Brevet FR3061715A1 — publié le 20180713

PEPTIDE IMMUNOMODULATEUR DOMAINE DE L'INVENTION: La présente invention concerne un peptide isolé, une composition pharmaceutique comprenant ce peptide et l'utilisation de ce peptide ou de cette composition comme médicament, notamment comme anti-infectieux ou anti-cancéreux. ARRIERE PLAN TECHNOLOGIQUE : Avec l'émergence croissante de pathogènes résistants et la raréfaction des anti- infectieux capables de lutter contre ces infections, la nécessité de mettre au point de nouvelles stratégies thérapeutiques n'a jamais été aussi urgente. Une de ces stratégies vise l'activation du système immunitaire avec la mise au point d'agents immunomodulateurs capables notamment de renforcer l'action du système immunitaire contre les pathogènes. RESUME DE L'INVENTION : Les inventeurs ont découverts que le peptide P17 et ses dérivés présentaient une activité immunomodulatrice. Le peptide P17 est un peptide présent dans le venin des fourmis Tetramorium bicarinatum. Ce peptide de 13 acides aminés avait été décrit par Rifflet et al. (Identification and characterization of a novel antimicrobial peptide from the venom of the ant Tetramorium bicarinatum. Peptides. 2012 Dec;38(2):363-70) mais n'avait alors montré aucune propriété intéressante. En particulier, il n'avait montré aucune propriété antibactérienne in vitro. Les inventeurs ont montré que de manière surprenante P17 et ses dérivés augmentaient la libération de cytokines pro-inflammatoires et favorisaient la sécrétion de radicaux libres oxygénés. L'immuno-modulation générée par P17 et ses dérivés est telle qu'elle permet l'élimination de pathogènes comme la levure C. albicans. Cette immuno-modulation est médiée par les récepteurs lectine de type C comme le récepteur au mannose ou dectine 1 qui interviennent dans la réponse immunitaire innée contre de nombreux pathogènes. Ces récepteurs reconnaissent des motifs moléculaires, tels que les glucanes, présents sur la surface de nombreux pathogènes et exprimés de manière anormale à la surface des cellules cancéreuses. P17 et ses dérivés sont donc des candidats particulièrement prometteurs pour le traitement ou la 3061715 2 prévention de nombreuses pathologies telles que les pathologies fongiques, bactériennes, virales ou cancéreuses. En conséquence la présente invention a pour objet un peptide isolé consistant en une séquence de 3 à 39 acides aminés dérivée de la séquence d'acides aminés SEQ ID 5 NO: 1, ledit peptide ayant une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par : a) les séquences de 3 à 39 acides aminés comprenant au moins les résidus 6 à 8 de SEQ ID NO : 1 et b) les séquences de 3 à 39 acides aminés présentant au moins 70% d'identité 10 avec ladite séquence en a), à l'exclusion du peptide ayant la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. La présente invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant : 15 - un peptide consistant en une séquence de 3 à 39 acides aminés dérivée de la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1 caractérisé en ce que ledit peptide a une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par : a) les séquences de 3 à 39 acides aminés comprenant au moins les résidus 6 à 8 de SEQ ID NO : 1 et 20 b) les séquences de 3 à 39 acides aminés présentant au moins 70% d'identité avec ladite séquence en a) et -un excipient pharmaceutiquement acceptable. 25 La présente invention a aussi pour objet un peptide isolé destiné à être utilisé comme médicament ; le peptide isolé consistant en une séquence de 3 à 39 acides aminés dérivée de la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1 caractérisé en ce que ledit peptide a une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par : a) les séquences de 3 à 39 acides aminés comprenant au moins les 30 résidus 6 à 8 de SEQ ID NO : 1 et b) les séquences de 3 à 39 acides aminés présentant au moins 70% d'identité avec ladite séquence en a). DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION 3061715 3 Peptides La présente invention concerne un peptide isolé consistant en une séquence de 3 à 39 acides aminés dérivée de la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1 caractérisé en ce que ledit peptide a une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe 5 constitué par : a) les séquences de 3 à 39 acides aminés comprenant au moins les résidus 6 à 8 de SEQ ID NO : 1 et b) les séquences de 3 à 39 acides aminés présentant au moins 70%, 80%, 90% ou 95% d'identité avec ladite séquence