Brevet FR3134583A1 — publié le 20231020

Titre : Procédé continu de croissance d’un microorganisme La présente invention se réfère à un procédé comprenant une étape (a) de croissance en continu d’un microorganisme apte à transformer un substrat en composé de formule (I), de préférence en vanilline. Pas de figure pour l’abrégé Procédé continu de croissance d’un microorganisme Domaine de l’invention La présente invention se réfère à un procédé comprenant une étape (a) de croissance en continu d’un microorganisme apte à transformer un substrat en composé de formule (I), de préférence en vanilline. Art antérieur La vanilline peut être obtenue par différentes méthodes connues de l’homme de l’art, et notamment par les deux voies suivantes : Une voie dite naturelle basée sur un procédé biotechnologique comprenant notamment la culture d’un microorganisme apte à permettre la biotransformation d’un substrat de fermentation en vanilline. Il est notamment connu de la demande EP0885968 un tel procédé dans lequel le substrat de fermentation est l’acide férulique. Le brevet US 5017388 décrit un procédé dans lequel le substrat de fermentation est l’eugénol et/ou l’isoeugénol. Ces procédés aboutissent à la préparation d’une vanilline dite vanilline naturelle. Une voie dite synthétique comprenant des réactions chimiques classiques à partir du gaïacol ne faisant pas intervenir de microorganisme. Ce procédé aboutit à la préparation d’une vanilline dite vanilline synthétique. Enfin la vanilline peut également être préparée selon une voie qualifiée de « bio-based » dans laquelle la vanilline est issue de lignine, on peut citer en particulier les documents US 2745796, DE1132113 et l’article intitulé « Preparation of lignin from wood dust as vanillin source and comparison of different extraction method » by Azadbakht et al in International Journal of Biology and Biotechnology, 2004, vol 1, No 4, pp 535-537, ou préparée à partir de matériaux d’origine naturelle, on peut citer en particulier le document WO 2019/020773. Comme mentionné ci-dessus, les procédés de la voie dite naturelle comprennent la culture d’un microorganisme apte à transformer un substrat en vanilline. Cette étape est une phase de croissance du microorganisme pour obtenir une biomasse qui sera utilisée comme biocatalyseur de la phase de bioconversion d’un substrat en vanilline. Industriellement, cette phase de croissance est chronophage et délicate. En effet, il est en général nécessaire d’inoculer une petite quantité de microorganisme contenu dans un cryotube, et de le transférer dans un premier fermenteur de volume un peu plus grand pour faire croître le microorganisme. Cette étape de croissance de la biomasse et de transfert dans un réacteur plus grand peut être répétée autant de fois que nécessaire. La durée totale de cette étape de croissance peut être importante, de l’ordre par exemple de 72h. Par ailleurs, cette étape de croissance doit être réalisée en milieu stérile. .Une étape de stérilisation initiale du ou des fermenteurs ainsi que de toutes les arrivées et sorties du ou des fermenteurs est requise et doit être effectuée dans des conditions spécifiques. Il en résulte que d’une part les transferts d’un fermenteur à un autre présentent des risques de contamination et d’autre part la mise en œuvre de ce type de procédé est complexe La présente invention vise un procédé efficace et industriel de croissance d’un microorganisme dans lequel le risque de contamination est réduit et dont la productivité est améliorée. Brève description Un premier objet de la présente invention porte sur un procédé comprenant une étape (a) de croissance en continu d’un microorganisme apte à transformer un substrat en composé de formule (I), de préférence en vanilline. La présente invention vise également un procédé de production d’un composé de formule (I), de préférence de vanilline caractérisé en ce qu’il comprend une étape (a) de croissance en continu d’un microorganisme apte à transformer un substrat en composé de formule (I), de préférence en vanilline. Description des figures : Procédé continu de croissance selon l’invention : Procédé de production d’un composé de formule (I) selon l’invention : Procédé de production d’un composé de formule (I) selon l’invention : Procédé de production d’un composé de formule (I) selon l’invention Procédé continu comprenant une étape (a) de croissance d’un microorganisme apte à transformer un substrat en composé de formule (I), de préférence en vanilline dans lequel le composé de formule (I) est dans lequel n est compris entre 0 et 5, de préférence compris entre 1 et 2, R, identique ou différent, est choisi dans le groupe constitué de OH, OR 1 , formyle -CHO, -CO 2 H, les chaines alkyles linéaires ou branchées, optionnellement substituées, comprenant entre 1 et 6 atomes de carbone, alcényles, linéaires ou branchées, optionnellement substituées, comprenant entre 1 et 6 atomes de carbone. Procédé continu selon la revendication 1 caractérisé en ce que le procédé de croissance est réalisé dans un milieu de croissance. Procédé continu selon la revendication 2 caractérisé en ce que le milieu de croissance est ajouté en continu. Procédé continu selon l’une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisé en ce que l’étape (a) est précédée d’une étape (a0) de mise en culture du microorganisme. Procédé continu selon l’une quelconque des revendications 1 à 4 caractérisé en ce que le substrat est choisi dans le groupe constitué de glucose, acide férulique, eugénol, isoeugénol, acide coumarique, acide cafféique, L-tyrosine, l’acide vanillique, 4-vinyl guaiacol, de préférence choisi parmi glucose, acide férulique et eugénol. Procédé de production d’un composé de formule (I), de préférence de vanilline caractérisé en ce qu’il comprend une étape (a) de croissance en continu d’un microorganisme apte à transformer un substrat en composé de formule (I), de préférence en vanilline selon l’une quelconque des revendications 1 à 5 et comprenant une étape (b) de bioconversion. Procédé de production d’un composé de formule (I), de préférence de vanilline selon la revendication 6 caractérisé en ce que les étapes (a) et (b) sont successives. Procédé de production d’un composé de formule (I), de préférence de vanilline selon l’une quelconque des revendications 6 à 7 caractérisé en ce que les étapes (a) et (b) sont simultanées.