FR 2002731 A1 19691031 FR 6905213 A 19690227 69 05213 i 20027 31 Le pyridoxine-4,5-monophosphate cyclique est- un .: ; précurseur biochimique et un intermédiaire dans la préparation du pyridoxal-5-phosphate sous forme de pyridoxine-5-phosphate. La pyridoxine ou vitamine b6 est un précurseur important du 5 pyridoxal-5-phosphate. Le pyridoxal-5-phosphate est un coenzyme intervenant dans diverses réactions enzymatiques dans des organismes vivants. Le pyridoxine-4,5-monophosphate cyclique, ci-après dénommé pyridoxine cyclophosphate a été'synthétisé par phosphoryla-10 tion directe de la pyridoxine ou d'un de ses sels (demandes de brevet japonais n" 49 295/67 et 45 325/67). En cherchant à éliminer les inconvénients trouvés dans l'art antérieur, la demanderesse a découvert selon l'invention un procédé permettant d'obtenir le pyridoxine-cyclo-15 phosphate de manière économique et avec un meilleur rendement que dans les procédés connus. Selon l'invention, on prépare le pyridoxine-cyclo-phosphate de formule 20 0 t I CH„ 0 ■OH » H^C :H, V (I) n 25 et ses sels par phosphorylation d'un dérivé de l,5-dihydro-8-méthylpyrido/~3>4, e/, /~l,j57dioxépine-9-ol de formule suivante R, 30 35 (II) 69 05213 2 2002731 ou un de ses sels dans laquelle R-^ et Rg représentent chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur, alkényle inférieur ou aryle ou bien R-^ et R^ pris ensemble représentent un'radical alkylène inférieur. 5 Dans la présente description, on entend par alkyle inférieur un reste hydrocarboné saturé à chaîne droite ou ramifiée, par exemple méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, etc..., et par alkényle inférieur un reste hydrocarboné insaturé à chaîne droite ou ramifiée, par exemple un groupe-10 ment 2-propényle, etc... Les groupements a,lkylène inférieurs comprennent par exemple les polyméthylènes inférieurs tels que pentaméthylène. Le terme de sel désigne un sel d'acide minéral ou organique, par exemple de l'acide chlorhydrique, de l'acide sulfurique, de l'acide oxalique, de l'acide 15 toluène sulfonique, etc... On peut facilement préparer le 1,S-dihydro-S-méthyl-pyrido^/j, 4,e7, /ï,^7dioxépine-9-ol de formule II ci-dessus ou ses sels utilisés comme matières premières pour le.procédé selon l'invention en faisant réagir la.4,7-dihydro-l,3-dioxé-20 pine avec l'oxazole. On peut préparer le pyridoxine-cyolophosphate par phosphorylation directe d'un composé de formule II ou de ses sels, par exemple le chlorhydrate. On peut, utiliser divers agents phosphorylants connus pour les buts de l'invention. 25 A titre d'illustration, on peut citer les.agents phosphorylants du type chlorure d'acide ou du type anhydride d'acide, par exemple oxychlorure de phosphore,, acide pyrophosphorlque, acide polyphosphorique, tétrachlorure de pyrophosphoryle. On peut aussi utiliser la phosphorylation par l'intermédiaire 50 d'un acide imidoyle phosphorique, par exemple la phosphorylation par l'acide phosphorique, l'acide pyrophosphorique ou leurs esters avec le dicyclohexylcarbodiimide,,etc... Si. on le désire, on peut aussi utiliser divers, autres agents classiques. 