Brevet FR3147278A1 — publié le 20241004

La présente invention porte sur des variantes d’ingénierie du polypeptide de Stéfine A de liaison au TNFR2, des polynucléotides codant les variantes d’ingénierie du polypeptide de Stéfine A de liaison au TNFR2, des cellules exprimant les variantes polypeptidiques, des préparations pharmaceutiques des variantes polypeptidiques, et des utilisations des variantes polypeptidiques dans le traitement de diverses affections humaines, y compris inflammatoires, l’auto-immunité et les cancers. POLYPEPTIDES DE LIAISON AU TNFR2 ET PROCEDES D'UTILISATION Le maintien du contrôle des réponses immunitaires à médiation cellulaire et humorales est une dimension importante de l'activité d'un système immunitaire sain. La régulation anormale des réactions immunitaires induites par les lymphocytes T et les lymphocytes B a été associée à un large éventail de maladies humaines, car l'augmentation inappropriée d'une réponse immunitaire contre divers autoantigènes (de l’anglais « self antigens ») et antigènes étrangers joue un rôle causal dans des pathologies telles que les troubles auto-immuns, l'asthme, les réactions allergiques, maladie du greffon contre l'hôte (GvHD, de l’anglais « graft versus host disease »), le rejet d’un greffon de transplantation et une variété d'autres troubles immunologiques incluant le cancer. Ces maladies sont médiées par les lymphocytes T et B qui font preuve d’une réactivité contre les autoantigènes et ceux dérivés de sources non menaçantes, telles que les allergènes ou les allogreffes de transplantation. Les lymphocytes T régulateurs (Tregs) ont évolué pour inhiber l'activité des cellules immunitaires qui réagissent de manière croisée avec les protéines du complexe majeur d'histocompatibilité (CMH) « du soi » (de l’anglais « self ») et d'autres antigènes bénins. Les populations de Tregs les mieux connues sont les Tregs CD4+, CD25+, FoxP3+ et les Tregs CD17+. Les sous-types 1 et 2 du récepteur du facteur de nécrose tumorale (TNFR, de l’anglais « Tumor Necrosis Factor Receptor ») ont été identifiés spécifiquement sur la surface des Tregs. L'activation du TNFR1 par le TNF-alpha soluble amplifie la cascade de signalisation par la caspase conduisant à l'apoptose des Treg. D'autre part, l'activation du TNFR2 par le TNF-alpha principalement lié à la membrane induit une signalisation par la voie de signalisation à protéine kinase activée par les mitogènes (MAPK, de l’anglais « Mitogen Activated Protein Kinase »), qui orchestre la transcription médiée par TRAF2/3 et NF-κB des gènes qui favorisent la prolifération cellulaire et échappent à l'apoptose. L'importance du rôle du TNFR2 dans la prolifération et la fonction des Treg a été démontrée dans diverses études. Les souris déficientes en TNFR2 ont montré des nombres réduits de Tregs thymiques et périphériques (2013_Chen X, et al. PMID: 23277487), et les Tregs TNFR2 -/- n'ont pas été capables de contrôler la réponse inflammatoire in vivo (2008_Van Mierlo GJ, et al. PMID: 18292492). Chez l'humain, il a été démontré que les Treg expriment un niveau plus élevé de TNFR2 que les lymphocytes effecteurs T (2013_Okubo Y, et al. PMID: 24193319 & 2002_ Annunziato F, et al. PMID: 12163566) et les Tregs TNFR2+ ont manifesté la suppression la plus puissante de la prolifération et de la production de cytokines des lymphocytes répondeurs T cocultivés (en anglais « co-cultured T-responder cells ») (2010_Chen X, et al. PMID: 20127680). De plus, il a été démontré que TNFR2 joue un rôle dans la carcinogenèse et la croissance tumorale en médiant les réponses TNF dans les cellules immunosuppressives, permettant l'évasion immunitaire et le développement tumoral (Sheng Y., et al. doi: 10.3389/fimmu.2018.01170). De plus, dans les maladies auto-immunes affectant le système nerveux central (SNC), en particulier la sclérose en plaques (SEP), des lymphocytes pathogènes sont générés en périphérie pour infiltrer le SNC et provoquer des inflammations locales et une démyélinisation. La démyélinisation est l'endommagement de la couche protectrice (gaine de myéline) qui entoure les fibres nerveuses dans le cerveau. Protéger contre la démyélinisation ou l'inverser sont des stratégies explorées pour lutter contre la SEP. De manière intéressante, plusieurs études ont rapporté l'implication du TNFR2 dans la neuroprotection. Par exemple, dans un modèle murin de démyélinisation induit par la cuprizone, il a été démontré que le TNFR2 est essentiel à la régénération des oligodendrocytes, les cellules principalement responsables du maintien et de la génération de la gaine de myéline qui entoure les axones, alors que la signalisation du TNF via TNFR1 favorisait la démyélinisation des nerfs (2001_HA Arnett, et al. PMID: 11600888). En raison de son rôle dans la direction de la survie et de la croissance des cellules, le TNFR2 représente une cible attrayante pour le traitement de maladies telles que les maladies auto-immunes, la GvHD, le rejet d'allogreffe, les réactions allergiques, l’asthme et le cancer. AFFIMER®, développé par Avacta Life Sciences Limited, est une petite molécule protéique stable d’ingénierie basée sur une protéine stéfine A (en anglais « stefin A »), qui est une protéine in vivo. AFFIMER® comprend deux courtes séquences peptidiques ayant une séquence aléatoire et une séquence N-terminale, et est capable de se lier à un matériau cible avec une affinité et une spécificité élevées d'une manière similaire à un anticorps monoclonal. AFFIMER® montre une affinité et une spécificité de liaison remarquablement améliorées par rapport à la bibliothèque de peptides libres, et a une très petite taille et une stabilité élevée par rapport aux anticorps, et fait donc l'objet d'une grande attention en tant que plateforme pharmaceutique alternative de prochaine génération pour remplacer les anticorps (Brevets US n° 9447170, 8853131, etc.). La présente invention concerne des polypeptides qui se lient spécifiquement au TNFR2 par ingénierie de la protéine naturelle stéfine A, aboutissant au développement de polypeptides AFFIMER® capables de se lier au TNFR2 avec d’excellentes affinité et spécificité. Résumé Dans un aspect, il est proposé un polypeptide d’ingénierie qui se lie spécifiquement au TNFR2 avec une Kd de 1×10 -6 M ou moins, le polypeptide d’ingénierie étant une variante d'une protéine Stéfine A. Dans un autre aspect, il est proposé une protéine de fusion comprenant un dimère, un trimère ou un tétramère des polypeptides d’ingénierie de l'invention, comprenant optionnellement un ou plusieurs lieurs. Dans un autre aspect, il est proposé une protéine de fusion comprenant un ou plus des polypeptides d’ingénierie de l'invention liés à un groupement thérapeutique ou diagnostique. Dans un autre aspect, il est fourni un polynucléotide ou un ensemble de polynucléotides codant pour le polypeptide d’ingénierie ou la protéine de fusion de l'invention. Dans un aspect, il est proposé un véhicule de distribution comprenant le polynucléotide de l'invention. Dans un autre aspect, il est proposé un plasmide ou un minicercle comprenant le polynucléotide de l'invention. Dans un autre aspect, il est proposé un ARN messager (ARNm) comprenant un cadre de lecture ouvert codant pour le polypeptide d’ingénierie de l'invention. Dans un aspect, il est proposé une nanoparticule lipidique, optionnellement une nanoparticule lipidique cationique, comprenant l'ARNm de l'invention. Dans un autre aspect il est proposé une composition pharmaceutique comprenant le polypeptide d’ingénierie, la protéine de fusion ou le véhicule de distribution selon l'invention, et optionnellement un excipient pharmaceutiquement acceptable. Dans un aspect, il est proposé un conjugué comprenant le polypeptide d’ingénierie ou la protéine de fusion selon l'invention liée à un groupement pharmacologiquement actif. Dans un autre aspect, il est fourni un procédé comprenant l'administration à un sujet de la composition pharmaceutique de l'invention. Dans un aspect il est proposé un polypeptide d’ingénierie, une protéine de fusion ou un véhicule de distribution de l'invention pour utilisation en tant que médicament. Dans un autre aspect, il est proposé un polypeptide d’ingénierie qui entre en concurrence pour la liaison au TNFR2 avec un polypeptide d’ingénierie selon l'invention. Dans un autre aspect, il est proposé un polypeptide d’ingénierie qui se lie au même épitope sur TNFR2 que celui d'un polypeptide d’ingénierie selon l'invention. Fig. 1 Schéma de la stratégie de sélection pour la campagne de sélection du TNFR2 humain. Les deux bibliothèques ont subi des sélections par solution et passives. Une stringence a été introduite en diminuant la concentration en hTNFR2 au fur et à mesure de la progression des tours et en augmentant le nombre d'étapes de lavage entre le tour 1 (5x PBS/0,1 % Tween 20, 2x PBS) et le tour 2 (15x PBS/0,1 % Tween 20, 2x PBS). (PBS, de l’anglais « Phosphate-buffered saline », soit « solution saline tamponnée ») Pour les sélections passives à l'aide de la bibliothèque de phages AFFIMER® de type 3 propriétaire d'Avacta (Brevet US n° 9.932.575), les approches par désélection et par concurrence ont été simultanément explorées. Pour l'approche de désélection, la concentration en Fc au tour n+1 était la concentration en hTNFR2 au tour n. Pour l'approche par concurrence, la concentration en Fc était de 10 fois l'excès molaire de la concentration en hTNFR2 spécifiée dans le tour donné. Pour les sélections passives à l'aide de la bibliothèque de phages AFFIMER® de type 1 propriétaire d'Avacta (Brevet US n° 8 841 491), l'approche par désélection a été exclusivement réalisée et un tour 4 a été introduit puisque le dépistage à un stade précoce des résultats du tour 3 indiquait une diversité et un taux de succès (en anglais « hit rate ») élevés. Pour les sélections par solution, les deux bibliothèques ont subi l'approche par concurrence pour réduire l'enrichissement des polypeptides AFFIMER® présentés sur un phage de liaison au Fc. On a alterné des billes recouvertes de streptavidine et de neutravidine entre les tours pour réduire l'enrichissement en peptides présentés sur les phages de liaison à la streptavidine et/ou à la neutravidine ; Fig. 2 Liaison du polypeptide AFFIMER® aux cellules Expi293F™ surexprimant le TNFR2 humain ; Fig. 3 Compilation des données des expériences de titrage. % d'inhibition à 3 µM et IC50 pour les meilleurs bloqueurs ; Fig. 4 Résultats SEAP en double, classement de 20 clones ; Fig. 5 Réactivité croisée de clones hTNFR2 AFFIMER® avec le TNFR2 de cynomolgus, en triple exemplaire. Description détaillée AFFIMER® Les polypeptides de stéfine englobent un sous-groupe de protéines dans la superfamille de la cystatine, une famille qui englobe des protéines qui contiennent de multiples séquences de type cystatine. Le sous-groupe Stéfine (en anglais « Stefin ») de la famille des cystatines inclut des protéines à domaine unique relativement petites (environ 100 acides aminés). Elles ne subissent aucune modification post-traductionnelle connue et sont dépourvues de liaisons disulfure, ce qui suggère qu'elles seront capables de se replier de manière identique dans une large gamme d'environnements extracellulaires et intracellulaires. La Stéfine A elle-même est une protéine monomérique, à chaîne unique et à domaine unique de 98 acides aminés. La structure de Stéfine A a été déterminée, facilitant la mutation rationnelle de la Stéfine A en le polypeptide AFFIMER®. La seule activité biologique connue des cystatines est l'inhibition de l'activité des cathepsines, ce qui a permis de tester de manière exhaustive l'activité biologique résiduelle des protéines d’ingénierie. Un « polypeptide AFFIMER® » (également appelé ici une « protéine AFFIMER® ») fait référence à une petite protéine très stable qui est une variante d’ingénierie d'un polypeptide de Stéfine. Les protéines AFFIMER® présentent deux boucles peptidiques et une séquence N-terminale qui peuvent toutes être randomisées pour se lier aux protéines cibles souhaitées avec une affinité et une spécificité élevées, d’une manière similaire aux anticorps monoclonaux. La stabilisation des deux peptides par l'échafaudage protéique de la Stéfine A limite les conformations possibles que les peptides peuvent prendre, augmentant l'affinité et la spécificité de liaison par rapport aux bibliothèques de peptides libres. Ces protéines de liaison non anticorps d’ingénierie sont conçues pour imiter les caractéristiques de reconnaissance moléculaire des anticorps monoclonaux dans différentes applications. Des variations d'autres parties de la séquence polypeptidique de Stéfine A peuvent être effectuées, de telles variations améliorant les propriétés de ces réactifs d'affinité, permettant par exemple une augmentation de la stabilité, de les rendre robustes sur une plage de températures et de pH, etc. Dans certains modes de réalisation, un polypeptide AFFIMER® inclut une séquence dérivée de Stéfine A, partageant une identité substantielle avec une séquence de type sauvage de Stéfine A, telle que la Stéfine A humaine. Il apparaîtra à une personne du métier que des modifications peuvent être apportées à la séquence d'échafaudage sans s'écarter de la divulgation. En particulier, un polypeptide AFFIMER® peut avoir une séquence d'acides aminés qui est au moins à 25%, 35%, 45%, 55% ou 60% d'identité avec les séquences correspondantes à la Stéfine A humaine, par exemple au moins 70%, au moins 80 %, au moins 85 %, au moins 90 %, au moins 92 %, au moins 94 %, au moins 95 % identiques, par ex. lorsque les variations de séquence n'affectent pas négativement la capacité de l'échafaudage à se lier à la cible souhaitée (telle que TFNR2), et par ex. qui ne restaurent pas ou ne génèrent pas de fonctions biologiques telles que celles qui sont possédées par la Stéfine A de type sauvage mais qui sont abolies dans les modifications mutationnelles décrites ici. Un « agent AFFIMER® » fait référence à un polypeptide qui inclut une séquence polypeptidique AFFIMER® et toute(s) autre(s) modification(s) (par ex. conjugaison, modifications post-traductionnelles, etc.) de manière à représenter une protéine thérapeutiquement active destinée à être délivrée à un individu. Un « conjugué lié à AFFIMER® » fait référence à un agent AFFIMER® ayant au moins un groupement qui lui est conjugué par l’intermédiaire d’une conjugaison chimique autre que par la formation d'une liaison peptidique contiguë via le C-terminus ou N-terminus de la partie polypeptidique de l’agent AFFIMER® contenant la séquence polypeptidique d’AFFIMER®. Un conjugué lié à AFFIMER® peut être un « conjugué AFFIMER®-médicament », qui fait référence à un agent AFFIMER® incluant au moins un groupement pharmacologiquement actif conjugué à celui-ci. Un conjugué lié à AFFIMER® peut également être un « conjugué AFFIMER®-étiquette », qui fait référence à un agent AFFIMER® incluant au moins un groupement détectable (par ex. une étiquette détectable) conjugué à celui-ci. Un « polynucléotide AFFIMER® codé » fait référence à une construction d'acide nucléique qui, lorsqu'elle est introduite dans et exprimée par des cellules, produit un agent AFFIMER® envisagé. TNFR2 Le récepteur 2 du facteur de nécrose tumorale (« TNFR2 », de l’anglais « Tumour necrosis factor receptor 2 »), ainsi que le récepteur 1 du facteur de nécrose tumorale (TNFR1), est un récepteur lié à la membrane de Type 1 qui se lie au facteur de nécrose tumorale alpha (« TNFα »). TNFR2, également connu sous le nom de p75, TNF Receptor Superfamily Member 1B ou CD120b, est codé chez l’humain sous le nom de TNFRSF1B qui exprime une protéine de 48 kDa de 461 acides aminés de longueur (UniProt P20333). Chez la souris, la protéine TNFR2 a une longueur de 474 acides aminés et une masse de 50 kDa. Un « agent TFNR2 AFFIMER® » fait référence à un agent AFFIMER® qui comprend au moins un polypeptide AFFIMER® qui se lie au TFNR2, en particulier le TFNR2 humain et optionnellement le TNFR2 de cynomolgus, avec une constante de dissociation (Kd) d'au moins 10 -6 M. Dans certains modes de réalisation, l'agent TFNR2 AFFIMER® lie le TFNR2 à un Kd de 1×10−7M ou moins, un Kd de 1×10−8M ou moins, un Kd de 1×10−9M ou moins, ou un Kd de 1×10−10M ou moins. Il doit être compris que les termes « polypeptide TFNR2 AFFIMER® », « protéine TFNR2 AFFIMER® » et « variante d’ingénierie de polypeptide de Stéfine A de liaison au TFNR2 » sont utilisés ici de manière interchangeable. Ainsi, un « polypeptide TFNR2 AFFIMER® » est un polypeptide d’ingénierie qui se lie spécifiquement au TFNR2 avec un Kd de 1 x 10 -6 M ou moins, dans lequel le polypeptide d’ingénierie est une variante d'une protéine Stéfine A. Polypeptides Les polypeptides (qui incluent les peptides et les protéines) sont des polymères d'acides aminés de n'importe quelle longueur. Le polymère peut être linéaire ou ramifié, il peut comprendre des acides aminés modifiés, et il peut être interrompu par des acides non aminés. Les termes englobent également un polymère d'acides aminés qui a été modifié naturellement ou par intervention ; par exemple, par formation de liaisons disulfure, glycosylation, lipidation, acétylation, phosphorylation, ou toute autre manipulation ou modification, telle qu’une conjugaison avec un composant de marquage. Sont également inclus dans la définition, par exemple, des polypeptides contenant au moins un analogue d'un acide aminé (y compris, par exemple, des acides aminés non naturels), ainsi que d'autres modifications connues dans le métier. Les acides aminés (également appelés ici résidus d'acides aminés) participent à une ou plus liaisons peptidiques d'un polypeptide. De manière générale, les abréviations utilisées ici pour désigner les acides aminés sont basées sur les recommandations de la Commission IUPAC-IUB sur la Nomenclature Biochimique (voir Biochemistry (1972) 11:1726-1732). Par exemple, Met, Ile, Leu, Ala et Gly représentent des "résidus" de méthionine, isoleucine, leucine, alanine et glycine, respectivement. Par résidu, on entend un radical dérivé de l'acide α-aminé correspondant en éliminant la partie OH du groupe carboxyle et la partie H du groupe α-amino. Le terme "chaîne latérale d'acide aminé" est la partie d'un acide aminé à l'exclusion de la partie -CH(NH2)COOH, tel que défini par K. D. Kopple, "Peptides and Amino Acids", W. A. Benjamin Inc., New York et Amsterdam, 1966, pages 2 et 33. Pour la plupart, les acides aminés utilisés dans l'application de cette divulgation sont les acides aminés d’occurrence naturelle trouvés dans les protéines, ou les produits anaboliques ou cataboliques d’occurrence naturelle de tels acides aminés qui contiennent des groupes amino et carboxyle. Des chaînes latérales d'acides aminés particulièrement appropriées incluent des chaînes latérales sélectionnées parmi celles des acides aminés suivants : glycine, alanine, valine, cystéine, leucine, isoleucine, sérine, thréonine, méthionine, acide glutamique, acide aspartique, glutamine, asparagine, lysine, arginine, proline, histidine, phénylalanine, tyrosine et tryptophane, et les acides aminés et analogues d'acides aminés qui ont été identifiés comme constituants des parois cellulaires bactériennes peptidylglycanes. Les résidus d'acides aminés ayant des "chaînes latérales basiques" incluent Arg, Lys et His. Les résidus d'acides aminés ayant des "chaînes latérales acides" incluent Glu et Asp. Les résidus d'acides aminés ayant des "chaînes latérales polaires neutres" incluent Ser, Thr, Asn, Gln, Cys et Tyr. Les résidus d'acides aminés ayant des "chaînes latérales non polaires neutres" incluent Gly, Ala, Val, Ile, Leu, Met, Pro, Trp et Phe. Les résidus d'acides aminés ayant des "chaînes latérales aliphatiques non polaires" incluent Gly, Ala, Val, Ile et Leu. Les résidus d'acides aminés ayant des "chaînes latérales hydrophobes" incluent Ala, Val, Ile, Leu, Met, Phe, Tyr et Trp. Les résidus d'acides aminés ayant de "petites chaînes latérales hydrophobes" incluent Ala et Val. Les résidus d'acides aminés ayant des "chaînes latérales aromatiques" incluent Tyr, Trp et Phe. Les résidus d'acides aminés comprennent en outre des analogues, des dérivés et des congénères de tout acide aminé spécifique auquel il est ici fait référence, tel par exemple, le polypeptide AFFIMER® sujet (en particulier s'il est généré par synthèse chimique) peut inclure un analogue d'acide aminé tel que, par exemple, la cyanoalanine, la canavanine, l’acide djenkolique, la norleucine, la 3-phosphosérine, l’homosérine, la dihydroxy-phénylalanine, le 5-hydroxytryptophane, la 1-méthylhistidine, la 3-méthylhistidine, l’acide diaminiopimélique, l’ornithine ou l’acide diaminobutyrique. D'autres métabolites ou précurseurs d'acides aminés d’occurrence naturelle ayant des chaînes latérales qui conviennent ici seront reconnus par les personnes du métier et sont inclus dans la portée de la présente divulgation. Sont également inclus les stéréoisomères (D) et (L) de ces acides aminés lorsque la structure de l'acide aminé admet des formes stéréoisomères. La configuration des acides aminés et des résidus d'acides aminés dans ce document est désignée par les symboles appropriés (D), (L) ou (DL), de plus lorsque la configuration n'est pas désignée, l'acide aminé ou le résidu peut avoir la configuration (D), (L) ou (DL). On notera que la structure de certains des composés de cette divulgation comprend des atomes de carbone asymétriques. Il doit être compris en conséquence que les isomères résultant d'une telle asymétrie sont inclus dans la portée de cette divulgation. De tels isomères peuvent être obtenus sous une forme sensiblement pure par des techniques classiques de séparation et par synthèse stériquement contrôlée. Aux fins de la présente demande, sauf indication contraire expresse, un acide aminé nommé doit être interprété comme comprenant à la fois les stéréoisomères (D) ou (L). Les termes "identique" ou pourcentage "d'identité" dans le contexte de deux ou plus acides nucléiques ou polypeptides, font référence à deux ou plus séquences ou sous-séquences qui sont les mêmes ou ont un pourcentage spécifié de nucléotides ou de résidus d'acides aminés qui sont les mêmes, lorsqu'ils sont comparés et alignés (en introduisant des intervalles, si nécessaire) pour une correspondance maximale, sans tenir compte des substitutions conservatrices d'acides aminés dans le cadre de l'identité de séquence. Le pourcentage d'identité peut être mesuré en utilisant un logiciel ou des algorithmes de comparaison de séquences ou par inspection visuelle. Divers algorithmes et logiciels qui peuvent être utilisés pour obtenir des alignements de séquences d'acides aminés ou de nucléotides sont bien connus dans le métier. Ceux-ci incluent, mais sans s'y limiter, BLAST, ALIGN, Megaalign, BestFit, GCG Wisconsin Package et des variantes de ceux-ci. Dans certains modes de réalisation, deux acides nucléiques ou polypeptides de l'invention sont sensiblement identiques, ce qui signifie qu'ils ont au moins 70 %, au moins 75 %, au moins 80 %, au moins 85 %, au moins 90 %, et dans certains modes de réalisation au moins 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % d'identité avec des résidus d'acides aminés ou de nucléotides, lorsqu'ils sont comparés et alignés pour une correspondance maximale, tels que mesurés en utilisant un algorithme de comparaison de séquences ou par inspection visuelle. Dans certains modes de réalisation, une identité existe sur une région des séquences d'acides aminés qui est d'au moins environ 10 résidus, d'au moins environ 20 résidus, d'au moins environ 40-60 résidus, d'au moins environ 60-80 résidus de long ou toute valeur entière entre ceux-ci. Dans certains modes de réalisation, une identité existe sur une région plus longue que 60-80 résidus, comme au moins environ 80-100 résidus, et dans certains modes de réalisation, les séquences sont sensiblement identiques sur toute la longueur des séquences comparées, comme la région codante d'une protéine cible ou d'un anticorps. Dans certains modes de réalisation, une identité existe sur une région des séquences nucléotidiques qui est d'au moins environ 10 bases, d'au moins environ 20 bases, d'au moins environ 40-60 bases, d'au moins environ 60-80 bases de long ou toute valeur entière entre ceux-ci. Dans certains modes de réalisation, une identité existe sur une région plus longue que 60-80 bases, comme au moins environ 80-1000 bases ou plus, et dans certains modes de réalisation, les séquences sont sensiblement identiques sur toute la longueur des séquences comparées, comme une séquence nucléotidique codant pour une protéine d’intérêt. Lors du calcul du pourcentage d'identité, tous les résidus définis comme « Xaa » ou « X » dans une séquence de référence sont inclus dans le calcul du pourcentage d'identité, c'est-à-dire que tout acide aminé à cette position dans une séquence de comparaison correspond à la séquence de référence. Une substitution conservatrice d'acide aminé est une substitution dans laquelle un résidu d'acide aminé est remplacé par un autre résidu d'acide aminé ayant une chaîne latérale similaire. Des familles de résidus d'acides aminés ayant des chaînes latérales similaires ont généralement été définies dans l'art, y compris des chaînes latérales basiques (par ex. lysine, arginine, histidine), des chaînes latérales acides (par ex. acide aspartique, acide glutamique), des chaînes latérales polaires non chargées (par ex. glycine, asparagine, glutamine, sérine, thréonine, tyrosine, cystéine), chaînes latérales non polaires (p. ex., alanine, valine, leucine, isoleucine, proline, phénylalanine, méthionine, tryptophane), chaînes latérales à ramification bêta (p. ex., thréonine, valine, isoleucine) et des chaînes latérales aromatiques (par ex. tyrosine, phénylalanine, tryptophane, histidine). Par exemple, la substitution d'une phénylalanine à une tyrosine est une substitution conservatrice. Généralement, les substitutions conservatrices dans les séquences des polypeptides, des protéines solubles et/ou des anticorps de la divulgation n'abrogent pas la liaison du polypeptide, de la protéine soluble ou de l'anticorps contenant la séquence d'acides aminés au site de liaison cible. Les procédés d'identification de substitutions conservatrices d'acides aminés qui n'éliminent pas la liaison sont bien connus dans le métier. Un polypeptide, une protéine soluble, un anticorps, un polynucléotide, un vecteur, une cellule ou une composition "isolé(e)" est un polypeptide, une protéine soluble, un anticorps, un polynucléotide, un vecteur, une cellule ou une composition qui se présente sous une forme non trouvée dans la nature. Les polypeptides, protéines solubles, anticorps, polynucléotides, vecteurs, cellules ou compositions isolé(e)s incluent ceux ou celles qui ont été purifiés à un degré tel qu'ils ne sont plus sous une forme dans laquelle ils se trouvent dans la nature. Dans certains modes de réalisation, un polypeptide, une protéine soluble, un anticorps, un polynucléotide, un vecteur, une cellule ou une composition qui est isolé(e) est sensiblement pur(e). Un matériel est considéré comme sensiblement pur s'il est pur à au moins 50 % (par ex. exempt de contaminants), au moins 60 %, au moins 70 %, au moins 80 %, au moins 90 % pur, au moins pur à 95 %, au moins pur à 98 %, ou au moins pur à 99 %. Un polypeptide de fusion (par ex. une protéine de fusion) est un polypeptide hybride exprimé par une molécule d'acide nucléique comprenant au moins deux cadres de lecture ouverts (par ex. à partir de deux molécules individuelles, par ex. deux gènes individuels). Un lieur (également appelé région lieuse) peut être inséré entre un premier polypeptide (par ex. des copies d'un polypeptide TFNR2 AFFIMER®) et un second polypeptide (par ex. un autre polypeptide AFFIMER®, un domaine Fc, un domaine de liaison de ligand, etc.). Dans certains modes de réalisation, un lieur est un lieur peptidique. Les lieurs ne doivent pas affecter négativement l'expression, la sécrétion ou la bioactivité des polypeptides. Dans certains modes de réalisation, les lieurs ne sont pas antigéniques et ne suscitent pas de réponse immunitaire. Un domaine transmembranaire (également appelé domaine TM) est une séquence qui peut être ajoutée à un polypeptide AFFIMER®, tel que par l'ajout d'une séquence polynucléotidique codant pour le domaine TM à la séquence polynucléotidique codant pour le polypeptide AFFIMER®, afin de s'assurer que l'AFFIMER® est retenu à la surface de la cellule qui l'exprime. Divers domaines TM sont disponibles et facilement utilisables avec le polypeptide AFFIMER®. Une « fusion AFFIMER®-anticorps » est une protéine de fusion qui comprend une portion de polypeptide AFFIMER® et une région variable d'un anticorps. Les fusions AFFIMER®-anticorps peuvent inclure des anticorps complets ayant, par exemple, au moins une séquence polypeptidique AFFIMER® attachée au C-terminus ou N-terminus d'au moins une de ses chaînes VH et/ou VL, par ex. au moins une chaîne de l'anticorps assemblé est une protéine de fusion avec un polypeptide AFFIMER®. Les fusions AFFIMER®-anticorps peuvent également comprendre au moins une séquence polypeptidique AFFIMER® en tant que partie d'une protéine de fusion avec un site de liaison à antigène ou une région variable d'un fragment d'anticorps. Un anticorps est une molécule d'immunoglobuline qui reconnaît et se lie spécifiquement à une cible, telle qu'une protéine, un polypeptide, un peptide, un glucide, un polynucléotide, un lipide ou une combinaison de l'un quelconque de tels éléments, par l’intermédiaire d’au moins un site de liaison à antigène, dans laquelle le site de liaison à antigène se situe généralement au sein de la région variable de la molécule d'immunoglobuline. Tel qu'il est utilisé ici, le terme « anticorps » englobe les anticorps polyclonaux intacts (entiers), les anticorps monoclonaux intacts, les fragments d'anticorps (tels que les fragments Fab, Fab', F(ab')2 et Fv), les anticorps Fv simple chaîne (scFv, de l’anglais « single chain Fv », soit « fragments variables simple chaîne ») à condition que ces fragments aient été formatés pour inclure un Fc ou autre domaine de liaison FcγRIII, les anticorps multispécifiques, les anticorps bispécifiques, les anticorps monospécifiques, les anticorps monovalents, les anticorps chimériques, les anticorps humanisés, les anticorps humains, les protéines de fusion comprenant un site de liaison à l’antigène d'un anticorps (formaté pour inclure un Fc ou autre domaine de liaison FcγRIII), les mimétiques d'anticorps, et toute autre molécule d'immunoglobuline modifiée comprenant un site de liaison à antigène pour autant que les anticorps présentent l'activité biologique souhaitée. L'anticorps peut appartenir à l'une des cinq grandes classes d'immunoglobulines : IgA, IgD, IgE, IgG et IgM, ou leurs sous-classes (isotypes) (par ex. IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 et IgA2), sur la base de l'identité de leurs domaines constants de chaîne lourde appelés alpha, delta, epsilon, gamma et mu. Dans certains modes de réalisation, la Fc est de non liaison (de l’anglais « null binding », c’est-à-dire ne se lie pas) à FcyR2b. Dans certains modes de réalisation, l'anticorps n'est pas un Fc d’IgG1. Une région variable d'un anticorps peut être une région variable d'une chaîne légère d'anticorps ou une région variable d'une chaîne lourde d'anticorps, soit seule, soit en combinaison. Généralement, la région variable des chaînes lourdes et légères inclut quatre régions de charpente (FR, de l’anglais « framework regions ») et trois régions déterminant la complémentarité (CDR, de l’anglais « complementarity determining regions »), également appelées régions hypervariables. Les CDR de chaque chaîne sont maintenues ensemble à proximité étroite par les régions de charpente et, avec les CDR de l'autre chaîne, contribuent à la formation des sites de liaison à antigène de l'anticorps. Il existe au moins deux techniques pour déterminer les CDR : (1) une approche basée sur la variabilité des séquences inter-espèces (par ex. Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Edition, National Institutes of Health, Bethesda Md.), et (2) une approche basée sur des études cristallographiques de complexes antigène-anticorps (Al Lazikani et al., 1997, J. Mol. Biol., 273:927-948). De plus, des combinaisons de ces deux approches sont parfois utilisées dans l'art pour déterminer les CDR. Un anticorps humanisé est une forme d'anticorps non humain (par ex. murin) qui est : des chaînes d'immunoglobulines spécifiques, des immunoglobulines chimériques ou des fragments de celles-ci qui contiennent des séquences non humaines minimales. En règle générale, les anticorps humanisés sont des immunoglobulines humaines dans lesquelles des résidus des CDR sont remplacés par des résidus des CDR d'une espèce non humaine (par ex. souris, rat, lapin ou hamster) qui ont la spécificité, l'affinité et/ou la capacité de liaison souhaitée(s). Dans certains cas, les résidus de la région de charpente Fv d'une immunoglobuline humaine sont remplacés par les résidus correspondants dans un anticorps provenant d'une espèce non humaine. L'anticorps humanisé peut être en outre modifié par la substitution de résidus supplémentaires soit dans la région de charpente Fv et/ou parmi les résidus non humains remplacés pour affiner et optimiser la spécificité, l'affinité et/ou la capacité de liaison de l'anticorps. L'anticorps humanisé peut comprendre des domaines variables contenant la totalité ou sensiblement la totalité des CDR qui correspondent à l'immunoglobuline non humaine tandis que la totalité ou sensiblement la totalité des régions de charpente sont celles d'une séquence d'immunoglobuline humaine. Dans certains modes de réalisation, les domaines variables comprennent les régions de charpente d'une séquence d'immunoglobuline humaine. Dans certains modes de réalisation, les domaines variables comprennent les régions de charpente d'une séquence consensus d'immunoglobuline humaine. L'anticorps humanisé peut également comprendre au moins une partie d'une région ou d’un domaine constant d'immunoglobuline (Fc), typiquement celui d'une immunoglobuline humaine. Un anticorps humanisé est généralement considéré comme distinct d'un anticorps chimérique. Un épitope (également appelé ici déterminant antigénique) est la partie d'un antigène capable d'être reconnue et spécifiquement liée par un anticorps particulier, un polypeptide AFFIMER® particulier ou un autre domaine de liaison particulier. Lorsque l'antigène est un polypeptide, les épitopes peuvent être formés à la fois à partir d'acides aminés contigus et d'acides aminés non contigus juxtaposés par repliement tertiaire d'une protéine. Les épitopes formés à partir d'acides aminés contigus (également appelés épitopes linéaires) sont typiquement conservés lors de la dénaturation des protéines, tandis que les épitopes formés par repliement tertiaire (également appelés épitopes conformationnels) sont typiquement perdus lors de la dénaturation des protéines. Un épitope comprend typiquement au moins 3, et plus généralement, au moins 5, 6, 7 ou 8-10 acides aminés dans une conformation spatiale unique. "Se lie spécifiquement à" ou est "spécifique de" fait référence à des interactions mesurables et reproductibles telles qu’une liaison entre une cible (par ex. TFNR2) et un polypeptide AFFIMER®, anticorps ou autre partenaire de liaison, qui permettent de déterminer la présence de la cible dans la présence d'une population hétérogène de molécules incluant des molécules biologiques. Par exemple, un polypeptide AFFIMER® qui se lie spécifiquement au TFNR2 est un polypeptide AFFIMER® qui se lie au TFNR2 avec une plus grande affinité, avidité (si formaté multimérique), plus facilement et/ou avec une plus grande durée qu'il ne se lie à d'autres cibles. « Conjugué », « conjugaison » et leurs variantes grammaticales font référence à la jonction ou la liaison ensemble de deux composés ou plus aboutissant à la formation d'un autre composé, par n'importe quel procédé de jonction ou de liaison connu dans l'art. Elles peuvent également faire référence à un composé qui est généré par la jonction ou la liaison de deux composés ou plus. Par exemple, un polypeptide TFNR2 AFFIMER® lié directement ou indirectement à au moins un groupement chimique ou polypeptide est un exemple de conjugué. De tels conjugués incluent les protéines de fusion, celles produites par des conjugués chimiques et celles produites par n'importe quel autre procédé. Polynucléotides Un polynucléotide (également appelé ici acide nucléique ou molécule d'acide nucléique) est un polymère de nucléotides de n'importe quelle longueur et peut comprendre de l'ADN, de l'ARN (par ex. de l'ARN messager (ARNm)) ou une combinaison d'ADN et d'ARN. Les nucléotides peuvent être des désoxyribonucléotides, des ribonucléotides, des nucléotides ou bases modifiés, et/ou leurs analogues, ou tout substrat qui peut être incorporé dans un polymère par ADN ou ARN polymérase. Un polynucléotide codant pour un polypeptide fait référence à l'ordre ou à la séquence de nucléotides le long d'un brin de désoxyribonucléotides d'acide désoxyribonucléique. L'ordre de ces désoxyribonucléotides détermine l'ordre des acides aminés le long de la chaîne polypeptidique (par ex. protéique). Ainsi, une séquence d'acide nucléique code pour la séquence d'acides aminés. Lorsqu'elle est utilisée en référence à des séquences nucléotidiques, une "séquence" peut comprendre de l'ADN et/ou de l'ARN (par ex. de l'ARN messager) et peut être à simple et/ou double brin. Les séquences d'acides nucléiques peuvent être modifiées, par ex. mutées, par rapport aux séquences d'acides nucléiques d’occurrence naturelle, par exemple. La séquence d'acide nucléique peut avoir n'importe quelle longueur, par exemple de 2 à 000.000 nucléotides ou plus (ou toute valeur entière au-dessus ou entre) un acide nucléique, par exemple une longueur d'environ 100 à environ 10.000, ou d'environ 200 nucléotides à environ 500 nucléotides. La transfection est le processus d'introduction d'un acide nucléique exogène dans une cellule eucaryote. La transfection peut être réalisée par divers moyens connus dans l'art, y compris la coprécipitation phosphate de calcium-ADN, la transfection médiée par DEAE-dextrane, la transfection médiée par polybrène, l'électroporation, la micro-injection, la fusion de liposome, la lipofection, la fusion de protoplastes, l'infection rétrovirale et la technologie biolistique (biolistique). Un vecteur est une construction qui est capable de délivrer, et généralement d'exprimer, au moins un gène ou une séquence d'intérêt dans une cellule hôte. Des exemples de vecteurs incluent, mais sans s'y limiter, des vecteurs viraux, des vecteurs d'expression d'ADN ou d'ARN nu, des vecteurs plasmidiques, cosmidiques ou phagiques, des vecteurs d'expression d'ADN ou d'ARN associés à des agents de condensation cationiques et des vecteurs d'expression d'ADN ou d'ARN encapsulés dans des liposomes. Un vecteur peut, dans certains modes de réalisation, être un acide nucléique isolé qui peut être utilisé pour délivrer une composition à l'intérieur de la cellule. Il est connu dans l'art un certain nombre de vecteurs comprenant, mais sans s'y limiter, les polynucléotides linéaires, les polynucléotides associés à des composés ioniques ou amphiphiles, les plasmides et les virus. Ainsi, un vecteur peut être un plasmide ou un virus, à réplication autonome. Le terme doit également être interprété comme incluant la facilitation du transfert d'acide nucléique dans des cellules des composés non plasmidiques et non viraux, par exemple, des composés de polylysine, des liposomes, et similaires. Des exemples non limitatifs de vecteurs viraux incluent, mais sans s'y limiter, des vecteurs adénoviraux, des vecteurs viraux adéno-associés et des vecteurs rétroviraux. Un vecteur d'expression est un vecteur comprenant un polynucléotide recombinant comprenant une séquence de contrôle de l'expression et une séquence de nucléotides à exprimer liés de manière opérationnelle. Le vecteur d'expression comprend suffisamment d'éléments agissant en cis (éléments agissant en cis) utilisés pour l'expression ; d'autres éléments d'expression peuvent être fournis par la cellule hôte ou le système d'expression in vitro. Les vecteurs d'expression incluent, par exemple, les cosmides, les plasmides (par ex. nus ou contenus dans des liposomes) et les virus (par ex. les lentivirus, les rétrovirus, les adénovirus et les virus adéno-associés). « Lié de manière opérationnelle » fait référence à un couplage fonctionnel entre la séquence régulatrice et une séquence d'acide nucléique hétérologue entraînant l'expression de cette dernière. Par exemple, si le promoteur affecte la transcription ou l'expression de la séquence codante, le promoteur est lié de manière opérationnelle à une séquence codante. Typiquement, les séquençages d'ADN liés de manière opérationnelle sont contigus et peuvent joindre deux régions codant pour une protéine dans le même cadre de lecture. Un promoteur est une séquence d'ADN reconnue par la machinerie de synthèse nécessaire à la machinerie de synthèse de la transcription spécifique à la cellule d'une séquence polynucléotidique ou introduite. « Expression inductible » fait référence à l'expression dans certaines conditions, telles que l'activation (ou l'inactivation) d'une voie de signalisation intracellulaire ou la mise en contact des cellules hébergeant la construction de l'expression avec une petite molécule qui régule l'expression (ou le degré d'expression) d'un gène lié de manière opérationnelle à un promoteur inductible sensible à la concentration de la petite molécule. Ceci contraste avec l'expression constitutive, qui fait référence à l'expression dans des conditions physiologiques (non limitées par certaines conditions). « Electroporation » fait référence à l'utilisation d'une impulsion de champ électrique transmembranaire pour induire des voies microscopiques (pores) dans une biomembrane ; leur présence permet aux biomolécules telles que les plasmides ou autres oligonucléotides de passer d'un côté à l'autre de la membrane cellulaire. Traitements « Traitement » fait référence à biomembrane la fois (1) les mesures thérapeutiques qui guérissent, ralentissent, atténuent les symptômes et/ou arrêtent la progression d'une affection ou d’un trouble pathologique diagnostiqué(e) et (2) les mesures prophylactiques ou préventives qui empêchent ou ralentissent le développement d'une affection ou d’un trouble pathologique ciblé(e). Ainsi, ceux qui ont besoin d'un traitement incluent ceux qui ont déjà le trouble ; ceux qui sont susceptibles d'avoir le trouble ; et ceux chez qui le trouble doit être prévenu. « Sujet », « individu » et « patient », utilisés ici de manière interchangeable, font référence à tout animal (par ex. un mammifère), y compris, mais sans s'y limiter, les humains, primates non humains, canidés, félins et rongeurs. « Réponse prolongée » fait référence à l'effet prolongé sur la réduction de l'inflammation après l'arrêt d'un traitement. Dans certains modes de réalisation, la réponse prolongée a une durée qui est au moins la même que la durée du traitement, au moins 1,5x, 2,0x, 2,5x ou 3,0x l’étendue de la durée du traitement. Une « réponse complète » ou « RC » fait référence à la disparition de toutes les lésions cibles ; « réponse partielle » ou « RP » fait référence à une diminution d'au moins 30 % de la somme des diamètres les plus longs (SLD, de l’anglais « sum of the longest diameters ») des lésions cibles, en prenant comme référence la SLD de base ; et « maladie stable » ou « SD » ne fait référence ni à un rétrécissement suffisant des lésions cibles pour se qualifier pour la RP, ni à une augmentation suffisante pour se qualifier pour la PD, en prenant comme référence la plus petite SLD depuis que le traitement a débuté. La « survie sans progression » (PFS, de l’anglais « Progression free survival ») fait référence à la durée pendant et après le traitement pendant laquelle la maladie que l’on traite (par ex. une maladie inflammatoire ou auto-immune) ne s'aggrave pas. La survie sans progression peut inclure la durée pendant laquelle les patients ont présenté une réponse complète ou une réponse partielle, ainsi que la durée pendant laquelle les patients ont présenté une maladie stable. Le "taux de réponse global" (ORR, de l’anglais « Overall response rate ») fait référence à la somme du taux de réponse complète (RC) et du taux de réponse partielle (RP). La « survie globale » fait référence au pourcentage d'individus dans un groupe qui sont susceptibles d'être en vie après une période de temps donnée. "Agoniste" et "agoniste" font référence à des agents qui sont capables de/d’, directement ou indirectement, induire, activer, promouvoir, augmenter ou amplifier sensiblement l'activité biologique d'une cible ou d'une voie cible. "Agoniste" est utilisé ici pour inclure tout agent qui induit, active, favorise, augmente ou amplifie partiellement ou totalement l'activité d'une protéine ou d'une autre cible d'intérêt. "Antagoniste" et "antagoniste" font référence à ou décrivent un agent qui est capable, directement ou indirectement, partiellement ou totalement de bloquer, d'inhiber, de réduire ou de neutraliser une activité biologique d'une cible et/ou d'une voie. Le terme « antagoniste » est utilisé ici pour inclure tout agent qui bloque partiellement ou totalement, inhibe, réduit ou neutralise l'activité d'une protéine ou d'une autre cible d'intérêt. "Modulation" et "moduler" font référence à un changement ou une altération d'une activité biologique. La modulation comprend, mais sans s'y limiter, la stimulation d'une activité ou l'inhibition d'une activité. La modulation peut être une augmentation de l'activité ou une diminution de l'activité, une modification des caractéristiques de liaison, ou tout autre changement des propriétés biologiques, fonctionnelles ou immunologiques associées à l'activité d'une protéine, d'une voie, d'un système ou d'autres cibles biologiques d'intérêt. Une réponse immunitaire comprend les réponses de chacun du système immunitaire inné et du système immunitaire adaptatif. Elle inclut à la fois les réponses immunitaires à médiation cellulaire et/ou humorales. Elle inclut à la fois les réponses des lymphocytes T et des lymphocytes B, ainsi que les réponses d'autres cellules du système immunitaire telles que les lymphocytes tueurs naturels (NK), les monocytes, les macrophages, etc. « Pharmaceutiquement acceptable » fait référence à une substance approuvée ou approuvable par un organisme de réglementation du gouvernement fédéral ou d'un gouvernement d'Etat ou répertoriée dans la pharmacopée américaine ou une autre pharmacopée généralement reconnue pour une utilisation chez les animaux, dont les humains. « Excipient pharmaceutiquement acceptable » est un excipient, support ou adjuvant qui peut être administré à un sujet, avec au moins un agent de la présente divulgation, et qui ne détruit pas l'activité pharmacologique de celui-ci et qui est non toxique lorsqu'il est administré à des doses suffisantes pour délivrer un effet thérapeutique. En général, les personnes du métier et la FDA (de l’anglais « Food & Drug Administration », soit « Agence fédérale américaine des produits alimentaires et médicamenteux ») des Etats-Unis considèrent qu'un excipient, support ou adjuvant pharmaceutiquement acceptable est un ingrédient inactif de toute formulation. Une « quantité efficace » (également appelée ici « quantité thérapeutiquement efficace » est une quantité d'un agent, tel qu'un agent TFNR2 AFFIMER®, efficace pour traiter une maladie ou un trouble chez un sujet tel qu'un mammifère. Dans le cas d'une maladie inflammatoire ou auto-immune, la quantité thérapeutiquement efficace d'un agent TFNR2 AFFIMER® a un effet thérapeutique et peut ainsi réduire l'inflammation ; soulager dans une certaine mesure au moins un des symptômes associés à la maladie inflammatoire ou auto-immune ; réduire la morbidité et la mortalité ; améliorer la qualité de vie ; ou une combinaison de ces effets. Divers Il est entendu que partout où des modes de réalisation sont décrits ici avec le terme "comprenant", des modes de réalisation autrement analogues décrits avec les termes "consistant en" et/ou "consistant essentiellement en" sont également proposés. Il est également entendu que partout où des modes de réalisation sont décrits ici avec le langage "consistant essentiellement en", des modes de réalisation autrement analogues décrits avec les termes "consistant en" sont également proposés. Telle qu'utilisée ici, la référence à « environ » ou « approximativement » une valeur ou un paramètre inclut (et décrit) des modes de réalisation qui concernent cette valeur ou ce paramètre. Par exemple, la description faisant référence à "environ X" inclut la description de "X". Le terme "et/ou" tel qu'il est utilisé dans une phrase telle que "A et/ou B" ici est destiné à inclure à la fois A et B ; A ou B ; A (seul) ; et B (seul). De même, le terme "et/ou" tel qu'utilisé dans une phrase telle que "A, B et/ou C" est destiné à englober chacun des modes de réalisation suivants : A, B et C ; A, B ou C ; A ou C ; A ou B ; B ou C ; A et C ; A et B ; B et C ; A (seul) ; B (seul) ; et C (seul). L'expression « au moins un » peut être utilisée de manière interchangeable avec « un ou plus ». Il convient de comprendre que "un" n'est pas limité à un mais signifie plutôt "au moins un". Polypeptide TFNR2 AFFIMER® Un polypeptide AFFIMER® est un échafaudage basé sur un polypeptide de Stéfine A, ce qui signifie qu'il a une séquence qui est dérivée d'un polypeptide de Stéfine A, par exemple, un polypeptide de Stéfine A de mammifère, par exemple, un polypeptide de Stéfine A humain. Certains aspects de la demande concernent des polypeptides AFFIMER® qui se lient au TFNR2 (également appelés « polypeptides TFNR2 AFFIMER® ») dans lesquels au moins une des boucles accessibles à solvant de la protéine Stéfine A de type sauvage ayant la capacité de se lier au TFNR2, de préférence sélectivement, et de préférence avec un Kd de 10 -6 M ou moins. Dans certains modes de réalisation, un polypeptide TFNR2 AFFIMER® est dérivé du polypeptide de Stéfine A humain de type sauvage ayant une séquence squelette et dans laquelle l'une ou les deux parmi la boucle 2 [désignée (Xaa)n] et la boucle 4 [désignée (Xaa)m] sont remplacées par des séquences de boucles alternatives (Xaa)n et (Xaa)m, pour avoir la formule générale (I) FR1-(Xaa)n-FR2-(Xaa)m-FR3 (I) où FR1 est une séquence polypeptidique représentée par MIPGGLSEAK PATPEIQEIV DKVKPQLEEK TGETYGKLEA VQYKTQVX (SEQ ID NO: 1) ou une séquence polypeptidique ayant au moins 70 % (par ex. au moins 75 %, au moins 80 %, au moins 85 %, au moins 90 %, au moins 95 % ou 100 %) d'identité avec la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 1, où X est n'importe quel nombre d'acides aminés sélectionnés indépendamment, plus convenablement trois ou moins acides aminés sélectionnés indépendamment, ou plus convenablement X est V ; et/ou FR2 est une séquence polypeptidique comprenant la séquence d'acides aminés de GTNYYIKVRA GDNKYMHLKV FKSL (SEQ ID NO : 2) ou une séquence polypeptidique ayant au moins 70 % (par ex. au moins 75 %, au moins 80 %, au moins 85 %, au moins 90 %, au moins 95 % ou 100 %) d'identité avec la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2 ; FR3 est une séquence polypeptidique comprenant la séquence d'acides aminés de EDLVLTGYQV DKNKDDELTG F (SEQ ID NO : 3) ou une séquence polypeptidique ayant au moins 70 % (par ex. au moins 75 %, au moins 80 %, au moins 85 %, au moins 90 %, au moins 95 % ou 100 %) d'identité avec la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 3 ; et Xaa, individuellement pour chaque occurrence, est un résidu d'acide aminé ; et n et m sont chacun, indépendamment, un nombre entier de 3 à 20. Dans certains modes de réalisation, FR1 est une séquence polypeptidique ayant au moins 80 %, 85 %, 90 %, 95 % ou même 98 % d'homologie avec SEQ ID NO : 1. Dans certains modes de réalisation, FR1 est une séquence polypeptidique ayant au moins 80 %, 85 %, 90 %, 95 % ou même 98 % d'identité avec SEQ ID NO : 1 ; dans certains modes de réalisation, FR2 est une séquence polypeptidique ayant au moins 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, ou même 98 % d'homologie avec SEQ ID NO : 2. Dans certains modes de réalisation, FR2 est une séquence polypeptidique ayant au moins 80 %, 85 %, 90 %, 95 % ou même 98 % d'identité avec SEQ ID NO : 2 ; dans certains modes de réalisation, FR3 est une séquence polypeptidique ayant au moins 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, ou même 98 % d'homologie avec SEQ ID NO : 3. Dans certains modes de réalisation, FR3 est une séquence polypeptidique ayant au moins 80 %, 85 %, 90 %, 95 % ou même 98 % d'identité avec SEQ ID NO: 3. Dans certains modes de réalisation, le polypeptide TNFR2 AFFIMER® a une séquence d'acides aminés représentée dans la Formule générale (II) : MIP-Xaa1-GLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVV-(Xaa)n-Xaa2-TNYYIKVRAGDNKYMHLKVF-Xaa3-Xaa4-Xaa5-(Xaa)m-Xaa6-D-Xaa7-VLTGYQVDKNKDDELTGF (SEQ ID NO: 4) où Xaa, individuellement pour chaque occurrence, est un résidu d'acide aminé, et n et m sont chacun, indépendamment, un nombre entier de 3 à 20. Dans certains modes de réalisation, le polypeptide TNFR2 AFFIMER® comprend une séquence d'acides aminés ayant au moins 90 % (par ex. au moins 95 %, au moins 96 %, au moins 97 %, au moins 98 %, au moins 99 %, ou 100 %) d’identité avec la séquence d'acides aminés de : MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVD-(Xaa)n-GTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSL-(Xaa)m-EDLVLTGYQVDKNKDDELTGF (SEQ ID NO: 5), où Xaa, individuellement pour chaque occurrence, est un résidu d'acide aminé, et n et m sont chacun, indépendamment, un nombre entier de 3 à 20. Dans certains modes de réalisation, Xaa1 est Gly, Ala, Val, Arg, Lys, Asp ou Glu, plus préférablement Gly, Ala, Arg ou Lys, et plus encore plus préférablement Gly ou Arg ; Xaa2 est Gly, Ala, Val, Ser ou Thr, plus préférablement Gly ou Ser ; Xaa3 est Arg, Lys, Asn, Gln, Ser, Thr, plus préférablement Arg, Lys, Asn ou Gln, et encore plus préférablement Lys ou Asn ; Xaa4 est Gly, Ala, Val, Ser ou Thr, plus préférablement Gly ou Ser ; Xaa5 est Ala, Val, Ile, Leu, Gly ou Pro, plus préférablement Ile, Leu ou Pro, et encore plus préférablement Leu ou Pro ; Xaa6 est Gly, Ala, Val, Asp ou Glu, plus préférablement Ala, Val, Asp ou Glu, et encore plus préférablement Ala ou Glu ; et Xaa7 est Ala, Val, Ile, Leu, Arg ou Lys, plus préférablement Ile, Leu ou Arg, et encore plus préférablement Leu ou Arg. Dans certains modes de réalisation, n est de 3 à 15, 3 à 12, 3 à 9, 3 à 7, 5 à 7, 5 à 9, 5 à 12, 5 à 15, 7 à 12 ou 7 à 9. Dans certains modes de réalisation, m est de 3 à 15, 3 à 12, 3 à 9, 3 à 7, 5 à 7, 5 à 9, 5 à 12, 5 à 15, 7 à 12 ou 7 à 9. Dans certains modes de réalisation, Xaa, indépendamment pour chaque occurrence, est un acide aminé qui peut être ajouté à un polypeptide par expression recombinante dans une cellule procaryote ou eucaryote, et encore plus préférablement l'un des 20 acides aminés d’occurrence naturelle. Dans certains modes de réalisation des séquences et formules ci-dessus, (Xaa)n est une séquence d'acides aminés sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 6 à 102, ou est une séquence d'acides aminés ayant au moins 80 %, 85 %, 90 %, 95 % ou même 98 % d'homologie avec une séquence sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 6 à 102. Dans certains modes de réalisation, (Xaa)n est une séquence d'acides aminés ayant au moins 80 %, 85 %, 90 %, 95 % ou même 98 % d'identité avec une séquence sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 6 à 102. Dans certains modes de réalisation des séquences et formules ci-dessus, (Xaa)m est une séquence d'acides aminés sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 103 à 199, ou est une séquence d'acides aminés ayant au moins 80 %, 85 %, 90 %, 95 % ou même 98 % d'homologie avec une séquence sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 103 à 199. Dans certains modes de réalisation, (Xaa)m est une séquence d'acides aminés ayant au moins 80 %, 85 %, 90 %, 95 % ou même 98 % d'identité avec une séquence sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 103 à 199. Dans certains modes de réalisation, le polypeptide TNFR2 AFFIMER® a une séquence d'acides aminés sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 200 à 296, où la séquence exclut optionnellement un ou plus des vingt-et-un résidus carboxy terminaux. Dans certains modes de réalisation, le polypeptide TNFR2 AFFIMER®® a une séquence d'acides aminés ayant au moins 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 % ou même 98 % d'identité avec une séquence sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 200 à 296, où la séquence exclut optionnellement un ou plus des vingt-et-un résidus carboxy terminaux. Tableau 1. Séquences polypeptidiques du TNFR2 AFFIMER®. Les 21 acides aminés C-terminaux sont des séquences supplémentaires ajoutées à des fins de clonage et d’essais : Lieur 3xAla, étiquette à dix acides aminés Myc, lieur 2xAla et étiquette 6xHis, qui sont tous facultatifs et non nécessaires pour la présente invention. Nom du clone Boucle 2 SEQ ID NO de Boucle 2 : Boucle 4 SEQ ID NO de Boucle 4 : Séquence protéique SEQ ID NO de protéine : CLONE 001 GQDQWGNYA 6 PDIPHNHWH 103 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVGQDQWGNYAGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLPDIPHNHWHEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 200 CLONE 003 GEDKWLNYA 7 ESEDHGQNT 104 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVGEDKWLNYAGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLESEDHGQNTEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 201 CLONE 004 RNLGNIYQW 8 SLNARYALD 105 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVRNLGNIYQWGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLSLNARYALDEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 202 CLONE 005 KLSYDLPPV 9 SLNKESIIV 106 MIPGGLSEAKPATPEIQEI VDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVKLSYDLPPVGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLSLNKESIIVEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 203 CLONE 006 VYWDILVEL 10 ISGGYSAQT 107 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVVYWDILVELGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLISGGYSAQTEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 204 CLONE 007 GLDIWGNNA 11 ADTARTEEA 108 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVGLDIWGNNAGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLADTARTEEAEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 205 CLONE 008 FVLDTNLWQ 12 RGFGNVKKV 109 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVFVLDTNLWQGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLRGFGNVKKVEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 206 CLONE 009 RLFHIWRWW 13 IHIYTDSIQ 110 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVRLFHIWRWWGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLIHIYTDSIQEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 207 CLONE 010 QEPGVWWWW 14 REGDFDYDI 111 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVQEPGVWWWWGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLREGDFDYDIEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 208 CLONE 011 LNWNDIYEH 15 SLTDQYKIS 112 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVLNWNDIYEHGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLSLTDQYKISEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 209 CLONE 012 YWGVQGALD 16 NWNHEFDLV 113 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVYWGVQGALDGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLNWNHEFDLVEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 210 CLONE 013 AHDYDGYKW 17 LLSNRASEH 114 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVAHDYDGYKWGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLLLSNRASEHEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 211 CLONE 014 WQDYQWRGQ 18 YQHIDPPYS 115 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVWQDYQWRGQGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLYQHIDPPYSEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 212 CLONE 015 EWEVGDVWG 19 WWVRGFFEP 116 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVEWEVGDVWGGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLWWVRGFFEPEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 213 CLONE 016 AETAKWFFY 20 VSYIEGAWK 117 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVLAAETAKWFFYSTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPVSYIEGAWKADRVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 214 CLONE 021 GELGEWQWY 21 QPPDWGWTF 118 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVLAGELGEWQWYSTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPQPPDWGWTFADRVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 215 CLONE 022 GHTDHYWYL 22 THERETGFT 119 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVLAGHTDHYWYLSTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPTHERETGFTADRVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 216 CLONE 023 GHTDQFWLT 23 IWQGDYDRY 120 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVLAGHTDQFWLTSTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPIWQGDYDRYADRVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 217 CLONE 026 LEIPSAIIY 24 YFWGDQEHW 121 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVLALEIPSAIIYSTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPYFWGDQEHWADRVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 218 CLONE 027 NQLGNGWDA 25 YQAKPNWRH 122 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVLANQLGNGWDASTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPYQAKPNWRHADRVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 219 CLONE 032 DSNGVSAVI 26 TWNIKPQWP 123 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVLADSNGVSAVISTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPTWNIKPQWPADRVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 220 CLONE 035 KWHQKQLPL 27 SLNNNFKIQ 124 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVKWHQKQLPLGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLSLNNNFKIQEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 221 CLONE 036 HDEHISHPV 28 DWWANINGT 125 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVHDEHISHPVGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLDWWANINGTEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 222 CLONE 037 AVNDFEPSL 29 FQLPDYSVN 126 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVAVNDFEPSLGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLFQLPDYSVNEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 223 CLONE 038 QHAFDGYAW 30 LQSAIKGIF 127 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVQHAFDGYAWGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLLQSAIKGIFEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 224 CLONE 042 VGDETFDAQ 31 AIQVIGYGT 128 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVVGDETFDAQGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLAIQVIGYGTEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 225 CLONE 043 HYHERHRIQ 32 SLDKQYNII 129 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVHYHERHRIQGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLSLDKQYNIIEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 226 CLONE 044 LFPEAVYWV 33 IWNDNAAQH 130 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVLFPEAVYWVGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLIWNDNAAQHEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 227 CLONE 045 VNDEGDHIA 34 YNVTGYVHW 131 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVVNDEGDHIAGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLYNVTGYVHWEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 228 CLONE 049 YDTDWQQDA 35 AYWYDVQGW 132 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVYDTDWQQDAGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLAYWYDVQGWEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 229 CLONE 051 WLVHAKTWL 36 LEPQYNVAN 133 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVWLVHAKTWLGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLLEPQYNVANEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHHAAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 230 CLONE 052 KRELVHYWW 37 DEDVSYAYE 134 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AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 282 CLONE 157 DHRVPDIGI 89 GPSLYFNHF 186 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVDHRVPDIGIGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLGPSLYFNHFEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 283 CLONE 160 VSLHYVSAV 90 SEWAFFFND 187 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVVSLHYVSAVGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLSEWAFFFNDEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 284 CLONE 162 VWRVSWAVE 91 WGVYEESKW 188 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVVWRVSWAVEGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLWGVYEESKWEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 285 CLONE 163 PRVEYVNNE 92 GGPNGWLYA 189 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVPRVEYVNNEGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLGGPNGWLYAEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 286 CLONE 164 IDRQSFSVV 93 WFFPPKYHP 190 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVIDRQSFSVVGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLWFFPPKYHPEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 287 CLONE 165 VDLQYVQVI 94 FNDANQIHW 191 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVVDLQYVQVIGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLFNDANQIHWEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 288 CLONE 166 VGWEGDIEE 95 SDQWPYVAI 192 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVVGWEGDIEEGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLSDQWPYVAIEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 289 CLONE 171 LQWHGYLNG 96 FPIQEGIVH 193 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVLQWHGYLNGGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLFPIQEGIVHEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 290 CLONE 172 WAEQAPYVHHF 97 LTFPVREAW 194 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVWAEQAPYVHHFGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLLTFPVREAWEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 291 CLONE 174 AHGQYLIVW 98 SNEVHAGDG 195 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVAHGQYLIVWGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLSNEVHAGDGEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 292 CLONE 175 IDPIPFAVY 99 DYFKFNHEH 196 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVIDPIPFAVYGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLDYFKFNHEHEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 293 CLONE 176 WDYWRELHA 100 RYLGQAADD 197 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVWDYWRELHAGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLRYLGQAADDEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 294 CLONE 177 YHLEWLQQW 101 YFDSLGWDP 198 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVYHLEWLQQWGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLYFDSLGWDPEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 295 CLONE 179 PYERWLVST 102 VDIANLFEY 199 MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVVPYERWLVSTGTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSLVDIANLFEYEDLVLTGYQVDKNKDDELTGF AAAEQKLISEEDLAAHHHHHH 296 Dans certains modes de réalisation, le polypeptide TNFR2 AFFIMER® a une séquence d'acides aminés qui est codée par un acide nucléique ayant une séquence codante au moins à 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 % ou même 98 % identique à une séquence sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 297 à 393, en excluant optionnellement les nucléotides codant pour les vingt-et-un acides aminés carboxy-terminaux. Dans certains modes de réalisation, le polypeptide TNFR2 AFFIMER® a une séquence d'acides aminés qui est codée par un acide nucléique qui ayant une séquence codante qui s’hybride à une séquence sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 297 à 393 en excluant optionnellement les nucléotides codant pour les vingt-et-un acides aminés carboxy-terminaux dans des conditions strictes (tel qu’en présence de chlorure de sodium/citrate de sodium (SSC) 6X à 45 °C suivi d'un lavage dans du SSC 0,2X à 65 °C. Tableau 2 : Séquences d'acides nucléiques de la présente invention. Les 5' 63 nucléotides codant pour les 21 acides aminés C-terminaux sont des séquences supplémentaires ajoutées à des fins de clonage et d’essai : Lieur 3xAla, étiquette à dix acides aminés Myc, lieur 2xAla et étiquette 6xHis, qui sont tous facultatifs et non nécessaires pour la présente invention. Nom du clone Séquence d'ADN SEQ ID NO d’ADN: CLONE 001 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGGTCAGGATCAGTGGGGTAACTACGCAGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGCCAGATATCCCACATAACCATTGGCATGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 297 CLONE 003 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGGTGAAGATAAATGGCTGAACTACGCAGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGGAATCTGAAGATCATGGTCAGAACACCGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 298 CLONE 004 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCCGTAACCTGGGTAACATCTACCAGTGGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTCTCTGAACGCAAGATACGCACTGGATGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 299 CLONE 005 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCAAACTGTCTTACGATCTGCCACCAGTTGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTCTCTGAACAAAGAATCTATCATCGTTGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 300 CLONE 006 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGTTTACTGGGATATCCTGGTTGAACTGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGATCTCTGGTGGTTACTCTGCACAGACCGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 301 CLONE 007 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGGTCTGGATATCTGGGGTAACAACGCAGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGGCAGATACCGCAAGAACCGAAGAAGCAGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 302 CLONE 008 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCTTCGTTCTGGATACCAACCTGTGGCAGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGAGAGGTTTCGGTAACGTTAAAAAAGTTGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 303 CLONE 009 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCCGTCTGTTCCATATCTGGCGTTGGTGGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGATCCATATCTACACCGATTCTATCCAGGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 304 CLONE 010 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCCAGGAACCAGGTGTTTGGTGGTGGTGGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGAGAGAAGGTGATTTCGATTACGATATCGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 305 CLONE 011 