Brevet FR3066916A1 — publié le 20181207

La présente invention se rapporte au domaine technique général des produits cosmétiques de soin, à usage topique, utilisables notamment sur la peau. Plus précisément, la présente invention est relative à un complexe végétal comprenant au moins de la sève de bouleau (ou eau de bouleau) et au moins un extrait de chaga (Inonotus obliquus), ainsi qu'a une composition cosmétique à application topique comprenant un tel complexe végétal à titre d'ingrédient actif. Elle se rapporte également à un procédé cosmétique non thérapeutique pour les soins de la peau mettant en oeuvre une telle composition, ainsi qu'a l'utilisation non thérapeutique d'une telle composition cosmétique pour les soins de la peau, et notamment pour protéger la peau des agressions extérieures, notamment des effets néfastes des rayons ultraviolets (UV), et calmer la peau tout en renforçant ses défenses naturelles. La peau est le principal organe du corps humain avec une surface totale d'environ 2 m2. La peau comprend plusieurs couches intégrées, allant de la couche superficielle, l'épiderme, jusqu'aux couches plus profondes, le derme et l'hypoderme, et chacune de ces couches possède des propriétés spécifiques permettant à l'ensemble de réagir et de s'adapter aux conditions de son environnement. L'épiderme, principalement composé de kératinocytes, de mélanocytes et de cellules de Langerhans, joue un rôle fondamental pour assurer la protection et le maintien d'une bonne trophicité. Les kératinocytes sont des cellules extrêmement dynamiques qui subissent une prolifération et une différenciation permanentes aux termes desquelles elles se transforment en cellules mortes (cornéocytes), s'éliminant régulièrement par desquamation. Le derme se compose principalement de collagène, d'élastine et de protéoglycanes, molécules synthétisées par les fibroblastes dermiques. Les fibres de collagène assurent la résistance mécanique et la texture de la peau, l'élastine est responsable de l'élasticité, et les protéoglycanes, combinant protéines et glycosaminoglycane, jouent un rôle majeur de structure et d'hydratation de la peau. Les glycosaminoglycanes, tels que l'acide hyaluronique, sont des molécules très hygroscopiques qui sont capables de retenir des quantités importantes d'eau. D'autres cellules, comme les macrophages et les leucocytes, sont également présentes dans la couche du derme. 3066916 2 L'hypoderme, qui est la couche la plus profonde de la peau, contient les adipocytes qui produisent des lipides pour que le tissu sous-cutané fabrique une couche lipidique protégeant les muscles, les os et les organes internes contre les chocs. 5 La peau protège l'organisme des agressions extérieures, contribue à la respiration et est le principal organe jouant sur l'immunité. Les agressions de l'environnement, y compris les agressions climatiques telle que l'exposition au soleil, les variations de températures, la pollution, jouent un rôle néfaste sur la peau en générant des radicaux libres 10 qui sont des espèces réactives de l'oxygène (ou ROS, de l'expression anglophone « Reactive oxygene species ») telles que l'anion superoxyde (On. L'attaque par voie radicalaire initie des réactions en chaîne qui ne s'arrêtent que lorsque deux radicaux libres s'inactivent mutuellement. En particulier, les radicaux libres génèrent un stress oxydant altérant les lipides 15 membranaires des cellules de la peau et les cellules elles-mêmes, non seulement au niveau de l'ADN mitochondrial et des mitochondries, qui sont le centre énergétique des cellules et « l'atelier » de réparation cellulaire, provoquant un vieillissement prématuré et/ou accéléré de la peau, mais également au niveau de l'ADN cellulaire, c'est-à-dire de l'ADN contenu dans 20 le noyau des cellules. Il est donc important de protéger les cellules de la peau des effets néfastes des agressions de l'environnement, et en particulier du stress oxydatif généré notamment par les rayonnements UV afin de prévenir et/ou retarder l'apparition de signes de vieillissement cutanés tels que rides et 25 ridules. Des compositions cosmétiques ayant des propriétés antiradicalaires ont déjà été proposées, notamment des compositions comprenant de la superoxyde dismutase qui est une métalloprotéine possédant une activité enzymatique catalysant la dismutation des anions superoxyde en dioxygène 30 et peroxyde d'hydrogène. Pour cette raison, cette enzyme est une composante essentielle du mécanisme d'élimination des radicaux libres (voir par exemple la demande de brevet FR2287899. Par ailleurs, au regard de certains composés synthétiques, incorporés dans les compositions cosmétiques, les produits d'origine naturelle ou 35 contenant des composés naturels sont de plus en plus appréciés par les consommateurs(trices) et ont amené l'industrie cosmétique à proposer des produits contenant des substances naturelles ou d'origine naturelle 3066916 3 présentant des propriétés anti-radicalaires. C'est ainsi que l'on connaît déjà des compositions cosmétiques contenant des substances d'origine végétale, telles que par exemple des polyphénols, capables de piéger les radicaux libres produits en excès par l'organisme lors d'agressions externes. 