Brevet FR3160411A1 — publié le 20250926

L’invention concerne un estolide copolymère d’un acide gras hydroxylé saturé et d’un acide gras hydroxylé insaturé fonctionnalisé par un monoalcool sur la fonction acide terminale avec un nombre d’estolide compris entre 1 et 6 et son procédé de préparation en présence d’une lipase. ESTOLIDES COPOLYMERES D’ACIDE GRAS HYDROXYLE SATURE ET INSATURE DOMAINE DE L’INVENTION La présente invention concerne des estolides sous forme de copolymères d’un acide gras hydroxylé saturé et d’un acide gras hydroxylé insaturé et leur procédé de préparation par voie biocatalytique en présence d’une lipase. DESCRIPTION DE L’ART ANTERIEUR Les estolides sont des esters oligomériques dérivés d’acides gras. Ce sont des composés biodégradables qui ont une importance industrielle comme lubrifiants, plastifiants, émulsifiants ou hydratants. Ils trouvent leur application dans l’industrie automobile, cosmétique et alimentaire. Ce large domaine d’applications est lié à leur stabilité thermo-oxydative, leur viscosité et leur bas point de fusion. Les estolides ont également des propriétés biologiques et texturantes et une balance hydrophile/lipophile ajustable. Les estolides apportent un pouvoir hydratant aux produits, ils ont un rôle de barrière thermique, ils améliorent l’élasticité des fibres, et ils donnent un effet de brillance. Les estolides peuvent représenter jusqu’à 20% de la composition d’un produit cosmétique. La préparation des estolides se fait principalement par des procédés chimiques à partir d’acides gras insaturés en présence de catalyseur comme décrit dans les brevets et demandes de brevet US5,380,894, WO2013/009471, WO2008/040864, WO2011/037778 ou encore US2,785,978. Les estolides formés par ces procédés donnent lieu à des régioisomères et/ou ont généralement une pureté peu élevée et nécessitent des étapes de purification longues et coûteuses. La préparation d’estolides par voie biocatalytique à partir d’acides gras hydroxylés a aussi été décrite avec diverses enzymes, notamment des enzymes de Candida sp. , de Thermomyces sp ., de Pseudomonas sp . ou encore de Rhizopus sp . Le brevet FR3073231 décrit la synthèse d’estolides en présence d’une lipase de Streptomyces avermitilis, en particulier de LpsA2 . Une nouvelle lipase de Streptomyces sp. a été identifiée par Wang and coll. en 2016 et nommée MAS1 (Yuan D, Lan D, Xin R, Yang B & Wang Y (2016) Screening and characterization of a thermostable lipase from marine Streptomyces sp. strain W007. Biotechnol Appl Biochem 63, 41–50). Son activité hydrolytique et sa capacité à produire des triacylglycerols a été démontrée. Mais il n’a jamais été démontrée qu’elle pouvait permettre de catalyser la polymérisation d’acides gras ou leurs dérivés. Il a été démontré que les estolides à base d’acide gras insaturé présentent des propriétés intéressantes dans le domaine de la cosmétique comme décrit dans la demande de brevet WO 2022/122719. Dans un souci de développement durable, le domaine cosmétique porte de plus en plus d’attention à la biodégradabilité de ses ingrédients. Les estolides à base d’acide ricinoléique présentent une biodégradabilité qui pourrait être améliorée. Il existe un besoin de développer de nouveaux types d’estolides présentant une biodégradabilité améliorée tout en maintenant des propriétés cosmétiques acceptables. L’invention porte sur des copolymères à base d’un acide gras hydroxylé saturé et d’un acide gras hydroxylé insaturé, le copolymère comprenant en position terminale une fonction ester et ayant une masse molaire moyenne en poids inférieure ou égale à 5000 g/mol. Les copolymères peuvent être préparés en présence d’une lipase de Streptomyces sp., notamment une lipase comprenant la séquence d’acides aminés SEQ ID NO. 1 ou une séquence d’acides aminés ayant au moins 75% d’identité avec la séquence SEQ ID NO. 1. D’autres aspects de l’invention sont tels que décrits ci-après. DESCRIPTION DĖTAILLĖE DE L’INVENTION Les inventeurs ont développé des copolymères ayant des critères compatibles pour une utilisation dans une formule cosmétique et présentant une biodégradabilité améliorée. Copolymère à base d’un acide gras hydroxylé saturé et d’un acide gras hydroxylé insaturé Le copolymère selon l’invention est un copolymère à base d’un acide gras hydroxylé saturé et d’un acide gras hydroxylé insaturé, le copolymère comprenant en position terminale une fonction ester et ayant une masse molaire moyenne en poids (Mw) inférieure ou égale à 5000 g/mol, en particulier allant de 1000 à 5000 g/mol. L'expression " à base de" désigne le produit de la réaction de polymérisation entre un acide gras hydroxylé saturé et un acide gras hydroxylé insaturé. La masse molaire moyenne en poids (Mw) du copolymère peut aller de 1500 à 4950 g/mol, de préférence de 2000 et 4900 g/mol, plus préférentiellement de 2200 à 4850 g/mol. Typiquement, le copolymère a nombre d’estolide EN allant de 1,0 à 6,0, notamment de 1,5 à 5,8, de préférence de 1,7 à 5,7, en particulier de 2,0 à 5,5, plus particulièrement de 2,5 à 5,0, par exemple entre 2,7 et 4,5. L’indice EN peut être déterminé par RMN, à partir de l’indice d’acide (IA), ou par GPC à partir du Mn (masse molaire en nombre). De préférence, le copolymère a une masse molaire en nombre Mn allant de 700 à 2700 g/mol, notamment de 1000 à 2600 g/mol, plus préférentiellement de 1200 à 2550 g/mol. Par exemple, le copolymère a un indice de polydispersité inférieur ou égal à 3,0, de préférence inférieur ou égal à 2,5, plus préférentiellement inférieur ou égal à 2,0. Le copolymère peut présenter au moins une ou les deux des caractéristiques suivantes : - Un indice d’acide de moins de 20, de préférence inférieur à 15, en particulier inférieur à 10; - Une couleur jaune pâle à ambrée. Un estolide obtenu par polymérisation d’un ou plusieurs acide(s) gras hydroxylé(s) a usuellement à une extrémité (ou position terminale) une fonction alcool et à une autre extrémité (ou position terminale) une fonction acide