Brevet FR3078782A1 — publié le 20190913

DESCRIPTION DE L'INVENTION TITRE PROCÉDÉ POUR L'OBTENTION D'UN INDICATEUR ÉLÉMENTAIRE DE LA RÉSILIENCE DE POPULATIONS BACTÉRIENNES ET AZOTOBACTÉRIENNES DU SOL ET SON APPLICATION À LA FERTILISATION RAISONNÉE DOMAINE TECHNIQUE DE L'INVENTION Analyses biologique et/ou physico-chimique des sols arables, et fertilisation raisonnée des cultures agronomiques. Accessoirement, il est aussi question de microbiologie des sols et de biofertilisation par inoculation azotobactérienne. ÉTAT DE LA TECHNIQUE Bien qu'a priori les pH plutôt neutres (6,5 à 7,5) soient favorables aux azotobactéries, et plus particulièrement aux Azotobacteraceae (eg. Martyniuk et Martyniuk 2003), ils ne favorisent pas nécessairement l'efficacité de la fertilisation azotobactérienne (Claude et Fillion 2004). Au contraire (voir par exemple ici, Figure 6). Celle-ci dépend plutôt de la résilience acidobasique des populations azotobactériennes indigènes (cf. EP2730926). Plus les populations indigènes d'azotobactéries sont résilientes, moins l'azotobactérisation de la résidusphère, y compris par inoculation, aura d'effets sur rendements agronomiques. Une précédente invention (EP2730926) permet d'apprécier cette résilience acidobasique des azotobactéries indigènes confrontées à variations intra-saisonnières de pH à hauteur de l'acidité échangeable du sol, soit approximativement la différence pHeau - pHKci, ou ApH (lire « delta pH »). Cependant, EP2730926 ne décrit pas comment quantifier précisément cette résilience. En effet, EP2730926 ne propose que de superposer des courbes dites fixes et variables fonction de comprenant un intervalle de confiance (ic), et de graduer la résilience azotobactérienne par rapport à l'angle, 0, entre ces courbes fixes et variables. Si la courbe dite variable s'écarte significativement de la courbe fixe en raison d'un angle, 0, important, les populations bactériennes indigènes sont dites peu ou pas résilientes. Le cas échéant, le renforcement de ces populations par azotobactérisation des résidus de culture est préconisé. Rien de plus. Or ce ApH affecte bel et bien l'efficacité de fazotobactérisation (eAZB) des résidus de culture (Claude et Fillion 2004 ; EP2730926), mais en l'état est difficilement intégrable à titre indicateur élémentaire d'eAZB dans le cadre d'une véritable fertilisation azotobactérienne raisonnée (FAR ; EP17196251.7). 2 DIVULGATION DE L'INVENTION Problème technique 5 Faute d'un indice élémentaire quantitatif, et malgré l'avancé que représente EP2730926, il est aujourd'hui difficile d'évaluer objectivement la résilience acidobasique des populations azotobactériennes indigènes d'un sol arable. En effet, EP2730926 ne propose pas véritablement un tel indicateur élémentaire facilement intégrable dans une démarche de fertilisation azotobactérienne raisonnée (FAR ; cf. EP17196251.7). 10 Solution technique La solution technique proposée consiste à quantifier cette résilience à l'aide d'un indicateur élémentaire (iSAB), et plus facilement obtenable que l'indice déjà proposé dans EP2730926). 15 Concrètement, il s'agit d'une méthode de fertilisation raisonnée adaptée à l'azotobactérisation (AZB) des résidus de culture cellulosiques au sol (RCS) et de cultures intermédiaires pièges à nitrates (cipan) comportant un indicateur élémentaire de la résilience de la fraction bactérienne de la microflore d'un sol arable en termes de diversité, d'activité et/ou d'abondance lorsque confrontée à des variations de pH du sol environnant ne nécessitant plus (pas) (a) l'échantillonnage de 20 chaque parcelle agricole, (b) la mesure de la dynamique de la fraction bactérienne du sol en termes de diversité, d'activité et/ou d'abondance à différentes valeurs de pH correspondant à l'étendue de l'acidité échangeable et/ou (c) la comparaison de cette mesure de la dynamique bactérienne avec des valeurs optimales pour ce sol arable, sachant que ; 25 la mesure de la résilience est obtenue par superposition de la courbe décrivant cette variation de la dynamique de ladite fraction bactérienne de la microflore du sol en fonction des susdites différentes valeurs de pH imposées in vitro (courbe variable), à une autre courbe fixée horizontalement (courbe fixe) à partir d'un pH optimal pour ladite dynamique bactérienne en termes de diversité, d'activité et/ou d'abondance, relative ou absolue, 30 mais plutôt caractérisée en ce que l'indicateur élémentaire, iSAB, est obtenu directement à l'aide de relations préétablies, à savoir ; - une première relation [ApH :: pH] représentant quantitativement la défiance acidobasique 35 du sol, DEF, définie comme le ratio entre l'amplitude