Brevet FR3144910A1 — publié le 20240719

Procédé d’analyse du pourcentage de pénétration sur au moins une couche de peau ciblée et de l’effet physiologique d’une composition cosmétique, ledit procédé comprenant : une première étape de détermination de la couche de peau ciblée et d’un intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans la couche de peau ciblée, une deuxième étape d’analyse par spectroscopie RAMAN ex vivo de la composition cosmétique de façon à obtenir un pourcentage de pénétration dans la couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs, une troisième étape de sélection ou de reformulation de la composition cosmétique en fonction de son pourcentage de pénétration, et une quatrième étape d’analyse par spectroscopie Raman in vivo de peaux humaines traitées avec la composition cosmétique sélectionnée de façon à déterminer l’effet physiologique sur la peau de la composition cosmétique sélectionnée. Figure 1 Procédé d’analyse d’une composition cosmétique DOMAINE DE L’INVENTION Le secteur technique de la présente invention concerne un procédé d’analyse d’une composition cosmétique et plus particulièrement un procédé d’analyse utilisant la spectroscopie RAMAN. ETAT DE LA TECHNIQUE La spectroscopie RAMAN est une technique utilisant un laser permettant d’analyser la structure vibratoire des molécules et ainsi d’établir un profil détaillé d’une composition, d’un tissu ou d’un matériau. On parle alors de « signature RAMAN » ou « profil RAMAN ». C’est une technique non invasive qui est de plus en plus utilisée pour étudier in vitro , ex vivo et in vivo des tissus biologiques et des échantillons de peau. Il est possible d’utiliser ces méthodes de façon non invasive pour par exemple analyser la peau de sujets vivants (étude in vivo ). Le document WO2020/047660 décrit par exemple un système et un procédé de détection in vivo de cancers. Ainsi, la spectroscopie RAMAN est particulièrement utile dans les études physiologiques cutanées pour collecter des informations sur la composition moléculaire, la structure de la peau et également sa fonction. Par exemple on peut collecter des informations sur le niveau d’hydratation de la peau, l’épaisseur du stratum corneum et les modifications éventuelles de son effet barrière. A partir d’explants de peaux, il est donc possible d’analyser le taux de pénétration cutanée d’une composition cosmétique sur la peau à l’aide de la spectroscopie RAMAN ex vivo . Cependant, cette technique n’est pas totalement représentative du comportement in vivo de la peau car elle utilise des explants de peau souvent congelés, ce qui peut altérer les propriétés intrinsèques de la peau. La spectrométrie RAMAN in vivo permet quant à elle d’analyser l’effet physiologique in vivo d’une composition cosmétique sur la peau. Cette technique permet d’aboutir à des résultats plus représentatifs du comportement réel d’une peau. Le document JP2008188302 décrit par exemple une méthode d’analyse par spectroscopie RAMAN in vivo de la distribution cutanée de l’eau avant et après l’application d’une composition cosmétique. Il est également possible de suivre la pénétration transcutanée de principes actifs. Le document KR20210150664 décrit par exemple une méthode d’analyse par spectroscopie RAMAN in vivo de la pénétration transcutanée de principes actifs. La spectroscopie RAMAN in vivo est donc un bon moyen d’étudier les effets de compositions cosmétiques, car elle est non invasive et est directement réalisée sur la peau d’un volontaire. Cependant, cette technique est coûteuse et difficile à mettre en œuvre car elle nécessite des moyens humains ainsi que des équipements spécifiques. Il peut donc s’avérer très couteux et difficile d’effectuer une telle analyse par spectroscopie RAMAN in vivo notamment lorsque la composition cosmétique est en cours de développement et que l’on ne sait pas précisément dans quelle couche de la peau la composition cosmétique pénètre. Aujourd’hui aucune technique d’analyse d’une composition cosmétique propose de combiner une analyse par spectroscopie RAMAN ex vivo suivie d’une analyse par spectroscopie RAMAN in vivo . Il existe donc un besoin de minimiser les coûts et de faciliter la mise en œuvre d’analyses de l’effet physiologique d’une composition cosmétique en cours de développement par spectroscopie RAMAN in vivo . L’invention concerne donc un procédé d’analyse du pourcentage de pénétration sur au moins une couche de peau ciblée et de l’effet physiologique d’une composition cosmétique, ledit procédé comprenant : une première étape de détermination, d’une part, de l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs, et, d’autre part, d’un intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs, une deuxième étape d’analyse par spectroscopie RAMAN ex vivo de la composition cosmétique de façon à obtenir un pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs, une troisième étape consistant à : si le pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée est compris dans l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration, la composition cosmétique est sélectionnée et on procède à une quatrième étape, si le pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée n’est pas compris dans l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration, on procède à une étape de reformulation de la composition cosmétique et on réitère les deuxième et troisième étapes, une quatrième étape d’analyse par spectroscopie Raman in vivo de peaux humaines traitées avec la composition cosmétique sélectionnée de façon à déterminer l’effet physiologique sur la peau de la composition cosmétique sélectionnée. Selon un mode de réalisation de l’invention, le procédé comprend une étape préliminaire de détermination du spectre RAMAN de référence de la composition cosmétique, de son ou ses principes actifs et d’un explant de peau témoin. Selon un autre mode de réalisation de l’invention, la deuxième étape est réalisée de la façon suivante : la composition cosmétique est appliquée sur un explant de peau humaine, l’explant est ensuite incubé pendant 8 heures à 32°C puis lavé puis congelé, des coupes fines longitudinales sont ensuite obtenues à partir de l’explant congelé, des spectres RAMAN sont ensuite obtenus pour chaque coupe fine longitudinale de façon à obtenir une image RAMAN de chaque coupe fine longitudinale, chaque image RAMAN est ensuite traitée de façon à obtenir pour la composition cosmétique et/ou son ou ses principes actifs un coefficient de pénétration transcutanée pour chaque valeur de profondeur de peau entre 0 µm et 200 µm, on obtient un graphique sous forme d’une courbe illustrant le coefficient de pénétration transcutanée en fonction de la profondeur de peau, et on obtient le pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs en effectuant le rapport entre l’aire sous la courbe correspondant à l’au moins une couche de peau ciblée et l’aire sous la courbe totale. Selon encore un autre mode de réalisation de l’invention, les spectres RAMAN sont obtenus au moyen d’une source laser de longueur d’onde de 660 nm. Selon encore un autre mode de réalisation de l’invention, l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs est déterminée en fonction d'un type de composition cosmétique. Selon encore un autre mode de réalisation de l’invention, la quatrième étape du procédé est réalisée de la façon suivante : on effectue au moins 10 mesures par spectroscopie RAMAN in vivo entre Z = 0 µm de profondeur et Z = 40 µm de profondeur de la peau d’un volontaire de façon à obtenir un profil RAMAN Z témoin de la peau, on évalue à partir du profil RAMAN Z témoin l’épaisseur témoin du stratum corneum et/ou la teneur en eau témoin de la peau et/ou la conformation et l’organisation témoins des