Brevet FR3143366A1 — publié le 20240621

La présente concerne un principe actif cosmétique obtenu à partir d’une levure de l’espèce Aureobasidium pullulans et ses utilisations cosmétiques, en particulier pour une application anti-âge. Principe actif cosmétique contenant un extrait de Aureobasidium pullulans L’invention concerne un principe actif cosmétique obtenu à partir d’une levure de l’espèce Aureobasidium pullulans et ses utilisations cosmétiques, en particulier pour une application anti-âge. Etat de l’art L’industrie cosmétique est toujours à la recherche de nouveaux ingrédients cosmétiques pour satisfaire les besoins des consommateurs. Il existe donc un besoin pour de nouveaux produits cosmétiques anti-âge permettant surtout d’améliorer l’éclat du teint et la fonction barrière, voire de diminuer les rougeurs ou encore d’atténuer les rides. Pour répondre à ce besoin, l’inventeur s’est intéressé à des matières premières naturelles et originales pour développer de tels ingrédients. Les levures, en particulier les levures dites adaptogènes et polyextrêmotolérantes, ont la particularité de survivre dans des environnements très hostiles (températures extrêmes, milieux pauvres en nutriments ou en matières organiques, milieux secs, ou encore milieux très exposés aux UVs). Pour survivre, elles ont su développer des mécanismes d’adaptation remarquables et représentent ainsi un intérêt certain pour l’industrie cosmétique. Contrairement à l’art antérieur qui utilise essentiellement la levure Aureobasidium pullulans pour fermenter des matières organiques animales ou végétales ou produire un polysaccharide particulier, le pullulan, l’inventeur utilise la biomasse des levures pour développer de nouveaux ingrédients d’intérêt. Dans ce contexte, l’inventeur a, de façon très surprenante, identifié une levure appartenant à l’espèce Aureobasidium pullulans dans le microbiote de rosiers cultivés sur le plateau de Valensol en France. Ainsi, l’invention propose un nouveau principe actif cosmétique obtenu à partir d’une levure de l’espèce Aureobasidium pullulans . La levure Aureobasidium pullulans , également dénommée levure noire ou « Black yeast » est ubiquiste, polyextrêmotolérante et se présente soit sous forme de champignon filamenteux, soit sous forme unicellulaire. Aureobasidium pullulans est bien connue comme épiphyte naturel de nombreuses espèces végétales, telles que la pomme ou le raisin. Depuis plusieurs années, elle est utilisée en biotechnologie pour la production de plusieurs enzymes ou dans la lutte contre certaines maladies du règne végétal, telles que la maladie du pommier. Enfin, il est également connu, des compositions cosmétiques comprenant un surnageant de culture d’ Aureobasidium pullulans ou des extraits de plantes fermentés par Aureobasidium pullulan s , mais aucun enseignement ne décrit l’utilisation d’un extrait d’ Aureobasidium pullulans contenant au moins 25% de sucres selon la présente invention pour un effet anti-âge. Aussi, l’invention vise un principe actif cosmétique comprenant au moins un extrait issu de la biomasse de la levure de l’espèce Aureobasidium pullulans , en particulier un principe actif cosmétique comprenant au moins 25% de sucres, en poids de matière sèche de l’extrait. Dans le contexte de l’invention, la levure Aureobasidium pullulans a été prélevée sur des rosiers, avantageusement cultivés sur le plateau de Valensol (France), préférentiellement la levure est prélevée sur les fleurs, et/ou les épines et/ou les racines de Rosa sp . L’invention se rapporte également à un procédé de préparation du principe actif selon l’invention, comprenant notamment une culture de la biomasse d’ Aureobasidium pullulans dans un milieu de culture, suivie d’une solubilisation de la levure Aureobasidium pullulans dans l’eau, une extraction des sucres, une séparation de la phase soluble et insoluble, puis une récupération de la phase soluble, une inactivation enzymatique, une purification et éventuellement une concentration de l’extrait suivie d’une filtration