Brevet FR3149896A1 — publié le 20241220

PEPTIDES MODIFIÉS, COMPOSITION, MÉTHODE DESTINÉE À INHIBER LA CONTRACTION DES MYOCYTES, MÉTHODE DESTINÉE À AMÉLIORER LA PEAU ET UTILISATION D’UN PEPTIDE MODIFIÉ La présente invention concerne des peptides modifiés comprenant une séquence d’acides aminés de SEQ ID N° : 1 à 80 et une modification des extrémités N- et/ou C-terminales, de préférence avec une modification d'un groupe acétyle et/ou carboxyle. La présente invention concerne également une composition comprenant lesdits peptides modifiés, des méthodes destinées à inhiber la contraction des myocytes et à améliorer la peau, et l’utilisation dudit peptide modifié. Figure pour l’abrégé : néant PEPTIDES MODIFIÉS, COMPOSITION, MÉTHODE DESTINÉE À INHIBER LA CONTRACTION DES MYOCYTES, MÉTHODE DESTINÉE À AMÉLIORER LA PEAU ET UTILISATION D’UN PEPTIDE MODIFIÉ DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention concerne des peptides modifiés comprenant des modifications dans les régions N- et/ou C-terminales. La présente invention concerne également une composition comprenant lesdits peptides modifiés, des méthodes destinées à inhiber la contraction des myocytes et à améliorer la peau, et l’utilisation dudit peptide modifié. CONTEXTE DE L’INVENTION Les peptides dérivés de précurseurs de peptides naturels isolés à partir de venin de serpent, par exemple, sont largement utilisés à diverses fins thérapeutiques ou cosmétiques. Un exemple bien connu est le captopril, dont le précurseur de peptides naturels est isolé à partir du venin du serpent Bothrops jararaca. Le captopril est un médicament à base de peptides qui inhibe l’enzyme de conversion de l’angiotensine, produisant un effet antihypertenseur. D'autres peptides utiles préparés à partir de précurseurs de peptides naturels comprennent les peptides natriurétiques, les peptides potentialisant la bradykinine et les sarafotoxines. Les protéines de faible masse telles que la crotamine, les désintégrines et les toxines à trois doigts sont dérivées du venin de serpent. Certains produits peptidiques du commerce contiennent des peptides synthétiques dérivés de peptides naturels isolés à partir de venin de serpent. Par exemple, SYN ® -AKE (DSM) est un composé antirides efficace à base de tripeptide synthétique, c’est-à-dire du dipeptide diaminobutyroyl benzylamide diacétate, qui imite l’activité du Waglerin 1, un polypeptide présent dans le venin de la vipère de temple Tropidolaemus wagleri . SYN ® -AKE agit au niveau de la membrane post-synaptique et est un antagoniste réversible du récepteur nicotinique musculaire de l’acétylcholine (mnAChR). Lors de la liaison au mnAChR par SYN ® -AKE, l’absorption du Na + est bloquée au niveau de la membrane post-synaptique et la contraction des myocytes est atténuée. SYN ® -AKE permet de réduire la transmission du signal entre les nerfs et agit de la même manière que le Botox pour relâcher les muscles. Bien que des peptides connus soient déjà utilisés dans les domaines cosmétique, dermo-cosmétique et dermatologique, il a été démontré qu’ils étaient moins stables que souhaité en termes de stabilité chimique dans une composition et aussi en termes de stabilité métabolique/biologique après avoir été appliqués sur un patient. L’une des principales causes de la mauvaise stabilité métabolique/biologique des peptides est qu’ils sont sensibles à la dégradation enzymatique par les peptidases qui sont des protéases en mesure de cliver, et donc souvent d'inactiver, de petits peptides. Ces enzymes sont largement réparties à la surface de nombreux types de cellules différents et, compte tenu de leur large répartition dans l’organisme, plusieurs tissus, y compris la peau, ont la capacité de métaboliser les peptides en résidus d’acides aminés. Il reste un besoin de peptides bioactifs qui ont une meilleure stabilité, en particulier chimique et/ou métabolique/biologique. Compte tenu de ce qui précède, l’objectif de la présente invention est de fournir des peptides qui ont amélioré la stabilité métabolique/biologique et/ou chimique dans la composition et après avoir été appliqués sur un patient, en particulier sur la