Brevet FR3107769A1 — publié le 20210903

L’invention concerne une méthode d’identification de composés utiles pour le traitement d’un cancer, basée sur l’évaluation de la capacité du composé à moduler l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Méthode d’identification de composés utiles pour le traitement d'un cancer L’invention concerne une méthode d’identification de composés utiles pour le traitement d’un cancer, basée sur l’évaluation de la capacité du composé à moduler l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Arrière-plan technologique Lors du processus de cancérogénèse, le métabolisme des cellules cancéreuses est reprogrammé de manière à favoriser la croissance des cellules tumorales, améliorer leurs capacités de réparation, d’invasion et leur résistance aux traitements anticancéreux. Les mitochondries sont des acteurs majeurs du métabolisme cellulaire via, entre autres, leur capacité à produire de l’ATP, produire différents métabolites et macromolécules, produire et détoxifier les espèces réactives de l’oxygène et moduler la mort cellulaire. Pour cette raison, cibler l’activité mitochondriale afin d’affecter le métabolisme des cellules cancéreuses constitue une piste d’intérêt dans le traitement des cancers. Cependant, les mécanismes moléculaires mitochondriaux susceptibles de fournir un bénéfice thérapeutique restent encore à déterminer. Pour fonctionner, la mitochondrie doit importer entre 1500 et 2000 protéines codées par le génome nucléaire grâce à des machineries protéiques particulières. Ainsi, AIF (Apoptosis Inducing Factor) et CHCHD4 (coiled-coil-helix-coiled-coil-helix domain containing 4) sont deux protéines exprimées dans l’espace inter-membranaire qui une fois associées forment une machinerie d’import pour différentes protéines possédant des motifs à cystéine. L’interaction AIF/CHCHD4 a été décrite dans l’article Hangen et al. 2015 in vitro et in cellulo . Cet article démontre notamment que la fonction de la protéine AIF dans la biogenèse des complexes de la chaîne respiratoire mitochondriale est médiée par son interaction physique et fonctionnelle avec CHCHD4. Avec comme objectif d’identifier de nouveaux composés utiles pour le traitement d’un cancer, les inventeurs ont mis au point une méthode d’identification, basée sur l’évaluation de la capacité d’un composé à inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. L’hypothèse des inventeurs serait qu’un composé inhibant la formation du complexe AIF/CHCHD4 serait capable d’affecter les cellules cancéreuses dont la survie et la prolifération dépendent de l’activité mitochondriale. La méthode mise au point par les inventeurs s’est révélée particulièrement efficace puisqu’elle a permis d’identifier des composés possédant des propriétés anti-cancéreuses. De plus, la présente méthode présente l’avantage d’être applicable au criblage à haut débit, facilitant ainsi l’identification de composés potentiellement utiles pour le traitement du cancer. Un aspect de l’invention concerne donc un procédé d’identification d’un composé potentiellement utile pour le traitement d’un cancer, caractérisé en ce qu’il comprend l’évaluation de la capacité dudit composé à inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4, ledit composé étant identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer s’il inhibe ladite interaction. Dans un mode de réalisation particulier, le procédé comprend : (a) la mise en contact de la protéine AIF et de la protéine CHCHD4 en présence et en l’absence dudit composé ; (b) la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4, en présence et en l’absence dudit composé ; et (c) la comparaison de la mesure de ladite interaction en présence et en l’absence dudit composé; ledit composé étant identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer si la mesure de ladite interaction est moins élevée en présence dudit composé qu’en l’absence dudit composé. Dans un mode de réalisation particulier, le composé est identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer s’il inhibe d’au moins 50%, 60%, 70%, 80%, ou d’au moins 90% l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. La mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 peut être effectuée au moyen d’un test homogène de proximité à luminescence amplifiée (ALPHA) ou d’un test de résonance plasmonique de surface (SPR). En outre, le procédé selon l’invention peut comprendre la confirmation, dans un modèle cellulaire ou animal non humain de cancer, des propriétés anticancéreuses du composé identifié. Dans un mode de réalisation particulier, le procédé comprend : (i) la détermination de la capacité dudit composé à inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4, au moyen d’un test homogène de proximité à luminescence amplifiée (ALPHA); (ii) la détermination de la capacité dudit composé à inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4, au moyen d’un test de résonance plasmonique de surface (SPR) ; et (iii) la confirmation, dans un modèle cellulaire ou animal non humain de cancer, des propriétés anticancéreuses du composé identifié. Un autre aspect de l’invention concerne un kit pour l’identification d’un composé potentiellement utile pour le traitement d’un cancer, caractérisé en ce qu’il comprend : - une protéine AIF ; - une protéine CHCHD4 ; - des moyens adaptés à la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4; - optionnellement un tampon adapté à l’expérience de mesure de ladite interaction ; et - optionnellement un composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Les moyens adaptés à la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 peuvent être des moyens adaptés à un test homogène de proximité à luminescence amplifiée (ALPHA). Dans un mode particulier de réalisation, le tampon adapté à l’expérience de mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 comprend du tampon phosphate salin (PBS) et de l’albumine de sérum bovin (BSA). Dans un mode particulier de réalisation, ledit composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 consiste en la séquence de SEQ ID NO :4 ou tout variant fonctionnel ayant au moins 70%, 80%, 90%, ou au moins 99% d’identité avec la séquence de SEQ ID NO :4. Brève description des figures Titrage AIF103-613 et CHCHD4 par Alphascreen. Le titrage de la protéine CHCHD4 contre la protéine AIF103-613 par la technologie ALPHAscreen conduit à une réponse en forme de cloche appelée effet de Hook. Inhibition de l’interaction de AIF103-613/CHCHD4. La banque Prestwick constitué de 1280 composés a été criblée, au moyen d’un test Alphascreen à une concentration de 10µM. Les composés sélectionnés sont identifiés par des carrés blancs, les points noirs correspondent aux composés non sélectionnés. Le composé est sélectionné si le signal brut obtenu en présence du composé est inférieur à une valeur seuil TH (TH = moyenne (signal du contrôle négatif) – 5 * SD (signal du contrôle négatif). L’axe des Y correspond au signal normalisé, à savoir le signal calculé comme pourcentage de la moyenne. Analyse par SPR des composés identifiés par Alphascreen. (A) Validation par SPR de la thioridrazine et de la mitoxantrone au moyen du test Alphascreen comme inhibiteurs de l’interaction AIF103-613 / CHCHD4. Les composés à 10 µM ont été incubés pendant 20 min avec AIF dans du DPBS à pH 7,4 à température ambiante. Ensuite, le mélange a été injecté pendant 3 minutes à raison de 30 µL par minute sur la protéine CHCHD4. Le peptide N27 à 3 µM a servi de contrôle positif. (B) Sensorgrammes par résonance plasmonique de surface (SPR), permettant de suivre la liaison de AIF103-613 à CHCHD4 en présence de chlorhydrate de thioridazine ou de dichlorhydrate de mitoxantrone. Le chlorhydrate de thioridazine et le dichlorhydrate de mitoxantrone ont été testés à des concentrations croissantes allant de 0,5 µM à 50 µM. Description détaillée 1- Procédé d’identification Un aspect de