Brevet FR3105924A1 — publié le 20210709

La présente invention se rapporte à l'utilisation cosmétique ou dermatologique d’ulvanes purifiés ou d’un extrait d’algues comprenant des ulvanes, en tant que principe actif renforçant, au niveau de l’épiderme, l’effet barrière, la cohésion cellulaire, la plasticité, l’élimination des cellules mortes et l’homéostasie de l’épiderme, en particulier pour lutter contre les stress, le vieillissement et le photo-vieillissement. L’invention se rapporte également à un principe actif particulier issu de l’algue Ulva armoricana ainsi que des compositions cosmétiques renfermant ce principe actif et à un procédé cosmétique de soin cutané afin de préserver ou de restaurer la caractéristique « plastifiante et barrière» de l’épiderme et de garder à la peau sa souplesse et sa fluidité de mouvement. PRINCIPE ACTIF COSMETIQUE ISSU D’ALGUES DE LA CLASSE DES ULVOPHYCEES RENFORÇANT L’EFFET BARRIERE, LA PLASTICITE, LA DESQUAMATION ET L’HOMEOSTASIE DE L’EPIDERME, COMPOSITION L’INCLUANT ET UTILISATION La présente invention se rapporte à l'utilisation cosmétique ou dermatologique d’un extrait d’algues comprenant des ulvanes, en tant que principe actif cosmétique ou dermatologique renforçant, au niveau de l’épiderme, l’effet barrière, la cohésion cellulaire, la plasticité, l’élimination des cellules mortes et l’homéostasie de l’épiderme. La peau constitue l’interface entre l’organisme et l’environnement extérieur. Sa raison d’être est d’assurer une mission de protection en formant une véritable barrière. En effet, le tissu cutané est quotidiennement soumis à de multiples agressions, qu’elles soient d’ordre physique (facteurs mécaniques, thermiques, rayonnements UV, etc.), chimique (tensioactifs, solvants, allergènes, etc.) ou biologique (agents infectieux). Cette barrière cutanée est en grande partie assurée par la couche la plus superficielle de la peau, l’épiderme. On parle alors de « barrière épidermique ». L’épiderme est formé de plusieurs couches cellulaires s’étendant de la couche basale à la couche cornée, chaque couche comprenant des kératinocytes à différents stades de différenciation. Ainsi, l’épiderme joue un rôle de barrière hydrique, physique, antioxydante, photoprotectrice mais également antimicrobienne. En plus de cette fonction d’obstacle à la pénétration d’éléments extérieurs, la peau est un élément qui est soumis quotidiennement à une variété dramatique de mouvements dynamiques, notamment des étirements, des compressions et des torsions qui conduisent avec le temps et les agressions à une perte de la plasticité de la peau et à l’apparition de rides. La couche cornée, qui comprend des cornéocytes résultant du processus de différentiation des kératinocytes, joue à ce niveau un rôle primordial pour à la fois résister et suivre ce mouvement. Elle doit permettre à la peau de subir une gamme de mouvements, se contractant et s'étirant. La couche cornée avec ses cornéocytes est ainsi un système dynamique qui assure la résistance mécanique et la plasticité de la barrière épidermique. Deux protéines, l’involucrine et la cornifine (Small proline-rich protein 1 ou SPRR1), constitutives de l’enveloppe du cornéocyte, vont jouer un rôle essentiel dans le rôle de barrière et de plasticité de l’épiderme. Afin de remplir ce rôle de barrière, les kératinocytes épidermiques doivent mener à bien un programme de différenciation strictement réglementé, au cours duquel ils initient la synthèse des principaux composants structurels indispensables à l'assemblage de l'enveloppe cellulaire cornée. Ce programme est caractérisé par la migration de kératinocytes épidermiques de la couche basale, site de prolifération, à travers des couches suprabasales se terminant par la couche cornée. Lors des étapes terminales de la différenciation épidermique, les kératinocytes subissent d’importants changements morphologiques avec notamment le remplacement de la membrane plasmique par une coque protéique rigide et insoluble, l’enveloppe cornée. Cette enveloppe cornée se met en place progressivement. La phase d’initiation a lieu sous la membrane plasmique des kératinocytes épineux. Deux protéines structurelles, l'involucrine et la cornifine jouent un rôle essentiel dans la