Brevet FR3155591A1 — publié le 20250523

Procédé pour évaluer une dynamique de pousse d’un poil ou cheveu humain Procédé pour évaluer ex vivo une dynamique de pousse d’au moins un poil ou cheveu humain, présentant un follicule pileux (1), le procédé comprenant les étapes consistant à : imager le follicule pileux (1), disposé dans un milieu de culture (5), avec un imageur (2, 12, 28) pendant une période d’observation suffisamment longue, avec une fréquence d’acquisition suffisamment rapide, et une résolution suffisamment fine le cas échéant, pour obtenir au moins une séquence animée (9) de la pousse du poil ou cheveu dans ce milieu de culture (5), permettant notamment d’observer des mouvements de cellules constitutives du follicule pileux, générer à partir de cette séquence (9) au moins une information relative à la dynamique de pousse du poil ou cheveu. Figure : 1 Procédé pour évaluer une dynamique de pousse d’un poil ou cheveu humain La présente invention concerne des procédés pour évaluer une dynamique de pousse d’un poil ou cheveu humain et/ou mettre en évidence l’efficacité d’au moins un produit sur la pousse et/ou l’état de ce poil ou cheveu. Le follicule pileux, également dénommé follicule pilo-sébacé, est une structure ancrée dans le derme de la peau donnant naissance à la tige du poil ou cheveu. Ce follicule est constitué de plusieurs couches internes concentriques de cellules, entourées successivement par une gaine épithéliale externe et une gaine de tissu conjonctif. La gaine de tissu conjonctif, aussi appelée gaine conjonctive ou gaine dermique, assure une fonction de support du poil ou cheveu. Elle se compose de couches longitudinales de fibres de collagène et contient également des vaisseaux sanguins et terminaisons nerveuses. A la base du follicule pileux, se trouve le bulbe, partie « vivante » du poil ou cheveu où se produit la division cellulaire. Le follicule pileux du cheveu a la propriété de se regénérer de façon cyclique. Ce processus suit trois phases : une phase de pousse active dite phase anagène, une phase d’involution ou phase catagène, et une phase de repos avec chute du cheveu, appelée la phase télogène. A la suite de cette dernière phase, le follicule se regénère par un processus de néo-morphogénèse, notamment à partir d’un réservoir de cellules souches pluripotentes situé dans un renflement au milieu du follicule pileux. L’étude du follicule pileux est ainsi précieuse pour comprendre les mécanismes sous-jacents à la pousse des poils et cheveux, et leur impact sur l’état apparent de ceux-ci, notamment sur leur épaisseur. De nombreuses études se sont intéressées aux follicules pileux, notamment aux mouvements des différents types de cellules en leur sein. Néanmoins, la plupart des expériences et observations sur lesquelles se basent les connaissances scientifiques actuelles ont été menées sur des animaux et notamment sur des rongeurs. Les follicules pileux humains présentent cependant des différences importantes avec les follicules pileux des animaux, en particulier en ce qui concerne leur régulation hormonale. Quelques rares expériences sur des poils humains ont été recensées mais elles se fondent exclusivement sur des comparaisons de photos prises à des intervalles de temps relativement longs sur des échantillons fixés ou congelés de telle sorte qu’elles ne permettent pas le suivi des mouvements d’une cellule individuelle du follicule pileux au cours de la pousse. Il demeure ainsi un besoin pour obtenir plus d’informations sur le poil ou cheveu humain que ne le permettent les procédés actuels, afin par exemple de faciliter le développement de nouvelles compositions cosmétiques capillaires. L’invention vise à répondre à ce besoin et a pour objet, selon l’un de ses aspects, un procédé pour évaluer ex vivo une dynamique de pousse d’au moins un poil ou cheveu humain, présentant un follicule pileux, le procédé comprenant les étapes consistant à : imager le follicule pileux, disposé dans un milieu de culture, avec un imageur pendant une période d’observation suffisamment longue, avec une fréquence d’acquisition suffisamment rapide, et une résolution suffisamment fine le cas échéant, pour obtenir au moins une séquence animée de la pousse du poil ou cheveu dans ce milieu de culture, générer à partir de cette séquence au moins une information relative à la dynamique de pousse du poil ou cheveu. La séquence animée peut permettre d’observer des mouvements de cellules constitutives du follicule pileux avec certains types d’imageur présentant une résolution suffisamment fine, comme par exemple avec un microscope multiphoton. D’autres types d’imageur peuvent permettre d’observer, comme le microscope champ clair, des groupes de cellules indistinctement. D’autres types imageurs ne peuvent permettre d’observer que la dynamique de pousse du poil ou cheveu, comme par exemple le microscope holographique. Le procédé selon l’invention rend possible l’acquisition d’une séquence animée du follicule pileux en phase active de pousse en l’imageant dans un milieu de culture qui préserve et assure sa croissance. L’obtention d’une telle séquence animée permet de tirer des observations plus précises qu’une comparaison entre deux images séparées par un intervalle de temps relativement important d’échantillons congelés par exemple. En effet, une séquence animée permet de se prononcer tout d’abord sur la linéarité de la pousse. Elle rend également possible de suivre précisément le mouvement de cellules au sein du follicule pileux au cours de la pousse. On peut également observer les divisons cellulaires des cellules épithéliales progénitrices, situées à la base du follicule pileux, assurant la production du poil ou cheveu. Séquence animée Par « séquence animée », il faut comprendre un ensemble d’images suffisamment rapprochées dans le temps par rapport au phénomène observé pour permettre de suivre la trajectoire des cellules du follicule pileux. L’acquisition des images s’effectue de préférence avec une fréquence comprise entre 2 images par heure et 30 images par heure. Cette fréquence d’acquisition des images est suffisamment rapide pour suivre les mouvements des cellules et observer des divisions cellulaires au sein du follicule pileux, permettant de ce fait d’obtenir des informations plus précises sur le comportement cellulaire. L’acquisition des images peut s’étaler pendant une durée