Brevet FR3069413A1 — publié le 20190201

EXTRAIT HYDROSOLUBLE DE PROPOLIS, PROCEDE D'OBTENTION ET UTILISATION POUR PRE VENIR ET/OU LUTTER CONTRE LES MALADIES DES VEGETAUX La présente invention concerne un extrait particulier de propolis, son procédé d'obtention et son utilisation pour prévenir ou lutter contre les maladies des végétaux, et notamment pour le traitement des fruits et/ou des légumes en post-récolte. Les végétaux sont sans cesse menacés par des maladies causées par des microorganismes : virus, bactéries ou encore champignons. Sur les cultures vivrières, fruitières et légumières et même sur les cultures ornementales, ces maladies sont responsables d'importantes pertes de rendement. Ce sont parfois des récoltes, voire des filières toutes entières, qui sont anéanties. Ces maladies peuvent toucher les plantes en culture, mais également leurs éventuels fruits et légumes produits par ces plantes, avant et/ou après la récolte. Pour protéger les fruits et légumes contre les attaques pathogènes et par conséquent diminuer les pertes et accroître leur durée de conservation, la majorité d'entre eux sont traités pendant leur phase de développement sur la plante et après la récolte. Toutefois, la majorité des traitements existants consiste en l'utilisation de fongicides chimiques qui présentent des inconvénients majeurs liés aux abus et risques de pollution, au développement de souches résistantes, et à l'impact négatif sur la santé et l'environnement. De plus, ces traitements sont en total opposition avec la volonté des consommateurs de s'orienter vers une agriculture biologique et des volontés politiques de réduction des phytosanitaires chimiques. II existe par conséquent un besoin urgent et important de produits naturels, respectueux de l'environnement et de la santé humaine et animale et c'est l'objectif de l'invention d'y répondre. A cet effet l'invention propose un extrait de propolis particulier. La propolis est connue et a déjà été décrite pour ses propriétés antimicrobiennes et antifongiques. Toutefois, en pratique, la propolis n'est pas utilisée pour traiter les plantes 2 et/ou les fruits et/ou les légumes en particulier du fait du caractère hydro-alcoolique et non standardisé des extraits existants testés, qui empêche toute utilisation phytosanitaire du produit. En effet l'utilisation d'extraits contenant de l'alcool est proscrite dans ces traitements. De plus, seuls des essais in vitro de propolis d'origine botanique plus ou moins 5 bien identifiée ont été réalisés et aucun essai in vivo n'a été présenté jusqu'alors démontrant la réelle efficacité de la propolis. Pour répondre à son objectif et pallier ces inconvénients, l'invention vise spécifiquement un extrait liquide hydrosoluble ne contenant pas d'alcool, comprenant au moins 5g de polyphénols totaux par litre d'extrait, et obtenu à partir d'au moins une propolis choisie 10 parmi la propolis de Peuplier, la propolis de Baccharis et la propolis de Dalbergia. Avantageusement, la nature hydrosoluble de l'extrait permet une solubilisation des polyphénols qui, combinée à la teneur importante en ces molécules, permet une très grande efficacité de l'extrait pour prévenir et/ou lutter contre les phytopathogènes. En outre, comme l'extrait ne contient pas d'alcool, il peut être utilisé sur les végétaux, en particulier 15 sur les plantes (toute partie, y compris les éventuels fruits et/ou légumes) en culture, ou en post récolte, notamment pour les fruits et/ou légumes. Il est écologique, respectueux de la santé humaine, et répond aux réglementations en vigueur concernant les produits phytosanitaires, tout en présentant une grande efficacité dans la prévention et la lutte contre les phytopathogènes. 20 L'invention a par conséquent également pour objet l'utilisation de l'extrait pour prévenir et/ou lutter contre les maladies des végétaux, en particulier pour le traitement post-récolte des fruits et/ou légumes. L'invention vise aussi un procédé d'obtention de l'extrait qui comprend notamment l'utilisation d'une solution tamponnée ou tampon. 25 L'invention est à présent décrite en détails. DEFINITIONS Par « extrait» au sens de l'invention on entend un extrait obtenu à partir d'une ou plusieurs propolis d'origine botanique spécifique. Un extrait est constitué par au moins une molécule ou par un mélange de plusieurs molécules issues d'une propolis d'origine botanique spécifique. 3 Par « plante » au sens de l'invention, on entend tout ou partie d'une plante, c'est-à-dire la plante entière ou une partie seulement de la plante comme par exemple les racines, les feuilles, les fruits ou les légumes. Par « végétaux » au sens de l'invention, on entend toute matière végétale, incluant 5 notamment les plantes en culture mais également tout ou partie de plantes après récolte (feuilles, fruits, légumes, racines, etc.). DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION L'invention a donc pour objet un extrait liquide hydrosoluble de propolis, ne contenant pas 10 d'alcool, comprenant au moins 5g de polyphénols totaux par litre d'extrait et obtenu à partir d'au moins une propolis choisie parmi la propolis de Peuplier, la propolis de Baccharis et la propolis de Dalbergia. L'extrait selon l'invention est donc soluble dans l'eau et ne contient pas d'alcool, contrairement aux extraits classiques de propolis. 