Brevet FR3070864A1 — publié le 20190315

COMPOSITION PHARMACEUTIQUE ET/OU COSMETIQUE COMPRENANT UN EXTRAIT AQUEUX DE PANCRATIU MARITINUM ET UTILISATIONS ASSOCIEES RE SUME DE L'INVENTION La présente invention concerne une composition pharmaceutique et/ou cosmétique comprenant un extrait aqueux de Pancratium maritinum, laquelle composition est destinée à être utilisée pour prévenir ou réduire les désordres liés aux effets aigus et/ou chroniques de l'inflammation ; pour prévenir ou réduire la libération de la prostaglandine de type 2 (PGE2), par les cellules fibroblastes du derme de la peau ; pour inhiber la lipogénèse ; et/ou pour préserver et augmenter l'hydratation de la peau. ART ANTERIEUR Pancratium maritimum, communément dénommée lys de mer ou lys des sables, est une plante à bulbe, poussant dans le sable. Elle appartient à la famille des Amaryllidaceae . Cette plante vivace présente de longues feuilles rubanées, et de spectaculaires fleurs blanches, dont la floraison est estivale. En particulier, l'inflorescence de cette plante, composée d'une petite dizaine de fleurs, est portée par une tige d'une trentaine de centimètres émergeant d'un bulbe enterré dans le sable. Cette plante se trouve notamment sur le pourtour méditerranéen, mais également dans certaines régions littorales atlantiques, notamment la Bretagne. Du fait de ses propriétés physicochimiques et biologiques, des extraits de Pancratium maritimum sont utilisés dans le domaine de la cosmétologie et/ou de la dermatologie, notamment par incorporation dans des compositions topiques. Par exemple, la demande de brevet français FR2926220 divulgue l'activité antioxydante et inhibitrice de la mélanogenèse d'un extrait de Pancratium maritimum, notamment via l'inhibition de la liaison de l'endothéline à son récepteur. Lorsqu'incorporé dans une composition cosmétique ou dermatologique, un tel extrait confère une protection efficace contre les dommages cellulaires causés par des facteurs toxiques extrinsèques comme les radiations ultraviolettes, le vent et les facteurs toxiques intrinsèques comme le vieillissement et les modifications biochimiques de la peau, incluant les espèces réactives de l'oxygène. Ainsi, selon FR2926220, les compositions comprenant un extrait de Pancratium maritimum peuvent être destinées à : (1) prévenir et/ou lutter contre les signes de vieillissement cutané ; (2) améliorer la texture de la peau et raviver l'éclat de la peau ; (3) 1 améliorer l'uniformité et la clarté de la peau ; (4) blanchir la peau ; (5) dépigmenter la peau et/ou les poils et/ou les cheveux ; et/ou (5) prévenir et/ou réduire et/ou supprimer les taches de pigmentation. Divers procédés d'extraction sont connus. Notamment, l'extrait de Pancratium 5 maritimum peut être obtenu par au moins une étape d'extraction choisie dans le groupe consistant en l'extraction aux solvants, l'extraction phase-solide, l'extraction au CO2 supercritique ou leurs combinaisons. Il est possible de procéder à plusieurs extractions successives jusqu'à l'épuisement de la matière à extraire par le solvant considéré. La durée d'extraction varie en fonction du solvant considéré, la température et éventuellement la 10 pression utilisée, pour aboutir à l'épuisement total d'extraction de la matière. A titre d'exemple, les solvants utilisables dans une étape d'extraction aux solvants peuvent être notamment l'eau, la glycérine, les glycols, le méthanol, l'acétonitrile, l'acétone, l'acétate d'éthyle ; préférentiellement l'eau. A titre d'exemple, les phases-solides utilisables peuvent être l'amberlite et la polyvinylpyrrolidone. 15 Les extraits de Pancratium maritimum sont donc d'un grand attrait dans les domaines de la cosmétologie et de la dermatologie. Afin d'informer toujours davantage les utilisateurs et les consommateurs, il est utile d'identifier les propriétés additionnelles de tels extraits. En effet, les utilisateurs et les consommateurs sont très attentifs aux vertus des compositions cosmétiques et dermatologiques utilisées, afin de pouvoir en potentialiser l'utilisation. Ainsi, 20 les formulateurs sont toujours à la recherche des effets et propriétés additionnelles de tels extraits. OBJECTIFS DE L'INVENTION 25 La présente invention à pour objectif l'identification de propriétés additionnelles des extraits aqueux de Pancratium maritimum, et des compositions cosmétiques et dermatologiques les contenant. DESCRIPTION DE L'INVENTION 30 Selon un premier aspect, la présente invention concerne une composition pharmaceutique et/ou cosmétique comprenant un extrait aqueux de Pancratium maritinum destinée à être utilisée pour prévenir ou réduire les désordres liés aux effets aigus et/ou chroniques de l'inflammation. 