Brevet FR3158314A1 — publié le 20250718

L’invention concerne un anticorps ou un fragment d’anticorps qui reconnait spécifiquement les G-quadruplexes d’ADN télomérique de conformation antiparallèle et qui comprend au moins les six séquences SEQ ID NO : 21, SEQ ID NO :1, SEQ ID NO :2, SEQ ID NO : 22, SEQ ID NO : 3 et SEQ ID NO : 4, ou au moins les six séquences SEQ ID NO : 21, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 22, SEQ ID NO : 7 et SEQ ID NO : 8, son utilisation dans des méthodes de diagnostic ou de pronostic ou comme médicament., notamment dans le traitement de maladies cancéreuses, de maladies neuro-dégénératives et de maladies génétiques. L’invention se rapporte aussi à un kit de détection comprenant un tel anticorps ou un tel fragment d’anticorps, un acide nucléique codant pour une desdites séquences peptidiques et un vecteur recombinant ou transformant contenant ce dernier. Anticorps spécifiques des G-quadruplexes d’ADN et utilisations L’invention concerne des anticorps ou des fragments d’anticorps qui reconnaissent spécifiquement une topologie déterminée des motifs G-quadruplexes d’ADN, ainsi que leurs applications. Les brins d’ADN des chromosomes se terminent par des séquences d’ADN répétitives riches en guanine (G) et qui ne contiennent pas de gènes, les télomères. Ils protègent les chromosomes contre des fusions par leurs extrémités et empêchent la dégradation des séquences internes. Ces séquences sont capables de former des structures secondaires appelées G-quadruplexes (ou G4) observées in vitro , mais encore assez méconnues, in vivo . De telles structures ont aussi été retrouvées au niveau des régions promotrices de gènes et des origines de réplication. Elles peuvent également être constituées avec des séquences d’autres acides nucléiques riches en guanine tels que les ARN messagers et les ARN non codants. Ces conformations G4 comportent deux tétrades de guanine (ou G-quartet) ou plus, qui résultent de l’arrangement planaire de quatre guanines, appariées par des liaisons hydrogène. Leur empilement s’effectue notamment via des interactions hydrophobes (π-stacking, ou empilement π en français) et conduit aux structures G4 qui présentent une grande diversité structurelle et topologique. Ainsi, selon l’orientation de chacun des brins d’acide nucléique impliqués, les G4 peuvent adopter des conformations (ou topologies) de type parallèle, antiparallèle ou hybride. Selon l’invention, on s’intéresse à une topologie antiparallèle. La vraisemblable implication des G4 dans plusieurs processus biologiques, notamment dans la régulation de la transcription, dans les réarrangements génomiques, dans les dysfonctionnements télomériques, avec un rôle parfois d’activateurs ou bien d’inhibiteurs, fait de ces structures la cible de nombreuses études, et en particulier en vue d’applications thérapeutiques. Ainsi, la thèse soutenue par Nasab REDA pour « Sélection d’anticorps spécifiques d’une topologie antiparallèle de l’ADN G-Quadruplex télomérique » soutenue publiquement le 30 mars 2022 décrit la mise au point d’une technique de sélection, dite de Phage Display (en français, expression phagique), qui vise à sélectionner des fragments d’anticorps dirigés contre une topologie antiparallèle de l’ADN G4 télomérique. Elle recourt à un système biomoléculaire de G-quadruplexe contraint en topologie antiparallèle sur un cyclodécapeptide. Cependant, à ce jour et malgré l’intérêt qu’ils suscitent, de tels anticorps spécifiques d’une topologie unique du G-quadruplex télomérique n’ont pas encore été identifiés. C’est à cet objectif que répond l’invention. Elle apporte en effet un anticorps ou un fragment d’anticorps qui reconnait spécifiquement les G-quadruplexes d’ADN télomérique de conformation antiparallèle. Par anticorps ou fragment d’anticorps qui reconnait spécifiquement des G4 d’ADN télomérique de conformation antiparallèle, on comprend que ledit anticorps ou ledit fragment d’anticorps