Brevet FR3061660A1 — publié le 20180713

Compositions sous forme d'une solution aqueuse injectable comprenant du glucagon humain et un co-polyaminoacide [0001] Le glucagon humain est une hormone hyperglycémiante d'action brève qui permet d'augmenter la glycémie, corrigeant ainsi un niveau hypoglycémique pouvant résulter d'un excès d'insuline. Il permet la libération de glucose par stimulation de la glycogénolyse hépatique, et possède des propriétés antagonistes de l'insuline (hypoglycémiante). Le glucagon humain est normalement sécrété par les cellules alpha des ilots de Langerhans dans le pancréas lorsqu'une hypoglycémie est détectée. [0002] Le glucagon humain est utilisé à des fins thérapeutiques, comme le traitement d'urgence d'hypoglycémies sévères, encore appelé « rescue », mais également dans un cadre diagnostique lors de la réalisation d'examens médicaux, par exemple pour inhiber la motilité gastro-intestinale. D'autres applications sont également envisagées pour le glucagon humain, en particulier son utilisation dans un système de régulation bi-hormonal de la glycémie aussi appelé pancréas artificiel et dans l'hyperinsulinisme congénital qui est une maladie rare caractérisée par des niveaux très élevés d'insuline. [0003] L'utilisation clinique du glucagon humain a été limitée à cause de certaines de ses propriétés peu favorables pour développer un produit pharmaceutique stable à visée thérapeutique. En effet, le glucagon humain présente une très faible solubilité à pH physiologique, une forte instabilité physique, à cause de sa propension à former des fibrilles sur une large gamme de pH. C'est pour cette raison que les seuls produits commerciaux à base de glucagon humain (Glucagen®, NOVO NORDISK et Glucagon pour injection, ELI LILLY) sont des formes lyophilisées à reconstituer extemporanément. [0004] Les travaux d'Onoue et al. (Pharm. Res. 2004, 21(7), 1274-83) ont montré le caractère potentiellement dangereux de ces fibrilles : le glucagon humain fibrillé étant cytotoxique dans des cellules de mammifères en culture. [0005] Outre son instabilité physique, le glucagon humain subit divers types de dégradation chimique. En solution aqueuse, il se dégrade rapidement pour former plusieurs produits de dégradation. Au moins 16 produits de dégradation du glucagon humain ont été identifiés par Kirsh et al. (International Journal of Pharmaceutics, 2000, 203, 115-125). La dégradation chimique de ce glucagon humain est donc rapide et complexe. [0006] La mauvaise stabilité chimique et physique du glucagon humain en solution a conduit des sociétés pharmaceutiques comme NOVO NORDISK, ELI LILLY et plus récemment FRESENIUS KABI à commercialiser ce glucagon humain sous la forme d'un lyophilisat à reconstituer à pH acide (pH . 30 [000158] On entend par « composition stable physiquement » des compositions qui après une certaine durée de stockage à une certaine température satisfont aux critères de l'inspection visuelle décrite dans la pharmacopée européenne, américaine et internationale, c'est-à-dire des compositions qui sont limpides et qui ne contiennent pas de particules visibles, mais également incolores. 35 [000159] On entend par « composition stable chimiquement » des compositions qui, après stockage un certain temps et à une certaine température, présentent une recouvrance minimum des principes actifs et sont conformes aux cahiers des charges applicables aux produits pharmaceutiques. 3061660 28 [000160] On entend par « solution aqueuse injectable» des solutions à base d'eau qui répondent aux conditions des pharmacopées EP et US, et qui sont suffisamment liquides pour être injectées. [000161] On entend par « co-polyaminoacide étant constitué d'unités glutamiques 5 ou aspartiques* des enchainements linéaires non cycliques d'unités acide glutamique ou acide aspartique liées entre elles par des liaisons peptidiques, lesdits enchainements présentant une partie C terminale, correspondant à l'acide carboxylique d'une extrémité, et une partie N-terminale, correspondant à l'amine de l'autre extrémité de l'enchainement. 10 [000162] On entend par « radical alkyl » une chaine carbonée, linéaire ou ramifiée, qui ne comprend pas d'hétéroatome. [000163] Le co-polyaminoacide est un co-polyaminoacide statistique ou bloc. [000164] Le co-polyaminoacide est un co-polyaminoacide statistique dans 15 l'enchaînement des unités glutamiques et/ou aspartiques. [000165] Dans les formules les * indiquent les sites de rattachements des différents éléments représentés. [000166] Dans les formules I, V et VI, les * indiquent les sites de rattachement des radicaux hydrophobes au co-polyaminoacide. Les radicaux Hy sont rattachés au co- 20 polyaminoacide via des fonctions amides. [000167] Dans les formules II et II', les * indiquent, de gauche à droite respectivement, les sites de rattachement de GpR : - au co-polyaminoacide et - à GpA si a = 1 ou à GPC si a = O. 25 [000168] Dans les formules III et III', les * indiquent, de gauche à droite respectivement, les sites de rattachement de GpA : - à GpR si r = 1 ou au co-polyaminoacide si r = O et - à GpC. [000169] Dans la formule IV, le * indique le site de rattachement de GpC : 30 - à GpA si a = 1, GpR si r = 1 et a = 0 ou au co-polyaminoacide si r = 0 et a = 0. [000170] Tous les rattachements entre les différents groupes GpR, GpA et GpC sont des fonctions amides. [000171] Les radicaux Hy, GpR, GpA, GpC, et D sont chacun indépendamment identiques ou différents d'une unité monomérique à l'autre. 35 [000172] Lorsque le co-polyaminoacide comprend une ou plusieurs d'unité(s) aspartique(s), celle(s)-ci peu(ven)t subir des réarrangements structuraux. 3061660 29 [000173] Dans un mode de réalisation la composition selon l'invention est caractérisée en ce que les co-polyaminoacides peuvent en outre comprendre des unités monomériques de formule VIII et/ou VIII' : 5 Formule VIII Formule VIII' [000174] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpC répond à la formule IVd 10 dans laquelle x = 15 et Cx est [000175] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpC répond à la formule IVd CH3 dans laquelle x = 16 et Cx est 15 [000176] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est GpC à la formule IVd dans laquelle x 15 et Cx est 20 [000177] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, C H 3 répond GpR répond à la formule II dans laquelle R est laquelle x = 15 et Cx est GpC répond à la formule IVd dans H 3 - 25 [000178] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est la formule IVd dans laquelle NH2, GpC répond à 15 et Cx est C H 3 3061660 30 [000179] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = O, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 17 et Cx est 5 cH3. [000180] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est 0 * *Cscp,-- ^.7\7 \ " , GpC répond à la formule IVd dans 10 laquelle X 19 et Cx est [000181] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpC répond à la formule IVa 7 15 dans laquelle b = 1, B est x = 15 et Cx est C H 3. [000182] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpC répond à la formule IVa 20 dans laquelle b B est , x = 11 et Cx est CH3 [000183] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 1, p = 2, 25 GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA répond à la formule Mb, GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 9 et Cx est CI-13 3061660 31 [000184] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 1, p = 2, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA répond à la formule Mb, GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 11 et Cx est CH3 5 [000185] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 1, p = 2, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA répond à la formule IIIb, 10 GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 13 et Cx est CH» [000186] Dans un mode de réalisation, le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 1, p = 2, 15 GpR répond à répond à la formule D dans laquelle R est , GpA répond à la formule IIIb, GpC la formule IVd dans laquelle x = 13 et Cx est CH3 20 [000187] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 23 +/- 5, i = 0,05 +/- 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, 25 a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpC répond à la formule IVd dans laquelle 15 et Cx est C H 3 [000188] Les valeurs de degré de polymérisation DP et de ratio i sont estimés par RMN 1H dans D20 en comparant l'intégration des signaux provenant des groupes 30 hydrophobes à celle des signaux provenant de la chaine principale du copolyaminoacide. [000189] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou 35 VIIa, dans laquelle DP = 35 +/- 5, i = 0,05 +/- 0,02 et le au moins un radical 3061660 32 hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpC répond à la formule IVd dans laquelle 15 et Cx est CH3. 5 [000190] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 35 +/- 5, i = 0,10 +/- 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r= 1, 10 a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpC répond à la formule IVd dans laquelle 15 et Cx est CH3. [000191] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges 15 carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = ]5 +/- 5, i = 0,05 +/- 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpC répond à la formule IVd dans laquelle 16 et Cx est Cf-13 20 H3. [000192] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 23 +/- 5, i = 0,05 +/- 0,02 et le au moins un radical 25 hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 17 et Cx est ( H», 30 [000193] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 22 +/- 5, i = 0,05 +/- 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r= 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est 3061660 , GpC répond à la formule IVd dans et Cx est cH3 5 [000194] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 30 +/- 5, i = 0,10 +/- 0,03 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est 10 GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 15 et Cx est CHa [000195] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou 15 VIIa, dans laquelle DP = 2] +/- 5, i = 0,07 +/- 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est 20 laquelle x = 15 et Cx est , GpC répond à la formule IVd dans cH3 [000196] Dans un mode de réalisation, le co-polyanninoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 23 +/- 5, i = 0,05 +/- 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, NH2, GpC répond à la formule IVd dans laquelle x 15 et Cx est CH3. [000197] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges 30 carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 26 +/- 5, i = 0,04 +/- 0,02 et le au moins un radical 33 laquelle 19 25 a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est 3061660 34 hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpC répond à la formule IVa dans laquelle b = 1, B est CH?, x = 15 et Cx est CH3, 5 [000198] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 35 +/- 5, i = 0,13 +/- 0,04 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, 10 a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpC répond à la formule IVa dans laquelle b B est x = 11 et Cx est C H3 [000199] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges 15 carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 23 +/- 5, i = 0,05 +/- 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est Ir\V\/- 0-7«^',-"°\7 , GpC répond à la formule IVd dans 20 laquelle x 19 et Cx est * H3 [000200] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou 25 VIIb, dans laquelle DP = 25 +/- 5, 0,03] i 0,05 et le radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 15 et Cx est cH3. 3061660 35 [000201] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIb, dans laquelle DP = 30 +/- 5, 0,028 i 0,04et le au moins un radical hydrophobe 5 de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est GpC répond à la formule IVd dans laquelle x 17 et Cx est 10 [000202] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIb, dans laquelle DP = 45 +/- 10, 0,018 i 0,028 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est 15 , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 17 et Cx est C H3 . [000203] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges 20 carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIb, dans laquelle DP = 60 +/- 10, 0,014 i 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r= 1, a = 0, p = 1, GpR répond à la formule II dans laquelle R est , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 17 et 25 Cx est [000204] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIb, dans laquelle DP = 25 +/- 5, 0,033 i 0,05 et le radical hydrophobe de formule I `C 1-13. 30 est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 0, p = 1, GpR répond , GpC x = 19 et Cx est à la formule II dans laquelle R est répond à la formule IVd dans laquelle C H3. 3061660 36 [000205] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 22 +/- 5, i = 0,05 +/- 0,02 et le au moins un radical 5 hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 1, p = 2, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA répond à la formule IIIb , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 11 et Cx est C H3 10 [000206] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 35 +/- 5, i = 0,05 +/- 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 1, p = 2, GpR répond à la formule II et dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA répond 15 à la formule Mb , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 11 et Cx est C H3 [000207] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou 20 VIIa, dans laquelle DP = 65 +/- 5, i = 0,05 +/- 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 1, p = 2, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA répond à la formule IIIb , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 11 et Cx est CH3 25 [000208] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 22 +/- 5, i = 0,04 +1- 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, 30 a = 1, p = 2, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA répond à la formule IIIb , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 13 et Cx est CH3 3061660 37 [000209] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 22 +/- 5, 0,03 +/- 0,01 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 1, p = 5 2, GpR répond à la formule II dans laquelle R est GpA répond à la formule Mb , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 13 et Cx est CH3 10 [000210] Dans un mode de réalisation, le co-polyarninoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIa, dans laquelle DP = 22 +/- 5, i = 0,07 +/- 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 1, p = 2, GpR répond à la formule II dans laquelle R est 15 , GpA répond à la formule IIIb , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 9 et Cx est CH3 [000211] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges 20 carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIb, dans laquelle DP = 27 +/- 5, 0,031 i 0,045 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 1, p = 2, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA répond à la formule IIIb , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 11 et Cx est CH3 25 [000212] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyarninoacide de formule VII ou VIIb, dans laquelle DP = 22 +/- 5, 0,037 i 5_ 0,055 et le au moins un radical 30 hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 1, p = 2, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA répond à la formule Mb , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 13 et Cx est CF13 3061660 38 [000213] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIb, dans laquelle DP = 22 +/- 5, 0,037 i 0,055 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, 5 a = 1, p = 2, GpR répond à la formule II dans laquelle R est 0 * le\-V°\70 ,--' ^.,' 10 [000214] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou VIIb, dans laquelle DP = 60 +/- 10, 0,014 i 0,02 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r = 1, a = 1, p = 2, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA répond à 15 la formule Mb , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 13 et Cx est CH3 [000215] Dans un mode de réalisation, le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est un co-polyaminoacide de formule VII ou 20 VIIb, dans laquelle DP = 40 +1- 5, 0,022 i 0,029 et le au moins un radical hydrophobe de formule I est choisi parmi les radicaux de formule I dans laquelle, r= 1, a = 1, p = 2, GpR répond à la formule II dans laquelle R est -CH2-CH2-, GpA répond à la formule Mb , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 13 et Cx est CH3 25 [000216] Dans un mode de réalisation, la composition selon l]nvention est caractérisée en ce que le co-polyanninoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation. [000217] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est 30 caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation par ouverture de cycle d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide aspartique. [000218] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyanninoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par 35 polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de , GpA répond à la formule Mb , GpC répond à la formule IVd dans laquelle x = 13 et Cx est CH3 3061660 39 N-carboxyanhydride d'acide aspartique comme décrit dans l'article de revue Adv. Polym. Sci. 2006, 202, 1-18 (Deming, T.J.). [000219] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par 5 polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique. [000220] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique choisi dans le groupe constitué par le N-carboxyanhydride glutamate de méthyle (GluOMe-NCA), le N- 10 carboxyanhydride glutamate de benzyle (G1u0BzI-NCA) et le N-carboxyanhydride glutamate de t-butyle (GluOtBu-NCA). [000221] Dans un mode de réalisation, le dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique est le N-carboxyanhydride L-glutamate de méthyle (L-GluOMe-NCA). [000222] Dans un mode de réalisation, le dérivé de N-carboxyanhydride d'acide 15 glutamique est le N-carboxyanhydride L-glutamate de benzyle (L-G1u0BzI-NCA). [000223] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide aspartique en utilisant comme initiateur un complexe 20 organométallique d'un métal de transition comme décrit dans la publication Nature 1997, 390, 386-389 (Denning, T.J.). [000224] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de 25 N-carboxyanhydride d'acide aspartique en utilisant comme initiateur l'ammoniaque ou une amine primaire comme décrit dans le brevet FR 2,801,226 (Touraud, F. ; et al.) et les références citées par ce brevet. [000225] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par 30 polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide aspartique en utilisant comme initiateur l'hexaméthyldisilazane comme décrit dands la publication ]. Am. Chem. Soc. 2007, 129, 14114-14115 (Lu H. ; et al.) ou une amine silylée comme décrit dans la publication ]. Am. Chem. Soc. 2008, 130, 12562-12563 (Lu H. ; et al.). 35 [000226] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le procéde de synthèse du polyaminoacide obtenu par polymérisation d'un dérivé de N-carboxyanhydride d'acide glutamique ou d'un dérivé de N-carboxyanhydride 3061660 d'acide aspartique dont est issu le co-polyaminoacide comprend une étape d'hydrolyse de fonctions ester. [000227] Dans un mode de réalisation, cette étape d'hydrolyse de fonctions ester peut consister en une hydrolyse en milieu acide ou une hydrolyse en milieu basique ou être 5 effectuée par hydrogénation. [000228] Dans un mode de réalisation, cette étape d'hydrolyse de groupements ester est une hydrolyse en milieu acide. [000229] Dans un mode de réalisation, cette étape d'hydrolyse de groupements ester est effectuée par hydrogénation. 10 [000230] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire. [0002]1] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée 15 en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation enzymatique d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire. [000232] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation chimique d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire. 20 [000233] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation enzymatique et chimique d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire. [000234] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée 25 en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation d'un polyaminoacide de plus haut poids moléculaire choisi dans le groupe constitué par le polyglutamate de sodium et le polyaspartate de sodium. [0002]5] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par 30 dépolymérisation d'un polyglutamate de sodium de plus haut poids moléculaire. [000236] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est issu d'un polyaminoacide obtenu par dépolymérisation d'un polyaspartate de sodium de plus haut poids moléculaire. [000237] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est 35 caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est obtenu par greffage d'un groupe hydrophobe sur un poly-L-glutamique acide ou poly-L-aspartique acide en utilisant les procédés de formation de liaison amide bien connus de l'homme de l'art. 3061660 41 [000238] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est obtenu par greffage d'un groupe hydrophobe sur un poly-L-glutamique acide ou poly-L-aspartique acide en utilisant les procédés de formation de liaison amide utilisés pour la synthèse peptidique. 