Brevet FR3073518A1 — publié le 20190517

Utilisation du 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol dans le traitement des dermatoses inflammatoires La présente invention concerne le 4-(1-phényléthyl)benzène5 1,3-diol, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de l'inflammation en particulier l'inflammation cutanée, notamment dans les dermatoses inflammatoires. L'épiderme est un épithélium pluristratifié qui exerce une 10 fonction barrière de protection contre son environnement et ses agressions. Parmi ses multiples fonctions physiologiques, l'épiderme possède celle de constituer une barrière à la fois biologique, physique et chimique contre l'invasion de l'organisme par les microorganismes. Cette propriété de barrière physique de 15 l'épiderme est notamment liée à sa structure. Ainsi l'épiderme est conventionnellement divisé en une couche basale de kératinocytes constituant la couche germinative de l'épiderme, une couche dite épineuse constituée de plusieurs couches de cellules polyédriques et enfin, un ensemble de couches 20 supérieures appelée couche cornée (ou stratum corneum), constituée de kératinocytes au stade terminal de leur différenciation appelés cornéocytes. Les propriétés de barrière chimique de l'épiderme dépendent, notamment, de la libération à la surface de ce dernier de nombreuses protéines 25 antimicrobiennes. Un dysfonctionnement de l'organisation structurelle cellulaire épidermique, ou un défaut de la fonction barrière chimique de l'épiderme, peut se traduire par un état inflammatoire cutané. L'inflammation est l'une des premières réponses du système 30 immunitaire stéréotypée du corps à une agression externe, comme une infection, une irritation, une brûlure ou une blessure due à des facteurs physico-chimiques externes, une agression interne, par exemple par des cellules cancéreuses ou du fait de facteurs innés. On peut ainsi distinguer l'inflammation résultant d'une 2 réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs innés (stress, maladie autoimmune) ou environnementaux physico-chimiques (abrasion, UV, soleil, pollution, contaminants, allergènes chimiques par exemple). On distingue aussi l'inflammation résultant d'une réponse immunitaire cutanée spécifique due à des facteurs externes tels que bactéries, virus, champignons qui vont pouvoir passer la barrière cutanée et déclencher le processus inflammatoire. L'inflammation est induite par des facteurs chimiques libérés par les cellules altérées et permet d'établir une barrière efficace contre la dissémination d'éventuels agents infectieux et d'initier les processus de réparation tissulaire après l'élimination des agents pathogènes. L'inflammation cutanée est induite par les cellules initialement présentes dans la peau, comme les kératinocytes, les macrophages, les cellules dendritiques, les histiocytes, les cellules de Kupffer ou les mastocyes. Ces cellules expriment à leur surface des récepteurs de reconnaissance de motifs moléculaires. Ces récepteurs reconnaissent des molécules, appelées motifs moléculaires associés aux pathogènes, qui sont exprimées par les organismes microbiens, mais distinctes des molécules de l'organisme. Au début d'une infection, d'une brûlure, ou d'une altération des tissus, la reconnaissance de motifs moléculaires associés aux pathogènes par les récepteurs de reconnaissance de motifs moléculaires exprimés par ces cellules conduit à leur activation et à la sécrétion de différents médiateurs responsables des signes cliniques de l'inflammation à savoir la douleur, la rougeur, l'augmentation de la chaleur locale et l'oedème. Lors d'une agression extérieure, les kératinocytes sont les premières cellules à être activées. Ces cellules jouent un rôle important dans l'initialisation de la réaction inflammatoire à travers la libération de nombreux composés spécifiques de cette réaction comme des cytokines, chimiokines, compléments et des 3 composés vasodilatateurs comme l'histamine ou les métabolites de la voie de l'acide arachidonique qui modulent l'intensité de la réaction défensive et le recrutement cellulaire. Les monocytes sont aussi très rapidement mobilisés et ils libèrent également 5 des composés qui participent de façon importante à l'apparition des réactions cutanées associées à cette réaction de défense de l'organisme. L'acide arachidonique est rapidement métabolisé en de nombreux composés hautement actifs et notamment en eicosanoïdes et prostaglandines. Parmi ces composés, le 10 thromboxane et les leucotriènes agissent comme des médiateurs locaux avec une faible durée de vie et sont impliqués dans le contrôle de la prolifération, de