Brevet FR3086668A1 — publié le 20200403

PRODUCTION CELLULAIRE DE PURES NANOPARTICULES D'OXYDE DE FER Domaine de l'invention Le domaine de l'invention est celui d'une production biologique de nanoparticules comprenant une faible quantité d'impuretés. Arrière-plan technique Les bactéries produisant des nanoparticules, telles que les bactéries magnétotactiques, sont connues pour accumuler des impuretés dans leur structure cristallisée. Par exemple, lorsque des bactéries magnétotactiques sont cultivées en présence de cobalt, elles produisent des magnétosomes comprenant de l'oxyde de fer et du cobalt (S. Staniland et al., Nature nanotechnology, V. 3, P. 158 (2008)). Pour les applications médicales, il est souhaitable que les nanoparticules contiennent un faible niveau d'impuretés toxiques telles que le cobalt. Description de l'invention L'invention concerne une méthode de production de nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté à l'aide de cellules produisant des nanoparticules, comprenant: i) une étape de pré-croissance consistant à amplifier la ou les cellules productrice(s) de nanoparticules dans un milieu de pré-croissance de telle sorte que la ou les cellules produisant des nanoparticules ne produit ou produisent pratiquement pas de nanoparticules, et ii) une étape de croissance consistant à amplifier la ou les cellules productrice(s) de nanoparticules provenant de l'étape de pré-croissance dans un milieu de croissance tel que la ou les cellules productrice(s) de nanoparticules produit ou produisent des nanoparticules. Dans un mode de réalisation de l'invention, la ou les nanoparticule(s) selon l'invention est ou , 1,20, sont un/des ensembles de plus de 1, 2, 5, 10, 103, 105, 1010, 102D, 10-50 ou 10100 nanoparticules, nanoparticules par litre de milieu de croissance ou nanoparticules par cellule productrice de nanoparticules. Dans certains cas, l'oxyde de fer représente ou est un assemblage de plus de 1, 10, 103, 105, 1010, 1020, 1050 ou 10100 atomes de fer et/ou plus de 1, 10, 10', 105, 1010, 1020, 1050 ou 10100 atome (s) d'oxygène. Dans certains autres cas, le/les éléments chimiques et/ou la/les impureté(s) compris dans les nanoparticules est/ sont ou représente(nt) plus de 1, 10, 103, 105, 1010, 1020, 105° ou 10100 élément(s) chimique(s) et/ou impureté (s) compris dans la/les nanoparticule(s). Dans un autre mode de réalisation de l'invention, la ou les nanoparticules selon l'invention sont des ensembles de moins de 10100, 1050, 1020, 1010, 105, 103, 100, 50, 10, 5 ou 2 2 nanoparticule(s), nanoparticule(s) par litre de milieu de croissance ou nanoparticules par cellule productrice de nanoparticules. Dans certains cas, l'oxyde de fer est ou représente un ensemble de moins de 1, 10, 103, 105, 1010, 1020, 1050 ou 10100 atomes de fer et/ou moins de 1, 10, 103, 105, 1010, 1020, 1050 ou 10100 atome (s) d'oxygène. Dans encore d'autres cas, le ou les 5 éléments chimiques et/ou la/les impuretés compris dans les nanoparticules est/sont ou représente(nt) moins de 10100, 105°, 102°, 1010, 105, 103, 100, 50, 10, 5 ou 2 éléments chimiques et/ou impuretés compris dans les nanoparticules. Dans un mode de réalisation de l'invention, au moins une impureté est comprise dans la nanoparticule. 10 Dans un mode de réalisation de l'invention, les nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté comprennent une faible quantité d'impureté(s), par exemple lorsque la méthode permet d'obtenir des nanoparticules avec une faible quantité d'impureté. Dans certains cas, la ou les nanoparticules ne comprend pas ou ne comprennent pas au moins une impureté ou comprennent au moins 1050, 1020, 1010, 105, 102, 10, 5, 2, 5, 1, 10-2, 10-10, 10-20 ou 10-50 15 impureté(s) ou impureté(s) par gramme de nanoparticules ou gramme d'impureté(s) par gramme de nanoparticules. Dans d'autres cas, le pourcentage, préférentiellement en masse, d'impureté (s) compris (s) à l'intérieur ou à la surface de la ou des nanoparticules est inférieur à 100, 90, 80, 70, 60, 50, 30, 20, 10, 5, 1, 0,1 ou 0,001%. Selon l'invention, ce pourcentage d'impureté (s) peut dans certains cas être défini comme le rapport entre le nombre d'atomes, la 20 quantité, la masse ou le volume d'impureté(s) compris dans la ou les nanoparticules divisé par le nombre total d'atomes, de quantité, de masse ou de volume de tous les éléments chimiques contenus dans les nanoparticules. Dans certains cas, tous les éléments chimiques contenus dans la ou les nanoparticules peuvent être la somme de l'oxyde de fer, du matériau dopant et de l'impureté ou des impuretés comprises dans la ou les nanoparticules. Dans d'autres cas 25 encore, la concentration de la ou des impuretés à l'intérieur ou à la surface de la ou des nanoparticules est inférieure à 105°, le, 1010, 105, 103, 500, 100, 50, 10, 1, 10-1, 10-3, 10-5 10-1° ou 10-5° )1g d'impureté(s) par gramme de nanoparticule(s). Dans un autre mode de réalisation de l'invention, les nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté comprennent une grande quantité d'impureté(s), par exemple lorsque la ou les 30 impuretés sont ajoutées ou incorporées aux nanoparticules après la production des nanoparticules par la méthode. Dans certains cas, les nanoparticules comprennent plus de 10 50, 10 2U, 1 10-H, IO'', 10-2, 1, 2, 5, 10, 103, 10', 1010, 102° ou 1050 impuretés ou impuretés par gramme de nanoparticules ou gramme d'impuretés par gramme de nanoparticules. Dans certains cas, les nanoparticules comprennent une grande quantité d'impureté (s). Dans certains 3 cas, le pourcentage, préférentiellement en masse, de la ou des impuretés comprises à l'intérieur ou à la surface de la ou des nanoparticules est supérieur à 10-40, 10-20, 1010, 10-5, 10', 10-1, 1, 5, 10, 25, 50, 75, 80 ou 90%. Dans d'autres cas encore, la concentration d'impuretés dans ou à la surface des nanoparticules est supérieure à 10100, 10-50, 10-20, 1010, 10-5, 10-3, 10- 5 2, 10-1, 1, 10, 50, 100, 103, 105 ou 1010 gg d'impureté (s) par gramme de nanoparticule(s). Dans certains cas, les impuretés peuvent être les mêmes impuretés, c'est-à-dire préférentiellement des impuretés comprenant les mêmes éléments chimiques. Dans certains autres cas, les impuretés peuvent être différentes impuretés, c'est-à-dire préférentiellement des impuretés comprenant au moins un élément chimique différent. 10 Dans un mode de réalisation de l'invention, le ou les élément(s) chimique(s) est ou sont choisis dans le groupe comprenant: actinide, actinium, aluminium, américium, antimoine, argon, arsenic, astatine, baryum, béryllium, bismuth, bismuth, bohrium, bore, brome , césium, calcium, californium, carbone, cérium, chlore, chrome, cobalt, copernicum, cadmium, cuivre, curium, darmstadtium, dubnium, dysprosium, einsteinium, erbium, europium, fermium, 15 fleovium, fluor, francium, gadolinium, gallium, germanium , or, hafnium, hélium, hessium, holmium, hydrogène, indium, iodure, iridium, fer, krypton, lanthanide, lanthane, lawrencium, plomb, lithium, livermorium, lutétium, magnésium, manganèse, meganium, meitherium, mendelevium, mercure, molybdène , néon, néphmium, nickel, niobium, azote, nobelium, osmium, oxygène, palladium, phosphore, platine, plutonium, polonium, potassium, 20 praséodyme, proctactinium, prométhium, radium, radon, rhénium, rhodium, rhodium, roentgenium, rubidium, ruthénium , samarium, sélénium, silicium, argent, sodium, strontium, soufre, scandium, seaborgium, tellure, terbium, thorium, thulium, étain, tantale, technétium, thallium, titane, tungstène, ununoctium, ununpentium, ununseptium, ununseptium, ununtrium, uranium, vanadium, xénon, ytterbium, yttrium, zinc, zirconium, et une combinaison de 25 plusieurs de ces éléments chimiques. L'invention concerne également le procédé selon l'invention, dans lequel la ou les impureté(s) est ou sont au moins un élément chimique différent du fer, de l'oxygène et/ou de l'oxyde de fer. L'invention concerne également le procédé selon l'invention, dans lequel l'impureté est 30 préférentiellement du carbone ou un matériau carboné. Dans un mode de réalisation de l'invention, le matériau carboné comprend au moins un atome de carbone, préférentiellement mais non nécessairement mélangé ou assemblé avec un autre élément chimique que le carbone. 4 Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, le carbone ou le matériau carboné provient de ou est produit par des cellules productrices de nanoparticules. L'invention concerne également le procédé selon l'invention, dans lequel la ou les nanoparticules obtenues par la méthode comprend ou comprennent un ou plusieurs oxydes de 5 fer, l'oxyde de fer ayant au moins l'une des propriétés suivantes: i), il comprend au moins un atome de fer et un atome d'oxygène, ii), il forme une structure cristallisée ou minérale, iii), il peut avoir la formule chimique FeO, Fe02, Fe304, Fe405, Fe506, Fe50/, Fe/5032, Fe130,6, aFe203, 13-Fe/03, y-Fe2O3, E-Fe2O3, iv), il peut être composé de wüstite, de dioxyde de fer, de magnétite, d'hématite, de maghémite, v), il peut être dans la phase epsilon, la phase alpha, la 10 phase bêta, la phase gamma, vi), il peut être à divers niveaux d'oxydation' vii), il a la formule Fec,OpDy, où a, 13 et/ou y est/sont des coefficients, préférentiellement stoechiométriques. Dans certains cas, a, [3, et/ou y est/sont égal/égaux à 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 19 ou 20 Dans d'autres cas, a, [3, et/ou y est/sont plus grand(s) que 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 19 ou 20. Dans encore d'autres cas, a, p, et/ou y est/sont 15 plus faible(s) que 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 18, 19 ou 20. Dans d'autres cas, D est le matériau dopant des nanoparticules. Dans certains cas, In some cases, le matériau dopant peut être sélectionné parmi: Aluminium, antimonite, baryum, chrome, cuivre, or, manganèse, argent, étain, titane, et zinc. Dans un mode de réalisation de l'invention, l'oxyde de fer contenu dans les nanoparticules est 20 l'élément chimique prédominant de la nanoparticule. Dans certains cas, les nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté peuvent comprendre une grande quantité d'oxyde de fer. Dans certains cas, le pourcentage, préférentiellement en masse, d'oxyde de fer compris dans la ou les nanoparticules est supérieur à 104°, 10'2°, 104°, 10'5, 10-2, 104, 1. 5, 10, 25, 50, 75, 80, 90, 99 ou 99,9%. Selon l'invention, ce pourcentage d'oxyde de fer peut dans certains cas être 25 défini comme le rapport entre le nombre d'atomes, la quantité, la masse ou le volume d'oxyde de fer dans la ou les nanoparticules divisé par le nombre total d'atomes, la quantité, masse ou volume de tous les éléments chimiques contenus dans les nanoparticules. Dans d'autres cas encore, la concentration en oxyde de fer, comprise dans la ou les nanoparticules, est supérieure à 10400 , 10'50, 10'20, 1040, 10'5, 10-3, 10.2, 10.1, 1, 10, 50, 100, 103, 105 ou 1010 mg 30 d'oxyde de fer, par gramme de nanoparticule(s). Dans un mode de réalisation de l'invention, les nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté comprennent une faible quantité d'oxyde de fer, par exemple lorsque les nanoparticules sont traitées et/ou partiellement ou totalement détruites et/ou administrées à un organisme, ou 5 lorsque la méthode ne permet pas d'incorporer une grande quantité d'oxyde de fer dans les nanoparticules. Dans certains cas, le pourcentage, préférentiellement en masse, d'oxyde de fer compris à l'intérieur ou à la surface de la ou des nanoparticules est inférieur à 100, 90, 80, 70, 50, 30, 10, 5, 1, 0,1 ou 0,001%. Dans certains autres cas, la concentration en oxyde de fer, 5 comprise dans la ou les nanoparticules, peut être inférieure à 105°, 1030, le, 105, 103, 500, 100, 50, 10, 1, 10'1, 10'3, 10'5, 10'1° ou 10'5° ',tg d'oxyde de fer par gramme de nanoparticule(s). Dans un autre mode de réalisation de l'invention, le pourcentage, la concentration, le nombre d'atomes, la quantité, la masse ou le volume d'oxyde de fer compris dans la ou les 10 nanoparticules est plus grand, préférentiellement d'un facteur 1,00001, 1,001, 1,1, 2, 5, 10, 50, 102, 103, 105, 1010, 1020 ou 1050, que le pourcentage, la concentration, le nombre d'atomes, la quantité, la masse ou le volume d'impureté (s) compris dans la ou les nanoparticules. Dans un mode de réalisation de l'invention, l'oxyde de fer et/ou les impuretés est/sont compris: i), à l'intérieur de la ou des nanoparticule(s), ii), à la surface de la ou des 15 nanoparticule(s), iii), à l'extérieur de la ou des nanoparticule(s), iv), insérées dans la structure cristalline ou amorphe de la ou des nanoparticule(s), iii), dans un défaut de la ou des nanoparticule(s), et/ou iv), dans une vacance de la ou des nanoparticule(s). Dans un mode de réalisation de l'invention, l'oxyde de fer et/ou les impuretés sont en interactions, par exemple des interactions avec la(les) nanoparticules électrostatiques, fortes, 20 faibles, nucléaires, métalliques, de Van der Waals, de Debye, de London ou hydrogène(s). Dans un mode de réalisation de l'invention, l'oxyde de fer et/ou les impuretés est/sont situé(s) à une distance inférieure de la/des nanoparticule(s), préférentiellement du centre ou de la surface de la ou des nanoparticule(s), qui est inférieure à 10'0, 1020, 1010, 105, 103, 100, 10, 5 ou 1 nm. Dans certains cas, le centre des nanoparticules est la région ou le volume ou 25 l'emplacement ou l'assemblage d'éléments chimiques situé au centre de la dimension la plus grande, la plus basse et/ou moyenne de la nanoparticule, telle que la moitié du diamètre d'une nanoparticule sphérique ou la moitié de la plus grande, la plus petite et/ou moyenne longueur d'une nanoparticule. Dans d'autres cas, la surface des nanoparticules est la région ou l'emplacement ou l'assemblage des éléments chimiques qui se trouve à la plus grande distance 30 du centre de la nanoparticule tout en restant dans la nanoparticule. Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, l'oxyde de fer et/ou les impuretés est/sont situé(s) à une distance des nanoparticules, préférentiellement du centre ou de la surface de la ou des nanoparticules, supérieure à 0,001, 0,01, 0,1, 1, 10, 100, 103, 105, 1010, 1020 ou 1050 nm. 6 Dans un autre mode de réalisation de l'invention, la ou les nanoparticules selon l'invention comprend ou comprennent un noyau et/ou un revêtement qui entoure(nt) préférentiellement le noyau de la ou des nanoparticules. Dans un mode de réalisation de l'invention, le noyau et/ou le revêtement de la ou des 5 nanoparticules possède(nt) au moins une propriété commune avec les nanoparticules telle que la concentration en oxyde de fer et/ou en impureté(s). Dans un mode de réalisation de l'invention, la ou les nanoparticules, le coeur et/ou le revêtement de la ou des nanoparticules, présente(nt) au moins l'une des propriétés suivantes: (a) Un/des comportement(s) ou propriété(s) magnétique(s), diamagnétique(s), 10 superparamagnétique(s), ferromagnétique(s), ferrimagnétique(s) et/ou paramagnétique(s), observé(s) de préférence sous l'application d'un champ magnétique d'intensité supérieure à 10.50, 1040 , 10-20, 1010, 101 10-2 ou 101 T, de préférence observés à des températures inférieures à 1010, 105, 103, 102, 10 ou 1 K. Dans certains cas, le noyau peut avoir différentes propriétés magnétiques que celles du revêtement. Par exemple, le noyau peut être 15 ferromagnétique ou superparamagnétique tandis que le revêtement peut être diamagnétique ou paramagnétique. (b) une partie ou structure cristalline comprenant au moins 1, 2, 5, 10, 50, 100, 103, 105, 107, 109, 1020 ou 105° plan(s) cristallin(s) ou structure(s) cristalline(s) ordonnée(s), que l'on peut de préférence observer ou mesurer en microscopie électronique. Dans certains cas, le noyau peut 20 avoir une structure cristalline différente de celle du revêtement. Par exemple, le noyau peut comprendre plus de 1, 5, 10, 103 ou 105 plan(s) cristallin(s) ou structure(s) ordonnée(s) cristalline(s) tandis que le revêtement peut avoir moins de 105, 103, 10, 5 ou 2 plans cristallins ou structures ordonnées. (c), une composition constituée de métal/métaux ou d'oxyde(s) métallique(s), 25 préférentiellement de l'oxyde de fer, plus préférentiellement de la maghémite et/ou de la magnétite. Dans certains cas, le noyau comprend une composition différente de celle du revêtement. Par exemple, le noyau comprend plus de 1, 5, 10, 25, 50, 75, 90, 95 ou 99 pourcent ou pourcent en masse d'oxyde de fer alors que le revêtement comprend moins de 99, 95, 90, 75, 50, 10, 5 ou 1 pourcent ou pourcent en masse d'oxyde de fer. Ce pourcentage peut 30 être le rapport entre la quantité, le volume, le nombre d'atomes, la masse d'oxyde de fer compris dans le noyau et/ou le revêtement divisé par la quantité totale, le volume total, le nombre total d'atomes, la masse totale de tous les éléments chimiques compris dans le noyau et/ou le revêtement. (d), un mono-domaine ou mono-domaine magnétique, 7 (e), une microstructure magnétique, qui peut être caractérisée par la présence de lignes de champ magnétique, qui peuvent être orientées dans une direction préférentielle telle qu'un axe de facile aimantation ou une direction cristallographique du noyau de la ou des nanoparticules, [111], où une telle microstructure magnétique peut dans certaines conditions 5 être observable, notamment par holographie électronique, (f), une taille comprise entre 1 nm et 105 nm, 1 nm et 103 nm, 1 nm et 100 nm, 1 nm et 10 nm, 1 nm et 1 nm, 5 nm et 1 ]tm, 5 et 500 nm, 5 et 250 nm, 5 et 100 nm, 5 et 80 nm, 5 et 60 nm, 10 nm et 1 i_tm, 10 et 500 nm, 10 et 250 nm, 10 et 100 nm, 10 et 80 nm 10 et 60 nm, 15 nm et 1 lam, 15 et 500 nm, 15 et 250 nm, 15 et 100 nm, 15 et 80 nm, 15 et 60 nm, 20 nm et 1 10 nm, 20 et 500 nm, 20 et 250 nm, 20 et 100 nm, 20 et 80 nm, ou entre 20 et 60 nm, (g), une taille dans certains cas supérieure à 0,1, 1, 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35 ou 40 nm, (h), une taille dans certains autres cas inférieure à 101°, 109, 104, 2000, 1000, 500, 400, 300, 200, 150, 120, 100, 95, 90, 80, 75, 70, 65, 60, 55, 50, 45, 40, 35, 30, 25, 20, 15, 10 ou 5 nm, (i) un potentiel zéta, une charge ou charge de surface comprise entre -1010 mV et 1010 mV, - 15 105 mV et 105 mV, -101 mV et 101 mV, -103 mV, -102 mV et 102 mV, -10 et 10 mV, préférentiellement à pH compris entre 0 et 14, 1 et 13, 2 et 12, 3 et 11, 4 et 10, 5 et 9, ou entre 6 et 8 (j) un potentiel zêta, une charge ou une charge de surface, qui est dans certains cas supérieure à -105°, -102°, -1010, -105, -10', -10, -5, -1, 0, 5, 10 , 20, 50 ou 100 mV, de préférence à un pH 20 supérieur à 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 ou 13. (k) un potentiel zêta, une charge ou une charge de surface, qui est dans certains cas supérieure à -105°, - 102°, -1010, -105, -103, -10, -5, -1, 0, 5, 10, 20, 50 ou 100 mV, de préférence à un pH inférieur à 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 ou 0 (1) un potentiel zêta, une charge ou une charge de surface, qui est dans certains cas inférieure à 25 105(), 1020, 1010, 105, 10', 10, 5, 1, 0, -5, -10, -20, - 50 ou -100 mV, de préférence à un pH supérieur à 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 ou 13. (m) un potentiel zêta, une charge ou une charge de surface, qui est dans certains cas inférieure à 10210, 1020, 1010, 105, 103, 10, 5, 1, 0, -5, -10, -20, - 50 ou -100 mV, de préférence à un pH inférieur à 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 ou 0 30 (n), un point isoélectrique compris entre 0 et 14, 1 et 13, 2 et 12, 3 et 11, 4 et 10, 5 et 9, ou entre 6 et 8, (o), dans certains cas, un point isoélectrique supérieur à 0, 1, 2, 3, 4, 5, 9, 10, 11, 12 ou 13, et/ou 8 (p), dans certains autres cas, un point isoélectrique dans certains autres cas inférieur à 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 ou 0. Dans un mode de réalisation de l'invention, le noyau et/ou le revêtement est/sont synthétisés par la ou les cellule(s) productrice(s) de nanoparticules. 