Brevet FR3154337A1 — publié le 20250425

La présente invention concerne un dispositif et un procédé de manipulation microfluidique comprenant les étapes: (a) injecter un liquide échantillon (20) dans un canal commun (4) d’un dispositif microfluidique ; (b) injecter au moins un liquide de gaine (21, 22) comprenant un liquide thermo-visqueux ayant une viscosité dynamique inférieure à 0.1 Pa.s à une température d’injection déterminée dans le canal commun (4). Selon l’invention, le procédé comprend l’étape (c) appliquer une source d’énergie sur une durée limitée, inférieure ou égale à 10 ms, dans au moins une zone de chauffage (31) située dans le canal commun (4) en amont de l’embranchement entre le premier canal de sortie (11) et le deuxième canal de sortie (12) pour chauffer localement ledit liquide de gaine (21, 22) qui présente une viscosité dynamique supérieure ou égale à 1.0 Pa.s à la température haute Th et pour extraire une portion (120, 130, 220) du liquide échantillon. Figure pour l’abrégé : Figure 1 Procédé et dispositif de manipulation microfluidique à base de liquide thermo-visqueux Domaine technique de l'invention La présente invention concerne le domaine technique des dispositifs et procédés de manipulation microfluidique pour contrôler et dévier rapidement la direction d’écoulement d’un liquide. La présente invention trouve des applications dans la manipulation précise et rapide de liquides ou l’extraction de très petits volumes au sein d’un liquide. L’invention concerne tout particulièrement la manipulation et le tri de particules individuelles de taille nanométrique dans un liquide. Etat de la technique Dans le domaine ci-dessus, il est connu d’utiliser des cytomètres en flux pour détecter, dénombrer, identifier des cellules ou des particules de dimensions micrométriques mises en suspension dans un liquide en écoulement en les faisant défiler, une par une et à grande vitesse, dans le faisceau d'un ou de plusieurs lasers puis pour les trier par la mise en œuvre de méthodes de tri basées sur des techniques variées. Les progrès en microscopie et en biologie ont permis de s’intéresser à des objets de taille toujours plus petite, en particulier à des nano-objets de taille inférieure à 100 nm. Les cytomètres en flux traditionnels ne fonctionnent correctement que pour des objets de taille supérieure au micromètre. Pour des objets nanométriques ou nano-objets, i.e. de taille inférieure à 100 nm, les cytomètres sont actuellement limités par leur capacité de détection. De plus, concernant l’opération de tri de nano-objets, les volumes de liquide généralement utilisés par les trieurs de cellules connus et la taille des gouttes servant à encapsuler les objets à trier ne sont pas compatibles avec le tri d’objets nanométriques. Il existe différentes méthodes de tri d’objets dans une puce microfluidique. Certaines méthodes de tri reposent sur des techniques passives. Elles peuvent être basées sur des méthodes de focalisation inertielle ou sur la structure de la puce elle-même : cela permet de séparer les objets en sous populations en fonction de leurs caractéristiques physiques (volume, masse, …). D’autres méthodes de tri, également passives, reposent sur la microfabrication de piliers micrométriques et permettent de réaliser une chromatographie sur puce, mais ne sont applicables que pour les objets micrométriques ou des chaînes polymériques de longueur micrométrique et polydisperses. Ces méthodes passives de tri ne permettent pas de trier les objets un par un en fonction d’un signal spécifique, par exemple de fluorescence. Des techniques micromécaniques permettent de trier des objets de taille micrométrique à une cadence de tri relativement lente. Ainsi, l’utilisation de valves pour séparer des cellules, par exemple des cellules eucaryotes ou procaryotes, ne permet pas de dépasser une cadence de tri de 1 Hz. D’autres techniques actives de tri reposent sur l’application d’un champ électrique ou magnétique. Par exemple, la diélectrophorèse ou l’utilisation d’ondes acoustiques de surface permettent d’atteindre une cadence de tri de l’ordre du kHz sur des gouttes micrométriques préformées et encapsulant des objets individuels. L’analyse microbiologique d’objets nanométriques d’intérêt est d’autant plus difficile que ces objets nanométriques d’intérêt sont présents dans un liquide échantillon contenant généralement un grand nombre d’autres objets en tous genres dont on souhaite isoler les objets nanométriques d’intérêt. Pour ne prendre que les nano-objets d'intérêt, il faut donc extraire de très petits volumes de liquide échantillon chaque fois que l’on veut extraire une objet d’intérêt isolé des autres objets. De plus, un même liquide échantillon peut comporter différents types d’objets nanométriques que l’on souhaite séparer les uns des autres. D’autre part, il est souhaitable d’augmenter la concentration en objets nanométriques de type déterminé dans un liquide pour pouvoir analyser ces objets nanométriques. Compte tenu de la très petite taille des objets nanométriques, il est nécessaire d'en extraire une quantité suffisante pour effectuer une analyse ultérieure, par exemple protéomique. On estime aujourd'hui qu'il faut environ 10 8 objets nanométriques d'intérêt pour effectuer une analyse protéomique. Pour trier cette quantité de nano-objets en un temps raisonnable, par exemple de l’ordre de 3 heures, il est nécessaire de pouvoir les trier à une cadence d’environ 10 4 nano-objets par seconde, soit 10 kHz. Ainsi la fréquence de tri est un critère essentiel pour que le tri de nano objets soit utile. Un but de la présente divulgation est de proposer un dispositif et procédé de manipulation microfluidique capable de trier des objets nanométriques dans un liquide à une fréquence de tri élevée, par exemple supérieure à 1kHz et de préférence d’au moins 10 kHz, sans risque de détérioration des objets nanométriques ainsi manipulés. Un des buts de la présente divulgation est de proposer un dispositif et procédé de manipulation microfluidique ayant une réponse temporelle plus rapide, pour permettre d’extraire un très petit volume d’un liquide échantillon, compris entre quelques femtolitres et quelques centaines de femtolitres ou pour permettre de trier des objets individuels à une fréquence de tri supérieure à ce qui est disponible dans l’art antérieur. Un autre but de la présente divulgation est de proposer un dispositif et procédé de manipulation microfluidique permettant d’extraire sélectivement des objets nanométriques d’un liquide échantillon initial pour obtenir un nouvel échantillon de liquide dans lequel la concentration en ces objets nanométriques est plus élevée que celle dans le liquide échantillon initial et/ou dans lequel le nombre de ces objets nanométriques est suffisamment élevé, par exemple supérieur à 10 8 . Encore un autre but de la présente divulgation est de proposer un dispositif et procédé de manipulation microfluidique permettant d’obtenir rapidement un liquide échantillon concentré en objets nanométriques sélectionnés. Présentation de l'invention Afin de remédier aux inconvénients précités de l’état de la technique, la présente invention propose un procédé de manipulation microfluidique comprenant les étapes suivantes : (a) injecter via un canal d’entrée un liquide échantillon dans un canal commun d’un dispositif microfluidique ; (b) injecter via au moins un autre canal d’entrée au moins un liquide de gaine à une température d’injection déterminée dans le canal commun pour permettre une focalisation hydrodynamique du liquide échantillon dans le canal commun et un écoulement du liquide échantillon vers un premier canal de sortie qui se situe en aval d’un embranchement entre le premier canal de sortie et un deuxième canal de sortie, le au moins un liquide de gaine comprenant un liquide thermo-visqueux, ledit au moins un liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux présentant une viscosité dynamique inférieure à 0.1 Pa.s à la température d’injection. Selon l’invention, le procédé comporte l’étape suivante : (c) appliquer une source d’énergie sur une durée limitée, inférieure ou égale à 10 ms, de préférence inférieure à 5ms, 1ms, 500 µs ou même 1 µs, dans une zone de chauffage située dans le canal commun en amont de l’embranchement entre le premier canal de sortie et le deuxième canal de sortie, la zone de chauffage étant localisée dans ou en contact avec le au moins un liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux de façon à chauffer localement ledit au moins un liquide de gaine à une température haute Th dans la zone de chauffage du canal commun, la température d’injection et la température haute étant séparées d’un écart en température inférieur ou égal à 40°C, ledit au moins un liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux présentant une viscosité dynamique supérieure ou égale à 1.0 Pa.s à la température haute Th, de façon à dévier ou extraire une portion du liquide échantillon sélectivement vers