Brevet FR3120768A1 — publié le 20220923

Utilisation d’un extrait d’algue rouge comme agent nématostatique et/ou nématicide L’invention concerne (i) l’utilisation d’un extrait d’algue rouge comme agent nématostatique vis-à vis des nématodes et/ou comme agent nématicide vis-à-vis des nématodes et (ii) un procédé de traitement d’un sol destiné à favoriser la croissance d’une plante en réduisant l’accès des nématodes aux racines de ladite plante ou en éliminant les nématodes présents dans ledit sol, ledit procédé comprenant l’apport audit sol d’un extrait d’algue rouge. Utilisation d’un extrait d’algue rouge comme agent nématostatique et/ou nématicide L’invention concerne l’utilisation d’un extrait d’algue rouge comme agent nématostatique vis-à vis des nématodes et/ou comme agent nématicide vis-à-vis des nématodes. Les nématodes sont des animaux vermiformes, dans la très large majorité des cas de taille microscopique. Ils se trouvent dans pratiquement tous les milieux, à la fois sous forme de parasites ou d’organismes libres. Ils sont dépendants de la présence d’eau pour leur survie, notamment d’eau interstitielle pour les nématodes présents dans les sols. Le cycle de vie de nématodes passe nécessairement par une phase larvaire (on parle généralement de juvéniles) et une phase mobile, conférant aux nématodes la capacité de se déplacer dans les sols sur de courtes distances. Les nématodes phyto-parasites sont capables d’occasionner des dégâts significatifs aux plantes cultivées et sont extrêmement répandus. Il existerait plus de 4000 espèces de nématodes phyto-parasites identifiés. En effet, ils parasitent un nombre important de cultures d’intérêt économique et sont présents dans tous les types de sols, ce qui impactent la production agricole. Les nématodes phyto-parasites peuvent avoir besoin de culture hôtes bien identifiées pour s’y nourrir et compléter leur cycle biologique, et sont alors appelés parasites obligatoires. Les nématodes phyto-parasites peuvent aussi se passer de la présence de cultures hôtes pour compléter leur cycle biologique et sont alors appelés parasites facultatifs. Dans les deux cas, ils causent des dégâts importants aux productions végétales. D’ailleurs, il est reconnu que les nématodes phyto-parasites réduisent la production agricole mondiale d’approximativement 11%, soit une perte de récolte de plusieurs millions de tonnes chaque année, correspondant à un coût économique estimé à l’échelle mondiale à 100 milliards de dollars par an. Les nématodes ont une répartition mondiale et sont présents dans les couches superficielles du sol. Ils sont adaptés à tout type de milieu : eau salée, eau douce, des régions polaires aux régions tropicales. Ils constituent le groupe animal le plus nombreux et le plus répandu dans le sol. Leurs larves peuvent rester vivantes des dizaines d’années sous forme de kystes. Les moyens de lutte contre ces phytopathogènes sont multiples mais parfois difficiles à mettre en place ou partiellement efficaces. Outre les nématicides chimiques (comme la fumigation chimique), les techniques de traitement physique (solarisation) et le respect de pratiques agricoles, voire le recours à certains biofumigants, de nouvelles méthodes de lutte peuvent être : l’apport au sol d’organismes biologiques prédateurs naturels des nématodes, l’amélioration génétique des plantes pour les rendre résistantes à ces pathogènes ou la stimulation naturelle des défenses des plantes par des éliciteurs, ou encore l’utilisation de bio-nématicides ou d’extraits naturels ayant des propriétés nématostatiques. Les produits de fumigation sont les moyens traditionnels de contrôle des nématodes notamment en USA, France, Japon, Italie et Espagne et représentent 45% des ventes de nématicides. Cependant, ils sont onéreux et limités de ce fait aux cultures de haute valeur. Les nématicides chimiques ont représenté en 2011, 55% des ventes totales et sont les plus utilisés au Brésil, UK, Mexique, Afrique du Sud, Chine et Argentine. Ces produits sont souvent toxiques et ont pour inconvénient d’être des biocides à large spectre, ce qui a souvent un impact sur l’ensemble de l’écosystème présent, éliminant toute forme de vie dans les cultures. En Europe, les cultures les plus concernées par l’infestation par les nématodes sont les grandes cultures (betteraves, maïs, blé dur et colza), les cultures légumières (carotte, pomme de terre, solanacées, cucurbitacées, laitues) et les cultures pérennes telle que la vigne. Pour des raisons environnementales et sanitaires, la quasi-totalité des nématicides les plus efficaces sont/seront retirés du marché, laissant les filières avec peu de solutions. Dans ce contexte, il existe un besoin de développer des méthodes alternatives pour protéger les cultures contre les nématodes phyto-parasitaires. La représente le cycle de développement d’un nématode. Le premier stade correspond à l’œuf, puis les stades de développement larvaires L1, L2, L3 et L4, et les deux stades de développement du nématode adulte (appelé L5 et adulte). La représente un schéma de préparation d’un extrait d’algue rouge de type Porphyra spp. La représente un dispositif