Brevet FR3050297A1 — publié le 20171020

DOMAINE TECHNIQUE La présente invention se rapporte au domaine de la cardiologie, et plus particulièrement à un nouvel algorithme utilisable notamment dans un procédé permettant de déterminer si un médicament est susceptible d'induire des troubles de la repolarisation ventriculaire cardiaque, associés ou non associés à un trouble du rythme ventriculaire de type Torsades de Pointes. ETAT DE LA TECHNIQUE ANTERIEUR On appelle torsades de pointes un type particulier de tachycardie ventriculaire c'est à dire un trouble du rythme des ventricules cardiaques se traduisant par des accélérations du rythme cardiaque à type de tachycardie (différent néanmoins de la fibrillation ventriculaire). Il existe deux types de torsades de pointes : les torsades à QT long et les tachycardies ventriculaires polymorphes à QT intercritique normal avec aspect de torsade. Les torsades de pointes induites par les médicaments sont un problème de santé publique à l'échelle individuelle et à l'échelle sociétale. Dans la grande majorité des cas, le mécanisme d'action de cet effet indésirable est l'inhibition d'un canal potassique impliqué dans la repolarisation ventriculaire appelé IKr qui induit une prolongation de la phase de repolarisation et se traduit électrocardiographiquement notamment par un allongement de l'intervalle QT corrigé sur la fréquence cardiaque (QTc). Ainsi que mentionné, dans Sekarski et al (Paediatrica, Vol. 19 No. 4 2008), l'allongement de l'intervalle QT peut provoquer une arythmie ventriculaire pouvant dégénérer et aboutir à une mort subite. L'allongement du QT constitue ainsi, actuellement, une des causes les plus fréquentes de restriction d'usage et de retrait de médicaments du marché. Parmi les médicaments ainsi retirés du marché, cette publication cite notamment le cisapride, la terfénadine, le dropéridol ou le sertindole. Ces phénomènes sont particulièrement observés avec les antiarythmiques de classe III, qui bloquent en priorité les canaux potassiques, allongeant ainsi la repolarisation. Les antiarythmiques de classe III actuellement sur le marché 3050297 2 possèdent tous une structure de base incluant un groupement méthanesulfoaniline (ou un bio-isostère de celui-ci). On peut ainsi citer l'amiodarone (Cordarone®), l'azimilide, le brétylium, le clofilium, le dofétilide, l'ibutilide (Corvert®), le sématilide le sotalol (Sotalex®) et le dronédarone (Multaq®). 5 La publication ci-dessus présente, dans les tableaux 1 et 2, un certain nombre de médicaments connus pour allonger le QT. Cette publication rappelle également que le « University of Arizona Center for Education and Research on Therapeutics» a établi et maintient une base de données de ces médicaments que l'on peut retrouver sur leur site internet www.torsades.org ou 10 https://crediblemeds.org/. Dans le processus de dépôt de dossier pour autorisation de mise sur le marché d'un nouveau médicament, toutes les molécules doivent avoir une évaluation de leur potentiel torsadogénique (potentiel d'induire une torsade de 15 pointes). Cette évaluation passe, chez l'homme par des études approfondies des modifications induites par les nouveaux médicaments de la repolarisation ventriculaire et particulièrement de l'allongement de l'intervalle QT, ou de l'allongement corrigé QTc. Cet allongement de l'intervalle QTc est le marqueur actuellement recommandé pour estimer le degré d'inhibition d'IKr d'un médicament 20 administré à des sujets avec une repolarisation ventriculaire normale à l'état basale. Ainsi, on considère qu'une molécule test est à risque significatif justifiant une surveillance rapprochée de ce risque rythmique lors de la mise sur le marché lorsque l'augmentation de QTc est supérieure à 20 ms. Lorsque l'allongement de 25 QT/QTc est compris entre 5 et 20 ms, on se trouve dans une « zone grise » et des études complémentaires doivent être réalisées pour mener à une conclusion plus fiable. On considère généralement qu'une molécule est sûre pour ce qui est de la repolarisation cardiaque lorsque l'on observe un allongement de QT/QTc inférieur à 5ms. 30 Toutefois, l'allongement de cet intervalle QTc est un paramètre très imparfait, peu spécifique de l'inhibition du canal IKr ventriculaire. Ainsi, si une inhibition du canal IKr augmente l'intervalle QT, celui-ci peut être augmenté sans inhibition d'IKr, le risque de torsade de pointes d'origine médicamenteuse étant alors moins important. Certaines molécules utiles vont ainsi voir leur 35 développement interrompu à cause d'une surestimation de ce risque quand 3050297 3 d'autres molécules vont voir leur développement poursuivi malgré un risque torsadogénique sous-estimé. À l'échelle individuelle, les torsades de pointes médicamenteuses peuvent affecter des sujets sans grande comorbidité et conduire au décès. Les 5 déterminants de ce risque individuel sont encore mal connus avec notamment un sur-risque identifié en cas d'hypokaliémie, de QT long congénital mais il n'existe pas de test diagnostic fiable permettant d'évaluer ce risque personnel surtout en cas de normalité de l'intervalle QTc à l'état de base. Ainsi, tant les instances réglementaires (comme la Food and Drug 10 Administration) que les médecins cliniciens sont à la recherche de nouvelles méthodes plus pertinentes et prédictives du risque torsadogénique des médicaments, dans l'évaluation pré-marketing, ou pour un patient particulier, qui aille au-delà de la simple analyse de l'augmentation de la durée de l'intervalle QTc après stress pharmacologique. 15 Le sotalol est un médicament antiarythmique recommandé et utilisé pour contrôler le rythme chez des patients avec fibrillation atriale. Le sotalol a une capacité élevée à bloquer le canal potassique IKr, associé à un risque dose dépendant d'induction de torsades de pointes, atteignant jusqu'à 7% des patients 20 traités. Le sotalol a une pharmacocinétique linéaire, une absorption pratiquement complète sans grande variabilité, et une concentration maximale observée 3 à 5 heures après prise orale. Il existe donc un besoin de mettre en place un test qui permette de 25 prédire le risque qu'un médicament puisse induire une torsade de pointes, après administration chez des patients. Alternativement, il est également intéressant de déterminer si un patient particulier possède un risque spécifique de présenter une torsade de pointes, après administration d'un médicament spécifique. 30 EXPOSE DE L'INVENTION L'invention se propose de fournir une méthode permettant de déterminer aisément, après une simple mesure d'électrocardiogramme, si un patient est susceptible de présenter un événement de torsade de pointes après 35 administration d'un médicament. 