5 A titre d'exemple, la demande de brevet EP 0 629 397 décrit une composition cosmétique ou pharmaceutique pour application topique ayant une action antiradicalaire et anti-infllammatoire, comprenant un extrait hydroglycolique de microalgues Chlorella, Scenedesmus et Spiruline en association avec un extrait de café vert. 10 Un autre exemple est donné par la demande de brevet EP 1 787 970 qui décrit une composition cosmétique à application topique ayant des propriétés anti-radicalaires comprenant des polyphénols extraits de fèves de cacao. Par ailleurs, la demande de brevet FR 2 829 695 décrit des 15 compositions cosmétiques renfermant de la sève de bouleau en association avec un jus d'argousier. Il est mentionné que cette association a des propriétés hydratantes, permet de calmer les sensations d'inconfort produites par l'irritation mécanique, notamment par le rasage quotidien bien connu pour déclencher le feu du rasoir, procure une sensation anti-fatigue et permet 20 de vitaliser les tissus. Compte tenu de la demande toujours croissante pour de nouveaux produits et de l'attrait des consommateurs et consommatrices pour les produits d'origine naturelle, il existe toujours un besoin pour des compositions cosmétiques alternatives ayant notamment des propriétés anti- 25 radicalaires et pouvant avantageusement être utilisées pour prévenir et/ou traiter les signes du vieillissement cutané. Les travaux réalisés par la Demanderesse ont montré que l'association de la sève de bouleau et d'au moins un extrait de chaga présente des propriétés anti-radicalaires synergiques, mais également qu'un tel extrait 30 permet de stimuler l'immunomodulation (renforcement des défenses naturelles), a un effet positif sur la production intrinsèque de superoxyde dismutase et de catalase par les cellules de la peau ayant subi un stress oxydatif enfin a une action protectrice et réparatrice de l'ADN mitochondrial et également une action protectrice de l'ADN cellulaire. Cette association 35 présente de plus un effet apaisant permettant de calmer les peaux irritées. 3066916 4 De plus, les essais effectués ont montré qu'un tel complexe végétal de ne présentait aucune cytotoxicité. La sève de bouleau est également appelée eau de bouleau en raison de sa transparence. Il ne faut pas la confondre avec le jus de bouleau qui est 5 une décoction de feuilles de bouleau. La récolte de la sève de bouleau a lieu généralement à la fin de l'hiver et au début du printemps, au moment où l'arbre se gorge de toute la sève dont il a besoin, et ce pendant 3 ou 4 semaines. Pendant cette période la sève monte alors dans l'arbre, c'est donc la sève montante qui est récoltée par incision de l'écorce du bouleau ou 10 pincement de celle-ci. C'est à cette période très précise que l'on peut récolter l'eau de bouleau, juste avant que les bourgeons n'apparaissent, parfois dès la fin du mois de février. La sève peut notamment être extraite du bouleau blanc (Betula alba), du bouleau verruqueux (Betula pendula), du bouleau flexible (Betula lenta), du bouleau papyfera (Betula papyfera) et du bouleau 15 fontinal (Betula fontinalis). La sève de bouleau est riche en oligoéléments, en sels minéraux, en oligosaccharides, en acides aminés et en acides organiques. Elle est connue pour ses bienfaits de drainage et de régénération de l'organisme. Elle peut être consommée à l'état naturel ou après incorporation dans des boissons fermentées en y ajoutant du miel par 20 exemple. Les propriétés anti-radicalaires de la sève de bouleau n'avaient cependant pas encore été décrites. Le chaga (lnonotus obliquus) est un champignon du genre lnonotus de la famille des Hymenochaetaceae. Il a une apparence de sclérote avec une surface de couleur allant de l'orange au noir. Il est un parasite du bouleau 25 dont il digère lentement le tronc. On le trouve dans les forêts de bouleau de Russie, de Corée, dans l'Est de l'Europe du Nord ainsi qu'en Auvergne et dans les régions du Nord des États-Unis, dans les montagnes en Caroline du Nord et au Canada. Le chaga est considéré comme un champignon médicinal qui a sa place en médecine populaire en Russie et en Europe de l'Est. Plusieurs 30 études ont démontré que le chaga aide à combattre le cancer et à détoxifier l'organisme des matières radioactives émises lors d'une chimiothérapie. Il renforcerait le système immunitaire en plus de prévenir l'asthme et les allergies. Il serait également un régénérateur du foie et du système digestif (WOLFE, David (2012). Chaga: King of the Medicinal Mushrooms. Berkeley, 35 California : North Atlantic Books). Il n'était cependant pas connu que l'association de la sève de bouleau et d'un extrait de chaga aurait notamment des propriétés synergiques 3066916 5 antiradicalaires ainsi qu'un effet immunomodulateur permettant de renforcer les défenses naturelles pouvant avantageusement être mises à profit dans des compositions cosmétiques à application topique pour prévenir et/ou traiter les signes du vieillissement cutané. 