FR 2068416 A1 19710827 FR 6936248 A 19691022 69 36248 1 2068416 10 15 20 25 30 la présente invention, à la réalisation de laquelle ©nt participé MM. MARTEL Jacques et HEYMES René, a pov-r objet de nouveaux dérivés de la céphalosporine. l'invention a plus particulièrement pour objet les ^-lactames de l'acide 6H,7H cis 7-(4-R sydnone 5-acétamido) 3-aininoiiéthyl cépk^ 3-ème 4-carboxylique soub forme optiquement active ou raeémique de formule générale I ï dans laquelle R = R* ou R", R' représentant un atome d'hydrogène ou un radical phényl éventuellement substitué par un groupement nitro et R" un radical phényl substitué par un groupement amis© et quand R = R* les sels d'acides organiques et minéraux de ces composés. . l'invention s'étend également à l'application, comme médicament9 des composés thérapeutiquement actifs englobés dans la formule générale I. Elle s'étend notamment aux composés suivants actuellement préférés : - le j-lactame de l'acide D1 6H,?H cis 7- (4-p-nitrophényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique ; - le y-lactame de l'acide D1 6H,7H cis 7-(4-p-aminophényl sydnone 3-acétamino) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique ; - le y-lactame de l'acide D1 6H,7H cis 7-(4-m-nitrophényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique ; - le y-lactame de l'acide D1 6H,7H cis 7-(4-m-aminophényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique 5 - le y-lactame de l'acide D1 6H,7H cis 7-(sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique ; - le y-lactame de l'acide D1 6H,7H cis 7-(4-phényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique. la céphalosporine C appartient à une classe chimique apparentée à celle de la pénicilline. Elle en possède les propriétés bactériologiques, quoique à un degré moindre (cf Ohauvette et Coll. .Anti-biotics Annal. 1966, 687). les propriétés antibiotiques des dérivés synthétiques de la céphalosporine C varient très sensiblement en fonction du substituant sur la fonction aminée. Ohauvette mentionne que d'une manière générale les substituants à l'azote aminée, les 69 36248 2 2068416 plus actifs sont les dérivés arylmercaptoacétylés et les dérivés silsylmercaptoacétylés. Néanmoins les dérivés les plus actifs' possèdent l'inconvénient d'être fortement désactivés par la présence de sérum dans les essais 5 in vitro9 ce qui laisse présager une faible activité lors d'essais sur l'animal ou sûr l'homme. On a donc recherché des copules acylantes dont l'effet serait à la fois d'accroître l'activité antibactérienne des céphalosporines synthétiques et de diminuer la perte d'activité en présence des 10 protéines.' Parmi les différentes copules étudiées à cet effet, on peut relever l'acylation par des dérivés d'acides sydnone-carboxyliques. C'est ainsi que G. Pala et Coll. Chimie thérapeutique 4(1969) 26 fait état de résultats obtenus avec des dérivés de l'acide 7-15 asino pénicillanique acylés par un acide 4-sydnone carbosylique. Dans cette série une telle acylation a entraîné une importante diminution d'activité par rapport à des pénicillines synthétiques comme par exemple la méthicilline « la demande de brevet hollandais publiée n° 67. 14888 décrit 20 l'utilisation d'une telle copule acylante en série céphalosporine. les résultats obtenus sur le plan bactériologique sont peu encourageants étant donné que les concentrations minima inhibifrrices vis-à-vis de Staphylococcus aureus, lorsqu'elles sont fournies, sont supérieures à celles d'autres dérivés synthétiques connus de la 25 céphalosporine comme par exemple la céphalothine. En outre, lorsque la fonction hydroxyméthylée, en position 3, est substituée par un groupement aminé tel qu'aminé aromatique ou composés hétérocycliques azotés, il en résulte un©baisse très sensible d'activité. On peut ainsi relever que la concentration minima inhibitrice vi-à-vis d'une 30 souche de Staphylococcus aureus est par exemple par l'acide 7-sydnone 3-acétamido) céphalosporanique de 1 y/ml, pour l'acide 7-(sydnone 3-acétamido) 3-(p-sulfoanilinométhyl) céph-3-ème 4-carboxylique de 10 y/ml et pour l'acide 7-(sydnone 3-acétamido) 3-(p-nitro anilinométhy1) céph-3-ème 4-carboxylique de 10 y/ml. 35 Toute substitution de cette fonction entrfeîne donc une atténua tion de l'activité antibiotique. Enfin le brevet belge 724072 décrit 1 ' acide 7-(syda.