Brevet FR3099339A1 — publié le 20210205

Description Titre de l'invention : Hydrolysat protéique issu de poissons bleus DOMAINE DE L'INVENTION [0001] La présente invention concerne le domaine des hydrolysats protéiques fonctionnels. Plus précisément, elle concerne un hydrolysat protéique obtenu à partir d'au moins une source protéique issue de poissons bleus comprenant (i) un degré d'hydrolyse (DH) d'au moins 10%, et/ou (ii) au moins 80% de protéines solubles dans l'eau dont le poids moléculaire est inférieur à 1000 Da, et/ou (iii) au moins 1% de phospholipides, et/ou (iv) au moins 0.5% de DHA et EPA. Elle concerne encore des compositions alimentaires ou pharmaceutiques comprenant ledit hydrolysat protéique et leur utilisation pour la prévention et/ou le traitement des troubles cognitifs légers liés à l'âge. ETAT DE LA TECHNIQUE [0002] Le vieillissement démographique constitue l'un des plus grands défis économiques et sociaux du XXIe siècle (1). D'ici à 2040, le nombre de personnes âgées de plus de 65 ans dans le monde devrait plus que doubler, passant de 506 millions en 2008 à 1,3 milliard de personnes, selon une étude américaine de 2009 (2). D'ici 2025 en Europe, plus de 148 millions d'habitants auront plus de 65 ans (>20 % de la population) contre 120 millions en 2010, avec une augmentation particulièrement rapide du nombre d'octogénaires. Le vieillissement s'accompagne chez l'Homme de l'apparition de symptômes spécifiques, notamment d'un déclin cognitif lié au vieillissement cérébral (3). Il s'agit d'une altération non pathologique niais significative des fonctions cérébrales incluant notamment des troubles mnésiques et de la vigilance pouvant conduire à une perte d'autonomie et pouvant parfois annoncer des pathologies neurodégénératives. Trouver des solutions permettant de vieillir en bonne santé le plus longtemps possible est donc primordial et constitue pour les pays développés un véritable enjeu économique, sociétal et de santé publique. Lc concept de « hcalthy aging » (4) ou « vieillissement réussi » intègre ces différents aspects et l'ère de la médecine des 4P (plus préventive, prédictive, personnalisée, participative) dans laquelle nous rentrons devrait faire une part belle dans les années à venir à la prévention, notamment par la nutrition, et à la mise en charge par chacun de sa santé. [0003] De manière similaire, l'espérance de vie augmente chez les animaux de compagnie, notamment celle des chats et des chiens, et ce, de manière continue, grâce à l'amélioration de la nutrition et des soins apportés. Aux Etats-Unis par exemple, la longévité des chiens atteignait en moyenne 11 ans en 2012 (+ 0.5 an par rapport à 2002), elle était de 12 ans cette même année pour les chats (+ 1 an par rapport à 2002) (5). Aux Etats-Unis toujours, on estime à 30-40 % de la population totale canine, la 2 proportion de chiens de plus de 7 ans. En Europe, l'estimation moins précise porte cette proportion à 25-45 %. [0004] Comme chez l'Homme, l'augmentation de l'espérance de vie des animaux de compagnie soulève de vrais défis quant au maintien de conditions de vie satisfaisantes pour les individus âgés. L'un des principaux enjeux est notamment de réduire la fréquence des maladies neurodégénératives liées à l'âge, ou du moins de les retarder. Parmi ces maladies, le syndrome de dysfonctionnement cognitif (SDC) est bien caractérisé chez le chien. Ses manifestations comportementales sont la perte d'orientation, les altérations de la relation avec le maître et les changements des cycles sommeil-éveil (6). Ces effets sont également constatés chez les chats âgés (6). Des études épidémiologiques réalisées indiquent que le SDC toucherait 5% des chiens âgés de 10 à 12 ans, 23% des chiens âgés de 12 à 14 ans et enfin, 41% des chiens âgés de plus de 14 ans (7). [0005] Pour faire face à ces enjeux, il existe un besoin pour de nouveaux produits capables de prévenir, chez l'Homme comme chez l'animal, le déclin cognitif lié à l'âge ainsi que les troubles qui y sont associés, et ainsi permettre de maintenir plus longtemps la qualité de vie mais aussi l'autonomie des individus âgés. [0006] Les effets bénéfiques de la consommation de poissons gras et maigres sont connus de longue date, et aujourd'hui il existe un réel intérêt des consommateurs pour les produits de la mer. Il est connu que les poissons gras en général, et les poissons bleus en particulier, sont riches en acides gras polyinsaturés (AGPI), notamment EPA (acide eicosapentaénoïque) et DHA (acide docosahexaénoïque), en phospholipides, ainsi qu'en protéines. [0007] Toutefois, à la connaissance des inventeurs, il n'existe pas sur le marché de la nutra- ceutique ou des aliments pour animaux de compagnie, de produit ou ingrédient renfermant de manière non négligeable ces actifs d'intérêt pour le cerveau, obtenu par un procédé éco-respectueux en partant d'une ressource marine unique, en particulier de poissons bleus comme la sardine. [0008] Les inventeurs ont ainsi développé un procédé d'hydrolyse particulièrement innovant, permettant d'obtenir des hydrolysats de poissons bleus présentant des effets bénéfiques pour la prévention du déclin cognitif lié à l'âge. Riche en peptides bioactifs associés à du DHA et des phospholipides, un tel hydrolysat présente notamment des effets avantageux au niveau de la neuroprotection, de l'amélioration des capacités cognitives et de réduction du stress/de l'anxiété. Exposé de l'invention [0009] Un but de l'invention est donc de fournir un produit « 3 en 1 » renfermant au moins 3 actifs d'intérêt pour le cerveau, notamment des peptides, des phospholipides et du 3 DHA, permettant de prévenir et/ou traiter, chez l'Homme comme chez l'animal, le déclin cognitif lié à et les troubles qui y sont associés. [0010] Il est à cet effet proposé, selon un premier aspect de l'invention, un hydrolysat protéique obtenu à partir d'au moins une source protéique issue de poissons bleus, notamment au moins issue de têtes de poissons bleus, comprenant : [0011] (i) un degré d'hydrolyse (DH) d'au moins 10%, et/ou [0012] (ii) au moins 80% de protéines solubles dans l'eau dont le poids moléculaire est inférieur à 1000 Da, et/ou [0013] (iii) au moins 1% de phospholipides, et/ou [0014] (iv) au moins 0.5% de DHA et EPA. [0015] L'invention porte encore sur une composition alimentaire comprenant au moins un hydrolysat protéique selon l'invention, caractérisée en ce qu'il s'agit d'un aliment complet ou d'un complément alimentaire, notamment un aliment fonctionnel ou nutracoufique, ladite composition alimentaire pouvant être à destination de l'Homme ou de l'animal. [0016] Un autre objet de l'invention concerne un procédé de préparation d'un hydrolysat protéique selon l'invention comprenant les étapes de : [0017] a. fourniture d'une source protéique ; [0018] h. broyage de ladite source protéique ; [0019] c. optionnellement, ajustement du pH ; [0020] d. ajout d'au moins une enzyme d'hydrolyse ; [0021] e. chauffage ; [0022] f. séparation ; [0023] g. séchage. [0024] L'invention porte finalement sur un hydrolysat protéique selon l'invention ou une composition pharmaceutique en contenant, pour une utilisation comme médicament. DESCRIPTION DES FIGURES [0025] [fig.1 a] La figure 1 