Brevet FR3130993A1 — publié le 20230623

Méthode de pronostic ou diagnostic d’une peau acnéique La présente invention concerne une méthode de pronostic ou diagnostic d’une peau acnéique, en particulier liée à la pollution. La présente concerne une méthode, en particulier in vitro , de pronostic ou diagnostic d’une peau acnéique d’un sujet, de préférence liée à une exposition chronique à la pollution, comprenant une étape (a) de détermination, dans un échantillon d’un ou plusieurs cheveu(x) dudit sujet, du niveau d’au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué des hydrocarbures aromatiques polycycliques. Méthode de pronostic ou diagnostic d’une peau acnéique La présente invention concerne une méthode de pronostic ou diagnostic d’une peau acnéique, en particulier liée à la pollution. Certains milieux urbains sont régulièrement soumis à des pics de pollution. L’individu dans son environnement quotidien et particulièrement en zone urbaine, peut être soumis à de multiples agressions au niveau des matières kératiniques, et notamment la peau, par différents polluants aériens. Parmi les polluants connus, on citera en premier lieu les gaz d’échappement devenus un enjeu majeur dans les grandes villes, les métaux lourds mais aussi les particules fines qui contiennent des molécules telles que les hydrocarbures aromatiques polycycliques tels que benzo-a-pyrène ou benzoanthracène. Ces polluants vont notamment entraîner au niveau de la peau, le dépôt de particules à la surface de l’épiderme, et entre autres conséquences, induire un vieillissement prématuré de la peau marqué par la présence de rides et/ou ridules, de macules étendues, de lentigo simplex, de rougeurs, et/ou d’un aspect terne et/ou hétérogène du teint. Les présents inventeurs ont montré qu’une exposition systémique prolongée à la pollution atmosphérique notamment à certains polluants comme les PAHs, mise en évidence par la détection de ces polluants dans des échantillons de cheveux des sujets étudiés, est associée au développement d’une peau acnéique. Le fait d’identifier l’exposition à la pollution comme facteur responsable du développement d’une peau acnéique pourrait permettre de les prévenir et/ou traiter de manière plus efficace en ciblant spécifiquement ces polluants. Il existe donc un besoin important de nouvelle méthode de pronostic ou diagnostic d’une peau acnéique, en particulier liée à la pollution. La présente invention répond à ce besoin. La présente invention résulte de la découverte inattendue par les inventeurs que la détection de hauts niveaux de polluants et notamment de certains PAHs, chez des sujets exposés à une pollution chronique systémique, mise en évidence par la détection de ces polluants dans des échantillons de cheveux des sujets étudiés, est corrélée avec le développement d’une peau acnéique. La présente invention a ainsi pour objet une méthode, en particulier in vitro , de pronostic ou diagnostic d’une peau acnéique d’un sujet, de préférence liée à une exposition chronique à la pollution, comprenant une étape (a) de détermination, dans un échantillon d’un ou plusieurs cheveu(x) dudit sujet, du niveau d’au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué des hydrocarbures aromatiques polycycliques. Figures Graphe montrant la prévalence de l’acné chez l’adulte dans une ville polluée (Baoding) comparée à une ville peu polluée (Dalian). La présente invention sera décrite plus en détail par les exemples ci-dessous. Exemple L’exemple ci-dessous montre la mise en évidence de l’association entre une exposition chronique à la pollution (PAH) et le développement d’une peau acnéique chez des individus exposés à une pollution chronique (sur la base de la détection de hauts niveaux de polluants dans des échantillons de leurs cheveux). Matériel et Méthode Sélection des lieux d'étude Les données de l'indice de la qualité de l'air (IQA) ont été évaluées pour des paires de villes chinoises présentant les caractéristiques similaires suivantes : villes avec une activité industrielle similaire telle que déterminée par le secteur économique (forte dépendance à l'égard de la fabrication), latitude (exposition similaire aux UV), zone géographique, climat et mode de vie de la population (habitudes de chauffage et de cuisine, évaluées par questionnaire). Ces similitudes permettent d'attribuer autant que possible les différences de paramètres mesurés entre les deux populations à la pollution de l'air. Les données d'indice UV pour des emplacements sélectionnés ont également été évaluées pour déterminer des niveaux d'exposition similaires. Les deux villes choisies étaient la ville la plus polluée de Baoding et la ville la moins polluée de Dalian. Les lieux d'étude ont été précédemment décrits (Palazzi P, et al. Exposure to