Brevet FR3157186A1 — publié le 20250627

L’invention concerne un procédé de préparation d’un hydrogel de polymère réticulé par ligation chimique native, le procédé mettant en œuvre un agent réticulant comprenant au moins deux groupes thiols, chacun des groupes thiols étant en bêta d’une amine primaire, et un polymère comprenant des groupes carboxyliques, une partie des groupes carboxyliques étant fonctionnalisée avec des groupes thioesters, le procédé comprenant au moins les étapes de: a) mettre en contact, dans une solution aqueuse, à un pH acide d’au moins 4,0, le polymère et l’agent réticulant, b) augmenter le pH d’au moins 0,5 unité, le pH étant au moins supérieur à 5,5 et n’excédant pas 8,0, et c) obtenir un hydrogel de polymère réticulé. L’invention concerne également un hydrogel obtenable par un tel procédé, et la mise en œuvre d’un tel hydrogel à des fins cosmétiques ou thérapeutique. Procédé de réticulation d’hydrogels de polysaccharides par ligation chimique native, les hydrogels obtenus par ce procédé, et leurs utilisations L’invention concerne les procédés de préparation d’ hydrogels de polysaccharides réticulés, ainsi que les hydrogels obtenus par ces procédés et leurs utilisations cosmétiques ou médicales. Les hydrogels de polysaccharides réticulés, tels que les hydrogels de glycosaminoglycanes réticulés, comme l’acide hyaluronique, sont largement utilisés dans différents domaines comme la cosmétique et la chirurgie réparatrice, à titre d’agent de comblement des tissus mous, en thérapeutique, comme agent pour la délivrance de médicaments, en ingénierie tissulaire, comme support pour la préparation et la croissance de tissus biologiques, ou encore en ophtalmologie, par exemple pour les injections intravitréennes, le traitement de la sécheresse oculaire et les lentilles de contact. Les hydrogels de polysaccharides, tels que les hydrogels d’acide hyaluronique, peuvent être rapidement dégradés après injection dans les tissus cutanés, notamment du fait de dégradations enzymatiques et/ou chimiques. Pour ralentir la dégradation in vivo des hydrogels de polysaccharide (et donc augmenter leur rémanence après injection), ajuster leurs propriétés viscoélastiques, améliorer la résistance à la stérilisation, notamment à la chaleur, et augmenter leur stabilité pendant le stockage, il a été proposé de réticuler les polysaccharides. Les hydrogels de polysaccharides sont presque exclusivement réticulés par la chimie des époxydes, tels que l’éther de diglycidyl 1,4-butanediol (1,4-butanediol diglycidyl ether - BDDE), des aldéhydes ou des polyvinylsulfones, tels que le divinylsulfone (DVS). La chimie des époxydes implique la mise en œuvre de milieux alcalins et de température parfois élevées (supérieures à 40°C) susceptibles d’altérer la structure et les propriétés des polysaccharides, notamment des glycosaminoglycanes tels que l’acide hyaluronique. Il peut en résulter la production de composés de poids moléculaires réduits et potentiellement inflammatoires. De plus les agents réticulants, tels que le BDDE, doivent être éliminés au moyen de procédés de purification spécifiques (permettant de réduire sa teneur à 2 ppm ou moins), industriellement longs, complexes et coûteux. WO 2019/238953 A1 décrit un hydrogel d’acide hyaluronique réticulé obtenu par réticulation d’un acide hyaluronique, dont les groupes carboxyliques ont été fonctionnalisés avec des groupes thiol. La réticulation effectuée en présence d’oxygène conduit à la formation de ponts disulfures. WO 2021/124147 A1 décrit un hydrogel d’acide hyaluronique réticulé obtenu par réticulation d’un acide hyaluronique, dont les groupes carboxyliques ont été fonctionnalisés avec le chlorure de 4-(6-dimethoxy-1,3,5-triazin-2-yl)-4methyl (DMTMM). La réticulation effectuée en présence d’acides aminés de type arginine ou ornithine, utilisés à titre d’agent réticulant, conduit à la formation de liaisons amides entre l’acide hyaluronique et les agents réticulants. Zhang et al. ( Chem Commun , 2015, 51(47) : 9662-9665) décrit la réticulation d’un hydrogel d’acide hyaluronique dont les groupes carboxyliques ont été fonctionnalisés par des groupes thiol, en présence d’un agent réticulant portant des groupes thioester (PEG-thioester). La réticulation est réalisée par ligation chimique native. Le procédé décrit implique une chimie complexe de modification d’acide hyaluronique requérant jusqu’à 9 étapes de synthèse, ce qui rend difficilement industrialisable ce procédé. De plus, l’étape de réticulation met en œuvre le BDDE. Il existe donc un besoin de disposer de nouveaux procédés de réticulation d’hydrogels de polysaccharides, notamment d’hydrogels de glycosaminoglycanes, notamment de l’acide hyaluronique, et de leurs sels biologiquement acceptables. Il existe donc un besoin de disposer de nouveaux procédés de réticulation d’hydrogels de polysaccharides qui soient doux et ne dénaturent pas les polysaccharides à réticuler. Il existe encore un besoin de disposer de procédés de réticulation d’hydrogels de polysaccharides ne mettant pas en œuvre d’agents réticulants de type époxydes, aldéhydes ou polyvinylsulfones. Il existe encore un besoin de disposer d’un procédé de réticulation d’hydrogels de polysaccharides permettant la réticulation par ligation chimique native requérant peu d’étapes. Il existe encore un besoin de disposer d’un hydrogel de polysaccharides réticulés dont la réticulation n’a pas été opérée par des agents réticulants de type époxydes, aldéhydes ou polyvinylsulfones. Il existe un besoin de disposer d’agents réticulants davantage biocompatibles et métabolisables afin de faciliter leur élimination par des procédés de purification simples et peu coûteux. Il existe un besoin de disposer de polysaccharides fonctionnalisés utilisables dans des procédés de réticulation par ligation chimique native. Il existe encore un besoin de disposer d’un hydrogel de polysaccharides réticulés dont la réticulation a été opérée par ligation chimique native. Il existe encore un besoin de disposer d’un hydrogel de polysaccharide réticulé dont la biocompatibilité avec les tissus corporels d’implantation ou d’injection est améliorée. Il existe encore un besoin de disposer d’un hydrogel de polysaccharide réticulé dont la rémanence dans les tissus corporels d’implantation ou d’injection est améliorée. La présente invention a pour objet de satisfaire à tout ou partie de ces besoins. Selon un de ses premiers objets, la présente invention concerne un procédé de préparation d’un hydrogel de polymère réticulé par ligation chimique native, le procédé mettant en œuvre un polymère fonctionnalisé non-réticulé et un agent réticulant, l’agent réticulant comprenant au moins deux groupes thiols, chacun des groupes thiols étant en bêta d’une amine primaire, et le polymère comprenant des groupes carboxyliques, une partie des groupes carboxyliques étant fonctionnalisée avec des groupes thioesters, le procédé comprenant au moins les étapes consistant à : a) mettre en contact, dans une solution aqueuse, à un pH acide d’au moins environ 4,0, ledit polymère fonctionnalisé non-réticulé et ledit agent réticulant, b) augmenter le pH du mélange obtenu à l’étape a) d’au moins 0,5 unité, le pH étant au moins supérieur à environ 5,5 et n’excédant pas 8,0, et c) obtenir un hydrogel de polymère polysaccharide réticulé. Comme illustré par les exemples donnés ci-après, les inventeurs ont développé une nouvelle méthode de réticulation des hydrogels de polysaccharides reposant sur la formation de ligation chimique native ou « Native Chemical Ligation » (NCL). Comme démontré par les exemples, le procédé de réticulation par ligation chimique native est un procédé de réticulation doux, faisant intervenir des agents réticulants davantage biocompatibles et métabolisables, réduisant ainsi les risques de dénaturation des polysaccharides et la formations de produits secondaires potentiellement toxiques ou immunogènes. De plus le caractère biocompatible et métabolisable des agents réticulants utilisés permet de réduire les risques de toxicité, et facilite leur élimination par des procédés de purifications simples et peu coûteux. Selon un mode de réalisation, les groupes thiol de l’agent réticulant proviennent de restes cystéine, les restes cystéines étant reliés entre eux par un espaceur. Selon un mode de réalisation, l’espaceur est de formule générale (I) : @-A-R 1 -B-@ (I) dans laquelle @- et -@ représentent des liaisons avec les groupes acyl des restes cystéine, et R 1 représente un reste choisi parmi une chaîne hydrocarboné en C 1 -C 10 , saturée ou insaturée, optionnellement interrompue par un plusieurs O, NR 2 , ou S, et optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -OH, -NH 2 , -NHR 2 , -SH, -COOR 2 et -CONHR 2 , dans lequel R 2 représente H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, A et B, identiques ou différents, représentent, NR 3 , O ou S, avec R 3 représentant H ou un alkyl en C 1 -C 6 . Selon un mode de réalisation, un agent réticulant peut être représenté par la formule (Ia) : Cys-A-R 1 -B-Cys (Ia) dans laquelle Cys représente un reste cystéine, et R 1 représente un reste choisi parmi une chaîne hydrocarboné en C 1 -C 10 , saturée ou insaturée, optionnellement interrompue par un plusieurs O, NR 2 , ou S, et optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -OR 2 , -NHR 2 , -SR 2 , -COOR 2 et -CONHR 2 , dans lequel R 2 représente H, une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, A et B, identiques ou différents, représentent, NR 3 , O ou S, avec R 3 représentant H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée. Selon un mode de réalisation, un agent réticulant peut être représenté par la formule (II) : (II). Selon un mode de réalisation, au moins environ 0,5% des groupes carboxyliques du polymère sont fonctionnalisés par des groupes thioesters. Selon un mode de réalisation, la proportion de groupes carboxyliques fonctionnalisés avec un groupe thioester varie d’environ 0,5% à environ 50%. Selon un mode de réalisation, les groupes carboxyliques du polymère sont fonctionnalisés avec un composé fonctionnalisant à groupe thioester de formule générale (III) : NH 2 -R 4 -C(O)-S-R 5 (III) dans laquelle R 4 représente une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -O-C(O)-R 6 , -C(O)-O-R 6 , -O-C(O)-NHR 6 , -S-R 6 , -S-C(O)OR 6 , -NHR 6 , -NH-C(O)R 6 , -NH-C(O)OR 6 , -C(O)NH-C(O)R 6 , -NH-C(NHR 6 )=NR 6 , -NH-C(NH-C(O)R 6 )=NH-C(O)R 7 , -Phe, -Phe-OC(O)R 6 , et R 5 représente une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -O-C(O)-R 6 , -C(O)-O-R 6 , -NHR 6 , -NH-C(O)R 6 , -C(O)NH-C(O)R 6 , -C(O)NH-COOR 6 , -NHC(O)(CH 2 ) 2 CH(NHR 6 )C(O)OR 7 , -SOR 6 , S(O)OR 6 , -Phe, -Phe-OC(O)R 6 , avec R 6 et R 7 représentant, indifféremment, H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, optionnellement substitué par Phe. Selon un mode de réalisation, le mélange obtenu à l’étape a) est maintenu sous agitation pendant une durée variant d’environ 5 minutes à environ 1 heure. Selon un mode de réalisation, le mélange obtenu à l’étape a) est maintenu sous agitation pendant une durée variant d’environ 5 minutes à environ 20 minutes. Selon un mode de réalisation, l’étape a) est réalisée sous atmosphère inerte, par exemple une atmosphère d’azote, d’argon ou de CO 2 . Selon un mode de réalisation, à l’étape b), le pH est ajusté à un pH d’environ 6,0 à environ 8,0, ou d’environ de 6,2 à environ 7,8, ou d’environ 6,4 à environ 7,6, ou d’environ 6,8 à environ 7,4, ou est d’environ 7,0. Selon un mode de réalisation, à l’étape b), le pH est ajusté à un pH d’environ 6,5 à environ 8,0, ou d’environ 6,7 à environ 7,8, ou d’environ 6,8 à environ 7,6, ou d’environ 6,8 à environ 7,4, ou est d’environ 7,0 Selon un mode de réalisation, l’étape b) comprend une première séquence b1) et une deuxième séquence b2), - la séquence b1) comprenant une augmentation du pH du mélange obtenu à l’étape a) d’au moins 0,5 unité, le pH étant au moins supérieur à environ 5,5 et n’excédant pas 8,0, pendant une durée d’environ 2 min. à environ 1 heure, et - la séquence b2) comprenant le maintien de la solution obtenue à l’issue de la séquence b1), sans agitation, pendant une durée d’environ 15 min. à