Brevet FR3093894A1 — publié le 20200925

Description Titre de l'invention : NOUVELLES UTILISATIONS D'UNE LACTONASE MUTEE ET COMPOSITIONS [0001] La présente invention concerne de nouvelles utilisations d'une lactonase mutée et des compositions la contenant. [0002] Certaines bactéries utilisent un système de communication moléculaire appelé Quorum Sensing (QS) afin de coordonner de nombreuses fonctions biologiques telles que la virulence ou la formation de biofilm. Elles utilisent notamment des acyleshomosérines lactones (AHL) comme molécules de communication. [0003] La formation de biofihn bactérien entraîne des problèmes médicaux comme environ- nementaux. H est donc important de trouver des solutions pour éliminer efficacement les biofilms bactériens. [0004] Ainsi, dans un premier aspect, l'invention concerne l'utilisation d'une lactonase mutée pour augmenter la sensibilité de bactéries aux agents anti-microbiens. [0005] Dans un second aspect, l'invention concerne l'utilisation d'une lactonase mutée et d'au moins un agent anti-microbien pour inhiber la croissance bactérienne. [0006] Dans un troisième aspect, l'invention concerne l'utilisation d'une lactonase mutée pour augmenter la sensibilité de bactéries vis-à-vis des bactériophages. [0007] Dans un quatrième aspect, l'invention concerne des compositions comprenant une lactonase mutée. [0008] Dans un cinquième aspect, l'invention concerne une méthode de prévention et/ou de traitement de pathologies liées à des infections bactériennes. [0009] Ainsi, l'invention concerne notamment l'utilisation d'une lactonase mutée ap- partenant à la famille des phosphotriesterase-likelactonase pour augmenter la sensibilité de bactéries aux agents anti-microbiens par rapport à l'utilisation d'agents antimicrobiens seuls, [0010] dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophane situé au début de la boucle 8 est substitué par l'acide aminé isoleucine, [0011] et en particulier, ladite lactonase mutée ayant la séquence SEQ ID NO: 1 dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophane W en position 263 est substitué par l'acide aminé isoleucine I, [0012] et en particulier, ladite sensibilité des bactéries aux agents Luni-microbiens est augmentée au moins d'un facteur 2. [0013] De manière surprenante, les Inventeurs de la présente demande ont trouvé que l'utilisation d'une lactonase hyperthermophile mutée permettait d'augmenter la sensibilité des bactéries aux agents anti-microbien, permettant ainsi de cibler efficacement 2 le biofilm. [0014] Dans tous les aspects de la présente invention, ladite lactonase mutée dérive de la lactonase hyperthermophile de Sulfolobus solfataricus (SsoPox) ou de Saccharolobus solfataricus. La lactonase hyperthermophile de Sulfolobus solfataricus (SsoPox) ou de Saccharolobus solfataricus présente à la fois une activité phosphotriesterase et une activité lactonase. Elle appartient à la famille des phosphotriestcrase-likc lactonase. [0015] Les enzymes de la famille des phosphotriesterase-like lactonase ont une structure tri- dimensionnelle conservée. Ainsi, selon la présente invention, ladite lactonase mutée comprend au moins la substitution de l'acide aminé tryptophane situé au début de la boucle 8 des enzymes de la famille des Phosphotriesterase-Like Lactonase par l'acide aminé Isolcucinc. [0016] Selon la présente invention, la lactonase mutée peut comprendre d'autres mutations, en plus de la mutation du tryptophane situé au début de la boucle 8 des enzymes de la famille des Phosphotricsterase-Like Lactonasc. Ces mutations supplémentaires peuvent, par exemple, améliorer les propriétés de la lactonase mutée ou améliorer sa stabilité. [0017] Ainsi, la présente invention concerne notamment l'utilisation d'une lactonase mutée appartenant à la famille des phosphotricstcrase-like lactonase pour augmenter la sensibilité de bactéries aux agents anti-microbiens par rapport à l'utilisation d'agents antimicrobiens seuls, [0018] dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophane situé au début de la boucle 8 est substitué par l'acide aminé isoleucine. [0019] Selon un mode de réalisation particulièrement préféré, la lactonase mutée de l'invention dérive de la lactonase hyperthermophile de Sulfolobus solfataricus (SsoPox) ayant la séquence SEQ ID NO : 1 dans laquelle l'acide aminé tryptophane en position 263 est substitué par une Isoleucine I. Ainsi, dans ce mode de réalisation, la lactonase mutée a pour séquence la séquence SEQ ID NO : 2 et comporte une mutation à la position 263 par rapport à la séquence SEQ ID NO : 1. 3 [Tableaux 1] SsoPox Wild- MRIPLVGKDSIESKDIGFTLIHEHLRVESEAVRQQWPHL typeSEQ ID NO: I YNEDEEFRNAVNEVKRAMQFGVKTIVDPTVMGLGRDI RFMEKVVKATGINLVAGTGIYIYIDLPFYFLNRSIDEIAD LFIHDIKEGIQGTLNKAGFVKIAADEPGITKDVEKVIR_AA AIANKETKVPIITHSNAHNNTGLEQQRILTEEGVDPGKIL IGHLGDTDNIDYIKKIADKGSFIGLDRYGLDLFLPVDKR NETTLRLIKDGYSDKIMISHDYCCTIDWGTAKPEYKPKL APRWSITLIFEDTIPFLKRNGVNEEVIATIFKENPKKFFS SsoPox mutée MRIPLVGKDSIESKDIGFTLIHEHLRVFSEAVRQQWPHL W263ISEQ ID NO: YNEDEEFRNAVNEVKRAMQFGVKTIVDPTVMGLGRDI 2 RFMEKVVKATGINLVAGTGIYIYIDLPFYFLNRSIDEIAD LFIHDIKEGIQGTLNKAGFVKIAADEPGITKDVEKVIRAA AIANKETKVPIITHSNAHNNTGLEQQRILTEEGVDPGKIL IGHLGDTDNIDYIKKIADKGSFIGLDRYGLDLFLPVDKR NETTLRLIKDGYSDKIMISHDYCCTIDIGTAKPEYKPKLA PRWSITLIFEDTIPFLKRNGVNEEVIATIFKENPKKFFS [0020] Ainsi, dans ce mode de réalisation particulier, la présente invention concerne l'utilisation d'une lactonase mutée pour augmenter la sensibilité de bactéries aux agents anti-microbiens par rapport à l'utilisation d'agents anti-microbiens seuls, 100211 ladite lactonase mutée ayant la séquence SEQ ID NO : I dans laquelle l'acide aminé W en position 263 est substitué par l'acide aminé isoleucine I. 100221 Ainsi, dans ce cas, le tryptophane situé au début de la boucle 8 correspond au résidu en position 263 de la structure primaire. Toutefois, dans le cas d'autres enzymes de la famille des phosphotriesterase-like lactonase, il peut s'agir d'une position différente dans la structure primaire, mais il s'agira toujours du résidu tryptophane situé au début de la boucle 8 des enzymes de la famille des Phosphotriesterase-Like Lactonase. 100231 Selon la présente invention, et dans ce mode de réalisation, la lactonase mutée comprend au moins la substitution du tryptophane par l'isoleucine à la position 263 de sa séquence, comme indiqué dans la séquence SEQ ID NO : 2. En effet, selon la présente invention, la lactonase mutée peut comprendre d'autres mutations, en plus de la mutation à la position 263 de sa séquence. Ces mutations supplémentaires peuvent, par exemple, améliorer les propriétés de la lactonase mutée de séquence SEQ ID NO : 2 ou améliorer sa stabilité. 