lipides de la peau et/ou la fluorescence de base témoin de la peau, on applique pendant 8 jours la composition cosmétique sélectionnée sur la peau du volontaire de façon à obtenir une peau traitée, on effectue au moins 10 mesures par spectroscopie RAMAN in vivo entre Z = 0 µm de profondeur et Z = 40 µm de profondeur de la peau du volontaire de façon à obtenir un profil RAMAN Z traité de la peau traitée, on évalue à partir du profil RAMAN Z traité l’épaisseur traitée du stratum corneum et/ou la teneur en eau traitée de la peau et/ou la conformation et l’organisation traitées des lipides de la peau et/ou la fluorescence de base traitée de la peau, on compare respectivement l’épaisseur témoin du stratum corneum, la teneur en eau témoin de la peau, la conformation et l’organisation témoins des lipides de la peau et la fluorescence de base témoin de la peau avec l’épaisseur traitée du stratum corneum, la teneur en eau traitée de la peau, la conformation et l’organisation traitées des lipides de la peau et la fluorescence de base traitée de la peau de façon à déterminer l’effet physiologique de la composition cosmétique sélectionnée sur la peau. Avantageusement, l’épaisseur du stratum corneum est déterminée de la façon suivante : on détermine la position exacte de la surface du stratum corneum en analysant la bande vibrationnelle -CH du profil RAMAN Z, la surface du stratum corneum correspondant à la valeur de Z du profil RAMAN Z pour laquelle l’intensité de la bande vibrationnelle -CH est égale à la moitié de l’intensité maximale de la bande vibrationnelle -CH, on détermine ensuite la limite basse du stratum corneum en analysant les bandes vibrationnelles -CH et -OH du profil RAMAN Z, ladite limite basse correspondant à la valeur de Z pour laquelle le rapport de la bande vibrationnelle -OH sur la bande vibrationnelles -CH du profil RAMAN Z est à son maximum, et on calcule l’épaisseur du stratum corneum en calculant la différence entre la valeur de Z correspondant à la surface du stratum corneum et la valeur de Z correspondant à limite basse du stratum corneum. Avantageusement encore, la teneur en eau de la peau est déterminée de la façon suivante : on calcule à partir d’un profil RAMAN Z le spectre RAMAN moyen de l’épiderme correspondant à la moyenne des spectres RAMAN situés entre Z = 0 µm et Z = 40 µm, et on calcule ensuite à partir du spectre RAMAN moyen l’intensité intégrée de la bande vibrationnelle -OH située dans la gamme de fréquence comprise entre 3100 cm -1 et 3620 cm -1 et représentant la teneur en eau de la peau. Avantageusement encore, l’organisation et la conformation des lipides de la peau sont déterminées de la façon suivante : on calcule à partir du spectre RAMAN Z le spectre RAMAN moyen de l’épiderme correspondant à la moyenne des spectres situés entre Z = 0 µm et Z = 40 µm, on analyse la conformation des lipides en calculant à partir du spectre RAMAN moyen de l’épiderme le rapport entre la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire C-C trans et la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire C-C gauche, et on analyse l’organisation des lipides en calculant à partir du spectre RAMAN moyen de l’épiderme le rapport entre la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire symétrique -CH2 et la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire asymétrique -CH2. Avantageusement encore, la fluorescence de base de la peau est déterminée de la façon suivante : on calcule à partir du spectre RAMAN Z le spectre RAMAN moyen de l’épiderme correspondant à la moyenne des spectres situés entre Z = 0 µm et Z = 40 µm, et on calcule ensuite à partir du spectre RAMAN moyen obtenu l’intensité intégrée de la région spectrale située dans la gamme de fréquence comprise entre 400 cm -1 et 600 cm -1 et représentant la fluorescence de base de la peau. Un tout premier avantage de la présente invention est qu’elle permet le développement d’une composition cosmétique conforme à ses revendications que cela soit en rapport avec sa présence souhaitée au niveau de l’au moins une couche de peau ciblée ou en rapport avec ses effets sur les cellules de l’au moins une couche de peau ciblée. Un autre avantage de la présente invention est qu’elle permet de déterminer le niveau de pénétration transcutanée d’une composition cosmétique et de son ou ses principes actifs. Un autre avantage encore de la présente invention est qu’elle permet de déterminer l’effet d’une composition cosmétique sur le niveau d’hydratation de la peau. Un autre avantage encore de la présente invention est qu’elle permet de déterminer l’effet d’une composition cosmétique sur l’épaisseur du stratum corneum. Un autre avantage encore de la présente invention est qu’elle permet de déterminer l’effet d’une composition cosmétique sur la fonction barrière de la peau. Un autre avantage encore de la présente invention est qu’elle permet de déterminer l’effet d’une composition cosmétique sur le contenu en mélanine de la peau. D’autres caractéristiques, avantages et détails de l’invention seront mieux compris à la lecture du complément de description qui va suivre en rapport avec les dessins dans lesquels : représente les différentes étapes du procédé selon un mode de réalisation de l’invention, représente un graphique illustrant la pénétration transcutanée de la composition cosmétique HAB5-Hydra Serum en fonction de la profondeur de la peau. représente un graphique illustrant la pénétration transcutanée de la composition cosmétique Re Time Serum en fonction de la profondeur de la peau. représente un graphique illustrant la pénétration transcutanée de la composition cosmétique B3 Recovery Cream en fonction de la profondeur de la peau. représente un graphique illustrant l’intensité des bandes vibrationnelles -CH et -OH en fonction de la profondeur de peau d’un profil RAMAN Z, et représente un spectre RAMAN moyen du stratum corneum obtenu à partir d’un profil RAMAN Z. DESCRIPTION DETAILLEE DE MODES DE REALISATION DE L’INVENTION Comme décrit précédemment, l’invention concerne un procédé d’analyse du pourcentage de pénétration sur au moins une couche de peau ciblée et de l’effet physiologique d’une composition cosmétique. La illustre les différentes étapes du procédé selon un mode de réalisation de l’invention. Le procédé comprend une première étape pendant laquelle il est déterminée au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs. Dans le cadre de la présente invention on entend par au moins une couche de peau ciblée la ou les couches de la peau dans la ou lesquelles la pénétration de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs est souhaitée. La peau selon l’invention comprend deux trois couches que sont le stratum corneum (SC), l’épiderme (E) et le derme D. L’épaisseur de l’épiderme peut varier en fonction des différentes zones de peau. Par exemple, l’épiderme de la peau au niveau de la paume de la main est plus épais que l’épiderme au niveau des paupières. Ainsi selon l’invention le stratum corneum est situé entre 0µm et 15µm de profondeur, l’épiderme est situé entre 15µm et 75µm de profondeur et le derme est situé au-delà de 75µm de profondeur de peau. Dans le cadre de la présente invention on entend par profondeur de la peau la distance entre un point situé dans la peau et la surface de la peau. Par exemple un point situé à 15µm de profondeur est situé à une distance de 15µm de la surface de la peau. Selon l’invention l’au moins une couche de peau ciblée est représentée par le stratum corneum, l’épiderme et/ou le derme. L’au moins une couche de peau ciblée est déterminée en fonction du type de composition cosmétique analysée selon le procédé de l’invention. Dans le cadre de la présente invention, on entend par type de composition cosmétique