Brevet FR3135992A1 — publié le 20231201

Signature moléculaire du lentigo actinique associée à la gestion des vésicules La présente invention concerne une méthode de caractérisation d’une tache pigmentaire cutanée apparente ou soupçonnée chez un être humain, comprenant la comparaison des niveaux d’expression, dans des échantillons de peau issue de ladite tache et de peau adjacente non lésée, d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, NAV3 et PCLO, et éventuellement du gène MREG. L’invention concerne également des méthodes d’évaluation de l’efficacité d’un traitement des taches pigmentaires, des méthodes cosmétiques de traitement des taches pigmentaires, ainsi que divers modulateurs desdits gènes et leur utilisation. Signature moléculaire du lentigo actinique associée à la gestion des vésicules La présente invention est dans le domaine cosmétique, elle est relative à la peau. Elle s’inscrit plus généralement dans le cadre de la caractérisation des taches pigmentaires de la peau et du traitement de ces taches. La couleur de la peau est principalement due à la présence d’un pigment, la mélanine dans l’épiderme. La mélanine est synthétisée par des cellules dendritiques spécifiques localisées dans la couche basale de l’épiderme, les mélanocytes. La mélanogénèse prend place dans des organelles, les mélanosomes qui, chargés de mélanine, sont transférés aux cellules voisines épidermiques, les kératinocytes, via les dendrites. La couleur de la peau, ou pigmentation constitutive varie selon les individus en fonction de la quantité de mélanine produite ainsi que de la nature chimiques de mélanines. Les mélanines sont des macromolécules formées à partir de tyrosine (eumélanine) ou de tyrosine et de cystéine (pheomélanine). Les mécanismes de synthèse mettent en jeu des enzymes dont les principales sont la tyrosinase et la protéine associée à la tyrosinase (Tyrp-1). Naturellement, la pigmentation de la peau est stimulée par l’exposition au soleil, c’est le phénomène de bronzage. Il existe cependant des situations où le processus de pigmentation est altéré, et qui peuvent aboutir à des défauts de pigmentation, hypopigmentations (vitiligo, albinisme) ou à l’inverse à un excès de pigmentation, hyperpigmentations. Parmi les désordres hyperpigmentaires bénins, caractérisés par une accumulation anormale (hors bronzage) de mélanine, on peut citer le lentigo actinique, le mélasma, les séquelles pigmentaires d'acné, la pigmentation post-inflammatoires, la dermite des prés, ou encore les dychromies bénignes du visage. Le lentigo actinique, également dénommé lentigo sénile ou solaire, tache sénile, tache de vieillesse, ou encore communément dénommé "crasse sénile", "marguerites de cimetière" ou "fleurs de cimetière", est de loin la plus fréquente des lésions pigmentaires. Ce type de lésions apparaît sur des zones de la peau qui ont été photoexposées, telles que le visage, le dos des mains, les membres supérieurs et notamment la face dorsale des avant-bras, le dos, et en particulier le haut du dos. Elles touchent en général les individus à partir de 40 ans. Macroscopiquement, les lentigos actiniques sont représentés par des macules pigmentées bénignes de couleur brune plus ou moins foncée, dont les bords sont nets mais irréguliers. De taille très variable, ils peuvent s’étendre de quelques millimètres à plus de deux centimètres. Malgré sa grande fréquence, peu d’études ont été publiées sur la physiologie et la genèse des lentigos actiniques. Sur la base des rares études histologiques existantes, il est connu qu’il existe une augmentation de la charge mélanique épidermique globale et plus particulièrement au niveau de la couche basale. Il existe également un allongement des crêtes épidermiques qui peuvent prendre un aspect en massue dans le derme papillaire (Montagna W, Hu F, Carlisle K. « A reinvestigation of solar lentigines ». Arch Dermatol. 1980 ; Ber Rahman, S. Bhawan, J. Lentigo. Int J Dermatol, 1996, Apr;35(4):229-39 ; Andersen WK, Labadie RR, Bhawan J. «Histopathology of solar lentigines of the face : a quantitive study» J Am Acad Dermatol. 