Brevet FR3135631A1 — publié le 20231124

« Puce microfluidique pour croissance cellulaire » Puce microfluidique (1) pour la croissance de cellules comprenant un réservoir (2) apte à contenir une solution, au moins deux chambres (3) distinctes aptes à être alimentées en solution provenant du réservoir et aptes à recevoir une ou plusieurs cellules, au moins deux canaux afférents (4) distincts reliant chacun une sortie (5) du réservoir, parmi au moins deux sorties (5) distinctes du réservoir, à une chambre parmi les au moins deux chambres distinctes et au moins deux canaux efférents (6) distincts reliant chacun une chambre parmi les au moins deux chambres distinctes à une évacuation (7), ladite évacuation étant apte à permettre l’évacuation de solution depuis chacune des au moins deux chambres. Figure pour l’abrégé : Figure 1 Puce microfluidique pour croissance cellulaire La présente invention appartient au domaine des puces microfluidiques et, en particulier, au domaine des organes sur puces et cancers sur puces (OCSP). Ce type de puce OSCP permet de reconstituer des tissues et/ou des organes. Il s’agit d’un outil permettant la modélisation in vitro d’organes humains et de pathologies humaines, en particulier de cellules cancéreuses. Ces puces sont conçues pour imiter et reproduire les conditions et milieux in vivo , tels que les différents signaux cellulaires et extracellulaires, par exemple moléculaires, structurels et physiques, pour un système ou organe donné. Etat de la technique antérieure On connaît dans l’état de la technique, les modèles de culture ou croissance cellulaire classiques, en deux dimensions. Des efforts sont réalisés pour trouver des alternatives à ces modèles qui sont peu représentatifs de la complexité des tissus et organes humains. Il existe dans l’état de la technique des dispositifs OCSP. Toutefois, leur usage à grande échelle est encore restreint compte tenu du manque de dispositifs standardisés et de l’absence de solutions commerciales viables et peu couteuses. La présente invention vise à pallier, au moins en partie, les inconvénients des dispositifs de l’état de l’art. Un but de l’invention est, en outre, de proposer une puce microfluidique : - plus simple à fabriquer, et/ou - plus simple à manipuler, et/ou - avec de faibles coûts de production, et/ou - permettant de paralléliser les essais sur une même puce, et/ou - permettant de simuler un grand nombre de cellules ou tumeurs sur une même puce, et/ou - de modéliser in vitro , de manière fidèle, des organes humains et/ou des pathologies, et/ou - permettant de reproduire ou imiter : ● les conditions rencontrées dans le corps et/ou dans un organisme et/ou dans un milieu biologique, et/ou ● les conditions de circulation du fluide dans les capillaires sanguins, et/ou ● l’environnement des cellules dans le corps et/ou dans un organisme et/ou dans un milieu biologique. Présentation de l’invention A cet effet, il est proposé une puce microfluidique pour la croissance de cellules. La puce microfluidique selon l’invention comprend : - un réservoir apte à contenir une solution, - au moins deux chambres distinctes aptes à être alimentées en solution provenant du réservoir et aptes à recevoir une ou plusieurs cellules, de préférence assemblées en 2D ou 3D sphéroïde ou organoides, - au moins deux canaux afférents distincts, de préférence une série de canaux afférents distincts, reliant chacun une sortie du réservoir, parmi au moins deux sorties distinctes du réservoir, à une chambre parmi les au moins deux chambres distinctes, - au moins deux canaux efférents distincts reliant chacun une chambre parmi les au moins deux chambres distinctes à une évacuation, ladite évacuation étant apte à permettre l’évacuation de solution depuis chacune des au moins deux chambres. De préférence, la puce microfluidique selon l’invention est apte à et/ou agencée pour permettre la croissance de cellules et/ou d’organes. De préférence, dans la présente demande, il est entendu par « au moins deux », deux ou plus. De préférence, dans la présente demande, il est entendu par entrées de la chambre, sorties de la chambre, canaux afférents ou canaux efférents « distincts », des entrées, sorties ou canaux indépendants, individuels ou différents. De préférence, les au moins deux canaux afférents distincts sont situés en amont des au moins deux chambres par rapport à un sens selon lequel la solution est destinée à s’écouler ou circuler dans la puce microfluidique. De préférence, les au moins deux canaux efférents distincts sont situés en aval des au moins deux chambres par rapport à un sens selon lequel la solution est destinée à s’écouler