Brevet FR3116122A1 — publié le 20220513

PROCEDE DE MESURE DU POTENTIEL OXYDANT D’ECHANTILLONS, NOTAMMENT D’AEROSOLS, L’APPAREILLAGE POUR SA MISE EN ŒUVRE ET SON UTILISATION POUR ANALYSER LA QUALITE DE L’AIR La présente demande concerne un procédé pour la détermination automatique en ligne et en temps réel du potentiel oxydant d’un milieu, permettant d’analyser la qualité de l’air et/ou la toxicité des vapeurs émises par divers appareils ou installations. Figure pour l'abrégé : Néant PROCEDE DE MESURE DU POTENTIEL OXYDANT D’ECHANTILLONS, NOTAMMENT D’AEROSOLS, L’APPAREILLAGE POUR SA MISE EN ŒUVRE ET SON UTILISATION POUR ANALYSER LA QUALITE DE L’AIR La présente invention concerne l’analyse la toxicité des milieux ambiants, notamment les aérosols, et plus largement l’analyse de la qualité de l’air, ou de la toxicité des vapeurs émises par divers appareils ou installations (vapoteuses électroniques, poêles, véhicules, etc…). La mauvaise qualité de l’air est l’une de principales causes de mortalité dans le Monde, et cet impact sanitaire provient très majoritairement des particules atmosphériques : les espèces réactives de l’oxygène ( reactive oxygen species ou ROS) sont apportées par cette pollution et/ou produites dans les poumons par réactions avec les composantes chimiques respirées. Certaines de ces espèces réactives peuvent être neutralisées par les mécanismes de défense cellulaires anti-oxydants. Cependant, elles sont responsables d’un stress oxydatif, lorsque les seuils de défense pulmonaire sont dépassés par la quantité de ces espèces. Ce stress oxydatif est le dénominateur commun des principales maladies cardio-respiratoires observées lors d’une exposition à la pollution atmosphérique. Dans tous les pays, la réglementation, quand elle existe (et qui est censée protéger les populations de ces impacts) est basée sur la masse des particules atmosphériques (généralement PM10 ou PM2,5 : particules avec un diamètre inférieur à 10 ou 2,5 µm). Or, la masse ne prend pas en compte les principales caractéristiques des PM responsables de leurs effets sanitaires : distribution en taille, chimie, solubilité, état de surface etc. Ainsi, la mesure du potentiel oxydant (PO) est également considérée pour évaluer les effets sanitaires de la qualité de l’air, ou d’émissions polluantes. Le PO est défini comme la capacité d’un échantillon à oxyder le milieu pulmonaire, par génération d’espèces réactives de l’oxygène et/ou par consommation d’anti-oxydants. Cette mesure du PO évalue donc la capacité des particules et gaz polluants à générer un stress oxydatif sur les poumons. Les mesures actuelles du PO sont très généralement réalisées à partir de prélèvements atmosphériques sur filtres, analysés ensuite au laboratoire. Ainsi, Yu et al Aerosol science and technology, vol.54, 304-320, 2020 décrit une analyse semi-automatique du PO d’échantillons qui sont cependant préparés au laboratoire, après l’extraction des filtres rapportés du site de collecte. De plus, un échantillon unique est soumis à plusieurs tests consécutifs, entrainant une augmentation importante du temps d’acquisition des résultats. Avec ces méthodologies, automatisées ou non, il s’ensuit donc un délai important entre le prélèvement et le résultat des analyses effectuées. Ceci ne permet donc pas la prise de décision sanitaire en temps réel. Des mesures automatiques sur site en temps réel (i.e. « on-line ») permettraient de systématiser la surveillance de la qualité de l’air ou des émissions, de proposer des possibilités d’alerte sanitaire ou industrielle, qui seraient de plus faites sur des bases réellement liées à la nocivité des milieux échantillonnés, et en particulier pour les PM, non pas liées juste à leur masse. A ce jour, les procédés de recherche utilisés sur site (« on-line ») et portés à l’état de la technique mettent en oeuvre des analyses qui ne permettent pas d’obtenir des quantifications suffisamment précises pour des milieux atmosphériques ambiants qui sont par exemple proches des réglementations en vigueur en Europe. Il reste donc primordial de mettre à disposition un procédé de détermination du PO d’échantillons, notamment