le destination et/ou l’effet recherché de la composition cosmétique. Des exemples non limitatifs de types de composition sont hydratante, antiâge, réparatrice de la barrière cutanée, réparatrice, apaisante ou encore décolorante. La première étape permet également la détermination d’un intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs. L’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration est notamment déterminé en fonction du type de composition cosmétique. Par exemple pour une composition cosmétique du type réparatrice de la barrière cutanée, l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans le stratum corneum est égal à 40% à 50%, l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans l’épiderme est égal à 40% à 50% et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans le derme est égal à 0% à 10%. Pour une composition cosmétique du type hydratante, l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans le stratum corneum est égal à 40% à 60%, l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans l’épiderme est égal à 20% à 60% et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans le derme est égal à 5% à 20%. Pour une composition cosmétique du type antiâge, l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans le stratum corneum est égal à 20% à 40%, l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans l’épiderme est égal à 40% à 60% et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans le derme est égal à 5% à 20%. Pour une composition cosmétique du type réparatrice et apaisante, l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans le stratum corneum est égal à 20% à 40%, l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans l’épiderme est égal à 40% à 60% et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans le derme est égal à 0% à 20%. Pour une composition cosmétique du type décolorante, l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans le stratum corneum est égal à 10% à 30%, l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans l’épiderme est égal à 30% à 60% et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans le derme est égal à 0% à 20%. Le procédé comprend également une deuxième étape d’analyse ex vivo par spectroscopie RAMAN ex vivo d’une composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs de façon à évaluer la pénétration transcutanée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs. Cette étape permet de visualiser la distribution cutanée de la composition cosmétique et/ou de de son ou ses principes actifs dans des explants de peau humaine après leur application et de déterminer un pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs. Optionnellement, une étape d’analyse par spectroscopie RAMAN in vitro est réalisée de façon à déterminer le spectre RAMAN de référence de la composition cosmétique, de de son ou ses principes actifs et d’une peau non traitée. Ainsi, il est possible de visualiser et de quantifier, par exemple sous la forme d’un pourcentage de pénétration, la distribution de la composition cosmétique ainsi que de son ou ses principes actifs dans les différentes couches de la peau. La troisième étape du procédé permet de sélectionner ou non la composition cosmétique analysée à la deuxième étape. Si la composition cosmétique et/ou son ou ses principes actifs présentent un pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée compris dans l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration, la composition cosmétique est sélectionnée pour la quatrième étape du procédé. A l’inverse si la composition cosmétique et/ou son ou ses principes actifs ne présentent pas un pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée compris dans l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration, la composition cosmétique n’est pas sélectionnée. On procède alors à une étape de reformulation de la composition cosmétique et on réitère les deuxième et troisième étapes du procédé. L’objectif de cette sélection est de permettre le développement d’une composition cosmétique présentant une action ciblée sur une ou plusieurs couches de peau précises. Cela permet également de réduire les couts d’analyse en n’effectuant l’analyse par spectroscopie RAMAN in vivo uniquement lorsque la composition cosmétique remplit le critère de pourcentage de pénétration. La reformulation de la composition cosmétique permet d’adapter la composition cosmétique en fonction de sa au moins une couche de peau ciblée. La reformulation a pour objectif de modifier la composition cosmétique de sorte que son pourcentage de pénétration soit compris dans l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration. Par exemple la reformulation de la composition cosmétique est effectuée en changeant la concentration du ou des principes actifs, des éventuels tensioactifs, émulsifiants, parfums, épaississant, conservateurs, agents émollients, colorants, pigments et/ou tout autre additif généralement admissible dans une composition cosmétique. La reformulation peut également être effectuée en ajoutant des nanomatériaux ou encore des micelles. La reformulation peut également être effectuée en changeant en modifiant le procédé d’obtention de la composition cosmétique. La quatrième étape d’analyse par spectroscopie RAMAN in vivo permet de déterminer l’effet physiologique in vivo de la composition cosmétique sélectionnée sur la peau. Cette quatrième étape permet en outre de déterminer l’effet physiologique de la composition cosmétique sur la barrière cutanée et/ou sur l’épaisseur du stratum corneum et/ou sur l’hydratation de la peau et/ou le niveau d’éclaircissement de la peau. Ainsi, le procédé selon l’invention permet de minimiser les coûts d’analyse d’une composition cosmétique en n’effectuant l’analyse par spectroscopie RAMAN in vivo uniquement lorsque la composition cosmétique remplit le critère de pourcentage de pénétration. En effet, une composition cosmétique, son ou ses principes actifs pénétrant en quantité suffisante dans une couche de peau déterminée présentent une plus grande probabilité d’avoir un effet physiologique sur l’ensemble de la peau. La description qui suit concerne un exemple de réalisation du procédé d’analyse selon l’invention. Les inventeurs ont analysé différentes compositions cosmétiques du commerce afin de déterminer leurs effets physiologiques sur les différentes couches de la peau. Parmi les compositions cosmétiques analysées on retrouve le HAB5-Hydra Serum, le Re Time Serum et la B3 Recovery Cream. Le HAB5-Hydra Serum est un sérum de type hydratant utilisé pour lutter contre les rides de dessèchement et les ridules de déshydratation. Il comprend des principes actifs tels que la provitamine B5, l’acide hyaluronique, l’érythritol et l’homarine. Pour cette composition l’au moins une couche de peau ciblée est préférentiellement le stratum corneum et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration est égal à 40% à 60%. De manière moins préférée l’au moins une couche de peau ciblée est l’épiderme et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration est égal à 20% à 60%. De manière encore moins préférée l’au moins une couche de peau ciblée est le derme et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration est égal à 5% à 20%. Le Re Time Serum est un sérum de type antiâge ou anti-rides utilisé pour réduire visiblement tous les types de rides. Il comprend des principes actifs tels que la vitamine A et le peptide Arg-Lys. Pour cette composition l’au moins une couche de peau ciblée est préférentiellement l’épiderme et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration est égal à 40% à 60%. De manière moins préférée l’au moins une couche de peau ciblée est le stratum corneum