Brevet FR3097231A1 — publié le 20201218

Description Titre de l'invention : Nouvelle souche de bactéries du genre Stenotro- phomonas, matériau comprenant ces bactéries et leurs utilisations pour la décontamination en uranium(VI) d'eaux et d'effluents aqueux Domaine technique [0001] L'Invention se rapporte au domaine de la décontamination en uranium(VI) d'eaux et d'effluents aqueux. [0002] Plus spécifiquement, elle se rapporte à une nouvelle souche de bactéries du genre Sienntrophottinnas, à un matériau comprenant des bactéries de cette souche immobilisées dans des matrices poreuses et à l'utilisation desdites bactéries ou dudit matériau pour décontaminer en uranium(VI) des eaux ou des effluents aqueux. [0003] L'invention présente un intérêt tout particulier pour bioremédier une eau contaminée en uranium(VI) telle que l'eau de cours d'eau, de plans d'eau, naturels ou artificiels, ou de nappes phréatiques, soit du fait de leur proximité avec une exploitation minière d'uranium soit en raison d'un déversement accidentel de matières ou d'effluents contenant de l'uranium. [0004] Toutefois, elle peut également être utilisée pour décontaminer un effluent aqueux issu d'activités d'extraction et/ou de traitement de minerais uranifères du type uraninite, monazite pechblende, coffinite, etc, ou de minerais de phosphates contenant de l'uranium. État de la technique antérieure [0005] La bioremédiation est l'utilisation d'organismes vivants et, notamment, de bactéries pour dépolluer ou décontaminer un milieu (air, sol, eau, sédiments) ayant été pollué ou contaminé par des activités humaines. [0006] Par rapport aux traitements physico-chimiques de dépollution et de décontamination, la bioremédiation présente de nombreux avantages dont ceux d'être basée sur des processus naturels puisqu'elle utilise la capacité que présentent naturellement certains organismes vivants à éliminer ou transformer les matières organiques ou inorganiques, d'être par conséquent respectueuse de l'environnement, de pouvoir être mise en oeuvre in situ et d'avoir un coût de mise en oeuvre bien inférieur à celui des traitements physico-chimiques. [0007] Concernant la bioremédiation par des bactéries de milieux contaminés en uranium(VI), un certain nombre de types d'interactions susceptibles de se produire entre des bactéries et l'uranium(VI) ont été déciits dans la littérature parmi lesquels on 2 peut citer : - la bioréduction qui consiste en une réduction enzymatique par les bactéries de 1'uranium(V1) soluble en uranium(IV) insoluble, en présence de composés physiologiques donneurs d'électrons (acétate, lactate, éthanol, ...) et dans des conditions anoxiques ; - la biosorption qui englobe à la fois l'adsorption de l'uranium(VI) à la surface des bactéries et l'absorption de 1'uranium(V1) par les bactéries ; et - la biominéralisation, ou bioprécipitation, qui consiste en une précipitation de l'uranium(VI) sous la forme de complexes inorganiques insolubles, par exemple des phosphates d'uranium(V1), dont la formation est catalysée par une activité enzymatique des bactéries, par exemple une activité phosphatase. [0008] Une revue détaillée de ces types d'interactions a été publiée par M.L. Merroun et S. Selenska-Pobell dans Journal of Contaminant Hydrology 2008, 102, 285-295. [0009] Des souches bactériennes qui sont capables de faire précipiter l'uranium(VI) sous la forme de phosphates d'uranium(VI) via une activité phosphatage et qui présentent en même temps une haute tolérance à l'uranium(VI) ont déjà été décrites dans la littérature. [0010] Ainsi, à titre d'exemples, on peut citer la souche Citrobacter sp. N14 qui est utilisée dans la demande internationale PCT WO-A-94/22770, les souches appartenant aux genres Bacillus et Rahnella qui ont été testées par R.J. Martinez et al. dans Environmental Microbiology 2007,9, 3122-3133, et la souche Stenotrophotnonas maltophilia JG-2 qui a été testée par M.L. Men-oun et S. Selenska-Pobell (Journal of Contaminant Hydrology 2008, 102, 285-295). [0011] Devant l'enjeu majeur que représente la bioremédiation d'eaux contaminées en uranium(VI), tant sur le plan écologique que sanitaire, les Inventeurs ont considéré qu'il serait souhaitable d'augmenter le panel de souches bactériennes aptes à être utilisées pour bioremédier des eaux contaminées en uranium(VI) et, par là même, d'identifier de nouvelles souches bactériennes ayant des propriétés adaptées à une bioremédiation. Exposé de l'invention [0012] L'invention vise justement à proposer, en premier lieu, une nouvelle souche de bactéries qui sont dotées à la fois d'une capacité remarquable à immobiliser l'uranium(VI), principalement par bioprécipitation sous la forme de phosphates d'uranium(VI), et d'une très haute tolérance à l'uranium(VI). [0013] Il s'agit de la souche Stenotrophomonas sp. Br8 qui a été déposée auprès de la Colecci6n Espaiiola de Cultivos Tipo sous le numéro d'accession CECT 9810. [0014] La Coleccién Espar-101a de Cultivos Tipo est une autorité de dépôt internationale 3 selon le Traité de Budapest