FR 2060074 A1 19710611 FR 7028450 A 19700731 70 28450 1 2060074 La présente invention se rapporte à des compositions alimentaires pour animaux familiers, utiles pour favoriser la santé et l'hygiène buccale, chez les chiens et les chats. Dans un aspect particulier, la présente invention se rapporte à des composi-5 tions alimentaires pour animaux familiers, utiles pour retirer la "plaque" et/ou pour empêcher la formation de calculs sur les dents des chats et des chiens, ces compositions alimentaires comprenant essentiellement un produit alimentaire nutritif solide pour chiens ou chats et une quantité efficace d'une substance enzymatique qui 10 est une protéase neutre,, un mélange de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase, un mélange de protéase neutre et d'amylase ou un mélange de protéase neutre et de protéase alcaline. Dans un autre aspect encore, la présente invention se rapporte à un procédé pour retirer la "plaque" et/ou pour empêcher la formation de calculs 15 sur les dents des chats et des chiens, en donnant à l'animal un produit alimentaire nutritif solide, contenant une quantité efficace d'une substance enzymatique qui est la protéase neutre, un mélange de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase, un mélange de protéase neutre et d'amylase ou tua. mélange de protéase neutre 20 et de protéase alcaline. Durant ces dernières années, l'augmentation de la durée de Yie d'animaux familiers, tels que des chiens et des chats, peut être attribuée, en partie, à des progrès importants dans la médeeine vétérinaire et, en partie, aux suppléments de soin et d'attention 25 prodigués à ces animaux par leurs propriétaires, dans une société de plus en plus prospère. On n'a ps besoin d'insister sur le fait que l'augmentation de la durée de vie comporte des problèmes de santé complexes et nombreux, le problème de la santé et de l'hygiène des dents n'est pas le moindre. En particulier, le développement 30 et la formation de "plaque" et de calculs (tartre) sur les dents des chats et des ehiens peut provoquer des maladies dans les tissus mous de la cavité buccale, spécialement dans les gencives, et peut contribuer à provoquer des carries dentaires chez les animaux. Tout ceci peut entraîner beaucoup de gêne, des endommagements à là san-35 té en général et des pertes éventuelles des dents, même chez les jeunes animaux. Bien sûr, ces problèmes deviennent plus nombreux et plus aigus au fur et à mesure que les animaux vieillissent. En outre, la "plaque" et les calculs abritent des bactéries qui peuvent contribuer à une haleine à mauvaise odeur ou en sont les causes 40 principales. Cette condition est particulièrement critiquable quand 70 28450 2 2060074 l'animal passe une grande partie de son temps dans 19Habitation du propriétaire. Pour empêcher la formation de "plaque" et la formation de calculs sur les. dents des chats et des chiens, on a suggéré que 5 les dents des animaux soient manuellement nettoyées avec i»a« brosse quotidiennement. En fait, on a conçu dans ee but des "brosses spéciales. Les avantages du brossage régulier des dents des chiens et des chats dans le but mentionné précédemment ne peuvent pas être contestés. Cependant,,pratiquement, aucun des propriétaires d'ani-10 maux familiers, sauf les plus attentifs, ne considéraient un programme de brossage pour un chien ou un chat sur une base régulière et: la majeure partie trouverait que la tâche prend beaucoup de temps et est ennuyeuse«, C'est un objet de la présente invention de prévoir des 15 compositions alimentaires pour animaux familiers, qui sont utiles et pratiques pour améliorer la santé et l'hygiène buccales des chiens et des chats. C'est un autre objet de la présente invention de prévoir un procédé simple et facilement réalisé pour améliorer la santé et 20 l'hygiène buccales des chiens et des chats. D'autres objets et avantages de la présente invention apparaîtront d'après la description suivante. La présente invention réside dans la découverte selon laquelle l'enlèvement et l'empêchement de "plaque" et de calculs 25 sur les dents des chats et des chiens sont réalisés en donnant à l'animal un aliment pour animaux familiers, se composant essentiellement d'un aliment nutritif solide et d'une quantité efficace de substance enzymatique qui est la protéase neutre, un mélange de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase, un mélange de 30 protéase neutre et d'amylase. Selon la présente invention, l'animal familier (chien ou chat) reçoit un aliment solide nutritif pour animaux familiers, dans lequel on incorpore une quantité efficace d'une ou de plusieurs enzymes spécifiées suffisantes pour retirer la "plaque* et/ 35 ou empêcher la formation de calculs sur les dents de l'animal familier. Alors que la quantité de la substance enzymatique dans l'alimentation peut varier selon, entre autres, l'âge et la taille de l'animal, les aliments nutritifs particuliers, l'enzyme particulière ou les, mélanges d* enzymes employées et les habitudes de nour-riture de l'animal, en général, me quantité efficace de substance 6AD ORIGINAL 70 28450 3 2060074 enzymatique est dans la gamme allant d'environ 4<>000 à environ 4.000.000 d'unités d'activité d'enzyme, de préférence 100.000 à 3.000.000 d'unités pour 0,453 kg d'aliments, au moins 4.000 de ces unités étant présentes sous forme de protéase neutre. 