3050297 4 Les inventeurs ont ainsi mis en évidence le fait qu'il est possible d'obtenir un résultat quantitatif fiable de la capacité, pour une substance d'inhiber le canal potassique IKr (effet général de la substance) ou pour un patient de présenter une 5 telle inhibition du canal potassique IKr après administration d'une substance susceptible de l'inhiber (effet de réponse individuelle du patient), en étudiant, non seulement le QTc, mais deux valeurs supplémentaires, l'amplitude maximale de l'onde T (TAmp) et la durée entre le pic et la fin de l'onde T (TpTe). En combinant les variations observées entre les trois valeurs mentionnées 10 ci-dessus, les inventeurs ont défini un algorithme permettant de fournir une information précise quant au risque de survenue d'un trouble de la repolarisation cardiaque induite par une substance. L'algorithme proposé par les inventeurs est particulièrement intéressant, en ce qu'il permet à la fois d'obtenir des informations sur une substance ou 15 composition particulière, lorsque testée sur une cohorte de patients, mais également de déterminer le risque individuel pour un patient particulier, ce qui permet d'effectuer un suivi adéquat des patients à risque, en diminuant le coût de suivi des patients non à risque a priori. 20 Mesures utilisées dans le contexte de l'invention On utilise ainsi les mesures suivantes : TAmp: amplitude maximale du premier pic de l'onde T On calcule la différence (exprimée en pourcentage) entre l'amplitude maximale du premier pic de l'onde T avant et après administration de la substance 25 que l'on souhaite tester. De fait, en cas de « notch », on peut observer deux pics de l'onde T. Il convient de mesurer l'amplitude du premier pic, même si elle est inférieure à celle du deuxième. La donnée calculée est donc ATAmp(%)=((Tamp avant administration - TAmp après administration)/(Tamp 30 avant administration))*100 On calcule ici, la différence entre l'amplitude de l'onde T avant administration et celle après administration afin que TAmp soit positif. Cela est dû au fait que l'inhibition du canal IKr induit une diminution de l'amplitude de l'onde T. 35 Le fait d'effectuer le calcul ci-dessus permet de refléter cette diminution en 3050297 5 pourcentage. L'expression des résultats en valeurs absolues (mV) permet également de calculer un algorithme opératoire. On aurait toutefois pu calculer la différence entre l'amplitude de l'onde T après administration et celle mesurée avant administration et TAmp aurait été 5 négatif. La valeur de TAmp que l'on prend en considération dans cette formule est préférentiellement une moyenne de plusieurs mesures de TAmp. Les mesures peuvent être réalisées sur les dérivations que choisira un praticien, mais préférentiellement sur les dérivations D2, V2, V3. On peut 10 également effectuer ces mesures sur les dérivations V4 ou V5, en particulier, si TAmp avant administration de la substance est inférieur à 0.1 mV. Dans un mode de réalisation particulier, et pour diminuer les erreurs potentielles dues aux variations pouvant exister chez le patient au cours de la mesure d'ECG, on préfère mesurer la valeur de TAmp sur un complexe moyenné 15 (généralement généré par un complexe médian type (template) obtenu à partir des enregistrements réalisés pendant 10 secondes), voire sur la moyenne de trois complexes moyennés générés à quelques minutes d'intervalle. TpTe : Intervalle entre le premier pic maximal de l'onde T et la fin de l'onde T 20 (TpTe) On calcule la différence (exprimée en pourcentage) entre le premier pic maximal de l'onde T et la fin de l'onde T, avant et après administration de la substance que l'on souhaite tester. La donnée calculée est donc 25 ATpTe(c/o)=((TpTe après administration - TpTe avant administration)/(TpTe avant administration))*100 La valeur de TpTe que l'on prend en considération dans cette formule est préférentiellement une moyenne de plusieurs mesures de TpTe. 30 Les mesures peuvent être réalisées sur les dérivations que choisira un praticien, mais préférentiellement sur les dérivations V2, V3, V4. On peut également effectuer les mesures sur les dérivations V5 ou V6. Dans un mode de réalisation particulier, et pour diminuer les erreurs potentielles dues aux variations pouvant exister chez le patient au cours de la 35 mesure d'ECG, on préfère mesurer la valeur de TpTe sur un complexe moyenné (généralement généré par un complexe médian type (template) obtenu à partir des 3050297 6 enregistrements réalisés pendant 10 secondes), voire sur la moyenne de trois complexes moyennés générés à quelques minutes d'intervalle. On peut également utiliser la valeur absolue (en msec) de la variation TpTe dans le cadre de l'algorithme. 5 QTcF : intervalle QT corrigé sur la fréquence cardiaque (QTc) On calcule la différence (exprimée en pourcentage) entre l'intervalle QT corrigé sur la fréquence cardiaque par une méthode appropriée qui minimise 10 l'influence de la fréquence cardiaque sur la valeur de QTc, c'est-à-dire établit une pente non différente de zéro dans la relation QTc en fonction de la fréquence cardiaque (le plus souvent, chez l'adulte, la correction appropriée se fait par la méthode de Fridericia, QTcF), avant et après administration de la substance que l'on souhaite tester. 15 On rappelle que QT Q1 I, RR étant l'intervalle entre le début d'un complexe QRS et le début du complexe QRS suivant exprimé en seconde. 20 La donnée calculée, pour l'utilisation du QTcF, est donc AQTcF(%)=((QTcF après administration - QTcF avant administration) / (QTcF avant administration))*100 La valeur de QTcF que l'on prend en considération dans cette formule est 25 préférentiellement une moyenne de plusieurs mesures de QTcF, en particulier une moyenne d'au moins trois complexes consécutifs. Ainsi que pour les autres valeurs vues plus haut, on peut aussi utiliser la valeur QTcF que l'on obtient sur un complexe médian obtenu à partir d'une enregistrement de quelques secondes, ou une moyenne de complexes moyennés. 30 Les mesures peuvent être réalisées sur les dérivations que choisira un praticien, mais préférentiellement sur la dérivation D2. On pourrait toutefois également calculer QTc par toute autre méthode connue dans l'art, en particulier la méthode de Bazett (QTcB) : 3050297 7 ()TcB = Là encore, on peut utiliser la valeur absolue de AQTc, plutôt que la variation en pourcentage. 