Brevet FR3073139A1 — publié le 20190510

Composition améliorant le bien-être des animaux L'invention concerne une composition visant à améliorer le bien-être des animaux, en particulier les animaux d'élevage. Les problèmes sanitaires en élevages sont souvent la conséquence de la combinaison de plusieurs pathogènes. Ceux-ci peuvent être présents dans différents écosystèmes microbiens : l'environnement (air, surfaces organiques ou inorganiques), dans le système interne de l'animal (système digestif ou respiratoire) ou sur l'animal (appareil cutané). Dans les différents types d'élevages d'animaux terrestres, on retrouve toujours des 10 phases à risque où les écosystèmes microbiens évoluent fortement, comme par exemple une phase de réimplantation d'une flore externe après désinfection, l'arrivée d'animaux dans un élevage, les premiers instants de vie des nouveaux nés, l'arrivée de nouveaux individus dans un lot d'animaux déjà existants, les transitions alimentaires, la phase de réimplantation d'une flore interne après utilisation d'antibiotique etc... 15 Aussi, est-il nécessaire de contrôler cet environnement afin de maintenir l'état sanitaire des élevages et préserver le bien-être des animaux. Des stratégies de traitements antibiotiques sont utilisées depuis très longtemps mais posent deux problèmes majeurs : d'une part, les résistances générées par l'utilisation trop régulière d'antibiotique, et d'autre part, un problème de santé publique par la 20 consommation de chaires animales comprenant de nombreux antibiotiques. Aussi, est-il nécessaire de trouver des alternatives aux antibiotiques. Une approche plus récente a été développée visant à utiliser des flores bactériennes permettant de réguler les flores pathogènes retrouvées dans les élevages. On peut citer par exemple des applications dans l'environnement comme dans la demande 25 EP0852114, où des bactéries non pathogènes sont utilisées pour proposer un procédé de désinfection systématique des bâtiments destinés à l'élevage d'un troupeau. D'autres approches sont utilisées et visent à traiter directement les animaux par voie cutanée avec des bactéries non pathogènes. On peut citer notamment la demande CN104307012 qui propose des compositions déodorantes et assainissantes pouvant 30 être pulvérisées sur les volailles, ou encore la demande CN103773721 qui propose des solutions probiotiques limitant les risques de diarrhée chez le nouveau-né, les exemples d'application étant par exemple une pulvérisation au niveau des mamelles de la mère. Toutefois, malgré ces différentes méthodes, les résultats sanitaires ne semblent pas satisfaisants. 35 Aussi, existe-t-il un besoin de trouver une solution pour maintenir l'environnement d'élevage des animaux terrestre sains, afin de favoriser leur santé et ainsi leur bien-être, ce qui favorisera la productivité des animaux d'élevage. 2 L'invention a pour but de palier les inconvénients susmentionnés. Un autre but de l'invention est de fournir une nouvelle méthode efficace pour maintenir la santé et le bienêtre des animaux d'élevage terrestre. Un autre but de l'invention est de fournir un kit utilisable directement par les éleveurs. 5 Aussi, l'invention concerne une composition bactérienne comprenant au moins une souche de bactérie du genre Bacillus, notamment de Bacillus subtilis et au moins une souche de bactérie lactique, notamment au moins une souche de Lactococcus lactis, pour son utilisation dans le cadre de la prévention ou du traitement des infections pathogènes affectant la santé des animaux d'élevage terrestres, ladite composition étant : a. Ingérée ou inhalée par lesdits animaux d'élevage terrestres, et b. soit b.1. épandue dans le milieu d'élevage desdits animaux d'élevage terrestres, b.2. appliquée sur lesdits animaux d'élevage terrestres, b.3. épandue dans le milieu d'élevage desdits animaux d'élevage terrestres et appliquée sur lesdits animaux d'élevage terrestres. L'invention repose sur la constatation surprenante faite par les inventeurs qu'un mélange d'au moins une souche de bactéries du genre Bacillus subtilis et au moins une souche du genre Lactococcus lactis, bactéries non pathogènes, agissent en synergie sur la santé animale des animaux terrestre lorsque ledit mélange est à la fois ingéré ou inhalé par les animaux et soit épandu dans le milieu d'élevage, soit appliqué directement sur l'animal, soit les deux. Dans l'invention, l'épandage est assimilé à une dispersion ; ces deux termes peuvent être utilisés uniformément dans l'invention. Les inventeurs ont prouvé une synergie de l'effet protecteur contre des pathogènes 25 lorsque les bactéries décrites dans l'invention (Bacillus et Lactococcus) sont à la fois présentes dans les voies digestives ou respiratoires et dans le milieu d'élevage et/ou sur l'animal. Dans l'invention on entend par souche bactérienne un ensemble des individus issus de repiquages successifs d'une colonie bactérienne. Une souche bactérienne est une 30 partie d'une espèce bactérienne différente des autres bactéries de la même espèce par une différence mineure mais identifiable. Dans l'invention, on entend par infections pathogènes, les infections par les microorganismes suivants : Salmonelles, Staphylocoques, Streptocoques, Clostridium, Listeria, Arcanobacterium, Mycoplasme, Klebsielle, Pasteurelles, Bordetelles, 35 Campylobacter, Brachyspire, Escherichia cou i et/ou responsable des pathologies suivantes : entérites, salmonellose, ulcères, boiteries infectieuses, rhinite, mammite, épidermites, nécroses, pasteurellose, bordetellose, listériose. 3 Il est particulièrement avantageux dans l'invention que la composition susmentionnée comprenne au moins deux souches de Bacillus, et notamment au moins deux souches différentes de Bacillus et au moins une souche de bactérie lactique, notamment de Lactococcus lactis . 