Brevet FR3150711A1 — publié le 20250110

L’invention concerne une composition pour une utilisation dans le traitement par voie orale d’une némathelminthiase, ladite composition comprenant de l’éléganolone et/ou un diterpène linéaire de type bifurcanol, et un procédé de préparation d’un anthelmintique correspondant Composition pour une utilisation dans le traitement par voie orale d’une némathelminthiase et procédé de préparation d’un anthelmintique Domaine de l’invention Le domaine de l’invention est celui des traitements antiparasitaires, notamment contre les nématodes gastro-intestinaux. Plus précisément, l’invention concerne une composition pour une utilisation dans le traitement par voie orale d’une némathelminthiase et un procédé de préparation d’un anthelmintique. L’invention est notamment destinée à un usage pharmaceutique ou vétérinaire et trouve également une application dans le domaine de l’alimentation animale. Art antérieur Les nématodes gastro-intestinaux sont une préoccupation majeure pour la santé humaine et animale dans le monde entier. Chez le bétail, ces parasites affectent la santé des animaux en provoquant inappétence, diarrhée, anémie et, dans les cas graves, la mort. Le parasitisme nuit également à la productivité et entraîne des pertes économiques importantes dans la production animale. En l'absence de stratégies alternatives efficaces, la lutte contre les nématodes parasites affectant la santé humaine ou animale repose essentiellement sur l'utilisation d'anthelminthiques chimiques. Cependant, leur utilisation intensive et parfois inappropriée a conduit au développement de résistances aux anthelminthiques. Par conséquent, il est urgent de trouver des solutions alternatives pour un contrôle durable des helminthes. Afin de prévenir l'émergence d'une résistance aux médicaments anthelminthiques, un nombre croissant d'études se concentrent désormais sur des composés d'origine naturelle susceptibles de contrôler des populations de nématodes gastro-intestinaux. Pour lutter contre les infections parasitaires causées par des nématodes, il est désormais connu d’utiliser du thymol, du carvacrol, du gamma-terpinène ou des huiles essentielles de terpinénol. Il est également connu que des diterpènes linéaires, tels que l’éléganolone ou le bifurcanol, sont présents dans les macroalgues de l’espèce B. bifurcata Des études ont montré que l’éléganolone a une activité anti-protozoaire contre Trypanosoma et Plasmodium ( Pais, A. C., Saraiva, J. A., Rocha, S. M., Silvestre, A. J., & Santos, S. A. (2019). Current research on the bioprospection of linear diterpenes from Bifurcaria bifurcata: From extraction methodologies to possible applications. Marine drugs , 17 (10), 556.). Une autre étude a par ailleurs montré l’activité antimitotique du bifurcanol isolé à partir de B. bifurcata . Objectifs de l’invention L’invention a notamment pour objectif de fournir un traitement anthelmintique qui soit efficace contre des parasites nématodoïdes et en particulier des parasites nématodoïdes des sous-ordres Rhabditina et/ou Spirurina, sensibles ou résistants aux anthelminthiques connus en médecine vétérinaire ou humaine, et en particulier qui soit plus efficace que le thymol ou le carvacrol, et qui préserve d’autre part la santé de l’hôte infecté et l’environnement. L’invention a en particulier pour objectif de fournir un traitement anthelmintique à partir de composés d’origine naturelle qui soit plus efficace que le thymol ou le carvacrol. Un autre objectif de l’invention est de fournir une telle technique qui soit simple à mettre en œuvre et peu couteuse. La présente invention a pour objet une composition pour une utilisation dans le traitement par voie orale d’une némathelminthiase, ladite composition comprenant de l’éléganolone et/ou un diterpène