FR 2003147 A1 19691107 FR 6905466 A 19690228 69 05466 i 2003147 La présente invention concerne de nouvelles compositions exerçant des effets thérapeutiques et/ou prophylactiques. L'invention concerne en outre un nouveau procédé de traitement ou de protection contre certains états pathologiques chez les animaux. Un certain nombre d'états pathologiques qui.peuvent affecter les animaux à sang chaud se traduit par un métabolisme anormal du calcium et du phosphate. Ces états peuvent être divisés en deux grandes catégories. 1) Les états qui se caractérisent par une accumulation anormale du calcium et du phosphate conduisant g une diminution des os générale ou particulière ou à des taux excessivement élevés de calcium et de phosphate dans les fluides du corps. Ces états sont parfois appelés ici déminéralisations pathologiques des tissus durs. 2) Les états qui provoquent ou qui proviennent d'un dépôt anormal nu calcium et du phosphate dans le corps. Ces états sont parfois appelés ici calcifications pathologiques. Dans la première catégorie on peut citer 1!ostéoporose dans laquelle les tissus durs des os diminuent de façon disproportionnée avec le développement des nouveaux tissus durs. La moelle et les espaces osseux deviennent plus importants, l'adhésion fibreuse diminue et les os compacts deviennent fragiles. L'ostéoporose peut être subdivisée en ostéoporose consécutive a la ménopause en ostéoporose sénile, en ostéoporose provoquée par les médicaments ( par exemple 1'adrénocorticoîde comme on en rencontre dans le traitement par stéroîdes), en ostéoporose provoquée par la maladie (par exemple : arthrite et tumeur), etc.., cependant les manifestations sont essentiellement les mêmes. Un autre état de la première catégorie est la maladie de Paget (ostéitis déformans) caractérisée-également par une diminution des os. Dans cette maladie, il se produit une dissolution des os normaux qui sont ensuite remplacés par des tissus mous, faiblement minéralisés au point que les os se déforment sous l'effet du poids, en particulier dans le tibia et dans le fémur. Cet état est souvent responsable du dépôt pathologique de calcium et de phosphate. La seconde catégorie, celle des états qui se manifestent par un dépôt anormal du calcium et du phosphate, englobe les affections telles que : arthrite, névrite, bursite, tendinite et autres états inflammatoires qui prédisposent les tissus mis en jeu à un dépôt de phosphates de calcium et le déséquilibre hormonal » BAD ORIGINAL ~ 69 05466 2 2003147 par exemple:l'hyperparathyrodisme, la myositis ossificans progres-siva, la calcinosis universalis, qui se traduisent par une calcification des tissus mous. L'athérosclérose est un autre état 'de cette catégorie et se traduit par une dégénération et des modi-5 fications profilérantes internes qui donnent naissance à des plaines lipidiques fibreuses. Lorsque ces plaques se calcifient ou que, sur les parois internes des artères, les plaques s'accumulent et se calcifient, cet état est habituellement désigné sous le nom d'artériosclérose. 10 Un autre état encore dans la catégorie (2) qui résulte d'un dépôt anormal du calcium et du phosphate est la formation de calculs dans le conduit biliaire, la vésicule biliaire, le pancréas, les glandes salivaires, les amygdales, les reins et la vessie. Bien que certains de ces calculs ne soient pas constitués 15 essentiellement de phosphate de calcium, il est vraisemblable que le noyau originel est constitué de phosphate de calcium. La formation de calculs urinaires, c'est-à-dire l'urolithiase, représente chez le gros et le menu bétail un problème majeur en médecine vétérinaire. On estime que de 5 à 10# des veaux sevrés 20 souffrent de cette affection lorsqu'on leur retire le lait et qu'ils commencent à prendre d'autres nourritures. Autant qu'on le sache, aucun traitement médical satisfaisant pour les états de la catégorie (1) décrits ci-dessus n'a été mis au point avant cette invention bien que le contrôle diététique, 25 les fluorures, les oestrogènes et l'hormone calcitonine (thyro-calcitonine) aient été suggérés ou utilisés pour ces états. Bien que certains phosphates minéraux comme les pyrophosphates et les phosphates condensés à longue chaîne aient été suggérés pour le 30 traitement des états de la catégorie (2), ils n'ont pas été largement utilisés par suite de leur tendance à s'hydrolyser en orthophosphates inefficaces lorsqu'ils sont administrés à des animaux importants comme le bétail,! l'homme. L'invention a par conséquence pour objet de fournir une 35 composition pour empêcher le dépôt et l'accumulation du phosphate de calcium dans les tissus animaux, elle a également pour objet do fournir un procédé amélioré pour le traitement des états de calcification pathologique et de déminéralisation des tissus durs chez les animaux. 