1997 Mar;36(3 Pt 1):444-7 ; Cario-Andre M, Lepreux, S, Pain C, Nizard C, Noblesse E, Taïeb A. «Prelesional vs. Lesional skin changes in senile lentigo» 2004). Enfin, il peut y avoir des anastomoses entre des crêtes adjacentes donnant un aspect en pont ou en réseau. Une incontinence pigmentaire avec présence de mélanine et de mélanophages peut également exister dans le derme. Les troubles pigmentaires cutanés bénins sont généralement considérés comme inesthétiques. Du fait de l’association avérée entre l’apparition des lentigos actiniques et l’exposition chronique au soleil, la prévention de leur apparition passe en général par l’application topique de produits dits photoprotecteurs comme les écrans solaires. Dans le cas de traitements « curatifs », de nombreux procédés, principalement à visées cosmétiques, ont donc été développés afin de tenter de les éliminer ou de réduire leur présence. L'élimination ou la réduction de la présence de ces troubles repose, d'ordinaire, sur l'application de traitements dépigmentants, basés sur la réduction de l’activité de synthèse de la mélanine dans les mélanocytes. Les molécules dépigmentantes interfèrent avec une ou des étapes de la mélanogénèse. L’une des voies des principaux produits utilisés à ce jour repose sur l’inhibition de la tyrosinase, une des enzymes clés du processus de mélanogénèse. Le but de ces traitements est de diminuer voire de stopper la synthèse de pigment. Les principales substances dépigmentantes connues sont l’hydroquinone et ses dérivés, l’acide kojique, l’arbutine, les iminophénoles, l’acide ascorbique et ses dérivés, l’association de carnitine et de quinone, les dérivés d’amino-phénol, et les dérivés de benzothiazole, des extraits naturels, des corticoïdes. On trouve souvent aussi associés à ces agents actifs des exfoliants permettant d’augmenter la desquamation, et ainsi d’éliminer plus facilement la mélanine présente dans le stratum cornéum. Une autre méthode de traitement non cosmétique consiste à détruire les lésions par des moyens physiques ou chimiques en utilisant les lasers ou les peelings. Cependant, ce sont des procédures assez lourdes qui ne s’attaquent pas à l’étiologie du désordre. Dans la majorité des cas, les lentigos actiniques réapparaissent quelques temps après le traitement. Par ailleurs, il existe des inconvénients majeurs aux traitements existants. Les substances dépigmentantes peuvent présenter notamment une certaine instabilité, une faible efficacité à faible concentration, une activité biologique touchant d’autres fonctions indésirables. De plus, du fait qu’ils ne ciblent pas la cause profonde ayant entrainé le dérèglement de la pigmentation, il existe une grande hétérogénéité de réponse aux différents traitements dépigmentants. Ainsi, pour un traitement donné, administré par exemple de façon topique, un trouble pigmentaire cutané bénin donné, comme un lentigo actinique ou un mélasma, peut s’atténuer ou disparaître, alors qu’un autre n’évoluera pas. Cette variabilité peut être observée entre des lésions chez des individus différents mais aussi chez un même individu, entre différentes lésions. Il existe donc des troubles pigmentaires cutanés bénins pour lesquels aucun traitement topique n’est efficace à ce jour. Il existe donc un besoin de trouver des traitements plus efficaces et plus inoffensifs pour ce type de lésion. Pour cela, il est nécessaire d’identifier les dérégulations moléculaires et dysfonctionnements fonctionnels pouvant exister dans ce type de désordre pigmentaire afin de pouvoir identifier de nouvelles cibles et de sélectionner des agents actifs corrigeant ces défauts. Dans l’art antérieur, concernant le traitement des taches pigmentaires et plus particulièrement des lentigos actiniques, il est décrit la stimulation au niveau génomique ou protéinique de molécules qui sont étroitement associées aux mélanocytes et la mélanogénèse (enzymes de la mélanogénèse, protéine du mélanosome, facteurs paracrine clé de la mélanogénèse). Elle est trouvée dans l’épiderme ou le derme pour les protéines suivantes : Tyrosinase, TRP1, DCT, Pmel-17 , POMC, ET1, ETBR, SCF, c-KIT , KGF , KGFR, Hepatocyte growth factor ( HGF), MIA, TRPM1, Melan-A, Pink eye dilution, P53 et IL1α. Or il est connu depuis peu, que la mélanogénèse ne représente pas le mécanisme biologique majeur impliqué dans l’apparition des tâches pigmentaires et notamment du lentigo actinique (Warrick et al Br J Dermatol 2017, Aoki Br J Dermatol 2007). Les présents inventeurs ont mis en évidence pour la première fois l’implication de gènes liés à la gestion (notamment