Brevet FR3120308A1 — publié le 20220909

UTILISATION D’EXOPOLYSACCHARIDES DE MICRO-ALGUES A TITRE D’AGENTS TEXTURANTS La présente invention concerne l’utilisation d’un exopolysaccharide ou mélange d’exopolysaccharides issu(s) de micro-algue appartenant au genre Glossomastix à titre d’agent texturant, notamment afin d’obtenir Figure pour l'abrégé : Aucune UTILISATION D’EXOPOLYSACCHARIDES DE MICRO-ALGUES A TITRE D’AGENTS TEXTURANTS La présente invention concerne le domaine des agents de rhéologie pour les dispersions, notamment les dispersions aqueuses dans les domaines alimentaires ou cosmétiques. Les alginates sont issus des algues et sont utilisés comme épaississants, gélifiants, émulsifiants et stabilisants de produits industriels les plus variés depuis les gelées alimentaires, les produits de beauté, jusqu'aux peintures et aux encres d'imprimerie. Dans l’industrie alimentaire, ils sont notamment utilisés comme agents texturants pour reconstruire des aliments en formant des gels durs et thermostables, ou pour apporter une texture onctueuse aux aliments. Le contrôle suspenseur ou anti-décantation (‘anti-settling’) des formulations liquides nécessite généralement l’addition d’agents de viscosité (peu efficaces) et/ou d’agents gélifiants. Les alginates et les agents viscosifiants et gélifiants classiquement utilisés présentent des propriétés rhéofluidifiantes mais ils présentent une viscosité ou un module élastique élevés et une forte contrainte seuil. Le contrôle de la suspension ou de la décantation exercé par ces agents conduit immanquablement à une texturation de la formule qui demeure généralement trop importante même sous cisaillement et qui apparait ainsi parfois non compatible avec le cahier des charges spécifique de certaines formulations pour lesquelles il convient d’avoir de faibles viscosités sous faibles contraintes (propriétés organoleptiques par exemple). Les gels fluides sont des solutions qui présentent un comportement de gel élastique à faible module, s’écoulant avec une forte rhéofluidité sous l’action d’une très faible contrainte. Ces propriétés de gel fluide peuvent avantageusement être mises à profit pour stabiliser les dispersions. WO 2015/004403 décrit la production d’exopolysaccharides obtenus de micro-organismes tels que des micro-algues. Il est donc désirable de mettre à disposition de nouveaux agent texturants d’origine naturelle, présentant de telles propriétés. Il a maintenant été découvert que de façon inattendue, les micro-algues appartenant au genre Glossomastix peuvent produire un ou des polysaccharide(s) qui présente(nt) des propriétés rhéologiques originales de type gel fluide (ou gel fragile). Selon un premier objet, la présente invention concerne l’utilisation d’un exopolysaccharide ou mélange d’exopolysaccharides issu(s) de la micro-algue appartenant au genre Glossomastix . à titre d’agent texturant. Tel qu’utilisé ici, le terme « micro-algue » fait référence aux algues microscopiques, parfois appelées microphytes. Selon l’invention, les micro-algues appartiennent au genre Glossomastix, et plus particulièrement aux espèces Glossomastix sp . RCC 3688 et Glossomastix sp . RCC 3707, déposées à la Collection de Cultures de Roscoff (RCC). Plus précisément, les exopolysaccharides de l’invention sont issus des souches suivantes : Glossomastix sp. RCC3688, souche déposée à l’autorité de dépôt internationale Culture Collection of Algae and Protozoa (CCAP) le 9 décembre 2020 sous le numéro CCAP 2912/2. Glossomastix sp. RCC3707, souche déposée à l’autorité de dépôt internationale Culture Collection of Algae and Protozoa (CCAP) le 9 décembre 2020 sous le numéro CCAP 2912/1. Lesdites souches ont été déposées par SATT Ouest Valo, 14 C rue du Pâtis Tatelin, Métropolis 2, CS 80804, 35708 Rennes Cedex, France, le 9 décembre 2020, auprès de l’autorité de dépôt internationale Culture Collection of Algae and Protozoa (CCAP), Scottish Association for Marine Science (SAMS), Scottish Marine Institute, Oban, Argyll, PA37 1QA, UK. On entend par « agent texturant » un agent qui permet, lorsqu’il est ajouté à une dispersion de stabiliser les dispersions. Selon un mode de réalisation, cette propriété est réalisée lorsque ledit agent texturant présente des propriétés de gel fluide, lorsqu’il est en solution aqueuse. On entend par gel fluide une solution qui présente un comportement de gel élastique à faible module (typiquement inférieur à 10 Pa) mais qui s’écoule avec une forte rhéofluidité sous l’action d’une très faible contrainte (typiquement inférieure à 1 Pa). En absence de cette contrainte, le module élastique (G’) est toujours supérieur au module visqueux (G’’). Il y a inversion entre ces deux modules à partir d’une certaine contrainte seuil faible (de l’ordre de 1 Pa ou moins selon la concentration en polysaccharide). Avantageusement, les propriétés de gel fluide des exopolysaccharides selon l’invention permettent de contrôler la décantation ou le crémage de suspensions ou d’émulsions sans altérer les propriétés de faibles viscosités sous faibles contraintes. Ces exopolysaccharides permettent de stabiliser des dispersions par la formation d’un réseau tridimensionnel d’origine physique et donc réversible de chaine polymère en l’absence de toute contrainte. Sous l’action d’une faible contrainte, le système s’écoule de façon non-newtonienne et rhéofluidifiante. A titre d’additif unique, les exopolysaccharides selon l’invention permettent d’obtenir ces propriétés de gel fluide, alors que plusieurs additifs sont généralement nécessaires. Les solutions de ces polysaccharides sont très fortement rhéofludifiantes même à faible concentration, et présentent des contraintes seuils relativement faibles, typiquement inférieures à 1 Pa jusqu’à 10 g.L -1 en exopolysaccharides. Ainsi, les dispersions selon l’invention présentent typiquement une concentration comprise entre 0,1 et 50 g/L en exopolysaccharides, et/ou une contrainte seuil comprise entre 10 -2 et 10 Pa. En