Brevet FR3080768A1 — publié le 20191108

La présente invention s'inscrit dans le domaine du traitement cosmétique de la peau. Plus particulièrement, elle concerne l'utilisation, pour lutter contre les effets de la pollution atmosphérique sur la peau d'un individu, d'une composition cosmétique à base d'un extrait végétal, plus précisément d'un extrait de la plante Sambucus nigra. La présente invention concerne également un procédé de traitement cosmétique de la peau d'un individu pour lutter contre les effets de la pollution atmosphérique. L'épiderme est constitué de quatre couches cellulaires, dans lesquelles on trouve quatre types de cellules : les kératinocytes, les mélanocytes, les cellules de Langerhans et les cellules de Merkel. Les kératinocytes sont les cellules les plus abondantes, elles représentent 80% des cellules et naissent dans la couche la plus profonde de l'épiderme. Ces cellules produisent de la kératine, ce phénomène étant qualifié de processus de kératinisation, ce qui leur permet de se différencier et ainsi de migrer vers la surface de l'épiderme. De cette manière, on retrouve les kératinocytes dans toutes les couches de l'épiderme. Au niveau de la couche la plus profonde, appelée couche basale, les kératinocytes forment une couche monocellulaire et sont ancrés sur la jonction dermo-épidermique par des hémidesmosomes et sur des jonctions intercellulaires latérales par des jonctions serrées ou desmosomes. Dans cette couche basale, les kératinocytes se divisent activement, chacun en donnant naissance à deux cellules filles, dont une qui migre vers la couche supérieure, la couche épineuse. La couche épineuse est caractérisée par la présence de cellules volumineuses, avec un noyau arrondi et de nombreux desmosomes. Le cytoplasme des cellules est constitué de tonofilaments de kératine en quantité importante. Au-dessus, la couche granuleuse est formée de trois couches de kératinocytes aplatis. Elle est caractérisée par la présence dans l'espace 2 extracellulaire de lipides qui jouent le rôle de ciment intracellulaire pour consolider, avec les desmosomes, toujours nombreux, les adhésions cellulaires. La couche cornée, la plus superficielle, est constituée de cellules 5 aplaties, complètement kératinisées. Les kératinocytes ne contiennent plus de noyaux. Ils deviennent des cornéocytes, remplis de kératine. La membrane plasmique s'épaissit. On distingue deux sous-couches : la couche compacte, en profondeur, qui assure la fonction barrière de l'épiderme, où les desmosomes sont remplacés par les cornéodesmosomes de structure plus 10 simple qui assurent la cohésion entre les cornéocytes ; et la couche desquamante, en surface, où se produit la desquamation des cellules cornées. Les facteurs environnementaux, et en particulier la pollution atmosphérique, sont des causes importantes de la dégradation de l'épiderme, qui se trouve en contact direct avec l'atmosphère. 15 La pollution atmosphérique est pour l'essentiel d'origine humaine, et elle est due à une mauvaise combustion des combustibles fossiles et de la biomasse. Parmi les principales sources de pollution atmosphérique, figurent les gaz d'échappement des véhicules, les émissions des usines et des centrales énergétiques, qui dégagent des composés organiques volatils, des 20 oxydes d'azote, des oxydes de carbone, de l'ozone, des métaux, des hydrocarbures aromatiques et des particules. A titre de polluants pouvant participer à la pollution atmosphérique, on peut en outre citer les solvants, le dioxyde de soufre, les métaux, la fumée de cigarette, etc. En zone urbaine, les éléments polluants présents dans l'atmosphère se déposent sous forme de 25 poussière, dite poussière urbaine, sur la peau. La peau du visage y est tout particulièrement exposée. La pollution atmosphérique engendre divers dommages sur la peau, et notamment un ralentissement du renouvellement épidermique, et l'altération des kératinocytes et de la cohésion cellulaire, ces dommages étant en 30 particulier associés à une diminution de la cohésion dermo-épidermique, entrainant la baisse des échanges métaboliques entre le derme et l'épiderme, 3 une altération des desmosomes et des tonofilaments, ainsi qu'une altération des kératinocytes avec un élargissement des espaces intercellulaires. L'épaisseur globale de l'épiderme diminue, l'homéostasie est modifiée et le renouvellement épidermique ralentit. 5 En ce qui concerne en particulier les kératinocytes, pendant leur migration vers la surface, ils subissent des modifications biochimiques et structurales comme la kératinisation. Les kératines, protéines complexes, sont présentes au niveau des différentes couches de l'épiderme avec des structures et des propriétés différentes. La synthèse de la protéine débute dans la couche 10 basale et se termine dans la cellule cornée. La différenciation se traduit également par l'apparition d'une matrice fibreuse intracornéocytaire, formée par l'agrégation de filaments de cytokératines grâce à la filaggrine formée lors de la transition du kératinocyte granuleux au cornéocyte. La kératine y est insoluble et résistante. Dans la partie supérieure de la couche cornée, la 15 filaggrine est complètement protéolysée, produisant des acides aminés permettant l'hydratation de la couche superficielle de l'épiderme (facteurs naturels d'hydratation, dits NMF). Au niveau de la couche granuleuse, les kératinocytes extrudent leur contenu