Brevet FR3063637A1 — publié le 20180914

UTILISATION D'EXTRAITS D'AGAVE POUR UNE APPLICATION CAPILLAIRE Domaine technique La présente invention se rapporte à une composition cosmétique ou dermatologique comprenant des extraits d'agave, ainsi qu'à une utilisation cosmétique non thérapeutique d'un extrait d'agave pour une amélioration de la croissance du cheveu et/ou de l'aspect du cheveu et/ou du cuir chevelu. La présente invention trouve une application dans le domaine de la cosmétique et de la dermatologie, plus particulièrement de la cosmétique capillaire. Dans la description ci-dessous, les références entre crochets (E]) renvoient à la liste des références présentée à la fin du texte. Etat de la technique La peau est un organe vital à part entière qui se compose de trois tissus distincts, assumant chacun différents rôles grâce à différents types cellulaires et différentes structures. Le tissu le plus en surface et donc le plus exposé est l'épiderme. Cet épithélium pluristratifié (Malpighien) et kératinisé, dont la partie la plus externe est la couche cornée, se compose de différentes cellules associées à de nombreuses fonctions de barrière et de protection. Les cellules majoritaires sont les kératinocytes qui, par leurs processus de prolifération/différenciation, aboutissent à la formation de la couche cornée connue pour ses propriétés hydrophobes, son aspect compacte et étanche. Le rôle majeur de l'épiderme est d'apporter à la peau, et donc au corps humain, une première ligne de protection contre les agressions extérieures, comme les agressions physiques, chimiques, hydriques et bactériologiques, notamment via la différenciation et le stratum corneum. 3063637 2 En position intermédiaire, le derme est aussi un tissu conjonctif investi majoritairement de fibroblastes et de protéines matricielles donnant à la peau ses qualités de compressibilité et d'élasticité connues. Au sein de la trame conjonctive, s'intercalent aussi d'autres cellules et structures, tel un 5 important réseau circulatoire et nutritif, constitué des vaisseaux sanguins et des capillaires lymphatiques, ainsi que les annexes épidermiques : cheveux, poils, ongles, glandes pilosébacées et glandes sudoripares, qui prennent naissance dans le derme profond. L'hypoderme, situé en profondeur et constitué en majeure partie de 10 lobules graisseux (adipocytes), assure une fonction de support primaire, de protection mécanique et thermique et joue aussi un rôle de stockage des réserves énergétiques rapidement mobilisables pour tous les besoins biologiques, comme par exemple le renouvellement cellulaire, la défense de l'organisme ou la contraction musculaire. 15 Le cuir chevelu est la partie de la peau située sur le crâne qui développe une pilosité particulière : les cheveux. Parmi les annexes de la peau, les follicules pileux présentent la particularité d'être une invagination tubulaire de l'épiderme qui s'enfonce dans le derme voire l'hypoderme. Cette invagination épidermique se renfle à son extrémité interne pour former 20 un bulbe composé de cellules épithéliales, les kératinocytes qui vont proliférer et se kératiniser pour former le cheveu. Le cycle de vie du cheveu comprend trois phases : la phase de croissance dite anagène (dure 3 à 5 ans), la phase de dégradation jusqu'à l'expulsion dite catagène (dure 15 à 20 jours) puis la phase de repos dite télogène (dure 2 à 3 mois). La 25 croissance du cheveu est possible grâce aux interactions entre les kératinocytes, les fibroblastes de la papille dermique et les cellules endothéliales des vaisseaux présents dans cette zone. En effet, lors de la phase anagène, des signaux sont envoyés par les fibroblastes de la papille dermique pour stimuler le processus d'angiogenèse qui va permettre 30 d'alimenter la naissance puis la croissance du cheveu. La migration des cellules endothéliales vers le bulbe du follicule pileux et la formation des 3063637 3 vaisseaux jouent donc des rôles prépondérants dans cette phase de croissance. De par leur position externe et leur longue durée de vie, les cheveux accumulent les dégâts engendrés par les stress environnementaux comme 5 les UVs, la pollution, le froid, mais également par les traitements esthétiques (séchage, frisage, lissage, coloration ...) ou l'utilisation de produits agressifs (shampoing trop récurrents ou mal adaptés). De plus, ils sont affectés par des facteurs internes comme le stress, les modifications hormonales ou encore le type d'alimentation. 