FR 2081380 A1 19711203 FR 7045662 A 19701217 70 45662 2081380 La présente invention concerne de nouveaux dérivés de l'acide pénicillanique, un procédé pour leur préparation, et leurs utilisations thérapeutiques» Les nouveaux dérivés de l'acide pénicillanique selon l'inven-5 tion répondent à la formule générale. R: 10 r4' R 'N- -NH CH CH 0 TC 0 o=c- -N- CH_ CH., (I) -CH- -C00H 15 20 dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un groupe alky-le inférieur (par exemple méthyle, éthyle, propyle, n- ou iso-buty-le, pentyle ou hexyle), R représente un groupe alkyle inférieur ou aryle (par exemple phényle, biphényle ou naphtyle, un groupe aryloxy (par exemple phénoxy ou naphtoxy), un groupe arylthio ou lac-tame cyclique (par exemple pyrrolido-2-one-5-yle), ou un groupe hétérocyclique aromatique relié par un atome de carbone (par exemple pyridyle, quinoléyle, pyrazinyle, thiényle, thiazolyte ou furyle), il . v Rv et R représentent chacun un atome d hydrogéné ou un groupe alkyle inférieur, aryle, aroyle ou cycloalkyle (par exemple cyclo-pentyle, cyclohexyle ou cycloheptyle), ou un groupe sulfonyle ou carbonyle substitué (par exemple un groupe benzène sulfonyle qui 25 peut être substitué par un groupe alkyle sur le noyau benzénique, entre autres un groupe p-tolylsulfonyle), ou bien R^ et R^ forment ensemble et avec l'atome d'azote auquel ils sont reliés un noyau hétérocyclique qui peut contenir un autre hétéroatome choM dans le groupe formé par l'oxygène, l'azote et le soufre (de préférence 30 un noyau .hétérocyclique monocyclique contenant 5 ou 6 atomes dans le cycle, par exemple un groupe pyrrolidino, pipéridino ou morpho- lino), les groupes éventuellement représentés par R , R£ 3 4 R et R pouvant porter un ou plusieurs substituants choisis par exemple parmi les atomes d'halogènes et les groupes nitro, alkyle, alkoxy, 35 ester et amide- L'invention comprend également les sels, par exemple les sels de métaux alcalins, de métaux alcalino-terreux et d'aminés, ainsi que les esters, de ces acides pénicillaniques„ 10 70 45662 2081380 Conformément à une caractéristique de l'invention, les nouveaux dérivés de l'acide pénicillanique répondant à la formule I ci-dessus sont préparés par un procédé qui consiste à faire réagir un ester d'acide 6-isocyanatopénicillanique répondant à la formule; Q CH? OCN-—-CH—CH c' (II) | I CH3 0=C——N———CH— COOE (dans laquelle E représente un radical organique facile à éliminer et à remplacer par un atome d'hydrogène avec fonnation d'un groupe carboxyle libre) avec un composé de formule générales 15 r1 I 5 ;n—c— c-—R (III) 20 R2 1 2 "5 4 dans laquelle R , R , R^ et R ont les significations indiquées ci- k T TT dessus et R-^ représente le groupe carboxyle ou un groupe Me ou Me -X dans lequel Me représente un atome métallique, l'exposant représente la valence de l'atome de métalj le métal peut être par exemple le 25 sodium, le lithium ou le magnésium, et X représente un atome d'halo-gènej après quoi, si on le désire, on libère l'acide de formule I à partir de l'ester obtenu, par des procédés connus en soie Les composés acides, obtenus dans ces conditions peuvent être eux-mêmes convertis par les procédés connus en soi en .leurs sels 30 de métaux alcalins et alcalino-terreux par exemple ou mis à réagir avec une quantité équimoléculaire d'une aminé avec formation de sels d! aminés de l'acide,, Les sels d'aminés qu'on peut préparer dans ces conditions peuvent être primaires, secondaires ou tertiaires dérivant d'aminés aliphatiques, cycloaliphatiques ou hétérocycliques, 35 par exemple des sels de trialkylaminé, de cyclohexylaminé, de dicy-clohexylaminé, de .dibenzylamine, de N-éthylpyridine, de N-éthylpi-péridine et de procaïne,, De préférence, le groupe E de la formule II doit répondre aux conditions suivantes? 70 45662 3 2081380 10 15 20 25 30 (a) 11 doit pouvoir être introduit facilement dans le groupe carboxyle de l'acide 6-aminopénicillanique de formules en évitant les conversions indésirables , par exemple l'ouverture du cycle p-lactame du squelette de l'acide pénicillanique; (b) il doit être facile à éliminer pour permettre la reconstitution de la fonction carboxylique sans toucher au squelette de l'acide pénicillanique, et (c) il doit conférer à l'ester lui-même une stabilité satisfaisante. Parmi les groupes appropriés représentés par le symbole E, on peut citer par exemple: (1) des groupes silyle tels que ceux répondant à la formule générale (R)^Si- dans laquelle R représente un radical hydrocarboné tel qu'un radical alkyle inférieur, aryle (de préférence phényle) ou aralkyle (de préférence phénylalkyle inférieur)„ On notera que l'on préfère les esters silyques répondant à la formule II qui s'hydrolysent facilement et régulièrement et en particulier les esters dans lesquels E est un groupe trialkylsilyle, plus spécialement le groupe triméthylsilyle. Le groupe ester silylique peut être facilement hydrolysé par addition d'alcools ou d'eau, (2) un groupe phénacyle éventuellement substitué sur le cycle benzénique (de préférence en position para) par un halogène, par exemple le groupe