Brevet FR3148037A1 — publié le 20241025

La présente invention concerne un dispositif de détection d’agents biologiques et/ou chimiques, ainsi qu’un procédé de détection d’agents biologique et/ou chimiques mettant en œuvre ce dispositif. Ledit dispositif est un dispositif micro- ou millifluidique pour la détection et/ou la quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans un échantillon liquide, comprenant : m x N sections susceptibles d’être mises en contact avec l’échantillon liquide, la section n comprenant une surface fonctionnalisée S n portant un ou plusieurs aptamères capables de lier l’agent biologique ou chimique n ; et un moyen de régulation de la température de la surface S n de chaque section n, m étant un entier naturel compris de 1 à 5. (figure 1) DISPOSITIF DE DETECTION D’AGENTS BIOLOGIQUES OU CHIMIQUES, AINSI QU’UN PROCEDE DE DETECTION DESDITS AGENTS METTANT EN ŒUVRE CE DISPOSITIF La présente invention concerne un dispositif de détection d’agents biologiques et/ou chimiques, ainsi qu’un procédé de détection d’agents biologique et/ou chimiques mettant en œuvre ce dispositif. La qualité de l’eau et de l’air sont des préoccupations majeures pour les gouvernements, les organisations non gouvernementales, et les particuliers du monde entier. En effet, l’omniprésence de contaminants chimiques dans l’environnement du fait de l'urbanisation, de l'agriculture et des activités industrielles sur la santé des populations constituent une préoccupation importante en santé publique. En outre, la pandémie mondiale de Covid-19 a accru la nécessité de surveiller l’environnement pour y détecter l’apparition et la présence de pathogènes biologiques potentiellement dangereux. Une analyse régulière et automatisable pour détecter ou quantifier les différentes contaminations représente ainsi un défi de taille pour la société. La détection d’agents biologiques (des microorganismes, tels que virus, bactéries, spores fongiques, etc., des macromolécules, telles que des protéines, etc.) ou chimiques (des petites molécules telles que mycotoxines, pesticides, perturbateurs endocriniens, etc.) dans l’environnement repose généralement sur une séquence des opérations suivantes : prélèvement(s), préparation du ou des échantillons prélevés, analyse du ou des échantillons préparés. Sur les surfaces, les agents biologiques par exemple peuvent être collectés par différents moyens techniques tels que des écouvillons, des lingettes, des éponges ou des dispositifs plus spécifiques tels que des rouleaux. Lorsqu’ils sont dispersés dans l’air, dans des aérosols et/ou des gouttelettes, les agents biologiques notamment peuvent être prélevés au moyen de collecteurs d’aérosols dits aussi biocollecteurs lorsqu’ils sont plus particulièrement adaptés à la collecte des agents biologiques. Le ou les échantillons sont obtenus soit sur une surface sèche, et ils sont alors suspendus dans une solution aqueuse, soit obtenus directement dans une solution liquide, soit encore précipités sur un milieu de culture gélosé adapté. Après le prélèvement d’au moins un échantillon, différentes approches analytiques peuvent être mises en œuvre pour détecter et identifier des agents biologiques contenus dans cet échantillon. Une première distinction entre celles-ci consiste généralement à distinguer les méthodes reposant sur une étape de culture de celles sans culture. La culture des microorganismes possède l’avantage de permettre une identification d’agents infectieux et ne pas risquer une fausse alerte sur des agents qui seraient présents dans l’échantillon analysé sans être encore infectieux. Toutefois la culture est un procédé long de plusieurs heures à plusieurs dizaines d’heures si bien qu’il n’est pas possible de l’employer pour le développement d’un système d’alerte qui par définition se doit d’être suffisamment rapide. Les autres méthodes de détection et d’identification peuvent être distinguées selon qu’elles sont ciblées ou non ciblées. Les approches ciblées sont des techniques immunoanalytiques (« Lateral Flow Assay », « Enzyme-Linked Immunosorbent Assay ») qui exploitent des réactions de reconnaissance d’un antigène généralement par un ou plusieurs anticorps ou encore par un ou plusieurs aptamères, ou des méthodes génétiques ciblées d’amplification biomoléculaire (« qPCR », « Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP) », « Recombinase Polymerase Amplification (RPA) », etc.) pour identifier les microorganismes. Toutefois ces approches reposent sur des réactifs spécifiques à chaque agent à détecter, ne sont pas réutilisables (toute nouvelle analyse imposant donc l’emploi de réactifs neufs), et peuvent poser des problèmes de stabilité. En effet, ces réactifs (par exemple enzymes, anticorps) sont souvent fragiles et imposent une conservation à basse température ou lyophilisées à l’abri de l’humidité, ce qui est par exemple difficilement conciliable avec un emploi dans une balise de surveillance environnementale, en vue d’une utilisation au bout de plusieurs heures voire plusieurs jours, ou encore dans un instrument destiné à être mis en œuvre hors laboratoire dans des conditions de terrain dégradées. Les approches non ciblées visent une détection sans a priori de l’agent, soit protéique avec la spectrométrie de masse, soit génétique avec le séquençage. Elles ne reposent sur aucun réactif spécifique et permettent donc la détection de n’importe quel agent pathogène, y compris un pathogène inconnu. Toutefois ces méthodes sont encore aujourd’hui très longues et/ou complexes à mettre en œuvre et ne se prêtent pas encore, notamment, à une intégration dans une balise d’alerte. En outre, l’enchaînement des opérations est généralement réalisé manuellement par un opérateur entrainé et certaines méthodes analytiques requièrent un haut niveau de qualification. Quelques développements ont été présentés