Brevet FR3050945A1 — publié le 20171110

Laboratoire mobile pour analyse génétique La présente invention a pour objet un laboratoire mobile pour l'analyse en série d'acides nucléiques à partir d'un échantillon biologique, en particulier dans le domaine de la criminalistique. Elle concerne le domaine technique des laboratoires mobiles rapidement transportables sur un lieu, en particulier des scènes d'infractions (scène de crime par exemple) en vue de la détection et de l'identification rapide, en particulier de l'identité de personnes, à partir d'un échantillon biologique. Généralement, une équipe de spécialistes prélève des échantillons (prélèvement de sang, de la moelle osseuse, des cellules buccales, du tissu biologique humain dégradé ou non dégradé) sur une scène d'infraction. Ces échantillons sont ensuite conditionnés puis transportés par un véhicule spécialisé vers un laboratoire d'analyse génétique afin d'identifier la personne associée à l'échantillon. Une fois que l'identification est effectuée, les informations sur l'identité de la ou les personne(s) ainsi identifiée(s) sont transmises aux autorités compétentes qui prennent les mesures adéquates. Les véhicules spécialisés acheminant les échantillons sont au mieux des véhicules frigorifiques ou à minima des véhicules équipés d'une glacière, aucun diagnostic ne pouvant être effectué à l'intérieur même dudit véhicule. En outre, il existe très peu de centres ayant un laboratoire d'analyse génétique accrédité pour l'identification de personnes si bien que le temps de transport des échantillons depuis la scène d'infraction jusqu'au laboratoire d'analyse peut prendre plusieurs heures, voir plusieurs jours en fonction de l'étendu du territoire, des conditions d'accès à la scène d'infraction, de sa localisation par rapport au laboratoire d'analyses le plus proche et les moyens de transport à disposition comme par exemple pour le crash aérien de la Germanwings intervenu le 24 Mars 2015 où un avion s'est écrasé au coeur des Alpes Françaises. Ce laps de temps qui s'écoule entre le prélèvement des échantillons et la transmission des informations sur l'identité des 3050945 2 personnes associées aux échantillons aux autorités compétentes n'est donc pas optimal, ce qui est fortement préjudiciable dans des situations particulièrement sensibles où le temps nécessaire à l'obtention des résultats d'analyses est un paramètre crucial. 5 A ce jour, des modèles de laboratoire dits mobiles sont proposés sur le marché mais leur activité est dédiée à la détection de pathogènes (virologie, bactériologie), de substances chimiques ou plus généralement de laboratoires militaires de campagne aux fins de soins médicaux et d'analyses biologiques simples. Toutefois, 10 aucun de ces laboratoires mobiles ne permet de mettre en oeuvre des analyses génétiques (ADN ou ARN) complètes du prélèvement jusqu'à la détermination avec certitude de l'identité de la personne associée à l'échantillon, depuis le lieu d'échantillonnage, avec le respect des contraintes liés aux risques de contamination et donc de mauvaise identification de personne propre au domaine de la 15 criminalistique. Les contraintes rencontrées pour la mise en oeuvre d'un tel laboratoire mobile sont les contraintes d'environnement liées aux risques de contamination ADN ainsi qu'au matériel traditionnel nécessaire pour l'amplification d'acides nucléiques et en particulier le matériel nécessaire pour le séquençage qui ne sont pas conçus pour 20 être déplacés de leur site initial d'installation. Le problème technique à résoudre était donc de proposer un laboratoire transportable au plus près d'une scène d'infraction, configuré avec tout le matériel traditionnel nécessaire et adapté pour permettre de réaliser des identifications de personnes par analyse génétique à partir d'un échantillon, dans des conditions 25 d'analyses au moins aussi fiables que dans un laboratoire conventionnel afin de ne pas pouvoir remettre en cause la fiabilité des résultats. Ce problème doit être résolu tout en permettant une mise en oeuvre facile par un personnel réalisant traditionnellement ces opérations dans un laboratoire classique d'analyse génétique, sans besoin de formation supplémentaire, et à un coût acceptable, en particulier 30 pour une utilisation ponctuelle par les forces de police ou armée où le coût est pris en charge par la collectivité. Enfin il est souhaitable que ce laboratoire mobile puisse être acheminé au plus près de n'importe quel type de scènes d'infraction quelque soit sa localisation géographique. 3050945 3 La Demanderesse a résolu ce problème en mettant au point un laboratoire mobile de conception simple, comportant les matériels d'analyse génétique utilisés en routine dans un laboratoire traditionnel et adapté pour le laboratoire mobile lorsqu'il est nécessaire de les déplacer, ne nécessitant pas de formation 5 supplémentaire du personnel car utilisant les mêmes matériels et les mêmes protocoles et rapidement opérationnel sur la scène d'infraction, et susceptible d'être acheminé facilement par la route, mais également par voie maritime, ferroviaire ou aérienne. 10 Ledit laboratoire mobile a une configuration qui permet de respecter le principe de la « marche en avant » du traitement d'un échantillon, à savoir : une première zone dans laquelle l'échantillon à analyser est inséré dans le laboratoire et rentre dans la zone analytique où sont réalisées les opérations techniques préparatoires à l'amplification génique par PCR ; 15 une seconde zone où est réalisée à la fois l'amplification génique par PCR dans le thermocycleur (22), la mise en contact des produits d'amplification avec le mélange de réaction de séquençage, et le séquençage. 20 Un autre but de l'invention est de proposer un laboratoire mobile dans un véhicule, se déplaçant de manière autonome sur la route. Le laboratoire mobile selon l'invention permet l'analyse en série d'acides nucléiques hors du laboratoire de génétique conventionnel permettant ainsi de 25 disposer d'une capacité d'analyse de masse au plus près de la scène de prélèvement. Par cette méthode de collecte et d'analyse, le délai entre l'installation du laboratoire sur site, la collecte de la trace biologique et la détermination du profil génétique est de moins de trois heures pour les premiers vingt et un échantillons analysés. Le système d'analyse permet ensuite de générer au moins vingt et un résultats 30 supplémentaires toutes les vingt à vingt cinq minutes. Les délais d'obtention des résultats sont ainsi considérablement réduits par rapport au temps nécessaire à l'acheminement et à l'analyse dans un laboratoire classique tout en conservant les avantages d'une production d'analyses en série de plusieurs dizaines de prélèvements. 