et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration est égal à 20% à 40%. De manière encore moins préférée l’au moins une couche de peau ciblée est le derme et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration est égal à 5% à 20%. La B3 Recovery Cream est une crème de type réparatrice de la barrière cutanée utilisée pour apaiser toutes les rougeurs et irritations de la peau notamment après des soins tels que les peelings ou les injections esthétiques. Cette crème comprend des principes actifs tels que la vitamine B3, l’urée, l’extrait de Mirabilis Jalapa, l’acide hyaluronique et le rhamnose. Pour cette composition l’au moins une couche de peau ciblée est préférentiellement le stratum corneum ou l’épiderme et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration est égal à 40% à 50%. De manière moins préférée l’au moins une couche de peau ciblée est le derme et l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration est égal à 0% à 40%. Spectroscopie RAMAN ex vivo et sélection de la composition cosmétique. La deuxième étape du procédé selon l’invention consiste en une analyse par spectroscopie RAMAN ex vivo de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs de façon à déterminer le pourcentage de pénétration de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs dans les couches de la peau. Les inventeurs se sont procuré des explants de peau humaine congelés qu’ils ont répartis en différents lots : un lot T destiné à être le lot témoin et ne subissant aucune application de composition cosmétique, un lot HAB5 SER destiné à être traité avec le HAB5-Hydra Serum, un lot RE SER destiné à être traité avec le Re Time Serum, et un lot B3 CRE destiné à être traité avec la B3 Recovery Cream. Les compositions cosmétiques HAB5-Hydra Serum, Re Time Serum et B3 Recovery Cream sont respectivement appliquées sur les explants des lots HAB5 SER, RE SER et B3 CRE à raison de 5 mg.cm -2 . Chaque explant de chaque lot est ensuite mis à incuber à 32 °C pendant 8 heures puis la surface de chaque explant est nettoyée de façon à éliminer l’excès de composition cosmétique. Après l’incubation et le nettoyage chaque explant est congelé à -80 °C et coupé longitudinalement à l’aide d’un Cryotome et trois sections de 20 µm d’épaisseur sont sélectionnées. Chaque section est ensuite déposée sur un support spécifique de CaF2 en vue de l’acquisition d’images RAMAN. Pour l’acquisition des images RAMAN les inventeurs ont appliqué les paramètres suivants : longueur d’onde du laser : 660 nm, objectif : 100 X, longue focale et ouverture numérique de 0,75, temps d’acquisition : 30 secondes, accumulation : 1X gamme de fréquences : 400 cm -1 à 3100 cm -1 , réseau optique :950T, trou confocal : 500 µm, largeur de fente : 150 µm (résolution spectrale de 6,5 cm -1 ), pas de de 5 µm sur l’axe X, et pas de 5 µm sur l’axe Y. Ces paramètres d’acquisitions sont choisis car ils permettent d’éviter les phénomènes d’auto-fluorescence de la peau d’optimiser le rapport signal/bruit des spectres RAMAN. Au total 15 images RAMAN sont enregistrées à raison d’une image pour chacune des 3 sections des 5 lots. Chaque image RAMAN est réalisée sur une profondeur de peau X de 200 µm et une largeur Y de 10 µm à raison d’un spectre RAMAN tous les 5 µm de profondeur X et tous les 5 µm de largeur Y. Ainsi, chaque image RAMAN comprend 123 spectres RAMAN. Chaque image RAMAN est ensuite prétraitée de façon éliminer les spectres aberrants. Les inventeurs ont également corrigé la ligne de base, lissé et normalisé les spectres RAMAN non éliminés. Les inventeurs ont ensuite effectué un traitement des images RAMAN prétraitées de façon à obtenir, pour chaque composition cosmétique et/ou principe actif de composition cosmétique, un coefficient de pénétration transcutanée en fonction de la profondeur de peau. Les inventeurs ont ainsi déterminé les spectres RAMAN de référence des compositions cosmétiques, du ou des principes actifs des compositions cosmétiques ainsi que celui de la peau de l’explant de peau témoin du lot T. Ainsi, plusieurs mesures par spectroscopie RAMAN ont été effectuées et un spectre RAMAN de référence moyen a été calculé pour chaque composition cosmétique, principe actif et pour la peau de l’explant de peau témoin du lot T. Afin de déterminer les marqueurs spectroscopiques spécifiques à une composition cosmétique et/ou à son ou ses principes actifs, les spectres RAMAN dé référence moyens ont ensuite été comparés pour évaluer la différence spectrale entre la composition cosmétique, le ou les principes actifs de la composition cosmétique et la peau de l’explant de peau témoin du lot T. Les images RAMAN prétraitées ont ensuite été reconstruites en utilisant une procédure d'ajustement qui prend en compte les spectres RAMAN de référence moyens des compositions cosmétiques, de leurs principes actifs et de la peau de l’explant de peu témoin du lot T. Les images RAMAN reconstruites permettent alors de voir le niveau de pénétration et la distribution spatiale de chaque composition cosmétique et/ou principe actif dans le stratum corneum, l'épiderme et le derme jusqu'à 200μm de profondeur et de déterminer un coefficient de pénétration transcutanée pour chaque valeur de profondeur de peau. En effet en superposant l’image RAMAN reconstruite à une image visible d’une section de peau de l’explant il est possible de visualiser histologiquement le niveau de pénétration et la distribution spatiale de chaque composition cosmétique ou principe actif. A partir des coefficients de pénétration transcutanée chacun associé à une valeur de profondeur de peau il est possible d’obtenir un graphique sous forme d’une courbe illustrant le coefficient de pénétration transcutanée en fonction de la profondeur de peau. Un tel graphique est représenté sur les figures 2 à 5. La courbe ainsi obtenue permet de déterminer le pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs en effectuant le rapport entre l’aire sous la courbe correspondant à l’au moins une couche de peau ciblée et l’aire sous la courbe totale. Le pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche ciblée représente alors la proportion de composition présente dans l’au moins une couche de peau ciblée par rapport à la quantité totale de la composition ayant pénétrée dans la peau. Ainsi un pourcentage de pénétration dans au moins une couche de peau ciblée de 50% signifie que 50% de la composition cosmétique ayant pénétrée dans la peau se retrouve au niveau de l’au moins une couche de peau ciblée. Il est ainsi possible de déterminer l’aire sous la courbe totale entre la courbe et l’axe des abscisses pour les valeurs de profondeur de peau comprises entre 0µm et 200µm. L’aire sous la courbe correspondant au stratum corneum est représentée par l’aire entre la courbe et l’axe des abscisses pour les valeurs de profondeur de peau comprises entre 0µm et 15µm. L’aire sous la courbe correspondant à l’épiderme est représentée par l’aire entre la courbe et l’axe des abscisses pour les valeurs de profondeur de peau comprises entre 15µm et 75µm. L’aire sous la courbe correspondant au derme est représentée par l’aire entre la courbe et l’axe des abscisses pour les valeurs de profondeur de peau supérieures à 75µm. L’aire sous la courbe est déterminée selon des techniques bien connues de l’homme du métier par exemple en utilisant la règle trapézoïdale. Ainsi le pourcentage de pénétration dans le stratum corneum est déterminé en effectuant le rapport entre l’aire sous la courbe pour les valeurs de profondeur de peau comprise entre 0µm et 15µm et l’aire sous la courbe totale. Le pourcentage de pénétration dans l’épiderme est déterminé en effectuant le rapport entre l’aire sous la courbe pour les valeurs de profondeur de peau comprise entre 15µm