5 Il est encore plus avantageux dans l'invention que la composition susmentionnée comprenne au moins trois souches de Bacillus, et notamment au moins trois souches différentes de Bacillus, et au moins une souche de bactérie lactique, notamment de Lactococcus lactis. Il est encore plus avantageux dans l'invention que la composition susmentionnée 10 comprenne au moins quatre souches de Bacillus, et notamment au moins quatre souches différentes de Bacillus et au moins une souche de bactérie lactique, notamment de Lactococcus lactis . Dans l'invention on distinguera une application dans l'environnement (E), en référence à l'épandage dans l'environnement, d'une application externe sur l'animal (A) en 15 référence à l'application sur l'animal, et d'une application interne (I), en référence à l'ingestion ou l'inhalation. L'application E permet de contrôler et/ou d'orienter la flore bactérienne de l'environnement des animaux d'élevage terrestre en diminuant la pression pathogène. Elle peut se faire en nébulisation ou pulvérisation des bâtiments d'élevage, incorporation 20 à la litière... On observe moins de contamination des animaux car il y a moins de foyers pathogènes. Une telle application joue sur les pathogènes vivants ou survivants dans l'environnement. Les modes d'épandage dans l'environnement sont la pulvérisation, la nébulisation, le recouvrement des surfaces par des mousses ou encore le saupoudrage de poudre. L'épandage se fait généralement sur les surfaces de l'élevage, principalement sur les surfaces en contact direct ou potentiel avec les animaux, de préférence sur des surfaces nettoyées et désinfectées, après avoir attendu la fin de la rémanence des produits désinfectants. L'épandage dans l'environnement est réalisé au moins une fois après un vide 30 sanitaire, après un protocole de nettoyage / désinfection ou avant arrivée des animaux. Il est particulièrement avantageux de pratiquer une application répétée toutes les semaines. L'application A permet de contrôler ou d'orienter le microbisme de l'animal en diminuant la pression pathogène. L'application peut se faire en nébulisation, 35 pulvérisation, trempage de l'animal terrestre. Cela génère moins de contamination des animaux car il y a moins de foyers pathogènes directement sur l'animal. L'application sur l'animal peut se faire par pulvérisation, nébulisation, trempage, 4 pédiluve, mousse, selon la zone de l'animal sur laquelle il est souhaité de déposer la composition selon l'invention. Il est avantageux d'appliquer au moins une fois la composition sur l'animal le plus tôt possible dans la vie de l'animal ou lors de l'arrivée dans un nouvel environnement. De 5 préférence l'application est répétée toutes les semaines. L'application 1 permet de contrôler et/ou d'orienter le microbisme digestif en diminuant la pression pathogène et/ou en stimulant les défenses naturelles des animaux. L'application peut se faire via l'eau de boisson, l'alimentation où tous les moyens permettant à l'animal d'ingérer la composition de l'invention. De cette manière, la 10 composition selon l'invention joue directement sur la santé digestive des animaux d'élevage terrestre, ce qui limite l'entrée d'autres pathogènes. L'application 1 peut également être une application par inhalation par nébulisation ou pulvérisation dans les voies respiratoires. L'application 1 devrait être démarrée le plus tôt possible, avant le début de la phase à 15 risque sanitaire et pendant toute la durée de la période à risque sanitaire. Il est recommandé de renouveler l'application au minimum tous les 10 jours, au mieux tous les jours. Dans l'invention, on entend par animaux d'élevage terrestre, tous les animaux n'étant pas aquatique, et pouvant servir directement ou indirectement à la nutrition humaine ou 20 animale. Cela concerne notamment les bovins, les ovins, les porcins, les caprins, les lapins, les équidés, les insectes mais également les oiseaux d'élevages tels que les poules, les canards, les oies, les dindes, les cailles et autres gallinacés d'élevage. Avantageusement, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle la composition bactérienne comprend : 25 - au moins l'une des trois souches de Bacillus subtilis suivantes : NOL01, NOLO2, NOLO3, lesdites souches étant respectivement déposées à la CNCM sous le numéro CNCM 1 - 4606, CNCM 1-5043 et CNCM 1 - 4607, et - au moins la souche de bactérie lactique: Lactococcus lactis spp lactis 1 souche NOL11, ladite souche étant déposée à la CNCM sous le numéro CNCM 1 -4609. L'invention concerne l'utilisation d'au moins une souche choisie parmi les souches NOL01, NOLO2 et NOLO3 et au moins la souche NOL11. Aussi, l'invention couvre les 7 combinaisons suivantes : - NOLO1 et NOL11, - NOLO2 et NOL11, - NOLO3 et NOL11, - NOL01, NOLO2 et NOL11, - NOL01, NOLO3 et NOL11, 5 - NOL02, NOLO3 et NOL11, et - NOL01, NOL02, NOLO3 et NOL11. Toutes ces souches ont été déposées à la collection nationale des microorganismes (CNCM) à l'Institut Pasteur à Paris, selon le traité de Budapest. 5 De manière plus avantageuse, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, ladite composition comprenant de 104 à 1011 colonies bactériennes de Bacillus et de 104 à 1011 colonies bactériennes de bactéries lactiques, les colonies bactériennes étant en gramme ou en millilitre de composition. En d'autres termes, dans ce mode de réalisation avantageux, si la composition selon 10 l'invention est sous forme liquide, ladite composition comprendra de 104 à 1011 colonies bactériennes de Bacillus par mL de composition, et cela pour chacune des souches lorsque la composition comprend au moins deux souches et de 104 à 1011 colonies bactériennes de Bacillus par mL de composition de bactérie lactique. Si par contre la composition selon l'invention est déshydratée ou non aqueuse, ladite 15 composition comprendra de 104 à 1011 colonies bactériennes de Bacillus par g de composition, et cela pour chacune des souches lorsque la composition comprend au moins deux souches et de 104 à 1011 colonies bactériennes de Bacillus par g de composition de bactérie lactique. Dans l'invention, de 104à 1011 colonies bactériennes signifie : environ 104, environ 5. 20 104, environ 105, environ 5.105, environ 106, environ 5.106, environ 107, environ 5.107, environ 108, environ 5.108, environ 109, environ 5.109, environ 1010, environ 5.1010 ou environ 1011 colonies bactériennes. Les colonies bactériennes s'entendent par mL (ou gramme) de culture bactérienne. L'homme du métier sait aisément comment déterminer ce nombre de bactéries, 25 notamment par comptage soit manuel (en utilisant une lame de Malassez) ou en utilisant un compteur de cellule automatique, ou par dilution puis ensemencement sur gélose et comptage des colonies. De manière avantageuse, on utilisera de 105 à 1010 colonies bactériennes par individus lors d'un traitement de volailles, de 105 à 1010 colonies bactériennes par individu 30 pour une application chez le porcelet, et de 105 à 1011 colonies bactériennes par individu pour une application chez le porc. Concernant la dose avantageuse pour une ingestion, celle-ci est de 105 à 1010 colonies bactériennes par animal par application. Pour l'environnement, il est avantageux d'utiliser de 105 à 1011 colonies bactériennes 35 par m2 de surface ou d'environnement à traiter. Encore plus avantageusement, l'invention concerne une composition pour son utilisation telle que définie précédemment, où ladite au moins une souche de Bacillus est 6 sous forme sporulée et/ou sous forme