5 D'une façon générale, on préfère calculer les ATAmp, AQTc, ATpTe de telle sorte qu'ils aient tous le même signe. Algorithme à mettre en oeuvre dans le contexte de l'invention 10 L'algorithme proposé ci-dessous permet d'obtenir une valeur quantitative, nommée PC1, très bien associée à l'apparition de signe ECG déterminant une inhibition d'IKr, et présumés associés à un risque accru d'épisode de torsade de pointes à QT long. PC1= al x ATAmp(%) + a2 x AQTcf(%) + a3 x ATpTe(%) + b 15 dans lequel - -0,05 al -0,030 - -0,2 a2 -0,1 - -0,04 a3 -0,02 - 1,5 b 2 20 De préférence, - -0,040 al -0,035 - -0,16 a2 -0,145 - -0,35 a3 -0,025 25 - 1,7 b 1,9 Dans un mode de réalisation préféré, - al = -0,038 ± 0,002 - a2 = -0,15 ± 0,001 30 - a3 = -0,031 ± 0,002 - b= 1,79 ± 0,05 Dans un mode de réalisation préféré, - al = -0,03814 35 - a2 = -0,15074 3050297 8 - a3 = -0,03059 - b = 1,79249 Dans un mode de réalisation particulier, 5 PC1= -0,038 x ATAmp(%) -0,151 x AQTcf(%) -0,0306 x ATpTe(%) + 1,792 Plus la valeur PC1 est négative, plus la substance administrée, inhibe le canal IKr et plus le patient est présumé présenter un risque de faire un épisode de torsade de pointes. 10 Ces algorithmes et valeurs sont valables lorsque l'on calcule ATAmp ainsi qu'indiqué ci-dessus pour qu'il soit positif. Si on calcule ATAmp de façon à ce qu'il soit négatif, les valeurs de l'algorithme changeront, et un nouvel algorithme pourra être défini en utilisant la méthode décrite plus bas. De même, si l'on utilise les valeurs absolues des différences entre TAmp, TpTe et QTc, on obtiendra un 15 algorithme présentant d'autres valeurs. Évaluation du potentiel torsadogénique d'un médicament Ainsi que vu plus haut, il est important de pouvoir évaluer le potentiel torsadogénique d'un composé, lors des essais cliniques préalables à l'obtention 20 d'une autorisation de mise sur le marché, afin de pouvoir rédiger les éventuelles précautions d'utilisation de ce médicament. Le potentiel torsadogénique d'une substance est le potentiel que cette substance induise une torsade de pointes après administration chez un patient. 25 La FDA (Food and Drug Administration) et l'EMA (European Medicine Agency) ont publié des directives issues de la conférence internationale pour l'harmonisation (ICH) sur la façon d'effectuer ces essais sous le titre E14 Clinical Evaluation of QT/QTc Interval Prolongation and Proarrhythmic Potential for NonAntiarrhythmic Drugs. 30 Ces directives sont accessibles sur le site de cette agence, et accompagnées de questions et réponses. L'adresse des directives est : http://www.fda. gov/downloads/drugs/guidancecom plianceregulatoryi nformation/gui dances/ucm073153.pdf 35 La capacité d'allonger la repolarisation cardiaque par des médicaments ou substances non antiarythmiques peut être mesurée par l'allongement de l'intervalle 3050297 9 QT sur l'électrocardiogramme (ECG) de surface. Il est rappelé que cet intervalle QT, représente la durée de la dépolarisation et la repolarisation subséquente ventriculaire et est mesuré à partir du début du complexe QRS à la fin de l'onde T. Un retard de repolarisation cardiaque crée un environnement favorisant le 5 développement des arythmies cardiaques, la plupart clairement une torsade de pointes (TdP), mais éventuellement d'autres tachyarythmies ventriculaires aussi. Ainsi que vu plus haut, l'intervalle QT est un biomarqueur imparfait pour le risque d'effet proarythmique, même s'il existe, dans la population générale, une relation qualitative entre l'intervalle QT et le risque de torsade de pointes, surtout 10 pour les médicaments qui provoquent un allongement substantiel de l'intervalle QT. D'une façon générale, on corrige la valeur de l'intervalle QT mesuré (obtention du QTc) pour tenir compte de la fréquence cardiaque, cet intervalle QT présentant une relation inverse avec celle-là. Il n'est toutefois pas clair si le 15 développement de l'arythmie est plus étroitement lié à une augmentation de l'intervalle QT, de façon absolue, ou du QTc. La plupart des médicaments présentant un risque d'induction de torsade de pointes augmentent l'intervalle QT absolu et le QTc. De façon générale, lorsque la molécule test augmente le QTc d'une durée 20 inférieure à 5 ms, on considère que celle-ci est sûre sur cet aspect. Lorsqu'elle augmente le QTc d'une durée supérieure à 20 ms, les effets de la molécule devront faire l'objet d'une surveillance post-marketing. Lorsque la molécule augmente le QTc d'une durée comprise entre 5 ms et 20 ms, on se trouve dans une « zone grise », c'est-à-dire qu'il n'est pas possible de conclure a priori quant 25 au risque réel de torsade de pointes, et que des analyses et études complémentaires sont requises. Il est donc requis de caractériser rigoureusement les effets de nouveaux médicaments quant au risque de retarder la repolarisation cardiaque. L'algorithme 30 défini ci-dessus permet, en particulier si les études sont réalisées avec le Sotalol à 80mg en tant que témoin positif, de donner des informations complémentaires intéressantes dans la zone grise d'augmentation du QT/QTc comprise entre 5 et 20 ms. 35 À ce stade, l'étude est réalisée sur une cohorte de patients. Effectuer ces études sur un nombre de patients suffisant permet ainsi d'obtenir des résultats qui 3050297 10 présentent une réalité statistique pour la molécule que l'on souhaite tester (médicament d'intérêt), éliminant les variations inter-patients. On comparera préférentiellement un placébo et la substance d'intérêt afin de déterminer si cette substance allonge l'intervalle QT (on pourrait mesurer les 5 intervalles sans utiliser de placébo, mais il est préférable d'en utiliser un, afin de tenir compte de l'évolution naturelle du QT au cours de la journée). Avantageusement, on utilisera également des contrôles positifs pour l'allongement de l'intervalle QT. Ainsi, dans les directives de la FDA, celle-ci conseille d'utiliser un contrôle positif qui augmente le QT/QTc d'environ 5ms, afin 10 de vérifier que cet effet de faible amplitude est bien détecté. On peut utiliser deux contrôles positifs, l'un augmentant l'intervalle QT en induisant une inhibition manifeste du canal potassique IKr (tel le sotalol), et un autre contrôle augmentant l'intervalle QT sans inhibition importante du canal IKr, tel que la moxifloxacine orale. On peut utiliser, en tant que contrôle, tout médicament connu pour allonger 15 le QT, notamment tel que cité dans les tableaux 1 ou 2 de Sekarski et al. Toutefois, du fait des risques potentiels posés par ces médicaments des tableaux 1 et 2 de Sekarski et al, on utilise de préférence le sotalol à 80 mg en tant que témoin positif. Cette molécule, à cette concentration, présente de nombreux avantages - 20 - la concentration maximale est bien connue (environ trois heures après administration orale), ce qui permet de planifier aisément le moment auquel faire les mesures mentionnées ci-dessus. - Cette molécule est connue pour inhiber le canal IKr - Cette molécule, à cette concentration augmente le QT/QTc d'environ 20 25 ms. - Cette molécule, à cette concentration, n'induit pas d'épisode de torsade de pointes, et est donc sûre pour le patient. Il est toutefois connu que cette molécule, à ses doses utilisées en clinique (utilisée jusqu'à 320 mg), peut induire des torsades de pointes. 