10 Actuellement il existe peu de produits cosmétiques stimulant la croissance du cheveu, il s'agit surtout de traitements hormonaux, de compléments alimentaires ou de dérivés d'acides aminés (taurine ou arginine) issus de processus de biotechnologie non naturels. Il reste donc un réel besoin de trouver de nouvelles compositions et/ou 15 composés d'origine végétale et/ou naturels permettant d'assurer et/ou d'améliorer de façon effective la croissance, la brillance et la douceur des cheveux. Description de l'invention 20 La présente invention a précisément pour but de répondre à ces besoins et inconvénients de l'art antérieur. Les inventeurs sont les tout premiers à utiliser des extraits d'agave permettant précisément de répondre efficacement aux besoins précités. L'agave est une plante monocotylédone, actuellement classée dans la 25 famille des Agavaceae. Les espèces les plus courantes sont Agave tequilana, Agave americana et Agave attenuata. L'agave est endémique sur le continent américain et est présente du sud du Canada jusqu'au Nord de l'Amérique du Sud et les îles Caraïbes, en particulier au Mexique et dans toute l'Amérique centrale (Maria de la Soledad ALONSO GUTIÉRREZ, 30 thèse, « Valorisation de la bagasse de l'Agave tequilana W. cv azul : 3063637 4 caractérisation, étude de la digestibilité et de la fermentation des sucres », 2005 ( [1])). Les agaves présentent une partie souterraine ayant la forme d'un rhizome, et d'une partie aérienne présentant de longues tiges et de grandes 5 feuilles fibreuses, disposées en forme de rosette et qui finissent en épine. Les fleurs se trouvent à la fin de la tige et sont de couleur jaune-vert ( [1]). L'inuline est un polysaccharide de réserve trouvé dans les plantes de la famille des Artéracées, notamment dans les bulbes et racines de dahlias, de topinambour, d'artichauts, de pissenlits et dans la chicorée, cette dernière 10 étant la source la plus utilisée industriellement. Constituée de 30 à 40 unités de fructose liés par des liaisons glycosidiques en 13 (1-2), et d'une à deux molécules de glucose placées en bout de chaîne, l'inuline est en réalité un glucofructosane. Les inulines d'agaves sont des réserves glucidiques de type fructanes (également appelées fructosanes). Des polyfructosanes ont 15 été extraits de l'Agave tequilana Weber var. azul, âgée de 8 ans. La caractérisation de ces fructosanes a donné comme résultat un degré de polymérisation compris entre 3 et 29, et une composition complexe de fructo-oligosacharides avec des liaisons de p (1-2) et p (2-6) différentes des inulines rencontrées dans les autres plantes (b5pez, M.G. ; Mancilla, N.A. ; 20 Mendoza-Diaz, G. (2003). : Molecular structures of fructans from Agave tequilana Weber var. azul. J. Agric. Chem. 51, 7835-7840 ( [2] ) ; ( [1] )). Les inuline de chicorée ont une structure différente de celle des inulines d'agave. Les inulines de chicorée présentent en effet des chaines linéaires de fructoses liées par des liaisons beta 2-1 alors que les inulines d'agave, 25 même si elles sont composées également principalement de fructose, ont des structres latérales branchées à la structure principale par des liaisons béta 2-6 (b5pez, M.G. et al. ( [2] )). Les inventeurs sont les tous premiers à avoir découvert que des extraits d'Agave possèdent de manière inattendue un effet d'amélioration 30 de la croissance et de l'aspect du cheveu et du cuir chevelu. 3063637 5 En effet, les inventeurs ont mis en évidence un effet des extraits d'Agave, notamment d'Agave tequilana, sur la formation des vaisseaux sanguins et la migration des cellules endothéliales, pour un effet de stimulation de la croissance du follicule pileux. 5 De plus, les inventeurs ont mis en évidence un effet des extraits d'Agave sur la stimulation du renouvellement des kératinocytes épidermiques, pour un effet sur la brillance et l'aspect du cheveu et du cuir chevelu. Ainsi, un premier objet de l'invention se rapporte à l'utilisation 10 cosmétique non thérapeutique d'un extrait d'Agave pour une amélioration de la croissance du cheveu et/ou de l'aspect du cheveu et/ou du cuir chevelu. On entend par « amélioration de la croissance du cheveu », toute amélioration, qualitative et/ou quantitative, de la vitalité et/ou de la pousse 15 du cheveu, en longueur et/ou en diamètre. Ces améliorations peuvent être mesurées par toute méthode de mesure de la pousse, de la densité des cheveux ou de leur répartition des phases connue de l'homme du métier, par exemple au moyen d'un trichogramme comprenant le prélèvement d'un coup sec une quarantaine de cheveux sur 3 zones spécifiques du cuir 20 chevelu pour étudier les racines et le diamètre des cheveux au microscope ou sur lecteur de microfiche, ou d'une macrophotographie avec rasage d'une petite zone qui est ensuite photographiée grâce à une caméra vidéo, pour comptabilisation exacte du nombre de cheveux et suivi avec un logiciel spécialisé, ou d'un phototrichogramme comprenant l'utilisation d'un logiciel 25 spécialisé (TricoscanTm) pour comptabiliser le nombre de cheveux total, après réalisation d'une macrophotographie avec rasage. On entend par « amélioration de l'aspect du cheveu » toute amélioration, qualitative et/ou quantitative, des propriétés optiques de réflexion et/ou tactiles de douceur et/ou de la régularité physique du cheveu 30 en général. Ces améliorations peuvent se mesurer par toute méthode de 3063637 6 mesure connue de l'homme du métier, par exemple par mesures de réflectance ou detribologie acoustique. On entend par « amélioration de l'aspect du cuir chevelu » une stimulation, qualitative et/ou quatitative, du renouvellement de l'épiderme du 5 cuir chevelu et/ou une amélioration de l'homogénéité et la régularité du cuir chevelu. Ces améliorations peuvent se mesurer par toute méthode de mesure connue de l'homme du métier, par exemple par photographies standardisées réalisées sur un appareil stéréotaxique permettant grâce à une distance fixe et à un éclairage standardisé des