40 Description sommaire de l'invention L'invention repose sur la découverte d'api'ès laquelle cerBAD ORIGINAL 69 05466 3 2003147 taines tris(phosphonoalcoyl)aminés et leurs sels pharmaceutiquemen-acceptables diminuent l'accumulation anormale et le dépôt des phosphates de calcium chez les animaux; L'invention fournit donc une composition et un procédé de traitement et de projection con-5 tre les états de déminéralisation pathologique des tissus osseux et de dépôt pathologique du calcium dans les tissus mous des animaux. Du point de vue du procédé, l'invention consiste a administrer auxdits animaux une quantité efficace d'une tris(phosphonoalcoyl) aminé telle qu'elle sera caractérisée ci-après. 10 Description détaillée de l'invention Suivant l'un de ses aspects, l'invention a pour objet une composition comprenant une quantité efficace mais non toxique d'une tris(phosphonoalcoyl)aminé conforme à la formule structurale P0,Ho 15 i 3 2 R1 - C - R2 30 N R3 \ \ ' X /B5 20 H2O3P__C' C'_po3H2 / \ P.6 dans laquelle R^, Rg, R^, R^, R^ et Rg sont chacun de l'hydrogène, 2ÇJ un alcoyle inférieur (1 à 4 atomes de carbone) ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables comme les sels alcalins (par exempl sodium et potassium) alcalino-terreux (par exemple : calcium et magnésium), un sel d'un métal lourd non toxique (par exemple : sel stanneux et d'indium), un sel d'ammonium ou d'ammonium substitué de faible poids moléculaire (par exemple mono-, di- et tri-éthanol ammonium); et un support pharmaceutique. Les tris (phosphonoalcoyl aminés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables sont appelés collectivement ci-après : tris(phosphonoalcoyl) aminés. Les tris(phosphonoalcoyl}amines préférées pour les besoins d l'invention sont la tris (phosphonométhyl)aminé; la tris (1-phos™ phonoéthyl)aminé; la tris(2-phosphono-2-propyl)amine et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. On préfère en particulier la tris(phosphonométhyl)aminé. On donne ci-après des exemples de composés pouvant également être utilisés. 2jq a) bis(phosphonométhyl)-l-phosphonoéthylamine; gAD ORIGINAL. 69 05466 2003147 4 b) bis(phosphonométhyl)-2-phosphono-2-propylamine; c ) bis (l-phosphonoc-thyl)phobphononéthyla.ra±'rie ; d) bis(2-phosphono-2-propyl)phosphonomëthylamine ; e) tris(1-phosphono-l-pentyl)amine; 5 f) bis(phosphonométhyl)2-phosphono-2~hexylamine et les sels des acides de (a) à (f) pharmaceutiquement acceptables, par exemple: les sels de sodium, de potassium, de calcium, de magnésium, d'ammonium, de triéthanolammonium, de diéthanolammonium et de monoéthanolammonium. 10 Des mélanges des tris(phosphonoalcoyl)amines et/ou des sels peuvent être utilisés dans l'invention. On peut préparer les tris(phosphonoalcoyl)amines par exemple, en préparant d'abord l'ester correspondant suivant la réaction générale : 15 f1 f h 3(RO)2P(°)(H) + 3C= 0 + NH^ —> f(RO)2 - P - C j3N r2 R2 2q où R est un alcoyle et R^ et R2 sont de l'hydrogène ou des alcoy-les inférieurs. Les acides libres peuvent être préparés par hydrolyse de l'ester avec emploi d'acides minéraux forts tels que l'acide chlorhydrique. On prépare évidemment les sels on neutralisant 2^ l'acide avec la base du cation désiré. La préparation des tris (phosphonoalcoyl)amines est décrite en détail par Irani et Coll. dans le brevet canadien 753 207 délivré le 21 Février 1967. La dose nécessaire de tris (phosphonoalcoyl)aminé varie avec l'état particulier à traiter, la gravité de l'affection, la jq durée du traitement et la tris (phosphonoalcoyl)amine particu- -liëre employée; cependant, les doses uniques peuvent varier de 0,01 à 500 mg/kg de poids, de préférence de 0,5 a 50 mg/kg (sauf indication contraire, l'unité désignée par "mg/kg" telle qu'elle est utilisée ici représente des mg/kg de poids) avec