Brevet FR3085386A1 — publié le 20200306

PROCÉDÉ D'ENRICHISSEMENT D'UNE BIOMASSE EN PROTÉINES DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention concerne un procédé d'enrichissement en protéines 5 d'une biomasse d'algues unicellulaires rouges telles que Galdieria et la biomasse ainsi obtenue. ETAT DE LA TECHNIQUE On connaît plusieurs sources de protéines végétales pour leur utilisation dans l'alimentation humaine ou animale, directement ou comme compléments 10 alimentaires, pour apporter aux animaux et humains des acides aminés nécessaires à leur métabolisme. Ces sources de protéines sont entendues comme des sources d'acides aminés disponibles pour les animaux ou humains une fois les aliments ingérés. La plus connue des sources de protéines végétales employée dans 15 l'alimentation animale est le soja, généralement employé sous forme de tourteaux, résidu solide secondaire issu de l'extraction de l'huile. Toutefois, l'emploi de tourteaux de soja présente plusieurs inconvénients associés à leur origine. Les tourteaux sont généralement importés de pays qui pratiquent une culture intensive du soja au détriment d'autres végétaux source de biodiversité. En outre, de 20 nombreux pays favorisent la culture de variétés de soja génétiquement modifiées (OGM), que l'on retrouve mélangées aux sojas non OGM dans les tourteaux, ce qui ne permet pas de répondre à une demande croissante de produits alimentaires d'origine végétale sans OGM. On connaît d'autres sources de protéines végétales, notamment la spiruline 25 ou la chlorelle, employées comme compléments alimentaires chez l'homme. La spiruline, comme la chlorelle, présentent toutefois l'inconvénient d'une faible productivité qui ne permet pas le passage à une culture en fermenteur à rendement élevé. Si leur culture permet de répondre à une demande locale et limitée en compléments alimentaires traditionnels, elle ne permet pas de répondre 30 à un objectif de production industrielle plus large, économiquement viable, d'une source de protéines alimentaires dont les qualités lui permettront de remplacer demain les sources usuelles comme le soja dans l'alimentation des animaux et de l'homme. On connaît des méthodes de production de biomasses de microorganismes 2 riches en protéines, qui passent par exemple par la sélection de souches particulièrement adaptées à la surexpression de protéines et/ou à la mise en oeuvre de méthodes de culture qui permettent de favoriser cette surexpression et enrichir la biomasse en protéines. Toutefois, les biomasses issues de microorganismes génétiquement modifiés (OGM) ne sont pas appropriées pour certains marchés de l'alimentation humaine et animale, y compris l'aquaculture (notamment en Europe). Il y a un intérêt à pouvoir proposer des sources de biomasses non-OGM riches en protéines répondant à un objectif de production industrielle large, 10 économiquement viable, comme alternative aux sources usuelles de protéines comme le soja. EXPOSE DE L'INVENTION La présente invention concerne un procédé de production d'une biomasse riche en protéines, le procédé comprenant les étapes de 15 b.1. mise en suspension d'une biomasse de microorganismes lysés, b.2. acidification de la suspension jusqu'à un pH inférieur ou égal à 5, c. récupération de la fraction de biomasse lysée insoluble à pH inférieur ou égal à 5, et le cas échéant répétition des étapes b.1., b.2. et c. sur la fraction de biomasse 20 lysée insoluble à pH inférieur ou égal à 5 récupérée en c. La fraction de biomasse récupérée en c. peut ensuite être séchée. L'invention concerne aussi la biomasse ainsi obtenue, son utilisation pour l'alimentation humaine ou animale, ainsi que les aliments et compositions alimentaires qui la contiennent. 