Brevet FR3051368A1 — publié le 20171124

La présente invention a pour objet une composition pharmaceutique destinée à être utilisée par voie orale ou par voie topique pour soulager et prévenir les douleurs musculaires et articulaires caractérisée en ce qu'elle mime les effets des peptides du venin du Mamba noir (Dendroaspis polylepsis)et qu'elle possède des propriétés analgésiques, anti-oxydantes et anti-inflammatoires. Cette invention concerne le soulagement et la prévention des douleurs musculaires et articulaires en général et en particulier faisant suite à un exercice physique de type sportif. On sait que le Mamba noir (Dendroaspis polylepis), espèce de serpents de la famille des Elapidae, possède un venin mortel pour l'homme. Ce serpent venimeux doit son nom à la coloration noire de l'intérieur de sa bouche. Il est l'un des serpents venimeux les plus grands et les plus répandus d'Afrique. Le venin du mamba noir contient des neurotoxines et des cardiotoxines. Sa morsure inocule en général 100 à 120 mg de venin, mais cela peut aller jusqu'à 400 mg, 10 à 15 mg de son venin étant mortel pour un homme adulte qui succombe entre 10 et 20 minutes après l'injection. Par conséquent, la quantité de venin injectée en une seule morsure suffirait en théorie pour tuer entre 12 et 40 hommes. La létalité de sa morsure dépend d'un certain nombre de facteurs, tels que la quantité de venin injectée et l'emplacement de la morsure. Cependant, si le venin atteint la circulation sanguine rapidement, les risques de mortalité augmentent drastiquement. Le premier symptôme d'une morsure est une douleur locale dans la zone de la morsure, cependant moins douloureuse que celle des serpents disposant d'un venin chargé d'hémotoxines. Puis la victime sent des fourmillements à ses extrémités, cligne des yeux, sa vision se rétrécit, elle se met à transpirer et à saliver de manière excessive, puis perd le contrôle de ses muscles. Si la victime ne reçoit pas de soins appropriés très rapidement, les symptômes progressent, et elle éprouve alors des nausées, perd son souffle, est confuse, a des problèmes pour respirer et se paralyse. Elle peut éventuellement être prise de convulsions, d'un arrêt respiratoire, d'un coma, ou mourir de la suffocation résultant de la paralysie des muscles respiratoires. 3051368 2 Bien qu'avec un traitement il soit possible de soigner 99 % des victimes, si la morsure n'est pas traitée, le taux de mortalité est de 100 %. La paralysie causée par le venin n'est pas permanente, bien que la victime ait besoin de respirer artificiellement jusqu'à 5 ce que son propre système immunitaire ait complètement nettoyé le sang de toute trace du venin. On a découvert que le venin de ce serpent contient des peptides, dénommées mambalgines, qui possèdent des propriétés analgésiques. La mambalgine bloque les canaux ASIC et produit a un effet durable 10 contre la douleur, comparable à celui de la morphine (Sylvie Diochot, Anne Baron, Miguel Salinas, Dominique Douguet, Sabine Scarzello, Anne-Sophie Dabert-Gay, Delphine Debayle, Valérie Friend, Abdelkrim Alloui, Michel Lazdunski, Eric Lingueglia, Black mamba venom peptides target acid-sensing ion channels to abolish pain, Nature 15 490(7421):552-5, October 2012). Ces peptides peuvent être obtenus soit par purification à partir de venin de Mamba noir par un procédé complexe utilisant une colonne échangeuse d'ion et une chromatographie à phase inverse soit par une synthèse coûteuse. Bien que réputée non neurotoxique la toxicité 20 générale est loin d'être établie et le fait que la substance provienne d'un venin de serpent très souvent mortel rend l'utilisation coûteuse, difficile et délicate. C'est en étudiant les expressions géniques de certaines plantes 25 que la demanderesse a découvert de manière tout à fait inattendue que ces problèmes peuvent être facilement résôlus par l'utilisation conjointe de plusieurs substances naturelles possédant un profil d'expression génique proche de celui induit par ces peptides de venin de Mamba noir. 30 La demanderesse décrit ci-dessous des compositions pharmaceutique permettant d'obtenir des effets voisins des peptides du venin de Mamba noir comme des effets analgésiques couplé à des effets antioxydants et anti-inflammatoire capable de soulager et de prévenir les douleurs musculaires et articulaires. Ces effets sont 35 par exemple intéressants pour les douleurs musculaires et articulaires en général et en particulier faisant suite à un exercice physique de type sportif. 