Brevet FR3142088A1 — publié le 20240524

Utilisations cosmétiques d’un extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum L’invention est relative à l’utilisation cosmétique d’un extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques des annexes cutanées. Un autre objet de l’invention consiste en un procédé de soin cosmétique comprenant l’application par voie topique de l’extrait hydrolysé de tourteau ou d’une composition le comprenant. Utilisations cosmétiques d’un extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum L’invention est relative à des utilisations cosmétiques d’un extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum . Le soin des annexes cutanées telles que les ongles, les poils, les cheveux, les cils, les sourcils, implique un traitement global, c’est à dire un traitement direct de la fibre kératinique mais aussi de la zone de peau correspondante, incluant le cuir chevelu et les follicules pileux (ou bulbes pileux et fibres capillaires). En outre, le soin direct de la fibre capillaire implique le traitement des protéines qui la constituent. Les protéines du cheveu comme les kératines sont particulièrement sensibles aux endommagements induits par le mode de vie, à l’exposition aux produits chimiques d’hygiène tels que leur nature et la fréquence de leurs usages, aux habitudes de coiffage mais aussi aux conditions environnementales, c’est-à-dire soleil, pollution, sel, vent, variations de conditions climatiques, à l’hygiène de vie en général ainsi que l’âge. Ces protéines vont se dénaturer et rendre les annexes cutanées, moins résistantes, moins souples, cassantes, mais aussi plus ternes et notamment des cheveux fourchus. Ces annexes perdent alors leurs propriétés biomécaniques. Une solution est l’apport de protéines hydrolysées exogènes permettant de compenser l’endommagement des protéines kératiniques et d’améliorer l’hydratation et l’élasticité des fibres kératiniques notamment capillaires. Lesdites protéines confèrent ainsi plus de douceur, de brillance, de rebond et de corps aux fibres. L’hydrolyse (chimique, thermique ou enzymatique) de ces protéines est un processus préalable nécessaire pour les fragmenter en faible poids moléculaire, afin de favoriser leur solubilité dans l’eau et leur pénétration dans la fibre kératinique, et faciliter leur formulation. Seules les molécules de faible poids moléculaire moyen en poids (inférieures à 7 kDa) peuvent en effet pénétrer dans la fibre kératinique, en particulier dans les fibres capillaires endommagées. Elles permettent de renforcer la fibre kératinique depuis l’intérieur, rendant la fibre kératinique, plus forte, plus élastique, moins cassante et notamment la fibre capillaire moins fourchue. Les protéines hydrolysées performantes présentent des propriétés d’adhésion à la fibre capillaire (liaisons faibles avec les kératines du cheveu) du fait des charges ioniques et des sites polaires (interactions par des forces de van der Walls). Elles peuvent également former des films protecteurs à la surface de la fibre capillaire. Des produits à base de protéines hydrolysées existent déjà sur le marché de la cosmétique. Ces protéines sont d’origine végétale ou animale. Les plus courantes sont des protéines hydrolysées de blé, de soie, de kératine, de collagène, d’élastine, de lait ou d’amandes. Il existe toutefois un besoin constant d’ingrédients alternatifs performants dans ce domaine. De manière tout à fait inattendue, la Demanderesse a découvert qu’un extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum avait la capacité de pénétrer dans la fibre kératinique, pour en augmenter les propriétés biomécaniques. Cet extrait hydrolysé s’est avéré capable d’agir sur la qualité des annexes cutanées, augmenter leur résistance et diminuer leur casse, en particulier celle des cheveux, les rendant plus brillantes, plus éclatantes et avec du volume. En outre, l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum possède des propriétés de réparation des annexes cutanées telles qu’il sera démontré dans la suite de la description. Un avantage de l’extrait hydrolysé selon la présente invention est qu’il s’agit d’un co-produit issu d’un résidu d’extraction industriel habituellement non valorisé et considéré comme un déchet industriel, cette invention s’inscrivant ainsi dans une démarche éco-responsable. Un autre avantage est qu’il s’agit d’un ingrédient assurant un soin complet, car ayant des effets à la fois sur la fibre kératinique, en particulier le cheveu, mais aussi sur les follicules pileux. En outre, l’extrait hydrolysé selon l’invention peut être facilement produit à l’échelle industrielle. Enfin, l’hydrolyse enzymatique permet de fractionner les protéines du tourteau pour récupérer des peptides de faible poids moléculaire, ceux précisément pouvant pénétrer les fibres kératiniques pour en assurer les effets cosmétiques décrits ici. L’extrait hydrolysé selon l’invention provient du tourteau de la plante Silybum marianum . Cette plante aussi appelé Chardon-Marie est connue depuis des millénaires pour son action hépatique. Elle est encore utilisée en Asie et en Afrique pour le traitement des problèmes rénaux, des troubles gastro-intestinaux, des maladies cardiaques, des rhumatismes ou encore de la fièvre. Ce sont principalement les graines qui sont utilisées à ces fins thérapeutiques. Les jeunes tiges, graines et germes charnus sont toujours, classiquement consommés dans plusieurs pays du Moyen-Orient, d’Afrique du Nord, de Sardaigne et d’Espagne. Les fruits de Silybum marianum peuvent être utilisés soit pour l’extraction de l’huile, soit comme farine, en mélange avec de la farine de blé, pour la préparation de divers produits de boulangerie ou comme produits alimentaires. Silybum marianum est aussi utilisé de manière générale en cosmétique avec notamment l’utilisation des fleurs (sans les graines) pour améliorer l’élasticité, la fermeté, l’effet barrière et l’hydratation de la peau ainsi que pour diminuer la chute des cheveux. La demande DE 4323614 divulgue un extrait de fruit de Chardon-Marie utilisé comme agent de croissance et de régénération capillaire. La demande CN103446021 divulgue un extrait de graines de Silybum marianum obtenu par chauffage et extraction au propylène glycol des graines entières protégeant les cheveux des dommages causés par les UV avec notamment une action anti-oxydante permettant de protéger la couleur du cheveu mais améliorant aussi la fermeté et la résistance à la tension. Le brevet FR3053253 décrit un procédé de préparation pour obtenir un extrait d’akènes de Silybum marianum comprenant moins de 0,2% de silymarine. Ledit procédé comprend une extraction de l’huile par un solvant compris parmi une solution aqueuse hydrotropique, de l’eau subcritique, de l’éthanol, de l’isopropanol ou leurs mélanges. Ainsi à la connaissance de la demanderesse, aucun art antérieur ne divulgue les utilisations cosmétiques de l’extrait hydrolysé selon la présente invention. Aucun document seul ou en combinaison ne les suggère non plus. Un premier objet concerne ainsi l’utilisation cosmétique non thérapeutique d’un extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum pour maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques des annexes cutanées, avantageusement des fibres kératiniques, préférentiellement des cheveux. Un second objet est relatif à l’utilisation cosmétique non thérapeutique de l’extrait hydrolysé selon l’invention dans une composition cosmétique. Un 3ème objet concerne un procédé de soin cosmétique non thérapeutique comprenant l’application par voie topique de l’extrait hydrolysé selon l’invention ou d’une composition cosmétique le comprenant pour maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques des annexes cutanées, avantageusement des fibres kératiniques, préférentiellement des cheveux. Un premier objet concerne donc l’utilisation cosmétique non thérapeutique d’un extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum pour maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques des annexes cutanées avantageusement des fibres kératiniques, préférentiellement des cheveux. On entend par « extrait hydrolysé », le produit obtenu après hydrolyse enzymatique ou chimique dans un solvant aqueux, du tourteau des graines de Silybum marianum . Dans un mode de réalisation préférentiel, l’extrait hydrolysé est obtenu par hydrolyse enzymatique. On entend par « tourteau », le coproduit d’extraction des graines, c’est-à-dire le résidu obtenu après extraction de l’huile. De préférence, le tourteau de graines de Silybum marianum utilisé est un tourteau délipidé de graines de Silybum marianum . On entend par « délipidé », une teneur en huile du tourteau strictement inférieure à 10% en poids, préférentiellement strictement inférieure à 8% en poids, par rapport au poids total du tourteau. On entend de manière générale par « huile », l’ensemble des composés lipophiles telles que les vitamines liposolubles, les acides gras, les mono-, les di- et les triglycérides et les phospholipides qui sont contenus dans la graine de Silybum marianum . On entend par « graines », le fruit ou l’akène dépourvu de son enveloppe. Cette enveloppe autrement dénommée péricarpe n’est ainsi pas contenu dans les graines selon l’invention. On entend par « utilisation cosmétique » une utilisation non thérapeutique, non pharmaceutique ni dermatologique, c’est-à-dire qui ne nécessite et n’implique pas de traitement thérapeutique et destinée à des annexes cutanées saines et/ou à des peaux saines comportant des annexes cutanées. On entend par « saines » des annexes cutanées et/ou peaux qualifiées de non pathologiques par un spécialiste du domaine, un dermatologue, c’est à dire qui ne présentent pas de candidose, de maladies ou d’affection, d’infection, d’inflammation, de cicatrice, de maladie ou d’affection cutanée telle que candidose, impétigo, psoriasis, eczéma, acné ou dermatite notamment séborrhéique, pellicules, ou plaies ou blessures et/ou autres dermatoses et/ou d’alopécie et/ou de calvitie et/ou de pelade. Ainsi au sens de l’invention, des annexes cutanées « abîmées » sont des annexes qualifiées de « non pathologiques » par le spécialiste du domaine. Elles sont donc saines tout en étant abîmées. De façon particulière, des annexes cutanées abîmées sont des annexes qui ont perdu leur souplesse et/ou leur plasticité et/ou leur résistance et/ou leur force et/ou leur brillance et/ou leur couleur et/ou leur volume et qui, par conséquent sont en particulier déshydratées. Les annexes cutanées « abîmées » ont ainsi perdues leurs propriétés biomécaniques. Ainsi, elles deviennent ternes, sèches, sont moins résistantes, deviennent friables, fragiles, cassantes, se dédoublent et/ou se recourbent et/ou sont fourchues. Les annexes cutanées « abîmées » peuvent résulter d’une exposition à un stress telles que les conditions environnementales comme par exemple le vent, le froid, le sel, le chlore, la pollution, le soleil, l’hygiène de vie ou encore l’âge, mais aussi à l’exposition à des agressions chimiques ou mécaniques dues aux traitements quotidiens des annexes comme les frottements, le coiffage, le frisage, la coloration, la décoloration, le lissage, le sèche-cheveux, les produits chimiques cosmétiques ou d’hygiène tels que le vernis, le maquillage et/ou le démaquillage, les shampoings, les conditionneurs ou les crèmes. Les fibres kératiniques, en particulier les cheveux sont par ailleurs plus difficiles à coiffer et à mettre en forme. Cette perte de qualité de surface des cheveux est visible et inesthétique. Les cheveux reflètent en effet également moins la lumière et sont ainsi visiblement moins brillants, moins colorés et moins lumineux. Ils sont également plus fins et moins épais. C’est notamment le cas des cheveux colorés ou méchés. On entend ici par « annexes cutanées » les cheveux, les cils, les sourcils, les poils, notamment poils de la barbe, et/ou les ongles. Selon l’invention, la barbe inclue la moustache. Préférentiellement, il s’agit des cheveux. On entend par « fibres kératiniques », l’ensemble des fibres constituants le système pileux humains, notamment les cheveux, les cils, les sourcils, les poils, notamment les poils de la barbe, incluant la moustache. Préférentiellement, il s’agit des cheveux. L’extrait hydrolysé selon l’invention est un ingrédient topiquement acceptable. On entend par « topiquement acceptable », un ingrédient adapté à une application par voie topique, non toxique, non irritant pour la peau, en particulier le cuir chevelu, ou les annexes cutanées, n’induisant pas de réponse allergique ou inflammatoire, et qui n’est pas instable sur le plan chimique. L’utilisation de l’extrait hydrolysé selon l’invention peut être par voie topique. On entend par « voie topique », l’application locale directe et/ou la vaporisation de l’ingrédient sur la surface de la peau, en particulier du cuir chevelu, ou des annexes cutanées, en particulier des cheveux. L’extrait hydrolysé peut être appliqué par voie topique sur tout ou partie de la surface de la peau comportant des annexes cutanées, en particulier du cuir chevelu, ou sur tout ou partie des annexes cutanées, avantageusement sur les ongles, les cheveux, les poils, notamment les poils de barbe, les cils et/ou les sourcils, plus avantageusement sur les fibres kératiniques, encore plus avantageusement sur les cheveux. Un objet de l’invention concerne ainsi l’utilisation cosmétique non thérapeutique d’un extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum pour maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques des annexes cutanées, avantageusement des fibres kératiniques, plus avantageusement des cheveux et/ou pour maintenir et/ou augmenter leurs propriétés biomécaniques. Au sens de la présente invention, on entend par « réparer les propriétés biomécaniques », améliorer et/ou augmenter au moins partiellement les propriétés biomécaniques des annexes cutanées abimées du fait de l’exposition à des agressions environnementales, chimiques, biologiques et/ou mécaniques, préférentiellement des fibres kératiniques, avantageusement des cheveux. En particulier les annexes cutanées réparées peuvent retrouver les propriétés biomécaniques qu’elles avaient avant d’être abîmées, c’est-à-dire celles des annexes cutanées non abîmées. Il est donc possible de comparer l’effet de l’extrait hydrolysé selon l’invention sur ces propriétés biomécaniques en comparant par exemple les propriétés biomécaniques des annexes cutanées avant et après traitement avec l’extrait hydrolysé selon l’invention ou en comparant les propriétés biomécaniques des annexes cutanées abîmées après traitement avec l’extrait hydrolysé selon l’invention aux propriétés biomécaniques des annexes cutanées non abîmées. On entend au sens de l’invention par « maintenir les propriétés biomécaniques » prévenir et/ou éviter la dégradation des propriétés biomécaniques des annexes cutanées, préférentiellement des fibres kératiniques, avantageusement des cheveux, en particulier lors de leur exposition à des agressions environnementales, chimiques, biologiques et/ou mécaniques, notamment en empêchant que les annexes cutanées deviennent des annexes cutanées abîmées et/ou en empêchant que ces annexes cutanées s’abiment encore plus. Il est donc possible de comparer l’effet de l’extrait hydrolysé selon l’invention sur ces propriétés biomécaniques en comparant par exemple les propriétés biomécaniques des annexes cutanées traitées avec l’extrait hydrolysé selon l’invention et exposées à des agressions environnementales, chimiques, biologiques et/ou mécaniques aux propriétés biomécaniques des annexes cutanées non traitées avec l’extrait hydrolysé selon l’invention et exposées à des agressions environnementales, chimiques, biologiques et/ou mécaniques. On entend au sens de l’invention par « augmenter les propriétés biomécaniques», améliorer les propriétés biomécaniques des annexes cutanées, préférentiellement des fibres kératiniques, avantageusement des cheveux, notamment des annexes cutanées abimées du fait de l’exposition à des agressions environnementales, chimiques, biologiques et/ou mécaniques, mais également des annexes cutanées non abimées. Il est donc possible de comparer l’effet de l’extrait hydrolysé selon l’invention sur ces propriétés biomécaniques en comparant par exemple les propriétés biomécaniques des annexes cutanées avant et après traitement avec l’extrait hydrolysé selon l’invention. On entend au sens de l’invention par « propriétés biomécaniques », la résistance et/ou la force et/ou le volume et/ou la couleur et/ou la brillance et/ou la plasticité c’est-à-dire leur aspect non-cassant, et/ou la souplesse des annexes cutanées, préférentiellement des fibres kératiniques, avantageusement des cheveux. Avantageusement, l’utilisation d’un extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum est pour réparer les annexes cutanées, préférentiellement les fibres kératiniques, avantageusement les cheveux. Préférentiellement, l’utilisation d’un extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum est pour pour maintenir et/ou augmenter la résistance et/ou la force et/ou le volume et/ou la couleur et/ou la brillance et/ou la plasticité c’est-à-dire l’aspect non-cassant, et/ou la souplesse des annexes cutanées, préférentiellement des fibres kératiniques, avantageusement des cheveux. Ces propriétés peuvent être évaluées ex-vivo par des tests mécaniques où est mesurée la résistance des annexes