Brevet FR3068214A1 — publié le 20190104

La présente invention a pour objet un mélange antibactérien contenant du 4-(3-éthoxy-4- hydroxyphényl)butan-2-one et un composé de chlorhexidine particulier, ainsi qu'une composition cosmétique contenant un tel mélange. Le 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one (composé cétonique) est une substance in- téressante en tant que conservateur de compositions cosmétiques pour protéger les compositions de la contamination microbienne, comme décrit dans la demande VVO 2011/039445. Toutefois, il est souhaitable de pouvoir incorporer ledit composé cétonique en concentra- tion réduite dans des compositions, notamment cosmétiques ou dermatologiques, tout en conservant une bonne performance de conservation antimicrobienne. Il est donc recherché à cet effet des associations du composé cétonique avec d'autres composés présentant une efficacité antimicrobienne. Les inventeurs ont découvert, de façon inattendue, que l'association du 4-(3-éthoxy-4- hydroxyphényl)butan-2-one avec un composé de chlorhexidine choisi parmi la chlorhexidine digluconate et la chlorhexidine chlorhydate permet d'obtenir un mélange antimicrobien présentant une synergie d'activité antimicrobienne, en particulier sur les moisissures, notamment sur Aspergillus figer, et sur les levures, en particulier sur Candida albicans. Les résultats de l'exemple 1 décrit ci-après montrent l'activité antimicrobienne synergique obtenue avec les mesures de concentrations minimales inhibitrices (CMI) faites avec plusieurs mélanges. L'activité antimicrobienne est considérée comme étant synergique lorsque le mélange antimicrobien permet d'obtenir un pourcentage de croissance de la souche inférieur ou égal à 25 %, voire inférieur ou égal à 20 %. La demande FR-A-2962328 et FR-A- 2973229 décrivent une compositon cosmétique pour traiter les odeurs corporelles liées à la transpiration humaine comprenant un composé 2-alcoxy-4-alkylcétonephénol , et éventuellement un actif déodorant additionnel tel que la chlorhexidine et ses sels. Ces documents ne décrivent pas spécifiquement un mélange antimicrobien constitué de l'association du 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one avec un composé de chlorhexidine choisi parmi la chlorhexidine digluconate et la chlorhexidine chlorhydate, et ne suggèrent pas non plus qu'un tel mélange présente une activité antimicrobienne synergique sur les moisissures, notamment sur Aspergillus figer, et sur les levures, en particulier sur Candida albicans. De façon plus précise, l'invention a pour objet un mélange antimicrobien comprenant , ou consistué (ou consistant en), de la 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one et un composé de chlorhexidine choisi parmi la chlorhexidine digluconate et la chlorhexidine chlor40 hydate. 2 L'invention a également pour objet une composition, notamment cosmétique, comprenant dans un milieu physiologiquement acceptable, le dit mélange décrit précédemment. L'invention a encore pour objet un procédé de traitement cosmétique non thérapeutique 5 des matières kératiniques comprenant l'application sur les matières kératiniques d'une composition telle que décrite précédemment. Le procédé peut être un procédé cosmétique de soin ou de maquillage ou de nettoyage des matières kératiniques. La 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one est un composé de formule 10 HO Le composé de chlorhexidine est choisi parmi la chlorhexidine digluconate et la chlorhexidine chlorhydate. Avantageusement, la 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one et l'acide dehydroacétique ou l'un de ses sels sont présents dans ledit mélange en une teneur telle que le ratio pondéral 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one / composé de chlorhexidine va de 2 à 3500, de préférence va de 2 à 250, et préférentiellement va de 2 à 220. Le mélange antimicrobien selon l'invention présente une synergie d'activité antimicrobienne, en particulier sur les moisissures, notamment sur Aspergillus figer, et sur les levures, en particulier sur Candida albicans. 