ou circuler dans la puce microfluidique. De préférence, les au moins deux sorties du réservoir sont, de préférence chacune, disposées en des zones distinctes du réservoir. De préférence, les au moins deux canaux afférents distincts sont chacun connecté ou relié à une zone distincte du réservoir. De préférence, les au moins deux canaux efférents distincts sont chacun connecté ou relié à une zone distincte du réservoir. Selon l’invention, de préférence, un seul ou un unique réservoir permet d’alimenter plusieurs chambres avec des solutions différentes ou distinctes. De préférence encore, un seul ou un unique réservoir permet d’alimenter chacune des chambres avec des solutions différentes ou distinctes. Cela permet, entre autres, de paralléliser les essais et tests. Cela permet, entre autres, d’obtenir des modèles plus fiables. Cela permet, entre autres, de tester au moins deux concentrations de médicaments sur une même puce. Cela permet, entre autres, de tester directement la cytotoxicité de médicaments sous forme de molécules ou de matériaux tels que, par exemple, des liposomes, des nanoparticules inorganiques, des nanoparticules organiques/inorganiques, des médicaments formulés à l’intérieur d’une structure liposomale. Dans la présente demande, il peut être entendu par solutions différentes ou distinctes des solutions de composition ou de nature différentes. Une solution alimentant une des chambres peut comprendre un ou des solutés et au moins une partie dudit ou desdits solutés sont différents d’au moins une partie du ou des solutés d’au moins une autre des solutions alimentant une autre des chambres. Une solution alimentant une des chambres peut comprendre un ou des solutés et au moins une partie dudit ou desdits solutés sont en concentration différente d’au moins une partie du ou des solutés d’au moins une autre des solutions alimentant une autre des chambres. De préférence, le ou les solutés d’une solution alimentant une des chambres peuvent être identiques au ou aux solutés d’une, de plusieurs ou de chacune des solutions alimentant la ou les autres chambres. Dans la présente demande, il peut être entendu par solutions différentes ou distinctes alimentant les chambres des solutions de composition identique. De préférence encore, une solution alimentant une des chambres : - présente une composition identique à au moins une autre des solutions alimentant une autre des chambres, - comprend un ou des solutés en concentrations différentes des solutés de ladite au moins une autre des solutions. Dans la présente demande, une, plusieurs ou chacune des solutions distinctes ou différentes alimentant les chambres peuvent : - être de composition identique, et - comprendre un ou des solutés en concentrations différentes. De préférence, la puce microfluidique selon l’invention est destinée à être utilisée dans le domaine des organes sur puces et/ou cancers sur puces (OCSP). Il est entendu par organoïde une structure multicellulaire tridimensionnelle qui reproduit in vitro la micro-anatomie d'un organe De préférence, au moins une partie de chacun des au moins deux canaux afférents forme une sinusoïde ou un serpentin. De préférence, la totalité des aux moins deux canaux afférents forme une sinusoïde. De préférence, au moins une partie, de préférence encore la totalité, de chacun des au moins deux canaux afférents forme un serpentin. Les serpentins ont, de préférence, pour effet de mimer ou reproduire ou imiter la circulation du fluide dans les capillaires sanguins. Cela permet, entre autres, de reproduire les phénomènes observés dans les capillaires sanguins tel que, à titre d’exemple non limitant, le phénomène d’opsonisation. Le phénomène d’opsonisation peut être définie comme la formation d’une couronne de protéines. Cela permet, entre autres, d’augmenter la longueur du parcours de la solution dans les canaux afférents. Cela permet, entre autres, d’augmenter la longueur du parcours de la solution dans les canaux afférents en limitant l’augmentation de taille associé et/ou l’encombrement de la puce microfluidique De préférence, la partie sinusoïdale ou le serpentin d’un, de plusieurs ou de chacun des au moins deux canaux afférents comprend au moins trois périodes. Il peut être entendu par « partie sinusoïdale comprenant au moins trois périodes » un serpentin comprenant au moins six coudes. De préférence, un canal afférent ayant une partie sinusoïdale comprenant au moins trois périodes présente une longueur suffisante pour obtenir une homogénéisation satisfaisante de la solution circulant dans ledit canal afférent. Le réservoir peut comprendre au moins deux entrées distinctes