sur la reconnaissance internationale du dépôt des microorganismes aux fins de la procédure en matière de brevets, dont l'adresse est : Edificio 3 CUE - Parc Cientffic Univcrsitat de Valencia - Cateditico Agustfn Escardino, 9 - 46980 Patcrna (Valencia) - Espagne. [0015] Cette souche a été isolée à partir d'échantillons d'eaux interstitielles qui ont été prélevés à proximité du site de stockage de résidus du traitement de minerais d'uranium du Brugeaud (France). [0016] On rappelle que les bactéries appartenant au genre Stenoirophornonas sont des y- protéobactéries, à Gram-négatif et aérobies. [0017] Pour un usage de micro-organismes en général et de bactéries en particulier à des fins de bioremédiation, il a été montré dans la littérature que l'immobilisation de ces micro- organismes présente de nombreux avantages dont, notamment, ceux de réduire l'espace nécessaire à la réalisation de la bioremédiation, de faciliter les opérations de transport et de manipulation, de permettre une utilisation répétée des micro-organismes, de mieux préserver leur intégrité cellulaire dans des conditions limitantes et de conférer aux biominéraux produits par les micro-organismes une stabilité à long terme. [0018] Différentes techniques d'immobilisation ont été proposées : l'adsorption sur un support via des interactions physiques (par exemple, de type électrostatiques) ou chimiques (par exemple, de type liaisons covalentes), la réticulation covalente par l'utilisation de composés réticulants, tels que le glutaraldéhyde, ainsi que différentes techniques que l'on regroupe sous le terme d'encapsulation et dont fait partie l'immobilisation dans une matrice poreuse. [0019] C'est cette dernière technique d'immobilisation qui a été retenue dans le cadre de l'invention. [0020] Aussi, l'invention a-t-elle également pour objet un matériau qui comprend des bactéries de la souche Stenotrophomonas sp. Br8 immobilisées dans des matrices poreuses. [0021] Conformément à l'invention, les matrices poreuses sont avantageusement en un polymère, lequel peut être naturel ou synthétique. [0022] Toutefois, on préfère que ce polymère soit un polymère naturel et, plus précisément, un alginate. [0023] Selon une disposition particulièrement préférée de l'invention, le matériau se présente sous la forme de billes. [0024] Dans ce cas, le matériau peut avantageusement être obtenu par un procédé comprenant les étapes consistant à : a) mélanger les bactéries, par exemple sous la forme d'une suspension en milieu liquide, avec une solution aqueuse d'un alginate ; b) mettre en forme, sous une forme de gouttes, le mélange obtenu à l'étape a) dans une solution aqueuse comprenant des cations divalents, moyennant quoi on obtient des billes formées d'un hydrogel comprenant l'alginate et les bactéries ; c) laisser les billes durcir dans la solution aqueuse comprenant les cations divalents ; et d) récupérer les billes ayant durci. [0025] La solution aqueuse d'alginate est, par exemple, une solution aqueuse d'un alginate de sodium tandis que la solution aqueuse comprenant les cations divalents est, par exemple, une solution aqueuse de chlorure de calcium. [0026] Lorsque la solution aqueuse d'alginate est une solution aqueuse d'un alginate de sodium, alors celle-ci comprend avantageusement de 1 % à 5 % (m/v), de préférence de 2 % à 4 % (m/v) et, mieux encore, 4 % (m/v) d'alginate de sodium. [0027] Conformément à l'invention, l'étape b) de mise en forme peut être réalisée en faisant tomber goutte à goutte, par exemple au moyen d'une seringue munie d'une aiguille, le mélange obtenu à l'étape a) dans la solution aqueuse comprenant des cations divalents. [0028] La bioprécipitation de l'uranium(VI) sous la forme de phosphates d'uranium(VI) par des bactéries est liée à la capacité de ces bactéries à rnédier, via l'activité phosphatasc qu'elles présentent, la conversion de phosphates organiques en ions phosphates (P043), lesquels vont réagir avec les ions uranyle (U0,2+) présents en solution aqueuse pour former des phosphates d'uranium(VI) insolubles dans l'eau. [0029] Il est donc souhaitable que les bactéries disposent d'une source de phosphate(s) organique(s) pour pouvoir immobiliser l'uranium(VI) par bioprécipitation. [0030] Aussi, le matériau peut-il comprendre de plus, en vue de son utilisation pour dé- contaminer une eau ou un effluent aqueux en uranium(VI), au moins un phosphate organique dispersé dans les matrices poreuses. [0031] Ce phosphate organique est avantageusement un phosphate de glycérol tel que le glycérol 2-phosphate ou le glycérol 3-phosphate, préférence étant donnée au glycérol 2-phosphate. [0032] Auquel cas, si le matériau se présente sous la forme de billes et si ces billes sont obtenues par le procédé décrit ci-avant, le phosphate organique peut être ajouté aux bactéries et/ou à la suspension aqueuse d'alginate préalablement à l'étape a) ou au cours de l'étape a). [0033] L'invention a encore pour objet l'utilisation de bactéries de la souche Stenotro- phomonas sp. Br8 ou d'un matériau tel que