Brevet FR3145476A1 — publié le 20240809

La présente invention concerne un extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro , caractérisé en ce que ledit extrait comprend au moins une lignanamide. La présente invention concerne également une composition pharmaceutique, dermatologique, nutraceutique ou cosmétique comprenant en tant qu’actif l’extrait décrit ci-dessus. EXTRAIT DE CANNABIS SATIVA CULTIVE IN VITRO DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention concerne des compositions pharmaceutiques, dermatologiques, nutraceutiques ou cosmétique. Ces compositions sont caractérisées en ce qu’elles contiennent un extrait de tissus racinaires de la plante Cannabis sativa , qui ont été cultivés in vitro et présentent une composition biochimique spécifique et avantageuse. ETAT DE LA TECHNIQUE La plante de Cannabis sativa est cultivée depuis la période du néolithique. Il s’agit d’une plante herbacée annuelle de la famille de Cannabinacées. Plusieurs chémotypes ont été identifiés, basés sur les teneurs en cannabinoïdes majoritaires, pouvant être classés en deux familles de variétés principales : le chanvre ou cannabis fibreux, avec de faible teneur en cannabinoïdes ( Les utilisations de cette plante sont multiples, elles vont de la confection de textile, de matériau de construction et de papier (chanvre), aux utilisations pharmaceutiques, vétérinaires, nutraceutiques et cosmétiques (chanvre et cannabis médical). Parmi les nombreux composés d’intérêt extraits de Cannabis sativa , les cannabinoïdes sont des composés produits uniquement par cette plante ; ces composés sont très étudiés, en particulier pour leurs propriétés thérapeutiques. Parmi la centaine de cannabinoïdes identifiés, le cannabidiol (CBD) et le delta-9-tetrahydrocannabinol (THC) sont les plus connus. Mais la plante Cannabis sativa comprend également des composés actifs communs avec d’autres plantes, et en particulier les composés d’intérêt suivants (Brenneisen, 2007) : Des terpènes, comprenant 5, 10, 15, 20, ou 30 carbones (respectivement dénommés hémiterpènes, monoterpènes, sesquiterpènes, diterpènes, et triterpènes) ; Des hydrocarbones, notamment des alcanes ; Des sucres, acides gras, alcools, esters ; Des flavonoids ; Des phytostérols ; et Des alcaloïdes, en particulier la cannabisativine et les lignanamides. Dans la plante de Cannabis sativa , toutes les structures anatomiques sont exploitées : les tiges pour leur teneur en fibres de haute qualité, les graines pour leurs propriétés nutritionnelles, notamment leur forte teneur en acides gras et protéines, et naturellement les fleurs et les feuilles qui contiennent l’essentiel des composés cannabinoïdes. Bien qu’elles ne contiennent que des traces de cannabinoïdes, les racines de la plante Cannabis sativa sont utilisées pour des applications thérapeutiques ou nutraceutiques depuis l’antiquité. Malgré cette longue histoire, les racines de Cannabis sativa ont été quelque peu délaissées par la médecine moderne, au profit de l’utilisation d’autres parties de la plante. Néanmoins, le potentiel anti-inflammatoire des composés phytochimiques identifiés dans la racine (alcaloïdes, triterpénoïdes, phytostérols) a récemment relancé l’intérêt des professionnels pour les extraits de racine de Cannabis sativa (Ryz et al ., 2017). En particulier, l’article de (Kornpointner et al ., 2021) présente les résultats d’une analyse de la composition phytochimique d’extraits de racines de Cannabis sativa , par chromatographie en phase gazeuse couplée à de la spectrométrie de masse (GC-MS). Cette analyse a permis d’identifier de nouveaux composés jamais décrits dans les racines de C. sativa . Les triterpénoïdes majoritaires (friedelin et epifriedelinol) ont été quantifiés dans des extraits issus de différents chémovars (« variétés chimiques ») cultivés en pleine terre, extraits selon différentes techniques. Il apparait que la composition biochimique des extraits de racine est dépendante de nombreux paramètres : chémovar employé, méthode de culture, technologie d’extraction, pour ne citer que quelques-uns. Des techniques de culture in vitro de plantes de Cannabis sativa ont été développées. En particulier, (Whaby et al ., 2013) ont montré qu’il était possible de transformer des racines de C. sativa cultivés in vitro, dans des boites de pétri, avec des souches d’ Agrobacterium rhizogenes . Cette transformation permet la génération de « chevelu racinaire » qui peut être ensuite cultivé dans un milieu nutritif liquide ou solide, afin de générer de la biomasse. Toutefois, ces racines de C. sativa cultivées in vitro n’ont jamais été caractérisées de manière précise du point de vue de leur composition biochimique. La présente invention est relative à un nouvel extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro , présentant une composition biochimique particulière, et en particulier comprenant au moins une lignanamide. Or, à ce jour, dans la plante de Cannabis sativa, la présence de lignanamides n’avait été observée que dans les graines (Yan et al ., 2015). Cet extrait de racines de C. sativa est caractérisé en qu’il est issu d’une culture in vitro de tissus racinaires de la plante. Ce procédé de culture permet d’obtenir une biomasse qui est ensuite récoltée, broyée et séchée afin d’obtenir ledit extrait comprenant au moins une lignanamide. Avantageusement, cet extrait présente des propriétés anti-oxydantes et anti-inflammatoires qui en font un produit actif pouvant être utilisé dans de nombreuses applications, notamment en pharmacie, en dermatologie, en cosmétique et en nutraceutique. Les inventeurs ont découvert que les extraits de tissus racinaires de Cannabis sativa cultivés in vitro comprenant au moins une lignanamide présentent des propriétés pharmaceutiques, dermatologiques, cosmétiques et nutraceutiques jamais décrites jusqu'à présent. La