FR 2032408 A1 19701127 FR 6945111 A 19691226 69 45111 2032408 Cette invention concerne de nouveaux antibiotiques de cépha-losporine à action orale, contenant du soufre. Plus particulièrement cette invention est constituée par l'acide 3-méthylthiométhyl-7-t*-amino-a-phényl) -acétamido- A.^-céphem-4-carboxylique et par les 5 composés apparentés. Les composés de cette invention peuvent être représentés par la formule suivante : « ^S\ R-CH-C-NH-CH-CH CH2 - 10 NH_ 0=C*—N C-CH-SCH, 9 co2h dans laquelle R est le radical phényle ou thiényle, ou bien le radical phényle substitué par le chlore, le brome, ou par un 15 groupement hydroxyle, alcoyle en C^-Cg, alcoxy en C^-Cg, nitro, ou cyano. Des groupements alcoyle et alcoxy typiques comprennent les groupements méthyle, éthyle, propyle, butyle, amyle, hexyle, mëthoxy, éthoxy, propoxy, butoxy, pentyloxy et hexyloxy. On peut préparer les nouveaux composés par acylation de 20 l'acide 3-méthylthiométhyl-7-amino- 3-céphem-4-carboxylique par la phénylglycine, la thiénylglycine, ou une phénylglycine substituée de façon appropriée. Dans tout ce mémoire descriptif les références à la phénylglycine sont destinées à inclure la thiénylglycine et de telles phénylglycines substituées. Il est entendu 25 que le groupement a-amino de la phénylglycine est protégé, au cours de l'étape d'acylation, par un groupement protecteur connu quelconque couramment utilisé pour protéger les groupements aminé dans la chimie des amino acides ou des peptides. Quelques exemples de ces groupements protecteurs sont les groupements te'rt-butoxy-30 carbonyle, benzyloxycarbonyle, et 2,2,2-trichloroéthoxycarbonyle. A la fin de l'étape d'acylation ces groupements peuvent être enlevés par traitement avec un acide comme l'acide p-toluènesuifonique ou bien par coupure réductrice. Pour 1*acylation la phénylglycine protégée peut être activée par un carbodiimide ou peut être utili-35 sée sous la forme du chlorure ou du bromure d'acide, ou bien d'un anhydride mixte, en particulier avec un acide(alcoyl inférieur) carbonique. Les méthodes d'acylation sont bien connues des hommes de l'art. L'acide 3-mêthylthiométhyl-7-amino- À 3-céphem-4-carboxylique 40 à acyler peut être préparé par une méthode connue quelconque. Par 69 45111 2 2032408 exemple, on peut préparer cet acide en traitant l'acide 7-amino-céphalosporanique par le méthyl mercaptan ou en traitant l'acide 3-acétoxyméthyl-7-phénylacétamido- ù 3-céphem-4-carboxylique ou le 7-phénoxyacétamido acide correspondant par le méthyl mercaptan, 5 en protégeant le groupement carboxyle par formation de l'ester, puis en coupant le groupement vhénylacétyle ou phénoxyacétyle par réaction avec le pentachlorure de phosphore en présence d'une aminé tertiaire, avant traitement par un alcanol inférieur, puis avec de l'eau ou un acide aqueux pour former l'ester de l'acide ÎO 3-méthylthiométhyl-7-amino- 3-céphem-4-carboxylique. Après acylation avec la phénylglycine on peut enlever le groupement ester poux régénérer l'acide carboxylique libre. On peut aussi préparer, les nouveaux composés à partir d'un produit de départ de la pénicilline comme la pénicilline V, selon 15 un procédé à plusieurs étapes partant du procédé décrit dans le Brevet E.U.A. de Morin et Jackson N° 3.275.626, délivré le 27 Septembre 1966, pour la. transformation d'un ester sulfoxyde de pénicilline en un ester d'acide désacétoxyçéphalosporanique. Cet ester de A 3-désâcétoxycéphalosporine est ensuite isomérisé en une 20 A 2-céphalosporine que l'on peut transformer en dérivé 