25 DESCRIPTION DES FIGURES La Figure 1 représente la teneur en protéines (% d'acides animés dans la Matière Sèche) pour une biomasse de spiruline et pour une biomasse de Galdieria su/phuraria souche UTEX 2919 avant et après traitement selon l'invention pour 1 cycle (PL1) ou 4 cycles (PL4) de traitement. 30 La Figure 2 représente la composition en acides aminés (en g/100g de MS) pour une biomasse de spiruline et pour une biomasse de Galdieria sulphuraria souche UTEX 2919 avant et après traitement selon l'invention pour 1 cycle (PL1) ou 4 cycles (PL4) de traitement. 3 DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION La présente invention concerne un procédé de production d'une biomasse de microorganismes lysés riche en protéines, le procédé comprenant les étapes de b.1. mise en suspension d'une biomasse de microorganismes lysés, 5 b.2. acidification de la suspension jusqu'à un pH inférieur ou égal à 5 c. récupération de la fraction de biomasse lysée insoluble à pH inférieur ou égal à 5, et le cas échéant répétition des étapes b.1., b.2. et c. sur la fraction de biomasse lysée insoluble à pH inférieur ou égal à 5 récupérée en c. Par microorganismes on entend selon l'invention essentiellement des microorganismes qui accumulent du glycogène soluble dans l'eau, comme des levures ou des protistes qui accumulent du glycogène soluble dans l'eau pendant leur croissance, en particulier dans des conditions industrielles de culture par fermentation avec accumulation de biomasse De manière avantageuse, le procédé est particulièrement adapté pour une biomasse de microorganismes producteurs de phycobiliprotéines. Le procédé permet avantageusement de valoriser la biomasse restant après extraction des phycobiliprotéines, sous-produit de la production de ces molécules d'intérêt. Ces microorganismes et leurs modes de culture sont bien connus de 20 l'homme du métier, notamment décrits dans les demandes WO 2017/050917, WO 2017/050918 et WO 2017/093345. On citera en particulier les algues rouges unicellulaires (ARUs). Par "ARU" on entend selon l'invention les Rhodophytes, en particulier de la sous-division des Cyanidiophytina, de préférence de la classe des Cyanidiophyceae, en particulier 25 de l'ordre des Cyanidiales, plus particulièrement des familles des Cyanidiaceae ou des Galdieriaceae, encore plus particulièrement des genres Cyanidioschyzon, Cyanidium ou Galdieria. De préférence, les ARUs sont choisies parmi les espèces Cyanidioschyzon merolae 10D, Cyanidioschyzon merolae D BV201, Cyanidium caldarium, 30 Cyanidium daedalum, Cyanidium maximum, Cyanidium partitum, Cyanidium rumpens, Galdieria daedala, Galdieria maxima, Galdieria partita ou encore Galdieria sulphuraria, plus préférentiellement de l'espèce Galdieria sulphuraria. De préférence, le procédé est mis en oeuvre avec une biomasse lysée dont au moins 70% des cellules sont lysées, plus préférentiellement d'au moins 80 % 4 de cellules lysées, encore plus préférentiellement 90%, encore plus préférentiellement 95%. Selon un mode de réalisation de l'invention, le procédé comprend une étape préalable a. de lyse d'une biomasse de microorganismes préalablement cultivés. 5 L'étape a. de lyse peut se faire par tout moyen de lyse cellulaire connu de l'homme du métier. On citera en particulier le broyage ou la lyse enzymatique. De manière préférée, la lyse cellulaire est réalisée par broyage, cette méthode étant particulièrement préférée pour la lyse des ARUs, en particulier de l'espèce Galdieria sulphuraria. 