Brevet FR3057268A1 — publié le 20180413

PROCÉDÉ DE DIAGNOSTIC/DÉTERMINATION DE L'EFFICACITÉ DE TRAITEMENT DE LA DÉPRESSION Domaine technique La présente invention se rapporte à notamment à des anticorps polyclonaux dirigés contre des peptides, notamment dérivés du propeptide de séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR (SEQ ID NO 1), ci-après nommé PE. La présente invention se rapporte également à des anticorps polyclonaux dirigés contre des peptides, notamment ceux dérivés du propeptide de séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR (SEQ ID NO 1) à l'exception du fragment 12-18 dudit propeptide, ci-après nommé Mini-Spadine. La présente invention se rapporte également à un procédé de détection de la dépression et à un procédé de suivi de l'efficacité d'un traitement anti-dépresseur. La présente invention permet avantageusement d'utiliser le dosage de peptides pour le diagnostic de la réponse au traitement antidépresseur dans la dépression majeure sans être affecté par le traitement avec la Mini-Spadine mature ou avec ses extrémités modifiées. La présente invention trouve une application notamment dans l'industrie pharmaceutique et notamment dans le développement d'outils de diagnostic utilisés dans la prévention et / ou la surveillance des maladies psychiatriques, en particulier des patients souffrant ou ayant souffert de la dépression. Dans la description ci-dessous, les références entre crochets ([ ]) renvoient à la liste des références présentée à la fin du texte. 3057268 2 État de la technique Les maladies psychiatriques représentent un réel problème de Santé Publique. Les travaux les plus récents ont confirmé la forte prévalence de la dépression : sur leur vie entière, 20% des femmes et 10% 5 des hommes ont fait, font ou feront un épisode dépressif [1]. De tels chiffres sont à l'évidence marquants; ils le sont plus encore lorsqu'on s'intéresse à la complication majeure de la dépression, le suicide, qui se chiffre à 12000 décès par an dans des pays comme la France [2]. La dépression est une maladie très fréquente et souvent 10 handicapante. Elle peut toucher jusqu'à 20% de la population dans les pays industrialisés. Ses origines sont diverses et multiples. Cette pathologie affecte aussi bien le psychisme que le comportement et la physiologie des patients. Les traitements de la dépression sont également multiples et les mécanismes d'action des médicaments utilisés ne sont pas 15 clairement établis. L'organisation mondiale de la santé (OMS) prévoit que la dépression unipolaire sera la deuxième cause de handicap en 2020. A la souffrance personnelle et familiale que représente la dépression s'ajoute le poids social important de cette pathologie. La dépression représente déjà 20 l'une des premières causes d'arrêt du travail, avec une charge économique qui s'élève à plus de 30 milliards d'euros par an. Malgré l'arsenal thérapeutique mis à disposition du corps médical, en particulier les SSRI (« selective serotonin reuptake inhibitors ») et SNRI (« serotonin norepinephrine reuptake inhibitors »), 30% de la population dépressive n'a 25 pas de traitement. Par ailleurs, le délai d'action des antidépresseurs est de l'ordre de 3 à 6 semaines et les effets secondaires sont souvent importants. D'une façon générale, on estime que 15% des patients déprimés décèdent par suicide. Chez la plupart des malades, la 30 dépression est due à l'interaction entre une prédisposition génétique et des facteurs environnementaux comme le stress ou les traumatismes 3057268 3 émotionnels [3]. La maladie est fréquente et le marché des antidépresseurs (AD) est immense (au moins 10 milliards d'euros par an). Néanmoins, si ces antidépresseurs améliorent l'état des patients dans environ 70% des cas, ils n'entraînent une rémission complète de la 5 maladie que chez 30 à 40% d'entre eux. De plus, près d'un tiers des sujets traités résiste aux traitements existants. Cet état de fait oblige donc à envisager de nouveaux traitements, capables de prendre en compte les mécanismes de la dépression [3]. Dans l'arsenal thérapeutique mis à disposition du corps médical, 10 les antidépresseurs tricycliques (TCA) avec l'amitriptyline et l'imipramine ont été les premiers découverts, suivis par les inhibiteurs de la monoamine oxydase (IMAO), irréversibles et non sélectifs comme la phénelzine et la pargyline. Les effets indésirables, en particulier la cardiotoxicité des TCA (surtout en cas de surdosage) et les crises hypertensives des IMAO 15 (interactions avec la tyramine alimentaire, le fameux « cheese effect ») ont poussé la recherche vers de nouvelles molécules d'efficacité thérapeutique identique mais de meilleure acceptabilité. La notion de sélectivité est alors apparue avec les inhibiteurs spécifiques