FR 2012866 A1 19700327 FR 6923705 A 19690711 69 23705 -1- 201.2866 La présente invention concerne des dérivés 4~alkyle de la mitomycine B ayant une action bactériostatique intéressante et leurs procédés de préparation. les composés suivant l'invention peuvent être représentés par la formule générale : ch2or1 10 où E/| représente un atome d'hydrogène, un groupe acyle de formule 15 -COR^, un groupe sulfonyle de formule -SOgR^ (R^ représentant un groupe hydrocarboné aromatique ou alkyle inférieur, substitué ou non) ou un groupe de formule -CON^î représente un groupement aliphatique hydrocarboné inférieur (lorsque R,j représente un atome d'hydrogène); ou un groupement alkyle inférieur (lorsque 20 représente un groupement acyle de formule -COR^, un groupement sulfonyle de formule -SOgR^, ou un groupement de formule -COHHg); et X représente un groupement méthoxy ou un groupementéminé primaire, secondaire ou tertiaire de formule R^R^N- (où Rj et R^, qui peuvent être semblables ou différents, représentent chacun 25 un atome d'hydrogène ou un groupement hydrocarboné aliphatique ou aromatique substitué ou non). Les composés de formule I possèdent une action bactériostatique intéressante contre une diversité de microorganismes. Les composés de formule I particulièrement avantageux comprennent 50 ceux où, par exemple, X représente un groupement méthylamine, diméthylaminé, isopropylamine ou aniline. Le symbole R^ peut représenter, par exemple, un groupement acétyle, chloroacétyle ou p-toluènesulfonyle tandis que Eg représente avantageusement un groupement méthyle. 55 Les composés de formule I n'ont pas seulement une bonne activité inhibitrice vis à vis de diverses bactéries, mais ils ont généralement une faible toxicité. De plus quelques uns des composés de formule I sont aussi utiles comme intermédiaires dans la préparation d'autres dérivés de la mitomycine. Les concentra-40 tions inhibitrices minimales de divers dérivés de la mitomycine 69 23705 -2- 2012866 10 15 vis à vis de certains microorganismes et leurs toxicités intraveineuses chez les souris sont données dans le tableau suivant. (Voir Tableau page suivante) L'invention vise un procédé de préparation des composés de formule I. Jusqu'ici, on ne connaissait pas de procédé permettant de dé-carbamoyler de manière sélective le groupement uréthane des mito-mycines. La présente invention a pour objet un procédé de prépa-» ration des composés de la formule II oh2oh II N-CH, 20 25 (où X et Eg sont tels que précédemment définis)qui consiste à hydrolyser un dérivé mitomycine de formule : ch2ocohh2 -CH- III (où X et E2 sont tels que précédemment définis). Les composés de formule II ainsi obtenus ont en général une 50 forte action inhibitriee sur les bactéries associée à une toxicité relativement faible. Les composés de formule II peuvent aussi être importants comme intermédiaires dans la synthèse de composés utiles. On peut, par exemple, effectuer l'hydrolyse en utilisant un 35 alcoolate métallique alcalin, tel qu'un alcoolate de sodium ou de potassium. Les alcools pour la formation des alcoolates métalliques alcalins peuvent être inférieurs, primaires, secondaires ou tertiaires, tels que le méthanol, l'éthanol, l'isopro-panol ou le t-butanol. 40 L'hydrolyse des composés de formule III est effectuée avanta- TABLEAU Os Concentration inhibitrice minimale ( V/ml) des composés de la formule I K> x Bactéries Eéf^SiS-fc ATCC kh2 och3 kh2 kh2 mh2 m2 mhc6h5 WHGH3 h OONH2 GOGH, 3 COOHgOl sog-^^- 0h5 oomh2 comh2 GOEH2 ch3 0h, 3 ch3 ch3 CH, 3 ch3 gh3 oh3 Bacillus subtilis 6633 0,781 0,039 1,562 6,25 >25 0,097 0,097 0,39 Staphylococcus aureus ' 3,125 0,156 12,5 >25 >25 0,39 0,39 3,125 Sarcina lutea 934-1 >25 0,039 3,125 >25 5,125 0,39 0,39 6,25 Escherichia coli 14948 6,25 0,781 3,125 25 >25 0,89 1,562 6,25 Pseudomonas 150/IS aerup;inosa >25 3,12 >25 >25 >25 6,25 3 