Brevet FR3142656A1 — publié le 20240607

L’invention concerne une formulation comprenant au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, pour utilisation dans la stimulation de la biosynthèse des glycosaminoglycannes, de préférence au moins un choisi parmi l’héparane sulfate, le dermatane sulfate et la chondroïtines sulfate, chez un patient humain, en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g dudit composé. De manière préférée, ladite formulation est pour utilisation dans la prévention ou le traitement des infections aux virus utilisant les syndécanes et/ou glypicanes comme récepteurs cellulaire, tels le SARS-CoV2 ou du VIH, ou dans la prévention ou le traitement du diabète de type 2 ou de l’insulinorésistance. L’invention concerne également l’utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale chez le sujet sain pour stimuler la biosynthèse de glycosaminoglycannes. D-xylose dans la prévention ou le traitement du COVID19, du VIH et du diabète L’invention concerne une formulation comprenant au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, pour utilisation dans la stimulation de la biosynthèse des glycosaminoglycannes, de préférence au moins un choisi parmi l’héparane sulfate, le dermatane sulfate et la chondroïtines sulfate, chez un patient humain, en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g dudit composé. De manière préférée, ladite formulation est pour utilisation dans la prévention ou le traitement des infections aux virus utilisant les syndécanes et/ou glypicanes comme récepteurs cellulaire, tels le SARS-CoV2 ou du VIH, ou dans la prévention ou le traitement du diabète de type 2 ou de l’insulinorésistance. L’invention concerne également l’utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale chez le sujet sain pour stimuler la biosynthèse de glycosaminoglycannes. Art Antérieur La pandémie de SRAS-Cov-2 qui touche actuellement le monde entier s'est révélée particulièrement dangereuse chez les personnes âgées et chez les fumeurs, avec notamment une forte comorbidité chez les patients souffrant déjà de maladies chroniques, telles que le diabète de type 2, les cas de cancer, les maladies respiratoires chroniques, l'obésité et l'hypertension. En parallèle, plusieurs études ont montré que l'inflammation des poumons en général et le diabète de type 2 s'accompagnent d'une dégradation des glycosaminoglycanes (GAG), notamment de l'héparane sulfate (HS). Plusieurs études ont également montré l'importance de contrer la dégradation des HS dans les infections pulmonaires et le diabète de type 2. Le D-xylose est seulement disponible sur le marché pour la réalisation du test au D-xylose, lors duquel cette molécule est ingérée par voie orale pour mesurer l’absorption intestinale chez les patients. Aucune autre utilisation médicamenteuse n’est rapportée à ce jour. Seulement deux familles de brevets ont été consacrées à son utilisation dans le domaine cosmétique / pharmaceutique : la famille WO1999024009A1 de 1999 pour son utilisation dans les produits cosmétiques et la famille WO1999048361A1 de 1998 dans le traitement des pathologies des voies respiratoires supérieures. Ces deux familles de brevets ne font cependant pas mention des propriétés antivirales caractérisées par le Demandeur. Plusieurs études in vitro portant sur le SARS-CoV-2 ont montré l’implication des GAG, plus précisément des HS, lors de l’attachement virale. En outre, l’implication des HS sur l’attachement viral de plus d’une dizaine de virus à enveloppe ont été reportés dans la littérature (voir Cheudjeu, 2021). Concernant cette implication, les conclusions issues d’éminents laboratoires reconnus du domaine après des études in vitro sur l’interaction entre le SARS-CoV-2 et les GAG, ont été que « les HS favorisent l’infection » (Claussen, T.M, 2020), arrivant à ce consensus. On peut notamment citer l’étude réalisée par une équipe de chercheurs chinois, qui ont confirmés qu’il y avait bien une corrélation de la sévérité du COVID-19 avec le D-xylose (Zhong et al, 2021). Mais ceux-ci ont conclu que la suggestion d’utiliser le D-xylose comme médicament contre la COVID-19 n’était pas supportée par leurs données. Ainsi, la formulation développée par le Demandeur va en sens opposé au consensus abordé par l’ensemble du milieu scientifique spécialiste du domaine, et montre néanmoins des résultats probants, comme présentés dans les exemples. En complément, cependant, la prise de D-xylose dans les tests d’absorption est généralement associée à des effets secondaires tels que des effets laxatifs chez les personnes adultes, diarrhée, nausée et vomissement. Pour ces raisons, il ne paraît pas envisageable pour un Homme du métier de développer une telle composition dans les indications énoncées dans l’invention. En outre, aucune posologie permettant de limiter ces effets secondaires n’est divulguée dans l’état de la technique. De manière surprenante, le Demandeur a pu ainsi développer une formulation à base de D-xylose ou d’un de ses dérivés, permettant d’agir sur les virus utilisant les syndécanes et/ou glypicanes comme récepteurs cellulaires, en résolvant le problème technique supplémentaire de limiter les effets secondaires associés au D-xylose ou à ses dérivés. L’invention concerne ainsi plus précisément de nouvelles utilisations du D-xylose ou de produits dérivés ou contenant du D-xylose pour stimuler la biosynthèse des glycosaminoglycannes ayant le D-xylose comme molécule initiatrice de leur chaînes (héparanes sulfates, dermatane sulfates, chondroïtines sulfates) et en réduisant les effets secondaires associés à son utilisation. Les nouvelles utilisations concernent la prévention ou le traitement d’infection aux virus utilisant les syndécanes et/ou glypicanes comme récepteurs cellulaire. L’invention décrit ainsi des utilisations du D-xylose, de ses dérivés ou de produits contenant du D-xylose, rendue possibles par l’application d’une posologie efficace permettant de limiter les effets secondaires de son utilisation pour un patient ou un consommateur. Le concept inventif commun dans le cadre de cette invention est l’utilisation d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, pour augmenter la synthèse des glycosaminoglycanes, chez un humain sain, ou un patient en prévision ou atteint d’infections aux virus utilisant les syndécanes et/ou glypicanes comme récepteurs cellulaire, de préférence ledit virus étant choisi parmi HSV-1, HSV-2, HPV-16, HPV-31, HVB, HVC, HIV-1, HTLV-1, SARS-CoV-2, HCMV, DENV-1, et DENV-2, dans le traitement du COVID-19, du SIDA, du diabète de type 2 ou de l’insulinoresistance. L’utilisation de ces composés est réalisée de manière à limiter les effets secondaires de son utilisation pour un patient ou un consommateur. Description de l’invention Selon un premier aspect, l’invention concerne une formulation comprenant au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, dans un milieu physiologiquement acceptable pour utilisation chez un patient humain dans la stimulation de la biosynthèse des glycosaminoglycannes. Le mécanisme d’action attenant à cette formulation est d’empêcher, grâce à l’administration du D-xylose ou un de ses dérivés, la réplication du virus, et ainsi diminuer les symptômes et marqueurs biologiques associées à la sévérité de l’infection virale, notamment, la toux, inflammation, etc…. Rendant bénigne l’infection (asymptomatique). Après administration de D-xylose ou d’un de ses dérivés, ce dernier entre en compétition avec la charge virale en se liant à la protéine centrale avant les virus, pour initier la production des glycosaminoglycannes (l’héparane sulfate, le dermatane sulfate et la chondroïtine sulfate). De manière préférée, l’invention concerne une formulation comprenant entre 500 mg et 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, dans un milieu physiologiquement acceptable, pour utilisation chez un patient humain dans la stimulation de la biosynthèse des glycosaminoglycannes. De manière préférée, l’invention concerne une formulation comprenant au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, pour utilisation chez un patient humain dans la stimulation de la biosynthèse des glycosaminoglycannes en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g dudit au moins un composé dans un milieu physiologiquement acceptable. La prise en petites doses permet de réduire les effets secondaires, notamment les effets laxatifs, la nausée et vomissement. De manière préférée, la biosynthèse des glycosaminoglycanes est augmentée d’au moins 1%, de préférence d’au moins 5%, de préférence d’au moins 10%, de préférence d’au moins 20%, de préférence d’au moins 30%, de préférence d’au moins 40%, de préférence d’au moins 50%, de préférence d’au moins 60%, de préférence d’au moins 70%, de préférence d’au moins 80%, de préférence d’au moins 90%, de préférence d’au moins 100%, de préférence d’au moins 150%, de préférence d’au moins 200%, de préférence d’au moins 500%, de préférence d’au moins 1000%. De manière préférée, ledit glycosaminoglycanne est un glycosaminoglycanne sulfaté. De manière préférée, ledit glycosaminoglycannes est au moins un choisi parmi l’héparane sulfate, le dermatane sulfate et la chondroïtine sulfate. Selon un mode de réalisation, ladite formulation est pour utilisation dans la prévention ou le traitement d’infection aux virus utilisant les syndécanes et/ou glypicanes comme récepteurs cellulaire, de préférence ledit virus étant choisi parmi HSV-1, HSV-2, HPV-16, HPV-31, HVB, HVC, HIV-1, HTLV-1, SARS-CoV-2, HCMV, DENV-1, et DENV-2. De manière encore plus préférée, ladite formulation est pour utilisation dans la prévention ou le traitement de l’infection au SARS-CoV-2. De manière encore plus préférée, ladite formulation est pour utilisation dans la prévention ou le traitement de l’infection au HIV-1. Selon un mode de réalisation, ladite formulation est pour utilisation dans la prévention ou le traitement du COVID-19. Selon un mode de réalisation, ladite formulation est pour utilisation dans la prévention ou le traitement du diabète de type 2. Selon un mode de réalisation, ladite formulation est pour utilisation dans la prévention ou le traitement de l’insulinorésistance. Selon un mode de réalisation, le nombre d’administration par jour est de 1. De manière préférée, le nombre d’administration par jour est compris entre 2 et 10 administrations. De manière encore plus préférée, le nombre d’administration par jour est de 2, ou 3, ou 4, ou 5, ou 6, ou 7, ou 8, ou 9, ou 10. Le nombre d’administration par jour peut être augmenté en fonction du risque de développer la pathologie, ou en fonction de sa sévérité. De manière préférée, ladite formulation pour utilisation selon l’invention est sous une forme adaptée pour une administration par voie orale, par voie nasale ou par voie parentérale. De manière préférée, la composition est sous une forme adaptée pour une administration parentérale par voie sous-cutanée, intradermique, intraveineuse ou intramusculaire. De manière préférée, la composition pour l’administration orale est formulée sous forme de capsules, de gélules, de comprimés, de comprimés effervescents, de poudres, de granules, de solutions orales ou des suspensions. De manière préférée, la composition pour l’administration nasale est formulée sous forme de solution sous forme d’aérosol. De manière préférée, la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie orale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides. De manière préférée, la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie orale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g de D-xylose. De manière préférée, la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie parentérale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 1 g à 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides. De manière préférée, la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie parentérale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 1 g à 10 g de D-xylose. De manière préférée, la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie nasale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides. De manière préférée, la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie nasale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g de D-xylose. De manière préférée, ledit au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, est du d-xylose. Selon un mode de réalisation, le D-xylose est présent dans la composition sous forme d’extraits végétaux comprenant du D-xylose. Dans une alternative, lesdits extraits végétaux sont choisis parmi des extraits de