Brevet FR3113809A1 — publié le 20220311

Plathelminthe et extrait de plathelminthe dépourvu de microorganismes pathogènes pour l’Homme L’invention concerne des plathelminthes nourris à la levure maltée dépourvus de microorganismes pathogènes pour l’Homme, et leur utilisation pour préparer des extraits utiles dans des applications non-thérapeutiques et thérapeutiques, Plathelminthe et extrait de plathelminthe dépourvu de microorganismes pathogènes pour l’Homme La présente invention concerne un plathelminthe dépourvu de microorganismes pathogènes pour l’Homme et un extrait dudit plathelminthe utile dans les domaines de la pharmacie, de la cosmétique et de la neutraceutique. Le terme « plathelminthes » désigne un embranchement de vers plats qui comporte quatre classes : les rhabditophora (anciennement « turbellariés ») comme la planaire, les monogènes qui sont des parasites d'organismes aquatiques, les trématodes (douves, digènes) qui sont des parasites comme la douve du foie, et les cestodes comme le ver solitaire ou ténia. Les planaires sont des vers plats aquatiques appartenant à plusieurs espèces dans la classe des rhabditophora. Elles peuvent être nageuses ou rampantes, et vivre en mer, en eau douce, ou dans les sols très humides (en forêt tropicale). Les planaires sont connues pour leurs capacités de régénération. Elles sont capables de se régénérer perpétuellement, et n’importe quelle partie de son corps, du fait de la présence d’une grande quantité de cellules souches (20-30%) dans ses tissus comparés aux autres organismes vivants pour lesquels la quantité de cellules souches est de l’ordre de 1ppm. Les cellules souches de planaires se multiplient et se régénèrent continuellement, à la différence des cellules souches des organismes plus évolués, lesquelles ne se multiplient pas ou peu. Les facteurs biochimiques permettant la multiplication des cellules souche chez une planaire restent non identifiés. Les plathelminthes sont connus pour se nourrir de substances d’origine animale dans leur environnement naturel, et sont généralement nourris avec du foie de veau ou du foie de poulet lorsqu’ils sont élevés en laboratoire. En raison de leur régime, les plathelminthes abritent dans leur microbiote des microorganismes pathogènes pour l’Homme. Les extraits de plathelminthes sont décrits dans la littérature comme ayant de nombreuses propriétés pharmacologiques. La demande de brevet WO2019016346 décrit un extrait aqueux de planaire, non parasitaire et non pathogène chez l’Homme, notamment de l’espèce Schmidtea mediterranea , capable d’activer la multiplication de cellules souches humaines et qui présente de ce fait, une activité de régénération cellulaire utile dans de nombreuses applications cosmétique, pharmaceutique ou neutraceutique. Les plathelminthes utilisés pour l’obtention des extraits de plathelminthes sont généralement nourris avec du foie de veau. Or, l’analyse de leur microbiote a révélé la présence de microorganismes pathogènes pour l’Homme, tels que Aeromonas veronii , Staphylococcus capitis , Pseudomonas fluorescens , Acinetobacter guillouiae , Aeromonas hydrophila , Delftia acidovorans , Comamonas testosteroni , Sphingomonas paucimobilis , Staphylococcus epidermidis , Micrococcus luteus et/ou Staphylococcus haemolyticus . Ces microorganismes peuvent être problématiques dans toutes les applications cosmétiques, pharmaceutiques ou neutraceutiques découlant de l’utilisation des extraits de plathelminthes ou des plathelminthes en tant que tels. Dans le cadre de la présente invention, il a été montré de façon tout à fait fortuite qu’il était possible de disposer de plathelminthes dépourvus de microorganismes pathogènes pour l’Homme en nourrissant lesdits plathelminthes avec de la levure maltée. Les extraits obtenus à partir de ces plathelminthes « sains » conservant la capacité d’activer la multiplication de cellules souches humaines et présentant de ce fait, une activité de régénération cellulaire notamment des cellules souches ou différenciées. Un premier objet de la présente invention concerne un plathelminthe nourri avec de la levure maltée, ledit plathelminthe étant dépourvu de microorganismes pathogènes pour l’Homme. Un deuxième objet de la présente invention concerne un extrait d’un ou plusieurs plathelminthes selon l’invention. Un troisième objet de la présente invention concerne une composition comprenant un ou plusieurs plathelminthes selon l’invention. Un quatrième objet de la présente invention concerne une composition comprenant un extrait selon l’invention. Un cinquième objet de la présente invention concerne un procédé d’élimination d’organismes pathogènes présents dans un ou plusieurs plathelminthes, ledit procédé comprenant une étape qui consiste à nourrir un ou des plathelminthes, de préférence exclusivement, avec de la levure maltée pendant une durée suffisante pour éliminer lesdits organismes pathogènes. Un sixième objet de la présente invention concerne un procédé de préparation d’un extrait de plathelminthe selon l’invention, comprenant les étapes de : (a) obtenir des plathelminthes dépourvu de microorganismes pathogènes pour l’Homme en mettant en œuvre le procédé de préparation des plathelminthes selon l’invention ; (b) préparer un extrait de plathelminthe à partir des plathelminthes obtenus à l’étape (a). Un septième objet de la présente invention concerne l’utilisation d’un extrait aqueux selon l’invention ou d’une composition comprenant un extrait selon l’invention, pour cultiver des cellules humaines ou animales in vitro ou ex vivo . Un huitième objet de la présente invention concerne un extrait selon l’invention ou une composition comprenant un extrait selon l’invention, pour son utilisation comme médicament, par exemple pour être utilisé pour favoriser la cicatrisation d’une plaie de la peau ou d’une brûlure de la peau. Description détaillée Le terme « plathelminthe » désigne un ver plat de l’embranchement du même nom. Dans le cadre de l’invention, le plathelminthe peut être de la classe des rhabditophora, de préférence il s’agit d’une planaire. De préférence, le plathelminthe selon l’invention est non parasitaire et/ou non pathogène chez l’homme. Avantageusement, le plathelminthe selon l’invention est une planaire appartement à l’une des espèces suivantes Schmidtea mediterranea , Dugesia japonica , Dendricoelum lacteum , Polycelis nigra , Polycelys tenuis et Planaria torva , de préférence à l’espèce Schmidtea mediterranea . La « levure maltée » ou « levure de bière » est bien décrite dans la littérature, elle est le résultat de la culture de saccharomyces cerevisiae avec du malt, généralement du malte d’orge. Elle se présente généralement sous la forme de flocons et est largement utilisée dans l’alimentation végétarienne. La levure maltée selon la présente invention peut être sous toute forme adaptée pour nourrir les plathelminthes, par exemple sous forme de poudre, de paillettes, de granulés ou sous forme liquide. L’expression « plathelminthe dépourvu de microorganismes pathogènes pour l’Homme » désigne un plathelminthe qui dont le tractus digestif est dépourvu de microorganismes pathogènes pour l’Homme, c’est-à-dire un plathelminthe dont le microbiote est dépourvu de microorganismes pathogènes pour l’Homme. Dans un mode de réalisation particulier, les microorganismes pathogènes pour l’Homme sont Aeromonas veronii , Staphylococcus capitis , Pseudomonas fluorescens , Acinetobacter guillouiae , Aeromonas hydrophila , Delftia acidovorans , Comamonas testosteroni , Sphingomonas paucimobilis , Staphylococcus epidermidis , Micrococcus luteus et Staphylococcus haemolyticus . Dans ce mode de réalisation particulier, le microbiote du plathelminthe de l’invention est donc dépourvu de l’ensemble microorganismes pathogènes susmentionnés. Le terme « extrait » désigne le produit résultant de l’extraction du contenu des cellules. Ainsi, le terme « extrait d’un ou plusieurs plathelminthes » désigne le produit résultant de l’extraction du contenu des cellules dudit ou desdits plathelminthes. Le terme « pharmaceutiquement acceptable » signifie approuvé par une agence règlementaire fédérale ou d’État ou énuméré dans la pharmacopée américaine ou européenne, ou dans une autre pharmacopée généralement reconnue, destiné à être utilisé chez les animaux et chez l’homme. Une « composition pharmaceutique » désigne une composition comprenant un véhicule pharmaceutiquement acceptable. Par exemple, un véhicule pharmaceutiquement acceptable peut être un diluant, un adjuvant, un excipient ou un véhicule avec lequel l'agent thérapeutique est administré. Ces véhicules peuvent être des liquides stériles, tels que l'eau et des huiles, y compris ceux d'origine pétrolière, animale, végétale ou synthétique, tels que l'huile d'arachide, l'huile de soja, l'huile minérale, l'huile de sésame, etc. Des solutions salines et des solutions aqueuses de dextrose et de glycérol peuvent également être utilisées comme véhicules liquides, en particulier pour les solutions injectables. Les excipients pharmaceutiquement acceptables comprennent l'amidon, le glucose, le lactose, le saccharose, le stéarate de sodium, le monostéarate de glycérol, le talc, le chlorure de sodium, le lait écrémé en poudre, le glycérol, le propylène glycol, l'eau, l'éthanol et similaires. Lorsque la composition pharmaceutique est adaptée à une administration orale, les comprimés ou les gélules peuvent être préparés par des moyens classiques avec des excipients pharmaceutiquement acceptables tels que des agents liants (par exemple de l'amidon de maïs prégélatinisé, de la polyvinylpyrrolidone ou de l'hydroxypropyl méthylcellulose); des charges (par exemple du lactose, de la cellulose microcristalline ou de l'hydrogénophosphate de calcium); des lubrifiants (par exemple, stéarate de magnésium, talc ou silice); des délitants (par exemple l'amidon de pomme de terre ou le glycolate d'amidon sodique); ou des agents mouillants (par exemple, le laurylsulfate de sodium). Les comprimés peuvent être enrobés par des procédés bien connus dans l’état de la technique. Les préparations liquides pour administration orale peuvent prendre la forme, par exemple, de solutions, de sirops ou de suspensions, ou peuvent être présentées sous forme de produit sec à reconstituer avec de l'eau ou un autre véhicule approprié avant utilisation. De telles préparations liquides peuvent être préparées par des moyens classiques avec des véhicules pharmaceutiquement acceptables tels que des agents de suspension (par exemple un sirop de sorbitol, des dérivés de la cellulose ou des graisses comestibles hydrogénées); des agents émulsifiants (par exemple, la lécithine ou l'acacia); véhicules non aqueux (par exemple huile d'amande, esters huileux, alcool éthylique ou huiles végétales fractionnées); et des conservateurs (par exemple des p-hydroxybenzoates de méthyle ou de propyle ou de l'acide sorbique). Les compositions pharmaceutiques peuvent également contenir des sels tampons, des aromatisants, des colorants et des édulcorants, selon le cas. Le terme « traiter » ou « traitement » englobe tout effet bénéfique ou souhaitable sur une pathologie ou un état pathologique, et peut même inclure une réduction minimale d'un ou plusieurs marqueurs mesurables de la pathologie ou de l'état pathologique. Le traitement peut par exemple impliquer soit la réduction ou l'amélioration des symptômes de la pathologie ou de l'état pathologique, soit le retardement de la progression de la maladie ou de l'état pathologique. Le terme « traitement » ne signifie pas nécessairement l'éradication complète ou la guérison de la pathologie, ni des symptômes associés. Plathelminthe et composition en contenant L’invention concerne un plathelminthe nourri avec de la levure maltée, ledit plathelminthe étant dépourvu de microorganismes pathogènes pour l’Homme. Les inventeurs se sont aperçus que des plathelminthes nourris exclusivement avec de la levure maltée étaient dépourvus de microorganismes pathogènes pour l’Homme, alors que des plathelminthes nourris avec de la nourriture conventionnelles, telle que le foie de veau, développent dans leur tube digestif des microorganismes pathogènes pour l’Homme. Les inventeurs ont donc montré qu’il suffit de nourrir des plathelminthes exclusivement avec de levure maltée pour obtenir les plathelminthes de l’invention. Le plathelminthe selon l’invention peut être vivant ou mort. Il peut par exemple être congelé, lyophilisé et/ou séché. Dans un mode de réalisation préféré, le plathelminthe est dépourvu des microorganismes pathogènes pour l’Homme suivants : Aeromonas veronii, Staphylococcus capitis, Pseudomonas fluorescens, Acinetobacter guillouiae, Aeromonas hydrophila, Delftia acidovorans, Comamonas testosteroni, Sphingomonas paucimobilis, Staphylococcus epidermidis, Micrococcus luteus et Staphylococcus haemolyticus. L’invention concerne également une composition comprenant un ou plusieurs plathelminthes selon l’invention. Il peut s’agir par exemple d’une composition comprenant le ou les plathelminthes dans leur environnement, par exemple une composition comprenant de l’eau, au moins un plathelminthe selon l’invention et éventuellement de la levure maltée. Il peut par exemple s’agir d’une composition comprenant un ou plusieurs plathelminthes selon l’invention et exclusivement de la levure maltée comme aliment du ou des plathelminthes. La composition peut être sous différentes formes, par exemple sous forme liquide ou sous forme lyophilisée. Sous forme lyophilisée, la composition peut en outre comprendre un lyoprotectant, tel qu’un lyoprotectant non-naturel. Extrait de plathelminthe L’invention concerne également un extrait, par exemple un extrait aqueux, d’un ou plusieurs plathelminthes selon l’invention. La préparation d’un extrait de plathelminthes ne présente aucune difficulté particulière, de nombreux procédés d’extraction étant décrits dans la littérature. La préparation d’un extrait de plathelminthes n’est pas