5 Dans un autre mode de réalisation de l'invention, le noyau et/ou le revêtement n'est ou ne sont pas synthétisé(s) par la ou les cellule(s) productrice de nanoparticules. Dans un mode de réalisation de l'invention, la ou les cellules productrice(s) de nanoparticules, également appelée(s) cellule(s) produisant des nanoparticules ou la(les) cellule(s), est/sont une/des cellule(s) eucaryote(s) ou procaryote(s) Dans certains cas, il s'agit de la ou des 10 cellules produite(s) par, comprise(s) ou amplifiée(s) dans le ou les milieux de pré-croissance et/ou de croissance. Dans un mode de réalisation de l'invention, moins de 100, 80, 70, 50, 10, 20, 10, 5, 2, 1, 0,1 ou 1010% des cellules productrices de nanoparticules comprennent ou produisent au moins une nanoparticule. Dans certains cas, ce pourcentage peut être le rapport entre le nombre de 15 cellules comprises dans le/les milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance et comprenant ou produisant au moins une nanoparticule divisé par le nombre total de cellules dans le/les milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, plus de 100, 80, 70, 50, 10, 20, 10, 5, 2, 1, 0,1 ou 1040% de cellules productrices de nanoparticules comprennent ou produisent au moins 20 une nanoparticule. Dans un mode de réalisation de l'invention, la ou les cellules productrice(s) de nanoparticules est/sont une/des cellule(s) entière(s). Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, la ou les cellule(s) productrice(s) de nanoparticules est/sont des parties de la ou des cellule(s) telles que membrane cellulaire, 25 vésicule, enzyme, protéine, lipide, ADN, ARN, organite, compartiment, cytoplasme, virus, compris dans, provenant de, se répliquant dans, ou produits par la ou les cellules synthétisantes. Dans un mode de réalisation de l'invention, la ou les nanoparticules synthétisée(s) par la ou les cellule(s) est/sont appelée(s) nanoparticule(s) synthétisée(s) par la/les cellule(s). 30 Dans un mode de réalisation de l'invention, la ou les cellules productrice(s) de nanoparticules synthétisent la ou les nanoparticules à l'intérieur de la ou des cellule(s). Préférentiellement, une ou plusieurs nanoparticule(s) est/sont synthétisée(s) à l'intérieur d'une ou de plusieurs cellule(s) lorsqu'elle(s) est/sont synthétisée(s), assemblée(s), cristallisée(s), en tout ou en partie: i), par ou dans ou près ou à l'intérieur d'une partie de la cellule telle qu'un organite, une 9 vésicule ou un appareil de Golgi , endosome, exosome, ribosome, réticulum endoplasmique, filament d'actine, noyau, peroxysome, microtubule, lysosome, mitochondrie, filament, centrosome, flagelle ou membrane cellulaire, ii) dans une région située à l'intérieur de la ou des cellule(s), ou iii) dans une région située à une distance d'une partie de la ou des cellules 5 inférieure à 105, 103, 100, 10 ou 1 nm. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, la ou les cellule(s) productrice(s) de nanoparticules synthétise(nt) la ou les nanoparticules à l'extérieur de la ou des cellules. Préférentiellement, la ou les nanoparticule(s) est/sont synthétisée(s) en dehors de la ou des cellule(s) lorsqu'elle(s) est/sont synthétisée(s), assemblée(s), cristallisée(s), partiellement ou 10 totalement: i) dans une région située à l'extérieur de la ou des cellule(s), ou ii) dans une région située à une distance d'une partie de la ou des cellule(s) plus grande que 1, 10, 100, 103 ou 10' nm. Dans certains cas, la ou les cellule(s) est/sont des assemblages de plus de 1, 10, 10', 105, 1010 , 1020, 1050 ou 10100 cellules, de préférence par litre de milieu de culture. Dans certains autres 15 cas, la/les cellule(s) est/sont des assemblages de moins de 10100, 1050, 1020, 1010, 105, 103, 100, 50, 10, 5 ou 2 cellules, préférentiellement par litre de milieu de culture. Dans un mode de réalisation de l'invention, la ou les cellules produisant des nanoparticules est/sont une ou des cellules eucaryote(s), appartenant préférentiellement à l'homme, aux animaux, aux plantes, aux arbres, aux farines, aux branches, aux champignons, aux archées, 20 aux oiseaux, aux poissons, aux pigeons, la truite, les mammifères, les fourmis, les abeilles ou les insectes. Dans un mode de réalisation de l'invention, la ou les cellule(s) produisant des nanoparticules est/sont une ou des cellule(s) procaryote(s) ou une bactérie. Dans certains cas, les cellules productrices de nanoparticules peuvent être Mycobacterium, 25 préférentiellement Mycobacterium paratubercul osi s, Shewanella, préférentiellement Shewanella oneidensi, Geothrix, préférentiellement Geothrix fermentans. Ces bactéries synthétisent préférentiellement des nanoparticules en dehors des cellules. Dans certains autres cas, les cellules productrices de nanoparticules peuvent être des bactéries magnétotactiques, telles que la souche AMB-1Magnetospirillummmmeticum, la souche MC- 30 1 coccus magnétotactique, trois souches de vibrions anaérobies facultatives MV-1, MV-2 et MV-4, la Magnelaspirdlum magnennaefieum MS-1, la souche MSR-1 Magneiospirdlum gryphiswaldense, un spirillum magnétotactique anaérobie facultatif, la souche MGT-1 Magnelospirdhun magnelicum, et une anaérobe obligatoire, Desulfovibrio magneficus RS-1. 10 Ces bactéries synthétisent préférentiellement des nanoparticules à l'intérieur de la ou des cellules. Dans un mode de réalisation de l'invention, la ou les cellules productrice(s) de nanoparticules est/sont cultivée(s) dans ou en utilisant un milieu de pré-croissance pour/pendant l'étape de 5 pré-croissance, et/ou dans ou en utilisant un milieu de croissance pour/pendant l'étape de croissance, et/ou dans ou en utilisant un milieu fed-batch pendant l'étape de croissance. Dans certains cas, le milieu de pré-croissance et/ou de croissance est/sont le(les) milieu(x) dans lequel/lesquels la/les cellule(s) productrice(s) de nanoparticules est/sont amplifiée(s). Dans certains cas, le milieu fed-batch est le milieu ajouté au milieu de croissance, 10 préférentiellement pendant l'étape de croissance. Dans un mode de réalisation de l'invention, le milieu total de pré-croissance et/ou de croissance peut comprendre au moins une source d'éléments chimiques, de l'eau et des cellules productrices des nanoparticules. Dans certains autres cas, le milieu partiel de pré-croissance et/ou de croissance comprend au moins une source d'éléments chimiques, de l'eau, 15 et pas de cellules productrices de nanoparticules. Dans encore d'autres cas, le milieu de pré- croissance et/ou de croissance ne comprend que des cellules productrices de nanoparticules. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance et/ou fed-batch comprend ou comprennent au moins une source, de préférence une source d'un élément chimique, ou comprend/comprennent au moins un élément chimique, de 20 préférence dans état liquide, gaze et/ou solide. Dans certains cas, le(les) milieu(x) de pré- croissance et/ou de croissance et/ou fed-batch est/sont à l'état liquide, gazeux et/ou solide. Dans un mode de réalisation de l'invention, la concentration d'un élément chimique tel que le fer dans le milieu de pré-croissance et/ou de croissance est la concentration de cet élément chimique dans: i) le milieu total de pré-croissance et/ou de croissance, ii), le milieu partiel de 25 pré-croissance et/ou de croissance, ou iii), les cellules productrices de nanoparticules. Dans un mode de réalisation de l'invention, une certaine quantité ou volume de cellule(s) peut être une certaine quantité ou volume de milieu de croissance comprenant ces cellules. Dans certains autres cas, une certaine quantité ou volume de cellule(s) peut être une certaine quantité ou volume de cellule(s) sans eau ou sans l'environnement aqueux de la ou des 30 cellules ou après que l'eau ou l'environnement aqueux de la cellule(s) a été éliminé, par exemple par lyophilisation. Dans un mode de réalisation de l'invention, les conditions d'amplification de cellules pendant les étapes de pré-croissance et/ou de croissance permettent d'empêcher les modifications génétiques des cellules productrices de nanoparticules. Dans certains cas, les modifications 11 génétiques des cellules productrices de nanoparticules sont des modifications d'au moins 105 50, 104n, 1040, 10'5, 104, 104, 1, 5, 10, 50, 75, 90 ou 95% de gène(s), partie(s) de gène(s), portion(s) d'ADN ou nucléotide(s) Ce pourcentage peut être le rapport entre le nombre ou la quantité de gène(s), partie(s) de gènes, portions d'ADN ou de nucléotides modifiés dans la ou 5 les cellules productrices de nanoparticules et le nombre total ou la quantité totale de tous les gènes, parties de gènes, de portions d'ADN ou nucléotide(s) appartenant à la ou aux cellules productrices de nanoparticules. Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, les milieux de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent une majorité d'eau, de préférence d'eau purifiée, 10 désionisée ou ultrapure, préférentiellement plus de 10550, 1020, 1040, 10-5, 10-3, 1, 10, 50, 75, 80, 90, 99, 99,99 ou 99,99999 pour cent ou pour cent en masse d'eau. Ce pourcentage peut être le rapport entre la quantité, la masse, le volume ou le nombre d'atomes d'eau compris dans le/les milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance divisés par la quantité totale, la masse, le volume ou le nombre d'atomes de tous les éléments chimiques compris (s) dans le 15 ou les milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent au moins un élément chimique ou une source d'élément chimique. Dans certains cas, la concentration d'un élément chimique, tel que le fer, dans le ou les milieux de pré-croissance et/ou de croissance est la concentration de cet élément chimique 20 à tout moment de l'étape de pré-croissance et/ou de croissance. Dans certains cas, cette concentration peut être mesurée en estimant le nombre de moles, la masse ou le volume de ou occupé par cet élément chimique divisé par le nombre total de moles, la masse totale ou le volume total de ou occupé par tous les éléments chimiques dans le/les milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance 25 Dans un mode de réalisation de l'invention, le/les milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent au moins une source de carbone. Dans certains cas, la source de carbone comprend l'élément chimique du tableau périodique C. Dans certains cas, la source de carbone peut être sélectionnée dans la liste suivante: acétate, glycolate, glucose, lactate, pyruvate, succinate, dioxyde de carbone, glycérol, et un dérivé ou une combinaison de 30 ces composés. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de croissance et/ou de pré-croissance comprend ou comprennent au moins une source d'azote. Dans certains cas, la source d'azote comprend l'élément chimique du tableau périodique N. Dans certains cas, la source d'azote peut être choisie dans le groupe comprenant: sels d'ammonium, sels de nitrate, 12 urée, acides aminés, sels d'ammonium, ammoniac, azote gazeux, et un dérivé ou une combinaison de ces composés. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent au moins une source de soufre ou de sulfate. Dans 5 certains cas, la source de soufre ou de sulfate comprend l'élément chimique du tableau périodique S. Dans certains cas, la source de soufre ou de sulfate peut être un sel de sulfate ou du sulfure d'hydrogène. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent au moins une source de phosphore ou de phosphate. 10 Dans certains cas, la source de phosphore ou de phosphate comprend l'élément chimique du tableau périodique P. Dans certains cas, la source de phosphore ou de phosphate peut être un sel de phosphate. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent au moins une source de calcium. Dans certains cas, la 15 source de calcium comprend l'élément chimique du tableau périodique Ca. Dans certains cas, la source de calcium peut être un sel de calcium. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent au moins une source de Potassium. Dans certains cas, la source de potassium comprend l'élément chimique du tableau périodique K. Dans certains 20 cas, la source de potassium est un sel de potassium. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent au moins une source de magnésium. Dans certains cas, la source de magnésium comprend l'élément chimique du tableau périodique Mg. Dans certains cas, la source de magnésium est un sel de magnésium. 25 Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent au moins une source d'oxygène. Dans certains cas, la source d'oxygène comprend l'élément chimique du tableau périodique O. Dans certains cas, la source d'oxygène est un composé organique, le dioxyde de carbone ou le di-oxygène. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de 30 croissance comprend ou comprennent au moins une source d'hydrogène. Dans certains cas, la source d'hydrogène comprend l'élément chimique du tableau périodique 1-I. Dans certains cas, la source d'hydrogène est un composé organique, ou di-hydrogène. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent au moins une source de fer. Dans certains cas, la source 13 de fer comprend l'élément chimique du tableau périodique Fe. Dans certains cas, la source de fer est ou consiste en ou comprend du fer. Dans certains cas, le fer provient du citrate de fer, du quinate de fer, du chlorure de fer ou du sulfate de fer. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de 5 croissance comprend ou comprennent au moins une source de soufre. Dans certains cas, la source de soufre comprend l'élément chimique du tableau périodique S. Dans certains cas, la source de soufre est constituée d'au moins une vitamine. Dans un mode de réalisation de l'invention, les sources de carbone, d'azote, de soufre, de sulfate, de phosphore, de phosphate, de calcium, de potassium, de magnésium, d'oxygène, 10 d'hydrogène, de fer, comprennent plus de 10100, 1050, le, 1040, 10'5, 104, 104, 1, 5, 10, 25, 50, 75, 80, 90 ou 95% en masse de carbone, azote, soufre, sulfate, phosphore, phosphate, calcium, potassium, magnésium, oxygène, hydrogène, fer, respectivement. Dans certains cas, ils sont à l'état gazeux, liquide ou solide. Dans d'autres cas, ils peuvent être utilisés pour préparer le ou les milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance. Dans certains cas, le ou les 15 milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent plus de 2, 3, 4, 5, 10, 50, 100, 103, 105, 1010 ou 1050 sources différentes de carbone, d'azote, de soufre , sulfate, phosphore, phosphate, calcium, potassium, magnésium, oxygène, hydrogène et/ou fer. Dans d'autres cas, le ou les milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprennent moins de 2, 3, 4, 5, 10, 50, 100, 103, 105, 1010 ou 105° sources différentes de carbone, d'azote, de soufre, 20 sulfate, phosphore, phosphate, calcium, potassium, magnésium, oxygène, hydrogène et/ou fer. Dans un mode de réalisation de l'invention, au moins une source de carbone, d'azote, de soufre, de sulfate, de phosphore, de phosphate, de calcium, de potassium, de magnésium, d'oxygène, d'hydrogène et/ou de fer du même milieu de pré-croissance est la même que celle du milieu de croissance. 25 Dans un autre mode de réalisation de l'invention, au moins une source de carbone, d'azote, de soufre, de sulfate, de phosphore, de phosphate, de calcium, de potassium, de magnésium, d'oxygène, d'hydrogène et/ou de fer du milieu de pré-croissance est différente de celle du milieu de croissance. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, le milieu de pré-croissance et/ou de 30 croissance comprend ou comprennent la ou les sources de carbone, d'azote, de soufre, de sulfate, de phosphore, de phosphate, de calcium, de potassium, de magnésium, d'oxygène, d'hydrogène, et/ou du fer à une concentration supérieure à 104°D, 104D, 104", 104D, 105, 104, 104, 1, 10, 102, 103, 105 ou 1010 mM. 14 Dans un autre mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent la ou les sources de carbone, d'azote, de soufre, de sulfate, de phosphore, de phosphate, de calcium, de potassium, de magnésium, d'oxygène, d'hydrogène, et/ou de fer, à une concentration inférieure à 10100, 1050, 1020, 1010, 105, 103, 10, 5 1, 104, 10-3, 10-6, 10-9, 10-20, 10-5° ou 10-1" mM. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, le ou les milieux de pré-croissance et/ou de croissance est/sont préparés en utilisant des produits ou éléments chimiques de qualité pharmaceutique ou ultra-pures. Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, le ou les impuretés du milieu sont le 10 ou les impuretés compris dans le ou les milieux de pré-croissance et/ou de croissance. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent une faible quantité d'impureté(s) du milieu. Dans certains cas, le pourcentage d'impuretés du milieu est inférieur à 100, 1020, 1010, 105, 102, 10, 5, 1, 0,1 ou 0,001%. Préférentiellement, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance 15 comprend ou comprennent une quantité ou concentration en impureté(s) du milieu inférieure, de préférence d'un facteur d'au moins 1,00001, 1,1, 1,5, 2, 5, 10 103, 10I0 ou 1020, à la quantité ou la concentration d'au moins une source de carbone, d'azote, de soufre, de sulfate, de phosphore, de phosphate, de calcium, de potassium, de magnésium, d'oxygène, d'hydrogène et/ou de fer. Selon l'invention, le pourcentage en impureté(s) du milieu peut dans certains cas 20 être défini comme le rapport entre le nombre d'atomes, la quantité, la masse ou le volume d' impuretés du milieu comprises dans le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou croissance divisé par le nombre total d'atomes, quantité, masse ou volume de tous les éléments chimiques compris dans le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance. Dans certains autres cas, la concentration en impureté(s) du milieu comprise(s) dans le(les) milieu(x) de pré-croissance 25 et/ou de croissance est inférieure à 105°, 1030, 1010, 105, 103, 500, 100, 50, 10, 1, 104, 10-3, 10- 5, 10-1° ou 10-50 µg d'impureté(s) de milieu par mL de milieu de pré-croissance et/ou de croissance. Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance ne comprend pas ou ne comprennent pas au moins une impureté du 30 milieu. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent une quantité significative d'impureté(s) du milieu. Dans certains cas, le pourcentage, préférentiellement en masse, d'impureté(s) du milieu est 10-20, 10-10, 10-5, 10-2, 1-4, supérieur à 104°, u 1, 5, 10 25, 50, 75, 80 ou 90%. Dans certains 15 autres cas, la concentration en impureté(s) du milieu comprise(s) dans le(les) milieu(x) de pré- croissance et/ou de croissance est supérieure à 10, 10-")°, 10-5°, 10-2°, 10-10, 10-3, 102, 10-1 1, 10 50, 100, 103, 105 ou 1010 gg d'impureté du milieu par ml de milieu de pré-croissance et/ou de croissance. 5 Dans certains cas, les nanoparticules produites ou obtenues ou résultant du(des) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance peuvent être des magnétosom es Dans un mode de réalisation de l'invention, la méthode selon l'invention comprend une étape de pré-croissance, consistant à amplifier la ou les cellule(s) productrice(s) de nanoparticules dans un milieu de pré-croissance, de manière à ce que la ou les cellule(s) productrice(s) de 10 nanoparticules ne produise(nt) essentiellement pas de nanoparticules. Dans un mode de réalisation de l'invention, la ou les cellules productrice(s) de nanoparticules utilisée(s) pour démarrer l'étape de pré-croissance sont des cellules ayant au moins l'une des propriétés suivantes: i), ce sont les cellules avant l'étape de pré-croissance, préférentiellement plus de 0.001, 01, 1, 5, 10, 103, 105 ou 1010 heure(s) avant le début de l'étape de pré- 15 croissance, ii) elles sont comprises dans une banque cellulaire telle qu'une banque de cellules mères, banque de cellules de travail, ou une banque de cellules de recherche, iii), elles comprennent plus de 1, 5, 10, 103, 105 ou 1013 nanoparticules par cellule, iv), elles sont comprises dans un liquide ou un milieu, préférentiellement identique ou de composition similaire au(x) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance, comprenant de préférence une 20 majorité d'eau, v), ils sont compris dans un milieu ayant une concentration en impureté(s) inférieure à 100, 10, 1, 10-1, 10-2, 10-3, 10-5 ou 10-10 gM, vi), elles sont comprises dans un milieu ou maintenus dans des conditions permettant de maintenir ou d'avoir moins de 100, 10, 1, 0,1 ou 0,01 gramme d' impureté(s) par gramme de nanoparticule(s), y), elles sont comprises dans un volume compris entre 10-1°0 et le°, 10-50 et 1050, 10-30 et 1030, 10-20 et 20, 10 10 40 et 1010, 25 10-6 et 105, 10-6 et 104, 10-6 et 102, ou entre 10-6 et 1 litre, vi), elles sont comprises dans un volume au moins 10 fois inférieur au volume de la première étape de pré-croissance, vii), elles sont ou représentent un nombre de cellules, de préférence par litre de milieu de pré-croissance et/ou de croissance, compris entre 1 et 1010°, 2 et 105°, 3 et 102°, ou entre 10 et 1010 cellules, vii), elles ont une densité optique comprise entre 10'50 et 1050, 10-20 et 30 1020, 101° et 10, 10'5 et 105, 10-5 et 103, 10'5 et 102, 10-5 et 1, 10'5 et 10'1, 10-5 et 10-2, ou entre 10'5 et 10-3, viii), elles ont un nombre de divisions cellulaires, préférentiellement par heure ou par heure et par litre de milieu de pré-croissance et/ou de croissance inférieur à 1, 10, 103, 105 , 1010, 102°, 1050 ou 10100, ix), elles sont stockées ou maintenues à une température inférieure à 100, 50, 25 ou 0 ° C, préférentiellement à 77 K ou -20 ° C. 16 Dans un mode de réalisation de l'invention, les cellules productrices de nanoparticules utilisées pour débuter l'étape de pré-croissance ont au moins l'une des propriétés suivantes: i), elles sont comprises dans un milieu ayant une concentration en impureté supérieure à 10-50 , 10-20, 1040, 10-5, 10-2, 10-1, 1 ou 10 1,1M, ii), elles sont comprises dans un milieu ou maintenus 5 dans des conditions permettant de maintenir ou d'avoir plus de 1040, 10'2O ou 1040 grammes d'impureté(s) par gramme de nanoparticule, vii), elles présentent un nombre de divisions cellulaires, préférentiellement par heure ou par heure par litre de milieu de pré-croissance et/ou de croissance, qui est supérieur à 1, 10, 103, 105, 10m, 1020, 105° ou 10100, viii), elles comprennent moins de 1, 5, 10, 103, 105 ou 1010 nanoparticules par cellule. Cela peut être le 10 cas lorsqu'elles ou si elles sont maintenues ou proviennent d'un milieu comprenant une concentration en fer suffisamment faible pour empêcher la production de nanoparticules. Dans un mode de réalisation de l'invention, au moins une des propriétés des cellules productrices de nanoparticules utilisées pour démarrer l'étape de pré-croissance permet d'empêcher la mort ou la destruction ou la disparition ou la dénaturation ou l'inactivation de la 15 ou des cellules productrice(s) des nanoparticules. Dans un mode de réalisation de l'invention, la densité optique de la ou des cellules est mesurée lorsque les cellules sont comprises dans le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance, dans une solution ou dans de l'eau, de préférence après que le milieu de croissance ait été retiré et les cellules ont été remises en suspension dans de l'eau. Dans certains cas, la 20 densité optique de la ou des cellules est mesurée à une longueur d'onde supérieure à 1, 2, 5, 10, 50, 100, 200, 300, 400, 450, 500, 550, 600, 900, 103, 10' ou 107 nm. Dans d'autres cas, la densité optique de la ou des cellules est mesurée à une longueur d'onde inférieure à 107, 105, 103, 900, 600, 550, 500, 450, 400, 300, 200, 100, 50, 10, 5, 2 ou 1 nm. Dans certains autres cas, la densité optique des cellules est mesurée à une longueur d'onde comprise entre 1 et 107 25 nm, 50 et 10' nm, 100 et 10' nm, 200 et 900 nm ou entre 400 et 800 nm. Dans un mode de réalisation de l'invention, le nombre d'amplification cellulaire, entre deux instants to et t1 de la ou des étape(s) de pré-croissance et/ou de croissance, est égal ou proportionnel à: i), le rapport entre la densité optique mesurée à t1 et la densité optique mesurée à to et/ou ii), le rapport entre le nombre de cellules à t1, n(t1), et le nombre de cellules 30 à to, n(to). Dans un mode de réalisation de l'invention, la vitesse ou le rythme de division cellulaire est n(t 1)-n (to)/(ti-to). 17 Dans un autre mode de réalisation, la vitesse ou le rythme de division cellulaire est: n(ti)- n(to)/[(ti-to).V], où V est le volume du milieu de pré-croissance et/ou de croissance dans lequel les cellules sont cultivées ou amplifiées. Dans un mode de réalisation de l'invention, l'étape de pré-croissance commence par la 5 décongélation ou le chauffage, de préférence d'une température inférieure à 100, 50, 25, 10 ou 0 °C à une température supérieure à 0, 10, 25, 50 ou 100 °C de la ou des cellule(s) productrice(s) de nanoparticules utilisées pour commencer l'étape de pré-croissance. Après cela, les cellules produisant des nanoparticules sont de préférence insérées ou ajoutées au milieu de pré-croissance. Dans certains cas, cette phase initiale de la phase de pré-croissance a 10 1010, lieu pendant un laps de temps compris entre 10-50 et 1050, 10'5° et 10-" et 105, 10'20 et 103, 1010 et 102 ou entre 10-5 et 10 heures. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, l'étape de pré-croissance est divisée en sous- étapes 0, 1, j, correspondant aux amplifications dans les différents volumes Vo, VI, --., N/J, préférentiellement croissants, où i est un entier désignant le nombre i 15 d'amplifications dans différents volumes (0 Dans un mode de réalisation de l'invention, le milieu fed-batch comprend au moins une source commune avec le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance. Dans certains cas, la concentration de cette source est égale ou supérieure d'au moins 1,00001, 1,1, 2, 5, 10, 103 ou 105 dans le milieu fed-batch que dans le milieu de pré-croissance et/ou de croissance. 5 Dans certains autres cas, la concentration de cette source est au moins inférieure de 105, 103, 10, 1, 1,1 ou 1,00000001 dans le milieu fed-batch que dans le milieu de pré-croissance et/ou de croissance. L'invention concerne la méthode selon l'invention, dans laquelle le milieu fed-batch comprend du fer ou une source de fer ayant une concentration supérieure à 10-50, 10-20, 1040, 10-5, 10-1, 10 1, 5, 10, 20, 50, 100, 103 ou 105 MM. Dans certains autres cas, le milieu fed-batch comprend du fer ou une source de fer à une concentration inférieure à 1050, 1020, 1010, 105, 102, 10-2, 10' ou 10-20 MM. Dans encore d'autres cas, le milieu fed-batch comprend du fer ou une source de fer à une concentration comprise entre 10-5° et 1050, 10-15 et 1015, 10-10 et 105, 10-5 et 105, entre 10-3 et 103 MM, ou entre 0,5 nM et 50 M, préférentiellement avant l'ajout du milieu fed- 15 batch au milieu de croissance. Dans un mode de réalisation de l'invention, le milieu fed-batch est acide ou a un pH inférieur à 7, 6, 5, 4 ou 3, préférentiellement inférieur à 2. Dans certains cas, le milieu fed-batch a un pH supérieur à 0 ou 1. L'invention concerne la méthode selon l'invention, dans laquelle le milieu fed-batch est 20 introduit dans le milieu de croissance à une vitesse comprise entre 10-15 litres par heure et 1015 litres par heure ou entre 1015 ttM de fer par heure et 1015 JIM de fer par heure. Dans certains cas, le fed-batch est ajouté au milieu de croissance à faible vitesse, préférentiellement à une vitesse inférieure à 10100, 1050, 102°, 1010, 105, 102, 10, 5, 1, 10'2, 10-3, le ou 10-1° litre(s) de fed-batch ou nM de fer par minute, préférentiellement lorsque le nombre de divisions 25 cellulaires dans le milieu de croissance est faible, préférentiellement inférieur à 1020, 1010 , 105, 103, 10, 1 division(s) cellulaire(s) par seconde ou heure ou jour ou mois. Dans certains autres cas, le milieu fed-batch est ajouté au milieu de croissance à un débit élevé, préférentiellement supérieur à 104°°, 10-50, 10-20, 10-10, 10-5, 10-2, 1, 5, 10, 102, 103, 105 ou 1010 litre(s) de milieu fed-batch par minute ou nM de fer par minute, préférentiellement 30 lorsque le nombre de division(s) cellulaire(s) dans le milieu de croissance est grand, préférentiellement supérieur à 1, 2, 5, 10, 103, 105, 1010 ou 1020 division(s) cellulaire(s) par seconde ou heure ou jour ou mois Dans certains cas, entre deux sous-étapes de l'étape de croissance, le débit du milieu fed-batch diminue, préférentiellement par un facteur supérieur à 1,0000001, 1,00001, 1,0001, 1,01, 1,1, 1,2, 1,5, 2, 5, 10, 103, 10', 107 ou 109. Dans certains 36 autres cas, entre deux sous-étapes de l'étape de croissance, le débit du fed-batch augmente, de préférence d'un facteur supérieur à 1,0000001, 1,00001, 1,0001, 1,01, 1,1, 1,2, 1,5, 2, 5, 10, 103, 105, 107 ou 10°. Dans un mode de réalisation de l'invention, avant d'être ajouté au milieu de croissance, le 5 milieu fed-batch a une concentration en fer supérieure d'au moins 1,000001, 1,001, 1, 1,5, 2, 5, 10, 102, 103 ou 105 à la concentration en fer du milieu de croissance. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, de préférence après avoir été ajouté au milieu de croissance, le milieu fed-batch fait partie du milieu de croissance. L'invention concerne la méthode selon l'invention, dans laquelle le(les) milieu(x) de pré- 10 croissance et/ou de croissance selon l'invention ne comprend ou ne comprennent qu'une seule vitamine choisie dans le groupe constitué de : la biotine, le pantothénate de calcium, l'acide folique, l'inositol, l'acide nicotinique, l'acide p-aminobenzoïque, pyridoxine HC1, la riboflavine, la thiamine HCL et tout dérivé de ces vitamines. Dans certains cas, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance peut ou peuvent 15 comprendre moins de 1050, 1020, 1010, 105, 103, 100, 75, 50, 25, 10, 5, 3, 2 ou 1 vitamines ou différentes vitamines. Dans certains cas, différentes vitamines peuvent être des vitamines 102, 103, 105, 1010, 1020 ou 1050 comprenant au moins 1, 2, 5, 10, 102 élément(s) chimique(s) différent(s). Dans certains autres cas, le ou les milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent plus de 1, 2, 5, 10, 102, 103, 105 ou 1010 vitamine(s) ou 20 différente(s) vitamine(s). Dans certains cas, la ou les vitamines peut ou peuvent être une ou des vitamine(s) soluble(s) dans l'eau. Dans certains autres cas, la ou les vitamines peut ou peuvent être une ou des vitamine(s) liposoluble(s). Dans d'autres cas encore, la ou les vitamines peut ou peuvent appartenir à la ou aux vitamines A, BI, B2, B3, B5, B6, B7, B9, B12 ou C. Dans d'autres cas 25 encore, la vitamine n'est pas produite par les cellules productrices de nanoparticules. Dans d'autres cas encore, la vitamine est une vitamine utilisée pour traiter une maladie telle qu'une maladie causée ou associée à une carence en vitamines. Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, la ou les vitamines est ou sont choisie(s) dans le groupe constitué de: l'adénosylcobalamine, l'acide aminobenzoïque, l'acide 30 ascorbique, la biotine, le calcium D-(+)-pantothénate, la carotène thiamine, les caroténoïdes bêta, le cholécalciférol (D3), Cyanocobalamine, Cyanacobalamine, Ergocalciférol (D2), Folates, Acide folique, Acide folinique, Hydroxocobalamine, Inositol, Menaquinones (K2), Méthylcobalamine, Niacinalide, Niacinamide, Nicotinamide, Acide Nicotinique, Acide di hydrogène, Pyri doxal, pyri doxam i ne, pyridoxine, acide p -thi octi que, pyri doxal, 37 pyridoxamine, pyridoxine, chlorhydrate de pyridoxine, rétine, acide rétinoïque, rétinol, riboflavine, thiamine, timaïne, tocophérol, ou tocotriénols, et un dérivé ou une combinaison de ces vitamines. Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, au moins une vitamine comprise 5 dans le milieu de croissance est la biotine, l'acide folique, la riboflavine, l'acide nicotinique ou la thiamine HCI. Dans certains cas, la ou les vitamine(s) comprise(s) dans le milieu de pré-croissance est ou sont identique(s) à la ou aux vitamine(s) comprise(s) dans le milieu de croissance. Dans certains autres cas, la ou les vitamine(s) comprise(s) dans le milieu de pré-croissance est ou 10 sont différente(s) de la ou les vitamine(s) comprise(s) dans le milieu de croissance. L'invention concerne également la méthode selon l'invention, dans laquelle la concentration d'au moins une vitamine comprise dans le/les milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance est inférieure à 10100, 1059, 1020, 1010, 105, 103, 10, 1, 101, 10-3, 10-4, 10-6, 10-9, 10-20, 10-5° ou 10100 M, ou de préférence inférieure à 0,002 mol/L. 15 Dans un autre mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent au moins une vitamine ou un élément chimique compris dans au moins une vitamine à une concentration supérieure à 10409, 10-5°, 10'2°, 1049, 10'5, 10'4, 10'3 ou 104, 1, 10, 102, 103, 105 ou 1010 M. L'invention concerne également la méthode selon l'invention dans laquelle le(les) milieu(x) de 20 pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent au moins une vitamine à une concentration inférieure, préférentiellement d'un facteur supérieur à 1.0001, 1.2, 1.5. 2, 5, 10, 103 ou 105, à la concentration de la source de carbone, d'azote, de soufre, de sulfate, de phosphore, de phosphate, de calcium, de potassium, de magnésium, d'oxygène, d'hydrogène et/ou de fer. Dans certains cas, les cellules ne nécessitent pas une grande concentration de 25 vitamines pour croître, se diviser et/ou synthétiser des nanoparti cul es. L'invention concerne également la méthode selon l'invention, dans laquelle le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent, par gramme ou ml de milieu de croissance, moins de: i) 1 mg d'extrait de levure, ii ), 1 mg d'au moins un composant d'extrait de levure, iii), 1 mg de peptone, iv), 1 mg d'au moins un composant de peptone, y), 1 30 mg d'agent CMR, vi), 1 mg d'au moins au moins un agent chélatant, vii), 1 mg d'au moins un acide aminé, viii), 1 mg d'un composé toxique ou cytotoxique et/ou ix), 1 mg d'au moins un métal lourd. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent une concentration en extrait de levure, peptone, agent 38 CMR, agent chélatant, acide aminé, composé toxique ou cytotoxique et/ou métal lourd, qui est inférieure à 10100, 1050, 1020, 1010, 105, 102, 10, 1, 104, 10-3, 10-3 ou 10-5 i..tg d'extrait de levure, peptone, agent CMR, agent chélatant, acide aminé, et/ou métal lourd par litre ou millilitre de milieu de pré-croissance et/ou de croissance. Dans certains cas, cette situation 5 peut se produire lorsque l'extrait de levure, la peptone, l'agent CMR, l'agent chélatant, les acides aminés, les composés toxiques ou cytotoxiques et/ou les métaux lourds, ont été enlevés ou ne sont pas compris dans le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance. Dans un mode de réalisation de l'invention, le premier et/ou second milieu(x) comprend ou comprennent une concentration en extrait de levure, peptone, acide(s) aminé(s) et/ou 10 métal/métaux lourd(s) supérieure(s) à 10- 100 0-50, 1010, 10-5, 10-2, 101, 1, 10, 103 ou 105 !..tg d'extrait de levure, de peptone, d'acide(s) aminé(s) et/ou métal/métaux lourd(s) par litre ou millilitre de milieu de pré-croissance et/ou de croissance. Dans certains cas, cette situation peut survenir lorsqu'un extrait de levure, une peptone, un agent CMR, un agent chélatant, un acide aminé et/ou un métal lourd a ou ont été ajouté(s), préférentiellement involontairement, 15 au(x) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance. Dans un mode de réalisation de l'invention, l'extrait de levure est ou comprend des peptides, des acides aminés, des bases de purine, des bases de pyrimidine et/ou des vitamines hydrosolubles du groupe B. Dans un mode de réalisation de l'invention, le ou les acides aminés sont l'alanine, l'arginine, 20 l'asparagine, l'acide aspartique, la cystéine, la glutamine, l'acide glutamique, la glycine, l'histidine, l'isoleucine, la leucine, la lysine, la méthionine, la phénylalanine, la phénylalanine, la proline, la sérine thréonine, le tryptophane, la tyrosine et/ou la valine. Dans un mode de réalisation de l'invention, le ou les métal/métaux lourd(s) est ou sont l'arsenic (As), le cadmium (Cd), le chrome (Cr), le cuivre (Cu), le mercure (Hg), le nickel 25 (Ni), le plomb (Pb), le sélénium (Se) et/ou le zinc (Zn). Dans un mode de réalisation de l'invention, le ou les agents cancérigènes, mutagènes ou toxiques pour la reproduction, également dénommé(s) agent(s) CMR, est ou sont préférentiellement l'acide nitriloacétique, le sel trisodique et/ou l'acide borique. Dans un mode de réalisation de l'invention, le composé toxique ou cytotoxique est un 30 composé qui provoque la mort d'une cellule ou d'un organisme, préférentiellement des cellules productrices de nanoparticules, préférentiellement lorsqu'il est introduit dans le milieu de pré-croissance et/ou de croissance, préférentiellement à une concentration supérieure à 10" 10, 10-5, 10-2, 1, 5, 10, 103, 10 JIM, préférentiellement à une concentration comprise entre 10-10 et 1010 39 Dans un mode de réalisation de l'invention, le milieu de pré-croissance et/ou de croissance ne comprend pas ou ne comprennent pas les minéraux sélectionnés dans le groupe constitué de: C6H6NO6Na3, sel trisodique d'acide nitriloacétique, MnO4S H2O, Manganèse(II) sulfate monohydraté, NaC1, chlorure de sodium, CoN2O6 61-120, nitrate de cobalt (11) hexahydraté, 5 O4SZn 71-120, sulfate de zinc heptahydraté, CuO4S 51-120, sulfate de cuivre (Il) pentahydraté, AIKO8S, 12H20, sulfate de sodium d'aluminium, 1-131303, acide borique, Na2MoO4 2H20, molybdate de sodium dihydraté, Cl2Ni 61-120, chlorure de nickel (II) hexahydraté, Na2Se03, sélénite de sodium, et un dérivé ou une combinaison d'un ou plusieurs de ces composés. Dans un mode de réalisation de l'invention, le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de 10 croissance comprend ou comprennent une concentration en minéral/minéraux inférieure à 10100 105°, 1020, 010, 105, 102, 10, 1, 101, 10-3 ou 10-5 pg de minéraux par litre ou millilitre de milieu de culture. Dans certains cas, cette situation peut se produire lorsque les minéraux ont été retirés du/des milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance. Dans un mode de réalisation de l'invention, le premier et/ou le deuxième milieu de croissance 15 comprend ou comprennent une concentration en minéraux, supérieure à 10-100, 10-50, 10-20, 10- Io 10-5, 10-2, 104, 1, 10, 10' ou 105 [tg de minéraux par litre ou millilitre de milieu de culture. Dans certains cas, cette situation peut se produire lorsque les minéraux ont été retirés, préférentiellement involontairement, du/des milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance. L'invention concerne également la méthode selon l'invention, qui comprend une étape 20 supplémentaire de purification de nanoparticule(s) d'oxyde de fer de haute pureté en éliminant au moins une ou plusieurs impureté(s) de la ou des nanoparticule(s). Dans un mode de réalisation de l'invention, l'étape supplémentaire de purification des nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté consiste à éliminer les impuretés des nanoparticules et/ou à dénaturer et/ou à détruire les impuretés contenues dans les 25 nanoparticules. Dans un mode de réalisation de l'invention, l'étape supplémentaire de purification des nanoparticules est précédée d'une étape antérieure d'isolement ou d'extraction des nanoparticules des cellules. Dans certains cas, l'étape antérieure est une étape de récupération des nanoparticules. Dans certains cas, l'étape antérieure est réalisée: i) en mélangeant les 30 cellules, obtenues préférentiellement à l'étape de croissance, avec un détergent tel que KOH ou NaOH, ii), en chauffant les cellules à une température supérieure à -270, - 250, -200, -150, -100, -50, -30, -10, -5, 0, 5, 10, 20, 30, 50, 75, 100, 150, 200, 500, 103, 105 ou 1010 °C ou compris entre -270 et 1010, -100 et 105, ou entre 0 et 100 °C, iii), induisant un gradient de température supérieur à 10'5°, 10-20, 1010, 10-5, 101, 101, 1, 2, 5, 10, 103, 105 ou 1010 °C par heure, minute ou seconde, ou compris entre 1059 et 1010 °C par heure, minute ou seconde, iii), en appliquant un pression sur les cellules, préférentiellement supérieure à 1, 10, 100, 500, 103, 104, 105, le, 107, i08, 10° 0.109 atmosphère (s) ou comprise entre 1 et W9 atmosphère (s), en utilisant par exemple une presse de French, et/ou iv), sonication des cellules, 5 préférentiellement à une puissance supérieure à 10-59, 10-20, 0-5, 10-1, 1, 10, 102, 103, 105 ou 1010 W. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, l'étape supplémentaire de purification des nanoparticules permet d'éliminer: i) un pourcentage en masse d'impureté(s) supérieur à 10-29, 1010, 10-5, 10-2, 101, 1, 5, 10, 25, 50, 75, 80 ou 90%, ou ii) plus de 10-9, 1020, 1019, 10-5, 10- 10 1, 1, 5, 10 , 103, 105 ou 1010 sg d'impureté(s) par gramme de nanoparticule(s). Dans un mode de réalisation de l'invention, la ou les impureté(s), préférentiellement éliminée(s) par l'étape supplémentaire de purification des nanoparticules, est/sont du carbone ou du matériau carboné et/ou n'est pas ou ne sont pas de l'oxyde de fer. Préférentiellement, cette/ces impureté(s) est ou sont située(s) dans le revêtement des nanoparticules. 15 Dans un mode de réalisation de l'invention, la ou les impureté(s) est ou sont éliminée(s) du noyau et/ou du revêtement des nanoparticules, préférentiellement du revêtement des nanoparticules. Préférentiellement, l'(les) impureté(s) qui est/sont éliminées est/sont une/des impureté(s) peu profonde(s). Dans d'autres cas, l'(les) impureté(s) qui est/sont éliminée(s) est/sont une/des impureté(s) profonde(s). 20 L'invention concerne également l'étape supplémentaire de la méthode de purification des nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté en éliminant au moins une ou plusieurs impuretés de la ou des nanoparticules, comprenant au moins deux étapes de chauffage dans lesquelles: - Au cours de l'étape 1, la température des nanoparticules est augmentée à une température Ti, 25 puis maintenue à T1 pendant une durée de chauffage comprise entre 1 seconde et 20 ans, où Tl est comprise entre 150 °C et 250 °C. - Au cours de l'étape 2, la température des nanoparticules est augmentée jusqu'à une température T2, puis maintenue à T7 pendant une durée de chauffage comprise entre 1 seconde et 20 ans, où T2 est comprise entre 350 et 450 °C. 30 Dans certains cas, l'étape supplémentaire de la méthode de purification des nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté ou l'étape de chauffage peut être qualifiée de méthode de purification. L'invention concerne une méthode d'élimination d'au moins une impureté de nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté, comprenant une étape supplémentaire entre les étapes 1 et 2, 41 dans laquelle la température des nanoparticules est augmentée à une température T3 et est ensuite maintenue à T3 pendant un temps de chauffage compris entre 1 seconde et 20 ans, où T3 est comprise entre 250 ° C et 350 ° C. Dans certains cas, la température des nanoparticules est maintenue à la température Ti, 17 5 et/ou T3 pendant une durée de chauffage inférieure à 100 ans, 50 ans, 20 ans, 10 ans, 5 ans, 2 ans, 1 année, 11 mois, 6 mois, 3 mois, 2 mois, 1 mois, 3 semaines, 2 semaines, 1 semaine, 6 jours, 5 jours, 3 jours, 1 jour, 23 heures, 12 heures, 6 heures, 1 heure, 50 minutes, 30 minutes, 20 minutes, 10 minutes, 5 minutes, 2 minutes, 1 minute, 50 secondes, 30 secondes, 10 secondes, 1 seconde, 1 milliseconde ou 1 microseconde. Dans d'autres cas, la température des 10 nanoparticules est maintenue à la température Ti, T2 et/ou 113 pendant une durée de chauffage supérieure à 1 microseconde, 1 milliseconde, 1 seconde, 10 secondes, 30 secondes, 50 secondes. 1 minute, 2 minutes, 5 minutes, 10 minutes, 1 heure, 6 heures, 12 heures, 23 heures, 1 jour, 3 jours, 5 jours, 6 jours, 1 semaine, 2 semaines, 3 semaines, 1 mois, 2 mois, 3 mois, 6 mois, 11 mois, 1 an, 2 ans, 5 ans, 10 ans, 20 ans, 50 ans ou 100 ans. Dans d'autres cas encore, 15 la température des nanoparticules est maintenue aux températures Ti, 12 et/ou T3 pendant une durée de chauffage comprise entre 1 microseconde et 100 ans, 1 seconde et 20 ans, 1 seconde et 1 an, 1 seconde et 1 mois, 1 seconde et 1 jour, 1 minute et 1 jour, 5 minutes et 1 jour, 10 minutes et 12 heures, 30 minutes et 6 heures ou entre 30 minutes et 3 heures. Dans un mode de réalisation de l'invention, la durée de chauffage est supérieure à la durée 20 pendant laquelle la température est augmentée jusqu'à T1, 11, et/ou 13, de préférence d'un facteur supérieur à 1,001, 1,1, 1,5, 2, 5, 10. 103, 105 ou 1010 . Dans certains cas, TI est comprise entre -273 °C et 250 °C, -200 °C et 250 °C, -100 et 250 °C, 0 et 250 °C, 50 et 250 °C, 150 et 250 °C ou entre 180 et 220 °C. Dans d'autres cas, T, est comprise entre 200 et 105, 250 et 105, 300 et 105, 350 et 105, 350 et 103, 350 et 500, 350 et 25 450, ou entre 360 et 400 °C. Dans certains cas, T3 est comprise entre -273 et 10', -200 et 103, -100 et 500, -50 et 200, 0 et 500, 100 et 500, 200 et 500, 200 et 400, ou entre 250 et 350 °C. Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, T3 est compris entre Ti et 1.7. Dans certains cas, 13 est inférieure à 12, préférentiellement d'un facteur supérieur à 1 0001, 1,1, 1,2, 1,5, 2, 5, 10, 103 ou 10?. Dans d'autres cas, T3 est supérieure à Ti, préférentiellement d'un 30 facteur de plus de 1.0001, 1.1, 1.2, 1.5, 2, 5, 10, 103 ou 10). Dans un mode de réalisation de l'invention, la température des nanoparticules est la température de l'appareil ou du four de chauffage utilisé pour chauffer les nanoparticules et/ou comprenant les nanoparticules, préférentiellement avant, pendant ou après le traitement des nanoparticules par la méthode de purification. 42 Dans un mode de réalisation de l'invention, l'intervalle de températures séparant T1 et T2, désigné par [Ti, T2], est tel que: i), les nanoparticules présentent la plus grande variation ou perte de poids ou de masse en fonction de la température et/ou ii), la dérivée de la variation de la perte de poids ou de masse des nanoparticules en fonction de la température est la plus 5 grande. Dans un mode de réalisation de l'invention, le rapport %W(T2)-%W(T1)/(T2-T1), où %W(T2) et %W(Ti) sont les pourcentages en poids ou en masse de la nanoparticules à T2 et Ti, respectivement, est supérieur à 10-5°, 10-1°, 10-20, le°, 10-5, 0,01, 0,02, 0,03, 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, 0,5, 1, 10 ou 105 %/°C. Dans certains cas, ce rapport est important lorsque le pourcentage 10 en masse de carbone dans les nanoparticules, préférentiellement avant le traitement des nanoparticules par ou avec la méthode de purification, est important, préférentiellement supérieur à 10-2°, 10-10, 10-5, 10-2, 10-1, 1, 5, 10, 20, 50, 75, 85, 95 ou 100%. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, le rapport %W(T2)-VoW(T0/(T2-Tl) est inférieur à 105°, le, 1020, 10'0, 105, 10, 5, 2, 1, 0,5 0,05, 10-1, 10-5, 10-'° ou 1020 %/°C. Dans 15 certains cas, ce rapport est faible lorsque le pourcentage en masse de carbone dans les nanoparticules, préférentiellement avant le traitement des nanoparticules par ou avec la méthode de purification, est faible, préférentiellement inférieur à 100, 95, 80, 70, 50, 30, 20, 10, 5, 2, 1, 10'1, 10'5, 10-5, 10-10 ou 10-20%. Dans un mode de réalisation de l'invention, la température des nanoparticules est maintenue à 20 Th 12 et/ou 13, lorsque Ti, 12 et/ou 13 varie ou varient de moins de 105, 105, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 3, 2, 1, 10-5, 1010 ou 10-20%. Dans certains cas, pour chaque température Ti, T2 et/ou T3, ce pourcentage est égal à T'',j-T.,'j/Ta,,,,, où Lam, T.112, et Ta,, (i = 1, 2, 3) sont les températures maximales, minimales et moyennes atteintes pendant la durée de chauffage ou pendant l'étape de chauffage, préférentiellement après ou lorsque la température est 25 maintenue à une température T1, 12 et/ou T3. Dans certains cas, ce pourcentage est faible lorsque le four ou l'appareil de chauffage permet de maintenir la température stable sans grandes fluctuations et/ou lorsque les nanoparticules ne sont pas sujettes à des réactions endothermiques et/ou exothermiques. Dans certains cas, la réaction endothermique est une réaction dans laquelle de la chaleur ou de l'énergie est transférée du milieu entourant les 30 nanoparticules aux nanoparticules. Dans d'autres cas, la réaction exothermique est une réaction dans laquelle de la chaleur ou de l'énergie est transférée des nanoparticules au milieu entourant les nanoparticules. Dans un mode de réalisation de l'invention, la température des nanoparticules n'est pas maintenue à Th T2 et/ou T3, lorsque la température des nanoparticules varie de plus de 105, 43 103, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 3, 2, 1, 10'5, 10-10 ou 10-20%. Dans certains cas, ce pourcentage est grand lorsque le four ou l'appareil de chauffage ne permet pas de maintenir la température stable sans grandes fluctuations et/ou lorsque les nanoparticules sont sujettes à des réactions endothermiques et/ou exothermiques. 5 Dans un mode de réalisation de l'invention, les températures T1 et/ou T., sont déterminées en: i) mesurant la variation du pourcentage en poids ou en masse des nanoparticules en fonction de la température lorsque les nanoparticules sont chauffées entre deux températures Tni et TT>T2, où TT T2 est supérieure à L. ii) mesurant, représentant, considérant, examinant ou utilisant au moins un pic de la dérivée 10 de la variation de ce pourcentage en fonction de la température, iii) estimant ou déduisant de la variation du pourcentage en poids ou en masse des nanoparticules en fonction de la température, l'intervalle de température dans lequel cette variation est maximale, où les températures minimale et maximale de cet intervalle sont T1 et 11,, respectivement, 15 iv) estimant ou déduisant de la position d'au moins un pic dans le tracé de la dérivée de la variation du pourcentage en poids ou en masse des nanoparticules les deux températures T1 et T7, conduisant aux valeurs minimales de la dérivée au début et à la fin du pic, respectivement, et T3 menant à la valeur maximale de la dérivée au milieu du pic, v) estimant ou déduisant de la position d'au moins un pic dans le graphique de le tracé du flux 20 thermique des nanoparticules en fonction des températures, les températures T1, T2, T3, situées préférentiellement au début d'au moins un pic. Dans certains cas, la température à laquelle ou pour laquelle le pic commence à présenter une augmentation de la dérivée de la variation du pourcentage en poids ou en masse des nanoparticules en fonction de la température est au début du pic. Dans certains autres cas, la 25 température à laquelle ou pour laquelle le pic cesse de présenter une augmentation de la dérivée de la variation du pourcentage en poids ou en masse des nanoparticules en fonction de la température est la fin du pic. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, le flux de chaleur des nanoparticules est le flux de chaleur produit par les nanoparticules ou libéré par les nanoparticules ou provenant 30 des nanoparticules, préférentiellement lorsque les nanoparticules sont chauffées avec un appareil de chauffage tel qu'un four. Préférentiellement, le flux thermique peut être mesuré avec un appareil ou en utilisant une méthode thermo-analytique, ou en utilisant la thermoanalyse différentielle (DTA) ou en utilisant la calorimétrie différentielle à balayage (DSC). 