précédemment défini pour décontaminer une eau ou un effluent aqueux en uranium(VI). [0034] Cette utilisation comprend, de préférence, les étapes consistant à : i) former un milieu réactionnel par mise en contact des bactéries ou du matériau avec l'eau ou l'effluent aqueux et, éventuellement, au moins un phosphate organique si le matériau ne comprend pas de phosphate organique, sous air et sous agitation ii) maintenir le milieu réactionnel sous air et sous agitation, moyennant quoi il se forme des précipités de phosphates d'uranium(V1) ; et iii) récupérer les précipités de phosphates d'uranium(V1) s'étant formés à l'étape ii). [0035] Comme précédemment, lorsqu'un phosphate organique est présent dans le milieu ré- actionnel, alors ce phosphate organique est avantageusement un phosphate de glycérol tel que le glycérol 2-phosphate ou le glycérol 3-phosphate avec, là également, une préférence pour le glycérol 2-phosphate. [0036] Ce phosphate de glycérol est, de préférence, présent dans le milieu réactionnel à une concentration allant de 2 à 10 mmol/L et, mieux encore, de 4 à 6 mmol/L. [0037] Conformément à l'invention, les étapes i) et ii) sont, de préférence, réalisées dans un réacteur ouvert à l'atmosphère et comprennent la fourniture d'air au milieu réactionnel à la fois par l'atmosphère au contact de laquelle se trouve cc milieu et par l'agitation de cc milieu. [0038] Pour une mise en oeuvre du procédé à une échelle industrielle, le réacteur peut, par exemple, être un bassin à ciel ouvert qui est muni d'agitateurs flottants. [0039] D'autres caractéristiques et avantages de l'invention ressortiront du complément de description qui suit, qui se rapporte à des expérimentations ayant permis de valider l'invention et qui est donné en référence aux figures annexées. [0040] Il va de soi toutefois que ce complément de description n'est donné qu'à titre d'illustration de l'objet de l'invention et ne doit en aucun cas être interprété comme une limitation de cet objet. Brève description des figures [0041] [fig.1] illustre le pourcentage d'uraniurn(VI), noté %U, ayant été immobilisé par des bactéries Stcnotrophomonas sp. Br8, notées Br8, au cours d'une incubation de 48 heures dans une solution aqueuse synthétique comprenant 0,5 mmol/L d'uranium(VI) et du glycérol 2-phosphate (G2P) ; à titre de comparaison, sont également indiqués sur cette figure les %U obtenus dans les mêmes conditions opératoires pour trois autres souches bactériennes, notées Be18, Br5 et BN5-6, ainsi que pour un contrôle abiotique, noté CA. [0042] [fig.2] est une image prise au microscope électronique en transmission à balayage (STEM), à un grandissement de 57 000 x, d'une cellule bactérienne Stenotrophomonas sp. Br8, vue en coupe, après une incubation de 48 heures dans une solution aqueuse synthétique comprenant 0,5 mmol/L d'uranium(VI) et du G2P. [0043] [fig.3] illustre les pourcentages d'uranium(VI), notés %U, ayant été immobilisé par des bactéiies Stenotrophomonas sp. Br8 mortes, au cours d'une incubation de 48 heures dans deux solutions aqueuses synthétique comprenant respectivement 0,1 mmol/L d'uranium(VI) (solution notée sol. A2) et 1 mmol/L d'uranium(VI) 6 (solution notée sol. A3) ainsi que du G2P à titre de comparaison, est également illustré sur cette figure le %U obtenu dans les mêmes conditions opératoires pour des bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 vivantes, ayant été mises à incuber dans la solution A2. [0044] [fig.4] illustre les pourcentages d'uranium(VI), notés %U, ayant été immobilisé par des bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 au cours d'incubations d'une durée allant de 1,5 heure à 30 jours dans une eau naturelle (C0MI79) provenant d'une exploitation minière d'uranium, additionnée ou non de 02P ; à titre de comparaison, sont également montrés sur cette figure les %U obtenus dans les mêmes conditions opératoires pour des contrôles abiotiques, notés CA. [0045] [fig.5] est une image prise au microscope électronique à balayage à effet de champ (FESEM), à un grandissement de 169 x, d'une bille d'alginate, vue en perspective, chargée en bactéries Stenotrophomonas sp. Br8. [0046] [fig.6] est une image prise au FESEM, à un grandissement de 8 000 x, de la bille montrée sur la figure 5 mais vue en coupe. [0047] [fig.7] illustre les pourcentages d'uranium(VI), notés %U, ayant été immobilisé par des billes d'alginate chargées en bactéries Stenotrophomonas sp. Br8, notées alginateBr8, au cours d'incubations, respectivement de 20 heures et de 96 heures, dans une solution aqueuse synthétique comprenant 0,3 mmol/L d'uranium(VI) et du 02P ; à titre de comparaison, sont également montrés sur la figure 7 les %U obtenus dans les mêmes conditions opératoires pour des contrôles abiotiques, notés CA. [0048] [fig.8] illustre les pourcentages d'uranium(VI), notés %15, ayant été immobilisé par des billes d'alginate chargées en bactéries Stenotrophomonas sp. Br8, notées alginateBr8, au cours d'incubations allant de 10 minutes à 48 heures dans de l'eau C0MI79, additionnée