3050945 4 Ce laboratoire mobile est conçu pour intervenir rapidement sur des scènes d'infraction, par exemple dans le cadre d'un attentat terroriste et pour effectuer directement sur la zone concernée une identification formelle de victimes ou de suspects de l'infraction, afin d'informer en temps réel les autorités compétentes pour 5 prendre rapidement les décisions qui s'imposent quant aux mesures à mettre en place (confirmation ou infirmation de l'identité de la ou les victimes aux familles, mandat d'arrêt à l'encontre d'un suspect, appel à témoin...). Enfin, l'utilisation, pour le prélèvement de l'échantillon à analyser dans le 10 laboratoire mobile selon l'invention, d'un outil de collection de matériel biologique comprenant une tige présentant à au moins une extrémité un corps absorbant sec comprenant des agents surfactants et dénaturants, permet d'éliminer l'étape d'extraction d'ADN et donc de réduire le coût de la main d'oeuvre, des équipements et des consommables de laboratoire nécessaires pour l'analyse génétique, tout en 15 diminuant les risques de contamination de l'échantillon. Un premier objet de la présente invention concerne un laboratoire mobile (1) formé d'un conteneur mobile transportable définissant un local de base, l'espace intérieur dudit local étant isolé de l'extérieur par l'intermédiaire d'au moins un 20 système de fermeture (8), ledit local comportant : o au moins deux espaces distincts l'un de l'autre j. Le premier espace (2) dit « pré-PCR » adapté à la réalisation d'une étape de pré-amplification et comportant : - Un mélange de réaction d'amplification par PCR d'acides nucléiques 25 - Un récipient un deuxième espace (3) dit « post -PCR » adapté à la réalisation d'une étape d'amplification d'acides nucléiques par PCR, de séquençage et de génotypage comportant : - Un dispositif d'analyse PCR (22) 30 - Un séquenceur (20) - Un mélange de réaction de séquençage - Un récipient o un système de sas à ouverture alternée (4a) entre l'extérieur et la zone pré-PCR (2) 3050945 5 de taille adaptée pour le passage d'un échantillon, ledit système de sas à ouverture alternée (4a) permettant la transmission d'échantillons entre l'extérieur et l'espace pré-PCR (2); o un système de fermeture (4b) entre les deux espaces (2) et (3) ledit système de 5 fermeture (4b) rendant les deux espaces (2) et (3) étanches l'un de l'autre et permettant la transmission d'échantillons entre les deux espaces (2) et (3); o un dispositif garantissant une alimentation électrique autonome, continue et secourue. Ledit laboratoire mobile étant adapté à l'analyse génétique et l'identification 10 d'un individu à partir d'un échantillon biologique directement sur le lieu de prélèvement dudit échantillon. Par système de fermeture, on entend désigner selon la présente invention une porte, de préférence coulissante, et permettant l'étanchéité entre les deux espaces 15 qu'elle sépare une fois fermée. Selon un mode de réalisation de l'invention, le système de fermeture (8) sépare l'extérieur du laboratoire mobile de l'espace post-PCR. L'utilisateur du laboratoire mobile selon l'invention rentre alors à l'intérieur du dit laboratoire par le système de fermeture (8) dans l'espace de post-PCR, referme le système de fermeture (8), 20 puis rentre dans l'espace de pré-PCR par l'intermédiaire du système de fermeture (4). Il referme ensuite le système de fermeture (4) afin d'assurer l'étanchéité entre les 2 espaces. De manière préférée, l'invention peut comprendre deux systèmes de fermeture 25 (8), l'un entre l'extérieur du laboratoire mobile (1) et l'espace pré-PCR (2), et l'autre système de fermeture entre l'extérieur du laboratoire mobile (1) et l'espace post-PCR (3). C'est cette configuration qui est présentée aux figures 1 et 2. De préférence, ledit système de fermeture (8) est un sas, à ouverture alternée. 30 De manière particulièrement préférée, le laboratoire mobile selon l'invention comprend deux sas, l'un entre l'extérieur du laboratoire mobile (1) et l'espace préPCR (2), et l'autre entre l'extérieur du laboratoire mobile (1) et l'espace post-PCR (3). Lesdits sas constituent une zone d'habillement entre l'extérieur et l'intérieur de chaque zone analytique dans lequel le manipulateur peut retirer sa tenue 3050945 6 vestimentaire et revêtir une tenue dédiée aux activités du laboratoire. De manière préférée, le système de fermeture (4) entre l'espace pré-PCR et l'espace post-PCR est un système de sas à ouverture alternée (4) entre les deux 5 espaces (2) et (3) de taille adapté pour le passage d'un échantillon, ledit système de sas à ouverture alternée (4) rendant les deux espaces (2) et (3) étanches l'un de l'autre et permettant le communication d'échantillon entre les deux espaces (2) et (3). De préférence, ledit sas ne permet pas le passage d'un être humain. 10 ESPACE PRE-PCR Le mélange de réaction d'amplification par PCR d'acides nucléiques tel que présent dans l'espace de pré-PCR du laboratoire mobile selon la présente invention fait référence à une combinaison particulière de réactifs qui sont nécessaires pour 15 effectuer une réaction d'amplification par PCR. Le mélange de réaction d'amplification utilisé dans chaque cas et les conditions appliquées pour effectuer l'amplification sont bien connues de l'Homme du métier. Par exemple, le mélange de réaction d'amplification peut comprendre un ou plusieurs ensembles d'amorces pour veiller à ce qu'un acide nucléique cible particulier soit soumis à la réaction 20 d'amplification, ainsi que des enzymes, des nucléotides, des sondes, des sels et des tampons qui peuvent également être nécessaires pour effectuer une amplification. Le milieu de réaction d'amplification peut amplifier typiquement des fragments d'ADN de type STR (Short Tandem Repeat) tels que dans les kits Identifiler plus et Globalfiler (Lifetechnologies) 25 Ledit mélange de réaction d'amplification par PCR d'acides nucléiques est ajouté en quantité suffisante pour saturer le corps absorbant du dispositif selon l'invention. Il est typiquement ajouté en une quantité de 7, 5 à 25 microlitres, de préférence 12,5 à 15, de manière encore préférée 12,5 microlitres. 