44 Dans un mode de réalisation de l'invention, l'étape i de chauffage de la méthode de purification selon l'invention comprend au moins l'une des phases suivantes, dans laquelle: - Au cours de la première phase, la température des nanoparticules augmente d'une température Ti à une température Ti,,,, pendant un laps de temps t'Ili, 5 - Au cours de la deuxième phase, la température des nanoparticules est maintenue à la température T', pendant un laps de temps top, - Au cours de la troisième phase, la température des nanoparticules est diminuée de Tiav à Tf, pendant un laps de temps ti3p. Dans certains cas, Ti et/ou tin, est/sont au moins 1.0001, 1.1, 1.5, 2, 5, 10 ou 100 fois inférieur 10 à Tm,- et/ou tin,. Dans certains cas, Tia, est égale à Ti, T2 ou T3 et/ou tiip est égal au temps de chauffage. Dans d'autres cas encore, Tf et/ou ti3p ne diffère pas ou ne diffèrent pas d'un facteur supérieur à 1 0001, 1,1, 1,5, 2, 5, 10, 102 ou lOn de Ti et/ou tin". L'invention concerne également la méthode, préférentiellement de purification, selon l'invention, dans laquelle plus de 10% en masse de carbone ou de matière carbonée sont 15 éliminés des nanoparticules, ce pourcentage étant égal à (%CA,/%Cni)/%CuT, où %CA, et %CBT sont les pourcentages de carbone ou de matière carbonée après et avant le traitement des nanoparticules avec la méthode, respectivement. Dans certains cas, (%CAT-VoCBT)/11/0CBT est supérieur à 105°, 10-2o, 10-5, 10-2, 10-1, 1, 5, 10, 50, 75, 90, 95 ou 99%. Cela peut être le cas lorsque la méthode de purification est efficace ou 20 lorsque la quantité de carbone ou de matière carbonée comprise dans la nanoparticule avant traitement des nanoparticules par la méthode de purification est inférieure à un certain seuil, préférentiellement inférieure à 99, 90, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 ou 1% Dans certains autres cas, (%CAT-%CBT)/%CBT est inférieur à 99, 90, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 ou 1%. Cela peut être le cas lorsque la méthode de purification n'est pas efficace ou lorsque la 25 quantité de carbone ou de matériau carboné comprise dans la nanoparticule avant traitement des nanoparticules avec la méthode de purification est supérieure à un certain seuil, préférentiellement supérieure à 99, 90, 70, 60. 50, 40, 30, 20, 10 ou 1%. Dans quelques autres cas encore, (VOCAT-%CBT)/%Cs, est compris entre 0,1 et 100, 1 et 99, 10 et 99, 50 et 99, ou entre 80 et 99%. 30 L'invention concerne des nanoparticules à base d'oxyde de fer de haute pureté obtenues par la méthode selon l'invention. L'invention concerne également des nanoparticules de haute pureté ou des nanoparticules de haute pureté qui ne sont pas obtenues par le procédé. Dans un mode de réalisation de l'invention, les nanoparticules de haute pureté, préférentiellement le revêtement de ces nanoparticules, comprennent: i) entre 0,8 et 0,999999999 g d'oxyde de fer par gramme de nanoparticule, et ii) entre 104° et 105 mg d'impureté(s) par gramme de nanoparticule. 5 Dans un mode de réalisation de l'invention, les nanoparticules de haute pureté comprennent un pourcentage en masse de carbone ou de matériau carboné inférieur à 90, 10, 5, 2, préférentiellement 1, 0,5, 0,4 ou 0,3%. Dans certains cas, un si faible pourcentage en masse de carbone permet de revêtir les nanoparticules d'un revêtement qui ne provient pas des cellules produisant des nanoparticules. 10 Dans un mode de réalisation de l'invention, la SAR des nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté est supérieure à 10-100, 10-50, 10-2°, 10'10, 10'5, 10'3, 104, 1, 10, 103 ou 105 Watt par gramme de nanoparticules. Dans certains cas, la SAR des nanoparticules est la plus élevée lorsque la quantité d'impuretés dans les nanoparticules est la plus faible. Dans certains cas, la SAR des nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté est comprise entre 10-100 et 10100, 10-1 15 et 105, ou entre 0,1 et 10' Watt par gramme de nanoparticules. Dans certains cas, la SAR des nanoparticules est proportionnelle à la pente, préférentiellement initiale, de la variation de température dans le temps des nanoparticules, (AT/St), préférentiellement entourée d'un milieu tel que l'eau, du matériel biologique, une partie du corps, ou tissu, où (AT/St) est estimé de préférence en °C/s., où SAR = a (AT/30. Dans certains cas, a = C,IC,'0, où C est la 20 capacité thermique spécifique, préférentiellement de l'eau, du matériel biologique, de la partie du corps ou du tissu, comprenant les nanoparticules, et C. est la concentration en nanoparticules ou la quantité ou le nombre de nanoparticules, comprises de préférence dans de l'eau, du matériel biologique, une partie du corps ou des tissus. Dans certains cas, la SAR est mesurée en exposant les nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté à un rayonnement, 25 de préférence un rayonnement qui produit de la chaleur, de préférence un laser, un champ magnétique, un champ magnétique alternatif, une onde acoustique, des ultrasons, une radiofréquence. Dans un mode de réalisation de l'invention, les nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté , 1-0, 10 ont une distribution de taille inférieure à 1050, 1020 105, 103, 102, 10, 1, 10-1, 10-2 OU 10-5 30 nm. Dans certains cas, la distribution en taille des nanoparticules est faible lorsque la méthode selon l'invention permet la fabrication de nanoparticules présentant une faible distribution en taille. 46 Dans un autre mode de réalisation de l'invention, les nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté, préférentiellement à une concentration supérieure à 10-6, 104, 104, 1 ou 10 mg de nanoparticules par ml, par mm3 ou par cellule, détruisent plus de 1, 10, 103, 106 ou 109 cellule(s). 5 L'invention concerne également des nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté produites à un rendement supérieur à 10-5°, 10-3°, 104°, 10-5, 10-2, 104, 1, 5, 10, 50, 102, 103 ou 105 mg de nanoparticule(s) ou mg de fer compris dans une ou plusieurs nanoparticule(s), préférentiellement par cellule, préférentiellement par litre de milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance. 10 L'invention concerne également la ou les nanoparticule(s) obtenue(s) par la méthode selon l'invention, dans laquelle le rendement de production de nanoparticules est inférieur à 1050 , 1030, 102°, 105, 102, 10, 5, 1, 104, 10-2, 10-3 ou 10-5 mg de nanoparticule(s) ou mg de fer compris dans la(les) nanoparticule(s), préférentiellement par cellule, préférentiellement par litre de milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance. 15 L'invention concerne également une ou plusieurs nanoparticule(s) à base d'oxyde de fer de haute pureté selon l'invention, où la(les) nanoparticule(s) d'oxyde de fer de haute pureté est/sont un/des magnétosomes. Dans un mode de réalisation de l'invention, les magnétosomes sont des nanoparticules produites par des bactéries magnétotactiques qui sont traitées préférentiellement de la manière 20 suivante: i) les nanoparticules sont extraites et/ou isolées des bactéries, de manière à obtenir préférentiellement des magnétosomes comprenant des minéraux cristallisés entourés d'une membrane biologique, ii), la membrane biologique est retirée, préférentiellement en utilisant la méthode de purification, iii), les magnétosomes sont recouverts d'un revêtement ne provenant pas de la cellule produisant les nanoparticules pour la stabilisation, de manière à 25 éviter que les magnétosomes s'agrègent et/ou sédimentent. L'invention concerne également une composition, un médicament, un dispositif médical, une composition de diagnostic, une composition thérapeutique ou une composition cosmétique, comprenant la ou les nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté selon l'invention. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, les nanoparticules d'oxyde de fer de haute 30 pureté mènent à: i) une activité médicale ou thérapeutique, par exemple en permettant la destruction de cellules pathogènes, de virus, de bactéries, de cellules cancéreuses ou en étant moins toxiques pour les tissus sains que les organismes pathogènes, cellules, virus, bactéries, cellules cancéreuses, ii), une activité de diagnostic, par exemple en permettant la détection de cellules pathogènes, virus, bactéries, cellules cancéreuses, ou en étant moins toxique pour les 47 tissus sains, et/ou, iii), une activité cosmétique, par exemple en améliorant l'apparence d'un être humain. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, les nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté sont non immunogènes ou non pyrogènes. Dans ce cas, de préférence, elles: i), attirent 5 ou conduisent à l'apparition d'un faible nombre de cellules immunitaires, préférentiellement inférieures à 1, 5, 10, 103, 1010, 1050 ou 10100 cellules immunitaires et/ou ii) produisent une augmentation de température d'un organisme vivant inférieure à 105, 103, 102, 50, 20, 10, 5, 2, 1 ou 0,1 °C. Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, la ou les propriété(s) ou 10 caractéristique(s), préférentiellement de la/des nanoparticule(s) ou de la méthode, décrite(s) dans chaque mode de réalisation individuel ou section ou phrase de cette demande de brevet peuvent être combinées pour aboutir à une combinaison de propriété(s) ou de caractéristique(s), préférentiellement de la/des nanoparticule(s) ou de la méthode Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, lorsqu'un composé tel que la 15 nanoparticule ou l'élément chimique a une propriété dans une condition 1 (P1) qui est supérieure, plus longue ou plus grande d'un facteur cc qu'une propriété dans une condition 2 (P2), cela signifie que Pl = a P2. Dans encore un autre mode de réalisation de l'invention, lorsqu'un composé tel que la nanoparticule ou l'élément chimique a une propriété dans une condition 1 (P1) plus petite ou 20 plus faible d'un facteur a qu'une propriété dans une condition 2 (P2), cela signifie que P1 = P2 / a. L'invention sera en outre décrite par les exemples non limitatifs suivants. 48 Description des figures Figure 1: Analyse TGA-DSC de bactéries magnétotactiques entières et de magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques selon la condition 2 de lyse. a), La variation du 5 pourcentage en poids en fonction de la température ainsi que la dérivé de cette variation en fonction de la température pour un échantillon comprenant 3 mg de bactéries magnétotactiques lyophilisées lorsqu'il est chauffé entre 20 °C et 600 °C à une vitesse de 6 °C/min (b), Flux de chaleur en mW en fonction de la température produit par un échantillon comprenant 3 mg de bactéries magnétotactiques lyophilisées lorsqu'il est chauffé entre 20 °C 10 et 600 °C à une vitesse de 6 °C/min. (c), La variation du pourcentage en poids en fonction de la température ainsi que la dérivé de cette variation en fonction de la température pour un échantillon comprenant 3 mg de magnétosomes lyophilisés extraits de bactéries entières selon la condition 2 de lyse lorsque le l'échantillon est chauffé entre 20 °C et 600 °C à une vitesse de 6 °C/min. (d), flux de chaleur en mW en fonction de la température produit par un 15 échantillon comprenant 3 mg de magnétosomes lyophilisés extraits de bactéries entières selon la condition 2 de lyse lorsque l'échantillon est chauffé entre 20 °C et 600 °C à une vitesse de 6 °C/min. En ce qui concerne les figures 1(a) et 1(c), l'axe des y peut être remplacé par le pourcentage en masse conduisant aux mêmes tracés. Figure 2: Analyse TGA-DSC de magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques selon 20 la condition 3 et de nanoparticules SIGMA synthétisées chimiquement. (a), Variation du pourcentage en poids en fonction de la température ainsi que la dérivé de cette variation en fonction de la température pour un échantillon comprenant 3 mg de magnétosomes lyophilisés extraits de bactéries magnétotactiques selon la condition 3. (b), Flux thermique en mW en fonction de la température produit par un échantillon comprenant 3 mg de magnétosomes 25 lyophilisés extraits de bactéries magnétotactiques selon la condition 3. (c), Variation du pourcentage en poids en fonction de la température ainsi que la dérivée de la variation en fonction de la température d'un échantillon comprenant 3 mg de nanoparticules SIGMA lyophilisées. (d), Flux de chaleur en mW en fonction de la température produit par un échantillon comprenant 3 mg de nanoparticules SIGMA lyophilisées. En ce qui concerne les 30 figures 2 (a) et 2 (c), l'axe des y peut être remplacé par le pourcentage en masse conduisant aux mêmes tracés. 49 EXEMPLES: MATÉRIEL ET MÉTHODES: Mesures de la densité optique de suspensions de bactéries magnétotactiques entières pour évaluer la croissance bactérienne: La densité optique des différentes suspensions de 5 bactéries magnétotactiques a été mesurée à 565 nm, appelée D056511111, à l'aide d'un spectrophotomètre Secomam UviLine9400. La valeur d'D056511. est proportionnelle aux concentrations de bactéries dans les suspensions. Mesure de la réponse magnétique de bactéries magnétotactiques vivantes à l'aide d'observations au microscope optique de ces bactéries sous application d'un champ 10 magnétique: 1 mL d'une suspension de bactéries magnétotactiques MSR-1 a été centrifugé à 14500 tours par minute pendant 10 minutes. Le milieu de croissance a été retiré et remplacé par un volume de PBS 0,1X pour atteindre une D0565/1111 de 0,5. 1 pt de cette suspension de bactéries magnétotactiques MSR-1 a été déposé sur une lame de microscope parallélépipédique (Menzel-Glaser, 24 mm x 60 mm, 0,13-16 mm d'épaisseur) pour 15 l'observation microscopique à l'aide d'un microscope optique Zeiss Primo Vert avec un grossissement X40. Quatre petits aimants cubiques en Neodinium de force 1,3 T (supermagnet, N42 W-10-N 10x10x10 mm) ont été placés sur la plate-forme du microscope à une distance d'environ 2 cm de la suspension bactérienne de manière à générer un champ magnétique parallèle à la position de l'observateur ou à la ligne séparant les deux jumelles 20 (position 1) ou perpendiculaire à cette position (position 2). 20 secondes après le positionnement de l'aimant en position 1 ou 2, le pourcentage de bactéries alignées dans la direction du champ magnétique a été estimé, en considérant 200 bactéries magnétotactiques. Les bactéries qui n'étaient pas alignées dans la même direction que le champ magnétique généré par l'aimant ont été considérées comme non magnétiques. Leur nombre est désigné par 25 11BNm. Les bactéries qui étaient alignées dans la direction du champ magnétique généré par l'aimant étaient considérées comme magnétiques. Leur nombre a été désigné comme nBm. Le pourcentage de bactéries magnétiques a ensuite été donné par nBM/(nBM+nBNM). Une réponse magnétique positive des bactéries magnétotatiques correspondait à nBM/(nBM+nBNM) > 0,5. Une réponse magnétique négative des bactéries magnétotatiques correspond à 30 nBm/(nBm+nEml) Notation: le nombre X après D dans DX désigne le nombre de jours suivant le début de l'étape de pré-croissance, préférentiellement le jour où les bactéries magnétotactiques sont insérées dans le milieu de pré-croissance pour la première fois ou pendant la première sous-étape de l'étape de pré-croissance. 5 Exemple 1: Détermination du minéral élixir minéral minimum permettant la croissance bactérienne et la synthèse de magnétosomes : Cet exemple décrit le protocole expérimental utilisé pour réduire autant que possible la composition en minéral élixir tout en permettant la croissance des bactéries magnétotactiques MSR-1 et la synthèse de magnétosomes par ces dernières. Dans cet exemple, des produits chimiques de qualité non pharmaceutique ont été 10 utilisés pour la préparation du milieu de croissance. La composition de 1 litre de milieux de pré-croissance et de croissance utilisés dans cet exemple (condition 1) est indiquée dans le tableau 1. Au cours du premier jour de l'expérience (Dl), une première étape consistait à recueillir les tubes de 15 ml contenant 5 ml de cellules MSR-1 provenant du congélateur à 80°C, à décongeler les tubes en les laissant à température ambiante pendant 10 minutes. Sous 15 une hotte, nous avons recueilli dans ces tubes 100 pl de 5.106 bactéries magnétotactiques MSR-1 que nous avons insérées dans un tube de 50 mL contenant 8 mL de milieu de pré-croissance filtré. Au total, 13 conditions de culture différentes ont été testées correspondant aux 13 différents élixirs de minéraux testés. Les tubes de 50 ml ont été incubés pendant 6 jours entre les jours Dl et D6 dans un incubateur à 29,5 °C dans des conditions d'agitation par 20 secousses à 150 tours par minute. Une deuxième étape a consisté à ajouter une source de fer au milieu de croissance afin de permettre la synthèse de magnétosomes par la bactérie MSR1. Après 6 jours de pré-croissance, à D6, les tubes de 50 ml ont été placés sous une hotte. 30 ml de milieu de culture filtré ont ensuite été ajoutés aux tubes de 50 ml et les bactéries se sont développées entre D6 et D13. Une réponse magnétique positive à D13 et un rapport entre la 25 densité optique à D13 et la densité optique à D6 supérieure à 1 ont été observés avec VO, V2, CB2, CB3, CB4, CB5, CB7, CB10, CB11, CB12, CB13 (condition 1). En revanche, aucune réponse magnétique n'a été observée pour les conditions CB1 et CB9, où les concentrations d'éléments chimiques qui composent les élixirs de minéraux sont inférieures à 104 ga. En conclusion, le minéral élixir minéral minimal permettant la croissance de bactéries MSR-1 30 avec une augmentation importante de la densité optique OD565nmD13/0D565nmD6 supérieur à 4,8 et la synthèse de magnétosomes (réponse magnétique positive) est CB13, composé uniquement de sulfate de fer heptahydraté à une concentration de 1 g/1 et de chlorure de calcium à une concentration de 20 g/l. 56 Exemple 2: Détermination d'un milieu de croissance sans extrait de levure, permettant la croissance de bactéries magnétotactiques et la synthèse de magnétosomes: Cet exemple décrit le protocole expérimental utilisé pour déterminer le milieu réduit remplaçant l'extrait de levure permettant la croissance de bactéries magnétotactiques MSR-1 et la synthèse de 5 magnétosomes par ces bactéries. Dans cet exemple, nous avons utilisé des produits chimiques de qualité non pharmaceutique pour la préparation du milieu de croissance. Les compositions des milieux de pré-croissance et de croissance, dans un litre d'eau déionisée, sont indiquées dans les tableaux 2 (condition 2), 3 (condition 3) et 4 (condition 4). Au cours du premier jour de l'expérience (Dl), une première étape consiste à collecter les tubes de 15 ml contenant 5 ml 10 de cellules MSR-1 du congélateur à -80 ° C, à les décongeler en les laissant à température ambiante pendant 10 minutes. Sous une hotte, nous avons prélevé dans ces tubes 100 pl contenant 5.106 bactéries magnétotactiques MSR-1 que nous avons insérées dans un tube de 50 ml contenant 8 ml de milieu de pré-croissance filtré de l'une des conditions 2 (tableau 2), 3 (tableau 3), ou 4 (tableau 4). Les tubes de 50 ml ont été incubés pendant 6 jours entre les jours 15 Dl et D6 dans un incubateur à 29,5 °C dans des conditions d'agitation par secousses à 150 tours par minute. Une deuxième étape a consisté à ajouter une source de fer au milieu de croissance afin de permettre la synthèse de magnétosomes par la bactérie MSR-1. Après 6 jours de pré-croissance, à D6, les tubes de 50 ml ont été placés sous une hotte. 