25 >25 Proteus vulKaris 6897 >25 3,12 >25 > 25 >25 6,25 >25 >25 LD^q (i.v.) mg/kg 300 300 i hO O ho oo o o 69 23705 ■2012866 geusement en présence d'un solvant tel qu'un alcool, on peut utiliser avantageusement l'alcool qui a servi à préparer 1'alcoolate métallique alcalin. Le solvant employé pour effectuer la réaction peut être un solvant aprotique, tel que, par exemple, le diméthyl 5 formamide ou le diméthylsulfoxyde. On peut obtenir de meilleurs résultats en mélangeant un alcool ou un solvant aprotique avec un solvant aromatique hydrocarboné comme le benzène ou le toluène. En effectuant l'hydrolyse des composés de formule III, il est avantageux d'employer un excès d'alcoolate métallique alcalin. 10 L'alcoolate est généralement utilisé en solution à une concentration comprise entre 1 et 5N; toutefois la réaction est possible avec des concentrations différentes. La réaction peut être effectuée à une température commode, avantageusement entre 0°C et le point d'ébullition du solvant. 15 La durée de la réaction peut varier en fonction d'un certain nombre de facteurs tels que la substance initiale, 1'alcoolate métallique alcalin, la concentration des réactifs, le solvant et la température. La réaction est généralement totale en 1'espace de 4 à 18 heures lorsqu'on agite rigoureusement à la température 20 ambiante. Quand la réactionést terminée, on sépare le produit réaction-nel du mélange obtenu par une méthode classique, par exemple, par mélange avec de l'eau puis extraction du produit réactionnel avec un solvant organique approprié tel que l'acétate d'éthyle. Une 25 variante consiste à neutraliser le mélange réactionnel, par exemple par barbotage de bioxyde de carbone dans ce mélange. On peut alors extraire le produit du mélange résultant avec un solvant approprié. On peut préparer les composés de formule 30 O (où X et Eg sont tels que précédemment définis lorsque E^ représente un groupement acyle de formule -COR^ ou un groupement sul-40 fonyle de formule -SOpH^) en faisant réagir un composé de for- BAD ORIGINAk 69 23705 -5- 2012866 mule II avec un agent acylant ou sulfonant approprié. Les composés de formule IV ont généralement une forte action inhibitrice sur les bactéries alliée à une toxicité relativement faible. 5 On peut utiliser tout agent acylant approprié, par exemple un anhydride d'acide de formule (E^CO^O ou un halogénure d1 acyle de formule E^COY (où E^ a été défini précédemment et Y représente un atome d'hydrogène, avantageusement un atome de chlore). L'agent sulfonant peut être, par exemple un halogénure sulfonyle de 10 formule E^S02Ï (où E^ et Y sont tels que précités). La réaction peut être effectuée dans un solvant organique tel qu'un hydrocarbure aromatique par exemple benzène, toluène ou un éther tel que le diéthyl éther, le tétrahydrofurane ou le dioxane. On peut utiliser d'autres solvants à condition qu'ils n'inhibent sensible-15 ment pas la réaction. La réaction peut être effectuée avantageusement en présence d'un agent acide liant tel qu'une base organique tertiaire, par exemple la pyridine, la picoline ou la tri-éthylamine. On peut effectuer la réaction à une température comprise par 20 exemple entre 0° et 100°C mais une température au plus égale à la température ambiante est avantageuse. La quantité d'agent acylant employée tel qu'un anhydride d'acide, un halogénure d'acyle ou un agent sulfonant tel qu'un halogénure sulfonyle, peut varier d'une quantité équimolaire, néces-25 saire en théorie pour une réaction totale du composé de formule IV, à une concentration égale à environ 2 à 10 fois la quantité théoriquement nécessaire. L'agent liant acide, lorsqu'on l'utilise, peut être présent à une quantité au moins équimolaire par rapport à la quantité de l'agent acylant ou sulfonant. Générale-30 ment, on prolonge la réaction jusqu'à ce que la substance initiale soit à