Brevet FR3146596A1 — publié le 20240920

L'invention concerne un extrait de bois de rose obtenu à partir de co-produits de la distillation de l’huile essentielle de bois de rose ( Aniba rosaeodora ) par extraction à l’aide de CO 2 supercritique en présence d’un co-solvant. L’invention a également pour objet le procédé d’obtention d’un tel extrait. L’invention concerne encore les compositions cosmétiques comprenant un tel extrait et enfin les utilisations cosmétiques de telles compositions pour raffermir la peau, limiter l’apparition de ptôse, redessiner le contour du visage, limiter l’apparition des rides et ridules. PROCEDE D’OBTENTION D’UN EXTRAIT DE BOIS DE ROSE, COMPOSITIONS LE COMPRENANT ET SES UTILISATIONS COSMETIQUES La présente invention concerne le domaine des ingrédients pour les soins de la peau. L’invention a trait à un extrait de bois de rose ( Aniba rosaeodora ) composé entre autres d’acide nicotinique, de cotoïne, de dérivés sesquiterpéniques et appauvri en composés volatils et en anibine, obtenu par un procédé d’extraction au CO 2 supercritique à partir des co-produits de la distillation du bois de rose. L’invention concerne également les compositions cosmétiques comprenant un tel extrait, et enfin les utilisations de telles compositions pour prévenir ou limiter les signes du vieillissement cutané. Arrière-plan technique de l’invention Le bois de rose ( Aniba rosaeodora Ducke ou « rosewood » en anglais), est un arbre présent dans les forêts humides tropicales et subtropicales du bassin amazonien (Venezuela, Colombie, Equateur, Guyane française, Guyana, Pérou, Suriname et Brésil). Le tronc, les branches ou les feuilles du bois de rose sont utilisés en parfumerie et en cosmétique sous forme d’huile essentielle dont la particularité olfactive est conférée par le linalool, un alcool terpénique volatil présent en grande quantité dans l’huile essentielle (70 à 90 %). D’après la littérature, la partie non volatile du bois de rose contient de l’anibine, du methoxy-4 paracotoïne, de la cotoïne et du pinocembrine, mais également de la(-)-rubranine, une chalcone présente dans les branches de cette espèce (Mors, W. B. et al. J. Am. Chem. Soc., 1957, 79, 4507-4511; Gottlieb, O. R. and Mors, W. B., J. Am. Chem. Soc., 1958, 80, 2263-2265 ; Galaverna, R. S. et al., Anal. Methods, 2015, 7 , 1984-1990 ; De Alleluia, I. B. et al., Phytochem., 1978, 17, 517-521). Plusieurs classes chimiques de composés présents dans le bois de rose, notamment les aryl phényl cétones, l’acide nicotinique et les phytostérols, ont montré des activités biologiques telles que des propriétés antioxydante, antibactérienne, antimicrobienne, antifongique, anti-inflammatoire, anti-cancéreuse, vasodilatatrice et hypolipémiante (Wu, S.-B. et al., Nat. Prod. Rep., 2014, 31, 1158-1174). Les extraits de bois de rose décrits dans l’art antérieur sont majoritairement obtenus par hydrodistillation. Il en résulte des extraits enrichis en composés volatils et principalement en linalool (70 à 90 %). Néanmoins, une quantité non négligeable de ces composés volatils, dont le linalool et le benzyl benzoate sont considérés comme allergéniques. Les inventeurs ont souhaité développer un extrait ne présentant pas ces caractéristiques en termes de composition chimique et de note olfactive. Pour ce faire, ils ont choisi d’utiliser une matière première de bois de rose (tronc, branches et feuilles) ayant subi une première distillation et donc épuisée en composés volatils odorants. Cette matière première épuisée est de nouveau extraite par un fluide à l’état supercritique afin d’obtenir un extrait enrichi en composés semi à non-volatils et possédant une grande diversité chimique. À ce jour, à la connaissance des inventeurs, aucun document ne décrit les paramètres d’une extraction du bois de rose par un fluide supercritique. Par exemple, les documents FR1000801B1, CN105708740 et CN105640822 décrivent des compositions cosmétiques et une huile de massage comprenant une huile essentielle de bois de rose obtenue par CO 2 supercritique sans énoncer les paramètres appliqués pour l’extraction. L’extrait de bois de rose selon la présente invention s’est avéré utile pour prévenir ou limiter les signes du vieillissement cutané et en particulier pour raffermir la peau, limiter l’apparition de la ptôse faciale, redessiner le contour du visage ou encore limiter l’apparition des rides et ridules. L’invention a pour premier objet l’obtention d’un extrait obtenu à partir de feuilles ou de copeaux de troncs et de branches de bois de rose ( Aniba rosaeodora ) préalablement épuisés, selon le procédé comprenant les étapes suivantes : a) on ajoute entre 5 et 25 % d’eau au bois de rose épuisé et séché; b) on réalise une extraction à l’aide d’un fluide à l’état supercritique tel que le dioxyde de carbone (CO 2 ) en présence d’un co-solvant polaire, choisi parmi les alcools primaires ou secondaires, ou tout mélange de ceux-ci ; c) on ajoute un solvant support choisi parmi les solvants de type polyol, alcools gras saturés ou insaturés, linéaires ou ramifiés, comprenant de 8 à 30 carbones, les solvants de type glycéride ou de type ester à longue chaîne carbonée, ou tout mélange de ceux-ci ; d) on évapore l’extrait solubilisé à l’étape c) pour éliminer la totalité du co-solvant, e) on filtre l’extrait afin d’éliminer les composés précipités qui ne se solubilisent pas dans le solvant support et de récolter le filtrat, f) on dilue l’extrait filtré obtenu en e) dans le même solvant support à une concentration comprise entre 0,005 et 50 % d’extrait brut en poids du poids total de l’extrait final. L’invention a pour deuxième objet un extrait purifié de bois de rose épuisé susceptible d’être obtenu par le procédé selon l’invention caractérisé en ce qu’il est dilué à une concentration comprise entre 0,1 et 1 % dans le solvant support et comprend de 0,3 à 0,5 %, avantageusement de 0,35 à 0,5 % et préférentiellement entre 0,4 et 0,5 % de composés semi à non-volatils. L’invention a pour troisième objet une composition comprenant en tant qu’agent actif, une quantité efficace d’un extrait purifié de bois de rose, obtenu selon le procédé de l’invention, et un milieu physiologiquement acceptable. L’invention a pour quatrième objet l’utilisation cosmétique d’une composition comprenant un extrait purifié de bois de rose pour prévenir ou limiter les signes du vieillissement cutané, pour raffermir la peau, limiter l’apparition de la ptôse faciale, redessiner le contour du visage ou encore limiter l’apparition des rides et ridules. L’invention a encore pour objet une composition comprenant un extrait purifié de bois de rose pour son utilisation pour obtenir un effet similaire à celui des rétinoïdes, sans présenter d’effets inflammatoires indésirables. Brève description des figures Les figures suivantes illustrent les avantages qui découlent de l’invention et des modes de réalisation non limitatifs qui sont présentés dans la description : Comparaison analytique par HS-GC/MS de la composition en composés volatils des drêches de bois de rose épuisés et de l’huile essentielle de bois de rose tel que décrit dans l’exemple 3. Comparaison analytique par HPLC/UV (300 nm) de la composition en composés semi à non-volatils d’une huile essentielle de bois de rose tel que décrit dans l’exemple 3 et de l’extrait purifié de bois de rose selon l’exemple 1. Comparaison analytique par HS-GC/MS de l’extrait purifié de bois de rose selon l’exemple 1 et d’une huile essentielle de bois de rose tel que décrit dans l’exemple 3. Comparaison analytique par HPLC/DEDL de l’extrait brut de bois de rose et de l’extrait purifié de bois de rose selon l’exemple 1 décrivant la différence de teneur en anibine. Evaluation de l’extrait purifié de bois de rose à 1% sur l’expression du collagène de type I, de type III et de l’acide hyaluronique sur des biopsies de peau humaine. Evaluation de l’extrait purifié de bois de rose à 1% sur l’expression de CRABP2 sur des biopsies de peau humaine en comparaison avec l’acide Rétinoïque. Evaluation de l’extrait purifié de bois de rose à 1% sur l’expression de la chaine alpha 3 du collagène de type V sur des biopsies de peau humaine en comparaison avec l’acide Rétinoïque. Evaluation de l’effet d’un extrait purifié de bois de rose à 1 % sur le volume de l’ovale du visage (a) et l’angle V de l’ovale du visage (b). Evaluation de l’effet d’un extrait purifié de bois de rose à 1 % sur la distance des ptôses du visage (a) et sur le volume des ptôses (b). Evaluation de l’effet d’un extrait purifié de bois de rose à 1 % sur le volume du coin des lèvres (a) et sur la rugosité de profil du coin des lèvres Ra (b) et Rz (c). Evaluation de l’effet d’un extrait purifié de bois de rose à 1 % sur la rugosité de profil Ra (a) et Rz (b) des rides des pattes d’oie. Evaluation de l’extrait purifié de bois de rose à 1% sur l’expression du récepteur de type 1 de l’interleukine 1 (IL1R1) sur des biopsies de peau humaine en comparaison avec l’acide Rétinoïque. Description détaillée de l’invention Définitions Tous les termes utilisés dans la présente description ont le sens le plus largement connus sauf mention contraire. Pour les besoins de l’invention les termes suivants sont définis comme suit : On entend indifféremment dans la présente description par « bois de rose » ou « bois de rose ( Aniba rosaeodora ) » ou « bois de rose épuisé » ou encore « co-produits ou sous-produits de la distillation de l’huile essentielle de bois de rose », les drêches de copeaux de tronc, de branches ou de feuilles de bois de rose ( Aniba rosaeodora) récupérés après extraction de l’huile essentielle. La teneur en huile essentielle dans la plante fraîche varie entre 0,4 et 3,5 %, dont une teneur moyenne en linalool comprise entre 0,32 et 2,8 %. L’huile essentielle est extraite traditionnellement par hydrodistillation ou distillation par entrainement à la vapeur. Le terme « épuisé » fait donc référence à une matière végétale ayant subi un premier traitement d’extraction, tel que la distillation par vapeur d’eau ou l’hydrodistillation, ou tous procédés d’extraction solide / liquide, visant à extraire entre 80 et 95% des composés volatils présents dans cette matière première. On entend par « tronc et branches de bois de rose » les parties du bois de rose correspondant au tronc et branches avec écorce. On entend par « co-solvant polaire » un solvant de polarité supérieure à celle du CO 2 à l’état supercritique telles que des alcools primaires ou secondaires, ou tout mélange de ceux-ci. On entend par solvant de « type polyol » des composés organiques possédant au moins 2 groupements hydroxyles, tels que les diols ou triols, ou mélange de ces composés. On entend par solvant de « type alcool gras » des composés organiques, saturés ou insaturés, linéaires ou ramifiés possédant un groupement hydroxyle, ou mélange de ces composés. On entend par solvant de « type glycéride », des esters d’acides gras et du glycérol, ou mélange de ces composés. On entend par solvant de « type ester à longue chaîne carbonée », des composés organiques possédant une fonction ester substituée par de longues chaînes carbonées. On entend par « solvant support » un solvant choisi parmi les solvants de type polyol, alcools gras saturés ou insaturés, linéaires ou ramifiés, comprenant de 8 à 30 carbones, les solvants de type glycéride ou de type ester à longue chaîne carbonée, ou tout mélange de ceux-ci. On entend par « composés volatils » les composés organiques pouvant facilement passer en phase gazeuse à pression atmosphérique et à température ambiante. On entend par « composés semi à non-volatils » des composés qui ne passent pas facilement en phase gazeuse à pression atmosphérique et à température ambiante du fait d’un point d’ébullition plus élevé que dans le cas des molécules volatiles. Dans le cadre de l’invention il s’agit de molécules moyennement polaires, appartenant principalement aux familles chimiques suivantes : vitamines, aryl phényl cétones, sesquiterpènes, dérivés sesquiterpéniques et phytostérols. On entend par « extrait purifié de bois de rose » l’extrait sous forme liquide purifié par précipitation partielle de l’anibine, après dilution de l’extrait brut dans un solvant de type polyol, alcool gras saturé ou insaturé, linéaire ou ramifié, comprenant de 8 à 30 carbones, les solvants de type glycéride ou ester à longue chaîne carbonée, ou tout mélange de ceux-ci, et filtré pour éliminer le précipité. On entend par « extrait brut » de bois de rose, l’extrait sous forme pâteuse obtenu par les étapes a), b) et c’) du procédé par évaporation complète du co-solvant sans ajout de solvant support. Quand une gamme de valeur est décrite, les bornes de cette gamme doivent être comprises comme incluant explicitement les bornes supérieure et inférieure de ladite gamme, ainsi que toutes les valeurs intermédiaires de la gamme. Par exemple, une gamme de valeur comprise entre 1% et 10% doit être comprise comme incluant 1 %, 2 %, 3 %, 4 %, 5 %, 6 %, 7 %, 8 %, 9 %, et 10 %, ainsi que toutes les valeurs décimales entre 1 % et 10 %. Les valeurs numériques en pourcentage sont des pourcentages en poids, c’est-à-dire le poids d’un composé par rapport au poids total du mélange envisagé, sauf spécifié autrement. Les compositions décrites dans la présente demande peuvent « comprendre », « consister en » ou « consister essentiellement en », les composés essentiels ou les ingrédients optionnels. « Consister essentiellement en » signifie que la composition ou le composant peut inclure des ingrédients additionnels, mais seulement si les ingrédients additionnels ne modifient pas les caractéristiques de bases ou les nouvelles caractéristiques de la composition ou de l’utilisation décrite dans la présente demande. On entend par « milieu physiologiquement acceptable » un solvant adapté pour une mise en contact avec les couches externes de la peau, du cuir chevelu ou des phanères, sans toxicité, irritation, réponse allergique indue et similaire ou réaction d’intolérance, et proportionné à un rapport avantage/risque raisonnable, aux concentrations utilisées. Par « quantité efficace » on désigne la quantité minimum d’extrait selon l’invention qui est nécessaire pour obtenir au moins une des activités biologiques recherchées. On entend par « ptôse faciale » le relâchement associé au glissement et à l'atrophie des volumes graisseux et à la fonte du support osseux du visage avec l'âge. Procédés d’extraction Le bois de rose a été surexploité pour son huile essentielle, le faisant entrer dans la catégorie des espèces protégées par l’IUCN (Union Internationale pour la Conservation de la Nature) dont le commerce est réglementé par la Convention sur le commerce international des espèces menacées d'extinction (CITES). Les inventeurs ont par conséquent choisi d’utiliser des co-produits de la distillation du bois de rose, afin de réduire l’impact sur l’environnement et sur la biodiversité et permettre une meilleure gestion des ressources végétales. Les feuilles ainsi que les copeaux de tronc ou de branches de bois de rose ( Aniba rosaeodora ) récupérés après extraction de l’huile essentielle par distillation sont séchés de telle sorte que le taux d’humidité résiduelle dans la matière végétale soit compris entre 1 et 10 %. L’objectif du procédé de l’invention est de concentrer et de favoriser la diversité chimique de l’extrait, la teneur en composés semi à non-volatils tout en conservant un rendement d’extraction le plus élevé possible. L’extraction est réalisée à l’aide de fluide supercritique tel que le CO 2 supercritique qui est un procédé alternatif à la distillation répondant aux principes de la chimie verte. L’ajout d’un co-solvant polaire au CO 2 supercritique permet d’augmenter la polarité du CO 2 et donc d’extraire des familles chimiques de métabolites sur une plus large gamme de polarité, tels que les carbohydrates, les flavonoïdes glycosylés ou non, les acides phénoliques, les triterpènes, les lipides, les phytostérols. Un plan d’expérience dit de criblage a permis de mettre en évidence les paramètres les plus influents sur les critères suivants : le rendement d’extraction, la diversité chimique de l’extrait et la teneur en composés semi à non-volatils. Les paramètres étudiés ont été le broyage, le taux d’humidification de la matière végétale, l’ajout ou non de composé inerte comme par exemple la poudre de cellulose, le débit de co-solvant, ainsi que la température et la pression d’extraction. Le plan d’expérience de criblage a mis en évidence que de façon surprenante le débit de co-solvant et le taux d’humidification de la matière végétale étaient les deux paramètres qui exerçaient une influence sur l’extraction, contrairement aux autres paramètres qui n’ont pas montré d’impact significatif. Ces deux paramètres influents ont ensuite été plus finement analysés par un plan d’expérience d’optimisation en appliquant la méthode des surfaces de réponse. Enfin, le solvant support ajouté avant l’évaporation du co-solvant, a été sélectionné à la suite de nombreux essais réalisés pour déterminer le meilleur solvant permettant à la fois de concentrer les composés d’intérêt et aussi d’éliminer au maximum l’anibine par précipitation. L'anibine est une substance classée comme irritante, et appartenant à une classe chimique connue pour posséder une activité biologique marquée souvent associée à une certaine toxicité. L’invention a ainsi pour premier objet un procédé d’obtention d’un extrait de bois de rose obtenu à partir de feuilles ou de copeaux de troncs et de branches de bois de rose ( Aniba rosaeodora ) épuisé comprenant les étapes suivantes : a) on ajoute entre 5 et 25 % d’eau au bois de rose épuisé et séché ; b) on réalise une extraction à l’aide d’un fluide à l’état supercritique tel que le dioxyde de carbone (CO 2 ) en présence d’un co-solvant polaire, choisi parmi les alcools primaires ou secondaires, ou tout mélange de ceux-ci ; c) on ajoute un solvant support choisi parmi les solvants de type polyol, alcools gras saturés ou insaturés, linéaires ou ramifiés, comprenant de 8 à 30 carbones, les solvants de type glycéride ou de type ester à longue chaîne carbonée, ou tout mélange de ceux-ci ; d) on évapore l’extrait solubilisé à l’étape c) pour éliminer la totalité du co-solvant, e) on filtre l’extrait afin d’éliminer les composés précipités qui ne se solubilisent pas dans le solvant support et de récolter le filtrat, f) on dilue l’extrait filtré obtenu en e) dans le même solvant support à une concentration comprise entre 0,1 et 1 % d’extrait brut en poids du poids total de l’extrait final. A l’étape a) avantageusement, on utilise des drêches séchées provenant de la distillation de copeaux de tronc et branches auxquelles on ajoute entre 5 et 25 % d’eau au bois de rose épuisé et séché pour obtenir un taux d’humidification optimum. Avantageusement, les copeaux épuisés peuvent provenir de tronc et branches de bois de rose cultivé en Amérique Latine. De préférence, préalablement à l’étape a), la matière première est broyée en présence ou non d’azote liquide permettant d’obtenir une poudre de granulométrie grossière. A l’étape b) de préférence le co-solvant est l’éthanol à une concentration comprise entre 80 et 100 % (volume/volume dans l’eau), préférentiellement entre 90 et 100 % et encore plus préférentiellement à une concentration de 96% dans l’eau (volume/volume). De préférence, le rapport massique de dioxyde de carbone (CO 2 ) à l’état supercritique, par rapport à la quantité de matière première humidifiée engagée est compris entre 10 et 50, avantageusement entre 20 et 40 et préférentiellement entre 25 et 35. De préférence, le rapport massique du co-solvant par rapport au solvant supercritique (dioxyde de carbone) est compris entre 0,050 et 0,080, avantageusement entre 0,055 et 0,075 et préférentiellement entre 0,060 et 0,070. De préférence le débit de co-solvant ; lorsque celui-ci est l’éthanol ; est compris entre 10 et 20 ml/min. De manière encore plus préférée, le débit du co-solvant est fixé à 20 ml/min. De préférence, la température d’extraction est comprise entre 35 et 85°C, avantageusement entre 45 et 75°C et préférentiellement entre 55 et 65°C. De préférence, la pression au sein de l’extracteur est comprise entre 90 et 1000 bar, préférentiellement entre 150 et 700 bar et encore plus préférentiellement entre 250 et 350 bar. Pour réaliser l’étape b) avantageusement, le mélange obtenu à