expérimental de suivi de mobilité des nématodes appelé test d’immobilisation, afin de mesurer l’effet nématostatique et/ou nématicide d’un extrait d’algue rouge. Après mise en contact des nématodes avec un extrait d’algue rouge, les nématodes ont été transférés sur une membrane poreuse et leur mobilité a été suivie au cours du temps (T1, T2) afin de déterminer s’ils étaient immobilisés de façon réversible et/ou irréversible. La représente le suivi du comportement des larves de nématodes au cours du temps (en jour) suite à la mise en contact des larves avec un extrait d’algue rouge. Le comportement des larves de nématodes traduit une spécificité d’action de l’extrait vis-à-vis des différents groupes de nématodes. Le pourcentage de larves au stade L2 (ou J2) immobilisées est exprimé en fonction du nombre de jours après immobilisation des larves. Il a été observé trois comportements des larves au cours du temps (en jour): i) un effet nématostatique, lorsque les larves de nématodes ont recouvré leur mobilité au cours du temps ; (ii) un effet nématicide lorsque les larves de nématodes n’ont pas recouvré leur mobilité au cours du temps , et (iii) un effet nématostatique et un effet nématicide lorsqu’ une première fraction de larves de nématodes n’a pas recouvré sa mobilité au bout de quelques jours et une seconde fraction des larves de nématodes a recouvré sa mobilité. La représente la mesure de l’indice de galles sur des racines de tomates à jar+30, après que des plants de tomates infectés par des larves au stade de développement L2 de type Meloidogyne incognita aient été traitées avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 15,8 g/L (NEMA 15,8 g/L), avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 31,6 g/L (NEMA 31,6 g/L) ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente la biomasse foliaire moyenne en gramme des plants de tomates à jar+30, après que des plants de tomates infectés par des larves au stade de développement L2 de type Meloidogyne incognita aient été traitées avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 15,8 g/L (NEMA 15,8 g/L), avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 31,6 g/L (NEMA 31,6 g/L) ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente la teneur en chlorophylle des tissus foliaires de tomate à jar+30, en Unité Arbitraire UA, après que des plants de tomates infectés par des larves au stade de développement L2 de type Meloidogyne incognita aient été traitées avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 15,8 g/L (NEMA 15,8 g/L), avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 31,6 g/L (NEMA 31,6 g/L) ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente le nombre de kystes de Heterodera schachtii présents dans les sols lors de la récolte de betteraves à jar+36, après que des plants de betterave infectés par des larves au stade de développement L2 et des œufs issus de Heterodera schachtii aient été traitées avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 15,8 g/L (NEMA 15,8 g/L), avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 31,6 g/L (NEMA 31,6 g/L) ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente la quantité de biomasse foliaire de betteraves à jar+36, après que des plants de betterave infectés par des larves au stade de développement L2 et des œufs issus de Heterodera schachtii aient été traitées avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 15,8 g/L (NEMA 15,8 g/L), avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 31,6 g/L (NEMA 31,6 g/L) ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente la quantité de biomasse racinaire de betteraves à jar+36, après que des plants de betterave infectés par des larves au stade de développement L2 et des œufs issus de Heterodera schachtii aient été traitées avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 15,8 g/L (NEMA 15,8 g/L), avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 31,6 g/L (NEMA 31,6 g/L) ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente le contenu en chlorophylle des tissus foliaires de betterave à jar+36, après que des plants de betterave infectés par des larves au stade de développement L2 et des œufs issus de Heterodera schachtii aient été traitées avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 15,8 g/L (NEMA 15,8 g/L), avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 31,6 g/L (NEMA 31,6 g/L) ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente la mesure de l’indice de galles sur des plants de pommes de terre à jar+57 (BBCH43), après que des plants de pomme de terre infectés par des larves au stade de développement L2 de Meloidogyne spp aient été traitées avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 30 g/L, avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 60 g/L, ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente le nombre de nématodes dans les sols lors de la récoltes de pommes de terre à jas+108; BBCH49, après que des plants de pomme de terre infectés par des larves au stade de développement L2 de Meloidogyne spp aient été traitées avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 30 