FR 2107943 A1 19720512 FR 7134313 A 19710923 71 34313 1 2107943 La présente invention concerne un procédé nouveau de préparation du composé intéressant connu, appelé 2,2'-anhydro-ara- 2 2 21 cytidine (également appelé 0 .2'-anhydro-ara-cytidine et 0 ,0 - anhydro-1-p-D-arabinofuranosylcytosine) de formule I : nh 5 ' hoc h2 nl il «■ ho " (base) 5 et ses sels d'addition d'acides. Elle concerne également la préparation de nouvelles 5 ' -O-acyl-2.2 ' -anhydro-ara-c.vtidines de formule II : nh2 ho dans laquelle X^—^ est la base conjuguée d'un acide fort et R est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques et alicyclioues 10 à chaîne droite ou ramifiée en à c^q ; des radicaux aromatiquesj 71 34313 2 2107943 des radicaux aromatiques monocycliques ou bicycliques en Cg à C20 ; des radicaux hétérocycliques monocycliques en à c^q ; des radicaux araliphatiques en C^ à C.|2 ; ou des radicaux hydrocarbonés à structure en cage, en à ©2Q ; y compris ces radicaux substitués 5 par des halogènes, ou des groupes hydroxyle, carboxyle, nitro, alkoxyle ou mercapto. l'invention concerne également la préparation de 51-O-acylates d1ara-cytidine à partir de composés de formules I et II. Elle concerne en outre des compositions pharmaceutiques de composés de formules I et II, destinées au traitement d'états pa-10 thologiques. Les composés de formules I et II sont doués d'activités antivirale, antitumorale et immuno-suppressive. La Demanderesse a découvert, et ceci fait l'objet de la-présente invention, que la 2.2'-anhydro-ara-cytidine (I) également appelée anhydro-ara-cytidine. et ses 5'-O-acylates (II), ont la 15 même activité biologique et thérapeutique générale que 1'ara-cytidine elle-même. Par exemple, ces composés sont doués d'activité contre la prolifération de cellules néoplastiques telles que les cellules leucémiques. Ils ont également une activité antivirale et immuno-suppressive, par exemple en s'opposant au rejet d'organes et de tis--20 sus transplantés, et dans le traitement de maladies auto-immunisantes, par exemple la sclérose en plaques et l'arthrite rhumatismale. En général, 1'anhydro-ara-cytidine, les 51-O-acylates et leurs compositions thérapeutiques peuvent être utilisés dans les cas où 1'ara-cytidine serait utilisée elle-même. Pai exemple, l'activité p 25 antitumorale du chlorhydrate de 0 .2'-anhydro-ara-cytidine (I) a été démontrée par un test in vivo, portant sur la leucémie lympholde L1210 chez la souris. La méthode utilisée se conforme au protocole établi par le "Cancer Chemotherapy National Service Center" (CCNSC) et décrite dans "Cancer Chemotherapy Reports" N° 25, pages 1-67, 30 1962. On implante par voie intrapéritonéale chez les souris expérimentales, le liquide d'ascite (contenant un nombre connu de cellules leucémiques L1210) prélevé sur des souris. Les souris traitées sont de la même souche (BDF^), du même sexe, de la même origine et du même poids (19 + 2 g). Elles sont réparties au hasard en groupes de 35 8-10 animaux, y compris un groupe témoin. Le traitement est commencé 24 heures après l'implantation de la tumeur et il est poursuivi conformément au plan de traitement que l'on utilise. Les agents 71 34313 3 2107943 dont on expérimente l'activité antitumorale sont dissous ou mis en suspension dans un véhicule stérile (solution isotonique de chlorure de sodium ou solution aqueuse à 0,25 $ de méthylcellulose). Les agents sont administrés soit par voie intrapéritonéale (i.p.), 5 soit par voie orale (p.o.) dans un volume uniforme de 0,2 ml. Les animaux témoins ne reçoivent que le véhicule approprié. On observe les souris et on compte les souris mortes, deux fois par jour. Pour déterminer l'efficacité du traitement, on établit les temps moyens de survie et les pourcentages d'augmentation de la durée de vie 10 (ADV %) comparativement à des animaux témoins et conformément au protocole CCNSC. Une étude approfondie fait supposer qu'une valeur ADV de 25 % est un critère minimal pour l'activité antitumorale. Cette valeur signifie que l'animal moyen du groupe traité a une durée de vie plus longue de 25 % que celle de l'animal moyen du 15 groupe non traité (témoin). Les résultats sont les suivants : le chlorhydrate de 2,2'-anhydro-ara-cytidine (I), administré à une dose de 100 mg/kg (i.p.) donne une valeur ADV % de 25 à 50 ; à la dose de 200 mg/kg (i.p.) et à la dose de 300 mg/kg (i.p.), la valeur ADV est de 50 à 20 100 ; à la dose de 500 mg/kg (p.o.), la valeur ADV est de 25 à 50 95. La préparation du chlorhydrate de 2.2 '-anh.vdro-ara-cytidine (I) par l'action de la phosphatase prostatique sur le 3',5'-di- phosphate du dérivé anhydro, que l'on obtient quant à lui par phos- avec 25 phorylation d1ara-cytidine/I'acide polyphosphorique t a été décrite pour la première fois dans "Proc. Chem. Soc." (1959). La préparation du chlorhydrate de 2.2*-anhydro-ara-cytidine (I) à partir de 2'-chloro-2'-déoxy-ara-cytidine a été décrite dans "J. Org. Chem." 32. 1462. La préparation de l'ester 31-phosphorique de 2,2'-anhydro-30 ara-cytidine en passant par un dérivé polytriméthylsilylé du phosphate 2',3'-cyclique correspondant, avec 3'-déphosphorylation enzy-matique subséquente en 2.2'-anhydro-ara-cytidine (I), est décrite dans "J. Am. Chem. Soc." 21, 5409. Toutefois, aucun de ces procédés n'offre un moyen pratique et peu coûteux de préparer les composés 35 de formule I. Pour pallier les différents inconvénients des synthèses indiquées ci-dessus, l'invention offre un procédé nouveau, plus satisfaisant, de production d'un composé de formule I. 71 34313 4 2107943 hoçhe ha I (sel d'addition d'acide) (dans laquelle X® est la base conjuguée d'un acide fort), procédé qui consiste : (1) à mélanger la 2-amino-0-D-arabinofurano-[ 1 ', 2 ' : 4,5 ]-2-oxazoline de formule : avec un acide fort dont la base conjuguée est la même que celle du composé de formule I ci-dessus, pour former un composé correspondant de formule : 71 34313 5 2107943 (dans laquelle X® a la même définition que ci-dessus) ; (2) à chauffer le composé ainsi produit, résultant de l'étape (1), avec un cyanacétylène pour produire un composé correspondant de formule I donnée ci-dessus. 5 L'étape (1) du procédé de l'invention implique la mise en suspension de 2-amino-p-D-arabinofurano-[l',2':4,5l-2-oxazoline (préparée comme indiqué dans "J. Mol. Biol." £2, 531) dans un solvant organique tel que le méthanol, l'éthanol, 1'acétonitrile, l'acétone ou le diméthylformamide (de préférence le méthanoU), à une 10 température d'environ -10 à environ 40°C (de préférence d'environ 25°C) et on ajoute une quantité d'un acide concentré fort tel que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique ou l'acide nitrique (de préférence l'acide chlorhydrique ou le gaz chlorhydrique) égale à 1-2 moles par rapport à l'oxazoline (on pré-15 fère environ 1,2 mole). Lorsqu'on agite le mélange, on obtient aisément une solution limpide, qui donne, après élimination du solvant (de préférence sous vide) et séchage, le sel d'addition d'acide désiré de la 2-amino-p-D-arabinofurano-[l',2':A,5]-2-oxazoline que l'on peut utiliser sans purification dans l'étape (2). 