stérilisante. Le principe actif selon l’invention est d’origine naturelle. Il présente avantageusement un effet anti-âge, permettant ainsi de répondre aux problématiques de l’art antérieur. Aussi, il peut être utilisé pour des applications cosmétiques et être ainsi intégré dans une composition cosmétique, avantageusement une composition sous une forme adaptée à une application topique. L’invention se rapporte donc également à une utilisation cosmétique d’une composition comprenant au moins 0,1% en poids du principe actif selon l’invention, en particulier pour ses effets anti-âges. D’autres caractéristiques et avantages ressortiront de la description détaillée de l’invention et des exemples qui vont suivre. Description détaillée de l’invention Définition Par « Aureobasidium pullulans » au sens de l’invention, on entend toute levure de la famille des Dothioraceae , du genre Aureobasidium et de l’espèce Aureobasidium pullulans . Préférentiellement, une souche de la levure Aureobasidium pullulans enregistrée dans une collection de levures (CIRM), sous le numéro CLIB 2138. Préférentiellement, Aureobasidium pullulans a été isolée à partir de rosiers ( Rosa sp .). Par « principe actif cosmétique » au sens de l’invention, on entend un extrait comprenant au moins un ensemble de molécules présentant un effet cosmétique sur la peau. Préférentiellement l’effet cosmétique sur la peau est un effet anti-âge. Par « extrait de Aureobasidium pullulans » au sens de l’invention, on entend un extrait comprenant au moins un ensemble de molécules, préférentiellement un extrait de la biomasse de la levure Aureobasidium pullulans comprenant au moins des sucres représentant au moins 25% en poids du poids total de l’extrait, obtenu à partir de tout procédé d’extraction bien connu de l’Homme du métier, par exemple par autolyse induite, sonication, homogénéisation, hydrolyse chimique, ou hydrolyse enzymatique. De tels procédés d’extraction sont décrits dans les publications Varelas V. et al. , Drug Test Anal. 2016 Jan et Du L. et al. Molecules. 2020 Jan 23. L’extrait selon l’invention n’est pas un extrait du surnageant de culture d’ Aureobasidium pullulans. Par « extrait du surnageant de culture de levure », on entend un extrait n’étant pas un extrait de la biomasse de culture d’ Aureobasidium pullulans. Principe actif selon l’invention La présente invention a donc pour objet un principe actif cosmétique comprenant au moins un extrait de la biomasse de la levure de l’espèce Aureobasidium pullulans , dans lequel l’extrait est riche en sucres. Selon un mode de réalisation, la levure Aureobasidium pullulans est préférentiellement la levure Aureobasidium pullulans est obtenue à partir de rosiers, plus préférentiellement à partir des fleurs, et/ou des épines et/ou des racines de Rosa sp . La biomasse d’ Aureobasidium pullulans est notamment produite à partir de la levure. Cette étape est réalisée selon le mode de culture des levures, dans un milieu adapté à leur développement, par exemple un milieu de culture adapté classique pour l’homme de métier. Une fois la biomasse obtenue, on réalise une étape d’extraction en vue d’obtenir les molécules actives, préférentiellement une extraction des sucres. L’extrait selon l’invention comprend au moins 25% de sucres en poids de matière sèche de l’extrait. L’extrait selon l’invention peut également comprendre des peptides et des cendres minérales. Ainsi, l’extrait selon l’invention comprend des sucres, ceux-ci représentent au moins 25% de l’extrait, en poids de matière sèche de l’extrait. Préférentiellement, l’extrait selon l’invention comprend au moins 30% de sucres, en poids de matière sèche de l’extrait. La teneur en sucres totaux dans ledit principe actif peut être déterminée par la méthode de DUBOIS (Dubois M. et al., Analytical chemistry, 28, 3, 350-356, 1956). La teneur en sucres totaux dans le principe actif selon l’invention est exprimée en pourcentage par rapport à la matière sèche. La taille des sucres présents dans l’extrait peut être caractérisée