p-bromophénacyle. (3) un groupe benzyle ou benzhydryle. (4) un groupe saccharamido, succinimido ou phtaliraido,, La réaction entre un ester d'acide 6-isocyanatopénicillanique et un acide de formule III dans laquelle R représente le groupe carboxyle s'effectue de préférence dans un milieu solvant organique inerte, par exemple dans le diehlorométhane, le toluène ou le benzonitrile» On opérera avantageusement en présence d'une petite proportion d'une base organique comme la pyridine, servant de catalyseur. Ce mode opératoire est particulièrement avantageux lorsque (IV) 0=C— CH—COOH 70 45662 2081380 le réactif acide présente dans l'eau un pK d environ + ,5 ou Q. moinso Le groupe ester du produit obtenu peut être éliminé par hydrolyse, par exemple à l'aide d'acétone aqueuse lorsque le résidu estérifiant est un groupe silyle» 5 La réaction entre un ester d'acide 6-IsocyahatopénIcillanique et un composé organométallique de formule III dans laquelle est t tt - un groupe Me ou Me -X* tel que défini ci-dessuss est effectuée dans un milieu solvant organique anhydride dans des conditions favorables à une réaction de Grignardj.de Reformatsky ou analogue. 10 peut parvenir à de bons résultats par utilisation de composés de Grignard ou d'organo-lithium avec un mode opératoire consistant à ajouter un isocyanate de formule II dissous dans un solvant approprié (par exemple le toluène) à une solution en général très froide du composé de Grignard ou de lithium dans un solvant tel que le 15 tétrahydrofuranne, l'éther 2,2!-=diméthoxy-diéthylique ou le 1,2- diméthoxyéthane, auquel on peut ajouter lorsque c'est nécessaire une quantité déterminée au préalable d'un solvant neutre fortement bipolaire comme la tétraméthylurée., la N-méthylpyrrolidone ou plus spécialement 11hêxaméthylphosphonotriamide. Ce mode opératoire 20 convient tout particulièrement lorsqu'on fait réagir des réactiffe de Grignard de formule III avec des isocyanates. On a constaté par l'expérience qu'il était plus facile de trouver des conditions appropriées à une conversion satisfaisante avec l'a-Li-ditriméthylsilyl-phénylacëtamide comme réactif organo-25 métallique qu'avec des réactifs préparés à partir du mono-triméthyl-silylphénylacétamide (obtenu quantitativement par silylation directe du phénylacétamide) et deux équivalents dë lithium-butyle ou à partir du phénylacétamide et de deux équivalents de lithium-butyle . Les esters de l'acide 6-isocyanatopénicillanique de formule II 30 peuvent être obtenus par réaction du phosgène avec un ester de l'acide 6-aminopénicillanique répondant à la formules H2N CH 35 o=c - 70 45662 5 2081380 dans laquelle E a la signification indiquée ci-dessus,,ou avec un dérivé d'un tel ester dans lequel l'un des atomes d'hydrogène du groupe amino a été remplacé par un groupe facile à éliminer tel qu'un groupe silyle (R)-^Si-(où R a la signification indiquée 5 ci-dessus), de préférence triméthylsilyle, dans un solvant organique anhydre inerte de manière à convertir le groupe amino ou amino substitué en groupe isocyanato sans toucher au noyau bicyclique. Les solvants organiques préférés sont le toluène, le dichloromé-thane et leurs mélanges. Pour faciliter la réaction, on peut ajou-10 ter au mélange de réaction une base organique qui neutralise l'HCl formé; on utilisera avantageusement à cet effet des aminés tertiaires comme la triéthylamine et la N-éthylpipéridine» La réaction de l'ester d'acide 6-aminopénicillanique avec le phosgène' doit être effectuée à température très basse; on observe-ra avantageusement des températures de -20°C ou au-dessous et de préférence de -40°C, On évite ainsi entièrement ou pratiquement entièrement la destruction du noyau bicyclique. Les esters de formule VI, ou leurs dérivés substitués à l'azote, peuvent être obtenus par réaction de l'acide 6-aminopéni-20 cillanique (ou d'un tel acide substitué sur le groupe amino) avec un alcool E-OH ou un ester de formule E-Hal représente un atome d'halogène (de préférence de chlore) et E a la signification indiquée ci-dessus, dans un solvant organique inerte^tel qu'un hydrocarbure aromatique (comme le toluène) et, lorsqu'on utilise un réactif 25 halogéné, en présence d'un agent neutralisant les acides,tel qu'une aminé tertiaire. Les nouveaux dérivés de l'acide pénicillanique répondant à la formule générale I possèdent des propriétés antibiotiques qui les rendent utilisables en puissance comme médicaments humains et vété-20 rinaires et comme additifs à l'alimentation animale. On les utilise de préférence en thérapeutique sous la forme de sels non toxiques, par exemple de sels de sodium, de potassium ou de calcium. Parmi les autres sels susceptibles d'être utilisés dans des préparations pharmaceutiques, on citera les sels non toxiques, et qui cristallises sent correctement, de bases organiques telles que des aminés, par exemple des trialkylamines, la procaîne et la dibenzylamine. Lorsqu'on les utilise dans des applications thérapeutiques, les composés de formule I peuvent être tels quels ou à l'état de préparations pharmaceutiques du type couramment utilisé pour l'adminis 70 45662 