cutanées, préférentiellement des fibres kératiniques, plus préférentiellement des cheveux, aux forces de tension, d’étirement, de flexion, de friction et de torsion. Ces paramètres biomécaniques, notamment ceux des cheveux, peuvent être évalués en réponse à l’étirement et peuvent être mesurés par exemple par le test de traction (Dia-Stron). Les paramètres mesurés peuvent être le module élastique (Pa), l’allongement à la rupture (%), la force à rupture (gmf), le gradient de la région de déformation plastique (gmf / % allongement) et sont normalisés par rapport au diamètre des annexes cutanées. Ce dernier paramètre (gradient) permet la mesure de la plasticité du matériel d’étude juste avant la casse. La technique permet d’obtenir une courbe de contrainte (ou force) en fonction de l’allongement caractéristique du matériel étudié. Il est connu qu’une augmentation de l’allongement à la rupture et qu’une diminution du gradient de déformation plastique peut s’observer sur des fibres capillaires (annexes cutanées) endommagées par oxydation, réduction ou irradiation ultraviolette suite à la casse des ponts disulfures en groupement libres dans le domaine cortical. Dans un mode de réalisation de l’invention, «maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées signifie diminuer les produits terminaux de glycation avancée (Advanced Glycation End Products ou AGEs) qui apparaissent au cours du vieillissement chrono-induit ou photo-induit notamment, mais aussi qui apparaissent au quotidien en réponse aux conditions environnementales, au contact d’agents chimiques ou physiques oxydatifs. Ces produits de glycation diminuent les propriétés biomécaniques des annexes cutanées. Les agressions environnementales incluent notamment les fumées, en particulier de cigarettes, la pollution notamment les métaux, les particules fines PM2,5 et PM10, la température notamment le chaud et le froid et leurs variations brutales, la teneur en eau notamment l’humidité ou la sècheresse, les irradiations solaires notamment les spectres visibles, les UV et/ou les rayons gamma et/ou la lumière bleue, la pluie, le vent, la poussière, et le sel marin, l’eau de piscine, notamment le chlore et les métaux de transition présents dans l’eau, mais aussi le vieillissement intrinsèque et/ou chrono-induit. Ce dernier est en effet aussi responsable de la perte des qualités structurelles et/ou fonctionnelles des annexes cutanées, préférentiellement des fibres kératiniques, en particulier des cils, des sourcils et des cheveux, plus particulièrement des cheveux. Les agressions chimiques incluent les agents chimiques tels que les produits de commodités, d’hygiènes et de beauté agressifs en particulier les shampoings et soins et/ou traitement capillaires agressifs notamment pour le coiffage, la mise en forme telle que le lissage et/ou les permanentes et/ou pour la coloration et/ou la décoloration, le chlore et les métaux de transition présents dans l’eau des piscines, les vernis et/ou dissolvants, les solvants, les produits de maquillage. Les agressions mécaniques incluent notamment le frottement tel que le brossage et/ou le frottement sur les tissus (oreillers, vêtements) et/ou des particules comme la poussière et/ou le sable, la chaleur avec les sèche-cheveux et fer à lisser, et/ou le coiffage avec notamment l’exposition à des forces de traction, étirement et/ou torsions. Ainsi dans un mode de réalisation de l’invention, la capacité de l’extrait selon l’invention à « réparer » les annexes cutanées abimées, peut être évalué selon les techniques existantes dans le domaine. Les méthodes classiques de mesure d’un effet de réparation permettent de mesurer la capacité du produit évalué à restaurer un état visuel, structurel et/ou fonctionnel d’une annexe cutanée endommagée, préférentiellement de cheveux endommagés, comparable à l’état d’une annexe cutanée non endommagée, préférentiellement de cheveux non endommagés. Elles sont mises en œuvre sur des annexes cutanées, préférentiellement cheveux, endommagé(e)s (ou abîmé(e)s), et l’effet de réparation est mesuré par comparaison aux annexes cutanées, préférentiellement des cheveux, non endommagé(e)s (ou abîmé(e)s). Avantageusement l’effet réparateur est un effet réparateur des annexes cutanées endommagées (ou abîmé(e)s) in vitro par un agent oxydant, lequel induit une dénaturation des protéines des annexes. Avantageusement, il s’agit d’un effet réparateur de l’extrait hydrolysé selon l’invention sur les cheveux et préférentiellement encore l’agent oxydant est le peroxyde d’hydrogène. Encore avantageusement, cette dénaturation protéique est évaluée par la mesure de la température de dénaturation (°C) protéique par calorimétrie différentielle (Wortmann et Deutz, Appl. Polym. Sci., 48, 137-150 (1993)) à l’aide d’un analyseur enthalpique différentiel (DSC Q100, TA Instruments), dans les conditions décrites dans l’exemple 10. Pour évaluer cet effet de réparation des annexes cutanées in vivo, avantageusement des cheveux, plusieurs méthodes peuvent être utilisées choisies parmi la vidéo microscopie, la microscopie confocale, la microscopie IRTF ou Raman, les rayons X, et la microscopie électronique, qui a pour but notamment d’observer l’état et/ou la qualité de la cuticule, enveloppe protectrice de la fibre kératinique des annexes cutanées. Les études de microscopies sur cheveu entier permettent la visualisation et quantification des écailles décollées comme témoin de l’endommagement de surface. Ces méthodes peuvent être utilisées sur des coupes de cheveux pour observer également l’état et/ou la qualité du cortex de la fibre kératinique. Des méthodes de quantification physique de surface permettant d’évaluer la morphologie des annexes cutanées, en particulier des cheveux, telles que l’Atomic Force Microscopy ou la White-light interferometric profilometry, d’évaluer la chimie (XPS), la charge (Streaming potential) ou encore l’énergie (inverse Gas Chromatography) peuvent être mises en place. Pour évaluer l’effet de réparation de l’extrait hydrolysé selon l’invention sur les propriétés internes des annexes cutanées, en particulier des cheveux, la calorimétrie (DSC) peut être utilisée. Au sens de la présente invention, on entend par « maintenir et/ou augmenter le volume », maintenir et/ou augmenter l’épaisseur des annexes cutanées sur toute leur longueur, préférentiellement maintenir et/ou augmenter le diamètre des fibres kératiniques, avantageusement le diamètre du cheveu. On entend au sens de l’invention par « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, maintenir et/ou augmenter leur résistance et/ou leur brillance et/ou leur couleur et/ou leur volume et/ou leur force et/ou leur propriété de plasticité c’est-à-dire leur aspect non-cassant et/ou leur souplesse. Ces propriétés peuvent être mesurées par les méthodes suivantes et décrites dans les paragraphes suivants et exemples correspondants : - par la mesure de l’activité anti-radicalaire, notamment in-tubo telle que décrite dans l’exemple 3 ; - par la mesure de l’activité chélatrice des métaux de transition comme le fer (Fe), notamment in-tubo telle que décrite dans l’exemple 4 ; - par la mesure de l’activité chélatrice des métaux de transition comme le cuivre (Cu), notamment in-tubo telle que décrite dans l’exemple 5 ; - par la mesure de l’activité anti-glycation sur les protéines des annexes cutanées, notamment in vitro telle que décrite dans l’exemple 6 ; - par la mesure de la carbonylation des kératines et des protéines associées des annexes cutanées notamment ex vivo telle que décrite dans les exemples 7a et b) ; - ex-vivo par la mesure du score de protection capillaire (SPC) tel que décrit dans l’exemple 7d ; - ex-vivo par la mesure de la stabilisation des groupements cystéines tel que dans l’exemple 9 ; – ex-vivo par des tests de force de tension (Diastron), des tests de fatigue, ou des tests de coiffage répétés des cheveux permettant d’évaluer leur casse tel que dans les exemples 11 et 13 ; - ex-vivo par la mesure des variations de couleurs des annexes cutanées tel que dans l’exemple 12 ; - in-vitro par la mesure de la quantité d’ATP dans les fibroblastes de la papille des follicules pileux tel que dans l’exemple 14. Ces propriétés peuvent être évaluées in-tubo par la mesure de l’activité anti-radicalaire, par exemple par le test au DPPH, mesurée en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention. Ainsi, dans un mode de réalisation particulièrement préféré l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, lorsque le pourcentage d’inhibition d’oxydation du radical libre DPPH° en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, dans les conditions décrites dans l’exemple 3, est supérieur à 50%, avantageusement supérieur à 65%, plus avantageusement supérieur à 80%, préférentiellement supérieur à 90% par rapport au pourcentage d’inhibition d’oxydation du radical libre DPPH°, mesuré en l’absence de l’extrait hydrolysé selon l’invention. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Ces propriétés peuvent également être évaluées in-tubo par la mesure de l’activité chélatrice des métaux de transition comme le fer (Fe), par exemple avec les tests de dégradation du tryptophane et/ou les tests de formation de dityrosine et/ou de pentosidine et/ou de produits de glycation fluorescents, mesurée en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, suite à l’oxydation de l’albumine, utilisée comme modèle de protéine, en présence de peroxyde d’hydrogène et de fer comme catalyseur d’oxydation. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, lorsque l’indice de protection calculé dans les conditions de l’exemple 4 pour le test de dégradation du tryptophane est supérieur à 10%, avantageusement supérieur à 15%, plus avantageusement supérieur à 20%, en particulier supérieur à 25%, plus particulièrement supérieur à 30%, encore plus particulièrement supérieur à 35%. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, lorsqu’on diminue le pourcentage de formation de dityrosine en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 4, d’au moins 10%, avantageusement d’au moins 15%, plus avantageusement d’au moins 20%, préférentiellement d’au moins 25% par rapport au pourcentage de formation de dityrosine mesuré en l’absence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, et/ou lorsque l’indice de protection calculé dans les conditions de l’exemple 4 pour le test de formation de dityrosine est supérieur à 30%, avantageusement supérieur à 35%, plus avantageusement supérieur à 60%, en particulier supérieur à 65%. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, lorsqu’on diminue le pourcentage de formation de pentosidine en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 4, d’au moins 10%, avantageusement d’au moins 25%, par rapport au pourcentage de formation de pentosidine mesuré en l’absence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, et/ou lorsque l’indice de protection calculé dans les conditions de l’exemple 4 pour le test de formation de pentosidine est supérieur à 50%, avantageusement supérieur à 60%. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, lorsqu’on diminue le pourcentage de formation de produits de glycation fluorescents en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 4, d’au moins 5%, avantageusement d’au moins 10%, plus avantageusement d’au moins 13%, par rapport au pourcentage de formation de produits de glycation mesuré en l’absence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, et/ou lorsque l’indice de protection calculé dans les conditions de l’exemple 4 pour le test de formation de produits de glycation fluorescents est supérieur à 10%, avantageusement supérieur à 15%, plus avantageusement supérieur à 20%, en particulier supérieur à 25%. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Les propriétés biomécaniques selon l’invention peuvent également être évaluées in-tubo par la mesure de l’activité chélatrice des métaux de transition comme le cuivre (Cu), par exemple avec le test d’oxydation des lipides évalué par la formation de malondialdéhyde (MDA) en présence de cuivre (Cu) (catalyseurs d’oxydation) et d’acide thiobarbiturique (TBA) en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, lorsqu’on diminue le pourcentage de lipides oxydés par le dosage du MDA en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 5, d’au moins 20%, avantageusement d’au moins 40%, plus avantageusement d’au moins 60%, préférentiellement d’au moins 75%, par rapport au pourcentage de lipides oxydés par le dosage de MDA mesuré en l’absence de l’extrait hydrolysé selon l’invention et/ou lorsque l’indice de protection calculé dans les conditions de l’exemple 5 pour le test de formation de produits de glycation fluorescents est supérieur à 60%, avantageusement supérieur à 75%, plus avantageusement supérieur à 90%, en particulier supérieur à 95%. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Ces propriétés peuvent en outre être évaluées in-vitro par la mesure de l’activité anti-glycation sur les protéines des annexes cutanées, par exemple avec le test de formation dityrosine et/ou de pentosidine mesurée après incubation desdites annexes dans une solution de glucose en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, lorsque l’on diminue le pourcentage de formation de dityrosine en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 6, d’au moins 5%, avantageusement d’au moins 10%, plus avantageusement d’au moins 15%, par rapport au pourcentage de formation de dityrosine mesuré en l’absence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, et/ou lorsque l’indice de protection calculé dans les conditions de l’exemple 6 pour le test de formation de dityrosine est supérieur à 40%, avantageusement supérieur à 45%, plus avantageusement supérieur à 50%, en particulier supérieur à 55%. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, lorsque l’on diminue le pourcentage de formation de pentosidine en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 6, d’au moins 5%, avantageusement d’au moins 10%, plus avantageusement d’au moins 15%, , par rapport au pourcentage de formation de pentosidine mesuré en l’absence de l’extrait hydrolysé selon l’invention et/ou lorsque l’indice de protection calculé dans les conditions de l’exemple 6 pour le test de formation de pentosidine est supérieur à 40%, avantageusement supérieur à 45%, plus avantageusement supérieur à 50%, en particulier supérieur à 55%. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Les propriétés biomécaniques peuvent également être évaluées ex-vivo par la mesure de la carbonylation des kératines et de leurs protéines associées, par exemple par le test aux particules (pollution) et aux UV, mesurée en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, lorsqu’on diminue le pourcentage de protéines carbonylées (produits d’oxydation) en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, en particulier au niveau de la cuticule, encore plus particulièrement au niveau du cortex, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 7, d’au moins 5%, avantageusement d’au moins 15%, plus avantageusement d’au moins 20%, préférentiellement d’au moins 25%, plus avantageusement d’au moins 30% au niveau du cortex, par rapport au pourcentage de protéines carbonylées, mesuré en l’absence de l’extrait hydrolysé selon l’invention et/ou lorsque l’indice de protection calculé dans les conditions de l’exemple 7 est supérieur à 40%, avantageusement supérieur à 45%, plus avantageusement supérieur à 50%, en particulier supérieur à 55%. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Les propriétés biomécaniques peuvent en outre être évaluées in-vitro par la mesure du stress oxydatif des annexes cutanées, par exemple avec la mesure optique des propriétés de biréfringence, notamment de l’indice de biréfringence (Kindex) des annexes cutanées traitées avec l’extrait hydrolysé selon l’invention. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, lorsque la valeur du Kindex en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 7c, augmente d’au moins 5%, avantageusement d’au moins 10%, plus avantageusement d’au moins 13%, par rapport à la valeur du Kindex mesuré en l’absence de l’extrait hydrolysé selon l’invention et/ou lorsque l’index d’amélioration calculé dans les conditions de l’exemple 7c est supérieur à 40%, avantageusement supérieur à 45%, plus avantageusement supérieur à 50%, en particulier supérieur à 55%. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Encore avantageusement, il s’agit de l’extrait hydrolysé tel que préparé selon l’exemple 1a). Les propriétés biomécaniques peuvent également être évaluées ex-vivo par la mesure du score de protection capillaire (SPC) pour classer les produits de soin capillaires, sur des annexes cutanées endommagées (irradiation UVA et particules), traitées avec l’extrait hydrolysé selon l’invention. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 7d, lorsque le SPC est supérieur à 30, préférentiellement égal ou supérieur à 50. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Ces propriétés peuvent de plus être évaluées ex-vivo par la mesure de la stabilisation des groupements cystéines, par exemple par mesure des spectres vibratoires des kératines d’annexes cutanées endommagées traitées avec l’extrait hydrolysé selon l’invention. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour «maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, lorsque les bandes d’absorption de 1174, 1116, 1150 et/ou 840 cm -1 d’annexes cutanés endommagées diminuent en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 9, d’au moins 5%, avantageusement d’au moins 15%, plus avantageusement d’au moins 20%, encore plus avantageusement d’au moins 35%, par rapport aux bandes d’absorption de 1174, 1116, 1150 et/ou 840 cm -1 mesurées en l’absence de l’extrait hydrolysé selon l’invention sur des annexes cutanées endommagés par blanchiment et/ou lorsque l’index d’efficacité calculé dans les conditions de l’exemple 9 est supérieur à 5%, avantageusement supérieur à 10%, plus avantageusement supérieur à 13%. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Les propriétés biomécaniques, en particulier de force et/ou plasticité et/ou résistance et/ou souplesse, peuvent par ailleurs être évaluées ex-vivo par la mesure de la stabilité des annexes cutanées endommagées, par exemple par mesure de la température de dénaturation des protéines des annexes cutanées endommagées à l’aide de peroxyde d’hydrogène, puis traités avec l’extrait hydrolysé selon l’invention. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour «maintenir et/ou augmenter la force et/ou la plasticité et/ou la résistance et/ou la souplesse » des annexes cutanées, lorsque la température de dénaturation augmente en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 10, d’au moins 2°C, avantageusement d’au moins 5°C, par rapport à la température de dénaturation mesurée en l’absence de l’extrait hydrolysé selon l’invention et/ou lorsque l’index de réparation par rapport aux annexes cutanées traités avec placebo ou non traité, calculé dans les conditions de l’exemple 10 est supérieur à 40%, avantageusement supérieur à 45%, plus avantageusement supérieur à 50%, en particulier supérieur à 60%. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Ces propriétés peuvent également être évaluées par des tests de force de tension (Diastron), des tests de fatigue, ou des tests de coiffage répétés des cheveux permettant d’évaluer leur casse. Il est possible aussi de quantifier les fibres capillaires comportant des fourches. On pourra par ailleurs évaluer ces propriétés biomécaniques en mesurant la force de coiffage nécessaire sur cheveux secs ou mouillés. Notamment, ces propriétés peuvent être évaluées ex-vivo par la mesure de la rupture des annexes cutanées, par exemple par un test de fatigabilité sur des annexes cutanées abimées, de préférence traitées au peroxyde d’hydrogène, puis traités avec l’extrait hydrolysé selon l’invention. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter la force et/ou la plasticité et/ou la résistance et/ou la souplesse » des annexes cutanées, lorsque le nombre de cycles avant rupture des annexes cutanées ou indice de renforcement de la fibre capillaire en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 11, est supérieur à 10%, préférentiellement supérieur à 20%, plus préférentiellement est supérieur à 30%, par rapport au nombre de cycles avant rupture des annexes cutanées ou à l’indice de renforcement mesuré en l’absence de traitement avec l’extrait hydrolysé selon l’invention. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Encore avantageusement, il s’agit de l’extrait hydrolysé tel que préparé selon l’exemple 1a). Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter la force et/ou la plasticité et/ou la résistance et/ou la souplesse » des annexes cutanées, lorsque la réduction du pourcentage de casse après coiffage répété des annexes cutanés endommagés et en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 13, est supérieur à 50%, préférentiellement supérieur à 70%, plus préférentiellement est supérieur à 75%, par rapport au pourcentage de casse des annexes cutanées mesuré en l’absence de traitement avec l’extrait hydrolysé selon l’invention. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Encore avantageusement, il s’agit de l’extrait hydrolysé tel que préparé selon l’exemple 1c). Les propriétés biomécaniques de couleur et/ou brillance peuvent être évaluées ex-vivo par la mesure des variations de couleurs des annexes cutanées, par exemple par un test de colorimétrie (Delta a* et Delta E*) sur des annexes cutanées abimées, de préférence à l’aide de peroxyde d’hydrogène, et ayant subis une exposition solaire, puis traités avec l’extrait hydrolysé selon l’invention. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter la couleur et/ou la brillance » des annexes cutanées, lorsque la valeur du Delta a* en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement dans les conditions décrites dans l’exemple 12, augmente de 4%, préférentiellement de 6%, par rapport à la valeur Delta a* mesurée en l’absence de l’extrait hydrolysé selon l’invention et/ou le % d’efficacité calculé dans les conditions de l’exemple 12 pour Delta a* est d’au moins 20%, avantageusement d’au moins 30%, en particulier d’au moins 80% et/ou la valeur du Delta E* diminue de 2%, préférentiellement de 3%, par rapport à la valeur Delta E* mesurée en l’absence de traitement avec l’extrait hydrolysé selon l’invention et/ou le % d’efficacité calculé dans les conditions de l’exemple 12 pour Delta E* est d’au moins 15%, avantageusement d’au moins 20%, en particulier d’au moins 25%. Avantageusement, les annexes cutanées sont les fibres kératiniques, préférentiellement les cheveux. Les propriétés biomécaniques peuvent en outre être évaluées in-vitro par la mesure de la quantité d’ATP dans les fibroblastes de la papille des follicules pileux. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé selon l’invention, est en quantité efficace pour « maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques » des annexes cutanées, préférentiellement les fibres kératiniques, avantageusement les cheveux, lorsque le pourcentage d’agrégats de fibroblastes de la papille en présence de l’extrait hydrolysé selon l’invention, préférentiellement en présence de l’extrait hydrolysé tel que préparé selon l’exemple 1a, dans les conditions décrites dans l’exemple 14, est supérieur à 10%, préférentiellement supérieur à 20%, plus préférentiellement est supérieur à 25%, avantageusement supérieur à 30% par rapport au pourcentage d’agrégats de fibroblastes de la papille mesuré en l’absence de traitement avec l’extrait hydrolysé selon l’invention. L’extrait hydrolysé selon l’invention est donc efficace et peut être utilisé pour maintenir et/ou augmenter la résistance et/ou la souplesse et/ou la force et/ou le volume et/ou la couleur et/ou la brillance et/ou la plasticité des annexes cutanées, et préférentiellement celles des cheveux, et est ainsi capable de diminuer leur fragilité, leur casse, leur rugosité, et ainsi améliorer le démêlage et/ou le coiffage. On entend encore par « maintenir et/ou augmenter les propriétés de biomécaniques» des annexes cutanées, avantageusement des cheveux, rendre lesdites annexes cutanées, avantageusement les cheveux, visuellement plus lisses et /ou brillantes et/ou plus lumineuses et/ou plus disciplinées et/ou moins fourchues. Ces propriétés peuvent être évaluées par technique d’imagerie, par exemple par vidéo-microscopie ou microscopie électronique, ou par des tests sensoriels par exemple sur mèches de cheveux, réalisés par des volontaires externes entrainés à définir leurs sensations visuelles ou tactiles ou encore par des tests d’évaluation par des experts (coiffeurs par exemple) ou volontaires entrainés ou d’auto-évaluation par questionnaires consommateurs. L’efficacité d’un produit dans sa formule est évaluée selon des critères de qualité visuelle ou tactiles perceptibles, en particulier de la chevelure. Les propriétés de réparation et/ou d’augmentation des propriétés biomécaniques de l’extrait hydrolysé selon l’invention en font un ingrédient cosmétique actif sur l’amélioration de la résistance et/ou de la force et/ou du volume et/ou de la couleur et/ou de la brillance et/ou de l’éclat des annexes cutanées, en particulier des fibres kératiniques, préférentiellement des cheveux. L’hydrolyse enzymatique afin d’obtenir l’extrait hydrolysé selon l’invention peut être mise en œuvre en présence de toute protéase connue de l’Homme du métier, et avantageusement en présence d’une enzyme d’origine animale choisie parmi la pepsine, les enzymes d’origine pancréatique telles que la trypsine ou la chymotrypsine, préférentiellement la trypsine, d’une enzyme d’origine végétale choisie parmi la papaïne, la bromélaïne, la ficine, l’actinidine, préférentiellement la papaïne, ou encore d’une enzyme d’origine bactérienne choisie parmi l’enzyme provenant de la souche Bacillus licheniformis en particulier commercialisée sous le nom d’Alcalase® ou de la souche B. subtilis , préférentiellement l’enzyme provenant de la souche Bacillus licheniformis commercialisée sous le nom l’Alcalase®. Dans un mode de réalisation particulièrement avantageux de réalisation de l’invention, l’enzyme utilisée provient de la souche Bacillus licheniformis et est en particulier commercialisée sous le nom d’Alcalase®. La quantité en poids de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention utilisée pour l’hydrolyse est avantageusement comprise entre 1% et 20%, plus avantageusement entre 2% et 15%, encore plus avantageusement entre 10% et 15%, en poids par rapport au poids total du solvant et du tourteau. Le solvant utilisable pour l’hydrolyse peut être un solvant aqueux. Selon l’invention on entend par « solvant aqueux », une solution aqueuse d’extraction contenant plus de 60% en poids, avantageusement au moins 70% en poids, en particulier au moins 80% en poids, plus particulièrement au moins 90% en poids, de façon particulière au moins 95% en poids, d’eau par rapport au poids total de la solution aqueuse, encore plus avantageusement ne contenant pas de glycol et de façon particulière ne contenant pas d’alcool. Le solvant aqueux ne contient pas de solution aqueuse hydrotropique, d’eau subcritique, d’éthanol, d’isopropanol ni de propylène glycol. Avantageusement, le solvant utilisé est l’eau comme unique solvant. L’hydrolyse peut être conduite à un pH compris entre 3 et 10 selon le pH optimum de l’enzyme, et avantageusement à un pH compris entre 7 et 9, très avantageusement à un pH entre 7,5 et 8,5, encore plus avantageusement à un pH de 7,5. Alternativement, l’hydrolyse enzymatique est effectuée en présence de papaïne, à un pH compris entre 3 et 5,5, préférentiellement entre 4,5 et 5. L’hydrolyse peut être réalisée à une température comprise entre 30°C et 75°C, avantageusement entre 50°C et 70°C, en particulier entre 55°C et 65°C, préférentiellement à 65°C. Elle peut être conduite durant une période de 30 minutes à 24 heures, préférentiellement de 45 minutes à 12h, plus préférentiellement de 50 minutes à 6h, très préférentiellement de 1h à 3h. La quantité en poids d’enzyme utilisée pour l’hydrolyse est comprise entre 0,1% à 25% en poids, préférentiellement entre 0,5% et 20% en poids, plus préférentiellement entre 0,75% et 10% en poids, avantageusement entre 1% et 5% en poids, par rapport au poids du tourteau. L’enzyme utilisée peut ensuite être inactivée par chauffage, avantageusement à une température de 80°C à 100°C et très avantageusement à une température de 90°C, en particulier durant une période de 10 minutes à 3h, préférentiellement de 10 minutes à 2h, plus préférentiellement de 20 minutes à 1h30. L’inactivation de l’enzyme peut avoir lieu à pH compris entre 3,5 et 8, préférentiellement entre 4 et 7, plus préférentiellement entre 4 et 6,5, avantageusement à pH 6,0. L’extrait hydrolysé obtenu peut ensuite être centrifugé puis clarifié par filtrations successives jusqu’à une porosité de 0,22µm (seuil de filtration). L’extrait hydrolysé selon l’invention peut donc se trouver sous forme liquide comprenant avantageusement une teneur en matière sèche de 1% à 20% en poids, avantageusement de 2 à 10% en poids, plus avantageusement entre 3 et 6 % en poids, par rapport au poids total de l’extrait hydrolysé sous forme liquide. Dans un mode de réalisation alternatif, une étape d’extraction aqueuse est conduite avant l’étape d’hydrolyse, par toute méthode connue de l’homme du métier, en particulier par macération, et avantageusement par extraction avec l’eau comme unique solvant. La quantité en poids de tourteau utilisée pour l’extraction aqueuse est comprise entre 1 et 20%, avantageusement comprise entre 2% et 15%, encore avantageusement entre 10% et 15%, en poids par rapport au poids total de solvant et du tourteau. Dans ce cas, l’extraction aqueuse peut être conduite à un pH compris entre 7,5 et 12, avantageusement à un pH compris entre 8 et 9, très avantageusement à un pH de 9, avantageusement durant une période de 30 minutes à 2 heures, préférentiellement durant une période de 1 heure. L’extraction aqueuse peut être réalisée à une température comprise entre 4°C et 300°C, avantageusement entre 15°C et 100°C, encore avantageusement entre 20°C et 90°C, très avantageusement entre 20°C et 70°C. Dans un mode de réalisation particulièrement avantageux de l’invention, l’extraction aqueuse est conduite à température ambiante, soit entre 20 et 25°C. Dans un mode de réalisation préférentiel, l’extraction aqueuse est réalisée à 20°C, à pH 12, à partir d’une quantité de 15% en poids de tourteau par rapport au poids total de tourteau et d’eau. Dans un autre mode de réalisation, l’extraction aqueuse est réalisée à 20°C, à pH 12, à partir d’une quantité de 12,5% en poids de tourteau par rapport au poids total de tourteau et d’eau. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extraction aqueuse est effectuée en conditions subcritiques. On entend par extraction en « conditions subcritiques » une extraction en présence d’eau, dans des conditions de température supérieures à 100°C et de pression inférieure à 22,1 MPa (221 bars), telle que l’eau reste à l’état liquide mais possède une viscosité et une tension de surface inférieures à celle de l’eau à température ambiante, augmentant sa constante diélectrique. Ainsi, la pression d’extraction sera comprise entre 0,2 MPa (2 bars) et 22,1 MPa (221bars) préférentiellement entre 1 et 5 MPa (10 et 50 bars) plus préférentiellement entre 1 et 2 MPa (10 et 20 bars). Ainsi en conditions subcritiques, l’extraction est réalisée dans l’eau, en particulier à une température allant de 100°C à 300°C, avantageusement de 120°C à 250°C, plus avantageusement entre 120°C et 180°C. L’extraction peut être réalisée à une température donnée unique ou à des températures successives croissantes. Dans un mode de réalisation avantageux de l’invention, l’extraction sera réalisée à une température unique de 160°C. Dans un mode alternatif, elle sera conduite selon un gradient de trois températures croissantes comprises entre 100°C et 200°C, tel que 120°C, 140°C puis 160°C ou 110°C, 130°C puis 150°C, ou encore 120°C, 145°C puis 170°C. Dans un mode de réalisation préférentiel, l’extraction subcritique est réalisée à une pression de 5MPa (50 bars), à une température de 120°C pendant 20 minutes. L’extrait obtenu est ensuite filtré à chaud. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extraction subcritique est réalisée à une pression de 5MPa (50 bars), à une température de 140°C pendant 20 minutes. L’extrait obtenu est ensuite filtré à chaud. Dans un mode de réalisation alternatif, l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum sous forme liquide ainsi obtenu peut être utilisé comme solvant pour hydrolyser une nouvelle quantité de tourteau de graines de Silybum marianum . Dans un mode de réalisation avantageux, l’extrait hydrolysé est obtenu par digestion enzymatique comme suit : le tourteau de graines de Silybum marianum est broyé et est mis en suspension dans de l’eau (en tant qu’unique solvant) à une teneur de 12,5% en poids de tourteau de graines par rapport au poids total de tourteau et de solvant et est soumis à une hydrolyse durant une période de 1 heure à une température de 55°C et à pH 8,5 avec maintien du pH pendant l’hydrolyse, avec une concentration en poids de 1 % d’une protéase bactérienne provenant de la souche Bacillus licheniformis (Alcalase®) sous forme liquide par rapport au poids du tourteau. L’enzyme est ensuite inactivée par chauffage durant 1h à une température de 90°C et à pH 4,5. Le mélange est ensuite refroidi, centrifugé, et le surnageant filtré (seuil de filtration : 0,22µm), dans les conditions décrites dans l’exemple 1b). Dans un mode particulièrement avantageux de réalisation de l’invention, l’extrait hydrolysé est obtenu par digestion enzymatique comme suit : le tourteau de graines de Silybum marianum est broyé et est mis en suspension dans de l’eau (en tant qu’unique solvant) à une teneur de 15% en poids de tourteau de graines par rapport au poids total de tourteau et de solvant et est soumis à une hydrolyse pendant une période de 2 heures à une température de 65°C et à pH 7,5 avec maintien du pH pendant l’hydrolyse, avec une concentration en poids de 1,7% de protéase bactérienne provenant de la souche Bacillus licheniformis (Alcalase®) sous forme liquide par rapport au poids du tourteau. L’enzyme est ensuite inactivée par chauffage durant 1h à une température de 90°C et à pH 6,0. Le mélange est refroidi à température ambiante (entre 20°C et 30°C), centrifugé et filtré (seuil de filtration : 0,22 µm) dans les conditions telles que décrites dans l’exemple 1a). On entend par « petits peptides » ou « peptides de petits poids moléculaires », des peptides ayant un poids moléculaire moyen en poids inférieur à 7000 Daltons, analysée par perméation de gel sur colonne (du type Superdex® peptide 10/30 HR GE ou du type Superose® 12 10/300 GL) suivi d’un étalonnage de la colonne par des molécules protéiques de poids moléculaires connus (chromatographie de perméation sur gel (GPC)). Avantageusement l’extrait hydrolysé selon l’invention a une teneur en masse sèche de protéines totales comprise entre 50% et 95% en poids, préférentiellement entre 60% et 90% en poids, plus préférentiellement entre 60 et 70% en poids, par rapport au poids total en masse sèche de l’extrait hydrolysé selon l’invention. De façon avantageuse, l’extrait hydrolysé selon l’invention a une teneur en masse sèche en peptides de poids moléculaire moyen en poids compris entre 100 Da et 20kDa, analysée en perméation de gel sur colonne (du type Superose® 12 10/300 GL), comprise entre 50% et 90%, préférentiellement entre 65% et 90 %, plus préférentiellement entre 75% et 90%, en poids par rapport au poids total en masse sèche des peptides hydrolysés de l’extrait hydrolysé selon l’invention. De façon avantageuse, l’extrait hydrolysé selon l’invention a une teneur en masse sèche en peptides de poids moléculaires moyen en poids compris entre 100Da et 700 Da, analysée en perméation de gel sur colonne du type Superdex® peptide 10/30 HR GE, comprise entre 60% et 90%, avantageusement entre 70% et 80%, plus avantageusement entre 75% et 80%, en poids par rapport au poids total en masse sèche des peptides de poids moléculaires compris entre 100Da et 7000Da de l’extrait hydrolysé selon l’invention (sensibilité de la colonne). De façon avantageuse, l’extrait hydrolysé selon l’invention a une teneur en masse sèche en peptides de poids moléculaires moyen en poids compris entre 100Da et 2500 Da, analysée en perméation de gel sur colonne du type Superdex® peptide 10/30 HR GE, comprise entre 70% et 99%, avantageusement entre 80% et 99%, plus avantageusement entre 90% et 99%, en poids par rapport au poids total en masse sèche des peptides de poids moléculaires compris entre 100Da et 7000Da de l’extrait hydrolysé selon l’invention (sensibilité de la colonne). Encore très avantageusement, l’extrait hydrolysé selon l’invention n’est pas utilisé en combinaison avec un rétinoïde. L’extrait hydrolysé selon l’invention peut être utilisé seul ou incorporé dans une composition cosmétique. Dans un mode de réalisation, l’extrait hydrolysé peut être ensuite séché par exemple par lyophilisation ou par atomisation en présence ou non de maltodextrine. L’extrait hydrolysé se présente alors sous forme de poudre. Selon un mode de réalisation, l’extrait hydrolysé selon l’invention, en particulier obtenu dans les conditions décrites dans les exemples 1a) et 1b), peut être atomisé en présence d’une concentration en poids de maltodextrine comprise entre 1% et 99%, avantageusement entre 5% et 90%, préférentiellement entre 40% et 85%, encore préférentiellement entre 65% et 85%, plus préférentiellement entre 70% et 80% par rapport au poids total de la poudre obtenue et d’une concentration en poids d’extrait hydrolysé selon l’invention comprise entre 1% et 99%, avantageusement entre 10% et 95%, préférentiellement entre 15% et 60%, encore préférentiellement entre 15% et 25%, plus préférentiellement entre 20% et 30% par rapport au poids total de la poudre obtenue, avantageusement dans le conditions des exemples 1c) ou 1d). Alternativement, l’extrait hydrolysé peut être utilisé seul sous forme solide, sous forme d’ingrédient cosmétique ou dermatologique. Alternativement, lorsqu’il est utilisé seul sous forme liquide, sous forme d’ingrédient cosmétique ou dermatologique, il est avantageusement solubilisé dans une solution aqueuse contenant de la glycérine, avantageusement présente à une concentration de 60% à 90%, encore avantageusement de 70% à 85%, très avantageusement à une concentration de 80%, en poids par rapport au poids total de la solution aqueuse comprenant l’extrait hydrolysé. Dans un mode de réalisation alternatif de l’invention, l’extrait hydrolysé sera solubilisé et/ou dilué dans un solvant notamment polaire, tel que l’eau, un alcool, un polyol, un glycol, tel que le pentylène glycol et/ou le butylène glycol et/ou l’hexylène glycol et/ou le caprylyl glycol, ou un de leurs mélanges, préférentiellement un mélange hydroglycolique, encore préférentiellement contenant un glycol choisi parmi l’hexylène glycol, le propylène glycol, le caprylyl glycol et l’un quelconque de leurs mélanges. Avantageusement l’extrait hydrolysé selon l’invention est dilué et/ou soluble dans une solution aqueuse contenant de l’hexylène glycol, en particulier contenant entre 0,1% et 10 % en poids de l’hexylène glycol, préférentiellement entre 0,5% et 5 % en poids d’hexylène glycol, par rapport au poids total de l’ingrédient cosmétique. Avantageusement l’extrait hydrolysé selon l’invention est dilué et/ou soluble dans une solution aqueuse contenant du caprylyl glycol, en particulier contenant entre 0,01% et 5 % en poids de caprylyl glycol, préférentiellement entre 0,1% et 1 % en poids de caprylyl glycol, par rapport au poids total de la solution aqueuse comprenant l’extrait hydrolysé. Alternativement, la solution dans laquelle est solubilisé l’extrait hydrolysé selon l'invention comprend du pentylène glycol et du caprylyl glycol. De façon particulière, la solution aqueuse dans laquelle est solubilisée l’extrait hydrolysé selon l'invention comprend de la gomme xanthane, en particulier entre 0,01% et 5 % en poids de gomme xanthane par rapport au poids total la solution aqueuse, plus particulièrement entre 0,1% et 1 % en poids de gomme xanthane par rapport au poids total de la solution aqueuse comprenant l’extrait hydrolysé. L’extrait hydrolysé peut être utilisé seul sous forme d’un ingrédient cosmétique ou incorporé dans une composition cosmétique comprenant au moins un excipient cosmétiquement acceptable. On entend au sens de la présente invention par excipient « cosmétiquement acceptable » un composé et/ou solvant cosmétiquement acceptable, en particulier topiquement acceptable, c’est-à-dire n’induisant pas de réponse inflammatoire et allergique au contact de la peau, notamment du cuir chevelu, non toxique, non instable, ou leurs équivalents, indue. On entend au sens de la présente invention par « composition cosmétique » une composition non thérapeutique, c’est-à-dire une composition destinée à la prévention et/ou au soin de la peau, notamment du cuir chevelu, et/ou des annexes cutanées, notamment des cheveux, dite « normale » par un dermatologue, c’est-à-dire non pathologique. On entend ici par peau ou cuir chevelu ou annexe cutanée ou cheveu « normal » une peau ou un cuir chevelu ou une annexe cutanée ou cheveu sain(e) tel que défini précédemment. Dans un mode de réalisation préférentiel de l’invention, l’extrait hydrolysé selon l’invention est présent dans la composition cosmétique en une teneur comprise entre 1x10 -4 % à 10% en poids, préférentiellement de 1x10 -3 % à 5% en poids, plus préférentiellement de 1x10 -3 % à 3% en poids, encore plus préférentiellement de 1x10 -3 % à 1% en poids, avantageusement de 0,01 à 1% en poids, par rapport au poids total de la composition. La composition peut donc être utilisée pour maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques des annexes cutanées, avantageusement des fibres kératiniques, préférentiellement des cheveux. La composition cosmétique selon l’invention, peut se présenter sous les formes galéniques classiquement utilisées pour une application topique sur la peau ou le cuir chevelu et/ou les annexes cutanées, préférentiellement le cuir chevelu et/ou les annexes cutanées, telles que les formes liquides ou solides ou même sous la forme de liquide sous pression. Elles peuvent être formulées sous la forme d’une solution, aqueuse ou huileuse, une crème ou un gel aqueux ou un gel huileux, notamment en pot ou en tube, notamment un gel douche, un shampoing, un après-shampoing, un lait, une huile, une émulsion, un hydrogel, une microémulsion ou une nano-émulsion, notamment huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple ou siliconée, un sérum, une lotion, notamment en flacon de verre, de plastique ou en flacon doseur ou en aérosol ou en spray, une ampoule, un savon liquide, une pâte, un pain dermatologique, une pommade, une mousse, un masque, une laque, un patch, un vernis, un produit anhydre, de préférence liquide, pâteux ou solide, par exemple sous forme de bâtonnet notamment en stick ou en poudres. Il peut s’agir d’un produit de maquillage en particulier pour cils ou sourcils tels qu’un mascara ou un crayon ou d’un produit de démaquillage pour le soin et la beauté du regard et/ou de produit pour le soin et la beauté des ongles et/ou pour le soin et/ou la beauté de la barbe. En particulier, la composition cosmétique est choisie dans le groupe constitué par un sérum, une lotion, une crème, un shampoing, un après-shampoing, une huile, un lait, une pommade, une pâte, une mousse, une émulsion, un hydrogel, un gel douche, un masque, une laque, un spray, une cire, un mascara, un crayon de maquillage, un vernis, avantageusement un shampoing, un après-shampoing ou une lotion. De manière préférentielle l’extrait hydrolysé selon l’invention est adapté pour la formulation de composition dite neutre et douce pour le respect des annexes cutanées, avantageusement de la fibre kératinique, notamment de la fibre capillaire. L’extrait hydrolysé selon l’invention est également adapté pour l’utilisation dans des formulations cationiques avec des tensioactifs. Les compositions cosmétiques selon l’invention peuvent contenir tout solvant approprié et/ou tout véhicule approprié et/ou tout excipient approprié, éventuellement en combinaison avec d’autres composés d’intérêts. Elles peuvent notamment contenir un excipient cosmétiquement acceptable choisi parmi des agents tensioactifs, des conservateurs, des agents tampon, des agents gonflants, des agents chélatants, des agents biocides, des dénaturants, des agents opacifiants, des ajusteurs de pH, des agents réducteurs, des agents stabilisants, des émulsifiants, des épaississants, des gélifiants, des polymères filmogènes, des solvants, des charges, des bactéricides, des absorbeurs d'odeurs, des agents matifiants, des agents conditionneurs, des agents de texture, des agents de brillance, des pigments, des colorants, des parfums et des filtres solaires chimiques ou minéraux, des oligo-éléments, des huiles essentielles. Ces combinaisons sont également couvertes par la présente invention. La composition cosmétique peut contenir d’autres agents cosmétiques possédant des propriétés identiques à l’extrait hydrolysé selon l’invention et induisant un effet synergique ou non avec ledit extrait hydrolysé, ou contenir des agents cosmétiques à effets complémentaires tels que des antichute, agent protecteur capillaire, actif apaisant, anti-âge ou anti-pollution. A titre d’actif antichute, on citera l’association de sulfopeptides, acides aminés, aminosaccharides, vitamine du groupe B, zinc et extrait de Panax ginseng et Artium majus commercialisé sous le nom Trichogen™ LS 8960 par la demanderesse ou un agent protecteur capillaire tel qu’un extrait de péricarpe de Litchi chinensis commercialisé sous le nom Litchiderm™ par la demanderesse, un actif apaisant et anti-démangeaisons tels que les phytostérols de colza commercialisé sous le nom de Phytosoothe™ LS9766 par la demanderesse. D’autres actifs pourront être présents dans la composition, tels qu’un extrait de feuilles de Cassia alata commercialisé sous le nom de DN-Age™ en tant qu’actif anti-oxydant pour le soin des cheveux notamment, une combinaison d’un extrait de Salvia miltiorhizza et de niacinamide commercialisée sous le nom de CollRepair™ en tant qu’agent déglyquant, ou des actifs favorisant la fermeté de la peau donc du cuir chevelu, tels qu’un tétrapeptide synthétique commercialisé sous le nom de Dermican™, un extrait d’Hibiscus abelmoschus commercialisé sous le nom de Linefactor™, un extrait purifié de pois commercialisé sous le nom de Proteasyl™, un extrait de Manilkara multinervis commercialisé sous le nom d’Elestan™, un extrait de Khaya senegalensis commercialisé sous le nom de Collalift™18, un extrait de pulpe d’Argan commercialisé sous le nom d’Argassential™ par la demanderesse, un extrait de Schizandra chinensis commercialisé sous le nom de Sqisandryl™, un extrait d’Eperua falcata commercialisé sous le nom d’Eperuline™, ou encore un extrait d ’Orthosiphon staminus commercialisé sous le nom de MAT-XS™ Bright commercialisés par la demanderesse. Ces associations d’actifs permettent notamment de renforcer le follicule pileux et diminuer la chute des cheveux. L’extrait hydrolysé de l’invention peut aussi être combiné à un extrait de graines de la plante Nephelium lappaceum , commercialisé sous le nom de Rambuvital™ par la demanderesse pour ses propriétés protectrices des cheveux, contre la pollution notamment. L’extrait hydrolysé peut aussi être utilisé en combinaison avec un extrait hydrolysé de tourteau de graines d’Hippophae rhamnoïdes . Avantageusement la composition cosmétique selon l’invention ne comprend pas de rétinoïde. Un troisième objet de l’invention est relatif à un procédé de soin cosmétique, non thérapeutique, comprenant l’application par voie topique de l’extrait hydrolysé selon l’invention ou d’une composition cosmétique le comprenant, pour maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques des annexes cutanées, avantageusement des fibres kératiniques, préférentiellement des cheveux. Dans un mode de réalisation avantageux de l’invention, le procédé de soin cosmétique consiste en l’application par voie topique de l’extrait hydrolysé selon l’invention ou de la composition cosmétique le comprenant sur tout ou partie de la peau du corps et/ou du visage comportant des annexes cutanées, en particulier choisie parmi le cuir chevelu, les jambes, les cuisses, les bras, le ventre, le décolleté, le cou, tout ou partie du visage, le front, le menton, le contour des lèvres, le contour des yeux, la zone dite « en T » du visage, et avantageusement le cuir chevelu, et/ou sur tout ou partie des annexes cutanées, avantageusement sur les ongles, les cheveux, les poils, notamment les poils de barbe, les cils et/ou les sourcils, encore plus avantageusement sur les cheveux, préférentiellement sur tout ou partie des fibres kératiniques, plus préférentiellement sur tout ou partie des cheveux. Le procédé de soin cosmétique permet par conséquent de maintenir et/ou d’augmenter la résistance et/ou la force et/ou le volume et/ou la couleur et/ou la brillance et/ou la plasticité c’est-à-dire l’aspect non-cassant, et/ou la souplesse des annexes cutanées, avantageusement des fibres kératiniques, plus avantageusement des cheveux. Un autre objet concerne encore une méthode de traitement cosmétique pour maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques des annexes cutanées, préférentiellement des fibres kératiniques, avantageusement des cheveux, et comprenant les étapes de : - Identification sur un être humain ne souffrant pas d’une pathologie, notamment cutanée, nécessitant un traitement thérapeutique, d’une zone de peau du corps et/ou du visage comportant des annexes cutanées et/ou d’une zone d’annexes cutanées pour laquelle on souhaite maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques desdites annexes cutanées, préférentiellement des fibres kératiniques, avantageusement des cheveux, et/ou qui en ont besoin ; - Application par voie topique sur ladite zone de la peau du corps et/ou du visage comportant des annexes cutanées et/ou sur ladite zone d’annexes cutanées de l’extrait hydrolysé selon l’invention ou de la composition le comprenant, en particulier à une teneur comprise entre 1x10 -4 % à 10% en poids, préférentiellement de 1x10 -3 % à 5% en poids, plus préférentiellement de 1x10 -3 % à 3% en poids, encore plus préférentiellement de 1x10 -3 % à 1 % en poids, avantageusement de 0,01% à 1% en poids, par rapport au poids total de la composition. Les exemples font partie intégrante de l’invention et toute caractéristique apparaissant nouvelle par rapport à un état de la technique antérieure à partir de la description prise dans son ensemble, incluant les exemples, fait partie intégrante de l'invention. Ainsi, chaque exemple a une portée générale. Sauf indication contraire, la température est exprimée en degré Celsius et la pression est la pression atmosphérique. EXEMPLES Exemple 1 : Différents modes de préparation de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention Le tourteau utilisé dans les exemples suivants contient moins de 8% en poids de lipides par rapport au poids total du tourteau. Exemple 1a : Hydrolyse enzymatique – Extrait hydrolysé 1 Un tourteau de graines de Silybum marianum est broyé et est mis en suspension dans de l’eau (en tant qu’unique solvant) à une teneur de 15% en poids de tourteau de graines par rapport au poids total de tourteau et de solvant et est soumis à une hydrolyse pendant une période de 2 heures à une température de 65°C et à pH 7,5 avec maintien du pH pendant l’hydrolyse, avec une concentration en poids de 1,7% de protéase d’origine bactrienne provenant de la souche Bacillus licheniformis (Alcalase®) sous forme liquide par rapport au poids du tourteau. L’enzyme est ensuite inactivée par chauffage durant 1h à une température de 90°C et à pH 6,0. Le mélange est refroidi à