lipidique (cholestérol, acides gras, céramides) dans l'espace intercellulaire. Ces lipides s'organisent en feuillets 20 intercornéocytaire jouant un rôle important dans la cohésion entre les cornéocytes. Au niveau de la couche cornée, il se forme une coque protéique rigide et résistante sous la membrane plasmique assurant la résistance du stratum cornéum, c'est la cornification. Des liaisons covalentes se forment entre différentes protéines (locrine, involucrine, cornifine, filaggrine, 25 cornéodesmosine...) catalysées par une activité transglutaminase. La dernière étape de différenciation correspond à la desquamation, au cours de laquelle se produit une destruction des membranes lipido-protéiques cornéocytaires et la dégradation enzymatique des cornéodesmosomes. Au niveau de l'épiderme, la cohésion cellulaire est assurée par les 30 jonctions adhérentes et les jonctions serrées. Les jonctions adhérentes assurent l'intégrité physique de l'épithélium en joignant les filaments d'actine de 4 deux cellules voisines. L'adhérence cellule-cellule fait intervenir différents types de protéines, dont les cadhérines. Les jonctions serrées sont des jonctions étanches qui ceinturent la cellule. Elles créent des occlusions qui interdisent entièrement la diffusion latérale des protéines ; l'espace intercellulaire est 5 totalement obturé. Au niveau des jonctions adhérentes, les cadhérines assurent une adhérence intercellulaire de type Ca2±-dépendante. Elles jouent un rôle essentiel dans l'adhérence entre les cellules et le contrôle de la prolifération et la différenciation cellulaire. Au niveau des jonctions serrées, les cadhérines forment des complexes avec des phosphoprotéines appelées 10 zonula occludine-1 et 2. Les éléments principaux contribuant à la formation de cette jonction sont deux protéines nommées claudine et occludine. Les desmosomes sont constitués de deux plaques denses protéiques situées sur la face interne des membranes plasmiques de deux cellules adjacentes, entre lesquelles on observe une ligne dense centrale appelée 15 Desmoglie, qui est constituée de glycoprotéines transmembranaires, permettant l'adhésion locale de deux cellules en joignant leurs filaments intermédiaires. Les glycoprotéines transmembranaires appartiennent à la famille des cadhérines et comprennent les desmogléines 1 et 3 et les desmocollines I et II, qui forment des interactions homophiles et hétérophiles 20 entre elles. Les cornéodesmosomes, résultant d'un remaniement des desmosomes au cours de la transformation kératinocyte-cornéocyte, sont responsables de la cohésion de la couche cornée. Les composés extracellulaires des cornéodesmosomes contiennent les cadhérines et la 25 cornéodesmosine aux propriétés d'adhésivité. En outre, l'activation kératinocytaire peut, suite à une agression extérieure par la pollution, déclencher une réaction inflammatoire. Les kératinocytes participent alors à la réponse immunitaire cutanée en produisant des cytokines pro-inflammatoires, telles que les interleukines et les 30 chemiokines. 5 La présente invention vise à proposer un moyen efficace pour lutter contre les effets néfastes de la pollution atmosphérique sur la peau. A l'origine de l'invention, il a été découvert par les présents inventeurs qu'un extrait végétal particulier permet d'atteindre un tel objectif, notamment 5 lorsqu'il est mis en oeuvre par application par voie topique sur la peau. Cet extrait végétal permet en particulier d'agir efficacement contre l'ensemble des désordres cutanés qui sont induits par la pollution atmosphérique, notamment d'agir, à la fois, contre le ralentissement du renouvellement épidermique, contre l'altération des kératinocytes et de la 10 cohésion cellulaire et contre les phénomènes inflammatoires déclenchés par l'exposition de la peau à la pollution. Parmi ses multiples effets bénéfiques, il a notamment été découvert par les présents inventeurs que cet extrait végétal active la différenciation des kératinocytes, ce qui participe à lutter contre les effets du vieillissement cutané, 15 qu'il améliore la cohésion cellulaire et rétablit les échanges métaboliques altérés par la pollution, et qu'il réduit l'expression des cytokines pro-inflammatoires produites par les kératinocytes. Ainsi, selon un premier aspect, la présente invention concerne l'utilisation cosmétique, non thérapeutique, pour lutter contre les effets de la 20 pollution atmosphérique sur la peau d'un individu, d'une composition cosmétique contenant un extrait de Sambucus nigra dans un véhicule cosmétiquement acceptable. On entend dans la présente description, par lutter contre les effets de la pollution atmosphérique sur la peau, aussi bien le fait de prévenir ces effets 25 néfastes, que celui de réparer les désordres cutanés induits par la pollution atmosphérique sur la peau. Cette définition exclut notamment la lutte contre les effets des rayonnements ultra-violets sur la peau. On englobe ici, dans le terme « peau », aussi bien la peau elle-même que les muqueuses, notamment les lèvres. 