FR 2100709 A1 19720324 FR 7119538 A 19710528 71 19533 i 2100709 La présente invention concerne des compositions notamment utiles pour prévenir ou traiter les infections virales contenant, comme constituants actifs, des dérivés de la pipérazine. Elle concerne également un procédé pour préparer lesdites compo-5 sitions et lesdits constituants actifs, et, en particulier, les applications des compositions ainsi préparées dans l'art vétérinaire. Plus particulièrement, l'invention concerne la prévention ou le traitement des infections virales au moyen de compositions contenant un composé choisi parmi un groupe de dérivés 10 hétérocycliques comportant un squelette pipérazine qui peut être ponté par des substituants alkylène. Les composés qui représentent les constituants antiviraux actifs des compositions de l'invention sont, en outre, caractérisés par le fait qu'ion des atomes d'azote de la fraction 15 pipérazine est lié à un autre atome d'azote de nature aminée» Lesdits composés peuvent être représentés par la formule générale suivante î (I) 20 X=N- N\ lï - R 25 dans laquelle R est un atome d'hydrogène, un radical alkyle inférieur acyle, arylalkyle, R^ RR^ et R^ représentent chacun indépendamment un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur î chacune des paires R-^ et R2* considérés ensemble, ou R^ et considérés ensemble, peut également représenter un radical alkylène 30 inférieur pontant le noyau pipérazine s X peut être choisi parmi les groupes suivants : Hg> benzylidène, et (H, acyle)„ On comprend également dans le cadre de l'invention les compositions contenant des sels d'addition d'acides pharmaceu-tiquement acceptables des composés de formule générale (l)„ Certains 35 desdits composés sont décrits dans la littérature chimique» Par exemple, le j5~amino-8-méthyl-3.» 8-diazabicyclo^,2, l7octane, qui a la formule structurale suivante : 71 19533 2 2100709 1 2 CH,-lf aJ? N-NHp 8 \r% / 5 4 est connu d'après Cignarella et coll., J. Med. Chem. 6, 385* (1963). De même, le dérivé 8-amino-3~méthyle Isomère est décrit par le même auteur dans J. Med. Chem. 6, 29 (1963). Les composés d'aminopipérazine sont connus d'après le brevet des E.U.A. 5 n° 2 663 706. On peut préparer d'autres dérivés de la série précitée selon des méthodes connues. Ainsi, dans le cas où X dans la formule générale (l) précitée représente un groupe (H, acyle), on obtient simplement le composé désiré par acylation des composés correspondants ayant un groupe amino libre. 10 On obtient les composés visés par la formule générale (I), précitée, dans laquelle le radical R est un groupe acyle ou alkyle et X représente le groupe HgSuivant une technique générale déjà décrite dans le brevet des E.U.A. n° 2 663 706, précité, au sujet de la l-méthyl-4-aminopipérazine. 15 On obtient facilement les dérivés benzylidèneamino en faisant réagir les composés à groupe amino libre avec le benzal-déhyde, d'une manière courante. Les compositions renfermant le groupe de composés précités selon l'invention peuvent contenir également, en même temps que le constituant actif, les agents 20 courants tels que des excipients, stabilisants, agents épaississantss agents tensio-actifs et solvants, tels que des sucres, des dérivés de cellulose, des amidons, des dérivés de polyoxyéthylène, des p-hydroxybenzoates, du stéarate de magnésium, du métabisulfite de sodium, de l'eau distillée exempte de matières pyrogènes, qui les 25 rendent propres à une administration par voie orale ou parentérale. Un autre mode d'administration consiste en une application intranasale de suspensiois ou de solutions que l'on peut pulvériser en imprégnant le tissu nasal. En vue de l'administration par voie orale, on mélange 30 les constituants actifs avec les agents précités en obtenant des compositions que 1 'on trans£©p«a en comprimés ou en capsules, 71 19533 3 2100709 15 contenant des doses de constituant actif comprises entre 100 mg et lg. Par exemple, un comprimé représentatif de l'invention peut avoir la composition suivante j Quantité (mg) Constituant antiviral actif 