30 L'étude est réalisée sur une cohorte de patients, selon un protocole qui peut être le suivant, pour chaque patient : - On effectue les mesures des TAmp, TpTe, QTc sur le patient avant d'administrer la substance dont on souhaite étudier le potentiel 35 torsadogénique 3050297 11 - On effectue les mesures des mêmes paramètres TAmp, TpTe, QTc sur le patient, après administration de la substance (qui peut donc être le placebo, la substance d'intérêt, ou le contrôle positif). On peut effectuer une seule mesure de ces paramètres (si l'on connaît, 5 pour la substance, la pharmacocinétique, et le pic de concentration de la substance dans la circulation du patient), mais on effectue, de préférence plusieurs mesures à plusieurs intervalles de temps (par exemple tous les 1/4 heures ou toutes les heures, en fonction de la demi-vie de la molécule). 10 Le fait de relever périodiquement les TAmp, TpTe et QTc permet d'améliorer la possibilité de détecter l'effet torsadogénique potentiel de la substance, voire de déterminer à quel moment cet effet est le plus important. - On calcule les valeurs ATAmp, ATpTe, AQTc, selon les formules 15 indiquées ci-dessus. - On utilise l'algorithme mentionné ci-dessus, afin de calculer le résultat pour chaque substance testée. D'une façon générale, l'homme du métier sera capable de définir le 20 protocole adéquat en fonction de la substance d'intérêt (moments auxquels on mesurera les TAmp, TpTe et QTc), en tenant compte notamment des directives de la FDA telles que mentionnées ci-dessus. En particulier, si l'on utilise le sotalol en tant que contrôle positif (d'inhibition du canal I Kr), on mesure les valeurs ci-dessus trois heures après administration, ce qui correspond au pic le plus fréquent de 25 concentration de cette substance. Si l'on utilise une autre substance en tant que contrôle, on choisit, pour mesurer les valeurs ci-dessus, le moment le plus adéquat, correspondant à celui où l'effet sur la dépolarisation est le plus important. Ces contrôles étant connus, l'homme du métier sait donc déterminer ces moments. De même, les concentrations optimales des contrôles utilisés seront déterminées 30 par l'homme du métier en fonction des connaissances qu'il aura sur les molécules contrôles qu'il utilisera. Ainsi, il pourra utiliser le sotalol à la dose à 80 mg pour les raisons de risque rythmique exposées ci-dessus. L'utilisation d'une quantité supérieure de sotalol pourrait éventuellement être envisagée, mais n'est toutefois pas préférée du fait des risques pour les patients et de sa non-conformité aux 35 recommandations d'initiation du traitement chez les malades qui en ont une indication. 3050297 12 Dans la définition du protocole par l'homme du métier, on préfère effectuer les différentes mesures au même moment du cycle menstruel, lorsque que la patiente est de sexe féminin. En effet, on sait que le niveau d'hormones influence le risque, chez une femme, de troubles de la repolarisation (QT long). 5 D'une façon générale, ainsi qu'indiqué ci-dessus, on effectue les étapes ci-dessus pour chaque patient d'une cohorte de patients, et l'on obtient ainsi une valeur calculée par l'algorithme décrit ci-dessus pour chaque patient (et pour chaque moment auquel les paramètres TAmp, TpTe, QTc ont été mesurés), et 10 pour chaque substance. Pour chaque moment auquel les paramètres TAmp, TpTe, QTc ont été mesurés, on préfère effectuer une moyenne des valeurs obtenues pour chaque patient, et pour chaque substance administrée (substance d'intérêt et éventuellement les placébo, et contrôle(s) positif(s)). Ceci permet de s'affranchir de 15 « l'effet patient », c'est-à-dire le fait que deux patients sont susceptibles de réagir différemment à un médicament ou une substance donnée. La valeur de la moyenne des valeurs PC1 est alors une valeur qui prend plus en compte l'effet torsadogénique présumé réel de la substance d'intérêt. Il est préférable que la cohorte de patients (le nombre de patients sur 20 lesquels on teste la substance d'intérêt) soit au minimum de 10 patients, de préférence au minimum de 20 voire de 50 patients. L'homme du métier sera capable de déterminer le nombre minimal de sujets dans la cohorte de patients afin d'obtenir des résultats qui soient statistiquement significatifs. De même, avant de réaliser ces études, il est préférable que l'homme du 25 métier ait réalisé des études de pharmacocinétiques et de réponse en fonction des doses de la substance d'intérêt, afin de déterminer les meilleurs moments pour mesurer les trois valeurs physiologiques mentionnées ci-dessus. Afin de déterminer le potentiel torsadogénique de la substance d'intérêt, 30 l'analyse sera différente, selon que l'on a utilisé ou non des contrôles. Si l'on a utilisé le sotalol en tant que contrôle positif d'inhibition du canal lKr La valeur PC1 est calculée pour chaque patient, pour le placébo, le sotalol trois heures après administration, et la substance d'intérêt (molécule test), aux 35 moments déterminés par le praticien, en fonction des caractéristiques pharmacocinétiques de la molécule test. 3050297 13 On effectue ensuite une moyenne de ces valeurs PC1 pour chacune des molécules (test, Sotalol, placébo), ainsi que la médiane. Si la moyenne, ou alternativement la médiane de PC1 pour le groupe de la molécule test est significativement inférieure à celle obtenue pour le groupe 5 sotalol, cette molécule test induit donc une inhibition du canal IKr au-delà d'un risque jugé raisonnable et devra faire l'objet de tests complémentaires et d'une surveillance accrue après mise sur le marché. Si la moyenne de PC1 pour le groupe de la molécule test est non significativement différente à celle obtenue pour le placébo alors la molécule peut 10 être considérée comme n'étant pas à risque. Si la moyenne de PC1 pour le groupe de la molécule test est significativement inférieure à celle calculée pour le placébo, mais est non significativement différente de la moyenne de PC1 pour le sotalol, on se trouve alors dans une « zone grise ». Un risque torsadogène existe puisqu'il existe avec 15 le sotalol, potentiellement, du moins, à des doses plus élevées. On devra alors mettre en place les surveillances d'usage si l'on a observé une augmentation de QT/QTc supérieure à 5 ms pour la molécule test par rapport au placebo. 