Brevet FR3099056A1 — publié le 20210129

Description Titre de l'invention : Utilisation de l'ANP pour détruire les biofilms bactériens [0001] La présente invention concerne la destruction de biofilms bactériens, en particulier dans le cadre (l'infections chroniques bactériennes. [0002] La résistance des bactéries aux antibiothérapies est largement attribuée à leur capacité à passer d'une forme de vie planctonique à une forme de vie communautaire, nommée biofilm, dans les tissus de l'hôte infecté. Le biofilm permet aux bactéries de se protéger contre les molécules antimicrobiennes et les défenses immunitaires de l'hôte, permettant ainsi aux pathogènes de survivre dans des environnements hostiles en leur conférant unc résistance à diverses molécules antibactériennes. De plus, un faible pourcentage de cellules bactériennes qualifiées de « cellules persistantes » se maintiennent au sein d'un biofilm exposé aux antibiotiques devenant donc temporairement résistantes et responsables de la reprise d'infections récurrentes. [0003] Lc pathogène opportuniste Pseudomonas aeruginosa est une cause majeure de mortalité chez les patients immunodéprimés, en particulier chez les patients souffrant de mucoviscidose. [0004] Lc traitement des infections sévères à P. aeruginosa est réalisé au moyen de plusieurs antibiotiques présentant, pour les plus efficaces (la tobramycine, la colistine, la ciprotloxacine, la gentamicine, la nétilmicine et l'amikacinc) un index thérapeutique étroit dû à l'existence d'une néphrotoxicité et d'une ototoxicité. Par ailleurs, ces traitements engendrent dans la durée l'apparition de souches résistantes aux antibiotiques. [0005] C'est la raison pour laquelle P. aeruginosa a été classé dans le groupe de bactéries ESKAPE (Santajit et Indrawattana (2016) Biomed. Res. bu. 2016 :2475067), regroupant les pathogènes les plus critiques en termes de résistance aux antibiotiques et nécessitant la découverte de nouvelles molécules ou stratégies thérapeutiques. Plus récemment, l'OMS a classé P. aeruginosa dans le top 3 des priorités en terme de bactéries critiques pour leurs antibio-résistances (aux carbapénèrnes en particulier). [0006] La présente invention vise à répondre à ce besoin. [0007] La présente invention résulte de la découverte inattendue, par les inventeurs, que l'hormone « Peptide Natriurétique Auriculaire » ou ANP (« Atrial Natriuretic Peptide en anglais) est capable, à faible dose (dès 0.1 nM), et très rapidement (dès 30 min après administration), de détruire environ 80% des biofilms de P. aeruginosa préétablis et ceci de manière dose-dépendante. [0008] Les peptides natriurétiques constituent une famille d'hormones initialement 2 identifiées pour leurs activités cardiovasculaires, osmorégulatrices, de régulation de la pression artérielle et d'élimination de sodium par les reins (natriurèse, d'où leur nom). Les trois membres principaux de cette famille sont I'ANP, le peptide « Drain Natriuretic Peptide » ou BNP et le peptide « C-type Natriuretic Peptide » ou CNP. La longueur de ces peptides est comprise entre 22 et 38 acides aminés et leur structure est caractérisée par un pont disulfure formant une boucle de 17 acides aminés conférant à cette molécule une forme dite « omega ». [0009] Il a été précédemment montré que r ANP, le BNP et le CNP empêchaient la formation de biofilm de P. aerogitzoso (Dcsriac et aL The natriuretic peptide hormones prevent Pseudomonos aerugitzosa biofilm formation through a spccific bactcrial target. I 6th international conference on Pseuclomonos, Sep 2017, Liverpool, United Kingdom; Rosay et aL (2015) 11/1Bio6 :6 ; Dcsriac et al. (2018) Pothogens7 :47). [0010] Toutefois, aucune action de ces peptides sur des biofilms déjà établis n'a été montrée à cc jour. [0011] Les inventeurs ont en outre ici montré que la capacité de I'ANP dc disperser les biofilms déjà établis n'était pas associée ou duc à une capacité de l'ANP à tuer les bactéries et est sans effet sur la virulence intrinsèque des bactéries. Ce mode d'action particulier permet d'éviter l'émergence de souches bactériennes résistantes à cette molécule. [0012] Par ailleurs, les inventeurs ont montré que lorsque r ANP, à faible dose, est utilisé en combinaison avec un antibiotique, tel que la tobramycine ou la ciprofloxacine, lui-même utilisé à faible dose, plus de 97% du biofilm établi est détruit. [0013] Ainsi, l'ANP et les antibiotiques présentent une action synergique sur la destruction des biofilms bactériens. [0014] La présente invention concerne donc un peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP pour son utilisation dans une méthode de traitement thérapeutique d'une infection bactérienne, en particulier d'une infection bactérienne chronique, associée à un biofilm bactérien chez un sujet, dans laquelle ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP disperse ledit biofilm bactérien. [0015] Dans un mode de réalisation particulier, ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP est utilisé en combinaison avec un antibiotique. [0016] Un autre objet de l'invention concerne une composition pharmaceutique comprenant (i) un peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP et (ii) un antibiotique. [0017] Un autre objet de l'invention concerne une combinaison pharmaceutique antibac- térienne comprenant (i) un peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP et (ii) un antibiotique pour une utilisation simultanée, séparée ou séquentielle dans le traitement thérapeutique d'une infection bactérienne, en particulier d'une infection 3 bactérienne chronique, associée à un biofilm bactérien chez un sujet. [0018] La présente invention concerne également l'utilisation in vitro d'un peptide ANP, d'un propeptide d'ANP ou d'un dérivé de peptide ANP pour disperser un hiofilm bactérien. Description détaillée de l'invention [0019] ANP, propeptide d'ANP ou dérivé d'ANP et peptides natriurétiques [0020] Par "peptide natriurétique", on entend ici un membre de la famille d'hormones et neurohormones eucaryotes composée de 3 principaux membres : le peptide natriurétique auriculaire (« Atrial Natriuretic Peptide ») ou ANP, le peptide natriurétique de type B (« Brain Natriuretic Peptide ») ou BNP et le peptide natriurétique de type C (« C-type Natriuretic Peptide ») ou CNP. Ces peptides sont principalement synthétisés et libérés par les cardiomyocytes et les cellules endothéliales. [0021] Par "ANP", on entend ici le peptide correspondant à la principale forme mature issue du clivage du fragment N-terminal de la pro-hormone proANP. [0022] Typiquement l'ANP humaine est un peptide de 28 acides aminés issu du clivage du fragment N-terminal de la pro-hormone proANP de 126 acides aminés. L'ANP humaine est formée des acides aminés 99 à 126 de la pro-hormone proANP. [0023] L'ANP est un peptide très conservé dans sa séquence en acides aminés puisque cette séquence est identique entre l'homme, les singes, les gorilles, le cochon, les chevaux et les moutons par exemple (Takei et al. (2011) General and Comparative Endocrinology 171 :258-266). Toutefois, chez de nombreuses espèces animales qui l'expriment, quelques différences de séquence sont observées. Ainsi, le rat, la souris et le lapin ont un acide aminé différent