25 Selon un premier mode de réalisation de l'invention, le composé de chlorhexidine présent dans le mélange antimicrobien est la chlorhexidine digluconate. Le mélange antimicrobien peut avoir un ratio pondéral 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl) butan-2-one / chlorhexidine digluconate allant de 25 à 150, de préférence allant de 30 à 130, 30 et préférentiellement allant de 45 à 90. Un tel mélange présente une activité antimicro- bienne synergique sur les levures, notamment sur Candida Albican. Le mélange antimicrobien peut avoir un ratio pondéral 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl) butan-2-one / chlorhexidine digluconate allant de 10 à 75, de préférence allant de 10 à 60, et 35 préférentiellement allant de 10 à 40. Un tel mélange présente une bonne activité antimi- crobienne synergique sur les moisissures, notamment sur Aspergillus figer. Selon un deuxième mode de réalisation de l'invention, le composé de chlorhexidine présent dans le mélange antimicrobien est la chlorhexidine chlorhydrate. 15 20 3 Le mélange antimicrobien peut avoir un ratio pondéral 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl) butan-2-one / chlorhexidine chlorhydrate allant de 60 à 350, de préférence allant de 80 à 250, préférentiellement allant de 90 à 220. Un tel mélange présente une bonne activité 5 antimicrobienne synergique sur les levures, notamment sur Candida Albican. Le mélange antimicrobien peut avoir un ratio pondéral 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl) butan-2-one / chlorhexidine chlorhydrate allant de 2 à 120, de préférence allant de 2 à 100, préférentiellement allant de 2 à 85. Un tel mélange présente une bonne activité antimicro- 10 bienne synergique sur les moisissures, notamment sur Aspergillus figer. Le composé 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one peut être présent dans la composition selon l'invention, en une teneur allant de 0,01 % à 5 % en poids, par rapport au poids total de la composition, de préférence allant de 0,01 % à 3 % en poids, préférentiellement 15 allant de 0,01 à 2, 5 % en poids, et plus préférentiellement allant de 0,01 à 2 % en poids. L'invention a aussi pour objet une composition comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, le mélange antimicrobien décrit précédemment. 20 On entend par milieu physiologiquement acceptable, un milieu compatible avec les ma- tières kératiniques d'êtres humains tels que la peau, le cuir chevelu, les cheveux, les ongles. Le dit milieu peut comprendre un ou plusieurs ingrédients additionnels, distinct du composé cétonique et dudit composé de chlorhexidine. 25 La composition peut comprendre au moins un ingrédient additionnel choisi parmi l'eau, les huiles, les polyols ayant de 2 à 10 atomes de carbone, les gélifiants, les tensioactifs, les polymères filmogènes, les matières colorantes, les parfums, les charges, les filtres UV, les extraits végétaux, les actifs cosmétiques et dermatologiques, et les sels. 30 La composition selon l'invention peut comprendre une phase aqueuse. La composition peut comprendre de l'eau qui peut être présente en une teneur allant de 5 % à 90 % en poids, par rapport au poids total de la composition, et de préférence allant de 35 % à 75% en poids. 35 La composition peut comprendre en outre un polyol miscible à l'eau à la température ambiante (25 °C) notamment choisi parmi les polyols ayant notamment de 2 à 10 atomes de carbones, de préférence ayant de 2 à 6 atomes de carbone, tels que la glycérine, le propylène glycol, le 1,3-propanediol, le butylène glycol, le pentylène glycol, l'hexylène glycol, 40 le dipropylène glycol, le diéthylène glycol, la diglycérine. Les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous forme d'émulsions huiledans-eau (H/E) ou eau-dans-huile (E/H) ou multiple (triple : E/H/E ou H/E/H), de solutions huileuses, de gels huileux, de solutions aqueuses, de gels aqueux, de compositions so- lides. Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles. 4 Les compositions selon l'invention peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème blanche ou colorée, d'une pommade, d'un lait, d'une lotion, d'un sérum, d'une pâte, d'une mousse. Elles peuvent être éventuellement appliquées sur la peau sous 5 forme d'aérosol. Elles peuvent aussi se présenter sous forme solide, et par exemple sous forme de stick ou de poudre compacte. La composition selon l'invention peut notamment se présenter sous la forme : - d'un produit de maquillage, notamment de la peau du visage, du corps ou des lèvres ou 10 des cils - d'un gel ou lotion après-rasage; de produit de rasage ; - d'un déodorant (stick, roll-on, aérosol) - d'une