Brevet FR3088322A1 — publié le 20200515

NOUVELLE VOIE DE SYNTHESE DE DIAZIRINES, ENRICHIES OU NON EN AZOTE-15 La présente invention concerne une nouvelle méthode de synthèse de diazirines, enrichies ou non en azote-15, à partir d'acides aminés ou d'imines via une méthode de synthèse en un seul pot. La présente invention se rapporte également à la préparation d'une solution d'ammoniac 15NH3 et à de nouveaux composés diazirines, enrichis ou non en azote-15. Ces diazirines peuvent être avantageusement utilisées en marquage par photoaffinité (« photoaffinity labelling »). Les 15N2-diazirines peuvent être utilisées en hyperpolarisation. Les diazirines sont des hétérocycles à trois chainons possédant une double liaison azote-azote et un carbone spi. Elles sont généralement obtenues en plusieurs étapes à partir de composés carbonylés. Ces derniers sont transformés en diaziridines en 2 ou 3 étapes en passant par des imines ou des oximes munies de groupements partants. Les diaziridines correspondantes sont ensuite oxydées en diazirines via un oxydant (Hill, J. R.; Robertson, A. A. B. J. Med. Chem. 2018, 61, 6945-6963). Les diazirines sont connues depuis les années 1980 comme étant des précurseurs de carbènes très réactifs. Cette propriété a permis l'essor de l'utilisation des diazirines comme réactifs de marquage par photoaffinité (« photoaffinity labelling » et de « photo-crosslinking »), le carbène généré formant rapidement une liaison covalente avec un atome à proximité. Ces méthodes permettent notamment d'identifier des sites actifs et d'étudier des interactions protéines-protéines. Les diazirines en tant que sondes photoactives ont été largement utilisées, par exemple pour la conception de composants électroniques organiques (W02016-049123), dans des procédés cosmétiques de traitement des odeurs corporelles humaines (W02016-096897) et de traitement d'atténuation des rides (W02010-076490), de substances photolabiles captant les parfums (W02017-045891) ou encore en tant que bio-adhésifs (W02014-081391). Les diazirines marquées à l'azote-15, notées 14\12-diazirines, peuvent être utilisées en hyperpolarisation, technique RMN prometteuse pour l'imagerie IRM. [Theis, T.; Ortiz Jr., G. X.; Logan, A. W. J.; Clayton, K. E.; Feng, Y.; Huhn, W. P.; Blum, V.; Malcolmson, S. J.; Chekmenev, E. Y.; Wang, Q.; Warren, W. S. Science Advances, 2016, 2, e1501438]. L'hyperpolarisation des 15N2-diazirines utilise la technique SABRE-SHEATH (Signal Amplification by Reversible Exchange - Shield Enables Alignement Transfer to Heteronuclei) qui s'effectue à l'aide d'un catalyseur organométallique à base d'iridium et de parahydrogène (pH2 ; disponible à partir du dihydrogène H2). Cette polarisation est transférée aux 15N2-diazirines grâce aux couplages scalaires existant entre le pH2 et les atomes d'azote de la diazirine, suite à des échanges de ligands réversibles. Cela se traduit alors par une augmentation 2 spectaculaire de l'intensité du signal en RMN de l'azote-15 (jusqu'à environ 15 000 fois). De plus cette hyperpolarisation peut être aussi transférée au proton, ce qui permet d'envisager son utilisation en IRM, notamment in-vivo [Shen, K.; Logan, A. W. J.; Colell, J. F. P.; Bae, J.; Ortiz Jr., G. X.; Theis, T.; Warren, W. S.; Malcolmson, S. J.; Wang, Q. Angew. Chem. Int. Ed. 2017, 56, 12112]. 5 L'introduction du groupement diazirine sur des molécules à activité biologique permettrait ainsi une utilisation comme marqueur moléculaire pour le diagnostic in-vivo par IRM (pour des pathologies telles que la maladie d'Alzheimer et les cancers), l'IRM étant une technique d'imagerie très répandue (environ 820 appareils en France), en évitant des examens par TEP (tomographie par émission de positon), une technique très coûteuse utilisant des radiations ionisantes et nettement moins 10 répandue (environ 120 appareils en France). La synthèse des diazirines s'effectue généralement en deux ou trois étapes, avec des rendements globaux faibles et présente des inconvénients majeurs comme l'utilisation de réactifs dangereux et des conditions réactionnelles contraignantes comme par exemple l'utilisation d'ammoniac liquide 15 (ammoniac gazeux condensé à une température de -78°C). Il apparaît qu'une seule synthèse de 151\12-diazirine a été réalisée en 3 étapes, en utilisant le "N-HOSA (hydroxylamine-O-sulfonic acid) et un dérivé carbonylé, avec seulement 18% de rendement global. Le 15N-HOSA est lui-même préparé à partir de 15N-hydroxylamine ('NH2OH) et d'acide chlorosulfonique 20 (CISO3H) [Theis, T.; Ortiz Jr., G. X.; Logan, A. W. J.; Clayton, K. E.; Feng, Y.; Huhn, W. P.; Blum, V.; Malcolmson, S. J.; Chekmenev, E. Y.; Wang, Q.; Warren, W. S. Science Advances, 2016, 2, e1501438]. De manière surprenante, les inventeurs, ont mis au point une synthèse de diazirine en un seul pot à partir d'acides aminés, naturels ou non, ou d'imines préalablement formées à partir de composés 25 carbonylés. Les diazirines sont obtenues avec de bons rendements allant jusqu'à 99 %. Ces méthodologies ont également pu être appliquées à la formation de diazirines enrichies en azote-15, ou 15N2-diazirines, également avec de hauts rendements (allant de 47 % à 91 %) en utilisant une solution d'ammoniac enrichie en azote-15 ("NH3) préalablement formée. 30 Récemment, Zakarian, A. et M. (l. Am. Chem. Soc. 2018, 140, 6027-6032) ont mis au point une synthèse de 'NH3 liquide pur à partir de chlorure d'ammonium, lui-même enrichi en azote-15 (15INH4C1). Cette méthode présente néanmoins l'inconvénient d'un passage de l'ammoniac à l'état gazeux qui oblige à le recondenser à très basse température (-78 °C). 3 A l'inverse, les inventeurs ont également développé une synthèse de 'NH3 en solution dans un alcool, typiquement le méthanol, à partir de 15NH4CI, dans des conditions réactionnelles très simples. Résumé de l'invention 5 La présente invention a pour objet un procédé de synthèse en un seul pot d'une diazirine, dans laquelle les atomes d'azotes correspondent chacun indépendamment l'un de l'autre à l'isotope 14N ou à l'isotope "N, en faisant réagir un acide aminé ou une imine, avec de l'ammoniac de formule 14NH3 ou "NH3 et un oxydant contenant un atome d'iode hypervalent. 10 Un second objet de l'invention concerne un procédé de synthèse d'ammoniac enrichi à l'azote-15, de formule 'NH3, comprenant les étapes suivantes : (a') réaction du chlorure d'ammonium enrichi à l'azote-15, de formule 15NH4CI, avec un alcoolate de formule WO-L dans l'alcool anhydre correspondant RXOH, (b') optionnellement, élimination du sel de formule L-Cl formé, avantageusement par 15 centrifugation. La présente invention a également pour objet des diazirines issues d'acides aminés susceptibles d'être obtenues ou directement obtenues par le procédé selon l'invention. 20 Un autre objet de l'invention concerne des diazirines de formule (I') enrichies à l'azote-15 et leur utilisation en hyperpolarisation. La présente invention concerne également l'utilisation des diazirines issues d'acides aminés susceptibles d'être obtenues ou directement obtenues par le procédé selon l'invention et des 25 diazirines de formule (1') en marquage par photoaffinité. Description détaillée de l'invention La présente invention concerne en premier lieu un procédé de synthèse en un seul pot de diazirineL enrichie ou non en azote-15, à partir d'un acide aminé ou d'une imine, comprenant la réaction de 30 l'acide aminé ou de l'imine avec de l'ammoniac, enrichi ou non en azote-15, et un oxydant contenant un atome d'iode hypervalent. Par « synthèse en un seul pot », on entend, au sens de la présente invention, que la synthèse des diazirines de l'invention à partir d'acides aminés ou d'imines s'effectue sans isolation des 4 intermédiaires de réactions, tels que par exemple les diaziridines correspondantes. La synthèse des diazirines de l'invention est avantageusement conduite dans un seul solvant de réaction. Le terme « diazirine » au sens de la présente invention désigne tout hétérocycle à trois chainons 5 possédant une double liaison azote-azote et un carbone sp3, substitué ou non sur ce carbone sp3, enrichi ou non en azote-15. Dans la présente description, le terme « enrichi en azote-15 » signifie que le composé concerné comporte une proportion d'isotope 15N nettement supérieure à l'abondance isotopique naturelle 10 (0,36 %). Dans la présente invention, les composés enrichis en azote-15 ont typiquement un taux d'incorporation compris entre 60,0 et 99,9 %. Ce taux d'incorporation dépend du pourcentage d'enrichissement en azote-15 des réactifs sources d'azote-15. Il s'agit principalement, au sens de la présente invention, d'acides aminés commerciaux enrichis en azote-15 et du chlorure d'ammonium commercial enrichi en azote-15. Ces réactifs sont typiquement enrichis à 99 % en azote-15. Les 15 termes « enrichi(e)(s) en azote-15 », « comportant un atome d'azote-15 », « dont un atome d'azote est un atome 15N » ont la même signification. De même, « azote-15 » et « 15N » sont équivalents. S'il n'est pas précisé que le composé est enrichi en azote-15, alors il ne contient que de l'azote 14. Dans le cas où la diazirine obtenue est enrichie en azote-15, cela signifie qu'au moins un des deux 20 azotes composant l'hétérocyle à 3 chaînons, de préférence les deux, est un isotope 15N. D'autres azotes éventuellement présents dans la diazirine en dehors de l'hétérocycle à trois chainons peuvent également être des azotes-15. Par « acide aminé », on entend au sens de la présente invention tout acide aminé naturel ou non 25 naturel, enrichi ou non en azote-15, quel que soit leur stéréochimie. La chaine latérale de l'acide aminé peut être protégée ou non protégée. Les fonctions acide carboxylique et amine, sont quant à elles non protégées. Les acides aminés naturels correspondent aux composés suivants : L-alanine, L-asparagine, acide-L-aspartique, L-glycine, L-glutamine, L-leucine, L-isoleucine, L-phénylalanine, L-tryptophane, L-valine, L-histidine, L-tyrosine, acide L-glutamique, L-arginine, L-lysine, L-sérine, 30 L-thréonine, L-proline, L-méthionine, L-cystéine. Dans un mode de réalisation particulier, l'acide aminé est enrichi en azote-15. Lorsque l'acide aminé est enrichi en azote-15, au moins l'azote de la fonction amine liée au carbone portant la fonction acide carboxylique correspond à l'isotope 15N. D'autres azotes susceptibles d'être présents sur la chaîne latérale de l'acide aminé peuvent également correspondre à l'isotope 15N. 5 Par « iode hypervalent », on entend un atome d'iode au sein d'une molécule possédant plus de huit électrons dans sa couche de valence et ne respectant donc pas la règle de l'octet. L'iode se trouve ainsi soit dans un état d'oxydation (+111), il est alors de type X3-iodane, soit dans un état d'oxydation (+V), il est alors de type À5-iodane. Dans la présente invention, l'oxydant utilisé comprend un atome 5 d'iode avantageusement de type À3-iodane. Ledit oxydant peut être préparé et isolé en amont du procédé ou préparé in situ au cours du procédé de l'invention à partir d'un dérivé iodé en présence d'un oxydant ou à partir d'un dérivé de type iodoso. De préférence, l'oxydant contenant un atome d'iode hypervalent utilisé au cours du procédé de l'invention est obtenu en amont du procédé. 