peau. Ainsi, les inventeurs ont réussi à surmonter le problème de l’état de la technique et ont développé de manière surprenante de nouveaux peptides comprenant des modifications C- et/ou N-terminales qui ont l’amélioration souhaitée, lesdites modifications étant de préférence avec des groupes acétyle et/ou carboxyle. La présente invention concerne des peptides modifiés comprenant des modifications dans les régions N- et/ou C-terminales, de préférence avec une modification de l’acétyle et/ou du carboxyle. La présente invention concerne également une composition comprenant lesdits peptides modifiés, des méthodes destinées à inhiber la contraction des myocytes et à améliorer la peau, et l’utilisation dudit peptide modifié dans les domaines cosmétique, dermo-cosmétique et dermatologique. La montre le spectre de masse du peptide non acétylé de SEQ ID N° : 2. La montre le chromatogramme et les spectres de masse des peptides acétylés des SEQ ID N° : 2, 4 et 48 quantifiés via LC/MS haute résolution. et Les figures 3A et 3B montrent les résultats d’une étude comparative du métabolisme cutané, où la représente le pourcentage résiduel de peptide non acétylé de SEQ ID N° : 2 au fil du temps et la représente le pourcentage résiduel de peptide acétylé de SEQ ID N° : 2 au fil du temps dans une expérience de 2 heures. Les pointillés représentent les contrôles et les traits continus représentent les points de données avec l’activité métabolique (Peau S9). DESCRIPTION DÉTAILLÉE DE L'INVENTION La présente invention concerne des peptides modifiés comprenant une séquence d’acides aminés de SEQ ID N° : 1 à 80, avec une modification des extrémités N- et/ou C-terminales. Dans un mode de réalisation préféré, la modification des extrémités N- et/ou C-terminales est sélectionnée à partir des groupes acétyle et/ou carboxyle. Dans un mode de réalisation préféré, le peptide modifié comprend une séquence d’acides aminés sélectionnée à partir des SEQ ID N° : 1 à 10, 48 et 51, avec modification des extrémités N- et/ou C-terminales. Dans un mode de réalisation davantage préféré, le peptide modifié comprend une séquence d’acides aminés de SEQ ID N° : 2 avec modification des extrémités N- et/ou C-terminales. Le terme « peptide » utilisé ici fait référence à un composé ayant deux acides aminés ou plus liés dans une chaîne par des liaisons peptidiques, avec ou sans chaîne ramifiée. Tout acide aminé dans le peptide peut avoir une ou plusieurs modifications post-traductionnelles. Dans un mode de réalisation préféré, le peptide modifié est un peptide de faible masse ne contenant pas plus de 5, 10, 50 ou 100 acides aminés. Dans un mode de réalisation davantage préféré, le peptide modifié est un tétrapeptide ayant quatre acides aminés liés dans une chaîne droite sans chaîne ramifiée comprenant une modification terminale. Les peptides modifiés de la présente invention sont particulièrement adaptés à l’amélioration de la peau et peuvent être appliqués localement et/ou associés à certain(e)s procédures médicales/dispositifs médicaux/esthétiques (tels que le laser, la radiofréquence, le microneedling, entre autres techniques). Par « amélioration de la peau », on peut comprendre une ou plusieurs caractéristiques bénéfiques telles que l’amélioration de l’élasticité, de la qualité de la peau (cicatrices d’acné, pores, inflammation) et de la fermeté, l’apparence des pores, ainsi que la prévention des cicatrices d’acné et l’amélioration de l’apparence de ces cicatrices, l’amélioration/la prévention de l’apparence et de l’aspect des rides, entre autres. Le peptide modifié peut être utilisé dans les domaines cosmétique, dermo-cosmétique et/ou dermatologique, tels qu’un produit prêt à l’emploi destiné à être appliqué par le consommateur final, ou un produit destiné à être appliqué par un professionnel de santé tel qu’un dermatologue ou une esthéticienne à des fins esthétiques. La présente invention concerne également une composition comprenant une quantité efficace dudit peptide modifié et d’un véhicule, d'un diluant ou d'un support acceptable sur les plans cosmétique, dermo-cosmétique et/ou dermatologique. La composition peut comprendre