l’invention concerne un procédé d’identification d’un composé potentiellement utile pour le traitement d’un cancer, caractérisé en ce qu’il comprend l’évaluation de la capacité d’un composé à inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4, ledit composé étant identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer s’il inhibe ladite interaction. Un aspect de l’invention concerne notamment un procédé de criblage d’une banque de composés pour identifier un composé potentiellement utile pour le traitement d’un cancer, caractérisé en ce qu’il comprend l’évaluation de la capacité des composés de ladite banque de composés à inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4, lesdits composés étant identifiés comme potentiellement utiles pour le traitement d’un cancer s’ils inhibent ladite interaction. Dans un mode de réalisation particulier, le procédé selon l’invention comprend : (a) la mise en contact de la protéine AIF et de la protéine CHCHD4 en présence et en l’absence dudit composé ; (b) la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4, en présence et en l’absence dudit composé ; et (c) la comparaison de la mesure de ladite interaction en présence et en l’absence dudit composé; ledit composé étant identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer si la mesure de ladite interaction est moins élevée en présence dudit composé qu’en l’absence dudit composé. Protéines AIF et CHCHD4 L’interaction physique et directe des protéines AIF et CHCHD4 a été démontrée dans l’article de Hangen et al., 2015. La protéine AIF (pour «Apoptosis Inducing Factor») est une flavoprotéine présente dans les mitochondries et qui promeut l’apoptose lorsqu’elle est libérée de la mitochondrie. Dans le cadre de la présente invention, la protéine AIF peut être de n’importe quelle origine, de préférence d’origine animale en particulier un mammifère, plus préférentiellement d’origine humaine. Dans un mode de réalisation particulier, la protéine AIF correspond à la protéine AIF naturelle humaine dont la référence de séquence NCBI est « NP_004199.1 », ou tout variant fonctionnel de celle-ci tel que AIF2 qui est une isoforme cerveau spécifique. En particulier, la protéine AIF selon l’invention peut correspondre au polypeptide humain naturel de séquence SEQ ID NO :1, ou tout variant fonctionnel. L’expression « variant fonctionnel » qui fait référence à la protéine AIF désigne tout polypeptide dérivé de la structure de la protéine AIF et conservant la capacité de liaison à la protéine CHCHD4, notamment à la protéine CHCHD4 de SEQ ID NO :2. Les variants fonctionnels peuvent être des variants naturels ou synthétiques tels que des fragments, mutants ou délétants. De préférence, le variant fonctionnel de la protéine AIF correspond à un polypeptide ayant une identité de séquence d’au moins 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, ou au moins 95% avec la protéine AIF de séquence SEQ ID NO :1. La protéine CHCHD4 (également dénommée « mitochondrial intermembrane space import and assembly protein 40» ou « MIA40 ») est une protéine qui participe à l’import protéique, dans l’espace intermembranaire des mitochondries. Dans le cadre de la présente invention, la protéine CHCHD4 peut être de n’importe quelle origine, de préférence d’origine animale en particulier un mammifère, plus préférentiellement d’origine humaine. Dans un mode de réalisation particulier, la protéine CHCHD4 correspond à la protéine CHCHD4 naturelle humaine dont la référence de séquence NCBI est « NP_001091972.1 ». En particulier, la protéine CHCHD4 selon l’invention peut correspondre au polypeptide humain naturel de séquence SEQ ID NO :2 ou tout variant fonctionnel. L’expression « variant fonctionnel » qui fait référence à la protéine CHCHD4 désigne tout polypeptide dérivé de la structure de la protéine CHCHD4 et conservant la capacité de liaison à la protéine AIF, notamment à la protéine AIF de SEQ ID NO :1. Les variants fonctionnels peuvent être des variants naturels ou synthétiques tels que des fragments, mutants ou délétants. De préférence, le variant fonctionnel de la protéine CHCHD4 correspond à un polypeptide ayant une identité de séquence d’au moins 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, ou au moins 95% avec la protéine CHCHD4 de séquence SEQ ID NO :2. Dans un mode de réalisation particulier, le variant fonctionnel de la protéine AIF est délété ou tronqué par rapport à la protéine AIF de SEQ ID NO :1. En particulier, le variant fonctionnel de la protéine AIF peut correspondre à un polypeptide dont la partie transmembranaire de la protéine AIF a été délétée. Dans un mode de réalisation particulier, le variant fonctionnel de la protéine AIF correspond à un polypeptide de séquence SEQ ID NO :3, ou à un polypeptide ayant une identité de séquence d’au moins 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, ou au moins 95% avec le polypeptide de séquence SEQ ID NO:3. Les protéines AIF et CHCHD4 peuvent être modifiées, à condition que cela n’empêche pas l’interaction entre les deux protéines. Par exemple, pour les besoins de l’expérience de mesure de leur interaction, les protéines AIF et/ou CHCHD4 peuvent être fusionnées à un fragment servant d’étiquette (ou « tag »). N’importe quelle étiquette conventionnelle peut être utilisée, à condition qu’elle n’empêche pas l’interaction entre les deux protéines. En particulier, toute étiquette adaptée à un test homogène de proximité à luminescence amplifiée (ALPHA) ou à un test de résonance plasmonique de surface (SPR) peut être utilisée. Plus particulièrement, les protéines AIF et/ou CHCHD4 peuvent être fusionnées à une étiquette Histidine correspondant à un motif constitué de plusieurs résidus histidine, ou à une étiquette GST correspondant à la protéine glutathion-S-transférase. Composé à tester Les composés susceptibles d’être identifiés par le procédé de l’invention peuvent être des composés de nature, structure et origine variées. Les composés susceptibles d’être identifiés peuvent notamment être des composés biologiques, chimiques, synthétiques, etc… Il peut notamment s’agir de composés de nature nucléique, peptidique, lipidique ou glucidique. Il peut s’agir également de banques, notamment de chimiothèques, de banques de protéines, de peptides, d’acides nucléiques ou de substances naturelles, etc… Mise en contact du composé à tester avec les protéines AIF et CHCHD4 Le composé à tester peut être mis en contact avec la protéine AIF et la protéine CHCHD4 dans tout support approprié et notamment sur une plaque, dans un tube ou une flasque, une membrane, etc…En particulier, la mise en contact peut être réalisée dans une plaque multipuits ce qui permet de conduire, en parallèle, des essais nombreux et variés. Parmi les supports typiques on trouve des plaques de microtitration et plus particulièrement des plaques 96 ou 384 puits (ou plus), faciles à manipuler. La quantité (ou la concentration) de composé à tester peut être ajustée par l’utilisateur selon le type de composé, la durée de la période d’incubation, etc. En particulier, la concentration du composé à tester peut varier de 1nM à 1mM. Il est bien sûr possible de tester d’autres concentrations sans dévier de la présente invention. Chaque composé peut, de plus, être testé, en parallèle, à différentes concentrations. De même, la quantité (ou concentration) en protéines AIF et CHCHD4 peut varier et être ajustée par l’utilisateur. En particulier, la concentration en protéines AIF et CHCHD4 est ajustée pour permettre une interaction optimale entre les deux protéines, en l’absence du composé à tester. Le contact entre les protéines et le composé à tester peut être maintenu par exemple entre quelques minutes et plusieurs heures ou jours, particulièrement entre 30 minutes et 72 heures, plus particulièrement entre 1 et 5 heures. L’ordre d’addition de la protéine AIF, de la protéine CHCHD4 et du composé à tester lors de