peine détectable par chromatographie en couche mince du mélange réactionnel. Le temps nécessaire pour cette étape peut varier en fonction de facteurs tels que la substance initiale spécifique ou les conditions de réaction mais il est 35 généralement compris entre 1 et 24 heures. On peut utiliser différentes méthodes pour isoler et purifier le produit désiré après l'achèvement de la réaction. On peut par exemple éliminer le solvant et l'excès de réactif par distillation, ou bien on peut ajouter une grande quantité d'eau au 40 mélange réactionnel et extraire le produit à l'aide d'un solvant 69 23705 -6- 2012866 10 organique. On peut alors laver l'extrait avec une solution aqueuse faiblement alcaline telle qu'une solution de bicarbonate de sodium, puis éliminer le solvant, par exemple par distillation sous vide. On peut,si on le désire, purifier le produit obtenu par recristallisation avec ou sans une étape intermédiaire de chromatographie, par exemple, sur gel de silice. la mitomycine B peut être représentée soit par la formule V soit par la formule VI qui peuvent être considérées comme étant O CHgOCOlSHg CH 0 l[ GH20C0]ra2 en équilibre. 0. n-ch. -ch-, 15 vi 20 L ' amino-cétone de formule VI peut être aflsylée en position 4 pour donner un dérivé 4-alkyle. LTinvention vise un procédé de préparation des composés de formule 0 ch2ocohh2 25 n-ch, vii (où Eg représente un groupement alkyle inférieur) qui consiste à faire réagir la mitomycine B avec un agent alkylant approprié. 30 Les dérivés 4—alkyle ainsi obtenus ont en général une forte action inhibitrice sur la croissance des bactéries et peuvent être aussi des intermédiaires importants pour la synthèse de dérivés utiles. L'alkylation de la mitomycine B peut être effectuée à l'aide 35 d'un agent alkylant classique, par exemple un halogénure d'alkyle inférieur tel qu'un halogénure de méthyle ou d'éthyle, 1'halogénure étant de préférence l'iodure, ou un disulfate d'alkyle inférieur. On peut effectuer cette réaction dans un solvant n'ayant pas sensiblement d'effet contraire sur le déroulement 40 de la réaction, par exemple un hydrocarbure aromatique tel q«e 69 23705 -7- 2012866 10 15 20 25 30 le benzène ou toluène, ou un solvant aprotique polaire tel que le diméthyl formamide ou le diméthyl suifoxyde. En général, on traite la mitomycine/avec un hydrure métallique alcalin tel que 1'hydrure de sodium, potassium ou lithium avant le traitement avec l'agent alkylant. La quantité d'hydrure métallique alcalin utilisée est avantageusement supérieure à l'équivalent théoriquement nécessaire. La réaction d'alkylation peut commodément être effectuée à température ambiante bien que la réaction puisse se faire à une température comprise entre 0°G et le point d'ébullition du solvant utilisé. Le temps requis pour la réaction peut varier en fonction, par exemple, du solvant utilisé et de la température de réaction. De toute manière, une durée de 10 heures est généralement suffisante. Pendant le déroulement de la réaction, la couleur du mélange réactionnel passe généralement du pourpre au bleu foncé lorsqu'on ajoute 1'hydrure métallique alcalin à la solution de mitomycine B, puis la couleur devient pourpre rougeâtre lorsqu'on ajoute l'agent alkylant. Une chromatographie en couche mince du mélange réactionnel, sur du gel de silice, suivie d'une élution avec un mélange 1/1 d'acétone/chloroforme (1=1) peut être utilisée pour mettre en évidence l'accumulation du produit désiré pourpre rougeâtre au dépend de la mitomycine B. Lorsque la réaction est terminée, on peut traiter le mélange réactionnel de façon classique, par exemple par décomposition de l'excès d'hydrure métallique alcalin avec de l'acétate d'é-thyle contenant de l'eau. On peut éliminer la substance insoluble ainsi produite par filtration et la mitomycine B contenue dans le filtrat par une méthode appropriée, telle