FR 2063919 A1 19710716 FR 6931912 A 19690919 31912 1 2063919 La présente invention, faite dans les services de la FRANÇAISE DES MATIERES COLORANTES S.A., concerne de nouveaux médicaments à activité amoebicide constitués par les sels d' antimoine de l'hydroxy-8 quinoléine et des composés suivants en dérivant : Ces sels ont un pouvoir amoebicide puissant et sont pratiquement atoxiques aux doses d'utilisation en thérapeutique humaine. Leur application dans ce domaine est ainsi particulièrement avantageuse. Préparation A titre d'exemple, ces produits peuvent être préparés suivant les procédés ci-dessous, dans lesquels les parties indiquées sont en poids, sauf mention contraire. Exemple 1 : Sel d'antimoine de l'hydroxy-8 quinoléine On prépare une solution chlorhydrique de chlorure d'antimoine en dissolvant 22,9 parties de trichlorure d'antimoine dans 40 parties d'eau distillée additionnées de 10 parties en méthyl-6 hydroxy-8 quinoléine, dibromo-5,7 hydroxy-8 quinoléine, dibromo-5,7 méthyl-6 hydroxy-8 quinoléine chloro-5 hydroxy-8 quinoléine chloro-5 iodo-7 hydroxy-8 quinoléine chloro-5 iodo-7 méthyl-6 hydroxy-8 quinoléine, nitro-5 hydroxy-8 quinoléine sulfo-5 hydroxy-8 quinoléine 0 3 volume d'acide chlorhydrique pur à 36 io. On dissout d'autre part 54,5 parties de chlorhydrate d*hydroxy-8 quinoléine dans 40 parties d'eau distillée et fil- 69 31912 2 2063919 tre si besoin est. On ajoute cette solution à celle de chlorure d'antimoine, chauffe à 45-50°C et neutralise par addition d'ammoniaque à 20% jusqu'à pH 6-7. On maintient quelques minutes sous agita-5 tion à une température comprise entre 50 et 60°C, filtre à cette température et lave le sel d'antimoine avec de l'eau distillée additionnée d'acide acétique (2 parties d'acide acétique pour 500 parties d'eau distillée) jusqu'à ce que les eaux de lavage ne renferment plus de chlorures. On sèche à 100°C et 10 obtient 52 parties du sel de formule ci-dessus dont les teneurs en oxyquinoléine et en antimoine sont respectivement s 78,8f> et 21,7 fo. Exemple 2 ; Sel d'antimoine de la méthyl-6 hydroxy-8 quinoléine. 58,7 parties de chlorhydrate de la méthyl-6 hydroxy-8 quinoléine. On obtient un sel ayant une teneur en méthyl oxyquinoléine de 79,6 fo et une teneur en antimoine de 20,8$. Exemple 3 ; Sel d'antimoine de la dibromo-5,7 hydroxy-8 quinoléine Br 15 On opère suivant le procédé de l'exemple 1 en utilisant 0 Dans un appareil muni d'un dispositif d'agitation, d'un thermomètre et d'un réfrigérant à reflux, on introduit 600 parties en volume d'alcool éthyliqueà 95°C et 30,3 parties de 69 31912 3 2063919 dibromo-5,7 hydroxy-8 quinoléine. On chauffe au reflux et ajoute lentement une solution de 23 parties de trichlorure d'antimoine dans 50 parties en volume d'acide chlorhydrique pur à 36 On maintient la température du reflux pendant quelques minutes en 5 vue d'obtenir une solution limpide. On filtre à 60°C environ pour.éliminer les impuretés éventuelles et neutralise à cette température par addition lente d'environ 75 parties en volume d'ammoniaque à 20 $ jusqu'à pH 6-7. Le sel d'antimoine est filtré, lavé à l'alcool à 95°s puis à l'eau distillée jusqu'à ce 10 que les eaux de lavage ne renferment plus de chlorures, et séché à 100°0. On obtient 41,5 parties d'un sel dont les teneurs sont les suivantes : brome i 35,92fo, antimoine ; 27,17 %, azote ; 3,17#. Exemple 4 : Sel d'antimoine de la dibromo-5,7 méthyl-6 hydroxy-8 15 quinoléine La préparation de ce sel est analogue au procédé de l'exemple 3. On utilise 31,7 parties de dibromo-5,7 méthyl-6 hydroxy-8 quinoléine. Poids du sel d'antimoine obtenu : 43 20 parties. Teneurs : azote : 3,05 % brome : 34,95 % antimoine :27,32 fo Exemple 5 : Sel d'antimoine de la chloro-5 iodo-7 hydroxy-8 25 quinoléine Cl ? SbO 69 31912 4 2063919 10 On opère comme à l'exemple 3 mais en utilisant 30,5 parties de chloro-5 iodo-7 hydroxy-8 quinoléine. Poids du sel d'antimoine obtenu : 40 parties. Teneurs : azote s 3,19 chlore s 7,99 ?