Brevet FR3161687A1 — publié le 20251031

Huile végétale modifiée contenant d e l’acide 13-hydroxy-9(Z)- octadecenoïque , ainsi que son procédé de fabrication L’invention concerne une huile végétale modifiée comprenant, en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale des acides gras libres de ladite huile végétale modifiée, au moins 10% d’acide 13-hydroxy-9(Z)-octadecenoïque (13-HOD). L’invention a aussi pour objet un procédé de préparation d’une huile végétale modifiée qui comprend les étapes suivantes : - hydrolyse par biocatalyse en présence d’une lipase des triglycérides de l’huile végétale pour obtenir de l’acide linoléique sous forme libre ; - hydratation par biocatalyse en présence d’une hydratase de l’acide linoléique pour obtenir ladite huile végétale modifiée. Huile végétale modifiée contenant de l’acide 13-hydroxy-9(Z)-octadecenoïque, ainsi que son procédé de préparation La présente invention concerne une huile végétale modifiée contenant de l’acide 13-hydroxy-9(Z)-octadecenoïque (ci-après abrégé « 13-HOD »), ainsi que son procédé de préparation. Une huile végétale comprend généralement, en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse de ladite huile végétale, entre environ 95% et environ 99% de triglycérides, les autres constituants de l’huile végétale étant mineurs. Les triglycérides sont des glycérides dans lesquels les 3 groupes hydroxyle du glycérol sont estérifiés par des acides gras qui peuvent être identiques ou différents entre eux. Les triglycérides sont ainsi des esters dérivés d’une molécule de glycérol et de 3 molécules d’acides gras ou autrement dit des triesters de glycérol et d’acides gras. Selon l’espèce végétale dont elle est issue et son procédé d’obtention, une huile végétale est plus ou moins riche en acides gras saturés, polyinsaturés et monoinsaturés. La répartition entre les différents acides gras confère à l’huile végétale des propriétés physiques déterminées (par exemple sa texture, sa fluidité). Ainsi, une huile végétale comprend un mélange d’acides gras sous forme très majoritairement de triglycérides. Selon le mode d’obtention de l’huile végétale, des acides gras libres peuvent être présents, mais en quantité très faible. Une huile végétale peut être obtenue par extraction mécanique, en particulier par pression. Elle peut être raffinée ou non. Elle peut avoir un usage alimentaire ou cosmétique. Le 13-HOD dont la structure chimique (1) est la suivante : (1) est un dérivé hydroxylé de l’acide linoléique qui est un acide gras naturel. Le 13-HOD est ainsi un acide gras hydroxylé. L’acide linoléique a la structure chimique (2) suivante : (2) L’acide linoléique est présent, en quantités variables, dans de nombreuses huiles végétales (par exemple l’huile de pépins de raisin ou de tournesol), essentiellement sous la forme de triglycérides et donc très minoritairement sous la forme d’acides gras libres. A la différence de l’acide linoléique, les huiles végétales ne comprennent pas de 13-HOD naturellement. En d’autres termes, il n’existe pas de 13-HOD d’origine naturelle. Or, le 13-HOD présente des propriétés cosmétiques intéressantes. De plus, le 13-HOD est connu pour son utilisation en tant qu’intermédiaire dans la préparation des lactones qui sont des composés chimiques mis en œuvre dans des domaines d’application très variés tels que l’alimentaire, les polymères, l’agriculture et tout particulièrement dans les cosmétiques et la parfumerie. C’est pourquoi, des voies de synthèse du 13-HOD mises en œuvre au cours de procédés de préparation des lactones ont déjà été divulguées. A cet égard, le brevet US 11,499,171 B2 décrit un procédé de production de la delta-decalactone qui comprend les étapes suivantes : i) une étape de synthèse du 13-HOD à partir d’acide linoléique et en présence d’un microorganisme modifié produisant une protéine d’une séquence définie d’acides aminés et ayant une activité 13-hydratase linoléate ; suivie ii) d’une étape de synthèse de ladite delta-decalactone à partir du 13-HOD ainsi formée à l’étape i), cette étape ii) étant réalisée en présence d’un microorganisme ayant une activité de bêta-oxydation. L’étape i) est une étape de biocatalyse. En effet, il s’agit d’une transformation enzymatique effectuée in vitro , via l’utilisation d’une enzyme qui est produite par un microorganisme modifié. A cet égard, on rappelle que les conditions opératoires de la biocatalyse (telles que les concentrations de substrat, la solution tampon, la température, le pH, le solvant, l’agitation, etc…) doivent être parfaitement définies, contrôlées et maîtrisées pour favoriser une activité optimale de l’enzyme et ainsi convertir, dans le cas du brevet US 11,499,171 B2, l’acide linoléique (autrement dit le substrat) en 13-HOD de manière optimale, c’est-à-dire de manière contrôlée, rapide, reproductible et avec un taux de conversion le plus élevé possible. Ainsi, dans le brevet US 11,499,171 B2, le 13-HOD est utilisé en tant qu’intermédiaire dans la synthèse de la delta-decalactone. De plus, il est obtenu à partir d’un composé pur qui est l’acide linoléique. Or, comme rappelé ci-dessus, l’acide linoléique est présent dans certaines huiles végétales (par exemple l’huile de pépins de raisin ou de tournesol). C’est pourquoi, il est aussi connu de synthétiser le 13-HOD à partir d’une huile végétale comprenant de l’acide linoléique. A cet égard, la demande de brevet IT 2019/00015713 A1 décrit un procédé de préparation de lactones (en particulier de dodecalactone et de decalactone) pour leur utilisation en tant que parfums et d’arômes, et ce à partir de la transformation d’une huile végétale, ledit procédé comprend les étapes suivantes qui sont toutes réalisées dans un même bioréacteur: - l’hydrolyse des triglycérides présents dans l’huile végétale de manière à obtenir les acides gras (en particulier l’acide oléique, linoléique et linolénique) sous forme libre, et ce au moyen d’une enzyme (lipase) ; - l’hydratation des doubles liaisons des acides gras ainsi libérés à l’étape précédente au moyen d’une fermentation bactérienne avec l’utilisation de microorganismes probiotiques exprimant des enzymes