FR 2085644 A1 19711231 FR 7014574 A 19700422 70 14574 1 2085644 10 15 20 25 La présente invention à la réalisation de laquelle ont participé MM. G-IRATJLT Pierre et HÔ.GEMAM Guy a pour objet de nouvelles urées aromatiques. Elle se rapporte en particulier à des thiocyano-phényl urées substituées. Elle concerne spécifiquement les N-alcoxy îîl-(3-cîiloro 4-thiocyanophényl) urées de formule générale : dans laquelle R et , identiques ou différents, représentent un radical alcoyle inférieur ou un radical alcényle inférieur ou forment ensemble le reste alcoylène d'un hétérocycle azoté. Les composés selon l'invention possèdent des propriétés antibactériennes intéressantes et une activité antifongique très élevée. On citera plus particulièrement les composés suivants : - la H-méthoxy ÎT-méthyl N'-O-chloro 4-thiocyanopliényl) urée - la H-méthoxy N-allyl IT'-(3-chloro 4-thiocyanophényl) urée - la H-/ (3-chloro 4-thiocyanophényl) carbamoyl/ isoxazoline. Les composés de l'invention peuvent être utilisés en thérapeutique en tant que médicaments antibactériens tout spécialement contre les bactéries gram positif et surtout comme médicament antifongique. Ils trouvent leur emploi pour le traitement des affections à Candida ou à Trichophyton, leur toxicité est très faible. Néanmoins on préfère les utiliser par voie topique ou permuqueuse. A cet effet ils sont présentés sous forme de crèmes, de gelées, de pommades, de collutoires, de poudres topiques, de solutions ou suspensions en aérosols. La posologie journalière pourra varier entre des'limites très larges. On emploie de préférence des crèmes ou des pommades dont la concentration en principe actif est comprise entre 0,5 et 15 ?<>, Ces formes pharmaceutiques sont destinées à être appliquées 1 à 4 fois par jour. L'invention s'étend en outre au procédé d'obtention des composés répondant à la formule générale qui consiste à faire réagir un 0 1 70 14574 2 2085644 dérivé fonctionnel d'un acide N-R^ M OR carbamique sur la 3-chloro 4-thiocyano aniline en milieu basique. le procédé est en outre caractérisé par le fait qu'on emploie comme dérivé fonctionnel dudit acide carbamique un halogénure et 5 notamment le chlorure ou un ester d'alcoyle inférieur et notamment l'ester éthylique. la condensation est effectuée en présence d'une base comme par exemple une aminé tertiaire, aliphatique, cyclique aromatique ou hydro-aromatique ou arylaliphatique. On pourra citer de préférence 10 la triéthylamine, la pyridine, la collidine, la pipéridine ou la diméthylaniline. la condensation est effectuée dans un solvant. Parmi les solvants qui conviennent plus particulièrement on peut nommer le tétrahydrofuran, les'hydrocarbures aromatiques, comme le benzène, 15 le xylène ou le toluène et les amides N-alcoylés comme le diméthyl-formamide ou le diméthylacétamide. lia réaction de condensation est effectués à chaud, de préférence à la température de reflux du solvant. Le temps de chauffage peut varier selon la température entre une et vingt-quatre heures. 