la différentiation, de l'apoptose ou encore de la formation de l'oedème ou de l'activation leucocytaire. Les kératinocytes libèrent de la 15 prostaglandine E2, ainsi que différentes cytokines pro-inflammatoires telles qu'IL-la, IL-6, IL-8, INFa, IL-1p, TGF-13, GM-CSF. Les monocytes, quant à eux, libèrent le leucotriène B4 de manière précoce. La publication scientifique de Kawahara et al. (Biochimica et Biophysica Acta 2015, 1851; 414) met en évidence 20 l'importance de la prostaglandine E2 dans l'inflammation. La présente invention se rapporte à de nouvelles applications du 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol pour traiter ou améliorer des maladies inflammatoires cutanées résultant d'une 25 réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnementaux ou innés, aigues ou chroniques, on peut citer à cet égard, les maladies inflammatoires chroniques externes comme les dermatoses. 30 Les dermatoses sont des affections de la peau et des muqueuses, qui se caractérisent par des manifestations inesthétiques comme des rougeurs et des plaques de desquamation. Plusieurs pathologies sont regroupées sous la dénomination de dermatoses inflammatoires. On peut citer, à titre d'exemples non 4 limitatifs, l'eczéma, la dermatite atopique, le psoriasis, la rosacée, le lichen plan, les prurigos, les dermites séborrhéiques ou encore l'acné. Ces dermatoses résultent bien souvent de phénomènes inflammatoires et/ou de désordres immunitaires. 5 La dermatite atopique est la manifestation cutanée de l'atopie, c'est une dermatose inflammatoire chronique, survenant sur un terrain génétiquement déterminé. Elle est maintenant considérée comme une préoccupation majeure de la santé publique. 10 La dermatite atopique est souvent associée à d'autres désordres atopiques tels que la rhinite allergique et l'asthme. Cette affection apparaît le plus souvent au cours de la petite enfance et se caractérise par des éruptions répétées pendant plusieurs années. Elle évolue par poussées entrecoupées de rémissions 15 spontanées. Les lésions se caractérisent par une sécheresse cutanée importante et par des lésions inflammatoires : éruptions érythémateuses papuleuses, vésiculeuses, squameuses et très prurigineuses. Sur le plan histologique, la dermatite atopique se caractérise comme bien des dermatoses, par une infiltration de 20 lymphocytes, monocytes et de polynucléaires éosinophiles autour de petits vaisseaux et des capillaires. Sur le plan biochimique, il a été montré que les chimiokines sont fortement impliquées dans les dermatoses et dans les maladies inflammatoires chroniques en général. 25 Le psoriasis, maladie inflammatoire de la peau par excellence, se caractérise par l'apparition d'épaisses plaques de peau qui desquament. Ces plaques sont présentes à différents endroits du corps, le plus souvent sur les coudes, les genoux et le cuir chevelu. Cette maladie chronique évolue par cycles, avec 30 des périodes de rémission. Le psoriasis peut être très désagréable voire même douloureux lorsqu'il se manifeste sur la paume des mains, la plante des pieds ou dans les plis de la peau. Il existe plusieurs types de psoriasis, la forme la plus courante est le psoriasis en plaques ou psoriasis vulgaire. Les autres 5 formes sont le psoriasis en gouttes, érythrodermique et pustuleux. L'eczéma est une dermatose prurigineuse caractérisée par une inflammation non contagieuse de la peau qui s'accompagne de 5 rougeurs, de fines vésicules, de squames et de démangeaisons. Il peut commencer très tôt dans la vie, il s'observe même chez le nourrisson. Les personnes atteintes connaissent des périodes communément appelées « poussées d'eczéma », durant lesquelles les symptômes s'aggravent. Ces poussées, de durée variable, sont 10 entrecoupées de périodes de rémission. L'eczéma serait un désordre de nature génétique, mais des facteurs environnementaux tels que la présence d'irritants chimiques ou innés tels que le stress influenceraient son apparition. La rosacée est une dermatose inflammatoire commune chronique 15 et progressive liée à une relaxation vasculaire. Il s'agit d'une affection qui touche les petits vaisseaux du visage. Elle touche fréquemment les personnes à peau claire et peut avoir des conséquences psycho-affectives importantes. Le nom de cette pathologie fait référence à la couleur caractéristique que prend 20 le visage lors de la maladie. Le lichen plan est une éruption cutanée prurigineuse ne touchant que les adultes. Il s'agit d'une affection cutanée inflammatoire d'origine inconnue. Cette dermatose touche la peau, les muqueuses mais aussi les cheveux et les ongles. Ces deux 25 