Brevet FR3163578A1 — publié le 20251226

Plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation dans le traitement d’une tumeur immunologiquement froide chez un patient ayant besoin d'un tel traitement. Traitement des tumeurs par plasma froid à pression atmosphérique (PFA) L'invention concerne le traitement par plasma froid à pression atmosphérique (PFA) des tumeurs, notamment des tumeurs immunologiquement froides, en particulier les tumeurs du cholangiocarcinome, un cancer des voies biliaires. Sur la base de leurs caractéristiques immunologiques les tumeurs peuvent être classées en tumeur dite immunologiquement « froide » ou immunologiquement « chaude ». Les termes « chaud » et « froid » sont utilisés pour décrire la présence ou l'absence de cellules immunitaires fonctionnelles dans les tumeurs, ce qui a des implications sur l'efficacité de l'immunothérapie dans le traitement du cancer. Les tumeurs immunologiquement froides (ou « tumeurs froides ») présentent peu de lymphocytes infiltrant la tumeur (TIL) et une faible charge mutationnelle. Le système immunitaire ne s'engage pas activement dans ces tumeurs, ce qui peut les rendre plus résistantes aux immunothérapies qui s'appuient sur une réponse immunitaire préexistante. Les tumeurs immunologiquement froides peuvent être classées en tumeurs « immuno-désertes », c.-à-d. qui ont très peu de cellules immunitaires, et en tumeurs « exclues du système immunitaire », où les cellules immunitaires sont présentes dans les tissus environnants mais sont incapables de pénétrer dans la tumeur elle-même. Les tumeurs immunologiquement chaudes (ou « tumeurs chaudes ») présentent des niveaux élevés de lymphocytes infiltrant la tumeur, tels que les cellules T cytotoxiques, ce qui indique une réponse immunitaire en cours contre la tumeur. Les tumeurs chaudes présentent aussi souvent des charges mutationnelles élevées, ce qui entraîne la production de nouveaux antigènes qui peuvent être reconnus par le système immunitaire. Ces tumeurs répondent généralement mieux aux immunothérapies telles que les inhibiteurs de points de contrôle, qui renforcent la réponse immunitaire existante de l'organisme contre les cellules cancéreuses. Le cholangiocarcinome (CCA), ou cancer des voies biliaires, ne présente pas d’infiltrat immunitaire dans 50% des cas. Environ 50% des cas de cholangiocarcinome sont des tumeurs froides. La maladie est classée en fonction de sa localisation : le cholangiocarcinome intrahépatique (CCAi) qui se développe dans le foie et le cholangiocarcinome extra-hépatique (CCAe) qui se développe dans les voies au niveau du hile (interface foie-canal biliaire extrahépatique, ou dans les voies biliaires distales (éloignées du foie). Le CCA est typiquement un cancer à croissance lente qui n'entraîne aucun symptôme dans ses premiers stades. Cependant, au fur et à mesure que le cancer progresse, les patients peuvent présenter divers symptômes, notamment une jaunisse (jaunissement de la peau et des yeux), des douleurs abdominales et une perte de poids. Une fois le diagnostic posé, trois lignes de traitement conventionnel peuvent être envisagées : la chirurgie (approche curative visant à retirer la tumeur), la chimiothérapie et les thérapies ciblées. Toutefois, ces dernières sont des traitements systémiques dits palliatifs et donc peu efficaces. L'une des principales caractéristiques du CCA est son taux élevé de fibroblastes associés au cancer (CAF). Ces cellules sont activées dans le microenvironnement tumoral et peuvent sécréter de grandes quantités de collagène et d'autres composants de la matrice extracellulaire, ce qui entraîne la formation d'un tissu fibrotique et rigide. Cette rigidité peut à son tour exercer des forces mécaniques qui favorisent la prolifération, l'invasion et la survie des cellules cancéreuses, contribuant potentiellement à l'agressivité du cancer. En outre, l'environnement stromal dense peut agir comme une barrière à l'administration des médicaments de chimiothérapie, réduisant ainsi l'efficacité du traitement. Il peut également entraver l'infiltration des cellules immunitaires, protégeant ainsi les cellules cancéreuses contre le système immunitaire. Toutes ces caractéristiques correspondent à une « tumeur immunologiquement froide ». La résistance d’une tumeur à un traitement anticancéreux peut être due au caractère immunologique froid de la tumeur. Des méthodes de traitement de cellules cancéreuses ou du cancer au moyen d’un plasma froid à pression atmosphérique ont été décrites (EP 3 222 121 B1, US 2017/0183632 A1, WO 2023/150338 A1) À ce jour il existe peu de traitements anticancéreux efficaces contre les cancers immunologiquement froids. À ce jour, il existe également peu de traitement anticancéreux efficaces contre le cholangiocarcinome. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements anticancéreux. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements anticancéreux ayant peu ou moins d'effets secondaires que les thérapies systémiques ou locales conventionnelles, telles que les chimiothérapies et la radiothérapie, respectivement. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements anticancéreux qui puissent être appliqués localement à différents cancers, en particulier les cancers immunologiquement froids. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements permettant de moduler le microenvironnement tumoral (MET). Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements permettant de réduire la rigidité de la matrice extracellulaire du MET. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements permettant de restructurer l'environnement de la tumeur et d'augmenter ainsi la pénétration des cellules immunitaires anti-tumorales et des traitements (anticorps par exemple). Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements anticancéreux pour des cancers où la rigidité du MET et l'immuno-surveillance antitumorale sont compromises et contribuent à la résistance au traitement et à une faible efficacité des traitements. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements anticancéreux contre les tumeurs dites « froides ». Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements anticancéreux contre les cholangiocarcinomes. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements permettant de réduire la rigidité de la tumeur afin de restaurer l'immuno-surveillance antitumorale et d'améliorer l'efficacité des thérapies anticancéreuses. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements des tumeurs solides présentant une grande rigidité et une résistance aux thérapies conventionnelles, telles que la chimiothérapie, la thérapie ciblée et l'immunothérapie. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements permettant de « transformer » les tumeurs froides en tumeurs chaudes afin d’augmenter l’efficacité du système immunitaire du patient et/ou des immunothérapies. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements des tumeurs chimiorésistantes. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements des tumeurs résistantes aux immunothérapies ou aux vaccins anticancers. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements anticancéreux aptes à induire une mort cellulaire immunogène. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements anticancéreux des tumeurs « froides » utilisables en combinaison avec d'autres thérapies anticancéreuses, telles que l'immunothérapie. Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements permettant de rétablir une action antitumorale des immunothérapies à l’égard des tumeurs « froides ». Il existe un besoin de disposer de nouveaux traitements anticancéreux du cholangiocarcinome. La présente invention a pour objet de satisfaire tout ou partie de ces besoins. Selon un de ses premiers objets, la présente invention concerne un plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation dans le traitement d’une tumeur immunologiquement froide chez un patient ayant besoin d'un tel traitement. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique est généré à partir d’un gaz noble. Selon un mode de réalisation, un gaz noble peut être choisi parmi l’hélium, le néon, l’argon, le krypton, le xénon et un mélange de ceux-ci. Selon un mode de réalisation, un gaz noble peut être choisi parmi l’hélium, le néon, l’argon, le krypton, et le xénon Selon un mode de réalisation, un gaz noble peut être l’hélium, le néon, ou l’argon. Selon un mode de réalisation, un gaz noble peut être l’hélium. Selon un mode de réalisation, le plasma atmosphérique froid peut produire au moins une espèce réactive choisie dans le groupe consistant en : espèces réactives de l’oxygène (reactive oxygen species - ROS), espèces réactives de l’azote (reactive nitrogen species - RNS), et des combinaisons de celles-ci. Selon un mode de réalisation, les espèces réactives de l’oxygène (reactive oxygen species - ROS) peuvent être choisies dans le groupe consistant en : oxygène atomique (O), oxygène radicalaire (O⸱), ozone (O 3 ), radical hydroxyle (HO⸱), anion superoxyde (O2⸱ - ), radical hyperoxyde (HOO⸱), hydroperoxyle (HO 2 ), peroxyde d’hydrogène (H 2 O 2 ), oxyde nitrique (NO⸱), ion hydronium (H 3 O + ), et des combinaisons de celles-ci. Selon un mode de réalisation, les espèces réactives de l’azote (reactive nitrogen species - RNS) peuvent être choisies dans le groupe consistant en : oxyde nitrique (NO⸱), protoxyde d'azote (N 2 O), dioxyde d’azote (NO 2 ), peroxynitrite (ONOO - ), trioxyde d’azote (N 2 O 3 ), tetraoxyde d’azote (N 2 O 4 ), ion nitrite (NO 2 - ), ion nitrate (NO 3 - ), et des combinaisons de celles-ci. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être généré par application d’impulsions électriques à un gaz noble, la durée de chaque impulsion étant comprise entre 1 ns et 100 ms. Selon un mode de réalisation, la durée séparant deux impulsions consécutives peut être fixe ou variable. Selon un mode de réalisation, la durée séparant deux impulsions consécutives est fixe. Selon un mode de réalisation, la durée séparant deux impulsions consécutives peut varier d’environ 1 ns à environ 20 ns, voire d’environ 2 ns à environ 15 ns, voire d’environ 5 ns à environ 10 ns. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être généré à partir d’un gaz noble soumis à une tension variant d’environ 100 V à environ100 kV, ou d’environ de 1 kV à environ 50 kV, ou d’environ de 5 kV à environ 30 kV ou être d’environ 10 kV. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être généré à partir d’un gaz noble soumis à un signal électrique dont la fréquence varie d’environ 0,1 Hz à environ 10 MHz, ou d'environ 1 Hz à environ 100 kHz ou d’environ 100 Hz à environ 30 kHz ou être d’environ 10 kHz. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être appliqué sur une portion de la surface du corps du patient au moins à une puissance surfacique d’environ 0,1 µW/cm 2 à environ 100 mW/cm 2 ou d’environ 1 µW/cm 2 à environ 10 mW/cm 2 , d’environ 10 µW/cm 2 à environ 1 µW/cm 2 , ou d’environ 20 à environ 500 µW/cm 2 . Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être appliqué sur une portion de la surface du corps du patient pendant environ au moins 1 seconde et communément sur un intervalle de temps variant d’environ 10 secondes à environ 30 minutes, et préférentiellement sur un intervalle de temps variant d’environ 1 minute à environ 5 minutes. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être généré à partir d’un gaz noble soumis à un signal électrique dont la tension varie d’environ 100 V et environ 100 kV, ou encore environ 30 kV, et à une fréquence variant d’environ 0,1 Hz à environ 10 MHz, pendant environ au moins 1 seconde. Selon un mode de réalisation, la tumeur immunologiquement froide peut être choisie parmi des tumeurs immunodéprimées altérées, des tumeurs immunitaires exclues altérées, des tumeurs immunitaires froides, des tumeurs désertées par le système immunitaire, des tumeurs exclues du système immunitaire, et des tumeurs à faible infiltration immunitaire. Selon un mode de réalisation, la tumeur immunologiquement froide peut être une tumeur d’un cancer choisi parmi un cancer du foie, un carcinome hépatocellulaire, un cancer des voies biliaires, un cancer de la vésicule biliaire, un cancer du pancréas, un cancer colorectal, un cancer gastrique, un cancer de la prostate, un cancer de la vessie, un cancer du rein, un cancer du poumon, un mélanome, un cancer du sein, un cancer du col de l'utérus, un cancer de l'endomètre, un cancer de l'ovaire, un carcinome à cellules de Merkel, et un cancer de la tête et du cou. Selon un mode de réalisation, le cancer des voies biliaires peut être un cholangiocarcinome. Selon un mode de réalisation, la tumeur immunologiquement froide peut être une tumeur d’un cholangiocarcinome et le plasma froid à pression atmosphérique appliqué sur une portion de la surface des voies biliaires du patient peut être généré à partir d’un gaz noble soumis à un signal électrique dont la tension varie d’environ 100 V à environ 100 kV, ou encore environ 30 kV, et à une fréquence variant d’environ 0,1 Hz à environ 10 MHz, pendant environ au moins 1 seconde. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être appliqué simultanément ou séquentiellement avec une administration d’un agent anticancéreux additionnel. Selon un mode de réalisation, l’agent anticancéreux additionnel peut être choisi parmi une électrothérapie, une chimiothérapie, une radiothérapie, un vaccin thérapeutique contre un cancer, une immunothérapie anticancer, et un virus oncolytique. Selon un mode de réalisation, l’agent anticancéreux additionnel est choisi parmi une chimiothérapie, une immunothérapie, ou une thérapie ciblée selon au moins une mutation identifiée dans la tumeur. Selon un mode de réalisation, une chimiothérapie peut être le GEMCIS. Comme illustré par les exemples donnés ci-après, les inventeurs ont observé que l’utilisation d’un plasma froid sur un modèle préclinique de cancer, notamment de cancer froid permettait de moduler le microenvironnement tumoral, notamment en réduisant la rigidité des tissus entourant la tumeur et d’induire une mort cellulaire immunogène. La « mort cellulaire immunogène » (MCI) est un type de mort cellulaire qui déclenche une réponse immunitaire. Dans le contexte du cancer, la MCI conduit à signaler activement au système immunitaire d’identifier et d'éliminer les cellules cancéreuses. Ce phénomène peut être particulièrement important dans la lutte contre les cellules cancéreuses. Avantageusement, un tel traitement permet d’améliorer et/ou de restaurer la sensibilité des tumeurs au système immunitaire du patient. Avantageusement, un tel traitement permet d’améliorer et/ou de restaurer la sensibilité des tumeurs froides au système immunitaire du patient. Avantageusement, un tel traitement permet d’améliorer et/ou de restaurer la sensibilité des cholangiocarcinomes au système immunitaire du patient. Avantageusement encore, un tel traitement permet d’améliorer et/ou restaurer l'efficacité des médicaments antitumoraux, notamment les inhibiteurs de points de contrôle immunitaire (c'est-à-dire les immunothérapies) à l’égard des tumeurs froides. Avantageusement encore, un tel traitement permet d’améliorer et/ou restaurer l’effet thérapeutique des traitement anticancéreux, en particulier dans les cas où les thérapies anticancéreuses conventionnelles ont échoué. Avantageusement encore, un tel traitement permet d’améliorer et/ou restaurer la sensibilité aux traitements anticancéreux de cancers chimiorésistants. Avantageusement, la modulation du microenvironnement tumoral à l'aide du plasma froid peut être particulièrement efficace pour traiter les tumeurs solides présentant une grande rigidité et une résistance aux thérapies conventionnelles, telles que la chimiothérapie et l'immunothérapie. Avantageusement, un traitement au plasma froid en raison de sa capacité à cibler le microenvironnement tumoral, peut avoir moins d'effets secondaires que les thérapies conventionnelles qui peuvent entraîner une toxicité systémique. FIG. 1 : (a) Diagramme électrique montrant la puissance électrique déposée sur une cible mimant la réponse électrique d’un modèle murin, en fonction de la fréquence et de la tension appliquée. (b) Profil temporel des températures tissulaires mesurées au cours d’un traitement par plasma froid de 10 minutes. (c) Principales espèces émissives de la phase plasma mesurées par spectroscopie d'émission optique. (d) Espèces chimiques à longue durée de vie et à courte durée de vie détectées par spectrométrie de masse dans la phase plasma en considérant 3 valeurs de débit : 0,2 L/min, 0,6 L/min et 1,0 L/min. L’intensité relative est calculée en soustrayant l’intensité des signaux quand le plasma est éteint à l’intensité des signaux quand le plasma est en fonctionnement. FIG. 2 : Comparaison de la croissance du volume tumoral de cholangiocarcinome (CCA) porté par deux groupes de souris : 10 souris non traitées au plasma (groupe Contrôle) et 10 souris traitées par plasma froid, à raison de 6 traitements de 5 min chacun, espacés tous les 2-3 jours (groupe Plasma). FIG. 3 : (a) Viabilité cellulaire des cellules hTERT-HSC (lignée de fibroblastes humains utilisés comme modèles cellulaires de fibroblastes associés au cancer) analysée 24 heures après l'exposition au plasma froid atmosphérique (PFA ou Cold Atmosphérique Plasma - CAP) à l'aide du test du cristal violet. (b) Niveaux d'expression de l'ARNm. (c) Niveaux d'expression des protéines α-SMA (marqueurs d’activation des fibroblastes) et γH2AX (marqueur de cassures double brun de l’ADN) 24h après l'exposition au PFA des cellules hTERT-HSC. (d) Image d'un essai de migration de hTERT-HSC pris 24h après l'exposition au PFA montrant que les cellules traitées perdent leur capacité à reconquérir l'égratignure réalisée avant le traitement, et donc à migrer. Description détaillée Définitions Sauf indication contraire, les termes scientifiques et techniques utilisés dans le présent document ont la signification communément admise dans le domaine auquel il se rattache. Des exemples de méthodes, dispositifs et matériaux sont décrits dans le présent document, mais des méthodes, dispositifs et matériaux similaires ou équivalents peuvent également être utilisés dans la mise en œuvre de la présente description. En cas de conflit, la présente description prévaudra. Sauf si le contexte l’indique autrement, les termes indiqués au singulier incluent le pluriel et les termes au pluriel incluent le singulier. Les termes « un », « un ou plusieurs » et « au moins un » peuvent être utilisés de manière interchangeable dans la description. Certaines caractéristiques de l’invention, qui sont, pour plus de clarté, décrites dans le contexte de modes de réalisation distincts, peuvent également être fournies en combinaison dans un seul mode de réalisation. Inversement, diverses caractéristiques de l’invention, qui sont, par souci de brièveté, décrites dans le cadre d’un seul mode de réalisation, peuvent également être mises en œuvre séparément ou dans toute sous-combinaison appropriée. Les plages numériques incluent tous les nombres définissant la plage. Chaque limitation numérique maximale donnée tout au long de la description inclut toute limitation numérique inférieure, comme si ces limitations numériques inférieures étaient expressément écrites. Chaque limitation numérique minimale donnée tout au long de la description inclut toute limitation numérique supérieure, comme si ces