Brevet FR3092968A1 — publié le 20200828

Description Titre de l'invention : COMPLEMENT ALIMENTAIRE [0001] La présente invention concerne une composition, ainsi qu'un complément ali- mentaire à base d'acides gras et de xanthophylles et leurs applications notamment pour prévenir ou lutter contre des troubles cognitifs chez l'humain ou l'animal. [0002] Les processus cognitifs sont définis comme l'ensemble des fonctions cérébrales pernaettant d'acquérir, traiter, mémoriser et utiliser les données issues de l'environnement afin de maximiser les avantages et de minimiser les inconvénients des contraintes extérieures. Ainsi, les processus cognitifs sont à l'oeuvre lors des phases impliquant le raisonnement (dont découlent la planification, l'organisation, le jugement), la perception, la reconnaissance, le langage, les émotions, la mémoire et l'apprentissage. [0003] Les troubles légers cognitifs, ou fragilités cognitives, sont. définis comme des al- térations des fonctions cognitives sans démence. D'un point de vue clinique, ces troubles sont associés à un score de 0,5 dans le cadre d'une évaluation via le test CDR (Cognitive Drug Research Computerized Assessment System). [0004] Parmi ces troubles cognitifs, un déclin cognitif survenant avec l'âge et des altérations cognitives induites par un stress prénatal sont deux phénomènes pouvant intervenir au cours de la vie d'un individu. [0005] Le déclin cognitif lié à l'âge est défini comme une diminution non pathologique des fonctions cognitives telles que la vitesse de traitement de l'information, la capacité attentionnelle et surtout la mémoire cite de travail (ou à court terme). Ces processus résultent de modifications physiologiques normales directement corrélées avec l'âge. L'âge du début de ce déclin est encore sujet à controverse, mais étant donné l'accélération du vieillissement de la population mondiale, plus de 20 % de la population mondiale ayant plus de 60 ans, et ce pourcentage sera de plus de 30% en 2050, le déclin cognitif lié à l'âge est un des enjeux majeurs de ces prochaines décennies, au niveau mondial, et spécifiquement au sein des pays développés, dans lesquels il impactera fortement l'économie (moins d'autonomie des personnes âgées) et les politiques publiques. [0006] A l'opposé de la pyramide des âges, des troubles cognitifs peuvent affecter les nourrissons et les jeunes enfants suite à un stress prénatal. En effet, depuis plusieurs années, F influence du stress durant certaines périodes de la grossesse sur le développement cognitif de l'individu à naitre, a été étudié tant chez l'humain, que chez les animaux. Ainsi, chez les animaux, principalement le rat, il a été montré qu'un stress prénatal chez la mère induisait une descendance possédant une mémoire à long terme altérée. 2 [0007] Il apparait que des stimuli négatifs intenses, des stress, peuvent induire des al- térations des fonctions cognitives des jeunes enfants, se manifestant par une hyperactivité, un déficit d'attention, des retards au niveau du langage, des tempéraments plus difficiles, et plus globalement des altérations comportementales telles qu'un comportement anxieux, traduisant un retard au point de vue neurodéveloppemental et une baisse des capacités cognitives. [0008] Un des mécanismes supposés de la traduction du stress prénatal en troubles cognitifs, est basé sur la mise en contact du foetus avec des doses importantes d'hormones, dites du stress, appartenant à la famille des corticostéroïdes, telles que le cortisol. Or, le cortisol passe la barrière placentaire et, à partir d'une certaine concentration, les mécanismes de protection du foetus contre les corticoïdes sécrétés par la mère, sont saturés, mettant ainsi le foetus en contact avec des doses trop importantes de cortisol qui semblent avoir un effet délétère sur le développement cognitif D'autres hypothèses complémentaires expliquant le lien entre stress prénatal et troubles cognitifs de l'enfant, sont avancées. [0009] La notion de stress peut être définie selon différents angles tels que l'approche biologique : le stress est alors une série de réactions métaboliques, suite à un ou des facteurs exogènes, induisant des changements physiologiques ou psychologiques (peur, angoisse) au sein de l'organisme. Cependant, la notion de stress et ses impacts est largement individu-dépendante, et la réponse de l'individu à un stress se définit aussi sous l'angle psychologique. Dès lors, étant donné qu'un évènement n'est