chèvrefeuille, de chèvrefeuille du Japon, de chiretta verte, d’algues rouges, de liseron d'eau, de feuille, d'écorce ou de sève de bouleau, d’une espèce du genre Artemisia, de tige de riz. Dans une autre alternative, le D-xylose est dérivé de lignocellulose de matières végétales. De manière préférée, le D-xylose est apporté sous forme d’hydrolysats d’hémicellulose de tiges de maïs. Selon un mode de réalisation, la composition comprend en outre au moins un autre ingrédient pharmaceutique actif acceptable et/ou au moins un excipient et/ou au moins un support pharmaceutique acceptable et/ou tout composé pharmaceutiquement acceptable. De manière préférée, ledit au moins un autre ingrédient pharmaceutique est un actif antiviral. De manière préférée, ledit au moins un autre ingrédient pharmaceutique est un actif permettant la prévention ou le traitement du COVID-19. De manière préférée, ledit au moins un autre ingrédient pharmaceutique est un actif permettant la prévention ou le traitement du diabète de type 2. De manière préférée, ledit au moins un autre ingrédient pharmaceutique est un actif permettant la prévention ou le traitement de l’insulinorésistance. De manière préférée, la composition comprend en outre un actif permettant d’accélérer le transfert dudit au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, de préférence le D-xylose, vers les cellules, de préférence ledit actif étant de l’insuline. Selon un mode de réalisation de l’invention, la formulation selon l’invention comprend également au moins un antibiotique. Selon un mode de réalisation de l’invention, la formulation selon l’invention comprend une hormone accélérant le transport du D-xylose ou de ses dérivés dans la cellule, à l’instar de l’insuline ou également toutes enzymes pharmaceutiquement acceptable facilitant le transport du D-xylose dans la cellule, par exemple les xylose transporteurs. Selon un mode de réalisation de l’invention, la composition selon l’invention comprend également un composé permettant de réduire au moins un effet secondaire de la prise de D-xylose, de préférence un composé permettant de réduire les vomissements ou la diarrhée. Selon un mode de réalisation de l’invention, la composition selon l’invention comprend également de la Vitamine C. Selon un deuxième aspect, l’invention concerne l’utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale chez le sujet sain comprenant au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides dans un milieu physiologiquement acceptable pour stimuler la biosynthèse de glycosaminoglycannes. De manière préférée, ledit glycosaminoglycanne est un glycosaminoglycanne sulfaté. De manière préférée, ledit glycosaminoglycannes est au moins un choisi parmi l’héparane sulfate, le dermatane sulfate et la chondroïtine sulfate. De manière préférée, l’invention concerne l’utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale chez le sujet sain comprenant entre 500 mg et 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, dans un milieu physiologiquement acceptable, dans la stimulation de la biosynthèse des glycosaminoglycannes. De manière préférée, ledit glycosaminoglycanne est un glycosaminoglycanne sulfaté. De manière préférée, ledit glycosaminoglycannes est au moins un choisi parmi l’héparane sulfate, le dermatane sulfate et la chondroïtine sulfate. De manière préférée, ledit au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, est du d-xylose. De manière préférée, la composition de complément alimentaire est sous une forme adaptée pour une administration par voie orale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides De manière préférée, la composition de complément alimentaire est sous une forme adaptée pour une administration par voie orale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g de D-xylose. De manière préférée, la composition de complément alimentaire est sous une forme adaptée pour une administration par voie nasale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides. De manière préférée, la composition de complément alimentaire est sous une forme adaptée pour une administration par voie nasale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g de D-xylose. De manière préférée, la biosynthèse des glycosaminoglycanes est augmentée d’au moins 1%, de préférence d’au moins 5%, de préférence d’au moins 10%, de préférence d’au moins 20%, de préférence d’au moins 30%, de préférence d’au moins 40%, de préférence d’au moins 50%, de préférence d’au moins 60%, de préférence d’au moins 70%, de préférence d’au moins 80%, de préférence d’au moins 90%, de préférence d’au moins 100%, de préférence d’au moins 150%, de préférence d’au moins 200%, de préférence d’au moins 500%, de préférence d’au moins 1000%. Selon un mode de réalisation, le complément alimentaire est formulé pour la prise orale sous forme de capsules, de gélules, de comprimés, de comprimés effervescents, de poudres, de granules, de solutions orales ou des suspensions. De manière préférée, le complément alimentaire pour administration nasale est formulé sous forme de solution sous forme d’aérosol. Selon un mode de réalisation, le complément alimentaire est formulé pour la prise orale dans un produit alimentaire, une boisson, un additif alimentaire ou un produit laitier, contenant ledit complément alimentaire. Selon un mode de réalisation, le nombre d’administration par jour est de 1. De manière préférée, le nombre d’administration par jour est compris entre 2 et 10 administrations. De manière encore plus préférée, le nombre d’administration par jour est de 2, ou 3, ou 4, ou 5, ou 6, ou 7, ou 8, ou 9, ou 10. Le nombre d’administration par jour peut être augmenté en fonction de la volonté du consommateur. De manière préférée, le D-xylose est présent dans la composition de complément alimentaire sous forme d’extraits végétaux comprenant du D-xylose. Dans une alternative, lesdits extraits végétaux sont choisis parmi des extraits de chèvrefeuille, de chèvrefeuille du Japon, de chiretta verte, d’algues rouges, de liseron d'eau, de feuille, d'écorce ou de sève de bouleau, d’une espèce du genre Artemisia, de tige de riz. Dans une autre alternative, le D-xylose est dérivé de lignocellulose de matières végétales. De manière préférée, le D-xylose est apporté sous forme d’hydrolysats d’hémicellulose de tiges de maïs. Selon un mode de réalisation de l’invention, la composition de complément alimentaire selon l’invention comprend également de la Vitamine C. Selon un mode de réalisation de l’invention, la composition de complément alimentaire selon l’invention comprend également du galactose. Selon un troisième aspect, l’invention concerne une méthode thérapeutique pour stimuler la biosynthèse des glycosaminoglycannes comprenant l’administration à un patient humain d’entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides dans un milieu physiologiquement acceptable. De manière préférée, ledit glycosaminoglycanne est un glycosaminoglycanne sulfaté. De manière préférée dans cette méthode thérapeutique, ledit glycosaminoglycannes est au moins un choisi parmi l’héparane sulfate, le dermatane sulfate et la chondroïtine sulfate. De manière préférée, ledit au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, est du d-xylose. De manière préférée, la biosynthèse des glycosaminoglycanes est augmentée d’au moins 1%, de préférence d’au moins 5%, de préférence d’au moins 10%, de préférence d’au moins 20%, de préférence d’au moins 30%, de préférence d’au moins 40%, de préférence d’au moins 50%, de préférence d’au moins 60%, de préférence d’au moins 70%, de préférence d’au moins 80%, de préférence d’au moins 90%, de préférence d’au moins 100%, de préférence d’au moins 150%, de préférence d’au moins 200%, de préférence d’au moins 500%, de préférence d’au moins 1000%. Selon un mode de réalisation de cette méthode thérapeutique, ladite formulation est pour utilisation dans la prévention ou le traitement d’infection aux virus utilisant les syndécanes et/ou glypicanes comme récepteurs cellulaire, de préférence ledit virus étant choisi parmi HSV-1, HSV-2, HPV-16, HPV-31, HVB, HVC, HIV-1, HTLV-1, SARS-CoV-2, HCMV, DENV-1, et DENV-2. De manière encore plus préférée dans cette méthode thérapeutique, ladite formulation est pour utilisation dans la prévention ou le traitement de l’infection au SARS-CoV-2. De manière encore plus préférée dans cette méthode thérapeutique, ladite formulation est pour utilisation dans la prévention ou le traitement de l’infection au HIV-1. Selon un mode de réalisation, cette méthode thérapeutique est dans la prévention ou le traitement du COVID-19. Selon un mode de réalisation, cette méthode thérapeutique est dans la prévention ou le traitement du diabète de type 2. Selon un mode de réalisation, cette méthode thérapeutique est dans la prévention ou le traitement de l’insulinorésistance. De manière préférée, le nombre d’administration par jour est compris entre 2 et 10 administrations. De manière encore plus préférée, le nombre d’administration par jour est de 2, ou 3, ou 4, ou 5, ou 6, ou 7, ou 8, ou 9, ou 10. Le nombre d’administration par jour peut être augmenté en fonction du risque de développer la pathologie, ou en fonction de sa sévérité. De manière préférée, le D-xylose est présent dans la composition sous forme d’extraits végétaux comprenant du D-xylose. De manière préférée dans cette méthode thérapeutique, ladite composition selon l’invention est sous une forme adaptée pour une administration par voie orale, par voie nasale ou par voie parentérale. De manière préférée dans cette méthode thérapeutique, la composition est sous une forme adaptée pour une administration parentérale par voie sous-cutanée, intradermique, intraveineuse ou intramusculaire. De manière préférée dans cette méthode thérapeutique, la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie orale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides. De manière préférée dans cette méthode thérapeutique, la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie orale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g de D-xylose. De manière préférée dans cette méthode thérapeutique, la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie parentérale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 1 g à 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides. De manière préférée dans cette méthode thérapeutique, la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie parentérale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 1 g à 10 g de D-xylose. De manière préférée dans cette méthode thérapeutique, la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie nasale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides. De manière préférée, la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie nasale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g de D-xylose. Dans une alternative, lesdits extraits végétaux sont choisis parmi des extraits de chèvrefeuille, de chèvrefeuille du Japon, de chiretta verte, d’algues rouges, de liseron d'eau, de feuille, d'écorce ou de sève de bouleau, d’une espèce du genre Artemisia, de tige de riz. Dans une autre alternative, le D-xylose est dérivé de lignocellulose de matières végétales. De manière préférée, le D-xylose est apporté sous forme d’hydrolysats d’hémicellulose de tiges de maïs. De manière préférée, la composition comprend en outre un actif permettant d’accélérer le transfert dudit au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, de préférence le D-xylose, vers les cellules, de préférence ledit actif étant de l’insuline. Selon un mode de réalisation de l’invention, la composition selon l’invention comprend également au moins un antibiotique. Selon un mode de réalisation de l’invention, la formulation selon l’invention comprend une hormone accélérant le transport du D-xylose ou de ses dérivés dans la cellule, à l’instar de l’insuline ou également toutes enzymes pharmaceutiquement acceptable facilitant le transport du D-xylose dans la cellule, par exemple les xylose transporteurs. Selon un mode de réalisation de l’invention, la composition selon l’invention comprend également un composé permettant de réduire au moins un effet secondaire de la prise de D-xylose, de préférence un composé permettant de réduire les vomissements ou la diarrhée. Selon un mode de réalisation de l’invention, la composition selon l’invention comprend également de la Vitamine C. Selon un quatrième aspect, l’invention concerne l’utilisation d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, dans un milieu physiologiquement acceptable pour la préparation d’un médicament utilisé