limitations numériques plus élevées étaient expressément écrites dans les présentes. Chaque plage numérique donnée tout au long de la description inclut toute plage numérique plus étroite qui se situe dans une plage numérique aussi large, comme si ces plages numériques plus étroites étaient toutes expressément écrites ici. Dans la description, les modes de réalisations décrits ici avec les termes « ayant » ou « comprenant » incluent les modes de réalisations décrits avec les termes « comprenant uniquement », « consistant en » et/ou « consistant essentiellement en ». L’expression « consistant en » implique l’inclusion des éléments énoncés à l’exclusion de tout autre élément. L’expression « consistant essentiellement en » implique l’inclusion des éléments énoncés, et éventuellement d’autres éléments lorsque les autres éléments n’affectent pas de façon significative la ou les caractéristiques fondamentales de la divulgation. En outre, l’expression « et/ou » doit être considérée comme une divulgation spécifique de chacune des deux caractéristiques avec ou sans l’autre. Ainsi, l’expression « et/ou » utilisée dans une expression telle que « A et/ou B » vise à inclure « A et B », « A ou B », « A » (seul) et « B » (seul). Les termes « environ » ou « approximativement » signifient une erreur de mesure acceptable pour une valeur particulière d’un paramètre déterminée par les méthodes de mesure habituelles dans le domaine et qui dépendra en partie de la façon dont la valeur est mesurée ou déterminée, c’est-à-dire des limites du système de mesure. Par exemple, « environ » peut signifier dans une plage de deux ou moins de deux écarts-types, selon la pratique de l’art. Alternativement, « environ » peut signifier une plage ou écart numérique allant jusqu’à 20%, par exemple jusqu’à 10%, par exemple jusqu’à 5%, et encore jusqu’à 1% d’une valeur donnée. Plasma froid à pression atmosphérique (ou Plasma froid atmosphérique). Un plasma froid à pression atmosphérique est un plasma généré à pression atmosphérique de sorte qu’il opère hors équilibre thermique et donc hors équilibre thermodynamique. Cela signifie que les espèces élémentaires qui le composent (électrons, ions et espèces neutres) ont chacun leur propre température. Typiquement, les électrons sont très minoritaires et ont des températures de l’ordre de 10 000 °C, voire plus. Les ions quant à eux ont des températures de l’ordre de 1000 °C. Enfin, les espèces neutres – de loin les plus nombreuses – ont une température inférieure à celle des ions, typiquement comprise entre 20 °C et 300 °C. Pour les applications médicale visées par la présente invention, il est entendu que la température des espèces neutres doit rester basse, typiquement inférieure ou égale à 50 °C, mieux inférieure ou égale à 45°C, encore mieux inférieure ou égale à 40°C. Ainsi, dans la présente demande, il est entendu par « plasma froid à pression atmosphérique » un plasma généré à pression atmosphérique et dont la température est inférieure ou égale à 50°C. Un plasma froid à pression atmosphérique est communément produit en appliquant une décharge électrique dans un milieu gazeux. Cette décharge est délivrée par une alimentation à haute tension qui provoque l’ionisation partielle dudit gaz. Le milieu gazeux peut être de l’air mais il est courant d’utiliser un gaz noble qui, de par son inertie chimique, permet de générer un plasma froid stable et facilement contrôlable. Le milieu gazeux peut comporter en particulier de l’hélium, de l’argon, du néon, ou une combinaison de ces gaz, de préférence le milieu gazeux comporte de l’hélium et/ou de l’argon et/ou néon. Au contact avec l’air ambiant, le plasma froid à pression atmosphérique peut alors produire des espèces réactives de l’oxygène et de l’azote. Traitement. Les termes « traiter » ou « traitement » signifient que la pathologie du patient est stabilisée, réduite ou au moins partiellement améliorée et qu'un certain soulagement, une atténuation ou une diminution d'au moins un symptôme clinique de la pathologie sont obtenus. Exposer. Dans le cadre de la description, utilisés à l’égard du plasma froid à pression atmosphérique, les termes « exposer », « appliquer », ou « administrer » sont interchangeables et font référence à l’exposition d’une, ou à l’application sur une, portion de la surface du corps d’un patient qui en a besoin, d’un plasma froid à pression atmosphérique tel que décrit ici. Tumeur immunologiquement froide. Les expressions « tumeur immunologiquement froide » et « tumeur froide » sont utilisées de manière interchangeable et font référence à une tumeur caractérisée par une faible infiltration de cellules immunitaires, notamment les lymphocytes T, ou par un microenvironnement tumoral (MET) qui inhibe ou empêche l’activité immunitaire contre la tumeur. Notamment, tel qu’utilisée ici, l’expression « tumeur immunologiquement froide » tend à couvrir les tumeurs immunodéprimées altérées, les tumeurs immunitaires exclues altérées et les tumeurs froides telles qu’elles peuvent être identifiées au moyen d’un Immunoscore (Bruni, D. et al. (2020). Nature Rev Cancer 20: 662-680.; Galon, J. et al. (2006). Science. 313: 1960-1964.; Lanzi A. et al. (2020). OncoImmunology, 9: 1-3; Galon J, and Bruni D. Nat Rev Drug Discov. 2019;18(3): 197-218.; Angell, H. K. et al. (2020). Clinical Cancer Research 26: 332-339). L'expression « tumeur froide » englobe également les tumeurs définies comme étant des tumeurs désertées par le système immunitaire, des tumeurs exclues du système immunitaire et des tumeurs à faible infiltration immunitaire. À l’opposé, une tumeur immunologiquement chaude est une tumeur caractérisée par une infiltration (présence) de cellules immunitaires, notamment les lymphocytes T, ou par un microenvironnement tumoral (MET) qui ne prévient pas l’activité immunitaire contre la tumeur. Patient. Sujet. Individu. Dans le cadre de la description, ces termes sont utilisés de manière interchangeable et désignent un mammifère, tel qu'un rongeur, un félin, un canidé ou un primate. En particulier, un patient est un être humain. Un « patient qui en a besoin » est un patient dont on sait ou dont on présume qu'il est atteint d’une tumeur. Surface du corps du patient. Au sens de la description, on entend désigner par « surface du corps du patient » une surface d’une partie du corps du patient en contact avec l'extérieur ou avec une autre partie du corps du patient. Une telle surface peut être en contact avec l’environnement extérieur ou un dispositif médical. Cette expression vise également à couvrir les surfaces des cavités internes du corps d’un patient, accessibles par voie naturelle par endoscopie ou par chirurgie. À titre d’exemple de surface du corps d’un patient, on peut mentionner la peau, la surface d’un globe oculaire, la muqueuse de l’estomac, de l’intestin ou de la vessie, ou encore la surface des voies biliaires (incluant la vésicule biliaire) ou d’un endothélium. Portion de la surface du corps du patient. Au sens de la description, on entend désigner par « portion de la surface du corps du patient » la totalité ou une fraction de cette surface. Plasma froid à pression atmosphérique Le plasma froid à pression atmosphérique est de préférence un plasma généré à partir d’un gaz noble. Selon un mode de réalisation, un gaz noble peut être choisi parmi l’hélium, le néon, l’argon, le krypton, le xénon et un mélange de ceux-ci. Selon un mode de réalisation, un gaz noble peut être choisi parmi l’hélium, le néon, l’argon, le krypton, et le xénon Selon un mode de réalisation, un gaz noble peut être l’hélium, le néon, ou l’argon. Selon un mode de réalisation, un gaz noble peut être l’hélium. Selon un mode de réalisation, le plasma atmosphérique froid peut produire au moins une espèce réactive choisie dans le groupe consistant en : espèces réactives de l’oxygène (reactive oxygen species - ROS), espèces réactives de l’azote (reactive nitrogen species - RNS), et des combinaisons de celles-ci. Selon un mode de réalisation, les espèces réactives de l’oxygène (reactive oxygen species - ROS) peuvent être choisies dans le groupe consistant en : oxygène atomique (O), oxygène radicalaire (O⸱), ozone (O 3 ), radical hydroxyle (HO⸱), anion superoxyde (O2⸱ - ), radical hyperoxyde (HOO⸱), hydroperoxyle (HO 2 ), peroxyde d’hydrogène (H 2 O 2 ), oxyde nitrique (NO⸱), ion hydronium (H 3 O + ), et des combinaisons de celles-ci. Selon un mode de réalisation, les espèces réactives de l’oxygène (reactive oxygen species - ROS) peuvent être choisies dans le groupe consistant en : oxygène atomique (O), oxygène radicalaire (O⸱), ozone (O 3 ), hydroperoxyle (HO 2 ), peroxyde d’hydrogène (H 2 O 2 ), ion hydronium (H 3 O + ), et des combinaisons de celles-ci. Selon un mode de réalisation, les espèces réactives de l’azote (reactive nitrogen species - RNS) peuvent être choisies dans le groupe consistant en : oxyde nitrique (NO⸱), protoxyde d'azote (N 2 O), dioxyde d’azote (NO 2 ), peroxynitrite (ONOO - ), trioxyde d’azote (N 2 O 3 ), tetraoxyde d’azote (N 2 O 4 ), ion nitrite (NO 2 - ), ion nitrate (NO 3 - ), et des combinaisons de celles-ci. Selon un mode de réalisation, les espèces réactives de l’azote (reactive nitrogen species - RNS) peuvent être choisies dans le groupe consistant en : oxyde nitrique (NO⸱), protoxyde d'azote (N 2 O), dioxyde d’azote (NO 2 ), et des combinaisons de celles-ci. Selon un mode de réalisation, les espèces réactives produites par un plasma atmosphérique froid peuvent être choisies dans le groupe consistant en : oxygène atomique (O), oxygène radicalaire (O⸱), ozone (O 3 ), radical hydroxyle (HO⸱), peroxyde d’hydrogène (H 2 O 2 ), hydroperoxyle (HO 2 ), oxyde nitrique (NO⸱), dioxyde d’azote (NO 2 ), protoxyde d'azote (N 2 O), et des combinaisons de celles-ci. Selon un mode de réalisation, un plasma atmosphérique froid peut produire une combinaison d’espèces réactives consistant en : oxygène atomique (O), oxygène radicalaire (O⸱), ozone (O 3 ), radical hydroxyle (HO⸱), peroxyde d’hydrogène (H 2 O 2 ), hydroperoxyle (HO 2 ), oxyde nitrique (NO⸱), dioxyde d’azote (NO 2 ), et protoxyde d'azote (N 2 O). Le plasma froid à pression atmosphérique peut être généré à partir d’au moins un gaz noble, par exemple l’hélium, soumis à des impulsions électriques étant en particulier de quelques microsecondes ou quelques millisecondes, de préférence de quelques microsecondes aussi appelées « nano-impulsions ». La durée de chaque impulsion peut être comprise entre 1 ns et 100 ms. Selon un mode de réalisation, la durée séparant deux impulsions consécutives peut être fixe ou variable. Selon un mode de réalisation, la durée séparant deux impulsions consécutives est fixe. Selon un mode de réalisation, la durée séparant deux impulsions consécutives peut varier d’environ 1 ns à environ 20 ns, voire d’environ 2 ns à environ 15 ns, voire d’environ 5 ns à environ 10 ns. Alternativement, le plasma froid à pression atmosphérique peut être généré à partir d’au moins un gaz noble, par exemple l’hélium, soumis à une tension sinusoïdale. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être généré à partir d’un gaz noble soumis à une tension variant d’environ 100 V à environ 100 kV, ou d’environ de 1 kV à environ 50 kV, ou d’environ de 5 kV à environ 30 kV ou être d’environ 10 kV. De façon générale, le plasma froid à pression atmosphérique peut être généré à partir d’au moins un gaz noble, notamment comportant de l’hélium, soumis à une tension variant d’environ 100 V à environ 30 kV, et plus communément variant d’environ 1 kV à environ 10 kV. Le plasma froid à pression atmosphérique est généré au moyen d’un dispositif de génération de plasma conventionnel. Un dispositif de génération de plasma conventionnel peut être un dispositif tel que décrit dans la demande de brevet WO 2022/229515. Un dispositif de génération de plasma froid à pression atmosphérique comporte classiquement une chambre de génération de plasma comportant une entrée en gaz noble, la chambre de génération de plasma étant soumise à un champ électrique via une ou plusieurs électrodes. Les électrodes sont configurées pour émettre un champ électrique qui, lorsque sa valeur dépasse le potentiel disruptif du gaz contenu entre les électrodes, provoque l’ionisation partielle du gaz confiné dans la chambre de génération de plasma. Les électrodes peuvent être configurées de sorte à générer un signal électrique à une fréquence d’environ 0,1 Hz à environ 10 MHz, ou d'environ 1 Hz à 100 kHz ou d’environ 100 Hz à 30 kHz ou pouvant être d’environ 10 kHz Le débit de gaz noble en entrée de la chambre de génération de plasma du dispositif de génération de plasma peut varier d’environ 1 µL/min à environ 10 L/min, mieux d’environ 1 mL/min à environ 5 L/min, mieux d’environ 50 mL/min à environ 2 L/min, encore mieux d’environ 500 mL/min à environ 1 L/min. De tels dispositifs permettent de générer un plasma froid à pression atmosphérique dont la distribution des jets est spatialement homogène permettant une application sur une surface comprise entre 0,1 cm² et 100 cm². Au contact de l’air ou de l’environnement extérieur, en sortie du dispositif de génération du plasma, le plasma peut avantageusement réagir avec l’oxygène et/ou l’azote et/ou la vapeur d’eau contenu dans l’air, afin de générer des espèces réactives ayant une plus-value thérapeutique. La température du plasma froid à pression atmosphérique, en sortie du dispositif de génération de plasma, est de préférence inférieure ou égale à 50°C, mieux inférieure ou égale à 45°C, encore mieux inférieure ou égale à 40°C. En sortie du dispositif de génération de plasma, la température du plasma froid à pression atmosphérique est de préférence supérieure ou égale à 10°C, mieux supérieure ou égale à 20°C. Le dispositif de génération de plasma n’est pas nécessairement en contact direct avec la surface à traiter. En particulier, une distance comprise entre 0,1 mm et 100 mm peut séparer le dispositif de génération de plasma de la surface à traiter. Tumeurs Selon un mode de réalisation, une tumeur considérée dans la présente description peut être une tumeur parmi un carcinome, un sarcome, ou un cancer du système nerveux central. Selon un mode de réalisation, une tumeur considérée dans la présente description peut être une tumeur parmi un cancer de la tête et du cou, un cancer thoracique, un cancer digestif, un cancer génito-urinaire, un cancer gynécologique, un cancer de la peau. Selon un mode de réalisation, une tumeur peut être choisie parmi un cancer du foie, un carcinome hépatocellulaire, un cancer des voies biliaires, un cancer de la vésicule biliaire, un cancer gastrique, un cancer de la prostate, un cancer du rein, un cancer du poumon, un cancer du col de l'utérus, un cancer de l'endomètre, un cancer de la vulve, un carcinome à cellules de Merkel (cancer de la peau), et un cancer de la tête et du cou. Les tumeurs considérées dans la présente description peuvent en particulier être des tumeurs immunologiquement froides. Les tumeurs immunologiquement froides sont des tumeurs faiblement infiltrées par des cellules immunitaires inflammatoires, notamment des cellules T et en particulier des cellules T CD8+. Il a été démontré que l'infiltration immunitaire des tumeurs, et en particulier l'infiltration des cellules T CD8+, est en corrélation avec une survie sans maladie et/ou une survie globale plus longue dans des cancers présentant des caractéristiques histologiques et des localisations anatomiques différentes. La densité des cellules T CD8+ dans la tumeur ou sa périphérie peut être un moyen d'identifier les patients atteints de tumeurs froides. Récemment, un test immunitaire appelé « Immunoscore » a été mis au point pour quantifier in situ l'infiltration des cellules T CD3+ CD8+ dans les tumeurs des patients atteints de cancer (Bruni, D. et al. (2020). Nature Rev Cancer 20: 662-680.; Galon, J. et al. (2006). Science. 313: 1960-1964.; Lanzi A. et al. (2020). OncoImmunology, 9: 1-3.). L'Immunoscore est un système de notation basé sur l'immunohistochimie et la pathologie numérique qui évalue les densités de cellules T CD3+ et CD8+ dans la tumeur et sa marge invasive. En bref, deux lames adjacentes de blocs tumoraux fixés au formol et inclus en paraffine sont colorées avec des anticorps anti-CD3 et anti-CD8 dans un automate de coloration. Les lames sont ensuite scannées et les images numériques sont utilisées pour quantifier les densités des cellules d'intérêt à l'aide d'un logiciel de pathologie numérique. Les densités sont finalement traduites en un Immunoscore, allant d'un Immunoscore faible (10) à un Immunoscore élevé (14). Galon et Bruni ont proposé que l'immunoscore soit aligné sur le concept de « tumeurs chaudes et froides » (Galon J, and Bruni D. Nat Rev Drug Discov. 2019;18(3): 197-218.; Angell, H. K. et al. (2020). Clinical Cancer Research 26: 332-339.). Avec cette approche, les tumeurs ont été classées en quatre catégories en fonction de l'infiltration des cellules T : les tumeurs immunitaires chaudes, les tumeurs immunodéprimées altérées, les tumeurs immunitaires exclues altérées et les tumeurs froides. Les caractéristiques de ces quatre types de tumeurs peuvent être définies comme suit : 1. Tumeurs immunitaires chaudes (également appelées ici tumeurs chaudes). Haut degré d'infiltration de cellules T et de cellules T cytotoxiques (immunoscore élevé). Activation des points de contrôle (protéine de mort cellulaire programmée 1 (PD-1), antigène 4 associé aux lymphocytes T cytotoxiques (CTLA-4), récepteur 3 des immunoglobulines mucines des cellules T (TIM-3) et gène 3 d'activation des lymphocytes (LAG-3)) ou autres fonctions altérées des lymphocytes T (par exemple, suppression des lymphocytes T induite par le potassium extracellulaire). 2. Tumeurs immunodéprimées altérées Infiltration faible, mais non absente, des lymphocytes T et des lymphocytes T cytotoxiques (Immunoscore intermédiaire) Présence de médiateurs inhibiteurs solubles (TGFγ, interleukine-10 (IL-10) et facteur de croissance de l'endothélium vasculaire (VEGF)) Présence de cellules immunosuppressives (cellules suppressives d'origine myéloïde et cellules T régulatrices) Présence de points de contrôle des cellules T (PD-1, CTLA-4, TIM-3 et LAG-3) 3. Tumeurs immunitaires exclues par altération Pas d'infiltration de cellules T à l'intérieur du lit tumoral Accumulation de cellules T aux frontières de la tumeur (marge invasive) (Immunoscore intermédiaire) Activation des voies oncogéniques Régulation épigénétique et reprogrammation du microenvironnement tumoral Vascularisation tumorale et/ou stroma aberrants Hypoxie 4. Tumeurs immunitaires froides Absence de cellules T à l'intérieur de la tumeur et sur les bords de la tumeur (faible Immunoscore) Échec de l'amorçage des cellules T (faible charge mutationnelle de la tumeur, mauvaise présentation de l'antigène et insensibilité intrinsèque à l'élimination par les cellules T). Un patient est considéré comme ayant une tumeur froide s'il a une tumeur correspondant à la définition d'une tumeur immunosupprimée altérée, d'une tumeur immunitaire exclue altérée ou d'une tumeur immunitaire froide telle que définie ci-dessus. C'est l'équivalent de patients cancéreux ayant des immunoscores I, II ou III mais pas IV (ces derniers étant des tumeurs enflammées par les lymphocytes T). La présente invention s'applique aux patients présentant un immunoscore I, II et III, mais pas IV. D'autres tests et technologies que l'immunoscore ou la densité des cellules T peuvent aider à identifier