température ambiante, centrifugé et filtré (seuil de filtration : 0,22 µm). On obtient un produit liquide ayant une teneur de 4,14 ±0,3% en poids de matière sèche par rapport au poids du produit liquide. Exemple 1b : Hydrolyse enzymatique – Extrait hydrolysé 2 Un tourteau de graines de Silybum marianum est broyé et est mis en suspension dans de l’eau (en tant qu’unique solvant) à une teneur de 12,5% en poids de tourteau de graines par rapport au poids total de tourteau et de solvant et est soumis à une hydrolyse durant une période de 1 heure à une température de 55°C et à pH 8,5 avec maintien du pH pendant l’hydrolyse, avec une concentration en poids de 1 % de protéase d’origine bactrienne provenant de la souche Bacillus licheniformis (Alcalase®) sous forme liquide par rapport au poids du tourteau. L’enzyme est ensuite inactivée par chauffage durant 1h à une température de 90°C et à pH 4,5. Le mélange est ensuite refroidi, centrifugé, et le surnageant filtré (seuil de filtration : 0,22µm). On obtient un produit liquide ayant une teneur de 3,26% en poids de matière sèche par rapport au poids du produit liquide. Exemple 1c : Extrait hydrolysé 1 sous forme d’ingrédient cosmétique (avec de la maltodextrine) L’extrait obtenu à l’Exemple 1a) est atomisé en présence de maltodextrine, en une quantité finale de maltodextrine de 75% en poids par rapport au poids total de l’extrait atomisé final. L’extrait est donc obtenu sous forme de poudre. Exemple 1d : Extrait hydrolysé 2 sous forme d’ingrédient cosmétique (avec de la maltodextrine) L’extrait obtenu à l’Exemple 1b) est atomisé en présence de maltodextrine, en une quantité finale de maltodextrine de 75% (p / p) en poids par rapport au poids total de l’extrait atomisé final. L’extrait est donc obtenu sous forme de poudre. Exemple 1e : Hydrolyse enzymatique par utilisation de l’extrait hydrolysé 1 selon Exemple 1a Un tourteau de graines de Silybum marianum est broyé et est mis en suspension dans l’extrait hydrolysé (unique solvant) obtenu à l’exemple 1a) à une teneur de 15% en poids de tourteau par rapport au poids total de tourteau et de solvant puis le mélange obtenu est soumis à hydrolyse durant une période de 2 heures à une température de 65°C et à pH 7,5 avec maintien du pH pendant l’hydrolyse, avec une concentration en poids de 1,7% de protéine d’origine bactérienne provenant de la souche Bacillus licheniformis (Alcalase®) sous forme liquide par rapport au poids de tourteau. L’enzyme est ensuite inactivée par chauffage durant 1h à une température de 90°C et à pH 6,0. Le mélange est refroidi à température ambiante, centrifugé, filtré (seuil de filtration : 0,22µm). On obtient un produit liquide ayant une teneur de 6,1% en poids de matière sèche par rapport au poids du produit liquide. Exemple 2. Teneur en équivalent peptides de l’extrait hydrolysé selon Exemple 1a et sous forme d’ingrédient cosmétique selon Exemple 1c et analyse du profil de poids moléculaire peptidique a) Dosage des protéines totales Le but de cette étude est de quantifier le contenu total en équivalent peptides de l’extrait hydrolysé selon l’Exemple 1a selon l’invention. Matériel et méthode : Les teneurs en équivalent peptides de l’extrait hydrolysé est estimé en réalisant le dosage de l’azote total (méthode de Kjeldahl - AOAC, Association of Official Analytical Chemists Official Methods of Analysis, AOAC, Washington, DC, USA, 2000) et en multipliant la valeur obtenue par un facteur de 6,25 (N x 6,25). Les résultats obtenus sont rassemblés dans le tableau 1. Teneur en équivalent peptides % en poids (Azote total calculé pour 100% de masse sèche d’extrait hydrolysé selon Exemple 1a) Moyenne 63,1 % Ecart type 3,1 % Résultats : La quantité de matière sèche obtenue après extraction et hydrolyse est comprise entre 3,84 % et 4,44 %. Les peptides totaux représentent entre 60% et 66,2% environ de la matière sèche de l’extrait hydrolysé selon l’exemple 1a (Tableau 1). Conclusion : Les extraits hydrolysés de tourteaux de graines de Silybum marianum selon l’invention sont riches en peptides végétaux (entre 60% et 66,2% en poids du poids total de matière sèche). b) Analyse du profil des poids moléculaires moyens des peptides hydrolysées Profil moléculaire de l’extrait hydrolysé Objectif : Pour caractériser les poids moléculaires moyen en poids des composés peptidiques de l’extrait hydrolysé selon l’invention, 2 extraits hydrolysés selon l’exemple 1a ont été étudiés et classés ensuite selon 3 catégories : inférieur à 100 Da, de 100 Da à 20 kDa (bornes inclues) et supérieur à 20 kDa. Matériel et méthode : La répartition des poids moléculaires moyen en poids des peptides de l’extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique selon l’exemple 1a est analysée en perméation de gel sur colonne du type Superose® 12 10/300 GL (GE Healthcare Life Sciences). Les poids moléculaires moyen en poids sont déterminés après étalonnage de la colonne par des molécules protéiques de poids moléculaire moyen en poids connu. Les résultats obtenus sont rassemblés dans le tableau 2. Répartition par catégories de poids moléculaire moyen en poids des peptides contenus dans l’extrait selon l’Exemple 1a (% en poids par rapport au poids total des peptides) PM > 20 000 Da 20000 Da PM Moyenne 7,9 73,7 18,4 Ecart type 1,5 2,5 1,1 Résultats : Les peptides des extraits hydrolysés de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention sont majoritairement des composés peptidiques ayant un poids moléculaires moyen en poids compris entre 100 Da et 20 kDa (Tableau 2). Profil moléculaire entre 100 Da et 7000 Da Objectif : L’objectif de cette étude est d’étudier le profil de répartition des poids moléculaires moyen en poids des peptides contenus dans les extraits hydrolysés de tourteaux de graines de Silybum marianum obtenus selon l’Exemple 1c, dans la gamme entre 100 Da et 7000Da. Les poids moléculaires moyen en poids ont été classés ensuite selon 3 catégories : les deux catégories extrêmes regroupant les plus petits poids moléculaires 100 Da Matériel et méthode : La répartition des poids moléculaires moyens en poids des peptides de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum obtenus selon l’Exemple 1c a été analysée en perméation de gel sur colonne du type Superdex® peptide 10/30 HR GE (GE Healthcare Life Sciences). Le fractionnement s’est fait de 100 Da à 7000 Da et la détection UV a été réalisée à 214 nm. Les poids moléculaires moyens en poids ont été déterminés après étalonnage de la colonne par des molécules protéiques de poids moléculaires moyen en poids connus. Les résultats obtenus sont rassemblés dans le tableau 3. Répartition des peptides de la gamme 100Da à 7000 Da selon les poids moléculaires moyen en poids (% en poids par rapport au poids total des peptides de cette gamme) Gammes de PM 100 Da 700 Da 2500 Da Extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique selon l’exemple 1c moyenne 77,15 20,88 1,97 Écart type 2,27 2,40 0,99 Résultats : Les extraits hydrolysés de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention présentent majoritairement (98,03%) des composés protéiques de petits poids moléculaires moyen en poids soit dans la gamme 100 Da - 2500 Da (Tableau 3). Exemple 3 : Effets in tubo de l’extrait hydrolysé selon l’Exemple 1b sur les propriétés biomécaniques des annexes cutanées – Activité anti-radicalaire (DPPH) Le but de cette étude est de mesurer l’activité anti-radicalaire des extraits hydrolysés selon l’Exemple 1b par la méthode DPPH. Matériel et méthode : Le diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH°) est un oxydant qui se présente sous forme d’un radical libre auquel il manque un électron. Sous cette forme, le composé, de couleur violet foncé présente une absorption dans les longueurs d’ondes comprises entre 510nm et 530 nm. En présence d’un composé réducteur donneur d’électron, le diphenyl-2-picrylhydrazyl va former un composé stable s’accompagnant de la diminution de ses propriétés d’absorption (décoloration du composé) (Blois M. Antioxidant Determinations by the Use of a Stable Free Radical. Nature 181, 1199–1200 (1958)). Cette méthode est utilisée pour sélectionner des extraits de plantes présentant des propriétés anti-radicalaires (Kim BJ, Kim JH, Kim HP, Heo MY. Biological screening of 100 plant extracts for cosmetic use (II): anti-oxidative activity and free radical scavenging activity. Int J Cosmet Sci. 1997 Dec;19(6):299-307). L’extrait hydrolysé de tourteaux de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1b est mélangé à 5% (p/v) dans de l’eau distillée. 100 µl de cette solution a été testé en présence d’un volume similaire d’une solution de diphenyl-1-picrylhydrazyl à 90 µM (DPPH°, Sigma – 3,55mg de poudre DPPH dans 100mL d’éthanol). Après 30 minutes d’incubation à température ambiante et à l’abri de la lumière, l’absorbance a été enregistrée à 530 nm à l’aide d’un spectromètre (Victor V, Perkin Elmer). Les résultats sont exprimés en pourcentage d’inhibition du radical libre DPPH° par rapport au contrôle négatif. Résultats : Ils sont rassemblés dans le tableau 4. L’extrait hydrolysé de tourteaux de graines de Silybum marianum selon l’invention a préservé l’oxydation du DPPH jusqu’à 95% (Tableau 4). Oxydation du DPPH Moyenne (%) ET (%) % inhibition d’oxydation Extrait hydrolysé selon l’exemple 1b à 0,03% en poids 25,14 0,06 74,9 Extrait hydrolysé selon l’exemple 1b à 0,05% en poids 5,3 0,013 94,7 Conclusion : L’extrait hydrolysé de tourteaux de graines de Silybum marianum selon l’invention présente une forte activité anti-radicalaire et donc un effet de maintien et/ou d’augmentation des propriétés biomécaniques. Exemple 4 : Effets in tubo de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines selon l’invention sur les propriétés biomécaniques des annexes cutanées – Activité anti-oxydante/chélatrice des métaux de transition (Fe) Des réactions de glycation peuvent se former de manière chimique, entre des sucres réducteurs et des protéines. La présence d’agents oxydant et de métaux catalyse cette réaction et la formation des produits terminaux de glycation AGE (Advanced Glycation End products : produits terminaux de glycation avancés). L’activité chélatrice et antioxydante de l’extrait hydrolysé de tourteau de Silybum marianum selon l’invention a été évaluée dans un modèle in tubo en présence d’albumine et de fer et d’un agent oxydant, le peroxyde d’hydrogène. La réaction d’oxydation est évaluée par la mesure de la dégradation du tryptophane, du pontage de tyrosine, ainsi que de la formation de produits de glycation dont la pentosidine. Matériel et méthode : Un réactif comprenant de l’albumine à 1,5% (p/v), du fer à 2 mM, de l’EDTA à 5 mM et de l’eau oxygénée H 2 O 2 à 25 mM est mis en présence ou non avec l’extrait hydrolysé de tourteau de Silybum marianum selon l’exemple 1a à une teneur de 0,003% en poids ou de 0,01% en poids. L’albumine s’oxyde en présence d’H 2 O 2 . La réaction d’oxydation est catalysée par le fer. Un contrôle de la catalyse de la réaction d’oxydation est effectué en l’absence de fer. La mixture est incubée à 37°C pendant 1 jour. Les quantités respectives de tryptophane, de dityrosine, de pentosidine et de produits de glycation fluorescents sont mesurées par fluorescence avec l’appareil Thermo Scientific Varioskan® Flash (longueurs d’onde d’excitation/d’émission : 280 nm / 340 nm pour le tryptophane ; 315 nm / 410 nm pour la dityrosine ; 335 nm / 385 nm pour la pentosidine ; 370 nm / 440 nm pour les produits terminaux de glycation). Le seuil de significativité statistique a été fixé à 5 % (p L’indice de protection est calculé selon la formule suivante : (Contrôle avec Fer – Traitement avec extrait hydrolysé selon l’invention et avec Fer) / (contrôle avec fer – contrôle sans fer) x100. Le test est réalisé sur l’extrait selon l’exemple 1a séché de façon à obtenir une teneur en extrait sec de 100%. Dégradation du tryptophane catalysée par le Fer – taux du tryptophane non dégradé Contrôle albumine sans Fer Contrôle Albumine avec fer Albumine avec fer + extrait hydrolysé selon l’exemple 1a à 0,003% en poids Albumine avec fer + extrait hydrolysé selon l’exemple 1a à 0,01% en poids Moyenne (%) 175 100 118 128 ET (%) 6 4 2 3 Ecart (%) par rapport au contrôle albumine + fer 75 - 18 28 Indice de protection (%) - - 24 38 Statistique vs contrôle albumine avec fer p-value - La présence de fer catalyse la réaction d’oxydation, observable par l’augmentation du taux de tryptophanes non dégradés dans le contrôle albumine sans fer (Tableau 5). En présence de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,003% et 0,01% (en poids), la dégradation du tryptophane est significativement amoindrie avec un recouvrement de 18% et 28% respectivement de résidus tryptophanes (non dégradés). L’indice de protection de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum testé à 0,01% en poids est de 38%. Formation des dityrosines catalysées par le Fer Contrôle Albumine sans Fer Contrôle Albumine avec fer Albumine avec fer + extrait hydrolysé de tourteau de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,003% en poids Albumine avec fer + extrait hydrolysé de tourteau de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,01% en poids Moyenne (%) 58 100 84 72 ET (%) 2 12 6 2 Ecart (%) - - -16 -28 Indice de protection (%) - - 38 67 Statistique vs contrôle albumine avec fer p-value - La présence de fer catalyse la formation de dityrosine au niveau de l’albumine en présence d’H 2 O 2 (Tableau 6). L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,003% en poids et 0,01% en poids diminue la formation de dityrosines de 16% et 28% respectivement. L’indice de protection de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum testé à 0,01% en poids est de 67%. Formation de la Pentosidine catalysée par le Fer Contrôle albumine sans Fer Contrôle Albumine avec fer Albumine avec fer + extrait hydrolysé de tourteau de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,01% en poids Moyenne (%) 56 100 73 ET (%) 3 8 4 Ecart (%) - 44 - -27 Indice de protection (%) - - 61 Statistique vs contrôle albumine avec fer p-value - La présence de fer catalyse également la formation de pentosidine en présence d’H 2 O 2 (Tableau 7). L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,01% en poids diminue la formation de pentosidine de 27%. L’indice de protection de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum testé à 0,01% en poids est de 61%. Formation de produits de glycation fluorescents catalysée par le Fer Contrôle albumine sans Fer Contrôle Albumine avec fer Albumine avec fer + extrait hydrolysé de tourteau de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,003% en poids Albumine avec fer + extrait hydrolysé de tourteau de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,01% en poids Moyenne (%) 49 100 91 86 ET (%) 2 6 6 5 Ecart (%) - 51 - -9 -14 Indice de protection (%) - - 18 27 Statistique vs contrôle albumine avec fer p-value - - La présence de fer catalyse le processus d’oxydation de l’albumine en présence d’H 2 O 2 et s’accompagne de la formation de produits de glycation fluorescents (Tableau 8). L’extrait hydrolysé de tourteau de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,003% en poids et 0,01% en poids diminue la formation de ces produits de glycation de 9% et 14% respectivement. L’indice de protection de l’extrait hydrolysé de tourteau de Silybum marianum testé à 0,003% en poids et à 0,01% en poids est de 18% et 27% respectivement. Conclusion : L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum réduit l’oxydation des protéines catalysée par le fer et la formation de produits de glycation et donc a un effet de maintien des propriétés biomécaniques. Exemple 5 : Effets in tubo de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines selon l’invention sur les propriétés biomécaniques des annexes cutanées – Activité anti-oxydante/chélatrice des métaux de transition (Cu) Le but de cette étude est d’évaluer l’activité antioxydante/chélatrice des métaux de l’extrait hydrolysé de tourteau de Silybum marianum selon l’invention dans un test in tubo, en présence de lipoprotéines et de cuivre. Matériel et méthode Du cuivre à 200 µM est mis en contact de lipoprotéines de basse densité (LDL) à 100 µg/ml dans une solution tampon Phosphate salin (Phosphate Buffer Saline). L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,048% en poids est ajouté ou non à la solution. Le mélange réactionnel est incubé à 37°C pendant 48 heures. Le niveau d’oxydation des lipides est évalué par la quantification de malondialdéhyde (MDA) après ajout d’acide thiobarbiturique (TBA) à 2% en volume par rapport au volume total du mélange réactionnel. Le niveau de fluorescence est quantifié par spectrophotométrie avec l’appareil Thermo Scientific Varioskan® Flash, à la longueur d’onde d’émission de 560 nm après une excitation à la longueur d’onde de 532 nm. Le contenu en bases de Schiff est évalué par spectrométrie (Longueur d’onde d’excitation 370 nm / émission 440 nm) à l’aide de l’appareil Thermo Scientific Varioskan® Flash. Le seuil de significativité statistique a été fixé à 5 % (p L’indice de protection est calculé selon la formule suivante : (Traitement avec extrait hydrolysé selon l’invention et avec LDL+Cuivre - Contrôle LDL+Cuivre) / (contrôle sans cuivre – contrôle LDL+cuivre) x100. Résultats : Les résultats sont rassemblés dans le tableau 9 ci-dessous. Teneur en lipides oxydés par le dosage du malondialdéhyde