5 [0002]9] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention est caractérisée en ce que le co-polyaminoacide est obtenu par greffage d'un groupe hydrophobe sur un poly-L-glutamique acide ou poly-L-aspartique acide comme décrit dans le brevet FR 2,840,614 (Chan, Y.P. ; et al. . 10 [000240] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 40 mg/mL. [000241] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 30 mg/mL. [000242] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide 15 porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 20 mg/mL. [00024]] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 10 mg/mL. [000244] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 5 mg/mL. 20 [000245] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 2,5 mg/mL. [000246] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 1 mg/mL. [000247] Dans un mode de réalisation, la concentration en co-polyaminoacide 25 porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 0,5 mg/mL. [000248] Dans un mode de réalisation, le ratio massique co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes sur glucagon est compris entre 1,5 et 25. 30 [000249] Dans un mode de réalisation, le ratio massique co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes sur glucagon est compris entre 2 et 20. [000250] Dans un mode de réalisation, le ratio massique co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes sur glucagon est compris entre 2,5 35 et 15. [000251] Dans un mode de réalisation, le ratio massique co-polyanninoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes sur glucagon est compris entre 2 et 10. 3061660 42 [000252] Dans un mode de réalisation, le ratio massique co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes sur glucagon est compris entre 2 et 7. 5 [00025]] Le glucagon humain est utilisé à des posologies qui varient en fonction des applications. [000254] En traitement d'urgence des hypoglycémies la posologie recommandée est de 1 mg par voie intramusculaire ou intraveineuse (0,5 g si la masse corporelle est inférieur à 25 kg). Cette administration est effectuée avec une solution de glucagon 10 humain à la concentration de 1 mg/ml. [000255] Dans les pompes, la dose journalière envisagée est d'environ 0,5 mg, les solutions peuvent ainsi comprendre de 0,25 mg/mi à 5 mg/nnl de glucagon humain. [000256] Selon un mode de réalisation les solutions peuvent comprendre de 0,5 mg/mi à 3 mg/mi de glucagon humain. 15 [000257] Dans le traitement de l'obésité la dose journalière envisagée est d'environ 0,5 mg, les solutions peuvent ainsi comprendre de 0,25 mg/mi à 5 mg/mi de glucagon humain. [000258] Dans un mode de réalisation, la concentration en glucagon humain est comprise entre 0,25 et 5 mg/mL. 20 [000259] Dans un mode de réalisation, la concentration en glucagon humain est comprise entre 0,5 et 4 mg/mL. [000260] Dans un mode de réalisation, la concentration en glucagon humain est comprise entre 0,75 et 3 mg/mL. [000261] Dans un mode de réalisation, la concentration en glucagon humain est 25 comprise entre 0,75 et 2,5 mg/mL. [000262] Dans un mode de réalisation, la concentration en glucagon humain est comprise entre 0,75 et 2 mg/mL. [000263] Dans un mode de réalisation, la concentration en glucagon humain est comprise entre 1 et 2 mg/mL. 30 [000264] Dans un mode de réalisation, hydrophobey[glucagon humain] est inférieur à 20. [000265] Dans un mode de réalisation, hydrophobe]/[glucagon humain] est inférieur à 15. 35 [000266] Dans un mode de réalisation, hydrophobe]/[glucagon humain] est inférieur à 10. le ratio molaire [radical le ratio molaire [radical le ratio molaire [radical 3061660 43 [000267] Dans un mode de réalisation, hydrophobe]/[glucagon humain] est inférieur à 5. [000268] Dans un mode de réalisation, hydrophobe]/[glucagon humain] est inférieur à 2,5. 5 [000269] Dans un mode de réalisation, hydrophobe]/[glucagon humain] est inférieur à 1,5. le ratio molaire [radical le ratio molaire [radical le ratio molaire [radical [000270] Le glucagon humain est un polypeptide hautement conservé comprenant 10 une chaîne simple de 29 résidus d'acides aminés présentant la séquence suivante H- His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Al a-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-OH. [000271] Il peut être obtenu de différentes manières, par synthèse peptidique par recombinaison. 15 [000272] Le glucagon humain est disponible via de nombreuses sources. Par exemple il peut s'agir du glucagon humain produit par Bachem via synthèse peptidique, notamment sous la référence 407473. [00027]] Dans un mode de réalisation, la compoosition comprend en outre un 20 composé polyanionique. [000274] Dans un mode de réalisation, le composé polyanionique est choisie dans le groupe constitué des polyacides carboxyliques et leurs sels de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+. [000275] Dans un mode de réalisation, le polyacide carboxylique est choisi dans le groupe constitué par l'acide citrique, l'acide tartrique, et leurs sels de Na+, K+, Ca2+ ou 25 Mg2+. [000276] Dans un mode de réalisation, le composé polyanionique est choisi dans le groupe constitué des polyacides phosphoriques et leurs sels de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+. [000277] Dans un mode de réalisation, le polyacide phosphorique est le triphosphate et ses sels de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+. 30 [000278] Dans un mode de réalisation, le composé polyanionique est l'acide citrique et ses sels de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+. [000279] Dans un mode de réalisation, le composé polyanionique est l'acide tartrique et ses sels de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+. [000280] Dans un mode de réalisation, le composé polyanionique est l'acide 35 triphosphorique et ses sels de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+. 3061660 44 [000281] Dans un mode de réalisation, est comprise entre 1 et 20 mM. [000282] Dans un mode de réalisation, est comprise entre 2 et 15 mM. 5 [00028]] Dans un mode de réalisation, est comprise entre 3 et 12 mM. [000284] Dans un mode de réalisation, est de 10 mM. [000285] Dans un mode de réalisation, 10 est de 5 mM. concentration concentration concentration concentration concentration en composé en composé en composé en composé en composé polyanionique polyanionique polyanionique polyanionique polyanionique la la la la la [000286] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est de 10 mM pour des concentrations en glucagon comprises entre 0,5 mg/m1 et 3 mg/ml. 15 [000287] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est de 10 mM pour des concentrations en glucagon comprises entre 0,5 rng/m1 et 2 mg/ml. [000288] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est de 10 mM pour des concentrations en glucagon comprises entre 1 mg/ml et 2 mg/ml. 20 [000289] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est de 5 mM pour des concentrations en glucagon comprises entre 0,5 mg/m1 et ] mg/ml. [000290] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique 25 est de 5 mM pour des concentrations en glucagon comprises entre 0,5 mg/mi et 2 mg/ml. [000291] Dans un mode de réalisation, la concentration en composé polyanionique est de 5 mM pour des concentrations en glucagon comprises entre 1 mg/mi et 2 mg/ml. 30 [000292] Dans un mode de réalisation, la concentration en acide citrique et ses sels de Na+, K+, Ca 2+ ou Mg2+ est comprise entre 1 et 20 mM. [000293] Dans un mode de réalisation, la concentration en acide citrique et ses sels de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+ est comprise entre 2 et 15 mM. [000294] Dans un mode de réalisation, la concentration en acide citrique et ses sels 35 de Na+, K-E, Ca2+ ou Mg2+ est comprise entre 3 et 12 mM. [000295] Dans un mode de réalisation, la concentration en acide citrique et ses sels de Na+, K±, Ca 2+ ou Mg2+ est de 10 mM. 3061660 [000296] Dans un mode de réalisation, la concentration en acide citrique et ses sels Ca2+ ou Mg2+ est de 5 mM. [000297] Dans un mode de réalisation, la concentration en acide citrique et ses sels 5 de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+ est de 10 mM pour des concentrations en glucagon comprises entre 0,5 mg/m1 et 3 mg/ml. [000298] Dans un mode de réalisation, la concentration en acide citrique et ses sels de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+ est de 10 mM pour des concentrations en glucagon comprises entre 0,5 mg/mi et 2 mg/ml. 10 [000299] Dans un mode de réalisation, la concentration en acide citrique et ses sels de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+ est de 10 mM pour des concentrations en glucagon comprises entre 1 mg/mi et 2 mg/ml. [000]00] Dans un mode de réalisation, la concentration en acide citrique et ses sels 15 de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+ est de 5 nnM pour des concentrations en glucagon comprises entre 0,5 mg/mi et 3 mg/ml. [000301] Dans un mode de réalisation, la concentration en acide citrique et ses sels de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+ est de 5 mM pour des concentrations en glucagon comprises entre 0,5 mg/mi et 2 mg/ml. 20 [000302] Dans un mode de réalisation, la concentration en acide citrique et ses sels de Na+, K+, Ca2+ ou Mg2+ est de 5 mM pour des concentrations en glucagon comprises entre 1 mg/mi et 2 mg/ml. [000303] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention 25 comprennent en outre une hormone gastrointestinale. [000304] On entend par « hormones gastrointestinales », les hormones choisies dans le groupe constitué par les GLP-1 RA pour agonistes du récepteur Glucagon humain-Like Peptide-1 (Glucagon like peptide-1 receptor agonist)Glucagon like) et le GIP (Glucose-dependent insulinotropic peptide), l'oxyntomoduline (un dérivé du 30 proglucagon humain), le peptide YY, l'amyline, la cholecystokinine, le polypeptide pancréatique (PP), la ghreline et l'entérostatine, leurs analogues ou dérivés et/ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables. [000]05] Dans un mode de réalisation, les hormones gastro-intestinales sont des analogues ou dérivés de GLP-1 RA (Glucagon like peptide-1 receptor agonist) choisis 35 dans le groupe constitué par l'exenatide ou Byetta® (ASTRA-ZENECA) , le liraglutide ou Victoza® (NOVO NORDISK), le lixisenatide ou Lyxumia® (SANOFI), l'albiglutide ou 3061660 46 Tanzeum® (GSK) ou le dulaglutide ou Trulicity® (ELI LILLY &. CO), leurs analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. [000306] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le pramlintide ou Symlin8(ASTRA-ZENECA). 5 [000]07] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est l'exenatide ou Byetta® ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. [000]08] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le liraglutide ou Victoza® ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 10 [000309] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le lixisenatide ou Lyxumia® ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. [000310] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est l'albiglutide ou Tanzeum® ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. [000311] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le dulaglutide 15 ou Trulicity® ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. [000312] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le pramlintide ou Symlin®, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables. [000313] On entend par « analogue », lorsqu'il est utilisé par référence à un peptide 20 ou une protéine, un peptide ou une protéine, dans lequel un ou plusieurs résidus d'acides aminés constitutifs ont été substitués par d'autres résidus d'acides aminés et/ou dans lequel un ou plusieurs résidus d'acides aminés constitutifs ont été supprimés et/ou dans lequel un ou plusieurs résidus d'acides aminés constitutifs ont été ajoutés. Le pourcentage d'homologie admis pour la présente définition d'un analogue est de 50 %. 25 [000314] On entend par « dérivé », lorsqu'il est utilisé par référence à un peptide ou une protéine, un peptide ou une protéine ou un analogue chimiquement modifié par un substituant qui n'est pas présent dans le peptide ou la protéine ou l'analogue de référence, c'est-à-dire un peptide ou une protéine qui a été modifié par création de liaisons covalentes, pour introduire des substituants. 30 [000]15] Dans un mode de réalisation, le substituant est choisi dans le groupe constitué des chaines grasses. [000316] Dans un mode de réalisation, la concentration en hormone gastrointestinale est comprise dans un intervalle de 0,01 à 10 mg/mL. [000317] Dans un mode de réalisation, la concentration en exenatide, ses analogues 35 ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise dans un intervalle de 0,04 à 0,5 mg/mL. 3061660 47 [000318] Dans un mode de réalisation, la concentration en liraglutide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise dans un intervalle de 1 à 10 mg/mL. [000319] Dans un mode de réalisation, la concentration en lixisenatide, ses 5 analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise dans un intervalle de 0,01 à 1 mg/mL. [000320] Dans un mode de réalisation, la concentration en pramlintide, ses analogues ou dérivés et leurs sels pharmaceutiquement acceptables est comprise entre 0,1 à 5 mg/mL. 10 [000321] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention sont réalisées par mélange de solutions de glucagon humain obtenues par reconstitution de lyophilisat et de solutions de GLP-1 RA (Glucagon like peptide-1 receptor agonist) GLP1 RA , d'analogue ou de dérivé de GLP-1 RA lesdites solutions de GLP-1 RA étant 15 commerciales ou reconstituées à partir de lyophilisat. [000322] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des tampons. [00032]] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent des tampons à des concentrations comprises entre O et 100 mM. 20 [000324] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent des tampons à des concentrations comprises entre 15 et 50 mM. [000325] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent un tampon choisi dans le groupe constitué par un tampon phosphate, le Tris (trishydroxyméthylaminométhane) ou le citrate de sodium. 25 [000]26] Dans un mode de réalisation, le tampon est le phosphate de sodium. [000327] Dans un mode de réalisation, le tampon est le Tris (trishydroxyméthylaminométhane). [000328] Dans un mode de réalisation, le tampon est le citrate de sodium. 30 [000]29] Dans un mode de réalisation, la composition comprend en outre un sel de zinc, en particulier du chlorure de zinc. [000330] Dans un mode de réalisation, la concentration en sel de zinc est comprise 35 entre 50 et 5000 pM. [000331] Dans un mode de réalisation, la concentration en sel de zinc est comprise entre 100 et 2000 pM. 3061660 48 [0003]2] Dans un mode de réalisation, la concentration en sel de zinc est comprise entre 200 et 1500 pM. [000333] Dans un mode de réalisation, la concentration en sel de zinc est comprise entre 200 et 1000 pM 5 [0003]4] Dans un mode de réalisation, la concentration en zinc est telle que le ratio molaire [zinc]/[glucagon] est compris entre 0,1 et 2,5. [000335] Dans un mode de réalisation, la concentration en zinc est telle que le ratio molaire [zinc]/[glucagon] est compris entre 0,2 et 2. [0003]6] Dans un mode de réalisation, la concentration en zinc est telle que le ratio 10 molaire [zinc]/[glucagon] est compris entre 0,5 et 1,5. [000]37] Dans un mode de réalisation, la concentration en zinc est telle que le ratio molaire [zinc]/[glucagon] est 1. [0003]8] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l]nvention 15 comprennent en outre des conservateurs. [000]39] Dans un mode de réalisation, les conservateurs sont choisis dans le groupe constitué par le m-crésol et le phénol seuls ou en mélange. [000340] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre des antioxydants. 20 [000341] Dans un mode de réalisation, les antioxydants sont choisis parmi la méthionine. [000342] Dans un mode de réalisation, la concentration des conservateurs est comprise entre 10 et 50 mM. [000]43] Dans un mode de réalisation, la concentration des conservateurs est 25 comprise entre 10 et 40 mM. [000344] Dans un mode de réalisation, les compositions selon l'invention comprennent en outre un tensioactif. [000345] Dans un mode de réalisation, le tensioactif est choisi dans le groupe constitué par le propylène glycol ou le polysorbate. 30 [000346] Les compositions selon l'invention peuvent en outre comprendre des additifs tels que des agents de tonicité. [000]47] Dans un mode de réalisation, les agents de tonicité sont choisis dans le groupe constitué par le chlorure de sodium, le mannitol, du sucrose, du sobitol et le glycérol. 35 [000348] Les compositions selon l'invention peuvent comprendre en outre tous les excipients conformes aux pharmacopées et compatibles avec le glucagon humain et les GLP-1 RA utilisés aux concentrations d'usage. [000349] 3061660 49 [000350] L'invention concerne également une formulation pharmaceutique selon l'invention, caractérisée en ce qu'elle est obtenue par séchage et/ou lyophilisation. [000351] Dans le cas des libérations locale et systémique, les modes d'administration envisagés sont par voie intraveineuse, sous-cutanée, intradermique ou intramusculaire. 5 [000]52] Les voies d'administration transdermique, orale, nasale, vaginale, oculaire, buccale, pulmonaire sont également envisagées. [000353] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris entre 6,6 et 7,8 comprenant du glucagon humain. 10 [000]54] L'invention concerne également des formulations unidoses à pH compris entre 6,6 et 7,8 comprenant du glucagon humain et une hormone gastrointestinale, telle que définie précédemment. [000355] Dans un mode de réalisation les formulations unidoses comprennent en outre un co-polyaminoacide substitué tel que défini précédemment. 15 [000356] Dans un mode de réalisation, les formulations sont sous forme d'une solution in]ectable.Dans un mode de réalisation, le GLP-1 RA, analogue ou dérivé de GLP-1 RA est choisi dans le groupe comprenant exenatide (Byetta®), liraglutide (Victoza®), lixisenatide (Lyxumia®), albiglutide (Tanzeurn®), dulaglutide (Trulicity®) ou l'un de leurs dérivés. 20 [000]57] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est l'exenatide. [000358] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le liraglutide. [000359] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le lixisenatide. [000360] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est l'albiglutide. [000361] Dans un mode de réalisation, l'hormone gastrointestinale est le dulaglutide. 25 [000362] Par ailleurs et de façon toute aussi importante, la demanderesse a pu vérifier que le glucagon humain en présence d'un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention conserve son action que ce soit seul ou en combinaison avec une hormone gastrointestinale. 30 [00036]] La préparation d'une composition selon l'invention présente l'avantage de pouvoir être réalisée par simple mélange d'une solution de glucagon humain, d'une solution de GLP-1 RA, d'un analogue ou un dérivé de GLP-1 RA, et d'un copolyaminoacide porteurs de charges carboxylates et d'au moins un radical hydrophobe selon l'invention, en solution aqueuse ou sous forme lyophilisée. Si nécessaire, le pH de 35 la préparation est ajusté à pH 7. [000364] Dans un mode de réalisation le mélange de glucagon humain et de co- polyaminoacide substitué est concentré par ultrafiltration avant le mélange avec de GLP- 3061660 1 RA, d'un analogue ou un dérivé de GLP-1 RA en solution aqueuse ou sous forme lyophilisée. [000365] Si nécessaire, la composition du mélange est ajustée en excipients tels que glycérol, m-crésol, et polysorbate (Tween®) par ajout de solutions concentrées de ces 5 excipients au sein du mélange. Si nécessaire, le pH de la préparation est ajusté à 7. Description de la Figure 1 : [000366] Les courbes de pharmacodynamie médianes de la glycémie exprimées par la différence de glucose par rapport au niveau basal sont représentées à la figure 1. 10 [000367] La courbe représentant les résultats obtenus avec la composition de l'exemple CB1e est représentée par des carrés vides et la courbe représentant les résultats de la composition de glucagen® est représentée par des ronds pleins. 