linéaire de type bifurcanol. Les inventeurs ont en effet découvert que l’éléganolone et/ou le bifurcanol ou un diterpène linéaire de type bifurcanol seul ou associés ensemble s’avèrent avoir une efficacité élevée contre des organismes zooparasitaires de type nématodoïdes. Dans le cadre de l’invention, on entend par « éléganolone » un dipertène linéaire présent par exemple dans les macroalgues Bifurcaria bifurcata , Cystoseira elegans ou Cystoseira balearica ayant des propriétés chimiques et/ou une structure chimique analogue aux éléganolones décrits dans les trois publications scientifiques suivantes : - Li, J., Lan, J., Liu, Z., & Li, Y. (1998). Studies on the synthesis of elegan-type linear diterpenes: the efficient total syntheses of eleganolone, eleganolone acetate, elegandiol, eleganonal, and epoxyeleganolone. Journal of natural products, 61(1), 92-95. - Gouveia, V., Seca, A. M., Barreto, M. C., & Pinto, D. C. (2013). Di-and sesquiterpenoids from Cystoseira genus: structure, intra-molecular transformations and biological activity. Mini reviews in medicinal chemistry, 13(8), 1150-1159. - Munoz, J., Culioli, G., & Köck, M. (2013). Linear diterpenes from the marine brown alga Bifurcaria bifurcata: A chemical perspective. Phytochemistry reviews, 12, 407-424. Par ailleurs, on entend dans le cadre de l’invention par « diterpène linéaire de type bifurcanol » un diterpène linéaire présent par exemple dans les macroalgues Bifurcaria bifurcata et ayant des propriétés chimiques et/ou une structure chimique analogue au composé référencé 39 dans la publication de Munoz et al. Dans un mode de réalisation préféré de l’invention, ledit éléganolone ou ledit diterpène de type bifurcanol est présent au sein d’un extrait de Bifurcaria bifurcata , de Cystoseira elegans ou de Cystoseira balearica incorporé dans ladite composition. Dans un mode de réalisation particulier de l’invention, ledit extrait de Bifurcaria bifurcata , de Cystoseira elegans ou de Cystoseira balearica est un extrait aqueux de Bifurcaria bifurcata , de Cystoseira elegans ou de Cystoseira balearica , un extrait obtenu par extraction de composés de Bifurcaria bifurcata , de Cystoseira elegans ou de Cystoseira balearica dans un solvant ou un extrait obtenu par extraction de composés de Bifurcaria bifurcata , de Cystoseira elegans ou de Cystoseira balearica dans une huile. Selon un aspect de l’invention, ladite némathelminthiase est causée par des organismes du sous-ordre Rhabditina et/ou Spirurina et en particulier causée par des organismes de la famille des Ascarididae des Heligosomatidae ou des Trichostrongylidae. Selon un autre aspect de l’invention, ladite némathelminthiase est causée par des organismes résistants aux anthelminthiques appartenant au groupe des lactones macrocycliques, tel que l’ivermectine, la moxidectine et l’eprinomectine, et/ou au groupe des benzimidazoles, tel que le thiabendazole, et/ou au groupe des imidazothiazoles, tel que le levamisole et/ou au groupe des tetrahydropyrimidines, tel que le pyrantel. Dans un mode de réalisation particulier de l’invention, ladite composition est une composition sous une forme adaptée à une administration par voie orale pour une utilisation dans le traitement d’une némathelminthiase intestinale. L’invention concerne également un procédé de préparation d’un anthelmintique destiné à être administré par voie orale comprenant : - préparer une composition comprenant de l’éléganolone et/ou un diterpène linéaire de type bifurcanol - encapsuler ladite composition dans des particules de levure ou l’incorporer dans une matrice d’amidon gélatinisé. Liste des figures D’autres caractéristiques et avantages de l’invention apparaitront plus clairement à la lecture de la description suivante de modes de réalisation de l’invention, donnés à titre