végétative. Les bactéries lactiques sont quant à elle toujours sous forme végétatives. Aussi la composition selon l'invention comprend au moins une souche de Bacillus sous forme sporulée et au moins une souche de bactérie lactique sous forme végétative, ou 5 comprend au moins une souche de Bacillus sous forme végétative et au moins une souche de bactérie lactique sous forme végétative. Encore plus avantageusement, l'invention concerne une composition pour son utilisation définie ci-dessus, où ladite composition inhalée ou ingérée et ladite composition épandue dans le milieu d'élevage desdits animaux d'élevage terrestres et/ou 10 appliquée sur lesdits animaux d'élevage terrestres, sont utilisées simultanément, séparément ou étalée dans le temps. Il n'est pas nécessaire que les traitements ingérés ou inhalés et les traitements épandus dans l'environnement ou appliqués sur l'animal soient simultanés, c'est-à-dire appliqués en même temps. Il est possible de séparer les applications dans le temps, par 15 exemple commencer à traiter l'environnement de l'animal, puis une fois l'animal introduit dans l'environnement, lui faire ingérer la composition selon l'invention. De manière plus avantageuse, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, où ladite composition est épandue et/ou appliquée préalablement à l'ingestion ou l'inhalation par lesdits animaux d'élevage terrestres. 20 Dans le cas d'un traitement préalable à l'ingestion ou l'inhalation de la composition selon l'invention, l'épandage dans l'environnement se fait selon les doses telles que définies ci-dessus. Avantageusement, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ladite composition consiste essentiellement en les quatre 25 souches bactériennes du groupe constitué par les trois souches NOL01, NOL02, NOL03, lesdites souches étant respectivement déposées à la CNCM sous le numéro CNCM 1 - 4606, CNCM 1-5043 et CNCM 1 - 4607 et la souche Lactococcus lactis spp lactis 1 souche NOL11, ladite souche étant déposée à la CNCM sous le numéro CNCM 1- 4609. Cette combinaison est particulièrement avantageuse et décrite dans les exemples. 30 Il est particulièrement avantageux que la composition comprenne les trois souches de bactéries Bacillus subtilis susmentionnées, sous forme végétative ou sporulée, et la souche de bactérie lactique susmentionnée, sous forme végétative De manière encore plus avantageuse, l'invention concerne une composition pour son utilisation telle que définie précédemment, où ladite composition est épandue par m2 à 35 raison de 105 à 1011 colonies bactériennes. Dans le cadre de l'application de l'environnement des animaux d'élevage, il est avantageux que la composition soit dispersée ou épandue à raison de 105 à 1011 colonies 7 bactériennes pour une composition sèche ou déshydratée, ou 105 à 1011 colonies bactériennes pour une composition liquide par m2 de surface ou de milieu à traiter. Toujours de manière avantageuse, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, où l'environnement est nettoyé et désinfecté et les animaux 5 terrestres sont lavés préalablement à l'épandage dans le milieu d'élevage desdits animaux d'élevage terrestres et/ou l'application sur lesdits animaux d'élevage terrestres. Il peut être avantageux de nettoyer l'environnement et/ou les animaux avant d'utiliser la composition selon l'invention. Ce nettoyage peut être assimilé à une désinfection. Avant implantation des flores de la composition selon l'invention, si un nettoyage ou une 10 désinfection est opéré, meilleure sera l'efficacité des bactéries, et meilleur sera le bénéfice pour les animaux. Les surfaces peuvent être traitées par tout moyen de nettoyage connu de l'homme du métier en utilisant la composition selon l'invention. En ce qui concerne le nettoyage des animaux, il est possible de les laver, les baigner, voire de les shampooiner avec des solutions comprenant la composition selon l'invention. 15 L'invention concerne en outre une trousse à destination des animaux d'élevage terrestres contre les infections pathogènes affectant la santé et le bien-être des animaux d'élevage comprenant - une composition telle que définie dans l'une quelconque des revendications précédentes, et 20 - au moins un agent de biosécurité et/ou au moins un agent de biocontrôle Dans l'invention on entend par agent de biosécurité un agent chimique ou physique capable de réduire le nombre ou d'inactiver des microorganismes et leurs biofilms. Il s'agit par exemple de désinfectants, de détergents, de rayonnements UV' ou encore de la vapeur d'eau ou tout autre agent biocide. Cette liste n'est pas limitative, et l'homme du 25 métier connait les agents de biosécurité. Dans l'invention on entend par agent de biocontrôle toute composition d'organismes vivants ou issue d'organismes vivants, ou composition de substances naturelles ayant pour but de protéger les animaux d'un point de vue sanitaire (des macro-organismes (insectes, nématodes, etc.), des micro-organismes (virus, bactéries, phages ou 30 champignons), des médiateurs chimiques (phéromones), ou des substances naturelles d'origine minérale, végétale ou animale telles que par exemple des huiles essentielles). Dans l'invention, il est proposé de fournir un kit qui comprend la composition telle que définie ci-dessus, et notamment une composition comprenant les bactéries NOL01, NOL02, et NOLO3 avec la bactérie NOL11, et en parallèle au moins un agent de 35 biocontrôle et/ou de biosécurité. Ce kit permet à l'utilisateur de disposer des moyens d'appliquer la composition selon l'invention, et le cas échéant, au préalable, ou après le traitement avec la composition 8 selon l'invention, d'utiliser un ou plusieurs autres agents tels que définis ci-dessus. Il est notable que pour conserver l'effet de la composition selon l'invention, l'agent susmentionné ne doit pas être utilisé simultanément avec la composition selon l'invention s'il a un effet antibactérien. 