20 L'analyse est équivalente si l'on a utilisé un autre contrôle positif que le sotalol, ce contrôle devant toutefois induire une augmentation de QT et une inhibition du canal IKr avec un risque torsadogénique considéré plus ou moins équivalent à celui associé à 80mg de Sotalol. 25 Si l'on n'a pas utilisé de contrôle positif On peut également utiliser l'algorithme défini ci-dessus en l'absence de contrôle positif, même s'il n'est pas conseillé de ne pas utiliser de contrôle positif. Dans ce cas, il est préférable que la population dans laquelle les essais sont réalisés contienne environ 50% de femmes et 50% d'hommes, bien que l'on 30 puisse aller jusqu'à 60 % de femmes et 40 % d'hommes (ou 40 % de femmes et 60 % d'hommes), selon les directives de la FDA. Les patients sont généralement âgés de 18 à 60 ans. Du fait du risque supérieur, pour les femmes, de développer des troubles de la repolarisation, par rapport aux hommes, l'utilisation d'une cohorte de patients 35 présentant la répartition ci-dessus permet d'augmenter la pertinence du résultat de 3050297 14 l'algorithme et la confiance que l'on peut tirer des résultats obtenus, et l'analyse que l'on peut en faire. La valeur PC1 est calculée pour chaque patient, pour le placébo, et la 5 substance d'intérêt (molécule test), aux moments déterminés par le praticien, en fonction des caractéristiques pharmacocinétiques de la molécule test. Si la moyenne de PC1 pour le groupe de la molécule test est non significativement différente de celle obtenue pour le placébo alors la molécule peut 10 être considérée comme n'étant pas à risque. Si la moyenne de PC1 pour le groupe de la molécule test est significativement supérieure de celle obtenue pour le placébo alors la molécule peut être considérée comme n'étant pas à risque. 15 Si la moyenne de PC1 pour le groupe de la molécule test est négative, et significativement inférieure à celle obtenue pour le groupe placébo, cette molécule test est à risque et devra faire l'objet de tests complémentaires et d'une surveillance accrue après mise sur le marché. 20 Si la moyenne de PC1 pour le groupe de la molécule test est négative, et non significativement inférieure à celle calculée pour le placébo, on se trouve alors dans une « zone grise ». On devra alors mettre en place les surveillances d'usage si l'on a observé une augmentation de QT/QTc supérieure à 5 ms pour la molécule 25 test par rapport au placebo. En cas de potentiel torsadogénique déterminé par la méthode décrite ci-dessus ou si la molécule est dans la zone grise, on effectuera des études plus poussées pour confirmer ce potentiel et mieux le qualifier et le quantifier. 30 En l'absence de contrôle positif, il est préférable d'effectuer les études sur un nombre de patients suffisants pour effectuer les analyses statistiques appropriées. Évaluation du risque individuel d'un patient de présenter un événement de torsade 35 de pointes 3050297 15 L'algorithme décrit ci-dessus permet également d'évaluer le risque individuel d'un patient à présenter un événement de torsade de pointes, après administration d'une substance ayant un potentiel torsadogénique. Pour ce faire, on peut suivre le protocole suivant : 5 - On effectue les mesures des TAmp, TpTe, QTcF sur le patient avant d'administrer du sotalol - On effectue les mesures des mêmes paramètres TAmp, TpTe, QTcF sur le patient, trois heures après administration de sotalol. Ainsi que vu plus haut, on sait que le sotalol présente une concentration maximale 10 environ 3 heures après prise orale, et on préfère utiliser une dose unique de 80 mg. - On calcule les valeurs ATAmp, ATpTe, AQTcF, selon les formules indiquées ci-dessus. - On applique l'algorithme ci-dessus à ces valeurs, afin d'obtenir un 15 résultat PC1 final. L'analyse des résultats s'effectue de la façon suivante : - Si PC1 -3.2 : un très haut risque de présenter un événement de 20 torsade de pointes (cette valeur correspond au 5ème percentile chez les femmes qui sont plus à risque que les hommes, c'est-à-dire que seules 5% de femmes ont une PC1 inférieure cette valeur) - Si -3.2 -0,22, on peut considérer que le patient ne présente pas de risque 35 3050297 16 De préférence, on utilise une quantité faible de sotalol, c'est-à-dire équivalente à la quantité généralement administrée à l'initiation du traitement en clinique. Ainsi, il est préféré que la dose de sotalol administrée au patient soit de 80 mg (prise unique par voie orale), ce qui permet d'observer un trouble de la 5 repolarisation sans mettre en danger le patient. En effet, on sait que le sotalol peut inhiber le canal potassique IKr. Les algorithmes décrits ci-dessus ont été validés sur des cohortes de patients ayant reçu une dose unique de 80mg de sotalol, les mesures ayant été faites trois heures après administration. Les valeurs obtenues sont des valeurs quantitatives fiables corrélées à l'inhibition du canal potassique 10 IKr. Ainsi, le résultat de l'algorithme permet d'indiquer si le patient est, ou non, susceptible de réagir à un médicament ayant la capacité d'inhiber le canal IKr. Ce test est donc plus informatif que la simple mesure du QT/QTc. 15 En fonction du résultat obtenu et du risque ainsi déterminé pour le patient, l'homme du métier sera capable d'ajuster le suivi nécessaire du patient. L'invention se rapporte donc à un nouvel outil permettant de générer une variable quantitative de l'inhibition du canal potassique IKr. 20 L'invention se rapporte ainsi à une méthode ex vivo ou in vitro pour déterminer le risque d'induction d'un effet torsadogénique après administration d'une composition chez un patient comprenant les étapes : I. combiner, dans un algorithme, obtenu par la méthode suivante : 25 a. rassembler une cohorte contenant un nombre n de patients, n étant supérieur ou égal à 50, 75, voire 100 ; b. leur administrer un médicament inhibant le canal IKr; c. mesurer les QTc, Tamp, TpTe avant et après administration de ce médicament avec 30 i. QTc = intervalle QT corrigé sur la fréquence cardiaque ii. TAmp = Amplitude maximale du premier pic de l'onde T iii. TpTe = Intervalle entre le premier pic maximal de l'onde T et la fin de l'onde T ; d. calculer les AQTc, ATamp et ATpTe correspondant à la 35 variation, en pourcentage, des valeurs QTc, TAmp et TpTe obtenues après administration du médicament, par rapport à 3050297 17 celles mesurées avant administration pour chacun des patients e. effectuer une analyse en composantes principales sur les valeurs AQTc, Tamp et TpTe afin de générer trois 5 nouvelles variables quantitatives PC1, PC2 et PC3 f. ledit algorithme étant la formule permettant d'obtenir la variable PC1 à partir des AQTc, Tamp et ATpTe , Obtenir un résultat final de cette combinaison ; III. Comparer la valeur de ce résultat final à une valeur de référence. 