de simples exemples illustratifs et non limitatifs, et des figures annexées parmi lesquels : est une comparaison de l'efficacité de différents extraits de Bifurcaria bifurcata provenant de France (congelée) et du Portugal (séchée) pour inhiber le développement des larves d’ Heligmosomoïdes bakeri . Des contrôles, avec de l’eau et avec du DMSO à 1%, ont été réalisés. Les extraits aqueux, les différents extraits organiques (heptane, EtOAc et BuOH) et la fraction aqueuse résiduelle ont été testés à 1 g/L. Les extraits sont issus soit du lot d’algues congelées et récoltées en France (en août 2019), soit du lot d’algues séchées et récoltées au Portugal (en juillet 2020). Les résultats proviennent d'au moins trois expériences indépendantes, avec n=6 par échantillon à chaque fois. Les analyses statistiques ont été réalisées à l'aide d'un test de Kruskal-Wallis avec test de comparaison multiple, avec ***p est une comparaison de l'efficacité entre différents extraits de Bifurcaria bifurcata provenant du Portugal avec deux procédés de conservation différents (séchage ou congélation) sur l’inhibition du développement des larves d’ Heligmosomoïdes bakeri. Un contrôle avec de l’eau a été réalisé. Les extraits aqueux et les différents extraits au butanol (BuOH) ont été testés à 1 g/L. Les extraits sont issus d’un lot d’algue qui a été récoltée en novembre 2021 au Portugal. Ces algues ont été soit séchées (vert) soit congelées (violet) avant l’extraction. Les résultats proviennent d'au moins deux expériences indépendantes, avec n=6 par échantillon à chaque fois. Les analyses statistiques ont été réalisées à l'aide d'un test de Kruskal-Wallis avec test de comparaison multiple, avec ***p présente l’activité d’extraits EtOAc issus de biomasse de Bifurcaria bifurcata provenant de lots différents sur le développement des larves d’ Heligmosomoides bakeri. Les fractions organiques EtOAc ont été réalisées directement sur la biomasse d’algue provenant de lots de B. bifurcata différents. Trois d’entre eux proviennent d’algues récoltées en France à différentes périodes (mars 2022 en marron, juin 2021 en turquoise et août 2019 en bleu) et congelées avant extraction. Deux autres proviennent d’algues récoltées au Portugal en novembre 2021 et soit séchées (vert), soit congelées (violet) avant extraction. Le pourcentage d’inhibition du développement des larves d’ H. bakeri , du stade L1/L2 au stade L3, est observé en présence d’eau (contrôle négatif) et de ces différents extraits EtOAc à 0,5 g/L. sont des spectres RMN 1H (a) et 13C (b) de la fraction heptane de Bifurcaria bifurcata. Deux molécules ont pu être identifiées grâce aux spectres RMN obtenus pour les atomes d’hydrogène (1H, correspond au profil a) et les atomes de carbone (13C, correspond au profil b) que sont l’éléganolone et le bifurcanol, deux diterpènes linéaires. Les positions des atomes d’hydrogène et de carbone sont numérotées (en orange pour l’éléganolone et en vert pour le bifurcanol), ainsi que les pics correspondant sur les spectres RMN obtenus. illustre l’effet pharmacologique de Bifurcaria bifurcata sur le récepteur à l’acétylcholine sensible à la nicotine d’ Ascaris suum. Etude de l’effet pharmacologique d’un extrait aqueux de B. bifurcata en tant qu’agoniste (a,c) ou en tant qu’antagoniste (b,d) sur le récepteur nicotinique formé de la sous-unité ACR-16 d’ A. suum dans le système d’expression en œuf de Xenopus laevis . (a,b) Représentation des courants enregistrés grâce à la technique Two-Electrode Voltage -Clamp suite à l’application de 100 µM d’acétylcholine, de 1 g/L et 5 g/L d’extrait aqueux de B. bifurcata seule ou en co-application avec l’ACh. Les temps d’applications des produits sont indiqués par les barres horizontales (noir pour ACh et vert pour B. bifurcata ). (c,d) Box-plots représentant