5 Ainsi, la présente invention a pour premier objet un complexe végétal comprenant au moins de la sève de bouleau et au moins un extrait aqueux de chaga (Inonotus obliquus). Un second objet de l'invention est l'utilisation cosmétique et non thérapeutique d'un complexe végétal tel que défini selon le premier objet de 10 l'invention, à titre d'ingrédient actif ayant des propriétés antiradicalaires et d'immunomodulation, dans une composition cosmétique destinée à prévenir et/ou traiter les signes du vieillissement cutané. Un troisième objet de l'invention est une composition cosmétique à application topique comprenant, dans un support cosmétiquement 15 acceptable, au moins un complexe végétal tel que défini selon le premier objet de l'invention, c'est-à-dire comprenant au moins de la sève de bouleau et au moins un extrait aqueux de chaga. Enfin, un quatrième objet de l'invention est un procédé de traitement cosmétique non thérapeutique pour prévenir et/ou traiter les signes du 20 vieillissement cutané comprenant au moins une étape d'application sur la peau d'une composition cosmétique à application topique telle que définie selon le troisième objet de l'invention, c'est-à-dire comprenant au moins un complexe végétal tel que défini selon le premier objet de l'invention. Comme indiqué précédemment la sève de bouleau peut être récoltée 25 par légère excision de l'arbre lorsque printemps lorsque la sève est montante et avant formation des bourgeons. Une fois récoltée, la sève est éventuellement additionnée d'un conservateur et décontaminée par filtration. La sève de bouleau est également disponible commercialement auprès de la société Greentech sous la dénomination commerciale BOULEAU SEVE BIO SB. 30 La sève de bouleau comprend des minéraux, notamment des chlorures, du calcium, du magnésium, du sodium, du potassium, du cuivre, du fer, du manganèse, de la silice et du zinc, ainsi que des oligosaccharides tels que le fructose, le galactose, le saccharose et le glucose, des acides aminés et des protéines tels que l'asparagine, l'acide aspartique, la glutamine, l'acide 35 glutamique, l'isoleucine, la valine et la citruline, ainsi que des acides 3066916 6 organiques tels que l'acide malique et l'acide citrique. Elle se présente sous la forme d'un liquide incolore ayant les caractéristiques suivantes : - indice de réfraction 1,325 à 1,345 ; - pH (direct) : 3,4 à 4,0 ; 5 - densité : 0,980 à 1,020. L'extrait de chaga peut être obtenu par cryobroyage du champignon entier après congélation à très basse température, puis extraction aqueuse du cryobroyat par macération dans l'eau, de préférence à une température de 35 à 40°C. L'extrait aqueux est ensuite clarifié puis éventuellement 10 additionné d'un conservateur avant d'être enfin décontaminé par filtration (diamètre 0,2 pm). Un tel extrait aqueux de chaga est également disponible dans le commerce auprès de la société Greentech, sous la dénomination commerciale INONOTUS OBLIQUUS CRYOEXTRAIT CONCENTRATE AQUEUX BIO SB. 15 L'extrait aqueux de chaga comprend, entre autres ingrédients, des oligo- et polysaccharides tels que du rhamnose, de l'arabinose, du xylose, du mannose, du glucose, du galactose, du fucose, de la glucosamine, de la galactosamine, de l'amidon, de l'acide uronique, des exo-polysaccharides (EPS), des endo-polysaccharides, des alpha-fucoglucomannanes, des beta- 20 glucanes ; des composés phénoliques tels que des tannins, des polyphénols, des acides phénoliques (acide vanillique, acide protocatéchique, acide syringique, acide caféique) et des acides aminés et des protéines tels que le tryptophane, la glycine, la cystéine et la mélanine. Il se présente sous la forme d'un liquide ambré à brun foncé ayant les caractéristiques suivantes : 25 - taux de matières sèches : 1,0 à 4,0 % en masse ; - pH (direct) : 3,4 à 4,0 ; - indice de réfraction : 0,950 à 1,050. - polysaccharides : 0,5 à 5 g/L ; - polyphénols (dont catéchine) : 0,30 à 0,60 g/L. 30 Le complexe végétal conforme à l'invention peut par exemple se présenter sous la forme d'un kit à plusieurs compartiments dans lequel un premier compartiment contient ladite sève de bouleau et un deuxième compartiment contient ledit extrait aqueux de chaga. 