Brevet FR3146400A1 — publié le 20240913

La présente invention a pour objet de nouveaux conjugués présentant une formule générale (I) telle que définie à la revendication 1. Les conjugués de l’invention comprennent 1/ au moins un analogue du mannose 6-phosphate (M6P), ledit analogue du M6P ciblant à la fois le récepteur du mannose 6-phosphate cation-indépendant (RM6P-CI) et le tissu osseux et 2/ un produit d’intérêt Y. L’invention concerne également le procédé de préparation desdits conjugués et leur utilisation médicale, de type thérapeutique ou diagnostique. Les conjugués de formule (I) de l’invention sont particulièrement intéressants pour une utilisation comme médicament, en particulier dans le traitement de pathologies osseuses et/ou de pathologies affectant à la fois le tissu osseux et les tissus mous. Conjugués ciblant le récepteur du mannose 6-phosphate cation-indépendant et le tissu osseux La présente invention relève du domaine de la chimie thérapeutique. Elle concerne plus particulièrement des conjugués comprenant : 1/ au moins un analogue du mannose 6-phosphate (M6P), ledit analogue du M6P ciblant à la fois le récepteur du mannose 6-phosphate cation-indépendant (RM6P-CI) et le tissu osseux et, 2/ un produit d’intérêt Y. L’invention concerne également le procédé de préparation desdits conjugués et leur utilisation médicale, de type thérapeutique ou diagnostique. Les conjugués de l’invention sont particulièrement appropriés pour une utilisation dans le traitement de pathologies osseuses et/ou de pathologies affectant à la fois le tissu osseux et les tissus mous. A titre d’exemple de pathologies affectant à la fois le tissu osseux et les tissus mous on pourra citer des maladies lysosomales comme par exemple les mucopolysaccharidoses. Les maladies lysosomales, encore appelées maladies de surcharge lysosomales, sont des maladies métaboliques rares dans lesquelles une enzyme lysosomale spécifique est défectueuse, ce qui entraîne une accumulation de substrat et donc des lésions tissulaires. La thérapie enzymatique substitutive (TES) est une thérapie souvent utilisée pour traiter ces maladies rares. Elle consiste en l’administration d’enzymes lysosomales recombinantes qui vont être dirigées vers les lysosomes via le RM6P-CI grâce aux résidus M6P présents à l’extrémité de leurs chaînes glycosylées. Seulement sept des cinquante- trois maladies de surcharge lysosomales bénéficient de la thérapie enzymatique substitutive (TES). Parmi les maladies lysosomales on pourra plus particulièrement citer le groupe des mucopolysaccharidoses, qui comprend sept maladies différentes, et qui se caractérise par une atteinte du tissu osseux, y compris du cartilage et des tissus mous. L’atteinte squelettique de ces maladies associe les déformations osseuses et la plupart des types de raideurs articulaires. Il n’existe actuellement aucune TES efficace qui cible à la fois les tissus mous et le tissu osseux. Le défi de cibler à la fois les tissus mous et le tissu osseux représente un problème médical majeur pour les patients souffrant en particulier de mucopolysaccharidoses. Afin de cibler à la fois le tissu osseux et les tissus mous, il est nécessaire de préparer une nouvelle génération de ligands combinant un ciblage osseux efficace et un ciblage modéré du RM6P-CI, afin d’éviter une accumulation des enzymes lysosomales par les tissus mous. Les enzymes lysosomales ont une demi-vie courte dans la circulation sanguine en raison de la liaison rapide des enzymes lysosomales aux récepteurs du M6P présents dans la plupart des organes. Par conséquent, l’amélioration des lésions du tissu osseux chez les patients atteints de mucopolysaccharidoses est très limitée, même après un traitement à long terme, et le ciblage de ce tissu osseux est donc de première importance pour améliorer les traitements. L’hydroxyapatite (HA) est un composant inorganique majeur du tissu osseux qui est absent dans les tissus mous. Certaines protéines du tissu osseux (ostéopontine, sialoprotéine osseuse, etc.) peuvent se lier à l’hydroxyapatite (HA) via leur séquence répétitive d’acides aminés chargés négativement, à savoir l’acide aminé aspartate (représenté par « Asp » ou « D ») et l’acide aminé glutamate (représenté par « Glu » ou « E »). Ces séquences répétitives enchaînant six de ces acides aminés sont appelées peptides polyanioniques de type E6 et D6. Dans le document Tomatsu, S. et al. (Mol. Gen. Metab. 2015, 114, 94-109), les peptides polyanioniques ont été appliqués à l’enzyme N-acétylgalactosamine-6-sulfatase humaine (GALNS) et à l’enzyme β-glucuronidase (GUSB). Ces enzymes, marquées par les séquences d’acides aminés de type E6 et D6, ont une élimination réduite de la circulation sanguine chez des souris atteintes de mucopolysaccharidose de type IVA et VII, et sont retenues plus longtemps dans l’os, avec une activité enzymatique résiduelle substantielle. Le document WO 2011/000958 décrit des analogues isostères synthétiques du mannose 6-phosphate (M6P) présentant une affinité pour le RM6P-CI allant de 10 -4 à 10 -9 M. Ces analogues du M6P, appelés « AMFA » (« Analogues synthétiques du Mannose 6-phosphate Fonctionnalisés en position Anomère ») ont été conçus pour être greffés sélectivement, par l’intermédiaire d’un bras espaceur, sur des glycoprotéines, et plus particulièrement sur les chaînes oligosaccharidiques d’une enzyme lysosomale. Ce greffage préserve à la fois la structure tridimensionnelle de l’enzyme et son activité enzymatique. De plus les composés bifonctionnels issus de ce greffage présentent une bonne stabilité dans le sang. Dans le document El Cheikh, K. et al (Angew. Chem. Int. Ed. 2016, 55,14774–14777), un composé AMFA comprenant une extrémité phosphonate a été greffé sur l’enzyme alpha-glucosidase acide (GAA) par l’intermédiaire d’un bras espaceur pour le traitement de la maladie de Pompe, qui est une maladie lysosomale affectant principalement les muscles. Cependant ces composés, même s’ils s’avèrent intéressants pour le traitement de maladies de surcharge lysosomale, ne permettent pas de traiter spécifiquement des altérations du tissu osseux. Les Inventeurs ont maintenant mis au point de nouveaux conjugués comprenant des analogues isostères du mannose 6-phosphate (M6P) aux propriétés particulièrement avantageuses. On entend par « isostère du M6P », un composé chimique synthétique présentant la même activité biologique que le M6P mais avec une stabilité améliorée. Les conjugués de l’invention comprennent plus particulièrement des analogues du M6P qui présentent à la fois une affinité pour le récepteur du mannose 6-phosphate cation-indépendant (RM6P-CI) mais également pour le tissu osseux, et en particulier pour l’hydroxyapatite. En outre, les conjugués de l’invention présentent une excellente stabilité dans les liquides physiologiques. Résumé Selon un premier aspect, la présente invention a pour objet un conjugué caractérisé en ce qu’il présente la formule générale (I) suivante (I) dans laquelle : X représente un groupement bisphosphonate [Chem2] un groupement hydroxybisphosphonate [Chem3] un groupement halogénobisphosphonate [Chem4] avec T représentant un halogène Cl ou F, un groupement malonate [Chem5] un groupement phosphonoacétate [Chem6] avec Z représentant indépendamment l’un de l’autre H; un métal alcalin choisi parmi Na, Li ou K ; un ammonium NH 4 ; n est un entier allant de 0 à 2 ; L 1 représente un radical choisi dans le groupe comprenant *-O-N=**, [Chem7] [Chem8] et [Chem9] avec * indiquant le point d’attachement de L 1 au groupe (O-CH 2 -CH 2 ) n et ** indiquant le point d’attachement de L 1 à Y 1 ; n 1 est un entier allant de 1 à 1000, de préférence de 1 à 20, et plus préférentiellement encore de 1 à 10, Y 1 représente un produit d’intérêt Y, ledit produit d’intérêt Y étant choisi dans le groupe comprenant des protéines, notamment des anticorps et des enzymes lysosomales, des nanoparticules, des composés cytotoxiques et des marqueurs pour l’imagerie médicale, Y 1 formant n 1 liaison(s) covalente(s) avec L 1 . Selon un deuxième aspect, la présente invention a pour objet un procédé de préparation d’un conjugué de formule (I) tel que défini ci-dessus. Selon un troisième aspect, la présente invention a pour objet un conjugué de formule (I) pour une utilisation médicale, de type diagnostique ou thérapeutique. Elle porte notamment sur un conjugué de formule (I) pour une utilisation comme médicament dans le traitement de pathologies osseuses et/ou de pathologies affectant à la fois le tissu osseux et les tissus mous. D’autres caractéristiques, détails et avantages apparaîtront à la lecture de la description détaillée ci-après, et à l’analyse des dessins annexés, sur lesquels : Fig. 1 illustre le procédé de préparation de l’intermédiaire triflate 6 : le 2,3,4-tri- O -benzoyl-6-(trifluorométhanesulfonate)-α-D-mannopyranoside de 2-bromoéthyle, qui servira comme précurseur pour la synthèse des composés de formule (II) dénommés respectivement MAM-1 ou 11 et MAM-2 ou 14 . Fig. 2 illustre le procédé de préparation du composé de formule (II), dénommé MAM-1 ou 11 , dans laquelle X représente un groupement bisphosphonate avec Z = H, n est égal à zéro et L représente ONH 2 , à partir du précurseur 6 . Fig. 3 illustre le procédé de préparation du composé de formule (II), dénommé MAM- 2 ou 1 4 , dans laquelle X représente un groupement malonate avec Z = H, n est égal à zéro et L représente ONH 2 , à partir du précurseur 6 . Fig. 4 illustre le schéma de synthèse général des conjugués de formule (I) dans laquelle n 1 est égal à 1, en fonction de la signification du groupe chimique réactif L de l’analogue du M6P de formule générale (II). La point 1/ illustre la réaction entre la fonction oxy-amine de l’analogue du M6P de formule (II) avec une fonction aldéhyde (-CHO) (préalablement générée lors d’un processus oxydatif) d’un produit d’intérêt Y (comme un anticorps ou une enzyme lysosomale). Le produit Y est représenté par Y 1 ’-CHO, Y 1 ’ représentant le produit Y sans son groupe fonctionnel L’ égal à -CHO. L’analogue (II) est dénommé MAM-1 lorsque X est un groupement bisphosphonate et n est égal à 0 et MAM-2 lorsque X est un groupement malonate et n est égal à 0. La point 2/ illustre la réaction entre la fonction squarate de l’analogue du M6P de formule (II) avec une fonction amine (-NH 2 ) d’un produit d’intérêt Y. Le produit d’intérêt Y est représenté par Y 1 ’-NH 2 , Y 1 ’ représentant Y sans son groupe fonctionnel L’ égal à -NH 2 . La point 3/ illustre la réaction entre la fonction maléimide de l’analogue du M6P de formule (II) avec une fonction thiol (-SH) d’un produit d’intérêt Y. Le produit d’intérêt Y est représenté par Y 1 ’-SH, Y 1 ’ représentant Y sans son groupe fonctionnel L’ égal à -SH. La point 4/ illustre la réaction entre la fonction carbonylacrylique de l’analogue du M6P de formule (II) avec une fonction thiol d’un produit d’intérêt Y. Fig. 5 illustre la cytotoxicité sur des fibroblastes sains des composés de formule (II) MAM-1 et MAM-2 en comparaison avec le composé mannose 6-phosphate (M6P) et avec un composé analogue du M6P, à savoir le composé dénommé « AMFA », composé dont la formule est proche de celle d’un composé de formule (II), à savoir avec n est égal à zéro et L égal à ONH 2 mais avec X qui représente un groupement phosphonate -CH 2 -P(O)(OH) 2 . L’axe des abscisses représente la concentration molaire des composés M6P (histogramme noir), AMFA (histogramme gris), MAM-1 (histogramme blanc) et MAM-2 (histogramme hachuré). L’axe des ordonnées représente la survie cellulaire des composés. La survie cellulaire observée en présence de M6P a été prise comme valeur du 100%. Fig. 6 illustre les interactions entre le RM6P-CI et les composés de formule (II) MAM-1 et MAM-2 en comparaison avec les composés M6P et AMFA. L’axe des abscisses représente la concentration molaire des composés M6P (courbe pointillée), AMFA (courbe grise aux motifs carrés), MAM-1 (courbe noire aux motifs ronds) et MAM-2 (courbe gris clair avec une croix). L’axe des ordonnées représente le pourcentage de liaison desdits composés au RM6P-CI. Fig. 7 illustre l’adsorption à l’hydroxyapatite (HA) des composés de formule (II) MAM-1 et MAM-2 et des composés M6P, AMFA, zolédronate et acide médronique. L’axe des abscisses représente, respectivement de gauche à droite : M6P (histogramme noir), AMFA (histogramme blanc), MAM-1 (histogramme gris foncé), MAM-2 (histogramme hachuré), zolédronate (histogramme pointillé) et acide médronique (histogramme gris clair). L’axe des ordonnées représente le pourcentage de composés adsorbés à HA. Fig. 8 illustre la cytotoxicité sur des fibroblastes sains des conjugués de l’invention de formule (I), à savoir Myo-MAM-1 et Myo-MAM-2, en comparaison avec le conjugué Myo-AMFA et avec l’enzyme Myozyme ® commerciale seule (qui est l’enzyme alpha-alglucosidase). L’axe des abscisses représente la concentration molaire des composés Myozyme ® (histogramme noir), Myo-AMFA (histogramme gris), Myo-MAM-1 (histogramme blanc) et Myo-MAM-2 (histogramme hachuré). L’axe des ordonnées représente la survie cellulaire en présence des composés. La survie cellulaire observée en présence de Myozyme a été prise comme valeur du 100%. Fig. 9 illustre les interactions entre le RM6P-CI et l’anticorps Infliximab seul ou fonctionnalisé par les composés de formule (II) MAM-1 et MAM-2 ou par le composé AMFA. L’axe des abscisses représente la concentration molaire des composés M6P (courbe en pointillée tout à droite), Infliximab (courbe grise avec motif carré), Infliximab-AMFA (courbe grise avec motif triangle), Infliximab-MAM-1 (courbe noire avec motif croix) et Infliximab-MAM-2 (courbe gris clair avec motif astérisque). L’axe des ordonnées dans chacune de ces figures représente le pourcentage de liaison des composés au RM6P-CI. Fig. 10 illustre l’adsorption à l’hydroxyapatite (HA) de l’anticorps Infliximab seul ou couplé aux composés de formule (II) MAM-1 et MAM-2 ou à AMFA. L’axe des abscisses représente, respectivement de gauche à droite : Infliximab (histogramme noir), Infliximab-MAM-1 (histogramme blanc), Infliximab-MAM-2 (histogramme gris) et Infliximab-AMFA (histogramme hachuré). L’axe des ordonnées représente le pourcentage de composés adsorbés à HA. Description détaillée Les conjugués de formule (I ) Comme indiqué, la présente invention a pour objet un conjugué de formule (I) telle que ci-dessus définie. On entend par « conjugué » au sens de l’invention un composé comprenant deux parties liées entre elles par une liaison covalente. La première partie du conjugué représente au moins un analogue du M6P tandis que la deuxième partie du conjugué Y 1 représente un produit d’intérêt Y choisi dans le groupe comprenant des protéines (telles que des anticorps, des enzymes lysosomales etc.), des nanoparticules, des composés cytotoxiques et des marqueurs pour l’imagerie médicale. Le produit d’intérêt Y désigne