10 Elle peut se faire alors que les cellules sont en suspension dans l'eau, moût de fermentation ou suspension reconstituée, ou sur une biomasse dite « sèche », c'est à dire séparée du milieu de fermentation, fraiche ou après séchage et conservation, par exemple après lyophilisation. De manière avantageuse, la lyse par broyage est réalisée sur une biomasse 15 de cellules « sèches », en particulier sur une biomasse de cellules fraiches séparées du milieu de fermentation après culture par toute méthode de séparation bien connue de l'homme du métier, notamment par filtration ou par centrifugation. Selon un autre mode de réalisation de l'invention, la lyse par broyage est réalisée sur une biomasse de cellules préalablement lyophilisées ou séchées pour 20 leur conservation. L'étape b.1. de mise en suspension permet d'obtenir une suspension de la biomasse lysée. La suspension obtenue à l'étape b1 a généralement entre 1% et 40% de matière sèche, voire plus. De préférence elle aura entre 20% et 30% de matière 25 sèche. L'étape b.2. est mise en oeuvre par l'ajout d'un acide pour obtenir une suspension dont la phase aqueuse a un pH inférieur ou égal à 5. De préférence, on cherchera à obtenir un pH inférieur ou égal à 4. L'ajustement du pH se fait par l'ajout d'un acide, minéral ou organique, fort 30 ou faible, sous forme de solide ou de solution, la quantité d'acide ajoutée étant déterminée par le pH de la suspension à traiter et la valeur de pH que l'homme du métier cherchera à obtenir. Parmi les acides minéraux bien connus de l'homme du métier, on citera plus particulièrement l'acide chlorhydrique, acide sulfurique et l'acide phosphorique. Parmi les acides organiques bien connus de l'homme du 5 métier, on citera en particulier l'acide acétique, l'acide citrique, l'acide tartrique, l'acide lactique, de préférence l'acide citrique. On peut également citer les polyphénols acides comme l'acide rosmarinique, l'acide tannique, l'acide digallique, l'acide quercitannic, l'acide gallotannique, les tannins acides comme la 5 quercitine, les ellagitannines, castalagine, castaline, casuariticine, grandinine, punicaligine punicaline, roburine A, tellimagrandine II, terflavine B, vescaligine, pendunculagine, casuariine, castline, vescaline, de préférence l'acide tannique. De préférence, les acides employés sont des acides autorisés pour un usage alimentaire, en particulier l'acide phosphorique, l'acide sulfurique, l'acide citrique 10 ou l'acide tannique. La suspension acide obtenue par l'étape b.2. a de préférence une teneur en matière sèche supérieure ou égale à 1%, avantageusement plus de 2% de matière sèche, préférentiellement de 3 à 30 % de matière sèche, plus préférentiellement de 4 à 15 % de matière sèche, encore plus préférentiellement 15 de 5 à 12 %, encore plus préférentiellement de 6 à 10 %. Selon un mode particulier de réalisation de l'invention, les étapes b.1. et b.2. sont consécutives, l'étape b.2 s'effectuant directement après l'étape b.1 sans autre étape de traitement de la biomasse comme une étape de délipidation, par exemple. La mise en suspension, ou la dilution de la suspension est suivie de l'ajout d'acide, sous forme solide ou liquide. Selon un autre mode particulier de réalisation de l'invention les étapes b.1. et b.2. sont réalisées de manière simultanée par l'ajout d'une quantité appropriée d'une solution acide pour obtenir à la fois le pH recherché inférieur ou égal à 5 et la teneur en matière sèche recherchée. En fonction de la biomasse lysée récupérée de l'étape a., notamment que la lyse ait été faite sur une suspension cellulaire dans l'eau ou sur une biomasse dite « sèche », l'homme du métier saura ajouter les quantités d'eau et d'acide nécessaires à l'obtention d'une suspension avec la teneur en matière sèche recherchée et au pH recherché, que ces ajouts soient faits en deux étapes ou en une seule étape. L'étape c. est mise en oeuvre par tout moyen de séparation connu de l'homme du métier pour séparer les résidus solides de lyse cellulaire de la solution aqueuse à partir de la suspension acide comprenant les cellules lysées, notamment par filtration ou par centrifugation. Pour la filtration, on citera en 6 particulier la filtration tangentielle, par exemple la filtration tangentielle sur membranes céramiques ou membranes organiques tel que les fibres creuses en polyéthersulfone. La filtration frontale peut également être utilisée (filtre-plaque ou filtre-presse). 