Brevet FR3134578A1 — publié le 20231020

La présente divulgation concerne un procédé de préparation d’un hydrogel comprenant un polysaccharide réticulé, en particulier, un procédé de préparation d’un hydrogel injectable comprenant de l’acide hyaluronique réticulé. La présente divulgation concerne également un hydrogel, de préférence injectable, susceptible d’être obtenu par le procédé, une composition comprenant l’hydrogel, et les utilisations de cet hydrogel. HYDROGELS POUR LE COMBLEMENT DES TISSUS MOUS DOMAINE DE L’INVENTION La présente invention concerne un procédé de préparation d’un hydrogel comprenant un polysaccharide réticulé, en particulier, un procédé de préparation d’un hydrogel injectable comprenant de l’acide hyaluronique réticulé. La présente invention concerne également un hydrogel, de préférence injectable, susceptible d’être obtenu par le procédé, une composition comprenant l’hydrogel, et les utilisations de cet hydrogel. ARRIERE PLAN TECHNOLOGIQUE Les hydrogels à base de polysaccharides, en particulier les hydrogels à base d’acide hyaluronique, sont largement utilisés pour le comblement des tissus mous, en particulier de la peau, qui présentent par exemple des défauts volumiques (ex. rides, cicatrices) ou pour l’augmentation de leur volume. Les hydrogels adaptés au comblement des tissus mous sont typiquement des hydrogels réticulés, i.e. le polysaccharide est réticulé au moyen d’un ou plusieurs agent(s) réticulant. Cette réticulation permet d’obtenir un hydrogel avec les propriétés mécaniques souhaitables pour le comblement des tissus mous. Bien que biodégradables et biocompatibles, les hydrogels à base d’acide hyaluronique, peuvent être, avec une incidence faible, à l’origine d’effets indésirables qui se développent entre 6 et 24 mois après l’application du produit de comblement. Notamment, il peut arriver que le produit de comblement migre jusque dans une zone éloignée de celle de son application dans ou sur le corps (Chae SY, Lee KC, Jang YH, Lee SJ, Kim DW, Lee WJ. A Case of the Migration of Hyaluronic Acid Filler from Nose to Forehead Occurring as Two Sequential Soft Lumps. Ann Dermatol. 2016;28(5):645-647 and Mosleh, Rasha & Mukari, Abed & Krausz, Judit & Hartstein, Morris & Hamed Azzam, Shirin. (2019). Orbit mass secondary to migration of dermal hyaluronic acid filler. JAAD Case Reports. 5. 488-490). Plusieurs raisons ont été proposées pour expliquer ce phénomène, telles que par exemple une mauvaise technique d’injection, un volume injecté trop important, une activité physique post-injection (activité musculaire, exercices), un déplacement induit par une pression (e.g. massage), une injection intravasculaire, un envahissement lymphatique, la gravité. Pour diminuer le risque de migration des gels à base de polysaccharides, certaines méthodes ont déjà été décrites, notamment, il a été proposé d’appliquer un champ électrique répulsif à au moins une partie du périmètre autour du site de traitement (WO2020/172371). Néanmoins, un besoin demeure pour la mise à disposition d’un hydrogel à base de polysaccharides réticulés, en particulier d’un hydrogel à base d’acide hyaluronique réticulé dont les chaines d’acide hyaluronique sont préservées, ayant des propriétés mécaniques adaptées au comblement des tissus mous et qui ne migre pas dans les tissus après son application. BREVE DESCRIPTION DE L’INVENTION La présente invention porte sur un procédé de préparation d’un hydrogel, de préférence injectable, comprenant les étapes suivantes : a) fournir au moins un polysaccharide ; b) fournir au moins un agent réticulant, ledit agent