Brevet FR3134312A1 — publié le 20231013

Extrait de Parois Cellulaires de Levure Saccharomyces Cerevisiae Riche en β -Glucanes dans la Prévention des Effets de la Mycotoxine Déoxynivalénol (DON) La présente invention concerne des extraits de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riches en β-glucanes, et leur utilisation dans la prévention de mycotoxicoses provoquées par la mycotoxine déoxynivalénol, en particulier dans la prévention des lésions hépatiques et intestinales, et des effets immunotoxiques causés par cette mycotoxine. (pas de figure) Extrait de Parois Cellulaires de Levure Saccharomyces Cerevisiae Riche en β-Glucanes dans la Prévention des Effets Toxiques de la Mycotoxine Déoxynivalénol (DON) La présente invention concerne le domaine de la santé, en particulier la santé animale. L’invention porte plus particulièrement sur des extraits de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riches en β-glucanes, et leur utilisation dans la prévention des effets toxiques, en particulier des effets immunotoxiques, de la mycotoxine déoxynivalénol (DON) et dans la prévention des lésions hépatiques et intestinales induites par la mycotoxine DON chez les animaux. Les mycotoxines sont des métabolites secondaires fongiques toxiques produits par diverses moisissures appartenant principalement aux espèces Aspergillus , Penicillium ou Fusarium . Ce sont des contaminants naturels des céréales mais aussi des fruits, des légumes, des noix et graines oléagineuses, et des épices. La contamination affecte de façon considérable la production et la commercialisation des céréales dans le monde entier et altère également la qualité des produits issus des grains contaminés. De plus, la présence de mycotoxines dans l’alimentation peut avoir des effets notifs sur la santé de l’homme et de l’animal, pouvant aller de troubles gastro-intestinaux et rénaux à un déficit immunitaire ou un cancer. Le déoxynivalénol (DON) est une mycotoxine de la famille des trichothécènes (classe B) produite par différents contaminants fongiques du genre Fusarium , comme les F. culmorum , F. graminearum et F. pseudograminearum . C’est une mycotoxine qui se développe sur la plante au champ et que l’on trouve en particulier dans les cultures céréalières telles que le maïs, le blé, l’orge, et l’avoine, mais également sur le riz, le seigle et le sorgho. Les trichothécènes étant thermostables et résistants à la stérilisation, on peut les retrouver dans les produits dérivés comme les aliments pour animaux mais aussi dans la farine, le pain, les pâtes…, et même la bière. Chez les animaux, l’ingestion d’aliments contaminés par le DON est associée à des altérations du système immunitaire et de la muqueuse intestinale, un refus d’alimentation et des vomissements ou des diarrhées pouvant résulter en un ralentissement de la croissance. Chez les humains, l’intoxication alimentaire au DON provoque des douleurs abdominales, des étourdissements, des maux de tête, une irritation de la gorge, des nausées, des vomissements, des diarrhées et des pertes de sang dans les selles. Il a récemment été démontré que le DON augmente le risque de maladies inflammatoires chroniques de l’intestin (MICI) et en exacerbe les symptômes (Payros et al. , Archives of Toxicology (2020), DOI : 10.1007/s00204-020-02817-z). Pour prévenir le risque de contamination par les mycotoxines, dont le déoxynivalénol, les autorités en charge de la sécurité alimentaire (FDA, EFSA, CSAH, JECFA, etc…) ont édicté des règlementations sur les concentrations maximales tolérables dans les denrées destinées à l’alimentation humaine et animale. Le contrôle et l’atténuation après récolte de la contamination de céréales par la mycotoxine DON étant à ce jour infaisables, le meilleur moyen de lutte contre le DON est la prévention au champ. En effet, le DON est produit par différentes espèces de Fusarium qui se développent dans les céréales à des conditions de température et d’hygrométrie bien précises. Stopper la croissance des champignons par l’apport de fongicides adéquats lors des conditions favorables au développement des champignons Fusarium permet de prévenir la sécrétion de DON et d’autres mycotoxines. Une approche pour réduire l’exposition des animaux aux mycotoxines consiste à réduire leur biodisponibilité par l’inclusion d’agents détoxifiants dans les aliments leur étant destinés. Mais dans le cas de la mycotoxine DON, il existe peu de solutions de détoxification, et celles existantes s’avèrent peu efficaces. Des solutions de biotransformation ont été décrites telles que des microorganismes ou des enzymes dégradant le DON en métabolite(s) moins toxique(s) mais un seul microorganisme ( C oriobacteriaceae BBSH797) est actuellement commercialisé. Concernant la détoxification par adsorption, il y a très peu de produits capables d’adsorber le DON. Il existe donc toujours dans l’art un besoin de nouvelles stratégies pour prévenir les effets toxiques provoqués par l’ingestion de la mycotoxine DON. Les présents Inventeurs ont trouvé, de manière surprenante, que les extraits de parois de levure Saccharomyces cerevisiae riches en β-glucanes améliorent de