5 Le cas échéant, le cycle de suspension/acidification/récupération (b.1./b.2./c.) peut être répété plusieurs fois sur la fraction de biomasse lysée insoluble à pH inférieur ou égal à 5 récupérée en c. de manière à épuiser celle-ci en éléments solubles à pH acide. Avantageusement, le cycle suspension/acidification/récupération est répété 1, 2 ou 3 fois sur la biomasse 10 lysée récupérée en c. La fraction de biomasse enrichie en protéines récupérée en c. peut ensuite être séchée selon toute méthode connue de séchage. Les eaux-mères de la suspension sont généralement récupérées pour être traitées de manière à en extraire des composants solubles à pH acides 15 susceptibles d'être valorisés de leur côté. C'est le cas notamment des phycocyanines lorsque les microorganismes sont des microorganismes producteurs de phycobiliprotéines tels que définis ci-dessus. Un tel procédé est notamment décrit dans la demande de brevet PCT/EP2018/058294 déposée le 30 mars 2018. 20 La biomasse obtenue a généralement au moins 60% de protéines (évaluées par le dosage de l'azote total, N*6,25) par rapport à la matière sèche, de préférence plus de 65%, encore plus préférentiellement plus de 68%, plus de 70% voire plus de 80%. La biomasse a également de préférence une teneur en sucres totaux 25 inférieure à 20% par rapport à la matière sèche, plus préférentiellement moins de 10%, moins de 5%. La biomasse obtenue a également de préférence une teneur en glycogène inférieure à 10% par rapport à la matière sèche, plus préférentiellement inférieure à 5%, voire inférieure à 1%, encore plus préférentiellement inférieure à 0,1%. 30 Selon les microorganismes employés, la biomasse lysée insoluble à pH inférieur ou égal à 5, peut avoir une teneur en matières grasses, notamment en lipides, pouvant être d'au moins 5%, voire d'au moins 10% par rapport à la matière sèche, voire d'au moins 15%, d'au moins 16%, jusqu'à 20%. La composition en matières grasse dépendra également des microorganismes. Pour les ARU, la 7 biomasse lysée selon l'invention comprend généralement des acides gras polyinsaturés de type omega 3, 6 et 9, notamment des acides oléique, palmitique et alpha-linolénique qui représentent au moins 30% de la matière grasse, préférentiellement 40%, encore plus préférentiellement 50% de la matière grasse. 5 L'homme du métier saura adapter les conditions de mises en oeuvre du procédé selon l'invention, notamment le pH de la suspension et le nombre de cycles de suspension/acidification/récupération à répéter sur la biomasse lysée récupérée pour obtenir une biomasse avec les quantités de protéines, de sucres, de glycogène et de lipides recherchées et notamment telles que définies ci- 10 dessus. Les pourcentages en poids en protéines peuvent être exprimés tant par rapport aux protéines elles-mêmes que par rapport aux acides aminés contenus dans lesdites protéines. Par protéines on entend, selon la présente invention, toute protéine, peptide ou acide aminé insolubles à pH acide inférieur ou égal à 5. 