Brevet FR3101240A1 — publié le 20210402

PROCEDE DE TRAITEMENT DE CORNEES La présente invention relève du domaine de l’ophtalmologie plus précisément des kératoplasties. La présente invention concerne un procédé de traitement de greffon de cornée, caractérisé en ce qu’il comprend au moins les étapes de : collecte d’une cornée, préparation d’un greffon de cornée, dessiccation du greffon de cornée sous vide en température positive. PROCEDE de traitement de cornées La présente invention relève du domaine de l’ophtalmologie plus précisément des kératoplasties ou plus communément appelées greffes de cornées. La présente invention est relative à un procédé de traitement de cornées issues de donneurs dans un but de préservation ou de recyclage de cornées périmées dont la viabilité est jugée insuffisante. Art antérieur La greffe de cornée consiste à remplacer une cornée malade par un cornée saine d'un donneur décédé. Depuis des années, le prélèvement de cornées se pratique dans de nombreux pays européens. Actuellement, seule la collerette cornéo-sclérale est retirée chez les patients décédés à cœur arrêté ou dans le cadre d'un prélèvement multi-organes. La cornée, tissu transparent et avasculaire, est la partie la plus antérieure de la paroi du globe oculaire. Elle est convexe et asphérique, ce qui lui confère un pouvoir réfractif. Son épaisseur est de 0,5 mm au centre, elle augmente progressivement vers la périphérie pour atteindre 0,7mm. Ses dimensions correspondent horizontalement à 11-12mm et verticalement à 9-11 mm. Elle est composée de 6 couches : le film lacrymal, l'épithélium, la couche de Bowman, le stroma, la membrane de Descemet, et l'endothélium. La cornée compte 3 fonctions principales : protéger les tissus intra-oculaires, transmettre la lumière par sa transparence, focaliser les images par son pouvoir dioptrique. Plusieurs pathologies peuvent entraîner le recours à une kératoplastie, notamment : les anomalies de développement de la cornée, les dystrophies de cornée héréditaires, les anomalies d’épaisseur comme le kératocône et le kératoglobe, les anomalies de surcharge comme le gérotoxon, les pathologies épithéliales, les pathologies endothéliales, les kératites qu'elles soient virales, bactériennes, toxiques..., les traumatismes, les tumeurs. Il existe différents types de kératoplasties : la kératoplastie transfixiante (KT) qui permet le changement de toute l’épaisseur de la cornée la Photo Kératectomie Thérapeutique (PTK) qui permet de traiter une cornée au laser jusqu’à 100 µm ; la Kératoplastie Lamellaire Automatisée (ALTK) qui permet de traiter des lésions jusqu’à 250 µm pour la technique dite superficielle et des lésions de toute l’épaisseur de la cornée pour la technique dite profonde ; la Kératoplastie Lamellaire Antérieure Profonde (KLAP) qui permet de traiter des lésions jusqu’à la membrane de Descemet ; la Kératoplastie Lamellaire Postérieure (DSAEK et DMEK) et l’Endokératoplastie (EKP) qui permettent de traiter les pathologies endothéliales. La législation impose comme à toutes les activités de transplantation d'organes et de tissus, un cadre précis dont les principaux objectifs sont le respect des personnes décédées, la transparence de l'activité et la sécurité sanitaire. Les dispositions actuelles sont issues essentiellement de la loi n094-654 du 29 juillet 1994 dite loi Bioéthique relative aux dons et à l'utilisation des éléments et produits du corps humain, à l'assistance médicale à la procréation et au diagnostic prénatal, de ses décrets d'application et arrêtés. Il existe 2 moyens de conservation des greffons de cornées : La conservation hypothermique à +4°C permet de conserver la cornée pendant une semaine. Cette conservation est surtout utilisée aux Etats Unis. L’organo-culture utilisée en Europe permet une conservation à +31°C pendant une durée plus longue d'environ 5 semaines. Cette culture permet une grande sécurité bactériologique des greffons, puisque ceux-ci sont traités pendant deux semaines et qu'à l'issue de ce délai on élimine les greffons porteurs de germes résistants. Du fait des procédures très strictes de prélèvement et de conservation, seulement 60% des cornées prélevées sont greffées. Le déficit de donneurs et le prix élevé des cornées importées implique de trouver des procédés de conservation des cornées permettant de prolonger