d’au moins 24h et jusqu’à 7 jours selon le type d’imageur utilisé. La séquence peut comporter au moins 48 images, mieux au moins 100 images, encore mieux au moins 1000 images, notamment plus de 5 000 images. Par « résolution suffisamment fine » (en anglais « resolution sufficiently high ») on entend une résolution permettant de distinguer deux points éloignés d’une distance suffisamment faible pour permettre d’observer le mouvement des cellules au sein du follicule pileux. La résolution de l’imageur peut être inférieure ou égale à 250 nm en xy. La visualisation des images peut se faire en accéléré, notamment à une fréquence d’au moins 10 images par seconde. Entre deux images de la séquence, un déplacement maximal d’une cellule peut représenter sur l’image moins de 1/10 de la diagonale de l’image. Les images de la séquence peuvent être monochromes ou en couleur, selon le type d’imageur. La séquence animée peut afficher une datation et/ou une échelle. La séquence animée peut être générée sous la forme d’une vidéo ayant une fréquence d’images prédéfinie ou d’une séquence d’images dont le passage d’une image à une autre est commandé par un utilisateur, ou d’un ensemble d’images affichées côte à côte, ou d’une projection en une même image de plusieurs images, notamment de toutes les images de la séquence animée. La séquence peut comporter toutes les images acquises ou seulement une sélection de celles-ci, par exemple une image sur n. Information L’« information relative à la dynamique de pousse » peut comprendre une mesure de la vitesse de pousse, une information sur la linéarité de la pousse, une information sur le comportement et/ou le mouvement, notamment sur la vitesse et/ou la direction de déplacement, d’au moins une cellule du follicule pileux au cours de la pousse, une quantification du nombre de divisions cellulaires dans une région du follicule pileux, une information sur la direction des divisions cellulaires au cours de la pousse au sein des différentes couches du follicule pileux, et/ou une information sur une évolution d’une caractéristique du follicule pileux au cours de la pousse. Le procédé peut comporter une étape c) où l’on compare ladite information à au moins une donnée de référence. Il s’agit par exemple de données obtenues pour des poils ou cheveux provenant de la même personne, mais soumis à un environnement différent durant la pousse. Imageur Le follicule pileux peut être imagé en 2D ou en 3D au cours du temps. Dans un mode de réalisation, l’imageur est un microscope à fluorescence, notamment un microscope multiphoton. Ces microscopes peuvent imager le follicule pileux en 3D en constituant une pile d’images (« stack ») en faisant varier la profondeur du plan d’imagerie au sein du follicule pileux. La résolution du microscope à fluorescence, et notamment du microscope multiphoton peut être d’environ 250 nm en xy et d’environ 1,5µm en z. Dans ce mode de réalisation, au moins un follicule pileux peut être reçu dans un porte-échantillon comprenant un support définissant au moins une cavité destinée à être remplie du milieu de culture, comportant un fond et présentant au moins une partie surélevée par rapport au fond et sous le niveau de remplissage maximal de la cavité, cette partie présentant au moins un trou de dimensions adaptées à maintenir sensiblement verticalement un poil ou cheveu humain, et au moins un sillon agencé de façon à maintenir sensiblement horizontalement un poil ou cheveu humain. Ladite partie peut se présenter sous la forme d’un plot. Ce dernier peut comporter deux montants supportant une surface supérieure, s’étendant sensiblement horizontalement, le ou les puits et le ou les sillons du porte-échantillon étant ménagés au sein de cette surface. Au moins un follicule pileux peut être disposé dans un trou du porte-échantillon et au moins un autre follicule pileux peut être disposé dans un sillon du porte-échantillon. En plaçant ainsi les follicules pileux, on peut acquérir avec le microscope à fluorescence, notamment multiphoton, respectivement une image en coupe longitudinale du follicule pileux, l’axe longitudinal du follicule étant l’axe de la tige du poil ou cheveu, ou une image en coupe transversale, perpendiculaire à l’axe de la tige du poil ou cheveu. En imageant les follicules pileux dans le sens de l’axe de leur tige et perpendiculairement à cet axe, on obtient une meilleure caractérisation du follicule pileux en microscopie à fluorescence, notamment multiphoton. Le porte-échantillon peut être fermé par une structure transparente, par exemple une lamelle en verre. Dans ce mode de réalisation, au moins un constituant du follicule pileux peut être marqué au moyen d’un marqueur d’imagerie. Plusieurs constituants du follicule pileux peuvent être marqués au moyen d’un même marqueur d’imagerie ou de différents marqueurs d’imagerie. Au moins une information relative aux mouvements dudit constituant marqué lors du développement du poil ou cheveu peut être générée à partir de la séquence animée acquise. Par « constituant du follicule pileux », on entend à la fois des molécules, comme l’ADN ou des protéines, par exemple l’actine, mais aussi par extension et abus de langage, des composants du follicule pileux comme des fibres, des cellules, ou des structures cellulaires comme les noyaux. Marquer les constituants du follicule pileux facilite le suivi de leurs mouvements dans la séquence animée, au cours du processus de pousse du poil ou cheveu, dans l’optique d’en déduire des informations permettant de caractériser la dynamique de pousse du poil ou cheveu. Il est également possible de se baser sur l’autofluorescence naturelle de certains constituants du follicule pileux, comme celle d’une coenzyme, le nicotinamide adénine dinucléotide (NADH), présente dans les cellules vivantes. Au moins une information relative aux mouvements des cellules lors de la pousse du poil ou cheveu peut être générée en se basant sur l’autofluorescence naturelle de celles-ci, notamment due à la présence de nicotinamide adénine dinucléotide (NADH). Le follicule pileux comprend des cellules eucaryotes, et dans un mode de réalisation, les noyaux de ces cellules peuvent être marqués au moyen d’un marqueur d’imagerie, notamment au moyen d’un colorant, par exemple un colorant Hoechst, en particulier le Hoechst-33258. Au moins une information relative aux mouvements des cellules au noyau