stressant qu'a posteriori, du fait d'une réaction propre à chaque individu, ou qu'il peut être objectivement stressant, il est difficile d'agir sur les sources du stress prénatal. A ceci s'ajoute le fait que la grossesse induit des changements hormonaux et psychologiques augmentant la sensibilité de la future mère à tout évènement pouvant avoir un lien avec le bien-être de l'enfant à naitre. [0010] L'approche strictement thérapeutique du stress ou de l'anxiété, par voie médica- menteuse, est périlleuse dans le cas de la femme enceinte : de nombreux psychotropes pour le traitement des troubles psychologiques ou de l'anxiété ont des effets tératogéniques avec des conséquences directes néfastes sur le foetus. Ceci nécessite une évaluation au cas par cas, et cette approche n'est utilisée que dans le cas de troubles psychologiques cliniques chez la femme enceinte et non dans le cas de stress dits subjectifs. [0011] Ainsi, il existe une problématique forte portant sur la découverte de solutions contre les conséquences du stress prénatal sur les troubles cognitifs de l'enfant ou du jeune adulte. [0012] Différentes études ont montré l'intérêt d'une supplémentation nutritionnelle en acides gras dits essentiels, mais aussi en carotènes et notamment en xanthophylles, voire en 3 l'association desdits acides gras et desdits carotènes, pour prévenir ou au moins limiter le déclin des fonctions cognitives. Des compléments alimentaires ou des médicaments ont été développés conduisant à des résultats encourageants. [0013] Ainsi on connait selon le document W02013/032333A1, une composition à base d'acides gras de type oméga-3, en particulier l'acide ékosapentaénoïquc (EPA) et l'acide docosahexaénoïque (DHA), d'asthaxanthinc et de glycérophospholipides, qui est préconisée pour la prévention ou le traitement de différents troubles et notamment des troubles cognitifs. Lesdits ingrédients sont présents dans cette composition sous forme d'extraits de microalgues ; dans une variante préférée de préparation, ils sont obtenus par formulation de deux extraits provenant de deux algues différentes. L'origine naturelle des constituants dc la composition est un réel atout. Toutefois, le besoin de compositions plus efficaces existe, en particulier eu égard aux enjeux cités précédemment. Il est en outre important de disposer de procédés de préparation de telles compositions simples et reproductibles. [0014] L'invention apporte une solution avec une composition comprenant un ou des acides gras de type oméga-3 et un ou des xanthophyllcs, ainsi qu'un ou des composés de la famille des stérols et un ou des composés de type prostaglandine. Il s'est avéré que l'association d'au moins un stérol et d'au moins un composé de type prostaglandine avec au moins un acide gras de type oméga-3 et au moins un xanthophyllc augmente significativement l'efficacité d'une composition en prévention ou en lutte contre les troubles cognitifs liés à l'âge mais aussi contre ceux associés à un stress prénatal. [0015] Une composition de l'invention comprend : [0016] au moins 50 mg/g d'un ou plusieurs acides gras de type oméga-3. [0017] au moins 10 mg/g d'un ou plusieurs xantophylles, [0018] au moins 1 mg/g d'un ou plusieurs stérols et [0019] au moins 2 pg/g d'un ou plusieurs composés de type prostaglandine. [0020] Dans une indication principale, une composition de l'invention peut être utilisée comme complément alimentaire. Aussi l'invention concerne un complément alimentaire qui comprend au moins 50 mg/g d'un ou plusieurs acides gras de type oméga-3, au moins 10 mg/g d'un ou plusieurs xantophylles, au moins 1 mg/g d'un ou plusieurs stérols et au moins 2 mg/g d'un ou plusieurs composés de type prostaglandine. [0021] L'invention présente un avantage essentiel dans le fait que l'ensemble des constituants ou ingrédients ci-dessus peuvent être obtenus à partir d'une source naturelle et en particulier peuvent être extraits d'une ou de plusieurs microalgues, et de préférence d'une seule microalgue. Bien entendu, l'un ou plusieurs des constituants ou ingrédients d'une composition ou d'un complément alimentaire de l'invention peuvent être d'origine non naturelle et apportés sous forme de produits fabriqués par synthèse chimique. [0022] Avant d'exposer l'invention plus en détails, certains termes employés dans le présent texte sont définis. [0023] Le ternie « comprend » dans l'expression « une composition comprend » ou « un complément alimentaire comprend » signifie que la