présente invention se rapporte à un extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro comprenant au moins une lignanamide. Par souci de concision, dans la présente demande, les expressions « extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro » ou « extrait de tissus racinaires de C. sativa » ou encore « extrait de tissus racinaires selon l’invention » sont utilisées indifféremment et désignent toutes un « extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro comprenant au moins une lignanamide ». L’invention concerne également des procédés d’obtention de cet extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro comprenant au moins une lignanamide. Le premier procédé de préparation de l’extrait est caractérisé en ce qu’il comprend la transformation de plantules avec une bactérie Agrobacterium rhizogenes pour l’obtention d’un chevelu racinaire, cultivé dans un milieu nutritif, puis séché et broyé. Le second procédé de préparation d’un extrait de tissus racinaires de C. sativa est caractérisé en ce qu’il comprend la dédifférentiation d’un explant de C. sativa en cal, puis la différentiation du cal en tissus racinaires adventis, cultivés dans un milieu nutritif, puis séchés et broyés. Enfin, l’invention se rapporte également à des compositions pharmaceutique, dermatologique, nutraceutique ou cosmétique, comprenant en tant qu’actif cet extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro comprenant au moins une lignanamide. DESCRIPTION DES FIGURES La représente une culture sur milieu solide de tapis racinaire de cannabis sativa agro-transformé âgés de 5 semaines. La représente une culture en milieu liquide de tissus racinaires de cannabis sativa agro-transformés en verrerie. (A) Biomasse le jour de sa mise en suspension, (B) biomasse après cinq jours de croissance, (C) biomasse après 8 jours de croissance. La montre la culture en milieu liquide de tissus racinaires de cannabis sativa agro-transformés en bioréacteur. (A) Biomasse dans le bioréacteur, (B) Biomasse récoltée hors du bioréacteur. La présente des photos de la biomasse de tissus racinaires de cannabis sativa agro-transformés séché et broyé au mortier. (A) Biomasse séchée, (B) Biomasse broyée. La montre les profils spectraux RMN (Résonance Magnétique Nucléaire) des deux fractions apolaire (UP) et polaire (LOW) obtenues après une extraction par solvant des composés biochimiques contenus dans l’extrait de tissus racinaires de l’invention. La présente les profils LC/MC des deux fraction apolaire et polaire obtenues après extraction par solvant des composés biochimiques contenus dans l’extrait de tissus racinaires de l’invention. DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION La présente demande concerne un extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro comprenant au moins un alcaloïde, et plus particulièrement au moins une lignane, et de manière préférée au moins une lignanamide. Au sens de l’invention, on désigne par Cannabis sativa ou C. sativa la plante ainsi nommée, également désignée par le terme « chanvre ». Ce terme inclut toutes les variétés et cultivars connus. Le terme « tissus racinaires » désigne des tissus végétaux différencié en racines, à savoir la partie souterraine de la plante lorsque celle-ci est cultivée en champ. Ces tissus végétaux présentent les mêmes caractéristiques et fonctions que les racines, en particulier assurer l'approvisionnement en eau et en éléments minéraux de la plante, permettre l’ancrage de la plante sur le substrat et stocker les réserves en assimilats. Au sens de l’invention, l’expression « cultivés in vitro » désigne le fait que les tissus racinaires sont cultivés hors sol, en l’absence de terre, et sont en particulier cultivés dans des milieux nutritifs adaptés, solides ou liquides en environnement contrôlé. Cette culture in vitro est réalisée dans des milieux bien connus de la personne de l’art, tel que par exemple le milieu MS (pour milieu de Murashige and Skoog). Le terme « extrait » désigne le fait que les tissus racinaires de C. sativa obtenus par culture in vitro , également désignés par le terme « biomasse », sont soumis à diverses étapes de procédé (notamment séchage et broyage) afin d’obtenir ledit extrait de tissus racinaires, qui est un extrait sec, dépourvu d’eau. Au sens de l’invention, l’expression « au moins une » signifie « une ou plusieurs ». Un alcaloïde est une substance organique d'origine végétale, contenant au moins un atome d'azote dans la molécule, en grande majorité hétérocyclique. Les alcaloïdes ont généralement une puissante action toxique ou thérapeutique (les composés tels que caféine, morphine, quinine, sont des alcaloïdes). Les lignanes sont des substances organiques d’origine végétale, dont la formule générale (1) est représentée ci-dessous : Les lignanes comprennent au moins deux groupements « phénol » caractérisés par la présence d’un cycle aromatique hydrocarboné et d’un ou plusieurs groupes hydroxyles (OH), ici désignés par le nom de monolignol. Il existe trois principaux monolignols : l'alcool coniférylique, l'alcool sinapylique et l'alcool para -coumarylique. De très nombreux lignanes ont été répertoriées, qui diffèrent par le type de liaison entre les deux unités et les modifications qui interviennent après la dimérisation. Les propriétés anti-oxydantes et anti-inflammatoires des lignanes ont été rapportées, par exemple dans la demande de brevet WO 2021/021744. Les lignanamides représentent une sous-catégorie des lignanes. Elles dérivent des acides aminés tyrosine et phénylalanine, et sont issues d’un couplage oxydatif avec des amides d'acide hydroxy-cinnamique comme intermédiaires. La revue (Leonard et al. , 2020) présente leur voie de biosynthèse à partir des précurseurs N-caffeoylthyramine et N-feruoylthyramine. Les lignanamides incluent les cannabisines