g/L, avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 60 /L, ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente la teneur en chlorophylle mesurée en Unité Arbitraire (UA) mesurée sur les tissus foliaires des plants de pommes de terre à jar+44 (BBCH40), après que des plants de pomme de terre infectés par des larves au stade de développement L2 de Meloidogyne spp aient été traitées avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 30 g/L, avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 60 g/L, ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente le rendement en kg pour vingt mètres linéaires à la récolte de pommes de terre à jar+108, après que des plants de pomme de terre infectés par des larves au stade de développement L2 de Meloidogyne spp aient été traitées avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 30 g/L, avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 60 g/L, ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente le nombre de kystes de Globodera rostochiensis et de Globodera pallida dénombrés à la récolte de pommes de terre, après que des plants de pomme de terre infectés par nématodes Globodera rostochiensis et de Globodera pallida aient été traités avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 30 g/L, avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 60 g/L, ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente le ratio Pf/Pi de kystes de Globodera rostochiensis et de Globodera pallida à la récolte de pommes de terre, après que des plants de pomme de terre infectés par nématodes Globodera rostochiensis et de Globodera pallida aient été traités avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 30 g/L, avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 60 g/L, ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente le rendement à la récolte de pommes de terre en tonne/hectare, après que des plants de pomme de terre infectés par nématodes Globodera rostochiensis et de Globodera pallida aient été traités avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 30 g/L, avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 60 g/L, ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). La représente la quantité moyenne de tubercules en tonne/hectare selon les calibres de tubercules (calibre inférieur à 28 mm, calibre compris entre 28 et 40 mm, calibre compris entre 40 et 50 mm, calibre compris entre 50 et 60 mm), après que des plants de pomme de terre infectés par nématodes Globodera rostochiensis et de Globodera pallida aient été traitées avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 30 g/L, avec une solution d’extrait d’algue rouge de Porphyra spp à 60 g/L, ou n’aient reçu aucun traitement (Témoin NT). Exemples Exemple 1 : Préparation d’un extrait d’algue rouge de type Porphyra spp pour son utilisation selon l’invention Méthode Un extrait de Porphyra spp (également appelé Pyropia spp ) a été préparé en suivant le procédé suivant : Etape 1 : 100 kg d’algue rouge séchée de type Porphyra spp ont été broyés et passés au travers d’un tamis afin d’obtenir des fragments de taille inférieure ou égale à 2 mm. Etape 2 : les 100 kg d’algue rouge séchée et broyée obtenus à l’étape 1 ont été mélangés à 2800 kg d’eau et 5 kg d’acide sulfurique (H 2 SO 4 ) à 40°C. Le mélange a été maintenu sous agitation à une température de 40°C et à un pH de 2,5, durant 3 heures. Etape 3 : le mélange obtenu à l’étape 2 (2400 kg) a été centrifugé à l’aide d’un décanteur centrifuge industriel, puis le surnageant a été filtré à 50 μm. L’extrait a ensuite été concentré par évaporation à une température inférieure à 57°C, afin d’obtenir 640 kg d’extrait liquide concentré comprenant 8 % de matière sèche (à savoir 80 g de matière sèche par litre d’extrait concentré). L’extrait concentré ainsi obtenu correspond à l’extrait utilisé dans les exemples ci-après. Exemple 2 : Effets nématostatique et/ou nématicide d’un extrait d'algue rouge de Porphyra spp ( Pyropia spp ) sur différents nématodes Conditions expérimentales : Un test d’immobilisation des larves de nématodes a été réalisé afin de mesurer l’effet nématostatique et/ou nématicide de l’extrait d’algue rouge. Ce test a permis de déterminer le comportement des larves de nématodes (au stade larvaire L2 également appelé stade juvénile J2) lorsqu’elles ont été mises en contact avec l’extrait d'algue rouge puis transférées sur une membrane poreuse comme décrit en . Les tests ont été réalisés sur des larves de nématodes appartenant aux groupes des nématodes phytoparasites facultatifs ( Ditylenchus dispaci, Xiphinema index ), et aux groupes de nématodes phytoparasites obligatoires ( Meloidogyne javanica, Heterodera carotae, Heterodera schachtii, Globodera pallida ). La mobilité des nématodes a été analysée afin de déterminer si l’extrait avait un effet nématicide et/ou nématostatique. La montre que les nématodes ont réagi de trois façons différentes, une fois mis en contact avec l’extrait d’algue rouge: - Une proportion de nématodes n’a pas recouvré leur mobilité, et ont été incapables de passer au travers de la membrane poreuse, ce qui reflète l’effet nématicide de l’extrait