aptes à permettre l’alimentation du réservoir en solution. De préférence, les au moins deux entrées sont, de préférence chacune, disposées en des zones distinctes du réservoir. Les entrées du réservoir sont aptes à permettre l’alimentation en solution du réservoir. De préférence, le réservoir est apte à être alimenté en solution. De préférence, il est entendu par solution distinctes ou différentes des solutions de même composition mais de concentrations différentes. De préférence, le réservoir est apte à être alimenté avec plusieurs solutions liquides. De préférence, le réservoir est apte à laisser transiter en son sein plusieurs solutions liquides. De préférence, le réservoir est apte à être alimenté en solution. De préférence, le réservoir est apte être alimenté par plusieurs solutions identiques ou différentes. De préférence, les au moins deux entrées du réservoir sont comprises dans une partie du réservoir en vis-à-vis d’une partie du réservoir sur laquelle sont comprises les au moins deux sorties du réservoir. De préférence, les au moins deux entrées du réservoir sont situées ou disposées sur ou le long d’une partie du réservoir. De préférence, les au moins deux entrées du réservoir sont comprises dans une partie d’une paroi du réservoir. De préférence, les au moins deux entrées du réservoir sont comprises dans une partie du réservoir en vis-à-vis d’une partie d’une partie d’une paroi du réservoir sur laquelle sont comprises les au moins deux sorties du réservoir. De préférence, les au moins deux sorties du réservoir sont situées ou disposées sur ou le long d’une partie du réservoir. De préférence, les au moins deux sorties du réservoir sont comprises dans une partie d’une paroi du réservoir. Les au moins deux entrées, de préférence chacune des au moins deux entrées, et les au moins deux sorties, de préférence chacune des au moins deux sorties, peuvent être comprises dans un même plan, dit plan axial. De préférence, le plan axial est sécant de chacune des entrées et de chacune des sorties du réservoir. De préférence, le réservoir s’étend principalement selon un axe, dit axe de dilution, qui s’étend principalement perpendiculairement à la direction principale selon laquelle est destinée à circuler la solution dans la puce depuis le réservoir vers l’évacuation. De préférence, le réservoir est de forme oblongue. De préférence, une longueur du réservoir s’étend selon l’axe de dilution. La longueur du réservoir et/ou l’axe de dilution peut être courbe. De préférence, la longueur du réservoir et/ou l’axe de dilution est rectiligne. De préférence, l’axe de dilution est compris dans le plan axial. La direction selon laquelle la solution est destinée à circuler dans le réservoir s’étend depuis une, plusieurs ou chacune des entrées vers une, plusieurs ou chacune des sorties. De préférence, la direction selon laquelle la solution est destinée à circuler dans la puce est la direction moyenne ou principale selon laquelle la solution circule entre le réservoir vers l’évacuation. De préférence, les au moins deux entrées sont réparties le long d’un axe parallèle à l’axe de dilution, de préférence de sorte à former une succession ou un enchainement ou une séquence, et les au moins deux sorties sont réparties le long d’un axe parallèle à l’axe de dilution, de préférence de sorte à former une succession ou un enchainement ou une séquence. De préférence : - chacune des au moins deux entrées est intersectée par un plan distinct, dit plan d’entrée, chacun des plans d’entrée est perpendiculaire au plan axial et, de préférence à l’axe de dilution, lesdits plans d’entrées forment une succession de plans parallèles entre eux, - chacune des au moins deux sorties est intersectée par un plan distinct, dit plan de sortie, chacun des plans de sortie est perpendiculaire au plan axial et, de préférence à l’axe de dilution, lesdits plans de sortie forment une succession de plans parallèles entre eux, les au moins deux plans d’entrée et les au moins deux plans de sortie sont parallèles entre eux. De préférence, au moins un plan d’entrée est compris entre deux plans de sortie et/ou au moins un plan de sortie est compris entre deux plans d’entrée. De préférence, pour une chambre considérée : - une extrémité du canal afférent à laquelle est reliée la chambre considérée est tangente à la chambre considérée pour, de préférence imiter ou reproduire les contraintes, en particulier les forces de cisaillement, s’exerçant sur les cellules dans l’organisme, et - une extrémité du canal efférent à laquelle est reliée la chambre considérée est tangente à la chambre considérée pour, de préférence imiter ou reproduire