et 75µm et l’aire sous la courbe totale. Le pourcentage de pénétration dans le derme est déterminé en effectuant le rapport entre l’aire sous la courbe pour les valeurs de profondeur de peau supérieures à 75µm et l’aire sous la courbe totale. La représente la courbe de pénétration transcutanée de la composition cosmétique HAB5-Hydra Serum en fonction de la profondeur de la peau. On constate que le HAB5-Hydra Serum présente un pourcentage de pénétration dans le stratum corneum de 44%, un pourcentage de pénétration dans l’épiderme de 39% et un pourcentage de pénétration dans le derme de 17%. Ainsi cette composition présente un pourcentage de pénétration dans l’au moins couche de peau ciblée, le stratum corneum, compris dans l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration. Le HAB5-Hydra Serum est donc sélectionné pour la quatrième étape. La représente la courbe de pénétration transcutanée de la composition cosmétique Re Time Serum en fonction de la profondeur de la peau. On constate que le Re Time Serum présente un pourcentage de pénétration dans le stratum corneum de 38%, un pourcentage de pénétration dans l’épiderme de 52% et un pourcentage de pénétration dans le derme de 10%. Ainsi cette composition présente un pourcentage de pénétration dans l’au moins couche de peau ciblée, l’épiderme, compris dans l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration. Le Re Time Serum est donc sélectionné pour la quatrième étape. La représente la courbe de pénétration transcutanée de la composition cosmétique B3 Recovery Cream en fonction de la profondeur de la peau. On constate que la B3 Recovery Cream présente un pourcentage de pénétration dans le stratum corneum de 52%, un pourcentage de pénétration dans l’épiderme de 46% et un pourcentage de pénétration dans le derme de 2%. Ainsi cette composition présente un pourcentage de pénétration dans l’au moins couche de peau ciblée, le stratum corneum ou l’épiderme, compris dans l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration. La B3 Recovery Cream est donc sélectionné pour la quatrième étape. Si une composition cosmétique ne présente pas un pourcentage de pénétration compris dans l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration, celle-ci n’est pas sélectionnée pour la quatrième étape et subit une étape de reformulation. Par exemple si le HAB5-Hydra Serum avait présenté un pourcentage de pénétration dans le stratum corneum inférieur à 10% ou supérieur à 60%, il n’aurait pas été sélectionné pour la quatrième étape et aurait été reformulé. Le même protocole est applicable en analysant la pénétration du ou des principes actifs de la composition cosmétique. L’au moins une couche de peau ciblée ainsi que l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration sont alors déterminés en fonction du type de composition mais également du type de principe actif. La sélection de la composition se fait alors en en fonction du pourcentage de pénétration du ou des principes actifs de la composition cosmétique comparé à l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration. Spectroscopie RAMAN in vivo La quatrième étape du procédé selon l’invention consiste en une analyse par spectroscopie RAMAN in vivo de peaux humaines traitées avec les compositions cosmétiques sélectionnées à l’issu de la troisième étape. Cette quatrième étape permet de déterminer l’effet physiologique sur la peau des compositions cosmétiques sélectionnées. Pour ce faire, les inventeurs ont évalué l’épaisseur du stratum corneum de la peau, la teneur en eau de la peau, la conformation et l’organisation des lipides de la peau ainsi que la fluorescence de base de la peau provenant de peaux de volontaires traitées avec les compositions cosmétiques sélectionnées à la deuxième étape du procédé. La description qui suit concerne un exemple de mise en œuvre de la troisième étape du procédé selon l’invention en prenant comme exemple l’analyse d’une seule composition cosmétique. Il va de soi qu’il est possible d’analyser plusieurs compositions cosmétiques sélectionnées lors de la troisième étape du procédé. Dans un premier temps, à T=0, les inventeurs ont effectué au moins 10 mesures par spectroscopie RAMAN in vivo entre Z = 0 µm de profondeur et Z = 40 µm de profondeur de la peau du visage d’un volontaire. Cela permet l’obtention d’au moins 10 spectres RAMAN entre la surface de la peau et 40 µm de profondeur dans la peau. Les au moins 10 spectres RAMAN obtenus constituent alors un profil RAMAN Z témoin. Il est possible de répéter cette opération afin d’obtenir plusieurs profils RAMAN Z témoins. Cela permet d’évaluer, à partir du ou des profils RAMAN Z témoins obtenus, l’épaisseur témoin du stratum corneum et/ou la teneur en eau témoin de la peau et/ou la conformation et l’organisation témoins des lipides de la peau et/ou la fluorescence de base témoin de la peau. Dans un deuxième temps, les inventeurs ont appliqué pendant 8 jours une composition cosmétique sélectionnée à l’issu de la deuxième étape sur la peau du visage du volontaire de façon à obtenir une peau traitée. Dans un troisième temps, à T = 8 jours, les inventeurs ont effectué au moins 10 mesures par spectroscopie RAMAN in vivo entre Z = 0 µm de profondeur et Z = 40 µm de profondeur de la peau traitée du visage du volontaire. Cela permet l’obtention d’au moins 10 spectres RAMAN entre la surface de la peau et 40 µm de profondeur dans la peau. Les au moins 10 spectres RAMAN obtenus constituent alors un profil RAMAN Z traité. Il est possible de répéter cette opération afin d’obtenir plusieurs profils RAMAN Z traités. Cela permet d’évaluer, à partir du ou des profils RAMAN Z traités obtenus, l’épaisseur traitée du stratum corneum et/ou la teneur en eau traitée de la peau et/ou la conformation et l’organisation traités des lipides de la peau et/ou la fluorescence de base traitée de la peau. Dans un quatrième temps, les inventeurs ont comparé respectivement l’épaisseur témoin du stratum corneum, la teneur en eau témoin de la peau, la conformation et l’organisation témoins des lipides de la peau, la fluorescence de base témoin de la peau avec l’épaisseur traitée du stratum corneum, la teneur en eau traitée de la peau, la conformation et l’organisation traitées des lipides de la peau et la fluorescence de base traitée de la peau de façon à déterminer l’effet physiologique de la composition cosmétique sur la peau. Les inventeurs ont réalisé les mesures de spectroscopie RAMAN in vivo au moyen d’un dispositif d’analyse par spectroscopie RAMAN in vivo qui comprend une sonde RAMAN confocale couplée à un spectrographe RAMAN dispersif. Le faisceau laser d'excitation est envoyé à la sonde distante via une fibre de 5μm de diamètre et le signal Raman est acheminé vers le spectrographe via une fibre de 100 μm de diamètre. La sonde est équipée d'un objectif à longue distance de travail 100X fonctionnant dans l'air. Un dispositif piézoélectrique permet de collecter les profils RAMAN Z en assurant des mesures axiales de la surface de la peau jusqu'à une profondeur définie dans la peau, par exemple 40µm. Une caméra vidéo couleur intégrée à la sonde permet de visualiser la surface de la peau et de contrôler la focalisation du laser sur la peau. Les profils RAMAN Z consistent en un balayage en profondeur de la peau. Les spectres RAMAN sont collectés à différents points de focalisation, de la surface de la peau à Z = 0 μm à Z = 40μm sous la surface de la peau avec un pas de 3 μm. Soit 14 mesures pour un profil RAMAN Z. Il est possible de modifier le pas de mesure ainsi que la profondeur de mesure en fonction des types de peaux et des compositions cosmétiques analysées. Le spectrographe RAMAN dispersif est équipé d'un détecteur CCD (Coupled Charge Detector) de 1024 x 