dernières localisations sont en général d'évolution chronique et peuvent laisser des séquelles irréversibles, alopécie, destruction des ongles. Un prurigo est un prurit intense de la peau avec des papules érythèmateuses et vésiculeuses avec lésions de grattage. Il 30 s'agit le plus souvent d'une sensibilité exagérée aux piqures d'insectes, sensibilité qui se prolonge anormalement longtemps et qui est fréquente surtout chez le jeune enfant. La dermite séborrhéique est une affection inflammatoire chronique de la peau, qui atteint les zones riches en glandes 6 sébacées, à savoir le cuir chevelu et le visage. Cette affection évolue par poussées favorisées par le stress, l'absence de soleil et la pollution. 5 La réaction inflammatoire aiguë peut produire des effets gênants (douleur, gonflement, fièvre) et il peut être nécessaire d'utiliser des médicaments qui limitent cette réaction inflammatoire. 10 Dans le cas des affections légères, des émollients et des kératolytiques sont préconisés. Ces traitements ont pour but de rendre les lésions tolérables pour le malade et ils n'ont souvent qu'un effet suspensif. 15 Pour les affections plus sévères, ce sont des anti- inflammatoires ou des corticoïdes susceptibles de réguler l'inflammation des kératinocytes, qui sont utilisés depuis plusieurs années. Tous ces traitements ont des effets secondaires importants, très lourds pour les patients. 20 Du fait des effets secondaires importants des traitements existants précités pour les troubles cutanés ou du cuir chevelu résultant de l'état d'activation de la réponse inflammatoire aigüe immunitaire cutanée non spécifique, en tant que mécanisme de l'immunité innée, il existe également un besoin de disposer de 25 nouveaux actifs cosmétiques ou thérapeutiques et de nouvelles compositions cosmétiques ou thérapeutiques utilisables pour le traitement desdits troubles cutanés ou du cuir chevelu. La présente invention a pour objet de répondre à ces 30 besoins. Les inventeurs ont de façon surprenante mis en évidence l'efficacité du 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol dans le traitement de l'inflammation aigrie cutanée résultant d'une 7 réponse immunitaire cutanée non spécifique, en particulier celle résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. Parmi les facteurs environnementaux on peut citer 5 l'abrasion, la température chaude, la température froide, les traumatismes mécaniques, les piqures, les UV, le soleil, la pollution, les contaminants, les allergènes chimiques par exemple. Parmi les facteurs innés on peut citer les cancers, le 10 stress et les maladies autoimmunes. En effet, les inventeurs ont démontré que le 4-(1- phényléthyl)benzène-1,3-diol présente un effet inhibiteur dans l'inflammation aigrie et ce par deux voies distinctes, PG6KF1a et PAR-2. 15 Les inventeurs ont en effet mis en évidence l'effet du 4-(1- phényléthyl)benzène-1,3-diol sur la réponse immunitaire cutanée non spécifique, en particulier celle résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. 20 Ce composé est déjà connu mais dans des indications vraiment différentes, notamment comme dépigmentant en atténuant les irrégularités visibles et/ou tactiles de la peau, activité décrite dans la demande de brevet N° FR2900046, mais aussi dans 25 les imperfections cutanées des peaux grasses, indication divulguée dans la demande de brevet N° FR2900047. La demande de brevet N° EP1847247 divulgue des compositions comprenant potentiellement le 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol et au moins un ingrédient favorisant la solubilisation, la stabilisation 30 et/ou l'activité du dérivé diphényl méthane hydroxyle. Romagnoli et al (Molecules, 21, 2016, 1306) décrivent des propriétés fungicides et antidermatophytes de dérivés du résorcinol. 8 La présente invention porte donc sur le 4-(1- phényléthyl)benzène-1,3-diol pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de l'inflammation aigrie cutanée 5 résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique, en particulier celle résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. Parmi les facteurs environnementaux on peut citer 10 l'abrasion, les traumatismes mécaniques, les piqures, la température chaude, la température froide, les UV, le soleil, la pollution, les contaminants, les allergènes chimiques par exemple. Parmi les facteurs innés on peut citer les cancers, le 15 stress et les maladies autoimmunes. Plus particulièrement, la présente invention porte donc sur le 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement des dermatoses inflammatoires 20 résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. D'une