qu'une chromatographie sur colonne de gel de silice. Conformément à l'invention, on prépare les composés de formule 0 VIII 69 23705 -8- 2012866 (où R2» Rj et R^ sont tels que précédemment définis) en faisant réagir un' composé doformule VII (précédemment défini) avec de l'ammoniac ou une aminé primaire ou secondaire. Les composés de formule VIII ainsi obtenus ont en général un 5 fort effet inhibiteur sur la croissance de diverses bactéries, allié à une toxicité relativement faible. Ils peuvent aussi être importants comme intermédiaires dans la synthèse de$dérivés utiles de mitomycine. Dans ce procédé, on peut avantageusement effectuer la réaction 10 en présence d'un solvant, par exemple dans un alcool inférieur tel que le méthanol, l'éthanol, propanol ou butanol, un solvant aprotique polaire tel que le diméthyl formamide ou le diméthyl-suif oxyde, l'eau ou un mélange de deux ou plus de ces solvants.. La quantité d'ammoniac ou d'aminé doit Stre, d'une manière, géné-15 raie, au moins égal à la quantité équivalente théorique bien qu'une quantité supérieure puisse être utilisée. La réaction peut être effectuée à une température appropriée voisine de la température ambiante mais on peut opérer à wae température comprise entre 0°0 et le point d'ébullition du solvant 20 employé. L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description détaillée qui-va suivre de quelques exemples non limitatifs de modes de réalisation suivant l'invention. Exemple 1 25 7-amino-dé—carbamoyl méthylmitomycine B On dissout de la 7-sBtiûo méthylmitomycine S (500 mg) dans un mélange de 10 ml d'une solution méthanolique 3N de méthylate de sodium et 100 ml de benzène absolu, et on agite vigoureusement à la température ambiante. La réaction est complète après environ 30 4- heures, ainsi que le confirme une chromatographie en couche mince. On ajoute au mélange réactionnel une grande quantité d'eau et extrait avec de l'acétate d'éthyle. L'extrait est séché et le solvant éliminé par évaporation. On recueille des cristaux noirs. 35 La recristallisation dans de 1'éther de pétrole/acétone donne 360 mg de cristaux noirs en forme d'aiguilles de 7-amin0""d-écarbamoyl méthylmitomycine B ayant le spectre infra-rouge (procédé au KBr) représenté sur la fig. 1. Exemple 2 40 Décarbamo.yl méthylmitomycine B BAD ORIGINAL 69 23705 -9- 2012866 On procède ainsi que décrit dans l'exemple 1, si ce n'est qu'on utilise 500 mg de méthylmitomycine B, La réaction est complète après 18 heures et donne de la décarbamoyl méthylmitomycine B. Le produit ne cristallise pas et reste sous forme d'-5 une huile de couleur pourpre, même après plusieurs purifications par chromatographie sur gel de silice. Exemple 5 7-Amino-décarbamoyl méth.ylmitom.ycine B On dissout la 7-amino-méthylmitomycine B (-500 mg) dans 100 ml 10 d'unè solution 2N butanolique tertiaire de tertio-butylate de ' potassium. La réaction est effectuée de manière similaire à celle décrite dans l'exemple 1. Le spectre infra-rouge des cristaux résultants est identique à celui de la fig. 1. Exemple 4- 15 7—10—acétoxy décarbamoyl méthylmitomycine B On dissout de la 7-amino décarbamoyl méthylmitomycine B (100 mg) dans un mélange d'1 ml d'anhydride acétique et 1 ml de pyridine et on laisse reposer une heure à la température ambiante. On élimine le solvant par évaporation sous vide et on purifie le 20 résidu par chromatographie sur gel de silice. La substance huileuse résultante, de couleur pourpre, est de la 7-amino-10-acéto-xy-décarbamoyl méthylmitomycine B, dont le spectre infra-rouge est représenté à la fig. 2. Exemple 5 25 7-Amino-10-acétoxy décarbamoyl méthylmitomycine B On fait réagir de la décarbamoyl méthylmitomycine B (100 mg) de manière similaire à celle décrite dans l'exemple 4-. La substance pourpre huileuse résultante est le 10-acétoxy décarbamoyl-mitomycine B. 50 Exemple 