20 Dans l'étape (2) du procédé de l'invention, le sel d'addi tion d'acide de la 2-amino-|3-D-arabinofurano-[l ' ,2': 4,5]-2-oxazoline obtenu dans l'étape (1) est dissous dans un solvant organique tel que le diméthylformamide, le diméthylacétamide ou le diméthylsulf0-xyde, de préférence le diméthylacétamide (environ 0,1 mole de 25 l'oxazoline mentionnée ci-dessus par 100 ml de solvant) et on ajoute 71 34313 6 2107943 une à deux moles (de préférence environ 1,2 mole) de cyanacétylène. On chauffe la solution résultante d'environ 50 à environ 130°C (de préférence à environ 100°C) pendant environ une à deux heures (pour effectuer la cyclisation) ou jusqu'à ce qu'il ne se forme plus de 5 précipité. On refroidit le mélange, on recueille le produit (par exemple par filtration), on le lave avec des solvants (par exemple diméthylacétamide, puis éther) et on le sèche pour obtenir le sel d'addition d'acide de 2.2'-anhydro-ara-cytidine désiré (I). La présente invention concerne aussi un procédé nouveau de 10 production d'un composé de formule III : (dans laquelle R est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques ou alicycliques à chaîne droite ou ramifiée contenant 1 à 20 atomes de carbone ; des radicaux aromatiques monocycliques ou bi-cycliques en C6 à C20 ; des radicaux monocycliques hétérocycliques 15 en à C1 q ; des radicaux araliphatiques en à ; ou des radicaux hydrocarbonés à structure en cage contenant 7 à 20 atomes de carbone ; y compris ces radicaux substitués par un halogène ou des groupes hydroxyle, carboxyle, nitro, alkoxyle ou mercapto) et de leurs sels d'addition d'acides, procédé caractérisé par le fait 20 qu'il consiste : (1) à acyler en position 5'-0 un composé de formule : 71 34313 2107943 hoçhg (dans laquelle X® est la base conjuguée d'un acide fort), pour obtenir un composé correspondant de formule : 0..O nhs x I I r\ (dans laquelle X^ et R ont la même définition que ci-dessus) ; (2) à hydrolyser au niveau de la liaison 2,2'-anhydro le 5 composé ainsi produit résultant de l'étape (1) pour former un composé correspondant de formule III donnée ci-dessus. Dans l'étape (1) du procédé de l'invention, que l'on vient de définir ci-dessus, pour la préparation des 5'-O-acylates (III), 71 34313 8 2107943 on met en suspension un sel d'addition d'acide de 2,2'-anhydro-ara-cytidine (I) dans un solvant correct tel que le diméthylformamide, le diméthylacétamide ou le triamide hexaméthylphospho-rique et on ajoute un agent d'acylation (par exemple un chlorure ou 5 anhydride d'acide approprié). On agite le mélange pendant environ 1 à 3 jours à une température d'environ 0 à 100°C, de préférence à 25°C, jusqu'à ce qu'on obtienne une solution limpide. L'acylation s'effectue presque exclusivement au niveau de la position 5'-OH. Le solvant est évaporé sous vide et le résidu est séché sous vide. 10 Le résidu ainsi obtenu consiste en 5'-0-acy1-2,2'-anhydro- ara-cytidine (II) brut, contenant un peu de 3',5'-di-(0-acyl)-anhydro-ara-cytidine, un résidu de matière première et d'autres impuretés. Il est fréquent que le produit 5'-O-acylique (il)désiré cristallise sélectivement pendant 1'évaporation et puisse être 15 isolé par filtration. Dans d'autres cas, l'anhydride 5'-O-acylé peut encore être purifié avant ou après 1'évaporation, suivant ce qui convient, par des procédés tels qu'une chromatographie sur colonne, une distribution à contre-courant, la transformation par métathèse en un sel insoluble, ou d'autres procédés pratiques. Par 20 suite de la labilité virtuelle de la liaison 2,2'-anhydro, on doit éviter l'exposition à des milieux aqueux alcalins. La 51-0-acyl-2,2'-anhydro-ara-cytidine (II) purifiée peut être obtenue sous la forme de substances sèches qui conviennent pour la formulation pharmaceutique. Les composés de formule II partagent les activités générale, 25 antivirale, antitumorale et immunosuppressive de 1'ara-cytidine. Dans l'étape (2) du procédé de l'invention, le résidu de l'étape (1), à savoir un mélange du sel d'addition d'acide de 5'-0-acyl-2.2'-anhydro-ara-cytidine (II), un peu de composé disubsti-tué et de matière première (I) n'ayant pas réagi, est dissous dans 30 un mélange (environ 1:1) d'eau et d'un solvant miscible à l'eau tel que le méthanol ou l'éthanol, et le pH est ajusté à environ 8 (entre environ 7et 10) avec une solution d'hydroxyde de métal alcalin tel que l'hydroxyde de sodium. Dans cette gamme de pH, la liaison 2,2'-anhydro du composé de formule II est hydrolysée pour pro-35 duire la 5'-0-acyl-ara-cytidine (III) désirée, sans effet notable sur la liaison ester entre le radical acyle et l'atome d'oxygène en position 5' du radical arabinose. La progression de l'hydrolyse 71 34313 9 2107943 (II III) est suivie par chromatographie en couche mince. Lorsque la chromâtographie en couche mince indique que le composé anhydro (II) s'est transformé en composé de formule III, le solvant est chassé sous vide et la 5'-O-acy1-ara-cytidine (III), le cas échéant, peut être purifiée par des procédés classiques, par exemple par cristallisation dans un solvant organique aqueux ou bien, le cas échéant, par chromâtographie sur colonne de gel de silice ou sur un autre support en utilisant, par exemple, le mélange de solvants méthyléthylcétone-acétone-eau (72:20:8). Le symbole R des formules données ci-dessus peut représenter des groupes méthyle, éthyle, tertiobutyle, 2,2-diméthylpropyle, 1-chloro-2,3-diméthylbutyle, 2,2-diméthylpropyle, 1-mercapto-2,2-diméthylpropyle, phényle, 2-méthylphényle, 2,6-diméthylphényle, 2,4,6-triméthylphényle, 1-naphtyle, 2-naphtyle, l'un des groupes de formules chs chs 9 a > O" @©L 9 y 71 34313 10 2107943 h et aussi des groupes qui, en association avec le groupe -C-, représentent le groupe acyle d'acides polycarboxyliques tels que les acides glutamique, glutarique, succinique, fumarique, aconitique, itaconique, lévulinique, 3,3-diméthylglutarique et d'autres acides 5 3,3-dialkylglutariques, ainsi que d'autres acides qui seront illustrés ci-après. Une classe importante des 5'-O-acy1-ara-cytldines (III) préparées au moyen du procédé de l'invention comprend celle pour lesquelles l'agent d'acylation utilisé dans l'étape (1) est l'halo-10 génure ou l'anhydride d'acyle