d’aérosols, tels que des échantillons atmosphériques ou d’émissions polluantes, automatique et en temps réel, fiable et reproductible pour permettre un contrôle sanitaire. De plus, les seuils de détection doivent être suffisamment bas pour permettre une détermination dans des conditions généralement rencontrées dans les atmosphères des pays développés. De plus, il importe de déterminer le PO dans des conditions aussi représentatives que possible des conditions physiologiques. Des mesures automatiques « on line » permettraient de déterminer en temps réel les sources des épisodes de pollution. Elles permettraient également de mieux cibler la réglementation (et de rediriger la politique de lutte contre la pollution atmosphérique) vers ces sources les plus nocives pour la santé respiratoire. Elles permettraient également de tester efficacement en laboratoire ou sur site les émissions de tout procédé polluant ou dépolluant. La présente invention propose donc un procédé de mesure automatique du PO « on-line », et l’appareillage correspondant. Selon un premier objet, la présente invention concerne un procédé de mesure du potentiel oxydant (PO) d’un milieu test, comprenant : Le prélèvement d’un échantillon test dudit milieu test, Le mélange de l’échantillon test ou d’une fraction de celui-ci avec un échantillon de fluide pulmonaire artificiel, de façon à obtenir un échantillon test liquide, La conduite sur ledit échantillon test liquide d’un ou plusieurs tests en parallèle de quantification de potentiel oxydant, La détermination du potentiel oxydant dudit milieu test. Le potentiel oxydant (PO) désigne la capacité d’un échantillon à oxyder le milieu pulmonaire, par apport ou génération d’espèces réactives de l’oxygène qui consomment les anti-oxydants du milieu. Le milieu test peut être notamment un aérosol. Le terme « aérosol » définit selon la présente invention un mélange de particules en suspension dans un gaz. Les particules peuvent être identiques ou différentes de par leur constitution chimique ou leurs caractéristiques physico-chimiques. Typiquement le milieu test est l’air ambiant ou l’atmosphère en sortie de dispositif ou installation émettant des particules (procédés industriels, véhicules, vapoteuses, cheminées etc..) ou cherchant à dépolluer un air ambiant ou un dispositif ou installation présentant des émissions polluantes. L’expression « milieu test » désigne le milieu à tester. L’expression « échantillon test » désigne un prélèvement du milieu test. Il contient donc une fraction gazeuse et/ou une fraction particulaire. L’échantillon test peut être analysé tel quel. Alternativement, la phase gazeuse et/ou la phase particulaire de l’échantillon peut(peuvent) être analysée(s) seules, grâce à des procédés de séparation, notamment des procédés de séparation déjà existant sur le marché. Typiquement, l’échantillon test ou la fraction particulaire de celui-ci est constitué de particules de taille déterminée. Toute fraction de taille peut être envisagée, selon le procédé utilisé en entrée de l’appareil. Selon un mode de réalisation, l’échantillon correspond à la fraction en PM 2,5 ou en PM 10 (particules de diamètre inférieur à 2,5 ou 10 µm, respectivement). L’échantillon test peut être prélevé par toute méthode, dans une chambre de réaction, telle qu’une chambre de nébullisation, par exemple par aspiration d’une quantité déterminée du milieu à tester. Typiquement, le prélèvement peut être effectué par un cyclone lorsque le milieu test est un aérosol par exemple. Un cyclone permet d’obtenir un échantillon aérosol constitué de particules dans leur gaz, en fonction du diamètre aérodynamique (Dae) des dites particules. Les fines particules, de plus faible inertie, s’éloignent moins de l'axe du cyclone et sont entraînées par un vortex ascendant vers une sortie axiale située en partie supérieure du cyclone où elles sont collectées. Le cyclone permet ainsi de réaliser une classification en taille des particules. Typiquement, le débit de la pompe du cyclone peut être compris entre 1 et 10 l/min, typiquement environ 5 l/min. Selon un mode de réalisation, le procédé comprend après l’étape de prélèvement