6 7-Amino-10-chloroacétoxy décarbamoyl méthylmitomycine B On dissout 100 g de 7-amino-décarbamoyl méthylmitomycine B dans 5 ml de triéthylamine et on ajoute cette solution goutte à goutte en agitant à un mélange de chlorure de chloracétyle 35 (0,8 ml) et de benzène absolu (5 ml) à 0°C. La réaction est terminée au bout de 2 heures. On ajoute alors de l'eau au mélange réactionnel et on extrait avec du chloroforme. L'extrait est lavé avec une solution de bicarbonate de potassium et puis lavé convenablement avec de l'eau et séché sur du sulfate de sodium 4-0 anhydre. Après avoir enlevé le solvant par évaporation sous vide, 69 2-J705 -10- 2012866 on soumet le résidu à une chromatographie sur gel de silice afin d'obtenir une fraction majeure qu'on recristallise dans un mélange d'éther de pétrole/acétone pour donner 20 mg de grains noirs de 7-amino-10-chloroacétoxy décarbamoyl méthylmitomycine B, dont 5 le spectre infra-rouge (procédé au KBr) est représenté sur la fig. 3. Exemple 7 7-Amino-10-p-toluènesulfonyl décarbamoyl méthylmitomycine B On dissout de la 7-amino décarbamoyl méthylmitomycine B 10 ( 50 mg) dans 1,5 nil de pyridine et on ajoute cette solution à 126 mg de chlorure de p-toluène sulfonyle. On agite le mélange à 0°0o La réaction est terminée après 20 heures environ. On ajoute une grande quantité d'eau au mélange réactionnel et on extrait avec du chloroforme. L'extrait est lavé avec une solu-15 tion de bicarbonate de potassium et ensuite soigneusement avec de l'eau. On sèche l'extrait sur du sulfate de sodium anhydre et on élimine le solvant par évaporation sous vide.Après purification par chromatographie sur gel de silice, on cristallise le résidu dans de l'acétate d'éthyle pour donner 20 mg de cris-20 taux bruns granuleux dont le spectre infra-rouge (procédé au KBr) est représenté à la fig. 4. Exemple 8 Méthylmitomycine B De la méthylmitomycine B (1 g) est dissoute dans un mélange 25 de solvant constitué de 36 ml de benzène absolu et 4 ml de di-méthylformamide, mélangée à 400 mg d'hydrure de sodium à 50 % et agitée à ia température ambiante. La coloration de la solution passe du pourpre au bleu foncé. On ajoute 2 ml d'iodure de méthyle et on agite continuellement. Le mélange réactionnel 30 passe progressivement au pourpre rougeâtre. On arrête la réaction, après environ une heure. La bande due au produit initial dans l'analyse chromatographique en couche mince a disparu. Immédiatement après, on décompose 1'hydrure de sodium restant et le composé additionnel de sodium en ajoutant de l'acétate d'éthyle 35 contenant de l'eau et on enlève la substance insoluble résultante, par filtration. On concentre le filtrat sous vide pour enlever le solvant et on soumet le résidu à une chromatographie sur gel de silice pour le purifier. On élue avec un mélange d'acétone et de chloroforme, on recueille les fractions principales 40 et on élimine le solvant par évaporation sous vide. La cristalli 69 23705 -11- 2012866 sation dans de l'acétate d'éthyle donne 315 mg de cristaux d'un pourpre rougeâtre ayant la forme d'aiguilles. Le spectre infrarouge de la méthylmitomycine B est représenté à la fig. 5» Exemple 9 5 Méthylmitomycine B On procède de la façon générale décrite dans l'exemple 6, si ce n'est qu'on utilise du tétrahydrofurane absolu (100 mg) au lieu du benzène absolu et du diméthyl formamide. On arrête la réaction après environ 5 heures. Le spectre infra-rouge des cris-10 taux résultants est identique à celui de la fig. 5» Exemple 10 7-amino-méthylmitomycine B On dissout la méthylmitomycine B (100 mg) dans du méthanol (10 ml) et on sature la solution avec du gaz ammoniac séché. La 15 réaction est complète avant une heure lorsque la bande correspondant au produit initial disparaît de l'analyse chromatographique en couche mince. Le solvant est enlevé par évaporation sous vide et le résidu