pour la stimulation de la biosynthèse de glycosaminoglycannes sur un patient humain. De manière préférée, l’invention concerne l’utilisation d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, pour la préparation d’un médicament utilisé pour la stimulation de la biosynthèse de glycosaminoglycannes sur une patient humain, et dans laquelle la quantité d’administration dudit au moins un composé est d’entre 500 mg et 10g dans un milieu physiologiquement acceptable par administration , le nombre d’administration par jour étant compris entre 1 et 10 administrations. De manière préférée, ledit glycosaminoglycanne est un glycosaminoglycanne sulfaté. De manière préférée, ledit glycosaminoglycannes est au moins un choisi parmi l’héparane sulfate, le dermatane sulfate et la chondroïtine sulfate. De manière préférée, ledit au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, est du d-xylose. Selon un mode de réalisation, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament dans la prévention ou le traitement d’infection aux virus utilisant les syndécanes et/ou glypicanes comme récepteurs cellulaire, de préférence ledit virus étant choisi parmi HSV-1, HSV-2, HPV-16, HPV-31, HVB, HVC, HIV-1, HTLV-1, SARS-CoV-2, HCMV, DENV-1, et DENV-2. Selon un mode de réalisation, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament dans la prévention ou le traitement de l’infection au SARS-CoV-2. Selon un mode de réalisation, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament dans la prévention ou le traitement de l’infection au HIV-1. Selon un mode de réalisation, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament dans la prévention ou le traitement du COVID-19. Selon un mode de réalisation, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament dans la prévention ou le traitement du diabète de type 2. Selon un mode de réalisation, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament dans la prévention ou le traitement de l’insulinorésistance. De manière préférée, la biosynthèse des glycosaminoglycanes est augmentée d’au moins 1%, de préférence d’au moins 5%, de préférence d’au moins 10%, de préférence d’au moins 20%, de préférence d’au moins 30%, de préférence d’au moins 40%, de préférence d’au moins 50%, de préférence d’au moins 60%, de préférence d’au moins 70%, de préférence d’au moins 80%, de préférence d’au moins 90%, de préférence d’au moins 100%, de préférence d’au moins 150%, de préférence d’au moins 200%, de préférence d’au moins 500%, de préférence d’au moins 1000%. De manière préférée, le nombre d’administration par jour est compris entre 2 et 10 administrations. De manière encore plus préférée, le nombre d’administration par jour est de 2, ou 3, ou 4, ou 5, ou 6, ou 7, ou 8, ou 9, ou 10. Le nombre d’administration par jour peut être augmenté en fonction du risque de développer la pathologie, ou en fonction de sa sévérité. Selon un mode de réalisation, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament sous une forme adaptée pour une administration par voie orale, par voie nasale ou par voie parentérale. De manière préférée, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament sous une forme adaptée pour une administration parentérale par voie sous-cutanée, intradermique, intraveineuse ou intramusculaire. De manière préférée, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament pour administration orale sous forme de capsules, de gélules, de comprimés, de comprimés effervescents, de poudres, de granules, de solutions orales ou des suspensions. De manière préférée, la composition pour l’administration nasale est formulée sous forme de solution sous forme d’aérosol. De manière préférée, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament pour administration orale, dont l’administration est réalisée en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides. De manière préférée, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament pour administration orale, dont l’administration est réalisée en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g de D-xylose. De manière préférée, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament pour administration par voie parentérale, dont l’administration est réalisée en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 1 g à 10 g de d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, De manière préférée, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament pour administration par voie parentérale, dont l’administration est réalisée en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 1 g à 10 g de D-xylose. De manière préférée, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament pour administration par voie nasale, dont l’administration est réalisée en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g d’au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides. De manière préférée, ladite utilisation concerne la préparation d’un médicament pour administration par voie nasale, dont l’administration est réalisée en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g de D-xylose. Selon un mode de réalisation, ledit médicament préparé sous forme de composition comprend en outre au moins un autre ingrédient pharmaceutique actif acceptable et/ou au moins un excipient et/ou au moins un support pharmaceutique acceptable et/ou tout composé pharmaceutiquement acceptable. De manière préférée, ledit au moins un autre ingrédient pharmaceutique est un actif antiviral. De manière préférée, ledit au moins un autre ingrédient pharmaceutique est un actif permettant la prévention ou le traitement du COVID-19. De manière préférée, ledit au moins un autre ingrédient pharmaceutique est un actif permettant la prévention ou le traitement du diabète de type 2. De manière préférée, ledit au moins un autre ingrédient pharmaceutique est un actif permettant la prévention ou le traitement de l’insulinorésistance. De manière préférée, le D-xylose est présent dans la composition sous forme d’extraits végétaux comprenant du D-xylose. Dans une alternative, lesdits extraits végétaux sont choisis parmi des extraits de chèvrefeuille, de chèvrefeuille du Japon, de chiretta verte, d’algues rouges, de liseron d'eau, de feuille, d'écorce ou de sève de bouleau, d’une espèce du genre Artemisia, de tige de riz . Dans une autre alternative, le D-xylose est dérivé de lignocellulose de matières végétales. De manière préférée, le D-xylose est apporté sous forme d’hydrolysats d’hémicellulose de tiges de maïs. Selon un mode de réalisation de l’invention, la composition selon l’invention comprend également l’ajout d’antibiotiques. Selon un mode de réalisation de l’invention, la composition comprend une hormone accélérant le transport du D-xylose ou de ses dérivés dans la cellule, à l’instar de l’insuline ou également toutes enzymes pharmaceutiquement acceptable facilitant le transport du D-xylose dans la cellule, par exemple les xylose transporteurs. Selon un mode de réalisation de l’invention, la composition selon l’invention comprend également un composé permettant de réduire au moins un effet secondaire de la prise de D-xylose, de préférence un composé permettant de réduire les vomissements ou la diarrhée. Selon un mode de réalisation de l’invention, la composition selon l’invention comprend également l’ajout de Vitamine C. De manière préférée, la composition comprend en outre un actif permettant d’accélérer le transfert dudit au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, de préférence le D-xylose, vers les cellules, de préférence ledit actif étant de l’insuline. Figures présente les résultats des concentrations IC50 pour les deux modes d’administrations : (1) Co-administration du D-xylose et le SARS-CoV-2, IC50=95.52 mM (2) Pré-incubation du D-xylose 6h avant l’infection par le SARS-CoV-2 IC50=26.22 mM. présente les résultats pour le remdesivir utilisé comme contrôle positif dans les tests antiviraux. présente les résultats du pourcentage d’inhibition du HIV-1 NL4-3 en fonction de la concentration du D-xylose seul avec calcul de la Concentration inhibitrice médiane (IC50) et la concentration cytotoxique médiane (TC50). présente les résultats du pourcentage d’inhibition du HIV-1 NL4-3 en fonction de la concentration du D-xylose + Insuline avec calcul de la Concentration inhibitrice médiane (IC50) et la concentration cytotoxique médiane (TC50). présente les résultats du pourcentage d’inhibition du HIV-1 NL4-3 en fonction de la concentration de AZT (utilisé comme contrôle) avec calcul de la Concentration inhibitrice médiane (IC50). présente les résultats du test d’immunofluorescence des plaques de 96 puits dans la même disposition comme montré dans la [Table 11] Définitions D-xylose et mécanisme d’action Le D-xylose est un pentose, présent sous la forme bioactive dans le corps humain, qui se retrouve également dans la nature, dans l’écorce du bois et dans certaines plantes. Cette molécule est approuvée notamment par la FDA dans le D-xylose test. Dans l’organisme, le D-xylose est utilisé au niveau des glycosaminoglycanes sulfatés (GAGs), qui sont de longues chaînes linéaires constituées d'unités répétitives disaccharidiques présentes dans la matrice extracellulaire (MEC), à la surface des cellules endothéliales, des cellules épithéliales, des fibroblastes, des macrophages et des hépatocytes (R.R. Vivès, Héparanes sulfate : structure, fonctions, régulation, 11 April 2020). Il existe cinq types de GAG sulfatés : les héparanes sulfates (HS), les héparines (Hep), les chondroïtines sulfates (CS), les dermatanes sulfates (DS) et les kératanes sulfates (KS). Les GAGs sulfatés sont liés à une protéine centrale (syndécans, glypicans, décorines, etc.) par une liaison covalente, formant ainsi des protéoglycanes (PG). Les principales protéines centrales des PG dans la matrice extracellulaire sont le perlécan (avec des chaînes de type HS), l'agrine (protéoglycane héparane sulfate [HSPG]), l'aggrécane (protéoglycane chondroïtine sulfate [CSPG]/protéoglycane dermatane sulfate [DSPG]) et la décorine. Les protéines membranaires centrales des PG sont classées en deux catégories : les syndécans et les glypicans. Les syndécanes sont des protéines transmembranaires, contrairement aux glypicans, qui sont des protéines entièrement extracellulaires (fixées sur la membrane cellulaire par un ancrage de type glycosyl-phosphatidyl inositol (GPI). Les PGs membranaires sont des HSPGs, CSPGs, et DSPGs, mais sont principalement des HSPGs. On trouve les HSPG à la surface de plusieurs types de cellules, comme les cellules endothéliales, les cellules épithéliales, les fibroblastes et les tissus neuronaux (R.R. Vivès, Héparanes sulfate : structure, fonctions, régulation, 11 April 2020 & S. Sarrazin, W.C. Lamanna, J.D. Esko, Heparan sulfate proteoglycans, Cold Spring Harb. Perspect. Biol. 3 (2011)) À l'exception du KS, tous les autres GAG sulfatés sont reliés aux protéines centrales par une région de liaison identique, constituée de la séquence trisaccharidique xylose-galactose-galactose. La biosynthèse de la chaîne HS (et également des chaînes CS, DS et Hep) commence par la fixation d'une molécule de D-xylose à des résidus sérine et occasionnellement thréonine spécifiques placés sur la protéine centrale (syndécan, glypican, décorine, etc.). Cette initiation de la biosynthèse des HS/CS/DS est réalisée soit par les enzymes xylosyltransférase 1 et xylosyltransférase 2 (R.R. Vivès, Héparanes sulfate : structure, fonctions, régulation, 11 April 2020 & S. Sarrazin, W.C. Lamanna, J.D. Esko, Heparan sulfate proteoglycans, Cold Spring Harb. Perspect. Biol. 3 (2011)) ou soit directement par les molécules libres (contrairement à l’UDP-Xyl) de D-xylose (Cheudjeu, 2022). Après la mise en place de la molécule de D-xylose, la liaison de deux molécules de galactose suit. La chaîne ainsi formée constitue la région de liaison. Celle-ci est ensuite complétée par une répétition de la même unité de base spécifique à chaque type de GAGs sulfatés (HS/CS/DS/Hep). L'unité de base du HS est un acide D-glucuronique lié à la N-acétylglucosamine. L'unité de base du CS est une N-acétylgalactosamine liée à un acide D-glucuronique. L'acide hyaluronique est le seul GAG non sulfaté ; ce type de glycosaminoglycane n'est pas lié à une protéine centrale. Les disaccharides qui le composent sont eux-mêmes constitués d'acide D-glucuronique et de D-N-acétylglucosamine (R.R. Vivès, Héparanes sulfate: structure, fonctions, régulation, 11 April 2020). Les HSPGs sont rapidement recyclées et renouvelées à la surface de la cellule ; leur demi-vie est d'environ 2-3 h (M. Egeberg, R. Kjeken, S.O. Kolset, T. Berg, K. Prydz, Internalization