6 La composition cosmétique selon l'invention est de préférence adaptée pour une application par voie topique sur la peau. La plante Sambucus nigra, également nommée sureau noir, ou grand sureau, appartient à la famille des Caprifoliacées. C'est un arbuste à écorce 5 fendillée et à feuilles imparipennées, qui peut mesurer jusqu'à 6 mètres de haut et possède des grandes inflorescences de fleurs blanches à l'odeur très marquée. Ses baies noires à suc rouge violacé et à trois graines murissent dans la fin de l'été, et présentent un diamètre d'environ 6 cm. Comme exposé ci-avant, il a été découvert par les présents inventeurs 10 qu'un extrait de cette plante, et tout particulièrement un extrait obtenu à partir des fruits de cette plante (ces fruits étant également désignés par le terme « baies » dans la présente description), permet de réduire efficacement les effets néfastes de la pollution environnementale sur la peau, notamment en application par voie topique sur la peau. L'extrait de baies de sureau noir est 15 notamment capable de favoriser la cohésion des kératinocytes et leur différenciation en stimulant l'expression génique. Il est capable de diminuer le phénomène inflammatoire des kératinocytes et d'augmenter leur viabilité lorsqu'ils sont exposés à la poussière urbaine. Il permet notamment de réduire l'expression des gènes impliqués dans les phénomènes d'inflammation au 20 niveau des kératinocytes, ainsi que de piéger les radicaux libres, ce qui participe également avantageusement à lutter contre les effets néfastes de la pollution atmosphérique sur la peau. En particulier, un test d'exposition de kératinocytes humains normaux intoxiqués par la poussière urbaine, en présence d'un extrait de Sambucus 25 nigra conforme à l'invention, démontre un effet protecteur particulièrement important de cet extrait sur ces kératinocytes. Cet effet se traduit notamment par une diminution de la libération des interleukines 8 pour les cellules intoxiquées et par une augmentation de la viabilité cellulaire des cellules intoxiquées. 30 La poussière urbaine désigne ici un matériau particulaire atmosphérique collecté en zone urbaine, qui contient notamment des 7 hydrocarbures aromatiques polycycliques et des dérivés nitrés, des polychlorobiphényles et des pesticides chlorés, de l'éther décabromodiphényle, des dibenzo-p-dioxines et des dibenzofuranes polychlorés. L'extrait de Sambucus nigra conforme à l'invention présente en outre 5 un effet prodifférenciant sur la différenciation des kératinocytes, notamment par stimulation des gènes codant pour la filaggrine (FLG), l'involucrine (IVL), la transglutaminase 1 (TGM1), la loricrine (LOR), la petite protéine riche en proline de type 1B (SPRR1B) et la petite protéine riche en proline de type 1A (SPRR1A) ; un effet de stimulation des gènes de la jonction serrée et de la 10 jonction adhérente, tels que les gènes codant pour l'envoplakine (EVPL), la cornéodesmosine (CDSN), la desmogléine 1 (DSG1) et la desmocolline 1 (DSC1) ; ainsi qu'un effet d'inhibition de l'expression des gènes codant pour les marqueurs de l'inflammation, la chimiokine (motif C-C) ligand 20 (CCL20), l'interleukine 1, alpha (IL1A), l'interleukine 8 (IL8) et la chimiokine (motif C-X-C) 15 ligand 1 (CXCL1). Ceci se traduit par une meilleure efficacité de la fonction barrière de la peau, une meilleure hydratation de cette dernière et un effet apaisant. L'extrait de Sambucus nigra conforme à l'invention présente en outre avantageusement un effet antioxydant et de diminution de la peroxydation 20 lipidique. Ainsi, cet extrait de Sambucus nigra peut avantageusement être utilisé, selon l'invention, pour lutter contre, c'est-à-dire prévenir et/ou réparer, le vieillissement de la peau induit par la pollution atmosphérique, pour augmenter l'hydratation de la peau exposée à la pollution, pour apaiser les 25 irritations causées à la peau par la pollution et/ou pour maintenir ou améliorer sa souplesse, cette liste d'effets bénéfiques de l'extrait de Sambucus nigra selon l'invention n'étant nullement limitative. De manière préférentielle, l'extrait de Sambucus nigra mis en oeuvre est un extrait d'une partie aérienne de la plante, et plus particulièrement de ses 30 baies. Il peut s'agir notamment d'un extrait obtenu à partir de baies séchées. 8 Cet extrait peut-être obtenu par toute méthode d'extraction connue en elle-même, par exemple par macération, infusion, décoction, etc. Préférentiellement, l'extrait de Sambucus nigra mis en oeuvre selon l'invention est obtenu par macération. 5 Dans des modes de mise en oeuvre particuliers de l'invention, l'extrait de Sambucus nigra est obtenu par extraction hydro-alcoolique d'une partie aérienne de la plante, de préférence par extraction hydro-alcoolique de baies de Sambucus nigra. L'extraction peut par exemple être réalisée dans un mélange d'eau et 10 de glycol. Elle est de préférence réalisée dans un mélange d'eau et de pentylène glycol. Le pentylène glycol présente notamment l'avantage d'être un solvant 100 % naturel, obtenu à partir de la valorisation de résidus de maïs et de canne à sucre. De manière plus générale, les ingrédients entrant dans la constitution 15 de la composition cosmétique mise en oeuvre selon l'invention sont de préférence choisis pour être d'origine naturelle, et/ou pour pouvoir être obtenus de manière respectueuse pour l'environnement. La proportion de glycol dans l'eau est notamment comprise entre 20 et 70 % en volume, par rapport au volume total du mélange eau / glycol. 