et avant l’étape de mélange, l’étape de fractionnement de l’échantillon test, en une fraction gazeuse et/ou une fraction particulaire. Cette étape peut être effectuée au moyen d’un dénudeur par exemple. Typiquement, la fraction peut être la fraction particulaire PM 2.5 . L’échantillon test ou une fraction de celui-ci obtenue en cas de fractionnement, tel que discuté ci-avant, est ensuite mélangée avec une phase liquide mimant le milieu pulmonaire. Selon l’invention, la phase liquide est un milieu pulmonaire artificiel. Selon un mode de réalisation, il s’agit de la solution de Gamble, décrite par Marques et al Dissolution technologies 15-28, 2011. La solution de Gamble comprend typiquement : 0.095 g/l de chlorure de magnésium, 6.019 g/L de chlorure de sodium, 0.298 g/Lde chlorure de potassium, 0.126 g/L d’hydrogénophosphate de disodium, 0.063 g/L de sulfate de de sodium, 0.368 g/L de chlorure de calcium, dihydrate, 0.574 g/L d’acétate de sodium, 2.604 g/L d’hydrogéocarbonate de sodium, 0.097 g/L de citrate de sodium, dihydrate dans l’eau. Typiquement, la solution de Gamble présente un pH de 7.4. Dans le milieu respiratoire, ce fluide interstitiel pulmonaire est plaqué contre les parois de l’appareil respiratoire grâce à un surfactant, le 1,2-dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC). Etant connu que les surfactants agissent sur la solubilité des particules en général d’une part et afin de se rapprocher au maximum des conditions physiologiques d’autre part, la solution de Gamble est avantageusement supplémentée en surfactant, tel que le 1,2-dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC), typiquement à une concentration d’environ 0.02% (concentration mesurée dans le système respiratoire) Le milieu pulmonaire artificiel selon l’invention se distingue donc notamment du milieu utilisé par Yu et al Aerosol science and technology, 2020 ( supra ) en ce que le fluide utilisé par Yu et al (« surrogate lung fluid ») n'est qu’un mélange d’anti-oxydants dont les auteurs mesurent ensuite la déplétion. La mise en phase liquide peut être réalisée par nébulisation. Typiquement, la nébulisation comprend la projection en fines gouttelettes du milieu pulmonaire artificiel et de l’échantillon test ou d’une fraction de celui-ci, de façon à obtenir une phase liquide comprenant les particules et/ou les gaz solubles, en mélange dans le milieu pulmonaire artificiel. Typiquement, le milieu pulmonaire artificiel et l’échantillon test liquide sont maintenus à des conditions représentatives des conditions physiologiques, avec notamment une température comprise entre 30 et 40°C, typiquement d’environ 37°C, et/ou un pH maintenu entre 7 et 8, à 7.4 notamment. L’échantillon test liquide obtenu peut être une suspension ou une solution : Lorsque l’échantillon test n’est pas fractionné, l’échantillon test liquide résultant du mélange est une suspension. On entend par « suspension » toute dispersion d'un solide dans un liquide. Lorsque l’échantillon test est fractionné et que la fraction particulaire est utilisée, l’échantillon test liquide résultant du mélange est une suspension. Lorsque l’échantillon test est fractionné et que la fraction gazeuse est utilisée, l’échantillon test liquide résultant du mélange est une solution. L’échantillon liquide ainsi obtenu est ensuite soumis à un ou plusieurs test(s) de quantification de son potentiel oxydant. On entend par « test de quantification de potentiel oxydant » un test mesurant la consommation par l’échantillon test d’une espèce anti-oxydante donnée. En bref, ces tests sont basés sur la mesure de la déplétion de l’espèce anti-oxydante lorsqu’elle est mise en contact avec l’échantillon à tester. La déplétion d’espèce anti-oxydantes (lorsqu’elle est en excès) est proportionnelle à la concentration des espèces réactives de l’échantillon testé. Plusieurs tests, basés chacun sur une espèce anti-oxydante distincte peuvent être conduits en parallèle. Pour chaque test conduit seul ou en parallèle, une fraction de volume calibrée de l’échantillon est utilisée, ladite fraction étant calibrée par prélèvement avec une pompe seringue dans la chambre de