dessous de cette contrainte, la solution présente un comportement de type gel (G’>G’’) mais avec des valeurs de module très faibles (typiquement selon la concentration en polysaccharides). Au-dessus de cette contrainte seuil, le comportement de la solution est de type visqueux (G’ Ce comportement de type gel fluide peut être mis à profit pour stabiliser des dispersions (solide/liquide/air dans une solution aqueuse) sans affecter notablement le comportement rhéologique de la dispersion. En d’autres termes, ces solutions de type ‘gel fluide’ se comportent au repos comme un gel à très faible module qui peut bloquer ou ralentir considérablement la décantation ou le crémage de suspensions ou d’émulsion par exemple et sous faible contrainte (> contraintes seuils) comme une solution visqueuse et très rhéofluidifiante. Le système est donc un liquide rhéofluidifiant aux propriétés de gel très faible sous très faible contrainte. Ce comportement atypique obtenu avec les exopolysaccharides selon l’invention peut être mis en évidence par l’étude rhéologique en écoulement et en oscillation, ainsi que par rheolaser, par application ou adaptation de la méthodologie décrite dans les exemples. Cette étude peut notamment être conduite avec des concentrations allant de 0,1 g/L à 20 g/L dans l’eau distillée ou en présence d’une force ionique (par exemple NaCl 0,1 mol/L). De façon inattendue, le comportement de type gel fluide est obtenu pour les exopolysaccharides issus de Glossomastix précités alors que d’autres micro-algues produisent des polysaccharides qui ne présente pas de comportement de type gel fluide mais plutôt un comportement en solution plus classique comparable à celui de polysaccharides extraits de macro-algues comme les alginates. Les propriétés de gel fluide sont donc spécifiques de la micro-algue productrice. Ce comportement de gel fluide peut être mis à profit pour la stabilisation de dispersion. Avantageusement, il a été mis en évidence que la stabilisation de la dispersion n’est possible qu’avec les polysaccharides dont la solution présente un comportement de type gel fluide sur une durée significative (supérieure à 10 heures notamment). Au sens de l’invention, le terme « exopolysaccharides » désigne les polysaccharides secrétés par les micro-algues dans le milieu extracellualire, les polysaccharides étant définis comme des polymères d’oses de la famille des glucides constitués de plusieurs oses liés entre eux par des liaisons osidiques. . Selon un mode de réalisation, les exopolysaccharides utilisables selon l’invention sont des exopolysaccharides natifs. Typiquement, les exopolysaccharides ont généralement un poids moléculaire supérieur à 100 kDa, typiquement compris entre 1 000 000 Da et plusieurs millions de Da, notamment 10 9 Da. Typiquement, ils présentent les constituants suivants : EPS de Glossomastix sp , RCC3688 : Composition osidique caractérisant un galacturono-rhamno-fucane (11% acide galacturonique, 20% rhamnose, 56% fucose), présentant également en moindres proportions : acide glucuronique (11%) et galactose (2%). EPS de Glossomastix sp . RCC3707 : Composition osidique caractérisant un galacturono-rhamno-fucane (19% acide galacturonique, 27% rhamnose, 44% fucose), présentant également en moindres proportions : acide glucuronique (6%) et galactose (4%). Selon un mode de réalisation, ledit exopolysaccharide présente donc une structure de type galacturono-rhamno-fucane, En particulier, l’exopolysaccharide présente une composition osidique caractérisant un galacturono-rhamno-fucane avec des teneurs pour les différents sucres compris entre 40 et 60% de fucose, entre 20 et 30% de rhamnose et entre 10 et 20% d’acide galacturonique. On décrit aussi ici les exopolysaccharides issus de la micro-algue Pavlova et notamment l’espèce Pavlova sp ,, telle que Pavlova sp,, RCC3438 souche déposée à l’autorité de dépôt internationale Culture Collection of Algae and Protozoa (CCAP) le 9 décembre 2020 sous le numéro CCAP 940/5. Ladite souche a été déposée par SATT Ouest Valo, 14 C rue du Pâtis Tatelin, Métropolis 2, CS 80804, 35708 Rennes Cedex, France, le 9 décembre 2020, auprès de l’autorité de dépôt internationale Culture Collection of Algae and Protozoa (CCAP), Scottish Association for Marine Science (SAMS), Scottish Marine Institute, Oban, Argyll, PA37 1QA, UK. Une souche est définie ici comme un rang taxonomique de bas niveau représentant un sous-type de micro-algue. Selon un mode de réalisation, les exopolysaccharides selon l’invention peuvent être obtenus de la façon suivante : Typiquement, ils peuvent être obtenus par culture des micro-algues correspondantes. Cette culture peut être faite selon des méthodologies classiques, telles que par exemple en erlenmeyer, en photobioréacteur cylindrique ou torique, ou en airlift. La culture des micro-algues est maitrisée par les industriels, permettant ainsi de générer aisément les exopolysaccharides souhaitDe préférence, le milieu de culture des micro-algues est un milieu de culture F/2 enrichi. La composition du milieu F/2 enrichi est basée sur celle du milieu F/2 décrit par Guillard et Ryther (Studies of marine planktonic diatoms. I. Cyclotella nana Hustedt and Detonula confervacea Cleve. Can. J. Microbiol. 