marqué lors de la pousse du poil ou cheveu peut être générée à partir de l’analyse de la séquence animée acquise. Au moins une information relative aux divisions des cellules au noyau marqué lors du développement du poil ou cheveu peut être générée à partir de l’analyse de la séquence animée. Les colorants Hoechst sont utilisés pour marquer l’ADN, et permettent ainsi par extension de marquer les noyaux contenant l’ADN dans les cellules eucaryotes. Marquer les noyaux permet de suivre plus facilement le mouvement des cellules au cours de la pousse du poil ou cheveu, d’analyser leur déplacement, de calculer leur vitesse au sein des différentes couches formant le follicule pileux mais aussi d’estimer le nombre de divisions cellulaires. Dans un autre mode de réalisation, l’imageur est un microscope champ clair. La résolution du microscope champ clair peut être d’environ 250 nm en xy et d’environ 1µm en z. Dans un autre mode de réalisation, l’imageur est un microscope holographique. La résolution du microscope holographique peut être d’environ 1µm en xy. L’utilisation d’un microscope holographique permet d’imager le poil ou cheveu en le laissant dans un milieu d’incubation, sans devoir le disposer dans un porte-échantillon spécifique fermé notamment par une lamelle. Période d’observation La période d’observation peut permettre d’observer une pousse d’au moins 0,1 mm, notamment comprise entre 0,1 et 2,5 mm. La période d’observation peut être supérieure ou égale à 12 heures, mieux à 24 heures. Dans un mode de réalisation où l’imageur est un microscope multiphoton, la période d’observation peut être comprise entre 1 heure et 48 heures, de préférence d’au moins 24 heures. Dans un mode de réalisation où l’imageur est un microscope champ clair ou un microscope holographique, la période d’observation peut être supérieure ou égale à 48 heures. Dans un mode de réalisation où l’imageur est un microscope champ clair, la période d’observation peut être comprise entre 1 heure et 120 heures, de préférence d’au moins 48 heures. Dans un mode de réalisation où l’imageur est un microscope holographique, la période d’observation peut être comprise entre 1 heure et 170 heures, de préférence d’au moins 72 heures. La microscopie champ clair et la microscopie holographique sont moins phototoxiques que la microscopie à fluorescence, notamment multiphoton, ce qui permet de maintenir le follicule pileux en phase de croissance plus longtemps. Follicule pileux Le follicule pileux peut être extrait en phase anagène. Le follicule pileux peut être extrait d’un tissu humain. Le tissu humain peut être un rebut de tissu résultant d’une opération chirurgicale, notamment d’une opération de chirurgie esthétique, par exemple d’un lifting du visage. On peut encore extraire les follicules en utilisant les mêmes techniques que pour les greffes de cheveux. Les follicules pileux peuvent encore provenir d’une culture en laboratoire. Le follicule peut être extrait sous un stéréomicroscope. Il peut être extrait au moyen d’un scalpel et/ou d’une pince à épiler. Le follicule pileux peut être disposé dans un milieu de culture. Le milieu de culture peut comporter du milieu E de William. Le milieu peut être enrichi en glutamine et/ou hydrocortisone et/ou insuline. Le milieu de culture peut être le milieu décrit dans l’article « Human hair growth in vitro » by Philpott et al., Journal of Cell Science, 1990. Le follicule pileux peut être incubé dans le milieu de culture dans les conditions de température, d’humidité et de CO 2 décrites dans l’article « Human hair growth in vitro » by Philpott et al précité, avant d’être imagé. Le follicule pileux peut être un follicule non-pigmenté. Le choix d’un follicule non-pigmenté permet d’éviter que la mélanine, présente dans les follicules pigmentés, absorbe la lumière utilisée pour l’excitation lorsque l’imageur est un microscope à fluorescence, résultant en une plus grande phototoxicité pour le follicule et parfois en une saturation du signal fluorescent émis par les mélanines. Le follicule pileux peut être coupé au-dessus de son bulbe avant d’être disposé dans le milieu de culture, puis d’être imagé. Après avoir été extrait et avant d’être coupé, le follicule pileux peut être disposé dans le milieu de culture. Le follicule pileux peut être incubé dans le milieu de culture après la coupe, avant d’être imagé. Le procédé peut ainsi comporter l’étape consistant à couper le follicule pileux au-dessus du bulbe à l’aide d’un scalpel avant de le disposer dans le milieu de culture puis de l’imager. Procédés d’évaluatio n de l’effet d’un stimulus et/ou traitement sur la dynamique de pousse d’un poil ou cheveu Selon un autre de ses aspects, l’invention a pour objet un procédé pour évaluer ex vivo l’effet d’un stimulus et/ou d’un traitement sur la dynamique de pousse d’au moins un poil ou cheveu humain, comportant les étapes consistant à : évaluer la dynamique de pousse du poil ou cheveu à l’aide du procédé tel que précédemment défini, notamment pendant une période d’observation comprise entre 1 et 24 heures, répéter l’étape a) sur au moins un poil ou cheveu exposé à l’action du stimulus et/ou traitement, comparer les informations générées par les deux évaluations et générer au moins une information relative à l’action du stimulus et/ou du traitement sur la dynamique de pousse du poil ou cheveu. Le poil ou cheveu exposé à l’étape b) à l’action du stimulus et/ou traitement peut être le même poil ou cheveu que le poil ou cheveu de l’étape a). En variante, le poil ou cheveu exposé à l’étape b) à l’action du stimulus et/ou traitement peut être un autre poil ou cheveu que le poil ou cheveu de l’étape a), provenant de préférence de la même personne. L’étape b) peut répéter en tout point l’étape a) sur le ou les poils ou cheveux exposés à l’action du stimulus et/ou traitement en utilisant une période d’observation de même durée. L’exposition à l’action du stimulus et/ou traitement peut être brève ou continue dans le temps, par exemple l’exposition peut s’étaler sur toute la durée de l’étape b). Dans un mode de réalisation où on évalue l’impact d’un traitement, notamment d’un actif, le poil ou cheveu peut être exposé au traitement pendant toute la période d’observation nécessaire à l’évaluation de sa dynamique de pousse. L’invention a encore pour objet un procédé pour évaluer ex vivo l’effet d’un stimulus et/ou d’un