Contrôle sans Cu Contrôle LDL + Cu LDL + Cu + extrait hydrolysé de tourteau de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,048% en poids Moyenne (%) 20 100 22 ET (%) 2 2 3 Ecart (%) 80 - -78 Indice de protection (%) - - 97,5 Statistique vs contrôle (t test) p-value - La présence de cuivre a potentialisé l’oxydation des lipides dosés par le malondialdéhyde. L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a utilisé à 0,048% en poids a diminué de manière significative de 78% la formation de Malondialdéhyde (Tableau 9). L’indice de protection de l’extrait hydrolysé de tourteau de Silybum marianum selon l’exemple 1a testé à 0,048% en poids est de 97,5 %. Conclusion : L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention a réduit l’oxydation des lipides catalysée par le cuivre et donc a permis de maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques. Exemple 6 : Effets in vitro de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines selon l’invention sur les propriétés biomécaniques des annexes cutanées – Activité anti-glycation sur les protéines de la fibre capillaire Objectif : Le but de cette étude est de mesurer l’effet anti-glycation de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’Exemple 1a sur les protéines de la fibre capillaire incubées dans une solution de glucose. Matériel et méthode : Des mèches de cheveux standardisées et nettoyées ont été incubées dans une solution tampon phosphate de glucose à 1 mol.L-1 (M) contenant ou non l’extrait hydrolysé selon l’exemple 1a séché de façon à avoir un extrait sec de 100% en une teneur de 0,01% en poids, à pH 7,4 pendant 2 jours à 50°C. Les mèches ont ensuite été rincées, essorées, coiffées, séparées puis découpées en morceaux de 1 cm de longueur. Les protéines sont extraites dans une solution d’hydroxyde de sodium NaOH de 1N pendant 24 heures à température ambiante, sous agitation douce. La quantité de dityrosine et de pentosidine (produits de glycation) est mesurée par fluorescence avec l’appareil Thermo Scientific Varioskan® Flash (longueurs d’onde d’excitation/d’émission : 315 nm / 410 nm pour la dityrosine ; 335 nm / 385 nm pour la pentosidine). L’indice de protection est calculé selon la formule suivante : (Contrôle glyquées – Glyquées +Traitement avec l’extrait selon l’invention) / (contrôle non glyquées – contrôle glyquées) x100. Le seuil de significativité statistique a été fixé à 5 % (p Résultats : ils sont présentés dans les tableaux 10 et 11 ci-dessous. Teneur en dityrosine sur cheveux glyqués (en présence de glucose) Control cheveux non glyqués Control cheveux glyqués Cheveux glyqués + Extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,01% en poids Moyenne (%) 72 100 84 ET (%) 9 11 6 Ecart (%) 28 - -16 Indice de protection (%) - - 57 Statistique vs contrôle (t-test ou Mann-Whitney) p-value - L’incubation des fibres dans une solution glucose a augmenté la teneur en dityrosine dans les protéines du cheveu. L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a utilisé à 0,01% en poids a diminué de manière significative de 16% la formation de dityrosine (Tableau 10). L’indice de protection de l’extrait hydrolysé selon l’exemple 1a utilisé à 0,01% en poids contre la production de dityrosine est de 57%. Teneur en pentosidine sur cheveux glyqués (en présence de glucose) Control cheveux non glyqués Control cheveux glyqués Cheveux glyqués + extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,04% en poids Moyenne (%) 71 100 83 ET (%) 6 9 10 Ecart (%) 29 - -17 Indice de protection (%) - - 59 Statistique vs contrôle (t-test) p-value - L’incubation des fibres dans une solution glucose a augmenté la teneur en pentosidine dans les protéines du cheveu. L’extrait hydrolysé de tourteau de graine de Silybum marianum selon l’exemple 1a utilisé à 0,04% en poids a diminué de manière significative de 17% la formation de pentosidine (Tableau 11). L’indice de protection de l’extrait hydrolysé selon l’exemple 1a utilisé à 0,04% en poids contre la production de dityrosine est de 59%. Conclusion : L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention a réduit la formation de produits de glycation en présence de glucose dans la fibre capillaire et donc permet de maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques de la fibre capillaire. Exemple 7 : Effets ex vivo de l’extrait hydrolysé selon l’invention sur les propriétés biomécaniques des annexes cutanées – Activité anti-oxydante/carbonylation des kératines Objectif : Le but de cette étude a été de mesurer l’effet protecteur de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention contre l’oxydation et en particulier la carbonylation des kératines et des protéines associées aux kératines (KAPs : Keratin Associated Proteins). Matériel et méthode : Préparation des mèches de cheveux : Des tresses capillaires de donneurs caucasiens ont été utilisées pour les mesures. Les cheveux ont été traités avec l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,05% (p/v) dans de l’eau distillée, par contact de 10 minutes, suivi d’un processus de lavage et de séchage. Des particules urbaines (particules fines) ont été appliquées sur les fibres capillaires (PM; ERM-CZ100 Fine Dust, Particulate Matter 10-like (PM10-like), Hydrocarbon Aromatics Polycycliques de 170 μg/cm²), et les cheveux ont été immédiatement exposés à l’irradiation UVA (84 J/cm², 6 heures d’exposition, source LED, pic d’émission à 365 nm) (cheveux stressés). Les cheveux traités à l’eau ou avec des N-acétyl cystéines à 0,2% (p/v) (antioxydants – témoin positif) et exposés ou non aux UVA et aux particules ont été utilisés comme témoins. Les tiges capillaires de chaque condition expérimentale ont été échantillonnées, cryoconservées, congelées dans de l’azote liquide et maintenues à -80°C jusqu’à l’analyse. a) Quantification des protéines carbonylés par Western blot Matériel et méthode Les protéines carbonylées ont été quantifiées dans les tiges capillaires par analyse par Western Blot pour les différentes conditions. Les protéines totales (kératines et protéines associées aux kératines) ont été extraites de chaque tige de cheveu par un procédé classique pour l’homme du métier. La quantification des protéines totales a été réalisée à l’aide de la méthode de Bradford. Les protéines carbonylées ont été marquées à l’aide d’une sonde fluorescente spécifique (Ex=647nm / Em=650 nm; Baraibar MA, Ladouce R, Friguet B. Proteomic quantification and identification of carbonylated proteins upon oxidative stress and during cellular aging. J Proteomics. 2013 Oct 30;92:63-70). Les protéines ont été résolues par SDS-PAGE et leur signal de fluorescence a été quantifié par acquisition des images du gel avec le système logiciel « iBright » de Thermofischer. Les protéines totales ont également été colorées dans le gel pour la normalisation à l’aide du système « iBright » (Thermofisher). Une valeur de score carbonyle (protéines carbonylées/protéines totales), représentant la quantification des protéines carbonylées, a été obtenue pour chaque échantillon. Score carbonyle (échantillon X) = Valeur de fluorescence Protéines oxydées (échantillon X) / Valeur de fluorescence Protéines totales (échantillon X) Un indice de protection (%) a été calculé selon la formule suivante : Indice de protection % = (Niveau de score carbonyle (stress) − Niveau de score carbonyle (traité avec extrait selon l’invention)) / (Niveau de score carbonyle (stress) − niveau de score carbonyle (contrôle)) x 100 À titre de référence, le groupe témoin est considéré comme ayant l’efficacité maximale (100%) et le groupe de stress a l’efficacité minimale (0%). Le seuil de significativité statistique a été fixé à 5 % (p Résultats : les résultats sont rassemblés dans le tableau 12 ci-dessous. Teneur en protéines carbonylées sur cheveux exposés au stress oxydatif (UVA et particules urbaines) mesurée par western blot Contrôle cheveux sains Contrôle cheveux après exposition UVA (84 J/cm² et particules urbaines) Cheveux stressés + extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,05% (p/v) Cheveux stressés + N acetyl cystéines à 0,2% (p/v) Moyenne (%) 76 100 75 89 ET (%) 4 5 1 3 Ecart (%) 24 -25 -11 Indice de protection > 100% 45 % Statistique vs contrôle (ANOVA) p-value P P P Une augmentation significative de la carbonylation des protéines a été observée lors de l’exposition au stress dues aux UVA et à la pollution (UVA 84 J/cm² et particules urbaines de type PM10) (Tableau 12). L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,05% (p/v) a significativement diminué le niveau de protéines carbonylées de 25% (p 100%. b) Quantification des protéines carbonylées par analyse d’images Matériel et méthode : L’analyse densitométrique in situ du signal de carbonylation a été réalisée par analyse des images obtenues grâce au logiciel « iBright » de Thermofischer et traitées avec le logiciel ImageJ de Rasband. Les niveaux d’oxydation de chaque groupe expérimental dans les régions de la cuticule et du cortex sont indiqués sous forme de moyenne (UFR) ± d’écart-type par rapport à la moyenne (Tableaux 13 et 14). Le seuil de significativité statistique a été fixé à 5 % (p Teneur en protéines carbonylées au niveau de la cuticule de cheveux exposés au stress oxydatif (UVA et particules urbaines) mesurée par analyse d’image. Control cheveux sains Control cheveux après exposition UVA (84 J/cm² et particules urbaines) Cheveux stressés + extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,05% (p/v) Cheveux stressés + N acétylcystéines à 0,2% (p/v) Moyenne (%) 44 100 72 66 ET (%) 7 x 5 1 Ecart (%) 56 - -28 -34 Index de protection - - 49% 61% Statistique vs contrôle (t test) p-value P - P P Résultats : Les UVA à 84 J/cm² et les particules urbaines ont augmenté la quantité de protéines carbonylées dans le cortex et la cuticule. Teneur en protéines carbonylées au niveau du cortex de cheveux exposés au stress oxydatif (UVA et particules urbaines) mesurée par analyse d’image Contrôle cheveux sains Contrôle cheveux après exposition UVA (84 J/cm² et particules urbaines) Cheveux stressés + extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,05% (p/v) Cheveux stressés + N acétylcystéines à 0,2% (p/v) Moyenne (%) 47 100 69 69 ET (%) 7 4 4 4 Ecart (%) 53 x -31 -31 Index de protection - - 59% 58% Statistique vs contrôle (t test) p-value P - P P L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,05% (p/v) a diminué significativement de 28% (p c) Protection de l’intégrité structurale du cheveu Objectif : L’état structurel des protéines kératiniques des tiges capillaires obtenues selon le protocole décrit ci-dessus, est évalué par mesure optique à l’aide d’un microscope XPolar® (KAMAX). Les propriétés de biréfringence d’une fibre capillaire dépendent de l’intégrité structurelle des kératines. Les cheveux sont composés de protéines fibreuses de kératines. La structure cristalline des fibres de kératine confère au cheveu la capacité de modifier la polarisation de la lumière qui le traverse, une propriété appelée biréfringence. Les propriétés de biréfringence dépendent de l’épaisseur des cheveux et de l’état cristallin de la kératine. Une diminution du paramètre de biréfringence (Kindex) indique des kératines structurellement endommagées. Une valeur de Kindex, qui est associée aux propriétés de biréfringence de la fibre capillaire, peut être déterminée et comparée entre les cheveux abîmés et non abîmés, les affections capillaires traitées et non traitées Matériel et méthode : Des segments de cheveux obtenus selon le protocole décrit ci-dessus, de 1 cm de longueur (n = 30 par condition) ont été transférés sur des lames compatibles pour l’analyse de la biréfringence à l’aide de la technologie XPolar. Il s’agit d’un appareil d’imagerie intégré dans un microscope, permettant d’observer et de mesurer les propriétés polarimétriques des échantillons étudiés. Des images d’intensité réfléchie ont d’abord été prises pour mesurer l’épaisseur des cheveux. Ensuite, les échantillons ont été éclairés par une lumière polarisée pour mesurer la Kmax. En supposant que les cheveux ont une géométrie cylindrique, il est possible d’estimer la valeur de biréfringence (Kindex) à partir de la valeur Kmax et des diamètres des cheveux en utilisant un Abacus. Une valeur d’amélioration de la structure capillaire a été obtenue en utilisant le groupe endommagé et les groupes non traités comme références, selon la formule : (cheveux stressés traités par l’extrait hydrolysé selon l’invention – cheveux stressés) / (cheveux sains – cheveux stressés) *100. Indice de biréfringence (K index ) relatif à la qualité structurale des cheveux Contrôle cheveux sains Contrôle cheveux après exposition UVA (84 J/cm² et particules urbaines) Cheveux stressés + extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,05% (p/v) Moyenne (%) 124 100 114 ET (%) 31 23 37 Ecart (%) -24 - 14 Index d’amélioration x x 59% Statistique vs contrôle (t-test avec correction de Welch) p-value P - P Résultats : Le stress oxydatif a provoqué un changement structural de la fibre capillaire. Une diminution des valeurs de Kindex a été observée sur les cheveux abîmés par rapport au contrôle des cheveux non endommagés (Tableau 15). Elle correspond à une dégradation de la structure de la kératine par oxydation des kératines sous exposition aux UVA et particules urbaines. Les fibres capillaires traitées avec l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,05% (p/v) dans l’eau distillée, ont montré une augmentation significative de la valeur moyenne de biréfringence par rapport aux fibres capillaires endommagées (Tableau 15). L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a a permis d’augmenter de 14% (p d) Score intégratif de protection capillaire Le score de protection capillaire (SPC) est l’indice intégratif pour classer l’efficacité des produits de soins capillaires. Les valeurs de score sont réparties entre : SPC 15; SPC 30; SPC 50 et SPC 50+. La valeur du SPC est obtenue en utilisant un algorithme spécifique intégrant les événements moléculaires précoces pour l’évaluation de la protection des fibres capillaires contre les blessures de la vie quotidienne. Les dommages moléculaires, évalués par l’évaluation de la carbonylation des protéines, et les dommages structurels, évalués par l’évaluation de la biréfringence capillaire selon l’Exemple 7 ont été intégrés pour obtenir le SPC du produit, soutenant la protection efficace de la fibre capillaire contre les dommages induits par la pollution (particules et irradiation UVA). Une référence interne a été utilisée comme témoin (N-acétylcystéine : SPC = 50). L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’Exemple 1a a montré un score de protection capillaire de 50+. Ce score est supérieur à celui de la N-acétylcystéine. Statistiques : Toutes les données ont été analysées à l’aide des logiciels GraphPad Prism 9 (Insightful Science USA) ou SigmaPlot (Systat Software Inv. USA). Les analyses statistiques ont été obtenues en utilisant des comparaisons binaires de test t de Student ou d’ANOVA entre les groupes et les conditions endommagées. Le seuil de significativité statistique a été fixé à 5 % (p Conclusion : L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention protège les kératines et protéines associées aux kératines de la carbonylation induite par l’exposition des fibres capillaires aux UVs et aux polluants, permettant le maintien de leurs intégrités structurelles et le maintien de leurs propriétés biomécaniques. Exemple 8 : Pénétration de l’extrait hydrolysé selon l’invention dans la fibre (cortex) (FT-IR) sur fibres capillaires ( ex vivo ) Objectif : Les techniques spectroscopiques vibrationnelles telles que la spectroscopie infrarouge Raman et la spectroscopie infrarouge par transformée de Fourier (FT-IR; Fourier transform infrared spectroscopy) sont de plus en plus utilisées dans les sciences cosmétiques pour étudier la composition chimique des cheveux et les changements dans la structure de la kératine selon différents environnements et traitements. Ces techniques sont non destructives et ne nécessitent aucun marquage des échantillons. Le FT-IR est particulièrement avantageux pour l’analyse des cheveux pigmentés car il est moins sujet à une absorption intense de la mélanine sous excitation visible. Le but de cette étude est d’évaluer la distribution des constituants de l’extrait hydrolysé selon l’invention dans la fibre capillaire et d’étudier son effet sur le profil infrarouge de la kératine. Matériels et méthodes : Préparation et traitement des cheveux : Le test a été effectué sur 3 mèches de cheveux humains caucasiens blanchies au persulfate (ultra-blanchies). Les mèches de cheveux ont été normalisées (2 g/ 2 g / 15 cm), nettoyées, rincées et séchées à température ambiante avant l’essai. Les tresses de cheveux sains Caucasiens (cheveux brun foncé naturels) ont été utilisées comme contrôle des cheveux naturels et non abîmés. Les mèches de cheveux ont été complètement recouvertes par l’extrait hydrolysé selon l’exemple 1a mélangé à 5% en p/v dans de l’eau distillée ou par de l’eau comme placebo. L’excès de produit a été retiré des mèches en essuyant chaque brin entre le pouce ganté et l’index ganté. Les cheveux ont été coupés en sections de 10 μm pour l’imagerie infrarouge. Spectroscopie infrarouge : Le produit a été caractérisé pour son profil spectral vibratoire par spectroscopie infrarouge couplée à un microscope. Les images ont été collectées entre 800-4000 