de la recapture de la noradrénaline (NA) ou de la sérotonine 2 0 (5-hydroxytryptamine ou 5HT). Les essais cliniques de phase III ont démontré pour ces nouvelles molécules une efficacité équivalente aux antidépresseurs de première génération et une meilleure sécurité, notamment en cas de surdosage. Les inhibiteurs spécifiques de la recapture de la sérotonine 25 (SSRI) et les inhibiteurs spécifiques de la recapture de la noradrénaline (SNRI) sont actuellement les molécules les plus utilisées [4-5]. Les AD sont ainsi le plus souvent associés à une facilitation de la transmission des systèmes monoaminergiques. Bien que la sérotonine, la noradrénaline et la dopamine sont 30 impliquées de façon certaine, il est admis aujourd'hui que les modifications des taux de monoamines produites par les AD et les processus adaptatifs qui en découlent, en particulier l'altération de la sensibilité de certains de 3057268 4 leurs récepteurs, ne peuvent expliquer à eux seuls le mécanisme d'action des antidépresseurs. Ainsi, il est difficile de corréler le délai de 3 à 6 semaines nécessaire à l'efficacité des AD avec l'augmentation des taux synaptiques 5 de monoamines, qui intervient dès la première administration du produit. En près d'un demi-siècle, le nombre d'hypothèses sur la pathogenèse de la dépression et son traitement n'a cessé d'évoluer. Par exemple, des concentrations élevées de glucocorticoïdes sont généralement associées à un effet négatif de l'humeur, ainsi que des 10 altérations structurelles de l'hippocampe, par l'intermédiaire d'une diminution de la synthèse de BDNF (« brain-derivated neurotrophic factor »), d'une sécrétion excessive d'acide glutamique et/ou d'une diminution de la capture du glucose [6]. Conformément à ces observations, des inhibiteurs de la synthèse des glucocorticoïdes et des antagonistes 15 des récepteurs de glucocorticoïdes exercent des effets de type AD [7] . Des antagonistes agissant sur les récepteurs de la substance P, en particulier le NK1, ou le récepteur CRF (« corticotropin-releasing factor »), ainsi que des antagonistes des récepteurs du NMDA ont été développés avec une certaine efficacité [8-10]. 20 Diverses études récentes réalisées dans des situations de stress et des modèles de dépression ont impliqué la neurogenèse dans l'étiologie des troubles dépressifs majeurs [11-13] . Il a été démontré que tous les traitements chroniques antidépresseurs, y compris l'électrochoc, stimulent la prolifération des cellules progénitrices à l'origine des neurones 25 de la couche granulaire de l'hippocampe. On sait également que les antidépresseurs modulent l'expression de différents facteurs impliqués dans la survie et la croissance des cellules, tels que la CREB, le BcI2 ou les MAP-kinases. Toutefois, l'importance fonctionnelle de ces neurones néoformés dans la 30 physiopathologie des troubles de l'humeur reste controversée [14] . 3057268 5 L'ensemble de ces indications montrent que la dépression est une maladie complexe dont la physiopathologie est multifactorielle et, en conséquence, le traitement d'une telle pathologie reste un challenge. Depuis plus de quarante ans, la recherche sur la dépression et 5 le développement de médicaments efficaces ont été dominées par l'hypothèse monoaminergique. Bien que les neurotransmetteurs monoaminergiques (sérotonine, noradrénaline et dopamine) sont impliqués de façon indiscutable, le nombre d'hypothèses sur la physiopathologie de la dépression et les mécanismes d'action des antidépresseurs n'a cessé 10 d'évoluer. Les médicaments antidépresseurs utilisés aujourd'hui produisent une gamme d'effets indésirables, parmi lesquels la sécheresse de la bouche, la vision floue et l'altération de la fonction intestinale (diarrhée ou constipation). Même si beaucoup d'effets secondaires sont 15 passagers (comme la nausée), certains semblent être constants au fil du temps (comme les effets sexuels) et risquent d'affecter l'assiduité au traitement à long terme. C'est la raison pour laquelle la recherche de nouvelles molécules agissant sur des récepteurs ou canaux nouvellement identifiés dans la dépression est cruciale. 