Brevet FR3163941A1 — publié le 20260102

L’invention se rapporte au domaine des procédés d’extraction de kératine. Plus particulièrement, l’invention concerne un procédé d’extraction « vert » de kératine d’origine animale à partir de laine de moutons. L’objectif de ce procédé industrialisable est de produire un hydrolysat de kératine animale, chimiquement propre, du lavage de la laine à l’hydrolysat extrait. PROCEDE D’EXTRACTION DE KERATINE ANIMALE A PARTIR DE LAINE DE MOUTONS L’invention se rapporte au domaine des procédés d’extraction de kératine. Plus particulièrement, l’invention concerne un procédé d’extraction « vert » de kératine d’origine animale à partir de laine de moutons. L’objectif de ce procédé industrialisable est de produire un hydrolysat de kératine animale, chimiquement propre, du lavage de la laine à l’hydrolysat extrait. Domaine de l’invention La laine de moutons est une bioressource peu coûteuse et facilement disponible qui contient 95 % à 98 % de protéines, ce qui en fait une source potentielle exceptionnelle de protéines pour les applications biotechnologiques, notamment du fait de sa richesse en kératine. Toutefois, la structure solide de la laine de moutons et son indigestibilité sont les principaux obstacles à la réalisation de son potentiel en tant que source de protéines. Du fait de sa nature fibreuse et de sa structure complexe qui lui confère des propriétés mécaniques remarquables, notamment sa résistance, sa flexibilité et sa durabilité, la kératine est une source protéique très intéressante. La composition en acides aminés de la kératine peut varier légèrement d’une espèce à l’autre, mais en général, elle est riche en acide-aminés non essentiels, en particulier la cystéine. Les cystéines de la kératine ont la capacité de former des ponts disulfure (S-S) entre elles ce qui confère à la kératine une structure tertiaire particulière hélicoïdale et fibreuse, qui est stable. Des procédés d’extraction de kératine à partir de matière animale sont connus de l’état de la technique. Le document EP3984372 décrit un procédé d’extraction de matière kératinique partiellement hydrolysée à partir de diverses sources de kératine animale : plumes, laine, cheveux, ongles… Le document US20190194297 décrit un procédé d’extraction de kératine à partir de poils de porc. La matière est tout d’abord lavée dans une solution contenant un détergent non ionique. Le document WO2019/209188 décrit un procédé d’extraction de kératine-béta à partir de cheveux humains grâce à l’utilisation de deux solvants : le GhCrosolan, et le CutissentialBehenly 18-MEA, composé de méthosulfate de behentrimonium, solvant chimique considéré toxique selon la classification REACH. Ce procédé se déroule sur 48h. Les caractéristiques de la matière extraite ne sont pas divulguées. Dans un contexte de valorisation de déchets, l'utilisation de produits chimiques pose problème, notamment en termes de pollution. Inconvénients de l’état de l’art L’utilisation de solvants chimiques pour nettoyer la matière en amont de l’extraction peut laisser des traces dans le produit fini et constitue un déchet qui doit être traité (pollution). De plus, l'ambition principale des protocoles d'extraction de la kératine vise à transformer efficacement les déchets organiques en ressources précieuses. Toutefois, la démarche traditionnelle, impliquant l'utilisation intensive de produits chimiques, soit pour le nettoyage initial des déchets, soit lors du processus d'extraction lui-même, soulève des contradictions évidentes avec les principes de développement durable et de valorisation des déchets. Les kératines disponibles sur le marché sont soit d’origine animale (non humaine), soit d’origine végétale. En ce qui concerne la kératine végétale, celle-ci n’existe pas à proprement parler. En effet, la kératine n’est décrite que chez les mammifères et les reptiles. La kératine dite « végétale » ou « phytokératine », est en réalité une protéine structurale d’origine végétale (ex : blé et amandes) ou une composition protéique issue de plantes. Il serait souhaitable de disposer de kératine d’origine animale de bonne qualité et d’un procédé industrialisable pour la produire en considérant une économie circulaire et un procédé 100 % propre chimiquement. Face aux problématiques exposées ci-dessus, les inventeurs ont developpé un procédé innovant qui se distingue de ceux de l’art antérieur en ce qu’il permet l’extraction de la kératine à partir de laine de moutons et la préparation d’une kératine hydrolysée. La laine de moutons élevés pour leur viande constitue une ressource abondante avec plus de 50.000 tonnes de déchets générées annuellement en France. Cette matière ne trouve actuellement pas de débouchés en local du fait de la délocalisation de l’industrie textile hors de France, et est majoritiarement incinérée, ce qui a un coût environnemental et financier. Le procédé objet de la présente invention contribue à résoudre ce problème et, ce faisant, il s’affranchit pratiquement de tout impact nocif sur l'environnement, s'alignant ainsi parfaitement sur les objectifs de préservation écologique et de valorisation des déchets. Ainsi, la présente invention concerne un procédé d’extraction de kératine animale à partir de laine de moutons défini par les étapes suivantes : Lavage de la laine par traitement microbiologique en l’absence de produit chimique, comprenant l’incubation de la laine dans un milieu de culture adapté à la croissance des microorganismes à une température comprise entre 25°C et 30°C pendant une durée de 24h à 96h ; Récupération de la laine lavée, essorage et séchage Broyage de la laine pour obtenir des morceaux d’une taille inférieure à 5 mm Mélange de la laine broyée avec de l’eau désionisée, en appliquant un ratio poids de laine/volume d’eau compris entre 0,1 et 3 kg/L Réaction d’extraction dans un réacteur thermal fermé hermétiquement en 2 étapes : 20 min à 1h30 à 140°C 30 min à 1h30 à 210°C Centrifugation à 4000 tr/min à 4°C et récupération du surnageant Ultra filtration. Filtration stérilisante à travers une membrane à pores de 0,2 µm Séchage de la kératine Le procédé développé ici offre une alternative respectueuse de l'environnement. En réduisant l'empreinte écologique et en annulant l'utilisation de substances nocives, il s'inscrit parfaitement dans une démarche durable. Avantages de l’invention Le procédé objet de l’invention permet d’extraire la kératine contenue dans la laine de moutons avec un bon rendement. Il fournit une kératine hydrolysée, disponible en grande qunatité et à un coût raisonnable de sorte à répondre au besoin du marché des ingrédients riches en protéines. Ce procédé n’utilise pas de produit chimique, ni pour le lavage de la laine, ni lors de l’étape d’extraction de la kératine. Le produit « kératine extraite » est donc dépourvu de tout résidu toxique et présente une forte naturalité. La kératine obtenue par l’invention est de haute qualité, et peut être utilisée dans des applications à haute valeur ajoutée telles que les compléments alimentaires pour l’homme (Beauté des cheveux, des ongles, ou encore de la peau) ou les animaux (Petfood) mais également en agriculture en tant que biostimulant, et dans les biomatériaux. Des études de cytotoxicité in vitro et in vivo n'ont rapporté aucun effet cytotoxique de la kératine extraite, ce qui laisse supposer qu'elle peut être utilisée comme ingrédient protéique de grande valeur qui soutient la santé. La particularité de ce procédé est de nettoyer la laine par un traitement microbiologique avant extraction de la kératine. Les conditions de ce traitement permettent un dégraissage de la laine efficace et rapide sans utilisation de produit chimique. La laine ainsi traitée peut être directement soumise à un traitement thermal permettant