Brevet FR3118465A1 — publié le 20220701

Procédé de détermination d’une présence de microorganismes dans un composant gélosé (10), le composant gélosé comprenant une gélose, la gélose comportant des nutriments propices au développement de microorganismes, le procédé comportant : a) obtention du composant gélosé, le composant gélosé s’étendant entre une première extrémité (11) et une deuxième extrémité (12), le composant gélosé étant au moins en partie transparent à une longueur d’onde d’illumination ; b) disposition du composant gélosé obtenu lors de a), au contact d’au moins un milieu ambiant (2, 14, 15), le milieu ambiant ayant un indice de réfraction inférieur à l’indice de réfraction de la gélose, de telle sorte que la gélose soit apte à confiner une lumière, à ladite longueur d’onde, entre la première extrémité et la deuxième extrémité ; c) illumination de la première extrémité par une source de lumière (21), et détection, par le photodétecteur (22), d’une lumière émanant de la deuxième extrémité après s’être propagée entre la première extrémité et la deuxième extrémité ; d) répétition de l’étape c) en différents instants ; e) à partir d’une évolution de la lumière détectée en différents instants, détermination d’une présence de microorganismes dans le composant gélosé. Figure 1C. procéd é de détermination de la présence de bactéries dans ou sur un composant gélosé Le domaine technique de l’invention est la détermination de la présence de bactéries dans une gélose ou à la surface d’une gélose, par des mesures optiques. ART ANTERIEUR L'observation de colonies bactériennes par imagerie est une technique connue depuis bien longtemps dans le domaine de la microbiologie, pour effectuer un suivi du développement de de microorganismes ou de cellules. Dans une boîte de Pétri, il est possible de suivre le développement de colonies, par exemple de colonies bactériennes, et de les dénombrer. La forme des colonies donne une information sur le type de microorganisme. En outre, en combinant l'utilisation de différents milieux de culture, permettant ou ne permettant pas le développement de colonies, il est possible d'identifier le type de microorganisme formant des colonies. La caractérisation de microorganismes sur des boîtes de Pétri est encore une méthode de référence, dont l'utilisation est fréquente dans le domaine de la microbiologie, du diagnostic, mais également dans le domaine de l'agroalimentaire ou de la cosmétique. Le principal inconvénient de cette méthode est sa lenteur, puisqu'il faut généralement attendre plusieurs journées pour obtenir un résultat exploitable. Un autre inconvénient est que cette méthode est difficilement automatisable, et requiert des opérateurs humains expérimentés. Récemment, des méthodes holographiques ont permis le dénombrement et la caractérisation de microorganismes, et constituent des alternatives prometteuses aux techniques existantes, en permettant une meilleure automatisation. La demande de brevet US20200327306 décrit un procédé permettant une détection précoce du développement de bactéries dans une gélose, en particulier une gélose opaque. Il s’agit d’un procédé conférant un large champ d’observation, et pouvant être mis en œuvre à partir d’un dispositif simple et peu onéreux. Les inventeurs proposent une autre approche, adaptée à des géloses présentant un certain niveau de transparence, et permettant également d’effectuer une détermination rapide de la présence de microorganismes dans un échantillon. Un premier objet de l’invention est un procédé de détermination d’une présence de microorganismes dans un composant gélosé, le composant gélosé étant formé à partir d’une gélose, la gélose comportant des nutriments propices au développement de microorganismes, le procédé comportant : a) obtention du composant gélosé, le composant gélosé s’étendant entre une première extrémité et une deuxième extrémité, le composant gélosé étant au moins en partie transparent à une longueur d’onde d’illumination ; b) disposition du composant gélosé, obtenu lors de a), au contact d’au moins un milieu ambiant, le milieu ambiant ayant un indice de réfraction inférieur à l’indice de réfraction de la gélose, de telle sorte que le composant gélosé soit apte à confiner une lumière, à la longueur d’onde d’illumination, entre la première extrémité et la deuxième extrémité ; c) illumination de la première extrémité par une source de lumière, dans la longueur d’onde d’illumination, et détection, par un photodétecteur, d’une lumière émanant de la deuxième extrémité après s’être propagée entre la première extrémité et la deuxième extrémité ; d) répétition de l’étape c) en différents instants ; e) à partir d’une évolution de la lumière détectée en différents instants, détermination d’une présence de microorganismes dans le composant gélosé. Par au moins en partie transparent, on entend que la transmittance du composant gélosé est supérieure à 0,1 (10%) entre la première extrémité et la deuxième extrémité. Selon un mode de réalisation, l’étape e) peut comporter une mesure d’une diminution