15 La présente invention concerne également la biomasse telle que définie précédemment, susceptible d'être obtenue par le procédé selon l'invention. Cette biomasse a avantageusement : - au moins 60% de protéines, de préférence plus de 65%, encore plus préférentiellement plus de 68%, plus de 70% voire plus de 80%, 20 - moins de 20 % de sucres totaux, préférentiellement moins de 10%, plus préférentiellement moins de 5%, - moins de 10% de glycogène, de préférence moins de 5%, plus préférentiellement moins de 1% voire encore plus préférentiellement moins de 0,1%, et 25 - jusqu'à 20% de matières grasses, les pourcentages étant exprimés par rapport à la matière sèche de la biomasse. L'invention a encore pour objet l'utilisation d'une biomasse telle que décrite précédemment dans les domaines cosmétiques, pharmaceutiques, alimentaires humain ou animal. 30 Elle concerne en particulier l'utilisation d'une biomasse enrichie en protéines selon l'invention, telle que décrite ci-dessus et ci-après, pour l'amélioration des performances des animaux. Cette amélioration de la performance peut être évaluée, en particulier, par la mesure de la consommation, du gain de poids ou encore du « Feed Conversion Ratio » (rapport de conversion de l'aliment). 8 On pourra distinguer dans l'alimentation animale, l'alimentation des animaux d'élevage, en particulier en élevage industriel et celle des animaux domestiques ou encore des animaux de compagnie ou des animaux dits de « loisir », comme les poissons d'aquarium ou les oiseaux de volière ou en cage ou encore les 5 Nouveaux Animaux de Compagnie (NAC). Par « animal d'élevage » on entend notamment les animaux de pacage (notamment les bovins élevés pour la viande, le lait, le fromage et le cuir ; les ovins élevés pour la viande, la laine et le fromage ; les caprins), les porcins, les lapins, les volailles (les poulets, les poules, les dindes, les canards, les oies et 10 autres), les équidés (poneys, chevaux, poulains), destinés à supporter des activités humaines (transport, loisirs) ou leur alimentation, les animaux aquatiques (par exemple les poissons, les crevettes, les coquillages (notamment les huîtres et les moules)). On pourra toutefois distinguer l'alimentation des poissons jusqu'au stade d'alevins, et celles des poissons élevés, y compris les aliments et 15 compositions alimentaires qui leur sont destinées. On les distinguera des animaux domestiques, animaux de compagnie ou animaux de loisir qui comprennent également des mammifères, ruminants ou non, des oiseaux ou des poissons. Ils comprennent en particulier les chiens et les chats. 20 L'invention a aussi pour objet un aliment, ou composition alimentaire, pour l'homme ou les animaux, comprenant une biomasse selon l'invention telle que décrite précédemment. On entend par « aliment » toute composition qui peut servir à la nourriture de l'homme ou des animaux. Selon l'invention l'aliment peut ne comprendre que de la biomasse, séchée 25 ou non, transformée ou non, ou de la biomasse, séchée ou non, transformée ou non, mélangée à tout autre additif, véhicule ou support, utilisé dans le domaine de l'alimentation humaine ou animale, comme par exemple les conservateurs alimentaires, les colorants, les exhausteurs de goût, les régulateurs du pH, ou encore des additifs pharmaceutiques comme par exemple des hormones de 30 croissance, des antibiotiques. La présente invention concerne en particulier des aliments pour animaux et plus particulièrement pour les animaux d'élevage. Ces aliments se présentent habituellement sous la forme de farines, de granulés ou de soupe dans lesquels est incorporée la biomasse selon l'invention. On entend par "aliment pour 9 animaux" tout ce qui peut servir à la nourriture des animaux. Pour l'élevage intensif des animaux, les aliments peuvent comprendre, en plus de la biomasse algale, une base nutritionnelle et des additifs nutritionnels. L'essentiel de la ration alimentaire de l'animal est alors constitué par la "base 5 nutritionnelle" et la biomasse algale. Cette base est constituée à titre d'exemple par un mélange de céréales, de protéines et de matières grasses d'origine animale et/ou végétale. Les bases nutritionnelles pour animaux sont adaptées à l'alimentation de ces animaux et sont bien connues de l'homme du métier. Dans le cadre de la présente 10 invention, ces bases nutritionnelles comprennent par exemple du maïs, du blé, du pois et du soja. Ces bases nutritionnelles sont adaptées aux besoins des différentes espèces animales auxquelles elles sont destinées. Ces bases nutritionnelles peuvent déjà contenir des additifs nutritionnels comme des vitamines, des sels minéraux et des acides aminés. 