8: 229-239, 1962), avec des teneurs en sources d’azote et phosphore augmentées. Un exemple représentatif de milieu F/2 enrichi est décrit dans les exemples. Avantageusement, les conditions de culture comprennent la culture en erlen ou en airlift, à température ambiante (par exemple environ à 20°C), sous irradiance entre 40 et 300 µmolphotons/m²/s avec un cycle jour/nuit ou illumination continue, sous agitation entre 0 et 120 rpm, plus particulièrement en airlift sans agitation, en erlenmeyer. Les exopolysaccharides étant excrétés par les micro-algues, ils sont présents dans les milieux de culture. Leur séparation peut être effectuée par collecte des surnageants de culture dans lesquels ils sont solubles après centrifugation. Cette collecte ne requiert donc généralement aucune étape d’extraction intracellulaire. Ceci a pour avantage de réduire le coût d’obtention de la matière première. Typiquement, les surnageants sont ensuite traités par ultrafiltration tangentielle par des séries de concentrations dilutions (membrane de seuil de coupure de 50 kDa). Les cycles de concentrations dilutions sont effectués jusqu’à obtention d’une conductivité stable (proche de 2 µS.cm -1 dans le perméat) afin d’éliminer les sels et molécules de faible masse molaire issues du milieu de culture, puis congélation et séchage, par lyophilisation par exemple. Ainsi selon un mode de réalisation, le procédé d’obtention des exopolysaccharides comprend l’étape d’obtention de l’exopolysaccharide à partir de la micro-algue par : - culture de ladite micro-algue, - collecte du surnageant de culture, - ultrafiltration (concentration/dilution), - et éventuellement lyophilisation. Selon un autre objet, la présente invention concerne également une formulation liquide comprenant un exopolysaccharide tel que défini ci-avant. Selon un premier mode de réalisation, ladite formulation peut être une solution aqueuse concentrée (10 à 50 g/L) dudit exopolysaccharide, de type gel fluide. Ladite formulation peut être obtenue par mise en solution de l’exopolysaccharide dans de l’eau. Elle peut avantageusement être utilisée en tant qu’additif texturant pour stabiliser les dispersions. Selon un autre mode de réalisation, ladite formulation peut être une dispersion de particules ou nanoparticules, comprenant ledit exopolysacharide à concentration moindre (notamment de 0.01 à 5 g/L, particulièrement de 0,1 à 5 g/L). Typiquement, il s’agit d’une dispersion obtenue par ajout d’un exopolysaccharide selon l’invention, par exemple sous forme de la solution concentrée précitée, afin de la stabiliser. Typiquement, ladite dispersion est une dispersion aqueuse stable, choisie notamment parmi les émulsions aqueuses ou les suspensions aqueuses. Le terme « dispersion » utilisé ici fait référence à tout mélange hétérogène de deux liquides ou d’un solide dans un liquide. On peut ainsi distinguer deux types de dispersion : les émulsions et les dispersions. On entend par « émulsion » un mélange hétérogène de deux substances liquides non miscibles, l'une étant dispersée sous forme de petites gouttelettes dans l'autre. On entend par « suspension » un mélange dans lequel un produit finement divisé est combiné avec un liquide, et dans lequel il est non soluble. Selon un autre objet, la présente invention concerne donc également un procédé de stabilisation d’une dispersion aqueuse comprenant le précitée. On entend ici par stabilisation, l’inhibition ou le retardement de la décantation ou du crémage notamment. Lesdites dispersions peuvent être notamment des dispersions dans les domaines cosmétique et agroalimentaire: La représente la viscosité de l'alginate (triangles pleins et vides) et de l'EPS- Pav (cercles pleins et vides) à 20 g.L -1 entre 0,1 et 1000 s -1 . La représente les modules élastiques et visqueux d'Alginate (triangles G’ pleins et G” vides) et EPS- Pav (cercles G’ pleins et G” vides) à 20 g.L -1 entre 0,1 et 10 Hz. La représente la viscosité de l'EPS-3707 (courbes aller : symboles pleins ; courbes retour : symboles vides). 20 g.L -1 , 10 g.L -1 , 5 g.L -1 , 1 g.L -1 et 0,5 g.L -1 . La représente les modules élastiques et visqueux d'EPS-3707 (symboles pleins G’ et vides G’’) entre 0,001 et 10Hz. 20 g.L -1 , 10 g.L -1 , 5 g.L -1 , 1 g.L -1 et 0,5 g.L -1 . La représente la viscosité de l'EPS-3688 (courbes aller: symboles pleins ; courbes retour: symboles vides) entre 0,1 et 1000 s -1 , 20 g.L -1 , 10 g.L -1 , 5 g.L -1 , 1 g.L -1 et 0,5 g.L -1 . La représente les modules élastiques et visqueux d'EPS-3688 (symboles pleins G’ et vides G”) entre 0,01 et 10 Hz ; 20 g.L -1 , 10 g.L -1 , 5 g.L -1 , 1 g.L -1 et 0,5 g.L -1 . La représente la viscosité complexe des solutions EPS-3707 dans l'eau à 20 g.L -1 , 10 g.L -1 , 5 g.L -1 et 1 g.L -1 par rapport à EPS- Pav 20 g.L -1 () et alginate 20 g.L -1 (). La représente la viscosité complexe des solutions EPS-3688 dans l'eau à 20 g.L -1 , 10 g.L -1 , 5 g.L -1 , 1 g.L -1 et 0,5 g.L -1 par rapport à EPS- Pav 20 g.L- 1 () et alginate 20 g.L -1 (). La illustre la rhéofluidité (viscosité en fonction du gradient de cisaillement): effet de la salinité sur la viscosité de solutions ESP-3707 (courbes aller : symboles pleins ; courbes retour : symboles vides ; NaCl 0,15 M : ronds ; eau : triangles), 20 g.L -1 (rouge), 10 g.L -1 (bleu), 5 g.L -1 (vert), 1 g.L -1 (noir) et 0,5 g.L -1 (rose). La illustre l’effet de la nature du sel sur la viscosité des solutions d'EPS-3707 à 1 g.L -1 dans l'eau, KSCN 1M et NaCl 1M (courbes aller : symboles pleins ; courbes retour : symboles vides) La illustre l’effet de la salinité sur les mesures d'oscillation. Axe gauche : modules élastique (cercle plein) et visqueux (cercle vide), axe droit : viscosité complexe (triangle) en fonction de la fréquence de EPS-3707 1 g.L -1 dans l'eau et NaCl à 0,05 ; 0,15 ; 0,5 et 1M. La illustre la comparaison entre SLB de solutions EPS à 1 g.L -1 dans l'eau à 25°C, 37°C et 60 °C . La représente les courbes de transmission (%) en fonction de la hauteur du tube (axe x) et du temps de vieillissement (courbes de t = 0 à t max) de suspensions de cellulose microcristalline A) dans l'eau B) dans une solution d’alginate à 10 g.L -1 C) dans une solution d’EPS-3688 à 1 g.L -1 . La représente les courbes de transmission (%) en fonction de la hauteur du tube (axe x) et du temps de vieillissement (courbes de t = 0 à t max) A) d’émulsions OO dans l'alginate 20 g.L -1 ; et B) d’émulsion OO avec l’EPS-3707 1 g.L -1 ; et C) avec l’EPS-3688 1 g.L -1 . La illustre le pourcentage de transmission avec le temps de vieillissement des suspensions de cellulose microcristalline à deux hauteurs différentes du tube (ligne pointillée : bas du tube, 2 cm) (ligne complète: haut du tube, 5,5 cm). La illustre le pourcentage de transmission avec le temps de vieillissement des émulsions OO à deux hauteurs différentes du tube (ligne pointillée : bas du tube, 2 cm) (ligne complète: haut du tube, 5,5 cm). Les exemples suivants sont donnés à titre illustratif et non limitatif de la présente invention : Exemple 1 : Etude des EPS et leurs propriétés Matières premières L'alginate (ALG) (avec un rapport mannuronate / glucuronate de sodium de 1,2) a été fourni par Cargill (France) Production des EPS Glossomastix sp. , (Souches RCC3688 et RCC3707 précitées) placées dans les Pinguiophyceae, sont des microalgues dorées isolées de St Margaret's Bay (Royaume-Uni) ; Pavlova souche 3438 placée dans les Pavlovophyceae est une microalgue isolée de la Mer Noire à Varna en Bulgarie. 