3-bromo-méthyle correspondant par traitement avec la N-bromosuccinimide. Le traitement dé ce composé 3-bromométhyle par le méthyl mercaptan entraine la formation du composé 3-méthylthiaméthyle correspondant. La double liaison de la position 2 peut alors être isomérisée en 25 position 3 par isomérisation basique. Le groupement acyle en position 7 peut être enlevé comme décrit ci-dessus pour donner l'acide ou l'ester 3-méthylthiométhyl-7-amino- 3-céphem-4-carboxylique. L'acylation de ce composé 7-amino par la phénylglycine donne l'acide ou l'ester voulus. 3G La préparation des composés de la présente invention va être illustrée plus en détail par les exemples suivants s Exemple 1 On refroidit dans un bain de glace une suspension de 0,353 g cl*acide 3-méthyl-7-phénoxyacétamido- ù 3-céphem-4-earboxylique 35 (préparé comme décrit dans le Brevet E.U.A. N° 3.275.626) dans 40 ml de benzène et on l'agite en même temps qu'on ajoute 0,256 g de chlorure d'oxalyle et une goutte de diméthylformamide. On agite le mélange réactionnel à environ 5° C pendant 45 minutes et on chasse le solvant sous pression réduite pour obtenir le chlorure 40 d'acide voulu de l'acide ù. 3-céphem de départ. 69 45111 3 2032408 Exemple 2 On ajoute goutte à goutte une solution de 1,75 g du chlorure d'acide de l'Exemple 1 dans 70 ml de chlorure de méthylène, à une solution agitée de 0,75 g de triéthy lamine et 4,0 g de 3-méthyl-5 l-butèn-3-ol dans 50 ml de chlorure de méthylène maintenu à la température de la glace. A la fin de l'addition (environ 90 minutes) , on lave successivement la solution organique à l'eau et avec de l'acide chlorhydrique à 3 % et on la fait évaporer à sec. On dissout le résidu dans de l'acétate d'éthyle, on le lave avec une 10 solution à 5 % de bicarbonate de sodium, et on le traite par du charbon actif. On filtre le mélange et on chasse le solvant du filtrat sous pression réduite pour obtenir 0,51 g de 3-méthyl-7-phénoxyacétamido- A 2-céphem-4-carboxylate de 2?(2-méthyl-3-butényle). La structure est confirmée par le spectre de résonance 15 magnétique nucléaire. Les eaux de lavage neutre et basique donnent 0,82 g d'un mélange des acides ù 2 et £[ Exemple 3 On agite une solution de 4,16 g de l'ester de 1'Exemple 2 dans un litre de tétrachlorure de carbone et on purge à l'azote 20 pendant 20 minutes. A cette solution on ajoute alors 2,67 g de N-bromosuccinimide et 50 mg d'azo-bis-isobutyronitrile. On agite la solution et'on la chauffe au reflux jusqu'à ce que l'on obtienne un test négatif sur le papier à l'amidon-iodurë (à peu près 4 heures 1/2). On refroidit la solution pendant une nuit dans un 25 réfrigérateur, on sépare l'excès de N-bromosuccinimide par filtra-tion sur un tampon de coton, et on évapore le tétrachlorure de carbone pour obtenir le 3-bromométhyl-7-phénoxyacêtamido- A 2-céphem-4-carboxylate de 2-(2-méthyl-3-butényle), que l'on utilise dans les réactions ultérieures. 30 Exemple 4 On agite une solution d'environ 4 millimoles du produit 3-bromométhyle de l'Exemple 3 dans 25 g de méthyl mercaptan, dans une bouteille à pression, à 25° C pendant une heure. On laisse l'excès de méthyl mercaptan s'évaporer et on dissout le 35 résidu dans du chlorure de méthylène. On lave la fraction chlorure de méthylène avec une solution à 5 % de bicarbonate de sodium et avec de l'éau, on la sèche sur sulfate de sodium, et on la concentré à sec pour obtenir 1,4 g de produit brut. On soumet ce produit brut à une chromatographie sur 100 g de gel de silice contenant 40 15 pour cent d'eau, en utilisant 6 à 