5 la protéase neutre, telle qu'utilisée dans cette descrip tion, se rapporte à l'enzyme dite protéase qui a son activité opti-ma à un pH dans la gamme d'environ 6 à environ 8„ la protéase alcaline, telle qu'utilisée dans cette description, se réfère à une enzyme dite protéase qui a son activité optima à un pH dans la gamme 10 d'environ 8 à environ 11. Des procédés analytiques pour déterminer les unité» d'activité d'enzyme sont bien connus dans la technique, l'activité de protéase (qu'elle soit neutre ou alcaline) est généralement déterminée par des procédés "bien connus de digestion de protéine utili-15 sant des substrats de protéines telles que la caséine. Des modes opératoires typiques pour déterminer l'activité de protéase sont décrits dan» Journal of General Physiology. 30* (1947) 291 et dan» Methods of Enzymology. 2 New York Academic Press, 1955, 33 « Pour la présente description, l'activité de protéase est 20 exprimée en unités de caséine, l'activité de protéase neutre est déterminée à un pH d'environ 7» alors que l'activité de protéase alcaline est déterminée à un pH d'environ 10. l'activité d'amylase est généralement déterminée par le procédé tien connu à l'acide dinitrosalicylique, qu'on appelle cou-25 ramment la technique de Bernfeld. Ce mode opératoire est décrit en détail dans Methods of Enzymology, Academic Press 1955 II» p.949o Pour la présente description, lorsqu'on indique des unités d'activité d'amylase, on doit comprendre que la technique de Bernfeld est employée pour déterminer cette activité. 30 i,a substance enzymatique utilisée dans la présente in vention est composée de protéase neutre, de mélanges de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase, de mélanges de protéase neutre et d'amylase et de mélanges de protéase neutre et de protéase alcaline, la substance enzymatique peut être sous n'importe 35 quelle forme convenable, par exemple elle peut être soluble dans l'eau ou insoluble dans l'eau, la substance enzymatique peut être obtenue par tout mode opératoire convenable tel que, par exemple, par fermentation dans un milieu de fermentation nutritif avec un micro-organisme convenable. Des exemples de ces micro-organismes 70 28450 4 2060074 comprennent des micro-organismes, produisant des enzymes, des genres Baeillus, Aspergillus et Streptomyees, tels que, par exemple, des souches de Baeillus subtilis, d1 Aspergillus oryzae et de streptomyees griceus. Une souche particulière de micro-organismes utili-5 ses dans la préparation de mélanges de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase est une souche mutante de Baeillus subtilis, décrite dans le brevet américain n.° 3.031.380. Une culture de cet organisme identifié par souche de B. Subtilis NERL B-3411 est déposée dans la collection de cultures du département d'agriculture des 10 Etats-Unis, Agricultural Service, Horthern Utilization Division, Peoria, Illinois, et est disponible au public. D'autres organismes comprennent le Baeillus thermoproteolyticus, le Streptomyees rec-tus, le Streptomyees naraensis et le Baeillus subtilis variété amy-losaccharitius, tous produisant soit un mélange de protéase neutre, 15 de protéase alcaline et d'amylase, soit seulement de la protéase neutre. Une source particulièrement bonne de substance enzymatique à utiliser dans la présente invention est un mélange d'enzymes produit par fermentation avec le Baeillus subtilis, souche HBBL 20 B-3411. Comme on l'a indiqué au préalable, on a trouvé que le mélange d'enzymes produites par cet organisme se composait généralement d'amylase et des deux protéases. Le mélange d'enzymes (solides récupérés) contient typiquement dans la gamme d'environ 700.000 à environ 2.000.000 d'unités d'activité de protéase neu-25 tre, dans la gamme d'environ 250.000 à environ 500.000 unités d'activité de protéase alcaline et dans la gamme d'environ 300.000 à environ 500.000 unités d'activité d'amylase par gramme. Si l'on désire utiliser une protéase neutre comme seule substance enzymatique dans la présente invention, la protéase neu-30 tre peut être séparée d'un mélange d'enzymes. Divers modes opératoires pour la séparation d'enzymes particulières à partir de mélanges d'autres enzymes sont eonnus dans la technique. Par exemple, la protéase neutre peut être séparée de mélanges d'enzymes par chromât ographie par échange d'ions, tel que décrit dans Journal of 35 Biological Chemistry 239 (1964 3706) et dans Agr. Biol. Chem.30 (1966) 651* Un mode opératoire particulier pour séparer les mélanges d'enzymes de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase est décrit dans 3a demande de brevet américain n° 752.460, déposée le 14 août 196.8, sous le titre "Purification et séparation de 40 protéase neutre à partir de pigment et de protéase alcaline", 70 28450 5 2060074 au nom de Léonard Keay. La matière de départ pour cette technique est une Mère de fermentation, claire comme de l'eau, contenant le mélange d'enzymes obtenu par filtration ou centrifugation ou un extrait aqueux du 5 mélange d'enssymes brut, précipité par un solvant» L'amylase est retirée par fractionnement par solvant, en Présence àrun sel de calcium ou par fractionnement au sulfate d'ammonium suivi d'une adsorption sur de l'amidon, en présence d'une solution aqueuse d'éthanol pour retirer les dernières traces d'amylase. Le pigment 10 est retiré par adsorption en utilisant une eellulose ou autre résine échangeuse d'ions0 Les deux protéases restant en solution sont fractionnées par adsorption sélective en employant de l'hy-droxylapatite comme produit d'adsorption. La protéase neutre est adsorbée et ultérieurement éluée alors que la protéase alcaline 15 n'est pas adsorbée. Si on le désire, la protéase neutre ainsi séparée peut être alors mélangée avec la protéase alcaline ou l'a-mylase séparée, ou les deux, suivant n'importe quelle proportion désirée pour l'utilisation dans la présente invention® Tout aliment solide nutritif convenable pour chat ou chien 20 peut être utilisé dans la présente invention. Ces aliments contiennent, en général, des quantités substantielles de protéines provenant de la viande ou de sous-produits de la viande, du poisson ou de sous-produits du poisson et de sources de plantes à teneur élevée en protéines, telles que des sojas, et des quantités substan-^ tielles d'hydrates de carbone fournies par les céréales et les graines. De faibles quantités de vitamines, de minéraux, de produits de saveur et de produits de conservation sont également généralement comprises dans ces aliments. ïïn aliment nutritif typique peut être préparé à partir des ingrédients suivants : Mélange de céréales 60 fi Déchets de viande et d'os 30 fi Farine de poisson 3 fi Graisses 3 fi Lait solide séché 2 fi Vitamines, produits minéraux, etc. faibles quantités L'aliment peut être sous n'importe quelle, forme convenable, telle que, par exemple, une boulette, une farine, des combinaisons de viandes broyées et de céréales pu un. article comprimé ou autrement conformé, tel qu'un biscuit dur pouvant être mâché, en forme d'os. Les ingrédients dans un aliment typique pour chienscu 70 28450 6 2060074 chats ne sent pas défavorablement affectés par l'enzyme ou le mélange d'enzymes employé dans la présente invention, et les enzyme s sont compatibles avec les ingrédients des produits alimentaires nutritifs pour animaux familiers. 5 l'incorporation de la substance enzymatique, en quantité désirée dans le produit alimentaire nutritif pour animaux familiersf peut être réalisée à n'importe quel point convenable durant le traitement et la formulation comme, par exemple, durant ou après le mélange d'ingrédients du produit alimentaire nutritif, la distribution des enzymes dans toute la matière alimentaire peut être réalisée par des moyens classiques.» la présente invention sera mieux comprise en se référant aux exemples spécifiques suivants, qui ne sont présentés qu'à titre d'illustration et non pas de limitation. 15 EXEMPLE 1 Préparation de ration expérimentale la ration expérimentale a été préparée en mélangeant un mélange de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase avec un produit alimentaire solide pour chiens, vendu dans le commerce 2Q sous le nom de Purina Dog Show par la société dite Ealston Purina Company, St. louis, Missouri, l'enzyme a été mélangée avec le produit alimentaire pour chiens, à un niveau de 1 gramme d*enzyme pour 0,453 kg de produit alimentaire pour chiens, le mélange d'enzymes a été préparé par fermentation avee l'organisme dit Baeillus subtirr lis, souche NBB1 B-3411, et contenait approximativement 2.000.000 d'unités de protéase neutre, approximativement 500.000 unités de protéase alcaline et approximativement 500.000 unités d'amylase par gramme de solides secs d'enzymes. Mode opératoire expérimental 20 les dents d'une chienne, de la race dite Berger Allemand, de 21 mois, en bonne santé, ont été examinées et on a observé qu'il y avait de lourds dépôts de "plaque". Pendant une période d'un mois avant l'examen, on a alimenté la chienne avec une ration d'eau et de produit connu sous, la marque déposée Purina Dog Show, ne contenant pas d'ensyme. On a alors alimenté la chienne par un produit comprenant de l'eau et la ration expérimentale pendant une période de seize jours, lors de l'achèvement de la période de seize jours, on a observé que les dépôts de "plaque" avaient été sensiblement réduits, les dents de la chienne semblaient plus blanches et généralement 40 plus propres que lors de l'examen précédent et la cavité buccale en 70 28450 7 2060074 général semblait en bon état. Durant tout le test et lors de l'achèvement du test, la santé générale de la chienne est restée bonne. On n'a pas observé de troubles de digestion ou de changements métaboliques. 