les courants induits par l’application de 100 µM d’ACh, d’1 g/L ou 5 g/L de l’extrait aqueux de B. bifurcata seul ou en co-application avec 100 µM d’ACh. Les courants sont normalisés avec l’amplitude de courant obtenue à la première application de 100 µM d’ACh. présente les résultats d’une étude de l’effet antagoniste des différents extraits organiques de Bifurcaria bifurcata sur le N-AChR d’ Ascaris suum. Box-plots représentant les amplitudes de courants normalisées suite à une co-application d’extraits organiques de B. bifurcata à 0,01 g/L avec 100 µM d’ACh sur le récepteur ACR-16 d’ Ascaris suum. Les extraits organiques utilisés sont les suivants : Bif AE correspond à un extrait à l’acétate d’éthyle obtenu après une extraction à l’heptane, Bif AEP correspond à une extraction à l’acétate d’éthyle comme premier solvant et Bif H correspond à une extraction à l’heptane comme premier solvant . Les courants sont normalisés par rapport au courant induit par la première application d’ACh (100 µM). illustre l’effet pharmacologique de Bifurcaria bifurcata sur le récepteur sensible à la nicotinique (N-AChR) et le récepteur sensible au Morantel (M-AChR) de Parascaris equorum. Etude de l’effet agoniste et antagoniste d’un extrait de B. bifurcata sur les récepteurs à l’acétylcholine de P. equorum , le N-AChR constitué de la sous-unité ACR-16 (a) et le M-AChR constitué des sous-unités ACR-26 et ACR-27 (b) Box-plots représentant les amplitudes de courants normalisées suite à l’application d’un extrait aqueux de B. bifurcata à 1 g/L et à 5 g/L ou d’une co-application de B. bifurcata à 1 g/L et à 5 g/L avec 100 µM d’ACh. Les courants sont normalisés par rapport au courant induit par la première application d’ACh (100 µM) Description détaillée de l’invention Exemples 1. Matériel biologique Deux premiers lots d’algues Bifurcaria Bifurcata présentant une différence d’efficacité ont été sélectionnés : un premier lot d’algues Bifurcaria Bifurcata collectées en France en août 2019 et congelées et un deuxième lot d’algues Bifurcaria Bifurcata collectées au Portugal en juillet 2020 et séchées. Par la suite d’autres lots d’algues Bifurcaria Bifurcata ont été collectés sur les côtes françaises en juin 2021 et mars 2022 et congelés. De même des lots supplémentaires d’algues ont été collectés au Portugal en novembre 2021 et ont été soit séchés, soit congelés. 2. Extractions organiques réalisées à partir d’extraits aqueux Des extractions organiques à l’heptane, à l’acétate d’éthyle (EtOAc) et au butanol (BuOH)ont donc été réalisées à partir d’extraits aqueux des lots d’algues française et portugaises récoltées respectivement en août 2019 et juillet 2020. La fraction aqueuse résiduelle a également été récupérée. L’activité sur des larves d’ Heligmosomoïdes bakeri de ces extraits organiques a été étudié : - efficacité sur le développement larvaire Les fractions heptane EtOAc et BuOH obtenues ont été testés à 1 g/L via un TDL en première intention ( ). Un contrôle négatif avec de l’eau a été réalisé, ainsi qu’un contrôle avec du DMSO à 1% correspondant à la concentration en DMSO des extraits organiques. Ces deux conditions contrôles n’ont pas montré d’inhibition du développement larvaire. Un test analogue réalisé sur la fraction aqueuse résiduelle a montré que les molécules actives ont été complètement extraites par les solvants organiques. Pour les deux lots d’algues françaises et portugaises, les fractions heptane et EtOAc inhibent totalement le développement des larves. L’inhibition du développement des larves n’est en revanche pas total avec l'extrait BuOH (99% d’inhibition du développement larvaire pour l’extrait obtenu à partir du lot d’algues collectées en France et 13% seulement pour l’extrait obtenu à partir du lot d’algues collectées au Portugal). Test de