A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K, L, M, N et O, ainsi que la grossamide. La formule (2) ci-dessous est celle de la cannabisine F, de numéro CAS 163136-19-4 : La formule (3) ci-dessous est celle de la cannabisine G, de numéro CAS 163136-20-7: Les lignanamides présentent des propriétés anti-inflammatoires et anti-oxydantes. Ces propriétés ont notamment été mises en évidence pour la cannabisine F et la grossamide issues des graines de Cannabis sativa ; pour la mélongénamide C issue des racines de Solanum melongena ; et pour la cannabisine B issue des coques des graines de Cannabis sativa (Leonard et al ., 2020, voir notamment le tableau 2). L’article (Wang et al., 2019) décrit les propriétés anti-inflammatoires de la cannabisine F. La présente invention concerne un extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro comprenant au moins une lignanamide, en particulier choisie parmi les cannabisines A, B, C, D, E, F, G, H, I, J, K, L, M, N et O, et la grossamide. Plus spécifiquement, l’extrait de tissus racinaires de C. sativa est caractérisé en ce que ladite au moins une lignanamide est une cannabisine, en particulier choisie parmi les cannabisines A, B, C, D, E, F et G. De manière préférée, ledit extrait de tissus racinaires comprend au moins une lignanamide choisie parmi les cannabisines D, F et G (respectivement de numéro CAS 144506-19-4, 163136-19-4 et 163136-20-7). L’extrait selon l’invention pourra comprendre une, deux, trois, quatre, cinq, six ou plus de lignanamides différentes. En particulier, l'invention a pour objet un extrait de tissus racinaires de Cannabis sativa cultivés in vitro riche en lignanamides, typiquement contenant au moins 0,01% en poids de lignanamides par rapport au poids de l'extrait sec. Avantageusement, l'extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro contient au moins 0,1%, avantageusement au moins 1%, en poids de lignanamides par rapport au poids total de l'extrait sec. Avantageusement, l’extrait de tissus racinaires de Cannabis sativa cultivés in vitro contient également d’autres composés d’intérêt et notamment des phytostérols, des dérivés de tyramine tels que N-coumaroyltyramine, N-feruloyltyramine, N-caffeoyltyramine, des triterpènes ainsi que d’autres alcaloïdes tels que la cannabisativine ou l’anhydrocannabisativine. De manière avantageuse, l’extrait de tissus racinaires de l’invention contient, outre au moins une lignanamide, au moins un autre composé actif choisi parmi la N-coumaroyltyramine, la N-feruloyltyramine, la N-caffeoyltyramine, la cannabisativine, ou tout mélange de ces composés. Au sens de l’invention, le terme « biomasse » désigne une masse de matière vivante, ici de matière végétale, représentant un ensemble de matières organiques susceptibles de devenir une source d’énergie ou de matière. Selon une mise en œuvre de l’invention, ledit extrait de tissus racinaires cultivés in vitro est constitué de biomasse de tissus racinaires, séchée et broyée. Lorsque lesdits tissus racinaires ont subi une transformation par une bactérie de type Agrobacterium Rhizogenes , les tissus racinaires adoptent une structure particulière qui est désignée « chevelu racinaire ». Il s’agit d’une prolifération racinaire importante liée à un déséquilibre hormonal des racines, qui est considérée comme une maladie par les producteurs. Toutefois dans le cadre d’une culture in vitro , ayant pour but de produire de la biomasse en quantité sur une durée minimale, cette prolifération racinaire est appréciée. Selon cette mise en œuvre, ledit extrait de tissus racinaires de C. sativa peut être constitué de biomasse de chevelu racinaire de C. sativa cultivé in vitro, séchée et broyée. Selon un autre aspect, la présente invention concerne un extrait de chevelu racinaire de C. sativa, obtenu par transformation des tissus racinaires de C. sativa par une bactérie Agrobacterium suivie d’une culture in vitro . Préférentiellement, ladite bactérie Agrobacterium est Agrobacterium rhizogenes, et elle ne contient pas d’ADN exogène. Procédés de préparation de l’extrait de tissus racinaires selon l’invention La présente invention concerne également des procédés de préparation d’un extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro. Le fait de cultiver des tissus racinaires de C. sativa in vitro permet d’obtenir des tissus racinaires présentant des propriétés tout à fait intéressantes, notamment des tissus comprenant au moins une lignanamide. Selon une première mise en œuvre, le procédé de préparation d’un extrait de tissus racinaires de C. sativa comprend la transformation de plantules de C. sativa avec une bactérie Agrobacterium rhizogenes pour l’obtention d’un chevelu racinaire, cultivé dans un milieu nutritif, puis séché et broyé. Selon une mise en œuvre particulière, ce premier procédé comprend les étapes successives suivantes : Mise en culture de graines de C. sativa dans un milieu de germination permettant le développement de plantules ; Transformation des tissus racinaires desdites plantules avec une bactérie Agrobacterium rhizogenes pour l’obtention d’un chevelu racinaire ; Culture in vitro , dans un milieu nutritif liquide, sous agitation, dudit chevelu racinaire de C. sativa ; Prélèvement, séchage et broyage dudit chevelu racinaire ainsi généré. Les différents milieux utilisés dans ce procédé sont bien connus de l’Homme du métier. On peut citer notamment comme exemple de milieu nutritif le milieu MS enrichi en saccharose. L’étape (b) de transformation des plantules avec une bactérie Agrobacterium rhizogenes est bien connue de l’Homme du métier. En particulier, (Wahby et al., 2013) ont présenté un protocole d’infection de la plante Cannabis sativa par Agrobacterium rhizogenes, réalisé in vitro sur cinq différentes variétés de cette espèce. Dans le procédé selon la présente invention, la bactérie Agrobacterium