composition ou le complément peut incorporer un quelconque constituant supplémentaire ou plus, non expressément mentionné, sous quelle que forme et de quelle qu'origine que ce soit. Il couvre aussi une composition ou un complément qui ne contiendrait que les constituants listés et qu'en conséquence la composition ou le complément consisterait en lesdits constituants. [0024] Un complément alimentaire est défini comme une ou des denrées alimentaires dont le but est de compléter le régime alimentaire normal d'un humain ou d'un animal, et qui constituent une source concentrée de nutriments ou d'autres substances ayant un effet nutritionnel ou physiologique seuls ou combinés ; il est généralement disponible sous forme de doses, à savoir les formes de présentation telles que les gélules, les pastilles, les comprimés, les pilules et autres formes similaires, ainsi que les sachets de poudre, les ampoules de liquide, les flacons munis d'un compte-gouttes et les autres formes analogues de préparations liquides ou en poudre destinées à être prises en unités mesurées de faible quantité. [0025] Le ou les acides gras de type oméga-3 sont une famille d'acides gras insaturés dont la chaîne hydrocarbonée a de l'ordre de 4 à 36 atomes de carbone, généralement de l'ordre de 14 à 36 atomes de carbone, et dont la double liaison ou la première double liaison, comptée depuis le groupe méthyle terminal de la chaîne, se trouve sur la troisième liaison carbone-carbone. La ou les insaturations peuvent être indépendamment les unes des autres, els ou trans. Les acides les plus représentatifs sont l'acide alpha-linolénique (ALA), l'acide éïcosapentaénoïque (EPA) et l'acide docosahexaénoïque (DHA), mais l'appellation « acides gras de type oméga-3 » n'y est pas restreinte. En outre, et en particulier quand le ou les acides gras sont d'origine naturelle, ils peuvent être extraits d'algues et se présenter sous la forme de molécules libres mais aussi sous une forme dérivée telle qu'une forme estérifiée, par exemple sous forme mono-, di- ou tri-estérifiée, ou en mélanges de ces formes. [0026] Par xanthophylles, sont définis les molécules appartenant aux caroténoïdes comportant un ou plusieurs atomes d'oxygène tels que l'astaxanthine, la cantaxanthine, la vaucheriaxanthine, la lutéine, la zéaxanthine, la diadinoxanthine, la néoxanthine, la loroxanthine, la siphonoxanthine, la diatoxanthine, la violaxanthine, la dinoxanthine, la flavoxanthine, l'a-cryptoxanthine, la P-cryptoxanthine et la fucoxanthine. Notamment quand le ou les xanthophylles sont d'origine naturelle, ils peuvent être extraits d'algues et se présenter sous la forme de molécules libres mais aussi sous une forme dérivée telle qu'une forme estérifiée de mono- ou pluri-esters, ou en mélanges de ces formes. [0027] Les stérols sont une famille de lipides bien connus possédant un noyau de stéranc dont le carbone en position 3 est porteur d'un groupe hydroxyle, cc dernier pouvant être modifié par exemple par un groupe acétyle. Ils incluent les stérols naturels ou phytostérols, et sont regroupés dans le présent texte sous le terme de phycostérols. De façon non exhaustive, on peut citer à titre de phytostérols, le 24-méthylène-cholestérol, le ri-sitostérol, le fucostérol, r isofucostérol, le saringostérol, l'oxocholestérol acétate, le crinostérol, et plus particulièrement le brassicastérol, le stigmastérol et le campestérol. [0028] Par composé de type prostaglandine, on entend une famille de lipides structu- rellement de type prostaglandine, d'origine naturelle, résultant d'oxydations non directement enzymatiques des acides gras présents naturellement au sein des biomasses microalgales, et sont et regroupés dans le présent texte sous le terme phycoprostancs. Ces composés sont en particulier choisis parmi les phytoprostancs, les isoprostanes et les neuroprostanes, selon l'acide gras qui a subi la ou des oxydations. Ainsi, ces composés peuvent être issus des acides gras tels que l'acide alinolénique (ALA), l'acide arachidoniquc (ARA), l'acide acosapentaendique (EPA), ou l'acide docosahexaénoïque (DHA). Les phytoprostanes sont principalement dérivés de r ALA et peuvent être choisis parmi le 9-epi-9F]t-PhytoP, le ent-16-epi-16-Flt-PhytoP, le 9-Flt-PhytoP, le ent-16B1t-PhytoP, le ent-9L1t-PhytoP, le 16(RS)-16-Alt-PhytoP. Les isoprostanes sont principalement dérivés de l'ARA et de l'EPA et peuvent être choisis parmi le 15-E2t-IsoP, le 15-F2t-IsoP, le 15-epi-15-F2t-IsoP, le 5-F2t-IsoP, le 