a une spécificité vis-à-vis d’une séquence dans une topologie unique, à savoir antiparallèle. Cette propriété permet d’incrémenter d’un niveau de spécificité la détection des G4 d’ADN télomérique pour tenter d’élucider l’importance de la topologie. Un anticorps est une molécule constituée de quatre chaines polypeptidiques, deux chaines lourdes identiques et deux chaines légères identiques, liées entre elles par des ponts disulfure. Chaque chaine lourde est composée d'un domaine variable (VH) et d’au moins 3 domaines constants (CH1, CH2 et CH3, voire CH4), tandis que chaque chaîne légère est composée d'un domaine variable (VL) et d’un domaine constant (CL). Les domaines constants déterminent l’appartenance d’un anticorps à un type d’immunoglobuline et les domaines variables constitués chacun de trois régions hypervariables (CDR), contiennent le site de liaison, ou paratope, à l’antigène via son épitope. Ce sont précisément, les séquences peptidiques des CDR1, CDR2 et CDR3 des chaines légères (VL) et des chaines lourdes (VH) de deux anticorps spécifiques selon l’invention qui ont été déterminées ; ces CDRs répondent aux séquences suivantes : pour un premier anticorps, les CDR1, CDR2 et CDR3 de la chaine lourde ont les séquences SEQ ID NOs : 21, 1 et 2, respectivement, et les CDR1, CDR2 et CDR3 de la chaine légère ont les séquences SEQ ID NOs : 22, 3 et 4, respectivement ; pour un second anticorps, les CDR1, CDR2 et CDR3 de la chaine lourde ont les séquences SEQ ID NOs : 21, 5 et 6, respectivement, et les CDR1, CDR2 et CDR3 de la chaine légère ont les séquences SEQ ID NOs : 22, 7 et 8, respectivement. Les domaines variables même sous forme de fragments d’anticorps conservent leur capacité de liaison à l’antigène. Parmi ceux-ci, les principaux sont les fragments Fab, F(ab’)2, Fv, scFv et VHH. Le fragment Fab, monovalent, comprend tout ou partie des domaines constants CH1 et CL et des domaines VH et VL de chacune des chaines lourdes et légères. Le fragment F(ab’)2, divalent, correspond à l'association de deux fragments Fab reliés par les ponts disuflure de la région charnière des chaines lourdes. Le fragment Fv, monovalent, comprend au moins le domaine VH, il peut en outre comprendre le domaine VL. Le fragment scFv, monovalent, comprend tout ou partie des domaines VH et VL reliés par un bras peptidique très flexible. Le fragment VHH est composé des trois CDR du domaine VL ou du domaine VH. Par fragment d’anticorps selon l’invention, on entend avantageusement un fragment scFv, voire un fragment Fab. L’expression « fragment d’anticorps » selon l’invention recouvre néanmoins tout fragment capable de reconnaître spécifiquement un G4 d’ADN télomérique de conformation antiparallèle et dont la molécule comprend, à cette fin, au moins les trois CDR du domaine VL et/ou au moins les trois CDR du domaine VH d’un anticorps de l’invention. Ceci signifie qu’il peut résulter d’une combinaison d’un ou plusieurs des fragments précités, il peut aussi comporter des acides aminés ou des peptides, voire des polypeptides, non présents dans la structure originale d’un anticorps mais provenant de son procédé d’obtention ou susceptibles d’apporter un intérêt par exemple dans sa production, sa purification, sa sélection ou son utilisation. Au fin d’une plus forte spécificité d’un fragment d’anticorps, ce dernier comprend au moins les trois CDR du domaine VL et au moins les trois CDR du domaine VH d’un anticorps de l’invention. Ainsi, l’invention concerne un anticorps ou un fragment d’anticorps qui reconnait spécifiquement les G-quadruplexes d’ADN télomérique et qui comprend au moins les six séquences SEQ ID NO : 21, SEQ ID NO :1, SEQ ID NO :2, SEQ ID NO 22, SEQ ID NO :3 et SEQ ID NO :4 ou qui comprend au moins les six séquences SEQ ID NO : 21, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO :6, SEQ ID NO : 22, SEQ ID NO : 7 et SEQ ID NO : 8. Selon une variante de l’invention, l’anticorps ou le fragment d’anticorps