Brevet FR3154315A1 — publié le 20250425

Composition chimique à activité immuno-modulatrice comprenant, en tant que substance active, un extrait de propolis d’origine naturelle et standardisé comprenant au moins, en mélange, une molécule A de la famille des acides phénoliques, une molécule B de la famille des flavanones, une molécule C de la famille des flavones, une molécule D de la famille des dihydroflavonoles et une molécule E de la famille des flavonoles Composition chimique à base d’extrait de Propolis La présente invention concerne une composition chimique à activité immuno-modulatrice comprenant, en tant que principe actif, un extrait de propolis, d’origine naturelle et standardisé, qui comprend au moins un mélange de cinq molécules appartenant respectivement à la famille des acides phénoliques, des flavanones, des flavones, des dihydroflavonoles et des flavonoles. L’invention concerne également l’utilisation de cette composition, en tant que médicament, pour la prévention ou le traitement, des infections bactériennes, des infections virales, des infections fongiques ou des affections tumorales générant une réponse immune inflammatoire. La présente invention concerne également l’utilisation d’une telle composition chimique comme ingrédient inducteur du trans-phénotypage des macrophages anti-inflammatoire inactif, de type « M2c », en macrophages actifs pro-inflammatoires, de type « M1 ». Actuellement, le traitement ou la prévention de l’apparition des pathologies, impliquant une réponse immune inflammatoire, se base principalement sur l’utilisation d’agents anti-inflammatoires comprenant une substance active synthétisée chimiquement. Néanmoins, il existe des inconvénients majeurs liés à l’usage de ces agents connus, notamment : - les effets secondaires néfastes qu’ils peuvent générer sur le corps humain, tels que les maux d’estomac, les maux de têtes, - le manque de précision d’action sur les cibles impliquées dans le mécanisme anti inflammatoire, avec pour risque d’affaiblir le système immunitaire actif pour lutter contre la pathologie, – la nécessité d’avoir, pour leur formulation galénique, une multitude d’excipients, inactifs contre la pathologie, ces excipients étant indispensables pour conserver l’intégrité chimique de la substance active synthétique, pour permettre sa diffusion et biodisponibilité dans l’organisme et garantir son effet sur la pathologie, notamment par une action topique. Afin de limiter en partie les effets secondaires et s’affranchir des inconvénients rencontrés avec les éléments de synthèse chimique, les usagers se tournent, de plus en plus, vers des agents d’origine naturelle. Ces derniers sont issus de produit naturel et ont pour avantage de minimiser la toxicité pour l’organisme à traiter. L’usage de la propolis en tant qu’ingrédient naturel pour son activité à l’encontre d’une maladie inflammatoire est connue. La propolis désigne une substance naturelle résineuse, gommeuse et balsamique présente sur certaines parties de végétaux, qui est recueillie par les abeilles, puis transformée par l’apport de leurs sécrétions salivaire et cirière, avant d’être utilisée dans la ruche comme matériel de construction (obturation des fentes, fixation, étanchéité de la ruche) et de protection contre le développement des microorganismes. La propolis brute est récupérable par les apiculteurs pour différents usages tels qu’un usage pharmaceutique, cosmétique ou encore agroalimentaire. La composition chimique et la couleur de l’extrait de propolis sont variables en fonction de l’origine géographique, du genre botanique et de la partie du végétal prélevée, de la période de récolte par les abeilles, de l’espèce d’abeille, du mode de récolte par l’apiculteur et de la méthode d’extraction de la propolis. Cette diversité de composition de la propolis naturelle représente un frein majeur pour garantir une activité homogène pour lutter contre une infection par tous types de pathogènes, ou, contre une affection tumorale. En particulier, cette diversité de composition de la propolis naturelle rend son implication dans la réponse inflammatoire aléatoire. Ainsi, il n’existe pas, à ce jour, de composition à base de propolis présentant un effet homogène agissant dans le mécanisme de réaction inflammatoire, qui soit non toxique, d’origine naturelle, avec des constituants standards et dont l’efficacité est équivalente aux agents anti-inflammatoires communément utilisés. La présente invention a pour objectif de proposer une composition à base d’extrait de propolis naturel et standardisé, de composition moléculaire contrôlée en substance active, s’affranchissant des inconvénients précités de l’état de la technique et apportant une solution permettant de garantir une activité d’immuno-modulation du mécanisme inflammatoire. La présente invention a pour objet une composition chimique à activité immuno-modulatrice comprenant, en tant que substance active, un extrait de propolis d’origine naturelle et standardisé comprenant au moins, en mélange, une molécule A de la famille des acides phénoliques, une molécule B de la famille des flavanones, une molécule C de la famille des flavones, une molécule D de la famille des dihydroflavonoles et une molécule E de la famille des flavonoles. Dans la présente invention, on entend par « propolis », « extrait de propolis » ou encore « extrait de propolis standardisé », une propolis issue d’un végétal appartenant aux familles des Salicaceae dont le genre Populus L. spp représente les espèces majoritaires source pour la récolte (peupliers) et Salix L. spp (saules), Betulaceae dont Betula L. spp (bouleaux) et Alnus Mill. spp (aulnes), Fagaceae dont Quercus L. spp (chênes), Castanea Mill. spp (châtaigniers) et Fagus L. spp (hêtres), Ulmaceae dont Ulmus L. spp (ormes), Oleaceae dont Fraxinus Tourn. ex L. spp (frênes), Sapindaceae dont Aesculus L. spp (marronniers d’Inde), Pinaceae dont Picea A.Dietr. spp (épicéas), Pinus L. spp (pins) et Abies Mill. spp (sapins), Araucariaceae dont Araucaria Juss. spp (araucarias), Cupressaceae dont Juniperus L. spp (cèdre), Anacardiaceae dont Pistacia L. spp (pistachiers), Rutaceae dont Ruta L. spp (rue des jardins), Myrtaceae dont Eucalyptus L’Hér. Spp. La propolis selon l’invention est d’origine naturelle, c’est-à-dire qu’elle est recueillie, en toutes saisons, par les abeilles du genre Apis me l lif e ra sur les bourgeons, les feuilles, les tiges, les écorces ou toutes parties aériennes du végétal produisant des exsudats résineux. De préférence, dans la présente invention, on entend par « propolis », « extrait de propolis » ou encore « extrait de propolis standardisé » une propolis issue d’un végétal appartenant à la famille du genre des peupliers (dit Populus spp , dite propolis brune), présent géographiquement en Europe, en Asie et en Amérique du sud. Avantageusement dans la composition chimique de l’invention, l’extrait de propolis consiste en de la propolis brune, issue d’une partie d’un végétal appartenant à la famille des peupliers de genre Populus spp , tel que Populus nigra L ., Populus alba L ., ou Populus tremula L . Pour obtenir la propolis brune de l’invention, les abeilles récoltent la résine sur les feuilles ou les bourgeons de feuilles. Selon l’invention, la composition chimique comprend un extrait de propolis d’origine naturelle et standardisé. L’extrait de propolis de la composition de l’invention est obtenu par un procédé standardisé de type méthode dynamique multi extraction dans lequel : – on prélève dans la ruche, la propolis brute, –on réalise une première extraction en milieu aqueux sur la propolis brute prélevée afin d’en retirer la cire d’abeille et les impuretés (résidus d’abeille, bois), – on réalise, sur le résidu de l’extraction aqueuse, obtenu préalablement, une série de trois extractions avec un solvant hydro –alcoolique constitué d’un mélange eau/éthanol en augmentant, à chaque extraction successive, la température d’extraction et la concentration en alcool. Dans ce procédé, le rapport entre le résidu de propolis brute d’extraction et le solvant hydro alcoolique est compris entre 0,1 :1 et 1 :1, avec des temps d’extraction entre 4 et 36 heures. La mise en œuvre de ce procédé permet d’obtenir un extrait de propolis d’origine naturelle et standardisé comprenant systématiquement au moins, en mélange, une molécule A de la famille des acides phénoliques, une molécule B de la famille des flavanones, une molécule C de la famille des flavones, une molécule D de la famille des dihydroflavonoles et une molécule E de la famille des flavonoles, ceci peu importe l’espèce du genre végétal de type Populus spp, la partie du végétal utilisée pour récolter la résine (soit les bourgeons, soit les feuilles), la date de prélèvement par l’apiculteur et la saison. Selon un mode de réalisation préféré, la composition chimique, de l’invention comprend en outre, de la gomme arabique, du saccharose et du dioxyde de silicium, en tant que support de l’extrait de propolis. De préférence, la composition chimique comprend en pourcentage massique par rapport à sa masse totale, entre 40% et 60% de gomme arabique, moins de 10% de saccharose et au maximum 3 % de dioxyde de silicium en tant que support en mélange avec entre 30% et 50% d’extrait de propolis. Selon d’autres modes de réalisation, la composition chimique de l’invention peut comprendre d’autres type de support de l’extrait de propolis tels que par exemple du propylène glycol ; de l’huile de graine de soja ; de l’huile de graine de tournesol ou un mélange d’eau et d’éthanol. Par exemple encore, le support de l’extrait de propolis peut comprendre un mélange de glycérine et d’eau, avec ou sans saccharose liquide traité thermiquement, ce dernier étant par exemple celui commercialisé sous la marque FruitMax® Brown 1203 WS. Selon un autre exemple, le support de l’extrait de propolis peut comprendre également un mélange de maltodextrine, de dioxyde de silicium et de saccharose liquide traité thermiquement. Selon l’invention et dans tous les cas, le support est inerte vis-à-vis de l’extrait de propolis d’origine naturelle et standardisé obtenue par le procédé susmentionné, il ne modifie en rien son activité et ses effets dans le mécanisme inflammatoire. Plus particulièrement, le support est inerte vis-à-vis du mélange des molécules A à E de l’extrait de propolis, le support n’empêche en rien l’activité immuno-modulatrice de la composition. De préférence, pour son activité immuno-modulatrice, la composition chimique comprend, en pourcentage massique par rapport à sa masse totale sèche, entre 1,3% et 1,8% de molécule A de la famille des acides phénoliques, entre 0,6% et 1,0% de molécule B de la famille des flavanones, entre 1,4% et 2,8% de molécule C de la famille des flavones, entre 2,4% et 3,3% de molécule D de la famille des dihydroflavonoles et entre 1,1% et 1,7% de molécule E de la famille des flavonoles. Avantageusement, au sein de la composition chimique de l’invention: - la famille des acides phénoliques, présente une chaine carbonée de base de formule IA ci-dessous de type acide cinnamique ou ses dérivés tels que l’acide o-coumarique, l’acide m-coumarique, l’acide p-coumarique, l’acide caféique, l’acide férulique, l’acide sinapique; formule IA : ou; de formule IB ci-dessous de type acide benzoïque et ses dérivés IB tels que l’acide m-hydroxy benzoïque, l’acide