carboxylique. La fonction acide carboxylique peut être fonctionnalisée en présence d’un alcool par estérification pour accéder à un estolide comprenant une fonction ester en position terminale. Le copolymère selon l’invention comprend une fonction ester en position terminale, précisément en position acide terminale. En d’autres termes, il est fonctionnalisé par un groupement hydrocarboné sur sa fonction acide carboxylique terminale. La fonction ester peut notamment répondre à la formule C(=O)-O-R1 avec R1 étant une chaîne hydrocarbonée comprenant de 1 à 22 atomes de carbone, ou de 1 à 20 atomes de carbone. En particulier, R1 est une chaîne hydrocarbonée, en particulier aliphatique, comprenant de 2 à 22 atomes de carbone, notamment de 2 à 20 atomes de carbones. Typiquement, R1 est un groupe alkyle linéaire ou branché comprenant de un à vingt-deux atomes de carbone (C1 à C22), par exemple de 2 à 20 atomes de carbones (C2-C20) ou un groupe alkényle linéaire ou branché comprenant de 3 à vingt-deux atomes de carbone (C3 à C22), par exemple de 3 à 20 atomes de carbones (C3 à C20). De préférence, R1 est non substitué, en particulier non substitué par un groupement hydroxy -OH. Plus préférentiellement, R1 est une chaîne alkyle linéaire ou branchée en C1-C22, notamment en C2-C20, par exemple en C2-C18. De manière non limitative R1 est un groupe éthyle, propyle, isopropyle, butyle, 2-butyl, pentyle, 2-pentyle, 3-pentyle, n-hexyle, 2-méthyl-pentyle, 3-méthyl-pentyle, 2,2-diméthylbutyle, 2,3-diméthylbutyle, tert-butyle, heptyle, octyle, 2-éthylhexyle, nonyle, décyle, undécyle, dodécyle, tridécyle, tétradécyle, pentadécyle, hexadécyle, heptadécyle, octadécyle, nonadécyle, éicosyle, hénéicosyle, docosyle, 2-butyloctyle, 2-octyldodécyle ou 2-hexyldécyle. Préférentiellement, R1 est groupe éthyle, propyle, isopropyle, n-hexyle, octyle, 2-éthylhexyle, décyle ou dodécyle. Le copolymère selon l’invention peut également comprendre une fonction ester en position alcool terminale. En d’autres termes, il est fonctionnalisé par un groupement acyle sur sa fonction alcool terminale. La fonction ester peut notamment répondre à la formule O-C(O)-R6 avec R6 étant une chaîne hydrocarbonée comprenant de 1 à 22 atomes de carbone. Typiquement, le copolymère a la formule chimique (I) suivante : R 8 -(O-CHR 7 -Z-CO) n -OR 1 (I) Où R 8 est un atome d’hydrogène ou un groupe -COR 6 , R 1 et R 6 sont tels que décrit ci-dessus, R 7 est un atome d’hydrogène ou un groupe aliphatique non cyclique saturé, linéaire ou branché comprenant de un à douze atomes de carbone (C1 à C12) optionnellement substitués par un groupe hydroxyle, chaque Z est, indépendamment l’un des autres, un groupe aliphatique non cyclique divalent saturé comprenant de trois à douze atomes de carbone (C3 à C12), optionnellement substitué par un groupe hydroxyle, ou un groupe aliphatique non cyclique divalent insaturé comprenant de trois à douze atomes de carbone (C3 à C12), optionnellement substitué par un groupe hydroxyle, au moins un Z est un groupe aliphatique insaturé et au moins un Z est un groupe aliphatique saturé, n est une valeur supérieure ou égale à 2,1, préférablement supérieure ou égale à 2,5. En particulier, le copolymère a la formule chimique (II) suivante : R 8 -(O-CHR 9 -W-CO) n -OR 1 (II) Où R 8 est un atome d’hydrogène ou un groupe -COR 6 , R 1 et R 6 sont tels que décrit ci-dessus, W est un groupe aliphatique non cyclique divalent saturé comprenant de trois à douze atomes de carbone (C3 à C12), optionnellement substitué par un groupe hydroxyle, chaque R 9 est indépendamment l’un des autres un groupe aliphatique non cyclique saturé, linéaire ou branché comprenant de un à douze atomes de carbone (C1 à C12) optionnellement substitués par un groupe hydroxyle, ou un groupe aliphatique non cyclique insaturé, linéaire ou branché comprenant de un à douze atomes de carbone (C1 à C12) optionnellement substitués par un groupe hydroxyle, au moins un R 9 est un groupe aliphatique insaturé et au moins un R 9 est un groupe aliphatique saturé, n est une valeur supérieure ou égale à 2,1, préférablement supérieure ou égale à 2,5. Le copolymère de l’invention est typiquement obtenu par biocatalyse. L’acide gras hydroxylé saturé L’acide gras hydroxylé saturé peut comprendre de 12 à 24 atomes de carbone, en particulier de 14 à 22 atomes de carbone, plus particulièrement de 16 à 20 atomes de carbone, notamment 18 atomes de carbone. Typiquement, l’acide gras hydroxylé saturé est mono-hydroxylé. La fonction hydroxyle de l’acide gras hydroxylé saturé est notamment en position 10, 12, 13 ou 14 de l’acide gras lorsqu’elles existent, préférentiellement en position 12. La fonction hydroxyle de l’acide gras peut également être en position terminale de l’acide gras, c’est-à-dire sur le carbone le plus éloigné de la fonction acide carboxylique. Typiquement, l’acide gras hydroxylé saturé a la formule chimique (III) suivante : HO-CHR 2 -Q-COOH (III) Avec R 2 étant un atome d’hydrogène ou un groupe aliphatique non cyclique saturé, linéaire ou branché comprenant d’un à douze atomes de carbone (C1 à C12), optionnellement substitués par un groupe hydroxyle, Q étant un groupe aliphatique non cyclique divalent saturé de trois à douze atomes de carbone (C3 à C12), optionnellement substitué par un groupe hydroxyle. Typiquement R 2 est un groupe aliphatique non cyclique saturé, linéaire non substitué, comprenant d’un à douze atomes de carbone (C1 à C12). En particulier, Q est un groupe aliphatique non cyclique divalent, saturé, non substitué de trois à douze atomes de carbone (C3 à C12). Par exemple, l’acide gras hydroxylé saturé est sélectionné dans le groupe constitué par l’acide 8-, 9-, 10, 11-, ou 12-hydroxy-laurique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, ou 12-hydroxy-tridécylique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-myristique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-pentadécylique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-palmitique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-margarique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-stéarique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-nonadécylique, l’acide 