rhizogenes ne contient pas d’ADN exogène. En effet, la transformation des tissus racinaires a pour but d’obtenir la croissance de tissus dits « chevelu racinaire », mais non de transformer lesdits tissus génétiquement de manière à faire exprimer des protéines codées par des séquences nucléotidiques exogènes. Ainsi, dans le procédé selon l’invention, seul l’ADN-T de Agrobactreium rhizogenes, est introduit dans les cellules des tissus racinaires transformés. En particulier l’ADN-T est composé des éléments rol A, B, C et D qui sont des facteurs de croissance et de différenciation des cellules, les gènes iaaM et iaaH qui sont responsables de la synthèse d’auxine. L’étape (c) de culture in vitro dure au moins 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 jours, ou 7 jours, ou 14 jours, ou 21 jours, ou 28 jours, en fonction de la quantité / du volume de chevelu racinaire souhaitée. Les conditions de cette culture (agitation, température, lumière) seront aisément déterminées par la personne de l’art sur la base de ses connaissances générales. L’étape (d) de prélèvement, séchage et broyage des tissus racinaires sera réalisée selon les protocoles bien connus de la personne de l’art. En ce qui concerne le séchage, il sera de préférence réalisé en utilisant un dessiccateur, ou par lyophilisation. En particulier, le broyage pourra être réalisé grâce à un mortier ou tout autre équipement de broyage. L’extrait séché et broyé est ensuite conservé dans un pot, de préférence à une température de 4°C. Selon une seconde mise en œuvre, le procédé de préparation d’un extrait de tissus racinaires de C. sativa comprend la dédifférentiation d’un explant de C. sativa en cal, puis la différentiation du cal en tissus racinaires adventis, cultivés dans un milieu nutritif, puis séchés et broyés. Un tel procédé est bien connu de la personne de l’art et est notamment décrit dans l’article de (Farag & Kayser, 2015). L’explant pourra être toute partie de la plante, et sera de préférence stérilisé préalablement à sa mise en culture. Les expressions « tissus racinaires adventis » ou « racines adventives » désignent des racines qui apparaissent le long d'une tige, spécialement dans les entre-nœuds. Selon une mise en œuvre particulière, ce second procédé comprend les étapes suivantes : a) Mise en culture in vitro d’un explant de C. sativa sur un milieu nutritif solide ; b) Induction de callogenèse par ajout de phytohormones audit milieu nutritif solide ; c) Culture du cal obtenu à l’étape (b) dans un milieu nutritif liquide comprenant un mélange de phytohormones spécifique, sous agitation, pour induire la formation de tissus racinaires adventis ; d) Prélèvement, séchage et broyage desdits tissus racinaires ainsi générés. L’étape (b) d’induction de callogenèse est avantageusement réalisée par l’ajout des cytokines et/ou d’auxines. L’étape (c) de culture in vitro dure au moins 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7 jours, ou au moins 14 jours, ou au moins 21 jours, ou au moins 28 jours, ou au moins 35 jours, ou encore au moins 42 jours, en fonction de la quantité / du volume de tissus racinaires adventis souhaitée. Les conditions de cette culture (agitation, température, lumière) seront aisément déterminées par la personne de l’art sur la base de ses connaissances générales. L’étape (d) sera réalisée comme précédemment décrit dans le cadre du premier procédé. Avantageusement, ces procédés de préparation de l’extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro permettent de concentrer les lignanamides présentes dans ces tissus racinaires, de manière à ce que cet extrait contienne au moins 0,01% en poids de lignanamides, de préférence au moins 0,1% en poids et plus avantageusement au moins 1% en poids par rapport au poids total de l'extrait sec. Compositions comprenant l’extrait de tissus racinaires de C. sativa selon l’invention L'invention a également pour objet une composition comprenant en tant qu'actif un extrait de tissus racinaires de C. sativa tel que défini ci-dessus ou tel qu’obtenu par l’un des procédés de l’invention, éventuellement en association avec un excipient approprié et/ou un véhicule. La présente invention concerne une composition pharmaceutique, une composition dermatologique, une composition nutraceutique et une composition cosmétique. Ladite composition est de préférence formulée pour être administrée par voie topique externe ou orale. La composition selon l’invention comprend en tant qu’actif une quantité efficace d’extrait de tissus racinaires de C. sativa selon l’invention. Au sens de l’invention, on entend par « quantité efficace », la quantité nécessaire et suffisante pour obtenir l’effet recherché selon l’invention, à savoir l’activité pharmacologique, dermatologique, nutraceutique ou cosmétique dudit extrait après son administration à un individu. Cette « quantité efficace » dépend de la nature de l’extrait de tissus racinaires, de l’effet recherché, de l’individu à qui est administré la composition de l’invention et de sa condition physiopathologique. Une quantité efficace peut aisément être déterminée par toute méthode connue de l’homme de métier, notamment, par exemple, au travers d’essais cliniques. Naturellement, une telle composition pourra comprendre au moins un autre composé actif, ainsi qu’un ou des excipients et un ou des véhicules pharmaceutiquement acceptables. A titre d’excipient, on peut citer le carbonate de magnésium, le dioxyde de titane, le lactose, le mannitol et d'autres sucres, le talc, les lactoprotéines, la gélatine, l’amidon, la cellulose et ses dérivés, les huiles animales et végétales, le polyéthylène glycol, et des solvants tels que l'eau et des mono-ou polyalcools tels que le glycérol. De nombreux véhicules pharmaceutiquement acceptables peuvent être utilisés, par exemple, l’eau, l’eau tamponnée, une