l’extraction de la kératine. Le procédé est rapide, l’extraction dure entre 5h et 7h, et est industrialisable. Il permet l’accès à des secteurs variés quant au choix des matières premières, comme la cosmétique, la nutraceutique et l’agriculture, mais également le secteur des biomatérieux, en particulier des bioplastiques, en forte expansion. Ce procédé apporte une solution de valorisation propre de déchets, qui sont sinon majoritairement incinérés. En France, ils représentent plus de 50.000 tonnes qui génèrent ainsi plus 100.000 tonnes de CO 2 par an. Ce procédé propre chimiquement transforme une ressource sous valorisée en un produit à haute valeur ajoutée. La présente invention met donc à disposition le premier procédé d’extraction de la kératine animale de haute qualité chimiquement propre et industrialisable incluant la préparation/lavage de la laine par un procédé microbiologique. DESCRIPTION DETAILLEE DE L’INVENTION Un premier objet de l’invention concerne un procédé d’extraction de kératine à partir de laine de moutons comprenant les étapes de : Lavage de la laine par traitement microbiologique en l’absence de produit chimique, comprenant l’incubation de la laine dans un milieu de culture adapté à la croissance des microorganismes à une température comprise entre 25°C et 30°C pendant une durée de 24h à 96h ; Récupération de la laine lavée, essorage et séchage Broyage de la laine pour obtenir des morceaux d’une taille inférieure à 5 mm Mélange de la laine broyée avec de l’eau désionisée, en appliquant un ratio poids de laine/volume d’eau compris entre 0,1 et 3 kg/L Réaction d’extraction dans un réacteur thermal fermé hermétiquement en 2 étapes : 20 min à 1h30 à 140°C 30 min à 1h30 à 210°C Centrifugation à 4000 tr/min à 4°C et récupération du surnageant Ultra filtration sur membrane spécifique Filtration stérilisante à travers une membrane à pores de 0,2 µm Séchage de la kératine La laine de moutons est couverte de matières contenues dans l’air (pollution, pollen…), les champs, mais également couverte de suint. Le suint est une substance cireuse et grasse qui provient de la graisse des moutons. Il est principalement composé de triglycérides, de cires, de stérols, d'esters, de squalène et d'autres composants lipophiles. Le suint est extrait de la laine brute lors du processus de lavage et de dégraissage de la laine. Il est nécessaire d’éliminer les matières présentes sur la laine avant de débuter le traitement d’extraction de la kératine. Dans le cadre de la présente invention, ce traitement consiste en un traitement microbiologique comprenant une incubation de la laine dans un milieu propice à la dégradation naturelle des impuretés, principalement des acides gras, triglycérides, par les microorganismes endogènes présents dans la laine (champignons, bactéries, acariens…). Afin de faciliter la délipidation et l’élimination des impuretés, l’incubation de la laine dans un milieu propice à la croissance des champignons et autres microorganismes endogènes se fait à une température comprise entre 25°C et 30°C, de préférence entre 27°C et 30°C, pendant 24h à 96h. Le milieu de croisssance adapté à la croissance des microorganismes présents dans la laine de moutons peut être tout milieu connu de l’homme du métier pour ce type culture, notamment les milieux suivants : ATCC Medium: 325 Malt Extract Agar ( Blakeslee's formula) ( utilisé sans agar ) Malt Extract......................................................20.0 g Glucose.............................................................20.0 g Peptone.............................................................1.0 g DI Water............................................................1000 ml ATCC Medium 336: Broth Medium Potato Dextrose Broth (BD 254920)................ 24.0 g DI Water....................................................... 