photographies globales 10 du cuir chevelu reproductibles avant ou après traitement. L'utilisation cosmétique de l'invention peut permettre de faire briller le cheveu et/ou adoucir le cheveu et/ou améliorer l'éclat du cheveu. Avantageusement, l'extrait d'Agave peut stimuler le renouvellement des kératinocytes, et/ou la formation des microtubules et/ou la migration des 15 cellules endothéliales. Sans vouloir être lié par l'explication d'un mécanisme d'action, il semble que la stimulation du renouvellement des kératinocytes et/ou la formation des microtubules et/ou la migration des cellules endothéliales soit à l'origine des effets cités précédemment. On entend par « extrait d'Agave » au sens de la présente invention, 20 tout extrait d'Agave permettant d'obtenir au moins l'un des effets cités précédemment. Il peut s'agir d'un extrait d'Agave tequilana, d'Agave americana ou d'Agave attenuata. Préférentiellement, il peut s'agir d'un extrait d'Agave tequilana. L'extrait d'Agave, notamment d'Agave tequilana, peut comprendre des 25 fructanes. Les fructanes peuvent comprendre des fructo-oligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10 et/ou des inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10. Ces fructanes sont donc issus directement de la plante, et sont donc naturels, c'est-à-dire non modifiés chimiquement, notamment ne comportant 30 pas de groupement à caractère hydrophobe greffé chimiquement. 3063637 7 Les fructo-oligosaccharides peuvent avoir par exemple un degré de polymérisation compris de 3 à 10. Les inulines peuvent avoir un degré de polymérisation supérieur strictement à 10, par exemple compris de 10 à 60, ou par exemple de 10 à 5 29. L'extrait d'Agave peut comprendre ou être constitué uniquement de fructo-oligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10. Alternativement, l'extrait d'Agave peut comprendre ou être constitué uniquement d'inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10. Par 10 exemple, le ratio fructo-oligosaccharides sur inulines peut être compris de 100/0 à 0/100, les bornes 0/100 et 100/0 n'étant éventuellement pas incluses. Le ratio peut être par exemple de 75/25, ou de 25/75, ou de 50/50. Avantageusement, un extrait d'inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10 peut en outre présenter un effet de protection 15 de la fibre capillaire par amélioration de l'hydrophobicité de la fibre capillaire. La Demanderesse a en effet identifié que de telles inulines possèdent une action hydrophobe permettant une protection de la fibre capillaire, et ce malgré leur caractère hydrophile. L'utilisation de ces inulines permet ainsi d'améliorer le caractère hydrophobe du cheveu, notamment par 20 amélioration de l'hydrophobicité de la fibre capillaire. L'utilisation d'un extrait d'Agave comprenant un ratio fructooligosaccharides sur inulines de 50/50 permettrait ainsi de combiner l'effet d'amélioration de la croissance du cheveu et/ou de l'aspect du cheveu et/ou du cuir chevelu et celui de protection de la fibre capillaire par amélioration 25 de l'hydrophobicité de la fibre capillaire. L'extrait d'Agave peut être obtenu par extraction des carbohydrates à partir de la bagasse, clarification de la liqueur brute obtenue à l'issue de l'extraction puis séparation pour obtenir une fraction de fructanes, notamment de fructo-oligosaccharides ayant un degré de polymérisation 30 inférieur ou égal à 10, et/ou une fraction d'inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10. 3063637 8 Un extrait d'Agave tequilana peut être un extrait commercial, par exemple le produit Metlos° (NEKUTLI), caractérisé par des fructooligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10, ou le produit Metlie (NEKUTLI) caractérisé par des inulines vraies ayant un 5 degré de polymérisation supérieur à 10. Il peut s'agir d'un mélange des produits MetloOet Metlie, dont le ratio peut être égal par exemple à 75/25, ou à 25/75, ou à 50/50. Un autre objet de l'invention se rapporte à une composition cosmétique ou dermatologique, améliorant notamment la croissance et/ou l'aspect de la 10 surface du cheveu et/ou du cuir chevelu, comprenant des extraits d'Agave tequilana et un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, ladite composition comprenant de 0,05 à 5 % en poids d'extraits d'Agave par rapport au poids total de la composition, ledit extrait d'agave comprenant des fructo-oligosaccharides ayant un degré de polymérisation 15 inférieur ou égal à 10 et/ou des inulines ayant un degré de polymérisation compris de 10 à 60. Toutes les caractéristiques d'extraits d'Agave mentionnées ci-avant pour l'utilisation de l'invention, ainsi que toutes les caractéristiques de l'utilisation d'un extrait décrites ci-avant, s'appliquent mutatis mutandis à la composition de l'invention. 20 On entend par « composition cosmétique », dans la présente invention, toute composition à visée cosmétique, c'est à dire esthétique, une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, par exemple l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires. Avantageusement, une composition cosmétique permet, exclusivement ou 25 principalement de les protéger, parfumer, maintenir en bon état, modifier leur aspect ou en corriger les défauts esthétiques superficiels. Dans la présente, on entend par « composition dermatologique » toute composition à visée dermatologique, c'est à dire une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, pour 30 un traitement de la peau, notamment du cuir chevelu, et des phanères, comme les cheveux ou les poils. 