les contraintes, en particulier les forces de cisaillement, s’exerçant sur les cellules dans l’organisme. De préférence, une, plusieurs ou chacune des chambres comprennent un canal annulaire à la périphérie, ou bordant ou formant un pourtour, de la des ou de chacune des chambres. Selon l’invention, le canal annulaire bordant le pourtour de la, des ou de chacune des chambres a pour effet, de préférence, d’imiter ou de reproduire les conditions dans l’organisme. De préférence encore, le canal annulaire bordant le pourtour de la, des ou de chacune des chambres a pour effet de répartir la solution autour de la ou des cellules. De préférence, l’extrémité du canal afférent à laquelle est reliée la chambre considérée et l’extrémité du canal efférent à laquelle est reliée la chambre considérée forment ou constituent, une partie, de préférence au moins une partie, du canal annulaire de la chambre considérée. Selon l’invention, il est également proposé un procédé de croissance cellulaire sur une puce microfluidique, de préférence mais non exclusivement sur la puce microfluidique selon l’invention, comprenant les étapes consistant à : - alimenter au moins deux chambres distinctes de la puce microfluidique, chacune des au moins deux chambres distinctes étant alimentée avec une solution distincte, dite solution fille, provenant d’un réservoir de la puce microfluidique, - convoyer chacune des solutions filles distinctes, depuis une sortie du réservoir, parmi au moins deux sorties distinctes du réservoir, dans un canal afférent distinct, parmi au moins deux canaux afférents distincts de la puce microfluidique étant, de préférence, chacun connecté à une zone distincte du réservoir de la puce microfluidique, - évacuer les solutions depuis les au moins deux chambres via au moins deux canaux efférents distincts de la puce microfluidique, lesdits au moins deux canaux efférents distincts reliant chacun une chambre, parmi les au moins deux chambres distinctes, à une évacuation. De préférence, l’étape consistant à alimenter chacune des au moins deux chambres distinctes de la puce microfluidique avec une solution fille distincte peut également être décrite comme une étape consistant à alimenter, en parallèle et/ou simultanément, plusieurs chambres distinctes, de préférence agencées en parallèle, d’une même puce microfluidique avec une solution distincte. De préférence, la croissance cellulaire s’effectue dans les canaux afférents et/ou dans les au moins deux chambres distinctes. De préférence, le procédé comprend une étape consistant à alimenter le réservoir avec au moins deux solutions distinctes, dites solutions mères, étant chacune injectée dans le réservoir via une entrée distincte du réservoir parmi au moins deux entrées distinctes du réservoir. De préférence, le procédé comprend l’étape consistant à mélanger dans le réservoir, de manière contrôlée, deux solutions mères, parmi les au moins deux solutions mères distinctes, de sorte à obtenir un mélange, de préférence un mélange souhaité ou recherché, des deux solutions mères au niveau d’une sortie du réservoir, parmi les au moins deux sorties distinctes du réservoir ; le mélange obtenu constituant une solution fille qui est distincte de l’au moins une autre des au moins deux solutions filles distinctes. De préférence, le mélange souhaité ou recherché est obtenu en contrôlant une ou des conditions du mélange. Les conditions du mélange peuvent être : - une concentration des solutions mères, et/ou - un débit des solutions mères, et/ou - une géométrie du réservoir et/ou un volume du réservoir, et/ou - un agencement, de préférence relativement aux sorties du réservoir, des entrées du réservoir, et/ou - un agencement, de préférence relativement aux entrées du réservoir, des sorties du réservoir. De préférence, l’étape consistant à mélanger les deux solutions mères de sorte à obtenir un mélange des deux solutions mères consiste à diluer, dans le réservoir de la puce microfluidique, au moins une des solutions mères pour obtenir au moins une des solutions filles. De préférence, le procédé comprend une étape consistant à diluer, dans le réservoir de la puce microfluidique, une, de préférence plusieurs, de préférence encore chacune, des solutions mères pour obtenir respectivement une, plusieurs ou chacune des solutions filles. Au moins une, de préférence encore plusieurs, de préférence encore de chacune, des solutions mères peuvent comprendre un ou des solutés en concentrations différentes du ou des solutés d’au moins une, de préférence de plusieurs, de préférence encore de chacune, des solutions filles. Une, de préférence plusieurs, de préférence encore