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCCTGAACTGGAACGATATCTACGAACATGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTCTCTGACCGATCAGTACAAAATCTCTGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 306 CLONE 012 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCTACTGGGGTGTTCAGGGTGCACTGGATGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGAACTGGAACCATGAATTCGATCTGGTTGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 307 CLONE 013 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGCACATGATTACGATGGTTACAAATGGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGCTGCTGTCTAACAGAGCATCTGAACATGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 308 CLONE 014 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCTGGCAGGATTACCAGTGGCGTGGTCAGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTACCAGCATATCGATCCACCATACTCTGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 309 CLONE 015 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGAATGGGAAGTTGGTGATGTTTGGGGTGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTGGTGGGTTAGAGGTTTCTTCGAACCAGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 310 CLONE 016 ATGATCCCGAGGGGACTGTCCGAGGCCAAGCCTGCCACCCCTGAGATCCAGGAAATTGTCGACAAAGTCAAGCCGCAGCTGGAAGAGAAAACGGGCGAAACCTACGGTAAGCTGGAAGCGGTCCAGTACAAAACCCAAGTGCTAGCAGCAGAAACCGCAAAATGGTTTTTTTACTCCACCAACTATTACATTAAGGTTCGTGCCGGTGACAATAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTCAACGGCCCGGTTTCTTACATCGAAGGTGCATGGAAAGCGGACCGTGTTCTGACCGGTTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 311 CLONE 021 ATGATCCCGAGGGGACTGTCCGAGGCCAAGCCTGCCACCCCTGAGATCCAGGAAATTGTCGACAAAGTCAAGCCGCAGCTGGAAGAGAAAACGGGCGAAACCTACGGTAAGCTGGAAGCGGTCCAGTACAAAACCCAAGTGCTAGCAGGTGAACTGGGTGAATGGCAGTGGTACTCCACCAACTATTACATTAAGGTTCGTGCCGGTGACAATAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTCAACGGCCCGCAGCCACCAGATTGGGGTTGGACCTTTGCGGACCGTGTTCTGACCGGTTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 312 CLONE 022 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ATGATCCCGAGGGGACTGTCCGAGGCCAAGCCTGCCACCCCTGAGATCCAGGAAATTGTCGACAAAGTCAAGCCGCAGCTGGAAGAGAAAACGGGCGAAACCTACGGTAAGCTGGAAGCGGTCCAGTACAAAACCCAAGTGCTAGCAGATTCTAACGGTGTTTCTGCAGTTATCTCCACCAACTATTACATTAAGGTTCGTGCCGGTGACAATAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTCAACGGCCCGACCTGGAACATCAAACCACAGTGGCCAGCGGACCGTGTTCTGACCGGTTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 317 CLONE 035 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCAAATGGCATCAGAAACAGCTGCCACTGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTCTCTGAACAACAACTTCAAAATCCAGGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 318 CLONE 036 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ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCCTGTGGCTGGAATCTCTGATCAACCAGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTAACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGAACCTGTCTAGAAACTACCAGCTGTGGGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 363 CLONE 112 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCTACTTCCGTAAACATGTTCATCCAGTTGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTCTATCGATAAATACTACCAGATCATCGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 364 CLONE 113 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGATGAAGATGAATACCTGCTGGTTTCTGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTTCCTGGATTACTTCTACAACATCGGTGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 365 CLONE 115 ATGATCCCGAGGGGACTGTCCGAGGCCAAGCCTGCCACCCCTGAGATCCAGGAAATTGTCGACAAAGTCAAGCCGCAGCTGGAAGAGAAAACGGGCGAAACCTACGGTAAGCTGGAAGCGGTCCAGTACAAAACCCAAGTGCTAGCAGATCATTACGCAGAACATTGGGATGATTCCACCAACTATTACATTAAGGTTCGTGCCGGTGACAATAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTCAACGGCCCGTACAAAGCAGATATCCAGTGGAAACATGCGGACCGTGTTCTGACCGGTTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 366 CLONE 116 ATGATCCCGAGGGGACTGTCCGAGGCCAAGCCTGCCACCCCTGAGATCCAGGAAATTGTCGACAAAGTCAAGCCGCAGCTGGAAGAGAAAACGGGCGAAACCTACGGTAAGCTGGAAGCGGTCCAGTACAAAACCCAAGTGCTAGCATGGCCACAGGGTCAGGATAAAACCCATTCCACCAACTATTACATTAAGGTTCGTGCCGGTGACAATAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTCAACGGCCCGGATGATGGTTCTCTGGAATGGCTGCATGGTGCGGACCGTGTTCTGACCGGTTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 367 CLONE 117 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCTGGCTGCTGGATGGTCTGCTGTGGAAAGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGCTGGAACATCAGTACGATGAATTCCTGGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 368 CLONE 118 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCAAATGGCAGCAGCTGGGTCCAATCCAGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGGCACTGGCAAAAGATTACACCCTGATCGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 369 CLONE 119 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCAAAGATCATCAGGCATCTCATACCCTGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTCTCTGTCTGGTGAATACATCGTTATCGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 370 CLONE 120 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCCATTACCTGTACTCTCTGCCAGTTCTGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGCAGGATGTTAAATACTGGGTTATCGAAGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 371 CLONE 124 ATGATCCCGAGGGGACTGTCCGAGGCCAAGCCTGCCACCCCTGAGATCCAGGAAATTGTCGACAAAGTCAAGCCGCAGCTGGAAGAGAAAACGGGCGAAACCTACGGTAAGCTGGAAGCGGTCCAGTACAAAACCCAAGTGCTAGCATACTGGGCAGGTAAACAGCTGGTTCTGTCCACCAACTATTACATTAAGGTTCGTGCCGGTGACAATAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTCAACGGCCCGAACCTGGCACTGCAGTTTGATACCGTTGCGGACCGTGTTCTGACCGGTTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 372 CLONE 125 ATGATCCCGAGGGGACTGTCCGAGGCCAAGCCTGCCACCCCTGAGATCCAGGAAATTGTCGACAAAGTCAAGCCGCAGCTGGAAGAGAAAACGGGCGAAACCTACGGTAAGCTGGAAGCGGTCCAGTACAAAACCCAAGTGCTAGCATTTTGGATCGAACCAGGTTACATCTACTCCACCAACTATTACATTAAGGTTCGTGCCGGTGACAATAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTCAACGGCCCGATCCATCTGGATCCAGAACTGACCTGGGCGGACCGTGTTCTGACCGGTTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 373 CLONE 129 ATGATCCCGAGGGGACTGTCCGAGGCCAAGCCTGCCACCCCTGAGATCCAGGAAATTGTCGACAAAGTCAAGCCGCAGCTGGAAGAGAAAACGGGCGAAACCTACGGTAAGCTGGAAGCGGTCCAGTACAAAACCCAAGTGCTAGCACTGGAAGGTGCACAGTACTACATCTCTTCCACCAACTATTACATTAAGGTTCGTGCCGGTGACAATAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTCAACGGCCCGTTTGAACAGCTGTACTTTTCTCCAAAAGCGGACCGTGTTCTGACCGGTTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 374 CLONE 130 ATGATCCCGAGGGGACTGTCCGAGGCCAAGCCTGCCACCCCTGAGATCCAGGAAATTGTCGACAAAGTCAAGCCGCAGCTGGAAGAGAAAACGGGCGAAACCTACGGTAAGCTGGAAGCGGTCCAGTACAAAACCCAAGTGCTAGCAGATTGGGCAGGTCTGTCTTTTAACGAATCCACCAACTATTACATTAAGGTTCGTGCCGGTGACAATAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTCAACGGCCCGATCTTTCCAGATGTTTGGGAATGGGGTGCGGACCGTGTTCTGACCGGTTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 375 CLONE 133 ATGATCCCGAGGGGACTGTCCGAGGCCAAGCCTGCCACCCCTGAGATCCAGGAAATTGTCGACAAAGTCAAGCCGCAGCTGGAAGAGAAAACGGGCGAAACCTACGGTAAGCTGGAAGCGGTCCAGTACAAAACCCAAGTGCTAGCAGCAGATCATGGTCAGGGTATCATCTGGTCCACCAACTATTACATTAAGGTTCGTGCCGGTGACAATAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTCAACGGCCCGGCACAGCTGTGGGTTTCTCCAGATTGGGCGGACCGTGTTCTGACCGGTTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 376 CLONE 139 ATGATCCCGAGGGGACTGTCCGAGGCCAAGCCTGCCACCCCTGAGATCCAGGAAATTGTCGACAAAGTCAAGCCGCAGCTGGAAGAGAAAACGGGCGAAACCTACGGTAAGCTGGAAGCGGTCCAGTACAAAACCCAAGTGCTAGCACATCAGCTGGGTGATTACGTTCGTATCTCCACCAACTATTACATTAAGGTTCGTGCCGGTGACAATAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTCAACGGCCCGTGGCTGATCATCCTGATCAACAACGATGCGGACCGTGTTCTGACCGGTTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 377 CLONE 141 ATGATCCCGAGGGGACTGTCCGAGGCCAAGCCTGCCACCCCTGAGATCCAGGAAATTGTCGACAAAGTCAAGCCGCAGCTGGAAGAGAAAACGGGCGAAACCTACGGTAAGCTGGAAGCGGTCCAGTACAAAACCCAAGTGCTAGCAAACGAAGAACCATGGGGTGAATGGTACTCCACCAACTATTACATTAAGGTTCGTGCCGGTGACAATAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTCAACGGCCCGTGGGATCCATACACCCAGCTGATCTCTGCGGACCGTGTTCTGACCGGTTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 378 CLONE 145 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGTTTACGAAAAATGGCTGGCAGTTGTTGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGATCCCAAACAACGATATCATCCTGGCAGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 379 CLONE 157 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGATCATCGTGTTCCAGATATCGGTATCGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGGGTCCATCTCTGTACTTCAACCATTTCGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 380 CLONE 160 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGTTTCTCTGCATTACGTTTCTGCAGTTGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTCTGAATGGGCATTCTTCTTCAACGATGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 381 CLONE 162 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGTTTGGCGTGTTTCTTGGGCAGTTGAAGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTGGGGTGTTTACGAAGAATCTAAATGGGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 382 CLONE 163 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCCCACGTGTTGAATACGTTAACAACGAAGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGGGTGGTCCAAACGGTTGGCTGTACGCAGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 383 CLONE 164 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCATCGATCGTCAGTCTTTCTCTGTTGTTGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTGGTTCTTCCCACCAAAATACCATCCAGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 384 CLONE 165 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGTTGATCTGCAGTACGTTCAGGTTATCGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTTCAACGATGCAAACCAGATCCATTGGGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 385 CLONE 166 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGTTGGTTGGGAAGGTGATATCGAAGAAGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTCTGATCAGTGGCCATACGTTGCAATCGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 386 CLONE 171 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCCTGCAGTGGCATGGTTACCTGAACGGTGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTTCCCAATCCAGGAAGGTATCGTTCATGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 387 CLONE 172 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCTGGGCAGAACAGGCACCATACGTTCATCATTTCGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGCTGACCTTCCCAGTTAGAGAAGCATGGGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 388 CLONE 174 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCGCACATGGTCAGTACCTGATCGTTTGGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTCTAACGAAGTTCATGCAGGTGATGGTGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 389 CLONE 175 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCATCGATCCAATCCCATTCGCAGTTTACGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGGATTACTTCAAATTCAACCATGAACATGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 390 CLONE 176 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCTGGGATTACTGGCGGGAACTGCATGCAGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGAGATACCTGGGTCAGGCAGCAGATGATGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 391 CLONE 177 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCTACCATCTGGAATGGCTGCAGCAGTGGGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGTACTTCGATTCTCTGGGTTGGGATCCAGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 392 CLONE 179 ATGATTCCCGGCGGACTTTCGGAAGCCAAGCCAGCCACTCCGGAGATTCAGGAAATCGTGGACAAGGTCAAACCGCAGCTGGAAGAGAAAACCGGCGAAACCTACGGCAAACTGGAAGCCGTCCAGTATAAGACTCAAGTCGTCCCATACGAACGTTGGCTGGTTTCTACCGGTACGAACTACTACATCAAGGTTCGTGCGGGTGACAACAAGTATATGCACCTGAAAGTGTTTAAGAGCCTGGTTGATATCGCAAACCTGTTCGAATACGAAGATTTGGTGCTGACGGGCTACCAGGTTGACAAGAACAAAGATGACGAGCTGACGGGTTTCGCGGCCGCTGAACAGAAGCTGATCTCCGAAGAAGATCTGGCCGCGCATCACCATCACCACCAC 393 En outre, des modifications mineures peuvent également inclure de petit(e)s délétions ou ajouts - au-delà des inserts de boucle 2 et de boucle 4 décrits ci-dessus - aux séquences dérivées de la Stéfine A ou de Stéfine A décrites ici, telles que l'ajout ou la délétion de jusqu'à 10 acides aminés par rapport à la Stéfine A ou au polypeptide AFFIMER® dérivé de la Stéfine A. Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® est un agent TNFR2 AFFIMER® comprenant une partie polypeptidique AFFIMER® qui se lie au TNFR2 humain en tant que monomère avec une constante de dissociation (KD) d'environ 1 uM ou moins, d'environ 100 nM ou moins, d'environ 40 nM ou moins, d’environ 20 nM ou moins, d’environ 10 nM ou moins, d’environ 1 nM ou moins, ou d’environ 0,1 nM ou moins. Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® est un agent TNFR2 AFFIMER® comprenant une partie polypeptidique AFFIMER® qui se lie au TNFR2 humain en tant que monomère avec une constante de taux de décalage (Koff, de l’anglais « off-rate constant »), telle que mesurée par l’essai BIACORE™, d'environ 10 -3 s -1 (par ex. unité en 1/seconde) ou plus lent ; d'environ 10 -4 s -1 ou moins ou même d'environ 10 -5 s -1 ou moins. Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® est un agent TNFR2 AFFIMER® comprenant une partie polypeptidique AFFIMER® qui se lie au TNFR2 humain en tant que monomère avec une constante d'association (Kon), telle que mesurée par l’essai BIACORE™, d'au moins environ 103 M-1s-1 ou plus rapide ; d’au moins environ 104 M-1s-1 ou plus rapide ; d’au moins environ 105 M-1s-1 ou plus rapide ; ou même d’au moins environ 106 M-1s-1 ou plus rapide. Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® est un agent TNFR2 AFFIMER® comprenant une partie polypeptidique AFFIMER® qui se lie au TNFR2 humain en tant que monomère avec une CI50 dans un essai de liaison en concurrence avec le TNFR2 humain de 1 uM ou moins, d'environ 100 nM ou moins, d'environ 40 nM ou moins, d’environ 20 nM ou moins, d’environ 10 nM ou moins, d’environ 1 nM ou moins, ou d’environ 0,1 nM ou moins. Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® a une température de fusion (Tm, par ex. la température à laquelle les états replié et déplié sont également peuplés) de 65°C ou plus, et de préférence d'au moins 70°C, 75°C, 80°C. °C ou même 85°C ou plus. La température de fusion est un indicateur particulièrement utile de la stabilité des protéines. Les proportions relatives de protéines repliées et non repliées peuvent être déterminées par de nombreuses techniques connues de la personne du métier, y compris la calorimétrie différentielle à balayage, la spectroscopie par différence aux UV, la fluorescence, le dichroïsme circulaire (CD de l’anglais « circular dichroism ») et la RMN (Pace et al. (1997) "Measuring the conformational stability of a protein" in Protein structure: A practical approach 2: 299-321). Protéines de Fusion - Général Dans certains modes de réalisation, les polypeptides AFFIMER® peuvent en outre comprendre une insertion, substitution et/ou délétion supplémentaire qui module l'activité biologique du polypeptide AFFIMER®. Par exemple, les additions, substitutions et/ou délétions peuvent moduler au moins une propriété ou activité des polypeptides AFFIMER® modifiés. Par exemple, les additions, substitutions ou délétions peuvent moduler l'affinité pour le polypeptide AFFIMER®, par ex. pour la liaison à, et l'inhibition du, TNFR2, moduler la demi-vie circulante, moduler la demi-vie thérapeutique, moduler la stabilité du polypeptide AFFIMER®, moduler le clivage par les protéases, moduler la dose, moduler la libération ou la biodisponibilité, faciliter la purification, diminuer la désamidation, améliorer la durée de péremption, ou améliorer ou altérer une voie d'administration particulière. Similairement, les polypeptides AFFIMER® peuvent comprendre des séquences de clivage de protéase, des groupes réactifs, des domaines de liaison d'anticorps (y compris, mais sans s'y limiter, FLAG ou poly-His) ou d'autres séquences basées sur l'affinité (y compris, mais sans s'y limiter, FLAG, poly-His, GST, etc.) ou des molécules liées (y compris, mais sans s'y limiter, la biotine) qui améliorent la détection, la purification ou d'autres caractéristiques du polypeptide. Dans certains cas, ces séquences supplémentaires sont ajoutées à une extrémité et/ou à l'autre du polypeptide AFFIMER® sous la forme d'une protéine de fusion. En conséquence, dans certains aspects de la divulgation, l'agent AFFIMER® est une protéine de fusion ayant au moins une séquence polypeptidique AFFIMER® et au moins une séquence polypeptidique hétérologue ("domaine de fusion" ici). Un domaine de fusion peut être sélectionné de manière à conférer une propriété souhaitée, telle que la sécrétion depuis une cellule ou la rétention à la surface de la cellule (par ex. pour un polynucléotide AFFIMER® codé), servir de substrat ou d'autre séquence de reconnaissance pour les modifications post-traductionnelles, créer des structures multimériques s'agrégeant par des interactions protéine-protéine, altérer (souvent pour étendre) la demi-vie sérique, ou altérer la localisation de tissus ou l'exclusion de tissus et autres propriétés ADME (de l’anglais « Absorption, Distribution, Metabolism, and Excretion », soit en français « Absorption, Distribution, Métabolisme, and Excrétion ») - simplement à titre d'exemples. Par exemple, certains domaines de fusion sont particulièrement utiles pour l'isolement et/ou la purification des protéines de fusion, tel que par chromatographie d'affinité. Des exemples bien connus de tels domaines de fusion qui facilitent l'expression ou la purification comprennent, à simple titre illustratif, des étiquettes d'affinité telles que la polyhistidine (par ex. une étiquette His6), l'étiquette Strep II, l'étiquette de peptide de liaison à la streptavidine (SBP, de l’anglais « streptavidin-binding peptide »), le peptide de liaison à la calmoduline (CBP, de l’anglais « calmodulin-binding peptide »), la glutathion S-transférase (GST de l’anglais « glutathione S-transferase »), la protéine de liaison au maltose (MBP, de l’anglais « maltose-binding protein »), l’étiquette S, l’étiquette HA, l’étiquette c-Myc, la thiorédoxine, la protéine A et la protéine G. Pour que l'agent AFFIMER® soit sécrété, il contiendra généralement une séquence signal qui dirige le transport de la protéine vers la lumière du réticulum endoplasmique et finalement pour être sécrétée (ou retenue sur la surface cellulaire si un domaine transmembranaire ou autre signal de rétention sur la surface cellulaire). Les séquences signal (également appelées peptides signaux ou séquences leader) sont situées à l'extrémité N-terminale des polypeptides naissants. Elles ciblent le polypeptide vers le réticulum endoplasmique et les protéines sont triées vers leurs destinations, par exemple vers l'espace interne d'un organite, vers une membrane interne, vers la membrane externe de la cellule, ou vers l'extérieur de la cellule par sécrétion. De nombreuses séquences signal sont clivées de la protéine par une peptidase signal après le transport des protéines jusqu’au réticulum endoplasmique. Le clivage de la séquence signal du polypeptide survient habituellement à un site spécifique dans la séquence d'acides aminés et dépend des résidus d'acides aminés dans la séquence signal. Dans certains modes de réalisation, le peptide signal a une longueur d'environ 5 à environ 40 acides aminés (tel qu’environ 5 à environ 7, environ 7 à environ 10, environ 10 à environ 15, environ 15 à environ 20, environ 20 à environ 25, ou environ 25 à environ 30, environ 30 à environ 35, ou environ 35 à environ 40 acides aminés de longueur). Dans certains modes de réalisation, le peptide signal est un peptide signal natif d'une protéine humaine. Dans d'autres modes de réalisation, le peptide signal est un peptide signal non natif. Par exemple, dans certains modes de réalisation, le peptide signal non natif est un peptide signal natif mutant provenant de la protéine humaine sécrétée native correspondante, et peut inclure au moins une (tel que 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, ou 10 ou plus) substitution, insertions et/ou délétions. Dans certains modes de réalisation, le peptide signal est un peptide signal ou un mutant de celui-ci d'une famille de protéines non IgSF, tel qu'un peptide signal d'une immunoglobuline (telle qu'une IgG chaîne lourde ou une IgG-kappa chaîne légère), une cytokine (telle que l'interleukine-2 (IL-2), ou CD33), une protéine d'albumine sérique (par ex. HSA ou albumine), une séquence signal de préprotéine azurocidine humaine, une luciférase, un trypsinogène (par ex. chymotrypsinogène ou trypsinogène) ou un autre peptide signal capable de sécréter efficacement un protéine d'une cellule. Des exemples de peptides signal incluent, mais sans s'y limiter : Tableau 3. Séquences peptidiques signal Protéine native Séquence signal SEQ ID NO : Albumine sérique humaine (HSA) MKWVTFISLLFLFSSAYS 483 Ig kappa chaîne légère MDMRAPAGIFGFLLVLFPGYRS 394 Préprotéine azurocidine humaine MTRLTVLALLAGLLASSRA 395 IgG chaîne lourde MELGLSWIFLLAILKGVQC 396 IgG chaîne lourde MELGLRWVFLVAILEGVQC 397 IgG chaîne lourde MKHLWFFLLLVAAPRWVLS 398 IgG chaîne lourde MDWTWRILFLVAAATGAHS 399 IgG chaîne lourde MDWTWRFLFVVAAATGVQS 400 IgG chaîne lourde MEFGLSWLFLVAILKGVQC 401 IgG chaîne lourde MEFGLSWVFLVALFRGVQC 402 IgG chaîne lourde MDLLHKNMKHLWFFLLLVAAPRWVLS 403 Ig kappa légère MDMRVPAQLLGLLLLWLSGARC 404 Ig kappa légère MKYLLPTAAAGLLLLAAQPAMA 405 Gaussia luciférase MGVKVLFALICIAVAEA 406 Chymotrypsinogène humain MAFLWLLSCWALLGTTFG 407 interleukine-2 shumaine MQLLSCIALILALV 408 Trypsinogène-2 humain MNLLLILTFVAAAVA 409 CD33 humain MPLLLLLPLLWAGALA 410 Prolactine MDSKGSSQKGSRLLLLLVVSNLLLCQGVVS 411 tPA humain MDAMKRGLCCVLLLCGAVFVSPS 412 Synthétique/Consensus MLLLLLLLLLLALALA 413 Synthétique/Consensus MWWRLWWLLLLLLLLWPMVWA 414 De nombreux lieurs naturels présentaient des structures α-hélicoïdales. La structure en hélice α était rigide et stable, avec des liaisons hydrogène intrasegment et un squelette étroitement compacté. Par conséquent, les lieurs α-hélicoïdaux raides peuvent agir comme espaceurs rigides entre domaines protéiques. George et al. (2002) “An analysis of protein domain linkers: their classification and role in protein folding” Protein Eng. 15(11):871-9. En général, les lieurs rigides présentent des structures relativement raides en adoptant des structures α-hélicoïdales ou en contenant de multiples résidus Pro. Dans de nombreuses circonstances, ils séparent les domaines fonctionnels plus efficacement que les lieurs flexibles. La longueur des lieurs peut être facilement ajustée en modifiant le nombre de copies pour obtenir une distance optimale entre les domaines. En conséquence, des lieurs rigides sont choisis lorsque la séparation spatiale des domaines est essentielle pour préserver la stabilité ou la bioactivité des protéines de fusion. A cet égard, des lieurs formant une hélice alpha avec la séquence de (EAAAK)n (SEQ ID NO: 421) ont été appliqués à la construction de nombreuses protéines de fusion recombinantes. Un autre type de lieurs rigides a une séquence riche en Pro, (XP)n, X désignant n'importe quel acide aminé, de préférence Ala, Lys ou Glu. A des fins purement d’illustration, des exemples de lieurs comprennent GRA, poly(Gly), poly(Ala) et ceux fournis dans le Tableau 4. Tableau 4. Séquences de lieurs. Séquence SEQ ID NO : (GGGGS) n (e.g., n = 1-6) 415 (Gly) 8 416 (Gly) 6 417 KESGSVSSEQLAQFRSLD 418 EGKSSGSGSESKST 419 GSAGSAAGSGEF 420 (EAAAK) n (e.g., n = 1-6) 421 A(EAAAK) 4 ALEA(EAAAK) 4 A 422 PAPAP 423 AEAAAKEAAAKA 424 (Ala-Pro)n (10 to 34 aa) 425 GGSG 426 GSGS 427 GGGS 428 S(GGS)n (n=1-7) 429 GGGSGGG 430 ESGGGGVT 431 LESGGGGVT 432 GRAQVT 433 WRAQVT 434 ARGRAQVT 435 SGTTSGTTRLLSGHTCFTLTGLLGTLVTMGLLT 436 SGTSPGLSAGATVGIMIGVLVGVALI 437 SAPVLSAVATVGITIGVLARVALI 438 SSPDLSAGTAVSIMIGVLAGMALI 439 TLGGNSASYTFVSLLFSAVTLLLLC 440 SGTSPGLSAGATVGIMIGVLVGVALI 441 Le polypeptide AFFIMER® peut en outre comprendre, par exemple être fusionné à, un domaine transmembranaire (domaine TM). De tels domaines TM garantissent que le polypeptide AFFIMER® reste à la surface de la cellule exprimant l'AFFIMER®. Ces domaines TM sont facilement disponibles et incluent les CD3, CD8, CD28, PDGFR TMD et autres. D'autres modifications, encore, qui peuvent être apportées à la séquence polypeptidique AFFIMER® ou à un groupement polypeptidique flanquant fourni en tant que partie d'une protéine de fusion sont au moins une séquence qui est un site de modification post-traductionnelle par une enzyme. Celles-ci peuvent inclure, mais sans s'y limiter, une glycosylation, une acétylation, une acylation, une modification lipidique, une palmitoylation, une addition de palmitate, une phosphorylation, une modification de la liaison glycolipidique, etc. Protéines de fusion multispécifiques Dans certains modes de réalisation, un agent AFFIMER® est un polypeptide multispécifique incluant, par exemple, un premier polypeptide TNFR2 AFFIMER® et au moins un domaine de liaison supplémentaire. Le domaine de liaison supplémentaire peut être une séquence polypeptidique sélectionnée parmi, pour illustrer, un second polypeptide AFFIMER® (qui peut être identique ou différent du premier polypeptide AFFIMER®), un anticorps ou un fragment de celui-ci ou un autre polypeptide de liaison à antigène, une partie de liaison à ligand, d'un récepteur (tel qu'un polypeptide piège de récepteur, de l’anglais « receptor trap polypeptide »), un ligand de liaison à récepteur (tel qu'une cytokine, un facteur de croissance ou similaire), un récepteur de lymphocyte T d’ingénierie, une enzyme ou un fragment catalytique de celle-ci. Dans certains modes de réalisation, un agent AFFIMER® inclut au moins une séquence polypeptidique AFFIMER® supplémentaire qui est également dirigée contre le TNFR2. Le(s) polypeptide(s) TNFR2 AFFIMER® supplémentaire(s) peu(ven)t être identique(s) ou différent(s) (ou un mélange de ceux-ci) du premier polypeptide TNFR2 AFFIMER® afin de créer une protéine de fusion AFFIMER® multispécifique. Les agents AFFIMER® peuvent se lier aux mêmes sites ou à des sites chevauchants sur TNFR2 ou peuvent se lier à deux sites différents de sorte que l'agent TNFR2 AFFIMER® peut se lier simultanément à deux sites sur la même protéine TNFR2 (biparatopique) ou à plus de deux sites (multiparatopique). Dans certains modes de réalisation, un agent AFFIMER® inclut au moins un site de liaison à antigène provenant d'un anticorps. L'agent AFFIMER® résultant peut être une chaîne unique comprenant à la fois le polypeptide TNFR2 AFFIMER® et le site de liaison à antigène (comme dans le cas d'un scFv) ou peut être un complexe protéique multimérique comme dans un anticorps assemblé avec des chaînes lourdes et/ou légères auxquelles la séquence de l'anticorps anti-TNFR2 a également été fusionnée. Dans certains modes de réalisation, par rapport à un agent AFFIMER® multispécifique comprenant une immunoglobuline de pleine longueur, la fusion de la séquence polypeptidique AFFIMER® à l'anticorps préservera la fonction Fc de la région Fc de l'immunoglobuline. Par exemple, l'agent AFFIMER® peut être capable de se lier, via sa partie Fc, au récepteur Fc des cellules positives au récepteur Fc. Dans certains autres modes de réalisation, l'agent AFFIMER® peut activer la cellule positive au récepteur Fc en se liant à la cellule positive au récepteur Fc, initiant ou augmentant ainsi l'expression de cytokines et/ou d'antigènes costimulateurs. De plus, l'agent AFFIMER® peut transférer au moins un second signal d'activation nécessaire à l'activation physiologique de la lymphocyte T à la lymphocyte T via les antigènes costimulateurs et/ou les cytokines. Dans certains modes de réalisation, résultant de la liaison de sa partie Fc à d'autres cellules qui expriment les récepteurs Fc présents à la surface des cellules effectrices du système immunitaire, telles que les cellules immunitaires, hépatocytes et cellules endothéliales, l'agent AFFIMER® peut posséder une fonction de cytotoxicité à médiation cellulaire dépendante des anticorps (ADCC, de l’anglais « antibody-dependent cellular cytotoxicity »), un mécanisme de défense immunitaire à médiation cellulaire par lequel une cellule effectrice du système immunitaire lyse activement une cellule cible, dont l'antigène de surface membranaire a été lié par un anticorps, et par conséquent, déclenche la mort des cellules tumorales via ADCC. Dans certains autres modes de réalisation, l'agent AFFIMER® est capable de démontrer une fonction ADCC. Comme décrit ci-dessus, outre la cytotoxicité médiée par Fc, la partie Fc peut contribuer au maintien des niveaux sériques de l’agent AFFIMER®, critiques pour sa stabilité et sa persistance dans l'organisme. Par exemple, lorsque la partie Fc se lie aux récepteurs Fc sur les cellules endothéliales et sur les phagocytes, l'agent AFFIMER® peut être internalisé et recyclé dans la circulation sanguine, amplifiant sa demi-vie dans le corps. Des exemples de cibles des polypeptides AFFIMER® supplémentaires incluent, mais sans s'y limiter, une autre protéine de point de contrôle immunitaire et un récepteur costimulateur immunitaire (en particulier si le(s) AFFIMER® supplémentaire(s) peuvent agoniser le récepteur costimulateur), un récepteur, une cytokine, un facteur de croissance ou un antigène associé à une tumeur, purement à titre illustratif. Dans certains modes de réalisation, la partie d’immunoglobuline peut être un anticorps monoclonal dirigé contre au moins une cible auto-immune (par ex. TNFR2 ou IL6-R). Dans certains modes de réalisation, le polypeptide TNFR2 AFFIMER® fait partie d'un agent AFFIMER® qui comprend un ou plus domaines de liaison qui se lient à une protéine régulée positivement dans des affections auto-immunes (par ex. TNFR2 ou IL6-R). Voir William BA et al. J. Clin. Med. 2019; 8(8): 1261 pour passer en revue les formats d'agents TNFR2 AFFIMER® englobés par la présente divulgation. Dans certains modes de réalisation, un agent TNFR2 AFFIMER® multispécifique peut en outre comprendre un groupement d'extension de demi-vie, tel que l'un quelconque de ceux décrits ici. Par exemple, un agent TNFR2 AFFIMER® peut comprendre au moins un polypeptide TNFR2 AFFIMER® lié par un lieur peptidique à un domaine de liaison spécifique d'au moins un domaine de liaison (par ex. CD3ε chaîne ou CD16) de cellule immunitaire (par ex. lymphocyte T et/ou lymphocyte NK) lié en outre à un groupement d'extension de demi-vie, tel qu'un domaine fragment cristallisable (Fc) (par ex. un Fc de non liaison à Fc-gammaR), de l'albumine sérique humaine (HSA) ou un polypeptide HSA AFFIMER®. Dans certains modes de réalisation, le groupement d'extension de demi-vie est un domaine fragment cristallisable (Fc). Dans certains modes de réalisation, le groupement d'extension de demi-vie est une albumine sérique humaine (HSA). Dans certains modes de réalisation, le groupement d'extension de demi-vie est un polypeptide HSA AFFIMER®. Ingénierie des propriétés PK et ADME Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® peut ne pas avoir une demi-vie et/ou un profil PK optimal pour la voie d'administration, telle qu'un dosage thérapeutique parentéral. Une "demi-vie" est la quantité de temps qu'il faut pour qu'une substance, telle qu'un agent AFFIMER® de la présente invention, perde la moitié de son activité ou de sa concentration pharmacologique ou physiologique. La demi-vie biologique peut être affectée par l'élimination, l'excrétion, la dégradation (par ex. enzymatique) de la substance, ou l'absorption et la concentration dans certains organes ou tissus du corps. Dans certains modes de réalisation, la demi-vie biologique peut être appréciée en déterminant le temps pris pour que la concentration plasmatique de la substance atteigne la moitié de son niveau d’état d'équilibre ("demi-vie plasmatique"). Pour remédier à cette lacune, une variété de stratégies générales pour prolonger la demi-vie a été utilisée dans le cas d'autres protéines thérapeutiques, y compris l'incorporation de groupements d’extension de demi-vie en tant que parties de l'agent AFFIMER®. Le terme « groupement prolongeant la demi-vie » fait référence à un groupement, un domaine ou une molécule pharmaceutiquement acceptable lié(e) de manière covalente (chimiquement conjugué ou fusionné) à un polypeptide AFFIMER® pour former un agent AFFIMER® décrit ici, optionnellement via un amino acide non codé naturellement, directement ou via un lieur, qui empêche ou atténue la dégradation protéolytique in vivo ou autre modification diminuant l'activité du polypeptide AFFIMER®, augmente la demi-vie, et/ou améliore ou altère d'autres propriétés pharmacocinétiques ou biophysiques, y compris, mais non limité à, l’augmentation du taux d'absorption, la réduction de la toxicité, l’amélioration de la solubilité, la réduction de l'agrégation des protéines, l’augmentation de l'activité biologique et/ou la sélectivité des cibles du polypeptide AFFIMER® modifié, l’augmentation de la fabricabilité et/ou la réduction de l'immunogénicité du polypeptide AFFIMER® modifié, par rapport à un comparateur tel qu'une forme non conjuguée du polypeptide AFFIMER® modifié. Le terme « groupement prolongeant la demi-vie » comprend des groupements prolongeant la demi-vie, non protéiques, telles qu'un polymère soluble dans l'eau tel que le polyéthylène glycol (PEG) ou le PEG discret, l'hydroxyéthylamidon (HEA), un lipide, un groupe acyle ramifié ou non ramifié, un groupe acyle en C8-C30 ramifié ou non ramifié, un groupe alkyle ramifié ou non ramifié, et un groupe alkyle en C8-C30 ramifié ou non ramifié ; et des groupements prolongeant la demi-vie protéiques, telles que l'albumine sérique, la transferrine, les adnectines (par ex. les adnectines se liant à l'albumine ou prolongeant la pharmacocinétique (PKE, de l’anglais « pharmacokinetics extending »), le domaine Fc, et un polypeptide non structuré, tel que les polypeptides XTEN et PAS (par ex. les séquences polypeptidiques conformationnelles désordonnées composées des acides aminés Pro, Ala et/ou Ser), et un fragment de l'un quelconque de tels éléments. Dans certains modes de réalisation, le groupement d’extension de demi-vie étend la demi-vie de l'agent AFFIMER® résultant circulant dans le sérum sanguin de mammifère par rapport à la demi-vie de la protéine qui n'est pas conjuguée ainsi au groupement (par ex. par rapport au polypeptide AFFIMER® seul). Dans certains modes de réalisation, la demi-vie est étendue de plus ou de plus d'environ 1,2 fois, 1,5 fois, 2,0 fois, 3,0 fois, 4,0 fois, 5,0 fois ou 6,0 fois. Dans certains modes de réalisation, la demi-vie est étendue de plus de 6 heures, de plus de 12 heures, de plus de 24 heures, de plus de 48 heures, de plus de 72 heures, de plus de 96 heures ou de plus d'1 semaine après administration in vivo par rapport à la protéine sans le groupement d’extension de demi-vie. Comme moyens à titre d’exemples additionnelles, les groupements prolongeant la demi-vie pouvant être utilisés dans la génération d'agents AFFIMER® de la divulgation incluent : • La fusion génétique de la séquence pharmacologique AFFIMER® à une protéine ou un domaine protéique à demi-vie naturellement longue (par ex. fusion Fc, fusion transferrine [Tf] ou fusion albumine. Voir, par exemple, Beck et al. (2011) “Therapeutic Fc-fusion proteins and peptides as successful alternatives to antibodies. MAbs. 3:1–2 ; Czajkowsky et al. (2012) “Fc-fusion proteins: new developments and future perspectives. EMBO Mol Med. 4:1015–28 ; Huang et al. (2009) “Receptor-Fc fusion therapeutics, traps, and Mimetibody technology” Curr Opin Biotechnol. 