15 Les additifs utilisés en alimentation animale peuvent être ajoutés pour améliorer certaines caractéristiques des aliments, par exemple pour en relever le goût, pour rendre plus digestes les matières premières des aliments pour animaux ou protéger les animaux. Ils sont fréquemment utilisés dans les élevages intensifs de grande envergure. 20 Les additifs utilisés en alimentation animale se déclinent, notamment, dans les sous-catégories suivantes (source EFSA): - additifs technologiques: par exemple, conservateurs, antioxydants, émulsifiants, stabilisateurs, régulateurs d'acidité et additifs pour l'ensilage; - additifs sensoriels: par exemple, arômes, colorants, 25 - additifs nutritionnels: par exemple, vitamines, am inoacides et oligo-éléments; - additifs zootechniques: par exemple, améliorateurs de digestibilité, stabilisateurs de flore intestinale; - coccidiostatiques et histomonostatiques (antiparasitaires). Dans un mode de réalisation, l'invention concerne des aliments pour animaux 30 d'élevage comprenant entre 1 et 60 %, de préférence entre 1 et 20%, de façon tout à fait préférentielle entre 3 et 8 % d'une biomasse séchée obtenue par le procédé selon l'invention. Dans un autre mode de réalisation, l'invention concerne des aliments pour animaux d'élevage comprenant entre 1 et 40 %, de préférence entre 5 et 10% 10 d'une biomasse non séchée obtenue par le procédé de l'invention. Selon un mode particulier de réalisation de l'invention, l'aliment est destiné aux animaux d'élevage, en particulier les bovins, les ovins, les porcins, les lapins, les volailles et les équidés. 5 Selon un autre mode particulier de l'invention, l'aliment est destiné aux animaux aquatiques, en particulier aux poissons, au moins jusqu'au stade alevins, y compris les poissons d'élevage et d'ornement. Selon un autre mode particulier de réalisation de l'invention, l'aliment est destiné aux animaux domestiques, animaux de compagnie et/ou animaux de 10 loisirs et les NACs. Enfin, selon un autre mode de réalisation de l'invention, la composition alimentaire est destinée à l'Homme. L'invention à également pour objet une composition cosmétique, nutraceutique ou pharmaceutique pour l'homme ou les animaux comprenant une 15 biomasse selon l'invention telle que décrite précédemment. Selon l'invention la composition cosmétique, nutraceutique ou pharmaceutique peut ne comprendre que de la biomasse, séchée ou non, transformée ou non, ou de la biomasse, séchée ou non, transformée ou non, mélangée à tout autre additif, véhicule ou support, utilisé dans le domaine de la 20 cosmétique ou de la pharmacie comme par exemple les conservateurs, les colorants, les régulateurs du pH. L'invention a aussi pour objet l'utilisation de la biomasse telle que décrite précédemment en thérapie, ainsi que dans la prévention et le traitement de la malnutrition. 