30 De manière avantageuse, l'espace de Pré-PCR comprend également au moins une paillasse dont une recouvrant une enceinte réfrigérée de +4°C à -20°C (21), une hotte à flux laminaire, au moins un récipient et les petits matériels de base (vortex, centrifugeuse, scelleuse de plaques, micropipettes). 3050945 7 De manière préférée le récipient consiste en le ou les puits d'une plaque ou une barrette, par exemple de 8 puits, 96 puits ou 384 puits et est prêt à l'emploi pour la PCR. Ainsi, de préférence, le récipient est pré-rempli avec le mélange de réaction d'amplification par PCR d'acides nucléiques. De manière avantageuse, ledit 5 récipient comprend également les témoins de réaction d'amplification, pré-remplis dans le récipient et déjà ajoutés dans le mélange d'amplification prêt à l'emploi. Par récipient on entend un récipient pour le corps absorbant afin d'effectuer la mise en contact du corps absorbant d'un dispositif de collection de matériel 10 biologique avec le mélange de réaction d'amplification par PCR d'acides nucléiques et la PCR ainsi que la mise en contact des produits d'amplification avec le mélange de réaction de séquençage. On entend par exemple désigner selon la présente invention un récipient d'une contenance de 10 à 350 microlitres, ou une combinaison de récipients d'une contenance de 10 à 200 microlitres tel qu'une 15 microplaque PCR de 96 puits, ou de 384 puits. De préférence, le récipient est une microplaque PCR de 96 puits de 100 ou 200 microlitres. Dans un mode de réalisation de l'invention, l'espace de pré-PCR est une boite à gants. Par boîte à gants on entend désigner selon la présente invention une enceinte 20 étanche qui permet des manipulations dans une atmosphère particulière. Des gants montant jusqu'aux épaules, fixés à une des parois, permettent d'accéder à l'intérieur sans que le confinement cesse. L'utilisateur place ses mains dans les gants et voit alors ses manipulations à travers la paroi transparente. 25 ESPACE POST-PCR De manière avantageuse, l'espace de Post-PCR comprend également au moins une paillasse dont une recouvrant une enceinte réfrigérée de +4°C à -20°C (21) au moins un récipient et les petits matériels de base (vortex, centrifugeuse, 30 micropipettes, scelleuse de plaques). Le récipient est avantageusement tel que décrit ci-avant. Ledit mélange de réaction de séquençage des acides nucléiques tel que présent dans l'espace de post-PCR du laboratoire mobile selon la présente invention fait 3050945 8 référence à une combinaison particulière de réactifs qui sont nécessaires pour effectuer un séquençage de fragments d'ADN amplifiés. Le mélange de réaction de séquençage utilisé dans chaque cas et les conditions appliquées pour réaliser le séquençage par la technique de l'électrophorèse sont bien connues de l'Homme du 5 métier. Par exemple, le mélange de la réaction de séquençage peut comprendre de la formamide ainsi qu'un ensemble de fragments d'ADN de poids moléculaire connus, communément appelé standard de taille par l'Homme du métier. En fonction de la taille qui leur est attribuée, chaque fragment d'ADN amplifié est identifié par comparaison avec un ensemble de fragments d'ADN de référence communément 10 appelé échelle allélique par l'Homme du métier. Le récipient est de préférence pré-rempli avec le mélange de réaction de séquençage des produits d'amplification par PCR d'acides nucléiques. De manière avantageuse ledit récipient peut également être pré-rempli, en complément du mélange de la réaction de séquençage, d'un ensemble de fragments d'ADN de 15 référence, appelé communément échelle allélique, permettant l'identification des produits d'amplifications. Selon encore une caractéristique avantageuse de l'invention, un dispositif d'analyse P.C.R. (Polymerase Chaîne Reaction) est agencé dans l'espace post-PCR 20 de manière à ce que le personnel puisse sélectionner et multiplier un gène ou une fraction de chaîne identifiable d'ADN ou d'ARN en vue d'identifier la personne associée à l'échantillon biologique, en moins de deux heures. Ce dispositif d'analyse PCR (22) est avantageusement un thermocycleur. Il peut s'agir de tout thermocycleur que l'on trouve dans le commerce pour 25 l'équipement d'un laboratoire traditionnel d'analyse génétique. De manière préférée, il dispose d'une prise électrique répondant aux standards internationaux comme par exemple une prise de type A et B ou de type C, E et F. Ainsi il peut s'agir par exemple d'un thermocycleur de modèles GeneAmp PCR system 9700, ou Veriti commercialisés par la société Thermofisher. 30 De manière avantageuse, une caisse pour faciliter le transport dudit dispositif d'analyse PCR (22) peut être utilisée. Des tests comparatifs de performance d'amplification d'ADN par PCR ont été effectués avec un même thermocycleur (modèle Veriti de Thermofisher) en Laboratoire conventionnel et dans le laboratoire mobile après avoir circulé 800 km, 3050945 9 sans test particulier de calibration et ont fournis les mêmes résultats. Le génotypage des produits de PCR est ensuite effectué à l'aide d'un dispositif analyseur séquenceur (20), dit «séquenceur ». Un séquenceur (20) de gènes est un 5 appareil capable d'automatiser l'opération de séquençage de l'ADN. Il peut s'agir de tout séquenceur (20) que l'on trouve dans le commerce pour l'équipement d'un laboratoire traditionnel d'analyse génétique. De manière préférée, il dispose d'une prise électrique standard. Ainsi il peut s'agir par exemple d'un séquenceur (20) de modèle ABI 3500 XL commercialisés par la société Thermofisher. 10 Le séquenceur (20) est généralement un instrument imposant pouvant peser une centaine de kilos et sédentaire qui utilise des systèmes optiques sensibles susceptibles de se dérégler dans le temps. Il constitue donc un instrument critique à transporter. A cet effet, de manière avantageuse dans le cadre de la présente 15 invention, les optiques du séquenceur (20) peuvent faire l'objet d'une fixation plus importante, à savoir que le système de fixation des optiques du séquenceur (20) a été resserré par rapport à une utilisation en laboratoire traditionnel. Ce resserrage peut n'être vérifié que lors de la visite annuelle de maintenance de l'instrument. 20 De manière préférée selon l'invention, le laboratoire mobile selon l'invention est caractérisé en ce que ledit séquenceur (20) est agencé dans un dispositif de transport anti-vibration. Ledit dispositif de transport anti-vibration est de manière préférée une caisse de transport réalisée sur mesure par rapport audit séquenceur (20) et garni d'un matériau visco- élastiques amortissant les vibrations tel qu'une 25 mousse en polymère amortissante. De manière avantageuse, ledit matériau visco-élastique est une mousse de polyéthylène, telle que la mousse de polyéthylène non réticulée ETHAFOAM 220 et ETHAFOAM 400 commercialisées par Dow Chemical, qui sont des mousses à cellules fermées résiliente et robuste de densité moyenne respectives de 35kg/m3 et 105kg/m3. 