réticulant comprenant au moins deux groupements fonctionnels Z, identiques ou différents, choisis parmi les groupements isocyanate, amino, époxyde, carboxyle, N-succinimidyloxycarbonyle, N-sulfosuccinimidyloxycarbonyle, halogénocarbonyle, isothiocyanate, vinyle, formyle, hydroxyle, sulfhydryle, hydrazino, acylhydrazino, aminoxy, carbodiimide, et un résidu d’anhydride d’acide ; c) préparer un milieu réactionnel de réticulation comprenant le ou les polysaccharide(s), le ou les agent(s) réticulant et un solvant, la quantité totale d’agent réticulant allant de 0,001 à 0,02 en moles pour 1 mole d’unité de répétition du polysaccharide, la durée de l’étape de préparation du milieu réactionnel n’excédant pas 5 heures ; d) placer le milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape c), pendant une durée allant de 2 semaines à 17 semaines, à une pression P inférieure ou égale à la pression atmosphérique et à une température T supérieure à la température du point eutectique du milieu réactionnel telle que mesurée à la pression P et inférieure à la température du point de congélation du milieu réactionnel telle que mesurée à la pression P. La présente invention porte également sur un hydrogel susceptible d’être obtenu par un procédé tel que présentement décrit, ainsi que sur une composition cosmétique ou pharmaceutique comprenant un tel hydrogel et leurs utilisations dans le comblement et/ou le remplacement de tissus, pour prévenir et/ou traiter l’altération des propriétés viscoélastiques ou biomécaniques de la peau ; pour combler des défauts volumiques de la peau, et notamment pour combler des rides, des ridules et des cicatrices ; par exemple, pour atténuer les sillons naso-géniens et plis d’amertumes, pour augmenter le volume des pommettes, du menton ou des lèvres, pour rétablir les volumes du visage notamment des joues, des tempes, de l’ovale du visage, et du pourtour de l’œil ; ou pour réduire l’apparition des rides et ridules ; ou pour stimuler, régénérer, hydrater, raffermir ou restaurer l’éclat de la peau, notamment par mésothérapie. D’autres aspects de l’invention sont tels que décrits ci-dessous et dans les revendications. FIGURES La figure 1 illustre le caractère collant d’un hydrogel selon l’invention par rapport à un hydrogel traditionnel sur une surface métal ( ), verre ( ]), plastique ( ) et collagène ( ). DEFINITIONS Le terme « gel » désigne un réseau de polymères qui est dilaté dans tout son volume par un fluide. Cela signifie qu'un gel est formé de deux milieux, l’un « solide » et l’autre « liquide », dispersés l'un dans l'autre. Le milieu dit « solide » est constitué des longues molécules polymères connectées entre elles par des liaisons faibles (par exemple des liaisons hydrogène) ou par des liaisons covalentes (réticulation). Le milieu liquide est constitué d’un solvant. Un gel correspond généralement à un produit qui possède un angle de phase δ inférieur ou égal à 45° à 1Hz pour une déformation de 0,1% ou une pression de 1 Pa, avantageusement un angle de phase δ allant de 2° à 45° ou allant de 20° à 45°. Le terme « hydrogel » désigne un gel tel que défini ci-dessus dans lequel le solvant constituant le milieu liquide est majoritairement de l'eau (par exemple au moins 90%, en particulier au moins 95%, notamment au moins 99% en poids du milieu liquide). De manière préférée, le milieu liquide comprend, notamment consiste en, une solution tampon, permettant avantageusement un pH du milieu liquide compris entre 6,8 et 7,8, notamment un tampon phosphate salin. Le terme « gel injectable » désigne un gel qui peut s’écouler et être injecté