hydratases ; - la dégradation microbiologique des acides gras ainsi hydratés en lactones, et ce au moyen de levures, de préférence des levures oléagineuses. Dans le procédé décrit dans la demande de brevet IT 2019/00015713 A1, à l’issue de l’étape d’hydratation, le 13-HOD qui s’est formé dans le bioréacteur est immédiatement transformé en lactones. De même que dans le brevet US 11,499,171 B2, le 13-HOD est donc uniquement un intermédiaire dans la synthèse de lactones. Par ailleurs, dans le procédé décrit dans la demande de brevet IT 2019/00015713 A1, l’étape d’hydrolyse des triglycérides est réalisée par biocatalyse, alors que l’étape d’hydratation est effectuée par bioconversion. Ce procédé de préparation de lactones met ainsi en œuvre dans un même bioréacteur deux techniques de réactions par voie enzymatique bien différentes. En effet, à la différence de la biocatalyse pour laquelle l’optimisation de l’activité de l’enzyme est recherchée, au cours de la bioconversion, l’enzyme transformant le substrat étant présente dans une biomasse vivante qui a été produite à l’issue d’un procédé de fermentation, on cherche à améliorer la croissance du microorganisme. Pour ce faire, la bioconversion s’effectue dans un milieu de culture qui contient les éléments nutritifs pour la croissance dudit microorganisme et les conditions opératoires (telles que la température, le pH, la durée de la bioconversion, les conditions osmotiques, etc…) doivent être compatibles avec ledit microorganisme. De plus, le substrat à convertir au cours de la bioconversion est dilué dans le fermenteur contenant le milieu de culture essentiellement constitué d’eau et la biomasse. Or, il est connu que les conditions opératoires de la bioconversion ne sont pas toujours compatibles avec la mise en œuvre d’un procédé à l’échelle industrielle et peuvent compliquer les étapes de purification du produit final souhaité. En outre, la bioconversion présente l’inconvénient de nécessiter des temps longs de réaction qui ne sont pas toujours adéquats pour une mise en œuvre à l’échelle industrielle. En d’autres termes, la préparation de 13-HOD telle que décrite dans les 2 premières étapes du procédé de la demande de brevet IT 2019/00015713 A1 n’est pas pleinement satisfaisante, du fait du recours à une bioconversion pour l’étape d’hydratation et des inconvénients inhérents à cette technique qui ont été rappelés ci-dessus. Enfin, étant donné que le procédé décrit dans la demande de brevet IT 2019/00015713 A1 a pour objectif final l’obtention de lactones, le 13-HOD ne constitue qu’un des produits intermédiaires obtenus à l’issue de l’étape d’hydratation parmi d’autres acides gras également transformés et qui proviennent notamment de la transformation de l’acide oléique et de l’acide linolénique. En effet, à l’issue de l’hydrolyse des triglycérides, le mélange résultant est un mélange complexe de divers acides gras sous forme libre. Ce procédé n’a nullement été mis au point pour synthétiser spécifiquement le 13-HOD et c’est pourquoi le rendement en 13-HOD obtenu au cours de ce procédé est faible. En se référant notamment à l’exemple 4 de cette demande de brevet italien décrivant l’obtention d’un mélange de lactones à une concentration de 1 g/L de milieu de culture à partir de 12 mL d’huile de lin (soit une masse de 11,1 g car de densité de 0,926 g/mL et qui contenait 17% d’acide linoléique par rapport à la masse totale des acides gras) dans 2 L dudit milieu de culture, on en déduit un rendement de production de seulement 18% dudit mélange de lactones. Or, étant donné que la concentration en 13-HOD synthétisé durant ce procédé de production ne peut excéder la concentration précitée de 1 g/L, ce procédé décrit dans la demande de brevet IT 2019/00015713 A1 présente une productivité faible en 13 HOD, et ce en outre avec l’inconvénient d’une dilution élevée de l’huile de lin (à savoir 5,5 g/L) dans le milieu de culture. Ainsi, au vu de l’art antérieur rappelé ci-dessus, on observe que les procédés de préparation du 13-HOD connus à ce jour et qui sont mis en œuvre pour utiliser le 13-HOD en tant que produit intermédiaire au cours de la synthèse de lactones, ne sont pas pleinement satisfaisants en termes notamment de rendements et de faisabilité à l’échelle industrielle. En effet, les quantités de 13-HOD obtenues avec ces procédés de l’état de l’art sont peu élevées. De plus, la productivité de ces procédés est relativement faible. Par ailleurs, dans un souci de développement durable, le domaine cosmétique porte de plus en plus d’attention à la naturalité de ses ingrédients. A cet égard, les huiles végétales sont des composés naturels qui remplissent parfaitement toutes ces exigences. C’est pourquoi, elles sont plébiscitées dans les formulations cosmétiques actuelles. Les ingrédients d’origine naturelle sont donc prisés et, lorsque les ingrédients ne peuvent être sourcés de manière naturelle, l’alternative favorisée est de les synthétiser à partir de produits naturels et/ou avec des procédés de chimie verte (notamment de bioconversion ou de biocatalyse). Comme expliqué ci-dessus, le 13-HOD est un composé présentant des propriétés cosmétiques intéressantes mais qui n’est pas présent naturellement dans les huiles végétales. C’est pourquoi, compte tenu de ces exigences de naturalité en matière de développements des cosmétiques, il serait tout à fait bénéfique de disposer d’un procédé de préparation du 13-HOD : - dont le produit de départ serait une huile végétale contenant de l’acide linoléique, à savoir un produit parfaitement naturel, - dont les étapes seraient en adéquation avec la chimie verte, - parfaitement industrialisable, et qui permettrait d’obtenir le 13-HOD avec une productivité élevée, c’est-à-dire avec des rendements importants de conversion de l’acide linoléique en 13-HOD et à partir d’une concentration élevée en produit de départ (c’est-à-dire l’huile végétale) afin d’améliorer les performances industrielles dudit procédé et d’éviter l’utilisation de quantités importantes de solvants impliquant ensuite des traitements de solvants usés. Les inventeurs ont réussi à atteindre tous ces objectifs