le peptide modifié à une concentration d’environ 0,01 à 500 μM, d'environ 0,1 à 100 μM, d'environ 1 à 50 μM ou d'environ 1 à 10 μM, par exemple, de 1 ou 10 μM. La composition peut être une composition cosmétique et comprendre en outre un véhicule, un diluant ou un support acceptable sur le plan cosmétique. La composition peut être une composition dermo-cosmétique et comprendre en outre un véhicule, un diluant ou un support acceptable sur le plan dermo-cosmétique. La composition peut être une composition dermatologique et comprendre en outre un véhicule, un diluant ou un support acceptable sur le plan dermatologique. Les véhicules, diluants ou supports acceptables sur les plans cosmétique, dermo-cosmétique et dermatologique sont connus de la technique et peuvent être sélectionnés par le jugement d’un technicien. La composition peut se présenter sous la forme d'une lotion, d'un gel, d'un lait, d'un sérum, d'une crème, d'une émulsion, d'un liquide, d'une poudre lyophilisée, d'un aérosol ou d'un spray. La composition peut être incorporée dans des systèmes de micro-aiguilles, tels que des patchs ou des dispositifs hydrogel. La composition peut en outre contenir d’autres composés habituellement utilisés dans le domaine, tels que des tensioactifs, des épaississants ou des gélifiants, des conservateurs, des agents basifiants ou acidifiants bien connus dans la technique, et en quantités suffisantes pour obtenir la forme de présentation souhaitée, en particulier une lotion plus ou moins épaisse, un gel, une émulsion ou une crème. La composition peut se présenter sous forme d’aérosol pressurisé ou de pulvérisateur à partir d’un flacon à pompe. Les termes « quantité efficace » désignent une quantité d’un peptide modifié ou d'une composition comprenant le peptide modifié selon la présente invention qui est nécessaire pour atteindre un objectif fixé. La quantité efficace peut varier en fonction de la nature du peptide modifié ou de la composition, du type de cellules cibles, de la durée de traitement et de l’objectif fixé. Une quantité efficace spécifique pour un peptide donné ou une composition donnée peut être généralement déterminée par le jugement d’un technicien. La présente invention concerne également une méthode d’inhibition de la contraction des myocytes, dans laquelle ces cellules sont en contact avec une quantité efficace du peptide modifié ou de la composition qui le contient, ledit contact entraînant l’inhibition de la contraction des myocytes. L’inhibition peut être irréversible. Selon la méthode d’inhibition, les myocytes peuvent être traités pendant au moins 0,5, 1, 2, 5, 10, 12, 18, 24 ou 48 heures environ, par exemple, au moins pendant 5 ou 24 heures environ. La contraction des myocytes peut être inhibée d’au moins 5 %, 10 %, 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 %, 95 % ou 99 % environ par rapport à celle observée avant le traitement. Dans certains modes de réalisation, les myocytes se trouvent dans un muscle d’un patient. Lors du traitement des myocytes avec le peptide modifié ou la composition qui le contient, le muscle peut être relâché. L’invention concerne également une méthode destinée à améliorer la peau, comprenant l’application d’une quantité efficace du peptide modifié ou de la composition qui le contient. La peau peut être traitée au moins une, deux ou trois fois par jour et/ou pendant au moins 7, 14, 21, 28, 60 ou 90 jours. La présente invention concerne également l’utilisation du peptide modifié pour la fabrication d’une composition ou d’un produit pour des traitements cosmétiques, dermo-cosmétiques et/ou dermatologiques. Dans un mode de réalisation préféré, ladite utilisation se fait à l’aide d’un dispositif esthétique pour le laser, la radiofréquence et/ou pour le microneedling. L’homme du métier peut facilement déterminer quel domaine d’application est intéressant en fonction du type de composition souhaité, par exemple, un traitement à base d’une crème prête à l’emploi, d’une composition dermatologique à appliquer par un professionnel de santé sur le consommateur. TERMES Le terme « environ », tel qu’il est utilisé ici, lorsqu’il fait référence