d’une quantité de la lumière détectée en différents instants. Selon un mode de réalisation : la gélose comporte un agent chromogène, apte à induire un changement de couleur de la gélose sous l’effet du développement des microorganismes ; l’étape e) comporte une détection d’une variation d’une longueur d’onde de la lumière détectée. Selon un mode de réalisation : au cours de plusieurs étapes c), le milieu ambiant comporte un milieu d’analyse (2) , susceptible de comporter des microorganismes ; le procédé comporte, suite à l’étape e), une détermination d’une présence de microorganismes dans le milieu d’analyse. La détermination de la présence de microorganismes dans le milieu peut notamment être effectuée en fonction de l’évolution de la lumière détectée aux différents instants. Selon un mode de réalisation : lors l’étape a), le composant gélosé est formé à partir d’une gélose comportant potentiellement des microorganismes ; le procédé comporte, suite à l’étape e), une détermination d’une présence de microorganismes dans la gélose. La détermination de la présence de microorganismes dans la gélose peut notamment être effectuée en fonction de l’évolution de la lumière détectée aux différents instants. Selon un mode de réalisation, la première extrémité et la deuxième extrémité sont deux extrémités opposées du composant gélosé, le composant gélosé formant un guide d’onde entre la première extrémité et la deuxième extrémité. Selon un tel mode de réalisation, le composant gélosé s’étend selon une direction d’extension entre la première extrémité et la deuxième extrémité ; la distance entre la première extrémité et la deuxième extrémité, selon la direction d’extension, forme une longueur du composant gélosé ; perpendiculairement à la direction d’extension, le composant gélosé s’étend selon un diamètre ou une plus grande diagonale inférieure au dixième de la longueur. Selon une possibilité, le milieu ambiant comporte de l’eau ; tout ou partie d’une périphérie du composant gélosé est mise en contact avec de l’eau. Selon un mode de réalisation : le composant gélosé est disposé sur une gélose auxiliaire ; une couche d’eau est interposée entre la gélose auxiliaire et le composant gélosé. La gélose auxiliaire peut comporter des nutriments, de sorte que des nutriments peuvent migrer vers le composant gélosé, à travers la couche d’eau. Selon une possibilité : le guide d’onde comporte plusieurs deuxièmes extrémités ; le guide d’onde comporte plusieurs branches, chaque branche s’étendant à entre un même tronçon du composant gélosé, et chaque deuxième extrémité respective ; le tronçon s’étend entre la première extrémité et chaque branche ; au cours de plusieurs étapes c) : une première branche est mise en contact avec un premier milieu ; une deuxième branche, différente de la première branche, est mise en contact avec un deuxième milieu ; le procédé comporte, suite à l’étape e), une détermination d’une présence de microorganismes dans le milieu le premier milieu et/ou dans le deuxième milieu. Selon un mode de réalisation, le composant gélosé s’étend entre un plan de base et au moins une face opposée ; la première extrémité et la deuxième extrémité sont disposées sur le plan de base ; le composant gélosé est configuré pour réfléchir une lumière incidente, émise par la source de lumière, et atteignant le plan de base selon un axe d’incidence, en formant, après propagation de la lumière incidente à travers le composant gélosé, une lumière réfléchie, la lumière réfléchie émanant du plan de base selon un axe de réflexion. Selon ce mode de réalisation, lors de plusieurs étapes c), tout ou partie de la face opposée est mise en contact avec un milieu d’analyse, susceptible de comporter des microorganismes ; le procédé comporte, suite à l’étape e), une détermination d’une présence de microorganismes dans le milieu d’analyse. La face opposée peut être une face hémisphérique. La face opposée peut comportee trois faces élémentaires, chaque face élémentaire s’étendant à partir d’un même sommet, les trois faces élémentaires formant un trièdre trirectangle. L’axe de réflexion est alors parallèle à l’axe d’incidence. Un deuxième objet de l’invention est un dispositif, pour déterminer une présence de microorganismes dans un composant gélosé, le dispositif comportant : un composant gélosé, le composant gélosé s’étendant entre une première extrémité et une deuxième extrémité, le composant gélosé étant au moins en partie transparent à une longueur d’onde d’illumination ; le composant gélosé étant configuré pour confiner une lumière, à la longueur d’onde d’illumination, entre la première extrémité et la deuxième extrémité ; une source de lumière, configurée pour illuminer la première extrémité ; un photodétecteur, configuré pour détecter une lumière émanant de la deuxième extrémité après s’être propagée entre la première extrémité et la deuxième extrémité ; une unité de traitement, programmée pour mettre en œuvre l’étape e) d’un procédé selon le premier objet de l’invention, de façon à déterminer une présence d’un microorganisme