en a), 10 à l'exclusion du peptide ayant la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. Le pourcentage d'identité d'une séquence d'acide aminé est défini par le pourcentage de résidus d'acides aminés dans une séquence à comparer qui sont identiques à une séquence de référence après alignement des séquences, en introduisant des espaces si nécessaire, de façon à obtenir une identité de séquence maximale. Le 15 pourcentage d'identité est ensuite déterminé selon la formule suivante : Pourcentage d'identité = 100 x [1 - (C/R)], tel que C est le nombre de différences entre la séquence de référence et la séquence à comparer sur toute la longueur de la séquence de référence, (i) chaque acide aminé dans la séquence de référence qui n'a pas d'acide aminé correspondant aligné dans la séquence à comparer, (ii) chaque espace dans la 20 séquence de référence et (iii) chaque acide aminé aligné dans la séquence de référence qui est différent d'un acide aminé dans la séquence à comparer constitue une différence, et R est le nombre d'acides aminés dans la séquence de référence sur toute la longueur de l'alignement avec la séquence à comparer (c'est à dire toute la longueur de la séquence de référence), chaque espace généré dans la séquence 25 de référence étant compté comme un acide aminé. L'alignement de séquences en vue de déterminer le pourcentage d'identité d'une séquence peut être réalisé de différentes façons connues de l'homme du métier, par exemple en utilisant des logiciels publics disponibles comme BLAST (Altschul et al , J. Mol. Biol., 1990, 215, 403-). Ce logiciel est de préférence utilisé avec des paramètres par défaut. 30 Les peptides selon l'invention peuvent avoir de 3 à 30, de 3 à 26, ou plus préférablement 5 à 15 acides aminés. Par exemple, le peptide isolé peut avoir 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38 ou 39 acides aminés. Avantageusement, ledit peptide a une séquence d'acides aminés sélectionnée dans 35 le groupe constitué par : 3061715 4 a) les séquences de 3 à 39 acides aminés comprenant au moins les résidus 5 à 9 de SEQ ID NO : 1 et b) les séquences de 3 à 39 acides aminés présentant au moins 70% d'identité avec ladite séquence en a), 5 à l'exclusion du peptide ayant la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. De préférence, les peptides selon l'invention comprennent au moins les résidus 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 à 8, 9, 10, 11, 12 ou 13 de SEQ ID NO : 1 ou ont des séquences d'acides aminés présentant au moins 70%, 80%, 90% ou 95% d'identité avec lesdits peptides comprenant au moins les résidus 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 à 8, 9, 10, 11, 10 12 ou 13 de SEQ ID NO : 1. Plus préférablement, les peptides selon l'invention comprennent au moins les résidus 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 à 8, 9, 10, 11, 12 ou 13 de SEQ ID NO : 1. Les positions des résidus d'acides aminés sont indiquées en référence à la séquence de P17 (SEQ ID NO: 1). 15 Selon un mode de réalisation, les peptides présentent au moins 95% d'identité avec ladite séquence définie ci-dessus. De préférence, le peptide est capable de se lier à la membrane de macrophages dérivés des monocytes. Il peut déclencher des voies de signalisation responsables de la production de médiateurs cytotoxiques. 20 De préférence, le peptide est capable d'induire la production de radicaux libres oxygénés et d'IL-1[3 par des macrophages dérivés de monocytes. La capacité des peptides à induire la production de radicaux libres oxygénés et d'II-1[3 peut aisément être mesurée par un homme du métier. De tels tests sont notamment décrits dans la partie Matériels et Méthodes décrites ci-dessous. 25 Avantageusement, le peptide consiste en une séquence de 5 à 15 acides aminés comprenant au moins les résidus 5 à 9 de la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1 Selon un mode de réalisation, le peptide consiste en une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué de : 30 a) SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO : 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO : 10, SEQ ID NO : 11, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 13, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 16 et SEQ ID NO : 17 et 3061715 5 [3) les séquences de 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38 ou 39 acides aminés présentant au moins 70%, 80%, 90%, 95% d'identité avec ladite séquence a), à l'exclusion du peptide ayant la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. 