2 Dans un mode particulier de réalisation, ladite composition pharmaceutique et/ou cosmétique est destinée à être utilisée pour prévenir ou réduire les rougeurs, désordres aigus de l'inflammation. Dans un autre mode particulier de réalisation, ladite composition pharmaceutique et/ou 5 cosmétique est destinée à être utilisée pour prévenir ou réduire le vieillissement cellulaire, désordre chronique de l'inflammation. Selon un deuxième aspect, la présente invention concerne une composition pharmaceutique et/ou cosmétique destinée à prévenir ou réduire la libération de la 10 prostaglandine de type 2 (PGE2), médiateur de l'inflammation, par les cellules fibroblastes du derme de la peau. Selon un troisième aspect, ladite composition pharmaceutique et/ou cosmétique comprenant un extrait aqueux de Pancratium maritinum est destinée à être utilisée pour 15 inhiber la lipogénèse. L'inhibition de la lipogenèse confère des propriétés amincissantes à l'extrait aqueux de Pancratium maritinum, et les compositions le contenant. Dans un mode particulier de réalisation, ladite composition pharmaceutique et/ou cosmétique est destinée à diminuer la production de triglycérides par les cellules adipocytes. 20 Selon un quatrième aspect, la présente invention concerne une composition pharmaceutique et/ou cosmétique comprenant un extrait aqueux de Pancratium maritinum, est destinée à préserver et à augmenter l'hydratation de la peau. Lesdites compositions, selon l'un des aspects ci-contre, comprennent un extrait aqueux 25 de Pancratium maritinum. Ledit extrait aqueux de Pancratium maritinum est préférentiellement obtenu à partir des seules parties aériennes de Pancratium maritinum. On entend par « partie aérienne », toute partie de la plante qui n'est pas souterraine. Les parties aériennes de Pancratium maritinum sont notamment les tiges, les feuilles, les fleurs, les fruits et/ou les graines ; 30 préférentiellement les feuilles et les fleurs. Les parties aériennes ne comprennent donc pas les bulbes et autres parties souterraines. L'extraction des seules parties aériennes permet notamment de ne pas extraire certains alcaloïdes toxiques qui peuvent être contenus dans les bulbes. 3 Ledit extrait peut être obtenu par un procédé d'extraction comprenant les étapes suivantes : (1) la collecte des parties aériennes de la plante ; (2) optionnellement le traitement des parties aériennes collectées ; (2) la lyophilisation et/ou le séchage des parties collectées et/ou traitées ; (3) l'extraction aqueuse des parties collectées et/ou traitées ; et (4) la filtration 5 ou clarification de l'extrait aqueux. L'étape de traitement peut être mise en oeuvre par broyage, découpe et/ou cassage des parties aériennes collectées. L'étape d'extraction peut être mise en oeuvre pour obtenir un extrait aqueux comprenant de 0,01% à 10%, préférentiellement de 0,1% à 5%, très préférentiellement de 10 0,5% à 2%, de matière sèche (parties filtrées). L'étape d'extraction peut se dérouler pendant 1 à 8 heures sous agitation avec 3 à 7 kg de plantes sèches ou lyophilisées pour 50 à 150 litres, notamment 100 litres d'eau. Il est possible de procéder à plusieurs extractions successives jusqu'à l'épuisement de la matière à extraire par l'eau. L'étape de filtration ou clarification peut être mise en oeuvre l'extrait par filtration 15 frontale de 10 à 20 um et/ou par filtration sur une membrane tangentielle avec des filtres ayant une porosité comprise entre 0,1 et 0,5 um, préférentiellement entre 0,2 et 0,4 um, très préférentiellement entre 0,2 et 0,3 um. Par exemple, l'étape de filtration ou clarification peut être mise en oeuvre par filtration sur une membrane de filtration