Brevet FR3077509A1 — publié le 20190809

Dispositif de stockage à température ambiante de matériels biologiques La présente invention concerne un dispositif de stockage à température ambiante de matériel biologique, comprenant au moins un récipient (1) constitué d'un fond (5) et d'une paroi latérale, ledit récipient (1) comprenant sur sa paroi latérale interne un moyen permettant de maintenir au-dessus et séparé du fond du récipient un support susceptible de contenir ledit matériel biologique à stocker. La présente invention concerne également un dispositif de stockage à température ambiante de matériel biologique comprenant un assemblage (4) solidaire d'au moins 2, de préférence un multiple de 8, de manière plus préférée 96, 384, ou 1536 dispositifs selon l'invention, et un dispositif d'archivage de matériels biologiques, pouvant accueillir au moins 2 assemblages (4) selon l'invention. Enfin, la présente invention concerne une de stockage de matériel biologique et une méthode de désarchivage de matériel biologique. Le domaine de l'invention concerne en particulier le stockage et l'archivage de matériels 15 biologiques. A ce jour, les dispositifs permettant le stockage de quelques milliers à plusieurs millions d'échantillons de nature biologique sont de deux types. Ceux permettant leur stockage à des températures négatives et ceux permettant leur stockage à température ambiante. 20 Le stockage des échantillons à des températures négatives pouvant atteindre les conditions de congélation voir de cryogénisation nécessite des infrastructures complexes, coûteuses à contrôler et à maintenir en service et dont la mise en oeuvre nécessite l'emploi de personnels qualifiés notamment dans l'application de procédures strictes afin de prévenir tous risques 25 d'incidents pouvant altérer l'intégrité des personnes et des échantillons. De plus, suivant le format du récipient dans lequel sont conditionnés de manière unitaire les échantillons (tubes 550 ml, microtubes 0,1-2 ml) l'espace nécessaire pour la conservation de plusieurs milliers à plusieurs millions d'échantillons est également un facteur pouvant devenir limitant dans le choix de ce mode de stockage. Afin de faciliter leur préparation et réduire la superficie des 30 zones de stockage, les échantillons peuvent être conditionnés dans des microplaques de format compatible au format international SBS (Society of Biomolecular Screening) pouvant accueillir 2 96, 384 ou 1536 échantillons. Dans ce format, les échantillons d'une même microplaque, bien qu'individualisés dans un emplacement distinct, sont solidaires les uns des autres. En cas de nécessité de réutiliser un échantillon parmi les autres, tous les échantillons doivent ainsi subir l'étape de décongélation afin de permettre de récupérer l'échantillon d'intérêt puis de 5 recongélation afin de poursuivre leur préservation. Ces étapes successives de congélation, décongélation sont de nature à dégrader les échantillons. Dans le but de préserver leur intégrité, le transport de ces échantillons doit également être réalisé dans les mêmes conditions que leur stockage. Le stockage des échantillons à température ambiante permet d'éliminer les contraintes de 10 dégradation des échantillons par les étapes successives de congélation/décongélation, ne nécessite pas d'infrastructures complexes à mettre en oeuvre et à entretenir. Selon ce mode de conservation, les frais de transport sont également diminués. On peut ainsi estimer que les frais de transport d'un même échantillon à une température négative sont environ 5 fois plus élevés qu'à température ambiante. En revanche, le processus technique de préparation des échantillons pour permettre leur stockage peut lui s'avérer assez complexe et peut nécessiter les services extérieurs de plateformes industrielles disposant du savoir-faire. C'est notamment le cas des services que peut proposer la société Imagene (France) dans son procédé de conservation de longue durée de molécules d'ADN (brevet EP 1 075 515 B1 (PCT/FR1998/000912 du 06/05/1998). Dans ce procédé industriel, l'ADN est déshydraté puis conservé dans une capsule métallique, appelée DNAshell®, de 0,7 cm3, anhydre, anoxique et étanche. Il est possible de conserver ainsi plus de 60000 échantillons sur une superficie d'environ 1 m2 et une