15 Partie A AA Synthèse des molécules hydrophobes dans lesquelles p = 1 [000]68] Les radicaux hydrophobes sont représentés dans le tableau suivant par la molécule hydrophobe correspondante avant greffage sur le co-polyaminoacide. Structure de la molécule hydrophobe avant greffage sur le copolyaminoacide NH H26 CH3 H N AA1 3061660 51 Tableau 1A : liste et structures des molécules hydrophobes synthétisées selon l'invention. Exemple AA1 : molécule AA1 5 Molécule Al : produit obtenu par la réaction entre le chlorure de palmitoyle et la L- proline. [000369] A une solution de L-proline (10,6 g, 92,1 mmol) dans de la soude aqueuse 1 N (230 mL ; 230 mmol) est ajoutée goutte à goutte pendant 90 minutes une solution de chlorure de palmitoyle (2],0 g, 83,7 mmol) dans l'acétone (167 mL). Après 14 h 10 d'agitation à température ambiante, le mélange hétérogène est refroidi à O °C, puis filtré sur fritté pour donner un solide blanc qui est lavé avec de l'eau (2 x 100 mL) puis 3061660 52 du diisopropyléther (100 nnL). Le solide est séché sous pression réduite. Le solide est alors dissous à reflux dans 200 mL d'eau puis 8 mL d'une solution d'acide chlorhydrique à 37% sont ajoutés pour obtenir un pH = 1. Le milieu réactionnel opalescent est alors refroidi à O °C. Le précipité obtenu est filtré sur fritté puis lavé avec de l'eau (5 x 50 5 mL) jusqu'à obtenir des filtrats de pH physiologique compris entre 6,0 et 8,0 pour être ensuite séché dans une étuve à 50 °C sous vide pendant une nuit. Le produit est purifié par recristallisation dans le diisopropyléther. Un solide blanc est obtenu. Rendement : 22,7 g (77%). RMN (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,19-1,45 (24H) ; 1,58-1,74 (2H) ; 1,88-2,14 (3H) ; 10 2,15-2,54 (3H) ; 3,47 (1H) ; 3,58 (1H) ; 4,41 (0,1H) ; 4,61 (0,9H) 6,60-8,60 (1H). Molécule A2 : produit obtenu par réaction entre la molécule Al et la Bocethylènediamine. [000370] A une solution de molécule Al (75,1 g, 212,4 mmol) dans 1500 mL de 15 chloroforme sont ajoutés successivement et à température ambiante de la N,N- diisopropyléthylamine (DIPEA) (68,8 g, 532,3 mmol), du 1-hydroxybenzotriazole (HOBt) (37,1 g, 274,6 mmol) puis du N-(3-dinnethylaminopropyI)-N'-ethylcarbodiimide (EDC) (53,1 g, 277,0 mmol). Après 15 minutes d'agitation à température ambiante, une solution de Boc-ethylènediamine (Boc-éthylènediamine) (37,6 g, 234,7 mmol) dans 35 20 mL de chloroforme est additionnée. Après 18 h d'agitation à température ambiante, une solution de HCI 0,1 N (2,1 L), puis une solution saturée de NaCI (1 L) sont ajoutées. Les phases sont séparées puis la phase organique est lavée successivement avec une solution de HCI 0,1 N / NaCI saturée (2,1 L/1 L), une solution de NaCI saturée (2 L), une solution de NaHCO3 saturée (2 L), puis une solution de NaCI saturée (2 L). La phase 25 organique est séchée sur sulfate de sodium anhydre, filtrée puis concentrée sous pression réduite. Le solide obtenu est purifié par triturations dans le diisopropyléther (3 x400 mL), pour donner un solide après séchage sous vide à 40 °C. Rendement : 90,4 g (86%). RMN 1h1 (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,20-1,37 (24H) ; 1,44 (9H) ; 1,54-1,70 30 (2H) ; 1,79-1,92 (1H) ; 1,92-2,04 (1H) ; 2,03-2,17 (1H) ; 2,17-2,44 (3H) ; 3,14-3,36 (4H) ; 3,43 (1H) ; 3,56 (1H) ; 4,29 (0,1 H) ; 4,51 (0,9 H) ; 4.82 (0,1H) ; 5,02 (0,9H) ; 6,84 (0,1H) ; 7,22 (0,9H). Molécule AA1 35 [000371] A une solution de molécule A2 (20,1 g, 40,5 mmol) dans 330 mL de dichlorométhane est ajoutée goutte à goutte et à 0 °C une solution d'acide chlorhydrique 4 M dans le dioxane (100 mL, 400 mmol). Après 3h30 d'agitation à température ambiante, la solution est concentrée sous pression réduite. Le résidu est purifié par 3061660 53 chromatographie flash (méthanol, dichloronnéthane) pour donner un solide blanc de molécule AA1 sous forme de sel de chlorhydrate. Rendement : 16,3 g (93%). RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,07-1,40 (24H) ; 1,49-1,63 (2H) ; 1,77-2,18 (4H) ; 5 2,18-2,45 (2H) ; 3,14-3,32 (2H) ; 3,42-3,6] (2H) ; 3,63-3,84 (2H) ; 4,37 (0,1H) ; 4,48 (0,9H) ; 6,81-8,81 (4H). LC/MS (ESI) : 396,5 ; (calculé ([M+H]+) : 396,4). Exemple AA2 : molécule AA2 10 P,loler u1,- A3 : 15-méthylhexadécan-1-ol. [000372] Dans un tricol sous argon est introduit du magnésium (9,46 g, ]89 mmol) en copeaux. Le magnésium est recouvert de THF (40 mL) anhydre et quelques gouttes de 1-bromo-3-méthylbutane sont ajoutées à température ambiante pour initier la réaction. Après l'observation d'un exotherme et un léger trouble du milieu, le reste du 15 1-bromo-3-méthylbutane (53,87 g, 357 mmol) est ajouté au goutte à goutte en 90 min alors que la température du milieu reste stable entre 50 et 60°C. Le milieu réactionnel est ensuite chauffé à 70°C pendant 2 h. [000373] Dans un tricol sous argon, à une solution de CuCI (482 mg, 4,86 mmol) dissous dans la NMP (62 mL) à 0°C est ajoutée au goutte à goutte une solution de 12- 20 bromo-1-dodécanol (43 g, 162.1 mmol) dans le THF (60 mL). A cette solution est ensuite ajoutée au goutte à goutte la solution de l'organonnagnésien chaude fraîchement préparée de façon à maintenir la température du milieu en dessous de 20°C. Le mélange est ensuite agité à température ambiante pendant 16 h. Le milieu est refroidi à 0°C et la réaction est stoppée par addition d'une solution aqueuse d'HCI 1N jusqu'à pH 1 et le 25 milieu est extrait à l'acétate d'éthyle. Après lavage de la phase organique avec une solution saturée en NaCI et séchage sur Na2SO4, la solution est filtrée et concentrée sous vide pour donner une huile. Après purification par DCVC sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle), une huile qui cristallise à température ambiante est obtenue. 30 Rendement: 32,8 g (74%) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,87 (6H) ; 1,14 (2H) ; 1,20-1,35 (22H) ; 1,50-1,55 (3H) ; 3,64 (2H). Molécufe M acide 15-méthylhexadécanoïque. 35 [000374] A une solution de molécule A3 (20,65 g, 80,5 mmol) et bromure de tétrabutylammonium (14,02 g, 42,5 mmol) dans un mélange d'acide acétique/dichloréthane/eau (124/400/320 mL) à température ambiante est ajouté par petites portions du permanganate de potassium (38,2 g, 241,5 mmol). Après agitation 3061660 54 à reflux pendant 5 h et retour à température ambiante, le milieu est acidifié à pH 1 par ajout progressif de HCI 5N. Na2S03 (44,6 g, 354,3 mmol) est ensuite ajouté progressivement jusqu'à décoloration du milieu. La phase aqueuse est extraite au dichlorométhane et les phases organiques combinées sont séchées sur Na2SO4, filtrées 5 et concentrées sous vide. Après purification par chromatographie sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle, acide acétique), un solide blanc est obtenu. Rendement : 19,1 g (quantitatif) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,87 (6H) ; 1,14 (2H) ; 1,22-1,38 (20H) ; 1,51 (1H) ; 1,63 (2H) ; 2,35 (2H). 10 Molécule A5 : produit obtenu par réaction entre la molécule A4 et la L-proline. [000375] A une solution de molécule A4 (10 g, 37 mmol) dans le THF (]60 mL) à 0°C sont ajoutés successivement du dicyclohexyle carbodiimide (DCC) (8,01 g, 38,8 mmol) et du N-hydroxysuccinimide (NHS) (4,47 g, 38,8 mmol). Après 17 h d'agitation 15 à température ambiante, le milieu est refroidi à 0°C pendant 20 min, filtré sur fritté. De la L-proline (4 g, 37,7 mmol), de la triéthylamine (34 mL) et de l'eau (30 mL) sont ajoutées au filtrat. Après 20 h d'agitation à température ambiante, le milieu est traité avec une solution aqueuse d'HCI 1N jusqu'à pH 1. La phase aqueuse est extraite avec du dichlorométhane (2 x 125 mL). Les phases organiques combinées sont lavées avec 20 une solution aqueuse de HCI 1N (2 x 100 mL), de l'eau (100 mL), puis une solution aqueuse saturée en NaCI (100 mL). Après séchage sur Na2SO4, la phase organique est filtrée, concentrée sous vide et le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle, acide acétique) Rendement : 9,2 g (72%) 25 RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,86 (6H) ; 1,14 (2H) ; 1,22-1,38 (20H) ; 1,50 (1H) ; 1,67 (2H) ; 1,95-2,10 (3H) ; 2,34 (2H) ; 2,49 (1H) ; 3,47 (1H) ; 3,56 (1H) ; 4,61 (1H). LC/MS (ESI): 368,3 ; (calculé ([M+Hr): 368,6). Molécule A6 produit obtenu par réaction entre la molécule A5 et la Boc- 30 éthylènediamine. [000376] A une solution de molécule A5 (9,22 g, 25,08 mmol) dans un mélange THF/DMF (200/50 mL) sont ajoutés de la triéthylamine (TEA) (5,23 mL) et du 2-(1Hbenzotriazol-1-y1)-1,1,3,3-tétraméthyluroniunn tétrafluoroborate (TBTU) à température ambiante. Après 10 min d'agitation, de la Boc-éthylènediamine (4,42 g, 27,6 mmol) est 35 ajoutée. Après agitation à température ambiante pendant 17 h, le mélange est dilué avec de l'eau (300 nnL) à 0°C et agité à froid pendant 20 min. Le précipité formé est filtré sur fritté et le filtrat est extrait à l'acétate d'éthyle. Les phases organiques combinées sont lavées avec une solution saturée de NaHCO3, séchées sur Na2SO4, 3061660 Molécule AA2 10 [000377] A une solution de la molécule A6 (5,3 g, 10,40 mmol) dans le dichlorométhane (50 nnL) à 0°C est ajoutée une solution de HCI 4N dans le dioxane (13 mL). Après 5 h d'agitation à 0°C, le milieu est concentré sous vide, repris dans de l'eau et lyophilisé pour donner un solide blanc de molécule AA2 sous forme de sel de chlorhydrate. 15 Rendement : 4,6 g (99%) RMN (D20, ppm) : 0,91 (6H) ; 1,22 (2H) ; 1,22-1,50 (20H) ; 1,63 (3H) ; 1,98 (1H) ; 2,10 (2H) ; 2,26 (1H) ; 2,39 (1H) ; 2,43 (1H) ; 3,22 (2H) ; 3,45-3,60 (3H) ; 3,78 (1H) ; 4,42 (1H). LC/MS (ESI): 410,4 ; (calculé ([M-Clr): 410,7). 20 Exemple AA3 : molécule AA3 Molécule A7 : produit obtenu par la réaction entre la molécule Al et la Boc- tri(éthylèneglycol)diamine. [000]78] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule 25 A2 appliqué à la molécule Al (4,0 g, 11,3 mmol) et à la Boc-tri(éthylèneglycol)diamine 30 Molécule AA3 [000379] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AA1 appliqué à la molécule A7 (5,5 g, 9,4 mmol), un solide blanc de molécule AA3 sous 35 forme de sel de chlorhydrate est obtenu après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane). Rendement : 4,3 g (92%). hie flash (méthanol, dichlorométhane). Rendement : 4,3 g (92%). (3,1 g, 12,4 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, toluène). Rendement : 5,5 g (84%). (3,1 g, 12,4 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, toluène). Rendement : 5,5 g (84%). RMN zH (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,09-1,39 (24H) ; 1,44 (9H) ; 1,64 (2H) ; 1,79-2,01 RMN zH (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,09-1,39 (24H) ; 1,44 (9H) ; 1,64 (2H) ; 1,79-2,01 (2H) ; 2,06-2,43 (4H) ; 3,23-3,68 (14H) ; 4,33 (0,2H) ; 4,56 (0,8H) ; 5,25 (1H) ; 6,49 (2H) ; 2,06-2,43 (4H) ; 3,23-3,68 (14H) ; 4,33 (0,2H) ; 4,56 (0,8H) ; 5,25 (1H) ; 6,49 (0,2H) ; 7,13-7,50 (0,8H). (0,2H) ; 7,13-7,50 (0,8H). 3061660 56 RMN (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (3H) ; 1,08-1,40 (24H) ; 1,40-1,52 (2H) ; 1,71-2,02 (4H) ; 2,02-2,31 (2H) ; 2,90-2,98 (2H) ; 3,15-3,47 (5H) ; 3,50-3,66 (7H) ; 4,24 (0,6H) ; 4,32 (0,4H) ; 7,83 (0,6H) ; 7,95 (3H) ; 8,17 (0,4H). LC/MS (ESI) : 484,6 ; (calculé ([M+Hr ) : 484,4). 5 Exemple AA4 : molécule AA4 Molécule A8: produit obtenu par la réaction entre la molécule Al et la Boc-1-amino4,7,10-trioxa-13-tridécane amine. [000380] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule 10 A2 appliqué à la molécule Al (4,5 g, 12,7 mmol) et à la Boc-1-amino-4,7,10-trioxa-13- tridécane amine (4,5 g, 14,0 mmol), une huile jaune est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane). Rendement : 7,7 g (92%). RMN zH (CDCI3, ppm) : 0,88 (]H) ; 1,22-1,37 (24H) ; 1,44 (9H) ; 1,59-1,67 (2H) ; 15 1,67-2,00 (6H) ; 2,06-2,45 (4H) ; 3,18-3,76 (18H) ; 4,28 (0,2H) ; 4,52 (0,8H) ; 4,69- 5,04 (1H) ; 6,77 (0,2H) ; 7,20 (0,8H). Molécule AA4 [000381] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule 20 AA1 appliqué à la molécule A8 (7,7 g, 11,8 mmol), une huile jaune est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane). Une coévaporation avec du diisopropyléther permet d'obtenir la molécule AA4 sous forme de sel de chlorhydrate sous forme d'un solide blanc qui est séché sous vide à 50 °C. Rendement: 5,4 g (76%). 25 RMN zH (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,08-1,40 (24H) ; 1,49-1,65 (2H) ; 1,76-2,39 (10H) ; 3,07-3,28 (3H) ; 3,34-3,80 (15H) ; 4,34 (0,05H) ; 4,64 (0,95H) ; 7,35 (0,05H) ; 7,66-8,58 (3,95H). LC/MS (ESI) : 556,7 ; (calculé ([M+Hr) : 556,5). 30 Exemple AA5 : molécule AA5 [000]82] Mole.' 89 : produit obtenu par réaction entre la molécule Al et l'ester méthylique de la N-Boc-L-lysine. [000383] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A2 appliqué à la molécule Al (4 g, 11,3 mmol) et à l'ester méthylique de la N-Boc-L- 35 lysine (3,2 g, 12,4 mnnol), une huile incolore est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane). Rendement : 4,9 g (73%). 3061660 57 RMN 1H(CDC]3, ppm) : 0,88 (3H) ; 0,99-1,54 (37H) ; 1,54-1,75 (3H) ; 1,75-2,04 (3H) ; 2,04-2,41 (4H) ; 2,94-3,19 (2H) ; 3,19-3,81 (5H) ; 4,28-4,64 (2H) ; 4,94 (1H) ; 6,45 (0.,1H) ; 7,36 (0,9H). LC/MS (ESI) : 596,7 ; (calculé ([M+Hr) : 596,5). 5 Molécule A10 : produit obtenu par traitement de la molécule A9 avec de l'ammoniaque. [000384] A une suspension de molécule A9 (4,9 g, 8,2 mmol) dans 10 mL de méthanol sont ajoutés 320 nnL d'une solution d'ammoniaque 7 N dans le méthanol. Après 19 h d'agitation à température ambiante en atmosphère fermée, 100 mL 10 supplémentaires de solution d'ammoniaque sont ajoutés. Après 24 h d'agitation à température ambiante en atmosphère fermée, le milieu réactionnel est concentré sous pression réduite. Le résidu est purifié par trituration dans le diisopropyléther à reflux (100 mL), pour donner un solide blanc qui est séché sous vide à 50 °C. Rendement : 4,1 g (85%). 15 RMN1H(CDC13, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,06-1,57 (37H) ; 1,57-1,79 (]H) ; 1,88-2,41 (7H) ; 3,09 (2H) ; 3,49 (1H) ; 3,62 (1H) ; 4,34 (1H) ; 4,51 (1H) ; 4,69-4,81 (1H) ; 5,43 (0,95H) ; 5,57 (0,05H) ; 6,25 (0,05H) ; 6,52 (0,95H) ; 6,83 (0,05H) ; 7,11 (0,95H). Molécule AA5 20 [000]85] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AA1 appliqué à la molécule A10 (388 mg, 0,67 mmol), un solide blanc de molécule AA5 sous forme de sel de chlorhydrate est obtenu après purification par trituration dans le diisopropyléther. Rendement : 292 mg (85%). 25 RMN zH (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (3H) ; 1,06-2,34 (38H) ; 2,61-2,81 (2H) ; 3,29-3,68 (2H) ; 4,05-4,17 (1,7H) ; 4,42 (0,3H) ; 7,00 (1H) ; 7,16 (0,7H) ; 7,4] (0,3H) ; 7,73- 8,04(3,7H) ; 8,16 (0,3H). LC/MS (ESI): 481,6 ; (calculé ([M+Hr) : 481,4). 30 Exemple AA6 : molécule AA6 Molécule A 1 : produit obtenu par la réaction entre le chlorure de stéaroyle et la Lproline. [000386] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule Al appliqué à la L-proline (5,0 g, 43,4 mmol) et au chlorure de stéaroyle (12,0 g, 39,6 35 mmol), un solide blanc est obtenu après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane). Rendement : 5,37 g (36%) 3061660 58 RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,26-1,37 (28H) ; 1,64-1,70 (2H) ; 1,88-2,10 (3H) ; 2,36 (2H) ; 2,54-2,58 (1H) ; 3,46 (1H) ; 3,56 (1H) ; 4,62 (1H). LC/MS (ESI) : 382,6 ; (calculé ([M+Hr) : 382,]). Molécule Al2 : produit obtenu par réaction entre la molécule A11 et la Boc- 5 tri(éthylèneglycol)diamine. [000387] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A6 appliqué à la molécule A11 (33,81 g, 88,6 mmol) et à la Boctri(éthylèneglycol)diamine (26,4 g, 106,3 mmol) dans le THF en utilisant la DIPEA au lieu de la TEA, un solide blanc est obtenu après purification par chromatographie flash 10 (acétate d'éthyle, méthanol). Rendement : 43,3 g (80%) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,87 (3H) ; 1,24 (30H) ; 1,43 (9H) ; 1,61 (2H) ; 1,82 (1H) ; 1,96 (1H) ; 2,25-2,45 (2H) ; 3,25-3,65 (14H) ; 4,30 (0,15H) ; 4,53 (0,85H) ; 5,25 (1H) ; 6,43 (0,15H) ; 7,25 (0,85H). 15 LC/MS (ESI): 612,6 ; (calculé ([M+Hr): 612,9). Molécule AA6 [000388] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AA2 appliqué à la molécule Al2 (43 g, 70,] mmol), le résidu obtenu après concentration 20 sous vide est trituré dans l'acétonitrile. La suspension est filtrée et le solide lavé avec de l'acétonitrile puis de l'acétone. Après séchage sous vide, un solide blanc de molécule AA6 sous forme de sel de chlorhydrate est obtenu. Rendement : ]1,2 g (81%) RMN 1H (DMSO-do, ppm) : 0,85 (3H) ; 1,23 (28H) ; 1,45 (2H) ; 1,70-2,05 (4H) ; 2,13 25 (1H) ; 2,24 (1H) ; 2,95 (2H) ; 3,10-3,25 (2H) ; ],30-3,65 (10H) ; 4,20-4,45 (1H) ; 7,85-8,25 (4H). LC/MS (ESI): 512,4 ; (calculé UM-Cl]±): 512,8). Exemple AA7 : molécule AA7 30 Mole( A13 : produit obtenu par réaction entre l'acide arachidique et la L-proline. [000389] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A5 appliqué à l'acide arachidique (15,51 g, 49,6] mmol) et à la L-proline (6 g, 52,11 mmol) en utilisant la DIPEA à la place de la TEA, un solide blanc est obtenu après purification par colonne chromatographique sur gel de silice (cyclohexane, acétate 35 d'éthyle, acide acétique). Rendement : 12,9 g (63%) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,28 (34H) ; 1,66 (2H) ; 1,95-2,15 (2H) ; 2,34 (2H) 3061660 59 LC/MS (ESI): 410,4 ; (calculé ([M+H]±): 410,6). Holecul A14 : produit obtenu par la réaction entre la molécule A13 et la Boc-1-amino4,7,10-trioxa-13-tridéca ne. [000390] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule 5 Al2 appliqué à la molécule A1] (10,96 g, 26,75 mmol) et à la Boc-1-amino-4,7,10- trioxa-13-tridécane (10,29 g, 32,11 mmol), un solide est obtenu après purification par colonne chromatographique sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle, méthanol). Rendement : 14,2 g (75%) RMN zH (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,24 (32H) ; 1,43 (9H) ; 1,61 (2H) ; 1,80 (1H) ; 10 1,96 (1H) ; 2,10-2,45 (4H) ; 3,20-3,75 (18H) ; 4,30 (0,20H) ; 4,55 (0,80H) ; 5,03 (1H) ; 6,75 (0,20H) ; 7,20 (0,80H). LC/MS (ESI): 712,8 ; (calculé ([M+Hr): 71],1). Molécule AA7 15 [000]91] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AA2 appliqué à la molécule A14 (14,25 g, 20,01 mmol), le résidu obtenu après concentration sous vide du milieu réactionnel est dissous dans le méthanol et évaporé sous pression réduite, l'opération étant répétée 4 fois pour donner un solide blanc de molécule AA7 sous forme de sel de chlorhydrate. 20 Rendement : 12,7 g (98%) RMN 1+1 (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (3H) ; 1,23 (32H) ; 1,45 (2H) ; 1,64 (2H) ; 1,70-2,05 (6H) ; 2,10-2,30 (2H) ; 2,82 (2H) ; 3,08 (2H) ; 3,30-3,60 (15H) ; 4,15-4,30 (1H) ; 7,73-8,13 (4H). LC/MS (ESI): 612,7 ; (calculé ([M-Cl]÷): 612,9). 25 Exemple AA8 : molécule AA8 Molécule A15_: produit obtenu par la réaction entre la L-leucine et le chlorure de palmitoyle. [000392] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule 30 Al appliqué à de la L-leucine (15,0 g, 114,4 mmol) et au chlorure de palmitoyle (34,5 g, 125 mmol), un solide blanc est obtenu par trituration dans le diisopropyléther. Rendement: 13,0 g (31%) RMN 1-1(CDC13, ppm) : 0,88 (3H) ; 0,96 (6H) ; 1,16-1,35 (24H) ; 1,55-1,77 (5H) ; 2,23 (2H) ; 4,55-4,60 (1H) ; 5,88 (1H). 35 3061660 Molécule Al G : produit obtenu par la réaction entre la molécule A15 et l'ester méthylique de la L-proline [00039]] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A2 appliqué à la molécule A15 (6,00 g, 16,2 mmol) et à l'ester méthylique de la L- 5 proline (3,23 g, 19,5 mmol), une huile légèrement jaune est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane). Rendement : 5,8 g (74%) RMN (CDCI3, ppm) : 0,83-1,00 (9H) ; 1,18-1,32 (24H) ; 1,40-1,73 (5H) ; 1,84-2,33 (6H) ; 3,47-3,89 (2H) ; 3,70 (1,14H) ; 3,71 (1,21H) ; 3,74 (0,53H) ; 3,76 (0,12H) ; 10 4,40-4,56 (1H) ; 4,63-4,67 (0,04H) ; 4,84 (0,38) ; 4,90 (0,40) ; 5,06 (0,18) ; 5,99 (0,18H) ; 6,08-6,21 (0,82). LC/MS (ESI) : 481,6 ; (calculé ([M+Hr) : 481,4). Molécule A17 : produit obtenu par la saponification de l'ester méthylique de la molécule 15 A16. [000394] A une solution de molécule A16 (5,8 g, 12,06 mmol) dans 30 mL de méthanol est ajoutée de la soude 1 N (13,5 mL, 13,5 mmol). Après 20 h d'agitation à température ambiante, la solution est diluée avec de l'eau puis acidifiée par 20 mL d'acide chlorhydrique 1 N à O °C. Le précipité est filtré puis rincé avec de l'eau (50 mL) 20 avant d'être solubilisé dans 50 mL de dichlorométhane. La phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée puis concentrée sous pression réduite pour donner une huile incolore. [000395] Rendement : 4,5 g (80%) RMN 1+1 (CDCI3, ppm) : 0,85-0,99 (9H) ; 1,14-1,41 (24H) ; 1,43-1,72 (5H) ; 1,87-2,47 (7H) ; 3,48-3,55 (0,6H) ; 3,56-3,62 (0,4H) ; 3,83-3,90 (0,4H) ; 3,90-3,96 (0,6H) ; 25 4,52-4,56 (0,6H) ; 4,56-4,59 (0,4H) ; 4,80-4,86 (0,4H) ; 4,86-4,91 (0,6H) ; 6,05 (0,4H) ; 6,11 (0,6H). LC/MS (ESI) : 467,6 ; (calculé ([M+Hr) : 467,4). Molécule A18 : produit obtenu par la réaction entre la Boc-éthylènediamine et la 30 molécule A17. [000396] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A2 appliqué à la molécule A17 (4,5 g, 9,64 mmol) et à la Boc-éthylènediamine (1,70 g, 10,61 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par chromatographie flash (méthanol, dichlorométhane). 35 Rendement : 2,0 g (34%) RMN (CDCI3, ppm) : 0,83-0.99 (9H) ; 1,19-1,32 (24H) ; 1,44 (9H) ; 1,48-2,37 (14H) ; 3,09-3,99 (4H) ; 4,28-5,01 (2H) ; 5,64-6,04 (1H) ; 6,87-7,06 (1H). LC/MS (ESI) : 609,7 ; (calculé ([M+Hr) : 609,5). 3061660 61 Molécule AA8 [000397] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AA1 appliqué à la molécule A18 (2 g, 3,28 mmol), un solide de molécule AA8 sous forme de sel de chlorhydrate est obtenu après purification par chromatographie flash 5 (méthanol, dichlorométhane). Rendement : 1,5 g (90%) 1,37-1,77 (5H) ; 1,93-2,41 10 Exemple AA9 : molécule AA9 Molécule A19 : produit obtenu par la réaction entre l'acide laurique et la L-phénylalanine. [000]98] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A5 appliqué à l'acide laurique (8,10 g, 40,45 mmol) et à la L-phénylalanine (7 g, 42,38 15 mmol), un solide blanc est obtenu. Rendement : 12,7 g (98%) RMN 1H (DMSO-da, ppm) : 0,86 (3H) ; 1,10-1,30 (16H) ; 1,36 (2H) ; 2,02 (2H) ; 2,82 (1H) ; 3,05 (1H) ; 4,42 (1H) ; 7,15-7,]0 (5H) ; 8,05 (1H) ; 12,61 (1H). LC/MS (ESI): 348,2 ; (calculé ([M+H]±): 348,5). 20 Molécule A20 : produit obtenu par la réaction entre la molécule A19 et le sel chlorhydrate de l'ester méthylique de la L-proline. [000399] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule A6 appliqué à la molécule A19 (9,98 g, 28,72 mmol) et au sel chlorhydrate de l'ester 25 méthylique de la L-proline (5,23 g, 31,59 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par colonne chromatographique sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle). Rendement : 5,75 g (44%) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,10-1,30 (16H) ; 1,50-1,75 (3H) ; 1,80-2,02 (3H) ; 30 2,17 (2H) ; 2,65 (0,5H) ; 2,95 (1H) ; 3,05-3,20 (1,5H) ; 3,50-3,65 (1H) ; 3,75 (3H) ; 4,29 (0,5H) ; 4,46 (0,5H) ; 4,70 (0,1H) ; 4,95 (0,9H) ; 6,20-6,30 (1H) ; 7,15-7,30 (5H) LC/MS (ESI): 459,2 ; (calculé ([M+Hr): 459,6). 