2 0 Certaines protéines, récepteurs et canaux, ont été impliqués dans les mécanismes moléculaires de la dépression. C'est notamment le cas du récepteur 3 de la neurotensine (NTRS3), originellement appelé sortiline, dont l'inactivation chez la souris produit un phénotype de résistance à la dépression, analogue à celui qui a été observé chez des 25 souris invalidées pour le canal potassique de fond TREK-1. L'étude récente STAR*D (Sequenced Treatment Alternatives to Relieve Depression) [1 5] , a identifié de manière pharmacogénétique TREK-1 comme un gène impliqué dans la réponse antidépressive chez l'homme. Cette étude suggère également l'utilité d'un modèle animal pour 30 la recherche de traitements antidépresseur dans l'identification de gènes candidats pour une étude chez l'homme. Des bloqueurs des canaux 3057268 6 TREK-1 représentent donc un nouveau concept dans le domaine de la conception de médicaments antidépresseurs. Les épisodes de trouble dépressif majeur (TDM) sont traités avec différentes classes de médicaments. Cependant, les traitements 5 principaux actuels, après plusieurs semaines, permettent environ 35% de remissions, et environ 30% des patients trouble dépressif majeur sont classés comme souffrant de dépression résistante à un traitement (DRT) [1, 16, 17]. En dépit des efforts importants de recherche visant à comprendre les fondements neurobiologiques de trouble dépressif majeur 10 (TDM) les traitements sont encore basés uniquement sur l'évaluation relativement subjective des symptômes. En raison du faible taux de rémission, l'identification de marqueurs biologiques solides prédisant l'évolution clinique de trouble dépressif majeur et caractérisant l'étendue du résultat du traitement apparait donc obligatoire [3]. Des études cliniques et 15 précliniques ont identifié un certain nombre de facteurs qui peuvent servir en tant que biomarqueurs putatifs pour le diagnostic et le traitement de trouble dépressif majeur. Cependant, l'utilité d'un quelconque marqueur donné pour servir en tant que biomarqueur cliniquement utile de TDM est limitée par un manque de sensibilité et de spécificité [18-19]. 20 Des études récentes ont identifié le facteur neurotrophique dérivé du cerveau (« Brain Derived Neurotrophic Factor » (BDNF)) en tant que biomarqueur potentiel de la réponse clinique dans la pharmacothérapie antidépressive et du devenir clinique [20-21]. La sortiline est connue pour contrôler la régulation du trafic 25 intracellulaire de la voie sécrétoire du facteur neurotrophique BDNF [22]. En outre, les taux sériques accrus de sortiline ont été indiqués comme associés à des TDM et corrélées avec le facteur neurotrophique BDNF [23-24]. Des protéines ont été également identifiées en liaison avec la 30 dépression. La spadine est un peptide partiel (12-28) du propeptide de 44 acides aminés (PE) générée à partir de la maturation de la sortiline [25], également appelé récepteur de la neurotensine-3 [26]. Lorsqu'ils sont 3057268 7 injectés par la voie intraveineuse ou intrapéritonéale chez des souris, la spadine et le propeptide ont démontré de puissantes activités antidépressives (AD) par inhibition de l'activité du canal potassique TREK-1 [27] qui est une cible pour le traitement de la dépression [28]. 5 Toutefois, malgré d'intenses recherches sur les mécanismes sous-jacents de la physiopathologie dépressive, des biomarqueurs fiables pour évaluer la réponse au traitement antidépresseur font encore défaut. Il existe donc un réel besoin de trouver un moyen palliant ces défauts, inconvénients et obstacles de l'art antérieur, en particulier d'un 10 procédé permettant de détecter physiologiquement un état dépressif, en particulier un trouble dépressif majeur. Il existe également un réel besoin de trouver un moyen palliant ces défauts, inconvénients et obstacles de l'art antérieur, notamment un procédé permettant d'évaluer l'efficacité d'un traitement de la dépression, 15 afin notamment réduire les coûts et d'améliorer l'efficacité du traitement de la dépression, en particulier un trouble dépressif majeur. Description de l'invention Les inventeurs ont démontré de manière intéressante que la 20 spadine et le propeptide sont des marqueurs biologiques efficaces de la dépression, en particulier du trouble dépressif majeur. Ainsi la présente invention permet précisément de résoudre et de surmonter les obstacles et inconvénients de l'art antérieur précités, en particulier l'absence de marqueurs fiables de la dépression et de son 25 traitement en fournissant des anticorps polyclonaux AB1 se liant notamment à la spadine et à son propeptide mais pas à la minispadine. La présente invention a également pour objet un anticorps polyclonal anti-peptidique dérivé du PE à l'exception du fragment 12-18 et un anticorps dirigé contre la séquence 12-18 du PE. 30 Les inventeurs sont les premiers à avoir élaboré des anticorps permettant de mesurer la concentration de spadine et du propeptide et ses fragments dans un échantillon biologique. En particulier, les inventeurs ont 3057268 8 démontré grâce aux anticorps de l'invention que deux peptides humains, à savoir le Propeptide et/ou la Spadine et la Mini-Spadine peuvent être indépendamment mesurés à partir d'échantillons de sérums humains. En particulier, la présente invention a pour objet des anticorps polyclonaux 5 (AB1) dirigés contre le peptide de séquence APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2) (Spadine). La présente invention a également pour objet des anticorps polyclonaux (AB2) dirigés contre les peptides comprenant la séquence GVSWGLR (Mini-Spadine). 