256 éléments refroidis par effet Peltier, et d'un réseau de 830 Traits.mm -1 qui permet de couvrir une large gamme de fréquences de 550 cm -1 à 3700 cm -1 en une seule acquisition avec une résolution spectrale d'environ 6 cm -1 . La source d'excitation est une diode laser de 660 nm et la puissance à l'échantillon est fixée à 30 mW conformément aux normes de protection. La longueur d’onde de 660 nm est choisie comme le compromis optimal entre la génération de fluorescence parasite et la sensibilité de la caméra CCD sur toute la gamme de fréquences. Pour la protection contre le rayonnement laser, des lunettes de protection sont utilisées. Pour l'acquisition des données, l’ensemble du dispositif est contrôlé par le logiciel Labspec 5. Ainsi, pour une composition cosmétique analysée, il est obtenu au moins 2 profils RAMAN Z, un profil RAMAN Z témoin et un profil RAMAN Z traité et chaque profil RAMAN Z comprend au moins 10 spectres RAMAN. En vue de l’analyse des données spectrales obtenues, les inventeurs ont prétraité les données au moyen du logiciel Matlab 7.2 de façon à éliminer les spectres RAMAN aberrants. Les spectres RAMAN retenus sont quant à eux soumis à des corrections de fond qui permettent de nettoyer le signal RAMAN de la peau. Ces corrections de fond comprennent le lissage des spectres avec un filtre Savitzky-Golay de 9 mm, la correction des pics et la correction de la ligne de base en utilisant une fonction polynomiale de degré 4 destinée à éliminer la fluorescence de la peau. Enfin, les profils RAMAN Z sont normalisés sur l'intensité de la gamme entière de fréquences, avec une fonction vectorielle. Chaque profil RAMAN Z obtenu permet de déterminer l’épaisseur du stratum corneum et les inventeurs procèdent de la manière suivante. La position exacte de la surface du stratum corneum est tout d’abord déterminée. En effet, en raison des déformations possibles de la peau pendant la mesure, la surface du stratum corneum peut varier légèrement et ne plus correspondre à la position zéro Z = 0 µm du déplacement de l'objectif actionné par le dispositif piézoélectrique. L’analyse de la bande vibrationnelle -CH du profil RAMAN Z permet de déterminer la position exacte de la surface du stratum corneum. La surface du stratum corneum correspond à la valeur de Z du profil RAMAN Z pour laquelle l’intensité de la bande vibrationnelle -CH est égale à la moitié de l’intensité maximale de la bande vibrationnelle -CH. En effet, la surface de la peau correspond à l'intensité semi-maximale de la bande vibrationnelle -CH. Cela est dû au fait que la moitié inférieure du faisceau laser est dans la peau et que la moitié supérieure est dans l'air, donc le point focal maximum est situé exactement à la surface de la peau. Ensuite, la limite basse du stratum corneum est déterminée en analysant les bandes vibrationnelles -OH et -CH du profil RAMAN Z. La limite basse du stratum corneum correspond à la valeur de Z du profil RAMAN Z pour laquelle le rapport de la bande vibrationnelle -OH sur la bande vibrationnelle -CH du profil RAMAN Z est à son maximum. L’épaisseur du stratum corneum peut alors être calculée en effectuant la différence entre la valeur de Z correspondant à la surface du stratum corneum et la valeur de Z correspondant à limite basse du stratum corneum. La représente un exemple de profil RAMAN Z sur lequel il est représenté l’intensité de la bande vibrationnelle -CH (vCH), l’intensité de la bande vibrationnelle -OH (vOH) ainsi que le rapport de la bande vibrationnelle -OH sur la bande vibrationnelle -CH (vOH/vCH) en fonction de la profondeur de la peau. Dans cet exemple, le point correspondant à la surface du Stratum corneum est situé à Z = -2 μm et la limite basse du stratum corneum est située à Z = -14 μm, l’épaisseur du stratum corneum (SC) est donc de 12 μm. Le tableau suivant illustre un exemple d’analyse de l’effet de la composition cosmétique HAB5-Hydra Serum sur l’épaisseur du stratum corneum : HAB5-Hydra Serum T=0 T=8 Epaisseur du stratum corneum (µm) 8,77 10,02 L’épaisseur témoin du stratum corneum est déterminée à T=0. L’épaisseur traitée du stratum corneum est déterminée à T=8 soit après 8 jours de traitement de la peau du visage du volontaire avec la composition cosmétique HAB5-Hydra Serum. L’épaisseur témoin du stratum corneum est ensuite comparée à l’épaisseur traitée du stratum corneum pour évaluer l’effet physiologique de la composition cosmétique HAB5-Hydra Serum sur l’épaisseur du stratum corneum. On constate ainsi que la composition cosmétique HAB5-Hydra Serum induit une augmentation significative de l’épaisseur du stratum corneum de 14,2% après 8 jours de traitement. Le tableau suivant illustre un exemple d’analyse de l’effet de la composition cosmétique Re Time Serum sur l’épaisseur du stratum corneum Re Time Serum T=0 T=8 Epaisseur du stratum corneum (µm) 6,92 9,95 L’épaisseur témoin du stratum corneum est déterminée à T=0. L’épaisseur traitée du stratum corneum est déterminée à T=8 soit après 8 jours de traitement de la peau du visage du volontaire avec la composition cosmétique Re Time Serum. L’épaisseur témoin du stratum corneum est ensuite comparée à l’épaisseur traitée du stratum corneum pour évaluer l’effet physiologique de la composition cosmétique Re Time Serum sur l’épaisseur du stratum corneum. On constate ainsi que la composition cosmétique Re Time Serum induit une augmentation significative de l’épaisseur du stratum corneum de 43,6% après 8 jours de traitement. Le tableau suivant illustre un exemple d’analyse de l’effet de la composition cosmétique B3 Recovery Cream sur l’épaisseur du stratum corneum : B3 Recovery Cream T=0 T=8 Epaisseur du stratum corneum (µm) 8,73 10,5 L’épaisseur témoin du stratum corneum est déterminée à T=0. L’épaisseur traitée du stratum corneum est déterminée à T=8 soit après 8 jours de traitement de la peau du visage du volontaire avec la composition cosmétique B3 Recovery Cream. L’épaisseur témoin du stratum corneum est ensuite comparée à l’épaisseur traitée du stratum corneum pour évaluer l’effet physiologique de la composition cosmétique B3 Recovery Cream sur l’épaisseur du stratum corneum. On constate ainsi que la composition cosmétique B3 Recovery Cream induit une augmentation significative de l’épaisseur du stratum corneum de 43,6% après 8 jours de traitement. Chaque profil RAMAN Z obtenu permet également de déterminer la teneur en eau de la peau et plus particulièrement du stratum corneum et de l’épiderme. Cela permet d’analyser l’effet d’une composition cosmétique sur le niveau d’hydratation de la peau. La teneur en eau peut être déterminée à partir d’un spectre RAMAN en calculant l’intégrale de l’intensité la bande vibrationnelle -OH située dans la gamme de longueur d’onde comprise entre 3100 cm -1 et 3620 cm -1 . Il est également possible de calculer la teneur en eau libre et en eau liée en calculant respectivement l’intégrale de l’intensité de la bande vibrationnelle -OH située dans la gamme de longueur d’onde comprise entre 3420 cm -1 et 3620 cm -1 et de la bande vibrationnelle -OH située dans la gamme de longueur d’onde comprise entre 3245 cm -1 et 3420 cm -1 . Pour ce faire les inventeurs ont calculé à partir d’un profil RAMAN Z le spectre RAMAN moyen de l’épiderme qui correspond à la moyenne des spectres RAMAN situés entre Z = 0 µm et Z = 40 µm. L’intégrale de la bande vibrationnelle -OH est ensuite calculée à partir du spectre RAMAN moyen de l’épiderme pour déterminer la teneur en eau de l’épiderme. Il est également possible de déterminer la teneur en eau du stratum corneum en calculant à partir d’un profil RAMAN Z le spectre moyen du stratum corneum. Pour ce faire l’épaisseur exacte du stratum corneum est tout d’abord déterminée selon la méthode décrite précédemment