de 02P ou de tripolyphosphate de sodium (STPP) ; à titre de comparaison, sont également montrés sur la figure 8 les %U obtenus dans les mêmes conditions opératoires pour des bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 ayant été mises à incuber dans de l'eau COMI79 additionnée de 02P ainsi que pour des tests abiotiques réalisés avec de l'eau COMI79 additionnée de STPP. [0049] [fig.9] illustre une image partielle prise au microscope électronique en transmission à balayage en champ sombre annulaire grand angle (STEM - HAADF), à un grandissement de 21 000 x, d'une coupe mince d'une bille d'alginate chargée en bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 telle qu'obtenue après une incubation de 48 heures dans de l'eau COMI79 additionnée de 02P. [0050] [fig.10] est une autre image partielle prise au STEM-HAADF, à un grandissement de 80 000 x, de la coupe mince montrée sur la figure 9. Description des modes de réalisation 7 [0051] Tous les tests décrits ci-après sont réalisés dans des erlenmeyers en verre préa- lablement lavés à l'acide nitrique et rincés à l'eau distillée. [0052] I - Mise en évidence de l'aptitude des bactéries Stenotrophomonas sp . Br8 à immobiliser l'uranium(VI) [0053] 1.1 - Tests réalisés sur des solutions aqueuses synthétiques d'uranium(VI) * Comparaison avec d'autres souches bactériennes [0054] Des tests sont réalisés pour vérifier l'aptitude des bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 à immobiliser l'uranium(VI) présent dans une solution aqueuse synthétique d'uranium(VI) et à la comparer avec celle d'autres souches bactériennes ayant également une activité phosphatage, à savoir Variovorav sp. Bel 8, Ilificrobacterium oxydans Br5 et Ralstonia sp. BN5-6. [0055] Pour ce faire, chaque souche de bactéries est mise à incuber dans un échantillon de 20 mL d'une solution aqueuse Al comprenant 0,5 mmol/L d'uranium(VI) (apporté sous la forme de nitrate d'uranyle) et 5 mmol/L de glycérol 2-phosphate (02P - apporté sous la forme de son sel disodique pentahydraté - Sigma-Aldrich), à raison d'environ l0 UFC/mL de solution aqueuse Al (UFC = Unités Formant Colonie). [0056] L'incubation dure 48 heures et est réalisée à 28°C, sous agitation continue (145-154 rpm) pour assurer une oxygénation des milieux d'incubation. [0057] Un contrôle abiotique est également réalisé en maintenant, pendant 48 heures, un échantillon de 20 mL de solution aqueuse Al à 28°C et sous agitation continue (145-154 rpm). [0058] Au terme des 48 heures d'incubation, tous les échantillons (suspensions bactériennes et contrôle abiotique) sont soumis à une centrifugation (15 000 rpm, 10 min 4°C). [0059] Les culots bactériens et les surnageants sont récupérés et la concentration de Furanium(VI) dans les surnageants est mesurée par spectrophotométrie (2,'1). = 651 nm) au moyen de la méthode Arsenazo III. [0060] Pour chaque souche bactérienne testée et pour le contrôle abiotique, le pourcentage d'uranium(VI) ayant été immobilisé, noté %U, est déterminé en appliquant la formule (I) suivante : %u QA1' 100 (i) Q-Al 100611 dans laquelle : 100621 Q. correspond à la quantité d'uranium(VI) présent dans le surnageant, 100631 Qu correspond à la quantité d'uranium(V1) initialement présent dans l'échantillon de solution aqueuse Al. 100641 Les résultats de ces tests sont présentés sur la figure 1 qui indique les %U pour chacune des souches bactériennes testées (notées Br8, Be18, Br5 et BN5-6) et pour le contrôle abiotique (noté CA). 8 [0065] Cette figure montre que plus de 90 % de l'uranium( I) initialement présent dans l'aliquote de solution aqueuse Al dans lequel les bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 ont été mises à incuber ont été immobilisés par ces bactéries. [0066] Elle montre également que l'incubation des autres souches bactériennes dans les aliquotes de solution aqueuse Al n'a conduit qu'à une très faible immobilisation de r uranium(VI), voire à une immobilisation de l'uranium(VI) identique à celle obtenue pour le contrôle abiotique dans le cas de Microbacteriutnoxydatzs Br5. [0067] Ceci signifie que les bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 présentent, d'une part, une activité phosphatase et, d'autre part, une tolérance à l'uranium(VI) qui sont très supérieures à celles des autres souches bactériennes testées. * Localisation cellulaire de l'uratziutn(VI) immobilisé par les bactéries Stenotrophomonas Br8 [0068] Les culots de Stenotrophomonas sp. Br8 ayant été récupérés à l'issue des tests ci- avant sont rincés avec une solution tampon cacodylate de sodium (pH 7,2) et les bactéries sont soumises à un examen au microscope électronique en transmission à balayage (STEM). [0069] Comme illustré par la figure 2, cet examen montre la présence de précipités d'uranium, en concentration très élevée, sur la paroi cellulaire de ces bactéries, signant une immobilisation de l'uranium(VI) par bioprécipitation. [0070] Les précipités sont formés de phosphates d'uranium(VI) dont la structure chimique est similaire à celle de