and stepwise degradation of heparan sulfate proteoglycans in rat hepatocytes, Biochim. Biophys. Acta 1541 (2001) 135–149). La dégradation des HSPGs à la surface des cellules dépend de l'action de plusieurs enzymes extracellulaires et lysosomales, et en particulier de l'héparanase qui clive les chaînes HS (R.R. Vivès, Héparanes sulfate: structure, fonctions, régulation, 11 April 2020 & S. Sarrazin, W.C. Lamanna, J.D. Esko, Heparan sulfate proteoglycans, Cold Spring Harb. Perspect. Biol. 3 (2011)). Le D-xylose est donc l'élément liant ces GAGs aux protéines centrales et ne possède qu'une seule position. Ce rôle du D-xylose dans la bio-synthèse des HS/CS/DS/Hep indique que la quantité de D-xylose dans l'organisme influence directement la quantité de ces GAGs présents dans cet organisme. Par « dérivés de D-xylose », sont entendus selon l’invention les esters de D-xylose, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides. Diabète de type 2 , insulinoresistance et mécanisme d’action Le diabète de type 2 (T2DM) est une maladie métabolique qui est souvent un des symptômes de certaines infections virales, comme c’est le cas pour le SARS-CoV-2, HIV-1, HVC… (Cheudjeu 2021). Plusieurs explications de l’apparition du T2DM lors d’infections virales ont été données, telles que : l’inflammation (tempête de cytokines) due à des infections qui causent des dommages aux cellules β du pancréas, conduisant à l’homéostasie de l’insuline. Cependant, si c’était la seule explication, la supplémentation en insuline serait suffisante définitivement, mais ce n’est pas toujours le cas. Cette incapacité de l’insuline à réduire la glycémie est appelée résistance à l’insuline (ou insulinoresistance) et est largement reporté lors des infections virales qui utilisent les core protéines comme récepteurs à la surface des cellules : SRAS-CoV-2 (Govender N et al,2021 : PMID: 33849817) , le HVC (Desai D.V et al, 2010 : https://doi.org/10.1096/fasebj.24.1_supplement.659.4 ), HIV-1 (Pedro M.N et al., 2018 : PMID: 30233499) etc…La résistance à l’insuline est également souvent observée chez certains patients obèses atteints de T2DM (Kahn, B.B., and Flier, J.S, 2000). La présente invention décrit pour la première fois comment la résistance à l’insuline est liée à la capacité du D-xylose à stimuler les GAG. La plupart des sucres constituant les chaînes des GAGS sont des métabolites du glucose (Cheudjeu 2022). En cas d'insuffisance de D-xylose dans l'organisme (ou dans le cas de certaines infections virales), l'une des premières conséquences est une augmentation de la glycémie. En effet, certains emplacements de sérine qui devraient être occupés par le d-xylose sur les protéines centrales (synde- cans, glypicans, etc.) pour initier la production de GAGs (HS/Hep/CS/ DS) sont libres en raison d'un manque de d-xylose (ou sont occupés en raison de la glycosylation des virus dans le cas de certaines infections virales), empêchant ainsi l'initiation de la biosynthèse des GAGs qui devrait avoir lieu à ces emplacements. Les sucres qui devraient être utilisés dans la production de ces GAGs (acide D-glu- curonique, galactose, N-acétylglucosamine, N-acétylgalactosamine) se trouvent dans la circulation sanguine (Cheudjeu 2020 ; Cheudjeu 2021 ; Cheudjeu 2022). Une étude de 2011 a montré que les GAG sulfatés étaient altérés au cours du diabète de type 2, avec des taux d'HS et de sulfates de chondroïtine et de dermatane (CS/ DS) diminués d'environ 14% (D. Joladarashi, P.V. Salimath, N.D. Chilkunda, Diabetes results in structural al- teration of chondroitin sulfate/dermatan sulfate in the rat kidney: effects on the binding to extracellular matrix components, Glycobiology 21 (2011) 960-972). Plusieurs autres études ont rapporté la dégradation des HS au cours du diabète (L.M. Hiebert, J. Han, A.K. Mandal, Glycosaminoglycans, hyperglycemia, and dis- ease, Antioxid. Redox Signal. 21 (2014) 1032-1043 & L.M. Hiebert, Proteoglycans and diabetes, Curr. Pharm. Des. 23 (2017) 1500-1509). Aussi, compte tenu de la demi-vie des GAGs à la surface de la cellule, qui est de 2-3 heures, cette dégradation contribue à l'origine des problèmes d'accumulation des chaînes de HS/CS/DS, sources de certaines maladies cardiovasculaires. D'autres études ont déjà montré que le taux de N-acétylglucosamine augmente au cours du diabète de type 2 et que la N-acétylglucosamine peut être utilisée comme biomarqueur du diabète de type 2 (Z. Wang, K. Park, F. Comer, L.C. Hsieh-Wilson, C.D. Saudek, G.W. Hart, Site- specific GlcNAcylation of human erythrocyte proteins: potential biomarker(s) for diabetes, Diabetes 58 (2009) 309-317, & L. Wells, K. Vosseller, G.W. Hart, A role for N-acetylglucosamine as a nutrient sensor and mediator of insulin resistance, Cell. Mol. Life Sci. 60 (2003) 222-228. Une autre conséquence est l'augmentation d'autres types de GAGs, comme l'acide hyaluronique (AH). En effet, l'acide hyaluronique non lié à une protéine centrale peut agir pour fixer l'excès de sucre non utilisé pour la synthèse de HS/CS/Hep/ DS. Une étude a montré que les niveaux d'acide hyaluronique pour le diabète de type 2 étaient plus élevés et que ces niveaux pouvaient être utilisés comme biomarqueur (S. Mine, Y. Okada, C. Kawahara, T. Tabata, Y. Tanaka, Serum hyaluronan con- centration as a marker of angiopathy in patients with diabetes mellitus, Endocr. J. 53 (2006) 761-766). Cette accumulation d'AH a déjà été rapportée dans le poumon dans le syndrome de détresse respiratoire de l'adulte, où elle est environ six fois plus élevée que chez les patients témoins (R. HaÃàllgren, T. Samuelsson, T.C. Laurent, J. Modig, Accumulation of hyaluronan (hyaluronic acid) in the lung in adult respiratory distress syndrome, Am. Rev. Respir. Dis. 139 (1989) 682-687). Une étude de 2010 a également montré qu'il existe une augmentation d'environ 66% de l'acide D-glucuronique dans le sang des personnes diabétiques par rapport aux personnes non diabétiques. Une autre conséquence est une diminution de l'activité des enzymes xylosyltransférases (XYLT1, XYLT2) due à la diminution des positions d'attachement des xyloses (causée par le manque de D-xylose ou par la glycosylation des virus à ces positions). En effet, Götting et al, dans une étude portant sur 100 patients diabétiques (Type 1 et Type 2) et 100 dons de sang de personnes non diabétiques, ont démontré que le sérum de xylosyltransférase des patients diabétiques était significativement plus faible que celui des patients non diabétiques. Ces chercheurs ont conclu que l'activité sérique de la xylosyltransférase pouvait être utilisée comme biomarqueur de la réduction de la biosynthèse des GAGs chez les diabétiques (C. Götting, J. Kuhn, K. Kleesiek, Serum xylosyltransferase activity in diabetic patients as a possible marker of reduced proteoglycan biosynthesis, Diabetes Care 31 (2008) 2018-2019). En outre, une étude réalisée sur des rats a montré qu'une telle variation de l'acivité de l'enzyme xylosyltransférase 2 induisait des lésions pulmonaires (R. Koslowski, U. Pfeil, H. Fehrenbach, M. Kasper, E. Skutelsky, K.W. Wenzel, Changes in xylosyltransferase activity and in proteoglycan deposition in bleo- mycin-induced lung injury in rat, Eur. Respir. J. 18 (2001) 347-356). Ceci confirme une fois de plus les propriétés anti-inflammatoires du D-xylose et fournit une explication du procédé conduisant à l'inflammation au cours du diabète (S. Tsalamandris, A.S. Antonopoulos, E. Oikonomou, G.A. Papamikroulis, G. Vogiatzi, S. Papaioannou, S. Deftereos, D. Tousoulis, The role of inflammation in diabetes: current concepts and future perspectives, Eur. Cardiol. 14 (2019) 50-59). Les propriétés antivirales du D-xylose confirmés par les essais effectués dans le cadre de la présente invention, viennent corroborer le binding-sites du SARS-CoV-2 virus utilisant les core protéines. Basé sur des études antérieures, Il a été expliqué pourquoi les propriétés anti-glycémique du D-xylose n’étaient pas liées à l’insuline, mais que l’inverse était possible. Vu que l’insuline augmente le taux de pénétration du D-xylose dans les cellules de deux à cinq fois, et à l’équilibre, en présence de l’insuline le xylose est présent à 80 % au lieu de 50 % à 55 % dans le cytosol, et 20 % dans le plasma (Kipnis, D.M, 1957). L’incapacité de l’insuline à réduire la glycémie est appelée résistance à l’insuline (ou insulinorésistance) et est largement rencontrée lors des infections virales des virus qui utilisent les protéines de base du protéoglycane (PG) comme récepteurs à la surface des cellules, comme le SRAS-CoV-2, lors du diabète en générale. La notion de résistance à l’insuline reflète ainsi une sous-estimation des capacités de stockage (poids) des GAG contenant du D-xylose par rapport aux capacités de stockage du glycogène hépatique. Lorsque le foie est rempli de glycogène et que le corps n’a pas suffisamment de molécules de D-xylose pour stimuler la thèse de biosynthèse de HS/CS/DS, toute supplémentation à l’insuline ne baisse plus la glycémie, résultant ainsi la situation connue sous le nom de résistance à l’insuline. En effet, dans cette condition, les GAGs n’agissent pas comme des « réservoirs » des métabolites du glucose, et puisque l’autre réservoir (le foie, où le glycogène est stocké) est plein, la supplémentation en insuline n’aura aucun effet sur la glycémie. Ainsi, puisque l’activité des enzymes de xylosyltransférase est réduite pendant le T2DM, l’augmentation des molécules libres de D-xylose permet de maintenir la biosynthèse des GAGs lors de l’insuline résistance et ainsi de réduire la glycémie. Ceci d’autant plus que le glucose est un inhibiteur compétitif de l’entrée du D-xylose dans la cellule (où les GAGs sont biosynthétisé dans l’appareil de Golgi). L’hémoglobine glyquée ou hémoglobine glycosylée (HbA1c) est l’un des biomarqueurs d’hyperglycémie pour le diabète. Il est utilisé pour l’évaluation, pour le contrôle du diabète à long terme et pour le diagnostic du diabète. L’action du D-xylose ou du xylitol son métabolite directe sur le taux d’hémoglobine glyquée (HbA1c) a déjà fait l’objet de plusieurs études antérieures, qui ont montré que, la prise du D-xylose ou du Xylitol son métabolite directe n’affecte quasiment pas ou peu le niveau d’hémoglobine glyquée chez une personne sain (Bae Y.J. et al, PMID: 22259678 ; Bordier V.et al, PMID: 34836205). Virus utilisant les syndécanes et/ou glypicanes comme récepteurs cellulaire, ( HSV-1, HSV-2, HPV-16, HPV-31, HVB, HVC, HIV-1, HTLV-1, SARS-CoV-2, HCMV, DENV-1, et DENV-2 ) et mécanisme d’action Les virus interagissent avec les protéoglycanes (PGs) à la surface des cellules hôtes pour s'y attacher (A. Jinno, et al. Methods Mol. Biol. 1229 (2015) 567-585 ; V. Cagno, et al. Viruses 11 (2019) 596). Plusieurs études ont porté sur ces interactions, en particulier sur les molécules de surface que sont les glycosaminoglycanes (GAG) et l'héparane sulfate (HS) (A. Jinno, et al. Methods Mol. Biol. 1229 (2015) 567-585 ; V. Cagno, et al. Viruses 11 (2019) 596). Cependant, même lorsque les virus interagissent avec l'HS, les protéines centrales de la plupart des virus sont les récepteurs viraux auxquels l'HS se fixe de manière covalente (tableau 1). Cela indique que l'interaction observée entre le HS et certains virus sont dues à leur liaison aux mêmes éléments : les protéines centrales (tableau 1). Beaucoup de ces virus utilisent d'autres molécules comme co-recepteurs en plus des protéines centrales, comme c'est le cas pour le SRAS-CoV- 2, qui utilise les syndécans et l'enzyme de conversion de l'angiotensine 2 (ACE 2) comme corecepteurs (M. Bermejo-Jambrina, J. Eder, et al., bioRxiv (2020)). Le VIH-1 utilise également les syndécans ainsi que le CD4 comme récepteurs (A.C. Saphire, et al., J. Virol. 75 (2001) 9187-9200). Le virus de l'hépatite C (HVC) possède plusieurs autres corécepteurs en plus des syndécans (Q.Shi, et al., J. Virol. 87 (2013) 6866-6875). Les différentes possibilités de modifications post-traductionnelles (PTM) des protéines de surface cellulaire peuvent expliquer la capacité des virus à utiliser différents récepteurs (J. Hu, et al. Front. Microbiol. 