Brevet FR3129831A1 — publié le 20230609

La présente invention concerne l’utilisation d’une composition à base de crocus sativus comme prébiotique chez l’Homme ou l’animal, en particulier pour augmenter la quantité de bactéries du genre Akkermansia dans le microbiote intestinal. Utilisation d’une composition à base de Crocus sativus comme prébiotique L’invention concerne l’utilisation d’une composition à base de crocus sativus comme prébiotique chez l’Homme ou l’animal, en particulier pour augmenter la quantité de bactéries du genre Akkermansia dans le microbiote intestinal. Etat de l’art Notre microbiote intestinal est constitué d’un ensemble de bactéries, virus, parasites et champignons non pathogènes, soit 10 12 à 10 14 micro-organismes présents dans le tube digestif de chaque individu, ce qui représente 2 à 10 fois plus que le nombre de cellules présent dans notre corps. Dès lors, son rôle est de plus en plus étudié ces dernières années. Aussi, il a été mis en évidence l’importance du rôle joué par le microbiote intestinal sur la santé de l’hôte. Dans ce cadre, il a été mis en évidence des corrélations inverses entre l’abondance de la population bactérienne d’ Akkermansia spp au sein du microbiote intestinal et divers désordres métaboliques (insulinorésistance, obésité, …) ou digestifs (syndrome du côlon irritable, maladie cœliaque, …). Les bactéries du genre Akkermansia , telles que l’espèce A kkermansia muciniphila représentent généralement 3-5% du microbiote humain (Belzer & de Vos, 2012 10.1038/ismej.2012.6; Derrien et al., 2004 doi: 10.1099/ijs.0.02873-0 ) . Elles agissent notamment sur l’inflammation, en diminuant la perméabilité intestinale, ce qui a pour conséquence de diminuer le phénomène d’endotoxémie, à l’origine de la production d’espèces réactives de l’oxygène et de cytokines pro-inflammatoires ( Hills RD Jr, Pontefract BA, Mishcon HR, Black CA, Sutton SC, Theberge CR. Gut Microbiome: Profound Implications for Diet and Disease. Nutrients. 2019 Jul 16;11(7):1613 ) doi: 10.3390/nu11071613). Récemment, il a été montré qu’un apport journalier de bactéries Akkermansia muciniphila chez des souris âgées améliorait significativement plusieurs réponses comportementales telles que la coordination, l’équilibre, les capacités d’exploration, les comportements de type anxieux ainsi que les fonctions immunitaires et des paramètres de stress oxydatif ( Cerro, E.DD., Lambea, M., Félix, J. et al. Daily ingestion of Akkermansia mucciniphila for one month promotes healthy aging and increases lifespan in old female mice. Biogerontology (2021) , doi: 10.1007/s10522-021-09943-w ) . D’autre part, des travaux menés sur différents modèles animaux suggèrent qu’une augmentation de la population d’ Akkermansia au sein du microbiote intestinal permettrait de prévenir l’apparition de déficits cognitifs ( Yang Y, Zhong Z, Wang B, Xia X, Yao W, Huang L, Wang Y, Ding W. Early-life high-fat diet-induced obesity programs hippocampal development and cognitive functions via regulation of gut commensal Akkermansia muciniphila. Neuropsychopharmacology. 2019 Nov;44(12):2054-2064 , doi : 10.1038/s41386-019-0437-1 ). Enfin, des données précliniques semblent indiquer que la présence de l’espèce Akkermansia muciniphila au sein du microbiote intestinal joue un rôle important dans l’axe intestin-cerveau (« gut-brain axis ») en intervenant notamment dans la voie de signalisation et le métabolisme de la sérotonine et par conséquent, sur les troubles liés à la ménopause et sur le syndrome prémenstruel (Yaghoubfar R, Behrouzi A, Ashrafian F, et al. Modulation of serotonin signaling/metabolism by Akkermansia muciniphila and its extracellular vesicles through the gut-brain axis in mice. Sci Rep. 2020;10(1):22119. Published 2020 Dec 17. doi:10.1038/s41598-020-79171-8). Aussi, la présence de l’espèce Akkermansia muciniphila au sein du microbiote intestinal chez l’Homme ou l’animal est un signe de bonne santé. Il existe donc un besoin important pour un produit capable d’augmenter la population d’Akkermansia au sein du microbiote