limitée à un procédé particulier, et les procédés classiques peuvent être mis en œuvre pour préparer un extrait selon l’invention, comme par exemple en mettant en œuvre un procédé comprenant les étapes suivantes : (i) broyer des plathelminthes afin d’obtenir un broyat, (ii) débarrasser le broyat des débris solides non solubles afin d’obtenir un extrait, et (iii) éventuellement concentrer ou diluer l’extrait. L’étape (i) peut être mise en œuvre avec toute méthode de broyage permettant d’éclater les cellules de plathelminthe et d’en libérer leur contenu, par exemple en agitant des plathelminthes avec des billes en verre. L’étape (ii) peut être mise en œuvre en centrifugeant et/ou en filtrant le broyat. Avantageusement, l’extrait selon l’invention est débarrassé de tout débris solide non soluble, notamment débarrassé des débris de membrane issus de l’éclatement des cellules de plathelminthes. Pour obtenir un tel extrait, le procédé de préparation peut comprendre au moins une étape de séparation solide/liquide, par exemple une ou plusieurs étapes de filtration sur membrane ayant un seuil de coupure approprié, par exemple un seuil de coupure de 1,20 µm, par exemple de 0,80 µm, de 0,45 µm, de 0,2 µm. La filtration permet d’obtenir un extrait qui contient des particules de taille inférieure au seuil de coupure du filtre utilisé, par exemple des particules de taille inférieure à 1,20µm, par exemple inférieure à 0,80 µm, inférieure à 0,45, inférieure à µm 0,2 µm. L’étape (iii) peut être mise en œuvre par évaporation ou par l’ajout d’un solvant approprié, par exemple de l’eau. L’Exemple 2 décrit un procédé de préparation d’un extrait de plathelminthes selon invention. Les conditions d’extraction seront choisies de telle façon que l’extrait obtenu présente la concentration souhaitée dans l'application envisagée. La concentration en protéine de l’extrait brut peut notamment varier en fonction de la quantité de plathelminthe utilisée (par exemple, lors d’une extraction aqueuse, lorsqu’on augmente le ratio plathelminthe/eau, la concentration en protéines de l’extrait augmente également), le temps d’extraction (par exemple, une augmentation du temps d’extraction lors d’une extraction aqueuse permet généralement d’augmenter la concentration en protéines de l’extrait) et/ou la température d’extraction (par exemple, une augmentation de la température d’extraction lors d’une extraction aqueuse permet généralement d’augmenter la concentration en protéines de l’extrait). Généralement, l’extrait brut comprend de 1 mg à 50 mg de protéines par mL d’extrait (mg/mL). L'absorbance à la longueur d'onde caractéristique de 280 nm (i.e. A280nm) est communément utilisée pour estimer la concentration totale de protéines dans l’extrait. L’extrait obtenu peut être plus ou moins concentré en protéines selon l’utilisation envisagée. Après extraction, l’extrait peut notamment comprendre entre 15 mg de protéines par mL d’extrait (mg/mL) et 20 mg/mL. L’extrait brut peut être dilué ou même concentré selon l’utilisation envisagée. Dans un mode de réalisation particulier, l’extrait selon l’invention comprend de 15 µg de protéines par mL d’extrait (µg/mL) à 50 mg de protéines par mL d’extrait (mg/mL), par exemple de 15 µg/mL à 20 mg/L, par exemple de 15 µg/mL à 1 mg/L, par exemple de 15 µg/mL à 0,3 mg/L. Dans un autre mode de réalisation particulier, l’extrait selon l’invention comprend moins de 0,5 mg de protéines par mL d’extrait (mg/mL), par exemple moins de 0,3 mg/mL, par exemple entre 15 µg/mL et 0,3 mg/mL, de préférence de 15 µg mg/mL à 75 µg /mL. Une déshydratation totale de cet extrait permet d’obtenir un extrait sous forme de poudre. Dans un mode de réalisation très particulier, l’extrait selon l’invention a un spectre MALDI TOF correspondant aux données présentées dans le Tableau 1. Extrait 1 Extrait 2 Extrait 3 m/z Intensité S/N m/z Intensité S/N m/z Intensité. S/N 2001 5051 8 2000.7 5566 8 2001.2 1706 7 2390.4 3699 5 2723.3 3988 7 2723.8 2062 9 2723.7 4012 8 3335.8 3074 5 3335.7 1224 5 3335.6 2812 5 3672.7 3390 7 3673.2 2021 9 3673.3 3533 9 3708.1 4153 10 3708.4 2804 13 3708.7 4596 13 4551.1 2822 7 3760.5 1500 7 3760.9 2701 6 4871.2 3613 10 4550.7 1414 7 4551.4 2604 7 5012.3 2930 8 4871.1 2254 11 4871.6 3185 10 5072.5 3321 9 5012.6 1683 9 5012.9 2746 8 5267.7 2351 6 5060 974 5 5060.4 2042 5 5646.8 7211 28 5072.8 2096 11 5072.8 3282 10 5870.1 2197 6 5268 1410 7 5268.3 2221 6 5890.7 2105 6 5647.1 5163 30 5647.6 6601 28 5906.5 2005 6 5870.4 1070 6 5871.3 1808 5 6393.6 5383 23 5890.8 1067 6 5891.4 1859 6 6415.4 1900 6 5906.7 1008 6 5907.7 1886 6 6432.8 4926 20 5965 901 5 5965.5 2019 6 6487 2204 7 6393.6 3673 24 6394.2 4603 21 6534.1 3192 12 6414.6 882 6 6433.5 4207 19 6556.8 4018 16 6433.2 3106 20 6487.8 2003 7 6577.9 1864 6 6487.1 1245 8 6535 2888 12 6674.1 5905 27 6534.4 1980 13 6557.6 3510 15 6695.2 1817 6 6557 2491 16 6675.2 4693 23 7347.6 7866 44 6674.5 3967 28 7306.6 1498 5 7369.5 2976 14 7348 6232 50 7349 7585 45 7418 10220 58 7369.7 2025 16 7369.9 2881 15 7438.6 3214 15 7418.4 7822 62 7419.5 8974 54 7471.5 2704 12 7472 1966 16 7472.7 2731 14 7492.2 2184 9 7523 4434 37 7524.1 5714 35 7522.9 5581 31 7542.1 1296 11 7568 1726 7 7541.6 2177 10 7569.3 1048 9 7588.1 3819 22 7564.9 1721 7 7587.1 2747 23 7606.4 1577 6 7586.4 3623 19 7754.2 616 5 7755.1 1452 6 7607 1645 6 8470.5 1655 17 8471.3 2189 15 8469.5 2390 16 8498.9 806 8 8499.6 1422 8 8498.3 1731 11 8525.6 870 9 8526.7 1394 8 8523.9 1798 11 8545.9 642 7 8547 1154 6 8544.4 1268 7 9395.7 741 9 9396.7 1148 9 9395.2 1143 8 14027.7 146 6 14031.1 223 5 M/z : rapports (masse en Dalton/charge) en abscisse des différents pics caractéristiques du spectre ; S/N : rapports (intensité du pic/intensité du bruit de fond) des différents pics caractéristiques du spectre. Composition comprenant un extrait de plathelminthe L’invention concerne également une composition comprenant un extrait selon l’invention. Dans un premier mode de réalisation particulier, la composition est une composition cosmétique et/ou dermatologique et peut comprendre un ou plusieurs supports et/ou excipients appropriés à l’utilisation ciblée. Dans ce mode de réalisation, la composition peut être sous forme de gel, lotion, crème, pommade, pâte ou savon. Ainsi, la composition selon l'invention peut comprendre divers excipients usuels adaptés à une administration topique externe, en particulier des excipients acceptables sur le plan dermatologique et/ou cosmétologique. Ces excipients appropriés pour la formulation sont bien connus de l'homme du métier et comprennent par exemple des agents favorisant la pénétration au niveau de la peau, des agents hydratants, des agents épaississants, des agents stabilisants, des agents émollients et des agents tensioactifs, des agents émulsifiants, des agents conservateurs, des agents ajusteurs de pH, etc. Par exemple, la composition selon l’invention est formulée sous forme de crème comprenant l’extrait de l’invention et au moins les excipients suivants: un agent