le deuxième canal de sortie. Avantageusement, le au moins un liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux présente, suite au chauffage localisé dans la zone de chauffage, une variation thermique de viscosité entre la température d’injection et la température haute, adaptée pour dévier ou extraire une portion du liquide échantillon sélectivement vers un canal de sortie déterminé parmi les au moins deux canaux de sortie. Le procédé est configuré pour éviter de générer de bulle(s) et de chauffer le liquide échantillon et éviter de chauffer le liquide de gaine sur toute sa section transverse. De façon remarquable, le chauffage bref et local du liquide de gaine n’entraine pas d’obturation du flux ni dans le canal commun ni sur aucune des branches de sortie mais simplement une perturbation limitée dans le temps et dans l’espace de l’écoulement et de sa répartition dans le canal commun. Cette perturbation entraine une modification dynamique du flux en aval de la zone de chauffage, sans interrompre l’écoulement, ce qui permet d’obtenir un effet rapide et localisé de déviation du liquide échantillon, contrairement à l’art antérieur. Grâce à la forme en pointe de l’embranchement entre les deux canaux de sortie, une perturbation de la viscosité du liquide de gaine entraine une déflexion suffisante du liquide échantillon pour le défléchir vers le premier canal de sortie. Dès que le chauffage est interrompu, la zone chauffée et visqueuse est emportée dans flux et revient rapidement à la température d’injection. De façon avantageuse, la température d’injection et la température haute sont séparées d’un écart en température inférieur ou égal à 40°C, 30°C, 20°C ou même à 10°C. Un tel procédé permet de dévier ou extraire une portion du liquide échantillon ayant un très faible volume, compris entre un femtolitre et 900 femtolitres, par exemple de l’ordre de 10 à 100 femtolitres. Ce procédé permet la manipulation et le tri de cellules ou de particules individuelles de taille nanométrique en suspension dans le liquide échantillon. De plus, le procédé permet un tri à une cadence plus élevée que dans les procédés de l’art antérieur. Selon un aspect particulier et avantageux, le liquide de gaine thermovisqueux comprend un polymère thermosensible. De façon avantageuse, le liquide de gaine comprend de 1% à 30% en poids dudit polymère thermosensible. Dans un exemple, le polymère thermosensible comprend au moins une chaîne linéaire de type polyoxyalkylène thermosensible allongée à au moins l’une de ses extrémités par un groupement organique via une liaison carbamate ou ester. Dans un autre exemple, le polymère thermosensible comprend d’une part des unités hydrosolubles et d’autre part des unités choisies parmi les polyuréthanes comportant des groupements poly(oxyde d’éthylène-b-oxyde de propylène-b-oxyde d’éthylène) (POE-b-POP-b-POE) et étant présent à une concentration massique inférieure ou égale à 10% dans une solution aqueuse. Selon un premier mode de réalisation, le procédé comprend une étape suivante après l’étape (c) : (d) appliquer une autre source d’énergie sur une durée limitée, inférieure ou égale à 10 ms, dans une deuxième zone de chauffage située dans le canal commun en amont de l’embranchement entre le premier canal de sortie et le deuxième canal de sortie, la deuxième zone de chauffage étant localisée dans ou en contact avec le au moins un liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux pour chauffer localement ledit au moins un liquide de gaine à la température haute Th dans la deuxième zone de chauffage du canal commun de façon à rétablir l’écoulement du liquide échantillon vers le premier canal de sortie. Avantageusement, l’étape d) est séparée de l’étape c) par une durée inférieure ou égale à 500 µs. Selon un aspect particulier et avantageux, la source d’énergie de l’étape c) comprend un laser émettant une première impulsion laser à une longueur d’onde comprise entre 100 nm et 10 µm. Selon un autre aspect particulier, l’autre source d’énergie de l’étape d) comprend un laser émettant une deuxième impulsion laser à une longueur d’onde comprise entre 100 nm et 10 µm. Avantageusement, le liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux est apte à absorber la première impulsion laser et/ou la deuxième impulsion laser. Par exemple, le liquide de gaine comprend un composant en suspension ou en solution apte à absorber la première et/ou la deuxième impulsion laser. Selon un autre aspect particulier et avantageux, la zone de chauffage ou, respectivement, la deuxième zone de chauffage comprend un transducteur photo-thermique. Selon encore un autre aspect particulier et avantageux, la première zone de chauffage ou, respectivement la deuxième zone de chauffage, comprend un transducteur électro-thermique et dans lequel la source d’énergie de l’étape c), respectivement de l’étape d), comprend une source d’énergie électrique. De préférence, la température haute Th est inférieure ou égale à 60°C, 50°C ou 40°C ou 35°C ou 30°C. Le au moins un liquide de gaine présente une viscosité dynamique croissante en fonction de la température dans une gamme déterminée de température supérieure ou égale à la température d’injection. La gamme déterminée de température s’étend, au-dessus de la température d’injection, sur environ 10 degrés, ou 15 degrés, 20 degrés, 25 degrés ou même 30 degrés, 35 degrés ou 40 degrés. Selon un aspect particulier, la variation thermique de viscosité dynamique a un maximum supérieur ou égal à 3 Pa.s.K -1 , ou 5 Pa.s.K -1 , ou même 7 Pa.s.K -1 dans la gamme déterminée de température. De façon avantageuse, le liquide échantillon est dépourvu de liquide thermovisqueux. L’invention concerne aussi un dispositif microfluidique comprenant un canal d’entrée de liquide échantillon, au moins un autre canal d’entrée de liquide de gaine, un premier canal de sortie, un deuxième canal de sortie, un canal commun disposé entre lesdits canaux d’entrée et lesdits canaux de sortie, le canal commun étant relié fluidiquement auxdits canaux d’entrée et de sortie, un embranchement séparant en aval le premier canal de sortie du deuxième canal de sortie, le canal d’entrée de liquide échantillon contenant un liquide échantillon injecté dans le canal commun, ledit au moins un autre canal d’entrée de liquide de gaine contenant au moins un liquide de gaine injecté dans le canal commun à une température d’injection déterminée, le au moins un liquide de gaine comprenant un liquide thermo-visqueux, ledit au moins un liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux présentant une viscosité dynamique inférieure à 0.1 Pa.s à la température d’injection, de façon à permettre une focalisation hydrodynamique du liquide échantillon dans le canal commun, le dispositif microfluidique étant configuré pour conduire le liquide échantillon focalisé hydrodynamiquement dans le canal commun par le au moins un liquide de gaine à la température d’injection vers le premier canal de sortie. Selon l’invention, le dispositif microfluidique comporte des moyens de chauffage comprenant une source d’énergie et au moins une zone de chauffage située dans le canal commun en amont de l’embranchement entre le premier canal de sortie et le deuxième canal de sortie, ladite au moins une zone de chauffage étant localisée dans ou en contact avec le au moins un liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux, les moyens de chauffage étant configurés pour appliquer la source d’énergie sur une durée limitée, inférieure ou égale à 10 ms, dans ladite au moins une zone de chauffage, de façon à chauffer localement ledit au moins un liquide de gaine à une température haute Th dans le canal commun dans ladite au moins une zone de chauffage du canal commun, la température d’injection et la température haute étant séparées d’un écart en température inférieur ou égal à 40°C, et de préférence inférieur ou égal à 30°C, 20°C ou même à 10°C, et ledit au moins un liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux présentant une viscosité dynamique supérieure ou égale à 1.0 Pa.s à la température haute Th, de façon à dévier ou extraire une portion du liquide échantillon sélectivement vers le deuxième canal de sortie. Selon un aspect particulier et avantageux, la source d’énergie comprend un laser à impulsion apte à générer des impulsions ayant une énergie par impulsion comprise entre 10nJ et 10000nJ, par exemple de l’ordre de 100 nJ. Bien entendu, les différentes caractéristiques, variantes et formes de réalisation de l'invention peuvent être associées les unes avec les autres selon diverses combinaisons dans la mesure où elles ne sont pas incompatibles ou exclusives les unes des autres. Description détaillée de l'invention De plus, diverses autres caractéristiques de l'invention ressortent de la description annexée effectuée en référence aux dessins qui illustrent une forme, non limitative, de réalisation de l'invention et où : FIG. 1 est une vue schématique d’un dispositif et d’un