environ 30h. La séquence b2) comprend le maintien du pH au pH obtenu à l’étape b1) (maintien du pH constant). Selon un de ses objets, l’invention concerne un procédé de préparation d’un hydrogel de polymère réticulé par ligation chimique native, le procédé mettant en œuvre un premier polymère et un deuxième polymère non-réticulés, le premier polymère comprenant au moins un groupe carboxylique, le groupe carboxylique étant fonctionnalisé avec un groupe thioester, et le deuxième polymère étant fonctionnalisé avec au moins un groupe thiol, le groupe thiol étant en bêta d’un d’une amine primaire, le procédé comprenant au moins les étapes consistant à : a) mettre en contact le premier et le deuxième polymères dans une solution aqueuse, la solution aqueuse étant à un pH acide d’au moins environ 4,0, b) augmenter le pH du mélange obtenu à l’étape a) d’au moins 0,5 unité, le pH étant au moins supérieur à environ 5,5 et n’excédant pas 8,0, et c) obtenir un hydrogel de polymère réticulé. Selon un de ses objets, l’invention concerne un procédé de préparation d’un hydrogel de polymère réticulé par ligation chimique native, le procédé mettant en œuvre un premier polymère et un deuxième polymère non-réticulés, le premier polymère comprenant des groupes carboxyliques, une partie des groupes carboxyliques étant fonctionnalisée avec des groupes thioesters, et le deuxième polymère étant fonctionnalisé avec au moins deux groupes thiol, les groupes thiols étant en bêta d’un d’une amine primaire, le procédé comprenant au moins les étapes consistant à : a) mettre en contact le premier et le deuxième polymères dans une solution aqueuse, la solution aqueuse étant à un pH acide d’au moins environ 4,0, b) augmenter le pH du mélange obtenu à l’étape a) d’au moins 0,5 unité, le pH étant au moins supérieur à environ 5,5 et n’excédant pas 8,0, et c) obtenir un hydrogel de polymère réticulé. Le premier polymère comprenant au moins un groupe carboxylique fonctionnalisé avec un groupe thioester peut être comme décrit précédemment. Dans ce procédé, le groupe thiol du deuxième polymère réagit avec le groupe thioester du premier polymère, permettant l’obtention d’un nœud de réticulation. Les étapes a), b) et c) de ce mode de réalisation peuvent être réalisées comme décrit précédemment à l’exception du fait que l’agent réticulant est remplacé par le second polymère fonctionnalisé avec au moins deux groupes thiols. Selon un mode de réalisation, un procédé tel que décrit ici peut comprendre une étape additionnelle de dialyse de l’hydrogel de polymère réticulé contre un tampon, par exemple un tampon phosphate. Selon un mode de réalisation, un procédé tel que décrit ici peut comprendre une étape additionnelle d’addition d’une solution aqueuse de polymère non-réticulé à l’hydrogel de polymère réticulé. Selon un mode de réalisation, le procédé peut comprendre une étape additionnelle d’addition d’au moins un agent actif. Selon un mode de réalisation, le polymère est un polysaccharide ou de ses sels biologiquement acceptables. Selon un mode de réalisation, le polysaccharide est l’acide hyaluronique, ou un de ses sels biologiquement acceptables. Selon un mode de réalisation, le polysaccharide est le hyaluronate de sodium. Selon un de ses objets, l’invention concerne un hydrogel obtenable selon un procédé tel que décrit ici. Selon un de ses objets, l’invention concerne une composition stérile injectable comprenant un hydrogel tel que décrit ici. Selon un de ses objets, l’invention concerne une utilisation cosmétique d’un hydrogel ou d’une composition tels que décrits ici comme agent de comblement des tissus mous ou pour l’augmentation des tissus mous Selon un de ses objets, l’invention concerne un hydrogel ou une composition tels que décrits ici pour une utilisation en tant que médicament ou dispositif médical. Selon un de ses objets, l’invention concerne un hydrogel ou une composition tels que décrits ici, ledit hydrogel ou ladite composition comprenant en outre au moins un agent actif, pour une utilisation en tant que médicament ou dispositif médical. Selon un de ses objets, l’invention concerne un polymère comprenant des groupes carboxyliques dans lequel une partie des groupes carboxyliques est fonctionnalisée avec des groupes thioesters, le polymère étant représenté par la formule générale (IV) : (IV) dans laquelle n représente de préférence la proportion de groupes carboxyliques dudit polymère fonctionnalisés avec un groupe thioester et varie d’environ 0,5% à environ 50% et Y représente un reste de polymère comprenant des groupes carboxyliques. Selon un de ses objets, l’invention concerne un agent réticulant comprenant au moins deux groupes thiol, chacun des groupes thiol étant en bêta d’une amine primaire. Selon un mode de réalisation, un agent réticulant peut être de formule générale (Ia) : Cys-A-R 1 -B-Cys (Ia) dans laquelle Cys représente un reste cystéine, R 1 représente un reste choisi parmi une chaîne hydrocarboné en C 1 -C 10 , saturée ou insaturée, optionnellement interrompue par un plusieurs O, NR 2 , ou S, et optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -OR 2 , -NHR 2 , -SR 2 , -COOR 2 et -CONHR 2 , dans lequel R 2 représente H, une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée ; un reste de polyol ; un reste d’acide aminée ; un reste peptidique ; un reste de saccharide aminé ; un reste de polyamine ; et un reste PEG diamine, A et B, identiques ou différents, représentent, NR 3 , O ou S, avec R 3 représentant H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée. Selon un mode de réalisation, un agent réticulant peut être représenté par la formule (II) : (II) Selon un de ses objets, l’invention concerne une utilisation d’un agent réticulant tel que décrit ici, pour réticuler entre eux deux polymères comprenant des groupes carboxyliques, une partie des groupes carboxyliques étant fonctionnalisée avec des groupes thioesters. FIG. 1 est un représentation schématique d’un procédé de réticulation décrit ici. L’étape 1 représente la fonctionnalisation d’un polymère comprenant des groupes carboxyliques, par exemple un acide hyaluronique, avec des groupes thioesters. L’étape 2 représente la réticulation du polymère fonctionnalisé avec un agent réticulant comprenant deux cystéines reliées par un espaceur. FIG. 2 est un représentation schématique d’un procédé de réticulation décrit ici. L’étape 1 représente la fonctionnalisation d’un polymère comprenant des groupes carboxyliques, par exemple un acide hyaluronique, avec des groupes thioesters. L’étape 2 représente la fonctionnalisation d’un polymère, par exemple un acide hyaluronique, avec des groupes thiols, apportés par des restes cystéine. L’étape 3 représente la réticulation des polymères fonctionnalisés aux étapes 1 et 2. Description détaillée Définitions Sauf indication contraire, les termes scientifiques et techniques utilisés dans le présent document ont la signification communément admise dans le domaine auquel il se rattache. Des exemples de méthodes et de matériaux sont décrits dans le présent document, mais des méthodes et matériaux similaires ou équivalents peuvent également être utilisés dans la mise en œuvre de la présente divulgation. En cas de conflit, la présente description prévaudra. Certaines caractéristiques de l’invention, qui sont, pour plus de clarté, décrites dans le contexte de modes de réalisation distincts, peuvent également être fournies en combinaison dans un seul mode de réalisation. Inversement, diverses caractéristiques de l’invention, qui sont, par souci de brièveté, décrites dans le cadre d’un seul mode de réalisation, peuvent également être mises en œuvre séparément ou dans toute sous-combinaison appropriée. Les plages numériques incluent tous les nombres définissant la plage. Chaque limitation numérique maximale donnée tout au long de la description inclut toute limitation numérique inférieure, comme si ces limitations numériques inférieures étaient expressément écrites. Chaque limitation numérique minimale donnée tout au long de la description inclut toute limitation numérique supérieure, comme si ces limitations numériques plus élevées étaient expressément écrites dans les présentes. Chaque plage numérique donnée tout au long de la description inclut toute plage numérique plus étroite qui se situe dans une plage numérique aussi large, comme si ces plages numériques plus étroites étaient toutes expressément écrites ici. Toutes les listes d’articles, telles que, par exemple, les listes d’ingrédients, sont destinées et doivent être interprétées comme des groupes de Markush. Ainsi, toutes les listes peuvent être lues et interprétées comme des éléments « sélectionnés dans le groupe constitué par la liste des articles » et des combinaisons et mélanges de ceux-ci. Dans la description, les modes de réalisations décrits ici avec les termes « ayant » ou « comprenant » incluent les modes de réalisations décrits avec les termes « comprenant uniquement », « consistant en » et/ou « consistant essentiellement en ». L’expression « consistant en » implique l’inclusion des éléments énoncés à l’exclusion de tout autre élément. L’expression « consistant essentiellement en » implique l’inclusion des éléments énoncés, et éventuellement d’autres éléments lorsque les autres éléments n’affectent pas de façon significative la ou les caractéristiques fondamentales de la divulgation. En outre, l’expression « et/ou » doit être considéré comme une divulgation spécifique de chacune des deux caractéristiques avec ou sans l’autre. Ainsi, l’expression « et/ou » utilisé dans une expression telle que « A et/ou B » vise à inclure « A et B », « A ou B », « A » (seul) et « B » (seul). Les termes « environ » ou « approximativement » signifient une erreur de mesure acceptable pour une valeur particulière d’un paramètre déterminée par les méthodes de mesure habituelles dans le domaine et qui dépendra en partie de la façon dont la valeur est mesurée ou déterminée, c’est-à-dire des limites du système de mesure. Par exemple, « environ » peut signifier dans une plage de trois ou plus de trois écarts-types, selon la pratique de l’art. Au sens de l’invention, on entend par « p olymère », une macromolécule composée d’un enchaînement linéaire ou ramifié de monomères reliés entre eux par des liaisons covalentes. Un polymère convenant à l’invention est polymère comprenant des groupes carboxyliques. Un polymère convenant à l’invention peut être une protéine ou un polysaccharide, ou leurs sels biologiquement acceptables. Notamment, un polymère peut être un polysaccharide ou un de ses sels biologiquement acceptables. Au sens de l'invention, on entend par « polymère fonctionnalisé », un polymère qui présente des groupes fonctionnels spécifiques, introduits par une modification chimique, et qui confère au polymère des propriétés nouvelles. Au sens de l'invention, on entend par « polymère réticulé » un polymère comprenant des nœuds de réticulation. L’expression « nœuds de réticulation » visent à désigner les points de liaison chimique entre des chaînes polymères adjacentes, formant une structure tridimensionnelle. Ces nœuds de réticulation représentent les jonctions entre les chaînes polymères qui confèrent à l'hydrogel sa capacité à retenir l'eau. Ces nœuds jouent un rôle central dans la détermination des propriétés de gonflement, de résistance mécanique et de perméabilité des hydrogels. Au sens de l'invention, on entend par un « polymère non-réticulé » désigne un polymère ne comprenant pas, ou peu, de nœuds de réticulation. Au sens de l'invention, on entend par « polysaccharide comprenant des groupes carboxyliques », un polymère constitué d'un enchaînement de monomères de sucres, au moins un desquels comporte un groupe carboxylique. Au sens de l'invention, on entend par « acide hyaluronique », l’acide hyaluronique, ou hyaluronan, et ses dérivés. Par conséquent, le terme « acide hyaluronique » englobe également les sels d’acide hyaluronique comme le hyaluronate de sodium et les acides hyaluroniques modifiés chimiquement par exemple par oxydation, réduction, désacétylation, sulfation ou amidation. L’acide hyaluronique est un polysaccharide linéaire avec une alternance de motifs d’acide D-glucuronique