3063637 9 Par « véhicule cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable », on entend un véhicule adapté pour une utilisation en contact avec des cellules humaines et animales cutanées, en particulier les cellules de l'épiderme, sans toxicité, irritation, réponse allergique indue et similaire, et 5 proportionné à un rapport avantage/risque raisonnable. Le véhicule cosmétiquement acceptable peut par exemple être choisi parmi l'eau, la glycérine, gel d'aloe vera, un extrait de plante aqueux, les tensio-actifs d'origine naturel, cette liste n'étant pas limitative. Un autre objet de l'invention se rapporte à un procédé de préparation 10 d'une composition cosmétique ou dermatologique telle que définie précédemment, comprenant le mélange d'un extrait d'agave tel que défini précédemment, et d'un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable. La composition de l'invention peut être obtenue par tout procédé 15 approprié connu de l'homme du métier pour la fabrication d'une composition cosmétique. Il peut s'agir, par exemple d'un simple mélange. Il peut s'agir alternativement, par exemple, d'un procédé comprenant une étape d'incorporation d'une phase interne dans une phase externe au moyen d'un émulseur, par exemple d'une turbine de type rotor-stator. Il peut s'agir 20 également par exemple d'un procédé utilisant la Température d'Inversion de Phase (TIP), ce procédé étant classiquement utilisé par l'homme de l'art pour obtenir des émulsions huile dans eau dont les gouttelettes dispersées sont particulièrement fines, par exemple avec un diamètre de 0,1 à 1 pm. Selon l'invention, la composition cosmétique ou dermatologique peut 25 comprendre de 0,05 à 5 % en poids d'extraits d'Agave par rapport au poids total de la composition, par exemple de 0,1 à 5%, de 0,1 à 1%, de 0,25 à 1% ou de 0,25 à 0,5%. La composition cosmétique ou dermatologique de la présente invention peut se trouver sous toute forme appropriée pour une application 30 cosmétique ou dermatologique. Avantageusement, la composition est une composition à usage topique, rincée ou non rincée. 3063637 10 Il peut s'agir par exemple d'une composition sous une forme choisie dans le groupe comprenant une émulsion huile dans eau ou eau dans huile ou un mélange de ces émulsions. Selon l'invention, la composition cosmétique ou dermatologique peut 5 par exemple se trouver sous une forme choisie dans le groupe comprenant un gel aqueux ou hydroalcoolique, une crème aqueuse ou hydroalcoolique et une lotion aqueuse ou hydroalcoolique. Ces formulations utilisables pour la mise en oeuvre de la présente invention sont connues dans l'état de la technique par les formulateurs. Dans ces exemples de composition, il suffit 10 d'ajouter des extraits d'Agave de la présente invention pour obtenir une composition conforme à la présente invention. Selon l'invention, la composition peut être sous une forme choisie parmi un shampooing, un onguent, une crème, une huile, un lait, une pommade, une poudre, une solution, un gel, un sérum, un baume, un beurre, 15 une lotion, une suspension, un savon ou une émulsion, cette forme pouvant être rincée ou non rincée. L'extrait de la présente invention peut être utilisé dans une composition cosmétique ou dermatologique seul ou en combinaison avec d'autres substances ou ingrédients actifs ou inactifs cosmétiquement ou 20 dermatologiquement. Les substances ou ingrédients inactifs sont ceux qui n'agissent pas cosmétiquement ou dermatologiquement. Il s'agit des éléments de la composition permettant notamment d'accompagner l'extrait, de constituer une formulation particulière, de conserver l'extrait actif dans le temps, cette liste n'étant pas limitative. Il peut s'agir en d'autres termes de 25 tout produit de base pouvant se trouver dans les compositions cosmétiques ou dermatologiques classiques. Par opposition, les substances ou ingrédients actifs sont ceux qui dans l'application cosmétique ou dermatologique visée ont une action esthétique et/ou médicale. Ainsi, l'extrait d'Agave de la présente invention peut être la seule 30 substance ou ingrédient actif d'une composition, ou il peut être associé à 3063637 11 d'autres substances ou ingrédients actifs d'une composition cosmétique ou dermatologique. Un autre objet de l'invention se rapporte à un dispositif pouvant se présenter sous une forme choisie parmi un pot, un flacon, un flacon-pompe, 5 un masque, un tube, un sachet soudé, un spray, ledit dispositif comprenant un extrait ou une composition selon l'invention. Un autre objet de l'invention se rapporte à un procédé de soin non thérapeutique, cosmétique ou dermatologique, permettant notamment d'apporter un effet d'amélioration des qualités de surface du cheveu ou du 10 cuir chevelu ou de la croissance du cheveu, par exemple au moins un effet choisi parmi l'amélioration de la vitalité, de la pousse, de la brillance, de la douceur du cheveu, l'amélioration de l'aspect général du cheveu ou du cuir chevelu. Le procédé peut comprendre une application sur le cheveu et/ou le cuir chevelu d'une composition cosmétique selon l'invention. 