6 - 2081380 tration des 'substances à activité thérapeutique et spécialement des antibiotiques. L'invention comprend donc également des compositions thérapeutiques contenant comme constituant actif un au moins des dérivés nouveaux de l'acide pénicillanique selon l'inven-5 tion en association avec un véhicule acceptable en pharmacie» Les types préférés de préparations thérapeutiques sont ceux qui conviennent à l'administration orale et spécialement les capsules» Ces capsules sont de préférence constituées d'une matière absor-. bable comme.la gélatine, et peuvent contenir la substance active 10 seule ou en mélange avec un diluant solide ou liquide» Elles peuvent également contenir la substance active fixée sur un véhicule ou incorporée dans un véhicule en sorte que la libération du composant actif se prolonge pendant une durée étendue après l'ingestion» Les préparations liquides peuvent se trouver sous la forme 15 de solutions convenant à l'administration parentérale» Les exemples suivants illustrent 1'invention sans toutefois la limiter; dans ces exemples les indications de parties et de % s'entendent en poids sauf mention contraire» EXEMPLE=I 20 Préparation du sel de sodium de l'acide 6-(q-N,N-diéthylcarbamoyl-benzyl)c arbonamido-pénic illanique » 30 Dans un ballon de 100ml à 3 tubulures, on prépare en atmosphère d'azote une solution de chlorure d'isopropylmagnésium par réaction de 0,5g (21 millimoles) de magnésium avec 1,7g (21,6 millimoles) de chlorure d'isopropyle dans 25 ml d'éther ëthylique» On ajoute goutte à goutte au mélange, sous agitation, en refroidissant au 35 bain de glace, une solution de 3*82g (20 millimoles) de N,N-diéthyl-benzylcarbonamide dans 25 ml d'éther éthylique» Il se dégage une forte quantité de chaleur et une huile se sépare de la solution» On retire le bain de glace et on agite le mélange de réaction pen 70 45662 7 2081380 dant 30mn sous atmosphère d azote. On distille 1 éther éthylique et on ajoute au résidu 20ml d ether 2,2f-diméthoxy-diéthylique anhydre. Il se forme une suspension de couleur jaunâtre qu'on refroidit à 0°C; on ajoute alors 5 ml d"hexaméthylphosphonotria-5 mlde. En poursuivant l'agitation du mélange de réaction, on le refroidit à -60°C environ., On ajoute à la même température, en 35mn, une solution de 4,05g (12,9 millimoles) de 1!ester triméthylsilylique de l'acide 6-lsocyanatopénlcillanIque dans 15ml de toluène. On obtient, une solution pratiquement limpide. Un chro-10 matogramme en couche mince indique que la réaction s'est terminée immédiatement après l'addition et que 1 *isocyanate a été converti à 70/é environ en le composé recherché «On coule le mélange de réaction dans de l'eau glacée tamponnée à pH 7 à ifaide d'un phosphate. A ce pH on extrait le mélange à 3 reprises par un mélange 15 d'une partie d'éther éthylique et d'une partie d'acétate d'éthyle. On acidifie la couche aqueuse à pH 3>2 et on extrait à 3 reprises à l'aide d'un mélange d'une partie d'éther éthylique et d'une partie d'acétate d'éthyle. Le composé recherché est séparé entièrement de la couche aqueuse. Les couches organiques recueillies sont 20 lavées à 2 reprises avec une petite quantité d'eau glacée, séchées et concentrées en partie sous vide à 0°C. Dans la solution concentrée, on ajoute goutte à goutte une solution d'a-éthylcaproate de sodium dans l'acétate d'éthyle. On obtient un précipité incolore qu'on sépare par filtration, qu'on lave à 1'éther éthylique froid 25 et qu'on sèche sous vide. Rendement : 2,97g (environ 50$) du produit de formule ci-dessus. Les spectres infrarouge et de résonance paramagnétique nucléaire confirment la structure envisagée. Le spectre de résonance paramagnétique nucléaire est analysé dans l'exemple qui suit. 30 exemple_ii Préparation du sel de sodium de l'acide 6-(a-NjH-dléthylcarbamoyl-benzyl) carbonamido-pénieillanique. On mélange dans un ballon de 5°ml à 3 tubulures équipé d'un thermomètre, d'une tubulure au travers de laquelle on introduit 35 de l'azote et d'une tubulure de sortie reliée à une petite tubulure plongeant dans un tube à essais contenant de l'eau de baryte 2,37g (7,5 millimoles) de l'ester triméthylsilylique de l'acide 6-isocyana-topénicillanique, 1,77g (7,5 millimoles) d'acide a-diéthylcarbamoyl- 70 45662 s 2081380 phénylacétique, 0,05 mole de pyridine et 25ml de dichlorométhane0 En agitant à température ambiante, il se forme une solution limpide et il se dégage une quantité importante d'anhydride carbonique. La solution vire peu à peu au pourpre. La formation d'anhydri-5 de carbonique cesse au bout de 4 heures. On refroidit alors la solution à -8°C et on ajoute sous agitation 10 ml d acétone aqueuse. On coule le mélange dans l'eau glacée et on ajoute simultanément de la soude caustique diluée de manière à maintenir le pH à 7,0. On transfère la totalité du mélange dans une ampoule à décanter. On 10 sépare la couche de dichiorométhane. On lave la couche aqueuse à 3 reprises avec une petite quantité d'éther éthylique. On règle le pH à 3*9 par addition d'HCl dilué. On extrait la solution aqueuse trouble à 4 reprises par du toluène en faisant