réaction. Le volume non utilisé étant évacué à la fin de la réaction vers une poubelle de récupération. Typiquement, au moins deux lignes de tests différents sont conduites en parallèle. Chaque ligne de test comprend le mélange d’une quantité déterminée de l’échantillon test liquide avec une quantité déterminée de l’espèce anti-oxydante du test considéré. Avantageusement, les lignes de tests sont basées sur des espèces anti-oxydantes complémentaires en ce qu’elles réagissent de façons distinctes aux espèces réactives du milieu test. A titre d’espèce anti-oxydante, on peut ainsi citer : l’acide ascorbique (AA), le dithiothreitol (DTT), la dichlorofluoresceine (DCFH), la gluthatione (GSH), le mélange RTLF (respiratory tract lining fluid, ou fluide tapissant les voies respiratoires humaines). Le mélange réactionnel considéré est généralement réalisé dans des conditions physiologiques (température d’environ 37°C, et pH maintenu entre 7 et 8, à 7.4 notamment), et de préférence à l’abri de la lumière. Généralement, l’incubation de l’échantillon test avec l’espèce anti-oxydante est conduit pendant une durée comprise entre 5 min et 1h. Selon un mode de réalisation, avant la mesure de la réactivité de l’échantillon, deux pré-mesures sont réalisées et seront retranchées à la mesure de l’échantillon lors du calcul de son potentiel oxydant : Une mesure de l’absorbance/fluorescence intrinsèque de l’échantillon test seul Une mesure de « blanc » de l’appareil qui consiste à mesurer l’absorbance/fluorescence de l’anti-oxydant sans présence d’échantillon test qui est remplacé par de l’eau ultra-pure. Après incubation, la diminution de la concentration de l’espèce anti-oxydante dans le mélange réactionnel (constitué de l’échantillon test liquide et d’une quantité déterminée d’une espèce anti-oxydante) est déterminée par mesure optique notamment par spectrophotométrie (absorbance, UV-visible, fluorescence…). Les données optiques obtenues peuvent être récupérées sur ordinateur à l’aide de l’interface de pilotage (par exemple sous LabVIEW). Ces données permettent de calculer la quantité de ROS générées en présence de l’échantillon test analysé après soustraction des blancs et calibration de l’appareil : La consommation d’espèce anti-oxydante par l’échantillon (par unité de volume du milieu test ou par unité de masse de l’échantillon test) est corrélée à la concentration d’espèces réactives de l’oxygène de l’échantillon. Cette concentration d’espèces réactives est ensuite corrélée au PO de l’échantillon test, et in fine au milieu testé. Après la mesure, le flux de liquide est purgé vers l’extérieur du système. Plus précisément, les tests peuvent être mis en oeuvre par application ou adaptation des méthodologies décrites par Calas et al Scientific reports 7, 11617, 2017. Typiquement, la méthodologie comprend tout d’abord la mesure de l’absorbance intrinsèque de l’échantillon test liquide à la longueur d’onde désirée, UV ou visible, puis une quantité de l’espèce anti-oxydante est injectée dans l’échantillon test liquide et dans un échantillon blanc (eau ultra-pure). Dans chaque cas, la concentration de l’espèce anti-oxydante est ensuite quantifiée à plusieurs intervalles de temps après mélange. La quantité restante de l’espèce anti-oxydante à l’issue de l’exposition (typiquement après un temps de réaction d’environ 30 min avec l’échantillon) peut être soit lue directement par absorbance ou fluorescence ou dosée. Typiquement, pour le DTT, la quantité restante peut être dosée par du 5,5-dithio-bis-(2-acide nitrobenzoïque (DTNB). Le taux de déplétion en espèce anti-oxydante (nmol.min -1 ) est déterminé à partir de la pente de régression linéaire de la concentration de l’espèce anti-oxydante (nmol) vs. le temps de contact avec l’échantillon. L’absorbance intrinsèque est ensuite soustraite à l’absorbance finale, et la perte en espèce anti-oxydante du blanc (eau ultra-pure) est soustraite de la perte en espèce anti-oxydante de l’échantillon, afin d’obtenir la déplétion effective de l’espèce anti-oxydante de l’échantillon. Le test à RTLF est basé sur un mélangé synthétique contenant des concentrations équimolaires d’acide ascorbique (AA), d’urate (UA) et de glutathione réduite (GSH). L’analyse de GSH est obtenue à partir de l’analyse de la gluthatione totale et de la glutathione oxydée (GSSG), par modification de la méthode décrite par Baker et al Anal. Biochem. 