25 EXEMPLES Matériel et Méthodes Biomasse lysée Les biomasses traitées par le procédé selon l'invention sont des biomasses de spiruline (Arthrospira platensis) et de Galdieria sulphurana souche UTEX 2919 30 (UTEX Culture Collection of Algae, 205 W. 24th St, Biological Labs 218, The University of Texas at Austin (A6700), Austin, TX 78712 USA) cultivées selon les méthodes usuelles de culture de ces souches. La biomasse lysée a une teneur en cellules lysées de 95% La teneur en matière sèche est de 10% 11 Mode opératoire Le procédé d'enrichissement s'opère par la répétition d'un rinçage du culot de la biomasse broyée en condition de pH acide. Pour ce faire l'opération implique l'utilisation d'une centrifugeuse, ici décrite par l'utilisation d'une SORVALL RC5B 5 plus et d'un rotor à angle fixe Sorvall SLA 3000. La biomasse broyée est centrifugée à 12000 x g pendant 15min, permettant de culoter au maximum la fraction insoluble. Le surnageant « fraction soluble » est retiré et remplacé par de l'eau. Le culot est resuspendu avant de réitérer l'opération de centrifugation, et le pH est contrôlé et ajusté si nécessaire à une valeur inférieure à pH 4,8. Ce 10 procédé ainsi répété 3 à 4 fois maximise l'enrichissement en protéine et lipides de la fraction insoluble. Analyses Les protéines totales sont estimées en utilisant la méthode Kjeldahl connue de l'homme du métier. Le profil en acides aminés par hydrolyse acide est réalisé 15 selon la méthode ISO 13903:2005; EU 152/2009. L'analyse de la teneur en lipides et de la composition se fait par GC/FID et étalonnage interne connue de l'homme du métier. Le profil des sucres est déterminé par Chromatographie ionique - Ampérométrique pulsée. Résultats 20 Nous avons réalisé un suivi de la composition de la phase lourde (PL ou fraction insoluble) après la lere extraction (PL1) et la 4eme (PL4) et l'avons comparé à celle du lysat d'entrée pour une biomasse de Galdieria sulphuraria souche UTEX 2919 (Tableaul) et pour une biomasse de Spiruline (Tableau 2). Les pourcentages sont exprimés par rapport à la Matière Sèche (MS). 25 Tableau C PC APC Sucres Protéines Acides Lipides totaux N*6,25 Aminés UTEX 2919 8,3% 0,99% 27,5% 58,8% 54% 6,5% UTEX 2919 PL1 5,2% 0,9% 14% 68,3% 62,7% 15% UTEX 2919 PL4 1,9% 0,3% 11,3% 73% 68,3% 16,1% On observe une nette augmentation de la teneur en protéines de la biomasse lysée dès le premier cycle suspension/acidification/récupération (plus de 6%). 12 Cette augmentation est encore plus marquée après le 4ème cycle de traitement (plus de 16%). Tableau 2 C PC APC Sucres Protéines totaux N*6,25 Spiruline 9,3% 2,8% 11,75% 68% Spiruline PL4 (pH 4) 5,3 % 1,2 % 13,8% 64,32% 5 Contrairement aux ARUs comme Galderia, la mise en oeuvre du procédé sur la spiruline entraine une diminution de la teneur en protéines dans la biomasse lysée insoluble à pH inférieur ou égal à 5 (Tableau 2). Pour une extraction à pH 4, pH inférieur au pHi de la phycocyanine (C-PC) de l'allophycocyanine (APC) nous pouvons observer une baisse dans de la quantité de phycocyanine et 10 d'allophycocyanine dans la phase lourde. A pH 4, la C-PC et APC n'étant pas soluble dans l'eau, les pertes observées dans la PL4 par rapport à la biomasse sont de certainement dues à une dégradation d'une partie de ces molécules à ce pH. Le contenu en protéines des différentes biomasses est représenté sur la 15 figure 1. Si l'on regarde dans le détail la composition en acides aminés dans les différents produits représentés sur la figure 2 on peut voir une augmentation globale de tous les acides aminés sur les phases lourdes, et des quantités supérieures ou égales à celles de la Spiruline pour la plus-part d'entre eux sauf pour l'alanine. 20 Si l'on prend en compte les recommandations de la FAO concernant les acides aminés essentiels pour l'alimentation humaine et que nous les comparons à la composition des différentes phases lourdes nous pouvons noter que les quantités sont toutes supérieures ou égales aux valeurs recommandées. Après plusieurs extractions il reste encore de la phycocyanine (C-PC et APC) 25 dans la phase lourde ce qui représente environ 3% de la masse sèche. La phycocyanine est connue pour être une molécule à fort pouvoir antioxydant. La composition en acides gras montre des quantités non négligeables d'acides gras insaturés de type omega 3, 6 et 9, sous forme de lipides polaires, représentant plus de 50% de la masse grasse qui représente environ 5% à 20% de la masse 30 sèche de la phase lourde (Tableau 3). 