Brevet FR3081325A1 — publié le 20191129

I DILTIAZEM POUR SON UTILISATION DANS LE TRAITEMENT DES INFECTIONS MICROBIENNES DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention concerne un composé pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'infections par des microorganismes pathogènes. Plus particulièrement, la présente invention concerne un composé pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'infections par des microorganismes pathogènes des épithéliums des tractus respiratoires et/ou intestinaux. ETAT DE LA TECHNIQUE Infections par des microorganismes pathogènes des épithéliums des tractus respiratoires et/ou intestinaux Les infections respiratoires aigües (IRA) représentent une des causes principales de consultations, d'hospitalisations et de décès dans le monde, en étant notamment la première cause de mortalité chez les jeunes enfants avec près de 2 millions de décès par an. Chaque année, pour tenter de traiter ces diverses infections respiratoires, le coût pour les sociétés est estimé entre 1,5 à 2 milliards d'euros. Parmi les agents étiologiques responsables des IRA, les virus occupent une place prépondérante. Ils sont en effet retrouvés dans la majorité des cas de pneumonies infantiles et sont un facteur prédisposant des pneumonies bactériennes chez l'adulte. Parmi les virus les plus représentatifs dans la fréquence et la morbidité, on dénombre notamment les virus influenza de type A et B, qui constituent de plus un facteur de risque pandémique récurrent, ainsi que le virus respiratoire syncytial (hRSV), les virus parainfluenza (hPIV) et le métapneumovirus humain (hMPV). De plus, l'émergence de nouveaux virus de la famille des Coronaviridae tels que le SRAS et le virus MERS-CoV récemment décrit, constitue très probablement un grave problème sanitaire en devenir. D'autres agents responsables des IRA sont les bactéries. Parmi les bactéries pathogènes les plus représentatives, on dénombre notamment S. pneumonia, P. aeruginosa, S. aureus et H. influenza. Ces bactéries pathogènes sont des agents étiologiques contribuant à une co- morbidité et une co-mortalité accrues dans le cas des co-infections respiratoires, et elles sont responsables de l'émergence et de la diffusion croissante de souches de bactéries 2 résistantes aux antibiotiques qui remettent fondamentalement en question l'efficacité des traitements antibiotiques classiques tant chez l'Homme que chez l'animal. A l'exception des virus influenza, il n'existe pour l'heure aucun vaccin, ni molécule antivirale efficace pour prévenir ou traiter les infections par ces différents virus respiratoires 5 pathogènes. En outre, dans le cas des virus influenza, les délais et l'efficacité variable de la vaccination, ainsi que l'émergence croissante de virus résistants aux antiviraux, sont aujourd'hui très préoccupants. En ce qui concerne la résistance aux antibiotiques des bactéries pathogènes responsables de surinfections, le Centre européen de contrôle des maladies évalue à 25 000 le nombre de 10 décès par an en Europe résultant de la résistance aux antibiotiques. Une surmortalité équivalente est observée aux Etats Unis par le CDC d'Atlanta. L'augmentation de la résistance sera responsable d'une augmentation dramatique de ces chiffres comme cela a été modélisé dans le rapport de Lord J. O'Neil sur l'impact de la résistance aux antibiotiques d'ici 2050. 15 En février 2017, l'OMS a publié une liste de bactéries résistantes représentant une menace à l'échelle mondiale : P. aeruginosa représente entre autres une urgence critique car elle résiste à un grand nombre d'antibiotiques ; S. pneumonia et S. aureus, résistantes à la méticilline (SARM), sont responsables d'infections diverses, pulmonaires et osseuses, ainsi que de septicémies, en particulier chez les patients les plus sensibles. 20 Ainsi, le développement de nouveaux traitements prophylactiques et thérapeutiques constitue un objectif majeur de santé publique. Le succès des nouvelles stratégies de traitement des infections par ces pathogènes repose en grande partie sur une meilleure caractérisation de leur biologie cellulaire et de leurs interactions moléculaires et fonctionnelles avec leur hôte. Les infections intestinales sont également une cause importante d'hospitalisations et dans 25 certains cas de décès. Dans les pays développés, les causes les plus fréquentes de gastro- entérite aiguë chez l'adulte immunocompétent sont les norovirus et les rotavirus, ainsi que les espèces et genres de bactéries suivants : Campylobacterspp., Salmonella spp., Escherichia cou, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, et Clostridium Interférons de type Ill 30 Les Interférons de type III, aussi désignés interférons lambda (2^,), constituent la première ligne de défense antimicrobienne au niveau de l'épithélium des tractus respiratoire et intestinal, en contribuant à l'inhibition initiale de la dissémination des