qui reconnait spécifiquement les G-quadruplexes d’ADN télomérique de conformation antiparallèle comprend au moins les six séquences SEQ ID NO : 21, SEQ ID NO : 1, SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 22, SEQ ID NO : 3 et SEQ ID NO : 4 successivement, ou au moins les six séquences SEQ ID NO : 21, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 22, SEQ ID NO : 7 et SEQ ID NO : 8 successivement. Les auteurs de l’invention sont ainsi parvenus à obtenir un anticorps ou un fragment d’anticorps qui présente une spécificité vis-à-vis des G4 d’ADN télomérique de topologie antiparallèle, reproductible. Le choix du fragment d’anticorps est majoritairement déterminé par la technique de sélection mise en œuvre. Ainsi, selon une variante de l’invention, c’est la technologie de Phage Display qui est utilisée et le fragment d’anticorps est de préférence choisi parmi les fragments Fab, Fv, scFv, mieux encore, il s’agit d’un fragment scFv. Par anticorps ou fragment d’anticorps qui comprend au moins les six séquences SEQ ID NO : 21, SEQ ID NO : 1, SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 22, SEQ ID NO : 3 et SEQ ID NO : 4 successivement, ou au moins les six séquences SEQ ID NO : 21, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 22, SEQ ID NO : 7 et SEQ ID NO : 8 successivement, on entend qu’il contient ces six séquences dans l’ordre indiqué, ces séquences se suivant, directement ou indirectement, à la surface de la structure quaternaire dudit anticorps ou dudit fragment d’anticorps et non nécessairement dans leur structure primaire, il s’agit d’un agencement de nature conformationnelle.. Les six séquences peuvent être consécutives, c’est-à-dire les unes à la suite des autres, ou être séparées par un ou plusieurs acides aminés, un peptide (oligopeptide ou polypeptide), étant entendu que, par exemple, parmi les 4 séquences, deux peuvent être consécutives et les autres peuvent être séparées par un ou plusieurs acides aminés ou par un peptide. On entend aussi qu’il peut contenir en plus de ces six séquences, un ou des acides aminés, des peptides (oligopeptides ou polypeptides) ou en amont de la première séquence (SEQ ID NO : 21 ou 22) et/ou en aval de la dernière séquence (SEQ ID NO : 4 ou 8), un ou des acides aminés, des peptides (oligopeptides ou polypeptides), des protéines par exemple des protéines de fusion, dès lors que sa spécificité à l’égard d’un G4 de conformation antiparallèle n’est pas sensiblement affectée ; de préférence, elle est améliorée. Ainsi, un anticorps ou un fragment d’anticorps selon l’invention peut comprendre, ou consister en, une séquence choisie parmi SEQ ID NO : 9 et SEQ ID NO : 10, la présence de l’une et/ou l’autre de ces séquences permettant d’optimiser la spécificité dudit anticorps ou dudit fragment. Par fragment d’anticorps qui consiste en une séquence choisie parmi SEQ ID NO : 9 et SEQ ID NO : 10, on entend que sa séquence est identique à l’une quelconque des séquences SEQ ID NO : 9 ou SEQ ID NO : 10 ; on entend aussi que sa séquence peut consister en une suite d’au moins deux desdites séquences, identiques ou différentes. Par fragment d’anticorps qui comprend une séquence choisie parmi SEQ ID NO : 9 et SEQ ID NO : 10, on entend que sa séquence est plus longue que l’une quelconque de ces séquences mais qu’elle comprend l’une quelconque de ces séquences, ou plusieurs de ces séquences, identiques ou différentes, à la suite ou non. Selon l’invention, un anticorps est avantageusement une IgG. Un anticorps ou un fragment d’anticorps de l’invention constitue un outil biologique d’un intérêt majeur afin d’explorer le rôle des G4 et de leurs différentes conformations, in vivo . Il peut ainsi supplanter les solutions existantes qui, si elles sont spécifiques des structures G4, ne permettent pas d’en distinguer les différentes topologies, on peut citer à titre d’exemple l’anticorps BG4 utilisé en immunofluorescence. Ainsi dans le cadre