par chromatographie HPLC/RI. Ils peuvent être sous forme de monosaccharides ou sous forme d’oligosaccharides, préférentiellement les oligosaccharides ont une masse molaire inférieure à 1800Da. De façon particulièrement préféré, les oligosaccharides sont majoritaires au sein de l’extrait selon la présente invention. Enfin, selon un mode de réalisation particulièrement préféré, les sucres de l’extrait sont composés d’au moins 80% d’oligosaccharides. Préférentiellement, les oligosaccharides de l’extrait sont des oligosaccharides de glucose liés par des liaisons alpha et/ou des oligosaccharides de glucose liés par des liaisons bêta. Les oligosaccharides de glucose liés en alpha sont des oligomères constitués de D-glucose liés par des liaisons alpha. Ces oligosaccharides présents dans le principe actif selon l’invention présentent un degré de polymérisation (DP) compris entre 2 et 10 unités, et présentent une masse molaire inférieure à 1800 Daltons. Préférentiellement, ils représentent entre 1,5 et 4 g/L. Les oligosaccharides de glucose liés en bêta sont des oligosaccharides, constitués de D-glucose liés par des liaisons bêta. Ces oligosaccharides présents dans le principe actif selon l’invention présentent un degré de polymérisation compris entre 2 et 10 unités, et présentent une masse molaire inférieure à 1800 Daltons. Préférentiellement, ils représentent entre 1,5 et 4 g/L. Aussi, le principe actif cosmétique selon l’invention comprend des sucres de structures oligosaccharidiques ayant un degré de polymérisation (DP) inférieur à 10, soit d’une masse molaire inférieure à 1800 Daltons. L’extrait selon l’invention comprend également des peptides. Préférentiellement, ceux-ci représentent au moins 30% en poids de matière sèche de l’extrait. La teneur en peptides peut être déterminée en mesurant la teneur en azote total selon la méthode de KJELDHAL (référence : Official method of analysis of the A.O.C., 12th ed. W Horwitz, E.D., New-York, 15-60, 1975). Les peptides ont une masse molaire inférieure à 2000Da. La répartition et la masse molaire des peptides peut être déterminée par chromatographie F.P.L.C. d’exclusion stérique (Fast Protein Liquid Chromatography), la quantité de chaque fraction peptidique est déterminée par dosage spectrophotométrique selon la méthode de Lowry (Lowry et al., Protein measurement with the Folin reagent, J. Biol. Chem., 193, 265-275, 1951). Lorsque l’extrait selon l’invention comprend des cendres minérales, le taux de cendres est préférentiellement compris entre 8 et 18% en poids par rapport à la matière sèche de l’extrait, encore plus préférentiellement compris entre 10 et 15%. La teneur en cendres brutes peut être déterminée par la pesée des résidus issus de l’incinération des échantillons à 550°C dans un four à moufle. La nature des minéraux contenus dans les cendres peut être déterminée par spectrométrie d’émission optique (ICP / OES). Le dosage des ions chlorure contenus dans les cendres est réalisé par titration avec du nitrate d’argent. Préférentiellement, les cendres minérales contenues dans l’extrait selon l’invention comprennent du calcium, du phosphore, des ions chlorure, du magnésium, du soufre et du sodium. La teneur en matières sèches de l’extrait peut être déterminée par la pesée des résidus issus du séchage de l’extrait selon l’invention à 105°C dans une étuve jusqu’à l’obtention d’un poids constant. Préférentiellement, l’extrait selon l’invention sous forme liquide a une teneur en matières sèches de : 10 g/L à 40 g/L, encore plus préférentiellement de 17 g/L à 26 g/L. Le principe actif cosmétique selon l’invention peut se présenter sous forme liquide ou sous forme solide. Lorsqu’il se présente sous forme liquide, le principe actif selon l’invention est préférentiellement l’extrait tel que décrit précédemment en tant que tel. Il se présente sous forme d’un liquide limpide, de couleur jaune très clair et présentant une faible odeur. Il peut toutefois être plus coloré et/ou être décoloré par tout procédé connu de l’homme du métier. Le