l'autunite et de la méta-autunite. * Impact de I 'état des bactéries Stenotrophomonas sp Br8 sur leur aptitude à immobiliser l'uranium (VI) [0071] Des tests complémentaires sont réalisés pour vérifier si une immobilisation de l'uranium(VI) par les bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 est encore possible lorsque ces bactéries sont mortes et n'ont donc plus d'activité phosphatase ou présentent une activité phosphatase minime. [0072] Ces tests sont réalisés en suivant un protocole opératoire analogue à celui décrit ci- avant mais en incubant des bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 mortes dans des échantillons de deux solutions aqueuses d'uranium(VI) synthétiques, respectivement A2 et A3, la solution aqueuse A2 comprenant 0.1 mmol/L d'uranium (VI) et la solution aqueuse A3 comprenant 1 mmol/L d'uranium(VI). Les solutions A2 et A3 comprennent de plus 5 mmol/L de 02P. [0073] À titre de comparaison, un test est également conduit dans les mêmes conditions opé- ratoires avec des bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 vivantes dans un échantillon de solution aqueuse A2. [0074] Là également, les échantillons sont centrifugés au terme des 48 heures d'incubation (15 000 rpm. 10 min. 4°C), la concentration de l'uranium(VI) dans les surnageants est 9 mesurée par spectrophotométrie (kb' = 651 nm) au moyen de la méthode Arscnazo et le pourcentage d'uranium(VI) ayant été immobilisé, noté %U, est déterminé en appliquant la formule (I) ci-avant. [0075] Les résultats de ces tests sont illustrés sur la figure 3. [0076] Cette figure montre qu'un peu plus de 50 % de l'uranium(VI) initialement présent dans l'échantillon de solution aqueuse A2 ont été immobilisés par les bactéries mortes, ce qui laisse à penser que, si l'immobilisation de l'uranium(VI) par les bactéries Stenotro-phomonas sp. Br8 relève principalement d'un processus de bioprécipitation, il existerait également un processus passif de biosorption de l'uranium(VI) par ces bactéries. [0077] 1.2 - Tests réalisés sur une eau naturelle provenant d'une exploitation minière d'uranium [0078] Des tests sont réalisés pour vérifier l'aptitude des bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 à immobiliser l'uranium(VI) présent dans une eau naturelle provenant d'une exploitation minière d'uranium. [0079] Cette eau, dénommée ci-après eau COMI79, a été prélevée sur le site minier de la Compagnie Minière d'Akouta (COMINAK) au Niger. [0080] Sur site, elle présente une température de 34,6-34,7cC, un pH de 6,82, un état rcdox de -60,9 mV, une conductivité électrique de 3 357 pS/cm et elle comprend 6,22 mg/L d'oxygène dissous. [0081] Sa composition quantitative et qualitative, telle que déterminée par spectrométrie de masse par plasma à couplage inductif (ICP-MS), est présentée dans le tableau I ci-après, dans lequel les valeurs indiquées correspondent aux moyennes obtenues à partir de 3 échantillons et sont exprimées en parties par billion en masse (ppbm). [0082] [Tableaux 1] Smential Un estso-Festre Be e 0,09-±-0,0e Sç 4,96 ±/0,83e VU 5,78 ±{1,44e Cre _ ,29e MnU 29,8-±1,2PS Co e 0, _ ete 6,61 _ 19,70,-1-8,5e Zne 14, Mu .+.0,13e Vu 5-±,0,01e e cdu .-e-cou 0,0 Sn- Sbe 0,00e -34,22'±'1,16e 0,00e Phe Be noou The 0. _ AB [0083] Les bactéries Stenotrophon onas sp. Br8 sont mises à incuber dans une série d'échantillons de 20 mL d'eau C0MI79, additionnée ou non de 5 mmol/L de 02P, à raison d'environ 10>' UFC/mL d'eau COM179. [0084] Les incubations durent 1,5 heure, 24 heures, 48 heures, 9 jours, 21 jours et 30 jours et sont réalisées à 35°C (pour que ces incubations se déroulent dans des conditions de température analogues à celles que présente l'eau C0MI79 sur site), sous agitation continue (145-154 rpm) pour assurer une oxygénation des milieux d'incubation. [0085] Pour chacune des durées d'incubation, un contrôle abiotique est également réalisé en maintenant un échantillon d'eau C0MI79 additionnée de 02P à 35°C et sous agitation continue (145-154 rpm). [0086] Au terme des durées d'incubation, tous les échantillons sont centrifugés (15 000 rpm, 10 min, 4°C). Les culots bactériens sont récupérés et les cellules bactériennes sont rincées avec une solution tampon cacodylate de sodium (pH 7,2). [0087] La concentration de l'uranium(VI) dans les surnageants est mesurée par spectropho- tométrie (X, = 651 nm) au moyen de la méthode Arsenazo III et le pourcentage d'uranium(VI) ayant été immobilisé, noté %U, est déterminé en appliquant la formule 11 (I) ci-avant. [0088] Les résultats sont illustrés sur la figure 4 qui indique les %U obtenus pour les bactéries ayant été mises à incuber dans les échantillons d'eau C0MI79 non additionnée de 02P (notées Br8 sur la figure 4), pour les bactéries ayant été mises à incuber dans les échantillons d'eau C0M179 additionnée de 02P (notées Br8 + 02P sur la figure 4) et pour les contrôles abiotiques (notés CA sur la figure 4) en fonction de la durée d'incubation. [0089] Cette figure montre qu'en présence d'un phosphate organique, les bactéries