de l’invention, les anticorps ou les fragments d’anticorps décrits précédemment peuvent être utilisés dans la stabilisation des G4 d’ADN télomérique de conformation antiparallèle. Ceci à des fins d’exploration et d’interprétation de la fonction des G4 et de leurs conformations, à des fins de détection ou de diagnostic, à des fins de traitement thérapeutique. Dans le cadre de l’invention, un anticorps ou un fragment d’anticorps peut être donc utilisé dans des méthodes de diagnostic ou de pronostic, ainsi que comme médicament. Les structures G4 étant présentes dans les télomères, elles sont associées à de nombreuses maladies tumorales. Les anticorps ou les fragments d’anticorps grâce à leur spécificité vont venir stabiliser les G4 et ainsi empêcher la prolifération des cellules tumorales. L’invention concerne en outre un anticorps ou un fragment d’anticorps tel que défini précédemment, pour une utilisation dans le traitement de maladies cancéreuses, de maladies neuro-dégénératives et de maladies génétiques. Effectivement, une formation élevée et importante des G4, ainsi qu’une dynamique déséquilibrée de ces structures, peut être associée à de telles maladies. Par exemple, une expansion des motifs pouvant adopter une structure G4 a été associée à des troubles génétiques comme le syndrome de l’X fragile, et à des maladies neuro-dégénératives telles que la sclérose latérale amyotrophique (SLA) [Maizels N. G4-associated human diseases. EMBO reports. 2015;16(8):910-22]. Selon une variante de l’invention, lesdits anticorps ou lesdits fragments d’anticorps sont utilisés pour traiter la sclérose latérale amyotrophique ou le syndrome de l’X fragile. Un anticorps ou un fragment d’un anticorps tel que défini précédemment peut être mis en œuvre sous différentes formes. Ainsi, l’invention se rapporte à une composition contenant au moins un ou plusieurs desdits anticorps et/ou fragments d’anticorps et un support pharmaceutiquement acceptable. L’invention fournit en outre un kit pour détecter et/ou quantifier un G4 d’ADN de conformation antiparallèle, ledit kit contenant au moins un ou plusieurs desdits anticorps et/ou desdits fragments d’anticorps et un réactif de détection et/ou de quantification. L’invention se rapporte aussi à une utilisation d’undit anticorps ou d’undit fragment d’anticorps pour préparer un réactif en vue de détecter un G4 d’ADN de conformation antiparallèle, dans un échantillon biologique ou in vivo . Selon une variante, les applications précitées d’un anticorps ou d’un fragment d’anticorps, sont destinées à des G4 d’ADN télomérique humain de conformation antiparallèle. Bien entendu, l’invention n’y est pas restreinte. L’invention a aussi pour objet un acide nucléique codant pour un anticorps ou un fragment d’anticorps selon l’invention. Ainsi, il peut comprendre au moins les six séquences SEQ ID NO : 23, SEQ ID NO : 11, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 24, SEQ ID NO : 13 et SEQ ID NO : 14, lesdites séquences codant respectivement pour SEQ ID NO : 21, SEQ ID NO : 1, SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 22, SEQ ID NO : 3 et SEQ ID NO : 4. Il peut aussi comprendre au moins les six séquences SEQ ID NO : 23, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 16, SEQ ID NO : 24, SEQ ID NO : 17 et SEQ ID NO : 18, lesdites séquences codant respectivement pour SEQ ID NO : 21, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 22, SEQ ID NO : 7 et SEQ ID NO : 8. Selon une variante, cet acide nucléique comprend ou consiste en une séquence choisie parmi SEQ ID NO : 19 et SEQ ID NO :20. Un autre objet de l’invention est un vecteur recombinant ou transformant contenant un acide nucléique tel que décrit ci-dessus. L’invention est illustrée avec les exemples suivants et à l’appui des figures selon lesquelles : FIG. 1 représente la structure de la cible, appelée Lat-H, d’un anticorps de l’invention, à savoir un ADN G4 avec une topologie antiparallèle de type