Brevet FR3078629A1 — publié le 20190913

L'invention concerne un additif alimentaire destiné à l'animal, en particulier aux volailles. Elle se rapporte également à l'utilisation de cet additif alimentaire pour la prévention ou le traitement de la coccidiose de l'animal, en particulier de la volaille. La coccidiose est une pathologie parasitaire pouvant affecter plusieurs espèces animales comme les volailles (par exemple poules, dindes, canards, pintades, oies), les ruminants (par exemple bovins, ovins, caprins), les porcs et les lapins. Les parasites responsables de cette pathologie sont les coccidies qui sont des protozoaires du genre Eimeria. Il en existe de nombreuses espèces plus ou moins 10 pathogènes. Les espèces les plus pathogènes présentes chez le poulet sont Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella. Le cycle de développement du parasite est divisé en plusieurs phases, se déroulant en partie dans le milieu extérieur, mais aussi dans l'intestin des animaux infestés causant ainsi des lésions à différents endroits du tube digestif. 15 Chez le poulet : - Eimeria acervulina va causer des lésions au niveau du duodénum (partie supérieure de l'intestin grêle) ; - Eimeria maxima causera la présence de lésions au niveau du jéjunum et de l'iléon, et enfin 20 - Eimeria tenella induira la présence de lésions dans les caeca. L'infestation se traduit alors par une diminution de la consommation d'eau et de nourriture, une perte de poids, mais aussi par la présence de diarrhées. Les oiseaux sont visiblement malades. Les infestations les plus graves peuvent conduire à la mort de l'animal. 25 Il existe de nombreux coccidiostatiques qui ont été proposés afin de traiter la coccidiose. Tout d'abord, des antibiotiques permettent de lutter contre cette pathologie. En effet, il en existe une diversité permettant de lutter contre la coccidiose, préparés par exemple à partir de Streptomyces comme cela est décrit dans la demande 30 de brevet FR 2 356 667 Al ou encore à base d'éther acide polycyclique obtenu par fermentation du microorganisme Actinomadura comme cela est divulgué dans la demande internationale W093/12800 Al. Par ailleurs, des molécules synthétiques permettent également de traiter la coccidiose. Il peut s'agir de : 35 - pyroles comme cela est décrit dans la demande internationale W001/34 632 A2, 2 - purines comme cela est décrit dans la demande EP 76 127 A2, ou encore de - dérivés de la riboflavine comme cela est divulgué dans la demande de brevet FR 2 368 956 Al. 5 Aussi, il existe des vaccins contre les protozoaires. Par exemple, la demande de brevet EP 47 662 A2 décrit un vaccin obtenu à partir d'une souche atténuée d'Eimeria necatrix qui permet de traiter les volailles contre la coccidiose. Le vaccin peut être distribué dans la nourriture ou l'eau de boisson de l'animal. Enfin, des formulations à base d'actifs végétaux permettent d'agir contre 10 la coccidiose en élevage. A cet égard, on peut citer : - des formulations élaborées à base d'artémisinine telles que décrites par exemple dans la demande internationale WO 00/04025 Al ; - des formulations à base de coque de noix de cajou telles que décrites par exemple dans la demande de brevet EP 1 103 190 A1; 15 - des formulations à bases de tannins hydrolysables telles que décrites par exemple dans la demande internationale WO 2014/004761 A2 ; - des formulations à base de sapogénines telles que décrites dans la demande de brevet EP 1 082 909 Al ; - le mélange comprenant un extrait de graine de fenugrec, un extrait 20 d'eucalyptus et un extrait de feuilles de boldo tel que décrit dans la demande internationale WO 03/055328 Al. Du fait des effets dévastateurs des infections de coccidiose rappelés ci-dessus, on est constamment à la recherche de nouveaux coccidiostatiques plus performants. 25 Les inventeurs de la présente invention ont découvert de manière tout à fait surprenante que l'administration d'une formulation comprenant l'association de saponines avec un composé ayant des propriétés antioxydantes avait un effet coccidiostatique sur les volailles. En effet, une réduction des lésions intestinales et de l'excrétion d'oocystes a été observée lors de tests réalisés chez la volaille. 30 La présente invention a ainsi pour premier objet un additif alimentaire destiné à l'animal, en particulier à la volaille, qui se caractérise en ce qu'il comprend au moins une saponine et un composé ayant des propriétés antioxydantes. L'additif alimentaire selon l'invention présente en outre l'avantage d'agir également sur les performances zootechniques de l'animal puisqu'il va contribuer, de 35 par la diminution de l'infestation due aux coccidies et la lutte contre le stress oxydatif, à maintenir ces performances. 