leur mise en contact peut être adapté par l’homme du métier.En particulier, le composé à tester peut être pré-incubé avec la protéine AIF, pendant une certaine durée, avant d’être mis en contact avec la protéine CHCHD4. Alternativement, le composé à tester peut être pré-incubé avec la protéine CHCHD4, pendant une certaine durée, avant d’être mis en contact avec la protéine AIF. La durée de la pré-incubation avec l’une ou l’autre des protéines, peut-être de quelques minutes, ou de plusieurs heures ou jours, plus particulièrement entre 5 et 60 minutes, plus particulièrement entre 5 et 30 minutes. Mesure de l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 L’interaction des protéines AIF et CHCHD4, en présence ou en l’absence du composé à tester, peut être mesurée selon n’importe quelle technique connue de l’homme du métier permettant de mesurer ou quantifier l’interaction entre deux protéines. Le terme « interaction » signifie l’association ou la liaison physico-chimique entre les deux protéines. L’interaction entre deux protéines peut résulter de liaisons covalentes et/ou non-covalentes. Les liaisons non-covalentes comprennent notamment les liaisons électrostatiques, ioniques, hydrogènes, hydrophobes, ainsi que les forces de Van der Waals. Le procédé selon l’invention comprend la mesure de l’interaction des protéines AIF et CHCHD4, d’une part en l’absence du composé à tester, et d’autre part en présence du composé à tester. Les deux mesures peuvent être réalisées consécutivement ou simultanément. Les deux mesures d’interaction, en présence ou en l’absence du composé à tester sont par la suite comparées. Dans un mode de réalisation particulier, le composé est identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer s’il inhibe d’au moins 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, ou d’au moins 90%l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. De préférence, le composé est identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer s’il inhibe d’au moins 50%, 60%, 70%, 80%, ou d’au moins 90% l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Dans un mode de réalisation particulier, le composé est identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer s’il inhibe d’au moins 50% l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. La mesure de l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 en présence ou en l’absence du composé à tester peut être effectuée au moyen de n’importe quelle technique permettant de mesurer ou quantifier l’interaction entre deux protéines, par exemple au moyen d’un test homogène de proximité à luminescence amplifiée (ALPHA), d’un test de résonance plasmonique de surface (SPR), d’une méthode de thermal shift assay (TSA), d’une méthode d’immunoprécipitation, d’un test de titration calorimétrique isotherme (ITC), d’un test de transfert d'énergie par résonance en fluorescence (FRET), d’un test de polarisation de fluorescence ou d’un test ELISA. Dans un mode de réalisation particulier, la mesure de l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 est effectuée au moyen d’un test ALPHA ou SPR. De préférence, la technique de mesure de l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 est applicable au criblage à haut débit. Dans un mode de réalisation particulier, la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 est effectuée au moyen d’un test homogène de proximité à luminescence amplifiée (ALPHA). La technologie ALPHA est une technique très sensible basée sur la détection de chimiluminescence qui permet de cribler une large gamme d’interactions et d’activités biologiques et qui convient également au criblage à haut débit (voir, par exemple, Eglen RM et al. The use of AlphaScreen technology in HTS: current status. Curr Chem Genomics. 2008;1:2–10 ; Ullman EF et al. Luminescent oxygen channeling immunoassay: measurement of particle binding kinetics by chemiluminescence. Proc Natl Acad Sci U S A. 1994;91(12):5426–5430 ; Yasgar A et al. AlphaScreen-Based Assays: Ultra-High-Throughput Screening for Small-Molecule Inhibitors of Challenging Enzymes and Protein-Protein Interactions. Methods Mol Biol. 2016;1439:77–98 ; Seethala and Prabhavathi, "Homogeneous Assays: AlphaScreen, Handbook of Drug Screening," Marcel Dekkar Pub. 2001, pp. 106-110.). La technologie ALPHA, également connue sous les noms commerciaux AlphaScreen® et AlphaLISA®, permet de mesurer l'interaction de deux molécules bio-conjuguées à des billes donneuses et des billes acceptrices. Les billes donneuses contiennent une molécule photosensible, telle que la phtalocyanine, qui convertit l'oxygène ambiant en oxygène singulet après excitation à 680 nm. L’oxygène singulet peut diffuser jusqu’à environ 200 nm en solution. Si une bille acceptrice est dans cette distance, l’énergie est transférée de l’oxygène singulet à des dérivés du thioxène dans la bille acceptrices, ce qui conduit à une émission de lumière à 520-620 nm (AlphaScreen®) ou à 615 nm (AlphaLISA®). Si la bille donneuse n'est pas à proximité d'une bille acceptrice, l'oxygène singulet retourne à l'état fondamental et aucun signal luminescent n'est produit. Dans un essai d'interaction protéine/protéine, une protéine est conjuguée aux billes donneuses, et l'autre protéine est conjuguée aux billes acceptrices. Ainsi, quand les deux protéines interagissent, la bille donneuse est amenée à proximité de la bille acceptrice, et l'excitation de la bille donneuse conduit à l'émission d’un signal lumineux quantifiable de la part de la bille acceptrice. La mesure du signal lumineux est effectuée au moyen d’un lecteur compatible avec la technologie ALPHA tel que le lecteur de plaque EnVision® ou EnSpire®. Dans un mode de réalisation particulier, la mesure de l’interaction est effectuée au moyen du test AlphaScreen®. L’intensité du signal lumineux permet donc de quantifier l’interaction des protéines dans un échantillon. Ainsi, le composé à tester est identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer si la mesure du signal lumineux est moins élevée en présence dudit composé qu’en l’absence dudit composé. Dans un mode de réalisation particulier, le composé est identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer s’il inhibe d’au moins 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, ou d’au moins 90% le signal lumineux mesuré en l’absence du composé à tester. De préférence, le composé est identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer s’il inhibe d’au moins 50%, 60%, 70%, 80%, ou d’au moins 90% le signal lumineux mesuré en l’absence du composé à tester. Dans un mode de réalisation particulier, le composé est identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer s’il inhibe d’au moins 50% le signal lumineux mesuré en l’absence du composé à tester. Dans le cadre de la présente invention, la protéine AIF peut être conjuguée à la bille donneuse et la protéine CHCHD4 à la bille acceptrice, et inversement : la protéine AIF peut être conjuguée à la bille acceptrice et la protéine CHCHD4 à la bille donneuse. Dans un mode de réalisation particulier, les billes donneuses et les billes acceptrices sont recouvertes de molécules ou groupes fonctionnels permettant leur conjugaison avec l’une ou l’autre des protéines AIF ou CHCHD4. Les protéines peuvent être fusionnées à des étiquettes permettant leur conjugaison sur les billes donneuses ou acceptrices. Par exemple,la protéine AIF ou la protéine CHCHD4 peut être fusionnée à une étiquette histidine permettant sa conjugaison sur une bille recouverte de Nickel, ou à une étiquette GST permettant sa conjugaison sur une bille recouverte de glutathion. Ainsi, selon un mode de réalisation particulier, le procédé comprend: (a’) la mise en contact d’une protéine AIF, d’une protéine CHCHD4, d’une bille donneuse et d’une bille acceptrice, en présence ou en l’absence d’un composé candidat ; (b’) l’excitation de la bille donneuse à une longueur d’onde