crème dépilatoire; - sous la forme d'une composition d'hygiène corporelle telle qu'un gel douche ou un 15 shampooing; - d'une composition pharmaceutique; - d'une composition solide telle qu'un savon ou un pain de nettoyage; - d'une composition aérosol comprenant également un agent propulseur sous pression.; - d'une lotion de mise en plis, d'une crème ou d'un gel coiffant, d'une composition de tein- 20 ture, d'une composition de permanente, d'une lotion ou d'un gel antichute, d'un après shampooing ; - d'une composition de soin ou de nettoyage de la peau. L'invention a aussi pour objet un procédé de préparation d'une composition, notamment 25 cosmétique ou dermatologique, comprenant une étape de mélange du 4-(3-éthoxy-4- hydroxyphényl)butan-2-one, dudit composé de chlorhexidine, et d'un ou plusieurs ingrédients additionnels, notamment cosmétiques ou dermatologiques, tels que ceux décrits précédemment. 30 L'invention est illustrée plus en détail dans l' exemple suivant. Les teneurs des ingrédients sont exprimées en pourcentage pondéral. Exemple 1: détermination de la synergie d'activité antimicrobienne en CMI 35 La démonstration d'un effet de synergie d'activité antimicrobienne avec un mélange de 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one (appelée substance A) et de c :ine di- (appelée substance B) et un mélange de 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2- one (appelée substance A) et de chlorhexidine chlorhydate (appelée substance C) est réalisé par le calcul de l'indice de synergie (ou FIC index) selon la formule suivante : 40 FIC Index = (CMIa avec B/CMIa) + (CMIb avec A/CM1b) avec : - CMIa avec B: concentration minimale en produit A dans l'association A + B per- 45 mettant d'obtenir un effet inhibiteur 5 - CMIb avec A: concentration minimale en produit B dans l'association A + B permettant d'obtenir l'effet inhibiteur. - CMIa : concentration minimale inhibitrice du produit A seul. - CMIb : concentration minimale inhibitrice du produit B seul. 5 Cette formule a été décrite pour la première fois dans l'article de F.C. Kull, P.C. Eisman, H.D. Sylwestrowka, and R.L. Mayer, Applied Microbiology 9:538-541, 1961. Pour chaque composé testé seul, la CMI est considérée comme la première concentration permettant l'obtention d'un pourcentage de croissance microbienne inférieur ou égal 10 à 25%,. Concernant les associations testées, CMIa avec b et CMIb avec a sont les concentrations respectives de A et de B dans les associations permettant l'obtention d'un pourcentage de croissance microbienne inférieur ou égal à 25%. 15 Interprétation du FIC Index : Lorsque la valeur du FIC index est inférieure ou égale à 1, on considère que l'association des composés testés présente un effet synergique. La synthèse des résultats obtenus est présentée dans les tableaux suivants. 20 L'association des composés A et B et l'association des composés A et C ont été testées sur les souches suivantes : Aspergillus figer et Candida albicans. On a utilisé la souche microbienne Aspergillus figer ATCC 6275, et un milieu de culture liquide bouillon Sabouraud additionné de monopalmitate de sorbitane polyoxyéthyléné (20 25 0E) (Tween 40 de chez Croda) et de Phytagel© BioReagent, à double concentration. On a utilisé la souche microbienne Candida albicans ATCC 10231 et un milieu de culture liquide bouillon Sabouraud à double concentration. .(soit un mélange de 5 g de Phytagel +0,6 g tween 40 + 60g bouillon Sabouraud). On utilise une microplaque 96 puits à une température d'incubation de 32,5 °C. 30 La durée d'incubation de la microplaque est : - de 24 à 48h en aérobiose pour Aspergillus figer; - de 18 à 24h en aérobiose pour Candida albicans. Essais Pour chaque composé : 35 A = composé 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one B = composé chlorhexidine ( aconate (en solutio.. '20 % m ( ive) C = composé chlorhexidine chlorhydate On a préparé une solution mère à 10 % (poids/volume) en mélangeant 1 g de composé dans 9 ml de solution aqueuse d'agar à 1%0 . des dilutions successives ont été effectuées 40 avec la solution d'agar à 1%0 . - Essais des composés A, B et C seul 50pL de chacune des solutions filles obtenues contenant le composé A ou B ou C est ajouté dans les puits de la microplaque. On y ajoute également 100p1 de bouillon nutritif liquide de Sabouraud ensemencé par la souche Aspergillus figer et 50pL de solution 45 aqueuse d'agar à 1%0 . 