jusqu'à 4 y- doses par jour. Les dosages supérieurs dans cet intervalle sont naturellement nécessaires dans le cas de l'administration orale par suite d'une absorption limitée. Des doses supérieures à 500 ng/kg environ peuvent donner des symptômes toxiques et doivent être évitées. En outre, des doses journalières supérieures jj0 à 2000mg/kg environ ne sont pas nécessaires pour obtenir l'offet BAD ORIGINAL 69 05466 2003147 5 recherché et peuvent produire des effets secondaires toxiques. Des doses inférieures à 0.01 mg/kg environ n'affectent pas sensiblement la calcification ou la déminéralisation pathologiques même lorsqu'elles sont adminitrées par voie intra-veineuse. Les 5 doses de 0,5 à 50 mg/kg sont de préférence utilisées lorsque les tris(phosphonoalcoyl)amines sont administrées par voie buccale. Le tableau 1 ci-après indique les doses préférées pour les divers états pouvant être traités selon l'invention. Tableau 1 10 Etat Dose orale (mg/kg) j usqu'à 4 fois/j our * 15 20 25 30 Ostéoporose (ménopause) 1-25 Ostéoporose (sénile et autres) 1-25 Maladie de Paget 10-50 Arthrite 1-25 Bursite 1-25 Névrite 1-25 Calculs 1-25 x une dose initial?, plus forte peut être nécessaire, par exemple: jusqu'à 500 mg/kg, suivie de la dose indiquée. Les tris(phosphonoalcoyl)amines peuvent aussi être administrées par voie parentérale en solution aqueuse par injection sous-cutanée5 intr?dermique, intramusculaire ou intraveineuse. La dose préférée varie pour ces modes d!administration comme suit : sous^cutanéc- 0,1-10 mg/kg intradermique 0,1-10 mg/kg intramusculaire 0,05_5mg/kg intraveineuse 0,05"5mg/kg Pour l'administration orale, les tris(phosphonoalcoyl)aminés peuvent être formulées sous forme de capsules, comprimés ou granules. Pour le traitement des animaux, les tris(phosphonoal-coyl)amines sont de préférence incorporées dans la nourriture des animaux comme concentrés ou additifs de nourriture. Elles peuvent aussi être préparées en doses unitaires avec un support pharma.-ceutiquo, chaque dose unitaire contenant de '15 mg à 10 g de tris (phosphonoalcoyl)aminé. La gamme de concentrations de tris(phosphonoalcoyl) aminé préférée dans les doses unitaires destinées à l'homme et à des animaux domestiques plus petits se situe entre 15 mg et lOOOmg, plus préférablement entre 100 mg et 500 mg. On 2jq préfère une gamme de concentrations plus élevée, c'est-à-dire de 1g bau 69 05466 6 2003147 à 5 g 3 dans les doses unitaires destinées au traitement d'animaux plus grands comme le bétail, les chevaux, etc. Lorsqu'elles sont administrées par voie buccale, les compositions de cette invention le sont sous une forme qui assure 5 un contact minimal des tris(phosphonoalcoyl)amines avec la cavité buccale. Bien que ces composes n'endommagent pas l'émail dentaire lorsqu'ils sont appliqués sur les surfaces dentaires aux concentrations relativement faibles, typiques des pâtes dentifrices, des eaux dentifrices, des pastilles et des compositions similaires 10 destinées à la prophylaxie du calcul dentaire, des concentrations de tris(phosphonoalcoyl)aminés sensiblement plus élevées fournies par les doses unitaires de cette invention peuvent déminéraliser l'émail dentaire par une exposition prolongée répétée. C'est ainsi que l'administration orale s'effectue de préférence avec 15 des formes de dosage unitaire telles que capsules, pillules et comprimés que l'on avale rapidement. On évitera de préférence les tablettes, les comprimés masticables et similaires qui séjournent, de manière typique, dans la cavité buccale pendant un certain temps avant l'ingestion. 20 Tel qu'il est utilisé ici le terme "support pharmaceutique" représente un diluant solide ou liquide ou une substance d'en-capsula.tion. Comme exemples de substances qui peuvent servir de supports pharmaceutiques, on peut citer les sucres comme le lactose, le glucose' et le sucrose; les amidoses comme l'amidon de 25 blé et l'amidon de pomme de terres la cellulose et ses dérivés comme la carboxyméthylcollulose de sodium, 1'éthylcellulose, l'acétate de cellulose, la poudre adragante, le malt, la gélatine le talc, l'acide stéarique,le stéarate de magnésium; le sulfate de calcium, les huiles végétales comme l'huile d'arachide,l'huile 30 de graine de coton, l'huile de sésame, l'huile d'olive, l'huile de blé et l'huile do théobrome, les" polyols comme le propylène glycol, la glycérine, le sorbitol, le mannitol et le polyéthylenc glycol, l'agar; l'acide alginique, l'eau non pyrogënique, les solutions salines isotoniques et les solutions tampon à base de 35 phosphates ainsi que d'autres substances compatibles non toxiques utilisées dans les formulations pharmaceutiques. Des agents mouillants et des lubrifiants comme le laurylsulfate de sodium ainsi que des agents colorants, des parfums et des composés de conservation peuvent aussi etre présents. 