chacune, des solutions filles peuvent consister en une dilution d’une des solutions mères. De préférence, au moins une entrée du réservoir alimente le réservoir avec solution mère différente ou distincte d’au moins une autre solution mère alimentant le réservoir par une ou plusieurs autres des entrées du réservoir. De préférence, le procédé comprend l’étape consistant à homogénéiser le mélange obtenu dans le canal afférent reliant une des chambres à la sortie au niveau de laquelle le mélange des deux solutions mères est obtenu. De préférence, le mélange des deux solutions mères est réalisé le long d’une interface comprise dans ou s’étendant selon un plan, dit plan de sortie, qui est : ● perpendiculaire à un plan, dit plan axial, dans lequel sont comprises les au moins deux entrées et les au moins deux sorties du réservoir, de préférence le plan axial est sécant aux entrées et aux sorties du réservoir, ● sécant à la sortie au niveau de laquelle le mélange des deux solutions mères est obtenu. De préférence, le plan de sortie est compris entre deux plans, dit d’entrée, distincts qui sont : ● perpendiculaires au plan axial, ● chacun sécant à une entrée différente parmi les au moins deux entrées du réservoir. De préférence, la puce microfluidique selon l’invention est apte à, de préférence encore est agencée pour, de manière davantage préférée est spécialement conçue pour, mettre en œuvre le procédé selon l’invention. Toute caractéristique de la puce microfluidique selon l’invention est directement transposable au procédé et inversement. Description des figures D’autres avantages et particularités de l’invention apparaîtront à la lecture de la description détaillée de mises en œuvre et de modes de réalisation nullement limitatifs, et des dessins annexés suivants : la est une représentation schématique d’une coupe longitudinale dans le plan axial d’une puce microfluidique selon un mode de réalisation de l’invention, la est une représentation schématique d’une simulation illustrant les étapes de convoi des solutions filles dans les canaux afférents d’une puce microfluidique selon un mode de réalisation et de mélange des solutions mères dans le réservoir de la puce microfluidique selon le mode de réalisation, la est une représentation schématique d’une simulation illustrant les étapes de convoi des solutions filles dans les canaux afférents d’une puce microfluidique selon un mode de réalisation et de mélange des solutions mères dans le réservoir de la puce microfluidique selon le mode de réalisation. Puce microfluidique (1) pour la croissance de cellules, ladite puce microfluidique comprend : - un réservoir (2) apte à contenir une solution, - au moins deux chambres (3) distinctes aptes à être alimentées en solution provenant du réservoir et aptes à recevoir une ou plusieurs cellules, - au moins deux canaux afférents (4) distincts reliant chacun une sortie (5) du réservoir, parmi au moins deux sorties (5) distinctes du réservoir, à une chambre parmi les au moins deux chambres distinctes, - au moins deux canaux efférents (6) distincts reliant chacun une chambre parmi les au moins deux chambres distinctes à une évacuation (7), ladite évacuation étant apte à permettre l’évacuation de solution depuis chacune des au moins deux chambres. Puce selon la revendication 1, dans laquelle au moins une partie de chacun des au moins deux canaux afférents (4) forme une sinusoïde ou un serpentin. Puce selon la revendication précédente, dans laquelle la partie sinusoïdale ou le serpentin des au moins deux canaux afférents (4) comprend au moins trois périodes. Puce selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle le réservoir (2) comprend au moins deux entrées (8) distinctes aptes à permettre l’alimentation du réservoir en solution. Puce selon la revendication précédente, dans laquelle les au moins deux entrées (8) du réservoir (2) sont comprises dans une partie du réservoir en vis-à-vis d’une partie du réservoir sur laquelle sont comprises les au moins deux sorties (5) du réservoir. Puce selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle les au moins deux entrées (8) et les au moins deux sorties (5) sont comprises dans un plan (9), dit plan axial (9). Puce selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle le réservoir (2) s’étend principalement selon un axe (10), dit axe de dilution (10), qui s’étend principalement perpendiculairement à une direction (11) selon laquelle est destinée à circuler la solution dans la puce depuis le réservoir vers l’évacuation. Puce selon la revendication précédente, dans laquelle les au moins deux entrées (8) sont réparties le long d’un