l’étape a) est placé dans une cartouche en acier inoxydable, cette cartouche est introduite dans un extracteur à fluide supercritique. La présence d’un co-solvant polaire dans les conditions d’extraction décrites ci-dessus, permet l’obtention d’un extrait possédant une diversité phytochimique notable en ce qu’il contient à la fois une part résiduelle de composés volatils non extraits lors de la distillation et des composés semi à non-volatils de polarité variable appartenant aux familles chimiques suivantes : vitamine et dérivé, aryl phényl cétones, dérivés sesquiterpéniques, sesquiterpènes, phytostérols et acides gras libres. A l’étape c), préférentiellement on ajoute à l’extrait obtenu à l’étape b), la quantité de solvant dit « support » nécessaire pour obtenir une teneur en extrait brut comprise entre 5 et 80 % en poids du poids total de l’extrait final, avantageusement entre 10 et 50 % et préférentiellement entre 15 et 25 %. De préférence le solvant support est choisi parmi l’octyldodécanol, le 2-hexyl décanol, l’alcool oléique, le tricaprylate / caprate de glycérol ou un ester octyldodécyl stéaroyl stéarate, ou tout mélange de ceux-ci. De manière encore plus préférée, le solvant support est le tricaprylate / caprate de glycérol. En présence du solvant support, on observe une précipitation. L’analyse montre que le précipité est principalement composé d’anibine, comme cela est illustré par les profils chromatographiques de la . A l’étape d) les conditions optimales d’évaporation du co-solvant sont une température d’évaporation d’au maximum 60°C et une pression inférieure à 60 mbar. A l’étape e) l’extrait liquide obtenu est filtré pour éliminer l’anibine précipitée. On récolte le filtrat. A l’étape f) le filtrat est dilué préférentiellement à une concentration de 0,5 % en poids d’extrait brut / poids d’extrait final. Avantageusement, le procédé peut être poursuivi par au moins une étape optionnelle g) de purification, selon toute technique connue de l’homme du métier et notamment par chromatographie ou par distillation moléculaire. Alternativement, à l’issue de l’étape b), il est possible de mettre en œuvre un autre procédé d’extraction en réalisant une étape c’) d’évaporation totale du co-solvant, sans ajout de solvant support. On obtient alors un extrait brut sous forme pâteuse. Cet extrait peut être utilisé entre autres pour des études de chimie analytique qui pourraient être perturbées par la présence d’un solvant support. A la fin de l’étape c’) le rendement d’extraction est compris entre 0,5 et 5 %. Extrait Le deuxième objet de l’invention est un extrait purifié de bois de rose épuisé susceptible d’être obtenu par le procédé selon l’invention caractérisé en ce qu’il est dilué à une concentration comprise entre 0,1 et 1 % dans le solvant support et comprend de 0,3 à 0,5 %, avantageusement de 0,35 à 0,5 % et préférentiellement entre 0,4 et 0,5 % de composés semi à non-volatils. L’extrait purifié de bois de rose est avantageusement solubilisé dans le tricaprylate / caprate de glycérol. Dans un autre mode de réalisation l’extrait purifié de bois de rose comprend 0,5 % d’extrait brut, en poids du poids total de l’extrait final. Dans ce mode de réalisation particulier les composés semi à non-volatils comprennent de 0,01 à 0,4 % de dérivés sesquiterpéniques en équivalent de cotoïne, de 0,001 à 0,1 % d’aryl phényl cétones dont 0,001 à 0.05 % de cotoïne, de 0,001 à 0,01 % de beta-sitostérol et de 0,001 à 0,1 % d’anibine. A titre d’exemple on peut citer extrait purifié de bois de rose dilué à 0,5 % dans le tricaprylate / caprate de glycérol en poids d’extrait brut par rapport au poids de l’extrait final et comprenant 0,08 % de dérivés sesquiterpéniques en équivalent de cotoïne, 0,006 % d’aryl phényl cétones dont 0,005 % de cotoïne et 0,009 % d’anibine. L‘extrait de l’invention est différent des extraits de bois de rose décrits dans l’art antérieur, et en particulier des huiles essentielles en ce qu’il possède une note olfactive beaucoup moins intense, une teneur en composés volatils et allergéniques largement diminuée, et des composés semi à non-volatils de polarité variable appartenant à plusieurs familles chimiques. Dans l’extrait purifié de bois de rose de l’invention les composés volatils sont présents à des concentrations inférieures à la limite de détection et ne peuvent donc pas être quantifiés. La concentration en linalool est inférieure à 0,01%. L’étude phytochimique pour caractériser les composés a été effectuée sur l’extrait brut de bois de rose épuisé, obtenu par un procédé comprenant les étapes a), b) et c’). L’extrait brut de bois de rose comprend : Entre 5 et 20 % de composés volatils, principalement des sesquiterpènes et des alcools sesquiterpéniques, préférentiellement entre 8 et 18 %, encore plus préférentiellement 10 et 15 % de composés volatils et au maximum 1 % de linalool. Entre 80 et 95 % de composés semi à non-volatils, préférentiellement entre 82 et 92 %, et encore plus préférentiellement entre 85 et 90 %. Cette fraction est principalement composée de dérivés sesquiterpéniques (environ 30 % de l’extrait), des aryl phényl cétones (environ 10 % de l’extrait dont environ 5 % de cotoïne), un dérivé de l’acide nicotinique (environ 20 % de l’extrait), des sesquiterpènes type eudesmane et guaiane, de l’acide nicotinique, des acides organiques, ainsi que des molécules plus apolaires appartenant aux familles chimiques du type phytostérol et acide gras (environ 25 % de l’extrait pour tous ces autres composés. Dans un mode de réalisation très avantageux, l’extrait brut de bois de rose comprend 13 % de composés volatils et 87 % de composés semi à non-volatils dont 32 % de dérivés sesquiterpéniques, 12 % d’aryl phényl cétones dont 6% de cotoïne, 20 % d’anibine et 23 % de composés sesquiterpéniques, acides gras libres et phytostérols. La liste non exhaustive des composés présents dans ces deux fractions analysées par HPLC couplé à un détecteur à barrette de diodes ou un détecteur évaporatif à diffusion de lumière par calibration externe est donnée à titre d’exemple dans le tableau 1 suivant : Fraction Famille chimique Identification Fraction volatile Alcools sesquiterpéniques, sesquiterpènes Gamma-sélinène Beta-sélinène Alpha-sélinène Alpha-muurolène Delta-cadinène Spathulénol Tau-cadinol Alpha-cadinol Fraction semi à non-volatile Aryl phényl cétones Vitamine et dérivé de l’acide nicotinique Dérivés sesquiterpéniques Sesquiterpènes Alcools sesquiterpéniques Acide nicotinique (2,6-dihydroxy-4-méthoxyphényl)-(4-hydroxyphényl)méthanone Cotoïne Teucladiol Incisumdiol 1,6-dihydroxy-4(14)-Eudesmene 1,6-dihydroxy-3-eudesmene Eudesma-4,11-dien-1-ol Alpha-dictyopterol Beta-dictyopterol Anibine Quelques marqueurs ont pu être quantifiés dans l’extrait brut de bois de rose. Celui-ci contient notamment : Entre 10 et 50 % de dérivés sesquiterpéniques, avantageusement entre 20 et 40 % et préférentiellement entre 25 et 35 % ; Entre 1 et 25 % d’aryl phényl cétones, avantageusement entre 5 et 20 % et préférentiellement entre 10 et 15 % dont entre 5 et 10 % de cotoïne ; Entre 0,01 et 2 % de beta-sitostérol, avantageusement entre 0,1 et 1,5 % et préférentiellement entre 0,5 et 1 % ; Entre 1 et 40 % d’anibine, avantageusement entre 5 et 30 % et préférentiellement entre 10 et 20 %. Compositions Un troisième objet de l’invention est une composition comprenant en tant qu’agent actif, une quantité efficace d’un extrait purifié de bois de rose, obtenu selon le procédé décrit ci-dessus, et un milieu physiologiquement acceptable. Avantageusement, l’extrait purifié de bois de rose est ajouté dans un milieu physiologiquement acceptable à une concentration comprise entre 0,01 % et 10% d’extrait purifié de bois de rose en poids par rapport au poids total de la composition, préférentiellement à une concentration comprise entre 0,1 et 5 % en poids par rapport au poids total de la composition, et encore plus préférentiellement à une concentration comprise entre 0,5 et 2 % en poids par rapport au poids total de la composition. La composition de la présente demande est formulée pour être appliquée par toute voie appropriée, notamment orale, ou topique externe, et la formulation des compositions sera adaptée par l'homme du métier. Préférentiellement, la composition de la présente demande se présente sous une forme adaptée à l’application par voie topique. Cette composition doit donc contenir un milieu physiologiquement acceptable, c’est-à-dire compatible avec la peau et les phanères, sans risque d’inconfort lors de son application. La composition pourra notamment se présenter sous forme d'une solution ou d’un gel aqueux, hydroalcooliques ou huileux, d'une émulsion huile-dans-eau, eau-dans-huile ou émulsions multiples ; elles peuvent aussi se présenter sous forme de suspensions, ou encore poudres, adaptées à une application sur la peau, les muqueuses, les lèvres et/ou les cheveux. La composition peut être plus ou moins visqueuse et avoir également l’aspect d’une crème, d’une lotion, d’un fluide, d’un lait, d’un sérum, d’une pommade, d’un gel, d’une pâte, d’un baume ou d’une mousse. Elle peut aussi se présenter sous forme solide, comme un stick ou être appliquée sur la peau sous forme d’aérosol. A titre de milieu physiologiquement acceptable communément utilisé dans le domaine d'application envisagé, on peut citer par exemple des adjuvants nécessaires à la formulation, tels que des solvants, des épaississants, des gélifiants, des diluants, des émulsionnants, des antioxydants, des colorants, des filtres solaires, des agents auto-bronzants, des pigments, des charges, des conservateurs, des parfums, des absorbeurs d’odeur, des huiles essentielles, des vitamines, des acides gras essentiels, des tensioactifs, des polymères filmogènes, des esters, des huiles ou beurres végétaux, etc. Dans tous les cas, l'homme de métier veillera à ce que ces adjuvants ainsi que leurs proportions soient choisis de telle manière à ne pas nuire aux propriétés avantageuses recherchées de la composition selon l’invention. Selon un autre mode de réalisation avantageux, l’extrait purifié de bois de rose peut être encapsulé ou inclus dans un vecteur cosmétique tels que les liposomes ou toute autre nano capsule