suivre d'un nouveau réglage du pH à 3,2. On extrait à nouveau la solution 15 aqueuse à 3 reprises par l'éther éthylique pour compléter le transfert de la pénicilline dans 1'éther éthylique. On sèche les extraits recueillis et on les concentre sous vide à petit volume. On ajoute à la solution concentrée une solution de 7S5 millimoles d'a-éthyl-caproate cb sodium dans l'éther éthylique et une pet'ite quantité 20 d'acétate d'éthyle. Il se forme un précipité incolore hygroscopi-que. On recueille le précipité par filtration, on le lave à l'éther éthylique et on le sèche sous vide. Rendement s l,5g° Un chromato-gramme en couche mince et un spectre de résonance paramagnétique nucléaire indiquent que la pureté du produit final spécifié ci-dessus 25 est d'environ 90$. Les impuretés consistent principalement en sel de sodium de l'acide a-diéthylcarbamoyl-phénylacétique. Analyse du spectre de résonance paramagnétique nucléaire du produit final dissous dans l'hexadeutéro-diméthylsulfoxyde (60 Me, valeurs de é en ppm, étalon interne s tétraméthylsil-ane ) ; ■^0 (CH2)-CH"2 1,0 (trlplet, J^6,8 eps, 6 protons) Cj-CH^ 1*5* 1s6 (doublet, et singlet élargi superposé, 6 protons) N-CHg 3*0— ?3?6 (4 protons) Cg-H 5,98 (1 proton) ■55 ca~H 5*02 (1 proton) C5-H st Cg-H . 5,25- -*5,60 (2 protons) CgH^ et N-H environ 7*^ (6 protons) 70 45662 9 2081380 EXEMPLE^III Préparation du sel de sodium de l'acide 6-(a-N-isopropylcarba-moylbenzyl)carbonamido-pénlcillanique » CH-NH-C-CH-C-NH-CH— CH C (CH, )„ |( | n I | J 5 2 0 0=C N CH-COOH 10 On introduit dans un ballon de 100 ml à 3 tubulures 1,65g de l'acide a-N-isopropylcartamoyl-phénylacëtique, 2,.57g de l'ester triméthylsilylique de l'acide 6-isocyanatopénicillanique, une petite quantité de pyridine et 55 ml de benzonitrile, La réaction est effectuée à température ambiante sous atmosphère d'azote. Au bout 15 de 6 heures, la réaction est terminée et le mélange de réaction est refroidi à -5°C, On ajoute de 1:acétone aqueuse afin d'hydrolyser l'ester silylique, On soumet le mélange aux opérations usuelles, y compris des extractions à pH 7 et 5,2, On obtient une solution de la pénicilline produite dans l'éther éthylique. On évapore la 20 solution sous vide, on reprend l'huile résiduelle dans une petite quantité d'acétate d'éthyle, on ajoute un léger excès (par rapport à la quantité équimoléculaire) d'a-éthylcaproate de sodium dissous dans l'acétate d'éthyle. La substance solide incolore qui se sépare est recueillie par filtration, lavée à l'acétate d'éthyle et à 25 l'éther éthylique et séchée sous vide. Rendement s 2,2g„ La structure du produit final, de formule cl-dessus, est confirmée par le spectre de résonance paramagnétique nucléaire du composé dissous dans l'hexadeutéro-diméthylsuifoxyde. Selon la chromatographie en couche mince et le spectre de résonance paramagnétique nucléaire, 30 la pureté du produit final est d'environ 80$, Les Impuretés consistent principalement en sels de sodium, de l'acide a-N-isopropylcar-bamoyl-phénylacétlque et de l'acide a-éthylcaproïque, EXEMPLE_IY Préparation du sel de sodium de l'acide 6-(a-carbamoylbenzyl) 55 carbonamido-pénicillanique. H_ N-C-CH-C-NH-CH CH^ ^C(CH^) 2 » i tt | i i 3 CL 0=0 N — CH-C00H 70 45662 10 2081380 Par un mode opératoire analogue à celui de l'exemple III, on fait réagir 6,3g de l'ester triméthylsilyliquecfe l'acide 6-iso-cyanatopénicillanique avec la quantité équivalente d'acide a-carba-moyl-phénylacétique en présence d'une petite quantité de pyridine, 5 On utilise comme solvant 63 ml de benzonitrile anhydre. Après agitation du mélange de réaction pendant 6 heures, on refroidit à -5°C, On ajoute sous agitation de l'acétone aqueuse puis on coule le mélange dans l'eau glacée en ajoutant simultanément de la soude caustique diluée pour maintenir le pH à 6,5»On- ajoute de l'éther 10 éthylique, on sépare les couches, on ajoute de l'éther éthylique à la couche aqueuse en agitant et on acidifie le mélange à pH 2,5 par addition d'HCl dilué. Après séparation des couches, on extrait à nouveau la couche aqueuse à 2 reprises par l'éther éthylique et 1 fois par une petite quantité d'acétate d'éthyle. On lave les cou-15 ches organiques recueillies à 2 reprises avec de l'eau glacée, on sèche sur sulfate de magnésium, on filtre et on concentre sous vide. On dissout le résidu dans 50 ml d'acétate d'éthyle. On ajoute à la solution, à 0°C, sous agitation vigoureuse, une solution de 2,5g d'a-éthylcaproate de sodium dans 65 ml d'acétate d'éthyle, 20 II se forme un précipité semi-solide. Après décantation de la couche surnageante, on mélange le précipité avec une petite quantité d'acétate d'éthyle anhydre, ce qui provoque une précipitation complète du produit. On recueille le précipité par filtration, on le lave à l'acétate d'éthyle anhydre et à l'éther éthylique et on 25 le sèche sous vide. Rendement s 4,9g = La pureté du sel de sodium du produit final de formule ci-dessus, conformément à un chromato-gramme en couche minee et au spectre de résonance paramagnétique nucléaire, est d'environ- 90$, Analyse du spectre de résonance paramagnétique nucléaire JO du