15 L'extrait comprend une teneur en principe actif élevée. En effet il comprend au moins 5g de polyphénols totaux par litre d'extrait, préférentiellement entre 5 et 50g par litre d'extrait, et encore plus préférentiellement entre 10 et 25g par litre d'extrait. La nature des polyphénols est dépendante de l'origine de la ou des propolis. Préférentiellement l'extrait comprend au moins un des polyphénols suivants : Apigenine, 20 Artepelline C, Biochanine A, chrysine, CAPE, Drupamine, galangine, Liquiritigenine, Medicarpine, Néovestitol, Pinocembrine, vestitol. L'extrait selon l'invention est obtenu à partir d'au moins une propolis choisie parmi la propolis de Peuplier, la propolis de Baccharis et la proprolis de Dalbergia. Selon un mode de réalisation préféré, l'extrait est obtenu à partir de propolis de Dalbergia, qui permet 25 d'obtenir un mélange de polyphénols et une concentration en polyphénols totaux particulièrement efficace pour les effets recherchés dans la prévention et/ou la lutter contre les phytopathogènes. Selon une variante, l'extrait peut être obtenu à partir d'au moins la propolis de Peuplier, la propolis de Baccharis et la propolis de Dalbergia. 30 L'extrait selon l'invention peut éventuellement être obtenu à partir d'au moins une autre propolis en plus de la propolis de Peuplier et/ou de la propolis de Baccharis et/ou de la propolis de Dalbergia. 4 L'extrait selon l'invention présente préférentiellement un pH compris entre 6 et 9, encore plus préférentiellement entre 6,5 et 8. L'extrait se présente sous forme liquide. Cette forme liquide prête à l'emploi permet une utilisation par trempage et/ou par pulvérisation qui s'adapte à tous types de végétaux 5 encore sur tige ou tous types de fruits et légumes en post-récolte. L'extrait selon l'invention peut être obtenu par tout procédé permettant d'obtenir ses caractéristiques. Préférentiellement, il est obtenu par un procédé spécifique qui constitue un objet de l'invention. Ledit procédé comprend les étapes suivantes : 10 - de la propolis brute, préférentiellement réduite en poudre à froid, est dissoute dans une solution hydroalcoolique, préférentiellement une solution entre 50 à 75° d'alcool ; cette étape est de façon préférée réalisée dans les conditions suivantes : o le ratio propolis brute / solvant hydroalcoolique est compris entre 10 et 250 g de propolis pour entre 25 et 2500 ml de solvant, et/ou 15 o macération sous agitation permanente à température ambiante plusieurs jours ou macération par ultra sons à température 1000 1- 101- 201- 501- >1000 1- 101- 201- 501- >1000 1- 101- 201- 501- >1000 100 200 500 1000 100 200 500 1000 100 200 500 1000 100 200 500 1000 Témoin 7 7 1 0 0 6 4 4 1 0 4 3 6 2 0 0 0 0 9 6 inoculé non traité Extrait aqueux de propolis 11 3 1 0 0 11 3 1 0 0 11 0 4 0 0 6 0 7 25 Tableau 3 Anthracnose de blessure nombre de bananes répertoriées par surface de nécrose (mm) On constate également de manière très nette l'efficacité de l'extrait hydrosoluble de propolis selon l'invention par rapport aux témoins non traités. Jusqu'au 8ènie jour après le 11 gazage des bananes, encore 11 fruits traités sur 15 ne présentent aucune nécrose de blessure en comparaison aux bananes témoins. D'un point de vue commercial, le traitement des bananes par l'extrait selon l'invention est très intéressant. 5 Protocole 3: Pourriture de couronne 50111 d'une suspension de spores de Colletotrichum muscle, calibrée à une concentration de 104 conidies/ml ont été déposés sur chaque couronne. Les bouquets ont été stockés pendant 4h à température ambiante puis traités par trempage 2 minutes dans un bac contenant la solution hydrosoluble de propolis EAP6 (10gEAG/I) et enfin restockées pendant 10 jours à 10 13°C (simulation de transport par cargo). Les bananes témoins inoculées sont trempées dans une solution d'eau distillée. Au terme des 10 jours de stockage, les fruits sont traités à l'éthylène pendant 24h dans une enceinte régulée à 19°C. Les fruits sont enfin stockés à 20°C. 15 Au bout de 10 jours de stockage, le développement externe des lésions de la couronne (SEL) est déterminé. Soit aucune nécrose (apparition d'un duvet cotonneux blanc) ne s'est développée, soit la nécrose est inférieure à 25% de la surface de la couronne, soit comprise entre 25 et 50%, soit entre 50 et 75%, soit supérieure à 75% de la surface. Cette évaluation reste qualitative. 