40 Le support pharmaceutique utilisé conjointement avec les bad ortginal 69 05466 7 2003147 tris(phosphonoalcoyl)amines est employé â une concentration suffisante pour fournir une taille pratique en rapport avec la dose. Le support pharmaceutique représente de préférence de 0,1 à 99% en poids de la composition totale. 5 Les compositions nutritives pour animaux auxquelles on peut ajouter les tris(phosphonoalcoyl)aminés de cette invention comportent généralement comme matières nutritives des déchets cellulosiques tels que foin, paille, balles de graine de cotnn, 10 pulpe de betterave, fourrage ensiloté, épis de maïs broyé, tiges de maïs, etc. Des constituants contenant des protéines comme les grains entiers y compris le maïs, le blé, l'avoine, l'orge, le seigle, le millet et l'alfa, des graines traitées y compris la farine de graine de coton, la farine de maïs, la farine de soja, 15 la farine de graine de lin et d'autres déchets de l'industrie oléagineuse; des protéines animales y compris la caséine, la gélatine, la farine de poisson et les déchets d'abattoirs sont aussi des matières nutritives nécessaires pour une composition nutritive équilibrée. Les compositions nutritives pour animaux 20 peuvent aussi contenir des huiles naturelles, y compris des graisses animales telles que suif de boeuf, suif de mouton, des huiles de poisson y compris de l'huile d'anguille, de hareng, de menhaden, de thon et de saumon et de l'huile de baleine. Les huiles végétales telles que l'huile de soja, l'huile de tournesol 25 l'huile d'olive, l'huile de carthame, l'huile de maïs, l'huile d'arachide, l'huile de graine de coton, l'huile de riz, l'huile de millet, l'huile de germe de blé et l'huile de palme peuvent aussi être utilisées. En plus des matières nutritives sus-mentionnées, les com-30 positions nutritives pour animaux peuvent comporter des sources supplémentaires de minéraux: poudre d'os, sels et les divers oligoéléments comme les sels de zinc, de cuivre, de manganèse, de magnésium, de cobalt, d'iode et de fer. Des antibiotiques, des stéroldes, des anti-helmintiques et d'autres médicaments ou subs-35 tances de stimulation de la croissance peuvent être incorporés dans les nourritures pour animaux. Diverses vitamines peuvent etr^ ajoutées aux compositions nutritives pour animaux pour pallier les déficiences inhérentes au choix des autres composants nutritifs. On peut incorporer d'autres matières nutritives comme la caséine, 40 d'autres scus-produits du lait et des sources synthétiques d'azote comme 1'urée. BAD ORIGINAL 69 05466 2003147 8 Les tris(phosphonoalcoyl)aminés peuvent être incorporées dans la composition nutritive totale comme décrit ci-dessus ou dans des concentrats intermédiaires ou dans des suppléments nutritifs pouvant être mélangés avec les déchets de base et les 5 matières nutritives protéiniques en vue de la préparation de la nourriture finale. Dans l'industrie alimentaire, le terme "concentrât11 est souvent utilisé pour désigner un produit qui contient une quantité relativement importante d'une ou de plusieurs matières nutritives telles qu'une protéine de haute qualité, des mi-10 neraux, des vitamines et similaires et qui peut être ajouté aux matières nutritives de base pour former une composition nutritive totale ou finale. Le terme "additif" est aussi utilisé pour désigner une matière nutritive particulière ou mélange qui est ajouté ou incorporé au concentrât de la nourriture totale ou à la nour-15 riture totale elle-même. Les tris(phosphonoalcoyl)amines peuvent être utilisées selon l'invention après incorporation dans des additifs nutritifs, des concentrats ou dans la composition nutritive totale (appelés par la suite "compositions nutritives"). Pour les besoins de cette invention, le terme "support