procédé microfluidique selon la présente divulgation ; FIG. 2 représente une courbe en trait plein de viscosité en fonction de la température et respectivement une courbe en tirets de variation de viscosité en fonction de la température pour un exemple de liquide de gaine à base de liquide thermovisqueux ; FIG. 3 illustre un premier mode de réalisation du procédé basé sur l’application de deux impulsions d'énergie entrainant une élévation de température du liquide de gaine successives, avec ici l’application de la première impulsion; FIG. 4 illustre le premier mode de réalisation, juste après l’application de la deuxième impulsion; FIG. 5 illustre le premier mode de réalisation et l’extraction d’une portion de liquide échantillon vers un canal de sortie ; FIG. 6 illustre le premier mode de réalisation et l’extraction d’une portion de liquide échantillon vers un canal de sortie ; FIG. 7 illustre un deuxième mode de réalisation du procédé basé sur l’application d’une seule impulsion, pendant cette impulsion; FIG. 8 illustre le deuxième mode de réalisation après la fin de cette impulsion et l’extraction d’une portion de liquide échantillon vers un canal de sortie. Dans le présent document, on entend par liquide thermo-visqueux, un liquide dont la viscosité augmente fortement et de manière réversible avec la température. La FIG. 1 représente un dispositif microfluidique 100 selon un exemple de réalisation de la présente divulgation. Le dispositif microfluidique 100 est généralement un dispositif planaire communément appelé puce microfluidique. On a représenté un repère orthonormé XY dans le plan de la FIG. 1 . Le dispositif microfluidique 100 comporte des canaux d’entrée 1, 2 et 3, un canal commun 4 et au moins deux canaux de sortie 11, 12. Les canaux d’entrée 1, 2 sont reliés fluidiquement respectivement à une source de liquide de gaine, qui est par exemple stocké dans un réservoir commun ou dans deux réservoirs séparés. Le canal d’entrée 3 est relié fluidiquement à une source de liquide échantillon 20 à analyser, qui est par exemple stocké dans un autre réservoir. A l’autre extrémité du canal commun 4 se trouve une jonction, par exemple de type jonction Y comprenant au moins un premier canal de sortie 11 et un deuxième canal de sortie 12 disposés en général symétriquement par rapport à l’axe longitudinal 14 du canal commun 4. L’axe longitudinal 14 est ici parallèle à l’axe X du repère XY. Un embranchement, ici en forme de pointe, sépare le premier canal de sortie 11 du deuxième canal de sortie 12. La pointe de l’embranchement forme un angle aigu compris en général entre 5 deg. et 40 deg. Dans une autre variante, le dispositif microfluidique comporte trois canaux de sortie : un premier canal de sortie dans l’axe longitudinal 14 du canal commun, un deuxième canal de sortie disposé sur un côté du canal commun et un troisième canal de sortie disposé sur un côté opposé du canal commun. Dans une autre variante, le dispositif microfluidique comporte plus trois canaux de sortie. Dans ces variantes, un embranchement sépare chaque paire de canaux de sortie adjacents. De façon connue, le dispositif microfluidique 100 est par exemple fabriqué dans du verre, de la céramique ou du silicium ou un polymère tel que le polydiméthylsiloxane (PDMS). Le dispositif microfluidique peut être fabriqué de manière monolithique ou par assemblage d’un bloc support et d’une lame formant couvercle. Le support est par exemple fabriqué dans du PDMS. Les canaux 1, 2, 3, 4, 11, 12 sont formés par exemple par moulage lors de la fabrication du support. Le support a par exemple les dimensions suivantes : 5mm d'épaisseur et 20 à 40mm de côté. La lame formant couvercle est de préférence transparente pour permettre l’observation et la détection de particules dans le liquide échantillon. Par exemple, la lame est une lamelle de microscope pour permettre l’observation du dispositif microfluidique 100 sous un objectif de microscope optique. Par exemple, on utilise une lame de verre très mince, ayant une épaisseur de 0.15mm. On note W la largeur, H la profondeur et L la longueur du canal commun 4. Par exemple, dans un dispositif microfluidique tel qu’illustré sur la FIG. 1 , la largeur W du canal commun est de 25 µm, la profondeur H du canal commun de 7 µm et la longueur L d’environ 100 µm. La distance G entre le début du canal de sortie 11, 12 et la pointe de l’embranchement de la jonction Y est comprise entre 10 et 30 µm. Selon une variante, le dispositif microfluidique présente une symétrie de révolution autour d’un axe longitudinal. Dans ce cas, un seul canal d’entrée de liquide de gaine peut être utilisé. Le liquide échantillon 20 est composé par exemple d’eau ou d’une solution tampon phosphate salin (PBS) dans laquelle se trouvent en suspension des micro-objets ou nano-objets à catégoriser et manipuler. Le liquide échantillon 20 comprend par exemple des particules à trier, à extraire et/ou à concentrer. Le liquide échantillon 20 et le ou les liquides de gaine 21, 22 peuvent être miscibles ou immiscibles entre eux. En général, le premier liquide de gaine 21 et le deuxième liquide de gaine 22 sont identiques. De façon avantageuse dans ce cas, le premier liquide de gaine 21 et le deuxième liquide de gaine 22 sont stockés dans un seul et même réservoir source. On utilise soit des seringues motorisées (communément appelées "pousse seringue") dans lesquelles on contrôle le débit des seringues, soit des systèmes à base de générateurs de pression dans lesquels on contrôle la pression d'injection pour injecter le liquide échantillon 20 et respectivement le(s) liquide(s) de gaine 21, 22 dans le dispositif microfluidique 100. On injecte simultanément un premier liquide de gaine 21 via le canal d’entrée 1, un deuxième liquide de gaine 22 via le canal d’entrée 2 et le liquide échantillon 20 via le via le canal d’entrée 3. Le premier liquide de gaine 21 et/ou le deuxième liquide de gaine 22 sont injectés à une température d’injection déterminée dans le canal commun 4. Par exemple, la température d’injection est égale à la température ambiante de 18°C, 19°C, 20 °C ou 22°C ou 25°C. Les canaux d’entrée 3, 1, 2 et conduisent fluidiquement le liquide échantillon 20 à analyser et le ou les liquides de gaine 21, 22 vers le canal commun 4 où le liquide échantillon 20 est focalisé hydrodynamiquement. En fonction du ratio entre le débit du liquide échantillon et le débit total des liquides de gaine, le liquide échantillon 20 présente, dans le canal commun 4, une largeur D réduite par rapport à la largeur W par focalisation hydrodynamique. A titre d’exemple, on obtient ainsi une veine de liquide échantillon 20 de largeur réduite D comprise entre 2 et 7 micromètres. En sortie du canal commun, et lorsqu’aucune action de tri n’est en cours, la veine de liquide échantillon 20 est dirigée continûment vers l’un ou l’autre des canaux de sortie 11, 12. Le dispositif microfluidique 100 comporte une unité de détection 50 disposée dans le canal commun 4. L’unité de détection 50 est par exemple basée sur un système de détection d’un ou plusieurs signaux de fluorescence émis par des particules passant dans le canal commun 4, ces particules à détecter étant marquées par un ou plusieurs marqueurs fluorescents. Les particules avec marqueur fluorescent sont par exemple des particules incluses dans le liquide échantillon, que l’on souhaite trier ou extraire. Par exemple, on mesure la fluorescence à une ou plusieurs longueurs d'onde et on active le tri lorsqu’un signal de fluorescence comprenant une combinaison prédéterminée de ces longueurs d'ondes est détecté. L’unité de détection 50 peut également être basée sur la mesure de taille des particules par diffusion d’un ou plusieurs faisceaux laser incidents sur la particule, ou encore par combinaison de plusieurs méthodes optiques ou électriques. Le dispositif microfluidique 100 comporte au moins une première zone de chauffage 31 située dans le canal commun 4, en aval de l’unité de détection 50. A titre d’exemple, sur la FIG. 1 , on a représenté deux zones de chauffage 31, 32 situées dans le canal commun 4, en amont des canaux de sortie 11, 12. La première zone de chauffage 31 est située sur le même côté du dispositif microfluidique 100 que le canal d’entrée 1 et le premier canal de sortie 11. La deuxième zone de chauffage 32 est située sur le même côté du dispositif microfluidique 100 que le canal d’entrée 2 et le deuxième canal de sortie 12. Un faisceau laser 41, respectivement 42, focalisé dans la première zone de chauffage 31, respectivement la deuxième zone de chauffage 32, permet de chauffer localement le liquide de gaine 21, respectivement 22. Dans le plan de la FIG. 1 , chaque zone de chauffage 31, 32 s’étend sur une surface limitée, par exemple en forme de disque, carré ou rectangle. En particulier, chaque zone de chauffage 31, 32 est limitée transversalement, suivant l’axe Y du repère XY, à une largeur inférieure à la largeur du premier liquide de gaine 21, respectivement