et de N-acétyl-D-glucosamine, liés par des liaisons β-1,3 glycosidiques et β-1,4 glycosidiques en alternance. Au sens de l'invention, on entend par « p rotéine », une macromolécule biologique composée d'un enchaînement linéaire d'acides aminés. Une protéine convenant à l’invention comprend des acides aminés dont la chaîne latérale comprend un groupe carboxylique (COOH). Au sens de l'invention, on entend par « h ydrogel », un matériau composé d'un réseau de polymères interconnectés qui sont entourés d'eau capable d’absorber et de retenir d'importantes quantités d'eau. Au sens de l'invention, on entend par « Ligation Chimique Native (LCN) », une méthode de synthèse chimique de peptides qui utilise des réactions chimiques naturelles pour former des liaisons covalentes entre des restes d'acides aminés. Au sens de l'invention, on entend par « agent réticulant », un composé capable d’introduire une réticulation entre différentes chaines de polymères. Au sens de l'invention, on entend par « reste cystéine », un résidu d'acide aminé cystéine, caractérisé par la présence d'un groupe thiol (-SH) sur le carbone alpha. Au sens de l'invention, on entend par « g roupe thiol », un groupe fonctionnel composé d'un atome de soufre lié à un atome d'hydrogène. Au sens de l'invention, on entend par « g roupe thioester », un groupe fonctionnel composé d'un atome de soufre lié à un atome d'oxygène et à un groupe acyle (R-CO-). Au sens de l'invention, on entend par « e spaceur », un segment assurant la liaison entre deux molécules ou deux parties d’une molécule. Au sens de l'invention, on entend par « a gent de comblement » des tissus mous, une substance injectable utilisable pour augmenter le volume des tissus mous, combler les rides et les ridules, ou remodeler les contours du visage. Au sens de l’invention, par « hydrogel stérile » ou « composition stérile » on entend qualifier un hydrogel ou une composition dotés de l’innocuité requise pour une administration dans ou à travers les zones superficielles de la peau, en sous-cutané, i.e. dans le derme supérieur, le derme moyen, et l’hypoderme. En particulier, il est essentiel que l’hydrogel ou la composition devant être administrés selon une technique d’injection soient dénués de tout corps contaminant susceptible d’initier une réaction secondaire indésirable au niveau de l’organisme hôte. Procédé de réticulation par ligation chimique native avec agent réticulant Selon un de ses objets, la présente invention concerne un procédé de préparation d’un hydrogel de polymère réticulé par ligation chimique native. Selon un mode de réalisation, un procédé décrit ici met en œuvre un polymère fonctionnalisé non-réticulé et un agent réticulant, l’agent réticulant comprenant au moins deux groupes thiol, chacun des groupes thiol étant en bêta d’une amine primaire, et le polymère comprenant au moins un groupe carboxylique, le groupe carboxylique étant fonctionnalisé avec un groupe thioester. Selon un mode de réalisation, un procédé décrit ici met en œuvre un polymère fonctionnalisé non-réticulé et un agent réticulant, l’agent réticulant comprenant au moins deux groupes thiol, chacun des groupes thiol étant en bêta d’une amine primaire, et le polymère comprenant des groupes carboxyliques, une partie des groupes carboxyliques étant fonctionnalisée avec des groupes thioesters. Selon un mode de réalisation, un procédé décrit ici comprend au moins les étapes consistant à : a) mettre en contact, dans une solution aqueuse, à un pH acide d’au moins environ 4,0, ledit polymère fonctionnalisé non-réticulé et ledit agent réticulant, b) augmenter le pH du mélange obtenu à l’étape a) d’au moins 0,5 unité, le pH étant au moins supérieur à environ 5,5 et n’excédant pas environ 8,0, et c) obtenir un hydrogel de polysaccharide réticulé. Selon un mode de réalisation, un procédé décrit ici met en œuvre met en œuvre un premier polymère et un deuxième polymère non-réticulés, le premier polymère comprenant au moins un groupe carboxylique, ledit groupe carboxylique étant fonctionnalisé avec un groupe thioester, et, le deuxième polymère étant fonctionnalisé avec au moins un groupe thiol, le groupe thiol étant en bêta d’un d’une amine primaire. Selon un mode de réalisation, un procédé décrit ici met en œuvre met en œuvre un premier polymère et un deuxième polymère non-réticulés, le premier polymère comprend des groupes carboxyliques, une partie des groupes carboxyliques étant fonctionnalisée avec des groupes thioesters, et, le deuxième polymère étant fonctionnalisé avec au moins deux groupes thiol, les groupes thiols étant en bêta d’un d’une amine primaire. Dans ce procédé, les groupe thiols du deuxième polymère réagissent avec les groupes thioesters du premier polymère, permettant l’obtention des nœuds de réticulation. Selon un mode de réalisation, un procédé décrit comprend au moins les étapes consistant à : mettre en contact le premier et le deuxième polymères dans une solution aqueuse, la solution aqueuse étant à un pH acide d’au moins 4,0, augmenter le pH du mélange obtenu à l’étape a) d’au moins 0,5 unité, le pH étant au moins supérieur à 5,5 et n’excédant pas 8,0, et obtenir un hydrogel de polymère réticulé. Etape a) Un procédé de l’invention comprend une étape a), comprenant la mise en contact, dans une solution aqueuse, à un pH d’environ 4,0 à environ 6,5, ou d’environ 4,0 à environ 6, d’un polymère fonctionnalisé non-réticulé et d’un agent réticulant ou d’un premier polymère non-réticulé comprenant au moins un groupe carboxylique, de préférence au moins deux groupes carboxyliques, le ou les, ou une partie des, groupes carboxyliques étant fonctionnalisés avec un ou des groupes thioesters, et d’un deuxième polymère non-réticulé fonctionnalisé avec au moins un groupe thiol, de préférence avec au moins deux groupes thiol, ou des groupes thiols, le ou les groupes thiols étant en bêta d’un d’une amine primaire. L’étape a) permet l’obtention d’un mélange homogène d’un polymère fonctionnalisé non-réticulé et d’un agent réticulant. Alternativement, l’étape a) permet l’obtention d’un mélange homogène d’un premier polymère et d’un deuxième polymère non-réticulés. Dans le contexte de la description, les expressions « mélange homogène d’un polymère non-réticulé et d’un agent réticulant », « mélange homogène d’un premier polymère et d’un deuxième polymères non-réticulés », « gel aqueux homogène d’un polymère non-réticulé et d’un agent réticulant » ou « gel aqueux homogène de polymères non-réticulé s » s'entend dans le contexte de la présente description comme un mélange ou un gel aqueux de polymère non réticulé ou faiblement réticulé, c'est-à-dire un mélange ou un gel dont l'angle de déphasage δ, mesuré dans des conditions de rhéologie dynamique à 1 Hz, est supérieur à 40° lorsqu'il est soumis à une contrainte supérieure à 1 Pa. Selon un mode de réalisation, l’étape a) est effectué à un pH dans un intervalle d’environ 4,0 à environ 6,5, de préférence d’environ 4,0 à environ 6, ou d’environ 4,2 à environ 6,2, ou d’environ 4,5 à environ 5,8, ou d’environ 4,8 à environ 5,3 ou à un pH d’environ 5,0. Lors de la mise en contact d’un polymère fonctionnalisé non-réticulé et d’un agent réticulant, une étape d’ajustement du pH du mélange obtenu peut être réalisée. Alternativement, lors de la mise en contact d’un premier et d’un deuxième polymères non-réticulés, tels que définis précédemment, une étape d’ajustement du pH du mélange obtenu peut être réalisée. Le pH peut être ajusté à une valeur d’environ 4,0 à environ 6,5, ou d’environ 4,0 à environ 6,0, ou d’environ 4,2 à environ 6,2, ou d’environ 4,5 à environ 5,8, ou d’environ 4,8 à environ 5,3 ou à un pH d’environ 5,0. Le pH peut être ajusté à une valeur d’environ 4,0 à environ 6,5, ou d’environ 4,0 à environ 6,0,ou d’environ 4,2 à environ 6,0, ou d’environ 4,5 à environ 5,5, ou à environ 5,0. Selon un mode de réalisation, le pH peut être ajusté à une valeur d’environ 4,0 à environ 6,0. L’ajustement du pH peut être effectuée par addition d’une base, par exemple NaOH, ou d’un acide, par exemple HCl. Selon un mode de réalisation, un polymère fonctionnalisé est mis en contact avec l’agent réticulant par : mise en contact d’une solution aqueuse de polymère fonctionnalisé avec une solution aqueuse d’agent réticulant, ou mise en contact d’une solution aqueuse de polymère fonctionnalisé avec un agent réticulant sous forme d’une poudre, ou mise en contact d’une solution aqueuse d’agent réticulant avec un polymère fonctionnalisé sous forme de fibres. Selon un mode de réalisation, un polymère fonctionnalisé est mis en contact avec l’agent réticulant par mise en contact d’une solution aqueuse de polymère fonctionnalisé avec un agent réticulant sous forme d’une poudre. Selon un mode de réalisation, un premier polymère non-réticulé est mis en contact avec un deuxième polymère non-réticulé par : mise en contact d’une solution aqueuse du premier polymère avec une solution aqueuse du deuxième polymère, ou mise en contact d’une solution aqueuse du premier polymère avec le deuxième polymère sous forme de fibres, ou mise en contact d’une solution aqueuse du deuxième polymère avec le premier polymère sous forme de fibres. Selon un mode de réalisation, un premier polymère est mis en contact avec un deuxième polymère par mise en contact d’une solution aqueuse du premier polymère avec une solution aqueuse du deuxième polymère. Le pH de la solution aqueuse peut être ajustée pour être dans un intervalle variant d’environ 4,0 à environ 6,5, ou d’environ 4,0 à environ 6,0, ou d’environ 4,2 à environ 6,0, ou d’environ 4,5 à environ 5,5, ou à environ 5,0. Selon un mode de réalisation, le pH de la solution aqueuse peut être ajustée pour être dans un intervalle variant d’environ 4,0 à environ 6,0. Selon une variante de réalisation, dans un procédé mettant en œuvre un premier polymère non-réticulé comprenant des groupes carboxyliques, une partie des groupes carboxyliques étant fonctionnalisée avec des groupes thioesters, et un deuxième polymère non-réticulé fonctionnalisé avec des groupes thiol, les groupes thiols étant en bêta d’un d’une amine primaire, les polymères peuvent être solubilisés concomitamment dans une solution aqueuse de pH dans un intervalle d’environ 6,8 à environ 7,8. Dans une telle variante de réalisation, l’étape b) peut être présente. Alternativement, dans une telle variante de réalisation, l’étape b) peut être absente, la réticulation des polymères étant réalisées concomitamment au mélange de polymères. Un polymère et/ou un agent réticulant peuvent être solubilisés dans une solution aqueuse choisie parmi de l’eau, un tampon choisi parmi le N-carbamoylméthyl taurine (CAS No: 7365-82-4), le sel de sodium d’acide 3-[N,N-bis(hydroxyéthyl)amino]-2-hydroxypropane sulfonique (CAS No: 102783-62-0), l’acide 3-morpholino-2-hydroxypropane sulfonique (CAS No: 68399-77-9), l’acide 1,4-piperazinediéthane sulfonique (CAS No: 5625-37-6), l’acide 1,4-piperazine-N,N’-bispropane sulfonique) (CAS No: 5625-56-9), l’acide 2-hydroxy-3-[tris(hydroxyméthyl)méthylamino]-1-propane sulfonique (CAS No: 68399-81-5), l’acide 2-[(2-hydroxy-1,1-bis(hydroxyméthyl)éthyl)amino]éthane sulfonique (CAS No: 7365-44-8), le N-tris(hydroxyméthyl)méthylglycine (CAS No: 5704-04-1), l'acide 3-(N-morpholino)propane sulfonique (CAS No: 1132-61-2), le tris(hydroxymethyl)aminométhane (CAS No: 77-86-1), le bis(2-hydroxyethyl)amino-tris(hydroxyméthyl)méthane (CAS No: 6976-37-0), le N,N-bis(2-hydroxyethyl)taurine (CAS No: 10191-18-1), le 4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonic acid (CAS No: 7365-45-9), l’acide 1,4-Piperazinediethane sulfonique (CAS No: 5625-37-6), l’acide 4-(2-hydroxyethyl)piperazine-1-(2-hydroxypropane-3-sulfonique) (CAS No: 68399-78-0), les tampons phosphates tels que le PBS avec un pH autour du pH physiologique (CAS No: 7647-14-5, 7447-40-7). Par exemple, le tampon peut être choisi parmi l’acide 3-(N-morpholino)propane sulfonique (CAS No: 1132-61-2), le tris(hydroxyméthyl)aminométhane (CAS No: 77-86-1), le bis(2-hydroxyethyl)amino-tris(hydroxyméthyl)méthane (CAS No: 6976-37-0), le N,N-bis(2-hydroxyéthyl)taurine (CAS No: 10191-18-1), l’acide 4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-éthane