pharma-20 ceutique" est destiné à représenter les compositions nutritives. Les compositions nutritives contenant une faible proportion d'une ou de plusieurs dos tris(phosphonoalcoyl)aminés décrites ici, incorporées dans une proportion importante d'une nourriture pour animaux, constituent une forme de réalisation préférée 25 de l'invention dans la mesure où elles fournissent une méthode efficace et pratique de prophylaxie de l'urolithiase pour les trou peaux importants d'animaux, en particulier pendant les périodes de pâturage limité. La prophylaxie de l'urolithiase peut être effectuée pour les troupeaux qui paissent, grâce à l'incorporation des 30 tris (phosphonoalcoyl)aminés dans les blocs de sel. La concentration des tris(phosphonoalcoyl)aminés dans les compositions nutritives varie bien entendu avec le poids de l'animal à traiter et la proportion du régime total que comporte la composition nutritive. Lorsqu'on doit traiter des troupeaux 35 d'animaux, le taux de tris(phosphonoalcoyl)aminés dans la composition nutritive doit être suffisante pour foùrnir les doses spécifiées ici, fondées sur la consommation moyenne de nourriture et le poids des animaux. Dans tous les cas, les tris(phosphonoalcoyl) aminés représentent une faible proportion de la composition 40 nutritive totale. ®ad orlginal 69 05466 2003147 Bien qu'il soit entendu que cette invention n'est pas limitée par une théorie particulière de mise en oeuvre, dans le cas des états qui provoquent ou qui résultent d'un dépôt de calcium et de phosphate anormal dans le corps, on pense que les 5 tris(phosphonoalcoyl)aminés interfèrent avec la transformation de phosphate de calcium amorphe aux rayons X en hydroxyapatite de calcium cristalline et diminuent fortement ou empêchent la formation des dépôts de phosphate do calcium. Bien que certains polyphosphates minéraux empêchent aussi la croissance cristalline 10 aussitôt après administration à un animal, ils sont hydrolysës en orthophosphate qui n'a pas de propriété d'inhibition de la croissance des cristaux et qui peut en fait prendre part lui-même a la formation d'hydroxyapatite. D'autre part, les tris(phosphonoalcoyl) aminés de cette invention sont stables à l'hydrolyse et res-15 tent actives après administration même à des animaux importants comme le bétail. Test d'inhibition de la croissance des cristaux L'efficacité des tris(phosphonoalcoyl)amines conformes a l'invention pour empêcher la croissance dos cristaux est démontrée 20 par le test d'inhibition de la croissance des cristaux qui est effectué comme suit : On dilue 1 ml d'une solution mère 0,1 M de NaK^PO^, Hp0 avec 22 ml d'eau distillée. On ajoute 1 ml d'une solution aqueuse du sel disodique de la tris(phosphonométhyl)amine (a une concen-25 tration suffisante pour fournir la concentration finale désirée dar le mélange rëacticnnel) â la solution diluée da Nalï^PO^ et ajuste-la solution à pH 7,4 au moyen de soude. On ajoute à cette solution 1 ml d'une solution 0,114 de CaCl„,2H„0 preajustée à pH 7,4 au É- «1 moyen de soude. On maintient ce mélange à un pH constant de 7,4 30 pendant toute la durée de réaction. Apres une durée de réaction suffisante déterminée par l'opérateur, en générale inférieure à 90 minutes, on filtre la solution à travers un tampon filtre Millipore de 0,45 ^u. Le précipité est séché à l'air et analysé par diffraction des rayons X. 35 Le phosphate de calcium solide précipité à partir de la solution décrite ci-dessus sans tris(phosphonoalcoyl)aminé donne un diagramme typique d'hydroxyapatite, alors que le phosphate de calcium précipité dans les mêmes conditions mais en présence de petites quantités de la tris(phosphonoalcoyl)aminé de l'invention est 40 amorphe aux rayons X. BAD ORIGINA! 