20 Dans un mode d'exécution préféré en prépare la N-méthoxy N-méthyl H'-(3-chloro 4-thiocyanophényl)urée en condensant le chlorure de IT-méthyl ïï-méthoxy carbamyle sur la 3-chloro 4-thiocyano aniline en milieu benzénique en présence de triéthylamine. Dans un autre mode d'exécution préféré, on prépare la N-méthoxy 25 ÏT-allyl ÎJ'-( 3-chloro 4- thiocyanophényl) urée en condensant le H-méthoxy H-allylcarbamat e d'éthyle sur la 3-chloro 4-thiocyano aniline en milieu toluénique en présence de pyridine. Dans un autre mode d'exécution préféré on prépare la M-allyloxy ÏT-allyl F'-(3-chloro 4-thiocyanophényl) urée en condensant le 30 chloarure de H-allyloxy N-a~l1ylcarbamyle sur la 3-chloro 4-thiocyano aniline en milieu toluénique en présence de triéthylamine ou de diméthylaniline. Dans un autre mode d'exécution préféré on prépare la ÏÏ-/J3-chloro 4-thiocyanophényl) carbamoyl/ isoxazolidine en faisant 35 réagir le chlorure de ÏT-isoxazolidinyl carbonyle avec la 3-chloro 4-thiocyano aniline en solution benzénique en présence de triéthylamine o Les exemples suivants sont destinés à mieux faire comprendre 70 14574 5 2085644 l'invention. Ils ne la limitent en aucune façon. Exemple I : N-méthoxy N-méthvl IT'-C 5-chloro 4-thiocyano"Phényl) urée : Stade A : ^-çhloro_4~thioc2;ano_.aniline On mélange 193 g de m-chloro aniline, 345 g de thiocyanate 5 d'ammonium et 900 cm3 de méthanol, refroidit à +520 et ajoute 86 cm3 de brome et 300 cm3 d'une solution saturée de bromure de sodium dans le méthanol. On agite le mélange réactionnel pendant quinze heures, à température ambiante, verse dans l'eau, neutralise par addition de bicarbonate de sodium, essore et lave le précipité à 10 l'eau et sèche sous vide. Après recristallisation du résidu sec dans l'éther isopropylique, on obtient 70 g de 3-chloro 4-thiocyano aniline, sous forme d'un produit solide jaune pâle, soluble dans l'éthanol, le chloroforme et l'acétone, peu soluble dans l'éther et le benzène, insoluble dans l'eau, fondant à 742C. 15 AnalvRft : C^Hj-Cll^S = 184,66 Calculé : C fô 45,52 H $ 2,73 Cl Spectre I.R. Présence de-MI2 à 3 492 et 3 400cm1 20 Présence de S-CfeN à 2 I60cm~^ Présence d'aromatique Ce composé est identique à celui obtenu par Tarizo Tàkahashi, Yakugato Zashi, 21» 645 (1957) Stade B : lî-méthozx H-méth^l_Nj_-X3-chloro, ^-thioçyanophényl)_ur é e 25 On mélange 15 g de 3-chloro 4-thiocyano aniline et 11 g de triéthylamine dans 200 cm3 de benzène et ajoute une solution de 12,5 g de chlorure de N-méthyl N-méthoxy earbamyle dans 50 cm3 de benzène, à température ambiante ; on porte au reflux pendant quinze heures, sous agitation, filtre l'insoluble, lave le filtre au benzèœ^ 30 lave les phases benzéniques à l'eau, à l'acide chlorhydrique 1T, à l'eau, a la soude N et enfin à l'eau jusqu'à neutralité des eaux de lavage ; on sèche sur sulfate de sodium et distille le benzène sous vide ; on filtre, empâte le précipité à l'éther isopropylique et sèche sous vide ; on obtient 11 g de N-méthoxy N-méthyl If'-(3-chloro 35 4-thiocyanophényl) urée, sous forme d'un produit solide jaune pâle, soluble dans l'alcool, l'acétone, le chloroforme et le benzène, insoluble dans l'eau et l'éther, fondant à 902Ce Analyse : C1QH10C1N^02S = 271,73 70 14574 4 2085644 Calculé : C $ 44,19 H $ 3,71 Cl & 13,05 N # 15,46 3 fo 11,80 ' Trouvé : 44,3 3,6 13,0 15,2 11,8 Spectre I.R. Présence de 0=0 dû à un arnide disubstitué à 1 687 5 Présence de C=lî Présence d'aromatique substitué par hétéro atome Pour autant que l'on sache, ce composé n'est pas décrit dans la littérature. Exemple II : N-méthoxy N-allvl N' ( 3-chloro 4-thioc.yanophénvl) urée 10 On dissout 15 g de 3-chloro 4-thiocyano aniline et 10 cm3 de pyridine anhydre dans 75 cm3 de toluène. On ajoute une solution de 16 g de N-méthoxy îtf-allyl carbamate d'éthyle dans 200 cm3 de toluène. La condensation est effectuée selon le mode opératoire décrit à l'exemple I. On obtient ainsi la H-méthoxy H-allyl ÏT'-(3-15 chloro 4-thiocyanophényl) urée. Pour autant que l'on