20 L'extraction peut par exemple être réalisée à température ambiante. Un extrait de baies de Sambucus nigra pouvant être mis en oeuvre selon l'invention répond notamment à l'une ou plusieurs, de préférence à l'ensemble, des caractéristiques ci-après : - une composition 100% naturelle, 25 - une masse sèche comprise entre 0,5 et 10 %, de préférence comprise entre 1,55 et 4,55 %, - un pH compris entre 3 et 8, de préférence compris entre 4 et 6, 9 - une densité comprise entre 0,7 et 1,4, de préférence comprise entre 0,8 et 1,2, - une concentration en flavonoïdes comprise entre 100 et 5000 pg/mL, de préférence comprise entre 300 et 1500 pg/mL, cette 5 concentration étant déterminée par un dosage colorimétrique selon la méthode de Dowd décrite par Subhashree Venugopal et al., dans Journal of Pharmacy Research 2011, 4(2), 464-466, - une concentration en anthocyanine comprise entre 50 et 3000 pg/mL, de préférence comprise entre 100 et 1000 pg/mL, cette 10 concentration étant déterminée selon la méthode du pH différentiel décrite dans la publication de Giusti et Wrolstad, dans Current protocols in food analytical chemistry, 2001, F1.2.1-F1.2.13, ou encore dans la publication de Wrolstad et al., dans Food Science & Technology 16, 2005, 423-428, 15 - une concentration en kuromanine supérieure ou égale à 20 pg/mL, de préférence supérieure ou égale à 30 pg/mL, cette concentration étant déterminée par chromatographie liquide haute performance (HPLC), selon la méthode décrite dans l'article de Perati et al., pour Thermo Fisher Scientific, « Rapid Separation of Anthocyanins 20 in Cranberry and Bilberry Extracts Using a Core-Shell Particle Column » (2016) (cet article étant consultable à l'adresse internet : https://assets.thermofishercom/TFS- Assets/CM D/posters/PN70895_EAS2013. pdf), - et/ou une concentration en sucres comprise entre 5000 et 25 20000 pg/mL, de préférence comprise entre 13000 et 12000 pg/mL, cette concentration étant déterminée par un dosage colorimétrique des sucres selon la méthode décrite dans la publication de Dubois, dans Nature 4265, 1951, 168-167. La composition cosmétique selon l'invention comporte de préférence 30 une quantité dudit extrait de Sambucus nigra comprise entre 0,25 et 2 % en 10 poids par rapport au poids total de la composition. Cette composition cosmétique peut en outre comporter un ou plusieurs autres agents actifs, notamment par voie topique, par exemple choisis parmi les agents antioxydants, les actifs hydrophiles ou lipophiles, les vitamines, les 5 agents hydratants, les huiles, les agents anti-UV, les vésicules lipidiques, etc., ou l'un quelconque de leurs mélanges. Dans des modes de mise en oeuvre particuliers de l'invention, la composition cosmétique contient en outre un extrait d'Eleutherococcus senticosus, de préférence de racines de la plante. 10 L'extrait de la plante Eleutherococcus senticosus, couramment désignée par le ternie éleuthérocoque, présente avantageusement un effet énergisant. L'extrait d'Eleutherococcus senticosus peut par exemple être obtenu par extraction, par exemple par macération, de racines de la plante dans un 15 mélange d'eau et de glycol, par exemple d'eau et de propylène glycol. La composition cosmétique mise en oeuvre selon l'invention peut en outre contenir tout additif classique en lui-même pour une composition cosmétique, par exemple un ou plusieurs des ingrédients suivants : colorant, pigment, conservateur, parfum, agent émollient et/ou humectant, tensiocatif, 20 émulsionnant, gélifiant, absorbant, agent stabilisant, diluant, agent neutralisant, etc. La composition cosmétique mise en oeuvre selon l'invention peut comporter tout véhicule cosmétiquement acceptable classique en lui-même, ce véhicule étant toutefois choisi pour être chimiquement inerte vis-à-vis de 25 l'extrait de Sambucus nigra mis en oeuvre. Par véhicule cosmétiquement acceptable, on entend un véhicule compatible avec la peau, les muqueuses, y compris l'intérieur des paupières et les lèvres, les ongles, les cheveux, et d'une manière générale toutes les matières kératiniques, notamment les cils. 11 Le véhicule mis en oeuvre est par exemple l'eau. Préférentiellement, le véhicule utilisé est choisi pour être adapté à une application de la composition cosmétique par voie topique sur la peau de l'individu concerné. 5 A cet égard, dans des modes de mise en oeuvre particulièrement préférés de l'invention, la composition cosmétique convient pour une application par voie topique, et l'invention prévoit l'utilisation de cette composition cosmétique par application par voie topique d'une quantité adéquate de cette composition cosmétique sur la peau de l'individu concerné, 10 notamment sur une zone de la peau qui est exposée ou susceptible d'être exposée à la pollution atmosphérique, par exemple sur le visage et le cou, sur les mains et/ou sur le corps. La composition mise en oeuvre selon l'invention peut se présenter sous toute forme classique en elle-même, par exemple sous forme d'une 15 crème ; d'une pommade ; d'un gel, par exemple anhydre ou huileux ; d'une solution ou d'une lotion, par exemple aqueuse, hydroalcoolique ou huileuse ; d'un lait ; d'un sérum ; ou d'une émulsion, par exemple de consistance liquide ou semi-liquide, du type lait, obtenue par dispersion d'une phase grasse dans une phase aqueuse ou inversement, ou de de consistance molle, semisolide 20 ou solide du type crème, gel, ou encore du type micro-émulsion. Elle peut notamment se présenter sous forme d'une crème de protection, de traitement ou de soin pour le visage, pour les mains ou pour le corps, d'un lait corporel de protection ou de soin, d'une lotion, d'un gel ou d'une mousse pour le soin de la peau. 25 Elle peut autrement se