en mettant au point une huile végétale modifiée contenant du 13-HOD, ainsi qu’un procédé de préparation d’une huile végétale modifiée contenant du 13-HOD. L’invention a ainsi pour objet une huile végétale modifiée qui se caractérise en ce qu’elle comprend, en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale des acides gras libres que contient ladite huile végétale modifiée, au moins 10%, de préférence au moins 20%, plus préférentiellement au moins 30% et encore plus préférentiellement au moins 40%, de 13-HOD. L’huile végétale modifiée selon l’invention peut comprendre, en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale des acides gras libres que contient ladite huile végétale modifiée, entre 10% et 80%, de préférence entre 20% et 70%, plus préférentiellement entre 30% et 60%, de 13-HOD. Dans le cadre de la présente invention, on entend par « huile végétale modifiée », une huile végétale qui n’existe pas sous une forme naturelle. En effet, comme expliqué ci-dessus, les huiles végétales ne comprennent pas naturellement de 13-HOD. A la différence des huiles végétales dites « naturelles » et qui ont pour caractéristique, comme cela a été expliqué ci-dessus, que la quasi-totalité de leurs acides gras se présentent sous la forme de triglycérides, l’huile végétale modifiée selon l’invention peut être une huile végétale qui a pour spécificité de comprendre essentiellement les acides gras sous forme libre. L’huile végétale modifiée selon l’invention peut comprendre entre 80% et 100%, de préférence entre 90% et 99%, d’acides gras sous forme libre, par rapport à la masse totale des acides gras qu’elle contient. L’huile végétale modifiée selon l’invention peut comprendre peu de triglycérides. Par exemple, l’huile végétale modifiée selon l’invention peut comprendre, en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale de ladite huile végétale modifiée, moins de 20%, de préférence moins de 10%, plus préférentiellement moins de 5%, de triglycérides. L’huile végétale modifiée selon l’invention peut comprendre, en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale de ladite huile végétale modifiée, entre 0,5% et 20%, de préférence entre 1% et 15%, plus préférentiellement entre 3% et 10%, de triglycérides. De préférence, l’huile végétale modifiée selon l’invention ne comprend pas de glycérol ou éventuellement des traces de glycérol. Le pourcentage massique en glycérol exprimé par rapport à la masse totale de ladite huile végétale peut être d’au plus 5%, de préférence 2%. Dans un mode de réalisation de l’invention, ledit pourcentage massique en glycérol peut être compris entre 0,05% et 5%, de préférence entre 0,1% et 3%, plus préférentiellement entre 0,2% et 2%. L’huile végétale peut être choisie dans le groupe constitué par l’huile de pépins de raisin, de carthame, de bourrache, d’arachide, de germe de blé, de maïs, de tournesol, de mûre, de nigelle, d’onagre, de pépin de courge, de chanvre, de coton, de noix, de soja, d’argan et de colza, prise seule ou en mélange de celles-ci. L’invention a aussi pour objet un procédé de préparation d’une huile végétale modifiée comprenant du 13-HOD qui se caractérise en ce qu’il comprend au moins les étapes suivantes : a) on dispose d’au moins une huile végétale dont une partie ou la totalité des triglycérides comprennent de l’acide linoléique ; b) on hydrolyse par biocatalyse, en présence d’une lipase, les triglycérides de l’au moins une huile végétale pour obtenir un milieu réactionnel contenant une huile végétale hydrolysée qui comprend de l’acide linoléique sous forme libre ; c) on hydrate par biocatalyse, en présence d’une hydratase, l’acide linoléique sous forme libre pour obtenir un milieu réactionnel contenant l’huile végétale modifiée comprenant du 13-HOD ; d) optionnellement, on isole l’huile végétale modifiée comprenant du 13-HOD du milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape c). Dans le cadre de l’exposé de la présente invention, on entend par « milieu réactionnel », un milieu dans lequel est effectuée une réaction enzymatique par biocatalyse (à savoir aux étapes b) et c)) ou, le cas échéant, une étape d’isolement (à savoir l’étape d)) lors de la mise en œuvre du procédé de préparation selon l’invention. A l’issue de l’étape b), on obtient une huile végétale hydrolysée. A l’issue de l’étape b), tout ou partie de l’acide linoléique, qui était présent initialement dans l’huile végétale sous forme de triglycérides, a été libéré. Au cours de l’étape b), d’autres acides gras que l’acide linoléique qui étaient initialement présents dans l’huile végétale sont aussi libérés. Les inventeurs ont constaté que durant l’étape b) l’acide linoléique était libéré en priorité par rapport aux autres acides gras. Au regard de l’art antérieur ayant pour produit de départ une huile végétale (par exemple la demande IT 2019/00015713 A1 précitée), le procédé de préparation d’une huile végétale modifiée comprenant du 13-HOD selon l’invention a pour originalité que les 2 étapes de réaction enzymatique sont réalisées par biocatalyse. Cela lui procure les avantages d’être aisément industrialisable et avec une productivité bien supérieure à celle qui pourrait être obtenue si les réactions enzymatiques étaient réalisées par bioconversion. De plus, tous les désagréments liés à la bioconversion et qui ont été rappelés ci-dessus sont évités. En outre, de manière tout à fait, surprenante, bien que l’étape c) d’hydratation soit effectuée sur une huile végétale hydrolysée, autrement dit un mélange complexe contenant des acides gras sous forme libre dont notamment l’acide linoléique, une productivité et un taux de conversion de l’acide linoléique en 13-HOD très satisfaisants sont obtenus. Or, compte tenu de ce mélange complexe, il n’était pas du tout évident qu’un taux de conversion de l’acide linoléique en 13-HOD aussi satisfaisant soit obtenu. En effet, comme cela est détaillé dans la partie expérimentale ci-après, des essais comparatifs ont montré que l’hydratation par biocatalyse de l’acide oléique qui est également libéré à l’issue de l’étape d’hydrolyse de l’huile végétale aboutissait à de plus faibles