100241 Ainsi, la présente invention concerne également l'utilisation d'une lactonase mutée pour augmenter la sensibilité de bactéries aux agents anti-microbiens par rapport à l'utilisation d'agents anti-microbiens seuls, [0025] ladite lactonase mutée ayant la séquence SEQ ID NO : 1 dans laquelle au moins l'acide aminé W en position 263 est substitué par l'acide aminé isoleucinc I. [0026] Ainsi, selon la présente invention, lorsqu'un agent anti-microbien donné est utilisé en association avec la lactonase mutée telle que définie précédemment et notamment avec la lactonase mutée de séquence SEQ ID NO :2, la sensibilité des bactéries à cet agent anti-microbien est augmentée par rapport à l'utilisation de cc même agent antimicrobien seul. Cela signifie que la quantité d'agent anti-microbien nécessaire à l'élimination de ces bactéries ou à l'inhibition de leur croissance peut être diminuée lorsque l'agent anti-microbien est utilisé avec la lactonase mutée telle que définie précédemment et notamment avec la lactonase mutée de séquence SEQ ID NO : 2. Ainsi, la toxicité liée à l'utilisation de concentrations potentiellement élevées d'agent antimicrobien est diminuée. Cela permet également d'éviter le développement de mécanismes de résistance aux agents anti-microbiens par les bactéries. [0027] Selon la présente invention, afin de mesurer la sensibilité des bactéries aux agents anti-microbiens, il est possible de mesurer, selon les méthodes connues de l'homme du métier : la Concentration Minimale d'Inhibition (CMI ou MIC en anglais) la Concentration Minimale d'Eradication du Biofilm (CMEB ou MBEC en anglais) l'abondance relative des protéines impliquées dans la résistance aux agents anti-microbiens (pompes à eftlux, porines) l'expression des gènes du système de CRISPR-Cas impliqués dans la résistance aux bactériophages. [0028] Ainsi, pour une dose donnée d'agent anti-microbien, l'observation d'une diminution de la concentration minimale d'inhibition, d'une diminution de la concentration minimale d'éradication du biofilm, d'une variation de l'abondance relative des protéines impliquées dans la résistance aux agents anti-microbiens ou encore d'une altération de l'expression des gènes du système de CRISPR-Cas impliqués dans la résistance aux bactériophages signifie que la sensibilité des bactéries aux agents antimicrobiens est augmentée. [0029] Dans un mode de réalisation de ce premier aspect, la sensibilité des bactéries aux agents anti-microbiens est augmentée au moins d'un facteur 2 par rapport à l'utilisation desdits agents anti-microbiens seuls. [0030] Cela signifie que, selon la présente invention, la sensibilité des bactéries aux agents anti-microbiens est augmentée d'un facteur 2, 3, 4, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 ou 100 par rapport à l'utilisation desdits agents anti-microbiens seuls. [0031] Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, la sensibilité des bactéries aux agents anti-microbiens est augmentée d'un facteur allant de 2 à 20 par rapport à l'utilisation desdits agents anti-microbiens seuls. [0032] Dans tous les aspects de la présente invention, le terme « agent antirtzierobien» désigne un composé qui tue un microorganisme ou inhibe sa croissance. [0033] Dans un mode de réalisation particulier, un agent andmicrobien peut, par exemple, être agent antibactérien, un agent antifongique, un agent antiviral, un agent antiprotozoaire, un agent antiparasitaire ou une combinaison de ces derniers. [0034] Un agent antimicrobien au sens de la présente invention peut, par exemple, être un composé inorganique, un composé organique, une protéine, un anticorps, un sucre, un acide nucléique ou une combinaison de ces derniers. [0035] Dans un mode de réalisation particulier, l'agent anti-microbien peut être choisi parmi le groupe constitué par les antibiotiques ou un mélange d'antibiotiques, les agents désinfectants ou un mélange d'agents désinfectants, les biocides ou un mélange de biocides et les bactériophages éventuellement naturellement présents dans l'environnement ou non, ou un cocktail de tels bactériophages. [0036] Ainsi, l'invention concerne notamment l'utilisation telle que décrite précédemment, dans laquelle l'agent andmicrobien est choisi parmi le groupe constitué par les antibiotiques ou un mélange d'antibiotiques, les agents désinfectants ou un mélange d'agents désinfectants, les biocides ou un mélange de biocides et les bactériophages éventuellement naturellement présents dans l'environnement ou non, ou un cocktail de tels bactériophages. [0037] Dans tous les aspects de l'invention, on entend par « antibiotique », tout agent capable de tuer une bactérie ou de réduire, limiter ou inhiber sa croissance. [0038] Selon la présente invention, les antibiotiques peuvent être des antibiotiques bac- téricides ou des antibiotiques bactériostatiques. On entend par « antibiotiques bactéricides », tout agent capable de tuer une bactérie. On entend par « antibiotiques bactériostatiques», tout agent capable de réduire, limiter ou inhiber la croissance bactérienne, sans tuer les bactéries. [0039] Dans tous les aspects de l'invention, on entend par « désinfectant », toute substance appliquée sur un objet non-vivant (inerte) ou vivant (comme la peau par exemple) et capable de tuer ou d'inhiber la croissance de microorganismes présents sur l'objet. Un désinfectant à usage corporel, c'est dire appliqué sur les surfaces externes du corps, telle que la peau par exemple, est appelé « antiseptique ». [0040] Dans tous les aspects de l'invention, on entend par « biocide », toute substance ou préparation destinée à détruire, repousser ou rendre inoffensifs les organismes nuisibles, à prévenir l'action des organismes nuisibles ou à les combattre, par une action chimique ou biologique. En d'autres termes, les biocides sont des substances exerçant une action sur ou contre les organismes nuisibles. [0041] Dans tous les aspects de l'invention, on entend par « bactériophage », tout virus 6 capable d'infecter des bactéries. Deux types de bactériophages peuvent être distingués les phages lytiques qui infectent la bactérie, détourne sa machinerie cellulaire pour se reproduire et détruisent le cellule pour libérer de nouveaux phages les phages lysogènes, ou tempérés, qui insèrent leur ADN dans celui de la bactérie sous la forme d'un prophage. [0042] Dans tous les aspects de la présente invention, on entend par « bactériophages éven- tuellement naturellement présents dans l'environnement ou non », les bactériophages naturellement présents dans l'environnement ainsi que les bactériophages non présents dans l'environnement et ajoutés par un tiers afin d'éliminer des bactéries. [0043] Dans un mode de réalisation particulier, ledit antibiotique peut être choisi parmi le groupe consistant en : Amikacinc, Amoxicillinc, Amoxicillinc/clavulanate, Ampicilline, Amprolium, Apramycinc, Aspoxicillinc, Aurcomycinc, Avilamycinc, Azithromycine, Bacitracinc, Bambermycine, Baquilopri me, Benzylpenicilline, Bicozamycine, Carbadox, Cefacetrile, Cefalexine, Ccfalonium, Cefalotine, Cefapyrine, Cefazol Mc, Ccfdinir, Cefquinome, Ceftiofur, Ceftriaxone, Cefuroxime, Chloramphenicol, Chlortetracycline, Ciprofloxacinc, Clarithromycinc, Cl indamycinc, Cloxacilline, Colistine, Dalbavancinc, Danofloxacinc, Decoquinate, Diclazuril, Dicloxacillinc, Difloxacinc, Doripenem, Doxycyclinc, Enramycinc, Enrofloxacinc, Ertapenem, Erythromycine, Florfcnicol, Flumequine, Fosfornycine, Framycetine, acide fusidiquc, Gentamicine, Gentamicine Sulfate, Gramicidine, bromhydrate d'halofuginone, Hetacilline, hnipenem, Imipenem/cilastatine, Josamycine, Kanamycine, Kitasamycine, Laidlomycine, Lasalocide , Levofloxacine, Lincomycine, chlorhydrate de lincomycine, Maduramycine, Marbotloxacine, Mecillinam, Meropeneme, Miloxacine, Minocycline, Mirosamycine, Monensine, Moxifloxacine, Nafcilline, acide nalidixique, Nm-asine, Neomycine, Neomycine/oxytetracycline, Neosporine, Nicarbazine, Norfloxacine, Novobiocine, Ofloxacine, Orbitloxacine, Oritavancine, Oxacilline, acide oxolinique , Oxytetracycline, Paromomycine, hydroxyde de penethamate, Penicilline, Penicilline G Potassium, Penicilline procaine, Penicilline V potassium, Phenethicilline, Phenoxymethylpenicilline, Pirlimycine, Polymyxine, Polymyxine B, Polysporine (bacitracine/polymyxine), Pristinamycine, Rifampicine, Rifaximine, Roxarsone, Salinomycine, Semduramicine, Spectinomycine, Spiramycine, Streptomycine, Sulfachlorpyridazine, Sulfadiazine, Sultadimerazine, Sulfadimethoxazole, Sulfadimethoxine, Sulfadimethoxine