200 5 Mannitol 20 Amidon 40 Stéarate de magnésium 5 Une solution ou une suspension représentative de 10 l'invention convenable pour l'administration par voie parentérale peut avoir la composition en pourcentage suivante : Poids/volume (%) Constituant antiviral actif 5,000 Métabisulfite de sodium 1,000 p-Hydroxybenzoate de méthyle 0, 050 p-Hydroxybenzoate de propyle 0,010 Eau distillée exempte de matières lrin Anr. pyrogènes, q.s.p. 100,000 20 Un nébulisat représentatif de l'invention pour l'admi nistration par voie intranasale peut avoir la composition suivante Quantité Constituant antiviral actif 5 S Thimérosal 2 mg 25 p-Hydroxybenzoate de méthyle 80 mg p-Hydroxybenzoate de propyle 20 mg Phosphate de sodium 500 mg E.D.T.A., sel disodique 5 mg Eau distillée exempte de matières ,Q0 , 20 pyrogènes, q.s.p. - Afin de donner une indication en ce qui concerne les propriétés antivirales présentées par les constituants actifs desdites compositions, on mentionne ci-après certains résultats obtenus dans l'inhibition de la formation de plaques dans des 35 cultures de fibroblastes d'embryons de poulets, infectés par le virus de la vaccine, et des cultures de reins de lapins, infectés par le virus d'herpès simplex (herpès a frigcns) „ On doit observer 71 19533 2100709 que d'autres virus typiques d'animaux, tels que les virus de la clavelée, de la variole aviaire, de la rhino-trachéite des félidés et des bovidés, appartiennent aux groupes de virus précités. En procédant à des opérations représentatives, on 5 effectue la détermination de l'effet direct de certains composés actifs de l'invention sur la formation de plaques par les virus, de la manière suivante j a) Sous gélose. 10 On fait adsorber les virus par des monocouches de cultures primaires de fibroblastes d'embryons de poulets. On recouvre ensuite la pellicule cellulaire par de la gélose contenant un milieu nutritif et le médicament. Après 4 jours à 37°C, on ajoute du rouge neutre et on compte les plaques 3 jours plus tard. 15 h) Dans un milieu liquide. On utilise les mêmes cellules que ci-dessus et on les cultive dans des tubes de Leighton. Après l'adsorption des virus (une unité de formation de plaque ou UFP par 1 à 3 cellules), 20 on lave les cellules, on ajoute 1 ml de milieu nutritif contenant le médicament. 48 heures plus tard, on congèle les cellules accompagnées du milieu fluide à ~70°C. On titre le virus après avoir brisé les cellules en procédant à 3 congélations et décongélations successives et à un traitement pendant 30 secondes au moyen d'ondes 25 soniques. On détermine le nombre de UFP en comptant les plaques comme dans la méthode sous gélose, précitée. On compare les résultats obtenus avec ceux des cultures témoins. c) Sous méthylcellulose. 30 Dans le cas du virus d'herpès simplex, on utilise des cultures primaires de reins de lapins. On applique la même méthode que dans le cas de a), ci-dessus, excepté que l'on utilise, au lieu de gélose, 2 % de méthylcellulose. Lesdits composés ont généralement une faible toxicité 35 vis-à-vis des cellules. On a trouvé, dans le cadre de l'invention, que certains d'entre eux sont dépourvus de toxicité même aux concentrations 5 fois plus grandes que celles qui produit une nette 71 19533 5 2100709 inhibition de la croissance virale» On détermine la toxicité selon les mêmes méthodes que pour l'essai sous gélose, décrites ci-dessus, en excluant toutefois l'addition des agents infectieux et en prenant en considération la concentration du produit qui 5 inhibe la coloration des cellules par le rouge neutre. TABLEAU I Ç°5°®55r5Ëi25_Eî!2ÉHiË§BS_yB®_IS^i^iÊîoS_§®_90^_de_la croissance Yî?§i®_.0ys/!2l) ° 10 Vaccine Herpès simplex Composé sous gélose dans un milieu liquide sous méthylcellulose 15 / \ NH0-N N-CH, 2 \ ✓ 3 100 200-300 __ 20 fi ^X-CH-N-ï/ ^n-ch, \=J \—J 3 100 200-300 — 25 fi ^S-CH-N-ï/ \l \=J V-/ 5 — 20 30 E-N-ï/ \H 2 \_y 30 20 20 35 CH,-C0HN-N/r~_^N-CH, 3 \ / 3 Uh2-N^N-oh2- 200 100 — 20 71 19538 « 2100709 TABLEAU I (suite) Vaccine Herpès simples. Composé sous gélose dans un milieu liquide sous méthylcellulose h2n-]Tjï-c2h5 — 20 A~\ H2N-=^yf-c3H? __ 20 -- CH^ H2N-y3laO CH^ 2-5 10 10 HgN-^A-OHj __ 100 __ -- 100 — O2H5-cohh-MQ^N-CH3 __ 100 __ H^Q-coc^ 200 — __ H^-NQmoc.