présenter sous forme d'une dispersion, du type lotion ou sérum, ou encore de micro-capsules, de micro-particules, ou de dispersions vésiculaires de type ionique et/ou non ionique et similaires. La composition cosmétique mise en oeuvre selon l'invention peut par exemple être appliquée par voie topique, sur la zone de peau de l'individu 30 concerné, notamment sur les zones de peau exposées ou susceptibles d'être 12 exposées à la pollution atmosphérique, en quantité efficace, à raison d'une ou deux fois par jour, par exemple le matin et le soir, et par exemple pendant une période comprise entre 1 semaine et 2 mois ou plus. Selon l'invention, la composition cosmétique peut en particulier être 5 utilisée pour lutter contre les effets, sur la peau, de la pollution atmosphérique résultant de la présence de poussière urbaine dans l'atmosphère. Elle est particulièrement efficace à cet effet. Elle peut notamment être utilisée pour augmenter la viabilité cellulaire des kératinocytes humains normaux intoxiqués par la poussière urbaine, ce qui participe avantageusement à lutter contre les 10 effets de la pollution atmosphérique sur la peau. La composition cosmétique mise en oeuvre selon l'invention peut en particulier être utilisée pour stimuler l'expression de gènes codant pour des protéines favorisant la cohésion cellulaire (par exemple EVPL, CDSN, DSG1, DSC1), et améliorer ainsi la jonction cellulaire, et/ou pour stimuler l'expression 15 de gènes codant pour des protéines favorisant la différenciation des kératinocytes humains normaux (par exemple FLG, IVL, TGM1, LOR, SPRR1B, SPRR1A), et présenter ainsi un effet pro-différenciant sur ces kératinocytes. Ces actions participent elles aussi avantageusement à la lutte contre les effets négatifs de la pollution atmosphérique sur la peau. 20 Selon un autre aspect, la présente invention concerne en outre un procédé de traitement cosmétique, non-thérapeutique, pour lutter contre les effets de la pollution atmosphérique sur la peau d'un individu. Ce procédé comprend l'administration, notamment l'application par voie topique sur la peau dudit individu, d'une composition contenant un extrait de Sambucus nigra, en 25 particulier un extrait de baies de Sambucus nigra. Ce procédé peut répondre à l'une ou plusieurs des caractéristiques décrites ci-avant dans la présente description. Les caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront plus clairement à la lumière des exemples ci-après, fournis à simple titre illustratif et 30 nullement limitatifs de l'invention, avec l'appui des figures 1 à 3, dans 13 lesquelles : - la figure 1 montre un graphe en barres représentant le % d'expression de 7 gènes spécifiques des jonctions serrées et des jonctions adhérentes pour des kératinocytes humains normaux cultivés en présence d'un 5 extrait de baies de Sambucus nigra conforme à l'invention, à une concentration de 0,5 % p/p dans le milieu de culture, par rapport au témoin sans extrait, pour lequel le niveau d'expression de chacun de ces gènes est fixé à 100 % ; - la figure 2 montre un graphe en barres représentant le % d'expression de 6 gènes spécifiques de la différenciation cellulaire pour des 10 kératinocytes humains normaux cultivés en présence d'un extrait de baies de Sambucus nigra conforme à l'invention, à une concentration de 0,5 % p/p dans le milieu de culture, par rapport au témoin sans extrait, pour lequel le niveau d'expression de chacun de ces gènes est fixé à 100 %; - et la figure 3 montre un graphe en barres représentant le % 15 d'expression de 4 gènes spécifiques de l'inflammation pour des kératinocytes humains normaux cultivés en présence d'un extrait de baies de Sambucus nigra conforme à l'invention, à une concentration de 0,5 % p/p dans le milieu de culture, par rapport au témoin sans extrait, pour lequel le niveau d'expression de chacun de ces gènes est fixé à 100 °A:, 20 A/ Préparation d'un extrait de fruits de Sambucus nigra Un procédé d'extraction de baies de Sambucus nigra est réalisé comme suit. Des baies de sont Sambucus nigra sont séchées, à une température 25 inférieure à 50°C, puis les baies séchées sont sourrises à macération dans un solvant constitué de pentylène glycol (Pentiol Green+C) commercialisé par la société Minasolvel0) et d'eau, contenant de 20 à 70 % en volume de pentylène glycol. A cet effet, les baies sont introduites à hauteur de 5 à 20 % en masse dans le mélange eau/pentylène glycol. 30 Le mélange est agité pendant 10 à 72 h à température ambiante et à 14 l'abri de la lumière, puis filtré. On obtient un extrait sous forme d'une solution liquide de couleur bordeaux, présentant une masse sèche comprise 1,55 et 4,55 %, un pH compris entre 4 et 6 et une densité comprise entre 0,8 et 1,2. 5 Sa concentration en flavonoïdes est comprise entre 300 et 1500 pg/mL, sa concentration en anthocyanine est comprise entre 100 et 1000 pg/mL (dont une concentration en kuromanine supérieure à 30 pg/mL), et sa concentration en sucres est comprise entre 13 000 et 12 000 pg/mL. L'absence de cytotoxicité de cet extrait a été démontrée par un test 10 d'évaluation de son potentiel irritant par application directe sur monocouche de fibroblastes de cornée de lapin, par la méthode de relargage du rouge neutre, ainsi que par un test d'évaluation de son potentiel irritant sur un modèle de peau reconstruite. Cet extrait est en outre non phototoxique et non sensibilisant. 