3 Les saponines sont des métabolites secondaires naturellement produits par des plantes. Les saponines sont très fréquemment présentes dans les racines, tiges, feuilles, graines ou fruits de plantes. Il s'agit d'hétérosides complexes composés d'un sucre associé à un stéroïde, un stéroïde alcaloïde (c'est-à-dire comportant une fonction 5 azotée) ou un triterpène. Du fait de la diversité de structure des glucides et des aglycones, il existe de nombreuses saponines. Ainsi, l'additif alimentaire selon l'invention peut comprendre au moins : - des graines, des feuilles, des fruits, des tiges ou des racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de plantes qui contiennent des saponines ; - le composé ayant des propriétés antioxydantes. Ces différents constituants des plantes que sont les graines, les feuilles, les fruits, les tiges ou encore les racines peuvent être sous forme de poudre. Dans un mode de réalisation de l'invention, l'additif alimentaire comprend au moins un extrait de graines, de feuilles, de fruits, de tiges ou de racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, d'une plante qui contient des saponines. L'obtention d'un tel extrait d'une plante est parfaitement à la portée de l'homme du métier qui maîtrise les techniques d'extraction sur les plantes, afin d'en extraire des substances actives qui incluent notamment les saponines. Les techniques d'extraction de substances actives de plantes comprennent généralement les étapes suivantes : - un traitement de broyage, - une extraction par un solvant, par exemple un solvant polaire tel que l'eau ou un alcool ; - un ou plusieurs lavages, par exemple avec un solvant non polaire. L'extraction de plantes permet de dissoudre les substances actives qu'elles contiennent. Après évaporation du solvant, on obtient un extrait de la plante qui contient de manière concentrée les substances actives, notamment les saponines. Dans un mode réalisation avantageux de l'invention, les extraits de plantes 30 sont obtenus selon un procédé qui comprend au moins les étapes suivantes : - une étape de macération des matières premières de la plante dans une solution aqueuse contenant entre 5% et 80% en masse d'éthanol par rapport à la masse totale de la solution ; - une étape de concentration au cours de laquelle les matières 35 premières sont standardisées en matière sèche par séchage ; 4 - une étape de broyage de manière à obtenir un extrait de la plante sous forme de poudre. Cette préparation des extraits des plantes présente l'avantage d'améliorer la biodisponibilité des substances actives qu'elles contiennent, notamment des 5 saponines. La saponine peut être choisie parmi les saponines des plantes suivantes : Aescuius hippocastanum, Argania spinosa, Calendula officinales, Camellia oleifera, Chenopodium quinoa, Gypsophila panicuiata, Medicago sativa, Melilotus officinales, Primuia yeris, Quillaja saponaria, Saponaria officinales, Saponaria vaccaria, Trigonella 10 foenum-graecum et Yucca schidigera. Dans un mode de réalisation préférentiel de l'invention, l'additif alimentaire comprend : - une saponine de la plante de Camellia oleifera ; - une saponine de la plante de Trigonella foenum-graecum ; 15 - le composé ayant des propriétés antioxydantes. Le Camellia oleifera est un arbre originaire de Chine, appartenant à la famille des Theaceae. Le Camellia oleifera contient des saponines dans ses graines, ses feuilles, ses tiges et ses racines. 20 Le Trigonella foenum-graecum, aussi connu sous la dénomination de fenugrec, est une plante herbacée de la famille des Fabaceae, et plus particulièrement des protéagineux. Le Trigonella foenum-graecum contient des saponines dans ses graines, ses feuilles, ses tiges et ses racines. 25 C'est pourquoi, l'additif alimentaire selon l'invention peut comprendre au moins : - des graines, des feuilles, des tiges ou des racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Camellia oleifera qui contiennent des saponines ; - des graines, des feuilles, des tiges ou des racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Trigonella foenum-graecum qui contiennent des saponines ; - le composé ayant des propriétés antioxydantes. Les inventeurs ont découvert que parmi les saponines, il était tout 35 particulièrement avantageux de combiner les saponines des deux plantes que sont 5 Camellia oleifera et Trigonella foenum-graecum pour obtenir un effet synergique pour le traitement ou la prévention de la coccidiose de la volaille. Les graines, les feuilles, les tiges et les racines de Camellia oleifera peuvent être sous forme de poudre. 