manière significative la résistance transépithéliale de la barrière épithéliale de cellules intestinales porcines exposées à la mycotoxine DON ; provoquent une diminution de l’expression du gène d’IL8 (une cytokine pro-inflammatoire) induite par le DON dans des cellules intestinales porcines in vitro , dans des explants de porc ex vivo et dans du tissu intestinal de poulet in vivo ; préviennent ces cellules d’une déstructuration observée chez les cellules non-traitées ; préviennent la réduction de la taille des villosités intestinales et l’altération de la morphologie des entérocytes dans les explants intestinaux de porc ; et préviennent efficacement les lésions hépatiques ainsi que la réduction de la taille des villosités induites par la mycotoxine DON chez le poulet. Par conséquent, la présente invention a pour objet un extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes pour une utilisation dans la prévention d’une mycotoxicose provoquée par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet, caractérisé en ce que l’extrait comprend des β-glucanes et des mannanes, où les β-glucanes sont présents sous forme d’un mélange de β-1,3-glucanes et β-1,6-glucanes en une quantité totale supérieure ou égale à 50% en poids ; et les mannanes sont présents en une quantité totale inférieure à 5% en poids. La présente invention a également pour objet un extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes pour une utilisation dans la prévention des effets immunotoxiques de la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet, caractérisé en ce que l’extrait comprend des β-glucanes et des mannanes, où les β-glucanes sont présents sous forme d’un mélange de β-1,3-glucanes et β-1,6-glucanes en une quantité totale supérieure ou égale à 50% en poids ; et les mannanes sont présents en une quantité totale inférieure à 5% en poids. La présente invention a aussi pour objet un extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes pour une utilisation dans la prévention de lésions hépatiques et/ou intestinales induites par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet, caractérisé en ce que l’extrait comprend des β-glucanes et des mannanes, où les β-glucanes sont présents sous forme d’un mélange de β-1,3-glucanes et β-1,6-glucanes en une quantité totale supérieure ou égale à 50% en poids ; et les mannanes sont présents en une quantité totale inférieure à 5% en poids. Dans certains modes de réalisation, la quantité totale en β-glucanes présents dans un extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes est comprise entre 50% et 90% du poids de l’extrait, par exemple entre 50% et 80%, ou entre 50% et 70%, ou encore entre 50 et 60%, du poids de l’extrait. Dans certains modes de réalisation, la quantité totale de mannanes présents dans un extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β -glucanes est comprise entre 1% et 5% du poids de l’extrait. Dans certains modes de réalisation, la quantité de mannanes dans l’extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes est telle que le rapport β-glucanes/mannanes est compris entre 12 et 40 (poids/poids). En particulier, le rapport β-glucanes/mannanes peut être compris entre 15 et 30 (poids/poids), ou encore plus particulièrement entre 18 et 22 (poids/poids). Dans certains modes de réalisation, l’extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes est caractérisé en ce qu’il présente une teneur en matière sèche supérieure ou égale à 94% en poids. En particulier, la teneur en matière sèche peut être supérieure ou égale à 96% en poids. Dans certains modes de réalisation, l’extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes comprend en outre une teneur en protéines inférieure ou égale à 10% en poids, et une teneur en glycogène inférieure ou égale à 10% en poids. Dans certains modes de réalisation, les β-glucanes et les mannanes sont les seuls ingrédients actifs de l’extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes. Dans certains modes de réalisation, l’extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes est le Safglucan ® qui comprend des β-glucanes et des mannanes, où les β-glucanes sont présents sous forme d’un mélange de β-1,3-glucanes et β-1,6-glucanes en une quantité totale comprise entre 52 et 60% en poids ; et les mannanes sont présents en une quantité totale comprise entre 1 et 5% en poids, et où le Safglucan® comprend également un teneur en protéines inférieure ou égale à 10% en poids, et une teneur en glycogène inférieure ou égale à 10% en poids. La présente invention a également pour objet une composition comprenant un extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes et au moins un agent bioactif pour une utilisation dans la prévention d’une mycotoxicose provoquée par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet ou dans la prévention des effets immunotoxiques de la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet ou dans la prévention de lésions hépatiques et/ou intestinales induites par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet, caractérisée en ce que l’extrait est tel que défini plus haut. La présente invention