émulsifiant, un agent émollient, un agent épaississant, un agent hydratant et éventuellement un agent conservateur. Dans un autre exemple, la composition selon l’invention est formulée sous forme de comprenant l’extrait de l’invention et au moins les excipients suivants additionnels: un agent gélifiant, un agent épaississant, un agent hydratant et éventuellement un agent conservateur. Dans ce premier mode de réalisation, la composition selon l’invention peut également comprendre d’autres composés adaptés à une utilisation cosmétique et/ou dermatologique tels que des capteurs de radicaux, des vitamines antioxydantes telles que la vitamine E, la vitamine C, des agents antioxydants comme les polyphénols naturels, des enzymes, des principes actifs végétaux, des substances anti-inflammatoires naturelles, des alcools, des polyols, des esters, des électrolytes, des huiles polaires et non polaires, des polymères, des copolymères, des phopholipides, des colorants, des parfums et/ou des agents de gommage de la peau. Dans un deuxième mode de réalisation particulier, la composition est une composition neutraceutique (ou complément alimentaire) et peut comprendre un ou plusieurs supports et/ou excipients appropriés à l’utilisation ciblée. Dans ce mode de réalisation, la composition doit donc pouvoir être ingérée. Elle peut se présenter sous différentes formes galéniques, telle qu’une dispersion, une capsule, un cachet, une poudre, une tablette, etc. La composition neutraceutique peut également se présenter sous la forme d’un aliment, tel qu’un yaourt, une barre de céréales, un gel, un bonbon, une gomme à mâcher, etc. Dans un troisième mode de réalisation particulier, la composition est une composition pharmaceutique et peut comprendre un véhicule pharmaceutiquement acceptable. Les excipients pharmaceutiques acceptables comprennent l'amidon, le glucose, le lactose, le saccharose, le stéarate de sodium, le monostéarate de glycérol, le talc, le chlorure de sodium, le lait écrémé séché, le glycérol, le propylène glycol, l'eau, l'éthanol et similaires. Lorsque la composition pharmaceutique est adaptée à une administration orale, les comprimés ou capsules peuvent être préparés par des moyens conventionnels avec des excipients pharmaceutiquement acceptables tels que des agents de liaison (par exemple l'amidon de maïs prégélatinisé, la polyvinylpyrrolidone ou l'hydroxypropylméthylcellulose); des agents de charges (par exemple, lactose, cellulose microcristalline ou hydrogénophosphate de calcium); des lubrifiants (par exemple, stéarate de magnésium, talc ou silice); des délitants (par exemple, l'amidon de pomme de terre ou le glycolate d'amidon sodique); ou des agents mouillants (par exemple, le laurylsulfate de sodium). Les comprimés peuvent être enrobés par des méthodes bien connues dans l'art. Les préparations liquides pour administration orale peuvent prendre, par exemple, la forme de solutions, de sirops ou de suspensions, ou elles peuvent être présentées comme un produit sec à reconstituer avec de l'eau ou un autre véhicule approprié avant utilisation. Ces préparations liquides peuvent être préparées par des moyens conventionnels avec des additifs pharmaceutiquement acceptables tels que des agents de suspension (par exemple, sirop de sorbitol, dérivés de cellulose ou graisses comestibles hydrogénées); des agents émulsifiants (par exemple, la lécithine ou l'acacia); véhicules non aqueux (par exemple, huile d'amande, esters huileux, alcool éthylique ou huiles végétales fractionnées); et des conservateurs (par exemple, les méthyl ou propyl-p-hydroxybenzoates ou l'acide sorbique). Les préparations peuvent également contenir des sels tampons, des agents aromatisants, colorants et édulcorants, selon le cas. La composition selon l’invention peut également comprendre un milieu de culture cellulaire, de préférence un milieu de culture apte à cultiver des cellules humaines ou animales. Procédé d’élimination d’organismes pathogènes présents dans un plathelminthe L’invention concerne également un procédé d’élimination d’organismes pathogènes présents dans un ou plusieurs plathelminthes, ledit procédé comprenant une étape qui consiste à nourrir un ou des plathelminthes, de préférence exclusivement, avec de la levure maltée pendant une durée suffisante pour éliminer lesdits organismes pathogènes. Le procédé permet notamment d’obtenir un ou plusieurs plathelminthes selon l’invention, tel que défini dans la partie « Plathelminthe et composition en contenant » ci-dessus. Dans un mode de réalisation particulier, les plathelminthes sont nourris au moins une fois par semaine, de préférence au moins deux fois par semaine, avec une quantité de levure maltée allant de 0,10 mg de levure/400 plathelminthes à 0,20 mg de levure/400 plathelminthes, de préférence une quantité de 0,15 mg de levure/400 plathelminthes. Les plathelminthes sont nourris pendant le temps nécessaire pour être dépourvus des microorganismes pathogènes pour l’Homme. Dans un mode de réalisation particulier, les plathelminthes sont nourris pendant un moins une semaine, de préférence pendant au moins 2 semaines, par exemple pendant 4 semaines. Avantageusement, les plathelminthes sont privés de toute nourriture pendant au moins une semaine avant d’être nourri avec la levure maltée. Procédé de préparation d’un extrait de plathelminthe L’invention concerne également un procédé de préparation d’un extrait de plathelminthe selon l’invention, comprenant les étapes de : (a) obtenir des plathelminthes dépourvu de microorganismes pathogènes pour l’Homme en mettant en œuvre le procédé de préparation des plathelminthes selon l’invention ; (b) préparer un extrait de plathelminthe à partir des plathelminthes obtenus à l’étape (a). L’étape (b) de préparation de l’extrait est décrite plus en détail dans la partie « Extrait de plathelminthe » ci-dessus. Indications non-thérapeutiques L’invention concerne également l’utilisation d’un extrait selon l’invention ou d’une composition comprenant un extrait selon l’invention, pour cultiver des cellules humaines ou animales in vitro ou ex vivo . L’extrait peut par exemple être utilisé pour régénérer des cellules humaines ou animales, par exemple en stimulant leur différenciation, leur croissance, leur multiplication et/ou leur prolifération. Selon un aspect particulier, l’extrait est utilisé pour régénérer des cellules souches humaines dentaires. Les cellules humaines ou animales peuvent être tout type de cellules, par exemple des cellules souches ou des cellules différenciées. Parmi les cellules différenciées on peut en particulier faire référence aux cellules épithéliales, aux fibroblastes, aux kératinocyte, aux cellules endothéliales, aux cellules neuronales ou aux cellules nerveuses. Un autre objet de la présente invention concerne l’utilisation d’un extrait selon l’invention ou d’une composition comprenant un extrait selon l’invention comme agent anti-âge, agent cicatrisant et/ou agent régénérant des cellules humaines