5 Les graines, les feuilles, les tiges et les racines de Trigonella foenum- graecum peuvent être sous forme de poudre. Dans un mode de réalisation de l'invention, l'additif alimentaire comprend un extrait de graines, feuilles, tiges ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Camellia oleifera qui contient lesdites saponines. L'obtention d'un tel extrait est 10 parfaitement à la portée de l'homme du métier qui maîtrise les techniques d'extraction sur les plantes afin d'en extraire des substances actives. Il peut s'agir du procédé d'extraction tel que décrit ci-dessus. L'extrait de graines, feuilles, tiges ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Camellia oleifera peut être sous forme de poudre. 15 Dans un mode de réalisation de l'invention, l'additif alimentaire comprend un extrait de graines, feuilles, tiges ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Trigonella foenum-graecum. L'obtention d'un tel extrait est parfaitement à la portée de l'homme du métier qui maîtrise les techniques d'extraction sur les plantes afin d'en extraire des substances actives. Il peut s'agir du procédé d'extraction tel que 20 décrit ci-dessus. L'extrait de Trigonella foenum graecum peut être sous forme de poudre. Dans un mode de réalisation de l'invention, l'additif alimentaire comprend : - un extrait de graines, feuilles, tiges ou racines, prises seules ou en 25 mélanges de celles-ci, de Camellia oleifera qui contient des saponines ; - un extrait de graines, feuilles, tiges, ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Trigonella foenum-graecum qui contient des saponines ; - le composé ayant des propriétés antioxydantes. 30 Les inventeurs ont découvert de manière surprenante qu'il était bénéfique de combiner une saponine avec un composé ayant des propriétés antioxydantes pour la prévention ou le traitement de la coccidiose de l'animal, en particulier de la volaille. Cette association d'un antioxydant avec une saponine est novatrice dans le domaine de l'alimentation pour animaux. Avantageusement, le composé est un extrait de plante ayant des propriétés antioxydantes. 6 L'extrait de plante ayant des propriétés antioxydantes peut être choisi parmi les extraits des plantes de Castanea sativa, Camellia sinensis, Rosmarinus officinalis, ou encore Olea europea par exemple. De manière préférée, il s'agit d'un extrait de plante de Castanea sativa. 5 Le composé ayant des propriétés antioxydantes permet de neutraliser les radicaux libres produits lors d'un stress oxydatif, notamment d'un stress oxydatif ayant pour origine la coccidiose. En effet, la coccidiose, mais également la prise d'un anticoccidien, induisent la production de radicaux libres. Dans un mode de réalisation de l'additif alimentaire, le ratio du 10 pourcentage massique des saponines de Camellia oleifera sur le pourcentage massique des saponines de Trigonella foenum-graecum est compris entre 0,02 : 19 et 10 : 0,2, de préférence entre 0,1 : 9,5 et 4,5 : 0,6. Dans un mode de réalisation de l'additif alimentaire, le ratio de la somme des pourcentages massiques des saponines de Camellia oleifera et de Trigonella 15 foenum-graecum sur le pourcentage massique du composé ayant des propriétés antioxydantes est compris entre 0,22 : 25 et 29 : 1, de préférence entre 0,7 : 15 et 14 : 1. L'additif alimentaire peut comprendre en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale dudit additif : 20 - entre 0,22% et 29%, de préférence entre 0,7% et 14%, de saponines ; - entre 1% et 25%, de préférence entre 1% et 15%, du composé ayant des propriétés antioxydantes. Lorsque l'additif alimentaire comprend un extrait de graines, feuilles, tiges, ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de plante qui contient des 25 saponines, l'extrait comprend entre 1% et 20%, de préférence entre 1% et 15%, de saponines par rapport à la masse totale de matière sèche dudit extrait. De manière préférée, l'additif alimentaire comprend en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale dudit additif : - entre 0,02% et 10%, de préférence entre 0,1% et 4,5%, de saponines 30 de Camellia oleifera ; - entre 0,2% et 19%, de préférence entre 0,6% et 9,5%, de saponines de Trigonella foenum-graecum ; - entre 1% et 25%, de préférence entre 1% et 15%, du composé ayant des propriétés antioxydantes. 