©Be 3-acétamido) céphalosporanique et ses sels. Ce brevet fait état d'une activité sensiblement améliorée vis-à-vis de Klebsellia Pneumoniae et 40 d'Escherichia Coli alors que la céphalothine est peu active via-à- 69 36248 3 2068416 vis de ces micro-organisme s. Par contre, il ressort des renseignements fournis dans ce brevet que l'acide 7-(sydnone 3-acétamido) céphalosporanique est sensiblement moins actif vis-à-vis des souches ffram- positifs que la céphalothine. -t 5 On pouvait donc légitimement considérer que le problème théra peutique des dérivés synthétiques de la céphalosporine n'avait pas encore été résolu d'une manière satisfaisante. Les composés obtenus manifestent une activité antibiotique vis-à-vis de Staphylococcus aureus atténuée par rapport à la pénicilline et la désactivation en •jO présence de sérum entraîne une perte d'activité supplémentaire. Les composés de la présente invention possèdent l'avantage de manifester une forte activité à la fois bactériostatique et bactéricide vis-à-vis des souches de staphylocoques pénicillino sensibles ou pénicillino résistants et surtout de n'être pratiquement ■jç pas désactivés en présence de sérum ou de protéines. C'est ainsi que les concentrations minima inhibitrices sont en général remarquablement faibles en présence ou en l'absence, de sérum. Cette forte activité apparaît inattendue en fonction des résul-20 tats fournis dans la demande de brevet hollandaise n° 67. 14 888 pour les dérivés aminométhylés en position 3. Les composés de l'invention trouvent leur emploi en thérapeutique dans le traitement des infections à germes G-ram- positifs telles que septicémies, furonculoses, gastro-entérites, cholecystites, infec-25 tion abdomino-pelviennes, brûlures ou plaies infectées. Us peuvent être employés par voie parentérale, buccale, rectale, ou externe.Ils sont présentés sous forme de suspensionsou solutions injectables conditionnées en ampoules ou flacons multidoses, de comprimés nus ou enrobés, de sirop, de suppositoires, de crème ou de 30 pommades. Ces formes d'-utilisation'sont préparées selon les procédés usuels de la pharmacotechnie. La posologie de ces composés s'échelonne entre 0,5 et 5 g par jour. L'invention a,en outre, pour objet les procédés de préparation 35 des composés de formule générale, I, racémiques ou optiquement actifs. Les composés de formule générale, I, dans laquelle R représente R' sont obtenus par le procédé illustré par le schéma n° 1 annexé. Ce procédé est caractérisé essentiellement en ce que l'on condense 40 en présence d'un agent basique le f-lactame de l'acide 6H,7H cis 69 36248 4 2068416 7-àmino 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique optiquement actif ou racémique, avec ' l'acide 4-E.' sydnone 3—acétique de formule générale, II, ou un de ses dérivés fonctionnels : R' i— 11—vah-V. ^-0 2 II J© F-CH„C00H o-# 5 pour obtenir le y-lactame de l'acide 6H,7H cis 7-(-4-R' sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique. On peut utiliser comme dérivé fonctionnel de..l'acide 4-R' sydnone 3-acétique de formule générale, II, l'anhydride formé in situ, par l'action d'un dialcoyl ou dicycloalcoyl carbodiimide sur 10 l'acide 4-R' sydnone 3-acétique, ou un halogérmre d'acide ou un . amide ou encore un anhydride mixte préparé notamment à partir d'acides aliphatiques carboxyliques ou d'acides allcyl ou aryl-sulfoniques. On utilise de préférence l'anhydride de l'acide 4-R' sydnone 3-acétique formé in situ par action du dicyclohexyl-15 carbodiimide sur l'acide II. Ûn peut utiliser comme agent basique des bicarbonates de métaux alcalins tels que le bicarbonate de sodium, des trialkylamines telles que la triéthylamine, ou la pyridine. /3-amino la condensation du y-lactame de l'acide 6H,7H cis 7-SÊdn^néthyl 20 céph-3-ème 4-carboxylique sur l'acide ou un dérivé fonctionnel de l'acide de formule générale, II, s'effectue en présence d'œn solvant inerte tel que l'acétone, le chloroforme, le chlorure .