a aussi pour objet une composition pharmaceutique comprenant un extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riches en β-glucanes et au moins un excipient physiologiquement acceptable pour utilisation dans la prévention d’une mycotoxicose provoquée par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet ou dans la prévention des effets immunotoxiques de la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet ou dans la prévention de lésions hépatiques et/ou intestinales induites par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet, caractérisée en ce que l’extrait est tel que défini plus haut. Dans certains modes de réalisation particuliers, le sujet auquel s’applique l’invention est un animal, en particulier un animal choisi parmi les animaux d’élevage et les animaux de compagnie. La présente invention a de plus pour objet un aliment pour animaux comprenant un extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucane pour utilisation dans la prévention d’une mycotoxicose provoquée par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un animal ou dans la prévention des effets immunotoxiques de la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un animal ou dans la prévention de lésions hépatiques et/ou intestinales induites par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un animal, caractérisé en ce que l’extrait est tel que défini plus haut ou en ce que l’extrait fait partie d’une composition telle que définie plus haut. Dans certains modes de réalisation, l’agent bioactif est sélectionné dans le groupe constitué par les liants de mycotoxines, les biotransformants des mycotoxines, les vitamines, les minéraux, les oligo-éléments, les hépatoprotecteurs, les immunoprotecteurs, et leurs combinaisons. Une description plus détaillée de certains modes de réalisation préférés de l’invention est donnée ci-dessous. Fig. 1 Suivi de la résistance transépithéliale (TEER) en fonction du temps (T) en heures dans des cellules intestinales porcines (lignée IPEC-J2) prétraitées de façon continue avec le Safglucan ® , avec l’ajout de la mycotoxine DON. Les variations de TEER sont comparées à celles de cellules traitées par la mycotoxine DON seule, le Safglucan ® en présence de la mycotoxine DON, ou deux conditions contrôles (les cellules épithéliales seules ou les cellules avec du Safglucan ® seul). Fig. 2 Niveau d’expression de l’ARNm de l’ il 8, déterminé par PCR quantitative, par des cellules intestinales porcines (lignée IPEC-J2) prétraitées ou non avec le Safglucan ® de façon continue, en absence ou en présence de la mycotoxine DON. Fig. 3 Microscopie de cellules intestinales porcines (lignée IPEC-J2), non-traitées (image de gauche), traitées avec la mycotoxine DON seule (image du milieu), et traitées avec du Safglucan ® et la mycotoxine DON (image de droite). Fig. 4 Niveau d’expression de l’ARNm de l’ il 8 par des cellules intestinales porcines (lignée IPEC-J2) prétraitées par différents « produits β-glucanes », un β-glucane d’algue (ALG), le Safmannan ® et le Safglucan ® en absence et en présence de la mycotoxine DON (P value * Fig. 5 Analyses histologiques d’explants de jéjunum de porcs (n=7). (A) Images prises par microscope de sections de 5 μm réalisées à partir des blocs de paraffine contenant des explants de jéjunum non-traités, ou traités par la mycotoxine DON seule, par du Safglucan ® seul, ou par le Safglucan ® et la mycotoxine DON. (B) Graphes présentant le score histologique, la morphologie des entérocytes, et la hauteur des villosités intestinales en fonction des traitements des explants de jéjunum de porcs. Fig. 6 Niveau d’expression de gènes liés à l’inflammation déterminé à partir d’ARNm isolés d’explants de jéjunum de porcs non-traités, ou traités par la mycotoxine DON seule, par du Safglucan ® seul, ou par le Safglucan ® et la mycotoxine DON (n=5 – 10). (P value * Fig. 7 Images de foie de poulet traité avec la mycotoxine DON (à droite) et non-traités (à gauche). Fig. 8 Graphes montrant le pourcentage de lésions hépatiques observées chez le poulet aux jours 13 et 28 ( B ) en fonction de la présence ou non de la mycotoxine DON et/ou de Safglucan ® dans le régime alimentaire. Fig. 9 Graphe présentant la hauteur des villosités intestinales dans du jéjunum de poulets non-traités, ou traités par la mycotoxine DON seule, ou par le Safglucan ® et la mycotoxine DON après 13 jours post traitement. Fig. 10 Niveaux d’expression des gènes il8 ( A ) et ifn γ ( B ) liés à l’inflammation déterminée à partir d’ARNm de jéjunum de poulets non-traités, ou traités par la mycotoxine DON seule, ou par le Safglucan ® et la mycotoxine DON. Extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes pour une utilisation dans la prévention d’une mycotoxicose provoquée par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet, caractérisé en ce que l’extrait comprend des β-glucanes et des mannanes, où les β-glucanes sont présents sous forme d’un mélange de β-1,3-glucanes et β-1,6-glucanes en une quantité totale supérieure ou égale à 50% en poids ; et les mannanes sont présents en une quantité totale inférieure à 5% en