35 Lorsque l'additif alimentaire comprend un extrait de graines, feuilles, tiges, ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Camellia oleifera, l'extrait 7 comprend entre 1% et 20%, de préférence entre 5% et 15% de saponines par rapport à la masse totale de matière sèche dudit extrait. Lorsque l'additif alimentaire comprend un extrait de graines, feuilles, tiges, ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Trigonella foenum5 graecum, l'extrait comprend entre 1% et 20%, de préférence entre 1% et 10%, de saponines par rapport à la masse totale de matière sèche dudit extrait. L'additif alimentaire peut comprendre en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale dudit additif - entre 20 % et 99 %, de préférence entre 60% et 99%, d'extrait de 10 graines, feuilles, tiges ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, d'une plante qui contient des saponines ; - entre 1% et 25%, de préférence entre 1% et 15%, du composé ayant des propriétés antioxydantes. Pour compléter l'additif alimentaire en masse à 100%, il peut en outre 15 contenir au moins un composé choisi parmi des excipients tels que la silice, l'argile, des conservateurs, des farines, ainsi que des co-produits céréaliers (par exemple du blé broyé ou du son). Le pourcentage massique de ce composé peut être compris entre 0,01% et 75%, de préférence entre 0,01% et 50%, par rapport à la masse totale dudit additif. 20 De manière préférée, l'additif alimentaire comprend en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale dudit additif - entre 2 % et 50 %, de préférence entre 2% et 30%, d'extrait de graines, feuilles, tiges ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Camellia oleifera ; 25 - entre 20 % et 95 %, de préférence entre 60% et 95%, d'extrait de graines, feuilles, tiges ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Trigonella foenum-graecum ; - entre 1% et 25%, de préférence entre 1% et 15%, du composé ayant des propriétés antioxydantes ; 30 - optionnellement entre 0,01% et 75%, de préférence entre 0,01% et 50%, du composé choisi parmi les excipients tels que la silice, l'argile, les conservateurs, les farines et les co-produits céréaliers. L'additif alimentaire selon l'invention peut se présenter sous forme de pellet, de poudre ou de mélange poudreux. 35 L'additif alimentaire de la présente invention peut être intégré à l'aliment de volailles à raison de 10 ppm à 1000 ppm, de préférence à raison de 250 ppm. 8 Dans un mode de réalisation de l'invention, l'additif alimentaire est intégré dans l'aliment de l'animal à raison de 0,01 à 1,00 kg, de préférence de 0,10 à 0,50 kg, par tonne d'aliment de l'animal. Dans un mode de réalisation de l'invention, l'additif alimentaire est intégré 5 dans l'aliment à raison de 0,09 à 9,00 g, de préférence de 0,9 à 4,5 g/100 kg de poids vif de volaille par jour (pour des animaux de 1,5 kg de poids vif consommant 0,135 kg d'aliment complet par jour). L'invention a ainsi pour objet un aliment pour animal, de préférence une volaille, qui se caractérise en ce qu'il comprend entre 0,01 et 1,00 kg, de préférence 10 entre 0,10 et 0,50 kg, d'additif alimentaire par tonne d'aliment tel que décrit ci-dessus. Lorsque l'additif alimentaire comprend uniquement des composés à base de plantes riches en métabolites secondaires, il est alors totalement d'origine naturelle et peut être utilisé jusqu'à l'abattage de l'animal, sans période de retrait préalable nécessaire. 15 De par sa propriété anticoccidienne, l'additif alimentaire de l'invention peut être incorporé dans la composition d'un aliment d'un animal (de préférence une volaille) qui est destiné à avoir une action coccidiostatique. L'additif alimentaire va pouvoir agir sur certains facteurs de risques de la maladie mis en évidence comme le statut immunitaire de l'animal et le stress oxydatif grâce au composé aux propriétés 20 antioxydantes. Un autre facteur de risque identifié est la présence d'aliments dits « favorisant » la coccidiose dans la ration alimentaire de l'animal. Il peut s'agir de régimes riches en protéines et/ou qui peuvent comprendre des acides gras essentiels, des vitamine B et D ou encore du calcium (si sa teneur massique dans la ration est supérieure à 1%). L'apport de l'additif alimentaire sert à contrecarrer la présence de ces 25 composants à risque. L'additif alimentaire peut également être utilisé dans le but qu'il agisse directement sur le développement des coccidies, ou encore sur l'altération de la muqueuse intestinale, sur l'excrétion d'oocystes et donc sur la recontamination de l'environnement, et enfin sur la diminution des performances zootechniques. 