d’algue rouge. - Une proportion de nématodes a recouvré leur mobilité au bout de 4 jours puis au bout de sept jours, et ont été capables de passer au travers de la membrane poreuse, ce qui reflète l’effet nématostatique de l’extrait d’algue rouge. - Une première fraction de nématodes n’a pas recouvré sa mobilité au bout de quatre jours, et a été incapable de passer au travers de la membrane poreuse. Une seconde fraction de nématodes a recouvré sa mobilité. Dans ce cas, l'extrait d’algue rouge a donc eu un effet nématicide et nématostatique. En condition témoin, les laves de nématodes mis en contact avec de l'eau (en lieu et place de l'extrait d'algue rouge), puis transférées sur une membrane poreuse, puis rincées avec de l'eau, ont recouvré immédiatement leur mobilité et sont passées au travers de la membrane poreuse. Les résultats sont présentés dans le Tableau 1. Phytoparasites sédentaires Phytoparasites facultatifs Meloidogyne javanica Globodera pallida Heterodera schachtii Heterodera carotae Xiphinema index Ditylenchus dispaci Effet nématicide Oui Effet nématostatique Oui Oui Oui Effet nématicide et nématostatique Oui Oui Les larves de nématodes du genre Meloidogyne (nématode endoparasite sédentaire, nématode à galle) ont été immobilisées de façon irréversible, ce qui reflète l’effet nématicide de l’extrait d’algue rouge préparé selon l’Exemple 1 sur ce groupe de nématode. Une fraction des larves de nématodes du genre Globodera (nématode endoparasite sédentaire, nématode à kyste) a été immobilisée de façon irréversible. L’autre fraction des larves de nématodes a recouvré sa mobilité. Cela reflète l’effet nématicide et nématostatique de l’extrait d’algue rouge préparé selon l’Exemple 1 sur ce groupe de nématodes. Les larves de nématodes du genre Heterodera (nématode endoparasite sédentaire, nématode à kyste) ont été immobilisées de façon réversible, ce qui reflète l’effet nématostatique de l’extrait d’algue rouge préparé selon l’Exemple 1 sur ce groupe de nématodes. Les larves de nématodes du genre Xiphinema (nématode phytoparasite migrateur) ont été immobilisées de façon réversible, ce qui reflète l’effet nématostatique del'extrait d'algue rouge préparé selon l’Exemple 1 sur ce groupe de nématodes. Une fraction des larves de nématodes du genre Ditylenchus (nématode phytoparasite facultatif) a été immobilisée de façon irréversible. L’autre fraction de larves de nématodes a recouvré sa mobilité. Cela reflète l’effet nématicide et nématostatique de l’extrait d’algue rouge préparé selon l’Exemple 1 sur ce groupe de nématodes. Exemple 3 : Mise en évidence, en serres expérimentales (i.e. en conditions contrôlées), des effets d’un extrait d’algue rouge sur l’infestation de plants de tomate infectés par des larves de nématodes au stade de développement L2 du genre Meloidogyne incognita Conditions expérimentales L’essai a été réalisé en serre expérimentale de recherche de façon à évaluer l’efficacité de l’extrait d’algue rouge de l’Exemple 1 sur des plants de tomate ( Solanum lycopersicum ) transférés dans un sol sableux infesté par des larves de nématodes de Meloidogyne incognita au stade de développement L2 en une quantité de 0,8 larves par mL de sol sableux. La variété de tomate utilisée pour cet essai était la variété 505 F1, sensible à l'attaque de Meloidogyne incognita . Ce nématode a la capacité d’attaquer les racines des plants de tomate, provoquant la formation de galles sur les racines, et réduisant indirectement le développement du plant de tomate, la biomasse aérienne du plant de tomate, l'efficacité de l'activité photosynthétique (contenu en chlorophylle des feuilles) et donc la qualité de la production. L’extrait concentré d’algue rouge de l’Exemple 1 a été dilué dans de l’eau afin d’obtenir une première solution à une concentration de 15,8 grammes d’extrait concentré par litre de solution (g/L) (comprenant 1,58 % d’extrait concentré dans la première solution) et une seconde solution à une concentration de 31,6 g/L (comprenant 3,16% d’extrait concentré dans la seconde solution). Les deux solutions ont été appliquées à la surface du sol sableux infesté par les larves de nématodes 5 jours avant le repiquage (jar-5) des plants de tomate, 1 jour après le repiquage, (jar+1), à jar+3, à jar+6, à jar+9 et à jar+12. 6 plants de tomate ont été testés pour chaque modalité. A la fin de l'essai (jar+30), les racines des plants de tomate ont été récupérées et l'indice de galles (gall index) a été déterminé. L'indice de galles est un système de mesure de notation du niveau d'infestation d'une racine par des nématodes à galle(s), permettant dans le cas présent de mesurer l’infestation de Meloidogyne incognita . Sur une échelle de 1 à 6, l’indice de galles informe sur le niveau d'infestation (1-2: 0-10% d’infestation; 2-3: 10-20% d’infestation; 3-4: 20-50% d’infestation; 4-5: 50-80% d’infestation; 5-6: 80-100% d’infestation). Parallèlement, la hauteur des plants de tomate et la biomasse aérienne ont été mesurées à la fin de l'essai. De même, le contenu en chlorophylle a été déterminé. Résultats Les résultats présentant l'indice de galles, sur des racines de tomates à