de l'acidité échangeable (ApHo - ApHn) et le ApH (Figure 1) associée au pHo (ApHo) obtenu par la dérivée première égale à 0,00 pour la susdite relation [ApH :: pH] (Figure 1), - une deuxième relation ngaBAC :: pH représentant quantitativement la résilience acidobasique des azotobactéries indigènes du sol, RES, définie comme le ratio entre le ApH effectif (ApHe) et ApHi (Figure 2), ApHe étant repérable dès que ngaBAC est appréciablement affectée par ApH lorsque le minimum d'une certaine l'intervalle de confiance (ic) de la susdite courbe fixe croise (intersecte) le maximum de l'ic de la susdite courbe variable au point « pi », 3 - la superposition, graphique ou mathématique, par rapport à ApHi = [pHeau - pHKcI], de ces deux relations - DEF et RES (Figure 3), afin d'obtenir la différence iSAB = [DEF - RES] (Figure 4) à titre d'indicateur élémentaire du degré de résilience acidobasique des populations azotobactériennes indigènes du sol, 5 - et enfin l'intégration d'iSAB dans un indice agrégé d'eAZB (Figures 5 et 6) servant au calcul des doses prévisionnelles d'engrais azotés (dN) adaptées au fonctionnement de telles azotobactérisation des résidus de culture cellulosiques en fertilisation raisonnée (Figure 7). 10 La première relation [ApH :: pH] représentant quantitativement la défiance acidobasique du sol, DEF, est obtenue préalablement à l'aide de valeurs pH du sol, avantageusement le pHeau afin d'assurer un ApH mesurable (ApHi), prélevées à travers le temps ou résultant de différentes pratiques culturales (eg. Edmeades et al. 1983), ou encore provenant de variations spatiales répertoriées dans diverses bases de données existantes (eg. BDAT (INRA-GisSol 2018), NCSS 15 (NCSS 2018)). DEF est exprimée par rapport à ApHi selon la relation DEF = ai + bi.ApHi (Figure 3), sachant qu'à ce stade les coefficients ai et bi peuvent appartenir à une gamme de valeurs comprises entre (Tableau 2) 1,60 et 2,00 pour ai et -1,15 et -1,65 pour La deuxième relation, [ngaBAC pH] représentant quantitativement la résilience acidobasique des 20 azotobactéries indigènes du sol, RES, lesdites intervalles de confiance (ic) sont fonctions des variations des valeurs de pH et de la dynamique des population azotobactérienne (ngaBAC) correspondante selon l'équation tirée de Wonnacott et Wonnacott (1991, éq. 12-13, p. 438) ; ic = (a + bX.) +/- to,o25 - s - racine(1/n + [(X. - X)2/ X2]) 25 25 lorsque que (a + bX0) décrit empiriquement la progression d'ngaBAC selon X0 = pH à partir de pHo (voir les deux droites divergentes aux Figures 2, 3 et 4), to,025 est la valeur critique de la statistique t lorsque les ddl (degrés de liberté) = nombre d'observations moins 1, s est l'écart-type et (X0 - X)2 la somme des carrés des différences entre X0 et la moyenne X pour les n observations. RES est 30 exprimée par rapport à ApHi selon la relation RES = a2 + b2.ApHi (Figure 3), sachant qu'à ce stade les coefficients a2 et b2 peuvent appartenir à une gamme de valeurs comprises entre (Tableau 2) 0,003 et 0,027 pour a2 et 0,315 et 0,365 pour b2. La superposition, graphique ou mathématique, par rapport à ApHi = [pHeau - pHKcI], de ces deux 35 relations - DEF et RES (Figure 3), afin d'obtenir la différence iSAB = [DEF - RES] (Figure 4) à titre d'indicateur élémentaire du degré de résilience acidobasique des populations azotobactériennes indigènes du sol donne lieu à une famille de relations iSAB fonctions de ApHi selon le type de situations agronomiques, types de sols, localisation géographique de la parcelle ou toutes autres caractéristiques agro-pédo-climatiques pouvant affecter le statut acidobasique (SAB) du sol. iSAB, 40 est exprimé par rapport à ApHi selon la relation iSAB = a3 + b3.ApHi (Figure 4), sachant qu'à ce 4 stade les coefficients a3 et b3 pouvent appartenir à une gamme de valeurs comprises entres (Tableau 2) 1,75 et 1,85 pour a3 et -1,72 et -1,80 pour b3. Enfin, l'intégration d'iSAB dans un indice agrégé d'eAZB (Figures 5 et 6) servant au calcul des 5 doses prévisionnelles d'engrais azotés (dN) adaptées à l'azotobactérisation des résidus de culture (Figure 7) ce fait comme suit (cf. EP17196251.7) ; iAZB = Z(Si x Pi) pour les i = 1, 2, 3 ... -> nombre d'indicateurs (n), y compris iSAB 10 Si étant ici le score normalisé (base 100 ou 1,00) de l'indicateur élémentaire affectant eAZB, et Pi le poids (0,00 à 1,00) attribué à ce score, pAZB est ici en sorte la contribution (fourniture) en N des microorganismes phytogènes du sol, y compris ceux réintroduits par l'inoculation, et en ce que dN fonction de l'indicateur agrégé, iAZB, obtenu par agrégation des indicateurs élémentaires d'eAZB est calculé comme suite ; 15 dN = a x pRDT - pAZB sachant que ; 20 - a = bARVALIS eAZBRUN - pAZB = pRDN - pRDN/eAZBRDN et que pRDT et pRDN sont les objectifs, ou potentiels, de rendements agronomiques (Qxgrain /ha) et protéiques (kg-Ngrain/ha), eAZBRDN et eAZBRUN les valeurs d'eAZB en termes de RDN et RUN 25 (rendements unitaires ; kg-Ngrain OU kg-Nbiomasse /unité d'N fertilisant), respectivement et par rapport à un témoin non traité, et que a est le coefficient b dit d'ArvalisTM (bARVALIS), alias « besoin unitaire » (i.e. unités d'N par Qx \, divisée par eAZBRUN. grain' Avantages apportés 30 De simples valeurs ApHi = [pHeau - pHKCL] peuvent maintenant estimer directement et quantitativement cette résilience acidobasique des azotobactéries indigènes du sol. L'utilisateur n'a plus à effectuer lui-même le titrage de l'acidité échangeable proposé dans EP2730926 pour chaque sol à analyser ; il peut utiliser directement et dès maintenant les relations DEF, RES et 35 iSAB fonctions de dpHi proposées ici. Sigles et définitions ; Dynamique des populations bactériennes (ngaBAC ; EP2730926) ; changements constatés à travers le 40 temps et/ou en fonction d'une variation des paramètres physico-chimiques (eg. pH) du nombre de cellules bactériennes (n), leurs masses et/ou leurs abondances relative à celles des autres fractions de la microflore du sol (g), leurs diversité génomique et/ou phénotypiques et, surtout, leurs activités métaboliques et/ou cataboliques (a). Fraction bactérienne (BAC) ; biomasse bactérienne du sol séparée chimiquement ou physiquement (eg. par centrifugation) d'une suspension aqueuse du sol (cf. Bakken 1985). 5 Résilience acidobasique ; caractéristique des bactéries du sol capables de maintenir une certaine dynamique optimale en dépit de variations de pH à hauteur de ApH. pHo (sols ; Figure 1) : pH du sol lorsque ApH est optimal selon la relation [ApH :: pH]. pHo est pH tellurique auquel ApH est le plus important, apportant ainsi aux azotobactéries du sol une certain « zone de confort » 5 plus ample et plus difficilement comblée à travers le temps ou selon les pratiques culturales. pHo (bactéries ; Figure 2) : pH du sol lorsque ngaBAC est optimal (ngaBACo ; Figure 2) selon la relation bimodale ngaBAC :: pH. pHo est ici une mesure de l'acidité à laquelle la dynamique des populations bactériennes du sol (ngaBAC) est la plus grande, voire optimale. pHeau, pHKci, pHcaci2 : Mesure de l'acidité du sol en terme de pH à l'aide d'une solution d'extraction 10 strictement aqueuse (eau), ou saline comportant différentes concentrations de KCI ou de CaCl2 selon le cas. ApH (alias acidité échangeable) : acidité du sol attribuable à l'aluminium et l'hydrogène adsorbés sur le complexe d'échange du sol, et échangeables par d'autres cations tels que le K± et/ou le Ca++. ApHi : ApH moyen d'un ensemble de ApH sur la base de la différence pHeau - pHKci (ou pHcaci2) mesuré par l'utilisateur de la présente invention. 15 ApHo : ApH optimal correspondant à la première dérivée nulle (0,00) de la relation [ApH :: pH]. ApHo est ici la valeur de ApH la plus vraisemblable ; c'est ApHo qui servira donc au calcul de DEF. ApHn : ApH minimum d'un ensemble de ApH. DEF (Figure 1) : « défiance » acidobasique d'un sol à l'égards de populations azotobactériennes qu'il abrite. Formellement DEF = [ApHo - ApHn] / ApHo, i.e. l'amplitude par rapport à la valeur minimum de l'acidité 20 échangeable (correspondant à pHo) observée in situ à travers le temps, selon les pratiques culturales, etc. RES (Figure 2) : résilience acidobasique des azotobactéries indigènes du sol confrontées à des variations de pH à hauteur de ApH = [pHeau - pHKa] voire [pHeau - pHcaci2]. iSAB (Figures 3, 4 et 5) : indicateur élémentaire (Lairez et al. 2015) de la résilience acidobasique des azotobactéries indigènes telluriques défiées par ApH. Formellement ; iSAB = [DEF - RES]. 25 eAZBrdn : efficacité relative en termes de rendement protéique (RDN ; kg-N /ha) de l'azotobactérisation grain, des résidus de culture (cellulosiques) au sol (RCS) par rapport à un témoin non azotobactérisés eAZBrun : efficacité relative en termes de rendement unitaire (RUN ; kg-Ngrain/uN) de l'azotobactérisation des résidus de culture (cellulosiques) au sol (RCS) par rapport à un témoin non azotobactérisés iAZB (EP17196251.7) : indicateur agrégé (Lairez et al. 2015) d'indicateurs élémentaires d'eAZBrdn et 30 eAZBrun, tel qu'iSAB par exemple. dX (Comifer 2013) : dose prévisionnelle d'engrais azotés pour cultures agronomiques calculée selon la méthode du bilan (Colomb 2017) exprimée en unités d'N (uN ; kg-Nfertilisant/ha). dN (Claude 2017) : dose prévisionnelle d'engrais azotés pour cultures agronomiques calculée selon la fertilisation azotobactérienne raisonnée (FAR), généralement exprimée en unités d'N (uN ; kg-Nfertilisant/ha). 