formation de la couche cornée du cornéocyte. L’enveloppe du cornéocyte est ainsi une structure spécialisée qui renforce la membrane plasmique des kératinocytes lorsqu’ils arrivent à leur stade de différenciation finale. Ainsi, cette structure hautement résistante contribue aux propriétés biomécaniques et plastiques de la couche cornée. Par ailleurs, il est extrêmement important que l'épaisseur de la couche cornée soit maintenue dans l'homéostasie. Une couche cornée trop mince ou trop épaisse peut entraîner des désordres cutanés. La peau doit donc en quelque sorte équilibrer l'apport de nouvelles cellules dans le processus de différenciation avec l’élimination des cellules épuisées formant des squames à la surface via la desquamation. Cette barrière épidermique doit, pour rester efficace, remplacer sans cesse ses squames par de nouvelles cellules fraîches. L'exfoliation des cornéocytes de la surface de la peau est facilitée par l'action d'enzymes hydrolytiques spécifiques dans la couche cornée, telles que la Kalikréine 7, qui dégradent les liaisons cornéodesmosomales par hydrolyse. Les cornéocytes constituent une barrière efficace à l'environnement qui est sans cesse renouvelée. Les effets les plus évidents du vieillissement sur l'épiderme sont son amincissement et une altération de la récupération de la barrière épidermique après des dommages. Avec l’âge et les agressions externes, la peau subit une altération de la récupération de la barrière épidermique. Cette altération affecte les mécaniques de la couche cornée qui se rigidifient et se fragilisent. Elle a alors tendance à se fissurer et à se fendre. Au fil du temps, la peau passe d'éclatante et souple à terne tout en perdant de son élasticité. Les propriétés physiques de la peau se modifient, l’épiderme dans son ensemble s’amincit, la couche cornée s’épaissit et devient irrégulière. Pendant ce temps les cellules de la couche cornée se desquament avec plus de difficultés et s’agglutinent à la surface de la peau. Leur mauvaise cohésion rend la surface de la peau de plus en plus terne. Il est donc important de préserver ou de restaurer la caractéristique « plastifiante et barrière» de l’épiderme afin que la peau conserve sa souplesse et sa fluidité de mouvement. Elle doit être capable de subir au quotidien des déformations continues, sans rupture et sans relaxation, afin de réduire l’apparition de rides. On sait que les extraits d’algues, en raison de leurs propriétés variées, ont été proposés dans de nombreuses applications cosmétiques. On sait que les ulvanes, polysaccharides sulfatés constitutifs de la paroi cellulaire de certaines algues vertes présentent un large éventail d’activités biologiques (antitumorale, antiproliférative, antibactérienne, anticoagulante, antihyperlipidemique, antivirale et immunomodulatrice). Ces ulvanes se définissent comme des polysaccharides anioniques fortement sulfatés, essentiellement composés de rhamnose, glucose, xylose, galactose et d’acides uroniques (acide glucuronique et acide iduronique). La demande de brevet FR3057770 A1 décrit l’utilisation d’ulvanes dépolymérisés de poids moléculaire moyen inférieur à 5000 daltons augmentant la production d’acide hyaluronique par les fibroblastes dermiques. La demande de brevet FR3047179 A1 décrit l’utilisation d’ulvanes dans les troubles de la coagulation. La demande de brevet EP3142749 A1 décrit l’utilisation des ulvanes dans des compositions utilisées pour le traitement de l’arthrite. Cependant, à la connaissance des inventeurs, les ulvanes ou un extrait d’algues comprenant des ulvanes n’ont jamais été utilisés pour améliorer la plasticité, la cohésion cellulaire et la desquamation au niveau de l’épiderme. L’objectif de la présente invention est de proposer une solution cosmétique ou dermatologique efficace capable de préserver, renforcer ou restaurer les fonctionnalités de l’épiderme telles que la cohésion cellulaire, la plasticité, l’effet barrière, la desquamation et l’homéostasie de l’épiderme. A cet effet, l’invention concerne l’utilisation d’ulvanes purifiés ou d’un extrait d’algues de la classe des ulvophycées et des genres Ulva, Enteromorpha ou Monostoma , ledit extrait comprenant des ulvanes, en particulier un extrait d’algues