8(RS)-8-F3t-IsoP. Les neuroprostanes sont principalement dérivés du DHA et peuvent être choisis parmi le 4-F3t-NeuroP, le 10-F4t-NeuroP, le 10-epi-10-F4t-NeuroP, le 4(RS)-4-F4t-NeuroP, le 14(RS)-14-F4t-NeuroP, le 20(R)-20-F4t-NeuroP. [0029] Par triglycérides à chaines moyennes (MCT, Medium Chain Liglycerides), on comprend des esters de glycérol et d'acides gras saturés, dont la chaîne hydrocarbonée a de l'ordre de 6 à 12 atomes de carbone. Ils sont naturellement présents dans l'huile de coco telle que l'huile de noix de coco, l'huile de palmiste et l'huile de palme, mais peuvent être obtenus à partir d'autres graisses ou huiles. [0030] La présente invention est ci-après déciite plus en détails et ses variantes exposées. [0031] Une composition ou un complément alimentaire de l'invention répond avanta- geusement aux caractéristiques suivantes, considérées seules ou en une ou plusieurs quelconques combinaisons. [0032] Elle ou il comprend 50 à 250 mg/g d'un ou plusieurs acides gras de type oméga-3, 10 à 50 mg/g d'un ou plusieurs xantophylles, 1 à 20 mg/g d'un ou plusieurs stérols et 2 à 100 pg/g d'un ou plusieurs composés de type prostaglandine. [0033] Elle ou il comprend 50 à 200 mg/g d'un ou plusieurs acides gras de type oméga-3, 10 6 à 30 mg/g d'un ou plusieurs xantophyllcs, 1 à 8 mg/g d'un ou plusieurs stérols et 2 à 50 pg/g d'un ou plusieurs composés de type prostaglandine. [0034] Elle ou il comprend 50 à 170 mg/g d'un ou plusieurs acides gras de type oméga-3, 10 à 25 mg/g d'un ou plusieurs xantophyllcs, 1 à 6 mg/g d'un ou plusieurs stérols et 2 à 40 pg/g d'un ou plusieurs composés de type prostaglandine. [0035] Avantageusement, une composition ou un complément alimentaire de l'invention contient en outre et à titre de véhicule ou support pour faciliter l'expression des ingrédients actifs, au moins une huile. De manière surprenante, il a été observé que la fabrication d'une composition ou d'un complément alimentaire sont facilitées lorsque cette huile est choisie parmi les triglycérides à chaincs moyennes (MCT). En particulier, lorsque les ingrédients actifs sont obtenus à partir d'un même extrait de microalgue, une homogénéisation optimale est constatée dans une telle huile. Selon une variante, les triglycérides à chaines moyennes (MCT) sont d'origine naturelle et sont apportés par une huile choisie parmi l'huile de coco, l'huile de palmiste et l'huile de palme ; ils peuvent aussi être obtenus ou dérivés d'une telle huile. [0036] Ci-après, des formulations préférées d'une composition ou d'un complément ali- mentaire de l'invention sont présentées, ces mises en oeuvre pouvant bien entendu être combinées : [0037] le ou au moins l'un des acides gras de type oméga-3 est choisi parmi l'acide stéa- ridonique (SDA), l'acide eicosapentaénoïque (EPA), l'acide docosahexaénoïque (DHA) et leurs mélanges ; [0038] le ou au moins l'un des xantophylles est la fucoxanthine ; [0039] le ou au moins l'un des stérols est choisi parmi les phytostérols ; [0040] le ou au moins l'un des composés de type prostaglandine est choisi parmi les phyto- prostanes, les isoprostanes et les neuroprostanes. [0041] Une composition ou un complément alimentaire de l'invention peut comprendre tout additif permettant notamment d'en améliorer la conservation, l'aspect, le goût, la formulation. Ainsi, un ou plusieurs additifs tels que ceux choisis parmi les agents conservateurs, les colorants, les arômes, les agents de délitement, les agents lubrifiants, les agents d'enrobage ou d'encapsulation peuvent y être incorporés. [0042] Une application majeure d'une composition de l'invention est nutraceutique, ainsi une telle composition ou un complément alimentaire tel que défini ci-dessus se présente avantageusement sous la forme de gélules, de capsules, de comprimés, de pastilles ou de poudre libre. Elle ou il est de préférence conditionné en doses ayant un poids unitaire compris entre 1 mg et 1 g. De manière générale, la galénique de la composition ou du complément sera adaptée au sujet considéré et en particulier selon qu'elle est destinée à un enfant ou un adulte. [0043] Une composition ou un complément alimentaire de l'invention peut être utilisé pour 7 prévenir ou lutter contre les troubles cognitifs liés au vieillissement ou les troubles cognitifs chez les enfants ou les jeunes adultes ayant subi un stress prénatal. Dans la prévention ou la lutte contre les troubles cognitifs liés au vieillissement, la prise journalière pourra être