hauteur d'environ 30 cm soit environ 400 000 échantillons pour 2 m3 (1 m2 de surface au sol et 2 m de haut). D'autres solutions techniques beaucoup plus simples à mettre en oeuvre sont également présentes sur le marché. Il s'agit notamment des solutions DNAStable® et DNAStable® LD proposées par la société Biomatricia (USA) (demande de brevet US 20110081363 du 11/05/2010) ou de la solution GenTegra-DNA® (W02003040991 A2, US 7142987 B2, US 7584240 B2 GenVault Corporation) proposée par la société GenTegra qui permettent de conserver l'ADN sous forme déshydratée. Ces solutions peuvent ainsi être contenues dans des microtubes unitaires de 0,5 ou 1,7 ml dotés ou pouvant supporter un bouchon mais également dans des microtubes unitaires de 0,3 ou 0,75 ml pouvant être insérés dans une microplaque à 96 positions. Dans ce format de microplaque 96, les microtubes peuvent supporter un bouchon individuel mais plus généralement tous les échantillons sont rendus solidaires entre eux à la fin du processus de conservation par l'apposition d'un film afin d'assurer l'étanchéité des 3 microtubes. Le procédé de conservation des échantillons sous forme déshydratée est composé de cinq étapes : 1. ajout d'un volume d'ADN sur la solution DNAStable® ou GenTegra-DNA® ; 2. homogénéisation de la solution à l'aide d'une micropipette ; 5 3. séchage pendant 4 à 72 heures à température ambiante ou 10 à 75 minutes à l'aide d'un concentrateur en fonction du volume d'ADN à déshydrater ; 4. fermeture du microtube ou scellage de la microplaque ; 5. conditionnement dans une cabine de séchage permettant de maintenir une hygrométrie REVENDICATIONS1. Dispositif pour le stockage à température ambiante de matériel biologique, comprenant au moins un récipient (1) constitué d'un fond (5) et d'une paroi latérale, caractérisé en ce que ce ledit récipient (1) comprend sur sa paroi latérale interne un moyen permettant de maintenir au-dessus et séparé du fond (5) du récipient (1) un support susceptible de contenir ledit matériel biologique à stocker.2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce que ledit matériel biologique à stocker contient des acides nucléiques, ADN et/ou ARN. Dispositif selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que ledit récipient (1) est de forme cylindrique. Dispositif selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que ledit support susceptible de contenir ledit matériel biologique à stocker est un support synthétique ou biologique. Dispositif selon l'une des revendications 1 et 4 caractérisé en ce que ledit récipient (1) est en plastique ou en métal. Dispositif selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que ledit moyen permettant de maintenir le support susceptible de contenir ledit matériel biologique à stocker au-dessus et séparé du fond (5) du récipient (1) est un anneau (3), de préférence en métal ou en plastique. Dispositif selon la revendication 6, caractérisé en ce que ledit anneau (3) est moulé avec le récipient (1). Dispositif selon les revendications précédentes, caractérisé en ce que le support susceptible de contenir ledit matériel biologique à stocker est choisi parmi les supports constitué de matière choisie parmi les fibres textiles, les plastiques, le papier, la paraffine utilisée pour des coupes histologiques dans le domaine de l'anatomopathologie, de préférence du papier traité chimiquement pour permettre la préservation 19 dans le temps et à température ambiante de l'ADN extrait d'un échantillon biologique ou contenu dans un échantillon biologique. 9. Dispositif selon l'une des revendications 1 et 8, caractérisé en ce que ledit matériel 5 biologique à stocker contient un acide nucléique, ADN ou ARN, d'origine animale, de préférence humaine, végétale, bactérienne, plasmidique, ou virale. 10. Dispositif selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que ledit récipient (1) est revêtu d'un couvercle (2), de préférence constitué du même matériau que le récipient 10 (1), permettant de rendre l'ensemble étanche à l'air et à l'eau, ledit couvercle (2) comprenant de préférence un joint renforçant l'étanchéité. 11. Dispositif pour le stockage à température ambiante de matériel biologique caractérisé en ce qu'il comprend un assemblage solidaire (4) d'au moins 2, de préférence un 15 multiple de 8, de manière plus préférée 96, 384, ou 1536 dispositifs selon l'une des revendications 1 et 10. 