le produit d’intérêt « libre » lorsqu’il ne forme pas de liaison avec l’analogue du M6P. Le produit d’intérêt Y 1 désigne le produit d’intérêt Y lorsque ce dernier est lié de façon covalente à l’analogue du M6P par l’intermédiaire du radical L 1 . Le produit d’intérêt Y libre peut être représenté par Y 1 ’-L’, avec L’ représentant un groupe fonctionnel ou une fonction réactive porté(e) par le produit d’intérêt Y. Autrement dit, Y 1 ’ représente le produit d’intérêt Y sans son groupe fonctionnel L’. C’est le groupe fonctionnel L’ de Y qui va réagir avec un groupe fonctionnel ou une fonction réactive porté(e) par l’analogue du M6P afin de former une liaison covalente entre le produit d’intérêt Y et l’analogue du M6P et obtenir ainsi le conjugué de formule (I) de l’invention. Dans la présente demande, on peut employer indifféremment les termes « groupe fonctionnel », « fonction réactive » ou « groupe chimique réactif ». Chacun de ces termes désigne un groupe porté par le produit d’intérêt Y (ou porté par l’analogue du M6P) capable d’entrer en réaction avec un groupe porté par l’analogue du M6P (ou porté par le produit d’intérêt Y). Dans la formule (I), l’analogue du M6P correspond à la formule délimitée par la grande parenthèse. L’entier n 1 indique le nombre d’analogue(s) du M6P lié(s) au produit d’intérêt Y 1 . Selon l’invention, n 1 analogue(s) du M6P peut (peuvent) être lié(s) de façon covalente à un produit d’intérêt. Ces n 1 analogues du M6P sont liés au produit d’intérêt par l’intermédiaire du radical L 1 . On entend par un analogue du M6P un composé qui diffère du M6P naturel mais qui présente une capacité d’interaction élevée au RM6P-CI. Une « interaction » désigne dans la présente demande une liaison de type non covalente. Dans toute la demande, M6P désigne le mannose 6-phosphate et RM6P-CI désigne le récepteur mannose 6-phosphate cation-indépendant. Le RM6P-CI est un récepteur ubiquitaire qui est présent à la fois dans le cytoplasme et à la membrane des cellules. Son rôle est notamment d’internaliser par endocytose dans la cellule des molécules portant le marqueur de reconnaissance mannose 6-phosphate (M6P). Le conjugué de formule (I) de l’invention est particulièrement avantageux en ce sens qu’il présente plusieurs capacités d’interaction avec plusieurs cibles telles que le RM6P-CI, le tissu osseux ou encore une molécule d’intérêt thérapeutique. Ainsi le conjugué (I) de l’invention présente plus particulièrement une capacité d’interaction au RM6P-CI (par l’intermédiaire de l’analogue du M6P), une capacité d’interaction au niveau du tissu osseux, plus particulièrement au niveau de l’HA (par l’intermédiaire de l’analogue du M6P et plus particulièrement du groupement X), mais également une capacité d’interaction à des molécules d’intérêt thérapeutique par l’intermédiaire du composé d’intérêt Y 1 . Ainsi, si le composé d’intérêt Y 1 est un anticorps, alors ledit anticorps pourra interagir par exemple avec une molécule d’intérêt thérapeutique qui serait un antigène cible. L’antigène cible se réfère à une molécule membranaire ou extracellulaire d’intérêt thérapeutique ou de diagnostic, en particulier une molécule dont la surexpression induit un état pathologique ou est associée à une condition pathologique ou dont l’expression est impliquée dans un trouble pathologique . A titre d’exemple de molécules d’intérêt thérapeutique en interaction avec les composés d’intérêt Y 1 on pourra notamment citer les glycosaminoglycanes qui s’accumulent et créent les maladies de surcharge lysosomales telles que les mucopolysaccharidoses, des facteurs de croissance ou des protéines membranaires impliqués dans la croissance des cancers, et en particulier des cancers osseux primitifs ou des métastases cancéreuses dans le tissu osseux, des facteurs impliqués dans les pathologies osseuses et pouvant servir dans l’imagerie pour le diagnostic ou le ciblage thérapeutique de l’ostéoporose ou des métastases osseuses provenant de cancers du sein, du rein, de la prostate, de la thyroïde et du poumon. Le tissu osseux désigne un tissu conjonctif qui est métaboliquement actif et constitué de plusieurs types cellulaires et d’une matrice dure. Cette matrice est minéralisée par des sels de calcium et de phosphore qui constituent l’hydroxyapatite et contient de grandes quantités de fibres de collagène. On entend par « capacité d’interaction » du conjugué (I), sa capacité à former des interactions non-covalentes avec les cibles ci-dessus mentionnées, à savoir avec : - le RM6P-CI par l’intermédiaire de l’analogue du M6P, - l’HA du tissu osseux par l’intermédiaire du groupement X de l’analogue du M6P, - une molécule d’intérêt thérapeutique par l’intermédiaire du composé d’intérêt Y 1 . La capacité d’interaction du conjugué avec ses cibles peut également être désignée par l’affinité du conjugué avec ses cibles. L’affinité correspond plus particulièrement à la force ou à l’intensité de l’interaction entre le conjugué et ses cibles. La « capacité de liaison » du conjugué (I) désigne sa capacité à former des liaisons de type covalentes dans le cas où la partie Y 1 du conjugué (I) contient une fonction capable de créer une liaison covalente avec une molécule d’intérêt thérapeutique. Dans le conjugué de formule (I) telle que définie ci-dessus, Y 1 peut plus particulièrement être représenté par le groupement L 2 -Y’ 1 dans lequel Y’ 1 représente le produit d’intérêt Y lié à L 1 par l’intermédiaire du radical L 2 avec L 2 choisi dans le groupe comprenant =CH- , -NH- et -S-, ledit Y 1 pouvant ainsi être représenté par =CH-Y’ 1 , -NH-Y’ 1 et -S-Y’ 1 . Le radical L 2 est plus particulièrement issu de la transformation du groupe fonctionnel L’ porté par le produit d’intérêt Y 1 lorsque ce dernier forme une liaison covalente avec l’analogue du M6P. Selon un mode de réalisation avantageux de l’invention, le conjugué de formule (I) est caractérisé en ce que n 1 est un entier égal à 1, et en ce que ledit conjugué est choisi dans le groupe comprenant : [Chem11] [Chem12] et [Chem13] avec X, n et Y’ 1 tels que définis ci-dessus. Selon encore un autre mode de réalisation avantageux, le conjugué de l’invention est caractérisé en ce que Y 1 représente un anticorps Y, ou un fragment d’anticorps Y comprenant au moins un domaine d’interaction avec l’antigène, ou une enzyme lysosomale Y. Selon un mode de réalisation de l’invention, le conjugué (I) est caractérisé en ce que Y 1 représente un anticorps Y choisi dans le groupe comprenant les anticorps monoclonaux, les anticorps chimériques, les anticorps humains ou humanisés, les anticorps à chaînes lourde et légère, les anticorps à chaîne unique, les anticorps bispécifiques ou multi-spécifiques et les nanocorps. Selon encore un mode de réalisation particulièrement avantageux, le conjugué de l’invention est plus particulièrement caractérisé en ce que Y 1 représente un anticorps Y qui est une immunoglobuline de type IgG, en particulier de sous-type lgG1, lgG2, lgG3 ou lgG4, ou une immunoglobuline de type IgE, IgD, IgA ou IgM. Selon encore un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, le conjugué de l’invention est plus particulièrement caractérisé en ce que Y 1 représente une enzyme lysosomale Y dont l’expression est altérée et impliquée dans les mucopolysaccharidoses pour lesquelles la croissance osseuse est altérée. Selon encore un autre mode de réalisation de l’invention, le conjugué de formule (I) tel que ci-dessus défini peut