35 Molécule A21 : produit obtenu par saponification de la molécule A20. [000400] A une solution de molécule A20 (5,75 g, 12,54 mmol) dans un mélange THF/rnéthanol/eau (40/40/40 mL) à 0°C est ajoutée de l'hydroxyde de lithium (Li0H) (600,49 mg, 25,07 mmol) puis le mélange est agité à température ambiante pendant RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,83-1,00 (9H) ; 1,18-1,32 (24H) ; (6H) ; 3,07-3,97 (6H) ; 4,44-4,77 (2H) ; 7,66-8,21 (2H). 3061660 62 20 h. Après évaporation des solvants organiques sous vide, la phase aqueuse est diluée dans l'eau, acidifiée avec une solution aqueuse de HCI 1N jusqu'à pH 1. Le produit est alors extrait à l'acétate d'éthyle. Les phases organiques combinées sont lavées avec une solution aqueuse saturée de NaCI, séchées sur Na2SO4, filtrées et concentrées sous 5 pression réduite pour donner une huile incolore. Rendement : 5,7 g (quantitatif) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,10-1,30 (16H) ; 1,50-1,80 (3H) ; 1,67-2,02 (2H) ; 2,20 (2H) ; 2,25 (0,4H) ; 2,60 (0,6H) ; 2,85-3,10 (2,6H) ; 3,55-3,65 (1,4H) ; ; 4,35 (0,6H) ; 4,55 (0,4H) ; 4,94 (1H) ; 6,28 (0,4H) ; 6,38 (0,6H) ; 7,20-7,30 (5H). 10 LC/MS (ESI): 445,2 ; (calculé ([M+H]±): 445,6). Malécure A22 : produit obtenu par réaction entre la Boc-éthylènediamine et la molécule A21. [000401] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule 15 A6 appliqué à la molécule A21 (5,67 g, 12,75 mmol) et à la Boc-éthylènediannine (2,25 g, 14,03 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par colonne chromatographique sur gel de silice (dichlorométhane, méthanol). Rendement : 5,7 g (76%) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,25 (16H) ; 1,43 (9H) ; 1,58 (2,6H) ; 1,75-1,95 20 LC/MS (ESI): 587,4 ; (calculé ([M+Hr): 587,8). 25 Molécule AA9 [000402] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule AA2 appliqué à la molécule A22 (5,66 g, 9,65 mmol), le résidu obtenu après concentration sous vide du milieu réactionnel est dissous dans le méthanol et évaporé sous pression réduite, l'opération étant répétée 4 fois pour donner une mousse blanche 30 de molécule AA9 sous forme de sel de chlorhydrate. Rendement : 4,9 g (97%) RMN zH (DMSO-d6, 120°C, ppm) : 0,89 (3H) ; 1,26 (16H) ; 1,43 (2H) ; 1,68 (0,6H) ; 1,75-2,00 (3H) ; 2,05-2,25 (2,4H) ; 2,82-3,05 (5H) ; 3,38 (2H) ; 3,50-3,70 (1,4H) ; 4,25 (0,6H) ; 4,63 (0,4H) ; 4,77 (0,6H) ; 7,25-7,50 (5H) ;7,55-8,20 (4H). 35 LC/MS (ESI): 487,4 ; (calculé KM-Clr): 487,7). (1,4H) ; 2,15-2,30 (3H) ; 2,64 (0,5H) ; 2,95-3,10 (2,5H) ; 3,20-3,40 (4H) ; 3,45 (0,5H) ; 3,55 (0,2H) ; 3,66 (1H) ; 4,44 (1H) ; 4,50 (0,2H) ; 4,60 (0,6H) ; 4,99 (0,7H) ; 5,54 (0,5H) ; 5,95 (0,2H) ; 6,17 (1H) ; 6,60 (0,5H) ; 7,07 (0,5H) ; 7,20-7,40 (5H). C15H31 Hy = Ri = H ou syroglutamate la 3061660 63 AB : Synthèse c7 es co-polyaminoacides Co-polyaminoacides statistiques de formule VII ou VIIa no co-polyaminoacides porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes AB1 H Hy = 0,05, DP (m + n) = 23 AB2 N H Hy = 0,05, DP (m + n) = 35 N Hy = RI = H ou pyroglutamate 3061660 Hy = 0,052, DP (m + n) = 35 N i NF-I N Hy = Ri = H ou pyroglutamate 0 AB4 ONa 64 Hy i= 0,10, DP (m + n) = 35 N Hy = Ri = H ou pyroglutamate I R1 N N H H -- n H H26 CH3 3061660 Hy i = 0,025, DP (m + n) = 20 Hy = *7 HN Hy = 0,05, DP (m + n) = 23 Hy = R1 = H ou pyroglutamate AB6 3061660 66 n m N H N H AB7 0 a Hy i = 0,03, OP (m + n) = 21 Hy = NH C 9H39 Ri=CH3-00- Hou ONa N H ro luta mate NH2 n AB8 Hy i = 0,03, OP (mn + n) = 24 Hy = NH C191-139 = H ou pyroglutamate 3061660 Hy ONa 67 o Hy = 0,12, DP (m + n)= 30 * Hy = R= H ou yroglutamate O ONa H H n i = 0,08, DP (m + n) = 25 Hy = Ri = CH3-CO- ou H ou yroglutamate Cl 5F-131 3061660 68 = 0,05, DP (m + n) = 23 0 H *- NH Hy = Ri - H ou pyroglutamate 0 ONa 0,,,, N...., C F-I3i H Hy i = 0,04, DP (m + n) = 26 3061660 69 AB13 Hy = Ri = H ou pyroglutamate CL ONa Hy = Ri = H ou yroglutamate N H N Hy o 3061660 Co-polyaminoacides définis de formule VII ou VIIb : N H n Hy i= 0,056, DP (m + n) = 22 Hy = fc' NH _0 Ri = H ou pyroglutamate Tableau lb C 91-139 C151-131 co-polyaminoacides porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes n° exemple N H 0 i= 0,04, DP (m) = 25 Ri = H ou pyroglutamate 3061660 AB15 C17H35 H AB17 AB18 i = 0,045, DP (m) = 22 Ri = H ou pyroglutamate ONi AB19 Cl7F-135 o i = 0,033, DP (m) = 30 Ri = H ou pyroglutamate i = 0,021, DP (nn) = 48 Ri = H ou pyroglutamate i = 0,038, DP (m) = 26 Ri = H ou pyroglutamate 71 3061660 72 Partie AB : synthèse des co-polyaminoacides 5 Exemple AB1 : Co-polyaminoacide AB1 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA1 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2900 g/mol Co-polyaminoacide AB1-1 : acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) relative 3861 g/mol issu de la polymérisation du y-benzyl-L-glutamate N- 10 carboxyanhydride initiée par l'hexylamine [000403] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve est placé sous vide du y- benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (89,9 g, 341 mmol) pendant 30 min, puis du DMF anhydre (200 mL) est introduit. Le mélange est alors agité sous argon jusqu'à complète dissolution, refroidi à 4 °C, puis de l'hexylamine (2,05 mL 15,5 mmol) est 15 introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 2 jours. Le milieu réactionnel est ensuite chauffé à 65 °C pendant 2 h, refroidi à température ambiante puis coulé goutte à goutte dans du diisopropyléther (3 L) sous agitation. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec du diisopropyléther (2 x 200 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly(gamma-benzyl-L- 20 glutamique) (PBLG). [000404] A une solution de PBLG (74,8 g) dans l'acide trifluoroacétique (TFA, 340 mL) à 4 °C est ajoutée goutte à goutte une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33% dans l'acide acétique (240 mL, 1,37 mol). Le mélange est agité à température ambiante pendant 2 h, puis coulé goutte à goutte sur un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther 25 et d'eau sous agitation (4 L). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (340 mL) puis avec de l'eau (340 mL). [000405] Le solide obtenu est alors solubilisé dans de l'eau (1,5 L) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude i = 0,015, DP (m) = 65 = H ou pyroglutamate AB20 i = 0,017, DP (m) = 60 R1=CH3-00-, H ou pyroglutamate Tableau lc : liste des co-polyammoacides synthétisés selon l'invention. 3061660 73 1 N. Après solubilisation, la concentration théorique est ajustée à 20 g/L théorique par addition d'eau pour obtenir un volume final de 2,1 L. [000406] La solution est filtrée sur filtre 0,45 pm puis purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du 5 perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée jusqu'à obtenir un volume final de 1,8 L. [000407] La solution aqueuse est alors acidifiée par ajout de solution d'acide chlorhydrique 37% jusqu'à atteindre un pH de 2. Après 4 h d'agitation, le précipité obtenu est filtré, lavé avec de l'eau (2 x 340 mL) puis séché sous vide à 30°C pour 10 donner un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 3861 g/mol par rapport à un standard de polyoxyéthylène (PEG). Co-polyaminoacide AB1 [000408] Le co-polyaminoacide AB1-1 (10,0 g) est solubilisé dans le DMF (700 mL) 15 à 30°C-40°C puis refroidi à O °C. La molécule AA1 sous forme de sel de chlorhydrate (1,64 g, 3,8 mmol) est mise en suspension dans du DMF (23 mL) et de la triéthylamine (0,39 g, 3,8 mmol) est ensuite ajoutée et le mélange est légèrement chauffé sous agitation jusqu'à complète dissolution. A la solution de co-polyaminoacide à 0 °C, de la N-méthylmorpholine (NMM, 7.6 g, 75 mnnol) dans le DMF (14 mL) et du chloroformate 20 d'éthyle (ECF, 8,2 g, 75 mmol) sont ajoutés. Après 10 min à 0°C, la solution contenant la molécule AA1 est ajoutée et le milieu maintenu à 30°C durant 2 h. Le milieu réactionnel est coulé goutte-à-goutte sur 5,5 L d'eau contenant du chlorure de sodium à 15% massique et du HCI (pH 2), puis laissé reposer une nuit. Le précipité est collecté par filtration et séché sous vide pendant environ 30 min. Le solide blanc obtenu est 25 repris dans de l'eau (500 mL) et le pH est ajusté à 7 par ajout lent d'une solution aqueuse de NaOH 1N. Après filtration sur filtre 0,45 pnn, la solution limpide obtenue est purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9% puis de l'eau, jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. Après déchargement, la solution est filtrée sur filtre 0,2 pm et stockée à 2-8°C. 30 Extrait sec : 24,9 mg/g Un degré de polymérisation moyen (DP) de 23 est estimé par RMN 11-I dans D20 en comparant l'intégration des signaux provenant de l'hydrophobe greffé à celle des signaux provenant de la chaine principale. D'après la RMN 1+1 : i = 0,05 35 La masse molaire moyenne calculée du co-polyanninoacide AB1 est calculée sur la base des masses molaires des radicaux R1 et R2, des résidus aspartate et/ou glutamate (y compris une liaison amide), du radical hydrophobe, du DS et du DP. La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB1 est de 3945 g/mol. 3061660 74 HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2900 g/mol. Exemple AB2 : Co-polyaminoacide AB2 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA1 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 5 3700 g/mol [000409] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacideAB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA1 (1,64 g, ],8 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de Mn relative 5200 g/mol (10,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacideAB1-1, un 10 poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA1 est obtenu. Extrait sec : 14,1 mg/g DP (estimé d'après la RMN 1H) : 35 D'après la RMN 1+1 : i = 0,05 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB2 est de 5972 g/mol. 15 HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3700 g/mol. Exemple AB3 : Co-polyaminoacide AB3 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA1 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4900 g/mol 20 [000410] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide AB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA1 (3,30 g, 7,6 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse moyenne en nombre (Mn) relative 5200 g/mol (10,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule 25 AA1 est obtenu. Extrait sec : 23,4 mg/g DP (estimé d'après la RMN 1-I) : 35 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB3 est de 6594 g/mol. D'après la RMN zH : i = 0,10 30 HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4900 g/mol. Exemple AB4 : Co-polyaminoacide AB4 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 1800 g/mol 35 [000411] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide AB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA2 (1,09 g, 2,4 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse moyenne Mn = 5600 g/mol (6,3 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide 3061660 AB1-1 mais avec une étape de déprotection des esters benzyliques utilisant l'iodure de triméthylsilane selon le protocole décrit dans la publication J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 26-34 (Subramanian G., et al.), un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA2 est obtenu. 5 Extrait sec : 21,5 ring/g DP (estimé d'après la RMN zHl : 35 D'après la RMN zH : i = 0,052 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB4 est de 6022 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 1800 g/mol. 10 Exemple AB5 : Co-polyaminoacide AB5 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA6 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2600 g/mol [000412] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 15 polyaminoacide AB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA6 (2,06 g, 3,8 mmol) et à un acide poly-L-glutamique (9,8 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA6 est obtenu. Extrait sec : 20,9 mg/g 20 DP (estimé d'après la RMN 1-I) : 23 D'après la RMN zH : i = 0,05 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB5 est de 4079 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2600 g/mol. 25 Exemple AB6 : Co-polyaminoacide AB6 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4000 g/mol [00041]] Un acide poly-L-glutamique de masse moyenne Mn = 3500 g/mol et de 30 degré de polymérisation 22 (10,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1 est solubilisé dans le DMF (420 mL) à 30°C-40°C puis maintenu à cette température. En parallèle, le sel de chlorhydrate de la molécule AA7 (1,47 g, 2,3 mmol) est mis en suspension dans du DMF (12 mL) et de la triéthylamine (0,23 g, 2,3 nnmol) est ajoutée, puis le mélange est légèrement chauffé 35 sous agitation jusqu'à complète dissolution. A la solution de co-polyaminoacide dans le DMF, de la NMM (7,6 g, 75 mmol), la solution de AA7 puis de la N-oxyde de 2- hydroxypyridine (HOPO, 0,84 g, 7,5 mmol) sont ajoutées successivement. Le milieu réactionnel est alors refroidi à 0°C, puis du EDC (1,44 g, 7,5 mmol) est ajouté et le 3061660 76 milieu est remonté à température ambiante durant 2 h. Le milieu réactionnel est filtré sur filtre tissé 0,2 mm et coulé au goutte-à-goutte sur 3,5 L d'eau contenant du NaCI à 15% massique et du HCI (pH 2) sous agitation. A la fin de l'ajout, le pH est réajusté à 2 avec une solution de HCI 37%, et la suspension est laissée reposer une nuit. Le 5 précipité est collecté par filtration, puis rincé par 100 mL d'eau. Le solide blanc obtenu est solubilisé dans 500 mL d'eau par ajout lent d'une solution aqueuse de NaOH 1 N jusqu'à pH 7 sous agitation, puis la solution est filtrée sur filtre 0,45 pm. La solution limpide obtenue est purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9% puis de l'eau, jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La 10 solution est filtrée sur filtre 0,2 pm et stockée à 2-8 °C. Extrait sec : 21,6 mg/g OP (estimé d'après la RMN 1H) : 20 D'après la RMN 1H : i = 0,025 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB6 est de 3369 g/mol. 15 HPLC-SEC aqueuse (calibrant PE(3) : Mn = 4000 g/mol. Exemple AB7 : Co-polyaminoacide AB7 - poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule AA7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3300 gimol 20 [000414] 00-polyaiiHrloacide AB7-1 : acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) relative 3600 g/mol et de OP 21 issu de la polymérisation du y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride initiée par l'hexylamine et cappé à l'une de ses extrémités par un groupement acétyle [000415] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve est placé sous vide du y- 25 benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (Glu(OBn)-NCA, 100,0 g, 380 mmol) pendant 30 minutes puis du DMF anhydre (225 mL) est introduit. Le mélange est alors agité sous argon jusqu'à complète dissolution, refroidi à 4°C, puis de l'hexylamine (1,78 g, 17 mmol) est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4°C et température ambiante pendant 2 jours puis précipité dans du diisopropyléther (3,4 L). Le précipité 30 est récupéré par filtration, lavé deux fois avec du diisopropyléther (225 mL) puis séché pour donner un solide blanc qui est dissous dans 450 mL de THF. A cette solution sont ajoutés successivement de la DIPEA, (31 mL, 176 mmol) puis de l'anhydride acétique (17 mL, 176 mmol). Après une nuit d'agitation à température ambiante, la solution est versée lentement dans du diisopropyléther (3 L) sous agitation. Après 1 h d'agitation, 35 le précipité est filtré, lavé deux fois avec du diisopropyléther (250 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly(gamma-benzyl-L-glutamique) cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle. 3061660 77 [000416] A une solution du co-polyaminoacide ci-dessus (72 g) dans l'acide trifluoroacétique (TFA, 335 mL) à 4°C est ajoutée goutte à goutte une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33% dans l'acide acétique (235 mL). Le mélange est agité à température ambiante pendant 3 h 30, puis coulé goutte à goutte sur un mélange 1:1 5 (v/v) de diisopropyléther et d'eau sous agitation (4 L). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (340 mL) puis avec de l'eau (340 mL). [000417] Le solide obtenu est alors solubilisé dans de l'eau (1,5 L) en ajustant le pH 10 à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10N puis une solution aqueuse de soude 1N. Après solubilisation, la solution est diluée par addition d'eau pour obtenir un volume final de 2,1 L. La solution est filtrée sur filtre 0,45 pm puis purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCl 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite 15 concentrée jusqu'à obtenir un volume final de 1,8 L. [000418] La solution aqueuse est alors acidifiée par ajout de solution d'acide chlorhydrique 37% jusqu'à atteindre un pH de 2. Après 4 h d'agitation, le précipité obtenu est filtré, lavé avec de l'eau (330 mL) puis séché sous vide à 30°C pour donner un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 3600 g/mol 20 par rapport à un standard de polyoxyéthylène (PEG), et de degré moyen de polymérisation 21. [000419] Co-polyaminoacide AB7 : Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB6 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA7 (1,43 g, 2,2 mmol) et au co-polyaminoacide AB7-1 (10,0 g), un acide poly-L- 25 glutamate de sodium modifié par la molécule AA7 est obtenu. Extrait sec : 24,3 mg/g OP (estimé d'après la RMN 1+1) : 21 D'après la RMN 1-H : i = 0,03 30 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB7 est de 3677 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3300 g/mol. Exemple ABB : Co-polyaminoacide AB8 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 35 3600 g/mol [000420] Co-polyaminoacide AB8-1 : acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 3800 g/ mol et de degré de polymérisation 24 issu de la polymérisation du y-méthyl-L-glutamate N-carboxyanhydride initiée par l'ammoniac 3061660 78 [000421] Par un procédé similaire à celui décrit dans la demande de brevet FR-A-2 801 226 appliqué au y-méthyl-L-acide glutamique N-carboxyanhydride (25,0 g, 133,6 mmol) et à une solution d'ammoniaque 0,5N dans le dioxanne (12,1 mL, 6,05 mmol), un acide poly-L-glutamique est obtenu. 5 Co-polyaminoacide AB8 : [000422] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide AB6 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA7 (2,1 g, 3,24 mmol) et au co-polyaminoacide AB8-1 (14,3 g), un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA7 est obtenu. 10 Extrait sec : 25,2 mg/g DP (estimé d'après la RMN : 24 D'après la RMN : i = 0,03 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB8 est de 4099 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3600 g/mol. 15 Exemple AB9 : Co-polyaminoacideAB9 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3200 g/mol [000423] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 20 polyaminoacideAB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA3 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA3 est obtenu. Extrait sec : 14,7 mg/g 25 DP (estimé d'après la RMN 1H) : 30 D'après la RMN zH : i = 0,12 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB9 est de 6192 g/rnol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3200 g/mol. 30 Exemple AB10 : Co-polyaminoacideAB10 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA4 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2600 g/mol [000424] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide AB7 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA4 et à unacide 35 poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA4 est obtenu. Extrait sec : 18,3 mg/g 3061660 79 DP (estimé d'après la RMN 1H) : 25 D'après la RMN 1H : i = 0,08 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB10 est de 4870 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2600 g/mol. 5 Exemple AB11 : Co-polyaminoacide AB11 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA5 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2700 g/mol [000425] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 10 polyaminoacide AB6 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA5 et à un acide poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA5 est obtenu. Extrait sec : 20,2 mg/g 15 DP (estimé d'après la RMN 1H) : 23 D'après la RMN 1H : i = 0,05 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB11 est de 4072 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2700 g/mol. 20 Exemple AB12 : Co-polyaminoacide AB12 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA8 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3000 g/mol [000426] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide AB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA8 et à un acide 25 poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA8 est obtenu. Extrait sec : 19,5 mg/g DP (estimé d'après la RMN 1H) : 26 30 D'après la RMN 1H : i = 0,04 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB12 est de 4477 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3000 g/mol. Exemple AB13 : Co-polyaminoacide AB13 - poly-L-glutamate de sodium 35 modifié par la molécule AA9 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3300 g/mol [000427] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide AB6 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA9 et à un acide 3061660 poly-L-glutamique obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1 en utilisant l'isoamylamine comme initiateur en place de l'hexylamine, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA9 est obtenu. Extrait sec : 22,3 mg/g 5 DP (estimé d'après la RMN 11-1) : 35 D'après la RMN 1H : I = 0,12 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB13 est de 7226 g/nnol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3300 g/mol. 10 Exemple AB21 : Co-polyaminoacide AB21 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3400 g/mol [000428] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide AB6 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA7 (2,44 g, 2,4 15 mmol) et à un acide poly-L-glutamique (10 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide AB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule AA7 est obtenu. Extrait sec : 22,7 mg/g DP (estimé d'après la RMN 11-1) : 22 20 D'après la RMN 1+1 : i = 0,056 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB21 est de 4090 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3400 g/mol. Exemple AB14 : Co-polyaminoacide AB14 - poly-L-glutamate da sodium 25 modifié à une de ses extrémités par la molécule AA1 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3400 g/mol [000429] Dans un contenant adapté sont introduits successivement le sel de chlorhydrate de la molécule AA1 (2,03 g, 4,70 mmol), du chloroforme (5 mL), du tamis moléculaire at (1,3 g), ainsi que de la résine échangeuse d'ion Amberlite IRN 150 (1,3 30 g). Après 1 h d'agitation sur rouleaux, le milieu est filtré et la résine est rincée avec du chloroforme. Le mélange est évaporé puis co-évaporé avec du toluène. Le résidu est solubilisé dans du DMF anhydre (30 mL) pour être utilisé directement dans la réaction de polymérisation. [000430] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve, du y-benzyl-L-glutamate N- 35 carboxyanhydride (25,59 g, 97,2 mmol) est placé sous vide pendant 30 min puis du DMF anhydre (140 mL) est introduit. Le mélange est agité sous argon jusqu'à solubilisation complète, refroidi à 4 °C, puis la solution de molécule AA1 préparée comme décrit précédemment est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 3061660 81 °C et température ambiante pendant 2 jours, puis chauffé à 65 °C pendant 2 h. Le mélange réactionnel est alors refroidi à température ambiante puis versé goutte à goutte dans du diisopropyléther (1,7 L) sous agitation. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé deux fois avec du diisopropyléther (140 mL) puis séché sous vide à 5 30 °C pour obtenir un solide blanc. Le solide est dilué dans du TFA (160 mL), et une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33% dans de l'acide acétique (62 mL, 354 mmol) est alors ajoutée goutte à goutte et à O °C. La solution est agitée pendant 2 h à température ambiante puis est coulée goutte à goutte sur un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther / eau et sous agitation (1,9 L). Après 2 h d'agitation, le mélange 10 hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé successivement avec un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (280 mL) puis avec de l'eau (140 mL). Le solide obtenu est solubilisé dans de l'eau (530 mL) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude 1 N. Après solubilisation, la concentration théorique est 15 ajustée à 20 g/L théorique par addition d'eau pour obtenir un volume final de 800 mL. Le mélange est filtré sur filtre 0,45 pm puis est purifié par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 % puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée à environ 30 g/L théorique et le pH est ajusté à 7,0. La solution aqueuse est filtrée sur 20 0,2 pm et conservée à 4 °C. Extrait sec : 24,1 nrig/g DP (estimé par RMN 11-I) = 25 donc i = 0,04 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB14 est de 3378 g/mol. 25 HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3400 g/mol. Exemple AB15 : Co-polyaminoacide AB15 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) 4100 g/mol 30 [000431] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide AB14 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA6 (2,16 g, 3,94 mmol) et à 25,58 g (97,2 mmol) de y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride, un polyL-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 est obtenu. Extrait sec : 45,5 mg/g 35 DP (estimé par RMN 11-I) = 30 donc i = 0,033 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB15 est de 5005 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4100 g/mol. 3061660 82 Exemple AB16 : Co-polyaminoacide AB16 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 6500 g/mol [0004]2] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 5 polyaminoacide AB14 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA6 (2,]9 g, 4,36 mmol) et à 50,0 g (189,9 rnmol) de y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride, un polyL-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 est obtenu. Extrait sec : 28,5 mg/g DP (estimé par RMN 1H) = 48 donc i = 0,021 10 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB16 est de 7725 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 6500 g/mol. Exemple AB17 : Co-polyaminoacide AB17 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA7 et ayant une masse 15 molaire moyenne en nombre (Mn) de 3500 g/mol [00043]] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide AB14 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA7 (2,80 g, 4,32 mmol) et à 25,0 g (94,9 mmol) de y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride, un polyL-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA7 est obtenu. 20 Extrait sec : 25,2 mg/g OP (estimé par RMN 1H) = 26 donc i = 0,038 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB17 est de 4500 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3500 g/mol. 25 Exemple AB18 : Co-polyaminoacide AB18 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA7 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3700 g/mol [0004]4] Un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA7 est obtenu par polymérisation du y-méthyl N-carboxyanhydride d'acide 30 glutamique (25,0 g, 133,6 mmol) en utilisant le sel chlorhydrate de la molécule AA7 (2,80 g, 4,]2 mmol) comme initiateur et en effectuant une déprotection des esters méthyliques par utilisation d'une solution d'acide chlorhydrique à 37% selon le procédé décrit dans la demande de brevet FR-A-2 801 226. Extrait sec : 44,3 mg/g 35 DP (estimé par RMN 1H) = 22 donc i = 0,045 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB18 est de 3896 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3700 g/mol. 3061660 83 Exemple AB19 : Co-polyaminoacide AB19 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 10500 g/mol [000435] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 5 polyaminoacide AB14 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule AA6 (1,64 g, 2,99 mmol) et au y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (49,3 g, 187 mmol), un polyL-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule AA6 est obtenu. Extrait sec : 23,4 mg/g DP (estimé par RMN 1H) = 65 donc i = 0,015 10 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB19 est de 10293 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 10500 g/mol. Exemple AB20 : Co-polyaminoacide AB20 - poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié à une de ses 15 extrémités par la molécule AA6 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 10400 g/mol [000436] Dans un contenant adapté sont introduits successivement le sel de chlorhydrate de la molécule AA6 (0,545 g, 1,00 mmol), du chloroforme (10 mL), du tamis moléculaire 4Â (3 g), ainsi que de la résine échangeuse d'ion Amberlite IRN 150 20 (3 g). Après 1 h d'agitation sur rouleaux, le milieu est filtré et la résine est rincée avec du chloroforme. Le mélange est évaporé puis co-évaporé avec du toluène. Le résidu est solubilisé dans du DMF anhydre (10 mL) pour être utilisé directement dans la réaction de polymérisation. [0004]7] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve, du y-benzyl-L-glutamate N- 25 carboxyanhydride (17,0 g, 64,6 mmol) est placé sous vide pendant 30 min puis du DMF anhydre (30 mL) est introduit. Le mélange est agité sous argon jusqu'à solubilisation complète, refroidi à 4 °C, puis la solution de molécule AA6 préparée comme décrit précédemment est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 2 jours, puis précipité dans du diisopropyléther (0,6 L). 30 Le précipité est récupéré par filtration, lavé deux fois avec du diisopropyléther (40 mL) puis séché pour donner un solide blanc qui est dissous dans 80 mL de THF. A cette solution sont ajoutés successivement de la DIPEA, (1,7 mL, 9,8 mmol) puis de l'anhydride acétique (0,9 mL, 9,5 mmol). Après une nuit d'agitation à température ambiante, la solution est versée lentement dans du diisopropyléther (480 mL) sur une 35 durée de 30 min et sous agitation. Après 1 h d'agitation, le précipité est filtré, lavé deux fois avec du diisopropyléther (80 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly(gamma-benzyl-L-glutamique) cappé à une de ses extrémités par un groupement 3061660 84 acétyle et modifié à l'autre de ses extrémités par la molécule AA6 sous la forme d'un solide blanc. [000438] Le solide est dilué dans du TFA (65 mL), et une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33% dans de l'acide acétique (45 mL, 257,0 mmol) est alors 5 ajoutée goutte à goutte et à 4 °C. La solution est agitée pendant 2 h à température ambiante puis est coulée goutte à goutte sur un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther / eau et sous agitation (780 mL). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé successivement avec un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (70 mL) puis 10 avec de l'eau (70 mL). Le solide obtenu est solubilisé dans de l'eau (300 mL) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude 1 N. Après solubilisation, la concentration théorique est ajustée à 20 g/L théorique par addition d'eau pour obtenir un volume final de 440 mL. Le mélange est filtré sur filtre 0,45 pm puis est purifié par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 0/0 puis 15 de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée à environ 30 g/L théorique et le pH est ajusté à 7,0. La solution aqueuse est filtrée sur 0,2 pm et conservée à 4 °C. Extrait sec : 21,5 mg/g DP (estimé par RMN 1H) = 60 donc i = 0,017 20 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide AB20 est de 9619 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 10400 g/mol. 3061660 Partie B: BB : synthèse des molécules hydrophobes dans lesquelles p = 2 [000439] Les radicaux sont représentés dans le tableau suivant par la molécule 5 hydrophobe correspondante avant greffage sur le co-polyaminoacide. N° Structure de la molécule hydrophobe avant greffage sur le co- polyaminoacide BA1 BA2 BA3 3061660 86 Tableau 1d : liste des molécules hydrophobes synthétisées selon l'invention. Part BA : synthèse des molécules hydrophobes dans lesquelles p = 2 Exemple BA1 : molécule BA1 5 Molécule 81 : produit obtenu par la réaction entre l'acide décanoïque et la L-proline. [000440] A une solution d'acide décanoïque (14,28 g, 82,91 mmol) dans le THF (520 mL) à 0°C sont ajoutés successivement du dicyclohexyle carbodiimide (DCC) (16,29 g, 78,96 mmol) et du N-hydroxysuccinimide (NHS) (9,09 g, 78,96 mmol). Après 60 h d'agitation à température ambiante, le milieu est refroidi à 0°C pendant 20 min, filtré 10 sur fritté. De la L-proline (10 g, 86,86 mmol), de la diisopropyléthylamine (DIPEA) (68,8 mL) et de l'eau (60 mL) sont ajoutés au filtrat. Après 24 h d'agitation à température ambiante, le milieu est dilué avec de l'eau (300 nnL). La phase aqueuse est lavée avec de l'acétate d'éthyle (2 x 250 mL), acidifiée jusqu'à pH -1 avec une solution aqueuse d'HCI 1N puis extraite avec du dichlorométhane (3 x 150 mL). Les phases organiques 15 combinées sont séchées sur Na2SO4, filtrées, concentrées sous vide et le résidu est purifié par chromatographie sur gel de silice (cyclohexane, acétate d'éthyle). Rendement : 14,6 g (69%) RMN 1-1 (CDCI3, ppm) : 0,87 (]H) ; 1,26 (12H) ; 1,65 (2H) ; 2,02 (3H) ; 2,34 (2H) ; 2,41 (1H) ; 3,48 (1H) ; 3,56 (1H) ; 4,58 (1H). 20 LC/MS (ESI): 270,2; (calculé ([M+H]±): 270,4). Molt.cule B2 : produit obtenu par la réaction entre la molécule B1 et la L-lysine. [000441] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule 81 appliqué à la molécule B1 (14,57 g, 54,07 mmol) et à la L-lysine (4,15 g, 28,39 25 mmol), une huile jaune est obtenue. Rendement : 16,4 g (93%) RMN 11-1 (CDCI3, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,26 (24H) ; 1,35-1,65 (8H) ; 1,85-2,35 (12H) ; 2,53 (0,2H) ; 2,90 (0,8H) ; 3,45-3,75 (5H) ; 4,50-4,70 (3H) ; 7,82 (1H). LC/MS (ESI): 649,6; (calculé ([M+H]±): 649,9). 3061660 87 Molécule B3 . produit obtenu par réaction entre la molécule B2 et la Bocéthylènediamine. [000442] A une solution de molécule B2 (16,4 g, 25,27 mmol) dans le THF (170 mL) sont ajoutés de la DIPEA (8,80 mL) et du 2-(1H-benzotriazol-1-y1)-1,1,3,3- 5 tétraméthyluronium tétrafluoroborate (TBTU, 8,52 g, 26,54 mmol) à température ambiante. Après 30 min d'agitation, de la Boc-éthylènediamine (4,45 g, 27,8 mmol) est ajoutée. Après agitation à température ambiante pendant 2 h, le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu est dilué avec de l'acétate d'éthyle (400 mL). La phase organique est lavée avec de l'eau (250 mL), une solution aqueuse saturée de NaHCO3 10 (250 ml), une solution aqueuse de 1 N HCI (250 mL), une solution aqueuse saturée en NaCl (250 nnL) et est séchée sur Na2SO4. Après filtration et concentration sous vide, le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur gel de silice (acétate d'éthyle, méthanol) pour donner une huile incolore. Rendement : 12,8 g (64%) 15 RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,87 (6H) ; 1,25-1,60 (42H) ; 1,80-2,05 (4H) ; 2,15-2,45 (9H) ; 3,10-3,75 (10H) ; 4,30 (1H) ; 4,50 (2H) ; 5,50 (0,6H) ; 5,89 (0,2H) ; 6,15 (0,2H) ; 7,03 (1H) ; 7,47 (1H). LC/MS (ESI): 791,8; (calculé ([M+Hr): 792,1). 20 Molécule BA1 [000443] A une solution de la molécule B3 (12,78 g, 16,15 mmol) dans le dichlorométhane (110 mL) à 5°C est ajoutée une solution de HCI 4N dans le dioxane (20,2 mL). Après 20 h d'agitation à 5°C, le milieu est concentré sous vide. Le résidu obtenu est dissous dans le méthanol et évaporé sous vide, cette opération étant répétée 25 4 fois pour donner un solide blanc de molécule BA1 sous forme de sel de chlorhydrate. Rendement: 11,4 g (97%) RMN 1H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,25-1,50 (]3H) ; 1,57 (1H) ; 1,70-2,40 (12H) ) 2,82 (2H) ; 3,00 (2H) ; 3,25-3,70 (6H) ; 4,05-4,50 (3H) ; 7,75-8,45 (6H). LC/MS (ESI): 691,6 ; (calculé ([M-C1r): 692,0). 30 Exemple BA2 : molécule BA2 Molécule 134 produit obtenu par la réaction entre l'acide laurique et la L-proline. [000444] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B1 appliqué à l'acide laurique (31,83 g, 157,9 mnnol) et à la L-proline (20 g, 17],7 35 mmol), une huile jaune est obtenue. Rendement : 34,3 g (73%) RMN 1H (CDC13, ppm) : 0,87 (3H) ; 1,26 (16H) ; 1,70 (2H) ; 1,90-2,10 (3H) ; 2,35 (2H) ; 2,49 (1H) ; 3,48 (1H) ; 3,56 (1H) ; 4,60 (1H). 3061660 88 LC/MS (ESI): 298,2 ; (calculé ([M+H]±): 298,4). Molécuie. : produit obtenu par la réaction entre la molécule B4 et la L-lysine. [000445] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule 5 B1 appliqué à la molécule B4 (3],72 g, 113,36 mmol) et à la L-lysine (8,70 g, 59,51 mmol), un solide blanc est obtenu. Rendement : 26,2 g (66%) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,26 (32H) ; 1,35-1,65 (8H) ; 1,85-2,35 (15H) ; 2,87 (1H) ; 3,40-3,75 (5H) ) 4,50-4,75 (3H) ; 7,87 (1H). 10 LC/MS (ESI): 705,6 ; (calculé ([M+Hr): 706,0). Molécule B6 : produit obtenu par réaction entre la Boc-éthylènediamine et la molécule B5 [000446] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule 15 83 appliqué à la molécule B5 (25,74 g, 36,51 mmol) et à la Boc-éthylènediamine (6,43 g, 40,16 mmol), une huile incolore est obtenue. Rendement : 30,9 g (quantitatif) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (6H) ; 1,35-1,65 (50H) ; 1,85-2,]5 (13H) ; 3,05-3,75 (10H) ; 4,25-4,65 (3H) ; 5,50 (0,4H) ; 5,88 (0,2H) ; 6,16 (0,2H) ; 7,08 (1H) ; 7,26 20 (1H) ; 7,49 (0,2H) LC/MS (ESI): 847,8 ; (calculé ([M+H]±): 848,2). Molécule BA2 [000447] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule 25 BA1 appliqué à la molécule B6 (]0,9 g, 36,47 mnnol), le résidu obtenu après concentration sous vide est dissous dans le méthanol et évaporé sous vide, cette opération étant répétée 4 fois pour donner un solide blanc de molécule BA2 sous forme de sel de chlorhydrate après séchage sous pression réduite. Rendement : 27,65 g (97%) 30 RMN 1-1-1 (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,10-2,40 (54H) ; 2,75-3,15 (4H) ; 3,25-],60 (6H) ; 4,05-4,50 (]H) ; 7,50-8,50 (6H). LC/MS (ESI): 747,6 ; (calculé ([M-Clr): 748,1). 3061660 89 Exemple BA3 : molécule BA3 Mnfecule B7 : produit obtenu par la réaction entre l'acide myristique et la L-proline. [000448] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B1 appliqué à l'acide myristique (18,93 g, 82,91 mmol) et à la L-proline (10 g, 86,86 5 mmol), une huile jaunâtre est obtenue. Rendement : 20 g (78%) RMN 1H (CDCI3, ppm) : 0,88 (3H) ; 1,28 (20H) ; 1,70 (2H) ; 1,90-2,10 (3H) ; 2,36 (2H) ; 2,51 (1H) ; 3,47 (1H) ; 3,56 (1H) ; 4,61 (1H). LC/MS (ESI): 326,2; (calculé ([M+H]±): 326,6). 10 Holecule E.38 . produit obtenu par la réaction entre la molécule B7 et la L-lysine [000449] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B1 appliqué à la molécule 87 (20,02 g, 61,5 mmol) et à la L-lysine (4,72 g, 32,29 mmol), un solide blanc est obtenu. 15 Rendement : 12,3 g (53%) RMN 1H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,26 (40H) ; 1,35-1,50 (6H) ; 1,50-2,10 (10H) ; 2,10-2,25 (4H) ; 3,01 (2H) ; 3,31-3,55 (4H) ; 4,10-4,40 (3H) ; 7,68 (0,6H) ; 7,97 (1H) ; 8,27 (0,4H) ; 12,50 (1H). LC/MS (ESI): 761,8 ; (calculé ([M+H]÷): 762,1). 20 Molécule B9 : produit obtenu par la réaction entre la Boc-éthylènediamine et la molécule B8. [000450] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B3 appliqué à la molécule B8 (12 g, 15,77 mmol) et à la Boc-éthylènediamine (3,03 g, 25 18,92 mmol), une huile incolore est obtenue après purification par colonne chromatographique sur gel de silice (acétate d'éthyle, méthanol). Rendement : 12,5 g (8896) RMN 1H (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,20-1,55 (55H) ; 1,50-2,25 (14H) ; 2,95-3,10 (6H) ; 3,31-3,55 (4H) ; 4,10-4,40 (3H) ; 6,74 (1H) ; 7,60-8,25 (]H). 30 LC/MS (ESI): 904,1 ; (calculé ([M+Hr): 904,3). Molécule BA3 [000451] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule BA1 appliqué à la molécule B9 (12,5 g, 13,84 mmol), le résidu obtenu après 35 concentration sous vide est dissous dans le méthanol et évaporé sous vide, cette opération étant répétée 4 fois pour donner un solide blanc de molécule BA3 sous forme de sel de chlorhydrate après séchage sous pression réduite. Rendement : 9,2 g (79%) 3061660 RMN (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,10-1,65 (48H) ; 1,70-2,35 (12H) ; 2,85 (2H) ; 3,01 (2H) ; 3,25-3,65 (6H) ; 4,10-4,50 (3H) ; 7,70-8,40 (6H). LC/MS (ESI): 803,9 ; (calculé [[M-Clr): 804,2). 5 Exemple BA4 : molécule BA4 Molécule B10 : produit obtenu par la réaction entre la molécule B8 et le Boc-1-amino4,7,10-trioxa-13-tridéca ne. [000452] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule B3 appliqué à la molécule B8 (29,80 g, 39,15 mmol) et au Boc-1-amino-4,7,10-trioxa- 10 13-tridécane (15,05 g, 46,96 mmol), une huile épaisse incolore est obtenue. Rendement : 25,3 g (61%) RMN 1+1 (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,25-2,35 (75H) ; 2,85-3,20 (6H) ; 3,25-3,65 (16H) ; 4,10-4,45 (3H) ; 6,38 (0,1H) ; 6,72 (0,9H) ; 7,50-8,25 (3H). LC/MS (ESI): 1064,2 ; (calculé ([M+H]±): 1064,5). 15 Molécule BA4 [00045]] Après un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation de la molécule BA1 appliqué à la molécule B10 (25,3 g, 23,8 mmol), le résidu obtenu après concentration sous vide est dissous dans le méthanol et évaporé sous vide, cette 20 opération étant répétée 4 fois pour donner un solide blanc de molécule BA4 sous forme de sel de chlorhydrate après séchage sous pression réduite. Rendement : 20,02 g (84%) RMN 11-I (DMSO-d6, ppm) : 0,85 (6H) ; 1,15-2,35 (66H) ; 2,80-3,20 (6H) ; 3,30-3,65 (16H) ; 4,10-4,45 (3H) ; 7,55-8,60 (6H). 25 LC/MS (ESI): 964,9 ; (calculé UM-Clr): 964,6). 3061660 91 BB Synthèse des couolyaminoacides Co-polvarninoacides staistaiques de formules Vil ou Vila ° co-polyaminoacides porteurs de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes oNa N H Hy i = 0,05, DP (m + n) = 23 Hy = 0 Ri = H ou pyroglutamate 3061660 NH 3 l\ Hy = O Ri = H ou_pyroglutamate ONa N H Hy = 0 049 DP (m n) = 34 N H Hy = 0,047, DP (m + n) = 21 92 3061660 93 H«= 0 Ri =B ou_pyroglutamate N H BB4 Hy = 0,04, DP (m + n) = 65 ,C 11H"" `NH C 11E123 Hy = Ri = H ou pyro lutamate 3061660 94 Hy = 0,042, DP (m + n) = 23 "C11E-123 .." NH N,NH---..,..NH N1-ro 1 Hy = 0 R1= CH3-CO-, H ou pyroglutamate C111-123 3061660 C 1F-123 NH Hy = 0 R1= CH3-00-, H ou pyroglutamate BB7 Hy = 0 Ri = H ou pyroglutamate ONa R1 N H Hy = 0,042, DP (m + n) = 22 N H n C111-123 UNa 3061660 N H R1 H Hy = 0,026, DP (m + n) = 21 C111123 Hy = 0 Ri = H ou pyroglutamate ONa 0 R1 n H Hy " = 0,05, DP m + n =36 96 3061660 97 3H27 Hy= Ri = H ou pyroglutamate ONa 0 H II H n Hy 0 = 0,029, DP (m + n) = 22 N Cial-127 Hy = 0 Ri = H ou pyroglutamate NH oo 3061660 98 N H Hy = 0,032, DP (m + n) = 22 Hy = R1= CH3-CO-, H ou pyroglutamate ()Na BB1 1 BB1 N H Hy = 0,03, DP (m + n) = 23 2 3061660 99 C 3H27 'NH Hy = R1= CH3-CO-, H ou 0 yro lutamate BB1 3 N H o i = 0,08, DP = 25 0 N1--i Hy C9H19 NNHNFI Hy = O I Ri = H ou pyroglutamate Tableau le NI C9H19 3061660 Co-polyaminoacides définis de formules VII ou VIIb co-polyaminoacides porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes ONa o N H = 0,034, DP (m) = 29 Ri = H ou pyroglutamate ONa ni HN i = 0,042, DP (m) = 24 1 Ri = H ou pyroglutamate BB15 C tiEl 2 3 CI3H27 3061660 ONa BB17 ONa BB18 101 i = 0,043, DP (m) = 23 Ri = H ou pyroglutamate i = 0,015, DP (m) = 65 = H ou pyroglutamate H N, Hw H H Cl3H27 3061660 102 i = 0,025, DP (m) = 40 Ri = CH3-00-, H ou pyroglutamate BB19 P- i = 0,04, DP (m) = 25 = H ou pyroglutamate Tableau 1f : liste des co-polyaminoacides synthétisés selon l'invention. Part BB : synthèse des co-polyaminoacides 5 Exemple BB1 : Co-polyaminoacide BB1 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2400 g/mol Co-polyaminoacide BB1-1 : acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) relative 3860 g/mol issu de la polymérisation du y-benzyl-L-glutamate N- 10 carboxyanhydride initiée par l'hexylamine [000454] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve est placé sous vide du y- benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (90,0 g, 342 mmol) pendant ]0 min, puis du DMF anhydre (465 mL) est introduit. Le mélange est alors agité sous argon jusqu'à complète dissolution, refroidi à 4 °C, puis de l'hexylamine (1,8 mL 14 mmol) est 15 introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 2 jours. Le milieu réactionnel est ensuite chauffé à 65 °C pendant 4 h, refroidi à température ambiante puis coulé goutte à goutte dans du diisopropyléther froid (6 L) sous agitation. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec du diisopropyléther (500 mL puis 250 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un 20 acide poly(y-benzyl-L-glutamique) (PBLG). [000455] A une solution de PBLG (42,1 g) dans l'acide trifluoroacétique (TFA, 325 mL) à 4 °C est ajoutée goutte à goutte une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33% 3061660 103 dans l'acide acétique (135 mL, 0,77 mol). Le mélange est agité à température ambiante pendant 2 h, puis coulé goutte à goutte sur un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau sous agitation (1,6 L). Après 1 h 30 d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec 5 un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (200 mL). [000456] Le solide obtenu est alors solubilisé dans de l'eau (1 L) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude 1 N. Après solubilisation, la concentration théorique est ajustée à 25 g/L théorique par addition d'eau pour obtenir un volume final de 1,5 L. 10 [000457] La solution est filtrée sur filtre 0,45 pm puis purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 %, puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. [000458] La solution aqueuse est alors acidifiée par ajout de solution d'acide chlorhydrique 37% jusqu'à atteindre un pH de 2. Après 4 h d'agitation, le précipité 15 obtenu est filtré puis séché sous vide à ]0 °C pour donner un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 3860 g/mol par rapport à un standard de polyoxyéthylène (PE(3). Co-polyaminoacide 20 [000459] Le co-polyaminoacide BB1-1 (10,0 g) est solubilisé dans le DMF (700 mL) à 30-40 °C puis refroidi à O °C. Le sel de chlorhydrate de la molécule BA2 (2,95 g, 3,8 mmol) est mis en suspension dans du DMF (45 mL) et de la triéthylamine (0,39 g, 3,8 mmol) est ensuite ajoutée à cette suspension puis le mélange est légèrement chauffé sous agitation jusqu'à complète dissolution. A la solution de co-polyaminoacide à O °C, 25 de la N-méthylmorpholine (NMM, 7,6 g, 75 mmol) dans le DMF (14 mL) et du chloroformate d'éthyle (ECF, 8,1 g, 75 mmol) sont ajoutés. Après 10 min à O °C, la solution de molécule BA2 est ajoutée et le milieu maintenu à 30 °C durant 1 h. Le milieu réactionnel est coulé goutte-à-goutte sur 6 L d'eau contenant du chlorure de sodium à 15% massique et du HCI (pH 2), puis laissé reposer une nuit. Le précipité est collecté 30 par filtration, lavé par la solution de chlorure de sodium à pH 2 (1L) et séché sous vide pendant environ 1 h. Le solide blanc obtenu est repris dans de l'eau (600 mL) et le pH est ajusté à 7 par ajout lent d'une solution aqueuse de NaOH 1 N. Le volume est ajusté à 700 mL par ajout d'eau. Après filtration sur filtre 0,45 pm, la solution limpide obtenue est purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9% puis de l'eau, jusqu'à ce 35 que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. Après déchargement, la solution est filtrée sur filtre 0,2 pm et stockée à 2-8 °C. Extrait sec : 19,7 mg/g DP (estimé d'après la RMN 11-1) : 23 3061660 104 D'après la RMN 1H : i = 0,05 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB1 est de 4350 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2400 g/mol. 5 Exemple B32: co-polyaminoacide BB2 - poly-L-g15A:amate de sodium modifié par la molécule BA2 et ayant une mase molaire moyenne en nombre (Mn) de 4900 g/mol [000460] Un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 4100 g/mol (5,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation 10 du co-polyaminoacide BB1-1 est solubilisé dans le DMF (205 mL) à 30-40 °C puis maintenu à cette température. En parallèle, le sel de chlorhydrate de la molécule BA2 (1,44 g, 1,84 mmol) est mis en suspension dans du DMF (10 nnL) et de la triéthylamine (0,19 g, 1,84 mmol) est ajoutée, puis le mélange est légèrement chauffé sous agitation ]usqu'à complète dissolution. A la solution de co-polyaminoacide dans le DMF, de la 15 NMM (3,7 g, 36,7 mmol), la solution de molécule BA2 puis de la N-oxyde de 2- hydroxypyridine (HOPO, 0,31 g, 2,76 mmol) sont ajoutées successivement. Le milieu réactionnel est alors refroidi à 0 °C, puis du EDC (0,53 g, 2,76 mmol) est ajouté et le milieu est remonté à température ambiante durant 3 h. Le milieu réactionnel est coulé au goutte-à-goutte sur 1,55 L d'eau contenant du NaCI à 15% massique et du HCI (pH 20 2) sous agitation. A la fin de l'ajout, le pH est réajusté à 2 avec une solution de HCI 1 N, et la suspension est laissée reposer une nuit. Le précipité est collecté par filtration, puis rincé par 100 mL d'eau. Le solide blanc obtenu est solubilisé dans 200 mL d'eau par ajout lent d'une solution aqueuse de NaOH 1 N jusqu'à pH 7 sous agitation, puis la solution est filtrée sur filtre 0,45 pm. La solution limpide obtenue est purifiée par 25 ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9% puis de l'eau, jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution obtenue est filtrée sur filtre 0,2 pm et stockée à 2-8 °C. Extrait sec : 16,3 mg/g DP (estimé d'après la RMN 11-1) : 21 30 D'après la RMN 1H : i = 0,047 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB2 est de 3932 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4900 g/mol. 3061660 Exemple BB3 : Co-polyaminoacide BB3 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 6400 g/mol Co-polyarninoacide BB3-1 : acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en 5 nombre (Mn) 17500 g/mol issu de la polymérisation du y-méthyl-L-glutamate N- carboxyanhydride initiée par la L-leucinamide [000461] Un acide poly-L-glutamique de masse moyenne en nombre (Mn) 17500 g/mol relative à un standard polymétacrylate de méthyle (PMMA) est obtenu par polymérisation du y-méthyl N-carboxyanhydride d'acide glutamique en utilisant la L- 10 leucinannide comme initiateur et en effectuant une déprotection des esters méthyliques par utilisation d'une solution d'acide chlorhydrique à 37% selon le procédé décrit dans la demande de brevet FR-A-2 801 226. [000462] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA2 (3,23 g, 4,1 mmol) 15 et au co-polyaminoacie BB3-1 (11 g), un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 est obtenu. Extrait sec : 27,5 nng/g DP (estimé d'après la RMN 1H) : 34 D'après la RMN 1H : |i = 0,049 20 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB3 est de 6405 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 6400 g/mol. Exemple SB4 : co-polyaminoacide BB4 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 25 10500 g/mol [000463] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide BB2 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule BA2 (5 g, 6,]5 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 10800 g / mol (21,7 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation 30 du co-polyaminoacide BB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 est obtenu. Extrait sec : 28,2 mg/g DP (estimé d'après la RMN 1H) : 65 D'après la RMN 1H : i = 0,04 35 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB4 est de 11721 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 10500 g/mol. 3061660 106 Exemple BB5 : Co-polyaminoacide BB5 - poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3600 g/mol 5 Co-polyarlimcHriciu, BBS-1 : acide poly-L-glutamique de Mn 3700 g/mol issu de la polymérisation du y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride initiée par l'hexylannine et cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle [000464] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve est placé sous vide du y- 10 benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (100,0 g, 380 mmol) pendant 30 minutes puis du DMF anhydre (250 mL) est introduit. Le mélange est alors agité sous argon jusqu'à complète dissolution, refroidi à 4 °C, puis de l'hexylamine (2,3 mL, 17 mmol) est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et température ambiante pendant 2 jours puis précipité dans du diisopropyléther (3,4 L). Le précipité est récupéré 15 par filtration, lavé deux fois avec du diisopropyléther (225 mL) puis séché pour donner un solide blanc qui est dissout dans 450 mL de THF. A cette solution sont ajoutés successivement de la N,N-diisopropyléthylamine (DIPEA, 31 mL, 176 mmol) puis de l'anhydride acétique (17 mL, 176 mmol). Après une nuit d'agitation à température ambiante, la solution est versée lentement dans du diisopropyléther (3 L) sur une durée 20 de 30 min et sous agitation. Après 1 h d'agitation, le précipité est filtré, lavé deux fois avec du diisopropyléther (200 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly(y-benzyl-L-glutamique) cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle. [000465] A une solution du co-polyaminoacide cappé (72 g) dans l'acide trifluoroacétique (TFA, 335 mL) à 4°C est ajoutée goutte à goutte une solution d'acide 25 bromhydrique (HBr) à 33% dans l'acide acétique (235 mL, 1,34 mol). Le mélange est agité à température ambiante pendant 3 h 30, puis coulé goutte à goutte sur un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau sous agitation (4 L). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé avec un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (340 30 mL) puis avec de l'eau (340 mL). Le solide obtenu est alors solubilisé dans de l'eau (1,5 L) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude 1 N. Après solubilisation, la concentration théorique est ajustée à 20 g/L théorique par addition d'eau pour obtenir un volume final de 2,1 L. La solution est filtrée sur filtre 0,45 p M puis purifiée par ultrafiltration contre une solution de NaCI 0,9 35 % , puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée jusqu'à obtenir un volume final de 1,8 L. La solution aqueuse est alors acidifiée par ajout de solution d'acide chlorhydrique 37% jusqu'à atteindre un pH de 2. Après 4 h d'agitation, le précipité 3061660 107 obtenu est filtré, lavé avec de l'eau (330 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour donner un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre (Mn) 3700 g/mol par rapport à un standard de polyoxyéthylène (PEG). 5 Co-polyaminoacide BB5 [000466] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA2 (6,92 g, 8,8 mnnol) et au co-polyaminoacide BB5-1 (30,0 g), un poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA2 est obtenu. 10 Extrait sec : 29,4 mg/g OP (estimé d'après la RMN 1H) : 23 D'après la RMN 1H : i = 0,042 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB5 est de 4302 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3600 g/mol. 15 Exemple BB6 : Co-polyaminoacide BB6 - poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4100 g/mol [000467] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 20 polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA2 (5,8 g, 7,4 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 3800 g / mol (25 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du copolyaminoacide BB5-1 en utilisant l'ammoniac à la place de l'hexylamine, un poly-Lglutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et 25 modifié par la molécule BA2 est obtenu. Extrait sec : 27,6 mg/g DP (estimé d'après la RMN 1H) : 24 D'après la RMN 1H : i = 0,04 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB6 est de 4387 g/mol. 30 HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4100 g/mol. Exemple BB7 : Co-polyaminoacide BB7 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4200 g/mol 35 [000468] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA2 (7,07 g, 9,0 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 3600 g / mol (30,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 3061660 108 polyaminoacide BB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 est obtenu. Extrait sec : 28,3 mg/g DP (estimé d'après la RMN 1H) : 22 5 D'après la RMN 1-H : i = 0,042 La masse molaire moyenne calculée du co-polyanninoacide BB7 est de 4039 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4200 g/mol. Exemple BB8 : co-polyaminoacide BB8 - poly-L-glutamate de sodium modifié 10 par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 5200 g/mol [000469] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA2 (0,85 g, 1,1 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 4100 g/ 15 mol (5,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide BB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA2 est obtenu. Extrait sec : 28,6 mg/g DP (estimé d'après la RMN 1H) : 21 20 D'après la RMN 1H : i = 0,026 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB8 est de 3620 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 5200 g/mol. Exemple BB9 : co-polyaminoacide BB9 - poly-L-glutamate de sodium modifié 25 par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4700 g/mol [000470] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA] (],05 g, 3,6 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 4100 g / 30 mol (10,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide BB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA3 est obtenu. Extrait sec : 28,6 mg/g DP (estimé d'après la RMN 1H) : 26 35 D'après la RMN 1H : i =O,05 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB9 est de 4982 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4700 g/mol. 3061660 109 Exemple BB10 : co-polyaminoacide BB10 - poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4200 g/mol [000471] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 5 polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA] (1,90 g, 2,3 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 3500 g / mol (10,0 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du copolyaminoacide BB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA3 est obtenu. 10 Extrait sec : 25,9 mg/g DP (estimé d'après la RMN 1+1) : 22 D'après la RMN : i = 0,029 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB1O est de 3872 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4200 g/mol. 15 Exemple BB11 : co-polyaminoacide BB11 - poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA4 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3900 g/mol [000472] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 20 polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA4 (2,21 g, 2,2 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse moyenne en nombre Mn = 3700 g / mol (10 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du copolyaminoacide BB5-1, un poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA4 est obtenu. 25 Extrait sec : 28,1 mg/g DP (estimé d'après la RMN 1-1-1) : 22 D'après la RMN : i = 0,032 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB11 est de 4118 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3900 g/mol. 30 Exemple E312 : co-polyaminoacide BB12 - poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3900 g/mol [00047]] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 35 polyaminoacide BB2 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA3 (1,9 g, 2,3 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse moyenne en nombre Mn = 3600 g / mol (10 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 3061660 polyanninoacide BB5-1, un poly-L-glutamate de sodium cappé à une de ses extrémités par un groupement acétyle et modifié par la molécule BA3 est obtenu. Extrait sec : 26,7 mg/g DP (estimé d'après la RMN 1H) : 23 5 D'après la RMN 11-1 : i = 0,03 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB12 est de 4145 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3900 g/mol. Exemple BB13 : co-polyaminoacide BB13 - poly-L-glutamate de sodium modifié 10 par la molécule BA1 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 2800 g/mol [000474] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide BB1 appliqué au sel de chlorhydrate de la molécule BA1 (3,65 g, 5 mmol) et à un acide poly-L-glutamique de masse molaire moyenne en nombre Mn = 15 3600 g / mol (10 g) obtenu par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co-polyaminoacide BB1-1, un poly-L-glutamate de sodium modifié par la molécule BA1 est obtenu. Extrait sec : 25,6 mg/g DP (estimé d'après la RMN 11-1) : 25 20 D'après la RMN zH : i = 0,08 La masse molaire moyenne calculée du co-polyanninoacide BB1] est de 5253 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 2800 g/mol. Exemple BB14 : co-polyaminoacide BB14 - poly-L-glutamate de sodium modifié 25 à une de ses extrémités par la molécule BA2 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 4020 g/mol [000475] Dans un contenant adapté sont introduits successivement le sel de chlorhydrate de la molécule BA2 (2,12 g, 2,70 mmol), du chloroforme (40 mL), du tamis moléculaire 4S% (1,5 g), ainsi que de la résine échangeuse d'ion Amberlite IRN 150 (1,5 30 g). Après 1 h d'agitation sur rouleaux, le milieu est filtré et la résine est rincée avec du chloroforme. Le mélange est évaporé puis co-évaporé avec du toluène. Le résidu est solubilisé dans du DMF anhydre (20 mL) pour être utilisé directement dans la réaction de polymérisation. [000476] Dans un ballon préalablement séché à l'étuve, du y-benzyl-L-glutamate N- 35 carboxyanhydride (18 g, 68,42 mmol) est placé sous vide pendant ]0 min puis du DMF anhydre (100 mL) est introduit. Le mélange est agité sous argon jusqu'à solubilisation complète, refroidi à 4 °C, puis la solution de molécule BA2 préparée comme décrit précédemment est introduite rapidement. Le mélange est agité entre 4 °C et 3061660 111 température ambiante pendant 2 jours, puis chauffé à 65 °C pendant 2 h. Le mélange réactionnel est alors refroidi à température ambiante puis versé goutte à goutte dans du diisopropyléther (1,2 L) sous agitation. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé deux fois avec du diisopropyléther (100 mL) puis séché sous vide à 30 °C pour 5 obtenir un solide blanc. Le solide est dilué dans du TFA (105 mL), et une solution d'acide bromhydrique (HBr) à 33% dans de l'acide acétique (38 mL, 220 mmol) est alors ajoutée goutte à goutte et à O °C. La solution est agitée pendant 2 h à température ambiante puis est coulée goutte à goutte sur un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther / eau et sous agitation (600 mL). Après 2 h d'agitation, le mélange hétérogène est laissé 10 au repos pendant une nuit. Le précipité blanc est récupéré par filtration, lavé successivement avec un mélange 1:1 (v/v) de diisopropyléther et d'eau (200 mL) puis avec de l'eau (100 mL). Le solide obtenu est solubilisé dans de l'eau (450 mL) en ajustant le pH à 7 par ajout d'une solution aqueuse de soude 10 N puis une solution aqueuse de soude 1 N. Le mélange est filtré sur filtre 0,45 pm puis est purifié par 15 ultrafiltration contre une solution de NaCI 0.9 % puis de l'eau jusqu'à ce que la conductimétrie du perméat soit inférieure à 50 pS/cm. La solution de co-polyaminoacide est ensuite concentrée à environ 30 g/L théorique et le pH est ajusté à 7,0. La solution aqueuse est filtrée sur 0,2 pm et conservée à 4 °C. Extrait sec : 22,3 mg/g 20 DP (estimé par RMN 1+1) = 29 donc i = 0,034 La masse molaire moyenne calculée du co-po)yaminoacide BB14 est de 5089 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 4020 g/mol. Exemple BB15 : co-polyaminoacide BB15 - poly-L-glutamate de sodium modifié 25 à une de ses extrémités par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3610 g/mol [000477] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide BB14 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA] (3,62 g, 4,32 mmol) et à 25,0 g (94,97 mmol) de y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride, un poly- 30 L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 est obtenu. Extrait sec : 26,5 mg/g DP (estimé par RMN 11-I) = 24 donc i = 0,042 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB15 est de 4390 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3610 g/mol. 35 3061660 112 Exemple BB16 : co-polyaminoacide BB16 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA4 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3300 g/mol [000478] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 5 polyanninoacide BB14 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA4 (5,70 g, 5,70 mmol) et à 29,99 g (113,9 mmol) de y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride, un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA4 est obtenu. Extrait sec : 32,3 mg/g 10 DP (estimé par RMN 11-1) = 23 donc i = 0,043 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB16 est de 4399 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3300 g/mol. Exemple BB17 : co-polyaminoacide BB17 - poly-L-glutamate de sodium modifié 15 à une de ses extrémités par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre de 10700 g/mol [000479] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- polyaminoacide BB14 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA] (2,51 g, 3 mmol) et à 52,7 g (200 mmol) de y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride, un poly-L- 20 glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 est obtenu. Extrait sec : 24,5 mg/g DP (estimé par RMN 11-1) = 65 donc i = 0,015 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB17 est de 10585 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 10700 g/mol. 25 Exemple BB18 : co-polyaminoacide BB18 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre de 6600 g/mol [000480] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 30 polyaminoacide BB14 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA] (2,51 g, 3 mmol) et à 31,6 g (120 mmol) de y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride, un poly-Lglutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 est obtenu. Extrait sec : 27,] mg/g DP (estimé par RMN I-H) = 40 donc i = 0,025 35 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB18 est de 6889 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 6600 g/mol. 3061660 113 Exemple BB19 : co-polyaminoacide BB19 - poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 et ayant une masse molaire moyenne en nombre (Mn) de 3400 g/mol [000481] Par un procédé similaire à celui utilisé pour la préparation du co- 5 polyaminoacide BB14 appliqué au sel chlorhydrate de la molécule BA3 (36,26 g, 43,2 rnmol) et de y-benzyl-L-glutamate N-carboxyanhydride (250,0 g, 949,7 rrirnol), un poly-L-glutamate de sodium modifié à une de ses extrémités par la molécule BA3 est obtenu. Extrait sec : 22,4 mg/g 10 DP (estimé par RMN 11-1) = 25 donc i = 0,04 La masse molaire moyenne calculée du co-polyaminoacide BB19 est de 4540 g/mol. HPLC-SEC aqueuse (calibrant PEG) : Mn = 3400 g/mol. Partie C : Le glucagon utilisé est du glucagon humain issu d'un processus de synthèse 15 peptidique. Il provient de la société Bachem (référence 407473). Exemple Cl : Solution de Glucagon à 2 mg/m1 [000482] Du glucagon (80 mg) en poudre est introduit dans un tube falcon de 45 ml. Une solution aqueuse d'acide chlorhydrique à 0,01 N (40 ml) est ajoutée. La poudre de 20 glucagon est mélangée par des inversions répétées du tube jusqu'à complète dissolution du glucagon. La solution de glucagon à 2 rng/m1 est alors filtrée sur membrane (0,22 Pm). Exemple C2 : Solution de Glucagon à 4 mg/mi 25 [000483] Du glucagon (160 mg) en poudre est introduit dans un tube falcon de 45 mi. Une solution aqueuse d'acide chlorhydrique à 0.003 N (40 ml) est ajoutée. La poudre de glucagon est mélangée par des inversions répétées du tube jusqu'à complète dissolution du glucagon. La solution de glucagon à 4 mg/mi est alors filtrée sur membrane (0,22 pm). 30 Exemple C3 : Solution de Glucagon à 6 mg/rn1 [000484] Du glucagon (240 mg) en poudre est introduit dans un tube falcon de 45 ml. Une solution aqueuse d'acide chlorhydrique à 0.003 N (40 ml) est ajoutée. La poudre de glucagon est mélangée par des inversions répétées du tube jusqu'à complète 35 dissolution du glucagon. La solution de glucagon à 6 mg/mi est alors filtrée sur membrane (0,22 pm). 3061660 114 Exemple C4 : Solution de Glucagon à 10 mg/mi [000485] Du glucagon (400 mg) en poudre est introduit dans un tube falcon de 45 ml. Une solution aqueuse d'acide chlorhydrique à 0.003 N (40 ml) est ajoutée. La poudre de glucagon est mélangée par des inversions répétées du tube jusqu'à complète 5 dissolution du glucagon. La solution de glucagon à 10 mg/mi est alors filtrée sur membrane (0,22 pm). [000486] Des essais ont été d'abord effectués afin de vérifier si les co- 10 polyaminoacides permettent de solubiliser le glucagon, et la concentration minimum de co-polyaminoacide nécessaire pour solubiliser le glucagon a été déterminée. Exemple CA1 : Compositions de co-polyaminoacide AB16 à concentrations variables et de glucagon à 1 mg/ml. 15 [000487] X mg de co-polyaminoacide AB16 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000488] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont 20 mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus afin de conduire à une composition comprenant X mg/nnl de co-polyaminoacide et 1 mg/mi de glucagon. [000489] Une inspection visuelle est effectuée pour déterminer si l'on obtient ou non une solution limpide. Le résultat de la concentration minimum est présenté en Tableau 25 5. Exemple CA2 : Compositions de co-polyaminoacide AB21 à concentrations variables et de glucagon à 1 mg/ml. [000490] De la même manière que décrite dans l'exemple CA1, des compositions comprenant X mg/mi de co-polyaminoacide AB21 et 1 mg/m1 de glucagon sont 30 préparées. [000491] Une inspection visuelle est effectuée pour déterminer si l'on obtient ou non une solution limpide. Le résultat de la concentration minimum est présenté en Tableau 5. Exemple CA3 : Compositions de co-polyarninoacide BB14 à concentrations variables et 35 de glucagon à 1 mg/ml. [000492] De la même manière que décrite dans l'exemple CA1, des compositions comprenant X mg/m1 de co-polyaminoacide BB14 et 1 mg/mi de glucagon sont préparées. 3061660 [000493] Une inspection visuelle est effectuée pour déterminer si l'on obtient ou non une solution limpide. Le résultat de la concentration minimum est présenté en Tableau 5. 5 Exemple CA4 : Compositions de co-polyaminoacide BB2 à concentrations variables et de glucagon à 1 mg/ml. [000494] De la même manière que décrite dans l'exemple CA1, des compositions comprenant X mg/mi de co-polyaminoacide BB2 et 1 mg/m1 de glucagon sont préparées. 10 [000495] Une inspection visuelle est effectuée pour déterminer si l'on obtient ou non une solution limpide. Le résultat de la concentration minimum est présenté en Tableau 5. Exemple CA5 : Compositions de co-polyaminoacide BB15 à concentrations variables et 15 de glucagon à 1 mg/ml. [000496] De la même manière que décrite dans l'exemple CA1, des compositions comprenant X mg/m1 de co-polyanninoacide BB15 et 1 mg/mi de glucagon sont préparées. [000497] Une inspection visuelle est effectuée pour déterminer si l'on obtient ou non 20 une solution limpide. Le résultat de la concentration minimum est présenté en Tableau 5. Exemple CA6 : Compositions de co-polyaminoacide BB9 à concentrations variables et de glucagon à 1 mg/ml. 25 [000498] De la même manière que décrite dans l'exemple CA1, des compositions comprenant X mg/mi de co-polyaminoacides BB9 et 1 mg/m1 de glucagon sont préparées. [000499] Une inspection visuelle est effectuée pour déterminer si l'on obtient ou non une solution limpide. Le résultat de la concentration minimum est présenté en Tableau ]0 5. 3061660 116 Co Concentration minimale en co- polyaminoacide polyaminoacide (en mg/m1) pour la solubilisation du glucagon humain (1 mg/mi.) 5_ 0,82 É 1,25 É 0,82 É 0,82 É1,25 É135 Tableau 5 : Concentration minimale en co-polyaminoacide (en mg/mi) pour la solubilisation du glucagon humain (1 mg/mL). 5 Exemple CA7: Solution de co-polyaminoacide BB15 à 4,4 mg/mi et de glucagon à 2 nig/m1 [000500] 17,2 mg de co-polyaminoacide BB15 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, 10 puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000501] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple C2 sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide BB15 telle que préparée ci-dessus. [000502] On obtient une solution limpide. 15 Exemple CA8 : Solution de co-polyaminoacide BB15 à 4,4 mg/m1 et de glucagon à 3 mg/mi [000503] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple C] sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide BB15 telle que préparée à l'exemple CA7. 20 [000504] On obtient bien une solution limpide. Exemple CA9 : Solution de co-polyaminoacide BB15 à 4,4 mg/mi et de glucagon à 5 mg/m| [000505] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple C4 sont 25 mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide BB15 telle que préparée à l'exemple CA7. [000506] On obtient bien une solution limpide. Exemple CA1 CA2 CA3 CA4 CA5 CA6 AB16 AB21 BB14 803 BB15 BB9 3061660 117 [000507] Des essais ont été effectués afin de vérifier si les co-polyaminoacides permettaient de stabiliser le glucagon, puis de déterminer une concentration minimum de co-polyaminoacide nécessaire pour stabiliser le glucagon. 5 Exemple CB1 : Solution de co-polyaminoacide BB15 à concentrations variables et de glucagon à 1 mg/mi [000508] 4X mg de co-polyaminoacide BB15 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, 10 puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000509] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyanninoacide telle que préparée ci-dessus afin de conduire à une composition comprenant X mg/mi de co-polyaminoacide et 1 mg/mi de glucagon. 15 [000510] Puis trois échantillons d'l ml chacun de ces solutions sont préparés et placés en conditions statiques à ]7°C. [000511] Une inspection visuelle est effectuée à 7 j, 14j, et 21j, voir Tableau 6. [000512] L'étude des stabilités physiques des compositions des exemples CB1a à CB1g décrites dans le tableau ci-dessous a été menée sur des volumes de 1 ml de 20 composition dans des flacons de contenance de ] ml (Adelphi - ref :VCDIN2RDLS1). Tableau 6 : Gamme de concentrations pour déterminer le ratio molaire minimum radical hydrophobe/glucagon 25 CB1b CB1c CB1d CB1e CB1f non oui oui OUI oui Exemple Concentration de co- Stable polyaminoacide BB15 à 7 j m /m1 CB1a | O4 Stable Stable à 14 j à 21j non | non non non non non Des gammes de concentration ont été effectuées avec d'autres co-polyaminoacides et ont conduit à l'obtention des solutions stables suivantes. 3061660 118 Exemple CB2 : Solution de co-polyaminoacide AB1 à 15 mg/nril et de glucagon à 1 mg/mi [000513] 60 mg de co-polyaminoacide AB1 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du 5 glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000514] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide AB1 telle que préparée ci-dessus. Puis trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en 10 conditions statiques à ]7°C. Exemple CB3 : Solution de co-polyaminoacide AB5 à 10 mg/mi et de glucagon à 1 mg/m1 [000515] 40 mg de co-polyaminoacide AB5 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml 15 d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000516] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis 20 trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. Exemple CB4 : Solution de co-polyaminoacide AB7 à 8,6 mg/m1 et de glucagon à 1 mg/mi 25 [000517] ]4,4 mg de co-polyaminoacide AB7 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000518] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont 30 mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à ]7°C. Exemple CB5 : Solution de co-polyaminoacide AB15 à 14 mg/m1 et de glucagon à 1 35 mg/m1 [000519] 56 mg de co-polyaminoacide AB15 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du 3061660 119 glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pnn). [000520] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis 5 trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. Exemple CB6 : Solution de co-polyaminoacide AB16 à 16,2 mg/m1 et de glucagon à 1 mg/mi 10 [000521] 64,8 mg de co-polyaminoacide AB16 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pnn). [000522] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont 15 mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. Exemple CB7 : Solution de co-polyaminoacide AB17 à 6,4 mg/nnl et de glucagon à 1 20 mg/mi [000523] 25,6 mg de co-polyaminoacide AB17 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). 25 [000524] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. 30 Exemple CB8 : Solution de co-polyaminoacide BB2 à 8 mg/mi et de glucagon à 1 mg/mi [000525] ]2 mg de co-polyaminoacide 882 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, 35 puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000526] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis 3061660 trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. Exemple CB9 : Solution de co-polyaminoacide BB5 à 9 mg/mi et de glucagon à 1 5 mg/mi [000527] ]6 mg de co-polyaminoacide BB5 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). 10 [000528] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à ]7°C. 15 Exemple CB10 : Solution de co-polyaminoacide BB7 à 15,4 mg/mi et de glucagon à 1 mg/mi [000529] 61,6 mg de co-polyaminoacide BB7 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, 20 puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000530] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée dessus. Puis trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à ]7°C. 25 Exemple CB11 : Solution de co-polyaminoacide BB8 à 7,6 mg/mi et de glucagon à 1 mg/mi [000531] 30,4 mg de co-polyaminoacide BB8 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du 30 glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000532] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée dessus. Puis trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions 35 statiques à 37°C. 3061660 121 Exemple CB12 : Solution de co-polyaminoacide BB9 à 4,3 mg/mi et de glucagon à 1 mg/mi [00053]] 17,2 mg de co-polyaminoacide BB9 sont pesés précisément, et ajouté à 2 5 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000534] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis 10 trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à ]7°C. Exemple CB13 : Solution de co-polyaminoacide BB11 à 5,9 mg/m1 et de glucagon à 1 mg/mi 15 [000535] 23,6 mg de co-polyaminoacide BB11 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000536] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont 20 mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée dessus. Puis trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. Exemple CB14 : Solution de co-polyaminoacide BB11 à 8,6 mg/m1 et de glucagon à 1 25 mg/m1 [000537] 34,4 mg de co-polyanninoacide BB11 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). 30 [0005]8] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée dessus. Puis trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. 35 Exemple CB15 : Solution de co-polyanninoacide BB14 à 9,1 mg/mi et de glucagon à 1 mg/mi [000539] ]6,4 mg de co-polyaminoacide BB14 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du 3061660 122 glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000540] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis 5 trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. Exemple CB16 : Solution de co-polyaminoacide BB16 à 3,8 mg/mi et de glucagon à 1 mg/mi 10 [000541] 15,2 mg de co-polyaminoacide BB16 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000542] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont 15 mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée dessus. Puis trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. Exemple CB17 : Solution de co-polyaminoacide BB16 à 6,3 mg/mi et de glucagon à 1 20 mg/mi [000543] 25,2 mg de co-polyaminoacide BB16 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). 25 [000544] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée dessus. Puis trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à ]7°C. 30 Exemple CB18 : Solution de co-polyaminoacide BB15 à 4,4 mg/ml et de glucagon à 2 mg/m1 [000545] 17,6 mg de co-polyaminoacide BB15 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée ]usqu'à dissolution du co-polyaminoacide, 35 puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000546] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple C2 sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis 3061660 123 trois échantillons d'1 ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. Exemple CB19 : Solution de co-polyaminoacide BB15 à 8,8 mg/m1 et de glucagon à 2 5 mg/m1 [000547] 35,4 mg de co-polyaminoacide BB15 sont pesés précisément, et ajouté à 2 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). 10 [000548] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple C2 sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis trois échantillons d'1 ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. 15 Exemple CB20 : Solution de co-polyaminoacide BB15 à 6,3 mg/ml, de glucagon à 1 mg/mi et de L-méthionine à 0,1 nng/m1 [000549] Une solution de co-polyaminoacide BB15 à 12,6 mg/mi est préparée en dissolvant 46,5 mg de lyophilisat de co-polyaminoacide BB15 avec 1,6 ml d'eau, 1,] mL de m-crésol à 126,7 mM, 358 pL de glycerol à 4,9 M, 360 pL d'une solution de 20 tampon phosphate à 100 mM and 75 pL de L-méthionine à 9,8 mg/mL. La solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000550] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple C2 sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis trois échantillons d'1 ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions 25 statiques à 37°C. Exemple CB21 : Solution de co-polyaminoacide BB15 à 6,3 mg/ml, de glucagon à 1 mg/mi et de L-méthionine à 1 mg/mi [000551] Une solution de co-polyaminoacide BB15 à 12,6 mg/mi est préparée en 30 dissolvant 46,5 mg de lyophilisat de co-polyaminoacide BB15 avec 937 pL d'eau, 1,] mL de m-crésol à 126,7 mM, ]58 pL de glycerol à 4,9 M, 360 pL d'une solution de tampon phosphate à 100 mM and 733 pL de L-méthionine à 9,8 mg/mL. La solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000552] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple C2 sont 35 mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus. Puis trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. 3061660 124 Exemple CB22 : Solution de co-polyaminoacide BB15 à 6,3 mg/ml, de glucagon à 1 mg/mi et d'exenatide à 0,1 mg/m1 [00055]] 14 mg d'exenatide (Bachem ; Pdt N°-4044219) sont introduits dans un 5 tube Eppendorf puis 1,4 ml d'eau est ajouté. La poudre est mélangée par des inversions répétées et la solution d'exenatide à 10 mg/mi est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000554] Une solution de co-polyaminoacide BB15 à 12,6 mg/mi est préparée en dissolvant 28,3 mg de lyophilisat de co-polyaminoacide BB15 avec 937 pL d'eau, 817 pL de m-crésol à 126,7 mM, 224 pL de glycerol à 4,9 M, 225 pL d'une solution de tampon 10 phosphate à 100 mM and 45 pL d'exenatide à 10 mg/mL,. La solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000555] La solution finale est préparée en mélangeant 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl et 2 ml de la solution de BB15 à 12,6 mg/mi telle que préparée ci-dessus. Le mélange est homogénéisé manuellement et contient 1 15 mg/mL of glucagon, 0,1 mg/mL of exenatide, 6,] mg/mL de BB15, 5 mM de tampon phosphate, 23 mM m-crésol et 249 mM de glycérol. [000556] Trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. 20 Exemple CB23 : Solution de co-polyaminoacide BB15 à 6,3 mg/ml, de glucagon à 1 mg/m1 et d'exenatide à 0,25 mg/mi [000557] Une solution d'exenatide à 10 mg/mi est obtenue de la même manière que décrit en exemple CB22. [000558] Une solution de co-polyaminoacide BB15 à 12,6 mg/mi est préparée en 25 dissolvant 28,4 mg de lyophilisat de co-polyaminoacide BB15 avec 872 pL d'eau, 817 pL de m-crésol à 126,7 mM, 224 pL de glycerol à 4,9 M, 225 pL d'une solution de tampon phosphate à 100 mM et 11] pL d'exenatide à 10 mg/mL. La solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000559] La solution finale est préparée en mélangeant 2 ml d'une solution de 30 glucagon telle que préparée à l'exemple Cl et 2 ml de la solution de BB15 à 12,6 mg/mi telle que préparée ci-dessus. Le mélange est homogénéisé manuellement et contient 1 mg/mL of glucagon, 0,25 mg/mL of exenatide, 6,] mg/mL de BB15, 5 mM de tampon phosphate, 23 mM m-crésol et 249 mM de glycérol. [000560] Trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés ]5 en conditions statiques à 37°C. 3061660 Exemple CB24 : Solution de co-polyaminoacide BB15 à 6,3 mg/ml, de glucagon à 1 mg/mi et d'exenatide à 0,5 mg/mi [000561] Une solution de co-polyaminoacide BB15 à 12,6 mg/mi est préparée en dissolvant 28,2 mg de lyophilisat de co-polyaminoacide BB15 avec 750 pL d'eau, 817 5 pL de m-crésol à 126,7 mM, 224 pL de Glycerol à 4,9 M, 225 pL d'une solution de tampon phosphate à 100 mM and 226 pL d'exenatide à 10 mg/mL, telle que préparée dans l'exemple ci-dessus. La solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000562] La solution finale est préparée en mélangeant 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl et 2 ml de la solution de co-polyaminoacide 10 BB15 à 12,6 mg/mi telle que préparée ci-dessus. Le mélange est homogénéisé manuellement et contient 1 mg/mL of glucagon, 0,5 mg/mL d'exenatide, 6,3 mg/mL de co-polyanninoacide BB15, 5 mM de tampon phosphate, 23 mM m-crésol et 249 mM de glycérol. [000563] Trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés 15 en conditions statiques à 37°C. Exemple CB25 : Solution de co-polyaminoacide AB21 à 8,6 mg/m1 et de glucagon à 1 mg/mi [000564] 34,4 mg de co-polyaminoacide AB21 sont pesés précisément, et ajouté à 2 20 ml d'une solution de tampon phosphate à 10 mM comprenant du m-crésol (46 mM), du glycérol (548 mM). La composition est agitée jusqu'à dissolution du co-polyaminoacide, puis la solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000565] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée dessus. Puis 25 trois échantillons d'l ml chacun de cette solution sont préparés et placés en conditions statiques à 37°C. Exemple CB26 : composition de co-polyaminoacide BB15 à 3,8 mg/ml, glucagon à 1 mg/mi et citrate à pH 7,1 30 [000566] X mg de co-polyaminoacide BB15 sont pesés précisément et dilués dans de l'eau, et par addition successive de solutions concentrées en glycérol, tampon phosphate et citrate, une solution aqueuse avec une concentration finale en BB15 (7,6 mg/mi), en glycérol (550 mM), en phosphate, provenant d'un mélange de NaH2PO4 et Na2HPO4, (4 mM) et de citrate de sodium (10 mM) est obtenue.. La solution est filtrée 35 sur membrane (0,22 pm). [000567] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple Cl sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus de manière à obtenir une composition comprenant ],8 mg/m1 de co-polyaminoacide BB15, 3061660 126 1 mg/mi de glucagon et 5 mM en citrate. Le pH de la solution est ajusté à pH 7,1 ± 0,1. La solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). [000568] De manière analogue à la composition décrite dans l'exemple CB26, les 5 compositions CB27, CB]0 et CB30' ont également été préparées (tableau 6a). De la L- méthionine est présente à raison de 1 mg/mi dans les compositions CB30 et CB30'. [000569] De manière analogue à la composition décrite dans l'exemple CB26, et en ajoutant une solution de chlorure de zinc au moment du mélange des solutions de 10 glucagon et de co-polyaminoacide, les compositions CB28 et CB29 ont également été préparées de manière à obtenir les concentrations désirées (tableau 6a). [000570] Les compositions précédemment préparées ont été transférées dans des cartouches (easy-to-fill de OMPI de 3 ml - Ref P40B4100.3250) à raison de 1 mL par cartouche et placées en conditions statiques à 37°C. 15 Compositions Glucagon Glycérol Co- Citrate Zinc pH (mg/m1) (mM) polyaminoacide (mM) (mM) (mg/mi) CB26 250 BB15 (3,8) 5 0 7,1 CB27 250 BB15 (3,8) 10 | O 7,1 CB28 250 BB15 (3,8) 5 7,1 CB29 250 BB15 (3,8) 10 7,1 CB3O 250 BB19 (3,3) 10 7,1 CB30' 1 250 l 8819 /3,9) 10 0 7,1 Tableau 6a : compositions de co-polyaminoacide, glucagon à 1 mg/mi et citrate à pH 7,1. Exemple CB31: composition de co-polyaminoacide BB15 à 11,3 mg/ml, glucagon à 3 mg/m| et citrate 20 [000571] X mg de co-polyaminoacide BB15 sont pesés précisément et dilués dans de l'eau, et par additions successives de solutions concentrées en glycérol, tampon phosphate, citrate et m-crésol, une solution aqueuse avec une concentration finale en BB15 (22,7 mg/mi), en glycérol (530 mM), en phosphate (4 mM), en citrate de sodium (20 mM) et en m-crésol (54 mM) est obtenue.. La solution est filtrée sur membrane 25 (0,22 pm). [000572] 2 ml d'une solution de glucagon telle que préparée à l'exemple C3 sont mélangés à 2 ml de la solution de co-polyaminoacide telle que préparée ci-dessus de manière à obtenir une composition à 11,] mg/m1 de co-polyaminoacide BB15, 3 mg/m1 de glucagon et 10 mM en citrate. Le pH de la solution est ajusté à pH 7,1 ± 0,1. La 30 solution est filtrée sur membrane (0,22 pm). 