taux de conversion de l’acide oléique en sa forme hydroxylée. L’huile végétale dont on dispose à l’étape a) peut avoir été obtenue par extraction mécanique, en particulier par pression. Elle peut être raffinée ou non. Elle peut avoir un usage alimentaire ou cosmétique. L’huile végétale dont on dispose à l’étape a) peut être un mélange d’au moins deux huiles végétales. L’huile végétale dont on dispose à l’étape a) peut être choisie dans le groupe constitué par l’huile de pépins de raisin, de carthame, de bourrache, d’arachide, de germe de blé, de maïs, de tournesol, de mûre, de nigelle, d’onagre, de pépin de courge, de chanvre, de coton, de noix, de soja, d’argan et de colza, prise seule ou en mélange de celles-ci. Ces huiles végétales présentent naturellement des teneurs élevées en acide linoléique. De préférence, l’huile végétale est une huile de pépins de raisin. De préférence, le pourcentage massique en acide linoléique que contient l’huile végétale dont on dispose à l’étape a), exprimé par rapport à la masse totale des acides gras que comprend ladite huile végétale, est d’au moins 10%, plus préférentiellement d’au moins 20%, encore plus préférentiellement d’au moins 50% et de manière tout à fait préférée d’au moins 65%. L’huile végétale dont on dispose à l’étape a) peut comprendre, en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale des acides gras que comprend ladite huile végétale, entre 10% et 90%, de préférence entre 25% et 85%, plus préférentiellement entre 45% et 80%, d’acide linoléique. L’acide linoléique que comprend l’huile végétale de l’étape a) est essentiellement sous la forme de triglycérides. Comme expliqué ci-dessus, une huile végétale (dite « naturelle ») contient majoritairement des triglycérides (entre 95% et 99% de la masse de l’huile végétale). L’huile végétale dont on dispose à l’étape a) peut comprendre d’autres acides gras que l’acide linoléique. Ils peuvent être saturés comme l’acide palmitique, stéarique ou arachidique. Ils peuvent être insaturés comme l’acide oléique, l’acide linolénique ou l’acide érucique. A l’étape b) du procédé de préparation, la lipase permet de transformer les triglycérides en un mélange d’acides gras libres et de glycérol. L’acide linoléique libre figure parmi les acides gras libres obtenus à l’issue de l’étape b). Le glycérol est ainsi un sous-produit de la réaction enzymatique de l’étape b). De manière avantageuse, à l’issue de l’étape b), la totalité de l’acide linoléique présent sous forme de triglycérides dans l’huile végétale de l’étape a) a été libéré dans le milieu réactionnel. En d’autres termes, de manière avantageuse, à l’issue de l’étape b), la totalité de l’acide linoléique est sous forme libre. De manière avantageuse, l’étape b) d’hydrolyse par biocatalyse est réalisée par incubation d’une lipase avec ladite huile végétale dans un réacteur. De préférence, l’étape b) est réalisée dans un milieu aqueux avec un pourcentage volumique de l’huile végétale exprimé par rapport au volume du milieu réactionnel, qui est d’au moins 20%, de préférence d’au moins 30%. L’huile végétale est ainsi diluée dans ledit milieu aqueux. Autrement dit, l’huile végétale est ajoutée dans un milieu aqueux. De préférence, à l’étape b), le pourcentage volumique de l’huile végétale exprimé par rapport au volume du milieu réactionnel peut être d’au moins 20%. En dessous de 20%, la productivité du procédé de préparation selon l’invention peut être diminuée car la dilution de l’huile végétale peut être trop importante. Avantageusement, le pourcentage volumique de l’huile végétale exprimé par rapport au volume du milieu réactionnel peut être compris entre 20% et 80%, plus préférentiellement compris entre 30% et 70%. Au-delà de 80%, le taux de conversion de l’acide de linoléique en 13-HOD lors de l’étape c) peut être limité. De préférence, à l’étape b), la concentration massique de l’huile végétale exprimée par rapport au volume du milieu réactionnel peut être d’au moins 185 g/L. Avantageusement, la concentration massique de l’huile végétale exprimée par rapport au volume du milieu réactionnel peut être compris entre 185 g/L et 740 g/L, plus préférentiellement compris entre 276 g/L et 650 g/L. Le volume du milieu réactionnel correspond à la somme du volume de l’huile végétale et du volume du milieu aqueux. Le pH du milieu aqueux est avantageusement compris entre 6 et 8. Cela constitue des conditions optimales pour l’étape b) d’hydrolyse. Le pH du milieu aqueux est avantageusement fixé par une solution tampon que peut comprendre le milieu aqueux. Le milieu aqueux peut par exemple comprendre une solution tampon de phosphate de sodium qui fixe le pH dudit milieu aqueux à 7. L’étape b) d’hydrolyse peut être réalisée dans un milieu aqueux dont le pH peut être compris entre 6 et 8 et à une température comprise entre 25°C et 70°C, de préférence entre 40°C et 60°C, encore plus préférentiellement entre 45°C et 55°C. L’étape b) d’hydrolyse peut être réalisée pendant une durée comprise entre 1 heure et 48 heures, de préférence entre 5 heures et 36 heures, plus préférentiellement entre 10 heures et 30 heures. Dans un mode de réalisation avantageux de l’invention, la durée de l’étape b) d’hydrolyse est de 24 heures. De manière avantageuse, la lipase et la quantité de lipase sont choisies de manière appropriée pour que l’hydrolyse complète des triglycérides de l’huile végétale soit réalisée au cours de l’étape b) en au plus 48 heures, plus préférentiellement en au plus 24 heures. De manière avantageuse, la lipase appartient à la classe E.C. 3.1.1., en particulier EC 3.1.1.3. De préférence, la lipase est d’origine naturelle. La lipase peut être issue de Streptomyces sp . Elle peut également être issue de Candida sp ., notamment Candida antarctica . De manière avantageuse, la lipase est exprimée de manière recombinante. De manière avantageuse, la lipase a été obtenue par culture de bactéries telles qu’E. c oli ou de levures telles que Pichia pastoris , Saccharomyces cerevisiae , Yarrowia lipolytica ou de champignons tels que Aspergillus sp . A l’étape b), la lipase peut être immobilisée, par exemple par adsorption, par