11 (2020), 517461), en particulier si l'on considère la diversité des glycoprotéines présentes sur les enveloppes virales et la capacité des virus à interagir avec les protéines cibles de l'hôte et à utiliser ces protéines pour pénétrer dans la cellule (S. Maya & A. Ploss, Hepatology 71 (2020) 380-382 ; K. Azarm, Icahn School of Medicine at Mount Sinai, New York, NY, 2020.). Bermejo-Jambrina et al. (M. Bermejo-Jambrina, J. Eder, et al., bioRxiv (2020)) ont récemment montré dans une étude in vitro que le SARS-CoV-2 se fixe d'abord aux protéoglycanes à sulfate d'héparane (HSPG) avant d'interagir avec ACE2. Cependant, un travail récent de Clausen et al. (T.M. Clausen et al. Cell 183 (2020) 1043-1057) a montré que la protéine spike du SARS-CoV-2 pouvait se lier simultanément à la surface cellulaire via les HSPG et le récepteur de la protéine ACE2. Le consensus de ces études citées est que les HSPG sont nécessaires à l'attachement du SARS-CoV-2 à la surface cellulaire. Zhang et al. (Q. Zhang, et al., Cell Discov 6 (2020), 80) sont également arrivés à la même conclusion après une étude in vitro. C’est également le cas pour le VIH-1. Saphire et al. (A.C. Saphire, et al., J. Virol. 75 (2001) 9187-9200) ont montré dans une étude in vitro que les CD4 seuls sont insuffisants pour l'infection des macrophages par le VIH-1 et que l'attachement aux HSPGs est également nécessaire. [Table 1] Virus, protéines centrales et leurs associations avec le diabète de type 2. Virus Protéines de base des protéoglycanes à héparane sulfate Associat ion avec le diabète SARS-CoV-2 : coronavirus 2 du syndrome respiratoire aigu sévère (SRAS) Syndecan 1 and 4 comme récepteurs [(M. Bermejo-Jambrina, J. Eder, et al., bioRxiv (2020) ; A.Hudak et al. Res. Sq, 2020] Diabète induit par le SRAS-CoV-2 (F. Rubino et al. , N. Engl. J. Med. 383 (2020) 789–790) ; T. Sathish et al. Prim. Care Diabetes 15 (2020) 194). SARS-CoV Les HSPG sont des sites d'attachement préliminaires du SRAS-CoV (J. Lang, et al. PLoS One 6 (2011)). HCoV-NL63 : coronavirus humain NL63 Les HSPG sont essentielles pour la liaison HCoV-NL63 (A. Milewska, et al. J. Virol. 88 (2014) 13221–13230) HSV-1 : virus de l'herpès simplex de type 1 Les syndécanes 1 et 2 comme récepteurs (S. Bacsa, et al. J. Gen. Virol. 92 (2011) 733–743). Forte association entre l'infection par le HSV-1 et le diabète de type 2 (Y. Sun et al. Diabetes Care 28 (2) (2005) 435–436) HPV-16 : papillomavirus humain de type 16 Le syndécane 1 comme récepteur (Z. Surviladze et al J. Gen. Virol. 96 (2015) 2232) Mauvais pronostic (A.Sobti, et al. PLoS One 14 (2019),). HVC : virus de l'hépatite C Le syndécane 1 comme récepteur (Q.Shi, et al., J. Virol. 87 (2013) 6866-6875). Forte association entre l'infection par le VHC et une prévalence plus élevée de diabète de type 2 (S.S. Hammerstad, et al. Front. Endocrinol. 6 (2015) 134) HIV-1 : virus de l'immunodéficience humaine de type 1 Les syndécanes et les bêtaglycanes comme récepteurs (A.C. Saphire, et al., J. Virol. 75 (2001) 9187-9200). Le VIH est un facteur de risque élevé pour la prévalence du diabète de type 2 (A.D. Duncan, et al. PLoS One 13 (2018)). HCMV : cytomégalovirus humain Forte supposition selon laquelle les syndécanes sont les récepteurs du virus CMV, d'après une étude in vitro (M. Silvestri, et al. J. Immunol. 53 (2001) 282–289). Rapport de risque relatif allant jusqu'à 12 d'avoir un diabète de type 2 pour les personnes précédemment exposées au CMV (B.W. Roberts, I. Cech, South. Med. J. 98 (2005) 686–692). DENV : virus de la dengue Syndécane 2 comme récepteur (K. Okamoto, et al. J. Gen. Virol. 93 (2012) 761–770). Forte association entre le diabète et la gravité de la dengue (M. Aamir, et al. Med. Heal. Sci 9 (2015) 99–101.) HTLV-1 : virus de la leucémie à cellules T humaines de type 1 Les HSPG sont essentiels à la liaison du HTLV-1 (K.S.Jones, et al. J. Virol. 79 (2005) 12692–12702). Rapport de risque relatif de HTLV-1 supérieur à 5 pour les personnes atteintes de diabète de type 2 (M. Taghavi et al. Br. J. Diabetes Vasc. Dis. 9 (2009) 81–83). HVB : virus de l'hépatite B Glypican-5 comme facteur d'entrée dans la cellule hôte pour les hépatites B et D (E.R. Verrier et al. , Hepatology (Baltimore, MD.) 63 (2016) 35–48). Le HBV est associé à la prévalence du diabète (Y.S. Hong et al. Sci. Rep. 7 (2017), 4606). HVD : virus de l'hépatite D Définitions Selon l’invention, le terme « Formulation » indique la présentation finale d’une composition, telle qu’elle sera donnée au patient. Selon l’invention le terme « stimulation de la biosynthèse des gycosaminoglycanes » indique que la biosynthèse des glycosaminoglycanes est supérieure à ce qu’elle était avant l’administration de la formulation ou du complément alimentaire selon l’invention. Par « glycosaminoglycane » est entendu la famille de molécules résultant de la polycondensation linéaire d’unités d’osamines et d’acides uroniques (remplacés parfois par du galactose), présents essentiellement dans la matrice extracellulaire des tissus conjonctifs. Les glycosaminoglycannes (GAGs) peuvent être sulfatés ou non. Il existe une seule classe de GAG non sulfaté, l’acide hyaluronique, mais 4 classes de GAGs sulfatés : les chondroïtines-sulfate, les dermatanes-sulfate, les kératanes-sulfate et les héparanes-sulfate/héparines. L’acide hyaluronique est libre dans les tissus, alors que les GAGs sulfatés sont accrochés sur des protéines porteuses (« protéines-cœur ») pour former de volumineux complexes appelé protéoglycannes. Les GAGs jouent un rôle important dans l’hydratation des tissus et dans la signalisation cellulaire. Par « Héparane sulfate » sont désignés ces polysaccharides complexes appartenant à la famille des glycosaminoglycanes (GAGs), présents en abondance à la surface cellulaire et dans les matrices interstitielles. C’est un polyoside sulfaté de masse moléculaire élevée formé par un enchaînement par des liaisons α (1-4) d'acides uroniques et de glucosamines, où alternent l'acide D-glucuronique ou L-iduronique et la glucosamine N-acétylée ou N-sulfatée. Ce mucopolysaccharide ou glycosaminoglycane porte des restes sulfuriques sur le deuxième carbone des acides iduroniques et sur le sixième carbone de la glucosamine, ainsi que sur la fonction amine en 2. Ce glycane, synthétisé dans les fibroblastes, est un constituant du tissu conjonctif (derme, aorte), faisant partie de la membrane basale, dans laquelle il est lié au collagène et à la laminine. Par « dermatane sulfate » est entendu ce glycosaminoglycane sulfaté dont la structure polyosidique ne contient pas d'acide glucuronique, mais de l'acide L-iduronique qui alterne avec les molécules de N-acétylgalactosamine, formant des maillons dihexosidiques (L-iduronosido-3-β-N-acétylgalactosamine) attachés au C4 de l’acide iduronique du maillon suivant. Les radicaux sulfuriques sont attachés au C4 des galactosamines. Comme la plupart des glycosaminoglycanes, les dermatane-sulfates font partie des édifices glycoprotéiniques, les protéoglycanes, des tissus conjonctifs, en particulier du derme, du cartilage et de la cornée. Selon les tissus, la longueur des chaînes varie de 10 à 50 maillons ; elles sont liées à un polypeptide de la même manière que les chaînes glucidiques des glycoprotéines. Ces dermatane-sulfates sont soit localisés sur la surface externe des membranes cellulaires, soit associés sous forme de complexes macromoléculaires dans la substance fondamentale extracellulaire. Par « chondroïtines sulfate » est entendu ce glycosaminoglycane sulfaté dont la structure polyosidique contient des acides glucuroniques, qui alternent avec des molécules de N-acétylgalactosamine, formant des maillons dihexosidiques (β-glucuronosido-3-β-N-acétylgalactosamine) attachés au C4 de l'acide glucuronique du maillon suivant. Les radicaux sulfuriques sont attachés au C4 ou au C6 des galactosamines. Comme la plupart des glycosaminoglycanes, les chondroïtine-sulfates font partie des édifices glycoprotéiniques, les protéoglycanes, des tissus conjonctifs, en particulier du derme, du cartilage et de la cornée. Selon les tissus, la longueur des chaines varie de 10 à 50 maillons ; elles sont liées à un polypeptide de la même manière que les chaines glucidiques des glycoprotéines. Ces chondroïtine-sulfates sont localisés soit sur la surface externe des membranes cellulaires, soit associés sous forme de complexes macromoléculaires dans la substance fondamentale extracellulaire. Par « esters du D-xylose » sont entendu des esters au sens du terme bien connu de l’Homme du métier, du d-xylose. De manière préférée, ledit ester est l'acide D-galacturonique. Sont également avantageusement compris dans le cadre de l’invention des esters d'acides gras comprenant de 16 à 24 atomes de carbone, en particulier les esters d'acides gras naturels. Parmi ces esters d'acide gras, on choisira avantageusement les esters des acides palmitique, stéarique, oléique, linoléique, linolénique, arachidonique, érucique, lignocérique. Par « oligosaccharides contenant du D-xylose » sont entendu les holosides constitués d'un petit nombre d'oses (2, 3, 4, 5, 6), comprenant du d-xylose. Par oligosaccharide au sens de l'invention, on entend des chaînes de sucres contenant de 2 à 6 sucres. De préférence, selon la présente invention, l'oligosaccharide contenant du xylose parmi les oligosaccharides tels que définis précédemment comprend au moins un xylose et de 1 à 6 sucres. De tels oligosaccharides sont avantageusement choisis parmi le xylobiose, le xylobiose hexaacétate, le méthyl-β-xylobioside, le xylotriose, le xylotétraose, le xylopentaose et le xylohexaose. De manière encore plus préférée, le xylobiose est l’oligosaccharide est utilisé, qui est composé de deux molécules de xylose liées par une liaison 1-4 ainsi que les acétates de xylobiose tels que le xylobiose hexaacétate. Par « patient humain » est entendu un individu humain atteint d’une pathologie ou à risque d’être atteint d’une pathologie, et dont la prévention ou le traitement est nécessaire. Par « sujet sain » est entendu un individu humain n’étant pas atteint d’une pathologie, et ne nécessitant donc pas de traitement. Par « en administrant » est entendu l’action de la prise par le patient ou le sujet sain de la formulation ou du complément alimentaire selon l’invention. Par « nombre d’administration » est entendu le nombre de fois où l’administration est réalisée, par exemple par jour, au patient ou au sujet sain de la formulation ou du complément alimentaire selon l’invention. Par « ingrédient pharmaceutique actif acceptable » est entendu une substance médicamenteuse active connue pour avoir un effet thérapeutique particulier. Par « actif antiviral » est entendu selon l’invention un composé connu pour ses propriétés d’élimination des virus, en particulier des virus mentionnés dans le cadre de l’invention. Par « actif permettant la prévention ou le traitement du diabète de type 2 » est entendu selon l’invention un composé connu pour ses propriétés de prévention ou de traitement du diabète de type 2. Par « actif permettant la prévention ou le traitement de l’insulinoresistance » est entendu selon l’invention un composé connu pour ses propriétés de prévention ou de traitement de l’insulinoresistance. Par « antibiotique » est entendu selon l’invention un composé qui agit soit en empêchant le développement des bactéries (antibiotiques bactériostatiques), soit en les tuant (antibiotiques bactéricides). Par « dose » est entendu une unité de prise de la formulation ou du complément alimentaire selon l’invention. Par « jour » est entendu l’unité horaire de 24h débutant à 00h00 et se terminant à 23h59. Les « protéoglycannes » sont des glycoprotéines composées d'une proteine centrale appelée également "protéine porteuse " ou « core protéine » sur laquelle sont attachées une ou plusieurs chaînes de glycosaminoglycannes sulfatés, liées généralement par une liaison osidique aux fonctions alcool de certains acides aminés sérine ou occasionnellement thréonine de la protéine. On distingue actuellement plus de 40 protéines porteuses différentes et 5 grandes classes de protéoglycannes : 1- les petits protéoglycannes riches en leucine (Small Leucin-Rich Proteoglycans, SLRP) , servant essentiellement à la stabilisation des fibres de collagène et à la régulation des activités cellulaires; les principaux sont la décorine, le lumicane et la fibromoduline; 2-les gros protéoglycannes extracellulaires, dont certains sont capables de s'agréger à l'acide hyaluronique pour former de très volumineux complexes permettant l'hydratation des tissus et l'amortissement des chocs; les principaux sont le versicane et l'agrécane; 3-les protéoglycannes associés au membranes basales, qui participent à la cohésion des tissus et à la filtration des molécules; les principaux sont le perlécane et l'agrine; 4-les protéoglycannes de la membrane cellulaire, qui jouent un rôle important dans la signalisation cellulaire et favorisent l'action des cytokines et facteurs de croissance. Cette classe se compose des syndécanes, dont la protéine porteuse est transmembranaire, et des glypicanes, pour lesquels la protéine