vertes du genre ulva, ou bien encore d’une composition cosmétique les contenant, pour le renforcement, la préservation ou la restauration de la cohésion cellulaire, de la plasticité, de l’effet barrière, de la desquamation et de l’homéostasie de l’épiderme. Au sens de l’invention, on entend par « extrait d’algues comprenant des ulvanes » au moins une molécule d’ulvane ou d’équivalent d’ulvane, ou un ensemble de plusieurs molécules incluant des ulvanes ou des équivalents d’ulvane, obtenues à partir d'une matière première algale. Il peut s’agir d’extraits d’algues présentant des degrés de purification variables. On entend par « ulvanes purifiés », des molécules d’ulvanes ou d’équivalent d’ulvane qui ont été extraites d’algues et purifiées et qui ne se trouvent pas en mélange avec d’autres molécules de nature différente. On entend par « équivalent d’ulvane » (traduit de l’expression anglaise « ulvane like ») des polysaccharides de composition en oses similaire aux ulvanes et notamment remarquables en ce que le rhamnose sulfaté est majoritaire dans cette composition. La présente invention est ainsi basée sur la découverte inattendue qu’un extrait d’algues comprenant des ulvanes ou d’ulvanes extraits d’algues et purifiés, , notamment d’ulvanes contenus dans des extraits d’algues vertes de la classe des ulvophycées, présente des effets notables au niveau épidermique avec des propriétés cosmétiques et dermatologiques très intéressantes pour renforcer la barrière épidermique contre les agressions extérieures et les stress oxydatifs, la cohésion cellulaire, l’élimination des cornéocytes en voie de desquamation ainsi que pour préserver la plasticité de l’épiderme. En effet, de manière surprenante et inattendue, l’auteur de la présente invention a mis en évidence un effet stimulant de tels extraits sur l’expression de l’involucrine, de la cornifine (Small proline-rich protein 1 ou SPRR1) et de la hème oxygénase 1 (HO-1) chez les kératinocytes. Les SPRR 1(petites protéines riches en proline) sont en effet essentielles à la différenciation terminale des kératinocytes et à la formation de l’enveloppe cornée. Au cours de la différenciation tardive, les SPRR sont exprimées avec d'autres gènes qui codent pour des protéines telle que l'involucrine. Dans les couches les plus externes de la peau, ces protéines sont réticulées à la périphérie de la cellule par des transglutaminases. Avec les lipides, ils forment l’enveloppe cornée sous la membrane des kératinocytes. En tant que partie intégrante de l’enveloppe cornée, les SPRR sont donc impliqués dans la fonction de barrière et la stabilité mécanique de l'épiderme. Ils interviennent également comme piégeurs d'espèces réactives de l'oxygène vis à vis des stress oxydatifs, avec une fonction importante sur les bords des plaies. L’involucrine (IVL) est un autre composant de l’enveloppe cornée (CE). C'est un composant précoce dans l'assemblage de l’enveloppe cornée qui fournit un échafaudage auquel d'autres protéines deviennent ensuite réticulées. Dans la structure de l’enveloppe cornée, l'involucrine est adjacente à la membrane cellulaire. La protection de cette barrière épidermique dynamique est également assurée par la stimulation de la hème oxygénase 1 (HO-1). En effet, la hème oxygénase-1 remplit une double fonction en tant qu'enzyme métabolique majeure dans le renouvellement de l'hème et comme protéine de stress inductible dans les cellules. HO-1 reconnue comme une protéine de stress cellulaire omniprésente exerce un rôle majeur dans les mécanismes de défense cellulaire et la protection contre le stress oxydatif. Elle joue également un rôle central dans l'homéostasie tissulaire. L'activité HO-1 fournit une fonction antioxydante en accélérant l'élimination de l'hème pour limiter le stress oxydatif. Involucrine et la SPRR 1 vont ainsi renforcer la cohésion cellulaire ainsi que préserver ou restaurer la plasticité de l’épiderme. HO-1 et SPRR1 vont agir en complément contre les stress oxydatifs afin de préserver l’intégrité et la plasticité de l’épiderme. Un autre point remarquable de la présente invention est la contribution importante des ulvanes ou d’extrait d’algues comprenant des ulvanes, selon la présente invention, sur l’élimination