3066916 7 La quantité de sève de bouleau à utiliser selon l'invention peut varier par exemple de 0,1 à 50 % en masse, et de préférence de 1 à 5 % en masse par rapport à la masse totale de la composition cosmétique. La quantité d'extrait aqueux de chaga à utiliser selon l'invention peut 5 varier par exemple de 0,1 à 15 % en masse, et de préférence de 0,1 à 2 % en masse par rapport à la masse totale de la composition cosmétique. Selon une forme de réalisation préférée de l'invention, la composition cosmétique comprend de 2,5 à 5 % en masse de sève de bouleau et de 0,5 à 2 % en masse d'extrait aqueux de chaga, et encore plus préférentiellement io 5 % en masse de sève de bouleau et 2 % en masse d'extrait aqueux de chaga, par rapport à la masse totale de la composition cosmétique. Au sens de la présente invention, on entend par « support cosmétiquement acceptable », les supports et excipients habituellement utilisés dans les compositions cosmétiques et/ou dermatologiques et qui sont 15 compatibles avec la peau et/ou ses phanères, qui présentent une couleur, une odeur et un toucher agréables et qui ne génèrent pas d'inconforts inacceptables (picotements, tiraillements, rougeurs pour les utilisatrices et utilisateurs de ces compositions). A titre d'exemple, de tels supports comprennent généralement de l'eau, un mélange d'eau et d'un ou plusieurs 20 solvants organiques, ou un solvant ou un mélange de solvants organiques cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptables. Suivant une forme avantageuse de réalisation, la composition cométique conforme à la présente invention peut contenir, outre le complexe végétal décrit ci-dessus, c'est-à-dire outre la sève de bouleau et l'extrait 25 aqueux de chaga, un ou plusieurs actifs supplémentaires renforçant ou complétant avantageusement leur activité, et compatibles, c'est-à-dire non susceptibles de réagir les uns avec les autres ou de masquer ou limiter leurs effets. De tels ingrédients actifs peuvent par exemple être choisis parmi tout type de composés habituellement utilisés dans les compositions cosmétiques 30 et tels que des émollients, des agents hydratants des couches supérieures de l'épiderme, des correcteurs de teint, des vitamines, des agents kératolytiques, des alpha-hydroxyacides, des agents stimulants de la circulation tels que par exemple des extraits de marron d'inde, de vigne rouge, de cyprès, etc... 35 La composition cosmétique conforme à la présente invention peut se présenter sous les formes galéniques classiquement utilisées pour une application par voie topique, notamment sous forme de gel, d'émulsion (en 3066916 8 particulier crème ou lait), d'émulsion biphasique huile-dans-eau ou eau-danshuile, de masque, de pommade, lesdites formes galéniques contenant en outre des excipients et supports usuels et acceptables sur le plan cosmétologique. La composition cosmétique conforme à l'invention est de 5 préférence utilisée sous forme de crème, de sérum, de lotion ou de gel. Ces formes d'application par voie topique sont préparées par les techniques usuelles, et par exemple, dans le cas d'une crème, par dispersion d'une phase grasse dans une phase aqueuse pour obtenir une émulsion huile-dans-eau, ou inversement pour préparer une émulsion eau-dans- 10 huile dans les cas de crèmes. La composition cosmétique conforme à l'invention peut en outre renfermer un ou plusieurs excipients acceptables sur le plan cosmétologique. Ces excipients appropriés pour la formulation sont bien connus de l'homme du métier et comprennent en particulier les agents de pénétration tels que le 15 phytantriol, l'octyl dodécanol et l'escine ; les épaississants tels que les gommes naturelles et les polymères de synthèse ; les tensioactifs ; les émulsionnants tels que des dérivés de polyglycérol ; les conservateurs tels que le phénoxyéthanol et l'acide déhydroacétique ; les colorants ; les parfums ; etc... 20 On peut également ajouter à la composition cosmétique des agents de protection contre les rayons ultraviolets, et par exemple des filtres solaires UV-A et UV-B hydrophiles ou lipophiles, ou des pigments formant écran antiultraviolet. L'utilisation non thérapeutique de la composition cosmétique conforme 25 à l'invention comprend tous les soins du corps et de la peau y compris les produits solaires, protecteurs et bronzants, les produits anti-âges, antiséborrhéiques, toniques, les produits assurant l'amélioration de l'aspect de la peau y compris le traitement acnéique et les rougeurs cutanées, les agents dépigmentants et/ou de blanchiment de la peau, etc.. 30 La composition cosmétique conforme à la présente invention est parfaitement tolérée par la peau, elle ne présente aucune phototoxicité et son utilisation sur des périodes, même prolongées, ne génère aucun effet systémique. De préférence, le procédé de traitement cosmétique non thérapeutique 35 pour prévenir et/ou traiter les signes du vieillissement cutané comprend une 3066916 9 à deux applications par jour de la composition cosmétique conforme à l'invention sur les zones à traiter, principalement sur le visage et le cou. Les exemples suivants illustrent l'invention sans pour autant en limiter la portée. 