Brevet FR3134515A1 — publié le 20231020

La présente invention concerne des compositions pour l’hygiène buccale comprenant des extraits de fleurs de Crocus sativus et leurs utilisations pour protéger la cavité buccale. L’invention porte encore sur des compositions thérapeutiques pour leurs utilisations dans la prévention et le traitement des affections de la cavité buccale, notamment les parodontites et les gingivites. Figure pour l’abrégé : Fig. 1 Extraits de fleurs de Crocus sativus , compositions les comprenant et leurs utilisations dans les soins buccaux La présente invention relève du domaine technique de l’hygiène buccale et du traitement thérapeutique des pathologies buccales. Elle concerne plus particulièrement des compositions comprenant des extraits de fleurs de Crocus sativus pour l’hygiène buccale ou la protection de la cavité buccale. L’invention concerne également des compositions comprenant des extraits de fleurs de Crocus sativus pour leurs utilisations thérapeutiques dans la prévention et le traitement des affections de la cavité buccale, notamment les saignements, l’inflammation, le déchaussement dentaire ou la perte de substance conjonctivale associés aux parodontites et aux gingivites provoquées par la bactérie Porphyromonas gingivalis . Arrière-plan technique de l’invention La cavité buccale est colonisée par de très nombreux micro-organismes composant le microbiome oral. Dans une cavité buccale saine, les micro-organismes sont essentiellement des bactéries commensales qui s’organisent pour maintenir l’équilibre de cet écosystème, ce qui n’exclue pas la présence de bactéries pathogènes. La cavité buccale est très fréquemment le siège de pathologies telles que la gingivite et la parodontite. La gingivite est une affection inflammatoire réversible, généralement provoquée par une accumulation de biofilm bactérien, qui se manifeste par des rougeurs gingivales, un œdème, quelquefois des saignements, mais sans déchaussement dentaire. Si la gingivite n’est pas traitée à temps, l’inflammation peut devenir chronique et évoluer en parodontite, caractérisée par une résorption de l'os alvéolaire, une destruction du ligament parodontal et in fine le déchaussement des dents. Une des causes majeures de la parodontite est le déséquilibre du microbiome buccal, associé à une faiblesse de la réponse immunitaire. Certaines bactéries pathogènes s’associent alors pour supplanter les bactéries commensales. Cette association de bactéries a été décrite sous le nom de « red complex » et se compose des espèces Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia et Treponema denticola (Socransky SS, Haffajee AD, Cugini MA, Smith C, Kent RL Jr. in J Clin Periodontol. 1998 ;25(2):134-144). Porphyromonas gingivalis joue un rôle prépondérant dans la formation d’un biofilm (Hajishengallis G, Darveau RP, Curtis MA., Nat Rev Microbiol. 2012;10(10):717-725) et dans la stratégie d’évitement du système immunitaire (Hajishengallis G., J Oral Biosci. 2011 ;53(3):233–240). Porphyromonas gingivalis sécrète une enzyme appelée gingipaïne permettant à la bactérie de capter le fer contenu dans l’hème des tissus hôtes. Cette enzyme est également impliquée dans la dégradation des jonctions cellulaires de l’épithélium gingival, l’induction de l’inflammation, l’œdème des gencives, une tendance au saignement et une destruction des fibres de collagène de type I et III du tissu conjonctif gingival. Le problème que l’invention se propose de résoudre est de fournir un nouvel ingrédient actif capable de cibler l’activité de l’enzyme gingipaïne, afin de limiter spécifiquement l’activité pathogène de la bactérie Porphyromonas gingivalis tout en préservant le microbiome oral et de limiter les conséquences de la parodontite et de la gingivite. Les inventeurs ont en effet découvert qu’un extrait de fleurs de Crocus sativus avait un effet inhibiteur sur l’activité enzymatique de la gingipaïne et pouvait limiter efficacement le développement de la bactérie Porphyromonas gingivalis associée à la parodontite et à la gingivite . Le Crocus sativus est une plante herbacée de la famille des Iridaceae surtout cultivée pour le pistil de ses fleurs appelé safran, utilisé dans l’alimentation comme épice ou pour ses propriétés antioxydante et antiinflammatoire, en particulier dans les affections buccales ou dentaires (Forouzanfar