dans le composant gélosé. Le composant gélosé peut présenter les caractéristiques telles que décrites en lien avec le premier objet de l’invention. L'invention sera mieux comprise à la lecture de l'exposé des exemples de réalisation présentés, dans la suite de la description, en lien avec les figures listées ci-dessous. FIGURES La représente un composant gélosé selon une premier mode de réalisation. La montre une vue de dessus d’un dispositif utilisant le composant gélosé représenté sur la . La représente une possibilité de mise en œuvre du dispositif décrit en lien avec la . La représente une autre possibilité de mise en œuvre du dispositif décrit en lien avec la . La montre un exemple de composant gélosé selon le premier mode de réalisation. La est une photographie d’un composant gélosé tel que décrit en lien avec la . La montre une variation de l’intensité transmise par un composant gélosé rectiligne, respectivement en l’absence et en présence de bactéries dans le composant gélosé. La représente un composant gélosé selon un deuxième mode de réalisation. La représente une possibilité de mise en œuvre du composant gélosé décrit en lien avec la . La représente une variante du deuxième mode de réalisation. EXPOSE DE MODES DE REALISATION PARTICULIERS L’invention exploite une variation des propriétés optiques d’un composant gélosé, sous l’effet du développement de microorganismes à la surface de ce dernier ou dans un volume délimité par ce dernier. Le composant gélosé comporte une gélose, comportant des nutriments propices au développement de microorganismes. Par microorganismes, on entend, à titre non limitatif, des bactéries, des virus, des champignons, des levures ou des microalgues. La gélose peut notamment être formée d’un hydrogel. La gélose peut par exemple comprendre de l’agar-agar, selon une fraction massique comprise entre 0.5% et 10% ou 0.5% et 20%. Selon une possibilité, la gélose est formée par l’adjonction d’un gélifiant, par exemple un gélifiant à froid, à une solution aqueuse. Le gélifiant à froid est hydrosoluble. Il est configuré pour gélifier lorsqu’il est mis au contact de la solution aqueuse, à température ambiante, formant alors un hydrogel. Le gélifiant à froid peut être choisi parmi : polysaccharide hydrosoluble, carboxyméthylcellulose, gomme de guar, gomme arabique, gomme gellane, gomme de xanthane, ou un gélifiant obtenu à partir d’os d’animaux, par exemple porc, bœuf, poulet. Le composant gélosé est au moins en partie transparent, ou considéré comme tel, à au moins une longueur d’onde d’illumination. Par au moins en partie transparent, on entend que la transmittance du composant gélosé, est supérieure à 0.1, et de préférence supérieure à 0.3 ou 0.5. Le terme transmittance désigne un ratio entre une intensité lumineuse transmise par le composant gélosé sur une intensité lumineuse incidente au composant gélosé, à la longueur d’onde d’illumination. La gélose présente un indice de réfraction, ce dernier étant généralement supérieur à 1.33 (indice de réfraction de l’eau). Un aspect de l’invention est de disposer le composant gélosé au contact d’un milieu ambiant, dont l’indice de réfraction est inférieur à l’indice de réfraction de la gélose. Du fait de la variation d’indice de réfraction à l’interface entre le composant gélosé et le milieu ambiant, le composant gélosé permet un confinement d’une lumière se propageant dans ce dernier. Le composant gélosé 10 s’étend entre une première extrémité 11 et une deuxième extrémité 12. Un aspect de l’invention est de déterminer une évolution de la transmittance du composant gélosé, entre la première extrémité 11 et la deuxième extrémité 12, sous l’effet du développement de microorganismes dans le composant gélosé ou au niveau de l’interface entre le composant gélosé et le milieu ambiant. De façon complémentaire ou alternative, un autre aspect de l’invention est de déterminer une évolution temporelle de la longueur d’onde d’une lumière émanant de la deuxième extrémité. On a représenté, sur les figures 1A à 1D, un premier mode de réalisation de l’invention, dans lequel le composant gélosé 10 s’étend selon une direction d’extension D rectiligne. Dans cet exemple, la direction d’extension D est parallèle à un axe longitudinal Y, entre la première extrémité 11 et la deuxième extrémité 12. Le composant gélosé s’étend selon la direction d’extension, entre la première extrémité et la deuxième extrémité. La longueur du composant gélosé, selon la direction d’extension, peut être comprise entre 1 cm et quelques dizaines de cm, par exemple 5 cm. Perpendiculairement à la direction d’extension D, le diamètre ou la plus grande diagonale du composant 10 est de préférence inférieure au dixième de la longueur. Ainsi, le composant gélosé s’étend selon une forme longiligne entre la première extrémité et la deuxième extrémité. Dans l’exemple représenté, le composant gélosé s’étend, parallèlement à l’axe X, et parallèlement à l’axe Z, selon une dimension comprise entre 5 µm et 100 µm. Le composant gélosé 10 est disposé dans un milieu ambiant. Dans