1.2 Production d'EPS Glossomastix sp . RCC3688 a été cultivée en erlen ou en airlift avec un milieu F/2 (enrichi ou non), à 20°C sous irradiance entre 40 et 300 µmolphotons/m²/s avec un cycle jour/nuit ou illumination continue sous agitation entre 0 et 120 rpm. La souche Glossomastix sp. (RCC3707) est cultivée en condition airlift dans des bouteilles (2 à 5 L) pour pallier à sa sensibilité à l’agitation mécanique. Les cultures airlift sont équipées d’un diffuseur d’air cylindrique relié à un réseau d’air comprimé stérilisé par filtration (0,22 µm). Les cultures sont réalisées à 20 °C (local climatisé) et illuminées par des néons fournissant une irradiance de 40 µmol photons.m -2 .s -1 . La souche est cultivée en mode batch et en photoautotrophie avec un cycle jour/nuit de 16 h/8 h. Les cultures batch 2 et 5 L sont réalisées en milieu « F/2 enrichi » et inoculées respectivement par 200 et 500 mL d’inoculum en phase exponentielle. La composition du milieu F/2 enrichi est la même que celle du milieu F/2 décrit par Guillard et Ryther (Studies of marine planktonic diatoms. I. Cyclotella nana Hustedt and Detonula confervacea Cleve. Can. J. Microbiol. 8: 229-239, 1962), excepté les teneurs en sources d’azote et phosphore qui ont été augmentées. Selon un mode de réalisation, Le milieu F/2 développé par Guillard and Ryther (1962) est un milieu de culture standard pour la culture des microalgues. Il est constitué pour 1 L d’eau de mer artificielle de : 100 µL d’une solution de microéléments 10X, de 100 µL d’une solution de vitamines 10X, de 0,0075 g de NaNO 3 et de 0,00055 g de NaH 2 PO 4 .2H 2 O. Le milieu « F/2 modifié » a la même composition que le milieu F/2, à l’exception des concentrations en NaNO 3 (1 g.L -1 ) et NaH 2 PO 4 .2H 2 O (0,2 g.L -1 ). Les nouvelles concentrations de ce milieu de culture ont été déterminées par Villay et al . (2013) Bioresource Technology, 146, 732-735 par une analyse stœchiométrique de la composition du milieu et comparaison avec la composition molaire moyenne des microalgues déterminée par Pruvost & Cornet. C. Posten, C. Walter (Eds.), Microalgal biotechnology, “potential and production”, Walter De Gruyter GmbH and Co KG, Germany (2012). Ces concentrations ont été déterminées afin d’atteindre une concentration en biomasse de 1 g.L -1 . Le milieu « F/2 enrichi » a la même composition que le milieu F/2 mais où les concentrations en NaNO 3 et NaH 2 PO 4 .2H 2 O sont respectivement égales à 1,7 et 0,55 g.L -1 , respectivement. Ces concentrations ont été déterminées avec la même méthode que celle employée pour le milieu « F/2 modifié », avec l’objectif d’atteindre une concentration en biomasse de 2 g.L -1 . Le milieu F/2 enrichi qui a été utilisé est composé pour 1 L d’eau de mer artificielle de : 100 µL d’une solution de microéléments 100 µL d’une solution de vitamines NaNO 3 1,7 g NaH 2 PO 4 ,2H 2 O 0,55 g La composition de l'eau de mer artificielle utilisée est: NaCl 28,13 g KCl 0,77 g CaCl 2 ,2H 2 O 1,60 g MgCl 2 ,6H 2 O 4,80 g NaHCO 3 0,11 g MgSO 4 ,7H 2 O 3,50 g Eau distillée qsp 1 000 mL La solution de microéléments est constituée de : Na 2 EDTA 4,16 g FeCl 3 ,6H 2 O 3,15 g CuSO 4 ,5H 2 O 0,01 g ZnSO 4 ,7H 2 O 0,022 g CoCl 2 ,6H 2 O 0,01 g MnCl 2 ,4H 2 O 0,18 g Na 2 MoO 4 ,2H 2 O 0,006 g Eau distillée qsp 1 00 mL La solution mère de vitamines est constituée de : Cyanocobalamine (Vitamine B 12 ) 0,0005 g Thiamine HCl (Vitamine B 1 ) 0,1 g Biotine 0,0005 g Eau distillée qsp 100 mL La souche Pavlova RCC3438 précitée a été cultivée en PBR torique de 1,4L, à 20°C, sous une irradiance continue de 150µmolphotons/m2/s et une agitation de 100rpm, avec un milieu F/2 enrichi. Le pH a été régulé par modification du taux de CO 2 dans l'air injecté (débit de gaz de 200 mL/min, avec un taux de CO 2 de 0.5 à 3%). 1.3 Rhéologie Les mesures rhéologiques ont été effectuées avec le rhéomètre AR2000 (TA Instrument, UK), en utilisant une géométrie de cylindre concentrique double entrefer de taille standard (aluminium, entrefer 500µm) sauf pour la concentration la plus élevée pour laquelle une géométrie cône/plan (diamètre 4cm; angle 2 °; entrefer 57µm) a été utilisée. Toutes les mesures ont été effectuées avec un piège à solvant pour éviter toute évaporation. Les procédures d'écoulement ont été effectuées à 25 °C de 0,1 à 1000 s -1 (pendant 10 min) et de 1000 à 0,1 s -1 (pendant 10 min) à diverses concentrations dans l'eau ou en milieu NaCl (0,05 à 1 M) (avec 200 ppm d'azide de sodium pour éviter la dégradation bactériologique). Les procédures d'oscillation ont été effectuées à 25 °C, 37 °C ou 60 °C. Le domaine de linéarité de chaque solution d'EPS a été déterminé avant d'effectuer les balayages en fréquence (de 0,001 ou 0,01 à 10 Hz). La valeur limite de contrainte (σ lim ) du domaine de linéarité a été déterminée graphiquement. Le modèle de Hershel-Bulkley a été appliqué sur les courbes d'écoulement pour déterminer la contrainte seuil de la solution d’'EPS. Avec σ la contrainte de cisaillement, le taux de cisaillement, la contrainte seuil, K l'indice de cohérence et n l'indice de rhéofluidité. Les analyses ont été effectuées avec le logiciel Rheology Advantage Instrument Control AR V3.0.0. 