ou animales, dans laquelle ledit extrait ou ladite composition est appliqué par voie topique. Par « voie topique » on fait référence à une application sur la peau, les muqueuses, les phanères tels que les ongles, les poils et les cheveux, de préférence la peau, par exemple une application sur une peau saine. L’Homme du métier saura déterminer la quantité et la fréquence d’application en fonction de l’effet anti-âge, cicatrisant et/ou régénérant recherché et du type de cellules ciblé. Les effets anti-âge, cicatrisant et/ou régénérant peuvent être mesurés par l’analyse de l’expression d’un ou plusieurs gènes dont le rôle dans le vieillissement cellulaire, la cicatrisation ou encore la prolifération cellulaire est connu. On peut également décrire ici un procédé cosmétique de traitement de la peau, par exemple une peau saine, pour lutter contre les signes du vieillissement cutané, et en particulier les rides d'expression provoquées par les contractions musculaires faciales incontrôlées, consistant à appliquer sur les zones de la peau nécessitant un tel traitement, une composition cosmétique selon l’invention. Indications thérapeutiques L’invention concerne également un extrait selon l’invention ou une composition comprenant un extrait selon l’invention, pour son utilisation comme médicament. L’extrait ou la composition peut être formulé pour une administration parentérale, par exemple une administration intravasculaire (intraveineuse ou intra-artérielle), intrapéritonéale, intramusculaire, entérale ou topique. L’administration ou l’application peut se faire en une seule fois ou, plus généralement, en plusieurs fois. La durée de traitement peut varier selon la pathologie traitée et le sujet traité. L’extrait ou la composition peut être utilisé en monothérapie ou en association avec des médicaments dont l’intérêt thérapeutique est reconnu dans la pathologie considérée. En particulier, l’invention concerne un extrait selon l’invention ou une composition comprenant un extrait selon l’invention, destiné à être utilisé pour favoriser la cicatrisation d’une plaie de la peau ou d’une brûlure de la peau. L’administration par voie topique est préférée dans cette indication. EXEMPLES Exemple 1 : Analyse des microorganismes contenus dans des planaires nourris avec différents régimes alimentaires Un premier groupe de 400 planaires ( Schmidtea mediterranea ) a été nourri 2 fois par semaine, pendant 2 semaines, avec 0,15 g de levure maltée (Markal - Levure Maltée de Bière - Paillettes 250g), soit 0,0375g/100 planaires/nourrissage. Un deuxième groupe de 400 planaires ( Schmidtea mediterranea ) a été nourri 2 fois par semaine, pendant 2 semaines, avec du foie de veau (société SAPRIMEX, Italie) à hauteur de 0.40mg/400 planaire/nourrissage. Les microorganismes contenus dans les deux groupes de planaires ont été analysés et recensés en analysant le microbiote selon le protocole détaillé ci-après. Protocole d’analyse du microbiote Après deux semaines de famine, les planaires ont été lavés dans de l'eau stérilisée par filtration, puis les planaires ont été inoculées sur gelose BCYE (Oxoid Deutschland GmbH, Wesel, Allemagne), Luria Bertani (LB) ou gélose Columbia enrichie avec 5% sang de mouton (bioMérieux, Marcy l’étoile, France). Chacune des inoculations est incubée sous trois conditions différentes de température (19°C, 28°C et 37°C) et sous deux contions de temps d’incubation (24 h et 48 h), à savoir 24h à 19°C, 24h à 28°C, 24h à 37°C, 48h à 19°C, 48h à 28°C ou 48h à 37°C. Chaque colonie bactérienne individuelle a été récoltée et identifiée par MALDI-TOF-MS (Spectromètre Microflex; Bruker Daltonics, Brême, Allemagne). Les spectres obtenus ont été importés dans le Logiciel MALDI Biotyper 3.0 (Bruker Daltonics) et analysés par rapport aux spectres de référence des bactéries inclus dans la base de données (base de données Bruker constamment mise à jour avec la base de données Mediterranee-Infection. Le logiciel MALDI Biotyper RTC a été utilisé pour interpréter les résultats en fonction des scores obtenus: une colonie a probablement été identifiée au niveau de l'espèce niveau pour un score> 2,0, probablement identifié pour un score entre 1,99 et 1,7, mais non identifié pour un score Les colonies bactériennes qui ont été identifiées à l'aide de MALDI-TOF, mais qui n’était pas connues dans la base de données Bruker, ont été identifiées par analyse phylogénétique. en utilisant le séquençage de l'ARNr 16S. L'ADN génomique a été extrait à l'aide d'un automate EZ1 et le kit de tissus ADN (Qiagen, Hilden, Allemagne). L'amplification et le séquençage complets du gène de l'ARNr 16S a été réalisée en utilisant huit amorces sur un séquenceur capillaire ABI Prism 3130xl Genetic Analyzer (AppliedBio systems, Bedford, MA, États-Unis). Le logiciel CodonCode Aligner a été utilisé pour l'alignement, l'assemblage et la correction des séquences (https://www.codoncode.com/). Pour l'affectation taxonomique, une recherche BLASTn a été effectuée sur la base de données nr. Un seuil de similitude de séquence de 98,65% par comparaison avec les espèces phylogénétiquement les plus proches avec la position dans la nomenclature a été utilisé pour délimiter une nouvelle espèce. Les relations phylogénétiques ont été déduites de la comparaison des séquences d'ARNr 16S en utilisant le Logiciel MEGA7. Résultats de l’analyse du microbiote Les planaires nourris avec la levure maltée étaient dépourvues de bactérie susceptible d’être pathogènes pour l’Homme. Les planaires nourris avec la levure maltée comprenaient une seule espèce bactérienne, non pathogène pour l’Homme : Pseudomonas brenneri . Il est intéressant de noter que les bactéries (non pathogènes) Urmitella massiliensis , Paenibacillus polymyxa et Micrococcus luteus ont été retrouvées dans la levure maltée donnée aux planaires, mais ces bactéries n’ont pas été retrouvées dans les planaires après nourrissage avec de la levure maltée. Les planaires nourris avec le foie de veau contenaient 11 bactéries susceptibles d’être pathogènes pour l’Homme (Table 2) et 25 bactéries non pathogènes (Table 3). Bactéries opportunistes pathogènes retrouvées dans les planaires nourris par du foie de veau Aeromonas veronii Staphylococcus capitis Pseudomonas fluorescens Acinetobacter guillouiae Aeromonas hydrophila Delftia acidovorans Comamonas testosteroni Sphingomonas paucimobilis Staphylococcus epidermidis Micrococcus luteus Staphylococcus haemolyticus Bactéries non pathogènes retrouvées dans les planaires nourris par du foie de veau Pedobacter ghigonii Marseille-Q2390 (*) Pseudomonas schmidteae Marseille-Q1929 (*) Pseudomonas timonensis Marseille-P9894 Pseudomonas timonensis Marseille-P9899 Chryseobacterium schmidteae Marseille-P9602 (*) Bacillus schmidteae Marseille-P9898 Janthinobacterium timonensis Marseille-P9896 Vogesella uthrealis Pedobacter schmidteae EG (*) Comamonas aquatilis (*) Pedobacter wanjuense Pseudomonas brenneri Variovorax paradoxus Pseudomonas anguilliseptica Chryseobacterium