micro-encapsulation, par inclusion, par réticulation ou par fixation chimique sur un support insoluble. A l’étape b), la lipase peut être également sous la forme d’un surnageant de culture (par exemple un mélange de protéines exprimées par la souche de culture) ou sous la forme d’une biomasse comprenant notamment les cellules entières d’expression de la lipase et la lipase exprimée. Lorsque la lipase est utilisée sous la forme d’une biomasse, autrement dit lorsqu’elle est présente dans des cellules entières, la quantité de biomasse mise en œuvre à l’étape b) d’hydrolyse peut être choisie de manière appropriée pour que sa concentration soit comprise entre 5 g/L et 30 g/L du milieu réactionnel. La quantité de biomasse à mettre en œuvre à l’étape b) peut être choisie de manière appropriée pour que le pourcentage massique de ladite biomasse exprimé par rapport à la masse d’huile végétale (à savoir l’huile végétale dont on dispose à l’étape a) soit compris entre 0,9% et 5,4%. Dans un mode de réalisation avantageux de l’invention, à l’issue de l’étape b) et préalablement à l’étape c), le milieu réactionnel ainsi obtenu est décanté de manière à isoler la phase organique qui comprend les acides gras sous forme libre. Dans ce mode de réalisation avantageux de l’invention, l’étape c) est alors réalisée avec la phase organique ainsi isolée. Plus précisément et de manière avantageuse, la phase organique ainsi isolée peut être diluée dans un milieu aqueux avant la réalisation de l’étape c). Le pH de ce milieu aqueux est avantageusement compris entre 5 et 8 et peut être fixé par une solution tampon que comprend ledit milieu aqueux. Cela constitue des conditions qui seront optimales pour l’étape c) d’hydratation. Le milieu aqueux peut par exemple comprendre une solution tampon contenant un mélange de citrate et de soude qui fixe le pH dudit milieu aqueux à 6. Bien entendu, cette étape d’isolement de la phase organique n’est pas obligatoire. C’est pourquoi, l’étape c) peut aussi parfaitement être effectuée avec le milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape b), et ce sans la nécessité de modifier son pH, ni d’inactiver la lipase ou, le cas échéant de retirer la biomasse contenant la lipase. Le milieu réactionnel de l’étape c) peut avantageusement comprendre un tensioactif. Le tensioactif peut être un polysorbate (par exemple le polysorbate 20, le polysorbate 40 ou le polysorbate 80). Le pourcentage volumique en tensioactif (par exemple en polysorbate) exprimé par rapport au volume du milieu réactionnel de l’étape c) peut être inférieur à 5%, de préférence inférieur à 2%. Par exemple, le pourcentage volumique en tensioactif est compris entre 0,5 et 1,5%. Dans un mode de réalisation de l’invention, le milieu réactionnel de l’étape c) peut être dépourvu de tensioactif. Durant l’étape c), l’acide linoléique libre compris dans l’huile végétale hydrolysée obtenue à l’issue de l’étape b) est transformé totalement ou en partie en 13-HOD. Plus précisément, à l’étape c), l’hydratase est sélective. En effet, elle hydroxyle la liaison double en position 13 de l’acide linoléique. De manière avantageuse, l’hydratase mise en œuvre à l’étape c) appartient à la classe E.C. 4.2. De préférence, l’hydratase est une hydratase d’oléate qui appartient à la classe 4.2.1.53. Plus préférentiellement, il s’agit d’une 13-hydratase linoléate. De préférence, l’hydratase est d’origine naturelle. L’hydratase peut être issue de Lactobacillus sp . , de préférence Lactobacillus acidophilus . De manière avantageuse, l’hydratase est exprimée de manière recombinante. De manière avantageuse, l’hydratase a été obtenue par culture de bactéries telles qu’ E. Coli ou de levures telles que Pichia pastoris , Saccharomyces cerevisiae , Yarrowia lipolytica ou de champignons tels que Aspergillus sp . De manière avantageuse, l’étape c) d’hydratation par biocatalyse est réalisée par incubation d’une hydratase avec l’huile végétale hydrolysée obtenue à l’issue de l’étape b) dans un réacteur. A l’étape c), l’hydratase peut être immobilisée, par exemple par adsorption, par micro-encapsulation, par inclusion, par réticulation ou par fixation chimique sur un support insoluble. A l’étape c), l’hydratase peut être également sous la forme d’un surnageant de culture (par exemple un mélange de protéines exprimées par la souche de culture) ou sous la forme d’une biomasse comprenant notamment les cellules entières d’expression de l’hydratase et l’hydratase exprimée. Lorsque l’hydratase est utilisée sous la forme d’une biomasse, la quantité de biomasse mise en œuvre à l’étape c) d’hydrolyse peut être choisie de manière appropriée pour que sa concentration soit comprise entre 55 g/L et 555 g/L du milieu réactionnel. La quantité de biomasse à mettre en œuvre à l’étape c) peut être choisie de manière appropriée pour que le pourcentage massique de ladite biomasse exprimé par rapport à la masse d’huile végétale hydrolysée soit compris entre 10% et 100%. Lorsque l’hydratase est utilisée sous la forme d’une biomasse, le ratio de la masse de l’huile végétale hydrolysée sur la masse de ladite biomasse peut être compris entre 1:1 et 10:1, de préférence entre 1:1 et 5:1, encore plus préférentiellement entre 1:1 et 3:1. L’étape c) d’hydratation peut être réalisée à une température comprise entre 15°C et 50°C, de préférence entre 20°C et 45°C, encore plus préférentiellement entre 25°C et 40°C. L’étape c) d’hydratation peut être réalisée pendant une durée comprise entre 1 heure et 48 heures, de préférence entre 5 heures et 36 heures, plus préférentiellement entre 10 heures et 30 heures. Dans un mode de réalisation avantageux de l’invention, la durée de l’étape c) d’hydratation est de 24 heures. De préférence, les étapes b) et c) sont réalisées successivement. En effet, les températures optimales pour la réalisation de l’étape b) d’hydrolyse (aux environs de 50°C) sont différentes de celles pour la réalisation de l’étape c) d’hydratation (aux environs de 30°C). L’hydratase est ajoutée dans le milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape b), le cas échéant dans un milieu réactionnel contenant un milieu