donnée, de préférence à une longueur d’onde d’environ 680 nm ; (c’) la mesure du signal lumineux émis par la bille acceptrice, le signal lumineux ayant de préférence une longueur d’onde entre 520 et 620 nm ; (d’) la comparaison de la mesure du signal lumineux en présence et en l’absence du composé ; dans lequel la bille donneuse est capable de se conjuguer à la protéine AIF et la bille acceptrice à la protéine CHCHD4, ou dans lequel la bille donneuse est capable de se conjuguer à la protéine CHCHD4 et la bille acceptrice à la protéine AIF ; ledit composé étant identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer si la mesure du signal lumineux est moins élevée en présence dudit composé qu’en l’absence dudit composé. Dans un autre mode réalisation, la mesure de l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 en présence ou en l’absence du composé à tester est mesurée au moyen d’un test de résonance plasmonique de surface (SPR) tel que le test Biacore®. Au cours d’une expérience SPR une des deux protéines est fixée sur une surface (sensor chip), alors que l’autre est délivrée sur la surface via un flux continu de tampon au moyen d’un système de microfluidique. L’interaction des protéines est suivie par résonance plasmonique de surface, qui détecte les changements de masse au niveau de la surface. Dans un mode de réalisation particulier, les étapes de mise en contact (a), de mesure de l’interaction (b) et de comparaison (c) du procédé de l’invention telles que décrites ci-dessus peuvent être répétées. En particulier, les étapes (a), (b), (c) peuvent être répétées en utilisant, pour chaque répétition, la même technique de mesure de l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4, ou une technique de mesure différente. La répétition des étapes (a), (b), (c) a pour avantage d’affiner le procédé de criblage et confirmer la capacité du composé à inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4. Par exemple, pour chaque composé à tester, les étapes (a), (b), (c) peuvent être réalisées en duplicat, triplicat, quadruplicat ou en quintuplicat. En outre, les étapes (a), (b), (c) du procédé de l’invention peuvent être répétées en utilisant la même technique de mesure de l’interaction protéique, par exemple la technologie ALPHA, mais en faisant varier, pour chaque répétition, la concentration du composé à tester. Faire varier la concentration du composé à tester a pour avantage de préciser les capacités d’inhibition du composé identifié, en déterminant par exemple la relation effet-dose du composé. Mesurer l’interaction des protéines AIF et CHCHD4, en faisant varier la concentration du composé à tester permet notamment de déterminer la concentration inhibitrice médiane (CI50) dudit composé. La CI50 donne une indication de la concentration du composé nécessaire pour inhiber de 50% l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4 et permet ainsi d’évaluer l’efficacité dudit composé à inhiber l’interaction. Dans un mode de réalisation particulier, le procédé comprend : - la mise en œuvre des étapes (a), (b), (c) telles que décrites ci-dessus, dans lesquelles l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 est mesurée au moyen d’un test ALPHA ; et - la répétition des étapes (a), (b), (c) telles que décrites ci-dessus, dans lesquelles l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 est mesurée au moyen d’un test SPR. Dans un mode de réalisation particulier, le procédé comprend dans cet ordre : - la mise en œuvre des étapes (a), (b), (c) telles que décrites ci-dessus, dans lesquelles l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 est mesurée au moyen d’un test ALPHA par une expérience de criblage à haut débit utilisant une banque de composés à tester ; - la sélection des composés capables d’inhiber d’au moins 50% l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 ; - la détermination de l’effet-dose pour chaque composé sélectionné comprenant la répétition des étapes (a), (b), (c) telles que décrites ci-dessus en faisant varier la concentration du composé sélectionné et en mesurant l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 au moyen d’un test ALPHA ; et - la répétition des étapes (a), (b), (c) telles que décrites ci-dessus avec les composés sélectionnés, dans lesquelles l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 est mesurée au moyen d’un test SPR. Dans un mode de réalisation particulier, le procédé de l’invention comprend la mise en œuvre des étapes (a), (b), (c) telles que décrites ci-dessus, dans lequel le composé est un composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. L’utilisation d’un composé d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 peut ainsi servir de contrôle positif, permettant de valider l’expérience. Dans un mode particulier de réalisation, ledit composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 consiste en la séquence de SEQ ID NO :4 , ou consiste en la séquence de SEQ ID NO :4 ou tout variant fonctionnel ayant au moins 70%, 80%, 90%, ou au moins 99% d’identité avec la séquence de SEQ ID NO :4. Par « variant fonctionnel » est ici entendu tout variant de la séquence SEQ ID NO :4 capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Dans un mode particulier de réalisation, ledit composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 est sélectionné dans le groupe constitué par : le disulfirame, la bromocriptine ou un de ses sels tel que le mésylate de bromocriptine, la thioridazine ou un de ses sels tel que le chlorhydrate de thioridazine, le Chicago sky blue 6B, la mitoxantrone ou un de ses sels tel que le dichlorhydrate de mitoxantrone, la rifapentine, la tétraéthylènepentamine ou un de ses sels tel que le pentachlorhydrate de tétraéthylènepentamine, la nisoldipine, la merbromine, la thiéthylpérazine ou un de ses sels tel que le dimalate de thiéthylpérazine et la bénidipine ou un de ses sels tel que le chlorhydrate de bénidipine. Dans un mode de réalisation particulier, le procédé de l’invention comprend une étape de comparaison de l’inhibition de l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 obtenue en présence du composé à tester et de l’inhibition de l’interaction obtenue en présence du composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Dans un mode de réalisation particulier, le composé est identifié comme potentiellement utile dans le traitement du cancer si l’inhibition obtenue avec le composé correspond à au moins 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80% ou au moins 90% de l’inhibition obtenue avec le contrôle positif, à savoir avec le peptide N27. En particulier, le composé est identifié comme potentiellement utile dans le traitement du cancer si l’inhibition obtenue avec le composé correspond à au moins 50% de l’inhibition obtenue avec le contrôle positif, à savoir avec le peptide N27. Confirmation des propriétés anticancéreuses du composé Dans un mode de réalisation particulier, le procédé de l’invention comprend en outre une étape de confirmation dans un modèle cellulaire ou animal non humain de cancer, des propriétés anticancéreuses du composé identifié comme capable d’inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4. Dans un mode de réalisation particulier, le procédé de l’invention comprend une étape d’administration du composé identifié dans un modèle animal de cancer, puis une étape d’analyse des propriétés anticancéreuses dudit composé. Tout modèle animal de cancer peut être utilisé, l’animal étant de préférence un mammifère. En particulier, l’animal peut être une souris, un rat, un cochon, un lapin, un poulet, ou un primate non humain. Dans un mode de réalisation particulier, le procédé de l’invention comprend une étape de mise en contact du composé identifié avec un modèle cellulaire de cancer, puis une étape d’analyse des propriétés cytotoxiques dudit composé. Il peut s’agir d’un modèle cellulaire cultivé en deux dimensions (2D) ou trois dimensions (3D). Tout modèle cellulaire de cancer peut être utilisé, telle qu’une lignée cellulaire cancéreuse. Par exemple, le composé identifié peut être mis en contact avec les lignées cancéreuses A549, MCF7, ou HCT116. 