3051368 3 L'objet de la présente invention concerne donc une composition pharmaceutique destinée à être utilisée par voie orale ou par voie topique pour soulager et prévenir les douleurs musculaires et articulaires faisant suite en général et en particulier à un 5 exercice physique de type sportif caractérisée en ce qu'elle mime les effets des peptides du venin du Mamba noir (Dendroaspis polylepsis) et qu'elle possède des propriétés analgésiques, antioxydantes et anti-inflammatoires. Il est à remarquer que la composition pharmaceutique suivant la demande est caractérisée en 10 ce qu'elle est non toxique contrairement au venin de mamba noir. Dans les exemples qui vont suivre, on verra que dans les essais qui ont été réalisés par la demanderesse les substances naturelles les plus efficaces pour mimer l'effet du venin de ce serpent sont une association d'au moins deux plantes différentes et de propolis 15 ayant un profil d'expression génique proche de celui obtenue par les peptides de du venin du Mamba noir (Dendroaspis polylepsis). Et que donc l'objet de la présente invention concerne également une composition pharmaceutique suivant la demande caractérisée en ce qu'elle est constituée d'une association d'au moins deux 20 plantes différentes et de propolis ayant un profil d'expression génique proche de celui obtenue avec les peptides du venin du Mamba noir (Dendroaspis polylepsis). Et plus précisément les deux plantes associées à la propolis sont le pin (Pinus pinaster) et la sauge (Salvia officinalis) et 25 préférentiellement leurs feuilles. Pour la clarté des explications qui suivent nous décidons d'appeler PSP l'association de Pin, Sauge et Propolis. La demanderesse a remarqué durant ses études que le profil d'expression génique modulé par les peptides du venin du Mamba 30 noir a les gènes de la famille des canaux ioniques ASIC en commun avec l'expression génique modulé par l'association PSP. Les utilisateurs ont noté une diminution de la sensation de douleurs musculaires et ostéoarticulaires causé par des mouvements ou positions répétés, ou par la pratique d'exercices physiques 35 intense grâce à l'ingestion quotidienne de 500mg de PSP pendant un mois. 3051368 4 L'objet de la présente invention concerne donc en particulier une composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle réduit les douleurs musculaires et ostéoarticulaires après une utilisation quotidienne de 500mg pendant un mois. 5 Les douleurs musculaire dues à la pratique régulière d'exercice de type sportif par exemple ou encore l'immobilisation du corps dans une même position pendant une longue période par exemple ou encore des mouvements répétés par exemple induisent également une augmentation de l'inflammation et de l'oxydation des tissues 10 musculaires. En effet l'activité physique induit des dommages musculaires et mène à la production de marqueurs pro-inflammatoire. Un effort long et intense peut augmenter le stress oxydatif au-delà de ce que l'organisme peut gérer, ce qui a pour conséquences d'augmentation le niveau d'oxydation du corps et d'aggraver 15 l'inflammation. Ce genre de phénomène est également observé dans le cas d'une vie sédentaire ou de mouvements ou positions répétés. Une forte inflammation chronique peut provoquer des dommages tissulaires et augmenter les douleurs et les maladies articulaires comme par exemple l'arthrose. De plus, une inflammation chronique 20 est souvent liée à l'obésité et au diabète par une augmentation de la résistance à l'Insuline. Cette augmentation de l'inflammation et de l'oxydation est réduite par la consommation de 500mg par jour de l'association PSP. L'association PSP est donc en plus caractérisée en ce qu'elle réduit l'inflammation et l'oxydation 25 induite par des exercices physiques réguliers à une dose de 500mg par jour. D'après le cycle circadien de la sensibilité à la douleur, l'efficacité de la prise d'analgésiques sur l'organisme est à une chronérgie maximum à 15h. L'association PSP est caractérisée en ce 30 qu'elle ait un maximum d'efficacité lorsqu'elle