5-, 6-, 7-, 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-arachidique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy- hénéicosanoïque, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-béhénique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-tricosanoïque, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-lignocérique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-pentacosanoïque, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-cérotique. De préférence l’acide gras hydroxylé saturé est sélectionné dans le groupe constitué par l’acide 10-hydroxystéarique, l’acide 12-hydroxystéarique, l’acide 13-hydroxystéarique, et les mélanges d’entre eux. L’acide gras hydroxylé insaturé L’acide gras hydroxylé insaturé peut comprendre de 12 à 24 atomes de carbone, en particulier de 14 à 22 atomes de carbone, plus particulièrement de 16 à 20 atomes de carbone, notamment 18 atomes de carbone. Typiquement, l’acide gras hydroxylé insaturé est mono-hydroxylé. La fonction hydroxyle de l’acide gras hydroxylé insaturé est notamment en position 10, 12, 13 ou 14 de l’acide gras lorsqu’elles existent, préférentiellement en position 12. La fonction hydroxyle de l’acide gras peut également être en position terminale de l’acide gras, c’est-à-dire sur le carbone le plus éloigné de la fonction acide carboxylique. Typiquement, l’acide gras hydroxylé insaturé a la formule chimique (IV) suivante : HO-CHR 3 -Y-COOH (IV) Avec R 3 étant un atome d’hydrogène ou un groupe aliphatique non cyclique saturé ou insaturé, linéaire ou branché comprenant d’un à douze atomes de carbone (C1 à C12), optionnellement substitués par un groupe hydroxyle, Y étant un groupe aliphatique non cyclique divalent saturé ou insaturé de trois à douze atomes de carbone (C3 à C12), optionnellement substitué par un groupe hydroxyle, et au moins l’un de R 3 ou Y comprenant au moins une insaturation. Typiquement R 3 est un groupe aliphatique non cyclique saturé ou insaturé, linéaire non substitué, comprenant d’un à douze atomes de carbone (C1 à C12). En particulier R 3 est un groupe insaturé, alternativement R 3 est un groupe saturé. En particulier, Y est un groupe aliphatique non cyclique divalent, saturé ou insaturé, non substitué de trois à douze atomes de carbone (C3 à C12). En particulier Y est un groupe insaturé, alternativement Y est un groupe saturé. De préférence, un de R 3 ou Y comprend au moins une insaturation, plus préférentiellement une insaturation. Alternativement, R 3 et Y comprennent chacun au moins une insaturation, notamment une insaturation chacun. Par exemple, l’acide gras hydroxylé insaturé est sélectionné dans le groupe constitué par l’acide 8-, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-myristoléique, l’acide 8-, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-palmitoléique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-sapiénique, l’acide 8-, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-oléique, l’acide ricinoléique, l’acide 10-hydroxy-12-octadécènoïque, l’acide 13-hydroxy-9-octadécènoïque, l’acide 8-, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-élaïdique, l’acide 8- ou 11-hydroxy-linoléique, l’acide 11-hydroxy-linolélaïdique, l’acide 8- ou 11-hydroxy-alpha-linolénique, l’acide 8- ou 11-hydroxy-gammalinolénique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, ou 12-hydroxy-érucique, l’acide 8-, 9-, 10, 11-, 12-, ou 13-hydroxy-nervonique. L’acide gras hydroxylé insaturé est notamment sélectionné dans le groupe constitué par l’acide ricinoléique, l’acide 10-hydroxy-12-octadécènoïque, l’acide 13-hydroxy-9-octadécènoïque et un mélange d’entre eux. Typiquement, le copolymère est à base d’un acide gras hydroxylé saturé et d’un acide gras hydroxylé insaturé ayant de 12 à 24 atomes de carbone chacun, notamment de 14 à 22 atomes de carbone chacun, par exemple de 16 à 20 atomes de carbone chacun. En particulier, l’acide gras hydroxylé saturé et l’acide gras hydroxylé insaturé ont le même nombre d’atomes de carbone chacun, en particulier 18 atomes de carbone chacun. De préférence, l’acide gras hydroxylé saturé est l’acide 12-hydroxystéarique et/ou l’acide gras hydroxylé insaturé est l’acide ricinoléique. Procédé L’invention concerne également un procédé pour la formation de copolymères tels que décrits ci-dessus caractérisé en ce qu’il est conduit en présence d’un acide gras hydroxylé saturé et d’un acide gras hydroxylé insaturé, ou de leur esters, et d’une lipase de Streptomyces sp. Lipase utile dans le cadre de la présente invention La lipase utile dans le cadre de la présente invention est une lipase de Streptomyces sp. Typiquement, la lipase utile dans le cadre de la présente invention comprend la séquence d’acides aminés SEQ ID NO. 1 suivante, ou une séquence ayant au moins 75% d’identité avec la séquence SEQ ID NO. 1 : ATATAATPAAEATSRGWNDYSCKPSAAHPRPVVLVHGTFGNSIDNWLVLAPYLVNRGYCVFSLDYGQLPGVPFFHGLGPIDKSAEQLDVFVDKVLDATGAPKADLVGHSQGGMMPNYYLKFLGGADKVNALVGIAPDNHGTTLLGLTKLLPFFPGVEKFISDNTPGLADQVAGSPFITKLTAGGDTVPGVRYTVIATKYDQVVTPYRTQYLDGPNVRNVLLQDLCPVDLSEHVAIGTIDRIAFHEVANALDPARATPTTCASVIG. De préférence, la lipase utile dans le cadre de la présente invention est la lipase MAS1 isolée de la souche Streptomyces sp. Strain W007 ayant notamment le numéro d’accession WP_007448656.1 comprenant la séquence d’acides aminés SEQ ID NO. 1. A titre d’alternative, la lipase utilisée dans le procédé selon l’invention peut également être une lipase avec une séquence ayant au moins 80%, au moins 82%, au moins 83%, au moins 85%, au moins 90%, au moins 92%, au moins 95%, au moins 96%, au moins 97%, au moins 98%, au moins 99%, au moins 99,3%, ou au moins 99,6% d’identité avec la séquence SEQ ID NO. 1. Les pourcentages d’identité auxquels il est fait référence dans le cadre de l’exposé