35 FAR (Claude 2017) : méthode de fertilisation raisonnée comportant un ajustement fonction d'eAZB des besoins unitaires (cf. coefficient bArvalis) et des fournitures en N provenant des sols dans lesquels sont enfouis des résidus de culture azotobactérisés, y compris par inoculation. Les doses prévisionnelles d'engrais-N (dN) ainsi calculées sont ainsi expressément adaptées à de telles azotobactérisations. 40 BRÈVES DESCRIPTION DES FIGURES Figure 1 : Relation bimodale [ApH :: pH], avantageusement ici quadratique de type ApH = a.(pH)2 + b.(pH) + c, et calcul de DEF. ApH (pHeau - pHKci) n'est fonction linéaire de pH. Au contraire, le pH marginaux (acidiques ou basiques) par rapport à une certaine valeur centrale (pHo) sont les 6 plus faibles dénotant une quantité acidité échangeable plus restreinte et plus sujette à être appréciablement, voire complétement réalisée à travers la campagne. Le cas échéant, les azotobactéries du sol devront affronter ces variations de pH capables d'affecter leur nombre (n), masse (g) et/ou activité (a), d'où la notion de « ngaBAC » (Figure 2). DEF est définie comme suit ; 5 [ApHo - ApHn] / ApHo, ApHn étant le ApH minimum dans l'ensemble des pH. (bas) A titre d'exemple, les données de Edmeades et al. 1983. Figure 2 : Relation bimodale entre ngaBAC et pH du sol et calcul de RES. ngaBAC est lui aussi bimodal par rapport à pH. La mesure de la résilience est obtenue par superposition de la courbe 10 décrivant cette variation de la dynamique de ladite fraction bactérienne de la microflore du sol en fonction des susdites différentes valeurs de pH imposées in vitro (courbe variable), à une autre courbe fixée horizontalement (courbe fixe) à partir d'un pH optimal (pHo) et/ou supposé optimal pour ladite dynamique bactérienne en termes de diversité, d'activité et/ou d'abondance, relative ou absolue. Cette caractéristique des azotobactéries est explicité dans EP2730926. ApHe peut 15 maintenant être repéré par rapport à pHo (Figure 1) comme la portion de Anl-li -,..- = pHeau pHKcI n'affectant pas sensiblement ngaBAC. Quantitativement, cette résilience des azotobactéries du sol est repérable lorsque l'intervalle de confiance (ic ; cf. EP2730926) fixe inférieur rejoint l'intervalle de confiance variable supérieure au point « pi ». ApHe est donc le degré de réalisation de l'acidité échangeable que peuvent subir les azotobactéries du sol sans réduction de ngaBAC. RES est 20 définie comme suit ; RES = ApHe / ApHi. (bas). A titre d'exemple, les données de Fernadez- Calvino et Baath 2010 (cf. EP2730926). Figure 3 : Mise en relation de DEF et RES par rapport à ApHi. DEF et RES sont mis en relations par rapport à ApHi conjointement afin de d'obtenir iSAB = DEF - RES. La pression ApH, ou le 25 choc de la variation acido-basique provenant de la réalisation de l'acidité échangeable à travers la campagne sera donc d'autant plus faible que ApHi est important (Figure 4). En principe, l'efficacité de l'azotobactérisation (eAZB) des résidusphères, y compris et notamment par inoculation des résidus de culture au sol (RCS), sera d'autant plus grande si cette pression ApH est importante puisque les populations azotobactériennes indigènes profiteront ainsi le plus de tels renforts. Sans 30 cette pression acido-basique, les populations indigènes peu affectées nécessiteront peu ou pas de telles augmentations de ngaBAC. iSAB reflète donc l'opportunité d'augmenter les contingents d'azotobactéries résidusphériques en vue d'une augmentation d'eAZB (Figure 5). A noter enfin que ces relations [DEF ApHi] et [RES ApHi] peuvent être ajustés selon la situation agronomique, le lieu (eg. les départements français), le type de sol (eg. argilo-calcaire, etc.). J'ai 35 indiqué ces éventuelles variantes en pointillés. Figure 4 : Illustration de la progression d'iSAB par rapport à ApHi. iSAB étant défini comme la différence DEF - RES (Figure 3), cet indicateur élémentaire d'eAZB décroit progressivement en fonction de ApHi favorisant ainsi l'accroissement d'eAZB (Figures 5 et 6). A noter qu'étant donné 40 d'éventuels ajustements agro, pédo-climatiques des fonctions (relations) [DEF ApHi] et [RES ApHi] (cf. Figure 3), la relation [iSAB ApHi] sera elle aussi raffinée en ce sens (cf. pointillés) et donnera lieu à une famille de relations iSAB fonction de ApHi plus particulières et précises. 7 Figure 5 : Illustration de la progression d'eAZBrdn et d'eAZBrun par rapport à iSAB sur la base de données agronomiques existantes déjà mentionnées dans Claude 2017 et EP17196251.7). 