mortalité des larves après éclosion L'activité anthelminthique des fractions organiques a ensuite été étudiée plus en détail à l'aide du test de mortalité des larves après éclosion ( Tableau 1 ). Les trois extraits organiques ont été testés à différentes concentrations. Alors que les extraits BuOH et les fractions aqueuses résiduelles ont montré un faible impact sur la mortalité des larves, même à 3 g/L, les extraits EtOAc ont été efficaces à 1 g/L et les extraits heptane ont eu une activité totale à 0,5 g/L. [Table 1] : Comparaison de l'activité nématicide de différents extraits de Bifurcaria bifurcata de France (congelée) et du Portugal (séchée) sur des larves fraîchement écloses d’ Heligmosomoïdes bakeri Les résultats proviennent de trois expériences indépendantes, avec n=6 par échantillon à chaque fois. Les valeurs représentent la moyenne de la mortalité (%) ± l'écart type. nd : non déterminé Ces résultats indiquent que les molécules actives sont majoritairement présentes dans les extraits heptane et EtOAc. quel que soit l’origine du lot d’algues. Facteurs influençant l’activité in vitro Pour approfondir les derniers résultats obtenus, et afin de déterminer quel facteur entre le lieu de récolte ou le procédé de conservation de l’algue impacte le plus l’activité biologique in vitro, deux lots d’algues Bifurcaria Bifurcata récoltées novembre 2021 au Portugal ont été étudiés avec des pré-traitements différents (séchage ou congélation). Un TDL a été réalisé sur les extraits aqueux de ces deux lots à 1g/L ainsi que sur les fractions BuOH à 1 g/L qui correspondent aux fractions organiques où un écart d’activité avait été observé précédemment ( ). Les résultats obtenus montrent une forte différence d’activité entre ces deux extraits, que ce soit pour les extraits aqueux ou les extraits BuOH : l’extrait issus d’algues portugaises congelées présente une forte inhibition du développement larvaire (88% pour l’extrait aqueux et 85% pour la fraction BuOH) contrairement au lot d’algues séchées ( 6.3. Extractions organiques réalisées à partir de la biomasse d’algue Des extractions organiques ont été réalisées directement sur des lots d’algues récoltées en France en août 2019 et en mars et juin 2021et congelées ainsi que sur des lots d’algues portugaises récoltées en 2021 (séchées ou congelées), en concentrant les composés actifs dans les fractions organiques sans passer par une première étape d’extraction aqueuse. Les résultats de test avec un TDL d’une fraction EtOAc à 0,5 g/L sont présentés sur la . Ceux-ci montrent qu’il n’y a pas de différence d’activité entre les lots étudiés et que tous inhibent totalement le développement des larves à la concentration de 0,5 g/L. On peut en conclure qu’une extraction effectuée directement à partir de la biomasse d’algue est sensiblement aussi efficace qu’une extraction aqueuse, et ce indépendamment du lot d’algues utilisé. 6.4. Exploration des modes d’action impliqués 6.4.1. Caractérisation des molécules actives Des échantillons de la fraction heptane ont été envoyés à une plateforme spécialisée en RMN (Résonnance Magnétique Nucléaire) de l’Université de Bretagne Occidentale, France (UBO), afin de caractériser les molécules actives dans ces fractions organiques de B. bifurcata . L’analyse des spectres RMN (1H et 13C) a permis d’identifier deux molécules différentes présentes dans cet extrait : l’éléganolone et un diterpène linéaire de type bifurcanol ( ). 