8 pour cent d'acétate d'éthyle 69 45111 4 2032408 dans du benzène comme solvant. De cette façon on obtient 100 mg de 3-méthylthiométhyl-7-phénoxyacétamido- /\ 2-céphem-4-carboxylate de 2-(2-méthyl-3-butényle). La structure est confirmée par le spectre de résonance magnétique nucléaire» 5 Exemple 5 On dissout le produit A2 de l'Exemple 4 dans 8 ml d'iso-propanol, on ajoute 2 ml de triéthylamine, et on agite le mélange à 25° C pendant line heure. On chasse les solvants sous pression réduite. Un spectre de résonance magnétique nucléaire confirme que 10 1*isomérisation en composé A ^ s'est produite. Exemple 6 On agite à 55° C un mélange de 750 mg de 3-méthylthiométhyl-7-phénoxyacétamido- A ^-céphem-4-carboxylate de 2-(2-méthyl-3-butényle) de l'Exemple 5, 580 mg de pentachlorure de phosphore, 15 et 221 mg de pyridine dans 75 ml de benzène sec. Au bout de trois heures on fait évaporer le mélange réactionnel, on dissout le résidu dans 100 ml de méthanol, et on réfrigère la solution pendant une nuit. On fait évaporer le méthanol et on dissout le résidu dans un mélange refroidi de 50 ml de tétrahydrofurane et 20 de 50 ml d'un tampon de citrate à pH 4,5. Au bout de 35 minutes on fait évaporer le tétrahydrofurane. On recouvre la solution aqueuse d'une couche d'acétate d'éthyle et on ajuste le pH à 7,0 par addition d'une solution d'orthophosphate monosodique. On lave la solution dans l'acétate d'éthyle avec une solution saturée de 25 sel, on la sèche sur du sulfate de magnésium, et on fait évaporer l'acétate d'éthyle. On redissout le 3-méthyl-thiométhyl-7-amino-A 3-céphem-4-carboxylate de 2-(2-méthyl-3-btitényle) brut dans 20 ml d'acétate d'éthyle et on ajoute une solution d'acide p-toluène-suif onique dans l'acétate d'éthyle jusqu'à ce que la solution 30' résultante présente une réaction acide au papier pH. Après refroidissement pendant 30 minutes dans un bain de glace, on recueille le précipité cristallin, on le lave à l'acétate d'éthyle, et on le sèche dans une étuve à vide à la température ambiante, ce qui donne 370 mg de 3-méthylthi"ométhyl-7-amiho- A. ^-eéphem-4-carboxylate 35 de 2-(2-méthyl-3-butényle) sous la forme du sel d'acide p-toluène-sulfonique. La structure est confirmée par le spectre de résonance magnétique nucléaire et par l'analyse élémentaire. • ' ' Exemple 7 r *' On laisse reposer à la température ambiante pendant deux 40 heures une solution de 412,7 mg du produit de l'Exemple 6 dans 69 45î11 5 2032408 5 ml d'acide formique. On concentre à sec le mélange réaçtionnel et on reprend le résidu huileux dans un mélange de 10 ml d'acétate d'éthyle et de 6 ml d'eau. Tout en refroidissant, on ajuste le pH de ce mélange à 8,5 à l'aide d'une solution diluée d'ammoniaque. 5 On sépare la couche aqueuse et on ajuste le pH à 3,8 à l'aide d'acide chlorhydrique 6 N. Après refroidissement pendant deux heures on recueille le précipité cristallin blanc qui s'est séparé et on le sèche dans une étuve à vide à 35® C, ce qui donne 166,3 mg d'acide 3-méthylthicméthyl-7-amino- A 3-céphem-4-carboxylique.La 10 structure est confirmée par le spectre de résonance magnétique nucléaire et par l'analyse élémentaire. Analyse t Calculée pour C9HX2N2°3S2 : C= 41,54î H= 4,65; N= 10,77 Trouvée : C= 41,70; H= 4,90; N = 10,52 15 Exemple 8 On refroidit à -5° C une solution de 160 mg de N-fcert-butoxy-carbonyl)phénylglycine dans 25 ml de tétrahydrofurane et on ajoute 65 mg de triéthylamine et 87 mg de chloroformate d'isobutyle. A cette solution froide on ajoute une solution de 150 mg du produit 20 de