ou microcapsule utilisée dans le domaine de la cosmétique ou adsorbé sur des polymères organiques poudreux, des supports minéraux comme les talcs et bentonites. Avantageusement, la composition peut comprendre, outre l’agent actif, c’est-à-dire un extrait purifié de bois de rose, au moins un autre agent actif présentant des effets cosmétiques similaires et/ou complémentaires à ceux de l'invention. De tels agent actifs additionnels peuvent également être choisis selon leur composition chimique, dans le groupe comprenant : les sucres aminés, glucosamine, D-glucosamine, N-acetyl- glucosamine, N-acetyl-D-glucosamine, mannosamine, N-acetyl mannosamine, galactosamine, N-acétyl galactosamine, vitamine B3 et ses dérivés, le niacinamide, déhydro-acétate de sodium, l'acide déhydroacétique et ses sels, phytosterols, composés d'acide salicylique, hexamidines, composés dihydroxyproline de dialkanoyl, extraits et dérivés de soja, equol, isoflavones, flavonoïdes, phytantriol, farnesol, géraniol, bisabolol, peptides et leurs dérivés, di -, tri -, tétra -, penta -, et hexapeptides et leurs dérivés, lys-thr-thr-lys-ser, palmitoyl-lys-thr-thr-lys-ser, carnosine, composés d'acide aminé N-acyl, rétinoïdes, propionate de rétinyl, rétinol, palmitate de rétinyl, acétate de rétinyl, rétinal, acide rétinoïque, vitamines hydrosolubles, ascorbates, vitamine C, glucoside ascorbyl, palmitate ascorbyl, magnesium ascorbyl phosphate, sodium ascorbyl phosphate, vitamines et leurs sels et dérivés, provitamines et leurs sels et dérivés, ethyl panthenol, vitamine A et ses dérivés, vitamine B et ses dérivés, vitamine Bl, vitamine B2, vitamine B6, vitamine B12, vitamine E, vitamine F, vitamine K et ses dérivés, acide pantothénique et ses dérivés, éther éthylique de pantothenyl, panthenol et ses dérivés, panthenol ethylique, dexpanthenol, biotine, acides aminés et leurs sels et les dérivés, acides aminés hydrosolubles, asparagine, alanine, indol, acide glutamique, vitamines insolubles dans l'eau, bêta-ionol, cedrol, et leurs dérivés, acides aminés insolubles dans l'eau, tyrosine, tryptamine, matériaux particulaires, hydroxytoluène butylé, hydroxyanisole butylé, allantoine, nicotinate de tocophérol, tocophérol, esters de tocophérol, palmitoyl-gly-his-lys, phytostérol, hydroxy acides, acide glycolique, acide lactique, acide lactobionique, kétoacides, acide pyruvique, acide phytique, acide lysophosphatidique, stilbenes, cinnamates, resveratrol, kinétine, zeatin, dimethylaminoethanol, peptides naturels, les peptides de soja, sels de sucres acides, gluconate de manganèse, gluconate de zinc, olamine de piroctone, 3,4,4'- trichlorocarbanilide, triclocarban, pyrithione de zinc, hydroquinone, acide kojique, acide ascorbique, magnésium ascorbyl phosphate, ascorbyl glucoside, pyridoxine, l'aloe vera, les alcools de terpène, allantoine, bisabolol, glycyrrhizinate dipotassique, acide de glycérol, de sorbitol, de pentaerythritol, de pyrrolidone et ses sels, dihydroxyacetone, erythrulose, glycéraldéhyde, tartaraldehyde, l'essence de clou de girofle, le menthol, le camphre, l'essence d'eucalyptus, eugénol, le lactate de menthyle, le distillat d'hamamélis, copolymère d'eicosene et vinyl pyrrolidone, iodopropyl butylcarbamate, un polysaccharide, un acide gras essentiel, un salicylate, un acide glycyrrhétinique, des caroténoïdes, des céramides et des pseudo-céramides, un lipide complexe, les huiles en général d'origine naturelle tels le beurre de karité, l'huile d'abricot, l'huile d'onagre, l'huile de pruneau, l'huile de palme, l'huile de monoï, l’huile de kahai, hydroquinone, 1'HEPES, la procystéine, l'O-octanoyl-6-D-maltose, le sel disodique d'acide méthyl glycine diacétique, les stéroïdes tels que la diosgénine et les dérivés de la DHEA, la DHEA déhydroépiandrostérone et/ou un précurseur ou dérivé chimique ou biologique, le N-éthylcarbonyl-4-para-aminophénol, les alpha hydroxy acides, les bêta hydroxy acides, les hydratants, les enzymes hydrolytiques épidermiques, les extraits de plantes, les phytohormones, les extraits de levure, un inhibiteur de métalloprotéinases, les enzymes, les inhibiteurs enzymatiques, les inducteurs enzymatiques, les coenzymes, les agents chélatants, les extraits végétaux et dérivés de plantes, les huiles essentielles, les extraits marins, les agents venant d'un procédé de biofermentation et/ou de biotechnologie, les sels minéraux, les extraits cellulaires. A titre d’exemples, on peut encore citer : les peptides commercialement connus sous le nom MATRIXYL®, ARGIRELINE®, CHRONOGEN™, LAMINIXYL IS™, PEPTIDE Q10™, COLLAXYL ™ (brevet FR2827170, ASHLAND®), PEPTIDE VINCI 01™ (brevet FR2837098, ASHLAND®), PEPTIDE VINCI 02™ (brevet FR2841781, ASHLAND®), ATPeptide™ (brevet FR2846883, ASHLAND®) ou encore le peptide de synthèse de séquence Arg-Gly-Ser-NH2, commercialisé sous le nom ATPeptide™ par ASHLAND® ; l’extrait d’Artémia salina, commercialisé sous le nom GP4G™ (FR2817748, ASHLAND®) ; les extraits peptidiques végétaux tels que les extraits de lin (Lipigénine™, brevet FR2956818, ASHLAND®), les extraits de soja, d’épeautre, de vigne, de colza, de lin, de riz, de maïs, de pois, de cacao ; les extraits de levures, par exemple le Dynagen™, (brevet FR2951946, ASHLAND®) ou l’Actopontine™ (brevet FR2944526, ASHLAND®). Utilisations L’invention a pour quatrième objet l’utilisation cosmétique d’une composition décrite précédemment comprenant un extrait purifié de bois de rose pour prévenir ou limiter les signes du vieillissement cutané et en particulier pour raffermir la peau, limiter l’apparition de ptôse faciale, redessiner le contour du visage, remodeler et restructurer le visage et limiter l’apparition des rides et ridules. . Le terme « utilisation cosmétique » signifie que l’utilisation est prévue pour des individus ayant une peau, un cuir chevelu ou des phanères sains. Par « signes du vieillissement cutané » on entend toute modification de l'aspect extérieur de la peau due au vieillissement comme, par exemple, un affaissement du visage avec une perte du contour ovale du visage, l’apparition de ptôses ou bajoues, une perte de volume des joues et des pommettes, l’apparition de rides et ridules au niveau des coins des lèvres et des pattes d’oie, le flétrissement, la perte d'élasticité, de fermeté et/ou de tonus de la peau, mais également toutes modifications internes de la peau qui ne se traduisent pas systématiquement par un aspect extérieur modifié comme, par exemple, l’amincissement de la peau, ou toutes dégradations internes de la peau consécutives à des agressions extérieures produisant des radicaux libres, telles que la pollution et les rayonnements solaires incluant les UV. La forme du visage est déterminée génétiquement et il est connu qu’un grand nombre de loci génétiques influencent la forme et les contours du visage. La matrice extracellulaire est un des premier déterminant de la morphologie faciale, l’extrait de bois de rose a donc été testé sur l’expression des collagènes I et III, et de l’acide hyaluronique et a montré un effet positif sur l’expression de ces protéines. Les inventeurs ont maintenant identifié par analyse bio-informatique sur les données des études d'association à l'échelle du génome certains déterminants génétiques impliqués dans la forme et les contours du visage. Parmi ces déterminants génétiques on peut citer, entre autres, le collagène XVII, la fibuline-7 et l’harmonine. La fibuline-7 en plus de son implication dans la forme et les contours du visage, interagirait avec la matrice extra cellulaire et des études ont suggéré qu’elle jouerait un rôle crucial dans le maintien des cellules souches épidermiques au cours du vieillissement cutané. Le collagène XVII est une protéine transmembranaire présente dans les hémidesmosomes (HD). Le collagène XVII participe aux interactions des cellules souches avec les cellules environnantes et la matrice et permettrait également le maintien des cellules souches et de leurs niches. Certaines mutations responsables d’un déficit en collagène XVII entraînent des phénotypes de vieillissement prématuré des cheveux. L’harmonine est une protéine d'échafaudage, une famille de protéines connue pour jouer un rôle central dans les assemblages macromoléculaires. L’extrait de bois de rose a été testé sur l’expression de la fibuline-7 et du collagène XVII, et de l’harmonine et a montré un effet positif sur l’expression de ces protéines, en lien avec l’effet antiride et de restauration de la forme et des contours du visage observé dans un test clinique. Des variations génétiques dans la chaine alpha 3 du collagène de type V ont été décrites dans un panel de volontaires asiatiques, comme étant associées à des prédispositions génétiques liées à l’affaissement de la peau et aux rides du le coin de l’œil (Okuno R. et al., Exp Dermatol. 2022 ;31(9):1411-1420.). De plus, une déficience en chaine alpha 3 du collagène de type V induite par l’action de la métalloprotéinase de matrice 9 (MMP-9) serait associée de façon significative à l’eczéma (Martin M.J. et al. Genes (Basel). 2020 ;11(4):442). L’extrait de bois de rose de l’invention a été testé sur l’expression de la chaine alpha 3 du collagène de type V, et a montré un effet positif sur l’expression de cette protéine, ce qui suggère un effet antiâge particulièrement intéressant pour les peaux asiatiques et caucasiennes et en particulier pour les peaux asiatiques. L’invention a encore pour objet l’utilisation cosmétique de la composition de l’invention pour augmenter l’expression des protéines suivantes : collagène XVII, fibuline-7, harmonine, chaine alpha 3 du collagène de type V et la CRABP2. L’ensemble des gènes qui codent pour ces protéines peuvent être considérés comme un "Complexe génomique de l’architecture du visage" ou " Complexe génomique architectural du visage". La vitamine A et ses dérivés, notamment le rétinol, font partie des substances les plus efficaces pour retarder le processus de vieillissement de la peau. De même, les rétinoïdes qui sont des dérivés d’origine naturelle ou synthétiques de la vitamine A, sont largement utilisés en dermatologie dans les traitements anti-âge (Mukherjee S, et al. Retinoids in the treatment of skin aging: an overview of clinical efficacy and safety. Clin Interv Aging. 