6.4.2. Exploration des modes d’actions par électrophysiologie en œufs de xénope Suite à l’identification d’éléganolone et d’un diterpène linéaire de type bifurcanol dans un extrait de B. bifurcata¸ la mécanistique et le mode d’action pouvant être impliqués dans les activités biologiques observées ont été recherchés. Il a été montré dans la littérature scientifique que certains terpènes ont pour cible des récepteurs cholinergique. En s’appuyant sur ces travaux les inventeurs ont recherché quels pourraient-être les effets d’extraits de B. bifurcata sur différents récepteurs connus pour être la cible d’anthelminthiques chez deux espèces de nématodes gastro-intestinaux que sont A. suum , un parasite du porc et P. equorum , un parasite du cheval. Ces récepteurs sont des hétéro- ou homopentamères, donc composés de 5 sous-unités différentes ou identiques. Plusieurs familles de récepteurs ont donc été choisies, parmi elles des récepteurs cholinergiques sensibles à la nicotine, composés de la sous-unité ACR-16 d’ A. suum ou de P. equorum , et un récepteur cholinergique sensible au Morantel composé des sous-unités ACR-26 et ACR-27 de P. equorum. Ces récepteurs ont été exprimés à la surface d’œufs de Xenopus laevis et des mesures d’électrophysiologie ont été réalisées afin de déterminer le potentiel effet agoniste ou antagoniste d’extraits aqueux et organiques de B. bifurcata appliqués sur ces récepteurs. Récepteur cholinergique N-AChR d’ Ascaris suum Le premier récepteur qui a été étudié est un récepteur cholinergique du parasite A. suum composé de 5 sous-unités ACR-16 formant un récepteur sensible à la nicotine. Il a été exprimé à la surface d’œufs de xénope et des courants ont été mesurés grâce à la méthode Two-Electrode Voltage-Clamp afin de déterminer la réponse du récepteur suite à l’application du ligand naturel (100 µM d’ACh) ou suite à l’application d’extraits aqueux de B. bifurcata (à 1 g/L et 5 g/L) seuls ou en co-application avec l’ACh. L’effet d’un extrait aqueux de B. bifurcata en tant qu’agoniste sur le récepteur nicotinique formé de la sous-unité ACR-16 d’ A. suum dans le système d’expression en œuf de Xenopus laevis est illustré sur la a) , qui présente des exemples de signaux de courant enregistrés grâce à la technique Two-Electrode Voltage -Clamp suite à l’application de 100 µM d’acétylcholine, de 1 g/L et 5 g/L d’extrait aqueux de B. bifurcata seule ou en co-application avec l’ACh et sur la c) est une représentation sous forme de diagramme en barres des valeurs des courants mesurées et de la dispersion observées sur les mesures, suite à l’application de 100 µM d’acétylcholine (ACh), de 1 g/L et 5 g/L d’extrait aqueux de B. bifurcata seule ou en co-application avec l’ACh L’effet d’un extrait aqueux de B. bifurcata en tant qu’antagoniste sur le récepteur nicotinique formé de la sous-unité ACR-16 d’ A. suum dans le système d’expression en œuf de Xenopus laevis est quant à lui illustré sur la b) , qui présente des exemples de signaux de courant enregistrés grâce à la technique Two-Electrode Voltage -Clamp suite à l’application de 100 µM d’acétylcholine, de 1 g/L et 5 g/L d’extrait aqueux de B. bifurcata seule ou en co-application avec l’ACh et la d) , qui est une représentation sous forme de diagramme en barres des valeurs des courants mesurées et de la dispersion observées sur les mesures, suite à l’application de 100 µM d’acétylcholine (ACh), de 1 g/L et 5 g/L d’extrait aqueux de B. bifurcata seule ou en co-application avec l’ACh On notera que dans les figures 5 c) et 5 d), les valeurs de courant ont été normalisées avec l’amplitude de courant obtenue à la première application de 100 µM d’ACh Dans un premier temps, deux applications successives d’ACh à 100µM ont été réalisées afin de contrôler la réplicabilité de l’effet du ligand naturel sur le récepteur. Les résultats observés montrent que le récepteur est correctement exprimé à la surface des œufs de xénope et que l’effet est stable car les amplitudes de courant sont comparables. L’application de l’extrait aqueux de B. bifurcata seul montre qu’il n’y a pas d’effet agoniste direct sur le récepteur N-AChR d’ Ascaris suum . En effet aucune