le transport, la fusion, l’accumulation, la rétention, la dégradation) des vésicules, de préférence des mélanosomes, dans les dérèglements pigmentaires se traduisant par des taches pigmentaires de la peau. En particulier, il a été montré par les présents inventeurs que certains gènes liés à la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, ont des niveaux de transcription différant significativement entre de la peau saine et de la peau issue d’une tache pigmentaire, mettant ainsi en évidence le lien entre dérégulation de la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, au sein de la peau, de préférence l’épiderme, et modulation de la pigmentation induisant notamment l’apparition de taches pigmentaires. Le mélanosome est un organite intracellulaire sous la forme de vésicule, ladit vésicule étant spécialisée dans la production de mélanine, pigment protégeant la peau humaine des radiations solaires. Il est produit dans les mélanocytes. Entouré d'une membrane lipidique, sa forme varie d'arrondie à allongée. Au sein de la peau humaine, les mélanosomes ne restent pas dans les mélanocytes, mais sont évacués en direction des kératinocytes le long de bras ressemblant aux dendrites des neurones (les mélanocytes sont d’origine neurale), dans lesquelles ils se déplacent portés par les kinésines, le long d'un système composé de microtubules, d’actine, de filaments intermédiaires et de protéines associées. Ce transport peut être déclenché ou intensifié par certains facteurs notamment par l’intensité des radiations ultraviolettes (bronzage). Ainsi, les kératinocytes répartissent les mélanosomes au-dessus de leur noyau, le protégeant des dégâts dus aux radiations U.V. Le nombre de mélanosomes produits par le mélanocyte, leur taille, leur concentration en mélanines et la nature de celles-ci (eumélanine ou pheomélanine), ainsi que la façon dont le kératinocyte les répartit au-dessus de son noyau, sont des caractéristiques héréditaires qui influent sur la pigmentation de la peau humaine. Les documents FR2974370, FR2974372, FR2974373, et FR2974371 bien que mettant en évidence des dérégulations moléculaires ou des dysfonctionnements fonctionnels dans le lentigo actinique, notamment avec l’implication des gènes de la voie de signalisation biologique TGFβ-SMAD, des gènes participant au remodellage de la matrice extracellulaire, des gènes codant pour des protéoglycanes et glycoprotéines extracellulaires, ceux-ci ne divulguent pas de gènes liés à la gestion des vésicules, notamment des mélanosomes. Ainsi, la présente invention a pour premier objet une méthode de caractérisation d’une tache pigmentaire cutanée apparente ou soupçonnée chez un être humain, comprenant la comparaison des niveaux d’expression, dans des échantillons de peau issue de ladite tache et de peau adjacente non lésée, d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, NAV3 et PCLO, et éventuellement du gène MREG. La présente invention a pour second objet une méthode d’évaluation de l’efficacité d’un traitement des taches pigmentaires cutanées, comprenant la comparaison des niveaux d’expression dans un échantillon de peau issue d’une telle tâche, avant et après traitement, d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, NAV3 et PCLO, et éventuellement du gène MREG. Un autre objet de la présente invention est une méthode in vitro de criblage d’agent actif pour prévenir et/ou traiter les taches pigmentaires cutanées, ladite méthode comprenant les étapes suivantes : i. mettre en contact un modèle cellulaire représentatif de la peau avec au moins un agent actif à tester, ou exposer ledit modèle cellulaire à un traitement physique à tester ; ii. effectuer une mesure du niveau d’’expression, d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, PCLO, NAV3 et MREG, ou du niveau d’expression ou d’activité du produit d’expression dudit gène choisi, et iii. comparer ladite mesure à une mesure de référence. L’invention se rapporte également à une méthode cosmétique de traitement ou de prévention de tache pigmentaire cutanée non pathologique de la peau humaine, comprenant l’application sur la peau d’une composition comprenant au moins un agent actif modulant le niveau d’expression ou de l’activité d’un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, où ledit gène est choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, PCLO, NAV3 