intestinal, en particulier pour augmenter la quantité de bactéries de l’espèce Akkermansia muciniphila , préférentiellement pour des sujets présentant un microbiote intestinal appauvri en bactérie du genre Akkermansia . Lors de leurs travaux, les inventeurs ont, de façon surprenante, mis en évidence que l’apport d’une préparation à base de safran, en particulier à base de cro c us sativus permet d’augmenter la quantité de bactéries du genre Akkermansia dans le microbiote intestinal et ainsi agir comme prébiotique. Les bienfaits du safran, en particulier de Crocus sativus , pour la santé sont bien décrit. A titre d’exemple, on peut citer son intérêt dans le traitement de la dépression, mais également sur des populations saines présentant des troubles de l’humeur (Jackson, 2021 ; doi:10.3389/fnut.2020.606124), ou encore dans la gestion du stress et de l’anxiété. Il a également été mis en évidence que le stress chronique peut provoquer des effets délétères sur la santé des décennies plus tard, par exemple un risque accru de démence (Wheelan, 2018 ; doi:10.1093/brain/awx341). D’autres études cliniques ont également montré qu’une supplémentation en safran chez des sujets sains ou chez des patients atteints de déclin cognitif ou de la maladie d’Alzheimer permettait d’améliorer ou de maintenir les performances cognitives par rapport à un placebo, ou avec une efficacité équivalente à celle de médicaments de référence (Avgerinos, 2020, doi:10.1007/s10072-020-04427-0). Des études cliniques suggèrent également qu’une supplémentation en safran permettrait de réduire les troubles d’origine inflammatoire, tant au niveau digestif (Tadyon Najafabadi, Borna et al. “ Therapeutic effects of saffron (Crocus sativus) versus fluoxetine on Irritable Bowel Syndrome: A double-blind randomized clinical trial .” Advances in integrative medicine 6 (2019): 167-173.), qu’au niveau articulaire (Hamidi Z, Aryaeian N, Abolghasemi J, Shirani F, Hadidi M, Fallah S, Moradi N. The effect of saffron supplement on clinical outcomes and metabolic profiles in patients with active rheumatoid arthritis: A randomized, double-blind, placebo-controlled clinical trial. Phytother Res. 2020 Jul;34(7):1650-1658. doi: 10.1002/ptr.6633. Epub 2020 Feb 11. PMID: 32048365.) Etant donné ses bienfaits pour la santé, de nombreuses préparations à base de safran sont connues de l’art antérieur, y compris des préparations à base d’extrait de Crocus sativus dont la teneur en safranal est élevée et mesurée par HPLC. A titre d’exemple, un extrait titré à 0,03% de safranal est commercialisé par la société Pharmactive (tel que décrit dans WO 2017/182688), mais encore par la société Activ’Inside, titré à au moins 0,2% de safranal (tel que décrit dans FR 3054443). Bien que de nombreuses études ont mis en évidence les bienfaits du safran sur la santé, aucune ne décrit l’utilisation de safran ou d’extrait de crocus sativus comme prébiotique, c’est-à-dire capable de promouvoir de façon sélective la croissance de certaines bactéries ou l'activité du microbiote. Certes, il a été montré que certains ingrédients pouvaient moduler la population d’ Akkermansia muciniphila au sein du microbiote intestinal, toutefois avec des résultats variables selon les ingrédients mais aussi selon les populations. A titre d’exemple, une supplémentation en resvératrol s’est révélée efficace chez des Caucasiens Américains, mais pas dans d’autres groupes ethniques. Un extrait de grenade quant à lui s’est révélé avoir une efficacité très variable (avec un facteur de presque 50) chez des sujets sains, selon qu’ils étaient producteurs ou non d’urolithine A. Enfin, une supplémentation en polyphénols de kiwi s’est révélée totalement inefficace (Verhoog S, Taneri PE, Roa Díaz ZM, Marques-Vidal P, Troup JP, Bally L, Franco OH, Glisic M, Muka T. Dietary Factors and Modulation of Bacteria Strains of Akkermansia muciniphila and Faecalibacterium prausnitzii: A Systematic Review . Nutrients. 