Brevet FR3149619A1 — publié le 20241213

La présente invention concerne l’utilisation dans une boisson alcoolisée d’un produit comprenant au moins un amphidinol, un produit destiné à être utilisé dans des boissons alcoolisées, une boisson alcoolisée particulière et son procédé de fabrication. La présente invention vise à fournir un nouveau moyen de lutte contre les micro-organismes indésirables dans les boissons alcoolisées tout en ayant aucun impact sur les qualités organoleptiques desdites boissons, afin d’obtenir une boisson alcoolisée sans sulfites ajoutés et sans altération des arômes. Utilisation d’au moins un amphidinol dans une boisson alcoolisée, notamment comme substitut aux sulfites L’invention concerne le domaine technique des boissons alcoolisées. En particulier, l’invention a pour objet l’utilisation dans une boisson alcoolisée d’un produit comprenant au moins un amphidinol, un produit destiné à être utilisé dans des boissons alcoolisées comprenant des amphidinols, une boisson alcoolisée particulière et son procédé de fabrication. Etat de l’art Les sulfites sont des composés chimiques contenant du soufre et de l’oxygène. Du fait de leurs capacités à inhiber la croissance de microorganismes indésirables et de leurs propriétés antioxydantes, ils sont couramment utilisés dans l’industrie alimentaire. Dans les boissons alcoolisées, les sulfites peuvent se former naturellement lors de la fermentation ou peuvent être ajoutés lors du procédé de fabrication de celles-ci. Les sulfites naturels se trouvent dans des quantités variables dans les boissons alcoolisées, et leur teneur dépend de différents paramètres tels que le type de boisson, le temps de fermentation et les conditions de stockage. En revanche, les sulfites ajoutés sont des sulfites supplémentaires ajoutés à la boisson alcoolisée pendant ou après la fermentation pour augmenter la stabilité et la durée de conservation. Les sulfites ajoutés peuvent être sous forme de dioxyde de soufre ou de sulfites, notamment de sulfite de potassium. A titre d’exemple, les sulfites ajoutés, comme notamment le dioxyde de soufre (SO 2 ), peuvent être utilisés pour contrôler les levures et autres micro-organismes indésirables des boissons alcoolisées. En particulier, l’emploi de SO 2 est actuellement le moyen de lutte le plus largement utilisé pour empêcher le développement de Brettanomyces bruxellensis , qui est considéré comme un microorganisme particulièrement indésirable des boissons alcoolisées et notamment du vin. En effet, la présence non contrôlée de l’espèce Brettanomyces dans les processus de fabrication de boissons alcoolisées est problématique dans la mesure où cette levure est responsable de la dégradation irréversible des qualités organoleptiques desdites boissons, telles que le vin ou la bière. L’espèce Brettanomyces bruxellensis notamment habituellement associée à des odeurs de gouache, de clou de girofle, de cuir, de sueur de cheval et d’écurie dues à la production de phénols volatils, essentiellement le 4-éthylphénol et le 4-éthylgaïacol. L’utilisation de sulfites, tels que le SO 2 permet donc d’aider à ralentir le développement de Brettanomyces bruxellensis dans les boissons alcoolisées tout en contrôlant également d’autres microorganismes tels que Saccharomyces cerevisiae et/ou des bactéries et en présentant un effet anti-oxydant. Toutefois, les produits chimiques tels que les sulfites ajoutés sont difficilement dégradables : ils se retrouvent dans les boissons alcoolisées traitées et sont ingérés par les consommateurs. Or, les sulfites ont un impact négatif sur la santé humaine, dû notamment à leur pouvoir allergène. De plus, l’utilisation de sulfites ajoutés devient de plus en plus controversée du fait d’apparition de résistances. Des études récentes ont en effet démontré que l’espèce Brettanomyces présente une grande diversité génétique permettant à un certain nombre de souches de l’espèce Brettanomyces de résister et de survivre aux sulfites. Ainsi, l’utilisation des sulfites pour contrôler les microorganismes indésirables comme l’espèce Brettanomyces dans les boissons alcoolisées montre donc ses limites et des solutions alternatives plus naturelles sont donc nécessaires. Pour remplacer les sulfites, il est possible d’utiliser des traitements physiques comme moyens de lutte contre les microorganismes indésirables dans les boissons alcoolisées, mais ces traitements sont employés de manière curative lorsque la contamination est dépistée et ne peuvent pas être utilisés en préventif. En outre, la mise en place d’un traitement physique, comme la microfiltration, au sein des procédés de fabrication des boissons alcoolisées peut être coûteux et peut affecter les qualités organoleptiques desdites boissons. Or, dans le domaine des boissons alcoolisées, il est particulièrement important de ne pas affecter les arômes et la texture de la boisson. Des alternatives apparaissent également avec l’utilisation de molécules naturelles permettant de contrôler les bactéries et/ou les levures indésirables. Le chitosane est une molécule naturelle levuricide qui a une action biocide contre la levure Brettanomyces bruxellensis mais qui, cependant, n’a aucune action contre S accharomyces cerevisiae . De plus, certaines souches de Brettanomyces bruxellensis sont insensibles à l’action du chitosane. Ce levuricide n’est donc pas adapté au traitement des boissons alcoolisées en particulier pour remplacer les sulfites. Il existe donc un besoin de disposer de nouveaux moyens de lutte contre les micro-organismes indésirables dans les boissons alcoolisées, adapté aux conditions des boissons alcoolisées, ne présentant aucun impact sur leurs qualités organoleptiques, afin d’obtenir une boisson alcoolisée sans sulfites ajoutés, sans altération des arômes. En recherchant des substituts aux sulfites, les inventeurs ont découvert que l’ajout d’au moins un amphidinol dans une boisson alcoolisée permettait de prévenir et/ou lutter contre les micro-organismes indésirables présents dans ladite boisson, tout en présentant un effet anti-oxydant et en préservant ses qualités organoleptiques. Ainsi, l’invention a pour objet l’utilisation dans une boisson alcoolisée, d’un produit comprenant au moins un amphidinol. Les amphidinols sont des composés organiques produits par certaines espèces de dinoflagellés et de microorganismes marins. A titre d’exemple les structures de l’amphidinol 18 et de l’amphidinol 19 sont données ci-dessous : Les amphidinols sont des polyhydroxy-polyenes (ploycétides à longue chaine) connues pour des activités biologiques variées, notamment des propriétés anticancéreuses, antifongiques et antivirales. De manière surprenante, les inventeurs ont mis en évidence : - l’effet des amphidinols sur le contrôle de la croissance des micro-organismes indésirables au sein des boissons alcoolisées, notamment sur les levures appartenant au genre brettanomyces et Saccharomyces et/ou sur les bactéries du genre Acetobacter , , oenococcus et Pediococcus , - la résistance des amphidinols aux conditions des boissons alcoolisées, et sa dégradation lente pendant la durée de fabrication de la boisson, jusqu’à disparition complète dans la boisson destinée à être consommée, - l’effet anti-oxydant des amphidinols dans les boissons alcoolisées, - la conservation des propriété organoleptiques de la boisson alcoolisée. Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1 à 19, l’amphidinol 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. En d’autres termes, selon un mode de réalisation particulièrement adapté, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1, l’amphidinol 2, l’amphidinol 3, l’amphidinol 4, l’amphidinol 5, l’amphidinol 6, l’amphidinol 7, l’amphidinol 8, l’amphidinol 9, l’amphidinol 10, l’amphidinol 11, l’amphidinol 12, l’amphidinol 13, l’amphidinol 14, l’amphidinol 15, l’amphidinol 16, l’amphidinol 17, l’amphidinol 18, l’amphidinol 19, l’amphidinol 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée comprend l’amphidinol 18. De façon préférée, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans une boisson alcoolisée comme bactéricide, levuricide et antioxydant. Selon un autre mode de réalisation adapté, le produit comprenant au moins un amphidinol est un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium. Avantageusement, selon ce mode de réalisation, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée est d’origine naturelle. L’invention a également pour objet, un produit destiné à être utilisé dans des boissons alcoolisées, comprenant au moins un amphidinol. Selon un mode de réalisation, le produit selon l’invention comprend l’amphidinol 18, l’amphidinol 19 et l’amphidinol 22. Un tel produit est particulièrement utile dans le contexte de l’invention permettant ainsi d’apporter une alternative à l’utilisation de sulfites dans les boissons alcoolisées. Selon