10 Par « oxydant à l'iode hypervalent », on entend, au sens de la présente invention, un composé chimique possédant un pouvoir oxydant et contenant un atome d'iode hypervalent. Typiquement, l'oxydant a l'iode hypervalent a pour rôle d'oxyder les intermédiaires de réactions, tels que les diaziridines, pour conduire aux diazirines correspondantes. Il peut également agir en catalyseur de réactions intermédiaires ayant lieu au cours de la synthèse des diazirines de l'invention à partir 15 d'acides aminés ou d'imines. Dans un mode de réalisation, l'oxydant contenant un atome d'iode hypervalent, peut être choisi parmi les composés de type À3-iodane. Par exemple, l'oxydant à l'iode hypervalent peut être choisi parmi les composés suivants : ktiodoarènes x3-benziodoxolones R= H, Me, Ac De préférence, l'oxydant utilisé est le PIDA (Phenyllodide DiAcetate ; Phl(OAc)21 20 La source d'ammoniac peut être de l'ammoniac pur gazeux ou liquide, de l'ammoniac en solution dans un solvant tel que le méthanol ou l'eau, ou un ammonium de formule générale NI-14.X-, où X-représente avantageusement un contre ion choisi parmi le groupe constitué par : OAc F CI NTs O OJCCF3 Cl OH -%0Ts NTs NTs 6 0 O 0 02 H2N00 o, o YCY00F3C 0o H 0 HO 0e Pli"-jj'%0 H2Ns, 0 OH Cle Bre 0 FO HOC> NOP NGSC> 0 0 1121304 S203HPO e 0 0 0 'gi0 o o o 0 0° 0 0 0-0o HSO4 PF0 B F4 0Cre 6b De préférence, la source d'ammoniac est de l'ammoniac en solution dans un solvant, préférablement de l'ammoniac en solution dans le méthanol. 5 L'ammoniac utilisé peut être enrichi ou non en azote-15. Selon un mode de réalisation préféré, l'ammoniac utilisé est enrichi en azote-15. Dans un mode de réalisation particulier, la diazirine obtenue à l'aide du procédé de l'invention ne 10 contient pas d'azote-15. Selon un autre mode de réalisation, la diazirine obtenue à l'aide du procédé de l'invention est enrichie en azote-15 et contient un ou deux azote-15. Le procédé de l'invention permet avantageusement d'obtenir une diazirine de formule (I) suivante : N=N 15 R2 (I) ou un sel ou un solvate physiologiquement acceptable de celle-ci, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, dans laquelle les atomes d'azotes correspondent chacun indépendamment l'un de l'autre à l'isotope 'AN ou à l'isotope BN, 20 et dans laquelle R1 représente H, V, W ou V-W où : V représente une chaîne aliphatique où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), S, 5(0), 5(0)2, NR' ou Si ; V est éventuellement substitué avec 1 à 12 groupements sélectionnés parmi OH, NR'R", halogènes, CN, oxo, (=NR') ou aryle, 25 W représente un cycloalkyle, un aryle, un hétérocycle ou un hétéroaryle; W est éventuellement substitué par 1 à 4 groupements sélectionnés parmi les halogènes, CN, NO2, OH, 7 NR'R", une chaîne aliphatique, où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne (C1-C10) aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), S, 5(0), 5(0)2, NR' ou Si, R' et R" représentent chacun indépendamment l'un de l'autre H ou une chaîne aliphatique, où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, 5 C(0), S, S(0), S(0)2, NR' ou Si, et R2 représente H ou une chaîne aliphatique, où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par 0, C(0), S, 5(0), S(0)2, NR' ou Si. Les sels physiologiquement acceptables des composés de la présente invention comprennent les sels 10 non toxiques conventionnels des composés de l'invention, tels que ceux formés à partir d'acides organiques ou inorganiques ou de bases organiques ou inorganiques. Au sens de la présente invention, on peut citer en particulier les sels formés à partir des composés de l'invention dont la fonction amine se trouve sous une forme ammonium et/ ou la fonction acide se trouve sous une forme carboxylate. A titre d'exemple, on peut citer les contres-ions chlorure, bromure, fluorure, 15 nitrate ou bicarbonate formant des sels d'ammonium, et les contres-ions issus de métaux alcalins tels que Na', r formant des sels de carboxylate. Ces sels peuvent être synthétisés à partir des composés de l'invention contenant une partie basique ou acide et les acides ou bases correspondants selon les méthodes chimiques conventionnelles. Des 20 solvates acceptables pour les composés selon la présente invention incluent des solvates conventionnels tels que ceux formés durant la dernière étape du procédé de préparation des composés selon l'invention, avec le(s) solvant(s) de réaction. A titre d'exemple, il peut être fait mention des solvates formés avec l'eau (appelés communément hydrates) ou avec le méthanol ou l'éthanol. 25 Par « chaine aliphatique », on entend, au sens de la présente invention, une chaîne hydrocarbonée linéaire ou ramifiée, complètement saturée ou contenant une ou plusieurs insaturations, mais non aromatique. Une chaine aliphatique selon la présente invention comporte avantageusement de 1 à 18 atomes de carbone, préférablement de 1 à 12 atomes de carbone, plus préférablement de 1 à 10 30 atomes de carbone. Le terme « chaîne aliphatique » inclut selon la présente invention des groupements alkyle, alcényle ou alcynyle, linéaires ou ramifiés, substitués ou non. Par « groupement alkyle », on entend, au sens de la présente invention, une chaîne hydrocarbonée saturée, linéaire ou ramifiée. A titre d'exemple, on peut citer les groupes méthyle, éthyle, propyle, 35 isopropyle, butyle, iso-butyle, sec-butyle, tert-butyle, pentyle ou encore hexyle. 8 Par « groupement alcényle » on entend, au sens de la présente invention, une chaine hydrocarbonée, linéaire ou ramifiée, comprenant une ou plusieurs double liaisons. Par « groupement alcynyle », on entend, au sens de la présente invention, une chaîne 5 hydrocarbonée, linéaire ou ramifiée, comportant au moins une triple liaison. A titre d'exemple, on peut citer les groupes éthynyle ou propynyle. Par « aryle », on entend, au sens de la présente invention, un groupement hydrocarboné aromatique, comportant de préférence de 6 à 10 atomes de carbone et comprenant un ou plusieurs 10 cycles accolés. Il s'agira avantageusement d'un groupement phényle ou naphtyle. Par « cycloalkyle », on entend, au sens de la présente invention, un cycle hydrocarboné non aromatique, complètement saturé ou contenant une ou plusieurs insaturations, comprenant avantageusement 3 à 10 chaînons. Le terme inclut des polycycles fusionnés, spiro ou pontés. Des 15 exemples de cycloalkyle sont le cyclopropényle, le cyclohexyle ou le cyclobutyle. Par « hétérocycle », on entend, au sens de la présente invention, un cycle non aromatique, complètement saturé ou contenant une ou plusieurs insaturations, comprenant avantageusement 3 à 10 chaînons dans lequel un ou plusieurs atomes de carbone, avantageusement 1 à 4 et encore plus 20 avantageusement 1 ou 2, sont chacun remplacés par un hétéroatome choisis parmi les atomes de soufre, d'azote et d'oxygène. Le terme inclut des polycycles fusionnés, spiro ou pontés. Avantageusement, il s'agira d'un monocycle ou d'un bicycle dans lequel 1 ou 2 atomes de carbone sont chacun remplacés par un hétéroatome choisis parmi les atomes de soufre, d'azote et d'oxygène, de préférence choisis parmi les atomes d'azote et d'oxygène, tel que l'azote. Des exemples 25 d'hétérocycles sont la pipéridinyle, la piperizinyle, la pyrrolidinyle, la pyrazolidinyl, l'azepanyle, la thiazolidinyle, l'isothiazolidinyle, l'oxazocanyle, la thiazepanyle, la benzimidazolonyle. Par « hétéroaryle », on entend, au sens de la présente invention, un groupe aromatique comprenant un ou plusieurs, notamment 1 ou 2 cycles hydrocarbonés accolés, dans lequel un ou plusieurs 30 atomes de carbone, avantageusement 1 à 4 et encore plus avantageusement 1 ou 2, sont chacun remplacés par un hétéroatome choisis parmi les atomes de soufre, d'azote et d'oxygène et dans lequel chaque cycle comprend avantageusement 5 à 7 chaînons, de préférence 5 ou 6 chaînons. Avantageusement, il s'agira d'un groupe aromatique comprenant 1 ou 2 cycles hydrocarbonés accolés, chaque cycle étant de 5 ou 6 chaînons, dans lequel 1 ou 2 atomes de carbone sont chacun 35 remplacés par un hétéroatome choisi parmi les atomes de soufre, d'azote et d'oxygène, de 9 préférence choisis parmi les atomes d'azote et d'oxygène, tel que l'azote. Des exemples de groupes hétéroaryle sont les groupes furyle, thiényle, pyrrolyle, oxazolyle, isoxazolyle, thiazolyle, isothiazolyle, imidazolyle, pyrazolyle, oxadiazolyle, thiadiazolyle, triazolyle, tétrazolyle, pyridyle, pyridazinyle, pyrimidinyle, pyrazinyle, triazinyle, quinolyle, quinoxalyle ou encore indolyle. Il s'agira 5 notamment d'un groupe pyridyle, indolyle ou imidazolyle. Par « atome d'halogène », on entend, au sens de la présente invention, les atomes de fluor, de chlore, de brome et d'iode. 10 Par « insaturé », on entend, au sens de la présente invention, que la chaîne hydrocarbonée peut comporter une ou plusieurs insaturation(s), avantageusement une. Par « insaturation », on entend, au sens de la présente invention, une double ou une triple liaison carbone-carbone (C=C ou CEC). 