principe actif peut également être combiné à des agents de stabilisation ou des agents de conservation. Lorsqu’il se présente sous forme solide le principe actif selon l’invention est préférentiellement constitué par l’extrait d’ Aureobasidium pullulans tel que précédemment décrit et par un support choisi parmi la maltodextrine, la gomme arabique, la lécithine de soja ou l’isomalt. Selon un mode de réalisation, particulièrement adapté, l’extrait représente au moins 10% en poids du principe actif et le support au plus 90% en poids du principe actif. Dans le cas d’une forme solide dans laquelle le principe actif est associé à un support, les teneurs en peptides, en sucres et en cendres minérales dans le principe actif sont modifiées, le support étant généralement constitué majoritairement de sucres. Le principe actif selon l’invention peut éventuellement être intégré dans une composition cosmétique, notamment une composition comprenant au moins 0,1% en poids dudit principe actif. En particulier, la composition est sous une forme adaptée à une application topique tel qu’une crème ou une lotion. Procédé d’extraction L’extrait constituant ou contenu dans le principe actif selon l’invention peut être obtenu par tout procédé comprenant au moins une étape d’extraction de la biomasse de la levure d’ Aureobasidium pullulans . Selon la présente invention, l’extraction de la biomasse de la levure ne consiste pas en la récupération du surnageant de la culture de la levure. Préalablement au procédé d’obtention de l’extrait en tant que tel, il convient de produire la biomasse d’ Aureobasidium pullulans . Cette étape est réalisée selon le mode de culture des levures dans un milieu adapté à leur développement, par exemple un milieu de culture adapté classique pour l’homme de métier. Une fois la biomasse obtenue, on réalise une étape d’extraction en vue d’obtenir les molécules actives, préférentiellement des sucres. L’étape d’extraction est réalisée par tout moyen connu de l’homme du métier, par exemple par autolyse induite, sonication, homogénéisation, lyse enzymatique, hydrolyse chimique, hydrolyse enzymatique. Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, le principe actif selon l’invention est obtenu par la mise en œuvre des étapes suivantes : culture de la biomasse d’ Aureobasidium pullulans dans un milieu de culture, préférentiellement un milieu de culture adapté, solubilisation à raison d’au moins 50 g/L de la biomasse d’ Aureobasidium pullulans dans l’eau, extraction, préférentiellement extraction des sucres, traitement thermique, séparation de la phase soluble et insoluble, et récupération de la phase soluble, purification par tri moléculaire, et éventuellement décoloration et désodorisation, éventuellement concentration et filtration stérilisante. La séparation de la phase soluble et insoluble est réalisée par tout moyen connu de l’homme du métier, par exemple par centrifugation, filtration ou décantation. Préférentiellement, la séparation des phases soluble et insoluble est réalisée pour récupérer la phase soluble contenant entre autres les sucres solubles, tels que les oligosaccharides. Eventuellement, le procédé comprend une étape de filtration après la récupération de la phase soluble pour éliminer les particules encore en suspension. Ainsi, cette étape de filtration permet la purification de la phase soluble récupérée et est réalisée afin d’éliminer les molécules de haut poids moléculaire. Le produit obtenu à ce stade peut éventuellement être encore concentré et/ou purifié, préférentiellement par des étapes d’ultrafiltrations successives à travers des filtres de porosité différentes, en conservant les filtrats à chaque étape et/ou par une méthode de type chromatographique. Le produit obtenu après filtration, avant ou après concentration et filtration stérilisante, est un extrait d’ Aureobasidium pullulans , et constitue une première forme du principe actif selon l’invention, se présentant alors sous forme liquide. L’extrait obtenu peut ensuite être séché et