10 Dans un autre mode de réalisation, les AQTc, Tamp et TpTe utilisés en I.d sont les valeurs absolues des différences, et pas les variations en pourcentage. Dans ce mode de réalisation, la méthode est in vitro ou ex vivo, c'est-à-dire 15 qu'elle n'est pas appliquée au corps humain. Elle utilise des données qui ont été relevées par électrocardiogramme sur un patient, mais ne comprends pas ces étapes de recueil des données. Cette méthode n'est donc pas appliquée au corps humain. 20 La demande décrit également une méthode pour déterminer le risque d'induction d'un effet torsadogénique après administration d'une composition chez un patient comprenant les étapes : I. mesurer, chez le patient, les valeurs QTc (intervalle QT corrigé sur la fréquence cardiaque), TAmp (amplitude maximale du premier pic de l'onde T), 25 TpTe (intervalle entre le premier pic maximal de l'onde T et la fin de l'onde T) avant et après administration de cette composition, calculer les valeurs AQTc, Tamp et TpTe correspondant respectivement à la différence, en pourcentage, de ces mesures obtenues après et avant administration 30 1111. combiner, dans un algorithme, obtenu par la méthode suivante : a. rassembler une cohorte contenant un nombre n de patients, n étant supérieur ou égal à 50, 75, ou 100 ; b. leur administrer un médicament inhibant le canal IKr; c. mesurer les QTc, Tamp, TpTe avant et après administration 35 de ce médicament; 3050297 18 d. calculer les AQTc, Tamp et TpTe correspondant à la variation, en pourcentage, des valeurs QTc, Tamp et TpTe obtenues après administration du médicament, par rapport à celles mesurées avant administration pour chacun des 5 patients e. effectuer une analyse en composantes principales sur les valeurs AQTc, Tamp et TpTe afin de générer trois nouvelles variables quantitatives PC1, PC2 et PC3 f. ledit algorithme étant la formule permettant d'obtenir la 10 variable PC1 à partir des AQTc, Tamp et ATpTe , IV. Obtenir un résultat final de cette combinaison dans l'algorithme ; V. Comparer la valeur de ce résultat final à une valeur de référence. Cette méthode peut également être un mode de réalisation de l'invention. 15 Dans un autre mode de réalisation, les AQTc, Tamp et TpTe utilisés en Il et III.d sont les valeurs absolues des différences, et pas les variations en pourcentage. 20 Les méthodes ainsi décrites permettent également de déterminer si la composition utilisée inhibe le canal potassique IKr chez un patient, le résultat final obtenu après application de l'algorithme étant lié quantitativement à l'inhibition du canal IKr. 25 L'algorithme utilisé dans les méthodes ci-dessus est celui décrit ci-dessus. L'exemple 1 décrit la façon dont un algorithme particulier a été obtenu. D'une façon générale, afin d'obtenir un algorithme utilisable dans le cadre des méthodes décrites dans la présente demande, on suit le procédé suivant : a. rassembler une cohorte contenant un nombre n de patients. 30 De préférence, le nombre n de patients suivis est supérieur ou égal à 50, 75 voire 100, afin d'obtenir des résultats qui présentent une réelle valeur statistique ; de préférence, la cohorte contient un nombre égal de femmes et hommes ou pas plus de 60 % de femmes et 40 % d'hommes ou inversement. Ceci permet d'obtenir 35 un algorithme utilisable quel que soit le sexe du patient. Toutefois, on peut aussi réaliser cette méthode d'obtention d'un algorithme en 3050297 19 utilisant une population de patients exclusivement féminins ou exclusivement masculins. Les algorithmes obtenus seront alors différents, du fait de l'inhibition supérieur du canal IKr observé chez les femmes par rapport aux hommes. 5 Dans le cadre des méthodes selon l'invention, on utilisera alors l'un ou l'autre algorithme selon le sexe du patient sur lequel on souhaite effectuer l'étude. b. administrer à chaque patient un médicament allongeant le QT, de 10 préférence en inhibant le canal IKr ; Le médicament que l'on administre à cette étape est un médicament tel que décrit ci-dessus, notamment les produites des tableaux 1 ou 2 de Sekarski et al. Ce médicament est choisi par l'homme du métier en fonction de ses caractéristiques pharmacocinétiques, et 15 les doses sont adaptées afin notamment de ne pas mettre en danger les patients de la cohorte, tout en permettant l'observation de l'allongement du QT lié à ce médicament dans un nombre suffisant (pour analyse statistique) de patients. On préfère ainsi utiliser le sotalol, en particulier à 80 mg par voie 20 orale pour les raisons mentionnées plus haut. c. mesurer les QTc, TAmp, TpTe avant et après administration de ce médicament; Ces valeurs sont mesurées avant l'administration du médicament à 25 l'étape b) (la mesure avant cette administration pouvant ainsi être qualifiée d'étape b0), et après cette administration. Du fait que le médicament utilisé à l'étape b est connu de l'homme du métier, la mesure après administration est effectuée à un moment optimal, déterminé par l'homme du métier en fonction des propriétés 30 pharmacocinétiques du médicament de l'étape b), tel que l'allongement du QT induit par ce médicament est maximal. Ceci correspond en général au moment où la concentration plasmatique du médicament est maximale. Si l'on choisit le sotalol en tant que médicament à l'étape b), on 35 effectue les mesures 3 heures après administration. 3050297 20 d. calculer les AQTc, Tamp et TpTe correspondant à la variation, en pourcentage, entre les valeurs QTc, TAmp et TpTe obtenues après administration du médicament, par rapport à celles mesurées avant administration, pour chacun des patients 5 Les valeurs AQTc, Tamp et TpTe sont ainsi préférentiellement calculées selon les formules indiquées ci-dessus. On pourrait toutefois calculer Tamp selon la formule Tamp = ((TAmp après administration - Tamp avant administration)/(TAmp avant administration) x 100. 10 Dans un autre mode de réalisation, les AQTc, Tamp et TpTe calculées sont les valeurs absolues des différences, et pas les variations en pourcentage. e. effectuer une analyse en composantes principales sur les valeurs 15 AQTc, Tamp et TpTe afin de générer trois nouvelles variables quantitatives PC1, PC2 et PC3 L'analyse en composantes principales (ACP ou PCA en anglais) est une méthode permettant de transformer des variables corrélées en nouvelles variables décorrélées les unes des autres. 