15 B/ Tests d'efficacité de l'extrait de baies de Sambucus niqra B.1/ Protection contre les effets de l'exposition à la poussière urbaine L'évaluation de l'effet protecteur contre la pollution urbaine de l'extrait de baies de sureau noir obtenu à l'exemple A/ ci-dessus a été conduite à partir 20 d'un modèle de kératinocytes humains normaux NHEK intoxiqués par la poussière urbaine. La poussière utilisée a été récoltée en zone urbaine, et est constituée principalement d'hydrocarbures polycyliques aromatiques (PAH), de dérivés nitrés d'hydrocarbures polycyliques aromatiques, de polychlorobiphényles et pesticides organochlorés, de poly-bromo-diphényl- 25 éthers et de polychlorodibenzo-p-dioxines et dibenzofuranes. La poussière urbaine utilisée pour ce test est plus particulièrement conforme au Standard Reference Material® 1649b du National Institute of Standards & Technology des Etats-Unis, daté du 23 février 2009. Une telle 15 poussière urbaine est notamment commercialisée par la société Sigma Aldrich, sous la dénomination Urban dust NIST® SRM® 1649b. L'effet protectecteur de l'extrait a été évalué d'une part par sa capacité à inhiber le phénomène inflammatoire par le biais de la libération des 5 interleukines 8, et d'autre part par sa capacité à augmenter la viabilité des kératinocytes. Un test préliminaire de cytotoxicité a été conduit afin de vérifier la viabilité des kératinocytes en présence de l'extrait, par la méthode de réduction au MTT (bromure de 3-(4,5-diméthylthiazol-2-y1)-2,5-diphényl tetrazolium), par 10 suivi de la densité optique DO, et l'observation morphologique au microscope après 72 h d'incubation en milieu de culture. Il a ainsi été vérifié que les concentrations sélectionnées pour le test sont non cytotoxiques. Les kératinocytes ont été ensemencés en plaque de 96 puits et cultivés en milieu de culture (milieu Keratinocyte-SFM complémenté avec du 15 facteur de croissance épidermal à 0,25 ng/ml, de l'extrait pituitaire à 25 lig/m1 et de la gentamycine à 25 lig/m1) pendant 24 h, à 37 °C et 5 % de dioxyde de carbone. Le milieu a ensuite été remplacé par un milieu contenant ou non (témoin intoxiqué) l'extrait, à une concentration de 0,37 ou 0,5 % p/p, et les cellules ont été intoxiquées à la poussière urbaine à une concentration de 20 0,5 mg/mL, puis incubées pendant 72 h. En parrallèle, un témoin non intoxiqué a été réalisé. Le surnageant a ensuite été isolé pour doser les interleukines 8 (IL-8) par un kit de dosage par la méthode immuno-enzymatique ELISA (pour l'anglais « enzyme-linked immunosorbent assay »). Chaque condition a été 25 testée trois fois, et la valeur moyenne a été calculée. Le tapis cellulaire a en outre été analysé pour évaluer la viabilité cellulaire à l'aide du test de réduction au MTT. Les résultats obtenus sont montrés dans le tableau 1 ci-après. 16 Données de base Données Viabilité normalisées cellulaire Conditions IL-8 (3/0 du témoin (3/0 de (3/0 du témoin (pg/ml) intoxiqué protection intoxiqué Témoin non intoxiqué 135 40 100 133 Témoin intoxiqué 342 100 0 100 Témoin intoxiqué + 175 51 81 106 Extrait à 0,37 °A p/p Témoin intoxiqué + 153 45 92 112 Extrait à 0,50 (3/0 p/p Tableau 1 - Effet de l'extrait de baies de Sambucus nigra sur la libération des IL-8 et la viabilité cellulaire pour des kératinocytes humains normaux intoxiqués par la poussière urbaine Comme on peut le voir, dans les conditions « témoin non intoxiqué », 5 la libération des IL-8 par les kératinocytes humains normaux s'est révélée faible (135 pg/mL). L'intoxication des cellules par la poussière urbaine a stimulé le relargage du médiateur inflammatoire à 342 pg/mL en diminuant la viabilité cellulaire. L'extrait de baies de sureau noir obtenu à l'exemple A/, testé à 0,5 % 10 p/p, a protégé les cellules contre l'effet de la pollution urbaine en diminuant de 92 % la quantité d'IL-8 par rapport au témoin intoxiqué, et a également augmenté la viabilité cellulaire par rapport au témoin intoxiqué. A 0,37 % p/p, cet extrait s'est également révélé particulièrement efficace. Ces résultats démontrent que l'extrait de baies de sureau noir mis en 15 oeuvre a un effet protecteur des cellules de l'épiderme contre l'intoxication par la poussière urbaine. B.2/ Amélioration de la cohésion cellulaire L'évaluation de l'effet de l'extrait de baies de sureau noir obtenu à 20 l'exemple A/ ci-avant sur la cohésion cellulaire a été réalisée sur un modèle de kératinocytes humains normaux, en conditions basales, par analyse de l'expression (ARNm) de 7 marqueurs spécifiques des jonctions serrées et des 17 jonctions adhérentes, les gènes : CLDN1 (Claudine 1), CLDN4 (Claudine 4), EVPL (Envoplakine), CDSN (Cornéodesmosine), DSG1 (Desmogléine 1), DSC1 (Desmocolline 1) et CGN (Cirguline). A cet effet, les kératinocytes ont été ensemencés en plaque de 24 5 puits et cultivés en milieux de culture (milieu Keratinocyte-SFM complémenté avec du facteur de croissance épidermal à 0,25 ng/ml, de l'extrait pituitaire à 25 lig/m1 et de la gentamycine à 25 lig/m1) pendant 24 h, à 37 °C et 5 % de dioxyde de carbone. Le milieu a ensuite été remplacé par un milieu contenant ou non l'extrait de baies de sureau noir ou un composé référence (chlorure de 10 calcium à 1,5 mM). Les cellules ont ensuite été incubées pendant 48 h, puis kes ARN totaux en ont été extraits, de manière classique en elle-même. L'expression des marqueurs a été évaluée par transcription inverse suivie par polymérisation