de la présente invention sont déterminés sur la base d’un alignement global des séquences à comparer, c’est-à-dire sur un alignement des séquences prises dans leur intégralité sur toute la longueur en utilisant tout algorithme bien connu de l'homme du métier tel que l’algorithme de Needleman et Wunsch-1970. Cette comparaison de séquences peut être effectuée à l'aide de tout logiciel bien connu de l'homme du métier : par exemple le logiciel needle en utilisant le paramètre « Gap open » égal à 10,0, le paramètre « Gap extend » égal à 0,5 et une matrice « Blosum 62 ». Le logiciel needle est par exemple disponible sur le site internet ebi.ac.uk world wide sous la dénomination « Align ». De préférence, le pourcentage d’identité défini dans le cadre de la présente invention est déterminé au moyen d’un alignement global des séquences à comparer sur toute leur longueur. Lorsque la lipase utile dans le cadre de l’invention possède une séquence d’acides aminés qui n’est pas 100% identique à la séquence de référence SEQ ID NO :1 mais qui possède au moins 83%, au moins 85%, au moins 90%, au moins 92%, au moins 93%, au moins 94%, au moins 95%, au moins 96%, au moins 97%, au moins 98%, au moins 99%, au moins 99,3%, ou au moins 99,6% d’identité avec une telle séquence de référence, elle peut présenter des insertions, délétions ou substitutions par rapport à la séquence de référence. Lorsqu’il s’agit de substitutions, la substitution est de préférence réalisée par un acide aminé « équivalent », c'est-à-dire tout acide aminé dont la structure est proche de celle de l’acide aminé d’origine et est donc peu probable de modifier les activités biologiques de la lipase. Des exemples de telles substitutions sont présentés dans le tableau suivant : Acide aminé d’origine Substitution(s) Ala (A) Val, Gly, Pro Arg (R) Lys, His Asn (N) Gln Asp (D) Glu Cys (C) Ser Gln (Q) Asn Glu (G) Asp Gly (G) Ala His (H) Arg Ile (I) Leu Leu (L) Ile, Val, Met Lys (K) Arg Met (M) Leu Phe (F) Tyr Pro (P) Ala Ser (S) Thr, Cys Thr (T) Ser Trp (W) Tyr Tyr (Y) Phe, Trp Val (V) Leu, Ala La lipase comprenant la séquence d’acides aminés SEQ ID NO :1 ou un pourcentage d’identité tel que décrit ci-dessus typiquement présente au moins l’une des caractéristiques suivantes, notamment au moins deux, en particulier au moins trois et de préférence toutes les caractéristiques suivantes : la séquence d’acides aminés comprend le motif de pentapeptide GHSQG (SEQ ID NO :2); la séquence d’acides aminés comprend également deux cystéines positionnées dans la région N-terminale et deux cystéines positionnées dans la région C-terminale. La région N-terminale correspond aux 100 acides-aminés, de préférence aux 75 acides aminés, de la séquence d’acides aminés à partir de l'extrémité N-terminale, i.e. de l’extrémité se terminant par un acide aminé avec une fonction amine libre (-NH2). La région C-terminale correspond aux 100 acides-aminés, de préférence aux 75 acides aminés, de la séquence d’acides aminés à partir de l'extrémité C-terminale, i.e. de l’extrémité se terminant par un acide aminé avec une fonction acide carboxylique libre (-COOH) ; la séquence d’acides aminés comprend le motif de pentapeptide LLGLT (SEQ ID NO :3) ; la séquence d’acides aminés comprend le motif d’hexapeptide LAPYLV (SEQ ID NO :4) ; la séquence d’acides aminés comprend le motif d’hexapeptide FHGLGP (SEQ ID NO :5) ; la séquence d’acides aminés comprend le motif d’oligopeptide YCVFSLDYGQL (SEQ ID NO :6) ; la séquence d’acides aminés comprend le motif d’oligopeptide YLKFLGGA (SEQ ID NO :7), la séquence d’acides aminés comprend le motif de tripeptide PAR (SEQ ID NO :8). En particulier, la lipase comprenant la séquence d’acides aminés SEQ ID NO :1 ou un pourcentage d’identité tel que décrit ci-dessus présente au moins l’une des deux caractéristiques suivantes, notamment les deux : la séquence d’acides aminés comprend le motif de pentapeptide LLGLT (SEQ ID NO :3) ; la séquence d’acides aminés comprend le motif d’hexapeptide LAPYLV (SEQ ID NO :4). En général, la lipase peut être produite sous forme recombinante dans des systèmes d’expression tels que des bactéries, levures ou champignons. Les systèmes d’expression de protéines recombinantes sont connus de l’homme de métier et incluent par exemple les souches de type Bacillus (e.g., B. subtilis ), Escherichia (e.g., E. coli ), Pseudomonas (e.g., P. aeruginosas ), Saccharomyces (e.g., S. cerevisiae ) , Yarrowia (e.g., Y. lipolytica ), Pichia (e.g., P. pastoris ), Trichoderma (e.g., T. reesei ) , Aspergillus. La lipase est produite de préférence sous forme recombinante dans une cellule hôte, telle que Escherichia coli , par des méthodes bien connues de l’homme du métier, et de préférence elle est produite telle que décrit à l’exemple 1. La lipase peut aussi avantageusement être produite sous forme recombinante dans une cellule hôte de Yarrowia ou Pichia pour des applications dans l’industrie alimentaire, telle que Yarrowia lipolytica ou Pichia pastoris . La lipase peut aussi être immobilisée sur un support afin de pouvoir la recycler. Par exemple, la lipase peut être déposée sur une résine ou un support minéral. Par exemple, les résines peuvent être sélectionnées parmi le polystyrène tel que Lewatit ® VP OC 1064 MD-PH de chez Lanxess, un copolymère de styrène et de divinylbenzène tel que Diaion ® HP20 de chez Resindion Srl (Binasco, Italie), le polyméthacrylate de méthyle tel que Diaion ® HP2MG de chez Resindion Srl (Binasco, Italie), le phénol-formaldéhyde tel que AMBERLITE ® XAD761 de chez Rhom and Haas, le chlorure de polyvinyle, les polyéthylène-polyamides, le silicone poly(hydroxyéthyl)méthacrylate, la lignine, ou encore les polysaccharides de type amidon, cellulose, ou l’éthyle cellulose. Parmi les supports minéraux, le carbonate de calcium, le charbon actif, entre autres, peuvent être utilisés comme supports d’immobilisation. Les supports et techniques d’immobilisation des enzymes sont bien connus de l’homme de métier, comme ceux décrits dans