et ormetoprim 5:3, Sulfadimidine, Sulfadoxine, Sulfafurazole, Sulfaguanidine, Sulfamethazine, Sulfamethoxazole/trimethoprime, Sulfamethoxine, Sunmethoxypyridazine, Sulfamonomethoxine, Sulfanilamide, Sulfaquinoxaline, Sunsalazine, Sulfisoxazole, Surfactine, Telavancine, Terdecamycine, Tetracycline, Thiamphenicol, Tiamuline, Ticarcilline, Tilmicosine, Tobicilline, Tobramycine, Trime- 7 thopri me, Tri methoprime/Sulfonamide, Tulathromycinc, Tylosinc, Valnemuline, Vancomycine, Virginiamycinc. [0044] Dans un mode de réalisation particulier, ledit agent désinfectant peut comprendre un alcool, un chlore, un aldéhyde, un agent oxydant, un iode, un ozone, un composé phénolique, un composé d'ammonium quaternaire ou un mélange de deux ou plus de ces derniers. [0045] Dans un mode de réalisation particulier, ledit agent désinfectant peut comprendre du formaldéhydc, de l'orthophtalaldéhyde, du glutaraldéhyde, du citrate de dihydrogène d'argent, du polyaminopropylc biguanide, du bicarbonate de sodium, de l'acide lactique, un agent de blanchiment chloré, du méthanol, de l'éthanol, du n-propanol, du 1-propanol, du 2-propanol, de r isopropanol, un hypochloritc, du dioxyde de chlore, du di chloro isocyanurate, du mono chloro isocyanurate, de l'hydantoïnc, du sodium hypochlorite, de Phypochlorite de calcium, du di chloro isocyanurate de sodium, du chlorite de sodium, du 4-méthylbenzenesulfonamidc, du sel de sodium, de l'alcool dichloro-2,4 benzylique, de l'acide performique, de l'acide paracétiquc, du permanganate de potassium, du peroxymonosulfate de potassium, du phénol, du phénylphénol, du chloroxylénol, de r hexachlorophène, du thymol, de l'amylmétacrésol, du benzalkonuim chlorure, du bromure de cétyltriméthylammonium, du chlorure de cétylpyridinium, du benzéthonium chloride, de l'acide borique, du vert brillant, du gluconatc de chlorhexidine, du providone iodée, du mercurochrome, du miel de manuka, du di-chlorhydrate d'octénidine, du polyhexaméthylène biguanide, du baume du Pérou, du du peroxyde d'hydrogène, du peroxyde organique, du peroxyacide, de l'hydroperoxyde organique, du sel du peroxyde, des peroxydes d'acide et des mélanges de deux ou plusieurs de ces derniers. [0046] Dans un mode de réalisation particulier, ledit biocide peut être choisi parmi le groupe consistant en : des peroxydes biocides actifs tels que le peroxyde d'hydrogène, les alcools mono et polyfonctionnels, les aldéhydes, les acides, l'ozone, les composés naphta et les composés contenant un métal alcalin, un métal de transition, un métal du groupe III ou du groupe IV, un soufre, un azote ou un atome d'halogène et des mélanges de deux ou plusieurs de ces derniers. [0047] Dans un mode de réalisation particulier, ledit biocide est choisi dans le groupe consistant en : formaldéhyde, glutaraldéhyde, acide peracétique, hypochlorites de métaux alcalins, composés d'ammonium quaternaire, 2-amino-2-méthy1-1-propanol, bromure de cétyltriméthylammonium, chlorure de cétylpyridinium, 2,4,4-trichloro-2-hydroxy diphényléther, 1-(4-chlorophény1)-3-(3,4-dichlorophényl) urée, oxyde de zinc, ricinoléate de zinc, pentachlorophénol, naphténate de cuivre, oxyde de tributylétain, dichlorophène, p-nitrophénol, p-chloro-m-xylenol, bêta-naphtol, 2,3,5,6-tétrachloro-4-(méthylsulfonyl) pyridine, salicylanilide, acide bro- 8 moacétique, acétate d'ammonium quaternaire d'alkyle, thiosalicylatc d'éthyl mercure de sodium, orthophénylphénatc de sodium, n-alkyl (C2 à Cs) chlorure de di méthyl benzyl ammonium, les organoborates, 2,2-(1-méthyltri méthylène dioxy)-bis(4-méthy1-1,3,2-dioxaborinanc), 2,2-oxybis(4,4,6-triméthyl)-1,3,2-dioxaborinanc, éther monométhylique d'éthylèneglycol, parahydroxybenzoatcs, composés organiques du bore, 8-hydroxyquinoléine, pentachlorophénate de sodium, chlorure d'alkyl ditnéthyl éthyl benzyl ammonium, sels d'alkylammonium, 1,3,5-triéthylhexahydro-1,3,5-triazine, chromate de strontium, phénols halogénés, 2-bromo-4-phénylphénol, sels d'argent tels que le nitrate d'argent, le chlorure d'argent, l'oxyde d'argent et l'argent élémentaire, peroxydes organiques, sulfadiazine argentiquc, dichloro-S-triazinetrione de sodium, 4-chloro-2-cyclohexylphénol, 2-chloro-4-nitrophénol, substitut de paraffines, 3-chloro-3-nitro-2-butanol, stéarate de 2-chloro-2-nitro-l-butanol, acétate de 2-chloro-2-nitrobutyle, 4-chloro-4-nitro-3-hexanol, 1-chloro-l-nitro-1-propanol, 2-chloro-2-nitro-l-propanol, chlorure de triéthylétain, 2,4,5-trichlorophénol, 2,4,6-trichlorophénol, 1,3-dichloro-5,5-di méthylhydantoïnc, tris(hydoxyméthyl)nitrométhane, nitroparaffines, 2-nitro-2-éthy1-1,3-propanediol, 2-éthy1-2-nitro-1,3-propancdiol, 2-méthy1-2-nitro-1,3-propanediol, hexahydro1,3,5-tris(2-hydroxyéthyl)-S-triazine, hexahydro1,3,5-tris(tétrahydro-2-furany1)-méthyl-S-triazine, bis(thiocyanate) de méthylène, 2,2-dibromo-3-niliilopropionamide, Béta-bromo-3-nitrostyrène, composés fluorés, Néthyl-N-méthy1-4-(trifluorométhyl)-2-(3,4-diméthoxyphényl) benzamide, pentachlorophénol, dichlorophène, orthophénylphénol, di-bicyclo (3,1,1 ou 2,2,1)-heptyle polyamines, di-bicyclo- (3,1,1 ou 2,2,1)-heptanyle polyamines et des mélanges de deux ou plusieurs de ces derniers. [0048] Dans un mode de réalisation particulier, ledit bactériophage peut appartenir à la famille des Myoviridae, Siphoviridae, Podoviridae, Corticoviridae, Cystoviridae, Inoviridae, Leviviridae, Microviridae, Plasmaviridae et Tectiviridae ou un cocktail de ces derniers. [0049] Selon la présente invention, la nature de l'agent anti-microbiens à utiliser dépend de la nature de la bactérie à éliminer [0050] Dans la présente invention, le terme « bactérie », désigne un genre de microor- ganismes procaryotes scientifiquement classés comme tels. La plupart des bactéries peuvent être classées comme bactéries à Gram positif ou à Gram négatif. [0051] Ainsi, dans un mode de réalisation particulier, les bactéries peuvent être choisies parmi les bactéries à gram positif et les bactéries à gram négatif. [0052] Selon la présente invention, les « bactéries à Grain positif» sont des bactéries liées par une seule membrane lipidique et contenant une couche épaisse de peptidoglycanes 9 (20 à 80 nm) qui retient la coloration au cristal violet dans une technique de coloration de Gram. [0053] Selon la présente invention, les « bactéries à Gram négatif » sont des bactéries liées par une membrane cytoplasmique ainsi que par une membrane cellulaire externe, ne contenant qu'une fine couche de peptidoglycanes entre les deux membranes, ce qui ne permet pas de retenir le colorant cristal violet dans une technique de coloration de Gram. [0054] Plus particulièrement, lesdites bactéries peuvent être choisies parmi le groupe consistant en : Acinetobacter baumannii, Acrococcus viridans, Aeromonas caviac, Aeromonas hydrophila, Aeromonas jandaci, Aeromonas salmonicida, Aeromonas sobria, Aeromonas veronii, Agrohacterium tumefaciens, Aliivibrio fischeri, Aliivihrio salmonicida, Brucella abortus, Brucella canis, Brucella melitensis, Brucella suis, Burkholderia cepacia complcx. Burkholderia pseudornallei, Burhkolderia mallei, Chlamydia trachomatis, Chromobacterium violaccurn, Clavibacter rnichiganensis, Clostridium botulinum, Clostridium difficile, Comarnonas acidovorans, Comamonas testosteronii, Delftia acidovorans, Desulfovihrio dcsulfuricans, Desulfovibrio gigas, Desulfovibrio vulgaris, Dickcya dadanantii, Dickcya solanii, Edwarsiellosis anguillarum, Edwarsiellosis ictaluri, Edwarsiellosis piscicida, Edwarsiellosis tarda, Enterobactcrium catenabacteriul, Entcrococcus faccalis, Erwinia