Brevet FR3138661A1 — publié le 20240209

La présente invention concerne un microcompartiment cellulaire apte à être utilisé en clinique, dit « GMP », un procédé de préparation du microcompartiment, et ses utilisations. Substitut de matrice extracellulaire dans un microcompartiment cellulaire L’invention se rapporte au domaine de la culture cellulaire en trois dimensions et concerne, en particulier des microcompartiments cellulaires pour la production de cellules et de tissus aptes à être utilisés en clinique pour un usage humain et vétérinaire, dit « GMP ». Etat de l’art La culture cellulaire est un domaine qui continue de susciter un intérêt croissant depuis la découverte des cellules souches pluripotentes induites (iPS ou iPSCs) par le Pr. Yamanaka. Historiquement, les cellules, y compris les cellules souches pluripotentes induites étaient cultivées en deux dimensions. Du fait des limitations de la culture cellulaire en deux dimensions, des systèmes de culture tridimensionnels ont été développés ces dernières années, permettant de surmonter en partie les inconvénients de la culture en deux dimensions. En effet, de tels systèmes sont avantageusement plus proches des systèmes naturels in vivo , et peuvent être utilisés pour de nombreuses applications, en particulier dans les thérapies cellulaires. Les cellules cultivées dans ces systèmes peuvent être de tout type. Il peut s’agir aussi bien de cellules différenciées avec différents phénotypes, de cellules progénitrices que de cellules souches. Une technologie particulièrement adaptée est celle décrite dans la demande de brevet WO 2018/096277 qui consiste en des microcompartiments en trois dimensions pour la culture de cellules souches. Bien qu’étant une technologie fortement prometteuse, la culture en trois dimensions souffre encore de certains inconvénients afin de pouvoir être utilisée en clinique. Pour ce faire, les cellules et les systèmes de culture tridimensionnels d’où sont issus les cellules, doivent respecter la réglementation relative aux Bonnes Pratiques de Fabrication (BPF) ou « Good Manufacturing Practices » en anglais (GMP). Or, la plupart des systèmes de culture tridimensionnels, tels que les microcompartiments cellulaires, comprennent une matrice extracellulaire, d’origine animale et/ou issue de lignées cellulaires cancéreuses, incompatible avec cette réglementation. Pour envisager l’avènement de thérapies cellulaires basées cette technologie mais également la production de cellules animales ou végétales pour la consommation alimentaire humaine ou animale, il existe donc un besoin pour développer une alternative, un substitut permettant de s’affranchir de la présence d’une telle matrice extracellulaire, tout en conservant la possibilité aux cellules d’adhérer et croître, de façon satisfaisante. Dans le cadre de leurs travaux, les inventeurs ont découvert de façon surprenante que la fibrine permettait d’obtenir des résultats particulièrement prometteurs lors de son utilisation dans des microcompartiments cellulaires, en ce qu’elle permet notamment d’obtenir des cellules en grande quantité, une croissance rapide. De tels résultats permettent ainsi d’envisager son utilisation dans des microcompartiments cellulaire en trois dimensions à usage humain et vétérinaire. Aussi, pour répondre à ce besoin de microcompartiment cellulaire dépourvu de matrice extracellulaire non GMP tel que le Matrigel®, l’invention propose un système de culture tridimensionnel reposant sur un microcompartiment cellulaire comprenant un maillage de fibrine agencé entre une couche externe en hydrogel et au moins une couche de cellules. Ainsi, l’invention concerne un nouveau microcompartiment cellulaire comprenant : au moins une couche de cellules, une couche externe en hydrogel, un maillage de fibrine agencé entre la couche externe en hydrogel et l’au moins une couche de cellule. Avantageusement, le maillage de fibrine peut être ou non ségrégé, c’est-à-dire enchevêtré avec au moins un des autres constituants du microcompartiment cellulaire, tels que les cellules ou la couche externe en hydrogel. Aussi, selon un mode de réalisation, les cellules peuvent être réparties à l’intérieur du maillage de fibrine et/ou le maillage de fibrine peut être enchevêtré dans la couche externe en hydrogel. Préférentiellement, le maillage de fibrine est enchevêtré dans la couche externe en hydrogel. Lorsque le maillage de fibrine est enchevêtré avec la couche externe en hydrogel, celui-ci peut former un réseau interpénétrant ou non. Lorsqu’il forme un réseau interpénétrant, celui-ci peut être un réseau de polymères interpénétré ou « Interpenetrated Polymer Network » en anglais (IPN) Lorsque le maillage de fibrine forme un réseau distinct, celui-ci n’est pas enchevêtré avec au moins un des autres constituants du microcompartiment cellulaire. Avantageusement, le maillage de fibrine peut comprendre d’autres molécules, par exemple des facteurs de croissance, des protéines, des peptides, des éléments du milieu de culture et/ou issu de l’activité des cellules, par exemple des protéines sécrétées, des métabolites etc. Selon un autre objet, la couche d’hydrogel comprend préférentiellement de l’alginate. Avantageusement les cellules constituant la couche de cellules sont choisies parmi les cellules eucaryotes, les cellules pluripotentes et les cellules différenciées. Selon un autre objet préféré, le microcompartiment selon l’invention comprend au moins l’une des caractéristiques suivantes : Le microcompartiment est clos, et/ou le microcompartiment est un microcompartiment en 3 dimensions, préférentiellement un microcompartiment en 3 dimensions creux, et/ou le microcompartiment à la forme d’un ovoïde, d’un cylindre, d’un sphéroïde, d’une sphère ou d’une larme, et/ou le microcompartiment comprend une ou plusieurs lumières à l’intérieur de ladite au moins une couche de cellules. Lorsque que le microcompartiment comprend une lumière, la couche de cellules, le maillage de fibrine et la couche externe sont organisées autour de la lumière. Préférentiellement, la couche de cellule, le maillage de fibrine et la couche externe sont successivement organisées autour de la lumière. Selon un objet particulièrement préféré, la fibrine comprise dans le microcompartiment selon l’invention est obtenue à partir de la polymérisation du fibrinogène par la thrombine. Avantageusement, la polymérisation du fibrinogène par la thrombine est obtenue pendant l’encapsulation et/ou après l’encapsulation. Selon un autre aspect, l’invention se rapporte également à un ensemble de microcompartiments, comprenant au moins un microcompartiment selon l’invention. Dans le contexte de l’invention, le microcompartiment est particulièrement adapté dans le cadre de protocole de thérapie cellulaire. Aussi, un autre aspect porte sur le microcompartiment selon l’invention ou l’ensemble de microcompartiments selon l’invention pour son utilisation comme médicament. D’autre part, le microcompartiment selon l’invention ou l’ensemble de microcompartiments selon l’invention peut être obtenu par tous moyens connus de l’Homme du métier. Selon un aspect particulièrement préféré, le microcompartiment selon l’invention peut être obtenu selon le procédé de préparation décrit ci-après. Ainsi, l’invention se rapporte préférentiellement à un procédé de préparation comprenant les étapes suivantes : mélanger des cellules, éventuellement préalablement incubées dans un milieu de culture avec un mélange de fibrinogène, encapsuler le mélange de l’étape a) dans une couche d’hydrogel, cultiver les capsules obtenues à l’étape b) dans un milieu de culture, éventuellement, cultiver les capsules issues de l’étape c) pendant au moins 1 jour, préférentiellement de 3 à 50 jours, et optionnellement récupérer les microcompartiments cellulaires obtenus, caractérisé en ce qu’une solution de thrombine est ajoutée lors de l’étape b) et/ou c). Préférentiellement, le procédé comprend éventuellement, une étape pour rincer les capsules issues de l’étape c), entre l’étape c) de culture et l’étape d) de culture pendant au moins 1 jour. Préférentiellement, l’étape b) d’encapsulation comprend les sous-étapes suivantes : mettre en contact le mélange de l’étape a) et une solution d’hydrogel pour former au moins un goutte, et collecter ladite goutte obtenue dans un bain de calcium apte à rigidifier la solution d’hydrogel pour former la couche externe de chaque microcompartiment, la partie interne de chaque goutte étant constituée par le mélange de l’étape a) et éventuellement de la solution de thrombine. Plus préférentiellement, la solution de thrombine peut être ajoutée lors de l’étape i) ou ii). Lorsque la solution de thrombine est ajoutée lors de l’étape i), la goutte obtenue comprend une couche externe et la partie interne de chaque goutte est constituée par le mélange de l’étape a) et la solution de thrombine. Préférentiellement, le mélange de l’étape i) est réalisé lors de la co-injection au moyen d’un injecteur microfluidique ou millifluidique permettant la formation de la goutte et la mise en contact de la thrombine ayant pour conséquence, la polymérisation du fibrinogène en fibrine. Lorsque la solution de thrombine est ajoutée lors de l’étape ii), la solution de thrombine est présente dans le bain de calcium apte à rigidifier la solution d’hydrogel pour former la couche externe de chaque microcompartiment. La solution de thrombine diffuse alors à travers la couche externe