2019 Jul 11;11(7):1565 ; doi: 10.3390/nu11071565). Ainsi, à ce jour il est d’une part, impossible de prédire les éventuels effets qu’aura un ingrédient sur la population d’ Akkermansia muciniphila au sein du microbiote et d’autre part, aucun effet prébiotique du safran n’a été rapporté. Il existe donc un besoin pour de nouvelles compositions prébiotiques permettant surmonter ses inconvénients et capable d’agir comme prébiotique, en particulier pour augmenter la population bactérienne du genre Akkermansia au sein du microbiote intestinal. Pour y répondre, les inventeurs mis en évidence que l’utilisation d’une composition comprenant au moins un extrait de Crocus sativus pouvait être utilisée comme composition prébiotique chez l’Homme ou l’animal. En effet, les inventeurs ont découvert que l’administration par voie orale d’une préparation à base de Crocus sativus à des rongeurs, dans un modèle d’inflammation, est capable d’augmenter la population bactérienne du genre Akkermansia au sein du microbiote intestinal des animaux. Aussi, l’invention concerne l’utilisation d’une composition comprenant au moins un extrait de Crocus sativus comme composition prébiotique. Préférentiellement, l’utilisation de la composition comprenant au moins un extrait de Crocus sativus est capable d’augmenter la population des bactéries du genre Akkermansia , et plus particulièrement de l’espèce A kkermansia muciniphila , au sein du microbiote intestinal d’un sujet, en particulier de l’Homme ou de l’animal. La composition à base de Crocus sativus est préférentiellement destinée aux sujets présentant un profil inflammatoire ou susceptible de présenter un profil inflammatoire ou un syndrome inflammatoire afin de rétablir un microbiote intestinal sain. Avantageusement, la composition est capable d’augmenter la quantité de bactéries du genre Akkermansia d’au moins 20%, par rapport à la quantité de bactéries initialement présentes dans le microbiote intestinal du sujet. Un tel apport permet d’augmenter significativement la quantité de bactérie de genre Akkermansia au sein du microbiote intestinal et ainsi de rétablir un microbiote intestinal sain. Selon un autre objet, la composition est capable d’augmenter la quantité de bactéries du genre Akkermansia d’au moins une unité logarithmique (1 Log) au sein du microbiote intestinal, en particulier par rapport à la quantité de bactéries initialement présentes dans le microbiote intestinal du sujet. Dans le contexte de l’invention, l’extrait de safran en particulier de crocus sativus peut être obtenu à partir d’un broyat de la plante entière, d’une partie de la plante broyé ou non, par exemple les stigmates, les pétales, le bulbe etc. Enfin, l’extrait peut également être obtenu à partir d’un procédé d’extraction basé par exemple sur une macération de la matière végétale, ou sur une extraction aqueuse, hydroalcoolique, alcoolique etc. accompagné d’un traitement thermique ou non. Selon un objet préféré, l’extrait de Crocus sativus constituant la composition et destinée à être utilisée comme prébiotique, comprend au moins 0,01% de safranal, préférentiellement au moins 0,03% en safranal, plus préférentiellement au moins 0,1% en safranal, encore plus préférentiellement au moins 0,2% en safranal, en poids par rapport au poids total de la matière sèche de l’extrait, mesuré par HPLC. Selon un autre objet préféré, l’extrait de Crocus sativus comprend un mélange de molécules comprenant : au moins 0,01% de safranal, préférentiellement au moins 0,03% de safranal, plus préférentiellement 0,2% de safranal, en poids par rapport au poids total de la matière sèche de l’extrait, mesuré par HPLC, et/ou au moins 1% de crocines en poids par rapport au poids total de la matière sèche de l’extrait, mesuré par méthode HPLC, et/ou au moins 500 ppm de flavonoïdes dérivés du kaempferol en poids de matière sèche de l’extrait, mesuré par méthode HPLC, et/ou au moins 0,5% de picrocrocine en poids de matière sèche de l’extrait, mesuré par méthode HPLC, et/ou un agent de charge choisi parmi la maltodextrine, le sucre, la silice et la gomme arabique, destiné à encapsuler ledit extrait de Crocus sativus . Un tel extrait de crocus sativus