dans la littérature pour automatiser ces opérations et leur enchainement. Mais, à ce jour, seul un dispositif semble avoir une maturité technologique suffisante pour être commercialisé : le Bioflash développé et proposé par Smith Detection. Ce dispositif fonctionne à l'aide de consommables qui contiennent des cellules génétiquement modifiés, exprimant à la fois les anticorps spécifiques à l'agent ciblé et les molécules bioluminescentes sensibles au calcium qui sont nécessaires pour produire l’émission d’un rayonnement lumineux détectable. L’analyse relève donc des méthodes immunoanalytiques. Actuellement, chaque BioDisk contient seize cuvettes avec différents biocapteurs spécifiques à l'agent à détecter. C’est ainsi que l’instrument peut réaliser une succession de collectes et d’analyses avec un même consommable. Toutefois la méthode de détection repose sur: - des cellules génétiquement modifiées comportant notamment les anticorps spécifiques à l’agent biologique à détecter; - pour chaque agent d’intérêt, autant de cuvettes de détection que de collectes et analyses à enchaîner. Une balise qui devrait enchainer Y analyses pour la détection, par exemple de Z pathogènes dans l’environnement, devrait stocker Y x Z réactifs sans compter les réactifs nécessaires aux contrôles positifs et négatifs ; ces Y x Z réactifs seraient ensuite employés au fur et à mesure. Ainsi le coût en réactifs augmente linéairement avec le nombre d’analyses et avec le nombre de pathogènes à détecter. L'invention a ainsi pour but de permettre la mise en œuvre d’un dispositif de détection d’agents biologique et/ou chimiques qui évite les inconvénients précités. Un but de l’invention est notamment la mise à disposition d’un dispositif de détection multiple, c’est-à-dire qui concerne la détection d’une pluralité d’agents biologique et/ou chimiques possiblement présents dans un échantillon, selon un procédé d’analyse dit multi-cibles ou multiplexe. Un autre but de l’invention est celui de fournir un dispositif permettant une détection pouvant être répétée, possiblement en mode continu, de façon simple et peu coûteuse, par exemple de façon automatisée, au sein dudit même dispositif. Encore un autre but de l’invention est celui de fournir un dispositif et un procédé de détection correspondant mettant en œuvre des réactifs stables, réutilisables, peu onéreux, synthétisés chimiquement, et également capables de détecter aussi bien des microorganismes que des macromolécules et de plus petites molécules. Encore un autre but de l’invention est celui de mettre à disposition un dispositif pouvant être employé pour la détection de pathogènes dans l’environnement, au sein d’une balise, notamment équipé d’un collecteur d’air ou d’eau pour surveiller la qualité de l’air ou de l’eau, respectivement, par exemple d’un cours d’eau ou d’un plan d’eau, notamment dans un drone de surveillance. Ainsi, selon un premier aspect, l’invention concerne un dispositif micro- ou millifluidique pour la détection et/ou la quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans un échantillon liquide, comprenant : m x N sections susceptibles d’être mises en contact avec l’échantillon liquide, la section n comprenant une surface fonctionnalisée S n portant un ou plusieurs aptamères capables de lier l’agent biologique ou chimique n ; et un moyen de régulation de la température de la surface S n de chaque section n, m étant un entier naturel compris de 1 à 5. L’échantillon liquide peut être liquide par nature. C’est par exemple le cas d’un échantillon directement prélevé sous forme liquide, notamment lorsque le produit à analyser est lui-même sous forme liquide. L’échantillon liquide peut également être obtenu de par un aérosol qui est collecté et mis en suspension sous forme liquide. L’entier naturel m indique ainsi si les sections n sont répétées ou non. Le nombre total de sections n est de N (cas m=1, c’est-à-dire sans répétition,), ou de m x N (c’est-à-dire avec répétition, m étant alors différent de 1). Selon un mode de réalisation particulier, m est de 1, 2 ou 3, m étant notamment 1, ou notamment 2-3. Ainsi, lorsque m est différent de 1, la détection et/ou la quantification de la pluralité d’agents biologiques et/ou chimiques se fait en réplicas analytiques (m=2 correspondant à des duplicas, m=3 à des triplicas, etc.). La séquence du un ou plusieurs aptamères capables de lier l’agent biologique ou chimique n, en particulier avec une forte affinité, peut être déterminée par la méthode SELEX (pour « Systematic Evolution of Ligands by EXponential enrichment »). Cette méthode peut être employée pour l’ensemble des aptamères, pour tout n, et ce, à une même température, en particulier Ta comme défini plus bas, et/ou dans un même tampon. Cette technique de sélection in vitro bien connue de l’homme du métier consiste généralement à rechercher des séquences dans une banque d’oligonucléotides aléatoires (par exemple, environ 1015 espèces différentes). Cette méthode comprend différentes étapes dont l’incubation d’ARN ou d’ADN aléatoires avec l’agent biologique ou chimique n, la sélection des séquences qui ont reconnu cette cible, l’amplification de ces séquences par RT-PCR, puis leur transcription in vitro . Ces étapes de sélection, amplification et transcription constituent généralement un cycle de SELEX et doivent typiquement être répétées (par exemple environ 8-15 fois), jusqu’à ce que les candidats ARN/ADN présentant l’affinité la plus forte pour l’agent biologique ou chimique n soient isolés ; on appelle ces candidats des aptamères. Depuis une dizaine d’années, la méthode SELEX a été utilisée pour générer des aptamères dirigés contre une variété de molécules-cibles de structure et de taille extrêmement variables. N est un entier naturel représentant le nombre total d’agents biologiques et/ou chimiques. n, entier naturel allant de 1 à