en hydrogel permettant la polymérisation du fibrinogène en fibrine. De façon alternative, la solution de thrombine peut être ajoutée après la formation du microcompartiment lors de l’étape c) de culture des capsules. Le milieu de culture comprend alors une solution de thrombine et celle-ci diffuse à travers la couche d’hydrogel permettant la polymérisation du fibrinogène en fibrine. Selon un objet particulièrement préféré, l’étape i) consiste à mettre en contact le mélange de l’étape a), la solution d’hydrogel, et une solution intermédiaire comprenant ladite solution de thrombine. Par « solution intermédiaire », au sens de l’invention on entend une solution dépourvue de molécules apte à rigidifier la solution d’hydrogel, et/ou dépourvue de calcium. Selon un mode de réalisation particulier la solution intermédiaire est une solution intermédiaire isotonique. La solution de thrombine est ainsi ajoutée lors de la formation de la goutte. Aussi, de façon particulièrement préférée, l’étape b), plus préférentiellement la sous-étape i), est réalisée par co-injection simultanée de la solution d’hydrogel, du mélange de l’étape a) et optionnellement de ladite solution intermédiaire ; ladite co-injection est réalisée de manière concentrique via un injecteur microfluidique ou millifluidique formant un jet en sortie d’injecteur constitué du mélange desdites solutions, ledit jet se fractionnant en gouttes. Dans le contexte de l’invention, la solution de thrombine ne peut être ajoutée avant l’étape b) d’encapsulation correspondant à la formation de la goutte. Préférentiellement, la concentration du fibrinogène est comprise entre 5 et 30 mg/mL, plus préférentiellement entre 10 et 25 mg/mL. Encore plus préférentiellement, la concentration du fibrinogène est comprise entre 14 et 20 mg/mL. Préférentiellement, la concentration de la thrombine est comprise entre 0.001U/mL et 2U/ml, plus préférentiellement entre 0.01U/mL et 1U/ml, entre 0.01U/mL et 0.05U/ml, entre 0.01U/ml et 0.03U/ml, encore plus préférentiellement 0.02U/ml. Préférentiellement, le diamètre d’ouverture finale de l’injecteur microfluidique est compris entre 50 et 800 µm, plus préférentiellement entre 50 et 300 µm, encore plus préférentiellement entre 80 et 240 µm, et le débit de chacune des solutions est compris entre 0,1 et 1000 mL/h, préférentiellement entre 1 et 500 mL/h plus préférentiellement entre 10 et 150 mL/h. De façon encore plus préférée, l'ouverture de l’injecteur microfluidique est de 100µm ou 215µm et le débit de chacune des solutions est compris entre 23mL/h et 100mL/h. Le microcompartiment selon l’invention est apte à être utilisé en clinique. Aussi, un aspect de l’invention porte sur le microcompartiment ou l’ensemble de microcompartiment selon l’invention pour son utilisation comme médicament. Enfin, selon un autre aspect, l’invention se rapporte également à l’utilisation d’un kit destiné à la préparation d’un microcompartiment selon l’invention, ledit kit comprenant au moins une solution de fibrinogène et une solution de thrombine. Selon un autre objet, l’invention concerne également un kit comprenant au moins une solution de fibrinogène, une solution de thrombine, une solution d’hydrogel, préférentiellement l’alginate, une solution isotonique, préférentiellement une solution de sorbitol, une solution de calcium, un milieu de culture adapté. Selon une variante, ledit kit est un kit-of-part. Préférentiellement, la solution de fibrinogène et la solution de thrombine sont d’origine humaine et sont conformes avec la réglementation relative au Bonnes Pratiques de Fabrication (BPF). D’autres caractéristiques et avantages ressortiront de la description détaillée de l’invention, des exemples et des figures qui vont suivre. Brève description des Figures représente un premier mode de réalisation de l’invention, lors duquel la solution de thrombine est mélangée avec le sorbitol au moment de la co-injection. La concentration de la solution de fibrinogène est de 14 mg/mL. A : Alginate à 2%, CS : Cellules en suspension et milieu de culture et fibrinogène. IS : Solution intermédiaire comprenant le sorbitol et la thrombine à 0.02U. La 1 ère étape concerne la co-injection des différents constituants formant un jet, se fractionnant en goutte dans le bain de CaCl2, rigidifiant la couche externe de la capsule. Lors d’une 2 ème étape, les capsules sont ensuite remises en suspension dans un milieu de rinçage. Enfin, les capsules sont remises en suspension dans un milieu final dans des flasques. représente un deuxième mode de réalisation de l’invention, lors duquel la solution de thrombine est ajoutée dans le bain de calcium, utilisé pour collecter les gouttes former après la fragmentation du jet en sortie d’injecteur. La concentration de la solution de fibrinogène est de 14 mg/mL. A : Alginate à 2%, CS : Cellules en suspension et milieu de culture et fibrinogène. IS : Solution intermédiaire, soit le sorbitol. La 1 ère étape concerne la co-injection des différents constituants formant un jet, se fractionnant en goutte dans le bain de CaCl2 supplémenté avec la solution de thrombine à 0.02U, permettant la polymérisation du fibrinogène et la rigidification de la couche externe de la capsule, constituée d’alginate. Lors d’une 2 ème étape, les capsules sont ensuite remises en suspension dans un milieu de rinçage. Enfin, les capsules sont remises en suspension dans un milieu final dans des flasques. représente un premier mode de réalisation de l’invention, lors duquel la solution de thrombine est ajoutée dans le milieu de culture final. La concentration de la solution de fibrinogène est de 14 mg/mL. A : Alginate à 2%, CS : Cellules en suspension et milieu de culture et fibrinogène. IS : Solution intermédiaire, soit le sorbitol. La 1 ère étape concerne la co-injection des différents constituants formant un jet, se fractionnant en goutte dans le bain de CaCl2, rigidifiant la couche externe de la capsule, constitués d’alginate. Lors d’une 2 ème étape, les capsules sont ensuite remises en suspension dans un milieu de rinçage. Enfin, les capsules sont remises en suspension dans un milieu final supplémenté avec la solution de thrombine à 0.02U dans des flasques, permettant la polymérisation du fibrinogène. est une image de microscopie à contraste de phase à J5, représentant des capsules en absence de matrice extracellulaire exogène (A), en présence de matrigel (B), des capsules selon l’invention selon le mode de réalisation de la (C), et des capsules selon l’invention selon le mode de réalisation de la (D). représente les résultats relatifs à l’amplification des capsules selon l’invention, des capsules en présence de matrigel, et des capsules en absence de matrice extracellulaire exogène. représente les résultats relatifs au pourcentage de capsules comprenant un cyste pour les capsules selon l’invention, les capsules en présence de matrigel et les capsules dépourvues de matrice extracellulaire exogène. représente les résultats relatifs à la pluripotence pour les capsules selon l’invention, les capsules en présence de matrigel et en absence de matrice extracellulaire exogène. est une image de microscopie à contraste de phase à J17 post-encapsulation, de neurones. Le panel A représente des neurosphères ou micro-tissu neuronal compris dans les microcompartiments selon l’invention, à savoir de la fibrine polymérisée à partir de fibrinogène à 14mg/ml, et le panel B des neurosphères ou micro-tissu neuronal dans des microcompartiments de l’art antérieur comprenant du matrigel. représente une analyse en composantes principales (en anglais « Principal Component Analysis » PCA), des 1000 gènes les plus variables entre les iPSCs à j0 et à j17, j24 après différenciation neurale dans des capsules ensemencées avec du fibrinogène ou du matrigel. Les progéniteurs dopaminergiques maturés en capsules sont utilisés comme contrôle positif. Description détaillée de l’invention Définition Par « microcompartiment » ou « capsule » au sens de l’invention, on entend également une structure tridimensionnelle partiellement ou totalement close, contenant plusieurs cellules. Celle-ci est formée à partir d’une matrice de chaînes polymères, par exemple l’alginate, gonflée par un liquide et préférentiellement de l’eau. La structure est notamment constituée d’une couche externe en hydrogel rigidifiée. Par « goutte » au sens de l’invention, on entend également une structure tridimensionnel formée à partir d’au moins une solution liquide comprenant les constituants d’un hydrogel non rigidifié (précurseurs de polymérisation, chaines de polymères non ou partiellement réticulées…), d’éléments précurseurs d’hydrogel. Aussi, la goutte constitue un état transitoire entre la co-injection des différents constituants et le microcompartiment. Par cellules « différenciées » au sens de l’invention on entend des cellules qui présentent un phénotype particulier, par opposition à des cellules souches pluripotentes qui ne sont pas différenciées ou des cellules progénitrices qui sont en cours de différenciation. Par « cellules humaines » au sens de l’invention on entend des cellules humaines ou des cellules de mammifères non humains immunologiquement humanisées. Même lorsque cela n’est pas précisé, les cellules, les cellules souches, les cellules progénitrices et les tissus selon l’invention sont constitués ou sont obtenus à partir de cellules humaines ou à partir de cellules de mammifères non humains immunologiquement