du deuxième liquide de gaine 22. De façon avantageuse, chaque zone de chauffage 31, 32 a une largeur inférieure ou égale à 35%, 25%, 20% ou 10% de la largeur W. Dans l’exemple ci-dessus, la largeur W est de 25 µm et la largeur de chaque zone de chauffage 31, 32 est d’environ 6µm. La première zone de chauffage 31, respectivement la deuxième zone de chauffage 32, est située à une distance D1, respectivement D2, de l’unité de détection 50. La première zone de chauffage 31, respectivement la deuxième zone de chauffage 32, est située à une distance P1, respectivement P2, de la pointe de l’embranchement de la jonction Y qui sépare le premier canal de sortie 11 du deuxième canal de sortie 12. A titre d’exemple, la distance D1, respectivement D2, est comprise entre 1 et 10µm et la distance P1, respectivement P2 est comprise entre 0 et 20µm. Selon une variante, les deux zones de chauffage 31, 32 sont situées dans le canal commun 4 sur le même côté du dispositif microfluidique 100 que le canal d’entrée 1 et le premier canal de sortie 11. Dans ce cas, la première zone de chauffage 31 est située en amont de la deuxième zone de chauffage 32. Le dispositif microfluidique 100 est généralement de forme planaire. Toutefois, dans un autre exemple de réalisation, le canal d’entrée 3 du liquide échantillon 20, le canal commun 4, le premier canal de sortie 11 et les parties reliées au canal d’entrée 1 de liquide de gaine et au deuxième canal de sortie 12 sont de révolution autour de l’axe longitudinal 14. En variante, il est possible de combiner des canaux d’entrée à symétrie de révolution avec un canal commun et des canaux de sortie de géométrie planaire. Dans cette variante, le dispositif microfluidique 100 comporte un seul canal d’entrée de fluide de gaine ou deux ou plus canaux d’entrée de fluide de gaine. Selon une autre variante, il est possible de combiner des canaux d’entrée et un canal commun de géométrie planaire avec des canaux de sortie à symétrie de révolution. Selon la présente divulgation, on utilise un liquide de gaine ayant des propriétés particulières de variation de viscosité en fonction de la température. Plus précisément, on utilise au moins un liquide de gaine 21 et/ou 22 comprenant un liquide thermo-visqueux. La viscosité du liquide thermo-visqueux augmente fortement et de manière réversible avec la température. Le liquide thermo-visqueux présente de préférence une viscosité de valeur initiale proche de celle de l’eau à la température d’injection, par exemple à température ambiante, et sa viscosité augmente lorsque la température augmente. Inversement, lorsque la température du liquide thermo-visqueux diminue et revient à température ambiante, le liquide thermo-visqueux voit sa viscosité diminuer pour retrouver sa valeur initiale. Le liquide de gaine 21, 22 comprend par exemple un gel thermoréversible de type hydrogel à base d’un mélange d’eau et d’un polymère thermo-sensible ou polymère thermosensible. Un polymère thermo-sensible est par exemple constitué de segments hydrophobes thermosensibles de type polyoxyde de propylène (POP) et de parties hydrophiles de type polyoxyde d’éthylène (POE). De tels polymères thermo-sensibles sont utilisés en cosmétique. Dans un exemple, le polymère thermosensible comprend au moins une chaîne linéaire de type polyoxyalkylène thermosensible allongée à au moins l'une de ses extrémités par un groupement organique via une liaison carbamate ou ester tel que décrit dans le document de brevet FR2840907 de la société Polymerexpert pour des applications dans le domaine des cosmétiques. Dans un autre exemple, le polymère thermosensible comprend d’une part des unités hydrosolubles et d’autre part des unités choisies parmi les polyuréthanes comportant des groupements poly(oxyde d’éthylène-b-oxyde de propylène-b-oxyde d’éthylène) (POE-b-POP-b-POE) et étant présent à une concentration massique inférieure ou égale à 10% dans une solution aqueuse comme décrit dans le document de brevet FR2940761 de la société Polymerexpert pour des applications à une formulation pour le traitement et/ou la prévention du ronflement et administrable par vaporisation par les voies nasale ou buccale. Le liquide thermo-visqueux est fabriqué par exemple en dissolvant un polymère thermosensible dans une solution aqueuse, par exemple de l’eau, à laquelle on ajoute éventuellement un ou plusieurs additifs permettant d’ajuster les propriétés de viscosité du liquide thermo-visqueux. Par exemple, on utilise un liquide de gaine comprenant 5% en poids de polymère thermosensible dilué dans de l’eau pure. Avantageusement, le liquide de gaine comprend environ 2% en poids de substance présentant une forte absorption à la longueur d’onde du laser, par exemple d’encre, ou de colorant, ou de pigment, pour permettre l’absorption d’un faisceau laser. De préférence, on utilise une encre noire alimentaire, biocompatible. En variante, des nanoparticules de carbone sont mises en suspension dans le liquide de gaine, par exemple des nanoparticules ayant une taille d’environ 90nm. Ces familles de liquides thermo-visqueux se caractérisent par une faible viscosité à température ambiante, la viscosité étant inférieure ou égale à 100mPa.s, ou même 40mPa.s, par exemple comprise entre 10mPa.s et 30mPa.s, (voire inférieure à 10mPa.s dans certaines configurations physicochimiques), et une viscosité croissante dans une gamme déterminée de température supérieure ou égale la température ambiante jusqu’à atteindre une viscosité maximale de 1.0 Pa.s ou plusieurs Pa.s voire plusieurs dizaines de Pa.s, à une température de l’ordre de 37°C+/- 10°C. Ceci se traduit par une variation de la viscosité en fonction de la température dont le maximum peut atteindre 1 Pa.s/K ou plusieurs Pa.s/K, par exemple 5 Pa.s/K ou 10 Pa.s/K, dans une gamme réduite de température à partir de la température ambiante. Les valeurs minimum et maximum de viscosité et les valeurs de variation thermique de viscosité ainsi que la température correspondant à la valeur maximum de viscosité dépendent du liquide thermo-visqueux choisi, de sa concentration massique dans l’eau et éventuellement du ou des additifs incorporé(s) dans le liquide de gaine. Le liquide thermo-visqueux présente une viscosité dynamique croissante en fonction de la température dans une gamme déterminée de température à partir d’une température d’injection dans la puce microfluidique. La température d’injection est comprise entre 5°C et 30°C, de préférence entre 15°C et 25°C, de préférence entre 18°C et 22°C. Avantageusement, la température d’injection est égale à la température ambiante de 18°C, 19°C, 20°C, 21°C, 22°C, 23°C, 24°C ou 25°C. On utilise par exemple un liquide de gaine 21, 22 thermo-visqueux comprenant un polymère thermosensible de la société PolymerExpert de nom commercial EG230 (numéro CAS 93665-35-1) qui est un polyuréthane ramifié contenant des unités POE-b-POP-b-POE, dont la désignation INCI (International Nomenclature of Cosmetic Ingredients) est BISMethoxy PEG-13 PEG-502/PPG-57 SMDI Copolymer. Le pourcentage en poids de polymère thermosensible dans le liquide de gaine est compris entre 0.5% et 10%, de préférence entre 1% et 7.5%, par exemple de 5%, 6% ou encore de 7.5 %, le polymère thermosensible étant dilué dans de l’eau pure. La FIG. 2 représente une courbe de viscosité V (en trait plein) en fonction de la température et respectivement une courbe de variation de viscosité ΔV/ΔT(en tirets) en fonction de la température, entre 12°C et 50°C, pour un liquide de gaine à base de polymère thermosensible EG230 dilué à une concentration de 7,5% dans de l’eau. On observe que la viscosité V du liquide de gaine comprenant ce liquide thermo-visqueux croit continument avec la température entre 12°C et environ 45°C contrairement aux liquides de gaine habituels. De plus, la valeur de la viscosité en dessous de 22°C est très faible : de l’ordre de 0.02 Pa.s. Enfin, la valeur maximum de viscosité est très élevée dans cet exemple : cette valeur maximum atteint environ 35 Pa.s à la température de 46°C. Au-dessus de la température de 46°C, la viscosité diminue continument tout en restant à des valeurs élevées, par exemple d’environ 28 Pa.s à 50°C. On observe que la pente de variation thermique de la viscosité du liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux à base de polymère thermosensible est positive et particulièrement forte sur une faible gamme de température entre environ 25°C et 40°C. Cette pente est d’environ 0,3 Pa.s/K autour de 30°C, d’environ 1,0 Pa.s/K autour de 33°C, d’environ 2,0 Pa.s/K autour de 36°C et d’environ 4,0 Pa.s/K autour de 40°C. Autrement dit, la pente maximum de la courbe de variation thermique de viscosité est dans cet exemple de 4.0 Pa.s/K. Au-dessus de 46°C, la pente de variation thermique de la viscosité du liquide de gaine comprenant le liquide thermovisqueux devient négative. Dans un autre exemple on utilise un liquide de gaine comprenant un polymère thermosensible dilué dans de l’eau pure. Le liquide de