balustinum Chryseobacterium scophthalmum Agrobacterium tumefaciens Microbacterium oxydans Micrococcus yunnanensis Flavobacterium oncorhynchi Flavobacterium tructae Pseudomonas gessardii Shinella zoogloeoides Acinetobacter bereziniae Ensifer adhaerens Rhizobium giardinii Corynebacterium lipophiloflavum Acidovorax wautersii Sphingomonas bisphenolicum Sphingomonas ginsenosidimutans (*) Bactéries nouvellement identifiées Il convient de noter que les bactéries (non pathogènes) Brochothrix thermosphacta, Lactococcus piscium, Pseudomonas frederiksbergensis, Pseudomonas gessardii, Serratia proteamaculans, Staphylococcus hominis et Pseudomonas azotoformans ont été retrouvées dans le foie de veau donné aux planaires, mais ces bactéries n’ont pas été retrouvées dans les planaires après nourrissage avec le foie de veau. Conclusion : le nourrissage des planaires à la levure maltée a permis d’éliminer les microorganismes susceptibles d’être pathogènes pour l’Homme, et donc d’obtenir des planaires dépourvues de microorganismes pathogènes pour l’Hommes. Ces planaires dépourvus de microorganismes pathogènes pour l’Homme sont particulièrement adaptés pour la préparation d’un extrait de planaires qui ne présente pas de risque pour l’Homme. Exemple 2 : Préparation de l’extrait de planaires nourris à la levure maltée 1. Préparation des planaires Environ 400 planaires ( Schmidtea mediterranea ) nourris avec de la levure maltée conformément à l’Exemple 1 (masse humide comprise entre 0,1g et 0,4g) ont été privés de nourriture pendant 2 semaines. Les planaires ont été lavés 2 fois avec 200 ml d’eau stérile (céramique : microfiltration (0,2 micron), intérieur de la céramique anti bactérie, charbon actif compacté). Les planaires lavés ont été transférés dans un tube et l’eau a été enlevée puis les planaires ont été congelés à -80°C. 2. Obtention de l’extrait Le tube contenant les planaires congelés a été posé sur de la glace jusqu'à décongélation. 20 ml d’eau stérile (température de 4°C) ont été ajoutés aux planaires décongelé. 1 cm de bille verre stérile (diamètre 3 mm) ont été ajoutées dans le tube (tube A). Le tube A a été mixé à l’aide d’un agitateur mécanique pendant 5 minutes, à 2500 cycles/minute. Le contenu du tube A a été passé au travers d’une seringue équipé d’une aiguille 23 g et placé dans un nouveau tube (tube B). Au tube A, contenant les billes de verre et les résidus qui sont restés collés aux billes, il a été ajouté 20 ml d’eau stérile (température de 4°C). Le tube A a été de nouveau mixé à l’aide d’un agitateur mécanique pendant 5 minutes, à 2500 cycles/minute. Le contenu du tube A a été de nouveau passé au travers d’une seringue équipé d’une aiguille 23 g puis transféré dans le tube B. Le tube B contient maintenant 40 ml d’extrait brut de planaire. Le tube Best centrifugé 5 min à 3220g à 4°C puis le surnageant du tube B a été filtré sur une membrane 1,20 µm (filtrat 1). Le filtrat 1 a ensuite été filtré sur membrane 0,80 µm (filtrat 2). Le filtrat 2 a ensuite été filtré sur membrane 0,45 µm (filtrat 3). Le filtrat 3 a ensuite été filtré sur membrane 0,2 µm (filtrat 4). Le filtrat 4 ne contenait que des particules inferieures à 0,2 µm. La concentration protéique du filtrat 4 a été déterminée par absorbance à la longueur d'onde de 280 nm. Pour 400 planaires de départ (masse humide comprise entre 0,1g et 0,4g) la concentration protéique obtenue était comprise entre 17,5 et 20 mg de protéine/mL. Le filtrat 4 (correspondant à un extrait aqueux débarrassé de tout débris solide non soluble de taille supérieure à 0,2 µm) a été lyophilisé et conservé à 4°C pour une utilisation ultérieure. Le filtrat 4 a été analysé en triplicat par MALDI-TOF selon le protocole détaillé ci-après. Protocole d’analyse MALDI-TOF Un échantillon de 1 µL d'extrait aqueux de l'exemple 3A a été dilué au 1/20ème avec un mélange acide trichloracétique, acétonitrile et eau a été déposé sur une matrice HCCA. Puis, 1 µL de matrice saturée HCCA a été ajoutée par-dessus, puis le tout a été séché pendant 10 minutes. L'analyse de l’extrait a été effectuée avec un spectromètre de masse Maldi-Tof Microflex LT10 (Bruker). Les résultats ont été collectés avec le logiciel MALDl Biotyper RTC. La méthode d'acquisition des spectres comprenait les étapes et caractéristiques suivantes : introduire la plaque (cible Microflex modèle de référence 224989 dénommé M5P 96) contenant les dépôts dans le spectromètre de masse Microflex LT, démarrer l'ordinateur associé au spectromètre pour lancer les analyses et lancer l'acquisition des spectres de masse MALDl-TOF. Les paramètres appliqués au spectromètre de masse étaient les suivants : mode linéaire positif1 Electrode 151 : 20,00 kV, Electrode 152 : 18,05 kV, Electrode de focalisation : 6 kV1 Fréquence du laser : 60Hz, Gain du détecteur : 8,8 X, Post Ion Extraction (PIE) : 120 ns, Gamme de masse : de 700 à 20000 Da. Les spectres ont été obtenus via une méthode automatique contrôlée par le logiciel FLEXCONTROL® du fabricant BRUKER DALTONICS® les paramètres étaient les suivants pour chaque spot :nombres séries de 40 tirs: 6 sur des positions différentes du spot (6x40=240 spectres), afin que les tirs aient balayé l'ensemble de l'échantillon de façon homogène l'acquisition se fait sur 6 positions différentes selon une géométrie hexagonale, pré-tirs : 10 tirs à 40% de la puissance maximum laser servent à dessaler l'échantillon (contamination par les sels minéraux), puissance laser : 30 % à 45 % régulée via le logiciel FLEXCONTROL®, sélection du spectre : sur une gamme de masse de 2000 à 20 000 Da. L'acquisition des spectres est au final réalisée via le logiciel BIOTYPER® du fabricant BRUKER DALTONICS® qui permet d'appliquer la méthode automatique décrite ci-dessus à une série d'échantillons en prenant en compte les critères mentionnés précédemment et un score de qualité ou score de validation qui représentent l'addition de 2 notes nl + n2 (nl étant fonction du nombre de pics et n2 fonction du rapport signal/bruit de fond) : nl est la note attribuée en fonction du nombre de pics caractéristiques du spectre n, avec : nl = 0 pour n ::s: 8, nl = 1 pour 8 n2 est la note attribuée en fonction de la valeur du rapport signal/bruit (Rmax) du pic de plus grande intensité du spectre, avec n2 = 0 pour Rmax :s; 6,8, n2 = 1 pour 6,8 Un spectre est pris en compte si son score de validation (nl+n2) est supérieur à 2. Résultats de l’analyse MALDI-TOF Les données sont présentées dans le tableau 4 (m/z : masse sur charge, intensité : intensité du signal ; S/N : signal sur bruit). Expérience 1 Expérience 2 Expérience 3 m/z Intensité S/N m/z Intensité S/N m/z Intensité. S/N 2001 5051 8 2000.7 5566 8 2001.2 1706 7 2390.4 3699 5 2723.3 3988 7 2723.8 2062 9 2723.7 4012 8 3335.8 3074 5 3335.7 1224 5 3335.6 2812 5 3672.7 3390 7 3673.2 2021 9 3673.3 3533 9 3708.1 4153 10 3708.4 2804 13 3708.7 4596 13 4551.1 2822 7 3760.5 1500 7 3760.9 2701 6 4871.2 3613 10 4550.7 1414 7 4551.4 2604 7 5012.3 2930 8 4871.1 2254 11 4871.6 3185 