jar+30, sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), l’indice de galles atteint la valeur de 5,6, ce qui signifie que de 80 à 100% des racines des plants de tomate étaient recouverts de galles. Lorsque la solution concentrée à 15, 8 g/L a été appliquée, l’indice de galles était de 4, soit une infestation d’environ 50%. Lorsque la solution concentrée à 31,6 g/L a été appliquée, l’indice de galles était de 3,6, soit une infestation de 20-50%. Cela montre que l’utilisation d’un extrait d’algue rouge selon l’invention permet une réduction significative de l’indice de galles, de façon dose dépendante. Les résultats montrant la quantité de biomasse foliaire des plants de tomate à jar+30 sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), les plants de tomates ont développé une biomasse foliaire de 30 g en moyenne par plant de tomate). Lorsque les solutions concentrées à 15, 8 g/L et 31,6 g/L ont été appliquées, la quantité de biomasse foliaire a été significativement supérieure à la biomasse du témoin NT (respectivement 50 g et 60g en moyenne par plant de tomate). Cela montre que l’utilisation d’un extrait d’algue rouge selon l’invention permet de réduire l’infestation des nématodes, ce qui a eu une conséquence directe sur la quantité de biomasse foliaire produite par les plants de tomate, de façon dose dépendante. Les résultats montrant le contenu en chlorophylle des tissus foliaires des plants de tomate à jar+30 sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), les plants de tomates présentaient un contenu en chlorophylle de 46 UA (Unité Arbitraire) en moyenne par plant de tomate. Lorsque les solutions concentrées à 15,8 g/L et à 31,6 g/L ont été appliquées, le contenu en chlorophylle était respectivement de 48 UA et de 52 UA en moyenne par plant de tomate. Cette augmentation du contenu en chlorophylle des tissus foliaires est corrélée à l'augmentation de la biomasse foliaire. Exemple 4 : Mise en évidence, en serres expérimentales (i.e. en conditions contrôlées), des effets d’un extrait d’algue rouge sur l’infestation de plants de betterave infectés par des larves de nématodes Heterodera schachtii au stade de développement L2 et effet sur la production de kystes par les larves de nématodes Heterodera schachtii Conditions expérimentales L’essai a été réalisé en serre expérimentale de recherche afin d’évaluer l’efficacité d’un extrait d’algue rouge préparé selon l’Exemple 1 sur des plants de betterave ( Beta vulgaris ) transférés dans un sol sableux infestés par 100-150 larves et kystes de Heterodera schachtii pour 100 mL de sol sableux. La variété de betterave utilisée pour cet essai était la variété Fiametta , qui est sensible à l'attaque de Heterodera schachtii . Ce nématode infeste les racines de betterave pour s'y reproduire, altérant ainsi la biomasse foliaire, de la biomasse racinaire, et du contenu en chlorophylle. En découle une altération de la production et la qualité des betteraves. Heterodera schachtii présente la particularité de produire à l'issu de son cycle d'infestation complet, une nouvelle génération de kystes. Cette génération de kystes produira des larves qui à leur tour infestera les plants de betterave. L’extrait concentré d’algue rouge préparée selon l’Exemple 1 a été diluée dans de l’eau afin d’obtenir une première solution à une concentration de 15,8 g d’extrait concentré par litre de solution (g/L) (comprenant 1,58 % d’extrait concentré) et une seconde solution à une concentration de 31,6 g/L (comprenant 3,16% d’extrait concentré). Les deux solutions ont été appliquées 2 jours après le stade de semis (jas+2) des graines de betterave, à jas+4, à jar+7, à jar+6, à jar+10 et à jar+13. 4 blocs indépendants ensemencés avec des graines de betterave variété Fiametta ont été testés pour chaque modalité. A la fin de l'essai (jar+36), les racines des plants de betterave ont été récupérées et la quantité de kystes produite a été déterminée. Parallèlement, la hauteur des plants de betterave, la biomasse foliaire et la biomasse racinaire ont également été mesurées à la fin de l'essai. De même, le contenu en chlorophylle a été déterminé. Résultats Les résultats montrant le nombre de kystes de Heterodera schachtii produit à l'issu de l'essai, à jar+36, sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), le nombre moyen de kystes produits était de 35 kystes pour 100 mL de sol. Lorsque les solutions à 15, 8 g/L et à 31,6 g/L ont été appliquées, le nombre moyen de kystes produit était respectivement de 26 kystes et de 23 kystes. Cette diminution du nombre de kystes produits, traduit une réduction significative du nombre de larves au stade de développement L2 ayant infectées les racines de betteraves suite au traitement avec les deux solutions, de façon dose dépendante. Les résultats montrant la quantité de biomasse foliaire des plants de betterave à jar+36 sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), les plants de betterave ont développé une biomasse foliaire de 23 g en moyenne par plant. Lorsque les solutions à 15,8 g/L et à 31,6 g/L ont été appliquées, la quantité de biomasse foliaire produite était respectivement de 24 g et