190, 360-365, 1990, avec le réactif de Ellman's (DTNB, acide 5,5-dithio-bis-(2-nitrobenzoique). Le produit formé, le thio-2-nitrobenzoïque (TNB) jaune, présente un pic d'absorbance à 412 nm. Selon un mode de réalisation, le procédé selon l’invention met en œuvre le test de quantification du PO par mesure de la déplétion de l’acide ascorbique (AA), et éventuellement le test de quantification du PO par mesure de la déplétion du dithiothreitol (DTT). Pour l’AA, le test est basé sur la consommation de l’AA, suivie par spectrophotométrie UV (à 265 nm). Pour le DTT, le test est basé sur la consommation du DTT dont la quantité restante à l’issue de l’exposition avec l’échantillon est dosé par du 5,5-dithio-bis-(2-acide nitrobenzoïque (DTNB) puis suivie par spectrophotométrie en lumière visible (à 412 nm). Pour le test à la DCFH (2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacétate), le suivi de la déplétion est réalisé par spectrométrie de fluorescence (excitation 485 nm, émission 530 nm). La détermination du potentiel oxydant dudit milieu test est effectuée par le recalcul du PO du milieu test initial à partir du PO obtenu de l’échantillon test ainsi obtenu. La méthode selon l’invention peut être entièrement automatisée et réalisée sur le site de collecte (mise en œuvre « on-line ») de l’échantillon test. Il n’est pas nécessaire de procéder à une extraction intermédiaire des échantillons collectés, comme cela est requis pour les échantillons collectés sur filtre. De fait, la mesure et la quantification du PO peuvent être obtenues en temps quasi-réel avec un objectif de temps réel. Le PO est un indicateur sanitaire (dont les résultats corrèlent avec des tests toxicologiques sur les mêmes échantillons) de la pollution atmosphérique ou des émissions. Selon un autre objet, la présente invention concerne donc également un procédé de détermination de la pollution atmosphérique ou des émissions de gaz et/ou particules, ledit procédé comprenant : La mise en œuvre du procédé de détermination du PO du milieu test selon l’invention à partir d’un échantillon test prélevé dans l’air atmosphérique ambiant ou les émissions de gaz et/ou particules à tester; La corrélation du PO obtenu avec la qualité de l’air ou toxicité du milieu testé. En particulier, ladite corrélation peut notamment comprendre la comparaison de la valeur du PO ainsi obtenu avec la valeur d’échantillons déjà caractérisés. Le procédé selon l’invention permet donc la mesure en temps réel de l’exposition sanitaire à la pollution atmosphérique, c’est-à-dire dans un laps de temps d’une heure environ, ou moins. Cette mesure de réactivité peut être associée à plusieurs propriétés physico-chimiques (composition, taille, solubilité, spéciation...) des échantillons, selon les résultats obtenus selon les espèces anti-oxydantes utilisées pour les tests. Ainsi, par exemple, le test à l’acide ascorbique est en effet sélectif vis-à-vis de métaux notamment et le test au DTT est sensible à de nombreux composés organiques et inorganiques de manière équilibrée. Le procédé selon l’invention trouve son application notamment pour la surveillance et éventuellement la prévision de la qualité air par les organismes qui réalisent ces mesures. Il peut également être avantageusement mis en œuvre dans diverses applications industrielles pour les tests des émissions de polluants générées par différents dispositifs ou installations (procédés industriels, véhicules automobiles, poêle à bois, procédés de fabrication, etc.) ou pour tester des techniques de dépollution (filtration, etc.). Selon un autre objet, la présente invention concerne encore un appareil pour la détermination automatique en ligne du PO d’un milieu test, comprenant : - un module de collecte d’un échantillon test à partir du milieu test ; - une chambre de nébulisation d’au moins une fraction de l’échantillon test avec un échantillon de fluide pulmonaire