d'un acide aliphatique contenant 1 à 20 atomes de carbone, tel que le chlorure ou l'anhydride d'acétyle, le bromure ou l'anhydride d'isobutyryle, le chlorure ou l'anhydride de caproyle, le chlorure ou l'anhydride de palmityle, le chlorure ou l'anhydride de stéaryle, le chlorure ou l'anhydride de iauryle, 15 le chlorure ou l'anhydride d'oléyle, le chlorure ou l'anhydride d'acide myristique, leurs isomères, etc. Tous les composés répondant à la formule I, les composés intermédiaires permettant de les obtenir, et les composés de formules II et III données ci-dessus, peuvent être isolés de leurs mé-20 langes réactionnels respectifs par des moyens classiques, par exemple, lorsqu'on utilise un solvant miscible à l'eau, en versant le mélange réactionnel dans de l'eau et en séparant le précipité résultant par filtration ou par extraction avec des solvants non miscibles à l'eau. En général, la liaison 2,2'-anhydro des composés de formules 25 I et II est assez stable en solution aqueuse pour autant que le groupe NH de l'atome de carbone 4 est protoné, c'est-à-dire si le composé est sous la forme d'un sel d'addition d'acide. Toutefois, une exposition prolongée à des milieux aqueux doit être évitée. Une purification supplémentaire des produits peut être effectuée par 30 des moyens classiques, par exemple.par chromâtographie par élution sur colonne adsorbante avec un solvant correct tel que l'acétone, 71 34313 2107943 l'acétate éthylique, l'éther ou des mélanges et combinaisons de ces solvants ; ainsi que par chromatographie avec gradient d'élu-tion sur colonne adsorbante avec un mélange convenable de solvants, tels que ceux qui sont indiqués ci-dessus. 5 Pour l'administration par voie orale, la 2,2'-anhydro-ara- cytidine et ses sels d'addition d'acides de formule I et ses 5'-0-acylates de formule II, peuvent être formulés avec un véhicule phanoaceutique pour obtenir des formes posologiques unitaires solides ou liquides. Les formes solides convenables comprennent des compri-10 més, aui peuvent être enrobés, par exemple kératinisés, ou non enrobés ; des pilules, des capsules dures ou molles ; des granulés, des poudres, des cachets, etc. Les comprimés kératinisés constituent une forme préférée. Les enrobages convenables pour comprimés enrobés comprennent une couche étanche de gomme laque, un revêtement à 15 base de glucides masquant le goût, par exemple un revêtement de sucre et de méthylcellulose, et un revêtement lisse de type lipidique, par exemple en cire de carnauba. Le revêtement peut être (a) un revêtement du type lipidique de nature semi-perméable destiné à retarder l'absorption du principal ingrédient actif pour exercer un 20 effet soutenu ; ou bien (b) des substances de kératinisation telles qu'un copolymère de styrène et d'acide maléique et l'acétate-phtalate de cellulose, qui résistent à la libération de l'ingrédient actif dans l'estomac et en permettent la libération dans la partie supérieure de l'intestin. Le diluant ou véhicule pharmaceutique 25 destiné à ces formes solides consiste avantageusement en amidon de mais, lactose, phosphate dicalcique, sulfate de calcium, talc, acide stéarique, stéarate de magnésium et gommes. Les formes liquides convenables comprennent des solutions, des suspensions, des sirops et des émulsions. Le véhicule pharmaceutique utilisé pour 30 ces formes liquides consiste avantageusement en eau, huiles et émulsions du type eau-dans-huile. Le cas échéant, on peut ajouter des agents convenables de mise en dispersion ou en suspension, par exemple le polysorbate 80, la gomme adragante, la gomme arabique, la gélose, une lécithine, le dextrane, le sel de sodium de la 35 carboxyméthylcellulose, la méthylcellulose, la polyvinylpyrrolidone, la gélatine et leurs mélanges. Les huiles qui conviennent pour les solutions et les émulsions du type eau-dans-huile comprennent 71 34313 12 2107943 l'huile de graines de coton, l'huile de sésame, l'huile de noix de coco et l'huile d'arachide. Lorsqu'on utilise des formulations aqueuses, ces formulations doivent être fraîchement préparées. Pour l'administration par voie parentérale, les composés de 5 formule I et II peuvent être formulés en solutions aqueuses diluées, suspensions aqueuses et dispersions dans l'huile sous la fonne po-sologique unitaire pour injection intramusculaire, injection intraveineuse lente, perfusion vasculaire, etc. On peut utiliser avantageusement un agent solubilisant, par exemple le N,N-diméthyl-10 acétamide (composé préféré), l'éthanol, etc. D'autres milieux aqueux tels que l'eau pour injectables, une solution saline normale, la solution de Ringer, le plasma sanguin et le sang entier peuvent être utilisés éventuellement. Les compositions de 2.2'-anhydro-ara-cytidine et de ses 15 sels d'addition d'acides (I) et de ses 5'-O-acylates (II) pour l'application locale et topique, par exemple dans le domaine chirurgical, pour des applications intravaginales, intra-urétrales, etc., comprennent des poudres, des aérosols, des pommades, des crèmes, des lotions, des pâtes, des gelées, des suppositoires, etc. 20 Ces compositions de l'ingrédient actif essentiel peuvent contenir des émulsifiants, des solvants, des anti-oxydants, des agents de conservation, des tampons et des substances influençant la consistance. Pour le traitement d'oiseaux et d'animaux domestiques par 25 administration buccale, les composés de formules I et II sont avantageusement préparés sous la forme d'un mélange préalable à ajouter à l'alimentation. Ce mélange préalable peut contenir les composés mentionnés ci-dessus, en mélange avec un diluant pharmaceutique comestible du type déjà mentionné tel que l'amidon, la farine d'avoine, 30 la farine de blé, le carbonate de calcium, le talc, la poudre de poisson, ainsi que d'autres diluants pharmaceutiques non toxiques acceptables par voie buccale. Le mélange préalable, après sa préparation, peut être ajouté à l'alimentation régulière, en apportant ainsi une médication à l'animal ou à l'oiseau pendant son alimenta-35 tion. L'expression "forme posologique unitaire" utilisée dans le présent mémoire désigne des unités discrètes du point de vue 71 34313 13 2107943 physique, qui conviennent comme doses unitaires pour des sujets humains et des animaux, chaque dose unitaire contenant une quantité prédéterminée de substance active calculée de manière à produire l'effet thérapeutique désiré en association avec le diluant, support 5 ou véhicule pharmaceutique requis. Les prescriptions concernant les nouvelles formes posologiques unitaires de l'invention dépendent directement (a) des caractéristiques remarquables de la substance active et de l'effet thérapeutique