N, représente l’entité n particulière à laquelle il se rapporte, par exemple l’agent biologique et/ou chimique n, ou l’ensemble de ces agents biologiques et/ou chimiques n particuliers, au nombre total de N. Selon un mode de réalisation particulier, N est compris de 2 à 100, notamment de 5 à 50, en particulier de 10 à 40, plus particulièrement de 15 à 30. Selon un mode de réalisation particulier, le moyen de régulation est apte à porter la surface S n de chaque section n à deux températures T A et T B distinctes, avec T A B , T A étant notamment comprise de 20 à 30°C, T B étant notamment supérieure ou égale à 50°C, et/ou inférieure à 100°C, en particulier comprise de 60 à 95°C, plus particulièrement de 70-80°C. Selon un mode de réalisation particulier, le moyen de régulation est apte à porter la surface S n des m x N sections n à une même température, à 5°C près, ou moins, notamment à 2°C près ou moins, en particulier à 1°C près ou moins. Selon un mode de réalisation particulier, les agents biologiques sont choisis parmi les microorganismes, en particulier virus, bactéries, spores fongiques, et les macromolécules, en particulier les protéines, et/ou les agents chimiques sont choisis parmi mycotoxines, pesticides, et perturbateurs endocriniens. Selon un mode de réalisation particulier, les virus sont choisis parmi les virus de la famille Arenaviridae , notamment du genre Mammarenvirus , par exemple le virus de Lassa, les virus de la famille Nairoviridae , notamment du genre Orthonairovirus , par exemple le virus de la fièvre hémorragique de Crimée-Congo, les virus de la famille Phenuiviridae , notamment du genre Phlebovirus , par exemple le virus de la fièvre de la Vallée du Rift, les virus de la famille Hantaviridae , notamment du genre Orthohantavirus , en particulier les virus du syndrome pulmonaire à Hantavirus, par exemple Andes et Sin Nombre, les virus de la famille Coronaviridae , par exemple les coronavirus liés au syndrome respiratoire aigu sévère, les virus de la famille Filoviridae , par exemple les virus Ebola et Marburg, les virus de la famille Flaviviridae , notamment du genre Flavivirus , par exemple Zika, de la dengue, de la fièvre jaune et de la fièvre du Nil occidental, les virus de la famille Orthomyxoviridae , par exemple le virus de la grippe, les virus de la famille Pneumoviridae , par exemple le virus respiratoire syncytial, les virus de la famille Paramyxoviridae , par exemple Nipah et parainfluenza, les virus de la famille Poxviridae , par exemple la variole du singe et la variole des camélidés, les virus de la famille Togaviridae , par exemple le virus Chikungunya. Selon un mode de réalisation particulier, les bactéries sont choisies parmi les bactéries du genre Clostridium , par exemple Clostridium botulinum , les bactéries du genre Pseudomonas , par exemple Pseudomonas aeruginosa , les entérobactéries, les staphylocoques, Francisella tularensis , par exemple Francisella tularensis tularensis , les bactéries du genre Yersinia , par exemple Yersinia pestis , les bactéries du genre Bacillus, par exemple Bacillus anthracis , les bactéries du genre Burkholderia, par exemple Burkholderia mallei ; les bactéries du genre Streptococcus , par exemple Streptococcus pneumoniae . Selon un mode de réalisation particulier, les spores fongiques sont choisis parmi les spores du genre Aspergillus , par exemple Aspergillus fumigatus , et les spores fongiques de Blastomyces dermatitidis, Coccidioides immitis ou Coccidioides posadasii, Histoplasma capsulatum, Paracoccidioides brasiliensis, et Sporothrix schenckii. Selon un mode de réalisation particulier, les mycotoxines sont choisies parmi les aflatoxines, l’ochratoxine A ; la patuline ; les trichothécènes, notamment nivalénol, déoxynivalénol ; la zéaralénone (ZEN) ; les fumonisines ; la citrinine ; et la zéaralénone. Selon un mode de réalisation particulier, les pesticides sont choisis parmi les organophosphorés. Selon un mode de réalisation particulier, les perturbateurs endocriniens sont choisis parmi les pesticides, notamment organochlorés, fongicides, herbicides ; les plastifiants, notamment les phtalates, le Bisphénol A ; les retardateurs de flamme, notamment les polybromodiphényléthers (PBDE) ; les revêtements, notamment les alcoxydes perfluorés (PFAs) ; les médicaments, notamment le distilbène, les anti-douleurs, par exemple le paracétamol, les anti-inflammatoires non stéroïdiens, l’aspirine, et les antidépresseurs, par exemple la fluoxétine ; les produits émis par les combustions incomplètes issues des incinérateurs, de l’industrie métallurgique et sidérurgique et à la pratique de l'écobuage des végétaux, par exemple les dioxines, les furanes, les polychlorobiphényles (PCB) ; les produits d’hygiène, notamment le triclosan ; les cosmétiques, notamment les parabènes ; et les phyto-estrogènes, par exemple de soja. Selon un mode de réalisation particulier, les aptamères sont des aptamères ADN, ARN, AXN, ou peptide, de préférence ADN. Selon un mode de réalisation particulier, les aptamères sont marqués par un luminophore, notamment choisis parmi le luminol et les complexes au ruthénium, en particulier le tris(2,2′-bipyridine)ruthénium(II). Selon un mode de réalisation plus particulier, les aptamères sont liés audit luminophore de manière covalente, à l’aide ou non d’un bras espaceur, plus particulièrement à l’aide d’un bras espaceur choisi parmi les polyéthylène glycols, et les polynucléotides, notamment les polyadénines et les polythymines. Les aptamères peuvent en outre être marqués par une ou deux sondes redox, comme bien connu de l’homme du métier. Il peut par exemple s’agir du bleu de méthylène, apte à être un rapporteur du changement conformationnel, et le ferrocène, comme contrôle interne, tel que décrit par Du et al. ( Anal. Chem. 2014, 86, 15, 8010–8016) ou par Spring et al. (Molecules 2021 , 26, 