a illustre les effets de l'hydrolysat selon l'invention sur l'expression de l'interleukine 6 dans les cellules microglialcs (BV2). [0026] [fig.lh] La figure lb illustre les effets de l'hydrolysat selon l'invention sur l'expression de l'interleukine lbêta (lb) dans les cellules microgliales (BV2). [0027] [fig.lc] La figure le illustre les effets de l'hydrolysat selon l'invention sur l'expression du TNF alpha (TNFa) dans les cellules microgliales (BV2). [0028] [fig.2] La figure 2 illustre les effets de l'hydrolysat selon l'invention sur l'expression des marqueurs d'inflammation et de neuroprotection dans les cellules microgliales (BV2). [0029] [fig.3] La figure 3 illustre les effets de l'hydrolysat selon l'invention sur l'expression des marqueurs de neuroprolection dans les neurones (HT22). [0030] [fig.4] La figure 4 illustre les effets de l'hydrolysat selon l'invention sur le com- portement de type anxieux. [0031] [fig.5] La figure 5 illustre les effets de l'hydrolysat et de l'hydrolysat complémenté en DHA, selon l'invention sur la réactivité au stress. [0032] [fig.6] La figure 6 illustre les effets de l'hydrolysat et de l'hydrolysat complémenté en DHA, selon l'invention sur la mémoire hippocampique lors d'un test labyrinthe en Y. [0033] [fig.7] La figure 7 illustre les effets de l'hydrolysat selon l'invention sur la mémoire hippocampique lors d'un test du labyrinthe aquatique de Morris. [0034] [fig.8] La figure 8 illustre l'analyse des stratégies spatiales développées lors du test du labyrinthe aquatique de Morris. [0035] [fig.9] La figure 9 illustre les effets de l'hydrolysat selon l'invention sur le marqueur d'activation microgliale cdl 1 b. DEFINITIONS [0036] Sauf indication contraire spécifique, les pourcentages sont exprimés ici en poids d'un produit de référence. [0037] Dans la présente description, les intervalles sont définis de façon abrégée afin d'éviter de les reproduire intégralement et de décrire chacune des valeurs et toutes les valeurs de cet intervalle. Toute valeur appropriée dans l'intervalle peut être choisie comme la valeur supérieure, la valeur inférieure ou les valeurs terminales de l'intervalle. Par exemple, un intervalle de 0,1 à 1,0 représente les valeurs terminales de 0,1 et 1,0, ainsi que les valeurs intermédiaires de 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, et tous les intervalles intermédiaires compris dans 0,1 à 1,0, tels que 0,2 à 0,5, 0,2 à 0,8, 0,7 à 1,0, etc. Un intervalle défini comme étant « compris entre la valeur A et la valeur B » inclut les valeurs A et B et est donc équivalent à un intervalle « allant de la valeur A à la valeur B ». En outre, l'expression « au moins » comprend la valeur énoncée ci-après. Par exemple, « au moins 5 % » doit être compris comme comprenant également « 5 ». L'expression « un maximum de » comprend la valeur énoncée ci-après. Par exemple, « un maximum de 5 % » doit être compris comme comprenant également « 5 % ». [0038] En outre, dans la présente invention, les valeurs mesurables telles qu'une quantité, doivent être comprises comme comprenant les écarts types qui peuvent être facilement déterminés par l'homme du métier dans le domaine technique de référence. De préférence, ces valeurs sont destinées à comprendre des variations de ± 5 %. [0039] Telle qu'elle est utilisée dans tout ce document, la forme au singulier d'un mot comprend le pluriel et inversement, sauf si le contexte indique clairement le contraire. Ainsi, les références « un », « une » et « le/la » comprennent généralement les pluriels des termes respectifs. Par exemple, une référence à un « procédé » ou un « aliment » comprend une pluralité de ces « procédés » ou « aliments ». De façon similaire, les mots « comprendre », « comprend » et « comprenant » seront interprétés de manière inclusive. De même, les termes « inclure », « incluant » et « ou » doivent tous être considérés comme inclusifs. Tous ces termes devront toutefois être considérés comme englobant des modes de réalisation exclusifs qui peuvent également être désignés en utilisant des termes tels que « consiste en ». [0040] Les procédés et compositions et autres modes de réalisation illustrés ici ne sont pas limités à des méthodologies, protocoles et réactifs particuliers qui sont décrits ici car ils peuvent varier comme le comprendra l'homme du métier. [0041] Sauf indication contraire, tous les ternies techniques et scientifiques, les termes utilisés dans l'art et les acronymes utilisés ici ont les significations communément admises par l'homme du métier dans le/les domaine(s) dc ou dans le/les domaine(s) dans lesquels le terme est utilisé. Bien que toute composition, tout procédé, article fabriqué ou autres moyens ou matériaux similaires ou équivalents à ceux décrits ici puisse être utilisé(c) dans la mise en pratique de la présente invention, les compositions, procédés, articles fabriqués préférée(s) ou autres moyens ou matériaux sont décrits ici. DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION [0042] Les inventeurs ont mis au point un hydrolysat de poissons bleus. Les composés d'intérêt des poissons bleus, et notamment les protéines, le DHA et les phospholipides, sont combinés dans l'hydrolysat selon l'invention. De manière particulièrement avantageuse, les inventeurs ont optimisé les proportions de ces composés d'intérêt afin de permettre l'obtention d'effets biologiques bénéfiques. Plus particulièrement, l'hydrolysat comprend une large proportion protéique, principalement sous forme de peptides. Cet hydrolysat, riche donc en peptides bioactifs et comprenant des phospholipides et du DHA, présente notamment des effets bénéfiques dans la prévention du déclin cognitif et dc l'anxiété, en particulier lié à l'âge. Hydrolysat protéique 100431 Dans le cadre de la présente invention, plusieurs méthodes de calcul ont été employées, notamment pour déterminer les profils de poids moléculaire des protéines et/ou peptides, les quantités de protéines, notamment protéines solubles, les quantités de phospholipides, DHA, EPA et autres composants dudit hydrolysat. Les méthodes de calcul et/ou articles de références détaillant lesdites méthodes sont toutes présentées à l'Exemple 1.7. [0044] Selon un premier aspect, l'invention porte sur un hydrolysat protéique obtenu à partir d'au moins une source protéique issue de poissons bleus comprenant : 6 [0045] (i) un degré d'hydrolyse (DH) d'au moins 10%, et/ou [0046] (ii) au moins 80% de protéines solubles dans l'eau dont le poids moléculaire est inférieur à 1000 Da, et/ou [0047] (iii) au moins 1% de phospholipides, et/ou [0048] (iv) au moins 0.5% de DHA et EPA. [0049] On entend par « poisson bleu » les poissons pélagiques de haute mer. Le poisson bleu tient son nom à la couleur de sa peau qui est influencée par l'accumulation de graisse, notamment les acides gras oméga 3, dans ses muscles. Les poissons bleus visés par la présente invention sont les poissons bleus de petite taille choisis parmi les poissons de la Famille Clupeidae, et notamment la sardine (Sardines pdchardus) ou le hareng (Clupea haretzgus); l'anchois (Eng raidis encrasicolus), le maquereau ( Scotnber scombrus) et les poissons du genre Trachurus. [0050] L'hydrolysat protéique de l'invention est