et MREG. L’invention concerne en outre, l’utilisation cosmétique d’un modulateur du niveau d’expression ou de l’activité du produit d’expression d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, PCLO, NAV3 et MREG dans le traitement de taches pigmentaires cutanées non-pathologiques. La présente invention se rapporte en outre à une méthode de préparation d’un modèle cellulaire apte à cribler des agents actifs pour prévenir et/ou traiter les taches pigmentaires cutanées, comprenant les étapes suivantes : i. prélever des kératinocytes et éventuellement des mélanocytes ; puis ii. transfecter lesdits kératinocytes prélevés à l’étape i. à l’aide de siRNA apte à réprimer le niveau d’expression d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, KIF21A, SLITRK6, SCIN, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, ASGR1, CHMP4C, SVIP, PCLO, NAV3 et MREG ; et/ou transfecter lesdits kératinocytes prélevés à l’étape i. à l’aide de vecteur d’expression, de préférence un plasmide, d’au moins gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes ARC, NRN1, SYNPO2, RASIP1, et LRMP, puis iii. cultiver les kératinocytes transfectés à l’étape ii. ou co-cultiver les kératinocytes transfectés à l’étape ii. avec les mélanocytes prélevés à l’étape i. Un autre de ses objets est un modèle cellulaire apte à cribler des agents actifs pour prévenir et/ou traiter les taches pigmentaires cutanées, susceptible d’être obtenu ou directement obtenu selon la méthode de préparation selon l’invention. Un autre objet de la présente invention est un modèle cellulaire apte à cribler des agents actifs pour prévenir et/ou traiter les taches pigmentaires cutanées, comprenant des kératinocytes et éventuellement des mélanocytes, dans lequel lesdits kératinocytes présentent un niveau d’expression d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, KIF21A, SLITRK6, SCIN, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, ASGR1, CHMP4C, SVIP, PCLO, NAV3 et MREG, réprimé et/ou dans lequel lesdits kératinocytes présentent un niveau d’expression d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes ARC, NRN1, SYNPO2, RASIP1, et LRMP, surexprimé. L’invention concerne en outre une méthode in vitro de criblage d’agent actif pour prévenir et/ou traiter les taches pigmentaires cutanées, ladite méthode comprenant les étapes suivantes : i. mettre en contact un modèle cellulaire comprenant des kératinocytes et éventuellement des mélanocytes, dans lequel lesdits kératinocytes présentent un niveau d’expression d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, KIF21A, SLITRK6, SCIN, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, ASGR1, CHMP4C, SVIP, PCLO, NAV3 et MREG, réprimé et/ou dans lequel lesdits kératinocytes présentent un niveau d’expression d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes ARC, NRN1, SYNPO2, RASIP1, et LRMP, surexprimé avec au moins un agent actif à tester, ou exposer ledit modèle cellulaire à un traitement physique à tester ; ii. effectuer une mesure quantitative ou qualitative de la mélanine et/ou une mesure du niveau d’’expression, d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP et PCLO, NAV3 et MREG, ou du niveau d’expression ou d’activité du produit d’expression dudit gène choisi, et comparer ladite mesure à une mesure de référence. Lesdits gènes s’entendent des gènes humains dénommés ainsi. Définitions Par « niveau d’expression d’un gène », on entend préférentiellement, le niveau de transcription et/ou le niveau de traduction dudit gène, plus préférentiellement le niveau de transcription dudit gène. Concernant l’évaluation du niveau de transcription du gène choisi, elle peut être réalisée par différentes manières bien connues de l’homme du métier, directement ou bien après transcription inverse. Le niveau de transcription peut notamment être évalué par l’utilisation de puces à ARN ou puces à ADN vendues dans le commerce à cet effet. Une méthode d’évaluation possible est décrite dans la partie expérimentale. Par « vésicule » on entend une structure plus ou moins sphérique formée d'une membrane biologique notamment une bicouche lipidique, refermée sur elle-même, présente au niveau des cellules de la peau, de préférence au niveau des kératinocytes. De préférence les vésicules sont des vésicules de transport