30 Un autre dispositif de transport anti-vibrations peut comprendre des amortisseurs à câble de type VIBCABLE commercialisés par PAULSTRA. De manière préférée, après chaque déplacement du laboratoire mobile et avant l'utilisation du séquenceur (20) pour une analyse génétique, une procédure de calibration est effectuée. Il s'agit de la même procédure que celle effectuée à 3050945 10 l'installation du séquenceur (20) lors de sa livraison initiale dans un laboratoire traditionnel. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, ledit laboratoire mobile peut comprendre plusieurs thermocycleurs et/ou plusieurs séquenceurs afin 5 d'augmenter le nombre d'échantillons qui peuvent être identifiés sur un laps de temps donné. De manière avantageuse, le poste de pilotage informatique a été également changé par rapport à la version standard: un ordinateur portable remplace l'ordinateur sédentaire. 10 Les tests comparatifs de performance effectués en laboratoire conventionnel et dans le laboratoire mobile avec un séquenceur (20) de modèle ABI 3500 XL commercialisés par la société Thermofisher, ont fourni les mêmes résultats. 15 De manière avantageuse, le laboratoire mobile selon l'invention comprend une table élévatrice pour transporter les caisses de transport du thermocycleur (22) et/ou du séquenceur (20) à l'intérieur puis à l'extérieur du laboratoire mobile. Afin d'éviter la contamination d'ADN humain qui est un facteur critique de 20 l'analyse ADN en criminalistique, le séquenceur (20) et le thermocycleur (22) sont insérés et retirés du laboratoire mobile, par l'intermédiaire d'un passe-instrument (6) à ouverture alternée constituée d'un "volet roulant" accessible de l'extérieur du véhicule et d'un volet roulant accessible de l'intérieur du laboratoire dans la zone analytique post-PCR, permettant de protéger la zone laboratoire de l'environnement 25 extérieur et de l'entrée d'individus dans cette zone. De préférence le laboratoire mobile selon l'invention comprend au moins un passe-instrument (6) et de manière plus préférée un passe-instrument (6) par appareil, constitué d'un volet roulant donnant accès depuis l'extérieur chacun à un sas ouvrant de manière alternée avec l'intérieur dudit laboratoire, soit avantageusement un volet roulant (6s) pour le 30 passage du séquenceur et donnant accès à un sas séquenceur, et un volet roulant (6t) pour le passage du thermocycleur, et donnant accès à un sas thermocycleur ; Typiquement, le socle du passe-instrument (6s) du séquenceur (20) peut 3050945 11 s'élever par une action mécanique engagée de l'intérieur de la zone post-PCR afin de constituer un plan de travail à hauteur standard (85-90cm du sol du véhicule). Une fois en position haute, la zone de stockage du couvercle de la caisse de transport du séquenceur (20) se situe sous le socle du passe-instrument (6s) une fois celui-ci en 5 position haute. Un système équivalent de passe-instrument (6t) est développé pour le thermocycleur (22) sans la nécessité de disposer d'un socle élévateur. Un système équivalent de volet roulant pour le groupe électrogène est développé. Les passes-instruments disposent de crochets d'arrimage des caisses de transport des instruments pour assurer leur maintien lorsque le véhicule roule. 10 En fonctionnement, les instruments restent dans le socle de leur caisse de transport. Ainsi, les matériels critiques peuvent être insérés et retirés du laboratoire sans pour cela avoir nécessité de pénétrer dans la zone analytique préservant ainsi ces zones de toutes souillures et contaminations provenant de l'environnement 15 extérieur. DISPOSITIF ELECTRIQUE AUTONOME Par dispositif garantissant une alimentation électrique autonome, continue et 20 secourue, on entend désigner selon la présente invention un onduleur autonome de courant associé à des batteries permettant de prévenir les microcoupures du courant et de fournir l'énergie nécessaire pour fonctionner sans courant ou groupe électrogène (7). De manière avantageuse, le laboratoire mobile selon l'invention comprend toutefois également un groupe électrogène (7), et un tableau électrique 25 convertisseur 12v/220V (ou 110V selon les pays d'utilisation du laboratoire mobile). L'onduleur autonome délivre une tension avec une fréquence soit fixe, soit ajustable par l'utilisateur. Il n'a pas toujours besoin de réseau électrique pour fonctionner ; par exemple un convertisseur de voyage que l'on branche sur la prise allume-cigare d'une voiture utilise le 12 V continu du véhicule pour générer du 120 30 ou 230 V, alternatif en 50 ou 60 Hz; De manière préférée, le dispositif garantissant une alimentation électrique autonome, continue et secourue est stocké dans le coffre (9) du véhicule. Dans la figure 1 l'emplacement (5) correspond au tableau électrique de la zone laboratoire (convertisseur 12v/220v) et l'emplacement de l'onduleur et des batteries associées. 3050945 12 Ledit dispositif garantit une alimentation électrique ininterrompue durant tout le processus d'amplification par PCR et le séquençage. Le laboratoire conforme à l'invention peut ainsi fonctionner de manière totalement autonome sur les scènes d'infractions. 5 CLIMATISATION De manière préférée selon l'invention, le laboratoire mobile selon l'invention 10 est caractérisé en ce qu'il est comprend un dispositif de climatisation (13) . Ledit dispositif permet de maîtriser les conditions de température ambiante. De manière préférée, le laboratoire selon l'invention dispose d'un dispositif de climatisation (13) indépendant pour chaque espace pré-PCR et post-PCR. De manière avantageuse, ledit dispositif permet également de maîtriser les conditions 15 d'hygrométrie ambiante et limiter la contamination des espaces par les poussières. Dans le cadre d'analyses génétiques, il est souhaitable de maintenir les conditions de température constantes, de préférence autour de 21°C, dans les espaces de pré-PCR et post-PCR. De manière avantageuse, ledit laboratoire mobile selon la présente invention 20 comprend également un enregistreur de température en continue permettant de tracer les conditions d'utilisation des instruments. Une enceinte réfrigérée +4°C!