cet exemple, le milieu ambiant est formé d’air 14 s’étendant autour du composant gélosé 10, à l’exception d’une partie périphérique du composant 10, au niveau de laquelle le milieu ambiant est une couche d’eau 15. Ainsi, qu’il s’agisse d’air ou d’eau, le milieu ambiant entourant le composant gélosé présente un indice de réfraction inférieur à l’indice de réfraction de la gélose formant le composant gélosé. Le composant gélosé peut alors former un guide de lumière, entre la première extrémité 11 et la deuxième extrémité 12. Dans le mode de réalisation représenté, le composant gélosé 10 est disposé en contact indirect avec une gélose auxiliaire 17, la couche d’eau 15 étant interposée entre la gélose auxiliaire 17 et le composant gélosé 10. Le contact est dit indirect du fait de la présence de l’eau à l’interface entre le composant gélosé 10 et la gélose auxiliaire 17. La gélose auxiliaire 17 peut être une gélose identique ou différente de la gélose à partir de laquelle le composant gélosé 10 a été formé. Lorsque la gélose et la gélose auxiliaire sont des hydrogels, la couche d’eau 15 peut se former spontanément entre les deux hydrogels. En effet, le composant gélosé 10 et la gélose auxiliaire 17 sont préparés séparément puis assemblés l’un à l’autre. Par exemple, le composant gélosé 10 est coulé sur la gélose auxiliaire 17 après que la gélose auxiliaire 17 a été solidifiée. Selon une autre possibilité, le composant gélosé 10 et la gélose auxiliaire 17 sont solidifiés séparément puis assemblés. Ainsi, le composant gélosé 10 et la gélose auxiliaire ne sont pas fixés mécaniquement l’un à l’autre. La couche d’eau 15 se forme à l’interface, par capillarité, l’eau diffusant depuis de chacun des hydrogels. La gélose auxiliaire 17 constitue une réserve de nutriments, les nutriments pouvant diffuser, à partir de cette dernière, vers le composant gélosé 10, à travers la couche d’eau 15. La couche d’eau 15 forme ainsi une interface entre le composant gélosé et la gélose auxiliaire 17. On note que l’indice de réfraction de la couche d’eau 15 est plus faible que celui du composant gélosé 10. D’une façon générale, la présence d’une couche d’eau 15 au niveau de tout ou partie de la périphérie du composant gélosé 10 permet également d’éviter un assèchement du composant gélosé au cours de son utilisation. La représente, en vue de dessus, un dispositif 1 permettant une mise en œuvre de l’invention. Outre le composant gélosé 10 préalablement décrit, le dispositif comporte une source de lumière 21, disposée face à la première extrémité 11. La source de lumière 21 est configurée pour émettre une lumière de façon à illuminer la première extrémité 11 dans une longueur d’onde d’illumination à laquelle le composant gélosé est considéré comme au moins en partie transparent. La source de lumière 21 peut être une source de lumière laser, ou une source de lumière blanche, ou une diode électroluminescente. La source de lumière 21 peut être associée à une fibre optique, la fibre optique s’étendant entre la source de lumière et la première extrémité 11. La source de lumière émet une lumière dans une bande spectrale d’illumination. Un filtre, permettant d’ajuster la bande spectrale d’illumination, peut être disposé entre la source de lumière 21 et la première extrémité 11. La bande spectrale d’illumination, selon laquelle la première extrémité 11 est illuminée, a une largeur de bande de préférence inférieure à 100 nm. Selon une possibilité, plusieurs bandes spectrales d’illumination peuvent être utilisées successivement ou simultanément. Le dispositif 1 comporte un photodétecteur 22, configuré pour détecter une lumière émanant de la deuxième extrémité 12. Le photodétecteur 22 peut être une photodiode ou un photodétecteur pixelisé, par exemple un capteur d’image de type CMOS ou CCD. Sous l’effet de l’illumination de la première extrémité 11 par la source de lumière 21, un faisceau lumineux incident, d’intensité incidente I in , pénètre dans le composant gélosé 10. Du fait du contraste d’indices de réfraction au niveau de l’interface entre le composant gélosé 10 et le milieu ambiant (eau ou air), la lumière est confinée à l’intérieur du composant gélosé, ce dernier formant un guide d’onde entre la première extrémité 11 et la deuxième extrémité 12. Un faisceau lumineux transmis par le composant gélosé, d’intensité I out , se propage entre la deuxième extrémité 12 et le photodétecteur 22. Le photodétecteur 22 détecte l’intensité I ou t de la lumière transmise par le composant gélosé 10. Le dispositif 1 comporte une unité de traitement 30, reliée au photodétecteur 22, de façon à effectuer les opérations de traitement décrites par la suite, en particulier un suivi de l’intensité transmise ou un suivi d’une longueur d’onde du faisceau lumineux transmis. L’unité de traitement 30 peut notamment comporter un microprocesseur. Le composant gélosé est illuminé à différents instants, de préférence selon une même intensité d’incidente I in . A chaque instant, la photodétecteur 22 mesure l’intensité I out du faisceau transmis par