1000.0 ml ATCC Medium: 312 Czapek's (utilisé sans agar) NaNO3 ..............................................................3.0 g K2HPO4 ............................................................1.0 g MgSO4 x 7H2O .................................................0.5 g KCl.....................................................................0.5 g FeSO4 x 7H2O...................................................0.01 g Water................................................................900 ml D’autres milieux, tels que le milieu de Sabouraud (Peptone 10g, glucose massé 20g , agar-agar 15g eaux distillées, 1L vitamines et facteurs de croissance, pH 6), un milieu aqueux à base de liqueur de maïs sont également appropriés. Ils contiennent les nutriments nécessaires à la pousse des microorganismes présents dans la laine (eau, glucose, acides aminés et vitamines). La laine est ensuite lavée à l’eau désionisée entre 1 et 3 fois postérieurement à la dite étape de lavage microbiologique. Ce rinçage peut se faire sous agitation orbitalaire douce. De préférence, le lavage comprend plusieurs étapes successives, afin d’éliminer les substances lipidiques et les impuretés et les contaminants de toute sorte qui pourraient affecter la qualité du produit final. L’eau utilisée pour ces lavages est préférentiellement de l’eau désionisée (à pH environ 7). Dans un premier mode de réalisation, le lavage de la laine à l’eau comprend au moins un cycle de lavage par trempage dans de l’eau désionisée pendant 30’ à 1h30 à une température comprise entre 45 et 60°C suivi d’un rinçage à l’eau désionisée à une température comprise entre 45 et 60°C. Le nombre de cycles de lavages peut être 2, 3 ou plus selon le niveau de salissure de la laine. Dans un deuxième mode de réalisation, le lavage de la laine à l’eau comprend trois cycles de lavage par trempage dans de l’eau désionisée pendant 30’ à 1h30 à une température comprise entre 45 et 60°C suivi d’un rinçage à l’eau désionisée à une température comprise entre 45 et 60°C. Après ce traitement, la laine peut être à nouveau rincés à l’eau, 1 à 3 fois. Après avoir été lavée, la laine est récupérée, par exemple par essorage (centrifugation), puis séchée. Le séchage peut être réalisé à température ambiante ou bien en appliquant une chaleur douce (autour de 45°C) si l’on souhaite réduire le temps de séchage. La laine séchée est ensuite broyée, par exemple à l’aide d’un broyeur à couteaux mécanique. Les morceaux de laine après broyage doivent être assez fins, c’est-à-dire d’une taille inférieure à 5 mm, de l’ordre de 0,1 à 5 mm, de préférence entre 0,5 et 2 mm, autour de 1 mm. En vue de l’extraction, la laine broyée est mélangée avec de l’eau désionisée. Le ratio poids de laine/volume d’eau compris entre 0,1 et 3 kg/L. Dans un mode de réalisation préféré, il est compris entre 0,5 et 3 kg/L, voire entre 0,8 et 2,5 kg/L, par exemple en mélangeant 1kg de laine dans 2L d’eau. Ce mélange peut être fait directement dans le réacteur où sera effectuée l’extraction. La densité de la matière est assez élevée sans que l’efficacité du procédé en soit affectée. Ainsi, le procédé permet un bon rendement d’extraction, ce qui permet de réduire les coûts énergétiques. L’extraction est réalisée dans un réacteur thermal fermé hermétiquement afin que la montée en température s’accompagne d’une montée en pression qui contribue à l’efficacité de l’extraction. La réaction d’hydrolyse se décompose en 2 étapes, à savoir : 20 min à 1h30 à 140°C 30 min à 1h30 à 210°C L’enchaînement de ces deux étapes de montée en températures, permettant une extraction très efficace de la kératine sous une forme hydrolysée. Cette hydrolyse est partielle. Dans un mode de réalisation préféré de l’invention, la réaction d’hydrolyse consiste en un traitement thermique avec les 2 épates suivantes : 30 min à 140°C puis 1h à 210°C. L’extrait présente une concentration élevée en kératine : 139 mg/mL. Ceci se traduit