30 ml de milieu de croissance filtré ont ensuite été ajoutés aux tubes de 50 ml (condition 2, tableau 2, 20 condition 3, tableau 3, condition 4, tableau 4) à D6 et les bactéries se sont développées entre D6 et D13. Les tableaux 11 et 12 indiquent qu'une réponse magnétique supérieure à 90% à D13 et à un rapport entre la densité optique mesurée à D13 et la densité optique mesurée à D6 supérieure à 1 ont été observées pour les extraits de levure YE, YNBWAA, YNBWAA, YNBWoAA, YNBWoAA, YNBWoAA.AS (condition 2), pour VitlX, Vit0.5X, Vit0.1X, 25 (condition 3), biotine (Bt), acide folique (FA), acide nicotinique (NA), riboflavine (R), thiamine 1-1C1 (T ) (condition 4). En revanche, la réponse magnétique est 0 pour les conditions VitSX, Vit1OX (condition 3) et très faible pour les conditions CP, I, AA, P (condition 4). En conclusion, l'extrait de levure peut être remplacé par une seule vitamine, à savoir la biotine, l'acide folique, la riboflavine, l'acide nicotinique ou la thiamine HC1. Ces vitamines mènent à 30 des valeurs de OD565nr'Di 3/0D565'mD6 de 9,8 (biotine), 2,9 (acide folique), 4,8 (riboflavine), 2,4 (acide nicotinique), 5,8 (thiamine HC1) et 90% de réponse magnétique (tableau 11). Exemple 3: Détermination des concentrations minimales des composants principaux du milieu de croissance (lactate de sodium, chlorure d'ammonium, sulfate de magnésium, phosphate de potassium) permettant la croissance de bactéries magnétotactiques et la 57 synthèse de magnétosomes par ces bactéries. Cet exemple décrit le protocole expérimental utilisé pour déterminer le milieu de croissance réduit, permettant la croissance des bactéries magnétotactiques MSR-I et la synthèse de magnétosomes par ces bactéries. Dans cet exemple, nous avons utilisé des produits chimiques de qualité non pharmaceutique pour la 5 préparation du milieu de croissance. Nous avons varié la concentration en lactate de sodium (conditions SLO, SLO.5X, SLO.2X, SLO.1X), chlorure de ammonium (ACO, AC0.5X, AC0.2X, ACOAX), sulfate de magnésium heptahydraté (MGO, MGO. 5X, MG0.2X, MG0.1X), phosphate de potassium dibasique (P0, P0.5X, P0.2X, P0.1X). Les compositions chimiques et les concentrations des milieux de pré-croissance et de croissance N, SLO, 10 SLO.5X, SLO.2X, SLO.1X, ACO, AC0.5X, AC0.2X, ACO.1X, MGO, MG0.5X, MGO .2X, MG0.1X, P0, P0.5X, P0.2X, 130.1X, sont résumés dans le tableau 5 pour 1 litre de milieu de croissance. Au cours du premier jour de l'expérience (DI), une première étape consiste à collecter les tubes de 15 ml contenant 5 ml de cellules MSR-I du congélateur à -80 ° C, à les décongeler en les laissant à température ambiante pendant 10 minutes. Sous une hotte, nous 15 avons recueilli de ces tubes 100 pl contenant 5.106 bactéries magnétotactiques MSR-1 que nous avons insérées dans un tube de 50 mL rempli de 8 mL de milieu de pré-croissance (condition 5, tableau 5). Les tubes de 50 ml ont été incubés pendant 6 jours entre les jours Dl et D6 dans un incubateur à 29,5 °C dans des conditions d'agitation par secousses à 150 tours par minute. Une deuxième étape a consisté à ajouter une source de fer au milieu de croissance 20 afin de permettre la synthèse de magnétosomes par la bactérie MSR-1. Après 6 jours de pré- croissance, à D6, les tubes de 50 ml ont été placés sous une hotte. 30 ml de milieu de croissance filtré ont ensuite été ajoutés aux tubes de 50 ml à D6 et les bactéries se sont développées entre D6 et D13. Pour les conditions N, P0,5X, P0,2X, le rythme de croissance, ou rapport entre la densité optique mesurée à D13 et la densité optique mesurée à D6, était 25 supérieur à 1 et une réponse magnétique positive (réponse magnétique > 90%) a été observé à D13. Cela indique que ces conditions ont permis aux bactéries de se développer et de produire des magnétosomes. En revanche, pour les conditions SLO, SLO.5X, SLO.2X, SLO.1X, ACO, AC0.5X, AC0.2X, AC0.1X, MGO, MG0.5X, MG0.2X, MG0.1X, P0.1X, P0, la synthèse des magnétosomes était très faible (réponse magnétique 90%) (tableau 15), indiquant que le chlorure de fer (III) est la meilleure source de fer. En outre, à l'exception du Pb, les concentrations d'impuretés élémentaires sont réduites dans la condition B3 dans laquelle des 5 produits chimiques de qualité pharmaceutique ont été utilisés, par rapport à la condition B4 dans laquelle des produits chimiques de qualité non pharmaceutique ont été utilisés (tableau 16). EXAMPLES 5 (méthode de purification): MATÉRIEL ET MÉTHODES: 10 Remarque: dans cet exemple, le poids pourrait être remplacé par la masse, conduisant préférentiellement au même sens.Equipment used to analyze and heat the various samples: TGA-DSC: «Analyse thermogravimétrique» (TGA) couplée à la «Calorimétrie différentielle à balayage» (DSC) est utilisée pour mesurer le flux thermique (en mW) ou le pourcentage de perte de masse de poudres contenant des magnétosomes lyophilisés (traités ou non), bactéries 15 entières lyophilisées, ou nanoparticules SIGMA lyophilisées en fonction de la température de chauffage de ces poudres. Pour les mesures, les poudres sont chauffées à une vitesse de 6 °C par minute entre 20 °C et 600 °C. La dérivée du pourcentage de la variation de masse de ces poudres est également représentée en fonction de la température. Les profils en TGA-DSC permettent de définir les températures pour lesquelles le matériau, de préférence un matériau 20 organique, situé dans ou à la surface des magnétosomes ou des nanoparticules sera dégradé, enlevé des nanoparticules, ou transformé. Les analyses TGA et DSC ont été effectuées avec le SDT Q600 (instrument TA), qui consiste en une enceinte fermée, un four avec contrôle de la température, une micro-balance et un thermocouple pour mesurer la température. CliNS: "Analyseur de carbone élémentaire, d'hydrogène, azote, et de soufre." Les mesures 25 CEINS sont effectuées à l'aide d'un analyseur CEINS (Flash Elemental Analyzer EA 1112 de Thermo Fischer Scientific) à l'aide d'une masse de 3 mg par mesure de magnétosomes lyophilisés (conditions de traitement n ° 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11), bactéries entières lyophilisées, nanoparticules SIGMA lyophilisées (non traitées). Les mesures CHNS permettent de déterminer les pourcentages en masse de carbone et d'azote dans les différentes 30 poudres. Four: Un four à moufle (Nabertherm L9/11/B410) est utilisé pour chauffer 30 ou 500 mg de magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques à la suite des conditions n °I ou 2 sans traitement thermique supérieur à 200 °C ou avec traitement thermique supérieur à 200 °C. (suivant les conditions n ° 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ou 11). Pour cela, la poudre de 30 ou 500 mg 61 de chaque échantillon est déposée dans un récipient en porcelaine non recouvert et placée au centre du four. Un programme est utilisé pour effectuer les différentes conditions de chauffage. Le four permet de maintenir la température des nanoparticules ou la température à l'intérieur du four à une température donnée de plus ou moins 2 °C, ou le four permet 5 d'obtenir une température stable entre 20 °C et 380 °C avec une fluctuation de 2 °C maximum. Échantillon comprenant des bactéries magnétotactiques entières (échantillon 0): Des bactéries magnétotactiques obtenues à partir de la condition 1 (minéral élixir V2, tableau 1) ont été recueillies et concentrées à l'aide d'un système de filtration tangentielle à une densité optique 10 mesurée à 565 nm (0D565nni), entre 100 et 200. L'échantillon 0 comprend des bactéries magnétotactiques entières concentrées. Échantillons comprenant des magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques sans traitement thermique supérieur à 200 °C (échantillons 1 et 2): Condition 1 de lyse (échantillon 1): 100 ml de l'échantillon 0, concentré à une DO56511m de 15 120, ont été mélangés à 400 ml de NaOH 5 M, soumis à une sonication, et chauffés à 60 °C pendant 1 heure à l'aide d'un bain à ultrasons pour lyser les bactéries. Les magnétosomes traités ont ensuite été isolés des débris bactériens en plaçant un aimant Neodinium une nuit contre la paroi du récipient contenant la suspension de bactéries lysées et en remplaçant le surnageant contenant le milieu et les débris bactériens par du PBS 1X. La suspension 20 résultante a ensuite été soniquée pendant 20 secondes à 10W en présence de PBS IX, placée contre un aimant de Neodinium pendant 15 minutes, le surnageant a été retiré et les magnétosomes traités ont été remis en suspension dans du PBS IX. Cette séquence de sonication et de séparation magnétique a été répétée quatre fois. Pour un fermenteur entier, ce traitement a été répété 10 fois dans 10 volumes différents. On a ainsi obtenu des chaînes de 25 magnétosome pyrogènes extraites de bactéries magnétotactiques MSR-1, c'est-à-dire environ 500 mg de fer dans des magnétosomes compris dans 1,7 ml d'eau. L'échantillon 1 comprend des magnétosomes obtenus à partir de la condition 1 de lyse. Condition 2 de lyse (échantillon 2): les bactéries magnétotactiques concentrées ont été congelées à -80 ° C pendant 48 heures. Après décongélation et dilution du concentré avec de 30 l'eau MilliQ pour obtenir une D0565nni de 30, une quantité de KOH a été ajoutée pour obtenir les bactéries concentrées afin d'obtenir une concentration finale en KOH de 1M. Cette solution a été transférée dans une bouteille de polypropylène (PP) et placée dans le bain-marie à 80 °C sous agitation à 150 tours par minute avec un tampon d'agitation mécanique (Fisher Scientific) pendant 30 minutes. Ensuite, le contenu de la bouteille a été transféré dans 4 autres 62 bouteilles en verre de 2 L. Chaque bouteille a été placée contre un aimant NdFeB pendant 12 heures pour séparer magnétiquement les magnétosomes extraits des débris bactériens. Les magnétosomes ont ensuite été lavés 6 fois dans des bouteilles de 500 ml par sélection magnétique, jusqu'à obtention d'un surnageant clair. Les deux premiers lavages ont été 5 effectués avec du PBS 10X, ce qui permet de revenir à un pH neutre. Ensuite, les quatre autres lavages ont été effectués avec de l'eau. Après la lyse, le pH basique du lysat, causé par le KOH, a été ramené à un pH neutre afin de ne pas endommager les magnétosomes. On a ainsi obtenu des chaînes de magnétosomes pyrogènes extraites de la souche MSR-1, à savoir environ 500 mg de magnétosomes en fer dans 1,7 ml. L'échantillon 2 comprend des 10 magnétosomes obtenus après la condition 2 de lyse. Echantillons comprenant du magnétosome extrait de bactéries magnétotactiques et traités au phénol-chloroforme (condition 3): Condition 3 de traitement (échantillon 3): 100 pl de la suspension contenant 30 mg de fer de magnétosomes obtenus à la suite de la condition 1 de lyse ont été mélangés à 200 ml d'une 15 solution contenant 1% de Triton X-100 et 1% de SDS. Le mélange a été chauffé pendant une nuit à 50 °C, a été placé contre un aimant de Neodinium, le surnageant a été retiré et remplacé par 80 ml de phénol à pH 8. La suspension obtenue a été chauffée pendant 2 heures sous sonication à 60 ° C, pendant une nuit à 60 ° C sans sonication, placé contre un aimant, le surnageant de la suspension a été retiré et remplacé par 80 ml de chloroforme. La suspension 20 contenant le chloroforme a été placée contre un aimant de Neodinium, le surnageant a été éliminé et le chloroforme résiduel adsorbé à la surface des magnétosomes traités a été éliminé par chauffage de ces magnétosomes pendant 2 heures sous une hotte. Enfin, les noyaux des magnétosomes ainsi obtenus ont été désorbés de la paroi de verre des tubes les contenant en ajoutant 80 ml de NaOH 1 M chauffés pendant 1 heure à 60 ° C dans un bain à ultrasons. La 25 suspension contenant les noyaux des magnétosomes a été placée contre un aimant Neodinium. Le surnageant a été retiré et remplacé par de l'eau MilliQ stérile. La suspension a été traitée par ultrasons pendant 20 secondes à 10 W. Cette séquence de lavage a été répétée quatre fois. Des magnétosomes purifiés non-pyrogènes ont été obtenus dans un petit volume d'eau apyrogène. L'échantillon 3 comprend des magnétosomes obtenus après la condition 3 du 30 traitement. Échantillons comprenant du magnétosome extrait de bactéries magnétotactiques et chauffés à des températures supérieures à 200 ° C (échantillons 4 à 11): Condition 4 de traitement thermique (échantillon 4): 100 pl de la suspension contenant environ 30 mg en fer de magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques MSR-1 après la 63 condition 2 de lyse ont été lyophilisés, introduits dans un creuset en porcelaine et cuits au four Nabertherm L9/11/B410. Le protocole de chauffage était le suivant. La température du four a été augmentée de 20 °C à 200 °C à une vitesse de 6 °C/min jusqu'à ce que la température du four atteigne 200 °C et la température dans le four a été maintenue à 200 °C pendant une 5 heure. Ensuite, la température du four a été réduite de 200 °C à 25 °C en 12 heures. L'échantillon 4 comprend des magnétosomes obtenus après la condition 4 du traitement. Condition 5 de traitement thermique (échantillon 5): 100 pl de la suspension contenant environ 30 mg de fer de magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques MSR-1 après la condition 2 de lyse ont été lyophilisés, introduits dans un creuset en porcelaine et cuits au four 10 Nabertherm L9/11/B410. Le protocole de chauffage était le suivant. La température du four a été augmentée de 20 °C à 400 °C à une vitesse de 6 ° C/min jusqu'à ce que la température du four atteigne 400 °C. La température dans le four a été maintenue à 400 °C pendant une heure. Ensuite, la température du four a été réduite de 400 °C à 25 °C en 20 heures. L'échantillon 5 comprend des magnétosomes obtenus après la condition 5 du traitement. 15 Condition 6 de traitement thermique (échantillon 6): 100 1.11 d'une suspension comprenant 30 mg en fer de magnétosomes préparés selon la condition 2 de lyse ont été lyophilisés, puis introduits dans un creuset en porcelaine et chauffés au four Nabertherm L9/11/B410. Le traitement thermique était comme suit. La température du four a été augmentée de 20 °C à 200 °C en 20 minutes à une vitesse de 9 °C/minute. La température du four a ensuite été 20 maintenue à 200 °C pendant 30 minutes. La température du four a ensuite été augmentée de 200 °C à 300 °C en 10 minutes à une vitesse de 10 °C/minute. La température du four a ensuite été maintenue à 300 °C pendant 1 heure. Ensuite, la température du four a été réduite de 300 °C à 25 °C en 12 heures. L'échantillon 6 comprend des magnétosomes obtenus après la condition 6 du traitement. 25 Condition 7 de traitement thermique (échantillon 7): 100 µl d'une suspension comprenant 30 mg en fer de magnétosomes préparés selon la condition 2 de lyse ont été lyophilisés, puis introduits dans un creuset en porcelaine et chauffés au four Nabertherm L9/11/B410. Le traitement thermique était comme suit. La température du four a été augmentée de 20 °C à 200 °C en 20 minutes à une vitesse de 9 °C/minute. La température du four a ensuite été 30 maintenue à 200 °C pendant 30 minutes. La température du four a ensuite été augmentée de 200 °C à 300 °C en 10 minutes à une vitesse de 10 °C/minute. La température du four a ensuite été maintenue à 300 °C pendant 1 heure. La température du four a ensuite été augmentée de 300 à 380 °C en 10 minutes à une vitesse de 8 °C/minute. La température du four a ensuite été maintenue à 380 °C pendant 1 heure. La température du four a ensuite été 64 augmentée de 380 °C à 550 °C en 20 minutes à une vitesse de 8,5 °C/minute. La température du four a ensuite été maintenue à 550 °C pendant 1 heure. Ensuite, la température du four a été réduite de 550 °C à 25 °C en 20 heures. L'échantillon 7 comprend des magnétosomes obtenus après la condition 7 du traitement 5 Condition 8 de traitement thermique (échantillon 8): 100 pl de la suspension contenant 30 mg en fer de magnétosomes préparés selon la condition 2 de lyse ont été lyophilisés, puis introduits dans un creuset en porcelaine et cuits au four Nabertherm L9/11/B410. Le traitement thermique était comme suit. La température du four a été augmentée de 20 °C à 200 °C en 20 minutes à une vitesse de 9 °C/minute. La température du four a ensuite été 10 maintenue à 200 °C pendant 30 minutes. La température du four a ensuite été augmentée de 200 °C à 300 °C en 10 minutes à une vitesse de 10 °C/minute. La température du four a ensuite été maintenue à 300 °C pendant 1 heure. La température du four a été augmentée de 300 °C à 380 °C en 10 minutes à une vitesse de 8 °C/minute. La température du four a ensuite été maintenue à 380 °C pendant 1 heure. Ensuite, la température du four a été réduite de 380 15 °C, à 25 °C en 12 heures. L'échantillon 8 comprend des magnétosomes obtenus après la condition 8 du traitement. Condition 9 de traitement thermique (échantillon 9): 100 n1 de la suspension contenant 30 mg en fer de magnétosomes préparés selon la condition 1 de lyse ont été lyophilisés, puis introduits dans un creuset en porcelaine et chauffés au four Nabertherm L9/11/B410. Le 20 traitement thermique était comme suit. La température du four a été augmentée de 20 °C à 200 °C en 20 minutes à une vitesse de 9 °C/minute. La température du four a ensuite été maintenue à 200 °C pendant 30 minutes. La température du four a ensuite été augmentée de 200 °C à 300 °C en 10 minutes à une vitesse de 10 °C/minute. La température du four a ensuite été maintenue à 300 °C pendant 1 heure. La température du four a été augmentée de 25 300 °C à 380 °C en 10 minutes à une vitesse de 8 °C/minute. La température du four a ensuite été maintenue à 380 °C pendant 1 heure. Ensuite, la température du four a été réduite de 380 °C à 25 °C en 12 heures. L'échantillon 9 comprend des magnétosomes obtenus après la condition 9 du traitement. Condition 10 de traitement thermique (échantillon 10): 1,7 ml d'une suspension contenant 500 30 mg en fer de magnétosomes préparés selon la condition n ° 2 de lyse ont été lyophilisés, puis introduits dans un creuset en porcelaine et chauffés au four Nabertherm L9/11/B410. Le protocole de traitement thermique était comme suit. La température du four a été augmentée de 20 °C à 200 T en 2 heures 30 minutes à une vitesse de 1,2 °C/minute. La température du four a ensuite été maintenue à 200 °C pendant 1 heure. La température du four a ensuite été augmentée de 200 °C à 300 °C en 1h20 à une vitesse de 1,25 °C/min. La température du four a ensuite été maintenue à 300 °C pendant 2 heures. La température du four a ensuite été augmentée de 300 °C à 380 °C en 1 heure 20 minutes à une vitesse de 1 °C/minute. La température du four a ensuite été maintenue à 380 °C pendant 2h. Ensuite, la température du 5 four a été réduite de 380 °C à 25 °C en 12 heures. L'échantillon 10 comprend des magnétosomes obtenus après la condition 10 de traitement. Condition 11 de traitement thermique (échantillon 11): 1,7 ml d'une suspension contenant 500 mg en fer de magnétosomes préparés selon la condition n ° 1 de lyse, ont été lyophilisés puis introduits dans un creuset en porcelaine et chauffés au four Nabertherm L9/11/B410. Le 10 traitement thermique était comme suit. La température du four a été augmentée de 20 °C à 200 °C en 2 heures et 30 minutes à une vitesse de 1,2 °C/min. La température du four a ensuite été maintenue à 200 °C pendant 1 heure. La température du four a ensuite été augmentée de 200 °C à 300 °C en 1h20 à une vitesse de 1,25 °C/min. La température du four a ensuite été maintenue à 300 °C pendant 2 heures. La température du four a ensuite été 15 augmentée de 300 °C à. 380 °C en 1 heure 20 minutes à une vitesse de 1 °C/minute. La température du four a ensuite été maintenue à 380 °C pendant 2h. Ensuite, la température du four a été réduite de 380 °C à 25 °C en 12 heures. L'échantillon 11 comprend des magnétosomes obtenus après la condition 11 du traitement. Nanoparticules de synthèse chimique (SIGMA, référence: 637106, n ° de lot: MKBK2270V): 20 Une poudre de nanoparticules synthétisées chimiquement a été achetée chez SIGMA. Ils ont une taille de 35 ± 13 mn et comprennent, outre de l'oxyde de fer, 198 ppm d'aluminium (Al), 600 ppm de calcium (Ca), 74 ppm de chrome (Cr), 72 ppm de magnésium (Mg), 642,5 ppm de manganèse (Mn), 30 ppm de nickel (Ni), 128 ppm de sodium (Na), 34 ppm de titane (Ti), 8,3 ppm de vanadium (V), 56,5 ppm de zinc (Zn). 