2006;1(4):327-348) et leur efficacité sur le photo-vieillissement et la restructuration du derme et de l’épiderme sont bien décrits. Toutefois, il est également connu que ces molécules ont des effets secondaires asséchant et irritant. L’extrait de bois de rose a été testé sur l’expression d’un marqueur de l’inflammation : le récepteur de type 1 de l’interleukine (1 IL1R1), et n’a montré aucune modulation significative sur l’expression de cette protéine. En comparaison, l’acide rétinoïque a provoqué une augmentation de l’expression de cette protéine. Les CRABP1 et CRABP2, les protéines de liaison spécifiques de l’acide rétinoïque, se lient à l’acide rétinoïque et favorise son transport au sein de la cellule. Il est connu qu’une déficience de l'expression de CRABP2 accélère le vieillissement cutané (Bielli A. et al., Aging (Albany NY). 2019 ;11(6):1619-1632. L’extrait de bois de rose a été testé sur l’expression de CRABP2 et a montré un effet positif sur l’expression de cette protéine et n’augmente pas l’expression de l’IL1R1. L’extrait purifié de bois de rose montre des effets comparables à l’acide rétinoïque sur l’expression de CRABP2, et à l’avantage de ne pas provoquer d’effets secondaire inflammatoire, que ne supportent pas la plupart des peaux sensibles. La composition de l’invention présente une bonne tolérance, ce qui permet son utilisation sur des peaux sensibles ou des peaux présentant des caractéristiques de dermatite atopique. L’invention a ainsi pour objet une composition décrite dans la présente invention pour son utilisation pour obtenir un effet similaire à celui des rétinoïdes, sans présenter d’effets inflammatoires indésirables (effet « rétinol-like »). L’invention a encore pour objet une composition comprenant un extrait purifié de bois de rose pour combattre les agressions extérieures produisant des radicaux libres pro-inflammatoires, tels que le stress, la pollution ou les agressions extérieures. Exemples La présente invention va maintenant être illustrée au moyen des exemples non limitatifs suivants : Exemple 1 : Préparation d’un extrait brut et d’un extrait purifié de bois de rose épuisé Pour la réalisation des exemples, les arbres de l’espèce Aniba rosaeodora ont été cultivés au Pérou. Les parties de la plante utilisées sont les drêches de copeaux de tronc et branches de l’arbre Aniba rosaeodora , épuisés de l’huile essentielle (composés volatils) par un premier procédé de distillation par entrainement à la vapeur. Lors du développement du procédé de l’invention, les paramètres d’extraction ont été optimisés de manière à extraire le maximum de composés semi à non-volatils avec un maximum de rendement. La première étape du développement a consisté à mettre en évidence les facteurs qui avaient le plus d’influence sur l’extraction. Ainsi, plusieurs paramètres ont été étudiés à savoir l’intérêt d’un cryobroyage, du taux d’humidification de la matière végétale, du pourcentage de cellulose ajouté, du débit de co-solvant, ainsi que de la température et la pression dans l’extracteur. Seuls les facteurs ayant montré un réel impact sur l’extraction ont été optimisés dans le cadre d’un plan d’expérience d’optimisation appliqué selon la méthode des surfaces de réponse. Le tableau 2 indique quelques résultats simulés obtenus par le plan d’expérience mené pour optimiser les paramètres d’extraction : Débit co-solvant (ml/min) Humidification matière végétale (%) Rendement d'extraction (%) Aire pic DEDL composé 1 Aire pic DEDL composé 2 10 1 1,31 1,94 18,25 20 15 2,18 47,79 24,88 15 29 1,99 17,16 17,52 20 1 1,72 7,01 13,78 10 29 1,87 8,01 23,71 20 29 2,26 31,17 16,18 10 15 1,70 4,36 16,91 15 1 1,63 4,24 12,16 15 15 2,01 13,85 19,38 15 15 2,02 13,90 18,53 15 15 2,05 14,12 20,31 13 12 1,91 7,48 18,87 17 12 1,86 12,30 25,97 15 22 1,98 10,82 18,80 15 15 2,01 11.53 20.40 Les pics sélectionnés (composé 1 et composé 2) pour le retraitement du plan d’expérience sont la cotoïne et un dérivé de la cotoïne. Chaque aire a ici été corrigée par la concentration de la solution injectée en HPLC afin de s’affranchir des variations liées à la préparation d’échantillon. Les conditions d’extraction ont été sélectionnées afin d’obtenir un rendement d’extraction satisfaisant tout en garantissant à l’extrait une teneur et une diversité chimique maximale en composés semi à non-volatils. Les paramètres d’extraction préférentiellement choisis sont les suivants : Les copeaux de bois de rose épuisés sont cryobroyés en utilisant un tamis de 4 mm. La poudre de plante ainsi obtenue est humidifiée avec 15 % d’eau (% massique). La matière végétale humifiée est introduite dans une cartouche en acier inoxydable. Cette cartouche est placée dans un extracteur à fluide supercritique tel que l’extracteur SFE 5 de la marque Separex. Le solvant d’extraction utilisé est le dioxyde de carbone à l’état supercritique à un débit de 15 kg/h additionné d’un co-solvant polaire, correspondant à de l’éthanol à 96 % dans l’eau (volume/volume) à un débit de 20 ml/min. Le ratio massique dioxyde de carbone/plante humidifiée est de 30 et celui entre le co-solvant et le dioxyde de carbone est de 0,065. La pression et la température au sein de l’extracteur sont respectivement de 300 bar et 60°C. La température au sein du séparateur est de 35°C. Une mesure de l’extrait sec est effectuée sur l’extrait éthanolique obtenu en vue de la préparation de l’extrait purifié. Dans le cas de l’extrait brut, la solution d’extrait éthanolique de bois de rose épuisé est évaporée sous vide jusqu’à évaporation totale de l’éthanol (pression inférieure à 90 mbar et température de bain-marie à 60°C maximum). On obtient alors un extrait sous forme de pâte relativement solide. Pour préparer l’extrait purifié, avant évaporation sous vide, on ajoute le solvant support ; à savoir le tricaprylate / caprate de glycérol ; à la solution d’extrait éthanolique de manière à obtenir une solution diluée à 20% d’extrait brut en poids du poids total de l’extrait dilué. Le mélange est évaporé sous vide jusqu’à évaporation totale de l’éthanol (pression inférieure à 90 mbar et température de bain-marie de 60°C maximum). En présence de tricaprylate / caprate de glycérol, l’anibine précipite partiellement. L’extrait est filtré et le précipité éliminé. La teneur en tricaprylate / caprate de glycérol dans le filtrat obtenu est quantifiée par CLHP. À partir de ce résultat, l’extrait est dilué dans ce même solvant (tricaprylate / caprate de glycérol) afin d’obtenir un extrait fluide et limpide contenant 0,5% d’extrait brut de bois de rose. L’extrait purifié obtenu se présente sous forme d’extrait liquide. Plusieurs marqueurs de l’extrait ont été quantifiés. Ainsi, l’extrait purifié de bois de rose est à 0,5 % dans le tricaprylate / caprate de glycérol (en poids d’extrait brut par rapport au poids de l’extrait final) et comprend 0,08 % de dérivés sesquiterpéniques en équivalent de cotoïne, 0,006 % d’aryl phényl cétones dont 0,005 % de cotoïne, 0,004 % de beta-sitostérol, ainsi que 0,009 % d’anibine. La teneur en linalool se trouve en dessous de la limite de détection, soit une teneur inférieure à 0.01 %. Exemple 2 : Caractérisation de l’extrait brut de bois de rose obtenu selon l’exemple 1 L’étude phytochimique a été réalisée sur l’extrait brut de bois de rose épuisé. Cet extrait est obtenu dans les conditions citées à l’exemple 1 dans le cas où le co-solvant (éthanol) est totalement évaporé sous vide (90 mbar, température du bain-marie à 60°C maximum) sans ajout de solvant support. On obtient alors l’extrait brut sous forme pâteuse relativement solide. Les composés volatils sont analysés par chromatographie en phase gazeuse (GC) couplée à de la spectrométrie de masse (MS) et/ou à une détection par ionisation de flamme (FID). La confirmation des identifications est rendue possible par comparaison des indices de rétention linéaire et des spectres de masse contenus dans des librairies. La quantification par GC/FID est faite par étalonnage interne avec utilisation des facteurs de réponse prédits et/ou calculés. Les composés semi à non-volatils sont suivis par chromatographie liquide haute performance (CLHP) couplée à un détecteur UV à barrette de diodes (DAD) et à un détecteur évaporatif à diffusion de lumière (DEDL). Les identifications structurales sont confirmées par des expériences de résonnance magnétique nucléaire (RMN) ainsi que des analyses de spectrométrie de masse haute résolution (HRMS). L’identification est également confirmée par injection du standard si celui-ci est disponible commercialement. Les dérivés sesquiterpéniques, les composés du type aryl phényl cétones ainsi que le beta-sitostérol ont été quantifiés par CLHP. La cotoïne est utilisée comme étalon externe dans le cas du dosage des dérivés sesquiterpéniques et des aryl phényl cétones. La teneur est alors exprimée en équivalent de cotoïne. La méthode analytique, développée pour ce dosage, a fait l’objet d’une validation de méthode selon les directives indiquées par l’ICH (International Conference on Harmonization La liste non exhaustive des composés présents dans la fraction volatile et la fraction semi à non-volatile est détaillée dans le tableau 3 ci-dessous : Famille chimique Identification Fraction volatile (alcools sesquiterpéniques, sesquiterpènes) Benzyl alcohol 2-phenyl ethanol Linalool Alpha-copaène Gamma-sélinène Beta-sélinène Alpha-sélinène Delta-cadinène Spathulenol Benzyl benzoate Fraction semi à non-volatile (aryl phényl cétones, dérivés sesquiterpéniques, sesquiterpènes, vitamine et dérivé de l’acide nicotinique, acide organique, acide gras, phytostérol) (2,6-dihydroxy-4-méthoxyphényl)-(4-hydroxyphényl)méthanone Cotoïne Anibine Acide nicotinique Acide citrique Teucladiol Incisumdiol 1,6-dihydroxy-4(14)-eudesmene 1,6-dihydroxy-3-eudesmene eudesma-4,11-dien-1-ol Alpha-dictyopterol Beta-dictyopterol Sitostérol Acide linoléique La fraction volatile et la fraction semi à non-volatile ont été quantifiées pour cet extrait. Il contient ainsi : 13 % de fraction volatile ; dont au maximum 1 % de linalool 87 % de fraction semi à non-volatile dont 32 % de dérivés sesquiterpéniques, 12 % d’aryl phényl cétones dont 5 % de cotoïne, 20 % d’anibine et 23 % de