par un aminogramme très riche, tel que présenté à la FIG. 1 (et commenté ci-après). La pression dans le réacteur est très haute, avec un équivalent de 3,6 bars à 140°C en début de procédé et allant au moins jusqu’à 16 bars lorsque la température atteint les 210°C. Le produit de la réaction d’extraction est centrifugé à 4000 tr/min pendant une durée pouvant aller de 10 à 30 min, par exemple pendant 15 min, à 4°C. Le surnageant contenant la kératine est récupéré. L’étape de centrifugation peut être répétée pour s’assurer que tous les débris ont bien été éliminés. Le surnageant est ensuite purifié par ultra filtration puis filtré afin d’éliminer les contaminants biologiques tels que les bactéries, les champignons et les levures. Afin que la filtration soit stérilisante, le surnageant contenant la kératine est filtré à travers une membrane dont les pores ont un diamètre de 0,22 μm ou moins. La kératine ainsi récupérée est séchée. Ce séchage peut être réalisé par toute technique adaptée connue de l’homme du métier telle que la lyophilisation, le spraydryer,… La kératine extraite par le procédé selon l’invention présente un aminogramme riche, ce qui est un marqueur de sa qualité. La FIG. 1 présente cet aminogramme sur lequel on voit la présence de nombreux acides aminés. La présente invention sera mieux comprise à la lecture des exemples qui suivent, fournis à titre d’illustration et ne devant en aucun cas être considérés comme limitant la portée de la présente invention. DESCRIPTION DES FIGURES FIG. 1 FIG. 1 : Aminogramme de la kératine de laine de moutons extraite selon le procédé selon l’invention. FIG. 2 FIG. 2 : Spectre MALDI d’un échantillon du produit extrait de la laine de mouton. EXEMPLES EXEMPLE 1 - Mise en œuvre du procédé d’extraction selon l’invention 1- Lavage: La laine de moutons a été obtenue auprès d’éleveurs locaux. Afin d’éliminer toutes les saletés dont le suint, la toison de laine 0,1 kg a été mise en incubation sous agitation orbitalaire à une température comprise entre 27 à 30°C dans 0,5 L dans un milieu de composition suivante préalablement autoclavé à 120 °C pendant 20 minutes. Le milieu de culture adapté à la croissance des microorganismes endogènes de la laine (champignons, batéries, acariens….) est ici à base de liqueur d’extrait de mais, de glucose et de minéraux classiques. Préparation de 1 L de milieu de culture à base de liqueur de maïs Corn-steep liquide (ROQUETTE FRERES solulys L48L) ou atomisé 10,0 g ou 5,0 g MgSO 4 , 7H 2 O 0,5 g NaNO 3 2,0 g FeSO4, 7H 2 O 0,02 g KCl 0,5 g Glucose 30,0 g K 2 HPO 4 0,8 g KH 2 PO 4 0,4 g Tableau 1 : Milieu d’incubation de la laine de moutons La laine et incubée à 27°C sous agitation (250 tours /min pendant 48h). La laine est ensuite récupérée puis lavée 3 fois (1h/lavage) avec de l’eau desionisée (pH environ 7) à température ambiante dans des bacs en inox sous agitation orbitalaire douce pour éliminer toute trace des impuretés. Une simple filtration ou essorage rapide de 20 minutes est ensuite effectué. Une étape de désinfection qui consiste à tremper l’échantillon 3x (1h à 55° C), alternés de 3 lavages avec H 2 O propre et desionisée (pH environ 7) à 55°C est ensuite réalisée suivi de 3 lavages avec de l’eau desionisée (10 min/ lavage sous simple agitation). La laine est ensuite essorée et séchée pendant deux jours à l’air libre sur des plateaux inoxydables avec simple agitation mécanique puis 3 fois par jour /3 h dans un four à air pulsé à 45°C permet de récupérer de la laine sèche qui est ensuite broyée en fins morceaux (± 1mm) à l’aide d’un broyeur à couteaux mécanique. Ce matériau a été ensuite utilisé comme matière première pour l’extraction de la kératine. 