5 Figure 6 : Comparaison d'eAZB pour des iSAB négatifs de positifs (fonction t.test() ; ExcelTM). A ce stade, la relation entre eAZB et iSAB (Figure 5) est nécessairement très lâche puisque iSAB n'est qu'un des multiples indicateurs élémentaires d'eAZB (cf. EP2728353, EP2845906, EP2942621, etc.). Cela dit, les valeurs d'eAZBrdn et eAZBrun associées à des iSAB négatifs (i.e. RES > DEF) sont en moyenne nettement inférieures à celles associées à des iSAB positifs (i.e. 10 RES pHo différents de ApH minimum 10 (ApHn) pour chaque jeu de données. La fonction [DEF ApHi] peut ainsi être tracée (Figure 3). Les données au Tableau 1 proviennent en partie d'études publiées (Edmeades et al. 1983, Martyniuk et al. 2003 et Fernandez-Calvino et al. 2010), et en partie de valeurs de pHeau et pHKci 9 (ou pHcaci2) extraites des bases de données BDAT (INRA-GisSol 2018) et NCSS (NCSS 2018) compilées (« filtrées » au sens d'ExcelTM) selon leurs agro-pédo-climat (APC ; EP2728353) ou encore plus simplement leur origine géographique en France. Par exemple, j'ai compilé 12 sous-ensembles (échantillons) de valeurs de pH et ApH provenant de la Région Centre en France 5 (BDAT ; INRA-GisSol 2018). Quelques 33 valeurs (n OBS, Tableau 1) ont été choisies aléatoirement (fonction alea() ; ExcelTM) 12 vois afin d'obtenir les valeurs moyennes au Tableau 1. Pour ce qui est de la fonction [RES ApHi]. Celle-ci est tracée, par exemple, à partir des données rapportées dans EP2730926 aux tableaux 1 et 2 (cf. tableau 1 - EP2730926 ; « Dynamique 10 métabolique, massique ou génomique (nga) de la fraction bactérienne du sol (BAC) pour le calcul de la première dérivée d'une fonction polynomiales de deuxième ou troisième degré au pHo (f'(pHo) = 0,00). », ou encore tableau 2 - EP2730926 ; « Coefficients des équations polynomiales pH = aX3 + bX2 + cX + d pour chacun des jeux de données publiés au tableau 1 »), et cela selon le schéma proposé ici à la Figure 2, sachant que les notions de courbes fixes et variables sont 15 décrites clairement dans EP2730926. Encore une fois (cf. Figure 2), la mesure de la résilience est obtenue par superposition de la courbe de la dynamique bactérienne fonction de pH in vitro (courbe variable) à une autre courbe fixée horizontalement (courbe fixe) à partir d'un pH optimal (pHo) pour ladite dynamique bactérienne (ngaBAC). 20 La détermination graphique et mathématique d'iSAB est représentée à la Figure 3. Cette mise en relation de DEF et RES par rapport à ApHi implique ici la réalisation empirique des deux fonctions présentées aux Figures 1 et 2. DEF et RES sont conjointement mis en relations par rapport à ApHi afin de déterminer iSAB = 25 [DEF - RES]ApHi. Tendanciellement, eAZB progresse selon iSAB (Figure 5) et peut donc servir d'indicateur élémentaire d'eAZB. En effet, la pression acidobasique provenant de la réalisation de l'acidité échangeable à travers la campagne sera donc d'autant plus faible que ApHi est important (Figure 4), et l'eAZB d'autant plus grande si cette pression ApH est importante puisque c'est dans de telles situations que les azotobactéries indigènes profitent le plus de la bioaugmentation de 30 leurs populations résidsphériques, y compris mais pas exclusivement, par inoculation des RCS. Au contraire, les azotobactéries indigènes soumises à des ApHi de moindres amplitudes seront moins affectées et nécessiteront peu ou pas de telles augmentations. iSAB reflète, en amplifiant ApHi, l'opportunité d'augmenter les contingents d'azotobactéries résidusphériques en vue d'une augmentation d'eAZB (Figure 5). Ces deux fonctions de ApHi superposées, DEF et RES, a priori 35 généralisables et applicables à l'ensemble des APC (EP2728353) tempérés d'Europe, définissent iSAB = [DEF - RES] fonctions de ApHi (Figure 4). Ces relations DEF, RES et iSAB fonctions de ApHi seront raffinées lors du développement expérimental plus poussé de l'invention. Cela dit, à ce stade du développement expérimental, le 40 paramétrage proposé au Tableau 2 permet néanmoins de réaliser l'invention correctement. - 10- Tableau 2 : Paramétrage des relations DEF, RES et iSAB (cf. Figures 3 et 4) fonctions de ApHi ; les coefficients a, et ID, (i = 1, 2 ou 3 pour DEF, RES et iSAB, respectivement) peuvent à ce stade appartenir à une gamme de valeurs +I- les écarts-types proposés entre (guillemets). Relation (Figures 2 et 3) (écartypes) b, (écartypes) DEF = a1 + b1 ~pHi 1,80 (0,20) -1,40 (0,25) RES = az + bz.ApHi 0,015 (0,012) 0,340 (0,025) iSAB = a3 + bz.ApHi 1,80 (0,05) -1,76 (0,04) 5 APPLICATION AGRONOMIQUE DE L'INVENTION La relation tendancielle et partielle d'eAZB par rapport iSAB (Figure 5) ne préjudicie par