ainsi obtenu par l'hydrolyse d'une source protéique issue de poissons bleus. On entend par « degré d'hydrolyse » (DH), le pourcentage de liens pcptidiques coupés lors d'une hydrolyse protéique. [0051] L'hydrolysat de l'invention présente un degré d'hydrolyse d'au moins 10%, ledit DH étant déterminé par la méthode pH-stat comme décrit par J. Adler-Nissen (17). De préférence, le degré d'hydrolyse supérieur à 11%. En particulier, le degré d'hydrolyse de ladite source protéique est inférieur à 20%, de préférence inférieur à 16%, de préférence encore inférieur à 15%, de préférence encore inférieur à 13%. L'obtention d'un tel degré d'hydrolyse permet avantageusement d'avoir les peptides bioactifs et les lipides d'intérêt dans l'hydrolysat selon l'invention. [0052] L'hydrolysat selon l'invention comprend en particulier au moins 45%, de préférence au moins 50%, de préférence encore au moins 55%, de manière encore préférée au moins 60%, de manière préférée entre toutes au moins 65% de protéines totales. Ledit hydrolysat comprend en particulier un maximum de 95%, de préférence un maximum de 90%, de préférence encore un maximum de 85%, de manière encore préférée un maximum 80% de protéines totales. [0053] Selon un mode de réalisation particulier, l'hydrolysat selon l'invention comprend au moins 45%, de préférence au moins 50%, de préférence encore au moins 55%, de manière encore préférée au moins 60%, de manière préférée entre toutes au moins 65% de protéines solubles. Ledit hydrolysat comprend en particulier un maximum de 95%, de préférence un maximum de 90%, de préférence encore un maximum de 85%, de manière encore préférée un maximum 80%, de manière préférée entre toutes un maximum de 75% de protéines solubles. [0054] Un large spectre d'activités biologiques est attribué aux peptides composant les hy- drolysats : activités anti-hypertensives, hypocholestérolémiantes, immuno-modulantes, anti-microbiennes, anti-oxydantes et opioïdes (ou anti-stress), etc. De façon générale, 7 les peptides bioactifs comportent généralement de 4 à 20 acides aminés. Ils sont ainsi plus résistants à l'action des enzymes digestives tandis que leur taille contenue leur permet de franchir la barrière intestinale et d'être véhiculés par le sang. De manière avantageuse, l'hydrolysat protéique de l'invention est riche en peptides. Il comprend notamment au moins 80% de protéines solubles dans l'eau de poids moléculaire inférieur à 1000 daltons (Da) (peptides). Dans le cadre de la présente invention, l'expression « protéines de poids moléculaire de XX Da » désigne des acides aminés et/ou peptides et/ou protéines, selon la valeur de poids moléculaire. Les « peptides » sont notamment définis par un poids moléculaire inférieur à 1000 Da. En particulier, l'hydrolysat protéique de l'invention comprend au moins 80% de protéines solubles dans l'eau de poids moléculaire inférieur à 1000 Da, de préférence au moins 83% de protéines solubles dans l'eau de poids moléculaire inférieur à 1000 Da, de préférence encore au moins 84% de protéines solubles dans l'eau de poids moléculaire inférieur à 1000 Da, de manière encore préférée au moins 85% de protéines solubles dans l'eau de poids moléculaire inférieur à 1000 Da, de manière préférée entre toutes au moins 86% de protéines solubles dans l'eau de poids moléculaire inférieur à 1000 Da. Ledit hydrolysat contient un maximum de 95% de protéines solubles dans l'eau de poids moléculaire inférieur à 1000 Da, de préférence un maximum de 93% de protéines solubles dans l'eau de poids moléculaire inférieur à 1000 Da, de préférence encore un maximum de 92% de protéines solubles dans l'eau de poids moléculaire inférieur à 1000 Da, de manière encore préférée un maximum 91% de protéines solubles dans l'eau de poids moléculaire inférieur à 1000 Da, de manière préférée entre toutes un maximum de 90% de protéines solubles dans l'eau de poids moléculaire inférieur à 1000 Da. [0055] Selon un mode de réalisation particulier, l'hydrolysat selon l'invention présente le profil de poids moléculaire suivant : [0056] - au moins 50%, de préférence au moins 55%, de préférence encore au moins 60%, de préférence encore au moins 65%, de préférence encore au moins 68% de protéines solubles dans l'eau ayant un poids moléculaire inférieur à 500 Da, et de préférence un maximum de 95%, de préférence encore un maximum de 90%, de préférence encore un maximum de 85%, de préférence encore un maximum de 82%, de préférence encore un maximum de 80% de protéines solubles dans l'eau ayant un poids moléculaire inférieur à 500 Da ; [0057] - au moins 8%, de préférence au moins 8.5%, de préférence encore au moins 9%, de préférence encore au moins 9.5%, de préférence encore au moins 10% de protéines solubles dans l'eau ayant un poids moléculaire compris entre 500 Da et 1000 Da, et de préférence un maximum de 25%, de préférence encore un maximum de 22%, de préférence encore un maximum de 20%, de préférence encore un maximum de 18%, 8 de préférence encore un maximum de 17% de protéines solubles dans l'eau ayant un poids moléculaire compris entre 500 Da et 1000 Da; [0058] - au moins 7%, de préférence au moins 7.5%, dc préférence encore au moins 8%, de préférence encore au moins 8.5%, de préférence encore au moins 9% de protéines solubles dans l'eau ayant un poids moléculaire compris entre 1000 Da et 5000 Da, et de préférence un maximum de 20%, de préférence encore un maximum de 18%, de préférence encore un maximum de 16%, de préférence encore un maximum de 15%, de préférence encore un maximum de 14% de protéines solubles dans l'eau ayant un poids moléculaire compris entre 1000 Da et 5000 Da; [0059] - au moins 0.10%, de préférence au moins 0.15%, de préférence encore au moins 0.20%, de préférence encore au moins 0.25%, de préférence encore au moins 0.30% de protéines solubles dans l'eau ayant un poids moléculaire supérieur à 5000 Da, et de préférence un maximum de 2.0%, de préférence encore un maximum de 1.5%, de préférence encore un maximum de 1.0%, dc préférence encore un maximum de 0.8%, de préférence encore un maximum de 0.7% de protéines solubles dans l'eau ayant un poids moléculaire supérieur à 5000 Da. [0060] L'hydrolysat comprend de préférence entre 12% et 35%, de préférence encore entre 15% et 32%, de préférence encore entre 17% et 30%, dc manière encore préférée entre 20% et 28%, de manière préférée entre toutes entre 22% et 26% d'acides aminés libres par rapport aux protéines totales. [0061] En particulier, l'hydrolysat comprend de préférence entre 0.3% et 2.0%, de préférence encore entre 0.4 et 1.8%, de préférence encore entre 0.5% et 1.5%, de manière encore préférée entre 0.6% et 1.3%, de manière préférée entre toutes entre 0.7% et 1.0% de tryptophane (% en poids d'hydrolysat). [0062] En particulier, l'hydrolysat comprend de préférence entre 3.0% et 9.0%, de préférence encore entre 3.5% et 8.5%, de préférence encore entre 4.0% et 8.0%, de manière encore préférée entre 4.5% et 7.5%, de manière préférée entre toutes entre 5.0% et 7.0% de lysine (% en poids d'hydrolysat). [0063] En particulier, l'hydrolysat comprend entre 3% et 20%, de préférence encore entre 5% et 18%, de préférence encore entre 7% et 16%, de manière encore préférée entre 9% et 15%, de manière préférée entre toutes entre 10% et 14% d'acides aminés branchés (% en poids d'hycholysat). On entend par « acides aminés branchés » l'isoleucine, la leucine et la valine. [0064] En particulier, l'hydrolysat comprend entre 0.5% et 8%, de préférence encore entre 1% et 7%, de préférence encore entre 1.5% et 6%, de manière encore préférée entre 1.8% et 5%, de manière préférée entre toutes entre 2% et 4% d'acides aminés soufrés (% en poids d'hydrolysat). On entend par « acides aminés soufrés » la cystine, la cystéine et la méthionine. 