5 Plus préférablement, le peptide consiste en une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué de : a) SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 13, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 16 et SEQ ID NO : 17 et [3) les séquences de 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 10 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38 ou 39acides aminés présentant au moins 70%, 80%, 90%, 95% d'identité avec ladite séquence a), à l'exclusion du peptide ayant la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. Les différentes séquences sont résumées dans le tableau 1 ci-dessous : Nom SEQ ID NO Séquence d'acides aminés P17 1 LFKEILEKIKAKL P17(2-13) 2 FKEILEKIKAKL P17(3-13) 3 KEILEKIKAKL P17(4-13) 4 EILEKIKAKL P17(5-13) 5 ILEKIKAKL P17(6-13) 6 LEKIKAKL P17(7-13) 7 EKIKAKL P17(8-13) 8 KIKAKL P17(9-13) 9 IKAKL P17(1-7) 10 LFKEI P17(1-6) 11 LFKEIL P17(1-7) 12 LFKEILE P17(1-8) 13 LFKEILEK P17(1-9) 14 LFKEILEKI P17(1-10) 15 LFKEILEKIK P17(1-11) 16 LFKEILEKIKA P17(1-12) 17 LFKEILEKIKAK 15 Tableau 1 : Séquences d'acides aminés 3061715 6 Avantageusement, les peptides sont des peptides recombinants ou de synthèse. Ainsi, les peptides peuvent être préparés par les techniques classiques connues de l'Homme du métier, notamment par synthèse en phase solide ou liquide ou par 5 expression d'un ADN recombinant dans un système cellulaire approprié (eucaryote ou procaryote). Par exemple, les peptides peuvent être synthétisés en phase solide, selon la technique Fmoc, originellement décrite par Merrifield et al (J. Am. Chem. Soc, 1964, 85: 2149-) et purifiés par chromatographie liquide haute performance en phase inverse. De préférence, les peptides sont des peptides de synthèse. 10 L'invention englobe les peptides variants naturels ou synthétiques obtenus par mutation (insertion, délétion, substitution) d'un ou plusieurs acides aminés dans la séquence de P17 (SEQ ID NO : 1) dès lors que ledit peptide dérivé de P17 conserve ses propriétés immunomodulatrices. Les peptides peuvent être amidés en C-terminal. Les peptides peuvent être acyles en 15 N-terminal. En particulier, l'invention englobe les peptides dérivés de P17 ou d'un peptide tel que défini ci-dessus dans lesquels certains acides aminés ont été substitués par un acide aminé aux propriétés similaires. Par exemple, les acides aminés hydrophobes tels que les résidus L1, L6 et L13, F2, 15, 19 et/ou A11 peuvent être substitués par un 20 autre acide aminé hydrophobe sélectionné dans le groupe consistant en A, V, L, 1, M, F, W et des acides aminés hydrophobes non naturels tels que l'ornithine, l'homolysine, et la tertioleucine ; les résidus K3, K8, K10 et/ou K12 peuvent être substitués par un autre acide aminé basique tel R et/ou H; les résidus E4 et/ou E7 peuvent être substitués par un autre acide aminé acide tel que D ou un acide aminé 25 acide non naturel tel que la paracarboxyalanine. Le peptide peut par exemple consister en un variant de P17 ou d'un dérivé de P17 tel que décrit ci-dessus dans lequel un ou plusieurs acides aminés hydrophobes tels que les résidus L1, L6 et L13, F2, 15, 19 et/ou A11 ont été remplacés par un autre acide aminé hydrophobe sélectionné dans le groupe consistant en A, V, L, 1, M, F, W et des 30 acides aminés hydrophobes non naturels tels que l'ornithine, l'homolysine, et la tertioleucine . Polynucléotides La présente invention a également pour objet un polynucléotide isolé codant pour un 35 peptide tel que défini ci- dessus ou un peptide P17. 3061715 7 Conformément à l'invention, la séquence dudit polynucléotide est celle de l'ADNc codant pour ledit peptide. Ladite séquence peut avantageusement être modifiée de façon à ce que l'usage des codons soit optimal chez l'hôte dans lequel elle est exprimée. 5 La présente invention a également pour objet un vecteur recombinant comprenant ledit polynucléotide. De préférence, ledit vecteur est un vecteur d'expression comprenant tous les éléments nécessaires à l'expression du peptide. Par exemple, ledit vecteur comprend une cassette d'expression incluant au moins un polynucléotide tel que défini ci - 10 dessus, sous le contrôle de séquences régulatrices de la transcription et éventuellement de la traduction appropriées (promoteur, activateur, intron, codon d'initiation (ATG), codon stop, signal de polyadénylation, site d'épissage). La présente invention a également pour objet une cellule hôte procaryote ou eucaryote modifiée, comprenant un