également être caractérisé en ce qu’il présente une affinité, mesurée par la concentration inhibant de 50% (IC 50 ), vis-à-vis du récepteur du mannose 6-phosphate cation indépendant (RM6P-CI) allant de 10 -4 M à 10 -9 M, et de préférence allant de 10 -5 M à 10 -8 M. Selon encore un autre mode de réalisation de l’invention, le conjugué de formule (I) tel que ci-dessus défini peut également être caractérisé en ce qu’il présente une capacité d’adsorption sur l’hydroxyapatite présente dans le tissu osseux. La propriété de double capacité d’interaction des conjugués (I) de l’invention, à savoir au niveau du RM6P-CI (et donc au niveau des compartiments endo-lysosomaux de la cellule) et au niveau du tissu osseux est notamment due au choix judicieux du groupement X du conjugué de formule (I). Par ailleurs les conjugués de l’invention sont également très avantageux de par la structure de leur bras espaceur. On entend par « bras espaceur » la partie située après l’oxygène porté par le carbone anomérique de la structure cyclique de l’analogue du M6P, qui fait la jonction avec le produit d’intérêt Y 1 , à savoir la partie « -(CH 2 ) 2 (O-CH 2 -CH 2 ) n -L 1 - » (voir conjugué de formule (I)). La structure de ce bras espaceur est notamment simple sur le plan chimique et permet un greffage efficace avec le produit d’intérêt. Des produits d’intérêt Y 1 considérés seuls et/ou des molécules d’intérêt thérapeutique interagissant avec ces produits d’intérêt Y 1 sont donc spécifiquement adressés au système endo-lysosomal et à l’hydroxyapatite via les conjugués (I) de l’invention. Les conjugués selon l’invention présentent donc de nombreuses applications dans le domaine du diagnostic et de la thérapie, et en particulier dans les thérapies enzymatiques de substitution combinées à une stratégie de ciblage osseux pour le traitement des maladies de surcharge lysosomale dans le corps humain ou chez l’animal. Ces conjugués peuvent aussi trouver des applications dans le domaine du traitement des cancers osseux ou de l’ostéoporose. Procédé de préparation des conjugués de formule (I) Selon un autre aspect, la présente invention a pour objet un procédé de préparation d’un conjugué de formule (I) tel que défini ci-dessus, caractérisé en ce que l’on fait réagir : - un produit d’intérêt Y avec - n 1 composé(s) répondant à la formule générale (II) suivante (II) dans laquelle X, n et n 1 sont tels que définis ci-dessus, L est un groupe chimique réactif choisi dans le groupe comprenant -O-NH 2 , [Chem15] [Chem16] et [Chem17] ledit groupe L du composé (II) formant n 1 liaison(s) covalente(s) avec n 1 groupe(s) fonctionnel(s) porté(s) par ledit produit d’intérêt Y. Le composé de formule (II) est un analogue du M6P. C’est le groupe chimique réactif L porté par l’analogue du M6P de formule (II) qui va réagir avec le groupe fonctionnel L’ du produit d’intérêt Y afin de former une liaison covalente entre le produit d’intérêt Y et l’analogue du M6P et obtenir ainsi le conjugué de formule (I) de l’invention. Le radical L 2 précédemment mentionné à propos de Y 1 (à savoir Y 1 est représenté par le groupement L 2 -Y’ 1 ) est plus particulièrement issu de la transformation du groupe fonctionnel L’ porté par le produit d’intérêt Y (Y étant représenté par le groupement L’-Y’ 1 ,) lorsque Y forme une liaison covalente avec l’analogue du M6P et est alors représenté par Y 1 . Les composés de formule (II) sont particulièrement intéressants de par la simplicité de leur bras espaceur. On entend par « bras espaceur » la partie située après l’oxygène porté par le carbone anomérique de la structure cyclique de l’analogue du M6P et qui comprend le groupe chimique réactif L, à savoir la partie (CH 2 ) 2 (O-CH 2 -CH 2 ) n -L. En effet, la simplicité de la structure du bras espaceur participe aux avantages présentés par les conjugués de formule (I) de l’invention. Cette simplicité du bras espaceur permet notamment de synthétiser aisément les composés de formule (II) puis de réaliser un couplage particulièrement intéressant et efficace avec un produit d’intérêt Y. La synthèse des conjugués de formule (I) est ainsi efficace et aisée à mettre en œuvre. Les groupes L de l’analogue du M6P tels que ci-dessus définis (par ordre d’apparition) peuvent être respectivement dénommés de façon simplifiée, « oxy-amine », « squarate », « maléimide » et « groupe comprenant une fonction carbonylacrylique ». Les analogues du M6P de formule (II) peuvent être représentés par le sigle « MAM », l’acronyme MAM signifiant « mime de l’acide médronique ». Selon un mode de réalisation de l’invention les analogues du M6P de formule (II) seront choisis dans le tableau 1 ci-dessous. Selon un mode de réalisation avantageux du procédé de l’invention, l’utilisation des analogues (II) décrits dans le tableau 1 permet d’une part d’effectuer un couplage particulièrement intéressant et efficace avec un produit d’intérêt Y et d’autre part permet d’interagir efficacement à la fois avec le RM6P-CI et avec le tissu osseux. Selon un autre mode de réalisation particulièrement avantageux, les analogues de formule (II) sont ceux dont le groupe L est une « oxy-amine » ou un « squarate ». Selon un mode de réalisation particulièrement avantageux de l’invention, si Y représente par exemple un anticorps ou une enzyme lysosomale, le groupe L du composé (II) va se lier au niveau d’une fonction carbonyle préalablement générée sur une chaîne/partie oligosaccharidique de la partie glycosidique de l’anticorps ou de l’enzyme lysosomale. La partie glycosidique de l’anticorps susmentionnée est plus particulièrement celle située au niveau de la région Fc de l’anticorps. A titre d’exemple de groupe L du composé (II), on pourra citer le groupe oxy-amine. Selon un autre mode de réalisation de l’invention, le groupe L du composé (II) va se lier au niveau d’un résidu acide aminé approprié de la chaîne/partie peptidique de l’anticorps ou de l’enzyme lysosomale. A titre d’exemple d’un résidu acide aminé approprié on pourra citer un groupe amine provenant d’une lysine ou encore un groupe thiol provenant d’une cystéine. A titre d’exemple de groupe L du composé (II), on pourra citer un groupe squarate, un groupe maléimide ou un groupe carbonylacrylique. La illustre un schéma de synthèse général des conjugués (I) de l’invention avec X représentant un bisphosphonate ou un malonate, en fonction des définitions respectives du groupe chimique réactif L de l’analogue du M6P de formule générale (II). Comme indiqué et montré sur la , point 1/, la fonction carbonyle (-CHO) du produit d’intérêt Y réagit avec la fonction oxy-amine du composé de formule (II). Si Y représente un anticorps, ce mode de couplage intervient par exemple au niveau d’une chaîne oligosaccharidique de la partie glycosidique située sur la partie Fc de l’anticorps. Concernant le mode de couplage du composé de formule (II) comprenant le groupe squarate (voir point 2/), si Y représente un anticorps, ce dernier intervient par exemple au niveau d’un résidu lysine de la partie peptidique d’un anticorps, à savoir plus particulièrement au niveau de la fonction amine. Concernant le mode de couplage du composé de formule (II) avec un groupe maléimide (voir point 3/), si Y représente un anticorps, ce dernier intervient au niveau d’un résidu cystéine de la partie peptidique de l’anticorps, à savoir plus particulièrement au niveau de la fonction thiol. Concernant le mode de couplage du composé de formule (II) comprenant