5 L'invention sera mieux comprise à la lumière des trois exemples et des 13 figures suivantes : BREVE DESCRIPTION DES FIGURES La Figure 1 représente un graphique représentant les résultats d'indice de consommation corrigé (ICC) des bâtiments d'élevage essais et témoins. L'axe des 10 abscisses différencie les résultats des lots essais (à gauche) et des lots témoins (à droite). L'axe des ordonnées représente les valeurs des ICC. Pour l'ensemble des lots essais, identifiés par les points noirs colonne gauche, est représentée une boite à moustache synthétique pour visualiser moyennes, médianes, quantiles et indices de confiance. De même pour les lots témoins colonne de gauche. A. : invention ; B: 15 témoins. La Figure 2 représente un graphique représentant la différence de résultats d'indice de consommation corrigé (ICC) entre les bâtiments essai et témoin d'un même élevage. L'axe des ordonnées représente les valeurs des ICC. Pour l'ensemble des élevages, identifiés par les points noirs, est représentée une boite à moustache synthétique pour 20 visualiser moyennes, médianes, quantiles et indices de confiance. La Figure 3 représente un graphique représentant les résultats des pesées individuelles des animaux à 7 jours d'âge tous élevages confondus, dans les bâtiments essais et témoins. L'axe des abscisses différencie les résultats des lots essais (à gauche -A.) et des lots témoins (à droite - B.). L'axe des ordonnées représente les valeurs des 25 poids en kg. Une boite à moustache synthétique indique les valeurs des moyennes, médianes, quantiles et indices de confiance pour l'ensemble des animaux issus des lots essais (gauche) ou témoins (droite). La Figure 4 représente un histogramme représentant les résultats de tarses brûlés obtenus à l'abattoir pour les poules femelles. L'abscisse différencie les lots témoins (gris 30 clair à gauche) et essais (gris foncé à droite). L'ordonnée représente le pourcentage de tarses brûlés. Les graphiques indiquent la valeur des médianes des deux lots et leur intervalle de confiance. La Figure 5 représente un histogramme représentant les résultats de tarses brûlés obtenus à l'abattoir pour les poulets mâles. L'abscisse différencie les lots témoins (gris 35 clair à gauche) et essais (gris foncé à droite). L'ordonnée représente le pourcentage de tarses brûlés. Les graphiques indiquent la valeur des médianes des deux lots et leur intervalle de confiance. 9 La Figure 6 représente un histogramme représentant les résultats de consommation d'antibiotique en ppm d'antibiotique par kg de poids vif. L'abscisse différencie les lots témoins (gris clair à gauche) et essais (gris foncé à droite). L'ordonnée représente la valeur de consommation d'antibiotique. Les graphiques indiquent la valeur des médianes 5 pour les deux lots et leur intervalle de confiance. La Figure 7 représente un histogramme représentant le nombre de jours de traitements antibiotiques cumulés sur l'ensemble des lots essais ou témoins. L'abscisse différencie les traitements réalisés pour des problématiques liées aux boiteries (A.) ou les traitements réalisés dans les 10 premiers jours de vie des animaux (démarrage B.). 10 L'ordonnée représente le nombre de jours de traitements antibiotiques. On différencie en gris clair les résultats pour les lots essais et en gris foncé les lots témoins. La Figure 8 représente un histogramme représentant les résultats de poids moyens obtenus à l'abattoir pour les poulets mâles. L'abscisse différencie les lots témoins (gris clair à gauche) et essais (gris foncé à droite). L'ordonnée représente le poids moyen des 15 animaux. Les graphiques indiquent la valeur des médianes des deux lots et leur intervalle de confiance. La Figure 9 représente un histogramme représentant les résultats de poids moyens obtenus à l'abattoir pour les poules femelles. L'abscisse différencie les lots témoins (gris clair à gauche) et essais (gris foncé à droite). L'ordonnée représente le poids moyen des 20 animaux. Les graphiques indiquent la valeur des médianes des deux lots et leur intervalle de confiance. La Figure 10 représente la modélisation de l'évolution de la mortalité cumulée chez les poules femelles. L'abscisse représente les jours de vie des animaux et l'ordonnée le pourcentage de morts cumulés. En gris clair (au-dessus) on visualise le modèle 25 correspondant aux lots témoins et en gris foncé (en dessous) le modèle des lots essais. La Figure 11 représente la modélisation du risque d'apparition de diarrhée dans une case selon le protocole suivi. L'axe des abscisses représente les jours de vie des porcelets par rapport à la date de mise bas (0). L'ordonnée représente la probabilité qu'au moins un porcelet d'une case présente une diarrhée. Les trois courbes regroupées 30 situées au-dessus représentent les modélisations des probabilités de diarrhées pour les lots 1 à 3 et la courbe isolée en dessous pour le lot 4. La Figure 12 représente la modélisation du risque de mortalité d'un porcelet selon le protocole suivi. L'axe des abscisses représente les jours de vie des porcelets par rapport à la date de mise bas (0). L'ordonnée représente la probabilité qu'un porcelet meurt. Les 35 trois courbes regroupées situées au-dessus représentent les modélisations des probabilités de diarrhées pour les lots 1 à 3 et la courbe isolée en dessous pour le lot 4. La Figure 13 représente un graphique représentant le nombre de case de porcelets 10 présentant des fèces normales sur 120 cases avec shampoing et 120 cases sans shampoing. L'abscisse représente les jours de vie des porcelets et l'ordonnée le nombre de cases présentant des fèces normales. En gris clair on visualise les cases qui n'ont pas reçu de shampoing avant de recevoir les flores et en noir les cases ayant reçu le 5 shampoing avant de recevoir les flores. EXEMPLES EXEMPLE 1 - application dans l'environnement : litière des veaux d'élevage Dans ce premier exemple, Les inventeurs cherchent à montrer si une application de la composition selon l'invention dans l'environnement ou sur la litière, seule, à un intérêt 10 pour la prévention des infections pathogènes. Cet essai est réalisé sur la partie veaux d'un élevage de vaches laitières Holstein en France dans le département d'Ille-et-Vilaine. Le produit testé, est une association de bactéries vivantes (souches de Bacillus subtilis et de Lactococcus lactis) dans leur milieu de culture, apporté congelé à l'élevage, 15 devant être dilué dans de l'eau avant pulvérisation. L'essai est réalisé dans le bâtiment des veaux avec un lot témoin et un lot où le produit sera pulvérisé dans l'environnement et sur la litière. L'impact du produit sera étudié au cours du temps. L'influence du produit sera mesurée sur les qualités chimiques de la litière, la propreté 20 des animaux et le bilan sanitaire du lot (fréquence et nature des pathologies, frais vétérinaires) au cours de temps. MATERIEL ET METHODES a -Animaux 16 veaux d'élevage Holstein de 6 semaines à 5 mois et demi répartis par 3, 4 ou 5 25 selon leur âge dans 4 cases de 15m2 en aire paillée. Les deux premières cases étant séparées des deux autres par un mur. b -Produit utilisé et matériel Une dose de composition est conditionnée dans deux flacons distincts de 20 ml : - Le flacon B contenant des bacillus 30 - Le flacon L contenant les Lactococcus Les flacons sont apportés congelés en élevage. L'eau utilisée lors de la pulvérisation, ne doit pas contenir de chlore, un traitement préalable de l'eau au thiosulfate de sodium peut donc être nécessaire. Le matériel nécessaire pour le traitement et les mesures est le suivant : 35 - 8 boites de 2 flacons de composition - Du thiosulfate de sodium - 1 pulvérisateur 11 - 1 ruban bovimétrique c -Dispositif expérimental AVANT LE LANCEMENT DES ESSAIS: - On prendra garde à vérifier le bon fonctionnement du pulvérisateur. 