade à 1 ?&. Les témoins ne reçoivent que l'excipient de la pommade. On met en incubation puis on mesure les zones d'inhibition. L'excipient de la pommade lavable, est constitué par un mélange d'alcools gras saturésen 020, de sulfate double d'alcool céto-30 stéarylique et de sodium, d'un mélange à parties égales d'alcools cétylique et stéarylique, de propylène glycol, de nitrate phényl-mercurique et d'eau distillée. Le champignon étudié est Candida albicans. Le diamètre des zones d'inhibition est de 2,3 cm, aussi bien 35 après quarante-huit, heures d'incubation qu'après vingt-quatre heures. L'activité du produit est donc stable dans le temps. II/ Activité antibactérienne in vitro 70 30026 3 2101060 A. Activité en milieu liquide : les concentrations minima inhibitrices (C.M.I) ont été déterminées en milieu liquide vis-à-vis de diverses souches "bactériennes, après 24 et 48 heures d'incubation à 372C. les résultats obtenus 5 sont réunis dans les tableaux suivants: Germes Gram+ C.M 24 heures .1. 48 heures Staphylococcus aureus Oxford Staphylococcus aureus clinique Streptococcus hemolyticus Bacillus subtilis 5 (ig/ml 5 " 20 " 5 " 1 0 [ig/ml 20 " 40 " 10 " Germes Gram- C.M 24 heures .1. 48 heures Escherichia coli Escherichia coli pathogène Elebsiella pneumoniae Salmonella typhimurium Proteus mirabilis Pseudomonas pyocyanea 2 ng/ml 5 " 5 2 " 2 " 5 5 ng/ml 10 " 20 " 5 20 " 20 " B. Activité par diffusion en milieu gélosé : la méthode utilisée est comparable à celle de I, B. le milieu utilisé est le milieu gélosé "D.S.T agar base Oxoïd" à pH = 7,4. le produit étudié est incorporé sous forme de la pommade précitée. les résultats obtenus sont réunis dans le tableau suivant_: Souches d'origine clinique Diamètre des zoï 24 heures les d'inhibition 48 heures Staphylococcus aureus (2 souches) Bacillus subtilis Escherichia coli (2 souches) Elebsiella pneumoniae Proteus mirabilis Pseudomonas aeruginosa 4.4 cm 5.5 " 3,9 " 3,8 " 3,8 " 4,7 " 4,2 cm 5,4 " 3,9 " 3,8 " 3,8 " 4,7 " Ces résultats montrent que la pommade utilisée diffuse bien et exerce une bonne activité inhibitrice vis-à-vis des bactéries G-ram+ et G-ram-. l'activité est stable dans _le temps, étant donné que les zones d'inhibition observées après quarante-huit heures d'incu- . /seulement Dation sont identiques à celles observées après vingt-quatre heures/ 70 30026 2IUÏUO0 III/ Tolérance cutanée la 3-amino 4,4-dichloro 5-pyrazolone a été appliquée sous forme de la pommade à 1 $ précitée sur une surface d'environ 24 à 28 cm2, une fois par jour et pendant 20 jours, sur la peau de 5 quatre rats blancs mâles (après épilage soigné et grattage sévère au papier émeri n2 000 jusqu'à saignement) d'un poids moyen de 140 g. Les animaux étaient pesés tous les quatre jours. Pendant toute la durée de 1' expérience, les rats conservaient un excellent état général et grossissaient très régulièrement (aucune anomalie 10 dans la courbe de poids). La repousse des poils a été normale, on n'a pas observé d'intolérance locale, et, à l'autopsie, aucune atteinte des organes macroscopiquement visibles n'a été constatée. Cette préparation est donc bien tolérée en application locale prolongée. 1 5 IV/ Toxicité La dose létale 50 per o^ chez le rat est de 750 mg/Kg Conclusion : Le produit étudié présente une bonne activité antibactérienne à large spectre, vis-à-vis de germes pathogènes G-ram+ et G-ram-. 20 Sous forme de pommade lavable à 1 5-pyrazolone : Formules : Pommade dermique : - 3-amino 4»4-dichloro 5-pyrazolone..... 