9 [0065] En particulier, l'hydrolysat comprend entre 5% et 20%, de préférence encore entre 6% et 18%, de préférence encore entre 7% et 16%, de manière encore préférée entre 8% et 14%, de manière préférée entre toutes entre 9% et 12% d'acides aminés essentiels (% en poids d'hydrolysat). On entend par « acides aminés essentiels » la lysine, la méthionine, la cystinc, la thréonine, le tryptophane, la phénylalanine, la tyrosine, la valine, la leucine, l'isolcucine (pour les Hommes). [0066] L'hydrolysat selon l'invention présente notamment une teneur en matière grasse totale d'au moins 3%, de préférence d'au moins 4%, de préférence encore d'au moins 5%, de manière encore préférée au moins 6%, de manière préférée entre toutes au moins 7%. Ledit hydrolysat comprend notamment une teneur en matière grasse totale inférieure ou égale à 20%, de préférence inférieure ou égale à 19%, de préférence encore inférieure ou égale à 18%, de manière encore préférée inférieure ou égale à 17%, de manière préférée entre toutes inférieure ou égale à 16%. [0067] Parmi les lipides présents, l'hydrolysat protéique de l'invention contient avanta- geusement des phospholipides (ou lipides polaires). Les phospholipides sont des lipides structurels, constituants principaux des membranes. Les acides gras associés (C20 et C22) aux phospholipides ont un rôle essentiel dans la membrane plasmique puisqu'ils assurent l'amélioration de sa fluidité grâce à deux éléments, la longueur des chaînes et les rotations autorisées par les doubles liaisons. [0068] L'hydrolysat protéique de l'invention comprend au moins 1% de phospholipides. En particulier il comprend au moins 1.1% de phospholipides, de préférence au moins 1.2% de phospholipides, de préférence encore au moins 1.3% de phospholipides, de manière encore préférée au moins 1.4% de phospholipides, de manière préférée entre toutes au moins 1.5% de phospholipides. Ledit hydrolysat contient un maximum de 3% de phospholipides, de préférence un maximum de 2.8% de phospholipides, de préférence encore un maximum de 2.5% de phospholipides, de manière encore préférée un maximum 2.3% de phospholipides, de manière préférée entre toutes un maximum de 2.1% de phospholipides (% en poids d'hydrolysat). [0069] En particulier, les phospholipides représentent au moins 10%, de préférence au moins 11%, de préférence encore au moins 12%, de manière encore préférée au moins 14%, de manière préférée entre toutes au moins 15% de la matière grasse totale de l'hydrolysat selon l'invention. Notamment, les phospholipides représentent au maximum 70%, de préférence au maximum 65%, de préférence encore au maximum 60%, de manière encore préférée au maximum 55%, de manière préférée entre toutes au maximum 50% de la matière grasse totale de l'hydrolysat selon l'invention. [0070] Selon un mode de réalisation préféré, l'hydrolysat de l'invention est riche en phos- phatidylsérine (PS), phosphatidyléthanolamine (PE), phosphatidylcholine (PC) et phosphatidylinositol (PI), quatre phospholipides prédominants dans le cerveau. [0071] Selon ce mode de réalisation, ledit hydrolysat contient notamment de la phosphati- dylserine dans une quantité d'au moins 0.1 mg, de préférence au moins 0.2 mg, de préférence encore au moins 0.3 mg, de manière encore préférée au moins 0.4 mg, de manière préférée entre toutes au moins 0.5 mg, par gramme d' hydrolysat. [0072] Selon ce mode de réalisation, ledit hydrolysat contient notamment de la phosphati- dylserine dans une quantité inférieure ou égale à 5 mg, de préférence inférieure ou égale à 4 mg, de préférence encore inférieure ou égale à 3 mg, de manière encore préférée inférieure ou égale à 2.5 mg, de manière préférée entre toutes inférieure ou égale à 2 mg, par gramme d'hydrolysat. [0073] Ledit hydrolysat contient également de la phosphatidyléthanolamine dans une quantité d'au moins 0.5 mg, de préférence au moins 0.8 mg, de préférence encore au moins 1.2 mg, de manière encore préférée au moins 1.4 mg, de manière préférée entre toutes au moins 1.5 mg, par gramme d'hydrolysat. [0074] Ledit hydrolysat contient également de la phosphatidyléthanolamine dans une quantité inférieure ou égale à 7 mg, de préférence inférieure ou égale à 6 mg, de préférence encore inférieure ou égale à 5 mg, de manière encore préférée inférieure ou égale à 4.5 mg, de manière préférée entre toutes inférieure ou égale à 4 mg, par gramme d'hydrolysat. [0075] Ledit hydrolysat contient encore de la phosphatidylcholine dans une quantité d'au moins 5 mg, de préférence au moins 6 mg, de préférence encore au moins 6.5 mg, de manière encore préférée au moins 7 mg, de manière préférée entre toutes au moins 7.5 mg, par gramme d'hydrolysat. [0076] Ledit hydrolysat contient encore de la phosphatidylcholine dans une quantité in- férieure ou égale à 20 mg, de préférence inférieure ou égale à 18 mg, de préférence encore inférieure ou égale à 16 mg, de manière encore préférée inférieure ou égale à 14 mg, de manière préférée entre toutes inférieure ou égale à 12.5 mg, par gramme d'hydrolysat. [0077] Ledit hydrolysat contient aussi du phosphatidylinositol dans une quantité d'au moins 0.5 mg, de préférence au moins 0.7 mg, de préférence encore au moins 0.9 mg, de manière encore préférée au moins 1 mg, de manière préférée entre toutes au moins 1.1 mg, par gramme d'hydrolysat. [0078] Ledit hydrolysat contient aussi du phosphatidylinositol dans une quantité inférieure ou égale à 5 mg, de préférence inférieure ou égale à 4 mg, de préférence encore inférieure ou égale à 3 mg, de manière encore préférée inférieure ou égale à 2.5 mg, de manière préférée entre toutes inférieure ou égale à 2.1 mg, par gramme d'hyclrolysat. [0079] Les acides gras polyinsaturés (AGPI) sont des acides gras dont la chaîne hydro- carbonée comprend au moins deux doubles liaisons. Parmi les différentes familles d'AGPI, deux familles, les AGPI de la série n-6 (ou oméga 6) et ceux de la série n-3 11 (ou oméga 3) sont d'un grand intérêt nutritionnel. Ils diffèrent par la position de la première double liaison. Ces deux familles dérivent de précurseurs métaboliques d'origine exclusivement végétale : l'acide alpha linolénique (n-3) (ALA) et l'acide linoléique (n-6) (LA) qui doivent donc obligatoirement être apportés par notre alimentation. Ce sont des acides gras indispensables. L'ALA se trouve essentiellement dans les graines et huiles de colza, de soja, de noix et de lin et le LA dans les graines et les huiles de tournesol, d'arachide, de maïs et de pépins de raisin. Une fois consommé, l'ALA est transformé en dérivés essentiels pour la santé : l'acide cicosapentaénoïque (EPA) et l'acide docosahexaénoïque (DHA). Les poissons marins, qui se