polycyclic aromatic hydrocarbons in women living in the Chinese cities of BaoDing and Dalian revealed by hair analysis. Environ Int. 2018;121(Pt 2):1341-54.). Les villes de Baoding (latitude 38,85°N) et Dalian (latitude 38,92°N), distantes d'environ 500 km dans le nord de la Chine, ont été sélectionnées comme lieux d'étude. Entre juin 2014 et juin 2015, des valeurs d'IQA supérieures à 100 ont été enregistrées pendant 270 jours à Baoding et pendant 83 jours à Dalian. L'analyse des données d'indice UV pour les 15 dernières années (2002-2017) a indiqué des niveaux d'exposition similaires pour Baoding et Dalian, avec un pic typique des niveaux de mai à juillet. Dalian a un climat légèrement plus humide (humidité relative de 50 à 90 %) par rapport à Baoding (40 à 80 %), probablement influencé par sa situation côtière. Les conditions de vent respectives diffèrent légèrement entre les deux villes, mais les niveaux de précipitations en 2015 se sont avérés similaires. Les données évaluées pour 2016 n'ont montré aucune autre différence dans les paramètres météorologiques entre les deux villes. Les populations de Baoding et de Dalian sont respectivement de 11 millions et 6 millions. Les deux villes ont leurs activités économiques tirées par le secteur secondaire, c'est-à-dire l'industrie et la construction comme principale source d'activité. Sujets Les sujets éligibles étaient des femmes en bonne santé, âgées de 25 à 45 ans, qui résidaient depuis au moins 15 ans dans leur ville de résidence actuelle (Baoding ou Dalian), exerçaient une activité professionnelle en intérieur, étaient non-fumeurs ou avaient cessé de fumer depuis plus de 5 ans auparavant, et qui avaient les cheveux naturels. Sont exclues les femmes qui avaient les cheveux traités chimiquement (permanente, coloration, défrisage), étaient enceintes ou avaient des pathologies cutanées ou des prescriptions de médicaments qui pourraient interférer avec l'étude ou la santé du sujet de l'avis de l'investigateur. Protocole d'étude L'étude a été menée sur 2 semaines consécutives pour chaque ville afin d'éviter les effets saisonniers, et en dehors des périodes de pic de pollution de l'air urbain entre octobre et novembre 2015. Les sujets ont été invités à suivre une période de wash-out de 3 jours et ont reçu des savon et instructions associées. Les sujets ont été évalués avec la peau nue, c'est-à-dire exempte de produits cosmétiques, après 15 minutes d'acclimatation en climat contrôlé (température 22 ± 2°C et hygrométrie environ 50 ± 10 %). L'investigation multiparamétrique a été réalisée in situ par un dermatologue dans les deux villes. Évaluations cutanées Le paramètre clinique de l'acné a été évalué sur une échelle de 4 degrés (pas du tout, faiblement, modérément à très) par un dermatologue. On a mesuré l’acné en cours, et lorsqu’il y avait de l’acné on a déterminé le type d’acné (rétentionnel, inflammatoire), la sévérité (pas du tout, faiblement, modérément à très) et la présence de cicatrices d’acné (pigmentées ou non). Des images standardisées ont été capturées par Visia-CR™ pour toutes les femmes. La lumière standard avec flash a été utilisée pour mieux apprécier l'acné. Détection des hydrocarbures aromatiques polycycliques dans les cheveux Pour chaque individu, seuls les 12 premiers cm (en partant du cuir chevelu) ont été utilisés pour l'analyse. Sur la base d'une croissance moyenne de 1 cm par mois pour les cheveux humains (Kintz P, Salomone A, and Vincenti M. Hair analysis in clinical and forensic toxicology. Academic Press, Elsevier; 2015), 12 cm correspondaient aux 12 mois précédant le prélèvement de cheveux. Après décontamination pour éliminer les particules et produits chimiques éventuellement déposés à la surface des cheveux, des échantillons de cheveux ont été extraits et analysés selon des méthodes précédemment publiées (Appenzeller BMR, Mathon C, Schummer C, Alkerwi A, and Lair M-L. Simultaneous determination of nicotine and PAH metabolites in human hair specimen: a potential methodology to assess tobacco smoke contribution in PAH exposure. Toxicol Lett. 2012;210(2):211-9, Grova N, Salquebre G, and Appenzeller BMR. Gas chromatography-tandem mass spectrometry analysis of 52 monohydroxylated metabolites of polycyclic aromatic hydrocarbons in hairs of rats after controlled exposure. Anal Bioanal Chem. 2013;Sep 7:PMID: 24013637) basées sur la chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse en tandem (GC-MS/MS). La concentration de biomarqueurs finalement détectée est donc considérée comme représentative de la dose interne de l'individu, sans biais limité dû au dépôt externe. La méthode a permis d'analyser les HAP parents (l’acénaphtylène, l’acénaphtène, le fluorène, le phénanthrène, l’anthracène, le fluoranthène, le pyrène, le