porteuse est ancrée à la surface de la cellule; 5- un petit protéoglycanne appelé serglycine présent dans les granulations intracellulaires des mastocytes et des macrophages, qui porte des chaînes d'héparine, anticoagulant majeur. Par « syndécane » est entendu le protéoglycane étant un constituant important des membranes de certaines cellules telles que les membranes sinusoïdales des hépatocytes, des cellules musculaires, des macrophages. Les syndécanes forment une famille de molécules transmembranaires dont le domaine extracellulaire est glycanique, et possédant une extrémité intracellulaire dans le cytoplasme. Des syndécanes sont impliqués dans l'internalisation des lipoprotéines athérogènes. Par « glypicane » est entendu le protéoglycane pour lequel la protéine porteuse est ancrée à la surface de la cellule. Le « HSV-1 » est le virus Herpès simple de type 1. Le « HSV-2 » est le virus Herpès simplex de type 2. Le « HPV-16 » est le papillomavirus humain 16. Le « HPV-31 » est le papillomavirus humain 31. Le « HVB » est le virus de l’hépatite B. Le « HVC » est le virus de l’hépatite C. Le « HIV-1 » ou VIH-1 est le virus de l'immunodéficience humaine. Le « HTLV-1 » est le virus Virus T-lymphotropique humain 1. Le « SARS-CoV-2 » est le virus associé au COVID-19. Le « HCMV » est le cytomégalovirus humain Le « DENV-1 » est le virus de la dengue dans son premier sérotype. Le « DENV-2 » est le virus de la dengue dans son deuxième sérotype. Par « administration par voie orale » ou voie gastro-intestinale ou per os (expression latine qui signifie « par la bouche ») est entendu la voie d’administration à destination entérale, qui consiste à les avaler par la bouche. Par « administration par voie nasale » est entendu selon l’invention la voie d’administration de médicaments au niveau du nez et des cavités nasales. Par « administration par voie parentérale » est entendu la voie d’administration au moyen d’une injection, par le biais d’une effraction cutanée. Par « voie sous-cutanée » est entendu une injection continue ou discontinue de dans le tissu sous-cutané (hypoderme). Par « voie intradermique » est entendu une injection dans la peau entre l’épiderme et le derme. Par « voie intraveineuse » est entendu une injection dans une veine. Par « voie intramusculaire » est entendu une injection dans un muscle. Selon l'invention, le terme " prévenir " ou la « prévention » indique une réduction du risque de développer des formes sévères desdites pathologies. Selon l'invention, le terme "traiter" ou « traitement » signifie l'atténuation des symptômes associés à un trouble ou un état spécifique et/ou l'élimination desdits symptômes. Par « actif permettant d’accélérer le transfert dudit au moins un composé vers les cellules » est entendu une molécule permettant de faciliter l’accès dudit au moins composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides, de préférence le D-xylose, aux cellules cibles grâce à son action propre. De préférence, ledit actif est l’insuline. Par « sous une forme adaptée » est entendu une forme galénique permettant la bonne administration de la formulation ou du complément alimentaire selon l’invention, permettant à la substance active d'atteindre l'organe visé le plus vite et le mieux possible. Par " complément alimentaire " est entendu selon l'invention un produit pouvant apporter un bénéfice nutritionnel. Ce complément peut être pris seul ou être formulé avec d'autres composés afin de rendre la composition plus attrayante à consommer en étant plus similaire à un produit alimentaire courant. Ce complément peut être un facteur contribuant à prévenir ou à diminuer tout problème de douleur viscérale superficielle qui ne nécessite pas de traitement thérapeutique. La composition selon l'invention comprend un « milieu physiologiquement acceptable », c'est-à-dire compatible avec l’administration orale, nasale ou parentérale. En d'autres termes, le milieu utilisé présente des composés permettant la non-dégradation du d-xylose ou de ses dérivés, et ne présentant aucun risque pour le patient ou le consommateur susceptible de le détourner d'utiliser cette composition, ou aucun risque qui pourrait lui causer des effets secondaires néfastes. Dans la description et dans les exemples suivants, sauf indication contraire, les pourcentages sont des pourcentages en poids et les plages de valeurs libellées sous la forme « entre ... et ... » incluent les bornes inférieure et supérieure précisées. Les exemples ci-après sont présentés à titre illustratif et non limitatif du domaine de l'invention. Exemples Exemple 1 : Test de l'activité antivirale et cytotoxique d'un composé contre le SRAS-CoV2 suivant deux modes d’administration. Trois essais ont été réalisés par le Laboratoire VIROLOGY RESEARCH SERVICES (VRS) de Londres pour étudier la Cytotoxicité du D-xylose et son action antivirale contre le SARS-CoV-2 avec deux modes d’administrations (1) Co-administration du D-xylose et le SARS-CoV-2 (2) Pré-incubation du D-xylose 6h avant l’infection par le SARS-CoV-2. La cytotoxicité des concentrations de D-xylose a été déterminée dans les mêmes conditions d’essai, mais en l’absence d’infection virale. L’administration du D-xylose et du virus simultanément permet d’étudier les propriétés d’inhibiteur compétitif du D-xylose vis-à-vis du SARS-CoV-2. L’administration (préincubation) du D-xylose 6h avant l’introduction du virus vise à confirmer que les propriétés antivirales du D-xylose vis-à-vis du SARS-CoV-2 sont liées à l’action de stimulation des HS, CS, DS du D-xylose. C’est-à-dire confirmer que l’action du D-xylose sur la cellule est transposable aux autres virus utilisants les protéines cœurs comme récepteurs. La durée de préincubation de 6h du mode d’administration (2) du D-xylose a été choisi pour être en ligne avec les essais ayant démontrés la stimulation de la biosynthèse des HS, CS, DS par le D-xylose, afin de lever les doutes sur le fait que les HS ne favorisent pas l’infection. Introduction Une dilution en série de 8 points, avec un facteur de dilution de 2 fois du D-Xylose (concentration de test la plus élevée : 42 mM) est ajouté au test. Les cellules (Vero E6) ont été utilisées, avec deux modes d’administration : soit en même temps soit 6h avant l'infection par le SARS-CoV2 (isolé précocement). Le composé (D-xylose) a été laissé sur les cellules pendant toute la durée de l'expérience (48h, après quoi l'inhibition de l'infection a été mesurée par quantification de l'effet cytopathique induit par le virus (CPE) par dosage MTT. En parallèle, la cytotoxicité des mêmes concentrations de composés a été déterminée dans les mêmes conditions d'essai mais en l'absence d'infection virale Objectif Le but de cette étude est de tester les propriétés antivirales et cytotoxiques de 8 concentrations du D(+)-Xylose, contre un isolat précoce de SARS-CoV2, lorsque le composé est administré en même temps ou 6h avant l'infection. La lecture de ce test est CPE, de sorte que l'infection sera arrêtée à 72 hpi (heure post-infection), et le composé restera pendant toute la durée de l’expérience. En parallèle, la cytotoxicité des mêmes concentrations de composé sera testée en l'absence de l’infection virale. Échantillons d'essai - Identité : D(+)-Xylose, Thermo Scientific, AC141001000, Lot: A0429492. - Reçu : 14/Jul/2022 - Stocké : RT Contrôles - Remdesivir Système d'essai Cellules: Vero AD - Virus: England/02/2020, S2P1_July2021, 1.3x107 IU/mL - Lecture : CPE (MTT assay) pour le test antiviral & MTT assay pour le test de cytotoxicité Réactifs - Complete media: M199 + 5% FBS + p/s - Infection media: M199 + 0.4% BSA + p/2 Procédure expérimentale Placage cellulaire La veille de l'expérience, les 8 000 cellules/puits sont ensemencées dans 2 plaques de 96 puits (claires, Sarstedt), une pour l'étude antivirale et une pour l'étude de cytotoxicité. La déclinaison des concentrations est conforme au tableau 2. [Table 2] Disposition des plaques D-Xylose ( mM) D-Xylose 6h pré-traitement Xylose au moment de l’infection Remdesivir au moment de l’infection Infecté Non-infecté Vide Numéro des lignes 42 A 21 B 10,5 C 5,25 D 2,625 E 1,3125 F 0,65625 G 0,328125 H Numéro de colonne 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Traitement avec le composé Une solution de 1M est préparée en dissolvant 1 g de xylose dans 6,7 ml d'eau stérile de qualité biologie moléculaire [Xylose MW = 150,13]. La composition est filtrée et stérilisée à travers un filtre de 0,22 µM. 134,4 µl de la composition à 1M est transférée dans 1 465,6 µl de milieu d'infection (= 84 mM, deux fois la concentration maximale finale). La quantité de diluant (eau) dans le mélange est de 8,4 % (4,2 % final). Ensuite le « milieu d'infection + diluant » est préparé en ajoutant 1 680 µl d'eau à 18 320 µl de milieu d'infection. Pour le remdesivir : ajouter 3,2 µl de solution mère 10 mM à 796,8 µl de milieu d'infection. Les puits sont répartis comme suit : Aux puits B à H (lignes) des colonnes 1 à 11, 110 µl de milieu d'infection + diluant. Aux puits B à H (lignes) de la colonne 12, 110 µl de milieu d'infection sans diluant. A partir de la ligne A, afin de remplir pour les concentrations inférieures, une série de dilutions de 2 fois est réalisée, à partir de 110 µl Ensuite, le support des cellules dans la plaque de cytotoxicité est retiré. Ensuite, sont ajoutés immédiatement 50 µl de milieu d'infection sans diluant dans tous les puits. Ensuite, sont ajoutés 50 µl de milieu d'infection sans diluant aux colonnes 4 à 6. Ensuite, sont ajoutés 50 µl de composés dilués dans les autres puits (xylose en 1 à 3, Remdesivir en 7 à 9, Média en 10-12). Ensuite, la plaque est incubée à 37°C, 5% CO2 pendant 48h. Le support des cellules dans la plaque antivirale est ensuite retiré. Ensuite, sont ajoutés immédiatement 50 µl de milieu d'infection sans diluant dans tous les puits. Ensuite, sont ajoutés 50 µl de milieu d'infection sans diluant aux colonnes 4 à 12. Ensuite, sont ajoutés 50 µl de composés dilués colonnes 1 à 3. Ensuite, la plaque est incubée à 37°C, 5% CO2 pendant 6h. Ensuite la plaque de dilution est stockée à 4°C. Infection Virus nécessaire : 16 000 x 150 puits x MOI 0,002 = 4 800 UI. Une aliquote de virus est décongelée et diluée à 1:10 en ajoutant 10 µl à 90 µl de milieu d'infection. Ensuite, il est ajouté 4 µl de virus dilué à 7,5 ml de milieu d'infection (sans diluant). 6 heures après le traitement avec Xylose, les médias/composition sont retirés de la plaque antivirale. Dans tous les puits, sont ajoutés 50 µl de la composition de la plaque de dilution. Sont ensuite ajoutés immédiatement 50 µl de milieu à la colonne 11 et à la moitié de la colonne 12. Sont ensuite ajoutés immédiatement 50 µl de virus dilué dans tous les autres puits. Ensuite, la plaque est incubée pendant 48h, ou lorsque le CPE est clair. Fixation et développement Après 72h, lorsque le CPE est clair, il est procédé à un test MTT pour la plaque antivirale et de cytotoxicité. Résultats des essais. Résultats pour la cytotoxicité : absorbance à 570 nm D-Xylose (mM) D-Xylose 6h pré-traitement D-Xylose au moment de l’infection Remdesivir au moment de l’infection Infecté non traité Non-infecté non-traité Vide 42 0,216 0,22 0,207 0,19 0,194 0,185 0,202 0,189 0,187 0,192 0,197 0,174 21 0,22 0,221 0,22 0,213 0,208 0,21 0,211 0,213 0,214 0,208 0,218 0,217 10,5 0,219 0,222 0,213 0,215 0,229 0,215 0,22 0,224 0,245 0,23 0,24 0,226 5,25 0,231 0,238 0,222 0,227 0,238 0,224 0,224 0,216 0,231 0,214 0,191 0,191 2,625 0,216 0,237 0,23 0,224 0,232 0,209 0,207 0,222 0,226 0,2 0,183 0,139 1,3125 0,244 0,249 0,236 0,218 0,224 0,228 0,205 0,224 0,217 0,225 0,165 0,182 0,65625 0,182 0,202 0,217 0,211 0,215 0,209 0,213 0,201 0,2 0,22 0,182 0,174 0,328125 0,261 0,24 0,231 0,193 0,209 0,223 0,201 0,204 0,211 0,177 0,163 0,122 Analyse (effectué par VRS) Données d’absorbance Remdesivir ( µm) D-Xylose (mM) D-Xylose 6h pré-traitement Remdesivir au moment de l’infection Infecté non traité Non-infecté non-traité Vide 20 42 0,216 0,22 0,207 0,202 0,189 0,187 0,192 0,197 0,174 10 21 0,22 0,221 0,22 0,211 0,213 0,214 0,208 0,218 0,217 5 10,5 0,219 0,222 0,213 0,22 0,224 0,245 0,23 0,24 0,226 2,5 5,25 0,231 0,238 0,222 0,224 0,216 0,231 0,214 0,191 0,191 1,25 2,625 0,216 0,237 0,23 0,207 0,222 0,226 0,2 0,183 0,139 0,63 1,3125 0,244 0,249 0,236 0,205 0,224 0,217 0,225 0,165 0,182 0,31 0,65625 0,182 0,202 0,217 0,213 0,201 0,2 0,22 0,182 0,174 0,16 0,328125 0,261 0,24 0,231 0,201 0,204 0,211 0,177 0,163 0,122 Moyenne pour la colonne infectée non traitée et la colonne infectée non traitée : = 0,2003125 Ecart-type de Pearson pour la colonne infectée non traitée et la