composés divers tels que des sesquiterpènes, des acides gras libres, des phytostérols et autres composés lipidiques. Exemple 3 : Réalisation d’un extrait de bois de rose de type huile essentielle Dans l’objectif de réaliser une analyse comparative, une extraction d’huile essentielle de bois de rose (non épuisé) a été réalisée de manière conventionnelle, par distillation à la vapeur d’eau. Le tronc et les branches d’ Aniba rosaeodora sont séchés puis grossièrement broyés pour donner des copeaux qui sont placés dans des alambics séparés pour être ensuite traversés par un courant de vapeur d’eau ; cette vapeur libère les molécules volatiles ou huile essentielle qui est entrainée par la vapeur d’eau et se condense dans le condenseur. Etant donné que l’huile essentielle est moins dense que l'eau et n'est pas ou peu hydrosoluble, elle est recueillie à la sortie dans un décanteur appelé essencier. L'eau qui contient encore de l’huile essentielle à l'état de traces est appelée hydrolat. L’huile essentielle se présente sous forme d’un liquide de couleur incolore à jaune pâle (densité 0,8789, indice de réfraction 1,4644, pouvoir rotatoire +1,15). Exemple 4 : Mise en évidence de l’épuisement de la matière première par distillation à la vapeur d’eau La matière première de bois de rose valorisée dans le cadre de l’invention est dite « épuisée ». Cela signifie qu’elle a subi un premier traitement d’extraction, en l’occurrence une distillation à la vapeur d’eau, qui a permis d’extraire la fraction volatile du bois de rose, c’est-à-dire l’huile essentielle. Les drêches de bois de rose épuisé ont été analysées par chromatographie gazeuse couplée à de la spectrométrie de masse (GC/MS) et à un détecteur à ionisation de flamme (DIF ou FID en anglais). L’injection a été réalisée en headspace ou espace de tête. Cette préparation d’échantillon favorise l’analyse des composés les plus volatils. La séparation a été obtenue sur colonne apolaire 30 x 0,25 m, 0,25 µm, avec élution selon un gradient de température (isotherme 50°C, 5 min ; puis 3°C/min jusqu’à 120°C ; puis 5°C/min jusqu’à 250°C ; isotherme 250°C, 5 min). Le gaz vecteur utilisé est l’hélium. La montre le profil chromatographique GC/MS des drêches de bois de rose épuisé comparé au profil chromatographique GC/MS de l’huile essentielle de bois de rose. On remarque que l’huile essentielle est beaucoup plus riche en composés volatils. Ces composés sont élués avant 40 min dans les conditions de la méthode décrite ci-dessus. L’abondance des pics est également bien plus intense que dans le cas des drêches de bois de rose. Le profil chromatographique des drêches montre au contraire des pics peu intenses par comparaison à l’huile essentielle qui éluent principalement entre 30 et 35 min. Exemple 5 : Mise en évidence des différences phytochimiques majeures entre une huile essentielle et l’extrait purifié obtenu selon l’exemple 1 L’extrait purifié de bois de rose obtenu selon l’exemple 1 a été comparé à une huile essentielle de Aniba rosaeodora telle que préparée à l’exemple 3 par analyse en chromatographie liquide haute performance (CLHP) couplé à un détecteur à barrette de diodes et à un détecteur évaporatif à diffusion de lumière (DEDL) de solutions de même concentration de ces deux extraits. L’analyse chromatographique a été effectuée sur une colonne de type Core-Shell C18 selon un gradient d’élution utilisant des phases mobiles acidifiées par de l’acide formique (HCO 2 H) constituées d’un mélange eau/acétonitrile (ACN)/Propane-2-ol (IPA) pour la voie A et ACN/IPA/Méthanol (MeOH) pour la voie B. La représente le profil chromatographique UV à 300 nm d’une huile essentielle de bois de rose tel que décrit dans l’exemple 3 et de l’extrait purifié de bois de rose épuisé selon l’exemple 1, analysés en CLHP/UV-DEDL dans les conditions de gradient d’élution suivante : 0-5 min 100 % A, 5-22 min passage de 100 % A à 100 % B puis 22-32 min 100 % B avec A : H2O/ACN/IPA/HCO 2 H 95/2,5/2,5/0,1 (v/v/v/v) et B : IPA/ACN/MeOH/HCO 2 H 40/40/20/0,1 (v/v/v/v). On retrouve sur l’axe des ordonnées la réponse du détecteur en mAU. L’abscisse représente le temps d’analyse en minutes. Comme le montre la , les composés majoritaires semi à non-volatils correspondant aux dérivés sesquiterpéniques et aryl phényl cétones ne sont pas ou faiblement détectés dans l’huile essentielle de bois de rose En parallèle, les deux extraits obtenus selon l’exemple 1 et 3 ont également été comparés par analyse GC/MS-FID. Les échantillons ont été analysés à la même concentration en headspace (HS) ou espace de tête. La séparation a été obtenue sur colonne apolaire 30 x 0,25 m, 0,25 µm, avec élution selon un gradient de température (isotherme 50°C, 5 min ; puis 3°C/min jusqu’à 120°C ; puis 5°C/min jusqu’à 250°C ; isotherme 250°C, 5 min). Le gaz vecteur utilisé est l’hélium. La représente les profils chromatographiques GC/MS d’une huile essentielle de bois de rose tel que décrit dans l’exemple 3 et de l’extrait purifié de bois de rose obtenu selon l’exemple 1, analysés en GC/MS-FID dans les conditions décrites au-dessus. On retrouve sur l’axe des ordonnées la réponse du détecteur. L’abscisse représente le temps d’analyse en minutes. La illustre l’absence ou la présence en très faible quantité de composés volatils dans l’extrait solubilisé de bois de rose épuisé par rapport à l’huile essentielle diluée à 0,5% dans le tricaprylate / caprate de glycérol qui contient, comme décrit dans l’art antérieur, une quantité importante de linalool (pic majoritaire entre 18 et 19 min) dont la teneur est estimée entre 70 et 90%. Le profil chromatographique de l’extrait purifié de bois de rose montre des abondances de pic beaucoup plus faibles que l’huile essentielle de bois de rose, avec une teneur en linalool estimée entre 0,05.10-3 et 0,005%. Cette nette diminution en composés volatils, particulièrement en linalool, est la conséquence du procédé de distillation par entrainement à la vapeur préalablement appliqué au bois de rose qui a épuisé la matière première en composés volatils. La présente les profils chromatographiques HPLC/DEDL de l’extrait brut de bois de rose à 1% dans l’éthanol comparé à l’extrait purifié de bois de rose à 1 % dans le tricaprylate / caprate de glycérol, obtenus selon l’exemple 1. L’analyse chromatographique a été effectuée sur une colonne de type Core-Shell C18 selon un gradient d’élution utilisant des phases mobiles acidifiées par de l’acide formique (HCO 2 H) constituées d’un mélange eau/acétonitrile (ACN)/Propane-2-ol (IPA) pour la voie A et ACN/IPA/Méthanol (MeOH) pour la voie B dans les conditions de gradient d’élution suivante : 0-5 min 100 % A, 5-22 min passage de 100 % A à 100 % B puis 22-32 min 100 % B avec A : H2O/ACN/IPA/HCO 2 H 95/2,5/2,5/0,1 (v/v/v/v) et B : IPA/ACN/MeOH/HCO 2 H 40/40/20/0,1 (v/v/v/v). On retrouve sur l’axe des ordonnées la réponse du détecteur en mAU. L’abscisse représente le temps d’analyse en minutes. On observe une nette diminution de l’intensité du pic d’anibine (temps de rétention à 9 min) pour l’extrait purifié contrairement à l’extrait brut pour lequel l’anibine fait partie des composés majoritaires. Ces profils sont illustrés à la et démontrent l’appauvrissement en anibine de l’extrait purifié, par précipitation de ce composé à la suite de la dilution dans le solvant support. Exemple 6 : Evaluation de l’extrait purifié de bois de rose à 1% sur l’expression du collagène de type I, de type III et de l’acide hyaluronique sur des biopsies de peau humaine Le but de cette expérience est de démontrer un effet de l’extrait purifié de bois de rose sur la synthèse de collagène I, de collagène III, et d’acide hyaluronique dans des biopsies de peau humaine ex vivo. Protocole : L’expression du collagène I, du collagène III, et d’acide hyaluronique a été évaluée par immunofluorescence indirecte sur des biopsies de peau, traitées au préalable par application topique de l’extrait purifié de bois de rose obtenu selon l’exemple 1 et dilué à 1% dans le tricaprylate / caprate de glycérol pendant 48 heures (2 fois par jour). Des biopsies contrôles incubées en parallèle dans les mêmes conditions reçoivent le placebo (Phosphate Buffer Saline, PBS). Au terme de l’incubation, les biopsies sont fixées et incluses en paraffine pour la réalisation de coupes histologiques. Les détections de collagène I, de collagène III, et d’acide hyaluronique sont réalisées par incubation avec de l’anticorps anti-Collagène I (Abcam) ; anti-Collagène III (Proteintech), et une sonde HABP (hyaluronan-binding protein) – biotinylée (millipore). Après une heure et demie d’incubation suivie de rinçages, les coupes sont incubées en présence de l’anticorps secondaire anti-lapin couplé à un fluorophore (Alexa Fluor® 488, Invitrogen) pour détecter les collagènes I et III. Un système biotine/streptavidine couplé à un fluorophore (Alexa Fluor® 488, Invitrogen) est utilisé pour détecter l’acide hyaluronique. Les coupes sont ensuite examinées au microscope à Epi-fluorescence (Zeiss Axiovert 200M microscope). L’expression du collagène I, du collagène III, et de l’acide hyaluronique sont alors observées et quantifiées par analyse d’image (Volocity® image analysis software, Improvision). Résultats : Comme présenté dans la , lorsque les biopsies ont été traitées par l’extrait purifié de bois de rose à 1%, l’expression du collagène I a augmenté de 20%, l’expression du collagène III a augmenté de 32%, et l’expression de l’acide hyaluronique a augmenté de 36% par rapport au contrôle négatif. Conclusion : L’extrait purifié de bois de rose a montré un effet positif sur l’expression du collagène I, du collagène III, et de l’acide hyaluronique. Exemple 7 : Evaluation de l’extrait purifié de bois de rose à 1% sur l’expression de la Fibuline-7 sur des biopsies de peau humaine L’extrait purifié de bois de rose a été testé sur l’expression de Principe : Le but de cette expérience est de démontrer un effet de l’extrait purifié de bois de rose sur la synthèse de la fibuline-7, dans des biopsies de peau humaine ex vivo. La fibuline-7 est une protéine préservant les kératinocytes souches et identifiée comme impliquée dans la morphologie faciale. Protocole : L’expression de fibuline-7 est évaluée par immunofluorescence indirecte sur des biopsies de peau, traitées comme dans l’exemple 6. La détection de fibuline-7 est réalisée par incubation avec de l’anticorps anti-fibuline-7 (Thermo Scientific). Après une heure et demie d’incubation suivie de rinçages, les coupes sont incubées en présence de l’anticorps secondaire anti-lapin couplé à un fluorophore (Alexa Fluor® 488, Invitrogen). Les coupes sont ensuite examinées au microscope à Epi-fluorescence (Zeiss Axiovert 200M microscope). L’expression de fibuline-7 est alors observée et quantifiée par analyse d’image (Volocity® image analysis software, Improvision). Résultats : lorsque les biopsies ont été traitées par l’extrait purifié de bois de rose à 1%, l’expression de la fibuline-7 a augmentée de 39% par rapport au contrôle négatif (moyenne +/- ESM, n=6 résultat hautement significatif avec le test de Student). Conclusion : L’extrait purifié de bois de rose a montré un effet positif sur L’expression de fibuline-7. Exemple 8 : Evaluation de l’extrait purifié de bois de rose à 1% sur l’expression du collagène XVII sur des biopsies de peau humaine L’extrait purifié de bois de rose a été testé sur l’expression collagène XVII, une protéine dont l’expression diminue avec l’âge dans la peau humaine (Xiang Y, et al., J Cell Commun Signal. 