** d'éthylène, le tétrahydrofuran, le benzène,etc. Les composés de formule générale, I, dans laquelle R représente 25 R" sont obtenus par le procédé illustré par le schéma n° 2 annexé. Oe procédé, qui fait également partie de l'invention, est caractérisé essentiellement en ce que l'on soumet le y-lactame de l'acide 6H,7H 7-(nitrophényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl oéph-3-ème 4-carboxylique de formule générale, III : 69 36248 5 2068416 à l'action, d'un agent d'hydrogénation en présence d'un catalyseur en milieu acide ou neutre pour obtenir le composé désiré que l'on salifie éventuellement par un acide organique ou minéral. Dans un mode opératoire actuellement préféré du procédé décrit 5 ci-dessus, on utilise comme agent d'hydrogénation l'hydrogène en présence d'un catalyseur à base de palladium, l'hydrogénation étant effectuée en présence d'un acide minéral ou organique comme l'acide chlorhydrique. On opère en milieu polaire comme par exemple en milieu diméthylformamide. ■jO II est possible de salifier le dérivé aminé y-lactamique avec des acides halohydriques, l'acide sulfuriquel'acide phosphorique, l'acide nitrique ou l'acide borique. Il est possible de lè salifier avec des acides organiques comme l'acide formique, l'acide acétique l'acide benzoïque, l'acide salicylique ou l'acide p-toluëne-15 suifonique. Il est également possible de salifier le y-lactame de 1'acide9 I" par un acide possédant par lui-même une activité thérapeutique comme par exemple un acide anti-inflammatoire dérivé de l'acide anthranilique ou de l'acide phényl acétique, ou par un acide ayant 20 des propriétés analgésiques comme une 4-(2'-hydroxycarbonylphényl-amino) quinoléine substituée, ou par un acide ayant des propriétés antibiotiques tel que l'acide nalidixique, ou l'acide fusidique, ou l'acide colimycine méthane suifonique. l'acide 4-R' sydnone 3-acétique de formule générale, II, uti-25 lisé au départ du procédé dé l'invention peut être préparé par cyclisation, à l'aide d'un agent de déshydratation d'un acide N-nitroso imino diacétique de formule générale, IV : . R'-GH-OOqH I * H-NO OH2-OO2H 17 dans laquelle R' représente les mêmes radicaux que pour la formule 30 générale, I'. Dans un mode opératoire actuellement préféré, on utilise l'anhydride acétique comme agent de déshydratation. Une méthode analogue a d'ailleurs déjà été décrite pour préparer l'acide sydnone 3-acétique par F.H,G. Stewart ^Chem. Ind. 35 (Londres) 1411 (1961)_7. les acides N-nitroso imino diacétiques de formule générale, IV autres que l'acide N-nitroso imino acétique peuvent eux-mêmes être 69 36248 e 2068416 notamment préparés par diverses méthodes. la première méthode consiste* à traiter un benzaldéhyde de formule générale, V : R« ■GEO V dans laquelle R' représente ici et dans ce qui suit un atome 5 d'hydrogène ou un râdical nitro, par le chlorhydrate de glycocollâte d1 éthyle et le cyanure de potassium pour former un chlorhydrate de H_-(a-phényl «-aitrilométhyl) glycocollate d'éthyle de formule générale, VI ; fi» 7-CH-GN ©HH2GI © CHg-GOg et VI 10 que l'on hydrolyse en milieu acide par l'acide chlorhydrique notamment pour obtenir le diacide correspondant de formule générale, VII : R -fY GH-GOgH © HHgGl 0 CHgCOgH VII On transforme celui-ci en dérivé nitrosé de formule générale, IV, par action du nitrite de sodium. 15 Une autre méthode consiste à traiter un acide a-bromophényl acétique de formule générale, VIII : C02H Br VÏII par le chlorhydrate de glycocollate d'éthyle pour obtenir une acide oi-éthoxycarbonyIméthylamiaophény 1 acétique de formule générale,IX î a» ■-o- 20 GH~Q0oH I C. m CHg-COg et IX que l'on saponifie par un agent alcalin pour obtenir le diacide correspondant de formule générale, X ; m y—v .ÇH-COgH \W JJg —/ 69 36248 7 2068416 qui est transformé en dérivé nitrosé de formule générale, IV, par action d'un nitrite de métal alcalin. l'invention concerne, bien entendu, à titre de moyens nécessaires à la mise en oeuvre des procédés les composés dont les noms 5 suivent s - l'acide a-éthoxycarbonylméthylamino p-nitrophényl acétique ; - l'acide a-(p-nitrophényl) imino diacétique ; - l'acide D1 4-(p-nitrophényl) sydnone 3-acétique ; - le chlorhydrate de N-(a-m-nitrophényl a-nitrilométhyl) g3ycocoHate 10 d* éthyle ; - l'acide DL a-(m-nitrophényl) imino diacétique ; - l'acide D1 4-(m-nitrophényl) sydnone 3-acétique. les exemples suivant illustrent l'invention sans toutefois lui apporter aucun caractère limitatif. 