le composant gélosé. Lorsque des microorganismes se développent dans le composant gélosé, ou à la surface de ce dernier, l’intensité transmise I out diminue, sous l’effet d’une diffusion ou d’une absorption de la lumière par les microorganismes. Ainsi, l’évolution, dans le temps, de l’intensité transmise I out , permet de déterminer une présence de microorganismes se développant dans le composant gélosé, ou à l’interface entre le composant gélosé et le milieu ambiant. Le développement de microorganismes peut également engendrer une variation morphologique du composant gélosé 10, par exemple des discontinuités au niveau de l’interface avec le milieu ambiant. Une telle modification de l’état de surface peut également entraîner une diminution progressive de l’intensité transmise I out . Plus les dimensions du composant gélosé, perpendiculairement à la direction d’extension D, sont faibles, meilleure est la sensibilité de la mesure. Par exemple, lorsque que la hauteur (selon Z) et la largeur (selon X) sont comprises entre 5 et 12 µm, le composant gélosé se comporte comme un guide d’onde monomode. Les inventeurs estiment que cette configuration est particulièrement sensible car les microorganismes se développent en surface et cette configuration est plus sensible à l’état de surface. La illustre une première modalité de mise en œuvre, selon laquelle la gélose, formant le composant gélosé 10, constitue un milieu analysé. Ainsi, l’évolution temporelle de l’intensité Iout détectée par le photodétecteur 22 est représentative d’une quantité de microorganismes initialement présente dans la gélose. Par initialement présente, on entend présente lors de la formation du composant gélosé 10 à partir de la gélose. Selon une application, la gélose formant le composant gélosé 10 peut avoir fait l’objet d’un ensemencement par des microorganismes. Selon cette modalité, la gélose peut comporter une concentration connue d’un agent inhibiteur du développement de microorganismes. Il peut s’agir d’un agent spécifique à une espèce donnée de microorganismes. L’évolution de l’intensité du faisceau lumineux transmis peut permettre de déterminer une sensibilité des microorganismes à l’égard de l’agent inhibiteur. L’évolution temporelle de l’intensité I out détectée par le photodétecteur 22 est alors représentative de l’aptitude des microorganismes à se développer en présence de l’agent inhibiteur. La illustre une deuxième modalité de mise en œuvre, selon laquelle le composant gélosé 10 est mis au contact d’un milieu analysé 2, ce dernier formant une partie du milieu ambiant, dans lequel le composant gélosé 10 est disposé. Le milieu analysé 2 s’étend autour de tout ou partie du composant gélosé. Lorsque le milieu analysé comporte des microorganismes, ces derniers peuvent se développer au niveau de l’interface entre le milieu analysé 2 et le composant gélosé 10. Il en résulte une diffusion ou une absorption de la lumière se propageant à travers le composant gélosé 10. Cela se traduit par une diminution progressive de l’intensité transmise Iout. Le milieu analysé 2 peut être gazeux ou liquide. L’indice de réfraction du milieu analysé 2 est inférieur à l’indice de réfraction de la gélose formant le composant gélosé. L’évolution temporelle de l’intensité Iout détectée par le photodétecteur 22 est alors représentative d’une quantité de microorganismes présents dans le milieu analysé. De même que dans la première modalité, la gélose, formant le composant 10, peut comporter une concentration connue d’un agent inhibiteur du développement de microorganismes. Il peut s’agir d’un agent spécifique à une espèce donnée de microorganismes. La représente une variante du mode de réalisation précédemment exposé. Selon cette variante, le composant gélosé comporte plusieurs branches 13₁, 13₂, chaque branche s’étendant à partir d’un même tronçon initial 13, respectivement vers plusieurs deuxièmes extrémités 12₁, 12₂. Dans cet exemple, le composant gélosé comporte deux branches, mais il peut en comporter davantage. Le tronçon initial 13 s’étend, à partir de la première extrémité 11, vers chaque branche. De préférence, les branches convergent vers un même point du tronçon central. De préférence, les trajets optiques entre la première extrémité 11 et respectivement chaque deuxième extrémité 12₁, 12₂, le long de chaque branche, sont identiques. Dans cet exemple, le composant 10 s’étend selon une direction d’extension D non rectiligne entre la première extrémité 11 et chaque deuxième extrémité 12₁, 12₂. Une possibilité de mise en œuvre est illustrée sur la : la première branche 13₁ est mise au contact d’un premier milieu analysé 2₁ et la deuxième branche 13₂ est mise en contact avec un deuxième milieu analysé 2₂. Les intensités Iout,1, Iout,2 respectivement issues des branches 13₁ et 13₂ peuvent être utilisées pour comparer les développements, sur le composant gélosé, de microorganismes présents respectivement du premier milieu 2₁ et du deuxième milieu 2₂. La représente une photographie d’un guide d’onde formant deux branches, tel que schématisé