tangentielle de porosité 0,22 um. A noter que cette étape de filtration peut permettre concomitamment la stérilisation de 20 l'extrait obtenu. Ledit extrait comprend préférentiellement de 0,01 à 10 g/L (équivalent épicathéchine), très préférentiellement de 0,1 à 1 g/L (équivalent épicathéchine), plus préférentiellement de 0,2 à 0,5 g/L (équivalent épicathéchine), de composés polyphénols. Les quantités en polyphénols sont mesurées selon la méthode conventionnelle de Folin-Ciocalteu. Cette 25 méthode consiste à mesurer l'oxydation des phénols par la réduction de l'acide phosphomolybdique et de l'acide phosphotungstique, pour obtenir le bleu de molybdène et le bleu de tungstène, absorbant à 725-730 nm. Par « polyphénols », on entend tout composé phénolique hydrosoluble, de poids moléculaire compris entre 500 et 40 000 Daltons. A titre d'exemple, les polyphénols comprennent notamment les acides phénoliques et leurs dérivés, 30 les flavonoïdes, les stilbènes, et/ou les lignines. Lesdites compositions, selon l'un des aspects ci-contre, comprennent de 0,001% à 1%, préférentiellement de 0,01% à 0,1%, très préférentiellement de 0,02% à 0,05%, dudit extrait aqueux de Pancratium maritinum par poids total de la composition. 4 Lesdites compositions, selon l'un des aspects ci-contre, peuvent comprendre en outre un support cosmétologiquement ou pharmaceutiquement acceptable. Par « support cosmétologiquement ou pharmaceutiquement acceptable », on entend toute matière qui est 5 appropriée à une utilisation dans une composition cosmétique ou pharmaceutique, notamment dermatologique. À titre d'exemples, les supports cosmétologiquement acceptables peuvent être choisis parmi le groupe consistant en la glycérine, la gomme xanthane, les polymères issus d'algues (agar, carraghénane, alginate), les silicones, le caprylic / capric triglyceride et les huiles de plantes (plantes du genre Macadamia), et leurs mélanges. À titre d'exemples, les 10 supports pharmaceutiquement acceptables peuvent être choisis parmi le groupe consistant en le lactose, l'amidon éventuellement modifié, la cellulose, l'hydroxypropyl cellulose, l'hydroxypropylmethyl cellulose, le sorbitol, le xylitol, le dextrose, le sulfate de calcium, le phosphate de calcium, le lactate de calcium, les dextrases, l'inositol, le carbonate de calcium, la glycine, la bentonite, la polyvinylpyrrolidone et leurs mélanges 15 Lesdites compositions, selon l'un des aspects ci-contre, peuvent comprendre en outre un adjuvant cosmétique ou pharmaceutique. Lesdites compositions, selon l'un des aspects ci-contre, peuvent comprendre en outre 20 tout composé additionnel, communément incorporé aux compositions cosmétiques et/ou pharmaceutiques. A titre d'exemples, les composés additionnels peuvent être choisis parmi le groupe consistant en les agents oxydants, les agents alcalins, les agents anti-radicalaires, les agents tampons et/ou adjusteurs de pH, les épaississants, les agents modifiant la rhéologie, les tensioactifs, les polymères, les parfums, les enzymes, les agents solubilisants, les ingrédients 25 et extraits naturels, les agents hydratants, les conservateurs, les colorants, et les pigments. Lesdites compositions, selon l'un des aspects ci-contre, sont préférentiellement des compositions topiques. Lesdites compositions peuvent se présenter sous différentes formes, notamment sous une forme choisie dans le groupe consistant en les solutions, les émulsions, 30 les crèmes, les pommades, les laits, les lotions et les gels. Ces différentes formes peuvent être obtenues par des techniques bien connues de l'Homme du Métier. Selon une terminologie alternative, les aspects de la présente invention, pour ce qui concerne les compositions cosmétiques, correspondent à l'utilisation cosmétique d'un extrait 5 aqueux de Pancratium maritinum, ou de la composition le comprenant, pour prévenir ou réduire les désordres liés aux effets aigus et/ou chroniques de l'inflammation, notamment pour prévenir ou réduire les rougeurs et/ou le vieillissement cellulaire ; son utilisation cosmétique pour prévenir ou réduire la libération de la prostaglandine de type 2 (PGE2), 5 médiateur de l'inflammation, par les cellules