en position 12 (Isoleucine à la place d'une Méthionine chez l'homme). De même, l'éléphant présente un ANP raccourci à 27 aminés et deux acides aminés différents par rapport à l'homme (Takci et al. (2011) General and Comparative Endocrinology171 :258-266). [0024] Par « propeptide d'ANP », on entend ici tout peptide issu de l'expression du gène codant le preproANP, de la maturation et des clivages, éventuellement successifs, du preproANP, et comprenant la séquence peptidique de l'ANP. [0025] Lc terme « propcptide d'ANP » inclut ainsi la pro-hormone proANP (typiquement de 126 acides aminés chez l'homme) portant l'ANP dans sa partie C-terminale, la préprohormone preproANP (typiquement de 151 acides aminés chez l'homme), qui correspond à la protéine produite chez l'homme par le gène NPPA. Le preproANP porte un peptide signal qui est clivé pour former le proANP. [0026] Dans le contexte de la présente invention, le terme « propeptide d'ANP » inclut également tout peptide issu de la maturation et des clivages du preproANP et du proANP. [0027] L'ANP consiste typiquement en la séquence d'acides aminés SLRRSSCFGGRM- DRIGAQSGLGCNSFRY (SEQ TD NO : 1), avec un pont disulfurc localisé entre les acides aminés 7 et 23. [0028] Le proANP consiste typiquement en la séquence d'acides aminés NPMYNAVS- NADLMDFKNLLDHLEEKMPLEDEVVPPQVLSEPNEEAGAALSPLPEVPPWTGE VSPAQRDGGALGRGPWDSSDRSALLKSKLRALLTAPRSLRRSSCFGGRMDRIG AQSGLGCNSFRY (SEQ TD NO : 5). [0029] Le preproANP consiste typiquement en la séquence d'acides aminés MSSFSTTTVS- FLLLLAFQLLGQTRANPMYNAVSNADLMDFKNLLDHLEEKMPLEDEVVPPQV LSEPNEEAGAALSPLPEVPPWTGEVSPAQRDGGALGRGPWDSSDRSALLKSKL RALLTAPRSLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (SEQ ID NO : 6). [0030] Par « dérivé d'ANP », on entend ici des dérivés naturels ou synthétiques de l'ANP. [0031] Par « dérivé d'ANP », on entend ici un peptide ANP tel que défini ci-dessus dans lequel un ou plusieurs résidus d'acide aminé a été modifié chimiquement, par exemple par alkylation, acylation, amidation, méthoxylation, formation d'ester, formation d'amide, insertion d'un substituant lipophile, ajout de polyéthylène glycol (PEG), ajout d'une chainc glucidique. [0032] Par « dérivé d'ANP », on entend ici également des formes tronquées d'ANP cor- respondant aux acides aminés 4 ou 5 à 28 de la forme entière de r ANP, des formes ayant une structure qui est un dimère antiparallèle de l'ANP, en particulier l'homodimère [3-ANP, un polymère constitué de monomères d'ANP. [0033] Par « dérivé d'ANP », on entend aussi des variants peptidiques d'ANP, c'est-à-dire des formes intermédiaires obtenues au cours de la synthèse, la maturation et la dégradation partielle de l'ANP tel que défini ci-dessus, ainsi que des peptides ANP dans lesquels 1 à 12, en particulier 1 à 10, en particulier 1 à 5, en particulier 1 à 4, en particulier 1 à 3, plus particulièrement 1 ou 2 acides aminés ont été supprimés, substitués ou ajoutés et conservant l'activité de l'ANP sauvage. [0034] Dans un mode de réalisation particulier, le dérivé d'ANP est un peptide ANP dans lequel a été substitué l'acide aminé Phénylalanine (Phe) de la boucle en position 8 (et remplacé par un acide aminé Alanine par exemple). [0035] Dans un autre mode de réalisation particulier, le dérivé d'ANP est un peptide ANP dans lequel a été substitué l'acide aminé Phénylalanine (Phe) en position 26 ou l'acide aminé Sérine en position 25, deux acides aminés responsables de la dégradation de l'ANP sauvage (Ichiki and Burnett (2017) Cire 181:913-919). [0036] Dans un mode de réalisation particulier, le dérivé d'ANP est une forme allongée de FANE', l'urodilatine, de séquence TAPRSLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCNSFRY (SEQ ID NO : 2), avec un pont disulfure entre les acides aminés 11 et 27. Ce peptide correspond à un ANP allongé de 4 acides aminés du coté N-terminal. [0037] Dans un autre mode de réalisation particulier, le dérivé d'ANP est une forme allongée du peptide ANP de 12 acides aminés, tel que le fsANP qui est une forme allongée de l'ANP de 12 acides aminés du côté C-terminal et qui est présente chez les personnes portant une mutation dans le gène codant r ANP (Dickey et al. (2009) J Biol Chern284:19196-19202). [0038] Dans un autre mode de réalisation particulier, le dérivé d'ANP est une version li- néarisée de l'ANP, avec clivage du pont disulfure (initialement localisé entre les acides aminés 7 et 23). [0039] Typiquement, les dérivés d'ANP pouvant être utilisés dans le cadre de la présente invention sont de préférence modifiés par rapport à l'ANP de manière à avoir une 1/2 vie plus longue que l'ANP et/ou d'avoir une affinité plus faible que r ANP pour les récepteurs endogènes humains de l'ANP. [0040] Par « autre peptide natriurétique », on entend ici un peptide natriurétique qui n'est pas r ANP, un propeptide d'ANP ou un dérivé d'ANP (tel que l'urodilatine). Typiquement, un autre peptide natriurétique est le BNP, un propeptide de BNP ou un dérivé du BNP, et/ou le CNP, un propeptide de CNP ou un dérivé du CNP. [0041] Par "BNP", on entend ici un peptide de 32 acides aminés issu du clivage du fragment N-terminal de la pro-hormone proBNP de 108 acides aminés, et qui correspond à la forme mature de l'hormone. Le BNP humain est ainsi formé des acides aminés 77 à 108 de la pro-hormone proBNP. [0042] Par « propeptide de BNP », on entend ici la pro-hormone proBNP de 108 acides aminés portant le BNP dans sa partie C-terminale et/ou la préprohormone preproBNP de 134 acides aminés, qui correspond à la protéine produite, chez l'homme par le gène NPPB. Le preproBNP porte un peptide signal qui est clivé pour former le proBNP de 108 acides aminés. [0043] Le BNP consiste typiquement en la séquence d'acides aminés SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (SEQ ID NO : 3), avec un pont disulfure entre les acides aminés 10 et 26. [0044] Le proBNP consiste typiquement en la séquence d'acides aminés HPLGSPGSASD- LETSGLQEQRNHLQGKLSELQVEQTSLEPLQESPRPTGVWKSREVATEGIRGH RKMVLYTLRAPRSPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSGLGCKVLRRH (SEQ ID NO : 7). [0045] Le preproBNP consiste typiquement en la séquence d'acides aminés MDPQTAPS- RALLLLLFLHLAFLGGRSHPLGSPGSASDLETSGLQEQRNHLQGKLSELQVEQT SLEPLQESPRPTGVWKSREVATEGIRGHRKMVLYTLRAPRSPKMVQGSGCFOR KMDRISSSSGLGCKVLRRH (SEQ ID NO : 8). [0046] Par « dérivé de BNP », on entend ici des dérivés naturels ou synthétiques du BNP. [0047] Par « dérivé de BNP », on entend ici un peptide BNP tel que défini ci-dessus dans 6 lequel un ou plusieurs résidus d'acide aminé a été modifié chimiquement, par exemple par alkylation, acylation, amidation, méthoxylation formation d'ester, formation d'amide, insertion d'un substituant lipophile, ajout de polyéthylène glycol (PEG), ajout d'une chainc glucidique. [0048] Par « dérivé de BNP », on entend aussi des variants peptidiques de BNP, c'est-à-dire des formes intermédiaires obtenues au cours de la synthèse, la maturation et la dégradation partielle du BNP tel que défini ci-dessus, ainsi que des peptides BNP dans lesquels 1 à 5, en particulier 1 à 4, en particulier 1 à 3, plus particulièrement 1 ou 2 acides aminés ont été supprimés, substitués ou ajoutés et conservant l'activité du BNP sauvage, en particulier le