un autre objet, l’invention porte sur une boisson alcoolisée comprenant au moins un amphidinol. Enfin selon un dernier objet, l’invention concerne un procédé de fabrication d’une boisson alcoolisée comprenant une étape d’ajout d’au moins un amphidinol dans la boisson. D’autres caractéristiques et avantages ressortiront de la description détaillée de l’invention et des exemples illustratifs mais non limitatifs de la portée de l’invention. Brève description des figures La est une photographie prise 3 jours après l’incubation de trois souches de Brettanomyces bruxellensis . La est une représentation graphique du protocole expérimental de l’exemple 2 ayant pour objectif de mette en évidence l’effet du produit selon l’invention sur trois souches de Brettanomyces bruxellensis . La est une représentation graphique de la mesure de la densité optique au cours du temps après incubation de trois souches de Brettanomyces bruxellensis en présence du milieu YPD seul (témoins négatif), d’éthanol ou en présence d’une concentration de 0,06 g/L à 2 g/L de produit selon l’invention. Deux réplicas (rep1 et rep2) ont été réalisés pour chaque condition. La est une photographie d’une observation réalisée à l’aide d’un microscope optique au grossissement X600 de la viabilité de Brettanomyces bruxellensis préalablement incubée avec de l’éthanol, le produit selon l’invention ou une température élevée. La est une représentation graphique illustrant la dégradabilité de l’amphidinol 18 à la lumière et à température ambiante pendant 120 jours. La est une représentation graphique du suivi de la croissance de Brettanomyces bruxellensis par mesure de la densité optique à 550 nm à 0, 1, 2, 3 et 7 jours (T0, T1, T2, T3 et T7) après incubation des levures à 28°C en présence du milieu YPD seul (témoin négatif), de l’éthanol ou en présence d’une concentration de 1 g/L de produit selon l’invention ou de produit selon l’invention inactivé. Deux réplicas (rep1 et rep2) ont été réalisés. La est une représentation graphique de la mesure de la concentration minimale d’inhibition (CMI) du produit selon l’invention pour différentes concentrations de Brettanomyces bruxellensis par suivi de la densité optique. La est une représentation graphique illustrant les données chromatographiques d’un produit selon l’invention après injection dans une colonne HPLC. La est une représentation graphique d’une analyse par spectrométrie de masse en tandem (MS/MS) du pic 0 de la . La est une photographie comparative de la fraction purifiée du pic 0 de la et d’un produit selon l’invention. La est une représentation graphique du suivi de la croissance de Brettanomyces bruxellensis par mesure de la densité optique à L550 nm à 0, 3 et 6 jours (T0, T3 et T6) après incubation des levures à 28°C en présence du milieu YPD seul (-), du méthanol ou en présence du pic 0 à une dilution de 1/32 à 1/256 correspondant à une concentration de 40 à 5ppm d’amphidinol 18 (AM18). Comme contrôle positif, la substance ICC001 à 0,25 g/L a été testée. Deux réplicas (rep1 et rep2) ont été réalisés. La est une représentation graphique de la mesure de la concentration minimale d’inhibition (CMI) de la fraction purifiée du pic0 sur Saccharomyces cerevisiae . La est une représentation graphique de la mesure par suivi de la densité optique de la concentration minimale d’inhibition (CMI) de la fraction purifiée du pic0 sur Acetobacter aceti . La est une représentation graphique du plan expérimentale utilisé au cours de l’exemple 9. La est une représentation graphique de la mesure logarithmique du nombre d’unité formant des colonies (log ufc/mL) de Brettanomyces bruxellensis NL6293 présents dans le vin à 1, 2, 4 et 11 jours (T1, T2, T4 et T11) après inoculation du vin avec Brettanomyces bruxellensis NL6293 pour les différentes conditions. La est une représentation graphique de la mesure logarithmique du nombre d’unité formant des colonies (log ufc/mL) de Brettanomyces bruxellensis NL6300 présents dans le vin à 1, 2, 4 et 11 jours (T1, T2, T4 et T11) après inoculation du vin avec Brettanomyces bruxellensis NL6293 pour les différentes conditions. La est une représentation graphique de la mesure logarithmique du nombre d’unité formant des colonies (log ufc/mL) de Saccharomyces cerevisiae présents dans le vin à 1, 2, 4 et 11 jours (T1, T2, T4 et T11) après inoculation du vin avec Brettanomyces bruxellensis NL6293 pour les différentes conditions. La est une représentation graphique de la mesure de la dégradabilité de l’amphidinol 18 dans du vin. Pour chaque modalité, la teneur en amphidinol 18 a été déterminée en point par million (ppm) par HPLC aux temps T6, T16 et T44 (6 jours, 16 jours et 44 jours après ajout d’un produit selon l’invention). La est une représentation graphique de la mesure de la dégradabilité de l’amphidinol 18 dans du vin. Pour chaque modalité, la teneur en AM18 est exprimée en pourcentage en considérant qu’à temps T0, 100% d’AM18 sont présents dans les échantillons. La est une représentation graphique d’un schéma expérimental permettant l’obtention d’un produit selon l’invention sous forme d’extrait cellulaire de Amphidinium carterae . La est une représentation graphique d’une étude comparative du chitosan et d’un produit selon l’invention comprenant de l’amphidinol 18 à travers leurs activités bactéricides et levuricides. Description détaillée de l’invention Définitions Par « boisson alcoolisée » au sens de l’invention, on entend une boisson comprenant au moins 1% d’alcool éthylique. Par « extrait cellulaire » au sens de l’invention, on entend un extrait obtenu en lysant des cellules de façon à libérer les composants intracellulaires tels que les protéines, les glucides et les métabolites. Préférentiellement les métabolites présents dans l’extrait cellulaire sont des amphidinols. Par « micro-organismes indésirables » au sens de l’invention, on entend une bactérie, une levure ou un champignon présentant, à l’égard d’une ou plusieurs boissons alcoolisées, plus d’effets négatifs que d’effets positifs. Dans certains cas, un même micro-organisme pourra, au sein de la même boisson, être considéré comme « micro-organisme indésirable » à certaines concentrations et « micro-organisme non-indésirable » à d’autres concentrations ou à d’autres stades de l’élaboration de la boisson alcoolisée. Par « qualités organoleptiques » au sens de l’invention, on entend les propriétés sensorielles de la boisson alcoolisée qui sont perçues par les organes des sens, à savoir l’apparence, l’odeur, le goût, et la texture. Utilisations dans une boisson alcoolisée, d’un produit comprenant au moins un amphidinol L’invention a pour objet l’utilisation d’un produit comprenant au moins un amphidinol dans au moins une boisson alcoolisée. Avantageusement, le produit comprenant au moins un amphidinol permet de lutter contre les micro-organismes indésirables sans altérer les qualités organoleptiques de la boisson alcoolisée. Le produit présente également un effet anti-oxydant dans la boisson alcoolisée. Le produit comprenant au moins un amphidinol peut donc être utilisé selon l’invention dans une boisson alcoolisée spécifiquement comme substitut aux sulfites. Par produit comprenant au moins un amphidinol, on entend tout produit sous toute forme comprenant une ou plusieurs molécule(s) d’amphidinol et éventuellement un ou plusieurs autres éléments tels que notamment des excipients ou une autre molécule active. Selon un mode de réalisation le produit comprenant au moins un amphidinol est constitué uniquement par une ou plusieurs molécules d’amphidinol. L’invention a donc également pour objet l’utilisation d’au moins un amphidinol pour lutter contre au moins un micro-organisme indésirable présent au sein d’une boisson alcoolisée. En particulier, un objet de l’invention est l’utilisation d’au moins un amphidinol dans une boisson alcoolisée pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins un microorganisme indésirable. De façon préférée, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1 à 19, l’amphidinol 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 3, l’amphidinol 18, l’amphidinol 19, l’amphidinol 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Préférentiellement, l’invention vise l’utilisation d’au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1 à 19, l’amphidinol 22 et leurs combinaisons, pour lutter contre au moins un micro-organisme indésirable présent au sein d’une boisson alcoolisée. Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, l’invention vise l’utilisation de l’amphidinol 18 pour lutter contre au moins un micro-organisme indésirable présent au sein d’une boisson alcoolisée. Selon un mode de réalisation, l’invention a pour objet l’utilisation d’un produit comprenant au moins l’amphidinol 18 dans une boisson alcoolisée. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée comprend au moins l’amphidinol 18 et l’amphidinol 3. Selon un mode de réalisation, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée comprend au moins l’amphidinol 18 et l’amphidinol 22. Selon mode de réalisation particulier de l’invention, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée comprend l’amphidinol 18, l’amphidinol 19 et l’amphidinol 22. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée comprend au moins l’amphidinol 18 et au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1 à 17, l’amphidinol 19 à 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée peut être spécifiquement un produit selon l’invention tel que décrit dans la présente demande. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé selon l’invention dans une boisson alcoolisée est d’origine naturelle. De façon préférée, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée est obtenu à partir d’un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium . Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée est un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium . Dans un mode de réalisation, ladite micro-algue de genre Amphidinium est choisie parmi les espèces suivantes : Amphidinium carterae ou Amphidinium klebsii . Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée est ou comprend un extrait cellulaire d’ Amphidinium carterae . Dans un mode de réalisation, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée est ou comprend un extrait cellulaire d’une souche d’ Amphidinium carterae choisie dans le groupe constitué de CCMP 124, de CCMP 1314, de CCMP 3177, d’AC 208, d’AC 792, et de BEA 01198. Dans le contexte de l’invention, CCMP signifie « Culture Collection of Marine Phytoplankton », AC signifie « Algobank Cean » et BEA signifie « Banco Español de Algas ». De façon préférée, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée est ou comprend un extrait cellulaire d’une souche d’ Amphidinium carterae choisie dans le groupe constitué de CCMP 1314, d’AC 208 et d’AC 792. Lorsque le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée est ou comprend un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium ledit extrait peut-être préparé par toute méthode d’extraction cellulaire connue de l’homme du métier, solide-liquide, liquide-liquide ou gaz-liquide, par exemple une extraction en solvant inorganique ou organique, lequel peut être choisi dans le groupe constitué de l’eau, des solutions aqueuses, des cétones, des esters, des acides, des éthers, des alcools et des mélanges en toutes proportions miscibles de ces solvants. Selon une variante, lorsque le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée est ou comprend un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium ledit extrait peut-être préparé par extraction CO2/H2O supercritique. Selon un mode de réalisation, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée est ou comprend un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium ledit extrait étant obtenu par une extraction dans un alcool, préférentiellement dans un alcool comprenant entre 1 et 4 atomes de carbone, encore plus préférentiellement le méthanol ou l’éthanol. De préférence, lorsque le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée est ou comprend un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium ledit extrait est une fraction hydrosoluble. Dans un mode de réalisation, l’invention vise l’utilisation d’un produit comprenant au moins un amphidinol, préférentiellement au moins l’amphidinol 18, dans une boisson alcoolisée, à une concentration supérieure à 1% en poids par rapport au poids total du produit, préférentiellement comprise entre 1 % et 100 % en poids par rapport au poids total du produit, notamment comprise entre 50 % et 90 % en poids par rapport au poids total du produit, encore plus préférentiellement comprise entre 75 % et 90 % en poids par rapport au poids total du produit. Dans un mode de réalisation, l’invention vise l’utilisation d’un produit comprenant au moins un amphidinol, préférentiellement au moins l’amphidinol 18, dans une boisson alcoolisée, à une concentration comprise entre 1 et 50 g/l, de préférence comprise entre 5 et 40 g/L, de préférence comprise entre 20 et 50 g/L, de préférence 33 g/L. Dans un mode de réalisation, l’invention vise l’utilisation d’un produit comprenant au moins un amphidinol, préférentiellement au moins l’amphidinol 18, dans une boisson alcoolisée, à une concentration comprise entre 0,06 g/L et 10 g/L par rapport au volume total de ladite boisson, préférentiellement entre 0,06 et 5g/L, entre 0,06 et 2 g/L, entre 0,06 et 1 g/L, entre 0,06 et 0,5 g/L , entre 0,06 et 0,25 g/L par rapport au volume total de ladite boisson. Selon un mode de réalisation, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée est présent dans ladite boisson à une concentration d’environ 0,125 g/L , par rapport au volume total de ladite boisson. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée selon l’invention, ne comprend pas au moins une des molécules choisies parmi les lingshuiols, les karatungiols, les luteophanols, et les colopsinols. Selon une variante adaptée, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée selon l’invention, ne comprend pas au moins une molécule choisie parmi le carteraol E, l’amphezonol A et leur mélange. De façon préférée, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée selon l’invention, ne comprend pas de carteraol. L’utilisation du produit comprenant au moins un amphidinol peut être réalisée dans tout type de boisson alcoolisée, préférentiellement les boissons obtenues par fermentation alcoolique. Selon un mode de réalisation préféré, la boisson alcoolisée est choisie parmi le vin, le cidre, la bière. Avantageusement, l’utilisation d’un produit comprend au moins un amphidinol dans une telle boisson alcoolisée permet : - de contrôler et/ou limiter la croissance des microorganismes indésirables - de présenter un effet anti-oxydant et de lutter contre les radicaux libres - de conserver les qualités organoleptiques de la boisson. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé selon l’invention dans une boisson alcoolisée présentant un pH inférieur à 7, préférentiellement inférieur à 4. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé selon l’invention dans une boisson alcoolisée présentant au moins 1% d’alcool éthylique, notamment au moins 4%, encore plus préférentiellement au moins 12%. Selon une variante de l’invention, le produit comprenant au moins un amphidinol peut être utilisé dans une boisson non alcoolisée. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans une boisson alcoolisée comme : - levuricide, notamment pour contrôler et/ou limiter la croissance de levures appartenant au moins un genre Brettanomyces, Hansaenula, Saccharomyces, Hanseniaspora, Pichia, Candida , Kloeckera , Torulopsis, Schizosaccharomyces et leurs combinaisons, encore plus préférentiellement pour contrôler et/ou limiter la croissance des levures appartenant au genre B rettanomyces notamment pour contrôler et/ou limiter la croissance des levures appartenant à l’espèce B rettanomyces bruxellensis , et/ou - bactéricide, encore plus préférentiellement pour contrôler et/ou limiter la croissance des bactéries appartenant au genre choisi parmi Gluconobacter , Acetobacter, Oenococcus, Lactobacillus, Pediococcus, Pectinatus, Megasphaera , Citrobacter, Enterobacter, Obesumbacterium, Klebsiella, Proteus, Serratia, Zymomonas notamment pour contrôler et/ou limiter la croissance des bactéries appartenant à l’espèce Acetobacter aceti, et/ou - antioxydant. De façon préférée, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans une boisson alcoolisée, préférentiellement dans du vin, comme bactéricide, levuricide et antioxydant. Selon un mode de réalisation, l’invention vise l’utilisation d’au moins un amphidinol pour lutter contre au moins un micro-organisme indésirable dans une boisson alcoolisée, préférentiellement choisie parmi les boissons alcoolisées obtenues par fermentation alcoolique, notamment le vin, le cidre, et la bière. Selon un mode de réalisation, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans une boisson alcoolisée comme levuricide pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins une levure d’un genre choisi parmi Brettanomyces, Hansaenula, Saccharomyces, Hanseniaspora, Pichia, Candida , Kloeckera , Torulopsis, Schizosaccharomyces et leurs combinaisons. Avantageusement, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée permet d’éviter qu’une levure du genre précité devienne majoritaire dans une boisson alcoolisée, et par conséquent, empêche la production de métabolites indésirables dont la formation en grand nombre peut induire des goûts indésirables dans une boisson alcoolisée. De préférence, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans une boisson alcoolisée comme levuricide pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins une levure d’espèce choisie parmi Kloeckera apiculata , Brettanomyces bruxellensis, Saccharomyces cerevisiae, Pichia membranefaciens, Hansenula anomala et leurs combinaisons. Selon un autre mode de réalisation, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans une boisson alcoolisée comme bactéricide pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins bactérie d’un genre choisi parmi Gluconobacter , Acetobacter, Oenococcus, Lactobacillus, Pediococcus, Pectinatus, Megasphaera , Citrobacter, Enterobacter, Obesumbacterium, Klebsiella, Proteus, Serratia, Zymomonas. Avantageusement, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée permet d’éviter qu’une bactérie du genre précité devienne majoritaire dans une boisson alcoolisée, et par conséquent, empêche la production de métabolites indésirables dont la formation en grand nombre peut induire des goûts indésirables dans une boisson alcoolisée. De préférence, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans une boisson alcoolisée comme bactéricide pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins une espèce de bactérie choisie parmi Oenococcus oenii, Lactobacillus brevis, Lactobacillus plantarum , Pediococcus damnosus, Pediococcus inopinatus, Pediococcus pentosaceus, Enterobacter cloaceae, Enterobacter agglomerans, Citrobacter freundii, Obesumbacterium proteus, Zymomonas mobilis et leurs combinaisons. Selon un mode de réalisation, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans du vin au moins comme levuricide. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans le vin pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins une levure d’un genre choisi parmi Brettanomyces, Hansaenula, Saccharomyces, Hanseniaspora, Pich i a, Candida , Kloeckera et leurs combinaisons. De préférence, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans le vin pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins une levure d’espèce choisie parmi Kloeckera apiculata , Brettanomyces bruxellensis , Saccharomyces cerevisiae et leurs combinaisons. De façon particulièrement préférée, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans le vin pour contrôler et/ou limiter la croissance de Brettanomyces bruxellensis. Dans un mode de réalisation particulier de l’invention, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans le vin pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins une levure indésirable d’espèce Brettanomyces bruxellensis et de souche(s) NL6295, NL6300 et/ou NL6293 (ces souches étant des souches ayant été isolées à partir de vin contaminé). Ainsi, selon une variante, l’invention vise l’utilisation d’au moins un amphidinol dans un vin pour lutter contre au moins une levure indésirable choisi parmi les levures de genre Brettanomyces (notamment Brettanomyces bruxellensis ) Candida (notamment Candida stellata , Candida pulcherima ou encore Candida vini ), Hansenula (notamment Hansaenula anomala ), Hanseniaspora , Kloeckera (notamment Kloeckera apiculata ), Pichia (notamment Pichia membranefaciens ), Zygosaccharomyces et Saccharomyces (au sein de ce dernier genre, uniquement certaines souches sauvages de Saccharomyces cerevisiae : var. diastaticus, pastorianus, ellipsoideus et willianus, peuvent être considérées comme étant des levures indésirables).Préférentiellement, l’invention vise l’utilisation d’au moins un amphidinol dans un vin pour lutter contre une levure Brettanomyces bruxellensis , de façon préférée contre une levure Brettanomyces bruxellensis de souche NL6295, NL6300 ou NL6293. Dans un mode de réalisation, l’invention vise l’utilisation d’au moins un amphidinol dans un vin pour lutter contre au moins une bactérie choisie parmi les bactéries acétiques indésirables et les bactéries lactiques indésirables. Selon un mode de réalisation, l’invention vise également l’utilisation d’un produit comprenant au moins un amphidinol dans du vin comme bactéricide. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé selon l’invention dans le vin pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins une bactérie choisie parmi les bactéries du genre Gluconobacter , Acetobacter, Oenococcus , Lactobacillus, Pediococcus et leurs combinaisons. De préférence, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans le vin pour contrôler et/ou limiter la croissance de Oenococcus oenii . Dans un mode de réalisation, la boisson alcoolisée est un vin, et le au moins un micro-organisme indésirable est au moins : - une bactérie acétique choisie parmi les bactéries du genre Acetobacter (notamment Acetobacter aceti ) et Gluconobacter et/ou - une bactérie lactique choisie parmi les bactéries du genre Oenococcus (notamment Oenococcus oenii ) Lactobacillus et Pediococcus . Selon un mode de réalisation, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans la bière comme levuricide. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans la bière pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins un genre de levure choisi parmi Torulopsis, Schizosaccharomyces, Brettanomyces, Hansaenula, Rhodotorula, Saccharomyces, Pich i a, Candida, Kloeckera et leurs combinaisons. De préférence, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans la bière pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins une espèce de levure choisie parmi Pichia membranefaciens , Hansenula anomala , Saccharomyces cerevisiae et leurs combinaisons. De façon particulièrement préféré, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans la bière pour contrôler et/ou limiter la croissance Brettanomyces bruxellensis . Dans un mode de réalisation, l’invention vise l’utilisation d’au moins un amphidinol dans une bière pour lutter contre au moins une levure indésirable choisi parmi les levures du genre Brettanomyces , Candida (notamment Candida Rhodotorula ), Hansenula (notamment Hansenula anomala ), Kloeckera , Pichia (notamment Pichia membranefaciens ) et Saccharomyces (au sein de ce dernier genre, uniquement certaines souches sauvages de Saccharomyces cerevisiae : var. diastaticus, pastorianus, ellipsoideus et willianus, peuvent être considérées comme étant des levures indésirables). Selon un mode de réalisation, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans la bière comme bactéricide. Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans la bière pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins un genre de bactérie choisi parmi Gluconobacter , Pectinatus , Megasphaera , Acetobacter, Lactobacillus, Pediococcus , Citrobacter, Enterobacter, Obesumbacterium, Klebsiella, Proteus , Serratia , Zymomonas et leurs combinaisons. De préférence, le produit comprenant au moins un amphidinol est utilisé dans la bière pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins une espèce de bactérie choisie parmi Lactobacillus brevis , Lactobacillus plantarum , P ediococcus damnosus , Pediococcus inopinatus , Pediococcus pentosaceus , Enterobacter cloaceae, Enterobacter agglomerans, Citrobacter freundii , Obesumbacterium proteus , Zymomonas mobilis . Dans un mode de réalisation, l’invention vise l’utilisation d’au moins un amphidinol dans une bière pour lutter contre au moins une bactérie indésirable choisie parmi les bactéries du genre Acetobacter , Citrobacter (notamment Citrobacter freundii ), Enterobacter (notamment Enterobacter cloaceae ou Enterobacter agglomerans ), Gluconobacter , Lactobacillus (notamment Lactobacillus brevis ou Lactobacillus plantarum ), Megasphaera , Obesumbacterium (notamment Obesumbacterium proteus ), Pectinatus , Pediococcus (notamment Pediococcus inopinatus ou Pediococcus pentosaceus ), Zymomonas (notamment Zymomonas mobilis ), Klebsiella , Proteus , Serratia , Hafnia , Selenomonas (notamment Selenomonas lacticifex ) et Zymophilus . Selon un mode de réalisation, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée est sous forme de poudre ou sous forme liquide. Contrairement aux solutions proposées par l’art antérieur, et à d’autres bactéricides et/ou levuricides, l’utilisation d’un produit comprenant au moins un amphidinol est adapté aux boissons destinées à être consommées et peut s’effectuer dans une boisson alcoolisée présentant un pH inférieur à 7, préférentiellement inférieur à 4, sans être dégradé rapidement. Avantageusement, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée conserve ses propriétés à pH acide, notamment sa capacité à contrôler et/ou limiter la croissance des levures appartenant au genre B rettanomyces . Préférentiellement, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée, en particulier dans du vin, est dégradé d’au moins 40% en poids du poids total du produit en 144 heures au sein de ladite boisson. Avantageusement, les amphidinols, plus particulièrement les amphidinols 18, 19 et 