2022;16(3):421-432.), et identifiée comme impliquée dans la morphologie faciale des Européens (Liu F. et al., PLoS Genet. 2012;8(9):e1002932). Protocole : L’expression du collagène XVII est évaluée par immunofluorescence indirecte sur des biopsies de peau, traitées comme dans l’exemple 6. La détection du collagène XVII est réalisée par incubation avec de l’anticorps anti-Col17A1 (Abcam). Après une heure et demie d’incubation suivie de rinçages, les coupes sont incubées en présence de l’anticorps secondaire anti-lapin couplé à un fluorophore (Alexa Fluor® 488, Invitrogen). Les coupes sont ensuite examinées au microscope à Epi-fluorescence (Zeiss Axiovert 200M microscope). L’expression du collagène XVII est alors observée et quantifiée par analyse d’image (Volocity® image analysis software, Improvision). Résultats : lorsque les biopsies ont été traitées par l’extrait purifié de bois de rose selon l’exemple 1 à 1%, l’expression du collagène XVII a augmenté de 94% par rapport au contrôle negatif (moyenne +/- ESM, n=6 résultat hautement significatif avec le test de Student). Conclusion : L’extrait purifié de bois de rose a montré un effet positif sur l’expression du collagène XVII. Exemple 9 : Evaluation de l’extrait purifié de bois de rose à 1% sur l’expression de l’harmonine sur des biopsies de peau humaine L’extrait purifié de bois de rose a été testé sur l’expression de l’harmonine, une protéine qui possède des propriétés d’échafaudage et de hub moléculaire dans les voies de signalisations (Bugge K, et al., J Biol Chem. 2021;296:100226 ; Friis Theisen F., et al., J Biol Chem. 2022;298(6):101963). Protocole : L’expression de l’harmonine, est évaluée par immunofluorescence indirecte sur des biopsies de peau, traitées comme dans l’exemple 6. La détection de l’harmonine, est réalisée par incubation avec de l’anticorps anti-harmonine (Proteintech). Après une heure et demie d’incubation suivie de rinçages, les coupes sont incubées en présence de l’anticorps secondaire anti-lapin couplé à un fluorophore (Alexa Fluor® 488, Invitrogen). Les coupes sont ensuite examinées au microscope à Epi-fluorescence (Zeiss Axiovert 200M microscope). L’expression du collagène XVII est alors observée et quantifiée par analyse d’image (Volocity® image analysis software, Improvision). Résultats : lorsque les biopsies ont été traitées par l’extrait purifié de bois de rose à 1%, l’expression de l’harmonine a augmenté de 44% par rapport au contrôle négatif (moyenne + :- ESM, n=6 résultat hautement significatif avec le test de Student). Conclusion : L’extrait purifié de bois de rose a montré un effet positif sur l’expression de l’harmonine. Exemple 10 : Evaluation de l’extrait purifié de bois de rose à 1% sur l’expression de CRABP2 sur des biopsies de peau humaine L’extrait purifié de bois de rose a été testé sur l’expression de CRABP2, une protéine qui diminue dans la peau humaine avec l’âge, et qui est impliquée dans la voie de signalisation de l’acide rétinoïque. Protocole : L’expression de CRABP2 est évaluée par immunofluorescence indirecte sur des biopsies de peau, traitées comme dans l’exemple 6. Des biopsies servant de contrôles positifs sont incubées en parallèle dans les mêmes conditions reçoivent 1 µg/ml et 10 µg/ml d’acide rétinoïque (Sigma). La détection de CRABP2 est réalisée par incubation avec de l’anticorps anti-CRABP2 (Abcam). Après une heure et demie d’incubation suivie de rinçages, les coupes sont incubées en présence de l’anticorps secondaire anti-lapin couplé à un fluorophore (Alexa Fluor® 488, Invitrogen). Les coupes sont ensuite examinées au microscope à Epi-fluorescence (Zeiss Axiovert 200M microscope). L’expression de CRABP2 est alors observée et quantifiée par analyse d’image (Volocity® image analysis software, Improvision). Résultats : Comme présenté dans la , lorsque les biopsies ont été traitées par l’extrait purifié de bois de rose selon l’exemple 1 à 1%, l’expression de CRABP2 a augmenté de 80%. Lorsque les biopsies ont été traitées par 1 µg/ml et 10 µg/ml d’acide rétinoïque, l’expression de CRABP2 a augmenté de 106% et 132% respectivement. Conclusion : L’extrait purifié de bois de rose a montré un effet positif sur L’expression de CRABP2. Exemple 11: Evaluation de l’extrait purifié de bois de rose à 1% sur l’expression du collagène de type V chaine alpha 3 sur des biopsies de peau humaine L’extrait purifié de bois de rose a été testé sur l’expression de la chaine alpha 3 du collagène de type V. Des variations génétiques de ce gène ont été associés aux rides situées dans le coin de l’œil. Protocole : L’expression de la chaine alpha 3 du collagène de type V est évaluée par immunofluorescence indirecte sur des biopsies de peau, traitées comme dans l’exemple 6. Des biopsies servant de contrôles positifs sont incubées en parallèle dans les mêmes conditions reçoivent 1 µg/ml d’acide rétinoïque (Sigma). La détection de la chaine alpha 3 du collagène de type V est réalisée par incubation avec de l’anticorps de la chaine alpha 3 du collagène de type V (Sigma). Après une heure et demie d’incubation suivie de rinçages, les coupes sont incubées en présence de l’anticorps secondaire anti-lapin couplé à un fluorophore (Alexa Fluor® 488, Invitrogen). Les coupes sont ensuite examinées au microscope à Epi-fluorescence (Zeiss Axiovert 200M microscope). L’expression de la chaine alpha 3 du collagène de type V est alors observée et quantifiée par analyse d’image (Volocity® image analysis software, Improvision). Résultats : Comme présenté dans la , lorsque les biopsies ont été traitées par l’extrait purifié de bois de rose à 1%, l’expression de la chaine alpha 3 du collagène de type V a augmenté de 23%. Lorsque les biopsies ont été traitées par 1 µg/ml d’acide rétinoïque, l’expression de la chaine alpha 3 du collagène de type V a augmenté de 28%. Conclusion : L’extrait purifié de bois de rose a montré un effet positif sur l’expression de la chaine alpha 3 du collagène de type V. Cet effet antiâge est particulièrement intéressant pour les peaux asiatiques. Exemple 12 : Evaluation in vivo (clinique) de l’extrait purifié de bois de rose sur l’affaissement du visage, et les signes du vieillissement comme les changements de volume et l’apparition de rides Principe : Étudier l’efficacité in vivo de l’extrait purifié de bois de rose selon l’exemple 1, formulé à 1% et faire le lien avec les résultats in vitro obtenus sur des marqueurs clés de la morphologie du visage. Protocole : étude comparative en double aveugle contre un placebo, menée sur le visage de 33 volontaires (âgés de 35 à 67 ans) répartis aléatoirement en deux groupes : 16 volontaires pour le groupe placebo et 17 volontaires pour le groupe traité, homogènes selon l’âge et le sexe. [Tableau 4] : Formule de soin contenant l’extrait de bois de rose de l’exemple 1 à 1% utilisée dans le test clinique sur le groupe traité. ingrédients (trade name | INCI) % w/w Fournisseur phase A Eau purifiée Water/Aqua Qs. 100 Local Sel EDTA tetrasodium Tetrasodium EDTA 0,05 Fisher Lubrajel* MS Free hydrogel Glycerin (and) Glyceryl Acrylate/Acrylic Acid Copolymer (and) Phenoxyethanol 3,00 Ashland LiquaPar™/Rokonsal™ MEP conservateur Phenoxyethanol (and) Methylparaben (and) Ethylparaben (and) Propylparaben 1,00 Ashland phase B UltraThix™ P-100 polymer Acrylic Acid/VP Crosspolymer 0,60 Ashland phase C Hydroxide de sodium Sodium Hydroxide 0,02 Fisher Eau purifiée Water/Aqua 0,50 Local phase D Belsil* W3230 Bis-Stearoxydimethylsilane (and) Stearyl Alcohol (and) Dimethicone 2,00 Wacker Simulsol* 165 PEG-100 Stearate (and) Glyceryl Stearate 2,00 Seppic Beurre de karité raffiné Butyrospermum Parkii (Shea) Butter 2,00 Ashland Ceraphyl™ 28 ester Cetyl Lactate 1,50 Ashland Ceraphyl 791 ester Isocetyl Stearoyl Stearate 2,00 Ashland Ceraphyl ODS ester Octyldodecyl Stearate 3,00 Ashland Ceraphyl 368 ester Ethylhexyl Palmitate 4,00 Ashland extrait purifié de bois de rose selon l’exemple 1 Caprylic/capric triglyceride (and) Aniba Rosaeodora (Rosewood) Wood Extract 1,00 Ashland phase E Hydroxide de sodium Sodium Hydroxide 0,03 Fisher Eau purifiée Water/Aqua 0,50 Local total 100,00% Le groupe placebo a reçu la même formule de soin mais ne contenant pas l’extrait. Durée de l’étude : 56 jours. Visites de contrôle à J0 (premier jour de l’étude), J28 et J56. –Mesures représentatives de l’affaissement du visage : l’angle de la forme V du visage, la distance entre les ptôses, le volume des ptôses, le volume de l’ovale du visage ainsi que le volume des pommettes par le système AEAVA-HE® (Eotech®). – Mesure du volume du coin des lèvres ainsi que de la rugosité par le système AEAVA-HE® (Eotech®). - Topographie de la peau des pattes d’oie par réplique de silicone, analysées par projection de franges et de stéréométrie associé au système AEAVA-HE® (Eotech®). La rugosité de profil des rides des pattes d’oie a été mesurée et des représentations 2D et 3D de la topographie de la peau ont été effectuées. - Photos couleur du visage avec le banc HeadScan* V03 (Orion Concept*). - Évaluation sur une échelle de 0 à 100 par un expert et par les volontaires de l’état de la peau du visage au toucher et selon l’aspect visuel des paramètres suivants : – Teint de la peau : 0 correspondant à une peau très terne et 100 à une luminosité et un teint parfait. – Ridules de la patte d’oie : 0 correspondant à une peau lisse sans ridules et 100 à une peau avec un microrelief marqué et des ridules visibles. – sillon nasogénien : 0 correspondant à un pli nasogénien très profond et 100 correspond à un sillon nasogénien pas marqué et pas visible - Tonicité de la peau : 0 correspondant à une peau flasque sans tonicité et 100 correspondant à une peau très ferme avec une très bonne tonicité - Contour ovale du visage : 0 correspondant à un contour du visage pas bien dessiné avec une ptôse prononcée et 100 correspondant à un contour de visage parfaitement ovale sans ptôse - Harmonie du visage : 0 correspondant à un visage peu harmonieux, à un teint terne, des rides profondes et un pli nasogénien présent, la peau flasque et l’ovale du visage pas du tout dessiné avec présence de ptôse. 