produit final dissous dans D^O (60 Me, valeurs de 6 en ppm, étalon interne s acide 2,2-dimétyl-2-silapentane-5-sulfonique)? CH3 1,50; 1,5^; 1,57; 1,63; (6 protons) C2-H 4,29; 4,33 (1 proton) C -H 4,78; 4,80 (1 proton) 35 Cj--H et Cg-H 5,37—^5*65 (multiplet, 2 protons) CgH^ " 7*45 (5 protons) Analyse partielle du spectre Infrarouge (disque de KBr, valeurs en cm"1)s 70 45662 ii 2081380 10 20 environ 3^00 OH et/ou NH 3070 et environ 3035 =C-H 1765 C^O p-lactame environ I69O et environ 1675 C=0 amide 1610 c=0 ion carboxylate EXEMPLE_V Préparation de l'acide 6-(a~carbamoylphénoxyméthyl)carbonamido-pénicillaniqueo H0 N-C-ÇH-C-NH-CH CH C(CH,)o n ? ô I I I 3 u 1 u 0=C- N —CH-COOH 15 Par un mode opératoire analogue à celui de l'exemple IV, on fait réagir l'ester triméthylsilylique de l'acide 6-isocyanato-pénicillanique avec la quantité équivalente d'acide a-carbamoyl-phénoxyacétique dans le benzonitrile en présence d'une petite quantité de pyridine. Au bout de 5 heures, la réaction est terminée; on hydrolyse soigneusement l'ester silylique par addition d'acétone aqueuse. On traite le mélange par les opérations usuelles, y compris des extractions à pH 6,5 et 3»°. On obtient une solution de la pénicilline produite, de formule ci-dessus, dans un mélange de 2 parties 25 d'éther éthylique et 1 partie d*acétate d'éthyle» On concentre cette solution à petit-volume sous vide. L'addition goutte à goutte d'éther éthylique à la solution, sous agitation ménagée, provoque la formation d'un précipité solide. La structure du produit final est confirmée par les spectres infrarouge et de résonance parama-•50 gnétique nucléaire. EXEMPLE_VI Préparation de l'acide 6-(a~4'-morphollnocarbonylbenzyl)carbonamldo-pénlcillanique. S\ 35 w ôLô 1 1 1 32 0= C N CH-COOH » 70 45662 12 2081380 On fait réagir 3*78g (12 millimoles) de l'éther triméthylsilylique de lracide 6-isoeyanatopéniGillanique avec 3,0g (12 millimoles) d'acide of-41 -morpholinocarbonyl-phénylacé-tique dans le benzonitrile en présence de 0,1g de pyridine. La 5 réaction est effectuée à température ambiante; elle est terminée au bout de 4 heures» On ajoute alors au mélange de réaction, à 0°C, une petite quantité d'acétone aqueuse et on coule le mélange sous agitation dans un bain d'eau glacée et d'éther éthylique, en ajou-, tant simultanément de la soude caustique diluée de manière à main-10 tenir le pH à 6,8. Après séparation, on lave la couche aqueuse avec de l'éther éthylique et on règle le pH à 3 par addition d'HCl dilué» Comme les valeurs de Rf sur les chromâtogrammes en couche mince de la pénicilline recherchée et de la N,N'-di-6-pénicillanyl-urée (probablement présente en produit secondaire) sont égales dans 15 plusieurs éluants, on soumet la solution aqueuse à line extraction fractionnée. On extrait la solution à 8 reprises à l'aide de quantités relativement faibles d'unnélange de 3 parties d'éther éthylique et 1 partie d'acétate d'éthyle. On lave les couches organiques combinées avec une petite quantité d'eau glacée, on sèche sur 20 sulfate de magnésium, on filtre et on concentre sous vide. On ajoute lentement à la solution concentrée de l'éther éthylique, ce qui provoque la formation d'un précipité cristallin. On recueille le précipité par filtration, on le lave à l'éther éthylique et on le sèche sous vide. Rendement ; 1,0g. Les spectres infrarouge ët de 25 résonance paramagnétique nucléaire indiquent que ce produit est un mélange des isomères D et L de la pénicilline recherchée,- de formule ci-dessus. La pureté du produit dépasse 95%« La couche aqueuse qui, conformément à un -chromatogramme en couche mince, pourrait contenir encore des quantités importantes de la pénicilline, est ■50 extraite une fois par l'acétate d'éthyle à pH 3» A partir de cet extrait, on obtient un second jet de 0,25g de la pénicilline par cristallisation. Ce produit est également pratiquement pur. Dans une expérience Identique, on obtient de petites quantités de l'isomère D ou de l'isomère L de la pénicilline à y- l'état cristallin pur. Ce résultat est obtenu par extraction partielle de la couche aqueuse à pH 3 à l'aide d'éther éthylique seul. Analyse du spectre de résonance paramagnétique nucléaire des produits finals dissous dans CDCl^ et une petite proportion 70 45662 13 2081380 d'hexadeutéro-diméthylsulfoxyde (60 Me, valeurs de 6 en ppm, étalon interne s tétraméthylsliane); 15 C-x-CH, 3 3 n(ch2)2+o (ci^)2 c2-h c -h a c5-h et cg-h 10 (multiplets, J-^4,0 et J2^ 8,0 eps) C6H5 n-h (doublets, 8,0 eps Mélange DL 1,58 + 1,68 et 1,68 (6p) 3,0 *4,0 (8 p) 4,40 et 4,46 (1 p) 4,84 et 4,89 (1 p) '5,45- >5,75 (2 p) environ 7,4 (5 p) 9,32 + 9,45 et 8,58 + 8,70 (environ 0,8p) Isomère (D ou L) 1,59 + 1,68 (3 p) 3,0 »4,0 (8 p) 4,39 (l P) 4,84 (1 p) 5j45«—»5,72 (2 p) environ 7,4 (5 p) 9,20 + 9,34 (environ 0,8p) EXEMPLE_VII Préparation du sel de sodium de l'acide 6-/a-(N-p-tolylsulfonyl) , carbamoylbenzyl/carbonamido-pénicillanique. 