l'Exemple 7 et de 0,08 ml de triéthylamine dans 5 ml d'eau et 2 ml de tétrahydrofurane. On agite ce mélange pendant trois heures en même temps qu'on le laisse se réchauffer jusqu'à la température ambiante. On sépare alors le tétrahydrofurane à l'aide d'un évapo-rateur rotatif. On dissout le mélange restant dans de l'eau, on 25 le recouvre d'une couche d'acétate d'éthyle, on le refroidit dans un bain de glace, et on ajuste le pH à 2,0 par addition, d'acide chlorhydrique 6 N. On sépare la couche acétate d'éthyle, on la lave avec une solution saturée de chlorure de sodium, on la sèche sur sulfate de magnésium, et on l'évaporé pour obtenir finalement 30 un résidu gommeux. On dissout ce résidu dans du diéthyl éther et on ajoute une fraction de pétrole bouillant à 60°-68° C pour faire précipiter 167,3 mg d'acide 3-méthylthiométhyl-7-(«-tert-butoxy-carboxamido-tt-phényl)acétamido- A 3-céphem-4-carboxylique. On dissout ce corps "N-bloqué,r dans 3 ml d'acide trifluoroacétique 35 froid.Après agitation pendant 5 minutes on fait évaporer la solution et on reprend le résidu dans 5 ml d'eau et 5 ml de méthyl isobutyl cétone. Après ajustement du pH à 4,5 avec de la tributyl-amine, on sépare la couche aqueuse et on la concentre à environ. 0,5 ml. On dilue cette solution avec environ 15 ml d'acétonitrile 40 et on la réfrigère pendant une nuit. On recueille le solide, on le 69 45111 6 2032408 lave à l'acétonitrile, et on le sèche sous vide, ce qui donne 64,6 mg d'acide 3-mêthylthiométhyl-7- (a-amino-c:-phényl)acétamido-A 3-céphem-4-carboxylique. En suivant la méthode de l'Exemple 8 et en utilisant la 5 thiénylglycine ou la phénylglycine substituée de façon appropriée, on prépare les composés suivants : acide 3-méthylthiométhyl-7-/«-amino-oc- (m-chlorophényl) -acétamido/- A 3-céphem-4-carboxylique; acide 3-méthylthiométhyl-7-^cT-ainino-«- (p-méthoxyphényl) -10 acétamido/7- A 3-céphem-4-carboxylique ; acide 3 -méthylthiométhyl- 7-^-amino-c:- ( o-butylphényl ) -acétamidôT- A 3-céphem-4-carboxylique; acide 3-méthylthiométhyl-7-^ô:-amino-o5- (p-nitrophényl)-acétamidç>7- A 3-céphem-4-carbQxylique; 15 acide 3-méthylthioïtiéthyl-7-^:-ainino-a- (m-hydroxyphényl) - \ y. , acétamidôT- A -céphem-4-carboxylique; ' acide 3 -méthylthiométhyl- 7-j/ër-amino-a-k-cyanophényl ) - acétamidôT-A 3-céphem-4-carboxylique; et acide 3 -méthylthiométhyl- 7- (os-amino-œ-thiényl ) acétamido-20 A 3-céphem-4-carboxylique. 69 45111 7 2032408 R E V E N D I CATIONS 1. Un composé représenté par la formule î O ^S R-CH-C-NH-CH-CH CH. « t i NH2 0=C—N C-CH2-S-CH3 >c ,2 n co2h dans laquelle R est le radical phényle, thiényle, ou phényle substitué par le chlore, le brome, ou par un groupement hydroxyle, 10 alcoyle ou alcoxy en C^-C^, nitro ou cyano. 2. Le composé de la revendication 1, dans lequel R est le radical phényle. 3. Une composition pharmaceutique qui comprend comme ingrédient actif un composé représenté par la formule : 15 O R-CH-C-NH-CH-CH CH. t I ! I 2 NH_ 0=C — N C-CH„-S-CH, J. \ «s J ^ c ^ I CO,H 2Q ou bien un de ses sels, où R est le radical phényle, thiényle, ou phényle substitué par le chlore, le brome, ou par un groupement hydroxyle, alcoyle ou alcoxy en C^-Cg, nitro, ou cyano. 