la publication WO2016/151115. Avantageusement, la lipase employée dans le procédé de la présente invention est thermostable. Elle peut être employée à une température élevée (entre 40°C et 95°C) avec ou sans immobilisation sur support solide. La lipase employée dans le procédé peut également être une lipase de Streptomyces Avermitilis, notamment la lipase LpsA2 employée dans le procédé décrit dans le brevet FR3073231. La lipase utile dans le cadre de la présente invention comprend la séquence d’acides aminés SEQ ID NO. 9 suivante, ou une séquence ayant au moins 75% d’identité avec la séquence SEQ ID NO. 9 : DSAPSSGWNDYSCKPSAAHPRPVVLVHGTLGNSVDNWLGLAPYLEHRGYCVFSLDYGQLSGVPFFHGLGPIDKSAEQLQVFVDKVLTATGATKADLVGHSQGGMMPRYYLKFLGGAGKVNALVGIAPNNHGTTLSGLTNLLPYFPGAEDLLSTATPGLADQVVGSAFMAKLNAGGDTVAGVHYTVIATQYDEVVTPYRTAFLSGSDVHNVLLQDLCPLDLSEHVAIGLIDRIAFHEVTNALDPAHATRTTCASVFS A titre d’alternative, la lipase utilisée dans le procédé selon l’invention peut également être une lipase avec une séquence ayant au moins 80%, au moins 82%, au moins 83%, au moins 85%, au moins 90%, au moins 92%, au moins 95%, au moins 96%, au moins 97%, au moins 98%, au moins 99%, au moins 99,3%, ou au moins 99,6% d’identité avec la séquence SEQ ID NO. 9. La lipase comprenant la séquence d’acides aminés SEQ ID NO :9 ou un pourcentage d’identité tel que décrit ci-dessus typiquement présente au moins l’une des caractéristiques suivantes, notamment au moins deux, en particulier au moins trois et de préférence toutes les caractéristiques suivantes : la séquence d’acides aminés comprend le motif de pentapeptide GHSQG (SEQ ID NO :2); la séquence d’acides aminés comprend également deux cystéines positionnées dans la région N-terminale et deux cystéines positionnées dans la région C-terminale. La région N-terminale correspond aux 100 acides-aminés, de préférence aux 75 acides aminés, de la séquence d’acides aminés à partir de l'extrémité N-terminale, i.e. de l’extrémité se terminant par un acide aminé avec une fonction amine libre (-NH2). La région C-terminale correspond aux 100 acides-aminés, de préférence aux 75 acides aminés, de la séquence d’acides aminés à partir de l'extrémité C-terminale, i.e. de l’extrémité se terminant par un acide aminé avec une fonction acide carboxylique libre (-COOH) ; la séquence d’acides aminés comprend le motif d’hexapeptide FHGLGP (SEQ ID NO :5) ; la séquence d’acides aminés comprend le motif d’oligopeptide YCVFSLDYGQL (SEQ ID NO :6) ; la séquence d’acides aminés comprend le motif d’oligopeptide YLKFLGGA (SEQ ID NO :7). Conditions réactionnelles Le procédé pour la formation de copolymère selon l’invention est conduit en présence d’un acide gras hydroxylé saturé et d’un acide gras hydroxylé insaturé, ou de leurs esters, et d’une lipase de Streptomyces sp. telle que décrite ci-dessus. Les acides gras hydroxylés saturés et insaturés sont tels que décrits ci-dessus. Dans le procédé, ils peuvent être introduits sous forme acide ou sous forme ester. Le procédé de la présente invention peut avantageusement être mis en œuvre à partir d’esters d’acides gras hydroxylés saturés et insaturés tels que décrits ci-dessus. Des exemples d’esters d’acides gras hydroxylés incluent de manière non limitative, les esters, tels que les (C1-C12)alkyle esters ou des triglycérides des acides gras hydroxylés décrits ci-avant. En particulier, les esters d’acide gras hydroxylés sont tels que la fonction ester répond à la formule C(=O)-O-R5 avec R5 étant une chaîne hydrocarbonée comprenant de 1 à 22 atomes de carbone. Typiquement, R5 est un groupe alkyle linéaire ou branché comprenant de un à vingt-deux atomes de carbone (C1 à C22), par exemple de 1 à 20 atomes de carbones (C1-C20) ou un groupe alkényle linéaire ou branché comprenant de 3 à vingt-deux atomes de carbone (C3 à C22), par exemple de 3 à 20 atomes de carbones (C3 à C20). De préférence, R5 est non substitué, en particulier non substitué par un groupement hydroxy -OH. Plus préférentiellement, R5 est une chaîne alkyle linéaire ou branchée en C1-C22, notamment en C1-C12, par exemple en C1-C6. De manière non limitative R1 est un groupe éthyle, propyle, isopropyle, butyle, 2-butyl, pentyle, 2-pentyle, 3-pentyle, n-hexyle, 2-méthyl-pentyle, 3-méthyl-pentyle, 2,2-diméthylbutyle, 2,3-diméthylbutyle, tert-butyle, heptyle, octyle, 2-éthylhexyle, nonyle, décyle, undécyle, dodécyle, tridécyle, tétradécyle, pentadécyle, hexadécyle, heptadécyle, octadécyle, nonadécyle, éicosyle, hénéicosyle, docosyle, 2-butyloctyle, 2-octyldodécyle ou 2-hexyldécyle. Préférentiellement, R5 est groupe éthyle, propyle, isopropyle, n-hexyle, octyle, 2-éthylhexyle, décyle ou dodécyle. Le procédé peut être avantageusement mis en œuvre sans solvant. Néanmoins, dans certains modes de réalisation, le procédé peut être conduit en présence d’un solvant apolaire du type hydrocarbure aliphatique ou aromatique ou de type éther. A titre d’exemple, le solvant peut être le toluène, le méthyle tert-butyle éther (MBTE), l’hexane, l’isooctane, ou le di-isopropyle éther. Notamment, l’utilisation d’un solvant est avantageuse lorsque l’acide gras hydroxylé ou son ester a un point de fusion élevé, tel qu’au-delà de 95°C. La réaction est typiquement initiée à une température au-dessus du point de fusion de l’acide gras hydroxylé ou de l’ester. La température peut ensuite être réduite. Le procédé peut également avoir lieu en présence d’eau, notamment moins de 10% m/m d’eau dans le milieu réactionnel. A des températures allant de 20°C à 95°C, le procédé est typiquement mis en œuvre sans solvant et sans l’apport d’un agent desséchant. La température de mise en œuvre du procédé est choisie en fonction du produit de départ. La température est sélectionnée pour que le produit de départ soit en phase liquide. Ainsi, la réaction est avantageusement initiée à une température au-dessus du point de fusion du produit de départ. Un alcool peut être ajouté au milieu réactionnel pour estérifier la fonction acide terminale de l’estolide. L’alcool