Stenotro- phornotzas sp. Br8 sont capables d'immobiliser en 24 heures plus de 90% de r uranium(VI) présent dans un échantillon d'une eau naturelle provenant d'une exploitation minière d'uranium. [0090] Elle montre également que cette capacité à immobiliser l'uranium(VI) est stable sur au moins une période de 30 jours. [0091] Les bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 ayant été récupérées et rincées à l'issue de ces tests sont analysées au microscope électronique en transmission à balayage en champ sombre annulaire grand angle (STEM - HAADF). Ces analyses montrent la présence de précipités d'uranium sur la paroi cellulaire de ces bactéries et dans le milieu extracellulaire, confirmant ainsi une immobilisation de l'uranium(VI) par bioprécipitation et le rôle clé des ions phosphates dans cette immobilisation. [0092] II - Mise en évidence de l'aptitude de matériaux comprenant des bactéries Stenotrophomonas sp . Br8 dans des billes d'alginate à immobiliser l'uranium(VI) 11.1 - Préparation des matériaux [0093] On prépare des matériaux comprenant des bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 dans des billes d'alginate en procédant comme suit : 1) on prépare tout d'abord une solution aqueuse à 2%, 3% ou 4% (m/v) d'alginate de sodium en dissolvant, sous agitation magnétique, une poudre d'alginate de sodium (PanReac) dans de l'eau distillée ; 2) on stérilise la solution ainsi obtenue à l'autoclave ; 3) on mélange 10 niL de la solution ainsi stérilisée avec 1 niL d'une suspension comprenant environ 109-10w/mL de bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 ayant été fraîchement cultivées (milieu de culture LB - IBI Scientific), préalablement rincées deux fois avec une solution aqueuse à 0,9 % de chlorure de sodium (NaC1) pour débarrasser les bactéries des résidus du milieu de culture et remises en suspension dans une solution aqueuse à 0,9 % de NaCl; 4) on met en forme, sous la forme de gouttes, le mélange ainsi obtenu dans une solution aqueuse qui est sous agitation magnétique et qui comprend 0,3 mol/L de chlorure de calcium (CaCb), moyennant quoi on obtient des billes gélatineuses ; cette 12 mise en forme est réalisée au moyen d'une seringue de diamètre interne allant de 0,3 mm à 0,6 mm et dont l'embout est situé à environ 20 cm de la surface de la solution aqueuse de CaCI, ; 5) on laisse les billes gélatineuses durcir dans la solution de CaCI, pendant 1 heure à 2 heures ; et 6)on récupère les billes durcies, on les lave avec une solution aqueuse à 0,9 % de NaCI et on les conserve dans une solution aqueuse à 0,9 % de NaC1 en attente d'une utilisation. [0094] Les billes ainsi obtenues mesurent en moyennent de 1,5 mm à 2 mm de diamètre. [0095] Ces billes sont examinées au microscope électronique à balayage à effet de champ (FESEM). [0096] À titre d'exemple, des images obtenues pour une bille ayant été préparée avec une solution aqueuse à 2 % d'alginate de sodium, respectivement vue en perspective et en coupe, sont illustrées sur les figures 5 et 6. [0097] La figure 5 montre que cette bille présente une sphéricité quasi parfaite et une surface d'une grande régularité tandis que la figure 6 montre que la distribution des cellules bactériennes dans la bille est très homogène et que le nombre de cellules bactériennes apparaissant comme saines est très élevé. [0098] 11.2 - Tests réalisés sur des solutions aqueuses synthétiques d'uranium(VI) [0099] Des tests sont réalisés pour vérifier l'aptitude de billes d'alginate chargées en bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 à immobiliser l'uranium(VI) présent dans une solution aqueuse synthétique d'uranium(VI). [0100] Pour ce faire, des billes obtenues au point 11.1 ci-avant à partir d'une solution aqueuse d'alginate de sodium à 3 % sont mises à incuber dans des échantillons de 10 int d'une solution aqueuse A4 comprenant 0,3 mmol/L d'uranium(VI) et 5 rmnol/L de 02P, à raison d'une bille/mL de solution aqueuse A4. [0101] Les incubations durent 20 hem-es et 96 heures et sont réalisées à 28°C, sous agitation continue (145-154 rpm) pour assurer une oxygénation des milieux d'incubation. [0102] Pour chacune des durées d'incubation, un contrôle abiotique est également réalisé en maintenant, à 28°C et sous agitation continue (145-154 ipm), des billes d'alginate identiques aux précédentes à ceci près qu'elles ne contiennent pas de bactéries Stenotrophomonas sp. Br8. [0103] Au terme des durées d'incubation, tous les échantillons sont soumis à une filtration, la concentration de l'uranium(VI) dans les filtrats est mesurée par spectrophotométrie (i.'bs = 651 nm) au moyen de la méthode Arsenazo III et le pourcentage d'uranium(VI) ayant été immobilisé, noté %Il, est déterminé en appliquant la formule (I) ci-avant. [0104] Les résultats des tests sont illustrés sur la figure 7 qui indique les %U obtenus pour les billes d'alginate chargées en bactéries Stenotrophotnonas sp. Br8 (notées alginate- 13 Br8 sur la figure 7) et pour les contrôles abiotiques (notés alginate-CA sur la figure 7) en