10 Les inventeurs ont démontré de manière surprenante que l'anticorps polyclonal AB1 se lie aux peptides choisis dans le groupe comprenant : QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR (SEQ ID NO 1), APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2), 15 APLPRWSGPIGVSWGL (SEQ ID NO 3), LPRWSGPIGVSW (SEQ ID NO 4) et WSGPI (SEQ ID NO 5) à l'exception du peptide GVSWGLR (SEQ ID NO 6) seul. La présente invention a pour objet des anticorps polyclonaux (AB1) dirigés contre les peptides dans le groupe comprenant : 20 QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR (SEQ ID NO 1), APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2), APLPRWSGPIGVSWGL (SEQ ID NO 3), LPRWSGPIGVSW (SEQ ID NO 4) et WSGPI (SEQ ID NO 5) à l'exception du peptide GVSWGLR (SEQ ID NO 6) seul. 25 En particulier, l'anticorps polyclonal (AB1) est dirigé contre les peptides dans le groupe consistant : QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR (SEQ ID NO 1), APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2), APLPRWSGPIGVSWGL (SEQ ID NO 3), LPRWSGPIGVSW (SEQ ID NO 30 4) et WSGPI (SEQ ID NO 5). 3057268 9 Les inventeurs ont également démontré de manière surprenante que l'anticorps polyclonal AB2 se lie aux peptides choisis dans le groupe comprenant : QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR 5 (SEQ ID NO 1), APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2) et GVSWGLR (SEQ ID NO 6). La présente invention a pour objet des anticorps polyclonaux (AB2) dirigés contre les peptides dans le groupe comprenant QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR 10 (SEQ ID NO 1), APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2) et GVSWGLR (SEQ ID NO 6). En particulier, l'anticorps polyclonal (AB2) est dirigé contre les peptides dans le groupe consistant en QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR 15 (SEQ ID NO 1), APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2) et GVSWGLR (SEQ ID NO 6). Aussi, les inventeurs sont les premiers à avoir élaboré des anticorps permettant de mesurer la concentration de spadine et du propeptide et ses fragments dans un échantillon biologique. En particulier, 20 les inventeurs ont démontré que deux peptides humains, à savoir le Propeptide et/ou la Spadine et la Mini-Spadine peuvent être indépendamment mesurés à partir d'échantillons de sérum humain. Dans la présente par propeptide ou PE on entend le peptide de séquence: 25 QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR (SEQ ID NO1). Dans la présente par PE 12-28 ou spadine on entend le fragment peptidique de la séquence en amino acides 12 à 28 du propeptide à savoir APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2). Dans la 3 0 présente par PE 12-27 on entend le fragment peptidique des peptides 12 à 27 du propeptide à savoir: APLPRWSGPIGVSWGL (SEQ ID NO 3). 3057268 10 Dans la présente par PE 14-25 on entend le fragment peptidique de la séquence en amino acides 14 à 25 du propeptide à savoir: LPRWSGPIGVSW (SEQ ID NO 4). Dans la présente par PE 1-16 ou pro-spadine on entend le 5 fragment peptidique de la séquence en amino acides 1 à 16 du propeptide à savoir: QDRLDAPPPPAAPLPR (SEQ ID NO 7). Dans la présente par PE 22-28 ou spadine (12-18) ou minispadine on entend le fragment peptidique de la séquence en amino acides 22 à 28 du propeptide ou le fragment peptidique des peptides 12 à 18 de la 10 spadine à savoir: GVSWGLR (SEQ ID NO 6). La présente invention a notamment pour objet un procédé de fabrication des anticorps polyclonaux de l'invention. Le procédé de fabrication des anticorps polyclonaux de 15 l'invention peut comprendre les étapes suivantes : a. administration d'une composition comprenant un peptide de séquence APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2) ou un peptide de séquence GVSWGLR (SEQ ID NO 6) à un animal b. récupération de l'anticorps dudit animal, et 20 c. isolement dudit anticorps. Dans la présente la composition comprenant un peptide de séquence APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2) ou un peptide de séquence GVSWGLR (SEQ ID NO 6) pour administration à un animal peut 25 être une composition immunogénique. Il peut s'agir par exemple de toute composition immunogénique connue de l'homme du métier. Il peut s'agir par exemple d'une composition comprenant au moins un adjuvant. Dans la présente, par adjuvant on entend tout adjuvant immunogénique connu de l'homme du métier. Il peut s'agir par exemple 30 d'un adjuvant de Freund, de l'Alun. 305 726 8 11 Dans la présente l'animal peut être tout animal connu de l'homme du métier utile pour la production d'anticorps, il peut s'agir par exemple de souris, rat, lapin, poule, chèvre, mouton, âne, cheval. Dans la présente l'administration peut être réalisée par tout 5 moyen et/ou procédé connu de l'homme du métier. Il peut s'agir par exemple d'une administration par injection, par exemple via une seringue. L'administration peut être réalisée par toute voie connue de l'homme du métier, il peut s'agir par exemple d'une administration par voie sous-cutanée, intradermique, intramusculaire et/ou intraveineuse. 