2009;20:692–9 ; Keefe et al. (2013) “Transferrin fusion protein therapies: acetylcholine receptor-transferrin fusion protein as a model. Dans: Schmidt S, editor. Fusion protein technologies for biopharmaceuticals: applications and challenges. Hoboken: Wiley ; p. 345–56 ; Weimer et al. (2013) “Recombinant albumin fusion proteins. Dans: Schmidt S, editor. Fusion protein technologies for biopharmaceuticals: applications and challenges. Hoboken: Wiley ; 2013. p. 297–323 ; Walker et al. (2013) “Albumin-binding fusion proteins in the development of novel long-acting therapeutics. Dans: Schmidt S, editor. Fusion protein technologies for biopharmaceuticals: applications and challenges. Hoboken: Wiley; 2013. p. 325–43. • La fusion génétique de la séquence pharmacologique AFFIMER® à un polypeptide inerte, par ex. XTEN (également connu sous le nom de PEG recombinant ou ''rPEG''), un polymère d'homoaminoacides (HAP ; HAPylation), un polymère proline-alanine-sérine (PAS ; PASylation), ou un peptide de type élastine (ELP ; ELPylation). Voir, par exemple, Schellenberger et al. (2009) “A recombinant polypeptide extends the in vivo half-life of peptides and proteins in a tunable manner. Nat Biotechnol. 2009;27:1186–90 ; Schlapschy et al. Fusion of a recombinant antibody fragment with a homo-amino-acid polymer: effects on biophysical properties and prolonged plasma half-life. Protein Eng Des Sel. 2007;20:273–84; Schlapschy (2013) PASylation: a biological alternative to PEGylation for extending the plasma halflife of pharmaceutically active proteins. Protein Eng Des Sel. 26:489–501. Floss et al. (2012) “Elastin-like polypeptides revolutionize recombinant protein expression and their biomedical application. Trends Biotechnol. 28:37–45. Floss et al. “ELP-fusion technology for biopharmaceuticals. Dans: Schmidt S, editor. Fusion protein technologies for biopharmaceuticals: application and challenges. Hoboken: Wiley; 2013. p. 372–98. • L’augmentation du rayon hydrodynamique par conjugaison chimique du peptide ou de la protéine pharmacologiquement actif pour répéter des groupements chimiques, par ex. au PEG (PEGylation) ou à l'acide hyaluronique. Voir, par exemple, Caliceti et al. (2003) “Pharmacokinetic and biodistribution properties of poly(ethylene glycol)-protein conjugates” Adv Drug Delivery Rev. 55:1261–77; Jevsevar et al. (2010) PEGylation of therapeutic proteins. Biotechnol J 5:113–28; Kontermann (2009) “Strategies to extend plasma half-lives of recombinant antibodies” BioDrugs. 23:93–109 ; Kang et al. (2009) “Emerging PEGylated drugs” Expert Opin Emerg Drugs. 14:363–80 ; et Mero et al. (2013) “Conjugation of hyaluronan to proteins” Carb Polymers. 92:2163–70. • L’augmentation significative de la charge négative de fusion du peptide ou de la protéine pharmacologiquement actif par polysialylation ; ou, alternativement, (b) la fusion d'un peptide fortement sialylé chargé négativement (par ex. le peptide carboxy-terminal [CTP ; de la gonadotrophine chorionique (GC) chaîne b]), connu pour prolonger la demi-vie de protéines naturelles telles que la GC humaine, sous-unité b, au candidat-médicament biologique. Voir, par exemple, Gregoriadis et al. (2005) “Improving the therapeutic efficacy of peptides and proteins: a role for polysialic acids” Int J Pharm. 2005 ; 300:125–30 ; Duijkers et al. “Single dose pharmacokinetics and effects on follicular growth and serum hormones of a long-acting recombinant FSH preparation (FSHCTP) in healthy pituitary-suppressed females” (2002) Hum Reprod. 17:1987–93 ; et Fares et al. “Design of a longacting follitropin agonist by fusing the C-terminal sequence of the chorionic gonadotropin beta subunit to the follitropin beta subunit” (1992) Proc Natl Acad Sci USA. 89:4304–8. 35; and Fares “Half-life extension through O-glycosylation. • La liaison non covalente, via la fixation d'un peptide ou d’un domaine de liaison à protéine à la protéine bioactive, à des protéines normalement à longue demi-vie telles que la HSA, l'IgG humaine, la transferrine ou la fibronectine. Voir, par exemple, Andersen et al. (2011) “Extending half-life by indirect targeting of the neonatal Fc receptor (FcRn) using a minimal albumin binding domain” J Biol Chem. 286:5234–41 ; O’Connor-Semmes et al. (2014) “GSK2374697, a novel albumin-binding domain antibody (albudAb), extends systemic exposure of extendin-4: first study in humans—PK/PD and safety” Clin Pharmacol Ther. 2014;96:704–12. Sockolosky et al. (2014) “Fusion of a short peptide that binds immunoglobulin G to a recombinant protein substantially increases its plasma half-life in mice” PLoS One. 2014;9:e102566. Les fusions génétiques classiques avec des protéines sériques à longue durée de vie offrent un procédé alternatif d'extension de la demi-vie distinct de la conjugaison chimique au PEG ou aux lipides. Deux protéines majeures ont traditionnellement été utilisées comme partenaires de fusion : les domaines Fc d'anticorps et l'albumine sérique humaine (HSA, de l’anglais « human serum albumin »). Les fusions Fc impliquent la fusion de peptides, de protéines ou d'exodomaines récepteurs à la partie Fc d'un anticorps. Les fusions Fc et albumine atteignent des demi-vies prolongées non seulement en augmentant la taille du médicament peptidique, mais toutes deux tirent également parti du mécanisme de recyclage naturel du corps : le récepteur néonatal Fc, FcRn. La liaison dépendante du pH de ces protéines au FcRn empêche la dégradation de la protéine de fusion dans l'endosome. Les fusions basées sur ces protéines peuvent avoir des demi-vies de l'ordre de 3 à 16 jours, bien plus longues que les peptides PEGylés ou lipidés typiques. La fusion aux domaines Fc d'anticorps peut améliorer la solubilité et la stabilité du médicament peptidique ou protéique. Un exemple de fusion peptidique Fc est le dulaglutide, un agoniste du récepteur GLP-1 actuellement en phase avancée d'essais cliniques. L'albumine sérique humaine, la même protéine exploitée par les peptides gras acylés, est l'autre partenaire de fusion populaire. L'albiglutide est un agoniste des récepteurs GLP-1 basé sur cette plateforme. Une différence majeure entre Fc et albumine est la nature dimère de Fc par rapport à la structure monomère d’HSA conduisant à la présentation d'un peptide fusionné sous forme de dimère ou de monomère selon le choix du partenaire de fusion. La nature dimérique d'une fusion AFFIMER®-Fc peut produire un effet d'avidité si les cibles AFFIMER® sont suffisamment rapprochées ou sont elles-mêmes des dimères. Ceci peut être souhaitable ou non en fonction de la cible. Fusions Fc Dans certains modes de réalisation, le polypeptide AFFIMER® peut faire partie d'une protéine de fusion avec un domaine Fc d'immunoglobuline ("domaine Fc"), ou un fragment ou une variante de celui-ci, tel qu'une région Fc fonctionnelle. Dans certains modes de réalisation, la région Fc est une région Fc de non liaison à Fc-gammaR. Dans ce contexte, une fusion Fc ("fusion-Fc"), telle qu'un agent TNFR2 AFFIMER® créé en tant que protéine de fusion de Fc-AFFIMER®, est un polypeptide comprenant au moins une séquence TNFR2 AFFIMER® liée de manière covalente par l’intermédiaire d’un squelette peptidique (directement ou indirectement) à une région Fc d'une immunoglobuline. Une fusion-Fc peut comprendre, par exemple, la région Fc d'un anticorps (qui facilite les fonctions effectrices et la pharmacocinétique) et une séquence TNFR2 AFFIMER® en tant que partie du même polypeptide. Une région Fc d'immunoglobuline peut également être liée indirectement à au moins un polypeptide TNFR2 AFFIMER®. Divers lieurs sont connus dans l'art et peuvent optionnellement être utilisés pour lier un Fc à un polypeptide incluant une séquence TNFR2 AFFIMER® pour générer une fusion-Fc. Dans certains modes de réalisation, les fusions-Fc peuvent être dimérisées pour former des homodimères fusion-Fc, ou en utilisant des domaines Fc non identiques, pour former des hétérodimères fusion-Fc. Dans certains modes de réalisation, un homodimère fusion-Fc comprend un dimère d'un agent TNFR2 AFFIMER® qui comprend un polypeptide TNFR2 AFFIMER® lié à un domaine Fc lié à un autre polypeptide TNFR2 AFFIMER® (polypeptide TNFR2 AFFIMER®-domaine Fc-polypeptide TNFR2 AFFIMER®). Il existe plusieurs raisons de choisir la région Fc d'anticorps humains pour une utilisation dans la génération d'agents TNFR2 AFFIMER® en tant que protéines de fusion TNFR2 AFFIMER®. La principale raison est de produire une protéine stable, suffisamment grande pour démontrer un profil pharmacocinétique similaire à ceux des anticorps, et de tirer parti des propriétés conférées par la région Fc ; ceci inclut la voie de récupération du récepteur FcRn néonatal impliquant le recyclage médié par FcRn de la protéine de fusion à la surface cellulaire après l’endocytose, évitant la dégradation lysosomale et résultant en une relibération dans la circulation sanguine, contribuant ainsi à une demi-vie sérique étendue. Un autre avantage évident est la liaison du domaine Fc à la Protéine A, ce qui peut simplifier le traitement en aval pendant la production de l'agent AFFIMER® et permettre la génération d'une préparation hautement pure de l'agent AFFIMER®. En général, un domaine Fc comprendra la région constante d'un anticorps à l'exclusion du premier domaine d'immunoglobuline à région constante. Ainsi, le domaine Fc fait référence aux deux derniers domaines d'immunoglobuline à région constante de l'IgA, IgD et IgG, et aux trois derniers domaines d'immunoglobuline à région constante de l'IgE et IgM, et à la charnière N-terminale flexible de ces domaines. Pour les IgA et IgM, Fc peut inclure la chaîne J. Pour les IgG, Fc comprend les domaines d'immunoglobuline Cγ2 et Cγ3 et la charnière entre Cγ1 et Cγ2. Bien que les frontières du domaine Fc puissent varier, la région Fc de l'IgG humaine chaîne lourde est généralement définie comme comprenant les résidus C226 ou P230 jusqu'à son extrémité carboxyle, la numérotation étant conforme à l'index EU tel qu'énoncé dans Kabat (Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, NIH, Bethesda, Md. (1991)). Fc peut faire référence à cette région isolément, ou à cette région dans le contexte d'un anticorps entier, d'un fragment d'anticorps ou d'une protéine de fusion de Fc. Des polymorphismes ont été observés à un certain nombre de positions Fc différentes et sont également inclus en tant que domaines Fc tels qu'utilisés ici. Dans certains modes de réalisation, le Fc Tel qu'utilisé ici, une « région Fc fonctionnelle » fait référence à un domaine Fc ou un fragment de celui-ci qui conserve la capacité de se lier au FcRn. Une région Fc fonctionnelle se lie au FcRn mais ne possède pas de fonction effectrice. La capacité de la région Fc ou d'un fragment de celle-ci à se lier au FcRn peut être déterminée par des essais de liaison standard connus dans l'art. Des exemples de "fonctions effectrices" incluent la liaison de C1q ; la cytotoxicité dépendante du complément (CDC) ; la liaison au récepteur Fc ; la cytotoxicité à médiation cellulaire dépendante des anticorps (ADCC) ; la phagocytose ; la régulation à la baisse des récepteurs de surface cellulaire (par ex. récepteur des lymphocytes B ; BCR, de l’anglais « B cell receptor »), etc. De telles fonctions effectrices peuvent être appréciées en utilisant divers essais connus dans l'art pour évaluer de telles fonctions effectrices d'anticorps. Dans un exemple de mode de réalisation, le domaine Fc est dérivé d'une sous-classe d'IgG1, cependant, d'autres sous-classes (par ex. IgG2, IgG3 et IgG4) peuvent également être utilisées. Un exemple de séquence d'un domaine Fc d'immunoglobuline IgG1 humaine pouvant être utilisé est : DKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID NO : 442) Dans certains modes de réalisation, la région Fc utilisée dans la protéine de fusion peut comprendre la région charnière d'une molécule Fc. Un exemple de région charnière comprend les résidus de charnière centrale couvrant les positions 1 à 16 (par ex. DKTHTCPPCPAPELLG ((SEQ ID NO : 484)) de l'exemple de séquence de domaine Fc d'immunoglobuline humaine IgG1 fourni ci-dessus. Dans certains modes de réalisation, la protéine de fusion contenant AFFIMER® peut adopter une structure multimérique (par ex. un dimère) en raison, en partie, des résidus de cystéine aux positions 6 et 9 au sein de la région charnière de l'exemple de séquence de domaine Fc d'immunoglobuline humaine IgG1 proposé ci-dessus. Dans d'autres modes de réalisation, la région charnière telle qu'utilisée ici peut comporter en outre des résidus dérivés des régions CH1 et CH2 qui flanquent la séquence charnière centrale de l'exemple de séquence de domaine Fc d'immunoglobuline IgG1 humaine fournie ci-dessus. Dans encore d'autres modes de réalisation, la séquence charnière peut comprendre ou consister en GSTHTCPPCPAPELLG (SEQ ID NO : 443) ou EPKSCDKTHTCPPCPAPELLG (SEQ ID NO : 444). Dans certains modes de réalisation, la séquence charnière peut inclure au moins une substitution qui confère des propriétés pharmacocinétiques, biophysiques et/ou biologiques souhaitables. Des exemples de séquences charnières incluent : EPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPS (SEQ ID NO: 445) ; EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPS (SEQ ID NO: 446) ; EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGSS (SEQ ID NO: 447); EPKSSGSTHTCPPCPAPELLGGSS (SEQ ID NO: 448) ; DKTHTCPPCPAPELLGGPS (SEQ ID NO: 449); et DKTHTCPPCPAPELLGGSS (SEQ ID NO: 450). Dans certains modes de réalisation, le résidu P en position 18 de l'exemple de séquence de domaine Fc d'immunoglobuline IgG1 humaine fourni ci-dessus peut être remplacé par S pour retirer la fonction effectrice de Fc ; ce remplacement est exemplifié dans des charnières ayant les séquences EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGSS (SEQ ID NO : 451), EPKSSGSTHTCPPCPAPELLGGSS (SEQ ID NO : 452), et DKTHTCPPCPAPELLGGSS (SEQ ID NO : 453). Dans un autre mode de réalisation, les résidus DK aux positions 1-2 de l'exemple de séquence de domaine Fc d'immunoglobuline humaine IgG1 proposé ci-dessus peuvent être remplacés par GS pour éliminer un site de clip (de l’anglais « clip site ») potentiel ; ce remplacement est exposé à titre d’exemple dans la séquence EPKSSGSTHTCPPCPAPELLGGSS (SEQ ID NO : 448). Dans un autre mode de réalisation, le C en position 103 de la région constante de la chaîne lourde de l'IgG1 humaine (par ex. les domaines CH1-CH3) peut être remplacé par S pour empêcher la formation incorrecte d’une liaison cystéine en l'absence d’une chaîne légère ; ce remplacement est illustré à titre d’exemple par EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGPS (SEQ ID NO : 446), EPKSSDKTHTCPPCPAPELLGGSS (SEQ ID NO : 451), et EPKSSGSTHTCPPCPAPELLGGSS (SEQ ID NO : 452). Dans certains modes de réalisation, le Fc est un Fc de mammifère tel qu'un Fc humain, comprenant des domaines Fc dérivés d'IgG1, IgG2, IgG3 ou IgG4. La région Fc peut posséder au moins environ 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % ou 99 % d'identité de séquence avec une région Fc native et/ou avec une région Fc d'un polypeptide parent. Dans certains modes de réalisation, la région Fc peut avoir au moins environ 90 % d'identité de séquence avec une région Fc native et/ou avec une région Fc d'un polypeptide parent. Dans certains modes de réalisation, le domaine Fc comprend une séquence d'acides aminés sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 454-467 ou une séquence Fc parmi les exemples fournis par les SEQ ID NO : 454-467. Il doit être compris que la lysine C-terminale d'un domaine Fc est un composant optionnel d'une protéine de fusion comprenant un domaine Fc. Dans certains modes de réalisation, le domaine Fc comprend une séquence d'acides aminés sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 454-467, à ceci près que la lysine C-terminale de celle-ci est omise. Dans certains modes de réalisation, le domaine Fc comprend la séquence d'acides aminés sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 454-467. Dans certains modes de réalisation, le domaine Fc comprend la séquence d'acides aminés sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 454-467 à ceci près que la lysine C-terminale de celle-ci est omise. Tableau 5. Séquences du domaine Fc. Nom Séquence SEQ ID NO : hIgG1a_191 [Sous-type A] DKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 454 hIgG1a_189 [hIgG1a_191 sans "GK" sur terminaison C ; Sous-type A] DKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSP 455 hIgG1a_191b [Sous-type A/F] DKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 456 hIgG1f_1.1_191 [Contient cinq mutations ponctuelles pour altérer la fonction ADCC, sous-type F] DKTHTCPPCPAPEAEGAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 457 hIgG1f_1.1_186 [Contient cinq mutations ponctuelles pour altérer la fonction ADCC et C225S (numérotation Edlemen) ; sous-type F] EPKSSDKTHTCPPCPAPEAEGAPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 458 hIgG1a_(N297G)_191 [Sous-type A] DKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYGSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 459 hIgG1a_190 [hIgG1a_190 sans "K" sur terminaison C ; Sous-type A] DKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG 460 hIgG1a_(N297Q)_191 [Sous-type A] DKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYQSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 461 hIgG1a_(N297S)_191 [Sous-type A] DKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYSSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 462 hIgG1a_(N297A)_191 [Sous-type A] DKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 463 hIgG1a_(N297H)_191 [Sous-type A] DKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYHSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 464 hIgG4 DKRVESKYGPPCPSCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 465 hIgG4_(S241P) DKRVESKYGPPCPPCPAPEFLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 466 hIgG1 (contient deux mutations ponctuelles pour altérer la fonction ADCC L20A, L21A) SEPKSCDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 467 La « cytotoxicité à médiation cellulaire dépendante des anticorps » ou « ADCC » (en anglais « Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity ») fait référence à une forme de cytotoxicité dans laquelle les Ig sécrétées liées aux récepteurs Fc (FcR) présents sur certaines cellules cytotoxiques (par ex. les lymphocytes NK (de l’anglais « Natural Killer », soit tueuses naturelles), les neutrophiles et les macrophages) permet à ces cellules effectrices cytotoxiques de se lier spécifiquement à une cellule cible porteuse d'antigènes et de tuer ensuite la cellule cible avec des cytotoxines. Dans certains modes de réalisation, la protéine de fusion comprend une séquence de domaine Fc pour laquelle l'agent AFFIMER® résultant n'a pas (ou qu’un niveau réduit) d'ADCC et/ou l'activation du complément ou la fonctionnalité effectrice. Par exemple, le domaine Fc peut comprendre une région constante naturellement désactivée d'isotype IgG2 ou IgG4 ou une région constante IgG1 mutée. Des exemples de modifications appropriées sont décrits dans EP0307434. Un exemple comprend les substitutions de résidus d'alanine aux positions 235 et 237 (numérotation selon l'index UE). Dans d'autres modes de réalisation, la protéine de fusion comprend une séquence de domaine Fc pour laquelle l'agent AFFIMER® résultant conservera une partie ou la totalité de la fonctionnalité Fc, par exemple sera capable d'une ou des deux activités ADCC et CDC, comme par exemple si la protéine de fusion comprend le domaine Fc de l'IgG1 ou IgG3 humaine. Les niveaux de fonction effectrice peuvent varier selon des techniques connues, par exemple par des mutations dans le domaine CH2, par exemple où le domaine IgG1 CH2 a au moins une mutation en des positions sélectionnées parmi 239 et 332 et 330, par exemple les mutations étant sélectionnées parmi S239D et I332E et A330L de telle sorte que l'anticorps ait une fonction effectrice amplifiée, et/ou par exemple en altérant le profil de glycosylation de la protéine de liaison à antigène de la divulgation de sorte qu'il y ait une réduction de la fucosylation de la région Fc. Fusions d'albumine Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® est une protéine de fusion comprenant, en plus d'au moins une séquence AFFIMER®, une séquence d'albumine ou un fragment d'albumine. Dans d'autres modes de réalisation, l'agent AFFIMER® est conjugué à la séquence d'albumine ou à un fragment d'albumine par l’intermédiaire d’une liaison chimique autre qu'une incorporation dans la séquence polypeptidique incluant le polypeptide AFFIMER®. Dans certains modes de réalisation, l'albumine, une variante de l'albumine ou un fragment d'albumine est de l’albumine sérique humaine (HSA), une variante de l’albumine sérique humaine ou un fragment d’albumine sérique humaine. Des protéines sériques d'albumine comparables à l'HSA se trouvent, par ex. chez les singes cynomolgus, les vaches, chiens, lapins et rats. Parmi les espèces non humaines, l'albumine sérique bovine (BSA, de l’anglais « bovine serum albumin ») est structurellement la plus similaire à l’HSA. Voir, par ex., Kosa et al., (2007) J Pharm Sci. 96(11):3117-24. La présente divulgation envisage l'utilisation d'albumine provenant d'espèces non humaines, dont, mais sans s'y limiter, une séquence d'albumine dérivée de l’albumine sérique cyno ou de l’albumine sérique bovine. L’HSA mature, un polypeptide de 585 acides aminés (env. 67 kDa) ayant une demi-vie sérique d'environ 20 jours, est principalement responsable du maintien de la pression artérielle osmotique colloïdale, du pH sanguin, et du transport et de la distribution de nombreux ligands endogènes et exogènes. La protéine a trois domaines structurellement homologues (domaines I, II et III), est presque entièrement de conformation alpha-hélicoïdale et est hautement stabilisée par 17 ponts disulfure. Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® peut être une protéine de fusion d'albumine comprenant au moins une séquence polypeptidique AFFIMER® et la séquence pour l'albumine sérique humaine mature (SEQ ID NO : 468) ou une variante ou un fragment de celle-ci qui maintient les propriétés PK et/ou de biodistribution de l'albumine mature dans la mesure souhaitée dans la protéine de fusion. La séquence d'albumine peut être séparée de la séquence polypeptidique AFFIMER® ou d'autres séquences flanquantes dans l'agent AFFIMER® par utilisation de séquences de lieurs comme décrit ci-dessus. Sauf indication contraire, la référence ici à « l'albumine » ou à « l'albumine mature » est prévue pour se référer à l'HSA. Cependant, il est à noter que la HSA pleine longueur a un peptide signal de 18 acides aminés (MKWVTFISLLFLFSSAYS (SEQ ID NO : 483) suivi d'un prodomaine de 6 acides aminés (RGVFRR) (SEQ ID NO : 469) ; ce peptide de 24 résidus d'acides aminés peut être appelé préprodomaine. Les protéines de fusion AFFIMER®-HSA peuvent être exprimées et sécrétées en utilisant le préprodomaine HSA dans la séquence codante des protéines recombinantes. En variante, la protéine de fusion AFFIMER®-HSA peut être exprimée et sécrétée par inclusion d'autres séquences signal de sécrétion, telles que décrites ci-dessus. Dans des modes de réalisation alternatifs, plutôt que fournis en tant que partie d'une protéine de fusion avec le polypeptide AFFIMER®, le polypeptide d'albumine sérique peut être couplé de manière covalente au polypeptide contenant AFFIMER® par l’intermédiaire d’une liaison autre qu'une liaison amide de squelette, tel que réticulé par l’intermédiaire d’une conjugaison chimique entre des chaînes latérales d'acides aminés sur chacun parmi le polypeptide d'albumine et le polypeptide contenant AFFIMER®. Dans certains modes de réalisation, un procédé de modification chimique qui peut être appliqué dans la génération des agents AFFIMER® sujets pour augmenter la demi-vie des protéines est la lipidation, qui implique la liaison covalente d'acides gras aux chaînes latérales peptidiques. Conçue à l'origine et développée en tant que procédé pour étendre la demi-vie de l'insuline, la lipidation partage le même mécanisme de base d’extension de la demi-vie que la PEGylation, à savoir l'augmentation du rayon hydrodynamique pour réduire la filtration rénale. Cependant, le groupement lipidique est lui-même relativement petit et l'effet est médié indirectement par la liaison non covalente du groupement lipidique à de l'albumine circulante. Une conséquence de la lipidation est qu'elle réduit la solubilité dans l'eau du peptide, mais l'ingénierie du lieur entre le peptide et l'acide gras peut moduler cela, par exemple en utilisant du glutamate ou des mini PEG au sein du lieur. L'ingénierie des lieurs et la variation du groupement lipidique peuvent affecter l'auto-agrégation, ce qui peut contribuer à augmenter la demi-vie en ralentissant la biodistribution, indépendamment de l'albumine. Voir, par exemple, Jonassen et al. (2012) Pharm Res. 29(8):2104-14. D'autres exemples de groupements de liaison à l'albumine à utiliser dans la génération de certains agents AFFIMER® incluent les adnectines de liaison à l'albumine (PKE2) (voir WO2011140086 "Serum Albumin Binding Molecules", WO2015143199 "Serum albumin-binding Fibronectin Type III Domains" et WO2017053617 "Fast-off rate serum albumin binding fibronectin type iii domains"), le domaine de liaison à l'albumine 3 (ABD3, de l’anglais « albumin binding domain 3 ») de la protéine G de la souche G148 de Streptocoque, et l'anticorps du domaine de liaison à l'albumine GSK2374697 (« AlbudAb ») ou la portion de nanocorps de liaison à l'albumine de l'ATN-103 (Ozoralizumab). AFFIMER® XT Dans certains modes de réalisation, la molécule qui se lie à une protéine sérique telle que l’HSA comprend un polypeptide HSA AFFIMER®. Des exemples de tels polypeptides HSA AFFIMER® peuvent être trouvés dans WO2022/023540. Un polypeptide HSA AFFIMER® proposé ici, dans certains modes de réalisation, est lié à une autre molécule et étend la demi-vie de cette molécule (par ex. un polypeptide thérapeutique). Il a été démontré que ces polypeptides HSA AFFIMER® dans des études pharmacocinétiques (PK, de l’anglais « PharmacoKinetic ») in vivo prolongent, de manière contrôlée, la demi-vie sérique de tout autre polypeptide AFFIMER® thérapeutique auquel il est conjugué en une seule fusion génétique, par ex. qui peut être faite dans E. Coli. Les polypeptides AFFIMER® XT™ peuvent également être utilisés pour prolonger la demi-vie d'autres agents thérapeutiques peptidiques ou protéiques, tels que le TNFR2 AFFIMER® de la présente invention. Dans certains modes de réalisation, un polypeptide HSA AFFIMER® prolonge la demi-vie sérique du polypeptide TNFR2 AFFIMER® in vivo. Par exemple, un polypeptide HSA AFFIMER® peut étendre la demi-vie du polypeptide TNFR2 AFFIMER® d'au moins 2 fois, par rapport à la demi-vie de la molécule non liée à un polypeptide HSA AFFIMER®. Dans certains modes de réalisation, un polypeptide HSA AFFIMER® prolonge la demi-vie du polypeptide TNFR2 AFFIMER® d'au moins 3 fois, au moins 4 fois, au moins 5 fois, au moins 6 fois, au moins 7 fois, au moins 8 fois, au moins 9 fois, au moins 10 fois, au moins 20 fois, ou au moins 30 fois, par rapport à la demi-vie du polypeptide TNFR2 AFFIMER® non lié à un polypeptide HSA AFFIMER®. Dans certains modes de réalisation, un polypeptide HSA AFFIMER® prolonge la demi-vie du polypeptide TNFR2 AFFIMER® de 2 fois à 5 fois, 2 fois à 10 fois, 3 fois à 5 fois, 3 fois à 10 fois. 15 fois à 5 fois, 4 fois à 10 fois, ou 5 fois à 10 fois, par rapport à la demi-vie du polypeptide TNFR2 AFFIMER® non lié à un polypeptide HSA AFFIMER®. Dans certains modes de réalisation, un polypeptide HSA AFFIMER® prolonge la demi-vie du polypeptide TNFR2 AFFIMER® d'au moins 6 heures, d'au moins 12 heures, d'au moins 24 heures, d'au moins 48 heures, d'au moins 72 heures, d'au moins 96 heures, par exemple au moins 1 semaine après administration in vivo, par rapport à la demi-vie de la molécule non liée à un polypeptide HSA AFFIMER®. Un polypeptide HSA AFFIMER® comprend un polypeptide AFFIMER® dans lequel au moins une des boucles accessibles à solvant provient de la protéine Stéfine A de type sauvage ayant des séquences d'acides aminés pour permettre à un polypeptide AFFIMER® de se lier à l'HSA, sélectivement, et dans certains modes de réalisation, avec un Kd de 10 -6 M ou moins. Dans certains modes de réalisation, le polypeptide HSA AFFIMER® est dérivé de la protéine Stéfine A humaine de type sauvage ayant une séquence squelette et dans laquelle l'une ou les deux parmi la boucle 2 (désignée (Xaa)n) et la boucle 4 (désignée (Xaa)m) sont remplacées par des séquences de boucles alternatives (Xaa)n et (Xaa)m, pour avoir la Formule générale (I) : FR1-(Xaa)n-FR2-(Xaa)m-FR3 (I), où FR1 est une séquence d’acides aminés ayant au moins 70 % (par ex. au moins 75 %, au moins 80 %, au moins 85 %, au moins 90 %, au moins 95 % ou 100 %) d'identité avec MIPGGLSEAK PATPEIQEIV DKVKPQLEEK TNETYGKLEA VQYKTQVLA (SEQ ID NO : 470) ; FR2 est une séquence d’acides aminés ayant au moins 70 % (par ex. au moins 75 %, au moins 80 %, au moins 85 %, au moins 90 %, au moins 95 % ou 100 %) d'identité avec GTNYYIKVRA GDNKYMHLKV FKSL (SEQ ID NO : 2) ; FR3 est une séquence d’acides aminés ayant au moins 70 % (par ex. au moins 75 %, au moins 80 %, au moins 85 %, au moins 90 %, au moins 95 % ou 100 %) d'identité avec EDLVLTGYQV DKNKDDELTG F (SEQ ID NO : 3) ; Xaa, individuellement pour chaque occurrence, est un acide aminé ; et n est un nombre entier de 3 à 20, et m est un nombre entier de 3 à 20. Des variantes supplémentaires de cette structure générale peuvent être trouvées dans WO2022/023540. Dans tous les modes de réalisation, chaque acide aminé de (Xaa)n peut être identique ou sélectionné parmi n'importe quel acide aminé. Il en va de même pour (Xaa)m. Dans certains modes de réalisation, le polypeptide TNFR2 AFFIMER® comprend un polypeptide HSA AFFIMER® comprenant une séquence d'acides aminés sélectionnée parmi l'une quelconque des SEQ ID NO : 471-477 (Table 6). Dans certains modes de réalisation, le polypeptide TNFR2 AFFIMER® a une demi-vie sérique étendue et comprend une séquence d'acides aminés qui est au moins à 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 % ou même 98 % identique à une séquence sélectionnée parmi les SEQ ID NO : 471-477 (Table 6). Des séquences de polypeptides HSA AFFIMER® supplémentaires à utiliser avec la présente invention peuvent être trouvées dans WO2022/023540. Tableau 6. Exemples de séquences polypeptidiques HSA AFFIMER® Séquence SEQ ID NO : MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTNETYGKLEAVQYKTQVLADWWQAKWPHSTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPYKVHQSSGGADRVLTGYQVDKNKDDELTGF 471 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTNETYGKLEAVQYKTQVLAGYWAAKWPGSTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPFPNTSYDLQADRVLTGYQVDKNKDDELTGF 472 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTNETYGKLEAVQYKTQVLANWYQQRWPGSTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPWHNYGESSGADRVLTGYQVDKNKDDELTGF 473 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTNETYGKLEAVQYKTQVLAVWGPEYQHQSTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPNAGWPLVPEADRVLTGYQVDKNKDDELTGF 474 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTNETYGKLEAVQYKTQVLAGHYARYWPGSTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPWAQKSKVHQADRVLTGYQVDKNKDDELTGF 475 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTNETYGKLEAVQYKTQVLAGFWASKWPGSTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPFTAVSKKDAADRVLTGYQVDKNKDDELTGF 476 MIPRGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTNETYGKLEAVQYKTQVLANFFQRRWPGSTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFNGPWKFRNTDRGADRVLTGYQVDKNKDDELTGF 477 Conjugués Les agents AFFIMER® sujets peuvent également inclure au moins un groupement fonctionnel destiné à conférer une détectabilité ou une activité pharmacologique supplémentaire à l'agent AFFIMER®. Les groupements fonctionnels pour la détection sont ceux qui peuvent être employés pour détecter l'association de l'agent AFFIMER® avec une cellule ou un tissu in vivo. Les groupements fonctionnels ayant une activité pharmacologique sont les agents qui sont destinés à être délivrés au tissu exprimant la cible de l'agent AFFIMER® (TNFR2 dans le cas des agents TNFR2 AFFIMER® de la présente divulgation) et, ce faisant, ont une conséquence pharmacologique pour les tissus ou cellules ciblé(e)s. La présente divulgation propose des agents AFFIMER® incluant des conjugués de substances ayant une grande variété de groupes, de substituants ou de groupements fonctionnels, ces Groupements Fonctionnels (en anglais « Functional Moieties ») incluant, mais sans s'y limiter, un marqueur ; un colorant ; une molécule d'immunoadhésion ; un radionucléide ; un composé cytotoxique ; un médicament ; un marqueur d'affinité ; un marqueur de photoaffinité ; un composé réactif ; une résine ; une seconde protéine ou un second polypeptide ou analogue de polypeptide ; un anticorps ou fragment d'anticorps ; un chélateur métallique ; un cofacteur ; un acide gras ; un glucide ; un polynucléotide ; un ADN ; un ARN ; un polynucléotide antisens ; un saccharide ; un dendrimère soluble dans l'eau ; une cyclodextrine ; un acide ribonucléique inhibiteur ; un biomatériau ; une nanoparticule ; une sonde radicalaire (en anglais « spin label ») ; un fluorophore, un groupement contenant un métal ; un groupement radioactif ; un nouveau groupe fonctionnel ; un groupe qui interagit de manière covalente ou non covalente avec d'autres molécules ; un groupement photocagé ; un groupement excitable par rayonnement actinique ; un groupement photoisomérisable ; la biotine ; un dérivé de la biotine ; un analogue de la biotine ; un groupement incorporant un atome lourd ; un groupe chimiquement clivable ; un groupe photoclivable ; une chaîne latérale allongée ; un sucre lié à un carbone ; un agent redox-actif ; un aminothioacide ; un groupement toxique ; un groupement isotopiquement marqué ; une sonde biophysique ; un groupe phosphorescent ; un groupe chimioluminescent ; un groupe dense en électrons ; un groupe magnétique ; un groupe intercalant ; un chromophore ; un agent de transfert d'énergie ; un agent biologiquement actif ; un marqueur détectable ; une petite molécule ; un point quantique ; un nanotransmetteur ; un radionucléotide ; un émetteur radio ; un agent de capture de neutrons ; ou toute combinaison de ce qui précède, ou tout autre composé ou substance souhaitable. Marqueurs et groupements détectables Lorsque le groupement est un marqueur détectable, il peut s'agir d'un marqueur fluorescent, d'un marqueur radioactif, d'un marqueur enzymatique ou de tout autre marqueur connu de la personne du métier. Dans certains modes de réalisation, le groupement fonctionnel est un marqueur détectable qui peut être inclus en tant que partie d'un conjugué pour former certains agents AFFIMER® adaptés à l'imagerie médicale. Par « imagerie médicale », on entend toute technique permettant de visualiser une région interne du corps humain ou animal, à des fins de diagnostic, de recherche ou de traitement thérapeutique. Par exemple, l'agent AFFIMER® peut être détecté (et quantifié) par radioscintigraphie, imagerie par résonance magnétique (IRM), tomodensitométrie (en l’anglais « computed tomography », ou CT scan), imagerie nucléaire, émission de positrons comprenant un agent de contraste de tomographie métallique (PET, de l’anglais « Positron Emission Tomography »), imagerie optique (telle que l'imagerie par fluorescence comprenant l'imagerie par fluorescence dans le proche infrarouge (NIRF, de l’anglais « near-infrared fluorescence »), imagerie par bioluminescence ou des combinaisons de celles-ci. Le Groupement Fonctionnel (en anglais « Functional Moiety ») est optionnellement un agent de contraste pour l'imagerie par rayons X. Les agents utiles pour amplifier ces techniques sont les matériaux