15 Exemple I : y-lactame de l'acide DL 6H.7H cis 7-(4-p-nitrophényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique Stade A : Acide q-éthoxycarbonyiméthylamino p-nitrophényl acétique On mélange 13 g d'acide a-bromo p-nitrophényl acétique (obtenu selon le procédé décrit dans Annalen 611.40)r 35 g de chlorhydrate 20 de glycocollate d'éthyle et 35 cm3 d'eau sous agitation et à une température intérieure de 0°C ; on ajoute 35 cm3 de soude 10 I en quinze minutes puis laisse sous agitation pendant trente minutes, à température ambiante. On refroidit à 0°G, ajoute 18 cm3 d'acide acétique, essore et lave à l'eau ; on ajoute cinq volumes d'acide 25 chlorhydrique N, essore, rince le précipité avec de l'acide chlorhydrique 0,1 N, puis à l'eau ; on amène le filtrat à pH = 7-8 par addition de pyridine, glace pendant quinze minutes, essore et lave à l'eau ; on obtient 2,8 g d'acide a-éthoxycarbonylméthylamino p-nitro-phényl acétique sous forme de cristaux incolores, solubles dans les 30 acides et les alcalis dilués aqueux, insolubles dans l'eau et l'éther, fondant à 170°0. Analyse : c-j2H14®6îî2 = 282»25 Calculé î ojé 51,1 5,0 9,9 Trouvé 51,3 4,8 10,1 35 Spectre I.R. (nujol) : Bandes à 1751, 1718, 1651, 1605, 1565, 1517 et 1348 S*"1 le composé se présente sous forme de sel interne. Pour autant que l'on sache, ce composé n'est pas décrit dans la littérature. 40 Stade B : Acide g-(p-nitrophényl) imino diacétique : 69 36248 a 2068416 On agite pendant une heure, à température ambiante,'14,1 g d'acide a-éthoxycarbonylméthylamino p-nitrophényl acétique obtenu au stade A dans 75 cm3 de soude 2 N. On ajoute 17 cm3 d'acide chlorhydrique 10 II et évapore à sec sous vide ; on reprend le résidu par 5 7,5 cm3 de pyridine, puis 100 cm3 d1éthanol, glace pendant quinze minutes. On essore le précipité, le lave à 1'éthanol puis à l'étherj on recueille 18,9 g d'acide brut ; on dissout 23 g de produit brut dans 100 cm3 d'éthanol additionnés de 8,5 cm3 d'acide chlorhydrique 10 N. On essore le précipité, le lave à l'éthanol, ajoute 10 au filtrat 15 cm3 de pyridine sous agitation, glace pendant quinze minutes, essore, lave à l'éthanol, puis à l'éther et obtient 10 g d'acide a-(p-nitrophényl) imino diacétique, sous forme de cristaux incolores, solvatés à15 # de pyridine, solubles dans l'eau, les acides et alcalis dilués aqueux, peu solubles dans l'éthanol, inso-15 lubies dans l'éther. Analyse : 0^0H100gN2 = 254,20 Calculé : 0 Trouvé : 51,2-51,5 4,2-4,6 11,4-11,5 Spectre I.R. (nujol) : 20 Présence d'aromatique, de NOg, de C=0 à1733 cm~^ et de 0H,HH associés. l'acide existe sous forme de sel interne. Pour autant que l'on sache, ce composé n*est pas décrit dans la littérature. 2^ Stade C : Acide PI 4-(p-nitrophényl) sydnone 3-acétique On mélange 10,2 g d'acide a-(p-nitrophényl) imino diacétique et 22 cm3 d'acide chlorhydrique 2N ; on amène la température intérieure à 10°C et ajoute une solution de 2,9 g de nitrite de sodium dans 6 cm3 d'eau et agite pendant quarante-cinq minutes, à température 30 ambiante ; on extrait à l'acétate de méthyle, en relargant au chlorure de sodium, sèche les phases organiques sur sulfate de sodium, essore, lave le filtre à l'acétate de méthyle et évapore le filtrat à sec ; on dissout l'acide N-nitroso a-p-nitrophényl) imino diacétique brut dans 60 cm3 d'anhydride acétique et agite pendant 35 trois heures, à température ambiante ; on ajoute 20 cm3 d'eau et laisse en contact pendant trente minutes ; on évapore à sec sous vide, reprend le résidu dans 50 cm3 d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à 10 essore, lave le filtre avec une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à2 $ puis à l'eau ; on amène 40 le filtrat à pH = 1 par addition d'acide chlorhydrique 10 N, glace 69 36248 9 2068416 pendant quinze minutes, essore, lave à l'eau et obtient 5g7 g d'acide DL 4-(p-nitrophényl) sydnone 3-acétiqae soas forme d'un produit solide jaune, soluble dans les bases faiblss et le diméthyl« formamide, insoluble dans l'eau, l'éther et les acides aqueux. Son 5 Son point de fusion est P. = 220°C (déc.) (rendement s 54 $). Analyse : s 265,18 Calculé î C# 42,4 3,2 ff £ 14,8 Trouvé : 42,3 3ro 14,9 Spectre I.R. (nujol) t 10 Présenee de C=0 à 1738 et 1713 cm_1 Présence de C=C, C=N, NOg et phényl à 1642, 1598 s* 1515 cm""1. Pour autant que l'on sacfce, ce composé a*est pas décrit dans-J la littérature. . . Stade D : y-lactame de l'acide DL 6H.7H cis 7-(4-p-nitrophényl 15 sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique On agite pendant seize heure s, à température ambiante, on mélange 2,12 g d'acide DL 4-(p-nitrophényl) sydneae 3-acétique, 3 g de dicyclohexylcarbodiimide, 20 cm3 de nitrométiiane, 422 mg de y-lactame de l'acide DL 6H,7H cis 7-amino 3-asdJ3oméi3ayl eéph-3-ème 20 4-carboxylique (obtenu selon le procédé décrit dans la demande de brevet français n® P.V. 156 898 déposée le 27 Juin 1968) et 0,2 ch3 de pyridine ; on essore et lave le précipité