fonction de la durée d'incubation. [0105] Cette figure montre que des billes d'alginate chargées en bactéries Stemm-0- phornotzas sp. Br8 sont capables d'immobiliser en 96 heures plus de 90% de r uranium(VI) initialement présent dans l'échantillon de solution aqueuse A4. [0106] Elle montre de plus que l'immobilisation de l'uranium(VI) par les billes d'alginate est bien liée à la présence des bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 dans ces billes puisqu'aucune immobilisation n'est observée pour des billes d'alginate exemptes de bactéries. [0107] 11.3 - Tests réalisés sur une eau naturelle provenant d'une exploitation minière d'uranium [0108] Des tests sont réalisés pour : - d'une part, vérifier l'aptitude de billes d'alginate chargées en bactéries Stenotrophornotzas sp. Br8 à immobiliser l' uranium(VI) présent dans une eau naturelle provenant d'une exploitation minière d'uranium, en l'espèce l'eau COM179 dont les caractéristiques ont été évoquées au point 1.2 ci-avant ; - d'autre part, apprécier la cinétique de cette immobilisation et la comparer à celle d'une immobilisation par des bactéries Stenotrophonzonas sp. Br8 planctoniques, c'est-à-dire non incluses dans des billes d'alginate ; et - enfin, apprécier l'impact sur cette immobilisation de l'utilisation d'un phosphate organique par rapport à celle d'un phosphate inorganique. [0109] Pour ce faire, des billes obtenues au point 11.1 ci-avant à partir d'une solution aqueuse d'alginate de sodium à 4 % sont mises à incuber dans une série d'échantillons de 50 mL d'eau C0MI79 additionnée de 5 mmol/L de 02P ou de tripolyphosphate de sodium (STPP), à raison d'une 1 bille/mL d'eau C0MI79. [0110] Les incubations durent 10 minutes, 1 heure, 1,5 heure, 7 heures, 20 hem-es, 24 heures et 48 hem-es et sont réalisées à 28°C, sous agitation continue (145-154 rpm) pour assurer une oxygénation des milieux d'incubation. [0111] Parallèlement, des bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 sont également mises à incuber dans les mêmes conditions opératoires dans une série d'échantillons de 50 mL d'eau C0MI79, additionnée de 5 mmol/L de 02P, à raison d'environ 10k UFC/mL d'eau C0MI79. [0112] Pour chaque durée d'incubation, un test abiotique est de plus réalisé en maintenant un échantillon de 50 mL d'eau C0MI79, additionnée de STPP, à 28°C et sous agitation continue (145-154 rpm). [0113] Au terme des durées d'incubation, les échantillons comprenant les billes d'alginate sont soumis à une filtration tandis que les échantillons comprenant les bactéries planctoniques ainsi que les échantillons abiotiques sont soumis à une centrifugation (15 000 14 rpm, 10 min, 4°C). [0114] La concentration de l'uranium(VI) dans les filtrats et les surnageants est mesurée par spectrophotométrie (ka,' = 651 nm) au moyen de la méthode Arsenazo III et le pourcentage d'uranium(VI) ayant été immobilisé, noté %U, est déterminé en appliquant la formule (I) ci-avant. [0115] Les résultats de ces tests sont illustrés sur la figure 8 qui indique les %U obtenus pour : - les billes d'alginate chargées en bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 ayant été mises à incuber dans les échantillons d'eau C0MI79 additionnée de G2P (notées alginate-Br8 + 02P sur la figure 8) ; - les billes d'alginate chargées en bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 ayant été mises à incuber dans les échantillons d'eau C0MI79 additionnée de STPP (notées alginate-Br8 + STPP sur la figure 8) ; - les bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 planctoniques ayant été mises à incuber dans les échantillons d'eau C0MI79 additionnée de 02P (notées Br8 + 02P sur la figure 8) ; et - les tests abiotiques (notés STPP sur la figure 8). [0116] Cette figure montre qu'en présence de 02P, la cinétique d'immobilisation de r uranium(VI) est plus lente pour les billes d'alginate chargées en bactéries Stenotrophornotzas sp. Br8 que celle observée pour les bactéries planctoniques niais que le taux d'immobilisation obtenu pour les billes d'alginate chargées en bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 rejoint progressivement, au fur et à mesure que la durée d'incubation augmente, celui obtenu pour les bactéries planctoniques, lequel est de presque 100 % après 48 heures d'incubation. [0117] Elle montre également qu'en présence de STPP, le taux d'immobilisation de l'uranium(VI) par les billes d'alginate chargées en bactéries Stenotrophomonas sp. Br8, qui est aux alentours de 25 % dans la première heure d'incubation, diminue au fur et à mesure que la durée d'incubation s'allonge. De manière similaire, le taux d'immobilisation de l'uranium(VI) observé pour les tests abiotiques, qui se situe initialement entre 25 % et 30 %, chute à partir de la 7'i" heure d'incubation pour n'être plus de 15 % environ à la 20ème heure d'incubation et de 10 % environ à la 48'i'e heure d'incubation. Ceci pourrait être lié au fait qu'en présence d'un phosphate inorganique, l'uranium précipite dans un premier temps puis se resolubilise. [0118] En