BNP4-32 dans lequel les 3 premiers acides aminés N-terminaux du BNP sont absents. [0049] Dans un mode de réalisation particulier, le dérivé de BNP est une version linéarisée du BNP, avec clivage du pont disulfure (initialement localisé entre les acides aminés 10 et 26). [0050] Typiquement, les dérivés de BNP pouvant être utilisés dans le cadre de la présente invention sont de préférence modifiés par rapport au BNP de manière à avoir une 1/2 vie plus longue que le BNP et/ou d'avoir une affinité plus faible que le BNP pour les récepteurs endogènes humains du BNP. [0051] Par « CNP », on entend ici un peptide de 22 acides aminés issu du processing du CNP-53 de 53 acides aminés lui-même issu du clivage du fragment N-terminal de la pro-hormone proCNP de 126 acides aminés, et qui correspond à la forme mature de l'hormone. Le CNP humain est ainsi formé des acides aminés 105 à 126 de la pro-hormone proCNP. [0052] Par « propeptide de CNP », on entend ici la forme CNP-53 de 53 acides aminés et/ou la pro-hormone proCNP de 103 acides aminés portant le CNP dans sa partie C-terminale et/ou la préprohormone preproCNP de 126 acides aminés, qui correspond à la protéine produite, chez l'homme par le gène NPPC. Le preproCNP porte un peptide signal qui est clivé pour former le proCNP de 103 acides aminés. [0053] Le CNP consiste typiquement en la séquence d'acides aminés GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (SEQ ID NO : 4), avec un pont disulfure entre les acides aminés 6 et 22. [0054] Le CNP-53 consiste typiquement en la séquence d'acides aminés DLRVDTKSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (SEQ ID NO : 9) [0055] Le proCNP consiste typiquement en la séquence d'acides aminés KPGAPPKVPRTPPAEELAEPQAAGGGQKKGDKAPGGGGANLKGDRSRLLRDLRVDTKSRAAWA RLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC (SEQ ID NO : 10). [0056] Le preproCNP consiste typiquement en la séquence d'acides aminés MHLSQLLA- 7 CALLLTLLSLRPSEAKPGAPPKVPRTPPAEELAEPQAAGGGQKKGDKAPGGGG ANLKGDRSRLLRDLRVDTKSRAAWARLLQEHPNARKYKGANKKGLSKGCFG LKLDRIGSMSGLGC (SEQ ID NO : 11). [0057] Par « dérivé de CNP », on entend ici des dérivés naturels ou synthétiques du CNP. [0058] Par « dérivé de CNP », on entend ici un peptide CNP tel que défini ci-dessus dans lequel un ou plusieurs résidus d'acide aminé a été modifié chimiquement, par exemple par alkylation, acylation, amidation, méthoxylation formation d'ester, formation d'amide, insertion d'un substituant lipophile, ajout de polyéthylène glycol (PEG), ajout d'une chainc glucidique. [0059] Par « dérivé de CNP », on entend aussi des variants peptidiques de CNP, c'est-à-dire des formes intermédiaires obtenues au cours de la synthèse, la maturation et la dégradation partielle du CNP tel que défini ci-dessus, ainsi que des peptides CNP dans lesquels 1 à 5, en particulier 1 à 4, en particulier 1 à 3, plus particulièrement 1 ou 2 acides aminés ont été supprimés, substitués ou ajoutés et conservant l'activité du CNP sauvage. [0060] Dans un mode de réalisation particulier, le dérivé de CNP est une version linéarisée du CNP, avec clivage du pont disulfure (initialement localisé entre les acides aminés 6 et 22). [0061] Typiquement, les dérivés de CNP pouvant être utilisés dans le cadre de la présente invention sont de préférence modifiés par rapport au CNP de manière à avoir une 1/2 vie plus longue que le CNP et/ou d'avoir une affinité plus faible que le CNP pour les récepteurs endogènes humains du CNP. [0062] Ces divers peptides natriurétiques présentent une certaine similarité structurelle. Tous possèdent en effet une boucle de 17 acides aminés formée par un pont disulfure. Parmi les 17 acides aminés qui forment cette boucle, 10 sont communs aux trois peptides. En revanche, de nombreuses différences dans la séquence en acides aminés de leurs extrémités C et N terminales sont observées, expliquant leurs activités physiologiques différentes. D'autre part, le CNP présente la particularité d'une absence de queue à l'extrémité C terminale. Il est intéressant de noter qu'outre les produits finaux actifs présentés ci-dessus, la synthèse, la maturation et la dégradation partielle des peptides natriurétiques peuvent aboutir à la production de nombreux variants possédant une activité physiologique. Ainsi, au 23 juillet 2019, trois variants du CNP et 16 variants du BNP sont répertoriés sur la banque de données UniProt (https://www.uniprot.org/). [0063] Outre l'ANP, le BNP et le CNP qui sont les trois principaux peptides natriurétiques humains, il existe d'autres membres de cette famille chez l'homme et dans le règne animal : l'urodilatine, décrite ci-dessus, l'uroguanyline, la guanyline, le VNP, le DNP et le KNP. [0064] Le peptide natriurétique ventriculaire (VNP) a initialement été identifié chez 8 l'anguille comme étant un peptide possédant des fonctions physiologiques semblables à celles de I'ANP et qui a, depuis, été identifié chez de nombreuses espèces de poissons (Kawakoshi et al. (2004) J. Mol. Endocrinol. 32 :547-555). [0065] Le dcndroapsis natriurctic peptide (DNP) a été identifié dans le venin du serpent mamba vert (Schweitz et aL (1992) J. Biot. Chem. 267 :13928-13932) et le Krait natriuretic peptide (KNP) a été identifié dans le venin du serpent Bungarus flaviceps (Sridharan et al. (2015) Biochem. J. 469 :255-266). [0066] De nombreux autres composés similaires aux peptides natriurétiques sont régu- lièrement identifiés dans les venins de vipères comme les léhétines isolées du venin de Macrovipera lebetina, de grands reptiles comme les dragons de Komodo (Natriuretic pcptidc toxin Var2) (Fry et aL (2009) Proc. Nad Acad. Sci. USA 106 :8969-8974) et, de même, dans le venin de scorpions (Alves et al. (2013) Toxicon74 :19-26). Ils sont généralement appelés peptides à activités natriurétiques-like. Parmi ceux-ci, les peptides natriurétiqucs préférés sont les latines L2ct (Glyl -Gly38) et Ll (Asp2-G1y13). Enfin, il est décrit chez la bactérie Escherichia cati la présence d'une cntérotoxine dénommée ST (« heat-stable cntcrotoxin ») qui présente une structure pcptidiquc proche de la guanylinc et de l'uroguanylinc humaines et qui présente une activité natriurétiquc-likc. [0067] Dans un mode de réalisation particulier, l'autre pcptidc natriurétiquc est choisi dans le groupe constitué du BNP, du propcptide de BNP, de dérivés de BNP, comme définis ci-dessus, du CNP, du propeptide de CNP, de dérivés de CNP, comme définis ci-dessus, du VNP, du DNP, du KNP, des lébétines, et des mélanges de ceux-ci. [0068] Dans un mode de réalisation particulier, l'autre peptide natriurétique est choisi dans le groupe constitué du BNP, du propeptide de BNP, de dérivés de BNP, comme définis ci-dessus, du CNP, du propeptide de CNP, de dérivés de CNP, comme définis ci-dessus et des mélanges de ceux-ci. [0069] BiolHm bactérien et infection bactérienne [0070] Par « infection bactérienne », on entend ici une infection due à une ou plusieurs espèces de bactéries, en particulier des bactéries à Gram négatif et/ou à Gram positif [0071] Dans un mode de réalisation particulier, l'infection bactérienne est une infection bac- térienne chronique. [0072] Dans un mode de réalisation particulier, l'infection bactérienne est une infection à une bactérie à Gram