cm -1 , avec une taille de pixel de 6,25x6,25 μm 2 . Des prétraitements analytiques ont été effectués pour nettoyer les spectres. Le spectre du produit a été suivi dans la fibre capillaire à l’aide d’une méthode d’ajustement (fitting). Résultats : L’extrait hydrolysé selon l’exemple 1a présente des bandes spectrales spécifiques à 993, 1053, 1110, 1403 et 1597 cm-1 qui sont distinctes du spectre de la kératine. Ces marqueurs spectraux ont été utilisés pour identifier l’extrait hydrolysé dans la fibre capillaire. Nous observons que l’extrait hydrolysé se concentre principalement au niveau de la cuticule du cheveu et diffusait au sein du cortex de la fibre. Exemple 9: Effets de l’extrait hydrolysé selon l’invention sur les propriétés biomécaniques des annexes cutanées - Restructuration moléculaire et stabilisation des groupements cystéines (FT-IR) sur fibres capillaires ( ex vivo ) Objectif : L’objectif est d’étudier plus précisément les spectres vibratoires des kératines endommagées ou non, et traitées ou non avec l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a. Ces analyses ont permis de démontrer l’interaction de l’extrait hydrolysé selon l’invention avec les kératines endommagées du cortex de cheveu et en particulier de son effet stabilisateur général et en particulier des groupements de type acide cystéique et de ses dérivés. Matériel et méthode Des mèches de cheveux de couleur brune de type Caucasien ont été oxydés par blanchiment en étant calibrées (12 cm / 1 g), nettoyées et séchées pour l’étude. Les mèches ont été blanchies avec une solution de peroxyde d’hydrogène à 5% en v/v pendant 20 minutes, puis rincées et séchées. L’analyse comparative des spectres vibratoires des kératines des cheveux non endommagés et des cheveux oxydés par blanchiment traité avec ou sans l’extrait selon l’Exemple 1a mélangé à 5% en p/v dans de l’eau distillée, s’est effectuée par analyse « fitting » : méthode utilisant l’environnement Matlab pour programmer la comparaison de spectres infrarouges donnés du témoin respectivement avec les spectres infrarouges du produit. Les changements dans le signal de la kératine ont été traités à l’aide d’une analyse hiérarchique par cluster pour déterminer le degré de proximité des spectres entre eux. L’aire sous la courbe a été déterminée pour les bandes d’absorption à 1174 cm -1 , 1116 cm -1 . Le seuil de significativité statistique a été fixé à 5 % (p Résultats : Les dommages oxydatifs causés par la décoloration chimique des cheveux ont montré des impacts sur la composition chimique et structurelle des cheveux avec des modifications observables au niveau des profils des spectres vibratoires. L’analyse hiérarchique par cluster a permis de montrer que les cheveux abîmés traités par l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a et les cheveux vierges présentent des profils spectraux plus proches que similaires à ceux des cheveux abîmés. Ces résultats suggèrent que l’extrait hydrolysé de tourteaux de graines de Silybum marianum selon l’invention interagit avec les kératines abîmées du cortex de la fibre et permet de les stabiliser. Les bandes spectrales faisant référence à l’intégrité des liaisons cystéine ont été ensuite étudiées plus en détail. Celles-ci ont été modifiées dans des conditions endommagées par une oxydation chimique par rapport aux cheveux sains non endommagés. En particulier, les bandes spectrales à 840, 1116, 1150 et 1174 cm -1 (se référant respectivement à N-H hors de la flexion du plan, à l’étirement du SO 2 et du CO et à l’étirement asymétrique du SO 3 ) ont augmenté en intensité dans les cheveux oxydés par décoloration capillaire par rapport aux cheveux sains. Il a été démontré que l’extrait hydrolysé selon l’invention était capable de diminuer ces intensités de bande vers celles des cheveux vierges. Enfin, il a été démontré que l’extrait hydrolysé tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention était capable de diminuer ces intensités de bande pour se rapprocher des spectres des cheveux sains (Tableau 16). En particulier, les endommagements oxydatifs ont agi sur les liaisons SO, SO 2 , NH et CO (augmentation significative de l’intensité de ces bandes). La création de ces groupements s’est effectuée à partir de l’oxydation des groupements et de la scission des ponts disulfures de cystéine. L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention a montré une diminution significative de l’intensité de ces liaisons SO, SO 2 , NH et CO. L’indice de protection est calculé selon la formule suivante : (Contrôle glyquées – Glyquées +Traitement avec l’extrait selon l’invention) / (contrôle non glyquées – contrôle glyquées) x100. Bandes d’absorption Aire sous la courbe pour les bandes d’absorption à 1174 cm -1 , 1116 cm -1 Cheveux non endommagés contrôles Cheveux oxydés par blanchiment (non traité) Cheveux oxydés par blanchiment traités avec l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à une teneur de 5% p/v 1174 cm -1 (étirement asymétrique de l’acide cystéique (S=O / SO 3 ) Moyenne 0,46 0,74 0,70 Ecart type 0,05 0,04 0,05 Statistiques vs Cheveux oxydés par blanchiment x Différence % x -5,4% vs non traité % efficacité 14% 1116 cm -1 (étirement de SO 2 ) Moyenne 1,06 1,46 1,07 Ecart type 0,15 0,28 0,32 Statistiques vs Cheveux oxydés par blanchiment x Différence % -26,7% vs non traité % efficacité 97,5% 1150 cm -1 (liée aux vibrations CO) Moyenne 0,55 0,76 0,62 Ecart type 0,09 0,10 0,10 Statistiques vs Cheveux oxydés par blanchiment x Différence % -18,4% vs non traité % efficacité 66,7% 840 cm -1 (liée aux NH) Moyenne 0,07 0,15 0,09 Ecart type 0,02 0,06 0,05 Statistiques vs Cheveux oxydés par blanchiment x Différence % -40% vs non traité % efficacité 75% Conclusion : L’extrait hydrolysé de tourteau de graine de de Silybum marianum selon l’invention est capable d’interagir avec les entités moléculaires des kératines et protéines associées aux kératines des fibres capillaires endommagées par oxydation chimique et de les stabiliser. L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention permet une efficacité de restauration structurale et donc une efficacité de réparation et/ou de maintien et/ou d’augmentation des propriétés biomécaniques, notamment de la force, de la plasticité, de la résistance et/ou de la souplesse comprise entre de 14% à 98% selon les groupements chimiques pour les bandes comprises entre 840 et 1174 cm -1 . Exemple 10 : Effets ex vivo de l’extrait hydrolysé selon l’invention sur la réparation de la fibre capillaire Le but de cette étude est de mesurer l’effet réparateur de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention sur des fibres capillaires endommagées par l’eau oxygénée par calorimétrie (DSC =Differential Scanning Calorimetry) Matériel et méthode : Les mèches de cheveux de couleur brun foncé de type caucasien ont été calibré (1g ; 12 cm) et préparé pour l’étude. Les mèches de cheveux ont été lavées puis blanchies 3 fois à l’aide d’une solution de peroxyde d’hydrogène (5,6% H 2 O 2 en volume + 13,9% (NH 4 ) 2 S 2 O 8 en volume, pH=9,4) pendant 30 minutes. Les mèches de cheveux saines (non blanchies) ont été conservées comme contrôle. Après lavage et séchage pendant 45 minutes à 55°C sous flux d’air, les mèches de cheveux ont été plongées pendant 24h dans de l’eau distillée (comme contrôle) ou dans une solution aqueuse contenant 1% (p/v) d’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1b. Les deux solutions ont été préalablement tamponnées à pH 5,5. Les mèches ont été rincées puis séchées 1h à environ 60°C sous un flux d’air. La température de dénaturation des protéines humaines a été déterminée par calorimétrie différentielle selon la méthode décrite par FJ. Wortmann, H. Deutz, Characterizing keratins using high-pressure differential scanning calorimetry (HPDSC), Vol.48-Issue 1, p.137-150, 5 April 1993 avec un taux de chauffe de 2 K/min est un analyseur enthalpique différentiel (DSC Q100, TA Instruments). L’indice de réparation versus le placebo est calculé comme suit : (cheveux blanchis traités avec extrait hydrolysé selon l’invention - Contrôle + eau(placebo) ) / (contrôle cheveux sains – Contrôle + eau(placebo) ) x100. L’indice de réparation versus le placebo est calculé comme suit : (cheveux blanchis traités avec extrait hydrolysé selon l’invention - Contrôle cheveux blanchis ) / (contrôle cheveux blanchis – Contrôle + eau(placebo) ) x100. Différentiel de température des fibres capillaires selon les traitements Cheveux sains (non blanchis, non traités) Cheveux blanchis contrôle (endommagés contrôle non traités) Cheveux blanchis contrôle + eau (placebo) Cheveux blanchis + extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1b à 1% (p/v) Moyenne (°C) 140,4 130,8 132,0 137,4 ET (°C) 0,07 0,16 0,10 0,09 Ecart (°C) - - 9,6 vs non blanchis - 5,4 vs placebo Indice de réparation (%) - - - 65% vs placebo 69% vs non traités Statistique vs cheveux blanchis contrôle (ANOVA) N=6 p-value - - Résultats : Les cheveux blanchis au peroxyde d’hydrogène sont plus instables par rapport aux cheveux sains non blanchis (Tableau 17). La différence de température de dénaturation des protéines de la fibre capillaire a été de -9,6°C entre les cheveux endommagés et les cheveux sains. Le traitement des cheveux endommagés avec l’extrait de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1b à 1% (p/v) a permis d’améliorer de +5,4°C la stabilité des protéines du cheveux face à la dénaturation par la chaleur par rapport aux cheveux endommagés traités avec de l’eau. L’extrait hydrolysé de tourteau de graine de Silybum marianum selon l’exemple 1b a montré un effet réparateur de la fibre capillaire endommagée par stress oxydatif chimique par rapport aux cheveux sains de 64%. Conclusion : Le traitement avec l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention des cheveux peroxydés a permis d’améliorer la stabilité les protéines de la fibre capillaire face à la chaleur. L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention a montré un effet réparateur de la fibre capillaire endommagée par le peroxyde d’hydrogène (stress oxydatif) et donc une efficacité de réparation et/ou de maintien et/ou d’augmentation des propriétés biomécaniques, notamment de la force, de la plasticité, de la résistance et/ou de la souplesse de la fibre capillaire. L’efficacité de réparation du cortex par l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention à 1% (p/v) est de 65% par rapport au contrôle endommagé traité avec l’eau (placebo) et de 69% par rapport au contrôle endommagé non traités. Exemple 11 : Effets ex vivo de l’extrait selon l’invention sur le renforcement de la fibre capillaire (single fiber fatigue test / test de fatigabilité sur fibre capillaire) Objectif : L’effet de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’Exemple 1a, sur le renforcement de la fibre capillaire fragilisée a été évalué par des tests de fatigue sur fibre capillaire isolée. Les expériences de fatigue évaluent la tendance à la casse des cheveux sous l’application répétée d’une force (Evans TA., Fatigue testing of hair-a statistical approach to hair breakage. J Cosmet Sci. 2009 Nov-Dec;60(6):599-616). Les propriétés mécaniques de tension du cheveu reflètent l’état interne de sa structure. Cette approche peut être considérée comme une simulation plus réaliste des pratiques de consommation où le toilettage représente un tel stimulus. Cette méthode permet également d’évaluer l’effet réparateur d’un ingrédient cosmétique, en particulier sur la cuticule. Matériel et méthode : Des mèches de cheveux bruns-foncés caucasiens décolorés 3 fois par le peroxyde d’hydrogène ont été calibrées (1g/ 12 cm) et nettoyées pour l’étude. Les mèches ont été traitées ou non avec 1% (p/v) de l’extrait de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a mélangé à de l’eau distillée, pendant 1 heure à pH 5,0-5,5, puis rincées et séchées. Entre 50 et 60 fibres ont été étudiées dans des conditions standardisées 40% +/-5% d’humidité relative à 21°C +/-2°C pour chaque condition traitée ou non traitée. Dans ce test, des fibres capillaires individuelles ont été soumises à des déformations répétées. L’instrument compte le nombre de cycles répétitifs d’un stimulus prédéfini qui sont nécessaires pour induire la rupture. Un nombre maximum de cycle a été défini. Dans ces conditions de test, la fibre peut ou ne peut pas se casser au cours de l’expérience. Une probabilité de survie à un moment donné a été calculée en utilisant le principe de la courbe de survie de Kaplan Meier, pour estimer la survie (ou fibre kératinique qui ne casse pas). Des analyses statistiques de comparaison des groupes ont été réalisées selon un modèle non paramétrique. Les différences ont été jugées significatives pour une valeur p Un indice de renforcement capillaire a été calculé selon l’équation suivante : (nombre de ce cycle avant casse des cheveux blanchis traités - nombre de ce cycle avant casse des cheveux blanchis non traités) / (nombre ce cycle avant casse des cheveux sains - nombre ce cycle avant casse des cheveux blanchis non traités) x 100 Nombre de cycles avant la casse du cheveu Cheveux sains (non blanchis) Cheveux blanchis contrôle (endommagés contrôle) Cheveux blanchis + extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 1% (p/v) Moyenne 3380 495 1437 ET 281 74 211 Indice de renforcement de la fibre capillaire - - 33% Statistique vs cheveux blanchis contrôle N=59-73 p-value - Résultats : L’oxydation chimique par blanchiment capillaire à réduit considérablement le nombre de cycles induisant la rupture de la fibre (Tableau 18). Ceci suggère que la fibre capillaire décolorée est plus fragile et plus sujette à la casse. Le traitement des cheveux blanchis 3 fois avec l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 1% (p/v) a significativement amélioré le nombre de cycles avant la rupture, indiquant le renforcement et/ou la réparation des cheveux endommagés par oxydation capillaire chimique. Conclusion : L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention présente des propriétés de renforcement et donc de réparation de la fibre capillaire permettant de réduire sa probabilité de se casser et donc de maintenir et/ou augmenter la force et/ou la plasticité et/ou la résistance et/ou la souplesse de la fibre capillaire, notamment de réparer les annexes cutanées préférentiellement les cheveux. Exemple 12 : Effets ex vivo de l’extrait hydrolysé selon l’invention sur les propriétés biomécaniques de la fibre capillaire – Préservation de la couleur (colorimétrie) Objectif : L’effet antioxydant et protecteur de la couleur de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention a été évalué dans un test de décoloration de la couleur capillaire après exposition solaire. Matériel et méthode : Des mèches de cheveux caucasiens décolorés 2 fois par le peroxyde d’hydrogène et colorées avec un pigment rouge, ont été utilisées. Les mèches de cheveux ont été calibrées (1g / 15 cm), nettoyées et séchées pour l’étude. Les mèches ont été traitées ou non avec 1% (p/v) de l’extrait de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a mélangé à de l’eau distillée, pendant 1 heure puis séchées toute la nuit à température ambiante. Les mèches ont été exposées à la lumière solaire (Suntest CPS+) aux longueurs d’ondes comprises entre 300-800 nm avec une puissance de lampe de 592 W/m 2 pendant 19 heures. L’énergie totale d’exposition a été de 41469 kJ/m² par cycle. Après exposition les mèches ont été lavées pendant 3 minutes et séchées toute la nuit dans une chambre conditionnée à 40% d’humidité relative et à température de 21°C, suivi par des mesures colorimétriques selon la méthode L*a*b*. Les paramètres mesurés ont été le delta E* (changement global de couleur) et le delta a* associé aux nuances rouge / verte (changement de la couleur rouge). La couleur des mèches a été mesurée après 1 cycle, 2 cycles ou 3 cycles de traitement et d’exposition solaire. Huit mèches ont été utilisées par conditions. Des analyses statistiques des données ont été réalisées par comparaison des groupes avec le test t de Student. Les différences ont été jugées significatives pour une valeur p Un pourcentage d’efficacité de préservation de la couleur capillaire contre la décoloration par la lumière solaire a été obtenue en utilisant le groupe stressé coloré et les groupes non traités comme références, selon la formule : 100 – [(cheveux colorés traités avec l’extrait hydrolysé selon l’invention / cheveux colorés contrôle)*100] Valeurs de Delta a* (changement de la couleur rouge) Cheveux colorés contrôle exposés à la radiation solaire non traités Cheveux colorés exposés à la radiation solaire + extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 1% (p/v) 1 cycle de traitement et d’exposition solaire Moyenne -6,6% -0,8% ET 1,7% 1,6% Statistique vs Cheveux colorés non traités N=8 p-value - Différence - 5,8% % efficacité - 87,9% 2 cycles de traitement et d’exposition solaire Moyenne -15,5% -11,4% ET 1,3% 1,4% Statistique vs Cheveux colorés non traités N=8 p-value - Différence - 4,1% %efficacité - 26,5% 3 cycles de traitement et d’exposition solaire Moyenne -21,1% -14,6% ET 1,3% 1,7% Statistique vs Cheveux colorés non traités N=8 p-value - Différence - 6,5% % efficacité - 30,8% Résultats : Les cheveux colorés exposés à l’irradiation solaire ont présenté des variations croissantes de couleur globale et de couleur rouge au cours des cycles d’exposition (Tableaux 19 et 20). L’exposition