p-hydroxy benzoïque, l’acide protacatéchique, l’acide vanillique, l’acide syringique: formule IB : la famille des flavanones présente une chaine carbonée de base de formule II ci-dessous : la famille des flavones présente une chaine carbonée de base de formule III ci-dessous : la famille des dihydroflavonoles présente une chaine carbonée de base de formule IV ci-dessous : la famille des flavonoles présente une chaine carbonée de base de formule V ci-dessous : . Selon l’invention, au sein de la composition chimique, les molécules appartenant aux familles susmentionnées, qui sont présentes dans l’extrait de propolis, interagissent ensembles et permettent d’obtenir l’activité immuno- modulatrice de la composition de l’invention. On entend, notamment, par l’expression « activité immuno-modulatrice », la capacité de l’extrait de propolis à participer à l’induction du trans-phénotypage des macrophages vers l’un ou l’autre des phénotypes de macrophages possibles. A titre d’exemple, on citera comme molécule A de la famille des acides phénoliques, les molécules suivantes : l’acide caféique, l’acide vanillique, l’acide p-coumarique, l’acide férulique, 3,4 diméthyle acide caféique l’acide isoférulique, l’acide trans-cinnamique, l’acide cinnamylidène acétique, (l’acide caféique isoprényl ester) l’ester caféate de prenyle - C 14 H 14 O 4 , (l’acide caféique benzyle ester) l’ester caféate de benzyle - C 16 H 14 O 4 , (l’acide caféique phénéthyle ester) l’ester caféate de phényléthyle (CAPE) - C 17 H 16 O 4 , (l’acide caféique cinnamyle ester) l’ester caféate de cinnamyle - C 18 H 16 O 4 , (l’acide coumarique cinnamyle ester) l’ester p-coumarate de cinnamyle . A titre d’dexemple, on citera comme molécule B de la famille des flavanones la pinocembrine. A titre d’exemple, on citera comme molécule C de la famille des flavones, les molécules suivantes : 5-méthyl chrysine ester , apigénine, 5-méthyl lutéoline ester, chrysine, méthoxychrysine, Tectochrysine. A titre d’exemple, on citera comme molécule D de la famille des dihydroflavonoles, les molécules suivantes : 5 méthyl pinobanksine, pinobanksine, pinobanksine-3-O-acétate, pinobanksine-3-O-propionate, les dérivées de pinobanksine. A titre d’exemple, on citera comme molécule E de la famille des flavonoles, les molécules suivantes : quercétine, 3 méthyl quercétin, kaempférole, Isorhamnetine, 5,7-diméthyl quercétine, 5-méthyl galangine, rhamnétine, 7-méthyl quercétine, galangine. Selon un mode préféré de réalisation de la composition chimique de l’invention, présentant une activité immuno-modulatrice significative, l’extrait de propolis comprend au moins, en mélange, : comme molécule A de l’acide caféique de formule ci-dessous : comme molécule B de la pinocembrine de formule ci-dessous : comme molécule C de la chrysine de formule ci-dessous : comme molécule D de la pinobanskine de formule ci-dessous : et comme molécule E de la galangine de formule ci-dessous : . Selon ce mode de réalisation spécifique, l’acide caféique, la pinocembrine, la chrysine, la pinobanskine et la galangine présents en mélange dans l’extrait de propolis standardisé et d’origine naturelle, interagissent de manière synergique et sont responsables de l’activité immuno-modulatrice de la composition chimique de l’invention. Plus spécifiquement, l’acide caféique, la pinocembrine, la chrysine, la pinobanskine et la galangine présents en mélange dans l’extrait de propolis induisent l’activation des macrophages et leur trans-phénotypage d’un phénotype M2c vers un phénotype M1, dans un contexte environnemental avec des cytokines anti-inflammatoires. Selon l’invention, la composition chimique se présente sous une forme liquide ou solide, en poudre, en solution, en gel, en émulsion, en crème, gélule ou en comprimé. Selon l’invention, la composition chimique se présente sous une forme galénique pharmaceutiquement et/ou cosmétiquement acceptable par l’organisme humain ou animal. Selon l’invention, la forme galénique de la composition chimique autorise l’une des voies d’administration suivantes : la voie orale, voie intraveineuse, voie intramusculaire, voie cutanée, sous-cutanée ou transdermique, voie sublinguale, voie oculaire, voie auriculaire, voie nasale. La forme galénique de la composition chimique permet par exemple une action étendue à tout l’organisme (systémique) De préférence, la forme galénique de la composition chimique permet une action locale (topique) ciblant la zone de la réaction inflammatoire. Un autre aspect de la présente invention concerne l’utilisation de la composition chimique de l’invention dans la préparation d’un produit cosmétique, d’un produit alimentaire, de préférence un complément alimentaire, ou d’un produit agrochimique. On entend par « produit cosmétique » toute substance ou tout mélange destiné à être mis en contact avec les parties superficielles du corps humain (épiderme, systèmes pileux et capillaire, ongles, lèvres et organes génitaux externes) ou avec les dents et les muqueuses buccales en vue, exclusivement ou principalement, de les nettoyer, de les parfumer, d'en modifier l'aspect, de les protéger, de les maintenir en bon état ou de corriger les odeurs corporelles. On entend par « compléments alimentaires » toutes les denrées alimentaires destinées à compléter un régime alimentaire normal et qui constituent une source concentrée de nutriments ou d’autres substances ayant un effet nutritionnel ou physiologique. Un autre aspect de la présente invention concerne l’utilisation de la composition chimique de l’invention en tant que médicament. Plus particulièrement, l’invention concerne aussi l’utilisation de la composition chimique de l’invention dans la prévention