intracellulaire, encore plus préférentiellement les vésicules sont des mélanosomes. Par « gestion des vésicules » ou « gestion des mélanosomes » on entend au sens de la présente invention, le transport, la fusion, l’accumulation, la rétention, la dégradation desdites vésicules ou desdits mélanosomes. Les noms des gènes précités ainsi que les familles biologiques fonctionnelles auxquelles ils appartiennent sont décrits dans le Tableau 1 ci-dessous. Sous-famille Symbole Nom Publications Trafic intracellulaire JAKMIP2 janus kinase and microtubule interacting protein 2 Cruz-Garcia Bichem J : The Golgi-associated long coiled-coil protein NECC1 participatesin the control of the regulated secretory pathway in PC12 cells ARC activity-regulated cytoskeleton-associated protein Fila Neural plasticity 2021: mRNA Trafficking in the Nervous System: A Key Mechanism of the Involvement of Activity-Regulated Cytoskeleton-Associated Protein (Arc) in Synaptic Plasticity- Wu Cell 2011: Arc/Arg3.1 Regulates an Endosomal Pathway Essential for Activity-Dependent b-Amyloid Generation Pastuzin Cell 2017 The Neuronal Gene Arc Encodes a Repurposed Retrotransposon Gag Protein that Mediates Intercellular RNA Transfer Kinésines KIF21A kinesin family member 21A Hirokawa Physiol Rev 2008 Intracellular Transport and Kinesin Superfamily Proteins, KIFs: Structure, Function, and Dynamics (Review) Niwa Anatomical Science International 2015: Kinesin superfamily proteins and the regulation of microtubule dynamics in morphogenesis Croissance axones NAV3 neuron navigator 3 Stringham Cell Adhesion & Migration 2009: Navigating the cell/ UNC-53 and the navigators, a family of cytoskeletal regulators with multiple roles in cell migration, outgrowth and trafficking SLITRK6 SLIT and NTRK-like family. member 6 Aruga Mol Cell Neuroscience 2003: Identification and characterization of Slitrk, a novel neuronal transmembrane protein family controlling neurite outgrowth NRN1 neuritin 1 Zito Brain Struct functio n 2014: Neuritin 1 promotes neuronal migration - Di Giovanni Faseb J 2005: Neuronal plasticity after spinal cord injury: identification of a gene cluster driving neurite outgrowth Organisation cytosquelette SCIN scinderin Trifano Can J Physiol Pharmacol. 1999 : Scinderin and cortical F-actin are components of the secretory machinery- Trifaro Neurochem Res 2000: Scinderin, a Ca2+-dependent actin filament severing protein that controls cortical actin network dynamics during secretion; SYNPO2 synaptopodin 2 Kannan and Tang JCB 2015: Synaptopodin couples epithelial contractility to α-actinin-4–dependent junction maturation- Kingsbury Biochem 2013: Avian Synaptopodin 2 (Fesselin) Stabilizes Myosin Filaments and Actomyosin in the Presence of ATP Activité contractile TNNT1 troponin T type 1 (skeletal. slow) I Cohen Methods Achiev Exp Pathol 1979: The contractile system of blood platelets and its function- Tobacman Biophys J 2021:Troponin Revealed: Uncovering the Structure of the Thin Filament On-Off Switch in Striated Muscle- Wei GENE 2016: TNNT1, TNNT2, and TNNT3: Isoform genes, regulation, and structure–function relationships SNTB1 syntrophin, beta 1 (dystrophin-associated protein A1, 59kDa, basic component 1) Iwata Eur J Cell Biol 2004 : Syntrophin is an actin-binding protein the cellular localization of which is regulated through cytoskeletal reorganization in skeletal muscle cells Famille Rho/Rab ARHGAP29 Rho GTPase activating protein 29 Post, et al. 2013 Rasip1 mediates Rap1 regulation of Rho in endothelial barrier function through ArhGAP29 - Biggs J Cell SCIENCE 2014: Interferon regulatory factor 6 regulates keratinocyte migration RAB3IP RAB3A interacting protein (rabin3) Brondyk Mol cell biol 1995 :Interaction Cloning of Rabin3, a Novel Protein That Associates with the Ras-Like GTPase Rab3A- Hattula Method in Enzymol 2005: Purification and functional properties of a Rab8-specific GEF (Rabin3) in action remodeling and polarized transport RHOBTB3 Rho-related BTB domain containing 3 Espinosa Cell 2009:RhoBTB3: A Rho GTPase-family ATPase required for endosome to Golgi transport RASIP1 Ras interacting protein 1 Post, et al. 2013 Rasip1 mediates Rap1 regulation of Rho in endothelial barrier function through ArhGAP29 Endocytose ASGR1 asialoglycoprotein receptor 1 Newman Cell 2021 : Importance of between and within Subject Variability in