nourrissent d'algues et de phytoplancton, sont une bonne source d'EPA et de DHA. Le LA quant à lui est métabolisé en acide arachidonique (AA), également essentiel pour la santé, qui est directement apporté par la consommation de produits provenant d'animaux terrestres (oeuf, viande). [0080] Les AGPI présents dans le cerveau sont majoritairement l'AA et le DHA qui sont constitutifs des membranes cérébrales. L'incorporation des AGPI est la plus forte au cours du développement cérébral, tandis que dans le cerveau adulte, le DHA et l'AA ne s'accumulent plus, mais leurs niveaux sont maintenus par un « turnover » régulier qui compense leur utilisation. Les apports alimentaires sont susceptibles de faire varier ces niveaux. [0081] De manière avantageuse, l'hydrolysat selon l'invention contient des acides gras poly- insaturés (AGPI), et en particulier une proportion importante d'oméga 3. En particulier, il comprend au moins 0.5%, de préférence au moins 1%, de préférence encore au moins 1.5%, de manière encore préférée au moins 2%, de manière préférée entre toutes au moins 2.5% d'acides gras polyinsaturés (AGPI), et notamment d'oméga 3 et d'oméga 6. De manière préférée, ledit hydrolysat contient un maximum de 5%, de préférence un maximum de 4.7%, de préférence encore un maximum de 4.5%, de manière encore préférée un maximum 4.2%, de manière préférée entre toutes un maximum de 4.0% d'acides gras polyinsaturés (AGPI), et notamment d'oméga 3 et d'oméga 6. [0082] De préférence, l'hydrolysat selon l'invention comprend au moins 0.5%, de préférence au moins 0.7%, de préférence encore au moins 1%, de manière encore préférée au moins 1.5%, de manière préférée entre toutes au moins 2% d'oméga 3. De manière préférée, ledit hydrolysat contient un maximum de 4%, de préférence un maximum de 3.9%, de préférence encore un maximum de 3.8%, de manière encore préférée un maximum 3.7%, de manière préférée entre toutes un maximum de 3.5% d'oméga 3. [0083] En particulier, les oméga 3 représentent au moins 15%, de préférence au moins 20%, de préférence encore au moins 25%, de manière encore préférée au moins 30% de la 12 matière grasse totale de l'hydrolysat selon l'invention. Notamment, les oméga 3 représentent au maximum 50%, de préférence au maximum 45%, de préférence encore au maximum 40%, de manière encore préférée au maximum 35% de la matière grasse totale de l'hydrolysat selon l'invention. [0084] En particulier, l'hydrolysat selon l'invention comprend au moins 0.05%, de préférence au moins 0.07%, dc préférence encore au moins 0.1%, dc manière encore préférée au moins 0.15%, dc manière préférée entre toutes au moins 0.2% d'oméga 6. De manière préférée, ledit hydrolysat contient un maximum de 1%, de préférence un maximum de 0.9%, de préférence encore un maximum de 0.8%, de manière encore préférée un maximum 0.7%, de manière préférée entre toutes un maximum de 0.6% d'oméga 6. [0085] L'hydrolysat dc l'invention est particulièrement avantageux du fait de la présence de DHA et d'EPA. L'hydrolysat protéique de l'invention comprend au moins 0.5% de DHA et EPA (en % d'hydrolysat). En particulier il comprend au moins 0.7% de DHA et EPA, de préférence au moins 0.9 % de DHA et EPA, de manière encore préférée au moins 1% de DHA et EPA, de manière préférée entre toutes au moins 1.5% de DHA et EPA. [0086] De manière préférée, ledit hydrolysat contient un maximum de 5% de DHA et EPA, de préférence un maximum de 4.5% de DHA et EPA, de préférence encore un maximum de 4% de DHA et EPA, de manière encore préférée un maximum 3.5% de DHA et EPA, de manière préférée entre toutes un maximum de 3.2% de DHA et EPA. [0087] Selon un autre mode de réalisation préféré, il contient notamment du DHA dans une quantité d'au moins 2 mg, de préférence au moins 3 mg, de préférence encore au moins 5 mg, de manière encore préférée au moins 7 mg, de manière préférée entre toutes au moins 9 mg, par gramme d'hydrolysat. [0088] Ledit hydrolysat contient préférentiellement du DHA dans une quantité inférieure ou égale à 30 mg, de préférence inférieure ou égale à 27 mg, de préférence encore inférieure ou égale à 25 mg, de manière encore préférée inférieure ou égale à 23 mg, de manière préférée entre toutes inférieure ou égale à 20 mg, par gramme d'hydrolysat. [0089] En particulier, le DHA représente au moins 10%, de préférence au moins 12%, de préférence encore au moins 13%, de manière encore préférée au moins 14%, de manière préférée entre toutes au moins 15% de la matière grasse totale de l'hydrolysat selon l'invention. Notamment, le DHA représente au maximum 30%, de préférence au maximum 27%, de préférence encore au maximum 25%, de manière encore préférée au maximum 22%, de manière préférée entre toutes au maximum 20% de la matière grasse totale de l'hydrolysat selon l'invention. [0090] Associé aux peptides, le DHA, présent mais non prépondérant, produit avanta- geusement des effets bénéfiques. 13 [0091] Selon un autre mode de réalisation préféré, ledit hydrolysat protéique contient également de l'EPA dans une quantité d'au moins 0.5 mg, de préférence au moins 1 mg, de préférence encore au moins 2 mg, de manière encore préférée au moins 3 mg, de manière préférée entre toutes au moins 4 mg, par gramme d'hydrolysat. [0092] Ledit hydrolysat contient préférentiellement de l'EPA dans une quantité inférieure ou égale à 20 mg, de préférence inférieure ou égale à 17 mg, de préférence encore inférieure ou égale à 15 mg, de manière encore préférée inférieure ou égale à 13 mg, de manière préférée entre toutes inférieure ou égale à 12 mg, par gramme d'hydrolysat. [0093] De manière particulièrement avantageuse, une proportion d'oméga 3 de l'hydrolysat selon l'invention, et notamment le DHA et EP/A, est liée aux phospholipides. [0094] En particulier, l'hydrolysat selon l'invention comprend au moins 0.3%, de préférence au moins 0.35%, de préférence encore au moins 0.4%, de manière encore préférée au moins 0.45%, de manière préférée entre toutes au moins 0.5% d'oméga 3 liés aux phospholipides. De manière préférée, ledit hydrolysat contient un maximum de 1%, de préférence un maximum de 0.95%, de préférence encore un maximum de 0.9%, de manière encore préférée un maximum 0.85%, de manière préférée entre toutes un maximum de 0.8% d'oméga 3 liés aux phospholipides. [0095] Plus particulièrement, l'hydrolysat selon l'invention comprend au moins 0.15%, de préférence au moins 0.20%, de préférence encore au moins 0.25%, de manière encore préférée au moins 0.30%, de manière préférée entre toutes au moins 0.35% de DHA lié aux phospholipides. De manière préférée, ledit hydrolysat contient un maximum de 1%, de préférence un maximum de 0.9%, de préférence encore un maximum de 0.8%, de manière encore préférée un maximum 0.7%, de manière préférée entre toutes un maximum de 0,65% de DHA lié aux phospholipides. [0096] Plus particulièrement, l'hydrolysat selon l'invention comprend au moins 0.050%, de préférence au moins 0.055%, de préférence encore au moins 0.060%, de manière encore préférée au moins 0.070%, de manière préférée entre toutes au moins 0.080% d'EPA lié aux phospholipides. De manière préférée, ledit hydrolysat contient un maximum de 0.2%, de préférence un maximum de 0.18%, de préférence encore un maximum de 0.15%, de manière encore préférée un maximum 0.13%, de manière préférée entre toutes un maximum de 0.11% d'EPA lié aux phospholipides. [0097] En particulier, l'hydrolysat selon l'invention comprend au moins 0.005%, de préférence au moins 0.01%, de préférence encore au moins 0.015%, de manière encore préférée au moins 0.02%, de manière préférée entre toutes au moins 0.025% d'oméga 6 liés aux phospholipides. De manière préférée, ledit hydrolysat contient un maximum de 0.5%, de préférence un maximum de 0.4%, de préférence encore un maximum de 0.3%, de manière encore préférée un maximum 0.2%, de manière préférée entre toutes un maximum de 0.15% d'oméga 6 liés aux phospholipides. 