Brevet FR3066386A1 — publié le 20181123

La présente invention a pour objet un procédé de préparation d'un gel aqueux d'acide hyaluronique homogène, le gel aqueux ainsi obtenu et ses utilisations, notamment pour le comblement des rides et ridules. Le collagène a longtemps été le produit de comblement de choix pour le visage, en particulier pour le comblement des rides et des ridules ou encore pour réourler les lèvres. Cependant, depuis la mise sur le marché des acides hyaluroniques, ces derniers sont de plus en plus utilisés. En effet, à la biodégradabilité du collagène jugée trop rapide, s'ajoutent les problèmes de sécurité liés à l'origine animale (bovine ou porcine) de celui-ci. L'injection d'acide hyaluronique présente deux avantages : un effet de comblement mécanique immédiat et l'absence de phénomènes inflammatoires, du fait de sa biocompatibilité. Lorsqu'il est administré sous une forme linéaire (non réticulée), l'acide hyaluronique présente une excellente biocompatibilité mais est rapidement dégradé par l'organisme (en environ une semaine). La durée de vie des produits injectés à base d'acide hyaluronique a pu être significativement prolongée jusqu'à environ 12 mois par l'utilisation d'acide hyaluronique réticulé. En effet, l'acide hyaluronique réticulé se présente sous la forme d'un gel cohésif présentant des propriétés visco-élastiques particulièrement intéressantes pour les produits de comblement des rides. Toutefois, lors de la réticulation, des particules de « zones dures » se forment au sein du gel d'acide hyaluronique, le rendant inhomogène. Ces zones dures affectent l'injectabilité du produit et sont susceptibles de poser des problèmes de tolérance pour le patient. Il est donc essentiel d'éliminer ces zones dures des gels d'acides hyaluroniques réticulés afin de disposer d'un produit parfaitement homogène pour son administration. Classiquement, les gels d'acide hyaluronique réticulés sont homogénéisés par tamisage ou par extrusion. Ces méthodes ne permettent qu'une élimination partielle des zones dures. De plus, la contrainte de cisaillement exercée sur les gels entraine une altération de sa structure et de ses propriétés visco-élastiques. Le gel soumis à un tamisage, une filtration ou une extrusion n'est donc pas parfaitement homogène et voit sa viscosité diminuée. Une fois injecté il risque de migrer dans les tissus et de se dégrader plus rapidement. Ses propriétés de comblement sont de fait altérées. Il est donc souhaitable de disposer d'un procédé permettant d'éliminer efficacement les zones dures présentes dans des gels d'acide hyaluronique réticulé, de manière à obtenir un gel homogène, sans altérer ses propriétés visco-élastiques. La présente invention propose donc un procédé de préparation d'un gel homogène d'acide hyaluronique réticulé, dans lequel l'homogénéisation du gel est obtenue par laminage. En particulier, la présente invention a pour objet, selon un premier aspect, un procédé de préparation d'un gel aqueux d'acide hyaluronique comprenant les étapes suivantes: a) la préparation d'un gel aqueux d'acide hyaluronique réticulé, b) l'homogénéisation du gel aqueux formé à l'étape (a) par laminage, c) la récupération du gel aqueux homogénéisé à l'étape (b). 3066386 2 L'invention a également pour objet, selon un second aspect, un gel aqueux d'acide hyaluronique susceptible d'être obtenu par un tel procédé. L'invention a encore pour objet, selon un troisième aspect, l'utilisation cosmétique d'un tel gel aqueux dans la réparation ou la reconstruction des tissus, en particulier pour le 5 comblement des rides et ridules, ou ledit gel aqueux pour son utilisation médicale pour la réparation ou la reconstruction des tissus. Figures La Figure 1 illustre un laminage du gel réalisé entre deux cylindres tournant à une même vitesse tangentielle. 