100 correspondant à un visage harmonieux au teint éclatant, une peau lisse sans rides, une peau tonique et l’ovale du visage parfaitement dessiné. Les mesures ont été effectuées sur le sujet après de 15 minutes de repos dans une pièce à 21°C +/-1 et avec un taux d’humidité relative de 50 % +/- 5. Les résultats des mesures de l’affaissement du visage et du changement de volume montrent qu’après un et deux mois d’application, les volontaires du groupe traité ont un angle du visage plus en V et un volume de l’ovale du visage diminué, contrairement aux volontaires du groupe placebo. Ces résultats sont illustrés par la . De plus, comme l’illustre la . la distance entre les ptôses ainsi que leurs volumes sont réduits par comparaison au groupe placebo Ces résultats sont en accord avec les résultats obtenus in vitro sur le collagène XVII mais aussi l’harmonine et la fibuline-7, marqueurs clés dans la morphologie du visage et diminuant avec l’âge. Résultats des mesures du volume du coin des lèvres et de la rugosité : comme illustré dans la , après 2 mois d’application, une diminution du volume et de la rugosité des rides du coin des lèvres est observée pour le groupe traité comparé au groupe placebo. Ces résultats sont en accords avec les résultats obtenus in vitro sur la Fibuline-7 (marqueur clé des rides du coin des lèvres et diminuant avec l’âge). Résultats des mesures de la topographie de la peau au niveau des pattes d’oie : comme illustré dans la une diminution de la rugosité des rides de la patte d’oie est observée à J28 et J56 pour le groupe traité comparé au groupe placebo. Ces résultats soutiennent les résultats obtenus in vitro sur le collagène I et III. Ces résultats sont confirmés par l’observation des photos couleur du visage et l’évaluation de l’expert et des volontaires. Conclusion du test : les résultats ci-dessus démontrent que l’extrait purifié de bois de rose selon l’exemple 1 formulé à 1% a un effet raffermissant, permet de diminuer l’affaissement du visage et de redessiner l’ovale du visage et a un effet antiride permettant l’atténuation des rides du coin des lèvres et des pattes d’oie. Des résultats similaires ont été obtenus lors d’une étude clinique menée sur peau asiatique dans laquelle une diminution des rides a été observée après un mois d’application avec la même crème contenant l’extrait purifié de bois de rose formulé à 1%. Ce résultat est en accord avec les résultats in vitro obtenus au niveau de la chaine alpha 3 du collagène de type V, un marqueur associé aux rides du coin de l’œil essentiellement sur les peaux asiatiques. Exemple 13 : Evaluation de l’extrait purifié de bois de rose à 1% sur l’expression du récepteur de type 1 de l’interleukine 1 (IL1R1) sur des biopsies de peau humaine L’extrait purifié de bois de rose a été testé sur l’expression de IL1R1, une protéine qui augmente dans la peau humaine avec l’inflammation. Protocole : L’expression de IL1R1 est évaluée par immunofluorescence indirecte sur des biopsies de peau, traitées comme dans l’exemple 6. Des biopsies servant de contrôles positifs sont incubées en parallèle dans les mêmes conditions reçoivent 1 µg/ml et 10 µg/ml d’acide rétinoïque (Sigma). La détection de l’IL1R1 est réalisée par incubation avec de l’anticorps anti-IL1R1 (Tebu bio). Après une heure et demie d’incubation suivie de rinçages, les coupes sont incubées en présence de l’anticorps secondaire anti-lapin couplé à un fluorophore (Alexa Fluor® 488, Invitrogen). Les coupes sont ensuite examinées au microscope à Epi-fluorescence (Zeiss Axiovert 200M microscope). L’expression de IL1R1 est alors observée et quantifiée par analyse d’image (Volocity® image analysis software, Improvision). Résultats : Comme présenté dans la , lorsque les biopsies ont été traitées par l’extrait purifié de bois de rose selon l’exemple 1 à 1%, l’expression de IL1R1 a diminué de 3%. Lorsque les biopsies ont été traitées par 1 µg/ml et 10 µg/ml d’acide rétinoïque, l’expression de IL1R1 a augmenté de 19% et 56% respectivement. Conclusion : L’extrait purifié de bois de rose n’a montré aucune modulation significative de L’expression du récepteur de type 1 de l’interleukine 1 (IL1R1). L’application d’acide rétinoïque a montré une augmentation de l’expression de l’IL1R1. Procédé d’obtention d’un extrait de bois de rose obtenu à partir de feuilles ou de copeaux de troncs et de branches de bois de rose ( Aniba rosaeodora ) épuisé comprenant les étapes suivantes : on ajoute entre 5 et 25 % d’eau au bois de rose épuisé et séché ; on réalise une extraction à l’aide de dioxyde de carbone (CO 2 ) à l’état supercritique en présence d’un co-solvant polaire choisi parmi les alcools primaires ou secondaires, ou tout mélange de ceux-ci ; on ajoute un solvant support choisi parmi les solvants de type polyol, alcools gras saturés ou insaturés, linéaires ou ramifiés, comprenant de 8 à 30 carbones, les solvants de type glycéride ou de type ester à longue chaîne carbonée, ou tout mélange de ceux-ci ; on évapore l’extrait solubilisé à l’étape c) pour éliminer la totalité du co-solvant, on filtre l’extrait afin d’éliminer les composés précipités qui ne se solubilisent pas dans le solvant support et de récolter le filtrat, on dilue l’extrait obtenu en e) dans le même solvant support à une concentration comprise entre 0,005 à 50 % d’extrait brut en poids du poids total de l’extrait final. Procédé selon la revendication 1 dans lequel à l’étape b) le co-solvant est l’éthanol, avantageusement à une concentration comprise entre 80 et 100 % (pourcentage volume/volume d’eau), préférentiellement entre 90 et 100 % et plus préférentiellement encore à une concentration de 96 %. Procédé de l’une des revendications précédentes dans lequel à l’étape b), le rapport massique du co-solvant par rapport au dioxyde de carbone (CO 2 ) à l’état supercritique est compris entre 0,050 et 0,080, avantageusement entre 0,055 et 0,075 et préférentiellement entre 0,060 et 0,070. Procédé de l’une des revendications 2 ou 3 dans lequel à l’étape b) le débit de co-solvant ; est compris entre 10 et 20 ml/min. Procédé de l’une des revendications précédentes dans lequel à l’étape b) la température d’extraction est comprise entre 35 et 85°C, avantageusement entre 45 et 75°C et préférentiellement entre 55 et 65°C et la pression au sein de l’extracteur est comprise entre 90 et 1000 bar, préférentiellement entre 150 et 700 bar et encore plus préférentiellement entre 250 et 350 bar. Procédé de l’une des revendications précédentes dans lequel à l’étape c) le solvant support est choisi parmi les solvants de type polyol, alcool gras saturé ou insaturé, linéaire ou ramifié, comprenant de 8 à 30 carbones ou les solvants de type glycéride ou de type esters à longue chaîne carbonée, ou tout mélange de ceux-ci, de préférence le solvant support est le tricaprylate / caprate de glycérol. Extrait purifié de bois de rose susceptible d'être obtenu par le procédé de l’une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce qu’il est dilué à une concentration comprise entre 0,1 et 1 % dans le solvant support et comprend de 0,3 à 0,5 %, avantageusement de 0,35 à 0,5 % et préférentiellement entre 0,4 et 0,5 % de composés semi à non-volatils. Extrait purifié de bois de rose de la revendication 7, caractérisé en ce les composés semi à non-volatils comprennent de 0,01 à 0,4 % de dérivés sesquiterpéniques en équivalent de cotoïne, de 0,001 à 0,1 % d’aryl phényl cétones dont 0,001 à 0.05 % de cotoïne, de 0,001 à 0,01 % de beta-sitostérol et de 0,001 à 0,1 % d’anibine. Composition comprenant une quantité efficace d’extrait purifié de bois de rose de l’une des revendications 7 ou 8 en tant qu’agent actif et un milieu physiologiquement acceptable. Composition de la revendication 9, caractérisée en ce qu’elle comprend entre 0,01 % et 10%, préférentiellement entre 0,1 et 5 % et encore plus préférentiellement entre 0,5 et 2 % d’extrait purifié de bois de rose en poids par rapport au poids total de la composition. Utilisation cosmétique de la composition de la revendication 9 pour prévenir ou limiter les signes du vieillissement cutané, raffermir la peau, limiter l’apparition de ptôse faciale, redessiner le contour du visage et encore pour limiter l’apparition des rides et ridules. Utilisation cosmétique de la composition de la revendication 9 pour augmenter l’expression du collagène I, du collagène III, du collagène XVII, de l’acide hyaluronique, de la fibuline-7, de l’harmonine et de la CRABP2. Utilisation cosmétique de la composition de la revendication 9 pour augmenter l’expression de la chaine alpha 3 du collagène de type V et pour limiter l’apparition des rides et ridules. Composition selon la revendication 9 pour son utilisation pour obtenir un effet similaire à celui des rétinoïdes sur les signes du vieillissement cutané, sans présenter d’effets inflammatoires indésirables. Composition selon la revendication 9 pour combattre les agressions extérieures produisant des radicaux libres pro-inflammatoires, telles que le stress ou la pollution.