des cornéocytes en voie de desquamation, grâce à son effet stimulant sur l’expression du gène et de la protéine Kalikréine 7 (KLK7). En effet, pour maintenir l’homéostasie de la fonction de barrière épidermique, les cornéocytes anciens et non fonctionnels doivent être éliminés par la desquamation, via la dégradation des cornéodesmosomes par une cascade protéolytique de peptidases liées à la kalikréine (KLKs). KLK7 va agir comme exfoliant doux pour éliminer les cellules mortes et améliorer l'aspect de la surface de la peau. Dans l’un des modes de réalisation de l’invention, l’extrait d’algues comprenant des ulvanes est un extrait hydrosoluble d’une algue de la classe des ulvophycées et des genres Ulva, Enteromorpha ou Monostoma . Selon un mode de réalisation de l’invention, les extraits précités sont extraits d'algues choisies dans le groupe constitué des espèces suivantes : Ulva armoricana , Ulva rigida , Ulva rotundata , Ulva lactuca , Ulva compressa, Enteromorpha intestinalis et Monostroma nitidum de préférence Ulva armoricana, Enteromorpha intestinalis et Monostroma nitidum . Préférentiellement, ledit extrait est obtenu à partir de chlorophycées choisies dans le genre des Ulva, et encore plus préférentiellement ledit extrait est obtenu à partir de Ulva armoricana. Préférentiellement, l’extrait d’algues contient au moins 15%, en poids par rapport au poids total d’extrait sec, d’ulvanes. Préférentiellement encore, lesdits ulvanes purifiés ou contenus dans ledit extrait d’algues sont sous une forme non hydrolysée. Il s’agit donc d’ulvanes de forme native. Selon un mode de réalisation de l’invention, les ulvanes présentent un poids moléculaire d’au moins 50 KDa, préférentiellement d’au moins 60 KDa, plus préférentiellement encore d’au moins 90 KDa. Selon encore un mode de réalisation de l’invention, lesdits ulvanes purifiés ou ledit extrait d’algues contenant des ulvanes présentent au moins l’une des caractéristiques suivantes, les pourcentages étant en poids par rapport au poids sec de l’extrait, ou par rapport au poids sec d’ulvanes purifiés : une teneur en acide glucuronique compris entre 0,5 et 30%, préférentiellement entre 1 et 10%. une teneur en acide iduronique comprise entre 0,5 et 30%, préférentiellement entre 2 et 15%. une teneur en rhamnose comprise entre 1 et 45%, préférentiellement entre 3 et 15%. une teneur en xylose comprise entre 0,1 et 15%, préférentiellement entre 0,15 et 5%. une teneur en glucose comprise entre 1et 30%, préférentiellement entre 3 et 15%. une teneur en galactose comprise entre 0,05 et 10%, préférentiellement entre 0,1 et 5%. Selon un mode de réalisation de l’invention, lesdits ulvanes purifiés ou ledit extrait d’algues contenant des ulvanes, sont utilisés pour la stimulation de l’expression génomique et/ou protéomique de l’involucrine, de la petite protéine riche en proline 1, de la hème-oxygénase 1 et de la kalikréine 7 chez les kératinocytes. Selon un autre mode de réalisation de l’invention, lesdits ulvanes purifiés ou ledit extrait d’algues contenant des ulvanes, sont utilisés pour la protection de l’épiderme vis à vis des stress oxydatifs, notamment vis à vis de la pollution urbaine, du soleil, tabac ou lumière bleue. L’invention concerne également une composition cosmétique et/ou dermatologique, caractérisée en ce qu’elle comprend entre 0,001 et 50%, préférentiellement entre 0,01 et 5%, plus préférentiellement entre 0,03 et 0,5% en poids, exprimé en matière sèche, du poids total de la préparation, d’au moins un extrait d’algues comprenant des ulvanes ou d’au moins un ulvane purifié. Selon un des modes de réalisation de l’invention, ladite composition cosmétique et/ou dermatologique se présente sous forme de crème d’une émulsion huile dans eau, d’une émulsion eau dans huile, d’une émulsion multiple, d’une solution, d’un gel, d’une suspension ou d’une poudre. L’invention concerne encore un procédé de traitement cosmétique pour lutter contre le vieillissement cutané caractérisé en ce qu'il consiste à appliquer sur la peau une composition comprenant au moins un extrait d’algues de la classe des ulvophycées comprenant des ulvanes ou au moins un ulvane purifié tels que définis. De façon préférentielle, ledit ulvane purifié ou l’extrait