ou le traitement des maladies du système inflammatoire, des infections bactériennes, virales ou fongiques et des affections tumorales. Selon un autre aspect particulier l’invention concerne également l’utilisation de la composition chimique de l’invention, comme ingrédient d’induction du trans-phénotypage des macrophages anti-inflammatoires inactifs de type M2C en macrophages actifs pro-inflammatoires de types M1 dans un contexte cellulaire anti inflammatoire. Les macrophages sont des cellules impliquées dans les réponses immunitaires innées et adaptatives permettant l’élimination de pathogène. En fonction de leur environnement et des signaux détectés, les macrophages adaptent leurs fonctions selon différentes modalités, on parle de « polarisation ». On distingue, la polarisation « classique » de type M1 dont l’activité est pro inflammatoire, de la polarisation « alternative » de type M2 qui participe à la régularisation de l’inflammation et au phénomène de réparation tissulaire. Les macrophages M1, décrits comme pro-inflammatoires, sont importants dans la défense directe de l'hôte contre les agents pathogènes, médiée par la phagocytose, la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires et de molécules microbicides. Par exemple, il est connu que les macrophages se polarisent sous forme de macrophage M1 après induction par l’interféron gamma (IFNg) et sécrètent plusieurs cytokines tels que les interleukines IL12p70, l’IL12p40, l’IL-6 ou l’IL-23, le facteur de nécrose tumorale TNFα et de l’Arginase. Les macrophages M2, décrits comme régulateur, agissent dans la phase de résolution de l'inflammation et la réparation des tissus endommagés. On distingue le phénotype M2a et le phénotype M2c. Le phénotype M2a, induit par exemple par l’interleukine IL-4, sécrète surtout de l’Arginase, du TARC et de l’interleukine IL1b. Le phénotype M2c est induit par l’interleukine IL-10. Dans l’organisme, la réponse immunitaire se présente sous la forme d’un état d’équilibre entre un phénotype anti-inflammatoire et un phénotype inflammatoire. En présence d’un pathogène, des biomarqueurs spécifiques sont produits et détectés par les macrophages. En fonction de la nature et de la présentation de ses biomarqueurs, un trans-phénotypage des macrophages vers l’état M1 ou M2 se produit. Dans l’environnement des macrophages, la présence de ces biomarqueurs bouscule l’état d’équilibre du phénotype anti-inflammatoire vers un phénotype inflammatoire et vice versa, la polarisation des macrophages se réalise. En conséquence, le trans-phénotypage est un phénomène qui renforce la réponse immunitaire au cours d’une infection. De manière avantageuse, la composition chimique de l’invention est utilisée comme ingrédient induisant le phénomène de trans-phénotypage des macrophages. Plus particulièrement, l’extrait de propolis, d’origine naturelle et standardisé, de la composition de l’invention, notamment l’action synergique des molécules A à E, a pour effet d’induire le trans-phénotypage des macrophages en permettant une immuno-modulation de la réponse inflammatoire en cas d’infection par un pathogène ou d’affection tumorale. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention ressortiront de la description détaillée qui va suivre des modes de réalisation non limitatifs de l'invention, en référence aux figures annexées, dans lesquelles : FIG. 1 le résumé des étapes du protocole expérimental permettant de montrer l’impact de la composition sur la polarisation des macrophages, FIG. 2 le polygone de l’expression des biomarqueurs CD14, CD64, CD11a, CD86, détecté par cytométrie de flux, de différentes populations de macrophages présentant différents phénotypes induits ou non par des cytokines (M1=INFg, M2a=IL4, M2c=IL10, M0=milieu seul) FIG. 2 montre les polygones de l’expression des biomarqueurs CD14, CD64, CD11a, CD86, détecté par cytométrie de flux, d’une population de macrophages, dans un contexte anti-inflammatoire, après induction par l’IL10, en présence d’une composition chimique de l’invention de type ESIT 12, ou des molécules individuelles, à savoir : galangine, chrysine, pinocembrine, pinobanskine et l’acide caféique à une concentration pondérée FIG. 3 le clustering hiérarchisé des résultats obtenus pour ESIT 12, ESIT 12r ainsi que les molécules individuelles purifiées à une concentration pondérée galangine, chrysine, pinocembrine, pinobanskine et l’acide caféique, en condition anti –inflammatoire (induction à IL10= macrophage M2c) pour les 6 donneurs en prenant en compte l’ensemble des marqueurs cytokiniques et membranaires. [Fig 4A] L’expression de la cytokine TNF-α en présence d’ESIT 12, ESIT 12r et en présence des molécules individuelles : galangine, chrysine, pinocembrine, pinobanskine et acide caféique à une concentration pondérée, en condition anti inflammatoire avec des macrophages M2c, après induction à l’IL-10, [Fig 4B] L’expression de la cytokine IL-6 en présence d’ESIT 12, ESIT 12r et en présences des molécules individuelles galangine, chrysine, pinocembrine, pinobanskine et acide caféique à une concentration pondérée, en condition anti inflammatoire avec des macrophages M2c, après induction à l’IL-10, [Fig 4C] L’expression de la cytokine IL-10 en présence d’ESIT 12, ESIT 12r et en présence des molécules individuelles galangine, chrysine, pinocembrine, pinobanskine et acide caféique à une concentration pondérée, en condition anti inflammatoire avec des macrophages M2c, après induction à l’IL-10 Les aspects de l’invention seront mieux compris à la lecture des exemples, donnés à titre indicatif sans caractère limitatif, et des résultats de test qui suivent. Exemple 1 : Procédé de préparation d’un