des tumeurs froides. Dans certains cas, une tumeur froide présente des lymphocytes anergisés (ou anergiques). Cela signifie que les lymphocytes ne répondent pas à l'antigène. Les méthodes de détermination des lymphocytes anergiques sont bien connues dans l'art. Dans d'autres cas, une tumeur froide présente un faible taux de cellules CD3 positives. Par exemple, la tumeur froide peut avoir moins de 10 % de cellules CD3 positives (en pourcentage du total des cellules de la tumeur), c'est-à-dire moins de 5 %, moins de 4 %, moins de 3 %, moins de 2 %, moins de 1 %, moins de 0,5 %, moins de 0,1 %, ou aucune cellule CD3 positive. Les méthodes de mesure du pourcentage de cellules CD3 positives sont connues dans l'art. L'expression « tumeur froide » englobe également toutes les tumeurs désertées par le système immunitaire, les tumeurs exclues du système immunitaire et les tumeurs à faible infiltration immunitaire. Les « tumeurs désertées par le système immunitaire » visent des tumeurs pour lesquelles il y a une absence totale de réponse immunitaire dans la tumeur en raison d'un manque de cellules T infiltrant la tumeur. Les « tumeurs exclues du système immunitaire » visent des tumeurs pour lesquelles des cellules T réactives sont générées mais ne sont pas en mesure de pénétrer dans la tumeur pour organiser une réponse contre elle ; des cellules T peuvent être présentes à la périphérie de la tumeur. Les « tumeurs à faible infiltration immunitaire » visent des tumeurs pour lesquelles le niveau de pénétration des cellules immunitaires (lymphocytes T) dans le microenvironnement tumoral est réduit. Par « cancer comprenant une tumeur froide », il est fait référence aux tumeurs froides et aux tumeurs non froides. Par exemple, cela peut se produire si le cancer initial (qui peut être une tumeur froide) s'est métastasé et a formé des tumeurs secondaires qui ne sont pas des tumeurs froides. Un patient concerné par la présente description peut avoir plusieurs tumeurs, dont une seule est une tumeur froide. Par « tumeur(s) froide(s) », il est fait référence aux cancers dont toutes les tumeurs (primaires et secondaires) sont froides. Selon un mode de réalisation, une tumeur immunologiquement froide peut être choisi parmi un sarcome ou un carcinome. Selon un mode de réalisation, une tumeur immunologiquement froide ou non peut être une tumeur d’un cancer choisi parmi un cancer du foie, un carcinome hépatocellulaire, un cancer des voies biliaires, un cancer de la vésicule biliaire, un cancer gastrique, un cancer de la prostate, un cancer du rein, un cancer du poumon, un cancer du col de l'utérus, un cancer de l'endomètre, un carcinome à cellules de Merkel, et un cancer de la tête et du cou. Selon un mode de réalisation, une tumeur immunologiquement froide peut être une tumeur d’un cancer choisi parmi un cancer du foie, un carcinome hépatocellulaire, un cancer des voies biliaires, un cancer de la vésicule biliaire, un cancer du pancréas, un cancer colorectal, un cancer gastrique, un cancer de la prostate, un cancer de la vessie, un cancer du rein, un cancer du poumon, un mélanome, un cancer du sein, un cancer du col de l'utérus, un cancer de l'endomètre, un cancer de l'ovaire, un carcinome à cellules de Merkel, et un cancer de la tête et du cou. Selon un mode de réalisation, un cancer des voies biliaires peut être un cancer comprenant des tumeurs immunologiquement froides ou chaudes. Selon un mode de réalisation, un cancer des voies biliaires peut être un cancer comprenant des tumeurs immunologiquement froides et chaudes. Selon un mode de réalisation, un cancer des voies biliaires peut être un cancer consistant en des tumeurs immunologiquement froides. Selon un mode de réalisation, un cancer des voies biliaires peut être un cholangiocarcinome. Le cholangiocarcinome est une tumeur maligne qui se développe à partir des cellules de l'épithélium des voies biliaires, qui sont les canaux transportant la bile du foie à la vésicule biliaire, puis à l'intestin grêle. Un cholangiocarcinome peut se développer dans n'importe quelle partie des voies biliaires. Il peut être observé dans le foie (cholangiocarcinome intrahépatique) ou à l'endroit où les voies biliaires quittent le foie (cholangiocarcinome extrahépatique incluant les cholangiocarcinomes péri hilaires et distaux, et les cancers de la vésicule biliaire). Selon un mode de réalisation un cholangiocarcinome peut être choisi parmi un cholangiocarcinome intrahépatique et un cholangiocarcinome extrahépatique. Les symptômes du cholangiocarcinome peuvent inclure des douleurs abdominales, de la fièvre, une jaunisse, des démangeaisons, une perte de poids et une fatigue. Le diagnostic du cholangiocarcinome peut être établi par une combinaison d'examens, notamment une échographie abdominale, une tomodensitométrie (TDM) ou une imagerie par résonance magnétique (IRM). Selon un mode de réalisation, une tumeur immunologiquement froide peut être un cancer choisi parmi un cancer des voies biliaires. Selon un mode de réalisation, une tumeur immunologiquement froide peut être une tumeur d’un cholangiocarcinome. Combinaison de traitements Selon un mode de réalisation, un plasma froid à pression atmosphérique tel que décrit pour le traitement de cancer peut être utilisé en combinaison avec au moins un autre agent thérapeutique anticancéreux. Les expressions « en combinaison avec » ou « combiné à » signifient que le plasma froid à pression atmosphérique est appliqué avant, après ou en même temps que l’administration de l’agent anticancéreux additionnel. Dans certains cas, l'expression « en combinaison avec » comprend l'application et l’administration simultanée ou séquentielle du plasma froid à pression atmosphérique et de l’agent anticancéreux additionnel. Selon un mode de réalisation, un plasma froid à pression atmosphérique tel que décrit peut-être appliqué simultanément ou séquentiellement avec une administration d’au moins un agent thérapeutique anticancéreux additionnel. Dans certains modes de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique et l’agent anticancéreux additionnel sont, respectivement, appliqués et administrés de manière séquentielle à un patient qui en a besoin. Par exemple, le plasma froid à pression atmosphérique et l’agent anticancéreux additionnel sont, respectivement, appliqués et administrés l'un le premier jour et l'autre le jour suivant de la période de traitement, ou le même jour, l'un à un premier moment et le second à un moment subséquent. Par exemple, le plasma froid à pression atmosphérique est appliqué le matin d'un jour, et l’agent anticancéreux additionnel est administré l'après-midi du même jour, ou inversement. Dans certains modes de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique et l’agent anticancéreux additionnel sont, respectivement, appliqués et administrés simultanément à un sujet qui en a besoin. Par exemple, le plasma froid à pression atmosphérique et l’agent anticancéreux additionnel sont, respectivement, appliqués et administrés le même jour, approximativement à la même heure. Selon un mode de réalisation, un plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation tel que décrit ici peut être appliqué simultanément ou séquentiellement à une administration d’un agent anticancéreux additionnel. Selon un mode de réalisation, un agent thérapeutique anticancéreux additionnel est administré subséquemment à l’application d’un plasma froid à pression atmosphérique. Cette administration peut être réalisée immédiatement après l’application du plasma froid à pression atmosphérique ou dans les 5h consécutives à cette application. Selon un mode de réalisation, un agent thérapeutique anticancéreux additionnel est administré avant l’application d’un plasma froid à pression atmosphérique. Cette administration peut être réalisée immédiatement avant l’application du plasma froid à pression atmosphérique ou dans les 5h précédant cette application. Un agent thérapeutique anticancéreux additionnel est nécessairement distinct d’un traitement au plasma froid à pression atmosphérique tel que décrit ici. Un agent anticancéreux additionnel froid à pression atmosphérique peut être choisi parmi une électrothérapie, par exemple à champs électrique pulsé, une chimiothérapie immunogène, une radiothérapie, un vaccin thérapeutique contre un cancer, une immunothérapie anticancer, et un virus oncolytique. Une immunothérapie anticancer peut être choisie parmi des inhibiteurs de points de contrôle immunitaire. La chimiothérapie immunogène permet d’entraîner la mort des cellules cancéreuses d'une manière qui provoque une réponse immunitaire, entraînant le recrutement de cellules immunitaires dans la tumeur. On peut citer, le 5-FU, la gemcitabine, la capecitabine, et l’oxaliplatine. La radiothérapie, comme la chimiothérapie, peut induire une mort cellulaire immunogène (immunogenic cell death en Anglais) des cellules tumorales conduisant à une réaction immunitaire anti-tumorale, comme la SIRT (radiothérapie interne sélective appelée aussi radio-embolisation) qui utilise de l’Yttrium-90, de l’Holmium-166 ou du Rhenium186 ou 188. Les vaccins contre le cancer permettent de stimuler une réponse immunitaire contre des antigènes tumoraux spécifiques, ce qui peut attirer les cellules immunitaires vers la tumeur. Parmi les cibles, on trouve CTLA-4, PD-1 (vaccin à ADN) ou Wilms’ tumor gene antigen (WT1) et la mucine 1 (MUC1) (vaccin à ARN). D’autres antigènes tumoraux testés sont : cell division associated 1 (CDCA1), cadherin 3 (CDH3) et la kinesin family member 20A (KIF20A). Les inhibiteurs du point de contrôle immunitaire comprennent les thérapies anti-PD-1, anti-PD-L1, et anti-CTLA-4, qui peuvent supprimer les rétrocontrôles des cellules T, ce qui peut renforcer