2130). Selon un mode de réalisation particulier, les surfaces S n comprennent ou sont constituées d’un matériau choisi parmi les polymères, les verres, la silice, le silicium et l’oxyde de silicium ; les surfaces peuvent être planaires ou bien sphériques avec par exemple des billes fonctionnalisées. Selon un mode de réalisation particulier, l’aire des surfaces S n est compris de 1µm 2 à 1mm 2 . Selon un mode de réalisation particulier, les surfaces S n sont réparties sur une superficie totale comprise de 1mm 2 à 10 cm 2 . Selon un mode de réalisation particulier, les m x N sections n sont des surfaces de chambre(s) ou cavité(s) microfluidique(s). Par « les sections n sont des surfaces de chambre(s) ou cavité(s) microfluidique(s) », on entend en particulier que ces sections sont des fractions de la surface de chambre(s) ou cavité(s) microfluidique(s). Les m x N sections n peuvent être des surfaces d’une même chambre ou cavité microfluidique, ou être des surfaces réparties sur plusieurs chambres ou cavités microfluidiques. Selon un mode de réalisation particulier, la ou les chambre(s) ou cavité(s) microfluidique(s) comprennent, pour chaque n, au moins une paroi transparente à un certain rayon lumineux, laquelle est positionnée de manière à ce que ledit rayon lumineux est susceptible de frapper la surface S n , et qu’un rayonnement émis au niveau de ladite surface puisse être détecté par un photo détecteur situé en dehors de la ou les chambres ou cavité(s) microfluidique(s). Selon un mode de réalisation particulier, la ou les chambre(s) ou cavité(s) microfluidique(s) comprenant optionnellement, pour chaque n, au moins une paroi transparente, laquelle est positionnée de manière à ce qu’un rayonnement émis au niveau de ladite surface puisse être détecté par un photo détecteur situé en dehors de la ou les chambres ou cavité(s) microfluidique(s). Selon un mode de réalisation particulier, chaque surface S n est la surface d’une électrode E n , ou dans lequel chaque surface S n se trouve à proximité d’une électrode E n . Par « à proximité d’une électrode E n », on entend en particulier que toute modification de la conformation des aptamères situés sur lesdites surfaces S n peut être détecté par un procédé électrochimique à l’aide de ladite électrode E n . Selon un mode de réalisation particulier, les n électrodes comprennent ou sont constituées d’un matériau choisi parmi le carbone, notamment sous forme de graphite et graphène, les métaux et leurs alliages, par exemple l’or et le platine, les oxydes métalliques conducteurs et les mélanges conducteurs d’oxydes métalliques, par exemple l'oxyde d'indium-étain (ITO), les polymères conducteurs, par exemple le Pedot:PSS. Selon un mode de réalisation particulier, la plus grande dimension de chaque surface S n est compris de 1µm à 1mm, notamment d’environ 10µm à environ 1mm. Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un dispositif tel que défini précédemment comprenant en outre au moins une paire d’électrodes apte à polariser simultanément les n électrodes E n . Ladite paire d’électrodes, bien connue de l’homme du métier, permet la détection par électrochimiluminescence bipolaire. En la présence de cette paire d’électrodes, notamment, les électrodes S n n’ont pas à être reliées à un circuit électronique. Selon un mode de réalisation particulier, les surface fonctionnalisée S n portent le un ou plusieurs aptamères par l’intermédiaire d’un bras espaceur, plus particulièrement à l’aide d’un bras espaceur choisi parmi les polyéthylène glycols, et les polynucléotides, notamment les polyadénines et les polythymines. Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un dispositif tel que défini précédemment, comprenant en outre un collecteur d’aérosols. Un dispositif micro- ou millifluidique comprenant un collecteur d’aérosols est par exemple décrit dans la demande FR 3 117 898, laquelle mentionne une unité de collecte de particules présentes dans un gaz ou mélange de gaz, comprenant un composant, une zone de collecte disposée sur le composant, sur laquelle viennent se déposer lesdites particules, des moyens de collecte configurés pour forcer lesdites particules à se déposer contre la zone de collecte, un circuit fluidique d'élution agencé dans ledit composant pour éluer les particules présentes dans la zone de collecte. Selon un mode de réalisation particulier, la présente invention concerne un dispositif tel que défini précédemment, comprenant en outre au moins deux électrodes disposées aptes à produire des micro écoulements électrothermiques au voisinage des surfaces S n , la tension imposée sur ces électrodes étant notamment alternative, en particulier d’une fréquence supérieure à 100kHz. Selon un autre aspect, la présente invention concerne également l’utilisation d’un dispositif tel que défini précédemment pour la détection et/ou la quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans un échantillon. Tous les modes de réalisation mentionnés ci-dessus quant au dispositif peuvent également s’appliquer ici, seuls ou en combinaison. Selon un autre aspect, la présente invention concerne également un procédé d’analyse d’un échantillon liquide au moyen du dispositif tel que défini précédemment, comprenant les étapes suivantes : la mise en contact des m x N surfaces S n du dispositif micro- ou millifluidique avec l’échantillon liquide, lesdites m x N surfaces S n étant à une température T A , à l’issue de laquelle, lorsqu’il est présent, l’agent biologique ou chimique n est lié par ledit un ou plusieurs aptamères fonctionnalisant ladite surface S n ; une étape de détection et/ou de quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans ledit échantillon liquide ; et une étape de réinitialisation par lavage des m x N surfaces S n à l’eau pure déionisée, ou en portant la température des m x N surfaces S n à une température T