peptide, un polynucléotide ou un vecteur tels que 15 définis ci-dessus ; la cellule pouvant être modifiée de façon stable ou transitoire. Composition pharmaceutique La présente invention a également pour objet une composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend un peptide tel que défini ci-dessus et un 20 excipient pharmaceutiquement acceptable. La composition peut également comprendre le peptide P17 et un excipient pharmaceutiquement acceptable. La composition peut notamment comprendre un peptide consistant en une séquence de 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38 ou 39 acides aminés dérivée de la 25 séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1 caractérisé en ce que ledit peptide a une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par : a) les séquences d'acides aminés comprenant au moins les résidus 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 à 8, 9, 10, 11, 12 ou 13 de SEQ ID NO : 1 et b) les séquences d'acides aminés présentant au moins 70%, 80%, 30 90% ou 95% d'identité avec ladite séquence en a). Avantageusement, la composition peut notamment comprendre un peptide consistant en une séquence de 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38 ou 39 acides aminés dérivée de la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1 caractérisé en ce que ledit 35 peptide a une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par : 3061715 8 a) les séquences d'acides aminés comprenant au moins les résidus 1,2, 3, 4 ou 5 à 9, 10, 11, 12 ou 13 de SEQ ID NO : 1 et b) les séquences d'acides aminés présentant au moins 70%, 80%, 90% ou 95% d'identité avec ladite séquence en a). 5 Selon un mode de réalisation, la composition pharmaceutique comprend un peptide ayant une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué : a) SEQ ID NO : 1, SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO : 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO : 10, SEQ ID NO : 11, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 13, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 10 15, SEQ ID NO : 16 et SEQ ID NO : 17 et [3) les séquences de 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38 ou 39 acides aminés présentant au moins 70%, 80%, 90%, 95% d'identité avec ladite séquence a). Selon un mode de réalisation préféré, la composition pharmaceutique comprend un 15 peptide ayant une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué : a) SEQ ID NO : 1, SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 16 et SEQ ID NO : 17 et [3) les séquences de 3 à 39 acides aminés présentant au moins 70%, 80%, 90% ou 95% d'identité avec ladite séquence a). 20 Plus préférablement, ledit peptide a la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. Les peptides peuvent être des peptides recombinants ou de synthèse. Les peptides peuvent être des variants naturels ou synthétiques obtenus par mutation des peptides précités. Comme indiqué plus haut, les variants peuvent comprendre une substitution des acides aminés hydrophobes tels que les résidus L1, L6 et L13, 25 F2, 15, 19 et/ou A11 par un autre acide aminé hydrophobe sélectionné dans le groupe consistant en A, V, L, 1, M, F, W et des acides aminés hydrophobes non naturels tels que l'ornithine, l'homolysine, et la tertioleucine, une substitution des résidus K3, K8, K10 et/ou K12 par un autre acide aminé basique tel R et/ou H et/ou une substitution des résidus E4 et/ou E7 par un autre acide aminé acide tel que D ou un acide aminé 30 non naturel tel que la paracarboxyalanine. La composition pharmaceutique comprend une dose efficace de peptide permettant d'obtenir un effet prophylactique/thérapeutique. Cette dose est déterminée et ajustée en fonction de facteurs tels que l'âge, le sexe et le poids du sujet. La composition pharmaceutique est généralement administrée selon les protocoles usuels, à des 35 doses et pendant une durée suffisante pour induire un effet immunomodulateur. 