façon préférée, la présente invention porte sur le 4- (1-phényléthyl)benzène-1,3-diol pour son utilisation dans le traitement des dermatoses inflammatoires résultant d'une réponse 25 immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. Le composé est notamment utile pour prévenir et/ou traiter les dermatoses inflammatoires aigries résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs 30 environnement ou innés, choisies parmi le psoriasis, l'eczéma, la dermatite atopique, le lichen plan, le prurigo et les dermites séborrhéiques. Selon un mode particulier de l'invention, le 4-(1- phényléthyl)benzène-1,3-diol est appliqué de façon topique sur la 9 peau du sujet présentant une inflammation cutanée aigrie résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. Selon un mode particulier de l'invention, le 4-(1- 5 phényléthyl)benzène-1,3-diol est appliqué de façon topique sur la peau du sujet présentant une dermatose inflammatoire résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés, choisie parmi le psoriasis, l'eczéma, la dermatite atopique, le lichen plan, le prurigo et 10 les dermites séborrhéiques. L'invention concerne également l'utilisation du 4-(1- phényléthyl)benzène-1,3-diol pour traiter les dermatoses inflammatoires aigries résultant d'une réponse immunitaire cutanée 15 non spécifique due à des facteurs environnement ou innés . Dans un mode de réalisation particulier, le 4-(1- phényléthyl)benzène-1,3-diol est le seul agent actif utilisé pour le traitement des dermatoses inflammatoires aigries résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des 20 facteurs environnement ou innés. L'invention concerne l'utilisation du 4-(1- phényléthyl)benzène-1,3-diol pour traiter les dermatoses inflammatoires aigries résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés, 25 choisies parmi le psoriasis, l'eczéma, la dermatite atopique, la rosacée, le lichen plan, le prurigo et les dermites séborrhéiques. Dans un mode de réalisation particulier, le 4-(1- 30 phényléthyl)benzène-1,3-diol est le seul agent actif utilisé pour le traitement des dermatoses inflammatoires aigries résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés, choisies parmi le psoriasis, l'eczéma, la dermatite atopique, la rosacée, le lichen plan, le 10 prurigo et les dermites séborrhéiques. Au sens de la présente invention, les termes « prévenir » et 5 « prévention » signifient éviter ou au moins retarder l'apparition d'une maladie, d'un trouble ou d'un ou plusieurs signes et/ou symptômes. Un autre objet de la présente invention concerne ainsi une 10 composition cosmétique ou dermatologique comprenant à titre de principe actif au moins le 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol en association avec un excipient cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable pour une application sur la peau, pour son utilisation pour prévenir et/ou traiter l'inflammation 15 cutanée aigüe résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. Dans un mode particulier, l'invention concerne une composition cosmétique ou dermatologique comprenant à titre de principe actif au moins le 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol en 20 association avec un excipient cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable pour une application sur la peau, pour son utilisation pour prévenir et/ou traiter les dermatoses inflammatoires aigries résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. 25 Dans un mode particulier, l'invention concerne une composition cosmétique ou dermatologique comprenant à titre de principe actif au moins le 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol en association avec un excipient cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable pour une application sur la peau, 30 pour son utilisation pour traiter les dermatoses inflammatoires aigües résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés choisies parmi le psoriasis, l'eczéma, la dermatite atopique, la rosacée, le lichen plan, le prurigo et les dermites séborrhéiques. 11 Dans un mode de réalisation particulier, le 4-(1- phényléthyl)benzène-1,3-diol est le seul principe actif de la composition pour traiter les dermatoses inflammatoires aigries résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à 5 des facteurs environnement ou innés. Dans la présente invention, on entend désigner par « cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable » ce qui est utile dans la préparation d'une composition cosmétique ou dermatologique qui est généralement sûre, non toxique et ni 10 biologiquement ni autrement non souhaitable et qui est acceptable pour une utilisation cosmétique ou dermatologique, notamment par application topique. De préférence, ladite composition est une composition 15 dermatologique. De manière particulièrement préférée, ladite composition est d'application topique. On entend par « application topique » une application directement sur la peau et/ou sur les muqueuses. 