puis le spectre RAMAN moyen du stratum corneum est calculé en faisant la moyenne de tous les spectres RAMAN situés entre la valeur de Z correspondant à la surface du stratum corneum et la valeur de Z correspondant à la limite basse du stratum corneum. L’intégrale de la bande vibrationnelle -OH est ensuite calculée à partir du spectre RAMAN moyen du stratum corneum pour déterminer la teneur en eau du stratum corneum. La représente un spectre RAMAN moyen du stratum corneum obtenu à partir d’un profil RAMAN Z. On distingue la bande vibrationnelle -OH située dans la gamme de longueur d’onde comprise entre 3100 cm -1 et 3620 cm -1 . L’intégrale de l’intensité de cette bande correspond alors à l’aire de la bande et représente la teneur en eau de la peau. Le tableau suivant illustre un exemple d’analyse de l’effet de la composition cosmétique HAB5-Hydra Serum sur la teneur en eau du stratum corneum. HAB5-Hydra Serum T=0 T=8 Intégrale de bande vibrationnelle -OH 24,48 28.95 La teneur en eau témoin du stratum corneum est déterminée à T=0. La teneur en eau traitée du stratum corneum est déterminée à T=8 soit après 8 jours de traitement de la peau du visage du volontaire avec la composition cosmétique HAB5-Hydra Serum. La teneur en eau témoin du stratum corneum est ensuite comparée à la teneur en eau traitée du stratum corneum pour évaluer l’effet physiologique de la composition cosmétique HAB5-Hydra Serum sur l’hydratation du stratum corneum. On constate ainsi que la composition cosmétique HAB5-Hydra Serum induit une augmentation significative du niveau d’hydratation du stratum corneum de 18,2% après 8 jours de traitement. Le tableau suivant illustre un exemple d’analyse de l’effet de la composition cosmétique Re Time Serum sur la teneur en eau de l’épiderme. Re Time Serum T=0 T=8 Intégrale de bande vibrationnelle -OH 27,30 32,28 La teneur en eau témoin de l’épiderme est déterminée à T=0. La teneur en eau traitée de l’épiderme est déterminée à T=8 soit après 8 jours de traitement de la peau du visage du volontaire avec la composition cosmétique Re Time Serum. La teneur en eau témoin de l’épiderme est ensuite comparée à la teneur en eau traitée de l’épiderme pour évaluer l’effet physiologique de la composition cosmétique Re Time Serum sur l’hydratation de l’épiderme. On constate ainsi que la composition cosmétique Re Time Serum induit une augmentation significative du niveau d’hydratation de l’épiderme de 18,2% après 8 jours de traitement. Le tableau suivant illustre un exemple d’analyse de l’effet de la composition cosmétique B3 Recovery Cream sur la teneur en eau du stratum corneum. B3 Recovery Cream T=0 T=8 Intégrale de bande vibrationnelle -OH 26,44 30,88 La teneur en eau témoin du stratum corneum est déterminée à T=0. La teneur en eau traitée du stratum corneum est déterminée à T=8 soit après 8 jours de traitement de la peau du visage du volontaire avec la composition cosmétique B3 Recovery Cream. La teneur en eau témoin du stratum corneum est ensuite comparée à la teneur en eau traitée du stratum corneum pour évaluer l’effet physiologique de la composition cosmétique B3 Recovery Cream sur l’hydratation du stratum corneum. On constate ainsi que la composition cosmétique B3 Recovery Cream induit une augmentation significative du niveau d’hydratation du stratum corneum de 16,8% après 8 jours de traitement. Chaque profil RAMAN Z obtenu permet également de déterminer la conformation et l’organisation des lipides de la peau. Cela permet d’analyser l’effet d’une composition sur la barrière cutanée. La conformation des lipides peut être analysée à partir d’un spectre RAMAN en calculant le ratio entre la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire C-C trans et la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire C-C gauche. Un rapport élevé est associé à un état compact de l’ensemble des lipides de la peau tandis qu’un rapport faible est associé à un relâchement dans la compacité des lipides de la peau. L’organisation des lipides peut être analysée à partir d’un spectre RAMAN en calculant le ratio entre la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire symétrique -CH2 et la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire asymétrique -CH2. Un rapport élevé est associé à un état compact de l’ensemble des lipides de la peau tandis qu’un rapport faible est associé à un relâchement dans la compacité des lipides de la peau. Ainsi, une augmentation de l’un de ces deux rapports est significative d’une amélioration de la fonction barrière de la peau. Pour calculer ces rapports, les inventeurs ont tout d’abord calculé le spectre RAMAN moyen de l’épiderme partir du spectre RAMAN Z Comme évoqué précédemment le spectre RAMAN moyen correspond à la moyenne des spectres situés entre Z = 0 µm et Z = 40 µm. Les inventeurs ont analysé la conformation des lipides en calculant à partir du spectre RAMAN moyen de l’épiderme le rapport entre la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire C-C trans et la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire C-C gauche. Les inventeurs ont analysé l’organisation des lipides en calculant à partir du spectre RAMAN moyen de l’épiderme le rapport entre la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire symétrique -CH2 et la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire asymétrique -CH2. Il est également possible d’analyser la conformation et l’organisation des lipides du stratum corneum à partir d’un profil RAMAN Z le spectre moyen du stratum corneum. Pour ce faire, l’épaisseur exacte du stratum corneum est tout d’abord déterminée selon la méthode décrite précédemment puis le spectre RAMAN moyen du stratum corneum est calculé en faisant la moyenne de tous les spectres RAMAN situés entre la valeur de Z correspondant à la surface du stratum corneum et la valeur de Z correspondant à la limite basse du stratum corneum. Une fois le spectre RAMAN moyen du stratum corneum obtenu, il est possible d’analyser la conformation et l’organisation des lipides du stratum corneum de la même façon que pour l’épiderme. Le tableau suivant illustre un exemple d’analyse de l’effet de la composition cosmétique B3 Recovery Cream sur la conformation des lipides de l’épiderme. B3 Recovery Cream T=0 T=8 C-C trans/C-C gauche 0,97 1,21 La conformation témoin des lipides du stratum corneum est analysée à T=0. La conformation traitée des lipides du stratum corneum est analysée à T=8 soit après 8 jours de traitement de la peau du visage du volontaire avec la composition cosmétique B3 Recovery Cream. La conformation témoin des lipides du stratum corneum est ensuite comparée à la conformation traitée des lipides du stratum corneum pour évaluer l’effet physiologique de la composition cosmétique B3 Recovery Cream sur la barrière cutanée. On constate que la B3 Recovery Cream induit une augmentation de 25,5% de ce rapport ce qui est à associer à une augmentation de la compacité de l'emballage lipidique du stratum corneum La B3 Recovery Cream montre une bonne efficacité sur la conformation des lipides du Stratum corneum ce qui induit une amélioration de la fonction barrière de la peau. Chaque profil RAMAN Z obtenu permet également de déterminer la fluorescence de base de la peau. Cela permet d’analyser l’effet d’une composition sur le niveau d’éclaircissement de la peau. La fluorescence de base de la peau peut être déterminée à partir d’un spectre RAMAN en calculant l’intégrale de la bande vibrationnelle située dans la gamme de longueur d’onde comprise entre 400 cm -1 et 600 cm -1 et représentant la fluorescence de base de la peau. Pour ce faire, les inventeurs ont calculé à partir d’un profil RAMAN Z le spectre RAMAN moyen de l’épiderme qui correspond à la moyenne des spectres RAMAN situés entre