comprise entre 2 à 5 mg/kg de poids corporel. Dans la prévention ou la lutte contre les troubles cognitifs chez les enfants ou les jeunes adultes ayant subi un stress prénatal, la prise journalière pourra être comprise entre 0,05 à 0,1 mg/kg de poids corporel. [0044] L'invention concerne aussi l'utilisation d'une microalgue pour préparer un complément alimentaire tel que défini précédemment. Une ou des rnicroalgucs préférées sont choisies dans l'un quelconque des taxons suivants Pinguiophyceae, Chrysophyceae, Bacillariophyceae, Mamiellophyceae, Prynmesiophyceae, Hapwphyceae,Coccolnhophyceae,Isochrysidaceae et Phaeodawylaceae. Avantageusement la microalgue est la Tisochrysis lwea ou la Phaemlawylum tricornwum. On optera pour de telles microalgues car une extraction appropriée conduit à un extrait dont la composition répond à la définition d'une composition de l'invention. A titre d'exemple, un tel extrait peut comprendre la fraction d'acides gras suivante : les acides gras, exprimés en pourcentage massique d'extrait total, sont sous forme d'acides gras libres entre 4 et 55 %, sous forme de rnonoacyl glycérol entre 0,5 et 10 %, sous forme de diacylglycérol entre 0,4 et 15 % et sous forme de triacyl glycérol entre 2 et 55%. Ces acides gras sont à hauteur de 5 à 20% (m/m) des acides gras de la série oméga-3 et entre 0,5 et 5 %, des acides gras de la série oméga-6. Plus précisément, les acides gras sont notamment de l'ALA (acide a-linolénique) entre 0,5 et 10%, du SDA (acide stéaridonique) entre 0,5 et 10%, de l'EPA (acide eicosapentaénoïque) entre 0,05 et 20%, du DHA (acide docosahexaénoïque) entre 0,1 et 10%. [0045] Comme indiqué précédemment, un des intérêts d'une composition ou d'un complément alimentaire réside dans son procédé de préparation et précisément l'origine naturelle de ses constituants qui peuvent tous être obtenus à partir d'une seule et même microalgue. Selon la microalgue utilisée, la formulation de la composition peut être directement obtenue avec l'extrait. Si tel n'est pas le cas, l'extrait sera dilué pour obtenir les concentrations requises selon l'invention. L'invention n'est toutefois pas limitée à cette mise en oeuvre, ainsi il peut être envisagé que seulement une partie des constituants soit d'origine naturelle, les autres étant obtenus par voie de synthèse chimique et/ou que les constituants d'origine naturelle ne soient pas issus de la même source, par exemple ne soient pas produits à partir de la même algue. [0046] La mesure et l'ajustement des concentrations des ingrédients actifs dans un extrait, et dans la composition ou le complément alimentaire obtenu, sont réalisées à l'aide de techniques analytiques qui appartiennent aux connaissances générales de l'homme du métier. 8 [0047] Un procédé de fabrication d'une composition ou d'un complément alimentaire à partir d'une culture de microalgue est ci-après décrit plus en détails. [0048] Selon une variante de l'invention, lesdits organismes sont des microalgues, telles que celles appartenant aux taxons Pinguiophyrecie, Chrysophyeene, Bacillariophyceae, Marniellophyeetoe, Prytnnesiophyceae, Haptophyceae,Coccolithophyceae, Isy)chrys idaceae,Phaenclactylaceae. Ces microorganismes capables de photosynthèses peuvent être autotrophes stricts, mixotrophcs ou hétérotrophes transitoirement. Ces organismes peuvent être récoltés dans un environnement naturel ou préférentiellement cultivés. [0049] Par extrait, on désigne une fraction de la biomasse issue des organismes capables de photosynthèse obtenus par un procédé permettant d'obtenir, directement ou indirectement, une composition de l'invention. Ces extraits ont une composition, exprimée en pourcentage massique de l'extrait total, en protéines comprises entre 5 et 30%, en lipides entre 20 et 80%, entre 0,1 et 2% de stérols, entre 0,1 et 20% de chlorophylle. [0050] Plus précisément, la partie lipophile composant l'extrait, exprimée en pourcentage massique d'extrait total, est constitué d'acides gras saturés entre 15 et 45%, d'acides gras polyinsaturés entre 5 et 20%, de xanthophylles entre 1 et 20% et de composés de type prostaglandine entre 0,0002 et 0,007%. [0051] Aux fins de la production de l'extrait selon l'invention, avantageusement les cellules sont des cellules de microalgues de l'espèce Tisochrysis lute° de la famille des hochrysidareae, ou des cellules de microalgues de l'espèce Phaedactylum tricortuaum de la famille des Phaeodactvlaceae, produites par autotrophie vis-à-vis du