particulier que l'on désire atteindre et (b) des limitations inhérentes à la technique de for-10 mulation de cette matière active pour l'usage thérapeutique chez les humains et les animaux, comme indiqué en détail dans le présent mémoire, ces particularités entrant dans le cadre de la présente invention. Des exemples de formes posologiques unitaires convenables conformément à l'invention comprennent des comprimés, enrobés ou 15 non enrobés ; des capsules, dures ou molles ; des suppositoires, des paquets de poudre, des granules, des pastilles, des formes administrées par cuillerées, des combinaisons multiples des formes précédentes, et d'autres formes décrites dans le présent mémoire. Les compositions de la présente invention contiennent, par unité 20 posologique, environ 1 mg à environ 1 g de 2.2'-anhydro-ara-c.vtidine. de ses sels d'addition d'acides et de ses 5'-O-acylates en association avec un véhicule pharmaceutique. \ La posologie de la 2.2'-anhydro-ara-cytidine. de ses sels d'addition d'acides (I) et de ses 5'-O-acylates (II), dépend de la 25 voie d'administration, des circonstances du traitement (par exemple gravité de la maladie, traitement accessoire et longueur du traitement) de même que de l'âge, du poids et de l'état physique général du sujet. En général, une posologie quotidienne totale^d'environ 1 à environ 1000 mg par kg est efficace. Les posologies inférieures 30 peuvent être adoptées pour une administration chronique, et les posologies supérieures peuvent l'être pour des cas aigus. On peut procéder à une administration quotidienne unique, une administration répartie en plusieurs doses au cours d'une journée, ou bien on peut suivre des plans intermittents. Dans le domaine chirurgical, et 35 pour d'autres applications locales et topiques, on peut utiliser des formulations contenant 0,5 à 25 $> de là substance active, et de préférence 2 à 5 96. Des concentrations supérieures à 25# peuvent être utilisées pour certaines applications locales. 71 34313 2107943 Les compositions décrites ci-dessus peuvent contenir d'autres ingrédients supplémentaires qui augmentent l'intérêt de l'ingrédient actif essentiel ou accélèrent la réponse clinique désirée au traitement. A ce point de vue, un intérêt particulier est 5 offert par les antibiotiques tels que la tétracycline, l'actino-mycine C et D, la chlortétracycline, la pénicilline, la novobiocine, la néomycine, etc., dans des compositions destinées au traitement dans le domaine chirurgical ; des agents détruisant les monolies, tels que la nystatine, l'amphotéricine B, la trichomycine, etc., 10 dans des compositions destinées à lutter contre les Trichomonas ; des hormones, par exemple le diéthylstilboestrol, la progestérone, la médroxyprogestérone et l'oestradiol ; la fluoxymestérone, la méthyltestostérone et la testostérone ; et en particulier des agents d'alkylation tels que le busulfan, le chlorambucile,le cyclo-15 phosphamide, le chlorhydrate de mechloréthamine, le thio-Tepa, la triéthylène-mélamine et le 5-[bis(2-chloréthyl)amino]uracile. L'administration des compositions de la présente invention permet au vétérinaire de traiter des néoplasmes à évolution maligne tels que des carcinomes, des lymphomes et des sarcomes, et des in-20 fections dues à des Trichomonas et des champignons. L'administration des compositions de la présente invention permet de même au médecin de traiter des néoplasmes à évolution maligne chez les êtres humains. Par exemple, on peut traiter des lymphomes, des sarcomes, des carcinomes, des mélanomes et d'autres 25 types de tumeurs solides ainsi que des tumeurs non solides telles que les leucémies. Les compositions sont particulièrement intéressantes pour le traitement des états mentionnés ci-dessus lorsqu'elles sont administrées en même temps qu'un traitement de radiothérapie, de même qu'avec une administration concomittente d'agents 30 d'alkylation. Les compositions sont également intéressantes à utiliser comme compositions immunosuppressives, par exemple pour combattre le rejet de transplants d'organes, pour le traitement antiviral et pour le traitement de maladies auto-immunisantes, telles que la sclérose en plaques et l'arthrite rhumatismale. 35 L'invention est illustrée par les exemples suivants, donnés à titre non limitatif. 71 34313 15 2107943 1 Chlorhydrate de 2-amino-|3-D-arabinofurano-[l ' ,2' :4,5]-2-oxazoline. On ajoute 45 g (0,3 mole) de D(-)-arabinose et 25,2 g (0,6 mole) de cyanamide à 15 ml d'hydroxyde d'ammonium 6M et 75 ml de mé-5 thanol, et on agite le mélange résultant à la température ambiante pendant environ 16 heures. On conserve le mélange au frais en agitant pendant environ 72 heures, puis on le refroidit au bain de sel et de glace pendant plusieurs heures. On recueille la substance solide, on la lave au méthanol froid, puis à l'éther et on la sèche à 10 l'air, pour obtenir 37,6 g (72 $ de rendement théorique) de 2-amino-p-D-arabinofurano-[l*,2*:4,5]-2-oxazoline fondant à 180,5-181,5°C (décomposition). Analyse : C i<> H i» N % Calculé pour CgH^NgO^ : 41 ,40 5,79 16,08 15 Trouvé : 41,20 6,07 16,14 Absorption infrarouge : NH/0H 3410, 3330, 3290, 3240, 3190, 3140, 2800, 2720, 2680 (cm_1) ; C=N/NH def 1670, 1610 (cm_1) ; C-O/CN/autres 1445, 1780, 1080, 1065, 1050, 20 1005, 950, 885 (Cm_1). On ajoute 27 ml d'acide chlorhydrique concentré à 52,2 g (0,3 mole) de 2-amino-P-D-arabinofurano-[l',2':4,5]-2-oxazoline en suspension dans 300 ml de méthanol. On agite le mélange pour effectuer la dissolution, et on chasse le solvant sous vide pour obtenir 25 un résidu vitreux qu'on sèche ensuite sous vide pour obtenir le chlorhydrate de 2-amino-3-D-arabinofurano-[l1,2':4,5]-2-oxazoline. En suivant le mode opératoire du paragraphe précédent, mais en remplaçant l'acide chlorhydrique par un autre acide tel que les acides bromhydrique, sulfurique, phosphorique, nitrique, trifluor-30 acétique, trichloracétique, etc., on obtient le sel d'addition d'acide correspondant de la 2-amino-P-D-arabinofurano-[l ',2':4,5]-2-oxazoline. Exemple 2 Chlo^ydrate de 2,2'-anhydro-ara-cytidine [chlorhydrate de 0 ,0 -anhydro-1-p-B-arabinofuranosylcytosine ou 2, 2'-anhydro-1-( |3-3>-arabinofuranosyl)cytosine] ( I) 71 34313 2107943 En suivant le mode opératoire décrit dans "Nippon Kagaku Zusshi" 22» 1689, on refroidit environ 500 ml d'ammoniac dans un ballon à environ -80°C et on ajoute lentement du propiolate de mé-thyle. On laisse reposer la solution limpide à environ -80°C pen-5 dant environ 22 heures. On laisse ensuite s'évaporer la majeure partie de l'ammoniac et on sèche la matière solide sous vide en maintenant le ballon au bain de glace, pour obtenir 81 g (94 % du rendement