d’algues contenant des ulvanes est obtenu par une extraction. Un extrait d’algues, comprenant des ulvanes ou un ulvane purifié utiles dans le cadre de la présente invention, peut être obtenu à partir de certaines espèces d’algues par un procédé comportant généralement les étapes suivantes : lavage, broyage, extraction assistée par enzymes ou par ultrasons, extraction (séparation solide-liquide) et éventuellement fractionnement et concentration. De tels procédés sont bien connus de l’homme du métier. Les conditions d’extraction et la nature des algues seront choisies de telle façon que l’extrait obtenu présente la concentration souhaitée. Ces choix pourront donc être facilement réalisés par l’homme de métier notamment en tenant compte des indications générales suivantes. L’extrait obtenu peut être plus ou moins concentré selon l’utilisation envisagée. Une déshydratation totale de cet extrait permettant une présentation sous forme pulvérulente hydrosoluble peut être obtenue, par exemple, par sécheur à tambour ou par atomisation. L’invention sera illustrée par les exemples non-limitatifs suivants. Exemples de préparations d’extraits d’algues comprenant des ulvanes conformes à la présente invention : Exemple 1 : Un extrait d’Ulva armoricana enrichi en ulvanes a été obtenu en suivant le protocole expérimental ci-après : Extraction 40 kg d’algues broyées sont dispersés dans 100 kg d’une solution aqueuse et portés à une température de 90°C dans un réacteur chauffant. L’ensemble est maintenu à cette température pendant une durée d’environ 2 heures. Une extraction assistée par enzyme peut être également réalisée en préalable à l’étape d’extraction, à partir par exemple d’une préparation d’une endoprotéase Protamex® (Novozymes) (6%, p / p). La préparation est ajoutée à raison de 6%. L’hydrolyse enzymatique est menée pendant 6 heures à 35°C. L’extraction assistée par enzyme est ensuite stoppée en inactivant l'enzyme pendant 10 min à 80° C (dénaturation). Il convient de noter que cette étape d’hydrolyse enzymatique n’a pas pour effet d’hydrolyser les ulvanes. L’opération de séparation intervient à l’issue des 2 heures d’extraction. Séparation et concentration La fraction soluble riche en ulvanes est séparée des débris d’algues par centrifugation (séparation solide-liquide) ou à l’aide d’un filtre à poche. L’extrait est ensuite filtré sur un filtre à terre de diatomées ou sur un filtre à plateaux, puis à nouveau filtré sur une membrane jusqu’à 1 µm. L’extrait ainsi préparé peut être utilisé sous une forme plus ou moins concentrée, la concentration finale étant déterminée en fonction de la teneur recherchée en dérivés actifs dans l’application envisagée. Ainsi, le filtrat mentionné précédemment peut être concentré, par exemple par ultrafiltration ou au moyen d’un évaporateur à flot tombant, de façon à ce que l’extrait sec représente de 10 à 20 % en poids de celui-ci. Une déshydratation totale peut également être obtenue, par exemple par sécheur à tambour ou par atomisation, lorsque l’on recherche une présentation sous forme pulvérulente hydrosoluble. Les ulvanes peuvent être également purifiés par précipitation à l’aide d’une solution d’éthanol (concentrée à 60-96%) de manière à obtenir une fraction contenant près de 100% en poids d’ulvanes dits purifiés. Détermination de la teneur en oses et en acides uroniques des extraits d’algues comprenant des ulvanes conformes à l’invention La fraction d’ulvanes est obtenue par extraction aqueuse d’algues fraîches (400 g d’algues fraîches / l d’eau). L’extraction est réalisée sous agitation à 90 °C pendant 2 heures. L’extrait est ensuite filtré sur une membrane de 0,2 um. Le solvant (eau) est évaporé pour obtenir une poudre hydrosoluble. La composition en oses et en acides uroniques de l’extrait (exprimée par rapport à la matière sèche) est réalisée sur les 6 espèces de chlorophycées sélectionnées parmi les 3 genres d’algues précédemment citées et prélevées à différents moments de l’année. Les résultats obtenus sont regroupés dans le tableau 1. Comme le montre ce tableau, les teneurs sont variables selon l’extrait de chlorophycées et selon la saison. Tableau 1 : Composition en oses et acides uroniques de l’extrait (exprimée par rapport à