30 L'invention a ainsi pour objet l'additif alimentaire ou l'aliment tels que décrits ci-dessus pour le traitement préventif ou curatif de la coccidiose, de préférence la coccidiose de la volaille. L'invention sera mieux comprise à l'aide de la description détaillée d'expérimentations qui sont exposées ci-dessous en référence au dessin annexé 35 représentant des résultats de données expérimentales relatives à l'association synergique des plantes de Camellia oleifera et de Trigonella foenum-graecum. 9 DESCRIPTION DE LA FIGURE La figure 1 représente un graphique sur lequel sont détaillés les pourcentages relatifs d'amélioration de l'indice de consommation. 5 PARTIE EXPERIMENTALE I - Effet synergique de l'association de Camellia oleifera et de Trigonella foenumgraecum sur l'indice de consommation de poulets infectés de coccidiose 10 Les résultats présentés ci-après ont été obtenus par synthèse des résultats de quatre essais expérimentaux détaillés ci-dessous. Essai N°1 : 15 Les animaux expérimentaux utilisés pour réaliser l'essai n°1 étaient des poulets de chair. 224 poulets de race Cobb 500 ont fait l'objet de l'étude. Les 2 lots témoins suivants ont été établis : - lier lot témoin T1 : un groupe de 56 poulets qui n'étaient pas infectés par la coccidiose. 20 - 2ième lot témoin T2 : un groupe de 56 poulets qui étaient infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella. Par ailleurs, les lots A et B suivants ont été établis : - Lot A : un groupe de 56 poulets ayant tous été infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella, et à qui on a 25 administré journalièrement un extrait de Camellia oleifera intégré à l'aliment à hauteur de 0,25 kg/tonne pendant 20 jours ; - Lot B : un groupe de 56 poulets ayant tous été infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella, et à qui on a administré journalièrement un extrait de Trigonella foenum-graecum 30 intégré à l'aliment à hauteur de 0,25 kg/tonne pendant 20 jours. Essai N°2 : Les animaux expérimentaux pris en compte pour la réalisation de la synthèse des résultats sont les deux groupes témoins uniquement pour cet essai n°2. 35 96 poulets de race Ross 308 ont fait l'objet de l'étude. Les 2 lots témoins suivants ont été établis : 10 - lier lot témoin T1 : un groupe de 48 poulets qui n'étaient pas infectés par la coccidiose. - 2ième lot témoin T2 : un groupe de 48 poulets qui étaient infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella. 5 Essai N°3 : Les animaux expérimentaux utilisés pour réaliser l'essai n°3 étaient des poulets de chair. 392 poulets de race Cobb 500 ont fait l'objet de l'étude. 10 Les 2 lots témoins suivants ont été établis : - ter lot témoin T1 : un groupe de 56 poulets qui n'étaient pas infectés par la coccidiose. - 2ième lot témoin T2 : un groupe de 56 poulets qui étaient infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella. 15 Par ailleurs, les lots A à E suivants ont été établis : - Lot A : un groupe de 56 poulets ayant tous été infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella, et à qui on a administré journalièrement un extrait de Camellia oleifera intégré à l'aliment à hauteur de 0,25 kg/tonne pendant 20 jours ; 20 - Lot B : un groupe de 56 poulets ayant tous été infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella, et à qui on a administré journalièrement un extrait de Trigonella foenum-graecum intégré à l'aliment à hauteur de 0,25 kg/tonne pendant 20 jours ; - Lot C : un groupe de 56 poulets ayant tous été infectés par les coccidies 25 Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella, et à qui on a administré journalièrement pendant 20 jours : o un extrait de Camellia oleifera intégré à l'aliment à hauteur de 0,1875 kg/tonne. o un extrait de Trigonella foenum-graecum intégré à l'aliment à 30 hauteur de 0,0625 kg/tonne. Le ratio de la quantité de Camellia oleifera sur celle de Trigonella foenum-graecum était de 3 : 1 ; - Lot D : un groupe de 56 poulets ayant tous été infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella, et à qui on a 35 administré journalièrement pendant 20 jours : o un extrait de Camellia oleifera intégré à l'aliment à hauteur de 0,125 kg/tonne. 11 o un extrait de Trigonella foenum-graecum intégré à l'aliment à hauteur de 0,125 kg/tonne. Le ratio de la quantité de Camellia oleifera sur celle de Trigonella foenum-graecum était de 1 : 1 ; 5 - Lot E : un groupe de 56 poulets ayant tous été infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella, et à qui on a administré journalièrement pendant 20 jours : o un extrait de Camellia oleifera intégré à l'aliment à hauteur de 0,0625 kg/tonne. 