° iode ; 29,39 f» antimoine ; 28,15 % Exemple" 6 i Sel d'antimoine de la chloro-5 iodo-7 méthyl-6 hydroxy-8 quinoléine QL PM = 456,3 On procède comme à l'exemple 3 mais en utilisant 32 parties de chloro-5 iodo-7 méthyl-6 hydroxy-8 quinoléine et 1500 parties en -volume d'alcool éthylique à 95° = Poids obtenu s 42 parties. 15 Teneurs en ÏT = 3,31 Cl = 7,43 % I = 26,03 %, Sb = 28,37 # Exemple 7 : Sel d'antimoine de la chloro-5 hydroxy-8 quinoléine Cl PM = 316,3 On opère suivant le procédé décrit à l'exemple 3 mais en 20 utilisant 18 parties de chloro-5 hydroxy-8 quinoléine. Poids obtenu s 29 parties. Teneurs : chlore ; 11,30 azote : 4,53 f°, antimoine : 38,85$ Exemple 8 : Sel d'antimoine de la nitro-5 hydroxy-8 quinoléine 69 31912 5 2063919 NO 2 PM = 326,8 0 SbO On prépare «ne solution chlorhydrique de chlorure d'antimoine en dissolvant 23 parties de trichlorure d'antimoine dans 40 parties d'eau distillée additionnées de 10 parties en volume d'acide chlorhydrique pur à 36 fo. D'autre part, on dissout 19 parties de nitro-5 hydroxy-8 quinoléine dans 400 parties d'eau distillée additionnées de 80 parties en volume d'acide sulfurique pur à 96$. La solution limpide obtenue est ajoutée à celle du chlorure d'antimoine. On chauffe à 50-60°C, neutralise par addition d' ammoniaque à 20 fo jusqu'à pH 3-3>5 et maintient quelques minutes sous agitation à une température comprise entre 50 et 60°C. Le sel d'antimoine formé est filtré à cette température, lavé à l'eau distillée jusqu'à ce que les eaux de lavage ne renferment plus de sulfates et séché à 100°0. Poids obtenu : 32 parties. Teneur en azote ; 8,65 Teneur en antimoine : 37,12 c,o. Exemple 9 : Sel d'antimoine de la sulfo-5 hydroxy-8 quinoléine SbOH PM = 630,8 2 A) On dissout 36 parties de tartrate neutre de sodium dans 100 parties d'eau distillée et prépare d'autre part une solution chlorhydrique de chlorure d'antimoine en dissolvant 23 parties de trichlorure d'antimoine dans 40 parties d'eau distillée additionnées de 10 parties en volume d'acide chlorhydrique pur à 69 31912 o 2063919 36fo. On ajoute très lentement cette solution à la première en maintenant le pH du mélange entre 7 et 7,5 par addition de soude à 10 fo soit 100 parties environ. On filtre si le mélange n'est pas limpide. 5 B) On dissout en outre 44,5 parties de sulfo-5 hydroxy-8 quinoléine dans 500 parties d'eau distillée additionnées de 25 parties en volume d'une solution d'hydroxyde de sodium à 30 fo. On chauffe à 80-85°C? le pH de la solution étant ajusté à 8-8,2. On filtre s'il existe un trouble. 10 Dans cette solution chaude on introduit lentement sous agitation la solution du complexe tartrique d'antimoine préparée sous A. Par refroidissement le sel d'antimoine de la sulfo-5 hydroxy-8 quinoléine cristallise. Il est filtré, lavé à l'alcool à 50° puis à l'alcool à 95° et enfin séché à 80°0. 15 Poids obtenu ; 45 parties. Teneurs en azote ° 4?52 fo, soufre : 9,95 /° , antimoine : 19 f°- Propriétés toxicologiques. Les sels d'antimoine sont administrés par voie orale et tubage gastrique à des souris albinos origine CHARLES RIVER CD^_ 20 Pour tous les dérivés décrits la DL 50 est supérieure à 900 mg/kg. Aux doses d'utilisation en thérapeutique humaine, ces produits peuvent être considérés corme atoxiques. Propriétés bactériostatiques Le sel d'antimoine de l'hydroxy-8 quinoléine, choisi à 25 titre d'exemple, est mis en suspension dans le polyéthylène-glycol 400. Le milieu de culture est préparé à partir d'un milieu peptoné, salé et gélose ayant la composition suivante : Extrait de viande : 5 g Peptone ; 10 g 