solution saline, une solution de glycine, ainsi que des agents nécessaires pour reproduire les conditions physiologiques comme par exemple des agents tampons et ajusteurs de pH, des surfactants comme l’acétate de sodium, le lactate de sodium, le chlorure de sodium, le chlorure de potassium, ou le chlorure de calcium, cette liste n’étant pas limitative. Une composition selon l’invention peut comprendre également des additifs, des liants, des agents de gonflement ou lubrifiants, ou des agents de solubilisation habituellement mis en œuvre dans le domaine. La composition selon la présente invention peut en outre comprendre au moins un adjuvant pharmaceutique ou cosmétique connu de l'homme du métier, choisi parmi les épaississants, les conservateurs, les parfums, les colorants, des filtres chimiques ou minéraux, les agents hydratants, les eaux thermales, etc. L’invention concerne en particulier une composition pharmaceutique et/ou dermatologique, comprenant en tant qu’actif un extrait de tissus racinaires de C. sativa tel que défini ci-dessus ou tel qu’obtenu par l’un des procédés de l’invention. Cette composition pharmaceutique selon l’invention peut être formulée sous toute forme galénique appropriée telle qu’une solution injectable, des comprimés, des gélules, ou des patchs transdermiques. En ce qui concerne la composition dermatologique selon l’invention, elle sera formulée selon une forme administrable par voie topique, et donc sous forme de crème, onguent ou gel. Cette composition pharmaceutique et/ou dermatologique pourra être stérilisée par des techniques de stérilisation bien connues de la personne de l’art. L’invention concerne également une composition nutraceutique, définie comme étant une composition prise par voie orale et ayant un effet pharmaceutique et/ou cosmétique, comprenant en tant qu’actif un extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro . L’invention concerne également un complément alimentaire comprenant en tant qu’actif un extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro . L’invention concerne également une composition cosmétique comprenant, en tant qu’actif, un extrait de tissus racinaires de C. sativa tel que défini ci-dessus ou tel qu’obtenu par le procédé de l’invention. Par « composition cosmétique », on entend au sens de la présente invention un produit tel que défini dans la Directive 93/35/CEE du 14 juin 1993 modifiant la Directive 76/768/CEE. Selon un autre aspect de l'invention, la composition comprend en outre au moins un autre composé actif en plus de l'extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro. Cet autre composé peut être en particulier choisi parmi des actifs classiquement utilisés en dermatologie, en pharmaceutique, en nutraceutique ou en cosmétique et connus de l'Homme de l'art, tels que les émollients, les actifs hydratants, les kératorégulateurs, les kératolytiques, les agents cicatrisant et/ou restructurant de la barrière cutanée, les agonistes PPAR, RXR ou LXR, les agents sébo-régulateurs, les agents anti-irritants et/ou anti-inflammatoires et/ou apaisants, les agents anti-oxydants, les agents anti-âge, les agents dépigmentants ou hypopigmentants, les agents pigmentants, les agents lipolytiques ou inhibiteurs de la lipogénèse ou encore les agents anti-cellulite ou amincissants, les filtres et écrans solaires minéraux ou organiques (pigmentaires ou ultrafins), les composés antifongiques, les conservateurs, les agents anti-bactériens, les pré et probiotiques, les antibiotiques, et les composés immnumodulateurs. Voies d’administration (Ryz et al., 2017) enseigne que la plupart des compostions à base d’extraits de racines de Cannabis sativa sont des compositions adaptées pour une administration par voie topique. La composition selon l'invention peut être formulée sous la forme de différentes préparations adaptées à une administration topique, à une administration orale, rectale, vaginale, nasale, auriculaire ou bronchique, ainsi qu'à une administration parentérale. La composition selon l'invention est avantageusement formulée sous la forme de différentes préparations adaptées à une administration topique, plus particulièrement pour application sur la peau, et/ou les phanères et/ou les muqueuses. Dans le cadre d'une utilisation pharmaceutique, ou dermatologique, ou cosmétique, la composition sera avantageusement formulée sous la forme d'une préparation adaptée à une administration topique. Selon cette variante, les différentes préparations sont adaptées à l'administration topique et incluent notamment les crèmes, les émulsions, les laits, les pommades, les lotions, les huiles, les solutions aqueuses ou hydro-alcooliques ou glycoliques, les poudres, les patchs, les sprays, les shampooings, les vernis ou tout autre produit pour application externe. Dans le cadre d'une utilisation à visée nutraceutique ou cosmétique («cosmet-food »), la composition sera avantageusement formulée sous la forme d'une préparation adaptée à une administration orale. Selon cette deuxième variante, les différentes préparations sont adaptées à une administration orale ; l'extrait de tissus racinaires de Cannabis sativa pouvant entrer soit dans un complément alimentaire soit dans une composition nutraceutique. La composition nutraceutique peut se présenter sous forme de l'extrait de tissus racinaires de Cannabis sativa en tant que tel ou bien sous forme de gélules ou de capsules molles de gélatine ou végétales dans le cadre de la présente invention. Utilisations de l’extrait de tissus racinaires selon l’invention L'invention a également pour objet l'utilisation d'un extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro pour la fabrication d'une composition pharmaceutique, dermatologique, nutraceutique ou cosmétique. Comme préalablement indiqué, l’extrait selon l’invention présente des propriétés anti-inflammatoires