-20°C est également présente dans chaque zone. Leur température est également tracée. Ces enceintes peuvent fonctionner lorsque le laboratoire est mobile permettant d'assurer ainsi une continuité dans la maîtrise de la chaîne du froid qui 25 garanti la préservation des réactifs et des consommables. LIAISON TELEMATIQUE ET RESEAU INFORMATIQUE De manière préférée selon l'invention, le laboratoire mobile selon l'invention 30 est caractérisé en ce qu'il comprend un dispositif informatique, tel qu'au moins un ordinateur portable, un réseau informatique interne ainsi qu'un une liaison télématique sécurisée. Ledit réseau informatique interne permet d'échanger des données dans le périmètre interne du laboratoire mobile. Ladite liaison télématique permet quant à elle en tout point du globe terrestre de transmettre les informations 3050945 13 et en particulier les profils génétiques ainsi déterminés par exemple à un expert ou dans les bases de données nationales ou internationales. Une telle liaison télématique est par exemple un moyen de connexion à internet sans fil tel une clé 4G, ou une liaison satellite, associée à un moyen de cryptage ou de chiffrement. 5 De manière préférée, le laboratoire mobile selon la présente invention comprend un dispositif de climatisation (13), une liaison télématique sécurisée, et un réseau informatique local. SYSTEME DE FERMETURE et SAS 10 Par système de fermeture, on entend désigner selon la présente invention une porte, de préférence coulissante, et permettant l'étanchéité entre les deux espaces qu'elle sépare une fois fermée. Selon un mode de réalisation de l'invention, le système de fermeture (8) sépare 15 l'extérieur du laboratoire mobile de l'espace post-PCR. L'utilisateur du laboratoire mobile selon l'invention rentre alors à l'intérieur du dit laboratoire par le système de fermeture (8) dans l'espace de post-PCR, referme le système de fermeture (8), puis rentre dans l'espace de pré-PCR par l'intermédiaire du système de fermeture (4). Il referme ensuite le système de fermeture (4) afin d'assurer l'étanchéité entre 20 les 2 espaces. Selon un autre mode de réalisation, l'utilisateur du laboratoire mobile selon l'invention peut rentrer à l'intérieur dudit laboratoire par le système de fermeture (8) dans l'espace de pré-PCR puis accéder par l'intermédiaire du système de fermeture (4).à l'espace de post-PCR. 25 De manière préférée, l'invention peut comprendre deux systèmes de fermeture (8), l'un entre l'extérieur du laboratoire mobile (1) et l'espace pré-PCR (2), et l'autre système de fermeture entre l'extérieur du laboratoire mobile (1) et l'espace post-PCR (3). C'est cette configuration qui est présentée aux figures 1 et 2. 30 De préférence, ledit système de fermeture (8) est un sas, à ouverture alternée. De manière particulièrement préférée, le laboratoire mobile selon l'invention comprend deux sas, l'un entre l'extérieur du laboratoire mobile (1) et l'espace préPCR (2), et l'autre système de fermeture entre l'extérieur du laboratoire mobile (1) et l'espace post-PCR (3). Lesdits sas constituent une zone d'habillement entre 3050945 14 l'extérieur et l'intérieur de chaque zone analytique dans lequel le manipulateur peut retirer sa tenue vestimentaire et revêtir une tenue dédiée aux activités du laboratoire. De manière préférée, le système de fermeture (4) entre l'espace pré-PCR et 5 l'espace post-PCR est un système de sas à ouverture alternée (4) entre les deux espaces (2) et (3) de taille adaptée pour le passage d'un échantillon, ledit système de sas à ouverture alternée (4) rendant les deux espaces (2) et (3) étanches l'un de l'autre et permettant la transmission d'échantillons entre les deux espaces (2) et (3). De préférence, ledit sas ne permet pas le passage d'un être humain. 10 De manière préférée selon l'invention, chaque sas ou système de fermeture dans le laboratoire mobile est équipé d'un interphone permettant de communiquer avec l'extérieur ou les autres espaces du laboratoire mobile. 15 De manière préférée selon l'invention, le laboratoire mobile selon l'invention est caractérisé en ce qu'il comprend en outre un espace supplémentaire (11) d'échantillonnage utilisé pour le prélèvement d'échantillon biologique et pouvant comprendre par exemple des tables de prélèvement telles que des tables d'autopsie. 20 De manière préférée selon l'invention, le laboratoire mobile selon l'invention est caractérisé en ce qu'il comprend en outre un espace de stockage de prélèvement utilisé pour le stockage des échantillons biologiques prélevés et pouvant comprendre par exemple des glacières. 25 De manière préférée selon l'invention, le laboratoire mobile selon l'invention est caractérisé en ce qu'il comprend en outre une zone d'interprétation utilisée pour l'interprétation des résultats obtenus après séquençage et pouvant comprendre par exemple des ordinateurs et une liaison télématique. 30 De manière préférée selon l'invention, le laboratoire mobile selon l'invention est caractérisé en ce qu'il comprend en outre une zone de réunion permettant de planifier les analyses et de communiquer les résultats obtenus. De manière particulièrement préférée selon l'invention, le laboratoire mobile 3050945 15 selon l'invention est caractérisé en ce qu'il comprend un espace supplémentaire mobile (11) d'échantillonnage et/ou de stockage de prélèvement, et/ou une zone d'interprétation, et/ou une zone de réunion. 5 Selon une caractéristique avantageuse de l'invention, le laboratoire mobile comporte au moins un espace complémentaire (11) montable sur place sur le lieu de l'infraction et formant au moins une annexe dans laquelle peut être installé ledit espace supplémentaire d'échantillonnage, ledit espace de stockage de prélèvement, ladite zone d'interprétation ou encore ladite zone de réunion. Dans la configuration 10 maximale où le laboratoire mobile présente un espace supplémentaire d'échantillonnage, un espace de stockage de prélèvement, une zone d'interprétation et une zone de réunion, la surface totale du laboratoire mobile et de ses annexes est d'environ 40 m2 ce qui est un espace suffisant pour travailler dans de bonnes conditions. 15 De manière préférée selon l'invention, le laboratoire mobile selon l'invention est caractérisé en ce que lesdits espaces complémentaires (11) sont mobiles. De préférence lesdits espaces complémentaires sont gonflables et/ou déployables. En particulier, il peut s'agir de paroies déployables depuis le laboratoire mobile. 