associé ou non à un support, pour se présenter sous forme solide. Cette phase peut être réalisée par la mise en œuvre des étapes suivantes : un support d’atomisation, de préférence la maltodextrine, est ajouté dans l’extrait d’ Aureobasidium pullulans , d’au plus 90% (en masse/volume) ; cette solution est ensuite concentrée sous vide ; une élimination des bactéries éventuellement présentes est réalisée par traitement thermique ; l’atomisation permet d’obtenir une poudre. Les étapes des procédés décrits ci-avant, prises individuellement sont usuelles dans le domaine des extractions d’actifs à partir de levures et l’homme du métier est à même d’en ajuster les paramètres réactionnels sur la base de ses connaissances générales. Utilisation cosmétique Le principe actif selon l’invention est particulièrement d’intérêt pour ses effets anti-âge. L’invention vise ainsi une utilisation cosmétique, non thérapeutique, du principe actif selon l’invention pour ses effets cosmétiques, seul pour au moins un effet cosmétique anti-âge. Par utilisation non thérapeutique, on entend au sens de l’invention une utilisation cosmétique du principe actif selon l’invention ou d’une composition cosmétique le comprenant, destinée à des personnes saines non malades, en particulier à des personnes présentant une peau saine. Préférentiellement, le principe actif selon l’invention, seul ou dans une composition, vise à être utilisé en application topique sur la peau. Le principe actif selon l’invention peut être introduit dans des compositions d’au moins 0,1% en poids du principe actif selon l’invention. Ces compositions comprennent, outre l’actif, un milieu physiologiquement acceptable et de préférence cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d’inconfort inacceptables pour l’utilisateur telles que des rougeurs, tiraillements ou picotements. L’invention est à présent illustrée par des exemples non limitatifs de compositions selon l’invention et par des résultats. Exemples Exemple 1 – Principe actif selon l’invention Le principe actif de l’exemple 1 est obtenu à partir d’une levure d’ Aureobasidium pullulans isolée de rosiers. Le principe actif de l’exemple 1 est obtenu par le procédé suivant : Culture de Aureobasidium pullulans dans un milieu de culture adapté Solubilisation de la biomasse de la levure Aureobasidium pullulans dans l’eau, à raison de 50g/l, Extraction des sucres, Traitement thermique, Séparation des phases solubles et insolubles, Purification par tri moléculaire, Concentration, et Filtration stérilisante. Le principe actif obtenu possède les caractéristiques suivantes : Teneur en Matières Sèches = 20,1 g/L dont : Teneur en Sucres Totaux (selon la méthode de Dubois) = 6,9 g/L (34%, en poids par rapport à la matière sèche) Dont la teneur en oligosaccharides de glucose liés en alpha = 2,5g/L Dont la teneur en oligosaccharides de glucose liés en bêta = 2,5g/L Teneur en peptides (selon la méthode KJELDHAL) = 6,6 g/L (33%, en poids par rapport à la matière sèche) Teneur en cendres minérales = 2,5 g/L (12%, en poids par rapport à la matière sèche) pH = 3,5 Liquide limpide, jaune très clair, faible odeur Exemple 2 – Principe actif hors invention Le principe actif de l’exemple 2 est également obtenu à partir d’une levure d’ Aureobasidium pullulans isolée de rosiers. Le principe actif de l’exemple 2 est obtenu par le procédé suivant : Culture de Aureobasi di um pullulans dans un milieu de culture adapté Solubilisation de la biomasse de la levure Aureobasidium pullulans dans l’eau, à raison de 50g/l, Extraction des protéines, Traitement thermique, Séparation des phases solubles et insolubles, Purification par tri moléculaire, Concentration, et Filtration stérilisante. Le principe actif obtenu possède les caractéristiques suivantes : Teneur en Matières Sèches = 26,8 g/L dont : Teneur en Sucres Totaux (selon la méthode Dubois) = 2,5 g/L (9%, en poids par rapport à la matière sèche) Teneur en Peptides (selon la méthode de KJELDHAL) = 12,4 g/L (46%, en poids par rapport à la matière