peut être obtenu par tout procédé d’extraction connu de l’art antérieur. Aussi, l’extrait de crocus sativus est susceptible d’être obtenu par le procédé comprenant les étapes suivantes : Broyage du Crocus sativus contenant du safranal, Extraction aqueuse ou hydroalcoolique ou avec un solvant organique, Séchage de l’extrait sur un agent de charge ou mélange avec un agent de charge. Préférentiellement, l’étape c) de séchage ou de mélange est remplacé par une étape d’imprégnation et d’encapsulation de l’extrait dans l’agent de charge dans la solution d’extraction, suivi d’une étape de traitement thermique, préférentiellement pendant au moins 2 heures à une température comprise entre 30°C et 95°C. Selon un autre aspect de l’invention, la composition peut comprendre au moins un extrait de Crocus sativus (i) et au moins une bactérie appartenant au genre Akkermansia (ii), en particulier ladite composition est une composition prébiotique. Préférentiellement, la bactérie appartient à l’espèce Akkermansia muciniphila . Avantageusement, l’effet du safran sur la population d’Akkermansia muciniphila au sein du microbiote est encore amélioré par l’ajout d’au moins une telle bactérie de l’espèce Akkermansia muciniphila et permet par exemple de restaurer un microbiote intestinal sain plus rapidement et avec une meilleure efficacité, notamment lorsque le microbiote intestinal du sujet est particulièrement appauvri en bactéries du genre Akkermansia . Selon un objet de l’invention, la bactérie présente dans la composition selon l’invention est préférentiellement sous forme pasteurisée. A titre d’exemple, une forme pasteurisée d’ Akkermansia muciniphila est décrite dans le brevet EP3347030. Afin d’optimiser encore davantage l’effet prébiotique, la composition selon l’invention peut préférentiellement comprendre au moins un ingrédient prébiotique supplémentaire et/ou au moins une bactérie et/ou levure probiotique et/ou au moins une vitamine et/ou au moins un minéral. Enfin, la composition est destinée à diverses applications. Aussi, la composition peut être administrée par voie orale comme produit alimentaire, complément alimentaire, boisson, produit cosmétique ou médicament. La composition peut également se présenter sous différentes formes galéniques, telles que sous la forme de comprimé, gélule, stick, patch, crème ou gel. Préférentiellement, la composition est encapsulée dans un support alimentaire. Une fois encapsulée, la composition peut se présenter sous forme de poudre, de gélule, de comprimé, de capsule, d’une solution, d’une suspension, d’une émulsion ou d’une gomme à mâcher. Selon un dernier aspect, la composition selon l’invention comprenant au moins un extrait de Crocus sativus (i) et au moins une bactérie appartenant au genre Akkermansia (ii) est destinée à être utilisée comme composition prébiotique. Aussi, selon un objet préféré, l’invention vise également l’utilisation de la composition comprenant au moins un extrait de crocus sativus et au moins une bactérie du genre Akkermansia , selon l’un des quelconques modes de réalisation décrits précédemment, comme prébiotique. Préférentiellement, son utilisation pour augmenter la population des bactéries du genre Akkermansia , et plus particulièrement pour augmenter la population des bactéries de l’espèce A kkermansia muciniphila , au sein du microbiote intestinal d’un sujet, en particulier de l’Homme ou de l’animal. D’autres caractéristiques et avantages ressortiront de la description détaillée de l’invention, des exemples et des figures qui vont suivre. Brève description des Figures représente la diversité bactérienne bêta basée sur l'indice de dissimilaritée de Bray-Curtis, sur 3 groupes de 6 souris C57/Bl6 (groupe SHAM, LPS et LPS-SAF). est un tableau représentant les résultats de l’analyse du microbiote sur les 3 groupes de 6 souris C57/Bl6 (groupe SHAM, LPS et LPS-SAF) par la méthode LEfSe. Les paramètres utilisés pour l’analyse sont un score logarithmique ADL >2 et un seuil pour la p value ajustée de 0,2. représente l’abondance des bactéries appartenant