sulfonique (CAS No: 7365-45-9) et les tampons phosphates tels que le PBS avec un pH autour du pH physiologique (CAS No: 7647-14-5, 7447-40-7). Selon un mode de réalisation, le tampon peut être un tampon phosphate, particulièrement un tampon de solution saline de NaH 2 PO 4 /Na 2 HPO 4 ou de KH 2 PO 4 /K 2 HPO 4 . Les solutions aqueuses peuvent être dégazées, avant ou après solubilisation du polymère et/ou de l’agent réticulant. Selon un mode de réalisation, un procédé de l’invention peut comprendre une étape, préalablement à l’étape a), consistant à préparer une solution aqueuse du polymère. Cette étape peut comprendre un ajustement du pH de la solution aqueuse de polymère fonctionnalisé à une valeur d’environ 4,0 à environ 6,5 ou d’environ 4,2 à environ 6,0, ou d’environ 4,5 à environ 5,5, ou à environ 5,0. Selon un mode de réalisation, l’étape de préparation de la solution aqueuse de polymère peut comprendre une étape de dégazage de la solution. L’étape de dégazage peut être effectuée sous agitation magnétique de la solution à 100 - 200 rpm, par inertage/bullage d’un gaz inerte (azote/argon) ou sous vide. L’étape de dégazage peut être effectuée pendant une durée d’environ 5 min à environ 30 min., ou d’environ 10 min à environ 25 min., ou d’environ 15 min à environ 20 min. L’étape de dégazage peut être effectuée à température ambiante, variant d’environ 21°C à environ 25°C. L’étape de dégazage de la solution aqueuse permet avantageusement de réduire les risques d’oxydation des fonctions thiols de l’agent réticulant ou du deuxième polymère. Selon un mode de réalisation, un procédé de l’invention peut comprendre une étape, préalablement à l’étape a), consistant à préparer une solution aqueuse d’agent réticulant. Selon un mode de réalisation, le mélange obtenu à l’étape a) est maintenu sous agitation jusqu’à obtention d’un mélange homogène. Lorsque l’agent réticulant ou un polymère est ajouté sous forme d’une poudre, le mélange obtenu à l’étape a) est maintenu sous agitation jusqu’à dissolution de la poudre. Selon un mode de réalisation, le mélange obtenu à l’étape a) est maintenu sous agitation jusqu’à obtention d’un mélange homogène. Selon un mode de réalisation, le mélange obtenu à l’étape a) est maintenu sous agitation pendant une durée variant d’environ 5 minutes à environ 1 heure, ou d’environ 10 min. à environ 30 min. ou d’environ 15 min. à environ 20 min. Selon un mode de réalisation, le mélange obtenu à l’étape a) est maintenu sous agitation pendant une durée variant d’environ 5 minutes à environ 20 minutes. L’agitation à l’étape a) peut être réalisée par une agitation manuelle, une agitation mécanique, une agitation magnétique, ou une alternance de 2 ou 3 types d’agitation. Une agitation manuelle peut être obtenue avec une spatule. Une agitation mécanique peut être obtenue avec un appareil à pales, à une vitesse d’environ 100 rpm à environ 200 rpm. De telles appareils sont connus de l’homme du métier. Une agitation magnétique peut être obtenue avec un barreau aimanté, à une vitesse d’environ 100 rpm à environ 200 rpm. L’étape a) peut être effectuée à une température d’environ 0°C à environ 55°C, ou d’environ 5°C à environ 40°C, ou d’environ 10°C à environ 30°C, ou d’environ 15°C à environ 25°C, ou d’environ 21°C à environ 25°C (température ambiante). Selon un mode de réalisation, l’étape a) est réalisée sous atmosphère inerte, par exemple une atmosphère d’azote, d’argon ou de CO 2 . Etape b) Un procédé de l’invention comprend une étape b), comprenant une augmentation du pH du mélange obtenu à l’étape a) d’au moins 0,5 unité, le pH étant au moins supérieur à 5,5 et n’excédant pas 8,0. L’augmentation du pH à l’étape b) permet d’induire la réticulation du polymère fonctionnalisé par formation de liaisons peptidiques natives par réaction entre les groupes thioester du polymère fonctionnalisé avec des groupes thioesters et les groupes thiols de l’agent réticulant. Alternativement, l’augmentation du pH à l’étape b) permet d’induire la réticulation du premier polymère fonctionnalisé avec des groupes thioesters avec le deuxième polymère fonctionnalisé avec des groupes thiols par formation de liaisons peptidiques natives par réaction entre les groupes thioester et les groupes thiols. Selon un mode de réalisation, le pH peut être ajusté dans un intervalle d’environ 6,0 à environ 8,0, ou d’environ de 6,2 à environ 7,8, ou d’environ 6,4 à environ 7,6, ou d’environ 6,8 à environ 7,4, ou être d’environ 7,0. Selon un mode de réalisation, à l’étape b), le pH est ajusté à un pH d’environ 6,5 à environ 8,0, ou d’environ 6,7 à environ 7,8, ou d’environ 6,8 à environ 7,6, ou d’environ 6,8 à environ 7,4, ou d’environ 7,0 à environ 7,4, ou est d’environ 7,0. Selon un mode de réalisation, le pH peut être ajusté à un pH physiologique. Un pH physiologique est pH dans l’intervalle variant d’environ 6,8 à environ 7,8. Le pH peut être ajusté par addition d’une solution aqueuse basique. Une solution aqueuse basique est choisie parmi une solution de soude (NaOH) et une solution d’hydroxyde de potassium (KOH). La solution aqueuse basique est avantageusement de concentration élevée, par exemple 1 M, pour ne pas diluer le mélange obtenu à l’étape a). Selon un mode de réalisation, l’étape b) peut être réalisée sous atmosphère inerte. Une atmosphère inerte peut être choisie parmi une atmosphère d’azote ou une atmosphère d’argon. Selon un mode de réalisation, lequel l’étape b) peut comprendre une première séquence b1) et une deuxième séquence b2). La séquence b1) peut comprendre une augmentation du pH du mélange obtenu à l’étape a) d’au moins 0,5 unité, le pH étant au moins supérieur à 5,5 et n’excédant pas 8,0, pendant une durée d’environ 2 min. à environ 1 heure. La séquence b1) est réalisée sous agitation. La séquence b1) peut durer environ 2 minutes à environ 1 heure, ou d’environ 5 min. à environ 30 min. ou d’environ 5 min. à environ 15 min. La séquence b2) peut comprendre le maintien de la solution obtenue à l’issue de la séquence b1), sans agitation, pendant une durée d’environ une durée d’environ 15 min. à environ 30h. La séquence b2) comprend le maintien du pH au pH obtenu à l’étape b1) (maintien du pH constant). L’agitation à la séquence b1) de l’étape b) peut être réalisée par une agitation manuelle, une agitation mécanique, une agitation magnétique, ou une alternance de 2 ou 3 types d’agitation. Une agitation manuelle peut être obtenue avec une spatule. Une agitation mécanique peut être obtenue avec un appareil à pales, à une vitesse d’environ 100 rpm à environ 200 rpm. De telles appareils sont connus de l’homme du métier. Une agitation magnétique peut être obtenue avec un barreau aimanté, à une vitesse d’environ 100 rpm à environ 200 rpm. Selon un mode de réalisation, l’agitation à la séquence b1) de l’étape b) peut être réalisée par une agitation mécanique. La séquence b2) peut comprendre le maintien de la solution obtenue à l’issue de la séquence b1), sans agitation, pendant une durée d’environ une durée d’environ 15 min. à environ 30h, ou d’environ 20 min. à environ 24h, ou d’environ 25 min à environ 20h, ou d’environ 30 min à environ 15h, ou d’environ 35 min à environ 10h, ou d’environ 40 min à environ 8h, ou d’environ 45 min à environ 5h, ou d’environ 50 min à environ 2h, ou être d’environ 1h. La séquence b2) peut comprendre le maintien de la solution obtenue à l’issue de la séquence b1), sans agitation, pendant une durée d’environ une durée 1h. Etape c) Un procédé de l’invention comprend une étape c), comprenant l’obtention d’un hydrogel de polymère réticulé. A l’issue de l’étape c), un gel aqueux homogène est obtenu, contenant au moins polymère réticulé. Avantageusement, un gel aqueux conforme à l’invention peut comprendre une concentration totale en polymère variant de 5 à 40 mg/g, 10 à 35 mg/g, ou de 15 à 30 mg/g, ou de 20 à 25 mg/g par rapport à la masse totale du gel. L’hydrogel de polymère réticulé obtenu à l’étape c) peut être, optionnellement, soumis à différentes étapes additionnelles. Les différentes étapes additionnelles peuvent permettre la préparation d’une composition stérile injectable. Selon encore un autre mode de réalisation particulier, un procédé de l'invention peut être mis en œuvre au moins en partie à l'intérieur d'un récipient spécifique à paroi déformable, tel que, par exemple, une poche. En effet, les propriétés de déformabilité d'un tel récipient et son herméticité permettent de réaliser les différentes étapes d'un procédé de l'invention, et notamment les étapes d'homogénéisation et de réticulation, dans des conditions optimales qui conduisent à l'obtention d'un gel réticulé encore meilleur, c'est-à-dire présentant des propriétés viscoélastiques et d'injectabilité supérieures à celles affichées par un gel obtenu selon un procédé mettant en œuvre un récipient conventionnel du type pot ou cuve. La paroi déformable ou la poche présente un degré de déformabilité tel qu'elle peut être déformée manuellement, c'est-à-dire sous l'effet d'une pression de la main, résultant, par exemple, d'une simple palpation. Le récipient, voire la poche, selon un aspect pratique mais aussi en vue de limiter au maximum les contacts avec le milieu extérieur, a un caractère hermétique. Le récipient selon l'invention peut cependant être avantageusement équipé d'un système d'ouverture ou port, de préférence refermable, et apte à introduire tout composé utilisé pour la fabrication d'un gel selon l'invention. Un récipient à paroi déformable ou une poche concernant à l’invention peut être tel que décrit, notamment, dans WO 2010/131175 A1. Etapes additionnelles Dialyse, Tamisage, Conditionnement, Stérilisation Selon un mode de réalisation, un hydrogel de polymère réticulé obtenu à l’étape c) peut être soumis à une étape additionnelle de dialyse. L’étape de dialyse peut être effectuée dans une solution tampon, par exemple un solution tampon choisie parmi un tampon phosphate, un tampon Tris-HCl, et un tampon bis-tris. Une solution tampon peut avoir un pH dans un intervalle physiologique, par exemple d’environ 6,8 à environ 7,8, ou d’environ 7,0 à environ 7,4. L’étape de dialyse peut être effectuée à température ambiante, par exemple à une température dans un intervalle variant d’environ 21°C à environ 25°C. Alternativement, l’étape de dialyse peut être effectuée à froid, c’est-à-dire à une température dans un intervalle variant d’environ 0°C à environ 10°C. Selon un mode de réalisation, un hydrogel de polymère réticulé obtenu à l’étape c) peut être soumis à une étape additionnelle de tamisage. Une étape additionnelle de tamisage peut être constituée d’un seul tamisage ou d’une séquence de tamisages successifs, par exemple au moins 2, 3, 4 ou 5 tamisages successifs. Le tamisage peut être réalisé avec un tamis ayant une maille de tamis dans un intervalle d’environ 750 et environ 30 µm, par exemple d’environ 710, 500, 250, 150, ou 34 µm. Selon un mode de réalisation, une étape de tamisage peur comprendre deux tamisages successifs. Le premier tamisage peut être réalisé avec un tamis ayant une maille d’environ 710 µm, et le second tamisage peut être réalisé avec un tamis ayant une maille d’environ 150 µm. Selon un mode de réalisation, un hydrogel de polymère réticulé obtenu à l’étape c) peut être soumis à une étape additionnelle de conditionnement. Le conditionnement peut être effectué en seringue. Selon un de ses aspects, la présente invention concerne un kit comprenant une seringue pré-remplie comprenant une composition stérile et injectable comprenant un hydrogel de polymère réticulé tel que décrit ici. Selon un mode de réalisation, un hydrogel de polymère réticulé obtenu à l’étape c) peut être soumis à une étape additionnelle de stérilisation. Le procédé peut comprendre une seule étape de stérilisation. Une étape de stérilisation peut être réalisée par des moyens thermiques, par exemple dans un autoclave, en particulier à une température entre 120°C et 140°C. Une étape de stérilisation peut être effectuée par autoclave, dans des conditions de chaleur humide, à une température supérieure ou égale à 121°C de manière à obtenir un F0 > 15 (valeur stérilisatrice). La stérilisation peut être réalisée sur une composition d’un