gaine présente une très faible viscosité inférieure ou égale à 0.04 mPa.s à une température inférieure ou égale à 20°C, et une forte augmentation de sa viscosité entre 20°C et 40°C, avec une pente positive dépassant 10 Pa.s/K. A la température de 35°C, le liquide de gaine a une viscosité d’environ 5000 mPa.s. A la température de 40°C, le liquide de gaine a une viscosité d’environ 18000 mPa.s. Au-dessus de 40°C, le liquide de gaine a une viscosité décroissante avec la température. On observe qu’il suffit d’une faible augmentation de température de l’ordre de 10°C, 15°C, 20°C ou 30°C, par rapport à la température ambiante d’environ 20°C, pour augmenter fortement la viscosité du liquide de gaine à base de liquide thermovisqueux. De plus, ce liquide de gaine est thermoréversible. Par conséquent, cette variation de viscosité est réversible. Une baisse de température du liquide de gaine thermovisqueux à base du polymère thermosensible EG230 7,5% de 40°C à 20°C permet de réduire la viscosité d’une valeur égale à environ 20 Pa.s (à 40°C) à une valeur inférieure ou égale à 0.04 mPa.s (à 20°C). Selon la présente divulgation, le liquide échantillon est en général constitué de cellules ou de particules de taille nanométrique mises en suspension dans un liquide généralement à base d’eau. Le liquide échantillon est constitué d'un milieu adapté aux particules transportées, qui peut être de l'eau pure, ou une solution tampon de phosphate salin (ou PBS, de l'anglais phosphate-buffered saline) ou encore un milieu nutritif pour des particules biologiques. Le liquide échantillon présente une viscosité dynamique faiblement décroissante en fonction de la température entre 0°C et 100°C et notamment dans la gamme déterminée de température à partir de la température d’injection, qui est de préférence la température ambiante. Le liquide échantillon 20 est dépourvu de liquide thermo-visqueux. En effet, l'addition de liquide thermo-visqueux dans ce liquide échantillon est susceptible de nuire à l'intégrité des particules que l’on cherche à isoler. Le dispositif microfluidique met à profit les propriétés d’au moins un liquide de gaine 21 et/ou 22 thermo-visqueux pour modifier l’écoulement du liquide échantillon 20 afin d’effectuer un tri ou l’extraction d’une portion de liquide échantillon vers un canal de sortie dédié. Nous allons maintenant expliquer le fonctionnement du dispositif microfluidique en lien avec les figures 1 et 3-8. Le liquide échantillon 20 est injecté dans la puce microfluidique 100 via le canal d’entrée 3. Les liquides de gaine 21 et respectivement 22 sont injectés dans la puce microfluidique via les canaux d’entrée 1 et respectivement 2. Dans l’exemple illustré, la puce microfluidique 100 a, au niveau du canal commun 4, une profondeur de 7 µm et une largeur de 25 µm, prise perpendiculairement à la direction longitudinale de propagation des liquides. Les liquides de gaine 21, 22 sont ici identiques. Selon la présente divulgation, la température d’injection du liquide de gaine est environ égale à la température ambiante, par exemple de 20°C. Le débit du liquide échantillon 20 est par exemple de 5µl/h. Dans les exemples illustrés, les débits respectifs des deux liquides de gaine 21, 22 sont ajustés à des valeurs légèrement différentes (par exemple de 80 µl/h et respectivement 81µl/h) pour diriger le liquide échantillon 20 vers le premier canal de sortie 11 en absence de chauffage dans les zones de chauffage. Dans cette configuration, le premier canal de sortie 11 est une sortie dite poubelle et le deuxième bras de sortie 12 est utilisé pour collecter les particules triées. A température ambiante, la faible viscosité du liquide de gaine à base de liquide thermo-visqueux permet de réaliser des écoulements présentant une vitesse linéaire élevée (plusieurs dizaines de cm/s) malgré les faibles dimensions des canaux de la puce microfluidique. De plus, la très forte variation réversible de viscosité en fonction de la température permet une commutation rapide au moyen d’une faible élévation puis diminution de température dans le liquide de gaine. Dans un exemple de réalisation, la source d’énergie utilisée est un laser émettant un faisceau laser à une longueur d’onde déterminée et le liquide de gaine 21, 22 est apte à absorber le faisceau laser pour le transformer en chaleur. Plus précisément, un faisceau laser 41 est dirigé et focalisé dans la première zone de chauffage 31 avec une taille de faisceau comprise entre environ 1 µm et 10 µm dans la zone de focalisation. De façon complémentaire et optionnelle, un autre faisceau laser 42 est dirigé et focalisé dans la deuxième zone de chauffage 32, comme illustré en FIG. 4 . Par exemple, le liquide de gaine 21, 22 est composé d’un liquide thermo-visqueux à base d’un polymère thermosensible dissous dans de l’eau et d’un matériau absorbant à la longueur d’onde du laser. Le matériau absorbant est en suspension ou solution dans le liquide de gaine. Le matériau absorbant comprend par exemple une encre ou encore des nanoparticules de carbone, aptes à absorber le faisceau laser focalisé à l’intérieur du liquide de gaine dans la zone de chauffage 31, 32 pour le transformer en chaleur. En variante, la longueur d’onde du faisceau laser correspond à une raie d’absorption du liquide porteur du liquide de gaine, par exemple une raie d’absorption de l’eau. La zone de chauffage 31, 32 a un diamètre d’environ 5µm sur la FIG. 1 . Dans un autre exemple de réalisation, chaque zone de chauffage 31, 32 comprend un transducteur photo-thermique réalisé de telle sorte à être en contact avec le liquide de gaine, chaque transducteur photo-thermique étant apte à absorber le faisceau laser focalisé dans ladite zone de chauffage 31, 32. Chaque transducteur photo-thermique comprend une surface métallique, formée par dépôt d’une couche mince métallique, par exemple en or ou en indium, d’épaisseur comprise entre 10 nm et 500 nm et ayant une aire comprise entre 1 µm 2 et 100 µm 2 . Chaque transducteur photo-thermique est apte à absorber le faisceau laser focalisé dans la zone de chauffage 31, 32 pour le transformer en chaleur localement. Selon encore un autre exemple de réalisation, chaque zone de chauffage 31, 32 comprend un transducteur électro-thermique, par exemple une résistance chauffante ou un élément dissipatif inductif. Chaque transducteur électro-thermique est relié à une source d’énergie électrique. Le transducteur électro-thermique est en contact avec le premier, respectivement deuxième, liquide de gaine 21, 22 dans le canal commun 4 pour permettre un échange thermique localisé. La FIG. 1 illustre un exemple dans lequel un faisceau laser 41, respectivement 42, chauffe directement le liquide de gaine 21, respectivement 22, dans la première zone de chauffage 31, respectivement la deuxième zone de chauffage 32. Le liquide de gaine 1, 2 est composé de liquide thermovisqueux et d’un matériau absorbant à la longueur d’onde du laser, en suspension ou solution dans le liquide de gaine. Le liquide thermovisqueux est composé d’eau et d’un polymère thermosensible, ici du EG230 avec une concentration massique de 7.5 % dans de l’eau. Le liquide échantillon 20 est constitué d’eau contenant les particules d’intérêt. La zone de chauffage est située dans ou en contact avec le liquide de gaine et de préférence à distance non nulle du liquide échantillon. Par exemple, la distance entre la première zone de chauffage 31, 32 et le liquide échantillon 20 est de l’ordre de 4µm. De cette manière, l’augmentation de température est localisée précisément à l’intérieur du liquide de gaine comprenant le liquide thermovisqueux. Cette disposition permet de limiter spatialement l’élévation de température dans le liquide de gaine et en dehors du liquide échantillon, de façon à éviter une élévation de température du liquide échantillon susceptible d’endommager ou de modifier les particules se trouvant dans le liquide échantillon. De plus, l’élévation de température est limitée spatialement à une partie de la section transverse du liquide de gaine de façon à éviter un blocage du canal commun 4 ou de l’un des canaux de sortie 11, 12 par liquide de gaine lorsque sa viscosité augmente. Dans un premier exemple de réalisation illustré à des instants différents sur les figures 3 à 6, suite à la détection via l’unité de détection 50 d’une particule d’intérêt dans le liquide échantillon, on déclenche l’émission d’une séquence de deux impulsions laser 41, 42 successives ayant chacune une durée limitée ou durée brève, comprise entre 1 µs et 500 µs, par exemple ici de l’ordre de 50µs. La puissance du laser est de l’ordre de 5mW. L’énergie par impulsion est comprise entre 10nJ et 10000 nJ, par exemple ici de 250 nJ. La première impulsion laser 41 est focalisée dans la première zone de chauffage 31 sur une durée de 50µs ( FIG. 3 ) puis, après un intervalle de durée comprise entre 0 et 50µs, la deuxième impulsion laser 42 est focalisée dans la deuxième zone de chauffage 32 sur une durée de 