B , avec T B >T A , un lavage des m x N surfaces S n à l’aide d’une solution de lavage étant réalisée de façon concomitante ou postérieurement à la montée en température à la température T B . Tous les modes de réalisation mentionnés ci-dessus quant au dispositif peuvent également s’appliquer ici, seuls ou en combinaison. Selon un mode de réalisation particulier, l’étape (ii) de détection et/ou de quantification se fait par mesure colorimétrique ou de fluorescence. Selon un mode de réalisation plus particulier, l’étape (ii) comprend les sous étapes suivantes : (iia) une étape de mise en contact des m x N surfaces S n avec un ou des réactif de détection de l’éventuelle présence de l’agent biologique ou chimique n lié par ledit un ou plusieurs aptamères fonctionnalisant ladite surface S n ; le ou les réactifs de détection étant choisis parmi les anticorps marqués avec un chromogène ou avec un fluorophore, les aptamères marqués avec un chromogène ou avec un fluorophore, les anticorps conjugués avec une enzyme et les aptamères conjugués avec une enzyme ; (iib) optionnellement, une étape de lavage des m x N surfaces S n avec une solution de lavage ; (iic) une étape, lorsque le réactif de détection est un anticorps ou un aptamère conjugué avec une enzyme, de mise en contact des m x N surfaces S n avec une solution contenant au moins un réactif étant un substrat chromogène ou fluorogène de ladite enzyme ; (iid) une étape de détection et/ou de quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans ledit échantillon liquide, par : Mesure de la colorimétrie (par mesure de l’absorbance), en particulier lorsque le ou les réactifs de détection sont des anticorps ou des aptamères marqués avec un chromogène, ou les anticorps ou aptamères conjugués avec une enzyme ayant un substrat chromogène ; ou Mesure de la fluorescence émise, après excitation, en particulier lorsque le ou les réactifs de détection sont des anticorps ou aptamères marqués avec un fluorophore, ou les anticorps ou aptamères conjugués avec une enzyme ayant un substrat fluorogène. Des exemples de couple enzyme/substrat pouvant être utilisés dans le cadre de la présente invention sont consignés dans le tableau suivant. Des exemples de longueur d’onde pouvant être utilisée lors de l’étape (iid) sont également donnés, lorsque cela est applicable. Enzyme Substrat chromogène/fluorigène Couleur Longueur d’onde, absorption peroxydase de raifort (HRP) 3,3’,5,5’-tetraméthylbenzidine (TMB) Bleu, devient jaune en présence d’acide sulfurique (pour arrêter la réaction) 370 ou entre 620 et 650 nm 450 nm si stoppé par H 2 SO 4 HRP Orthophénylène diamine (OPD) Orangé 450 nm ou 492 nm si stoppé par HCl ou H 2 SO 4 HRP 2,2’-azino-di-(3-éthylbenzothiazoline-6-sulphonate) (ABTS) Bleu-vert 405/450 nm HRP 3-amino-9-éthyl-carbazole (AEC) Rouge NA HRP Acide 5-aminosalicylique ou mésalazine (5-ASA) Brun 450 nm HRP 4-chloro-1-naphtol Bleu noir NA HRP Diaminobenzidine (DAB) Marron foncé NA HRP Ortholidine Bleu 630 nm HRP Luminol Bleu Emission à 413 nm Excitation à 355 nm NA Phosphatase alcaline (PAL) Paranitrophénol phosphate (pNPP) Jaune 405 nm PAL 5-bromo-4-chloro-3’-indolylphosphate/nitro-bleu de tetrazolium (BCIP/NBT) Bleu-violet 670 nm PAL Fluorescéine diphosphate (FDP) Vert Emission à 528 nm Excitation à 485 nm NA PAL 7-hydroxy-9H- (1,3-dichoro-9,9-diméthylacridine-2-one (DDAO) Rouge Emission à 633 nm quand excité He-Ne NA PAL 4-méthylumbélliferyl phosphate (MUP) Violet Emission à 440 nm quand excité à 360 nm ou par UV NA Acétylcholinestérase Acide 5,5’-dithio-bis-(2-nitrobenzoïque (Réactif d’Ellman acétylthiocholine/DTNB) Jaune 405-412 nm Les couples enzyme / substrat sont plus particulièrement choisis parmi les couples suivants : HRP/TMB, PAL/pNPP, AChE/réactif d’Ellman DTNB. Selon un mode de réalisation particulier, l’étape (ii) de détection et/ou de quantification se fait par électrochimiluminescence, chaque surface S n étant la surface d’une électrode E n , ou chaque surface S n se trouvant à proximité d’une électrode E n . Selon un mode de réalisation plus particulier, l’étape (ii) comprend les sous étapes suivantes : (iia) une étape de mise en contact des m x N surfaces S n avec un ou des réactif de détection de l’éventuelle présence de l’agent biologique ou chimique n lié par ledit un ou plusieurs aptamères fonctionnalisant ladite surface S n ; le ou les réactifs de détection étant choisis parmi les anticorps et les aptamères couplés à un luminophore électrochimiluminescent tel que les complexes de ruthénium, le luminol; (iib) optionnellement, une étape de lavage des m x N surfaces S n avec une solution de lavage ; (iic) une étape de mise en contact des m x N surfaces S n avec une solution contenant au moins un réactif nécessaire aux réactions d’électrochimiluminescence, notamment choisi parmi tri-n-propylamine (TRpA) et eau oxygénée, le luminophore électrochimiluminescent étant un complexe de ruthénium ou le luminol, respectivement ; (iid) une étape de détection et/ou de quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans ledit échantillon liquide, par imposition, simultanément ou séquentiellement, d’une tension adaptée entre l’électrode E n et une autre électrode dédiée pour déclencher une émission de lumière par électrochimiluminescence si l’agent biologique ou chimique n est présent au niveau de cette électrode et détecter au moyen d’un dispositif optique adapté ce signal révélant la présence de l’agent biologique ou chimique n. Par solution de lavage, on entend notamment un tampon aqueux, par exemple de même composition que celui dans lequel les agents biologiques et/ou chimiques n à détecter sont contenus. Selon un mode de réalisation plus particulier, l’étape (ii) de détection et/ou de quantification se fait par mesure colorimétrique ou de fluorescence, les aptamères fonctionnalisant les surfaces S n étant marqués