2- Extraction: L’extraction de kératine a été réalisée dans un réacteur hermétique de 20 litres. La proportion laine-eau désionisée utilisée est de 2 kg de laine de moutons pour 3,2 kg d’eau pure. Le réacteur thermal fermé est équipé d’une douce agitation continue et garde une très haute pression. Aucun produit chimique n'a été utilisé pour la réaction et l’agitateur est fixé à l’intérieur permettant une bonne agitation interne de la solution au cours de l’extraction. Les paliers de températures suivants ont été appliqués et respectés : 30 min à 140°C, puis 60 min à 210°C. La durée totale du procédé d’extraction est d’environ 7 heures comprenant les phases de chauffe, maintiens en température et refroidissement (4h). Le produit extrait est filtré sur une membrane de 200 μm. L’ensemble de la matière est centrifugée deux fois à 4000 tr/min pendant 30 min à 4°C (pour enlever encore les impuretés). On réalise ensuite une UltraFiltration : Une membrane sanitaire UF NFS éte installée sur le skid TIA UF/MF/NF/OI – 20E028. La membrane a éte lavée avec une solution d’hydroxyde de sodium 4% (pH = 10) et la température a éte surveillée en permanence pour s’assurer qu’elle ne dépassait pas 50 °C. Ensuite, la membrane a éte rincée à l’eau distillée (en circulation dans le Skid de microfiltration) jusqu’a ce que le perméat et le rétentat soient neutralisés pour atteindre un pH = 7. Le réservoir d’alimentation a éte vidé. La solution a éte versée dans la cuve d'alimentation. Le débit d’alimentation a éte fixé à 800 L/h avec une pression de recirculation comprise entre 10 et 36 bar. Une fois ceux-ci ajustés, la collecte du perméat a commence. Seul le surnageant est récupéré et filtré via des filtres spécifiques. « Ref : MPGP002A1 Description : 0.22 μm membrane filter for particulate and bacteria-free water at the point of dispense for the Milli-Q® IQ, IX and EQ 7 series water purification systems ». Il s’agit d’une filtration stérilisante de l’extrait liquide (surnageant) à travers une membrane à pores de 0,2 µm permettant d’éliminer efficacement les contaminants biologiques tels que les bactéries, les moisissures et les levures. Au final un facteur de concentration volumique d’environ 30% a été atteint pour un rendement d’extraction de 35%. La solution résultante a ensuite été séchée au spray dryer pour obtenir une poudre kératinique de granulométrie homogène. EXEMPLE 2 : Caractérisation de la kératine extraite A - Analyse de l’aminogramme Un aminogramme a été réalisé afin d’obtenir le profil d’acides aminés (hydrolyse acide ou oxydante pour MET et Cystine) par chromatographie ionique/UV sur un échantillon séché. La chromatographie ionique a été utilisée pour séparer chaque acide aminé, suivie d’une détection par réaction en post-colonne. L’échantillon a été hydrolysé avant l’analyse, utilisant de l’HCl pendant 24h à 110°C. Le résultat de l’aminogramme est représenté par la FIG. 1 . On note la présence de 15 acides aminés. Les acides aminés les plus représentés et présents sont l’acide glutamique, l’alanine, la glycine, la leucine, la proline ou encore la valine. B - Analyse par gel SDS-PAGE: L’analyse par électrophorèse sur gel polyacrylamide (gel SDS-PAGE) a été réalisée sur un gel Mini-PROTEAN TGX 4-20% gel (12 puits, 8,6 x 6,7cm, Biorad). Les échantillons ont été préparés selon la méthode de Laemmli 4x (250mM Tris-HCl, pH 6,8, 4% SDS, 40% (w/v) glycérol, 0,02% bleu de bromophénol) en présence de β-mercaptoéthanol. Les échantillons à analyser ont été dilués afin d’introduire respectivement 10, 15, 20 et 25 mg/puits. Le standard d’identification des masses moléculaires utilisé est le « Precision Plus Protein Standard » (ref Biorad, #161-0373) contenant des protéines de 10 à 250 kDa. La migration a été effectuée à 250 V, puis la coloration au bleu de Coomassie. Les résultats préliminaires montrent des bandes représentatives de masses moléculaires de protéines conformes à celles attendues ; ils sont en cours de confirmation. C - C onfirmation de la nature du produit extrait par spectrométrie de masse /MALDI-TOF L'analyse MALDI-TOF est une technique