sache ce composé n'est pas décrit dans la littérature. Le n-méthoxy ÏT-allyl carbamate d'éthyle est préparé selon le procédé décrit dans la demande de brevet français PV 174 358 20 déposé le 19 novembre 1968 au nom de la Société demanderesse. Exemple III : N-/T3-chloro 4-thiocyanophénvl) ca.rba.movl7 iso- xazolidine. . , de/ En opérant de la même façon au départ de 9 g/3-chloro 4-thiocyano benzène, on obtient par action de la N-chloro carbonyl 25 isoxazolidine en présence de 6 g de triétbylamine dans le benzène, la N-/X3-chloro 4-thiocyanophényl) carbamoylJ isoxazolidine. Pour autant que l'on sache ce composé n'est pas décrit dans la littératureo La chloro carbonyl isoxazolidine est obtenue par application 30 du procédé décrit dans le brevet belge 733 024. Exemple 17 : Exemple d'une forme pharmaceutique Pommade à 1 E-méthoxy N-méthyl IT'-( 3-chloro 4-thiocyanophényl) urée 1g Alcools gras sulfonés 3g 35 Ether cétylique de polyoxyéthylèneglycol 1g Huile de vaseline 5 g Nitrate phénylmercurique 2 mg Eau distillée q.s.p.100 g 70 14574 5 2085644 Bfcnflft nhfli-mfl nnloginue des composes, obi et de l'invention 1) Activité antifongique "in vitro" en milieu liquide la détermination de l'activité antifongique "in vitro" a été effectuée avec la N-méthoxy E-méthyl N'-(3-chloro 4-thiocyanophényl) 5 urée vis-à-vis de diverses souches de Candida en milieu Sabouraud liquide Oxoïd à pH = 5,7. Les concentrations mi.nima inhibitrices (C.M.I.) observées après vingt-quatre heures et quarante-huit heures de séjour en étuve à 37SC,sont les suivantes î Souches pathogènes d'origine clinique C.M.I (moyenne des essais) après 24 heures après 48 heures Candida albicans (7souches) Candida tropicalis (1 souche) Jandida krusei [2 souches) 10 y / cm3 40Y/cm3 0,1y/cm3 30 y / cm3 100 -y / cm3 2 y /cm3 10 Certaines souches sont très sensibles au produit étudié (4 sou ches de Candida albicans et 2 souches de Oandida krusei sont en effet inhibées par moins de 0,1 y/cm3 de ce composé et l'activité ne varie pas entre vingt-quatre et quarante-huit heures d'incubation). Dans l'ensemble, l'activité antifongique vis-à-vis des champignons levuri-15 formes est importante. 2) Activité an-hi -fongique locale par diffusion en mi if pu gélosé On ensemence un milieu gélosé D.S.Ï Oxoïd avec des souches de Candida albicans ; on perfore le milieu gélosé et enlève une lamelle circulaire de 1 cm de diamètre ; dans la cavité ainsi obtenue, on 20 introduit une quantité déterminée du produit étudié sous forme d'une pommade à 1 (les témoins ne reçoivent que l'excipient de la pommade) et porte le milieu en étuve à 37SC pendant vingt-quatre et quarante-huit heures. Il apparaît autour de la cavité une zone d'inhibition circulaire dont on mesure le diamètre et qui est propor-25 tionnelle à l'activité du produit. Dans les conditions de l'expérience, le diamètre de la zone d'inhibition est de 2,8 cm aussi bien après quarante-huit heures d'incubation qu'après vingt-quatre heures seulement ; l'activité 7 D 14574 6 2085644 inhibitrice est donc importante. La diffusion du produit étudié contenu dans la pommade est très nette. 3) Activité anti harstér-i emng» "in vitro" eP mi 1 i aii 1 i rjuirip L'essai a été effectué en milieu Sabouraud liquide Oxoïd à 5 pH = 5,7 vis-à-vis de diverses souches bactériennes gram +. Les concentrations minima inhibitrices (C.M.I.) sont les suivantes : Souches pathogènes C.M.I après 24 heures après 48 heures Staphylococcus aureus Oxford Staphylococcus aureus clinique Staphylococcus aureus aémolytiques Bacillus subtilis Streptocoques aémolytiques 10y/cm3 10y/cm3 60y/cm3 40^/cm3 2Y/cm3 20ï/cm3 10y/cm3 1 00Y/cm3 40Y/cm3 5Y/cm3 Le produit étudié présente donc une importante activité antibactérienne vis-à-vis de souches bactériennes à gram +. 