traitement sur la dynamique de pousse d’au moins un poil ou cheveu humain, dans lequel au moins deux populations d’au moins un poil ou cheveu humain sont exposées différemment au stimulus et/ou au traitement, dans lequel on compare au moins une information relative à la dynamique de pousse du poil ou cheveu, obtenue au moyen du procédé d’évaluation de la dynamique de pousse tel que précédemment défini, pour les différentes populations. L’exposition au stimulus peut être différente dans la durée entre les populations. Le traitement peut être appliqué à des doses différentes entre les populations. L’une des populations peut ne pas être exposée au stimulus et/ou traitement, à la différence de l’autre ou des autres populations. Stimulus et traitement Le stimulus selon l’invention peut être choisi parmi un stimulus électrique, chimique, biologique, mécanique, thermique, électromagnétique, notamment lumineux, ou radiologique, ou une combinaison de ceux-ci. Le traitement peut être non thérapeutique. Le traitement peut être un traitement cosmétique, notamment via l’application d’un produit favorisant la repousse ou l’embellissement de la chevelure, notamment l’épaississement des cheveux. Le traitement peut comporter 1'application ou l’administration d’un produit, notamment d’un produit cosmétique. Par « produit cosmétique », on entend un produit tel que défini dans la Directive 93/35/CEE du 14 juin 1993, modifiant la Directive 76/768/CEE. Système Selon un autre de ses aspects, l’invention a pour objet un système pour la mise en œuvre d’un procédé tel que précédemment défini, comportant une unité d’imagerie, notamment une unité de microscopie à fluorescence, en particulier multiphoton ou une unité de microscopie champ clair ou une unité de microscopie holographique, permettant d’acquérir au moins une séquence animée d’au moins un poil ou cheveu humain, disposé dans un milieu de culture, et un moyen de calcul, notamment une unité informatique capable de stocker la ou les séquences animées et/ou de les traiter au moyen d’ un processeur intégré ou de les adresser à un serveur de calcul distant , ce moyen de calcul étant configuré pour générer à partir de la ou des séquences animées acquises, au moins une information relative à la dynamique de pousse du poil ou cheveu, et de présenter cette information, par exemple sous la forme de texte et/ou d’images, par exemple via une interface utilisateur. L’unité d’imagerie peut être séparée du reste du système et reliée à celui-ci par exemple par une connexion filaire ou sans fil. Le moyen de calcul peut comporter un processeur intégré au système ou être distant, comme un serveur de calcul connecté au système par une connexion filaire ou sans fil. L’interface utilisateur peut être incluse dans le système ou séparée, comme lorsqu’il s’agit d’un écran d’affichage. Porte échantillon Selon un autre de ses aspects, l’invention a encore pour objet un porte-échantillon comprenant un support définissant au moins une cavité destinée à être remplie d’un milieu de culture ou de conservation liquide, comportant un fond et présentant au moins une partie surélevée par rapport au fond et sous le niveau de remplissage maximal de la cavité, cette partie présentant au moins un trou de dimensions adaptées à maintenir sensiblement verticalement un poil ou cheveu humain, et au moins un sillon agencé de façon à maintenir sensiblement horizontalement un poil ou cheveu humain. Ladite partie peut se présenter sous la forme d’un plot. Ce dernier peut comporter deux montants supportant une surface supérieure, s’étendant sensiblement horizontalement, le ou les puits et le ou les sillons du porte-échantillon étant ménagés au sein de cette surface. Le porte-échantillon selon l’invention offre un support permettant d’imager des poils ou cheveux dans le sens de l’axe de leur tige mais aussi perpendiculairement à cet axe, ce qui est particulièrement avantageux lorsque les poils ou cheveux sont imagés par un microscope à fluorescence, notamment un microscope multiphoton comme décrit précédemment. Le porte-échantillon permet de maintenir les poils ou cheveux dans deux directions pour être imagés tout en les laissant pousser en raison de la présence d’un milieu de culture dans lequel les poils ou cheveux sont immergés. Le porte-échantillon peut être au moins partiellement en un matériau transparent ou translucide. Le porte-échantillon peut être imprimé en 3D, notamment au moyen d’une résine photopolymère. Procédés d’évaluation de l’effet d’un stimulus et/ou d’un traitement sur la pousse et/ou l’état d’ un poil ou cheveu Selon un autre de ses aspects, l’invention a pour objet un procédé pour évaluer ex vivo l’effet d’un stimulus et/ou d’un traitement, affectant au moins les propriétés mécaniques et/ou géométriques de la gaine conjonctive d’un follicule pileux d’un poil ou cheveu humain, sur la pousse et/ou l’état de celui-ci, le procédé comprenant les étapes consistant à : acquérir avec un imageur au cours d’une période d’observation au moins une image du follicule pileux ayant été exposé à l’action du stimulus et/ou traitement, le follicule pileux étant disposé dans un milieu de culture, générer au moins une information relative à la pousse et/ou à l’état dudit poil ou cheveu, par exemple son épaisseur, à partir de la ou des images acquises, comparer la ou les informations générées à l’étape b) à au moins une donnée de référence, par exemple une épaisseur de référence, et délivrer au moins une information relative à l’action du stimulus et/ou du traitement sur la pousse et/ou l’état du poil ou cheveu. Par « les propriétés mécaniques et/ou géométriques de la gaine conjonctive », on entend au moins l’une des caractéristiques de la gaine conjonctive choisies parmi la liste non-limitative suivante : la rigidité de la gaine conjonctive, son intégrité locale ou globale, son organisation fibrillaire et son épaisseur. La ou les données de référence peuvent être acquises sur au moins un poil ou cheveu ou une population de référence, non exposés audit stimulus et/ou traitement, et/ou exposés différemment audit stimulus et/ou traitement Selon un autre de ses aspects, l’invention a encore pour objet un procédé pour évaluer ex vivo l’effet d’un stimulus et/ou d’un traitement affectant au moins les propriétés mécaniques et/ou géométriques de la gaine conjonctive d’un follicule pileux d’un poil ou cheveu humain