20 25 30 35 ch y \ 3 s-nh-c-ch-c-nh-ch- « I tî 0/^0 Q 0 o=c ■ ■ch I -N - C(CRj)2 ch-c00h Par un mode opératoire analogue à celui de l'exemple précédent, on fait réagir 3,14g de l'ester triméthylsilylique de l'acide 6-isocyanatopénieillanique avec 3,35g d'acide a-(N-p-tolyl-sulfonyl)carbamoylphénylaeétique dans 30 ml de benzonitrile en présence de 0,1 ml de pyridine„ La réaction est terminée au bout de 5 heures environ» On traite le produit de réaction comme décrit dans les exemples qui précèdent » La pénicilline ei extraite à l'aide d'un mélange de 9 parties d'éther éthylique et 1 partie d'acétate d'éthyle à pH 4,0» On obtient le sel de sodium du dérivé de pénicilline de formule ci-dessus par addition d'une solution d'a-éthyleaproate de sodium à la solution eonce1^rée dans l'acétate d'éthyle» On sépare 3,0g du produit final» La chromatographie en couche mince et le spectre de résonance paramagnétique nucléaire montrent que la pureté du produit final"est d'environ 85$» 70. 45662 14 2081380 Analyse partielle du spectre infrarouge; du produit final (disque de KBr, valeurs én cm"1)s • 3450 ' NH . environ 3065, environ 3042 =CH 5 1765 C=0 P-lactame 1660 C=0 amide environ 1605 C=0 ion carboxylate environ 1515 NH def» 1493 C=C aromatique 1G environ 1315, 1138 probablement S02 760, 660 modèle de substance aroma tique» Préparation de l'acide 6-/5-(2'-pyridyl)carbamylbenzyl7carbonamido-^ pénicillanique à l'aide du N-(2)-pyridyl-benzylcarbonamide C^N-dilithiéo 20 25 x. -NH-C-CH-C-NH-CH-CH ^C(CH,)0 \ / "°A ô I I I 3 2 0=C— N CH-COOH 30 35 A une solution de 1,0g (4,43 millimoles) de N-(2)-pyridyl-benzylcarbonamlde £~\2- (2 ' -phénylacétamido J-pyridine/dans 10ml de tétrahydrofuranne (distillé sur hydrure de lithium-aluminium), on ajoute goutte à goutte 3,0 ml d'une solution de lithium-n-butyle dans l'hexane (correspondant à environ 4,45 millimoles de lithium-butyle)„ Durant la lente addition de cette solution, effectuée en atmosphère d'azote sec, on maintient par refroidissement extérieur une température interne d'environ -20°Co A la solution limpide, légèrement brunâtre, obtenue, on ajoute à nouveau, goutte à goutte, 3,0 ml de la solution de lithium-n-butyle dans l'hexane, à la même concentration, à une température de -15 à -20°C„ La solution limpide, de couleur brun orangé, de 2-(2'-phénylacétamido)pyridine C,N-dilithiée dans le tétrahydrofuranne est agitée pendant encore 30mn à -20°C„ A cette solution, on ajoute goutte à goutte une solution de 1,32 g (4,2 millimoles) de l'ester triméthylsilylique de l'acide 6-isocyanatopénicillanique dans 15 ml de tétrahydrofuranne 70 45662 15 2081380 sec en 25mn environ à une température interne de -45 + 5°C. Il se forme au début de l'addition un précipité volumineux épais qui se redissout presque complètement par la suite. On poursuit l'agitation du mélange de réaction pendant j50 mn à la même température. 5 Un chromatogramme en couche mince du mélange de réaction indique qu'il s'est effectué une conversion de 40 à 50$ de l'isocyanate en la pénicilline recherchée» On coule le mélange de réaction dans l'eau glacée en ajoutant simultanément de l'acide chlorhydrique dilué pour maintenir le pH à 7 pendant toute la neutralisation;cnextrait 10 ens uite à pH 7 par l'acétate d'éthyle; cette extraction élimine des quantités considérables d ' impuretés de couleur jaune. On réalise une nouvelle purification de la couche aqueuse par extraction à l'aide d'une petite quantité d'acétate d'éthyle à pH 5, laquelle provoque une certaine perte du composé recherché. La cou-15 che aqueuse résiduelle est extraite à 2 reprises par l'acétate d'éthyle, 1 fois à pH 5 et 1 fois à pH 4,5. La chromâtographie en couche mince indique que les deux extraits constituent des solutions pratiquement pures de la pénicilline recherchée; on les combine donc et on les lave à 2 reprises à l'eau glacée; on sèche sur sul-20 fate de magnésium anhydre et on concentre sous vide à petit volume. L'addition d'éther de pétrole provoque la précipitation de la pénicilline à l'état de substance solide jaunâtre qu'on recueille par filtration et qu'on sèche sous vide. Rendement ; 800mg (environ 40$. La chromâtographie en couche mince, le spectre infrarouge et le 25 spectre de résonance paramagnétique nucléaire indiquent que la pureté du produit est d'environ 9°$, les seules Impuretés notables consistant en une certaine quantité d'eau et d'éther de pétrole entraînés. L'addition d'une solution d1a-éthylcaproate de sodium dans le propanol à une solution de 600mg du produit obtenu ci-dessus 30 dans 10ml d'acétate d'éthyle, suivie de l'addition de 40ml d'éther éthylique, donne 500mg du sel de sodium presque incolore à environ 90$ de pureté. Analyse du spectre de résonance paramagnétique nucléaire de l'acide 6-/â-(2'-pyridylîcarbamylbenzyl/carbonamido-pénicilla-35 nique dissous dans le deutérochloroforme (60 Me, valeurs de 6 en ppm, étalon interne s tétraméthylsilane)î C,-CH-* : 1>6 1,7 (doublet et singlet élargi superposé, 3 ^ 6 protons) 70 45662 16 2081380 10 Cg-H % 4,54 4j,58 (1 proton) Ca-H î 4,8 (doublet non résolu, 1 proton) Cpj-H et Cg-H s 5>55—*6,0 (2 protons) CgH^ et C^H^Net (N-H)2 ; 6,9-—*8,9 (11 protons) COOH et H20 s ™ 11,7 ( > 1 proton) Par un mode de préparation pratiquement identique, on prépare l'acide 