5 Des résultats semblables sont observés lorsqu'on retire la "plaque" dans des dents de chats, quand le mélange d'enzymes indiqué ci-dessus de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase est incorporé en quantité semblable dans un produit alimentaire solide nutritif pour chats et qu'on le donne à des chats. 10 "BTF.MPLE 2 On alimente dix chiens avec une ration quatidienne d'un produit alimentaire solide nutritif, dans lequel on incorpore 500.000 à 2.000.000 d'unités de protéase neutre pour 0,453 kg de produit alimentaire nutritif et la "plaque" est retirée de leurs 15 dents. EXEMPLE 3 On alimente dix chiens avec une ration quotidienne d'un produit alimentaire nutritif solide, dans lequel on incorpore environ 500.000 à environ 2.000.000 d'unités de protéase neutre et envi-20 ron 150.000 à environ 500.000 unités de protéase alcaline pour 0,453 kg d'alimentation nutritive et la "plaque" est retirée de leurs dents. EXEMPLE 4 On alimente dix chiens avec une ration quotidienne d'une 25 alimentation nutritive solide, dans laquelle on incorpore environ 500.000 à environ 2.000.000 d'unités de protéase neutre et environ 150.000 à environ 500.000 unités d'amylase pour 0,453 kg de produit alimentaire nutritif et la "plaque" est retirée de leurs dents. La présente invention n'est pas limitée aux exemples de 30 réalisation qui viennent d'être décrits, elle est au contraire susceptible de variantes et de modifications qui apparaîtront à l'homme de l'art. 35 70 28450 8 2060074 BEyEKDICATIOflS 1 - Composition alimentaire pour des chats et des chiens, caractérisée en ce qu'elle se compose essentiellement d'une alimentation nutritive solide et d'une faible quantité, suffisante pour 5 retirer la "plaque" et empêcher la formation des calculs sur les dents des chats et des chiens, d'une substance enzymatique choisie dans le groupe comprenant la protéase neutre, des mélanges de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase, des mélanges de protéase neutre et de protéase alcaline et des mélanges de protéase 10 neutre et d'amylase, la quantité de protéase neutre présente étant au moins 4.000 unités pour 0,453 kg d'alimentation. 2 - Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que la quantité de substance enzymatique est dans la gamme d'environ 4.000 à environ 4.000.000 d'unités. 15 3 - Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que la substance enzymatique est la protéase, neutre. 4 - Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que la substance enzymatique est un mélange de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase. 20 5 - Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce que le mélange de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase est obtenu par fermentation avec l'organisme dit Baeillus subtilis KERL B-3411. 6 - Composition selon la revendication 1, caractérisée 25 en ce que la substance enzymatique est un mélange de protéase neutre et de protéase alcaline. 7 - Composition selon la revendication 1» caractérisée en ce que la substance enzymatique est un mélange de protéase neutre et d'amylase. 30 8 - Procédé d'enlèvement de "plaques" et d'empêchement de formation de calculs sur les dents d'un chien ou d'un chat, caractérisé en ce qu'il consiste à alimenter l'animal par un produit alimentaire pour animaux familiers, se composant essentiellement d'un aliment nutritif solide et d'une quantité efficace d'une subs- 35 tance enzymatique choisie dans le groupe comprenant la protéase neutre, des mélanges de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase, de mélange de protéase neutre et de protéase alcaline et des mélanges de protéase neutre et d'amylase, la quantité de protéase neutre présente étant d'au moins 4.000 unités pour 0,453 kg d'ali- 40 mentation. 70 28450 9 2060074 9 - Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que la quantité de substance enzymatique est dans la gamme d'environ 4.000 à environ 4.000.000 d'unités. 10 - Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce 5 que la substance enzymatique est la protéase neutre. 11 - Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que la substance enzymatique est un mélange de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase. 12 - Procédé selon la revendication 11, caractérisé en 10 ce que le mélange de protéase neutre, de protéase alcaline et d'amylase est obtenu par fermentation avec l'organisme dit Baeillus subtilis BEEL B-3411. 13 - Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que la substance enzymatique est un mélange de protéase neutre et 15 de protéase alcaline. 14 - Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que la substance enzymatique est un mélange de protéase neutre et d'amylase.