2- Kit Un autre aspect de l’invention concerne un kit pour l’identification d’un composé potentiellement utile pour le traitement d’un cancer, caractérisé en ce qu’il comprend : - une protéine AIF ; - une protéine CHCHD4 ; et - des moyens adaptés à la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Dans le cadre de la présente invention, la protéine AIF peut être de n’importe quelle origine, de préférence d’origine animale en particulier un mammifère, plus préférentiellement d’origine humaine. Dans un mode de réalisation particulier, la protéine AIF correspond à la protéine AIF naturelle humaine dont la référence de séquence NCBI est « NP_004199.1 », ou tout variant fonctionnel de celle-ci. En particulier, la protéine AIF selon l’invention peut correspondre au polypeptide humain naturel de séquence SEQ ID NO :1, ou tout variant fonctionnel, tel que AIF2 qui est une isoforme spécifique du cerveau. L’expression « variant fonctionnel » qui fait référence à la protéine AIF désigne tout polypeptide dérivé de la structure de la protéine AIF et conservant la capacité de liaison à la protéine CHCHD4, notamment à la protéine CHCHD4 de SEQ ID NO :2. Les variants fonctionnels peuvent être des variants naturels ou synthétiques tels que des fragments, mutants, ou délétants. De préférence, le variant fonctionnel de la protéine AIF correspond à un polypeptide ayant une identité de séquence d’au moins 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, ou au moins 95% avec la protéine AIF de séquence SEQ ID NO :1. Dans le cadre de la présente invention, la protéine CHCHD4 peut être de n’importe quelle origine, de préférence d’origine animale en particulier un mammifère, plus préférentiellement d’origine humaine. Dans un mode de réalisation particulier, la protéine CHCHD4 correspond à la protéine CHCHD4 naturelle humaine dont la référence de séquence NCBI est « NP_001091972.1 ». En particulier, la protéine CHCHD4 selon l’invention peut correspondre au polypeptide humain naturel de séquence SEQ ID NO :2 ou tout variant fonctionnel. L’expression « variant fonctionnel » qui fait référence à la protéine CHCHD4 désigne tout polypeptide dérivé de la structure de la protéine CHCHD4 et conservant la capacité de liaison à la protéine AIF, notamment à la protéine AIF de SEQ ID NO :1. Les variants fonctionnels peuvent être des variants naturels ou synthétiques tels que des fragments, mutants ou délétants. De préférence, le variant fonctionnel de la protéine CHCHD4 correspond à un polypeptide ayant une identité de séquence d’au moins 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, ou au moins 95% avec la protéine CHCHD4 de séquence SEQ ID NO :2. Dans un mode de réalisation particulier, le variant fonctionnel de la protéine AIF est délété ou tronqué par rapport à la protéine AIF de SEQ ID NO :1. En particulier, le variant fonctionnel de la protéine AIF peut correspondre à un polypeptide dont la partie transmembranaire de la protéine AIF a été délétée. Dans un mode de réalisation particulier, le variant fonctionnel de la protéine AIF correspond à un polypeptide de séquence SEQ ID NO :3. Les protéines AIF et CHCHD4 peuvent être modifiées, à condition que cela n’empêche pas l’interaction entre les deux protéines. Par exemple, pour les besoins de l’expérience de mesure de leur interaction, les protéines AIF et/ou CHCHD4 peuvent être fusionnées à un fragment servant d’étiquette (ou « tag »). N’importe quelle étiquette conventionnelle peut être utilisée, à condition qu’elle n’empêche pas l’interaction entre les deux protéines. En particulier, les protéines AIF et/ou CHCHD4 peuvent être fusionnées à une étiquette Histidine correspondant à un motif constitué de plusieurs résidus histidine, ou à une étiquette GST correspondant à la protéine glutathion-S-transférase. Par « moyens adaptés à la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 », on entend tout moyen par exemple tout réactif, composé, matériau, support ou composition, nécessaire à la mise en œuvre de la technique de mesure de l’interaction entre lesdites protéines. Les moyens adaptés à la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4, peuvent être des moyens adaptés à toute technique permettant de mesurer ou quantifier l’interaction entre deux protéines. Par exemple, le kit peut comprendre des moyens adaptés à un test homogène de proximité à luminescence amplifiée (ALPHA), un test de résonance plasmonique de surface (SPR), une méthode de thermal shift assay (TSA), une méthode d’immuno-précipitation, un test de titration calorimétrique isotherme (ITC), un test de transfert d'énergie par résonance en fluorescence (FRET), un test de polarisation de fluorescence et / ou un test ELISA. De préférence, les moyens adaptés à la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 sont applicables au criblage à haut débit. Dans un mode de réalisation particulier, le kit comprend des moyens adaptés à un test ALPHA et / ou à un test SPR. Dans un mode de réalisation préféré, le kit comprend des moyens adaptés à la mesure de l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 par un test ALPHA. En particulier, le kit peut comprendre : - une protéine AIF ; - une protéine CHCHD4 ; - des billes donneuses capables d’émettre des espèces réactives de l'oxygène, telles que des oxygènes singulets, lorsqu’elles sont excitées à une longueur d’onde donnée, de préférence d’environ 680 nm ; et - des billes acceptrices capables d’émettre un signal lumineux, de préférence entre 520 nm et 620 nm, suite à la réaction avec des espèces réactives de l’oxygène, telles que des oxygènes singulets ; les billes donneuses et acceptrices étant en outre capables de se conjuguer avec l’une ou l’autre des protéines AIF ou CHCHD4. Dans un mode de réalisation particulier, les billes donneuses et les billes acceptrices sont recouvertes de molécules ou groupes fonctionnels permettant leur conjugaison avec l’une ou l’autre des protéines AIF ou CHCHD4. En particulier, les billes donneuses et acceptrices peuvent être recouvertes d’une couche de Nickel, de Glutathion, de streptavidine, de protéine A, G, L ou d’anticorps. Dans un mode de réalisation particulier, les billes donneuses sont recouvertes de Nickel et les billes acceptrices sont recouvertes de glutathion. Dans un mode de réalisation particulier, les billes donneuses comprises dans le kit sont préalablement conjuguées à l’une ou l’autre des protéines AIF ou CHCHD4. Dans un mode de réalisation particulier, les billes acceptrices comprises dans le kit préalablement conjuguées à l’une ou l’autre des protéines AIF ou CHCHD4. Dans un mode de réalisation particulier, les billes donneuses et acceptrices sont des billes issues du test commercial Alphascreen ® ou Alphalisa® (Perkinelmer). Optionnellement, le kit tel que décrit ci-dessus peut comprendre un tampon adapté à l’expérience de mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Par « tampon » on entend toute solution dans laquelle sont mis en contact les protéines AIF et CHCHD4, le composé à tester et éventuellement les moyens adaptés à la mesure de l’interaction des protéines. Le tampon est choisi de manière à ne pas inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4. Ainsi, le tampon peut également servir de contrôle négatif lors de la mise en œuvre du procédé de l’invention. Dans un mode de réalisation particulier, le kit comprend un tampon adapté à un test ALPHA. Dans un mode de réalisation particulier, le tampon comprend du tampon phosphate salin (PBS) et de l’albumine de sérum bovin (BSA). Dans un mode de réalisation particulier, le tampon comprend du PBS et 0,1% de BSA. Optionnellement, le kit tel que décrit ci-dessus peut comprendre un composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Le composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 peut ainsi servir de contrôle positif, permettant de valider l’expérience de mesure de l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4, lors de la mise en œuvre du procédé de l’invention. Dans un mode particulier de réalisation, ledit composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 consiste en la séquence de SEQ ID NO :4. ou tout variant fonctionnel ayant au moins 70%, 80%, 90%, ou au moins 99% d’identité avec la séquence de SEQ ID NO :4. Par « variant fonctionnel » est ici entendu tout variant de la séquence SEQ ID NO :4 capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Dans un mode particulier de réalisation, ledit composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 est sélectionné dans le groupe constitué par : le disulfirame, la bromocriptine ou un de ses sels tel que le mésylate de bromocriptine, la thioridazine ou un de ses sels tel que le chlorhydrate de thioridazine, le Chicago sky blue 6B, la mitoxantrone ou un de ses sels tel que le dichlorhydrate de mitoxantrone, la rifapentine, la tétraéthylènepentamine ou un de ses sels tel que le pentachlorhydrate de tétraéthylènepentamine, la nisoldipine, la merbromine, la thiéthylpérazine ou un de ses sels tel que le dimalate de thiéthylpérazine et la bénidipine ou un de ses sels tel que le chlorhydrate de bénidipine. Le kit tel que décrit ci-dessus peut en outre comprendre tout support adapté à l’expérience de mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Par exemple, le support peut être choisi parmi une plaque, un tube, une flasque, une membrane, etc… En particulier, le support peut être une plaque multipuits ce qui permet de conduire, en parallèle, des essais nombreux et variés. Parmi les supports typiques on trouve des plaques de microtitration et plus particulièrement des plaques 96 ou 384 puits (ou plus), faciles à manipuler. Un aspect de l’invention concerne en outre l’utilisation du kit tel que décrit ci-dessus, dans une méthode d’identification d’un composé potentiellement utile pour le traitement d’un cancer. 4- Composition Un autre aspect de l’invention concerne une composition pharmaceutique comprenant un composé identifié par le procédé tel que décrit ci-dessus, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. Ainsi, un aspect de l’invention concerne une composition pharmaceutique comprenant un composé capable d’inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. Par véhicule pharmaceutiquement acceptable, il faut comprendre toute substance autre que le principe actif dans un médicament. Son addition est destinée à conférer des caractéristiques physico-chimiques et/ou biochimiques pour favoriser l’administration par voie orale, sublinguale, respiratoire, rectale, nasale, intestinale, parentérale, par injection intraveineuse, intrapéritonéale, intramusculaire, sous-cutanée, ou d’autres caractéristiques de consistance ou gustatives particulières, au produit final, en évitant de préférence les interactions, chimiques covalentes avec les principes actifs. Les compositions pharmaceutiques de l’invention peuvent être sous forme de comprimés simples ou dragéifiés, de comprimés sublinguaux, de gélules, de glossettes, de capsules, de tablettes, de préparations injectables, d’aérosols, de gouttes nasales, de suppositoires, de crèmes, pommades ou gels dermiques. 5 - Utilisations Un autre aspect de l’invention concerne un composé identifié par le procédé tel que décrit ci-dessus, pour son utilisation en tant que médicament. Ainsi, un aspect de l’invention concerne un composé capable d’inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4, pour son utilisation en tant que médicament. En particulier, un aspect de l’invention concerne un composé identifié par le procédé tel que décrit ci-dessus, pour son utilisation dans une méthode de traitement du cancer. Ainsi, un aspect de l’invention concerne un composé capable d’inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4, pour son utilisation dans une méthode de traitement du cancer. Dans un mode de réalisation particulier, le composé capable d’inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4 est sélectionné dans le groupe constitué par : le chicago sky blue 6b, la rifapentine, la nisoldipine, la merbromine, la thiéthylpérazine ou un de ses sels tel que le dimalate de thiéthylpérazine, et la bénidipine ou un de ses sels tel que le chlorhydrate de bénidipine. Il est ainsi décrit une méthode de traitement d’un cancer chez un sujet, comprenant l’administration audit sujet d’un composé capable d’inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4 ou de la composition pharmaceutique comprenant ledit composé. La méthode de traitement peut comprendre l’administration du composé capable d’inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4 ou de la composition pharmaceutique comprenant ledit composé, seule ou en combinaison avec tout traitement anti-cancéreux tels que la radiothérapie, la chimiothérapie et l’immunothérapie. En particulier, la méthode de traitement peut comprendre l’administration dudit composé capable d’inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4, en combinaison avec l’administration d’un agent chimiothérapeutique. L’administration du composé capable d’inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4 peut être effectuée préalablement, simultanément, ou postérieurement à l’administration de l’agent chimiothérapeutique. On entend par "agent chimiothérapeutique" un produit chimique qui peut être utilisé pour détruire une cellule cancéreuse, ou pour ralentir, arrêter ou inverser la croissance d’une cellule cancéreuse. Dans le contexte de l'invention, le terme "sujet" ou "patient" désigne un animal, de préférence un mammifère, en particulier un être humain, quel que soit son âge ou son sexe, souffrant de cancer. Le terme inclut les animaux domestiques ainsi que les animaux de laboratoire tels que les primates non humains, les félins, les canidés, les équidés, les porcins, les bovins, les chèvres, les moutons, les lapins, les rats et les souris. De préférence, le patient à traiter est un être humain. Tel qu'utilisé ici, le terme "cancer" désigne n'importe quel type de tumeur maligne. La tumeur maligne peut correspondre à une tumeur primitive ou à une tumeur secondaire (c'est-à-dire une métastase). En outre, la tumeur peut correspondre à une tumeur maligne solide, qui comprend par exemple des carcinomes, des adénocarcinomes, des sarcomes, des mélanomes, des mésothéliomes, des blastomes ou à un cancer des cellules sanguines tel que les leucémies, les lymphomes et les myélomes. Le cancer peut par exemple correspondre à un cancer de la peau, du poumon, de la vessie, du rein, à un cancer digestif (côlon, pancréas, foie), de l’ovaire, du cerveau, de la face et du cou, etc. Le terme “traitement” comprend un traitement curatif et/ou préventif. Un traitement curatif fait référence à la réduction, amélioration, stabilisation et/ou élimination d’un symptôme de la maladie, ou encore à l’inhibition de la progression d’un symptôme de la maladie. Un traitement préventif fait référence à l’un quelconque des effets suivants : empêcher ou retarder l'apparition d’un trouble donné, réduire le développement, le risque de développement, l'incidence ou la gravité d’un trouble, augmenter le délai d'apparition des symptômes et/ou la survie du patient. Un autre aspect de l’invention concerne l’utilisation en recherche académique d’un composé identifié par le procédé tel que décrit ci-dessus, pour son utilisation en tant que composé pour perturber l’import mitochondrial et/ou le métabolisme cellulaire. Dans un mode particulier de réalisation, ledit composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 est sélectionné dans le groupe constitué par : le disulfirame, la bromocriptine ou un de ses sels tel que