manuellement au moyen d’une seringue munie d'une aiguille de diamètre allant de 0,1 à 0,5 mm, par exemple d’une aiguille hypodermique de 30 G, 27 G, 26 G, 25 G. Préférentiellement, un « gel injectable » est un gel présentant une force d’extrusion moyenne inférieure ou égale à 25N, de préférence allant de 5 à 25 N, encore de préférence allant de 8 à 15 N, lors d’une mesure avec un dynamomètre, à une vitesse fixe d’environ 12,5 mm/min, dans des seringues de diamètre externe supérieur ou égal à 6,3 mm, avec une aiguille de diamètre externe inférieur ou égal à 0,4 mm (27 G) et de longueur ½ ’’, à température ambiante. Le caractère « filant » d’un produit désigne sa capacité à être étiré entre deux surfaces auxquelles il a adhéré. Le caractère filant peut être déterminé à l’aide d’un texturomètre, d’une analyse sensorielle effectuée par un panel, ou encore de mesures rhéologiques et mécaniques incluant notamment la mesure de l’angle de phase (δ) ou des tests de traction. Notamment, ce caractère peut être mesuré comme décrit par P. Micheels et al. ( Micheels et al., Comparison of two swiss-designed hyaluronic acid gels : six-month clinical follow-up, Journal of Drug in Dermatology, 2017, 16:154-161, « Resistance to stretching » ) ou en réalisant un test de Tack et en mesurant la longueur des fils de gel en traction. Le caractère « collant » d’un produit désigne sa capacité à adhérer à une surface. Il peut être déterminé qualitativement à l’aide d’une analyse sensorielle effectuée à l’aide d’un panel ou encore en déplaçant un bolus sur une surface. Il peut également être déterminé quantitativement par une mesure de la force d’adhésion à une surface, machine de traction ou analyse mécanique. Le terme « polysaccharide » désigne un polymère composé de monosaccharides (préférentiellement des énantiomères D) joints entre eux par des liaisons glycosidiques. Le terme « monosaccharide », encore appelé « ose » désigne un monosaccharide non modifié ou modifié. Un « monosaccharide non modifié » désigne un composé de formule H-(CHOH) x -CO-(CHOH) y -H avec x et y représentant, indépendamment l’un de l’autre, un nombre entier allant de 0 à 5 à la condition que 2 ≤ x+y ≤ 5, le monosaccharide pouvant se trouver sous une forme linéaire représentée par la formule susmentionnée ou pouvant se trouver sous une forme cyclisée par réaction de la fonction CO (aldéhyde ou cétone) avec l’un des groupes OH pour former un groupe hémiacétal ou hémicétal. De préférence, le monosaccharide est sous forme cyclisée. Il existe deux types d’ose : les aldoses qui portent une fonction aldéhyde (quand x ou y vaut 0) et les cétoses qui portent une fonction cétone (quand ni x, ni y vaut 0). Les monosaccharides sont classés par nombre de carbones. Par exemples les monosaccharides à 6 carbones (x+y=5) sont les hexoses de formule C 6 H 12 O 6 et peuvent être l’allose, l’altrose, le glucose, le mannose, le gulose, l’idose, le galactose ou le talose. Les monosaccharides à 5 carbones (x+y=4) sont les pentoses de formule C 5 H 10 O 5 et peuvent être le ribose, l’arabinose, le xylose, ou le lyxose. De préférence, le monosaccharide est un hexose, c’est-à-dire que x+y = 5. Un monosaccharide comprend en outre x+y carbones asymétriques et donc 2 (x+y-1) paires d’énantiomères. Chaque paire d’énantiomères est désignée par un nom différent et les énantiomères d’une même paire sont qualifiés respectivement d’énantiomères D et L. Un « monosaccharide modifié » désigne un monosaccharide non modifié tel que défini ci-dessus dont, par exemple : - un ou plusieurs des groupes fonctionnels OH ont été remplacés