5 - Surface totale de l'aire paillée (témoin + essai) : 60 m2, soit environ 4 m2 par animal - Surface traité avec la composition selon l'invention : 2 cases de 15 m2 - Surface témoin : 2 cases de 15 m2 Séparation des cases témoins et essais par un mur. Le poids des veaux est estimé au début de l'essai grâce à un ruban bovimétrique. La 10 répartition des veaux dans chaque case a été réalisé pour obtenir un poids vif total comparable entre les cases témoins et essais. d - Déroulement de l'essai et mesures L'essai a duré 2 mois, période entre deux curages. Sem Sem Sem Sem Sem Sem Sem Sem Sem 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Curage Pulvérisation des cases 3 et 4 X X X X X X X X 15 La première application du produit est réalisée après le curage en semaine 16. Les premières mesures sont réalisées juste avant la première application des flores. Ensuite les mesures sont réalisées chaque semaine avant application du produit. Fin des applications du produit en semaine 23 et dernière mesure juste avant le deuxième curage 20 en semaine 24. e -Application Mode d'emploi : à appliquer sous forme liquide. Une dose de produit (constituée des flacons B et L) est nécessaire pour chaque pulvérisation hebdomadaire. 1 L de composition diluée est utilisé pour traiter les 30 m2 de l'essai veaux. 25 Procédure de préparation de la solution : - Laisser décongeler le produit à température ambiante entre 15 et 25 °C jusqu'à liquéfaction complète (env. 1h ± 15 minutes) - Préparer 10L d'eau et ajouter 160mg de thiosulfate de sodium (si l'eau est traitée au chlore, ajouter du thiosulfate de sodium à hauteur de 16 mg/L d'eau. Si l'eau est traitée 30 au peroxyde d'hydrogène, utiliser impérativement de l'eau minérale ou de l'eau non traitée). - Enlever la capsule et retirer le bouchon des flacons - Verser les deux flacons du produit dans l'eau traitée 12 - Mélanger pour homogénéiser le produit puis laisser reposer pendant 15 minutes - Dans un pulvérisateur n'ayant pas contenu de désinfectant, verser 1L de la composition selon l'invention, ladite composition étant diluée, et pulvériser sur la litière et l'ensemble des surfaces des cases 3 et 4. 5 - Cette application sera à renouveler toutes les semaines de l'essai (8 au total). Pendant l'essai, aucune désinfection ne sera réalisée dans le bâtiment. f - Pratiques de paillage L'éleveur garde ses pratiques de paillage habituelles pendant toute la durée de l'essai. - Apporter 1 round de paille pour 30 m2 après curage 10 - Paillage 2 à 3 fois par semaine - Répartir les quantités de paille de manière identique dans chacune des cases. - Lors des journées de mesures/traitement, le paillage est réalisé après ces pratiques g - Mesures et Analyses 15 Date des prélèvements et mesures : Sem Sem Sem Sem Sem Sem Sem Sem Sem 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Curage MS de la litière x x x x T° de la litière x x xx x Hauteur de litière - Mesures de température Réaliser une mesure de T° hebdomadaire sur l'horizon 0 - 20 cm dès le premier curage 20 à la surface de la paille et en profondeur (indiquer la profondeur de la première mesure pour réaliser la même tout au long de l'essai, si l'épaisseur augmente, une troisième mesure plus profonde pourra être prise (longueur totale de la sonde). - Mesures de MS A partir du premier curage, une fois toutes les deux semaines, réaliser des prélèvements 25 de litière (3 - 4 poignées pour un total de 200g minimum) sur l'horizon 0 - 20 cm, et mesurer la MS (envoi des échantillons au laboratoire). Les semaines avec curage, réaliser la mesure au jour du curage, juste avant le début des opérations. Pour chaque prélèvement, effectuer un prélèvement à tous les points de prélèvement, et rassembler les échantillons par case. On obtient donc 4 échantillons de 1kg minimum. 30 Homogénéiser avant envoi à l'analyse et identifier de la manière suivante : numéro de case (1, 2, 3 et 4)! date de prélèvement! analyse (MS) 13 - Mesures sur les animaux Sanitaire : demander à l'éleveur de noter les problèmes sanitaires apparus en cours d'essai + les frais vétérinaires pour chaque période (diarrhée, problème respiratoire ou autre). 5 Résultats et conclusion : Les résultats de températures de la litière ainsi que la matière sèche sont équivalents entre les deux lots. Quelques diarrhées observées, mais aucune différence significative entre le lot témoin et lot essai (traité avec la composition selon l'invention), notamment en qualité de fèces 10 et en termes de propreté des cases où les résultats sont équivalents entres les lots. Aussi, l'application dans l'environnement seule n'est pas suffisante pour améliorer la condition de vie des animaux. EXEMPLE 2 - Application sur l'animal - volailles CONTEXTE ET OBJECTIFS 15 Dans ce second exemple l'objectif est de déterminer si l'application sur l'animal peut avoir un meilleur effet. L'objectif de cet essai est de tester l'application de la flore de barrière (combinaison congelée de Bacillus et Lactococcus) dès le couvoir, sur les poussins à JO, afin d'étudier son impact sur la qualité sanitaire des lots. L'essai sera réalisé sur des poussins à destination de 20 élevages, qui seront comparés à des lots 20 témoins contemporains. Dans chaque élevage en essai, seuls les poussins d'un bâtiment seront traités en couvoir, les poussins du second bâtiment n'auront subi aucun traitement (témoin). Le but est de vérifier un effet sur la baisse de mortalité, l'amélioration sanitaire, l'amélioration des indices zootechniques. 25 On applique la composition selon l'invention (souches de Bacillus subtilis et de Lactococcus lactis) directement sur les poussins après sexage. Les doses seront décongelées dans un bain-marie de 27°C pendant 9 minutes 30. Elles seront ensuite diluées dans 3L d'eau minérale pour 30 000 poussins, soit 0,1mL par poussin. Cette préconisation tient compte du volume d'eau utilisé pour une 30 vaccination par pulvérisation soit 0,2 à 0,3m L. 100 mâles et 100 femelles sont pesés à J7 dans chaque bâtiment. Les paramètres étudiés sont : les consommations d'aliment et d'eau, la mortalité et élimination ainsi que les données de l'abattoir (résultats technico économique, saisies, dénombrement des pododermatites, tarses, LCI et bréchets). 