1.4 Rheolaser Master® Les propriétés viscoélastiques des solutions d'EPS ont également été évaluées de manière non destructive (sans contrainte mécanique) à l'aide du Rheolaser Master® de la société Formulaction (France). Cette technique est basée sur une technique de diffusion dynamique de la lumière appelée Spectroscopie à ondes diffusantes (DWS). Un laser (λ=650 nm) éclaire l'échantillon contenant des objets (particules, gouttelettes ou fibres), les photons pénètrent dans l'échantillon et sont rétrodiffusés par les objets. Une caméra vidéo est utilisée comme détecteur des ondes rétrodiffusées pour afficher une image d'interférence appelée «Speckle». Les taches sombres et lumineuses sur l'image obtenue résultent d'interférences respectivement destructives et constructives entre les ondes rétrodiffusées. Le mouvement brownien des objets dépend de la structure viscoélastique de l'échantillon, par conséquent, la vitesse des fluctuations d'intensité sur l'image d’interférence est également différente. Ainsi, la vitesse de déformation du motif de speckle permet de caractériser les propriétés structurelles des échantillons étudiés. Ensuite, une fonction de décorrélation est utilisée et le déplacement carré moyen (MSD) des diffuseurs du produit est obtenu à partir de la courbe de décorrélation, reflétant la surface moyenne explorée par les particules à un temps de décorrélation donné. De la courbe MSD en fonction du temps de décorrélation, de nombreuses informations sont obtenues et des paramètres tels que l'indice d'élasticité (EI) et la balance solide-liquide (SLB) sont déterminés. L’EI est déterminé comme l'inverse de la valeur de hauteur de plateau, et est proportionnel au module élastique G’ au plateau. EI donne des informations sur l'évolution de l'élasticité du produit avec le temps et est calculé automatiquement entre 2,5 ms et 1,5 s de décorrélation. SLB est caractéristique du rapport entre le comportement de type solide et le comportement de type liquide du produit. Les valeurs SLB changent de la même manière que tan δ (rapport de G" sur G’) obtenu en rhéologie en mode oscillation. SLB est obtenu par la valeur de la pente (en échelle logarithmique) au plateau élastique de la courbe MSD. Plus l'échantillon est «élastique / solide», plus la valeur SLB est faible (0 Pour les analyses Rheolaser Master®, l'alginate et les EPS de Glossomastix , RCC3707 et Pavlova sp. RCC3438ont été dissous dans 25 mL d'eau (contenant 200 ppm d'azide de sodium) à 0,1, 0,5, 0,75 ou 1 g.L -1 . Ensuite, 200 µL de solution de particules de latex (10% v/v, taille des particules de latex de 1 µm) ont été ajoutés aux solutions de polysaccharides et le mouvement brownien des particules de latex a été étudié. Les mesures ont été effectuées trois fois à 25, 37 ou 60 °C pendant 2h. Toutes les données sont analysées avec le logiciel RheoSoft Master v1.4.0.0. Les résultats (EI et SLB) sont donnés comme la moyenne de trois mesures. 1.5 Stabilité des dispersions: Turbiscan® Turbiscan® Classic MA2000 est un analyseur optique de la société Formulaction, France. Cette technique est basée sur la variation de signaux lumineux rétrodiffusés ou transmis. Les intensités de rétrodiffusion (BS) et transmises (T) sont mesurées en fonction de la hauteur de l'échantillon et du temps de vieillissement. La taille du tube est de 6 cm de hauteur. Pour les analyses, nous avons déterminé le pourcentage de transmission en bas du tube (2 cm) et en haut du tube (5,5 cm) en fonction du temps de vieillissement. Si le pourcentage de transmission augmente et atteint une valeur proche de 100%, cela signifie que la décantation ou le crémage se produisent accompagné ou non de floculation ou de coalescence. 1.5.1 Suspensions de cellulose microcristalline La stabilité des suspensions microcristallines de cellulose (ACROS, France, taille moyenne des particules 90µm) dans les solutions d'EPS a été étudiée par cette technique. Les suspensions ont été préparées en mélangeant 0,1 g de cellulose microcristalline dans 6 mL de solutions d'EPS à différentes concentrations dans l'eau (tableau 1). La stabilité des suspensions a été comparée aux solutions d'alginate et à l'eau pure. Les suspensions d'EPS de Pavlova (EPS- Pav) n'ont pas été testées car ce polysaccharide donne des solutions troubles et il n'est pas compatible avec l'analyse optique. 1.5.2 Émulsions d'huile d'orange La stabilité des émulsions d'huile d'orange (Sigma, France) dans les solutions d'EPS a également été étudiée. Une émulsion d'huile d'orange (OO) a été préparée comme suit : 2,5 mL d'OO ont été ajoutés à 22,5 ml d'eau (le rapport eau / huile était de 90/10 (V/V)) et homogénéisés avec l'homogénéisateur Ultra-Turrax (T18 Basic, IKA , France) pendant 5 min à la vitesse 3 (11 000 tr / min) (tableau 1bis). La stabilité des émulsions OO dans l'eau pure a été contrôlée par des mesures de taille (Mastersizer 3000, Malvern, USA) et la taille des gouttelettes d'huile (3 µm ± 0,5) est stable pendant 15 min. Ensuite, 1 mL d'émulsion OO a été rapidement ajouté à 5 mL de solutions EPS (à diverses concentrations) et rapidement homogénéisé en inversant le tube trois fois pour obtenir 6 mL d'émulsion OO dans des solutions EPS. Les tableaux 1 et 1 bis reprennent les différentes dispersions (la concentration finale des solutions d'EPS est donnée en tenant compte de la dilution due au mélange de 1 mL d'émulsion OO dans 5 mL de solution d'EPS) et le temps et la fréquence des analyses avec le Turbiscan®. Les émulsions EPS- Pav n'ont pas été testées car ce polysaccharide donne des solutions troubles et il n'est pas compatible avec l'analyse optique. [Table 1] : Préparation des émulsions huile d'orange / EPS dans l'eau; Temps et fréquence des analyses avec Turbiscan® Concentration finale d’EPS en suspensions Durée (Fréquence) des analyses RCC3707 et RCC3688 0,5 g.L -1 dans l’eau 1 h 20 (1 scan/min) 0,5 g.L -1 dans l’eau 2 h (1 scan/min) 1 g.L -1 dans l’eau 45 min (1 scan/min) Alginate Eau 10 g.L -1 dans l’eau 5h15 (1 scan/6 min) - 2h (1scan/4 min) [Table 1bis]: Préparation de suspensions dans l’eau ou dans une solution de NaCl 0,15M ; Durée et fréquence des analyses avec le Turbiscan™ EPS Concentration finale d’EPS en émulsion Durée (Fréquence) des analyses 3707 3688 Alginate 1 g.L -1 eau 40 h (1 scan /h) 0,5 g.L -1 eau 6 h (1 scan/min) 1 g.L -1 eau 47 h (1 scan/min) 20 g.L -1 eau 13 h (1 scan/min) 2 Résultats et discussion 2.1 Propriétés rhéologiques Les propriétés physico-chimiques des solutions d'EPS dans l'eau ou en milieu salin ont été étudiées par rhéologie dans des expériences d'écoulement conduisant aux propriétés de viscosité ; ou dans des expériences d'oscillation afin d'analyser les propriétés viscoélastiques. Le comportement rhéologique des solutions d'EPS a ensuite été comparé à l'alginate, un polysaccharide issu de macroalgues. 