^. 50 __ -- 71 19538 7 2100709 TABI&AU I (suite) Vaccine Herpès simple* 5 Composé sous gélose dans un milieu liquide 10 /~~N /~\ HgN-N N-CHg-CHg-CHg-^ J 20 20 H2N-N~\-ch2-oh2-«Q> 50 __ 50 15 • Lorsqu'on les soumet à des essais sur les animaux, les composés de l'invention,qui sont les constituants antiviraux 20 actifs desdites compositions, présentent une activité remarquable même aux doses inférieures à 90 mg/kg par voie parentérale» A titre d'exemple, on soumet à l'essai, au cours d'opérations représentatives, les composés des exemples 4 et 8 c i-après, par voie intrapéritonéale à la dose de 10 mg/kg chez 25 les souris infectées par le virus de la vaccine. On compte les lésions dues à la vaccine sur la queue des souris 8 jours après l'injection initiale de la vaccine» On compare le nombre moyen des lésions chez les animaux traités avec celui que l'on observe chez les témoins. Les composés des exemples 4 et 8 abaissent le 30 nombre moyen des lésions respectivement jusqu'à 17,8 et 13,6, par rapport au nombre de 23 observé dans le cas du témoin» On illustre la préparation de quelques composés de l'invention dans les exemples suivants, indiqués à titre d'illustration sans nullement limiter ladite invention dans son cadre 35 et son esprit. 71 19538 8 2100709 EXEMPLE 1. l-Benzylidèneamino-pigérazine. A une solution contenant 7,8 g d'hexahydrate de pipérazine dans 20 ml d'eau, on ajoute 8 ml d'acide chlorhydrique 5 concentré. En maintenant la température à environ 5-10°C, on ajoute lentement 2,8 g de NaNOg dans 8 ml de HgO. Après avoir laissé reposer pendant 3 heures à 10°C, on refroidit le mélange avec de la glace et on élimine les impuretés par filtration. On amène la solution aqueuse à pH 12 en ajoutant de l'hydroxyde 10 de sodium, puis on l'extrait plusieurs fois avec du chloroforme. Par évaporation de la phase organique, on obtient 3,4 g du dérivé nitrosé que l'on utilise pour l'opération consécutive. On effectue la réduction du dérivé nitrosé en solution aqueuse selon la méthode décrite par G.W. Smith et coll., "Ind. Eng. Chem. Prod. Res. et 15 Dev„", Vol. 1, n° 2, page 117 (1962). A la solution hydrogénée, contenant initialement 3,4 g du dérivé nitrosé brut, on ajoute 3,15 g de benzaldéhyde dans 15 ml d'éthanol. Après avoir laissé reposer pendant 24 heures à la température ambiante, on extrait le mélange avec du benzène. Après avoir évaporé la couche orga-20 nique, on obtient 4,4 g de 1-benzylidèneamino-pipérazine, fondant à 74-76°C. EXEMPLE 2. 1-Aminopipérazine. 25 On porte au reflux 4,4 g de 1-benzylidèneamino-pipéra zine pendant 2 heures dans une solution aqueuse contenant 4,7 ml de HCl concentré. Après refroidissement, on extrait le mélange avec du benzène et, ensuite, on évapore la couche aqueuse sous vide. On cristallise le résidu à partir de méthanol aqueux. Ainsi, 30 on obtient 4 g de dichlorhydrate de 1-aminopipérazine monohydraté. On obtient ensuite la base libre en la libérant par vin alcali à partir du chlorhydrate selon les méthodes courantes. On rectifie le produit sous vide à 58-60°C sous 0,3 mm de Hg. 35 EXEMPLE 3. On traite la l-amino-4-méthylpipérazine avec un excès d'anhydride acétique pendant environ 3 heures et, après avoir éliminé 71 19538 9 2100709 l'anhydride acétique en excès sous vide, on la traite avec de l'eau, en effectuant une neutralisation avec du carbonate de sodium. On concentre ensuite la couche aqueuse sous vide, en éliminant par filtration les sels minéraux qui précipitent. 5 On lave le résidu final avec de l'éther diéthylique et on le cristallise ensuite à partir de benzène. Pt P.148-150°C. EXEMPLE 4. 10 4-Benzylidèneamino-l-méthylpipérazine. On dissout 3,8 g de 4-amino-l-méthylpipérazine dans l'eau et, après avoir amené la solution à pH 4 par addition d'acide chlorhydrique, on ajoute 3*15 g de benzalhéhyde. On maintient le mélange pendant 15 minutes à 50°C et, ensuite, après 15 refroidissement, on le lave avec de l'éther diéthylique. La couche organique fournit par évaporation la 4-benzylidèneamino-l-méthyl-pipérazine. Pt P.56-57°C. 20 EXEMPLE 5. 