10 La Figure 2 illustre un laminage du gel réalisé entre trois cylindres dont la vitesse tangentielle augmente pour permettre l'entrainement du gel à la surface du cylindre adjacent. Les Figures 3, 4 et 5 illustrent les forces d'éjection des compositions 3, 4 et 5 de gels aqueux préparés dans les exemples de réalisation. Gel aqueux 15 La présente invention propose un nouveau procédé de préparation de gels aqueux d'acide hyaluronique. On entend par « gel », au sens de la présente demande, une composition cohésive, qui ne s'écoule pas sous son propre poids, et présentant des propriétés visco-élastiques lui conférant une certaine déformabilité. Le gel, s'il est cisaillé, ne se reforme pas, contrairement aux 20 fluides visqueux. Les gels d'acide hyaluronique, selon l'invention, se distinguent donc de solutions d'acide hyaluronique. La distinction gel/solution peut être observée par une étude rhéologique en déformation et fréquence constante à 25°C afin de déterminer le modules visqueux G" et le module élastique G' dans la zone de viscoélasticité linéaire. En effet, un gel au sens de la 25 présente invention se caractérise notamment par le fait que son module élastique G' est supérieur au module visqueux G" selon la définition de Winter et Chambon (1986). Dans le cas d'une solution visqueuse au contraire, le module visqueux G" est supérieur à son module élastique G'. Les mesures sont effectuées sur un rhéomètre Discovery HR1 (TA industries) et une 30 géométrie plan/plan 40 mm selon un mode continu (contrainte de déformation 10%, fréquence de 1Hz, à 25°C, pendant 120s). Les échantillons constitués d'environ 1.2 ml sont déposés dans un entrefer de 1000p.m. Les gels d'acide hyaluronique selon l'invention sont de préférence homogènes. Par « gel homogène d'acide hyaluronique », on entend au sens de la présente invention que l'acide 35 hyaluronique réticulé est dispersé de manière uniforme au sein du gel. 3066386 3 L'homogénéité du gel d'acide hyaluronique peut notamment être caractérisée par mesure de la variation de la force d'éjection du gel au travers d'une seringue dont l'aiguille présente un diamètre interne de 3001..tm (27G TSK UTW). La mesure de la force d'éjection (ou force d'extrusion) est réalisée grâce à un banc de force EZ-Test SX shimadzu équipé d'une cellule 5 de 50N. L'extrusion est réalisée à lOmm/min-1 et l'échantillonnage est réglé à 100 point/s-1. Les essais sont réalisés avec des seringues BD lmL longue équipées d'aiguille TSK 27G 1/2". L'acquisition est traitée entre la 20e et la 140e seconde d'extrusion pour ne pas tenir compte des contraintes de mise en contact de début et fin d'extrusion. A la fin de l'acquisition, la suite de point N=f(t) (force d'extrusion en fonction du temps) est linéarisée. Une marge de 10 ±10% à la linéarité est matérialisée. Chaque intersection de la courbe N=f(t) avec les droites N=f(t) linéarisées N+io%=f(t) et N_io%=f(t) correspond à l'extrusion d'une partie hétérogène. Ainsi, selon un mode préféré de réalisation, le gel d'acide hyaluronique homogène ne présente pas de variation de la force d'extrusion de plus de ±10% par rapport à la force d'extrusion linéarisée. 15 Acide Hyaluronique Les gels aqueux selon l'invention comprennent au moins un acide hyaluronique. L'acide hyaluronique est un glycosaminoglycane (GAG) linéaire composé d'unités répétitives de D-acide glucuronique et de N-acetyl-D-glucosamine liés entre eux par des liaisons glycosidiques alternées beta-1,4 et beta-1,3. 20 L'acide hyaluronique présente la structure suivante : COOH HN- C- CH3 i I 0 n De préférence, l'acide hyaluronique mis en oeuvre dans la préparation du gel aqueux selon l'invention présente une masse molaire comprise entre 1 000 000 Da et 5 000 000 Da, de préférence entre 1 500 000 Da et 3 500 000 Da. Le poids moléculaire peut être notamment 25 déterminé par chromatographie d'exclusion stérique Waters GPCV Alliance 2000, éluant NaNO3 0.1M dans l'eau couplée en ligne avec trois détecteurs Wyatt : un refractomètre, un viscosimètre et une mesure de la diffusion de lumière. L'acide hyaluronique est présent dans le gel aqueux d'acide hyaluronique obtenu à l'étape a) en une teneur comprise entre 1 mg/mL et 300 mg/mL, de préférence entre 75 et 200 mg/mL, 30 plus préférentiellement entre 100 et 175 mg/mL. 3066386 4 Phase aqueuse Outre l'acide hyaluronique, les gels aqueux selon l'invention comprennent également une phase aqueuse. Le gel peut comprendre de l'eau en une teneur allant de 60% à 99 % en poids, par rapport au 5 poids total de la composition, de