35 Résultats : Les résultats observés pour l'indice de consommation corrigé (ICC) sont mentionnés aux figures 1 et 2. 14 Avec un test Student : p-value = 0,882, la différence entre les animaux traités et non traités n'est pas significative. Il en est de même pour la marge poussin aliment (MPA), les tarses brûlés, la mortalité, les traitements antibiotiques, les poids des animaux mentionnés à la figure 3, les 5 pododermatites qui ne sont pas significativement différents entre les témoins et les animaux ayant reçu la composition selon l'invention. Aussi, on constate que l'application sur l'animal seule n'apporte pas de bénéfice à l'animal. EXEMPLE 3 -Application dans l'environnement, sur l'animal : Volailles 10 OBJECTIF L'objectif de cet essai est de tester l'efficacité de la composition selon l'invention à la fois sur l'animal et dans l'environnement. Le but est d'identifier une utilisation optimale pour la prévention de pathologies (boiteries, colibacilloses, etc.) et/ou la santé intestinale et l'amélioration de la qualité des litières et donc du bien-être animal. 15 DISPOSITIF EXPERIMENTAL 2 élevages testés. Le premier élevage testé dispose de 2 bâtiments comparables, avec litière cosses de sarrasin sur sol béton. Il est équipé de pesons. Son eau de boisson est traitée avec 3% d'acide hypochloreux pur à 80% (système de traitement par électrolyse - société DCVV). 20 Le second élevage dispose de 2 bâtiments comparables, avec litière cosses de sarrasin et copeaux de bois sur sol non bétonné. Il est équipé de pesons. Son eau de boisson est traitée avec du peroxyde d'hydrogène, arrêt du traitement lors de la pulvérisation de la flore. L'influence du produit est mesurée sur les performances de croissance, le bilan 25 sanitaire du lot (fréquence et nature des pathologies, frais vétérinaires), les comptages bactériologiques (litière), les émissions de gaz, la qualité des litières et les critères de bien-être. APPLICATION Application de 5 doses en cours d'élevage. 30 5 doses réparties de la façon suivante : JO -J3 J7-J9-J14-J21. L'ensemencement à JO est réalisé après la mise en place. Pulvériser l'environnement et les animaux. Les bâtiments essais et témoin se distinguent uniquement par l'application ou non de la flore de barrière. Le produit est pulvérisé par brumisation (environ 15-20L d'eau 35 contenant la flore à chaque application, pour 1200 m2). L'eau utilisée est de l'eau de puits artésien non traité. 15 Résultats : Le tableau suivant présente une comparaison des résultats entre les bâtiments témoin et essai pour les deux élevages. Elevage 1 Elevage 2 Performances zootechniques ICC Bien-être Eau /Aliment +4 pts +2,5 pts + avant 28j - après 28j Litière - avant 28j - en fin de bande Matière Sèche - sauf en fin de bande Pododermatites Etat sanitaire Traitements plus de traitements dans le plusieurs traitements dans les Mortalité lot témoin deux lots + pour les males + pour les femelles avant 27 j puis - - pour les mâles après 27j Tri + pour les mâles Tenue sur pattes Saisies + pour femelles Bactériologie Litière Pas de différence Pas de différence significative significative Conclusions : 5 Les applications animal et environnement seules ne suffisent pas à améliorer le bien être des animaux. En effet, les résultats sur les 2 élevages montrent des effets contradictoires sur les boiteries, la mortalité et les pododermatites, pas de différence significative sur la bactériologie et des litières et un indice de consommation dégradés. 10 EXEMPLE 4 - Applications dans l'environnement, sur l'animal et ingérée: Volailles Cet essai a pour but de déterminer si une combinaison des applications dans l'environnement, sur l'animal et une ingestion à une efficacité sur la prévention des infections pathogènes. 15 a. Dispositif expérimental Une étude statistique préliminaire a permis de classifier les élevages de volaille chair selon la proximité des résultats zootechniques de deux bâtiments de l'élevage. Sont rentrés dans cette classification, tous les élevages comportant au moins 5 bandes depuis début 2014 pour lesquelles les valeurs de poids, mortalité, ICC et pododermatite ont été 16 renseignées. Cette étude a permis d'établir une liste des 60 élevages comportant des résultats les plus proches entre deux bâtiments. L'essai aura donc lieu dans une vingtaine d'élevages présents sur cette liste avec dans chaque élevage en essai, un bâtiment témoin et un bâtiment recevant une 5 application de flores de barrière. Avant l'intégration de chaque élevage dans l'essai, on s'assurera que les deux bâtiments en essai recevront les mêmes lignées d'un même couvoir pendant 2 bandes. b. Produit utilisé et matériel L'application du produit se fera avec des pulvérisateurs à accus ou avec les 10 pulvérisateurs des éleveurs utilisés pour la vaccination (après validation du matériel : contenance suffisante, praticité, pas d'utilisation pour des traitements de désinfection ou tout autre produit incompatible). Le matériel nécessaire pour le traitement et les mesures est le suivant : Boites de 2 flacons de flores 15 De l'eau minérale Nébulisateur à accus Gants Sur-bottes Cottes 20 c. Applications Deux types d'application sont réalisés : dans le bâtiment + animaux et dans le circuit d'eau. Application environnement et animaux : Pulvérisation sur : la litière, les mangeoires, les abreuvoirs et sur les animaux. 25 1 dose pour 1000 à 1200 m2 ou 1 dose pour 20 à 24 000 poussins. Application : JO (juste après la mise en place), J10 et J20. Procédure de préparation de la solution : Laisser décongeler le produit à température ambiante entre 15 et 25 °C jusqu'à liquéfaction complète (env. 1h ± 15 minutes) ou 5 minutes dans un bain-marie de 30°C. 30 Verser 10L d'eau dans le réservoir du pulvérisateur (si l'eau est traitée au chlore, ajouter du thiosulfate de sodium à hauteur de 16 mg/L d'eau. Si l'eau est traitée au peroxyde d'hydrogène, utiliser impérativement de l'eau minérale ou de l'eau non traitée). Enlever la capsule et retirer le bouchon des flacons Verser les deux flacons du produit dans l'eau (traitée ou minérale) 35 Mélanger pour homogénéiser le produit puis laisser reposer pendant 15 minutes avant de commencer la nébulisation. Pulvériser la solution dans l'ensemble du bâtiment et sur les animaux. 17 Application dans le circuit d'eau : Arrêt du traitement de l'eau (ou neutralisation par du thiosulfate de sodium si l'eau est chlorée). 1 dose pour 20 à 24 000 poussins. 