de 24,5 g en moyenne par plant de betterave. Cette augmentation de la quantité de biomasse foliaire par rapport au témoin NT traduit indirectement une réduction de l'intensité de l'attaque des larves et œufs du nématode Heterodera schachtii . Les résultats montrant la quantité de biomasse racinaire des plants de betterave à jar+36 sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), les plants de betterave ont développé une biomasse racinaire de 15 g en moyenne par plante. Lorsque les solutions à 15,8 g/L et à 31,6 g/L ont été appliquées aux plants de betterave, la quantité de biomasse racinaire produite était respectivement de 15,5 g et de 15,7 g en moyenne par plant de betterave. Cette augmentation de la quantité de biomasse racinaire produite traduit indirectement une réduction de l'intensité de l'attaque des larves et œufs du nématode Heterodera schachtii . Les résultats montrant le contenu en chlorophylle des tissus foliaires des plants de betterave à jar+36 sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), les plants de betterave présentaient un contenu en chlorophylle de 220 UA en moyenne par plante. Lorsque les solutions à 15,8 g/L et à 31,6 g/L ont été appliquées aux plants, le contenu en chlorophylle était respectivement de 260 UA et de 265 UA en moyenne par plant de betterave. Cette augmentation du contenu en chlorophylle des tissus foliaires découle de l'augmentation de la biomasse foliaire produite consécutive à l’utilisation d’un extrait d’algue rouge, de façon dose dépendante. Exemple 5 : Mise en évidence, en plein champ, d’un extrait d’algue rouge sur l’infestation de plants de pomme de terre infectés par des larves de nématode de Meloidogyne spp .au stade de développement L2 Conditions expérimentales L’essai a été réalisé en plein champ, sur des parcelles préalablement sélectionnées pour la présence de nématodes Meloidogyne incognita , de façon à évaluer l’efficacité de l’extrait d’algue rouge préparé selon l’Exemple 1 sur des plants de pomme de terre ( Solanum tuberosum ). La variété de pomme de terre utilisée pour cet essai était la variété AGRIA , variété sensible à l'attaque de Meloidogyne incognita . Ce nématode infeste les racines de pomme de terre, provoquant la formation de galle sur les racines, et réduisant indirectement le développement du plant de pomme de terre, la biomasse aérienne du plan de pomme de terre, l'efficacité de l'activité photosynthétique (contenu en chlorophylle des feuilles) et donc la qualité de la production. L’extrait concentré d’algue rouge préparée selon l’Exemple 1 a été diluée dans de l’eau afin d’obtenir une première solution à une concentration de 30 g d’extrait concentré par litre de solution (g/L) (comprenant 3 % d’extrait concentré) et une seconde solution à une concentration de 60 g/L (comprenant 6% d’extrait concentré). Les deux solutions ont été appliquées 1 jour après le stade semis, (jas+1), à jar+15, à jar+30, à jar+45 et à jar+60. L'indice de galle est un système de mesure de notation du niveau d'infestation d'une racine par les larves au stade de développement L2 des nématodes à galle, de type Meloidogyne incognita , comme décrit dans l’Exemple 3. Le nombre de larves de nématodes du genre Meloidogyne a été déterminé dans des échantillons de sol. Le contenu en chlorophylle des tissus foliaires des plants de pommes de terre à jar+44 (BBCH40) a été déterminé. Enfin, les tubercules de pomme de terre ont été récupérés et classés, en fonction de leur calibre. Résultats Les résultats montrant l'indice de galle, à jar+57 (BBCH43), sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement, l’indice de galle était de 3,0. Lorsque les solutions à 30 g/L et à 60 g/L ont été appliquées aux plants de pomme de terre, l’indice de galle était respectivement de 0,6 et de 0,5. Cette diminution de l'indice de galle montre l’effet de l’extrait d’algue rouge aux deux concentrations testées. Les résultats montrant la quantité de nématodes présents dans les sols à la récolte (jas+108; BBCH49) sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement, les échantillons de sol contenaient une population de nématodes à la récolte quatre fois supérieure à la population de nématodes le jour du semi (210 larves à la récolte de nématode contre 55 larves le jour du semis). Cette valeur du nombre de larves reflète l'intensité de l’infestation en absence de traitement. Lorsque les solutions à 30 g/L et à 60 g/L ont été appliquées, la quantité de nématodes était respectivement de 110 larves de nématode à la récolte contre 60 larves au semis (soit une dynamique de reproduction de 1,5) et de 120 larves de nématode à la récolte contre 85 larves au semis (soit une dynamique de reproduction de 1,4). Les résultats montrant le contenu en chlorophylle des tissus foliaires des plants de pommes de terre à jar+44 (BBCH40) sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), les plants de pommes de terre présentaient un contenu en chlorophylle de 42 UA en moyenne par plant. Lorsque les solutions à 30 g/L et à 60 g/L ont été appliquées aux plants, le contenu en chlorophylle était respectivement de 48 UA et de 61 UA. Les résultats