négatif. [0073] Dans un mode de réalisation particulier, l'infection bactérienne est une infection à une bactérie du genre Pseudomonas, plus particulièrement de l'espèce Pseudomonas aeruginosa. [0074] Dans un autre mode de réalisation particulier, l'infection bactérienne est une infection à une bactérie à Gram positif 9 [0075] Dans un mode de réalisation particulier, l'infection bactérienne est une infection à une bactérie du genre Staphylococcus, plus particulièrement de l'espèce Staphylococcus aureus. [0076] Par « biofilm bactérien », on entend ici une communauté de bactéries adhérant entre elles et à une surface. La production de hiofilm est caractérisée par la sécrétion d'une matrice qui est susceptible d'adhérer à de nombreux types de surface, et permettre la cohésion et la protection des bactéries constituant cette structure. [0077] Dans le cadre de l'invention, le hiofilm bactérien comprend au moins la ou les espèces bactériennes responsables de l'infection à traiter. [0078] Dans le cadre de l'invention, ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé dc peptide ANP disperse le biofilm bactérien. [0079] Par « dispersion du hiofilm bactérien » ou « destruction du biofilm bactérien », on entend ici que les bactéries formant la communauté constituant le hiofilm bactérien se séparent les unes des autres et de la surface, dc sorte que le hiofilm diminue voire disparait, rendant typiquement les bactéries à nouveau accessibles aux antibiotiques. [0080] Dans un mode de réalisation particulier, ledit hiofilm bactérien est dispersé à au moins 65%, en particulier à au moins 70%, au moins 75%, au moins 80%, au moins 85%, au moins 90%, au moins 95% ou au moins 100%. [0081] Avantageusement, ledit peptide ANP, propeptidc d' ANP ou dérivé de peptide ANP disperse le hiofilm bactérien sans tuer les bactéries constituant ce hiofilm. [0082] Il est toutefois à noter que lorsque ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP est utilisé en combinaison avec un antibiotique, les bactéries constituant le biofilm peuvent être tuées par ledit antibiotique, notamment lorsqu'elles sont libérées suite à l'effet dispersif de l'ANP, d'un propeptide d'ANP ou d'un dérivé d'ANP. [0083] Application thérapeutique [0084] La présente invention concerne un peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP, tel que défini dans la section «ANP, propeptide, dérivé d'ANP et peptides natriurétiques » ci-dessus pour son utilisation dans une méthode de traitement thérapeutique d'une infection bactérienne associée à un biofilm bactérien, telle que définie dans la section «Biofilin bactérien et infection bactérienne » ci-dessus chez un sujet, dans laquelle ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP disperse ledit biofilm bactérien. [0085] La présente invention concerne également l'utilisation d'un peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP, tel que défini dans la section «ANP, propeptide, dérivé d'ANP et peptides natriurétiques » ci-dessus pour la fabrication d'un médicament pour le traitement thérapeutique d'une infection bactérienne associée à un biofilm bactérien, telle que définie dans la section «Biofilm bactérien et infection bac- térietuie » ci-dessus chez un sujet, dans laquelle ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP disperse ledit hiofilm bactérien. [0086] La présente invention concerne également une méthode de traitement thérapeutique d'une infection bactérienne associée à un hiofilm bactérien, telle que définie dans la section «Biofilm bactérien et infection bactérienne » ci-dessus chez un sujet souffrant d'une infection bactérienne, en particulier d'une infection chronique bactérienne, comprenant l'administration audit sujet d'une quantité thérapcutiqucment efficace d'un peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP, tel que défini dans la section «ANP, propeptide, dérivé d'AMY et peptides natriurétiques » ci-dessus, dans laquelle ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP disperse ledit hiofilm bactérien. [0087] Par « sujet », on entend ici un humain ou un animal tel qu'un mammifère non humain, un oiseau ou un poisson. [0088] Dans un mode de réalisation particulier, le sujet souffre d'une pathologie respiratoire chronique, telle que la mucoviscidose, une hronchopneumopathic chronique obs- tructive ou une bronchectasic. De préférence, le sujet souffre de mucoviscidose. [0089] Dans un autre mode de réalisation particulier, ledit sujet souffre de brûlures im- portantes (grand brûlé) ou d'une infection de surface. [0090] Dans un autre mode de réalisation, ledit sujet porte un implant et/ou une prothèse. [0091] Dans un mode de réalisation particulier, ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP est utilisé en combinaison avec un antibiotique. [0092] Par « antibiotique », on entend ici une substance naturelle ou synthétique détruisant ou bloquant la croissance des bactéries. [0093] Les antibiotiques incluent : [0094] les antibiotiques inhibiteurs de la synthèse des enveloppes bactériennes parmi lesquels : les beta-lactamines, en particulier : - les pénicillines dont les pénicillines du groupe A telles que l'amoxicilline ; les pénicillines du groupe G et V telles que la benzathine benzylpénicilline, la benzathine pénicilline, la benzathine phenoxyméthylpénicilline, les pénicillines G et la pénicilline V ; les pénicillines du groupe M telles que la cloxacilline et l'oxacilline ; les carboxypénicillines telles que la ticarcilline les uréidopénicillines telles que la pipéracilline les aminidopénicillines telles que le pivmécillinam ; et la témocilline ; les carbapénèmes telles que l'ertapénem, l'imipénem et le méropénem ; - - 11 les tnonobactarnes tels que l'aztréonam ; les céphalosporines dont les céphalosporines de 1,re génération telles que le céfaclor, le céfadroxil, la céfalexine, la céfalotine, la céfazoline et la céfradinc ; lcs céphalosporines de 2,ifie génération telles que le céfamandole, la céfoxitinc, le céfuroxime sodique et le céfuroxime axétil ; et les céphalosporines de 3,n1e génération telles que le céfixime, le cefpodoxime proxétil, le céfodiam hexétil, le céfépime, le céfotaxime, le cefpirome, le ceftazidime et le ceftriaxone ; - les fosfornycines telles que la fosfomycine et la fosfomycinc trométamol ; - les glycopeptides tels que la teicoplanine et la vancomycine ; - les lipopeptides tels que la daptomycinc ; et - les polymyxincs telles que la polymyxinc B et la polymyxine E ou colistine ; lcs antibiotiques inhibiteurs de la synthèse des protéines, parmi lesquels : - les aminosides tels que r amikacinc sulfate, la gentamicine, la néomycine, la nétilmycinc, la spectinomycine, la streptomycine et la tobramycine ; - les macrolides et apparentés, en particulier : les macrolides vrais tels que l'amphotéricine B, Fazithromycine, la clarithromycine, l'érythromycine, la josamycine, la midécamycine la roxithromycine ; les lincosamides tels que la clindamycine et la lincomycine ; les kétolides tels que la télithromycine ; et les synergistines telles que la pristinamycine ; - les phénicoles tels que le thiamphénicol ; - les cyclines telles que la chlortétracycline, la doxycycline, la lymécycline, la méthylènecycline, la minocycline et la tigécycline ; - les acides fusidiques tels que l'acide fusidique ; et - les oxazolidinones tels que le linézolide et le tedizolid ; les antibiotiques inhibiteurs de la synthèse des acides nucléiques, parmi lesquels : les quinolones telles que l'acide pipémidique, la fluméquine, l'énoxacine, la loméfloxacine, la nortloxacine, la ciprofloxacine, l'ofloxacine, la péfloxacine, la lévotloxacine et la moxitloxacine ; les quinoléines telles que l'hydroxyquinoléine ; la mupirocine ; et 12 - la rifamycinc ; les antibiotiques inhibiteurs de la synthèse de l'acide folique parmi lesquels les sulfamides telles que la sulfadiazine, le sulfaméthizol, le sulfafueazole et le sulfaméthoxazole ; et les antibiotiques de mécanismes complexes ou méconnus parmi lesquels : - les produits nitrés, en particulier : les nitrofuranes tels que le nitrofurantoïnc et le nifuroxazide ; et les nitro-imidazoles tels que le métronidazole, l'omidazole et le tinidazole ; et - l'éthambutol, l'isoniazide, la pyrazinamidc, la rifabutine et la rifampicinc. [0095] Dans un mode de réalisation particulier, ledit antibiotique est un antibiotique in- hibiteur de la synthèse protéique, en particulier un aminosidc tel que la tobramycine, ou un antibiotique inhibiteur de la synthèse d'acide nucléique, en particulier une quinolonc telle que la ciprofloxacine. [0096] Dans un mode de réalisation particulier, ledit antibiotique est un antibiotique aminosidc ou une quinolonc. [0097] Dans un autre mode de réalisation particulier, ledit antibiotique est la tobramycinc et/ ou la ciprofloxacinc. [0098] Les inventeurs ont montré que l'utilisation combinée du peptide ANP avec ces anti- biotiques présente un effet synergique sur la destruction des biofilms. Sans être lié par la théorie, il est supposé que le peptide ANP, en dispersant les bactériens constituant le biofilm, les rend plus accessibles aux antibiotiques, qui sont ainsi plus efficaces. [0099] Dans un autre mode de réalisation particulier, ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP est utilisé en combinaison avec au moins un autre peptide natriurétique tel que défini dans la section « ANP, propeptide, dérivé d'ANP et peptides natriurétiques ». [0100] Dans un mode de réalisation particulier, ledit au moins un autre peptide natriurétique est (i) le BNP, un propeptide de BNP, un dérivé de BNP ou un mélange de ceux-ci et/ ou (ii) le CNP, un propeptide de CNP, un dérivé de CNP ou un mélange de ceux-ci. [0101] Dans un mode de réalisation particulier, ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP est utilisé en combinaison avec le BNP ou le CNP. [0102] L'utilisation combinée du peptide ANP et d'un autre peptide natriurétique a l'avantage de pouvoir utiliser des doses plus faibles de chacun des composés, limitant ainsi encore plus efficacement les éventuels effets secondaires [0103] Dans ce mode de réalisation particulier, ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP peut en outre est utilisé en combinaison avec un antibiotique 13 comme décrit ci-dessus. [0104] Dans un mode de réalisation particulier, ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP est utilisé en combinaison avec toute autre substance adaptée pour le traitement du sujet souffrant de l'infection bactérienne tel que décrit ci-dessus. [0105] En particulier, lorsque le sujet souffre d'une pathologie respiratoire chronique, ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP est de préférence utilisé en combinaison avec une substance adaptée pour le traitement de cette pathologie respiratoire chronique. [0106] Ainsi, dans le mode de réalisation dans lequel ledit sujet souffre de mucoviscidose, ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP est de préférence utilisé en combinaison avec une substance pour la clairance muco-ciliaire, telle que la Dnase (par exemple le Pulmozyme0), et/ou bronchodilatatrice. [0107] Dans ces modes de réalisation particuliers, ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP peut en outre être utilisé en combinaison avec un antibiotique comme décrit ci-dessus et/ou avec un autre peptide natriurétique comme décrit ci-dessus, de préférence avec un antibiotique comme décrit ci-dessus. [0108] Dans le contexte de l'invention, le terme « traitement » ou « traiter » signifie inverser, soulager ou inhiber le progrès de la maladie à laquelle ce terme s'applique, ou un ou plusieurs symptômes de cette maladie. [0109] Par « quantité thérapeutiquement efficace », on entend ici une quantité suffisante du composé d'intérêt pour disperser le biofilm bactérien dans le traitement de l'infection bactérienne, à un ratio risque/bénéfice raisonnable applicable à n'importe quel traitement médical. Il sera bien compris cependant que l'utilisation journalière totale des composés utilisés dans le cadre de l'invention sera décidée par le médecin traitant dans le cadre de son jugement médical. Le niveau de dose thérapeutiquement efficace spécifique à un sujet particulier dépendra d'un certain nombre de facteurs dont la maladie à traiter et la gravité de cette maladie, l'activité des composés spécifiquement employés, l'âge, le poids, l'état de santé général, le sexe et le régime alimentaire, le temps d'administration, la voie d'administration et le vitesse d'excrétion des composés spécifiques employés, la durée du traitement, les médicaments utilisés en combinaison ou de manière coïncidente avec les composés spécifiques employés, et des facteurs semblables bien connus dans le domaine médical. Par exemple, il est bien connu dans le domaine de commencer les doses de composés à des niveaux plus faibles que ceux requis pour atteindre l'effet thérapeutique désiré et d'augmenter graduellement le dosage jusqu'à ce que l'effet désiré soit obtenu. [0110] Les composés utilisés dans le contexte de l'invention peuvent être administrés sous la forme d'une composition pharmaceutique comprenant des excipients pharmaceutiquement acceptables, et éventuellement des matrices à libération différée, telles que 14 des polymères biodégradables, pour former des compositions thérapeutiques. [0111] Par « pharmaceutique » ou « pharmaceutiquement acceptable », on entend ici des entités moléculaires et des compositions qui ne produisent pas de réactions secondaires, allergiques ou autrement fâcheuse quand elles sont administrées à un mammifère, en particulier à un humain. Un véhicule ou excipient pharrnaccutiquement acceptable désigne une charge non-toxique solide, scmi-sol ide ou liquide, un diluant, une matière d'encapsulation ou un auxiliaire de formulation de tout type. [0112] La forme des compositions pharmaceutiques comprenant les composés utilisés dans le contexte de l'invention et la voie d'administration dépendront naturellement de la maladie à traiter, de la sévérité de la maladie, de l'âge, du poids et du genre du patient, etc... [0113] Les composés utilisés dans le contexte de l'invention peuvent être formulés pour une administration par voie aérienne ou inhalation (en particulier par nébulisation), orale, parentéral, intranasale, intraveineuse, intramusculaire, topique, sous-cutanée ou intraoculaire par exemple. [0114] Dans un mode de réalisation particulier, les composés utilisés dans le contexte de l'invention sont administration