0,75 g 30 - eau distillée.... 4,50 g - huile de vaseline épaisse Codex 2,38 g - polysorbate 80 0,42 g - propylène glycol Codex 26,60 g - stéarate de zinc 5,90 g 35 - vaseline 9,85 g - métabisulfite de sodium 0,50 g - tétracémate disodique 0,10 g - cholestérol 0,70 g - acétylméthylamine q. s.p 100 g 0 70 30026 5 21.01060 Crème dermique : - 3-amino 4,4-dichloro 5-pyrazolone . 0,400 g - alcool gras saturé en C20 commercialisé sous le nom d'Eutanol G- .... 10,000 g 5 - sulfate double d'alcool cétostéarylique et de sodium commercialisé sous le nom de lanette E. 0,300 g - mélange à parties égales d'alcools eétylique et stéarylique commercialisé sous le nom d1 Excipient GM 946 . 3,700 g 10 - nitrate phénylmercurique 0,002 g - propylène glycol.. 10,000 g - métabisulfite de sodium 0,500 g - tris-(hyaroxyméthyl) amino méthane 0,100 g ■ - eau distillée . ....q. s..p 100,000 g 15 Gouttes auriculaires : - 3-amino 4,4-dichloro 5-pyrazolone . ... . 0,40 g - éthylène diamine tétracétate trisodique 0,10 g - métabisulfite de sodium.. - .. 0,50 g - glycérine 10,00 g 20 - eau distillée 10,00 g - propylène glycol Codex. q.s.p 100,00 g Préparation en aérosol : - 3-amino 4,4-dichloro 5-pyrazolone................ 1,00 g - stéarate de zinc... ' 0,60 g 25 - perhydrosqualène 3,50 g - tétracémate disodique 0,10 g - gaz propulseurs liquéfiés q.s.p 50 ml Collyre : - 3-amino 4,4-dichloro 5-pyrazolone 0,500 g 30 - polyéthylène glycol 4 000 ' 10,000 g - chlorure de lithium 0,300 g - acide citrique .. 0,020 g - citrate trisodique 0,200 g - nitrate phénylmercurique ' 0,001 g 35 - alcool benzylique 0,030 g - éthylène diamine tétracétate trisodique ".... 0,050 g - métabisulfite de sodium 0,500 g '- eau distillée Codex injectable ...q.s.p 100 g 70 30026 6 2101060 Gouttes nasales : - 3-amino 4>4-dichloro 5-pyrazolone 0,500 g - alcool benzylique. 0,300 g - polysorbate 80.... 0,100 g 5 - carboxyméthylcellulose (sel de sodium) 0,500 g - chlorure de sodium 0,800 g - nitrate phénylmercurique 0,002 g - métabisulfite de sodium 0,500 g - tétracémate disodique... 0,100 g 10 - eau distillée q.s.p 100,00 g Solution pour application locale : - 3-amino 4,4-dichloro 5-pyrazolone 0,500 g - tris-(hycLroxyméthyl) amino méthane 0,100 g - métabisulfite de sodium 0,500 g 15 - soluté isotonique de chlorure de sodium q.s.p 1 00 g Pâte gingivale : - 3-amino 4,4-dichloro 5-pyrazolone 0,20 g - savon médicinal 0,20 g - phosphate tricalcique 0,15 g 20 - propylène glycol Codex... 10,00 g - glycérine 10,00 g - saccharine.... 0,01 g - essence de menthe 0,04 g - métabisulfite de sodium.... 0,05 g 25 - tétracémate disodique 0,100 g - carbonate de calcium. q.a .p 100 g 70 30026 7 21.01060 REVENDICATIONS 12 A titre de composés antibactériens et antifongiques, la 3-amino 4,4-diciiloro 5-pyrazolone et ses sels avec un acide minéral ou organique physiologiquement compatible. 5 22 A titre de médicaments, la 3-amino 4,4-dichloro 5-pyrazolone et ses sels avec un acide minéral ou organique thérapeutiquement compatible. 32 Les compositions pharmaceutiques contenant comme principe actif un au moins des composés selon 1 e et un excipient inerte pharma-1 O ceutique. 4S Les compositions pharmaceutiques contenant comme principe actif un des composés selon 12 et un ou plusieurs autres principes actifs d'action antibactérienne et/ou antifongique. 5- Les préparations à usage cosmétique, notamment crèmes et produits 15 d'hygiène contenant un au moins des composés selon 12.