20 De manière préférée selon l'invention, le laboratoire mobile selon l'invention est caractérisé en ce que les petits matériels de base, les réactifs et consommables nécessaires aux analyses, le dispositif d'analyse PCR (22) , le séquenceur (20) et le 25 dispositif garantissant une alimentation électrique autonome, continue et secourue sont mobiles et peuvent être enlevés du laboratoire mobile après chaque utilisation dudit laboratoire. VEHICULE 30 De manière préférée selon l'invention, le laboratoire est agencé à l'intérieur d'un véhicule. Par véhicule, on entend désigner selon la présente invention un véhicule mobile 3050945 16 motorisé, typiquement une camionnette ou un bus. De manière préférée ledit vehicule motorisé se conduit avec un permis de conduire pour les véhicules de toursime (Permis B en France). De manière avantageuse selon l'invention, le laboratoire mobile est aménagé directement à l'intérieur dudit véhicule mobile. De préférence, ledit véhicule dispose d'au moins un avertisseur sonore et lumineux (14) permettant son signalement aux autres usagers lorsqu'il est en route vers la scène d'infraction et faciliter le transport du véhicule le plus rapidement possible et en toute sécurité. Une zone de rangement pour ladite table élévatrice est dédiée dans le coffre (9) du véhicule du laboratoire mobile. Le laboratoire mobile selon l'invention dispose de prises électriques externes 15 (15) permettant le raccordement au réseau électrique, notamment si un groupe électrogène n'est pas utilisé, et de prises électriques internes à la zone analytique, ainsi qu'un éclairage en particulier si ledit laboratoire ne comprend pas de fenêtres. De manière avantageuse, le laboratoire mobile selon l'invention comprend un système de stabilisation et de mise à niveau horizontal du véhicule à l'arrêt qui 20 pourrait être utile en fonction de la configuration du terrain sur le site de projection. Une zone pour le rangement des armes de service des forces policière ou armée peut également être prévue dans le laboratoire mobile. De manière particulièrement préférée selon l'invention, le laboratoire mobile 25 est déplaçable par tout moyen, routier, aérien, ferroviaire ou maritime. En particulier, le laboratoire mobile peut être déplacé par voie aérienne en étant chargé à bord d'un avion militaire, par exemple de type C-160 TRANSALL. DISPOSITIF DE COLLECTION SANS ETAPE D'EXTRACTION 30 De manière préférée selon l'invention, le laboratoire mobile selon l'invention est caractérisé en ce qu'il comprend un dispositif de collection de matériel biologique comprenant une tige présentant à au moins une extrémité un corps absorbant sec comprenant des agents surfactants et dénaturants. De préférence, ledit 5 10 3050945 17 corps absorbant a une surface comprise entre environ 1 et environ 3,14 mm2 Par matériel biologique, on entend désigner selon la présente invention tout matériel issu d'un être vivant, pouvant se trouver sous forme de molécules, 5 d'organites, de fluides, de fragments cellulaires ou de cellules, et présent sur un support biologique ou non biologique. De préférence, ledit matériel biologique comprend des acides nucléiques, de préférence de l'ADN, sous une forme permettant leur amplification par PCR (Polymerase Chain Reaction) et leur analyse et/ou identification. Ledit matériel biologique est avantageusement sélectionné dans 10 le groupe consistant en des fluides corporels physiologiques, des cellules ou suspensions cellulaires d'humains ou d'animaux, en particulier une trace de contact, du sang, de la moelle osseuse, des cellules buccales, du tissu biologique humain dégradé ou non ou des suspensions cellulaires de plantes ; des produits liquides, extraits ou suspensions de bactéries, de champignons, de plasmides, de parasites, ou 15 de virus ; des extraits liquides ou des homogénats de tissus corporels humains ou animaux ; des milieux issus d'une synthèse d'acides nucléiques ; et des mélanges d'acides nucléiques synthétisés chimiquement ou biochimiquement. De manière particulièrement préférée, le matériel biologique selon la présente invention est en particulier une trace de contact, du sang, de la moelle osseuse, des cellules buccales, 20 du tissu biologique humain dégradé ou non dégradé. Par acides nucléiques, on entend selon la présente invention l'ADN et l'ARN. De préférence, on entend désigner selon la présente invention l'ADN. Par corps absorbant, on entend désigner selon la présente invention un support solide sec composé d'un matériau absorbant, naturel ou synthétique. De préférence, 25 ledit corps absorbant est choisi dans le groupe consistant en de la cellulose, de la nitrocellulose, du coton, des fibres synthétiques floquées, par exemple des fibres de nylon floquées, des polymères hydrophiles, de la fibre de verre, du polytétrafluoroéthylène, du polyester, du nylon, de la rayonne, du coton et une céramique poreuse. De manière encore préférée, ledit corps absorbant est choisi 30 parmi de la cellulose, et des fibres synthétiques floquées. De manière particulièrement préférée, ledit corps absorbant est composé de fibres synthétiques floquées, de préférence de fibres de Nylon floquées, de préférence directement sur la tige. De manière avantageuse, les fibres sont collées sur la tige. De préférence les fibres mesurent entre 1 et 1,5 mm de longueur et entre 0,01 et 0,5 mm de diamètre. 3050945 18 Cette configuration permet d'obtenir les meilleurs résultats en terme de collecte de matériel biologique et de relargage des acides nucléiques dudit matériel biologique, associé à une simplicité de fabrication et d'utilisation. De part sa superficie miniature de l'ordre de 1 à 3,14 mm2, le corps absorbant 5 présente à nouveau un intérêt majeur sur le plan économique car cette caractéristique permet de réaliser l'amplification d'acides nucléiques dans un volume réactionnel réduit de 50% par rapport aux préconisations du fournisseur et donc de réduire considérablement le coût des analyses d'un nombre important de prélèvements. En effet, les tests effectués avec les kits d'amplification génique 10 Identifiler plus et Globalfiler ont permis par exemple de démontrer l'efficacité du dispositif pour un volume réactionnel de PCR de 251u.1 comme préconisé par le fournisseur, mais également dans un volume réactionnel réduit de moitié soit de 12,50. 11 a ainsi été démontré qu'une telle petite surface du corps absorbant permet de collecter une quantité suffisante d'acides nucléiques pour l'obtention d'un profil 15 génétique. Ledit corps absorbant est pré-traité avec des agents dénaturants et surfactants lors de sa conception permettant ainsi la lyse in situ des cellules. 