humanisées. Par « cellule mutante » au sens de l’invention, on entend une cellule porteuse d’au moins une mutation. Par « cellule progénitrice » au sens de l’invention, on entend une cellule souche déjà engagée dans la différenciation cellulaire mais pas encore différenciée. Par « cellule souche embryonnaire » au sens de l’invention on entend une cellule souche pluripotente de cellule dérivée de la masse cellulaire interne du blastocyste. La pluripotence des cellules souches embryonnaires peut être évaluée par la présence de marqueurs tels que les facteurs de transcription OCT4, NANOG et SOX2 et des marqueurs de surface comme SSEA3/4, Tra-1-60 et Tra-1-81. Les cellules souches embryonnaires utilisées dans le cadre de l’invention sont obtenues sans destruction de l’embryon dont elles sont issues, par exemple à l’aide de la technique décrite dans Chang et al. (Cell Stem Cell, 2008, 2(2)) : 113-117). Eventuellement les cellules souches embryonnaires d’êtres humains peuvent être exclues. Par « cellule souche pluripotente » ou « cellule pluripotente » au sens de l’invention, on entend une cellule qui a la capacité de former tous les tissus présents dans l’organisme d’origine entier, sans pour autant pouvoir former un organisme entier en tant que tel. Les cellules souches pluripotentes humaines peuvent être appelées hPSC dans le contexte de la présente invention. Il peut s’agir en particulier de cellules souches pluripotentes induites (iPSC ou hiPSC pour les cellules souches pluripotentes induites humaines), de cellules souches embryonnaires ou de cellules MUSE (pour « Multilineage-differentiating Stress Enduring »). Par « cellule souche pluripotente induite » au sens de l’invention on entend une cellule souche pluripotente induite à la pluripotence par reprogrammation génétique de cellules somatiques différenciées. Ces cellules sont notamment positives pour les marqueurs de pluripotence, comme la coloration à la phosphatase alcaline et l’expression des protéines NANOG, SOX2, OCT4 et SSEA3/4. Des exemples de procédés permettant l’obtention de cellules souches pluripotentes induites sont décrits dans les articles Yu et al. (Science 2007, 318 (5858) : 1917-1920), Takahashi et al (Cell, 207, 131(5) : 861-872) et Nakagawa et al (Nat Biotechnol, 2008, 26(1) : 101-106). Par « couche de cellules » ou « assise de cellules » au sens de l'invention, on entend plusieurs cellules formant une couche ou une assise pouvant être structurée autour d’une lumière, il peut s’agir par exemple d’un tissu ou d’un micro-tissu cellulaire ou d’une culture groupée en trois dimensions. L’épaisseur de la couche de cellules pouvant être variable. Cette couche est organisée en trois dimensions dans le microcompartiment. Par « tissu » ou « tissu biologique »au sens de l’invention, on entend le sens commun de tissu en biologie c’est-à-dire le niveau d'organisation intermédiaire entre la cellule et l’organe. Un tissu est un ensemble de cellules semblables et de même origine (le plus souvent issus d’un lignage cellulaire commun, bien qu’elles puissent trouver leur origine par association de lignages cellulaires distincts)., regroupées en amas, réseau ou faisceau (fibre). Un tissu forme un ensemble fonctionnel, c'est-à-dire que ses cellules concourent à une même fonction. Les tissus biologiques se régénèrent régulièrement et sont assemblés entre eux pour former des organes. Par « maillage de fibrine » ou « réseau de fibrine » au sens de l'invention, on entend plusieurs fibres de fibrine enchevêtrées entre-elle constituant un maillage ou un réseau. Celles-ci sont éventuellement enchevêtrées avec la face interne de la couche externe du microcompartiment en hydrogel. Par « lumière » ou « lumen » au sens de l’invention, on entend un volume de solution aqueuse topologiquement entouré de cellules. Préférentiellement son contenu n’est pas en équilibre diffusif avec le volume de liquide convectif présent à l’extérieur du microcompartiment. Microcompartiment cellulaire La présente invention a donc pour objet un microcompartiment cellulaire comprenant des cellules, une couche externe en hydrogel et un maillage de fibrine. Le microcompartiment selon l’invention comprend au moins une couche de cellules. Etant entendu que le microcompartiment peut également comprendre des cellules en suspension dans le milieu ou éventuellement logées dans le maillage de fibrine. Aussi, le microcompartiment cellulaire comprend avantageusement : au moins une couche de cellules, une couche externe en hydrogel, un maillage de fibrine agencé entre la couche externe en hydrogel et ladite couche de cellule. Préférentiellement, le microcompartiment est un microcompartiment en trois dimensions, délimité par la couche externe en hydrogel et à l’intérieur de ladite couche externe, ledit microcompartiment comprend les cellules et un maillage de fibrine. Il peut se présenter sous la forme d’un ovoïde, d’un cylindre, d’un sphéroïde, d’une sphère ou d’une larme. Avantageusement, le microcompartiment en trois dimensions est creux, plus préférentiellement, le microcompartiment creux se présente sous la forme d’un ovoïde, d’un cylindre, d’un sphéroïde, d’une sphère ou d’une larme. Préférentiellement l’hydrogel utilisé est biocompatible, c’est-à-dire qu’il n’est pas toxique pour les cellules. La couche d’hydrogel doit permettre la diffusion d’oxygène et de nutriment pour alimenter les cellules contenues dans le microcompartiment et permettre leur survie. Selon un mode de réalisation, la couche externe d’hydrogel comprend au moins de l’alginate. Elle peut être constituée exclusivement d’alginate. L’alginate peut être en particulier un alginate de sodium, composé à 80% d’α-L-guluronate et 20% de β-D-mannuronate, avec une masse moléculaire moyenne de 100 à 400 kDa et une concentration totale comprise entre 0,5 et 5% en masse. Avantageusement, la couche en hydrogel est dépourvue de cellules. La couche d’hydrogel permet également de protéger les cellules du milieu extérieur, de limiter la prolifération incontrôlée des cellules, et leur différenciation en cas de différenciation. Les cellules présentes dans le microcompartiment peuvent être tout type de cellules, en particulier les cellules sont des cellules eucaryotes, avantageusement ce sont des cellules de mammifère. Plus préférentiellement, les cellules sont des cellules humaines ou animales. Dans un mode de réalisation particulier, le microcompartiment comprend des cellules souches pluripotentes. Une cellule souche pluripotente, ou cellule pluripotente, s’entend d’une cellule qui a la capacité de former tous les tissus présents dans l’organisme d’origine entier, sans pour autant pouvoir former un organisme entier en tant que tel. Les cellules souches pluripotentes peuvent être en particulier des cellules souches pluripotentes induites (iPS), des cellules MUSE (« Multilineage-differentiating Stress Enduring ») que l’on trouve dans la peau et la moelle osseuse des mammifères adultes, ou des cellules souches embryonnaires (ES). Selon un mode de réalisation, le microcompartiment selon l’invention ne comprend pas de cellules souche embryonnaires (ES). Selon une variante particulièrement adaptée de l’invention, le microcompartiment selon l’invention comprend des cellules souches pluripotentes induites humaines ou animales. Dans un autre mode de réalisation particulier, le microcompartiment selon l’invention comprend des cellules multipotentes humaines ou animales et/ou des cellules progénitrices humaines ou animales issues de ces cellules multipotentes. Les cellules multipotentes et/ou progénitrices ont préférentiellement été obtenues à partir de cellules souches pluripotentes, en particulier de cellules souches pluripotentes humaines, ou éventuellement à partir de cellules humaines non pluripotentes dont le profil transcriptionnel a été modifié artificiellement pour rejoindre celui de cellules multipotentes et/ou de progéniteurs particuliers, typiquement par expression forcée de facteurs de transcriptions spécifiques du phénotype cellulaire cible. Préférentiellement, les cellules multipotentes et/ou progénitrices ont été obtenues à partir de cellules souches pluripotentes après mise en contact avec une solution capable d’initier la différenciation desdites cellules souches. Selon une autre variante, le microcompartiment selon l’invention comprend des cellules différenciées humaines ou animales. Les cellules différenciées ont préférentiellement été obtenues à partir de cellules souches pluripotentes ou de cellules progénitrices, en particulier de cellules souches pluripotentes humaines ou de cellules progénitrices humaines, ou éventuellement à partir de cellules humaines non pluripotentes dont le profil transcriptionnel a été modifié artificiellement pour rejoindre celui de cellules différenciées particulières, typiquement par expression forcée de facteurs de transcriptions spécifiques du phénotype cellulaire cible. Préférentiellement, les cellules différenciées ont été obtenues à partir de cellules souches pluripotentes ou multipotentes ou progénitrices après mise en contact avec une solution capable d’initier la différenciation desdites cellules souches. Selon une variante, le contenu cellulaire du microcompartiment comprend des identités cellulaires homogènes ou mixtes. Les cellules différenciées peuvent en particulier se présenter sous forme d’au moins une couche de cellules ou sous forme d’un tissu ou micro-tissu en trois