sèche) Teneur en Cendres minérales = 5 g/L (19%, en poids par rapport à la matière sèche) pH = 3,6 Liquide limpide, jaune très clair, odeur faible. Exemple 3 – Principe actif hors invention Le principe actif de l’exemple 3 est obtenu à partir du surnageant de culture de la biomasse de Aureobasidium pullulans . Culture de Aureobasidium pullulans dans un milieu de culture adapté Séparation physique afin de récupérer le surnageant de culture de la biomasse Filtration stérilisante Le principe actif obtenu possède les caractéristiques suivantes : Teneur en Matières Sèches = 9,6 g/L dont : Teneur en Sucres Totaux (selon la méthode de Dubois) = 1,6 g/L (17%, en poids par rapport à la matière sèche) Teneur en Protéines (selon la méthode de Lowry) = 0,11 g/L (1%, en poids par rapport à la matière sèche) Teneur en Cendres minérales = 6,2 g/L (65%, en poids par rapport à la matière sèche) pH = 6,9 Liquide limpide, jaune clair, odeur faible. Evaluation de l’effet cosmétique du principe actif selon l’invention Essai 1 - Effet du principe actif selon l’invention sur le vieillissement des cellules du compartiment épidermique La présente étude vise à étudier l’expression de certains gènes et à déterminer le taux de certaines protéines dans des kératinocytes et traités avec les différents extraits. Les kératinocytes sont vieillis au moyen d’un stress radicalaire UVB, ou sont issus de donneurs âgés. Le tableau 1 liste les gènes du compartiment épidermique modulés lors d’un vieillissement par stress radicalaire. Symbole Nom HSP90AA1 heat shock protein 90 alpha family class A member 1 SIRT1 sirtuin 1 Le tableau 2 liste les protéines du compartiment épidermique modulées lors d’un vieillissement par stress radicalaire. Nom Symbole Parkinson disease protein 7 DJ-1 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 6 TNR6 Les résultats de l’étude sont présentés dans les tableaux 3 à 5 ci-après. Le tableau 3 représente l’expression des gènes HSP90AA1 et SIRT1 dans des kératinocytes soumis à un stress radicalaire UVB et traités avec les différents extraits. HSP90AA1 (%) Efficacité (%) SIRT1 (%) Efficacité (%) Kératinocytes non vieillis, non stressés Témoin 100 100 Kératinocytes vieillis par stress UVB Témoin 39 16 EXEMPLE 1 0,5% 58 + 48 33 + 106 EXEMPLE 2 0,5% 46 + 18 20 + 25 EXEMPLE 3 0,5% 44 + 13 3 0 Le principe actif selon l’invention, riche en sucres, (exemple 1) présente un meilleur effet sur l’expression des gènes HSP90AA1 et SIRT1 dans des kératinocytes vieillis par stress UVB que les extraits hors invention (exemple 2 et exemple 3). Le tableau 4 ci-après représente les taux d’expression des protéines DJ-1 et TNR6 dans des kératinocytes vieillis par stress UVB et traités avec les différents extraits. DJ-1 (%) Efficacité (%) TNR6 (%) Efficacité (%) Kératinocytes non vieillis, non stressés Témoin 100 100 Kératinocytes vieillis par stress UVB Témoin 2496 507 EXEMPLE 1 0,5% 2227 - 11 310 - 39 EXEMPLE 2 0,5% 2290 - 8 417 - 18 EXEMPLE 3 0,5% 2453 - 2 507 0 Le principe actif selon l’invention, riche en sucres, (exemple 1) présente un meilleur effet sur le taux de protéines DJ-1 et TNR6 dans des kératinocytes vieillis par stress UVB que les extraits hors invention (exemple 2 et exemple 3). Le tableau 5 ci-après représente les taux d’expression de la protéine DJ-1 dans des kératinocytes issus de donneurs âgés et traités avec le principe actif selon l’invention (exemple 1). DJ-1 (%) Efficacité (%) Kératinocytes jeunes Témoin 100 Kératinocytes âgés Témoin 118 EXEMPLE 1 0,5% 54 - 54 Le principe actif (exemple 1) selon l’invention, riche en sucres, présente un effet significatif sur le taux d’expression de la protéine DJ-1 dans des kératinocytes issus de donneurs âgés. Ce résultat confirme les résultats obtenus sur des kératinocytes vieillis par stress radicalaire. Ainsi, l’extrait riche en sucres selon l’exemple 1 présente un effet sur les voies du métabolisme du vieillissement (HSP90AA1 +48%, SIRT1 +106%, DJ 1 -54%, TNR6 -39%). L’extrait selon l’exemple 2, riche en protéines, a un effet beaucoup plus