11 n'est donc pas nécessaire d'appliquer sur ce corps absorbant un tampon d'humidification spécifique pour la lyse des cellules en amont de la collecte. Par agents surfactants et dénaturants on entend désigner des agents permettant 20 la lyse cellulaire, la dénaturation des protéines et l'extraction des acides nucléiques. Les agents surfactants et dénaturants peuvent être choisis parmi une liste comprenant l'acide urique ou sel d'urate, tris, SDS sel de guanidine, de préférence le thiocyanate de guanidine, Triton X100, Tween 20, CHAPS, CHAPS-0, octylglucoside, octyl thioglucoside et leur combinaisons. 25 De manière préférée selon l'invention les agents surfactants et dénaturants sont une combinaison d'acide urique ou sel d'urate, de tris, et de SDS. De préférence, le corps absorbant comprend en outre de l'EDTA. En particulier le corps absorbant comprend un mélange par cm2 de 2 micromols d'acide urique, 8 micromols de Tris, et 1 mg de SDS. De préférence le corps absorbant comprend en outre 0,5 30 micromols d'EDTA. Selon une variante de l'invention les agents surfactants et dénaturants peuvent être une combinaison de sel de guanidine, de préférence le thiocyanate de guanidine, et de Triton X100. Une quantité efficace desdits agents peut être trouvée entre 0,01M :0,01M et 0,4M :0,4M. 3050945 19 Des agents dénaturants et surfactants alternatifs, selon les connaissances générales de l'Homme du métier, pourront être utilisés dans le corps absorbant afin de garantir son innocuité vis à vis de la santé humaine et animale, si par exemple le dispositif devait être utilisé sur des organismes vivants, par exemple à des fins 5 d'analyse médicale. Dans ces conditions, le corps absorbant pourra par exemple être directement appliquée dans la cavité buccale d'un individu afin d'en prélever des cellules à des fins d'analyses génétiques. Quelque soit sa forme et sa nature, le corps absorbant comprenant ainsi des 10 agents surfactants et dénaturants a la propriété de piéger puis de relarguer les acides nucléiques collectés ainsi rendus directement disponibles, sans délai, pour des applications de biologie moléculaire sans qu'il soit nécessaire de procéder à une étape conventionnelle d'extraction en laboratoire. Selon un mode préféré de la présente invention, ladite extrémité présentant ledit 15 corps absorbant du dispositif est sécable ou éjectable. Selon un mode préféré de la présente invention, ledit dispositif comprend un étui hermétique dans lequel vient s'insérer tout le dispositif, ou bien une partie de la tige ainsi que l'extrémité de la tige avec le corps absorbant, à l'exclusion de la zone de préhension et de manipulation, ou bien uniquement le corps absorbant. De 20 manière préférée, l'étui hermétique comporte un identifiant unique, par exemple par code-barres, RFID, ou NFC. De préférence l'identifiant unique selon l'invention est un code-barres. Selon une variante de l'invention illustrée par la figure 3, ce dispositif peut-être également couplé à un second dispositif de collection constitué d'une tige, de 25 préférence d'une longueur de 5 à 10 cm environ, dont de préférence l'extrémité est sécable ou éjectable, présente un corps absorbant permettant la collection du matériel biologique. Ce second dispositif de collection peut par exemple permettre la conservation et l'extraction ultérieure des acides nucléiques aux fins d'analyses par les techniques de biologie moléculaire notamment par PCR. Dans cette 30 configuration, les deux dispositifs sont associés mais insérés chacun dans un étui hermétique distinct, de préférence identifiable notamment par un code-barres, RFID ou NFC. Le corps absorbant de ce second dispositif de collection peut être de taille et/ou de composition identique ou différent du corps absorbant du premier dispositif. De 3050945 20 préférence, ledit corps absorbant du second dispositif est constitué de fibres synthétiques floquées sur la tige ou de fibres de coton enroulées autour de la tige, d'une surface comprise entre lmm2 et 2 cm2. De manière avantageuse selon l'invention, le dispositif de collection et en 5 particulier son corps absorbant, subit à l'issue de la fabrication et avant utilisation un traitement par tout type de système de stérilisation à sec, notamment de type gamma irradiation, oxyde d'éthylène et plasma. Ce traitement de stérilisation permet de prévenir la contamination du dispositif de collection avant utilisation par un matériel biologique autre que celui qui sera prélevé. Ceci permet notamment au 10 dispositif de collection de répondre aux recommandations internationales les plus exigeantes en matière de prévention de toute contamination par des acides nucléiques ne provenant pas de la trace biologique prélevée. Le dispositif particulièrement préféré selon l'invention présente un corps absorbant solide et sec composé de fibres synthétiques floquées sur la tige, d'une 15 surface comprise entre environ 1 et environ 3,14 mm2, sécable, sur une tige rectiligne de 5 à 10 cm de longueur, associé à un étui hermétique identifiable. Le corps absorbant comprend 2 micromols d'acide urique, 8 micromols de Tris, 0,5 micromols d'EDTA et 1 mg de SDS par cm2. Ce dispositif particulièrement préféré est utilisé sans humidification préalable du matériel biologique ou du corps 20 absorbant avant collecte. De manière préférée selon l'invention, le récipient consiste en le ou les puits d'une plaque ou une barrette, par exemple de 8 puits, 96 puits ou 384 puits et est prêt à l'emploi pour la PCR. Ainsi, de préférence, le premier récipient est pré- 25 rempli avec le mélange de réaction d'amplification par PCR d'acides nucléiques. De manière avantageuse, ledit récipient comprend également les témoins de réaction d'amplification, pré-remplis dans le récipient et déjà ajoutés dans le mélange d'amplification prêt à l'emploi. Le second récipient est de préférence pré-rempli avec le mélange de réaction de séquençage des produits d'amplification par 30 PCR d'acides nucléiques. De manière avantageuse ledit récipient peut également être pré-rempli, en complément du mélange de la réaction de séquençage, d'un ensemble de fragments d'ADN de référence, appelé communément échelle allélique, permettant l'identification des produits d'amplifications. 