3061715 9 L'administration peut être sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse, intradermique, intrapéritonéale, orale, sublinguale, rectale, vaginale, intra-nasale, par inhalation ou par application transdermique. La composition pharmaceutique se présente sous une forme galénique adaptée à une 5 administration choisie : solution stérile injectable, poudre, comprimés, gélules, suspension, sirop, suppositoires, qui sont préparés selon les protocoles standards. La composition pharmaceutique peut comprendre en outre un autre agent thérapeutique. L'agent thérapeutique peut être par exemple sélectionné dans le groupe consistant en un antifongique, un anticancéreux, un antiviral, un 10 antiparasitaire et un antibiotique. Thérapie Les inventeurs ont montré que P17 et ses dérivés activaient les fonctions cytotoxiques des macrophages dérivés des monocytes humains de sang 15 périphérique. Ainsi, les macrophages polarisés par P17 ou ses dérivés présentent une forte capacité de reconnaissance et de phagocytose des pathogènes qui expriment sur leur paroi des structures moléculaires conservés (PAMP) reconnues par les récepteurs lectines de type C. Les récepteurs lectines de type C sont impliqués dans la réponse immunitaire innée 20 contre des nombreux pathogènes tels que : -des bactéries (Sukhithasri V. et al., Innate immune recognition of microbial cell wall components and microbial strategies to evade such recognitions, Microbiol Res. 2013 Aug 25;168(7):396-406, Killick KE et al., Receptor-mediated recognition of mycobacterial pathogens, Cell Microbiol. 2013 Sep;15(9)), 25 -des champignons et les levures (Vautier S et al., C-type lectin receptors and cytokines in fungal immunity, Cytokine. 2012 Apr;58(1):89-99 ; Drummond RA et al., The role of Dectin-1 in the host defence against fungal infections, Curr Opin Microbiol. 2011 Aug;14(4):392-9), -des parasites (Vàzquez-Mendoza A. et al., Parasitic infections: a role for C- 30 type lectins receptors, Biomed Res Int. 2013;2013:456352 Epub 2013 Jan 27, Lefèvre L. et al., The C-type lectin receptors dectin-1, MR, and SIGNR3 contribute both positively and negatively to the macrophage response to Leishmania infantum. lmmunity. 2013 May 23;38(5):1038-49) -ainsi que contre des cellules tumorales (Dube DH. Et al., Glycans in cancer 35 and inflammation--potential for therapeutics and diagnostics, Nat Rev Drug Discov. 3061715 10 2005 Jun;4(6):477-88, Aarnoudse CA et al., Recognition of tumor glycans by antigenpresenting cells, Curr Opin Immunol. 2006 Feb;18(1):105-11, Chiba S et al. Recognition of tumor cells by Dectin-1 orchestrates innate immune cells for anti-tumor responses, Elife. 2014 Aug 22;3). 5 Par conséquent l'invention concerne également un peptide et/ou une composition pharmaceutique comprenant ledit peptide et un excipient pharmaceutiquement acceptable destiné à être utilisé comme médicament, ledit peptide isolé consistant en une séquence de 3 à 39 acides aminés dérivée de la séquence d'acides aminés SEQ 10 ID NO: 1 caractérisé en ce que ledit peptide a une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par : a) les séquences de 3 à 39 acides aminés comprenant au moins les résidus 6 à 8 de SEQ ID NO : 1 et b) les séquences de 3 à 39 acides aminés présentant au moins 70% 15 d'identité avec ladite séquence en a). Avantageusement, ledit peptide peut consister en une séquence de 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29,30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38 ou 39 acides aminés dérivée de la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1, ledit peptide ayant une séquence d'acides aminés sélectionnée dans 20 le groupe constitué par : a) les séquences d'acides aminés comprenant au moins les résidus 1,2, 3, 4, 5 ou 6 à 8, 9, 10, 11, 12 ou 13 de SEQ ID NO : 1 et b) les séquences d'acides aminés présentant au moins 70%, 80%, 90% ou 95% d'identité avec ladite séquence en a). 25 L'invention concerne une méthode de traitement chez un sujet à traiter comprenant l'administration audit sujet d'une quantité efficace dudit peptide ou de ladite composition pharmaceutique comprenant ledit peptide isolé et un excipient pharmaceutiquement acceptable. 30 L'invention concerne aussi l'utilisation dudit peptide ou de ladite composition pharmaceutique comprenant ledit peptide et un excipient pharmaceutiquement acceptable dans la fabrication d'un médicament. Avantageusement, ledit peptide consiste en une séquence de 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 35 34, 35, 36, 37, 38 ou 39 acides aminés dérivée de la séquence d'acides aminés SEQ 3061715 11 ID NO: 1 caractérisé en ce que ledit peptide a une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par : a) les séquences d'acides aminés comprenant au moins les résidus 1,2, 3, 4 ou 5 à 9, 10, 11, 12 ou 13 de SEQ ID NO : 1 et 5 b) les séquences d'acides aminés présentant au moins 70%, 80%, 90% ou 95% d'identité avec ladite séquence en a). Selon un mode de réalisation, le peptide a une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué : a) SEQ ID NO : 1, SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 4, SEQ ID 10 NO : 5, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO : 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO : 10, SEQ ID NO : 11, SEQ ID NO : 12, SEQ ID NO : 13, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 16 et SEQ ID NO : 17 et [3) les séquences de 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38 ou 39 acides 15 aminés présentant au moins 70%, 80%, 90%, 95% d'identité avec ladite séquence a). Selon un mode de réalisation préféré, ledit peptide destiné à être utilisé comme médicament a une séquence d'acides amines sélectionnée dans le groupe constitué : a) SEQ ID NO : 1, SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 5' SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 16 et SEQ ID NO : 17 et 20 [3) les séquences de 3 à 39 acides aminés présentant au moins 70%, 80%, 90% ou 95% d'identité avec ladite séquence a). De préférence, ledit peptide a la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. Les inventeurs ont montré que P17 et ses dérivés entrainaient la production de cytokines pro-inflammatoires. Par conséquent, l'invention a aussi pour objet ledit 25 peptide ou ladite composition pharmaceutique pour leur utilisation comme agent pro- inflammatoire. Les inventeurs ont montré que les macrophages polarisés par P17 présentaient une surexpression des récepteurs lectines de type C. Ces récepteurs sont impliqués dans la réponse immunitaire contre de nombreux pathogènes. 30 Par conséquent, l'invention concerne ledit peptide ou/et ladite composition pharmaceutique pour son utilisation dans la prévention ou le traitement d'une maladie causée par un pathogène reconnu par les récepteurs lectines de type C, de préférence par des récepteurs au mannose ou dectine 1. Les pathogènes peuvent être : 3061715 12 -une bactérie ; par exemple une bactérie sélectionnée dans le groupe consistant en Streptococcus pneumoniae, Klebellia pneumoniae, Cryptococcus neoformans et Mycobacterium tuberculis, -un champignon, par exemple Candida albicans, 5 -un parasite ; par exemple des parasite sélectionné dans le groupe constitué de Leishmania donovani, Pneumocystis carinii et Trypanosoma cruzi. L'invention concerne donc une méthode pour la prévention ou le traitement d'une maladie causée par un pathogène reconnu par un récepteur lectine de type C chez un sujet à traiter comprenant l'administration audit sujet d'une quantité efficace dudit 10 peptide ou de ladite composition pharmaceutique comprenant ledit peptide isolé et un excipient pharmaceutiquement acceptable. La maladie causée par un pathogène reconnu par un récepteur lectine de type C est de préférence une mycose, plus préférablement une candidose. Les récepteurs lectines de type C sont également impliqués dans la réponse 15 immunitaire contre les cellules tumorales. Par conséquent, ledit peptide peut être pour une utilisation comme anti-cancéreux ; dans le traitement du cancer. L'invention concerne donc également une méthode pour la prévention ou le traitement d'un cancer chez un sujet à traiter comprenant l'administration audit sujet d'une quantité efficace dudit peptide ou de ladite composition pharmaceutique comprenant 20 ledit peptide isolé et un excipient pharmaceutiquement acceptable. L'invention sera en outre illustrée par les figures et exemples suivants. Cependant, ces exemples et figures ne doivent pas être interprétés comme limitant la portée de la présente invention. 25 FIGURES La figure 1 montre l'élimination de C. albicans par des macrophages dérivés de monocytes humains traités ou non par le P17 in vitro. La figure 2 montre l'effet de l'administration de P17 in vivo sur le poids corporel de 30 souris présentant une candidose gastro-intestinale induite par C. albicans. La figure 3 montre l'effet de P17 sur la liaison et la phagocytose de C. albicans par des macrophages dérivés de monocytes humains. La figure 4 montre l'effet de P17 sur la production de radicaux libres oxygénés (RLO) et d'IL-1[3 par des macrophages dérivés de monocytes humains en réponse à une 35 stimulation par C. albicans. 3061715 13 La figure 5 montre l'effet de P17 sur l'expression protéique des récepteurs lectine de type C. La figure 6 schématise le mode d'action de P17. 