par voie aérienne ou inhalation (en particulier par nébulisation). [0115] Dans un mode de réalisation particulier, le peptide ANP (ou propeptide ou dérivé) utilisé dans le contexte de l'invention est administré à une dose journalière de 0.3 ng/ ml à 3.000 ng/ml. [0116] Dans un autre mode de réalisation particulier, l'antibiotique utilisé en combinaison est administré à une dose journalière maximale de 600 mg (deux fois 300 mg par jour). [0117] Composition pharmaceutique et combinaison pharmaceutique [0118] La présente invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant (i) un peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP tel que défini dans la section «ANP, propeptide, dérivé d'ANP et peptides natriurétiques » ci-dessus et (ii) un antibiotique tel que défini dans la section « Application thérapeutique » ci-dessus. [0119] Dans un mode de réalisation particulier, la composition selon l'invention comprend en outre un véhicule ou excipient pharmaceutiquement acceptable tel que défini ci-dessus. [0120] Dans un autre mode de réalisation particulier, la composition selon l'invention comprend en outre un autre peptide natriurétique tel que défini dans la section «ANP, propeptide, dérivé d'ANP et peptides natriurétiques » ci-dessus, en particulier du BNP et/ou du CNP. [0121] La présente invention concerne également une combinaison pharmaceutique antibac- térienne comprenant (i.) un peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP tel que défini dans la section « ANY, propeptide, dérivé d'ANP et peptides natriurétiques » ci-dessus et (ii) un antibiotique tel que défini dans la section « Application thérapeutique » ci-dessus pour une utilisation simultanée, séparée ou séquentielle dans le traitement thérapeutique chez un sujet tel que défini ci-dessus d'une infection bactérienne associée à un hiofilm bactérien telle que définie dans la section « Biofiltn bactérien et infection bactérienne » ci-dessus. [0122] La présente invention concerne également l'utilisation (i) d'un peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP tel que défini dans la section « ANP, propeptide, dérivé d'ANP et peptides natriurétiques » ci-dessus et (ii) d'un antibiotique tel que défini dans la section « Application thérapeutique » ci-dessus pour la fabrication d'une combinaison pharmaceutique antibactérienne pour une administration simultanée, séparée ou séquentielle pour le traitement thérapeutique chez un sujet tel que défini ci-dessus d'une infection bactérienne associée à un hiofilm bactérien telle que définie dans la section « Biofihn bactérien et infection bactérienne » ci-dessus. [0123] La présente invention a également pour objet une méthode de traitement théra- peutique d'une infection bactérienne associée à un hiofilm bactérien telle que définie dans la section « Biofiltn bactérien et infection bactérienne » ci-dessus, comprenant l'administration simultanée, séparée ou séquentielle chez un sujet qui en a besoin d'une quantité thérapeutiquement efficace (i) d'un peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP tel que défini dans la section « ANP, propeptide, dérivé d'ANP et peptides natriurétiques » ci-dessus et (ii) d'un antibiotique tel que défini dans la section « Application thérapeutique » ci-dessus. [0124] Dans le contexte de l'invention, le terme « combinaison » ou « combinaison pharma- ceutique » définit soit une combinaison fixée dans une seule forme d'unité de dosage, soit un kit pour administration combinée dans lequel le peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP et l'antibiotique peuvent être administrée indépendamment au même moment ou séparément en des intervalles de temps qui permettent aux partenaires de la combinaison de montrer un effet synergique. [0125] Les composés de la combinaison de l'invention peuvent donc être formulés en une ou deux combinaisons pharmaceutiques séparées, chaque composition étant pour la même voie d'administration ou pour des voies d'administration différentes. [0126] Dans un mode de réalisation particulier, ladite combinaison pharmaceutique selon l'invention comprend en outre (iii) un autre peptide natriurétique tel que défini dans la section « « ANP, propeptide, dérivé d'ANP et peptides natriurétiques », en particulier le BNP et/ou le CNP et/ou (iv) une autre substance adaptée pour le traitement du sujet souffrant de l'infection bactérienne tel que défini dans la section « Application thérapeutique » ci-dessus. [0127] Dans ce mode de réalisation particulier, la combinaison peut être une combinaison 16 fixée dans une seule forme d'unité de dosage, ou un kit pour une administration combinée dans lequel le peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP, l'antibiotique, l'autre peptide natriurétique et/ou l'autre substance adaptée pour le traitement du sujet, peuvent être administrée indépendamment au même moment ou séparément en des intervalles de temps qui permettent aux partenaires de la combinaison de montrer un effet synergique. [0128] Dans ce mode de réalisation, les composés de la combinaison peuvent donc être formulés en une, deux, trois ou quatre combinaisons pharmaceutiques séparées, chaque composition étant pour la même voie d'administration ou pour des voies d'administration différentes. [0129] Pour préparer les composés pharmaceutiques utilisées dans le cadre de l'invention, une quantité efficace des composés utilisées dans le cadre de l'invention peut être dissoute ou dispersée dans un véhicule ou un milieu aqueux pharmaceutiquement acceptable. [0130] Les formes pharmaceutiques adaptées à une utilisation injectable incluent les solutions ou dispersions aqueuses stériles et les poudres stériles pour une préparation extemporanée de solutions ou dispersions injectables stériles, par exemple sous forme mien-misée. Dans tous les cas, la forme doit être stérile et doit être fluide de manière à ce que l'utilisation par seringue soit facile. Elle doit être stable sous les conditions de fabrication et de conservation et doit être préservée contre l'action contaminante de microorganismes tels que les bactéries, les virus ou les champignons. [0131] Le véhicule peut être un solvant ou un milieu de dispersion comprenant, par exemple, de l'eau, de l'éthanol, un polyol (par exemple, du glycérol, du propylène glycol, du polyéthylène glycol liquide, ou autre), et mélanges appropriés de ceux-ci. Une fluidité appropriée peut être maintenue par exemple en utilisant un revêtement telle que de la lécithine, en maintenant une taille de particule requise dans le cas d'une dispersion, et en utilisant des tensioactifs, des agents stabilisants, des cryoprotecteurs ou des anti-oxydants. La prévention de l'action des microorganismes peut être apportée par des agents antibactériens et antifongiques. Dans de nombreux cas, il sera préférable d'inclure des agents isotoniques, par exemple des sucres ou du chlorure de sodium. [0132] Les solutions injectables stériles peuvent être préparées en incorporant les composés actifs dans une quantité requise du solvant approprié avec plusieurs des autres ingrédients, suivi d'une stérilisation filtrée. En général, les dispersions sont préparées en incorporant les divers ingrédients actifs stérilisés dans