pathogènes, sans toutefois déclencher de réponse inflammatoire (Andreakos et al., 2017). Ces interférons de 3 type III sont effectivement produits très tôt en réponse à l'activation par les pathogènes des senseurs cellulaires de l'hôte, de type récepteurs Toll-like ou effecteurs cytoplasmiques. Ces interférons de type III activent l'expression de nombreux gènes dits « ISGs » (via l'activation des voies JAK/STAT), qui confèrent une activité inhibitrice contre les pathogènes 5 respiratoires, en inactivant par exemple l'entrée cellulaire des virus (gène IFITM), ou leur réplication (gène OAS, OASL, IFIT1, IFIT2, IFIT13, ISG15). Cette réponse anti-pathogène précoce, dite « de type interféron de type III », est notamment prédominante dans la réponse initiale de l'épithélium respiratoire à l'infection par les virus influenza (Galani et al., 2017). 10 Les interférons de type III ont déjà été évalués en essai clinique pour traiter les infections à hépatite B et C, et ont démontré des effets secondaires moins importants en comparaison aux traitements par les interférons de type I (Chan et al., 2016). L'utilisation des interférons de type III comme traitement antiviral non inflammatoire contre les infections à virus influenza a été récemment proposée (Davidson et al., 2016). 15 II serait avantageux de stimuler la production endogène d'un ou plusieurs interférons de type III pour lutter contre les infections des épithéliums respiratoires et/ou intestinaux, notamment contre les infections virales de ces épithéliums. Toutefois, à l'heure actuelle, aucun composé thérapeutique ayant cette activité stimulatrice n'est connu. Ainsi, seule l'administration d'interféron de type III exogène a pu être testée 20 jusqu'à présent. Le diltiazem, un agent inhibiteur des canaux calciques Le diltiazem est une molécule membre de la famille des benzothiazépines, référencée sous le numéro CAS 42399-41-7. Cette molécule peut être sous la forme de deux énantiomères Lcis et D-cis, ou d'un mélange racémique. 25 Le diltiazem est connu depuis plus de 30 ans et est approuvé, en Europe et aux Etats-Unis, par les autorités règlementaires du médicament. Il peut être administré sous forme d'hydrochloride de diltiazem. Cardizem®, Cartia®, Taztia® et Dilacor0 sont ses dénominations commerciales les plus courantes. De nombreuses formulations sont disponibles, en particulier des formulations à libération 30 prolongée. Le diltiazem est disponible sous différentes formes galéniques, telles que sous forme de crème pour application topique, sous forme de comprimés ou capsules pour 4 administration orale, sous forme de poudre pour préparation de solution injectable ou sous forme de préparations pharmaceutiques pour inhalation (VVO 02/094238, US 4,605,552). Son action physiologique connue est l'inhibition des canaux calciques, et donc l'inhibition des flux de calcium intracellulaires. Le diltiazem freine notamment l'entrée 5 du calcium transmembranaire au niveau de la fibre musculaire myocardique et de la fibre musculaire lisse des vaisseaux. Ceci permet de diminuer la concentration intracellulaire calcique atteignant les protéines contractiles. Chez l'homme, l'administration de diltiazem est indiquée pour son action vasodilatatrice, dans le but de réduire le travail cardiaque. Il est ainsi utilisé dans la prise en charge des désordres 10 cardiaques et circulatoires tels que les angines de poitrine, l'hypertension artérielle, les ischémies myocardiques et la tachycardie. D'autres utilisations thérapeutiques du diltiazem ont également été proposées dans la littérature, sans toutefois que des médicaments soient déjà approuvés par les autorités règlementaires pour ces nouvelles applications thérapeutiques. 15 La demande internationale VVO 87/07508 décrit l'utilisation de composés thérapeutiques inhibant les influx de calcium dans la cellule, tels que le diltiazem, pour le traitement d'infections virales liées au cytomégalovirus ou à l'herpès. La demande internationale VVO 2011/066657 décrit l'utilisation d'un inhibiteur des canaux calciques, tel que le vérapamil ou le diltiazem, pour le traitement ou la prévention d'infections 20 virales et/ou bactériennes, ou encore de maladies auto-immunes. Les virus concernés sont notamment ceux de l'herpès buccal, de l'herpès génital et du zona. La demande internationale VVO 2011/126071 décrit l'utilisation de composés inhibant les influx de calcium dans la cellule, tel que le diltiazem, pour le traitement d'infections virales, notamment celles liées aux virus influenza. Il est spécifiquement expliqué que le diltiazem 25 inhibe l'interaction entre le virus et les canaux calciques, et ainsi bloque l'entrée du virus dans les cellules. La demande internationale VVO 2016/146836 divulgue des compositions pharmaceutiques ou vétérinaires comprenant du diltiazem pour leur utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'une infection par les virus influenza. 