Basket dérivé de la séquence d’ADN télomérique humain et greffé sur un cyclo-peptide rigide appelé RAFT (pour Regioselectively Addressable Functionalized Template). La séquence originale de 22 nucléotides est remplacée par deux séquences de 11 nucléotides chacune. Ces oligo-nucléotides sont accrochés sur le « RAFT » dans une topologie précise, contraignant ainsi la structure tridimensionnelle. FIG. 2 illustre les valeurs moyennes de 1/KD (Mean 1/KD) dans 1/nM d’une IgG de l’invention de SEQ ID NO : 9 pour différentes cibles ADN définies à l’Exemple 3, KD étant la constante de dissociation entre ladite IgG et sa cible, mesurée par la technique optique d’interférométrie en biocouches (BLI). FIG. 3 illustre les valeurs moyennes de 1/KD (Mean 1/KD) dans 1/nM d’une IgG de l’invention de SEQ ID NO : 10 pour différentes cibles ADN définies à l’Exemple 3, KD étant la constante de dissociation entre ladite IgG et sa cible, mesurée par la technique BLI. Exemple 1 : Obtention de deux anticorps de l’invention par la méthode Phage Display 1.1) La méthode Phage Display La méthode Phage Display a été utilisée pour sélectionner les anticorps dirigés contre la structure ADN G4 antiparallèle contrainte telle que représentée sur la FIG. 1 ( Lat-H ). Cette méthode est basée sur l’utilisation des bactériophages M13 comme outils de criblage des protéines d’intérêt. Ce processus est une sélection in vitro. La méthode consiste à incuber une bibliothèque de phages présentant une grande variété d’anticorps à leurs surfaces avec la molécule cible immobilisée sur un support solide. Les phages exposant les anticorps (en fusion avec la protéine PIII de la capside) les plus spécifiques de l’ADN G4 se fixent à la surface du support sur lequel sont accrochées les molécules cibles. Plusieurs lavages successifs assurent une sélection des anticorps les plus spécifiques de la cible et sont retenus sur le support solide. Les phages sont ensuite décrochés de la cible et mis en contact avec des bactéries afin que celles-ci soient infectées et puissent produire de nouveaux phages contenant les séquences sélectionnées. La nouvelle bibliothèque de phages obtenue est plus restreinte en diversité de séquences et est utilisée pour le tour suivant de sélection. Après trois tours de sélection, les phages spécifiques sont ainsi amplifiés, puis isolés et récupérés. Plusieurs sessions d’expériences complètement indépendantes les unes des autres ont abouti à un lot ou un panel d’anticorps sélectionnés contre la cible Lat-H . Ce premier criblage a résulté en une centaine d’anticorps qui ont ensuite été testés par des analyses de spécificité (ELISA). Les candidats les plus spécifiques de la cible Lat-H ont ensuite été produits et purifiés afin d’effectuer des analyses de caractérisation par interférométrie en biocouches (BLI). 1.2) Banque et bactéries utilisées La bibliothèque Tomlinson a été mise à disposition par le laboratoire de G. Winter au MRC Cambridge et Geneservice (Source Bioscience, Nottingham, Royaume-Uni). Le phage helper M13KO7 est utilisé pour produire les phages après infection des bactéries (souches TG1 d' E. Coli) . La bibliothèque Tomlinson est composée de 1,47x 10 9 ScFv clonés dans un vecteur phagémide résistant à l'ampicilline, et transformés dans des cellules TG1. Cette bibliothèque semi-synthétique est basée sur un seul cadre humain pour la chaîne lourde variable, V H et la chaîne légère variable, V L . Les anticorps scFv sont présentés sur la protéine d'enveloppe mineure PIII de M13 avec des étiquettes 6xHistidine, qui sont utiles pour la détection spécifique et la purification par chromatographie d'affinité. 