35 Le produit désiré, le pyridoxine-oyclophosphate s'hydrolyse facilement en conditions basiques... En conséquence, la phosphorylation ne doit pas être effectuée dans des conditions qui nécessitent l'élimination désavantageuse du ou des 69 05213 3 20027 31 groupements protecteurs après phosphorylation. Il est donc avantageux d'utiliser des procédés de phosphorylation par l'acide polyphosphorlque, 1'oxychlorure de phosphore, etc... On préfère,pour obtenir de bons résultats, 1foxychlorure de 5 phosphore avec une quantité convenable d'eau ou d'alcool (par exemple un alcanol inférieur). On peut effectuer la réaction de phosphorylation dans un solvant approprié, par exemple tin solvant organique tel que benzène, chloroforme, phosphate de trlalkyle, etc... 10 On peut aussi effectuer la réaction directement en l'absence de solvant avec un agent de phosphorylation approprié. On peut effectuer la réaction à une température d'environ -10°C à 100°C, de préférence d'environ 50°C. La température de réaction varie selon le type d'agent de phosphorylation, 15 etc... Alix températures et dans les autres conditions préférées, la réaction est complète en environ 2 à 10 heures. Les composés connus de formule II qui ont été synthétisés et que l'on peut utiliser par le procédé de l'invention comprennent les composés suivants : 20 1,5-dihydro-8-méthylpyrido_^5,4,e7, dioxépine-9-ols 1, 5-dihydro-8-méthyl-8-phénylpyridq 25 Lorsque la réaction est terminée, on ajoute de l'eau au mélange réactionnel. Lorsqu'on utilise un solvant, on élimine le solvant par un procédé convenable tel que l'extraction. On sépare le pyridoxine-èyclophosphate de la solution aqueuse brute obtenue. On peut cristalliser directe-30 ment le produit désiré. Il est possible de neutraliser la solution brute en utilisant un sel convenable tel qu'un sel de calcium ou de baryum et de traiter le produit résultant par une résine échangeuse d'ions. Ensuite, on concentre la solution aqueuse purifiée 35 et on recristallise le concentrât pour obtenir des cristaux de pyridoxine cydophosphate avec un bon rendement. Le pyridinoxi-ne=cyciophosphate obtenu est identique à l'échantillon standard 69 05213 4 2002731 déterminé au moyen des spectres IR et UV, du spectre de RMN,• des constituants, de l'analyse élémentaire, de la réaction avec le quinone chlorimide et le chlorure ferreux, le pK,etc... Les exemples suivants illustrent l'invention sans 5 toutefois en limiter la portée. EXEMPLE 1 On ajoute 12 g de l,5-dihydro-3,3,8-triméthyl-pyrido^/J, 4, e7,/T,_27dioxépine-9-ol à une solution préparée séparément de 92 ml d'oxychlorure de phosphore et 20 ml d'eau. 10 On effectue la réaction pendant 2 heures à 150°C et ensuite on combine le mélange réactionnel avec de l'eau glacée pour faire environ 200 ml et on laisse refroidir le mélange au repos jusqu'à ce qu'il se forme des cristaux sous forme d'aiguilles blanchâtres. On sépare les cristaux par filtra-15 tion et on les recristallise pour obtenir 3,6 g de pyridoxi» -ne-cyclophosphaifeec. Le produit obtenu brunit à environ 160°C. Son point de fusion et son point de décomposition ne sont pas nettement déterminés. La réaction colorée du phénol par la quinone est positive. Formule moléculaire : CqH^qO^NPî poids 20 moléculaire 231,14. Analyse élémentaire : Trouvé : C 41,58; H 4,57; N 5,96; P 13,21 Calculé : C 41,58; H 4,33; N 6,06; P 13,39 Les spectres UV et IR sont identiques à ceux d'un 25 échantillon standard de pyridoxine-cyclophosphate. ; - EXEMPLE 2 On ajoute 10 g de 1,5-dihydro-3-méthylp3rrido^, 4,£/, /ï,2L/dioxépine-9-ol à une solution préparée séparément de 90 ml d'oxychlorure de phosphore et 20 ml d'éthanol. On effectue la 30 réaction