au nitrométliane puis à l'éther ; on recueille 3,14 g de y-lactame "brut ; on reprend le y-lactame brut dans 15 cm3 de diméthylformamide, essore, lave avec du 25 diméthylf ormamide, ajoute 90 cm3 dteu au filtrat, essore, lave à l'eau et obtient 0,74 g de y-lactame de l'acide DL 6E,7H cis 7-(4-p« nitrophényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique sous forme de cristaux jaunes solubles dans le diméthyl-formamide, insolubles dans l'eau et l'éther et le nitrométhane• 30 Analyse : C^H^O^ÎTgS = 458,40 Calculé : (# 47,2 ^ 3,1 H* 18,3 7,0 Trouvé : 47,4 3,5 17,9 6,8 Spectre I.R. (nuiol) : Présence de HH à 3310 cm~1 35 Présence de {3-lactame à 1787 Cm~^ Présence de C=0 et C=C à 1733, 1710, 1686 et 1658 cm~1 Présence d'aromatique +NO2 +NH à 1600, 1593 et 1519 cm~^ Pour autant que l'on sache, ce composé n'est pas décrit dans la littérature. 40 Exemple 1"I : y—lactame de l'acide DL 6H.7H cis 7—(4—p—aminophénvl 69 36248 10 2068416 sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl cé-ph-3-ëme 4-earboxyIigue : 10 Préparation du_ c at alv seur : On mélange 350 mg de noir actif, 3,5- cm3 d'une solution aqueuse de chlorure de palladium h2$ et 3,5 cm3 d'eau. On agite en atmos-5 phère d'hydrogène pendant trente minutes, à température ambiante; on essore le charbon que l'on lave à l'eau jusqu'à neutralité des eaux de lavage. 2° Séduction : On mélange 680 mg de y-lactame d© l'acide DL 6H,7H cis 7-(4-p-10 aitrophényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4- carboxylique (obtenu dans l'exemple I), 6 cm3 de diméthylformamide, 1,5 cm3 d'acide chlorhydrique H et le charbon palladié obtenu ci-dessus ; on agite en atmosphère d'hydrogène pendant quarante minutes à 30°0} on sépare le catalyseur, lave le filtre à l'eau et éva-15 pore à see le filtrat sous vide ; on reprend le résidujar 0,2 cm3 de pyridine puis par 10 cm3 d'éthanol ; on essore, lave à l'éthanol et obtient 235 mg de y-lactame de l'acide DL 6H,7H cis 7-(4-p-amino— phényl sydnone 3-acétamido) 3-amino»éthyl céph-3-ème 4-carboxylique sous forme de cristaux incolores solubles dans les acides dilués 20 aqueux et le diméthylformamidep peu solubles dans l'éthanol, insolubles dans l'eau. âmâZM î G18H1 6°5K6S = 428,42 Calculé î C$ 50,4 3,8 9* 19,6 7,5 Trouvé % 50,3 4,2 19,3 6,9 25 gpectre I.R. (nujol) % Présence de -lactame à 1777 . Pour autant que l'on sache, ce composé n'est pas déerit daa.3 ■ la littérature. Exemple III : -y-lactame de l'acide DL 6H.7H cis 7-(4-w-nttro-phényl 30 sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl aégh-3-ème 4-carboxylique Stade A s Chlorhydrate de M-(g-m-nitrophényl a-nitrilome^û^^^eir^Te On agite pendant vingt-quatre heures, à température ambiante, un. mélange de 13 g de chlorhydrate de glycocollate d'éthyle, 6,5 g de cyanure de potassium, 15 g de m-nitr© benzaldéhyde, 130 em3 35 d'acétate d'éthyle et 13 cm3 d'eau ? on décante la phase organique, la sèche sur sulfate de magnésium, essore,lave le filtre à l'acétate d'éthyle et évapore le filtrat à sec sous vide j on recueille 24 g de chlorhydrate brut que l'on purifie par chromatogra-phie sur gel de silice, élution au mélange chloroforme-acétate 40 d®éthyle (8-2) et précipitation dans l'éthwr par l'acide chlor- 69 36248 n 2068416 hydrique gazeux ; on obtient 18 g de chlorhydrate de N-(a-m-nitro-phényl a-nitrilométhyl) glycocollate d'éthyle» Pour l'analyse, on dissout 1 g du chlorhydrate à chaud dans 4 cm3 d'éthanol, essore, refroidit, essore, lave à l'éthanol puis à 5 l'éther; on obtient 530 mg de chlorhydrate pur, sous forme de cristaux; jaunes, solubles dans l'eau, insolubles dans l'éther» ■Analyse : C^H^O^l^01 = 299,71 Calculé : OJÉ 48,1 4,7 H# 14,0 01# 11,8 Trouvé : 49,1 4,7 14,0 10,5 10 Spectre I.R. (nujol) : Présence de 0=0 ester à 1745 cm~^ Présence d'aromatique et de NO,,. Pour autant que l'on sache, ce composé n'est, pas décrit dans la littérature. 