préférence allant de 70 % à 99 % en poids, et préférentiellement allant de 80 % à 99 % en poids. Le gel peut comprendre en outre un polyol miscible à l'eau à la température ambiante (25 °C) notamment choisi parmi les polyols ayant notamment de 2 à 20 atomes de carbones, de préférence ayant de 2 à 10 atomes de carbone, et préférentiellement ayant de 2 à 6 atomes de 10 carbones, tels que la glycérine, le propylène glycol, le butylène glycol, le pentylène glycol, l'hexylène glycol, le dipropylène glycol, le diéthylène glycol ; les éthers de glycol (ayant notamment de 3 à 16 atomes de carbone) tels que les alkyl(C1-C4)éther de mono, di- ou tripropylène glycol, les alkyl(C1-C4)éthers de mono, di-ou triéthylène glycol ; et leurs mélanges. 15 Le polyol miscible à l'eau peut être présent dans le gel selon l'invention en une teneur allant de 0.1 % à 20 % en poids, par rapport au poids total de la composition, et de préférence allant de 3 % à 15 % en poids. Préparation d'un gel aqueux d'acide hyaluronique réticulé Le procédé selon l'invention met en oeuvre une première étape a) de préparation d'un gel 20 aqueux d'acide hyaluronique réticulé. Cette étape a) comprend, de préférence, au moins les étapes suivantes : i. la réticulation en milieu acide ou basique dudit acide hyaluronique en présence d'au moins un agent de réticulation, et ii. la neutralisation de la solution d'acide hyaluronique obtenue à l'étape i. jusqu'à un pH 25 compris entre 6,5 et 7,5, de manière à obtenir un gel aqueux d'acide hyaluronique réticulé. Selon un mode particulier de réalisation, l'étape de réticulation est effectuée en milieu basique et comprend au moins les étapes suivantes : la dissolution d'au moins un acide hyaluronique et/ou l'un de ses sels, dans une 30 solution basique présentant un pH supérieur à 7,5, de préférence supérieur ou égal à 10, plus préférentiellement compris entre 10 et 14, la réticulation en solution basique dudit acide hyaluronique en présence d'au moins un agent de réticulation. La réticulation en milieu basique favorise la formation de liaisons éther entre l'acide 35 hyaluronique et l'agent de réticulation, qui se dégradent lentement. 3066386 5 Selon un autre mode particulier de réalisation, l'étape de réticulation est effectuée en milieu acide et comprend au moins les étapes suivantes : - la dissolution d'au moins un acide hyaluronique et/ou l'un de ses sels, dans une solution acide présentant un pH inférieur à 6,5, de préférence inférieur ou égal à 5, 5 plus préférentiellement compris entre 4.5 et 2. - la réticulation en solution acide dudit acide hyaluronique en présence d'au moins un agent de réticulation. La réticulation en milieu acide favorise quant à elle la formation de liaisons ester entre l'acide hyaluronique et l'agent de réticulation, qui se dégradent plus rapidement que les liaisons 10 éther. Selon un mode préféré de réalisation, l'étape de réticulation de l'acide hyaluronique comprend au moins une réticulation en milieu basique de l'acide hyaluronique et une réticulation en milieu acide de l'acide hyaluronique, de manière à contrôler les liaisons éther et ester formées, et ainsi la vitesse de dégradation du gel d'acide hyaluronique réticulé ainsi 15 formé. Plus préférentiellement, l'étape de réticulation de l'acide hyaluronique comprend une première réticulation en milieu basique de l'acide hyaluronique suivie d'une réticulation en milieu acide de l'acide hyaluronique. Avant dissolution, l'acide hyaluronique mis en oeuvre dans le procédé selon l'invention se 20 présente typiquement sous forme sèche, de préférence sous forme de poudre ou de paillettes. Lorsqu'il est mis en oeuvre sous forme de sel, l'acide hyaluronique peut de préférence être un sel de sodium, un sel de calcium, un sel de zinc ou un sel de potassium de l'acide hyaluronique, et de préférence un sel de sodium. La teneur en acide hyaluronique linéaire dissous dans la solution aqueuse est comprise entre 25 50 mg/mL et 300 mg/mL, de préférence entre 100 et 200 mg/mL. La réticulation de l'acide hyaluronique linéaire dissous dans la solution aqueuse est réalisée en présence d'au moins un agent de réticulation. L'agent de réticulation est de