est prise de manière chronobiologique au milieu de la journée. La composition pharmaceutique contenant l'association PSP se présente sous la forme d'une émulsion eau dans huile (E/H) ou huile dans eau (H/E) ou d'émulsion multiple (H/E/H, E/H/E), de 35 microémulsion, d'émulsion à phase gémellaires, d'émulsion PIT, de nano-émulsion, de pseudo-émulsion (dispersion stable de deux phases non miscibles au moyen de gélifiant), de gel aqueux, de gel gras, de gel hydro-alcoolique, de phase grasse, de suspension, de 3051368 5 solution moussante ou non, de poudre, de gel ou d'émulsion lyophilisée et pouvant se présenter sans que cela soit limitatif en gels, liquides, boisson prête à l'emploi, crèmes, pâtes, lotions, émulsions, solides, huiles, sirops, inhalation, masques, 5 stick, comprimés, sirop, sprays, aérosol, gélules, poudres. La demanderesse va maintenant donner à titre d'exemple les études qui ont permis de sélectionner ces substances naturelles en comparaison avec les peptides de venin du Mamba noir ainsi que des 10 compositions sans que ces exemples ne soient limitatifs. Rappelons que pour la clarté des explications qui suivent nous décidons d'appeler PSP l'association de Pin, Sauge et Propolis. Exemple 1 : Activité antidouleur 15 Afin de mesurer l'activité anti douleur de l'association PSP, une étude clinique en double aveugle a été réalisée sur 40 volontaires atteints de douleur ostéoarticulaires. Les 40 patients ont été répartis par randomisation en 2 groupes de 20 personnes. Le premier groupe a ingéré une seule dose de 500mg de 20 l'association PSP décrite par la présente invention tandis que le deuxième groupe a ingéré un placebo chaque jour pendant un mois. Le niveau de douleurs ressenties par les patients a été évalué au début de l'étude et après un mois de traitement grâce à une échelle comprenant différents niveaux : pas de douleurs 25 ressenties, faibles douleurs, douleurs modérées et fortes douleurs. La majorité des patients ressentent au début de l'étude des douleurs modérées sans différences significatives entre les deux groupes. Après un mois de traitement, les patients ayant ingéré l'association PSP à une dose de 500mg par jour pendant un 30 mois déclarent à 90% ressentir une baisse de la sensation de douleurs : passage de modérée à faible. De plus, aucun patient n'a ressenti d'effet secondaire lors de l'étude. En revanche, le groupe ayant consommé un placebo ne ressent pas de changement dans la sensation de douleur avant et après l'étude qui reste à 35 un niveau modéré. L'association PSP réduit les douleurs ostéoarticulaires après un mois d'ingestion à une dose de 500mg par jour. 3051368 6 Exemple 2 : Activité anti-oxydante et anti-inflammatoire Une étude a été réalisée afin d'évaluer l'effet de l'ingestion de supplément alimentaire contenant l'association PSP sur les marqueurs d'inflammations (C-réactive protéine et Interleukine-6) 5 et sur les marqueurs d'oxydation lipidique dans le sang (MDA et TAC). Cette étude a été réalisée avec 38 volontaires en bonne santé sans distinction de sexe avec un âge moyen de 36.1±3.9 ans, sans aucune maladie connue, avec un indice de masse corporel (BMI) de 18.5 kg/mg2 à 24.9 kg/mg2. Les participants ont montrés 10 au début de l'étude un niveau élevé des marqueurs sanguins d'inflammations. Les 38 patients ont été répartis par randomisation en 2 groupes de 19 personnes. Le premier groupe a ingéré une seule dose de 500mg de l'association PSP décrite par la présente invention tandis que le deuxième groupe a ingéré un 15 placebo chaque jour pendant quatre semaines. Il a été demandé aux patients des deux groupes sans distinction de pratiquer 3 fois par semaines 90min de course à pied. Les participants ont subi au début et à la fin de l'étude une analyse sanguine des marqueurs d'inflammations (C-réactive protéine et Interleukine-6) 20 et sur les marqueurs d'oxydation lipidique dans le sang (MDA et TAC). Le niveau sanguin des marqueurs pro-inflammatoire IL-6 des participants au début et à la fin de l'étude pour les deux groups est montré dans le tableau suivant: 25 Il-6 Jour 0 Jour 28 Valeur P PSP (N=19) 8.05±0.5 3.67±0.2 P 0.05 On observe une augmentation du TAC dans le plasma sanguin dans le groupe PSP alors qu'aucune modification significative n'est 15 observée