cristallisé dans de l'acétone pour donner des cristaux (65 mg) de méthylmitomycine B pourpre foncé ayant 20 la forme d'aiguilles. Si on le désire, le produit brut peut être purifié par chromatographie sur gel de silice. Le spectre infrarouge du composé obtenu est représenté sur la fig. 6. Exemple 11 7-Amino méthylmitomycine B 25 On procède ainsi que décrit dans l'exemple 10, si ce n'est qu'on utilise de l'ammoniaque (1 ml) concentré aqueux à la place du gaz ammoniac sec. Le spectre infra-rouge du produit obtenu à est identique à celui représenté la fig. 6. Exemple 12 30 7-Amino méthylmitomycine B Un procédé similaire à celui décrit dans l'exemple 10 est mis à exécution avec du diméthyl formamide à la place du méthanol. Le temps de réaction est signifieativement plus court que celui de l'exemple 10. Le spectre infra-rouge des cristaux obtenus est 35 identique à celui représenté à la fig. 6. Exemple 13 7-Méthylamino méthylmitomycine B On dissout de la méthylmitomycine B (100 mg) dans une solution méthanolique (10 ml) contenant de la méthylamine (1 g) et 40 on laisse reposer à la température ambiante. La réaction est 69 23705 -12- 2012866 complète en l'espace de 10 minutes, comme le montre l'analyse chromatographique en couche mince. Le solvant est enlevé par é-vaporation sous vide. On peut éventuellement purifier le produit par chromatographie sur une colonne de gel de silice. La cris-5 tallisation dans de l'acétate d'éthyle donne des cristaux (75 ®S) de 7-méthylamino méthylmitomycine B, noirâtres granuleux. Le spectre infra-rouge est représenté à la fig. 7. Exemple 14 7-Anilino-méthylmitomycine B 10 On dissout de la méthylmitomycine B (100 mg) dans du méthanol (100 mg) et on mélange avec de l'aniline-(1 ml), le mélange est abandonné à la température ambiante durant-une nuit pour l'achèvement de la réaction. On élimine le solvant et l'excès d'aniline par évaporation sous vide. On peut, si on le déaire, effec-15 tuer une chromatographie sur une colonne de gel de silice c&Lxl de purifier le produit. La cristallisation dans de l'acétate d'éthyle donne des cristaux vert foncé (60 ag) de 7-anilino-méthyl-mitomycine B. Le spectre infra-rouge est représenté à la fig. 8. Exemple 15 20 7-Isopropylamino méthylmitomycine B On dissout de la méthylmitomycine (100 mg) dans du méthanol (10 ml) et on ajoute de 1'isopropylamine (1 ml). La réaction est complète avant 10 minutes. Le solvant et l'excès d*isopropylamine sont enlevés par évaporation sous vide. On purifie par une chro-25 matographie sur gel de silice. La cristallisation dans de l'acétate d'éthyle donne des cristaux noirs de 7-isopropylamino méthylmitomycine C (50 mg). Le spectre infra-rouge est représenté à la fig. 9. Exemple 16 50 7-Dixaéthylamino méthylmitomycine B" On dissout de la méthylmitomycine B (100 mg) dans du méthanol (10 mg) et on ajoute 1 ml d'une solution aqueuse à 40 % de di-méthylamine. On abandonne le mélange à la température ambiante pendant 10 minutes pour achever la réaction. On soumet le mélange 55 réactionnel à une chromatographie en coupe mince sur un gel de silice, en utilisant du chloroforme/acétone (1/1) comme solvant. On observe une bande vert jaunâtre légèrement-en dessous de la bande de produit initial. Immédiatement après cela, on élimine le solvant par éTaporation sous vide pour obtenir des cristaux m 40 vert foncé (30 rjg) ds' liaéfchylamino méthylmitomycine 3. COPT 69 23705 -13- 2012866 Bien entendu, l'invention n'est nullement limitée aux exemples décrits, elle est susceptible de nombreuses variantes accessibles à l'homme de l'art, suivantes applications envisagées et sans qu'on s'écarte pour cela du cadre de l'invention. 