par un autre groupe fonctionnel, par exemple : (i) un groupe OR avec R représentant un groupe (C 1 -C 6 )alkyle tel que méthyle ou éthyle ; hydroxy-(C 1 -C 6 )alkyle tel qu’hydroxyéthyle (-CH 2 CH 2 OH) ou hydroxypropyle (-CH 2 -CH(OH)-CH 3 ) ; carboxy-(C 1 -C 6 )alkyle tel que carboxyméthyle (-CH 2 COOH) ; ou CO-(C 1 -C 6 )alkyle tel qu’acétyle ; et/ou (ii) un groupe NR’R’’ avec R’ et R’’ représentant, indépendamment l’un de l’autre, H, (C 1 -C 6 )alkyle ou CO-(C 1 -C 6 )alkyle tel qu’acétyle ; et/ou (iii) un groupe OSO 3 H ; et/ou - la ou les fonctions CH 2 OH terminales ont été remplacées par un groupe COOH ou CHO ; - une liaison -CH(OH)-CH(OH)- est oxydée pour donner deux groupes -CHO (aldéhyde) terminaux en lieu et place de cette liaison ; et/ou - une fonction CH 2 OH terminale a été condensée avec un groupe fonctionnel OH pour former une chaîne -O-CH 2 -. L’expression « unité de répétition » d’un polysaccharide désigne un motif structurel constitué d’un ou plusieurs (généralement 1 ou 2) monosaccharides dont la répétition produit la chaîne de polysaccharide complète. Une partie ou l’ensemble des monosaccharides peut être sous une forme modifiée. Les monosaccharides, lorsqu’ils sont modifiés, peuvent être sous différentes formes modifiées. Le terme « physiologiquement acceptable » désigne ce qui est généralement sûr, non toxique et ni biologiquement ni autrement non souhaitable et qui est acceptable pour une utilisation cosmétique (c’est-à-dire non thérapeutique) ou thérapeutique humaine ou vétérinaire, notamment pour une utilisation par injection dans le corps humain ou animal ou pour une application topique sur la peau. Les « sels » utiles dans le cadre de la présente invention sont de préférence des sels physiologiquement acceptables. Les termes « sels physiologiquement acceptables » désignent notamment : (1) les sels d’addition d’acide pharmaceutiquement acceptable formés avec des acides inorganiques pharmaceutiquement acceptables tels que l’acide chlorhydrique, l’acide bromhydrique, l’acide sulfurique, l’acide nitrique, l’acide phosphorique et similaires ; ou formés avec des acides organiques pharmaceutiquement acceptables tels que l’acide formique, l’acide acétique, l’acide benzènesulfonique, l’acide benzoïque, l’acide camphresulfonique, l’acide citrique, l’acide éthane-sulfonique, l’acide fumarique, l’acide glucoheptonique, l’acide gluconique, l’acide glutamique, l’acide glycolique, l’acide hydroxynaphtoïque, l'acide 2-hydroxyéthanesulfonique, l’acide lactique, l’acide maléique, l’acide malique, l’acide mandélique, l’acide méthanesulfonique, l’acide muconique, l’acide 2-naphtalènesulfonique, l’acide propionique, l’acide salicylique, l’acide succinique, l’acide dibenzoyl-L-tartrique, l’acide tartrique, l’acide p-toluènesulfonique, l’acide triméthylacétique, l’acide trifluoroacétique et similaires, et (2) les sels d’addition de base pharmaceutiquement acceptable formés lorsqu’un proton acide présent dans le composé parent est soit remplacé par un ion métallique, par exemple un ion de métal alcalin (e.g. Na, K), un ion de métal alcalino-terreux (e.g. Ca, Mg), un ion de zinc, un ion d’argent ou un ion d'aluminium ; soit coordonné avec une base organique pharmaceutiquement acceptable telle que la diéthanolamine, l’éthanolamine, N-méthylglucamine, la triéthanolamine, la trométhamine et similaires ; ou avec une base inorganique pharmaceutiquement acceptable telle que l’hydroxyde d’aluminium, l’hydroxyde de calcium, l’hydroxyde de potassium, le carbonate de sodium, l’hydroxyde de sodium et similaires. Le « degré de modification » (MOD) d’un