sur la pousse et/ou l’état de celui-ci, dans lequel au moins deux populations d’au moins un poil ou cheveu humain sont exposées différemment au stimulus et/ou au traitement, dans lequel on compare entre les populations au moins une information relative à la pousse et/ou à l’état du poil ou cheveu générée à partir d’au moins une image acquise avec un imageur au cours d’une période d’observation de chaque population disposée dans un milieu de culture. Comme indiqué précédemment, l’exposition au stimulus peut être différente dans la durée entre les populations. Le traitement peut être appliqué à des doses différentes entre les populations. L’une des populations peut ne pas être exposée au stimulus et/ou traitement, à la différence de l’autre ou des autres populations. Le stimulus peut être choisi parmi un stimulus mécanique, électrique, chimique, biologique, thermique, électromagnétique, notamment lumineux, ou radiologique, ou une combinaison de ceux-ci. Le stimulus peut comprendre le sectionnement de la gaine conjonctive sur au moins une partie de sa circonférence, par exemple sur toute sa circonférence. Le sectionnement peut s’effectuer au-dessus du bulbe du follicule pileux, de préférence à moins d’un millimètre au-dessus du bulbe. Le sectionnement peut être réalisé à l’aide d’un scalpel. Le stimulus peut comprendre le sectionnement du follicule pileux au-dessus du bulbe à l’aide d’un scalpel. Le stimulus peut comprendre l’altération ponctuelle, en un ou plusieurs points, de la gaine conjonctive. Cette altération peut s’effectuer au-dessus du bulbe du follicule pileux. Elle peut être réalisée par photoablation. Le stimulus peut comporter l’exposition à une enzyme, notamment une enzyme ayant une action sur les fibres de collagène comme la collagénase. Le procédé peut comporter l’étape consistant à exposer le follicule pileux audit stimulus et/ou traitement avant de le disposer dans le milieu de culture et de l’imager. L’information relative à la pousse et/ou à l’état dudit poil ou cheveu peut concerner au moins l’une des caractéristiques choisies parmi son épaisseur, sa porosité et/ou son hydratation, l’organisation de ses écailles, l’organisation de ses fibres de kératine, sa vitesse de croissance, le nombre de divisions cellulaires dans le bulbe, sa rigidité, sa forme et sa direction de pousse après l’exposition au stimulus et/ou traitement. L’imageur peut être un imageur tel que précédemment défini et peut présenter l’une quelconque des caractéristiques telles que définies ci-dessus. Le follicule pileux peut présenter l’une quelconque des caractéristiques telles que précédemment définies. Le traitement peut présenter l’une quelconque des caractéristiques telles que précédemment définies. Selon un autre de ses aspects, l’invention a encore pour objet un procédé de criblage d’un actif dans lequel on évalue ex vivo l’effet de divers actifs sur la pousse et/ou l’état d’au moins un poil ou cheveu humain au moyen d’un procédé d’évaluation de l’impact d’un stimulus et/ou traitement tel que précédemment défini, de façon à identifier au moins un actif ayant une action recherchée sur le poil ou cheveu. Par « action recherchée », on entend toute action améliorant une caractéristique du cheveu, comme l’organisation de ses écailles, l’organisation de ses fibres de kératine, sa vitesse de croissance, le nombre de divisons cellulaires dans son bulbe, son épaisseur, sa porosité ou hydratation. L’invention pourra être mieux comprise à la lecture de la description qui va suivre, d’exemples de mise en œuvre non limitatifs de celle-ci, et à l’examen du dessin annexé, sur lequel : FIG. 1 représente en une vision schématique les différentes étapes d’un exemple de procédé d’évaluation d’une dynamique de pousse d’un poil ou cheveu conforme à l’invention, FIG. 2 illustre un microscope champ clair imageant un follicule pileux d’un poil ou cheveu, selon le procédé de la FIG. 1 , FIG. 3 est un schéma d’une séquence animée acquise par un imageur, notamment l’imageur de la FIG. 2 , selon le procédé de la FIG. 1 , FIG. 4 représente deux images extraites d’une séquence animée acquise au cours du procédé représenté en FIG. 1 avec l’imageur de la FIG. 2 FIG. 5 illustre un microscope multiphoton imageant un follicule pileux d’un poil ou cheveu dans deux positions différentes, selon le procédé de la FIG. 1 , FIG. 6 est une vue en perspective, schématique et partielle, d’un porte-échantillon selon l’invention, FIG. 7 représente deux images extraites d’une séquence animée acquise au cours du procédé représenté en FIG. 1 avec l’imageur de la FIG. 5 , le follicule pileux étant imagé longitudinalement dans le sens de la tige du poil ou cheveu FIG. 8 présente en a) une image extraite d’une séquence animée acquise au cours du procédé représenté en FIG. 1 avec l’imageur de la FIG. 5 , le follicule pileux étant imagé transversalement, perpendiculairement au sens de la tige du poil ou cheveu, et en b) une projection des images de toute la séquence permettant de mettre en évidence la trajectoire des 3 cellules suivies pendant un certain temps, FIG. 9 représente une image de la densité de mitoses au sein d’un follicule pileux, calculée à partir de la séquence animée de la FIG. 7 , FIG. 10 illustre un microscope holographique imageant plusieurs follicules pileux, selon le procédé de la FIG. 1 , FIG. 11 représente une image extraite d’une séquence animée acquise au cours du procédé représenté en FIG. 1 avec l’imageur de la FIG. 10 , FIG. 12 est une représentation schématique et partielle de l’étape a 0 ) du procédé de la FIG. 1 , FIG. 13 présente une image acquise au cours d’un procédé évaluant l’impact d’un stimulus et/ou traitement affectant les propriétés mécaniques et/ou géométriques de la gaine conjonctive d’un follicule pileux d’un poil ou cheveu sur la pousse et/ou l’état d’au moins un poil ou cheveu, FIG. 14 présente des images d’une population de référence et d’une population affectée par un stimulus acquises au cours d’un procédé semblable à celui de la FIG. 13 , et FIG. 15 illustre un exemple de système pour la mise en œuvre d’un procédé d’évaluation de la dynamique de pousse d’un poil ou cheveu conforme à l’invention, Description détaillée On va décrire en référence aux figures 1 à 12 différentes étapes d’un exemple de procédé d’évaluation ex vivo d’une dynamique de pousse d’un poil ou cheveu. L’étape a) de la FIG. 1 