69 23705 -14- 2012866 - REVENDICATIONS -1Composés de la formule générale O 10 où représente un atome d'hydrogène, un groupement acyle de formule -COE^ ou un groupement sulfonyle de formule -SOgR^ (où représente tin groupe hydrocarboné aromatique ou alkyle inférieur, substitué ou non) ou un groupement de formule -COHHg Eg représente un groupement aliphatique hydrocarboné inférieur 15 (lorsque R^ représente un atome d'hydrogène) ; un groupement al kyle inférieur (lorsque E^ représente un groupement acyle de formule -COR^, un groupement sulfonyle de formule -SOgE^, ou un groupement de formule -COïïB^) î X représente un groupement méthoxy ou un groupement aminé pri-20 maire, secondaire ou tertiaire de formule E^E^ÏT- (où E^ et R^, identiques ou différents, représentent un atome d'hydrogène ou un groupement hydrocarboné aromatique ou aliphatique, substitué ou non). 2.- Composés suivant 1 où représente un groupement acétyle 25 chloroacétyle ou p-toluènesulfonyle. 3.- Composés suivant 1 ou 2 où Rg représente un groupement méthyle. 4-.-• Composés suivant l'une des revendications précédentes, notamment la méthyl mitomycine B. 30 5.- Composés suivant 1, 2 ou 3 où le groupement de formule E^E^N- représente un groupement métbylamino, diméthylamino, iso propylamino ou anilino. 6.- Procédé de préparation des composés suivant la revendication 1 où E^j représente un atome d'hydrogène, lesdits composés 55 pouvant être représentés par la formule 69 23705 -15- 2012866 CH20H II N-CH- où X et Eg sont tels que précédemment définis) ; ledit procédé consistant à hydrolyser un dérivé de la mitomycine 10 de formule 0 X 15 CH, ch2oconh2 III -CH, éventuellement en présence d'un solvant et à une température 20 comprise entre 0°C et la température d1ébullition du solvant. 7.- Procédé suivant 6, où l'hydrolyse est effectuée avec un alcoolate métallique alcalin. 8.- Procédé suivant 7 où 1'alcoolate est un alcoolate de sodium ou de potassium. 25 9«- Procédé suivant 6, 7 ou 8 où l'alcoolate provient d'un alcool primaire, secondaire ou tertiaire inférieur. 10.- Procédé suivant 9 où l'alcool est choisi dans le groupe formé par le méthanol, l'éthanol, l'isopropanol, let-butanol. 11.- Procédé suivant l'une des revendications 6 à 10 où le 30 solvant est un alcool ou un solvant polaire aprotique. 12.- Procédé suivant 11 où le solvant est choisi dans le groupe formé par l'alcool de l'alcoolate métallique, le diméthyl-formamide ou le diméthylsulfoxyde. 13.- Procédé suivant 11 ou 12 où le solvant contient de plus 35 un hydrocarbure aromatique. 14.- Procédé suivant 13 où l'hydrocarbure aromatique est du benzène ou du toluène. 15.- Procédé suivant l'une des revendications 7 à 14 caractérisé en ce qu'on utilise un excès d'alcoolate métallique alcalin. 69 23705 -16- 2012866 16.- Procédé suivant l'une des revendications 7 à 15 où l'hydrolyse est effectuée en solution, la concentration de l'alcoolate étant de 1 à 5N. 17«- Procédé suivant l'une des revendications 6 à 16 dans lequel la durée réactionnelle est de 4 à 18 heures, la réaction étant effectuée à la température amMante avec agitation vigoureuse. 18.- Procédé de préparation des composés suivant 1 de formule 10 """ \ . CHgOR^ IV 15 (où X et Eg sont tels que précédemment définis et R^ représente un groupement acyle de formule -CQR^ ou un groupement sulfonyle de formule -SOgR^), ledit procédé consistant à faire réagir un 20 composé de formule II avec un agent acylant ou sulfonant approprié, éventuellement en présence d'un solvant, à une température comprise entre 0°C et 100°G, pendant une durée comprise entre 1 et 24 heures 19-- Procédé suivant 18 où l'agent acylant comprend un anhy-25 dride d'acide de formule (R^CO^O ou un halogénure d'acyle de formule E^COY (où est tel que précité et T représente un atome d'halogène). 20.- Procédé suivant 18 où l'agent sulfonant est un halogénure de sulfonyle de formule R^SOgT (où R^ et Y sont tels que 30 précités). 21.- Procédé suivant 19 ou 20 où 1'halogénure est un chlorure. 22.- Procédé suivant l'une des revendications 18 à 21 où le solvant est un hydrocarbure aromatique ou un éther. 