2.1.1 EPS de Pavlova sp. Pour commencer, les solutions d'EPS de Pavlova sp. RCC3438(EPS- Pav ) ont été analysées par des expériences d'écoulement entre 0,1 et 1000 s -1 à 20 g.L -1 dans l'eau ( ). Le caractère thixotrope a également été évalué par une deuxième étape de 1000 à 0,1 s -1 . Comme le montre la , la solution EPS- Pav présente un comportement visqueux, non newtonien et faiblement rhéofluidifiant. Par rapport à une solution d'alginate à la même concentration, la solution EPS- Pav a une viscosité inférieure η 0 : 0,018 Pa.s pour l’EPS- Pav et 0,27 Pa.s pour l'alginate (le modèle de Cross est utilisé pour déterminer η 0 ). De plus, aucune thixotropie (ou très légère) n'a été observée. Concernant les propriétés viscoélastiques, le balayage en fréquence entre 0,1 et 10 Hz (dans le domaine de linéarité) a montré un comportement majoritairement visqueux de la solution EPS- Pav avec un module visqueux G" supérieur au module élastique G’ sauf à 10 Hz. G’ et G” d'EPS- Pav sont inférieurs à ceux de la solution d'alginate ( ). 2.1.2 EPS issus de Glossomastix sp . RCC3688 RCC3707 (ci-après EPS-3688 et EPS-3707) Le comportement rhéologique de solutions de l'EPS-3688 et de l'EPS-3707 a également été étudié à différentes concentrations. À 20, 10, 5, 1 et 0,5 g.L -1 dans l'eau, les solutions d'EPS-3707 ( ) et d'EPS-3688 ( ) présentent un comportement non newtonien comme les fluides à contrainte seuil. Une très légère thixotropie est observée. La viscosité apparente des solutions EPS-3707 et EPS-3688 à 20 g.L -1 dans l'eau est beaucoup plus élevée que la solution EPS- Pav à la même concentration. Le modèle de Hershel-Bulkley a été appliqué sur des courbes d'écoulement pour déterminer la contrainte seuil σ 0 des solutions d’EPS et les données ont été comparées à la valeur limite de contrainte σ lim du domaine de linéarité pendant les procédures d'oscillation (tableau 2). Une bonne corrélation est obtenue entre ces deux données. Les balayages en fréquence des solutions EPS-3707 ( ) et des solutions EPS-3688 ( ) ont montré un comportement atypique par rapport aux solutions EPS- Pav ou alginate. En effet, à 20, 10, 5 et 1 g.L -1 , un comportement majoritairement élastique est observé entre 0,1 et 10 Hz, avec des valeurs de modules faibles mais avec un module élastique G’ supérieur au module visqueux G”. Ces caractéristiques traduisent le comportement d'un gel faible avec une faible valeur de la contrainte seuil. Ainsi, les solutions EPS-3688 et EPS-3707 se comportent comme des gels faibles même à faible concentration (1 g.L -1 ) avec une faible contrainte seuil et de faibles modules viscoélastiques. À 1 g.L -1 , les deux EPS-3707 et EPS-3688 conduisent à des gels faibles avec une dynamique du même ordre de grandeur. En effet, le temps de relaxation tr, ou temps de désenchevêtrement (déterminé au point de croisement des courbes G' et G” sur les figures 4 et 6 et donné dans le tableau 2) est de 85 s pour la solution EPS-3707 avec un module élastique de 0,02 Pa et d’environ 50 s pour la solution EPS-3688 avec un module élastique de 0,03 Pa. À une concentration plus faible (0,5 g.L -1 ), la solution EPS-3688 a une dynamique ralentie par rapport à la solution EPS-3707. Le temps de relaxation est environ dix fois plus élevé. Les viscosités complexes des solutions d'EPS dans l'eau sont comparées aux solutions d'alginate et d'EPS- Pav sur la (EPS-3707) et la (EPS-3688). Une forte variation de viscosité complexe est également observée sur toute la gamme de fréquence alors que pour les solutions d'alginate ou d'EPS- Pav , la viscosité complexe varie très peu. [Tableau 2] : Données rhéologiques: contrainte seuil (σ 0 ), contrainte limite, temps de relaxation t r et module élastique G’ à t r EPS-3707 EPS- 3688 EPS-3707 EPS- 3688 Concentration (g/L) σ 0 a (Pa) σ lim (Pa) σ 0 a (Pa) σ lim (Pa) t r (s) G’ (Pa) t r (s) G’ (Pa) 0,5 0,01 0,006 0,02 0,02 0,8 0,01 10 0,02 1 0,03 0,03 0,06 0,06 85 0,02 50 0,03 5 0,18 0,2 0,5 0,7 140 0,12 >100 - 10 0,37 0,4 1,7 2,0 >1000 - >100 - 20 3,44 4 11,5 12,6 >1000 - >100 - 2.1.3 Effet de la salinité sur le comportement rhéologique Des solutions d'EPS ont été préparées en milieu NaCl, un sel lyotrope (renforçant les interactions hydrophobes) ou KSCN, un sel chaotrope (affaiblissant les interactions hydrophobes) à différentes concentrations pour étudier l'impact de la salinité sur la rhéologie des solutions. Les courbes d'écoulement des solutions EPS-3707 dans NaCl 0,15 M sont comparées aux courbes d'écoulement dans l'eau sur la . Les courbes aller (symbole plein) et retour (symbole vide) sont représentées pour montrer la légère thixotropie. La viscosité des solutions salines est augmentée par rapport aux solutions dans l'eau sauf pour la solution à 1 g.L -1 pour laquelle la viscosité dans NaCl 0,15 M est légèrement diminuée par rapport à la viscosité dans l'eau. La présence de NaCl conduit à l’écrantage des charges présentes sur les polysaccharides avec une diminution des interactions électrostatiques et une éventuelle augmentation des interactions hydrophobes provoquant un gain de viscosité. Un autre effet de la présence