fibroblastes du derme de la peau ; son utilisation cosmétique pour inhiber la lipogénèse ; son utilisation cosmétique pour diminuer la production de triglycérides par les cellules adipocytes ; et/ou son utilisation cosmétique pour préserver et à augmenter l'hydratation de la peau. 10 DESCRIPTIF DES FIGURES La figure 1 est une représentation graphique de la concentration en PEG2 (pg/ml) des compositions testées. La figure 2 une représentation graphique de la fluorescence (en RFU) des compositions 15 testées. Les figures 3 et 4 sont les représentations graphiques du taux d'hydratation (en %) des compositions testées. EXEMPLES 20 Exemple 1 - Effet apaisant de l'extrait de Pancratium maritinum L'effet apaisant de l'extrait de Pancratium maritinum selon la présente invention a été évalué par la capacité à diminuer la libération d'un médiateur de l'inflammation, la prostaglandine de type 2 (PGE2), par des fibroblastes de derme humain dans le milieu de 25 culture. Les fibroblastes de derme humain d'un donneur de 38 ans, utilisés au 4ème repiquage, ont été ensemencés dans des plaques de 24 puits avec un milieu de culture additionné de glutamine et de 10% de sérum de veau foetal (SVF). Les cultures ont été réalisées dans une atmosphère à 37°C, 5% CO2 et saturée en humidité. Les cellules ont été incubées avec le 30 produit pendant 16 heures avant ajout d'un ester de phorbol (PMA). Le PMA (SIGMA) a été ajouté à 0,1pg/mL dans les cultures de cellules, et les cellules ont été incubées à 37°C pendant 24 heures supplémentaires. Après l'incubation, les milieux de culture ont été prélevés et congelés à -20°C. 6 Le dosage de PGE2 a été réalisé à l'aide d'un kit de dosage. Les résultats des dosages sont exprimés en picogrammes de PGE2 par millilitre de milieu de culture (pg/ml) d'après une courbe étalon PGE2. L'effet anti-inflammatoire est exprimé en pourcentage d'inhibition de la production de PGE2 par les fibroblastes stimulés par PMA. Les résultats sont illustrés 5 dans la figure 1. L'extrait de Pancratium maritinum, testé à 0,01% et 0,1%, inhibe significativement la production de PGE2 par les fibroblastes de respectivement -25% et -36% (voir Figure 1 en annexe). Le produit présente donc un effet apaisant mais également un potentiel effet anti-âge. En effet il a été démontré un effet de l'inflammation sur le vieillissement cutané via un 10 phénomène appelé « inflamm'aging ». Exemple 2 - L'effet de l'extrait de Pancratium maritinum sur la lipogenèse L'effet de l'extrait de Pancratium maritinum selon l'invention sur la lipogenèse a été évalué en mesurant la production de triglycérides par fluorescence au spectrofluorimètre. 15 Les cellules utilisées étaient des adipocytes humains différenciés à partir de cellules souches mésenchymateuses humaines (Lonza) utilisées au Sème repiquage. Les cellules souches mésenchymateuses humaines ont été cultivées à hyper confluence dans un milieu adéquat pendant 10 jours, puis les cellules ont été différenciées selon la procédure du fournisseur, pendant 17 jours (3 cycles de milieu induction/maintenance). Le produit était 20 ajouté ou non à chaque changement de milieu. Les triglycérides produits pendant les 14 jours de culture ont été marqués dans les adipocytes avec l'Adipored (marqueur fluorescent spécifique des lipides) puis une lecture au spectrofluorimètre (marque BMG) a été réalisée afin de les quantifier par fluorescence (unité RFU). Les résultats sont rapportés en figure 2. 25 L'induction de la différenciation augmente la production de triglycérides. La synthèse lipidique est en effet plus élevée dans le témoin induit que dans le témoin non induit. Comparativement au témoin différencié, l'extrait de Lys de mer, testé à 0,01% et 0,1%, inhibe significativement la production de triglycérides de respectivement -25% et -34%. 