colonne infectée non traitée : (Ecart-type standard : 0,0230903) Pourcentages de viabilité Remdesivir ( µm) D-Xylose (mM) D-Xylose 6h pré-traitement Remdesivir au moment de l’infection Infecté non traité Non-infecté non-traité Vide 20 42 107,83 109,83 103,34 100,84 94,35 93,35 95,85 98,35 86,86 10 21 109,83 110,33 109,83 105,34 106,33 106,83 103,84 108,83 108,33 5 10,5 109,33 110,83 106,33 109,83 111,83 122,31 114,82 119,81 112,82 2,5 5,25 115,32 118,81 110,83 111,83 107,83 115,32 106,83 95,35 95,35 1,25 2,625 107,83 118,32 114,82 103,34 110,83 112,82 99,84 91,36 69,39 0,63 1,3125 121,81 124,31 117,82 102,34 111,83 108,33 112,32 82,37 90,86 0,31 0,65625 90,86 100,84 108,33 106,33 100,34 99,84 109,83 90,86 86,86 0,16 0,328125 130,30 119,81 115,32 100,34 101,84 105,34 88,36 81,37 60,90 Pourcentages de cytotoxicité Remdesivir ( µm) D-Xylose (mM) D-Xylose 6h pré-traitement Remdesivir au moment de l’infection Infecté Non-infecté Vide 20 42 -7,83 -9,83 -3,34 -0,84 5,65 6,65 4,15 1,65 13,14 10 21 -9,83 -10,33 -9,83 -5,34 -6,33 -6,83 -3,84 -8,83 -8,33 5 10,5 -9,33 -10,83 -6,33 -9,83 -11,83 -22,31 -14,82 -19,81 -12,82 2,5 5,25 -15,32 -18,81 -10,83 -11,83 -7,83 -15,32 -6,83 4,65 4,65 1,25 2,625 -7,83 -18,32 -14,82 -3,34 -10,83 -12,82 0,16 8,64 30,61 0,63 1,3125 -21,81 -24,31 -17,82 -2,34 -11,83 -8,33 -12,32 17,63 9,14 0,31 0,65625 9,14 -0,84 -8,33 -6,33 -0,34 0,16 -9,83 9,14 13,14 0,16 0,328125 -30,30 -19,81 -15,32 -0,34 -1,84 -5,34 11,64 18,63 39,10 Résultats pour les tests antiviraux Données brutes : Absorbances Filtre 1 : 570 nm D-Xylose ( mM) D-Xylose 6h pré-traitement D-Xylose au moment de l’infection Remdesivir au moment de l’infection Infecté Non-infecté Vide 42 0,095 0,09 0,108 0,059 0,095 0,09 0,161 0,155 0,156 0,062 0,163 0,058 21 0,116 0,109 0,098 0,111 0,151 0,113 0,169 0,199 0,188 0,08 0,183 0,059 10,5 0,102 0,102 0,096 0,109 0,131 0,107 0,198 0,215 0,174 0,086 0,155 0,058 5,25 0,087 0,106 0,098 0,09 0,137 0,126 0,178 0,195 0,166 0,098 0,16 0,05 2,625 0,075 0,121 0,124 0,141 0,113 0,103 0,127 0,137 0,128 0,116 0,196 0,17 1,3125 0,08 0,099 0,091 0,096 0,094 0,091 0,094 0,116 0,109 0,09 0,161 0,146 0,65625 0,08 0,081 0,085 0,096 0,099 0,101 0,084 0,101 0,098 0,088 0,181 0,148 0,328125 0,067 0,073 0,088 0,088 0,087 0,088 0,086 0,077 0,078 0,079 0,181 0,175 Analyses (effectué par VRS) Absorbance Remdesivir ( µm) D-xylose (mM) D-Xylose 6h pré-traitement D-Xylose au moment de l’infection Remdesivir au moment de l’infection Infecté non-traité Non-infecté Non traité Vide 20 42 0,095 0,090 0,108 0,059 0,095 0,090 0,161 0,155 0,156 0,062 0,163 0,058 Milieu non traité 10 21 0,116 0,109 0,098 0,111 0,151 0,113 0,169 0,199 0,188 0,080 0,183 0,059 5 10,5 0,102 0,102 0,096 0,109 0,131 0,107 0,198 0,215 0,174 0,086 0,155 0,058 2,5 5,25 0,087 0,106 0,098 0,090 0,137 0,126 0,178 0,195 0,166 0,098 0,160 0,050 1,25 2,625 0,075 0,121 0,124 0,141 0,113 0,103 0,127 0,137 0,128 0,116 0,196 0,170 Milieu non infecté 0,63 1,3125 0,080 0,099 0,091 0,096 0,094 0,091 0,094 0,116 0,109 0,090 0,161 0,146 0,31 0,65625 0,080 0,081 0,085 0,096 0,099 0,101 0,084 0,101 0,098 0,088 0,181 0,148 0,16 0,328125 0,067 0,073 0,088 0,088 0,087 0,088 0,086 0,077 0,078 0,079 0,181 0,175 Moyenne pour la colonne infectée non traitée : 0,087 Ecart-type standard pour la colonne infectée non traitée : 0,016 Moyenne pour la colonne non infectée non traitée : 0,173 Ecart-type standard pour la colonne non infectée non traitée : 0,015 Pourcentages de viabilité Remdesivir ( µm) D-xylose (mM) D-Xylose 6h pré-traitement D-Xylose au moment de l’infection Remdesivir au moment de l’infection Infecté non-traité Non-infecté Non traité Vide Numéro des lignes 20 42 8,96 3,08 24,23 -33,33 8,96 3,08 86,49 79,44 80,62 -29,81 88,84 -34,51 A Milieu non traité 10 21 33,63 25,40 12,48 27,75 74,74 30,10 95,89 131,13 118,21 -8,66 112,33 -33,33 B 5 10,5 17,18 17,18 10,13 25,40 51,25 23,05 129,96 149,93 101,76 -1,62 79,44 -34,51 C 2,5 5,25 -0,44 21,88 12,48 3,08 58,30 45,37 106,46 126,43 92,36 12,48 85,32 -43,91 D 1,25 2,625 -14,54 39,50 43,02 63 30,10 18,36 46,55 58,30 47,72 33,63 127,61 97,06 E Milieu non infecté 0,63 1,3125 -8,66 13,66 4,26 10,13 7,78 4,26 7,78 33,63 25,40 3,08 86,49 68,87 F 0,31 0,65625 -8,66 -7,49 -2,79 10,13 13,66 16,01 -3,96 16,01 12,48 0,73 109,99 71,22 G 0,16 0,328125 -23,94 -16,89 0,73 0,73 -0,44 0,73 -1,62 -12,19 -11,01 -9,84 109,99 102,94 H Numéro de colonne 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Interprétation des résultats Les résultats finaux de cytocicité de la [Table 6] reçus de VRS montrent que la concentration de cytotoxicité du D-xylose dans l’organisme est supérieure à 42mM Pour une raison inexpliquée par VRS, les puits supérieurs (rangée A de la plaque antivirale) semblent inhiber moins que la rangée B, ce qui ne pourrait pas être dû à une mort cellulaire accrue au bord de la plaque où la concentration de médicament est plus élevée, au vue les résultats de cytotoxicité. L’interprétation des résultats a donc été réalisée sans la concentration maximale affichée (Figures 1 et 2). Une dilution en série avec un facteur de dilution de 2 fois a été choisie. La même concentration maximale et la même dilution en série ont été mises en œuvre pour les deux modes d'administration du D-xylose (c'est-à-dire simultanément avec le virus ou en pré-incubation de 6 heures). Bien que, comme expliqué précédemment, le D-xylose devrait inhiber la fixation du SARS-CoV-2 par inhibition compétitive, dans cette première expérience réalisée par VRS, nous avons choisi délibérément de conserver les concentrations de D-xylose ayant servi à stimuler les GAG dans la littérature, p our confirmer que tout comme l’héparine, le D-xylose qui stimule la biosynthèse des GAGs (HS/CS/DS/Hep) à des propriétés antivirales, ce qui contredit donc l'interprétation selon laquelle les HS favorisent l’infection du SARS-CoV-2. D’autres arguments qui sont revenus à plusieurs reprises lors des processus d'examen par les pairs des articles précédents, après plusieurs rounds, faisaient référence à la sulfatation. Toute explication liée à toute action de la sulfatation de l'héparine sur l'attachement virale du SARS-CoV-2 est réfutée par le fait que même avec une préincubation de 25 minutes avant l'infection, l'héparine inhibe l'attachement viral du SARS-CoV-2. En plus, dans cet exemple, le D-xylose, qui est une petite molécule bioactive, ne contient pas de sulfate et stimule la biosynthèse des GAGs par leur initiation. Les propriétés antivirales du D-xylose contre le SARS-CoV-2 sont confirmés par les présents essais présentés. Exemple 2 : Test in vitro de l'activité antivirale et cytotoxique d'un composé seul ou en combinaison avec un deuxième composé contre le HIV-1 (VIH-1). Trois autres essais ont été réalisés par le Laboratoire VIROLOGY RESEARCH SERVICES (VRS) de Londres pour étudier la Cytotoxicité du D-xylose seul à des concentrations supérieures à celle des premières essais (Exemple 1), la cytoxicité du D-xylose + Insuline également et les activités antivirales du D-xylose seul et D-xylose + Insuline contre le HIV-1. La cytotoxicité des concentrations de D-xylose seul et D-xylose + Insuline a été déterminée dans les mêmes conditions d’essai, mais en l’absence d’infection virale. L’administration du D-xylose seul ou D-xylose + Insuline et du virus simultanément permet d’étudier les propriétés d’inhibiteur compétitif du D-xylose vis-à-vis du HIV-1 et d’étudier l’impact de l’insuline sur les propriétés antivirales du D-xylose. Le choix de laisser les composés (D-xylose seul ou D-xylose + Insuline) pendant toute la durée d’incubation (largement supérieure à 6h) a été choisi afin de lever les doutes sur le fait que les HS ne favorisent pas l’infection. Introduction Une dilution en série de 8 points, avec un facteur de dilution de 2 fois d'un composé à petite molécule (D-Xylose ; concentration d'essai la plus élevée : 208 mM), seule ou en combinaison avec de l'insuline, ajouté aux cellules de test (HeLa Tzmbl) en même temps que l'infection par le VIH-1 (NL4.3), suivant le schéma de dilution ci-dessous : D-Xylose (mM) D-Xylose (mM) + Insulin (µM) 208 208 208 208 + 4.8 208 + 4.8 208 + 4.8 104 104 104 104 + 2.4 104 + 2.4 104 + 2.4 52 52 52 52 + 1.2 52 + 1.2 52 + 1.2 26 26 26 26 + 0.6 26 + 0.6 26 + 0.6 13 13 13 13 + 0.3 13 + 0.3 13 + 0.3 6.5 6.5 6.5 6.5 + 0.15 6.5 + 0.15 6.5 + 0.15 3.25 3.25 3.25 3.25 + 0.075 3.25 + 0.075 3.25 + 0.075 1.625 1.625 1.625 1.625 + 0.0375 1.625 + 0.0375 1.625 + 0.0375 Les composés (D-xylose seul ou D-xylose + Insulin) ont été laissés sur les cellules pendant toute la durée de l'expérience (48h, après quoi l'inhibition de l'infection a été mesurée en quantifiant le pourcentage des cellules infectées à l'aide d'un test basé sur l’immunofluorescence. En parallèle, la cytotoxicité des mêmes concentrations de composés a été déterminée dans les mêmes conditions d'essai mais en l'absence d'infection virale à l'aide du test MTT. Objectif Le but de cette étude est de tester les propriétés antivirales et cytotoxiques de 8 concentrations de D(+)-Xylose seul ou en association avec 8 concentrations d'Insuline humaine recombinante contre le VIH-1 NL4-3. Échantillons d'essai - Identité : D(+)-Xylose (Thermo Scientific, AC141001000, Lot: A0429492), Insuline humaine recombinante avec zinc (Gibco 12585014) - Reçu : Xylose - 14 Juillet 2022 ; Insuline - 01 Novembre 2022 - Stocké : Xylose - température ambiante ; Insuline - 80ºC Contrôles - 3-Azido-3-deoxythymidine (AZT) (Sigma-Aldrich A2169) Système d'essai Cellules: HeLa TZMBL - Virus: Human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) NL4-3, VRS stock 31220 (9.4x105 IU/ml) - Lecture : IF (Immunofluorescence) pour le test antiviral & MTT assay pour le test de cytotoxicité Réactifs - Complete media: DMEM (Gibco 10566016) + 10% FBS (Gibco 10500064) + 1x p/s (Gibco 15070063) - Infection media: DMEM (Gibco 10566016) + 10% FBS (Gibco 10500064) + 1x p/s (Gibco 15070063) Procédure expérimentale Placage cellulaire La veille de l'expérience, il est nécessaire de détacher HeLa TZMBL avec 5 mM d'EDTA dans du PBS et d’ensemencer 10 000 cellules/puits dans 2 x 96 puits, dont une plaque Perkin Elmer noire pour le test antiviral et une plaque Sarstedt transparente pour l’étude de la cytotoxicité La déclinaison des concentrations est conforme au tableau 2. [Table 11] Disposition des plaques D-xylose ( mM) Xylose ( mM) + Insuline (µM) AZT Control (µM) Infecté Non-infecté Media Numéro des lignes 208 208 208 208 + 4,8 208 + 4,8 208 + 4,8 1,667 1,667 1,667 0,3 0.00 0,3 A 104 104 104 104 + 2,4 104 + 2,4 104 + 2,4 0,556 0,556 0,556 0,3 0.00 0,3 B 52 52 52 52 + 1,2 52 + 1,2 52 + 1,2 0,185 0,185 0,185 0,3 0.00 0,3 C 26 26 26 26 + 0,6 26 + 0,6 26 + 0,6 0,062 0,062 0,062 0,3 0.00 0,3 D 13 13 13 13 + 0,3 13 + 0,3 13 + 0,3 0,021 0,021 0,021 0,3 0.00 0.00 E 6.5 6.5 6.5 6,5 + 0,15 6,5 + 0,15 6,5 + 0,15 0,007 0,007 0,007 0,3 0.00 0.00 F 3.25 3.25 3.25 3,25 + 0,075 3,25 + 0,075 3,25 + 0,075 0,002 0,002 0,002 0,3 0.00 0.00 G 1.625 1.625 1.625 1,625 + 0,0375 1,625 + 0,0375 1,625 + 0,0375 1,667 1,667 1,667 0,3 0.00 0.00 H Numéro de colonne 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Les puits des colonnes 1 à 6, 10 et 11 contiennent du milieu d'infection + diluant tandis que les puits 7, 8, 9 et 12 contiennent du milieu d'infection sans diluant (diluant pour contrôle AZT non pris en compte). Préparation du composé Préparation de 3M Xylose [MW = 150,13 ; selon Sigma D(+)-Xylose cat# 1.08689, solubilité = 550 g/L ou 3.66M] : • Dissoudre 3 g de xylose dans le milieu d'infection jusqu’à un volume final de 6,66 ml. Chauffer à 37°C et vortexer. • Stériliser par filtre à travers un filtre de 0,22 µM. Préparer 832 mM de xylose (= 4x concentration maximale finale de 208 mM) dans 1000µl: • 277,3 µl de Xylose 3M + 722,7 µl de milieu d'infection (vol = 1000 µl). Le stock d'insuline recombinante humaine avec zinc (insuline) est de 4 mg/ml ou 688,7 µM [MW = 5807,7] dans l'eau. Préparer 19,2µM d'insuline (= 4x la concentration maximale finale de 4,8µM) dans 500µl: • 13,9 µl d'insuline 688,7 µM + 486,1 µl de milieu d'infection (vol = 500 µl). Le diluant (eau) dans cette solution est de 2,8 % (la finale est de 0,7 %). Lorsque des volumes égaux de xylose 832 mM et d'insuline 19,2 µM sont combinés, la concentration de diluant (eau) est de 1,4 % (2xfinale de 0,7 %). Préparer un « milieu d'infection + diluant total » contenant le double de la concentration finale de diluant dans 15 ml : • 210µl d'eau + 14790µl de milieu d'infection (vol = 15ml). Préparer le « milieu d'infection + diluant d'insuline » pour correspondre au diluant dans le stock d'insuline 19,2 µM pour l'ajout