artificiel pour former un échantillon test liquide ; - au moins un module de test configuré pour faire réagir l’échantillon test liquide obtenu avec un réactif ; - un module de mesure de la déplétion dudit réactif ; - un module de calcul du PO. Selon un mode de réalisation, ledit appareil peut comprendre en outre un système configuré pour alimenter le(s) module(s) de test : - en échantillon test liquide depuis la sortie de la chambre de nébulisation, - en réactif depuis un réservoir de stockage du réactif. Selon un mode de réalisation, ledit appareil peut également comprendre un ou plusieurs modules de tests en parallèle, chaque module de test étant configuré pour faire réagir l’échantillon test liquide avec un réactif respectif. Typiquement, le module de mesure comprend un système de mesure optique. Selon un mode de réalisation, ledit appareil peut également comprendre un système configuré pour faire circuler une solution de lavage dans le(s) module(s) de test. Figures La représente un schéma de fonctionnement selon un mode de réalisation du procédé et de l’appareil selon l’invention. La représente la corrélation entre les résultats obtenus avec la méthode on-line de l’invention, comparativement à la méthode de mesure sur filtre. La représente la réactivité du milieu test (milieu aérosol ambiant du laboratoire) pour différents temps de prélèvement. Selon l’invention, la illustre la succession des 4 modules suivants : un module de préparation de l’échantillon 1 comprenant un module de collecte, par exemple à effet cyclone 11 et une chambre de nébulisation 13 ; un module de test 2 ; un module de mesure 3 ; et un module de calcul 4. Selon un mode de réalisation, le module de préparation de l’échantillon 1 a pour fonction de préparer un échantillon test liquide à partir d’un milieu à tester, tel qu’un aérosol. Pour cela, un module de collecte 11 extrait l’échantillon test, par exemple un échantillon test aérosol, dans une chambre de réaction. La chambre de réaction peut être un module à effet cyclone, et extrait du milieu aérosol à tester les particules qui y sont contenues, selon la taille des particules. Un dénudeur 12 ou filtre à air à haute efficacité peut être présent entre le module de collecte 11 et la chambre de nébulisation 13 pour limiter l’échantillon test aérosol à soit la fraction de particules, soit la fraction gazeuse. L’échantillon test ou une fraction de celui-ci ainsi collecté(e) est conduit(e) dans une chambre de nébulisation 13 où il est mis en contact avec un échantillon de fluide pulmonaire artificiel. L’échantillon test liquide ainsi obtenu est ensuite conduit vers le module de test 2. Selon un mode de réalisation, un système 16 tel qu’une pompe à seringue prélève l’échantillon test liquide en sortie du module 1 vers le module de test. Le système 16 prélève également un échantillon de réactif stocké dans un réservoir de 14 pour mise en réaction avec l’échantillon test liquide. Des mesures de contrôle, non représentées sur la sont effectuées en parallèle. Entre deux prélèvements effectués par le système 16, une solution de lavage stockée dans le récipient 15 est prélevée par le système 16 puis rejetée dans le réservoir de récupération des déchets 10. Tel que cela est représenté en , plusieurs modules de tests 2 peuvent être présents en parallèle, chaque test étant conduit avec un réactif donné. Dans cette configuration, une fraction déterminée de l’échantillon test liquide est prélevée par le système 16 pour être mise en réaction avec un réactif donné. Le module de test 2 est avantageusement maintenu dans des conditions physiologiques : Typiquement, la température est maintenue entre 30 et 40°C, typiquement à environ 37°C. Généralement, le pH maintenu entre 7 et 8, à 7.4 notamment A l’issue du test, le système 17, typiquement une pompe, telle qu’une pompe péristaltique, achemine le mélange réactionnel dudit test vers le module de mesure 3. Les données peuvent être notamment acquises sur un spectrophotomètre portable à large spectre. Le module de mesure 3 comprend typiquement un système de mesure optique 19 tel qu’un spectrophotomètre par exemple, permettant de