de NaCl peut être observé sur la solution d'EPS-3707 à 20 g.L -1 : la thixotropie disparaît (les courbes aller et retour sont superposables). L'effet sur la concentration de NaCl a également été étudié sur EPS-3707 à 1 g.L -1 dans NaCl 1M, 0,5M, 0,15M et 0,05M avec un faible impact sur les viscosités de la solution. On peut supposer qu'une faible concentration de NaCl est suffisante pour écranter les charges. L'effet d'un sel chaotrope a également été étudié sur les solutions EPS-3707 1 g.L -1 ( ). Outre un effet de diminution de la viscosité, KSCN a un effet sur la thixotropie des solutions ESP-3707. En effet, la thixotropie de ces solutions est augmentée par rapport à la solution dans l'eau. L’étude d’EPS 3688 donne des résultats comparables. L'impact de la salinité a été examiné sur la dynamique des solutions d'EPS par des procédures d'oscillation entre 0,01 et 10 Hz (le domaine de linéarité de chaque solution a été vérifié auparavant). En présence de NaCl et quelle que soit la concentration en sel, la dynamique des solutions EPS-3707 1 g.L -1 est accélérée (les temps de relaxation passent de 85 s dans l'eau à 16 s dans NaCl 0,5 M avec 0,016 ). 2.2 Étude Rheolaser Master® Pour compléter l'étude rhéologique, des analyses de solutions EPS ont été réalisées avec l'instrument Rheolaser Master®, une méthode non destructive (sans aucune contrainte mécanique). Cette technique basée sur une technique de diffusion dynamique de la lumière appelée Spectroscopie à ondes diffuses (DWS) a conduit à la détermination de différentes données comme l'indice d'élasticité (EI) et la balance solide-liquide (SLB). EI est proportionnelle au module élastique G ’au plateau. SLB est caractéristique du rapport entre le comportement de type solide et le comportement de type liquide du produit. Les valeurs SLB changent de la même manière que tan δ (rapport de G" sur G’). Le tableau 3 donne l’EI à différentes températures (25, 37 et 60 °C) pour chaque polysaccharide à 1 g.L -1 dans l'eau et à différentes concentrations pour les solutions EPS-3688 (0,75 ; 0,5 et 0,1 g.L -1 ). Cette technique confirme le caractère élastique plus élevé des EPS-3688 et EPS-3707 que EPS- Pav à 25 °C. En effet, l'EI d'EPS-3688 et d’EPS-3707 est supérieur à l'EI d'EPS- Pav . L'effet de la concentration sur l'EI a été évalué sur EPS-3688 entre 0,1 et 1 g.L -1 dans l'eau et à chaque température. EI diminue logiquement si la concentration diminue comme le module élastique G’. Le mouvement brownien des particules dépend de la structure viscoélastique de l'échantillon et lorsque la concentration diminue, les propriétés viscoélastiques diminuent également. L'augmentation de la température montre une différence entre les solutions d’EPS. Pour l'EPS-3707 et l'EPS- Pav , une augmentation de la température entraîne une légère diminution de l'EI alors que pour l'EPS-3688, la température n'a aucun effet sur l'EI (sauf à 0,1 g.L -1 ). La diminution de l'EI avec l'augmentation de la température semble logique car le mouvement brownien des particules s'accélère avec la température. Mais si l'EI est inchangée avec la température, il semble que les interactions conduisant à la structure de gel faible sont suffisamment fortes pour ne pas être influencées par la température. Ce comportement a été vérifié par des mesures rhéologiques classiques en balayage en oscillation à 1 Hz et les résultats ont montré que G' était quasi constant à 25, 37 et 60 °C et toujours supérieur à G” (comportement élastique quel que soit la température). [Tableau 3]: EI des solutions d'EPS dans l'eau à 25, 37 et 60 °C et module élastique G ’d'EPS-3688 à 1 g.L -1 et 25, 37 et 60 °C. [Tableau 3]: EI de solutions d’EPS dans l’eau à 25, 37 and 60°C et module élastique G’ de EPS-3688 à 1 g.L -1 0,5 g.L -1 et 25, 37 et 60°C TEMP. (°C) CONC. (g.L -1 ) EPS- 3688 EI x 10 4 (nm -2 ) EPS- 3707 EI x 10 4 (nm -2 ) EPS- PAV EI x 10 4 (nm -2 ) ALGINATE EI x 10 4 (nm -2 ) EPS- 3688 G’ (Pa) 25 1 9,7 ± 0,1 9,3 ± 0,3 6,7 ± 0,1 - 0,21 ± 0,03 0,75 8,9 ± 0,6 0,5 6,8 ± 0,3 0,13 ± 0,02 0,1 5,4 ± 0,1 37 1 10,1 ± 0,7 9,1 ± 0,2 5,2 ± 0,1 5,7 ± 0,1 0,19 ± 0,03 0,75 8,9 ± 0,6 0,5 6,6 ± 0,4 0,13 ± 0,02 0,1 5,0 ± 0,4 60 1 10,7 ± 0,8 6,8 ± 0,3 3,6 ± 0,1 3,9 ± 0,1 0,25 ± 0,03 0,75 9,2 ± 0,3 0,5 7,6 ± 0,6 0,24 ± 0,03 0,1 3,7 ± 0,2 La balance Solide Liquide (Balance SLB) est obtenue par la valeur de la pente (en échelle logarithmique) au plateau élastique de la courbe MSD. Si SLB La compare la SLB de tous les EPS à 1 g.L -1 à différentes températures. À 25 °C, seul l'EPS-3688 a un comportement de type élastique (SLB = 0,53) ; la SLB d'EPS-3707 est légèrement supérieur à 0,5 (SLB = 0,62), suggérant un comportement viscoélastique, et l’EPS- Pav et l'alginate ont clairement un comportement visqueux (SLB EPS- Pav = 0,94 et SLB alginate = 0,98). À 37 °C, la SLB d'EPS-3688 et d'EPS-3707 n'est pas modifiée ou même diminue, tandis qu'elle augmente légèrement pour l’EPS- Pav et l'alginate. Enfin, à 60°C, SLB d'EPS-3688 reste toujours constant et proche de 0,5 lorsque la SLB d'EPS-3707 augmente à 0,75. Ainsi, seule la solution EPS-3688 à 1 g.L -1 dans l'eau conserve son comportement élastique si la température augmente à 60 °C. 2.3 Stabilité des dispersions Les solutions EPS-3688 et EPS-3707 pourraient être utilisées comme stabilisateurs de dispersions grâce à leur comportement élastique même à faible concentration. 