20 Dans un mode de réalisation particulier, on effectue une ACP pour transformer les trois variables AQTc, Tamp et TpTe en trois nouvelles variables décorrélées PC1, PC2 et PC3. L'analyse en ACP est une méthode connue dans l'art, qui peut être réalisée notamment à l'aide de tout logiciel connu dans l'art. 25 L'algorithme utilisable dans les méthodes décrites ci-dessus est la formule permettant d'obtenir la variable PC1 à partir des variables AQTc, Tamp et ATpTe. Parmi les trois variables PC1, PC2 et PC3 obtenues, la variable PC1 considérée est la variable qui est la mieux corrélée à chacun des AQTc, Tamp et 30 ATpTe. Cela signifie que le coefficient de corrélation que l'on peut calculer pour PC1 avec chacun des AQTc, Tamp et TpTe est supérieur (en valeur absolue) au coefficient de corrélation que l'on calcule pour les autres composantes principales PC2 et PC3 pour le AQTc, Tamp ou TpTe en question. Le tableau 1 des exemples montre bien que la valeur absolue du coefficient de corrélation de 35 PC1 est supérieure à la valeur absolue du coefficient de corrélation des PC2 et PC3 calculé pour chacun des AQTc, Tamp et ATpTe. 3050297 21 Si l'on a calculé ATamp selon la formule indiquée ci-dessus de telle sorte que ATamp soit positive, alors PC1 est corrélée de la même manière (coefficient de corrélation présentant le même signe) avec les AQTc, ATamp et ATpTe. Si l'on a TAmp négatif, PC1 est corrélée dans le même sens pour QTc et ATpTe, et 5 dans l'autre sens pour ATamp. Le tableau 1 des exemples montre une PC1 est corrélée négativement avec AQTc, ATamp et ATpTe, alors que PC2 est corrélée négativement avec QTc et positivement avec ATamp et ATpTe. PC3 est corrélée négativement avec ATamp et positivement avec TpTe et AQTc. On remarque aussi que les coefficients de corrélation de chaque valeur « A » sont plus élevés 10 avec PC1 qu'avec l'une ou l'autre nouvelle variable. L'invention se rapporte également à une méthode pour la génération d'un algorithme permettant de générer une valeur quantitative associée à l'apparition de signe ECG déterminant une inhibition d'IKr, c'est-à-dire un risque d'épisode de 15 torsade de pointes à QT long, comprenant les étapes mentionnées ci-dessus. L'invention se rapporte également à une méthode (in vitro ou ex vivo) pour la génération d'un algorithme permettant de générer une valeur quantitative associée à l'apparition de signe ECG déterminant une inhibition d'IKr, c'est-à-dire 20 un risque d'épisode de torsade de pointes à QT long, comprenant les étapes i) obtenir les valeurs AQTc, TAmp et TpTe correspondant à la différence, en pourcentage, entre les valeurs QTc, TAmp et TpTe obtenues avant et après administration d'un médicament allongeant le QT, de préférence en inhibant le canal IKr, pour chacun des 25 patients d'une cohorte ii) effectuer une analyse en composantes principales sur ces valeurs AQTc, TAmp et TpTe afin de générer trois nouvelles variables quantitatives PC1, PC2 et PC3. L'algorithme ainsi généré est la formule permettant d'obtenir la variable 30 PC1 à partir des variables AQTc, ATamp et ATpTe. La valeur PC1 est celle décrite ci-dessus. Ainsi que vu plus haut, les méthodes décrites peuvent être utilisées pour déterminer le risque individuel d'un patient de présenter un trouble de la 35 repolarisation ventriculaire en cas d'administration d'une substance connue pour 3050297 22 présenter un effet torsadogénique, et que ladite composition administrée au patient est le sotalol. On envisage donc une méthode pour déterminer le risque individuel d'un patient de présenter un trouble de la repolarisation ventriculaire en cas 5 d'administration d'une substance connue pour présenter un effet torsadogénique, caractérisée en ce que l'on applique la méthode décrite ci-dessus audit patient, ladite composition administrée audit patient étant le sotalol, selon les conditions ci-dessus. L'analyse du risque individuel est effectuée selon les éléments mentionnés plus haut. 10 Les méthodes décrites peuvent également être utilisées pour déterminer si une substance d'intérêt (molécule test, ou médicament test) présente un caractère torsadogénique. Dans ce mode de réalisation, les méthodes selon l'invention sont répétées sur une cohorte de patient contenant nombre de patients supérieur ou 15 égal à 2. Les différents résultats obtenus pour chaque patient sont ensuite analysés selon les informations fournies ci-dessus. Ainsi que vu plus haut, on préfère lorsque la méthode est répétée, sur chaque patient, avec la substance d'intérêt et au moins une autre composition choisie dans le groupe constitué d'un placebo et d'un contrôle positif, et 20 notamment lorsque le contrôle positif est choisi parmi le sotalol et la moxifloxacine, de préférence lorsqu'au moins un contrôle positif est le sotalol. Dans ce cas, il est préférable de l'utiliser à une dose de 80 mg en prise unique. 25 BREVES DESCRIPTION DES FIGURES D'autres caractéristiques et avantages de l'invention ressortiront à la lecture de la description détaillée qui suit, en référence aux figures annexées, qui illustrent : La figure 1 montre un tracé d'électrocardiogramme représentatif, chez un patient, 30 avant (1.A) et trois heures après prise de sotalol (1.B), ainsi que la valeur PC1 obtenue pour ce patient, représentée par rapport à la distribution des valeurs PC1 dans la population (1.C). On observe le double pic de l'onde T (notch), et que la valeur PC1 est parmi les plus éloignées de 0. La figure 2 montre un tracé d'électrocardiogramme représentatif, chez un autre 35 patient, avant (1.A) et trois heures après prise de sotalol (1.B), ainsi que la valeur PC1 obtenue pour cet autre patient, représentée par rapport à la distribution des 3050297 23 valeurs PC1 dans la population (1.C). Ce patient présente une inhibition faible d'IKR induite par sotalol. La valeur PC1 calculée est donc proche de 0. EXEMPLES 5 Exemple 1 - Génération d'un algorithme Population / Cohorte de patients La cohorte de patients était celle de l'étude GENEREPOL, et consistait en 995 volontaires en bonne santé, âgés de 18 à 60 d'origine européenne ou nord-africaine. L'objectif de cette étude était d'identifier des prédispositions génétiques 10 liées à l'inhibition du canal IKr après administration de 80mg sotalol, avec un indice de masse corporelle entre 19 et 29kg/m2, le consentement éclairé ayant été reçu. Certains critères d'exclusion ont été utilisés : grossesse, asthme, fréquence cardiaque inférieure à 50 bpm, ECG (électrocardiogramme) anormal ou QRS>100ms, pression sanguine systolique 450ms. Protocole de mesure de l'ECG Les volontaires ont été hospitalisés à 8h00 pendant une durée d'environ 6 heures après un jeûne nocturne. 