théorique) d'acétylènecarboxamide. On agite, à l'agitateur magnétique, environ 175 ml de 10 xylène anhydre et 75 g de pentoxyde de phosphore dans un ballon à 3 tubulures de 2 litres de capacité, équipé d'une tête de prélèvement, d'un condenseur, d'un adaptateur courbe muni d'un tube dessicateur de chlorure de calcium, et d'un ballon de réception refroidi au bain de glace. On purge l'appareil à l'azote et on ajoute 25 g 15 d'acétylènecarboxamide, qu'on mélange intimement avec le pentoxyde de phosphore, et on chauffe rapidement le mélange au bain d'huile jusqu'à ce que la température du bain s'approche de 125°C, la vitesse de chauffage étant alors réduite. Lorsque la température du bain atteint 135°C, la réaction se déclenche et la masse collante 20 gonfle à mesure que la réaction progresse. Le produit distille à environ 40-45°C en donnant 13,8 g (75 % de la théorie) de cyan-acétylène ayant -un point de fusion de 5°C. On dissout le chlorhydrate de 2-amino-(3-D-arabinofurano-[1',2':4,5l-2-oxazoline préparé dans l'exemple 1, dans 300 ml de 25 diméthylacétamide, et on ajoute à la solution environ 17 g (excès de 10 #) de cyanacétylène. Le mélange s'échauffe spontanément à environ 55°C puis se refroidit à la température ambiante. On chauffe la solution à environ 95°C pendant environ 2 heures pour effectuer la cyclisation, période pendant laquelle le produit se sépare sous 30 la forme d'une substance solide cristalline blanche. On refroidit le mélange, on recueille le produit, on lave d'abord au diméthylacétamide, puis à l'éther et on le sèche pour obtenir 41,5 g (53 de la théorie) de chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine (I), ayant un point de fusion de 260°C (décomposition) et une rotation 35 Uljp de -79 0 (chloroforme, dimé thylsulfoxyde). Analyse : C Calculé pour CgH^N^O^-HCl : 41 ,31 4,62 16,06 13,55 Trouvé : 41,12 5,12 15,68 13,60 71 34313 17 2107943 + Spectre infrarouge ; OH/NH 3310, 3180, 3110, pice faibles 2800-2600 (cm"1)î C=N/C=C 1685s., 1660s., 1575, 1560, 1500 (cm-1); 5 C-O/C-N/autres 1265, 1205, 1110, 1090, 1070, 1030, 1000, 995 (Cm~1) autres 965, 930, 805, 790, 735 (cm~1) ; En suivant le mode opératoire de l'exemple 2, mais en remplaçant le chlorhydrate de 2-amino-3-D-arabinofurano-[l',2':4,53-10 2-oxazoline par un autre sel d'addition d'acide de ce composé, on 2 obtient un sel d'addition d'acide correspondant de 0 ^'-anhydro-ara-cytidine (I), par exemple le bromhydrate, le sulfate, le phosphate, le nitrate, le trifluoracétate, le trichloracétate, etc. Les sels d'addition d'acides de 2,21-anhydro-ara-cytidine 15 (I) peuvent être transformés en base libre par neutralisation avec Une solution aqueuse diluée d'hydroxyde de sodium ou d'hydroxyde de potassium. Exemple 3 Chlorhydrate de 5'-0-acétyl-2,2'-anhydro-ara-cytidine (ii) 20 On met en suspension dans 50 ml de diméthylformamide un échantillon de 2,6 g (10 milllmoles) de chlorhydrate de 2,2'-anhydro-ara-cytidine (préparé comme dans l'exemple 2). On ajoute goutte à goutte & cette suspension, 0,94 g (12 millimoles) de chlorure d'acétyle. On agite le mélange réactionnel à environ 25°C 25 pendant environ 36 heures, puis on le verse dans 60 ml d'eau et on évapore le mélange à sec sous vide. On dissout le résidu dans du chloroforme, on lave la solution résultante avec de l'eau puis une solution saturée de chlorure de sodium et on la déshydrate sur du svilfate de sodium. On chasse le chloroforme par distillation sous 30 vide et on cristallise le résidu dans de l'acétone pour obtenir le chlorhydrate de 5'-0-acétyl-2.2'-anhydro-ara-cytidine (II). En suivant le mode opératoire de l'exemple 3, mais en remplaçant le chlorure d'acétyle par un autre agent d'acylation, par exemple l'un des suivants : 35 (1) chlorure de pivaloyle, (2) bromure d'isobutyryle, (3) chlorure d'octanoyle, 71 34313 2107943. (4) chlorure de myristyle, (5) chlorure de stéaryle, (6) anhydride oléylique, (7) chlorure de fî-chloropivaloyle, 5 (8) chlorure de p-nitrobenzoyle, (9) chlorure de o-toluoyle, (10) chlorure de benzoyle, (11) chlorure de 2,6-diméthylbenzoyle, (12) chlorure de 2,4,6-triméthylbenzoyle, 10 (13) chlorure de 1-fluorènecarbonyle, (14) chlorure de 1-naphtoyle, (15) chlorure de 1-indènecarbonyle, (16) chlorure de p-anisoyle, (17) chlorure de 3,4,5-triméthoxybenzoyle, 15 (18) chlorure de 1-norbornanecarbonyle, (19) chlorure de 1-adamantanecarbonyle, (20) chlorure de [a-chloro-3,5,7-triméthyl-1-adamantylacétyle], (21) chlorure de cyclopentanecarbonyle, (22) chlorure de picolinyle, 20 (23) chlorure de tétrahydrofuryle, (24) chlorure de 1O-xanthinecarbonyle, (25) chlorure de nicotinyle, (26) chlorure de 4-cinnolinecarbonyle, (27) chlorure de 5-hromo-2-furoyle, 25 (28) chlorure de coumalyle, (29) chlorure de 2-quinuclidinecarbonyle, (30) chlorure de N-trichloréthoxycarbonyl-2-indole-carbonyle, (31) chlorure d'acide trans-(3-n-propyl)-hygrique, (32) chlorure de fumaryle, 30 (33) anhydride succlnique, (34) anhydride 3,3-dimé thylglutarique, • (35) anhydride aconitique, etc., on obtient respectivement les composés suivants de formule II : (1) chlorhydrate de 2.2'-anhydro-5'-O-pivaloyl-ara-cytidlne. 35 (2) chlorhydrate de 2,2'-anhydro-51-0-iaobutyry1-ara-cytidine, (3) chlorhydrate de 2.2'-anhydro-5'-O-octanovl-ara-cytidine. (4) chlorhydrate de 2.2'-anhydro-51-O-myristyl-ara-cytidine. 71 34313 19 2107943 10 15 20 25 30 35 40 (5 (6 (7 (8 (9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 [23) (30) chlorhydrate de 2 chlorhydrate de 2 chlorhydrate de 2 cytidine, chlorhydrate de 2 cytidine, chlorhydrate de 2 chlorhydrate de 2 chlorhydrate de 2 ara-cytidine. chlorhydrate de 2 ara-cytidine. chlorhydrate de 2 cytidine, chlorhydrate de 2 chlorhydrate de 2 cytidine, chlorhydrate de 2 chlorhydrate de 2 ara-cytidine, chlorhydrate de 2 ara-cytidine. chlorhydrate de 5 cytidine, chlorhydrate de 2 2'-anhydro-5'-0-stéary1-ara-cytidine, 2*-anhydro-5 '-O-oléyl-ara-cytidine, 21 -anhydro-5 * -0-B-ch.loropivaloyl-ara- 2•-anhydro-5'-0-nitrobenz oy1-ara- 2•-anhydro-51-0-o-toluoyl-ara-cytidine, 2'-anhydro-51-O-benzoyl-ara-cytidine, 21-anhydro-51-0-2,6-diméthylbenzoyl- 2'-anhydro-51-0-2,4,6-triméthylbenzoyl- 2•-anhydro-5'-0-1-indënecarbonyl-ara- 2'-anhydro-51-0-1-napht oy1-ara-cyt idine, 21-anhydro-51-0-1-indènecarbonyl-ara- 2•-anhydro-5'-0-2?