dimensions ou sous forme de plusieurs tissus ou micro-tissus dans le microcompartiment. Il peut s’agir d’un tissu ou micro-tissu compacté ou non, avec ou sans lumière. Le microcompartiment selon l’invention peut comprendre plusieurs types de cellules. En particulier, le microcompartiment selon l’invention peut comprendre par exemple des cellules souches induites à la pluripotence et/ou des cellules multipotentes et/ou des cellules progénitrices et/ou des cellules différenciées. Avantageusement, le microcompartiment selon l’invention est obtenu après plusieurs cycles de division cellulaire. En effet, les cellules comprises dans le microcompartiment selon l’invention sont des cellules obtenues par amplification, à partir d’au moins une cellule. Aussi, les cellules présentes dans le microcompartiment selon l’invention ont été obtenues après au moins deux cycles de division cellulaire après l’encapsulation dans une couche externe d’hydrogel d’au moins une cellule. De façon préférée, les cellules présentes dans le microcompartiment selon l’invention ont été obtenues après au moins 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 28, 30 cycles de division cellulaire après l’encapsulation dans une couche externe d’hydrogel d’au moins 1 cellules, préférentiellement entre 1 et 5, entre 1 et 10, entre 1 et 15, entre 1 et 20, entre 1 et 30, entre 1 et 40, entre 1 et 50, entre 1 et 60, entre 1 et 100 cellules. Par exemple, les cellules présentes dans le microcompartiment ont été obtenues après au moins six cycles de division cellulaire après l’encapsulation dans une couche externe d’hydrogel d’au moins 1 cellule, préférentiellement entre 1 et 50 cellules. Préférentiellement le microcompartiment est obtenu après au moins 2 passages après l’encapsulation, plus préférentiellement au moins 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 passages. Chaque passage peut durer par exemple au moins 1 jour, ou entre 2 et 50 jours, notamment entre 3 et 10 jours. De façon préférée le microcompartiment est obtenu après au moins une ré-encapsulation, plus préférentiellement entre 1 et 14 ré-encapsulations, notamment entre 2 et 7 ré-encapsulations. Très préférentiellement une ré-encapsulation correspond à un nouveau passage et chaque cycle d’encapsulation correspond à un passage. Préférentiellement la totalité des cellules encapsulées initialement dans le microcompartiment avant le premier cycle de division cellulaire représente un volume inférieur à 50% du volume du microcompartiment dans lequel elles sont encapsulées, plus préférentiellement inférieur à 40%, 30%, 20%, 10% du volume du microcompartiment dans lequel elles sont encapsulées. Ainsi, selon l’un mode de réalisation, les cellules présentes dans le microcompartiment selon l’invention ont été obtenues après au moins 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 28, 30 cycles de division cellulaire, après l’encapsulation dans une couche externe d’hydrogel de cellule(s) représentant un volume inférieur à 50% du volume du microcompartiment dans lequel elles sont encapsulées, plus préférentiellement inférieur à 40%, 30%, 20%, 10% du volume du microcompartiment dans lequel elles sont encapsulées. Préférentiellement, dans le microcompartiment selon l’invention, les cellules représentent plus de 50% en volume par rapport au volume du microcompartiment, encore plus préférentiellement plus de 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% en volume par rapport au volume du microcompartiment. Le microcompartiment selon l’invention comprend plusieurs cellules, préférentiellement au moins 20 cellules, encore plus préférentiellement au moins 100, au moins 500, au moins 1000, au moins 10000. Dans le contexte de l’invention, le maillage de fibrine est particulièrement adapté comme substitut aux matrices extracellulaires non GMP tel que le Matrigel®, et permet de répondre aux inconvénients de l’art antérieur. Aussi, le maillage de fibrine permet d’obtenir la multiplication des cellules de façon satisfaisante. Le maillage de fibrine forme ainsi avantageusement un réseau de fibrine au sein de la capsule, pouvant éventuellement constituer un gel ou un caillot de fibrine dans la capsule. Ce maillage peut être soit interpénétré avec au moins l’un des autres constituants du microcompartiment ou non, préférentiellement avec la couche externe du microcompartiment. Lorsque le maillage n’est pas interpénétré, par exemple avec la couche externe il forme un réseau distinct dans lequel les cellules peuvent venir se loger et se multiplier. Préférentiellement, le maillage de fibrine est enchevêtré avec la couche externe en hydrogel, plus préférentiellement la face interne de la couche externe en hydrogel. Aussi, la délimitation entre le maillage de fibrine et la couche externe peut ne pas être parfaitement nette. Par conséquent, au moins une partie du maillage de fibrine peut être enchevêtrée avec la face interne de la couche externe, préférentiellement avec l’alginate la composant. Ainsi, au moins une partie du maillage constitué de fibrine est préférentiellement enchevêtré avec la couche externe en hydrogel. Selon un autre mode de réalisation particulier, le maillage de fibrine forme un réseau interpénétré, ou « Interpenetrated Polymer Network » en Anglais (IPN) avec la couche externe en hydrogel. Selon un objet particulièrement préféré, la fibrine est obtenue à partir de la polymérisation du fibrinogène par un agent de polymérisation du fibrinogène, avantageusement ledit agent est la thrombine, pendant l’encapsulation et/ou après l’encapsulation. Aussi, la polymérisation de la solution de fibrinogène par la solution de thrombine a lieu au cours de l’encapsulation et/ou après celle-ci. Lorsqu’elle a lieu après l’encapsulation, la polymérisation a lieu au sein de la goutte ou de la capsule nouvellement formée. Le maillage de fibrine peut éventuellement comprendre un mélange de protéines et de composés extracellulaires nécessaires à la culture des cellules en cours de différenciation ainsi que des cellules isolées. Avantageusement, l’encapsulation est réalisée au moyen d’une co-injection réalisée de manière concentrique via un injecteur microfluidique formant un jet en sortie d’injecteur constitué du mélange des différentes solutions utiles, ledit jet se fractionnant en gouttes. Les gouttes sont alors collectées dans un bain de calcium apte à rigidifier la solution d’hydrogel pour former la couche externe de chaque microcompartiment. Selon un premier mode de réalisation, la polymérisation de la solution de fibrinogène par la thrombine a lieu au cours de l’encapsulation. Le mélange de cellules, le mélange de fibrinogène, la solution d’hydrogel et la solution de thrombine sont mise en contact simultanément et co-injectés de manière concentrique via un injecteur microfluidique ou millifluidique formant le jet en sortie d’injecteur, se fractionnant en gouttes. Dès la mise en contact des différentes solutions, la polymérisation est initiée, celle-ci est alors réalisée presque instantanément. Selon un deuxième mode de réalisation, les gouttes sont collectées dans le bain de calcium apte à rigidifier la solution d’hydrogel pour former la couche externe de chaque microcompartiment. En l’absence de solution de thrombine lors de la co-injection via l’injecteur microfluidique, la polymérisation du fibrinogène n’est pas initiée. Ainsi, la polymérisation de la solution de fibrinogène par la solution de thrombine a lieu après l’encapsulation. Selon cet objet, la solution de thrombine est ajoutée dans le bain de calcium permettant la collecte et la formation du microcompartiment. La solution de thrombine peut ainsi diffuser à travers la solution d’hydrogel en cours de rigidification. Selon un troisième mode de réalisation, la solution de thrombine n’est pas ajoutée dans le bain de calcium. Dès lors, le processus de rigidification de la solution d’hydrogel par le bain de calcium terminé, les microcompartiments formés sont rincés et une solution isotonique, préférentiellement un milieu de culture contenant un inhibiteur de l’apoptose, est ajoutée. Celle-ci est alors supplémentée avec une solution de thrombine. La solution de thrombine peut alors diffuser à travers la coque d’hydrogel rigidifiée permettant la polymérisation du fibrinogène par la thrombine. Selon un objet particulièrement préféré, la solution de thrombine est co-injectée simultanément avec les cellules, la solution de fibrinogène, le milieu de culture comprenant les cellules et la solution d’hydrogel. Plus préférentiellement, une solution isotonique est également co-injecté et celle-ci comprend la solution de thrombine, avantageusement, la solution isotonique est une solution de sorbitol. Selon l’un des quelconques trois modes de réalisation décrits précédemment, la polymérisation du fibrinogène par un agent de polymérisation du fibrinogène, tel que la thrombine, permet d’obtenir un maillage de fibrine au sein de la capsule sur dans lequel les cellules vont se loger ou se lier à la surface du maillage pour se multiplier. Le maillage de fibrine peut soit former un réseau distinct, soit former un réseau interpénétré avec au moins l’un des autres constituants du microcompartiment, préférentiellement la couche externe d’hydrogel. Le microcompartiment selon l’invention peut également comprendre d’autres éléments, en particulier un milieu de culture. Le milieu de culture est un milieu adapté aux cellules présentes dans le