10 o un extrait de Trigonella foenum-graecum intégré à l'aliment à hauteur de 0,1875 kg/tonne. Le ratio de la quantité de Camellia oleifera sur celle de Trigonella foenum-graecum était de 1 : 3. 15 Essai N°4 : Les animaux expérimentaux utilisés pour réaliser l'essai n°4 étaient des poulets de chair. 336 poulets de race Ross 308 ont fait l'objet de l'étude. Les 2 lots témoins suivants ont été établis : - lier lot témoin T1 : un groupe de 48 poulets qui n'étaient pas infectés 20 par la coccidiose. - 2ième lot témoin T2 : un groupe de 48 poulets qui étaient infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella. Par ailleurs, les lots A à E suivants ont été établis : - Lot A : un groupe de 48 poulets ayant tous été infectés par les coccidies 25 Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella, et à qui on a administré journalièrement un extrait de Camellia oleifera intégré à l'aliment à hauteur de 0,25 kg/tonne pendant 20 jours ; - Lot B : un groupe de 48 poulets ayant tous été infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella, et à qui on a 30 administré journalièrement un extrait de Trigonella foenum-graecum intégré à l'aliment à hauteur de 0,25 kg/tonne pendant 20 jours ; - Lot C : un groupe de 48 poulets ayant tous été infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella, et à qui on a administré journalièrement pendant 20 jours : 35 o un extrait de Camellia oleifera intégré à l'aliment à hauteur de 0,1875 kg/tonne. 12 o un extrait de Trigonella foenum-graecum intégré à l'aliment à hauteur de 0,0625 kg/tonne. Le ratio de la quantité de Camellia oleifera sur celle de Trigonella foenum-graecum était de 3 : 1 ; 5 - Lot D : un groupe de 48 poulets ayant tous été infectés par les coccidies Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella, et à qui on a administré journalièrement pendant 20 jours : o un extrait de Camellia oleifera intégré à l'aliment à hauteur de 0,125 kg/tonne. 10 o un extrait de Trigonella foenum-graecum intégré à l'aliment à hauteur de 0,125 kg/tonne. Le ratio de la quantité de Camellia oleifera sur celle de Trigonella foenum graecum était de 1 : 1 ; - Lot E : un groupe de 48 poulets ayant tous été infectés par les coccidies 15 Eimeria acervulina, Eimeria maxima et Eimeria tenella, et à qui on a administré journalièrement pendant 20 jours : o un extrait de Camellia oleifera intégré à l'aliment à hauteur de 0,0625 kg/tonne. o un extrait de Trigonella foenum-graecum intégré à l'aliment à 20 hauteur de 0,1875 kg/tonne. Le ratio de la quantité de Camellia oleifera sur celle de Trigonella foenum-graecum était de 1 : 3. L'inoculation par les coccidies a eu lieu au 141ème jour pour les essais n°1 et 3 et au 161ème jour pour les essais n°2 et 4. 25 L'indice de consommation a été mesuré pendant la période du 14ième au 20'ènle jour d'essai. Il correspond au rapport entre la quantité d'aliment consommée et le gain de poids de l'animal. Pour chacun des lots détaillés ci-dessus, et ce pour les 4 essais, le pourcentage relatif d'augmentation de l'indice de consommation par rapport au témoin 30 T1 (non infecté) sur la période du 14ième au 20'ènle jour d'essai a été calculé. La moyenne de ces pourcentages relatifs a été calculée pour les groupes ayant reçu le même traitement, tous essais confondus. On a alors obtenu un pourcentage relatif moyen d'augmentation de l'indice de consommation par rapport au témoin T1 pour chacun des traitements testés. Ceux-ci sont présentés sur le graphique constituant la figure 1. 35 On observe que l'infection des animaux du groupe Témoin T2 cause une augmentation de l'indice de consommation de 87,32% par rapport au Témoin T1. 13 Cette augmentation est atténuée par les différentes administrations de Camellia oleifera et Trigonella foenum-graecum qui ont été testées sur les lots de poulets A à E. Il faut alors noter que l'administration seule de Camellia oleifera ou de 5 Trigonella foenum-graecum réduit très peu l'indice de consommation qui a été augmenté à cause de l'infection des volailles par le parasite Eimeria. Avec une administration seule de Camellia oleifera, on observe une augmentation de 83,07% de l'indice de consommation. Cela signifie que cette administration permet seulement de réduire de 4,25% l'indice de consommation par 10 rapport au témoin T2. De même, avec une administration seule de Trigonella foenum-graecum, on observe une augmentation de 84,62% de l'indice de consommation par rapport au Témoin Ti. Cela signifie que cette administration a permis de réduire l'indice de consommation de 2,70% par rapport au Témoin T2. 