à une valeur mesurable telle qu’une quantité, un pourcentage, etc., est censé englober des variations de ±20 % ou de ±10 %, plus préférablement de ±5 %, encore plus préférablement de ±1 %, et encore plus préférablement de ±0,1 % par rapport à la valeur indiquée, selon le cas. Bien que l’invention soit illustrée et décrite ici en référence à des modes de réalisation spécifiques, l’invention n’est pas destinée à se limiter aux détails montrés. Au contraire, diverses modifications peuvent être apportées aux détails dans le champ d’application et la gamme d’équivalents des revendications sans s’écarter de l’invention. MODIFICATIONS PEPTIDIQUES Comme déjà mentionné, le terme « peptide » utilisé ici fait référence à un composé ayant deux acides aminés ou plus liés dans une chaîne par des liaisons peptidiques, avec ou sans chaîne ramifiée. Tout acide aminé dans le peptide peut avoir une ou plusieurs modifications post-traductionnelles. Dans un peptide, le groupe carboxyle d’un acide aminé est lié au groupe amine d’un autre. Une extrémité du peptide a un groupe amine libre, tandis que l’autre extrémité a un groupe carboxyle libre, formant respectivement les extrémités amino-terminale (N-terminale - [NH 2 ]) et carboxy-terminale (C-terminale - [COOH]). Dans un mode de réalisation, le peptide modifié est un tétrapeptide ayant quatre acides aminés liés dans une chaîne droite sans chaîne ramifiée comprenant une modification terminale. La « modification terminale » peut se produire aux extrémités N- et/ou C-terminales du peptide modifié et peut inclure, sans s'y limiter, les modifications, substitutions et/ou conjugaisons des extrémités amino- et carboxy-terminales. Des modifications terminales peuvent se produire avec un groupe acétyle, un groupe méthyle, un groupe phosphate, un groupe carboxyle, un acide gras comprenant des groupes capryloyle, capryle et lauryle, un amide, un N-alkylamide, un aldéhyde, une urée, une alkylamine, etc. Dans un mode de réalisation préféré, la modification terminale comprend la modification des extrémités N- et/ou C-terminales avec un groupe acétyle et/ou carboxyle. Dans un mode de réalisation préféré, le peptide est N-acétylé. Dans un autre mode de réalisation préféré, le peptide est carboxylé. L’acétylation décrit une réaction dans laquelle la charge positive sur l'extrémité N-terminale des peptides est éliminée. La carboxylation décrit une réaction dans laquelle un groupe carboxyle est incorporé à l’extrémité terminale du peptide. L’amidation décrit une réaction dans laquelle l’extrémité C-terminale du peptide est synthétisée sous forme d’amide pour neutraliser la charge négative de l'extrémité C-terminale COOH. Les modifications terminales peuvent être synthétisées via les techniques habituelles dans le domaine. Le peptide modifié peut être synthétisé chimiquement et/ou enzymatiquement et, dans un mode de réalisation préféré, le peptide est synthétisé enzymatiquement. Les enzymes appropriées peuvent inclure les transférases qui sont des enzymes qui transfèrent un groupe d’un composé à un autre et qui sont classées en fonction de leur schéma de groupe donneur/accepteur. Dans un autre mode de réalisation préféré, le peptide est synthétisé chimiquement. Les modifications terminales peuvent augmenter la stabilité cosmétique, métabolique/biologique et/ou chimique des peptides modifiés en empêchant la dégradation des extrémités N- et/ou C-terminales par des peptidases et/ou en modifiant les propriétés physico-chimiques des peptides qui peuvent inclure la longueur, la masse moléculaire, l’hydrophobie, etc. des peptides. EXEMPLES Exemple 1 – Peptide modifié Le peptide modifié de la présente invention comprend une séquence d’acides aminés sélectionnée à partir des SEQ ID N° : 1 à 80, comme indiqué dans le tableau 1. SEQ ID N° Peptide SEQ ID N° Peptide SEQ ID N° Peptide SEQ ID N° Peptide 1 WQHE 21 KYWFY 41 KALA 61 KKKY 2 KWKK 22 IPSP 42 KFFCK 62 KYKK 3 NFKD 23 KVFL 43 RNYL 63 YKKK 4 RADH 24 YWFYP 44 YLKP 64 FKKK 5 CSEI 25 WKTYW 45 QLGK 65 KKKI 6 IIHK 26 NRNY 46 LKPF 66 KKFK 7 LWEY 27 FANL 47 KNYK 67 KKIK 8 IWDH 28 FCKKP 48 WKKK 68 KKKF 9 EPPA 29 GKIP 49 KYWL 69 KKLK 