1.3) Production des bactériophages M13 Les bactéries TG1 (contenant le phagemide) sont cultivées dans du milieu 2xTY (tryptone 16g/L, extrait de levure 10g/L et NaCl 5g/L) contenant 100 µg/mL ampicilline et 1% glucose avec agitation à 37°C. Une fois la densité optique (DO) à 600 nm de 0,5 atteinte, les bactéries sont infectées avec le phage auxiliaire M13K07 (avec un rapport de 1 bactérie pour 20 phages auxiliaires) et incubées sans agitation à 37°C pendant 30 min. Les bactéries infectées sont centrifugées à 3300 x g pendant 10 min, re-suspendues dans du milieu 2xTY en présence de l’ampicilline (à 100 µg/mL) et de la kanamycine (à 25 µg/mL), et cultivées une nuit à 30°C. La culture est centrifugée à 10,000 x g pendant 10 minutes, et le surnageant contenant les phages est récupéré. 1.4) Sélection Une solution saline tamponnée au phosphate (PBS : KH 2 PO 4 1,5mM; NaCI 155mM; Na 2 HPO 4 -7H 2 O 2,7mM; pH7,2) a été utilisée pour les incubations des sélections puis une solution PBS-T (PBS avec 0,1% de Tween 20) a été utilisée pour les lavages. Les phages produits sont d’abord présentés à la cible Lat-H (0,4 nmol/mL) et ensuite sont mis en contact avec des billes magnétiques fonctionnalisées avec de la streptavidine à la surface. Les cibles Lat-H s’accrochent aux billes grâce à leur biotine. Le mélange est incubé à température ambiante pendant 1h (avec agitation sur roue). Les billes magnétiques sont par la suite lavées 10 fois, pour éliminer toutes les interactions non spécifiques, avec une solution de PBS-T. Les phages sont élués avec une solution de triéthylamine (TEA), et agités 10 min sur un plateau. Le surnageant est retiré et une solution Tris-HCl (1M, pH 7) est ajoutée. Des bactéries TG1 (à une DO de 0,5) sont ajoutées sur les phages élués et sur les billes restantes, puis sont incubées dans un bain-marie à 37°C pendant 30 min sans agitation. Enfin, ces bactéries infectées sont étalées sur des boîtes de pétri gélosées (2xTY ampicilline/glucose 1%, agar) et incubées une nuit à 30°C. Le lendemain, les tapis bactériens des boîtes gélosées sont récupérés pour commencer un autre tour de sélection. Plusieurs tours de sélection ont été nécessaires pour obtenir des séquences scFv spécifiques de la cible Lat-H . A la fin des tours de sélection, quelques clones bactériens (contenant un phagémide avec une scFv) sont isolés et la portion d’ADN des phagémides correspondant à la séquence scFv est séquencée. Exemple 2 : Purification et sélection des deux anticorps obtenus à l’Exemple 1 2.1) Expression et purification des anticorps ScFv Les scFv ont été produits à partir des E. coli TG1 hébergeant le phagemide. Chaque culture de TG1 est incubée 2h à 37°C. L’expression est ensuite induite avec l’isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG, concentration finale 1 mM) à une densité optique de 0,5 et la culture est incubée à 30°C de 18 à 24 h. Le lendemain, les cultures sont centrifugées à 10 000xg pendant 10min. Les culots bactériens ont été remis en suspension dans un tampon de lyse (avec 1mM d'inhibiteurs de protéase). La suspension est agitée sur un bain de glace pendant 10 min et sur roue pendant 15 min; le surnageant est recueilli après centrifugation à 16 000xg pendant 30 min. Les surnageants sont regroupés et utilisés pour la purification par chromatographie d'affinité du scFv marqué à l'hexa-histidine. La fraction péri-plasmique brute d'E. Coli est mélangée avec une résine Ni-NTA, agitée à température ambiante pendant quelques minutes et placée sur la colonne de purification. L'élution est effectuée par ajout de 200 µL d'imidazole à 250 mM. Les fractions scFv éluées sont dialysées contre 1 litre de PBS pendant 24 h. La quantité d’anticorps dialysée est déterminée par un dosage d’absorbance à une longueur d’onde de 280 nm, ainsi qu’un dosage alternatif par la coloration Bradford. Les échantillons dialysés sont incubés avec le colorant Bradford pendant 10 min à l’obscurité. La fixation de ce colorant aux protéines est détectée par une absorbance à 595 nm et comparée à une gamme étalon pour déterminer la valeur de concentration protéique. L'activité des anticorps scFv testés est déterminée par ELISA. Les candidats scFv ayant une activité spécifique de la cible Lat-H avec le moins d’activité vis-à-vis de cibles contrôles (ADN qui ne sont pas des ADN G-quadruplexe anti-parallèle) sont sélectionnés. 