5 EXEMPLES EXEMPLE 1 : Préparation d'une crème de jour comprenant de la sève de bouleau et un extrait aqueux de chaga Par les techniques usuelles, on a préparé une crème de jour pour le soin des peaux normales à mixtes ayant la composition massique indiquée ci-10 après (quantités indiquées en % en masse) : - Polyacrylate Crosspolymer vendu sous la dénomination commerciale SEPIMAX ZEN C) par la société SEPPIC 0,90 - Chlorphenesin vendu sous la dénomination commerciale ELESTAB CPN C) par la société AMI 0,27 15 - Sorbate de potassium vendu sous la dénomination commerciale SORBATE DE POTASSIUM GRANULAR C) par la société UNIVAR 0,20 - EDTA disodique vendu sous la dénomination commerciale DISSOLVINE NA2P par la société BRENNTAG 0,10 20 - Mélange de polyglucery1-6-distearate, d'esters de jojoba de polyglycery1-3 Beeswax et d'alcool cétylique vendu sous la dénomination commerciale EMULIUM MELLIFERA C) par la société GATTEFOSSE 3,50 - Triglycéride caprylique/caprique vendu sous la dénomination 25 commerciale MYRITOL C) 318 par la société BASF/AMI 3,00 - Alcool cétylique vendu sous la dénomination commerciale LANETTE 16 C) par la société BASF/AMI 0,50 - Squalane vendu sous la dénomination commerciale PHYTOSQUALAN par la société SOPHIM 1,50 30 - Alcool béhénylique vendu sous la dénomination commerciale LANETTE 22 C) par la société BASF/AMI 0,20 - Triglycérides en C10-C18 vendus sous la dénomination commerciale LIPOCIRE A SG C) par la société GATTEFOSSE 2,00 - Insaponifiables d'éthylhexyl olivate hydrogéné et d'huile 35 d'olive hydrogénée vendus sous la dénomination commerciale SOFT OLIVE C) par la société SOLIANCE 3,00 - Stearoyl glutamate de sodium/chlrorure de sodium vendu 3066916 10 sous la dénomination commerciale EUMULGIN SG C) par la société BASF/AMI 0,80 - Huile de graines de Corylus avellana vendue sous la dénomination commerciale HV-REFINED HAZELNUT OIL C) par 5 la société SOPHIM 1,00 - Huile hybride de tocophérol et d'Helianthus annuus vendu sous la dénomination commerciale BIOXAN SF T50 C) par la société QUIMASSO 0,50 - Pentylène glycol vendu sous la dénomination commerciale 10 HYDROLITE 5 C) par la société SAFIC-ALCAN 1,00 - Glycérine vendue par la société UNIVAR 3,00 - Extrait aqueux de chaga vendu sous la dénomination commerciale INONOTUS OBLIQUUS CRYOEXTRACT CONCENTRATE AQUEUX SB C) par la société GREENTECH 0,50 15 - Sève de bouleau vendue sous la dénomination commerciale BOULEAU SEVE BIO SB C) par la société GREENTECH 2,50 - Parfum 0,10 - Acide citrique monohydraté (AMI) 0,20 - Eau déminéralisée qsp 100,00 20 Cette crème de jour peut être utilisée une à deux fois par jour par application sur les zones de la peau à traiter. Elle permet de lutter contre les effets du vieillissement cutané. EXEMPLE 2 : Préparation d'un sérum aqueux visage comprenant de la sève de bouleau et un extrait aqueux de chaga 25 Par les techniques usuelles, on a préparé un sérum aqueux pour les soins du visage ayant la composition massique indiquée ci-après (quantités indiquées en % en masse). - Mélange de gomme Sclerotium, de lysolécithine, de Pullulan de gomme de xanthane et de silice vendu sous la 30 dénomination commerciale ECOGEL C) par la société UNIPEX 1,30 - EDTA disodique vendu sous la dénomination commerciale DISSOLVINE NA2P par la société BRENNTAG 0,10 - Butylène glycol-1,3 vendu par la société UNIVAR 2,00 - Sorbate de potassium vendu sous la dénomination 35 commerciale SORBATE DE POTASSIUM GRANULAR C) par la société UNIVAR 0,25 - Chlorphenesin vendu sous la dénomination commerciale 3066916 11 ELESTAB CPN C) par la société AMI 0,27 - Mélange aqueux d'acide lévulinique, de glycérine et de lévulinate de sodium vendu sous la dénomination commerciale DERMOSOFT 700 B C) par la société UNIPEX 0,50 5 - Sève de bouleau vendue sous la dénomination commerciale BOULEAU SEVE BIO SB C) par la société GREENTECH 5,00 - Extrait aqueux de chaga vendu sous la dénomination commerciale INONOTUS OBLIQUUS CRYOEXTRACT CONCENTRATE AQUEUX SB C) par la société GREENTECH 1,00 10 - Polysorbate 20 vendu sous la dénomination commerciale MONTANOX 20 DF C) par la société SEPPIC 0,40 - Parfum 0,10 - Eau déminéralisée qsp 100,00 Ce sérum peut être utilisé une à deux fois par