30 Le brevet EP 1 117 408 décrit l'utilisation de diltiazem, en tant que composé inhibiteur des canaux calciques, pour traiter des pathologies liées à la dégénérescence des photorécepteurs de la rétine. 5 Toutefois, toutes les actions bénéfiques du diltiazem n'ont probablement pas encore été explorées, et les effets techniques associés au diltiazem utilisé comme médicament ne sont vraisemblablement pas encore tous connus à ce jour. 5 EXPOSE DE L'INVENTION Le problème technique sous-jacent à la présente invention concerne l'identification de molécules permettant de stimuler l'expression des gènes codant pour des protéines de type interféron III, dans le but de prévenir et/ou traiter des infections par des microorganismes pathogènes des épithéliums des tractus respiratoires et/ou intestinaux. 10 En effet, en cas d'infection par des microorganismes des tractus respiratoires et/ou intestinaux, il est avantageux de stimuler la réponse de l'organisme contre ces pathogènes, sans toutefois induire une réponse inflammatoire, et ainsi éviter la sur-stimulation du système immunitaire. Or, à l'heure actuelle, aucun composé thérapeutique présentant cette activité n'est connu. 15 Des composés thérapeutiques ayant la capacité de stimuler l'expression des gènes codant pour des protéines telles que l'interleukine 29, l'interleukine 28A et/ou l'interleukine 28B sont donc activement recherchés. De façon surprenante, les inventeurs ont mis en évidence le fait que le diltiazem, un inhibiteur des canaux calciques, a également une action stimulatrice de l'expression de ces gènes 20 codant pour des protéines de type interféron III. Ainsi, le diltiazem peut être utilisé pour différentes applications thérapeutiques, et en particulier pour prévenir et/ou traiter des infections par au moins un microorganisme pathogène des épithéliums des tractus respiratoires et/ou intestinaux. Le diltiazem, en sa qualité d'agent activateur de l'expression des gènes codant pour un ou 25 plusieurs interféron(s) de type III, est particulièrement adapté pour le traitement des infections virales ou bactériennes, mais également des co-infections liées à la fois à la présence d'un virus et d'une bactérie, et en particulier est adapté pour le traitement des surinfections bactériennes concomitantes à une primo-infection virale. La présente invention concerne le diltiazem pour son utilisation en tant qu'agent activateur de 30 l'expression d'au moins un gène codant pour un interféron de type III. 6 Comme l'Homme du métier le sait, au regard de l'abondante littérature scientifique sur le sujet, l'activation de la « voie de l'interféron III » permet de traiter de nombreux désordres physiologiques, et en particulier ceux liés à des infections par des pathogènes. En particulier, la présente invention concerne le diltiazem pour son utilisation en tant qu'agent 5 activateur de l'expression d'au moins un gène codant pour un interféron de type III, dans la prévention et/ou le traitement des infections par au moins un microorganisme pathogène des épitheliums des tractus respiratoires et/ou intestinaux. La présente invention concerne également une composition pharmaceutique ou vétérinaire comprenant du diltiazem en tant qu'agent activateur de l'expression d'au moins un gène 10 codant pour un interféron de type III, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement des infections par des microorganismes pathogènes des épitheliums des tractus respiratoires et/ou intestinaux. Selon un aspect particulier, la composition pharmaceutique ou vétérinaire est caractérisée en ce qu'elle est sous une forme galénique adaptée pour une administration par inhalation. 15 DESCRIPTION DES FIGURES Figure 1. Caractérisation par RNAseq de l'induction par le diltiazem de l'expression des gènes de l'interféron de type III. 1A- Ratios d'expression des gènes codant pour les interférons de type III IFN-21, IFN-22 et 20 IFN-23 (désignés respectivement par IFNL1, IFNL2 et IFNL3) entre : - les épithéliums respiratoires humains reconstitués traités 3 jours par le diltiazem (90 pM) et - les épithéliums respiratoires humains reconstitués non traités (niveau basal de 1). 1B- Ratios d'expression des gènes codant pour IF144L, IFIT1, IFIT2, IFIT3, IFITM1, I5G15, MX1, MX2, OAS1, 0A52, 0A53, OASL, RSAD2 et STAT1 entre : 25 - les épithéliums respiratoires humains reconstitués traités 3 jours par le diltiazem (90 pM) et - les épithéliums respiratoires humains reconstitués non traités (niveau basal de 1). Figure 2. Confirmation par Rt-qPCR de l'induction par le diltiazem de 8 gènes associés à la réponse Interféron de type III. Ratios d'expression des gènes IFIT1, IFIT2, IFIT3, IF127, IFN-21 (IFNL1), IFN-22 (IFNL2), 30 IF144L et IFITM1 entre : 7 - les épithéliums respiratoires humains reconstitués traités 3 jours par le diltiazem (90 pM) (à droite) et - les épithéliums respiratoires humains reconstitués non traités (à gauche). *P