3-Méthyl-8-propionamido-3, 8-diazabicyclo^, 2, l7ootane. On prépare ledit composé selon le mode opératoire décrit à l'exemple 3, en utilisant la l-amino-4-méthylpipérazine. Rendement î 74 % 25 Pt F.133-135°C. EXEMPLE 6. 8-amlno-3-propionjrl-3,8-diazabicyclo/3,2, l7octane. A 68 ml de HCl à 18 %, refroidi à 0°C, on ajoute 30 goutte à goutte 18,6 g de 3-propionyl-3,8-diazabicycloi/3,2,3^7octane. En maintenant la température entre 0 et +5°C, on ajoute lentement, goutte à goutte, 9,6 g de nitrite de sodium dissous dans 15 ml d'eau. On abandonne le mélange pendant 3 heures en l'agitant à la température ambiante. Après cela, on ajoute 4,8 g supplémentaires 35 de nitrite de sodium et 20 ml de HCl à 18 %. On abaidonne le mélange pendant 3 heures supplémentaires en l'agitant à la température ambiante, puis on le rend, alcalin avec NaOH à 30 % et on l'extrait jusqu'à épuisement avec de l'éther. On sèche les extraits éthériques sur Na2S0^ et on les évapore à siccité: en obtenant un résidu que 71 19538 10 2100709 l'on distille. Pt Eb. (sous 0,5 mm de Hg) : 150-153°C. Rendement 83 A une suspension de 35 g de Zn en poudre (0,508 mole) dans 50 ml d'eau, et en maintenant la température entre +10 et +20°C, on ajoute goutte à goutte 25 g (0,127 mole) 5 du dérivé nitrosé, préparé selon le mode opératoire décrit ci-dessus, dans 42 ml (0,72 mole) d'acide acétique. On abandonne le mélange pendant 1 heure en l'agitant à la température ambiante. Ensuite, on élimine par filtration le précipité insoluble, en le lavant sur le filtre avec une petite quantité de HCl à 5 %„ On 10 rend le filtrat alcalin avec NaOH à 30 % refroidi, puis on l'extrait jusqu'à épuisement avec du chloroforme. Ensuite, on le sèche sur NagSO^ et on l'évaporé à siccité. On distille le résidu en obtenant 16 g de 8-amino-3-propionyl-3,8-diazabicyclo^, 2,jj^octane. Pt Eb. 145°C sous 0,6 mm de Hg. 15 EXEMPLE 7. 3-amino-8-propionyl-3,8-diaza.bicyclo|/3,2, l7octane. On prépare ledit composé en opérant comme à l'exemple 6 et en utilisant le 8-propionyl-3,8-diazabicyclo^, 2, iToctane 20 au lieu du 3-propionyl-3,8-diazabicyclq/3,2,l7octane. On obtient le 3-amino-8-propionyl-3,8-diazabicyclo/3, 2, l/octane avec un rendement de 61 %. Pt Eb. 110°C sous 0,6 mm de Hg. 25 EXEMPLE 8. iz&®i52:^I^®S5ïïl2,6-diméth2l£igérazine. En opérant comme décrit dans la première partie de l'exemple 6, et en utilisant comme substance de départ la 4-benzyl-2,6-diméthylpipérazine au lieu du 3-propionyl-3,8-diazabicyclo 30 ,/3,2,^octane, on obtient la 4-benzyl-2,6-diméthyl-l-nitrosopipé-razine, avec tm rendement de 77 %. Pt Eb. 140-145°C sous 0,6 mm de Hg. On ajoute, goutte à goutte, 24 g du dérivé nitrosé dans 50 ml de tétrahydrofurane anhydride à une suspension de 9,5 g 35 d'hydrure de lithium-aluminium dans J00 ml de tétrahydrofurane, en maintenant la température à environ 45°C. On porte ensuite la suspension au reflux pendant 7 heures, on la refroidit à -5°c et 71 19538 ii 2100709 on la traite avec 30 ml d'eau. On sèche la couche organique sur Na?S0^ et, après évaporation du solvant, on distille le résidu à 120-122°C/0,8 mm de Hg. Rendement 18,7 S» 5 EXEMPLE Q. ll^!Bî:22l^zÉthylpipérazine . On prépare ledit composé selon le mode opératoire de l'exemple 8. Pt Eb. 75-80°C sous 15 mm de Hg. 10 EXEMPLE 10. On prépare ledit composé selon le mode "opératoire de l'exemple 8. 