pendant 3 heures à 40°C et on traite le mélange réactionnel comme décrit à l'exemple 1 pour obtenir 5,2 g de pyridoxine-cyclophosphaté. EXEMPLE 3 On ajoute 10 g de chlorhydrate de 1,5-dlhydro-3-35 isopropyl-8-méthylpyrido^, 4,e7,/T,27dioxépine-9-ol à une solution préparée séparément d'acide polyphosphorique obtenu par mélange d'acide phosphorique à 85$ et de pentachlorure de phosphore (1:1). On effectue la réaction pendant 6 heures à 69 05213 5 2002731 30°C et ensuite on combine le mélange réactionnel de l'eau glacée pour faire environ 500 ml. On fait passer la solution à travers une colonne garnie de 1 litre de résine Dianion SK n° 1A (résine échangeuse de cations fortement acide vendue 5 par Mitsubishi Kasei Kogyo K.K., Japo,) sous sa forme H+. On élue la résine par de lleau et on recueille 1 litre d'une fraction légèrement acide ayant un maximum d'absorption à 320 myu, en concentre 50 ml et on refroidit pour obtenir des cristaux que l'on sépare, que l'on sèche pour obtenir 27,2 g 10 de pyridoxine-cyclophosphate. EXEMPLE 4 On ajoute 10 g de l,5-dihydro-3-phényl-8-méthyl-pyrido/~3,4,e7,/~l,^7dioxépine-.9-ol à un mélange de 250 ml de phosphate de triéthyle et 10 ml de tétrachlorure de pyro-15 phosphoryle à 0QC. On effectue la réaction pendant environ 8 heures. On combine le mélange réactionnel avec 500 ml d'eau. On extrait le solvant organique par le benzène pour obtenir une solution aqueuse que l'on traite comme décrit à l'exemple 3 pour obtenir 5)8 g de pyridoxine-cyclophosphate. 69 05213 6 20027 31 H_E_V_E_N_D_X_Ç_A_T_I_0_N_S 1. Un procédé de préparation du pyridoxine-4,5-mon°- phosphate cyclique de formule : 10 et de ses sels, consistant à phosphoryler un dérivé de 1,5-dihydro-8-méthylpyrido/3, ks£/,/ï,'^/à±oxêplne-g-ol de formule 15 CH, 20 HO. ïi C— i I CH, -R, H3d. N' 25 ou ses sels, dans lequel R-^ et R2 représentent chacun un atome d'hydrogène ou un radical alkyle inférieur, alkényle inférieur ou aryle ou bien R-^ et R2 pris ensemble représentent un radical alkylène inférieur. 2. Le procédé selon la revendication 1 dans lequel 30 on effectue la phosphorylation avec un agent phosphorylant du type chlorure d'acide ou anhydride d'acide. 3. Le procédé selon la revendication 1 dans lequel on effectue la phosphorylation avec 1'oxychlorure de phosphore, l'acide pyrophosphorique, l'acide polyphosphorique ou le tétra-35 chlorure..de pyrophosphotfyle », 69 05213 7 20027 31 4. Le procédé selon la revendication 1 dans lequel le sel est un sel d'un acide organique ou minéral. 5. Le procédé selon la revendication 4 dans lequel le sel est ion sel de l'acide chlorhydrique, sulfurique, 5 oxalique ou toluènesulfonique. 6. Le procédé selon la revendication 1 dans lequel on effectue la phosphorylation en présence d'un solvant. 7. Le procédé selon la revendication 6 dans lequel le solvant est l'eau, un alcanol inférieur, le benzène, le 10 chloroforme ou un phosphate de trialkyle. 8. Le procédé selon la revendication 1 dans lequel on effectue la phospjorylation à une température de -10 à 100°C. 9. Le procédé selon la revendication 8 dans lequel 15 on effectue la phosphorylation pendant environ 2 à 10 heures. 10. Le procédé selon la revendication 1 dans lequel R-^ et R2 représentent chacun un radical méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, 2-propnéyle ou phényle ou bien R^ et R2 pris ensemble représentent un radical pentaméthylène.