5 EXEMPLES Matériel et Méthodes: Etude de l'élimination de C. albicans par les macrophages dérivés de 10 monocytes humains Les macrophages dérivés de monocytes humains ont été traités ou non avec le peptide P17 puis incubés à 37°C pendant 24h. Ces cellules ont été incubées pendant 40 min à 37°C avec C. albicans (à un ratio de 0.3 levures par macrophage) et les levures non liées sont éliminées par lavages. Ces macrophages sont alors incubés à 15 37 °C pendant 4h. Après incubation, le milieu a été enlevé et les cellules ont été lysées. Les unités formant des colonies (CFU) de C. albicans ont été déterminées sur boites de Sabouraud après étalement et mise en culture pendant 48h à 37 °C. Etude de la liaison et de la phagocytose de C. albicans par les macrophages 20 dérivés de monocytes humains Pour l'analyse de la liaison et de la phagocytose de C. albicans, les macrophages dérivés de monocytes humains ont été traités ou non avec le peptide P17 puis incubés à 37°C pendant 24h. Les macrophages dérivés des monocytes humains ont été mis en présence avec des levures marquées GFP (ratio 1/6) puis incubés à 4°C 25 pendant 20 minutes afin d'évaluer la liaison . La phagocytose a été évaluée après lh d'incubation à 37°C. La quantité de C. albicans liée ou ingérée par les macrophages dérivés des monocytes humains a été déterminée par mesure de la fluorescence en utilisant un fluorimètre (EnvisionPerkin Elmer). 30 Etude de la production de ROS par les macrophages dérivés de monocytes humains en réponse à C. albicans Pour l'analyse de la production de ROS, les macrophages dérivés de monocytes humains ont été traités ou non avec le peptide P17 puis incubés à 37°C pendant 24h. La production de dérivés réactifs de l'oxygène (ROS) a été mesurée par 35 chimioluminescence en présence de 5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione 3061715 14 (luminol) (Envision; Perkin Elmer). La génération de chimioluminescence a été mesurée en continu pendant 1h30 après incubation des cellules avec le luminol (66 pM) en présence ou non de C. albicans (ratio levures par macrophage : 3:1). 5 Etude de la production d'IL-lp Les macrophages dérivés de monocytes humains ont été stimulés avec le peptide P17 pendant 24h, puis ces macrophages activés par le peptide P17 ont été stimulés avec C. albicans à un ratio levures pour macrophage de 3:1 pendant 8 h. La production d'IL-113 dans les surnageants cellulaires a été déterminée par ELISA 10 (OptiElA BD Biosciences). Evaluation de l'expression protéique des récepteurs lectine de type C Pour l'analyse du niveau protéique des récepteurs lectine de type C, les macrophages dérivés de monocytes humains ont été traités ou non avec le peptide P17 puis 15 incubés à 37°C pendant 24h. Les cellules ont été rrarquées avec des anticorps couplés à différents fluorochromes dirigés contre le récepteur Dectine-1 (mAb; R&D FAB1859C-100, 1/40), DC-SIGN (mAb; BD Biosciences 551 265, 1/20 ) et le récepteur mannose. L'analyse a été réalisée par cytométrie en flux (Becton Dickinson FACScalibur) sur une population de 10,000 cellules. 20 Modèle experimental murin de candidose gastrointestinale Pour les expériences in vivo, une infection gastrointestinale avec la souche C. albicans 98/26135 a été établie par gavage avec 50 x106 de C. albicans par souris (n=8 par groupe). Aucun antibiotique ou traitement immunosuppresseur n'a été utilisé 25 pour faciliter l'infection des muqueuses de la cavité buccale et du tractus gastro- intestinal. Les souris ont été traitées par voie intrapéritonéale (i.p.) avec le peptide P17 (10 pg par souris) ou avec une solution saline pour les groupes témoins, 1 jour avant l'infection avec C. albicans, 1 jour après l'infection et puis tous les 2 jours (5 injections). Le poids corporel de chaque souris a été enregistré quotidiennement. Au 30 8ème jour après le traitement (7 jours après l'infection), toutes les souris ont été euthanasiées par asphyxie au CO2. L'cesophage, l'estomac, le caecum et le foie ont été enlevés de manière aseptisée pour évaluer la colonisation par C. albicans. 