un véhicule stérile qui contient le milieu de dispersion basique et les autres ingrédients requis. Dans le cas des poudres stériles pour la préparation de solutions injectables stériles, les méthodes préférées de préparation sont les techniques de séchage sous vide et de lyophilisation, qui produisent une poudre de l'ingrédient actif plus n'importe quel ingrédient additionnel 17 désiré à partir d'une solution de ceux-ci préalablement stérilisée par filtration. [0133] Pour une administration parentérale dans une solution aqueuse, par exemple, la solution sera de préférence tamponnée de manière appropriée si nécessaire et le diluent liquide rendu isotonique avec une solution saline ou de glucose suffisante. Ces solutions aqueuses particulières sont particulièrement appropriées pour une administration intraveineuse, intramusculaire, sous-cutanée et intrapéritonéale. [0134] Les formulations de compositions pharmaceutiques pour une administration par in- halation sont bien connues de l'homme du métier. En général, les ingrédients actifs sont délivrés sous la forme d'un spray aérosol à partir d'un inhalateur pressurisé à dose mesurée en utilisant un gaz propulseur approprié, tel que le dichlorodifluorométhane, le trichlorofluorométhane, le dichloro-tétrafluoroéthane ou le dioxyde carbone, sous la forme de poudre administrée en utilisant un inhalateur à poudre sèche, ou, sous la forme d'un aérosol à liquide aqueux en utilisant un nébuliseur. Les nébuliseurs pour délivrance d'un aérosol liquide peuvent être catégorisés en nébuliseurs à jet mis en oeuvre par un flux pressurisé d'air en utilisant un compresseur portable ou un fournisseur d'air central à l'hôpital, les nébuliseurs à ultrason incorporant un piezocristal pour fournir l'énergie pour générer l'aérosol hors d'une fontaine ultrasonique, et des nébuliseurs électroniques basés sur le principe d'une membrane vibrante perforée. [0135] Utilisations non-thérapeutiques [0136] La présente invention concerne également l'utilisation in vitro d'un peptide ANP, d'un propeptide d'ANP ou d'un dérivé de peptide ANP tel que défini dans la section ANP, propeptide, dérivé d'ANP et peptides natriurétiques » ci-dessus pour disperser un biofilm bactérien. [0137] L'ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP peut ainsi typiquement être utilisé dans des applications antisalissures antifading »), par exemple sur les bateaux ou dans les canalisations. [0138] La présente invention concerne ainsi également une méthode in vitro ou ex situ de dispersion d'un biofilm bactérien sur une surface, comprenant l'application sur ladite surface d'une composition comprenant un peptide ANP, un propeptide d'ANP ou un dérivé de peptide ANP tel que défini dans la section «ANP, propeptide, dérivé d'ANP et peptides natriurétiques » ci-dessus. [0139] Ladite surface peut typiquement être la surface d'une canalisation, la surface d'un bateau, la surface d'un dispositif implantable avant implantation. [0140] L'application de ladite composition sur ladite surface peut être mise en oeuvre par toute technique appropriée, dépendant de la formulation de la composition. [0141] La présente invention sera décrite plus en détail par les exemples ci-dessous et figures ci-dessous. Brève description des séquences 18 [0142] 19 [Tableaux ] SEQ ID NO Description Séquence 1 Séquence d'acides aminés de l'ANP SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGC NSFRY 2 Séquence d'acides aminés de l'urodilatine TAPRSLRRSSCFGGRMDRIGAQS GLGCNSFRY 3 Séquence d'acides aminés du BNP SPKMVQGSGCFGRKMDRISSSSG LGCKVLRRH 4 Séquence d'acides aminés du CNP GLSKGCFGLKLDRIGSMSGLGC 5 Séquence d'acides aminés du proANP NPMYNAVSNADLMDFKNLLDHL EEKMPLEDEVVPPQVLSEPNEEA GAALSPLPEVPPWTGEVSPAQRD GGALGRGPWDSSDRSALLKSKLR ALLTAPRSLRRSSCFGGRMDRIG AQSGLGCNSFRY 6 Séquence d'acides aminés du preproANP MSSFSTTTVSFLLLLAFQLLGQTR ANPMYNAVSNADLMDFKNLLDH LEEKMPLEDEVVPPQVLSEPNEE AGAALSPLPEVPPWTGEVSPAQR DGGALGRGPWDSSDRSALLKSKL RALLTAPRSLRRSSCFGGRMDRIG AQSGLGCNSFRY 7 Séquence d'acides aminés du proBNP HPLGSPGSASDLETSGLQEQRNHL QGKLSELQVEQTSLEPLQESPRPT GVWKSREVATEGIRGHRKMVLY TLRAPRSPKMVQGSGCFGRKMD RISSSSGLGCKVLRRH 8 Séquence d'acides aminés du preproBNP MDPQTAPSRALLLLLFLHLAFLG GRSHPLGSPGSASDLETSGLQEQR NHLQGKLSELQVEQTSLEPLQESP RPTGVWKSREVATEGIRGHRKM VLYTLRAPRSPKMVQGSGCFGRK MDRISSSSGLGCKYLRRH 9 Séquence d'acides aminés du CNP- DLRVDTKSRAAWARLLQEHPNA 53 RKYKGANKKGLSKGCFGLKLDRI GSMSGLGC 10 Séquence d'acides aminés du proCNP KPGAPPKVPRTPPAEELAEPQAA GGGQKKGDKAPGGGGANLKGD RSRLLRDLRVDTKSRAAWARLL QEHPNARK Y KGA NK KG LS KGCF GLKLDRIGSMSGLGC 11 Séquence d'acides aminés du preproCNP MHLSQLLACALLLTLLSLRPSEAK PGAPPKVPRTPPAEELAEPQAAG GGQKKGDKAPGGGGANLKGDRS RLLRDLRVDTKSRAAWARLLQE HPNARKYKGANKKGLSKGCFGL KLDRJGSMSGLGC Brève description des figures [0143] [fig.1] La Figure 1 montre des graphiques représentant la croissance de P. aeruginosa en présence de différentes concentrations d'ANP. Exemples [0144] Exemple 1 : Effet de l'ANP seul (0,1 pM) sur les biofilms en formation, sur les biofilms préformés de P. aeruginosa et sur la croissance de P. aeruginosa. [0145] Cet exemple montre l'action de l'ANP sur les biofilms préformés de P. aeruginosa. [0146] Matériel et méthodes [0147] Substances testées, souches bactériennes et cultures bactériennes [0148] La souche de P. aeruginosa sauvage PA14 utilisée était de la Havard Medical School (Norton, MA) (Liberati et al. (2006) Proc. Natl. Acad. Sei. USA103 :2833-2838). [0149] Les souches bactériennes ont été cultivées à 37°C dans du milieu Luria Bertani (LB) sous agitation. [0150] Formation du biofilm de P. aeruginosa en conditions dynamiques [0151] Après 3 h de pré-culture en milieu LB à 37°C, P. aeruginosa a été inoculée à une DO 600 = 0,08 dans du milieu LB et sous-cultivé pendant 2 h. [0152] L'ANP (Calbiochem Merck) a été ajouté 2 h après le début de la culture, un moment correspondant au milieu de la phase exponentielle de croissance des bactéries. La densité finale bactérienne et l'absence de contamination ont été contrôlées par ensemencement [0153] Les biofilms ont été formés en conditions dynamiques à 37°C dans une chambre à flux à 3 canaux comme décrit dans Bazire et al. (2010) J. Bacterio1.192 :3001-3010. Brièvement, à partir d'une pré-culture de 18h, une suspension bactérienne à DO600 21 =0,08 préparée dans le l'eau physiologique stérile a été injectée dans chaque canal de la chambre à flux. Les bactéries ont été laissées pendant 2h à 37°C en conditions statiques (sans flux) afin que celles-ci adhèrent à la lame de verre. L'étude de la formation de hiofilm a ensuite été réalisée sous un flux de milieu LB (2,5 ml/h) pendant 24h à 37°C. [0154] Destruction du hiofilm de P. aeruginosa en conditions dynamiques [0155] Pour étudier l'impact de l'ANP sur les hiofilms préformés pendant 24 h, 300 Ft1 d'ANP (0.11.1M) ou 300 pl d'eau ultra-pure stérile (condition contrôle) ont été injectés dans chaque canal de la chambre à flux. Le traitement du hiofilm préformé a été réalisé pendant 2 h à 37°C en conditions statiques. Après les 2h, le flux de milieu a été de nouveau appliqué pendant 15 min afin d'éliminer les cellules qui se seraient détachées du hiofilm sous l'action du traitement. [0156] Les hiofilms ont été observés en microscopie