amylovora, Eschcrichia coli, Francisclla noatunensis, Francisclla tularensis, Gallionella ferruginea, Klehsiella pneumoniae, Lactococcus garvieae, Legionella pneumophila, Mycobacterium fortuitum, Mycobacterium marinum, Nocardia asteroids, Nocardia crassostreae, Nocardia seriolae, Pantoea aglomerans, Pantoea ananatis, Pantoea stewartii, Pectobacterium atrosepticum, Pectobacterium carotovorum, Porphyromonas gingivalis, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas anguilliseptica, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas savastanoi, Pseudomonas syringae, Renibacterium salmoninarum, Salmonella enterica, Senatia liquefaciens, Serratia marcescens, Shewanella japonica, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalactiae, Streptococcus iniae, Streptococcus mutans, Streptomyces scabiei, Thiobacillus ferooxidans, Vibrio cholerae, Vibrio harveyi, Vibrio parahaemolyticus, Vibrio vulnificus, Xanthomonas campestris, Xanthomonas citri, Xanthomonas oryzae, Xanthomonas translucens, Xylella fastidiosa, Yersinia pestis, Yersinia ruckeri. [0055] Dans un mode de réalisation particulier, les bactéries peuvent être résistantes au traitement par un ou plusieurs agents antimicrobiens seuls. [0056] Ainsi, dans le cas où les bactéries sont résistantes au traitement par un ou plusieurs agents anti-microbiens donnés, un ou plusieurs autres agents anti-microbiens sont administrés en association avec la lactonase mutée telle que définie précédemment et notamment avec la lactonase mutée de séquence SEQ ID NO: 2. Dans cc cas, l'utilisation de la lactonase mutée telle que définie précédemment et notamment avec la lactonase mutée de séquence SEQ ID NO : 2 permet de diminuer la dose d'agents anti-microbiens nécessaire pour éliminer ces bactéries ou inhiber leur croissance et donc, d'éviter le développement de mécanismes de résistance à ces autres agents antimicrobiens par les bactéries. [0057] Dans tous les aspects de l'invention, ladite lactonase mutée de l'invention est utilisée à une dose efficace. [0058] Dans la présente invention, on entend par « dose efficace », une dose suffisante de lactonase mutée pour augmenter la sensibilité des bactéries aux agents anti-microbiens. [0059] Selon la présente invention, la dose efficace de lactonase mutée dépend de la nature des agents anti-microbiens utilisés et de la bactérie à éliminer. [0060] Selon la présente invention, la lactonase mutée telle que définie précédemment et notamment avec la lactonase mutée de séquence SEQ ID NO : 2 peut être utilisée à une concentration de 0,1 mg/L à 10 g/L (concentration liquide) ou de 1 pg/cm2 à 1 mg/cm2 (concentration surfacique en solide). [0061] Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, la lactonase mutée de l'invention peut être utilisée à une concentration de 10 mg/L à 2 g/L. [0062] Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, la lactonase mutée de l'invention peut être utilisée à une concentration de 5 pg/cm2 à 500 pg/cm2. [0063] Dans un mode de réalisation, ledit agent anti-microbien est utilisé à une dose efficace. [0064] Dans la présente invention, on entend par « dose efficace », une dose suffisante d'agents anti-microbiens pour tuer lesdites bactéries ou inhiber leur croissance. [0065] Selon la présente invention, la dose efficace d'agents anti-microbiens dépend de la bactérie à éliminer [0066] Dans un mode de réalisation particulier, ledit agent anti-microbien peut être utilisé à une concentration de 10 RM à 100 mM. [0067] Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, ledit agent anti-microbien peut être utilisé à une concentration de 1 mM à 100 mM. [0068] Dans un mode de réalisation, la dose efficace d'agents anti-microbiens est diminuée au moins d'un facteur 2 par rapport à la dose efficace desdits agents anti-microbiens seuls. [0069] Cela signifie que, selon la présente invention, la dose efficace d'agents anti- microbiens est diminuée d'un facteur 2, 3, 4, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 ou 100 pal- rapport à la dose efficace (lesdits agents anti-microbiens seuls. [0070] Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, la dose efficace d'agents anti- microbiens est diminuée d'un facteur allant de 2 à 20 par rapport à la dose efficace 11 desdits agents anti-microbiens seuls. [0071] Dans un deuxième aspect, l'invention concerne l'utilisation d'une lactonase mutée, telle que défini dans le premier aspect, pour inhiber la croissance bactérienne. [0072] Ainsi, dans ce second aspect, et dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne l'utilisation d'une lactonase mutée appartenant à la famille des phosphotriesterase-like lactonase dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophanc situé au début de la boucle 8 est substitué par l'acide aminé isolcucine et d'au moins un agent anti-microbien pour inhiber la croissance de bactéries, [0073] dans laquelle l'inhibition de la croissance de bactéries est augmentée au moins d'un facteur 2 par rapport à l'utilisation dudit agent anti-microbien seul. [0074] Dans ce second aspect, et dans un autre mode de réalisation particulier, l'invention concerne l'utilisation d'une lactonase mutée et d'au moins un agent and-microbien pour inhiber la croissance de bactéries, [0075] ladite lactonase mutée ayant la séquence SEQ ID NO : 1 dans laquelle l'acide aminé W en position 263 est substitué par l'acide aminé isolcucine I, [0076] dans laquelle l'inhibition de la croissance de bactéries est augmentée au moins d'un facteur 2 par rapport à l'utilisation dudit au moins un agent anti-microbien seul. [0077] Dans le cas de la présente invention, on appelle « croissance bactérienne » d'une bactérie donnée, l'augmentation en nombre ou en masse de cette bactérie sur une période donnée. La mesure de la croissance bactérienne peut être mesurée selon les méthodes connues de l'Homme du métier. [0078] On parle « d'inhibition bactérienne » en cas d'arrêt ou de réduction de la croissance bactérienne. On parle d'inhibition de la croissance bactérienne lorsque la croissance bactérienne a été diminuée d'au moins 10% par rapport aux conditions de croissance normales et jusqu'à 100%. [0079] Dans un mode de réalisation particulier, ladite lactonase mutée a la séquence SEQ ID NO : 2. [0080] Concernant l'agent anti-microbien, les différents modes de réalisation détaillés dans le premier aspect s'appliquent à ce deuxième aspect. [0081] De la même façon, selon ce deuxième aspect, les bactéries sont telles que détaillées dans les différents modes de réalisation du premier aspect de l'invention. [0082] Comme pour le premier aspect, ladite lactonase mutée et ledit au moins un agent anti-microbien sont utilisés à une dose efficace. Notamment, la dose efficace d'agent anti-microbiens peut diminuée au moins d'un facteur 2 par rapport à la dose efficace dudit au moins un agent anti-microbien seul. [0083] Dans un troisième aspect, l'invention concerne l'utilisation d'une lactonase mutée, telle que défini dans le premier aspect, pour augmenter la sensibilité de bactéries vis-à-vis des bactériophages. 