14 [0098] Les « lipides neutres » ou « graisses neutres » ou « lipides simples », constitués es- sentiellement de triglycérides (ou triacylglycérols), représentent la principale forme de stockage des graisses dans les cellules adipeuses. Selon un mode de réalisation particulier, l'hydrolysat selon l'invention comprend au moins 0.1%, de préférence au moins 0.2%, de préférence encore au moins 0.3%, de manière encore préférée au moins 0.4%, de manière préférée entre toutes au moins 0.5% de lipides neutres, de préférence des triglycérides. De manière préférée, ledit hydrolysat contient un maximum de 15%, de préférence un maximum de 14%, de préférence encore un maximum de 12%, de manière encore préférée un maximum 10% de lipides neutres, de préférence des triglycérides. [0099] Selon un mode de réalisation particulier, l'hydrolysat selon l'invention comprend au moins 0.05 mg, de préférence au moins 0.10 mg, de préférence encore au moins 0.15 mg, de manière encore préférée au moins 0.20 mg de plasmalogènes par gramme d'hydrolysat. De manière préférée, ledit hydrolysat contient un maximum de 1.0 mg, de préférence un maximum de 0.8 mg, de préférence encore un maximum de 0.7 mg, de manière encore préférée un maximum 0.5 mg de plasmalogènes par gramme d' hydrolysat. [0100] L'hydrolysat peut se présenter sous n'importe quelle forme, et notamment sous forme liquide ou sous forme de poudre. Selon un mode de réalisation particulier, l'hydrolysat selon l'invention se présente sous la forme d'une poudre. Selon ce mode de réalisation particulier, l'hydrolysat comprend de préférence au moins 1%, de préférence au moins 2% d'humidité, de préférence encore au moins 3%, de manière encore préférée au moins 4% d'humidité. En outre, ledit hydrolysat comprend au maximum 15%, de préférence au maximum de 12%, de préférence encore au maximum 10%, de manière encore préférée au maximum 9%, de manière préférée entre toutes au maximum 8% d'humidité. [0101] L'hydrolysat contient des matières minérales. En particulier, l'hydrolysat peut comprendre de préférence au moins 5%, de préférence au moins 6%, de préférence encore au moins 7%, de manière encore préférée au moins 8%, de manière préférée entre toutes au moins 8,5% de matières minérales. En outre, ledit hydrolysat comprend au maximum 20%, de préférence au maximum de 15%, de préférence encore au maximum 12%, de manière encore préférée au maximum 11%, de manière préférée entre toutes au maximum 10% de matières minérales. [0102] En particulier, l'hydrolysat comprend de préférence entre 2 mg et 8 mg, de préférence encore entre 2.3 mg et 7.8 mg, de préférence encore entre 2.5 mg et 7.5 mg, de manière encore préférée entre 2.8 mg et 7.3 mg, de manière préférée entre toutes entre 3 mg et 7 mg de sélénium par kilogramme d'hydrolysat selon l'invention. [0103] En particulier, l'hydrolysat comprend de préférence entre 12 mg et 60 mg, de préférence encore entre 15 mg et 55 mg, de préférence encore entre 18 mg et 50 mg, de manière encore préférée entre 20 mg et 48 mg, de manière préférée entre toutes entre 22 mg et 45 mg de zinc par kilogramme d'hydrolysat selon l'invention. [0104] En particulier, l'hydrolysat comprend de préférence entre 400 mg et 1500 mg, de préférence encore entre 450 mg et 1450 mg, de préférence encore entre 500 mg et 1400 mg, de manière encore préférée entre 550 mg et 1350 mg, de manière préférée entre toutes entre 600 mg et 1300 mg de calcium par kilogramme d'hydrolysat selon l' invention. [0105] En particulier, l'hydrolysat comprend de préférence entre 2000 mg et 8000 mg, de préférence encore entre 2150 mg et 7500 mg, de préférence encore entre 2300 mg et 7000 mg, de manière encore préférée entre 2500 mg et 6500 mg, de manière préférée entre toutes entre 2750 mg et 6000 mg de phosphore par kilogramme d' hydrolysat selon l'invention. [0106] L'hydrolysat comprend de préférence entre 0.01 mg et 1 mg, de préférence encore entre 0.03 mg et 0.7 mg, de préférence encore entre 0.05 mg et 0.5 mg, de manière encore préférée entre 0.07 mg et 0.4 mg, de manière préférée entre toutes entre 0.1 mg et 0.2 mg de vitamine B12 par 100 grammes d'hydrolysat selon l'invention. [0107] L'hydrolysat comprend de préférence entre 0.004 mg et 0.06 mg, de préférence encore entre 0.005 mg et 0.05 mg, de préférence encore entre 0.006 mg et 0.04 mg, de manière encore préférée entre 0.007 mg et 0.03 mg, de manière préférée entre toutes entre 0.008 mg et 0.02 mg de vitamine D3 par 100 grammes d'hydrolysat selon l'invention. [0108] Selon un mode de réalisation préféré, la source protéique utilisée pour l'invention est au moins issue de têtes de poissons bleus. Selon un autre mode de réalisation préféré, ladite source protéique est issue de sardines. Selon un mode de réalisation préféré entre tous, ladite source protéique est au moins issue de têtes de sardines. [0109] On entend par « sardine » un petit poisson pélagique qui se nourrit de plancton, d'oeufs et de larves de crustacés. Son aire de répartition géographique s'étend en particulier de la partie centrale de la mer du Nord jusqu'au cap Blanc en Mauritanie. L'espèce est également abondante en Méditerranée jusqu'à la mer Noire. Poisson gras dont la teneur en lipides varie de 3,2 à 15% il est intéressant pour ses qualités nutritionnelles. En effet, la sardine est l'un des poissons les plus riches en lipides et spécifiquement en acides gras de la famille des omégas 3 (20 à 30 % des acides gras totaux) avec un rapport acides gras insaturés/acides gras saturés, proche de 2. La sardine est pauvre en glucides ( 75% de la surface), « en cercle » (la souris fait de tout petits cercles et peut faire quelques mouvements nets dans certaines directions). On retrouve ensuite des stratégies de « recherche locale» : le « balayage » (l'animal cherche dans une zone limitée, souvent au centre, de la piscine en couvrant en 15 et 75% de la surface), la « boucle » (la souris nage de façon circulaire à une distance assez fixe des bords supérieure à 15cm), la « incorrecte répétée » (l'animal nage dans une direction précise qui ne correspond pas à la position de la plateforme et répète la même trajectoire à plusieurs reprises), et enfin la « focale incorrecte » (l'animal cherche de façon intensive dans une petite portion de la piscine qui ne contient pas la plateforme). [0277] Les stratégies spatiales comportent les stratégies « correcte répétée » (lorsque l'animal nage dans la direction de la plateforme puis répète la même trajectoire à plusieurs reprises), « spatiale indirecte » (l'animal nage indirectement vers la plateforme en effectuant éventuellement une ou deux boucles), « spatiale directe » (la souris nage directement vers la plateforme), et la « focale correcte » (l'animal nage puis cherche de façon intensive dans le quadrant où est située la plateforme). [0278] 1.3.6. Réactivité au stress : [0279] La réactivité au stress a été effectuée 10 semaines après le début des supplé- mentations. Pour ce faire les animaux sont soumis à un test de contention de 30 minutes. Un prélèvement de sang à la joue est effectué au niveau de la veine mandibulaire au début du test (TO), puis 30 minutes (T30) et 60 minutes (T60) après le début du test. Les souris sont euthanasiées 90 minutes (T90) après le test et une ponction intracardiaque est réalisée afin de prélever un échantillon de sang. 1.4. Analyses biochimiques [0280] 1.4.1. Dosage des taux de corticostérone plasmatique : [0281] Lc plasma a été isolé du sang par centrifugation à 3000g pendant 20 minutes. A partir du plasma, un dosage de la corticostérone totale a été réalisé grâce au Kit ELISA DetectX® « Corticosterone, Enzyme Irnmunoassay Kit » selon les indications du fournisseur (Arbor Assay). La concentration en corticostérone (ng/mL) de chaque échantillon est calculée en fonction de la gamme étalon obtenue par spectrophotométrie. [0282] 1.4.2. Expression génique : [0283] L'expression des différents gènes d'intérêt a été évaluée par PCR quantitative en temps réel comme décrit par Rey et aL (16). Ces analyses ont été réalisées sur les cellules BV2 et HT22 et sur les hippocampes. [0284] 1.4.3. Extraction des ARN totaux : [0285] Les ARN totaux ont été extraits des cellules et des hippocampes en utilisant le protocole d'extraction du réactif TRIzol (Invitrogen, Life Technologies) contenant du phénol et de l'isothiocyanate de guanidine. Ce réactif permet, après lyse et ajout de chloroforme, de séparer une phase aqueuse supérieure contenant l'ARN d'une phase organique contenant l'ADN et les protéines. Après récupération de la phase aqueuse, l'ARN est précipité avec du glycogène (20ing/mL) et de l'isopropanol. Après des lavages successifs à l'éthanol 70%, le culot d'ARN est séché puis repris dans 104 d'eau stérile. La pureté et la quantité d'ARN de chaque échantillon ont été mesurées par spectrophotométrie (Nanodrop, Life technologies). [0286] 1.4.4. Transcription inverse : [0287] La transcription inverse (RT) a été réalisée avec h.tg ou 2Rg d'ARN, selon la quantité 36 obtenue, pour synthétiser des ADN complémentaires (ADNc). Les ARN ont été incubés à 37°C pendant 15 minutes puis à 75°C durant 1 minute avec un mélange de tampon DNAse, RNAsin, DNAse 1 (Invitrogen, Life Technologies). Une deuxième incubation à 65°C pendant 5 minutes en présence de random primers (15Ong/pL, Invitrogen) et de dNTP à 10mM est effectuée. Enfin, un mélange de tampon 5X, de DTT, de RNase OUT à 40U/pL et. de Supercript HI à 2000/pL (lnvitroeen, Life Technologies) a été ajouté. Le mix réactionnel est incubé à 25°C pendant 5 minutes, puis 50°C pendant 50 minutes et 70°C pendant 15 minutes. La concentration finale des ADNc obtenus est de 5Ong/pL (si ln d'ARN initial) ou 10Ong/pL (si 2pg d'ARN initial). [0288] 1.4.5. PCR quantitative en temps réel : [0289] Les ADNc issus de la réaction de RT ont été amplifiés sélectivement grâce à des amorces spécifiques aux séquences des gènes cibles étudiés. Le gène de référence utilisé ici est la B-Actinc, et les gènes cibles étudiés, pour la coculture, sont : IL-6, IL-1B, TNF-a, BDNF et NGF ; et pour les hippocampes : 1L-6, IL-1B, TNF-a, CD11 b. [0290] Pour chaque échantillon, 2p1 d' ADNc à 2Ong/p1 ont été additionnés à 8p1 d'un mélange comprenant de la Taq polymérise (5X), les couples d'oligonucléotides des gènes cibles (2X) et de l'eau stérile (1X). La plaque a ensuite été placée dans un thermocycler Light Cycler (LC 480 version 2, Roche) afin de réaliser le programme de PCR : une phase d'activation (2 minutes à 95°C) et 50 cycles d'amplification comprenant chacun une phase de dénaturation (15 secondes à 95°C), et une phase d'hybridation des oligonucléotides et élongation (1 minute à 60°C). [0291] La quantification finale a été réalisée en utilisant la méthode comparative des « Cycle Tlu-eshold » (Ct). Pour chaque gène cible et chaque échantillon, le taux de transcrits a été normalisé avec le taux de transcrits du gène de référence (B-Actine). 1.5. Statistiques [0292] Les analyses statistiques ont été- réalisées avec les logiciels GraphPad Prism et Statistica. En ce qui concerne les analyses de l'Open Field, de la réactivité au stress et des qPCR, les 6 groupes expérimentaux ont été comparés par des ANOVA à 2 facteurs (âge et régime) suivi d'un test post-hoc de Tukey en cas d'interaction statistiquement significative entre les facteurs. Pour le labyrinthe en Y les 6 groupes expérimentaux ont été comparés par un one sample t-test par rapport à la valeur du hasard 33%. Pour l'analyse du labyrinthe aquatique de Morris, la phase d'apprentissage des 6 groupes expérimentaux a été analysée par une ANOVA à 3 facteurs à mesures répétées (âge, régime et jour) ; et le probe test a été analysé par une ANOVA 1 facteur (quadrants). [0293] Les données ont été exprimées sous la forme de moyennes ± écart-type par rapport à la moyenne (SEM), et les différences ont été- considérées comme significatives lorsque la valeur de p était inférieure à 0,05. 37 1.6. Préparation des hydrolysats 102941 Un hydrolysai. protéique, Hl, a été obtenu par le procédé suivant : une solution aqueuse contenant 50% de broyat de têtes de sardines a été hydrolysée à 55°C par une endopeptidase à sérine, d'origine microbienne, pendant une durée de 2 heures. L'enzyme a ensuite été inactivée par chauffage à 95°C pendant 30 minutes. Les particules solides (arêtes) ont été enlevées par tamisage. Une étape de centrifugation verticale a alors été réalisée, de manière à retirer les boues et la phase grasse (principalement des protéines insolubles, des lipides neutres - triglycérides - de la matière minérale). La phase aqueuse a ainsi été isolée puis séchée. [0295] Un hydrolysat protéique, H2, a été obtenu par le procédé suivant : une solution aqueuse contenant 87% de broyat de têtes de sardines a été hydrolysée à 55°C par une endopeptidase à sérine, d'origine microbienne, pendant une durée de 3 heures. L'enzyme a ensuite été inactivée par chauffage à 95°C pendant 30 minutes. Les particules solides (arêtes) ont été enlevées par tamisage. Une étape de centrifugation verticale a alors été réalisée, de manière à retirer les boues et la phase grasse (principalement des protéines insolubles, des lipides neutres - triglycérides - de la matière minérale). La phase aqueuse a ainsi été isolée puis séchée. 