la matière sèche) Oses et acides uroniques % (de l’extrait sec) Monosaccharide GlcA IduA Gal Glc Xyl Rha ULVA armoricana 1-10 2-20 0,1- 5 3-15 0,1-5 3 -45 ULVA lactuca 1-10 1-8 0,05- 6 1-9 0,1- 4 5 - 35 ULVA compressa 3-20 1-10 0,1- 4 1- 8 0,1- 5 1-15 ULVA rotundata 2-20 0,5-5 0,1- 5 3-10 0,1 - 15 5-25 ENTEROMORPHA intestinalis 1-9 2-10 0,1 - 6 1 - 9 0,1 - 5 1 - 10 MONOSTROMA nitidum 2 - 15 0,5 - 8 0,05- 4 1- 25 0,1 - 9 5 - 24 GlcA : acide glucuronique ; IduA : acide iduronique ; Gal : galactose ; Glc : glucose ; Xyl : xylose ; Rha : rhamnose. EFFET BARRIERE, COHESION CELLULAIRE, PLASTICITE, EXFOLIANT ET HOMEOSTASIE DE L’EPIDERME. - Etude transcriptomique L'étude a été réalisée sur des cultures 2D in vitro de kératinocytes épidermiques humains normaux (NHEK) irradiés aux UV. Les effets de différents extraits sur l'expression de 4 gènes (Hème oxygénase 1 (HO-1), cornifine (SPRR1A), involucrine et la Kallikréine 7 (KLK7) ) impliqués dans la biologie épidermique sont évalués par qRT-PCR. 24h avant les traitements, les NHEK ont été ensemencés dans des flacons de culture. Les extraits sont ensuite solubilisés directement dans un milieu de culture pendant 18 heures. Après 18 heures de traitement, les cellules sont irradiées par des UVA à 5 J / cm2 (en l'absence des éléments à tester). Puis les extraits à tester sont réappliqués dans un milieu de culture pendant 6 heures supplémentaires. Le tableau 2 résume les effets significatifs des extraits d’Ulva armoricana, Ulva lactuca, Ulva compressa, Enteromorpha compressa et Monostroma nitidum sur l'expression des gènes. La valeur RQ est présentée: elle correspond à la quantification relative de l'expression du gène cible par rapport à la condition de contrôle (contrôle non traité irradié). Tableau 2: Expression des gènes après 24h de traitement des kératinocytes et une irradiation aux UVA effectuée après 18h de traitement. EXPRESSION GENE Quantification Relative (RQ) ESPECES SPRR1A IVL KLK7 H0-1 ULVA armoricana 2,1322 1,4934 2,1505 2,9629 ULVA lactuca 2,0567 1,0231 1,9785 2,7691 ULVA compressa 1,9845 1,1564 2,0563 2,8379 ENTEROMORPHA intestinalis 2,0567 1,3465 2,0378 2,5632 MONOSTROMA nitidum 2,0743 1,1307 2,0621 2,9164 L’augmentation de l'expression de SPRR1A, IVL et KLK7 permet de renforcer la cohésion entre les cornéocytes, d’améliorer la fonction de barrière du stratum corneum, la plasticité de l’épiderme et d’éliminer les cellules mortes. - Etude protéomique L'étude a été réalisée à l'aide de cultures de kératinocytes épidermiques normaux. Les kératinocytes NHEKs ont été ensemencés sur des lames de verre, 24h avant le traitement. Ils ont ensuite été traités pendant 72h avec les extraits à une concentration déterminée. A la fin des traitements, les kératinocytes NHEKs ont été fixés et mis en présence des anticorps primaires spécifiques des 3 protéines d'intérêt. Des anticorps secondaires conjugués à la fluorescéine ont ensuite été utilisés pour détecter les anticorps primaires. L’étude confirme au niveau des protéines, l'induction de l'expression des gènes observée lors de l’étude précédente, après le traitement des kératinocytes NHEK avec les extraits. Les résultats quantitatifs obtenus par rapport au témoin non traité sont résumés dans le tableau 3. Tableau 3 : Résultats de l’immunomarquage (valeur relative par rapport au témoin) EXPRESSION PROTEOMIQUE ESPECES SPRR1A IVL KLK7 ULVA armoricana 32X 26X 4X ENTEROMORPHA intestinalis 28X 22X 2X MONOSTROMA nitidum 26X 21X 3X Les 3 extraits appliqués pendant 72h sur le milieu kératinocytaire, ont tous entraîné une augmentation significative de l'expression de la cornifine, de l'involucrine et de la Kallikréine7, à la fin du traitement. Ces résultats confirment ainsi les effets de ces extraits sur la fonction de barrière cutanée à travers la formation de l’enveloppe cornée, le maintien ou le renforcement de la plasticité de l’épiderme et l’élimination des cellules mortes. Dans le cas de KLK7, une coloration de faible intensité observée à la fin du traitement indique un peeling doux avec les extraits, alors que la protéine n'est pratiquement pas détectée chez le témoin non traité. EFFET PROTECTEUR CONTRE LE STRESS OXIDATIF L’expression de HO-1 est considérée comme l’indicateur le plus