12. Dispositif selon la revendication 11, caractérisé en ce que les récipients (1) sont reliés 2 à 2 entre eux par une tige sécable (6) permettant de détacher un ou plusieurs récipient 20 (1) de l'ensemble. 13. Dispositif selon la revendication 11 ou 12, caractérisé en ce que chacun desdits récipients (1) de l'assemblage (4) est revêtu d'un couvercle (2) qui lui est solidaire permettant de rendre chacun desdits récipients (1) de l'assemblage (4) étanche à l'air et 25 à l'eau, de préférence lesdits couvercles (2) étant reliés deux à deux entre eux par des tiges sécables (6). 14. Dispositif selon la revendication 13, caractérisé en ce que ledit couvercle (2) comprend un joint permettant de renforcer l'étanchéité du récipient (1). 30 15. Dispositif pour l'archivage à température ambiante de matériels biologiques, caractérisé en ce qu'il peut accueillir au moins 2 dispositifs selon l'une des revendications 11 à 14, de préférence entre 2 et 50, de manière encore plus préférée entre 2 et 10, ledit dispositif 20 d'archivage pouvant être ouvert ou fermé par une fermeture (8) le rendant étanche à l'air et à l'eau. 16. Dispositif d'archivage selon la revendication 15, caractérisé en ce qu'il comprend un 5 système (9) permettant de faire le vide d'air une fois fermé. 17. Dispositif selon les revendications 1 à 16, caractérisé en ce que chacun desdits récipients (1), assemblages (4) et/ou dispositifs d'archivages contient un identifiant unique passif, de préférence un identifiant par code-barres bi- ou tridimensionnelle à haute densité, de 10 type Datamatrix 2D ou 3D, et/ou un identifiant unique actif, de préférence une puce basée sur la technologie d'identification par radio fréquence (RFID). 18. Méthode de stockage de matériel biologique contenant de l'acide nucléique comprenant les étapes de : 15 a. Disposer un support sur le moyen permettant de maintenir ledit support au- dessus et séparé du fond (5) du récipient (1) dans le dispositif de stockage selon l'une des revendications 1 à 14 et 17. b. Disposer manuellement ou au moyen d'un automate le matériel biologique contenant de l'acide nucléique sur le support selon l'une des revendications 1 à 20 14 et 17 ; 19. Méthode de stockage de matériel biologique selon la revendication précédente, comprenant en plus une étape c. de : c. Refermer le dispositif de stockage selon l'une des revendications 10 à 14 et 17 25 à l'aide dudit couvercle (2). 20. Méthode de stockage de matériel biologique selon la revendication précédente, comprenant en plus les étapes de : d. Insérer le dispositif de stockage contenant ledit matériel biologique, ou 30 l'assemblage (4) dont il fait partie, dans le dispositif d'archivage selon l'une des revendications 15 à 17 ; e. Refermer ledit dispositif d'archivage selon l'une des revendications 15 à 17. 21 21. Méthode de stockage de matériel biologique selon la revendication précédente, comprenant en plus l'étape f. de : f. Faire le vide d'air du dispositif d'archivage selon l'une des revendications 16 et 5 17. 22. Méthode de désarchivage de matériel biologique comprenant les étapes de : a. Déterminer quel matériel biologique est à désarchiver ; 10 b. Identifier par l'intermédiaire d'un lecteur d'identifiant actif la localisation dudit matériel biologique à désarchiver à l'aide de l'identifiant unique actif selon la revendication 17 présent sur le dispositif d'archivage dans lequel il est archivé ; c. Ouvrir le dispositif d'archivage selon les revendications 15 à 17 dans lequel ledit matériel biologique a été identifié ; 15 d. Identifier, à l'aide des identifiants uniques passifs ou actifs selon la revendication 17, l'assemblage (4) contenant ledit matériel biologique à désarchiver ; e. Identifier, à l'aide des identifiants uniques passifs ou actifs selon la revendication 17, ledit dispositif de stockage contenant ledit matériel biologique 20 à désarchiver ; f. Détacher le dispositif de stockage contenant ledit matériel biologique à désarchiver en sectionnant les tiges sécables (6), de préférence par simple pression ou découpage ; g. Sortir le matériel biologique à désarchiver contenu dans ledit dispositif de 25 stockage manuellement ou à l'aide d'un automate.