mesurer une propriété optique (telle que l’absorbance ou la fluorescence par exemple), du mélange réactionnel au moyen d’une source lumineuse 18. Cette mesure optique est ensuite traitée dans le module de calcul 4 : Selon des algorithmes de calcul, la mesure optique conduit in fine à la valeur du potentiel oxydant du milieu test : Elle peut tout d’abord être corrélée avec la concentration en réactif après incubation, selon la loi de Beer-Lambert. La concentration du réactif dans le mélange réactionnel après incubation peut permettre de déterminer la déplétion en réactif par rapport à la quantité de réactif injectée dans le module de test 2. Cette déplétion est imputable à la concentration en espèces réactives de l’oxygène présentes dans l’échantillon test ou une fraction de celui-ci. A cette valeur peut être associée le potentiel oxydant du mélange testé. Le module de calcul 4 peut également comprendre un système de traitement des données 20 Exemples Un appareil de mesure selon l’invention a été réalisé, avec les spécifications suivantes : Dimensions max : Environ 50 * 40 * 30 (L * P * h) , Poids: 20 kg Débit d’air : 1 m3 / hr Autonomie : 1 jour Consommation électrique : Fréquence de mesure : 1 mesure intégrée sur 40 min par heure. Gamme de mesure : de 0,05 à 25 nmol d’antioxydant AA. min -1 , sur une gamme linéaire Répétabilité sur toute la gamme : Blanc d’appareillage (LOD) env 5 pmol d’antioxydant AA.min -1 Contamination des mesures par hystérésis : moins de 3 % Autonomie de consommables de l’ordre de 3 à 4 jours Le milieu aérosol à tester était l’air ambiant du laboratoire dans lequel est disposé l’appareil selon l’invention L’échantillon aérosol test a été prélevé par une pompe et l’intégralité de l’aérosol a été prélevé successivement pendant 10, 20 et 30 min à 5L.min-1. Pendant ce temps de pompage de l’échantillon, un blanc est réalisé : on injecte une solution d’eau H 2 O puis on injecte une solution composée d'acide ascorbique (AA)+ H 2 O. On le fait passer dans le module de mesure (typiquement une flow-cell ou une cuvette), avant de tracer le spectre d’absorbance de cette solution. Cette référence permet d’avoir une valeur initiale à soustraire aux échantillons. Une fois cette référence réalisée, 1 ml d’échantillon est mis contact avec 1ml de AA et envoyé vers la cellule de mesure : L’acquisition de l’absorbance à 265nm de l’échantillon est réalisée en fonction du temps et démarre si les deux conditions suivantes sont réunies : une température de 37,2°c +/- 0,2°C et une intensité > 12 000. Puis on rince le dispositif 3 fois avec de l’acide nitrique à 0,1% pour qu’il ne reste plus de présence de solution polluée dans la seringue. Les résultats ont été obtenus entre 20 et 40 min pour un cycle et sont illustrés à la . La pente, c’est-à-dire la réactivité de l’échantillon augmente lorsque sa concentration augmente, c’est-à-dire lorsque le temps de prélèvement dans l’air ambiant du laboratoire est allongé. La limite de détection a été mesurée à 4.1 pmol.min-1 pour le test AA. Exemples comparatifs : 1. Par comparaison, le procédé décrit par Yu et al Aerosol science and technology, vol.54, 304-320, 2020 conduit à des résultats (5 tests sur un même échantillon) de l'ordre de 4 heures pour un cycle, avec une limite de détection de 0.197 µM.min-1 pour des blancs d’eau ultra-pure, lorsque celle de notre appareil est de 4.1 pM.min-1 en moins de 30 min. 2. Le procédé selon l’invention « on-line » a également été comparé aux procédés « off-line » utilisés pour réaliser les mesures sur filtres (typiquement par spectrophotométrie de plaques), pour différents composés atmosphériques Les résultats sont illustrés à la pour un composé à base de cuivre (CuCl2) à des concentrations typiques de celles rencontrées dans l’atmosphère. Pour les mêmes concentrations de cuivre, le potentiel oxydant a été mesuré avec le test AA avec un spectrophomètre de plaque au laboratoire, ou avec l’invention. Les résultats sont similaires entre les deux procédés pour des concentrations entre 0,1 et 5 µM de CuCl2 comprenant des valeurs extrêmes de cuivre rencontrées dans l’atmosphère (corrélation proche de 1 pour 6 points (6 concentrations testées) ; pente de la droite de régression proche de 1 ; ordonnée à l’origine très faible). Procédé de mesure du potentiel oxydant (PO) d’un milieu test, comprenant : - Le prélèvement 11 d’un échantillon test dudit milieu test, - Le mélange 13 dudit échantillon test ou une fraction de celui-ci avec un échantillon de fluide pulmonaire artificiel, de façon à obtenir un échantillon test liquide, - La conduite sur ledit échantillon test liquide d’un ou plusieurs tests 2 en parallèle de quantification de potentiel oxydant, - La détermination du potentiel oxydant dudit milieu test. Procédé selon la revendication 1, tel qu’il comprend en outre après l’étape de prélèvement 11 et avant l’étape de mélange 13, l’étape de fractionnement 12 de l’échantillon test, en une fraction gazeuse et/ou une fraction particulaire. Procédé selon la revendication 1 ou 2 tel que l’échantillon pulmonaire artificiel est le milieu de Gamble, éventuellement supplémenté en dipalmitoylphospatidylcholine (DPPC). Procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes tel que le(s) test(s) de quantification du potentiel oxydant est(sont) choisi(s) parmi les tests mesurant la consommation par un échantillon test d’une espèce anti-oxydante donnée. Procédé selon la revendication 4, tel que les espèces anti-oxydantes sont choisies parmi le groupe consistant en l’acide ascorbique (AA), le dithiothreitol (DTT), la dichlorofluoresceine (DCFH), la gluthatione (GSH), le mélange RTLF (« respiratory tract lining fluid », ou fluide tapissant les voies respiratoires humaines). Procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes tel qu’il met en œuvre le test de quantification du PO par mesure de la déplétion de l’acide ascorbique (AA), et le test de quantification du PO par mesure de la déplétion du dithiothreitol (DTT). Procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes tel que le(s) test(s) de quantification du potentiel oxydant est(sont) mis en œuvre dans les conditions physiologiques. Procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes tel que le mélange 13 de l’échantillon test ou une fraction de celui-ci avec le fluide pulmonaire artificiel est réalisé par nébulisation. Procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes tel qu’il est conduit de façon automatisée sur le site de collecte dudit échantillon test, et conduit à la détermination du PO en temps réel. Procédé de détermination de la pollution atmosphérique ou des émissions de gaz et/ou particules, ledit procédé comprenant : - La mise en œuvre du procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes à partir d’un échantillon test prélevé dans l’air atmosphérique ambiant ou les émissions de gaz et/ou particules à tester ; - La corrélation du PO obtenu avec la qualité de l’air ou toxicité du milieu testé. Appareil pour la détermination automatique en ligne du PO d’un milieu test, comprenant : - un module de collecte 11 d’un échantillon test à partir du milieu test ; - une chambre 13 de nébulisation l’échantillon test ou une fraction de celui-ci avec un échantillon de fluide pulmonaire artificiel pour former un échantillon test liquide ; - au moins un module de test 2 configuré pour faire réagir l’échantillon test liquide obtenu avec un réactif ; - un module de mesure 3 de la déplétion dudit réactif ; - un module de calcul 4 du PO. Appareil selon la revendication 11 tel qu’il comprend un système 16 configuré pour alimenter le(s) module(s) de test : - en échantillon test liquide depuis la sortie de la chambre de nébulisation, - en réactif 14 depuis un réservoir de stockage du réactif. Appareil selon l’une quelconque des revendications 11 ou 12 tel qu’il comprend plusieurs modules de tests 2 en parallèle, chaque module de test 2 étant configuré pour faire réagir l’échantillon test liquide avec un réactif respectif. Appareil selon l’une quelconque des revendications 11 à 13 tel que le module de mesure 3 comprend un système de mesure optique. Appareil selon l’une quelconque des revendications 11 à 14 tel qu’il comprend un système configuré pour faire circuler une solution de lavage 15 dans le(s) module(s) de test 2.