microcompartiment selon les connaissances de l’homme du métier. Selon un autre objet préféré de l’invention, le microcompartiment comprend au moins une lumière ou un lumen. L’au moins une lumière peut contenir un liquide, notamment du milieu de culture et/ou un liquide sécrété par les cellules. Avantageusement la présence de cette partie creuse permet aux cellules de disposer d’un petit volume diffusif dont elles peuvent contrôler la composition, favorisant une communication cellulaire. Cet agencement tridimensionnel en monocouche ou assise cellulaire sphérique entourant la lumière ou le lumen central peut être également appelé un cyste. La lumière est préférentiellement générée, au moment de la formation du cyste, par les cellules qui se multiplient et se développent sur ou au sein du maillage de fibrine. Selon un autre objet préféré, la couche de cellule, le maillage de fibrine et la couche externe sont organisées autour de la lumière, plus préférentiellement ils sont organisés successivement autour de la lumière. La conformation sous forme de cyste permet de réduire les pressions subies par les cellules souches par rapport aux cultures 2D ou en agrégats. Cette configuration permet également de diminuer la mortalité cellulaire et d’augmenter le facteur d’amplification de la culture. Par conséquence cela permet de réduire le nombre de passages et dissociation nécessaire ; de réduire le temps en culture nécessaire pour atteindre le nombre de cellules final nécessaire. Selon un mode de réalisation, le microcompartiment peut comprendre plusieurs cystes ou tissu ou micro tissu. Le microcompartiment cellulaire selon l’invention est clos ou partiellement clos, c’est à dire que la couche externe est close ou partiellement close. Préférentiellement le microcompartiment est clos. Le microcompartiment selon l’invention peut se présenter sous toute forme en trois dimensions, c’est-à-dire qu’il peut avoir la forme de tout objet de l’espace. Le microcompartiment peut avoir n’importe quelle forme compatible avec l’encapsulation de cellules. Préférentiellement le microcompartiment selon l’invention se présente sous une forme sphérique ou allongée. Il peut avoir la forme d’un ovoïde, d’un cylindre, d’un sphéroïde ou d’une sphère. Il peut en particulier se présenter sous la forme d’un sphéroïde creux, d’un ovoïde creux, d’un cylindre creux ou d’une sphère creuse. C’est la couche externe du microcompartiment, c’est-à-dire la couche d’hydrogel, qui confère sa taille et sa forme au microcompartiment selon l’invention. Préférentiellement la plus petite dimension du microcompartiment selon l’invention est comprise entre 10 µm et 1 mm, préférentiellement entre 100 µm et 700 µm. Elle peut être comprise entre 200 µm et 600 µm, notamment entre 300µm et 500 µm. Sa plus grande dimension est préférentiellement supérieure à 10µm, plus préférentiellement comprise entre 10µm et 1m, encore plus préférentiellement entre 10µm et 50cm. Le microcompartiment selon l’invention peut être éventuellement congelé pour être stocké. Il devra ensuite être décongelé avant son utilisation. L’invention a également pour objet plusieurs microcompartiments ensemble. Aussi, l’invention vise aussi un ensemble ou une série de microcompartiments cellulaires tels que décrits précédemment comprenant au moins deux microcompartiments cellulaires selon l’invention. L’invention vise aussi un ensemble ou une série de microcompartiments d’au moins deux microcompartiments cellulaires en trois dimensions, chaque microcompartiment comprenant au moins une couche externe en hydrogel et à l’intérieur de ladite couche externe au moins une couche de cellules, dans lequel au moins un microcompartiment est un microcompartiment selon l’invention. De façon préférée, les cellules présentes dans les microcompartiments de l’ensemble de microcompartiments selon l’invention ont été obtenues après au moins 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 28, 30 cycles de division cellulaire après l’encapsulation dans une couche externe d’hydrogel d’au moins 1 cellule par microcompartiment. Le ou les microcompartiments présents dans cet ensemble de microcompartiments peuvent présenter une ou plusieurs caractéristiques d’un microcompartiment selon l’invention (taille, forme, nombre de cellules, volume de cellules, couche intermédiaire, lumière, etc.). L’ensemble de microcompartiments selon l’invention comprend préférentiellement entre 2 et 10 16 microcompartiments. De façon préférée la série de microcompartiments selon l’invention est dans un milieu de culture, en particulier dans un milieu de culture au moins partiellement convectif. Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, l’invention a pour objet une série de microcompartiments cellulaires dans une enceinte close, telle qu’un bioréacteur, préférentiellement dans un milieu de culture dans une enceinte close, telle qu’un bioréacteur. La présence d’une couche externe d’hydrogel et éventuellement d’une couche intermédiaire de solution aqueuse isotonique permet une distribution uniforme des cellules entre les microcompartiments. Par ailleurs cette couche d’hydrogel permet d’éviter les fusions de microcompartiments qui sont une source majeure de variabilité défavorable pour l’homogénéité phénotypique des cellules. Procédé Le microcompartiment peut être obtenu par tous moyens connus de l’Homme du métier pour préparer des microcompartiments ou capsules. Selon un autre aspect, l’invention vise également un procédé de préparation de microcompartiments selon l’invention. Le procédé de préparation d’un microcompartiment ou d’un ensemble de microcompartiments selon l’invention, comprend au moins les étapes suivantes : mélanger des cellules, éventuellement préalablement incubées dans un milieu de culture, avec un mélange de fibrinogène, encapsuler le mélange de l’étape (a) dans une couche d’hydrogel ; cultiver les capsules obtenues à l’étape (b) dans un milieu de culture, éventuellement, cultiver les capsules issues de l’étape (c) pendant au moins 1 jour, préférentiellement de 3 à 50 jours, et optionnellement, récupérer les microcompartiments cellulaires obtenus, caractérisé en ce qu’une solution de thrombine est ajoutée lors de l’étape b) et/ou c). De façon avantageuse, le procédé selon l’invention peut comprendre des étapes supplémentaires. Ainsi, préférentiellement, les cellules sont incubées préalablement à l’étape de mélange des cellules avec le mélange de fibrinogène dans un milieu de culture adapté. Ledit milieu de culture comprend préférentiellement au moins un facteur cytoprotecteur, plus préférentiellement au moins un inhibiteur de l’apoptose. L’inhibiteur de l’apoptose peut par exemple être un ou plusieurs inhibiteur(s) des voies RHO/ROCK (« Rho-associated protein kinase »), ou tout autre inhibiteur de l’apoptose connu de l’homme du métier. L’inhibiteur de l’apoptose doit permettre de promouvoir la survie des cellules, l’adhérence des cellules à la fibrine au moment de la formation de la couche externe d’hydrogel. Le procédé selon l’invention peut comprendre une étape de dissociation des cellules par une dissociation chimique, enzymatique ou mécanique, préalablement ou simultanément mise en œuvre à l’étape d’incubation des cellules, elle-même effectuée préalablement à l’étape a) de mélange. Cette étape est particulièrement importante dans le cas de cellules adhérentes. Les cellules encapsulées sont en suspension sous forme de cellules uniques et/ou d’amas de cellules. De façon préférée, les cellules uniques représentent moins de 50% en nombre de la totalité des cellules encapsulées, plus préférentiellement les cellules uniques sont des cellules hPSC. En effet il est préférable d’encapsuler des amas de cellules car cela diminue l’apparition de phénomène de mutagénèse. Préférentiellement, les étapes postérieures à l’encapsulation sont mises en œuvre sous agitation permanente ou séquentielle. Cette agitation est importante car elle maintient l’homogénéité de l’environnement de culture et évite la formation de tout gradient diffusif. Par exemple, elle permet un contrôle homogène de niveau d’oxygénation cellulaire ; évitant ainsi les phénomènes de nécrose lié à l’hypoxie, ou de stress oxydatif lié à l’hyperoxie. Par conséquent, elle évite une augmentation de la mortalité cellulaire et/ou du stress oxydatif. Préférentiellement, après l’étape de culture des capsules obtenues, le procédé comprend une étape qui consiste à rincer les capsules issues de l’étape (d), avantageusement de manière à éliminer le facteur cytoprotecteur, tel que l’inhibiteur de l’apoptose. Préférentiellement, l’étape b) d’encapsulation comprend les sous étapes suivantes : mettre en contact le mélange de l’étape a), c’est-à-dire les cellules et le mélange de fibrinogène, avec la solution d’hydrogel pour former au moins un goutte, et collecter l’au moins une goutte obtenue dans un bain de calcium apte à rigidifier la solution d’hydrogel pour former la couche externe de chaque microcompartiment, la partie interne de chaque goutte étant constituée par le mélange de l’étape i). Une fois la couche externe en hydrogel rigidifiée par le bain de calcium, le microcompartiment est formé. Celui-ci peut alors être rincé, afin d’éliminer, par exemple l’inhibiteur d’apoptose. Lorsque la solution de thrombine est ajoutée lors de l’étape b) d’encapsulation, celle-ci peut être ajoutée lors de l’étape i) de mélange ou ii) de collecte de la goutte. Selon un