3050945 21 Par récipient on entend un récipient pour le corps absorbant afin d'effectuer la mise en contact dudit corps absorbant avec le mélange de réaction d'amplification par PCR d'acides nucléiques et la PCR ainsi que la mise en contact des produits d'amplification avec le mélange de réaction de séquençage. On entend par exemple 5 désigner selon la présente invention un récipient d'une contenance de 10 à 350 microlitres, ou une combinaison de récipients d'une contenance de 10 à 200 microlitres tel qu'une microplaque PCR de 96 puits, ou de 384 puits. De préférence, le récipient est une microplaque PCR de 96 puits de 100 ou 200 microlitres. 10 D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront mieux à la lecture de la description d'un mode de réalisation préférée qui va suivre, en référence aux dessins annexés, réalisés à titre d'exemples indicatifs et non limitatifs et sur lesquels : 15 la figure 1 est une vue en coupe du dessus du laboratoire mobile la figure 2 est une vue latérale cotée entrée du laboratoire La figure 3 est une vue de face coté sas instrument La figure 4 est une vue de face arrière du véhicule du laboratoire mobile (coffre (9)) La figure 5 est une vue de la configuration maximale où le laboratoire mobile 20 présente un espace supplémentaire d'échantillonnage et de stockage de prélèvement (11), et un espace supplémentaire servant de zone d'interprétation et une zone de réunion (11) ces espaces supplémentaires étant mobiles et gonflables par rapport au laboratoire mobile. 25 Le laboratoire mobile est compartimenté en deux espaces distincts: pré-PCR et post-PCR séparés physiquement et d'accès personnel distinct. Le principe de la marche en avant des personnels et des échantillons est respecté: les échantillons sont introduits dans le laboratoire par le passe-plat à ouverture de porte alternée communiquant entre le coffre (9) du véhicule et la zone laboratoire pré-PCR. Les 30 échantillons transitent de la pré-PCR vers la post-PCR via un autre passe-plat. L'échantillonnage/traçabilité des échantillons peut être réalisée par le déploiement d'une extension modulaire à partir de l'arrière du véhicule. L'exploitation des données et la communication des résultats peuvent être effectuées par le déploiement d'une extension modulaire latérale donnant l'accès vers les sas d'entrée 3050945 22 des zones laboratoire. Un réseau informatique sécurisé et mobile de type réseau 4G équipe le véhicule pour transmettre les résultats d'analyses directement dans les bases de données génétiques européennes. Les techniciens communiquent entre eux via un interphone positionné au niveau de chaque passe-plat échantillon. Idem entre 5 le sas habillement et la zone laboratoire. Les règles HSIE sont également prises en compte (présence d'un extincteur, de containers pour la gestion des DASRI et d'une trousse à pharmacie dans chaque zone). Sur la base des éléments fournis supra, il est donc possible de réaliser des analyses ADN au plus prés de la scène de crime en utilisant les mêmes matériels et 10 les mêmes protocoles que ceux utilisés dans un laboratoire conventionnel avec un degré de fiabilité et de qualité équivalent, et de manière très rapide. REVENDICATIONS1. Laboratoire mobile (1) formé d'un conteneur mobile transportable définissant un local de base, l'espace intérieur dudit local étant isolé de l'extérieur par l'intermédiaire d'au moins un système de fermeture (8), ledit local comportant : o au moins deux espaces distincts l'un de l'autre j. Le premier espace (2) dit « pré-PCR » adapté à la réalisation d'une étape de pré- amplification et comportant : - Un mélange de réaction d'amplification par PCR d'acides nucléiques - Un récipient un deuxième espace (3) dit « post -PCR » adapté à la réalisation d'une étape d'amplification d'acides nucléiques par PCR, de séquençage et de génotypage comportant : - Un dispositif d'analyse PCR (22) - Un séquenceur (20) - Un mélange de réaction de séquençage - Un récipient o un système de sas à ouverture alternée (4a) entre l'extérieur et la zone pré-PCR (2) de taille adaptée pour le passage d'un échantillon, ledit système de sas à ouverture alternée (4) permettant la transmission d'échantillons entre l'extérieur et l'espace pré-PCR (2); o un système de fermeture (4b) entre les deux espaces (2) et (3) ledit système de fermeture (4b) rendant les deux espaces (2) et (3) étanches l'un de l'autre et permettant la transmission d'échantillons entre les deux espaces (2) et (3); o un dispositif garantissant une alimentation électrique autonome, continue et secourue ledit laboratoire mobile étant adapté à l'analyse génétique et l'identification d'un individu à partir d'un échantillon biologique directement sur le lieu de prélèvement dudit échantillon. 2. Laboratoire mobile selon la revendication 1 caractérisé en ce que le système de fixation des optiques du séquenceur (20) a été resserré par rapport à une utilisation en laboratoire traditionnel, de manière à être transporté sans que les systèmes optiques ne se dérèglent. 3050945 24 3. Laboratoire mobile selon l'une quelconque des revendications 1 à 2 caractérisé en ce que ledit séquenceur (20) est agencé dans un dispositif de transport anti-vibration. 4. Laboratoire mobile selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisé en ce 5 qu'il est comprend un dispositif de climatisation (13), une liaison télématique sécurisée, et un réseau informatique. 5. Laboratoire mobile selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 caractérisé en ce qu'il est comprend au moins un passe-instrument (6). 10 6. Laboratoire mobile selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 caractérisé en ce qu'il est comprend un espace supplémentaire mobile (11) d'échantillonnage et/ou, de stockage de prélèvement, et/ou une zone d'interprétation, et/ou une zone de réunion. 7. Laboratoire mobile selon la revendication 6 caractérisé en ce que ledit espace supplémentaire mobile est installé dans au moins un espace complémentaire 15 gonflable et/ou déployable. 8. Laboratoire mobile selon l'une quelconque des revendications 1 à 7 caractérisé en ce que le dispositif d'analyse PCR (22), le séquenceur (20) et le dispositif garantissant une alimentation électrique autonome, continue et secourue sont mobiles et peuvent être enlevés du laboratoire mobile après chaque utilisation dudit laboratoire. 20 9. Laboratoire mobile selon l'une quelconque des revendications 1 à 8 caractérisé en ce qu'il comprend un dispositif de collection de matériel biologique comprenant une tige présentant à au moins une extrémité un corps absorbant sec comprenant des agents surfactants et dénaturants. 10. Véhicule caractérisé en ce qu'il comprend à l'intérieur un laboratoire mobile selon 25 l'une quelconque des revendications 1 à 9.