peut consister à imager un ou plusieurs follicules pileux de poils ou cheveux disposés dans un milieu de culture, comme un milieu E de William enrichi en glutamine, insuline et hydrocortisone avec un imageur. L’étape a) s’étend sur une période d’observation suffisamment longue, avec une fréquence d’acquisition suffisamment rapide, par exemple de 30 images par minute, et une résolution suffisamment fine pour acquérir une séquence animée de la pousse du poil ou cheveu dans laquelle on peut observer des mouvements des cellules constitutives du follicule pileux. L’étape a) peut éventuellement être précédée d’une étape a 0 où l’on coupe le follicule pileux 1 à l’aide d’un scalpel avant de le disposer dans le milieu de culture et de l’imager. L’étape b) du procédé peut consister à générer au moins une information relative à la dynamique de pousse du poil ou cheveu à partir de la séquence acquise. Le procédé peut éventuellement comporter une étape c) où l’on compare l’information générée avec au moins une donnée de référence. Le follicule pileux 1 peut être imagé au cours de l’étape a) par un microscope champ clair dont l’objectif 2 est illustré à la FIG. 2 . Le follicule pileux 1 est reçu dans un porte-échantillon 3, comportant un sillon 4 dans lequel est placé le follicule 1. Le porte-échantillon 3 peut être rempli du milieu de culture de telle sorte que le sillon 4 est immergé par le milieu. Le porte-échantillon 3 peut être fermé par une lamelle de verre 6, de la graisse de silicone 7 étant placée sous la lamelle au niveau du point de contact avec les bords du porte-échantillon. Une goutte d’huile 8 peut être placée sur la lamelle 7 de façon à éliminer une partie de la réfraction des rayons. La figure 3 représente de manière schématique et partielle une séquence animée 9 acquise par un imageur au cours de l’étape a) du procédé de la figure 1. La séquence animée 9 consiste en une succession d’images 10 acquises à des intervalles de temps identiques . Elle permet de suivre la trajectoire d’une cellule 11 du follicule pileux et d’estimer, par exemple, sa vitesse de déplacement. La période d’observation totale de l’étape a) du procédé de la FIG. 1 avec un microscope champ clair peut être supérieure ou égale à 48 heures, étant donné que le microscope champ clair est peu phototoxique, ce qui permet de suivre relativement longtemps la pousse du poil ou cheveu. Les figures 4 a) et 4 b) sont deux images 10 extraites de la séquence animée 9 acquise avec le microscope champ clair 2. Le follicule pileux 1 peut être imagé au cours de l’étape a) par un microscope multiphoton 12 comme illustré à la FIG. 5 . Le follicule pileux 1 peut être reçu, lorsqu’imagé avec un microscope à fluorescence et notamment avec un microscope multiphoton, dans un porte-échantillon spécifique 13, représenté de manière isolée à la FIG. 6 . Le porte-échantillon 13 comprend un support définissant deux cavités 14. Chaque cavité 14 comporte un fond 15 et présente une partie prenant la forme d’un plot 16 surélevé par rapport au fond 15. Le plot 16 présente deux montants 17 supportant une surface supérieure 18 s’étendant horizontalement. Le porte-échantillon 13 est rempli d’un milieu de culture 5 de telle sorte que les follicules pileux reçus sont complètement immergés. Chaque plot 16 est ainsi agencé de telle sorte que sa surface supérieure 18 se trouve au-dessous du niveau maximal de remplissage de la cavité 14. Chaque plot 14 présente sur sa surface supérieure 18 un sillon 19, agencé de façon à maintenir sensiblement horizontalement un poil ou cheveu humain, et deux trous 20 de dimensions adaptées à maintenir sensiblement verticalement un poil ou cheveu humain. Les trous 20 peuvent avoir un diamètre compris entre 200 et 400 µm, par exemple d’environ 300µm. Le sillon 19 peut avoir une longueur comprise entre 3 et 7 mm, par exemple de 5mm environ, une largeur comprise entre 100 et 300 µm, par exemple de 200µm environ et une profondeur comprise entre 50 et 150 µm, par exemple de 100µm environ. Comme décrit précédemment, le porte-échantillon 13 peut être fermé par une lamelle 6 sur laquelle est déposée une goutte d’huile. En plaçant les follicules pileux alternativement dans un sillon 19 ou un trou 20, le microscope multiphoton permet d’acquérir respectivement une image en coupe longitudinale du follicule pileux, l’axe longitudinal du follicule étant l’axe de la tige du poil ou cheveu, ou une image en coupe transversale. En faisant varier le plan d’imagerie 21 le long d’un axe de profondeur Z, le microscope multiphoton acquière des images en 3D et ainsi des séquences animées en 3D du follicule pileux. Le porte-échantillon 13 est par exemple en un matériau transparent. Il peut être imprimé en 3D à l’aide d’une résine photopolymère. La figures 7 a) et 7 b) sont deux images extraites successivement d’une séquence animée acquise avec le microscope multiphoton 12 dans le cas où le follicule pileux est placé dans le sillon 19. Précédemment à l’acquisition de cette séquence, les noyaux des cellules ont été marqués avec un colorant Hoechst pour faciliter leur visualisation. Les figures 7 a) et 7 b) présentent chacune sur leur côté gauche l’image du follicule pileux 1 acquise avec le microscope multiphoton et sur leur côté droit une segmentation binaire 22 de cette image. La segmentation binaire 22 de l’image permet de mieux mettre en évidence les cellules, ce qui facilite leur suivi. Quatre cellules de la région supra-bulbaire du follicule pileux ont été suivies manuellement et sont indiquées sur les deux images. Trois cellules 23 situées dans les couches internes du follicule semblent suivre dans cette région un mouvement ascendant tandis que la cellule 24 indiquée dans la gaine épithéliale externe 25 semble y suivre un mouvement descendant. La FIG. 8 a) est également extraite d’une séquence animée acquise avec un microscope multiphoton mais dans un cas où le follicule pileux est disposé dans un trou 20 du porte-échantillon 13. Dans cet exemple, les noyaux n’ont pas été marqués, et on observe l’autofluorescence naturelle du NADH présent dans les cellules vivantes du follicule pileux. Des cellules 26 ayant un signal d’autofluorescence important sont observées dans la gaine épithéliale externe 25 sur la figure a). La FIG. 8 b) a été éditée pour montrer avec des flèches la trajectoire des cellules 26 entre la figure a) et la figure b). Les cellules 