15 Un autre objet de l'invention se rapporte à l'utilisation d'une composition cosmétique ou dermatologique telle que définie précédemment, pour son utilisation dans un produit dermatologique destiné à l'amélioration de la croissance et/ou l'aspect du cheveu et/ou du cuir chevelu d'un sujet. Dans le cadre des procédés cosmétiques selon l'invention, ou de 20 l'utilisation selon l'invention, l'utilisation s'entend d'une utilisation non- thérapeutique, par exemple pour le traitement des peaux et cheveux sains, c'est-à-dire notamment des cuirs chevelus ne présentant pas un état pathologique ou, si le cuir chevelu présente un état pathologique, pour une utilisation strictement esthétique, à l'exclusion de toute utilisation 25 thérapeutique. En effet, l'utilisation cosmétique et esthétique de l'invention n'est pas associée à un effet thérapeutique inévitable. Ainsi, toute utilisation cosmétique et tout procédé cosmétique selon l'invention sont respectivement des utilisations cosmétiques non-thérapeutiques et des procédés cosmétiques non-thérapeutiques, ne visant 30 pas à traiter une pathologie. 3063637 12 D'autres avantages pourront encore apparaître à l'homme du métier à la lecture des exemples ci-dessous, donnés à titre illustratif. EXEMPLES 5 Exemple 1 : Préparation des extraits d'Agave La matière première utilisée pour la production des fructooligosaccharides de degré de polymérisation inférieur ou égal à 10 (produit commercial Metlos ) et des inulines de degré de polymérisation 10 supérieur à 10 (produit commercial Metlire) est l'Agave bleu biologique récoltée dans les hauts plateaux de l'État de Jalisco. Après 5 à 7 ans de croissance soigneusement contrôlée, l'Agave a la quantité maximale de fructanes, et est donc prête à être transformée. L'agave est reçue fraîche et lavée à l'arrivée pour éliminer autant de 15 matières étrangères que possible. L'agave est ensuite broyée en trois étapes pour passer de 40 à 100 kg de noyau d'agave à une bagasse pulpeuse, prête à être transformée pour en extraire les glucides. La liqueur brute obtenue à partir de l'extraction est ensuite clarifiée pour éliminer toute couleur et impuretés restantes. Ensuite, le jus clarifié est 20 purifié en deux fractions: Metlos° et Metlie. Chaque produit est ensuite amené à une dernière étape de purification afin d'éliminer tous les minéraux pour obtenir une pureté élevée (> 99% de glucides). 25 Exemple 2 : Effet d'extraits d'Agave obtenus dans l'Exemple 1 sur le renouvellement des kératinocytes épidermiques Les études ont été réalisées sur des kératinocytes épidermiques humains normaux, obtenus à partir de plasties abdominales, ensemencés 30 en monocouche dans les conditions de culture adéquates, à savoir dans un 3063637 13 milieu KSFM appauvri (« Keratinocyte Serum Free Medium»), à une température de 37°C, sous atmosphère à 5% de CO2et saturée en humidité. Les cellules ont été traitées avec deux types d'extraits d'Agave (Metlin ou Metlos° à 10-1%, 10-2% ou 10-3%). 5 Après 3 ou 7 jours de traitement (test en triplicata et reproduit 2 fois), la viabilité cellulaire a été évaluée par quantification de l'activité métabolique des déshydrogénases mitochondriales, par mesure d'hydrolyse du MTT (« MethylThiazoleTetrazolium »). Les données du tableau I ci-dessous concernent le pourcentage de 10 viabilité des kératinocytes, ayant subi différents traitements. La référence positive est le milieu KSFM complet (avec Bovine Pituitary Extract). Tableau I : Pourcentage de viabilité des kératinocytes Durée Milieu base KSFM Inuline Metlie Inuline Metlos° Traitement complet (jours) 10-1% 10-2% 10-3% 10-1% 10-2% 10-3% 3 100 159 133 131 141 136 132 132 7 100 148 120 123 118 85 107 113 15 Cet exemple montre que l'adjonction de l'un ou l'autre des extraits d'Agave dans le milieu de culture permet aux kératinocytes de proliférer d'avantage jusqu'à 41% à 10-3% pour l'inuline Metlie et 36% à 10-1% pour l'inuline Metlos . Le renouvellement des kératinocytes étant impliqué dans 20 le lissage et l'homogénéité de surface du cheveu et du cuir chevelu, ce test valide l'intérêt de ces extraits. Exemple 3 : Effet d'extraits d'Agave obtenus dans l'Exemple 1 sur la formation de microtubules par les cellules endothéliales. 25 Dans cette expérience les cellules sont des cellules endothéliales de veines ombilicales humaines (HUVEC) cultivée dans du milieu M200 3063637 14 (Invitrogen M200500) sur du matrigel (BD Biosciences 354234) pendant 6 heures. Les cellules sont soit dans le milieu (témoin milieu), soit traitées par la suramine (témoin négatif), soit traitées par le VEGF (témoin positif), soit traitées par les inulines Metlie ou Metlos° (à 0,1%). Après 6 heures 5 d'incubation, les pseudo-tubes formés sont observés en microcopie et des images sont prises aléatoirement pour ensuite être quantifiées (surface totale du réseau) par analyse d'images. Témoin T+ T- Inuline Inuline milieu (VEGF) (Suramine) Metlie Metlos° Concentrations - 50 ng/ml 20 pM 0,1% 0,1% Nombre de 13 18 0 28 27 ramifications Résultats 100 140 0 220 216 rapportés en % Le traitement avec les inulines Metlin ou Metlos permet de 10 stimuler la formation de pseudo tubes de 220% à 0,1% pour Metlie et de 216% à 0,1% pour Metloe Ces résultats valident donc l'utilisation de l'extrait dans un soin cosmétique visant à stimuler la croissance du cheveu. Exemple 4 : Effet d'extraits d'Agave obtenu dans l'Exemple 1 sur la 15 migration des cellules endothéliales. L'étude a été réalisée sur des PEC (progéniteurs endothéliaux circulants) issus de sang de cordon humain, cultivées dans le milieu EGM2 (Endothelial Growth medium-2). 