12 [0084] Ainsi, dans cc troisième aspect, et dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne l'utilisation d'une lactonase mutée appartenant à la famille des phosphotriesterase-like lactonase dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophanc situé au début de la boucle 8 est substitué par l'acide aminé isolcucine et d'au moins un bactériophage pour augmenter la sensibilité des bactéries vis-à-vis des bactériophages, éventuellement naturellement présents dans l'environnement ou non, par rapport à l'utilisation dudit au moins un bactériophage seul. [0085] Dans un mode de réalisation particulier, ce troisième aspect concerne l'utilisation d'une lactonase mutée et d'au moins un bactériophage pour augmenter la sensibilité des bactéries vis-à-vis des bactériophages, éventuellement naturellement présents dans l'environnement ou non, par rapport à l'utilisation dudit au moins un bactériophage seul, [0086] ladite lactonasc mutée ayant la séquence SEQ ID NO : 1 dans laquelle l'acide aminé W en position 263 est substitué par l'acide aminé isolcucine I. [0087] Ainsi, dans un mode de réalisation particulier, ladite lactonase mutée a la séquence SEQ ID NO : 2. [0088] Comme pour le premier aspect de l'invention, dans un mode de réalisation, la sen- sibilité des bactéries aux bactériophages est augmentée au moins d'un facteur 2 par rapport à l'utilisation du bactériophage seul. [0089] Ainsi, selon la présente invention, lorsqu'un bactériophage donné est utilisé en as- sociation avec la lactonase mutée telle que définie précédemment et notamment avec la lactonase mutée de séquence SEQ ID NO : 2, la sensibilité des bactéries à ce bactériophage est augmentée par rapport à l'utilisation de ce même bactériophage seul. Cela signifie que la quantité de bactériophage nécessaire à l'élimination de ces bactéries ou à l'inhibition de leur croissance peut être diminuée lorsque le bactériophage est utilisé avec la lactonase mutée telle que définie précédemment et notamment avec la lactonase mutée de séquence SEQ ID NO : 2. Cela permet également d'éviter le développement de mécanismes de résistance aux bactériophages par les bactéries. [0090] Dans un mode de réalisation de ce troisième aspect, ledit bactériophage peut ap- partenir à la famille des Myovh-idae, Siphoviridae, Podoviridae, Corticoviridae, Cystoviridae, Inoviridae, Levivù-idae, Microviridae, Plasmaviridae et Tectiviridae ou un cocktail de ces derniers. [0091] De la même façon, selon ce troisième aspect, les bactéries sont telles que détaillées dans les différents modes de réalisation du premier aspect de l'invention. [0092] Dans un mode de réalisation particulier, les bactéries peuvent être résistantes au traitement par un bactériophage seul. [0093] Comme pour le premier aspect, ladite lactonase mutée et ledit bactériophage sont utilisés à une dose efficace. Notamment, la dose efficace de bactériophages utilisée 13 peut être diminuée d'au moins d'un facteur 2 par rapport à la dose efficace de bactériophage seul. [0094] Dans un quatrième aspect, l'invention concerne des compositions comprenant une lactonase mutée telle que définie dans le premier aspect. [0095] Ainsi, dans cc quatrième aspect, et dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne [0096] une composition comprenant comme principe actif une lactonase mutée appartenant à la famille des phosphotriesterase-like lactonase dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophane situé au début de la boucle 8 est substitué par l'acide aminé isoleucinc et au moins un agent anti-microbien, [0097] la dose efficace d'agent anti-microbiens dans ladite composition étant présente en quantité au moins 2 fois inférieure à celle dudit au moins un agent anti-microbien seul. [0098] Dans cc quatrième aspect, et dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne également une composition comprenant comme principe actif une lactonase mutée et au moins un agent anti-microbien, [0099] ladite lactonasc mutée ayant la séquence SEQ ID NO : 1 dans laquelle l'acide aminé W en position 263 est substitué par l'acide aminé isoleucine I, [0100] la dose efficace d'agent anti-microbiens dans ladite composition étant présente en quantité au moins 2 fois inférieure à celle dudit au moins un agent anti-microbien seul. [0101] Ainsi, dans un mode de réalisation particulier, ladite lactonase mutée a la séquence SEQ ID NO : 2. [0102] Ainsi, dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne une composition comprenant comme principe actif une lactonase mutée appartenant à la famille des phosphotriesterase-like lactonase dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophane situé au début de la boucle 8 est substitué par l'acide aminé isoleucine, et au moins un agent anti-microbien, [0103] et en particulier ladite lactonase mutée ayant la séquence SEQ ID NO : 1 dans laquelle au moins l'acide aminé W en position 263 est substitué par l'acide aminé isoleucine I, [0104] la dose efficace d'agent anti-microbiens dans ladite composition étant présente en quantité au moins deux fois inférieure à celle dudit au moins un agent anti-microbien seul. [0105] Concernant l'agent anti-microbien, les différents modes de réalisation détaillés dans le premier aspect s'appliquent à ce quatrième aspect. [0106] De la même façon, selon ce quatrième aspect, les bactéries sont telles que détaillées dans les différents modes de réalisation du premier aspect de l'invention. [0107] Comme pour le premier aspect, ladite lactonase mutée et ledit agent anti-microbien sont utilisés à une dose efficace. 14 [0108] Dans ce quatrième aspect et selon un mode de réalisation, ledit agent anti-microbien est utilisé à une concentration de 10 pM à 100 mM. [0109] Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, ledit agent anti-microbien est utilisé à une concentration de 1 [11M à 100 mM. [0110] Ainsi, l'invention concerne également une composition telle que définie pré- cédemment dans laquelle ledit agent anti-microbien est utilisé à une concentration de 10 1M à 100 mM, de préférence de 1 [11M à 100 mM. [0111] Selon la présente invention, la lactonase mutée telle que définie précédemment et notamment avec la lactonase mutée de séquence SEQ ID NO : 2 peut être utilisée à une concentration de 0,1 mg/L à 10 g/L (concentration liquide) ou de 1 pg/cm2 à 1 mg/cm2 (concentration surfacique en solide). [0112] Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, la lactonase mutée telle que définie précédemment et notamment avec la lactonase mutée de séquence SEQ ID NO : 2 peut être utilisée à une concentration de 10 mg/L à 2 g/L. [0113] Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, la lactonase mutée telle que définie précédemment et notamment avec la lactonase mutée de séquence SEQ ID NO : 2 peut être utilisée à une concentration de 5 pg/cm2 à 500 pg/cm2. [0114] Ainsi, r invention concerne également une composition telle que définie pré- cédemment dans laquelle ladite lactonase mutée est utilisée à une concentration de 0,1 mg/L à 10 g/L, de préférence de 10 mg/L à 2 g/L ou à une concentration de lpg/cm2 à 1 mg/cm2, de préférence de 5pg/cm2 à 500 pg/cm2. [0115] Dans un mode de réalisation particulier, ladite composition décrite ci-dessus peut être appliquée sur du matériel contaminé par lesdites bactéries ou susceptible de l'être. [0116] Dans un mode de réalisation particulier de ce quatrième aspect, ledit matériel contaminé par lesdites bactéries ou susceptible de l'être peut être choisi parmi : des dispositifs médicaux tels que des pansements, des cathéters, des endoscopes, des implants, des nébulisateurs du matériel médical des surfaces immergées telles que des coques de bateaux, des infrastructures portuaires ou pétrolières pouvant être la cible de biofouling ou de biocorrosion, des installations industrielles telles que des tours aéroréfrigérées, des systèmes de climatisation, des bioréacteurs, des tuyauteries, des nébulisateurs, des brumisateurs, des bassins. [0117] Dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne également une com- position telle décrite ci-dessus pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de pathologies liées à des infection bactérienne. [0118] Dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne également une com- position telle décrite ci-dessus comme produit phytosanitaire pour la prévention et/ou le traitement des infections de plantes telles que le feu bactérien. [0119] Par « traitement», on entend le moyen de soigner une pathologie déclarée, dont les symptômes sont visibles. Par «prévention », on entend le moyen d'empêcher ladite pathologie de se déclarer. [0120] Dans un mode de réalisation particulier, ladite composition décrite ci-dessus peut être utilisée en santé animale notamment pour la prévention et/ou le traitement des infections bactériennes, la prévention et/ou le traitement des dysbioses, la prévention et/ ou l'élimination de biofilms présents dans les bassins d'élevages et les aquariums. [0121] Dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne également une com- position telle décrite ci-dessus comme complément alimentaire pour l'homme ou l'animal ou comme produit de nutrition animale. [0122] Dans un mode de réalisation particulier, ladite composition décrite ci-dessus peut être utilisée en santé humaine notamment pour le la prévention et/ou traitement des infections bactériennes telles que les pneumonies, les maladies nosocomiales, les plaies, les brûlures, les infections oculaires, le pied diabétique, pour la prévention et/ou le traitement des dysbioses, ou pour la prévention et/ou le traitement de la plaque dentaire. [0123] Dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne une composition telle que définie précédemment comprenant comme principe actif une lactonase mutée appartenant à la famille des phosphotriesterase-like lactonase dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophane situé au début de la boucle 8 est substitué par l'acide aminé isoleucine et au moins un agent anti-microbien, [0124] en particulier, ladite lactonase mutée ayant la séquence SEQ ID NO : 1 dans laquelle l'acide aminé W en position 263 est substitué par l'acide aminé isoleucine I, [0125] la dose efficace d'agent anti-microbiens dans ladite composition étant présente en quantité au moins deux fois inférieure à celle dudit au moins un agent anti-microbien seul, [0126] pour son utilisation : en santé animale notamment pour la prévention et/ou le traitement des infections bactériennes, le traiement des dysbioses, la prévention de biofilms présents dans les bassins d'élevages et les aquariums, ou en santé humaine notamment pour la prévention et/ou le traitement des infections bactériennes telles que les pneumonies, les maladies nosocomiales, les plaies, les brûlures, les infections oculaires, le pied diabétique, pour la prévention et/ou le traitement des dysbioses, ou pour la prévention et/ou le traitement de la plaque dentaire. [0127] Dans un mode de réalisation particulier, ladite composition décrite ci-dessus peut être 16 formulée avec au moins un excipient approprié pour son utilisation sous forme de solution, d'huile, de suspension, d'émulsion, de nanoparticules, de liposomes, de granulés ou de surface fonctionnalisée. [0128] Dans un cinquième aspect, l'invention concerne une méthode de prévention et/ou de traitement de pathologies liées à des infections bactériennes, comprenant l'administration d'une lactonasc mutée telle que définie dans le premier aspect et d'au moins un agent anti-microbien. [0129] Ainsi, dans ce cinquième aspect et dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne une méthode de prévention et/ou de traitement de pathologies liées à des infections bactériennes, comprenant l'administration d'une lactonase mutée appartenant à la famille des phosphotriesterase-like lactonasc dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophanc situé au début de la boucle 8 est substitué par l'acide aminé isolcucine et d'au moins un agent and-microbien, [0130] la dose efficace d'agents anti-microbiens dans ladite composition étant présente en quantité au moins 2 fois inférieure à celle dudit au moins agent anti-microbien seul. [0131] Dans ce cinquième aspect et dans un mode de réalisation particulier, l'invention concerne une méthode de prévention et/ou de traitement de pathologies liées à des infections bactériennes, comprenant l'administration d'une lactonasc mutée et d'au moins un agent anti-microbien, [0132] ladite lactonasc mutée ayant la séquence SEQ ID NO: 1 dans laquelle l'acide aminé W en position 263 est substitué par l'acide aminé isoleucine I, [0133] la dose efficace d'agents anti-microbiens dans ladite composition étant présente en quantité au moins 2 fois inférieure à celle dudit au moins un agent anti-microbien seul. [0134] Dans un mode de réalisation de ce cinquième aspect, lesdites infections bactériennes peuvent être des infections bactériennes chez les plantes telles que le feu bactérien. [0135] Dans un mode de réalisation de ce cinqiuème aspect, lesdites infections bactériennes peuvent être des infections bactériennes chez les animaux telles que des dysbioses. [0136] Dans un mode de réalisation de ce cinquième aspect, lesdites infections bactériennes peuvent être des infections bactériennes chez l'homme telles que les pneumonies, les maladies nosocomiales, les plaies, les brûlures, les infections oculaires, le pied diabétique, pour le traitement des dysbioses, ou pour le traitement de la plaque dentaire. [0137] Tous les modes de réalisations des différents aspects décrits ci-dessus sont ap- plicables à ce cinquième aspect. [0138] Les figures et les exemples suivants illustrent l'invention, sans en limiter la portée. [0139] [fig.I] [0140] FIGURE 1 : Dénombrement des bactéries P. aeruginosa récupérées des biofilms formés en présence ou non de la lactonase SsoPox-W263I après traitement à 17 l'antiseptique H202. [0141] Gauche : Dénombrement des bactéries P. acruginosa récupérées des biofilms en absence de traitement à l'antiseptique H202, en absence de la lactonase SsoPoxW2631 (Ce') ou en présence de la lactonase SsoPox-W2631 (SsoPox) [0142] Droite : Dénombrement des bactéries P. acruginosa récupérées des biofilms après traitement à l'aide de 10mM d'antiseptique H202, en absence de la lactonase SsoPoxW2631 (Ce') ou en présence de la lactonase SsoPox-W2631 (SsoPox) [0143] [fig.2] [0144] FIGURE 2: Augmentation de la sensibilité dc Pseudomonas acruginosa PA14 au cocktail de phages Intesti. Les barres représentent le nombre de bactéries après exposition à différentes concentrations du cocktail de phages (allant de 0 à 50% (vol/vol)), traitées avec la lactonase mutée W2631 (0,5 mg/mL) ou avec l'enzyme inactive SsoPox-5A8 (0,5mg/mL). [0145] [fig.3] [0146] FIGURE 3 : Modification de l'expression du système CRISPR-Cas. L'expression des gènes casl, cas3, csyl, csy2, csy3 et csy4 du système CRISPR-Cas a été mesurée pour la souche modèle de P. acruginosa PA14 ainsi que pour des isolats cliniques issues d'infections du pied diabétique (Ail, B10, C5, C11, D10 et F3) et pour la bactérie marine Chromobacterium violaceum CV12472. Les cultures ont été traitées avec l'enzyme SsoPox-W263I ou l'enzyme inactive SsoPox-5A8 (V27G/P67Q/L72C/Y97S/Y99A/T177D/R223L/L226Q/L228M/ W263H). Les histogrammes représentent l'expression des gènes du système CRISPR-Cas traités par SsoPox-W2631 normalisés par rapport aux valeurs obtenues avec le variant inactif Les barres d'erreurs représentent les variations pour 2 duplicats techniques de 2 réplicats biologiques. *p-values 10 01 [0160] Tableau 4 : MBEC avec ou sans utilisation de la lactonase mutée SsoPox W263I [0161] Par ailleurs, les bactéries Pseudomonas aeruginosa sont également traitées avec la lactonase mutée W2631 et un cocktail de bactériophages (Instesti cocktail ; Microgen Russia) avec des résultats satisfaisants. 