extrait de propolis d’origine naturelle et standardisé selon l’invention L’extrait de propolis d’origine naturelle et standardisé de la composition chimique de l’invention est obtenu en réalisant une méthode dynamique multi extraction, comprenant les étapes successives suivantes : – a) on prélève dans la ruche la propolis brute – b) on élimine la cire d’abeille et les impuretés de la propolis brute par une extraction aqueuse, de sorte à récupérer uniquement la composante résineuse, balsamique de la propolis brute sous forme pâteuse, – c) on réalise trois extractions hydro-alcoolique successives sur le résidu de l’extraction précédente, par exemple avec la propolis soustraite de la cire d’abeille puis sur les résidus d’extraction obtenus, avec un mélange d’extraction eau/éthanol, – d) on récupère l’extrait de propolis d’origine naturelle et standardisé de la composition chimique de l’invention, – e) de manière optionnelle, on sèche par pulvérisation l’extrait de propolis de l’étape d) de sorte à l’obtenir sous la forme d’une poudre, par exemple le séchage est réalisé par atomisation à 180°C, de sorte à obtenir un extrait sec de propolis sous forme de poudre présentant une humidité finale inférieur à 10%. Pour l’étape b), la séparation de la propolis brute, de la cire d’abeille et des impuretés, est réalisée par une extraction aqueuse, 100% eau à environ 80°C pendant environs 10h sous ultrason, suivie d’une étape de refroidissement à environs 8°C et d’une étape de filtration sur filtre de l’ordre de 30µm. Pour l’étape c), chacune des extractions avec le mélange hydro-alcoolique eau/éthanol est réalisée sur le résidu de l’extraction précédente, en augmentant la teneur en alcool du mélange d’extraction eau/éthanol et en augmentant la température d’extraction. De plus chacune des extractions réalisées se termine par une étape de refroidissement à 15°C, une étape de filtration avec un filtre de 30 à 50µm et une étape de concentration par évaporation pour éliminer les résidus d’alcool, de sorte à obtenir un résidu d’extraction de propolis le plus concentré possible en actif. De préférence, pour l’étape c) : –la première extraction, sur la propolis brute, est réalisée avec un mélange eau/éthanol entre 35 et 40 degrés d’alcool à une température d’extraction comprise entre 40 et 60°C, - la seconde extraction, sur le résidu de propolis issue de la première extraction, est réalisée avec un mélange eau/éthanol entre 55 et 60 degrés d’alcool à une température d’extraction comprise entre 40 et 80°C, - la troisième extraction, sur le résidu de propolis issue de la seconde extraction, est réalisée avec un mélange eau/éthanol entre 70 et 80 degrés d’alcool à une température d’extraction comprise entre 60 et 80°C. Pour l’étape c), le rapport entre le résidu d’extraction de propolis et le mélange d’extraction est compris entre 0,1 : 1 et 1 : 1. Pour l’étape e), le séchage par atomisation est réalisé à des température minimale comprises entre 65°C et 85°C, de préférence à une température minimale de 65°C et à des températures maximales comprises entre 175°C et 185°C, de préférence à 185°C de sorte à conserver les qualités pharmaceutiques de l’extrait de propolis et de conserver son action. Pour la série de trois extractions, le temps de réalisation d’une extraction est compris entre 4h et 36h. A l’issue de la troisième extraction, on obtient l’extrait de propolis d’origine naturelle et standardisé, sous la forme d’une solution hydro-alcoolique de propolis comprenant au moins en mélange, une molécule A de la famille des acides phénoliques, une molécule B de la famille des flavanones, une molécule C de la famille des flavones, une molécule D de la famille des dihydroflavonoles et une molécule E de la famille des flavonoles. Exemple 2 : Composition chimique selon l’invention avec différents supports Le tableau 1 ci-dessous montre des exemples de composition chimique selon l’invention comprenant différent support en mélange avec l’extrait de propolis d’origine naturelle standardisé sous forme de poudre et sous forme de liquide, obtenu par le procédé de l’exemple 1. Les fourchettes des pourcentages sont exprimées en masse par rapport à la masse totale de la composition chimique, qui correspond à une valeur de 100%. Tableau 1 : Composition Composants % Composition Composants % 1 Extrait de propolis 4-15 6 Extrait de propolis 8-50 Ethanol 65-83 Gomme arabique 40-85 eau 7-24 Saccharose 2 Extrait de propolis 70-75 Dioxide de silicium ≤3 Ethanol 21-25 7 Extrait de propolis 10-35 eau 3-5 maltodextrine 58-82 3 Extrait de propolis 3-10 Saccharose liquide traité thermiquement 4-5 Glycérine 85-94 Dioxide de silicium ≤3 eau 3-5 8 Extrait de propolis 13-20 4 Extrait de propolis 1-3 Propylène glycol 80-90 Glycérine 92-96 9 Extrait de propolis 10-15 eau 1-3 huile de graine de soja 85-90 5 Extrait de propolis 2-3 10 Extrait de propolis 10-15 Glycérine 85-90 huile de graine de tournesol 85-90 eau 7-12 saccharose liquide traité thermiquement 1-1,5 Exemple 3 : Composition chimique de l’invention Composition chimique selon l’invention, sous forme de poudre, nommée ESIT12, comprenant, en masse par rapport à sa masse totale sèche : 25,5% d’un extrait sec de propolis, 63,8% de gomme arabique, 9,6% de saccharose et 1,1% de dioxide de silicium. Exemple 4 : Impact de la composition chimique de l’invention sur le trans-phénotypage des macrophages Il est connu qu’une culture in vitro de macrophage à l’état basale M0 se polarise vers un phénotype spécifique, après induction en présence de cytokines de différenciation. Ainsi, pour une culture in vitro de macrophages, il est connu : – qu’en présence d’interleukine 10 dit « IL10 », les macrophages se