polysaccharide, tel que l’acide hyaluronique, correspond à la quantité molaire d’agent réticulant liée au polysaccharide, par une ou plusieurs de ses extrémités, exprimée pour 100 moles d’unités de répétition du polysaccharide. Il peut être déterminé par des méthodes connues de l’homme du métier telle que la spectroscopie de Résonance Magnétique Nucléaire (RMN). Par exemple, un degré de modification de 1% signifie qu’il y a une molécule d’agent réticulant pour 100 unités de répétition de polysaccharide. Le « taux de réticulation molaire » (TR), exprimé en %, désigne le rapport molaire de la quantité d’agent réticulant par rapport à la quantité d’unité de répétition du polysaccharide introduite dans le milieu réactionnel de réticulation exprimé pour 100 moles d’unités de répétition du polysaccharide dans le milieu de réticulation. Par exemple, un taux de réticulation molaire de 1% signifie qu’il y a une molécule d’agent réticulant introduite dans le milieu réactionnel pour 100 unités de répétition de polysaccharide. L’expression « principe actif thérapeutique » désigne une substance pour guérir, soulager les symptômes et/ou prévenir une maladie ; une substance possédant des propriétés curatives ou préventives à l’égard des maladies humaines ou animales, ainsi que toute substance pouvant être utilisée chez l’homme ou chez l’animal ou pouvant leur être administrée, en vue d’établir un diagnostic médical ou de restaurer, corriger ou modifier leurs fonctions physiologiques en exerçant une action pharmacologique, immunologique ou métabolique. L’expression « principe actif cosmétique » désigne toute substance non thérapeutique notamment destinée à être mise en contact avec diverses parties superficielles du corps humain, tel que l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires, les ongles, les lèvres, la poitrine et les dents, en vue, exclusivement ou principalement, de les nettoyer, protéger, parfumer, maintenir en bon état, modifier leur aspect ou l'odeur. Le terme « environ » désigne que la valeur concernée peut être inférieure ou supérieure de 10%, notamment de 5%, en particulier de 1%, à la valeur indiquée. L’expression « groupement espaceur » désigne un fragment comprenant au moins un atome visant à lier ensemble deux groupements chimiques au sein d’une même molécule. Préférentiellement, le groupement espaceur contient au moins un atome de carbone. Le terme « halogène » désigne un atome de fluor, chlore, brome ou iode. Un groupement « époxyde » est un résidu d’oxyde d’éthylène lié au reste de la molécule par l’un de ses atomes de carbone. Un groupement « N-succinimidyloxycarbonyle » est un groupe de formule Chem. GR1 ci-dessous : Un groupement « N-sulfosuccinimidyloxycarbonyle» est un groupe de formule Chem. GR2 ci-dessous : Un groupement « halogénocarbonyle » est un groupement de formule -CO-Hal avec Hal représentant un halogène, tel que Cl ou Br. Un groupement « carbodiimide » est un groupe comprenant un motif -N=C=N-, et plus particulièrement un groupement de formule -N=C=N-R a avec R a représentant un groupe hydrocarboné aliphatique comportant de 1 à 20 atomes de carbone, de préférence un groupe (C1-C6)alkyle, dont un ou plusieurs atomes de carbone sont éventuellement remplacés par un hétéroatome choisi parmi O, S et N, notamment N. Un « résidu d’anhydride d’acide » est un groupe comprenant un motif -C(O)-O-C(O)-, et plus particulièrement un groupement cyclique monovalent comprenant le motif-C(O)-O-C(O)-, tel qu’un groupe monocyclique monovalent hydrocarboné saturé comprenant 5 à 10, notamment 5 ou 6, atomes de carbone dont trois