aqueux et la phase organique si cette dernière a été isolée à l’issue de l’étape b). En effet, l’hydratase n’agit pas sur les triglycérides de l’huile végétale mais de manière sélective sur l’acide linoléique libéré à l’issue de l’étape b). Le procédé de préparation de 13-HOD a pour avantage remarquable que l’étape c) d’hydratation de l’acide linoléique en 13-HOD peut parfaitement être effectuée directement dans le milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape b), à savoir sans la nécessité de purifier l’acide linoléique libéré à l’issue de l’étape b) ou la nécessité d’isoler la phase organique contenant les acides gras libérés parmi lesquels figure l’acide linoléique. Les inventeurs ont en effet découvert de manière tout à fait surprenante que l’activité de l’hydratase n’était pas inhibée lors de l’étape c), et ce même en l’absence de purification de l’acide linoléique et/ou de l’isolement de la phase organique le contenant. Dans un mode de réalisation de l’invention, les étapes b) et c) peuvent être mises en œuvre sans isoler l’huile végétale hydrolysée ainsi obtenue à l’issue de l’étape b) du milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape b) et en transférant ce milieu réactionnel dans un autre réacteur afin d’y effectuer l’étape c). En d’autres termes, dans ce mode de réalisation de l’invention, les réacteurs des étapes b) et c) sont deux réacteurs différents. Dans un autre mode de réalisation de l’invention, les étapes b) et c) peuvent être mises en œuvre sans isoler l’huile végétale hydrolysée ainsi obtenue à l’issue de l’étape b) du milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape b) et de façon monotope. Par « les étapes b) et c) peuvent être mises en œuvre de façon monotope », on entend que les étapes b) et c) peuvent être réalisées dans un même réacteur. Bien entendu, le choix du ou des réacteurs (par exemple un récipient) dans lequel ou lesquels sont effectuées les étapes b) et c) du procédé de préparation selon l’invention est parfaitement à la portée de l’homme du métier. De préférence, à l’étape c), le pourcentage volumique de l’huile végétale hydrolysée exprimé par rapport au volume du milieu réactionnel peut être d’au moins 20%. En dessous de 20%, la productivité du procédé de préparation selon l’invention peut être diminuée car la dilution de l’huile végétale hydrolysée peut être trop importante. Avantageusement, le pourcentage volumique de l’huile végétale hydrolysée exprimé par rapport au volume du milieu réactionnel peut être compris entre 20% et 80%, plus préférentiellement compris entre 20% et 70%. Au-delà de 80%, le taux de conversion de l’acide de linoléique en 13-HOD lors de l’étape c) peut être limité. Le volume du milieu réactionnel correspond à la somme du volume de l’huile végétale hydrolysée et du volume du milieu aqueux. De préférence, à l’étape c), la concentration massique de l’huile végétale hydrolysée exprimée par rapport au volume du milieu réactionnel peut être d’au moins 185 g/L. Avantageusement, la concentration massique de l’huile végétale hydrolysée exprimée par rapport au volume du milieu réactionnel peut être compris entre 185 g/L et 740 g/L, plus préférentiellement compris entre 276 g/L et 650 g/L. De manière préférée, l’étape c) est réalisée de manière appropriée pour qu’à l’issue de cette étape c), le taux de conversion de l’acide linoléique en 13-HOD soit supérieur ou égal à 30%, plus préférentiellement supérieur ou égal à 50%. Dans un mode de réalisation avantageux de l’invention, le taux de conversion d’acide linoléique en 13-HOD à l’issue de l’étape c) peut être compris entre 60% et 80%. De manière optionnelle, à l’issue de l’étape c) du procédé de préparation selon l’invention, une étape d) est effectuée, ladite étape d) consistant à isoler du milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape c) l’huile végétale modifiée comprenant du 13-HOD. La mise en œuvre de l’étape d) est parfaitement à la portée de l’homme du métier. Des modes de réalisation envisageables de cette étape d) sont détaillés ci-dessous à titre d’exemple. Si tous les acides gras libres présents dans le milieu réactionnel ne sont pas sous forme acide, au cours de l’étape d), ledit milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape c) peut tout d’abord être acidifié de manière à ce que la totalité des acides gras libres présents dans ledit milieu réactionnel soient sous forme acide. Dans un mode de réalisation de l’invention, le milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape c) peut être acidifié jusqu’à un pH de 3, de préférence jusqu’à un pH de 2, plus préférentiellement jusqu’à un pH de 1. Pour ce faire, une solution aqueuse acide (par exemple une solution concentrée d’acide chlorhydrique) est ajoutée au milieu réactionnel de manière à obtenir un milieu réactionnel qui est acidifié. Cette étape d’acidification est parfaitement optionnelle. En effet, tous les acides gras présents dans le milieu réactionnel obtenus à l’issue de l’étape c) peuvent être sous forme acide. En d’autres termes, l’étape d’acidification optionnelle peut être mise en œuvre pour hydrolyser le restant des acides et éliminer le restant du glycérol dans la phase aqueuse. Dès lors que les acides gras libres sont sous forme acide, ils peuvent être extraits dudit milieu réactionnel avec un solvant organique. Le choix du solvant organique est parfaitement à la portée de l’homme du métier. Il peut par exemple s’agir d’acétate d’éthyle, 2-méthyltétrahydrofurane, méthyl tert-butyl éther, méthoxycyclopentane, dichlorométhane, acétate d’isopropyle ou acétate d’isobutyle. Cette extraction des acides gras libres peut optionnellement être répétée plusieurs fois. Les phases organiques ainsi obtenues sont alors rassemblées de manière à obtenir une seule phase organique contenant les acides gras libres sous forme acide. La phase organique peut être filtrée, de préférence avec une membrane (par exemple une membrane en microfibre de verre). Enfin, le solvant organique peut être retiré, par exemple par évaporation de manière à isoler l’huile végétale modifiée contenant du 13-HOD. L’huile végétale modifiée