69 05466 2003147 10 On a constaté que les composés qui sont efficaces pour empêcher la croissance des cristaux d'hydroxyapatite à des concentrations inférieures à 1,5 x 10~^M dans les conditions de ce test, empêchent l'accumulation anormale et le dépôt des phosphates de calcium dans les tissus animaux, alors que plusieurs composés 5 n'appartenant pas à l'invention et ayant peu ou pas d'effet dans ce test sont inefficaces in vivo. — R L'emploi de 6, £9 x 10 'M de tris(phosphonométhyl)aminé dans le test d'inhibition de croissance des cristaux décrit ci-dessus a conduit à la formation d'un phosphate de calcium amorphe plutôt 10 qu'a celle d'une hydroxyapatite de calcium cristalline comme cela se produit en l'absence de tris(phosphonoalcoyl)amine et la formation totale d'orthophosphate de calcium est fortement diminuée. Le pouvoir des tris(phosphonoalcoyl)aminés d'empêcher la calcification anormale a été aussi démontré in vivo comme - suit : 15 Ce test repose sur l'observation que des doses massives de vitamines D_ produisent une calcification importante dans l'aorte des rats (voir Gillman et coll. J. Exp. Path. 40, 1(1960)). On a réparti au hasard des rats Wister femelles pesant chacun 150 a 200 g en un groupe témoin de 60 animaux et en des groupes 20 d'essai contenant chacun 10 animaux. Les animaux ont été maintenus dans une pièce thermostabilisée à 22°C et ont reçu un régime normal et de l'eau du robinet ad libitum pendant toute la durée de-l'essai. On a donné à tous les animaux des doses quotidiennes de 75 000 unités/kg de vitamine D, par un tube stomacal pendant 5 3 25 jours en commençant, le troisième jour et en finissant le 7§me jour de l'essai. En commençant le premier jour (avant la première dose de vitamine D.,) jusqu'à la fin de l'essai, on a administré aux groupes d'animaux testés des dosages spécifiés de tris (phosphonoalcoyl) aminés , respectivement par voie buccale par tube 30 stomacal et par voie sous-cutanée une fois par jour. Dans chaque cas, les tris(phosphonoalcoyl)amines ont été dissoutes dans une solution de NaCl à 0,95? lorsqu'elles ont été administrées à la plus faible dose, et dans l'eau distillée lorsqu'elles ont été administrées aux doses supérieures. La solution a été ajustée ^ à pH 7,4 et la quantité de solution administrée était de 2ml/lcg de poids. Le quinzième jour les animaux ont été sacrifiés et leurs aortes ont été disséquées et séchées pendant 48 heures à 120°C. Après détermination du poids sec, les aortes ont été réduites en cendres dans un four à moufle à 800°C pendant six heures. BAD original 69 05466 2003147 ii On a dissous le résidu dans de 1*1101 0,2 N et titré le calcium au moyen de EDTA en utilisant du calcichrome comîtiê indicateur dans un photomètre de titrage, selon les méthodes décrites par Irvring et coll., Proc. Soc. Exp.Biol. Med. 122, 3, 852 (1966). 5 Les taux de calcium obtenus au cours de cet essai montrent que plusieurs compositions représentatives de cette invention diminuent sensiblement la calcification induite par la vitamine D, dans l'aorte des rats. 3 EXEMPLE 1 10 On a préparé des capsules par les méthodes habituelles comprenant les produits suivants : Ingrédient mg/capsule Sel disodique de la tris (phosphonométhyl)aminé 350,00 15 Amidon 55,60 Lauryl sulfate de sodium 2,90 Les capsules ci-dessus administrées par voie buccale 2 fois par jour diminuent sensiblement la décalcification des os chez un malade pesant environ 70 kg atteint d'ostéoporose. On obtient des 20 résultats semblables en utilisant dans la capsule précédemment décrite, à la place du sel disodique, le sel dipotassique de la tris (phosphonométhyl)aminé, le sel de diammonium de la tris(phosphono-méthyl)amine, le sel monocalcique de la tris(phosphonométhyl)aminé et le sel mcnomagnésien de la tris(phosphonométhyl)aminé, respec-25 tivement. Exemple II On prépare par les méthodes habituelles des comprimés formulés comme suit : Ingrédient- mg/comprimé 30 Tris(phosphonométhyl)aminé 25,00 Lactose 40,00 Amidon 2,50 Stéarate de magnésium 1,00 Administrée par voie buccale 4 fois par jour, la composition 35 précédente diminue notablement la formation des calcule rénaux ches un malade pesant environ 50 kg, ayant une prédisposition à cette formation. On obtient des résultats semblables avec des comprimés formules comme ci-dessus mais en remplaçant la tris(phosphonome-40 thyl)aminé par le- sel disodique de la/6ris(phosphono:itbyl)ani:ae..-;, BAD ORIGINAL 69 05466 2003147 12 par le sel trisodique de la tris(2-phosphono-2-propyl)aminé, par le sel distanneux de la bis(phosphonométhyl}—1-phosphonoéthylamine et par la bis(l-phosphonoéthyl)phosphonométhylamine. Le lactose utilisé dans cet exemple est remplacé par 5 le sucrose et le stéarate de magnésium par la carboxyméthylcel-lulose de sodium sans modification des propriétés souhaitées du comprimé. On prépare3 comme suit, des compositions supplémentaires pour comprimés;, conformes à l'invention. 