le mésylate de bromocriptine, la thioridazine ou un de ses sels tel que le chlorhydrate de thioridazine, le Chicago sky blue 6B, la mitoxantrone ou un de ses sels tel que le dichlorhydrate de mitoxantrone, la rifapentine, la tétraéthylènepentamine ou un de ses sels tel que le pentachlorhydrate de tétraéthylènepentamine, la nisoldipine, la merbromine, la thiéthylpérazine ou un de ses sels tel que le dimalate de thiéthylpérazine et la bénidipine ou un de ses sels tel que le chlorhydrate de bénidipine. Exemples MATERIELS ET METHODES Abréviations anglais/français: AIF apoptosis-inducing factor BSA bovine serum albumin CHCHD4 Coiled-Coil-Helix-Coiled-Coil-Helix (CHCH) Domain 4 CI50 concentration inhibitrice médiane CV coefficient de variation DMSO dimethyl sulfoxide GST Glutathione S-transferase HIS histidine HTS High Throughput Screening MEF Mouse embryonic fibroblast PBS phosphate buffer saline RT room temperature RU resonance unit S/B signal over background ratio SD standard deviation/déviation standard SPR surface plasmon resonance TH threshold/seuil Expression protéique et purification Les protéines AIF103-613 (fragment 103-613 de la protéine AIF) et CHCHD4 ont été produites dans des bactéries BL21 + DE3 (RIPL), via une induction de 3 heures avec de l'IPTG 0,5 mM à 37°C. Les bactéries ont été transformées selon les recommandations du fournisseur (Agilent). Les protéines ont ensuite été purifiées. La concentration totale en protéines a été déterminée par un kit de dosage Bradford. La pureté de l’expression a également été évaluée sur gel de polyacrylamide en présence de SDS. Test de l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 et identification de composés modulant cette interaction au moyen d’un test A lpha Une méthode permettant l’identification de composés capables d’inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4 et adapté au criblage à haut débit a été mise au point. Cette méthode comprend l’utilisation : - des protéines AIF103-613 et CHCHD4 précédemment produites ; - d’un kit AlphaScreen® (PerkinElmer) comprenant des billes donneuses et des billes acceptrices capables de se conjuguer aux protéines AIF et CHCHD4 ; - d’un contrôle positif : le peptide N27 (correspondant aux 27 acides aminés de l’extrémité N-ter de la protéine CHCHD4, tel que décrit dans Hangen et al, 2015 ; - d’un contrôle négatif : solution d’albumine de sérum bovin (BSA) à 0,1% dans du tampon phosphate salin (PBS) - d’une banque de composés à tester : la banque de composés chimiques Prestwick (Prestwick Chemical Library®). Le test ALPHA a d’abord été réalisé à haut débit, à l'aide de microplaques blanches à 384 puits (Greiner, référence 781075), en utilisant 25 µL de volume total par puits. Les protéines, le témoin positif et les billes ont été dilués dans une solution de 0,1% BSA/PBS. Toutes les distributions ont été effectuées avec une multipette électronique, puis les plaques ont été centrifugées (200 g , 1 min). Les plaques ont été fermées hermétiquement et incubées à l'obscurité dans une pièce à 23°C. Une banque de 1,280 petites molécules fournie par Prestwick Chemicals (Prestwick Chemical Library®) a été criblée. Cette banque comprend des composés aux propriétés chimiques et pharmacologiques diverses, qui sont déjà approuvés par les agences de santé telle que la FDA (Food and Drug Administration) ou l’EMEA (Agence Européenne d'Évaluation du Médicament). Chaque composé de la banque est dilué dans une solution de DMSO à 0.1% et utilisé à une concentration de 10 µM. Tout d'abord, 5 µL de composé à 10 µM, de N27 à 3 µM (contrôle positif) ou de 0,1% BSA/PBS (contrôle négatif) ont été ajoutés dans les puits. Deuxièmement, 5 µL de protéines AIF103-613 ont été incubés avec les composés pendant 20 min avant l'ajout de 5 µL de CHCHD4 pendant 2 h. Troisièmement, 10 µL d'un mélange de billes donneuses et de billes acceptrices à 5 µg / mL ont été incubés pendant 3 h. L’analyse des résultats a été effectuée au moyen d’un lecteur de plaques multimodes EnSpire® (Perkin Elmer). L’interaction des protéines AIF et CHCHD4 est révélée par détection d’un signal lumineux par le lecteur de plaques. Analyse des données du test ALPHA Pour chaque expérience de mesure de l’interaction des protéines AIF et CHCHD4, 3 mesures validant la qualité de l’expérience ont été effectuées : le coefficient de variation des contrôles (CV), le rapport signal/bruit de fond (S/B) et le facteur Z’ tel que décrit ci-dessous. Pour chaque plaque de 384 puits, 16 puits correspondent au contrôle positif et 16 puits correspondent au contrôle négatif. Le contrôle positif correspond à la mesure de l’interaction des protéines AIF103-613 et CHCHD4 en présence du peptide N27 (équivaut au signal minimal). Le contrôle négatif correspond à la mesure de l’interaction des protéines AIF103-613 et CHCHD4 en présence du tampon (0.1 % BSA/PBS) (équivaut au signal maximal). CV est défini comme le rapport de l’écart type (SD) divisé par la moyenne de chaque contrôle : S/B est le ratio correspondant à la moyenne des contrôles négatifs, divisée par la moyenne des contrôles positifs : Le facteur Z’ factor évalue l’amplitude du signal d’un essai, en mesurant la différence entre les contrôles positifs et négatifs, et en tenant en compte des écarts types (SD) : Chaque série de mesure est validée si CV 10 et le facteur Z’ > 0.5 [Goktug et al., Drug Discovery, 2013 doi10.5772/52508]. Suite au criblage à haut débit, les composés sont sélectionnés si le signal obtenu en présence du composé est inférieur au seuil TH suivant : TH = moyenne ( signal du contrôle négatif) – 5 * SD ( signal du contr ô l e n é gati f ) Pour chaque composé précédemment sélectionné, le test ALPHA est répété manuellement en utilisant un autre lot de poudre des composés. Chaque composé est testé à 10µM et 30µM en raison de l’effet de Hook particulier à la technologie ALPHAscreen et afin de sélectionner les composés donnant un signal situé dans la partie ascendante de la cloche de Hook et donc actifs à basse dose dans une perspective de développement de médicament. Le composé est sélectionné si : - le signal obtenu en présence du composé est inférieur au seuil TH tel que décrit ci-dessus ; et - que le signal obtenu à 30µM est inférieur au signal obtenu à 10µM. De plus, pour chaque composé ainsi sélectionné, la relation effet-dose du composé est déterminée. Ceci permet de déterminer la concentration inhibitrice médiane (CI50) dudit composé. Validation des composés inhibant l’ interaction des protéines AIF et CHCHD4 au moyen d’un test SPR Certains des composés identifiés au moyen du test Alpha tel que décrit ci-dessus ont été testés par résonance plasmonique de surface (Biacore ™ T100, GE Healthcare Life Sciences). La protéine CHCHD4 a été immobilisée de manière covalente sur une matrice de dextran comprenant des groupes carboxyle fonctionnels COOH (Serie S CM5® sensor chip, GE Healthcare Life Sciences, 29149603). Pour réaliser le criblage, les composés (à 10 µM) ont été pré-incubés pendant 20 min avec la protéine AIF, à température ambiante dans un tampon DPBS à pH 7,4 (Sigma, D8577). Ensuite, le mélange du composé et de la protéine AIF a été injecté pendant 3 min à 30 µL par minute à 25°C. Un contrôle négatif a été réalisé en injectant la protéine AIF seule à 1 µM (diluée dans 0,1% DMSO/PBS). Un contrôle positif a été effectué en injectant un mélange de peptide à N27 (à 3 µM) et de protéine AIF. Un composé est validé s’il est capable de diminuer de manière significative l’interaction entre AIF103-613 et CHCHD4, c’est-à-dire si l’inhibition obtenue avec le composé correspond à au moins 50% de l’inhibition obtenue avec le contrôle positif, à savoir avec le peptide N27. Les sensorgrammes ont été analysés à l'aide du logiciel BIAevaluation (version 2.0.4). RESULTATS Mise au point du protoc o le et optimisation pour le criblage haut débit. Les concentrations en protéines AIF103-613 et CHCHD4 nécessaires pour