jour par application sur 15 les zones de la peau à traiter. Il permet de lutter contre les effets du vieillissement cutané. EXEMPLE 3 : Préparation d'un sérum aqueux émulsionné pour le visage comprenant de la sève de bouleau et un extrait aqueux de chaga 20 Par les techniques usuelles, on a préparé un sérum aqueux émulsionné pour les soins du visage ayant la composition massique indiquée ci-après (quantités indiquées en % en masse). - Butylène glycol-1,3 vendu par la société UNIVAR 2,00 - Acrylates/C10-C30 alkyl acrylate crosspolymère vendu sous 25 la dénomination commerciale PEMULEN TR2 C) par la société GATTEFOSSE 0,27 - Méthylpropanediol vendu sous la dénomination commerciale DUB DIO C) par la société STEARINE DUBOIS 1,00 - Gomme de xanthane vendue sous la dénomination 30 commerciale RHODICARE T par la société SACI-CFPA 0,05 - Chlorphenesin vendu sous la dénomination commerciale ELESTAB CPN C) par la société AMI 0,27 - Sorbate de potassium vendu sous la dénomination commerciale SORBATE DE POTASSIUM GRANULAR C) par la 35 société UNIVAR 0,20 - EDTA disodique vendu sous la dénomination commerciale DISSOLVINE NA2P par la société BRENNTAG 0,10 3066916 12 - Mélange de carbonate dicaprylyl et de tocophérol vendu sous la dénomination commerciale CETIOL CC C) par la société BASF/AMI 1,00 - Squalane vendu sous la dénomination commerciale 5 PHYTOSQUALAN par la société SOPHIM 6,00 - Ceteareth-20 vendu sous la dénomination commerciale EUMULGIN B2 C) par la société BASF/AMI 1,00 - Stéarate de glycéryl vendu sous la dénomination commerciale CUTINA GMS SE par la société BASF/AMI 0,60 10 - Huile hybride de tocophérol et d'Hélianthus annuus vendu sous la dénomination commerciale BIOXAN SF T50 C) par la société QUIMASSO 0,50 - Extrait aqueux de chaga vendu sous la dénomination commerciale INONOTUS OBLIQUUS CRYOEXTRACT 15 CONCENTRATE AQUEUX SB C) par la société GREENTECH 1,00 - Sève de bouleau vendue sous la dénomination commerciale BOULEAU SEVE BIO SB C) par la société GREENTECH 5,00 - Parfum 0,10 - Hydroxyde de sodium (Merck) 0,092 20 - Eau déminéralisée qsp 100,00 Ce sérum émulsionné peut être utilisé une à deux fois par jour par application sur les zones de la peau à traiter. Il permet de lutter contre les effets du vieillissement cutané. EXEMPLE 4 : Vérification de l'absence cytotoxicité et étude de 25 l'effet du complexe végétal sur l'ADN mitochondrial La cytotoxicité du complexe végétal suivant l'invention, ainsi que son effet sur l'ADN mitochondrial ont été étudiés vis-à-vis de kératinocytes humains en culture. 4.1 Culture des kératinocytes 30 Des cultures de kératinocytes ont été établies à partir de prépuce néonatal d'un sujet mâle âgé de 2 ans, d'origine caucasienne, prélevé sous acte chirurgical. L'étude a été réalisée sur des cellules cultivées en plaque 6 puits à raison de 2.106 cellules par puits dans du milieu de culture pour kératinocytes supplémenté en extrait de glandes pituitaires bovines (0,4% 35 V/V), EGF recombinant humain (0,125 ng/ml), insuline (5 pg/ml), hydrocortisone (0,33 pg/ml), transférine humaine (10 pg/ml), épinéphrine (0,39 pg/ml) et chlorure de calcium (0,15 mM). 3066916 13 4.2 Etude de la cytotoxicité Quatre lots ont été constitués : Lot n° 1 : témoin ne recevant aucun produit. Lot n° 2 : traité par le Complexe végétal 1 5 Lot n° 3 : traité par le Complexe végétal 2 Lot n° 4 : par le Complexe végétal 3 Complexe 1 : sève de bouleau : 2,5 % en masse / Extrait aqueux de chaga : 0,5 % en masse Complexe 2 : sève de bouleau : 5 % en masse / Extrait aqueux de 10 chaga : 1 % en masse Complexe 3 : sève de bouleau : 5 % en masse / Extrait aqueux de chaga : 2 % en masse Chaque lot a été maintenu au contact des kératinocytes humains en culture pendant 24 heures. Chaque lot a été testé en triplicate. 15 La viabilité cellulaire est déterminée par le test de réduction au bleu de Formazan (test MU) après 24 heures d'incubation avec les kératinocytes. Après incubation des cellules avec chacun des lots de produit à l'étude, les puits contenant les cellules sont vidés par retournement doux et le tapis cellulaire est rincé avec le milieu de culture. On distribue dans tous les puits 20 200 pl d'une solution de MU (bromure de 3-(4,5-diméthylthiazol-2-y1)-2,5- diphényltétrazolium) diluée au moment de l'emploi (5 mg/mi), puis les plaques sont incubées à 37°C pendant 3 heures. Il y a alors formation de cristaux bleu de Formazan, en quantité inversement proportionnelle à l'atteinte des succinates déshydrogénases. 25 Les puits sont à nouveau vidés par retournement doux et les cellules sont ensuite lysées et les cristaux de bleu de Formazan sont dissous par addition de 200 pl de diméthylsulfoxyde (DMSO). Après homogénéisation de la coloration par agitation, la densité optique (DO) des plaques est lue, au moyen d'un spectrophotomètre à 570 nm, ce qui permet de connaître la 30 quantité relative de cellules vivantes et actives métaboliquement. Les valeurs de la densité optique (DO) après 24 heures de contact sont regroupées dans le tableau 1 ci-dessous. 