50µs ( FIG. 4 ). On suppose que le liquide de gaine absorbe la totalité de la puissance des impulsions laser. Les figures 3 à 6 illustrent bien la séquence à deux impulsions laser. Sur la FIG. 3 , la première impulsion laser 41 dans la première zone de chauffage 31, sur un premier côté du dispositif microfluidique 100, initie la déviation du liquide échantillon vers le deuxième canal de sortie 12. Sur la FIG. 4 , dès que la déviation est initiée, la deuxième impulsion laser 42 dans la deuxième zone de chauffage 32, sur un second côté du dispositif microfluidique 100, inverse le mouvement. Toutefois, comme le liquide échantillon s’est propagé entre les deux impulsions laser, une petite partie du liquide échantillon continue vers le deuxième canal de sortie 12. Sur la FIG. 5 , les deux impulsions laser 41, 42 sont éteintes, mais l’effet d’augmentation locale de la viscosité du liquide de gaine continue à se propager : on observe une portion 130 extraite se former dans le deuxième canal de sortie 12 alors que la suite du flux de liquide échantillon 20 revient vers le premier canal de sortie 11 ou bras poubelle. Sur la FIG. 6 , la portion 130 extraite s’est détachée du flux de liquide échantillon 20 qui est rétabli dans le premier canal de sortie 11 (bras poubelle). Les figures 3-8 montrent aussi le changement local de température du liquide de gaine 21, 22 pendant et immédiatement après chaque impulsion laser. On a représenté schématiquement la teinte du liquide de gaine en fonction de la température. La teinte du liquide de gaine est plus claire là où le liquide de gaine est à température ambiante, c’est-à-dire là où le liquide de gaine a une faible viscosité, inférieure à 0.1 Pa.s. La teinte du liquide de gaine est d’autant plus sombre localement, que la température est plus élevée. Autrement dit, le liquide de gaine présente localement une viscosité d’autant plus élevée que sa teinte est sombre sur les figures 3-8. Sur les figures 3-8, en amont des zones de chauffage 31, 32, le liquide échantillon 20 et le liquide de gaine 21, 22 sont à la température d’injection, par exemple à température ambiante d’environ 20°C. La température d’injection est ici une température à laquelle le liquide de gaine 21, 22 présente une très faible viscosité. A 20°C, le liquide de gaine 21, 22 comprenant le liquide thermo-visqueux présente une faible viscosité d’environ 20 mPa.s. L’absorption de chaque impulsion laser 41, respectivement 42 augmente localement la température du liquide de gaine 21, respectivement 22 dans la première zone de chauffage 31, respectivement la deuxième zone de chauffage 32 jusqu’à une température haute Th d’environ 40°C. Dans la zone de chauffage du liquide de gaine, la température est croissante pendant la durée de l’impulsion, elle est maximale à la fin de l’impulsion et décroit ensuite pratiquement à la même vitesse. La limitation en durée et en puissance de l’apport d’énergie permet de limiter la température maximale d’échauffement du liquide de gaine, ici appelée température haute Th. Cette température haute Th reste bien en-dessous de la température d’ébullition du liquide de gaine, de façon à éviter la génération de bulles. La température haute Th peut être inférieure, égale ou même supérieure à la température à laquelle le liquide de gaine présente une valeur maximum de viscosité. Avantageusement, la température haute Th est inférieure à la température à laquelle le liquide de gaine présente une valeur maximum de viscosité, de façon à limiter l'échauffement du liquide de gaine. De plus, la température haute Th du liquide de gaine est ajustée de façon à ce que la viscosité dynamique du liquide de gaine à cette température haute Th soit fortement supérieure à la viscosité à la température d’injection. Par exemple, la viscosité dynamique du liquide de gaine est supérieure ou égale à 1.0 Pa.s à la température haute Th. Cet échauffement localisé et instantané du liquide de gaine a pour effet de rendre le liquide thermo-visqueux extrêmement visqueux dans la zone de chauffage pendant l’impulsion laser, ce qui entraine une déflexion de l’ensemble des lignes de courant par une modification des conditions d’écoulement. En effet, à 40°C, le liquide thermovisqueux présente une viscosité supérieure à 10 Pa.s. Ceci entraine une déviation du flux de la veine du liquide échantillon 20 autour de la zone de viscosité accrue, et notamment une déviation du flux de liquide échantillon. L’arrêt du chauffage provoque un refroidissement quasi instantané du liquide de gaine, et la diminution de la viscosité du liquide de gaine. La limitation spatiale de l’augmentation de viscosité à une section inférieure à la section du fluide de gaine considéré permet d’éviter la formation d’un bouchon qui bloquerait l’écoulement de liquide de gaine. Cette limitation spatiale de l’augmentation de viscosité à l’intérieur du liquide de gaine permet au contraire de maintenir l’écoulement du liquide de gaine vers les canaux de sortie ce qui entraine un refroidissement rapide du liquide de gaine après arrêt de l’impulsion laser de chauffage. De cette manière, comme le flux global n’est pas interrompu, la zone du liquide de gaine qui a été échauffée est entrainée vers l’aval avant même qu’elle n’ait complètement refroidi. Ceci accélère encore le rétablissement des conditions initiales et favorise un fonctionnement à haute fréquence. Au contraire dans l’art antérieur, les zones chauffées se trouvent dans l’un des bras de sortie et s’étendent sur toute la largeur du bras de sortie, pour produire un bouchon dans le bras de sortie, l’écoulement de liquide dans ce bras de sortie étant alors interrompu tant que la température reste élevée. Ce fonctionnement implique que le rétablissement des conditions initiales est lent et ne peut avoir lieu qu’après refroidissement complet de la zone chauffée. Selon la présente divulgation, l’écoulement continu du liquide de gaine permet le rétablissement rapide de la direction du flux initial après la séquence de chauffe. Toutefois, suite à l’échauffement localisé du liquide de gaine, la modification de la circulation du liquide échantillon 20 permet d’orienter une toute petite partie du liquide échantillon vers le deuxième canal de sortie 12 qui sert de voie de collection (voir figures 3-6). Néanmoins, la zone de viscosité accrue ne bloque pas l’écoulement de liquide, car elle est limitée spatialement du fait de la focalisation du laser et elle ne s’étend pas sur toute la largeur du liquide de gaine. En particulier, l’écoulement de liquide dans les deux canaux de sortie 11, 12 n’est pas interrompu. De plus, la durée de l’échauffement est très brève, si bien que la température et la viscosité de la zone de viscosité accrue diminuent très rapidement après l’arrêt du chauffage. Sur la FIG. 6 , on observe que la portion 111 du liquide de gaine ayant subi une augmentation de température s’est décalée par rapport à la position de la première zone de chauffage 31 où l’impulsion laser 41 a été appliquée. De plus, la température maximale de cette portion 111 de liquide de gaine 21 est d’environ 35°C, c’est-à-dire inférieure à la température haute de 40°C. En effet, la FIG. 4 est réalisée 50 µs après l’arrêt de l’impulsion laser 41. Ce décalage et cette réduction rapide de la température la portion 111 du liquide de gaine s’expliquent par la diffusion thermique et l’écoulement continu du liquide de gaine vers le canal de sortie 11. De la même manière, on observe sur les figures 4 à 6 la diminution de température de la portion 112 du liquide de gaine qui a été chauffée par la deuxième impulsion laser 42. Sur la FIG. 4 , la portion 112 du liquide de gaine ayant subi le chauffage est située dans la deuxième zone de chauffage 32 et présente une température d’environ 40°C. Sur la FIG. 5 , la portion 112 du liquide de gaine chauffée s’est décalée vers le deuxième canal de sortie 12 et a une température d’environ 35°C. Sur la FIG. 6 , la portion 112 du liquide de gaine chauffée est sortie de la deuxième zone de chauffage 32 et est maintenant située dans le deuxième canal de sortie 12 et a une température d’environ 30°C ce qui correspond selon la FIG. 2 au quasi rétablissement de la viscosité à température d’injection. De plus, on observe bien sur les figures 3 à 6 que le liquide échantillon ne subit pratiquement pas d’élévation de température, notamment au voisinage des zones de chauffage 31, 32. Le maintien du liquide échantillon à la température d’injection permet de préserver l’intégrité des particules ou cellules que l’on souhaite analyser. L’application de deux impulsions laser successives, c’est-à-dire décalées dans le temps, permet d’induire un effet de cisaillement dans la veine de liquide échantillon 20, qui permet d’extraire une petite portion 130 du liquide échantillon en direction du deuxième canal de sortie 12. En pratique la première impulsion laser 41 crée une première zone de viscosité accrue avant l’entrée du premier canal de sortie 11. Le liquide