carbone. [0052] Mode de production des microalgues [0053] Les microalgues sont idéalement cultivées de façon contrôlée au sein de systèmes adaptés tels que des race-ways, open ponds ou préférentiellement des systèmes fermés de type photobioréacteurs. Les photobioréacteurs utilisés peuvent être de tout type existants tels que des photobioréacteurs tubulaires horizontaux, verticaux tels que des systèmes dits « green wall panel », des photobioréacteurs plans ou en colonne. Préférentiellement, la production de la biomasse s'effectuera au sein d'un système de culture fermé, par autotrophie sans impact sur les terres arables. [0054] La production de la biomasse s'effectue selon les modes de conduite de culture de type batch, fed-batch, continu, semi-continu, turbidostat ou chemostat. [0055] Obtention des extraits de ces microalgues [0056] Les extraits issus de ces microorganismes sont obtenus préférentiellement après concentration de la biomasse par élimination de tout ou partie de l'eau en utilisant des procédés chimiques ou physiques tels que la centrifugation, la filtration, la floculation, la sédimentation, couplés, ou non, à des étapes de séchage par lyophilisation, séchage sous vide, séchage tambour, atomisation ou tout autre procédé permettant de baisser la teneur en eau de la biomasse. En complément à ces étapes, des procédés de lyses cel- 9 lulaircs peuvent être mis en oeuvre tels que l'applications de pressions, de flux électriques de forces de cisaillements, l'utilisation d'enzymes, ou tout autres procédés permettant la dcstructuration des tissus, organes, cellules ou organites. [0057] Les composés d'intérêt de la biomasse sont extraits selon un procédé de type ex- traction solide-liquide, pouvant être par fluides hypercritiques ou par fluides subcritiques, pouvant faire intervenir des co-traitements menés en parallèle ou en séquentiel de types micro-ondes, ultrasons, pressions, enzymatiques. Les solvants utilisés purs ou en mélange peuvent être de l'acétone, de l'hexanc, de l'acétate d'éthyle, du méthyltétrahydrofuranc, dc l'heptane, du méthanol, des huiles naturelles ou ramifiées, de l'éthanol ou tout autre solvant permettant d'extraire tout ou partie des composés de natures hydrophobes et amphiphilcs. [0058] Le solvant ou le mélange de solvants est séparé de la biomasse résiduelle après ex- traction par des procédés de type centrifugation, filtration et peut par la suite être concentré, ou le solvant éliminé, par des techniques telles que l'évaporation sous vide ou tout autre technique permettant l'évaporation sélective du solvant considéré. L'extrait ainsi obtenu est de nature lipophile tout en comportant des molécules amphiphiles. [0059] Formulation en tant que complément alimentaire [0060] La formulation de l'extrait s'effectue avec des matrices compatibles, permettant sa dissolution afin d'obtenir une solution homogène de concentration voulue en extrait, comme par exemple, des huiles végétales telles que l'huile (l'olive, l'huile de colza, l'huile de lin, l'huile de tournesol, l'huile de pépins de raisins, l'huile de palme et préférentiellement les huiles MCT, et composées à plus de 70% en masse d'un mélange d'acide caprylique et d'acide caprique, et de préférence choisies parmi l'huile de noix de coco ou l'huile de palme, le tout complémenté avec des molécules permettant d'augmenter la stabilité tels que des anti-oxydants de synthèse ou naturels. Les taux massiques d'incorporation des matrices/des additifs afin d'obtenir le complément sont généralement compris entre 15 et 80 %, préférentiellement entre 35 et 45%. [0061] L'extrait, mais préférentiellement la composition formulée ou le complément obtenu, peuvent être mis sous forme de capsules molles, ou peuvent être formulés sous forme de poudre, par toute technique permettant la microencapsulation de solution aqueuse faisant intervenir ou non un support ou une matrice permettant ou non sa dispersibilité homogène au sein d'une solution buvable polaire. [0062] L'extrait ou le complément peut être utilisé seul ou comme ingrédient au sein d'une complémentation alimentaire. [0063] Les différents objets de l'invention sont ci-dessous illustrés et leurs avantages mis en évidence dans les exemples suivants, à l'appui des figures suivantes : [0064] [fig.1] est une représentation des effets du complément de l'invention sur l'activité locomotrice, avec le diagramme de gauche illustrant les effets sur les déficits d'alternances spontanées et le