par réaction en chaîne (RT-PCR) sur les ARN totaux extraits des cellules. Les ADN complémentaires ont été synthétisés par 15 transcription inverse des ARN totaux. Les réactions de PCR ont ensuite été réalisées par PCR quantitative. Un test préalable de cytotoxicité a été mené afin de vérifier la viabilité cellulaire en présence de l'extrait de baies de sureau noir, par la méthode de réduction au MTT (par suivi de la densité optique DO) et l'observation 20 morphologique au microscope, après 48 h d'incubation des cellules en milieu de culture. Il a été vérifié que la concentration 0,5 % p/p en l'extrait est non cytotoxique. Les résultats obtenus sont montrés sur la figure 1. Comme on peut le voir sur cette figure, l'extrait selon l'invention à une 25 concentration de 0,5 % p/p a conduit à une stimulation de l'ensemble des marqueurs testés, avec une stimulation très significative de 4 marqueurs de la jonction serrée et jonction adhérante (EVPL, CDSN, DSG1, DSC1), notamment de DSG1 et DSC1. 18 Ceci démontre l'effet de cet extrait au niveau de l'adhésion des cellules, par le biais de la stimulation des cadhérines telles que les desmogléines et les desmocollines. 5 B.3/ Effet sur la différentiation des kératinocytes L'évaluation de l'effet de l'extrait de baies de sureau noir obtenu à l'exemple A/ ci-avant sur la différenciation des kératinocytes a été réalisée sur un modèle de kératinocytes humains normaux, en conditions basales, par analyse de l'expression (ARNm) de 6 marqueurs spécifiques de la 10 différenciation des kératinocytes, les gènes : FLG (Filaggrine), IVL (Involucrine), TGM1 (Transglutaminase 1), LOR (Loricrine), SPRR1B (Petite protéine riche en proline de type 1B), SPRR1A (Petite protéine riche en proline de type 1A). Les kératinocytes ont été ensemencés en plaque de 24 puits et 15 cultivés en milieu de culture, dans les conditions indiquées dans l'exemple B.2/ ci-avant, pendant 24 h. Le milieu a ensuite été remplacé par un milieu contenant ou non l'extrait de baies de sureau noir ou un composé référence (chlorure de calcium à 1,5 mM). Les cellules ont ensuite été incubées pendant 48 h. 20 L'expression des marqueurs a été évaluée par transcription inverse suivie par polymérisation par réaction en chaîne (RT-PCR) sur les ARN totaux extraits des cellules. Les ADN complémentaires ont été synthétisés par transcription inverse des ARN totaux. Les réactions de PCR ont ensuite été réalisées par PCR quantitative. 25 Un test préalable de cytotoxicité a été mené afin de vérifier la viabilité cellulaire en présence de l'extrait de baies de sureau noir, par la méthode de réduction au MTT (par suivi de la densité optique DO) et l'observation morphologique au microscope, après 48 h d'incubation en milieu de culture. Il a été vérifié que la concentration 0,5 % p/p en l'extrait est non cytotoxique. 30 Les résultats obtenus sont montrés sur la figure 2. 19 On y observe que l'extrait de baies de Sambucus nigra à 0,5 % p/p dans le milieu de culture a conduit à une stimulation de tous les marqueurs de la différenciation (FLG, IVL, TGM1, LOR, SPRR1B, SPRR1A), avec une expression de TGM1 et FLG particulièrement forte. 5 Ceci démontre l'effet de cet extrait au niveau de la différenciation des kératinocytes, par action sur l'expression des gènes de la filaggrine, de l'involucrine, de la transglutaminase, de la locrine et des protéines riches en proline. 10 B.4/ Effet anti-inflammatoire L'évaluation de l'effet de l'extrait de baies de sureau noir obtenu à l'exemple A/ ci-avant sur le phénomène inflammatoire a été réalisée sur un modèle de kératinocytes humains normaux, en conditions basales, par analyse de l'expression (ARNm) de 4 marqueurs spécifiques de l'inflammation, les 15 gènes : CCL20 (Chimiokine (motif C-C) ligand 20), IL1 A (Interleukine 1, alpha), IL8 (Interleukine 8) et CXCL1 (Chimiokine (motif C-X-C) ligand 1 (facteur stimulateur de croissance du mélanome, alpha)). Les kératinocytes ont été ensemencés en plaque de 24 puits et cultivés en milieu de culture, dans les conditions indiquées dans l'exemple B.2/ 20 ci-avant, pendant 24 h. Le milieu a ensuite été remplacé par un milieu contenant ou non l'extrait de baies de sureau noir ou un composé référence (chlorure de calcium à 1,5 mM). Les cellules ont ensuite été incubées pendant 48 h. L'expression des marqueurs a été évaluée par transcription inverse 25 suivie par polymérisation par réaction en chaîne (RT-PCR) sur les ARN totaux extraits des cellules. Les ADN complémentaires ont été synthétisés par transcription inverse des ARN totaux. Les réactions de PCR ont ensuite été réalisées par PCR quantitative. Un test préalable de cytotoxicité a été mené afin de vérifier la viabilité 30 cellulaire en présence de l'extrait de baies de sureau noir, par la méthode de 20 réduction au MTT (par suivi de la densité optique DO) et l'observation morphologique au microscope, après 48 h d'incubation en milieu de culture. Il a été vérifié que la concentration 0,5 % p/p en l'extrait est non cytotoxique. Les résultats obtenus sont montrés sur la figure 3. 