permettant de déterminer la masse des protéines, peptides, oligonucléotides, polysaccharides et d'autres molécules d'un échantillon avec précision. Cette technique permet en effet de déterminer la masse exacte de molécules inconnues. Elle utilise un laser pour ioniser ces composés qui sont placés sur un type spécial de plaque cible recouverte d'un matériau matriciel. Les ions résultants sont ensuite accélérés dans un tube à temps de vol et analysés pour obtenir des spectres de masse qui peuvent être utilisés pour identifier les molécules présentes dans l'échantillon. Les caractéristiques de l’appareil utilisé sont les suivantes : Caractéristiques Instrumentales Maldi-Tof Autoflex Bruker / UltraFleXtreme BRUKER smartbeanTM -II laser, 355 nm Fonctionnement reflectron et linéaire, mode positif Voltage d'accélération 20kV Source à extraction retardée Conditions Opératoires Echantillon L'échantillon est mis en solution dans de l'eau 0.1% TFA Matrice 10 mg/ml Dépôt 1 µl d'un mélange volumique Matrice:échantillon:adduit 10:1 ou 10:10 Tableau 2 : Caractéristiques de l’appareil utilisé pour spectrométrie de masse/MALDI-TOF. Les échantillons ont été dilués 100 fois et appliqués dans une matrice d’acide α-cyano-4-hydroxycinnamique avec un dépôt volumique matrice/échantillon de 10:10. Les résultats préliminaires montrent plusieurs signaux visibles. L’analyse MALDI, représentée à la FIG. 2 , a permis de mettre en évidence pour les deux échantillons des masses dans une gamme inférieure à 10 kDa, le pic le plus intense étant détecté à 4372 Da et la masse la plus élevée à 8706 Da. Aucune masse n’a été détectée dans la gamme 10 kDa-200 kDa ; les pics détectés sortent à 4372.5 Da, 5600 Da, 7663.87 Da et 8706.7 Da). Ceci peut être corrélé à une distribution des poids moléculaires des peptides et confirme la présence de kératine hydrolysée. Ces analyses permettent de confirmer la présence de peptides de poids moléculaires variés, en taille et en structure, allant de petits oligopeptides à des chaines plus longues, principalement entre 3 et 14 kDa (kilodaltons). Procédé d’extraction de kératine à partir de laine de moutons comprenant les étapes de : Lavage de la laine par traitement microbiologique en l’absence de produit chimique, comprenant l’incubation de la laine dans un milieu de culture adapté à la croissance des microorganismes à une température comprise entre 25°C et 30°C pendant une durée de 24h à 96h ; Récupération de la laine et séchage Broyage de la laine pour obtenir des morceaux d’une taille inférieure à 5 mm Mélange de la laine avec de l’eau désionisée, en appliquant un ratio poids de laine/volume d’eau compris entre 0,1 et 3 kg/L Réaction d’extraction dans un réacteur thermal fermé hermétiquement en 2 étapes : 20 min à 1h30 à 140°C 30 min à 1h30 à 210°C Centrifugation à 4000 tr/min à 4°C et récupération du surnageant Ultra filtration sur membrane spécifique Filtration stérilisante à travers une membrane à pores de 0,2 µm Séchage de la kératine Procédé selon la revendication 1 dans lequel ladite étape de lavage de la laine à l’eau comprend au moins 2 cycles de lavage par trempage dans de l’eau désionisée pendant 30’ à 1h30 à une température comprise entre 45°C et 60°C suivi d’un rinçage à l’eau désionisée à une température comprise entre 45 et 60°C. Procédé selon l’une des revendications 1 ou 2 dans lequel de la laine est rincée à l’eau désionisée entre 1 et 3 fois postérieurement à ladite étape de lavage. Procédé selon l’une des revendications précédentes dans lequel ratio poids de laine/volume d’eau compris entre 0,8 et 2,5 kg/L. Procédé selon l’une des revendications précédentes dans lequel les étapes de la réaction d’extraction sont réalisées dans les conditions suivantes : 30 min à 140°C puis 1h à 210°C. Procédé selon l’une des revendications précédentes dans lequel ledit séchage est réalisé par lyophilisation, ou spraydryer.