polarisent vers un phénotype M2c, qui est représentatif d’un contexte anti inflammatoire, – qu’en présence d’interféron gamma dit « IFNg », les macrophages se polarisent vers un phénotype M1, – qu’en présence, à intervalle de quelques jours, d’IL10 puis d’IFNg, il est possible de visualiser un trans-phénotypage des macrophages d’un phénotype M2c vers un phénotype M1, – que le Lipopolysaccharide dit « LPS », en tant que constituant membranaire bactérien, active les macrophages, afin de permettre leur polarisation accrue vers un phénotype spécifique et la sécrétion de cytokines dans leur environnement de culture. L’impact d’une composition chimique selon l’exemple 3, nommé « ESIT12 » sur la polarisation des macrophages a été réalisé in vitro sur des macrophages humains primaires obtenus à partir de cellules mononucléaires périphériques (PBMC) en provenance de six donneurs D1 à D6. La FIG. 1 montre schématiquement le protocole expérimental réalisé pour visualiser l’impact de la composition chimique de l’invention sur le trans-phénotypage des macrophages. Les PBMC sont isolés à partir d’échantillon sanguin, puis mis en milieu de culture avec une densité de 600 000 cellules adhérentes/puits, pendant 2 jours avant leur mise en contact avec les extraits à tester. Pour visualiser l’impact des extraits de propolis dans le trans-phénotypage des macrophages, les macrophages sont incubés, pendant 9 jours à 37°C et 5% de CO 2 , avec : – soit la composition chimique selon l’exemple 3 dit « ESIT 12 », – soit une solution comprenant une des molécules A à E purifiée à une concentration pondérée, – soit avec une solution comprenant l’ensemble des molécules purifiées représentatives de l’extrait de propolis. A 6 jours, le milieu de culture est renouvelé ou supplémenté de cytokine induisant le trans-phénotypage des macrophages. A 8 jours, on ajoute du LPS dans tous les puits de culture, de sorte à avoir une activité accrue des macrophages et la sécrétion de cytokines dans l’environnement de culture en fonction du phénotype des macrophages polarisés. Après 9 jours de culture, les cellules sont décollées puis dissociées pour réaliser un immuno-marquage multiparamétrique avec acquisition des signaux de fluorescence par cytométrie de flux. Les marqueurs utilisés en cytométrie de flux pour identifier les différentes populations de macrophages sont décrit dans le tableau 2 ci-dessous : Tableau 2 : Marqueurs M0 M1 M2a M2 CD14 +/- +/- - +++ CD16 + +/- - ++ CD11a ++ +++ ++ ++ CD64 + +++ - +++ HLA-DR ++ +++ +++ +/- CD86 + + +++ - CD200R - - +++ - La combinaison de l’expression des marqueurs CD14/CD64/CD11a/CD86 a été retenu pour distinguer et discriminer les différents phénotypes de macrophages. Le polygone de la FIG. 2 composé de ces 4 marqueurs est utilisé comme base pour la comparaison de l’impact de la composition chimique de l’invention et des molécules purifiées sur la polarisation des macrophages. Sur les polygones à 4 marqueurs, les points correspondent aux médianes de fluorescence des 4 marqueurs CD14/CD64/CD11a/CD86 et les cercles à l’écart à la moyenne des signaux de fluorescences détectés pour la population de cellules décollés après 9 jours de culture. Après 9 jours de culture également, un dosage de 13 cytokines est réalisé sur le surnageant de culture récupéré. Les 13 cytokines détectées en cytométrie de flux dans le surnageant pour discriminer les sécrétomes des différents phénotypes de macrophages sont identifiés dans le tableau 3 ci-dessous Marqueurs Mo M1 M2a M2c Il12-p70 - + - - TNF-α + + + + IL-6 + + + - IL-4 - - NA - IL-10 + - - NA IL-1b + + + + Arginase + + + + TARC + + + + IL1-RA + + + + IL12-p40 + + + - IL-23 - + - - IFN-g - NA - - IP-10 + + + + Dans le tableau 3 : L’indication « + » indique que la cytokine /marqueur a été détecté par son signal de fluorescence en cytométrie de flux dans le surnageant de culture L’indication « - » indique que le signal de fluorescence correspondant au marqueurs n’a pas été détecté dans le surnageant L’indication « NA » indique que le signal de fluorescence correspondant à la cytokine/marqueur n’a pas été analysé car déjà présent dans le milieu de culture. Les résultats montrent que le sécrétome des différentes populations de macrophages est comme suit : – les macrophages M0, à l’état basal, uniquement dans le milieu de culture, sécrètent plusieurs cytokines mais à un niveau relativement bas, – les macrophages de phénotype M1, après induction avec de l’IFNg dans le milieu, sécrètent de manière différentielle au M0 : IL12-p70 ; IL12-p40 ; TNF-α, IL-6, IL-23 et Arginase, – les macrophages de phénotype M2c, après induction avec IL-10 répriment l’expression d’une majorité de cytokine notamment IL-6 et TNF-α. Les témoins d’activation des macrophages IFNg/IL10 sont utilisés pour appréhender respectivement les phénotypes M1/M2c. Les extraits et les molécules purifiés sont incubés après les cytokines de différenciation afin de vérifier leur capacité à induire un trans-phénotypage des macrophages. Plus précisément dans le protocole expérimental, après 2 jours de croissance des PBMC à un état basal M0, on ajoute 20 ng/ml d’IL-10 dans tous les puits de culture afin d’induire la polarisation des macrophages vers un phénotype M2c. L’ajout d’IL-10 dans le milieu de culture des macrophages permet de simuler in vitro un environnement cytokinique anti-inflammatoire des macrophages. Ainsi, dans ce contexte anti inflammatoire induit par IL-10 les macrophages seront des M2c. Puis, on ajoute dans différents puits, au jour 6 ; les éléments suivants : – 7 µmol /L de la composition chimique de l’invention selon l’exemple 3 dit « ESIT12 », – 7 µmol/L d’une solution dit « ESIT 12r », comprenant