l'utilisation de cette indicateur élémentaire (Lariez et al. 2015). L'agrégation de plusieurs indicateurs d'eAZB 10 de ce type en un seul indice agrégé d'eAZB, iAZB (EP17196251.7) a été ici refaite avec iSAB au sens de la présente invention en remplacement de l'indicateur putatif « iRES » (EP2730926). En abîme de la Figure 7 (haut) la fonction [eAZB iSAB] (normalisée) décrivant cette augmentation tendancielle d'eAZBrdn selon iSAB rapportée aux Figure 5 et 6 ; idem pour eAZBrun (non rapportée). Notons qu'iSAB est strictement fonction de ApHi (Figure 4), sans pour autant être 15 redondant. En effet, puisque ApHi permet de jumeler les deux variables, DEF et RES (Figure 3), c'est la pente de la relation [iSAB ApHi] (Figure 5) qui détermine la contribution de ApHi à DEF, et donc de iSAB à iAZB (Figure 7). Enfin et sans surprise, la dose prévisionnelle d'engrais-N (dN) au sens de Claude 2017 et 20 EP17196251.7 diminue progressivement selon l'augmentation d'iAZB ; Le statut acidobasique du sol est maintenant partie intégrante d'iAZB, de dN et de la FAR (Claude 2017 ; EP17196251.7), ce qui n'était pas véritablement le cas avec EP2730926 simplement assimilé à ApH par Claude 2017 faute d'indicateurs élémentaires facilement réalisables sans 25 manipulations relativement onéreuses. En ce sens, la présente invention reprend, résume et instrumentalise EP2730926. L'invention est applicable aux populations bactériennes et/ou azotobactériennes du sol. Bien l'ubiquité des azotobactéries (eg. Orr et al. 2011) fait que iSAB applicable aux premières soit aussi 30 putativement applicable aux dernières, je propose néanmoins à la Figure 8 un projet de kit d'incubation permettant de déterminer simultanément les relations bimodales ngaBAC :: pH (supra Figure 2) pour les bactéries et les azotobactéries du sol. L'idée est de s'assurer que les conditions d'incubation des bactéries et azotobactéries soient (quasi) identiques. L'incorporation d'un puit plus petit avec milieux de culture azoté au sien d'un puit plus large avec milieux de culture sans 35 azote permet de segmenter un même aliquote de la susdite fraction azotobactérienne du sol et d'obtenir deux cinétiques parfaitement commensurables mais différentes selon leurs activités diazotrophiques. A suivre. Références Claude, P-Ph. 2017. Fertilisation raisonnée et azotobactérisation des résidus de culture. Poster no. 19, Thème 3 : Indicateurs, méthodes de raisonnement et OAD. 13ièmes Rencontres de la fertilisation 5 raisonnée et de l'analyse. 8 & 9 novembre 2017, Cité, Centre de congrès de Nantes / Comifer et le Gemas - http://www.comifer.asso.fr/index. php/fr/evenements/rencontres-2017/posters-desrencontres-2017.html Claude, P-Ph. et L. Fillion. 2004. Effet de l'apport d'un Inoculum bactérien aux résidus de culture de maïs-grain au Sol sur le rendement et la qualité de blés d'hiver panifiables en France. Agrosolutions 10 15(1) : 23-29. Colomb, B. 2017. Guide de la fertilisation raisonnée (2ième édition). Éditions France Agricole, 75493 Paris. Edmeades, DC, CE Smart et DM Wheeler. 1983. Aluminium toxicity in New Zealand soils: Preliminary results on the development of diagnostic criteria, New Zealand J. Agric. Res., 26:4, 493-501 EP2730926 (Claude 2014) Diagnosis of the microbiological state of soils according to the resilience of its 15 bacterial population. https://patents.google.com/patent/EP2730926A1/da EP2728353 (Claude 2014) Method for assigning an agro/micro-pedoclimate (AMPC) to an agricultural plot, and for forming microbial consortia. https://patents.google.com/patent/EP2728353A1/da EP2845906 (Claude 2015) Method for assessing the carbon efficiency of soil bacteria. https://patents.google.com/patent/EP2845906A1/en 20 EP2942621 (Claude 2015) Diagnostic de l'état diazotrophe de sols arables et préconisation des apports d'engrais azoté. https://patents.google.com/patent/EP2942621Al/sv Fernandez-Calvino, D. et Erland Baath. 2010. Growth response of the bacterial community to pH in soils differing in pH. FEMS Microbiol Ecol 73 (2010) 149-156 INRA GisSol 2018. Base de données d'analyses de terre (BDAT). http://webapps.qissol.fr/qeosol/ 25 Lairez, J et al. 2015. Agriculture et Développement Durable ; guide pour l'évaluation multicritère. Eds. Quae 78026 Versailles Cedex). Martyniuk, S et M Martyniuk. 2003. Occurrence of Azotobacter Spp. in Some Polish Soils. Polish Journal of Environmental Studies Vol. 12, No. 3 (2003), 371-374 NCSS 2018. National Cooperative Soil Survey / National Cooperative Soil Survey Characterization Database 30 http://ncsslabdatamart.sc.egov.usda.gov/ Orr, CH, A James, C Leifert, JM Cooper et SP Cummings. 