échantillon 20 est ainsi dévié vers le deuxième canal de sortie 12. La première impulsion commence à dévier le flux du premier canal de sortie 11 (bras poubelle) vers le deuxième canal de sortie 12 (bras échantillon) qui voit son débit augmenter. Peu de temps ou aussitôt après, la deuxième impulsion laser 42 a pour effet de compenser la déflexion initiale et réorienter le liquide échantillon vers le premier canal de sortie 11 en ne conservant qu’une toute petite portion 130 de liquide échantillon dans le deuxième canal de sortie 12 (bras échantillon). En effet, le flux vers le premier canal de sortie 11 est alors rétabli par une forte diminution de la viscosité dans le premier liquide de gaine 21 ce qui entraine un retour de l’écoulement dans la direction du premier canal de sortie 11 pendant la durée de la deuxième impulsion. Cette séquence de deux impulsions laser successives entraine la découpe d’une petite quantité ou portion 130 de liquide échantillon qui est dirigée vers le deuxième canal de sortie 12 (bras de collection ou de recueil) et le rétablissement du flux principal de liquide échantillon vers le premier canal de sortie 11 ou bras poubelle. Ce dispositif et ce procédé permettent ainsi d’extraire un volume de liquide échantillon de quelques femtolitres à quelques centaines de femtolitres en un temps très court, car il a lieu sans interrompre le flux global dans chacun des bras. La diminution de la durée des impulsions en augmentant la puissance des impulsions laser à énergie constante permet de diminuer encore la durée de l’extraction de la portion de fluide échantillon et ainsi de réduire encore le volume prélevé. Cette séquence de deux impulsions laser successives fonctionne bien parce que la variation locale de température est très faible, de l’ordre de 20°C, ce qui permet une faible inertie et un comportement dynamique très rapide du procédé de manipulation microfluidique. Dans l’exemple ci-dessus, entre la FIG. 3 et la FIG. 6 , il s’est écoulé 150µs. A noter également que l’augmentation brutale de viscosité au sein d’un liquide très fluide agit comme une sorte de déflecteur, ce qui est très différent de ce qui pourrait se passer si la viscosité diminuait. Le dispositif et le procédé présentent ainsi une meilleure efficacité que les dispositifs et procédés de manipulation microfluidique de l’art antérieur basés sur une diminution locale de viscosité. Le procédé à deux impulsion s’applique de manière analogue avec des zones de chauffage 31, 32 comprenant chacune un transducteur électro-thermique, en appliquant des impulsions électriques à la place des impulsions laser. Les impulsions électriques peuvent avoir une durée dans le domaine milliseconde, inférieure ou égale à 10 ms, à 1ms, à 100µs à 10µs. Dans l’exemple de la FIG. 1 , les deux zones de chauffage 31, 32 sont disposées symétriquement par rapport à l’axe longitudinal 14 du canal commun 4 et à la même distance P1=P2= 5µm environ de la pointe de la jonction Y. Selon une variante, les zones de chauffage 31, 32 sont décalées l’une par rapport à l’autre le long de l’axe longitudinal 14 du canal commun 4. Par exemple, la première zone de chauffage 31 est plus proche de la jonction Y que la deuxième zone de chauffage 32. On applique successivement la première impulsion laser 41 dans la première zone de chauffage 31 pendant une durée de 50µs puis, après un intervalle de 50µs, la deuxième impulsion laser 42 dans la deuxième zone de chauffage 32 pendant une durée de 50µs. La première zone de chauffage 31 est par exemple située juste avant l’entrée du premier canal de sortie 11. La deuxième zone de chauffage 32 est située en amont de la première zone de chauffage 31 suivant l’axe longitudinal 14. Par exemple, la première zone de chauffage 31 est à une distance P1 =2µm de la pointe de la jonction Y et la deuxième zone de chauffage 32 est à une distance P2 =7µm de la pointe de la jonction Y. La première impulsion laser 41 a pour effet d’augmenter localement et temporairement la viscosité d’une portion 111 du liquide de gaine 21 à l’entrée du premier canal de sortie 11 et de dévier le flux du liquide échantillon vers le deuxième canal de sortie 12. Après 50µs, la deuxième impulsion laser 42 a pour effet d’augmenter localement et temporairement la viscosité d’une autre portion 112 du liquide de gaine 22 dans le canal commun ce qui rétablit le flux de la totalité de la veine de liquide échantillon vers le canal poubelle 11. Selon un deuxième mode de réalisation illustré sur les figures 7 et 8, on utilise une seule impulsion laser focalisée sur une seule zone de chauffage 31. Dans ce mode de réalisation, le liquide de gaine 21 comporte un liquide thermovisqueux. Par contre, le liquide de gaine 22 ne comporte pas nécessairement de liquide thermovisqueux. Il reste cependant avantageux d’utiliser le même liquide de gaine 22 que le liquide de gaine 21 à base de liquide thermovisqueux. Les paramètres de fonctionnement du laser (puissance, énergie par impulsion, durée d’impulsion, longueur d’onde…) sont identiques à ceux décrits en lien avec la première impulsion du premier mode de réalisation. Les figures 7 et 8 montrent l’écoulement de la veine fluidique du liquide échantillon ainsi que la température du liquide de gaine (l’élévation de température étant représentée par l’intensité de la couleur noire dans le liquide de gaine 21). La FIG. 7 montre une image de simulation du dispositif microfluidique 50µs après l’application d’une impulsion laser 41 sur la zone de chauffage 31 sur une durée de 50µs. L’impulsion laser 41 a pour effet d’augmenter localement la température jusqu’à une température haute d’environ 40°C et ainsi d’augmenter la viscosité du liquide de gaine 21. L’impulsion laser 41 crée une zone de viscosité accrue qui perturbe localement et brièvement l’écoulement du liquide de gaine 21 et du liquide échantillon 20 en amont de l’embranchement entre les deux canaux de sortie. En particulier, la zone de viscosité accrue réduit le débit du liquide de gaine 21 vers le premier canal de sortie 11 et dévie le flux du liquide échantillon vers le deuxième canal de sortie 12. On observe aussi sur la FIG. 7 que l’élévation de température induite par l’impulsion laser reste localisée dans une zone d’environ 10 µm de diamètre dans le liquide de gaine 21. La température haute atteint environ 40°C dans la zone de chauffage du liquide de gaine 21. Par contre, le liquide échantillon ne subit pratiquement pas d’élévation de température, notamment autour de la zone de chauffage 31. L’arrêt de l’unique impulsion laser 41 a pour effet de découper une petite quantité de liquide échantillon qui est dirigée vers le bras de collection ( FIG. 8 , environ 100µs après la FIG. 7 ). On observe sur la FIG. 8 que le liquide échantillon est discontinu dans le premier canal de sortie 11. Cette discontinuité de la veine fluidique dans le premier canal de sortie 11 correspond à l’extraction de la portion 130 de liquide échantillon vers le deuxième canal de sortie 12. Le liquide échantillon s’écoule donc de manière ininterrompue. On observe aussi sur la FIG. 8 que la température du liquide de gaine 21 est revenue pratiquement à la température ambiante. De plus, la portion 130 de liquide échantillon extraite dans le deuxième canal de sortie 12 ne subit aucune élévation de température, susceptible d’endommager le liquide échantillon et/ou les particules triées. De même, le liquide échantillon 20 en amont de la zone de chauffage 31 ne subit aucune élévation de température. Dans le deuxième mode de réalisation, le rétablissement du flux après l’impulsion laser de chauffage est passif et plus lent que dans la configuration à deux impulsions. Le deuxième mode de réalisation est plus simple car il met en œuvre une seule impulsion laser dans une seule zone de chauffage, mais moins rapide et moins précis que le premier mode de réalisation. En effet, dans le premier mode de réalisation qui utilise deux impulsions, la seconde impulsion sert à forcer le rétablissement du flux initial. Le premier mode de réalisation est donc plus rapide et aussi plus précis, puisque la seconde impulsion permet une découpe de la veine d'échantillon qui est passée dans le bras de collecte. Dans le deuxième mode de réalisation, cette découpe est progressive au fur et à mesure que le flux se rétablit. Dans tous les modes de réalisation, la faible distance entre l’unité de détection 50 et la ou les zones de chauffage 31, 32 permet d’appliquer un faisceau laser très peu de temps après la détection d’une particule d’intérêt, ce qui permet de réduire le temps de commutation pour extraire la particules détectée vers le canal de collection. Autrement dit, cette configuration permet d’augmenter la fréquence de commutation ou de tri ou d’extraction de particule. La présente divulgation permet avantageusement de prélever des particules uniques dans un liquide concentré. De plus, le chauffage du liquide thermo-visqueux dans le canal commun, avant l’entrée dans les