la galangine, chrysine, pinocembrine, pinobanskine et de l’acide caféique dans les mêmes proportions et concentrations où elles sont présentes dans ESIT 12, – 7 µmol/L d’une solution de molécules purifiées de galangine dit « Galanr », - 7 µmol/L d’une solution de molécules purifiées de chrysine dit « Chrysr », - 7 µmol/L d’une solution de molécules purifiées de pinocembrine dit « PinoCr », - 7 µmol/L d’une solution de molécules purifiées de pinobanskine dit « PinoBr », - 7 µmol/L d’une solution de molécules purifiées d’acide caféique dit « CafAcr ». Un puit témoin de contrôle de la différenciation des cellules en M1 est réalisé en ajoutant, au jour 2, 20 ng/mL IFNg . Un puit témoin de contrôle de la différenciation des cellules en M2c est réalisé en ajoutant, au jour 2, 20 ng/mL d’IL10. Un puit témoin du trans-phénotypage des macrophages de M2c vers M1 est réalisé en ajoutant 20 ng/mL d’IL 10 au jour 2, puis à 6 jours 20 ng/mL d’IFNg. Les résultats sont montrés sur les polygones à 4 marqueurs de la FIG. 2 , dans lesquels les flèches représentent les signaux de fluorescences détectés en cytométrie de flux pour la population de cellules décollé après 9 jours et mise en présence des différents extraits et solution. Avec la FIG. 2 , on constate, que dans un contexte anti-inflammatoire, créé in vitro après induction à l’IL-10, les macrophages de profil M2c, initialement présents en culture, retournent majoritairement vers un phénotype M0/M1 en présence d’ESIT 12 de l’invention et des molécules purifiées à concentration pondéré. Ainsi, la composition ESIT 12 de l’invention présente une activité immuno-modulatrice, du trans-phénotypage des macrophage M2c vers un phénotype M0/M1, dans un contexte anti –inflammatoire induit par IL-10. Ces résultats montrent que la composition chimique de l’invention participe donc à réguler le mécanisme inflammatoire, en agissant sur le trans-phénotypage des macrophages. La FIG. 3 compile les résultats de mesures de l’intensité des signaux de fluorescences obtenus par analyse en cytométrie de flux pour chacun des marqueurs (IP10, IL12 p40, CD86, CD16, CD14, CD64, CD200r, CD11a, HLA-DR, IL6,IL23,IL4,IL1b, IFNg, IL12 p70, TNF-α, Arginase, TARC, IL1RA) des surnageant des cultures issus de chacun des donneurs D1, D2, D3, D4, D5 et D6, en condition anti-inflammatoire (après induction à l’IL-10) après 9 jours de culture, mise en présence avec les extraits et activation au LPS. L’analyse par bio-informatique de l’intensité de ces signaux permettent de regrouper les résultats sous forme de cluster hiérarchisé par intensité et nature des signaux de fluorescence détectés en cytométrie de flux. Des regroupements par signaux et intensité de fluorescent dit « clusters » hiérarchisés sont créés pour ESIT 12, ESIT12r ainsi que les molécules purifiées pondérés, ceci par analogie des signaux détectés pour les témoins en particulier par comparaison au contrôle de trans-phénotypage M2c vers M1 (induction IL-10 puis IFNg). Ainsi, la FIG. 3 montre, par un regroupement hiérarchisé de l’intensité des signaux de fluorescence pour chaque marqueur et chaque population de donneur, qu’ESIT 12, et de manière similaire ESIT 12r, permettent de recréer un phénotype similaire au phénotype M1 à partir d’un macrophage M2c (cluster A FIG. 3 ). La FIG. 3 montre également que les molécules seules, indépendamment les unes des autres, ne sont pas suffisantes pour permettre un trans-phénotypage des macrophages de M2c vers M1 comme en témoigne le cluster B. Seule la combinaison des 5 molécules à concentration pondérée (CafAcr, Chrysr, PinoCr, PinoBr et Galanr) réunis sous ESIT12r permet d’avoir une compilation des signaux de fluorescence comparable au témoin M1. La FIG. 3 montre donc, sur la base de 13 cytokines, dont l’intensité de fluorescence est détectée dans le surnageant, que seule la combinaison des 5 molécules à concentration pondérée permet le trans-phénotypage de M2c vers M1 en contexte anti-inflammatoire. Une synergie entre les molécules A à E de l’extrait de propolis est indispensable pour que la composition chimique de l’invention présente une activité immuno-modulatrice. Par exemple, les figures 4A, 4B et 4C montrent respectivement l’intensité de fluorescence des marqueurs TNFα, IL-6 et IL-10 au sein des populations de cellules et dosage des cytokines excrétées dans le surnageant de culture cellulaire après 9 jours de culture, induction à l’IL10 et une sur-activation au LPS. La composition chimique de l’invention ESIT 12 et la solution ESIT 12r avec les molécules A à E agissant en synergie, sécrètent chacune les cytokines pro-inflammatoire marqueurs de l’inflammation, à savoir TNF-α et IL-6, tandis que l’IL-10 du sécrétome est faible. ESIT 12 et ESIT12r, en condition anti –inflammatoire induit par IL-10 permettent au macrophage de se polariser en M1 et de retrouver une fonction productrice de cytokine pro-inflammatoire. Il est à noter que pris individuellement, en regardant le dosage du TNFα et de l’ IL-6, l’effet global des molécules purifiées est similaire à celui de la composition chimique de l’invention ESIT 12 ou de la solution des molécules en mélange à concentration pondérée ESIT12r. C’est pourquoi, une analyse par marqueur individuelle n’est pas suffisante pour relater du trans-phénotypage des macrophages de M2c vers M1, seule une analyse multiparamétrique de l’intensité de fluorescence de plusieurs marqueurs (cluster de la FIG. 3 ) permet réellement de montrer l’impact et la synergie des molécules en mélange sur le trans-phénotypage des macrophages. La mesure de l’intensité de fluorescence des marqueurs cytokiniques par cytométrie de flux montre qu’en condition anti-inflammatoire, la