22, se dégradent naturellement au cours du temps au sein de la boisson alcoolisée. Ainsi, contrairement aux sulfites, il est possible d’introduire une forte concentration d’amphidinol dans la boisson alcoolisée pour lutter contre les microorganismes indésirables sans être ingéré par le consommateur. L’Homme du métier est capable de calculer une concentration initiale nécessaire pour lutter contre les microorganismes indésirables tout en mesurant la dégradation des amphidinols au cours du temps pour limiter son ingestion par le consommateur. Dans le vin, avec une concentration de 60 à 480ppm, il est dégradé 90% en 44 jours. Avantageusement, le produit comprenant au moins un amphidinol utilisé dans une boisson alcoolisée se mélange pour former une boisson alcoolisée homogène. Produit destiné à être utilisé dans des boissons alcoolisées, comprenant au moins un amphidinol L’invention concerne également un produit solide destiné à être utilisé dans des boissons alcoolisées, comprenant au moins un amphidinol. Un tel produit est particulièrement utile dans le contexte de l’invention permettant ainsi de lutter contre les microorganismes indésirables tel que les levures et/ou les bactéries présentes dans les boissons alcoolisées tout en ayant aucun impact sur les caractéristiques organoleptiques desdites boissons. Selon un mode de réalisation préféré, le produit selon l’invention comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1 à 19, l’amphidinol 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Préférentiellement, le produit selon l’invention comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 18, l’amphidinol 19, l’amphidinol 22 et leurs mélanges. Préférentiellement, le produit selon l’invention comprend au moins deux amphidinols choisis parmi l’amphidinol 1 à 19, l’amphidinol 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Préférentiellement, le produit selon l’invention comprend au moins deux amphidinols choisis parmi l’amphidinol 18, l’amphidinol 19, l’amphidinol 22 et leurs mélanges. Selon un mode de réalisation, le produit selon l’invention comprend l’amphidinol 18 et au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1 à 17, l’amphidinol 19 à 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Préférentiellement, le produit selon l’invention comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 18 et/ou un amphidinol 22. Préférentiellement, le produit selon l’invention comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 18 et/ou un amphidinol 3. Selon un autre mode de réalisation préféré, le produit selon l’invention comprend au moins l’amphidinol 18, l’amphidinol 19 et l’amphidinol 22. Avantageusement, l’activité levuricide et/ou bactéricide et/ou anti-oxydante, plus particulièrement le contrôle de la croissance des levures appartenant au genre brettanomyces , est uniquement dû aux amphidinols présents dans le produit selon l’invention. Selon un mode de réalisation particulier, le produit selon l’invention comprend au moins 50% d’amphidinol 18 et au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1 à 17, l’amphidinol 19 à 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Préférentiellement le produit selon l’invention comprend en poids du poids total du produit : - entre 40 et 60% d’amphidinol 18, - entre 35 et 45% d’amphidinol 19, et/ou - entre 35 et 45% d’amphidinol 22. Le produit selon l’invention est particulièrement adapté pour son utilisation dans des boissons alcoolisée. Selon un mode de réalisation, le produit selon l’invention se présente sous la forme d’une poudre ou sous forme liquide. De façon préférée, le produit selon l’invention est obtenu à partir d’un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium . Le produit selon l’invention est préférentiellement un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium . Ladite microalgue de genre Amphidinium peut notamment appartenir à l’espèce Amphidinium carterae . Lorsque le produit selon l’invention est un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium , ledit extrait peut-être préparé par toute méthode d’extraction cellulaire connue de l’homme du métier, solide-liquide ou liquide-liquide, par exemple une extraction en solvant inorganique ou organique, lequel peut être choisi dans le groupe constitué de l’eau, des solutions aqueuses, des cétones, des esters, des acides, des éthers, des alcools et des mélanges en toutes proportions miscibles de ces solvants. Selon un mode de réalisation, le produit comprenant au moins un amphidinol est un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium ledit extrait étant obtenu par une extraction dans un alcool, préférentiellement dans un alcool comprenant entre 1 et 4 atomes de carbone, encore plus préférentiellement le méthanol ou l’éthanol. De préférence, lorsque le produit comprenant au moins un amphidinol est un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium ledit extrait est une fraction hydrosoluble. Lorsque le produit selon l’invention est un extrait cellulaire d’une ou plusieurs microalgues du genre Amphidinium, son procédé de préparation est caractérisé par les étapes suivantes : a) récolte de cellules fraiches d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium ; a’) éventuellement congélation et/ou lyophilisation desdites cellules ; b) mise en suspension desdites cellules fraîches ou congelées ou dudit lyophilisat dans un solvant inorganique ou organique dans un rapport en poids lyophilisat ou biomasse/solvant compris entre 1/200 et 1/2 ; b’) éventuellement lyophilisation de l’extrait obtenu. De façon préférée, le solvant inorganique peut être choisi parmi l’eau ou des solutions aqueuses. Préférentiellement, le solvant organique de l’étape b) peut être choisi parmi : - les solvants hydrocarbonés tels que les aliphatiques ou les aromatiques ; - les solvants oxygénés tels que les alcools, les cétones, les acides, les esters et les éthers ; et - les mélanges en toutes proportions miscibles de ces solvants. Selon un mode de réalisation préféré, le solvant organique de l’étape b) est un alcool ayant de 1 à 4 atomes de carbone, comme le méthanol ou l’éthanol. Lorsque le solvant de l’étape b) est un solvant organique, la mise en suspension peut être réalisée à une température entre 4 et 60°C, de préférence entre 18 et 60°C, de manière particulièrement préférée à température ambiante. De préférence, la mise en suspension de l’étape b) desdites cellules fraiches ou congelées ou dudit lyophilisat dans un solvant inorganique est réalisée à une température ambiante. De préférence, la mise en suspension de l’étape b) desdites cellules fraiches ou congelées ou dudit lyophilisat dans un solvant inorganique dure moins de 5 minutes, de préférence moins de 3 minutes, de préférence moins de 1 minute. La mise en suspension de l’étape b) est réalisée soit en ajoutant auxdites cellules fraiches ou congelées ou audit lyophilisat le solvant porté préalablement à la température désirée, soit en ajoutant le solvant, en re suspendant le mélange et en ajustant à la température désirée. De préférence, la mise en suspension de l’étape b) desdites cellules fraiches ou congelées ou dudit lyophilisat dans un solvant inorganique ou organique est réalisée dans un rapport en poids lyophilisat ou biomasse/solvant compris entre 1/100 et 1/50. Avantageusement, les cellules fraiches récoltées et extraites de l’étape a) proviennent d’une culture cellulaire dans des conditions de température, photopériode et salinité adaptées à la souche concernée jusqu’à une concentration cellulaire comprise entre 5.10 4 cellules/mL et 5.10 7 cellules/mL, préférentiellement une concentration cellulaire comprise entre 5.10 5 cellules/mL et 2.10 7 cellules/mL. Les cellules sont cultivées en batch pendant 5 à 20 jours, puis en continu ou en semi-continu pendant plusieurs mois. L’intensité lumineuse est comprise entre 40 µE et 2000 µE, de préférence comprise entre 70 µE et 500 µE. La température de culture est généralement comprise entre 17°C et 30°C, de préférence comprise entre 17°C et 26°C. La photopériode jour/nuit est de préférence comprise entre 8h/16h et 16h/8h. La salinité minimum est de 15 ppt (part per thousand). Selon un mode de réalisation particulier, lorsque les cellules fraiches récoltées et extraites de l’étape a) proviennent de la souche Amphidinium carterae, elles ont été cultivées selon les paramètres suivants : les cellules sont incubées dans du milieu d’eau de mer naturel ou artificiel à une température comprise entre 17 à 25°C avec un cycle jour/nuit compris entre 8h/16h et 16h/8h, de préférence de 16h/8h. Boisson alcoolisée comprenant au moins un amphidinol L’invention vise également un intermédiaire développemental clé pour obtenir une boisson alcoolisée sans sulfites ajoutés, sans microorganismes indésirables et sans altération des arômes. A cet effet, l’invention