10 Dans la présente le peptide peut être administré à l'étape a) à une concentration de 1 à 4 mg par animal, par exemple de 1,5 mg à 3 mg par animal, par exemple à une concentration de 2 mg par animal. Dans la présente la récupération de l'anticorps peut être réalisée par tout procédé connu de l'homme du métier. Il peut s'agir par 15 exemple d'un prélèvement du sérum de l'animal, d'une saignée et/ou de tout moyen/procédé permettant de récupérer le sérum de l'animal. Dans la présente l'isolement de l'anticorps peut être réalisé par tout procédé connu de l'homme du métier. Il peut s'agir par exemple d'une filtration, par exemple à travers une membrane. La filtration de la solution 20 peut être effectuée via une membrane comprenant des pores avec un diamètre de pores compris de 0,2 à 0,45pm. Il peut s'agir par exemple d'une membrane stérile. La membrane peut être par exemple une membrane en cellulose, en polyethersulfone, en polycaronate, en nylon. Il peut s'agir également d'un procédé comprenant une étape coagulation du 25 sang, par exemple pendant 1 à 3 heures à une température comprise de 15 à 25°C, élimination du caillot formé, filtration de la solution, centrifugation, et récupération du surnageant comprenant les anticorps polyclonaux. La centrifugation peut être effectuée pendant un temps compris de 5 à 20 minutes, par exemple de 10 à 17 minutes, par exemple 30 de 15 minutes. La centrifugation peut être effectuée par exemple à une vitesse de 5 000 à 25 000 tours par minute, par exemple de 10 000 à 20 000 tours par minutes, par exemple égale à 15 000 tours par minutes. 3057268 12 L'homme du métier de part ses connaissances générales saura adapter et/ou choisir le procédé d'obtention des anticorps polyclonaux. Dans la présente, les anticorps de l'invention peuvent être produits par tout procédé adapté par exemple le procédé décrit dans Lee, 5 B.S., Huang, J.S., Jayathilaka, L.P., Lee, J., Gupta, S. 2016. Antibody production with synthetic peptides. High resolution imaging of cellular proteins, vol 1474 of the series Methods in Molecular Biology, 25-47. [29] Les inventeurs ont également démontré que les anticorps selon l'invention permettent de mesurer la concentration de spadine et du 10 propeptide et ses fragments dans un échantillon biologique. En particulier, les inventeurs ont démontré que deux peptides humains, à savoir le Propeptide ou la Spadine et la Mini-Spadine peuvent être indépendamment mesurés à partir d'échantillons de sérum humain. La présente invention a donc également pour objet l'utilisation 15 in-vitro des anticorps de l'invention pour la détection/dosage d'un peptide choisi parmi le propeptide, la spadine et la mini-spadine dans un échantillon biologique. Les anticorps utiles pour la détection et/ou le dosage du Propeptide, de la Spadine et de la Mini-Spadine sont tels que définis ci- 20 dessus. Il peut s'agir par exemple des anticorps polyclonaux AB1 ou AB2. Les inventeurs ont également démontré que les anticorps selon l'invention permettent de détecter et/ou mesurer la concentration de mini spadine dans un échantillon biologique. Les inventeurs ont également démontré que les anticorps selon l'invention permettent avantageusement 25 de détecter et/ou mesurer dans un échantillon la concentration de mini spadine qui a été injectée chez un mammifère, par exemple un animal ou un être humain. En particulier, les inventeurs ont démontré que deux peptides humains, à savoir le Propeptide ou la Spadine et la Mini-Spadine peuvent 30 être indépendamment mesurés à partir d'échantillons de sérum humain. Les inventeurs ont également démontré que les anticorps selon l'invention permettent avantageusement avec l'anticorps AB1 la détection / 3057268 13 la mesure de la concentration du PE, de la spadine mais pas la minispadine, et avec l'anticorps AB2 la détection / la mesure de la concentration du PE, de la spadine et de la mini-spadine, la valeur absolue de la différence de concentration entre la mesure avec l'anticorps AB2 et 5 AB1 correspondant à la concentration en mini-spadine. La présente invention a donc également pour objet l'utilisation in-vitro des anticorps selon l'invention pour la détection et/ou mesure de la