préférence choisi parmi les époxydes di-fonctionnels, les époxydes multifonctionnels, esters bi ou poly fonctionnels, les divinylsulfones, les 30 carbodiimides, le formaldéhyde, les dialdéhydes et leurs mélanges, et de préférence l'agent de réticulation est le 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE, aussi connu sous la dénomination 1,4-Diglycidyloxybutane, Tetramethylene Glycol Diglycidyl Ether et sous la nom IUPAC 2- [4-(oxiran-2-ylmethoxy)butoxymethyl] oxirane. L'agent de réticulation est notamment introduit en une quantité comprise entre 10 mg et 250 35 mg par gramme d'acide hyaluronique linéaire introduit à l'étape de réticulation. 3066386 6 L'étape de réticulation est de préférence conduite à une température comprise entre 30 et 70°C, de préférence entre 45 et 55°C, ce qui permet de catalyser la réticulation de l'acide hyaluronique. Après réticulation, la solution d'acide hyaluronique est neutralisée jusqu'à un pH compris 5 entre 6,5 et 7,5, de manière à obtenir un gel aqueux d'acide hyaluronique réticulé. La neutralisation peut être réalisée par ajout d'un acide ou d'une base selon que la réticulation a été réalisée en milieu basique ou acide. La neutralisation entraine la dilution de l'acide hyaluronique. La teneur en acide hyaluronique réticulé présent dans le gel après neutralisation est comprise entre 10 mg/mL et 100 mg/mL, 10 de préférence entre 20 et 80 mg/mL. Par exemple, lorsque la réticulation a été réalisée en milieu acide, l'ajustement du pH peut être opéré par ajout d'un composé tel que l'ammoniaque, la soude, hydrogénocarbonate de sodium, le bicarbonate de sodium, le carbonate de sodium ou leurs dérivés ou d'une solution de tampon phosphate (PBS « Phosphate Buffer Saline » - solution saline de tampon 15 phosphate). Lorsque la réticulation a été réalisée en milieu basique, l'ajustement du pH pour la neutralisation peut être opéré par ajout d'un composé tel que l'acide chlorhydrique, l'acide acétique, l'acide phosphorique et le dihydrogénophosphate de sodium ou leurs dérivés. Alternativement, la neutralisation peut être réalisée par dialyse. La neutralisation par dialyse 20 permet l'ajustement du pH se fait de manière très progressive ce qui permet de préserver au mieux les propriétés mécaniques et visco-élastiques du gel d'acide hyaluronique formé. La dialyse est un procédé de séparation par membrane des molécules ou des ions en solution. Ainsi, dans le cadre de la présente demande, le gel d'acide hyaluronique selon l'invention peut être dialysé contre une solution tampon présentant un pH égal ou proche du pH final 25 souhaité pour le gel d'acide hyaluronique (pH cible), c'est à-dire compris entre 6,5 et 7,5, de préférence entre 6,75 et 7,2. La solution tampon peut, par exemple, être une solution saline de tampon phosphate (PBS, PBS-acide lactique), de tris(hydroxymethyl)methylamine (TRIS), de solution saline de TRIS (TB S ), d'acide 4-2-hydroxyethyl-l-piperazineethanesulfonique (HEPES), d'acide 2- 30 { }tris(hydroxymethyl)methyl] amino } ethanesulfonique(TES), d'acide 3 -(N- morpholino)propanesulfonique (MOPS), d'acide piperazine-N,N'-bis(2-ethanesulfonique), MES d'acide (2-(N-morpholino)ethanesulfonique (PIPES), et de chlorure de sodium (NaC1). Selon un mode préféré de réalisation, la solution tampon est une solution de tampon phosphate PBS (« Phosphate Buffer Saline » - solution saline de tampon phosphate) 35 composée d'un sel « acide » NaH2PO4, d'un sel «basique » le Na2HPO4 et de NaCl. Selon un mode particulier de réalisation, le tampon est physiologiquement acceptable, c'est-à-dire qu'il ne présente aucun risque d'intolérance ou de toxicité lors de l'injection du gel d'acide hyaluronique selon l'invention ou de sa mise en contact avec les tissus. 