objet de l’invention, la solution de thrombine est mélangée avec le mélange de l’étape a), et la solution d’hydrogel, préférentiellement la thrombine est co-injectée simultanément avec les autres solutions. Préférentiellement, l’étape i) consiste à mettre en contact le mélange de l’étape a), la solution d’hydrogel, et une solution intermédiaire isotonique comprenant ladite solution de thrombine, plus préférentiellement la solution intermédiaire isotonique est une solution de sorbitol. De façon particulièrement avantageuse, l’étape de mélange du mélange de l’étape a) et de l’hydrogel est une étape qui vise à structurer sous forme de flux colinéaire et concentrique ledit mélange de l’étape a) et la solution d’hydrogel. Avantageusement, l’ajout de thrombine lors de la co-injection simultanée permet de maitriser la polymérisation en ce que le temps de contact thrombine/fibrinogène peut être contrôlé. D’autre part, la quantité de thrombine ajoutée est moins importante, préférentiellement d’un facteur 4 à 8, comparé à l’ajout de la solution de thrombine après l’encapsulation. Selon un autre objet de l’invention, la solution de thrombine est ajoutée dans le bain de calcium, soit lors de l’étape ii). La solution de thrombine peut ainsi, diffuser à travers la coque d’hydrogel du microcompartiment en cours de rigidification et ainsi, polymériser le fibrinogène en fibrine. Un maillage de fibrine est ainsi formé sur ou dans lequel les cellules vont se multiplier et former un cyste. Lorsque, le procédé selon l’invention, comprend une étape de rinçage des capsules obtenues, la solution constituant le bain de calcium est éliminée et remplacée par un milieu adapté pour la culture des microcompartiments selon l’invention, préférentiellement une solution isotonique, plus préférentiellement un milieu de culture contenant un inhibiteur de l’apoptose. Ce milieu peut, selon un autre objet, comprendre une solution de thrombine. Là encore, la solution de thrombine peut diffuser à travers la coque d’hydrogel du microcompartiment rigidifiée et polymériser le fibrinogène en fibrine, constituant le maillage de fibrine. Aussi, selon un autre objet de l’invention, la solution de thrombine est ajoutée lors de l’étape c). De façon particulièrement préféré, l’étape b) du procédé selon l’invention est réalisée par co-injection simultanée de la solution d’hydrogel, du mélange de l’étape a) et optionnellement de ladite solution intermédiaire isotonique ; ladite co-injection est réalisée de manière concentrique via un injecteur microfluidique formant un jet en sortie d’injecteur constitué du mélange desdites solutions, ledit jet se fractionnant en gouttes. Lorsque la solution de thrombine est co-injectée avec les autres solutions, celle-ci est préférentiellement mélangée avec la solution intermédiaire isotonique. Préférentiellement, la concentration du fibrinogène est comprise entre 5 et 30 mg/mL, préférentiellement 10-25 mg/mL, plus préférentiellement entre 14 et 20 mg/mL. Selon un autre objet de l’invention, la concentration de la thrombine est préférentiellement comprise entre 0.001U/mL et 2U/ml, plus préférentiellement entre 0.01U/mL et 1U/ml, entre 0.01U/mL et 0,05U/ml, entre 0,01U/ml et 0,03U/ml, encore plus préférentiellement 0,02U/ml Par « U » on entend une unité d’activité enzymatique (soit la concentration pour une enzyme) qui représente la quantité d’enzyme nécessaire pour traiter une micromole de substrat en 1 minute. Etant entendu que la concentration indiquée est celle dans le mélange. En effet, avantageusement la thrombine est mélangée avec les autres constituants selon un ratio 1 :1. Aussi, au sein de la capsule, lorsque que la concentration de la thrombine, avant le mélange, est de 0.01U/ml, la concentration dans la capsule est de l’ordre de 0.01U/ml. Le procédé selon l’invention est mis en œuvre via un injecteur microfluidique permettant la co-injection des différentes solutions et permettant la formation d’un jet se fractionnant en goutte. Préférentiellement, le diamètre d’ouverture finale de l’injecteur microfluidique est compris entre 50 et 800 µm, plus préférentiellement entre 50 et 300 µm, encore plus préférentiellement entre 80 et 240 µm, et le débit de chacune des solutions est compris entre 0,1 et 1000 mL/h, préférentiellement entre 1 et 500 mL/h plus préférentiellement entre 10 et 150 mL/h. Le procédé selon l’invention est préférentiellement mis en œuvre d’une enceinte close tel qu’un bioréacteur clos ou une flasque. Le nombre cycles de divisions cellulaires à l’étape (d) de culture des capsules est d’au moins 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 cycles de division cellulaire. Préférentiellement le microcompartiment est obtenu après au moins 2 passages (un passage correspond à un cycle complet des étapes (a), (b), et (c), optionnellement (c), plus préférentiellement au moins 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 passages. Chaque passage peut durer par exemple entre 2 et 15 jours, notamment entre 3 et 8 jours. Dans une variante préférée, le procédé selon l’invention comprend au moins une ré-encapsulation des cellules après l’étape (d), c’est-à-dire au moins deux cycles d’encapsulations. Préférentiellement chaque cycle d’encapsulation correspond à un passage. Dans cette variante du procédé (au moins une ré-encapsulation des cellules après l’étape (d) le nombre de divisions cellulaires de l’ensemble du procédé (pour l’ensemble des passages) est d’au moins 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30 cycles de division cellulaire. Dans un procédé selon l’invention il peut y avoir plusieurs ré-encapsulation, préférentiellement entre 1 et 100, notamment entre 1 et 10 ré-encapsulation. Chaque ré-encapsulation peut comprendre : une étape qui consiste à dissocier le microcompartiment ou la série de microcompartiments pour obtenir une suspension de cellules ou une suspension d’amas de cellules ; l’élimination de la couche externe en hydrogel peut être réalisée notamment par hydrolyse, dissolution, perçage et/ou rupture par tout moyen biocompatible, c’est-à-dire non toxique pour les cellules. Par exemple, l’élimination peut être réalisée en utilisant un tampon phosphate salin, un chélateur d’ions divalents, une enzyme comme l’alginate lyase si l’hydrogel comprend de l’alginate et/ou la microdissection laser, et une étape de ré-encapsulation de tout ou partie des cellules ou amas de cellules dans une capsule d’hydrogel. La ré-encapsulation est un moyen adapté pour une augmentation de l’amplification cellulaire obtenue depuis l’étape pluripotente, et diminuer les risques de mutation. Selon un mode de réalisation particulier la ré-encapsulation comprend les étapes suivantes : éliminer la couche externe en hydrogel, remettre en suspension les cellules qui étaient contenues dans le microcompartiment de façon à obtenir des cellules uniques et/ou au moins un ensemble ou amas de cellules dans un milieu isotonique, préférentiellement un milieu de culture contenant un inhibiteur de l’apoptose, encapsuler la suspension de cellules dans une couche d’hydrogel ; préférentiellement, cultiver les microcompartiments obtenus dans une solution isotonique contenant un inhibiteur de l’apoptose, préférentiellement un milieu de culture contenant un inhibiteur de l’apoptose ; préférentiellement, rincer les microcompartiments, avantageusement, de manière à éliminer l’inhibiteur de l’apoptose ; cultiver les microcompartiments dans une solution isotonique, préférentiellement un milieu de culture, pendant au moins un cycle de division cellulaire, et optionnellement récupérer les microcompartiments cellulaires obtenus. Utilisation L’utilisation d’une solution de fibrinogène et d’une solution de thrombine permettant la formation de fibrine comme substitut à la matrice extracellulaire, en particulier le matrigel® est particulièrement adapté pour la culture cellulaire en trois dimensions, que la culture cellulaire soit mise en œuvre au moyen de microcompartiment cellulaire, de tube ou de fibre comprenant les cellules. Ainsi, l’invention se rapporte également à l’utilisation d’un kit destiné à la culture en trois dimensions, ledit kit comprenant une solution de fibrinogène et une solution de thrombine. Lorsque que le kit est destiné à être mis en œuvre dans des tubes ou fibres comprenant les cellules, le procédé de préparation peut être le suivant : mélanger des cellules, éventuellement préalablement incubées dans un milieu de culture, avec un mélange de fibrinogène, enrober le mélange de l’étape (a) dans une couche d’hydrogel ; cultiver les fibres ou tubes obtenues à l’étape (b) dans un milieu de culture, caractérisé en ce que la solution de thrombine est ajoutée lors de l’étape b) et/ou c). Avantageusement, l’étape b) d’enrobage est mise en œuvre au moyen d'un flux concentrique. Le flux concentrique comprenant : un flux central (i) comprenant le mélange de cellules et de fibrinogène de l’étape a), optionnellement un flux intermédiaire (ii) positionné de façon plus externe au flux central dépourvu de calcium et comprenant une solution isotonique, par exemple une solution isotonique de sorbitol pouvant, optionnellement comprendre du fibrinogène, un flux plus externe (iii) par rapport au flux intermédiaire comprenant une solution d'hydrogel, par exemple une solution d’alginate, comprenant optionnellement de la thrombine, et de façon encore plus externe un flux (iv) dépourvu de calcium et comprenant