1.7. Caractérisation des hydrolysats [0296] Plusieurs caractéristiques des hydrolysats H1 et H2 ont été déterminées, comme montré dans le tableau 3. [0297] Lc DH a été déterminé par (1) la méthode pli-stat, comme décrit pari. Adler-Nissen (17), ainsi que (2) par la méthode OPA, comme décrit par Niclsen, P (18). [0298] L'humidité a été mesurée selon la méthode du Règlement CE 152/2009. [0299] La quantité de protéines totales a été déterminée par la méthode Dumas, basée sur la norme NF EN 1SO 16634-1. [0300] La quantité de protéines solubles a été déterminée en solubilisant l'échantillon dans de l'eau ultrapure, en récupérant la phase aqueuse après centrifugation et en appliquant la méthode de Kjedahl (Règlement CE 152/2009) sur ladite phase aqueuse. [0301] La quantité de matière minérale a été déterminée selon la méthode de la norme NF VO4-404 - Avril 2001. [0302] La quantité de matière grasse totale (ou lipides totaux) a été déterminée selon la méthode du Règlement CE 152/2009. [0303] Les quantités de lipides neutres, dont les triglycérides, de lipides polaires, dont la phosphatidylcholine, ont été déterminées par HPTLC (High-Performance Thin-Layer Chromatography). Les différentes classes de lipides neutres et de lipides polaires ont été analysées séparément par HPTLC (High performance Thin layer chromatography) sur des plaques de verre (10x20 cm) imprégnées de silice 60 (Merck). Un lavage pré- 38 liminaire de la plaque a été réalisé avec un mélange hexane / diéthyl éther (97:3, v/v) dans le cas des lipides neutres, et avec un mélange méthyl acétate / isopropanol / chloroforme / méthanol / KCI (0.25%) (10:10:10:4:3.6; v:v) dans le cas des lipides polaires, afin d'enlever les possibles impuretés. Les plaques ont ensuite été activées à 110°C pendant 30 minutes. Les extraits lipidiques ont été déposés en quantité adaptée suivant les échantillons par un passeur automatique (CAMAG). Un double développement a permis de séparer les lipides neutres. Lors de la première migration un mélange hexane / diéthyl éther / acide acétique (20/5/0.5, v:v:v) a été utilisé et un mélange hexane / diéthyl éther (93/3, v:v) lors de la deuxième. Les lipides polaires ont été séparés après un seul développement, avec comme solvant d'élution un mélange méthyl acétate / isopropanol / chloroforme / méthanol / KCI (0.25%) (10:10:10:4:3.6; v:v). [0304] Après révélation par immersion des plaques dans une solution d'acide cuprique et d'acide phosphorique suivie d'un chauffage à 120°C pendant 20 minutes, les différentes classes de lipides neutres et de lipides polaires sont apparues sous forme de taches noires. Six classes de lipides neutres (alcools, acides gras libres, esters de stérols, éthers de glycérides, triacylglycérols et stérols) et 7 classes de lipides polaires (phosphatidyl ethanolamine, phosphatidyl choline, phosphatidyl serine, phosphatidyl inositol, cardiolipidc, céramide aminoéthylphosphonate et lysophosphatidyl choline) ont pu être séparées et identifiées par comparaison avec des standards. La quantification a été réalisée par étalonnage externe, par densitométrie à l'aide d'un scanner réglé à 370 nm et du logiciel Wincats (CAMAG). [0305] Les quantités d'oméga 3 et d'oméga 6, de DHA et EPA, de plasmalogènes ont été déterminées comme décrit par Mathieu-Resuge, et al., (19). [0306] Tableau 3 : Caractéristiques des hydrolysats HI et H2 [0307] 39 ITableaux31 Hl 112 DH (pH-stat) (%) 16.0 12.8 DM (OPA) (%) 32.2 30.3 Humidité (g/100g) 2.6 3.4 Protéines totales (g/100g) 72.1 69.6 Protéines solubles (g/100g) 70.4 67.0 Matière minérale (g/100g) 9.5 9.0 Matière grasse totale (g/100g) 7.8 10.3 Phosphatidylcholinc (nig/g) 10.0 8.9 Oméga 3 (mg/g) 26.5 33.8 Oméga 6 (mg/g) 3.6 4.5 DHA (mg/e) 13.5 17.3 EPA (mg/g) 6.6 8.4 Plasmalogènes (mg/g) 0.2 0.3 Lipides neutres (mg/g) 61.6 85.5 Triglycérides 58 73.6 Lipides polaires (mg/g) 16.4 18.2 EPA 0.9 0.9 DHA 4.9 4.4 103081 Le profil de poids moléculaire des protéines solubles dans l'eau a été déterminé par chromatographie SEC comme décrit dans F. Guérard et al., (20). 103091 Tableau 4 - Profil de poids moléculaire des protéines solubles dans l'eau 103101 ITableaux4l H1 H2 > 5000 Da 0.4 0.6 1000-5000 Da 10.7 12.8 500-1000 Da 14.4 12.9 REVENDICATIONS[Revendication 1] Hydrolysat protéique obtenu à partir d'au moins une source protéique issue de poissons bleus comprenant : (1) un degré d'hydrolyse (DH) d'au moins 10%, et/ou (11) au moins 80% de protéines solubles dans l'eau dont le poids mo- léculaire est inférieur à 1000 Da, et/ou (III) au moins 1% de phospholipides, et/ou (1V) au moins 0.5% de DHA et EPA, caractérisé en ce que ledit hydrolysat est obtenu par hydrolyse en- zymatique. [Revendication 2] Hydrolysat protéique selon la revendication 1, caractérisé en ce que ladite source protéique est au moins issue de têtes de poissons bleus. [Revendication 3] Hydrolysat protéique selon la revendication 1 ou la revendication 2, ca- ractérisé en ce que ledit hydrolysat protéique est complémenté en acide docosahexaénoïque (DHA). [Revendication 4] Hydrolysat protéique selon la revendication 1 ou la revendication 2, ca- ractérisé en ce qu'il est obtenu par un procédé d'hydrolyse enzymatique comprenant les étapes de : a. fourniture d'une source protéique ; b. broyage de ladite source protéique ; c. optionnellement, ajustement du pH ; d. ajout d'au moins une enzyme d'hydrolyse ; e. chauffage ; f. séparation ; g. séchage. [Revendication 5] Composition alimentaire comprenant au moins un hydrolysat protéique tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce qu'il s'agit d'un aliment complet ou d'un complément alimentaire, notamment un aliment fonctionnel ou nutraceutique. [Revendication 6] Composition alimentaire selon la revendication 5, caractérisée en ce que ladite composition alimentaire est un complément alimentaire, notamment un aliment fonctionnel ou nutraceutique pour l'Homme. [Revendication 7] Composition alimentaire selon la revendication 5, caractérisée en ce que ladite composition alimentaire est un aliment pour animaux de compagnie, de préférence un aliment pour chiens ou chats. [Revendication 8] Procédé de préparation d'un hydrolysai protéique tel que défini dans la revendication 1 ou la revendication 2 comprenant les étapes de : 47 [Revendication 9] [Revendication 10] [Revendication 11] [Revendication 12] a. fourniture d'une source protéique ; h. broyage de ladite source protéique ; c. optionnellement, ajustement du pH ; d. ajout d'au moins une enzyme d'hydrolyse ; c. chauffage ; f. séparation ; g. séchage. Procédé de préparation d'un hydrolysat protéique selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'il comprend en outre une étape de supplémentation en DHA. Kit comprenant, dans un seul emballage, plusieurs contenants : a) au moins un hydrolysat protéique tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 4 ; h) un ou plusieurs ingrédients alimentaires pour animaux de compagnie, choisis de préférence dans le groupe consistant en protéines, peptides, acides aminés, céréales, glucides, matières grasses ou lipides, nutriments, facteurs d'appétence, digcstats animaux, farine de viande, gluten, conservateurs, tensioactifs, agents texturants ou agents de texture ou agents stabilisants, agents colorants, composés de phosphate inorganique, arômes et/ou assaisonnements. c) optionnellement au moins du DHA. Composition pharmaceutique comprenant au moins un hydrolysat protéique tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 4, un véhicule pharmaceutiquement acceptable et/ou un excipient. Hydrolysat protéique tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 4 ou composition pharmaceutique selon la revendication 11, pour une utilisation comme médicament.