-anisoy 1-ara-cy tidine, 2'-anhydro-5'-0-3,4,5-triméthoxybenzoyl- 2•-anhydro-51-0-1-norbornylcarbonyl- -0-1-adamantoy1-2,2'-anhydro-ara- 2*-anhydro-5'-0-[(a-chloro-3,5,7-trimé thy 1-1 -adeunantyl)acétyl]-ara-cytidine, chlorhydrate de 2,2*-anhydro-5'-O-cyclopentylcarbony1-ara-c.y tidine. chlorhydrate de 2 chlorhydrate de 2 ara-cytidine, chlorhydrate de 2 ara-cytidine. chlorhydrate de 2 chlorhydrate de 2 cytidine, chlorhydrate de 2 cytidine, chlorhydrate de 2 chlorhydrate de 2 ara-cytidine. chlorhydrate de 2 cytidine, 2'-anhydro-5'-0-picolinoy1-ara-cytidine, 2•-anhydro-51-0-tétrahydro-2-furoyl- 2•-anhydro-5'-0-(1O-xanthylcarbonyl)- 2•-anhydro-51-O-nicotinoyl-ara-cytidine, 2•-anhydro-51-0-4-cinnolinoyl-ara- 2'-anhydro-51-0-(5-bromo-2-furoy1)-ara- 2'-anhydro-5'-0-coumaloy1-ara-cytidine, 2'-anhydro-51-0-2-quinuclidinylcarbony1- 2'-anhydro-51-0-2-indolylcarbony1-ara- 71 34313 2107943 (31) chlorhydrate de 2,2'-anhydro-5'-O-trans-3-(n-propyl)-hygroyl-ara-cytidine, (32) chlorhydrate de 2,2'-anhydro-5'-O-hémifumaroy1-ara-cy tidine , 5 (33) chlorhydrate de 2.2'-anhydro-51-O-hémisucoinoyl-ara- cytidine, (34) chlorhydrate de 2,2'-anhydro-5'-0-hémi-(3,3-diméthyl-glutaroyl)-ara-cytidine, (35) chlorhydrate de 5 ' -O-aconito.vl-2.2 ' -anhydro-ara-cytidine. 10 etc. Exemple 4 5'-O-acétyl-ara-cytidine (III) Le chlorhydrate de 51-O-acétyl-2.2'-anhydro-ara-cytidine obtenu dans l'exemple 3 est dissous dans un mélange à 1:1 d'eau et de méthanol,et le pH de la solution résultante est ajusté à 8 envi- 15 ron avec de l'hydroxyde de sodium. On suit par chromâtographie en couche mince la progression de l'hydrolyse. Lorsque l'hydrolyse est terminée, on chasse le solvant sous vide et on chromatographie le résidu sur du gel de silice (acide silicique), mis en place et élué avec un mélange de méthyléthylcétone-acétone-eau (72:20:8) et on 20 rassemble les fractions contenant le produit désiré, puis on les évapore à sec. Le résidu est rechromatographié sur du gel de silice et les fractions contenant le produit désiré sont rassemblées et évaporées à sec. Le résidu est cristallisé dans un mélange aqueux de méthanol et de benzène en donnant la 5'-O-acétyl-ara-cytidine 25 (III) pure. En suivant le mode opératoire de l'exemple 4, mais en utilisant d'autres 5'-acylates d'un sel d'addition d'acide de 2,2'- anhydro-ara-cytidine (II), par exemple les suivants : (1 30 (2 (3 (4 (5 35 (6 (7 chlorhydrate de 2.2'-anhydro-5'-0-propionyl-ara-cytidine. bromhydrate de 2,2'-anhydro-51-0-'valéry1-ara-cytidine, chlorhydrate de 2.2'-anhydro-51 -0-myristyl-ara-cytidine. chlorhydrate de 2.2'-anhydro-5'-0-benzoyl-ara-cytidine. chlorhydrate de 2,2'-anhydro-5'-0-1-fluorènecarbonyl-ara-cytidine, chlorhydrate de 2.2'-anhydro-5'-O-p-anisoyl-ara-cytidine. chlorhydrate de 5'-0-1-adamantoyl-2,2'-anhydro-ara-cytidine, (8) nitrate de 2,2'-anhydro-5'-O-coumarine-3-carbonyl-ara-cytidine. 71 34313 2107943 (9) chlorhydrate de 2,2'-anhydro-5'-0-2-pyrolylcarbony1-ara-cytidine, (10) chlorhydrate de 2,2'-anhydro-5'-0-hémisucciny1-ara-cy tidine, etc. 5 on obtient respectivement les composés suivants de formule III : (1) 5'-0-propiony1-ara-cytidine, (2) 5'-O-valéryl-ara-cytidine, (3) 5 »-O-myristyl-ara-cytidine, (4) 5•-0-benzoy1-ara-cytidine, 10 (5) 51-0-1 -fluorènecarbony1-ara-cytidine. (6) 5'-0-p-anisoy1-ara-cytidine, (7) 5'-0-1-adamantoy1-ara-cytidine, (8) 5 ' -0-c oumarine- 3-carb ony 1-ara-cy tidine, (9) 5 »-0-2-pyrrolylcarbony1-ara-cytidine, 15 (10) 5'-O-hémisucciny1-ara-cytidine, etc. Exemple 5 chlorhydrate de 5'-0-palmitoyl-2,2'-anhydro-ara-cytidine (II) On dissout 5,2 g (0,02 mole) de chlorhydrate de 2,2'-anhydro-ara-cytidine (I) dans 200 ml de triamide-hexaméthylphospho-20 rique et on ajoute 6,6g (0,024 mole) de chlorure de palmityle. On laisse reposer le mélange pendant 72 heures à la température ambiante. Le produit est précipité avec 2 litres d'éther de pétrole. Le solvant est séparé par décantation de l'huile résultante, et l'huile est cristallisée par agitation avec 100 ml d'éther. La 25 substance solide est recueillie par filtration, lavée à l'éther et séchée. Le produit est recristallisé dans l'eau. On obtient-4,6 g (46 $>). Le point de fusion est indéfini, la fusion commençant à environ 195°. Cette substance est recristallisée dans 25 ml de 1-butanol. Le rendement est de 3,1 g. On recristallise un échantillon 30 dans le 1-butanol, et on obtient la 51-0-palmitoyl-2,2'-anhydro-ara-cytidine (II) destinée à l'analyse. Il n'y a pas de modification du point de fusion. Analyse : C % H Calculé pour C^H^N^Cl : 60,04 8,47 8,40 7,09 35 Trouvé : 59,97 8,61 8,17 6,69 71 34313 22 2107943 Spectre infrarouge (suspension dans le Nujol) : OH/NH 3300, 3120 C=0 1745 C=F 1670 5 C=N/C=C 1565, 1525, 1500 C-O/C-N/autres 1275, 1205, 1145, 1095, 1020, 965 autre 810 TJV(méthanol) : 234 mji, e = 9 750; 263 mjx, e = 10 900. Exemple 6 5'-O-palmitoyl-ara-cytidine (III) obtenue à partir du 10 chlorhydrate de 5'-0-palmitoyl-2,2'-anhydro-ara- cytidine (II). On dissout 0,5 g (0,001 mole) de chlorhydrate de 5'-0-palmity1-2,2'-anhydro-ara-cytidine (II) de l'exemple 5 dans 1 ml de méthanol et on ajoute 10,0 ml de solution d'hydroxyde de sodium 15 0,1 ON. On agite le mélange pendant environ 20 minutes. On recueille la substance solide par filtration, on la lave et on la sèche. Le rendement est de 0,4 g (83 i°). La chromatographie en couche mince montre que la 5'-O-palmitoyl-ara-cytidine est le seul produit absorbant la lumière ultraviolette. 20 Exemple 7 composition en comprimés On prépare 10 000 comprimés destinés à l'administration par voie orale, contenant chacun 100 mg de chlorhydrate de 2,2'-anhydro-ara-cytidine, à partir des ingrédients suivants : Chlorhydrate de 2.2*-anhydro-ara-cytidine 1000 g 25 Lactose 1250 g Talc 300 g Les matières en poudre sont mélangées intimement et granulées par un procédé de compression en disques. Les granules sont mélangés avec un mélange lubrifiant composé de 100 g d'amidon tamisé et de 30 20 g de stéarate de calcium, puis transformés en comprimés. Les comprimés peuvent être enrobés ou non enrobés. Des enrobages convenables comprennent un enrobage étanche de gomme laque, un enrobage à base de glucide masquant le goût, par exemple à base de sucre et de méthylcellulose, et un enrobage lisse du type lipidique, par 35 exemple en cire de carnauba. L'enrobage peut comprendre (a) des enrobages de type lipidique, de nature semi-perméable pour retarder l'absorption du principal ingrédient actif de manière à obtenir une 71 34313 23 2107943 action soutenue, ou (b) des substances de kératinisation telles qu'un copolymère de styrène et d'acide maléique et l'acétate-phtalate de cellulose, pour résister à la libération de l'ingrédient actif dans l'estomac et permettre sa libération dans la partie su-5 périeure de l'intestin. Ces comprimés conviennent pour l'usage clinique, de préférence administrés à la dose d'un comprimé par jour. La 5'-O-palmi toyl-2.2'-anhydro-ara-cytidine peut remplacer la 2.2'-anhydro-ara-cytidine sur une base équimolaire. Exemple 8 composition pour capsules de