2.3.1 Suspensions de cellulose microcristalline La stabilité de dispersion de cellulose microcristalline a été étudiée dans différents milieux (eau, solution d’alginate et d’EPS-3688) à l'aide de l'analyseur Turbiscan®. Cette technique est basée sur la variation de signaux lumineux rétrodiffusés ou transmis. Les intensités de rétrodiffusion (BS) et transmises (T) sont mesurées en fonction de la hauteur de l'échantillon et du temps de vieillissement. Cette technique permet notamment d’évaluer la décantation de particules en suspension. La figure 13A montre un exemple de graphique obtenu pour l'analyse d'une suspension de cellulose microcristalline dans de l'eau pure. L'axe des x représente la hauteur du tube d'analyse, l'axe des y, la transmission et le temps de vieillissement est représenté par les différentes couleurs. La figure 13B montre un exemple de graphique obtenu pour l'analyse de la suspension de cellulose microcristalline dans une solution d’alginate à 10 g.L -1 dans l’eau et la figure 13C dans une solution d'EPS-3688 à 1 g.L -1 dans l'eau. Les différences entre les trois exemples montrent clairement la stabilité de la suspension dans une solution d'EPS-3688 (même à 1 g.L -1 ). Dans l'eau pure, les particules décantent rapidement au fond du tube et la transmission en haut du tube atteint son maximum en quelques minutes. Dans une solution aqueuse d’alginate à 10 g.L -1 , la décantation est moins rapide et dans une solution d’EPS-3688, la transmission reste constante sur toute la hauteur du tube et sur la durée de la mesure (environ 17h). Les suspensions de cellulose microcristalline dans l'Alginate 10 g.L -1 , dans l'eau et dans l'EPS-3707 1 g.L -1 dans l'eau ont également été étudiées à différents niveaux du tube de décantation. En traçant le pourcentage de transmission avec le temps de vieillissement à différents niveaux du tube ; en haut (ligne complète) ou en bas (ligne pointillée), les différentes suspensions peuvent être comparées entre elles ( ). Ainsi, la suspension de cellulose microcristalline dans une solution d’EPS-3688 à 1 g.L -1 est beaucoup plus stable que dans l'eau et dans une solution d'alginate à 10 g.L -1 . En effet, le pourcentage de transmission au fond du tube reste constant, seule une légère augmentation de la transmission est observée à l'extrême sommet du tube (la valeur maximale est de 32% après 17h), en raison du début de la décantation. Alors que, dans l'alginate, la transmission augmente dès le début en haut du tube (atteignant 88% en 5h30) et plus lentement en bas du tube (atteignant 27% après 5h30) confirmant le début rapide de la décantation. La solution EPS-3688 est un bon stabilisateur de suspension. 2.3.2 Émulsions d'huile d'orange La stabilité des émulsions OO avec les solutions d’alginate (Fig. 19A), d’EPS-3707 (Fig. 19B) et d'EPS-3688 (Fig. 19C) a été étudiée à l'aide du Turbiscan® Classic MA2000. Les figures 14A-B-C montrent une stabilité élevée des émulsions plus particulièrement dans la solution d’EPS-3688 : aucun pic de transmission n'est observé pendant toute l'expérience. Avec l’EPS-3707, un petit pic apparaît autour de 0,7 mm après 3h et dans l'alginate il apparaît plus tôt traduisant une instabilité. La montre clairement la bonne stabilité des émulsions avec les solutions d'EPS (pas de variation de transmission en bas (2 cm) ou en haut du tube (5,5 cm) pendant tout le temps (40h)). Alors que pour l'émulsion OO avec la solution d'alginate, le pourcentage de transmission augmente en haut du tube dès les premières minutes. Les EPS-3707 et EPS-3688 sont donc de bons stabilisateurs d'émulsion. Conclusion : Les études de stabilité ont été réalisées sur une émulsion (huile essentielle d’orange dans eau) et une suspension (nanoparticules de cellulose microcristalline dans eau). Celles-ci ont été possibles par l’utilisation d’un Turbiscan (société Formulaction) qui mesure le signal transmis ou rétrodiffusé par un laser sur toute la longueur d’un tube. Dans le cas de l’émulsion, la coalescence des gouttelettes d’huile a été suivie en mesurant leur taille dans le temps par Mastersizer 3000 Malvern et par évolution de la transmission (Turbiscan). Comme pour l’étude rhéologique, la nature du stabilisant (différents polysaccharides issus de plusieurs microalgues et polysaccharides de macroalgue) et leur concentration ont été modifiées. Il a été mis en évidence que la stabilisation de la dispersion n’est possible qu’avec les polysaccharides dont la solution présente un comportement de type gel fluide sur une durée significative. Utilisation d’un exopolysaccharide ou mélange d’exopolysaccharides issu(s) de micro-algue appartenant au genre Glossomastix à titre d’agent texturant. Utilisation selon la revendication 1 telle que la microalgue appartenant au genre Glossomastix est choisie parmi les souches : Glossomastix sp. RCC3688, souche déposée à l’autorité de dépôt internationale Culture Collection of Algae and Protozoa (CCAP) le 9 décembre 2020 sous le numéro CCAP 2912/2. Glossomastix sp. RCC3707, souche déposée à l’autorité de dépôt internationale Culture Collection of Algae and Protozoa (CCAP) le 9 décembre 2020 sous le numéro CCAP 2912/1. Utilisation selon la revendication 1 ou 2 telle que l’exopolysaccharide est un exopolysaccharide natif. Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes telle que l’exopolysaccharide présente un poids moléculaire moyen supérieur à 100 kDa. Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes telle que l’exopolysaccharide présente une composition osidique caractérisant un galacturono-rhamno-fucane. Utilisation selon l’une quelconque des revendications précédentes telle l’exopolysaccharide est susceptible d’être obtenu à partir de la micro-algue par appartenant au genre Glossomastix par un procédé comprenant : - la culture de ladite micro-algue, - la collecte du surnageant de culture, - l’ultrafiltration (concentration/dilution), - et éventuellement la lyophilisation. Formulation liquide comprenant un exopolysaccharide tel que défini à l’une quelconque des revendication 1 à 6. Formulation selon la revendication 7, telle qu’il s’agit d’une solution aqueuse de concentration comprise entre 10 et 50 g/L dudit exopolysaccharide, de type gel fluide. Formulation selon la revendication 7 telle qu’il s’agit d’une dispersion aqueuse stable. Formulation selon la revendication 7 ou 8 choisie parmi les émulsions aqueuses ou les suspensions aqueuses. Procédé de stabilisation d’une dispersion aqueuse comprenant le mélange de ladite dispersion à une formulation concentrée selon la revendication 8.