confocale à balayage laser (Zeiss LSM710 (Zeiss) après avoir été marqués pendant 15 min avec 5 pM de fluorochromc Syto9 green (Invitrogen). Des prises de vue ont été réalisées dans les différentes couches du hiofilm permettant ainsi une reconstitution tridimensionnelle ; au minimum 3 prises de vue ont été réalisées en des points différents d'un même canal de la chambre à flux. Les fichiers de chaque prise de vue ont été ensuite analysés par le logiciel COMSTAT (Hcydorn et al. (2000) Microbiology 146 :2395-2407), 3 prises de vue d'au moins 3 expériences indépendantes sont analysées, permettant de déterminer les épaisseurs moyennes et maximales des biofilms ainsi que le biovolume bactérien. [0157] Culture cellulaire [0158] La lignée de cellules épithéliales pulmonaires humaines de type II A549 (ATCC-CCL185TM, ATCC Manassas, VA) a été cultivée à 37°C dans une atmosphère à 5% CO, dans un milieu DMEM (Lonza) complémenté avec 10% de sérum de veau foetal (Lonza) et 1% de pénicilline et streptomycine (Penistrep, Lonza). En routine, les cellules ont été ensemencées dans une fiole de 25 ml et utilisées à 80% de confluence. [0159] Pour les tests de cytotoxicité, les cellules ont été ensemencées dans des plaques 24 puits à une densité finale de 3x105 cellules par puits, et cultivées pendant 48 h avant utilisation. Un minimum de 24 h avant les tests d'infection, les cellules ont été déprivées en antibiotiques et en sérum de veau foetal par ajout d'un milieu sans sérum frais. [0160] Mesure de la libération de lactate déshydrogénase cytosolique (LDH) par les cellules A549 [0161] La LDH est une enzyme cytosolique stable libérée dans le milieu de culture après lyse cellulaire et donc un marqueur de mort cellulaire. La quantité de LDH libérée par les cellules eucaryotes en présence de bactéries, exposées ou non à l'ANP (concentration de 1µM à 10 nM), a été déterminée en utilisant le test enzymatique Cytotox 96 (Promega, Charbonnières, France). Les cellules A549 ont été incubées pendant 6 h avec un contrôle (sans traitement) ou avec P. aeruginosa PA14 (pré-traitées à r ANP) à une multiplicité d'infection de 10. Un tampon de lyse, consistant en une solution de Triton X-100 (9% dans l'eau), a été employé pour déterminer le maximum de LDH potentiellement libéré par les cellules A549 dans les conditions expérimentales (100% de libération de LDH). Un niveau bruit de fond a été établi en utilisant le milieu de culture seul, et défini comme 0% de libération de LDH, pour éliminer la contribution du milieu de culture. Le pourcentage de libération de LDH dans la population cellulaire a ensuite a été calculé en utilisant l'équation : [0162] %I.DH = DO échantillon DO 100% x 100 [0163] Le test était suffisamment sensible pour mesurer une concentration de LDH équivalente à une lyse de 1% de la population cellulaire. [0164] Résultats [01 65] Effet de l'ANP sur un biofilm préformé de P. aeruginosa [0166] Les inventeurs ont étudié le potentiel d'activité anti-biofilm de l'ANP sur un biofilm établi de P. aeruginosa. Dans cette optique, après 24 h de formation d'un biofilm de P. aeruginosa dans un système d'écoulement dynamique, les inventeurs ont exposé pendant 2 h les bactéries à l'ANP à 0.1 pM. Dans ces conditions, les inventeurs ont observé une dispersion du biofilm qui a été perturbée par l'ANP, et les structures en forme de champignon, observées en condition contrôle et caractéristique d'un biofilm de P. aeruginosa, étaient absentes après exposition à l'ANP. La biomasse bactérienne a été réduite après exposition à l'ANP pendant 2 heures à 0,1 pM de 81,4 ± 4,1% (P REVENDICATIONS[Revendication 1] Peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP pour son uti- lisation dans une méthode de traitement thérapeutique d'une infection bactérienne associée à un biofilm bactérien chez un sujet, dans laquelle ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP disperse ledit biofilm bactérien, ledit dérivé de peptide ANP étant unc forme tronquée d'ANP correspondant aux acides aminés 4 ou 5 à 28 de la forme entière de l'ANP, une forme ayant unc structure qui est un dimère antiparallèle de l'ANP, un peptide ANP dans lequel a été substitué l'acide aminé Phe de la boucle en position 8, un peptide ANP dans lequel a été substitué l'acide aminé Phe en position 26 ou l'acide aminé Ser en position 25, l'urodilatine, le fsANP ou une version linéarisée de l'ANP avec clivage du pont disulfure. [Revendication 2] Peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP pour son uti- lisation selon la revendication 1, dans laquelle ladite infection bactérienne est une infection à Pseudomonas aeruginosa. [Revendication 3] Peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP pour son uti- lisation selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle ledit sujet souffre d'une pathologie respiratoire chronique, en particulier de la mucoviscidose. [Revendication 4] Peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP pour son uti- lisation selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle ledit sujet porte un implant ou une prothèse, ou souffre de brûlures importantes (grand brûlé) ou d'une infection de surface. [Revendication 5] Peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP pour son uti- lisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans laquelle ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP est utilisé en combinaison avec un antibiotique. [Revendication 6] Peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP pour son uti- lisation selon la revendication 5, dans laquelle ledit antibiotique est un antibiotique aminoside ou une quinolone. [Revendication 7] Peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP pour son uti- lisation selon l'une des revendications 1 à 6, dans laquelle ledit peptide ANP, propeptide d'ANP ou dérivé de peptide ANP est utilisé en combinaison avec au moins un autre peptide natriurétique tel que le BNP et/ ou le CNP. [Revendication 8] Composition pharmaceutique comprenant (i) un peptide ANP, 29 [Revendication 9] propeptidc d'ANP ou dérivé de peptide ANP et (ii) un antibiotique, ledit dérivé de peptide ANP étant une forme tronquée d'ANP correspondant aux acides aminés 4 ou 5 à 28 de la forme entière de r ANP, une forme ayant une structure qui est un dimère antiparallèle de l'ANP, un pcptidc ANP dans lequel a été substitué l'acide aminé Phc de la boucle en position 8, un peptide ANP dans lequel a été substitué l'acide aminé Phc en position 26 ou l'acide aminé Scr en position 25, l'urodilatine, le fsANP ou une version linéarisée de l'ANP avec clivage du pont disulfure. Utilisation in vitro d'un peptide ANP, d'un propeptidc d'ANP ou d'un dérivé de peptide ANP pour disperser un hiofilm bactérien, ledit dérivé de pcptidc ANP étant une forme tronquée d'ANP correspondant aux acides aminés 4 ou 5 à 28 de la forme entière de l'ANP, une forme ayant une structure qui est un dimère antiparallèle de l'ANP, un peptide ANP dans lequel a été substitué l'acide aminé Phc de la boucle en position 8, un pcptidc ANP dans lequel a été substitué l'acide aminé Phc en position 26 ou l'acide aminé Ser en position 25, l'urodilatinc, le fsANP ou une version linéariséc de rANP avec clivage du pont disulfurc.