26 semblent ainsi suivre un mouvement de rotation perpendiculaire à la tige du poil ou cheveu. En combinant les informations acquises à partir des figures 7 et 8, on peut mettre en évidence un mouvement complexe 3D descendant, pouvant s’assimiler à une hélice, des cellules des couches de la gaine épithéliale externe du follicule pileux 1 dans sa région supra-bulbaire. En se basant sur les séquences animées, une vitesse moyenne de déplacement des cellules peut être calculée. La cellule 24 disposée dans la couche épithéliale externe s’y déplace par exemple avec une vitesse moyenne de - 7 ± 4 µm/h alors que les cellules des couches internes se déplacent plus lentement vers le haut. Pour caractériser la dynamique de pousse du poil ou cheveu, il est également possible de quantifier, à partir de la séquence animée de la FIG. 7 par exemple, le nombre de divisions cellulaires des cellules épithéliales progénitrices, situées à la base du follicule pileux, au cours d’une période T donnée. En marquant l’ADN des cellules avec un colorant Hoechst, il est possible d’observer la plaque équatoriale sur laquelle s’alignent les chromosomes lors de la métaphase de la mitose et ainsi d’obtenir une estimation du nombre de mitoses. La FIG. 9 montre une carte de la densité de mitoses au sein du follicule pileux en se basant sur la quantification des plus proches voisins 27, allant de 0 à 6, durant une période T d’environ 15 heures. Cette carte permet de localiser les zones d’intenses divisions cellulaires au sein du follicule. On peut également analyser l’orientation des lignes équatoriales se formant lors des métaphases des mitoses pour estimer la direction des divisions cellulaires et comprendre le mouvement des flux de cellules lors de la pousse du poil ou cheveu. Le follicule pileux 1 peut être imagé au cours de l’étape a) par un microscope holographique 28, comme illustré à la FIG. 10 , par exemple un cytonote 6W, disposé dans un incubateur. Plusieurs follicules pileux peuvent être observés à la fois et sont placés dans des rangées de puits 29, remplis de milieu de culture 5. La FIG. 11 représente une image extraite d’une séquence animée acquise avec un microscope holographique 28 au cours d’un procédé selon l’invention évaluant l’impact d’un traitement sur la dynamique de pousse d’un poil ou cheveu. Trois groupes de quatre follicules pileux 1 ont été incubés dans des puits 29 avec une concentration différente d’hydrocortisone dans le milieu de culture 2. La séquence animée a été éditée pour faire apparaître une ligne 30 montrant la progression de la pousse des poils ou cheveux dans les différentes conditions de concentration du milieu. La FIG. 12 représente un schéma partiel de l’étape a 0 ) du procédé de la FIG. 1 consistant à couper un follicule pileux 1 au-dessus de son bulbe 31 au niveau d’une ligne de coupe 32 à l’aide d’un scalpel. La FIG. 13 montre une image acquise avec un microscope champ clair au cours d’un procédé évaluant l’impact d’un stimulus et/ou traitement affectant les propriétés mécaniques et/ou géométriques sur la pousse et/ou l’état d’au moins un poil ou cheveu. Le follicule pileux 1 a été coupé à l’aide d’un scalpel comme illustré à la FIG. 12 . Il a ensuite été disposé au sein d’un milieu de culture et incubé. On observe que dans la zone 33, correspondant à la zone de repousse après la coupe du follicule pileux 1 au niveau de la ligne de coupe 32, le poil ou cheveu repousse sans gaine conjonctive. La tige 34 du poil s’épaissit dans la zone 33, l’épaisseur E c mesurée dans la tige après la ligne de coupe 32 étant supérieure à l’épaisseur E mesurée dans la tige de la partie non coupée. La FIG. 14 présente des images d’une population de follicules pileux de référence ou témoin et d’une population de follicules pileux exposée à l’action d’un stimulus mécanique, acquises avec un imageur au cours d’un procédé mettant en évidence l’impact de ce stimulus sur la pousse et/ou l’état de ces follicules pileux. Le stimulus consiste en une photoablation de la gaine conjonctive des follicules pileux en huit points diamétralement opposés de la gaine, au-dessus du bulbe des follicules pileux. Les figures 14 a) et 14 c) représentent au jour j respectivement la population témoin et la population destinée à être exposée au stimulus juste avant que ne soit réalisée la photoablation. Les figures 14 b) et 14 d) représentent respectivement la population témoin et la population exposée au stimulus au jour j + 8. Les résultats de la population témoin peuvent être considérés comme des données de référence. En comparant les résultats de la population exposée au stimulus avec ces données, on met en évidence que la photoablation a permis de relâcher les contraintes mécaniques s’exposant sur la tige du poil ou cheveu, contribuant de ce fait à modifier la forme et la direction de pousse des poils ou cheveux. La FIG. 15 illustre un exemple de système D mettant en œuvre un procédé d’évaluation de la dynamique de pousse d’un poil ou cheveu conforme à l’invention. Le système D capture au moyen d’une unité d’imagerie 35, comme une unité de microscopie à fluorescence, notamment de microscopie multiphoton, ou une unité de microscopie champ clair ou holographique, au moins une séquence animée d’un follicule pileux 1, disposé dans un milieu de culture 5. La ou les séquences animées 9 sont conservées et traitées dans une unité informatique 36 qui envoie des données pour calcul à un processeur intégré 37a ou distant 37b, communiquant avec D par tout moyen. Les résultats des calculs sont retournés à l’unité informatique 36, qui transfère au moins une information sous la forme d’une image et/ou d’un texte à une interface 38 à destination d’un utilisateur U. L’invention n’est pas limitée aux exemples qui viennent d’être décrits. D’autres imageurs peuvent être utilisés et d’autres types d’informations peuvent être tirées des séquences animées acquises. Le porte-échantillon peut présenter une organisation différente, notamment un plus grand nombre de sillons et/ou de puits. Procédé pour évaluer ex vivo une dynamique de pousse d’au moins un poil ou cheveu humain, présentant un follicule pileux (1), le procédé comprenant les étapes consistant à : imager le follicule pileux (1), disposé dans un milieu de culture (5), avec un imageur (2, 12, 28) pendant une période d’observation suffisamment longue, avec une fréquence d’acquisition