leur activité et leur capacité à infiltrer les tumeurs. Selon un mode de réalisation, un inhibiteur de point de contrôle immunitaire peut être un anticorps qui inhibe la protéine transmembranaire de mort cellulaire programmée 1 (PDCD1 ou PD-1 ou CD279), le ligand PD-L1 (B7H1 ou CD274) et/ou la molécule 4 associée aux lymphocytes T cytotoxiques (CTLA-4). Un tel anticorps peut être un anticorps monoclonal. Selon un mode de réalisation, un anticorps bloquant PD-1 peut être choisi parmi le pembrolizumab, le nivolumab, le spartalizumab, le tislelizumab et le cemiplimab. Selon un mode de réalisation, un anticorps bloquant PD-L1 peut être choisi parmi l'atezolizumab, l'avelumab et le durvalumab. Selon un mode de réalisation, un anticorps bloquant CTLA-4 peut être l'ipilimumab. Les virus oncolytiques peuvent infecter et tuer sélectivement les cellules cancéreuses, provoquant la libération d'antigènes tumoraux et provoquant une réponse immunitaire. Le terme « oncolytique » vise à désigner la capacité d'un virus à se répliquer sélectivement dans des cellules en division (par exemple, une cellule proliférative telle qu'une cellule cancéreuse) dans le but de ralentir la croissance et/ou de lyser ladite cellule en division, que ce soit in vitro ou in vivo , tout en ne montrant aucune réplication ou une réplication minimale dans des cellules non en division (par exemple, des cellules normales ou saines). À titre d’exemple de virus oncolytiques convenant à l’invention, on peut citer les adénovirus, les protoparvovirus, les virus de la vaccine, les réovirus ; le virus de l'herpès simplex (HSV) ; le virus de la stomatite vésiculaire (VSV) ; le virus de la maladie de Newcastle (NDV) ; le virus de la rougeole ; les picornavirus ; ou encore le virus de Maraba. Ces virus sont connus des personnes compétentes en médecine et en virologie. Utilisations et méthodes Selon un de ses objets, l’invention concerne un plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation dans le traitement d’une tumeur chez un patient ayant besoin d'un tel traitement. Selon un mode de réalisation, la tumeur peut être une tumeur immunologiquement froide. Selon un mode de réalisation, la tumeur peut être une tumeur immunologiquement chaude. Selon un de ses objets, l’invention concerne une méthode de traitement d’une tumeur, en particulier immunologiquement froide, chez un patient ayant besoin d'un tel traitement, la méthode comprenant au moins une étape consistant à appliquer un plasma froid à pression atmosphérique sur une portion de la surface du corps du patient. L’étape consistant à appliquer un plasma froid à pression atmosphérique sur une portion de la surface du corps du patient permet le traitement d’une tumeur, en particulier immunologiquement froide. Selon un mode de réalisation, une utilisation ou une méthode telles que décrites ici permettent le traitement de tumeurs immunodéprimées altérées. Selon un mode de réalisation, une utilisation ou une méthode telles que décrites ici permettent le traitement de tumeurs immunitaires exclues altérées. Selon un mode de réalisation, une utilisation ou une méthode telles que décrites ici permettent le traitement de tumeurs immunitaires froides. Selon un mode de réalisation, une utilisation ou une méthode telles que décrites ici permettent le traitement de tumeurs désertées par le système immunitaire. Selon un mode de réalisation, une utilisation ou une méthode telles que décrites ici permettent le traitement de tumeurs exclues du système immunitaire. Selon un mode de réalisation, une utilisation ou une méthode telles que décrites ici permettent le traitement de tumeurs à faible infiltration immunitaire. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être appliqué sur une portion de la surface du corps du patient pendant une durée variant d’environ 1 s à environ 120 min., ou d’environ 10 s à environ 45 min., ou d’environ 1 min à environ 10 min., ou d’environ 1 à environ 5 min., ou être d’environ 5 min. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être appliqué sur une portion de la surface du corps du patient au moins à une fréquence variant de 0,1 Hz à environ 10 MHz, ou d'environ 1 Hz à 100 kHz ou d’environ 100 Hz à 30 kHz ou être d’environ 10 kHz. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être appliqué sur une portion de la surface du corps du patient au moins à une tension de générateur variant entre 100 V et 100 kV, ou d’environ 1 kV et 50 kV, ou d’environ 5 kV et 30 kV ou être d’environ 10 kV. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être appliqué sur une portion de la surface du corps du patient au moins à une puissance surfacique de 0,1 µW/cm 2 à 100 mW/cm 2 ou de 1 µW/cm 2 à 10 mW/cm 2 , de 10 µW/cm 2 à 1 µW/cm 2 , ou de 20 à 500 µW/cm 2 . Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être appliqué sur une portion de la surface du corps du patient pour un nombre de traitements au minimum de 1, typiquement compris entre 2 et 10 traitements. La durée entre deux traitements consécutifs est comprise entre environ 1h et environ 1 semaine, ou entre environ 10 heures et 3 jours, ou entre environ 1 jour et 2 jours. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être généré à partir d’au moins un gaz noble, notamment l’hélium, soumis à un champ électrique via au moins une électrode délivrant un signal électrique à une tension de générateur variant entre 100 V et 100 kV, ou d’environ 1 kV et 50 kV, ou d’environ 5 kV et 30 kV ou être d’environ 10 kV, et à une fréquence de 0,1 Hz à environ 10 MHz, ou d'environ 1 Hz à 100 kHz ou d’environ 100 Hz à 30 kHz ou d’environ 10 kHz, le gaz noble s’écoulant à un débit compris entre 1 µL/min et 10 L/min, mieux entre 1 mL/min et 5 L/min, mieux entre 50 mL/min et 2 L/min, encore mieux entre 500 mL/min et 1 L/min. Selon un mode de réalisation, le plasma froid à pression atmosphérique peut être appliqué sur une portion de la surface du corps du patient pendant au moins 1 seconde et communément sur un intervalle de temps compris entre 10 secondes et 30 minutes, et préférentiellement sur un intervalle de temps compris entre 1 minute et 5 minutes. Selon un mode de réalisation, le cancer est un cholangiocarcinome et le plasma froid à pression atmosphérique peut être appliqué sur une portion de la surface des voies biliaires du pendant au moins 1 seconde et préférentiellement sur un intervalle de temps compris entre 10 secondes et 10 minutes. Exemples Les exemples décrits ci-après sont donnés aux fins d’illustration de l’invention revendiquée et ne doivent pas être interprétés comme limitant celle-ci. Exemple 1 : Matériels et Méthodes Dispositif à plasma froid L'appareil à plasma froid permet de générer un plasma non thermique à pression atmosphérique avec des paramètres réglables tels que la puissance, la fréquence et la durée du traitement. L'appareil garantit un traitement au plasma uniforme sur la zone cible et les résultats présentés ci-après indiquent qu'aucun risque de dommage thermique/électrique n'a été mis en évidence sur les tissus environnants. Le dispositif permettant de générer le plasma froid possède une chambre de génération de plasma, conçue pour contenir l'hélium et permettre la formation de plasma. Elle est fabriquée avec des matériaux résistants à la chaleur et à l'ionisation pour assurer la sécurité et la durabilité. Typiquement, il s'agit de matériaux diélectriques comme le quartz ou l'alumine. Le dispositif comprend également un système d'alimentation en hélium pour injecter ce gaz dans la chambre de génération de plasma. Ce système est équipé de régulateurs de débit pour contrôler précisément la quantité d'hélium injectée. Deux anneaux concentriques servent d'électrodes. Ces anneaux sont positionnés stratégiquement à l'extérieur de la chambre pour créer un champ électrique uniforme et efficace, sans risque de passage au régime d'arc afin de toujours garantir la génération du plasma froid. L'une de ces électrodes doit être connectée à une source d'alimentation de haute tension, de préférence de haute tension impulsionnelle. La tension impulsionnelle est réglable, permettant un contrôle fin de l'intensité et de la fréquence des impulsions, ce qui est crucial pour moduler les caractéristiques du plasma généré. Grâce à la précision de l'alimentation en tension impulsionnelle et au design optimisé des électrodes à double anneaux, le dispositif permet un contrôle avancé de la température et de la densité du plasma. Cette caractéristique est essentielle pour des applications spécifiques où la précision du plasma est cruciale. Des systèmes de sécurité intégrés, comme des coupe-circuits automatiques et des détecteurs de surtension, peuvent être utilisés pour assurer la sécurité de l'opérateur et la fiabilité du dispositif. Détermination des espèces réactives Le présent dispositif à jet de plasma est conçu pour générer une variété d'espèces réactives, dont la composition et les caractéristiques peuvent être analysées et quantifiées avec précision à l'aide de la Spectroscopie d'Émission Optique (OES) et de la Spectrométrie de Masse (MS). La Spectroscopie d'Émission Optique est utilisée pour détecter et caractériser les espèces radiatives, principalement les ions, les atomes, et les molécules dans des états excités, qui émettent de la lumière lors du retour à un état énergétique inférieur. Cette méthode est particulièrement efficace pour l'analyse des espèces radiatives à courte durée de vie, telles que certains radicaux libres et ions excités, qui émettent rapidement de la lumière après excitation. En particulier, nous avons pu mettre en évidence la génération de radicaux OH et O. La Spectrométrie de Masse est utilisée pour identifier et quantifier les espèces ioniques et certaines molécules neutres