qui permettent une visualisation d'un locus, organe ou site de maladie particulier dans le corps, et/ou qui mènent à une certaine amélioration de la qualité des images générées par les techniques d'imagerie, offrant une interprétation améliorée ou plus facile de ces images. De tels agents sont appelés ici agents de contraste, dont l'utilisation facilite la différenciation des différentes parties de l'image, en augmentant le "contraste" entre ces différentes régions de l'image. Le terme « agents de contraste » englobe ainsi les agents qui servent à amplifier la qualité d'une image qui peut néanmoins être générée en l'absence d'un tel agent (comme c'est le cas, par exemple, en IRM), ainsi que les agents qui sont préalables à la génération d'une image (comme c'est le cas, par exemple, en imagerie nucléaire). Dans certains modes de réalisation, le marqueur détectable comprend un groupement chélate pour chélater un métal, par ex. un chélateur pour un radiométal ou un ion paramagnétique. Dans certains modes de réalisation, le marqueur détectable est un chélateur pour un radionucléide utile pour des procédures de radiothérapie ou d'imagerie. Les radionucléides utiles dans la présente divulgation incluent les émetteurs gamma, émetteurs de positrons, émetteurs d'électrons Auger, émetteurs de rayons X et émetteurs de fluorescence, avec les émetteurs bêta ou alpha à usage thérapeutique. Voici des exemples de radionucléides utiles comme toxines en radiothérapie : 43K, 47Sc, 51Cr, 57Co, 58Co, 59Fe, 64Cu, 67Ga, 67Cu, 68Ga, 71Ge, 75Br, 76Br, 77Br, 77As, 81Rb, 90Y, 97Ru, 99mTc, 100Pd, 101Rh, 103Pb, 105Rh, 109Pd, 111Ag, 111In, 113In, 119Sb 121Sn, 123I, 125I, 127Cs, 128Ba, 129Cs, 131I, 131Cs, 143Pr, 153Sm, 161Tb, 166Ho, 169Eu, 177Lu, 186Re, 188Re, 189Re, 191Os, 193Pt, 194Ir, 197Hg, 199Au, 203Pb, 211At, 212Pb, 212Bi et 213Bi. Les conditions dans lesquelles un chélateur coordonnera un métal sont décrites, par exemple, par Gansow et al., Brevet US NOS: 4,831,175, 4,454,106 et 4,472,509. Des exemples de chélateurs comprennent, simplement à titre d'illustration, l'acide 1,4,7-triazacyclononane-N,N',N"-triacétique (NOTA) l’acide 1,4,7,10-tétraazacyclododécane-N,N',N",N'"-tétraacétique (DOTA) l’acide 1,4,8,11-tétraazacyclotétradécane-N,N',N",N'"-tétraacétique (TETA). D'autres isotopes détectables qui peuvent être incorporés directement dans les résidus d'acides aminés du polypeptide AFFIMER® ou qui autrement ne nécessitent pas de chélateur, incluent 3H, 14C, 32P, 35S et 36Cl. Des ions paramagnétiques, utiles pour les procédures de diagnostic, peuvent également être administrés. Des exemples d'ions paramagnétiques incluent le chrome (III), le manganèse (II), le fer (III), le fer (II), le cobalt (II), le nickel (II), le cuivre (II), le néodyme (III), le samarium (III), l’ytterbium (III), le gadolinium (III), le vanadium (II), le terbium (III), le dysprosium (III), l’holmium (III), l’erbium (III), ou des combinaisons de ces ions paramagnétiques. Des exemples de marqueurs fluorescents incluent, mais sans s'y limiter, les colorants organiques (par ex. la cyanine, la fluorescéine, la rhodamine, les Alexa Fluors, les Dylight fluors, les ATTO Dyes, les BODIPY Dyes, etc.), les fluorophores biologiques (par ex. la protéine fluorescente verte (GFP, de l’anglais « Green Fluorescent Protein »), l’R-Phycoérythrine, etc.), et les points quantiques. Les composés fluorescents non limitatifs qui peuvent être utilisés dans la présente divulgation incluent, Cy5, Cy5.5 (également connu sous le nom de Cy5++), Cy2, l'isothiocyanate de fluorescéine (FITC, de l’anglais « fluorescein isothiocyanate »), l'isothiocyanate de tétraméthylrhodamine (TRITC, de l’anglais « tetramethylrhodamine isothiocyanate »), la phycoérythrine, Cy7, la fluorescéine (FAM), Cy3, Cy3.5 (également connu sous le nom de Cy3++), Texas Red, LightCycler-Red 640, LightCycler Red 705, la tétraméthylrhodamine (TMR), la rhodamine, un dérivé de rhodamine (ROX), l’hexachlorofluorescéine (HEX), la rhodamine 6G (R6G), le dérivé de rhodamine JA133, les Alexa Fluorescent Dyes (tels que Alexa Fluor 488, Alexa Fluor 546, Alexa Fluor 633, Alexa Fluor 555, et Alexa Fluor 647), le 4′,6-diamidino-2-phénylindole (DAPI), l’iodure de propidium, l’AMCA, le Spectrum Green, le Spectrum Orange, le Spectrum Aqua, la Lissamine et complexes de métaux de transition fluorescents, tels que l'europium. Les composés fluorescents qui peuvent être utilisés incluent également des protéines fluorescentes, telles que la GFP (protéine fluorescente verte), la GFP amplifiée (EGFP, de l’anglais « enhanced GFP »), la protéine fluorescente bleue et ses dérivés (BFP, de l’anglais « blue fluorescent protein », EBFP, EBFP2, Azurite, mKalama1), la protéine fluorescente cyan et ses dérivés (CFP, de l’anglais « cyan fluorescent protein », ECFP, Cerulean, CyPet) et la protéine fluorescente jaune et ses dérivés (YFP, de l’anglais « yellow fluorescent protein », Citrine, Venus, YPet). WO2008142571, WO2009056282, WO9922026. Des exemples de marqueurs enzymatiques incluent, mais sans s'y limiter, la peroxydase de raifort (HRP, de l’anglais « horseradish peroxidase »), la phosphatase alcaline (AP, de l’anglais « alkaline phosphatase »), la glucose oxydase et la ß-galactosidase. Un autre marqueur bien connu est la biotine. Les marqueurs à biotine sont généralement composés du groupe biotinyle, d'un bras espaceur et d'un groupe réactif qui est responsable de la fixation aux groupes fonctionnels cibles sur les protéines. La biotine peut être utile pour attacher la protéine marquée à d'autres groupements qui comprennent un groupement avidine. Conjugués polypeptides AFFIMER®-médicaments Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® comprend au moins un agent thérapeutique, par ex. pour former un conjugué polypeptide-médicament AFFIMER®. Tel qu'utilisé ici, le terme « agent thérapeutique » fait référence à une substance qui peut être utilisée dans la guérison, l'atténuation, le traitement ou la prévention d'une maladie chez un humain ou autre animal. De tels agents thérapeutiques incluent des substances reconnues dans la Pharmacopée officielle des États-Unis (de l’anglais « official United States Pharmacopeia »), la Pharmacopée Homéopathique officielle des États-Unis (de l’anglais « official Homeopathic Pharmacopeia of the United States »), le Formulaire National officiel (de l’anglais « official National Formulary »), ou toute addition de ceux-ci, et incluent, mais sans s'y limiter, les petites molécules, les nucléotides, les oligopeptides, les polypeptides, etc. Les agents thérapeutiques qui peuvent être attachés aux polypeptides contenant AFFIMER® incluent, mais sans s'y limiter, le/les agents cytotoxiques, anti-métabolites, agents alkylants, antibiotiques, facteur de croissance, cytokines, agents anti-angiogéniques, agents anti-mitotiques, toxines, agents apoptotiques ou similaires, tels que les agents alkylants d'ADN, inhibiteurs de la topoisomérase, inhibiteurs des microtubules (par ex. DM1, DM4, MMAF et MMAE), agents induisant le stress du réticulum endoplasmique, composés du platine, antimétabolites, vincalcaloïdes, taxanes, épothilones, inhibiteurs d'enzymes, antagonistes des récepteurs, anticorps thérapeutiques, inhibiteurs de la tyrosine kinase, radiosensibilisants et combinaisons thérapeutiques chimiothérapeutiques, tels qu’en illustration. N'importe quel procédé connu dans l'art pour la conjugaison à des anticorps et autres protéines peut être utilisé pour générer les conjugués de la présente divulgation, y compris les procédés décrits par Hunter, et al., (1962) Nature 144:945 ; David et al., (1974) Biochemistry 13:1014 ; Pain, et al., (1981) J. Immunol. Meth. 40:219; et Nygren, J., (1982) Histochem. and Cytochem. 30:407. Les procédés de conjugaison de peptides, de polypeptides et de groupements organiques et inorganiques à des anticorps et à d'autres protéines sont conventionnels et très bien connus dans l'art et facilement adaptés à la génération de ces versions des agents AFFIMER® sujets. Lorsque le groupement conjugué est un peptide ou un polypeptide, ce groupement peut être chimiquement réticulé au polypeptide contenant l'AFFIMER® ou peut être inclus en tant que partie d'une protéine de fusion avec le polypeptide contenant l'AFFIMER®. Et un exemple illustratif serait une protéine de fusion toxine diphtérique-AFFIMER®. Dans le cas d'entités non peptidiques, l'ajout au polypeptide contenant AFFIMER® se fera généralement par voie de conjugaison chimique au polypeptide contenant AFFIMER® - tel que via un groupe fonctionnel sur une chaîne latérale d'acide aminé ou le groupe carboxyle au niveau du groupe C-terminal ou amino à l'extrémité N-terminale du polypeptide. Dans certains modes de réalisation, qu'il s'agisse d'une protéine de fusion ou d'un groupement chimiquement réticulé, le groupement conjugué comprendra au moins un site qui est sensible à une condition environnementale (telle que le pH) qui permet au groupement conjugué d'être libéré du polypeptide contenant l'AFFIMER®, comme dans un tissu malade (ou un tissu à protéger si le groupement conjugué fonctionne pour protéger un tissu sain). Espaceurs Dans certains modes de réalisation, un conjugué polypeptide-médicament AFFIMER® comprend un espaceur ou une liaison (L1) entre le groupement d'extension de demi-vie et la séquence de reconnaissance de substrat (SRS, de l’anglais « substrate recognition sequence ») clivable par l'enzyme, par ex. présente dans un microenvironnement inflammatoire. L'espaceur peut être n'importe quelle molécule, par ex. un ou plus nucléotides, acides aminés, groupes fonctionnels chimiques. Dans certains modes de réalisation, l'espaceur est un lieur peptidique (par ex. deux acides aminés ou plus). Les espaceurs ne doivent pas affecter négativement l'expression, la sécrétion ou la bioactivité des polypeptides. Dans certains modes de réalisation, les espaceurs ne sont pas antigéniques et ne suscitent pas de réponse immunitaire. Une réponse immunitaire comprend une réponse du système immunitaire inné et/ou du système immunitaire adaptatif. Ainsi, une réponse immunitaire peut être une réponse à médiation cellulaire et/ou une réponse immunitaire humorale. La réponse immunitaire peut être, par exemple, une réponse à lymphocytes T, une réponse à lymphocytes B, une réponse à lymphocytes tueurs naturels (NK), une réponse à monocytes et/ou une réponse à macrophages. D'autres réponses cellulaires sont envisagées ici. Dans certains modes de réalisation, les lieurs ne codent pas pour des protéines. Dans certains modes de réalisation, L1 est un hydrocarbure (chaîne droite ou cyclique) tel que le 6-maléimidocaproyle, le maléimidopropanoyle et le maléimidom éthyl cyclohexane-l-carboxylate, ou L1 est le N-succinimidyl 4-(2-pyridylthio) pentanoate, le N-succinimidyl 4- (N- maléimidométhyl) cyclohexane-1 carboxylate, le N-succinimidyl (4-iodo-acétyl) aminobenzoate. Dans certains modes de réalisation, L1 est un polyéther tel qu'un poly(éthylène glycol) ou un autre lieur hydrophile. Par exemple, lorsque le CBM (de l’anglais « carbohydrate-binding module », soit module de liaison aux glucides) comprend un thiol (tel qu'un résidu de cystéine), L1 peut être un polyéthylèneglycol) couplé au groupe thiol par l'intermédiaire d'un groupement maléimide. Des exemples non limitatifs de lieurs à utiliser conformément à la présente divulgation sont décrits dans la publication internationale n° WO 2019/236567, publiée le 12 décembre 2019. Polynucléotide AFFIMER® codé pour administration in vivo Une approche alternative à la délivrance d'agents thérapeutiques AFFIMER®, tels qu'un agent TNF2 AFFIMER®, serait de laisser la production du polypeptide thérapeutique au corps lui-même. Une multitude d'études cliniques a illustré l'utilité du transfert de gène in vivo dans les cellules en utilisant une variété de systèmes de délivrance différents. Le transfert de gène in vivo cherche à administrer aux patients le polynucléotide AFFIMER® codé, plutôt que l'agent AFFIMER®. Cela permet au corps du patient de produire l'agent thérapeutique AFFIMER® d'intérêt pendant une durée prolongée, et de le sécréter soit de manière systémique soit locale, selon le site de production. Le polynucléotide AFFIMER® codé à base de gènes peut présenter une alternative économique en termes de temps et financiers aux production, purification et administration conventionnelles de la version polypeptidique de l'agent AFFIMER®. Un certain nombre de plateformes d'expression d'anticorps, auxquelles la livraison du polynucléotide codé AFFIMER® peut être adaptée, a été suivi in vivo, y compris les vecteurs viraux, l'ADN nu et l'ARN. Le succès de la thérapie génique a été entraîné en grande partie par les améliorations apportées aux vecteurs de transfert de gènes non viraux et viraux. Un éventail de procédés non viraux physiques et chimiques a été utilisé pour transférer de l'ADN et de l'ARNm à des cellules de mammifères et un nombre substantiel de ceux-ci a été développé en tant que technologies de stade clinique pour la thérapie génique, à la fois ex vivo et in vivo, et est facilement adapté à la délivrance du polynucléotide TNFR2 AFFIMER® codé de la présente divulgation. Une approche efficace de transfert de gène AFFIMER® codé aboutit à une expression qui doit être à un niveau approprié à l'application spécifique. Les promoteurs sont un élément majeur agissant en cis au sein de la conception du génome du vecteur qui peut dicter la force globale de l'expression ainsi que la spécificité cellulaire. De même, la polyadénylation d'une transcription AFFIMER® codé transcrite peut également être importante pour l'exportation nucléaire, la traduction et la stabilité de l'ARNm. Par conséquent, dans certains modes de réalisation, le polynucléotide AFFIMER® codé comprendra un promoteur et/ou une séquence signal de polyadénylation, ainsi que d'autres éléments régulateurs bien connus dans l'art, tels que des amplificateurs (de l’anglais « enhancers »), des séquences introniques, des agents régulateurs post-transcriptionnels et similaires. Vecteurs viraux Des exemples de système de thérapie génique virale qui sont facilement adaptés pour utilisation dans la présente invention incluent les plasmides, les adénovirus, les virus adéno-associés (AAV), les rétrovirus, les lentivirus, les virus herpès simplex, le virus de la vaccine, le poxvirus, les réovirus, les virus de la rougeole, le virus de la forêt de Semliki, etc. Les vecteurs viraux préférés sont basés sur des virus eucaryotes non cytopathiques dans lesquels des gènes non essentiels ont été remplacés par la construction d'acide nucléique portant les séquences d'acide nucléique codant pour les épitopes et les séquences de ciblage d'intérêt. Pour illustrer davantage, les polynucléotides AFFIMER® codés peuvent être délivrés in vivo en utilisant des adénovirus et des virus adéno-associés (AAV), qui sont des virus à ADN double brin qui ont déjà été approuvés pour une utilisation humaine en thérapie génique. Les polypeptides TNFR2 AFFIMER® peuvent être codés et délivrés in vivo en utilisant des vecteurs rétroviraux, tels que des gammarétrovirus ou des lentivirus. Dans certains modes de réalisation, le vecteur viral est pseudotypé avec une enveloppe choisie parmi l'une des enveloppes de virus amphotrope, polytrope, xénotrope, 10A1, GALV, VSV-G, du virus endogène du babouin, RD114, des rhabdovirus, alphavirus, des virus de la rougeole ou de la grippe. Vecteurs non viraux Des exemples d'acides nucléiques ou de polynucléotides pour les agents TNFR2 AFFIMER® codés de la présente divulgation incluent, mais sans s'y limiter, les acides ribonucléiques (ARN), les acides désoxyribonucléiques (ADN), les acides nucléiques à thréose (ANT), les acides nucléiques à glycol (ANG), les acides nucléiques peptidiques (PNA, de l’anglais « peptide nucleic acids »), les acides nucléiques bloqués (LNA, de l’anglais « locked nucleic acids » ; y compris les LNA ayant une configuration β-D-ribo, les a-LNA ayant une configuration a-L-ribo (un diastéréoisomère de LNA), les 2'-amino-LNA ayant une fonctionnalisation 2'-amino, et les 2'-amino-a-LNA ayant une fonctionnalisation 2'-amino), les acides nucléiques d'éthylène (ENA, de l’anglais « ethylene nucleic acids »), les acides nucléiques de cyclohexényle (CeNA, de l’anglais « cyclohexenyl nucleic acids ») ou les hybrides ou combinaisons de ceux-ci. Par conséquent, le polynucléotide TNFR2 AFFIMER® codé peut être délivré par de l'ADN plasmidique, de l'ADN de minicercle, de l'ARNm, des réplicons d'ARN et similaires. Les moyens de délivrance incluent la transfection utilisant l'électroporation, l'utilisation de la lipofection et d'autres réactifs de transfection, la délivrance d'ADN nu, la délivrance de particules d'or et autres moyens connus dans l'art. Procédés et systèmes d'expression pour la production de protéines Les protéines d'agent TNFR2 AFFIMER® décrites ici peuvent être produites par n'importe quel procédé approprié connu dans l'art. De tels procédés vont des procédés de synthèse directe de protéines à la construction d'une séquence d'ADN codant pour des séquences polypeptidiques et à l'expression de ces séquences dans un hôte approprié. Pour les protéines à agent AFFIMER® recombinantes comprenant d'autres modifications, telles que des modifications chimiques ou une conjugaison, la protéine à agent AFFIMER® recombinante peut être encore manipulée chimiquement ou enzymatiquement après isolement depuis la cellule hôte ou synthèse chimique. Le polypeptide AFFIMER® peut être sécrété ou associé à la membrane de la cellule d'expression, par exemple par ancrage ou fixation (de l’anglais « tethering »), comme par inclusion d'un domaine transmembranaire. La présente divulgation inclut des procédés recombinants et des acides nucléiques pour exprimer par de manière recombinante les protéines à agent AFFIMER® recombinantes de la présente divulgation comprenant (i) l’introduction dans une cellule hôte d’un polynucléotide codant pour la séquence d'acides aminés dudit agent AFFIMER®, par exemple, où le polynucléotide est dans un vecteur et/ou est lié de manière opérationnelle à un promoteur ; (ii) la culture de la cellule hôte (par ex. eucaryote ou procaryote) dans des conditions favorables à une expression du polynucléotide et, (iii) optionnellement, l’isolation de l'agent AFFIMER® depuis la cellule hôte et/ou le milieu dans lequel la cellule hôte est cultivée. Voir par ex. WO 04/041862, WO 2006/122786, WO 2008/020079, WO 2008/142164 or WO 2009/068627. Dans certains modes de réalisation, une séquence d'ADN codant pour une protéine à agent AFFIMER® recombinante d'intérêt peut être construite par synthèse chimique en utilisant un synthétiseur d'oligonucléotides. Les oligonucléotides peuvent être conçus sur la base de la séquence d'acides aminés du polypeptide souhaité et en sélectionnant les codons qui sont favorisés dans la cellule hôte dans laquelle le polypeptide recombinant d'intérêt sera produit. Des procédés standard peuvent être appliqués pour synthétiser une séquence polynucléotidique codant pour un polypeptide d'intérêt isolé. Par exemple, une séquence complète d'acides aminés peut être utilisée pour construire un gène rétrotraduit. En outre, un oligomère d'ADN contenant une séquence nucléotidique codant pour le polypeptide isolé particulier peut être synthétisé. Par exemple, plusieurs petits oligonucléotides codant pour des parties du polypeptide souhaité peuvent être synthétisés puis ligaturés (en anglais « ligated »). Les oligonucléotides individuels contiennent typiquement des extensions 5' ou 3' pour un assemblage complémentaire. Une fois qu'une séquence d'acide nucléique codant pour une protéine à agent AFFIMER® recombinante de la divulgation a été obtenue, le vecteur pour la production de la protéine à agent AFFIMER® recombinante peut être produit par la technologie à ADN recombinant en utilisant des techniques bien connues du métier. Des procédés bien connus de la personne du métier peuvent être utilisés pour construire des vecteurs d'expression contenant les séquences codant pour l'agent AFFIMER® recombinant et des signaux de contrôle transcriptionnels et traductionnels appropriés. Ces procédés incluent, par exemple, des techniques à ADN recombinant in vitro, des techniques de synthèse et une recombinaison génétique in vivo. (Voir, par ex. les techniques décrites dans Sambrook et al, 1990, MOLECULAR CLONING, A LABORATORY MANUAL, 2d Ed., Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N.Y. and Ausubel et al. eds., 1998, CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY, John Wiley & Sons, NY). Un vecteur d'expression comprenant la séquence nucléotidique d'une protéine à agent AFFIMER® recombinante peut être transféré à une cellule hôte par des techniques conventionnelles (par ex. électroporation, transfection liposomale, et précipitation au phosphate de calcium) et les cellules transfectées sont ensuite cultivées par des techniques conventionnelles pour produire la protéine à agent AFFIMER® recombinante de la divulgation. Dans des modes de réalisation spécifiques, l'expression de la protéine à agent AFFIMER® recombinante est régulée par un promoteur spécifique d'un tissu, constitutif, ou inductible. Le vecteur d'expression peut comprendre une origine de réplication, telle qu'elle peut être sélectionnée sur la base du type de cellule hôte utilisée pour l'expression. A titre d'exemple, l'origine de réplication du plasmide pBR322 (Produit n° 303-3s, New England Biolabs, Beverly, Massachussets) est utile pour la plupart des bactéries Gram- négatives tandis que diverses origines provenant de SV40, de polyome, d’adénovirus, du virus de la stomatite vésiculaire (VSV) ou des papillomavirus (tels que HPV ou BPV) sont utiles pour cloner des vecteurs dans des cellules de mammifères. Généralement, le composant origine de réplication n'est pas nécessaire pour les vecteurs d'expression de mammifère (par ex. l'origine du SV40 est souvent utilisée car elle contient le promoteur précoce). Le vecteur peut comprendre au moins un gène marqueur sélectionnable, par ex. des éléments génétiques qui codent pour une protéine nécessaire à la survie et à la croissance d'une cellule hôte cultivée dans un milieu de culture sélectif. Les gènes marqueurs de sélection typiques codent pour des protéines qui (a) confèrent une résistance aux antibiotiques ou à d'autres toxines, par ex. l'ampicilline, la tétracycline ou la kanamycine pour les cellules hôtes procaryotes, (b) complètent les déficiences auxotrophes de la cellule ; ou (c) fournissent des éléments nutritifs critiques non disponibles en provenance de milieux complexes. Les marqueurs sélectionnables préférés sont le gène de résistance à la kanamycine, le gène de résistance à l'ampicilline et le gène de résistance à la tétracycline. Un gène de résistance à la néomycine peut également être utilisé pour la sélection dans des cellules hôtes procaryotes et eucaryotes. D'autres gènes de sélection peuvent être utilisés pour amplifier le gène qui sera exprimé. L'amplification est un processus où des gènes qui sont plus sollicités pour la production d'une protéine critique pour la croissance sont réitérés en tandem au sein des chromosomes de générations successives de cellules recombinantes. Des exemples de marqueurs sélectionnables pour des cellules de mammifères comprennent la dihydrofolate réductase (DHFR) et la thymidine kinase. Les transformants de cellules de mammifères sont placés sous une pression de sélection où seuls les transformants sont uniquement adaptés pour survivre en vertu du marqueur présent dans le vecteur. La pression de sélection est imposée en cultivant les cellules transformées dans des conditions dans lesquelles la concentration en agent de sélection dans le milieu est modifiée successivement, conduisant ainsi à une amplification à la fois du gène de sélection et de l'ADN qui code pour la protéine à agent AFFIMER® recombinante. En conséquence, des quantités accrues de la protéine à agent AFFIMER® recombinante sont synthétisées à partir de l'ADN amplifié. Le vecteur peut également comprendre au moins un site de liaison au ribosome, qui sera transcrit dans l'ARNm comprenant la séquence codante pour la protéine à agent AFFIMER® recombinante. Par exemple, un tel site est caractérisé par une séquence Shine-Dalgarno (procaryotes) ou une séquence Kozak (eucaryotes). L'élément est typiquement situé en 3' du promoteur et en 5' de la séquence codante du polypeptide à exprimer. La séquence Shine-Dalgarno est variée mais est typiquement une polypurine (ayant une forte teneur en A-G). De nombreuses séquences de Shine-Dalgarno ont été identifiées, chacune d’entre elles pouvant être facilement synthétisée en utilisant les procédés exposés ci-dessus et utilisées dans un vecteur procaryote. Les vecteurs d'expression contiendront typiquement un promoteur qui est reconnu par l'organisme hôte et lié de manière opérationnelle à une molécule d'acide nucléique codant pour la protéine à agent AFFIMER® recombinante. Un promoteur natif ou hétérologue peut être utilisé en fonction de la cellule hôte utilisée pour l'expression et le rendement souhaité. Les promoteurs à utiliser avec des hôtes procaryotes incluent les systèmes promoteurs de la bêta-lactamase et du lactose ; la phosphatase alcaline, un système promoteur du tryptophane (trp) ; et des promoteurs hybrides tels que le promoteur tac. D'autres promoteurs bactériens connus conviennent également. Leurs séquences ont été publiées, et ils peuvent être ligaturés à une ou plus séquences d'acide nucléique souhaitées, en utilisant des lieurs ou des adaptateurs comme souhaité pour fournir des sites de restriction. Les promoteurs à utiliser avec des levures hôtes sont également connus dans l'art. Les amplificateurs de levure sont avantageusement utilisés avec des promoteurs de levure. Les promoteurs appropriés pour une utilisation avec des cellules hôtes de mammifères sont bien connus et comprennent ceux obtenus à partir des génomes de virus tels que le virus du polyome, le virus de la variole aviaire, l'adénovirus (tel que l'adénovirus 2), le virus du papillome bovin, le virus du sarcome aviaire, le cytomégalovirus, un rétrovirus, le virus de l'hépatite-B et le plus préférablement le Virus Simien 40 (SV40, de l’anglais « Simian Virus 40 »). D'autres promoteurs appropriés de mammifères incluent des promoteurs de mammifères hétérologues, par ex. des promoteurs de choc thermique et le promoteur de l'actine. Des promoteurs supplémentaires qui peuvent être utilisés pour exprimer les agents de liaison sélectifs de la divulgation comprennent, mais ne sont pas limités à : la région du promoteur précoce du SV40 (Bernoist et Chambon, Nature, 290 : 304-310, 1981) ; le promoteur CMV ; le promoteur contenu dans la répétition terminale longue 3' du virus du sarcome de Rous (Yamamoto et al. (1980), Cell 22: 787-97) ; le promoteur de la thymidine kinase de l’herpès (Wagner et al. (1981), Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 78: 1444-5) ; les séquences régulatrices du gène de la métallothionine (Brinster et al, Nature, 296 ; 39-42, 1982) ; les vecteurs d'expression procaryotes tels que le promoteur de bêta-lactamase (Villa-Kamaroff, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 75; 3727-3731, 1978) ; ou le promoteur tac (DeBoer, et al. (1983), Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 80: 21-5). Sont également intéressantes les régions de contrôle transcriptionnel animales suivantes, qui démontrent une spécificité tissulaire et ont été utilisées chez des animaux transgéniques : la région de contrôle du gène de l'élastase I qui est active dans les cellules acineuses pancréatiques (Swift et al. (1984), Cell 38: 639-46 ; Ornitz et al. (1986), Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 50: 399-409; MacDonald (1987), Hepatology 7: 425-515) ; la région de contrôle du gène de l'insuline qui est active dans les cellules bêta pancréatiques (Hanahan (1985), Nature 315: 115-22) ; la région de contrôle du gène de l'immunoglobuline qui est active dans les cellules lymphoïdes (Grosschedl et al. (1984), Cell 38 ; 647-58 ; Adames et al. (1985), Nature 318 ; 533-8 ; Alexander et al. (1987), Mol. Cell. Biol. 7: 1436-44) ; la région de contrôle du virus de la tumeur mammaire de la souris qui est active dans les cellules testiculaires, mammaires, lymphoïdes et mastocytaires (Leder et al. (1986), Cell 45: 485-95) ; la région de contrôle du gène de l'albumine qui est active dans le foie (Pinkert et al. (1987), Genes and Devel. 1: 268-76) ; la région de contrôle du gène de l’alpha-foetoprotéine qui est active dans le foie (Krumlauf et al. (1985), MoI. Cell. Biol. 5: 1639-48 ; Hammer et al. (1987), Science, 235: 53-8) ; la région de contrôle du gène de l’alpha 1-antitrypsine qui est active dans le foie (Kelsey et al. (1987), Genes and Devel. 1: 161-71) ; la région de contrôle du gène de la bêta-globine qui est active dans les cellules myéloïdes (Mogram et al., Nature, 315 338-340, 1985 ; Kollias et al. (1986), Cell 46: 89-94) ; la région de contrôle du gène de la protéine basique de la myéline qui est active dans les cellules oligodendrocytes du cerveau (Readhead et al. (1987), Cell, 48: 703-12) ; la région de contrôle du gène de la myosin chaîne légère-2 qui est active dans les muscles squelettiques (Sani (1985), Nature, 314 : 283-6) ; et la région de contrôle du gène de l'hormone de libération gonadotrope qui est active dans l'hypothalamus (Mason et al. (1986), Science 234: 1372-8). Une séquence amplificatrice (en anglais « enhancer sequence ») peut être insérée dans le vecteur pour augmenter la transcription dans les cellules hôtes eucaryotes. Plusieurs séquences amplificatrices disponibles à partir de gènes de mammifères sont connues (par ex. la globine, l'élastase, l'albumine, l'alpha-foeto-protéine et l'insuline). Typiquement, cependant, un amplificateur issu d'un virus sera utilisé. L'amplificateur SV40, l'amplificateur du promoteur précoce du cytomégalovirus, l'amplificateur du polyome et les amplificateurs de l'adénovirus sont des exemples d'éléments amplificateurs pour l'activation des promoteurs eucaryotes. Alors qu'un amplificateur peut être épissé dans le vecteur en une position 5' ou 3' par rapport à la région codant pour le polypeptide, il est typiquement situé en un site 5' du promoteur. Les vecteurs pour exprimer les acides nucléiques incluent ceux qui sont compatibles avec les cellules hôtes bactériennes, d'insectes et de mammifères. Ces vecteurs incluent, entre autres, pCRII, pCR3 et pcDNA3.1 (Invitrogen Company, San Diego, Californie), pBSII (Stratagene Company, La Jolla, Californie), pET15 (Novagen, Madison, Wisconsin), pGEX (Pharmacia Biotech, Piscataway, New Jersey), pEGFP-N2 (Clontech, Palo Alto, Californie), pETL (BlueBacII ; Invitrogen), pDSR-alpha (Publication PCT n° WO90/14363) et pFastBacDual (Gibco/BRL, Grand Island, New York). Des vecteurs supplémentaires possibles incluent, mais sans s'y limiter, les virus modifiés, cosmides, ou plasmides, mais le système de vecteur doit être compatible avec la cellule hôte sélectionnée. De tels vecteurs incluent, mais sans s'y limiter, des plasmides tels que des dérivés de plasmide Bluescript® (un phagémide à base de ColEl à nombre de copies élevé, de Stratagene Cloning Systems Inc., La Jolla, Californie), des plasmides de clonage PCR conçus pour cloner des produits PCR amplifiés par Taq (par ex. TOPO™, TA Cloning® Kit, dérivés de plasmide PCR2.1, Invitrogen, Carlsbad, Californie), et des vecteurs de mammifère, de levure ou de virus tels qu'un système d'expression de baculovirus (dérivés de plasmide pBacPAK, Clontech, Palo Alto, Californie). Les molécules recombinantes peuvent être introduites dans des cellules hôtes par transformation, transfection, infection, électroporation, ou autres techniques connues. Les cellules hôtes eucaryotes et procaryotes, y compris les cellules de mammifères comme hôtes pour l'expression de la protéine à agent AFFIMER® recombinante décrite ici sont bien connues dans l'art et incluent de nombreuses lignées cellulaires immortalisées disponibles auprès de l'American Type Culture Collection (ATCC, de l’anglais, soit « Collection de Cultures de Types Américaine »). Celles-ci incluent, entre autres, les cellules ovariennes de hamster chinois (CHO, de l’anglais « Chinese hamster ovary cells »), les NSO, les cellules SP2, les cellules HeLa, les cellules rénales de bébé hamster (BHK, de l’anglais « baby hamster kidney cells »), les cellules rénales de singe (COS), les cellules de carcinome hépatocellulaire humain (par ex. Hep G2), les cellules A549, les cellules 3T3, les cellules HEK-293 et un certain nombre d'autres lignées cellulaires. Les cellules hôtes de mammifères incluent les cellules humaines, de souris, de rat, de chien, de singe, de porc, de chèvre, de bovin, de cheval et de hamster. Les lignées cellulaires de préférence particulière sont sélectionnées en déterminant quelles lignées cellulaires ont des niveaux d'expression élevés. D'autres lignées cellulaires qui peuvent être utilisées sont des lignées cellulaires d'insectes, telles que les cellules Sf9, des cellules d'amphibiens, des cellules bactériennes, des cellules végétales et des cellules fongiques. Les cellules fongiques incluent les cellules de levures et de champignons filamenteux comprenant, par exemple, cellules de Pichia pastoris, Pichia finlandica, Pichia trehalophila, Pichia koclamae, Pichia membranaefaciens, Pichia minuta (Ogataea minuta, Pichia lindneri), Pichia opuntiae, Pichia thermotolerans, Pichia salictaria, Pichia guercuum, Pichia pijperi, Pichia stiptis, Pichia methanolica, Pichia sp., Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces sp., Hansenula polymorpha, Kluyveromyces sp., Kluyveromyces lactis, Candida albicans, Aspergillus nidulans, Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Trichoderma reesei, Chrysosporium lucknowense, Fusarium sp., Fusarium gramineum, Fusarium venenatum, Physcomitrella patens and Neurospora crassa., Pichia sp., tout Saccharomyces sp., Hansenula polymorpha, tout Kluyveromyces sp., Candida albicans, any Aspergillus sp., Trichoderma reesei, Chrysosporium lucknowense, tout Fusarium sp., Yarrowia lipolytica, et Neurospora crassa. Une variété de systèmes de vecteurs d'expression hôte peut être utilisée pour exprimer la protéine à agent AFFIMER® recombinante de la divulgation. De tels systèmes d'expression hôte représentent des véhicules par lesquels les séquences codantes de la protéine à agent AFFIMER® recombinante peuvent être produites puis purifiées, mais représentent également des cellules qui peuvent, lorsqu'elles sont transformées ou transfectées avec les séquences codantes nucléotidiques appropriées, exprimer la protéine à agent AFFIMER® recombinante de la divulgation in situ. Ceux-ci incluent, mais sans s'y limiter, des micro-organismes tels que des bactéries (par ex. E. coli et B. subtilis) transformées avec des vecteurs d'expression d'ADN de bactériophage, d'ADN plasmidique ou d'ADN cosmidique recombinant contenant des séquences codant pour la protéine à agent AFFIMER® ; de la levure (par ex. Saccharomyces pichia) transformée avec des vecteurs d'expression de levure recombinants contenant des séquences codant pour la protéine à agent AFFIMER® ; des systèmes de cellules d'insectes infectés avec des vecteurs d'expression de virus recombinants (par ex. baculovirus) contenant les séquences codant pour la protéine à agent AFFIMER® ; des systèmes cellulaires végétaux infectés par des vecteurs d'expression de virus recombinants (par ex. le virus de la mosaïque du chou-fleur (CaMV, de l’anglais « cauliflower mosaic virus ») et le virus de la mosaïque du tabac (TMV, de l’anglais « tobacco mosaic virus »)) ou transformés avec des vecteurs d'expression de plasmide recombinants (par ex. le plasmide Ti) contenant des séquences codant pour la protéine à agent AFFIMER® ; ou des systèmes cellulaires de mammifères (par ex. des cellules COS, CHO, BHK, 293, 293T, 3T3, des cellules lymphatiques (voir Brevet US n° 5,807,715), des cellules Per C.6 (cellules rétiniennes de rat développées par Crucell)) hébergeant des constructions d'expression recombinantes contenant des promoteurs dérivés du génome de cellules de mammifères (par ex. le promoteur de la métallothionéine) ou de virus de mammifères (par ex. le promoteur tardif de l'adénovirus ; le promoteur 7.5K du virus de la vaccine). Dans les systèmes bactériens, un certain nombre de vecteurs d'expression peuvent être avantageusement sélectionnés en fonction de l'utilisation prévue pour la protéine à agent AFFIMER® recombinante exprimée. Par exemple, lorsqu'une grande quantité d'une telle protéine doit être produite, pour la génération de compositions pharmaceutiques de la protéine à agent AFFIMER® recombinante, des vecteurs qui dirigent l'expression de niveaux élevés de produits à protéines de fusion qui sont immédiatement purifiés peuvent être souhaitables. De tels vecteurs incluent, mais sans s'y limiter, le vecteur d'expression de E. coli pUR278 (Ruther et al. (1983) "Easy Identification Of cDNA Clones," EMBO J. 2:1791-1794), dans lequel la séquence codante de la protéine à agent AFFIMER® peut être ligaturée individuellement dans le vecteur en cadre avec la région codante lac Z de sorte qu'une protéine de fusion est produite ; vecteurs pIN (Inouye et al. (1985) "Up-Promoter Mutations In The Lpp Gene Of Escherichia coli," Nucleic Acids Res. 13:3101-3110 ; Van Heeke et al. (1989) "Expression Of Human Asparagine Synthetase In Escherichia coli," J. Biol. Chem. 24:5503-5509); etc. Les vecteurs pGEX peuvent également être utilisés pour exprimer des polypeptides étrangers en tant que protéines de fusion avec la glutathion S-transférase (GST). En général, ces protéines de fusion sont solubles et peuvent aisément être purifiées à partir de cellules lysées par adsorption et liaison à une matrice de billes de glutathion-agarose suivie d'une élution en présence de glutathion libre. Les vecteurs pGEX sont conçus pour inclure des sites de clivage de la protéase du facteur Xa ou de la thrombine afin que le produit du gène cible cloné puisse être libéré du groupement GST. Dans un système d'insecte, le virus de la polyédrose nucléaire d'Autographa californica (AcNPV, de l’anglais « Autographa californica nuclear polyhedrosis virus ») est utilisé comme vecteur pour exprimer des gènes étrangers. Le virus se développe dans les cellules de Spodoptera frugiperda. La séquence codante de la protéine à agent AFFIMER® peut être clonée individuellement dans des régions non essentielles (par ex. le gène de la polyédrine) du virus et placée sous le contrôle d'un promoteur d’AcNPV (par ex. le promoteur de la polyédrine). Dans les cellules hôtes de mammifères, un certain nombre de systèmes d'expression à base virale peut être utilisé. Dans les cas où un adénovirus est utilisé en tant que vecteur d'expression, la séquence d'intérêt codant pour la protéine à agent AFFIMER® peut être ligaturée à un complexe de contrôle de transcription/traduction d'adénovirus, par ex. le promoteur tardif et la séquence de tête tripartite (de l’anglais « tripartite leader sequence »). Ce gène chimère peut ensuite être inséré dans le génome de l'adénovirus par recombinaison in vitro ou in vivo. L'insertion dans une région non essentielle du génome viral (par ex. la région E1 ou E3) résultera en un virus recombinant qui est viable et capable d'exprimer la molécule d'immunoglobuline chez des hôtes infectés. (Voir par ex. Logan et al. (1984) "Adenovirus Tripartite Leader Sequence Enhances Translation Of mRNAs Late After Infection," Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 81:3655-3659). Des signaux d'initiation spécifiques peuvent également être requis pour une traduction efficace des séquences insérées codant pour la protéine à agent AFFIMER®. Ces signaux comprennent le codon d'initiation ATG et les séquences adjacentes. De plus, le codon d'initiation doit être en phase avec le cadre de lecture de la séquence codante souhaitée pour assurer la traduction de l'insert entier. Ces signaux exogènes de contrôle de traduction et ces codons d'initiation peuvent avoir diverses origines, à la fois naturelles et synthétiques. L'efficacité de l'expression peut être amplifiée par l'inclusion d'éléments amplificateurs de transcription appropriés, de terminateurs de transcription, etc. (Voir Bitter et al. (1987) "Expression and Secretion Vectors For Yeast," Methods in Enzymol. 