axe parallèle à l’axe de dilution (10) et les au moins deux sorties (5) sont réparties le long d’un axe parallèle à l’axe de dilution. Puce selon la revendication 6 ou selon l’une des revendications 7 ou 8 prise en combinaison avec la revendication 6, dans laquelle : - chacune des au moins deux entrées (8) est intersectée par un plan distinct (12), dit plan d’entrée, chacun des plans d’entrée (121, 122, 123, 124) est perpendiculaire au plan axial (9), lesdits plans d’entrées forment une succession de plans parallèles entre eux, - chacune des au moins deux sorties (5) est intersectée par un plan distinct (13), dit plan de sortie, chacun des plans de sortie (131, 132, 133, 134, 135) est perpendiculaire au plan axial, lesdits plans de sortie forment une succession de plans parallèles entre eux, les au moins deux plans d’entrée et les au moins deux plans de sortie sont parallèles entre eux. Puce selon la revendication précédente, dans laquelle au moins un plan d’entrée (12) est compris entre deux plans de sortie (13) et/ou au moins un plan de sortie est compris entre deux plans d’entrée. Puce selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle, pour une chambre (3) considérée : - une extrémité (14) du canal afférent (4) à laquelle est reliée la chambre considérée est tangente à la chambre considérée, et - une extrémité (15) du canal efférent (6) à laquelle est reliée la chambre considérée est tangente à la chambre considérée. Puce selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle une, plusieurs ou chacune des chambres (3) comprennent un canal annulaire (16) à la périphérie de la, des ou de chacune des chambres. Puce selon la revendication précédente prise en combinaison avec la revendication 11, dans laquelle l’extrémité (14) du canal afférent (4) à laquelle est reliée la chambre considérée et l’extrémité (15) du canal efférent (6) à laquelle est reliée la chambre considérée forment une partie du canal annulaire (16) de la chambre considérée. Procédé de croissance cellulaire sur une puce microfluidique (1), comprenant les étapes consistant à : - alimenter au moins deux chambres (3) distinctes de la puce microfluidique, chacune des au moins deux chambres distinctes étant alimentée avec une solution distincte, dite solution fille, provenant d’un réservoir (2) de la puce microfluidique, - convoyer chacune des solutions filles distinctes, depuis une sortie du réservoir, parmi au moins deux sorties (5) distinctes du réservoir, dans un canal afférent (4) distinct, parmi au moins deux canaux afférents distincts, de la puce microfluidique, - évacuer les solutions depuis les au moins deux chambres via au moins deux canaux efférents (6) distincts de la puce microfluidique, lesdits au moins deux canaux efférents distincts relient chacun une chambre, parmi les au moins deux chambres distinctes, à une évacuation (7). Procédé selon la revendication précédente, comprenant une étape consistant à alimenter le réservoir (2) avec au moins deux solutions distinctes, dites solutions mères, étant chacune injectée dans le réservoir via une entrée (8) distincte du réservoir parmi au moins deux entrées distinctes du réservoir. Procédé selon la revendication précédente, comprenant l’étape consistant à mélanger dans le réservoir (2), de manière contrôlée, deux solutions mères, parmi les au moins deux solutions mères distinctes, de sorte à obtenir un mélange des deux solutions mères au niveau d’une sortie (5) du réservoir, parmi les au moins deux sorties distinctes du réservoir ; le mélange obtenu constituant une solution fille qui est distincte de l’au moins une autre des au moins deux solutions filles distinctes. Procédé selon la revendication précédente, comprenant l’étape consistant à homogénéiser le mélange obtenu dans le canal afférent (4) reliant une des chambres (3) à la sortie (5) au niveau de laquelle le mélange des deux solutions mères est obtenu. Procédé selon la revendication 16 ou 17, dans lequel le mélange des deux solutions mères est réalisé le long d’une interface (1321, 1322, 1323) comprise dans un plan (13), dit plan de sortie (13), qui est : ● perpendiculaire à un plan (9), dit plan axial (9), dans lequel sont comprises les au moins deux entrées (8) et les au moins deux sorties (8) du réservoir, ● sécant à la sortie au niveau de laquelle le mélange des deux solutions mères est obtenu. Procédé selon la revendication précédente, dans lequel le plan de sortie (13) est compris entre deux plans (12), dit plan d’entrée (12), distincts qui sont : ● perpendiculaires au plan axial (9), ● chacun sécant à une entrée (8) différente parmi les au moins deux entrées du réservoir (2).