3061660 127 [000573] De manière analogue à la composition décrite dans l'exemple CB]1, et en ajoutant une solution de chlorure de zinc au moment du mélange des solutions de glucagon et de co-polyaminoacide, les compositions CB32 à CB34 ont également été préparées de manière à obtenir les concentrations désirées (tableau 6b). 5 [000574] Les compositions précédemment préparées sont transférées dans ] cartouches (easy-to-fill de OMPI de 3 ml - Ref P40B4100.3250) à raison de 1 mL par cartouche et placées en conditions statiques à 37°C. Compositions Glucagon (mg/m1) Glycérol BB15 ,_ Zinc m-crésol (mM) pH (mM) (mg/m1) Citrate (mM) (mM) CB31 3 250 11,3 10 0 27 7,1 CB32 250 11,3 10 0,3 27 7,1 CB33 250 11,3 10 0,9 27 7,1 CB34 3 . 250 11,3 10 1,8 27 7,1 Tableau 6b : compositions de co-polyaminoacide BB15 à 11,3 mg/ml, glucagon à 3 mg/m1 et citrate 10 à pH 7,1. Partie D : STABILITE Exemple D1 : Stabilité physique de compositions co-polyaminoacide/glucagon [000575] L'inspection visuelle des échantillons placés en conditions statiques à 37°C 15 est effectuée à 0, 7, 14 et 21 jours à 37°C afin de détecter l'apparition de particules visibles ou d'une turbidité. Cette inspection est réalisée selon les recommandations de la Pharmacopée Européenne (EP 2.9.20) : les échantillons sont soumis à un éclairage d'au moins 2000 Lux et sont observés face à un fond blanc et un fond noir. Quand des particules sont visibles dans au moins 2 des 3 échantillons la composition est estimée 20 non stable. Stable signifie donc qu'au jour de l'inspection au moins 2 échantillons étaient dépourvus de particules. [000576] Les résultats des inspections visuelles sont reportés dans le tableau 7 suivant. [000577] L'étude des stabilités physiques des compositions des exemples CBle, CB2 25 à CB25 décrites dans le tableau ci-dessous a été menée sur des volumes de 1 ml de composition dans des flacons de contenance de 3 ml (Adelphi - nef :VCDIN2RDLS1). Exemple Co- Glucagon (mg/mi) Exenatide Polyaminoacide (mg/mi) (mg/m|) CB1e 8B15 (3,B CB2 AB1 (15) 1 CB3 A85 (1U> 1 0 L-méthionine Stable (mg/mi) à 7 j oui oui non oui oui Stable à 21 j oui non 3061660 128 1 0 0 oui oui oui 0 oui oui oui 0 0 oui oui oui 0 0 oui oui oui 1 0 0 oui oui OUI 0 O oui oui non 1 oui oui oui- non oui non 1 oui OUI OU! 0 Oui oui non 1 oui oui oui 1 O O oui oui non 1 oui oui non 1 0 oui oui oui 2 0 0 oui oui non 1 0 0 oui oui oui 0 0,1 oui oui OUI 0 1 Oui 0,1 Oui oui Oui Oui oui 1 0,25 0 Oui oui oui 0,5 Oui Oui oui Oui Oui Oui CB4 CB5 CB6 CB7 CB8 CB9 CB1O CB11 BB8 (7,6) CB12 8B9(4,3) CB13 BB11 (5,9) CB14 BB11 (8,6) BB14 (9.1) B816 (3,O) B816(6.3) BB15 (4,4) BB15 (8,6) CB20 88l5 (6,3) C821 BB15 (6,3) CB22 BB15 (6,3) CB23 BB15 (6,3) AB7 (8.6) AB15 (14) A816(16,2) AB17 (6.4) BB2 (8) BB5 (9) BB7 (15,4) CB24 BB15 (6,3) CB25 AB21 (8,6) « - » signifie non observé Tableau 7 : Résultats des inspections visuelles de compositions comprenant un copolyaminoacide et du glucagon 5 Exemple Dl a : Stabilité physique de compositions co-polyaminoacide/glucagon/ citrate. [000578] L'inspection visuelle des échantillons est réalisée comme décrit précédemment dans l'exemple Dl. [000579] Les résultats des inspections visuelles des compositions à 1 mg/mi et 3 mg/m1 en glucagon sont reportés dans le tableau 7a. 10 [000580] L'étude des stabilités physiques des compositions des exemples CB26 à CB34 décrites dans le tableau ci-dessous a été menée sur des volumes de 1 ml de composition dans des cartouches de contenance de 3 ml (easy-to-fill de OMPI de 3 ml - RefP4OB41OO.325O). Les spécificités de ce contenant font que les stabilités observées sont souvent supérieures à celles observées en flacons. 15 3061660 129 1 5 10 5 10 10 10 10 10 0,3 0 O 10 0,9 10 Composition Co- polyaminoacid (mg /m1) CB26 BB15 (3,8) CB27 BB15 (3,8) CB28BB15 (3,8) CB29 BB15 (3,8) CB30BB19 (3,3) CB30' 8819 /3,9) CB31 0@15 (11,3) CB32 BB15 (11,3) CB33 BB15 (11,3) CB34 BB15 (11,3) « - » signifie non mesuré Stabl Stabl Stabl Stabl e à 21 e à 28 e à e à 42 35j Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Oui Non Non Non Oui Oui Non Non Oui Oui Oui Non Oui Oui Non Non Glucago Citrat (mM) Zinc (mM n (m8h11) Tableau 7a : résultats des inspections visuelles de compositions à 37°C comprenant un copolyaminoacide, du glucagon, du citrate, avec ou sans zinc. 5 Les compositions comprenant du co-polyaminoacide BB15 à 3,8 mg/ml, du glucagon à 1 mg/mi et du citrate à 5 ou 10 mM, avec du zinc à 0,3 mM ou sans zinc présentent une stabilité physique à 37°C en conditions statiques en cartouche d'au moins 42 jours. Les compositions comprenant du co-polyaminoacide BB19 à 3,3 et 3,9 mg/ml, du 10 glucagon à 1 mg/ml, du citrate à 10 mM, et de la L-méthionine (1 mg/mi) présentent une stabilité physique à 37°C en conditions statiques en cartouche d'au moins 21 jours. Les compositions de co-polyaminoacide BB15 à 11,3 mg/ml, du glucagon à 3 mg/m1 et du citrate à 10 nnM, avec ou sans zinc présentent une stabilité physique à 37°C en 15 conditions statiques en cartouche d'au moins 21 jours. Exemple D2 : Stabilité chimique de compositions co-polyaminoacide/glucagon [000581] Une méthode RP-HPLC adaptée à partir des directives USP a été utilisée pour déterminer la concentration de glucagon et de ses produits de dégradation. Cette 20 méthode a été utilisée pour évaluer la stabilité chimique du glucagon des compositions. Les conditions HPLC sont les suivantes : - Colonne : 4.6 x 150 mm, C-18 - Phase mobile A : Solution S/Acétonitrile 80/20 (v/v), la solution S étant une solution de dihydrogénophosphate de potassium 150 mm dans l'eau, ajustée à 25 pH 2,7 avec une solution d'acide phosphorique à 85% - Phase mobile B : eau/acétonitrile 60/40 (v/v) - Phase mobile C : eau/acétonitrile 10/90 (v/v) 3061660 Température de colonne : 45°C Detection : UV 210 nm Température de l'autoéchantillonneur : 4°C 5 [000582] La recouvrance a été mesurée sur des échantillons à 7, 14 et 21 jours à 37°C en conditions statiques. Les données de stabilités chimiques, c'est-à-dire de recouvrance en glucagon obtenues par RP-HPLC sont présentées dans le tableau 8 suivant. [000583] L'étude des stabilités chimiques des compositions décrites dans le tableau 10 ci-dessous a été menée sur des compositions dans des flacons (1 ml de composition dans flacon de contenance de 3 ml (Adelphi - ref :VCDIN2RDLS1)). Exemple CB5 CB7 CB8 CB10 CB14 CB1e CB4 L- méthionine (mg/mi 0 0 O 0 0 0 Recouv rance à 14 j k 90 > 90 k 90 k 90 .> 90 k 90 Co- Polyaminoacide (mg/m1) BB15 (3,8) 4@7 (8.6) AB15 (14) AB17 (6.4) 8B20) BB7 (15,4) BB11 (8,6) Glucagon (mg/m1) 1 1 1 1 1 1 Exenatide (mg/mi) 0 0 0 O 0 Recouv rance à 7] k 95 > 95 > 95 k 95 .> 95 Recouv rance à 21 j > 85 >O5 > 90 k 90 k 90 k 90 0 0,25 0,5 0 O 0 CB19 ÇB20 CB21 CB23 CB24 CB25 BB14 (9,1) BB16 (6,3) 8B15 (4,4) BB15 (8,6) BB15 (6,3) BB15 (6,3) BB15 (6,3) BB15 (6,3) AB21 (8,6) 1 1 k 90 > 90 >90 _k 90 u90 > 90 > 85 CB15 0 0 0 0 0,1 1 0 0 0 2 1 u95 >95 >95 k 90 > 90 > 90 >. 85 90 « - » signifie non mesure 15 Tableau 8 : Mesures de recouvrance de compositions comprenant un co-polyaminoacide et du glucagon 3061660 131 Exemple D2a : Stabilité chimique de compositions co-polyaminoacide/glucagon/citrate [000584] De manière analogue à l'exemple D2, la recouvrance a été mesurée sur des échantillons à 2, 4 et 6 semaines à 37°C en conditions statiques. Les données de stabilités chimiques, c'est-à-dire de recouvrance en glucagon obtenues par RP-HPLC 5 sont présentées dans le tableau suivant. [000585] L'étude des stabilités chimiques des compositions des exemples CB26 à CB29 et CB31 à CB34 décrites dans le tableau ci-dessous a été menée sur des échantillons de compositions prélevés dans des cartouches (1 ml de composition dans cartouche de contenance de 3 ml (easy-to-fill de OMPI de 3 ml - Ref P40B4100.3250)). 10 Composition Co- Glucago Citrat Zinc Recouvranc s Polyaminoacid n e (mM e à 14 j e (mg/mi) (mM) ) (mg/mi) CB26 BB15 (3,8) _k 85 CB27 BB15 (3,8) 10 k 90 CB28 BB15 (3,8) 5 0,3 k 90 CB29 BB15 (3,8) 1 10 0,3 k 95 CB31 BB15 (11,3) 10 0 k90 CB32 BB15 (11,3) 10 0,3 95 CB33 BB15 (11,3) 10 0,9 95 CB34 BB15 (11,3) 10 1,8 95 k 85 ?. 90 k 90 k 90 k#5 k 80 k 85 k 80 e/5 85 85 85 Recouvranc | Recouvranc e à 28 j | e à 42 j - » signifie non mesuré. Tableau 8a : Mesures de recouvrance de compositions comprenant un copolyaminoacide, du glucagon et du citrate 15 Partie F : Etudes de pharmacodynamie chez le porc [000586] Des études ont été conduites dans l'objectif d'évaluer la pharmacodynamie d'une composition de co-polyaminoacide BB15 et de glucagon (exemple CB1e) à une dose de 2pg/kg chez le cochon. [000587] Les effets hyperglycémiants de cette composition de l'exemple CB1e ont 20 été comparés par rapport à une injection d'une solution de glucagon (Glucagen®, NOVO NORDISK) à 2pg/kg. [000588] Douze animaux qui ont été mis à jeun depuis 5,5 heures environ ont été injectés dans le flanc à la dose de 2pg/kg à l'aide d'un stylo Junior Star®. Afin de d'affranchir des effets régulateurs de la glycémie par la sécrétion d'insuline, en réponse 25 à l'effet hyperglycémiant induit par l'injection de glucagon, 30 minutes avant l'injection, 44 pg/kg d'octréotide est administré aux cochons par voie sous cutanée. Trois prélèvements sanguins sont réalisés dans l'heure précédant l'injection (T-40min, T20min et T-10min), afin de déterminer le niveau basal de glucose et de glucagon. Des 3061660 132 prélèvements sanguins sont ensuite réalisés pendant les 3h suivant l'administration. La glycémie est déterminée au moyen d'un glucomètre. [000589] Les courbes de pharmacodynamie médianes de la glycémie exprimées par la différence de glucose par rapport au niveau basal sont représentées à la figure 1. 5 [000590] La courbe représentant les résultats obtenus avec la composition de l'exemple CB1e est représentée par des carrés vides et la courbe représentant les résultats de la composition de glucagen® est représentée par des ronds pleins. [000591] Les résultats de pharmacodynamie obtenus à partir de l'administration de la formulation de l'exemple CB1e et de Glucagen® montrent une activité 10 hyperglycémiante rapidement après injection avec une glycémie maximale atteinte 30 minutes après injection. Ces profils pharmacodynamiques montrent que la formulation de l'exemple CBle et le glucagon humain commercial (Glucagen®) ont des propriétés pharmacodynamiques similaires. 15 REVENDICATIONS1. Composition sous forme d'une solution aqueuse injectable, dont le pH est compris entre 6, 0 et 8,0, comprenant au moins : a) du glucagon humain ; b) un co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes Hy, ledit co-polyaminoacide étant constitué d'unités glutamiques ou aspartiques et lesdits radicaux hydrophobes Hy étant de formule I suivante : *--(GpR GpAH GpC) r a P Formule I dans laquelle 0 GpR est un radical de formules II ou II' : Il H H H " R N *Ir; *-N-R-N-* hi ou * GpA est un radical de formules III ou III' : 0 HN-* Il Al 0 HN-* III ou * Il H GpC est un radical de formule IV : 0 IV; les * indiquent les sites de rattachement des différents groupes liés par des fonctions amides ; a est un entier égal à 0 ou à 1 ; b est un entier égal à O ou à 1; p est un entier égal à 1 ou à 2 et 3061660 134 o si p est égal à 1 alors a est égal à O ou à 1 et GpA est un radical de formule III' et, o si p est égal à 2 alors a est égal à 1, et GpA est un radical de formule III; 5 c est un entier égal à O ou à 1, et si c est égal à 0 alors d est égal à 1 ou à 2; d est un entier égal à 0, à 1 ou à 2; r est un entier égal à 0 ou à 1, et o si r est égal à 0 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au copolyaminoacide via une liaison covalente entre un carbonyl du radical 10 hydrophobe et un atome d'azote en position N terminale du co- polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine en position N terminale du précurseur du co-polyaminoacide et une fonction acide portée par le précurseur du radical hydrophobe , et o si r est égal à 1 alors le radical hydrophobe de formule I est lié au co- 15 polyaminoacide : via une liaison covalente entre un atome d'azote du radical hydrophobe et un carbonyl du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction amine du précurseur du radical hydrophobe et une fonction acide portée par 20 le précurseur du co-polyaminoacide ou - via une liaison covalente entre un carbonyl du radical hydrophobe et un atome d'azote en position N terminal du co-polyaminoacide, formant ainsi une fonction amide issue de la réaction d'une fonction acide du précurseur du radical hydrophobe et une fonction 25 amine en position N terminale portée par le précurseur du co- polyaminoacide; R est un radical choisi dans le groupe constitué par : o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant si GpR est un radical de formule II de 2 à 12 atomes de carbone ou si GpR est un radical de formule II' de 1 à 11 atomes de carbone ; o un radical alkyle divalent, linéaire ou ramifié, comprenant si GpR est un radical de formule II de 2 à 11 atomes de carbone ou si GpR est un radical de formule II' de 1 à 11 atomes de carbone, ledit radical alkyle portant une ou plusieurs fonctions -CONH2, et o un radical éther ou polyéther non substitué comprenant de 4 à 14 atomes de carbone et de 1 à 5 atomes d'oxygène ; A est un radical alkyle linéaire ou ramifié comprenant de 1 à 6 atomes de carbone; 3061660 135 5 B est un radical alkyle linéaire ou ramifié, éventuellement comprenant un noyau aromatique, comprenant de 1 à 9 atomes de carbone; Cx est un radical alkyl monovalent linéaire ou ramifié, dans lequel x indique le nombre d'atomes de carbone et : o si p est égal à 1, x est compris entre 11 et 25 (11 x 25) : o si p est égal à 2, x est compris entre 9 et 15 (9 x 5_ 15), le ratio i entre le nombre de radicaux hydrophobes et le nombre d'unités glutamiques ou aspartiques étant compris entre entre O 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle p = 1, représentée par la formule V suivante : 20 GpA)- GpC a formule V GpR, GpA, GpC, r et a ont les définitions données précédemment. 25 3. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que lesdits radicaux hydrophobes sont choisis parmi les radicaux hydrophobes de formule I dans laquelle a = 1 et p = 2, représentée par la formule VI suivante : 30 dans laquelle GpR GpA GpC) 2 Formule VI GpR, GpA, GpC, r et a ont les définitions données précédemment. 3061660 136 4. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII suivante : N H Hy formule VII 5 dans laquelle, D représente, indépendamment, soit un groupe -CH2- (unité aspartique) soit un groupe -CH2-CH2- (unité glutamique), - Hy est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de 10 formules I, V ou VI, dans lesquelles r = 1 et GpR est un radical de Formule II, Ri est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules I, V ou VI dans lesquelles r=0 ou r = 1 et GpR est un radical de Formule II', ou un radical choisi dans le groupe constitué par un H, un 15 groupe acyle linéaire en C2 à C10, un groupe acyle ramifié en C3 à C10, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate, R2 est un radical hydrophobe choisi parmi les radicaux hydrophobes de formules I, V ou VI dans lesquelles r = 1 et GpR est un radical de Formule II, ou un radical -NR'R", R' et R" identiques ou différents étant choisis 20 dans le groupe constitué par H, les alkyles linéaires ou ramifiés ou cycliques en C2 à C10, le benzyle et lesdits R' et R" alkyles pouvant former ensemble un ou des cycles carbonés saturés, insaturés et/ou aromatiques et/ou pouvant comporter des hétéroatomes, choisis dans le groupe constitué par 0, N et S, 25 X représente un H ou une entité cationique choisie dans le groupe comprenant les cations métalliques ; 3061660 137 n + m représente le degré de polymérisation OP du co-polyaminoacide, c'est-à-dire le nombre moyen d'unités monomériques par chaîne de copolyaminoacide et 5 n + m 35O; 5 5. Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VII, dans laquelle Ri = R'i et R2 = R'2, de formule VIIa suivante : Hy Formule VIIa 10 dans laquelle, m, n, X, D et Hy ont les définitions données précédemment, R'i est un radical choisi dans le groupe constitué par un H, un groupe acyle linéaire en C2 à C10, un groupe acyle ramifié en C3 à C10, un benzyle, une unité « acide aminé » terminale et un pyroglutamate, 15 R'2 est un radical -NR'R", R' et R" identiques ou différents étant choisis dans le groupe constitué par H, les alkyles linéaires ou ramifiés ou cycliques en C2 à C10, le benzyle et lesdits R' et R" alkyles pouvant former ensemble un ou des cycles carbonés saturés, insaturés et/ou aromatiques et/ou pouvant comporter des hétéroatomes, choisis dans le groupe constitué par(], N et S. 20 6. Composition selon la revendication 4, caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VII dans laquelle n = O de formule VIIb suivante : 3061660 138 Formule VIIb dans laquelle m, X, D, Ri et R2 ont les définitions données précédemment et au moins Ri ou R2 est un radical hydrophobe de formule I, V ou VI. 5 7. Composition selon la revendication 6, caractérisée en ce que le co- polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formule VIIb dans laquelle R2 est un radical hydrophobe de formule I, V ou VI dans lesquelles r = 1 et GpR est de Formule II'. 10 8. Composition selon l'une quelconque des revendications 4 à 7, caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VII, VIIa ou VIIb dans lesquels le au moins un co-polyaminoacide est choisi parmi les co-polyaminoacides dans lesquels 15 le groupe D est un groupe -CH2- (unité aspartique). 9. Composition selon l'une quelconque des revendications 4 à 7, caractérisée en ce que le co-polyaminoacide porteur de charges carboxylates et de radicaux hydrophobes est choisi parmi les co-polyaminoacides de formules VII, VIIa ou VIIb dans lesquels le 20 au moins un co-polyarrinoacide est choisi parmi les co-polyaminoacides dans lesquels le groupe D est un groupe -CH2-CH2- (unité glutamique). 10. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la concentration en co-polyaminoacide porteur de charges 25 carboxylates et de radicaux hydrophobes est au plus de 40 mg/mL. 11. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la concentration en glucagon humain est comprise entre 0,25 et 5 mg/mL. 30 3061660 139 12. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le ratio molaire [radical hydrophobe]/[glucagon humain] est inférieur à 15. 5 13. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un composé polyanionique. 14. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un sel de zinc. 10 15. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre une hormone gastrointestinale. 16. Composition selon la revendication 1], caractérisée en ce que l'hormone 15 gastrointestinale est choisie dans le groupe constitué par l'exenatide, le liraglutide, le lixisenatide, l'albiglutide et le dulaglutide, leurs analogues ou dérivés et leurs sels pharnnaceutiquement acceptables. 17. Composition selon l'une quelconque des revendications 13 et 14, caractérisée en 20 ce que la concentration en hormone gastrointestinale est comprise dans un intervalle de 0,01 à 10 mg/mL.