10 mp;/comprimé Ingrédient Ex/ III IV V VI VII VIII IX Sel tétrasodique de bis (2-phosphono-2-propyl) phosphonométhylaminc 80 Sel pentasodique de tris 15 (1-phosphono-l-pentyl)aminé 100 Sel dimagnésien de bis( phosphonométhyl)-2--phosphono- 2-hexylamine 120 20 25 30 Sel pentasodique de tris (phosphonométhyl)amino 50,0 25,0 Tris(1-phosphonoéthyl)aminé 85,0 25,0 Tris(l-phosphono-l~butyl)aminé 30,0 Lactose 97,0 31,0 31,0 73.0 97,030,030,0 Amidon ' 45,0 13,0 13,0 57,0 45,0 Acide stéarique 6,0 Talc 35,5 6,5 6,5 9,0 35,0 5,0 5,0. Stéarate de calcium 1,0 1,0 1,0 1,0 Ethylcellulose 16,C 16,0 15,015,0 On prépare des solutions pour administration parentérale en dissolvant les tris(phosphonoalcoyl)aminés suivantes dans de l'eau distillée à la concentration spécifiée , en ajustant le pH à 7,4 avec la base correspondant à la forme saline indiquée ou 35 avec de la soude dans le cas des acides et en stérilisant le tout par les techniques» normales de stérilisation. Bad originm 69 05466 2003147 13 Exemple Phosphonate Conc. mg/ml X Sel de bisCtriéthanolammonium) de tris(l-phosphonoéthyl)aminé 1030 XI Sol de bis(diéthanolammonium) de tri s(1-p honp aono-1-n ron yI)aminé 15,0 5 XII Sel de bis (picnoéthanolammcnium)de bis (phosphonométhyl) -l~phosphono- ' ethylarain.j 530 XIII Sel disodique de tris(phusphono- méthyl ) and.no 13.0 1C Les solutions der; exemples précédents 3 administrées par injection à des animaux on quantité suffisante pour donner les d->ses désirées comme spécifié précédemment diminuent sensiblement la calcification pathologique et la déminéralisation des tissus durs. Les solutions sont de préférence conditionnées dans des ar.i-15 poules scellées pour des injections hypodermiques à dose unique. Exemple XIV On prépare une composition nutritive complète selon la présente invention eu broyant et en mélangeant les composés suivants : Composant Parties en poids 20 Foin Timothy 960 Alfa déshydraté 40 Maïs jaune 600 ' Amidon de blé 310 Sol iodé 10 25 7:>rine Col marin 2 Farine de soja 3C Biuret Zo Sel disodique de tris(phesphoncméthyl) 30 aminé 03694 Cette composition est donnée à des bouvillons en sevrage de 180kg â raison de 534 kg environ par jour. La dose moyenne de sel disodique do tris(phosphonométhyl)aminé mise en jeu de cette manière est de 1,8 g environ par jour. Des animaux soumis a ce 35 régime subissent une urolithiase sensiblement inférieure à celle d'animaux témoins recevant la même nourriture sans le sel disodique de tris(phosphonométhyl)aminé. On obtient des résultats sensmblables en employant dans la composition nutritive décrite ci-dessus3 a la place du sel diso--10 dique de tris (phosphonométhyl) .mine, la tris(phophonométhyl)aminéa BAD ORIGINAL 69 05466 2003147 14 la tris(1-phosphonoéthyl)aminé, la tris(2-phosphono-2-propyl) aminé, la bis(phosphonométhyl)-1-phosphonoéthylamine, la bis(phosphonométhyl)-2-phosphono~2-propylamine, la bis (1-phospho-noéthyl)phosphonomëthylamine, la bis(2-phosphono-2-propyl)phos~ 5 phonométhylamine, la tris(1-phosphono-i-pentyl)aminé, la bis (phosphonométhyl}-2-phosphono-2-hexylamine et la tris(l-phcBphc— nc-l-butyl)amine. Exemple XY On prépare un concentrât nutritif supplémentaire en mélan-10 géantintimement les composés suivants : Composant Parties en poids Biuret 400 Grains sèches de brasserie 25 Alfa déshydraté 43 15 3el iode 10 Phosphate tricalcique 2 Tris(phosphonométhyl)aminé 4 Cette composition est utilisable pour le mélange avec le fourrage ensilote, le foin en grain, les grains broyés, et simi-20 laires en vue de la préparation de compositions nutritives totales pour ruminants. Administrée à de jeunes moutons paissant â raison de 0,11 kg par jour, cette matière nutritive supplémentaire réduit fortement l'incidence do l'urolithiase. On obtient des résultats semblables avec un concentrât nutri-25 tif formulé comme ci-dessus mais an remplaçant la tris(phosphonométhyl) aminé par le disodiqe de tris(l-pbosphonoéthyl)aminé, le sel trisodique de tris(2-phosphono-2-propyl)amine, le sel distanneux de bis (phosphonométhyl)--l-phospho.noethyl aminé, le sel totrasodique de bis(2-phosphono-2--prcpyl)phosphonométhylamine, 30 le sel pentasodique de tris(1-phosphono-l-pentyl)aminé, le sel dimagnésien de bis(phosphonométhyl)-2-phosphono~2-hexylamine, le