une solution isotonique, par exemple une solution isotonique de sorbitol pouvant optionnellement comprendre du fibrinogène. Selon un autre aspect, l’invention concerne l’utilisation d’un kit destiné à la préparation d’un microcompartiment selon l’invention, ledit kit comprenant une solution de fibrinogène et une solution de thrombine. Préférentiellement, la solution de fibrinogène et la solution de thrombine sont d’origine humaine et sont conforme avec la réglementation relative au Bonnes Pratiques de Fabrication (BPF). Enfin, le microcompartiment est particulièrement adapté à une utilisation en clinique. Aussi, l’invention se rapporte également à un microcompartiment selon l’invention ou ensemble de microcompartiments selon l’invention pour son utilisation comme médicament. Selon un autre aspect, l’invention se rapporte à l’utilisation du microcompartiment selon l’un des quelconques précédents objets, pour la production de cellules, tissus, préférentiellement pour la production de telles cellules et/ou tissus à grande échelle. Le microcompartiment selon l’invention peut être utilisé également pour la production de cellules animales ou végétales pour la consommation alimentaire humaine ou animale. Cette utilisation est particulièrement utile pour créer des substituts aux produits carnés tels que la viande, dans un objectif de limiter la consommation de produits carnés. Selon un autre aspect, l’invention concerne également un kit comprenant au moins une solution de fibrinogène, une solution de thrombine, une solution d’hydrogel, préférentiellement l’alginate, une solution isotonique, préférentiellement une solution de sorbitol, une solution de calcium, un milieu de culture adapté. Selon une variante, ledit kit est un kit of part. L’invention est à présent illustrée par des exemples non limitatifs de compositions selon l’invention et par des résultats. Exemples Exemple 1 - Capsule selon un premier mode de réalisation. Cet exemple décrit un premier mode de réalisation de l’invention, également représenté en , dans lequel la solution de thrombine est ajouté dans la solution de sorbitol et co-injecté via l’injecteur microfluidique avec le mélange de cellules dans le milieu de culture et avec la solution d’hydrogel. Ainsi, les cellules ont été mélangées avec du milieu de culture cellulaire et du Fibrinogène à 14 mg/mL. L’injecteur microfluidique permettant la co-injection des différentes solutions comprend trois lignes en amont de la buse. Cette solution comprenant le fibrinogène a été injectée dans la ligne correspondant aux cellules et l'encapsulation a été réalisée. Les deux autres lignes comprenant respectivement une solution d’alginate à 2%, et une solution intermédiaire comprenant la solution de sorbitol et la solution de thrombine à 0,02U/ml. Une fois l'encapsulation réalisée, les gouttes sont recueillies dans le bain de CaCl2 permettant la rigidification de l’alginate et la formation de la coque d’alginate formant le microcompartiment ou capsule. Cette solution comprenant les capsules a ensuite été rincée avec un milieu de culture cellulaire dépourvu de sérum. Exemple 2 - Capsule selon un deuxième mode de réalisation. Cet exemple décrit un second mode de réalisation de l’invention, également représenté en , dans lequel la solution de thrombine est ajoutée dans le bain de calcium, dans lequel la goutte nouvellement formée après la fragmentation du jet en sortie de l’injecteur microfluidique va être collectée. Les cellules ont été mélangées avec du milieu de culture cellulaire et du Fibrinogène à 14 mg/mL, cette solution a été injectée dans la ligne correspondante en amont de l’injecteur microfluidique et l'encapsulation a été réalisée. Les deux autres lignes comprenant respectivement une solution d’alginate à 2%, et une solution intermédiaire comprenant la solution de sorbitol. Une fois l'encapsulation réalisée, les capsules sont collectées dans la solution constituant le bain de CaCl2 et supplémenté par la solution de Thrombine à 0,02U. Cette solution a été rincée avec un milieu de culture cellulaire dépourvu de sérum. Exemple 3 - Capsule selon un troisième mode de réalisation. Cet exemple décrit un troisième mode de réalisation de l’invention, également représenté en , dans lequel la solution de thrombine est ajouté dans une solution isotonique après le rinçage des capsules obtenus après la rigidification de l’alginate par l’action du bain de calcium. Les cellules ont été mélangées avec du milieu de culture cellulaire et du Fibrinogène à 14 mg/mL, cette solution a été injectée dans la ligne correspondante en amont de l’injecteur microfluidique et l'encapsulation a été réalisée. Les deux autres lignes comprenant respectivement une solution d’alginate à 2%, et une solution intermédiaire comprenant la solution de sorbitol. Une fois l'encapsulation réalisée, les capsules sont collectées dans la solution constituant le bain de CaCl2 et cette solution a été rincée avec un milieu de culture cellulaire dépourvu de sérum et supplémenté par la solution de Thrombine à 0,02U. Exemple 4 – Résultats comparatif des capsules selon l’invention et capsules à base de matrigel®. Des résultats comparatifs ont été réalisées entre des microcompartiments de l’art antérieur en présence de matrice extracellulaire, en particulier de matrigel®, ou en absence de matrice extracellulaire exogène ou de substitut de matrice extracellulaire, en comparaison avec les microcompartiments selon l’invention. Bien que le matrigel® représente la solution la plus efficiente pour obtenir des cystes, elle n’est pas adaptée pour l’utilisation des capsules en clinique, par exemple dans le cadre de la production cellules différenciées. A titre d’exemple, les capsules peuvent produire en grande quantité des cellules neuronales susceptibles d’être injectées chez des patients souffrant de maladies neurodégénératives, par exemple la maladie d’Alzheimer. Ainsi, le produit directement obtenu par les capsules selon l’invention peut être utilisé dans le cadre de thérapie cellulaire. Les capsules et les cellules obtenues nécessitent ainsi de respecter la réglementation GMP. Or, le matrigel®, étant donné sa composition ne peut être utilisé en condition GMP. Cette problématique est résolue de manière satisfaisante avec le maillage de fibrine comme représenté dans les résultats ci-après. Protocole Dans le cadre de cet essai, les inventeurs ont utilisé une lignée cellulaire iPS qui a été générée selon les standards habituels de la culture iPS en deux dimensions, puis les cellules ont été décollées des flasques via l'action d'une enzyme, selon les connaissances de l’Homme du métier, et reprises dans du milieu de culture adapté à la culture d'iPS. Les cellules iPS ont été mélangées dans un milieu de culture adapté, comprenant une solution de fibrinogène à 14mg/ml, de façon à obtenir une densité de cellules de l’ordre de 3M/ml. La solution de thrombine a été mélangée dans une solution de sorbitol. Les différentes solutions ont ensuite été chargées via les lignes dédiées et co-injectées simultanément au moyen d’un injecteur microfluidique. La quantité de cellules encapsulées est de l’ordre de 1,2*10^6. Le même protocole a été mis en œuvre afin d’obtenir des capsules dépourvues de matrice extracellulaire exogène et des capsules avec du matrigel®. De J1 à J5 après l’encapsulation, les capsules sont vérifiées visuellement. A J5, l’aspect des cellules, la quantité de cellules, leur viabilité et la pluripotence est observé. Résultats Les résultats présentés en , , , et . La représente des capsules dépourvues de matrice extracellulaire exogène (A), des capsules comprenant du matrigel® (B), des capsules selon l’invention selon l’exemple 2 (C), et des capsules selon l’invention selon l’exemple 1 (D). Des images de microscopie à contraste de phase ont été générées et les inventeurs ont observé l’obtention de capsules comprenant au moins une couche de cellules, une couche externe en hydrogel et un maillage de fibrine (C) et (D) en comparaison avec les capsules de l’art antérieur à base de matrigel® (B), et des capsules sans matrice extracellulaire exogène (A). Les inventeurs ont ensuite caractérisé les capsules obtenues. Les résultats en représentent les résultats relatifs à l’amplification des capsules selon l’invention, des capsules en présence de matrigel®, et des capsules en absence de matrice extracellulaire exogène. Les inventeurs ont observé une meilleure amplification avec la fibrine par rapport à l'absence de matrice extracellulaire exogène mais inférieur par rapport au matrigel®. Toutefois, les résultats obtenus démontrent que les capsules à base de maillage de fibrine permettent une bonne amplification des capsules permettant leur utilisation pour produire des cellules. Les résultats en représentent le pourcentage de capsules comprenant un cyste, que ce soit pour les capsules selon l’invention, les capsules en présence de matrigel® et les capsules dépourvues de matrice extracellulaire exogène. Les inventeurs ont observé la présence d’au moins un cyste dans environ 60% des capsules selon l’invention. Là encore, les résultats obtenus démontrent que les capsules à base de maillage de fibrine permettent d’obtenir un cyste et donc leurs utilisations pour produire des cellules. Les résultats en représentent les résultats relatifs à la pluripotence pour les capsules selon l’invention, les capsules en présence de matrigel® et en absence de matrice extracellulaire