sur la . On a représenté une source de lumière 21, fibrée, injectant une lumière d’intensité Iin à la première extrémité du composant gélosé. Cette figure illustre la capacité d’un composant gélosé à guider la lumière. Dans cet exemple, le composant gélosé était formé d’une gélose TSA (Trypticase Soy Agar : milieu trypticase soja). La section du guide d’onde était de 1*1 mm². Les figures 2A et 2B illustrent des configurations selon lesquelles le composant gélosé ne s’étend pas de façon rectiligne entre la première extrémité 11 et la deuxième extrémité 12. La direction d’extension peut être courbe, ou comporte des parties rectilignes et des parties courbes. Elle peut être en forme de spirale, ou en zig-zag, ce type de géométrie permettant d’obtenir de grandes longueurs entre les extrémités 11 et 12. La montre un essai expérimental, réalisé en utilisant un composant gélosé rectiligne, tel que décrit sur les figures 1A et 1B. Le composant gélosé a été réalisé en utilisant une gélose TSA, de section 1 mm², et de longueur 2 cm. Le composant gélosé a été obtenu par moulage, dans un moule d’aluminium, d’une solution liquide à laquelle on a ajouté un gélifiant (agar-agar – Sigma Aldrich 11296) -concentration 15 g/litre. Au cours d’un premier essai, la gélose ne comportait pas de bactéries. Au cours d’un deuxième essai, la gélose comportait des bactéries. L’espèce bactérienne était Escherichia coli, initialement présente en suspension à 2.108 cfu/mL, cfu signifiant unité formant colonie (colony forming unit), dans du sérum physiologique. La gélose du composant gélosé a été ensemencée en masse à 40°C au 1/100ième à partir de suspension, ce qui correspondait à une charge microbienne initiale de 2. 106 cfu/mL dans le composant gélosé. Le composant gélosé a été illuminé avec une source de lumière fibrée de type laser (longueur d’onde 546 nm). On a mesuré l’intensité détectée par un photodétecteur, optiquement couplé à la deuxième extrémité. Dans cet exemple, le photodétecteur était un capteur d’image, disposé au contact de la deuxième extrémité. La montre l’évolution temporelle de l’intensité détectée respectivement en utilisant la gélose sans bactérie (courbe a) et la gélose comportant des bactéries (courbe b). L’axe des ordonnées correspond à l’intensité lumineuse (niveaux de gris), tandis que l’axe des abscisses correspond au temps (unité : minute). On observe une nette, et rapide, décroissance de l’intensité lumineuse en présence de bactéries dans la gélose. Cette figure illustre un aspect important de l’invention : l’utilisation d’une gélose à la fois pour permettre un développement de bactéries, mais également pour guider une lumière entre deux extrémités du composant gélosé, à des fins d’analyse. La montre un autre mode de réalisation, dans lequel le composant gélosé 10 forme une demi-boule. La demi boule s’étend entre un plan de base P et une face opposée F. Dans cet exemple, la face opposée F est hémisphérique. Lorsque le composant gélosé est disposé dans un milieu ambiant dont l’indice de réfraction est suffisamment inférieur à celui de la gélose, le composant gélosé peut se comporter comme un réflecteur : lorsqu’un faisceau lumineux incident se propage vers le plan de base P, parallèlement à un axe d’incidence, à la périphérie du plan de base, le composant gélosé 10 forme, par réflexions internes, une onde réfléchie, qui se propage, à partir du plan de base P, selon un axe de réflexion. Selon un tel mode de réalisation, la première extrémité 11 et la deuxième extrémité 12 sont coplanaires et formées sur le plan de base P. De même que décrit dans les modes de réalisation précédents, une source de lumière 21 émet un faisceau lumineux incident d’intensité I in vers la première extrémité 11. Un photodétecteur 22 détecte un faisceau lumineux transmis, issu de la deuxième extrémité 12. Dans ce mode de réalisation, le faisceau lumineux transmis est un faisceau lumineux réfléchi. Le faisceau lumineux est réfléchi par des réflexions internes successives, sur la face hémisphérique F. Lorsque le composant gélosé comporte des microorganismes, l’intensité I out réfléchie par le composant gélosée est atténuée, sous l’effet de la diffusion ou de l’absorption de la lumière se propageant dans le composant gélosé. Sur la , on a représenté un exemple de mise en œuvre dans lequel la face hémisphérique est placée dans un milieu analysé 2, ce dernier pouvant être gazeux ou liquide. L’indice de réfraction du milieu analysé 2 est inférieur à l’indice de réfraction de la gélose formant le composant gélosé. Lorsque des microorganismes sont présents dans le milieu analysé 2, ils se développent sur la face F. Il en résulte une modification des propriétés de réflexion interne, conduisant à une diminution de l’intensité réfléchie Iout. Le milieu analysé 2 peut être de l’eau ou du gaz. Sur la , on a représenté une variante de ce mode de réalisation, dans laquelle le composant gélosé s’étend entre un plan de base P et une face opposée F, cette dernière formant un trièdre trirectangle isocèle. Une forme en trièdre