poids. Extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes pour une utilisation dans la prévention des effets immunotoxiques de la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet, caractérisé en ce que l’extrait comprend des β-glucanes et des mannanes, où les β-glucanes sont présents sous forme d’un mélange de β-1,3-glucanes et β-1,6-glucanes en une quantité totale supérieure ou égale à 50% en poids ; et les mannanes sont présents en une quantité totale inférieure à 5% en poids. Extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes pour une utilisation dans la prévention de lésions hépatiques et/ou intestinales induites par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet, caractérisé en ce que l’extrait comprend des β-glucanes et des mannanes, où les β-glucanes sont présents sous forme d’un mélange de β-1,3-glucanes et β-1,6-glucanes en une quantité totale supérieure ou égale à 50% en poids ; et les mannanes sont présents en une quantité totale inférieure à 5% en poids. Extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes pour une utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que les mannanes sont présents en une quantité telle que le rapport β-glucanes/mannanes est compris entre 12 et 40 (poids/poids). Extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes pour une utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que l’extrait présente une teneur en matière sèche supérieure ou égale à 94% en poids. Extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes pour une utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que l’extrait comprend en outre une teneur inférieure ou égale à 10% en poids, et une teneur en glycogène inférieure ou égale à 10% en poids. Extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes pour une utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que les β-glucanes et les mannanes sont les seuls ingrédients actifs de l’extrait. Extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes pour une utilisation selon la revendication 7, caractérisé en ce que l’extrait est le Safglucan ® qui comprend des β-glucanes et des mannanes, où les β-glucanes sont présents sous forme d’un mélange de β-1,3-glucanes et β-1,6-glucanes en une quantité totale comprise entre 52 et 60% en poids ; et les mannanes sont présents en une quantité totale comprise entre 1 et 5% en poids, et où le Safglucan® comprend en outre une teneur en protéines inférieure ou égale à 10% en poids, et une teneur en glycogène inférieure ou égale à 10% en poids. Une composition comprenant un extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes et au moins un agent bioactif pour une utilisation dans la prévention d’une mycotoxicose provoquée par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet ou dans la prévention des effets immunotoxiques de la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet ou dans la prévention de lésions hépatiques et/ou intestinales induites par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet, caractérisée en ce que l’extrait est tel que défini dans l’une quelconque des revendications 1 à 8. Une composition pharmaceutique comprenant un extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riches en β-glucanes et au moins un excipient physiologiquement acceptable pour utilisation dans la prévention d’une mycotoxicose provoquée par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet ou dans la prévention des effets immunotoxiques de la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet ou dans la prévention de lésions hépatiques et/ou intestinales induites par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un sujet, caractérisée en ce que l’extrait est tel que défini dans l’une quelconque des revendications 1 à 8. Un extrait pour une utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 8 ou une composition pour une utilisation selon la revendication 9 ou une composition pharmaceutique pour une utilisation selon la revendication 10, caractérisé en ce que le sujet est un animal, en particulier un animal choisi parmi les animaux d’élevage et les animaux de compagnie. Un aliment pour animaux comprenant un extrait de parois cellulaires de levure Saccharomyces cerevisiae riche en β-glucanes pour utilisation dans la prévention d’une mycotoxicose provoquée par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un animal ou dans la prévention des effets immunotoxiques de la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un animal ou dans la prévention de lésions hépatiques et/ou intestinales induites par la mycotoxine déoxynivalénol (DON) chez un animal, caractérisé en ce que l’extrait est tel que défini dans l’une quelconque des revendications 1 à 8 ou en ce que l’extrait fait partie d’une composition telle que définie dans la revendication 9. Une composition pour une utilisation selon la revendication 9 ou la revendication 12, caractérisée en ce que l’agent bioactif est sélectionné dans le groupe constitué par les liants de mycotoxines, les biotransformants des mycotoxines, les vitamines, les minéraux, les oligo-éléments, les hépatoprotecteurs, les immunoprotecteurs, et leurs combinaisons.