faible sur les voies du métabolisme du vieillissement. Aussi, il est moins efficace que l’extrait selon l’exemple 1. L’extrait selon l’exemple 3, extrait du surnageant, ne présente pas d’effet sur les voies du métabolisme de vieillissement dans le compartiment épidermique. Aussi, un extrait riche en sucres permet d’obtenir un effet amélioré sur les voies du métabolisme de vieillissement. Essai 2 – Effet du principe actif selon l’invention sur la migration des kératinocytes âgés La présente étude vise à étudier la capacité des différents extraits à augmenter la migration cellulaire de kératinocytes humains normaux. La migration cellulaire est la capacité de certaines cellules à se mouvoir, cette capacité migratoire est réduite avec l’âge. La présente étude est réalisée sur des kératinocytes issus de donneurs âgés (> 60 ans). Le tableau 6 ci-après représente la quantification de la migration des kératinocytes dans la blessure réalisée dans des cultures de kératinocytes âgés, traités avec les différents extraits. Migration / Témoin (%) Efficacité / Témoin (%) Témoin 100 EXEMPLE 1 0,5% 123 +23 EXEMPLE 3 0,5% 100 0 L’extrait selon l’exemple 3 ne présente pas d’effet sur la migration des kératinocytes âgés. A l’inverse, l’extrait selon l’exemple 1 stimule la migration des kératinocytes âgés, de 23%. Là encore, l’extrait riche en sucres selon l’invention de l’exemple 1 permet un effet amélioré dans la stimulation de la migration des kératinocytes âgés et donc une efficacité anti-âge. Principe actif cosmétique comprenant au moins un extrait de la biomasse de levure de l’espèce Aureobasidium pullulans , caractérisé en ce que l’extrait comprend au moins 25% de sucres, en poids de matière sèche de l’extrait. Principe actif cosmétique selon la revendication précédente caractérisé en ce que la levure Aureobasidium pullulans est isolée à partir de rosiers. Principe actif cosmétique selon l’une des revendications précédentes caractérisé en ce que la levure est isolée à partir des fleurs, et/ou des épines et/ou des racines de Rosa sp . Principe actif cosmétique selon l’une des revendications précédentes caractérisé en ce que l’extrait comprend au moins 30% de sucres, en poids de matière sèche de l’extrait. Principe actif cosmétique selon la revendication précédente, caractérisé en ce que les sucres de l’extrait sont composées d’au moins 80% d’oligosaccharides, en poids de matière sèche des sucres. Principe actif cosmétique selon la revendication précédente, caractérisé en ce que les oligosaccharides sont des oligosaccharides de glucose liés en alpha et/ou des oligosaccharides de glucose liés en bêta. Principe actif cosmétique selon l’une des revendications 5 ou 6, caractérisé en ce que les oligosaccharides ont une masse molaire inférieure à 1800 Da. Principe actif cosmétique selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu’il se présente sous forme liquide ou sous forme solide. Principe actif cosmétique selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu’il est susceptible d’être obtenu par un procédé comprenant les étapes suivantes : culture de la biomasse de Aureobasidium pullulans dans un milieu de culture solubilisation d’au moins 50g/L de Aureobasidium pullulans dans l’eau, extraction des sucres, traitement thermique, séparation de la phase soluble et insoluble, et récupération de la phase soluble, purification par tri moléculaire, et éventuellement décoloration et désodorisation, et éventuellement concentration et filtration stérilisante. Procédé de préparation d’un principe actif selon l’une des revendications 1 à 9 comprenant les étapes suivantes : culture de la biomasse de Aureobasidium pullulans dans un milieu de culture solubilisation d’au moins 50g/L de Aureobasidium pullulans dans l’eau, extraction des sucres, traitement thermique, séparation de la phase soluble et insoluble, et récupération de la phase soluble, purification par tri moléculaire, et éventuellement décoloration et désodorisation, et éventuellement concentration et filtration stérilisante.