FR 2005767 A1 19691219 FR 6910587 A 19690404 6910587 i 2005767 lia présente invention concerne des dérivés de dextrane contenant des groupements céto sur un ou plusieurs des atomes de carbone en position 2, 3 et 4 des cycles à motifs anhydro— glucose substitués par les groupements céto. Les dérivés de 5 dextrane de l'invention peuvent être représentés par la formule générale suivante, à savoir : •^CHCOH)_7H_Dr C0_7tt dans laquelle m indique le nombre de groupements alcool secondaire dans le dextrane qui peut être représenté comme répon-10 dant à la formule générale A/~0H(0H}_^ , et où n est un nombre choisi de telle façon que le degré de substitution n/m soit compris entre 0,01 et 0,50. A dans cette partie du dextrane ne comporte pas les groupements. Z~3H(0H)_J^. mentionnés plus haut» Le degré de substitution peut être choisi dans les 15 gammes de 0,01 à 0,5 mais est, de préférence, compris entre 0,03 et 0,2* Le dextrane est, comme cela est bien connu , un polysac-charide constitué de motifs de glucose qui sont reliés les tins aux autres d'une façon prépondérante par des liaisons œ(1 -=—> 6)t 20 La formule suivante représente un motif de glucose relié en a(1—>6) avant lsoxydation î © 25 30 35. La formule qui suit moatr® le motif de glucose correspon dant dans lequel, un groupement hydroxyle seconâaire a été transformé en groupement céto après oxydation s 6910587 2 2005767 5 n . o 10 . . . OH ...... Dans la formule ci-dessus, l'oxydation en groupement céto .a été réalisée sur l'atone de carbone en position 3. De la même façon , l'oxydation en groupement céto pourrait sa prc-15 duire sur un atome de carbone en position 2 ou 4« le dérivé de dextrane de l'invention est très utile coama • produit intermédiaire et comme produit à "base de dextrane modifié, par exemple à des fins de synthèse* A titra d'exemple, le dérivé de dextrane répondant à la formule définie ci-dsasu3, 20 et appelé ci-aprèa cétodextrane, a montré qu'il possédait de . reaarquablaa propriétés car il permet des réactions avec ds3 substances qui réagissent avec les groupements céto. Il convient notamment bien pour la réaction avec des substances qui réagissent en particulier avec des groupements céto comme, par exemple, les substances qui sont actives du point de vue biologique. Il peut9 par conséquent, servir comme produit intermédiaire de réaction pour la préparation de polymères dégradablea et actifs par voie biologique avec des liaisons glucosidiques ej a (1 >6). De plua, le dérivé de dextrane mentionné plus haut peut être avantageusement utilisé comme m«ûière première 30 pour un procédé que la demanderesse a déjà décrit. obtenir, de cette façonr des dérivés de valeur. A titre d'exas pie, le dérivé peut réagir avec des hydrazines et des hydra-35 zides pour donner de3 hydrazones. L'hydrazide do l'acide iso-nicotinique qui est un médicament anti—tuberculeux important peut, ainsi, être relié au cétodextrane• Le cétodextrane réagit également avec les thiosemicarbazides pour donner dïs thio aeaic arbazone3• L'hydrazone de l'acide isonicotinique du Le cétodextrane peut ainsi réagir avec des substanceo différentes- qui réagissent avec les groupements céto» On peut rr>pv 6910587 3 2005767 cétodextrane inhibe la croissance de Mycobacterium tuberculosis. De plus, il peut réagir avec les aminés avec la formution de bases de Schiff, par exemple le suifanilamide. Les bases de Schiff sont également facilement décomposées» le polymère peut 5 ainsi servir de véhicule pour des composés pharmaceutiques contenant des groupements hydrazines et amino. Par réduction directe des cétodextranes avec du borohydrure de sodium dans l'eau, on peut obtenir un polysaccharide modifié qui, excepté les motifs de glucose non modifiés, contient éga-10 lement d'autres, sucres, à savoir : le mannose, l'allose et le galactose» Conformément à une caractéristique de l'invention, les polymères mentionnés sont préparés par un procédé qui consiste à faire réagir du dextrane ayant la formule a/~CH(OH) avec la quantité appropriée d'un agent oxydant modéré corres-15 pondant à n moles d'oxygène calculé comme £~0_7» De cette façon, n groupements hydroxyle secondaire sont transformés en n .groupements céto- Une certaine dépolymérisation peut avoir lieu simultanément avec l'oxydation de la molécule de dextrane» Pour compenser cette dépolymérisation, on peut ajouter un dex-20 trane de poids moléculaire moyen supérieur au milieu réactionnel dans lequel la réaction se produit plutôt qu'à celui désiré pour le cétodextrane. Conformément à une