atomes de carbone successifs sont remplacés par C(O)-O-C(O) et éventuellement dont un ou plusieurs, notamment un, atomes de carbone additionnels, de préférence non consécutifs aux trois atomes de carbone substitués par CO-O-CO, sont chacun remplacés par un hétéroatome tel que N, O ou S, notamment N. Le résidu d’anhydride d’acide peut répondre en particulier à la formule Chem. GR3 suivante : Le résidu d’anhydride d’acide peut aussi être choisi parmi un résidu d’anhydride maléique ou un résidu d’anhydride succinique. L’expression « chaîne hydrocarbonée aliphatique » ou « groupe hydrocarboné aliphatique » désigne un groupe hydrocarboné linéaire, ramifié et/ou cyclique, saturé ou insaturé mais non aromatique, avantageusement comprenant de 1 à 50, notamment de 1 à 20, par exemple de 1 à 12 ou de 1 à 6 atomes de carbone. Il s’agira en particulier de groupes alkyles. L’expression « chaîne hydrocarbonée aliphatique ramifiée » désigne spécifiquement une chaîne hydrocarbonée aliphatique principale comprenant au moins une chaîne hydrocarbonée aliphatique secondaire. L’expression « chaîne hydrocarbonée aliphatique étoilée » désigne une chaîne hydrocarbonée aliphatique ramifiée comprenant plusieurs chaînes hydrocarbonées aliphatiques secondaires partant toutes d’un seul point de ramification. L’expression « alkyle en C1-Cx » ou « (C1-Cx)alkyle » ou encore « alkyle comportant de 1 à x atomes de carbone » désigne un groupe hydrocarboné monovalent saturé, linéaire ou ramifié, comportant de 1 à x atomes de carbone, avec x un nombre entier, comme par exemple un groupement méthyle, éthyle, isopropyle, tertio-butyle, n-pentyle, cyclopropyle, cyclohexyle, etc. L’expression « (C1-Cx)alkylène » désigne un groupement hydrocarboné divalent saturé, linéaire ou ramifié, comportant de 1 à x atomes de carbone, avec x un nombre entier, comme par exemple un groupement methane-1,1-diyle, ethane-1,1-diyle, ethane-1,2-diyle, propane-1,3-diyle, butane-1,4-diyle, butane-1,3-diyle, butane-1,2-diyle, pentane-1,5-diyle, hexane-1,6-diyle, hexane-1,5-diyle, heptane-1,7-diyle, octane-1,8-diyle, nonane-1,9-diyle, decane-1,10-diyle, etc. Il s’agit notamment d’un groupe methane-1,1-diyle ou propane-1,3-diyle. L’expression « hydroxy-(C1-Cx)alkyle » désigne un groupement (C1-Cx)alkyle tel que défini ci-dessus substitué par un groupe hydroxyle (OH) comme par exemple un hydroxyéthyle (-CH 2 CH 2 OH) ou un hydroxypropyle (par ex. -CH 2 -CH(OH)-CH 3 ). L’expression « carboxy-(C1-Cx)alkyle » désigne un groupement (C1-Cx)alkyle tel que défini ci-dessus substitué par un groupe carboxyle (COOH) comme par exemple un carboxyméthyle (-CH 2 COOH). L’expression « aryle » désigne un groupement hydrocarboné aromatique monovalent, comportant de préférence de 6 à 10 atomes de carbone, comprenant un ou plusieurs cycles, comme par exemple un groupement phényle, ou naphtyle. L’expression « arylène » désigne un groupement hydrocarboné aromatique divalent, comportant de préférence de 6 à 10 atomes de carbone, comprenant un ou plusieurs cycles, comme un groupe phénylène. L’expression « aryle-(C1-Cx)alkyle » désigne un groupe aryle tel que défini ci-dessus, lié au reste de la molécule par l’intermédiaire d’une chaîne (C1-Cx)alkyle telle que définie ci-dessus avec x un nombre entier, comme par exemple le groupe benzyle ou encore phényléthyle. L’expression « groupe polyvalent » désigne un groupe pouvant former plusieurs liaisons covalentes avec d’autres groupes d’un même composé ou de deux composés différents. Les liaisons aux autres groupes peuvent être formées à partir d’un même atome du groupe polyvalent ou de