par un luminophore, notamment choisis parmi le luminol et les complexes au ruthénium, en particulier le tris(2,2′-bipyridine)ruthénium(II), l’étape (ii) comprenant notamment les sous étapes suivantes : (iic) une étape de mise en contact des m x N surfaces S n avec une solution contenant au moins un réactif nécessaire aux réactions de chimiluminescence, notamment choisi parmi tri-n-propylamine (TRpA) et eau oxygénée, le luminophore étant un complexe de ruthénium ou le luminol, respectivement ; (iid) une étape de détection et/ou de quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans ledit échantillon liquide, par : Mesure de la colorimétrie (par mesure de l’absorbance); ou Mesure de la fluorescence émise, après excitation. Selon un mode de réalisation plus particulier, les aptamères fonctionnalisant les surfaces S n sont marqués par un luminophore, notamment choisis parmi le luminol et les complexes au ruthénium, en particulier le tris(2,2′-bipyridine)ruthénium(II), et l’étape (ii) comprend les sous étapes suivantes : (iic) une étape de mise en contact des m x N surfaces S n avec une solution contenant au moins un réactif nécessaire aux réactions d’électrochimiluminescence, notamment choisi parmi tri-n-propylamine (TRpA) et eau oxygénée, le luminophore électrochimiluminescent étant un complexe de ruthénium ou le luminol, respectivement ; (iid) une étape de détection et/ou de quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans ledit échantillon liquide, par imposition, simultanément ou séquentiellement, d’une tension adaptée entre l’électrode E n et une autre électrode dédiée, ou par polarisation à l’aide d’une paire d’électrodes autres, telle que notamment définie précédemment, pour déclencher une émission de lumière par électrochimiluminescence si l’agent biologique ou chimique n est présent au niveau de cette électrode et détecter au moyen d’un dispositif optique adapté ce signal révélant la présence de l’agent biologique ou chimique n. Selon un mode de réalisation particulier, l’étape (ii) de détection et/ou de quantification se fait par mesure de l’impédance. Selon un mode de réalisation particulier, l’étape (ii) de détection et/ou de quantification se fait par microgravimétrie. Selon un mode de réalisation particulier, l’étape (i) est suivie d’une étape de lavage avec une solution de lavage. Selon un mode de réalisation particulier, les étape (i) à (iii) sont répétées. Il peut dans ce cas s’agir d’un procédé réalisé en mode continu. Selon un mode de réalisation particulier, l’étape (i) est précédée d’une étape de mélange, en particulier de dissolution ou d’élution, d’un échantillon avec une solution aqueuse pour obtenir ledit échantillon liquide. Selon un autre aspect, l’invention concerne également une balise de prélèvement comprenant un dispositif tel que défini précédemment, ainsi qu’un collecteur d’agents biologiques ou chimiques dans l’air ou dans l’eau. Tous les modes de réalisation mentionnés ci-dessus quant au dispositif peuvent également s’appliquer ici, seules ou en combinaison. Définitions Tel qu’on l’entend ici, les plages de valeur sous forme de « x-y » ou « de x à y » ou « entre x et y » incluent les bornes x et y ainsi que les entiers compris entre ces bornes. A titre d’exemple, « 1-5 », ou « de 1 à 5 » ou « entre 1 et 5 » désignent les entiers 1, 2, 3, 4 et 5. Les modes de réalisations préférés incluent chaque entier pris individuellement dans la plage de valeur, ainsi que toute sous-combinaison de ces entiers. A titre d’exemple, les valeurs préférées pour « 1-5 » peuvent comprendre les entiers 1, 2, 3, 4, 5, 1-2, 1-3, 1-4, 1-5, 2-3, 2-4, 2-5, etc. FIGURES La décrit la mise en œuvre d’un dispositif de l’invention pour la détection d’agents biologiques ou chimiques dans un échantillon, selon les étapes 1 à 4 décrites dans l’exemple 1. La décrit la mise en œuvre d’un dispositif de l’invention pour la détection d’agents biologiques ou chimiques dans un échantillon, selon les étapes 1 à 3 décrites dans l’exemple 2. EXEMPLES Exemple 1 : Mise en œuvre d’un dispositif de l’invention pour la détection d’agents biologiques ou chimiques dans un échantillon Un dispositif de l’invention, dans lequel chaque surface S n est la surface d’une électrode E n , ou chaque surface S n se trouve à proximité d’une électrode E n , a été mis en œuvre selon les étapes suivantes : Capture des agents biologiques ou chimiques : Mise en présence de l’échantillon avec une surface fonctionnalisée au moyen d’aptamères ; Marquage : Ajout d’un autre réactif marqué pour la détection ; Détection du marquage : par exemple en imposant une différence de potentiel sur les électrodes pour déclencher les réactions d’électrochimiluminescence et en détectant le signal lumineux émis au moyen par exemple d’un photo détecteur tel qu’un photomultiplicateur, un photoconducteur, une photodiode, d’une barrette de photo détecteurs ou encore d’une caméra ; Ré-initialisation des sites de capture : Décrochage des agents capturés au moyen d’une température à laquelle l’affinité des aptamères pour leurs cibles est abaissée, notamment supérieure ou égale à 50°C, et/ou inférieure à 100°C, en particulier comprise de 60 à 95°C, plus particulièrement de 70-80°C, et lavage de ladite surface par une solution tampon adaptée. Le composant est alors de nouveau disponible pour une analyse avec les mêmes sites/réactifs de capture (mesures en mode continu). Exemple 2 : Mise en œuvre d’un autre dispositif de l’invention pour la détection d’agents biologiques ou chimiques dans un échantillon Un dispositif de l’invention, dans lequel chaque surface S n est la surface d’une électrode E n , ou chaque surface S n se trouve à proximité d’une électrode E n , et dans lequel les aptamères fonctionnalisant les surfaces S n sont marqués par un luminophore, a été mis en œuvre selon les étapes suivantes : Capture