caractéristique de l'invention, le cétodextrane mentionné peut être préparé en employant un sulfo-25 xyde en mélange avec un anhydride d'acide, par exemple, l'anhydride acétique pour l'oxydation. On peut utiliser tout sulfo-xyde approprié. Le diméthyl—suif oxyde et le tétraméthylène— sulfoxyde se sont révélés être particulièrement convenables. On peut employer datu» le mélange, à la place de l'anhydride de 30 l'acide acétique, d'autres anhydrides d'acides carboxyliques appropriés, du pentoxyde de phosphore, de l'acide polyphospho-rique, de l'acide orthophosphorique et de l'acide phosphoreux. Les différents degrés de substitution sont obtenus en faisant varier les proportions des réactifs et lés conditions de la 35 réaction. Les spécialistes dans ce domaine peuvent simplement, à l'aide d'expériences préliminaires, déterminer les conditions pour obtenir le degré désiré de substitution. Pour éviter la dépolymérisation pendant le procédé, il est désirable que le traitement du mélange réactionnel et la purification du céto— 6910587 4 2005767 dextrane formé soit conduit d'une façon modérée» On a trouvé que le cétodextrane peut être avantageusement isolé du milieu réactionnel par précipitation dans un solvant miscible à l'eau tel que lracétone ou l'éthanol. le précipité ainsi obtenu 5 peut être lavé avec l'agent de précipitation puis redi3sous et reprécipité. Par exemple, par fractionnement, par addition progressive d'éthanol à une solution aqueuse de cétodextrane, on peut obtenir des fractions de poids moléculaire moyen désiré Par hydrolyse partielle, c'est-à-dire, par hydrolyse acide, les 10 produits de poids moléculaire moyen supérieur peuvent être dépolymérisés en produits de poids moléculaire moyen inférieur» Pendant la réaction avec le suifoxyde, excepté depuis les groupements céto, diverses quantités de substituants à base d'éther méthylthiométhylique indésirables, de même que des 15 quantités mineures de groupements acétyle peuvent être introduites dans le dextrane suivant les conditions de la réaction» On a trouvé que ces groupements méthylthiométhyliques peuvent être éliminés par traitement du cétodextrane brut avec un acide faible sous des conditions modérées, de façon que le âex-20 trane ne soit pas trop hydrolysé» Des quantités mineures de groupements acétyle, s'ils sont présents, peuvent aussi facilement être éliminées. L'invention est représentée, à titre non limitatif, aux exemples suivants® 25 EXEMPLE 1 On dissout 20 g de dextrane (poids moléculaire = 500*000) dans 220 ml de diméthyl-sulfoxyde. On ajoute ensuite, goutte à goutte, tout en agitant, 95 ml d'anhydride acétique. Le mélange réactionnel est agité à 40°0 pendant 90 mn et est 30 ensuite précipité dans l'acétone. Le précipité est filtré et lavé à l'acétone. Il est ensuite dissous dans 150 ml d'eau» à laquelle on ajoute 7 ml d'acide chlorhydrique 10 H. Le mélange est maintenu à 35°C pendant 2 heures et est ensuit© précipité avec de l'éthanol. Le précipité est lavé pour être dé~ 35 barrassé de l'acide avec 85 $ d'éthanol. Après reprécipitation depuis un mélange d'eau et d'éthanol, on obtient 15 g de cé=» todextrane (poids moléculaire = 125«000)• Le degré de substitution par rapport aux groupements céto est déterminé par le procédé à l'hydroxylamine et on trouve qu'il est de 0,09» La 6910587 5 2005767 teneur en soufre est inférieure â 0,03 fi* L*absorption à l'infrarouge donne une bande à 1.730 cm ^ (groupement céto)» le produit peut être eneore purifié par reprécipitation etc, ... EXEMPLE 2 5 On dissout 10 g de dextrane (poids moléculaire = 70.000) dans 100 ml de diméthyl-sulfoxyde » On ajoute 9 g d'acide po-lyphosphorique et le mélange ainsi obtenu est maintenu à 50°G pendant 2 heures. Après précipitation'avec de l'acétone et une nouvelle précipitation répétée depuis un mélange d'eau et 10 dracéton%, on fixe 7 g du produit. Le poids moléculaire moyen du cétodextrane est de 52.000 et le degré de substitution par rapport 4^ groupements céto est de 0,12, L*absorption à l'infrarouge donne une bande à 1.730 em~1 (groupement céto). Les «exemples suivants illustrent des applications du pro— 15 duit comme composés intermédiaires dans la préparation d'autres produits de valeur. •RTRMPT.