montrant le rendement à la récolte à jar+108 sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), le rendement en pomme terre a atteint la valeur de 30 Kg de pomme de terre pour 20 mètres linéaires. Lorsque les solutions à 30 g/L et à 60 g/L ont été appliquées aux plants, le rendement en pomme de terre était respectivement de 38,3 Kg de pomme de terre pour 20 mètres linéaires et de 38,6 Kg de pomme de terre pour 20 mètres linéaires. Exemple 6 : Mise en évidence, en plein champ, des effets d’un extrait d’algue rouge sur l'infestation de plants de pomme de terre par des nématodes des genres Globodera pallida et Globodera rostochiensis . Conditions expérimentales Un essai visant à évaluer l’efficacité d’un extrait d’algue rouge préparé selon l’Exemple 1 sur une culture de pomme de terre variété Agata en plein champ, a été réalisé sur une parcelle présentant des taux d'infestation à Globodera rostochiensis de 24,7 kystes pour 100mL de sol et de 23,7 kystes de Globodera pallida pour 100 mL de sol. La variété de pomme de terre utilisée était la variété Agata , variété sensible à l'attaque des deux nématodes à kyste susmentionnés. Les larves au stade de développement L2 infestent les tubercules et les jeunes racines de pomme de terre, s'y reproduisent, altérant ainsi la production et la qualité de la pomme de terre (biomasse foliaire, biomasse racinaire, contenu en chlorophylle). Ces nématodes à kyste présentent la particularité de produire à l'issu de leur cycle d'infestation complet, une nouvelle génération de kystes. Cette génération de kystes produira des larves qui à leur tour infesteront les plants de pomme de terre. L’extrait concentré d’algue rouge préparée selon l’Exemple 1 a été diluée dans de l’eau afin d’obtenir une première solution à une concentration de 30 g d’extrait concentré par litre de solution (g/L) (comprenant 3 % d’extrait concentré) et une seconde solution à une concentration de 60 g/L (comprenant 6% d’extrait concentré). Les deux solutions ont été appliquées au stade du semis des tubercules de pomme de terre (jas+10), à jas+20, à jas+30, à jas+35, à jas+40. Le dispositif expérimental a été réalisé selon un plan en bloc de Fisher à quatre répétitions totalement aléatoires dans le champ. A la récolte, les racines tubercules de pommes de terre ont été récupérées et classées en fonction de leur calibre. La quantité de kystes dans le sol a été déterminée à la récolte. De même, le rapport Pf/Pi a été déterminé. Le rapport Pf/Pi (nombre de kystes dénombrés à la récolte Pf, divisé par le nombre de kystes dénombrés au stade de semis Pi) renseigne sur l'efficacité du traitement à perturber le cycle infectieux du nématode, et à réduire la quantité de kystes présents dans le sol à l'issue de la récolte. Le rendement en pomme de terre a également été déterminé. Enfin, les tubercules de pomme de terre ont été récupérés et classés en fonction de leur calibre. Résultats Les résultats présentant le nombre de kystes de Globodera rostochiensis et de Globodera pallida produit à l'issu de l'essai, à la récolte, sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), le nombre moyen de kystes dénombrés était de 26 et 29 kystes pour 100 mL de sol pour Globodera rostochiensis et Globodera pallida respectivement. Lorsque la solution à 30 g/L a été appliquée aux plants, le nombre de kystes dénombrés était de 22 et 17 kystes pour 100 mL de sol pour Globodera rostochiensis et Globodera pallida respectivement. Lorsque la solution à 60 g/L a été appliquée aux plants, le nombre de kystes dénombrés était de 19 et 12 kystes pour 100 mL de sol, pour Globodera rostochiensis et Globodera pallida respectivement . Cette diminution du nombre de kystes montre la réduction du nombre de larves au stade de développement L2 ayant infecté les racines des plants de pomme de terre, consécutivement à l’utilisation d’un extrait d’algue rouge selon l’invention. Les résultats présentant le ratio Pf/Pi du nombre de kystes de Globodera rostochiensis et de Globodera pallida produits à l'issu de l'essai, à la récolte, sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), le Pf/Pi était de 1,2 pour Globodera rostochiensis et Globodera pallida . Lorsque la solution à 30 g/L a été appliquée aux plants, le ratio Pf/Pi du nombre de kystes était de 1 et 0,7 pour Globodera rostochiensis et Globodera pallida respectivement. Lorsque la solution à 60 g/L a été appliquée aux plants, le ratio Pf/Pi du nombre de kystes était de 0,8 et 0,6 pour Globodera rostochiensis et Globodera pallida respectivement. Cette diminution significative du ratio Pf/Pi montre l’effet d’un extrait d’algue rouge vis-à-vis des nématodes Globodera rostochiensis et Globodera pallida . Les résultats montrant le rendement à la récolte sont présentés en . Ils montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), le rendement en pomme de terre atteignait 31 tonnes/ha. Lorsque les solutions à 30 g/L et à 60 g/L ont été appliquées aux plants, le rendement était respectivement de 39 tonnes/ha et de 41 tonnes/ha. Cette augmentation du rendement traduit indirectement une réduction de l'intensité d'attaque des nématodes Globodera rostochiensis