30 Exemple 3 - Effet de l'extrait de Pancratium maritinum sur l'hydratation cutanée L'effet de l'extrait de Pancratium maritinum selon l'invention sur l'hydratation cutanée a été étudié en utilisant des explants de peau humaine de 12 mm de diamètre obtenus à partir d'une plastie abdominale effectuée sur une femme de type caucasien de 50 ans. 7 Un mélange de produits déshydratants a été appliqué directement sur l'épiderme des explants à l'aide d'un petit pinceau (20[ig ou 200) avec une pipette à piston type microman. Le jour de la réception, les explants ont été mis en culture à l'interface air-milieu dans une plaque de 6 puits avec 10000 de milieu long Terme ou Hepes pendant 2 heures (période de « 5 conditionnement » des explants, n=4 explants par condition). Deux types de protocoles ont ensuite été testés. Un premier protocole a permis d'évaluer l'effet protecteur de l'extrait contre la déshydratation. Les explants ont été prétraités pendant une demi-heure avec le produit avant d'être déshydratés par le mélange de poudres déshydratantes pendant deux heures. Le second protocole permet d'évaluer son effet 10 réhydratant sur des explants préalablement déshydratés avec le mélange de poudres. La mesure du taux hydratation a été réalisée à l'aide d'un cornéomètre CM820 (Courage et Khazaka) : 3 mesures ont été effectuées à chaque temps sur chaque explant en respectant un délai de 5 secondes entre chacune d'entre elles. Le traitement des explants de peau par l'extrait de Pancratium maritinum à 1,5% 15 pendant 30min avant leur déshydratation par le mélange de poudres desséchantes, permet de protéger les explants d'une chute trop importante du taux d'hydratation par rapport aux explants non traités. Il augmente le taux d'hydratation de +20,0% 30 minutes après déshydratation et de +16,2% 18h30 après déshydratation (augmentation significative). Les résultats sont rapportés dans la figure 3. 20 Le traitement par l'extrait de Pancratium maritinum à 1,5% pendant 30min sur des explants de peau préalablement déshydratés, permet d'augmenter le taux d'hydratation par rapport aux explants non traités : +5,3% (limite significatif p=0,0785) dès la fin du traitement et +11,5% REVENDICATIONS1. Composition pharmaceutique et/ou cosmétique comprenant un extrait aqueux de Pancratium maritinum destinée à être utilisée pour prévenir ou réduire les désordres liés aux effets aigus et/ou chroniques de l'inflammation. 2. Composition pharmaceutique et/ou cosmétique, selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle est destinée à être utilisée pour prévenir ou réduire les rougeurs, désordres aigus de l'inflammation. 3. Composition pharmaceutique et/ou cosmétique, selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle est destinée à être utilisée pour prévenir ou réduire le vieillissement cellulaire, désordre chronique de l'inflammation. 4. Composition pharmaceutique et/ou cosmétique selon la revendication 1, destinée à prévenir ou réduire la libération de la prostaglandine de type 2 (PGE2), médiateur de l'inflammation, par les cellules fibroblastes du derme de la peau. 5. Composition pharmaceutique et/ou cosmétique comprenant un extrait aqueux de Pancratium maritinum destinée à être utilisée pour diminuer la lipogenèse. 6. Composition pharmaceutique et/ou cosmétique selon la revendication 5, destinée à diminuer la production de triglycérides par les cellules adipocytes. 7. Composition pharmaceutique et/ou cosmétique comprenant un extrait aqueux de Pancratium maritinum, destinée à préserver et à augmenter l'hydratation de la peau. 8. Composition, selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ledit extrait aqueux de Pancratium maritinum est obtenu à partir des seules parties aériennes de Pancratium maritinum. 9 9. Composition, selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ledit extrait comprend de 0,01 à 10 g/L (équivalent épicathéchine) de composés polyphénols. 5 10. Composition, selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ladite composition comprend de 0,001% à 1% dudit extrait aqueux de Pancratium maritinum par poids total de la composition. 11. Composition, selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée 10 en ce que ladite composition comprend en outre un support cosmétologiquement ou pharmaceutiquement acceptable. 12. Composition, selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ladite composition comprend en outre un adjuvant cosmétique ou 15 pharmaceutique. 13. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ladite composition est une composition topique. 10