3066386 7 Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, la dialyse peut être réalisée dans un seul ou plusieurs bains contre une solution tampon telle que décrite précédemment. Selon un mode plus préféré de réalisation, la dialyse peut être réalisée dans plusieurs bains successifs contre des solutions tampon présentant des pH différents de plus en plus proches du 5 pH final souhaité pour la solution d'acide hyaluronique (pH cible). Il est ainsi possible de rehausser le pH de manière plus progressive en fonction du nombre de bains tampons mis en oeuvre. Selon un mode préféré de réalisation, pour contrôler simultanément l'osmolarité du gel d'acide hyaluronique, le tampon mis en oeuvre pour la dialyse peut être associé à un sel dit 10 neutre, c'est-à-dire n'interagissant pas avec le tampon, notamment un de sel de sodium (NaC1) ou de potassium (KC1) en une concentration en sel pour atteindre l'osmolarité des tissus compris entre 280mOsmoLL-1 et 380 m0smoLL-1. En particulier, la solution tampon peut présenter une osmolarité comprise entre 250 et 350 mOsm/L, de préférence entre 280 et 330 mOsm/L. 15 Homogénéisation par laminage Dans le cadre du procédé de l'invention, le gel aqueux d'acide hyaluronique réticulé préparé à l'étape a) est ensuite homogénéisé par laminage pour éliminer les zones dures (agrégats formés lors de la réticulation) sans altérer les propriétés mécaniques et visco-élastiques du gel. En particulier, le laminage consiste en une compression continue entre au moins deux 20 cylindres contrarotatifs, de préférence trois cylindres contrarotatifs. Le cylindre d'entrée peut par exemple tourner à une vitesse tangentielle comprise entre 0.1 -1 -1 -1 -1 m.s et 5 m.s , de préférence entre 0.5m.s et 3m.s . Lorsque le laminage est réalisé entre deux cylindres, ceux-ci tournent de préférence à une même vitesse tangentielle, et le gel est introduit entre les deux cylindres, comme illustré à la 25 figure 1. Lorsque le laminage est réalisé entre trois cylindres, la vitesse tangentielle des différents cylindres devrait augmenter pour permettre l'entrainement du gel à la surface du second cylindre pour conduire un second laminage entre le 2e et le 3e cylindre. A titre d'exemple, tel qu'illustré à la Figure 2, si le premier cylindre tourne à une vitesse tangentielle x 1, le second 30 pourrait tourner à cette vitesse tangentielle x2, et le troisième à cette vitesse tangentielle x3 pour permettre un double laminage du gel. Selon un mode préféré de réalisation, l'espacement entre les cylindres contrarotatifs (aussi appelé entrefer) est compris entre 20 pm et 1 mm, de préférence entre 20 pm et 100 pm. Les cylindres peuvent de préférence être en acier inoxydable, pour pouvoir être facilement 35 nettoyé, et éventuellement pourvus d'un revêtement microporeux ou céramique, susceptible de favoriser l'adhérence du gel à la surface des cylindres. 3066386 8 Purification Selon un mode particulier de réalisation, et en particulier dans le cas où la neutralisation n'est pas réalisée par dialyse, le gel aqueux d'acide hyaluronique réticulé peut être purifié avant ou après l'étape b) d'homogénéisation par laminage afin d'éliminer les traces d'agent de 5 réticulation résiduel. Selon un mode préféré de réalisation, la purification est de préférence réalisée par dialyse dans les conditions précédemment décrites. La purification par dialyse permet, outre l'élimination de l'agent de réticulation résiduel, d'affiner encore le pH obtenu après neutralisation et de contrôler l'osmolarité du gel. 10 La purification peut entrainer une nouvelle dilution de l'acide hyaluronique. La teneur en acide hyaluronique réticulé présent dans le gel après purification est comprise entre 1 mg/mL et 60 mg/mL, de préférence entre 5 et 50 mg/mL. Acide hyaluronique linéaire Selon un mode particulier de réalisation, on peut ajouter un acide hyaluronique linéaire après 15 l'étape (a) de préparation du gel aqueux d'acide hyaluronique réticulé de manière à diminuer la viscosité du gel et ainsi, ajuster ses propriétés mécaniques, en particulier, afin de diminuer la force d'éjection du gel et de faciliter le remplissage des seringues. L'introduction d'acide hyaluronique linéraire peut être effectuée avant ou après l'étape de purification précédemment décrite. 