2011. Diversity and Activity of Free-Living Nitrogen-Fixing Bacteria and Total Bacteria in Organic and Conventionally Managed Soils. Appl. Environ. Mircrobiol. p. 911-919 Vol. 77, No. 3 Wonnacott, TH et RJ Wonnacott. 1991 (traduction française). Statistique - économie, gestion, sciences, 35 médecine (4ième édition). Economia, 49, rue Héricart, REVENDICATIONS1. Méthode de fertilisation raisonnée adaptée à l'azotobactérisation (AZB) des résidus de culture cellulosiques au sol (RCS) et de cultures intermédiaires pièges à nitrates (cipan) comportant un indicateur élémentaire de la résilience de la fraction bactérienne de la microflore d'un sol arable en termes de diversité, d'activité et/ou d'abondance lorsque confrontée à des variations de pH du sol environnant caractérisée en ce que l'indicateur élémentaire, iSAB (indicateur élémentaire de la résilience acidobasique des azotobactéries indigènes telluriques défiées par LpH), est obtenu directement à l'aide de relations préétablies, à savoir ; - une première relation [ApH :: pH] représentant quantitativement la défiance acidobasique du sol, DEF (défiance acidobasique d'un sol à l'égards de populations azotobactériennes qu'il abrite) définie formellement comme le ratio entre l'amplitude de l'acidité échangeable (ApHo - ApHn) et le ApH associée au pHo (ApHo) et obtenue par la dérivée première égale à 0,00 de la relation [ApH :: pH] sur la base de valeurs pH du sol, avantageusement le pHeau afin d'assurer un ApH (alias acidité échangeable du sol attribuable à l'aluminium et l'hydrogène adsorbés sur le complexe d'échange du sol mais échangeable par d'autres cations tels que le K+ et/ou le Ca") mesurable (ApHi ; ApH moyen d'un ensemble de ApH sur la base de la différence pHeau - pHKCI (ou Olicac12) mesuré par l'utilisateur) prélevées à travers le temps ou résultant de différentes pratiques culturales ou provenant de variations spatiales répertoriées dans diverses bases de données existantes, sachant que ApHo est le ApH optimal correspondant à la première dérivée nulle (0,00) de la relation [ApH :: pH] et ApHn le ApH minimum d'un ensemble de ApH, - une deuxième relation [ngaBAC:: pH] représentant quantitativement la résilience acidobasique des azotobactéries indigènes du sol, RES (résilience acidobasique des azotobactéries indigènes du sol confrontées à des variations de pH à hauteur de ApH = - pHKcI] voire [pHeau - pHcaci2]) définie comme le ratio entre le ApH effectif (ApHe) et ApHi, ApHe étant repérable dès que ngaBAC (nombre de cellules bactériennes (n), leurs masses (g) et/ou leurs abondances relative à celles des autres fractions de la microflore du sol, leurs diversité génomique et/ou phénotypiques et/ou leurs activités métaboliques et/ou cataboliques) est appréciablement affectée par ApH lorsque le minimum d'une certaine l'intervalle de confiance (ic) de la susdite courbe fixe croise (intersecte) le maximum de l'ic de la susdite courbe variable au point « pi », - la superposition, graphique ou mathématique, par rapport à ApHi = [pHeau - pHKci], de ces deux relations - DEF et RES, afin d'obtenir la différence iSAB = [DEF - RES] à titre d'indicateur élémentaire du degré de résilience acidobasique des populations azotobactériennes indigènes du sol, - et enfin l'intégration d'iSAB dans un indice agrégé d'eAZB servant au calcul des doses prévisionnelles d'engrais azotés (dN) adaptées au fonctionnement de telles azotobactérisation des résidus de culture cellulosiques en fertilisation raisonnée. - 13 - 2. Méthode de fertilisation raisonnée adaptée à l'azotobactérisation (AZB) des résidus de culture cellulosiques au sol (RCS) et de cultures intermédiaires pièges à nitrates (cipan) selon la première revendication caractérisée en ce que la défiance acidobasique du sol, DEF, est exprimée par rapport à ApHi selon la relation DEF = al + brApHi. 5 3. Méthode de fertilisation raisonnée adaptée à l'azotobactérisation (AZB) des résidus de culture cellulosiques au sol (RCS) et de cultures intermédiaires pièges à nitrates (cipan) selon la revendication précédente caractérisée en ce que les coefficients ai et bi peuvent appartenir à une gamme de valeurs comprises entre 1,60 et 2,00 pour ai et -1,15 et -1,65 pour bi. 10 4. Méthode de fertilisation raisonnée adaptée à l'azotobactérisation (AZB) des résidus de culture cellulosiques au sol (RCS) et de cultures intermédiaires pièges à nitrates (cipan) selon un quelconque des revendications précédentes caractérisée en ce que pour la deuxième relation, [ngaBAC :: pH] représentant quantitativement la résilience acidobasique des 15 azotobactéries indigènes du sol, RES, lesdites intervalles de confiance (ic) sont fonctions des variations des valeurs de pH et de la dynamique des population azotobactérienne (ngaBAC) correspondante selon l'équation ; ic = (a + 13X0) +/- t0,025 - s racine(1 /n + [(X0 - 5)2/ Ex2]) lorsque que (a + bXo) décrit empiriquement la progression d'ngaBAC selon X0 = pH à partir de pHo, to,025 est la valeur critique de la statistique t lorsque les ddl (degrés de liberté) = nombre d'observations moins 1, s est l'écart-type et (X0 - X)2 la somme des carrés des différences entre Xo et la moyenne X pour les n observations. 