10 ACDN 30 YLQK 50 KKWK 70 KLKK 11 FYPAK 31 WFYG 51 KYWF 71 KKKS 12 WFYP 32 CYKK 52 YPAK 72 LKKK 13 YNKK 33 YSSY 53 NKKY 73 IKKK 14 KALAI 34 FYPA 54 KYKI 74 KIKK 15 YGCY 35 TYNK 55 NYKI 75 KSKK 16 CCYKK 36 KKLT 56 FCKK 76 KKSK 17 WFYPA 37 CKKP 57 KKKW 77 KKPK 18 GKVF 38 FFCK 58 YWFY 78 KKKL 19 NKYWF 39 YGAK 59 KKYK 79 KPKK 20 KFFC 40 KNNY 60 KFKK 80 PKKK Séquences de peptides Exemple 2 – Quantification des peptides via LC/MS haute résolution Les peptides acétylés ont été quantifiés avec un système de chromatographie UPLC Vanquish (Thermo TM ) couplé à un spectromètre de masse Q-Exactive (Thermo TM ). Les peptides ont été ionisés avec le mode ionisation positive par électrospray et détectés avec le mode balayage intégral selon un pouvoir de résolution à 35 000 uma. Les spectres de masse ont montré des ions à deux charges et la quantification a été effectuée sur le rapport m/z des ions de 295,195 uma (avec z=2, ) pour les peptides KWKK (SEQ ID N° 2) et WKKK (SEQ ID N° 48) et le rapport m/z des ions de 322 166 (avec z=2, ) pour le tétrapeptide KYWF (SEQ ID N° 51). Les données ont été traitées avec le logiciel Excalibur et sont illustrées sur la . Exemple 3 – Étude comparative du métabolisme cutané La stabilité métabolique/biologique des peptides acétylés et non acétylés de SEQ ID N° : 2 a été étudiée avec des fractions subcellulaires S9 (S9) obtenues à partir de modèles de peau humaine reconstruite Episkin TM , et de foie. La demi-vie des peptides a été déterminée quantitativement et l’apparence qualitative des métabolites potentiels a été étudiée. Le protocole de l’étude du métabolisme avec la peau S9 est présenté ci-dessous. Foie et peau S9 [Matériel biologique] (mg prot./ml) 2 [peptides] (μM) 5 Tampon Tampon phosphate (100 mM, pH 7,4) [Cofacteurs] (μM) : Néant Cinétique à 37 °C : 0 à 120 min Méthode analytique : - Quantification du substrat - Identification des métabolites LC/MS LC/MS Protocole pour l’étude du métabolisme cutané avec la peau S9 Un contrôle réalisé dans les mêmes conditions expérimentales sans S9 a également été effectué afin de vérifier si la disparition du composé parent est liée aux activités enzymatiques. À différents points temporels (0, 5, 10, 15, 30, 60 et 120 min), 100 μl de milieu sont inactivés avec 200 μl de méthanol avec 0,1 % d'acide formique. Des échantillons ont ensuite été analysés par LC/MS pour quantifier les peptides. Des métabolites potentiels (perte d’un ou deux acides aminés sur l’extrémité C-terminale) ont été identifiés par LC/MS. La demi-vie de la disparition du peptide d’essai découle d’une adaptation de la courbe à l’aide des données de la concentration résiduelle du peptide parent en fonction du temps à l’aide du logiciel GraphPad (V. 5.02). Le pourcentage de peptides résiduels au fil du temps est représenté sur la FIG. 3. Il ressort clairement des et 3B que ce peptide non acétylé présente une diminution très rapide au fil du temps avec une demi-vie inférieure à 5 min, tandis que le peptide acétylé présente le même comportement avec ou sans la fraction métaboliquement active. Peptide modifié comprenant une séquence d’acides aminés de SEQ ID N° : 2 et une modification des extrémités N- et/ou C-terminales. Peptide selon la revendication 1, dans lequel la modification des extrémités N- et/ou C-terminales s'effectue avec un groupe acétyle et/ou carboxyle. Peptide modifié comprenant une séquence d’acides aminés de SEQ ID N° : 2 et une modification N- et/ou C- terminale, pour son utilisation en tant que produit cosmétique, dermo-cosmétique et/ou dermatologique. Composition comprenant un peptide modifié comprenant une séquence d’acides aminés de SEQ ID N° : 2 et une modification N- et/ou C-terminale, ainsi qu’un véhicule, un diluant ou un support acceptable sur le plan cosmétique, dermo-cosmétique et/ou dermatologique. Composition, selon la revendication 4, la composition se présentant sous la forme d’une lotion, d’un gel, d’un lait, d’un sérum, d’une crème, d’une émulsion, d’un liquide, d’une poudre lyophilisée, d’un aérosol ou d’un spray ou étant incorporée dans des systèmes de micro-aiguilles, tels que des patchs ou des dispositifs hydrogel.