a pour objet une boisson alcoolisée comprenant au moins un amphidinol. Cette boisson comprenant au moins un amphidinol est une boisson en cours d’élevage, phase pendant laquelle le ou les amphidinols introduits selon l’invention sont encore présents. La présence d’au moins un amphidinol est temporaire au sein de la boisson alcoolisée du fait de la dégradabilité des amphidinols. Selon un mode de réalisation, la boisson alcoolisée selon l’invention comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1 à 19, l’amphidinol 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Selon un mode de réalisation préféré, la boisson alcoolisée selon l’invention comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 18, l’amphidinol 19, l’amphidinol 22 et leurs mélanges. Selon un mode de réalisation particulier, la boisson alcoolisée selon l’invention comprend au moins deux amphidinols choisis parmi l’amphidinol 1 à 19, l’amphidinol 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Préférentiellement, la boisson alcoolisée selon l’invention comprend l’amphidinol 18 et au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1 à 17, l’amphidinol 19 à 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Préférentiellement, la boisson alcoolisée selon l’invention comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 18, un amphidinol 22 et leur mélange. Préférentiellement, la boisson alcoolisée selon l’invention comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 18, l’amphidinol 3 et leur mélange. Selon un mode de réalisation préféré, la boisson alcoolisée selon l’invention comprend un produit décrit selon l’un des quelconques modes de réalisation préalablement décrit. La boisson alcoolisée selon l’invention ne comprend pas de sulfites ajoutés. Procédé de fabrication d’une boisson alcoolisée Selon un dernier objet, l’invention concerne un procédé de fabrication d’une boisson alcoolisée comprenant la mise œuvre d’une étape d’ajout d’au moins un amphidinol dans la boisson. Selon un mode de réalisation particulier de l’invention, l’ajout d’au moins un amphidinol dans la boisson alcoolisée peut être réalisé à tout moment lors du procédé de préparation d’une boisson alcoolisée. Selon un mode de réalisation préféré, le procédé de fabrication d’une boisson alcoolisée selon l’invention comprend au moins une étape d’ajout d’au moins un produit décrit selon l’un des quelconques modes de réalisation préalablement décrit. De façon préférée, la boisson alcoolisée selon l’invention peut être toute boisson obtenue par fermentation alcoolique. Préférentiellement, la boisson alcoolisée selon l’invention peut être choisie parmi le vin, le whisky, le cidre, la bière et le kombucha. Exemples Exemple 1 : Obtention d’un produit selon l’invention sous forme d’ extrait de microalgue Amphidinium carterae . La culture en laboratoire de la microalgue Amphidinium carterae , souche ICC001, se fait en flasque ventilée T25, T50 ou en ballon de 5 L dans un milieu L1 (voir composition du milieu ci-dessous) dans une chambre de culture de 18°C avec un cycle jour/nuit de 12h/12h à une intensité lumineuse de 50-100 µE. La montée en échelle de volume de culture permet de passer de moins d’un litre de culture à plusieurs m3 et nécessite l’utilisation de photobioréacteur (PBR) contenant des poches de culture. Cela se fait par l’ensemencement de poche de 100 L de milieu de culture du PBR avec des cultures de 5 L de la micro-algue. La culture en PBR se fait à une température de 22-23°C avec un contrôle du pH par ajout de CO2 et la mise en place d’un bullage (débit d’aération de 1L/min). L’éclairage à 6 500 K est compris entre 150 et 500 µE en lumière continue sur 24h. Lorsque la culture atteint la densité optique désirée, la récolte des microalgues se fait de façon continue par prélèvements quotidiens de 10 à 20% de la culture en ajoutant un volume équivalent de milieu de culture. Ces prélèvements de microalgues sont effectués par un système de filtration tangentielle qui permet de concentrer les microalgues qui sont ensuite centrifugées pour obtenir une pâte de microalgue à une teneur en matière sèche de 25-35%. Cette pâte est ensuite resuspendue dans de l’éthanol (EtOH) 100% afin d’obtenir une concentration finale en EtOH de 60-70%. Une teneur de 100 g de matière sèche pour 1L de solution (100 g/L) est ainsi obtenue. Cet extrait est centrifugé à 5 000 rpm pour obtenir un surnageant clarifié qui correspond au produit selon l’invention et qui contient en théorie 100 g/L de matière sèche. Le produit selon l’invention a une concentration en amphidinol 18 de 33 g/L. Ce produit selon l’invention, sera diluée dans 100% d’EtOH à différentes concentrations de 0,006 g/L à 2 g/L et utilisée pour les Figures 1 à 4 et pour aux et 9B. Le produit selon l’invention a par la suite été purifiée par chromatographie d’exclusion en phase inverse sur une colonne C18 afin d’obtenir un pic d’élution contenant l’amphidinol 18 (AM18), appelé pic 0. Ce pic 0 a été utilisé pour les figures n°5 à n°8. Pour ce faire, la pâte a été resuspendue dans du méthanol (MetOH) à 3 mg de matière sèche pour 1 mL de MetOH. Après filtration de cette pâte à 0,2 µm, 10 µL de l’échantillon ont été injectés dans la colonne C18. L’élution des différents composants a été effectuée selon un mélange de solvant A (0,1% acide formique) et de solvant B (MetOH) qui diffère selon le temps d’élution : T0 min (A/B : 50/50) ; T25 min (A/B : 0/100) ; T40 min (A/B : 0/100) ; T43 min (A/B : 50/50) et T48 min (A/B : 50/50). Le pic 0 correspond au premier pic d’élution et pour lequel la présence d’AM18 (poids moléculaire : 1381,8 Da et masse molaire : 1358,83 g/mol) a été confirmée par spectrométrie de masse. Le Pic 0 a été utilisé dans le cadre des Figures 5, 6, 7 et 8. Il sera parfois appelé « fraction purifiée du pic0 ». Le schéma général du procédé est donné en . Composition de 1L du milieu L1 1 L de milieu SSW 2 mL de solution NP 1 mL de solution de métaux 0,5 mL de F/2 vitamines. Solution SSW : NaCl : 24.5 g Na2SO4 : 4.09 g KCl : 0.7 g NaHCO3 : 0.2 g KBr : 0.1 g H3BO3 : 0.03 g NaF : 0.003 g MgCl2 6H2O : 11.1 g CaCl2 2H2O : 1.54 g H20 qsp 1 L Solution NP (50X) : NaNO3 : 37.5 g NaH2PO4-H2O : 2.5 g H20 : qsp 100 mL. Solution de métaux (1000X) : FeCl3 ∙ 6H2O : 3.15 g Na2EDTA ∙ 2H2O : 4.36 g CuSO4 ∙ 5H2O : 0.00245 g Na2MoO4 ∙ 2H2O : 0.0189 g ZnSO4 ∙ 7H2O : 0.022 g CoCl2 ∙ 6H2O : 0.01 g MnCl2 ∙ 4H2O : 0.18 g H2SeO3 : 0.0013 g NiSO4 ∙ 6H2O : 0.0027 g Na3VO4 : 0.00184 g K2CrO4 : 0.00194 g H20 : qsp 1 L. Solution de F/2 vitamines : Thiamine (B1) : 400mg Cobalamine (B12) : 2mg Biotine (H) : 2mg H20 : qsp 1 L Exemple 2 : Mise en évidence de l’effet d’un produit selon l’invention sur trois souches de Brettanomyces bruxellensis Trois souches de Brettanomyces bruxellensis , et plus précisément deux souches triploïdes (NL6293 et NL6293) et une souche diploïde (NL6300), ont été mises à pousser indépendamment sur milieu YPD agar en boite de pétri. Après trois jours d’incubation à 28°C et à pression atmosphérique, une photo mettant en évidence la présence des trois colonies a été réalisée, elle est donnée en . Ensuite, des dilutions de ces trois souches sont préparées, à 5.10 4 ufc/mL. Par ailleurs, des dilutions dans YPD du produit selon l’invention sont réalisées. Ensuite, les trois souches ont été mises à incuber en présence ou non de produit selon l’invention à différentes concentrations pendant sept jours à 28°C et à pression atmosphérique. Les différents échantillons sont les suivants : - YPD seul (témoin négatif ; 100 µL de dilution de levure + 100 µL de YPD) ; - YPD avec présence d’éthanol (100 µL de dilution de levure + 100 µL de YPD contenant 0,7 µL d’éthanol) ; - YPD avec présence de produit selon l’invention (100 µL de dilution de levure + 100 µL de YPD contenant 0,06 g/L à 2 g/L de produit selon l’invention). Deux réplicas ont été réalisés pour chaque condition. Un schéma général de ce protocole est donné en . La croissance des levures est mesurée par une lecture de la densité optique à 550 nanomètres aux temps suivants : T = 0, T = 2 jours, T = 3 jours, T = 5 jours, et T = 7 jours. Le récapitulatif des densités optiques mesurées est donné en . Il est à remarquer que les populations des trois souches de Brettanomyces bruxellensis sont particulièrement sensibles à l’ICC001, et en particulier lorsque la concentration en produit selon l’invention est de 0,250 g/L. Il a donc été mis en évidence que le produit selon l’invention a une activité antimicrobienne contre les différentes souches de Brettanomyces bruxellensis . Par ailleurs, si l’on compare l’activité du produit selon l’invention à celle de l’éthanol, il s’avère qu’elle est meilleure, quelle que soit la concentration testée. Exemple 3 : Mise en évidence de l’effet du produit selon l’invention sur la viabilité de Brettanomyces bruxellensis Une souche NL6293 de