au genre Akkermansia sur les 3 groupes de 6 souris C57/Bl6 (groupe SHAM, LPS et LPS-SAF). La valeur de chaque individu ainsi que la médiane et l’écart interquartiles sont représentés. **p Utilisation d’une composition comprenant au moins un extrait de Crocus sativus comme composition prébiotique. Utilisation selon la revendication précédente, comme composition prébiotique capable d’augmenter la quantité de bactéries du genre Akkermansia dans le microbiote intestinal d’un sujet. Utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que le sujet présente ou est susceptible de présenter un profil inflammatoire. Utilisation selon l’une des revendications 2 ou 3, caractérisée en ce que la quantité de bactéries du genre Akkermansia est augmentée d’au moins 20%, par rapport à la quantité de bactéries initialement présentes dans le microbiote intestinal du sujet. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la quantité de bactéries du genre Akkermansia est augmentée d’au moins une unité logarithmique au sein du microbiote intestinal du sujet. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait de Crocus sativus est obtenu à partir des stigmates et/ou des pétales de Crocus sativus . Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait de Crocus sativus comprend au moins 0,01% en safranal, en poids par rapport au poids total de la matière sèche de l’extrait, mesuré par HPLC. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait de Crocus sativus comprend : au moins 0,01% en safranal, en poids par rapport au poids total de la matière sèche de l’extrait, mesuré par HPLC, et/ou au moins 1% de crocines en poids par rapport au poids total de la matière sèche de l’extrait, mesuré par méthode HPLC, et/ou au moins 500 ppm de flavonoïdes dérivés du kaempferol en poids de matière sèche de l’extrait, mesuré par méthode HPLC, et/ou au moins 0,5% de picrocrocine en poids de matière sèche de l’extrait, mesuré par méthode HPLC, et/ou un agent de charge choisi parmi la maltodextrine, le sucre, la silice et la gomme arabique, destiné à encapsuler ledit extrait de Crocus sativus . Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que l’extrait de Crocus sativus est susceptible d’être obtenu par un procédé comprenant les étapes suivantes : broyage du Crocus sativus contenant du safranal, extraction aqueuse ou hydroalcoolique ou avec un solvant organique, séchage de l’extrait sur un agent de charge ou mélange avec un agent de charge, ou imprégnation et encapsulation dans l’agent de charge dans la solution d’extraction, et séchage, et/ou traitement thermique. Composition comprenant au moins un extrait de Crocus sativus (i) et au moins une bactérie appartenant au genre Akkermansia (ii). Composition selon la revendication précédente, caractérisée en ce que la bactérie appartient à l’espèce Akkermansia muciniphila . Composition selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la bactérie est sous forme pasteurisée. Composition selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce qu’elle comprend également au moins un ingrédient prébiotique supplémentaire et/ou au moins une bactérie et/ou levure probiotique. Composition selon la revendication précédente, caractérisée en ce que : l’ingrédient prébiotique est choisie parmi l’inuline, les FOS, les GOS, XOS ou MOS, et/ou la bactérie et/ou levure probiotique est choisie parmi les bactéries et/ou levure du genre Lactobacillus, Bifidobacterium, Bacillus, Streptococcus, Saccharomyces, Enterococcus, Pediococcus et Escherichia . Composition selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition se présente sous une forme choisie parmi un complément alimentaire, une denrée alimentaire, une boisson, un produit cosmétique. Composition selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition se présente sous forme de comprimé, gélule, stick, patch, crème, gel, poudre, capsule, solution, suspension, émulsion ou gomme à mâcher. Utilisation selon l’une des revendications 1 à 9 caractérisée en ce que la composition est selon l’une des revendications 10 à 16.