153:516-544). De plus, une souche de cellule hôte peut être choisie, laquelle module l'expression des séquences insérées ou modifie et transforme le produit génique de la manière spécifique souhaitée. De telles modifications (par ex. une glycosylation) et traitements (par ex. clivage) de produits protéiques peuvent être importants pour la fonction de la protéine. Différentes cellules hôtes ont des mécanismes caractéristiques et spécifiques pour le traitement post-traductionnel et la modification de protéines et de produits géniques. Des lignées cellulaires ou des systèmes hôtes appropriés peuvent être choisis pour assurer la modification et le traitement corrects de la protéine étrangère exprimée. A cette fin, des cellules hôtes eucaryotes qui possèdent la machinerie cellulaire pour le bon traitement de la transcription primaire, la glycosylation et la phosphorylation du produit génique peuvent être utilisées. De telles cellules hôtes de mammifères incluent, mais sans s'y limiter, CHO, VERY, BHK, Hela, COS, MDCK, 293, 293T, 3T3, WI38, BT483, Hs578T, HTB2, BT20 et T47D, CRL7030 et Hs578Bst. Pour une production à long terme et à haut rendement de protéines recombinantes, une expression stable est envisagée. Par exemple, des lignées cellulaires qui expriment de manière stable un anticorps de la divulgation peuvent être modifiées par ingénierie. Plutôt que d'utiliser des vecteurs d'expression qui contiennent des origines virales de réplication, les cellules hôtes peuvent être transformées avec de l'ADN contrôlé par des éléments de contrôle d'expression appropriés (par ex. promoteur, amplificateur, séquences, terminateurs de transcription, sites de polyadénylation, etc.) et un marqueur sélectionnable. A la suite de l'introduction de l'ADN étranger, les cellules d’ingénierie peuvent être laissées se développer pendant 1 à 2 jours dans un milieu enrichi, puis sont basculées vers un milieu sélectif. Le marqueur sélectionnable dans le plasmide recombinant confère une résistance à la sélection et permet aux cellules d'intégrer de manière stable le plasmide dans leurs chromosomes et de se développer pour former des foyers qui à leur tour peuvent être clonés et développés dans des lignées cellulaires. Ce procédé peut avantageusement être utilisé pour concevoir des lignées cellulaires qui expriment les protéines à agent AFFIMER® recombinantes de la divulgation. De telles lignées cellulaires d’ingénierie peuvent être particulièrement utiles dans le criblage et l'évaluation de composés qui interagissent directement ou indirectement avec les protéines à agent AFFIMER® recombinantes. Un certain nombre de systèmes de sélection peut être utilisé, y compris, mais sans s'y limiter, la thymidine kinase du virus de l'herpès simplex (Wigler et al. (1977) "Transfer of Purified Herpes Virus Thymidine Kinase Gene to Cultured Mouse Cells," Cell 11:223-232), l’hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransférase (Szybalska et al. (1962) "Genetics Of Human Cess Line. IV. DNA-Mediated Heritable Transformation of a Biochemical Trait," Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 48:2026-2034), et l'adénine phosphoribosyltransférase (Lowy et al. (1980) "Isolation Of Transforming DNA: Cloning The Hamster Aprt Gene," Cell 22:817-823) dont les gènes peuvent être employés dans des cellules tk-, hgprt- ou aprt-, respectivement. Aussi, une résistance aux antimétabolites peut être utilisée comme base de sélection pour les gènes suivants : dhfr, qui confère une résistance au méthotrexate (Wigler et al. (1980) "Transformation Of Mammalian Cells With An Amplfiable Dominant-Acting Gene," Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 77:3567-3570 ; O'Hare et al. (1981) "Transformation Of Mouse Fibroblasts To Methotrexate Resistance By A Recombinant Plasmid Expressing A Prokaryotic Dihydrofolate Reductase," Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 78:1527-1531) ; gpt, qui confère une résistance à l'acide mycophénolique (Mulligan et al. (1981) "Selection For Animal Cells That Express The Escherichia coli Gene Coding For Xanthine-Guanine Phosphoribosyltransferase," Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 78:2072-2076) ; neo, qui confère une résistance à l'aminoglycoside G-418 (Tachibana et al. (1991) "Altered Reactivity Of Immunoglobutin Produced By Human-Human Hybridoma Cells Transfected By pSV.2-Neo Gene," Cytotechnology 6(3):219-226; Tolstoshev (1993) "Gene Therapy, Concepts, Current Trials And Future Directions," Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 32:573-596; Mulligan (1993) "The Basic Science of Gene Therapy," Science 260:926-932; and Morgan et al. (1993) "Human gene therapy," Ann. Rev. Biochem. 62:191-217). Des procédés couramment connus dans l'art de la technologie à ADN recombinant qui peuvent être utilisés sont décrits dans Ausubel et al. (eds.), 1993, CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY, John Wiley & Sons, NY; Kriegler, 1990, GENE TRANSFER AND EXPRESSION, A LABORATORY MANUAL, Stockton Press, NY ; et aux chapitres 12 et 13, Dracopoli et al. (eds), 1994, CURRENT PROTOCOLS IN HUMAN GENETICS, John Wiley & Sons, NY.; Colbere-Garapin et al. (1981) "A New Dominant Hybrid Selective Marker For Higher Eukaryotic Cells," J. Mol. Biol. 150:1-14 ; et hygro, qui confère une résistance à l'hygromycine (Santerre et al. (1984) "Expression Of Prokaryotic Genes For Hygromycin B And G418 Resistance As Dominant-Selection Markers In Mouse L Cells," Gene 30:147-156). Les niveaux d'expression d'une protéine à agent AFFIMER® recombinante peuvent être augmentés par amplification vectorielle (pour consultation, voir Bebbington et Hentschel, "The Use of Vectors Based On Gene Amplification For The Expression Of Cloned Genes In Mammaian Cells", dans DNA CLONING, Tome 3. (Academic Press, New York, 1987)). Lorsqu'un marqueur dans le système de vecteur exprimant une protéine à agent AFFIMER® recombinante est amplifiable, une augmentation du niveau d'inhibiteur présent dans la culture de la cellule hôte augmentera le nombre de copies du gène marqueur. Puisque la région amplifiée est associée à la séquence nucléotidique de la protéine à agent AFFIMER® recombinante, la production de la protéine à agent AFFIMER® recombinante augmentera également (Crouse et al. (1983) "Expression and Amplification of Engineered Mouse Dihydrofolate Reductase Minigenes," Mol. Cell. Biol. 3:257-266). Lorsque l'agent AFFIMER® est une fusion d'anticorps AFFIMER® ou un autre complexe multiprotéique, la cellule hôte peut être cotransfectée avec deux vecteurs d'expression, par exemple le premier vecteur codant pour une chaîne lourde et le second vecteur codant pour un polypeptide dérivé d'une chaîne légère, l'un ou les deux desquels comprenant une séquence codant pour le polypeptide AFFIMER®. Les deux vecteurs peuvent contenir des marqueurs sélectionnables identiques qui permettent une expression égale des polypeptides des chaînes lourdes et légères. Alternativement, un unique vecteur peut être utilisé qui code à la fois pour les polypeptides des chaînes lourdes et légères. Dans de telles situations, la chaîne légère doit être placée avant la chaîne lourde pour éviter un excès de chaîne lourde libre toxique (Proudfoot (1986) "Expression and Amplification Of Engineered Mouse Dihydrofolate Reductase Minigenes," Nature 322:562-565; Kohler (1980) « Immunoglobulin Chain Loss In Hybridoma Lines, », Proc. Natl. Acad. Sci. (U.S.A.) 77:2197-2199). Les séquences codant pour les chaînes lourdes et légères peuvent inclure de l'ADNc ou de l'ADN génomique. En général, les glycoprotéines produites dans une lignée cellulaire ou un animal transgénique particulier auront un schéma de glycosylation qui est caractéristique des glycoprotéines produites dans la lignée cellulaire ou l'animal transgénique. Par conséquent, le profil de glycosylation particulier de la protéine à agent AFFIMER® recombinante dépendra de la lignée cellulaire particulière ou de l'animal transgénique particulier utilisé pour produire la protéine. Dans certains modes de réalisation de fusions AFFIMER®/anticorps, un schéma de glycosylation comprenant uniquement des N-glycanes non fucosylés peut être avantageux, parce que dans le cas des anticorps, il a été démontré qu'il présente généralement une efficacité plus puissante que les homologues fucosylés à la fois in vitro et in vivo (Voir par exemple, Shinkawa et al., J. Biol. Chem. 278: 3466-3473 (2003); Brevet U.S. NOS: 6,946,292 et 7,214,775). En outre, l'expression d'un agent AFFIMER® à partir de lignées cellulaires de production peut être amplifiée en utilisant un certain nombre de techniques connues. Par exemple, le système d'expression du gène de la glutamine synthétase (le système GS) est une approche courante pour amplifier l'expression dans certaines conditions. Le système GS est discuté en tout ou en partie en lien avec les brevets européens n° : 0216846, 0256055 et 0323997 et demande de brevet européen n° 89303964.4. Ainsi, dans certains modes de réalisation de l'invention, les cellules hôtes de mammifères (par ex. CHO) sont dépourvues du gène de la glutamine synthétase et sont cultivées en l'absence de glutamine dans le milieu dans lequel, cependant, le polynucléotide codant pour la chaîne d'immunoglobuline comprend un gène de la glutamine synthétase qui complète l'absence du gène dans la cellule hôte. De telles cellules hôtes contenant le liant (de l’anglais, « binder ») ou le polynucléotide ou le vecteur tel que décrit ici ainsi que les procédés d'expression, tels que décrits ici, pour fabriquer le liant en utilisant une telle cellule hôte font partie de la présente divulgation. L'expression de protéines recombinantes dans des systèmes de culture de cellules d'insectes (par ex. baculovirus) offre également un procédé robuste pour produire des protéines correctement repliées et biologiquement fonctionnelles. Les systèmes de baculovirus pour la production de protéines hétérologues dans des cellules d'insectes sont bien connus des personnes du métier. Les protéines recombinantes à agent AFFIMER® produites par un hôte transformé peuvent être purifiées selon tout procédé approprié. Les procédés standard incluent la chromatographie (par ex. les chromatographies d'exclusion stérique [de l’anglais « sizing column chomatography », d'affinité, et de dimensionnement), la centrifugation, la solubilité différentielle ou toute autre technique standard pour la purification des protéines. Des étiquettes d'affinité telles que l'hexa-histidine, le domaine de liaison au maltose, la séquence d'enveloppe de la grippe, et la glutathion-S-transférase peuvent être attachées à la protéine pour permettre une purification facile par passage sur une colonne d'affinité appropriée. Les protéines isolées peuvent également être caractérisées physiquement à l'aide de techniques telles que la protéolyse, la spectrométrie de masse (MS), la résonance magnétique nucléaire (RMN), la chromatographie liquide à haute performance (HPLC, de l’anglais « high performance liquid chromatography ») et la cristallographie aux rayons X. Dans certains modes de réalisation, les protéines à agent AFFIMER® recombinantes produites en culture bactérienne peuvent être isolées, par exemple, par extraction initiale à partir de comprimés cellulaires, suivie d'au moins une étape de concentration, de relargage, d'échange d'ions aqueux ou de chromatographie d'exclusion stérique (de l’anglais « size exclusion chromatography »). La HPLC peut être utilisée pour les étapes finales de purification. Les cellules microbiennes employées dans l'expression d'une protéine recombinante peuvent être rompues par n'importe quel procédé commode, dont les cycles de congélation-décongélation, la sonication, la rupture mécanique ou l'utilisation d'agents de lyse cellulaire. Procédés d'utilisation et compositions pharmaceutiques Les agents AFFIMER® de la divulgation sont utiles dans une variété d'applications comprenant, mais sans s'y limiter, des procédés de traitement thérapeutique, pour le lupus érythermatose disséminé (LES), la néphrite lupique (par ex. la néphrite lupique d’origine médicamenteuse), la thrombocytopénie immunitaire (ITP, de l’anglais « immune thrombocytopenia »), la polyarthrite rhumatoïde (PR), la sclérose en plaques (SEP), les maladies inflammatoires chroniques de l'intestin (MICI) (par ex. la maladie de Crohn et la colite/colite ulcéreuse), la maladie du greffon contre l'hôte (GvHD) (liée aux transplantations de cellules souches) également appelée rejet d'allogreffe, la transplantation/Transplantation d'Organe Solide (SOT, de l’anglais « Solid Organ Transplantation »), la cholangite biliaire primitive (CBP), le psoriasis, l’arthrite psoriasique, l’arthrite induite par le collagène, l’encéphalomyélite allergique expérimentale (EAE), l’ovarite, la rhinite allergique, l’asthme, le syndrome de Sjogren, l’eczéma atopique, la myasthénie, la maladie de Basedow, la glomérulosclérose et/ou le cancer. Les procédés d'utilisation peuvent être des procédés in vitro, ex vivo ou in vivo. Lupus Erythermatose Disséminé Le lupus érythémateux disséminé (LES), communément appelé simplement lupus, est une maladie auto-immune chronique qui peut provoquer un gonflement (inflammation) et des douleurs dans tout le corps. Il existe plusieurs types différents de lupus. Le lupus érythémateux disséminé est le plus fréquent. D’autres types de lupus incluent : Lupus érythémateux cutané : Ce type de lupus affecte la peau - cutané est un terme qui signifie peau. Les personnes atteintes de lupus érythémateux cutané peuvent connaître des problèmes de peau comme une sensibilité au soleil et des éruptions. La perte de cheveux peut également être un symptôme de cette affection. Lupus d'origine médicamenteuse : Ces cas de lupus sont causés par certains médicaments. Les personnes atteintes de lupus d'origine médicamenteuse peuvent présenter bon nombre des mêmes symptômes que ceux du lupus érythémateux disséminé, mais il est généralement temporaire. Lupus néonatal : Un type rare de lupus, le lupus néonatal est une affection que l'on retrouve chez les nourrissons à la naissance. Les enfants nés avec un lupus néonatal ont des anticorps qui leur ont été transmis depuis leur mère – qui avait soit le lupus au moment de la grossesse, soit peut présenter l’affection plus tard dans la vie. Tous les bébés nés d'une mère atteinte de lupus ne présenteront pas la maladie. Les thérapies qui peuvent être utilisées en combinaison avec les polypeptides TNFR2 AFFIMER® proposés ici incluent, par exemple : les stéroïdes (corticostéroïdes, y compris la prednisone) ; l’Hydroxychloroquine (Plaquenil®) ; l’Azathioprine (Imuran®); le Méthotrexate (Rheumatrex®) ; le Cyclophosphamide (Cytoxan®) et le Mycophénolate Mofétil (CellCept®) ; le Belimumab (Benlysta®) ; et/ou le Rituximab (Rituxan®). Néphrite lupique La néphrite lupique est une complication fréquente chez les personnes atteintes de lupus érythémateux disséminé, plus connu sous le nom de lupus. La néphrite lupique survient lorsque les autoanticorps lupiques affectent les structures des reins qui filtrent les déchets. Ceci provoque une inflammation des reins et peut entraîner l’apparition de sang dans les urines, de protéines dans les urines, d’une pression artérielle élevée, d’une altération de la fonction rénale ou même d’une insuffisance rénale. Jusqu'à la moitié des adultes atteints de lupus systémique développent une néphrite lupique. Le lupus systémique entraîne des lésions des reins par les protéines du système immunitaire, ce qui nuit à leur capacité à filtrer les déchets. Polyarthrite rhumatoïde La polyarthrite rhumatoïde est un type d'arthrite chronique (permanente) qui touche les articulations des deux côtés du corps, comme les mains, les poignets et les genoux. Les objectifs à court terme des médicaments contre la polyarthrite rhumatoïde sont de réduire la douleur et le gonflement des articulations et/ou d'améliorer la fonction articulaire. L'objectif à long terme est de ralentir ou d'arrêter le processus de la maladie, en particulier les lésions articulaires. L'arthrite est un terme général qui décrit une inflammation des articulations. La polyarthrite rhumatoïde est un type d'arthrite chronique (permanente) (entraînant des douleurs et un gonflement) qui survient généralement dans les articulations de manière symétrique (des deux côtés du corps, comme les mains, les poignets et les genoux). Cette atteinte de plusieurs articulations aide à distinguer la polyarthrite rhumatoïde d’autres types d'arthrite. En plus d'affecter les articulations, la polyarthrite rhumatoïde peut occasionnellement affecter la peau, les yeux, les poumons, le cœur, le sang, les nerfs ou les reins. Les thérapies qui peuvent être utilisées en combinaison avec les agents TNFR2 AFFIMER® proposés ici pour traiter la polyarthrite rhumatoïde peuvent inclure, par exemple : Les médicaments qui diminuent la douleur et l'inflammation. Ces produits incluent les anti-inflammatoires non stéroïdiens (AINS), tels que l'ibuprofène (MOTRIN®), le naproxène (ALEVE®) et autres produits similaires. Un autre type de médicament - l'inhibiteur de la COX-2 - entre également dans cette catégorie de médicaments, offrant un soulagement aux signes et symptômes de la polyarthrite rhumatoïde. Le célécoxib (CELEBREX®), un inhibiteur de la COX-2, est disponible et utilisé aux États-Unis. Les inhibiteurs de la COX-2 ont été conçus pour présenter moins d'effets secondaires de saignement sur l'estomac. Antirhumatismaux modificateurs de maladie (ARMM). Contrairement aux autres AINS, les ARMM peuvent en réalité ralentir le processus de la maladie en modifiant le système immunitaire. Les ARMM plus anciens incluent le méthotrexate (TREXALL®), les sels d'or, la pénicillamine (CUPRIMINE®), l'hydroxychloroquine (PLAQUENIL®), la sulfasalazine (AZULFIDINE®), la cyclosporine (SANDIMMUNE®), le cyclophosphamide (CYTOXAN®) et le léflunomide (ARAVA®). Actuellement, le méthotrexate, le léflunomide, l'hydroxychloroquine et la sulfasalazine sont les plus couramment utilisés. (La cyclosporine, le cyclophosphamide, les sels d'or et la pénicillamine ne sont généralement plus utilisés.) Produits biologiques. Au-delà de ces ARMM plus "traditionnels", de nouveaux médicaments ont été approuvés. Actuellement, il existe sept classes différentes de médicaments et, dans certains cas, différentes sortes existent dans chaque classe. (Certains d'entre eux, comme les anti-TNF de classe, sont utilisés depuis 2000.) Collectivement, ces ARMM sont connus sous un autre nom – agents biologiques (ou agents de réponse biologique). Par rapport aux ARMM traditionnels, ces produits ciblent les molécules qui causent l'inflammation dans la polyarthrite rhumatoïde. Les cellules inflammatoires des articulations sont impliquées dans le développement de la polyarthrite rhumatoïde elle-même. Les agents biologiques réduisent le processus inflammatoire qui cause in fine les lésions articulaires observées dans la polyarthrite rhumatoïde. Les ARMM plus anciens fonctionnent un peu plus loin que les produits biologiques ; ils agissent en modifiant la propre réponse immunitaire du corps à l'inflammation. En attaquant les cellules à un niveau plus spécifique de l'inflammation elle-même, les produits biologiques sont considérés comme plus efficaces et plus spécifiquement ciblés. Les agents biologiques incluent l'étanercept (ENBREL®), l'infliximab (REMICADE®), l'adalimumab (HUMIRA®), l'anakinra (KINARET®), l'abatacept (ORENCIA®), le rituximab (RITUXAN®), le certolizumab pegol (CIMZIA®), le golimumab (SYMPONI ®), le tocilizumab (ACTEMRA®) et le tofacitinib (XELJANJ®). Certains des produits biologiques sont utilisés en association avec les ARMM traditionnels, en particulier avec du méthotrexate. Sclérose en plaques La sclérose en plaques (SEP) est une maladie auto-immune. Avec ces affections, le système immunitaire attaque à tort les cellules saines. Chez les personnes atteintes de SEP, le système immunitaire attaque les cellules dans la myéline, la gaine protectrice qui entoure les nerfs dans le cerveau et la moelle épinière. Les lésions à la gaine de myéline interrompent les signaux nerveux allant du cerveau vers d'autres parties du corps. Les lésions peuvent entraîner des symptômes affectant le cerveau, la moelle épinière et les yeux. Il existe quatre types de sclérose en plaques : Syndrome cliniquement isolé (SCI) : Lorsqu'une personne présente un premier épisode de symptômes de SEP, les fournisseurs de soins de santé le classent souvent en tant que SCI. Toutes les personnes atteintes de SCI ne développent pas de sclérose en plaques. SEP récurrente-rémittente (SEP-RR) : Il s'agit de la forme la plus courante de sclérose en plaques. Les personnes atteintes de SEP-RR ont des poussées - également appelées rechutes ou exacerbations - de symptômes nouveaux ou qui s'aggravent. Des périodes de rémission suivent (lorsque les symptômes se stabilisent ou disparaissent). SEP primaire progressive (SEP-PP, de l’anglais « Primary progressive Multiple Sclerosis ») : Les personnes diagnostiquées d’une SEP-PP ont des symptômes qui s'aggravent lentement et progressivement sans aucune période de rechute ou de rémission. SEP secondaire progressive (SEP-SP, de l’anglais SPMS, ou « Secondary progressive Multiple Sclerosis ») : Dans de nombreux cas, les personnes initialement diagnostiquées avec une SEP-RR évoluent finalement vers une SEP-SP. Avec une sclérose en plaques secondaire progressive, on continue d'accumuler des lésions nerveuses. Les symptômes s'aggravent progressivement. Bien que l'on puisse encore éprouver des rechutes ou des poussées (lorsque les symptômes augmentent), on n'a plus de périodes de rémission par la suite (lorsque les symptômes se stabilisent ou disparaissent). Les thérapies qui peuvent être utilisées en combinaison avec les polypeptides TNFR2 AFFIMER® proposés ici incluent, par exemple : Des thérapies modificatrices de la maladie (DMT, de l’anglais « Disease-modifying therapies ») : Plusieurs médicaments disposent d’un agrément de la FDA pour le traitement à long terme de la SEP. Ces médicaments aident à réduire les rechutes (également appelées poussées ou attaques). Ils ralentissent la progression de la maladie. Et ils peuvent empêcher que de nouvelles lésions ne se forment sur le cerveau et la moelle épinière. Des médicaments de gestion de rechutes : En cas d’attaque grave, un neurologue peut recommander une forte dose de corticostéroïdes. Le médicament peut réduire rapidement l'inflammation. Ils ralentissent les lésions à la gaine de myéline entourant les cellules nerveuses. Une rééducation physique : La sclérose en plaques peut affecter les fonctions physiques. Rester en bonne forme physique et fort aide à maintenir la mobilité. Le conseil en santé mentale : Faire face à une affection chronique peut être difficile sur le plan émotionnel. La SEP peut parfois affecter l'humeur et la mémoire. Travailler avec un neuropsychologue ou disposer d’un autre soutien émotionnel est un élément essentiel de la gestion de la maladie. Une maladie inflammatoire chronique de l'intestin Les maladies inflammatoires chroniques de l'intestin (MICI) sont un groupe de troubles qui provoquent une inflammation chronique (douleur et gonflement) dans les intestins. La maladie de Crohn et la colite ulcéreuse sont les principaux types de MICI. Les types incluent : La maladie de Crohn provoque des douleurs et un gonflement dans le tractus digestif. Elle peut affecter n'importe quelle partie depuis la bouche jusqu’à l'anus. Elle affecte le plus souvent l'intestin grêle et la partie supérieure du gros intestin. La colite ulcéreuse provoque un gonflement et des plaies (ulcères) dans le gros intestin (côlon et rectum). La colite microscopique provoque une inflammation intestinale qui n'est détectable qu'au microscope. Les thérapies qui peuvent être utilisées en combinaison avec les polypeptides TNFR2 AFFIMER® proposés ici incluent, par exemple : les aminosalicylates (un médicament anti-inflammatoire comme la sulfasalazine, la mésalamine ou le balsalazide) minimisent l'irritation des intestins ; les antibiotiques traitent les infections et les abcès ; les produits biologiques interrompent les signaux provenant du système immunitaire qui provoquent une inflammation ; les corticostéroïdes, tels que la prednisone, maintiennent le système immunitaire sous contrôle et gèrent les poussées ; les immunomodulateurs calment un système immunitaire hyperactif ; les médicaments antidiarrhéiques ; les anti-inflammatoires non stéroïdiens (AINS) ; les vitamines et suppléments tels que les probiotiques. Maladie du greffon contre l'hôte La maladie du greffon contre l'hôte (GvHD) est une affection qui peut survenir après une greffe allogénique. Dans la GvHD, la moelle osseuse donnée ou les cellules souches du sang périphérique perçoivent le corps du receveur comme étranger, et les cellules/la moelle osseuse données attaquent le corps. Il existe deux formes de GvHD : Maladie aiguë du greffon contre l'hôte (aGvHD, de l’anglais « Acute graft versus host disease ») ; et Maladie chronique du greffon contre l'hôte (cGvHD, de l’anglais « Chronic graft versus host disease »). Psoriasis Le psoriasis est une affection cutanée chronique, c'est-à-dire une affection cutanée qui ne disparaît pas. Les personnes atteintes de psoriasis ont des plaques de peau épaisses, roses ou rouges couvertes d'écailles blanches ou argentées. Les aplats épais et squameux sont appelés plaques. Le psoriasis commence généralement au début de l'âge adulte, bien qu'il puisse commencer plus tard dans la vie. En plus des plaques rouges et squameuses, les symptômes du psoriasis incluent : des démangeaisons, une peau craquelée et sèche, un cuir chevelu squameux, des douleurs cutanées, des ongles piqués, fissurés ou friables, et des douleurs articulaires. Les thérapies qui peuvent être utilisées en combinaison avec les polypeptides TNFR2 AFFIMER® proposés ici incluent, par exemple : Des crèmes à base de stéroïdes, des crèmes hydratantes pour peaux sèches, l’anthraline (un médicament ralentissant la production de cellules cutanées), des lotions médicamenteuses, des shampoings et solutions pour le bain pour améliorer le psoriasis du cuir chevelu, des pommades à la vitamine D3, des crèmes à la vitamine A ou aux rétinoïdes, la luminothérapie, le PUVA (un traitement associant un médicament appelé psoralène avec exposition à une forme spéciale de lumière UV), le méthotrexate, les rétinoïdes, la cyclosporine et/ou les thérapies immunitaires. Syndrome de Sjogren Le syndrome de Sjögren est une maladie auto-immune permanente qui réduit la quantité d'humidité produite par les glandes des yeux et de la bouche. Il porte le nom d'Henrik Sjögren, un oculiste suédois qui a décrit l’affection pour la première fois. Bien qu’une bouche sèche et des yeux secs soient les principaux symptômes, la plupart des personnes qui ont ces problèmes n'ont pas le syndrome de Sjögren. La bouche sèche est aussi appelée xérostomie. Il existe deux formes du syndrome de Sjögren : le syndrome de Sjögren primaire, qui se développe de lui-même, non à cause d'un autre problème de santé, et le syndrome de Sjögren secondaire, qui se développe en plus d'autres maladies auto-immunes telles que la polyarthrite rhumatoïde, le lupus et le rhumatisme psoriasique. Les thérapies qui peuvent être utilisées en combinaison avec les polypeptides TNFR2 AFFIMER® proposés ici incluent, par ex. des traitements pour les yeux secs (par ex. des larmes artificielles, gouttes ophtalmiques sur ordonnance, bouchons lacrymaux, la chirurgie, des gouttes de sérum autologue), des traitements pour la sécheresse buccale (par ex. des producteurs de salive), des traitements des problèmes articulaires ou organiques (par ex. analgésiques, antirhumatismaux, immunosuppresseurs, stéroïdes, antifongiques et traitements de la sécheresse vaginale. Myasthénie auto-immune La myasthénie auto-immune (MG, de l’anglais « myasthenia gravis ») est une maladie auto-immune, ce qui signifie que le système immunitaire du corps attaque par erreur ses propres parties. La MG affecte la communication entre les nerfs et les muscles (la jonction neuromusculaire). Les personnes atteintes de MG perdent la capacité de contrôler volontairement leurs muscles. Ils éprouvent une faiblesse musculaire et une fatigue de gravités variables. Ils peuvent ne pas être capables de bouger les muscles des yeux, visage, cou et membres. La MG est une maladie neuromusculaire permanente. La MG affecte environ 20 personnes sur 100.000. Les experts estiment que 36.000 à 60.000 Américains sont atteints de cette maladie neuromusculaire. Le nombre réel de personnes touchées peut être plus élevé, car certaines personnes atteintes de cas bénins peuvent ne pas savoir qu'elles sont atteintes de la maladie. La MG affecte majoritairement les femmes âgées de 20 à 40 ans et les hommes âgés de 50 à 80 ans. Environ un cas de MG sur 10 survient chez des adolescents (MG juvénile). La maladie peut toucher des personnes de tous âges mais est rare chez les enfants. La MG auto-immune est la forme la plus courante de cette maladie neuromusculaire. La MG auto-immune peut être : Oculaire : Les muscles qui déplacent les yeux et les paupières faiblissent. Les paupières peuvent s’affaisser ou il peut ne pas être possible de garder les yeux ouverts. Certaines personnes présentent une vision double. La faiblesse des yeux est souvent le premier signe de la MG. Près de la moitié des personnes atteintes de MG oculaire évoluent vers la forme généralisée dans les deux ans suivant le premier symptôme. Généralisée : La faiblesse musculaire affecte les yeux et d'autres parties du corps telles que les visage, cou, bras, jambes et gorge. Il peut être difficile de parler ou d'avaler, de lever les bras au-dessus de la tête, de se lever depuis une position assise, de marcher de longues distances et de monter les escaliers. Les thérapies qui peuvent être utilisées en combinaison avec les polypeptides TNFR2 AFFIMER® fournis ici incluent, par exemple, les médicaments, les anticorps monoclonaux, l'immunoglobuline IV (IVIG), l'échange de plasma (plasmaphérèse) et/ou la chirurgie. Cancer Il a été démontré que la liaison du TNF au TNFR2 favorise l'activation des cellules tumorales et des types de cellules associées aux tumeurs, tout en affectant la réponse immunitaire, comme les lymphocytes infiltrant la tumeur, pour créer un environnement dans lequel la tumeur peut progresser. En effet, l'expression de TNFR2 dans les tumeurs est associée à la progression de la maladie et à de mauvais résultats cliniques (Sheng Y, et al.). Par conséquent, les polypeptides TNFR2 AFFIMER® de la présente invention peuvent être utiles dans le traitement du cancer, soit en monothérapie soit en conjonction avec d'autres