sel pentasodique de tris(phosphonométhyl)aminé, le sel de bis (tricthanolammonium) de tris(l-phosphonoothyl)aminé, le sel de bis(diéthanolarnmonium) de tris(l-phosphono-l-propyl)aminé, le sel 35 de bis(monoéthanolammonium) de bis(phosphonométhyl-l-phosphono-éthylamine et le sel disodique de tris(phosphonométhyl)aminé. Bad orioinal ' 69 05466 2003147 15 REVENDICATIONS 1 - Une composition pour empêcher le dépôt et l'accumulation du phosphate de calcium dans les tissus animaux comprenant une quantité efficace mais non toxique d'une tris(phosphonoalcoyl) ■ 5 aminé de formule : [°3H2 R1 - c - r2 10 35 t R- N R,_ \ X / H_0 P C C — PO H_ 3 / \ 32 R4 R6 dans laquelle R^, R2, R^s R^, R 15 parmi l'hydrogène et un alcoyle inférieur et leurs sels pharmaceutiquement acceptables et un support pharmaceutique. 2 - La composition selon la revendication 1 dans laquelle la tris(phosphonoalcoyl)aminé est la tris(phosphonométhyl)aminé ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 20 3 - La composition selon la revendication 1 dans laquelle la tris(phosphonoalcoyl)aminé est la tris(1-phosphonoéthyl)aminé ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 4 - La composition selon la revendication 1 dans laquelle la tris(phosphonoalcoyl)aminé est la tris(2-phosphono-2-propyl) 25 aminé ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 5 - Un procédé pour le traitement d'états mettant en jeu la calcification pathologique et la déminéralisation des tissus durs chez les animaux qui consiste essentiellement à administrer auxdits animaux une quantité efficace d'une tris(phosphonoalcoyl) 30 aminé répondant à la formule : F°3H2 R1 - p RP_ R, N R, v_/ 5 HgO^P _C C PO,H \ 3 2 r4 r6 dans laquelle R^, R^, R^, R^, et Rg sont indépendamment choisis 40 dans le groupe comprenant de l'hydrogène et un alcoyle inférieur BAD ORIGINAL 69 05466 2003147 16 et leurs sels pharmaceutiquement acceptables, et un support pharmaceutique. 6 - Le procédé selon la revendication 5 dans lequel la tris (phosphonoalcoyl)aminé est la tris(phosphonométhyl)amine ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 5 7 - Le procédé selon la revendication 5 dans lequel la tris(phosphonoalcoyl)aminé est la tris(1-phosphonoéthyl)aminé ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 8 - Une composition nutritive pour animaux comprenant une faible proportion d'une tris(phosphonoalcoyl)aminé choisie 10 répondant à la formule : [°3H2 R-, - C - R5 I R ,N R ■ " \ / \ / H2°3P C - • C P0,H2 / \ R1 r6 dans laquelle R^, R^, R^, R^, R^ et Rg sont indépendamment choisis dans le groupe comprenant de l'hydrogène et un alcoyle inférieur et leurs sels pharmaceutiquement acceptables, et une proportion importante de matière nutritive pour animaux. 9 - La composition selon la revendication 8 dans laquelle 2^ la tris(phosphonoalcoyl)aminé est la tris(phosphonométhyl)aminé ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 10 - La composition selon la revendication 8 dans laquelle la tris(phosphonoalcoyl)amine est la tris(l-phosphonoéthyl)ami-ne ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. •jq 11 - La composition selon la revendication 8 dans laquelle la tris(phosphonoalcoyl)aminé est la tris(2-phosphono-2-propyl) aminé ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 12 - Une composition pharmaceutique à dose unitaire comprenant de 15 mg à 10 g d'une tris(phosphonoalcoyl)amine choisie, 35 répondant à la formule : bad original 69 05466 „ " 2003147 15 P°3h2 R1 - c - r2 R, N Rc \ / \ / H~0,P C C _P0,H,, £ J / t) 2 / \ 10 Rlt r6 dans laquelle R^, R2S R^a R^, Rr et Rg sont indépendamment choisis parmi l'hydrogène et un alcoyle inférieur et leurs sels pharmaceutiquement acceptables3 et un support pharmaceutique. 13 - La composition selon la revendication 12 dans laquelle la tris(phosphonoalcoyl)amine est la tris(phosphonométhyl) aminc ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. lk - La composition selon la revendication 12 dans laquelle la tris(phosphoncalccyl)amine est la tris(1-phosphonoéthyl)aminé ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 20 15 - La composition selon la revendication 12 dans laquelle la tris(phosphonoalcoyl)amine est la tris(2-phosphono-2-propyl) aminé ou un de ses sels- pharmaceutiquement acceptables. 1 bad ORIGINAL