5 Application à: JO - J1 - J2 - J10 - J20 - J30 - J40 Procédure de préparation de la solution : Laisser décongeler le produit à température ambiante entre 15 et 25 °C jusqu'à liquéfaction complète (env. 1h ± 15 minutes) ou 5 minutes dans un bain-marie de 30°C Remplir le réservoir d'environ 100L d'eau pour les applications jusqu'à J10 et 300L 10 pour les autres (si l'eau est traitée au chlore, ajouter du thiosulfate de sodium à hauteur de 16 mg/L d'eau. Si un autre traitement de l'eau est réalisé, l'arrêter les jours de traitement). Enlever la capsule et retirer le bouchon des flacons Verser les deux flacons du produit dans l'eau 15 Mélanger pour homogénéiser le produit Si un traitement antibiotique est réalisé à l'arrivée des poussins, décaler les traitements du circuit d'eau à deux jours après la fin de l'antibiotique. d. Résultats Les figures 4 à 10 représentent les résultats obtenus pour la boiterie, la mortalité, le 20 traitement avec les antibiotiques, les tarses brûlés chez les mâles, et la consommation d'aliments. Les figures 4 et 5 montrent une diminution significative du nombre d'animaux ayant des tarses brûlés chez les mâles (figure 4) ou les femelles (figure 5) lors du triple traitement avec la composition selon l'invention, comparé à l'échantillon témoin. 25 Les figures 6 et 7 montrent que les animaux traités avec la composition selon l'invention selon les trois modes d'application ont significativement besoin de moins d'antibiotiques. On observe une tendance de 12 ppm/kg de poids vif d'antibiotique administrés de moins dans les lots essais par rapport aux témoins, soit une baisse de 39% de la consommation d'antibiotiques. 30 Les mâles ont un poids plus important après traitement avec la composition selon l'invention (figure 8), tout comme les femelles avant le 1 er abattage (figure 9). Enfin la mortalité est diminuée chez les animaux ayant été traités avec les compositions selon l'invention comparés aux animaux témoins (figure 10) En conclusion, on observe un bénéfice significatif sur la santé des animaux, et leur 35 bien être lors de l'utilisation simultanée de la composition dans l'environnement, une application sur l'animal et une ingestion par eau de boisson. EXEMPLE 5 - Application dans l'environnement, sur l'animal et par inhalation : 18 Porcs Cet essai a pour objectif de montrer si une application combinée environnement animal et inhalation est efficace. Donc vérifier par rapport à l'exemple précédant, si d'autres types d'applications peuvent être réalisés comme l'inhalation à la place de 5 l'ingestion. L'essai a été réalisé dans 2 élevages différents selon les protocoles suivants. Elevage 1 : Stade Evénement Traitement témoin (placebo) Traitement essai PS Traitement essai PS+ENG PS + ENG Vidange préfosse, nettoyage désinfection (ND) Oui Oui Oui puis vide sanitaire (VS) PS Nb porcs/salle 180 180 180 Priv* JO Oui Oui Oui Pulv* JO Placebo 2 doses/1000 2 doses/1000 m2 m2 Pulv J15 Placebo 1 dose/1000 m2 1 dose/1000 m2 Pulv J30 Placebo 1 dose/1000 m2 1 dose/1000 m2 Priv J42 Oui Oui Oui ENG Priv JO Oui Oui Oui Pulv JO Placebo Placebo 1 dose/1000 m2 Pulv J15 Placebo Placebo 1 dose/1000 m2 Pulv J45 Placebo Placebo 1 dose/1000 m2 Priv J50 Oui Oui Oui Pulv J75 Placebo Placebo 1 dose/1000 m2 Priv J90 Oui Oui Oui *Priv = prélèvements bactériologiques, Pulv = Nébulisation, ENG: engraissement, PS: post sevrage 10 Elevage 2 : Stade Evénement Traitement (placebo) témoin Traitement PS+Eng essai PS + ENG Vidange préfosse, ND Oui Oui 19 puis VS PS Nb porcs/salle 350 350 Priv* JO Oui Oui Pulv* JO Placebo 2 doses/1000 m2 Pulv J15 Placebo 1 dose/1000 m2 Pulv J30 Placebo 1 dose/1000 m2 Priv J42 Oui Oui ENG Priv JO Oui Oui Pulv JO Placebo 1 dose/1000 m2 Pulv J15 Placebo 1 dose/1000 m2 Pulv J45 Placebo 1 dose/1000 m2 Priv J50 Oui Oui Pulv J75 Placebo 1 dose/1000 m2 Priv J90 Oui Oui ABA Abattage J100 Oui Oui (groins) *Priv = prélevements bactériologiques, Pulv = Nébulisation, ENG : engraissement, PS : post sevrage, ABA : Abattage Dans cet exemple, sont comparés des animaux traités avec la composition selon l'invention selon les trois modes de traitement par rapport à des animaux n'ayant pas 5 reçu la composition de l'invention (placebo). L'application a été réalisée avec un nébulisateur en présence des animaux donc les flores ont été appliquées sur les surfaces des salles (E), sur les animaux (A) et en inhalation (I). Des porcs pris aléatoirement dans l'élevage 2 ont été analysés après l'abattage en 10 mesurant les déformations sur des coupes de groins. Différents prélèvements bactériologiques ont été réalisés avant la première application de flore dans les différentes salles pour évaluer la qualité de l'étape de nettoyage et désinfection et à la sortie des animaux des salles après les différentes applications de flores pour évaluer la pression pathogène. 15 Résultats : Les résultats sont compilés dans le tableau suivant : Notation nez (coupe de groin en abattoir) Note 0 Note 1 10 Note 2 Note 3 Note 4 Moyenne TE état nasal TB état nasal : très bon état nasal Note 0: absence de déviation de la cloison et d'atrophie des volutes et cornets Note 4: déviation de la cloison et atrophie des volutes et cornets 5 L'échantillon placebo (sans composition) indique 30% des individus avec un très bon état anatomique nasal (absence de déviation de la cloison nasale, absence d'atrophie des volutes et cornets nasaux). 1:échantillon essai (porcs élevés en présence de flore de barrière depuis l'entrée en post-sevrage jusqu'en fin d'élevage) révèle que 2 fois plus (63%) d'individus enregistrent 10 un très bon état anatomique nasal vs placebo. Il apparait que l'application selon l'invention apporte un effet significatif sur la santé et le bien-être des animaux. Les résultats bactériologiques montrent que plus la phase de nettoyage et désinfection des salles a été bien réalisée, plus la flore de barrière a montré de meilleurs résultats sur 15 l'inhibition de la flore pathogène : Note de la qualité de la phase de nettoyage désinfection Note 1,3 Note Note Note 1,9 2,2 2,4 (1=excellente à 4=absence) Fréquence de meilleur résultat de la flore de barrière sur la flore 5/6 4/6 3/6 0/6 pathogène vs placebo, en fin de période (83%) (67%) (50%) (0%) Conclusions Cet essai montre aussi l'importance de l'application environnement dont l'efficacité est améliorée lorsque le nettoyage et désinfection des surfaces en amont de l'application est bien réalisé. L'intérêt du produit se mesure tant sur les animaux (sanitaire), que vis-à-vis 20 Elevage 2 Placebo n=20 PC Flore n=19 PC 12 7 O 1 0 o 0,95 0,37 30% 63% 21 de l'éleveur (conditions de travail). EXEMPLE 6 - Application dans l'environnement et sur l'animal en comparaison avec application environnement, animal et ingéré : Porcs Cet essai a pour but de confirmer l'intérêt de la combinaison des trois modes 5 d'applications par rapport à la combinaison de seulement deux d'entre eux. L'élevage suivi est un élevage de 700 truies