Brettanomyces bruxellensis a été, selon les échantillons : - préalablement incubée en présence de 1/300ème d’éthanol pendant vingt-quatre heures ; - préalablement incubée en présence de 1 g/L de produit selon l’invention pendant vingt-quatre heures ; ou bien - soumise à une température de 95°C pendant cinq minutes. Ensuite, tous les échantillons ont été incubés pendant une minute avec du bleu de trypan, qui est un marqueur de viabilité cellulaire (il est exclu des cellules viables mais est présent dans les cellules non viables et marquent le noyau) agissant en tant qu’intercalant de l’ADN. Ensuite, une photo de chacun des trois échantillons a été prise. Elle est donnée en . Il a donc été mis en évidence que le produit selon l’invention provoque une perte de viabilité de Brettanomyces bruxellensis . Par ailleurs, si l’on compare l’activité du produit selon l’invention à celle de l’éthanol, il s’avère qu’elle est meilleure. Exemple 4 : Mise en évidence de l’effet de l’amphidinol 18 sur trois souches de Brettanomyces bruxellensis Un produit selon l’invention à un gramme par litre (dans l’éthanol à 70%) a été placé à la lumière et à température ambiante durant 120 jours. Régulièrement, la concentration en amphidinol 18 au sein du produit selon l’invention a été mesurée par chromatographie en phase liquide à haute performance. L’ensemble des données récoltée ont été mise sous forme de graphique, donné en . Il a été mis en évidence que la concentration en amphidinol 18 du produit selon l’invention diminuait ; à T = 0 jours, elle est de 24 mg/L, tandis qu’à T = 120 jours, elle est près de 0 mg/L. En parallèle, différents échantillons ont été préparés en utilisant les mêmes trois souches de Brettanomyces bruxellensis qu’en exemple 2: - YPD seul (témoin négatif ; 100 µL de dilution de levure + 100 µL de YPD) ; - YPD avec présence d’éthanol (100 µL de dilution de levure + 100 µL de YPD contenant 0,7 µL d’éthanol) ; - YPD avec présence du produit selon l’invention (100 µL de dilution de levure + 100 µL de YPD contenant 1 g/L de produit selon l’invention ; T = 0 jours) ; g/L- YPD avec présence de produit selon l’invention inactivé (100 µL de dilution de levure + 100 µL de YPD contenant 1 g/L de produit selon l’invention ayant un degré de vieillissement de T = 7 jours) ; Deux réplicas ont été réalisés pour chaque condition. La croissance des levures est mesurée par une lecture de la densité optique à 550 nanomètres. Le récapitulatif des densités optiques est donné en . Il est à remarquer que les populations des trois souches de Brettanomyces bruxellensis sont particulièrement sensibles au produit selon l’invention à tous les temps : aucune souche de Brettanomyces ne pousse en présence de produit selon l’invention, et ce quel que soit le temps. A partir de T = 3 jours, les effets en présence de produit selon l’invention inactivé sont similaires à ceux de l’éthanol. Mettant en rapport les deux tests présentés dans cet exemple, il semble que l’amphidinol 18 soit un amphidinol particulièrement efficace pour contrôle et/ou limiter la croissance de Brettanomyces bruxellensis . Exemple 5 : Détermination de la concentration minimale d’inhibition du produit selon l’invention à différentes concentrations de Brettanomyces bruxellensis La concentration minimale d’inhibition du produit selon l’invention a été déterminée pour trois concentrations de Brettanomyces bruxellensis : 2,5.10 2 ufc/mL, 2,5.10 3 ufc/mL et 2,5.10 4 ufc/mL selon le protocole décrit en exemple 2 et . La DO550 nm à 0, 3, 5 et 6 jours (T0, T3, T5 et T6) a été mesurée après incubation des levures à 28°C en présence du milieu YPD seul (témoin négatif), de l’éthanol ou en présence de produit selon l’invention à une concentration finale de 0,03 g/L à 0,25 g/L. Deux réplicas ont été réalisés pour chaque condition. Le récapitulatif des densités optiques est donné en . Il est à remarquer que quelle que soit la concentration en Brettanomyces bruxellensis , une concentration de 0,125 g/L d’ICC001 est très efficace pour inhiber Brettanomyces bruxellensis . Exemple 6 : Détermination de la concentration minimale d’inhibition d’une fraction purifiée du produit selon l’invention sur Brettanomyces bruxellensis . Les données chromatographiques du produit selon l’invention après injection dans la colonne de chromatographie en phase liquide à haute performance sont données en . L’analyse du pic 0 par spectrométrie de masse en tandem (MS/MS) est donnée en . Le pic à 27,759 correspond à l’amphidinol 18 (AM18). La photo de la fraction du pic 0 et du produit selon l’invention est donnée en . La concentration minimale d’inhibition du pic 0 (fraction purifiée) a été déterminée pour deux souches de Brettanomyces bruxellensis (NL6293 et NL6300) selon le protocole décrit en exemple 2 et . La DO550 nm à T = 0 jours, T = 3 jours et T = 6 jours a été mesurée après incubation des levures à 28°C en présence du milieu YPD seul (témoin négatif), de méthanol ou en présence du pic 0 à des dilutions allant 1/32 à 1/256 correspondant à des concentrations de 40 à 5 ppm d’amphidinol 18. Le produit selon l’invention à 0,25 g/L a également été testé (témoin positif). Deux réplicas ont été réalisés. L’ensemble des données obtenues est donné en . Il a été mis en évidence que l’ensemble des dilutions ainsi que le produit selon l’inveniton (0,25 g/L) sont efficaces contre la souche NL6293. Il a également été mis en évidence que l’ensemble des concentrations sauf la concentration à 5ppm d’AM18 ainsi que le produit selon l’invention (0,25 g/L) sont efficaces contre la souche NL6300. Exemple 7 : Détermination de la concentration minimale d’inhibition d’une fraction purifiée du produit selon l’invention sur la levure Saccharomyces cerevisiae La concentration minimale d’inhibition (CMI) du pic 0 décrit dans la a été déterminée pour Saccharomyces cerevisiae selon le protocole décrit en exemple 2 et . La DO550 nm à 0, 3 et 6 jours (T0, T3 et T6) a été mesurée après incubation à 28°C des levures à 2,5.104 ufc/mL en présence du milieu YPD seul (témoin négatif), du méthanol (MEtOH) ou en présence du pic 0 à une dilution de 1/32 à 1/256 correspondant à des concentrations de 40 à 5 ppm d’amphidinol 18. Le produit selon l’invention à 0,25 g/L a été aussi testée dans les mêmes conditions. Deux réplicas (rep1 et rep2) ont été réalisés. L’ensemble des données obtenues est donné en . Il a été mis en évidence que les concentrations de 40 et 20ppm d’AM18 ainsi que le produit selon l’invention (0,25 g/L) sont efficaces contre Saccharomyces cerevisiae . Exemple 8 : Détermination de la concentration minimale d’inhibition d’une fraction purifiée du produit selon l’invention sur la bactérie Acetobacter aceti La concentration minimale d’inhibition (CMI) du pic 0 décrit dans la a été déterminée pour Acetobacter aceti selon le protocole décrit en exemple 2 et . La DO550 nm à 0, 3 et 6 jours (T0, T3 et T6) a été mesurée après incubation à 28°C des levures à 10 5 ufc/mL en présence du milieu MRS seul (témoin négatif), du méthanol (MEtOH) ou en présence du pic 0 à une dilution de 1/32 à 1/256 correspondant à des concentrations de 40 à 5 ppm d’amphidinol 18. Le produit selon l’invention à 0,25 g/L a été aussi testée dans les mêmes conditions. Deux réplicas (rep1 et rep2) ont été réalisés. L’ensemble des données obtenues est donné en . Il a été mis en évidence que les concentrations 40, 20 et 10pp : d’AM18 ainsi que le produit selon l’invention (0,25 g/L) sont efficaces contre Acetobacter aceti. Exemple 9 : Etude de l’action antimicrobienne de la fraction purifiée du produit selon l’invention sur Brettanomyces bruxellensis et Saccharomyces cerevisiae dans le vin. Au temps T0, du vin non sulfité préalablement chauffé à 100°C pendant 5 min puis supplémenté de 20 g/L de glucose a été inoculé avec Brettanomyces bruxellensis , souche NL6293 ou NL6300, ou bien avec Saccharomyces cerevisiae à une concentration finale de 5.10 4 ufc/mL. Après 24h d’incubation à température ambiante et à l’obscurité (T1), 500 µL de ces échantillons ont été inoculés avec 1/32ème de milieu YPD (témoin négatif) ou 1/32ème de méthanol ou 1/32ème ou 1/64ème de la fraction purifiée pic 0 du produit selon l’invention. Ces échantillons sont mis à incuber à température ambiante et à l’obscurité sous agitation douce. Aux temps indiqués (T = 1 jour, T = 2 jours, T = 4 jours et T = 11 jours), 10 μL de chacun des échantillons sont prélevés afin de déterminer la quantité d’unité de levures formant des colonies (ufc) par comptage sur boite de Petri. Les données recueillies ont été disposés dans des figures 8A, 8B et 8C. La mesure logarithmique du nombre d’unité formant des colonies (log ufc/mL) de Brettanomyces bruxellensis NL6293 présents dans le vin à T = 1 jour, T = 2 jours, T = 4 jours et T = 11 jours après inoculation du vin avec Brettanomyces bruxellensis NL6293 pour les différentes