15 Stade B : Acide DL g-(m-nitrophényl) imino diacétique On chauffe au reflux pendant seize heures un mélange de 3 g de chlorhydrate de N-(a-m-nitrophényl/ftTtrilométhyl) glycocollate dféthyle, 7,5 cm3 d'eau et 7,5 cm3 d'acide chlorhydrique 10 N ; après refroidissement de la solution, on ajoute 150 cm3 d'acétone et glace 20 pendant trente minutes, on essore, lave le filtre à l'acétone et évapore à sec le filtrat sous vide ; on reprend le résidu à . l'acétone, glace pendant une heure, essore, lave à l'acétone et obtient 1,64 g de chlorhydrate de l'acide a-(m-nitrophényl) imino diacétique, sous forme de cristaux incolores, solubles dans l'eau et 25 l'alcool, insolubles dans l'acétone et l'éther. Pour l'analyse, on dissout 1,6 g du chlorhydrate dans 8 cm3 d'éthanol, essore, lave à l'éthanol, amène le filtrat à pH = 7-8 par addition de pyridine, glace pendant quinze minutes, essore, lave à l'éthanol puis à l'éther et obtient 1 g d'acide libre sous forme de 30 sel interne. L'acide se présente so'us forme de cristaux incolores, solubles dans l'eau, les acides dilués et.les bases diluées. Analyse : ^ioH10^2®6 = 254,20 (à 20 jé de pyridine) Calculé s 0/» 53,1 4,5 N# 12,4 Trouvé : 53,0-53,2 4,5-4,6 12,1 35 Spectre I.R. (nujol) : Présence de 0=0 à 1730 cm~1 Présence d'aromatique, NOg et 0H,NH associé, carboxyle. Pour autant que l'on sache, ce composé n'est pas décrit dans -la littérature. 40 Stade 0 : Acide DL 4-(m-nitrophényl) sydnone 3-acétique 69 36248 12 2068416 On mélange 29 g de chlorhydrate de l'acide a-(m-nitrophényl) imino diacétique et 60 cm3 d'eau, ajoute une solution de 8,3 g de nitrite de sodium dans 15 cm3 d'eau et agite pendant trente minutes, à température ambiante ; on extrait à l'acétate de méthyle en relar-5 gant au chlorure de sodium, sèche les phases organiques sur sulfate de sodium, essore, lave le filtre à l'acétate de méthyle et évapore à sec sous vide. On obtient ainsi l'acide N-nitroso a-(m-nitrophényl) imino diacétique brut avec un rendement quantitatif. On dissout le résidu dans 120 cm3 d'anhydride acétique et agite pendant trois •jo heures, à température ambiante. On ajoute alors 40 cm3 d'eau,-laisse en contact pendant trente minutes et évapore à sec sous vide ; on extrait le résidu par 100 cm3 d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à 10 essore, lave le filtre avec la solution de bicarbonate de sodium, puis à l'eau ; on amène le filtrat à pH = 1 par 15 addition d'acide chlorhydrique 10 N, essore, lave à l'eau puis à l'éther et obtient 13»5 g d'acide DL 4-(m-nitrophényl) sydnone 3-acétique sous forme de cristaux jaunes, solubles dans les bases faibles et le diméthylformamide, insolubles dans l'eau, l'éther et les acides aqueux. Son point de fusion F. = 2202C (déc). ?0Analyse : C^H^OgN^ = 265,18 Calculé : C# 45,3 2,7 15,8 Trouvé : 45,3 2,5 15,5 Spectre I.R. (chloroforme) : Présence d'aromatique, de N02, de 0=0 et bande CH. 25 Pour autant que l'on sache, ce composé n'est pas décrit dans la littérature. Stades D î_ de l'acide DL 6H.7H cis 7-(4-ffl—nitrophényl sydnone c£tamido )_3-aminométhj;l_céjph-2.-ème ^-carboxjlique On agite pendant seize heures, a température ambiante, un mé-30 lange de 2,12 g d'acide DL 4-(m-nitrophényl) sydnone 3-acétique, 1 g de dicyclohexyl carbodiimide, 20 cm3 de nitrométhane, 422 mg de y-lactame de l'acide DL 6H,7H cis 7—amino 3-aminométhyl céph—3—ème 4— carboxylique et 0,2 cm3 de pyridine ; on essore, lave le filtre au nitrométhane puis à l'éther et recueille 1,65 g de y-lactame brut. 35 On le purifie par mise en suspension dans 6,5 cm3 de diméthyl-formamide ; on essore et lave le filtre au diméthylformamide puis ajoute 20 cm3 d'eau au filtrat. On glace le filtrat pendant quinze minutes, essore, lave à l'eau puis à l'éther et obtient 380 mg de y-lactame de l'acide DL 6H,7H cis 7-(4-m-nitrophényl sydnone 3- 40 acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique, sous forme de cristaux incolores solubles dans le diméthylformamide, insolubles dans l'eau. 69 36248 13 2068416 Analyse : C^H^NgS = 458,40 Calculé : Cg 47,2 E* 3,1 H* 18,3 S* 7,0 Trouvé î 47,5 3,3 18,0 7,2 Spectre I.R. (nujol) : 5 Présence de p-lactame, d'amide secondaire, de NOg et de sydnone. Pour autant que l'on sache, ce composé n'est pas décrit dans la littérature. •Rrem-n1.fi TV : Y-lactame de l'acide DL 6E.7H cia 7°»(4 ■-m^ais.-î.a.ophényl ay^norift ^-acétamifio) nométhvl céph-5-èm® 4-Qarbogyliga.e 10 19 Préparation du_çataL2s£u£ : On mélange 200 mg de noir actif, 2 cm3■de solution aqueuse de chlorure de palladium à 2 i> et 2 cm3 d'eau % on agit© ea atmosphères d'hydrogène à température ambiante, jusqu'à réduction complète du palladium ; on essore le charbon que l'on lave à l'eau jusqu'à 15 neutralité des eaux de lavage. 