6 - Essais des composés A + B ou A + C en mélange 50pL de chacune des solutions filles obtenues contenant le composé A et 50pL de chacune des solutions filles obtenues contenant le composé B ou C sont ajoutées dans les puits de la microplaque. On y ajoute également 100p1 de bouillon nutritif liquide de Sabou- 5 raud ensemencé à double concentration par la souche Aspergillus figer. Témoin de croissance microbienne On a également réalisé un témoin positif de croissance microbienne. Le témoin positif de croissance microbienne correspond au mélange de 100p1 d'une solution aqueuse d'agar 1%0 avec 100p1 de bouillon nutritif liquide de Sabouraud ensemencé à double concentra- 10 tion par la souche Aspergillus figer en l'absence des composés A, B et C. Témoin d'absorbance des composés A, B et C seul On a réalisé parallèlement un témoin d'absorbance des composés A, B et C seul. Ce témoin correspond à 100p1 de bouillon nutritif liquide de Sabouraud stérile à double concentration + 100p1 du composé A ou B ou C à double concentration. 15 Dans les trois cas (témoin absorbance, témoin de croissance et essai) le volume final présent dans chacun des puits de la microplaque est de 200pL. Dans les deux cas (essai et témoin), l'inoculum représente la concentration de la souche Aspergillus figer présente dans le volume final des puits (200pL) et est compris entre 2 et 6.105 ufc/ml en Aspergillus figer. 20 La concentration minimale inhibitrice (CMI) de chaque composé A, B et C seul et en as- sociation a été déterminée de façon connue à l'aide des mesures de densité optique à la longueur d'onde 620nm. Le test tel que décrit ci-dessus (essais, témoins absorbance et témoin de croissance) a de 25 nouveau été réalisé pour tester les associations A + B et A + C sur la souche Candida albicans. On a obtenu les résultats suivants : (pourcentage massiques en matière active) 30 A) Mélanges avec le composé B: chlorhexidine digluconate Candida albicans concentra- 0 A 0,025A 0,05A 0,1 A tions testées (en % poids) 0 B 63 47 22 0,00025 B 59 56 32 14 0,0005 B 32 16 6 1 (FIC 0,75) (FIC 1) 0,001 B 3 0 0 1 CMI de A seul e n % CMI de B seul en % CMI de composé chaque en mélange B% FIC Index A% 0,1 0,001 0,025 0,0005 0,75 Ratio A/B = 50 7 Les résultats obtenus montrent une synergie de l'activité inhibitrice pour les mélanges : i) 0,025 % de A et 0,0005 % de B soit ratio A/B = 50 ii) 0,05 % de A et 0,0005 % de B soit ratio A/B = 100 5 Aspergillus figer concentra- tions testées (en % poids) 0 A 0,0625A 0,125A 0,25 A 0 B 83 49 5 0,0025B 98 1 1 2 (FIC 0,5 (FIC 0,75) 0,005B 98 1 1 1 (FIC 0,75) (FIC 1) 0,01 B 7 1 2 2 CMI de A seul e n % CMI de CMI de composé chaque en mélange B% FIC Index B seul en % A% 0,25 0,01 0,0625 0,0025 0,50 Ratio A/B = 25 10 Les résultats obtenus montrent une synergie de l'activité inhibitrice pour les mélanges : i) 0,0625 % de A et 0,005 % de B soit ratio A/B = 12,5 ii) 0,125 % de A et 0,005 % de B soit ratio A/B = 25 iii) 0,0625 % de A et 0,0025 % de B soit ratio A/B = 25 iv) 0,125 % de A et 0,0025 % de B soit ratio A/B = 50 15 B) Mélanges avec le composé C: chlorhexidine chlorhydate 20 Candida albicans concentrations testées (en % poids) 0 A 0,025A 0,05A 0,1A 0,2 A OC 83 70 50 10 0,00025 C 82 67 62 32 1 0,0005 C 64 44 22 1 0 (FIC 0,75 ) (FIC 1) 0,001 C 14 0 0 0 0 CMI de A seul e n % CMI de CMI de composé chaque en mélange C% FIC Index C seul en % A% 0,2 0,001 0,05 0,0005 0,75 Ratio A/C = 100 8 Les résultats obtenus montrent une synergie de l'activité inhibitrice pour les mélanges : i) 0,05 % de A et 0,0005 % de C soit ratio A/C = 100 ii) 0,1 % de A et 0,0005 % de C soit ratio A/C = 200 5 As er illus ni er concentrations testées (en % poids) 0 A 0,025 A 0,05 A 0,1 A 0,2 A 0,4 A OC 228 109 73 72 6 0,0250 194 3 3 2 2 8 (FIC 0,19) (FIC 0,25) (FIC 0,37) (FIC 0,56) 0,050 121 3 3 3 2 1 (FIC 0,31) (FIC 0,37) (FIC 0,5) (0,75) 0,10 137 2 3 2 2 2 (FIC 0,56) (FIC 0,62) (FIC 0,75) (FIC 1) 0,2C 2 2 2 4 4 8 CMI de A seul e n % CMI de CMI de composé chaque en mélange 0% FIC Index C seul en % A% 0,4 0,02 0,025 0,0025 0,19 Ratio A/C = 10 10 Les résultats obtenus montrent une synergie de l'activité inhibitrice pour les mélanges : i) 0,025 % de A et 0,01 % de C soit ratio A/C = 2,5 ii) 0,05% de A et 0,01 % de C soit ratio A/C = 5 iii) 0,1 % de A et 0,01 % de C soit ratio A/C = 10 iv) 0,2 % de A et 0,01 % de C soit ratio A/C = 20 15 v) 0,025% de A et 0,05% de C soit ratio A/C = 5 vi) 0,05 % de A et 0,05 % de C soit ratio A/C = 10 vii) 0,1 % de A et 0,05 % de C soit ratio A/C = 20 viii) 0,2 % de A et 0,05 % de C soit ratio A/C = 40 ix) 0,025 % de A et 0,0025 % de C soit ratio A/C = 10 20 x) 0,05 % de A et 0,0025 % de C soit ratio A/C = 20 xi) 0,1 % de A et 0,0025 % de C soit ratio A/C = 40 xii) 0,2 % de A et 0,0025 % de C soit ratio A/C = REVENDICATIONS1. Mélange antimicrobien comprenant de la 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one et un composé de chlorhexidine choisi parmi la chlorhexidine digluconate et la chlorhexidine chlorhydate. 