Z = 0 µm et Z = 40 µm. L’intégrale de la bande vibrationnelle située dans la gamme de longueur d’onde comprise entre 3100 cm -1 et 3620 cm -1 est ensuite calculée à partir du spectre RAMAN moyen de l’épiderme pour déterminer la fluorescence de base de la peau. Procédé d’analyse du pourcentage de pénétration sur au moins une couche de peau ciblée et de l’effet physiologique d’une composition cosmétique, ledit procédé comprenant : une première étape de détermination, d’une part, de l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs, et, d’autre part, d’un intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs, une deuxième étape d’analyse par spectroscopie RAMAN ex vivo de la composition cosmétique de façon à obtenir un pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs, une troisième étape consistant à : si le pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée est compris dans l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration, la composition cosmétique est sélectionnée et on procède à une quatrième étape, si le pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée n’est pas compris dans l’intervalle de valeurs seuils de pourcentage de pénétration, on procède à une étape de reformulation de la composition cosmétique et on réitère les deuxième et troisième étapes, une quatrième étape d’analyse par spectroscopie Raman in vivo de peaux humaines traitées avec la composition cosmétique sélectionnée de façon à déterminer l’effet physiologique sur la peau de la composition cosmétique sélectionnée. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu’il comprend une étape préliminaire de détermination du spectre RAMAN de référence de la composition cosmétique, de son ou ses principes actifs et d’un explant de peau témoin. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que la deuxième étape est réalisée de la façon suivante : la composition cosmétique est appliquée sur un explant de peau humaine, l’explant est ensuite incubé pendant 8 heures à 32°C puis lavé puis congelé, des coupes fines longitudinales sont ensuite obtenues à partir de l’explant congelé, des spectres RAMAN sont ensuite obtenus pour chaque coupe fine longitudinale de façon à obtenir une image RAMAN de chaque coupe fine longitudinale, chaque image RAMAN est ensuite traitée de façon à obtenir pour la composition cosmétique et/ou son ou ses principes actifs un coefficient de pénétration transcutanée pour chaque valeur de profondeur de peau entre 0 µm et 200 µm, on obtient un graphique sous forme d’une courbe illustrant le coefficient de pénétration transcutanée en fonction de la profondeur de peau, et on obtient le pourcentage de pénétration dans l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs en effectuant le rapport entre l’aire sous la courbe correspondant à l’au moins une couche de peau ciblée et l’aire sous la courbe totale. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que les spectres RAMAN sont obtenus au moyen d’une source laser de longueur d’onde de 660 nm. Procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que l’au moins une couche de peau ciblée de la composition cosmétique et/ou de son ou ses principes actifs est déterminée en fonction d'un type de composition cosmétique. Procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la quatrième étape du procédé est réalisée de la façon suivante : on effectue au moins 10 mesures par spectroscopie RAMAN in vivo entre Z = 0 µm de profondeur et Z = 40 µm de profondeur de la peau d’un volontaire de façon à obtenir un profil RAMAN Z témoin de la peau, on évalue à partir du profil RAMAN Z témoin l’épaisseur témoin du stratum corneum et/ou la teneur en eau témoin de la peau et/ou la conformation et l’organisation témoins des lipides de la peau et/ou la fluorescence de base témoin de la peau, on applique pendant 8 jours la composition cosmétique sélectionnée sur la peau du volontaire de façon à obtenir une peau traitée, on effectue au moins 10 mesures par spectroscopie RAMAN in vivo entre Z = 0 µm de profondeur et Z = 40 µm de profondeur de la peau du volontaire de façon à obtenir un profil RAMAN Z traité de la peau traitée, on évalue à partir du profil RAMAN Z traité l’épaisseur traitée du stratum corneum et/ou la teneur en eau traitée de la peau et/ou la conformation et l’organisation traitées des lipides de la peau et/ou la fluorescence de base traitée de la peau, on compare respectivement l’épaisseur témoin du stratum corneum, la teneur en eau témoin de la peau, la conformation et l’organisation témoins des lipides de la peau et la fluorescence de base témoin de la peau avec l’épaisseur traitée du stratum corneum, la teneur en eau traitée de la peau, la conformation et l’organisation traitées des lipides de la peau et la fluorescence de base traitée de la peau de façon à déterminer l’effet physiologique de la composition cosmétique sélectionnée sur la peau. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que l’épaisseur du stratum corneum est déterminée de la façon suivante : on détermine la position exacte de la surface du stratum corneum en analysant la bande vibrationnelle -CH du profil RAMAN Z, la surface du stratum corneum correspondant à la valeur de Z du profil RAMAN Z pour laquelle l’intensité de la bande vibrationnelle -CH est égale à la moitié de l’intensité maximale de la bande vibrationnelle -CH, on détermine ensuite la limite basse du stratum corneum en analysant les bandes vibrationnelles -CH et -OH du profil RAMAN Z, ladite limite basse correspondant à la valeur de Z pour laquelle le rapport de la bande vibrationnelle -OH sur la bande vibrationnelles -CH du profil RAMAN Z est à son maximum, et on calcule l’épaisseur du stratum corneum en calculant la différence entre la valeur de Z correspondant à la surface du stratum corneum et la valeur de Z correspondant à limite basse du stratum corneum. Procédé selon la revendication 6 ou 7, caractérisé en ce que la teneur en eau de la peau est déterminée de la façon suivante : on calcule à partir d’un profil RAMAN Z le spectre RAMAN moyen de l’épiderme correspondant à la moyenne des spectres RAMAN situés entre Z = 0 µm et Z = 40 µm, et on calcule ensuite à partir du spectre RAMAN moyen l’intensité intégrée de la bande vibrationnelle -OH située dans la gamme de fréquence comprise entre 3100 cm -1 et 3620 cm -1 et représentant la teneur en eau de la peau. Procédé selon l’une quelconque des revendications 6 à 8, caractérisé en ce que l’organisation et la conformation des lipides de la peau sont déterminées de la façon suivante : on calcule à partir du spectre RAMAN Z le spectre RAMAN moyen de l’épiderme correspondant à la moyenne des spectres situés entre Z = 0 µm et Z = 40 µm, on analyse la conformation des lipides en calculant à partir du spectre RAMAN moyen de l’épiderme le rapport entre la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire C-C trans et la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire C-C gauche, et on analyse l’organisation des lipides en calculant à partir du spectre RAMAN moyen de l’épiderme le rapport entre la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire symétrique -CH2 et la bande vibrationnelle de la liaison moléculaire asymétrique -CH2. Procédé selon l’une quelconque des revendications 6 à 9, caractérisé en ce que la fluorescence de base de la peau est déterminée de la façon suivante : on calcule à partir du spectre RAMAN Z le spectre RAMAN moyen de l’épiderme correspondant à la moyenne des spectres situés entre Z = 0 µm et Z = 40 µm, et on calcule ensuite à partir du spectre RAMAN moyen obtenu l’intensité intégrée de la région spectrale située dans la gamme de fréquence comprise entre 400 cm -1 et 600 cm -1 et représentant la fluorescence de base de la peau.