présentes dans le plasma. Cette technique est adaptée pour la détection d'espèces non-radiatives, offrant ainsi une analyse complète des composants stables du plasma. L'utilisation combinée de l'OES et de la MS dans ce dispositif permet une analyse exhaustive des espèces présentes dans le jet de plasma, couvrant à la fois les aspects radiatifs et non-radiatifs, ainsi que les caractéristiques à court et long terme des espèces générées. Sécurité thermique Afin d'assurer une utilisation sûre et conforme aux normes de sécurité, le dispositif est conçu pour maintenir la température de traitement en dessous du seuil critique de 40 °C, indépendamment de la durée du traitement par plasma. Pour garantir le respect continu de cette contrainte de température, une surveillance thermique est mise en œuvre à l'aide de l'imagerie thermographique infrarouge. Ce système de surveillance capte en temps réel les données thermiques du dispositif à jet de plasma et de l'environnement de traitement, permettant une évaluation précise et instantanée des températures. Les données capturées par l'imagerie thermographique sont analysées pour identifier toute zone ou composant du dispositif dépassant la limite de température de 40 °C. En cas de dépassement de cette température, des mécanismes de régulation thermique sont automatiquement activés pour réduire la température à un niveau sûr. Ces systèmes peuvent inclure la modulation de l'intensité du plasma, l'ajustement des débits de gaz, et l'activation de systèmes de refroidissement. Mesure de la rigidité des tumeurs par élastographie par ondes de cisaillement Les mesures d'élastographie par ondes de cisaillement (shear wave elastography (SWE)) sont réalisées avec un appareil à ultrasons Aixplorer (SuperSonic Imagine, Aix-en-Provence, France) en utilisant une sonde superficielle de 15 MHz dédiée à la recherche (256 éléments, 0,125 µm de pas). Les souris ont été anesthésiées avec 2% d'isoflurane et leur température corporelle maintenue à un niveau physiologique à l'aide d'une plaque chauffante. Les images en mode B et les images SWE ont été acquises simultanément. L'image en mode B permet de déterminer manuellement la région d'intérêt (ROI) correspondant aux contours de la tumeur. Le mode SWE a été réalisé en mode pénétration avec une échelle de couleur allant de 0 (transparent) à 40 kPa (rouge), choisie arbitrairement au début de l'étude en fonction des valeurs de rigidité attendues. La surface, le diamètre et un ensemble de valeurs de rigidité (moyenne, minimum, maximum et écart-type) ont été enregistrés pour la ROI telle que définie précédemment. Les images SWE ont été également analysées à l'aide d'un code MATLAB interne afin de récupérer la carte de rigidité. Modèle de cholangiocarcinome chez la souris (ectopique sous-cutanée) Deux modèles ont été utilisés. Xénogreffe : les cellules de cholangiocarcinome injectées sont d’espèce différente de la souris. Des cellules humaines de CCA ont été injectées sous la peau du flanc droit ou gauche des souris dites immunodéficientes (souche Rj:ATHYM-Foxn1nu/nu) ; leur système immunitaire est incomplet. Voir la publication suivante pour une description détaillée (Lekbaby et al., Experimental model of biliary tract cancers : subcutaneous xenograft of human cell lines in immunodeficient nude mouse. Methods in Cell Biology, 2024). Syngénique : les cellules de cholangiocarcinome injectées sont de la même espèce que la souris. Les cellules de cholangiocarcinome murine (SB1) ont été injectées sous la peau du flanc droit ou gauche des souris dites immunocompétentes (B6/Rj -Tyr c/c ); leur système immunitaire est complet. Par souris ont été injectées 3 millions de cellules à l’aide d’une seringue (voir publication citée dessus dans partie « xénogreffe »). Après 3 à 4 semaines post-injection, les tumeurs sont apparues ; elles ont été mesurées à l’aide d’un pied à coulisse 3 fois par semaines. Dans les deux cas, les traitements avec le plasma froid à pression atmosphérique ont débuté lorsque les tumeurs mesuraient entre 50 et 100 mm 3 . Modèles de conduits biliaires artificiels Deux modèles ont été utilisés : un "ERCP trainer" et un modèle anatomique porcin post-mortem. L'ERCP trainer est un simulateur de formation spécialement conçu pour l'entraînement à l'endoscopie rétrograde cholangiopancréatique (ERCP), une technique médicale avancée utilisée pour diagnostiquer et traiter les pathologies des voies biliaires et du pancréas. Ce dispositif reproduit de manière réaliste l'anatomie concernée, offrant ainsi aux professionnels de santé un environnement sûr pour pratiquer et se perfectionner dans diverses procédures ERCP, telles que la canulation des conduits biliaires, l'injection de colorant, la pose de stent, la sphinctérotomie et la lithotripsie. Le modèle anatomique porcin post-mortem. Ce modèle comprend l'œsophage, l'estomac, le duodénum, l'arbre biliaire, le foie et la vésicule biliaire. Il est placé dans une structure en plastique dédiée, conçue pour ressembler à la cavité péritonéale humaine. Cette structure est connue sous le nom d'EASIE (Erlangen active simulator for interventional endoscopy) et a été utilisée dans sa version EASIE-RTM, fournie par la société ENDOSIM. L'EASIE-RTM est reconnu comme un outil éducatif exceptionnel pour l'endoscopie interventionnelle. Viabilité cellulaire, altérations d’ADN, migration des cellules Viabilité cellulaire analysée par la méthode du cristal violet : Les cellules ont été ensemencées dans des plaques 24 puits la veille du traitement au plasma. La viabilité cellulaire a été évaluée entre 24h et 72 h post-traitement sur toutes les lignées étudiées, le milieu ayant été renouvelé au préalable. Les cellules ont été colorées au cristal violet (violet de gentiane dilué dans du méthanol) pendant 15 min puis rincées à l’eau. Le cristal violet a ensuite été dissout dans du SDS. Les plaques ont été incubées à 37 °C pendant 2 h, puis l’absorbance a été quantifiée avec un spectrophotomètre (TECAN®) à la longueur d’onde de 595 nm. Etude de la migration en temps réel des fibroblastes par « Scratch Assay » : Les cellules myofibroblastiques (hTERT-HSC) ont été ensemencées à confluence dans une plaque 24 puits la veille du traitement. A l’aide d’un cône, une déchirure du tapis cellulaire a été réalisée au fond de chaque puits. Après lavage, les cellules ont été directement traitées avec le plasma froid. La migration des cellules a été filmée en temps réel pendant 24 h à l’aide d’un microscope Olympus IX83, doté d’une platine motorisée et d’une chambre thermostatée. Les photos ont été prises toutes les 30 min, puis analysées avec le logiciel ImageJ . Analyse des a ltération s de l’ADN par Western Blot : 24 h suivant le traitement au plasma froid, les cellules ont été lysées avec une solution de RIPA ( Radio- Immunoprecipitation Assay , Merck) sur la glace pendant 15 min sous agitation. Après centrifugation (15 min à 4 °C), les surnageants ont été collectés et les protéines ont été dosées à l’aide d’un kit BCA (Pierce™ BCA Protein Assay Kit, ThermoFisher 23225) dont le fonctionnement se base sur l’acide bicinchoninique. La concentration en protéines a alors été déterminée par mesure de l’absorbance à 570 nm (TECAN®) en utilisant une gamme d’étalonnage en BSA. Les protéines ont ensuite été diluées à une concentration de 2 µg/µL dans le tampon de charge qui est le bleu de Laemmli en présence de 2-mercaptoéthanol qui permet de dénaturer les protéines pendant 5 min à 98 °C. La migration des protéines a été faite sur un gel d’acrylamide concentré à 12 % dans une solution de migration (constituée de Tris-Glycine-SDS dilué dans de l’eau distillée) pendant ~1h sous une tension de 150 V. Puis les protéines ont été transférées sur une membrane de nitrocellulose pendant ~1h20 sous une tension de 50 V (via une solution de transfert composée de Tris-Glycine dilué). Les membranes ont ensuite été saturées en BSA 5 % dilué dans du TBS Tween 0,1 % (TBS-T) pendant 1 h sous agitation à température ambiante, puis découpées au scalpel en fonction de la taille des protéines souhaitées. Celles-ci ont été incubées avec l’anticorps primaire ( Table 1 ) pendant une nuit à 4 °C sous agitation, puis lavées au TBS-T. Les membranes ont par la suite été mises en présence de l’anticorps secondaire (couplé à la peroxydase) pendant 1 h à température ambiante sous agitation. La révélation des protéines a été effectuée à l’aide du kit ECL Prime (Life Sciences) par chimioluminescence (Imager iBright, ThermoFisher). Une solution de décapage (Stripping Buffer, GeBa) a été utilisée sur les membranes pendant 15 min, afin de révéler des protéines ayant des poids moléculaires proches. L’anticorps g-H2AX a été utilisé comme marqueurs des cassures de l’ADN. Table 1 : Anticorps primaires Protéine Poids moléculaire (kDa) Référence Compagnie Dilution Source γH2AX 15 #9718 Cell Signaling 1/1000 (WB) Lapin GAPDH 36 sc-32233 Santa Cruz 1/1000 Souris A nalyses du phénotype des fibroblasts par RT - qPCR : Les ARNm totaux ont été extraits à l’aide du kit NucleoSpin RNA (Macherey-Nagel) 24 h après le traitement avec le plasma froid. L’ARN a été élué dans 40 µL d’eau RNAse free puis dosé à l’aide d’un Nanodrop (ThermoScientific). Les ADNc ont ensuite été synthétisés à l’aide d’un kit (Invitrogen) et d’un thermocycleur (Agilent Technologies). Les PCR quantitatives ont été réalisées sur le LightCycler 96 (Roche) à partir d’ADNc concentrés à 2,5 ng/µL, en utilisant le SYBR Green comme sonde fluorescente. L’expression des gènes d’intérêt est analysée par duplicate selon la méthode 2 - [(CT gène d’intérêt – CT gène de ménage) – CT échantillon contrôle] , en utilisant la GAPDH comme gène de normalisation. Table 2 : Séquences des amorces utilisées pour la RT-qPCR. Protéine Gène