6-/ct-(benzoyl)carbamylbenzyl/ carbonamido-périicillanique s C-NH-C-CH-C-NH-CH=—CH C(CH,)~ ?i m 1 «■ î .1 I S> a 0 OX 0 I I I 0=C — N : —-CH-COOH 15 à partir du N-benzoyl~benzylcarbonamide et de 1'isocyanate, ici encore à l'aide de 2 équivalents de lithium-n-butyle dans le tétrahydrofuranne comme solvant; on isole l'acide à l'état de sel de sodium» La structure du composé est confirmée par ses spectres infrarouge et de résonance paramagnétique nucléaire» 20 Analyse partielle du spectre infrarouge du produit final (disque de KBr, valeurs en cm™1)? environ 3400"^ environ 325QJ N-H o* 3°65) 3035J =C-H aromatique 1765 C=0 p-lactame 30 - c=0 du groupe C0»NH»C0 1685 C=0 amide + 1600 C=0 carboxylate et C=C aromatique 70 45662 17 2081380 15 20 25 30 EXEMPLE_IX Préparation de l'acide 6-(ct-carbamylbenzyl)carbonamido-pénicil-lanique à l'aide de 1'a-lithlum-ditriméthylsilyl-benzylcarbo-nam'ide. (phénylacétamide) dans 65ml de tétrahydrofuranne anhydre dans un ballon de 250 ml à 3 tubulures équipé d'une tubulure d'introduction de gaz au travers de laquelle on introduit en continu de l'azote sec, d'une ampoule à brome reliée à une tubulure de sortie de gaz garnie d'un agent déshydratant, et d'un thermomètre. Après refroidissement de la solution agitée par un barreau magnétique à -50°C, on introduit goutte à goutte une solution d'environ 30 millimoles de lithium-n-butyle dans l'hexane. On poursuit l'agitation de la solution de coloration jaunâtre jusqu'à disparition complète de cette coloration. On ajoute ensuite goutte à goutte à -30°C une solution de 30 millimoles de triméthylchlorosilane redistillé dans 10 ml de toluène sec. A la solution légèrement trouble, mais incolore, de N-mono-triméthylsilyl-phénylacétamide, on ajoute une solution d'environ 30 millimoles de lithium-n-butyle dans l'hexane à -30°C. La solution, qui est alors de couleur légèranent orangée, ne se décolore pas complètement lorsqu'on poursuit l'agitation. On ajoute encore 30 millimol-es de triméthylchlorosilane dissoutes dans 10 ml de toluène à -30°C. On obtient une solution trouble à laquelle on ajoute 100ml de toluène sec à 0°C; on concentre sous vide à volume final d'environ 80ml„ La solution trouble de couleur orangée est refroidie à -65°Cj on ajoute goutte à goutte une solution d'environ 30 millimoles de lithium-n-butyle et 30 millimoles de N,N,N',N'-tétraméthyl éthylène diamine dans un mélange hexane-éther de pétrole à une vitesse réglée de manière à maintenir la température de réaction entre -62 et -68°Ci on poursuit l'agitation pendant 40mn à une température de -65 à -70°C. La solution finale trouble d'a-lithium-ditriméthylsilyl-benzylcarbonamide a pris une coloration jaune-rouge. On ajoute goutte à goutte à -70°C une solution de 6,6g (21,3 millimoles) de l'ester triméthylsilylique de 5 On dissout 4,05g (3° millimoles) de benzylcarbonamide 70 45662 18 2081380 l'acide 6-isocyanato-pénicillanique dans 40 ml de toluène sec, et on poursuit l'agitation pendant 30 un à ~70°C. Pour réduire au minimum les risques de destruction par contact de la solution de couleur Jaune fortement basique avec l'eau, on ajoute 5 au mélange de réaction, à -70°C, 9° millimoles de triméthylchlorosilane. On coule le contenu du récipient dans un mélange d'eau glacée et d'éther éthylique, sous bonne agitation, et on règle le pH à 7. La chromâtographie en couche mince appliquée aux couches à pH 7 indique une conversion d'environ 60$ de l'isocyanate en la 10 pénicilline recherchée; le principal sous-produit est l'acide n-butyl-carbonamido-pénicillanique. Après séparation des couches, on extrait la couche aqueuse à 2 reprises par l'éther éthylique. Pour éliminer la butyl-pénicilline, on extrait les couches aqueuses à 3 reprises à pH 5 Par l'éther éthylique puis 1 fois à pH 4,5 par un mélange 15 9?1 d'éther éthylique et d'acétate d'éthyle, ce qui provoque une certaine perte de la pénicilline recherchée. L'extraction finale est effectuée à pH 2,5 à l'aide d'un mélange éther/acétate d'éthyle; 9:1. Après les opérations usuelles, on obtient un sel de sodium incolore à 90$ environ de pureté. Le produit est identique au 20 produit"préparé par la réaction de l'isocyanate avec l'acide a-carbamyle phénylacétique (exemple IV). Rendements 3,4g (environ 38$). EXEMPLE_X Préparation de l'acide 6-/Ja-t).e"-zimidazole-l '-yl-carbonyl ) benzylcar-bonamido^-pénic illanique. 