15 Par « stéréoisomère », on entend, au sens de la présente invention, un isomère géométrique ou un isomère optique. Les isomères géométriques résultent de la position différente des substituants sur une double liaison 20 qui peut avoir alors une configuration Z ou E. Les isomères optiques résultent notamment de la position différente dans l'espace des substituants sur un atome de carbone comprenant 4 substituants différents. Cet atome de carbone constitue alors un centre chiral ou asymétrique. Les isomères optiques comprennent les diastéréoisomères et 25 les énantiomères. Les isomères optiques qui sont des images l'un de l'autre dans un miroir mais non superposables sont désignés par « énantiomères ». Les isomères optiques qui ne sont ni superposables, ni images l'un de l'autre dans un miroir sont désignés par « diastéréoisomères ». Un mélange contenant des quantités égales de deux formes énantiomères individuelles de chiralité 30 opposée est désigné par « mélange racémique ». Par « groupe chiral », on entend, au sens de la présente invention, un groupe qui n'est pas superposable à son image dans un miroir. Un tel groupe chiral pourra comprendre en particulier un atome de carbone asymétrique, c'est-à-dire un atome de carbone substitué par quatre substituants 35 (incluant l'hydrogène) différents. 10 Au sens de la présente invention, la stéréoisomérie des composés peut être induite par les chaînes latérales R3 et/ou R2. Au sens de la présente invention, le terme « température ambiante » utilisé par la suite désigne une 5 température allant de 18 °C à 30 °C, de préférence allant de 20 °C à 25 °C, de manière plus préférée étant de 22 °C. Dans un mode de réalisation préféré, R2 représente H ou un groupement alkyle, de préférence un méthyle. Avantageusement, R2 est un atome d'hydrogène. 10 Selon un mode de réalisation, le procédé de synthèse de diazirine de la présente invention comprend les étapes suivantes : (a) Réaction d'un composé de formule (II) suivante : A 15 Ri R2 (11) ou d'un sel ou d'un solvate physiologiquement acceptable de celui-ci, d'un tautomère, d'un stéréoisomère ou d'un mélange de stéréoisomères en toutes proportions dans lequel A représente NH2, l'atome d'azote correspondant à l'isotope 34N ou à l'isotope 15N, et B représente COOH et R3 et R2 sont tels que définis ci-dessus 20 ou A-B forme un seul et même groupement imine de formule =NR3, et R3 représente une chaîne aliphatique, un cycloalkyle ou un aryle ; dans lequel jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), S, 5(0), S(0)2, NR' ou Si, et dans lequel ledit aryle est éventuellement substitué par 1 à 4 groupements sélectionnés parmi les halogènes, CN, NO2, OH, NR'R", une chaîne aliphatique telle que définie ci-dessus, 25 avec un oxydant comprenant un atome d'iode hypervalent de formule (III) suivante : Y X dans lequel X représente un (C2-Cio)alkyle, un aryle ou un hétéroaryle; X étant optionnellement substitué avec 1 à 12 groupements sélectionnés parmi OH, NR'R", halogènes, CN, oxo, (=N131) ou aryle, 11 Y et Z représentent indépendamment l'un de l'autre OH, un halogène, NH2, CN, un groupement (C1- Cio)alkyle, ((Ci-Ci.0)alkyle)-aryle, ((Q.-C10)alkyle)-hétéroaryle, où jusqu'à 4 unités méthylènes dudit alkyle sont optionnellement remplacées par O, C(0), S(0)2 ou NH, et en présence d'ammoniac 14N1-13 ou 15NH3, dans un solvant de réaction à une température 5 avantageusement comprise entre 0°C et la température ambiante, typiquement pendant un temps compris entre 1 h et 4 h. (b) Avantageusement, purification de la diazirine de formule (I) obtenue à l'étape (a), avantageusement par chromatographie ou par distillation. 10 Dans un mode de réalisation préféré, R3 représente un groupement benzyle, tosyle, cyclohexyle, un hydroxyle ou un alkyle tel qu'un groupement tert-butyle. De préférence, R3 est un groupement tertbutyle ou tosyle. 15 Dans un mode de réalisation préféré, X est un aryle, par exemple un phényle, et/ou Y et Z sont préférablement identiques et encore plus préférablement, Y et Z représentent un halogène, par exemple un chlore ou un fluor, un groupement OH, NH2, CN, 0-(Ci-Cs)alkyle, 0-(C1-C6)- perfluoroalkyle, 0-aryle, 0-5(0)2-(C2-C6)alkyle, O-S(0)2-hétéroaryle, NH-502-(Ci-C6)alkyle, NH-5(0)2- hétéroaryle, N(S02-(C2-C6)alkyle)2, N(S(0)2-hétéroaryle)2 ou un groupement ester 0(C0)(Ci-05)alkyle, 20 O(CO) (C2-C6)perfluoroalkyle, O(CO)aryle, de préférence un groupement ester 0(C0)(Ci-C6)alkyle. De préférence, l'oxydant est le diacétate d'iodobenzène, dénommé PIDA, pour lequel X est un phényle et Y=Z=O-C(0)-CH3. 25 Dans un mode de réalisation préféré, le solvant utilisé est un solvant avantageusement choisi parmi les alcools, l'acétonitrile, le THF, le toluène, le dichlorométhane, l'acétate d'éthyle, le DM50, l'acétone, la pyridine ou le DMF. La réaction a lieu avantageusement dans un alcool tel que le méthanol, l'éthanol, le propan-1-ol, le n-butanol, le tert-butanol, le pentan-1-ol, l'hexan-l-ol, de préférence dans le méthanol. 30 Avantageusement, le solvant de réaction correspond au solvant de la source d'ammoniac. 12 Etape (a) Avantageusement, l'ammoniac est utilisé en excès par rapport au composé de formule (II), de préférence à raison de 15 à 20 équivalents, préférablement de 17 à 18 équivalents. En particulier, l'ammoniac est utilisé à raison de 17,5 équivalents par rapport au composé de formule (II). 5 Selon un mode de réalisation, le composé de formule (II) est ajouté à une solution d'ammoniac dans un solvant, de préférence à une solution d'ammoniac dans le méthanol. L'oxydant comprenant un atome d'iode hypervalent est utilisé avantageusement en excès par 10 rapport au composé de formule (II), à raison de 2 à 5 équivalents, de préférence 3 équivalents. Dans un mode de réalisation, l'oxydant comprenant l'atome d'iode hypervalent est ajouté au milieu réactionnel constitué par l'ammoniac, le composé de formule (II) et le solvant, de préférence lorsque le milieu réactionnel est à une température de 0°C. 15 Un seul ajout d'oxydant est avantageusement réalisé au cours du procédé d'obtention des diazirines à partir des composés de formule (II). Typiquement, au cours de l'étape (a), la température du milieu réactionnel est, dans un premier 20 temps, maintenue à 0 °C pendant une période comprise entre 15 minutes et 45 minutes, de préférence 30 minutes, après l'ajout de l'oxydant comprenant un atome d'iode hypervalent, puis elle est montée à la température ambiante, et typiquement maintenue à cette température typiquement pendant un temps compris entre 1 heure et 3 heures, de préférence pendant 1h30. 25 Etape (b) La diazirine obtenue à l'étape (a) est avantageusement purifiée, de manière préférée par chromatographie ou distillation. Par « chromatographie », on entend, au sens de la présente invention, une technique de purification 30 des composés basée sur la différence d'affinité des composés avec la phase mobile et la phase stationnaire. Il existe différent type de chromatographie : d'adsorption, d'exclusion, d'échange d'ions ou de partage. Avantageusement, au sein de la présente invention, les composés seront séparés par chromatographie d'adsorption. La phase mobile peut être un liquide, un gaz ou un fluide supercritique. De manière préféré, la phase mobile sera un liquide, préférablement un mélange de 35 solvants de polarité différente, par exemple deux solvants, choisis parmi le pentane, l'acétate 13 d'éthyle, le méthanol, le dichlorométhane, l'éthanol ou le diéthyléther. La phase stationnaire peut être du papier, de la silice, modifiée ou non, des polymères, de l'alumine, etc. Avantageusement, dans le cadre de la présente invention, la phase stationnaire sera de la silice. 5 De manière préférée, la chromatographie sera une chromatographie sur gel de silice. Dans un mode de réalisation, le composé de formule (Il) est un acide aminé de formule (lia) suivante : 10 ou un sel ou un solvate physiologiquement acceptable de celui-ci, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, dans lequel l'atome d'azote de la fonction amine lié au carbone portant également la fonction acide carboxylique COOH, correspond soit à l'isotope 14N soit à l'isotope 15N, et 15 R1 représente H, V, W ou V-W où : V représente une chaîne aliphatique où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), S, 5(0), S(0)2, NR' ou Si ; V est éventuellement substitué avec 1 à 12 groupements sélectionnés parmi OH, NR'R", halogènes, CN, oxo, (=NR') ou aryle, 20 W représente un cycloalkyle, un aryle, un hétérocycle ou un hétéroaryle; W est éventuellement substitué par 1 à 4 groupements sélectionnés parmi les halogènes, CN, NO2, OH, NR'R", une chaîne (CLC20)aliphatique, où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne (C1-C20)aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), S, 5(0), S(0)2, NR' ou Si, R' et R" représentent chacun indépendamment l'un de l'autre H ou une chaîne aliphatique, 25 où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), 5, 5(0), 5(0)2, NR' ou Si. Dans un mode de réalisation préféré, le composé (lia) correspond aux acides aminés suivants : acide L-aspartique, L-asparagine, L-glutamine, L-glycine, L-alanine, L-valine, L-isoleucine, L-leucine, L- 30 phénylalanine, L-tryptophane, 4-méthyl-L-phénylalanine, 4-iodo-L-phénylalanine &Histidine, L- tyrosine, acide L-glutamique. 14 Dans un mode de réalisation particulier, le composé (lia) correspond à des acides aminés naturels. Préférablement, le composé (lia) correspond aux acides aminés permettant d'obtenir des diazirines non volatiles, tels que les acides aminés naturels suivants : L-Histidine, L-tyrosine ou acide L-glutamique. 5 Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, le procédé comprend une étape préliminaire de protection du composé (lia). Par « étape de protection », on entend la mise en place d'un groupement protecteur sur une 10 fonction chimique présente dans le groupement R1 du composé (lia). Le terme « étape de protection » peut également désigner une réaction chimique réversible permettant d'inhiber la réactivité d'une fonction chimique dans les conditions réactionnelles du procédé de l'invention, tel que par exemple une étape d'oxydation, de réduction ou d'amidation. 