peut être ajouté au début de la réaction ou une fois que l’indice d’acide du milieu réactionnel est inférieur à 60. La quantité d’alcool à ajouter dépend du degré de polymérisation de l’estolide désiré ou obtenu. Elle peut être évaluée selon le nombre d’estolide désiré pour ajouter l’alcool en début de polymérisation ou être évaluée en fonction de l’indice d’acide résiduel du milieu réactionnel suite à la polymérisation. Plus l’indice d’acide est faible, plus le nombre d’estolide désiré est élevé, plus la quantité d’alcool à ajouter est petite. En général, l’alcool est ajouté à un taux de 10 à 35% d’équivalent du produit de départ. De préférence, l’alcool est ajouté à un taux de 15 à 25%, ou de 20 à 25%, ou de 25 à 30%, ou de 30 à 35%, ou à environ 25 % d’équivalent du produit de départ. Typiquement, l’alcool est de formule R4-OH, R4 étant une chaîne hydrocarbonée comprenant de 1 à 22 atomes de carbone. En particulier, R4 est une chaîne hydrocarbonée, en particulier aliphatique, comprenant de 2 à 22 atomes de carbone, notamment de 2 à 20 atomes de carbones. Typiquement, R4 est un groupe alkyle linéaire ou branché comprenant de un à vingt-deux atomes de carbone (C1 à C22), par exemple de 2 à 20 atomes de carbones (C2-C20) ou un groupe alkényle linéaire ou branché comprenant de 3 à vingt-deux atomes de carbone (C3 à C22), par exemple de 3 à 20 atomes de carbones (C3 à C20). De préférence, R4 est non substitué, en particulier non substitué par un groupement hydroxy -OH. Plus préférentiellement, R4 est une chaîne alkyle linéaire ou branchée en C1-C22, notamment en C2-C20, par exemple en C2-C18. De manière non limitative R4 est un groupe éthyle, propyle, isopropyle, butyle, 2-butyl, pentyle, 2-pentyle, 3-pentyle, n-hexyle, 2-méthyl-pentyle, 3-méthyl-pentyle, 2,2-diméthylbutyle, 2,3-diméthylbutyle, tert-butyle, heptyle, octyle, 2-éthylhexyle, nonyle, décyle, undécyle, dodécyle, tridécyle, tétradécyle, pentadécyle, hexadécyle, heptadécyle, octadécyle, nonadécyle, éicosyle, hénéicosyle, docosyle, 2-butyloctyle, 2-octyldodécyle ou 2-hexyldécyle. Préférentiellement, R4 est groupe éthyle, propyle, isopropyle, n-hexyle, octyle, 2-éthylhexyle, décyle ou dodécyle. Des exemples d’alcool incluent de manière non limitative le méthanol, éthanol, propanol, isopropanol, butanol, 2-butanol, pentanol, 2-pentanol, 3-pentanol, n-hexanol, 2-méthyl-pentanol, 3-méthyl-pentanol, 2,2-diméthylbutanol, 2,3-diméthylbutanol, tert-butanol, heptanol, octanol, 2-éthylhexanol, nonanol, décanol, undécanol, dodécanol, tridécanol, tétradécanol, pentadécanol, hexadécanol, heptadécanol, octadécanol, nonadécanol, éicosanol, hénéicosanol, docosanol (alcool béhénylique), iso-octadécanol, 2-butyloctanol, 2-octyldodécanol, 2-hexyldécanol, alcool iso-stéarylique tel que 2-(4,4-diméthylpentan-2-yl)-5,7,7-triméthyloctan-1-ol (Fineoxocol ® 180) ou 2-(3-méthylhexyl)-7-décan-1-ol (Fineoxocol ® 180N), alcool iso-palmitique (Fineoxocol ® 1600), 2-octyldécanol, glycérol, polyglycérol, glycol, polyéthylèneglycol (adjuvant E1521, PEG8, PEG400, PEG600, PEG1000, PEG2000, PEG4000, PEG8000), 1,2-propylèneglycol, polypropylèneglycol, 1,3-propylene glycol, 1,4-butanediol, thréitol, tetritol, érythritol, xylitol, ribitol, arabinitol, arabitol, pentitol, pentaérythritol, mannitol, allitol, altritol, hexitol, glucitol, sorbitol, dulcitol, volémitol, polyérythritol, polypentaérythritol, polymannitol, ou un mélange de ceux-ci. Préférentiellement, l’alcool est le méthanol, l’éthanol, l’octanol, le décanol, le dodécanol, , ou le 2-éthylhexanol, de préférence le 2-éthylhexanol. Optionnellement aussi, un acide organique est ajouté au milieu réactionnel pour protéger la fonction hydroxyle libre de l’estolide une fois que l’indice d’acide de l’estolide dont la fonction acide terminale est estérifiée est compris entre 10 et 40 inclus, ou une fois que l’indice d’acide de l’estolide dont la fonction acide terminale n’est pas estérifiée est en dessous de 60, ou au début de la réaction. La quantité d’acide à ajouter dépend du degré de polymérisation de l’estolide désiré ou obtenu. Elle peut être évaluée selon le nombre d’estolide désiré pour ajouter l’acide en début de polymérisation ou être évaluée en fonction de l’indice d’acide résiduel du milieu réactionnel. Plus l’indice d’acide est faible, plus le nombre d’estolide est élevé, plus la quantité d’acide à ajouter est petite. En général, l’acide est ajouté à un taux de 10 à 35% d’équivalent de l’acide gras hydroxylé initial. De préférence, l’acide est ajouté à un taux de 15 à 20%, ou de 20 à 25%, ou de 25 à 30%, ou de 30 à 35%, ou à environ 25 % d’équivalent de l’acide gras hydroxylé initial. Des exemples d’acide organiques incluent de manière non limitative l’acide acétique, propionique, butyrique, valérique, caproïque, énanthique, caprylique, pélargonique, caprique, undécylique, laurique, tridécylique, myristique, pentadécylique, palmitique, margarique, stéarique, nonadécylique, arachidique, hénéicosanoïque, ou béhénique ou un mélange de ceux-ci. Préférentiellement, l’acide organique est l’acide palmitique, stéarique, ou arachidique. Le procédé de la présente invention est typiquement un procédé monotope. La quantité de lipase à introduire dans la réaction peut être déterminée aisément par l’homme du métier. Par exemple, la lipase peut être utilisée à un taux de 5 à 10% en poids, tel que 5, ou 6, ou 7, ou 8, ou 9, ou 10% en poids, exprimé en termes de ratio de la masse de cellules sèches contenant la lipase utilisée sur la masse de l’acide hydroxylé de départ. EXEMPLES Conditions Générales L’acide ricinoléique (pureté de plus de 80%) est obtenu de TCI Europe (Zwijndrecht, Belgique). L’acide 12-hydroxystéarique (pureté de 85%) est obtenu de Alfa Aesar (Karlsruhe, Allemagne). Le ricinoléate de méthyle et le ricinoléate d’éthyle (pureté de plus de 75% et 80% respectivement) sont obtenus de TCI Europe (Zwijndrecht, Belgique R0029) Les lipases MAS1 et MAS1 mutée ont été produites par Protéus by Seqens. Méthodes L’indice