25 Résultats: La figure 1 (a) montre le pourcentage de perte de poids d'un échantillon comprenant 3 mg de bactéries magnétotactiques MSR-1 entières lyophilisées (échantillon 0) en fonction de la température de l'échantillon, lorsque la température de l'échantillon est augmentée de 20 °C à 600 °C à une vitesse de 6 °C par minute, ainsi que la dérivée première de ce pourcentage. Ces 30 mesures ont été effectuées avec un appareil combiné TGA-DTA/DSC, mesurant à la fois le flux thermique en utilisant la calorimétrie différentielle à balayage et les variations de masse en utilisant la thermogravimétrie en fonction de la température. Les mesures CHNS de 3 mg de bactéries magnétotactiques MSR-1 entières lyophilisées (échantillon 0) ont montré qu'elles contenaient un pourcentage élevé de carbone de 44%, avant d'être chauffées (Figure 3 (a)). Le 66 pourcentage en poids de cet échantillon diminue de 100% à 20 °C à 5,5% à 600 °C, ce qui indique que l'échantillon perd la plus grande partie de sa masse entre 20 et 600 °C. Plus précisément, il apparaît sur la figure 1(a) que la pente de la variation du pourcentage de poids en fonction de la température est la plus grande dans deux plages de température: entre 200 et 5 400 °C (intervalle 1) et entre 400 et 540 °C (intervalle 2). Entre 200 et 400 ° C, la variation en fonction de la température de la pente du pourcentage de poids en fonction de la température affiche un double pic dont les maxima sont à 260 °C et 315 °C. Ce double pic pourrait être dû à la perte par l'ensemble des bactéries magnétotactiques de matière organique, préférentiellement de type 1, pour le pic centré à 260 °C et de matière organique, 10 préférentiellement d'un type différent du type 1 tel que le type 2, pour le pic centré à 315 °C. Entre 400 et 540 °C, la variation en fonction de la température de la pente du pourcentage de variation de poids en fonction de la température affiche un pic. Ce pic pourrait être dû à la perte par les nanoparticules de matériau organique, préférentiellement d'un type différent du type 1 ou du type 2 tel que le type 3. 15 La Figure 1 (b) montre le flux thermique en milliwatt d'un échantillon comprenant 3 mg de bactéries magnétotactiques entières lyophilisées en fonction de la température de l'échantillon, lorsque la température de l'échantillon est augmentée de 20 ° C à 600 ° C à une vitesse de 6 ° C par minute. Ces mesures ont été effectuées avec un appareil TGA-DSC. La figure 1 (b) montre deux pics avec le flux de chaleur maximum observé à des températures de 330 ° C et 20 500 ° C. Le pic centré à 330 ° C pourrait être attribué à la combustion de la masse de nanoparticules perdues ou éliminées des nanoparticules ou transformées entre 200 et 400 ° C. Le pic à 500 ° C pourrait être attribué à la combustion de la masse de nanoparticules perdue entre 500 et 540 ° C. La Figure 1(c) montre le pourcentage de variation du poids d'un échantillon comprenant 3 mg 25 de chaînes de magnétosomes lyophilisées préparées selon la condition 2 de lyse en fonction de la température de l'échantillon, lorsque la température de l'échantillon est augmentée de 20 °C à 600 °C à la vitesse de 6 °C par minute, ainsi que la dérivée première de ce pourcentage. Ces mesures ont été effectuées avec un appareil TGA-DSC. Les mesures CHNS des chaînes de magnétosomes lyophilisées (condition n°2) ont montré qu'elles contiennent un pourcentage 30 de carbone de 7% avant d'être chauffées, ce qui est bien inférieur au pourcentage de carbone de bactéries magnétotactiques entières (Figure 3(a)). Le pourcentage en poids de l'échantillon comprenant des chaînes de magnétosomes diminue de 100% à 20 °C à 91,4% à 600 °C, ce qui indique que l'échantillon comprenant des chaînes de magnétosomes perd beaucoup moins en masse, soit 8,6%, que l'échantillon comprenant les bactéries magnétotactiques entre 20 °C et 67 600 °C. Plus précisément, il apparaît sur la figure 1(c) que la pente de la variation du pourcentage en poids des chaînes de magnétosomes en fonction de la température est la plus grande dans la plage de températures de 200 à 400 °C. Entre 200 et 400 ° C, la variation en fonction de la température de la pente du pourcentage en poids des chaînes de magnétosomes 5 en fonction de la température affiche un double pic dont les maximums sont à 260 °C et 315 °C, des positions similaires que ceux du double pic observé avec des bactéries entières. Ce double pic pourrait être dû à la perte par les chaînes de magnétosomes de matériau organique, préférentiellement du matériau organique de type 1, pour le pic centré à 260 °C, et de matériau organique, préférentiellement matériau organique de type 2 pour le pic centré à 315 10 °C, où cette matière organique provient probablement de la membrane organique entourant le noyau d'oxyde de fer minéral des magnétosomes. La figure 1 (d) montre le flux thermique en milliwatt d'un échantillon comprenant 3 mg de chaînes de magnétosomes lyophilisées en fonction de la température de l'échantillon, lorsque la température de l'échantillon est augmentée de 20 °C à 600 °C à une vitesse de 6 °C par minute. Ces mesures ont été 15 effectuées avec un appareil TGA-DSC. La figure 1(d) montre trois pics avec le flux thermique maximal observé à des températures de 250 °C, 360 °C et 525 °C. Les pics centrés à 250 °C et à 360 °C pourraient être attribués à la combustion de la masse de nanoparticules perdue entre 200 et 400 °C. Le pic à 525 °C pourrait être attribué à la combustion de la masse de nanoparticules perdues au-dessus de 500 °C et/ou à l'oxydation des magnétosomes à partir 20 d'une composition d'oxyde de fer composée de magnétite, de maghémite ou d'une composition intermédiaire entre la magnétite. et de la maghémite en hématite, ce qui pouffait entraîner un dégagement de chaleur éventuellement causé par une réaction exothermique. La figure 2(a) montre la variation du pourcentage en poids d'un échantillon comprenant 3 mg de magnétosomes lyophilisés (échantillon 3), préparé selon la condition 3 en fonction de la 25 température de l'échantillon, lorsque la température de l'échantillon est augmentée de 20 °C à 600 °C à raison de 6 °C par minute, ainsi que la dérivée première de ce pourcentage. Ces mesures ont été effectuées avec un appareil TGA-DSC. Les mesures CHNS de magnétosomes lyophilisés préparés selon la condition 3 ont montré qu'ils contenaient un pourcentage de carbone de 4% avant chauffage, ce qui est inférieur au pourcentage de carbone dans les 30 magnétosomes préparés selon la condition 2. Le pourcentage en poids de l'échantillon comprenant des magnétosomes (échantillon 3) diminue de 100% à 20 °C à 95,1% à 600 °C, ce qui indique que l'échantillon 3 comprenant des magnétosomes préparés selon la condition 3 perd moins de poids, c'est-à-dire 4,9%, que l'échantillon 2 contenant des magnétosomes préparé selon la condition 2. Plus précisément, il apparaît sur la figure 2 (a) que la pente de la 68 variation du pourcentage de poids en fonction de la température est la plus grande dans la plage de températures de 200 à 400 °C. Entre 200 et 400 °C, la variation en fonction de la température de la pente du pourcentage en poids en fonction de la température affiche un pic quadruple dont les maxima sont à 264 °C, 286 °C, 325 et 331 °C. Les deux pics à 264 °C et 5 325 °C peuvent être associés à des épaulements de pics Ce quadruple pic pourrait être dû à la perte par les nanoparticules de matériau organique, préférentiellement de type 1, pour le pic centré à 264 °C, de matériau organique, préférentiellement de type 3, pour le pic centré à 286 °C, de matériau, préférentiellement de type 2 pour le pic centré à 325 °C, et de matériau organique, préférentiellement de type 4, pour le pic centré à 331 °C, lorsque ce matériau 10 organique provient probablement d'une matière organique entourant ou se trouvant à la surface du noyau d'oxyde de fer minéral des magnétosomes. La figure 2(b) montre le flux thermique en milliwatt d'un échantillon comprenant 3 mg de magnétosomes lyophilisés, préparé conformément à la condition 3 (Sample3), en fonction de la température de l'échantillon, lorsque la température de l'échantillon est augmentée de 20 °C à 600 °C à raison 15 de 6 °C par minute. Ces mesures ont été effectuées avec un appareil TGA-DSC. La figure 2(b) montre quatre pics avec le flux thermique maximal observé à des températures de 277 °C, 335 °C, 455 °C et 522 °C. Les pics centrés à 277 °C et à 335 °C pourraient être attribués à la combustion de la masse de nanoparticules perdue entre 200 et 400 °C. Les pics à 455 et 522 °C pourraient être attribués à la combustion de la masse de nanoparticules perdue au-dessus 20 de 500 °C et/ou à l'oxydation des magnétosomes d'une composition d'oxyde de fer composée de magnétite, de maghémite ou d'une composition intermédiaire entre la magnétite et la maghémite en hématite, ce qui pourrait entraîner un écoulement de chaleur éventuellement causé par une réaction exothermique. La figure 2 (c) montre la variation du pourcentage en poids d'un échantillon comprenant 3 mg 25 de poudre de nanoparticules SIGMA, achetée chez Merck Sigma, en fonction de la température de l'échantillon, lorsque la température de l'échantillon est augmentée de 20 °C à 600 °C à la vitesse de 6 °C par minute, ainsi que la dérivée première de ce pourcentage. Ces mesures ont été effectuées avec un appareil TGA-DSC. Les mesures CEINS de nanoparticules SIGMA lyophilisées ont montré qu'elles contenaient un pourcentage de carbone de 0,3% 30 avant chauffage, ce qui est inférieur au pourcentage de carbone dans les magnétosomes préparés selon la condition 3 (échantillon 3). Le pourcentage en poids de l'échantillon comprenant les nanoparticules SIGMA diminue de 100% à 20 °C à 98,7% à 600 °C, ce qui indique que l'échantillon contenant des nanoparticules SIGMA perd moins de masse, soit 1,3%, que les magnétosomes préparés selon les conditions 2 et 3. Plus précisément, il apparaît 69 sur la figure 2(c) que la pente de la variation du pourcentage en poids de nanoparticules SIGMA en fonction de la température est la plus grande dans la plage de températures de 200 à 400 °C. Entre 200 et 400 °C, la variation en fonction de la température de la pente du pourcentage en poids de nanoparticules SIGMA en fonction de la température affiche un pic 5 dont le maximum est à 296 °C. Ce pic pourrait être dû à la perte par les nanoparticules de matériau organique, préférentiellement de type 5, ce matériau organique pouvant provenir d'un matériau organique adsorbé à la surface ou compris dans ou à la surface des nanoparticules SIGMA. La figure 2 (d) montre le flux thermique en milliwatt d'un échantillon comprenant 3 mg de poudre de nanoparticules SIGMA en fonction de la température de 10 l'échantillon, lorsque la température de l'échantillon est augmentée de 20 °C à 600 °C à une vitesse de 6 °C par minute. Ces mesures ont été effectuées avec un appareil TGA-DSC. La figure 2(d) montre deux pics avec le flux de chaleur maximal observé à des températures de 200 °C et 515 °C. Le pic centré à 200 °C pourrait être attribué à la combustion de la masse de nanoparticules perdue entre 200 et 400 °C. Le pic centré à 515 °C pourrait être attribué à la 15 combustion de la masse de nanoparticules perdue au-dessus de 500 °C et/ou à l'oxydation des magnétosomes d'une composition d'oxyde de fer composée de magnétite, de maghémite ou d'une composition intermédiaire magnétite et maghémite en hématite, pouvant entraîner un dégagement de chaleur éventuellement provoqué par une réaction exothermique résultant de l'oxydation. 20 Détermination des différents types d'impuretés préférentiellement de matières organiques pouvant être éliminées, libérées ou dissociées des nanoparticules: Chaque température correspondant ou conduisant à la valeur maximale de la dérivée de la variation du pourcentage en poids de magnétosomes ou de nanoparticules Sigma en fonction de la température pourrait être associé à un certain type de matériau organique qui est retiré des 25 nanoparticules. Ainsi, en connaissant les valeurs de ces températures, il est possible de comparer entre différents échantillons, le type de matériau organique pouvant être éliminé des nanoparticules. Détermination des températures auxquelles les magnétosomes ont été chauffés dans le four: Dans les différents échantillons étudiés (bactéries magnétotactiques entières, Fig. 1(a), 30 chaînes de magnétosomes extraites de bactéries magnétotactiques, Fig. 1(c), magnétosomes extraits et chauffés Fig. 2(a)), la majeure partie de la matière organique est extraite ou libérée des magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques entre 200 et 400 °C, c'est-à-dire la variation de poids (%) et la dérivée de la variation du poids (%/°C) sont les plus élevés dans cette plage de température. Nous avons donc choisi de chauffer les magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques à différentes températures comprises entre 200 et 400 °C. Détermination de la méthode de lyse conduisant à la plus faible quantité de carbone dans les magnétosomes: Les magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques avec KOH ont une 5 quantité de carbone inférieure à celle du magnétosome extrait de bactéries magnétotactiques avec NaOH (7,1% avec KaOH, échantillon 2, par rapport à 14% avec NaOH, échantillon 1). Les magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques avec du KOH et chauffés à 200 °C pendant 30 minutes, à 300 °C pendant 1 heure et à 380 °C pendant 1 heure ont un pourcentage de carbone inférieur à celui des magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques avec 10 NaOH et chauffés à 200 °C pendant 30 minutes, 300 °C pendant 1 heure et 380 °C pendant 1 heure (0,3% avec KOH, échantillon 8, comparé à 1% avec NaOH, échantillon 9). Les magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques avec KOH et chauffés à 200 °C pendant 1 heure, à 300 T pendant 2 heures et à 380 °C pendant 2 heures ont un pourcentage de carbone inférieur à celui des magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques avec 15 NaOH et chauffés à 200 °C pendant 1 heure, 300 °C pendant 2 heures et 380 °C pendant 2 heures (0,23% avec KOH, échantillon 10, comparé à 0,8% avec NaOH). Cela indique que KOH est la meilleure méthode de lyse pour obtenir un faible pourcentage de carbone dans les magnétosomes et donc pour obtenir un niveau élevé de purification. Les magnétosomes extraits de bactéries magnétotactiques à l'aide de NaOH puis purifiés par une méthode 20 chimique au phénol et au chloroforme possèdent un pourcentage de carbone supérieur à celui des magnétosomes extraits de bactéries magnétoatctiques à l'aide de NaOH et chauffés à 200 °C pendant 30 minutes. 300 °C pendant 1 heure et 380 °C pendant 1 heure (1% de carbone avec l'échantillon 9 comparé à 5% de carbone avec l'échantillon 3). Détermination de la température de chauffage conduisant à la plus faible quantité de carbone 25 dans les magnétosomes: Considérant les magnétosomes lysés avec du KOH, les chauffer à 400 ° C pendant 1 heure entraîne une quantité de carbone inférieure à celle obtenue lorsqu'ils sont chauffés à 200 °C pendant 1 heure (3% de carbone à 400 °C, échantillon 5, comparé à 5% de carbone à 200 °C, échantillon 4), indiquant que l'augmentation de la température de chauffage permet d'éliminer plus de carbone. 