20 La quantité d'acide hyaluronique linéraire introduite dans le gel d'acide hyaluronique réticulé est de préférence inférieure ou égale à la quantité d'acide hyaluronique réticulé présent dans le gel après neutralisation et éventuellement purification, de manière à ne pas diluer davantage l' acide hyaluronique. En particulier, la teneur en acide hyaluronique réticulé présent dans le gel après purification 25 est comprise entre 0,1 mg/mL et 100 mg/mL, de préférence entre 1 et 50 mg/mL. Polymère additionnel Selon un mode particulier de réalisation, le gel aqueux d'acide hyaluronique comprend également au moins un polymère additionnel autre que l'acide hyaluronique, tel que la chondroïtine, la cellulose, l'alginate, le polycaprolactone, l'acide polylactique, l'acide 30 polyglycolique, le collagène, la soie, le PTFE et leurs dérivés. Le polymère additionnel peut être introduit avant la réticulation de l'acide hyaluronique pour conduire à une co-réticulation de l'acide hyaluronique avec le polymère additionnel, ou après l'étape a) de préparation du gel aqueux d'acide hyaluronique réticulé, et en particulier avant l'étape b) d'homogénéisation par laminage. 35 Le polymère additionnel peut par exemple être introduit en une teneur allant de 0,1% à 5%, de préférence de 0,5% à 4%. 3066386 9 Compositions injectables Selon un mode préféré de réalisation, le gel aqueux préparé selon le procédé de l'invention est injectable. Par gel injectable, on entend au sens de la présente invention une composition se présentant 5 sous forme de gel présentant des propriétés d'injectabilité (ou seringuabilité, c'est-à-dire facilité d'injection du fait d'un écoulement plus ou moins satisfaisant à travers une aiguille dans une seringue) satisfaisantes, et en particulier capables d'être injectées au moyen d'une seringue présentant une aiguille de diamètre interne environ égal à 300 !lm. Au sens de la présente demande, sont considérés comme injectables d'un point de vue rhéologique, les gels 10 ayant de préférence une viscosité inférieure ou égale à 10000 Pa.s et un facteur de perte (Tan6) compris entre 0,01 et 5. Les mesures rhéologiques (G', G" et Tan6) sont effectuées sur un rhéomètre Discovery HR-1 (TA industries) et une géométrie plan/plan 40 mm selon un mode continu (contrainte de déformation 10%, fréquence de 1Hz, à 25°C, pendant 120s). Les échantillons constitués 15 d'environ 1.2 ml sont déposés dans un entrefer de 1000p.m. Les mesures de viscosité maximum sont réalisées en mode dynamique (fréquence angulaire de 0,1 à 100 rad.s-1). Les échantillons constitués d'environ 1.2 ml sont déposés dans un entrefer de 10001..tm. Le gel aqueux préparé selon le procédé de l'invention peut donc être conditionné dans des 20 seringues pour pouvoir être injecté dans les tissus. L'invention a ainsi pour objet, selon un autre aspect, une seringue contenant le gel préparé selon le procédé de l'invention, tel que décrit précédemment. Une telle seringue est en particulier destinée au comblement des rides ou des ridules. Selon ce mode de réalisation, un dégazage peut être effectué avant le remplissage des 25 seringues pour supprimer toute bulle d'air éventuelle. Utilisations Dans un mode de réalisation particulier, le gel aqueux obtenu selon la présente invention est destiné à être utilisé dans la réparation ou la reconstruction des tissus. En particulier, le gel aqueux selon la présente invention peut être utilisé pour la constitution 30 ou la substitution de tissus biologiques, par exemple comme implant, ou le comblement des tissus biologiques, par exemple l'injection dans les cartilages osseux ou dans les articulations ou pour le comblement des cavités du corps ou du visage, telles que les rides ou les ridules, pour la création ou l'augmentation de volumes du visage ou du corps humain, ou encore pour la cicatrisation de la peau. 35 Selon d'autres modes de réalisation particuliers, le gel aqueux selon la présente invention peut être utilisé : 3066386 10 - en chirurgie, notamment dans la réparation d'organes, ou en médecine ou chirurgie esthétique, en urologie, notamment pour le traitement de l'incontinence urinaire, en infectiologie, notamment comme fluide vecteur pour les vaccins, 5 en ophtalmologie, notamment pour la cicatrisation cornéenne, - en odontologie, notamment pour la pose d'un implant dentaire ou pour la réparation osseuse, - en orthopédie, notamment dans le périoste pour la création de volume, - pour la thérapie cellulaire ou l'ingénierie tissulaire, dans le cadre