13 Tableau 3 Acides Gras % AG dans les Lipides Totaux (FAMEs) C8:0 Ac. caprylique 0.12 (± 0.3) C10:0 Ac. caprique 0.17 (± 0.38) C12:0 Ac. laurique 0.19 (± 0.39) C14:0 Ac. myristique 0,78 (± 0.58) C15:0 Ac. pentadécylique 0,27 (± 0,41) C16:0 Ac. palmitique 29,35 (± 1,96) C16:1 (n-7c) Ac. palmitoléique 0,45 (± 0,46) C17:0 Ac. margarique 0,15 (± 0,37) C18:0 Ac. stéarique 4,85 (± 0,95) C18:1 (n-7c) Ac. vaccénique 0,36 (± 0,44) C18:1 (n-9c) Ac. oléique w9 22,34 (± 1,74) C18:1 (n-9t) + C18:1 (n-12t) 0,14 (± 0,37) C18:2 (n-6c) Ac. linoléique (LA) w6 33,77 (± 2,09) C18:2 t2 0,09 (± 0,34) C18:3 (n-3) Ac. a-linolénique (ALA) w3 5,87 (± 1,02) C20:0 Ac. arachidique 0,19 (± 0,39) C20:1 (n-9c) Ac. gondoique 0,25 (± 0,41) C20:2 (n-6c) Ac. éicosodiénoique 0,46 (± 0,46) C20:3 (n-3c) Ac. eicosatriénoique 0,06 (± 0,33) C22:0 Ac. béhénique 0,07 (± 0,33) C24:0 Ac. Lignocérique 0,06 (± 0,33) Ratio w6 / w3 5,76 Les sucres sont en dessous du seuil de détection de la méthode, de même que les fibres (Tableau 4). 5 14 Tableau 4 Sucres % de MS Glucose REVENDICATIONS1. Procédé de production d'une biomasse de microorganismes lysés riche en protéines, le procédé comprenant les étapes de b.1. mise en suspension d'une biomasse de microorganismes lysés, b.2. acidification de la suspension jusqu'à un pH inférieur ou égal à 5, c. récupération de la fraction de biomasse lysée insoluble à pH inférieur ou égal à 5, et le cas échéant répétition des étapes b.1., b.2. et c. sur la fraction de biomasse 10 lysée insoluble à pH inférieur ou égal à 5 récupérée en c. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la suspension acide obtenue en b.2. a un pH inférieur ou égale à 4,5. 3. Procédé selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que la suspension acide obtenue par l'étape b.2. a une teneur en matière sèche de 1% à 15 30%. 4. Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que les étapes b.1. et b.2. sont consécutives ou simultanées. 5. Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'il comprend une étape préalable a. de lyse d'une biomasse de microorganismes 20 préalablement cultivés. 6. Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que la biomasse récupérée en c. est séchée. 7. Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que les microorganismes sont choisis parmi les algues rouges unicellulaires (ARUs) des 25 familles des Cyanidiaceae ou des Galdieriaceae. 8. Biomasse de microorganismes lysés riche en protéines susceptible d'être obtenue par le procédé selon l'une des revendications 1 à 7. 9. Biomasse selon la revendication 8, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins 60% de protéines par rapport à la matière sèche, et au moins une teneur 30 en sucres totaux inférieure à 20% par rapport à la matière sèche et/ou une teneur en glycogène inférieure à 10% par rapport à la matière sèche et/ou teneur en matières grasses d'au moins 5% par rapport à la matière sèche. 10. Aliment ou composition alimentaire pour l'homme ou les animaux caractérisée en ce qu'elle comprend une biomasse de microorganismes lysés telle 19 que définie selon les revendications 8 ou 9. 11. Biomasse de microorganismes lysés telle que définie selon les revendications 8 ou 9 pour son utilisation en thérapie. 12. Biomasse de microorganismes lysés telle que définie selon les 5 revendications 8 ou 9 pour son utilisation dans la prévention et le traitement de la malnutrition.