amplitude de courant n’est observée suite à l’application de 5 g/L ou de 1 g/L d’extrait. A contrario, lorsque l’extrait de B. bifurcata est appliqué en même temps que 100 µM d’ACh, on observe une diminution de l’amplitude de courant normalement obtenu avec l’ACh seule. En effet, lors de la co-application de l’ACh avec 5 g/L de B. bifurcata, le courant obtenu est diminué d’environ 90% comparé à l’ACh seule, et avec 1 g/L de B. bifurcata, le courant est diminué d’environ 50%. Ces résultats montrent un effet antagoniste dose-dépendant de l’extrait aqueux de B. bifurcata . Il est important de noter ici, qu’après les différentes applications des extraits d’intérêts les récepteurs récupèrent correctement car les amplitudes de courants obtenues avec la troisième application d’ACh sont comparables à celle de la première application d’ACh. Pour compléter les premiers résultats obtenus, des fractions organiques de B. bifurcata ont également été testées sur le récepteur N-AChR d’ Ascaris suum ( ) . Les premières applications d’ACh seule démontrent une stabilité des amplitudes de courant obtenues entre les deux applications. Les fractions testées proviennent d’extraits obtenus avec le solvant acétate d’éthyle (Bif AE), en utilisant l’EtOAc directement sans extraction au préalable à l’heptane (Bif AEP) et avec le solvant heptane (Bif H). Les extraits ont été testés à 0,01 g/L en co-application avec 100 µM d’ACh. On observe qu’avec la co-application de l’extrait Bif AE et de l’ACh, une légère diminution du courant est observée (environ 10%) par rapport à l’ACh seule. L’extrait Bif AEP présente une diminution d’environ 25% du courant obtenu par rapport à l’ACh seule. Ce résultat met en évidence une meilleure efficacité de la fraction extraite à l’EtOAc directement et non pas après une première extraction à l’heptane. Enfin la fraction heptane en co-application induit un effet antagoniste plus fort que les fractions acétate d’éthyle en induisant une diminution d’environ 75% du courant par rapport à l’ACh seule. Une récupération totale des récepteurs est observée avec la dernière application d’ACh seule. Les résultats obtenus montrent que les fractions organiques sont nettement plus efficaces que les fractions aqueuses pour induire un effet antagoniste sur ces récepteurs cholinergiques, et en particulier la fraction heptane. Récepteurs cholinergiques N-AChR et M-AChR de Parascaris equorum Les seconds récepteurs étudiés sont des récepteurs cholinergiques de P. equorum , l’un sensible à la nicotine (N-AChR) et composé de la sous-unité ACR-16, l’autre sensible au Morantel (M-AChR) et composé des sous-unités ACR-26 et ACR-27. Ces récepteurs ont également été exprimés à la surface d’œufs de Xénope et les courants ont été mesurés grâce à la méthode Two-Electrode Voltage-Clamp afin de déterminer la réponse du récepteur suite à l’application du ligand naturel (100 µM d’ACh) ou suite à l’application d’extraits aqueux de B. bifurcata (à 1 g/L et 5 g/L) seuls ou en co-application avec l’ACh ( ). Les résultats obtenus sur ces deux récepteurs sont très semblables. Ils indiquent que l’application des extraits aqueux de B. bifurcata n’ont pas d’effet agoniste direct. Un léger effet est tout de même observé pour l’extrait à 5 g/L sur le récepteur Peq-M-AChR avec une intensité de courant d’environ 10% par rapport à l’intensité de courant obtenue avec le ligand naturel. Concernant les effets antagonistes observés, lors de la co-application de 100 µM d’ACh et 5 g/L de B. bifurcata , une diminution de l’intensité de courant d’environ 40% est observée sur les deux récepteurs Peq-N-AChR et Peq-M-AChR. Pour la concentration de B. bifurcata à 1g/L en co-application avec l’AChR, une diminution d’environ 10% est observée pour les deux récepteurs. Ces résultats montrent qu’il y