gélatine dure 10 On prépare dix mille capsules de gélatine dure en deux morceaux pour l'administration orale, chaque capsule contenant 75 mg de chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine. à partir des ingrédients suivants : chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine 750 g 15 amidon de maïs 1600 g huile minérale légère 130 g stéarate de magnésium en poudre 160 g talc - 160 g Les ingrédients en poudre sont mélangés intimement et encapsulés de 20 la manière usuelle. Les capsules résultantes peuvent être administrées cliniquement à la dose d'une capsule par jour. En remplaçant par 150 g d'ingrédient actif les 750 g indiqués ci-dessus, on obtient des capsules contenant chacune 15 mg de cet ingrédient, que l'on peut administrer à la dose d'une capsule 25 quatre fois par jour. Exemple 9 composition en capsules élastiques molles On prépare dix mille capsules élastiques molles pour l'administration par voie orale, contenant chacune 225 mg de chlorhydrate de 2,2'-anhydro-ara-cytidine, en dispersant 2250 g du 30 composé indiqué ci-dessus dans une quantité suffisante d'huile de maïs pour permettre l'encapsulage du composé actif et la préparation subséquente de capsules élastiques molles, de la manière usuelle. L'administration d'une capsule par jour est une posologie efficace. 35 En remplaçant par 10 000 g d'ingrédient actif la quantité de 2250 g indiquée ci-dessus, on obtient des capsules contenant chacune 1000 mg d'ingrédient actif, que l'on peut administrer sur 71 34313 24 2107943 la base d'une capsule par jour. Exemple 10 suspension aqueuse On prépare dix litres d'une suspension aqueuse destinée à l'administration par voie orale, contenant 15 mg de chlorhydrate de 5 2.2'-anhydro-ara-cytidine par 5 ml de suspension, immédiatement avant l'usage, en mélangeant intimement les ingrédients suivants : Chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine 30 g Méthylparaben 7,5 g Propylparaben 2,5 g 10 Sel de sodium de la saccharine 12,5 g Glycérine 3000 g Poudre de gomme adragante 10 g Essence d'orange (parfum) 10 g Colorant orangé P. D. et C. 7,5 g 15 Eau désionisée, quantité suffisante pour 10 000 ml La suspension préparée comme indiqué ci-dessus convient pour l'usage clinique et peut être administrée à la dose d'une cuillerée à café (5 ml) 3 fois par jour. On peut remplacer la 2.2'-anhydro-ara-cytidine par la 5*-0-20 palmitoyl-2.2'-anhydro-ara-cytidine sur une base équimolaire. Exemple 11 composition pour capsules On prépare dix mille capsules de gélatine dure, contenant chacune 125 mg de chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine et 250 000 unités de nystatine, à partir des ingrédients suivants : 25 Chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine 1250 g Nystatine (2000 unités/mg) 1250 g Huile minérale blanche 65 g Stéarate de magnésium en poudre 65 g Talc 65 g 30 Les ingrédients sont mélangés intimement et encapsulés de la manière usuelle. Les capsules peuvent être administrées à la dose d'une capsule trois fois par jour. Exemple 12 poudre stérile (pour application locale) On prépare 5000 g de poudre stérile pour application locale 35 dans le domaine de la chirurgie et pour l'application topique, à partir des ingrédients suivants : 71 34313 25 2107943 Chlorhydrate de 2,2'-anhydro-ara-cytidine, poudre fine 250 g Lactose (U.S.P.), poudre fine 4750 g On ajoute avantageusement à la préparation.indiquée ci-5 dessus, 5 g de 5-Cbis(2-chloréthyl)amino]uracile remplaçant une quantité égale de lactose. A titre de variante, on peut ajouter 10 g de 5-[bis(2-chloréthyl)amino3uracile pour remplacer une quantité égale de lactose. Exemple 15 gelée 10 On prépare une gelée contenant 10 mg de chlorhydrate de 2.2*-anhydro-ara-cytidine par g (1 io en poids) en mélangeant intimement les ingrédients suivants : Chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine "Polysorbate" 80 15 Polyéthylène-glycol 400 Sel de sodium de carboxyméthylcellulose, faible viscosité 10 g 14 g 50 g 20 g 8 g 3 g 1000 g . une zone Chlorure de sodium Benzoate de sodium 20 Eau, quantité suffisante pour On applique topiquement la gelée résultant* chirurgicale affectée, de préférence deux fois par jour. Exemple 14 suspension aqueuse stérile On prépare une suspension aqueuse stérile qui convient pour 25 une injection intramusculaire et qui contient 100 mg de chlorhydrate de 2,2'-anhydro-ara-cytidine par ml, immédiatement avant l'usage, à partir des ingrédients suivants : Chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine 100 g Polyéthylène-glycol 400 30 g 30 Chlorure de sodium (U.S.P.) 9 g Chlorure de myristyl-gamma-picolinium 0,2 g Eau, quantité suffisante pour 1000 ml On peut remplacer la 2.2'-anhydro-ara-cytidine par la 5'-0-palmitoyl-2.2'-anhydro-ara-cytidine sur une base équimolaire. 35 Exemple 15 préparation à base d'huile pour injection intramusculaire Une préparation stérile qui convient pour l'injection 71 34313 26 2107943 intramusculaire et qui contient par ml 25 g de chlorhydrate de 2,2'- anhydro-ara-cyt idine est préparée à partir des ingrédients suivants : Chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine 250 g Gel de monostéarate d'aluminium et d'huile 5 d'arachide, quantité suffisante pour 10 000 ml On chauffe lentement sous agitation à 100°C un mélange de deux parties de monostéarate d'aluminium et 98 parties d'huile d'arachide (parties en poids).On chauffe le mélange à cette température jusqu'à ce que la gélification soit terminée (environ 1 heure); 10 ensuite, on la chauffe à 150°C et on la maintient à cette température pendant 1 heure. On refroidit le gel et on incorpore les 250 g de poudre stérile de chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine. sous agitation dans des conditions aseptiques, dans un volume inférieur à 10 000 ml. le volume total final est ajusté à 10 000 ml par addi-15 tion de gel. Exemple 1 6 En suivant le mode opératoire des exemples 5 à 13 précédents, mais en remplaçant le chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine de ces exemples par une quantité équivalente de chacun des autres sels 20 d'addition d'acides tels que "bromhydrate, sulfate, nitrate, phosphate, trifluoracétate, tribromacétate, trichloracétate, etc., ou la 2,2'-anhydro-ara-cytidine sous la forme de la base libre, on peut préparer des compositions du même ordre d'intérêt'. Exemple 17 25 En suivant le mode opératoire des exemples 5 à 13, mais en remplaçant la 2.2'-anhydro-ara-cytidine par une quantité équivalente de 5'-O-acy1-2.2'-anhydro-ara-cytidine. par exemple la 5'-0-acétyl-, 5'-O-palmitoyl- bu 5'-0-(1-adamantoyl)- [c'est-à-dire 1'ara-cytidine-5'-0-(1-adamantanecarboxylate)] ara-cytidine ou leurs sels d'addi-30 tion d'acides acceptables du point de vue pharmaceutique, on peut préparer des compositions du même ordre d'intérêt. Exemple 18 Composition pour administration orale On dissout 4,0 g de chlorhydrate de 5'-O-palmitoyl-2,2 anhydro-ara-cytidine (II) dans 115 ml d'éthanol. On ajoute à cette 35 solution 205 ml d'une solution aqueuse contenant 1,0 g d'aérosol 0TB ( suif o suc cinate de dioctyl-sodium N.3?.). On obtient une solution limpide pour l'administration par voie orale. La composition doit être fraîchement préparée avant l'usage. copy 71 34313 27 2107943 REVENDICATIONS 1 - Composition caractérisée par le fait qu'elle contient, sous la forme posologique unitaire, environ 1 mg à environ 1 g, d'un représentant du groupe comprenant la 2.2'-anhydro-ara-cytidine 5 de formule : hqçh ho et un sel d'addition d'acide de ce composé, en combinaison avec un véhicule pharmaceutique. 