5 On y observe que l'extrait de baies de Sambucus nigra à 0,5 % p/p dans le milieu de culture a conduit à l'inhibition des marqueurs de l'inflammation (CCL20, UA, IL8, CXCL1), avec une forte inhibition d'IL8 et CXCL1. Ceci démontre l'effet de cet extrait au niveau de l'inflammation des 10 kératinocytes, par action sur l'inhibition de l'expression des gènes codant pour les interleukines 8, Ides chimiokines ligand 1 et 20 et les interleukines 1 alfa. B.5/ Effet antioxydant L'activité de piégeur de radicaux libres de l'extrait de baies de 15 Sambucus nigra obtenu à l'exemple A/ ci-avant a été évaluée par le test au DPPH (1,1-diphény1-2-picrilhydrazyl), mis en oeuvre selon le protocole décrit dans la publication de Buenger et al., dans International Journal of Cosmetic Science, 28, 2006, 135-145. Le résultat de ce test est exprimé en % de piégeage de radicaux 20 libres. Le DPPH est un radical stable de par la délocalisation d'un électron libre autour de la molécule. Cet électron célibataire engendre une coloration violette du DPPH caractérisée par une bande d'absorption centrée à 520 nm. Lorsque le DPPH est mélangé à une substance capable de donner un atome d'hydrogène, le DPPH passe sous forme réduite et la couleur disparaît. L'acide 25 ascorbique est utilisé en tant que témoin positif. L'absorbance étant diminuée par la réduction du radical DPPH, le pourcentage d'inhibition de ce radical se calcule selon l'équation : 21 % de réduction du DPPH = % d'inhibition du DPPH = (Ao-Ae) / Ao où Ao représente l'absorbance de la référence (acide ascorbique) et Ae représente l'absorbance de l'échantillon testé Les résultats obtenus sont montrés dans le tableau 2 ci-dessous. Substance testée Concentration % d'inhibition Acide ascorbique 0,1 mg/m1 97,47 Extrait selon l'invention 0,25 % p/p 91,21 5 Tableau 2 - Activité de piégeage de radicaux libres d'un extrait de baies de Sambucus nigra mesurée par le test DPPH Comme on peut le constater, l'extrait de baies de sureau noir, dès la concentration de 0,25 % p/p, présente une efficacité importante et permet d'inhiber 91 % des radicaux DPPH. 10 C/ Composition cosmétique Une composition cosmétique conforme à la présente invention, sous forme de crème, contenant en tant qu'actif anti-pollution un extrait de baies de Sambucus nigra tel qu'obtenu à l'exemple A/, répond à la composition indiquée 15 dans le tableau 3 ci-après. Dans ce tableau, les pourcentages de chaque constituant sont indiqués en % en poids par rapport au poids total de la composition (°/0 p/p). L'extrait de racines d'Eleutherococcus senticosus est un extrait liquide obtenu par extraction par un mélange de propylène glycol et d'eau (50/50), 20 contenant 1 à 2 % de masse sèche et de densité comprise entre 1,01 et 1,06. 22 Ingrédient Fonction % pi p Copolymère d'ammonium acryloyldiméthyltaurate / gélifiant 0,5-2 vinylpyrrolidone Beurre de karité / tocophérol huile végétale 2-10 Butylène glycol humectant 2-10 Stéarate de glycéryle /cétéareth-12/ alcool cétéarylique émulsionnant 2-10 Glycérine humectant 2-10 Alcool cétylique stabilisant 0,5-5 Triglycérides capryliques / capriques émollient 5-10 Caprylyl glycol/ acide caprylhydroxamique /glycérine conservateur 0,1-1 Extrait de racines d'Eleutherococcus senticosus actif 0,2-2 Extrait de fruits de Sambucus nigra actif 0,2-2 Eau - qsp 100 Tableau 3 - composition cosmétique conforme à l'invention Cette crème peut être appliquée, à raison d'une ou deux fois par jour, par exemple le matin et le soir, sur la peau du visage et du cou. Elle permet de lutter efficacement contre les effets de la pollution atmosphérique sur la peau, REVENDICATIONS1. Utilisation cosmétique pour lutter contre les effets de la pollution atmosphérique sur la peau d'un individu, d'une composition contenant un extrait de Sambucus nigra dans un véhicule cosmétiquement acceptable. 2. Utilisation selon la revendication 1, selon laquelle ledit extrait de Sambucus nigra est un extrait de baies de Sambucus nigra. 3. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 2, selon laquelle ledit extrait de Sambucus nigra est obtenu par extraction hydroalcoolique d'une partie aérienne de Sambucus nigra, de préférence de baies de Sambucus nigra. 4. Utilisation selon la revendication 3, selon laquelle ladite extraction est réalisée dans un mélange d'eau et de glycol, de préférence dans un mélange d'eau et de pentylène glycol. 5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, comprenant l'application par voie topique sur la peau dudit individu d'une quantité adéquate de ladite composition. 6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, selon laquelle ladite composition comporte une quantité dudit extrait de Sambucus nigra comprise entre 0,25 et 2 % en poids par rapport au poids total de la composition. 7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, selon laquelle ladite composition contient en outre un extrait d'Eleutherococcus sen ticosus. 8. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, selon laquelle ladite composition se présente sous forme d'une crème, d'une 24 pommade, d'un gel, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum ou d'une émulsion. 9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, selon laquelle ladite pollution atmosphérique résulte de la présence de poussière urbaine dans l'atmosphère. 5 10. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, pour stimuler l'expression de gènes codant pour des protéines favorisant la cohésion cellulaire et/ou l'expression de gènes codant pour des protéines favorisant la différenciation des kératinocytes humains normaux. 11. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, pour 10 augmenter la viabilité cellulaire des kératinocytes humains normaux intoxiqués par la poussière urbaine.