15 Par « groupement protecteur », on entend désigner, au sens de la présente invention, un groupement qui permet de protéger une fonction chimique réactive contre des réactions indésirables tels que les groupements décrits par T. W. Greene, « Protective Groups In Organic synthesis », (John Wiley & Sons, New York (1981)) et Harrison et al. « Compendium of Synthetic Organic Methods », Vols. 1 à 8 (J. Wiley & sons, 1971 à 1996). 20 Le terme « fonction chimique » désigne, selon la présente invention, toute entité chimique réactive susceptible de réagir au cours du procédé de l'invention. Il peut s'agir d'un atome, d'un ensemble d'atome, par exemple d'un cycle ou hétérocycle saturé insaturé ou aromatique. 25 De manière préférée, l'étape de protection préliminaire est réalisée sur le composé (lia) dans lequel R1 comprend une fonction chimique incompatible avec les réactifs utilisés dans le procédé de l'invention, telle que OH, NH2, C(0)NH2, C(0)OH, SH, une fonction guanidine, un cycle indole ou une fonction thioéther. Plus particulièrement, l'étape de protection préliminaire est réalisée sur le composé (lia) dans lequel 30 Ri- correspond à la chaîne latérale des acides aminés suivants : la lysine, l'arginine, la sérine, la thréonine, la méthionine, le tryptophane et la cystéine. Les groupements protecteurs selon la présente invention incluent en particulier un groupement tertbutoxycarbonyle, communément abrégé Boc, un groupement benzyle (Bn), un groupement trityle 15 (Tr), un groupement carboxybenzyle (CBz), des groupements acyles tel que le groupement acétate (Ac) ou des groupements protecteurs silylés, tels que le tert-butylediphénylsilyle (TBDPS). Avantageusement, l'étape de protection d'un composé (Ila) dont le groupement RI- comporte une 5 fonction thioéther correspond à une oxydation de cet atome en sulfoxyde. De manière avantageuse, une fonction thiol est protégée sous forme de thioéthers, par exemple avec un trityle. Avantageusement, une fonction NH2 présente dans le groupement 1:21- du composé (Ila) est protégée sous forme d'amide ou de carbamate, par exemple à l'aide d'un groupement acétate, d'un 10 groupement Boc ou d'un groupement CBz. Avantageusement, une fonction OH présente dans le groupement RI- du composé (Ila) est protégée sous forme d'éther, notamment à l'aide d'un benzyle, et plus particulièrement d'éthers silylés, par exemple à l'aide de TBDPS. 15 Avantageusement, une fonction indole dans le groupement RI- du composé (Ila) est protégée par l'introduction d'un groupement Boc. Selon un mode de réalisation préféré, le composé (lia) correspond aux acides aminés protégés 20 suivants : K-Acétyl-L-lysine, N,-benzyloxycarbamate-L-lysine, L-méthionine sulfoxyde, S-trityl-L-cystéine, S-benzyl-L-cystéine, O-benzyl-DL-sérine, O-tert-butyldiphénylsilyl-DL-sérine, O-tert-butyldiphénylsilyl-DL-thréonine, 1-(tert-butoxycarbonyl)-L-tryptophane, L-théanine, acide y-benzyl-L-glutamique. 25 Dans un mode de réalisation particulier, le composé (lia) subit une modification fonctionnelle visant à diminuer la volatilité des diazirines correspondantes. Ladite modification fonctionnelle correspond typiquement à l'introduction de groupements qui vont augmenter la masse moléculaire et/ou la polarité du composé pour le rendre moins volatile. Les groupements permettant de diminuer la volatilité des composés incluent par exemple les halogènes, en particulier l'iode, ou encore les 30 groupements isopropyle ou tert-butyle. L'introduction d'un atome d'iode est particulièrement intéressant car il permet de réaliser des fonctionnalisations ultérieures par couplage organométallique de manière efficace. Avantageusement, le composé (lia) correspond à la 4-iodophényl-alanine. 16 Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, la diazirine selon l'invention, avantageusement de formule (I), enrichie en azote-15 est obtenue à l'aide du procédé selon l'invention à partir de l'acide aminé (11a) enrichi en azote-15 et d'ammoniac enrichi en azote-15. 5 La diazirine selon l'invention, avantageusement de formule (I), enrichie en azote-15 obtenue à partir de l'acide aminé (11a) enrichi en azote-15 et d'ammoniac enrichi en azote-15 possède un taux d'incorporation d'azote-15 supérieur à 99 %. Selon un autre mode de réalisation, la diazirine selon l'invention, avantageusement de formule (I), 10 enrichie en azote-15 est obtenue à l'aide du procédé selon l'invention à partir de l'acide aminé (11a) non enrichi en azote-15 et d'ammoniac enrichi en azote-15. La diazirine de selon l'invention, avantageusement de formule (I), enrichie en azote-15 obtenue à partir de l'acide aminé (11a) non enrichi en azote-15 et d'ammoniac enrichi en azote-15 possède un 15 taux d'incorporation d'azote-15 compris entre 60 % et 90 %. Selon un autre mode réalisation, le composé de formule (11) est une imine de formule (I lb) suivante : R3 N../1- R1 R2 (11b) 20 ou un sel ou un solvate physiologiquement acceptable de celle-ci, un tautomère, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, dans laquelle : 112.1 représente H, V, W ou V-W où : V représente une chaîne aliphatique où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne (Cifio)aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), S, 5(0), S(0)2, NR' ou Si ; V est 25 éventuellement substitué avec 1 à 12 groupements sélectionnés parmi OH, NR'R", halogènes, CN, oxo, (=NR') ou aryle, W représente un cycloalkyle, un aryle, un hétérocycle ou un hétéroaryle; W est éventuellement substitué par 1 à 4 groupements sélectionnés parmi les halogènes, CN, NO2, OH, NR'R", une chaîne aliphatique, où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont 30 optionnellement remplacées par O, C(0), S, 5(0), S(0)2, NR' ou Si, 17 R' et R" représentent chacun indépendamment l'un de l'autre H ou une chaîne aliphatique, où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), 5, 5(0), 5(0)2, NR' ou Si , R2 représente H ou une chaîne aliphatique, où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne 5 (Citio)aliphatique sont optionnellement remplacées par 0, C(0), S, 5(0), S(0)2, NR' ou Si, et R3 représente une chaîne (C2-C20) aliphatique, un cycloalkyle ou un aryle ; dans lequel jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne (C2-C20) aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), 5, 5(0), 5(0)2, NR' ou Si, et dans lequel ledit aryle est éventuellement substitué par 1 à 4 groupements sélectionnés parmi les halogènes, CN, NO2, OH, NR'R", une chaîne (C1-C20) aliphatique telle que 10 définie ci-dessus. Dans un mode de réalisation préféré, R1 représente une chaîne (C2-Waliphatique telle que définie ci-dessus. De préférence, R' comprend une fonction acide carboxylique COOH. En particulier, R1 représente un groupement alkyle-COOH, par exemple CH2CH2COOH. 15 Dans un autre mode de réalisation préféré, Fil est un aryle, de préférence un phényle, avantageusement substitué. Avantageusement, R' est un phényle substitué par un groupement nitrile (CN) ou NO2. 20 Selon un mode de réalisation, R2 représente H ou un alkyle, de préférence un méthyle. Avantageusement, R3 représente un groupement benzyle, tosyle, cyclohexyle, un hydroxyle ou un alkyle tel qu'un groupement tert-butyle. De préférence, R3 est un groupement tert-butyle ou tosyle. 25 Selon un mode de réalisation de l'invention, l'imine de formule (11b) est obtenue préalablement à partir d'un composé carbonylé de formule (IV) suivante : 0 Ri `R2 (IV) ou d'un sel physiologiquement acceptable de celui-ci, un tautomère, un stéréoisomère ou un 30 mélange de stéréoisomères en toutes proportions dans lequel R' et R2 sont tels que définis ci-dessus. 18 Les modes de réalisation préférés concernant R1 et R2 sont identiques à ceux relatifs au composé (11b). La réaction d'obtention de l'imine de formule (11b) comprend avantageusement la réaction du 5 composé carbonylé de formule (IV) avec une amine de formule (V) suivante : R3-NH2 (V) dans laquelle R3 est tel que défini ci-dessus. Préférablement, R3 représente un groupement benzyle, tosyle, cyclohexyle, un hydroxyle ou un alkyle tel qu'un groupement tert-butyle. De préférence, R3 est un groupement tert-butyle ou tosyle. 10 Selon un mode de réalisation, la diazirine selon l'invention, avantageusement de formule (I), enrichie en azote-15 est obtenue à l'aide du procédé selon l'invention à partir de l'imine (11b) non enrichi en azote-15 et d'ammoniac enrichi en azote-15. 15 La présente invention a également pour objet un procédé de synthèse d'ammoniac enrichi à l'azote-15, de formule 15NH3, comprenant les étapes suivantes : (a') réaction du chlorure d'ammonium enrichi à l'azote-15 de formule 15INH4CI avec un alcoolate de formule Rx0-L dans l'alcool anhydre correspondant I:t'OH, où 20 ft S--- 15Nt\-.'_'S.,...- Ph ii O 2a 2c 2d 2h 2i 15N '5N HisN'b 2t 1,5N 0,Ph isNli\'......','', Si, S'.' 1 tBu 4 ,' Ph O NH 2q 2s '5N NO2 O 5a 5b 15N '5N O 2j 25 22 La présente demande concerne également l'utilisation des diazirines la à 1s et éventuellement des diazirines enrichies en azote-15 telles que définies ci-dessus pour leur application en marquage par photoaffinité. 5 Un objet de la présente demande concerne également l'utilisation des diazirines enrichies en azote-15 de formule (I') pour leur application en hyperpolarisation, notamment dans le domaine de l'imagerie médicale. La présente demande est illustrée par les exemples suivants, sans y être pour autant limitée. 10 Exemples Procédure générale (A) pour la synthèse de diazirines 1 à partir d'acides aminés NH3 (17,5 éq.) HO2C R1 PIDA (3 éq.) N R1 H2N H Me0H, 0°C à t a. 2h Dans un Schlenk sous argon contenant l'acide aminé (0,5 mmol ; 1 éq.), est ajoutée la solution 15 d'ammoniac (1,25 mL à 7 M dans le méthanol ; 17,5 éq.). Le mélange réactionnel est refroidi à 0 °C puis le diacétate d'iodobenzène (1,5 mmol ; 3 éq.) est additionné en une seule portion. Après 30 minutes à 0°C, le bain de glace est retiré et le mélange réactionnel est agité pendant 1h30 à température ambiante. Après conversion totale, le milieu est concentré sous pression réduite puis le brut réactionnel est purifié par chromatographie sur gel de silice pour conduire à la diazirine 1. 