25 Un cathéter intraveineux a été disposé pour effectuer les prises de sang. Puis on a enregistré l'ECG des patients en utilisant le dispositif Cardioplug (Cardionics Inc®, Bruxelles, Belgique) connecté à un ordinateur portable. Les enregistrements d'ECG de base (effectués chacun en triple, pendant 10 secondes) ont été obtenus après repos des patients pendant 10 minutes couchés sur le dos. On a ensuite 30 donné une dose orale unique de 80 mg de sotalol aux patients et poursuivi le suivi ECG. Trois heures après prise de sotalol (H10), on a de nouveau enregistré l'ECG (triplicatas) après que les sujets sont restés couchés sur le dos pendant 10 minutes et avant le déjeuner. 3050297 24 À H3, un échantillon sanguin a été prélevé pour déterminer la concentration plasmatique de sotalol. Les participants ont été libérés 5 à 6 heures après prise de sotalol après avoir vérifié que QTcF était inférieur au QTcF de base + 40 ms. 5 Analyse des ECG Dans la mesure où l'augmentation du QT par le sotalol représente l'équivalent de la forme iatrogène congénitale du syndrome du QT long LQT2, on a vérifié l'apparition des différences classiques entre le tracé de base et le tracé trois heures après prise de sotalol sur l'ECG. 10 Les QTcF, TpTe, TAmp et la présence d'encoches (double pic) dans l'onde T (notch) ont été quantifiés. La correction de Fridericia (QTcF) a été utilisée pour corriger le QT par rapport à la fréquence cardiaque, en accord avec les directives ICH E14. L'analyse des données d'ECG a été effectuée avec le logiciel CARDIABASE 15 (Groupe Banook, Nancy, France). L'analyse quantitative des QTcF, TpTe and TAmp a été effectuée par deux investigateurs entraînés, afin de limiter la variabilité inter-évaluateur. TpTe a été mesurée par la méthode de tangente, en triplicata, sur un battement 20 représentatif (représentation moyennée d'un ECG de 10 secondes) sur les dérivations V3, V4 et V5. En cas de double pic de l'onde T (notch), le pic pris en considération a été le premier pic, même si l'amplitude de l'onde T était moins importante pour ce pic. La valeur moyenne obtenue a été retenue. En cas d'impossibilité de mesure de TpTe sur V3, V4 ou V5, on a, à la place, effectué la 25 mesure sur V2 (pour V3), ou V6 (pour V4/V5). Afin de mesurer, TAmp, on s'est positionné sur l'endroit de l'amplitude maximale du premier pic de l'onde T sur un battement représentatif (représentation moyennée d'un ECG de 10 secondes) sur les dérivations DII, V2, et V3. On a calculé et retenu la moyenne des valeurs TAmp issues de ces trois dérivations, et 30 mesurées sur trois différents ECG de 10 secondes (triplicatas). S'il n'était pas possible de mesurer une TAmp sur une de ces dérivations (notamment en raison d'une faible valeur ( REVENDICATIONS1. Méthode ex vivo pour la génération d'un algorithme permettant de générer une valeur quantitative associée à l'apparition de signe ECG déterminant une inhibition d'IKr, c'est-à-dire un risque d'épisode de torsade de pointes à QT long, comprenant les étapes i) obtenir les valeurs .àQTc, ATamp et ATpTe correspondant à la différence, en pourcentage ou valeur absolue, entre les valeurs QTc, Tamp et TpTe obtenues avant et après administration d'un médicament allongeant le QT, de préférence en inhibant le canal IKr, pour chacun des patients d'une cohorte, avec a) QTc = intervalle QT corrigé sur la fréquence cardiaque b) TAmp = Amplitude maximale du premier pic de l'onde T c) TpTe = Intervalle entre le premier pic maximal de l'onde T et la fin de l'onde T ii) effectuer une analyse en composantes principales sur ces valeurs ,,QTc, iTamp et ATpTe afin de générer trois nouvelles variables quantitatives PC1, PC2 et PC3 ledit algorithme étant la formule permettant d'obtenir la variable PC1 à partir des AQTc, ATamp et ATpTe, la variable PC1 étant la variable la mieux corrélée à chacun des AQTc, ATamp et ATpTe. 2. Méthode selon la revendication 1, caractérisée en ce que TAmp a été mesuré sur les dérivations D2, V2, V3. 3. Méthode selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que TpTe a été mesuré sur les dérivations V2, V3, V4. 4. Méthode selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que QTcF a été mesuré sur la dérivation D2. 5. Méthode selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce qu'au moins une valeur TAmp, TpTe ou QTcF a été mesurée sur un complexe moyenné. 3050297 31 6. Méthode ex vivo pour déterminer le risque d'induction d'un effet torsadogénique après administration d'une composition chez un patient comprenant les étapes : Il. Combiner, les valeurs iQTc, ATamp et TpTe correspondant à la 5 différence, en pourcentage ou valeur absolue, entre les valeurs QTc, Tamp et TpTe obtenues avant et après administration de ladite composition, dans un algorithme, obtenu par la méthode selon l'une des revendications 1 à 5 III. Obtenir un résultat final de cette combinaison ; 10 IV. Comparer la valeur de ce résultat final à une valeur de référence. 7. Méthode selon la revendication 7, caractérisée en ce que ledit algorithme est : al x iTAmp(%) + a2 x 3,QTcf(%) + a3 x ATpTe(%) + b, avec -0,05 5 al 5 -0,03 ; -0,2 5 a2 5 -0,1 ; -0,04 5 a3 5 -0,02 ; 1,5 5 b 2. 15 8. Méthode selon la revendication 7 ou 8, caractérisée en ce que ledit algorithme est : al x ATAmp(%) + a2 x AQTcf(%) + a3 x ATpTe(%) + b, avec al = -0,038 ± 0,002 ; a2 = -0,15 ± 0,001 ; a3 = -0,031 ± 0,002 ; b = 1,79 ± 0,05. 20 9. Méthode selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que ladite composition est le sotalol, et qu'elle permet de déterminer le risque individuel d'un patient de présenter un trouble de la repolarisation ventriculaire en cas d'administration d'une substance connue pour 25 présenter un effet torsadogénique. 10. Utilisation de la méthode selon l'une des revendications 6 à 8, ladite composition étant une substance d'intérêt, pour déterminer si la substance d'intérêt présente, en tant que telle, un caractère torsadogénique, 30 caractérisée en ce que l'on répète ladite méthode sur une cohorte de patient contenant nombre de patients supérieur ou égal à 2. 11. Utilisation selon la revendication 10, caractérisée en ce que la méthode est répétée, sur chaque patient, avec la substance d'intérêt et au moins une 3050297 32 autre composition choisie dans le groupe constitué d'un placébo et d'un contrôle positif. 12. Utilisation selon la revendication 11, caractérisée en ce que le contrôle 5 positif est choisi parmi le sotalol et la moxifloxacine. 13. Utilisation selon la revendication 12, caractérisée en ce que le contrôle positif est le sotalol, utilisé à 80 mg en prise unique, et que ladite substance d'intérêt présente un caractère plus torsadogénique que le sotalol si la 10 moyenne des résultats finaux obtenus pour les patients de la cohorte après administration de la substance d'intérêt est inférieure à la moyenne des résultats finaux obtenus pour les patients de la cohorte après administration du sotalol. 15