10 4) Activité antibfirrhfiTiPiins locale par diffusion sn milieu gélosé sur des souches à gram + On opère selon le procédé décrit au paragraphe 2) ; le milieu gélosé utilisé est le milieu D.S.T. agar base Oxoïd à pH = 7,4 . Le tableau suivant réunit les résultats obtenus ï 15 Souches d'origine clinique Diamètre des zones d'inhibition après 24 heures après 48 heures Staphylococcus aureus Bacillus subtilis 2 cm 3,4 cm 1,4 cm 3,4 cm Ces résultats montrent que la pommade à 1 % de produit étudié diffuse bien et exerce une importante activité inhibitrice vis-à-vis de bactéries pathogènes à gram +. 70 14574 7 2085644 5) Tolérance cutanée La N-méthoxy U-méthyl II'-(3-chloro 4-thiocyanophényl) urée a été appliquée sous forme de pommade à 1 jî sur une surface de 4 cm2 environ, une fois par jour et pendant 18 jours, sur la peau 5 de rats mâles pesant 175 g environ, après épilage et grattage au papier émeri. Les animaux sont pesés tous les jours ; la courbe pondérale est normale. Des prélèvements de peau effectués à l'en^e droit d'application de la pommade n'ont pas montré d'épaississement/ la peau qui est restée très souple ; la repousse des poils est 10 rapide dans tous les cas. A l'autopsie pratiquée le 2Qème jour, les organes ne présentent aucune atteinte macroscopiquement visible. La préparation est donc bien tolérée en application locale prolongée. 6) Détermination de la toxicité aiguë 15 La toxicité aiguë a été déterminée sur des lots de souris de souche Rockland pesant de 20 à 22 g. Le composé a été administré par voie orale à des doses croissantes. Les animaux ont été mis en observation pendant 8 jours. Dans les conditions de l'expérience, la dose létale 50 c/o 20 (DL50) est de 300 mg/kg pour la lï-méthoxy ïf-méthyl F1-(3-chloro 4-thiocyanophényl) urée. 70 14574 , 8 2085644 R E Y E N D I CATI0N3 12 Les ÏT-alcoxy N'-(3-chloro 4-thiocyanophényl) urées de formule générale : Yl s "^R Cl *1 dans laquelle R et R^ identiques ou différents représentent un 5 radical alcoyle inférieur ou un radical alcényle inférieur ou forment ensemble le reste alcoylène d'un hétérocycle azoté. 22 La N-méthoxy N-méthyl N'-(3-chloro 4-thiocyanophényl) urée. 3- La N-méthoxy ÎT-allyl U'—(3-chloro 4-thiocyanophényl) urée. 40 La U-^T 3-chloro 4-thiocyanophényl) carbamoy 1/i s oxazoline. 10 52 L'application à la thérapeutique des.composés selon 12, notamment comme médicament antibactérien et antifongique. 62 Un procédé de préparation des composés selon 12, qui consiste à faire réagir un dérivé fonctionnel d'un acide H-R^ ÎT-OR carbamique sur/>-chloro 4-thiocyano aniline en milieu basique. 15 72 Un procédé selon 62 dans lequel le dérivé fonctionnel de l'acide carbamique est un halogénure d'acide et notamment le chlorure. 82 Un procédé selon 62, dans lequel le dérivé fonctionnel de l'acide carbamique est un ester d'alcoyle inférieur et notamment l'ester éthylique. 20 92 Un procédé selon 62, dans lequel la condensation est effectuée en présence d'une base tertiaire^telle qu'une dialcoylamine, une aminé cyclique aromatique ou hydro aromatique ou une dialcoylarylamine. 102 Les compositions pharmaceutiques renfermant comme principe actif au moins un des composés selon 12, et un excipient inerte 25 adapté pour l'usage externe.