-R 5 Liaison de l'hydrazide de l'acide isonicotinique au cétodextmrje 2 g de cétodextrane s, conformément à l'exemple 2, sont 20 dissous dans 100 ml d'eau. La solution, ainsi obtenue est acidifiée faiblement avec de l'acida acétique® On ajoute 0,5 g d'hydraside d'acide isonieotinique et le mélange réagit pendant 24- heures. Le produit est précipité dans l'éthanol. Après reprécipitât!on à partir d'eau et d'éthanol et séchage9 on obtient 1 g de produit relié qui contient 5 $ d'hydraside d'acide isonieotinique. Le produit montre une absorption à l'ultraviolet à 255 aa« EXEMPLE 4 Liaison du sulfanilamide au cétodextrane On dissout 2 g de oétodextrane, conformément à l'exemple 2a dans 20 ml ds©au« La solution ainsi obtenue est tamponnée avec une petite quantité d'acétate de sodium et on ajoute ensuite 0,7 g de sulfanilamide. Le mélange est maintenu à 70°C pendant 10 mn. Après refroidissement, il est filtré et le gel de filtrat filtré sur un lit de gel consistant en dextrane polymérisé avec de l'épi-chlorhyârine a une regrise d'eau de 2,5 g S.5esta, par gramme de substance anhydre (Sephadex G-25). ii BAD ORIGINAL O 30 35 6910587 2005767 On obtient 1,6 g d'un produit de poids moléculaire supérieur composé d'un polymère auquel on a fixé des groupeme.i.u.cs sulfanilamide. EXEMPLE 5 5 Liaison du 4-méthyl-3-thiosemlcarbazide au cétodextrane On dissout, dans 40 ml d'eau, 2 g de cétodextrane ayant un. degré de substitution de 0,05. On ajoute ensuite 0,25 g de 4-méthyl-3-tMosemicarbazide à la solution ainsi obtenue et le mélange est agité à la température ambiante toute une nuit» 10 II est filtré et le gel de filtrat est filtré sur le même milieu comme décrit à l'exemple - 4. On obtient 1,5 g d'un produit de poids moléctilaire supérieur ayant une teneur en azote de 1,5 Il montre une absorption à l'ultraviolet à 268 nm. EXEMPIE 6 15 Réduction du cétodextrajie On dissout, dans 3 litres d'eau, 100 g de cétodextrane ayant un degré de substitution de 0,1 , le pH étant réglé entre 7 èt 8* On ajouts 20 g de fcorohydrure de sodium et on laisse 1 solution au repos pendant 60 mn» Après neutralisation, dialyse 20 et précipitation dans l'éthanol, on obtient 100 g de produit qui ne montre pas d'absorption à 1'infrarouge de tout groupement céto. p *■ - - copy 6910587 7 2005767 REVEHDICATIONS 1 - Dérivé de dextrane caractérisé en ce qu'il contient des groupements céto sur au moins un des atomes de carbone en position 2, 5 et 4- des cycles à motifs anhydro-glucose subs-5 titués par les groupements céto, ce dérivé étant représenté par la formule générale, à savoir ï - . A/~0H(0H)J4 _ n . dans laquelle m représente le nombre de groupements d'alcool - secondaire dans le dextrane ayant la formule suivante : 10 A Z~0H(0H)^i. , et où n -est un nombre choisi de telle façon que le degré de substitution n/m soit compris entre 0,01 et • 0,5, et dans laquelle ^~CH(0H)J^ représente les radicaux • 15 2 - Procédé de préparation d'un dérivé de dextrane suivant la revendication 1, caractérisé en ce que ce dérivé contient ' des groupements céto sur au moins un des atomes de carbone en position 2,3 et 4 dans les cycles.à motifs anhydro-glucose substitués par les groupements céto, ce dérivé étant représenté 20 r par la formule générale, à savoir ï A Z~CH(0H)J4 . j/~C0_£. dans laquelle m représente le nombre de groupements alcool secondaire dans le dextrane ayant la formule générale A Z~CH(0H) , et dans laquelle n est un nombre choisi de 25 telle façon que le degré de substitution n/m soit compris dans la gamme de 0,01 à 0,5 et où ^fCH(0H)J^ représente les radicaux portant les groupements alcool secondaire du dextrane, A étant le reste du dextrane, le procédé étant caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir du dextrane ayant la formule 30 A ZTÔH(0Hdans laquelle A et n ont chacun la signification donnée ci—dessus avec une quantité d'un agent capable d'oxyder les groupements hydroxyle secondaires en groupements céto correspondant à n moles d'oxygène lié /~0_7- 3 — Procédé suivant la revendication 2, caractérisé en 35 ce que l'agent oxydant est un suifoxyde. 4 _ Procédé suivant la revendication 3, caractérisé en ce que l'agent oxydant est un suifoxyde et un anhydride d'acide. 5 - Procédé suivant l'une des revendications 3 ou 4-, caractérisé en ce que le suifoxyde est le dimethyl—suifoxyde• COPY 6910587 2005767 6 - Procédé suivant l^une des revendications 2 à 5, caractérisé en ce que l'agent oxydant est le diméthyl-sulfoxyde et 11 anhydride.acétique• 7 - Procédé suivant l'une des revendications 2 à 6, carac 5 térisé en ce que le produit réactionnel est purifié par traitement avec iin acide sous des conditions modérées» 8 - Procédé suivant l'une des revendications 2 à 7, carac térisé en ce que le produit réactionnel est purifié par précipitation depuis sa solution aqueuse avec un alcool aliphatique 10 inférieur ou une cétone.