tout état de cause, la figure 8 met clairement en évidence l'intérêt d'utiliser un phosphate organique plutôt qu'un phosphate inorganique lorsque l'on souhaite utiliser des bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 ou un matériau les comprenant pour décontaminer une eau ou un effluent aqueux en uranium(VI). [0119] Des billes d'alginate chargées en bactéries Stenotrophomonas sp. Br8 ayant été mises à incuber pendant 48 heures dans de l'eau C0M179 additionnée de 02P sont examinées, après rinçage avec une solution aqueuse à 0,9 % de NaC1, sont examinées au STEM - HAADF. [0120] Comme le montrent les figures 9 et 10, des précipités de phosphate d'uranium(VI) sont présents à la surface des billes, notée S, ainsi qu'à l'intérieur des billes, notamment sur la paroi cellulaire des bactéries, notées Br8, mais aucun précipité n'est visible dans le milieu intracellulaire de ces bactéries, ce qui signe la haute tolérance à I' uranium(VI) de la souche Stenotrophomonas sp. Br8. Références citées [0121] M.L. Merroun et S. Selenska-Pobell, Journal of Contaminant Hydrology 2008, 102, 285-295 Demande internationale PCT WO-A-94/22770 R.J. Martinez et al., Environnzental Microbiology 2007, 9, 3122-3133 16 [Revendication 1] [Revendication 2] [Revendication 3] [Revendication 4] [Revendication 5] [Revendication 6] [Revendication 7] [Revendication 8] [Revendication 9] [Revendication 10] [Revendication 11] [Revendication 12] REVENDICATIONSSouche Stenotrophomonas sp. Br8 déposée auprès de la Colecci6n Espatiola de Cultivos Tipo sous le numéro d'accession CECT 9810. Matériau, qui comprend des bactéries d'une souche selon la revendication 1, immobilisées dans des matrices poreuses. Matériau selon la revendication 2, dans lequel les matrices sont en un polymère. Matériau selon la revendication 3, dans lequel le polymère est un alginate. Matériau selon la revendication 4, qui se présente sous la forme de billes. Matériau selon la revendication 5, qui est obtenu par un procédé comprenant les étapes consistant à : a) mélanger les bactéries avec une solution aqueuse d'un alginate ; b) mettre en forme, sous une forme de gouttes le mélange obtenu à l'étape a) dans une solution aqueuse comprenant des cations divalents, moyennant quoi on obtient des billes formées d'un hydrogel comprenant l'alginate et les bactéries ; c) laisser les billes durcir dans la solution aqueuse comprenant les cations divalents ; et d) récupérer les billes ayant durci. Matériau selon la revendication 6, dans lequel la solution aqueuse d'alginate est une solution aqueuse d'un alginate de sodium et la solution aqueuse comprenant des cations divalents est une solution aqueuse de chlorure de calcium. Matériau selon la revendication 7, dans lequel la solution aqueuse d'alginate de sodium comprend de 1 % à 5 % (in/v) et, de préférence, de 2 % à 4 % (m/v) d'alginate de sodium. Matériau selon l'une quelconque des revendications 4 à 8, qui comprend de plus un phosphate organique. Matériau selon la revendication 9, dans lequel le phosphate organique est un phosphate de glycérol, de préférence le glycérol 2-phosphate. Utilisation de bactéries d'une souche selon la revendication 1 ou d'un matériau selon l'une quelconque des revendications 2 à 10 pour décontaminer une eau ou un effluent aqueux en uranium(VI). Utilisation selon la revendication 11, qui comprend les étapes consistant : 17 [Revendication 13] [Revendication 14] [Revendication 15] [Revendication 16] [Revendication 17] i) former un milieu réactionnel par mise en contact des bactéries ou du matériau avec l'eau ou l'effluent aqueux et, éventuellement, au moins un phosphate organique si le matériau ne comprend pas de phosphate organique, sous air et sous agitation ; ii) maintenir le milieu réactionnel sous air et sous agitation, moyennant quoi il se forme des précipités de phosphates d'uranium(VI) ; et iii) récupérer les précipités de phosphates d'uranium(VI) s'étant formés à l'étape ii). Utilisation selon la revendication 12, dans laquelle le phosphate organique est un phosphate de glycérol, de préférence le glycérol 2-phosphate. Utilisation selon la revendication 13, dans laquelle le milieu réactionnel comprend de 2 mmol/L à 10 mmol/L et, de préférence, de 4 mmol/L à 6 mmol/L du phosphate de glycérol. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 12 à 14, dans laquelle les étapes i) et ii) sont réalisées dans un réacteur ouvert à l'atmosphère et comprennent la fourniture d'air au milieu réactionnel à la fois par l'atmosphère au contact de laquelle se trouve cc milieu et par l'agitation de cc milieu. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 11 à 15, dans laquelle l'eau à décontaminer en uranium(VI) est l'eau d'un cours d'eau, d'un plan d'eau ou d'une nappe phréatique. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 11 à' 15, dans laquelle l'effluent aqueux à décontaminer en uranium(VI) est un effluent aqueux issu d'activités d'extraction et/ou de traitement de minerais uranifères ou de minerais de phosphates contenant de l'uranium.