15 Pt Eb. 96-98°C sous 15 mm de Hg. EXEMPLE 11." On traite 15 g de 1-nitrosopipérazine dans 100 ml 20 d'éthanol à 95 % pendant 1 heure avec 29 g de 3-chloropropylbenzëne en présence de 30 g de bicarbonate de sodium. Après avoir éliminé le précipité minéral par filtration, on évapore la solution et on dissout le résidu dans du chloroforme. On chromatographie la solution sur une colonne de gel de silice (éluant ï CHCI^ïCH^OH 99,5: 25 0,5) en obtenant 7 g du dérivé nitroso. On traite le dérivé nitroso avec de l'hydrure de lithium-aluminium selon l'exemple 8 en obtenant 3,8 g de l-amino-4-(3-phénylpropyl)-pipérazine. Pt Eb. 117-120°C/0,2 mm de Hg. On peut préparer les composés de l'exemple 8 selon le 30 mode opératoire précités mais en utilisant comme substances de départ la l-nitroso-2,6-diméthyl-pipérazine et le bromure de benzyle. EXEMPLE 12. On prépare ledit composé selon le mode opératoire de l'exemple 11. Pt Eb. 108-110°C/0,6 mm de Hg. 71 19538 12 2100709 50 REVENDICATIONS 1. Compod-tions pharmaceutiques, notamment destinées au traitement des maladies virales, caractérisées en ce qu'elles contiennent comme constituants actifs un ou plusieurs composés de formule générale suivante : X=N- W - R 10 dans laquelle R est choisi parmi un atome d'hydrogène, un radical ■J a -r h alkyle inférieur, acyle, arylalkyle; R , R , et R sont choisis chacun indépendamment parmi un atome d'hydrogène et un 15 radical alkyle inférieur; chacune des paires R1 et R2, considérés "3 4 ensemble, ou r et R , considérés ensemble, peut également représenter un radical alkylène inférieur pontant le noyau pipérazine; X peut être choisi parmi les groupes suivants : Hg, benzylidène, et (H, acyle); lesdits composés pouvant être sous la forme de 20 leurs selB d'addition d'acides pharmaceutiquement acceptables. 2. Procédé pour préparer une composition selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on mélange un ou plusieurs constituants actifs définis comme spécifié dans ladite revendication 1, avec un véhicule pharmaceutique convenable. 25 3. Procédé pour préparer les dérivés d'amino-pipérazine de formule générale suivante : h - R dans laquelle R est un radical phényl-alkyle inférieur, R^, R^, 35 R^, R^ sont chacun choisis parmi un atome d'hydrogène et un radical alkyle inférieur, ledit procédé consistant en ce qu'on traite un dérivé nitroso de formule générale suivante ; 2100709 dans laquelle R^, R^ sont définis comme spécifié ci-dessus avec un halogénure de phényl-alkyle inférieur dans un solvant organique et on soumet le groupe nitroso du composé obtenu à une hydrogénation en un groupe amino selon des modes opératoires connus. 4. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le constituant actif est la 1-benzylidène-pipérazine. 5. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le constituant actif est la 1-aminopipérazine. 6. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le constituant actif est la l-acétamido-4~méthylpipéra-zine » 7. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le constituant actif est la 4-benzylidèneamino-l-méthyl-pipérazine. 8. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le constituant actif est le 3-nréthyl-8=propionamido-3,8-diazabicyclo Z~3,2,l/ octane. 9. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le constituant actif est le 8-amino-3-propionyl-3,8-dia-zabicyclo /~3*2,1J octane. 10. Composition selon la ^revendication 1, caractérisée en ce que le constituant actif est le 3-amino-8-propionyl-3.,8-dia-zabicyclo /~3,2,l7 octane. 11. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le constituant actif est la l-amino-4-benzyl-2,6-dimé-thylpipérazine. 12. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le constituant actif est la l-amino-4-éthylpipérazine. 13. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le constituant actif est la l-amino-4-propylpipérazine. 71 19538 71 19538 H 2100709 14. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le constituant actif est la l-aroino-4-(j5-phénylpropyl)-pipérazine. 15. Composition selon la revendication 1, caractérisée 5 en ce que le constituant actif est la l-amino-4-phénéthyl-pipéra-zine. 16„ Formes pharmaceutiques en vue de l'administration des compositions selon la revendication 1, par voie orale, paren-térale et intranasale, notamment comprimés et capsules contenant 10 100 mg - lg de constituant actif; solutions, suspensions et né-bulisats à 5 g de constituant actif pour 100 ml de composition. 17. Compositions selon la revendication 1, caractérisées en ce qu'elles constituent des médicaments vérérinaires.