canaux de sortie permet d’obtenir des performances importantes en termes de cadence de tri et de petitesse du volume prélevé . Le procédé permet une grande vitesse de l’écoulement, en raison de la faible viscosité à la température d’injection. La vitesse d’écoulement est en effet de l'ordre de plusieurs dizaines de cm par seconde, ce qui est très élevé compte tenu de la géométrie et des faibles dimensions du dispositif microfluidique. L’augmentation transitoire de la viscosité localisée dans le liquide de gaine est obtenue avec une faible élévation de température (moins de 40°C, de préférence moins de 30°C, ou de 20°C, ou même moins de 10°C lors de la commutation ce qui évite un chauffage nuisible au liquide échantillon. Le procédé permet d’obtenir une très grande vitesse de commutation, en raison de la faible plage de température de variation de la viscosité, ce qui permet l’augmentation et la diminution de la température rapidement sans avoir à dissiper de grandes quantités d’énergie, et ce qui limite l’inertie thermique du dispositif et du procédé. Le laser requiert une faible puissance optique (de l’ordre de quelques mW) pour effectuer la commutation. Le dispositif et procédé de la présente divulgation permettent d’extraire un volume très faible (de l’ordre de quelques dizaines de femtolitre), tout en conservant une grande vitesse d’écoulement du liquide nécessaire pour analyser de grands volumes. L’utilisation d’un liquide de gaine thermo-visqueux et de zones de chauffage en amont de l’embranchement entre les canaux de sortie permet une commutation rapide sans interruption du flux de liquide échantillon. Procédé de manipulation microfluidique comprenant les étapes suivantes : (a) injecter via un canal d’entrée (3) un liquide échantillon (20) dans un canal commun (4) d’un dispositif microfluidique ; (b) injecter via au moins un autre canal d’entrée (1, 2) au moins un liquide de gaine (21, 22) à une température d’injection déterminée dans le canal commun (4) pour permettre une focalisation hydrodynamique du liquide échantillon (20) dans le canal commun (4) et un écoulement du liquide échantillon (20) vers un premier canal de sortie (11) qui se situe en aval d’un embranchement entre le premier canal de sortie (11) et un deuxième canal de sortie (12), le au moins un liquide de gaine comprenant un liquide thermo-visqueux, ledit au moins un liquide de gaine (21, 22) comprenant le liquide thermo-visqueux présentant une viscosité dynamique inférieure à 0.1 Pa.s à la température d’injection ; caractérisé en ce que le procédé comporte l’étape suivante : (c) appliquer une source d’énergie sur une durée limitée, inférieure ou égale à 10 ms, dans une zone de chauffage (31) située dans le canal commun (4) en amont de l’embranchement entre le premier canal de sortie (11) et le deuxième canal de sortie (12), ladite zone de chauffage (31) étant localisée dans ou en contact avec le au moins un liquide de gaine (21, 22) comprenant le liquide thermo-visqueux de façon à chauffer localement ledit au moins un liquide de gaine (21, 22) à une température haute Th dans la zone de chauffage (31) du canal commun (4), la température d’injection et la température haute étant séparées d’un écart en température inférieur ou égal à 40°C, ledit au moins un liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux présentant une viscosité dynamique supérieure ou égale à 1.0 Pa.s à la température haute Th, de façon à dévier ou extraire une portion (120, 130, 220) du liquide échantillon sélectivement vers le deuxième canal de sortie (12). Procédé selon la revendication 1 comprenant une étape suivante après l’étape (c) : (d) appliquer une autre source d’énergie sur une durée limitée, inférieure ou égale à 10 ms, dans une deuxième zone de chauffage (32) située dans le canal commun (4) en amont de l’embranchement entre le premier canal de sortie (11) et le deuxième canal de sortie (12), la deuxième zone de chauffage (32) étant localisée dans ou en contact avec le au moins un liquide de gaine (21, 22) comprenant le liquide thermo-visqueux pour chauffer localement ledit au moins un liquide de gaine (21, 22) à la température haute Th dans la deuxième zone de chauffage (32) du canal commun (4) de façon à rétablir l’écoulement du liquide échantillon vers le premier canal de sortie (11). Procédé selon la revendication 2 dans lequel l’étape d) est séparée de l’étape c) par une durée inférieure ou égale à 500 µs. Procédé selon l’une des revendications 1 à 3 dans lequel la source d’énergie de l’étape c) comprend un laser émettant une première impulsion laser à une longueur d’onde comprise entre 100 nm et 10 µm. Procédé selon la revendication 2 dans lequel l’autre source d’énergie de l’étape d) comprend un laser émettant une deuxième impulsion laser à une longueur d’onde comprise entre 100 nm et 10 µm. Procédé selon l’une des revendications 4 à 5 dans lequel le liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux est apte à absorber la première impulsion laser et/ou la deuxième impulsion laser. Procédé selon la revendication 4 ou, respectivement, la revendication 5, dans lequel la zone de chauffage (31) ou, respectivement, la deuxième zone de chauffage (32) comprend un transducteur photo-thermique. Procédé selon l’une des revendications 1 à 3 dans lequel la zone de chauffage (31) ou, respectivement la deuxième zone de chauffage (32), comprend un transducteur électro-thermique et dans lequel la source d’énergie de l’étape c), respectivement de l’étape d), comprend une source d’énergie électrique. Procédé selon l’une des revendications 1 à 8 dans lequel la variation thermique de viscosité dynamique du liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux présente un maximum supérieur ou égal à 3 Pa.s.K -1 dans une gamme déterminée de température s’étendant à partir de la température d’injection, sur environ 10 degrés, ou 15 degrés, 20 degrés, 25 degrés ou même 30 degrés, 35 degrés ou 40 degrés au-dessus de la température d’injection. Procédé selon l’une des revendications 1 à 9 dans lequel le liquide échantillon (20) est dépourvu de liquide thermo-visqueux. Dispositif microfluidique (100) comprenant un canal d’entrée (3) de liquide échantillon, au moins un autre canal d’entrée (1, 2) de liquide de gaine, un premier canal de sortie (11), un deuxième canal de sortie (12), un canal commun (4) disposé entre lesdits canaux d’entrée (1, 2, 3) et lesdits canaux de sortie (11, 12), le canal commun (4) étant relié fluidiquement auxdits canaux d’entrée et de sortie (1, 2, 3, 11, 12), un embranchement séparant en aval le premier canal de sortie (11) du deuxième canal de sortie (12), le canal d’entrée (3) de liquide échantillon contenant un liquide échantillon (20) injecté dans le canal commun (4), ledit au moins un autre canal d’entrée (1, 2) contenant au moins un liquide de gaine (21, 22) injecté dans le canal commun (4) à une température d’injection déterminée, le au moins un liquide de gaine comprenant un liquide thermo-visqueux, ledit au moins un liquide de gaine (21, 22) comprenant le liquide thermo-visqueux présentant une viscosité dynamique inférieure à 0.1 Pa.s à la température d’injection, de façon à permettre une focalisation hydrodynamique du liquide échantillon (20) dans le canal commun (4), le dispositif microfluidique étant configuré pour conduire le liquide échantillon (20) focalisé hydrodynamiquement dans le canal commun (4) par le au moins un liquide de gaine (21, 22) à la température d’injection vers le premier canal de sortie (11), caractérisé en ce que : le dispositif microfluidique comporte des moyens de chauffage comprenant une source d’énergie (40) et au moins une zone de chauffage (31) située dans le canal commun (4) en amont de l’embranchement entre le premier canal de sortie (11) et le deuxième canal de sortie (12), la ladite au moins une zone de chauffage (31) étant localisée dans ou en contact avec le au moins un liquide de gaine (21, 22) comprenant le liquide thermo-visqueux, les moyens de chauffage étant configurés pour appliquer la source d’énergie sur une durée limitée, inférieure ou égale à 10 ms, dans ladite au moins une zone de chauffage (31), de façon à chauffer localement ledit au moins un liquide de gaine (21, 22) à une température haute Th dans le canal commun (4) dans ladite au moins une zone de chauffage (31) du canal commun (4), la température d’injection et la température haute étant séparées d’un écart en température inférieur ou égal à 40°C, et en ce que ledit au moins un liquide de gaine comprenant le liquide thermo-visqueux présente une viscosité dynamique supérieure ou égale à 1.0 Pa.s à la température haute Th, de façon à dévier ou extraire une portion (120, 130, 220) du liquide échantillon sélectivement vers le deuxième canal de sortie (12). Dispositif microfluidique selon la revendication 11 dans lequel la source d’énergie comprend un laser à impulsion apte à générer des impulsions ayant une énergie par impulsion comprise entre 10nJ et 10000nJ.