2 - Composition suivant la revendication 1 , caractérisée par le fait que le sel d'addition d'acide est celui de l'acide 10 chlorhydrique, à savoir le chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine♦ 3 - Composition caractérisée par le fait qu'elle contient, sous la forme posologique unitaire, environ 1 mg à environ 1 g d'un représentant du groupe comprenant les sels d'addition d'acides de 5'-O-acy1-2.21-anhydro-ara-cytidine de formule : copv 71 34313 28 2107943 dans laquelle X ^ est la base conjuguée d'un acide fort et R est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques à chaîne droite, aliphatiques et alicycliques à chaîne ramifiée, en C^ à C20' ^es radicaux aromatiques monocycliques et bicycliques en Cg à CgC), 4 - Composition suivant la revendication 3, caractérisée 15 par le fait que le composé de formule II est choisi entre la 5'- 0-palmitoyl-2.2'-anhydro-ara—-cytidine et un sel d'addition d'acide de ce composé. 5 - Procédé de production d'un composé de formule : 71 34313 « 2107943 & (dans laquelle X est la base conjuguée d'un acide fort), caractérisé par le fait qu'il consiste (1) à mélanger une 2-amino-P~D-arabinofurano-E11,2':4,5]-2-oxazoline de formule : avec un acide fort dont la base conjuguée est la même que celle du composé de formule I ci-dessus, pour obtenir un composé correspondant de formule : 71 34313 30 2107943 (dans laquelle Xe25 a la même définition que ci-dessus); et (2) à chauffer le composé ainsi produit résultant de l'étape (1) avec, le cyanacétylène pour obtenir un composé correspondant de formule I donnée ci-dessus. 5 6 - Procédé suivant la revendication 5, caractérisé par le fait que l'acide fort est l'acide chlorhydriquejet le composé de formule I est le chlorhydrate de 2.2'-anhydro-ara-cytidine. 7 - Procédé de production d'un composé de formule : caractérisé par le fait qu'il consiste : 10 (1) à mélanger une 2-amino-0-D-arabinofurano-[1',2':4,5]-2- 71 34313 " 2107943 oxazoline avec un acide fort pour obtenir un composé de formule hoch; NH3 ®X ° (dans laquelle X® est la base conjuguée d'un acide fort) ; (2) à chauffer le composé ainsi produit résultant de l'étape (1) avec le cyanacétylène pour obtenir un composé correspondant de formule : (dans laquelle X® a la définition donnée ci-dessus); et (3) à neutraliser le composé ainsi produit résultant de 71 34313 32 2107943 l'étape (2) pour obtenir le composé de formule I donnée ci-dessus. 8 - Procédé de préparation d'un composé de formule : (dans laquelle R est un radical choisi entre des radicaux aliphatiques à chaîne droite, aliphatiques à chaîne ramifiée et alicycli-5 ques en à C2q, des radicaux aromatiques monocycliques et bi-cycliques en Cg à C2q, des radicaux monocycliques hétérocycliques en à C1Q, des radicaux araliphatiques en à C^» des radicaux hydrocarbonés à structure en cage en à C2q, non substitués ou substitués par les radicaux choisis entre les radicaux hydroxyle, 10 carboxyle, nitro, mercapto et alkoxyle en C1 à C2Q, et R, en association avec 8, est le radical acyle d'un acide dicarboxylique ali-phatique en à Cg), procédé caractérisé par le fait qu'il consiste (1) à acyler en position 5'-0- un composé de formule : 71 34313 33 2107943 H2 ~ x ® v 0 hqçh* (dans laquelle X® est la base conjuguée d'un acide fort) pour obtenir un composé correspondant de formule : rc0ch2 ha @ x © 11 (dans laquelle X® et R ont les définitions données ci-dessus) ; (2) à hydrolyser seulement au niveau de la liaison 2,2'-anhydro le composé ainsi produit résultant de l'étape (1) pour former un composé correspondant de formule III donnée ci-dessus. 9 - Procédé suivant la revendication 8, caractérisé par le fait que l'acylation dans l'étape (1) est effectuée par mélange de 71 34313 34 2107943 chlorhydrate de 2,2'-anhydro-ara-cytidine (I) avec du chlorure de 1-adamantanecarbonyle pour obtenir le chlorhydrate de 5 * —0—1 — adamantoyl-2,2'-ara-cytidine (il), et l'hydrolyse dans l'étape (2) est effectuée par mélange de chlorhydrate de 5'-0-1-adamantoy1-2,2'-5 ara-cytidine (II) avec une solution aqueuse méthanolique d'hydroxyde de sodium pour obtenir la 5'-0-1-adamantoyl-ara-çytidine (III). fait que l'acylation dans l'étape (1) est effectuée par mélange de chlorhydrate de 2,2'-anhydro-ara-cytidine (I) avec le chlorure de 10 palmityle pour obtenir le chlorhydrate de 5'-0-palmitoyl-2,2 *-ara-cytidine (II), et l'hydrolyse dans l'étape (2) est effectuée par mélange de chlorhydrate de 5'-0-palmitoy1-ara-cytidine (II) avec une solution aqueuse méthanolique d'hydroxyde de sodium pour obtenir la 5'-0-palmitoy1-ara-cytidine (III). 15 11 - Composé caractérisé par le fait qu'il répond à la un radical choisi dans le groupe comprenant des radicaux aliphatiques à chaîne droite ou ramifiée et alicycliques en ^ à C2Q, des 20 radicaux aromatiques monocycliques et bicycliques en Cg à C2q> des radicaux monocycliques hétérocycliques en C^ à C1Q, des radicaux araliphatiques en C^ à C^2, des radicaux hydrocarbonés à structure en cage en C^ à C2q, non substitués ou substitués par des radicaux 10 - Procédé suivant la revendication 8, caractérisé par le formule : (dans laquelle X® est la base conjuguée d'un acide fort et R est 71 34313 35 2107943 choisis entre des radicaux hydroxyle, carboxyle^nitro, mercapto et alkoxyle en à C20' et R, en association avec 8, est le radical acyle d'un acide dlcarboxylique aliphatique en C^ à Cg) ; ce composé se présentant également sous la forme de ses sels d'addition d'acides acceptables du point de vue pharmaceutique. 12 - Composé suivant la revendication 11 , caractérisé par le fait que RC- est le radical palmitoyle et l'acide fort est l'acide chlorhydrique, c'est-à-dire que le composé est le chlorhydrate de 5'-O-palmitoy1-2.2'-anhydro-ara-cytidine.