au xylose seul (=4x concentration finale) dans 500µl: • 13,9 µl d'eau + 486,1 µl de milieu d'infection (vol = 500 µl). Le stock d'AZT est de 10 mM dans du DMSO. Préparer 10 µM d'AZT (= 2x concentration maximale finale de 5 µM) : • 1 µl d'AZT 10 mM + 999 µl de milieu d'infection. Comme il s'agit du contrôle et qu'il a un diluant différent (DMSO), et que la concentration finale de diluant est faible (0,05 %) à la concentration maximale d'AZT, le diluant n'est pas pris en compte. Étiqueter une plaque inférieure ronde à 96 puits pour correspondre à la disposition de la plaque ci-dessus. Aux puits 1 à 6 de la rangée A, ajouter 120 µl de xylose 832 mM. Aux puits 1 à 3 de la rangée A, ajouter 120 µl de « milieu d'infection + diluant insuline ». Aux puits 4 à 6 de la rangée A, ajouter 120 µl d'insuline 19,2 µM. Aux puits 1 à 6 des rangées B à H, ajouter 120 µl de « milieu d'infection + diluant total ». Aux puits 7 à 9 de la rangée A, ajouter 240 µl d'AZT 10 µM. Aux puits 7 à 9 des rangées B à H, ajouter 120 µl de milieu d'infection. Diluer en série les échantillons de test 2 fois en déplaçant 120 µl de la rangée A (puits 1 à 6) jusqu'à H, en mélangeant 10 fois. Diluer en série les échantillons de contrôle 3 fois en descendant 80 µl de la rangée A (puits 7 à 9) jusqu'à H, en mélangeant 10 fois. Aux colonnes 10 et 11, ajouter 240 µl de « milieu d'infection + diluant total ». Dans la colonne 12, ajouter 240 µl de milieu d'infection. Cytotoxicité Retirer le milieu des cellules dans la plaque de cytotoxicité. Remplacer par 50 μl de dilutions composées de la plaque à fond rond immédiatement suivies de 50 μl de milieu d'infection. Incuber pendant 48 heures à 37 °C et 5% de CO2. Infection Calculer le volume de stock de virus nécessaire à l'aide de la formule ci-dessous: [(Nombre de cellules/puits*) x (nombre de puits + ≥10 % de nombre de puits en excès) x MOI] /virus UI/ml * Doubler le nombre de cellules étalées la veille = (20000x110x0.08/9.4x105x = 187μl Décongeler une aliquote de virus et ajouter 187 μl de virus + 5,313 ml de milieu d'infection (volume total 110*50 μl = 5500 μl). Retirer le support des cellules dans la plaque antivirale. Remplacer par 50 µl de dilutions de composés de la plaque à fond rond immédiatement suivis de 50 µl de virus dilué ou milieu d'infection selon la disposition de la plaque ci-dessus (Table 2). Incuber pendant 48 heures à 37°C et 5 % de CO2. Fixation et développement Après 48 heures d'incubation, procéder à la fixation (test antiviral) ou au test MTT (test de cytotoxicité). Pour le test MTT, ajouter du Triton dans une colonne de cellules non traitées comme contrôle. Immunocoloration Colorer la plaque antivirale à l’aide d’un anti-HIV-1 HXB2 gag p24 (NIBSC Centre For AIDS Reagents ARP432), puis par goat anti-rabbit 488 (Thermo Fisher A11034) at 1:800. Résultats des essais. Résultats pour la cytotoxicité : D-Xylose (mM) Insulin (µM) AZT (µM) D-Xylose Xylose + Insulin AZT Media + Diluant Triton Media 208,000 4,800 5,000 1,288 1,339 1,241 1,237 1,255 1,247 2,36 2,337 2,402 2,647 0,040 1,288 104,000 2,400 1,667 2,075 2,027 2,064 2,022 1,991 1,934 2,469 2,46 2,505 2,485 0,039 2,075 52,000 1,200 0,556 2,123 2,266 2,199 2,204 2,212 2,204 2,406 2,353 2,414 2,424 0,040 2,123 26,000 0,600 0,185 2,196 2,137 2,158 2,142 2,117 2,152 2,301 2,341 2,329 2,425 0,039 2,196 13,000 0,300 0,062 2,175 2,293 2,032 2,281 2,316 2,235 2,337 2,307 2,356 2,347 0,040 2,175 6,500 0,150 0,021 2,168 2,211 2,316 2,257 2,28 2,27 2,294 2,33 2,338 2,282 0,040 2,168 3,250 0,075 0,007 2,286 2,266 2,242 2,198 2,23 2,242 2,278 2,29 2,333 2,241 0,040 2,286 1,625 0,038 0,002 2,399 2,351 2,424 2,409 2,38 2,39 2,438 2,455 2,474 2,431 0,040 2,399 Analyse (effectué par VRS) Moyenne pour la colonne « Media + diluant » : = 2,410 Écart-type Écart-type standard de la colonne « Media + diluant » : 0,126 Pourcentages de viabilité D-Xylose (mM) Insulin (µM) AZT (µM) D-Xylose Xylose + Insulin AZT Media + Diluant Triton Media 208,000 4,800 5,000 52,66 54,81 50,67 50,51 51,27 50,93 97,88 96,91 99,65 109,99 0,01 107,67 104,000 2,400 1,667 85,86 83,83 85,39 83,62 82,31 79,91 102,48 102,10 104,00 103,15 -0,03 102,35 52,000 1,200 0,556 87,88 93,91 91,09 91,30 91,64 91,30 99,82 97,58 100,16 100,58 0,01 101,34 26,000 0,600 0,185 90,96 88,47 89,36 88,68 87,63 89,11 95,39 97,08 96,57 100,62 -0,03 98,98 13,000 0,300 0,062 90,08 95,05 84,04 94,55 96,02 92,61 96,91 95,64 97,71 97,33 0,01 98,64 6,500 0,150 0,021 89,78 91,59 96,02 93,54 94,51 94,08 95,10 96,61 96,95 94,59 0,01 97,54 3,250 0,075 0,007 94,76 93,91 92,90 91,05 92,40 92,90 94,42 94,93 96,74 92,86 0,01 97,54 1,625 0,038 0,002 99,53 97,50 100,58 99,95 98,72 99,15 101,17 101,89 102,69 100,88 0,01 105,85 Pourcentages de cytotoxicité D-Xylose (mM) Insulin (µM) AZT (µM) D-Xylose Xylose + Insulin AZT Media + Diluant Triton Media 208,000 4,800 5,000 47,34 45,19 49,33 49,49 48,73 49,07 2,12 3,09 0,35 -9,99 99,99 -7,67 104,000 2,400 1,667 14,14 16,17 14,61 16,38 17,69 20,09 -2,48 -2,10 -4,00 -3,15 100,03 -2,35 52,000 1,200 0,556 12,12 6,09 8,91 8,70 8,36 8,70 0,18 2,42 -0,16 -0,58 99,99 -1,34 26,000 0,600 0,185 9,04 11,53 10,64 11,32 12,37 10,89 4,61 2,92 3,43 -0,62 100,03 1,02 13,000 0,300 0,062 9,92 4,95 15,96 5,45 3,98 7,39 3,09 4,36 2,29 2,67 99,99 1,36 6,500 0,150 0,021 10,22 8,41 3,98 6,46 5,49 5,92 4,90 3,39 3,05 5,41 99,99 2,46 3,250 0,075 0,007 5,24 6,09 7,10 8,95 7,60 7,10 5,58 5,07 3,26 7,14 99,99 2,46 1,625 0,038 0,002 0,47 2,50 -0,58 0,05 1,28 0,85 -1,17 -1,89 -2,69 -0,88 99,99 -5,85 Résultats pour les tests antiviraux et analyses (effectuée par VRS) % Infection D-Xylose (mM) Insulin (µM) AZT (µM) D-Xylose Xylose + Insulin AZT Infecté + Diluant Non infecté + Diluant Media 208,000 4,800 5,000 0,78 1,21 1,34 1,24 1,02 1,11 0,44 0,47 0,39 18,32 0,15 16,11 104,000 2,400 1,667 14,95 13,53 14,38 14,21 13,16 13,04 0,95 0,89 0,97 19,39 0,29 16,55 52,000 1,200 0,556 20,24 20,75 18,90 19,36 19,71 21,30 1,51 1,70 1,44 19,25 0,31 16,80 26,000 0,600 0,185 20,61 19,38 18,63 18,74 20,07 19,79 2,76 2,59 2,55 17,99 0,37 18,06 13,000 0,300 0,062 20,38 18,66 19,01 18,22 17,71 18,29 5,12 5,07 4,49 17,99 0,43 0,24 6,500 0,150 0,021 18,11 18,92 16,54 19,38 19,32 19,32 6,61 5,94 7,11 19,17 0,19 0,19 3,250 0,075 0,007 20,42 18,16 18,89 19,27 18,83 18,68 10,29 9,89 10,74 19,56 0,40 0,28 1,625 0,038 0,002 20,77 20,01 21,42 20,67 18,00 19,83 13,79 13,28 13,72 18,81 0,28 0,20 Moyenne pour la colonne infectée +diluant : 18,81 Écart-type standard pour la colonne infectée +diluant : 0,63 Moyenne pour la colonne non infectée +diluant : 0,30 Écart-type standard pour la colonne non infectée +diluant : 0,10 Pourcentages de viabilité D-Xylose (mM) Insulin (µM) AZT (µM) D-Xylose Xylose + Insulin AZT Infecté + Diluant Non infecté + Diluant Media Numéro des lignes 208,000 4,800 5,000 97,44 95,08 94,40 94,95 96,13 95,66 99,26 99,09 99,55 2,64 100,84 14,59 A Milieu non traité 104,000 2,400 1,667 20,84 28,55 23,94 24,83 30,53 31,18 96,51 96,80 96,37 -3,15 100,04 12,22 B 52,000 1,200 0,556 -7,72 -10,48 -0,50 -2,99 -4,87 -13,45 93,50 92,46 93,88 -2,37 99,95 10,87 C 26,000 0,600 0,185 -9,72 -3,08 0,97 0,37 -6,82 -5,32 86,73 87,65 87,85 4,45 99,62 4,03 D 13,000 0,300 0,062 -8,49 0,82 -1,07 3,19 5,94 2,79 74,00 74,22 77,36 4,42 99,34 100,35 E Milieu non infecté 6,500 0,150 0,021 3,77 -0,58 12,28 -3,07 -2,75 -2,75 65,92 69,53 63,24 -1,94 100,58 100,62 F 3,250 0,075 0,007 -8,72 3,50 -0,45 -2,50 -0,11 0,70 46,06 48,19 43,59 -4,07 99,47 100,12 G 1,625 0,038 0,002 -10,59 -6,48 -14,12 -10,04 4,38 -5,51 27,13 29,87 27,48 0,01 100,15 100,54 H Numéro de colonne 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Interprétation des résultats Tout comme pour l’exemple 1, le fait que le D-xylose ait des activités antivirales contre le HIV-1 NL4-3 confirme l’intérêt de se focaliser sur la biosynthèse des glycosaminoglycanes, notamment des héparanes sulfate, chondroïtines sulfate et dermatanes sulfate, dont le D-xylose est un stimulateur prouvé de la biosynthèse pour lutter contre le HIV-1 NL4-3. Calcul de l’index de sélectivité SI = TC50/IC50. Pour le D-xylose seul contre le HIV-1, l’index de sélectivité est SI = 260.3/124.4 = 2,092444 (voir ) Pour le D-xylose+l’insuline contre le HIV-1, l’index de sélectivité est SI = 233.9/120.4 = 1,94269 (voir ) La lignée cellulaire HeLa Tzmbl est une lignée cellulaire épithéliale humaine immortelle dérivée d'une tumeur cancéreuse du col de l'utérus (adénocarcinome). La question qui peut se poser est de savoir si le D-xylose et/ou d'autres xylosides stimulent les glycosaminoglycanes pour tous les types de cellules, y compris les cellules épithéliales, comme les cellules utilisées ici. Plusieurs D-xylosides, dont le D-xylose sont des stimulateurs avérés de glycosaminoglycanes de plusieurs types cellulaires : fibroblastes, kéranocytes (cellules épithéliales), CHO: cellules ovariennes de hamster chinois (cellules épithéliales), BHK : cellules rénales de bébés hamsters, BAE : cellules endothéliales aortiques bovines, cellules 3T3 de souris Swiss transformées par SV40, les cellules mésenchymateuses, cellules cartilagineuses mésenchymateuses, cellules gliales du rat, neuroblastome de la souris (C1300, NB41A), cellules hépatiques du rat (HTC, H4)… Les propriétés antivirales du D-xylose contre le HIV-NL4-3 sont confirmés par les présents essais présentés. Exemple 3 : Résumé des essais (Exemples 1 et 2 ) réalisés par le Laboratoire VRS de Londres et conclusions Tableau récapitulatif Composé Mode d’administration Virus Type de cellules/essais IC50 du D-xylose (mM) TC50 du D-xylose (mM) Index de sélectivité SI = TC50/IC50 D-xylose Préincubation avec les cellules 6h avant infection SARS-CoV-2 Vero E6 (CPE& MTT) 95,52 260,3 2,73 Administration en même temps que le virus SARS-CoV-2 26,22 260,3 9,93 HIV-NL4-3 HeLa Tzmbl (Immunofluorescence & MTT) 124,4 260,3 2,09 D-xylose + Insuline Administration en même temps que le virus HIV-NL4-3 120,4 233,9 1,94 Utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale chez le sujet sain comprenant au moins un composé choisi parmi le D-xylose, ses esters, les oligosaccharides comprenant du D-xylose, et/ou les β-D-xylosides dans un milieu physiologiquement acceptable pour stimuler la biosynthèse de glycosaminoglycannes, de préférence au moins un choisi parmi l’héparane sulfate, le dermatane sulfate et la chondroïtine sulfate. Utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale selon la revendication précédente, dans laquelle la composition est sous une forme adaptée pour une administration par voie orale ou nasale en administrant entre 1 et 10 doses par jour d’une composition ayant une masse de 500 mg à 10 g dudit au moins un composé. Utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale selon la revendication précédente, dans laquelle le nombre d’administration par jour est compris entre 2 et 10 doses par jour. Utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale selon l’une quelconque des revendications précédentes, où ledit au moins un composé est le D-xylose. Utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale selon la revendication précédente, où le D-xylose est présent dans la composition de complément alimentaire sous forme d’extraits végétaux comprenant du D-xylose. Utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale selon la revendication précédente, où lesdits extraits végétaux sont choisis parmi des extraits de chèvrefeuille, de chèvrefeuille du Japon, de chiretta verte, d’algues rouges, de liseron d'eau, de feuille, d'écorce ou de sève de bouleau, d’une espèce du genre Artemisia, de tige de riz. Utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale selon la revendication 4, où le D-xylose est présent dans la composition de complément alimentaire sous forme de dérivé de lignocellulose de matières végétales, de préférence d’hydrolysats d’hémicellulose de tiges de maïs. Utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale selon l’une quelconque des revendications précédentes, où ladite composition est formulée pour la prise orale sous forme de capsules, de gélules, de comprimés, de comprimés effervescents, de poudres, de granules, de solutions orales ou des suspensions. Utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, où ladite composition est formulée pour la prise orale dans un produit alimentaire, une boisson, un additif alimentaire ou un produit laitier, contenant ledit complément alimentaire. Utilisation d’une composition de complément alimentaire à prise orale ou nasale selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, où ladite composition est formulée pour administration nasale sous forme de solution sous forme d’aérosol.