des agents biologiques ou chimiques : mise en présence de l’échantillon avec une surface fonctionnalisée au moyen d’aptamères électrochimiquement actifs quand la reconnaissance a lieu ; Détection du marquage : par exemple en imposant une différence de potentiel sur les électrodes pour déclencher les réactions d’électrochimiluminescence et en détectant le signal lumineux émis au moyen par exemple d’un photo détecteur tel qu’un photomultiplicateur, un photoconducteur, une photodiode, d’une barrette de photo détecteurs ou encore d’une caméra ; Ré-initialisation des sites de capture : Décrochage des agents capturés au moyen d’une température à laquelle l’affinité des aptamères pour leurs cibles est abaissée, notamment supérieure ou égale à 50°C, et/ou inférieure à 100°C, en particulier comprise de 60 à 95°C, plus particulièrement de 70-80°C, et lavage de ladite surface par une solution tampon adaptée. Le composant est alors de nouveau disponible pour une analyse avec les mêmes sites/réactifs de capture (mesures en mode continu). Dispositif micro- ou millifluidique pour la détection et/ou la quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans un échantillon liquide, comprenant : m x N sections susceptibles d’être mises en contact avec l’échantillon liquide, la section n comprenant une surface fonctionnalisée S n portant un ou plusieurs aptamères capables de lier l’agent biologique ou chimique n ; et un moyen de régulation de la température de la surface S n de chaque section n, m étant un entier naturel compris de 1 à 5. Dispositif selon la revendication 1, dans lequel N est compris de 2 à 100, notamment de 5 à 50, en particulier de 10 à 40, plus particulièrement de 15 à 30. Dispositif selon la revendication 1 ou 2, dans lequel le moyen de régulation est apte à porter la surface S n de chaque section n à deux températures T A et T B distinctes, avec T A B , T A étant notamment comprise de 20 à 30°C, T B étant notamment supérieure ou égale à 50°C, et/ou inférieure à 100°C, en particulier comprise de 60 à 95°C, plus particulièrement de 70-80°C, le moyen de régulation étant notamment apte à porter la surface S n des m x N sections n à une même température, à 5°C près, ou moins, notamment à 2°C près ou moins, en particulier à 1°C près ou moins. Dispositif selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans lequel les agents biologiques sont choisis parmi les microorganismes, en particulier virus, bactéries, spores fongiques, et les macromolécules, en particulier les protéines, et/ou les agents chimiques sont choisis parmi mycotoxines, pesticides, et perturbateurs endocriniens. Dispositif selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans lequel les aptamères sont marqués par un luminophore, notamment choisis parmi le luminol et les complexes au ruthénium, en particulier le tris(2,2′-bipyridine)ruthénium(II), les aptamères étant en particulier liés audit luminophore de manière covalente, à l’aide ou non d’un bras espaceur, plus particulièrement à l’aide d’un bras espaceur choisi parmi les polyéthylène glycols, et les polynucléotides, notamment les polyadénines et les polythymines. Dispositif selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans lequel les m x N sections n sont des surfaces de chambre(s) ou cavité(s) microfluidique(s), les surfaces S n comprenant ou étant constituées notamment d’un matériau choisi parmi les polymères, les verres, la silice, le silicium, l’oxyde de silicium, la ou les chambre(s) ou cavité(s) microfluidique(s) comprenant optionnellement, pour chaque n, au moins une paroi transparente à un certain rayon lumineux, laquelle est positionnée de manière à ce que ledit rayon lumineux est susceptible de frapper la surface S n et qu’un rayonnement émis au niveau de ladite surface puisse être détecté par un photo détecteur situé en dehors de la ou les chambres ou cavité(s) microfluidique(s). Dispositif selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, dans lequel chaque surface S n est la surface d’une électrode E n , ou dans lequel chaque surface S n se trouve à proximité d’une électrode E n , les électrodes E n comprenant ou étant constituées en particulier d’un matériau choisi parmi le carbone, notamment sous forme de graphite et graphène, les métaux et leurs alliages, par exemple l’or et le platine, les oxydes métalliques conducteurs et les mélanges conducteurs d’oxydes métalliques, par exemple l'oxyde d'indium-étain (ITO), les polymères conducteurs, par exemple le Pedot:PSS, la ou les chambre(s) ou cavité(s) microfluidique(s) comprenant optionnellement, pour chaque n, au moins une paroi transparente, laquelle est positionnée de manière à ce qu’un rayonnement émis au niveau de ladite surface puisse être détecté par un photo détecteur situé en dehors de la ou les chambres ou cavité(s) microfluidique(s). Utilisation d’un dispositif selon l’une quelconque des revendications 1 à 7 pour la détection et/ou la quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans un échantillon. Procédé d’analyse d’un échantillon liquide au moyen du dispositif selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, comprenant les étapes suivantes : la mise en contact des m x N surfaces S n du dispositif micro- ou millifluidique avec l’échantillon liquide, lesdites m x N surfaces S n étant à une température T A , à l’issue de laquelle, lorsqu’il est présent, l’agent biologique ou chimique n est lié par ledit un ou plusieurs aptamères fonctionnalisant ladite surface S n ; une étape de détection et/ou de quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans ledit échantillon liquide ; et une étape de réinitialisation par lavage des m x N surfaces S n à l’eau pure déionisée, ou en portant la température des m x N surfaces S n à une température T B , avec T B >T A , un lavage des m x N surfaces S n à l’aide d’une solution de lavage