leur durée de vie pour une utilisation en kératoplastie. Une technique de conservation courante est la lyophilisation. L’utilisation de cornées lyophilisées destinées à la kératoplastie est bien connue de l’art antérieur. Par exemple, la publication de Farias R et al. « Deep anterior lamellar transplant using lyophilized and Optisol corneas in patients with keratoconus », divulgue l’utilisation de cornées lyophilisées pour des kératoplasties lamélaires antérieures profondes. La publication de Lee et al. 2009, « The effect of lyophilization on graft acceptance in experimental xenotransplantation using porcine cornea », divulgue les effets antigéniques moindres d’une cornée porcine lyophilisée en comparaison à une cornée porcine fraiche. Cette technique possède néanmoins l’inconvénient d’entrainer la formation de cristaux lors de la phase de congélation même en présence d’une faible quantité d’eau, cristaux qui vont dégrader les micro-fibrilles et entrainer une désorganisation des fibres de collagène. La cornée devient alors blanche et le stroma est désorganisé. Cette technique ne permet également pas de contrôler la qualité de la transparence du produit par l’observation. Le document WO2014089548 divulgue un procédé de préparation d’un tissu biologique pouvant être une cornée. Le procédé comprend une étape de déshydratation du tissu qui peut être réalisée par séchage sous vide. Le procédé de traitement de cornées mis au point par la demanderesse se démarque des de l’art antérieur en ce qu’il comprend une étape de dessiccation de la cornée sous vide à température positive par augmentation progressive de la température. Procédé de traitement de greffon de cornée, caractérisé en ce qu’il comprend au moins les étapes de : collecte d’une cornée, préparation d’un greffon de cornée, dessiccation du greffon de cornée sous vide en température positive. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la dessiccation du greffon de cornée sous vide en température positive est réalisée par montée progressive de la température. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que la montée progressive de la température s’effectue jusqu’à 35°C. Procédé selon l’une quelconque des revendications 2 à 3, caractérisé en ce que la montée progressive de la température s’effectue entre 0°C et 35°C. Procédé selon l’une quelconque des revendications 2 à 4, caractérisé en ce que la montée progressive de la température s’effectue par paliers de 5°C. Procédé selon l’une quelconque des revendications précedentes, caractérisé en ce que la dessication sous vide est réalisée sous des pressions comprises entre 900 et 50 microbars. Procédé selon l’une quelconque des revendications précedentes, caractérisé en ce qu’il comprend une étape de stérilisation par irradiation. Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que la stérilisation par irradiation est choisie dans le groupe constitué de l’irradiation par rayonnement beta, l’irradiation par rayonnement gamma, l’irradiation par rayons X, l’irradiation par faisceau d’électrons, et de leurs combinaisons. Procédé selon selon l’une quelconque des revendications précedentes, caractérisé en ce qu’il comprend une étape de réhydratation du greffon de cornée. Procédé selon l’une quelconque des revendications précedentes, caractérisé en ce que la cornée ou le greffon de cornée est issu(e) d’organoculture. Procédé selon selon la revendication 10, caractérisé en ce qu’il comprend une étape de traitement de déturgescence de la cornée ou du greffon de cornée antérieurement à l’étape de dessication. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que le traitement de déturgescence de la cornée ou du greffon de cornée est réalisé par l’utilisation d’une solution comprenant un disaccharide. Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que le traitement de déturgescence de la cornée ou du greffon de cornée est réalisé par l’utilisation d’une solution de saccharose. Procédé selon la revendication 13, caractérisé en ce que le traitement de déturgescence de la cornée ou du greffon de cornée par utilisation d’une solution de saccharose est réalisée par diminution progressive du taux de saccharose. Procédé selon selon l’une quelconque des revendications 10 à 14, caractérisé en ce qu’il comprend une étape de rincage de la cornée ou du greffon de cornée.