2. Mélange selon la revendication précédente, caractérisé en ce qu'il comprend du 4-(3- éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one et un composé de chlorhexidine choisi parmi la chlorhexidine digluconate et la chlorhexidine chlorhydate en quantités telles que le rapport pondéral 4-(3-éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one / composé de chlorhexidine va de 2 à 3500, de préférence va de 2 à 250, et préférentiellement va de 2 à 220. 3. Mélange antimicrobien selon l'une des revendications précédentes, caracétrisé en ce qu'il présente une activité antimicrobienne sur les moisissures, notamment sur Aspergillus figer, et sur les levures, en particulier sur Candida albicans. 4. Mélange antimicrobien selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le composé de chlorhexidin est la chlorhexidine digluconate. 5. Mélange selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'il a un ratio pondéral 4-(3- éthoxy-4-hydroxyphényl) butan-2-one / chlorhexidine digluconate allant de 25 à 150, de préférence allant de 30 à 130, et préférentiellement allant de 45 à 90. 6. Mélange selon la revendication précédente, caractérisé en ce qu'il présente une activité antimicrobienne sur les levures, notamment sur Candida Albican. 7. Mélange selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'il a un ratio pondéral 4-(3- éthoxy-4-hydroxyphényl) butan-2-one / chlorhexidine digluconate allant de 10 à 75, de préférence allant de 10 à 60, et préférentiellement allant de 10 à 40. 8. Mélange selon la revendication précédente, caractérisé en ce qu'il présente une activité antimicrobienne sur les moisissures, notamment sur Aspergillus figer. 9. Mélange antimicrobien selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le composé de chlorhexidin est la chlorhexidine chlorhydrate. 10. Mélange selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'il a un ratio pondéral 4-(3- éthoxy-4-hydroxyphényl) butan-2-one / chlorhexidine chlorhydrate allant de 60 à 350, de préférence allant de 80 à 250, préférentiellement allant de 90 à 220. 11. Mélange selon la revendication précédente, caractérisé en ce qu'il présente une activité antimicrobienne sur les levures, notamment sur Candida Albican. 12. Mélange selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'il a un ratio pondéral 4-(3- éthoxy-4-hydroxyphényl) butan-2-one / chlorhexidine chlorhydrate allant de 2 à 120, de préférence allant de 2 à 100, préférentiellement allant de 2 à 85. 10 13. Mélange selon la revendication précédente, caractérisé eh ce qu'il présente une activité ,antimicrobienne sur les moisissures, notamment sur Aspergillus.niger. 14. Composition comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, un mélange 5 antimicrobien selon l'une des revendications 1 à 13. 15. Composition selon la revendication précédente, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un ingrédient additionnel choisi parmi l'eau, lés huiles, les polyols ayant de 2 à 10 atomes de carbone, les gélifiants, les tensioactifs, les polymères filmogènes, les Matières. 10 colorantes, les: parfums, les charges, les filtres UV, les extraits végétaux, les actifs cosmé- tiques et dermatologiques, et les Sels. 16. Composition selon l'une des revendication 14 ou 15, caractérisée en ce que la 4-(3- éthoxy-4-hydroxyphényl)butan-2-one est présente en une teneur allant de 0,01 % à 5 % en 15 poids, par rapport au poids total de la composition, de préférence allant de 0,01 % à 3 % en poids, et préférentiellement allant de 0,01 à 2,5 % en poids. 17. Utilisation d'un mélange antimicrobien, selon l'une quelconque des revendications 1 à 13 pour la conservation d'une composition Comprenant un milieu physiologiquement accep20 table.