diagramme de droite illustrant les effets sur l'activité locomotrice. [0065] [fig.2] est une représentation des effets sur les déficits d'apprentissage induits par le D-Gal selon le test MWM. [0066] [fig.3] est une représentation des effets du complément et du DHA sur les déficits d'apprentissage induits par le D-Galactose. [0067] [fig.4] est une représentation des effets sur les déficits d'évitements passifs induits par le D-Galactose chez la souris, avec les effets sur la latence de passage à pas illustrés sur le diagramme de gauche et sur la latence d'échappement illustrés sur le diagramme de droite, mesurés pendant la période de rétention. [0068] [fig.5] est une représentation des effets du complément et du DHA sur la per- oxydation lipidique induite par le D-Galactose [0069] [fig.6] est une représentation des effets du complément et du DHA sur l'expression induite de TNF-ct dans le cortex et le plasma par le D-Galactose, avec l'effet sur le cortex sur le diagramme de gauche et l'effet sur le plasma sur le diagramme de droite. [0070] [fig.7] est une représentation des effets du complément et du DHA sur l'expression induite par le D-Galactose, d'IL-6 dans le cortex (diagramme de gauche) et le plasma (diagramme de droite). [0071] [fig.8] est une représentation de l'effet du complément sur l'anxiété, dans le test de locomotion au centre de l'espace de test, jour JPN46. [0072] [fig.9] est une représentation de l'effet du complément sur la mémoire de recon- naissance, dans le test de reconnaissance d'un objet, jour JPN47. [0073] [fig.I0] est une représentation de l'effet du complément sur la mémoire de recon- naissance, dans le test de reconnaissance d'un nouvel objet. [0074] Exemple 1 : Formulation d'un extrait contenant les constituants d'une com- position de l'invention. [0075] Un extrait est obtenu selon l'une des techniques décrites ci-dessus à partir de la mi- croalgue Phaeodactvlum tricornututn. [0076] Il est insoluble dans l'eau et est hautement visqueux empêchant toute manipulation à température ambiante. [0077] L'extrait et l'huile de palme sont mis à température ambiante (25 ± 1 °C) 24 h avant la préparation. L'extrait est transféré dans un tube à centrifuger comportant l'huile de telle manière que la masse nette finale du mélange soit d'environ 5 g et la proportion massique soit telle que l'extrait consiste en 25 % de la masse totale nette du mélange. Le mélange est agité pendant une minute par utilisation d'un dispositif de mélange dit vortex. L'agitation est répétée trois fois par mélange. On obtient un mélange homogène. 11 [0078] Exemple 2 : Test d'un extrait naturel de la microalgue Tisochrysis Intea dans le cadre du modèle in vivo sur l'atténuation des déficits induits par le déclin cognitif lié à l'Ire [0079] Le complément alimentaire de l'invention est préparé à partir d'un extrait de Ti- sochry.sis biwa qui comprend en mg/g : [0080] Acides gras de type oméga-3 (ALA, SDA, EPA, DHA) : 152,6 ± 14,4; [0081] Fucoxanthine : 20,0 ± 4,0; [0082] Stérols : 4,9 ± 0,8 ; [0083] Composés de type prostaglandine : 0,035 ± 0,007 [0084] Le complément est obtenu par addition d'huile de noix de coco à raison de 360 mg + 10 mg/g audit extrait. [0085] Le complément est incorporé à des croquettes selon 3 formulations différentes telles que les concentrations finales en DHA de ces lots de croquettes soient égales à 0,5, 1,5 et 3,0 % (m:m). [0086] Un extrait huileux commercial de rnicroalgues ne comprenant à titre de fraction grasse que les acides gras DHA 77 % (m:m) et EPA 3% (m:m) est également testé ; il est aussi incorporé à un lot de croquettes tel que la concentration finale en DHA de ce lot de croquettes soit égale à 3,1% (m:rn). [0087] Un lot supplémentaire de croquettes est formulé uniquement avec l'huile de noix de coco, tel que la concentration en véhicule soit équivalente à celle des autres lots, soit 0,01 % (m:m). [0088] Les cinq lots de croquettes ainsi obtenus sont référencés tels que décrit dans le tableau 1 ci-dessous. [0089] [Tableauxl] Croquettes formulées Référence IDHAI en % (m:m) Huile de noix de coco Al 0 Complément A2 0,5 Complément A3 1,5 Complément A4 3,0 Extrait huileux commercial A5 3,1 [0090] Le modèle in vivo considéré est le modèle D-Galactose tppliqué à des souris qui est adapté à l'étude du déclin cognitif lié à l'âge. Cc modèle imite en effet de nombreuses caractéristiques comportementales et moléculaires du vieillissement cérébral dans les modèles de rongeurs. [0091] Le