A. et al., Iran J Med Sci. 2016 May ;41). La plupart des extraits décrits dans l’art antérieur sont des extraits de pistils ou de fleurs entières, comprenant donc le pistil. Ces extraits présentent l’inconvénient de contenir une quantité élevée de composés tels que le safranal, substance classée irritante cutanée, irritante oculaire et sensibilisante cutanée selon le système harmonisé de classification mondiale (UN-GHS). Les documents de brevet CN11330420A, CN102657747A et CN109646535A décrivent des extraits obtenus à partir de fleurs dépourvues de pistils obtenus en utilisant de l’éthanol absolu ou des solvants hydro-éthanoliques. On citera encore le brevet FR2928835B1 qui décrit la préparation d’un extrait de pétales de Crocus sativus obtenu par une macération de plusieurs jours dans de l’éthanol à 70%. L’extrait obtenu contient environ 50% de polyphénols de type flavonoïdes dont une quantité importante de kaempférol, ce qui lui confère des propriétés dépigmentantes de la peau. Les solvants hydro-alcooliques à forte teneur en alcool tels qu’utilisés dans le document brevet FR2928835B1 sont également susceptibles d’extraire des composés allergéniques tels que le géraniol ou le linalol car ce sont des molécules ayant une forte affinité pour ce type de solvant. La présente invention décrit l’utilisation d’un solvant hydro-alcoolique principalement aqueux. Ainsi, l’extraction de ces composés indésirables est réduite. Les inventeurs ont montré que l’extrait de l’invention ne contient aucune des 57 substances identifiées comme allergènes cosmétiques potentiels, par le Comité Scientifique pour la Sécurité des Consommateurs. De plus le rendement d’extraction de phytocomposés polaires, tels que les protéines, les acides aminés ou les acides phénoliques est amélioré, comparativement à une extraction hydro-éthanolique. Un autre problème que se propose donc de résoudre l’invention est de fournir un nouvel extrait aqueux de Crocus sativus préparé à partir des fleurs entières dépourvues de pistils et ne comprenant pas de molécules allergéniques, irritantes ou potentiellement toxiques, pour son utilisation dans les soins d’hygiène buccales ou la prévention et le traitement des pathologies buccales. L’utilisation d’un solvant hydro-alcoolique principalement aqueux présente également l’avantage d’augmenter le rendement d’extraction de phytocomposés d’intérêt tels que les sucres, les acides aminés, les protéines, les vitamines et les acides organiques, que l’on ne retrouve pas ou peu dans les extraits de l’art antérieur. La matière première de l’invention, ne comprend que les fleurs de Crocus sativus dépourvues de pistils répondant à l’exigence de naturalité du marché de l’hygiène et des soins oraux-buccaux actuel tout en présentant une efficacité biologique remarquable. Les inventeurs ont développé un nouvel extrait de Crocus sativus comprenant de 9 à 13 g/Kg de matière sèche, de 5,5 à 8,5 g/kg de sucres totaux, de 2,5 à 5,5 g/kg de protéines, de 0,35 à 0,55 g/Kg d’acides aminés, de 0,6 à 1,2 g/kg d’acides organiques, de 0,4 à 12 g/kg de composés phénoliques totaux dont de 150 à 450 mg/kg de kaempférol sophoroside, de 5 à 30 mg/kg de kaempférol glucoside et de 10 à 40 mg/kg de quercétine diglucoside. Dans un mode de réalisation particulier, l’extrait ci-dessus est obtenu par macération de fleurs dépourvues de pistils dans un solvant hydro-polyalcoolique majoritairement aqueux comprenant de 20 à 50 % d’alcool en poids par rapport au poids total de solvant, l’alcool pouvant être choisi parmi le propanediol, le propylène glycol, le butylène glycol et le pentanediol. L’invention a pour deuxième objet une composition d’hygiène buccale ou thérapeutique comprenant, en tant qu’ingrédient actif, une quantité efficace de l’extrait de Crocus sativus, et un milieu physiologiquement acceptable. L’invention a pour troisième objet l’utilisation non thérapeutique de la composition pour l’hygiène buccale. L’invention a pour quatrième objet une composition comprenant un extrait de fleurs de Crocus sativus pour son utilisation thérapeutique dans la prévention ou le traitement des affections de la cavité buccale et notamment la gingivite et/ou la parodontite. L’invention et les avantages qui en découlent seront mieux compris à la lecture de la description et des modes de réalisation non limitatifs qui suivent, illustrés