20 Après quelques jours de stockage, une nécrose partant de la couronne de la banane progresse un à peu le long du pédoncule. Cette nécrose est ainsi mesurée sur chacune des 3 bananes pour chaque couronne. La longueur moyenne est ainsi déterminée. Un résumé des résultats obtenus est présenté dans le Tableau 4 : Surface nécrosée de la couronne de la banane (%) 2 jours après gazage 5 jours après gazage 8 jours après gazage 0 75 0 75 0 25 a 25 > 75 25 50 75 25 50 75 50 75 0 REVENDICATIONS1. Extrait liquide hydrosoluble ne contenant pas d'alcool, comprenant au moins 5g de polyphénols totaux par litre d'extrait, et obtenu à partir d'au moins une propolis choisie parmi la propolis de Peuplier, la propolis de Baccharis et la propolis de Dalbergia. 2. Extrait selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il comprend entre 5 et 50g de polyphénols totaux par litre d'extrait. 3. Extrait selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il comprend au moins un des polyphénols suivants : Apigenine, Artepelline C, Biochanine A, chrysine, CAPE, Drupamine, galangine, Liquiritigenine, Medicarpine, Néovestitol, Pinocembrine, vestitol. 4. Extrait selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il présente un pH compris entre 6 et 9. 5. Procédé d'obtention d'un extrait selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : - De la propolis brute est dissoute dans une solution hydroalcoolique, - Une solution tamponnée est ajoutée à la solution hydro alcoolique, puis l'ensemble est agité, - Une centrifugation est effectuée, - L'alcool est évaporé jusqu'à obtention d'une solution aqueuse sans alcool. 6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que le ratio propolis brute / solvant hydroalcoolique est entre 10 et 250 g de propolis pour entre 25 et 2500 ml de solvant. 7. Procédé selon l'une des revendications 5 ou 6, caractérisé en ce que le tampon phosphate est ajouté à raison d'un volume pour un volume de solution hydro alcoolique. 8. Procédé selon l'une des revendications 5 à 7, caractérisé en ce que le tampon phosphate et la solution hydroalcoolique, sont agités à température ambiante pendant entre 20 et 24 heures. 9. Procédé selon l'une des revendications 5 à 8, caractérisé en ce que la centrifugation est effectuée durant entre 5 et 25 minutes. 15 10. Utilisation d'un extrait de propolis selon l'une des revendications 1 à 4, pour la prévention ou le traitement des maladies des végétaux. 11. Utilisation selon la précédente revendication, pour prévenir ou traiter les maladies des végétaux causées par au moins un phytopathogène. 5 12. Utilisation selon l'une des revendications 10 ou 11 pour prévenir ou traiter une des maladies suivantes : le mildiou de la vigne, l'anthracnose, la pourriture de couronne, la pourriture grise, la fusa riose. 13. Utilisation selon la revendication 10 ou 11, pour le traitement post-récolte des fruits et/ou des légumes. 10 14. Utilisation selon la précédente revendication, pour prévenir ou lutter contre les maladies des fruits et/ou légumes causées par au moins un phytopathogène. 15. Utilisation selon l'une des revendications 13 ou 14, pour prévenir ou lutter contre l'apparition de taches noires, l'apparition de taches brunes, la pourriture des fruits ou légumes, la pourriture des feuilles, la pourriture noire, l'apparition de moisissures noires, la 15 pourriture brune, la pourriture grise, l'anthracnose, la pourriture « oeil de boeuf » des pommes et des poires, la curvulariose, la maladie du bout noir, la pourriture de la couronne de la banane, la fusariose, la pourriture sèche, la moniliose sur fruits, l'attaque des fruits à pépins, la maladie des raies noires, la maladie de Sigatoka, l'apparition de tâches blanchâtres poudreuses, la moisissure bleue-verdâtre, la pourriture verte des agrumes, la pourriture 20 bleue, la pourriture bleuâtre, la maladie mucoromycosis. 16. Utilisation selon l'une des revendications 13 à 15, pour prévenir ou lutter contre les désordres causés sur les fruits et/ou les légumes par au moins un phytopathogène choisi parmi : Dothiorella dominicana, Colletotrichum gloeosporioides, Aspergillus figer, Altern aria alterna ta, Colletotrichum musae, Fusarium moniliforme, Fusarium pallidoroseum, 25 Botryodiplodia theobromae, Mycosphaerella fijiensis, Thielayiopsis paradoxa, Penicillium digitatum, Penicillium italicum, Botrytis cinerea, Penicillium expansum, Rhizo pus nigrigans, Rhizopus stolonifer, Gloeosporium sp. Monilia fructicola, Fusarium oxysporum, Stemphylium yesicarium, Sclerotinia sclerotiorum, Glomus mosseae, Phomopsis sp. 17. Utilisation selon l'une des revendications 13 à 16, sur au moins un des fruits ou légumes suivants : mangue, banane, ananas, litchi, papaye, citron, fraise, kiwi, pomme, prune, abricot, tomate, asperge, carotte, salade, pomme de terre et avocat. 16 18. Utilisation selon l'une des revendications 13 à 17, pour inhiber et/ou retarder la croissances des phytopathogènes fongiques sur les fruits et/ou légumes en post-récolte.