3066916 14 TABLEAU 1 LOTS Densité optique DO 570 nm cyo Lot n°1 (témoin) 0,752 ± 0,07 - Lot n°2 (complexe 1) 0,810 ± 0,04 ns Lot n°3 (complexe 2) 0,790 ± 0,08 ns Lot n°4 (complexe 3) 0,778 ± 0,09 ns n.s. : non significatif par rapport au témoin Ces résultats montrent que le complexe végétal utilisé dans l'invention ne présente aucune cytotoxicité vis-à-vis des kératinocytes humains en 5 culture aux concentrations étudiées. 4.4 Etude de l'effet du complexe végétal sur l'ADN mitochondrial Trois types d'effets ont été étudiés : a) Etude de l'effet du complexe végétal sur l'ADN mitochondrial dans les conditions physiologiques 10 Quatre lots ont été constitués : Lot n° 1 : témoin ne recevant aucun produit. Lot n° 2 : traité par le Complexe végétal 1 Lot n° 3 : traité par le Complexe végétal 2 Lot n° 4 : par le Complexe végétal 3 15 L'essai a été conduit en triplicate pendant 24 heures. Les cellules ont été traitées par les complexes 1, 2 ou 3. Elles ont été récupérées après 24 heures d'incubation avant l'extraction de l'ADN. L'ADN total a été extrait à l'aide d'un kit d'extraction Invisorbe Spin DNA Extraction Kit (Eurobio, Les Ulis, France). 20 Brièvement, les cellules ont été lysées à l'aide d'un tampon de lyse et les acides nucléiques ont été précipités en présence d'éthanol à 70%. Après précipitation, l'ADN total a été fixé directement sur la membrane d'une colonne dédiée à l'extraction des ADN. Après lavage de cette membrane, l'ADN a été élue à l'aide d'un tampon en faible teneur en sel. 25 L'ADN a ensuite été amplifié à l'aide d'un kit REPLI-g Mitochondrial DNA (Qiagen, Courtaboeuf, France) contenant de la DNA polymérase, ainsi que les tampons et les réactifs nécessaires pour l'amplification du génome mitochondrial humain à partir du génome entier avec un rendement approximatif de 3 à 5 pg d'ADN mitochondrial amplifié par réaction 3066916 15 (correspondant approximativement à 2 X 109 copies de génomes mitochondriaux par microlitre). Brièvement, l'ADN total a été dénaturé à 75 °C pendant 5 minutes par un tampon spécifique. Après arrêt de la dénaturation par refroidissement de 5 la solution à température ambiante, la DNA polymérase a été ajoutée. L'amplification isothermique a lieu pendant 8 heures à 33°C, puis l'ADN mitochondrial a été congelé à -20°C. La quantification des éventuels dommages causés à l'ADN mitochondrial a ensuite été déterminée de la façon suivante. Les sites 10 Apuriniques/apyrimidiniques (AP) sont une des lésions principales de l'ADN formées durant l'excision et la réparation des bases oxydées, désaminées, ou alkylées. On estime qu'environ 2x105 lésions de base sont générées par cellules et par jour. Le niveau des sites AP dans les cellules peut être un bon indicateur des lésions de l'ADN et du taux de réparation contre les dommages 15 chimiques ou causés par l'âge des cellules. Le DNA Damage quantification Kit (Biovision, Mountain View, USA) utilise les réactifs ARP (« Aldehyde Reactive Probe ») qui réagissent spécifiquement avec les groupements aldéhydes qui se trouvent dans les fenêtres ouvertes formées par les sites AP. Après traitement de l'ADN contenant les sites AP avec les réactifs ARP, les sites AP 20 sont marqués avec des résidus biotines, qui peuvent être quantifiés en utilisant des réactions avidine-biotine suivies par une détection colorimétrique. Brièvement, 0,5 pg d'ADN mitochondrial ont été incubés avec les réactifs ARP pendant 1h à 37°C pour marquer les sites AP de l'ADN. Ce 25 dernier a été ensuite précipité par l'éthanol pur puis centrifugé et lavé 3 fois par l'éthanol 70%. Le culot d'ADN a été séché à l'air libre puis repris dans 1 ml de tampon TE. L'ADN marqué a été coaté sur une plaque 96 puits (parallèlement à une gamme standart d'ADN-ARP) sur la nuit. Le lendemain, après 5 lavages, une solution HRP-streptavidine a été ajoutée dans les puits 30 pendant 1h à température ambiante. Après 5 lavages, le développement de la couleur a été révélé par un tampon spécifique pendant 1h à 37°C, puis stoppé par de l'acide sulfurique 2N. La densité optique a été lue sur un spectrophotomètre à 450 nm. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 2 ci-dessous. 3066916 16 TABLEAU 2 LOTS Nombres de site AP/105 paires de cyo bases Lot n°1 (témoin) 0,78 ± 0,05 - Lot n°2 (complexe 1) 0,75 ± 0,08 ns Lot n°3 (complexe 2) 0,73 ± 0,06 ns Lot n°4 (complexe 3) 0,71 ± 0,07 ns n.s. : non significatif par rapport au témoin Ces résultats montrent que le complexe végétal utilisé dans l'invention n'a induit aucune lésion de l'ADN mitochondrial dans les conditions 5 physiologiques. b) Etude de l'effet protecteur du complexe végétal sur l'ADN mitochondrial dans les conditions d'inductions par les UVB Cinq lots ont été constitués : Lot n° 1 : témoin négatif ne recevant aucun produit. 