d’acide (IA) et le nombre d’estolides (EN) sont calculés comme décrit ci-après. L’indice d’acide (IA) est calculé comme étant la masse de KOH (mg) nécessaire pour neutraliser 1g d’acide ou d’échantillon réactionnel. La valeur EN représente le nombre d’acides gras hydroxylés ajoutés sur un acide gras hydroxylé de départ tels que un dimère a un EN de 1, un trimère a un EN de 2, et un mélange équimolaire de dimère et trimère a un EN de 1.5. Le nombre d’estolides (EN) est donc le nombre moyen d’acides gras hydroxylés additionnés à l’acide gras hydroxylé (AGH) de départ. Lorsque l’acide carboxylique terminal de l’estolide n’est pas fonctionnalisé, EN est calculé selon la formule : Où IA représente l’indice d’acide, MW KOH représente la masse molaire de la potasse, et MW AGH représente la masse molaire de l’acide gras hydroxylé. Lorsque l’acide carboxylique terminal de l’estolide est fonctionnalisé, l’indice d’acide ne peut pas être utilisé pour calculer l’EN. Les EN sont évalués à partir d’analyses GPC/SEC (chromatographie par perméation sur gel/chromatographie d’exclusion stérique) permettant de déterminer le Mn et le Mw. En particulier, l’analyse GPC/SEC a été effectuée par calibration avec un standard polystyrène. Il a été préalablement vérifié que l’EN déterminé par l’IA des estolides analogues dont la fonction acide carboxylique n’a pas été modifiée répondent de façon linéaire au Mn (masse molaire en nombre) déterminé par GPC (EN = Mn x a + b). Les EN annoncés par cette méthode ne tiennent pas compte de la liaison ester formée entre la fonction acide de l’estolide et l’alcool. Exemple 1 : Préparation des Lipases Les lipases ont été exprimées dans Escherichia coli. Les gènes ont été obtenus par voie synthétique et clonés dans le vecteur d’expression pET26b+. Les cultures ont été préparées dans des erlenmeyers de 2L de la façon suivante : 500mL de Milieu autoinducteur (AIMTB0210 Formedium TM ) est inoculé avec 5mL d’une préculture (préparée la veille dans du milieu LB avec de la kanamycine), auquel est ajouté 1,2mL d’une solution à 25g/L de kanamycine. La culture est alors incubée dans un incubateur Eppendorf Innova S44i 4 heures à 37°C, puis 18 à 20 heures à 20°C à 1800rpm. Les cultures sont récupérées, centrifugées 10 minutes à 4°C et 5000rpm. Les culots cellulaires sont lyophilisés avant d’être utilisés dans les protocoles. La séquence protéique SEQ ID NO. 1 de la lipase MAS1 est la suivante : ATATAATPAAEATSRGWNDYSCKPSAAHPRPVVLVHGTFGNSIDNWLVLAPYLVNRGYCVFSLDYGQLPGVPFFHGLGPIDKSAEQLDVFVDKVLDATGAPKADLVGHSQGGMMPNYYLKFLGGADKVNALVGIAPDNHGTTLLGLTKLLPFFPGVEKFISDNTPGLADQVAGSPFITKLTAGGDTVPGVRYTVIATKYDQVVTPYRTQYLDGPNVRNVLLQDLCPVDLSEHVAIGTIDRIAFHEVANALDPARATPTTCASVIG La séquence protéique SEQ ID NO. 10 de la lipase MAS1 mutée est la suivante (la mutation est F153A) : ATATAATPAAEATSRGWNDYSCKPSAAHPRPVVLVHGTFGNSIDNWLVLAPYLVNRGYCVFSLDYGQLPGVPFFHGLGPIDKSAEQLDVFVDKVLDATGAPKADLVGHSQGGMMPNYYLKFLGGADKVNALVGIAPDNHGTTLLGLTKLLPFAPGVEKFISDNTPGLADQVAGSPFITKLTAGGDTVPGVRYTVIATKYDQVVTPYRTQYLDGPNVRNVLLQDLCPVDLSEHVAIGTIDRIAFHEVANALDPARATPTTCASVIG Ces deux enzymes sont exprimées avec le peptide signal MLPWIRAARVPRTRSLLAALLLALTALVAPA (SEQ ID NO. 11). Exemple 2 : Préparation d’estolide copolymère à base d’acide ricinoléique et d’acide 12-hydroxystéarique 50/50 fonctionnalisé en position acide terminale par du 2-éthyl-1-hexanol Dans un tricol muni d’un bulleur, 25 d’acide 12-hydroxystéarique, 25g d’acide ricinoléique et 5,4g de 2-éthyl-1-hexanol sont introduits. Le milieu réactionnel est chauffé à 90°C jusqu’à dissolution complète du mélange, puis la température est diminuée jusque 60°C. A 60°C, 0,5g d’eau et 2g de lipase MAS1 mutée sont ajoutés. Le milieu réactionnel est agité sous flux d’azote à 60°C pendant 46 heures jusqu’à totale consommation des deux acides gras hydroxylés. Le milieu réactionnel est dilué à température ambiante avec 150 mL de EtOAc puis ajout de 5g Clarcel ceca DIC B puis agité pendant 5 minutes. Le milieu réactionnel est filtré sur fritté, lavé avec de l’eau puis la phase organique est évaporée et séchée sous vide. 45 g d’une huile visqueuse de couleur jaune pale ont été récupérés. Le titrage d’un échantillon a indiqué un IA de 3,5, un Mw de 2924 et un EN de 3,3 par analyse GPC. Exemple 3 : Préparation d’estolide copolymère à base d’acide ricinoléique et d’acide 12-hydroxystéarique 90/10 fonctionnalisé en position acide terminale par de l’éthanol Dans un tricol muni d’un bulleur, 3g de 12-hydroxystéarate d’éthyle et 27g de ricinoléate d’éthyle sont introduits. Le milieu réactionnel est chauffé à 70°C jusqu’à dissolution complète du mélange. Puis 0,3g d’eau et 0,75g de lipase MAS1 mutée sont ajoutés. Le milieu réactionnel est agité sous flux d’azote à 70°C pendant 24 heures. Le milieu réactionnel est dilué à température ambiante avec 100 mL de EtOAc puis ajout de 2g Clarcel ceca DIC B puis agité pendant 5 minutes. Le milieu réactionnel est filtré sur fritté, évaporé et séché sous vide. 25 g d’une huile visqueuse de couleur ambre ont été récupérés. Le titrage d’un échantillon a indiqué un IA de 8,7, un Mw de 2636 et un EN de 3,3 par analyse GPC. Exemple 4 (comparatif): préparation d’estolide d’acide ricinoléique fonctionnalisé en position acide terminale par de l’éthanol Dans un tricol muni d’un bulleur, 45,7g de ricinoléate d’éthyle sont introduits suivi de 0,75g d’eau et de 2,28g de lipase MAS1 mutée. Le milieu réactionnel est agité sous flux d’azote à 60°C pendant 29 heures. Le milieu réactionnel est dilué à température ambiante avec 150 mL de EtOAc puis ajout de 5g Clarcel ceca DIC B puis agité pendant 5 minutes. Le milieu réactionnel est filtré sur fritté, lavé avec de l’eau puis la phase organique est évaporé et séché sous vide. 38 g d’une huile visqueuse de couleur jaune pale ont été récupérés. Le titrage d’un échantillon a indiqué un IA de 1,6, un Mw de 3678 et un EN de 4,1 par analyse GPC. Exemple 6 : étude de la biodégradabilité des estolides selon les exemples 3, 4 et 5 La biodegradabilité