15 Cependant, si l'on s'intéresse aux effets de l'association des deux plantes pour les lots C à E, on observe un effet synergique de cette association qui est bénéfique, car il limite de manière plus importante l'augmentation de l'indice de consommation chez les animaux infectés, et ce quel que soit le ratio. En effet, l'indice de consommation pour les poulets des lots C à E à qui on 20 a administré les plantes Camellia oleifera et Trigonella foenum-graecum a augmenté de respectivement 40,83%, 33,66% et 28,33% par rapport au témoin Ti. Cela est bien plus faible que pour les poulets des lots A et B. Les réductions de l'indice de consommation induites par l'administration combinée de Camellia oleifera et Trigonella foenumgraecum sont respectivement de 46,49%, 53,66% et 58,99% par rapport au témoin T2. 25 Cette expérimentation a mis en évidence l'effet de synergie entre Camellia oleifera et Trigonella foenum-graecum, c'est-à-dire l'effet de l'association de ces deux plantes est plus important que la somme des effets individuels de chacune de ces plantes. 30 II - Amélioration de la capacité hémolytique par l'association de Camellia oleifera et Trigonella foenum-araecum Un second test réalisé in vitro portant sur la capacité hémolytique des plantes Camellia oleifera et Trigonella foenum-graecum a permis de confirmer la 35 présence d'un effet synergique entre ces deux plantes. 14 Le test de capacité hémolytique consiste à mettre des échantillons de Camellia oleifera et Trigonella foenum-graecum au contact d'une solution d'hématies afin d'observer la capacité de lyse des hématies de l'échantillon testé. On déduit de cet essai une dose hémolytique « DH50 » qui est la dose 5 permettant de lyser 50% des hématies de solution. Ce test permet de mesurer l'effet d'un actif sur la membrane cellulaire de globules rouges qui ont une structure similaire à la membrane cellulaire des coccidies. La DH50 des plantes seules a tout d'abord été déterminée, puis les DH50 d'associations des deux plantes selon les ratios (tels que détaillés dans le tableau 1 ci-10 dessous) de la masse de Camellia oleifera sur celle de Trigonella foenum-graecum ont été calculées théoriquement avant d'être déterminées également. Pour chacun des ratios, la DH50 théorique a été calculée à partir des DH50 déterminées pour chaque plante seule, en fonction de leurs régressions linéaires et de leurs rendements d'extractions respectifs. 15 Le tableau 1 détaille les données de DH50 calculée et observée en fonction du ratio considéré : DH50 DH50 Différence entre DH50 (1.1g/mL) (1.1g/mL) théorique théorique observée et DH50 observée (%) Ratio = 1 2300 734 -68,09% Ratio = 2 1560 483 -69,04% Ratio = 3 935 371 -60,32% Tableau 1 détaillant les données de DH50 théorique et observée en fonction du ratio considéré 20 On observe que pour chacun des ratios testés, la DH50 théorique est bien plus élevée que la DH50 observée. En effet, pour le ratio 1, on observe que la DH50 mesurée lors du test est plus faible de 68,09% par rapport à la DH50 théorique. Pour le ratio 2, elle est plus faible 25 de 69,04% et pour le ratio 3, elle est plus faible de 60,32%. Le fait que les DH50 observées soient plus faibles que les DH50 théoriques signifie que l'association des deux plantes Camellia oleifera et Trigonella foenumgraecum présente une efficacité supérieure à ce que l'on pouvait attendre selon les calculs théoriques. 30 Cette expérimenation confirme également que l'association REVENDICATIONS1. Additif alimentaire destiné à l'animal, en particulier à la volaille, caractérisé en ce qu'il comprend au moins une saponine et un composé ayant des propriétés antioxydantes. 2. Additif alimentaire selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'additif alimentaire comprend au moins un extrait de graines, de feuilles, de fruits, de tiges ou de racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, d'une plante qui contient 10 des saponines. 3. Additif alimentaire selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que la saponine est choisie parmi les saponines des plantes Aesculus hippocastanum, Argania spinosa, Calendula officinalis, Camellia oleifera, Chenopodium quinoa, 15 Gypsophila paniculata, Medicago sativa, Melilotus officinalis, Primula veris, Quillaja saponaria, Saponaria officinalis, Saponaria vaccaria, Trigonella foenum-graecum et Yucca schidigera. 4. Additif alimentaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, 20 caractérisé en ce qu'il comprend au moins : - une saponine de la plante de Camellia oleifera ; - une saponine de la plante de Trigonella foenum-graecum ; - le composé ayant des propriétés antioxydantes. 