concentration de la mini-spadine dans un échantillon biologique. Dans la présente, par « échantillon biologique », on entend 10 tout échantillon obtenu à partir de mammifères, par exemple un mammifère choisi dans le groupe comprenant l'ordre Monotremata, Didelphimorphia, Paucituberculata, Microbiotheria, Notoryctemorphia, Dasyuromorphia, Peramelemorphia, Diprotodontia, Tubulidentata, Sirenia, Afrosoricida, Macroscelidea, Hyracoidea, Proboscidea, Cingulata, Pilosa, 15 Scandentia, Dermoptera, Primates, Rodentia, Lagomorpha, Erinaceomorpha, Soricomorpha, Chiroptera, Pholidota, Carnivora, Perissodactyla, Artiodactyla et Cetacea. Il peut s'agir par exemple d'un humain ou d'un animal. Dans la présente, l'échantillon biologique peut être tout liquide 20 biologique, par exemple, il peut s'agir d'un échantillon de sang, de plasma, de sérum, de liquide céphalorachidien (LCR), de mucus vaginal, de mucus nasal, de salive, d'urine et/ou de lait. De préférence l'échantillon biologique est un échantillon de sang ou un échantillon de sérum. Selon l'invention, les anticorps de l'invention peuvent être 25 utilisés dans tout procédé de dosage/détection adapté connu de l'homme du métier. Il peut s'agir d'un procédé d'immunodosage, par exemple un dosage ELISA ou AlphaLISA. Il peut s'agir par exemple d'un procédé de dosage décrit dans le document Immunoanalyse: De la théorie aux critères de choix en biologie clinique, Catherine Massart, EPD science 2009. 30 L'homme du métier de par ses connaissances générales saura adapter les conditions/utiliser les procédés de dosage/détection les anticorps selon l'invention. 3057268 14 Les inventeurs sont également les premiers à avoir démontré que la concentration du peptide de séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR 5 (SEQ ID N°1) est diminuée chez un individu présentant un état dépressif. Les inventeurs ont également démontré que les anticorps selon l'invention permettent de déterminer la concentration du peptide de séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR(SEQ ID N°1) dans un échantillon biologique d'un individu contrôle sain et 10 également d'un individu dépressif. La présente invention a donc également pour objet l'utilisation in-vitro des anticorps de l'invention pour la détection d'un état dépressif à partir d'un échantillon biologique d'un individu. Dans la présente par « état dépressif » ou « individu dépressif » 15 on entend un individu présentant un trouble de l'humeur accompagné de tristesse et de souffrance morale. Il peut s'agir par exemple de tout état dépressif connu de l'homme du métier, par exemple un trouble dépressif majeur (TDM), une dépression névrotique / dépression psychotique, une dépression psychogène / dépression endogène et/ou une dépression 20 réactionnelle / dépression d'autonome. Dans la présente par « individu contrôle sain » on entend un individu, par exemple un être humain, ne présentant pas d'état dépressif, par exemple de trouble de l'humeur accompagné de tristesse et de souffrance morale, et/ou n'ayant pas présenté d'état dépressif et/ou ne 2 5 présentant pas de trouble dépressif majeur et/ou n'ayant pas présenté de trouble dépressif majeur. Selon l'invention, par « individu » on entend un mammifère choisi dans le groupe comprenant l'ordre Monotremata, Didelphimorphia, Paucituberculata, Microbiotheria, Notoryctemorphia, Dasyuromorphia, 30 Peramelemorphia, Diprotodontia, Tubulidentata, Sirenia, Afrosoricida, Macroscelidea, Hyracoidea, Proboscidea, Cingulata, Pilosa, Scandentia, Dermoptera, Primates, Rodentia, Lagomorpha, Erinaceomorpha, 3057268 15 Soricomorpha, Chiroptera, Pholidota, Carnivora, Perissodactyla, Artiodactyla et Cetacea. Il peut s'agir par exemple d'un humain ou d'un animal. Dans la présente, par « échantillon biologique », on entend 5 tout échantillon obtenu à partir de mammifères, par exemple un mammifère choisi dans le groupe comprenant l'ordre Monotremata, Didelphimorphia, Paucituberculata, Microbiotheria, Notoryctemorphia, Dasyuromorphia, Peramelemorphia, Diprotodontia, Tubulidentata, Sirenia, Afrosoricida, Macroscelidea, Hyracoidea, Proboscidea, Cingulata, Pilosa, 10 Scandentia, Dermoptera, Primates, Rodentia, Lagomorpha, Erinaceomorpha, Soricomorpha, Chiroptera, Pholidota, Carnivora, Perissodactyla, Artiodactyla et Cetacea. Il peut s'agir par exemple d'un humain ou d'un animal. Dans la présente, le procédé de détection in-vitro peut être tout 15 procédé in-vitro connu de l'homme du métier adapté pour l'utilisation d'anticorps. Il peut s'agir par exemple d'un procédé immunochimique, par exemple un western blot, ELISA, d'un procédé immunocytochimique, par exemple en microscopie confocale, microscopie immunoélectronique, et/ou d'un procédé immunohistochimique. 