sensible et le plus fiable du stress oxydatif cellulaire. Il a été démontré que l'irradiation par les rayons ultraviolets A et d'autres oxydants régulent positivement l'expression de l'ARNm de HO-1 dans la peau. L’activité anti-pollution a été réalisée à l’aide d’explants de peau humaine. Au jour 0 (J0), J1, J2 et J5 (4 heures avant l'exposition au polluant), les extraits ont été appliqués à la dose de 3% par voie topique. Les explants témoins n'ont reçu aucun traitement hormis le renouvellement du milieu de culture. Le milieu de culture a été renouvelé à moitié à J2 et à J5 (avant exposition au polluant) et complètement à J5 (après exposition au polluant). À J5, 4 heures après l'application du produit, les explants des lots ont été placés sur le système PolluBox®. Le polluant est un mélange de métaux lourds supplémentés en hydrocarbures polycycliques aromatiques et matière particulaire. À J6 (24 heures après l'exposition au polluant), les explants de chaque lot ont été recueillis. L'immunomarquage de HO-1 a été réalisé sur des coupes paraffinées avec un anticorps monoclonal anti-HO-1 et a été évalué par observation au microscope. Le pourcentage de surface colorée (% surface) pour chaque traitement est comparé à la condition non traitée. Les mêmes comparaisons sont effectuées pour les lots stressés avec ou sans traitement. Les résultats observés sont les suivants : Au jour 0, sur le témoin T0, la coloration de HO-1 est faible à modérée dans l’épiderme. A J6, sur le témoin « non pollué » (TJ6), l'expression de HO-1 est modérée dans l'épiderme. A J6, sur les explants « non pollués », l’application des extraits induit une légère diminution de l’expression de HO-1, témoignant d’un effet sur l’oxydation cellulaire basale. A J6, l'exposition aux polluants induit une augmentation nette de l'expression de HO-1 pour le témoin. La forte diminution de HO-1 dans les explants traités avec les extraits, confirme leur effet protecteur vis à vis des stress oxydatifs. Tableau 4 : Résultats de l’immunomarquage (% du témoin) HO-1 ESPECES Vs témoin « non pollué » J6 Vs témoin « pollué » J6 ULVA armoricana -22% -60% ENTEROMORPHA intestinalis -21% -55% MONOSTROMA nitidum -18% -53% Ainsi, l'exposition aux polluants induit une augmentation de l'expression de HO-1. Les extraits présentent une bonne activité anti-pollution en inhibant l'augmentation de l'expression de HO-1 induite par l'exposition à des polluants. ETUDE CLINIQUE L’étude est réalisée sur des volontaires de sexe féminin, âgés entre 18 et 60 ans et ayant la peau sèche au niveau des avant-bras. L’effet sur la cohésion cellulaire est évalué après stripping, entre une crème placébo (Placébo) et la crème contenant 3% de l’extrait (Exemple 1, Traité), après 28 jours d’application. Cette évaluation est réalisée à partir de la mesure d’index de desquamation et à partir de mesures réalisées à partir d’images obtenues par microscopie électronique à balayage. La pression exercée lors de l'application de D-Squam® est contrôlée à l'aide de QDerm®. Des échantillons successifs ont été prélevés sur la même zone à J0 (t0 et tx) et après 28 jours d'utilisation du produit. L'analyse des échantillons est réalisée à l'aide de Skin Image Analyser® (S.I.A®) avec le logiciel QuantiSquam®. La surface de décapage est éclaircie de manière standardisée (35 °) et observée avec un appareil photo numérique relié à un ordinateur. Une zone de 1 cm2 est étudiée. L'image numérisée obtenue est analysée en niveaux de gris afin de déterminer la surface occupée par les squames enlevées (en mm²) et l'indice de desquamation (rapport entre la surface occupée et l'épaisseur des couches cellulaires). Tableau 5: Indice de desquamation (% du témoin) Paramètre Produit Cinétique Variation Efficacité Indice Desquamation Placebo J0 -6,6 ± 2,0 + 7% J28 -7,8 ± 1,8 Traité J0 -9,4 ± 1,8 - 1% J28 -4,3 ± 2,2 Traité vs Placebo J28 -6,3 ± 3,2 + 8% Par rapport à l'état initial, le placébo n'a pas induit de variation significative de l'indice de desquamation. Par contre, l’extrait d’Ulva armoricana (exemple 1) induit une diminution significative de l'indice de desquamation (+ 7%) montrant ainsi une meilleure cohésion cellulaire. L'analyse statistique montre un effet plus important sur