hydrogel tel que décrit ici déjà conditionnée dans son dispositif d’administration, par exemple une seringue. Addition de polymère non-réticulé Selon un mode de réalisation, un hydrogel de polymère réticulé obtenu à l’étape c) peut être soumis à une étape additionnelle d’addition d’une solution aqueuse de polymère non-réticulé à l’hydrogel de polymère réticulé. La solution aqueuse de polymère non-réticulé peut être ajoutée à l’hydrogel de polymère réticulé en en une proportion d’environ 5% à environ 30% en masse/masse, ou d’environ 10% à environ 25% en masse/masse, ou d’environ 15% à environ 20% en masse/masse de l’hydrogel de polymère réticulé. Selon, un mode réalisation, la solution aqueuse de polymère non-réticulé peut être ajouté à l’hydrogel de polymère réticulé en une proportion d’environ 10% en masse/masse de l’hydrogel de polymère réticulé. Selon, un mode réalisation, le polymère réticulé et le polymère non-réticulé sont de même nature ou sont de natures différentes. Selon, un mode réalisation, le polymère réticulé et le polymère non-réticulé sont de même nature. Selon, un mode réalisation, le polymère réticulé et le polymère non-réticulé sont un polysaccharide. Selon, un mode réalisation, le polymère réticulé et le polymère non-réticulé sont un acide hyaluronique ou un de ses sels biologiquement acceptables. Selon, un mode réalisation, le polymère réticulé et le polymère non-réticulé sont le hyaluronate de sodium. La solution aqueuse dans laquelle est dissout le polymère non-réticulé peut être de nature différente ou de même nature que la solution aqueuse dans laquelle est préparée le polymère fonctionnalisé destiné à préparer un hydrogel de polymère réticulé. Selon un mode de réalisation, les solutions aqueuses de polymère non-réticulé et de polymère fonctionnalisé à réticuler sont de même nature. Addition d’un agent actif Selon un mode de réalisation, un hydrogel de polymère réticulé obtenu à l’étape c) peut être soumis à une étape additionnelle d’addition d’au moins un agent actif. Au sens de la présente description, on entend par « agent actif », une substance ou une composition destinée à exercer une action pharmacologique au sein des tissus biologiques dans lequel est injecté un hydrogel de polymère réticulé tel que décrit. Un agent actif peut être choisi parmi un agent anesthésiant, un antioxydant, un acide aminé, une vitamine, des minéraux, un acide nucléique, un nucléotide, un nucléoside, une co-enzyme, un dérivé adrénergique, et des mélanges de ceux-ci. Un agent anesthésiant peut être choisi parmi l’ambucaïne, l’amoxecaïne, l’amyleine, l’aprindine, l’aptocaïne, l’articaïne, la benzocaïne, la betoxycaïne, la bupivacaïne, la butacaïne, le butamben, la butanilicaïne, le chlorobutanol, la chloroprocaïne, la cinchocaïne, la clodacaïne, la cocaïne, la cryofluorane, la cyclomethycaïne, la dexivacaïne, la diamocaïne, le diperodon, la dyclonine, l’etidocaïne, l’euprocine, la febuverine, la fomocaïne, le guafecaïnol, l’heptacaïne, l’hexylcaïne, l’hydroxyprocaïne, l’hydroxytetracaïne, l’isobutamben, la leucinocaïne, la levobupivacaïne, le levoxadrol, le lidamidine, la lidocaïne, la lotucaïne, le menglytate, la mepivacaïne, la meprylcaïne, la myrtecaïne, l’octacaïne, l’octodrine, l’oxetacaïne, l’oxybuprocaïne, la parethoxycaïne, la paridocaïne, la phenacaïne, la piperocaïne, la piridocaïne, le polidocanol, la pramocaïne, la prilocaïne, la procaïne, la propanocaïne, la propipocaïne, la propoxycaïne, la proxymetacaïne, la pyrrocaïne, la quatacaïne, la quinisocaïne, la risocaïne, la rodocaïne, la ropivacaïne, la tetracaïne, la tolycaïne, la trimecaïne , et leurs sels. Selon un mode de réalisation, un agent anesthésiant peut être la mépivacaïne, la lidocaïne ou un de leurs sels. Selon un mode de réalisation, un agent anesthésiant peut être un sel de chlorhydrate mépivacaïne ou de lidocaïne. Selon un mode de réalisation, la mépivacaïne, la lidocaïne ou un de leurs sels peuvent être mises en œuvre dans des quantités variant d’environ 0,1 à environ 30 mg/mL, par exemple d’environ 0,5 à environ 10 mg/mL ou plus préférentiellement d’environ 2 à environ 6 mg/mL. Un antioxydant peut être choisi parmi le glutathion, l’acide ellagique, la spermine, le resvératrol, le rétinol, la L-carnitine, les polyols, les polyphénols, les flavonols, les théaflavines, les catéchines, la caféine, l’ubiquinol, l’ubiquinone, et l’acide alpha-lipoïque. Un acide aminé peut être choisi parmi l’arginine, l’isoleucine, la leucine, la lysine, la glycine, la valine, la thréonine, la proline, la méthionine, l’histidine, la phénylalanine, le tryptophane, et la cystéine. Une vitamine peut être choisie parmi les vitamines E, A, C, et B, et en particulier les vitamines B4, B5, B6, B8, B9, B7, et B12 et préférentiellement, la pyridoxine. Les minéraux peuvent être choisis parmi les sels de zinc, de magnésium, de calcium, de potassium, de manganèse, de sodium, de cuivre. Une co-enzyme peut être choisi parmi les coenzymes Q10, CoA, NAD, et NADP. Un dérivé adrénergique peut être choisi parmi l’adrénaline et la noradrénaline. Agents réticulants Un procédé selon l’invention met en œuvre un agent réticulant comprenant au moins deux groupes thiol, chacun des groupes thiol étant en bêta d’une amine primaire. Selon un mode de réalisation les groupes thiol de l’agent réticulant proviennent de restes cystéine. Un agent réticulant peut comprendre au moins deux restes cystéine. Les deux restes cystéine peuvent reliés entre eux au moyen d’un espaceur. Selon un mode de réalisation, un espaceur convenant pour relier deux cystéines peut comprendre, avant liaison aux restes cystéine, au moins deux groupes chacun choisi parmi une amine primaire, une amine secondaire, un hydroxyle, et un thiol. Selon un mode de réalisation, chaque reste cystéine peut être lié à l’espaceur par une liaison choisie parmi #-NR 3 -CO-*, #-O-CO-* et #-S-CO-* dans laquelle #- et -* figurent, respectivement, une liaison covalente avec l’espaceur et une liaison covalent avec le reste cystéine, et R 3 représentant H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée . Au sens de la description, l’expression « chaîne hydrocarbonée » vise à désigner un enchaînement d’atomes de carbones reliés entre eux par des liaisons covalentes. Au sens de la description, le terme « saturé » utilisé en lien avec l’expression « chaîne hydrocarbonée » signifie que les atomes de carbones sont reliés entre eux par des liaisons covalentes simples. Au sens de la description, le terme « insaturé » utilisé en lien avec l’expression « chaîne hydrocarbonée » signifie que la chaîne comprend au moins deux atomes de carbone reliés entre eux par une liaison covalente double ou une triple. Au sens de la description, le terme « linéaire » utilisé en lien avec l’expression « chaîne hydrocarbonée » signifie que la chaîne est constituée d’une unique chaîne hydrocarbonée. Au sens de la description, le terme « ramifié » utilisé en lien avec l’expression « chaîne hydrocarbonée » signifie que la chaîne comprend au moins un atome de carbone formant une chaîne secondaire branché sur une chaîne principale. Selon un mode de réalisation, R 3 représente H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée. Selon un mode de réalisation, R 3 représente H, un méthyle, un éthyle, un propyle, ou un butyle. Selon un mode de réalisation, R 3 représente H. Selon un mode de réalisation, chaque reste cystéine est lié à l’espaceur par une liaison choisie parmi une liaison amide établie entre une amine primaire ou secondaire de l’espaceur et un groupe carboxylique d’un reste cystéine, une liaison ester établie entre groupe hydroxyle de l’espaceur et un groupe carboxylique d’un reste cystéine, et une liaison thioester établie entre un groupe thiol de l’espaceur et un groupe carboxylique d’un reste cystéine. Selon un mode de réalisation, l’espaceur et les restes cystéine peuvent être liés par des liaisons amide établies entre une amine primaire ou une amine secondaire de l’espaceur et un groupe carboxylique d’un reste cystéine. Selon un mode de réalisation, l’espaceur et les restes cystéine peuvent être liés par des liaisons ester établies entre un hydroxyle de l’espaceur et un groupe carboxylique d’un reste cystéine. Selon un mode de réalisation, l’espaceur et les restes cystéine peuvent être liés par des liaisons thioester établies entre un thiol de l’espaceur et un groupe carboxylique d’un reste cystéine. Espaceur Un espaceur peut être de formule générale (I) : @-A-R 1 -B-@ (I) dans laquelle @- et -@ représentent des liaisons avec les groupes acyl des restes cystéine, et R 1 représente un reste choisi parmi une chaine hydrocarboné en C 1 -C 10 , saturée ou insaturée, optionnellement interrompue par un plusieurs O, NR 2 , ou S, et optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -OR 2 , -NHR 2 , -SR 2 , -COOR 2 et -CONHR 2 , dans lequel R 2 représente H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, A et B, identiques ou différents, représentent, NR 3 , O ou S, avec R 3 représentant H ou un alkyl en C 1 -C 6 . Au sens de la description, l’expression « interrompue par un plusieurs O, NR 2 , ou S » utilisée en lien avec l’expression « chaîne hydrocarbonée » signifie qu’un ou plusieurs atomes d’oxygène, groupes amino et/ou atome de soufre sont reliés à deux atomes de carbones par des liaisons covalentes, par exemple sous la forme : -C-O-C-, -C-NR 2 -C-, ou -C-S-C-. Selon un mode de réalisation, R 1 une chaîne hydrocarbonée, saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, en C 1 -C 10 , ou en C 2 -C 8 , ou en C 3 -C 7 , ou encore en C 4 -C 6 . Selon un mode de réalisation, R 1 est une chaîne hydrocarbonée interrompue par un plusieurs O. Selon un mode de réalisation, R 1 est une chaîne polyéthylène-glycol. Selon un mode de réalisation, R 1 est substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -OH, -NH 2 , -NHR 2 , -SH, -COOR 2 et -CONHR 2 . Selon un mode de réalisation, R 1 est substituée par un ou plusieurs groupes -CONHR 2 . Selon un mode de réalisation, R 2 représente H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée. Selon un mode de réalisation, R 2 représente H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 Selon un mode de réalisation, R 2 représente un méthyle, un éthyle, un propyle, ou un butyle. Selon un mode de réalisation, R 2 représente un méthyle. Selon un mode de réalisation, R 3 est tel que défini précédemment. Selon un mode de réalisation, -A-R 1 -B- peut être choisi parmi un reste de polyol ; un reste d’acide aminé comprenant au moins deux groupes chacun choisi parmi une amine primaire, une amine secondaire, un hydroxyle, et un thiol ; un reste d’un peptide comprenant au moins deux groupes chacun choisi parmi une amine primaire, une amine secondaire, un hydroxyle, et un thiol ; un reste d’un saccharide aminée ; un reste d’un polysaccharide aminé ; un reste de polyamine ; et un reste de PEG diamine. Un polyol peut être choisi parmi un saccharide, un polysaccharide, l’éthylène glycol, un polyéthylène glycol. Un saccharide peut être le tréhalose. Un polysaccharide peut être une cyclodextrine. Un acide aminé peut être la lysine, l’arginine, l’asparagine, ou la glutamine. Un saccharide aminée peut être choisi parmi le diamino tréhalose Un polysaccharide aminée peut être choisi parmi le chitosan et des dérivés de celui-ci, un diamino cyclodextrine. Selon un mode de réalisation, -A-R 1 -B- peut être un reste d’acide aminé choisi parmi un reste de lysine, d’arginine, d’asparagine, ou de glutamine. Selon un mode de réalisation, -A-R 1 -B- peut être un reste de lysine. Selon un mode de réalisation, un espaceur peut être représenté par la formule (Ib) : @-NH-(CH 2 ) n -CH(CO 2 Et)-NH-@ (Ia), dans laquelle @- et -@ représentent des liaisons avec les groupes acyl des restes cystéine, et n figure un entier naturel variant de 1 à 10, notamment de 2 à 8, notamment de 3 à 6, et notamment étant 4. Agents réticulants Selon un de ses objets, l’invention concerne un agent réticulant de formule générale (Ia) : Cys-A-R 1 -B-Cys (Ia) dans laquelle Cys représente un reste cystéine, et R 1 représente un reste choisi parmi une chaîne hydrocarboné en C 1 -C 10 , saturée ou insaturée, optionnellement interrompue