une fonction carbonylacrylique (voir point 4/), si Y représente un anticorps, ce dernier intervient au niveau d’un résidu cystéine de la partie peptidique de l’anticorps, à savoir plus particulièrement au niveau de la fonction thiol. Tous ces modes de couplage sont particulièrement avantageux car ils ne créent pas ou créent peu d’encombrement au niveau des autres fonctions réactives de l’anticorps (comme par exemple les récepteurs FcRn de l’anticorps), ce qui permet avantageusement à l’anticorps de préserver ses propriétés naturelles. Un anticorps a plus particulièrement été cité comme exemple de composé Y. Cependant les modes de couplage sur des résidus lysine et/ou cystéine ci-dessus décrits sont également applicables à toutes protéines ou peptides non glycosylés. Utilisation des conjugués (I) dans une méthode de traitement thérapeutique ou de diagnostic Pour les raisons mentionnées précédemment, les conjugués (I) de l’invention, de par leurs propriétés avantageuses, sont particulièrement intéressant pour une utilisation dans le domaine de la thérapie ou dans le domaine du diagnostic. Selon un autre aspect de l’invention, il est proposé une composition pharmaceutique caractérisée en ce qu’elle comprend : - un conjugué tel que défini ci-dessus, - au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable. Le conjugué de l’invention de formule (I) est présent en une quantité thérapeutiquement efficace dans la composition de l’invention. Par "quantité thérapeutiquement efficace", on entend un dosage suffisant pour produire un résultat souhaité, par exemple, une quantité suffisante pour obtenir des résultats thérapeutiques (y compris préventifs) bénéfiques ou souhaités, tels qu'une réduction du taux d’un élément dont la surexpression extracellulaire ou membranaire est responsable d’une pathologie ou est impliquée dans une condition pathologique. Une quantité efficace peut nécessiter une ou plusieurs administrations. Selon encore un autre aspect, l'invention concerne une composition pharmaceutique comprenant : - une quantité thérapeutiquement efficace du conjugué de formule (I), - au moins un autre agent thérapeutiquement actif, - éventuellement au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable. La présente invention concerne également un conjugué de formule (I) tel que défini ci-dessus ou une composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus, pour une utilisation médicale, de type thérapeutique ou diagnostique. A cet égard, l’invention a plus particulièrement pour objet un conjugué de formule (I) tel que défini ci-dessus ou une composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus, pour une utilisation comme médicament dans le traitement des pathologies osseuses et/ou de pathologies affectant à la fois le tissu osseux et les tissus mous. A titre d’exemple de pathologie osseuse on pourra citer : - l’ostéoporose et l’ostéomalacie, les dystrophies osseuses (comme la maladie osseuse de Paget), les ostéonécroses, les tumeurs bénignes des os (ostéomes, ostéoblastomes etc.), les tumeurs bénignes du cartilage (enchondromes, ostéochondromes etc.), certaines formes d’arthrite (notamment l’arthrose), - certaines tumeurs osseuses primitives qui trouvent leur origine dans un os. Certaines des tumeurs osseuses primitives sont malignes telles que les adamantinomes et les ostéosarcomes survenant chez des enfants et adolescents, et les chondrosarcomes, chordomes, tumeurs malignes à cellules géantes qui sont plus fréquentes chez les adultes. A leur stade précoce, ces tumeurs restent localisées au niveau de tissu osseux mais peuvent métastaser vers des tissus mous tels que le poumon à un stade avancé. A titre d’exemple de pathologies affectant à la fois le tissu osseux et les tissus mous, on pourra citer - certains cancers de l’os tels que le sarcome d’Ewing, les fibrosarcomes et lymphomes osseux indifférenciés présentant une composante de tissu mou dès leur formation, - des cancers de l’os qui se développent à partir des cellules métastatiques ayant migré à partir d’une tumeur primaire localisée dans un tissu mou (sein, poumon, rein, prostate, thyroïde, colon etc.), - un cancer développé à partir de la moelle osseuse tel que le myélome multiple, - des maladies de surcharge lysosomale comme par exemple les mucopolysaccharidoses (MPS-I, MPS-II, MPS-III, MPS-IV, MPS-V, MPS-VI et MPS-VII), la maladie de Fabry et la maladie de Pompe. Selon un mode de réalisation avantageux de l’invention, le conjugué ou la composition pharmaceutique est appropriée pour une utilisation dans le traitement d’une pathologie choisie dans le groupe comprenant l’ostéoporose, un cancer de l’os, une maladie de surcharge lysosomale. L’invention a également pour objet un conjugué de formule (I) tel que défini ci-dessus ou une composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus, pour une utilisation dans une méthode de diagnostic. Selon un mode de réalisation avantageux, l’invention a pour objet le conjugué de formule (I) ou la composition pharmaceutique pour une utilisation telle que ci-dessus définie, caractérisée en ce que le conjugué ou la composition pharmaceutique est sous une forme adaptée pour une administration par voie parentérale, intraveineuse ou sous-cutanée. Exemples Les exemples qui suivent font référence aux figures 1 à 10 et décrivent la synthèse des analogues du M6P de formule (II) et des conjugués (I) de l’invention, ainsi que l’étude de leur effets biologiques. Les analogues du M6P de formule (II) de l’invention seront également comparés à l’analogue du M6P dénommé AMFA (composé notamment décrit dans le document WO 2011/000958) et au composé mannose 6-phosphate M6P. E xemple 1 : Synthèse des analogues du M6P Les analogues du M6P synthétisés dans cet exemple sont les composés de formule (II) dénommés respectivement MAM-1 ou 11 et MAM-2 ou 14 dont les formules développées sont respectivement les suivantes : [Chem19] Préparation du synthon 6 , précurseur commun aux composés MAM-1 et MAM-2 La synthèse du composé 6 (« 2,3,4-tri- O -benzoyl-6- O -(trifluorométhanesulfonyl)-α-D-mannopyranoside de 2-bromoéthyle ») est illustrée à la . Le composé de départ est le 1,2,3,4,6-penta- O -acétyl α-D-mannose sur lequel est introduit en position anomère un groupement bromoéthoxy à l’aide de diéthyléthérate de trifluorure de bore et de 2-bromoéthanol dans du dichlorométhane pour former le composé 1 (« 2,3,4,6-tétra- O -acétyl-α-D-mannopyranoside de 2-bromoéthyle ») avec un rendement de 80%. Les acétates présents sur les positions 2, 3, 4 et 6 du composé 1 ont ensuite subi une méthanolyse en présence d’une solution de méthanolate de sodium dans du méthanol pour former le composé 2 (« α-D-mannopyranoside de 2-bromoéthyle ») avec un rendement de 100%. La position 6 du dérivé 2 est ensuite protégée avec du chlorure de monométhoxytrityle dans de la pyridine pour donner l’intermédiaire 3 (« 6-O-méthoxytrityl-α-D-mannopyranoside de 2-bromoéthyle »). Successivement, les positions 2, 3 et 4 sont ensuite benzoylées par l’action du bromure de benzoyle pour former le composé 4 (« 2,3,4-tri- O -benzoyl-6- O -((4-méthoxyphenyl)diphénylméthyl))-α-D-mannopyranoside de 2-bromoéthyle »). Le synthon 5 (« 2,3,4-tri- O -benzoyl-α-D-mannopyranoside de 2-bromoéthyle ») est obtenu après déprotection sélective du groupement trityle en présence de nitrate de cérium et d’ammonium (CAN) dans un mélange acétonitrile/eau, à reflux. Le rendement sur 3 étapes est de 