20 La composition selon l'invention est particulièrement compatible avec les matières kératiniques d'êtres humains, comme la peau, les muqueuses, le cuir chevelu ou les cheveux. Avantageusement, les compositions sont sous une forme adaptée à une application par voie topique sur les matières 25 kératiniques. Les concentrations de 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol appliquées seront adaptées par l'homme du métier en fonction de la formulation et de l'effet recherché. Des compositions 30 convenant à la mise en oeuvre de l'invention contiennent par exemple le 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol à une concentration de 0,01 à 10% en poids par rapport au poids total de la composition, notamment de 0,05 à 8%, plus particulièrement de 0,1 à 5% et encore plus particulièrement de 0,3 à 5%, et tout 12 particulièrement inférieure ou égale à 2% en poids par rapport au poids total de la composition. Dans un mode particulier de réalisation de l'invention, la 5 composition selon la présente invention peut en outre contenir des agents actifs destinés notamment à la prévention et/ou au traitement des affections cutanées. Dans un mode particulier de réalisation de l'invention, la composition selon la présente invention contient en outre au 10 moins un agent actif destiné à la prévention et/ou au traitement des dermatoses inflammatoires aigries résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. 15 Les compositions selon l'invention sont destinées à être appliquées sur la peau. Ces compositions peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel ou d'une mousse. Elles peuvent aussi se présenter sous forme solide, comme un stick ou 20 être appliquées sur la peau sous forme d'aérosol. Ces compositions pourront notamment se présenter sous forme d'une solution huileuse ; d'une émulsion huile-dans-eau, eau-dans-huile ou émulsions multiples. Lorsque la composition est une émulsion, la proportion de la 25 phase grasse peut aller de 5 à 80% en poids, de préférence de 8 à 50% en poids par rapport au poids total de la composition. L'émulsionnant et le co-émulsionnant peuvent être présents en une proportion allant de 0,1 à 50% en poids, et de préférence de 0,5 à 20% en poids par rapport au poids total de la composition. 30 La composition selon l'invention apporte une solution pour le traitement des dermatoses inflammatoires aigries résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés, elle peut être appliquée quotidiennement, ou plusieurs fois par jour selon la nécessité. 13 La composition peut en particulier être appliquée aux peaux sensibles, fragiles et/ou réactives, et notamment aux peaux de bébé. De préférence, la composition selon la présente invention 5 est utilisée pour prévenir et/ou traiter les peaux sensibles. D'une manière générale, les peux sensibles se définissent par une réactivité particulière de la peau. Cette réactivité cutanée se traduit classiquement par la manifestation de signes d'inconfort en réponse à la mise en 10 contact du sujet avec un élément déclenchant qui peut avoir diverses origines. Il peut s'agir de l'application d'un produit cosmétique en surface de la peau sensible, de la prise d'aliments, de l'exposition à des variations brutales de températures, à la pollution atmosphérique et/ou à des rayons 15 ultra-violets ou infrarouges. Il existe également des facteurs associés comme l'âge et le type de peau. Ainsi les peaux sensibles sont plus fréquentes parmi les peaux sèches ou grasses que parmi les peaux normales. Au sens de la présente invention, les peaux sensibles couvrent les peaux irritables et les peaux 20 intolérantes. L'exemple suivant illustre l'invention sans en limiter la portée. Exemple 1 : Activité du 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol sur la prostaglandine PG6K 25 Le kératinocyte est la cellule la plus représentée dans l'épiderme. En réponse à plusieurs facteurs extracellulaires présents dans l'environnement, l'épiderme libère divers médiateurs biologiquement actifs en particulier, des lipides bioactifs, des prostaglandines et leucotriènes qui jouent un rôle 30 important dans l'initiation et la modulation des réactions inflammatoires de la peau mais qui participent aussi dans la régulation de la réponse