trirectangle isocèle, usuellement désignée « coin de cube », est connue dans le domaine de l’optique. La face opposée F comporte trois faces élémentaires F1, F2, F3 orthogonales, planes, sécantes en un même point, ce dernier formant un sommet S. Chaque face forme un triangle rectangle, de préférence isocèle, dont l’angle droit est situé au niveau du sommet S. Le plan de base P est perpendiculaire à une hauteur du trièdre passant par le sommet S. Le plan de base P forme une base du trièdre, opposée au sommet S. Par base du trièdre, on entend un plan s’étendant perpendiculairement à une hauteur issue du sommet S du trièdre. Selon cette variante, lorsque le composant gélosé est disposé dans un milieu ambiant dont l’indice de réfraction est suffisamment inférieur à celui de la gélose, le composant gélosé se comporte comme un réflecteur : lorsqu’un faisceau lumineux incident se propage vers le plan de base P, parallèlement à un axe d’incidence, le composant gélosé forme une onde réfléchie qui se propage, à partir du plan de base P, selon un axe de réflexion parallèle à l’axe d’incidence. Le faisceau lumineux transmis est un faisceau lumineux réfléchi. Le faisceau lumineux est réfléchi par des réflexions internes successives, sur les faces F 1 , F 2 et F 3 . Lorsque le composant gélosé comporte des microorganismes, l’intensité I out réfléchie par le composant gélosée est atténuée, sous l’effet de la diffusion ou de l’absorption de la lumière se propageant dans le composant. Le réflecteur représenté sur la peut être utilisé selon le mode de réalisation décrit en lien avec la . Quel que soit le mode de réalisation, le composant gélosé peut comporter un substrat chromogène, configuré pour induire une variation de couleur de la gélose en présence de microorganismes. Le substrat peut par exemple entraîner une variation de couleur sous l’effet du métabolisme des microorganismes. Selon un tel mode de réalisation, le photodétecteur 22 est configuré pour détecter une variation de couleur du faisceau lumineux émanant du composant gélosé 10. Plus la quantité de bactéries présentes dans le composant gélosé, ou à la surface du composant gélosé, est importante, plus le changement de couleur de la lumière est marqué. Ainsi, la détection d’un développement de microorganismes dans le composant, ou à la surface de ce dernier, peut être effectuée par une mesure d’un changement de la longueur d’onde de la lumière émanant du composant gélosé. Les substrats de la beta-D-glucuronidase, comme par exemple les dérivés indoxyles du beta-D-glucuronide, forment des substrats chromogéniques précipitant permettent de mettre en évidence spécifiquement Escherichia coli . Les substrats de l’alpha-glucosidase, comme par exemple les dérivés indoxyles du beta-D-glucuronide, permettent de mettre en évidence spécifiquement Staphylococcus aureus . Quel que soit le mode de réalisation, un composant gélosé tel que précédemment décrit peut être obtenu par moulage d’une solution liquide à laquelle est ajouté un gélifiant à froid. Le moulage peut être effectué dans un moule métallique, par exemple en aluminium. Alternativement, la solution introduite dans le moule est une gélose chauffée au-delà d’une température de surfusion, par exemple entre 40°C et 60 °C. Outre le moulage, un composant gélosé peut être obtenu par usinage d’une gélose. Procédé de détermination d’une présence de microorganismes dans un composant gélosé (10), le composant gélosé étant formé à partir d’une gélose, la gélose comportant des nutriments propices au développement de microorganismes, le procédé comportant : a) obtention du composant gélosé, le composant gélosé s’étendant entre une première extrémité (11) et une deuxième extrémité (12), le composant gélosé étant au moins en partie transparent à une longueur d’onde d’illumination ; b) disposition du composant gélosé, obtenu lors de a), au contact d’au moins un milieu ambiant (2, 14, 15), le milieu ambiant ayant un indice de réfraction inférieur à l’indice de réfraction de la gélose, de telle sorte que le composant gélosé soit apte à confiner une lumière, à la longueur d’onde d’illumination, entre la première extrémité et la deuxième extrémité ; c) illumination de la première extrémité par une source de lumière (21), dans la longueur d’onde d’illumination, et détection, par un photodétecteur (22), d’une lumière émanant de la deuxième extrémité (12) après s’être propagée entre la première extrémité et la deuxième extrémité ; d) répétition de l’étape c) en différents instants ; e) à partir d’une évolution de la lumière détectée en différents instants, détermination d’une présence de microorganismes dans le composant gélosé. Procédé selon la revendication 1, dans lequel l’étape e) comporte une mesure d’une diminution d’une quantité de la lumière détectée en différents instants. Procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans lequel : la gélose comporte un agent chromogène, apte à induire un changement de couleur de la gélose sous l’effet du développement des microorganismes ; l’étape e) comporte une mesure d’une variation d’une longueur d’onde de la lumière détectée. Procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans lequel : au cours de plusieurs étapes c), le milieu ambiant comporte un milieu d’analyse (2) , susceptible de comporter des microorganismes ; le procédé comporte, suite à l’étape e), une détermination d’une présence de microorganismes dans le milieu d’analyse. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, dans lequel : lors l’étape a), le composant gélosé est formé à partir d’une gélose comportant potentiellement des microorganismes ; le procédé comporte, suite à l’étape e), une détermination d’une présence de microorganismes dans la gélose. Procédé selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans lequel la première extrémité et la deuxième extrémité sont deux extrémités opposées du composant gélosé, le composant gélosé formant un guide d’onde entre la première extrémité et la deuxième extrémité. Procédé selon la revendication 6, dans lequel : le composant gélosé s’étend selon une direction d’extension (D) entre la première extrémité et la deuxième extrémité ; la distance entre la première extrémité et la deuxième extrémité, selon la direction d’extension, forme une longueur du composant gélosé ; perpendiculairement à la direction d’extension, le composant gélosé s’étend selon un diamètre ou une plus grande diagonale inférieure au dixième de la longueur. Procédé selon l’une quelconque des revendications 6 ou 7, dans lequel : le milieu ambiant comporte de l’eau (15) ; tout ou partie d’une périphérie du composant gélosé est mise en contact avec de l’eau. Procédé selon la revendication 8, dans lequel : le composant gélosé est disposé sur une gélose auxiliaire (17); une couche d’eau est interposée entre la gélose auxiliaire (17) et le composant gélosé. Procédé selon la revendication 9, dans lequel la gélose auxiliaire comporte des nutriments, de sorte que des nutriments peuvent migrer vers le composant gélosé, à travers la couche d’eau. Procédé selon l’une quelconque des revendications 6 à 10, dans lequel le guide d’onde comporte plusieurs deuxièmes extrémités (12 1 , 12 2 ); le guide d’onde comporte plusieurs branches (13 1 , 13 2 ), chaque branche s’étendant à entre un même tronçon (13) du composant gélosé (10), et chaque deuxième extrémité respective ; le tronçon (13) s’étend entre la première extrémité (11) et chaque branche ; au cours de plusieurs étapes c) : une première branche (13 1 )est mise en contact avec un premier milieu (2 1 ) ; une deuxième branche (13 2 ), différente de la première branche, est mise en contact avec un deuxième milieu (2 2 ); le procédé comporte, suite à l’étape e), une détermination d’une présence de microorganismes dans le milieu le premier milieu et/ou dans le deuxième milieu. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, dans lequel : le composant gélosé s’étend entre un plan de base (P) et au moins une face opposée (F) ; la première extrémité et la deuxième extrémité sont disposées sur le plan de base ; le composant gélosé est configuré pour réfléchir une lumière incidente, émise par la source de lumière, et atteignant le plan de base selon un axe d’incidence, en formant, après propagation de la lumière incidente à travers le composant gélosé, une lumière réfléchie, la lumière réfléchie émanant du plan de base selon un axe de réflexion. Procédé selon la revendication 12, dans lequel : lors de plusieurs étapes c), tout ou partie de la face opposée est mise en contact avec un milieu d’analyse (2), susceptible de comporter des microorganismes ; le procédé comporte, suite à l’étape e), une détermination d’une présence de microorganismes dans le milieu d’analyse. Procédé selon l’une quelconque des revendications 12 ou 13, dans lequel la face opposée est une face hémisphérique. Procédé selon l’une quelconque des revendications 12 ou 13, dans lequel la face opposée comporte trois faces (F 1 , F 2 , F 3 ), chaque face s’étendant à partir d’un même sommet (S), les trois faces formant un trièdre trirectangle, l’axe de réflexion étant parallèle à l’axe d’incidence. Dispositif, pour déterminer une présence de microorganismes dans un composant gélosé, le dispositif comportant : un composant gélosé, le composant gélosé s’étendant entre une première extrémité (11) et une deuxième extrémité (12), le composant gélosé étant au moins en partie transparent à une longueur d’onde d’illumination ; le composant gélosé étant configuré pour confiner une lumière, à la longueur d’onde d’illumination, entre la première extrémité (11) et la deuxième extrémité (12) ; une source de lumière (21), configurée pour illuminer la première extrémité ; un photodétecteur (22), configuré pour détecter une lumière émanant de la deuxième extrémité (12) après s’être propagée entre la première extrémité et la deuxième extrémité ; une unité de traitement (30), programmée pour mettre en œuvre l’étape e) d’un procédé selon l’une quelconque des revendication précédentes, de façon à déterminer une présence d’un microorganisme dans le composant gélosé.