20 La présente invention a également pour objet un procédé in- vitro de détection/détermination de la dépression chez un patient comprenant les étapes suivantes a. Mesure de la concentration (Cm) du peptide de séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRG 25 GRWRR (SEQ ID NO 1) dans un échantillon biologique d'un individu, b. Comparaison de la concentration (Cm) du peptide mesurée à l'étape a) avec une concentration de référence (Cref) d'un individu sain et calcul d'un score (Si) selon la formule 30 suivante : S1= Cm/Cref 3057268 16 une valeur de S1 inférieure à 1 indiquant que l'individu à partir duquel a été obtenu l'échantillon est dépressif. Selon l'invention la mesure de la concentration du peptide 5 de séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR (SEQ ID NO 1) peut être réalisée selon le procédé décrit dans Mazella, J. et al. Spadine, a sortilin-derived peptide, targeting rodent TREK-1 channels: a new concept in the antidepressant drug design. PLoS Biol 8, 10 e1000355 (2010) [27] incorporé ici par référence et/ou avec tout procédé immunologique adapté connu de l'homme métier en utilisant les anticorps polyclonaux de l'invention définie ci-dessus L'homme du métier de par ses connaissances générales sait adapter les conditions pour la mise en oeuvre des procédés connus en utilisant les anticorps polyclonaux selon 15 l'invention. Dans la présente par « sujet sain de référence », on entend un mammifère, par exemple un être humain, ne présentant pas d'état dépressif et/ou n'ayant pas présenté d'état dépressif et/ou ne présentant pas de trouble dépressif majeur et/ou n'ayant pas présenté de trouble 2 0 dépressif majeur. Selon l'invention par « groupe de sujets de référence » on entend un groupe permettant de définir une valeur de référence fiable. Il peut s'agir par exemple d'un groupe comprenant au moins 2 sujets de référence tel que définis ci-dessus, par exemple au moins 40 sujets de 25 référence. Il peut s'agir par exemple d'un groupe comprenant de 40 à 200 sujets de référence. Selon l'invention lors de l'étape de comparaison de la concentration (Cm) du peptide mesurée avec une concentration de référence du peptide (Cref), la concentration de référence du peptide (Cref) 30 de préférence correspond à une concentration mesurée à partir d'un échantillon biologique d'un sujet ou groupe de sujets sains de référence avec des caractéristiques physiologiques similaires par exemple choisies 3057268 17 dans le groupe comprenant l'âge, le poids, le sexe, la masse corporelle, abus de drogues, tabac, alcool. Selon l'invention la « concentration de référence du peptide » (Cref) peut-être la concentration dudit peptide chez un sujet sain et/ou 5 groupe de sujets sains de référence. Par exemple, lorsque l'échantillon biologique est un échantillon de sang, la concentration de référence du peptide peut être comprise de 20 à 30 nM, par exemple de 22 à 28 nM. Les inventeurs ont également démontré que la concentration du peptide de séquence 10 QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR (SEQ ID NO1) évolue lors d'un traitement pharmacologique d'un état dépressif chez un individu. En particulier, les inventeurs ont démontré qu'un traitement pharmacologique effectif permet de « restaurer » la concentration du peptide de séquence 15 QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR (SEQ ID NO1) et d'augmenter sa concentration voire un retour à une concentration de référence. Les inventeurs ont également démontré que les anticorps selon l'invention permettent de suivre l'efficacité d'un traitement sur la dépression 20 via le suivi de la concentration du peptide de séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR (SEQ ID NO1) dans un échantillon biologique d'un individu. La présente invention a donc en outre pour objet un procédé de 25 suivi de l'efficacité d'un traitement sur la dépression comprenant : a) Mesure de la concentration Cl du peptide de séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPR GGRWRR (SEQ ID NO1) dans un échantillon biologique d'un individu dépressif 30 b) Mesure de la concentration C2 du peptide de séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPR 3057268 18 GGRWRR (SEQ ID NO1) dans un échantillon biologique dudit individu après ledit traitement, c) Comparaison des valeurs de concentration et calcul d'un score (S2) selon la formule suivante : 5 S2 = C2 / une valeur de S2 supérieure à 1,2 indiquant que le traitement est un antidépresseur efficace. Dans la présente par « traitement » on entend par exemple un traitement médical, par exemple allopathique, faisant intervenir la prise de 10 molécules, par exemple des molécules chimiques, par exemple des molécules obtenues par synthèse organique, des molécules d'origine biologique, par exemple des