immune. Le kératinocyte apparait comme un bon modèle d'étude pharmacologique de la peau. Ce modèle cellulaire permet de 14 déterminer in vitro les capacités de divers composés à moduler la production de ces médiateurs résultant du métabolisme de l'acide arachidonique. Dans cette étude, les inventeurs ont investigué une 5 prostaglandine en particulier, la 6-kéto-PGF1a (PG6KF1a) qui est le métabolite stable de la prostacycline. Cette dernière est l'un des métabolites majeurs produits par les kératinocytes stimulés, et est représentatif de la modulation de production des métabolites de l'acide arachidonique (Dorris and Stokes Peebles, 10 Mediators of Inflammation, vol 2012, article ID 926968, 9 pages). Le but de cette étude est de rechercher une activité anti-inflammatoire potentielle du 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol en mesurant ses effets sur la libération de prostaglandine PG6KF1a. La lignée cellulaire utilisée dans cette étude est la lignée 15 HaCat (kératinocytes humains). Les cellules sont mises en culture sur plaques de 24 puits. Elles sont ensuite pré-incubées pendant 60 minutes avec les produits à tester. Un agent stimulant de la voie de l'acide arachidonique est ajouté pendant 5 heures, il s'agit de 20 l'ionophore calcique A23187, utilisé à 5pM. Après 5 heures de stimulation, le surnageant de culture de chaque puit est prélevé, centrifugé à 3000 tours/min puis stocké à -20°C. La production de prostaglandine PG6KF1a dans le surnageant de culture est mesurée avec le kit Euromedex Elisa selon les instructions du 25 fournisseur. L'analyse statistique est réalisée par une Annova suivi du post test de Dunnett. Il est à noter que 3 expériences indépendantes ont été menées. Les résultats pour chaque produit et pour chaque dose sont moyennés à partir des mesures faites sur 3 puits. 30 Les résultats d'activation de PG6KF1a (en pg/ml) sont résumés dans le tableau 1 ci-dessous : 15 Témoin A23187 Indo 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3- diol Conc 5 pM 0,1 pM 3 pM 10 pM 30 pM 50 pM Moy 155 1182 570 605 377 150 164 SD 57 112 304 157 181 4 45 Indo : indométacine ; Conc : concentration ; Moy : moyenne ; SD : déviation standart. 5 La stimulation par l'ionophore calcique A23187 stimule fortement la production de PG6KF1a, l'indométacine (antiinflammatoire non stéroïdien) inhibe cette production d'environ 50%, ce qui permet de valider la pertinence de ce test. Le 4-(1-phényléthyl)benzène1,3-diol, testé de 3 pM à 50 pM, montre un effet inhibiteur 10 concentration-dépendant sur la libération de PG6KF1a, avec déjà 50% d'inhibition dès 3pM, environ 70% à lOpM et presque une inhibition totale à 30pM. En conséquence, les inventeurs ont mis en évidence l'efficacité du 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol dans 15 l'inflammation. Exemple 2 : Activité du 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol sur le PAR-2 20 Le récepteur « Protease-Activated receptor-2 (PAR-2) » est 25 associé à la phyio-pathologie de plusieurs des réponses inflammatoires. Le PAR-2 superfamille des récpteurs à 7 domaines couplés aux protéines G, mais possède une unique. En effet, le PAR-2 est maladies impliquant appartient à la trans-membranaires voie d'activation sérine-protéases activé par des telles que la trypsine, la tryptase, les facteurs Xa et Vila. Le clivage par ces protéases de la partie extracellulaire du récepteur expose un nouveau domaine amino terminal (SLIGKV) qui agit comme un ligand attaché au récepteur, il se fixe sur lui- 16 même au niveau de la boucle extracellulaire 2 et s'auto-active. Le PAR-2 est exprimé par les différents types cellulaires de la peau, comme les kératinocytes, les cellules myoépithéliales des glandes sudoripares, follicule pileux, cellules dendritiques- 5 like du derme et les cellules endothéliales de la lamina propria et du derme (Steinhoff et al, Exp. Dermatol. 1999 ;8 :282-294). Les mélanocytes n'expriment pas ce récepteur (Seiberg et al,Exp. Cell Res. 2000, 254(1) 25-32) bien que le PAR-2 joue un rôle important dans la pigmentation en favorisant le transfert de 10 mélanine des mélanocytes vers les kératinocytes (Sharlow et al, J Cell Sci. 2000, 113(Pt 17) 3093-3101). Les sérine-protéases générées par l'épiderme exercent des effets chiomiotactiques induisant le recrutement des leucocytes dans la peau. Elles sont également impliquées dans la régulation 15 de l'homéostasie, de la mitogenèse et de la différenciation épidermique et modulent la fonction barrière de la peau. De plus les sérines-protéases contribuent à la physiopathologie de maladies cutanées liées à l'inflammation, la cancérogenèse, la fibrose et la stimulation nerveuse. 