benz[a]anthracène, le chrysène, le benzo-b-fluoranthène, le benzo-k-fluoranthène, le benzo[a]pyrène, l’indéno[1,2,3- cd ]pyrène, le dibenz-a-h-anthracène, le benzo-g-h-i-pérylène), et les métabolites monohydroxylés HAP (le 1-hydroxy-naphtalène, le 2-hydroxy-naphtalène, le 9-hydroxy-flurorène, le 3-hydroxy-flurorène, le 2-hydroxy-flurorène, le 4-hydroxy-phenanthrène, le 9-hydroxy-phenanthrène, le 1-hydroxy-anthracène, le 3-hydroxy-phenanthrène, le 1-hydroxy-phenanthrène, le 2-hydroxy-phenanthrène, le 3-hydroxy-fluroanthène, le 1-hydroxy-pyrène, le 2-hydroxy-benzo[c]phenanthrène, le 1-hydroxy-benz[a]anthracène, le 4-hydroxy-chrysène, le 6-hydroxy-chrysène, le 11-hydroxy-benz[a]anthracène, le 2-hydroxy-benz[a]anthracène, le 3-hydroxy-benzo[c]phenanthrène, le 8-hydroxy-benz[a]anthracène, le 5-hydroxy-benz[a]anthracène, le 3-hydroxy-chrysène, le 1-hydroxy-chrysène, le 4-hydroxy-benz[a]anthracène, le 3,9-hydroxy-benz[a]anthracène, le 2-hydroxy-chrysène, le 8-hydroxy-benzo-b-fluoranthène, le 1,7-hydroxy-benzo-b-fluoranthène, le 12-hydroxy-benzo-b-fluoranthène, le 8-hydroxy-benzo-k-fluoranthène, le 9-hydroxy-benzo-k-fluoranthène, le 7-hydroxy-benzo[a]pyrène, le 9-hydroxy-benzo[a]pyrène, le 6-hydroxy-indéno[1,2,3- cd ]pyrène, le 1-hydroxy-indéno[1,2,3- cd ]pyrène, le 8-hydroxy-indéno[1,2,3- cd ]pyrène) plus la nicotine et la cotinine. Pour le parent HAP, la limite de détection variait de 0,01 pg/mg pour le benzo[a]pyrène à 4,2 pg/mg pour le phénanthrène. Pour les métabolites des HAP, la limite de détection variait de 0,014 pg/mg pour le 3OH-phénanthrène à 3,79 pg/mg pour le 1OH-indéno[1,2,3-cd] pyrène. Analyse statistique Le nombre de femmes dans chaque ville a été déterminé sur la base des résultats de l'étude mexicaine (Lefebvre MA, et al. Evaluation of the impact of urban pollution on the quality of skin: a multicentre study in Mexico. Int J Cosmet Sci. 2015;37(3):329-38). En conséquence, un échantillon de 100 femmes par ville a été considéré comme suffisant pour atteindre les objectifs. Les données de HAPs ont été résumés par un score, la première composante principale d’une analyse en composantes principales sur les mesures d’HAP log-normalisées. Ce score est le meilleur résumé des HAPs, ie, la variable la plus corrélée à l’ensemble des HAPs. La prévalence de l’acné a été comparée en fonction du niveau d’HAP(( médiane du score HAP) à l’aide d’un test du Chi² . On observe une prévalence de l’acné significativement plus élevée chez les femmes avec des niveaux de HAP supérieurs à la médiane (64.7% vs 51.0% ; p=0.047). Méthode in vitro de pronostic ou diagnostic d’une peau acnéique d’un sujet, liée à une exposition chronique à la pollution, comprenant une étape (a) de détermination, dans un échantillon d’un ou plusieurs cheveu(x) dudit sujet, du niveau d’au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué des hydrocarbures aromatiques polycycliques, le niveau dudit au moins un marqueur dans l’échantillon est la concentration massique dudit au moins un marqueur dans l’échantillon. Méthode selon la revendication 1, dans laquelle les hydrocarbures aromatiques polycycliques sont choisis parmi l’acénaphtylène, l’acénaphtène, le fluorène, le phénanthrène, l’anthracène, le fluoranthène, le pyrène, le benz[a]anthracène, le chrysène, le benzo-b-fluoranthène, le benzo-k-fluoranthène, le benzo[a]pyrène, l’indéno[1,2,3-cd]pyrène, le dibenz-a-h-anthracène, le benzo-g-h-i-pérylène. Méthode selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle le niveau dudit au moins un marqueur est mesuré par chromatographie gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (GC-MS). Méthode selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit échantillon d’un ou plusieurs cheveux est une ou plusieurs mèche(s) de cheveux prélevé(e)(s) de manière non-invasive chez ledit sujet notamment présentant une longueur d’environ 12 cm depuis la racine du ou des cheveu(x). Méthode selon l’une quelconque des revendications précédentes, comprenant en outre les étapes consistant à : (b) comparer le niveau dudit au moins un marqueur mesuré à l’étape (a) avec un contrôle, et (c) sur la base de la comparaison de l’étape (b), déterminer si le sujet, en particulier la peau du sujet, présente ou est susceptible de développer une peau acnéique. Méthode selon la revendication précédente, dans laquelle le contrôle est une valeur de référence, de préférence, déterminée par la valeur moyenne du niveau dudit marqueur dans une population déterminée, encore mieux, la valeur moyenne du niveau dudit marqueur chez une population de sujets, en particulier de sujets, vivant dans une ville peu polluée, en particulier une ville présentant un index de qualité d’air inférieur à 100 pendant moins de 100 jours, en particulier moins de 85 jours, sur une année.