solaire a décoloré les cheveux. Le traitement des cheveux colorés avec l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a a permis de ralentir de manière significative ces modifications de la couleur (Delta a* et Delta E*) en fonction des cycles d’exposition. L’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention a présenté un effet protecteur de la couleur capillaire contre la décoloration par la lumière solaire et donc permet de maintenir et/ou augmenter la couleur et/ou la brillance de la fibre capillaire. Exemple 13 : Effets ex-vivo d’un extrait hydrolysé selon l’invention sur les propriétés biomécaniques du cheveu - anti-casse Objectif : L’efficacité d’un traitement capillaire en termes de prévention anti-casse et anti-fourche a été testée sur un appareil permettant le peignage répété des mèches de cheveux. L’influence des traitements capillaires chimiques comme le blanchiment sur la casse des cheveux peut être examinée. Puis, les effets protecteurs des produits de référence du marché et de l’extrait hydrolysé selon l’invention ont été étudiés. Matériel et méthode : Des mèches de cheveux de couleur brune de type Caucasien ont été calibrées (12 cm / 1 g), nettoyées et séchées pour l’étude. Les mèches ont été blanchies avec une solution de peroxyde d’hydrogène à 5% en v/v pendant 20 minutes, puis rincées et séchées. Les mèches ont été traitées avec le shampooing ayant la composition ci-dessous contenant l’extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique selon l’exemple 1c (ce qui représente 0,25 g de shampoing / g de cheveux) puis ont été traitées avec l’après-shampooing ayant la composition ci-dessous contenant l’extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique selon l’exemple 1c (ce qui représente 0,125 g d’après-shampoing / g de cheveux). Les produits ont été rincés et les mèches ont reposées pendant 5 heures, à 40% d’humidité relative avant l’analyse. Les mèches ont été coiffées 50 000 fois dans les condition suivantes : 40% d’humidité relative à 30°C. Les fibres cassées d’une longueur inférieure à 9 cm ont été récoltées et pesées. La valeur de casse du cheveu est calculée selon la formule : cheveux cassés (g) / mèches (g) x 100 Les données aberrantes ont été détectées par le test de Grubbs avec un niveau de significativité de 0,05 et retirées des enregistrements des données. Formule du shampooing anti-casse : Dénominations % en poids Eau 74,15 Sodium Benzoate 0,50 Xanthan Gum 0,45 Decyl Glucoside 12,00 Dicaprylyl Ether, Decyl Glucoside, Glyceryl Oleate 1,50 Sodium Cocoyl Glutamate 8,00 Guar Hydroxypropyltrimonium Chloride 0,20 Citric acid, water 0,10 Extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique selon exemple 1c 0,20 Acide citrique et eau 2,90 Formule de l’après shampooing anti-casse : INCI Name % en poids Water 86,00 Cetearyl Alcohol, Lecithin, Sodium Cetearyl Sulfate, Olus Oil 9,00 Coco-Caprylate 2,00 Olus Oil 2,00 Sodium Benzoate 0,50 Extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique selon exemple 1c 0,20 Acide citrique et eau 0,30 Pourcentage de cheveux cassés après coiffage répété (50 000 fois) Cheveux fragilisés (blanchis) contrôle (% en poids) Cheveux fragilisés + traités avec shampoing et après shampoing comprenant respectivement l’extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique selon l’exemple 1c à 0,2% (p/p) (% en poids) Moyenne 20,1% 4,5% ET 2,5% 1,7% Réduction de la casse du cheveu vs non traités - 78% Statistique vs Cheveux blanchis non traités N=10 p-value - Résultats : Le pourcentage de casse des cheveux fragilisés non traités a été estimé à 20,1% contre 4,5% pour les cheveux fragilisés traités avec les shampooing et après-shampooing contenant l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1c (Tableau 22). La protection contre la casse des produits finis contenant l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1c a été de 78%. Conclusion : De bonnes propriétés de conditionnement, et de protection des cheveux contre la casse ont été trouvées avec le shampooing et l’après shampooing contenant l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention. Exemple 14 : Effets in vitro d’un extrait hydrolysé selon l’invention sur les propriétés biomécaniques – protection et stimulation du métabolisme sur la papille du follicule pileux Les fibroblastes de la papille jouent un rôle important dans l’orchestration des signaux régulateurs impliqués dans le métabolisme cellulaire du follicule pileux (Reynolds AJ., Jahoda CA, Cultured dermal papilla cells induce follicle formation and hair growth by transdifferentiation of an adult epidermis. Development 115: 587-593; (1992) ;Matsuzaki T, Yoshizato K., Role of hair papilla cells on induction and regeneration processes of hair follicles. Wound Repair Regen. Nov-Dec;6(6):524-30. (1998))). Avec l’âge, ou en réponse à des stress environnementaux, la physiologie et le métabolisme des fibroblastes de la papille peuvent être affectés, et par conséquent impacter la qualité de la fibre kératinique qui en résulte. Objectif : L’objectif de cette étude a été d’évaluer l’effet anti-âge et stimulateur du métabolisme de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a sur des modèles de culture en agrégats de fibroblastes de la papille issus de follicule pileux par la mesure de l’ATP. Ce modèle cellulaire en 3 dimensions permet de conserver les caractéristiques de la papille in vivo, en particulier celle d’être capable d’induire la formation et la pousse d’un cheveu de qualité (Yang CC and Cotsarelis G, Review of hair follicle dermal cells. J Dermatol Sci. 57(1): 2 (2010)). Matériels et méthode : Une suspension composée de fibroblastes de la papille de follicules pileux humains (40x103 cellules) dans du DMEM avec 0,2% en v/v de facteurs de croissances (Mesenchymal Stem Cell Growth Supplement) et la présence ou non de l’extrait hydrolysé de Silybum marianum selon l’exemple 1a à une teneur de 0,01% en poids/volume dans l’eau distillée, a été placée en microplaque 96 puits et mise à centrifuger 5 minutes à 200 g pour former des agrégats. Les agrégats sont incubés à 37°C dans une atmosphère contrôlée (5% de CO 2 et humidité relative de 95%). Pour l’analyse des paramètres d’intérêt, les agrégats sont rincés dans une solution tamponnée saline (PBS) et les cellules sont séparées par incubation dans une mixture comprenant de la collagénase A 100mg, et un mélange de 20mL de Trypsine (2,5% en v/v) et EDTA (0,02% en v/v) avec ratio 1:1 . Les cellules en suspension ont été utilisées pour doser l’ATP par bioluminescence selon les instructions des fournisseurs (Kit Bioluminescence Assay Kit CLS II Roche 11699695001, Sigma Aldrich). Résultats : Le traitement des agrégats avec l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,01% en poids/volume a permis d’augmenter la quantité totale d’ATP produite (+32% par rapport au témoin ; tableau 23). Effet de l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum sur la production d’ATP par les fibroblastes de la papille cultivés en agrégats. Agrégats de fibroblastes de la papille dans un milieu contrôle Agrégats de fibroblastes de la papille traités avec l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’exemple 1a à 0,01% en poids/volume Moyenne (%) 100 132 ET (%) 19 23 Différences (%) - 32 Statistique vs contrôle t test N=7-10 p-value - Conclusion : Le traitement des agrégats de fibroblastes de la papille par l’extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum selon l’invention permet d’augmenter l’ATP au sein de la pseudo-papille. Ces résultats suggèrent un potentiel vitalisant du follicule pileux pour un renforcement structurel et fonctionnel de la fibre kératinique. Exemple 15 : Test consommateur avec shampooing et après shampooing comprenant respectivement l’extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique selon l’exemple 1c Objectif : Le but de l’étude est d’évaluer la perception des consommateurs concernant les bénéfices apportés par l’extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique, incorporé dans un shampooing et un après-shampoing sur les cheveux abîmés. Matériels et méthode : L’étude a été randomisée en double aveugle sur un total de 31 volontaires. Le shampoing et l’après shampoing utilisés sont identiques à ceux utilisés dans l’exemple 13 (Tableaux 20 et 21). Les mêmes volontaires ont appliqué soit le shampooing et l’après shampooing contenant l’extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique soit les produits placebo au moins 3 fois par semaine pendant une période de 4 semaines, de manière séquentielle, avec une période d’arrêt de traitement de 3 semaines entre les deux phases de traitement. Les volontaires ont répondu à un questionnaire d’auto-perception des bénéfices consommateurs mesurant leurs opinions sur les produits, après 4 semaines d’utilisation. Le nombre de questions positives ou négatives ont été groupées et analysées avec un test binomial non paramétrique (Chambers E. and Wolf M. “Sensory Testing Methods: Second Edition.” Micro & Nano Letters (1996)). Le seuil de significativité a été fixé à 5% (p Résultats : Une majorité significative des volontaires ont perçu des effets bénéfiques pour leurs cheveux en utilisant régulièrement un shampooing et un après shampooing contenant l’extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique. Parmi ces opinions favorables, l’utilisation de cette routine d’hygiène et de soin a été perçue comme apportant une protection contre le stress chimique, la casse, les fourches. Les cheveux ont semblé moins endommagés et d’apparence plus saine. Les cheveux ont semblé montrer plus de vitalité, de volume, de brillance et moins de sécheresse. Le cuir chevelu semblait plus confortable. En revanche, le shampooing et l’après-shampoing placebo, ne contenant pas l’extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique, n’ont pas montré de majorité significative d’opinions favorables concernant la perception d’un bénéfice sur la protection des cheveux contre stress chimique, contre les fourches, l’augmentation de la vitalité, du volume et la réduction de la sécheresse des cheveux. Pourcentage d’opinions favorables sur les bénéfices consommateurs de l’utilisation de produits rincés d’hygiène et de soins capillaires. Shampooing et après shampooing placebo Shampooing et après shampooing contenant l’extrait hydrolysé sou forme d’ingrédient cosmétique selon Exemple 1c à 0,2% (p/p) L’utilisation du shampooing et de l’après shampooing protège mes cheveux contre … …le stress chimique 52% 71%* …la casse 69%* 74%* … les fourches 62% 77%* Mes cheveux semblent… …moins endommagés 69%* 77%* …d’apparence plus saine 72%* 81%* L’utilisation du shampooing et de l’après shampooing améliorent …. De mes cheveux …la vitalité 62% 74%* …le volume 59% 71%* …la sécheresse 62% 71%* …la brillance 72%* 81%* * Majorité significative d’opinion favorable (p Conclusion : Des bénéfices additionnels de la présence de l’extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique sur les cheveux ont été perçus par des volontaires ayant utilisés un shampooing et un après shampooing de manière régulière pendant 4 semaines. Exemple 16 : Ingrédients cosmétiques Ingrédient cosmétique 1 (% en poids) : Extrait hydrolysé selon l’exemple 1a) 20% Maltodextrine 80% Ingrédient cosmétique 2 (% en poids) : Extrait hydrolysé selon l’exemple 1b) 30% Maltodextrine 70% Exemple 17 : Compositions cosmétiques comprenant l’ingrédient cosmétique Formule du shampoing anti-casse Dénominations % Eau 74,15 Sodium Benzoate 0,50 Xanthan Gum 0,45 Decyl Glucoside 12,00 Dicaprylyl Ether, Decyl Glucoside, Glyceryl Oleate 1,50 Sodium Cocoyl Glutamate 8,00 Guar Hydroxypropyltrimonium Chloride 0,20 Citric acid, water 0,10 Extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique selon exemple 1c 0,20 Acide citrique et eau 2,90 Formule de l’après shampooing anti-casse Dénominations % Eau 86,00 Cetearyl Alcohol, Lecithin, Sodium Cetearyl Sulfate, Olus Oil 9,00 Coco-Caprylate 2,00 Olus Oil 2,00 Sodium Benzoate 0,50 Extrait hydrolysé sous forme d’ingrédient cosmétique selon exemple 1c 0,20 Acide citrique et eau 0,30 Utilisation cosmétique non thérapeutique d’un extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum pour maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques des annexes cutanées, avantageusement des fibres kératiniques, préférentiellement des cheveux. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que l’extrait hydrolysé est obtenu dans de l’eau comme unique solvant. Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait hydrolysée est obtenu par hydrolyse enzymatique. Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que l’extrait hydrolysé est obtenu par hydrolyse enzymatique à un pH compris entre 3 et 10, avantageusement compris entre 7 et 9. Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait hydrolysé a une teneur en masse sèche de protéines totales comprise entre 50% et 95% en poids, préférentiellement entre 60% et 90% en poids, plus préférentiellement entre 60 et 70% en poids, par rapport au poids total en masse sèche de l’extrait hydrolysé. Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait hydrolysé a une teneur en masse sèche en peptides de poids moléculaire moyen en poids de 100Da à 20kDa comprise entre 50% et 90%, avantageusement entre 65% et 90%, plus avantageusement entre 75% et 90%, en poids par rapport au poids total en masse sèche des peptides de l’extrait hydrolysé. Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait hydrolysé a une teneur en masse sèche en peptides de poids moléculaire moyen en poids compris entre 100Da et 700 Da comprise entre 60% et 90%, avantageusement entre 70% et 80%, plus avantageusement entre 75% et 80%, en poids par rapport au poids total en masse sèche des peptides de poids moléculaires moyen en poids compris entre 100Da et 7000Da de l’extrait hydrolysé. Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait hydrolysé maintien et/ou augmente la résistance et/ou la force et/ou le volume et/ou la couleur et/ou la brillance et/ou la plasticité c’est-à-dire l’aspect non-cassant, et/ou la souplesse des annexes cutanées, préférentiellement des fibres kératiniques, avantageusement des cheveux. Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait hydrolysé est destiné à une application par voie topique sur tout ou partie de la peau du corps et/ou du visage comportant des annexes cutanées, en particulier le cuir chevelu, et/ou sur tout ou partie des annexes cutanées, avantageusement sur les ongles, les cheveux, les poils, notamment les poils de barbe, les cils et/ou les sourcils, plus avantageusement sur tout ou partie des fibres kératiniques, préférentiellement sur tout ou partie des cheveux. Utilisation selon la revendication 9 dans laquelle l’application est faite sur des cheveux abîmés, colorés ou méchés, ternes, secs, cassants, fragiles, friables, fins, fourchus et/ou stressés. Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait hydrolysé est atomisé en présence d’une concentration en poids de maltodextrine comprise entre 1% et 99%, avantageusement entre 5% et 90%, préférentiellement entre 40% et 80%, encore préférentiellement entre 70% et 80%, par rapport au poids total de la poudre obtenue. Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes caractérisée en ce que l’extrait hydrolysé est présent dans une composition cosmétique, à une teneur comprise entre 1x10 -4 % et 10% en poids, préférentiellement de 1x10 -3 % à 5% en poids, plus préférentiellement de 1x10 -3 % à 3% en poids, encore plus préférentiellement de 1x10 -3 % à 1% en poids, avantageusement de 0,01% à 1% en poids, par rapport au poids total de la composition cosmétique. Utilisation selon la revendication 12, caractérisée en ce que la composition cosmétique comprend au moins un excipient cosmétiquement acceptable et en ce que cette composition est choisie parmi un sérum, une lotion, une crème, un shampoing, un après-shampoing, une huile, un lait, une pommade, une pâte, une mousse, une émulsion, un hydrogel, un gel douche, un masque, une laque, un spray, une cire, un mascara, un crayon de maquillage, un vernis, avantageusement ’un shampoing, un après-shampoing ou une lotion. Utilisation selon la revendication 1, pour réparer les annexes cutanées, préférentiellement les cheveux. Procédé de soin cosmétique non thérapeutique comprenant l’application par voie topique d’un extrait hydrolysé de tourteau de graines de Silybum marianum ou d’une composition cosmétique le comprenant pour maintenir et/ou augmenter les propriétés biomécaniques des annexes cutanées, avantageusement des fibres kératiniques, préférentiellement des cheveux. Procédé de soin cosmétique selon la revendication 14, pour réparer des annexes cutanées, avantageusement des fibres kératiniques, préférentiellement des cheveux. Procédé de soin cosmétique selon la revendication 15 ou 16, caractérisé en ce que l’extrait hydrolysé ou la composition cosmétique le comprenant est appliqué par voie topique sur tout ou partie de la peau du corps et/ou du visage comportant des annexes cutanées, en particulier le cuir chevelu, et/ou sur tout ou partie des annexes cutanées, préférentiellement sur tout ou partie des fibres kératiniques, plus préférentiellement sur tout ou partie des cheveux. Procédé de soin cosmétique selon l’une quelconque des revendications 15 à 17, caractérisé en ce que l’extrait est tel que défini dans l’une quelconque des revendications 2 à 8 et 11 à 14.