25 v\ -CH-Ç-NH-CH-CH 30 i ii r i r^cH, 0 = C 0 || I I - 0=c—N CH - COOH Il n^tch N-""" On refroidit à -J0°C une suspension de 2,36g (10 millimoles) de l-phénylacétyl-benzimldazole (obtenu à l'état pur par réaction du 1-triméthylsilyl-benzimidazole avec le chlorure de phé-nylacétyle) dans 20ml de toluène sec, et on introduit goutte à 35 goutte une solution de 10 millimoles de lithium-n-butyle et 10 millimoles de N,N,N®,N'-tétraméthyl éthylène diamine dans un mélan-. ge de 4,3 ml d'hexane et .10 ml d'éther de pétrole à des températures inférieures à -60°C. On poursuit l'agitation pendant 1 heure à -60°C et on ajoute goutte à goutte à -65°C, une solution de 3s°g 70 4S662 2081380 (9,5 millimoles) de l'ester triméthylsilylique de l'acide 6-isocya-nato-pénicillanique dans 10 ml de toluène» On poursuit l'agitation du mélange de réaction pendant 1 heure à -60°C, puis on termine de la manière usuelle» Une solution de la pénicilline recherchée 5 dans l'éther éthylique, obtenue par extraction à pH 4, est entièrement évaporée sous pression réduite; on obtient un dépôt d'une substance solide jaunâtre» La structure avancée pour la pénicilline est confirmée par les spectres infrarouge et de résonance paramagnétique nucléaire du produit final» 10 Analyse du spectre de résonance paramagnétique nucléaire du produit final dissous dans un mélange d'hexadeutéroacétone et une petite quantité d'hexadeutéro-diméthylsulfoxyde (60 Me, valeurs de 8 en ppm, étalon internes tétraméthylsilane; % C^-CH^s 1,56 et 1,69 (6 protons) 15 C2~H: 4,38 (1 proton) C,--H et Cg-H: 5,4——>5,8 (multiplet)\ Ca-H : 5,65 J 3 Pr0t°nS C^-Hr- : environ 7,3 o 5 CgH^ et N-H ; 7,0 ^8,2 (multiplet étendu) 20 et C00H C2,-H ; 8,62 (1 proton) environ 11 protons 70 45662 20 2081380 REVENDICATIONS 1. Dérivés de l'acide pénicillanique répondant à la formule générale : R3\ r H H.H N-C-C-C-N-C-C C " i » - o R>^ - 0 | fi ,2' ^CH, 3 ^C-N C-COOH R' 0' H 10 1 v dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un groupe P ' alkyle inférieur, R représente un groupe alkyle inférieur ou aryle, aryloxy, arylthio ou lactame cyclique ou un groupe hétéro- 1 '3 4 cyclique aromatique relié par un atome de carbone, et R re- 15 présentent chacun un atome d'hydrogène, un groupe alkyle inférieur, » aryle ou aroyle, cycloalkyle, un groupe sulfonyle substitué ou un 3 4 - , groupe carbonyle, R et R pouvant également former ensemble et avec l'atome d'azote auquel ils sont fixés un noyau hétérocyclique, lequel peut contenir un autre hétéroatome 'choisi dans le groupe 20 formé par l'oxygène, l'azote et le soufre, les groupes représentés 1 2 3 4 " - par les symboles R , R , R et R pouvant en outre porter un ou plusieurs substituants choisis parmi les atomes d'halogènes et les groupes nitro, alkyle, alkoxy, ester et amido, leurs sels métalliques et d'aminés, et leurs esters- 25 2. Dérivés de l'acide pénicillanique selon la reven- dication 1, caractérisés en ce que R représente un groupe méthyle, éthyle, propyle, n- ou iso-butyle, péntyle ou hexyle, 3. Dérivés dç l'acide pénicillanique selon la reven-dication 1, caractérisés en ce que R représente un groupe phényle, 30 biphényle, naphtyle, phénoxy, naphtoxy, pyrrolido-2-one-5-yle, pyridyle, quinoléyle, pyrazinyle, thiényle, thiazolyle ou furyle. 4. Dérivés de l'acide pénicillanique selon la revendi- cation 1, caractérisés en ce que R représente un groupe cyclo- pentyle, cyclohexyle, cyeloheptyle, ou p-tolylsulfonyle„ 35 - 5. Dérivés de l'acide pénicillanique selon la revendi- 3 2r ... « cation 1, caractérisés en ce que Br et R forment: ensemble et avec l'atome d'azote auquel ils sont fixés un noyau pyrrolidono, pipéridino, imidazolyle, benzimidazolyle ou morpholino* . 21 70 45662 2081380 6. L'acide 6-(a-N,N-d!iéthylcarbamoylbenzyl)carbonamido-pénicillanique et ses sels. 7. L'acide 6-(a-N-isopropylcarbamoylbénzyl)carbonamido-pénicillanique et ses sels. 5 8. L'acide 6-(a-carbamoylphénoxyméthyl)carbonamido- pénicillanique et ses sels. 9. L'acide 6-(a-4'-morpholinocarbonylbenzyl)carbonamido-pénicillanique et ses sels. 10. L'acide 6-/â-(N-p-tolylsulfonyl)carbamoylbenzyl7 10 carbonamido-pénicillanique et ses sels. 11. L'acide 6-/jx- (21 -pyridyl)carbamylbenzyl7oarbon-amido-pénicillanique et ses sels. 12. L'acide 6-/â- (benzoyl)carbamylbenzyl7carbonamido-pénicillanique. 15 13. L'acide 6-/Ia-benzimidazole-l'-yl-carbonyl)benzyl- carbonamido7pénicillanique. 14. Procédé de préparation des dérivés de l'acide pénicillanique selon l'une quelconque des revendications qui précèdent, le procédé se caractérisant en ce que l'on fait réagir 20 un ester d'acide 6-isocyanato-pénicillanique de formule générale; H H/S\ /CH3 0 = C = N- C- C C Il I 0iI3 c N CH - COOE 0 25 dans laquelle E représente un radical organique facile à éliminer et à remplacer par un atome d'hydrogène avec formation d'un groupe carboxyle libre, avec un composé de formule générale % 30 R\ f N - C - C - R5 V o R î p Il dans laquelle R , R , R et R ont les significations indiquées ■tjc dans la revendication 1, et R^ représente le groupe carboxyle ou T TT un groupe Me ou Me -X, Me représentant un atome de métal et l'exposant sa valence, et X représente un atome d'halogène, 22 70 45662 2081380 après quoi, lorsqu'on le désire, on libère l'acide formé de l'ester obtenu et on forme éventuellement ses sels de métaux alcalins, alcalino-terreux ou d'aminés, par des procédés connus en soi„ 5 15» L'acide 6-(a-carbamoylbenzyl)carbonamido- pénicillanique préparé par le procédé selon la revendication 14 „ 16„ A titre de médicaments nouveaux, utiles notamment comme antibiotiques, les composés de formule I selon la revendication 1„ 10 17. Compositions thérapeutiques contenant comme constituant actif l'un au moins des composés de formule I selon la revendication 1. 18. Formes d'administration des compositions thérapeutiques selon la revendication 17„