25 5. Additif alimentaire selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'il comprend au moins : - des graines, des feuilles, des tiges ou des racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Camellia oleifera qui contiennent des saponines ; 30 - des graines, des feuilles, des tiges ou des racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Trigonella foenum-graecum qui contiennent des saponines ; - le composé ayant des propriétés antioxydantes. 35 6. Additif alimentaire selon la revendication 4 ou 5, caractérisé en ce qu'il comprend : 16 - un extrait de graines, feuilles, tiges ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Camellia oleifera qui contient des saponines ; - un extrait de graines, feuilles, tiges, ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Trigonella foenum graecum qui contient des 5 saponines ; - le composé ayant des propriétés antioxydantes. 7. Additif alimentaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que le composé ayant des propriétés antioxydantes est un extrait de 10 plante qui est choisi parmi les extraits des plantes de Castanea sativa, Camellia sinensis, Rosmarinus officinalis ou d'Olea europea. 8. Additif alimentaire selon la revendication 7, caractérisé en ce que l'extrait de plante est un extrait de Castanea sativa. 15 9. Additif alimentaire selon l'une quelconque des revendications 4 à 8, caractérisé en ce que le ratio du pourcentage massique des saponines de Camellia oleifera sur le pourcentage massique des saponines de Trigonella foenum-graecum est compris entre 0,02 : 19 et 10 : 0,2, de préférence entre 0,1 : 9,5 et 4,5 : 0,6. 20 10. Additif alimentaire selon l'une quelconque des revendications 4 à 9, caractérisé en ce que le ratio de la somme des pourcentages massiques des saponines de Camellia oleifera et de Trigonella foenum-graecum sur le pourcentage massique du composé ayant des propriétés antioxydantes est compris entre 0,22 : 25 et 29 : 1, de 25 préférence entre 0,7 : 15 et 14 : 1. 11. Additif alimentaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisé en ce qu'il comprend en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale dudit additif : 30 - entre 0,22% et 29%, de préférence entre 0,7% et 14%, de saponines ; - entre 1% et 25%, de préférence entre 1% et 15%, du composé ayant des propriétés antioxydantes. 12. Additif alimentaire selon l'une quelconque des revendications 4 à 11, 35 caractérisé en ce qu'il comprend en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale dudit additif : 17 - entre 0,02% et 10%, de préférence entre 0,1% et 4,5%, de saponines de Camellia oleifera ; - entre 0,2% et 19%, de préférence entre 0,6% et 9,5%, de saponines de Trigonella foenum-graecum ; 5 - entre 1% et 25%, de préférence entre 1% et 15%, du composé ayant des propriétés antioxydantes. 13. Additif alimentaire selon l'une quelconque des revendications 2 à 12, caractérisé en ce qu'il comprend en pourcentages massiques exprimés par rapport à la 10 masse totale dudit additif - entre 20 % et 99 %, de préférence entre 60% et 99%, d'extrait de graines, feuilles, tiges, ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, d'une plante qui contient des saponines ; - entre 1% et 25%, de préférence entre 1% et 15%, du composé ayant 15 des propriétés antioxydantes. 14. Additif alimentaire selon l'une quelconque des revendications 6 à 13, caractérisé en ce qu'il comprend en pourcentages massiques exprimés par rapport à la masse totale dudit additif 20 - entre 2 % et 50 %, de préférence entre 2% et 30%, d'extrait de graines, feuilles, tiges, ou racines, prises seules ou en mélanges de celles-ci, de Camellia oleifera ; - entre 20 % et 95 %, de préférence entre 60% et 95%, d'extrait de graines, feuilles, tiges, ou racines, prises seules ou en mélanges de 25 celles-ci, de Trigonella foenum graecum ; - entre 1% et 25%, de préférence entre 1% et 15%, du composé ayant des propriétés antioxydantes ; - optionnellement entre 0,01% et 75%, de préférence entre 0,01% et 50%, d'un composé choisi parmi les excipients tels que la silice, l'argile, 30 les conservateurs, les farines et les co-produits céréaliers. 15. Aliment pour animal, de préférence une volaille, caractérisé en ce qu'il comprend entre 0,01 et 1,00 kg, de préférence entre 0,10 et 0,50 kg, d'additif alimentaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 14 par tonne d'aliment. 35 18 16. Additif alimentaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 14 ou aliment selon la revendication 15 pour le traitement préventif ou curatif de la coccidiose, de préférence la coccidiose de la volaille. 5