la cohésion cellulaire avec le produit traité versus placébo, après 28 jours d'utilisation (+ 8% d'efficacité). Tableau 6: Épaisseur moyenne des espaces intercellulaires (mm) de la couche cornée Paramètre Produit Cinétique Moyenne ± ES (moyenne ±) % sur la moyenne Épaisseur moyenne des espaces intercellulaires de la couche cornée Placebo J0 0,90 ± 0,12 -33% J28 0,61 ± 0,11 -0,29 ±0,01 Traité J0 0,48 ± 0,02 - 100% J28 0,00 ± 0,00 -0,48 ± 0,02 L’observation de l’échantillon de peau au microscope électronique à balayage montre un effet sur l’hydratation des couches superficielles de l’épiderme. La diminution de l’épaisseur moyenne des espaces intercellulaires de la couche cornée confirme l’effet sur le renforcement de la cohésion cellulaire et son effet réparateur en préservant ou en restaurant la plasticité de l’épiderme. Utilisation d’ulvanes purifiés ou d’un extrait d’algues de la classe des ulvophycées et des genres Ulva, Enteromorpha ou Monostoma , ledit extrait comprenant des ulvanes, ou d’une composition cosmétique les contenant, pour préserver, restaurer ou renforcer, au niveau de l’épiderme, l’effet barrière, la cohésion cellulaire, la plasticité, la desquamation, et l’homéostasie de l’épiderme. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que les extraits précités sont extraits d'algues choisies dans le groupe constitué des espèces suivantes : Ulva armoricana , Ulva rigida , Ulva rotundata , Ulva lactuca , Ulva compressa, Enteromorpha intestinalis et Monostroma nitidum de préférence Ulva armoricana, Enteromorpha intestinalis et Monostroma nitidum . Utilisation selon l’une des revendications 1 à 2, caractérisée en ce que les ulvanes purifiés ou contenus dans ledit extrait, sont sous une forme non hydrolysée. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que les ulvanes purifiés ou contenus dans ledit extrait, présentent un poids moléculaire d’au moins 50 KDa, préférentiellement d’au moins 60 KDa, plus préférentiellement encore d’au moins 90 KDa. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, caractérisée en ce que lesdits ulvanes purifiés ou l’extrait d’algues contenant des ulvanes présentent au moins l’une des caractéristiques suivantes, les pourcentages étant en poids par rapport au poids sec de l’extrait : une teneur en acide glucuronique comprise entre 0,5 et 30%, préférentiellement entre 1 et 10%, une teneur en acide iduronique comprise entre 0,5 et 30%, préférentiellement entre 2 et 15%, une teneur en rhamnose comprise entre 1 et 45%, préférentiellement entre 3 et 15%, une teneur en xylose comprise entre 0,1 et 15%, préférentiellement entre 0,15 et 5%, une teneur en glucose comprise entre 1 et 30%, préférentiellement entre 3 et 15%, une teneur en galactose comprise entre 0,05 et 10%, préférentiellement entre 0,1 et 5%. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, pour la stimulation de l’expression génomique et/ou protéomique de l’involucrine, de la petite protéine riche en proline 1 , de la hème-oxygénase 1 et de la kalikréine 7 chez les kératinocytes. Utilisation selon l’une des revendications précédentes, pour la protection de l’épiderme vis à vis des stress oxydatifs, notamment vis à vis de la pollution urbaine, du soleil, tabac ou lumière bleue. Composition cosmétique et/ou dermatologique, caractérisée en ce qu’elle comprend entre 0,001 et 50%, préférentiellement entre 0,01 et 5%, plus préférentiellement entre 0,03 et 0,5% en poids, exprimé en matière sèche, du poids total de la préparation, d’au moins un extrait d’algues contenant des ulvanes ou d’au moins un ulvane purifié, tels que définis dans l’une des revendications 1 à 7. Composition cosmétique et/ou dermatologique selon la revendication 8, caractérisée en ce qu’elle se présente sous forme de crème, d’une émulsion huile-dans-eau, d’une émulsion eau-dans-huile, d’une émulsion multiple, d’une solution, d’un gel, d’une suspension ou d’une poudre. Procédé de traitement cosmétique pour lutter contre le vieillissement cutané, caractérisé en ce qu'il consiste à appliquer sur la peau une composition comprenant au moins un extrait d’algues de la classe des ulvophycées comprenant des ulvanes ou au moins un ulvane purifié tels que définis dans l'une des revendications 8 à 9.