composition chimique de l’invention ESIT 12, notamment l’ensemble de ces molécules A à E agissant en synergie, joue un rôle d’immunostimulant des macrophages, synonyme d’une activité immuno-modulatrice. Ces résultats montrent que la composition chimique ESIT 12 de l’invention, par la présence d’un extrait de propolis comprenant les 5 molécules A à E agissant en synergie, dans un contexte anti-inflammatoire, permet : – de restaurer la production de cytokines pro-inflammatoires comme le TNF-α et l’IL-6 favorisant le recrutement des cellules immunitaires sur le site de l’inflammation, - au macrophage M2c de se polariser vers un phénotype M0/M1. La composition chimique de l’invention présente une activité immuno-modulatrice qui permet de renforcer l’activité du système immunitaire, en particulier dans un contexte anti –inflammatoire, notamment en modulant les macrophages de phénotype M2c vers un phénotype M1 producteur de cytokines. Ces résultats montrent qu’une composition chimique selon l’invention comprenant un extrait de propolis, obtenue par le procédé susmentionné garantissant la présence des molécules A à E, présente une activité immuno-modulatrice dans le mécanisme inflammatoire qui permet de renforcer le système immunitaire en cas d’infection par un pathogène ou d’affection tumorale. La composition chimique de l’invention ne présente aucune toxicité pour l’organisme humain ou animal et a pour avantage d’être d’origine naturelle. De plus, l’action synergique des molécules A à E de l’extrait de propolis contenue dans la composition chimique de l’invention permet de diminuer les signes pathologiques en cas d’infection et de renforcer l’activité immunitaire médiée par les macrophages. En conséquence, la composition chimique de l’invention est un bon candidat clinique pour traiter des maladies induisant une réponse inflammatoire du système immunitaire. Composition chimique à activité immuno-modulatrice comprenant, en tant que substance active, un extrait de propolis d’origine naturelle et standardisé comprenant au moins, en mélange, une molécule A de la famille des acides phénoliques, une molécule B de la famille des flavanones, une molécule C de la famille des flavones, une molécule D de la famille des dihydroflavonoles et une molécule E de la famille des flavonoles. Composition chimique, selon la revendication 1, caractérisée en ce que l’extrait de propolis consiste en de la propolis brune, issue d’une partie d’un végétal appartenant à la famille des peupliers de genre Populus spp, tel que Populus nigra L., Populus alba L., ou Populus tremula L. Composition chimique, selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu’elle comprend en outre, de la gomme arabique, du saccharose et du dioxyde de silicium. Composition chimique, selon l’une quelconque des revendications précédente, caractérisée en ce qu’elle comprend, en pourcentage massique par rapport à sa masse totale sèche, entre 1,3% et 1,8% de molécule A de la famille des acides phénoliques, entre 0,6% et 1,0% de molécule B de la famille des flavanones, entre 1,4% et 2,8% de molécule C de la famille des flavones, entre 2,4% et 3,3% de molécule D de la famille des dihydroflavonoles et entre 1,1% et 1,7% de molécule E de la famille des flavonoles. Composition chimique, selon l’une quelconques des revendications précédentes, caractérisée en ce que : la famille des acides phénoliques correspondant à un acide cinnamique ou ses dérivés tels que l’acide o-coumarique, l’acide m-coumarique, l’acide p-coumarique, l’acide caféique, l’acide férulique, l’acide sinapique; ou correspondant à un acide benzoïque et ses dérivés tels que l’acide m-hydroxy benzoïque, l’acide p-hydroxy benzoïque, l’acide protacatéchique, l’acide vanillique, l’acide syringique: la famille des flavanones présente une chaine carbonée de base de formule II ci-dessous : la famille des flavones présente une chaine carbonée de base de formule III ci-dessous : la famille des dihydroflavonoles présente une chaine carbonée de base de formule IV ci-dessous : la famille des flavonoles présente une chaine carbonée de base de formule V ci-dessous : . Composition chimique, selon l’une quelconques des revendications précédentes, caractérisée en ce que, l’extrait de propolis comprend au moins, en mélange, : comme molécule A de l’acide caféique de formule ci-dessous : comme molécule B de la pinocembrine de formule ci-dessous : comme molécule C de la chrysine de formule ci-dessous : comme molécule D de la pinobanskine de formule ci-dessous : et comme molécule E de la galangine de formule ci-dessous : . Composition chimique, selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu’elle se présente sous une forme liquide ou solide, en poudre, en solution, en gel, en émulsion, en crème, gélule ou en comprimé. Composition chimique, selon l’une quelconque des revendications précédentes, pour son utilisation dans un produit alimentaire, de préférence un complément alimentaire, ou un produit agrochimique. Composition chimique, selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, pour son utilisation en tant que médicament. Composition chimique, selon l’une quelconques des revendications 1 à 7 ou de la revendication 9, pour utilisation dans la prévention ou le traitement des maladies du système inflammatoire, des infections bactériennes, virales ou fongiques et des affections tumorales. Composition chimique, selon l’une quelconques des revendications 1 à 10, pour son utilisation comme ingrédient d’induction du trans-phénotypage des macrophages anti-inflammatoires inactifs, de type M2C, en macrophages actifs pro-inflammatoires de types M1, dans un contexte cellulaire anti inflammatoire.