de la vectorisation de 10 cellules thérapeutiques ou de facteurs biactifs, ou encore en angiologie. Le gel aqueux selon la présente invention peut également être utilisé en rhumatologie. Avantageusement, le gel aqueux selon la présente invention peut également être utilisé en tant que vecteur de principe actif notamment thérapeutique, tel que des cellules, un vaccin ou une 15 hormone du type insuline ou oestrogène, et d'une manière plus générale pour tous les principes actifs dont la délivrance ou libération contrôlée et/ou prolongée présente un avantage. La présente invention concerne également l'utilisation cosmétique d'un gel aqueux selon l'invention pour traiter ou lutter contre le vieillissement de la peau. L'exemple suivant est destiné à illustrer l'invention sans aucunement en limiter la portée. 20 Exemple : Un gel aqueux d'acide hyaluronique conforme à l'invention (Composition 1) a été préparé selon le procédé suivant : De l'acide hyaluronique (HTL, France) a été complètement solubilisé dans une solution alcaline de tampon phosphate (300mOsmo1-1, pH=12.9, Merck, France) pour obtenir une 25 concentration finale en acide hyaluronique de 150mg.mL-1. Une solution de BDDE à 20% en masse (SA, France) est ajoutée lentement. Le mélange est ensuite chauffé à 50°C jusqu'à ce que la texture n'évolue plus et que le mélange se teinte en jaune. Le gel obtenu est ensuite laminé à l'aide d'un laminoir tricylindrique EXAKT 50i G line 30 (Exakt, Allemagne). Lorsque le laminage est terminé, une solution acide de tampon phosphate (472mOsmo1.L-1, pH=1.59, Merk, France) est ajoutée pour neutraliser le mélange réactionnel et pour diluer le gel à une concentration de 32.5mg.mL-1 en acide hyaluronique. 3066386 11 Le gel est ensuite dialysé contre un tampon phosphate (300mOsmoLL-1, pH 7.4, Merck, France). La dialyse est stoppée lorsque la neutralité est atteinte. Pour finir, 4% (w/w) d'une solution d'acide hyaluronique à 25mg.mL-1 (HTL, France) sont ensuite ajoutés. Le gel d'acide est ensuite placé dans des seringues de lmL (BD, lmL longue) puis stérilisée par autoclavage 5 (121°C pendant 15 min). Un gel aqueux d'acide hyaluronique comparatif (Composition 2) a également été préparé selon le même procédé, en dehors de l'étape de laminage qui n'a pas été réalisée. L'effet du laminage sur l'homogénéité du gel a été mis en évidence par mesure de la force d'éjection. Plus la force d'éjection est stable lors de l'expulsion du produit à travers la 10 seringue et l'aiguille, plus le gel est homogène. On a mesuré les forces d'éjection des compositions 1 et 2 de gels aqueux précédemment préparés. Les résultats de ces mesures sont présentés en Figures 3 et 4. On observe une excellente stabilité de la force d'éjection pour la Composition 1 selon l'invention (Figure 3). Au contraire, pour la Composition 2 (comparative), non laminée, non 15 tamisée et non broyée, on observe de fortes variations de la force d'éjection dépassant plusieurs fois la marge de ±10% par rapport à la force d'extrusion N=F(t) linéarisée (Figure 4). On a également mesuré la force d'éjection d'une composition commerciale de gel aqueux d'acide hyaluronique réticulé Teosyal Ultradeep (Composition 3) dont le procédé de 20 fabrication met en oeuvre une étape de tamisage/broyage comme décrit dans la demande de brevet US 2013/0237615. Le résultat de cette mesure est présenté à la figure 5. On observe de large variation dans la force d'éjection durant l'éjection ce qui démontre une hétérogénéité du gel. 25 REVENDICATIONS1. Procédé de préparation d'un gel aqueux d'acide hyaluronique comprenant les étapes suivantes: a) la préparation d'un gel aqueux d'acide hyaluronique réticulé, b) l'homogénéisation du gel aqueux formé à l'étape (a) par laminage, c) la récupération du gel aqueux homogénéisé à l'étape (b). 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le laminage consiste en une compression continue entre au moins deux cylindres contrarotatifs, de préférence trois cylindres contrarotatifs. 3. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que l'espacement entre les cylindres contrarotatifs est compris entre 20 p.m et 1 mm, de préférence entre 20 p.m et 100 p.m. 