10 5072.5 3321 9 5012.6 1683 9 5012.9 2746 8 5267.7 2351 6 5060 974 5 5060.4 2042 5 5646.8 7211 28 5072.8 2096 11 5072.8 3282 10 5870.1 2197 6 5268 1410 7 5268.3 2221 6 5890.7 2105 6 5647.1 5163 30 5647.6 6601 28 5906.5 2005 6 5870.4 1070 6 5871.3 1808 5 6393.6 5383 23 5890.8 1067 6 5891.4 1859 6 6415.4 1900 6 5906.7 1008 6 5907.7 1886 6 6432.8 4926 20 5965 901 5 5965.5 2019 6 6487 2204 7 6393.6 3673 24 6394.2 4603 21 6534.1 3192 12 6414.6 882 6 6433.5 4207 19 6556.8 4018 16 6433.2 3106 20 6487.8 2003 7 6577.9 1864 6 6487.1 1245 8 6535 2888 12 6674.1 5905 27 6534.4 1980 13 6557.6 3510 15 6695.2 1817 6 6557 2491 16 6675.2 4693 23 7347.6 7866 44 6674.5 3967 28 7306.6 1498 5 7369.5 2976 14 7348 6232 50 7349 7585 45 7418 10220 58 7369.7 2025 16 7369.9 2881 15 7438.6 3214 15 7418.4 7822 62 7419.5 8974 54 7471.5 2704 12 7472 1966 16 7472.7 2731 14 7492.2 2184 9 7523 4434 37 7524.1 5714 35 7522.9 5581 31 7542.1 1296 11 7568 1726 7 7541.6 2177 10 7569.3 1048 9 7588.1 3819 22 7564.9 1721 7 7587.1 2747 23 7606.4 1577 6 7586.4 3623 19 7754.2 616 5 7755.1 1452 6 7607 1645 6 8470.5 1655 17 8471.3 2189 15 8469.5 2390 16 8498.9 806 8 8499.6 1422 8 8498.3 1731 11 8525.6 870 9 8526.7 1394 8 8523.9 1798 11 8545.9 642 7 8547 1154 6 8544.4 1268 7 9395.7 741 9 9396.7 1148 9 9395.2 1143 8 14027.7 146 6 14031.1 223 5 Exemple 3 : effet de l’extrait aqueux de planaire (filtrat 4 obtenu à l’Exemple 2) 1. Toxicité de l’extrait aqueux de planaire La cytotoxicité de l’extrait aqueux obtenu à l’Exemple 2 (filtrat 4) a été testée sur des cellules lymphocytaires humaines HL60 (ATCC CCL-240). Les cellules ont été mises en contact avec différentes dilutions de l’extrait. Brièvement, 5x10 4 cellules / puit (plaque de 24 puits) ont été mises en culture dans du milieu RPMI (GibCoBRL) complémenté avec du sérum de veaux fœtal (10%) et de la pénicilline et streptomycine (5000U/ml, 5000µg/ml respectivement), à 37°C, et sous atmosphère 5% CO2. A la dilution de 1:5 (soit 0,3 mg de protéines/ml d’extrait) l’extrait a entrainé la mort des cellules. Les dilutions 1:20 (soit 75 µg de protéines/ml d’extrait) et 1:100 (soit 15µg de protéines/ml d’extrait), n’ont pas affectées la viabilité des cellules ( ). 2. Effet de l’extrait aqueux de planaire sur la multiplication des cellules souches humaines Les cellules utilisées étaient des cellules souche humaine (ATCC CLS-300702). Les cellules ont été mises en contact avec différentes dilutions de l’extrait. Brièvement, 5x103 cellules / puit, sur une plaque de 48 puits, ont été mises en culture dans du milieu DMEM/F12 (GibCoBRL) complémenté avec du sérum de veaux fœtal (10%) et de la pénicilline et streptomycine (5000U/ml, 5000µg/ml respectivement), à 37°C, et sous atmosphère 5% CO2. Les résultats sont présentés à la à D. Seule une dilution (1/20 ; ), qui est comprise entre 1:5 ( ) et 1:100 ( ), a permis une induction significative (*p montre la croissance des cellules souches humaines traitées par l’extrait aqueux de planaire dilué au 1/20e pendant 9 jours et le contrôle sans traitement. Les cellules ont été colorées au Giemsa. 3. Mesure de l’effet de l’extrait aqueux de planaire sur la multiplication de cellules épithéliale humaine Les cellules utilisées étaient des cellules humaines épithéliales (ATCC CCL-2). Les cellules ont été mises en contact avec différentes dilutions de l’extrait. Brièvement, 5x10 3 cellules / puit, sur une plaque de 48 puits, ont été mises en culture dans du milieu DMEM (GibCoBRL) complémenté avec du sérum de veaux fœtal (10%) et de la pénicilline et streptomycine (5000U/ml, 5000µg/ml respectivement), à 37°C, et sous atmosphère 5% CO2. Une dilution (1/20 ; ), allant de 1:5 ( ) à 1:100 ( ), a permis une induction significative (*p montre la croissance des cellules épithéliales humaines traitées par l’extrait aqueux dilué au 1/20e pendant 9 jours et le contrôle sans traitement. Les cellules ont été colorées au Giemsa. 4. Effet de l’extrait aqueux de planaire sur la multiplication des cellules endothéliales humaines Les cellules utilisées étaient des cellules humaines endothéliales (ATCC CRL-1730). Les cellules ont été mises en contact avec différentes dilutions de l’extrait. Brièvement, 5x10 3 cellules / puit, sur une plaque de 48 puits, ont été mises en culture dans du milieu DMEM (GibCoBRL) complémenté avec du sérum de veaux fœtal (10%) et de la pénicilline et streptomycine (5000U/ml, 5000µg/ml respectivement), à 37°C, et sous atmosphère 5% CO2. Une dilution (1/20 ; ), allant de 1:5 ( ) à 1:100 ( ), a permis une induction significative (*p 5. Effet de l’extrait aqueux de planaire traité par la chaleur sur la réplication des cellules souches humaines (ATCC CLS-300702), endothéliales humaines (ATCC CRL-1730), épithéliales humaines (ATCC CCL-2) Une dilution au 1/20 de l’extrait aqueux de planaire obtenu à l’Exemple 2 (filtrat 4) a été traité à 95°C pendant 10 minutes est ajouté aux cellules humaines d’intérêt. La multiplication des cellules a été mesurée âpres 9 jours. La chaleur a inactivé l’activité de l’extrait puisque qu’aucune prolifération cellulaire n’a été observée, que ce soit pour les cellules souches humaines ( ), épithéliales humaines ( ), ou endothéliales humaines ( ). L’extrait aqueux de planaire inactivé par la chaleur n’induit pas la multiplication cellulaire. Cela suggère que les propriétés de l’extrait proviennent des protéines contenues dans l’extrait. 6. Effet de l’extrait aqueux de planaire sur la cicatrisation d’un tapis cellulaire de cellules souches humaines (ATCC CLS-300702) et de cellules épithéliales humaines (ATCC CCL-2) Les cellules ont été cultivées à confluence jusqu'à former un tapis cellulaire. Une lésion de 325 µm de large du tapis cellulaire a été faite à l’aide d’une aiguille calibrée, puis une dilution au 1/20 de l’extrait aqueux de planaire a été ajoutée ou pas à la culture cellulaire. La cicatrisation du tapis cellulaire (remplissage complet de la lésion par des cellules neuve) a été suivie au cours du temps. Les résultats sont illustrés aux figures et . Il a été observé que pour les cellules souches humaines, comme pour les cellules épithéliales, la cicatrisation de la lésion du tapis cellulaire était quasi complète après 24h, et la lésion était totalement fermée après 48h de traitement avec l’extrait aqueux de planaire dilué au 1:20 e . En absence d’extrait la cicatrisation n’était pas complète après 48h. 7. Effet l’extrait aqueux de planaire sur l’induction de gènes dans les cellules humaine Des cellules humaine épithéliales, endothéliales (ATCC CRL-1730) et souches (ATCC CLS-300702) ont été traitées avec une dilution au 1/20 e de l’extrait aqueux de planaire, puis l’expression de certains gènes a été mesurée par PCR quantitative. L’expression a été exprimée en « fold change ». Plus le « fold change » est élevé plus le gène est exprimé. Les résultats sont présentés dans le tableau 5. Ratio d’expression des gènes par rapport au contrôle Cellules épithéliales Cellules endothéliales Cellules souches Gènes Fonctions