D-Galactose est administré par voie sous-cutanée à raison de 150 mg/kg de poids frais de souris par jour, et le complément alimentaire ci-dessus est incorporé dans un 12 granulé, selon le schéma suivant : [0092] - Entre le jour -14 et le jour 51, le complément est administré par incorporation dans des granulés alimentaires ; - Entre le jour 01 et le jour 51, le D-Galactose est administré par voie sous-cutanée, cinq jours par semaine ; - Entre les jours 43 et 51, trois tests comportementaux différents sont utilisés pour surveiller les effets des composés d'essai. [0093] L'efficacité du complément est évaluée selon les paramètres suivants : amélioration des déficits d'apprentissage (mémoire de travail spatiale : alternance spontanée dans le labyrinthe en Y selon le test Y-maze ; mémoire spatiale par le test dit « Morris Water Maze » et mémoire contextuelle à long terme dans le test d'évitement passif), taux de peroxydation lipidique (LPO) dans l'hippocampe et l'effet sur les marqueurs de ncuroinflammation 1L6 et TNFa. [0094] Amélioration des déficits d'apprentissage [0095] - Au jour 43, tous les animaux ont été testés pour la performance d'alternance spontanée dans le test Y-É-naze (YM), via un indice de mémoire de travail spatiale ; - Du jour 44 jusqu'au jour 49, tous les animaux ont été testés pour la mémoire spatiale dans le test Morris Water Maze (MWM) via un indice de mémoire spatiale ; - Du jour 44 jusqu'au jour 49, tous les animaux sont testés via le test MVVM pour évaluer la mémoire de travail spatiale ; - Les jours 50 et 51, la mémoire contextuelle à long terme des animaux est évaluée à l'aide de la procédure d'évitement passif de type pas-à-pas (STPA), via des séances d'entraînement et de rétention, respectivement ; - Les jours 50 et 51, tous les animaux sont testés pour la tâche STPA. [0096] Taux de peroxydation lipidique (LPO) dans l'hippocampe et effet sur les marqueurs de neuro-inflammation 1L6 et TNEa [0097] Le 51e jour, après les tests comportementaux, les animaux sont euthanasiés. [0098] Pour tous les animaux, le sang du tronc est prélevé et centrifugé pour récupérer le plasma, et le cerveau est rapidement prélevé. L'hippocampe et le cortex sont disséqués, l'hippocampe est ensuite utilisé pour déterminer les taux de peroxydation lipidique par méthode colorimétrique ; le cortex hémi-frontal et le plasma sont utilisés pour déterminer le niveau des biomarqueurs inflammatoires interleukine-6 (IL-6) et le facteur alpha de nécrose tumorale (TNE-a). [0099] La quantification des taux de peroxydation lipidique (LPO) a été réalisée selon la procédure modifiée et adaptée de Hermes-Lima et col.. Cette méthode mesure la capacité des lipides peroxydés du cerveau à oxyder un complexe d'oxyde ferreux et de xylénol orange, mise en évidence en présence d'hydroperoxyde de cumère (CHP). Le niveau de peroxydation lipidique est déterminé en équivalent-CHP selon : 13 [0100] CHPE = A5801/A5802 x [CHP (nmol)] et expri nié en équivalent-CHP par poids humide de tissu et en pourcentage comparativement aux données obtenues pour le groupe témoin (D-Galactose + véhicule). [0101] Les teneurs en IL6 et TNFa sont quantifiées au moyen de tests ELISA avec les kits suivants : [0102] Pour la quantification de l'IL6 : ThermoScientifique, EM21L6 [0103] Pour la quantification du TN-Fez : TherrnoScientifique, EMTNFA [0104] Pour tous les essais, le cortex est homogénéisé après décongélation dans un tampon de 50 niM Tris-150 rnM NaCI, pH 7,5, et sonique pendant 20 s. Après centrifugation (16 100g pendant 15 min, 4 °C), un surnageant ou du plasma sont utilisés pour les essais ELISA conformément aux instructions du fabricant des tests ELISA. Pour chaque essai, l'absorbance est lue à 450 nm et la concentration de l'échantillon calculée à l'aide de la courbe étalon. Les résultats sont exprimés en pg de marqueur par mg de tissu frais. [0105] Toutes les valeurs, à l'exception des latences d'évitement passif, sont exprimées en moyenne plus ou moins l'écart type de mesure. Des analyses statistiques sont effectuées séparément pour chaque composé à l'aide d'une ANOVA unidirectionnelle (valeur F), suivies du test de comparaison multiple post-hoc de Dunnett. Les latences d'évitement passives ne suivent pas une distribution gaussienne, puisque les temps limites supérieurs sont fixés. Elles sont donc analysées à l'aide d'une ANOVA non paramétrique Kruskal-Wallis (valeur H), suivie d'un test de comparaison multiple de Dunn. Les valeurs avec p