2.2) Production des candidats scFv sélectionnés sous format IgG Ces anticorps sont ensuite produits à partir de cellules de mammifères (CHO DG44) sous format IgG (avec Fc humain, IgG1 HC : G1m3). La purification est effectuée par chromatographie d’affinité (Ni-NTA). Ces anticorps produits et purifiés sont ensuite engagés dans des études d’interférométrie en biocouches (BLI). Exemple 3: Spécificité des deux anticorps de l’invention sélectionnés à l’Exemple 2 Les FIG. 2 et FIG. 3 montrent l’affinité (1/KD) des anticorps de SEQ ID NO : 9 et SEQ ID NO : 10 pour différentes cibles ADN et ARN. Tel 23 est la cible ADN G4 télomérique antiparallèle ; 25 CEB, C-kit et C-myc correspondent à des ADN G-quadruplex de topologie parallèle ; Terra correspond à un ARN télomérique de topologie parallèle ; ss RNA correspond à un simple brin d’ARN ; et HP-ATT correspond à un double-brin d’ADN. On observe sur les figures la spécificité de chacun des anticorps de SEQ ID NO : 9 et SEQ ID NO : 10. Anticorps ou fragment d’anticorps reconnaissant spécifiquement les G-quadruplexes d’ADN télomérique de conformation antiparallèle et comprenant au moins les six séquences SEQ ID NO : 21, SEQ ID NO : 1, SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 22, SEQ ID NO : 3 et SEQ ID NO : 4, ou au moins les six séquences SEQ ID NO : 21, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 22, SEQ ID NO : 7 et SEQ ID NO : 8. Anticorps ou fragment d’anticorps selon la revendication 1, caractérisé en ce qu’il comprend ou consiste en une séquence peptidique choisie parmi SEQ ID NO : 9 et SEQ ID NO : 10. Anticorps ou fragment d’anticorps selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce qu’il comprend ou consiste en un fragment choisi parmi les fragments scFv et les fragments Fab. Anticorps selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce qu’il est une IgG. Anticorps ou fragment d’anticorps selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, pour son utilisation dans des méthodes de diagnostic ou de pronostic. Anticorps ou fragment d’anticorps selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, pour son utilisation comme médicament. Anticorps ou fragment d’anticorps selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, pour une utilisation dans la stabilisation des G-quadruplexes d’ADN télomérique de conformation antiparallèle. Anticorps ou fragment d’anticorps selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, pour une utilisation dans le traitement de maladies cancéreuses, de maladies neuro-dégénératives et de maladies génétiques. Anticorps ou fragment d’anticorps pour une utilisation selon la revendication 8, caractérisé en ce que la maladie est la sclérose latérale amyotrophique ou le syndrome de l’X fragile. Composition contenant au moins un ou plusieurs des anticorps et/ou fragments d’anticorps selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, et un support pharmaceutiquement acceptable. Kit pour détecter et/ou quantifier un G-quadruplexe d’ADN de conformation antiparallèle, ledit kit contenant au moins un ou plusieurs des anticorps et/ou fragments d’anticorps selon l’une quelconque des revendications 1 à 4 et un réactif de détection et/ou de quantification. Utilisation d’un anticorps ou d’un fragment d’anticorps selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, pour préparer un réactif pour détecter et/ou quantifier un G-quadruplexe d’ADN de conformation antiparallèle, dans un échantillon biologique ou in vivo . Acide nucléique codant pour un anticorps ou un fragment d’anticorps selon la revendication 1 ou 2. Acide nucléique selon la revendication 13, caractérisé en ce qu’il comprend ou consiste en une séquence choisie parmi SEQ ID NO : 19 et SEQ ID NO : 20: Vecteur recombinant ou transformant contenant l’acide nucléique selon la revendication 13 ou 14.