22 Réduction î On met en suspension le noir palladié ainsi obtenu dans 4 cm3 de diméthylformamide avec 383 mg de Y-lactame de l'acide DL 6H,7H cis 7-(4-m-nitrophényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl eéph-3- 20 ème 4-carboxylique et 0,85 cm3 d'acide chlorhydrique H" | on agite en atmosphère d'hydrogène pendant trente minutes, à 30^0 $ on essore le catalyseur, lave le filtre à l'eau et évapore le filtrat à sec sous vide. On reprend le résidu par 0,2 cm3 de pyridine, ajoute 6 cm3 d'éthanol, glace pendant qjiinze minutes. Le précipité est essoré et 25 lavé à l'éthanol ; on obtient 153 mg de Y-lactame de l'acide DL 6H, 7H cis 7-(4-m-aminophényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3- ème 4-carboxylique, sous forme de cristaux incolores, solubles dans les acides aqueux et le diméthylformamide, peu solubles dans l'alcool^ insolubles dans l'eau. 30 Analyse : C^gH^gO^NgS = 428,42 Calculé î (# 49,6 HJÉ 4,3 ï# 18,2 Btfi 6,9 Trouvé î 49,6 4,15 18,2 6,7 Spectre I.R. (nujol) ï Présence de p-lactame à 1783 Cm_1. 35 Pour autant que l'on sache, ce composé n'est pas décrit dans la littérature. Exemple V i Y-lactame de l'acide PL 6H.7B cis 7-(sydnone 3'-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxyliaue (avec R=H) On agite pendant une nuit, vers 252C, un mélangé de 575 mg 40 d'acide sydnone 3-acétique (décrit dans Chem. Ind», 1961. 1411), 69 36248 14 2068416 500 ag de diayclohexylcarbodiimide, 211 mg de y-lactame de l'acide DL 6H,7H eis 7-(amin© 3-aminométhyl eéph=3-ème 4-carboxylique, 5 cm3 de nitrométhane et une goutte de pyridine j on essore, rince le filtra au nitrométhane, empâte avec «M âisiéthylformamide, concentre à 5 petit volume, sous vide, la solutisa ùa clis^éthylformamide, reprend ai .méthanol, essora, rince au aéthasQl pmis à l'éther et sèche % -on recueille 190 mg de produit brut que l'on reprend dans 0,4 cm3 de diméthylfomasd.de ; on ajoute 2.ca3 d© aétàanol, essore, lave au -méthanol puis à l'éther et sèche f ©a obtient 160 mg de y-lactame de 10 l'acide DL 6H, 7H ois 7-(sydnone 3-aeétsaiM©) 3-ssiinométhyl céph-3-ème 4-earboxylique, sous foae de cristaux incolores, solubles dans le diméthylformamide, insolubles dans l'eau, le méthanol et l'éther, de . point de fusion supérieur à 250°0. Analyse s C^H^Q^S » 337,31 15 Calculé ? Ofi 42,7 ^ 3,3 H# 20,8 9,5 Trouvé i 42,4 3,S 20,7 9,6 ghaec-tre I9R9 (nujol) g Présence de 3-lactame à 1788. cm_1 Présence de 0=0 sydnone à 1725 cm~^ 20 Présence de 0=0 amide à 1697 cm~^ Présence d'amide à 1562 et 1555 cm~^ « Pour autant que l'on .sache^ se composé n'est pas décrit - dass • la littérature. Exemple YI s y-lactame de l'acid® BL'SILTH ois 7-(4-phényl sydnone 25 S-acétamido ) 5-aminoEétfayl céph-°5-ème 4°°carboxylique (R = C^H^) En. opérant comme dans l'exemple I„ au départ de l'acide 4-phényi sydnone 3-acétique (obtenu selon le procédé décrit par STEI'JART J• Chenu Soc» 1963. 701) et du ■y-lactame de l'acide DL 6H?7H cis 7-amino 3-aminométhyl céph-S-ème 4-carboxylique, on obtient le y-3Q lactame de l'acide DL 6H,7H cis 7-(4 -phényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique avec un rendement de 40 Le composé se présente sous forme de cristaux incolores, solubles dans le diméthylformamide;, insolubles dan® 1 'eau9 l'éther et le méthanol;, de point de fusion supérieur à 250°C. 35 Mslyse s C18H150515S = 413,40 Calculé s Ofo 52,3 W° 3,7 W° 16,9 W* 7,8 Trouvé î 52,1 3,8 16,6 7,7 Spectre IeR. (nujol) % Présence de p-lactame à 1779 cm~'' 40 Présence d'amide à 1522 cm-1 BAD ORIGINAL 69 36248 15 2068416 Présence de sydnone à 1736 cm ^. Pour autant que l'on sache, ce. composé n'est pas décrit dans . la littérature. Etude pharmacologigue des composés, objet de l'invention : _ Activité mMipaccénenne in vrÈ¥o " " ~ 5 les concentrations minima inhibitrices (O.M.I.) determinees en milieu liquide (milieu Oxoïd n° 2 à pH = 7,3, après vingt-quatre et /à57°G. ont été déterminées via-à-vis de diverses souches bacterj quarante-huit heures d1 incubation/ffram+ et ffram- avec dès concen— trations croissantes des produits étudiés. 