20 Les propriétés physiologiques et physio-pathologiques cutanées des sérine-protéases seraient en partie liées aux récepteurs PARs. En effet, les récepteurs PAR-2 sont sur-exprimés dans l'épiderme, le derme et les vaisseaux de patients atteints de maladies inflammatoires de la peau comme la dermatite 25 atopique, le lichen plan et le psoriasis (Steinhoff et al, 1999). Les PAR-2 joueraient également un rôle dans le développement du prurit chez des patients atteints de dermatite atopique. L'activation de PAR-2 par une protéase de type trypsine induit la production d'interleukine 8 (IL8) à partir de 30 kératinocytes. Plus récemment, il a été démontré que IL8, chémokine chimio-attractive pour les leucocytes, permettrait l'infiltration de neutrophiles dans l'épiderme de patients atteints de Psoriasis vulgaris (Iwakiri et al, J. Invest. Dermatol. 122, 937-944, 2004). La signalisation intracellulaire 17 du PAR-2 est sous-tendue pour partie par une mobilisation de calcium intracellulaire. Dans cette étude les inventeurs ont évalué l'activité antiPAR-2 du 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol, sur des kératinocytes 5 humains issus d'une lignée HaCaT, en mesurant l'influx de calcium intracellulaire induit suite à la stimulation spécifique par le peptide agoniste SLIGKV (Ser-Leu-Ile-Gly-Arg-Val) des PAR-2. La lignée cellulaire utilisée dans cette étude est la lignée HaCat (kératinocytes humains). 10 Les cellules sont mises en culture sur microplaques de 96 puits. La sonde fluorescente est incorporée pendant 30 minutes dans les cellules ensemencées, puis les produits à tester sont incubés pendant 30 minutes. La mesure du flux calcique intracellulaire est basée sur l'utilisation d'une sonde 15 fluorescente estérifiée par un groupement AM, facilitant sa pénétration par diffusion passive dans la cellule. La sonde utilisée est le Fluo-4/AM. Seule la forme désestérifiée est liée aux ions calcium est excitable en fluorescence à 485 nm et émet à 535 nm. Le flux calcique est mesuré puits par puits en temps réel 20 selon une cinétique avant et après injection du SLIGKV (agoniste PAR-2). Les valeurs indiquées dans le tableau 2 ci-dessous représentent l'activité inhibitrice du 4-(1-phényléthyl)benzène1,3-diol testé à 3 concentrations différentes, sur le flux 25 intracellulaire de calcium suite à une stimulation SLIGKV dans les cellules HACaT dans 3 expérimentations indépendantes. Concentration % % stimulation inhibition Sans sonde 17,1 - SLIGKV 100 pM 242,7 - 4-(1-phényléthyl) benzène-1,3-diol 10 pM (0,0002%) 263,7 -9 30 pM (0,0006%) 223,5 9 50 pM (0,001%) 180,9 27 * * : p REVENDICATIONS1. Le 4-(1-phényléthyl) benzène-1,3-diol, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de l'inflammation aigüe cutanée résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. 2. Le 4-(1-phényléthyl) benzène-1,3-diol, pour son utilisation selon la revendication 1, dans le traitement des dermatoses inflammatoires aigües résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. 3. Le 4-(1-phényléthyl.) benzène-1,3-diol, pour son utilisation selon la revendication 2, caractérisé en ce que les dermatoses inflammatoires algues résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés sont choisies parmi le psoriasis, l'eczéma, la dermatite atopique, la rosacée, le lichen plan, le prurigo et les dermites séborrhéiques. 4. Composition cosmétique ou dermatologique comprenant à titre de principe actif au moins le 4-(1-phényiéthyl)henzène-1,3- diol, en association avec au moins un excipient cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable pour une application sur la peau, pour son utilisation pour prévenir et/ou traiter l'inflammation cutanée aigüe résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. 5. Composition cosmétique ou dermatologique selon la revendication 4 pour son utilisation pour traiter les dermatoses inflammatoires aigües résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés. 6. Composition cosmétique ou dermatologique selon la revendication 5, pour son utilisation pour traiter les dermatoses inflammatoires aigües résultant d'une réponse immunitaire cutanée non spécifique due à des facteurs environnement ou innés choisies parmi le psoriasis, l'eczéma, la dermatite atopique, la rosacée, le lichen plan, le prurigo et les dermites séborrhéiques. 7. Composition cosmétique ou dermatologique pour son utilisation selon l'une des revendications 4 à 6, caractérisée en ce que le 4-(1-phényléthyl)benzène-1,3-diol Copie propre 20 représente de 0,1 à 10% en poids, du poids total de la composition. Copie propre