conditions décrites est donnée en . En présence de milieu YPD (témoin négatif), la croissance d’ufc est en phase exponentielle à partir de T = 4 jours. En présence de méthanol la croissance d’ufc est en phase exponentielle à partir de T = 4 jours. En présence d’1/32ème de la fraction purifiée du produit selon l’invention, absence de croissance d’ufc, à T = 2 jours aucune ufc viable n’est détectée. En présence d’1/64ème de la fraction purifiée du produit selon l’invention, aucune ufc viable n’est détectée à T = 4 jours mais la croissance d’ufc viable devient détectable à T = 11 jours. En résumé, la fraction purifiée du produit selon l’invention est très efficace pour lutter contre Brettanomyces bruxellensis NL6293 dans le vin. La mesure logarithmique du nombre d’unité formant des colonies (log ufc/mL) de Brettanomyces bruxellensis NL6300 présents dans le vin à T = 1 jour, T = 2 jours, T = 4 jours et T = 11 jours après inoculation du vin avec Brettanomyces bruxellensis NL6300 pour les différentes conditions décrites est donnée en . En présence de milieu YPD (témoin négatif), la croissance d’ufc est en phase exponentielle à partir de T = 4 jours. En présence de méthanol la croissance d’ufc est en phase exponentielle à partir de T = 4 jours. En présence d’1/32ème de la fraction purifiée du produit selon l’invention, absence de croissance d’ufc, à T = 2 jours aucune ufc viable n’est détectée. En présence d’1/64ème de la fraction purifiée du produit selon l’invention, aucune ufc viable n’est détectée à T = 4 jours mais la croissance d’ufc viable devient détectable à T = 11 jours. En résumé, la fraction purifiée du produit selon l’invention est très efficace pour lutter contre Brettanomyces bruxellensis NL6300 dans le vin. La mesure logarithmique du nombre d’unité formant des colonies (log ufc/mL) de Saccharomyces cerevisiae présents dans le vin à T = 1 jour, T = 2 jours, T = 4 jours et T = 11 jours après inoculation du vin avec Saccharomyces cerevisiae pour les différentes conditions décrites est donnée en . En présence de milieu YPD (témoin négatif), la croissance d’ufc est très forte à partir de T = 2 jours. En présence de méthanol la croissance d’ufc est en croissance à partir de T = 2 jours. En présence d’1/32ème de la fraction purifiée du produit selon l’invention, absence de croissance d’ufc, et à T = 4 jours aucune ufc viable n’est détectée. En présence d’1/64ème de la fraction purifiée du produit selon l’invention, les ufc sont stabilisées jusqu’à T = 4 jours. En résumé, la fraction purifiée du produit selon l’invention est très efficace pour lutter contre Saccharomyces cerevisiae dans le vin. Exemple 10 : Etude de la cinétique de dégradation de l’amphidinol 18 dans le vin. Différentes doses du produit selon l’invention, contenant de 60 ppm à 480 ppm d’amphidinol 18 ont été inoculés dans le vin. La quantité d’amphidinol 18 a été déterminée par dosage HPLC au cours du temps, jusqu’au jour 44 (T44). Le pourcentage d’amphidinol 18 par rapport à la dose initiale a ainsi été évalué au cours du temps. Ces résultats sont décrits aux figures 9A et 9B. Cet exemple montre que l’amphidinol 18 se dégrade de manière constante dans le vin. Au bout de 44 jours dans le vin, on retrouve des quantités d’amphidinol similaire et ce indépendamment de la concentration initiale. Exemple 11 : Etude de l’activité levuricide d’un produit selon l’invention dans le vin. Un vin naturel contenant des levures a été traité soit avec le produit selon l’invention comprenant 10 ppm d’amphidinol 18 (AM18), soit avec une dose commerciale de chitosan. Un témoin non traité (TNT) a également été réalisé. Le comptage des levures et des bactéries présentes dans chaque condition a été effectué par observation en épifluorescence avant le traitement (J0) et 3j après le traitement (J3). Les résultats de cet exemple sont illustrés à la . On peut observer que le produit selon l’invention comprenant l’amphidinol 18 présente une meilleure efficacité bactéricide et levuricide que le chitosan après 3 jours de traitement. Exemple 12 : Etude de l’activité du produit selon l’invention pour contrôler et/ou limiter la croissance des levures appartenant au genre brettanomyces dans des conditions de pH acides. Les souches de B rettanomyces (NL6293 et NL6200) à une concentration de 2,5 10 5 cfu/mL ont été incubées en présence d’une gamme de concentration du produit selon l’invention dans un milieu YPD à différents pH. Une concentration minimum de produit selon l’invention induisant 100% d’inhibition (CMI) des levures a pu être déterminée dans chaque condition. Brettanomyces CMI pH 3.7 pH 4.0 pH 6.5 NL6293 0.03 0.015 0.015 NL6200 0.03 0.03 0.03 Ces résultats indiquent que le produit selon l’invention conserve sa capacité à contrôler et/ou limiter la croissance des levures appartenant au genre B rettanomyces à pH acide. Utilisation dans une boisson alcoolisée, d’un produit comprenant au moins un amphidinol. Utilisation selon la précédente revendication, comme substitut aux sulfites. Utilisation selon l’une des précédentes revendications, caractérisée en ce que la boisson alcoolisée présente un pH inférieur à 7, préférentiellement inférieur à 4. Utilisation selon l’une des précédentes revendications, caractérisée en ce que la boisson alcoolisée comprend au moins 1% d’alcool éthylique, préférentiellement au moins 4%. Utilisation selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce que le produit comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1 à 19, l’amphidinol 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Utilisation selon l’une des précédentes revendications, caractérisée en ce que la boisson alcoolisée est une boisson obtenue par fermentation alcoolique. Utilisation selon la précédente revendication, caractérisée en ce que la boisson alcoolisée est choisie parmi le vin, le cidre et la bière. Utilisation selon l’une des précédentes revendications, dans une boisson alcoolisée comme bactéricide, levuricide et/ou antioxydant. Utilisation selon l’une des précédentes revendications, dans une boisson alcoolisée pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins une levure d’un genre choisi parmi Brettanomyces, Hansaenula, Saccharomyces, Hanseniaspora, Pichia, Candida , Kloeckera et leurs combinaisons. Utilisation selon l’une des précédentes revendications, dans une boisson alcoolisée, pour contrôler et/ou limiter la croissance des levures appartenant au genre B rettanomyces , préférentiellement au moins des levures Brettanomyces bruxellensis . Utilisation selon l’une des précédentes revendications, dans une boisson alcoolisée, pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins une bactérie d’un genre choisi parmi Gluconobacter , Acetobacter, Oenococcus, Lactobacillus, Pediococcus, Pectinatus, Megasphaera , Citrobacter, Enterobacter, Obesumbacterium, Klebsiella, Proteus, Serratia, Zymomonas . Utilisation selon l’une des précédentes revendications, caractérisée en ce que le produit se présente sous forme de poudre ou sous forme liquide. Produit destiné à être utilisé dans des boissons alcoolisées, comprenant au moins un amphidinol. Produit selon la précédente revendication, caractérisé en ce qu’il comprend au moins un amphidinol parmi l’amphidinol 1 à 19, l’amphidinol 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Produit selon l’une des revendications 13 ou 14, caractérisé en ce qu’il s’agit d’un extrait cellulaire d’une ou plusieurs micro-algue(s) du genre Amphidinium . Produit selon la précédente revendication, caractérisé en ce que ladite micro-algue de genre Amphidinium est Amphidinium carterae. Produit selon l’une des revendications 13 à 16, caractérisé en ce qu’il ne comprend pas de carteraol. Procédé de fabrication d’une boisson alcoolisée, comprenant au moins une étape d’ajout d’au moins un amphidinol dans la boisson. Procédé selon la précédente revendication, caractérisé en ce que la boisson alcoolisée est choisie parmi le vin, le cidre et la bière. Procédé selon l’une des revendications 18 ou 19, comprenant une étape d’ajout d’au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1 à 19, l’amphidinol 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Procédé selon l’une des revendications 18 à 20, caractérisé en ce qu’il comprend une étape d’ajout d’au moins un produit selon l’une des revendications 13 à 17 Boisson alcoolisée comprenant au moins un amphidinol. Boisson alcoolisée selon la précédente revendication, caractérisée en ce qu’elle comprend au moins un amphidinol choisi parmi l’amphidinol 1 à 19, l’amphidinol 22, l’amphidinol A et leurs mélanges. Boisson alcoolisée selon la précédente revendication, caractérisée en ce qu’elle ne comprenant pas de sulfites ajoutés. Utilisation d’au moins un amphidinol dans une boisson alcoolisée pour contrôler et/ou limiter la croissance d’au moins un microorganisme indésirable.