Extracellular Vesicle Abundance and Cargo when Performing Biomarker Analyses - Susan-Resiga JBC 2021 : Asialoglycoprotein receptor 1 is a novel PCSK9-independent ligand of liver LDLR cleaved by furin CHMP4C charged multivesicular body protein 4C Russel Mbio 2021:Novel Role for ESCRT-III Component CHMP4C in the Integrity of the Endocytic Network Utilized for Herpes Simplex Virus Envelopment - Tauro Methods 2012: Comparison of ultracentrifugation, density gradient separation, and immunoaffinity capture methods for isolating human colon cancer cell line LIM1863-derived exosomes Autophagie SVIP small VCP/p97-interacting protein Wang PlosOne 2011: SVIP Induces Localization of p97/VCP to the Plasma and Lysosomal Membranes and Regulates Autophagy Gestion des vésicules LRMP lymphoid-restricted membrane protein Behrens J Immonol 1994 : Jaw1, A lymphoid-restricted membrane protein localized to the endoplasmic reticulum PCLO piccolo (presynaptic cytomatrix protein) leal Ortiz JCB 2008: Piccolo modulation of Synapsin1a dynamics regulates synaptic vesicle exocytosis - Mukherjee PNAS 2010: Piccolo and bassoon maintain synaptic vesicle clustering without directly participating in vesicle exocytosis MREG melanoreguline Moore 1988: Mreg’s role in the suppression of Rab27a-Mlph-Myo5a–deficient phenotype over 30 years ago , O'Sullivan, 2004 :melanosome center aggregation Ohbayashi, 2012: microtubules mediated retrograde transport as a cargo receptor Méthode de caractérisation d’une tache pigmentaire cutanée apparente ou soupçonnée chez un être humain, comprenant la mesure puis la comparaison des niveaux d’expression mesurés, dans des échantillons de peau issue de ladite tache et de peau adjacente non lésée, d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, NAV3 et PCLO, et éventuellement du gène MREG. Méthode selon la revendication 1, comprenant la comparaison des niveaux d’expression d’au moins deux gènes distincts, de préférence d’au moins cinq gènes distincts choisis parmi ladite liste. Méthode selon la revendication 1, où ledit gène est choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP et PCLO. Méthode selon la revendication 1, où ladite tache est confirmée comme tache hyperpigmentaire quand le niveau d’expression mesuré est : supérieur dans l’échantillon de peau issue de la tache par rapport au niveau dans l’échantillon de peau adjacente non lésée, si le gène est choisi parmi ARC, NRN1, SYNPO2, RASIP1, et LRMP, et/ou inférieur dans l’échantillon de peau issue de la tache par rapport au niveau dans l’échantillon de peau adjacente non lésée, si le gène est choisi parmi JAKMIP2, KIF21A, SLITRK6, SCIN, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, ASGR1, CHMP4C, SVIP, NAV3 et PCLO, et éventuellement MREG. Méthode selon la revendication 1, où ladite tache pigmentaire est un lentigo actinique, sénile ou solaire. Méthode d’évaluation de l’efficacité d’un traitement du lentigo actinique, comprenant la mesure puis la comparaison des niveaux d’expression mesurés dans un échantillon de peau issue d’un lentigo actinique, avant et après traitement, d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, NAV3 et PCLO, et éventuellement du gène MREG. Méthode selon la revendication 6, où ledit traitement est considéré comme efficace pour le traitement du lentigo actinique quand le niveau d’expression mesuré est : inférieur après traitement par rapport au niveau d’expression avant traitement, si le gène est choisi parmi ARC, NRN1, SYNPO2, RASIP1, et LRMP, et/ou supérieur après traitement par rapport au niveau d’expression avant traitement, si le gène est choisi parmi JAKMIP2, KIF21A, SLITRK6, SCIN, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, ASGR1, CHMP4C, SVIP, NAV3 et PCLO et éventuellement MREG. Méthode in vitro de criblage d’agents actif pour prévenir et/ou traiter les taches pigmentaires cutanées, ladite méthode comprenant les étapes suivantes : mettre en contact un modèle cellulaire représentatif de la peau avec au moins un agent actif à tester, ou exposer ledit modèle cellulaire à un traitement physique à tester ; effectuer une mesure du niveau d’’expression, d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, PCLO, NAV3 et MREG, ou du niveau d’expression ou d’activité du produit d’expression dudit gène choisi, et comparer ladite mesure à une mesure de