et anti-oxydantes tout à fait remarquables, qui peuvent être mises à profit dans des utilisations pharmaceutique, dermatologique, nutraceutique ou cosmétique. Selon un premier aspect, l’invention concerne un extrait de tissus racinaires de C. sativa tel que décrit ci-dessus ou tel qu’obtenu par l’un des procédés mentionnés ci-dessus, ou une composition pharmaceutique et/ou dermatologique le comprenant, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement des troubles ou pathologies de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères, en particulier dans la prévention et/ou le traitement des altérations du tissu dermique. On peut citer comme exemple d'altération du tissu dermique les déséquilibres de la matrice dermique tels les rides, les problèmes de cicatrisation, la fermeté ou l'élasticité de la peau. Ainsi, l'extrait selon l'invention ou la composition pharmaceutique et/ou dermatologique le comprenant est également avantageusement utilisée dans la prévention du vieillissement, en particulier du vieillissement intrinsèque ou encore du vieillissement photo-induit et de la peau vergeturée. En particulier, l'extrait selon l'invention ou la composition pharmaceutique et/ou dermatologique le comprenant est destiné à la prévention et/ou au traitement des réactions ou pathologies allergiques, inflammatoires, irritatives ou des troubles de la barrière ou de l'homéostasie de la peau, des phanères (cheveux et ongles) et/ou des muqueuses (gencives, parodontes, muqueuses génitales) immature(s), normale(s) ou mature(s)/âgée(s). En particulier, l'extrait selon l'invention ou la composition pharmaceutique et/ou dermatologique le comprenant est destiné à une utilisation dans la prévention et le traitement des réactions inflammatoires ou irritatives de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères. Avantageusement, l'extrait selon l'invention ou la composition pharmaceutique et/ou dermatologique le comprenant peut être utilisé(e) pour la prévention et/ou le traitement des réactions, troubles ou pathologies : de la peau, telles que l'acné, la rosacée ou érythrocouperose, le psoriasis, la dermite du siège, la dermatite atopique, l'eczéma, la dermatite de contact, la dermatite irritative, la dermatite allergique, la dermite séborrhéique (croûte de lait), la peau sensible, la peau réactive, la peau sèche (xérose), la peau déshydratée, la peau avec rougeur, l'érythème cutanée, la peau photosensibilisée, la peau pigmentée (mélasma, pigmentation post-inflammatoire...), la peau dépigmentée (vitiligo), les dartres, les gerçures, les piqûres, les crevasses en particulier des seins, les coups de soleil, les inflammations dus aux rayons de toutes sortes, les irritations par agents chimiques, physiques (par exemple contrainte de tension pour les femmes enceintes), bactériologiques, fongiques ou viraux, parasitaires (poux, gale, teigne, acariens, dermatophytes), radiologiques ou par déficit de l'immunité innée (peptides antimicrobiens) ou acquise (cellulaire, humorales, cytokines), et/ou des muqueuses telles que les gencives et parodontes pouvant présenter des gingivites (gencives sensibles des nouveaux nés, problèmes d'hygiène, dus au tabagisme ou autres), des parodontopathies, ou des muqueuses génitales pouvant présenter des irritations des sphères génitales maies ou femelles externes ou internes et/ou des phanères tels que les ongles (ongles cassants, fragiles ...) et des cheveux (alopécie, pellicules, hirsutismes, dermites séborrhéiques, folliculites) immatures, normaux ou matures, présentant en particulier des troubles du cuir chevelu tels que les alopécies (ou pelade) androgénétiques, aiguës, localisées, cicatricielles, congénitales, occipitales du nourrisson, aerata, dues à la chimiothérapie/radiothérapie ou encore l'effluvium télogène, l'effluvium anagène, la dystrophie pilaire, la trichotillomanie, la teigne ou les pellicules grasses ou sèches. Selon un deuxième aspect, l’invention concerne l’utilisation nutraceutique ou cosmétique d’un extrait de tissus racinaires de C. sativa tel que décrit ci-dessus ou tel qu’obtenu par l’un des procédés mentionnés ci-dessus. L'invention concerne également un procédé de soin cosmétique de la peau et/ou des phanères et/ou des muqueuses, en vue d'améliorer leur état et/ou leur aspect, comprenant l'administration ou consistant à administrer une composition cosmétique ou un extrait selon la présente invention. Dans un mode de réalisation du procédé cosmétique selon l'invention, la composition ou l'extrait selon l'invention est utilisé en vue d'améliorer la fermeté, l'élasticité ou la tonicité de la peau, ou de prévenir le manque de fermeté ou de tonicité ou d'élasticité de la peau, on encore pour synthétiser et/ou protéger la matrice extracellulaire, ou encore pour prévenir et/ou traiter les altérations du tissu dermique. Dans un autre mode de réalisation du procédé cosmétique selon l'invention, la composition ou l'extrait selon l'invention est utilisé comme agent antivieillissement ou anti-âge de la peau, des phanères ou des muqueuses, en particulier contre le vieillissement intrinsèque ou extrinsèque, notamment comme agent photo-vieillissement ou agent anti-UV, ou encore comme agent pour lutter contre l'accumulation du tissu adipeux et la peau avec cellulite. De manière particulièrement avantageuse, l'extrait ou la composition selon l'invention est utilisé dans des applications cosmétiques, avantageusement par voie topique, notamment pour le soin ou l'hygiène de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères tels que les cheveux, ou encore pour la prévention et/ou le traitement des troubles de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères tels que les cheveux. EXEMPLES Exemple 1. Procédé de préparation d’un extrait de tissus racinaires de C. sativa selon l’invention Des graines de