23 Diazirines synthétisées (l'acide aminé précurseur est indiqué au-dessus de la formule) : L-méthionine sulfoxyde 0 N HN L-histidine acide L-glutamique 4-iodo-L-phénylalanine lc N-Ac-L-lysine N H 1g N-Boc-L-tryptophane S-Bn-L-cystéine sulfoxyde O N Ph S,s',''...N 1h N-Cbz-L-lysine L-tyrosine HO 1a L-asparagine O N H2N le L-tryptophane N N H lb L-glutamine 0 H2N)L-'-'"t lf O N0 N Ph0 H Bloc 1k 11 11 L-théanine O-Bn-L-acide O-benzyl-DL-sérine 0-t-butyldiphenylsilyl- glutamique DL-sérine 0 N Ph \N tBu 1n Ph- \-,N lp N lo 0-tert-butyldiphenylsilylL-thréonine S-triphénylméthylL-cystéine Ph N Ph'Si ",c,-", 1q Ph N Ph Ph lr 5 4-((3H-diazirin-3-yl)méthyl)phénol (la) HO Préparé d'après la procédure générale A en utilisant la L-tyrosine (90,6 mg ; 0,5 mmol). De 10 l'hydroxyde de potassium (56,1 mg ; 1 mmol) est ajouté pour permettre une meilleure solubilité. Après purification par chromatographie sur gel de silice (pentane/AcOEt 4/1 ; Rf = 0,4), 74 mg de diazirine la sont obtenus (99 %) sous la forme d'une huile brune. RMN 1H (400 MHz, CDCI3) : = 7,12 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 6,81 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 5,03 (s large, 1 H, OH), 2,49 (d, J = 4,0 Hz, 2 H), 1,10 (t, J = 4,0 Hz, 1 H). 15 RMN 13C (101 MHz, CDCI3) : 6 = 154,5 ; 130,2 ; 128,1 ; 115,6 ; 35,7 ; 22,2. HRMS (ASAP-QTOF) : m/z calculée pour C81-19N20. [M+H]' : 149,0715 ; trouvée : 149,0717. 24 3-((3H-diazirin-3-yl)méthyl)-1H-indole (1b) 5 Préparé d'après la procédure générale A en utilisant le L-tryptophane (102,1 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (pentane/AcOEt 9/1 ; Rf = 0,3) pour fournir 23 mg de diazirine lb (27 %, produit volatil) sous la forme d'une huile brune. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 8,03 (s large, 1 H, NH), 7,68 (d,1 = 8,0 Hz, 1 H), 7,38 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,24 (t, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,20 (t,J = 8,0 Hz, 1 H), 7,13 (s, 1 H), 2,71 (d, J = 4,0 Hz, 2 H), 1,19 (t, J = 4,0 Hz, 10 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 136,4 ; 127,3 ; 122,4 ; 122,3 ; 119,7 ; 119,0 ; 26,5 ; 21,9. HRMS (ASAP-QTOF) : m/z calculée pour C1oH1oN3+ [M+H]' : 172,0875 ; trouvée : 172,0874. 5-((3H-diazirin-3-yl)méthyl)-1H-imidazole (1c) 15 H N C N-k N N Préparé d'après la procédure générale A en utilisant la L-histidine (77,6 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (AcOEt/MeOH 95/5 ; R1= 0,3) pour fournir 60 mg de diazirine lc 20 (98%) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 9,48 (s large, 1 H, NH), 7,67 (s, 1 H), 6,95 (s, 1 H), 2,59 (d, J = 4,0 Hz, 2 H), 1,17 (t, J= 4,0 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 135,3 ; 132,9 ; 116,3 ; 28,4 ; 21,0. HRMS (ESI-QT0F) : m/z calculée pour C3H,N4' [M+H]' : 123,0671 ; trouvée : 123,0673. 25 3-(2-(méthylsulfinyl)éthyl)-3H-diazirine (ld) 30 Préparé d'après la procédure générale A en utilisant la L-méthionine sulfoxyde (165,2 mg ; 1 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (AcOEt/MeOH 98/2 ; R1= 0,3) pour fournir 105 mg de diazirine ld (79 %) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 2,74-2,64 (m, 2 H), 2,60 (s, 3 H), 1,83-1,68 (m, 2 H), 1,06 (t, J = 4,5 Hz, 1 H). 25 RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 49,5 ; 38,5 ; 23,5 ; 20,0. HRMS (ESI-QT0F) : m/z calculée pour C4H8N2OSNa+ [M+Na]* : 155,0255 ; trouvée : 155,0256. 2-(3H-diazirin-3-yl)acétamide (le) 5 0 N H2N Préparé d'après la procédure générale A en utilisant la L-asparagine (66,1 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (AcOEt/MeOH 98/2; Rf = 0,5) pour fournir 4 mg de la diazirine le (7 %, produit volatil) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. 10 RMN1H (500 MHz, CDCI3) : = 5,75 (s large, 2 H), 2,14 (d, J = 4,5 Hz, 2 H), 1,27 (t, J = 4,5 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 170,7 ; 37,2 ; 18,0. 3-(3H-diazirin-3-yl)propanamide (1f) OII 15 H 2N Préparé d'après la procédure générale A en utilisant la L-glutamine (73,1 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (AcOEt/MeOH 98/2; Rf = 0,4) pour fournir 4 mg de la diazirine 1f (7 %, produit volatil) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. 20 RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 4,89 (s large, 2H), 3,22 (t, J = 6,5 Hz, 2 H), 1,49 (td, J = 6,5, 4,5 Hz, 2 H), 0,94 (t, J = 4,5 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 5 = 158,5 ; 36,7 ; 30,6 ; 19,8. N-(4-(3H-diazirin-3-yl)butyl)acétamide (1g) 25 0 LN H Préparé d'après la procédure générale A en utilisant la A/6-acétyl-L-lysine (94,1 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (pentane/AcOEt 1/4 ; R1 = 0,1) pour fournir 78 mg de 30 diazirine 1g (99 %) sous la forme d'une huile incolore. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 5,58 (s large, 1 H), 3,23 (q, J = 6,5 Hz, 2 H), 1,97 (s, 3 H), 1,54 (quin, J = 7,5 Hz, 2 H), 1,36-1,30 (m, 2 H), 1,27-1,23 (m, 2 H), 0,84 (t, J= 4,5 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 170,1 ; 39,3 ; 29,4 ; 29,1; 23,3 ; 22,5 ; 21,2. HRMS (ESI-QT0F) : m/z calculée pour C7H13N30Na*[M+Na]* : 178,0956 ; trouvée : 178,0955. 3-(1-(benzylsulfinyl)méthyl)-3H-diazirine (1h) 26 O N 5 Préparé d'après la procédure générale A en utilisant la S-benzyl-L-cystéine sulfoxyde (113,7 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (pentane/AcOEt 1/1; Rf = 0,2) pour fournir 69 mg de la diazirine 1h (71 %) sous la forme d'un solide orange. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 7,42-7,34 (m, 3 H), 7,29-7,27 (m, 2 H), 4,20 et 4,18 (système AB, JAR = 13,0 Hz, 2 H, CH2), 2,55 (dd, J = 14,3 et 5,3 Hz, 1H), 2,40 (dd, J = 14,3 et 5,3 Hz, 1H), 1,32 (t, J = 5,3 Hz, 10 1 H). RMN 13C(125 MHz, CDCI3) : 6 = 130,2 ; 129,3 ; 129,0 ; 128,8 ; 58,0 ; 51,2 ; 15,7. 3-((4-iodophenyl)méthyl)-3H-diazirine (1i) 15 Préparé d'après la procédure générale A en utilisant le sel d'acide trifluoroacétique de la 4-iodo-Lphénylalanine (141,8 mg ; 0,35 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (100 % pentane ; Rf = 0,6) pour fournir 70,4 mg de diazirine 1i (78 %) sous la forme d'une huile incolore. RMN 1H(500 MHz, CDCI3) : 6 = 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 7,01 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 2,49 (d, J = 4,3 Hz, 20 2 H), 1,10 (t, J = 4,3 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 138,0 ; 135,7 ; 131,0 ; 92,4 ; 36,2 ; 21,6. HRMS (ASAP-QTOF) : m/z calculée pour C81-18N21+ [M+H]' : 258,9732 ; trouvée : 258,9732. Acide 3-(3H-diazirin-3-yl)propanoïque (1j) 25 Préparé d'après la procédure générale A en utilisant l'acide L-glutamique (73,6 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (DCM/EtOH 97/3 ; Rf = 0,3) pour fournir 27,6 mg de 30 diazirine 1[ (48 %) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. RMN 1+1 (500 MHz, CDCI3) : 6 = 2,41 (t, J = 73 Hz, 2 H), 1,57 (td, J = 73 et 4,5 Hz, 2 H), 0,98 (t, J = 4,5 Hz, 1 H). RMN 13C(125 MHz, CDCI3) : 6 = 178,7 ; 29,6 ; 25,1 ; 20,6. HRMS (ESl-QTOF) : m/z calculée pour C41-151\1202- [M]- : 113,0351 ; trouvée : 113,0352. 35 27 3((3H-diazirin-3-yl)méthyl)-1-(tert-butoxycarbony1)-indole (1k) N Boc 5 Préparé d'après la procédure générale A en utilisant le 1-(tert-butoxycarbonyl)-L-tryptophane (152,2 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (pentane/AcOEt 98/2 ; Rf 0,3) pour fournir 94,3 mg de diazirine 1k (70 %) sous la forme d'une huile incolore. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 8,15 (s large, 1 H), 7,59 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,53 (s large, 1 H), 7,35 (ddd, J = 8,3 et 7,2 et 0,9 Hz, 1 H), 7,29 (ddd, J = 8,0 et 7,1 et 0,9 Hz, 1 H), 2,62 (dd, J = 4,3 et 0,9 Hz, 10 2 H), 1,19 (t, J = 4,3 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6= 149,8; 135,7; 130,3; 124,8; 123,8 ; 122,8; 119,2; 115,5; 115,1; 83,8 ; 28,3 ; 26,5 ; 21,2. HRMS (ASAP-QTOF) : m/z calculée pour C1sE118N3021[M+H]' : 272,1399 ; trouvée : 272,1398. 15 Benzyl(4-(3H-diazirin-3-yl)butyl)carbamate (11) H Préparé d'après la procédure générale A en utilisant le sel d'acide chlorhydrique de la Nr-benzyloxy 20 carbamate-L-lysine (158,4 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (pentane/AcOEt 4/1 ; Rf = 0,4) pour fournir 111 mg de diazirine 11 (90 %) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6= 7,36-7,35 (m, 4 H), 7,34-7,30 (ni, 1 H), 5,10 (s, 2 H), 3,20 (q, J = 5,5 Hz, 2 H), 1,54 (quin, J = 6,0 Hz, 2 H), 1,37-1,32 (ni, 2 H), 1,28-1,24 (m, 2 H), 0,84 (t, J = 3,5 Hz, 1 H). 25 RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 156,5 ; 136,7 ; 128,7 ; 128,3 ; 66,8 ; 40,9 ; 29,6 ; 29,5 ; 22,5 ; 21,4. HRMS (ESI-QT0F) : m/z calculée pour C131-117N302Na* [M+Na]* 270,1218 ; trouvée : 270,1219. 3-(3H-diazirin-3-yl)-N-éthylpropanamide (1m) 30 0 H Préparé d'après la procédure générale A en utilisant la L-théanine (87 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (pentane/AcOEt 30/70; Rf = 0,3) pour fournir 34 mg de diazirine 1m (48 %) sous la forme d'une huile incolore. N 28 RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 5,69 (s large, 1 H), 3,28 (qd, J = 7,2 et 5,5 Hz, 2 H), 2,14 (t, J = 7,4 Hz, 2 H), 1,58 (td, J = 7,4 et 4,4 Hz, 2 H), 1,13 (t, J = 7,2 Hz, 3 H), 0,95 (t, J = 4,4 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 171,2 ; 34,6 ; 31,6 ; 25,8 ; 20,9 ; 14,9. HRMS (ESI-QT0F) : m/z calculée pour C6H11N3ONa+ [M+Na]* : 164,0800 ; trouvée : 164,0801. 5 Benzyl-3-(3H-diazirin-3-yl)propanoate (ln) 0 10 Préparé d'après la procédure générale A en utilisant l'acide 7-benzyl-L-glutamique (118,6 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (pentane/AcOEt 4/1; R1= 0,7) pour fournir 100 mg de la diazirine in (98 %) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 7,39-7,32 (m, 5 H), 5,15 (s, 2 H), 2,41 (t, J = 7,3 Hz, 2 H), 1,58 (td, J = 7,3 et 4,5 Hz, 2 H), 0,96 (t, J = 4,5 Hz, 1 H). 15 RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 172,3 ; 135,8 ; 128,8 ; 128,5 ; 128,4 ; 66,7 ; 29,9 ; 25,4 ; 20,7. HRMS (ASAP-QTOF) : m/z calculée pour c11ii13N2o2* [m+H]* : 205,0977 ; trouvée : 205,0981. 3-((benzyloxy)méthyl)-3H-diazirine (1o) 20 N Préparé d'après la procédure générale A en utilisant la O-benzyl-DL-sérine (97,6 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (gradient de solvant allant de pentane/AcOEt 3/7 à AcOEt 100 %) pour fournir 43 mg de la diazirine lo (53 %) sous la forme d'une huile orangée. RMN 1H(500 MHz, CDCI3) : 6 = 7,37-7,29 (m, 5 H), 4,54 (s, 2 H), 3,30 (d, J = 4,1 Hz, 2 H), 1,13 (t, J = 4,1 25 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 137,6 ; 128,6 ; 128,1; 127,9 ; 73,0 ; 69,0 ; 20,3. 