contenant du 13-HOD qui a été isolée peut ne pas contenir de glycérol ou éventuellement des traces de glycérol. En effet, au cours de l’étape d) d’isolement de l’huile végétale modifiée, le glycérol demeure dans la phase aqueuse. Le pourcentage massique en glycérol exprimé par rapport à la masse totale de ladite huile végétale modifiée et ainsi isolée peut être d’au plus 5%, de préférence d’au plus 2%. Dans un mode de réalisation de l’invention, ledit pourcentage massique en glycérol peut être compris entre 0,05% et 5%. L’invention a aussi pour objet une huile végétale modifiée contenant du 13-HOD directement obtenue par le procédé de préparation tel que décrit ci-dessus. L’invention et ses avantages sont illustrés dans les exemples ci-après. Exemples : Matériel : Au cours des expérimentations, les matières premières suivantes ont été utilisées : - une huile de pépins de raisin commercialisée par la société DKSH France S.A. ; - l’acide linoléique commercialisé par la société Sigma Aldrich ; - l’acide oléique commercialisé par la société TCI ; - les enzymes E4375, E4026 et E4027 qui sont des enzymes de kits commerciaux commercialisés sous la dénomination commerciale SEQENZYM® par la société Seqens. Plus précisément, la répartition en acide gras dans l’huile de pépins de raisin, établie selon la norme de la Pharmacopée Européenne 2.4.22 était la suivante : - entre 0,0% et 2,% d’acides gras trans ; - entre 6% et 10% d’acide palmitique ; - entre 0,0% et 0,5% d’acide palmitoléique ; - entre 3% et 6% d’acide stéarique ; - entre 13% et 40% d’acide oléique ; - entre 58% et 77% d’acide linoléique ; - entre 0,0% et 0,5% d’acide linolénique ; - entre 0,0% et 0,3% d’acide arachidique ; - entre 0,0% et 2,0 % d’acide érucique. L’huile de pépins de raisin comprenait ainsi majoritairement de l’acide linoléique, de l’acide oléique, de l’acide palmitique et de l’acide stéarique. L’enzyme E4375 était une lipase. L’enzyme E4026 était une hydratase qui a été choisie de manière appropriée pour hydroxyler l’acide linoléique au niveau de la liaison double en position 13. L’enzyme E4027 était une hydratase qui a été choisie de manière appropriée pour hydroxyler l’acide oléique au niveau de la liaison double en position 10. Le procédé de préparation d’une huile végétale modifiée contenant du 13-HOD selon l’invention a été mis en œuvre de la manière suivante sur l’huile de pépins de raisin : Etape b) d’hydrolyse : Dans un réacteur de 1L, 300 mL de l’huile de pépins de raisin ont été dilués dans 200 mL d’une solution tampon de phosphate de potassium à une concentration de 100 mmol/L et de pH 7. Une biomasse comprenant l’enzyme E4375 a été ajoutée dans le réacteur. La masse de la biomasse a été choisie de manière appropriée pour que sa masse corresponde à 9% de la masse de l’huile de pépins de raisin. Le milieu réactionnel ainsi obtenu a été agité dans le réacteur à 52°C pendant 24 heures. Par suivi par chromatographie en phase liquide haute performance (HPLC), la conversion complète des triglycérides de l’huile de pépins de raisin en acides gras sous forme libre et glycérol a été observée. Dès la réalisation de la conversion complète des triglycérides, le milieu réactionnel a ensuite été acidifié avec une solution aqueuse d’acide chlorhydrique à une concentration de 1 mol/L. Ensuite, de l’acétate d’éthyle a été ajouté dans le milieu réactionnel ainsi acidifié. Puis, le milieu réactionnel a été filtré sur coton sous vide. Enfin, la phase organique a été isolée et l’acétate d’éthyle a été évaporé. A l’issue de cette étape d’isolement, 240 g d’huile de pépins de raisin hydrolysée ont été obtenus. Etape c) d’ hydratation : 55,5 mg de l’huile de pépins de raisin hydrolysée (soit un volume de 60 µL) ont été introduits dans un flacon de 4 mL. Une solution tampon de phosphate de potassium à une concentration de 0,1 mol/L et de pH 6,5 a été ajoutée dans le flacon afin de diluer l’huile de pépins de raisin hydrolysée pour que sa concentration soit de 30g/L du milieu réactionnel. De plus, un tensioactif Tween® 40 a été ajouté de manière à obtenir un milieu réactionnel comprenant donc l’huile de pépins de raisin hydrolysée, la solution tampon et le tensioactif. La quantité du tensioactif a été choisie de manière appropriée pour que son pourcentage volumique dans ce milieu réactionnel soit de 0,25%. Le milieu réactionnel a été agité à 40°C. Puis, l’hydratase E4026 comprise dans une biomasse a été ajoutée. Après 24 heures d’incubation à 40°C, il a été observé que 68% (pourcentage massique) de l’acide linoléique que comprenait l’huile de pépins de raisin hydrolysée ont été transformés en 13-HOD. Une huile de pépins de raisin modifiée contenant du 13-HOD a ainsi été obtenue avec le procédé de préparation selon l’invention. L’huile de pépins de raisin modifiée ainsi obtenue a été analysée. Elle comprenait, en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale des acides gras libres de ladite huile de pépins de raisin modifiée : - 20,5% d’acide linoléique, - 17% d’acide oléique, - 7% d’acide palmitique, - 3,5% d’acide stéarique, - 1% d’acide gras trans -oléique, - 51% de 13-HOD. On relève que le 13-HOD est l’acide gras très majoritaire parmi les acides gras libres présents dans l’huile de pépins modifiée selon l’invention. Expérimentation complémentaire : hydratation d’acide linoléique pur : Par ailleurs, une autre expérimentation a été effectuée en réalisant de la même manière l’étape c) décrite ci-dessus, à la seule exception que les 60 µL d’huile de pépins de raisin hydrolysée ont été remplacés par 60 µL d’acide linoléique pur. Après 24 heures d’incubation à 40°C, il a été observé que 67% (pourcentage massique) de l’acide linoléique pur ont été transformés en 13-HOD. On observe ainsi qu’avec le procédé de préparation selon l’invention, le taux de conversion de l’acide linoléique de l’huile de pépins de raisin et qui était donc initialement très majoritairement sous forme de triglycérides est équivalent à celui obtenu à partir d’acide linoléique pur. Le procédé de préparation selon l’invention permet d’obtenir une huile végétale modifiée contenant du 13-HOD avec un rendement