35 3061715 15 Résultats: La figure 1 montre que la présence de P17 augmente considérablement la capacité des macrophages à éliminer C. albicans in vitro. Ces résultats ont été confirmés in vivo sur des souris infectées par C. albicans. En 5 effet, des souris présentant une candidose gastrointestinale traitées par P17 présentaient une perte de poids moindre par rapport à des souris non traitées (figure 2). Les inventeurs ont cherché à connaître le mécanisme sous-jacent à l'action du P17. Les macrophages dérivés de monocytes humains traités par le P17 présentent à la 10 fois une plus grande capacité à reconnaitre et phagocyter C. albicans (figures 3). De plus, P17 induit une plus forte production de ROS en réponse à une stimulation par C. albicans et de cytokines pro-inflammatoires telles que l'IL-1[3 (figure 4). L'augmentation de la production de ces médiateurs cytotoxiques par le peptide P17 est associées à la surexpression des récepteurs lectine de type C à la surface des 15 macrophages dérivés de monocytes humains (figure 5). REVENDICATIONS1. Peptide isolé consistant en une séquence de 3 à 20 acides aminés dérivée de la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1 caractérisé en ce que ledit peptide a une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par : a) les séquences de 3 à 20 acides aminés comprenant au moins les résidus 6 à 8 de SEQ ID NO : 1 et b) les séquences de 3 à 20 acides aminés présentant au moins 70% d'identité avec ladite séquence en a), à l'exclusion du peptide ayant la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. 2. Peptide selon la revendication 1 caractérisé en ce que ledit peptide a une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par : a) les séquences de 3 à 20 acides aminés comprenant au moins les résidus 5 15 à9 de SEQ ID NO : 1 et b) les séquences de 3 à 20 acides aminés présentant au moins 70% d'identité avec ladite séquence en a), à l'exclusion du peptide ayant la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. 20 3. Peptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 2 caractérisé en ce qu'il consiste en une séquence de 5 à 15 acides aminés comprenant au moins les résidus 5 à 9 de la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. 25 4. Peptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisé en ce qu'il consiste en une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué de : a) SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 16 et SEQ ID NO : 17 et 30 8) les séquences de 3 à 20 acides aminés présentant au moins 70% d'identité avec ladite séquence a), à l'exclusion du peptide ayant la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. 5. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend : 3061715 17 - un peptide consistant en une séquence de 3 à 20 acides aminés dérivée de la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1 caractérisé en ce que ledit peptide a une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par : a) les séquences de 3 à 20 acides aminés comprenant au moins les 5 résidus 6 à 8 de SEQ ID NO : 1 et b) les séquences de 3 à 20 acides aminés présentant au moins 70% d'identité avec ladite séquence en a) et -un excipient pharmaceutiquement acceptable. 10 6. Composition pharmaceutique selon la revendication 5 caractérisée en ce que ledit peptide a la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. 7. Peptide pour son utilisation comme médicament caractérisé en ce que le peptide isolé consiste en une séquence de 3 à 20 acides aminés dérivée de la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1, ledit peptide ayant une séquence d'acides aminés sélectionnée dans le groupe constitué par : a) les séquences de 3 à 20 acides aminés comprenant au moins les résidus 6 à 8 de SEQ ID NO : 1 et b) les séquences de 3 à 20 acides aminés présentant au moins 70% d'identité avec ladite séquence en a). 8. Peptide pour son utilisation selon la revendication 7 caractérisé en ce que le peptide isolé a une séquence d'acides amines sélectionnée dans le groupe constitué : a) SEQ ID NO : 1, SEQ ID NO : 2, SEQ ID NO : 3, SEQ ID NO : 4, SEQ ID NO : 5, SEQ ID NO : 6, SEQ ID NO : 14, SEQ ID NO : 15, SEQ ID NO : 16 et SEQ ID NO: 17 et 8) les séquences de 3 à 20 acides aminés présentant au moins 70% d'identité avec ladite séquence a). 9. Peptide pour son utilisation selon la revendication 7 ou 8 caractérisé en ce que ledit peptide a la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1. 3061715 18 10. Peptide tel que défini à l'une quelconque des revendications 7 à 9 pour son utilisation comme agent pro-inflammatoire. 11. Peptide tel que défini à l'une quelconque des revendications 7 à 9 pour son 5 utilisation dans la prévention ou le traitement de maladies causées par un pathogène reconnu par un récepteur lectine de type C, de préférence par un récepteurs au mannose ou dectine 1. 12. Peptide tel que défini à l'une quelconque des revendications 7 à 9 pour son 10 utilisation dans la prévention ou le traitement d'une mycose, de préférence une candidose. 13. Peptide tel que défini à l'une quelconque des revendications 7 à 9pour son utilisation dans le traitement du cancer. 15