4. Un procédé pour préparer un antibiotique de céphalosporine 25 représenté par la formule : O ^ S " / \ R-CH-C-NH-CH-CH CH0 il i 2 NH_ 0=C— N C-CH-—S-CH- 2 \ 2 3 I 30 C02H dans laquelle R est un radical phényle, thiényle, ou phényle substitué par le chlore, le brome, ou par un groupement hydroxyle, alcoyle ou alcoxy en C^-C^, nitro ou cyano, procédé qui comprend l1 acylation de lucide 3-méthylthiométhyl-7-amino-A 3-céphem-4- 35 carboxylique ou/in de ses esters par un agent acylant choisi entre la phénylglycine, la thiénylglycine, la phénylglycine substituée de façon appropriée, toutes"N-bloqués"ou bien par un halogénure ou a*acide un anhydride /le ces dernières, et l'enlevement du groupement protecteur de l'ci-amino et du groupement ester, s'ils sont présents. 40 5. Le procédé de la revendication 4, dans lequel le groupement 69 45111 8 2032408 "N-bloquant' est un groupement tert-butoxycarbonyle, benzyloxycar-bonyle ou 2,2,2-trichloroéthoxycarbonyle. 6. Le procédé de la revendication 4 ou 5, qui comprend le mélange de la N-(tert-butoxycarbonyl)phénylglycine, du chloroforma- 5 te d'isdbutyle et de l'acide 3-méthylthiométhyl-7-amino- A 3-céphem-4-carboxylique dans le tétrahydrofurane avec une proportion mineure de triéthylamine, 1'évaporation du tétrahydrofurane, la dissolution du mélange restant dans l'eau, l'extraction de la solution aqueuse à l'acétate d'éthyle, la séparation, le lavage 10 et le séchage de la couche acétate d'éthyle, 11évaporation de l'acétate d'éthyle, la dissolution du résidu gommeux dans le diéthyl éther, l'addition d'un éther de pétrole à la solution pour faire précipiter l'acide 3-méthylthiométhyl-7- (c:-tert-butoxycarbo-xamido-a-phényl) acétamido- A 3-céphem-4-carboxylique, et l'enlè-15 vement du groupement N-bloquant. 7. Le procédé de la revendication 4, dans lequel on prépare l'acide ou l'ester 3-méthylthiométhyl-7-amino- A 3-céphem-4-carboxylique qui doit être acylé en chauffant dans des conditions acides un sulfoxyde de pénicilline représenté par la formule : 20 O 1 " /N ^CIÏ3 R -CO-NH-CH-CH NC - CH- Il I 3 0=C—N CH l 2 COOR 1 2 25 dans laquelle R est un radical organique quelconque et R est la partie alcool d'un groupement ester, de façon à produire l'ester d'acide désacétoxycéphalosporanique correspondant, en isomérisant l'ester d'acide désacétoxycéphalosporanique en composé A 2 correspondant , en traitant le composé &2 par la N-bromosuccinimide pour 30 obtenir le dérivé 3-bromométhyle correspondant,en traitant le dérivé 3-bromométhyle par le méthyl mercaptan pour obtenir le composé 3-méthylthiométhyle correspondant, en isomérisant la double liaison de/position 2 du composé 3-méthylthiométhy]P, dans des conditions alcalines,à la position 3, en hydrolysant le 35 groupement acyle en position 7 pour obtenir l'ester d'acide 3-métlvlthiométhyl-7-amino- ô 3-céphem-4-carboxylique, et en enlevant le groupement ester par hydrolyse si on le désire. 8 Le procédé de la revendication 4, dans lequel on prépare l'acide 3-méthylthiométhyl-7-amino- A 3-céphem-4-carboxylique à 40 acyler en traitant l'acide 7-aminocéphalosporanique par le méthyl 69 45111 9 2032408 mercaptan. 9. Le procédé de la revendication 4, dans lequel on prépare l'acide ou l'ester 3-méthylthiomêthyl-7-amino- A 3-céphem-4-carboxylique à acyler en traitant l'acide 3-acétoxyméthyl-7-5 phénylacétamido ou phénoxyacétamido-A 3-céphem-4-carboxylique par le méthyl mercaptan, en protégeant le groupement carboxyle par formation d'un ester, en coupant le groupement phénylacétyle ou phénoxyacétyle par réaction avec le pentachlorure de phosphore en présence d'une aminé tertiaire, et en traitant le produit ainsi 10 obtenu par un alcanol inférieur et de l'eau ou un acide aqueux pour former l'ester d'acide 3-méthyithiométhyl-7-amino-/^ 3-eéphem-4-carboxylique correspondant; et, si on le désire, en enlevant le groupement ester par hydrolyse.