20 Avant le traitement les cellules sont sevrées dans du milieu EBM-2 0,2% de sérum de veau foetal (SVF). Les cellules sont ensuite ensemencées dans un insert contenant du milieu EGM-2 avec 0,2% SVF, baignant dans un puits contenant le traitement : soit le milieu EGM-2 0,2% SVF (témoin négatif), soit le milieu EGM-2 0,2% SVF plus le VEGF à 10 ng/ml (témoin 25 positif), soit le milieu EGM-2 0,2% SVF plus les inulines Metlie ou Metlos° à 0,5% ou 1%. Après 5 heures d'incubation, les cellules à l'intérieur des 3063637 15 inserts sont éliminées et celles ayant migré de l'autre côté de la membrane de l'insert sont fixées au paraformaldéhyde 4% pendant 10 min. Les cellules ayant migré sont ensuite comptées. T- T+ Inuline Metlin° Inuline Metlin° Inuline Inuline (milieu (milieu + VEGF) 0,5% 1% Metlos° Metlos 1`)/0 seul) 0,5% VEGF - + _ + _ + _ + - + (10 ng/ml) Nombre de cellules 231 417 356 609 404 672 271 489 328 504 Résultats 100% 181% 155% 264% 175% 291% 178% 243% 185% 280% rapportés au T- 5 Le traitement avec les inulines Metlin ou Metlos permet de stimuler la migration des progéniteurs endothéliaux humains de 75% à 1 % pour Metlie et de 85 % à 1`)/0 pour Metlos ° en condition basale (non stimulée par le VEGF). En condition stimulée, Le traitement avec les inulines Metlie 10 ou Metlos permet de stimuler la migration des progéniteurs endothéliaux humains de 191% à 1 % pour Metlie et de 180 % à 1% pour Metlos° . Ces résultats valident donc l'utilisation de l'extrait dans un soin cosmétique visant à stimuler la vascularisation du follicule pileux et ainsi la croissance du cheveu. 15 Exemple 5: Évaluation de l'effet des inulines par des mesures tensiométriques de la surface des cheveux L 'objectif de cette étude est d'évaluer l'effet de Metlin® et de Metlos®, 20 notés respectivement actif A et actif B par des mesures de l'angle de contact de l'eau sur la surface des cheveux. Les cheveux sains sont naturellement protégés par une couche de surface lipidique avec des propriétés hydrophobes. Or, l'hydrophobicité des cheveux diminue après des dommages 25 chimiques engendrés par exemple par la décoloration. Le but de la présente 3063637 16 étude est de mesurer l'augmentation de l'hydrophobicité sur la surface des cheveux après immersion dans une solution d'actifs nourrissante à base de fructanes (inulines et/ou fructo-oligosaccharides), dues à l'amélioration de l'hydrophobicité sur les cheveux. 5 Principe de l'étude La mesure est basée sur la méthode de Wilhelmy. Il s'agit d'une méthode actuellement utilisée pour mesurer l'angle de contact d'un liquide sur une seule fibre. La fibre (le cheveu) ne doit pas être perméable au liquide utilisé (l'eau) et la tension superficielle de ce liquide doit être connue. 10 Le principe consiste en l'utilisation d'une balance de haute précision afin de mesurer la force nécessaire lors de l'immersion des cheveux dans l'eau. L'angle de contact est calculé à partir de l'équation de Wilhelmy: Y = Lx cos 0 15 Avec : y: Tension de surface de l'eau : 72,8 mN/m F : force L: longueur à l'état mouillé (mesuré précédemment) e: angle de contact 20 Comme indiqué ci-dessus, la mesure de l'angle de contact nécessite une détermination préalable de la longueur mouillée de l'échantillon. La mesure de la longueur mouillée s'effectue à l'aide d'un solvant à faible tension superficielle, l'hexane dont la tension superficielle est de 18,4 mN/m, pour laquelle on considère que l'angle de contact est nul. 25 Quant à la mesure de l'angle de contact, l'échantillon est graduellement immergé dans l'hexane, la force d'immersion est mesurée. La force F exercée juste en contact avec le solvant est déterminée par régression linéaire, la et par calcul, et la longueur mouillée avec l'équation de Wilhelmy. Données du test Mèche Naturelle - traitée 3063637 17 T Nat Naturel standard (bruns européens, fournisseur : Quimdis) D2 D2 - Standard D2 + D2 + 1 application par immersion rincée ou non dans la solution d'actif Traitement Origine des cheveux: Cheveux bruns européens. Les cheveux dits « D2 » ou « D2 standard » sont des cheveux bruns européens (fournisseur : Quimdis) ayant subit 2 cycles de décolorations. La 5 décoloration est l'éclaircissement de la nuance naturelle des cheveux par la modification chimique (procédés d'oxydation alcaline) des caractéristiques des pigments de mélanine. Le processus, très progressif, de décoloration du pigment (solubilisation par dépolymérisation de la mélanine) est précédé de l'attaque de la kératine et des polypeptides stabilisant le pigment 10 mélanique par le traitement décolorant (rupture des liaisons disulfures, amides, salines et hydrogènes). On note D2 les cheveux ayant subi une décoloration répétée deux fois. Nous réalisons ce processus en laboratoire par immersion des mèches dans une solution à base de peroxodisulfate de sodium et de peroxyde d'hydrogène. 