45%. La position 6 du composé 5 est ensuite activée sous la forme de triflate, grâce à l’addition à froid d’anhydride triflique sur le sucre en présence de 2,6-di- tert -butyl-4-méthylpyridine. Le composé 6 est ainsi obtenu avec un rendement de 90% après purification. Conditions et réactifs : (i) BF 3 .Et 2 O, 2-Bromoéthanol, DCM, TA, 20 h ; (ii) MeONa, MeOH, TA, 1h ; (iii) MMTrCl, Pyridine, TA, 5 h ; (iv) BzCl, Pyridine, 0°C, 19h ; (v) CAN, ACN/H 2 O (95 :5), 82°C, 2 h ; (vi) Tf 2 O, 2,6-Di- tert -butyl-4-méthylpyridine, DCM, -40°C, 30 min. Préparation du composé « bisphosphon ate » MAM-1 (ou 11 ) répondant à la formule (II) Le composé MAM-1 (ou 11 ) répond à la formule (II) dans laquelle X représente un groupement bisphosphonate avec Z = H, n est égal à zéro et L représente ONH 2 , à partir du précurseur 6 . Ce composé pourra être appelé composé « bisphosphonate » MAM-1. La synthèse du composé MAM-1 (ou 11 ) est illustrée à la . Le synthon triflate 6 est transformé en intermédiaire bisphosphonate 7 (« 2,3,4-tri- O -benzoyl-6-désoxy-6-bis(diéthoxyphosphinyl)méthylène-α-D-mannopyranoside de 2-bromoéthyle ») en additionnant, à froid, une solution d’anion de méthylènebisphosphonate de tétraéthyle préparé dans une suspension d’hydrure de sodium (NaH) dans du tétrahydrofurane (THF). Le rendement de cette étape est de 50%. L’intermédiaire 8 (« 6-désoxy-6-bis(diéthoxyphosphinyl)méthylène-α-D-mannopyranoside de 2-bromoéthyle ») est obtenu après méthanolyse des groupements benzoates grâce à l’action d’une solution méthanolique de méthanolate de sodium, avec un rendement de 50%. Le composé 9 (« 6-désoxy-6-bis(diéthoxyphosphinyl)méthylène-α-D-mannopyranoside de 2-(phtalimidoxy)éthyle ») est obtenu avec un rendement de 55% après substitution nucléophile du brome par l’anion du N -hydroxyphthalimide formé avec du NaH dans du THF à chaud. La silylation des positions 2, 3 et 4 de l’intermédiaire est réalisée en ajoutant du chlorure de triméthylsilyl et de la triéthylamine dans du dichlorométhane, afin d’obtenir le dérivé 10 (« 2,3,4-tri- O -triméthylsilyl-6-désoxy-6-bis(diéthoxyphosphinyl)méthylène-α-D-mannopyranoside de 2-(phtalimidoxy)éthyle ») avec un rendement quantitatif. Le produit final MAM-1 (ou 11) (« 6-désoxy-6-bis(dihydroxyphosphinyl)méthylène-α-D-mannopyranoside de 2- aminooxyéthyle ») est obtenu à la suite de deux réactions successives de déprotection. Dans un premier temps, les groupements alkyles du bisphosphonate sont convertis par transestérification en esters de triméthylsilyle correspondants grâce à la réaction de Rabinowitz employant du chlorure de triméthylsilyle TMSCl en présence d’iodure de sodium NaI et de triéthylamine NEt 3 dans de l’acétonitrile. Un traitement avec de l’hydrazine monohydratée dans du méthanol MeOH permet d’obtenir le MAM-1 final ( 11 ) avec un rendement sur 2 étapes de 78% après purification. Conditions et réactifs : (i) MDPTE, NaH, THF, 0°C, 5 h ; (ii) MeONa, MeOH, 0°C, 3h ; (iii) N -Hydroxyphthalimide, DBU, THF, 60°C, 4 h ; (iv) TMSCl, Et 3 N, DCM, 0°C, 20 min ; (v) TMSCl, NaI, Et 3 N, ACN, 50°C, 24 h ; (vi) N 2 H 4 .H 2 O, MeOH, TA, 24 h. Préparation du composé « malonate » MAM- 2 (ou 1 4 ) répondant à la formule (II) Le composé MAM- 2 (ou 1 4 ) répond à la formule (II) dans laquelle X représente un groupement malonate avec Z = H, n est égal à zéro et L représente ONH 2 , à partir du précurseur 6 . Ce composé pourra être appelé composé « malonate » MAM-2. La synthèse du composé MAM- 2 (ou 1 4 ) est illustrée à la . Le triflate 6 est transformé en composé 12 (« (2,3,4-tri- O -benzoyl-6,7-didésoxy-7-méthoxycarbonyl-α-D- manno -octopyranoside de 2-bromoéthyle) uronate de méthyle ») avec un rendement de 85% après réaction avec l’anion du malonate de diméthyle préalablement préparé par l’action de NaH dans du THF. L’atome de brome du composé 12 est ensuite substitué par l’anion du N -hydroxyphthalimide préparé avec du bicarbonate de sodium NaHCO 3 dans du DMF, à 65°C. Le composé 13 (« 2,3,4-tri- O -benzoyl-6,7-didésoxy-7-méthoxycarbonyl-α-D- manno -octopyranoside de 2-(phtalimidoxy)éthyle) uronate de méthyle ») est ainsi obtenu avec un rendement de 92%. Le composé 13 est ensuite traité avec de l’hydrazine monohydratée dans du MeOH, puis avec une solution de NaOH 1M dans du THF pour produire le composé final MAM-2 (ou 14 ) (« Acide (6,7-didésoxy-7-carboxy-α-D- manno -octopyranoside de 2- aminooxyéthyle) uronique ») avec un rendement de 42% sur les 2 étapes. Conditions et réactifs : (i) Malonate de diméthyle, NaHCO 3 , THF, 0°C, 5 h ; (ii) N -hydroxyphthalimide, DBU, DMF, 65°C, 22 h ; (iii) N 2 H 4 .H 2 O, MeOH, 0°C, 2h30 ; (iv) NaOH 1M, THF, 0°C, 2h30 Préparation du composé AMFA Les composés MAM-1 et MAM-2 seront notamment comparés dans ce qui suit à un autre analogue du M6P, à savoir le composé dénommé AMFA dont la formule développée est la suivante : Ce composé AMFA est synthétisé selon un protocole décrit dans le document WO 2011/000958. Les composés MAM-1 et MAM-2 se différencient du composé AMFA en ce que le groupement X est respectivement un bisphosphonate dans MAM-1 et un malonate dans MAM-2 alors que dans le composé AMFA le groupement X est un phosphonate. Les composés MAM-1, MAM-2 et AMFA seront également comparés au composé mannose 6-phosphate (M6P) acheté dans le commerce. Exemple 2 : Préparation des conjugués de l’invention Deux produits d’intérêt Y, à savoir une enzyme lysosomale et un anticorps, ont respectivement été fonctionnalisés avec des analogues du M6P, à savoir avec les composés de formule (II) de l’invention MAM-1 et MAM-2, mais aussi avec le composé AMFA. L’enzyme lysosomale testée est achetée dans le commerce sous la dénomination Myozyme ®. Il s’agit de l’enzyme alpha alglucosidase (ou alpha glucosidase acide). Elle peut être représentée dans ce qui suit par « Myo ». Elle contient dans sa structure des résidus M6P permettant le ciblage du RM6P-CI. L’enzyme lysosomale Myo est utilisée pour le traitement de la maladie de Pompe par thérapie enzymatique substitutive. L’anticorps testé est l’infliximab, qui est un anticorps monoclonal chimérique de type IgG1 qui ne possède pas de résidus M6P dans sa structure. Il peut être représenté dans ce qui suit par « Infli ». Les conjugués ainsi formés peuvent indifféremment être représentés dans la présente demande par « MAM-1-Myo » ou « Myo-MAM-1 », « MAM-2-Myo » ou « Myo-MAM-2 », « MAM-1-Infli » ou « Infli-MAM-1 », « MAM-2-Infli » ou « Infli-MAM-2 », « AMFA- Myo » ou « Myo-AMFA », « AMFA-Infli » ou « Infli-AMFA ». Les conjugués de l’invention sont ceux qui comprennent la partie MAM-1 ou MAM-2. Avantageusement selon l’invention la partie MAM-1 ou MAM-2 du conjugué (I) interagit à la fois avec le RM6P-CI et avec l’hydroxyapatite (HA). Couplage et quantification des analogues du M6P (MAM-1, MAM-2 et AMFA) avec un produit d’intérêt Y ( Myo ou Infliximab) Le couplage d’un analogue du M6P (MAM-1, MAM-2 et AMFA) avec un produit d’intérêt Y (Myo ou Infliximab) est réalisé grâce à la fonction éthyloxyamine présente sur le bras espaceur de MAM-1, MAM-2 et AMFA, qui permet la formation d’une liaison covalente de type oxime avec les fonctions aldéhydes préalablement générées par oxydation ménagée sur les chaînes oligosaccharidiques du produit d’intérêt Y (Myo ou Infliximab). Le couplage d’un produit d’intérêt Y comprenant une fonction aldéhyde (générée par oxydation) avec un composé de formule (II) comprenant un bras espaceur avec une fonction éthyloxyamine (donc avec n égal à zéro et L= -ONH 2 ) est illustré en point 1/ . Oxydation des chaînes oligosaccharidiques d u produit d’intérêt Y ( Myo ou I nfliximab ) Une quantité de 0,5 mg/mL de produit d’intérêt Y et une solution 1 mM de métapériodate de sodium (NaIO 4 ) sont mis à réagir dans 0,1 M tampon phosphate pH 6,25 pendant 30 min à 4°C dans l'obscurité. Le glycérol (concentration finale 272 mM) est ajouté pendant 5 min à 0°C pour arrêter la réaction et l'échantillon est filtré sur une colonne PD-10 en utilisant un tampon phosphate 25 mM pH 7. Couplage des analogues du M6P (MAM-1, MAM-2 et AMFA) avec Myo ou Infliximab Après l’étape d’oxydation ménagée, un excès d’analogue du M6P (MAM-1, MAM-2 ou AMFA) est ajouté et incubé pendant 2 h à température ambiante. Enfin, les échantillons sont dialysés dans l’eau pour les échantillons testés en spectrométrie de masse MALDITOF ou dans un tampon contenant 25 mM phosphate, 2% mannitol et 0,005% polysorbate 80 pendant une nuit. Une analyse par spectrométrie de masse MALDI-TOF a permis d’évaluer le nombre de résidus « analogue du M6P » greffés sur le produit d’intérêt Y. Le tableau 2 ci-dessous représente le nombre moyen d’analogues du M6P greffés, calculé à partir de deux analyses MALDI-TOF. Remarques et conclusion Dans cette condition d’oxydation par 1mM NaIO 4 le greffage des AMFA, MAM-1 et MAM-2 est évalué à 3,9 à 4,8 analogues du M6P par molécule d’Infliximab et seulement 0,9 à 1,1 analogue du M6P par Myo. Ceci indique une plus grande sensibilité à l’oxydation des chaînes glycosylées de Infliximab par rapport à celles de Myo qui peut être due à des différences dans la nature des chaînes oligosaccharidiques les composant. Exemple 3 : Evaluation biologique des analogues M6P Les analogues M6P de formule (II) de l’invention, à savoir les composés MAM-1 et MAM-2, ont été comparés sur le plan biologique à l’analogue AMFA et au M6P. En effet, les composés AMFA et M6P sont connus pour ne pas présenter de toxicité cellulaire et pour avoir des capacités d’interaction avec le RM6P-CI. 1/ Évaluation de la cytotoxicité des analogues MAM-1 et MAM-2 La cytotoxicité des analogues MAM-1 et MAM-2 de formule (II) a été évaluée en comparaison avec celle du M6P et l’analogue AMFA sur des fibroblastes humains sains selon le protocole décrit ci-dessous. Protocole expérimental : Les cellules sont ensemencées dans des plaques de 96 puits (Maxisorp Nunc) dans une étuve à 37°C contenant 5% CO 2 . Elles sont ensuite traitées selon un gradient de concentrations (10 - 3 à 10 -6 M) d’analogues. Après 72 h une solution de MTT (bromure de 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tétrazolium) est ajoutée et l’incubation est poursuivie pendant 4 h à 37°C. Les cristaux formés sont ensuite dissous avec une solution DMSO/EtOH (1:1). La mesure de la survie cellulaire est effectuée au spectrophotomètre à 540 nm. Les résultats obtenus sont illustrés à la . Il ressort de cette figure que les composés MAM-1, MAM-2, AMFA et M6P ne sont pas cytotoxiques sur les deux lignées cellulaires même à des concentrations élevées. 2/ Affinité des analogues MAM-1 et MAM-2 pour le RM6P-CI Les analogues MAM-1 et MAM-2 ont été évalués pour leur affinité pour le récepteur RM6P-CI en comparaison avec l’AMFA et le M6P. Comme déjà indiqué, l’affinité désigne l’intensité de l’interaction des analogues du M6P pour le RM6P-CI. Pour ce faire, un test basé sur la compétition d’interaction avec le RM6P-CI est réalisé selon le protocole décrit ci-dessous. Protocole expérimental : Des plaques de 96 puits (Maxisorp Nunc) sont incubées une nuit à 4°C avec 200 µL de PM6P (pentamannose 6-phosphate) à la concentration de 200 µg.mL -1 , dans le tampon carbonate (NaHCO 3 /Na 2 CO 3 0,1M, pH 9.6). Le lendemain, la solution contenant le PM6P résiduel est écartée et les puits sont saturés, pendant 1 h à température ambiante, avec 360 µL gélatine 1% ( Type A from Porcine Skin ) diluée dans PBS (1,9 mM NaH 2 PO 4 , 8,1 mM Na 2 PO 4 et 154 mM NaCl, pH 7.4). Les puits sont ensuite rincés 5 fois par PBS additionné de 0,2% gélatine. Tous les lavages ainsi que les dilutions sont réalisés dans PBS additionné de 0,2% gélatine. Les composés à tester (MAM-1, MAM-2, AMFA et M6P) aux différentes concentrations (de 10 - 3 à 10 -6 M) sont pré-incubés en présence du RM6P-CI préalablement biotinylé (RM6P b) (2,5 µg.mL -1 ) pendant 20 min, puis 200 µL du mélange sont incubés dans les puits pendant 2 h, à température ambiante. Après 3 lavages, les puits sont incubés pendant 1 h avec une solution 3.10 -8 M de streptavidine-peroxydase. Après 3 autres lavages, 200 µL de solution contenant 1 mg.mL -1 OPD ( o -phenylènediamine et 1 µL 30% H 2 O 2 .mL -1 dans tampon citrate pH 5,0) est ajoutée. Après 20 min d’incubation dans l’obscurité et à température ambiante, les densités optiques sont mesurées à 450 nm. Les résultats obtenus sont illustrés à la . Les données indiquent de très bonnes affinités de MAM-1, MAM-2 et AMFA correspondant à des concentrations inhibitrices à 50% (IC 50 ) de 3,2.10 -5 M, 3,0.10 -5 M, 4,5.10 -5 M respectivement. Par comparaison l’affinité du M6P est de 2,4.10 -5 M dans ces mêmes expériences. 3 / Adsorption des analogues MAM-1 et MAM-2 sur l’hydroxyapatite La méthode repose sur le dosage inverse de la quantité d’analogues non liés à l’hydroxyapatite, par analyse RMN 31 P ou 1 H. Pour cela, deux tubes sont préparés contenant une quantité égale d’analogues. Dans l’un, une quantité définie d’hydroxyapatite est introduite au préalable et les deux tubes sont ensuite placés sous agitation. Après centrifugation, un volume égal du surnageant de chaque tube est prélevé et une quantité définie d’étalons est rajoutée en complément lors du conditionnement pour l’analyse RMN. Pour chaque tube, l’aire des signaux correspondant aux analogues et celle de l’étalon sont mesurées et le rapport des deux aires est effectué. La capacité d’adsorption des analogues MAM-1, MAM-2, AMFA et du M6P est évaluée selon ce procédé et comparée à celles de composés thérapeutiques commerciaux utilisés dans le cadre du traitement de maladies osseuses, à savoir le zolédronate et l’acide médronique. Les résultats obtenus sont illustrés à la . Il ressort de cette figure que l’analogue MAM-1 se lie totalement à l’hydroxyapatite comme les dérivés bisphosphonates thérapeutiques de l’art antérieur (le zolédronate et l’acide médronique). Ces résultats sont donc encourageants et prometteurs quant à la capacité des conjugués de l’invention comprenant de tels analogues du M6P de traiter efficacement des pathologies osseuses. En effet, même si des dérivés bisphosphonates ont été précédemment utilisés pour le traitement de pathologies osseuses, rien ne laissait supposer à l’homme de l’art qu’un analogue du M6P de formule (II) avec un groupement X tel que précédemment défini permettrait de conférer une double capacité d’interaction, à la fois au niveau du RM6P-CI mais également au niveau de l’HA. Les composés M6P, AMFA et MAM-2 quant à eux démontrent une capacité d’adsorption à l’HA nettement inférieure aux dérivés bisphosphonates, avec une valeur proche de 30 % pour le MAM-2. Exemple 4 : Evaluation biologique des conjugués de l’invention Les conjugués testés dans cet exemple sont ceux précédemment décrits dans le tableau 2. 