CD44 récepteur acide hyaluronique/immunité/adhésion et migration cellulaire 1.94 1.47 2.36 TLR2 immunité 3.21 2.95 6.04 TGFb prolifération cellulaire 2.64 1.08 1.73 RunX1 multiplication, cohesion des tissues, différention cellulaire 2.7 0.4 9.38 PiwiL1 renouvellement cellulaire 2.35 0.19 9.29 SGK1 protection UV et anti-stress oxydatif, photo-aging 29 4.49 10.92 FOXO1 protection UV, photo-aging 2.25 0.13 8.43 BCL2 anti mort cellulaire 2.05 0.19 27.37 HMMR récepteur acide hyaluronique, mobilité cellulaire associé 1.5 1.59 2.56 COL1A1 Synthèse collagène 3.14 0.3 2.07 FBL5 cicatrisation 0 171.87 28.4 En fonctions du type cellulaire, il a été observé que l’extrait aqueux de planaire induisait les gènes de la cicatrisation, des gènes immunitaires, des gènes du renouvellement cellulaire, des gènes de la migration cellulaire, des gènes de la protection contre le photo-aging, des gènes anti mort cellulaire, et des gènes activateur des récepteurs a l’acide hyaluronique. La illustre la mesure de la cytotoxicité de l’extrait aqueux de planaire sur les cellules lymphocytaire humaine. Les figures 2A à 2D illustrent la mesure de l’extrait aqueux de planaire sur la multiplication de cellule souche humaine. Seule une dilution comprise (1/20, B ) entre 1/5 ( A ) et 1/100 ( C ) permet une induction significative (*p montre la croissance des cellules souches humaines traitées par l’extrait aqueux de planaire dilué au 1/20 pendant 9 jours et le contrôle sans traitement. Les cellules sont colorées au Giemsa. Les figures 3A à 3D illustrent la mesure de l’effet l’extrait aqueux de planaire sur la multiplication de cellules épithéliales humaines. Les cellules utilisées sont des cellules humaines épithéliales (ATCC CCL-2). Une dilution (1/20 ; B ) et 1:5 ( A ) et 1:100 ( C ) permet une induction significative (*p montre la croissance des cellules épithéliales humaines traitées par l’extrait aqueux de planaire dilué au 1/20 pendant 9 jours et le contrôle sans traitement. Les cellules sont colorées au Giemsa. Les figures 4A à 4C illustrent la mesure de l’effet de l’extrait aqueux de planaire sur la prolifération des cellules endothéliales humaines. Les cellules utilisées sont des cellules humaines endothéliales (ATCC CRL-1730). Une dilution (1/20 ; B ) et 1:5 ( A ) et 1:100 ( C ) permet une induction significative (*p Les figures 5A à 5C illustrent la mesure de l’effet de l’extrait aqueux de planaire traité par la chaleur sur la réplication des cellules souche humaine (ATCC CLS-300702), endothéliales humaines (ATCC CRL-1730), épithéliale humaine (ATCC CCL-2). Une dilution au 1/20 de l’extrait aqueux de planaire est traité à 95°C pendant 10 minutes est ajouté aux cellules humaines d’intérêt et la multiplication des cellules est mesuré après 9 jours. La chaleur inactive l’activité de l’extrait aqueux de planaire puisque qu’aucune prolifération cellulaire n’est observée que ce soit pour les cellules souches humaines ( A ), épithéliales humaines ( B ), ou endothéliales humaines ( C ). L’extrait aqueux de planaire inactivé par la chaleur n’induit pas la multiplication cellulaire. Les figures 6A et 6B illustrent la mesure l’effet de l’extrait aqueux de planaire sur la cicatrisation d’un tapis cellulaire de cellules souches humaines et de cellules épithéliales humaines. Les cellules humaines d’intérêt sont cultivées a confluence jusqu'à former un tapis cellulaire. Une lésion de 325 µm de large, du tapis cellulaire est faite à l’aide d’une aiguille calibrée, puis l’extrait aqueux de planaire dilué au 1/20 e est ajouté ou pas à la culture cellulaire. La cicatrisation du tapis cellulaire (remplissage complet de la lésion par des cellules neuves) est suivie au cours du temps. Nous observons que pour les cellules souches humaines, comme pour les cellules épithéliales, la cicatrisation de la lésion du tapis cellulaire est quasi complète après 24h, et la lésion est totalement fermée après 48h de traitement avec l’extrait aqueux de planaire dilué au 1/20 e . En absence de traitement la cicatrisation n’est pas complète après 48h. Extrait d’un ou plusieurs plathelminthe nourri avec de la levure maltée, ledit plathelminthe étant dépourvu de microorganismes pathogènes pour l’Homme. Extrait selon la revendication 1, lesdits microorganismes pathogènes pour l’Homme sont Aeromonas veronii , Staphylococcus capitis , Pseudomonas fluorescens , Acinetobacter guillouiae , Aeromonas hydrophila , Delftia acidovorans , Comamonas testosteroni , Sphingomonas paucimobilis , Staphylococcus epidermidis , Micrococcus luteus et Staphylococcus haemolyticus . Extrait selon l’une quelconque des revendications 1 ou 2, le plathelminthe étant de la classe des rhabditophora, de préférence étant une planaire, de préférence appartenant à l’espèce Schmidtea mediterranea . Extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, étant débarrassé de tout débris solide non soluble. Extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, comprenant de 15 µg à 50 mg de protéines par mL d’extrait (mg/mL). Extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, comprenant moins de 0,5 mg/mL de protéines par mL d’extrait (mg/mL), par exemple entre 15 µg/mL et 0,3 mg/mL, de préférence de 15 µg/mL à 75 µg/mL. Extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, ayant un spectre MALDI-TOF correspondant aux données présentées dans le Tableau 1. Composition comprenant un ou plusieurs plathelminthes nourris avec de la levure maltée, ledit ou lesdits plathelminthes étant dépourvus de microorganismes pathogènes pour l’Homme. Composition comprenant un extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 7. Procédé d’élimination d’organismes pathogènes présents dans un ou plusieurs plathelminthes, ledit procédé comprenant une étape qui consiste à nourrir un ou des plathelminthes, de préférence exclusivement, avec de la levure maltée pendant une durée suffisante pour éliminer lesdits organismes pathogènes. Procédé de préparation d’un extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 7, comprenant les étapes de : (a) obtenir des plathelminthes dépourvu de microorganismes pathogènes pour l’Homme en mettant en œuvre le procédé de la revendication 10 ; (b) préparer un extrait de plathelminthe à partir des plathelminthes obtenus à l’étape (a). Utilisation d’un extrait selon l’une des revendications 1 à 7 ou d’une composition selon la revendication 9, pour cultiver des cellules humaines ou animales in vitro ou ex vivo , dans laquelle lesdites cellules humaines ne sont pas des cellules souches embryonnaires humaines nécessitant la destruction d’un embryon humain et ayant la capacité de se développer en être humain. Extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 7 ou composition selon la revendication 9, pour son utilisation comme médicament. Extrait selon l’une quelconque des revendications 1 à 7 ou composition selon la revendication 9, pour son utilisation pour favoriser la cicatrisation d’une plaie de la peau ou d’une brûlure de la peau.