des estolides est déterminée en utilisant le test de biodégradabilité standardisé OCDE 301F (essai de respirométrie manométrique). L'inoculum utilisé dans cette expérience était composé d'une boue prélevée à La Courly, station d'épuration de Pierre-Bénite (France). L'inoculum a été échantillonné et a été aéré sous agitation pendant la nuit pour diminuer la teneur en carbone organique. Puis trois étapes de centrifugation successives (9250 tr/min, 15 min à température ambiante) ont été réalisées pour éliminer le contenu liquide et remettre en suspension l'inoculum à 5 g/L de MLSS (« mixed liquor hanging solids » solides en suspension de liqueur mélangée) dans le milieu minéral du test de biodégradation. La composition du milieu du test de biodégradation était de 85 mg/L KH2PO4, 217,5 mg/L K2HPO4, 334 mg/L Na2HPO4, 27,5 mg/L CaCl2, 11,5 mg/L MgSO4 et 0,100 mg/L FeCl3. Le pH du milieu a été ajusté à 7,2 par ajout d'une solution aqueuse 1 M d'HCl. Les copolymères des exemples 2, 3 et 4 ont été préparé selon le protocole d'émulsion suivant. Une solution mère à 2 g/L dans une solution de tensioactif non biodégradable (Symperonic PE105 à 1 g/L) a été préparée, puis diluée par 2 avec de l'huile de silicone et une émulsion a été formée à l'aide d'un ultra-turax. L'émulsion maintenue sous agitation constante a été introduite dans le flacon contenant le milieu minéral. Un test de biodégradation a été réalisé en incubant l'inoculum lavé à une concentration finale de 28,38 mg/L de MLSS en présence de l'échantillon à environ 140 mg/L O2 consommé pour minéraliser la totalité de l'échantillon exprimé en ThOD. La biodégradation a été évaluée dans des flacons de DBO incubés à 20 °C à l'aide des chambres d'incubation TS608/4i (Xylem Analytics ; France) en enregistrant la variation de la pression atmosphérique quotidiennement à l'aide de capteur OxiTop®-IDS. La biodégradabilité a ensuite été exprimée en pourcentage en fonction de la quantité d'oxygène nécessaire pour minéraliser l'échantillon. Des conditions de test supplémentaires ont été réalisées en utilisant une substance de référence utilisée dans le test pour conclure à la fois sur la fonctionnalité de l'inoculum et sur une toxicité non pertinente ou faible de l'échantillon. La biodégradabilité de l'échantillon a été suivie pendant plus de 28 jours et moins de 60 jours. estolide Jour 28 Jour 60 1 Exemple 2 53.1% ± 3.6% 73.1% ± 3.6% 2 Exemple 3 51.4% ± 2.1% 75.7% ± 3.4% 3 Exemple 4 44.7% ± 0.3% 67.7% ± 1.3% Copolymère à base d’un acide gras hydroxylé saturé et d’un acide gras hydroxylé insaturé, le copolymère comprenant en position terminale une fonction ester et ayant une masse molaire moyenne en poids inférieure ou égale à 5000 g/mol, en particulier allant de 1000 à 5000 g/mol. Copolymère selon la revendication 1 caractérisé en ce que son nombre d’estolide va de 1 à 6. Copolymère selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que son indice de polydispersité est inférieur ou égal à 3,0, de préférence inférieur ou égal à 2,5, plus préférentiellement inférieur ou égal à 2,0. Copolymère selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que son nombre d’estolide va de 1,5 à 5,8, en particulier de 2,0 à 5,5, par exemple entre 2,7 et 4,5. Copolymère selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que la fonction ester répond à la formule C(=O)-O-R1 avec R1 étant une chaîne hydrocarbonée comprenant de 1 à 20 atomes de carbone. Copolymère selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que l’acide gras hydroxylé saturé et l’acide gras hydroxylé insaturé ont le même nombre de carbones, en particulier 18 atomes de carbone. Copolymère selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que l’acide gras hydroxylé saturé est l’acide 12-hydroxystéarique et/ou l’acide gras hydroxylé insaturé est l’acide ricinoléique. Copolymère selon l’une quelconque des revendications précédentes obtenu par biocatalyse. Procédé pour la formation de copolymère selon l’une quelconques des revendications précédentes caractérisé en ce qu’il est conduit en présence d’un acide gras hydroxylé saturé et d’un acide gras hydroxylé insaturé, ou de leur esters, et d’une lipase de Streptomyces sp. Procédé selon la revendication précédente caractérisée en ce que la lipase comprend la séquence d’acides aminés SEQ ID NO. 1 ATATAATPAAEATSRGWNDYSCKPSAAHPRPVVLVHGTFGNSIDNWLVLAPYLVNRGYCVFSLDYGQLPGVPFFHGLGPIDKSAEQLDVFVDKVLDATGAPKADLVGHSQGGMMPNYYLKFLGGADKVNALVGIAPDNHGTTLLGLTKLLPFFPGVEKFISDNTPGLADQVAGSPFITKLTAGGDTVPGVRYTVIATKYDQVVTPYRTQYLDGPNVRNVLLQDLCPVDLSEHVAIGTIDRIAFHEVANALDPARATPTTCASVIG ou une séquence comprenant au moins 75% d’identité avec la séquence SEQ ID NO. 1. Procédé selon l’une quelconque des revendications 9 ou 10, caractérisé en ce que la lipase a la séquence d’acides aminés SEQ ID NO. 1 ou une séquence ayant au moins 80%, en particulier au moins 85%, notamment au moins 90% d’identité avec la séquence SEQ ID NO. 1. Procédé selon l’une quelconque des revendications 9 à 11, caractérisé en ce que la séquence d’acides aminés comprend le motif pentapeptide GHSQG, en particulier la séquence d’acides aminés comprend également deux cystéines positionnées dans la région N-terminale et deux cystéines positionnées dans la région C-terminale. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que la séquence d’acides aminés comprend un ou plusieurs motifs choisis parmi le groupe suivant : le pentapeptide LLGLT (SEQ ID NO :3), l’hexapeptide LAPYLV (SEQ ID NO :4), l’hexapeptide FHGLGP (SEQ ID NO :5), l’oligopeptide YCVFSLDYGQL (SEQ ID NO :6) et l’oligopeptide YLKFLGGA (SEQ ID NO :7), en particulier un ou plusieurs motifs choisis parmi le groupe suivant : le pentapeptide LLGLT (SEQ ID NO :3) et l’hexapeptide LAPYLV (SEQ ID NO :4). Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce qu’il est conduit sans solvant. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisé en ce que le monoalcool est ajouté au milieu réactionnel lorsque les acides gras sont sous forme acide.