traitements du cancer tels que les immunothérapies, par ex. les thérapies CAR-T, les inhibiteurs de points de contrôle et les traitements anticancéreux conventionnels. Préparations pharmaceutiques Les formulations sont préparées pour le stockage et l'utilisation par combinaison d’un agent AFFIMER® purifié de la présente divulgation avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable (par ex. un support ou excipient). Les personnes du métier considèrent généralement que les supports, excipients et/ou stabilisants pharmaceutiquement acceptables sont des ingrédients inactifs d'une formulation ou composition pharmaceutique. Dans certains modes de réalisation, un agent AFFIMER® décrit ici est lyophilisé et/ou stocké sous une forme lyophilisée. Dans certains modes de réalisation, une formulation comprenant un agent AFFIMER® décrit ici est lyophilisée. Les véhicules pharmaceutiquement acceptables appropriés incluent, mais sans s'y limiter, des tampons non toxiques tels que le phosphate, le citrate et d'autres acides organiques ; des sels tels que le chlorure de sodium ; des antioxydants dont l'acide ascorbique et la méthionine ; les conservateurs tels que le chlorure d'octadécyldiméthylbenzylammonium, le chlorure d'hexaméthonium, le chlorure de benzalkonium, le chlorure de benzéthonium, le phénol, l'alcool butylique ou benzylique, les alkylparabènes tels que le méthyl- ou propylparabène, le catéchol, le résorcinol, le cyclohexanol, le 3-pentanol, le m-crésol ; des polypeptides de faible poids moléculaire (par ex. moins d'environ 10 résidus d'acides aminés) ; des protéines telles que l'albumine sérique, la gélatine ou les immunoglobulines ; les polymères hydrophiles tels que la polyvinylpyrrolidone ; des acides aminés tels que la glycine, la glutamine, l'asparagine, l'histidine, l'arginine ou la lysine ; les glucides tels que les monosaccharides, les disaccharides, le glucose, le mannose ou les dextrines ; des agents chélatants tels que l'EDTA ; les sucres tels que le saccharose, le mannitol, le tréhalose ou le sorbitol ; des contre-ions salifiants tels que le sodium ; les complexes métalliques tels que les complexes Zn-protéine ; et des tensioactifs non ioniques tels que le TWEEN ou le polyéthylène glycol (PEG). (Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22.sup.nd Edition, 2012, Pharmaceutical Press, London.). Les compositions pharmaceutiques de la présente divulgation peuvent être administrées de n'importe quel nombre de manières pour un traitement soit local, soit systémique. L'administration peut être topique par patchs épidermiques ou transdermiques, pommades, lotions, crèmes, gels, gouttes, suppositoires, pulvérisateurs, liquides et poudres ; pulmonaire par inhalation ou insufflation de poudres ou d'aérosols, notamment par nébulisation, intratrachéale et intranasale ; orale ; ou parentérale y compris intraveineuse, intra-artérielle, intratumoralle, sous-cutanée, intrapéritonéale, intramusculaire (par ex. injection ou perfusion) ou intracrânienne (par ex. intrathécale ou intraventriculaire). La formulation thérapeutique peut être sous forme posologique unitaire. De telles formulations incluent les comprimés, pilules, gélules, poudres, granulés, solutions ou suspensions dans de l'eau ou des milieux non aqueux, ou les suppositoires. Dans les compositions solides telles que les comprimés, le principal ingrédient actif est mélangé avec un support pharmaceutique. Les ingrédients de fabrication de comprimés classiques incluent l'amidon de maïs, le lactose, le saccharose, le sorbitol, le talc, l'acide stéarique, le stéarate de magnésium, le phosphate ou les gommes dicalciques, et les diluants (par ex. de l'eau). Ceux-ci peuvent être utilisés pour former une composition de préformulation solide contenant un mélange homogène d'un composé de la présente divulgation, ou un sel pharmaceutiquement acceptable non toxique de celui-ci. La composition de préformulation solide est ensuite subdivisée en formes posologiques unitaires d'un type décrit ci-dessus. Les comprimés, pilules, etc. de la formulation ou composition peuvent être enrobés ou mélangés d'une autre manière pour offrir une forme posologique offrant l'avantage d'une action prolongée. Par exemple, le comprimé ou la pilule peut comprendre une composition interne recouverte d'un composant externe. De plus, les deux composants peuvent être séparés par une couche entérique qui sert à résister à la désintégration et permet au composant interne de traverser intact l'estomac ou d'être retardé dans sa libération. Une variété de matériaux peut être utilisée pour ces couches ou revêtements entériques, de tels matériaux incluant un certain nombre d'acides polymériques et de mélanges d'acides polymériques avec des matériaux tels que la gomme laque, l'alcool cétylique et l'acétate de cellulose. Les agents AFFIMER® décrits ici peuvent également être piégés dans des microcapsules. De telles microcapsules sont préparées, par exemple, par des techniques de coacervation ou par polymérisation interfaciale, par exemple, des microcapsules d'hydroxyméthylcellulose ou de gélatine et des microcapsules de poly-(méthacrylate de méthyle), respectivement, dans des systèmes colloïdaux de délivrance de médicament (par exemple, des liposomes, des microsphères d'albumine, des microémulsions, nanoparticules et nanocapsules) ou dans des macroémulsions tel que décrit dans Remington : The Science and Practice of Pharmacy, 22.sup.nd Edition, 2012, Pharmaceutical Press, London. Dans certains modes de réalisation, les formulations pharmaceutiques comprennent un agent AFFIMER® de la présente divulgation complexé avec des liposomes. Les procédés de production des liposomes sont connus des personnes du métier. Par exemple, certains liposomes peuvent être générés par évaporation en phase inverse avec une composition lipidique comprenant de la phosphatidylcholine, du cholestérol et de la phosphatidyléthanolamine dérivée de PEG (PEG-PE). Les liposomes peuvent être extrudés à travers des filtres de taille de pores définie pour produire des liposomes du diamètre souhaité. Dans certains modes de réalisation, des préparations à libération prolongée comprenant des agents AFFIMER® décrits ici peuvent être produites. Des exemples appropriés de préparations à libération prolongée incluent des matrices semi-perméables de polymères hydrophobes solides contenant un agent AFFIMER®, où les matrices sont sous la forme d'articles façonnés (par ex. des films ou microcapsules). Des exemples de matrices à libération prolongée incluent les polyesters, les hydrogels tels que le poly(2-hydroxyéthyl-méthacrylate) ou le poly(alcool vinylique), les polylactides, les copolymères d'acide L-glutamique et de 7 éthyl-L-glutamate, l'éthylène-acétate de vinyle non dégradable, les copolymères dégradables d'acide lactique et d'acide glycolique tels que le LUPRON DEPOT™. (microsphères injectables composées de copolymère d'acide lactique-acide glycolique et d'acétate de leuprolide), d'isobutyrate d'acétate de saccharose et d'acide poly-D-(-)-3-hydroxybutyrique. Dans certains modes de réalisation, en plus de l'administration d'un agent AFFIMER® décrit ici, le procédé ou le traitement comprend en outre l'administration d'au moins un agent thérapeutique supplémentaire. Un agent thérapeutique supplémentaire peut être administré avant, concurremment à et/ou après l'administration de l'agent AFFIMER®. Des compositions pharmaceutiques comprenant un agent AFFIMER® et le(s) agent(s) thérapeutique(s) supplémentaire(s) sont également fournies. Dans certains modes de réalisation, l’au moins un agent thérapeutique supplémentaire comprend 1, 2, 3 ou plus agents thérapeutiques supplémentaires. La thérapie combinée avec deux ou plus agents thérapeutiques utilise souvent des agents qui agissent selon différents mécanismes d'action, bien que cela ne soit pas requis. La thérapie combinée utilisant des agents ayant des mécanismes d'action différents peut entraîner des effets additifs ou synergiques. La thérapie combinée peut autoriser une dose plus faible de chaque agent que celle utilisée en monothérapie, réduisant ainsi les effets secondaires toxiques et/ou augmentant l'indice thérapeutique de l'agent AFFIMER®. Dans certains modes de réalisation des procédés décrits ici, la combinaison d'un agent AFFIMER® décrit ici et d'au moins un agent thérapeutique supplémentaire aboutit à des résultats additifs ou synergiques. Dans certains modes de réalisation, la thérapie combinée aboutit à une augmentation de l'indice thérapeutique de l'agent AFFIMER®. Dans certains modes de réalisation, la thérapie combinée aboutit à une augmentation de l'indice thérapeutique de(s) agent(s) thérapeutique(s). Dans certains modes de réalisation, la thérapie combinée entraîne une diminution de la toxicité et/ou des effets secondaires de l'agent AFFIMER®. Dans certains modes de réalisation, la thérapie combinée entraîne une diminution de la toxicité et/ou des effets secondaires de(s) agent(s) thérapeutique(s). L'administration combinée peut inclure une coadministration, soit dans une seule formulation pharmaceutique soit en utilisant des formulations séparées, ou une administration consécutive dans l'un ou l'autre ordre mais généralement dans un laps de temps tel que tous les agents actifs puissent exercer leurs activités biologiques simultanément. On comprendra que la combinaison d'un agent AFFIMER® décrit ici et d'au moins un agent thérapeutique supplémentaire peut être administrée dans n'importe quel ordre ou concurremment. Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® sera administré à des patients ayant préalablement subi un traitement avec un second agent thérapeutique. Dans certains autres modes de réalisation, l'agent AFFIMER® et un second agent thérapeutique seront administrés sensiblement simultanément ou concurremment. Par exemple, un sujet peut recevoir un agent AFFIMER® tout en subissant une trajectoire de traitement avec un second agent thérapeutique (par ex. une chimiothérapie). Dans certains modes de réalisation, un agent AFFIMER® sera administré sous 1 année du traitement avec un second agent thérapeutique. Dans certains modes de réalisation alternatifs, un agent AFFIMER® sera administré dans les 10, 8, 6, 4 ou 2 mois de tout traitement avec un second agent thérapeutique. Dans certains autres modes de réalisation, un agent AFFIMER® sera administré dans les ou la 4, 3, 2 ou 1 semaine(s) de tout traitement avec un second agent thérapeutique. Dans certains modes de réalisation, un agent AFFIMER® sera administré sous 5, 4, 3, 2 ou 1 jour(s) de tout traitement avec un second agent thérapeutique. On notera en outre que les deux agents ou traitements (ou plus) peuvent être administrés au sujet en l'espace de quelques heures ou minutes (par ex. sensiblement simultanément). Pour le traitement d'une maladie, la posologie appropriée d'un agent AFFIMER® de la présente divulgation dépend du type de maladie à traiter, de la sévérité et de l'évolution de la maladie, de la réactivité de la maladie, du fait que l'agent AFFIMER® est administré à des fins thérapeutiques ou préventives, des thérapies antérieures, des antécédents cliniques du patient, etc., le tout à la discrétion du médecin traitant. L'agent AFFIMER® peut être administré en une seule fois ou sur une série de traitements durant de plusieurs jours à plusieurs mois, ou jusqu'à ce qu'une guérison soit atteinte ou qu'une diminution de l'état de la maladie soit obtenue. Les schémas de dosage optimaux peuvent être calculés à partir des mesures d'accumulation de médicament(s) dans le corps du patient et varieront en fonction de la puissance relative de chaque agent individuel. Le médecin traitant peut déterminer des dosages optimaux, des méthodologies de dosage et les fréquences de répétition. Dans certains modes de réalisation, la posologie est de 0,01 ug à 100 mg/kg de poids corporel, de 0,1 ug à 100 mg/kg de poids corporel, de 1 ug à 100 mg/kg de poids corporel, de 1 mg à 100 mg/kg de de poids corporel, de 1 mg à 80 mg/kg de poids corporel, de 10 mg à 100 mg/kg de poids corporel, de 10 mg à 75 mg/kg de poids corporel, ou de 10 mg à 50 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est d'environ 0,1 mg à environ 20 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est environ 0,1 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est environ 0,25 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est environ 0,5 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est environ 1 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est environ 1.5 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est environ 2 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est environ 2.5 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est environ 5 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est environ 7.5 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est environ 10 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est environ 12.5 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage de l'agent AFFIMER® est environ 15 mg/kg de poids corporel. Dans certains modes de réalisation, le dosage peut être administré une fois ou plus par jour, par semaine, par mois ou par an. Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® est donné une fois par semaine, une fois toutes les deux semaines, une fois toutes les trois semaines ou une fois toutes les quatre semaines. Dans certains modes de réalisation, un agent AFFIMER® peut être administré à une dose de « charge » initiale supérieure, suivie d'au moins une dose inférieure. Dans certains modes de réalisation, la fréquence d'administration peut également changer. Dans certains modes de réalisation, un schéma posologique peut comprendre l'administration d'une dose initiale, suivie de doses supplémentaires (ou doses « d'entretien ») une fois par semaine, toutes les deux semaines, toutes les trois semaines ou chaque mois. Par exemple, un schéma posologique peut comprendre l'administration d'une dose de charge initiale, suivie d'une dose d'entretien hebdomadaire de, par exemple, la moitié de la dose initiale. Dans certains modes de réalisation, un schéma posologique comprend l'administration d'une dose de charge initiale, suivie de doses d'entretien de, par exemple, la moitié de la dose initiale toutes les deux semaines. Dans certains modes de réalisation, un schéma posologique comprend l'administration de trois doses initiales pendant 3 semaines, suivies de doses d'entretien, par exemple, de la même quantité toutes les deux semaines. Comme cela est connu des personnes du métier, l'administration de tout agent thérapeutique peut entraîner des effets secondaires et/ou des toxicités. Dans certains cas, les effets secondaires et/ou les toxicités sont si graves qu'ils empêchent l'administration de l'agent particulier à une dose thérapeutiquement efficace. Dans certains cas, la thérapie médicamenteuse doit être interrompue, et d'autres agents peuvent être essayés. Cependant, de nombreux agents d'une même classe thérapeutique présentent souvent des effets secondaires et/ou des toxicités similaires, ce qui signifie que le patient doit soit arrêter la thérapie, soit, si possible, souffrir des effets secondaires désagréables associés à l'agent thérapeutique. Dans certains modes de réalisation, le schéma de dosage peut être limité à un nombre spécifique d'administrations ou de "cycles". Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® est administré pendant 3, 4, 5, 6, 7, 8 ou plus cycles. Par exemple, l'agent AFFIMER® est administré toutes les 2 semaines pendant 6 cycles, l'agent AFFIMER® est administré toutes les 3 semaines pendant 6 cycles, l'agent AFFIMER® est administré toutes les 2 semaines pendant 4 cycles, l'agent AFFIMER® est administré toutes les 3 semaines pendant 4 cycles, etc. Les programmes de dosage peuvent être décidés et ensuite modifiés par les personnes du métier. Ainsi, la présente invention propose des procédés d'administration à un sujet des polypeptides ou agents décrits ici comprenant l'utilisation d'une stratégie de dosage intermittent pour administrer au moins un agent (par ex. deux ou trois agents), qui peut réduire les effets secondaires et/ou les toxicités associés à l’administration d'un agent AFFIMER®. Dans certains modes de réalisation, un procédé de traitement d'une maladie inflammatoire ou auto-immune chez un sujet humain comprend l'administration au sujet d'une dose thérapeutiquement efficace d'un agent AFFIMER® en combinaison avec une dose thérapeutiquement efficace d'un autre agent thérapeutique, l'un ou les deux agents étant administré(s) selon une stratégie de dosage intermittent. Dans certains modes de réalisation, la stratégie de dosage intermittent comprend l'administration d'une dose initiale d'un agent AFFIMER® au sujet et l'administration de doses ultérieures de l'agent AFFIMER® environ une fois toutes les 2 semaines. Dans certains modes de réalisation, la stratégie de dosage intermittent comprend l'administration d'une dose initiale d'un agent AFFIMER® au sujet et l'administration de doses ultérieures de l'agent AFFIMER® environ une fois toutes les 3 semaines. Dans certains modes de réalisation, la stratégie de dosage intermittent comprend l'administration d'une dose initiale d'un agent AFFIMER® au sujet et l'administration de doses ultérieures de l'agent AFFIMER® environ une fois toutes les 4 semaines. Dans certains modes de réalisation, l'agent AFFIMER® est administré en utilisant une stratégie à dosage intermittent et l'agent chimiothérapeutique est administré chaque semaine. D'autres modes de réalisation de l'invention sont exposés dans les clauses ci-dessous. 1. Polypeptide d’ingénierie qui se lie spécifiquement au TNFR2 avec une Kd de 1×10 -6 M ou moins, dans lequel le polypeptide d’ingénierie est une variante d'une protéine Stéfine A. 2. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 1 comprenant une séquence d'acides aminés ayant au moins 80 %, au moins 90 %, au moins 95 ou au moins 98 % d'identité avec une séquence d'acides aminés de MIP-Xaa1-GLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVV-(Xaa)n-Xaa2-TNYYIKVRAGDNKYMHLKVF-Xaa3-Xaa4-Xaa5-(Xaa)m-Xaa6-D-Xaa7-VLTGYQVDKNKDDELTGF (SEQ ID NO : 4), où Xaa, individuellement pour chaque occurrence, est un résidu d'acide aminé ; et n et m sont chacun, indépendamment, un entier de 3 à 20. 3. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 2 où la séquence d'acides aminés a 100 % d'identité avec une séquence d'acides aminés de MIP-Xaa1-GLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVV-(Xaa)n-Xaa2-TNYYIKVRAGDNKYMHLKVF-Xaa3-Xaa4-Xaa5-(Xaa)m-Xaa6-D-Xaa7-VLTGYQVDKNKDDELTGF (SEQ ID NO : 4), où Xaa, individuellement pour chaque occurrence, est un résidu d'acide aminé ; et n et m sont chacun, indépendamment, un entier de 3 à 20. 4. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 1 comprenant une séquence d'acides aminés ayant au moins 80 %, au moins 90 %, au moins 95 ou au moins 98 % d'identité avec une séquence d'acides aminés de MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVD-(Xaa)n-GTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSL-(Xaa)m-EDLVLTGYQVDKNKDDELTGF (SEQ ID NO: 5), où Xaa, individuellement pour chaque occurrence, est un résidu d'acide aminé ; et n et m sont chacun, indépendamment, un entier de 3 à 20. 5. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 4 où la séquence d'acides aminés a 100 % d'identité avec une séquence d'acides aminés de MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVD-(Xaa)n-GTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSL-(Xaa)m-EDLVLTGYQVDKNKDDELTGF (SEQ ID NO: 5), où Xaa, individuellement pour chaque occurrence, est un résidu d'acide aminé ; et n et m sont chacun, indépendamment, un entier de 3 à 20. 6. Polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des clauses 1 à 5, dans lequel n est un nombre entier de 5 à 18. 7. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 6, dans lequel n est un nombre entier de 7 à 15. 8. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 7, dans lequel n est un nombre entier de 8 à 12. 9. Polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des clauses 1 à 8, dans lequel n est un nombre entier de 5 à 18. 10. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 9, dans lequel m est un nombre entier de 7 à 15. 11. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 10, dans lequel m est un nombre entier de 8 à 12. 12. Polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des clauses 1 à 11 qui se lie au TNFR2 avec un Kd de 1×10 -7 M. 13. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 12 qui se lie au TNFR2 avec un Kd de 1×10 -8 M. 14. Polypeptide d’ingénierie selon l’une quelconque des clauses 1 à 13, dans lequel (Xaa)n comprend une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par les SEQ ID NO : 6-102. 15. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 14, dans lequel (Xaa)n consiste en une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par les SEQ ID NO : 6-102. 16. Polypeptide d’ingénierie selon l’une quelconque des clauses 1 à 15, dans lequel (Xaa)m comprend une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par les SEQ ID NO : 103-199. 17. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 16, dans lequel (Xaa)m consiste en une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par les SEQ ID NO : 103-199. 18. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 14, dans lequel (Xaa)n comprend une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par les SEQ ID NO : 6, 11, 13, 16, 17, 24, 25, 29, 33, 41, 54, 65, 67, 73, 75, 82, 89, 90, 98 et 99. 19. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 18, dans lequel (Xaa)n consiste en une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par les SEQ ID NO : 6, 11, 13, 16, 17, 24, 25, 29, 33, 41, 54, 65, 67, 73, 75, 82, 89, 90, 98 et 99. 20. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 16, dans lequel (Xaa)m comprend une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par les SEQ ID NO : 103, 108, 110, 113, 114, 121, 122, 126, 130, 138, 151, 162, 164, 170, 172, 179, 186, 187, 195 et 196. 21. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 20, dans lequel (Xaa)m consiste en une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par les SEQ ID NO : 103, 108, 110, 113, 114, 121, 122, 126, 130, 138, 151, 162, 164, 170, 172, 179, 186, 187, 195 et 196. 22. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 1 comprenant une séquence d'acides aminés au moins 75 %, au moins 85 %, ou au moins 95 % d'identité avec une séquence d'acides aminés des SEQ ID No: 200, 205, 207, 210, 211, 218, 219, 223, 227, 235, 248, 259, 261, 267, 269, 276, 283, 284, 292 à 293, où la séquence exclut optionnellement un ou plus des vingt-et-un résidus carboxy terminaux. 23. Polypeptide d’ingénierie selon la clause 22 comprenant une séquence d'acides aminés ayant 100 % d'identité avec une séquence d'acides aminés des SEQ ID No: 200, 205, 207, 210, 211, 218, 219, 223, 227, 235, 248, 259, 261, 267, 269, 276, 283, 284, 292 à 293, où la séquence exclut optionnellement un ou plus des vingt-et-un résidus carboxy terminaux. 24. Polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des clauses 1 à 23, dans lequel le polypeptide de Stéfine A est un polypeptide de Stéfine A de mammifère. 25. Polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des clauses 1 à 24, dans lequel le polypeptide de Stéfine A est un polypeptide de Stéfine A humaine. 26. Polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des clauses 1 à 25, comprenant en outre un peptide signal. 27. Protéine de fusion comprenant un dimère, un trimère ou un tétramère du polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des clauses 1 à 26, comprenant optionnellement un lieur ou plus. 28. Protéine de fusion selon la clause 10, dans laquelle le lieur est un lieur rigide. 29. Protéine de fusion selon la clause 28, dans laquelle le lieur rigide est un lieur peptidique comprenant la séquence (EAAAK)n, où n vaut 1-6. 30. Une protéine de fusion comprenant un ou plus des polypeptides d’ingénierie selon l’une quelconque des clauses 1 à 29 lié(s) à un groupement thérapeutique ou diagnostique. 31. Protéine de fusion selon la clause 30, dans laquelle le groupement thérapeutique est une protéine ou un peptide thérapeutique. 32. Protéine de fusion selon la clause 31, dans laquelle le groupement thérapeutique est un anticorps. 33. Protéine de fusion selon la clause 30, dans laquelle le groupement diagnostique est une protéine fluorescente. 34. Polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des clauses 1 à 26 ou la protéine de fusion selon l'une quelconque des clauses 27 à 33 comprenant en outre un groupement d'extension de demi-vie. 35. Polypeptide d’ingénierie ou protéine de fusion selon la clause 34, dans lequel le groupement d'extension de demi-vie est sélectionné parmi les domaines Fc d'anticorps, l'albumine sérique humaine, les protéines de liaison du sérum. 36. Polypeptide d’ingénierie ou protéine de fusion selon la clause 34, où le groupement d'extension de demi-vie est une variante d'une protéine Stéfine A qui se lie spécifiquement à l'albumine sérique humaine avec un Kd de 1×10 -6 M ou moins. 37. Polypeptide d’ingénierie ou protéine de fusion selon l'une quelconque des clauses 1 à 36, dans lequel/laquelle le Kd est mesuré par analyse cinétique Biacore. 38. Polypeptide d’ingénierie ou protéine de fusion selon la clause 37, dans lequel/laquelle le Kd est mesuré comme exposé dans l'EXEMPLE 3, « essai Biacore ». 39. Polypeptide d’ingénierie ou protéine de fusion selon l'une quelconque des clauses 1 à 38, dans lequel le polypeptide d’ingénierie se lie au TNFR2 en tant que monomère avec une CI50 dans un essai de liaison en concurrence avec le TNFR2 de 1 uM ou moins, d'environ 100 nM ou moins, d'environ 40 nM ou moins, d’environ 20 nM ou moins, d’environ 10 nM ou moins, d’environ 1 nM ou moins, ou d’environ 0,1 nM ou moins. 40. Polypeptide d’ingénierie ou protéine de fusion selon l'une quelconque des clauses 1 à 39, dans lequel/laquelle le TNFR2 est un TNFR2 de mammifère. 41. Polypeptide d’ingénierie ou protéine de fusion selon la clause 40, dans lequel/laquelle le TNFR2 est un TNFR2 humain. 42. Polypeptide d’ingénierie ou protéine de fusion selon la clause 40, dans lequel/laquelle le TNFR2 est un TNFR2 de souris. 43. Polypeptide d’ingénierie ou protéine de fusion selon la clause 34, dans lequel le groupement d'extension de demi-vie est sélectionné dans le groupe constitué des SEQ ID NO : 471-477. 44. Polynucléotide ou ensemble de polynucléotides codant pour le polypeptide d’ingénierie ou la protéine de fusion selon l'une quelconque des clauses 1 à 43. 45. Polynucléotide ou ensemble de polynucléotides selon la clause 44, comprenant une séquence d'acide nucléique ayant au moins 80 %, au moins 90 %, au moins 95 ou au moins 98 % d'identité avec une séquence sélectionnée dans le groupe constitué des SEQ ID NO : 297, 302, 304, 307, 308, 315, 316, 320, 324, 332, 345, 356, 358, 364, 366, 373, 380, 381, 389 et 290, où la séquence exclut optionnellement les nucléotides codant pour un ou plus des vingt-et-un résidus carboxy terminaux. 46. Véhicule de distribution comprenant le polynucléotide de l’une des clauses 44 ou 45. 47. Véhicule de distribution selon la clause 46, qui est un véhicule de distribution viral. 48. Véhicule de distribution selon la clause 47, dans lequel le véhicule de distribution viral est un vecteur adénoviral, un vecteur rétroviral, un vecteur lentiviral ou un vecteur viral adéno-associé (AAV). 49. Véhicule de distribution selon la clause 46, qui est un véhicule de distribution non viral. 50. Véhicule de distribution selon la clause 49, dans lequel le véhicule de distribution non viral est un liposome ou une nanoparticule lipidique. 51. Plasmide ou minicercle comprenant le polynucléotide selon l'une quelconque des clauses 44 à 50. 52. ARN messager (ARNm) comprenant un cadre de lecture ouvert codant pour le polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des clauses 1 à 43. 53. L'ARNm selon la clause 52 comprenant en outre un cadre de lecture ouvert codant pour une liaison aux cellules immunitaires. 54. Nanoparticule lipidique, optionnellement nanoparticule lipidique cationique, comprenant l'ARNm selon la clause 52 ou 53. 55. Nanoparticule lipidique selon la clause 54, dans laquelle la nanoparticule lipidique est une nanoparticule lipidique cationique. 56. Composition pharmaceutique comprenant le polypeptide d’ingénierie, la protéine de fusion ou le véhicule de distribution selon l'une quelconque des clauses 1 à 50, et optionnellement un excipient pharmaceutiquement acceptable. 57. Conjugué comprenant le polypeptide d’ingénierie ou la protéine de fusion selon l’une quelconque des clauses 1 à 43 liée à un groupement pharmacologiquement actif. 58. Procédé comprenant l'administration à un sujet de la composition pharmaceutique selon la clause 56. 59. Le procédé de la clause 58 où le sujet souffre du lupus érythermatose disséminé (LES), de la néphrite lupique (par ex. la néphrite lupique d’origine médicamenteuse), de la thrombocytopénie immunitaire (ITP), de la polyarthrite rhumatoïde (PR), de la sclérose en plaques (SEP), des maladies inflammatoires chroniques de l'intestin (MICI) (par ex. la maladie de Crohn et la colite/colite ulcéreuse), de la maladie du greffon contre l'hôte (GvHD) (liée aux transplantations de cellules souches) également appelée rejet d'allogreffe, de la transplantation/Transplantation d'Organe Solide (SOT), de la cholangite biliaire primitive (CBP), du psoriasis, de l’arthrite psoriasique, de l’arthrite induite par le collagène, de l’encéphalomyélite allergique expérimentale (EAE), de l’ovarite, de la rhinite allergique, de l’asthme, du syndrome de Sjogren, de l’eczéma atopique, de la myasthénie, de la maladie de Basedow, de la glomérulosclérose ou du cancer. 60. Polypeptide d’ingénierie, protéine de fusion ou véhicule de distribution selon l'une quelconque des clauses 1 à 50 pour utilisation en tant que médicament. 61. Le polypeptide d’ingénierie, la protéine de fusion ou le véhicule de distribution de la clause 60 pour utilisation dans le traitement du lupus érythermatose disséminé (LES), de la néphrite lupique (par ex. la néphrite lupique d’origine médicamenteuse), de la thrombocytopénie immunitaire (ITP), de la polyarthrite rhumatoïde (PR), de la sclérose en plaques (SEP), des maladies inflammatoires chroniques de l'intestin (MICI) (par ex. la maladie de Crohn et la colite/colite ulcéreuse), de la maladie du greffon contre l'hôte (GvHD) (liée aux transplantations de cellules souches) également appelée rejet d'allogreffe, de la transplantation/Transplantation d'Organe Solide (SOT), de la cholangite biliaire primitive (CBP), du psoriasis, de l’arthrite psoriasique, de l’arthrite induite par le collagène, de l’encéphalomyélite allergique expérimentale (EAE), de l’ovarite, de la rhinite allergique, de l’asthme, du syndrome de Sjogren, de l’eczéma atopique, de la myasthénie, de la maladie de Basedow, de la glomérulosclérose ou du cancer. 62. Utilisation du polypeptide d’ingénierie, de la protéine de fusion ou du véhicule de distribution selon l’une quelconque des clauses 1 à 50 dans la fabrication d’un médicament pour le traitement du lupus érythermatose disséminé (LES), de la néphrite lupique (par ex. la néphrite lupique d’origine médicamenteuse), de la thrombocytopénie immunitaire (ITP), de la polyarthrite rhumatoïde (PR), de la sclérose en plaques (SEP), des maladies inflammatoires chroniques de l'intestin (MICI) (par ex. la maladie de Crohn et la colite/colite ulcéreuse), de la maladie du greffon contre l'hôte (GvHD) (liée aux transplantations de cellules souches) également appelée rejet d'allogreffe, de la transplantation/Transplantation d'Organe Solide (SOT), de la cholangite biliaire primitive (CBP), du psoriasis, de l’arthrite psoriasique, de l’arthrite induite par le collagène, de l’encéphalomyélite allergique expérimentale (EAE), de l’ovarite, de la rhinite allergique, de l’asthme, du syndrome de Sjogren, de l’eczéma atopique, de la myasthénie, de la maladie de Basedow, de la glomérulosclérose ou du cancer. 63. Polypeptide d’ingénierie qui entre en concurrence pour la liaison au TNFR2 avec un polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des clauses 1 à 43. 64. Polypeptide d’ingénierie qui se lie au même épitope sur TNFR2 que celui d'un polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des clauses 1 à 43. 65. Polypeptide d’ingénierie ou protéine de fusion selon l'une quelconque des clauses 1 à 64 qui comprend une séquence signal et/ou un domaine transmembranaire. EXEMPLES Le but de ces expériences a été d'identifier des polypeptides AFFIMER® agonistes spécifiques des TFNR2 humain et de souris. Exemple 1. Sélection de polypeptides AFFIMER® de liaison au TNFR2 à partir d’une bibliothèque d’exposition sur phages Identification de clones candidats Les polypeptides TNFR2 AFFIMER® de la présente invention ont été identifiés par sélection à partir d'une bibliothèque de polypeptides AFFIMER® avec deux séquences de boucles aléatoires, chaque boucle ayant une longueur d'environ 9 acides aminés affichée dans un squelette de charpente polypeptidique AFFIMER® constant basé sur la séquence d'acides aminés de la Stéfine A. De telles procédures de sélection ont été décrites (voir, par ex. Tiede et al. Protein Eng Des Sel. 2014. 27(5): 145–155 et Hughes et al. Sci Signal. 2018. 