et Globodera pallida , consécutive à l’utilisation d’un extrait d’algue rouge selon l’invention. Les résultats montrant la qualité de la récolte sont présentés en . Ici, la qualité de la récolte a été caractérisée par le calibre des tubercules de pommes de terre à la récolte. Plus le calibre est élevé, meilleure est la qualité de la récolte. Les résultats obtenus montrent qu’en absence de traitement (Témoin non traité; témoin NT), la proportion de tubercules de calibre inférieur à 40 mm était de 15%. Pour le témoin, la proportion de tubercules de calibre comprise entre 40 et 50 mm, entre 50 et 60 mm, puis supérieur à 60 mm, était respectivement de 11%, 4 et 2%. Lorsque les solutions à 30 g/L et à 60 g/L ont été appliquées aux plants, on a constaté une plus grande proportion de tubercules de calibre supérieur à 40 mm (voir tableau 2, respectivement 23% et 27% contre 17% pour le témoin). Calibre des tubercules de pommes de terre Condition Témoin Nombre de tubercules en % Solution d’extrait à 30 g/L Nombre de tubercules en % Solution d’extrait à 60 g/L Nombre de tubercules en % inférieur à 28 mm 10% 7% 6% compris entre 28 et 40 mm 5% 9% 10% entre 40 et 50 mm 11% 17% 22% entre 50 et 60 mm 4% 4% 3% supérieur à 60 mm 2% 2% 2% Utilisation d’un extrait d’algue rouge comme agent nématostatique vis-à vis des nématodes et/ou comme agent nématicide vis-à-vis des nématodes. Procédé de traitement d’un sol destiné à favoriser la croissance d’une plante en réduisant l’accès des nématodes aux racines de ladite plante ou en éliminant les nématodes présents dans ledit sol, ledit procédé comprenant l’apport audit sol d’un extrait d’algue rouge. Utilisation selon la revendication 1 ou procédé selon la revendication 2, caractérisée en ce que l’algue rouge est choisie parmi Porphyra spp , Porphyra columbina , Porphyra acanthophora , Porphyra tenera , Porphyra perforata , Porphyra vietnamensis , Porphyra rosengurttii , Porphyra yezoensis , Porphyra haitanensis , encore plus préférentiellement Porphyra spp ou Porphyra columbina . Utilisation ou procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que l’extrait d’algue rouge est obtenu par extraction aqueuse à un pH acide. Utilisation ou procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que l’extrait d’algue rouge est obtenu par extraction aqueuse à un pH compris entre 1 et 7, de préférence entre 2 et 6, encore plus préférentiellement entre 2 et 5. Utilisation ou procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que l’extrait d’algue rouge est obtenu par extraction aqueuse à une température comprise entre 10 et 50°C, préférentiellement entre 20 et 50°C. Utilisation ou procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que les nématodes sont des nématodes pathogènes, de préférence choisis parmi les familles des Anguinidae , des Longidoridae , des Tylenchulidae , des Pratylenchidae , des Hoplolaimidae , des Tylenchulidae , des Trichodoridae , des Heterodoridae , et des Meloidogynidae . Procédé selon l’une quelconque des revendications 2 à 7, dans lequel l’extrait est apporté au sol au stade du semis, au stade de pré-émergence de la plante et/ou au stade de post-émergence de la plante. Procédé selon l’une quelconque des revendications 2 à 8, dans lequel l’extrait est apporté au sol en une quantité allant de 1 à 50 kg/ha, de préférence allant de 1 à 10 kg/ha, de préférence environ 5 kg/ha. Utilisation ou procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 9, dans lequel la plante est choisie parmi la betterave, le maïs, le blé dur, le colza, la carotte, la pomme de terre, les solanacées, les cucurbitacées, la laitue ou la vigne. Procédé selon l’une quelconque des revendications 2 à 10, ne comprenant pas l’apport audit sol d’un acide autre que les acides naturellement présents dans l’algue rouge utilisée pour préparer l’extrait d’algue rouge, de préférence le procédé ne comprend pas l’apport audit sol d’un acide carboxylique, par exemple un acide carboxylique choisi parmi l’acide formique, l’acide acétique, l’acide lactique, l’acide citrique, l’acide oxalique, l’acide propionique, l’acide malique, l’acide tartrique, l’acide fumarique, l’acide gluconique, l’acide sorbique et l’acide butyrique. Utilisation ou procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce que l’extrait d’algue rouge est dépourvu d’acide autre que les acides naturellement présents dans l’algue rouge utilisée pour préparer l’extrait d’algue rouge. Utilisation ou procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 12, caractérisé en ce que l’extrait d’algue rouge est dépourvu d’acide carboxylique. Utilisation ou procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 13, caractérisé en ce que l’extrait d’algue rouge est dépourvu d’acide carboxylique choisi parmi l’acide formique, l’acide acétique, l’acide lactique, l’acide citrique, l’acide oxalique, l’acide propionique, l’acide malique, l’acide tartrique, l’acide fumarique, l’acide gluconique, l’acide sorbique et l’acide butyrique. Utilisation ou procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 14, caractérisé en ce que l’extrait d’algue rouge est dépourvu d’acide formique.