obtenir un signal optimal en Alphascreen® ont été évaluées. La figure 1 montre que le signal optimal est obtenu avec AIF103-613 et CHCHD4 est dépendant de la dose. Puis les lots de protéines, peptide et réactifs ont été vérifiés lors d’une expérience préliminaire et obtenir un Z’>0,5 (non présenté). Résumé des statistiques obtenues par criblage à haut débit en plaques 384 puits Puis la banque Prestwick (1280 molécules) a été criblée à l’aide de 4 plaques 384 puits (Plate #1 à #4). Avant le criblage lui-même, tous les réactifs (protéines, billes tampons) et matériels (plaques, cônes, pipetteur) sont soumis à un contrôle qualité appelé « test de validation pré-criblage » et un certain nombre de critères sont analysés. Comme indiqué ci-dessus, chaque série de mesure est validée si CV 10 et le facteur Z’ > 0.5. Les données statistiques obtenues par criblage à haut débit en plaques 384 puits sont détaillées dans le tableau 1 suivant : Identification de composés inhibant l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4 1) Identification des composés au moyen d’un test ALPHA La banque de composés Prestwick, comprenant 1280 molécules a été criblée à l’aide de 4 plaques 384 puits, comme décrit ci-dessus. Les composés ont été sélectionnés sur la base du signal obtenu en Alphascreen® en présence du composé à une concentration de 10µM. En particulier, le composé est sélectionné si le signal obtenu à 10µM est inférieur à une valeur seuil TH ( TH = moyenne ( signal du contrôle négatif) – 5 * SD ( signal du contr ô l e n é gati f ) ). Sur les 1280 composés analysés, 148 ont été sélectionnés, soit 12% de la banque de composés (cf. figure 2). Les 148 composés sélectionnés ont de nouveau été testés au moyen d’un test ALPHA réalisé manuellement, tel que décrit ci-dessus. Sur les 148 composés testés, 11 composés ont finalement été sélectionnés. Pour les 11 composés sélectionnés : - le signal obtenu à 10µM est inférieur à la valeur seuil TH ; et - le signal obtenu à 30µM est inférieur au signal obtenu à 10µM. Le tableau 2 suivant liste les 11 composés sélectionnés par ALPHA screen. Les numéros CAS et les structures chimiques de chaque composé sont rapportés dans le tableau 2 suivant. Les propriétés anti-cancéreuses de certains de ces composés ont déjà été démontrées, validant ainsi le procédé de criblage de la présente invention. Par exemple, les propriétés anti-cancéreuses de la thioridazine sont décrites dans l’article de Shen et al. , 2017. De plus, la mitoxantrone est commercialisée comme anti-cancéreux (sous le nom de Novantrone®), notamment dans le traitement du cancer du sein métastatique, du lymphome non-hodgkinien ou encore de la leucémie myéloïde aiguë (LMA). Le tableau 3 suivant liste les CI50 des 11 composés identifiés, obtenues manuellement à l’aide du test en Alphascreen : 2 ) Confirmation de l’inhibition de l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 au moyen d’un test SPR L’inhibition de l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 par la thioridazine et la mitoxantrone a été analysée au moyen d’un test par résonance plasmonique de surface (cf. figure 3). Un composé est considéré comme inhibant l’interaction des protéines AIF et CHCHD4 si l’inhibition obtenue avec le composé correspond à au moins 50% de l’inhibition obtenue avec le contrôle positif, à savoir avec le peptide N27. Le test par résonnance plasmonique de surface a confirmé que la thioridazine et la mitoxantrone sont capables d’inhiber l’interaction entre les protéines AIF et CHCHD4. Références Hangen, E., et al., Interaction between AIF and CHCHD4 regulates respiratory chain biogenesis. Molecular cell, 2015. 58(6): p. 1001-1014. Shen, J., et al., Thioridazine has potent antitumor effects on lung cancer stem‑like cells. Oncology letters, 2017. 13(3): p. 1563-1568. Procédé d’identification d’un composé potentiellement utile pour le traitement d’un cancer, caractérisé en ce qu’il comprend l’évaluation de la capacité d’un composé à inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4, ledit composé étant identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer s’il inhibe ladite interaction. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu’il comprend : (a) la mise en contact de la protéine AIF et de la protéine CHCHD4 en présence et en l’absence dudit composé ; (b) la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4, en présence et en l’absence dudit composé ; et (c) la comparaison de la mesure de ladite interaction en présence et en l’absence dudit composé; ledit composé étant identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer si la mesure de ladite interaction est moins élevée en présence dudit composé qu’en l’absence dudit composé. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que ledit composé est identifié comme potentiellement utile pour le traitement d’un cancer s’il inhibe d’au moins 50%, 60%, 70%, 80% ou d’au moins 90%, l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Procédé selon la revendication 2 ou 3, caractérisé en ce que la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 est effectuée au moyen d’un test homogène de proximité à luminescence amplifiée (ALPHA), d’un test de résonance plasmonique de surface (SPR), d’une méthode de thermal shift assay (TSA), d’une méthode d’immuno-précipitation, d’un test de titration calorimétrique isotherme (ITC), d’un test de transfert d'énergie par résonance en fluorescence (FRET), d’un test de polarisation de fluorescence ou d’un test ELISA, de préférence au moyen d’un test homogène de proximité à luminescence amplifiée (ALPHA) ou d’un test de résonance plasmonique de surface (SPR). Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant en outre la confirmation, dans un modèle cellulaire ou animal non humain de cancer, des propriétés anticancéreuses du composé identifié. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant : (i) la détermination de la capacité dudit composé à inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4, au moyen d’un test homogène de proximité à luminescence amplifiée (ALPHA) ; (ii) la détermination de la capacité dudit composé à inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4, au moyen d’un test de résonance plasmonique de surface (SPR) ; et (iii) la confirmation, dans un modèle cellulaire ou animal non humain de cancer, des propriétés anticancéreuses du composé identifié. Kit pour l’identification d’un composé potentiellement utile pour le traitement d’un cancer, caractérisé en ce qu’il comprend : - une protéine AIF ; - une protéine CHCHD4 ; - des moyens adaptés à la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4; - optionnellement un tampon adapté à l’expérience de mesure de ladite interaction ; et - optionnellement un composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4. Kit selon la revendication 7, dans lequel les moyens adaptés à la mesure de l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 sont des moyens adaptés à un test homogène de proximité a luminescence amplifiée (ALPHA). Kit selon la revendication 7 ou 8, dans lequel ledit tampon comprend du tampon phosphate salin (PBS) et de l’albumine de sérum bovin (BSA). Kit selon l’une quelconque des revendications 7 à 9, dans lequel ledit composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 consiste en la séquence de SEQ ID NO :4 ou tout variant fonctionnel ayant au moins 70%, 80%, 90%, ou au moins 99% d’identité avec la séquence de SEQ ID NO :4. Kit selon l’une quelconque des revendications 7 à 9 dans lequel ledit composé capable d’inhiber l’interaction entre la protéine AIF et la protéine CHCHD4 est sélectionné dans le groupe constitué par : disulfirame, mésylate de bromocriptine, chlorhydrate de thioridazine, Chicago sky blue 6B, Dichlorhydrate de mitoxantrone, rifapentine, pentachlorhydrate de tétraéthylènepentamine, Nisoldipine, merbromine, dimalate de thiéthylpérazine et chlorhydrate de benidipine.