5. Méthode de fertilisation raisonnée adaptée à l'azotobactérisation (AZB) des résidus de culture cellulosiques au sol (RCS) et de cultures intermédiaires pièges à nitrates (cipan) selon la revendication précédente caractérisée en ce que la résilience acidobasique des azotobactéries du sol, RES, est exprimée par rapport à ApHi selon la relation RES = a2 + b2 ApHi. 30 6. Méthode de fertilisation raisonnée adaptée à l'azotobactérisation (AZB) des résidus de culture cellulosiques au sol (RCS) et de cultures intermédiaires pièges à nitrates (cipan) selon la revendication précédente caractérisée en ce que les coefficients a2 et b2 peuvent appartenir à une gamme de valeurs comprises entre 0,003 et 0,027 pour a2 et 0,315 et 0,365 pour 35 b2. 7. Méthode de fertilisation raisonnée adaptée à l'azotobactérisation (AZB) des résidus de culture cellulosiques au sol (RCS) et de cultures intermédiaires pièges à nitrates (cipan) selon un quelconque des revendications précédentes caractérisée en ce que la superposition, 40 graphique ou mathématique, par rapport à ApHi = [pHeau - PHKCI], de ces deux relations - DEF et RES, afin d'obtenir la différence iSAB = [DEF - RES] à titre d'indicateur élémentaire du degré de résilience acidobasique des populations azotobactériennes indigènes du sol donne lieu à une famille de relations iSAB fonctions de ApHi selon le type de situations agronomiques, types de 20 25 - 14 - sols, localisation géographique de la parcelle ou toutes autres caractéristiques agro-pédoclimatiques pouvant affecter le statut acidobasique (SAB) du sol. 8. Méthode de fertilisation raisonnée adaptée à l'azotobactérisation (AZB) des résidus de 5 culture cellulosiques au sol (RCS) et de cultures intermédiaires pièges à nitrates (cipan) selon la revendication précédente caractérisée en ce que l'indicateur du degré de résilience acidobasique des populations azotobactériennes indigènes du sol, iSAB, est exprimé par rapport à LpHi selon la relation iSAB = a3 + b3.LpHi. 10 9. Méthode de fertilisation raisonnée adaptée à l'azotobactérisation (AZB) des résidus de culture cellulosiques au sol (RCS) et de cultures intermédiaires pièges à nitrates (cipan) selon la revendication précédente caractérisée en ce que les coefficients a3 et b3 peuvent appartenir à une gamme de valeurs comprises entre 1,75 et 1,85 pour a3 et -1,72 et -1,80 pour b3. 15 10. Méthode de fertilisation raisonnée adaptée à l'azotobactérisation (AZB) des résidus de culture cellulosiques au sol (RCS) et de cultures intermédiaires pièges à nitrates (cipan) selon un quelconque des revendications précédentes caractérisée en ce que l'intégration d'iSAB dans un indice agrégé d'eAZB (efficacité relative en termes de rendement protéique (RDN ; kg-Ngrain/ha) ou de rendement unitaire (RUN ; kg-Ngrain/uN) de l'azotobactérisation des résidus de culture (cellulosiques) au 20 sol (RCS) par rapport à un témoin non azotobactérisés) servant au calcul des doses prévisionnelles d'engrais azotés (dN) adaptées à l'azotobactérisation des résidus de culture ce fait comme suit ; iAZB = E(Si x Pi) pour les i = 1, 2, 3 ... -> nombre d'indicateurs (n), y compris iSAB 25 Si étant ici le score normalisé (base 100 ou 1,00) de l'indicateur élémentaire affectant eAZB, et Pi le poids (0,00 à 1,00) attribué à ce score, pAZB est ici en sorte la contribution (fourniture) en N des microorganismes phytogènes du sol, y compris ceux réintroduits par l'inoculation, et en ce que dN fonction de l'indicateur agrégé, iAZB, obtenu par agrégation des indicateurs élémentaires d'eAZB est calculé comme suite ; 30 dN = a x pRDT - pAZB sachant que ; 35 - a = bARVALIS eAZBRUN - pAZB = pRDN - pRDN/eAZBRDN et que pRDT et pRDN sont les objectifs, ou potentiels, de rendements agronomiques (Qxg /ha) et grain. protéiques (kg-N /ha), eAZBRDN et eAZBRUN les valeurs d'eAZB en termes de RDN et RUN (Qxgrain/ha) 40 (rendements unitaires ; kg-Ngrain ou kg-Nbiomasse /unité d'N fertilisant), respectivement et par rapport à un témoin non traité, et que a est le coefficient b dit d'Arvalis TM (bARVALIS), alias « besoin unitaire » (i.e. unités d'N par Qxgrain), divisée par eAZBRUN.