chanvre ont été stérilisées et mise en culture dans des boites de pétri composé d’un milieu de culture de germination (base MS). Après une semaine, les cultures ont été placés à la lumière (photo périodicité 8h – 16h). Les plantules sont ensuite infectées par une bactérie du type Agrobacterium rhizogenes. Pour cela les plantules sont mises au contact de la bactérie pendant une semaine. Puis les plantules sont placées sur un milieu de sélection enrichi en source carboné. Les tissus racinaires commencent à apparaitre au bout de quelques jours, et sont repiqués sur un milieu de même composition jusqu’à l’obtention de tapis racinaires. La présente de tels tapis racinaires, visibles au bout de 3 semaines. Afin d’amplifier les cultures, une partie du tapis racinaire est prélevé et mis en suspension dans un milieu de même composition. Les tissus croient ainsi par un facteur moyen de 2 tous les 3 jours à température ambiante sous agitation orbitale. La montre les récipients contenant cette biomasse en culture, après différents temps de culture. Au bout de 8 jours, on distingue nettement la structure de « chevelu racinaire ». La représente le bioréacteur utilisé (3A) ainsi que la biomasse constituée de chevelu racinaire récoltée à l’issue de la culture (3B). A la fin de la culture, la biomasse est prélevée, séchée (figure 4A) et broyée au mortier (figure 4B). Exemple 2. Analyse de la composition biochimique de l’extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivé in vitro A- Préparation de l'échantillon L'échantillon est un extrait sec de tissus racinaires de Cannabis sativa cultivés in vitro, obtenu selon le procédé comprenant une transformation des tissus racinaires par Agrobacterium rhizogenes . A partir de cet échantillon, deux extraits ont été préparé à l’aide d’un système de solvants biphasiques composé d’acétate d’éthyle, d’acétonitrile et d’eau en proportion 3 / 3/ 4 (v/v). Deux phases non miscibles ont ainsi été séparées : une phase apolaire contenant des molécules apolaires et une phase polaire contenant des molécules polaires. Pour obtenir un extrait sec permettant de procéder à la caractérisation biochimique, les deux phases ont ensuite été évaporées à l’évaporateur, séparément. B - Analyses RMN et identification des principaux métabolites Chaque extrait a été analysé par RMN HSQC et les profils de RMN sont présentés dans la . C - Analyses par chromatographie liquide haute performance / spectrométrie de masse (HPLC/MS) Les 2 extraits apolaire et polaire ont également été analysés par LC/MS en mode ion positif (ESI+) et négatif (ESI-). Pour l’HPLC, deux phases mobiles différentes ont été utilisés selon l’extrait : une phase polaire a été utilisée pour l’extrait apolaire (par exemple H20 + 0.1% acide formique) et une non polaire pour l’extrait polaire (par exemple CH3CN + 0.1% acide formique). Pour la spectrométrie de masse, les rapports masse/charges allant de 50 à 2000 m/z ont été observés. Les résultats de l’analyse biochimique par LC/MS des phases apolaire et polaire sont présentés dans le tableau 1 ci-dessous, ainsi que dans la . LC temps de rétention (min) m/z observé Composition élémentaire Δppm Annotation Extrait apolaire 2.42 311.1455 [M+H] + C11H23N2O8 0.3 Glucopine, Mannopine ou isomère 309.1294 [M-H] - C11H21N2O8 -1.3 2.54 312.1295 [M+H] + C11H22NO9 0.0 Acide Mannopinique ou isomère 2.55 195.0500 [M-H] - C6H11O7 -2.6 Acide Gluconique ou isomére 3.09 341.1085 [M-H] - C12H21O11 0.3 Saccharose 4.61 294.1194 [M+H] + C11H20NO8 1.0 Non assigné 292.1029 [M-H] - C11H18NO8 -1.0 4.73 243.0618 [M-H] - C9H11N2O6 0.4 Uridine 4.74 268.1045 [M+H] + C10H14N5O4 -0.1 Adenosine 4.82 282.0836 [M-H] - C10H12N5O5 -0.7 Guanosine 4.96 180.1389 [M+H] + C11H18NO 0.6 Non assigné 5.25 253.1188 [M+H] + C12H17N2O4 0.0 Dipeptide Phe-Ser ou isomère 5.28 144.0485 [M+H] + ? - Non assigné 5.36 270.2542 [M+H] + ? - Non assigné 5.61 380.2914 [M+H] + C21H38N3O3 0.3 Non assigné 5.74 267.1345 [M+H] + C13H19N2O4 0.0 Dipeptide Thr-Phe ou isomère 265.1189 [M-H] - C13H17N2O4 0.4 5.98 299.0770 [M-H] - C13H15O8 1.0 Hydroxybenzoyl glucose 5.98 382.3071 [M+H] + C21H40N3O3 0.3 Cannabisativine 6.20 188.0713 [M+H] + C11H10NO2 0.5 Non assigné 6.41 284.2338 [M+H] + C15H30N3O2 0.0 Non assigné 6.54 233.1504 [M+H] + C10H21N2O4 1.3 Dipeptide Thr-Leu ou isomère 231.1345 [M-H] - C10H19N2O4 0.0 6.66 217.1554 [M+H] + C10H21N2O3 0.3 Dipeptide Val-Val ou isomére 215.1400 [M-H] - C10H19N2O3 1.9 6.79 215.1397 [M-H] - C10H19N2O3 0.5 Dipeptide Val-Val ou isomère 6.98 266.2232 [M+H] + ? - Non assigné 7.05 249.1244 [M-H] - C13H17N2O3 2.0 Non assigné 7.22 467.1552 [M-H] - C22H27O11 -0.2 Non assigné 7.50 236.0556 [M-H] - C11H10NO5 -1.3 Non assigné 7.50 268.2386 [M+H] + C15H30N3O -1.1 Non assigné 7.59 326.2445 [M+H] + C17H32N3O3 0.3 Non assigné 7.87 444.1658 [M-H] - C23H26NO8 0.0 N-Coumaroyltyramine glucoside 282.1129 [M-H-Glu] - C17H16NO3 -0.4 N-Coumaroyltyramine fragment 7.98 476.1922 [M+H] + C24H30NO9 0.2 N-Feruloyltyramine glucoside 474.1771 [M-H] - C24H28NO9 1.5 N-Feruloyltyramine glucoside 312.1239 [M-H-Glu] - C18H18NO4 1.0 N-Feruloyltyramine fragment 8.10 474.1762 [M-H] - C24H28NO9 -0.4 N-Feruloyltyramine glucoside isomer2 8.20 328.2602 [M+H] + C17H34N3O3 0.6 Non assigné 8.53 488.1920 [M-H] - C25H30NO9 -0.2 Non assigné 8.78 121.0290 [M-H] - C7H5O2 0.0 Acide benzoique 9.59 298.1076 [M-H] - C17H16NO4 -1.0 N-Caffeoyltyramine 9.80 453.2337 [M-H] - C20H37O11 0.2 Non assigné 10.00 187.0966 [M-H] - C9H15O4 -2.1 Acide azelaique 10.57 423.2235 [M-H] - C19H35O10 1.2 Non assigné 10.82 325.2277 [M+H] + C21H29N2O -0.9 Non assigné 10.94 284.1288 [M+H] + 282.1132 [M-H] - C17H18NO3 C17H16NO3 0.4 0.7 N-Coumaroyltyramine 11.26 314.1393 [M+H] + 312.1241 [M-H] - C18H20NO4 C18H18NO4 0.3 1.0 N-Feruloyltyramine 12.06 625.2550 [M+H] + 623.2396 [M-H] - C36H37N2O8 C36H35N2O8 0.0 0.5 Cannabisine D ou G ou F ou isomère 12.19 