3-(((tert-butyldiphénylsilyl)oxy)méthyl)-3H-diazirine (1p) Ph 30 tBu. Si N Préparé d'après la procédure générale A en utilisant la O-tert-butyldiphenylsilyl-DL-sérine (171,7 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (gradient de solvant allant de pentane 100 % à pentane/AcOEt 10/1) pour fournir 94 mg de la diazirine ip (60 %) sous la forme d'une huile 35 légèrement jaunâtre. 29 RMN 1H(500 MHz, CDCI3) : 6 = 7,66-7,64 (ni, 4 H), 7,46-7,38 (m, 6 H), 3,52 (d, J = 3,5 Hz, 2 H), 1,05 (s large, 10 H) RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 135,7 ; 133,1 ; 130,0 ; 127,9 ; 62,7 ; 26,8 ; 22,0 ; 19,4. 5 3-(1-((tert-butyldiphénylsilyl)oxy)éthyl)-3H-diazirine (1q) Ph Ou, I Ph" -Or--t,N Préparé d'après la procédure générale A en utilisant la O-tert-butyldiphenylsilyl-L-thréonine 10 (161,0 mg ; 0,45 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (gradient de solvant allant de pentane 100 % à pentane/Et20 100/1) pour fournir 81,0 mg de la diazirine lq (50 %) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 7,71 (d, I = 7,7 Hz, 2 H), 7,65 (d, I = 7,7 Hz, 2 H), 7,45-7,35 (ni, 6 H), 3,59 (dq, J = 6,3 et 3,5 Hz, 1 H), 1,07 (s, 9 H), 0,97 (d, J = 6,4 Hz, 3 H), 0,92 (d, = 3,4 Hz, 1 H). 15 RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 136,0 ; 135,9 ; 134,0 ; 133,6 ; 129,94; 129,88 ; 127,8 ; 127,7 ; 67,7 ; 27,0 ; 26,0 ; 20,4 ; 19,4. 3-(1-(tritylsulfanyl)méthyl)-3H-diazirine (1r) N N 20 Ph Ph Préparé d'après la procédure générale A en utilisant la S-triphénylméthyl-L-cystéine (182 mg, 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (gradient de solvant allant de pentane 100 % à pentane/Et20 100/1) pour fournir 62 mg de la diazirine ir (38%) sous la forme d'un solide 25 légèrement jaunâtre. RMN I-H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 7,40-7,39 (d, 1 = 7,9 Hz, 6 H), 7,29-7,26 (ni, 6 H), 7,21-7,19 (ni, 3 H), 2,00 (d, J = 4,8 Hz, 2 H), 0,65 (t, J = 4,8 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) = 144,5 ; 129,7 ; 128,2 ; 67,0 ; 33,6 ; 20,1. 30 3-(2-(S-méthylsulfonimidoyl)éthyl)-3H-diazirine (1s) O NH \" F, 30 Preparé d'après la procédure générale A avec 6 équivalents de PIDA en utilisant la L-méthionine sulfoxyde (82,6 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (AcOEt/MeOH 95/5 ; Rf = 0,4) pour fournir 73,6 mg de diazirine ls (99 %) sous la forme d'une huile brune. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : d = 3,14-3,10 (m, 2 H), 3,04 (s, 3 H), 1,90 (s large, NH), 1,90-1,74 (m, 2 H), 5 1,11 (t, J= 4,5 Hz, 1 H). RMN 33C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 52,6 ; 43,5 ; 24,2 ; 19,5. Préparation d'une solution d'ammoniac marqué à l'azote 15, à 7 M dans le méthanol (7 M 15NH3 dans le Me0H) 10 A une solution de chlorure d'ammonium enrichi à l'azote 15 (15NH4CI ; 3,814 g; 70 mmol) dans le méthanol anhydre (7,2 mL) à 0 °C, est ajouté le méthanolate de sodium (3,780 g; 70 mmol) en 5 portions sur période de 30 minutes, sous forte agitation magnétique. Le milieu réactionnel est ensuite agité à température ambiante pendant deux heures puis passé à la centrifugeuse à 4500 tours par minute, pendant 10 minutes. Le surnageant est ensuite transféré, sous flux d'argon 15 dans un flacon scellé. Procédure générale (B) pour la synthèse de 15N2-diazirines 2 à partir d'acides aminés 15NH3 (17,5 éq.) HO2C...7( R1 PIDA (3 éq.) H2N H Me0H, 0°C à ta. 2h Dans un Schlenk sous argon contenant l'acide aminé (0,5 mmol ; 1 éq.), est ajoutée la solution 20 d'ammoniac marqué à l'azote 15 (1,25 mL à 7 M dans le méthanol ; 17,5 éq.). Le mélange réactionnel est refroidi à 0°C puis le diacétate d'iodobenzène (1,5 mmol ; 3 éq.) est additionné en une seule portion. Après 30 minutes à 0 T, le bain de glace est retiré et le mélange réactionnel est agité pendant 1h30 à température ambiante. Après conversion totale, le milieu est concentré sous pression réduite puis le brut réactionnel est purifié par chromatographie sur gel de silice pour 25 conduire à la 35N2-diazirine 2. 15N 31 15N2-Diazirines synthétisées (l'acide aminé précurseur est indiqué au-dessus de la formule) : L-tyrosine ou L-histidine L-méthionine sulfoxyde S-Bn-L-cystéine sulfoxyde 4-iodo-L-phénylalanine 15N-L-tyrosine 15NN I I 15N 9 ,, 0 2a 2c 2d 2h 21 acide L-glutamique 15N 15N4 OH 0 2j 0-t-butyldiphénylsilylL-thréonine 15N 15Nt L-méthionine sulfoxyde 15N f"-;% NH 2s L-méthionine sulfoxyde i5N H15N "0 2t Si, _P tBu Ph 2q 151\12-(44(3H-diazirin-3-yl)méthyl)phénol) (2a) 5 OH Préparé d'après la procédure générale B en utilisant la L-tyrosine (90,6 mg ; 0,5 mmol). De l'hydroxyde de potassium (56 mg ; 1 mmol) est ajouté pour permettre une meilleure solubilité. Après 10 purification par chromatographie sur gel de silice (pentane/AcOEt 4/1 ;pf = 0,4), 68 mg de diazirine 2a (91 %) sont obtenus, sous la forme d'une huile brune. RM NI-H(600 MHz, CDCI3) : d = 7,12 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 6,80 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 4,74 (s large, 1 H, OH), 2,49 (d, J = 4,3 Hz, 2 H), 1,10 (tt, J = 4,2 et 2,2 Hz, 1 H). RMN 13C (150 MHz, CDCI3) : 6 = 154,6 ; 130,3 ; 128,3 ;115,7 ; 35,8 ; 22,2 (t, J = 9,3 Hz). 15 RMN 15N (60,8 MHz, CDCI3) : 6 = 445,8 (dt, J = 2,2 et 0,8 Hz, 2 N). HRMS (ASAP-QTOF) : m/z calculée pour C31-1915N2Q- LM+Hr : 151,0656 ; trouvée : 151,0658. Ratio 15N2-diazirine/(15N 14N)-diazirine : 87 % En utilisant la 1:5N-L-tyrosine, le taux de 1:5N2-diazirine est supérieur à 99 %. 20 151\12-(5-((3H-diazirin-3-yl)méthyl)-1H-imidazole) (2c) Préparé d'après la procédure générale B en utilisant la L-histidine (77,6 mg ; 0,5 mmol) puis purifié 25 par chromatographie sur gel de silice (AcOEt/MeOH 95/5; Rf = 0,3) pour fournir 35,4 mg de la diazirine 2c (57%) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. 32 RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 11,4 (s large, 1 H, NH), 7,69 (s, 1 H), 6,96 (s, 1 H), 2,60 (d, J = 4,3 Hz, 2 H), 1,18 (tt, J = 4,2 et 2,5 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 135,2 ; 132,8 ; 116,2 ; 28,3 ; 20,9 (t, J = 9,3 Hz). RMN 15N (50,7 MHz, CDCI3) : 6 = 443,5 (dt, J = 2,5 et 0,8 Hz, 2 N). 5 HRMS (ASAP-QTOF) : m/z calculée pour C5H2N215N21[m+H]' : 125,0611; trouvée : 125,0616. Ratio 15N2-diazirine/(15N-14N)-diazirine : 75%. 151\12-(3-(2-(méthylsulfinynéthyl)-3H-diazirine) (2d) 15N 10 Préparé d'après la procédure générale B en utilisant la L-méthionine sulfoxyde (82,6 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (AcOEt/MeOH 98/2 ; 8f = 0,3) pour fournir 54 mg de la diazirine 2d (80 %) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. 15 RMN 1FI (500 MHz, CDCI3) : 6 = 2,74-2,65 (m, 2 H), 2,61 (s, 3H), 1,83-1,71 (m, 2H), 1,07 (tt, J = 4,2 et 2,2 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 49,6 ; 38,7 ; 23,5 ; 19,9 (t,J= 9,3 Hz). RMN 13N (50,7 MHz, CDCI3) : 6 = 442,3 (dt, J = 2,5 et 0,8 Hz, 2 N). HRMS (ESI-QT0F): m/z calculée pour C4F1815N2OSNa*[M+Na]' : 157,0196 ; trouvée : 157,0197. 20 Ratio 13N2-diazirine/(13N-34..)_ diazirine : 75%. 151\12-(3-(1-(benzykulfinyl)méthyl)-3H-diazirine) (2h) 15N 0 15N" ph 25 Préparé d'après la procédure générale B en utilisant la S-benzyl-L-cystéine sulfoxyde (113,7 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (pentane/AcOEt 1/1 ; 8f = 0,3) pour fournir 49 mg de diazirine 2h (50%) sous la forme d'un solide orange. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 7,42-7,34 (m, 3 H), 7,29-7,27 (m, 2 H), 4,19 et 4,16 (système AB, JAR = 13,1 Hz, 2 H, CH2), 2,53 (dd, J = 14,2 et 4,8 Hz, 1H), 2,40 (dd, J = 14,2 et 4,8 Hz, 1H), 1,32 (tt, J = 4,9 et 30 2,2 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 130,0 ; 129,2 ; 128,9 ; 128,7 ; 57,9 ; 51,2 ; 15,5 (t,1 = 9,3 Hz). RMN 15N (60,8 MHz, CDCI3): 6 = 437,2 (ddt, J = 13,7 et 2,2 et 0,8 Hz), 436,2 (ddt, J = 16,7 et 2,2 et 0,8 Hz). HRMS (ESI-QTOF) : m/z calculée pour C9F11115N2053[M+H]' : 197,0533 ; trouvée : 197,0538. 35 Ratio 15N2-diazirine/(15N-34N)-diazirine : 60 %. 33 151\12-(3-(4-iodobenzy1)-3H-diazirine) (21) 5 Préparé d'après la procédure générale B en utilisant le sel d'acide trifluoroacétique de la 4-iodo-L- phénylalanine (202,6 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (100 % pentane ; Rf 0,6) pour fournir 97,4 mg de diazirine 7 (75 %) sous la forme d'une huile incolore. RMN 1H(500 MHz, CDCI3) : 6 = 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 7,01 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 2,49 (d, J = 4,6 Hz, 2 H), 1,11 - 1,08 (nn, 1 H). 10 RMN (125 MHz, CDCI3) : 6 = 137,9 ; 135,7 ; 131,0 ; 92,4; 36,2; 21,6 (t, = 9.4 Hz). RMN 15N (50,7 MHz, CDCI3) : 6 = 444,4 (dt, J = 2,5 et 0,8 Hz, 2 N). 1S2-(acide 3-(3H-diazirin-3-yl)propanoïque) (2j) 15N 15 0 Préparé d'après la procédure générale B en utilisant l'acide L-glutamique (73,6 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (DCM/EtOH 97/3; Rf = 0,3) pour fournir 28 mg de diazirine 2j (48 %) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. 20 RMN 1H(500 MHz, CDCI3) : 6 = 2,42 (t, J = 7,2 Hz, 2 H), 1,59-1,55 (m, 2 H), 0,99-0,96 (rn, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 178,6 ; 29,6 ; 25,1 ; 20,5 (t, J = 9,2 Hz). RMN 15N (50,7 MHz, CDCI3) : 6 = 443,8 (dt, J = 2,5 et 0,8 Hz, 2 N). 1S2-(3-(1-((tert-butyldiphénylsilynoxy)éthyl)-3H-diazirine)(2q) 25 -15N 15Nin,'....'0'Ph tBu Ph Préparé d'après la procédure générale B en utilisant la O-tert-butyldiphenylsilyl-L-thréonine (178,8 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (gradient de solvant allant de 30 pentane 100 % à pentane/Et20 100/1) pour fournir 77 mg de diazirine 2q (47%) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. RMN 1H(500 MHz, CDCI3) : 6 = 7,71 (d, J = 7,4 Hz, 2 H), 7,65 (d, J = 7,4 Hz, 2 H), 7,46-7,36 (m, 6 H), 3,59 (m, 1 H), 1,07 (s, 9 H), 0,97 (d, J = 6,2 Hz, 3 H), 0,93-0,91 (m, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 136,0 ; 135,9 ; 134,0 ; 133,6 ; 129,95 ; 129,89 ; 127,82 ; 127,75 ; 67,7 ; 35 27,0 ; 25,9 (dd, J = 9,4 et 7,3 Hz); 20,4 ; 19,4. 34 RMN 15N (50,7 MHz, CDCI3) : 6 = 438,3 (ddt, J = 13,9 et 2,9 et 0,8 Hz), 439,8 (ddt, J = 16,8 et 2,9 et 0,8 Hz). 