15 Les inulines ou oligo-fructosaccharides utilisées sont Metlin ou Metlos° (NEKUTLI) et leurs mélanges dont les ratios Metlin / Metlos sont les suivants : 100/0, 75/25, 50/50, 25/75 et 0/100. Les concentrations des inulines et/ou oligo-fructosaccharides dans les solutions aqueuses d'actifs appliquées sont de 0,25%, 0,5% et 1%. Ce 20 pourcentage correspond au produit total dans le produit, c'est-à-dire soit l'inuline lorsque le produit ne contient pas de oligo-fructosaccharides, soit les oligo-fructosaccharides lorsque le produit ne contient pas d'inuline, soit le mélange des deux lorsque le produit comporte de l'inuline et des oligofructosaccharides. 25 Dans certains cas, les cheveux ont été rincés après l'application des inulines et/ou oligo-fructosaccharides après 5 minutes d'immersion dans la 3063637 18 solution aqueuse d'actifs, tandis que dans les autres cas, les cheveux n'ont pas été rincés. Le tensiomètre utilisé est le tensiomètre Krüss K100SF. 5 Protocole d'échantillonnage 10 cheveux par mèche ont été mesurés. Pour chaque cheveu, le protocole suivant est utilisé: - Le cheveu est coupé de la mèche à l'aide de ciseaux propres sans autre manipulation et manipulés avec une pince propre. 10 - II est fixé sur sa partie supérieure sur une feuille de papier au moyen d'un adhésif double face. - Pour chaque mesure, un échantillon d'une longueur de 15 mm est coupé à l'aide de ciseaux propres. - Les 3 premiers échantillons sont utilisés pour mesurer la longueur 15 mouillée. - Les 3 échantillons suivants sont utilisés pour mesurer l'angle de contact. - L'échantillon est fixé sur la surface collante du porte-échantillon, sur une longueur d'environ 5 mm (fixation directe sur le porte-échantillon sans 20 autre manipulation). L'échantillon doit être aussi droit que possible, pour venir perpendiculairement au contact du liquide, de manière à ne pas fausser la mesure. La mesure est effectuée à 5 mm du fond de l'échantillon. Conditions de mesure 25 Mesure de longueur mouillée paramètres: valeur Vitesse de détection 6 mm/min Sensibilité de détection 5.10-5g Mesure de la vitesse 3 mm/min Différence de position 0,2 mm Profondeur d'immersion 5 mm 3063637 19 Contrôle de l'eau Les mesures sont effectuées avec de l'eau du robinet qui est systématiquement contrôlée tous les jours lors des mesures. 5 Résultats: temperature pH Surface tension (mN/m) 23°C 7.4±1 72,7 mN/m (s=0.1) Résultats des tests d'hydrophobicité: Les résultats sont donnés au moyen d'un calcul d'un test W de Mann-Whitney pour comparer les médianes des deux échantillons comparés, les 10 échantillons étant indépendants. Les échantillons comparés sont les cheveux abimés par décoloration (D2) et les cheveux abimés par décoloration (D2) et traités avec la solution aqueuse d'actifs. RESULTATS DES TESTS HYDROPHOBICITE 1% (Actif A: 15 Actif B: Metlos ) références Mèche 1 : cheveux naturels Mèche 2 : cheveux abîmés Angle de contact (°) (décolorés) Angle de contact (°) reg moy reg moy moy 102,4 101,5 78,2 77,8 Ecart type 2,9 2,4 11,8 11,0 Coef 2,8 2,3 15,1 14,1 variation % Ratio 100/0 75/25 50/50 25/75 0/100 A/B 3063637 20 Non Mèche 3 Mèche 4 Mèche 5 Mèche 6 Mèche 7 rincé reg moy reg moy reg moy reg moy reg moy moy 91,8 90,2 83,7 83,7 87,1 85,2 84,5 82,6 84,4 82,7 Ecart type 7,4 7,8 13,5 12,3 13,2 13,6 11,5 11,5 15,2 15,7 Coef variatio n% 8,1 8,7 16,1 14,7 15,2 15,9 13,6 13,9 18,1 19,0 Ratio A/B 100/0 75/25 50/50 25/75 0/100 Rincé Mèche 8 Mèche 9 Mèche 10 Mèche 11 Mèche 12 reg moy reg moy reg moy reg moy reg moy moy 90,8 90,5 87,7 85,7 87,7 84,7 83,4 82,1 87,4 85,9 Ecart type 11,6 11,4 7,0 7,4 10,6 11,4 9,5 8,8 8,3 8,7 Coef 12,7 12,6 8,0 8,6 12,1 13,4 11,4 10,8 9,5 10,1 variation % Une différence significative par rapport au 02 est constatée. RESULTATS DES TESTS HYDROPHOBICITE 0.5% et 0.25% (Actif A: Inuline-Metlin , Actif B : Metlos ) références Mèche 1 : cheveux naturels Mèche 2 : cheveux abîmés Angle de contact (°) (décolorés) contact (°) Angle de 3063637 21 reg moy reg moy moy 105,6 104,2 68,0 67,2 Ecart type 3,4 3,5 15,3 16,6 Coef 3,2 3,4 22,5 24,6 variation % Une différence significative par rapport au 02 est constatée. Ratio A/B 50/50 - 0,5% 50/50 - 25% Angle de contact (°) Angle de contact (°) reg moy reg moy moy 77,6 76,8 69,5 68,0 Ecart type 13,2 12,2 7,1 6,5 Coef variation % 17,0 15,8 10,2 9,6 5 P =0.00355455**5 P =0.0929457****ns Une différence significative par rapport au 02 est constatée pour le ratio 50/50 à 0.5%. On constate donc une différence significative du ratio 50/50 à 0,5% rincé par 10 rapport au témoin décoloré, et une différence non significative par rapport au 50/50 1`)/0 Rincé. RESULTATS DES TESTS HYDROPHOBICITE Tous les ratios rincés et non rincés à 1`)/0 +Essais 50/50 rincé à 0.5% et 0.25% 15 On constate un apport significatif d'hydrophobicité pour les traitements : - Rincé à 1% : tous les ratios (moindre pour le 25/75) - Rincé à 0,5% pour le ratio 50/50 - Non rincé à 1`)/0 tous les ratios (moindre pour les 75/25 et 0/100) 20 3063637 22 Exemple 6: Formulation d'un extrait d'Agave dans un sérum