étant réalisée de façon concomitante ou postérieurement à la montée en température à la température T B . Procédé selon la revendication 9, dans laquelle l’étape (ii) de détection et/ou de quantification se fait par mesure colorimétrique ou de fluorescence, l’étape (ii) comprenant notamment les sous étapes suivantes : (iia) une étape de mise en contact des m x N surfaces S n avec un ou des réactif de détection de l’éventuelle présence de l’agent biologique ou chimique n lié par ledit un ou plusieurs aptamères fonctionnalisant ladite surface S n ; le ou les réactifs de détection étant choisis parmi les anticorps marqués avec un chromogène ou avec un fluorophore, les aptamères marqués avec un chromogène ou avec un fluorophore, les anticorps conjugués avec une enzyme et les aptamères conjugués avec une enzyme ; (iib) optionnellement, une étape de lavage des m x N surfaces S n avec une solution de lavage ; (iic) une étape, lorsque le réactif de détection est un anticorps ou un aptamère conjugué avec une enzyme, de mise en contact des m x N surfaces S n avec une solution contenant au moins un réactif étant un substrat chromogène ou fluorogène de ladite enzyme ; (iid) une étape de détection et/ou de quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans ledit échantillon liquide, par : Mesure de la colorimétrie (par mesure de l’absorbance), en particulier lorsque le ou les réactifs de détection sont des anticorps ou des aptamères marqués avec un chromogène, ou les anticorps ou aptamères conjugués avec une enzyme ayant un substrat chromogène ; ou Mesure de la fluorescence émise, après excitation, en particulier lorsque le ou les réactifs de détection sont des anticorps ou aptamères marqués avec un fluorophore, ou les anticorps ou aptamères conjugués avec une enzyme ayant un substrat fluorogène. Procédé selon la revendication 9, dans laquelle l’étape (ii) de détection et/ou de quantification se fait par mesure colorimétrique ou de fluorescence, les aptamères fonctionnalisant les surfaces S n étant marqués par un luminophore, notamment choisis parmi le luminol et les complexes au ruthénium, en particulier le tris(2,2′-bipyridine)ruthénium(II), l’étape (ii) comprenant notamment les sous étapes suivantes : (iic) une étape de mise en contact des m x N surfaces S n avec une solution contenant au moins un réactif nécessaire aux réactions de chimiluminescence, notamment choisi parmi tri-n-propylamine (TRpA) et eau oxygénée, le luminophore étant un complexe de ruthénium ou le luminol, respectivement ; (iid) une étape de détection et/ou de quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans ledit échantillon liquide, par : Mesure de la colorimétrie (par mesure de l’absorbance); ou Mesure de la fluorescence émise, après excitation. Procédé selon la revendication 9, dans laquelle l’étape (ii) de détection et/ou de quantification se fait par électrochimiluminescence, chaque surface S n étant la surface d’une électrode E n , ou chaque surface S n se trouvant à proximité d’une électrode E n , l’étape (ii) comprenant notamment les sous étapes suivantes : (iia) une étape de mise en contact des m x N surfaces S n avec un ou des réactif de détection de l’éventuelle présence de l’agent biologique ou chimique n lié par ledit un ou plusieurs aptamères fonctionnalisant ladite surface S n ; le ou les réactifs de détection étant choisis parmi les anticorps et les aptamères couplés à un luminophore électrochimiluminescent tel que les complexes de ruthénium, le luminol; (iib) optionnellement, une étape de lavage des m x N surfaces S n avec une solution de lavage ; (iic) une étape de mise en contact des m x N surfaces S n avec une solution contenant au moins un réactif nécessaire aux réactions d’électrochimiluminescence, notamment choisi parmi tri-n-propylamine (TRpA) et eau oxygénée, le luminophore électrochimiluminescent étant un complexe de ruthénium ou le luminol, respectivement ; (iid) une étape de détection et/ou de quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans ledit échantillon liquide, par imposition, simultanément ou séquentiellement, d’une tension adaptée entre l’électrode E n et une autre électrode dédiée pour déclencher une émission de lumière par électrochimiluminescence si l’agent biologique ou chimique n est présent au niveau de cette électrode et détecter au moyen d’un dispositif optique adapté ce signal révélant la présence de l’agent biologique ou chimique n, les aptamères fonctionnalisant les surfaces S n étant en particulier marqués par un luminophore, notamment choisis parmi le luminol et les complexes au ruthénium, en particulier le tris(2,2′-bipyridine)ruthénium(II), l’étape (ii) comprenant alors les sous étapes suivantes : (iic) une étape de mise en contact des m x N surfaces S n avec une solution contenant au moins un réactif nécessaire aux réactions d’électrochimiluminescence, notamment choisi parmi tri-n-propylamine (TRpA) et eau oxygénée, le luminophore électrochimiluminescent étant un complexe de ruthénium ou le luminol, respectivement ; (iid) une étape de détection et/ou de quantification d’une pluralité de N agents biologiques et/ou chimiques n, n allant de 1 à N, éventuellement présents dans ledit échantillon liquide, par imposition, simultanément ou séquentiellement, d’une tension adaptée entre l’électrode E n et une autre électrode dédiée, ou par polarisation à l’aide d’une paire d’électrodes autres, pour déclencher une émission de lumière par électrochimiluminescence si l’agent biologique ou chimique n est présent au niveau de cette électrode et détecter au moyen d’un dispositif optique adapté ce signal révélant la présence de l’agent biologique ou chimique n. Balise de prélèvement comprenant un dispositif selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, ainsi qu’un collecteur d’agents biologiques ou chimiques dans l’air ou dans l’eau.