différents atomes du groupe polyvalent, et de préférence à partir de différents atomes du groupe polyvalent. En particulier, le groupe polyvalent est un groupe divalent et peut donc former deux liaisons covalentes avec deux autres groupements d’un même composé ou de deux composés différents. Le nombre de liaisons covalentes pouvant être formées désigne la « valence » du groupe polyvalent. Procédé de préparation d’un hydrogel, de préférence injectable, comprenant les étapes suivantes : a) fournir au moins un polysaccharide ; b) fournir au moins un agent réticulant, ledit agent réticulant comprenant au moins deux groupements fonctionnels Z, identiques ou différents, choisis parmi les groupements isocyanate, amino, époxyde, carboxyle, N-succinimidyloxycarbonyle, N-sulfosuccinimidyloxycarbonyle, halogénocarbonyle, isothiocyanate, vinyle, formyle, hydroxyle, sulfhydryle, hydrazino, acylhydrazino, aminoxy, carbodiimide, et un résidu d’anhydride d’acide ; c) préparer un milieu réactionnel de réticulation comprenant le ou les polysaccharide(s), le ou les agent(s) réticulant et un solvant, la quantité totale d’agent réticulant allant de 0,001 à 0.02 moles pour 1 mole d’unité de répétition du polysaccharide, la durée de l’étape de préparation du milieu réactionnel n’excédant pas 5 heures ; d) placer le milieu réactionnel obtenu à l’issue de l’étape c), pendant une durée allant de 2 semaines à 17 semaines, à une pression P inférieure ou égale à la pression atmosphérique et à une température T supérieure à la température du point eutectique du milieu réactionnel telle que mesurée à la pression P et inférieure à la température du point de congélation du milieu réactionnel telle que mesurée à la pression P. Le procédé selon la revendication 1 dans lequel le polysaccharide est un glycosaminoglycane, de préférence le polysaccharide est l’acide hyaluronique ou un sel de ce dernier. Le procédé selon la revendication 1 ou 2 dans lequel les groupements fonctionnels Z de l’agent réticulant sont des groupements époxyde, de préférence l’agent réticulant est choisi parmi le 1,4-butanediol diglycidyl éther (BDDE), le 1,2,7,8-diépoxy-octane, le poly(ethylene glycol) diglycidyl ether (PEGDG), le 1,2-bis(2,3-époxypropoxy)éthane (EGDGE), et leurs mélanges. Le procédé selon l’une des revendications précédentes dans lequel la quantité totale d’agent réticulant varie de 0,001 à 0,01 moles pour 1 mole d’unité de répétition du polysaccharide, de préférence de 0,001 à 0,005 moles pour 1 mole d’unité de répétition du polysaccharide. Le procédé selon l’une des revendications précédentes dans lequel la température T est supérieure ou égale à -55°C et inférieure ou égale à -5 °C, de préférence est d’environ -20°C. Le procédé selon l’une des revendications précédentes dans lequel la pression P est égale à la pression atmosphérique. Le procédé selon l’une des revendications précédentes comprenant en outre une étape de stérilisation. Hydrogel susceptible d’être obtenu par le procédé de l’une des revendications précédentes. Composition cosmétique ou pharmaceutique comprenant un hydrogel selon la revendication 8. Utilisation cosmétique d’un hydrogel selon la revendication 8 ou d’une composition selon la revendication 9 pour prévenir et/ou traiter l’altération des propriétés viscoélastiques ou biomécaniques de la peau ; pour combler des rides, des ridules et des cicatrices ; pour atténuer les sillons naso-géniens et plis d’amertumes ; pour réduire l’apparition des rides et ridules ; ou pour stimuler, régénérer, hydrater, raffermir ou restaurer l’éclat de la peau, notamment par mésothérapie.