10 Lot n° 2 : témoin positif (UVB 100 mJ/cm2) Lot n° 3 : traité par le Complexe végétal 1 + (UVB 100 mJ/cm2) Lot n° 4 : traité par le Complexe végétal 2 + (UVB 100 mJ/cm2) Lot 5 : par le Complexe végétal 3 + (UVB 100 mJ/cm2) L'essai a été conduit en triplicate pendant 24 heures. Les cellules ont 15 été traitées par les complexes 1, 2 ou 3 pendant 2h30 puis irradiées aux UVB. Les cellules ont été récupérées après 24 heures d'incubation. L'effet protecteur du complexe végétal conforme à l'invention aux concentrations testées vis-à-vis du rayonnement UVB a ensuite été évalué par la détermination du nombre de site AP/105 paires de base selon le même 20 protocole que celui détaillé ci-dessus au point 4.4 a). Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 3 ci-dessous. 3066916 17 TABLEAU 3 LOTS Nombres de site AP/105 paires cyo de bases Lot n°1 (témoin négatif) 0,78 ± 0,05 - Lot n°2 (témoin positif UVB) 1,45 ± 0,11 +86 Lot n°3 (complexe 1 + UVB) 1,06 ± 0,13 ** -27 Lot n°4 (complexe 2 + UVB) 0,97 ± 0,09 ** -33 Lot n° 5 (complexe 3 + UVB) 0,85 ± 0,15 ** -41 n.s. non significatif par rapport au témoin * significativement différent par rapport au témoin négatif (p 50 queue de la comète Lot n°1 : témoin négatif 75 % 25 % - - - Lot n°2 (complexe 1) 79 %* 21 0/0* - - - Lot n°3 (complexe 2) 83 %* 17 0/0* - - - Lot n°4 (complexe 3) 89 Wo* 11 0/0* - - - significativement différent par rapport au témoin négatif (p 50 de la comète Lot n°1 : témoin négatif 75 % 25 % - - - Lot n°5 témoin positif [UVB 2 % * 6 Wo* 9 %* 16 %* 67 Wo* 100mJ/cm2 + UVA (53/cm2)] Lot n°6 (complexe 1 + [UVB 45 0/0** 28 0/0** 20 0/0** 7 0/0** - 100mJ/cm2 + UVA (53/cm2)]) Lot n°7 (complexe 2+ [UVB 51 0/0** 22 0/0** 25 0/0** 2 0/0** - 100mJ/cm2 + UVA (53/cm2)]) Lot n°8 (complexe 3+ [UVB 53 0/0** 32 %** 15 %** - - 100mJ/cm2 + UVA (53/cm2)]) n.s. non significatif par rapport au témoin * significativement différent par rapport au témoin négatif (p REVENDICATIONS1. Complexe végétal comprenant au moins de la sève de bouleau et au moins un extrait aqueux de chaga (Inonotus obliquus). 2. Complexe selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il se présente sous la forme d'un kit à plusieurs compartiments dans lequel un premier compartiment contient ladite sève de bouleau et un deuxième compartiment contient ledit extrait aqueux de chaga. 3. Utilisation cosmétique et non thérapeutique d'un complexe végétal tel que défini selon la revendication 1 ou 2, à titre d'ingrédient actif 113 ayant des propriétés antiradicalaires et d'immunomodulation, dans une composition cosmétique destinée à prévenir et/ou traiter les signes du vieillissement cutané. 4. Composition cosmétique à application topique comprenant, dans un support cosmétiquement acceptable, au moins un complexe végétal 15 comprenant au moins de la sève de bouleau et au moins un extrait aqueux de chaga. 5. Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce que la quantité de sève de bouleau varie de 0,1 à 50 % en masse par rapport à la masse totale de ladite composition cosmétique. 20 6. Composition selon la revendication 4 ou 5, caractérisée en ce que la quantité de sève de bouleau varie de 1 à 5 % en masse par rapport à la masse totale de ladite composition cosmétique. 7. Composition selon l'une quelconque des revendications 4 à 6, caractérisée en ce que la quantité d'extrait aqueux de chaga varie de 0,1 à 25 15 % en masse par rapport à la masse totale de la composition cosmétique. 8. Composition selon l'une quelconque des revendications 4 à 7, caractérisée en ce que la quantité d'extrait aqueux de chaga varie de 0,1 à 2 % en masse par rapport à la masse totale de la composition cosmétique. 9. Composition selon l'une quelconque des revendications 4 à 8, 30 caractérisée en ce qu'elle comprend de 2,5 à 5 % en masse de sève de bouleau et de 0,5 à 2 % en masse d'extrait aqueux de chaga par rapport à la masse totale de la composition cosmétique. 10. Composition selon l'une quelconque des revendications 4 à 8, caractérisée en ce qu'elle comprend 5 % en masse de sève de bouleau et 3066916 51 2 % en masse d'extrait aqueux de chaga, par rapport à la masse totale de la composition cosmétique. 11. Procédé cosmétique non thérapeutique pour prévenir et/ou traiter les signes du vieillissement cutané comprenant au moins une étape 5 d'application sur la peau d'une composition cosmétique à application topique telle que définie telle que définie à l'une quelconque des revendications 4 à 10.