naisseur engraisseur en sélection multiplication (5 bandes de 120 truies). L'essai s'est déroulé sur 2 bandes à l'intérieur desquelles 3 lots de 40 truies ont été constitués en respectant une répartition homogène des rangs de portée. Le protocole d'application comprend la pulvérisation d'une flore de 10 barrière dans l'environnement, sur les mamelles et le périnée des truies ainsi qu'une administration probiotique aux truies via la machine à soupe. Protocoles de pulvérisation appliqués : Lot 1 Lot 2 Lot 3 Lot 4 Bande 1 + 2 1 1 + 2 2 Antibiotique sur oui oui oui non porcelets J-3 Environnement et truies Environnement et truies Environnement et truies Environnement et truies J-2 J-1 Mamelles et périnée Mamelles et périnée Mamelles et périnée Mamelles et périnée JO: Mise bas J1 Mamelles et périnée Mamelles et périnée Mamelles et périnée Mamelles et périnée J4 Mamelles et périnée Mamelles et périnée Equivalence protocole A + E A + E A + E A + E + I L'ensemble des truies a reçu une dose de probiotiques à l'auge de J-3 à J1 par rapport à la mise bas. 15 Lors de la seconde bande, l'ensemble des truies ont reçu un shampoing avant l'arrivée en maternité, contrairement à la première bande. Seuls les porcelets du lot 4 n'ont pas reçu d'antibiotique au moment des soins. L'antibiotique utilisé pour l'ensemble des autres lots étant très efficace contre les flores positives, les inventeurs considèrent dans cet essai que le protocole de ces lots équivaut 20 à une application uniquement environnement et sur l'animal car les flores ingérées par les porcelets n'ont pas survécu à l'antibiotique. Les inventeurs s'intéressent donc ici aux différences observées entre les lots 1 à 3 (A + E) avec le lot 4 (A + E + I). Résultats : 25 Les figures 11 et 12 montrent qu'avec les trois applications combinées le risque 22 d'apparition de diarrhée est moins important et le risque de mortalité également par rapport à une application uniquement environnement et sur l'animal. La figure 13 montre que plus de cases comportant des porcelets dont les mères ont reçu un shampoing préalablement à l'application de flore sont saines d'un point de vue 5 digestif en comparaison aux porcelets dont les truies n'ont pas reçu de shampoing. En effet, dans le premier cas (bande 2) on observe au plus bas 78 cases sur 120 avec des fèces normales alors que dans le second cas (bande 1), seulement 50 cases sur 120. Ce résultat montre donc également l'importance de l'application sur l'animal, favorisée par le shampoing des truies pour un meilleur développement des flores positives, pour 10 augmenter l'efficacité du produit. Conclusions Dans cet exemple, les inventeurs ont montré que l'application A+E+I est plus efficace que l'application A+E. De plus, ils ont montré que si on favorise l'implantation des flores sur l'animal (application A mieux réalisée), on améliore la prévention des diarrhées. 15 L'invention n'est pas limitée aux modes de réalisation présentés et d'autres modes de réalisation apparaîtront clairement à l'homme REVENDICATIONS1. Composition bactérienne comprenant au moins une souche de bactérie du genre Bacillus, notamment de Bacillus subtils et au moins une souche de bactérie lactique, notamment au moins une souche de Lactococcus lactis, pour son utilisation dans le cadre de la prévention ou du traitement des infections pathogènes affectant la santé des animaux d'élevage terrestres, ladite composition étant sous une forme adaptée pour être: a. Ingérée ou inhalée par lesdits animaux d'élevage terrestres, et b. soit b.1. épandue dans le milieu d'élevage desdits animaux d'élevage terrestres, b.2. appliquée sur lesdits animaux d'élevage terrestres, b.3. épandue dans le milieu d'élevage desdits animaux d'élevage terrestres et appliquée sur lesdits animaux d'élevage terrestres. 15 2. Composition pour son utilisation selon la revendication 1, dans laquelle la composition bactérienne comprend : - au moins l'une des trois souches de Bacillus subtilis suivantes : NOL01, NOL02, NOL03, lesdites souches étant respectivement déposées à la CNCM sous le numéro 20 CNCM I - 4606, CNCM 1-5043 et CNCM 1 - 4607, et - au moins la souche de bactérie lactique: Lactococcus lactis spp lactis 1 souche NOL11, ladite souche étant déposée à la CNCM sous le numéro CNCM I - 4609. 3. Composition pour son utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2, 25 ladite composition comprenant de 104 à 101' colonies bactériennes de Bacillus et de 104 à 1011 colonies bactériennes de bactéries lactiques les colonies bactériennes étant en gramme ou en millilitre de composition. 4. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, 30 où ladite au moins une souche de Bacillus est sous forme sporulée et/ou sous forme végétative. 5. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, où ladite composition sous une forme adaptée pour être inhalée ou ingérée et ladite 35 composition sous une forme adaptée pour être épandue dans le milieu d'élevage desdits animaux d'élevage terrestres et/ou sous une forme adaptée pour être appliquée sur 24 lesdits animaux d'élevage terrestres, sont utilisées simultanément, séparément ou étalée dans le temps. 6. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, 5 où ladite composition est sous une forme adaptée pour être épandue et/ou appliquée préalablement à l'ingestion ou l'inhalation par lesdits animaux d'élevage terrestres. 7. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans laquelle ladite composition consiste essentiellement en les quatre souches 10 bactériennes du groupe constitué par les trois souches Bacillus subtilis NOL01, N0L02, NOL03, lesdites souches étant respectivement déposées à la CNCM sous le numéro CNCM I - 4606, CNCM I-5043 et CNCM I - 4607 et la souche Lactococcus lactis spp lactis 1 souche NOL11, ladite souche étant déposée à la CNCM sous le numéro CNCM I - 4609. 8. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, où ladite composition est épandue par m2 à raison de 105 à 1011 colonies bactériennes. 9. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, où l'environnement est nettoyé et désinfecté et les animaux terrestres sont lavés préalablement à l'épandage dans le milieu d'élevage desdits animaux d'élevage terrestres et/ou l'application sur lesdits animaux d'élevage terrestres. 10. Trousse de prévention des infections pathogènes affectant la santé et le bien-être 25 des animaux d'élevage terrestre comprenant - une composition telle que définie dans l'une quelconque des revendications précédentes, et - au moins un agent de biosécurité choisi parmi les désinfectants, les détergents, les rayonnements UV, ou encore la vapeur d'eau et/ou des huiles essentielles. 30