1/ Évaluation de la cytotoxicité des conjugués Myo -MAM-1 et Myo -MAM-2 La cytotoxicité des conjugués Myo-MAM-1, Myo-MAM-2 de l’invention de formule (I) et du conjugué Myo-AMFA a été évaluée en comparaison avec l’enzyme lysosomale seule Myo sur des fibroblastes humains sains, selon le même protocole que celui décrit dans l’exemple 3. Les cellules ont été incubées avec des concentrations croissantes (100-1000 ng/mL) de conjugués pendant 72 h. Les résultats obtenus sont illustrés à la . Les conjugués Myo-MAM-1, Myo-MAM-2 et Myo-AMFA montrent leur innocuité sur les fibroblastes humains. 2 / Affinité des conjugués Infli-MAM-1 et Infli-MAM-2 pour le RM6P-CI Les conjugués Infli-MAM-1 et Infli-MAM-2 de l’invention de formule (I) et le conjugué Infli-AMFA ont été évalués pour leur affinité pour le récepteur RM6P-CI selon le même protocole que celui décrit dans l’exemple 3. Les résultats obtenus sont illustrés à la . Il est intéressant de constater que le greffage des analogues MAM-1 et MAM-2 de l’invention et de l’analogue AMFA à l’Infliximab permet d’obtenir un anticorps affin pour le RM6P-CI alors que l’infliximab ne présente pas d’affinité, en accord avec l’absence de groupement M6P dans sa structure. L’affinité des conjugués Infli-AMFA, Infli-MAM-1 et infli-MAM-2 est comparable pour l’interaction avec le RM6P-CI ce qui indique que l’addition de plusieurs analogues bispécifiques de type MAM-1 ou MAM-2 permet avantageusement de créer une affinité 10 fois supérieure à celle du M6P. 3 / A dsorption des conjugués Infli-MAM-1, Infli-MAM-2 sur l ’hydroxyapatite Les conjugués Infli-MAM-1, Infli-MAM-2 de l’invention de formule (I) et le conjugué Infli-AMFA ont été évalués pour leur capacité d’adsorption sur l’hydroxyapatite selon le même protocole que celui décrit dans l’exemple 3. Les résultats obtenus sont illustrés à la . Les résultats démontrent qu’environ 28% de l’infliximab s’adsorbe naturellement à l’hydroxyapatite (HA). Le greffage des analogues MAM-1 et MAM-2 à l’anticorps permet d’augmenter de façon significative l’adsorption à HA. Les 4,6 MAM-1 et 3,9 MAM-2 greffés à l’infliximab permettent d’augmenter de 20% et 25% respectivement l’adsorption de l’infliximab à l’HA. Les adsorptions équivalentes des Infli-MAM-1 et Infli-MAM-2 pour l’HA s’expliquent par l’effet de multivalence généré par la présence de 4,6 et 3,9 MAM greffés sur l’infliximab puisque lorsque le MAM-2 est considéré seul (c’est-à-dire quand il n’est pas couplé à un produit d’intérêt Y) il a une très faible affinité pour l’HA (voir exemple 3 ). Il est également intéressant de constater que le greffage de l’analogue AMFA à l’anticorps ne permet absolument pas d’augmenter l’adsorption de l’Infliximab à l’HA mais au contraire a pour effet de la diminuer. Cela démontre encore une fois l’intérêt des analogues (II) de l’invention qui confèrent aux conjugués (I) de l’invention des propriétés particulièrement avantageuses. La présente divulgation ne se limite pas aux exemples décrits ci-avant, seulement à titre d’exemple, mais elle englobe toutes les variantes que pourra envisager l’homme de l’art dans le cadre de la protection recherchée. Conjugué caractérisé en ce qu’il présente la formule générale (I) suivante (I) dans laquelle : X représente un groupement bisphosphonate un groupement hydroxybisphosphonate un groupement halogénobisphosphonate avec T représentant un halogène Cl ou F, un groupement malonate un groupement phosphonoacétate avec Z représentant indépendamment l’un de l’autre H; un métal alcalin choisi parmi Na, Li ou K ; un ammonium NH 4 ; n est un entier allant de 0 à 2 ; L 1 représente un radical choisi dans le groupe comprenant *-O-N=**, et avec * indiquant le point d’attachement de L 1 au groupe (O-CH 2 -CH 2 ) n et ** indiquant le point d’attachement de L 1 à Y 1 ; n 1 est un entier allant de 1 à 1000, de préférence de 1 à 20, et plus préférentiellement encore de 1 à 10, Y 1 représente un produit d’intérêt Y, ledit produit d’intérêt Y étant choisi dans le groupe comprenant des protéines, notamment des anticorps et des enzymes lysosomales, des nanoparticules, des composés cytotoxiques et des marqueurs pour l’imagerie médicale, Y 1 formant n 1 liaison(s) covalente(s) avec L 1 . Conjugué selon la revendication 1, caractérisé en ce que Y 1 est représenté par le groupement L 2 -Y’ 1 dans lequel Y’ 1 représente le produit d’intérêt Y lié à L 1 par l’intermédiaire du radical L 2 avec L 2 choisi dans le groupe comprenant =CH- , -NH- et -S-, ledit Y 1 pouvant ainsi être représenté par =CH-Y’ 1 , -NH-Y’ 1 et -S-Y’ 1 . Conjugué selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que n 1 est un entier égal à 1 et en ce que ledit conjugué de formule (I) est choisi dans le groupe comprenant : et avec X, n et Y’ 1 tels que définis à la revendication 1 ou 2. Conjugué selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que Y 1 représente un anticorps Y, ou un fragment d’anticorps Y comprenant au moins un domaine d’interaction avec l’antigène, ou une enzyme lysosomale Y. Conjugué selon la revendication 4, caractérisé en ce que Y 1 représente un anticorps Y qui est une immunoglobuline de type IgG, en particulier de sous-type lgG1, lgG2, lgG3 ou lgG4, ou une immunoglobuline de type IgE, IgD, IgA ou IgM. Conjugué selon la revendication 4, caractérisé en ce que Y 1 représente une enzyme lysosomale Y dont l’expression est altérée et impliquée dans les mucopolysaccharidoses pour lesquelles la croissance osseuse est altérée. Conjugué selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu’il présente une affinité, mesurée par la concentration inhibant de 50% (IC 50 ), vis-à-vis du récepteur du mannose 6-phosphate cation indépendant (RM6P-CI) allant de 10 -4 M à 10 -9 M, et de préférence allant de 10 -5 M à 10 -8 M. Conjugué selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce qu’il présente une capacité d’adsorption sur l’hydroxyapatite présente dans le tissu osseux. Procédé de préparation d’un conjugué de formule (I) tel que défini à l’une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que l’on fait réagir : - un produit d’intérêt Y avec - n 1 composé(s) répondant à la formule générale (II) (II) dans laquelle X, n et n 1 sont tels que définis à la revendication 1, L est un groupe chimique réactif choisi dans le groupe comprenant -O-NH 2 , et ledit groupe L du composé (II) formant n 1 liaison(s) covalente(s) avec n 1 groupe(s) fonctionnel(s) porté(s) par ledit produit d’intérêt Y. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu’elle comprend : - un conjugué tel que défini à l’une quelconque des revendications 1 à 8, - au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable. Conjugué tel que défini à l’une quelconque des revendications 1 à 8 ou composition pharmaceutique selon la revendication 10, pour une utilisation comme médicament dans le traitement des pathologies osseuses et/ou des pathologies affectant à la fois le tissu osseux et les tissus mous. Conjugué ou composition pharmaceutique pour une utilisation selon la revendication 11, caractérisée en ce que la pathologie est choisie dans le groupe comprenant l’ostéoporose, un cancer de l’os, une maladie de surcharge lysosomale. Conjugué tel que défini à l’une quelconque des revendications 1 à 8 ou composition pharmaceutique selon la revendication 10, pour une utilisation dans une méthode de diagnostic. Conjugué ou composition pharmaceutique pour une utilisation selon l’une quelconque des revendications 11 à 13 caractérisée en ce que le conjugué ou la composition pharmaceutique est sous une forme adaptée pour une administration par voie parentérale, intraveineuse ou sous-cutanée.