101621 La bactérie P. aeruginosa PA14 est traitée par l'enzyme mutée SsoPox-W2631 et le cocktail de phages lntesti ou par le cocktail de phages Intesti et le variant inactif SsoPox-5A8. Le cocktail de phages Intesti consiste en un mélange de filtrats stériles de phages dirigés contre les bactéries Shigella flexneri (sérovariants 1, 2, 3, 4, 6), Shigellasi, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Enterococcus, Staphylococcus, Pseudomonas aeruginosa et d'excipients tel que le sulfate de 8-hydroxyquinoléine monohydraté à 0,0001 g / ml (teneur estimée) et est commercialisé par Intesti-bacteriophage, Microgen, Russia 101631 La figure 2 montre que la bactérie P. aeruginosa PA14 traitée par l'enzyme mutée 23 SsoPox-W2631 et le cocktail de phages Intesti est plus sensible au cocktail de phages Intesticontrairement à la bactérie traitée par le variant inactif SsoPox-5A8 et le cocktail de phages Intcsti. En effet, la bactérie traitée par l'enzyme inactive SsoPox-5A8 et le cocktail de phages est peu impact& par le cocktail de phages Intesti alors que moins de bactéries sont dénombrées après traitement par l'enzyme mutée SsoPox-W2631. a. Expression des gènes du système CRISPR-Cas [0164] Le système CRISPR-Cas est impliqué dans la défense des bactéries vis-à-vis des bac- tériophages. Pour déterminer si l'enzyme mutée SsoPox-W2631 a un effet sur la régulation du système CRISPR-Cas, les niveaux d'expression des gènes cas], cas3, csyl, csy2, csy3 et csy4 du système CRISPR-Cas ont été mesurés chez P. acruginosa PA14 et des isolats cliniques de P. acruginosa issus d'infections du pied diabétique (Ail, B10, C5, C11, D10, F3) ainsi que chez la souche marine de Chromobacterium violaceum CV12472. Des amorces ciblant ces différents gènes ont été créées à partir des génomes de P. acruginosa PA14 et C. violaccum CV12472 (tableau 2). Les cultures ont été traitées avec l'enzyme SsoPox-W263 ou l'enzyme inactive SsoPox5A8 (V270/P67Q/L72C/Y97S/Y99A/T177D/R223L/L226Q/L228M/W263H). [0165] L'expression de gènes est totalement abolie chez P. acruginosa PA14 après traitement par l'enzyme mutée SsoPox-W2631. Chez B10 et Cl 1 l'expression des gènes est diminuée d'un facteur 5.5 et 8 respectivement. Chez Ail et D10 l'expression des gènes csyl -4 est réduite significativement. Chez F3 à l'inverse l'expression des gènes est augmentée d'un facteur 1.7 en moyenne. Chez C. violaceum l'expression des gènes cas3 et csy2-4 est significativement diminuée. Ces résultats montrent que l'enzyme SsoPox-W2631 impacte la régulation du système CRISPR-Cas. 24 [Revendication 1] [Revendication 2] [Revendication 3] REVENDICATIONSUtilisation d'une lactonase mutée appartenant à la famille des phosphotriesterase-like lactonase pour augmenter la sensibilité de bactéries aux agents anti-microbiens par rapport à l'utilisation d'agents antimicrobiens seuls, dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophane situé au début de la boucle 8 est substitué par l'acide aminé isoleucinc, et en particulier, ladite lactonase mutée ayant la séquence SEQ ID NO : 1 dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophane W en position 263 est substitué par l'acide aminé isoleucine et en particulier, ladite sensibilité des bactéries aux agents antimicrobiens est augmentée au moins d'un facteur 2. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle l'agent antimicrobien est choisi parmi le groupe constitué par les antibiotiques ou un mélange d'antibiotiques, les agents désinfectants ou un mélange d'agents désinfectants, les biocides ou un mélange de biocides et les bactériophages éventuellement naturellement présents dans l'environnement ou non, ou un cocktail de tels bactériophages. Utilisation selon la revendication 2, dans laquelle ledit antibiotique est choisi parmi le groupe consistant en - Amikacine, Amoxicilline, Amoxicilline/clavulanate, Ampicilline, Amprolium, Apramycine, Aspoxicilline, Aureomycine, Avihunycine, Azithromycine, Bacitracine, Bambermycine, Baquiloprime, Benzylpenicilline, Bicozamycine, Carbadox, Cefacetrile, Cefalexine, Cefalonium, Cefalotine, Cefapyrine, Cefazoline, Cefdinir, Cefquinome, Ceftiofur, Ceftriaxone, Cefuroxime, Chloramphenicol, Chlortetracycline, Ciprofloxacine, Chtrithromycine, Clindamycine, Cloxacilline, Colistine, Dalbavancine, Danofloxacine, Decoquinate, Diclazuril, Dicloxacilline, Difloxacine, Doripenem, Doxycycline, Enramycine, Enrofloxacine, Ertapenem, Erythromycine, Florfenicol, Flumequine, Fosfomycine, Framycetine, acide fusidique, Gent amicine, Gentamicine Sulfate, Gramicidine, bromhydrate d'halofuginone, Hetacilline, Imipenem, Imipenem/cilastatine, Josamycine, Kanamycine, Kitasamycine, Laidlomycine, Lasalocide , Levofloxacine, Lincomycine, chlorhydrate de lincomycine, Maduramycine, Marbofloxacine, Mecillinam, Meropeneme, Mlioxacine, Minocycline, Mirosamycine, Monensine, Moxifloxacine, Nafcilline, acide nalidixique, Narasine, Neomycine, Neomycine/oxytetracycline, 25 [Revendication 4] Neosporine, Nicarbazinc, Norfloxacinc, Novobiocinc, Ofloxacinc, Orbifloxacinc, Oritavancinc, Oxacilline, acide oxol inique , Oxytetracycline, Paromomycinc, hydroxyde de penethamate, Penicilline, Penicilline G Potassium, Penicilline procainc, Penicilline V potassium, Phonethicillinc, Phenoxymethylpenicilline, Pirlitnycine, Polymyxinc, Polymyxinc B, Polysporine (bacitracinelpolymyxinc), Pristinamycinc, Rifampicinc, Rifaximinc, Roxarsonc, Salinomycinc, Semduramicine, Spectinomycine, Spiramycinc, Streptomycine, Sulfachlorpyridazinc, Sulfadiazinc, Sulfadimerazine, Sulfadimethoxazole, Sulfadimethoxine, Sulfadimethoxine et ormetoprim 5:3, Sulfadimidine, Sulfadoxine, Sulfafurazole, Sulfaguanidinc, Sulfamethazine, Sulfamethoxazole/tri methoprimc, Sulfamethoxine, Sulfamethoxypyridazine, Sulfamonomethoxine, Sulfanilamidc, Sulfaquinoxalinc, Sulfasalazinc, Sulfisoxazole, Surfactinc, Telavancinc, Terdecarnycine, Tetracycline, Thiamphenicol, Tiamulinc, Ticarcillinc, Tilmicosinc, Tobicillinc, Tobramycine, Trimethoprime, Trimethoprime/Sulfonamide, Tulathromycinc, Tylosinc, Valnemuline, Vancomycinc, Virginiamycinc. Utilisation selon la revendication 2, dans laquelle ledit agent désinfectant comprend un alcool, un chlore, un aldéhyde, un agent oxydant, un iode, un ozone, un composé phénolique, un composé d'ammonium quaternaire ou un mélange de deux ou plus de ces derniers, de préférence, ledit agent désinfectant comprend du formaldéhyde, de l'orthophtalaldéhyde, du glutaraldéhyde, du citrate de dihydrogène d'argent, du polyaminopropyle biguanide, du bicarbonate de sodium, de l'acide lactique, un agent de blanchiment chloré, du méthanol, de l'éthanol, du n-propanol, du 1-propanol, du 2-propanol, de l'isopropanol, un hypochlorite, du dioxyde de chlore, du di chloro isocyanurate, du mono chloro isocyanurate, de l'hydantoïne, du sodium hypochlorite, de l'hypochlmite de calcium, du di chloro isocyanurate de sodium, du chlorite de sodium, du 4-méthylbenzènesulfonamide, du sel de sodium, de l'alcool dichloro-2,4 benzylique, de l'acide perfonnique, de l'acide paracétique, du permanganate de potassium, du peroxymonosulfate de potassium, du phénol, du phénylphénol, du chloroxylénol, de l'hexachlorophène, du thymol, de 1' amylmétacrésol, du benzalkonuim chlorure, du bromure de cétyltriméthylammonium, du chlorure de cétylpyridinium, du benzéthonium chloride, de l'acide borique, du vert brillant, du gluconate de chlorhexidine, du