suffisamment rapide, et une résolution suffisamment fine le cas échéant, pour obtenir au moins une séquence animée (9) de la pousse du poil ou cheveu dans ce milieu de culture (5), permettant notamment d’observer des mouvements de cellules constitutives du follicule pileux, générer à partir de cette séquence (9) au moins une information relative à la dynamique de pousse du poil ou cheveu. Procédé selon la revendication précédente, comportant une étape c) où l’on compare ladite information à au moins une donnée de référence. Procédé selon l’une des revendications précédentes, l’imageur étant un microscope à fluorescence, notamment un microscope multiphoton (12). Procédé selon la revendication précédente, au moins un follicule pileux (1) étant reçu dans un porte-échantillon (13) comprenant un support définissant au moins une cavité (14) destinée à être remplie du milieu de culture (5), comportant un fond (15) et présentant au moins une partie (16) surélevée par rapport au fond et sous le niveau de remplissage maximal de la cavité, cette partie (16) présentant au moins un trou (20) de dimensions adaptées à maintenir sensiblement verticalement un poil ou cheveu humain, et au moins un sillon (19) agencé de façon à maintenir sensiblement horizontalement un poil ou cheveu humain. Procédé selon la revendication précédente, au moins un follicule pileux (1) étant disposé dans un trou (20) du porte-échantillon (13) et au moins un autre follicule pileux (1) étant disposé dans un sillon (19) du porte-échantillon (13). Procédé selon l’une quelconque des revendications 3 à 5, au moins un constituant du follicule pileux (1) étant marqué au moyen d’un marqueur d’imagerie. Procédé selon la revendication précédente, le follicule pileux (1) comprenant des cellules eucaryotes, les noyaux de ces cellules étant marqués au moyen d’un marqueur d’imagerie, notamment au moyen d’un colorant. Procédé selon la revendication précédente, au moins une information relative aux mouvements des cellules au noyau marqué lors de la pousse du poil ou cheveu étant générée à partir de la séquence animée acquise. Procédé selon l’une des revendications 1 ou 2, l’imageur étant un microscope champ clair (2). Procédé selon l’une des revendications 1 ou 2, l’imageur étant un microscope holographique (28). Procédé selon l’une des revendications 9 ou 10, la période d’observation étant supérieure ou égale à 48 heures. Procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes, le follicule pileux (1) ayant été coupé au-dessus de son bulbe (31) avant d’être disposé dans le milieu de culture (5), puis d’être imagé. Procédé selon la revendication précédente, comportant l’étape consistant à couper le follicule pileux (1) au-dessus du bulbe (31) à l’aide d’un scalpel avant de le disposer dans le milieu de culture (5) puis de l’imager. Procédé pour évaluer ex vivo l’effet d’un stimulus et/ou d’un traitement sur la dynamique de pousse d’au moins un poil ou cheveu humain, comportant les étapes consistant à : évaluer la dynamique de pousse du poil ou cheveu à l’aide du procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes, notamment pendant une période d’observation comprise entre 1 et 24 heures, répéter l’étape a) sur au moins un poil ou cheveu exposé à l’action du stimulus et/ou traitement, comparer les informations générées par les deux évaluations et générer au moins une information relative à l’action du stimulus et/ou du traitement sur la dynamique de pousse du poil ou cheveu. Procédé selon la revendication précédente, le poil ou cheveu exposé à l’étape b) à l’action du stimulus et/ou traitement étant le même poil ou cheveu que le poil ou cheveu de l’étape a). Procédé selon la revendication 14, le poil ou cheveu exposé à l’étape b) à l’action du stimulus et/ou traitement étant un autre poil ou cheveu que le poil ou cheveu de l’étape a), provenant de préférence de la même personne. Procédé pour évaluer ex vivo l’effet d’un stimulus et/ou d’un traitement sur la dynamique de pousse d’au moins un poil ou cheveu humain, dans lequel au moins deux populations d’au moins un poil ou cheveu humain sont exposées différemment au stimulus et/ou au traitement, dans lequel on compare au moins une information relative à la dynamique de pousse du poil ou cheveu, obtenue au moyen du procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 13, pour les différentes populations. Procédé selon l’une des revendications 14 à 17, le traitement étant un traitement cosmétique, notamment via l’application d’un produit favorisant la repousse ou l’embellissement de la chevelure, notamment l’épaississement des cheveux. Système (D) pour la mise en œuvre du procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes, comportant une unité d’imagerie (35) ; notamment une unité de de microscopie à fluorescence, en particulier multiphoton, une unité de microscopie champ clair ou une unité de microscopie holographique, permettant d’acquérir au moins une séquence animée d’au moins un poil ou cheveu humain, disposé dans un milieu de culture, et un moyen de calcul, notamment une unité informatique (36) capable de stocker la ou les séquences animées et/ou de les traiter au moyen d’ un processeur intégré (37a) ou de les adresser à un serveur de calcul distant (37b), ce moyen de calcul étant configuré pour générer à partir de la ou des séquences animées acquises, au moins une information relative à la dynamique de pousse du poil ou cheveu, et de présenter cette information, par exemple sous la forme de texte et/ou d’images, par exemple via une interface utilisateur (38). Porte-échantillon (13) comprenant un support définissant au moins une cavité (14) destinée à être remplie du milieu de culture (5), comportant un fond (15) et présentant au moins une partie (16) surélevée par rapport au fond et sous le niveau de remplissage maximal de la cavité, cette partie (16) présentant au moins un trou (20) de dimensions adaptées à maintenir sensiblement verticalement un poil ou cheveu humain, et au moins un sillon (19) agencé de façon à maintenir sensiblement horizontalement un poil ou cheveu humain. Porte-échantillon (13) selon la revendication précédente, étant au moins partiellement en un matériau transparent ou translucide. Porte-échantillon (13) selon l’une des deux revendications immédiatement précédentes, étant imprimé en 3D, notamment au moyen d’une résine photopolymère.