référence. Méthode cosmétique de traitement ou de prévention du lentigo actinique de la peau humaine, comprenant l’application sur la peau d’une composition comprenant au moins un agent actif modulant le niveau d’expression ou l’activité d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, où ledit gène est choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, PCLO, NAV3 et MREG. Méthode selon la revendication 9, où ladite méthode comprend la modulation d’au moins deux gènes, de préférence d’au moins cinq gènes distincts, choisis parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, PCLO, NAV3 et MREG. Méthode selon la revendication 9, où ladite modulation est une inhibition si le gène est choisi parmi ARC, NRN1, SYNPO2, RASIP1, et LRMP ; et/ou une augmentation du niveau d’expression ou de l’activité si le gène est choisi parmi JAKMIP2, KIF21A, SLITRK6, SCIN, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, ASGR1, CHMP4C, SVIP, PCLO, NAV3 et MREG. Utilisation cosmétique d’un modulateur du niveau d’expression ou de l’activité du produit d’expression d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, PCLO, NAV3 et MREG dans le traitement du lentigo actinique. Utilisation selon la revendication 12, où ledit modulateur est la caféine, le calcitriol, l’acide folique, l’acide hyaluronique, l’huile de palme, l’huile de sésame, la curcumine, et leurs mélanges. Méthode de préparation d’un modèle cellulaire apte à cribler des agents actifs pour prévenir et/ou traiter les taches pigmentaires cutanées, comprenant les étapes suivantes : transfecter les kératinocytes prélevés à l’aide de siRNA apte à réprimer le niveau d’expression d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, KIF21A, SLITRK6, SCIN, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, ASGR1, CHMP4C, SVIP, PCLO, NAV3 et MREG ; et/ou transfecter lesdits kératinocytes prélevés à l’aide de vecteur d’expression, de préférence un plasmide, d’au moins gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes ARC, NRN1, SYNPO2, RASIP1, et LRMP, puis cultiver les kératinocytes transfectés à l’étape i. ou co-cultiver les kératinocytes transfectés avec les mélanocytes préalablement prélevés. Modèle cellulaire apte à cribler des agents actifs pour prévenir et/ou traiter les taches pigmentaires cutanées, susceptible d’être obtenu ou directement obtenu selon la méthode de préparation telle que défini dans la revendication 14. Modèle cellulaire apte à cribler des agents actifs pour prévenir et/ou traiter les taches pigmentaires cutanées, comprenant des kératinocytes et éventuellement des mélanocytes, dans lequel lesdits kératinocytes présentent un niveau d’expression d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, KIF21A, SLITRK6, SCIN, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, ASGR1, CHMP4C, SVIP, PCLO, NAV3 et MREG, réprimé et/ou dans lequel lesdits kératinocytes présentent un niveau d’expression d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes ARC, NRN1, SYNPO2, RASIP1, et LRMP, surexprimé. Méthode in vitro de criblage d’agent actif pour prévenir et/ou traiter les taches pigmentaires cutanées, ladite méthode comprenant les étapes suivantes : mettre en contact un modèle cellulaire comprenant des kératinocytes et éventuellement des mélanocytes, dans lequel lesdits kératinocytes présentent un niveau d’expression d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, KIF21A, SLITRK6, SCIN, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, ASGR1, CHMP4C, SVIP, PCLO, NAV3 et MREG, réprimé et/ou dans lequel lesdits kératinocytes présentent un niveau d’expression d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes ARC, NRN1, SYNPO2, RASIP1, et LRMP, surexprimé avec au moins un agent actif à tester, ou exposer ledit modèle cellulaire à un traitement physique à tester ; effectuer une mesure quantitative ou qualitative de la mélanine et/ou une mesure du niveau d’’expression, d’au moins un gène impliqué dans la gestion des vésicules, de préférence des mélanosomes, choisi parmi la liste constituée des gènes JAKMIP2, ARC, KIF21A, SLITRK6, NRN1, SCIN, SYNPO2, TNNT1, SNTB1, ARHGAP29, RAB3IP, RHOBTB3, RASIP1, ASGR1, CHMP4C, SVIP, LRMP, PCLO, NAV3 et MREG, ou du niveau d’expression ou d’activité du produit d’expression dudit gène choisi, et comparer ladite mesure à une mesure de référence..