10(505): eaaj2005). Selon de telles procédures, des suspensions de phages exprimant des protéines AFFIMER® ont été incubées avec du TNFR2 humain (ou de souris dans des expériences ultérieures) selon les besoins, les séquences desquelles étant présentées dans le Tableau 7. Tableau 7. Séquences de protéines TNFR utilisées lors de la sélection (de Sino Biologicals). Protéine Séquence cible Numéro du plasmide au catalogue SEQ ID NO : TNFR2 humain MAPVAVWAALAVGLELWAAAHALPAQVAFTPYAPEPGSTCRLREYYDQTAQMCCSKCSPGQHAKVFCTKTSDTVCDSCEDSTYTQLWNWVPECLSCGSRCSSDQVETQACTREQNRICTCRPGWYCALSKQEGCRLCAPLRKCRPGFGVARPGTETSDVVCKPCAPGTFSNTTSSTDICRPHQICNVVAIPGNASMDAVCTSTSPTRSMAPGAVHLPQPVSTRSQHTQPTPEPSTAPSTSFLLPMGPSPPAEGSTGDFALPVGLIVGVTALGLLIIGVVNCVIMTQVKKKPLCLQREAKVPHLPADKARGTQGPEQQHLLITAPSSSSSSLESSASALDRRAPTRNQPQAPGVEASGAGEARASTGSSDSSPGGHGTQVNVTCIVNVCSSSDHSSQCSSQASSTMGDTDSSPSESPKDEQVPFSKEECAFRSQLETPETLLGSTEEKPLPLGVPDAGMKPS Cat: HG10417-CY 478 TNFR1 humain MGLSTVPDLLLPLVLLELLVGIYPSGVIGLVPHLGDREKRDSVCPQGKYIHPQNNSICCTKCHKGTYLYNDCPGPGQDTDCRECESGSFTASENHLRHCLSCSKCRKEMGQVEISSCTVDRDTVCGCRKNQYRHYWSENLFQCFNCSLCLNGTVHLSCQEKQNTVCTCHAGFFLRENECVSCSNCKKSLECTKLCLPQIENVKGTEDSGTTVLLPLVIFFGLCLLSLLFIGLMYRYQRWKSKLYSIVCGKSTPEKEGELEGTTTKPLAPNPSFSPTPGFTPTLGFSPVPSSTFTSSSTYTPGDCPNFAAPRREVAPPYQGADPILATALASDPIPNPLQKWEDSAHKPQSLDTDDPATLYAVVENVPPLRWKEFVRRLGLSDHEIDRLELQNGRCLREAQYSMLATWRRRTPRREATLELLGRVLRDMDLLGCLEDIEEALCGPAALPPAPSLLR HG10872-CY 479 TNFR2 de cynomolgus MAPAAVWAALAVGLELWAAGHALPAQVAFTPYAPEPGGTCRLREYYDQTAQMCCSKCPPGQHAKVFCTKTSDTVCDSCEDSTYTQLWNWVPECLSCGSRCSSDQVETQACTREQNRICTCRPGWYCALSKQEGCRLCAQLRKCRPGFGVARPGTETSDVVCKPCAPGTFSNTTSSTDICRPHQICHVVAIPGNASMDAVCTSTSPTRSMAPGAVHLPQPVSTRSQHTQPTPAPSTAPGTSFLLPVGPSPPAEGSTGDIVLPVGLIVGVTALGLLIIGVVNCVIMTQVKKKPLCLQRETKVPHLPADKARGAQGPEQQHLLTTVPSSSSSSLESSASALDRRAPTRNQPQAPGAEKASGAGEARASTGSSDSSPGGHGTQVNVTCIVNVCSSSDHSSQCSSQASSTTGDTDASPSGSPKDEQVPFSKEECAFRSQLETPETLLGSTGEKPLPLGVPDAGMKPS CG90102-ACR 480 TNFR2 de souris MAPAALWVALVFELQLWATGHTVPAQVVLTPYKPEPGYECQISQEYYDRKAQMCCAKCPPGQYVKHFCNKTSDTVCADCEASMYTQVWNQFRTCLSCSSSCTTDQVEIRACTKQQNRVCACEAGRYCALKTHSGSCRQCMRLSKCGPGFGVASSRAPNGNVLCKACAPGTFSDTTSSTDVCRPHRICSILAIPGNASTDAVCAPESPTLSAIPRTLYVSQPEPTRSQPLDQEPGPSQTPSILTSLGSTPIIEQSTKGGISLPIGLIVGVTSLGLLMLGLVNCIILVQRKKKPSCLQRDAKVPHVPDEKSQDAVGLEQQHLLTTAPSSSSSSLESSASAGDRRAPPGGHPQARVMAEAQGFQEARASSRISDSSHGSHGTHVNVTCIVNVCSSSDHSSQCSSQASATVGDPDAKPSASPKDEQVPFSQEECPSQSPCETTETLQSHEKPLPLGVPDMGMKPSQAGWFDQIAVKVA MG50128-CY 481 TNFR1 de souris MGLPTVPGLLLSLVLLALLMGIHPSGVTGLVPSLGDREKRDSLCPQGKYVHSKNNSICCTKCHKGTYLVSDCPSPGRDTVCRECEKGTFTASQNYLRQCLSCKTCRKEMSQVEISPCQADKDTVCGCKENQFQRYLSETHFQCVDCSPCFNGTVTIPCKETQNTVCNCHAGFFLRESECVPCSHCKKNEECMKLCLPPPLANVTNPQDSGTAVLLPLVILLGLCLLSFIFISLMCRYPRWRPEVYSIICRDPVPVKEEKAGKPLTPAPSPAFSPTSGFNPTLGFSTPGFSSPVSSTPISPIFGPSNWHFMPPVSEVVPTQGADPLLYESLCSVPAPTSVQKWEDSAHPQRPDNADLAILYAVVDGVPPARWKEFMRFMGLSEHEIERLEMQNGRCLREAQYSMLEAWRRRTPRHEDTLEVVGLVLSKMNLAGCLENILEALRNPAPSSTTRLPR MG50496-CY 482 Tableau 8. Antigènes commerciaux utilisés lors de la sélection. Les antigènes TNFR2 ayant les séquences présentées dans le Tableau 7 ainsi que d'autres protéines présentées ci-dessous ont été testés dans différents formats pour biotinylation et utilisation dans la sélection TNFR2 AFFIMER® et d'autres essais. Antigène Fournisseur Numéro au catalogue Etiquette Source PM prévu (kDa) hTNFR2-hFc-his-Avi (conjugué à la biotine) BPS 100205 IgG1 humaine, 6x His, Avi, Biotine HEK293 75 hTNFR2-hFc-his-Avi BPS 79363 IgG1 humaine, 6x His, Avi HEK293 75 hTNFR2-his Acro Biosystems AMS.TN2-H5227 Etiquette 6X His HEK293 26 hTNFR2-his-avi (conjugué à la biotine) Acro Biosystems AMS.TN2-H82E3 Etiquette 6X His et Avi, Biotine HEK293 26 hTNFR2-his Sino Biologicals 10417-H08H 6x His HEK293 45 hTNFR2 Peprotech 310-12 N/A E. coli 20 mTNFR2-mFc R&D Biosystems 9707-R2-050 IgG2a de souris NS0 52 mTNFR2-his Sino Biologicals 50128-M08H 6x His HEK293 27 mTNFR2-hFc Sino Biologicals 50128-M02H IgG1 Fc humaine HEK293 52 hTNFa Peprotech 300-01-A N/A E. coli 17,4 mTNFa Peprotech 315-01A N/A E. coli 17,3 hFc (IgG1) AcroBiosystems FCC- H5214 N/A HEK293 26 hFc-Avi (IgG1) (conjugué à la biotine) AcroBiosystems IG1-H8213 Etiquette Avi, biotine HEK293 28,4 mFc (IgG2a) AcroBiosystems IGA-M5207 N/A HEK293 26,4 mFc (IgG2a) biotinylé AcroBiosytems IGA-M8210 N/A HEK293 28,2 hTNFR1-hFc AcroBiosytems TN1-H5251 IgG1 Fc humaine HEK293 47,9 mTNFR1-hFc-His R&D Systems 430-RI/CF IgG1 Fc humaine NS0 48,6 Dans certains cas, le TNFR2 a été biotinylé et capturé sur des billes de streptavidine et de neutravidine en alternance, alternativement le TNFR2 a été passivement absorbé par une surface. Les particules de phage non liées ont ensuite été enlevées par lavage et, en suite du lavage, le phage lié ont été élués. L'élution du phage lié a été accomplie par i exposition à la trypsine. Les particules de phage élués ont ensuite été utilisées pour infecter Escherichia coli (E. coli) et les bactéries infectées ont été incubées dans des conditions adaptées à la réplication du bactériophage. Après libération de particules de bactériophage par ces bactéries infectées, le cycle consistant à permettre aux particules de phage de se lier à l'antigène cible, à éluer les particules de phage liées, à propager les particules de phage éluées dans les bactéries, et à isoler les particules de phage libérées des bactéries infectées a été répété pour enrichir la population de bactériophages pour les particules de phage présentant des protéines qui se lient à l'antigène cible. Des conditions spécifiques ont été modifiées dans ces cycles, telles que l'augmentation du nombre d'étapes de lavage, la réduction de la quantité d'antigène disponible ou l'ajout d'un réactif de blocage, pour sélectionner des particules de phage exhibant des protéines qui se lient plus étroitement ou spécifiquement à l'antigène cible. Après de multiples tours de sélection et d'amplification de la bibliothèque d'exposition sur phages (de l’anglais « phage display library », les protéines exprimées par les phages ont été exprimées et criblées par dosage immuno-enzymatique (ELISA, de l’anglais « enzyme-linked immunosorbent assay »). En bref, les polypeptides AFFIMER® ont été surexprimés à partir de vecteurs phagémides, les cellules bactériennes ont été lysées, et les lysats ont été utilisés comme substrats dans les ELISA. Dans ces ELISA, du TNFR2 humain, murin et de cynomolgus a été immobilisé sur une plaque, des lysats ont été ajoutés, et la quantité de polypeptide AFFIMER® se liant au TNFR2 dans chaque plaque a été mesurée à l'aide d'un anticorps détecteur spécifique de l'étiquette Myc exprimée sur les polypeptides AFFIMER® candidats. Les vecteurs phagémides codant pour les polypeptides AFFIMER® avec la meilleure activité de liaison au TNFR2 humain ont été séquencés pour identifier les séquences d'ADN des clones candidats pour un développement ultérieur. Des polypeptides TNFR1 ont également été utilisés pour distinguer la spécificité. Les séquences d'acides aminés de la boucle 2 et de la boucle 4 de chacun de ces clones candidats sont présentées dans le tableau 1. EXEMPLE 2 : Production d'AFFIMER® dans des cellules de mammifères en tant que protéine soluble et criblage Clonage dans un vecteur d'intérêt Pour apprécier la capacité des protéines AFFIMER® sélectionnées à se lier au TNFR2 lorsqu'elles sont exprimées à la surface d'une cellule de mammifère, des groupes de cellules transfectées de manière transitoire ont été générés pour 30 clones « accélérés » (en anglais « fast-tracked ») sur la base des séquences les plus répétées lors de la sélection passive. Ces clones ont été utilisés pour la caractérisation initiale et l'optimisation de l’essai. Les séquences TNFR2 AFFIMER® et les cibles TNFR2 ont été clonées à partir du phagémide de l'Exemple 1 dans le vecteur d'expression de mammifère pD609kanR (vecteur personnalisé ATUM) pour expression dans des cellules Expi293F™ (ThermoFisher). La concentration moyenne obtenue à partir de l'expression a été de 2,8 mg/mL, avec 19 clones sélectionnés en fonction de leur pureté et jaugés par pour dégradation. Ces 19 clones ont été criblés sur des cellules exprimant Expi293F™hTNFR2 par cytométrie en flux à 1 µM et 0,1 µM tout en étant comparés aux témoins négatifs SQT-GLY et 3T0-GLY qui contiennent des glycines uniquement dans la Boucles 2 et la Boucles 4 et ne sont donc pas des liants spécifiques. Le signal détecté sur les cellules transfectées a été soustrait du signal obtenu sur les cellules Expi293F™ non transfectées. Parmi ceux-ci, 16 clones démontrent une liaison aux cellules hTNFR2-Expi293F™ à 1 µM > 10 % qu’une liaison à la lignée cellulaire parentale ait été soustraite. Les clones 15, 22 et 23 n'ont pas démontré de telle liaison ( ). Les protéines AFFIMER® purifiées de mammifère hTNFR2 ont été criblées dans l’essai rapporteur HEK Blue™ TNFα SEAP (Invivogen) selon les instructions du fabricant pour déterminer si elles pouvaient déclencher la voie NFkB et la production de SEAP (phosphatase alcaline embryonnaire sécrétée, de l’anglais « Secreted embryonic alkaline phosphatase ») via une liaison au TNFR2 lorsqu'elles sont regroupées (de l’anglais « clustered ») par un anticorps anti-his enduit sur la plaque. Dans cette expérience, 5 des clones accélérés (01, 09, 12, 21 et 26) ont démontré une capacité à déclencher la libération de SEAP, le clone 12 montrant l'agonisme le plus cohérent. 90 autres polypeptides AFFIMER® ont été clonés à partir du phagémide et caractérisés de manière similaire. 55 clones ont été repris et la liaison confirmée par analyse Mirrorball. Une caractérisation plus poussée a été effectuée par ELSA en concurrence pour tester leur capacité à bloquer l'interaction entre hTNFR2-hFc-his-avi et le TNF-alpha recombinant. Une série d'expériences a été réalisée pour déterminer l'EC80 de hTNFR2-hFc-his-Avi lors de la liaison au hTNF alpha enrobé (593 pM). Les protéines AFFIMER® ont été testées à trois concentrations différentes (10, 1 et 0,1 µM) lorsque cela était possible, en présence de l'antigène hTNFR2 à sa CE80 déterminée. La détection de hTNFR2-hFc-his-Avi lié a été effectuée par l’anticorps anti-hFc-HRP. Parmi les 75 clones testés, 32 clones, qui ont montré un % d'inhibition supérieur à 65 % à 10 µM, ont été sélectionnés pour être caractérisés davantage afin de déterminer leur CI50 ( ). Les clones 06, 21, 26, 27, 44, 108 et 115 ont montré une inhibition totale de l'interaction entre TNFα et hTNFR2 aux concentrations testées. A ce stade, ces 55 clones ainsi que les 14 clones du groupe accéléré (13 agonistes, un négatif, clone 06) ont été clonés dans le vecteur pDisplay (Thermo Fisher). Ce vecteur contient un domaine transmembranaire de protéine PDGFR en C-term pour permettre l'expression d'Affiner à la surface des cellules d'expression et en tant que protéines solubles. Des étiquettes supplémentaires telles que HA en N-term sont également codées par ce vecteur permettant une vérification facile de l'expression d’Affimer. Une fois clonées, ces Affimer ont été transfectées de manière transitoire dans des cellules Expi293F™ pour une analyse SEAP comme décrit précédemment. En prenant toutes les données ensemble, 43 clones ont été sélectionnés pour une caractérisation supplémentaire. EXEMPLE 3 : Caractérisation de 43 clones sélectionnés Essai Biacore Les 43 clones sélectionnés ont été testés dans une analyse cinétique Biacore en tant que protéines solubles. En bref, des cinétiques multicycles ont été réalisées à l'aide d'une puce CM5 sur laquelle l'antigène dimérique hTNFR2-hFc-his-avi a été immobilisé à 500RU. Les protéines AFFIMER® ont été titrées à la baisse (de l’anglais « downtitrated ») dans un tampon HBS-EP+ à partir de 1 µM dans une série de dilutions à 1:2. Le temps d'association et la dissociation utilisés étaient respectivement de 200 s et 400 s à un débit de 20 µl/min avec une régénération avec 10 mM de glycine à pH 1,5 pendant 30 s à 30 µl/min. Douze clones ont montré une réponse très faible et aucune valeur KD n'a pu être estimée pour ceux-ci. Le clone 09 a été ajusté à l'aide du modèle de liaison à 1:1, cependant, la valeur KD rapportée était trop élevée (>E-05) pour être fiable avec la plage de concentration utilisée. Pour 16 clones, le signal atteint était adéquat et ils ont pu être ajustés avec succès en utilisant le modèle de liaison à 1:1, la courbe et leur ajustement sont compilés. Deux clones (21 et 69) qui sont des dimères ont été ajustés en utilisant à la fois le modèle de liaison à 1:1 et un état d'équilibre afin d'estimer leur KD, tandis que dans 12 clones, un faible Rmax a rendu difficile leur ajustement en utilisant le modèle de liaison à 1:1 et le modèle d'état d’équilibre (en anglais « Steady State ») a été utilisé à la place. Dans ce cas, la valeur KD obtenue n'a pas été rapportée ; à la place, un ordre de grandeur l'a été. Les résultats sont présentés en . Réactivité croisée ELISA de liaison La spécificité des clones TNFR2 AFFIMER® pour hTNFR2 a été appréciée par ELISA lorsque les clones se liant au TNFR2 ont été comparés à leur liaison au TNFR1. Aucun des clones n'a montré de liaison au TNFR1 en tant qu'antigène recombinant. hTNFR1 a également été exprimé dans des cellules Expi293F™, et aucune liaison n'a été observée à ce hTNFR1 exprimé de manière cellulaire, confirmant l'absence de réactivité croisée entre les liants polypeptidiques hTNFR2 AFFIMER® avec hTNFR1. En plus de leur liaison au TNFR2 humain, la liaison des clones au TNFR2 de souris a également été testée pour vérifier si l'un d'entre eux présentait une réaction croisée. Il y avait très peu de chances que cela se produise car l'homologie entre les deux protéines est d'environ 68 % pour le domaine extracellulaire, ce qui a été confirmé car aucun clone n'a démontré de liaison aux cellules Expi293F™ exprimant mTNFR2. HEK293 – Caractérisation par essai HEK Blue Les 43 clones principaux ont été transfectés de manière transitoire dans des cellules HEK 293, ainsi que 4 témoins, SQT-Gly, 3t0-Gly, Vecteur vide et le clone 06 qui s'est révélé être négatif. Environ 29h après la transfection, la viabilité des cellules a été déterminée en utilisant un compteur de cellules, et l'expression de l'AFFIMER® a été déterminée par cytométrie en flux en utilisant un anticorps anti-HA. 48 heures après la transfection, les cellules HEK293 exprimant AFFIMER® ont été cocultivées avec des cellules rapporteuses HEK Blue à 4 densités cellulaires différentes, 40000, 20000, 10000 et 5000 avec un nombre fixe de cellules HEK Blue de 50 000 cellules/puits. En parallèle, le contrôle positif MR2-1 a également été incubé avec des cellules HEK Blue pendant 24h sur une plage de concentrations. Après 24h, la libération de SEAP dans le surnageant a été quantifiée en utilisant Quanti-Blue et une mesure d'absorbance 640 nm. La coloration des AFFIMER® avec un anticorps monoclonal anti-HA a montré des niveaux d'expression > 90 % dans chacune des deux expériences. Dans l’essai rapporteur de coculture, l'effet des protéines TNFR2 AFFIMER® exhibées sur HEK293 sur les cellules HEK-Blue était visible, ainsi que l'effet du clone MR2-1, permettant la sélection de 16 clones qui ont été classés de manière cohérente parmi les 20 meilleurs clones dans chacune des deux expériences. Ces résultats sont compilés en , avec les clones suivants identifiés : 001, 007, 009, 012, 013, 026, 027, 037, 044, 059, 069, 079, 100, 103, 112 et 115. Liaison cellulaire au TNFR2 humain et de cynomolgus Les 16 meilleurs agonistes ont été caractérisés en format soluble pour leur liaison au TNFR2 humain surexprimant Expi293F™ et au TNFR2 de cynomolgus surexprimant Expi293F. L'expérience a été répétée 3 fois et 2 lots différents de cellules transfectées de manière transitoire ont été utilisés. Tous les clones ont montré une liaison spécifique cohérent aux cellules hTNFR2-Expi293F™. Les clones 26 et 69 ont montré les meilleures CE50 sur à la fois les cellules exprimant TNFR2 humaines et de cynomolgus. 13 des 16 clones testés montrent une réactivité croisée avec le TNFR2 de cynomolgus. Les 3 clones sans réactivité croisée étaient les clones 001, 007 et 009. Sans nécessairement être les meilleurs liants, les clones DAW02-013, DAW02-044 et DAW02-112 sont les clones avec le moins de différence entre la liaison aux cellules surexprimant le TNFR2 humain et le TNFR2 de cynomolgus lorsque les 3 expériences sont compilées ( ). EXEMPLE 4. Constructions d'homodimères de fusion en ligne Les clones 001, 009 et 012 ont été choisis pour être formatés en tant qu'homodimères de fusion en ligne (ILF, de l’anglais « in-line fusion »), afin de déterminer si ce format serait un avantage pour déclencher un agonisme par rapport à la forme monomérique des clones, en tant que protéine soluble et lorsqu'il est affiché sur les cellules. Deux constructions ont été utilisées pour la génération des homodimères ILF avec un lieur flexible, un codon optimisé pour une expression de mammifère et un codon non optimisé. Les deux constructions ont été clonées dans un vecteur de sécrétion de mammifère (pD609-KanR) pour purifier la protéine recombinante et apprécier leurs niveaux d'expression, la qualité de la protéine, la cinétique de liaison à hTNFR2-hFc-his-avi par Biacore et l'activité agoniste dans un essai à rapporteur (en anglais, « reporter assay ») avec des cellules rapporteuses HEK. De plus, les deux constructions ont été clonées dans le vecteur pDisplay pour leur expression sur la surface cellulaire Expi293F™ et l'appréciation de leurs niveaux d'expression, de la liaison à hTNFR2-hFc-his-avi et de l'activité agoniste dans un essai à rapporteur de coculture avec des cellules rapporteuses HEK. L'optimisation des codons n'a pas amélioré les rendements ou la pureté des homodimères ILF solubles, ce qui a été confirmé par HPLC. Lorsqu'ils ont été analysés par Biacore, les clones 001 et 009 ont montré une affinité accrue dans leur format ILF soluble par rapport au format monomère soluble. Le Clone 12 n'a montré aucune réponse. Aucune différence n'a été observée entre les constructions d'optimisation des codons. Dans les essais SEAP, seul le clone 12 a montré un profil amélioré en tant que format ILF soluble, mais lorsqu'il est exhibé sur des cellules, dans les essais SEAP ainsi que dans les essais de présentation par cytométrie en flux, aucune différence n'a pu être déterminée entre les formats ILF et monomère. Résumé de la sélection du polypeptide hTNFR2 AFFIMER® et caractérisation. Plus de 2500 phages monoclonaux ont été criblés par ELISA sur phages avec un taux de succès supérieur à 60% avec une bonne diversité (20-40%). Lors du criblage dans l’ELISA sous forme d'extrait brut de cellules, plus de 400 clones ont montré une liaison à l'antigène hTNFR2. A ce stade, il a été décidé d'introduire une autre étape dans la campagne de criblage de sélection pour réduire le nombre de clones à cloner dans le vecteur d'expression de mammifère. En parallèle, il a également été décidé d'accélérer 30 clones de la sélection passive directement à l'expression en tant que protéines AFFIMER® solubles pour faciliter le développement d’essais et la construction de la cascade de criblage pour le reste des clones. 20 de ces clones ont passé les critères de qualité de production de protéines de plus de 80% de pureté par SEC-HPLC (de l’anglais « size exclusion chromatography - high performance liquid chromatography », soit « chromatographie d'exclusion stérique - chromatographie liquide à haute performance ») et ont été utilisés pour mettre en place différents essais ainsi que pour être caractérisés. 5 clones sur 20 ont démontré une activité agoniste dans un essai agoniste préliminaire où la protéine AFFIMER® soluble monomère a été regroupée avec un anticorps anti-his via leur étiquette histidine et incubée avec la lignée cellulaire rapporteuse HEK. Parallèlement au développement d’essais avec des clones accélérés, la campagne de criblage de phages a été finalisée et un total de 364 protéines humaines AFFIMER® se liant au TNFR2 ont été purifiées à partir du phagémide et leur liaison à une lignée cellulaire surexprimant le TNFR2 a été testée. A la suite de cet essai, 90 protéines AFFIMER® humaines se liant au TNFR2 ont été reformatées dans le vecteur d'expression de mammifère. 55 de ces clones ont passé les critères de qualité de production de protéines de plus de 80% de pureté par SEC-HPLC et ont été repris pour le reste des essais. Le nombre total de clones (accélérés et non accélérés) a été restreint de 75 à 43 à la suite d'une série d'expériences s’intéressant à la liaison des protéines solubles AFFIMER® aux cellules surexprimant hTNFR2, l’essai agoniste avec des cellules rapporteuses HEK et les données préliminaires de l’essai agoniste utilisant des cellules rapporteuses HEK en coculture avec des protéines AFFIMER® exprimées à la surface des cellules Expi293F™. Ces 43 meilleurs clones ont été caractérisés en tant que protéines solubles pour leur liaison au TNFR2 humain par Biacore où 16 sur 43 ont vu leur KD calculé avec succès en utilisant un modèle de liaison à 1:1. Aucun des clones n'a démontré de liaison au TNFR1 humain par ELISA ou au TNFR2 de souris par liaison cellulaire. En tant que protéines AFFIMER® exhibées à la surface de HEK293, la capacité de ces 43 clones à déclencher un agonisme au TNFR2 dans une lignée cellulaire rapporteuse HEK lorsqu'ils sont en coculture a été testée. Une grande majorité des clones testés ont démontré un effet dépendant de la dose sur les cellules rapporteuses HEK (80%). 16 protéines AFFIMER® ont été sélectionnées comme meilleures agonistes et soumises à une caractérisation supplémentaire pour apprécier la liaison du TNFR2 de cynomolgus et la liaison du TNFR1 humain sur les cellules. Les 16 polypeptides hTNFR2 AFFIMER® sélectionnés sont les clones 001, 007, 009, 012, 013, 026, 027, 037, 044, 059, 069, 079, 100, 103, 112 et 115. L'utilisation d'homodimères de fusion en ligne en tant que protéines solubles vs. monomères a montré des avantages pour la liaison au TNFR2 recombinant par Biacore et un avantage possible dans l’essai d'agonisme de regroupement anti-his avec des cellules rapporteuses HEK. Cependant, aucun avantage n'a été démontré par rapport aux monomères lorsque les protéines AFFIMER® de fusion en ligne ont été exhibées sur des cellules pour déclencher la voie d'agonisme de la lignée cellulaire rapporteuse via TNFR2. La raison pour laquelle les homodimères de fusion en ligne n'ont pas obtenu de meilleurs résultats que les monomères dans ce dernier essai pourrait être que le format de fusion en ligne n'était pas bien exhibé sur la surface de la cellule et qu'une seule des deux protéines AFFIMER® était disponible pour la liaison ou que la limite de l’essai rapporteur avait été atteinte et qu'il n'était pas possible de discriminer entre les deux formats. EXEMPLE 5. Polypeptides TNFR2 AFFIMER® de souris Campagne de sélection et de criblage de phages L’aptitude d’antigènes TNFR2 murins, ayant la séquence telle que montrée dans le Tableau 7 mais dans différents formats, à être utilisés dans des essais pour sélectionner des polypeptides mTNFR2 AFFIMER® a été testée. Parmi les trois formats (mFc, hFc et étiqueté His), le mTNFR2-mFc a été choisi pour la biotinylation et l'utilisation dans les sélections AFFIMER® en raison de ses meilleures performances dans les essais. Sélections Des sélections passives et par solution ont été effectuées sur les deux bibliothèques de phages AFFIMER® comme décrit pour la sélection d’hTNFR2 AFFIMER®. L'enrichissement a été observé lorsque la concentration en mTNFR2 a été maintenue à 10 nM au tour 3. Plus de 2000 protéines AFFIMER® présentées sur phage ont été criblées par ELISA de phages monoclonaux à partir des résultats du tour 2 et du tour 3. Parmi ces clones, plus de 900 ont démontré une liaison au mTNFR2, sans liaison non spécifique au Fc de souris détectable, au plastique, à la streptavidine ou à la neutravidine. Ceux-ci ont été définis comme des « succès » sur la base des critères d'absorbance 450nm-630nm au-dessus de 0,5 sur des plaques revêtues de mTNFR2 et en dessous de 0,05 sur des plaques revêtues d'antigènes de contrôle (c'est-à-dire Fc de souris, plastique, neutravidine). Le séquençage des succès ELISA sur phage a identifié 281 séquences de clones uniques, 109 desquels ayant démontré une liaison au mTNFR2 après ELISA sur des extraits bruts de cellules. Une analyse plus approfondie de la liaison à l'aide de cellules mTNFR2-Expi293F™ a réduit ce champ à 58 clones, identifiés comme clones 122-179 dans le Tableau 2. Caractérisation des protéines solubles Comme décrit pour la caractérisation du polypeptide hTNFR2 AFFIMER® ci-dessus, les polypeptides mTNFR2 AFFIMER® identifiés ont été clonés à partir de phagémides vers des vecteurs mammifères pour une expression dans des cellules Expi293F™. La pureté des protéines exprimées a ensuite été évaluée par SDS-PAGE et HPLC, et l'affinité par Biacore, ainsi que la liaison sur base cellulaire de mTNFR2 dans les cellules mTNFR2-Expi293F™. La spécificité pour mTNFR2 a été testée à l'aide d'ELISA et d’essais cellulaires utilisant mTNFR1 et mTNFR2 en tant que cibles, confirmant la spécificité des clones identifiés. Pour compléter la caractérisation des protéines solubles, la capacité des polypeptides AFFIMER® à bloquer la liaison du mTNFR2-mFC à mTNFα dans un ELISA a été testée, avec quatre clones (157, 160, 171 et 172) montrant une capacité concurrentielle claire dans la gamme testée. Essais de stimulation des lymphocytes T L’essai de stimulation des lymphocytes T a été utilisé comme outil de dépistage puisque les lymphocytes T activées expriment des niveaux élevés de TNFR2, lorsqu'elles sont stimulées avec HM102 (agoniste du TNFR2), l'expression de CD25 augmente. Les polypeptides mTNFR2 AFFIMER® ont d'abord été exprimés sur la surface cellulaire des HEK293. Ensuite, ces cellules ont été cocultivées pendant 48 heures avec des splénocytes BALB/c et enfin l'augmentation de l'expression de CD25 a été évaluée sur des lymphocytes T CD4 et CD8 positifs. L'expression des protéines AFFIMER® sur la surface cellulaire HEK293 a été appréciée par coloration par cytométrie en flux de l'étiquette HA présente au début du cadre de lecture ouvert avant les protéines AFFIMER® et la protéine d'ancrage cellulaire. Afin d'apprécier l'effet des protéines AFFIMER®-HEK sur les cellules CD4+ et CD8+, après 48h d'incubation, les cellules ont été colorées avec le panel de marqueurs suivant, coloration Live/Dead, CD90.2, CD4, CD8 et CD25. Une dose-réponse a été observée dans l'expression de CD25 dans les lymphocytes T CD4+ et CD8+ en réponse aux cellules HEK293 exprimant les protéines mTNFR2 AFFIMER®, similaire à la réponse observée pour l'agoniste HM102 du TNFR2. La réponse obtenue dans les lymphocytes T CD8+ est plus forte que dans les lymphocytes T CD4+. Cependant, en se concentrant sur les deux nombres de cellules les plus élevés utilisés, un classement similaire des clones a été obtenu entre les sous-ensembles de lymphocytes T CD8+ et CD4+. Dans deux cycles de cette expérience d’essai, les six protéines AFFIMER® les mieux classées étaient cohérentes 174, 160, 175, 125, 157 et 179. Résumé de la sélection du polypeptide mTNFR2 AFFIMER® et caractérisation. Plus de 2000 phages monoclonaux ont été criblés par ELISA sur phages avec un taux de succès modéré de 35-60%, avec une bonne diversité (25-35%). Lors du criblage dans l’ELISA sous forme d'extrait brut de cellules, 109 clones ont montré une liaison à l'antigène mTNFR2. En utilisant la même cascade de criblage que pour le programme humain, il a été décidé de purifier les liants identifiés à partir du phagémide et de tester leur liaison à une lignée cellulaire surexprimant le TNFR2. A la suite de cet essai, 60 protéines AFFIMER® se liant au TNFR2 de souris ont été reformatées dans le vecteur d'expression de mammifère, produites et testées pour leurs propriétés biophysiques en tant que protéines solubles. 22 protéines Affimer ont passé les critères de qualité de production de protéines de pureté par SEC-HPLC supérieure à 80%. Les 22 clones ont été caractérisés dans différents essais en tant que protéines solubles, puis ont été exprimés à la surface de HEK293 pour un essai de coculture avec des splénocytes. Bien que seulement 10 des 22 protéines Affimer aient montré des affinités de liaison nanomolaires à trois chiffres (KD) lorsque testées sur Biacore, il a été considéré que même une protéine Affimer avec une valeur KD plus élevée pourrait être une bonne agoniste une fois exhibée sur la surface cellulaire. Additionnellement, la performance des clones en tant que protéines solubles dépendait également de s'il s'agissait d'un dimère ou d'un trimère naturel. Pour ces raisons, les données Biacore ont été considérées dans le contexte de l'activité agoniste de mTNFR2 et n'ont pas été utilisées pour discriminer les clones. Lorsqu'ils ont été testés sur des cellules exprimant le TNFR2 de souris, 20 des 22 clones ont démontré une liaison spécifique avec une large gamme de valeurs CE50. Pour ce qui est des données Biacore, les résultats de liaison cellulaire n'ont été pris en compte que dans le contexte de l'activité agoniste du TNFR2 de souris et n'ont pas été utilisés pour discriminer les clones. Aucun des clones ne s'est lié au TNFR1 sous forme de protéines recombinantes ou exprimé à la surface d'une cellule. 5 des 22 clones ont démontré une inhibition complète de l'interaction entre le TNF-alpha et le TNFR2 dans un ELISA en concurrence. Les 22 clones de souris ont également été exprimés à la surface des cellules HEK293 pour un essai de coculture avec des splénocytes. La principale lecture de l’essai était l'augmentation de l'expression de CD25 sur les lymphocytes T CD4+ et les lymphocytes T CD8+. Une grande majorité des clones testés a démontré un effet dépendant du dosage sur les lymphocytes T CD4+ et les lymphocytes T CD8+ (plus de 70%). Les clones ont été classés eu égard à l'expression de CD25 sur les lymphocytes T CD4+ et CD8+. Sur la base des résultats de cet essai clé, six protéines mTNFR2 AFFIMER® ont été identifiées : 174, 160, 175, 125, 157 et 179. Polypeptide d’ingénierie qui se lie spécifiquement au TNFR2 avec une Kd de 1×10 -6 M ou moins, dans lequel le polypeptide d’ingénierie est une variante d'une protéine Stéfine A et dans lequel le polypeptide d’ingénierie comprend une séquence d'acides aminés ayant au moins 80 %, au moins 90 %, au moins 95 ou au moins 98 % d'identité avec une séquence d'acides aminés de MIP-Xaa1-GLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVV-(Xaa)n-Xaa2-TNYYIKVRAGDNKYMHLKVF-Xaa3-Xaa4-Xaa5-(Xaa)m-Xaa6-D-Xaa7-VLTGYQVDKNKDDELTGF (SEQ ID NO : 4), où Xaa, individuellement pour chaque occurrence, est un ou deux résidu(s) d'acide aminé ; et n et m sont chacun, indépendamment, un entier de 3 à 20. Polypeptide d’ingénierie selon la revendication 1, comprenant une séquence d'acides aminés ayant au moins 80 %, au moins 90 %, au moins 95 ou au moins 98 % d'identité avec une séquence d'acides aminés de MIPGGLSEAKPATPEIQEIVDKVKPQLEEKTGETYGKLEAVQYKTQVD-(Xaa)n-GTNYYIKVRAGDNKYMHLKVFKSL-(Xaa)m-EDLVLTGYQVDKNKDDELTGF (SEQ ID NO : 5), où Xaa, individuellement pour chaque occurrence, est un résidu d'acide aminé ; et n et m sont chacun, indépendamment, un entier de 3 à 20. Polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des revendications précédentes qui se lie au TNFR2 avec un Kd de 1×10 -7 M, de préférence un Kd de 1×10 -8 M. Polypeptide d’ingénierie selon la revendication 1 ou la revendication 2, dans lequel (Xaa)n comprend une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par les SEQ ID NO : 6-102, et/ou (Xaa)m comprend une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par les SEQ ID NO : 103-199. Polypeptide d’ingénierie selon la revendication 4, dans lequel (Xaa)n comprend une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par les SEQ ID NO : 6, 11, 13, 16, 17, 24, 25, 29, 33, 41, 54, 65, 67, 73, 75, 82, 89, 90, 98 et 99 et/ou (Xaa)m comprend une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par les SEQ ID NO : 103, 108, 110, 113, 114, 121, 122, 126, 130, 138, 151, 162, 164, 170, 172, 179, 186, 187, 195 et 196. Polypeptide d’ingénierie selon la revendication 1 comprenant une séquence d'acides aminés au moins 75 %, au moins 85 %, ou au moins 95 % d'identité avec une séquence d'acides aminés des SEQ ID No : 200, 205, 207, 210, 211, 218, 219, 223, 227, 235, 248, 259, 261, 267, 269, 276, 283, 284, 292 et 293, où la séquence exclut optionnellement un ou plus des vingt-et-un résidus carboxy terminaux. Polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant en outre un peptide signal. Polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant en outre un domaine transmembranaire. Protéine de fusion comprenant un dimère, un trimère ou un tétramère du polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant optionnellement un lieur. Protéine de fusion selon la revendication 9, dans laquelle le lieur est un lieur rigide. Protéine de fusion selon la revendication 10, dans laquelle le lieur rigide est un lieur peptidique comprenant la séquence (EAAAK)n, où n vaut 1-6. Une protéine de fusion comprenant un ou plus des polypeptide(s) d’ingénierie selon l’une quelconque des revendications 1 à 8 lié(s) à un groupement thérapeutique ou diagnostique. Protéine de fusion selon la revendication 12, dans laquelle le groupement thérapeutique est une protéine ou un peptide thérapeutique, optionnellement un anticorps. Protéine de fusion selon la revendication 12, dans laquelle le groupement diagnostique est une protéine fluorescente. Polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des revendications 1-8 ou la protéine de fusion selon l'une quelconque des revendications 9-14 comprenant en outre un groupement d'extension de demi-vie sélectionné parmi les domaines Fc d'anticorps, l'albumine sérique humaine, les protéines de liaison du sérum. Polypeptide d’ingénierie ou protéine de fusion selon la revendication 15, où le groupement d'extension de demi-vie du polypeptide d’ingénierie est une variante d'une protéine Stéfine A qui se lie spécifiquement à l'albumine sérique humaine avec un Kd de 1×10 -6 M ou moins. Polypeptide d’ingénierie ou protéine de fusion selon la revendication 16, dans lequel le groupement d'extension de demi-vie est sélectionné dans le groupe constitué des SEQ ID NO : 471-477. Polynucléotide ou ensemble de polynucléotides codant pour le polypeptide d’ingénierie selon l’une quelconque des revendications 1 à 8 ou 15 à 17 ou la protéine de fusion selon l'une quelconque des revendications 9 à 14. Polynucléotide ou ensemble de polynucléotides selon la revendication 18 comprenant une séquence d'acide nucléique ayant au moins 80 %, au moins 90 %, au moins 95 % ou au moins 98 % d'identité avec une séquence sélectionnée dans le groupe constitué des SEQ ID NO : 297, 302, 304, 307, 308, 315, 316, 320, 324, 332, 345, 356, 358, 364, 366, 373, 380, 381, 389 et 290, où la séquence exclut optionnellement les nucléotides codant pour vingt résidus carboxy-terminaux. Véhicule de distribution comprenant le polynucléotide selon l'une quelconque des revendications 18 ou19. Véhicule de distribution selon la revendication 20, qui est un véhicule de distribution viral. Véhicule de distribution selon la revendication 21, dans lequel le véhicule de distribution viral est un vecteur adénoviral, un vecteur rétroviral, un vecteur lentiviral ou un vecteur viral adéno-associé (AAV, de l’anglais « adeno-associated viral »). Véhicule de distribution selon la revendication 20, qui est un véhicule de distribution non viral. Véhicule de distribution selon la revendication 23, dans lequel le véhicule de distribution non viral est un liposome ou une nanoparticule lipidique. Plasmide ou minicercle comprenant le polynucléotide selon l'une quelconque des revendications 18 ou 19. ARN messager (ARNm) comprenant un cadre de lecture ouvert codant pour le polypeptide d’ingénierie selon l'une quelconque des revendications 1 à 8 ou 15 à 17. Nanoparticule lipidique, optionnellement nanoparticule lipidique cationique, comprenant l'ARNm selon la revendication 26. Composition pharmaceutique comprenant le polypeptide d’ingénierie selon l’une quelconque des revendications 1 à 8 ou 15 à 17, la protéine de fusion selon l’une quelconque des revendications 9 à 14, ou le véhicule de distribution selon l'une quelconque des revendications 20 à 24, et optionnellement un excipient pharmaceutiquement acceptable. Conjugué comprenant le polypeptide d’ingénierie selon l’une quelconque des revendications 1 à 8 ou 15 à 17 ou la protéine de fusion selon l’une quelconque des revendications 9 à 14 lié(e) à un groupement pharmacologiquement actif. Composition pharmaceutique selon la revendication 28 pour son utilisation comme médicament. Composition pharmaceutique selon la revendication 30 pour son utilisation dans le traitement du lupus érythermatose disséminé (LES), de la néphrite lupique (par ex. la néphrite lupique d’origine médicamenteuse), de la thrombocytopénie immunitaire (ITP), de la polyarthrite rhumatoïde (PR), de la sclérose en plaques (SEP), d’une maladie inflammatoire chronique de l'intestin (MICI) (par ex. la maladie de Crohn et la colite/colite ulcéreuse), de la maladie du greffon contre l'hôte (GvHD) (liée aux transplantations de cellules souches) également appelée rejet d'allogreffe, de la transplantation/Transplantation d'Organe Solide (SOT), de la cholangite biliaire primitive (CBP), du psoriasis, de l’arthrite psoriasique, de l’arthrite induite par le collagène, de l’encéphalomyélite allergique expérimentale (EAE), de l’ovarite, de la rhinite allergique, de l’asthme, du syndrome de Sjogren, de l’eczéma atopique, de la myasthénie, de la maladie de Basedow, de la glomérulosclérose et/ou du cancer.