par un plusieurs O, NR 2 , ou S, et optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -OR 2 , -NHR 2 , -SR 2 , -COOR 2 et -CONHR 2 , dans lequel R 2 représente H, une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, A et B, identiques ou différents, représentent, NR 3 , O ou S, avec R 3 représentant H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée. R 1 , R 2 et R 3 sont tels que définis précédemment. Selon un mode de réalisation, un agent réticulant peut être représenté par la formule (II) : (II) Selon un de ses objets, l’invention concerne l’utilisation d’un agent réticulant tel que décrit ici, pour réticuler entre eux deux polymères comprenant des groupes carboxyliques, une partie desdits polysaccharides étant fonctionnalisée avec un groupe thioester. Polymères fonctionnalisés Un procédé selon l’invention met en œuvre un polymère comprenant au moins un groupe carboxylique, de préférence au moins deux groupes carboxyliques. Selon un mode de réalisation, un procédé selon l’invention met en œuvre un polymère comprenant au moins un groupe carboxylique, de préférence au moins deux groupes carboxyliques, une partie des groupes carboxyliques étant fonctionnalisée avec des groupes thioesters. Selon un mode de réalisation, au moins environ 0,5% desdits groupes carboxylique dudit polymère sont fonctionnalisée avec des groupes thioesters. Une partie des groupes carboxyliques fonctionnalisée avec des groupes thioesters signifie qu’au moins 0,5% desdits groupes carboxylique dudit polymère sont fonctionnalisée avec des groupes thioesters. Une partie des groupes carboxyliques fonctionnalisée avec des groupes thioesters signifie qu’au plus 80% desdits groupes carboxylique dudit polymère sont fonctionnalisée avec des groupes thioesters. Selon un mode de réalisation, d’environ 0,5% à environ 50%, ou d’environ 5% à environ 40%, ou d’environ 6% à environ 30%, ou d’environ 8% à environ 20 %, ou environ 10%, ou environ 5% des groupes carboxylique du polymère peuvent être conjugués aux groupes thioester. Selon un mode de réalisation, d’environ 5% à environ 20% des groupes carboxylique du polymère peuvent être conjugués aux groupes thioester. Selon un mode de réalisation, environ 5% des groupes carboxylique du polymère peuvent être conjugués aux groupes thioester. Un polymère comprenant des groupes carboxyliques convenant à l’invention peut être choisi parmi des polysaccharides et des protéines, et leurs sels biologiquement acceptables. Selon un mode de réalisation, un polymère comprenant des groupes carboxyliques convenant à l’invention est un polysaccharide. Selon un mode de réalisation, un polysaccharide, ou un de ses sels biologiquement acceptables, convenant à l’invention peut être choisi parmi l’alginate, la chondroïtine, la chondroïtine sulfate, le dermatane sulfate l’héparine, le xanthane, l’acide hyaluronique, la carboxyméthylcellulose, la carboxycyclodextrine, leurs sels biologiquement acceptables, et des mélanges de ceux-ci. Un sel biologiquement acceptable de polysaccharide peut être choisi parmi les sels de sodium, les sels de potassium, les sels d’argent, les sels de sulfates, et des mélanges de ceux-ci. Selon un mode de réalisation, un polysaccharide, ou un de ses sels biologiquement acceptables, convenant à l’invention peut être l’acide hyaluronique, ou un de ses sels physiologiquement acceptable. Selon un mode de réalisation, un sel de polysaccharide convenant à l’invention peut être le hyaluronate de sodium. Selon un mode de réalisation, l’acide hyaluronique ou le hyaluronate de sodium à un poids moléculaire variant d’environ 100 kDa à environ 5 MDa, ou d’environ 500 kDa à environ 4 MDa, ou d’environ 1 MDa à environ 3 MDa, ou est d’environ 1,5 MDa. Selon un mode de réalisation, une protéine convenant à l’invention peut être choisi parmi HSA, la fibrine, et le collagène. Selon un de ses objets, l’invention concerne un polymère comprenant des groupes carboxyliques dans lequel une partie des groupes carboxyliques est fonctionnalisée avec des groupes thioesters, le polymère étant représenté par la formule générale (IV) : (IV) dans laquelle n représente la proportion de groupes carboxyliques dudit polymère fonctionnalisés avec un groupe thioester et varie d’environ 0,5% à environ 50% et Y représente un reste de polymère comprenant des groupes carboxyliques. Selon un de ses objets, l’invention concerne un polymère comprenant des groupes carboxyliques dans lequel une partie des groupes carboxyliques est fonctionnalisée avec des groupes thioesters, le polymère étant représenté par la formule générale (IVa) : (IVa) dans laquelle n représente la proportion de groupes carboxyliques dudit polymère fonctionnalisés avec un groupe thioester et varie d’environ 0.5% à environ 50%. Selon un mode de réalisation au moins environ 0,5% desdits groupes carboxylique du polymère sont fonctionnalisés avec un groupe thioester. Selon un mode de réalisation, d’environ 5% à environ 50%, ou d’environ 5% à environ 40%, ou d’environ 6% à environ 30%, ou d’environ 8% à environ 20 %, ou environ 10%, ou environ 5% des groupes carboxylique du polymère peuvent être fonctionnalisés avec un groupe thioester. La proportion de groupes carboxyliques fonctionnalisés par des groupes thioester peut être déterminé par toute méthode connue de l’homme de l’art, par exemple par des méthodes spectroscopiques telle que la RMN. Selon un mode de réalisation, un polymère peut être un polysaccharide tel que défini précédemment. Comme indiqué précédemment, la présente invention concerne un procédé de préparation d’un hydrogel de polymère réticulé par ligation chimique native mettant en œuvre un premier polymère comprenant au moins un groupe carboxylique, de préférence au moins deux groupes carboxyliques ou des groupes carboxyliques, le, ou moins un, ou une partie des groupes carboxyliques étant fonctionnalisés avec des groupes thioesters, et un deuxième polymère fonctionnalisé avec au moins un groupe thiol, de préférence avec au moins deux groupes thiols, ou des groupes thiols, le ou les groupes thiols étant en bêta d’un d’une amine primaire. Le premier polymère peut être comme décrit précédemment. Le second polymère fonctionnalisé avec au moins une fonction thiol peut être préparé par toute méthode connue dans le domaine, par exemple par les méthodes décrites dans WO 2019/238953 A1 ou WO 2021/123247 A1 Selon un mode de réalisation, un premier et un second polymère peuvent être un polysaccharide ou un de ses sels biologiquement acceptables, notamment tel que défini ci-après. Selon un mode de réalisation, un polysaccharide, ou un de ses sels biologiquement acceptables, convenant à l’invention peut être l’acide hyaluronique, ou un de ses sels physiologiquement acceptable. Selon un mode de réalisation, un sel de polysaccharide convenant à l’invention peut être le hyaluronate de sodium. Un acide hyaluronique, ou de ses sels biologiquement acceptables, comprenant des groupes carboxyliques fonctionnalisés avec des groupements thiols peut être préparé comme décrit dans WO 2019/238953 A1 ou Zhang et al. ( Chem Commun , 2015, 51(47) : 9662-9665). Composés fonctionnalisant à groupe thioester Selon un mode de réalisation, les groupes carboxyliques du polymère peuvent être fonctionnalisés avec un composé fonctionnalisant comprenant un groupe thioester et une amine primaire. Avant liaison à un groupe carboxylique du polymère, un groupe thioester peut être un composé fonctionnalisant comprenant un groupe thioester et une amine primaire. Selon un mode de réalisation, les groupes thioester peuvent être liés au polymère par des liaisons amide. Les liaisons amide peuvent être établies entre une amine primaire du thioester et un groupe carboxylique du polymère. Selon un mode de réalisation, un composé fonctionnalisant à groupe thioester peut être de formule générale (III) : NH 2 -R 4 -C(O)-S-R 5 (III) dans laquelle R 4 représente une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -O-C(O)-R 6 , -C(O)-O-R 6 , -O-C(O)-NHR 6 , -S-R 6 , -S-C(O)OR 6 , -NHR 6 , -NH-C(O)R 6 , -NH-C(O)OR 6 , -C(O)NH-C(O)R 6 , -NH-C(NHR 6 )=NR 6 , -NH-C(NH-C(O)R 6 )=NH-C(O)R 7 , -Phe, -Phe-OC(O)R 6 , et R 5 représente une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -O-C(O)-R 6 , -C(O)-O-R 6 , -NHR 6 , -NH-C(O)R 6 , -C(O)NH-C(O)R 6 , -C(O)NH-COOR 6 , -NHC(O)(CH 2 ) 2 CH(NHR 6 )C(O)OR 7 , -SOR 6 , S(O)OR 6 , -Phe, -Phe-OC(O)R 6 , avec R 6 et R 7 représentant, indifféremment, H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, optionnellement substitué par Phe. Selon un mode de réalisation, R 4 représente une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée. Selon un mode de réalisation, R 4 représente une chaîne hydrocarbonée, saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, en C 1 -C 4 , ou en C 1 -C 2 , ou encore en C 1 . Selon un mode de réalisation, R 4 représente un méthylène, un éthylène, un propylène, ou un butylène. Un mode de réalisation, R 4 peut être substitué par un ou plusieurs groupes choisis parmi -O-C(O)-R 6 , -C(O)-O-R 6 , -O-C(O)-NHR 6 , -S-R 6 , -S-C(O)OR 6 , -NHR 6 , -NH-C(O)R 6 , -NH-C(O)OR 6 , -C(O)NH-C(O)R 6 , -NH-C(NHR 6 )=NR 6 , -NH-C(NH-C(O)R 6 )=NH-C(O)R 7 , -Phe, -Phe-OC(O)R 6 . Selon un mode de réalisation, R 4 peut être substitué par un ou plusieurs groupes choisis parmi -O-C(O)-R 6 , -C(O)-O-R 6 , -O-C(O)-NHR 6 , -NHR 6 , -NH-C(O)R 6 , -NH-C(O)OR 6 , -C(O)NH-C(O)R 6 , -Phe, -Phe-OC(O)R 6 . Selon un mode de réalisation, R 4 peut être substitué par un ou plusieurs groupes choisis parmi -O-C(O)-R 6 , -C(O)-O-R 6 , -O-C(O)-NHR 6 , -NHR 6 , -NH-C(O)R 6 , -NH-C(O)OR 6 , -C(O)NH-C(O)R 6 . Selon un mode de réalisation, NH 2 -R 4 -C(O)- représente un reste d’acide aminé dans lequel les groupes réactifs de la chaine latérale sont protégés par un groupe choisi parmi un acétyle, un méthyle, un éthyle, un tert-butyloxycarbonyle (BOC), ou un carbamate. Selon un mode de réalisation, R 5 représente une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -O-C(O)-R 6 , -C(O)-O-R 6 , -NHR 6 , -NH-C(O)R 6 , -C(O)NH-C(O)R 6 , -C(O)NH-COOR 6 , -NHC(O)(CH 2 ) 2 CH(NHR 6 )C(O)OR 7 , -SOR 6 , S(O)OR 6 , -Phe, -Phe-OC(O)R 6 . Selon un mode de réalisation, R 5 représente une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée. Selon un mode de réalisation, R 5 représente une chaîne hydrocarbonée, saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, en C 1 -C 4 , ou en C 1 -C 2 , ou encore en C 1 . Selon un mode de réalisation, R 5 représente un méthylène, un éthylène, un propylène, ou un butylène. Selon un mode de réalisation, R 5 peut être substitué par un ou plusieurs groupes choisis parmi -O-C(O)-R 6 , -C(O)-O-R 6 , -NHR 6 , -NH-C(O)R 6 , -C(O)NH-C(O)R 6 , -C(O)NH-COOR 6 , -NHC(O)(CH 2 ) 2 CH(NHR 6 )C(O)OR 7 . Selon un mode de réalisation, R 5 peut être substitué par un ou plusieurs groupes choisis parmi -O-C(O)-R 6 , -C(O)-O-R 6 , -NHR 6 , -NH-C(O)R 6 . Selon un mode de réalisation, R 6 et R 7 représentent, indifféremment, un reste alkyl en C 1 -C 4 , optionnellement substitué par Phe. Selon un mode de réalisation, R 6 et R 7 représentent, indifféremment, H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, optionnellement substitué par Phe. Selon un mode de réalisation, R 6 et R 7 représentent, indifféremment, une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, optionnellement substitué par Phe. Selon un mode de réalisation, R 6 et R 7 représentent, indifféremment, un méthyle ou un éthyle. Selon un mode de réalisation, NH 2 -R 4 -C(O)- représente un reste glycine. Selon un mode de réalisation, -S-R 5 représente un groupe choisi parmi un reste cystéine, un reste cystéamine, ou un reste glutathion. Selon un mode de réalisation, -S-R 5 représente un groupe choisi parmi un reste cystéine. Selon un mode de réalisation, un composé fonctionnalisant à groupe thioester peut être un composé de formule (IIIa) : (IIIa) Selon un mode de réalisation, un groupe thioester peut être représenté par la formule générale (IIIa) : §-NH-R 4 -C(O)-S-R 5 (IIIb) dans laquelle $- représente une liaison avec un reste acyl d’un groupe carboxylique du polysaccharide, et R 4 et R 5 sont tels que définis ci-dessus. Selon un mode de réalisation, un polymère comprenant des