a également un effet antagoniste dose-dépendant de l’extrait aqueux de B. bifurcata sur les récepteurs de P. equorum. Les résultats observés dans un premier temps sur un récepteur cholinergique du parasite A. suum, sont confirmés ici sur une autre espèce de parasite d’animaux d’importance vétérinaire. Composition sous une forme adaptée à une administration par voie orale pour une utilisation dans le traitement d’une némathelminthiase, ladite composition comprenant de l’éléganolone et/ou un diterpène linéaire de type bifurcanol. Composition pour une utilisation dans le traitement par voie orale d’une némathelminthiase selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit éléganolone ou ledit diterpène de type bifurcanol est présent au sein d’un extrait de Bifurcaria bifurcata , de Cystoseira elegans ou de Cystoseira balearica incorporé dans ladite composition. Composition pour une utilisation dans le traitement par voie orale d’une némathelminthiase selon la revendication 2, caractérisé en ce que ledit extrait de Bifurcaria bifurcata , de Cystoseira elegans ou de Cystoseira balearica est un extrait aqueux de Bifurcaria bifurcata , de Cystoseira elegans ou de Cystoseira balearica , un extrait obtenu par extraction de composés de Bifurcaria bifurcata , de Cystoseira elegans ou de Cystoseira balearica dans un solvant ou un extrait obtenu par extraction de composés de Bifurcaria bifurcata , de Cystoseira elegans ou de Cystoseira balearica dans une huile. Composition pour une utilisation dans le traitement par voie orale d’une némathelminthiase selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce ladite némathelminthiase est causée par des organismes du sous-ordre Rhabditina et/ou Spirurina et en particulier causée par des organismes de la famille des Ascarididae des Heligosomatidae ou des Trichostrongylidae . Composition pour une utilisation dans le traitement par voie orale d’une némathelminthiase selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce ladite némathelminthiase est causée par des organismes résistants aux anthelminthiques appartenant au groupe des lactones macrocycliques, tel que l’ivermectine, la moxidectine et l’eprinomectine, et/ou au groupe des benzimidazoles, tel que le thiabendazole, et/ou au groupe des imidazothiazoles, tel que le levamisole et/ou au groupe des tetrahydropyrimidines, tel que le pyrantel. Composition pour une utilisation dans le traitement par voie orale d’une némathelminthiase selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que ladite némathelminthiase est une némathelminthiase intestinale. Procédé de préparation d’un anthelmintique sous une forme adaptée à une administration par voie orale comprenant : - préparer une composition convenant pour une utilisation dans le traitement par voie orale d’une némathelminthiase comprenant de l’éléganolone et/ou un diterpène linéaire de type bifurcanol, - encapsuler ladite composition dans des particules de levure ou l’incorporer dans une matrice d’amidon gélatinisé. Procédé de préparation d’un anthelmintique selon la revendication 7, caractérisé en ce que ledit anthelmintique est efficace contre des organismes du sous-ordre Rhabditina et/ou Spirurina et en particulier des organismes de la famille des Ascarididae des Heligosomatidae ou des Trichostrongylidae . Procédé de préparation d’un anthelmintique selon l’une quelconque des revendications 7 et 8, caractérisé en ce que ledit anthelmintique est efficace par des organismes résistants aux anthelminthiques appartenant au groupe des lactones macrocycliques, tel que l’ivermectine, la moxidectine et l’eprinomectine, et/ou au groupe des benzimidazoles, tel que le thiabendazole, et/ou au groupe des imidazothiazoles, tel que le levamisole et/ou au groupe des tetrahydropyrimidines, tel que le pyrantel.