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que l'étape a) de préparation d'un gel aqueux d'acide hyaluronique réticulé comprend au moins les étapes suivantes : i. la réticulation en milieu acide ou basique dudit acide hyaluronique en présence d'au moins un agent de réticulation, et ii. la neutralisation de la solution d'acide hyaluronique obtenue à l'étape i. jusqu'à un pH compris entre 6,5 et 7,5, de manière à obtenir un gel aqueux d'acide hyaluronique réticulé. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que la réticulation en milieu basique de l'acide hyaluronique comprend au moins les étapes suivantes : - la dissolution d'au moins un acide hyaluronique et/ou l'un de ses sels, dans une solution basique présentant un pH supérieur à 7,5, de préférence supérieur ou égal à 10, plus préférentiellement compris entre 10 et 14, - la réticulation en solution basique dudit acide hyaluronique en présence d'au moins un agent de réticulation. 6. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que la réticulation en milieu acide de l'acide hyaluronique comprend au moins les étapes suivantes : - la dissolution d'au moins un acide hyaluronique et/ou l'un de ses sels, dans une solution acide présentant un pH inférieur à 6,5, de préférence inférieur ou égal à 5, plus préférentiellement compris entre 4,5 et 2. - la réticulation en solution acide dudit acide hyaluronique en présence d'au moins un agent de réticulation. 3066386 13 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 4 à 6, caractérisé en ce que l'étape i. de réticulation de l'acide hyaluronique comprend au moins une réticulation en milieu basique de l'acide hyaluronique et une réticulation en milieu acide de l'acide hyaluronique, et de préférence une réticulation en milieu basique de l'acide hyaluronique suivie d'une réticulation 5 en milieu acide de l'acide hyaluronique 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que l'acide hyaluronique mis en oeuvre dans la préparation du gel aqueux à l'étape a) présente une masse molaire comprise entre 1 000 000 Da et 5 000 000 Da, de préférence entre 1 500 000 Da et 3 500 000 Da. 10 9. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que la teneur en acide hyaluronique dans le gel aqueux d'acide hyaluronique obtenu à l'étape a) est comprise entre 1 mg/mL et 300 mg/mL, de préférence entre 75 et 200 mg/mL, plus préférentiellement entre 100 et 175 mg/mL. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 4 à 9, caractérisé en ce que l'agent de 15 réticulation est choisi parmi les époxydes di-fonctionnels, les époxydes multifonctionnels, esters bi ou poly fonctionnels, les divinylsulfones, les carbodiimides, le formaldéhyde, les dialdéhydes et leurs mélanges, et de préférence l'agent de réticulation est le 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE). 11. Procédé selon l'une quelconque des revendications 4 à 10, caractérisé en ce que l'agent de 20 réticulation est introduit en une quantité comprise entre 10 mg et 250 mg par gramme d'acide hyaluronique linéaire introduit à l'étape i. 12. Procédé selon l'une quelconque des revendications 5 à 11, caractérisé en ce que le sel d'acide hyaluronique est choisi parmi un sel de sodium, un sel de calcium, un sel de zinc et un sel de potassium, de préférence un sel de sodium. 25 13. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, caractérisé en ce que le gel aqueux est purifié avant ou après l'étape b) d'homogénéisation par laminage, ladite purification étant de préférence réalisée par dialyse. 14. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, caractérisé en ce qu'on ajoute un acide hyaluronique linéaire après l'étape (a). 30 15. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 14, caractérisé en ce que le gel aqueux préparé est injectable. 16. Gel aqueux d'acide hyaluronique susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 15. 17. Gel aqueux selon la revendication 16 pour son utilisation médicale pour la réparation ou la reconstruction des tissus. 18. Utilisation cosmétique d'un gel aqueux selon la revendication 16 dans la réparation ou la reconstruction des tissus, en particulier pour le comblement des rides et ridules.