10 Les tableaux suivants réunissent les résultats obtenus : 10 y-lactame de l'acide DL 6H.7H cis 7-(4-p-nitrophényl sydnone 3- acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique Souches O.M.I. en yj cm3 24 heures d'incubation 48 heures d'incubation Staphylococcus n° 1061 2,5 5 Staphylococcus n° 1061 en présence de 5 7» d'albumine >5 > 5 Staphylococcus n° 1128 pénicillino résistant 5 10 2° Y-lactame de l'acide DL 6H.7H cis 7-(4-p-aminophényl sydnone 3- acétamido) 3-amin'oiiiéthyl céph-3-ème 4-carboxylique Souches O.M.I. en y/cm3 24 heures d'incubation 48 heures d'incubation Staphylococcus n° 1061 1 2,5 Staphylococcus n° 1061 en présence de 5 y» d'albumine 1 2,5 Staphylococcus n° 1128 pénicillino résistant 1 2,5 Germes G-ram- > 50 > 50 3° y-lactame de l'acide DL 6H,7H cis 7-(4-m-njtrophényl sydnone 3- acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique 69 36248 16 2068416 1 Souches C.MoI. en y cm3 24 heures d1 incubation 48 heures d1 incubation Staphylocoecus n° 1061 2,5 5 Staphylococcus n° 1061 en présence de 5 70 d'albumine >5 >5 Staphylococcus pénicillino résistant 2,5 5 40 Y-lactame de l'acide DL 65.7H cis 7-(4-m-aminophényl sydnone 5-acétamido) 5-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique ' Souches C.M.I. en y/cm3 24 heures d'incubation 48 heures d ' incubation Staphylococcus n° 1061 0»5 1 Staphylococcus n° 1061 en présence de 5 t> d'albumine 1 2,5 Staphylococcus n° 1128 pénicillino résistant 1 2,5 Germes G-ram- >50 >50 5 5° y-lactame de l'acide DL 6H.7H cis 7-(4-phényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique Souches C.M.I. en y/cm3 24 heures d'incubation 48 heures d'incubation Staphylococcus Oxford n° 1061 0,10 0,25 Staphylococcus Oxford en présence de sérum 0,10 0,25 Staphylococcus pénicillino résistants n° 1128 0,25 0,50 69 36248 17 2068416 REVEHDI C il I O I 8 1* les y-lactames de l'acide 6H,7H cis 7-(4-R sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-earboxylique sous forsae optiquement active ou racémique de formule générale, I ï 5 dans laquelle R = R' ou S", R' représentant un atome d5hydrogène gkl un radical phényl éventuellement substitué par un groupement nitra et R" un radical phényl substitué par un groupement smino et quand R = R" les sels d'acides organiques et minéraux de ces composés» 2° les composés selon 1° : 10 - le y-lactame de l'acide D1 6H,7H cis 7-(4-p-nitrophényl sydnone 3=» acétamido) 3-aainométhyl céph-3-ème 4-carboxylique ; - le y-lactame de l'acide D1 6H,7H cis 7-#-p-aminophényl sydnone acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique ; - le y-lactame de l'acide DI 6H,7H cis 7(4 -^n-nitrophényl sydnone 3=-15 acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique ; - ley*3actame de l'acide D1 6H,7H cis 7-(4-m-aminophényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl, céph-3-ème 4-carboxylique ; - le y-lactame de l'acide DL 6H,7H cis 7-(sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique ; 20 - le y-lactame de l'acide D1 6H,7H cis 7-(4-phényl sydnone 3-acétamido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique. 3° A titre de médicaments, les composés thérapeutiquement actifs englobés dans la formule générale selon 1° et notamment les composés selon 2° 25 4° les compositions pharmaceutiques contenant un au moins des composés selon 3° et un excipient pharmaceutique inerte j 5° Procédé de préparation des composés de formule générale selon 1° dans laquelle R représente R' caractérisé en ce que l'on condense, en présence d'un agent basique, le y-lactame de l'acide SH,7H 30 cis 7-amino 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique optiquement actif ou racémique, avec de l'acide 4-R' sydnone 3-acétique de formule générale, II, ou un de ses dérivés fonctionnels s 69 36248 18 2068416 COOH II pour obtenir le y-lactame de l'acide 6Er7H cis 7-(4«Jlr sylnone 3-aeétazaido) 3-aminométiijl Géph-3~ème 4-carboxylique. 6e Procédé de préparation des composés de formule générale selon 1° 5 dans laquelle S représent© &*, caractérisé en ce que l'on soumet le y-lactame de 1'acide 6E,7H 7-(nitxôphényl àydnone 3-acétaaido) 3-aminométhyl céph-3-ème 4-carboxylique de formule générale, III î à l'action d'un agent d'hydrogénation, on présence d'un catalyseur en 10 milieu acide ou neutre pour ofeteiair lé eomposé désiré que l'on salifie éventuellement par un acide organique ou minéral* 7° Procédé selon 6° caractérisé en c© que l'on utilise c oniine agent d'hydrogénation l'hydrogène, oa présence de charbon palladié, en opérant en milieu acide et notamment en, milieu acide chlorhydrique» 15 8° les composés nécessaires à la mise en oeuvre des procédés selon 5° et à savoir : - l'acide Œ~éthoxycarbonylméthylamino p-nitrophényl acétique ; - l'acide oc-(p-nitrophényl) imino diacétique ; - l'acide D! 4-(p-nitrophényl) sydnone 3-acétique j 20 => le chlorhydrate de N-(a-m-nitrophényl oc-nitrilométhyl) glycocollate d'éthyle ; - l'acide DI a-(m-nitrophényl) imino diacétique % 1 ' acide D1 4~(m~nitrophényl) sydnone 3-acétique0 10 III BAD ORIGINAL