groupes carboxyliques fonctionnalisés avec un composé fonctionnalisant à groupe thioester peut être représenté par la formule générale (IV) : (IV) dans laquelle n représente la proportion de groupes carboxyliques dudit polymère fonctionnalisés avec un groupe thioester et Y représente un reste de polymère comprenant des groupes carboxyliques. Selon un mode de réalisation, un polymère comprenant des groupes carboxyliques fonctionnalisés avec un composé fonctionnalisant à groupe thioester peut être représenté par la formule générale (IVa) : (IVa) dans laquelle n représente la proportion de groupes carboxyliques dudit polymère fonctionnalisés avec un groupe. Selon un mode de réalisation, n représente un pourcentage de fonctionnalisation variant d’environ 0,5% à environ 50%, ou d’environ 5% à environ 40%, ou d’environ 6% à environ 30%, ou d’environ 8% à environ 20 %, ou environ 10%, ou environ 5% des groupes carboxylique du polymère. Alternativement, selon un mode de réalisation, les groupes carboxyliques du polymère peuvent être fonctionnalisés avec un composé fonctionnalisant comprenant un groupe thiol. Selon un mode de réalisation, les groupes thioester peuvent être liés au polymère par des liaisons thioéthers. Les liaisons thioéthers peuvent être établies entre le soufre d’un composé comprenant une fonction thiol et un groupe carboxylique du polymère. Selon un mode de réalisation, un composé fonctionnalisant à groupe thiol peut être de formule générale (IIIc) : SH-R 5 (IIIc) dans laquelle R 5 est tel que défini précédemment. Hydrogels réticulés, compositions, et utilisations Selon un de ses objets, l’invention concerne un hydrogel de polymère réticulé obtenable selon le procédé tel que décrit ici. Selon un de ses objets, l’invention concerne une composition comprenant un hydrogel de polymère réticulé obtenu selon le procédé tel que décrit ici. Selon un de ses objets, l’invention concerne une composition stérile injectable comprenant un hydrogel de polymère réticulé obtenu selon le procédé tel que décrit ici Selon un de ses objets, l’invention concerne une utilisation cosmétique d’un hydrogel ou d’une composition tels que décrits ici comme agent de comblement des tissus mous, notamment le comblement des rides. Selon un de ses objets, l’invention concerne un hydrogel ou une composition tels que décrits ici pour son utilisation cosmétique dans l’augmentation des tissus mous. Selon un de ses objets, l’invention concerne un hydrogel ou une composition tels que décrits ici pour son utilisation cosmétique dans la prévention et/ou le traitement d’une altération de l’aspect de surface de la peau Une utilisation cosmétique d’un hydrogel ou d’une composition tels que décrits ici peut viser à combler les rides, restaurer le volume perdu du visage ou du corps, réduire les fossettes en cas de cellulite, modeler les contours du visage ou du corps. Une utilisation cosmétique d’un hydrogel ou d’une composition tels que décrits ici peut viser à la prévention et/ou le traitement d’une altération des propriétés viscoélastiques ou biomécaniques de la peau. Une utilisation cosmétique d’un hydrogel ou d’une composition tels que décrits ici peut viser à la prévention et/ou le traitement de signes cutanés du vieillissement chronologique et/ou induits par des facteurs externes tels que le stress, la pollution atmosphérique, le tabac ou une exposition prolongée aux ultraviolets (UV). Selon un de ses objets, l’invention concerne un hydrogel de polymère réticulé obtenable selon le procédé tel que décrit ici, ou une composition comprenant un tel hydrogel, pour utilisation en tant que médicament ou dispositif médical, ou système de délivrance d’agents actifs, notamment tels que définis précédemment. Selon un mode de réalisation, l’invention concerne un hydrogel ou une composition tels que décrits ici, pour utilisation dans le traitement ou la prévention d’une maladie choisie parmi l’ostéoarthrite, le glaucome, la cataracte, la lipodystrophie, pour favoriser les processus de cicatrisation, et la lipoatrophie chez les patients atteints du sida. Exemples Les exemples décrits ci-après sont donnés aux fins d’illustration de l’invention revendiquée et ne doivent pas être interprétés comme limitant celle-ci. Exemple 1 : Préparation d’un thioester pour fonctionnaliser un polysaccharide : N -acétyl- S -[( tert -butoxycarbonyl)glycyl]cystéinate de méthyle puis N -acétyl- S -(glycyl)cystéinate de méthyle sous la forme de son sel de TFA La Boc-glycine N -hydroxysuccinimide ester (Boc-Gly-OSu, 10 g, 0.036 mmol, 1,5 eq) et le N -Acetyl-L-cystéinate de méthyle (Ac-Cys-Ome, 4,3 g, 0,024 mmol, 1 eq) sont dissouts dans le diméthyle formamide (DMF) anhydre (85 mL) sous atmosphère d’argon dans un ballon de 500 mL. La solution est agitée une nuit à température ambiante. Le milieu réactionnel est dilué avec de l’eau (40 mL) puis la phase aqueuse est extraite (3×80 mL d’acétate d’éthyle (AcOEt)). Les phases organiques sont rassemblées, lavées avec de la saumure (40 mL). La phase obtenue est séchée sur MgSO 4 puis filtrée et évaporée. Une huile transparente est obtenue. Une purification par chromatographie sur gel de silice (Heptane/AcOEt, gradient 50/50 à 0/100) permet d’obtenir le N -acétyl- S -[( tert -butoxycarbonyl)glycyl]cystéinate de méthyle sous forme d’une poudre blanche. Le N -acétyl- S -[( tert -butoxycarbonyl)glycyl]cystéinate de méthyle (600 mg, 1.80 mmol, 1 eq) est introduit dans un ballon et solubilisé dans du dichlorométhane (15 mL). La solution est placée sous atmosphère d’argon. L’acide trifluoroacétique (TFA, 3 mL) est ajouté à l’aide d’une seringue et avec un goutte-à-goutte rapide. La solution est agitée à température ambiante pendant 1h30. Le milieu réactionnel est dilué avec du méthanol (22,5 mL) afin de co-évaporer le TFA. Des co-évaporations successives sont réalisées avec des volumes de méthanol d’environ 20 mL jusqu’à ce que la masse soit stabilisée et l’obtention d’une huile jaune pâle qui se cristallise ensuite à basse température (réfrigérateur, 4°C) de N -acétyl- S -(glycyl)cystéinate de méthyle sous la forme de son sel de TFA. Exemple 2 : Préparation d’un agent réticulant comprenant deux fonctions thiols : bis-cystéine - N α , N ε -bis[ N -( tert -butoxycarbonyl)- S -trityl-L-cystéinyl]-L-lysinate d’éthyle puis N α , N ε -bis(L-cystéinyl)-L-lysinate d’éthyle Le lysinate d’éthyle (Lys-Oet, 0,7g, 2,83 mmol, 1 eq), la N -( tert -butoxycarbonyl)- S -trityl-L-cystéine (3,28 g, 7,08 mmol, 2,5 eq), ainsi que les agents de couplages 1-hydroxybenzotriazole (HOBt, 1 g, 7,08 mmol, 2,5 eq) et 1-éthyl-3-(3-diméthylaminopropyl)carbodiimide (EDCI, 1,83 g, 7,08 mmol, 2,5 eq) sont placés dans un ballon sous atmosphère d’argon et le DMF anhydre est ajouté (17,5 mL), suivi de la N , N -diisopropyléthylamine (DIEA, 1,83 g, 2,34 mL, 14,2 mmol, 5 eq). La solution est agitée à température ambiante (env. 21°C - 25°C) pendant 48h. Le milieu réactionnel est dilué avec de l’eau (30 mL) puis la phase aqueuse est extraite (3×40 mL AcOEt). Les phases organiques sont regroupées et lavées avec de la saumure (40 mL), séchées sur MgSO 4 . Finalement, les solvants sont évaporés afin d’obtenir une huile jaune. Une purification par chromatographie sur gel de silice (Heptane/AcOEt, gradient 100/0 à 0/100) permet d’obtenir le N α , N ε -bis[ N -( tert -butoxycarbonyl)- S -trityl-L-cystéinyl]-L-lysinate d’éthyle sous la forme d’une poudre blanche. Le N α , N ε -bis[ N -( tert -butoxycarbonyl)- S -trityl-L-cystéinyl]-L-lysinate d’éthyle (400 mg, 0,375 mmol, 1 éq.) est placé dans un ballon sous atmosphère inerte d’argon. Le produit est ensuite dissout dans du dichlorométhane (5 mL) puis l’acide trifluoroacétique (5 mL) et le triéthylsilane (0,24 mL, 1,5 mmol, 4 éq.) sont ajoutés au mélange. La solution est agitée à température ambiante pendant 3h puis le mélange est dilué avec de l’eau (40 mL). La phase aqueuse est lavée avec de l’éther diéthylique (3×25 mL). La phase aqueuse est ensuite lyophilisée pour obtenir le N α , N ε -bis(L-cystéinyl)-L-lysinate d’éthyle sous la forme d’une poudre blanche. Exemple 3 : Fonctionnalisation du hyaluronate de sodium avec des fonctions thioester La fonctionnalisation du hyaluronate de sodium est illustrée par l’étape 1 de FIG. 1 . De l’acide hyaluronique de sodium (NaHA ou hyaluronate de sodium) de poids moléculaire 1,5 MDa a été solubilisé dans de l’eau pour préparation injectable (ppi), à la concentration de 10 mg/g (1% w/v) sous agitation magnétique (200 rpm), pendant 2h à 3h, à température ambiante (env. 21°C - 25°C). Le pH de la solution était dans un intervalle de 5,0 à 5,5. Une solution visqueuse, homogène et transparente, de NaHA a été obtenue. 0,5 équivalent (Eq.) de chlorure de 4-(4,6-dimethoxy-1,3,5-triazin-2-yl)-4-methyl-morpholinium (DMTMM) a été solubilisé dans 1 mL d’eau ppi (soit 0,5 mole de DMTMM pour 1 mole de NaHA), à température ambiante (env. 21°C). Une solution homogène et transparente avec dissolution complète des cristaux de DMTMM a été obtenue. La DMTMM solubilisée a été ajoutée goutte-à-goutte à la solution de NaHA. Le mélange obtenu a été laissé à réagir pendant 30 minutes sous agitation magnétique, 200 rpm, à température ambiante (env. 21°C - 25°C). Le pH du mélange réactionnel était dans un intervalle de 5,0 et 5,5. 0,5 équivalent (Eq.) (0,5 mole de thioester pour 1 mole de NaHA) du sel de thioester de formule (V) : (V) a été solubilisé dans 1 mL d’eau ppi. Le thioester solubilisé a été ajouté, goutte-à-goutte, au mélange réactionnel de NaHA et de DMTMM. Le mélange obtenu a été laissé à réagir pendant 72 heures sous agitation magnétique, 200 rpm, à température ambiante (env. 21°C - 25°C), et à température ambiante pour obtenir du hyaluronate de sodium dont environ 5%-10% des groupes carboxyliques ont été fonctionnalisés avec des fonctions thioester (NaHA-thioester). Le pH du mélange réactionnel était dans un intervalle d’environ 4,0 à environ 5,5 pendant la réaction. Exemple 4 : Purification et récupération du hyaluronate de sodium fonctionnalisé avec des fonctions thioesters (HA-thioester) La purification du hyaluronate de sodium fonctionnalisé avec des fonctions thioesters (NaHA-thioester) obtenu à l’ Exemple 3 a été effectué par précipitation dans de l’éthanol. La précipitation du NaHA-thioester permet d’éliminer l’excès de DMTMM n’ayant pas réagi, les éventuels produits de dégradation de la DMTMM et l’excès de thioester. Par ailleurs, la précipitation permet de récupérer du NaHA-thioester sous forme de fibres. L’ajout de chlorure de sodium (NaCl) à la solution de NaHA-thioester permet de faciliter la précipitation du NaHA-thioester dans l’éthanol. Du NaCl a été dissout dans la solution de HA-thioester pour atteindre une concentration finale de 1 M. La précipitation du NaHA-thioester a été obtenue par addition goutte-à-goutte de la solution saline de NaHA-thioester (obtenue après addition de NaCl) dans 3 fois son volume d’éthanol froid (EtOH à 96% stocké entre 5°C et 7°C) sous agitation pour former un vortex. Le NaHA-thioester précipité a été récupéré sous forme de fibres. L’étape de précipitation a été répétée 3 fois afin de purifier le NaHA-thioester. Après la dernière précipitation, le NaHA-thioester récupéré sous forme de fibres a été solubilisé à la concentration de 5 mg/g d’eau ppi. La solution de NaHA-thioester purifiée a été lyophilisée. La solution a été congelée à -80°C puis placée sous vide (inférieure à 1 mbar), avec un système de capture de l’eau à -80°C. La durée de lyophilisation est ajustée en fonction du volume de solution à lyophiliser. Exemple 5 : Préparation d’un hydrogel de hyaluronate de sodium réticulé au moyen d’un hyaluronate de sodium fonctionnalisé avec des fonctions thioester (NaHA-thioester) La réticulation du hyaluronate de sodium fonctionnalisé par des groupes thioester au moyen d’une bi-cystéine est illustrée par l’étape 2 de FIG. 1 . Le NaHA-thioester lyophilisé obtenu à l’ Exemple 4 a été solubilisé, à température ambiante (env. 21°C-25°C), à la concentration de 20 mg/g dans un tampon phosphate salin de pH 7,0-7,4, sous agitation magnétique (200 rpm env.). Le pH final de la solution était d’environ 5,5. Selon les formulations testées 0,05 ou 0,14 Eq. de bi-cystéine, de