exogène. Dans cet essai, les inventeurs ont observé plus de cellules positives pour Oct4, Nanog, SSEA4 et SSEA5 (facteurs caractéristiques des cellules iPS) dans les capsules comprenant la fibrine que celles dépourvues de matrice extracellulaire exogène, démontrant ainsi que les capsules à base de fibrine permettent de maintenir la pluripotence des cellules et donc la viabilité. Les résultats démontrent ainsi que la fibrine se présente comme un substitut de matrice extracellulaire satisfaisant dans le contexte de l’invention, bien que présentant des résultats légèrement inférieurs au matrigel®. En effet, la fibrine est systématiquement supérieure à l’utilisation de capsule dépourvue de matrice extracellulaire exogène et permet d’obtenir une bonne amplification, de conserver la pluripotence, et de développer des cystes, de façon satisfaisante. Ainsi, l’utilisation de fibrine, en particulier l’utilisation d’un maillage de fibrine permet de surmonter les inconvénients de l’art antérieur permettant l’utilisation de cette technologie de microcompartiment en trois dimensions à base de maillage de fibrine, en clinique dans le cadre de thérapies cellulaires. Exemple 5 – Capsule selon l’invention dans le cadre d’un protocole de différenciation de cellules iPS en tissu neuronal. Cette étude vise à utiliser le microcompartiment selon l’invention dans le cadre d’un protocole de différenciation en tissu neuronal à partir de cellules iPS. Protocole Une fois les microcompartiments cellulaire selon l’invention obtenus comprenant les cellules iPS, celles-ci vont subir une différenciation cellulaire de manière à les différencier en cellules neuronales selon le phénotype souhaité. Dans le cadre de cet essai, la méthode mise en œuvre est adaptée de Kriks et al. (« Dopamine neurons derived from human ES cells efficiently engraft in animal models of Parkinson's disease », Nature 2011 Nov 6;480(7378):547-51) et de Nolbrant et al. (“Generation of high-purity human ventral midbrain dopaminergic progenitors for in vitro maturation and intracerebral transplantation”, Nature Protocols 2017). Les capsules comprenant les cellules iPS puis différenciées en tissu neuronal sont cultivées pendant 24 jours après l’encapsulation. Résultats Les résultats sont présentés en et . Les inventeurs ont ainsi observé la présence de tissu neuronal 24 jours après l’encapsulation à partir de cellules iPS. Le panel A est une image représentant les microcompartiments selon l’invention à base de fibrine polymérisée à partir de fibrinogène à 14mg/ml, et le panel B représente des microcompartiments de l’art antérieur à base de matrigel®. Les inventeurs ont ainsi pu observer la présence de tissu neuronal, en particulier des neurosphères ayant une taille similaire que ce soit dans les capsules à base de fibrine ou les capsules à base de matrigel®. Le tissu neuronal à J24 exprime bien la tyrosine hydroxylase (TH), marqueur spécifique des cellules neuronales constituant le tissu neuronal. Enfin, les inventeurs ont de façon surprenante observé que les capsules selon l’invention comprennent des cellules neuronales présentant un phénotype plus mature que celles comprises dans les capsules à base de matrigel® (Hors Invention). Ces résultats sont présentés en . Les inventeurs ont analysé l’expression de certains gènes présents dans la population cellulaire du tissu neuronal à J24 cultivé dans les capsules de l’invention et les capsules à base de matrigel®. Un contrôle positif basé sur l’ajout de progéniteurs de neurones dopaminergiques dans des capsules a également été ajouté. Les résultats montrent que le tissu neuronal présent dans les capsules de l’invention, présente un profil proche de celui du contrôle positif, démontrant la présence d’un phénotype plus mature. Aussi, les résultats démontrent bien qu’un maillage de fibrine est particulièrement adapté comme substitut de la matrice extracellulaire non GMP dans le contexte de culture tridimensionnelle dans des microcompartiments cellulaires. Microcompartiment cellulaire comprenant : - au moins une couche de cellules, - une couche externe en hydrogel, - un maillage de fibrine agencé entre la couche externe en hydrogel et ladite couche de cellule, ledit microcompartiment ne comprenant pas de cellules souches embryonnaires d’êtres humains. Microcompartiment cellulaire selon la revendication précédente, dans lequel le maillage de fibrine est enchevêtré avec la couche externe en hydrogel. Microcompartiment cellulaire selon l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce que la couche externe comprend de l’alginate. Microcompartiment cellulaire selon l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le microcompartiment est clos. Microcompartiment selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce que le microcompartiment est un microcompartiment en trois dimensions. Microcompartiment selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce que le microcompartiment à la forme d’un ovoïde, d’un cylindre, d’un sphéroïde, d’une sphère ou d’une larme. Microcompartiment cellulaire selon l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce que les cellules constituant la couche de cellules sont des cellules choisies parmi les cellules eucaryotes, cellules pluripotentes, et cellules différenciées. Microcompartiment cellulaire selon l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le microcompartiment comprend une lumière. Microcompartiment cellulaire selon la revendication précédente, caractérisé en ce que la couche de cellule, le maillage de fibrine et la couche externe sont successivement organisées autour de la lumière. Microcompartiment selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce que la fibrine est obtenue à partir de la polymérisation du fibrinogène par la thrombine pendant l’encapsulation et/ou après l’encapsulation. Ensemble de microcompartiments, caractérisé en ce que au moins un microcompartiment est un microcompartiment selon l’une des revendications précédentes. Microcompartiment selon l’une des revendications 1 à 10 ou ensemble de microcompartiments selon la revendication 11 pour son utilisation comme médicament. Procédé de préparation d’un microcompartiment cellulaire selon l’une des revendications 1 à 10, comprenant les étapes suivantes : mélanger des cellules, éventuellement préalablement incubées dans un milieu de culture avec un mélange de fibrinogène, encapsuler le mélange de l’étape (a) dans une couche d’hydrogel ; cultiver les capsules obtenues à l’étape (b) dans un milieu de culture, éventuellement, cultiver les capsules issues de l’étape (c) pendant au moins 1 jour, préférentiellement de 3 à 50 jours, et optionnellement récupérer les microcompartiments cellulaires obtenus, caractérisé en ce qu’une solution de thrombine est ajoutée lors de l’étape (b) et/ou (c). Procédé selon la revendication précédente, caractérisé en ce que l’étape (b) comprend les sous-étapes suivantes : mettre en contact le mélange de l’étape (a) et une solution d’hydrogel pour former au moins une goutte, et collecter l’au moins une goutte obtenue dans un bain de calcium apte à rigidifier la solution d’hydrogel pour former la couche externe de chaque microcompartiment, la partie interne de chaque goutte étant constituée par le mélange de l’étape (a). Procédé selon la revendication précédente, caractérisé en ce que la solution de thrombine est ajoutée lors de l’étape i) ou ii). Procédé selon l’une des revendications 13 à 15, caractérisé en ce que l’étape i) consiste à mettre en contact le mélange de l’étape a), la solution d’hydrogel, et une solution intermédiaire comprenant ladite solution de thrombine. Procédé selon l’une des revendication 13 ou 14, caractérisé en ce que la solution de thrombine est ajoutée lors de l’étape c). Procédé selon l’une des revendications 13 à 17 caractérisé en ce que la concentration du fibrinogène est comprise entre 5 et 30 mg/mL, préférentiellement 10-25 mg/mL. Procédé selon la revendication précédente, caractérisé en ce que la concentration du fibrinogène est comprise entre 14 et 20 mg/mL. Procédé selon l’une des revendications 13 à 19, caractérisé en ce que la concentration de la thrombine est comprise entre 0.001 et 2U/ml, préférentiellement entre 0.01 U/ml et 0.03 U/ml. Procédé selon l’une des revendications 13 à 20, caractérisé en ce que l’étape b) est réalisée par co-injection simultanée de la solution d’hydrogel, du mélange de l’étape a) et optionnellement de ladite solution intermédiaire ; ladite co-injection est réalisée de manière concentrique via un injecteur microfluidique ou millifluidique formant un jet en sortie d’injecteur constitué du mélange desdites solutions, ledit jet se fractionnant en gouttes. Procédé selon la revendication précédente, caractérisé en ce que le diamètre d’ouverture finale de l’injecteur microfluidique est compris entre 50 et 800 µm, préférentiellement entre 80 et 240 µm, et le débit de chacune des solutions est compris entre 0,1 et 1000 mL/h, préférentiellement entre 10 et 150 mL/h. Utilisation d’un kit destiné à la préparation d’un microcompartiment selon l’une des revendications 1 à 10, ledit kit comprenant une solution de fibrinogène et une solution de thrombine. Utilisation selon la revendication précédente, caractérisé en ce que la solution de fibrinogène et la solution de thrombine sont d’origine humaine et sont conforme avec la réglementation relative au Bonnes Pratiques de Fabrication (BPF).