au regard des figures annexées dans lesquelles : Modulation de l’activité de la gingipaïne spécifique de l’arginine, par un extrait de Crocus sativus à 1%. Modulation de l’activité de la gingipaïne spécifique de la lysine par un extrait de Crocus sativus à 1% Test d’inhibition de l’hémolyse induite par la bactérie Porphyromonas gingivalis en présence d’un extrait de Crocus sativus à 1%. Mesure de l’expression des marqueurs CD14+ et CD163 à la surface des macrophages de type 2, traités ou non avec l’extrait Crocus sativus à 1%. Mesure de la fluorescence relative moyenne des marqueurs CD14 et CD163 à la surface des macrophages de type 2, traités ou non avec l’extrait Crocus sativus à 1%. Extrait de fleurs de Crocus sativus comprenant de 9 à 13 g/Kg de matière sèche, de 5,5 à 8,5 g/kg de sucres totaux, de 2,5 à 5,5 g/kg de protéines, de 0,35 à 0,55 g/Kg d’acides aminés, de 0,6 à 1,2 g/kg d’acides organiques, de 0,4 à 12 g/kg de composés phénoliques totaux dont de 150 à 450 mg/kg de kaempférol sophoroside, de 5 à 30 mg/kg de kaempférol glucoside et de 10 à 40 mg/kg de quercétine diglucoside. Extrait de fleurs de Crocus sativus de la revendication 1, caractérisé en ce qu’il est obtenu par le procédé comprenant les étapes suivantes : a) Les fleurs fraiches ou sèches dépourvues de pistils, sont mises en présence d’un solvant hydro-polyalcoolique majoritairement aqueux comprenant de 20 à 50 % d’alcool en poids par rapport au poids total du solvant, b) Le mélange est mis sous agitation douce pendant 30 minutes à deux heures à une température comprise entre la température ambiante et 80°c, c) le mélange obtenu en b) est purifié pour éliminer la matière solide végétale et récupérer la partie liquide, d) l’extrait obtenu à l’étape précédente est clarifié par au moins six étapes de filtrations séquentielles en utilisant des filtres de porosités décroissantes allant de 30 à 0,2µm, e) une filtration stérilisante est réalisée en utilisant un filtre de porosité de 0,22µm. Extrait de fleurs de Crocus sativus de l’une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce qu’à l’étape a) les fleurs sont séchées et broyées. Extrait de fleurs de Crocus sativus de l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu’à l’étape a), le solvant hydro-polyalcoolique est le propanediol ou le butylène glycol à un ratio compris entre 25 % et 35 %. Extrait de fleurs de Crocus sativus de l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu’à l’étape a), le solvant hydro-polyalcoolique est le propanediol à un ratio de 30 %. Extrait de fleurs de Crocus sativus de l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu’à l’étape b), le mélange est mis sous agitation douce pendant 30 minutes à une heure trente à une température comprise entre 30°C et 50°C Composition d’hygiène buccale ou thérapeutique comprenant, en tant qu’ingrédient actif, une quantité efficace de l’extraits de fleurs de Crocus sativus de l’une des revendications 1 à 6, et un milieu physiologiquement acceptable Composition selon la revendication 7, dans laquelle la quantité efficace d’extrait de fleurs Crocus sativus correspond est à une concentration comprise entre 0,5 % et 10 %, de préférence à une concentration comprise entre 0,8 % et 2 % et encore plus préférentiellement à une concentration de 1%. Composition selon la revendication 7, pour son utilisation pour l’hygiène buccale. Composition selon la revendication 7, pour son utilisation thérapeutique dans la prévention et le traitement des affections de la cavité buccale. Composition pour son utilisation thérapeutique selon la revendication 10, dans laquelle les affections de la cavité buccale sont les saignements, l’inflammation, la récession gingivale, le déchaussement dentaire ou la perte de substance conjonctivale associés aux parodontites et aux gingivites. Composition pour son utilisation thérapeutique selon la revendication 10, dans laquelle les affections de la cavité buccale sont provoquées par la bactérie Porphyromonas gingivalis . Composition pour son utilisation thérapeutique selon la revendication 12, dans laquelle l’activité des enzymes gingipaïnes sécrétées par la bactérie Porphyromonas gingivalis est inhibée. Composition pour son utilisation thérapeutique selon la revendication 13, dans laquelle les enzymes gingipaïnes sont les gingipaïnes spécifiques de l’arginine.