concentré pour soin végétal capillaire Composants (nom INCI) Pourcentage (1)/0 en poids) AQUA 54,575 GELLAN GUM 0,150 SODIUM CHLORIDE 0,075 SODIUM BENZOATE 0,500 POTASSIUM SORBATE 0,200 SALICYLIC ACID 0,150 BETAINE 2,000 LACTIC ACID & AQUA 0,150 PANTHENOL 0,200 ALOE BARBADENSIS LEAF JUICE 40,000 FRUCTOOLIGOSACCHARIDES 1,000 INULIN 1,000 5 Exemple 7: Formulation d'un extrait d'Agave dans un shampooing Composants (nom INCI) Pourcentage (1)/0 en poids) AQUA 76,660 GUAR HYDROXYPROPYLTRIMONIUM CHLORIDE 0,150 CITRIC ACID 0,090 SODIUM BENZOATE 0,500 ZINC GLUCONATE 0,500 SALICYLIC ACID 0,050 FRUCTOOLIGOSACCHARIDES 0,125 INULIN 0,125 COCO-GLUCOSIDE & GLYCERYL OLEATE & AQUA 3,000 DECYL GLUCOSIDE & AQUA 3,000 AMMONIUM LAURYL SULFATE & AQUA 10,400 COCAMIDOPROPYL BETAINE & AQUA 4,000 PARFUM 0,400 URTICA DIOICA EXTRACT & AQUA & GLYCERIN 1,000 Exemple 8 : Formulation d'un extrait d'Agave dans un soin nutrition pour les cheveux sous forme d'après-shampooing 3063637 23 Composants (nom INCI) Pourcentage (1)/0 en poids) AQUA 87,967 INULIN 0,250 FRUCTOOLIGOSACCHARIDES 0,250 PANTHENOL 0,100 SODIUM BENZOATE 0,350 BEHENTRIMONIUM CHLORIDE & ISOPROPYL ALCOHOL 3,000 STEARYL ALCOHOL 3,500 CETYL ALCOHOL 2,000 PERSEA GRATISSIMA OIL 1,000 COCOS NUCIFERA OIL 1,000 PARFUM 0,400 OLEA EUROPAEA FRUIT OIL & BETA-CAROTENE 0,003 CITRIC ACID 0,180 3063637 24 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES 1. Maria de la Soledad ALONSO GUTIÉRREZ, thèse, « Valorisation 5 de la bagasse de l'agave tequilana W. cv azul : caractérisation, étude de la digestibilité et de la fermentation des sucres », 2005. 2. Lepez, M.G. ; Mancilla, N.A. ; Mendoza-Diaz, G. (2003). : Molecular structures of fructans from Agave tequilana Weber var. azul. J. Agric. Chem. 51, 7835-7840. 10 REVENDICATIONS1. Utilisation cosmétique non thérapeutique d'un extrait d'Agave pour une amélioration de la croissance du cheveu et/ou de l'aspect du cheveu et/ou du cuir chevelu. 2. Utilisation cosmétique selon la revendication 1, pour faire briller le cheveu et/ou adoucir le cheveu et/ou améliorer l'éclat du cheveu. 3. Utilisation cosmétique selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle ledit extrait d'Agave stimule le renouvellement des kératinocytes. 4. Utilisation cosmétique selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit extrait d'Agave stimule la formation des microtubules et/ou la migration des cellules endothéliales. 5. Utilisation cosmétique selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit extrait d'Agave comprend des fructooligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10 et/ou des inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10. 6. Utilisation cosmétique selon la revendication 5, dans laquelle lesdits fructo-oligosaccharides ont un degré de polymérisation compris de 3 à 10. 7. Utilisation cosmétique selon la revendication 5, dans laquelle lesdites inulines ont un degré de polymérisation compris de 10 à 60. 8. Utilisation cosmétique selon la revendication 5 à 7, dans laquelle le ratio fructo-oligosaccharides sur inulines est compris de 100/0 à 0/100. 3063637 26 9. Utilisation cosmétique selon la revendication 8, dans laquelle le ratio fructo-oligosaccharides sur inulines est de 50/50. 10. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, 5 dans laquelle l'extrait d'Agave est un extrait d'Agave tequilana. 11. Composition cosmétique ou dermatologique améliorant la croissance et/ou l'aspect du cheveu et/ou du cuir chevelu comprenant des extraits d'Agave tequilana et un véhicule cosmétiquement et/ou 10 dermatologiquement acceptable, ladite composition comprenant de 0,05 à 5 % en poids desdits extraits d'Agave tequilana par rapport au poids total de la composition, et ledit extrait d'agave comprenant des fructooligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10 et/ou des inulines ayant un degré de polymérisation compris de 10 à 60. 15 12. Composition selon la revendication 11, ladite composition étant sous une forme choisie parmi un shampooing, un onguent, une crème, une huile, un lait, une pommade, une solution, une poudre, un gel, un sérum, un baume, un beurre, une lotion, une suspension, un savon ou une émulsion 20 qui peut être rincée ou non rincée. 13. Dispositif se présentant sous une forme choisie parmi un pot, un flacon, un flacon-pompe, un masque, un spray, ledit dispositif comprenant une composition selon l'une quelconque des revendications 11 ou 12. 25 14. Procédé cosmétique non thérapeutique pour améliorer la croissance et/ou l'aspect du cheveu et/ou du cuir chevelu, comprenant une application sur le cheveu et/ou du cuir chevelu d'une composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications 11 ou 12. 30 3063637 27 15. Utilisation d'une composition cosmétique ou dermatologique telle que définie dans l'une quelconque des revendications 11 ou 12, pour son utilisation dans un produit dermatologique destiné à l'amélioration de la croissance et/ou l'aspect du cheveu et/ou du cuir chevelu d'un sujet. 16. Procédé de préparation d'une composition cosmétique ou dermatologique telle que définie dans la revendication 11 ou 12, comprenant le mélange d'un extraits d'agave et d'un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable. 5 10