dans le groupe placebo. Le niveau sanguin des marqueurs de dommages musculaires (MDA) chez les participants au début et à la fin de l'étude dans les 2 groupes est montré dans le tableau suivant : TAC (nmol/L) Jour 0 Jour 28 Valeur P PSP (N=19) 1.32±0.4 1.55±0.3 P 0.05 20 Les participants montrent au début de l'étude un niveau moyen de stress oxydatif élevé. Une diminution signification du niveau de MDA est observée dans le groupe PSP et plus précisément, le niveau de MDA diminue de 43%. Alors qu'une légère augmentation 25 est observée dans le groupe placebo. Ces résultats montrent que PSP est efficace pour réduire l'oxydation lipidique causée par la pratique d'activité sportive intense et régulière. De plus, aucun patient n'a ressenti d'effet secondaire lors de l'étude. 3051368 8 Exemple 3 : Boisson antioxydantes - PSP 0,1-1,0 g - Proto-lait 0,1-6,0 g - Jus de pommes concentré 0 1-0,7 g 5 - Poudre de lait écrémé 0 05-0,5 g - Oligosaccharides de glucose 0 05-0,5 g - Fibres alimentaires 0 01-0,1 g Cette formule se présente sous la forme de poudre à diluer dans de l'eau et à utiliser 2 fois par jour. 10 Exemple 4 : Boisson gélifiée antidouleur PSP 0,5 g - Acides aminés 1,0-5,0 g - Raisin 10-20 g 15 - Acide citrique 0 5-2 g - Agent gélifiant 2-3,5 g - Lactate de Calcium 1-2 g 20 Cette formule se présente sous la forme d'une boisson gélifiée à boire une fois par jour. Après 4 semaines d'utilisation, les utilisateurs affirment ressentir moins de douleurs musculaires après des mouvements répétés ou de longues immobilisations dans la même position comme par exemple une position assise à un bureau. 25 Exemple 5 : Emulsion gel H/E pour le corps Carbopol 981 (commercialisé par Goodrich) 0,6 g - Alcool éthylique 15 g - Huile de silicone volatile 3 g - Huile de purcellin 3 g 30 - PSP 2 g - Parfum 0,4 g - Triéthanolamine 0,2 g - Conservateurs 0,3 g - Eau déminéralisée qsp 100 g 35 Cette émulsion gel, appliquée une fois par jour permet de réduire les douleurs locales. 3051368 9 Exemple 6: Complément alimentaire analgésique - PSP 50-100 mg - Dextrine 300-450 mg - Maltose 300-500 mg 5 - Jus de fruits 50-90 mg - Acide citrique 100-200 mg - Arômes naturels 10-20 mg Une étude sur 60 volontaires, hommes et femmes, âgés de 25 à 50 ans, depuis' au moins 6 mois, la chronergie de l'effet analgésique 10 de ce complément alimentaire. Au 30ème jour, les résultats montrent que ce complément alimentaire pris 1 fois par jour à 15h est à une plus grande activité analgésique que pris 1 fois par jour à 8h. REVENDICATIONS1.)Composition pharmaceutique destinée à être utilisée par voie orale ou par voie topique pour soulager et prévenir les douleurs musculaires et articulaires caractérisée en ce qu'elle est constituée d'une association d'au moins deux plantes différentes et de propolis ayant un profil d'expression génique proche de celui obtenue par les peptides du venin du Mamba noir (Dendroaspis polylepsis) tout en étant non toxique. 2.)Composition pharmaceutique selon la revendication 1 caractérisée en ce que les deux plantes sont le pin (Pinus pinaster) et la sauge (Salvia officinalis) et préférentiellement leurs feuilles. 3.)Composition pharmaceutique selon les revendications 1 à 2 caractérisée en ce que le profil d'expression génique stimulé par les peptides du venin du Mamba noir ont les gènes de la famille des canaux ioniques ASIC en commun avec l'expression génique stimulé par l'association de propolis, de pin (Pinus pinaster) et de sauge (Salvia officinalis). 4.)Composition pharmaceutique selon les revendications 1 à 3 caractérisée en ce que la composition est sous la forme d'une émulsion eau dans huile (E/H) ou huile dans eau .(H/E) ou d'émulsion multiple (H/E/H, E/H/E), de microémulsion, d'émulsion à phase gémellaires, d'émulsion PIT, de nano- émulsion, de pseudo-émulsion (dispersion stable de deux phases non miscibles au moyen de gélifiant), de gel aqueux, de gel gras, de gel hydro-alcoolique, de phase grasse, de suspension, de solution moussante ou non, de poudre, de gel ou d'émulsion lyophilisée et pouvant se présenter sans que cela soit limitatif en gels, liquides, boisson prête à l'emploi, crèmes, pâtes, lotions, émulsions, solides, huiles, sirops, inhalation, masques, stick, comprimés, sirop, sprays, aérosol, gélules, poudres.