élevé en 13-HOD, comparable à celui qui serait obtenu avec de l’acide linoléique pur (68% versus 67%). Exemple comparatif : Etape d’hydratation de l’acide oléique présent dans l’huile de pépins hydrolysée : 55,5 mg de l’huile de pépins de raisin hydrolysée (soit un volume de 60 µL) ont été introduits dans un flacon de 4 mL. Une solution tampon de phosphate de potassium à une concentration de 0,1 mol/L et de pH 6,5 a été ajoutée dans le flacon afin de diluer d’huile de pépins de raisin hydrolysée pour que sa concentration soit de 30g/L du milieu réactionnel. De plus, un tensioactif Tween® 40 a été ajouté de manière à obtenir un milieu réactionnel comprenant donc l’huile de pépins de raisin hydrolysée, la solution tampon et le tensioactif. La quantité du tensioactif a été choisie de manière appropriée pour que son pourcentage volumique dans ce milieu réactionnel soit de 0,25%. Le milieu réactionnel a été agité à 40°C. Puis, l’hydratase E4027 comprise dans une biomasse a été ajoutée. Après 24 heures d’incubation à 40°C, il a été observé que 42% (pourcentage massique) de l’acide oléique que comprenait l’huile de pépins de raisin hydrolysée ont été hydroxylés. Expérimentation complémentaire : hydratation d’acide oléique pur : Par ailleurs, une autre expérimentation a été effectuée en réalisant de la même manière l’étape c) décrite juste ci-dessus, à la seule exception que les 60 µL d’huile de pépins de raisin hydrolysée ont été remplacés 60 µL d’acide oléique pur. Après 24 heures d’incubation à 40°C, il a été observé que 95% (pourcentage massique) de l’acide oléique ont été hydroxylés. On observe ainsi qu’avec l’huile de pépins hydrolysée, le taux de conversion de l’acide oléique en sa forme hydroxylée est bien inférieur à celui obtenu à partir de la forme pure de l’acide oléique (42% versus 95%). Cet exemple comparatif confirme qu’une huile végétale hydrolysée est un mélange complexe, à savoir qu’il comprend des acides gras sous forme libre, résultat de l’hydrolyse des triglycérides de l’huile végétale, et que de ce fait, il n’est pas possible de prédire à partir d’un tel mélange complexe quels sont les acides gras qui seront transformés en leur forme hydroxylée par réaction enzymatique par biocatalyse avec un taux de conversion qui soit comparable à celui qui serait obtenu à partir des acides gras correspondants sous leur forme pure. Huile végétale modifiée, caractérisée en ce qu’elle comprend, en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale des acides gras libres que contient ladite huile végétale modifiée, au moins 10%, de préférence au moins 20%, plus préférentiellement au moins 40%, d’acide 13-hydroxy-9(Z)-octadecenoïque (ci-après abrégé « 13-HOD »). Huile végétale modifiée selon la revendication 1, caractérisée en ce qu’elle comprend en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale de ladite huile végétale modifiée, moins de 20%, de préférence moins de 10%, plus préférentiellement moins de 5%, de triglycérides. Huile végétale modifiée selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que ladite huile végétale est choisie dans le groupe constitué par l’huile de pépins de raisin, de carthame, de bourrache, d’arachide, de germe de blé, de maïs, de tournesol, de mûre, de nigelle, d’onagre, de pépin de courge, de chanvre, de coton, de noix, de soja, d’argan et de colza, prise seule ou en mélange de celles-ci. Procédé de préparation d’une huile végétale modifiée comprenant du 13-HOD, caractérisé en ce qu’il comprend au moins les étapes suivantes : a) on dispose d’au moins une huile végétale dont une partie ou la totalité des triglycérides comprennent de l’acide linoléique ; b) on hydrolyse par biocatalyse, en présence d’une lipase, les triglycérides de l’au moins une huile végétale pour obtenir un milieu réactionnel contenant une huile végétale hydrolysée qui comprend de l’acide linoléique sous forme libre ; c) on hydrate par biocatalyse, en présence d’une hydratase, l’acide linoléique sous forme libre pour obtenir un milieu réactionnel contenant l’huile végétale modifiée comprenant du 13-HOD ; d) optionnellement, on isole l’huile végétale modifiée comprenant du 13-HOD du milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape c). Procédé de préparation d’une huile végétale modifiée selon la revendication 4, caractérisé en ce que l’huile végétale dont on dispose à l’étape a) est choisie dans le groupe constitué par l’huile de pépins de raisin, de carthame, de bourrache, d’arachide, de germe de blé, de maïs, de tournesol, de mûre, de nigelle, d’onagre, de pépin de courge, de chanvre, de coton, de noix, de soja, d’argan et de colza, prise seule ou en mélange de celles-ci. Procédé de préparation d’une huile végétale modifiée selon l’une quelconque des revendications 4 à 5, caractérisé en ce que l’étape b) est réalisée dans un milieu aqueux avec un pourcentage volumique de l’huile végétale exprimé par rapport au volume du milieu réactionnel, qui est d’au moins 20%, de préférence d’au moins 30%. Procédé de préparation d’une huile végétale modifiée selon l’une quelconque des revendications 4 à 6, caractérisé en ce que l’étape b) d’hydrolyse est réalisée dans un milieu aqueux dont le pH est compris entre 6 et 8 et à une température comprise entre 25°C et 70°C, de préférence entre 40°C et 60°C, encore plus préférentiellement entre 45°C et 55°C. Procédé de préparation d’une huile végétale modifiée selon l’une quelconque des revendications 4 à 7, caractérisé en ce que l’hydratase mise en œuvre à l’étape c) est une 13-hydratase linoléate. Procédé de préparation d’une huile végétale modifiée selon l’une quelconque des revendications 4 à 8, caractérisé en ce que les étape b) et c) sont mises en œuvre sans isoler l’huile végétale hydrolysée ainsi obtenue à l’issue de l’étape b) du milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape b) et de façon monotope. Procédé de préparation d’une huile végétale modifiée selon l’une quelconque des revendications 4 à 9, caractérisé en ce que le taux de conversion de l’acide linoléique en 13-HOD à l’issue de l’étape c) est supérieur ou égal à 30%, de préférence supérieur ou égal à 50%.