15N2-(3-(2-(S-méthylsulfonimidoyl)éthyl)-3H-diazirine) (2s) 5 15N 0 NH Dans un pilulier contenant la diazirine 2d (20 mg ; 0,15 mmol) en solution dans le méthanol (0,3 mL) à température ambiante, sont ajoutés le carbamate d'ammonium (47 mg ; 0,6 mmol ; 4 éq.) puis le 10 diacétate d'iodobenzène (144 mg ; 0,45 mmol ; 3 éq.) en une seule portion. Le mélange réactionnel est agité pendant 30 minutes à température ambiante. Après conversion totale, le milieu est concentré sous pression réduite puis le brut réactionnel est purifié par chromatographie sur gel de silice (AcOEt/MeOH 95/5 ; Rf = 0,4) pour fournir 19 mg de diazirine sulfoximine 2s (85 %) sous la forme d'une huile brune. 15 RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 3,10 (t, J = 7,7 Hz, 2 H), 3,02 (s, 3 H), 2,05 (s large, NH), 1,88-1,76 (m, 2 H), 1,09 (tt, J = 4,4 et 2,2 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 52,7 ; 43,6 ; 24,3 ; 19,6 (t,J= 9,3 Hz). RMN 15N (50,7 MHz, CDCI3) : 6 = 441,7 (m, 2 N). 20 15N2-(3-(2-(S-méthyli5N-sulfonimidoyl)éthyl)-3H-diazirine) (2t) 15N 15NH s Preparé d'après la procédure générale B avec 6 équivalents de PIDA en utilisant la L-méthionine 25 sulfoxyde (82,6 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (AcOEt/MeOH 95/5 ; Rf = 0,4) pour fournir 75,1 mg de diazirine 2t (99 %) sous la forme d'une huile brune. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 3,10 (t, J = 7,7 Hz, 2 H), 3,02 (s, 3 H), 2,05 (s large, NH), 1,88-1,76 (m, 2 H), 1,09 (tt, J = 4,4 et 2,2 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 52,7 (d, J = 3,1 Hz, 1 C); 43,6 (d, J = 4,3 Hz, 1 C); 24,3 ; 19,6 (t, J = 9,3 30 Hz, 1 C). RMN 15N (50,7 MHz, CDCI3) : 5 = 441,7 (m, 2 N), 92,4 (m, 1 N). 35 Procédure générale (C) pour la synthèse des N-tert-butyl imines 3 0 NH2 (4 eq.) NiBu Rij"L R2 R R2 MgSO4, Toluène, 2 h, ta A une suspension de tert-butyl amine (4 éq.) dans le toluène anhydre (1,1 mL) contenant 500 mg de sulfate de magnésium anhydre, est ajouté par portion ou au goutte à goutte le dérivé carbonylé 5 (1 éq.) sur une période de 20 minutes. La solution est alors agitée pendant 2 heures à température ambiante. Après conversion totale, le milieu est filtré sur fritté et le résidu est lavé au chloroforme, puis le solvant est évaporé sous pression réduite pour fournir l'imine 3. N-tert-butyl-1-(4-nitrophényl)méthanimine (3a) H 02N Préparé d'après la procédure générale C en utilisant le p-nitrobenzaldéhyde (1000 mg ; 6,62 mmol) pour fournir 1,305 g de l'imine 3a (96 %) sous la forme d'un solide jaune. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 8,33 (s, 1 H), 8,26 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 7,92 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 1,32 (s, 15 9 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 153,1 ; 130,6 ; 128,8 ; 124,5 ; 123,9 ; 29,6 ; 27,8. HRMS (ASAP-QTOF) : m/z calculée pour C11l-115N202+ [(V1+Hr :207,1134 ; trouvée : 207,1133. acide 4-(tert-butylimino)pentanoïque (3b) 20 N'iBu OH 0 Préparé d'après la procédure générale C en utilisant l'acide 4-oxopentanoïque (1000 mg ; 8,61 mmol) pour fournir 1,474 g de l'imine 3b (99 %) sous la forme d'une poudre beige. 25 RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 7,55 (s large, 1 H, OH), 2,67 (t, J = 6,8 Hz, 2 H), 2,40 (t, J = 6,8 Hz, 2 H), 2,14 (s, 3 H), 1,30 (s, 9 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 208,8 ; 179,0 ; 50,7 ; 40,0 ; 32,1 ; 30,2 ; 28,1. HRMS (ESl-QTOF) : mfr calculée pour C91-137NO2Na+ [M+Na]' : 194,1157 ; trouvée : 194,1155. 10 36 Procédure générale (D) pour la synthèse de diazirines 4 à partir des N-tert-butyl imines NIIII;Bu R1 R2 NH3 (17,5 éq.) PIDA (3 éq.) NR1 m. >(' Me0H, 0°C à t.a. N R2 2h Dans un Schlenk sous argon contenant la N-tert-butyl imine (0,5 mmol, 1 éq.), est ajoutée la solution d'ammoniac (1,25 mL à 7 M dans le méthanol, 17,5 éq.). Le mélange réactionnel est refroidi à 0 °C 5 puis le diacétate d'iodobenzène (1,5 mmol, 3 éq.) est additionné en une seule portion. Après 30 minutes à 0 °C, le bain de glace est retiré et le mélange réactionnel est agité pendant 1h30 à température ambiante. Après conversion totale, le milieu est concentré sous pression réduite puis le brut réactionnel est purifié par chromatographie sur gel de silice pour fournir la diazirine 4. 10 3-(4-nitrophényl)-3H-diazirine (4a) N=N H 02N Préparé d'après la procédure générale D en utilisant l'imine 3a (103,2 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par 15 chromatographie sur gel de silice (pentane/AcOEt 95/5; Rf = 0,3) pour fournir 66 mg de la diazirine 4a (80 %) sous la forme de cristaux orangés. RMN 1H(500 MHz, CDCI3) : 6 = 8,19 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 7,07 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 2,19 (s, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 147,6 ; 143,6 ; 125,9 ; 123,6 ; 23,1. 20 Acide 3-(3-méthyl-3H-diazirin-3-yl)propanoïque (4b) N=N H 0 Préparé d'après la procédure générale D en utilisant l'imine 3b (85,6 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par 25 chromatographie sur gel de silice (DCM/MeOH 95/5 ; Rf = 0,3) pour fournir 64 mg de diazirine 4b (99 %) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. RMN 1H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 2,24 (t, J = 7,7 Hz, 2 H), 1,72 (t, J = 7,7 Hz, 2 H), 1,05 (s, 3 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 178,0 ; 29,8 ; 29,3 ; 25,4 ; 19,8. HRMS (E5I-QT0F) : m/z calculée pour C5H7N202- [M]- : 127,0508 ; trouvée : 127,0513. 30 37 Procédure générale (E) pour la synthèse de 15N2-diazirines 5 à partir des N-tert-butyl imines 113u 15NH3 (17,5 éq.) PIDA (3 éq.) 15N R1 N R1 R2 R2 MeOH, 0°C à ta. 2h Dans un Schlenk sous argon contenant la N-tert-butyl imine (0,5 mmol ; 1 éq.), est ajoutée la solution d'ammoniac marqué à l'azote 15 (1,25 mL à 7M dans le méthanol ; 17,5 éq.). Le mélange réactionnel 5 est refroidi à 0°C puis le diacétate d'iodobenzène (1,5 mmol ; 3 éq.) est additionné en une seule portion. Après 30 minutes à 0°C, le bain de glace est retiré et le mélange réactionnel est agité pendant 1h30 à température ambiante. Après conversion totale, le milieu est concentré sous pression réduite puis le brut réactionnel est purifié par chromatographie sur gel de silice pour fournir la diazirine 5. 10 15N2-(3-(4-nitrophényI)-3H-diazirine) (5a) NO2 H 15 Préparé d'après la procédure générale E en utilisant l'imine 3a (103,2 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (pentane/AcOEt 95/5; Rf , 0,3) pour fournir 53 mg de la diazirine Sa (64 %) sous la forme de cristaux orangés. RMN 1H (600 MHz, CDCI3) : 6 = 8,19 (d, J = 7,5 Hz, 2 H), 7,07 (d, J = 7,5 Hz, 2 H), 2,19 (t, J = 2,2 Hz, 1 H). RMN 13C (150 MHz, CDCI3) : 6 = 147,7 ; 143,7 (t, J = 1,2 Hz), 126,0 ; 123,7 ; 23,2 (t, J = 9,0 Hz). 20 RMN 15N (60,8 MHz, CDCI3) : 6 = 422,0 (d, J= 2,2 Hz). 151\12-(Acide 3-(3-méthy1-3H-diazirin-3-yl)propanoïque) (56) 0 15Ner OH 25 Préparé d'après la procédure générale E en utilisant l'imine 3b (85,6 mg ; 0,5 mmol) puis purifié par chromatographie sur gel de silice (DCM/MeOH 95/5; R1= 0,3) pour fournir 22,4 mg de diazirine Sb (30 %) sous la forme d'une huile légèrement jaunâtre. RMN 1H (600 MHz, CDCI3) : 6 = 9,52 (s large, 1 H), 2,23 (tt, J = 7,8 et 2,2 Hz, 2 H), 1,71 (t, J = 7,8 Hz, 2 30 H), 1,05 (t, J = 0,8 Hz, 3 H). RMN 13C (150 MHz, CDCI3) = 178,5 ; 29,5 (t, J = 1,5 Hz, 1 C); 28,6 ; 25,2 (t, J = 10,5 Hz, 1 C) ; 19,8 (t, J= 1,5 Hz, 1 C). 38 RMN 15N (60,8 MHz, CDCI3) : 6 = 464,2. Utilisation des diazirines selon l'invention en marquage par photoaffinité La diazirine la, issue de la tyrosine, a été solubilisée dans le méthanol puis soumise à une irradiation 5 UV (360 nm) pendant une durée de 16h. Le carbène généré in-situ est alors directement piégé par le solvant de réaction, le méthanol, pour conduire à l'éther 6a (voir figure ci-dessous) avec une conversion totale. Cette réaction démontre que les diazirines de la présente invention sont utilisables en marquage par 10 photoaffinité. Les sondes moléculaires sont généralement des molécules complexes, possédant des groupements particuliers tels que des marqueurs fluorescent ou des groupements possédant une affinité particulière avec leur cible biologique. Ainsi, les inventeurs ont montré que les diazirines selon 15 l'invention pouvaient être facilement fonctionnalisées. La diazirine la a donc réagit avec le tert-butyl bromoacétate pour conduire à l'ester 7, ensuite rapidement hydrolysé pour obtenir un acide carboxylique 8. hv (360 nm) CH, OH H3 HO ri, 16 h HO full conversion la 6a BrCH2CO2IBu K2CO3, KI, CH3CN rt, 16 h, 99% 20 Synthèse de 6a : Dans un ballon monocol de 5 mL, sous argon, contenant la diazirine la (30 mg ; 0,2 mmol) est ajouté 0,4 mL de méthanol anhydre. La solution est agitée sous irradiation à 365 nm (Rayonet) pendant 16 h à température ambiante. L'analyse RMN 1+1 confirme une conversion totale, avec l'apparition de signaux correspondants à l'éther 6a. 25 Synthèse de 7 tBu-O O 8 BuO O 39 A une solution de diazirine la (0,5 mmol) dans l'acétonitrile (1,5 mL), sont introduits successivement le carbonate de potassium (0,75 mmol), l'iodure de potassium (15 mol%) puis goutte à goutte le bromoacétate de tert-butyle (0,625 mmol). Le milieu réactionnel est agitée pendant 24 h à température ambiante, dilué avec de l'eau distillée puis extrait avec de l'acétate d'éthyle. La phase 5 organique est séchée sur sulfate de magnésium puis filtrée. Après évaporation sous vide, la diazirine 7 est obtenue (131 mg ; 99 %) sous la forme d'une huile orangée. RMN I-H (500 MHz, CDCI3) : 6 = 7,18 (d, J = 7,0 Hz, 2 H), 6,86 (d, J = 7,0 Hz, 2 H), 4,51 (s, 2 H), 2,49 (d, J = 3,5 Hz, 2 H), 1,49 (s, 9 H), 1,09 (t, J = 3,5 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : 6 = 168,2 ; 157,1 ; 130,1; 129,1 ; 115,0 ; 82,5 ; 65,9 ; 35,9 ; 28,2 ; 22,2. 10 HRMS (ESII : m/z calculée pour Ci4H18N203Na+ [M+Na]' : 285,1215 ; trouvée : 285,1216. Synthèse de 8 HO,r, 15 0 A une solution de diazirine 7 (0,4 mmol) dans le dichlorométhane (1 mL) est ajouté, goutte à goutte, l'acide trifluoroacétique (1 mL). Après agitation magnétique du milieu réactionnel pendant 1 h à température ambiante, celui-ci est évaporé puis le résidu est dissout dans l'éther diéthylique. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium puis filtrée. Après évaporation, la diazirine 8 20 (82 mg ; 99 %) est obtenue sous forme d'un solide beige. RMN 1+1 (500 MHz, CDCI3) = 7,20 (d, J = 8,7 Hz, 2 H), 6,90 (d, J = 8,7 Hz, 2 H), 4,68 (s, 2 H), 2,51 (d, J = 4,4 Hz, 2 H), 1,10 (t, = 4,4 Hz, 1 H). RMN 13C (125 MHz, CDCI3) : Ô= 173,4 ; 156,5 ; 130,3 ; 129,8 ; 115,1 ; 65,0 ; 35,8 ; 22,1. HRMS (ES11 : m/z calculée pour C1oH3N203 [M-H]- : 205,0613 ; trouvée : 205,0603. REVENDICATIONS1. Procédé de synthèse en un seul pot d'une diazirine, dans laquelle les atomes d'azotes correspondent chacun indépendamment l'un de l'autre à l'isotope 14N ou à l'isotope 15N, à partir d'un acide aminé ou d'une imine, comprenant la réaction de l'acide aminé ou de l'imine avec de l'ammoniac de formule 14NH3 ou 15NH3 et un oxydant contenant un atome d'iode hypervalent. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la diazirine correspond à la formule (I) suivante : R1 R2 (I) ou un sel ou un solvate physiologiquement acceptable de celle-ci, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, dans laquelle les atomes d'azotes correspondent chacun indépendamment l'un de l'autre à l'isotope 14N ou à l'isotope 15N, dans laquelle R1 représente H, V, W ou V-W où : V représente une chaîne aliphatique où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), 5, 5(0), 5(0)2, NR' ou Si ; V est éventuellement substitué avec 1 à 12 groupements sélectionnés parmi OH, NR'R", halogènes, CN, oxo, (=NR') ou aryle, W représente un cycloalkyle, un aryle, un hétérocycle ou un hétéroaryle; W est éventuellement substitué par 1 à 4 groupements sélectionnés parmi les halogènes, CN, NO2, OH, NR'R", une chaîne aliphatique, où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), S, 5(0), S(0)2, NR' ou Si, R' et R" représentent chacun indépendamment l'un de l'autre H ou une chaîne aliphatique, où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), S, S(0), S(0)2, NR' ou Si , et R2 représente H ou une chaîne (CLCio)aliphatique, où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), 5, 5(0), 5(0)2, NR' ou Si, préférablement R2 représente H ou un groupement alkyle, préférablement un méthyle, ledit procédé comprenant les étapes suivantes : 41 (a) Réaction d'un composé de formule (II) suivante : A ou d'un sel ou d'un solvate physiologiquement acceptable de celui-ci, d'un stéréoisomère ou d'un 5 mélange de stéréoisomères en toutes proportions, dans lequel A représente NH2, l'atome d'azote correspondant à l'isotope 14N ou à l'isotope 1:5N, et B représente COOH et RI- et R2 sont tels que définis ci-dessus, ou A-B forme un seul et même groupement imine de formule =NR3, et R3 représente une chaîne aliphatique, un cycloalkyle ou un aryle ; dans lequel jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne 10 aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), S, S(0), 5(0)2, NR' ou Si, et dans lequel ledit aryle est éventuellement substitué par 1 à 4 groupements sélectionnés parmi les halogènes, CN, NO2, OH, NR'R" ou une chaîne aliphatique telle que défini ci-dessus, de préférence R3 représente un groupement benzyle, tosyle, cyclohexyle, un hydroxyle ou un groupement alkyle, préférablement R3 est un groupement tert-butyle ou un groupement tosyle. 15 avec un oxydant comprenant un atome d'iode hypervalent de formule (III) suivante : Y X dans lequel X représente un (C1-Cio)alkyle, un aryle ou un hétéroaryle; X étant optionnellement substitué par 1 à 12 groupements sélectionnés parmi OH, NR'R", halogènes, CN, oxo, (=NR') ou aryle, préférablement X représente un aryle, de préférence phényle, et 20 Y et Z représentent indépendamment l'un de l'autre OH, un halogène, NH2, CN, un groupement (C1- C20)alkyle, ((Q.-C10)alkyle)-aryle, ((Q.-Clo)alkyle)-hétéroaryle, où jusqu'à 4 unités méthylènes dudit alkyle sont optionnellement remplacées par O, C(0), 5(0)2 ou NH, préférablement Y et Z sont identiques et encore plus préférablement Y et Z représentent un groupement acétate de formule 0- C(0)-C H3, 25 l'oxydant étant avantageusement le diacétate d'iodobenzène (PIDA), et en présence d'ammoniac 14NH3 ou 15N H3, dans un solvant de réaction à une température comprise entre 0°C et la température ambiante, le solvant de réaction étant préférablement choisi parmi les alcools, de préférence le méthanol, 42 (b) Purification de la diazirine de formule (I) obtenue à l'étape (a), avantageusement par chromatographie ou distillation. 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que la source d'ammoniac est de 5 l'ammoniac pur gazeux ou liquide ou de l'ammoniac en solution dans un solvant, préférablement de l'ammoniac en solution dans un solvant, ledit solvant étant avantageusement du méthanol. 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le composé de formule (11) est un acide aminé de formule (lia) suivante : H2N COOH 10 ou un sel ou un solvate physiologiquement acceptable de celle-ci, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, dans lequel l'atome d'azote de la fonction amine lié au carbone portant également la fonction acide 15 carboxylique COOH, correspond soit à l'isotope IAN soit à l'isotope 151\1, et RI est tel que défini dans la revendication 2. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'il comprend une étape préliminaire de protection du composé (lia), en particulier du composé (lia) dans lequel R1 comprend un groupement 20 OH, NH2, C(0)NH2, C(0 )0 H, SH, un cycle indole ou un atome S, avantageusement R1 correspond à la chaîne latérale des acides aminés suivants : l'arginine, la lysine, la sérine, la thréonine, la méthionine et la cystéine. 6. Procédé selon la revendication 4 ou 5, caractérisé en que le composé (lia) correspond aux acides 25 aminés suivants : acide L-aspartique, L-asparagine, L-glutamine, L-glycine, L-alanine, L-valine, L-isoleucine, bleucine, L-phénylalanine, L-tryptophane, 4-méthyl-L-phénylalanine, L-Histidine, L-tyrosine, acide L-glutamique et aux acides aminés protégés suivants : Ns-Acétyl-L-lysine, NE-benzyloxycarbamate-L-lysine, L-méthionine sulfoxyde, S-trityl-L-cystéine, S-benzyl-L-cystéine, O-benzyl-DL-sérine, O-tert-butyldiphénylsilyl-DL-sérine, O-tert-butyldiphénylsilyl-DL-thréonine, 30 1-(tert-butoxycarbonyI)-L-tryptophane, 4-iodophényl-alanine, L-théanine, acide y-benzyl-Lglutamique, de préférence, le composé (lia) correspond aux acides aminés L-Histidine, L-tyrosine, acide L-glutamique. 43 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le composé de formule (11) correspond à une imine de formule (11b) suivante : R3 R2 (11b) 5 ou un sel ou un solvate physiologiquement acceptable de celle-ci, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, dans lequel R1, R2 et R3 sont tels que définis dans la revendication 2. 8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que l'imine de formule (11b) est obtenue à 10 partir d'un composé carbonylé de formule (IV) suivante : o Ri R2 (iv) ou un sel ou un solvate physiologiquement acceptable de celle-ci, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, 15 dans lequel R1 et R2 sont tels que définis dans la revendication 2, comprenant la réaction du composé carbonylé de formule (IV) avec une amine de formule (V) suivante : R3-NH2 (V) dans laquelle R3 est tel que défini à la revendication 2. 20 9. Procédé de synthèse d'ammoniac enrichi à l'azote-15, de formule 151\1H3, comprenant les étapes suivantes : (a') réaction du chlorure d'ammonium enrichi à l'azote-15 de formule 15NH4C1 avec un alcoolate de formule R"O-L dans l'alcool anhydre correspondant R"OH, où 25 Rx correspond à un groupement alkyle, préférablement un groupement C1-C5alkyle, plus préférablement R" est un méthyle, et L est un contre-ion choisi parmi Na', r et Lit de préférence Na', 44 (b') optionnellement, élimination du sel L-CI formé, avantageusement par centrifugation, le chlorure d'ammonium enrichi à l'azote 15 et l'alcoolate Rx0-L étant avantageusement utilisés en quantité équivalente, et ledit procédé ayant lieu de préférence à une température comprise entre 0°C et la température 5 ambiante. 10. Diazirines issues d'acides aminés susceptibles d'être obtenues par le procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, avantageusement les diazirines répondant aux formules suivantes : HO 0 S'-''''''''tN N 'N \ .,N ....- H N lb lc ld la N yIOI H2N O O H2N ,N N Ph N H N le 1f 1g 1h 11 0 Ph0 H H 0)"---N O lj li O H lpN 10 1m Ph \N tBu, OSi O Ph Oi%--"'tN ln 10 Ph N t 0 NH au, I / ., Ph"Si S,...'."-N -",0"--",N Pli- I e.."''N N Ph N lq lr ls 11. Diazirine de formule (I') suivante : 15 ou un sel physiologiquement acceptable de celui-ci, un stéréoisomère ou un mélange de stéréoisomères en toutes proportions, dans laquelle : R1 représente H, V, W ou V-W où : 45 V représente une chaîne aliphatique où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), 5, 5(0), 5(0)2, NR' ou Si ; V est éventuellement substitué avec 1 à 12 groupements sélectionnés parmi OH, NR'R", halogènes, CN, oxo, (=NR') ou aryle, 5 W représente un cycloalkyle, un aryle, un hétérocycle ou un hétéroaryle; W est éventuellement substitué par 1 à 4 groupements sélectionnés parmi les halogènes, CN, NO2, OH, NR'R", une chaîne aliphatique, où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), S, 5(0), S(0)2, NR' ou Si, R' et R" représentent chacun indépendamment l'un de l'autre H ou une chaîne aliphatique, 10 où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), 5, S(0), 5(0)2, NR' ou Si , et R2 représente H ou une chaîne aliphatique, où jusqu'à 4 unités méthylènes de la chaîne aliphatique sont optionnellement remplacées par O, C(0), S, 5(0), S(0)2, NR' ou Si, préférablement, R1 correspond à la chaîne latérale d'acides aminés et R2 représente H, 15 de préférence, les diazirines de formule (I') répondent aux formules suivantes : OH 15N 4 NH 15 m /ri\ I I5N15N 1 h5N P O 2c 2d 2h 15N 2a 5N 15N _Ph itBu Ph 0"'NH 2q 2s '5N NO2 O 5b isN OH 2i 15N 2t O 2j 5a 12. Utilisation des diazirines selon l'une quelconque des revendications 10 ou 11 en marquage par photoaffinité. 13. Utilisation des diazirines selon la revendication 11 en hyperpolarisation. 20