Amorce sens (5’- 3’) Amorce antisens (5’- 3’) α-SMA ACTA2 SEQ ID NO: 1 : GACAATGGCTCTGGGCTCTGTAA SEQ ID NO: 2 : CTGTGCTTCGTCACCCACGTA COL1A1 COL1A1 SEQ ID NO: 3 : AGTTCGAGTATGGCGG SEQ ID NO: 4: CAGTGACGCTGTAGGT COL4A1 COL4A1 SEQ ID NO: 5 : CCGCTGCGAAGGGTGG SEQ ID NO: 6: CCCTTTTGTCCTGGTGGTCCC GAPDH GAPDH SEQ ID NO: 7 : AGCCACATCGCTCAGACAC SEQ ID NO: 8 : GCCCAATACGACCAAATCC Exemple 2 : Résultats Détermination des paramètres d’utilisation du plasma froid à pression atmosphérique Afin de déterminer les paramètres optimaux pour le traitement des tumeurs par plasma froid, une série d'expériences a été réalisée in vitro et in vivo afin d'identifier la puissance, la fréquence et la durée les plus efficaces pour moduler le microenvironnement tumoral (MET). Ces paramètres sont ajustés en fonction du type de tumeur, de sa taille et de sa localisation. Une étude paramétrique a été menée pour étudier les conditions de fonctionnement électrique du traitement par plasma froid en utilisant des modèles de voies biliaires artificiels qui imitent les propriétés des conduits réels. Lors de l’étude, une tension de 2500 à 6000 V et une fréquence de 1 à 20 kHz ont été appliquées (voir Fig. 1a). La puissance électrique résultante déposée dans la cible est indiquée par la barre de couleur. La zone en pointillés dans le coin inférieur gauche indique une combinaison de paramètres électriques où aucun plasma ne peut être généré, tandis que la zone noire dans le coin supérieur droit indique que la décharge électrique s'est transformée en arc thermique, ce qui peut être dangereux pour le patient. Les valeurs de puissance dans la région située entre ces deux zones sont comprises entre 3 et 350 µW, qui sont sûres et efficaces pour une utilisation sur des patients humains. Détermination des espèces réactives Les espèces réactives de l’oxygène et de l’azote de la phase plasmatique qui induisent des effets antitumoraux et le remodelage du MET ont été identifiées, comme le montre la Fig. 1b. Les principales espèces comprennent les radicaux (tels que OH et O), les ions N2+ et les espèces excitées (He et N2*). Les espèces réactives de l'azote sont les plus émissives, suivies par les atomes d'hélium. Ces espèces résultent de mécanismes réactionnels complexes qui induisent un stress oxydatif, des effets antitumoraux et une réduction de la rigidité de la tumeur. Sécurité thermique La sécurité thermique a été vérifiée sur des modèles porcins post-mortem à l'aide de diagnostics optiques. L'imagerie infrarouge a été utilisée pour surveiller l'augmentation de la température dans la région anatomique où se trouve la tumeur avant, pendant et après l'exposition au plasma froid, comme le montrent les Fig. 1c et 1d. Les résultats indiquent que l'échauffement induit par le plasma reste assez faible, l'augmentation de la température ne dépassant jamais 10 °C et peut facilement être abaissée jusqu'à 5 °C, même après un traitement de 5 minutes. Modèle de souris à tumeur du cholangiocarcinome ectopique sous-cutanée L'effet antitumoral du plasma froid à pression atmosphérique a été étudié sur un modèle immunodéprimé de cholangiocarcinome, une tumeur desmoplasique de l'épithélium biliaire caractérisée principalement par un important stroma fibreux. Cette tumeur est décrite par une forte rigidité établie par des populations cellulaires spécifiques appelées fibroblastes associés au cancer (Cancer-Associated Fibroblasts (CAF)), qui sécrètent une matrice extracellulaire riche en collagène responsable de l'inefficacité des thérapies contre le cholangiocarcinome. Cette « barrière » empêche l'action des chimiothérapies, limite l'infiltration des cellules immunitaires et compromet la surveillance antitumorale. Les résultats obtenus in vivo ont montré qu'un traitement répété de la tumeur sous-cutanée à l'aide d’un plasma froid entraînait une diminution significative de la charge tumorale par rapport au groupe témoin ( FIG. 2 ). En outre, il a été observé à l'aide de l'élastographie par ondes de cisaillement que cette réduction était liée à une légère diminution de la rigidité de la tumeur. La rigidité est représentée par une pression interne exprimée en kPa. Alors que cette valeur peut atteindre 40 kPa dans les tumeurs non traitées, elle diminue typiquement jusqu'à des valeurs moyennes proches de 10 kPa dans les tumeurs traitées avec un plasma froid. Modèles cellulaires de fibroblastes associés au cancer Des expériences in vitro ont été réalisées pour exposer des lignées cellulaires myofibroblastiques hépatiques humaines (hTERT-HSC utilisées comme modèles de CAF) au plasma froid à pression atmosphérique afin d'étudier les changements phénotypiques induits par un tel traitement. Nous avons démontré que le traitement au plasma conduit à une diminution significative de la viabilité cellulaire (Fig. 3a ), et que les cellules vivantes restantes sous-expriment certains marqueurs myofibroblastiques, tels que la protéine d’actine α de muscle lisse (α -SMA) ( Fig. 3b ). L'exposition au plasma froid à pression atmosphérique a entraîné des altérations de l'ADN, comme le montre l'augmentation de la phosphorylation de l'histone H2AX : gamma-H2AX ( Fig. 3c ). De plus, les cellules vivantes restantes ont perdu leur capacité à migrer, comme observé en microscopie en temps réel ( Fig. 3d). Ces résultats démontrent la capacité d’un plasma froid à moduler le MET. Exemple 3 : Conclusion Le traitement des tumeurs par le plasma froid à pression atmosphérique décrit ici constitue une nouvelle approche de la modulation du microenvironnement tumoral, susceptible de renforcer l'efficacité des thérapies anticancéreuses et d'améliorer les résultats (aux stades localement avancé ou métastatique, les taux de survie à 1 an, 3 ans et 5 ans sont respectivement de 25%, 10% et 7%) pour les patients. En réduisant la rigidité de la matrice et en augmentant l'accessibilité des cellules immunitaires antitumorales et des agents thérapeutiques à la tumeur, le traitement par plasma froid a démontré son efficacité pour le traitement des cancers tumeurs présentant un microenvironnement rigide. Plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation dans le traitement d’une tumeur immunologiquement froide chez un patient ayant besoin d'un tel traitement. Plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation selon la revendication 1, dans laquelle le plasma froid à pression atmosphérique est généré à partir d’un gaz noble. Plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation selon la revendication 2, le plasma froid produisant au moins une espèce réactive choisie dans le groupe consistant en : espèces réactives de l’oxygène (reactive oxygen species - ROS), espèces réactives de l’azote (reactive nitrogen species - RNS), et des combinaisons de celles-ci. Plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation selon la revendication 2, dans laquelle le plasma froid à pression atmosphérique est généré par application d’impulsions électriques audit gaz noble, la durée de chaque impulsion étant comprise entre 1 ns et 100 ms. Plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation selon la revendication 2 ou 3, dans laquelle le plasma froid à pression atmosphérique est généré à partir dudit gaz noble soumis à une tension variant de 100 V à 100 kV, ou de 1 kV à 50 kV, ou de 5 kV à 30 kV ou être de 10 kV. Plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation selon l’une des revendications 2 à 4, dans laquelle le plasma froid à pression atmosphérique est généré à partir dudit gaz noble soumis à un signal électrique dont la fréquence varie de 0,1 Hz à 10 MHz, ou de 1 Hz à 100 kHz ou de 100 Hz à 30 kHz ou être de 10 kHz. Plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation selon l’une des revendications 1 à 5, dans laquelle le plasma froid à pression atmosphérique est appliqué sur une portion de la surface du corps du patient au moins à une puissance surfacique de 0,1 µW/cm 2 à 100 mW/cm 2 ou de 1 µW/cm 2 à 10 mW/cm 2 , de 10 µW/cm 2 à 1 µW/cm 2 , ou de 20 à 500 µW/cm 2 . Plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation selon l’une des revendications 1 à 6, dans laquelle le plasma froid à pression atmosphérique est appliqué sur une portion de la surface du corps du patient pendant au moins 1 seconde et communément sur un intervalle de temps variant de 10 secondes à 30 minutes, et préférentiellement sur un intervalle de temps variant de 1 minute à 5 minutes. Plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation selon l’une des revendications 1 à 7, dans laquelle la tumeur immunologiquement froide est choisie parmi des tumeurs immunodéprimées altérées, des tumeurs immunitaires exclues altérées, des tumeurs immunitaires froides, des tumeurs désertées par le système immunitaire, des tumeurs exclues du système immunitaire, et des tumeurs à faible infiltration immunitaire. Plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation selon l’une des revendications 1 à 8, dans laquelle la tumeur immunologiquement froide est une tumeur d’un cancer choisi parmi un cancer du foie, un carcinome hépatocellulaire, un cancer des voies biliaires, un cancer de la vésicule biliaire, un cancer du pancréas, un cancer colorectal, un cancer gastrique, un cancer de la prostate, un cancer de la vessie, un cancer du rein, un cancer du poumon, un mélanome, un cancer du sein, un cancer du col de l'utérus, un cancer de l'endomètre, un cancer de l'ovaire, un carcinome à cellules de Merkel, et un cancer de la tête et du cou. Plasma froid à pression atmosphérique pour son utilisation selon l’une des revendications 1 à 9, dans laquelle le plasma froid à pression atmosphérique est appliqué simultanément ou séquentiellement avec une administration d’un agent anticancéreux additionnel.