formule (VI) (VI) utilisée comme agent réticulant, a été ajoutée sous forme de poudre à la solution de NaHA-thioester sous agitation magnétique (200 rpm env.), à température ambiante (env. 21°C-25°C) afin d’assurer la solubilisation de la bi-cystéine et un mélange homogène. Après dissolution de la bi-cystéine, le pH du mélange NaHA-thioester/bi-cystéine a été ajusté à un pH compris entre 6,0 et 7,8, par addition d’une solution de soude (NaOH) 0,25 M, sous agitation pendant env. 2 min à la spatule, à température ambiante (env. 21°C-25°C). L’addition de soude permet d’initier la réaction de réticulation. La réaction de réticulation du NaHA-thioester en présence de bi-cystéine, suite à l’addition de soude, se produit de manière très rapide et est effectué dans sa quasi-totalité en 5 min. environ. Le gel obtenu a été maintenu au repos, sans agitation, pendant 1 heure environ. L’ajustement du pH du mélange réactionnel à un pH entre 6,0 et 7,8 permet d’initier et d’accélérer la réaction de réticulation par formation de ligations chimiques natives (liaisons amides) entre les fonctions thioesters du NaHA fonctionnalisé et les fonctions thiols de la bi-cystéine. La réaction de réticulation se produit très rapidement, voire quasi instantanément. L’ensemble des réactifs peut être consommé en 5 minutes ou moins. La réaction de réticulation peut avantageusement être réalisée sous atmosphère inerte afin de prévenir ou limiter la réaction de cyclisation de la bi-cystéine, par exemple comme dans le cas de la préparation des formulations selon l’invention 1 et 2 données ci-après. Avantageusement, à l’issue de l’étape de réticulation, l’hydrogel de hyaluronate de sodium (NaHA) réticulé obtenu peut être dialysé dans un bain de tampon phosphate salin, de pH d’environ 7,0 - 7,4, à température ambiante (env. 21°C-25°C). Exemple 6 : Préparation d’un agent de comblement pour tissus mous L’hydrogel de NaHA réticulé obtenu à l’ Exemple 5 a été additionné de 10% en masse (masse/masse) de NaHA non-réticulé à 1,5 MDa, dissout dans un tampon phosphate à la concentration de 23 mg/g (sauf dans le cas de la préparation de la formulation selon l’invention 1 donnée ci-après). L’étape d’addition se fait sous agitation manuelle (spatule) ou mécanique (robot à pales, à température ambiante (env. 21°C-25°C). Le mélange de HA obtenu a été tamisé avec un tamis ayant une maille de quelques centaines de micron. Le gel de comblement pour tissus mous ainsi obtenu a été conditionné en seringues, et ensuite stérilisé à l’autoclave, dans des conditions de chaleur humide, à une température supérieure ou égale à 121°C de manière à obtenir un F0 > 15 (valeur stérilisatrice). Exemple 7 : Mesures des modules élastiques (G’) Différents gels de HA réticulés ont été préparés selon le protocole décrits aux exemples 3-6 , mais avec les paramètres suivants : Paramètres Eq. [HA : DMTMM] Eq. [HA : thioester] HA-thioester mg/g avant réticulation Eq. [HA-thioester : bi-cystéine] Addition de HA non-réticulé (% en masse de gel) Procédé 1 0,5 0,5 20 0,14 0 Procédé 2 0,5 0,5 20 0,14 10 Procédé 3 0,5 0,5 20 0,05 10 Paramètres Durée de réaction HA :DMTMM pH avant addition bi-cystéine pH après addition bi-cystéine et de soude Procédé 1 1h 4,2 6,4 Procédé 2 1h 4,2 6,4 Procédé 3 30 min 4,12 7,3 Le module élastique G’ et l’angle de déphasage δ des différentes formulations ont été mesurés avant après stérilisation comme suit. Les mesures ont été effectuées à 25°C, à une fréquence de 1 Hz, avec balayage en contrainte à l’aide d’un rhéomètre Thermo Haake RS6000 avec une géométrie cône-plan 1°/diamètre 35mm. G’ et τsont relevés à une contrainte de déformation appliquée de 5 Pa, c’est-à-dire dans le domaine de viscoélasticité où G’ et τ restent stables (c’est-à-dire dans le domaine de viscoélasticité linéaire). Le module élastique G’, ou module de conservation, mesure l’énergie restituée par le gel lorsqu’il est soumis à une faible déformation. Cette grandeur peut être imagée par la raideur d’un ressort. L’angle de déphasage δ caractérise le degré de viscoélasticité d’un matériau : il varie entre 0° pour un matériau 100 % élastique (toute l’énergie de déformation est restituée par le matériau, c’est-à-dire qu’il retrouve sa forme initiale) et 90° pour un matériau 100 % visqueux (toute l’énergie de déformation est perdue par le matériau, c’est-à-dire qu’il s’écoule et perd totalement sa forme initiale). Un gel de comblement cutané doit être majoritairement élastique pour assurer ses propriétés de comblement, c’est-à-dire que τ doit être La mesure des modules élastiques avant et après stérilisations étaient les suivants : Paramètres G’ (Pa) δ (°) T (Pa) Procédé 1 Avant stérilisation 1876 1,9 226 Après stérilisation 1786 1,9 137 Procédé 2 Avant stérilisation 1340 5,2 132 Après stérilisation 1102 4,1 96 Procédé 3 Avant stérilisation 524 7,7 174 Après stérilisation 377 4,5 124 Les hydrogels obtenus par un procédé tel que décrit ici présentent des modules élastiques, mesurés après stérilisation, compatibles avec des hydrogels convenant à un usage comme agent de comblement de tissus mous. Les hydrogels obtenus par un procédé tel que décrit ici peuvent être ajustés à un pH compris entre 6.8 et 7.8. Procédé de préparation d’un hydrogel de polymère réticulé par ligation chimique native, le procédé mettant en œuvre un polymère fonctionnalisé non-réticulé et un agent réticulant, l’agent réticulant comprenant au moins deux groupes thiols, chacun des groupes thiols étant en bêta d’une amine primaire, et le polymère comprenant des groupes carboxyliques, une partie des groupes carboxyliques étant fonctionnalisée avec des groupes thioesters, le procédé comprenant au moins les étapes consistant à : mettre en contact, dans une solution aqueuse, à un pH acide d’au moins 4,0, ledit polymère fonctionnalisé non-réticulé et ledit agent réticulant, augmenter le pH du mélange obtenu à l’étape a) d’au moins 0,5 unité, le pH augmenté étant au moins supérieur à 5,5 et n’excédant pas 8,0, et obtenir un hydrogel de polymère réticulé. Procédé selon la revendication 1, dans lequel les groupes thiol de l’agent réticulant proviennent de restes cystéine, les restes cystéines étant reliés entre eux par un espaceur. Procédé selon la revendication 1 ou 2, dans lequel l’agent réticulant est de formule générale (Ia) : Cys-A-R 1 -B-Cys (Ia) dans laquelle Cys représente un reste cystéine, et R 1 représente un reste choisi parmi une chaîne hydrocarboné en C 1 -C 10 , saturée ou insaturée, optionnellement interrompue par un plusieurs O, NR 2 , ou S, et optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -OH, -NH 2 , -NHR 2 , -SH, -COOR 2 et -CONHR 2 , dans lequel R 2 représente H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, A et B, identiques ou différents, représentent, NR 3 , O ou S, avec R 3 représentant H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée. Procédé selon l’une des revendications 1 à 3, dans lequel l’agent réticulant est représenté par la formule (II) : (II) Procédé de préparation d’un hydrogel de polymère réticulé par ligation chimique native, le procédé mettant en œuvre un premier polymère et un deuxième polymère non-réticulés, le premier polymère comprenant au moins un groupe carboxylique, le groupe carboxylique étant fonctionnalisé avec un groupe thioester, et, le deuxième polymère étant fonctionnalisé avec au moins un groupe thiol, le groupe thiol étant en bêta d’un d’une amine primaire, le procédé comprenant au moins les étapes consistant à : mettre en contact le premier et le deuxième polymères dans une solution aqueuse, la solution aqueuse étant à un pH acide d’au moins 4,0, augmenter le pH du mélange obtenu à l’étape a) d’au moins 0,5 unité, le pH étant au moins supérieur à 5,5 et n’excédant pas 8,0, et obtenir un hydrogel de polymère réticulé. Procédé selon l’une des revendications 1 à 5, dans lequel au moins environ 0,5% desdits groupes carboxylique du polymère comprenant des groupes carboxyliques fonctionnalisées avec des groupes thioesters sont fonctionnalisés par des groupes thioesters. Procédé selon l’une des revendications 1 à 6, dans lequel lesdits groupes carboxyliques du polymère comprenant des groupes carboxyliques fonctionnalisées avec des groupes thioesters sont fonctionnalisés avec un composé fonctionnalisant à groupe thioester de formule générale (III) : NH 2 -R 4 -C(O)-S-R 5 (III) dans laquelle R 4 représente une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -O-C(O)-R 6 , -C(O)-O-R 6 , -O-C(O)-NHR 6 , -S-R 6 , -S-C(O)OR 6 , -NHR 6 , -NH-C(O)R 6 , -NH-C(O)OR 6 , -C(O)NH-C(O)R 6 , -NH-C(NHR 6 )=NR 6 , -NH-C(NH-C(O)R 6 )=NH-C(O)R 7 , -Phe, -Phe-OC(O)R 6 , et R 5 représente une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -O-C(O)-R 6 , -C(O)-O-R 6 , -NHR 6 , -NH-C(O)R 6 , -C(O)NH-C(O)R 6 , -C(O)NH-COOR 6 , -NHC(O)(CH 2 ) 2 CH(NHR 6 )C(O)OR 7 , -SOR 6 , S(O)OR 6 , -Phe, -Phe-OC(O)R 6 , avec R 6 et R 7 représentant, indifféremment, H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, optionnellement substitué par Phe. Procédé selon l’une des revendications 1 à 7, dans lequel le mélange obtenu à l’étape a) est maintenu sous agitation pendant une durée variant de 5 minutes à 1 heure. Procédé selon l’une des revendications 1 à 8, dans lequel, à l’étape b), le pH est ajusté à un pH de 6,0 à 8,0, ou de 6,2 à 7,8, ou de 6,4 à 7,6, ou de 6,8 à 7,4, ou est de 7,0. Procédé selon l’une des revendications 1 à 9, dans lequel l’étape b) comprend une première séquence b1) et une deuxième séquence b2), - la séquence b1) comprenant une augmentation du pH du mélange obtenu à l’étape a) d’au moins 0,5 unité, le pH étant au moins supérieur à 5,5 et n’excédant pas 8,0, pendant une durée de 2 min. à 1 heure, et - la séquence b2) comprenant le maintien de la solution obtenue à l’issue de la séquence b1), sans agitation, pendant une durée de 15 min. à 30h. Procédé selon l’une des revendications 1 à 10, dans lequel le polymère est un polysaccharide ou de ses sels biologiquement acceptables, optionnellement le polysaccharide est l’acide hyaluronique, ou un de ses sels biologiquement acceptable. Hydrogel de polymère réticulé obtenable selon le procédé tel que défini selon l’une des revendications 1 à 11. Composition stérile injectable comprenant un hydrogel selon la revendication 12. Utilisation cosmétique d’un hydrogel selon la revendication 12 ou d’une composition selon la revendication 13 comme agent de comblement des tissus mous ou pour l’augmentation des tissus mous. Hydrogel selon la revendication 13 ou composition selon la revendication 14, ledit hydrogel ou ladite composition comprenant en outre au moins un agent actif, pour utilisation en tant que médicament ou dispositif médical. Polymère comprenant des groupes carboxyliques dans lequel une partie des groupes carboxyliques est fonctionnalisée avec des groupes thioesters, le polymère étant représenté par la formule générale (IV) : (IV) dans laquelle n représente la proportion de groupes carboxyliques dudit polymère fonctionnalisés avec un groupe thioester et varie de 0,5% à 50% et Y représente un reste de polymère comprenant des groupes carboxyliques. Agent réticulant comprenant au moins deux groupes thiol, chacun des groupes thiol étant en bêta d’une amine primaire. Agent réticulant selon la revendication 17, de formule générale (Ia) : Cys-A-R 1 -B-Cys (Ia) dans laquelle Cys représente un reste cystéine, R 1 représente un reste choisi parmi une chaîne hydrocarboné en C 1 -C 10 , saturée ou insaturée, optionnellement interrompue par un plusieurs O, NR 2 , ou S, et optionnellement substituée par un ou plusieurs groupes choisis parmi -OR 2 , -NHR 2 , -SR 2 , -COOR 2 et -CONHR 2 , dans lequel R 2 représente H, une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 4 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée, A et B, identiques ou différents, représentent, NR 3 , O ou S, avec R 3 représentant H ou une chaîne hydrocarbonée en C 1 -C 6 , saturée ou insaturée, linéaire ou ramifiée. Utilisation d’un agent réticulant selon l’une des revendications 17 à 18, pour réticuler entre eux deux polymères comprenant des groupes carboxyliques, une partie des groupes carboxyliques étant fonctionnalisée avec des groupes thioesters.