23.- Procédé suivant 22 où le solvant est choisi dans le 35 groupe formé par le benzène, le toluène, le diméthyl éther, le tétrahydrofurane, le dioxane. 24.- Procédé suivant l'une des revendications 18 à 23 où la réaction est effectuée en présence d'un agent liant pour acide. 1 BAD ORIGINAL 69 23705 -17- 2012866 25.- Procédé suivant 24 où l'agent liant est une base organique tertiaire. 26.- Procédé suivant 25 où la base est choisie dans le groupe formé par la pyridine, la picoline, la triéthylamine. 5 27.- Procédé suivant l'une des revendications 18 à 26 où la température ne dépasse pas la température ambiante normale. 28.- Procédé suivant l'une des revendications 18 à 27 où la proportion de l'agent acylant ou sulfonant et du composé de formule II est au moins équimolaire. 10 29.- Procédé suivant 28 où la proportion molaire est comprise entre 2/1 et 10/1. 30.- Procédé suivant l'une des revendications 24 à 26 où la proportion de l'agent liant pour acide et de l'agent acylant ou sulfonant est au moins équimolaire. 15 31«- Procédé de préparation des composés suivant 1 représentés par la formule 25 (où Kg représente un groupement alkyle inférieur) qui consiste à faire réagir la mitomycine B avec un agent alkylant approprié, éventuellement en présence d'un solvant à une température comprise entre 0°C et la température d'ébullition du solvant. 32.- Procédé suivant 31 qù l'agent alkylant est choisi dans 30 le groupe formé par les halogénures d'alkyle inférieur, les sulfates de dialkyle inférieur. 33.- Procédé suivant 32 où l'agent alkylant est un halogénure de méthyle ou d'éthyle. 34.- Procédé suivant 32 ou 33 où 1'halogénure d*alkyle infé-35 rieur est un iodure d1alkyle inférieur. 35.- Procédé suivant l'une des revendications 31 à 34 où le solvant est un hydrocarbure aromatique, un éther ou un solvant aprotique polaire. 69 23705 -18- 2012866 36.- Procédé suivant 35 où le solvant est choisi dans le groupe formé par le "benzène, toluène, diéthyl éther, tétrahydro-furane, dioxane, diméthylformamide, diméthylsulfoxyde. 37 •- Procédé suivant l'une des revendications 31 à. 36 où la 5 mitomycine B est traitée avec un hydrure métallique alcalin avant la réaction d'alkylation. 38.- Procédé suivant 37 où 1'hydrure est un hydrure de sodium, de potassium ou de lithium. 39•- Procédé suivant 37 ou 38 où on utilise au moins un équi-1O valent d'hydrure. 40.- Procédé pour la préparation des composés suivant 1 représentés par la formule 20 (où ^2» et R^ sont tels que définis en 1, qui consiste à faire réagir un composé de formule VII avec de l'ammoniac ou une aminé primaire ou secondaire, éventuellement en présence d'un solvant à une température comprise entre 0°C et le point d'ébullition 25 du solvant. 41 o- Procédé suivant 40 où le solvant est choisi dans le groupe formé par les alcools inférieurs, les solvants aprotiques polaires, l'eau et les mélanges d'au moins deux desdits solvants. 30 42.- Procédé suivant 41 où le solvant est choisi dans le groupe formé par le méthanol, l'éthanol, le butanol, le propanol, le diméthylformamide, le diméthylsulfoxyde, et les mélanges d'au moins deux desdits solvants. 43.- Procédé suivant l'une des revendications 40 à 42 où la 35 proportion d'ammoniac ou d'aminé primaire ou secondaire et du composé de formule VII est au minimum équimolaire. 44.- Procédé suivant l'une des revendications 40 à 43 où on effectue la réaction à une température voisine de la température ambiante. 69 23705 -19- 2012866 4-5.- Aplication des composés de formule II préparés par le procédé suivant 6 à 17, des composés de formule IV préparés par le procédé suivant 18 à 30, des composés de formule VII préparés par le procédé suivant 31 à 39, des composés de formule VIII préparés par le procédé suivant 40 à 44, pour inhiber la croissance des microorganismes.