328.1548 [M+H] + C19H22NO4 -0.3 Non assigné 12.27 625.2550 [M+H] + 623.2401 [M-H] - C36H37N2O8 C36H35N2O8 0.0 1.3 Cannabisine D ou G ou F ou isomère 13.21 327.2178 [M-H] - C18H31O5 2.1 Dérivé d’acide gras C18 14.18 329.2334 [M-H] - C18H33O5 1.8 Dérivé d’acide gras C18 14.55 565.2342 [M+H] + C34H33N2O6 0.5 Non assigné 14.70 625.2556 [M+H] + 623.2394 [M-H] - C36H37N2O8 C36H35N2O8 1.0 0.3 Cannabisine D ou G ou F ou isomère 15.41 639.2704 [M+H] + 637.2552 [M-H] - C37H39N2O8 C37H37N2O8 -0.3 0.3 Non assigné 16.11 316.2852 [M+H] + C18H38NO3 0.0 Dérivé Sphingosine 16.49 934.3574 [M-H] - ? - Non assigné 17.03 318.3006 [M+H] + C18H40NO3 -0.6 Dérivé Sphingosine 18.82 476.2780 [M-H] - ? - Non assigné 19.99 603.3898 [M+H] + 601.3741 [M-H] - C35H55O8 C35H53O8 0.2 0.2 Non assigné 24.21 471.3109 [M-H] - C29H43O5 -0.2 Non assigné 24.34 481.2936 [M+H] + C30H41O5 -3.7 Non assigné 24.63 271.2271 [M-H] - C16H31O3 -0.7 Acide Palmitique 25.59 355.3218 [M-H] - C22H43O3 1.7 Acide Hydroxydocosanoique 26.26 455.3532 [M-H] - C30H47O3 1.5 Triterpène (oleanolique ou ursolique ou isomère) 26.90 299.2593 [M-H] - C18H35O3 2.3 Dérivé d’acide gras C18 28.22 605.4058 [M-H] - C36H53N4O4 -1.5 Non assigné Extrait polaire 2.42 311.1455 [M+H] + 309.1294 [M-H] - C11H23N2O8 C11H21N2O8 0.3 -1.3 Glucopine or Mannopine ou isomére 2.54 312.1295 [M+H] + C11H22NO9 0.0 Acide Mannopinique ou isomère 2.55 195.0500 [M-H] - C6H11O7 -2.6 Acide Gluconique ou isomère 2.77 404.1041 [M-H] - C12H22NO14 0.2 Non assigné 3.09 341.1085 [M-H] - C12H21O11 0.3 Saccharose 3.18 253.0926 [M-H] - C9H17O8 1.2 Hexoside de Glycerol 3.91 606.0735 [M-H] - C25H20NO17 0.7 Non assigné 4.61 294.1194 [M+H] + 292.1029 [M-H] - C11H20NO8 C11H18NO8 1.0 -1.0 Non assigné 4.82 282.0836 [M-H] - C10H12N5O5 -0.7 Guanosine 5.74 267.1345 [M+H]+ 265.1189 [M-H]- C13H19N2O4 C13H17N2O4 0.0 0.4 Dipeptide Thr-Phe ou isomère 6.54 233.1504 [M+H]+ 231.1345 [M-H]- C10H21N2O4 C10H19N2O4 1.3 0.0 Dipeptide Thr-Leu ou isomère 6.66 217.1554 [M+H]+ 215.1400 [M-H]- C10H21N2O3 C10H19N2O3 0.3 1.9 Dipeptide Val-Val ou isomère 6.98 266.2232 [M+H]+ ? - Non assigné 7.50 236.0556 [M-H]- C11H10NO5 -1.3 Non assigné 7.50 268.2386 [M+H]+ C15H30N3O -1.1 Non assigné 8.20 328.2602 [M+H]+ C17H34N3O3 0.6 Non assigné Les résultats présentés dans le tableau 1 mettent en évidence la présence des composés d’intérêt suivants dans l’extrait selon l’invention : Des acides phénoliques dont des triterpènes, notamment de l’acide oléanolique et de l’acide ursolique ; Stérols, notamment beta-sitostérol, Acides gras, saturés et non saturés, Nucléosides, di-peptides et Un grand nombre d’alcaloïdes dont la cannabisativine et des dérivés de tyramine. Parmi des dérivés de tyramine, on note en particulier la présence de cannabisines, probablement de cannabisine D, F ou G. Sont également présents dans l’extrait selon l’invention les composés suivants : N-coumaroyltyramine, N-feruloyltyramine et N-caffeoyltyramine. REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES Brenneisen, Chemistry and Analysis of Phytocannabinoids and Other Cannabis Constituents Rudolf Brenneisen, 2007) (livre) William Leonard, Pangzhen Zhang, Danyang Ying & Zhongxiang Fang (2021) Lignanamides: sources, biosynthesis and potential health benefits – a minireview, Critical Reviews in Food Science and Nutrition, 61:8, 1404-1414. Yan X, Tang J, dos Santos Passos C, Nurisso A, Simões-Pires CA, Ji M, Lou H, Fan P. Characterization of Lignanamides from Hemp (Cannabis sativa L.) Seed and Their Antioxidant and Acetylcholinesterase Inhibitory Activities. J Agric Food Chem. 2015 Dec 16;63(49):10611-9. doi: 10.1021/acs.jafc.5b05282. Epub 2015 Dec 2. PMID: 26585089. Ryz NR, Remillard DJ, Russo EB. 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American Journal of Plant Sciences , 6 (11), 1874. Extrait de tissus racinaires de C. sativa cultivés in vitro , caractérisé en ce que ledit extrait comprend au moins une lignanamide. Extrait de tissus racinaires de C. sativa selon la revendication 1, caractérisé en ce que ladite au moins une lignanamide est une cannabisine, en particulier choisie parmi les cannabisines A, B, C, D, E, F et G. Extrait de tissus racinaires de C. sativa selon l’une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que ledit extrait est constitué de tissus racinaires, séchés et broyés. Extrait de tissus racinaires de C. sativa selon l’une des revendication 1 à 3, caractérisé en ce que ledit extrait est constitué de chevelu racinaire de C. sativa, séché et broyé. Procédé de préparation d’un extrait de tissus racinaires de C. sativa selon la revendication 4, comprenant la transformation de plantules avec une bactérie Agrobacterium rhizogenes pour l’obtention d’un chevelu racinaire, cultivé dans un milieu nutritif, puis séché et broyé. Procédé de préparation d’un extrait de tissus racinaires de C. sativa selon l’une des revendications 1 à 3, comprenant la dédifférentiation d’un explant de C. sativa en cal, puis la différentiation de ce cal en tissus racinaires adventis, cultivés dans un milieu nutritif, puis séchés et broyés. Composition pharmaceutique comprenant en tant qu’actif un extrait de tissus racinaires de C. sativa selon l’une revendications 1 à 4 ou tel qu’obtenu par le procédé de l’une des revendications 5 ou 6. Composition dermatologique, comprenant en tant qu’actif un extrait de tissus racinaires de C. sativa selon l’une revendications 1 à 4 ou tel qu’obtenu par le procédé de l’une des revendications 5 ou 6. Composition nutraceutique comprenant en tant qu’actif un extrait de tissus racinaires de C. sativa selon l’une revendications 1 à 4 ou tel qu’obtenu par le procédé de l’une des revendications 5 ou 6. Composition cosmétique comprenant en tant qu’actif un extrait de tissus racinaires de C. sativa selon l’une revendications 1 à 4 ou tel qu’obtenu par le procédé de l’une des revendications 5 ou 6.