30 Détermination du nombre d'étapes de chauffage conduisant à la plus faible quantité de carbone dans les magnétosomes: Considérant les magnétosomes lysés avec KOH, les chauffer à deux températures différentes de 200 et 300 °C (échantillon 6) ou trois températures différentes de 200 °C , 300 °C et 380 °C (échantillon 8), permet d'éliminer plus de carbone que les chauffer uniquement à une température (il reste 0,65% de carbone dans les 71 magnétosomes lorsqu'ils sont chauffés à 200 °C et 300 °C, échantillon 6 et il reste 0,3% de carbone dans les magnétosomes lorsqu'ils sont chauffés à 200, 300 et 380 °C, échantillon 8). Ceci suggère que pour atteindre un niveau bas de carbone dans les magnétosomes, ceux-ci peuvent être chauffés à plus de deux températures différentes comprises entre 200 °C et 380 5 °C, telles que 200 °C, 300 °C et 380 °C. Détermination du temps de chauffage conduisant à la plus faible quantité de carbone dans les magnétosomes: Considérant les magnétosomes lysés avec du KOH et chauffés à 200 °C, 300 °C et 380 °C, augmenter le temps de chauffage à 200 °C de 30 minutes à 1 heure et augmenter la durée de chauffage à 300 °C et à 380 °C de 1 heure à 2 heures, diminuent 10 légèrement le pourcentage de carbone restant dans les magnétosomes après traitement thermique (0,23% pour l'échantillon 10 par rapport à 0,3% pour l'échantillon 8). En conclusion, nous avons développé une méthode de chauffage de nanoparticules, appelées magnétosomes, produites par des cellules spécifiques appelées bactéries magnétotactiques, qui permet d'atteindre un très faible pourcentage de carbone, similaire à celui trouvé dans les 15 nanoparticules synthétisées chimiquement, qui ne sont pas synthétisées par des cellules. TABLES: Table 1: Compositions dans un litre d'eau des milieux de pré-croissance et de croissance utilisés pour cultiver les bactéries magnétotactiques MSR-1 dans des tubes de 50 millilitres suivant la condition 1. Dans cette condition, 13 milieux de pré-croissance et 13 milieux de 20 croissance différents ont été préparés en utilisant 13 élixirs de minéraux différents (VO, CB1, V2, CB2, CB3, CB4, CB5, CB7, CB9, CB10, CB11, CB12, CB13), dont la composition dans un litre d'eau déionisée est donnée dans le tableau 6. Table 2: Compositions dans un litre d'eau des milieux de pré-croissance et de croissance utilisés pour cultiver les bactéries magnétotactiques MSR-1 dans des tubes de 50 millilitres 25 suivant la condition 2. Dans cette condition, 4 milieux de pré-croissance et 4 milieux de croissance différents ont été préparés en utilisant 4 extraits de levure différents (YE, YNBWAA, YNBWoAA, YNBWoAA.AS), dont la composition dans un litre d'eau déionisée est donnée dans le tableau 7. Table 3: Compositions dans un litre d'eau des milieux de pré-croissance et de croissance 30 utilisés pour cultiver les bactéries magnétotactiques MSR-1 dans des tubes de 50 millilitres suivant la condition 3. Dans cette condition, 5 milieux de pré-croissance et 5 milieux de croissance différents ont été préparés en utilisant 5 cocktails de vitamines différentes (VitlX, VitSX, Vit10X, Vit0.5X, Vit0.1X), dont la composition dans un litre d'eau déionisée est donnée dans le tableau 8. 72 Table 4: Compositions dans un litre d'eau des milieux de pré-croissance et de croissance utilisés pour cultiver les bactéries magnétotactiques MSR-1 dans des tubes de 50 millilitres suivant la condition 4. Dans cette condition, 9 milieux de pré-croissance et 9 milieux de croissance différents ont été préparés en utilisant 9 vitamines différentes (Bt, CP, FA, 1, NA, 5 AA, P, R, T), dont la composition en un litre d'eau déionisée est donnée dans le tableau 9. Table 5: Compositions dans un litre d'eau des milieux de pré-croissance et de croissance utilisés pour cultiver les bactéries magnétotactiques MSR-1 dans des tubes de 50 millilitres suivant la condition 5. Dans cette condition, 4 concentrations différentes de lactate de sodium (SLO, SLO.5X, SLO.2X, SLO.1X), chlorure d'ammonium (A0, A0.5X, A0.2X, A0.1X), sulfate 10 de magnésium heptahydraté (MGO, MG0.5X, MG0.2X, MGO.1X), phosphate de potassium dibasique (P0, P0,5X, P0,2X, P0,1X) ont été testés. Table 6: Compositions dans un litre d'eau des différents élixirs de minéraux (VO, CB1, V2, CB2, CB3, CB4, CB5, CB7, CB9, CBIO, CB11, CB12, CB13). Table 7: Composition dans un litre d'eau des différents extraits de levure (YE, YNBWAA, 15 YNBWoAA, YNBWoAA.AS). Table 8: Compositions dans un litre d'eau de différents cocktails de vitamines (VitlX, VitSX, Vit10X, Vit0.5X, Vit0.1X). Table 9: Compositions dans un litre d'eau des différentes vitamines (Biotine Bt, Pantothénate de calcium CP, Acide folique FA, Inositol I, Acide nicotinique NA, Acide p-aminobenzoïque 20 AA, Pyridoxine HC1 P, Riboflavine R, Thiamine HC1 T) . Table 10: Pour la condition 1, densité optique mesurée à la fin de l'étape de pré-croissance, 6 jours après le début de la croissance, ODD6, ou 13 jours après le début de la croissance, ODD, 3, rapport ODDI3/ODD6 et pourcentage de réponse magnétique. Table 11: Pour les conditions 2 et 3, densité optique mesurée à la fin de l'étape de pré- 25 croissance, 6 jours après le début de la croissance, ODD6, ou 13 jours après le début de la croissance, ODDH, rapport ODD13/0DD6 et pourcentage de réponse magnétique. Table 12: Pour la condition 4, densité optique mesurée à la fin de l'étape de pré-croissance, jours après le début de la croissance, ODD6, ou 13 jours après le début de la croissance, ODD, 3, rapport ODD13/ODD6 et pourcentage de réponse magnétiques. 30 Table 13: Pour la condition 5, densité optique mesurée à la fin de l'étape de pré-croissance, 6 jours après le début de la croissance, ODD6, ou 13 jours après le début de la croissance, ODD, 3, rapport ODDI3/ODD6 et pourcentage de réponse magnétique. Table 14 (a): Pour la condition 6 de croissance de bactéries magnétotactiques MSR-1 dans un fermenteur d'un litre, compositions du milieu de pré-croissance, de milieu de croissance et de 73 milieu alimenté en fed-batch pour BI et B4, préparées à l'aide de produits chimiques de qualité non pharmaceutique. Table 14 (b): Pour la condition 6 de croissance de bactéries magnétotactiques MSR-1 dans un fermenteur d'un litre, compositions du milieu de pré-croissance, du milieu de croissance et du 5 milieu alimenté fed-batch pour B2 et B3, préparés à l'aide de produits chimiques de qualité pharmaceutique. Table 15: Pour la condition 6, densité optique et nombre de cellules par ml mesurés au début de l'étape de pré-croissance (DO) pour les bactéries insérées dans un volume de 250 ml de milieu de pré-croissance, à la fin de l'étape de pré-croissance (D9) pour les bactéries cultivées 10 dans un milieu de pré-croissance de 1,5 litre, au début de l'étape de croissance (D9), lorsque les bactéries sont cultivées dans un milieu de croissance de 800 ml, à D9 de l'étape de croissance, à Dll de l'étape de croissance. Rapport entre la densité optique des bactéries mesurée à D II et la densité optique des bactéries mesurée à D9. Pourcentage de réponse magnétique mesurée à D 1 1. 15 Table 16: Pour les magnétosomes produits dans la condition 6, extraits de bactéries magnétotactiques et purifiés pour éliminer plus de 99% des matières carbonées, concentration d'impuretés (Ag, Al, As, Ba, Cd, Co, Cr, Cu, Mn, Mo, Ni, Pb, Sb, Se, Si, Sn, Ti, W, Zn) en Rg d'impuretés par gramme de magnétosome, pour les milieux B1, B2, B3 et B4. Table 17: Pour les fermenteurs Bl, B2, B3, B4, les concentrations en fer compris dans: i), le 20 milieu de pré-croissance à DO (jour 0), D8, D9, ii), le milieu de croissance Oh après le début de l'étape de croissance à D9, 6h après le début de l'étape de croissance à D9, 12h après le début de l'étape de croissance à D9, 24h après le début de l'étape de croissance à DIO, 48h après le début de l'étape de croissance à D11, iii) volume de milieu fed-batch introduit dans le milieu de croissance Oh après le début de l'étape de croissance à D9, 6h après le début de 25 l'étape de croissance à D9, 12h après le début de l'étape de croissance à D9, 24h après le début de la phase de croissance à D9, 48h après le début de la phase de croissance à D11. Table 18: Conditions de traitement pour les différents échantillons (échantillons 0 à 11), y compris l'état de lyse (avec NaOH, KOH ou NaOH + Phénol et chloroforme), la température initiale avant chauffage de l'échantillon (T,), la température T1, la vitesse rd auquel la 30 température est augmentée de T, à TI, la durée ti pendant laquelle la température est maintenue à Ti, la température T2, la vitesse riz à laquelle la température est augmentée de Ti à T2, la vitesse riz à laquelle la température est augmentée de T, à Tz, la durée tz pendant laquelle la température est maintenue à T2, la température T3, la vitesse ria à laquelle la température est augmentée de Ti à T3, la vitesse r32 à laquelle la température est augmentée T3 74 à Ti, la durée t3 pendant laquelle la température est maintenue à T3, la température T4, la vitesse r34 à laquelle la température est augmentée de T3 à T4, la durée t4 pendant laquelle la température est maintenue à T4, la température finale Tt la vitesse rif à laquelle la température est diminuée de Ti à Tf, la vitesse r2f à laquelle la température est diminuée de T2 à Tf, la 5 vitesse r3f à laquelle la température est abaissée de T3 à Tf, la vitesse ru à laquelle la température est diminuée de T4 à Tf. Table 19: Pour les différents échantillons (échantillons 3 à 11), les pourcentages en masse de carbone (%C) et d'azote (%N) après traitement des nanoparticules dans les conditions 3 à 11, les pourcentages en masse de carbone et (%Ci) et azote (%Ni) pour les magnétosomes extraits 10 de bactéries magnétotactiques après la condition 1 ou 2 avant le traitement thermique (échantillons 4 à 11) ou avant le traitement au phénol-chloroforme (échantillon 3). Valeurs de A%C = %Ci-%C, A%N = %Ni-%N, (100.4%C)/%Ci, (100.A%N)/%Ni. Condition 1.13 d ifferents élixirs de minés (Sart 'arias mua nétotaci iq nes MSR-1 amplifiées dam des tubes de 50 rall e su g G3 mi Qua:aï:té la g uo,se M Sulfate de magnésium ha ptahydrate FM .71in5 Phosphate de potassium d ibasique Extraits de levure (Table 7, YE erei Meir SU, UN, V2, C$2, Ce& a7, ae;à1(a Ai ;c4e,m I M ET,I6 gbel Eau déionisée ydne# tour M Lera-2 m e04,5 t4t1/24 er24c sa tiaüz } 1:5fig tend. rzesetriristia ri Lactate de sodium .............................................................. h Io rure d'Ammonium .le Condition 3:7 différents cocktails de vitamines testés les magnétetattiques MSR-1 amplifiées dans des tubes de ml) quentrt 2,6 g CC g Ntla : : Sulfate de magnésium heptahydrate µµ Phosphate de potassium di basin ue tottc' V it 'sît, Vela V tas" cruumu Tatslee tolime-aitakir Mea ei Eau déloreisée ite de sodium C;34,Nalad re eAmmo Sulfate de magnésium heptahydrate Phosphate de potassium di bas igue- beakieci;, Ck. Vitra, t4r 12e, tefige,,let VitalC Table E. Mfirieral 7He0ï te 213,10 M Jea 20 4M Citrate ferrique (20 rn C3,8 Fe03 Eau déionisée I L f OA t Chlorure d'Ammonium 74 Condition 4:9 différentes vitensi nes individuelles testées (Bactéries ntagnétat quelques NISR-1 amplifiées dans des tubes de 50 mi) Nom du produit chimique remet drmielse rsustritité Lactate de sodium Phosphate de potassium dibasiqua niesi Feliveuelles: et, CP, FA, I, NA, AR, P, R, ou Y issisie Minerai eller tas (Tztlea Eau dékonisée Lactate de sodium CtiNtres52 Chlorure d'Ammonium i smia Sulfate de magnésium ho ptah 2,303 La 2.6 t , -'- ge.240i4Me(ONIYIneelg iFee0ye . 7M30/ Sulfate de:magnésium heptahylrate Phosphate de potassium dibasique NA-IPCA M Citrate ferrique (29 2, te 'edettl.4,1à04 [FANzS . ?He/ Aq ;Cele) 0; 4 e4 vie ---------------------- Eau tétanisée L eteTetlet 'deleeedeeee, s703.$1 C:g Cg 2 lei 4 - f- . -, 4- ce i ce : cc ;e111e5c oz : Og :370041 171g e.i 5 4 : et' oe 0g e 88. de Z f C1,4SsG 4y h ez I- Cg fee ee le 4 r 4 1 xt °g-4 !g .L94L9.4 cfre Pe II :4 IL Te big fl OE le 0g- -- le et 9 9 ' l!e__ Ope. 1.1 IL til: iL fié Euitnaiate- Neste> -1:'1443 4f4t4N2044 Lb* d ce 10e ,,,,, ,,,, - 4- - Cg Me0sC.. tee colles el ut° Sg ce nez sa ceteste Qe '8i cg co O Corripcsition das différa n ex liwo Val-mule I 4 Yg D Ve 3 Oc fg u Exfraï3s 4e ne f Qg . W Sai.- ty tate cr Etut hi in isth^At; ,OZ Q 1-22 Io n CeliCtChliCial-WitçO0h g Cv 32 a tc de poixss.'zum 1g Q 4 0_ nonobasgme 0, e in ....... &n dtarure ne sodium Eerne4e3 ou», c« , ws , oe rlg. B AüEg 4.. t 2.Io e 4a "4 2- Gin fine Cn3i3c1,320a1 g PaniailsërFate de Ea i1CMZC3â3191 Adde c t3gEi2.fite4s '9/ . e 2.104g e - - - -- - reas c$ ei o u g 4,1434 "t inenitx1 mcetco2H ;MO; . Hco 04g le 4e 2,10- g.'.. Art e nimtïxxique Cs 32-1/3/1.204 tahkirii: ,11C1 I .10 4,1$ g Acide n-Aminnhenzniqun Pridexinn te/ 1130 ... 4F. Atbutiewne ...'..'.......'..'...'..'.......'..' Thiernine tia ......'...,,....'_''',_ Eau drç, c -Velde 7 CO 4^10,(1-30b4 ow annrtin .-SZ;Sa a.laipp Sap 11011 tkrn des différentes vitarnine individuelles testées: NA i Ali Eau ars5;ié co W co co di ess plu-9J d C anbez, etsts.@C3 E co LO et C tre Zt a OIS 00 açn Xxs..notia 00 4 t't : an --e ; f et S 06 4 et ara tee S 3 . . a a . xT,73:M 3 ,.., : t f" S + e re : eau a ( . wea S ,---e . s te . mea 1 Xnelfa . mea S . --,- az ce . . 4 ta XS' 09W a S . n'e OeVa 5 _ .... _ _ ......... te afe&t'a S XMV S XttoV et te ! ! Zre ! 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Z i sigt 3 , 4 de éngaesmrm teptal.ydsate 0 '4. e 7..Y.:É~S~M r IIdl à g4 1 Qg, 0M ' It ', 7334. / - 'fi -( khi I C. . 88 Condition des fermente vec des gr imiques au grade pharmaceutique, du e hi igue ai 8 aetate de sodℑ i C F9 Eda0a 3. .3,10'2 3. 2.3. l la 8 ... ... 4 iCEiiI.iPLPCi reAFtut1fJ 'IO te , 1 in en~ygatan ecncenÆxaBio E lydratE 1 , 1.1e g>,*') .1g Yhafa de fltftas5hffflkr e , 2 aW Pal; -8 1 au C Ibl . e I a 14.. - Iaeia£e de:srst h _ ,.. .... 1. ii Ise 5:u1 S .9 . 2 P7trsphat ta pa assiu£xtdi1aaSitEue 1 Be le: i 6) = . it t -*logis i II ) a. .4...10 M . plaque a. 4 2 ' ÷- ptt ta5aTtent ibasiquel 6g 4, le fe e Sui ' N SO .10 is:1 7.Ag ana 1 0g Ch i- Î efe) e (. I g. IP Eau s 89 Pered Sain3Wed0 MUS el SUnp Jej ep JedseeeindtuLp vl~samee awa9asa eund Lep am4ritit enoPMPUie.) o rn Spa a ! taux ern ta up!latukacuirj (no) atruirtx ap ris sej fez} appee ad 4 9 '!Wilk? Eckertieer e %Nt -> i ;StE h%3i3. 1 an . & éC 100 a. 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Méthode de production de nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté à l'aide de cellules productrices des nanoparticules, comprenant : i) Une étape de pré-croissance consistant à amplifier la ou les cellule(s) productrice(s) de nanoparticules dans un milieu de pré-croissance de telle sorte que la ou les cellules productrice(s) de nanoparticules ne produisent pratiquement pas de nanoparticules, et ii) Une étape de croissance consistant à amplifier la ou les cellule(s) productrice(s) de nanoparticules provenant de l'étape de pré-croissance dans un milieu de croissance tel que la ou les cellule(s) productrice(s) des nanoparticules produisent des nanoparticules. 2. Méthode selon la revendication 1, dans laquelle le milieu de pré-croissance ne comprend pas de fer, ni de source de fer. 3. Méthode selon la revendication I. dans laquelle le milieu de pré-croissance comprend au moins une source de fer choisis dans le groupe comprenant le citrate de fer, le quinate de fer, le chlorure de fer ou le sulfate de fer. 4. Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 ou 3, dans laquelle la concentration en fer ou en source de fer dans le milieu de pré-croissance est inférieure à 105, 103, 102 ou 20 p.M 5. Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans laquelle la concentration en fer ou en source de fer dans le milieu de croissance est supérieure ou égale à la concentration en fer ou en source de fer dans le milieu de pré-croissance ou est supérieure à 0, 1, 5, 10 ou 20 . 6. Méthode selon la revendication 5, dans laquelle le milieu de croissance est alimenté par un milieu fed-batch. 7. Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans laquelle le ou les milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance ne comprend ou ne comprennent qu'une seule vitamine choisie dans le groupe constitué de la biotine, du pantothénate de calcium, de l'acide folique, de finositol, de l'acide nicotinique, de l'Acide amMo-benzoïque, de la pyridoxine HC1, de la riboflavine et de la thiamine HCL, ainsi que de tout dérivé de ces vitamines. 8. Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, dans laquelle le(les) milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance comprend ou comprennent, par gramme ou ml de milieu(x) de pré-croissance et/ou de croissance, moins de: i) , 1 mg d'extrait de levure, ii), 1 mg d'au moins un composant d'extrait de levure, iii), 1 mg de peptone, iv), 1 mg d'au moins un composant de peptone, v), 1 mg d'agent CMR , vi), 1 mg d'au moins un agent chélateur, vii), 1 mg d'au moins un acide aminé, viii), 1 mg d'un composé toxique ou cytotoxique, et/ou viii), 1 mg d'au moins un métal lourd. 9. Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, qui comprend une étape supplémentaire de purification de nanoparticule(s) d'oxyde de fer de haute pureté en éliminant au moins une ou plusieurs impureté(s) de la ou des nanoparticule(s). 10. Méthode selon la revendication 9, comprenant au moins deux étapes de chauffage dans lesquelles: - Au cours de l'étape 1, la température des nanoparticules est augmentée à une température Ti, puis est maintenue à TI pendant une durée de chauffage comprise entre 1 seconde et 1 mois, où TI est comprise entre 150 °C et 250 °C, - Au cours de l'étape 2, la température des nanoparticules est augmentée à une température T2, puis est maintenue à T2 pendant une durée de chauffage comprise entre 1 seconde et 1 mois, où T2 est comprise entre 350 ° C et 450 ° C. 11. Nanoparticule(s) à hase d'oxyde de fer de haute pureté ohtenue(s) par la méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 10. 12. Nanoparticule(s) selon la revendication 11, comprenant un pourcentage en masse de carbone ou de matériau carboné inférieur à 90, 10, 5, 2, préférentiellement 1, 0,5, 0,4 ou 0,3%. 13. Nanoparticule(s) d'oxyde de fer de haute pureté suivant l'une quelconque des revendications 11 à 12, où la(les) nanoparticule(s) d'oxyde de fer de haute pureté est/sont un/des magnetosome(s). 14. Composition comprenant la ou les nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté selon l'une quelconque des revendications 11 à 13. 15. Dispositif médical comprenant la ou les nanoparticules d'oxyde de fer de haute pureté selon l'une quelconque des revendications 11 à 13.