30 Chlorure de sodium :5g Gélose : 20 g Eau distillée pH 7,2 ; 1000 g (q.s) 69 31912 7 2063919 Après liquéfaction au bain-marie et refroidissement à 40-50°C, ce milieu est coulé dans des boîtes de Pétri contenant la suspension du sel d'antimoine précité et fermement agité afin de répartir les quelques graine insolubles de celui-ci de 5 façon aussi régulière que possible au sein du milieu gélosé. Les souches bactériennes sont repiquées la veille de l'essai en bouillon peptoné salé (sans gélose). Après 24 heures en étuve à 37°C, le milieu coulé en boîte de Pétri est ensemencé en stries en surface et les boîtes mises à l1étuve à 37°C. Une 1C boîte témoin reçoit du polyéthylène glycol 400. Les résultats sont les suivants ; Concentrations bactériostatiquës exprimées en mg/litre après 72 heures d'incubation à 37°C Staphylocoque E.Coli Entérocoque Pneumob acille Pyo-cianique 15 10 20 10 10 > 40 Ces résultats montrent que le sel d'antimoine de l'hydroxy-8 quinoléine possède un pouvoir bactériostatique élevé. Les tubes témoins, sans produit inhibiteur, Liais contenant toutes les concentrations de polyéthylène glycol 400 em-20 ployées ont toujours montré une culture positive pour les germes utilisés. Propriétés amoebicides • Les essais ont consisté à déterminer "in vitro" l'activité amoebicide sur une souche d'Ëntam.oeba dysenteriae entretenue 5 sur milieu de PAVL0VA-J0IIES, en prenant conme substance de référence le chlorhydrate d'énétine et en utilisant deux procédés différents. 1) Inhibition au départ des cultures On détermine la concentration minimale qui empêche la reprise de la culture après 72 heures à 37°C; l'ensemencement est d'environ 10.000 amibes par tube de culture; le produit à 69 31912 8 2063919 essayer est mis en suspension dans le ïween 80. 2) Action léthale sur une culture de 3 jours. On détermine la concentration minimale qui tue toutes les amibes d'une culture de 3 jours après 48 heures à 37°C. ; 5 l'ensemencement est d'environ 10.000 amibes par tube; le produit à essayer est mis en suspension dans le Iween 80. Les tableaux I -II -- III ci-dessous réunissent les résultats obtenus; A désigne le sel d'antimoine de l'hydroxy-8 quinoléine, B le sel d'antimoine de la méthyl-6 hydro-10 xy-8 quinoléine» Dans le tableau III, les produits A et B ont été comparés au chlorhydrate d'émétine (C.E) utilisé comme produit de référence. I - Activité amoebicide "in vitro" : inhibition au départ des cultures 15 Concentrations 1/10.000 1/100.000 1/1.000.000 Produit A 0 0 +++ Produit B 0 0 +++ ~ Activité amoebicide "in vitro" ; inhibition au départ 20 des cultures Concentrations 1/100.000 1/200.000 1/400.000 1/1.600.000 1/800.000 Produit A 0 0 0 ++ 0 Produit B 0 0 0 25 III - Activité amoebicide "in vitro" s action léthale sur une culture de 3 jours Concentrations 1/100.000 1/200.000 1/400.000 1/800.000 1/1.600.000 Produit A 0 0 ++ +++ +++ 30 Produit B 0 + ++ +++ +++ C.E. 0 + -H- +4*4- ++■+- 69 31912 9 2063919 Applications thérapeutiques Les indications, pour cas différents sels d'antimoine de dérivés de l'hydroxy-8 quinoléine, concernent le traitement des bilharzioses, des amibiases, des leishmanioses, des 5 filarioses, des diarrhées microbiennes* Ces produits peuvent être administrés sous la forme de comprimés dosés à 10 mg à raison de 6 à 10 par jour. 69 31912 10 2063919 ISfSfîICilIOlI Nouveaux médicaments à activité amoebicide constitués par les sels d'antimoine de l'hydroxy-8 quinoléine et des composés suivants en dérivant s 5 . méthyl-6 hydroxy-8 quinoléine, dibromo-5,7 hydroxy-8 quinoléine, dibrorao-5 >7 méthyl-6 hydroxy-8 quinoléine chloro-5 hydroxy-8 quinoléine chloro-5 iodo-7 hydroxy-8 quinoléine 10 chloro-5 iodo-7 iaéth.yl-6 hydroxy-8 quinoléine, nitro-5 hydroxy-8 quinoléine sulfo-5 hydroxy-8 quinoléine