providone iodée, du mercurochrome, du miel de manuka, du dichlorhydrate 26 [Revendication 5] d'octénidinc, du polyhexaméthylène biguanidc, du baume du Pérou, du du peroxyde d'hydrogène, du peroxyde organique, du peroxyacidc, de l'hydroperoxyde organique, du sel du peroxyde, des peroxydes d'acide et des mélanges de deux ou plusieurs de ces derniers. Utilisation selon la revendication 2, dans laquelle le biocide est choisi parmi le groupe consistant en : des peroxydes biocides actifs tels que le peroxyde d'hydrogène, les alcools mono et polyfonctionnels, les aldéhydes, les acides, l'ozone, les composés naphta et les composés contenant un métal alcalin, un métal de transition, un métal du groupe III ou du groupe IV, un soufre, un azote ou un atome d'halogène et des mélanges de deux ou plusieurs de ces derniers, de préférence, ledit biocide est choisi dans le groupe consistant en : formaldéhyde, glutaraldéhyde, acide peracétique, hypochlorites dc métaux alcalins, composés d'ammonium quaternaire, 2-amino-2-méthyl-l-propanol, bromure de cétyltrirnéthylammonium, chlorure de cétylpyridinium, 2,4,4-trichloro-2-hydroxy diphényléther, 1 -(4-chlorophény1)-3-(3,4-dichlorophényl) urée, oxyde de zinc, ricinoléate de zinc, pentachlorophénol, naphténate de cuivre, oxyde de tributylétain, dichlorophène, p-nitrophénol, p-chloro-m-xylenol, bêta-naphtol, 2,3,5,6-tétrachloro-4 (méthylsulfonyl) pyridinc, salicylanilidc, acide bromoacétique, acétate d'ammonium quaternaire d'alkyle, thiosalicylate d'éthyl mercure de sodium, orthophénylphénate de sodium, nalkyl (C2 à Cs) chlorure de diméthyl benzyl ammonium, les organoborates, 2,2-(1-méthyltriméthylène dioxy)-bis-(4-méthy1-1,3,2-dioxaborinane), 2,2-oxybis(4,4,6-triméthyl)-1,3,2-dioxaborinane, éther monométhylique d'éthylèneglycol, parahydroxybenzoates, composés organiques du bore, 8-hydroxyquinoléine, pentachlorophénate de sodium, chlorure d'alkyl diméthyl éthyl benzyl ammonium, sels d'alkylammonium, 1,3,5-triéthylhexahydro-1,3,5-triazine, chromate de strontium, phénols halogénés, 2-bromo-4-phénylphénol, sels d'argent tels que le nitrate d'argent, le chlorure d'argent, l'oxyde d'argent et l'argent élémentaire, peroxydes organiques, sulfadiazine argentique, dichloro-S-triazinetrione de sodium, 4-chloro-2-cyclohexylphénol, 2-chloro-4-nitrophénol, substitut de paraffines, 3-chloro-3-nitro-2-butanol, stéarate de 2-chloro-2-nitro-l-butanol, acétate de 2-chloro-2-nitrobutyle, 4-chloro-4-nitro-3-hexanol, 1 -chloro- 1-nitro-1 -propanol, 2-chloro-2-nitro-1-propanol, chlorure de triéthylétain, 27 [Revendication 6] [Revendication 7] [Revendication 8] [Revendication 9] [Revendication 10] 2,45-trichloroph6nol, 2,4,6-trichlorophénol, 1,3-dichloro-5,5-diméthylhydantoïnc, tris(hydoxyméthyDnitrométhanc, nitroparaffines, 2-nitro-2-éthy1-1,3-propanediol, 2-éthy1-2-nitro-1,3-propanediol, 2-méthy1-2-nitro-1,3-propanediol, hexahydro-1,3,5-tris(2-hydroxyéthyl)-S-triazine, hexahydro1,3,5-tris(tétrahydro-2-furany1)-méthyl-S-triazine, bis(thiocyanate) de méthylène, 2,2-dihromo-3-nitrilopropionamide. Bétabromo-3-nitrostyrène, composés fluorés, Néthyl-N-méthy1-4-(trifluorométhyl)-2-(3,4-diméthoxyphényl) benzamide, pentachlorophénol, dichlorophenc, orthophénylphénol, dibicyclo (3,1,1 ou 2,2,1)-heptyle polyamines, di-bicyclo- (3,1,1 ou 2,2,1)-heptanyle polyamines et des mélanges de deux ou plusieurs de ces derniers. Utilisation selon la revendication 2, dans laquelle le bactériophage appartient à la famille des Myoviridac, Siphoviridae, Podoviridae, Corticoviridae, Cystoviridac, Inoviridae, Leviviridae, Microviridac, Plasmaviridac et Tectiviridaeou un cocktail de ces derniers. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle la dose efficace d'agent anti-microbiens est diminuée au moins d'un facteur 2 par rapport à la dose efficace d'agent anti-microbien seul. Composition comprenant comme principe actif une lactonase mutée appartenant à la famille des phospholiiesterase-like lactonase dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophane situé au début de la boucle 8 est substitué par l'acide aminé isoleucine, et au moins un agent antimicrobien, et en particulier ladite lactonase mutée ayant la séquence SEQ ID NO : 1 dans laquelle au moins l'acide aminé W en position 263 est substitué par l'acide aminé isoleucine I, la dose efficace d'agent anti-microbiens dans ladite composition étant présente en quantité au moins deux fois inférieure à celle dudit au moins un agent anti-microbien seul. Composition selon la revendication 8, dans laquelle ledit agent antimicrobien est utilisé à une concentration de 10 pM à 100 mM, de préférence de 1 mM à 100 mM. Composition selon la revendication 8, dans laquelle ladite lactonase mutée est utiliséé à une concentration de 0,1 mg/L à 10 g/L, de préférence de 10 mg/L à 2 g/L ou à une concentration de lpg/cm2 à 1 mg/cm2, de préférence de 5pg/cm2 à 500 pg/cm2. 28 [Revendication 11] Composition selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, ladite composition étant appliquée sur du matériel contaminé par lesdites bactéries ou susceptible de l'être, dans laquelle ledit matériel contaminé par lesdites bactéries ou susceptible de l'être est de préférence choisi parmi : des dispositifs médicaux tels que des pansements, des cathéters, des endoscopes, des implants, des nébulisatcurs du matériel médical des surfaces immergées telles que des coques de bateaux, des infrastructures portuaires ou pétrolières pouvant être la cible de biofouling ou de biocorrosion, des installations industrielles telles que des tours aéroréfrigérécs, des systèmes de climatisation, des bioréacteurs, des tuyauteries, des nébulisatcurs, des brumisateurs, des bassins. [Revendication 12] Composition selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, comme produit phytosanitaire pour la prévention et/ou le traitement des infections de plantes telles que le feu bactérien. [Revendication 13] Composition selon l'une quelconque des revendications 8 à 10, comme complément alimentaire pour l'homme ou l'animal ou comme produit de nutrition animale [Revendication 14] Composition selon l'une quelconque des revendications 8 à 13, ladite composition étant formulée avec au moins un excipient approprié pour son utilisation sous forme de solution, d'huile, de suspension, d'émulsion, de nanoparticules, de liposomes, de granulés ou de surface fonctionnalisée [Revendication 15] Composition comprenant comme principe actif une lactonase mutée ap- partenant à la famille des phosphotriesterase-like lactonase dans laquelle au moins l'acide aminé tryptophane situé au début de la boucle 8 est substitué par l'acide aminé isoleucine et au moins un agent antimicrobien, en particulier, ladite lactonase mutée ayant la séquence SEQ ID NO : 1 dans laquelle l'acide aminé W en position 263 est substitué par l'acide aminé isoleucine I, la dose efficace d'agent anti-microbiens dans ladite composition étant présente en quantité au moins deux fois inférieure à celle dudit au moins un agent anti-microbien seul, 29 pour son utilisation : en santé animale notamment pour la prévention et/ou le traitement des infections bactériennes, le traitement des dysbioses, la prévention de biofilms présents dans les bassins d'élevages et les aquariums, ou en santé humaine notamment pour la prévention et/ou le traitement des infections bactériennes telles que les pneumonies, les maladies nosocomiales, les plaies, les brûlures, les infections oculaires, le pied diabétique, pour la prévention et/ou le traitement des dysbioses, ou pour la prévention et/ou le traitement de la plaque dentaire.