protéines, des molécules provenant d'organismes vivants, par exemple de mammifères, de microorganismes, de plantes et/ou synthétisées par des organismes vivant, par exemple des 15 protéines, des molécules d'acides nucléiques, ou tout autre traitement non chimique, par exemple la rééducation, ou tout autre traitement basé sur la thérapie cellulaire, par exemple l'injection de cellules souches. Dans la présente le traitement peut être tout traitement antidépresseur connu de l'homme du métier. Il peut s'agir par exemple de 20 traitement utilisant des SSRI (« selective serotonin reuptake inhibitors »), par exemple la fluoxétine (Prozac (marque déposée)), la paroxétine (Deroxat, Divarius, Paxil (marque déposée)), la sertraline (Zoloft (marque déposée)) ; le citalopram (Seropram, Celexa (marque déposée)), l'oxalate d'escitalopram (Seroplex, Cipralex (marque déposée)), l'indalpine, la 25 zimelidine, la dapoxétine (Priligy (marque déposée)), le maléate de fluvoxamine (Floxyfral (marque déposée)); des SNRI (« serotonin norepinephrine reuptake inhibitors »), par exemple la venlafaxine (Effexor (marque déposée)), le milnacipran (Ixel,Savella (marque déposée)), la duloxétine (Cymbalta (marque déposée)), le tramadol (Topalgic (marque 30 déposée)), la néfazodone, la desvenlafaxine (Pristiq (marque déposée)), les antidépresseurs tricycliques (TCA), par exemple l'amitriptyline (Laroxyl (marque déposée), Elavil (marque déposée)), l'amoxapine (Défanyl 3057268 19 (marque déposée)), la clomipramine (Anafranil (marque déposée), Clomipramine Merck (marque déposée)), le chlorhydrate de dosulépine (Prothiaden, (marque déposée)), la doxépine (Quitaxon, (marque déposée)), l'imipramine (Tofranil, (marque déposée)), la maprotiline 5 (Ludiomil, (marque déposée)), l'opipramol (Insidon, (marque déposée)), la quinupramine (Kinupril, (marque déposée)), la trimipramine (Surmontil, (marque déposée)), les inhibiteurs de la monoamine oxydase (IMAO), irréversibles et non sélectifs, par exemple la moclobémide, le toloxatone, des antagonistes agissant sur les récepteurs de la substance P, des 10 antagonistes des récepteurs du NMDA, des antidépresseurs noradrénergique et spécifique des sérotoninergiques (ANSS). Dans la présente, l'échantillon biologique est tel que défini ci- dessus. Dans la présente, l'individu est tel que défini ci-dessus. 15 Dans la présente, la mesure de la concentration peut être réalisée par tout procédé connu et adapté de l'homme du métier. Il peut s'agir d'un procédé tel que défini ci-dessus. Avantageusement, la présente invention permet de mesurer la quantité de peptides dérivés de la Sortiline dans un échantillon biologique, 20 par exemple un échantillon de sang issu d'un individu, en particulier un mammifère tout en la différenciant du dosage de la mini-spadine qui peut correspondre à la molécule active utilisée dans un traitement antidépresseur. En outre, la présente invention permet avantageusement, 25 lorsque la mini-spadine (12-18) est utilisée comme médicament anti- dépresseur, de surveiller et de contrôler les doses efficaces dans chaque individu/patient. En d'autres termes, les anticorps de l'invention permettent avantageusement de différencier les peptides endogènes dérivés de la Sortiline de peptides exogènes, la mini-spadine (12-18), présents dans le 30 sérum humain. L'utilisation des anticorps dans des procédés de mesure de concentrations selon l'invention et/ou de suivi de l'efficacité d'un traitement 3057268 20 antidéprésseur permet avantageusement avec AB1 de mesurer les niveaux sériques de peptides dérivés de Sortiline de contrôles/individus sains et des individus/patients dépressifs même s' ils sont traités avec la mini-Spadine (12-18), et de mesurer l'efficacité de la biodisponibilité mini- 5 Spadine (12-18) avec la différence obtenue entre les peptides mesurés avec AB2 et les peptides mesurés avec AB1 comme décrit dans la figure 1A. Brève description des figures : 10 Figure 1 : la figure 1A est un diagramme représentant les relations structure-reconnaissance des anticorps AB1 et AB2 en fonction des différents fragments. Sur cette figure + signifie que l'anticorps reconnait le fragment et - signifie qu'il n'est pas reconnu, n.t. correspond à non testé Les figures 1B et 1C représentent les affinités relatives pour la Spadine, le 15 PE et des analogues dosés par la méthode de détection. La figure 1D représente les résultats de test de la nage forcée de Porsolt (FST), couramment utilisé dans le screening d'antidépresseurs. Les souris traitées avec la Spadine ou des peptides partiels avaient un temps plus court d'immobilité par rapport à ceux obtenus avec une solution saline. 20 (D'une façon ordinaire ANOVA, F5,54 =20,21, **** p non Non (SEQ ID NO 7) (pro- spadine) 1000 détectable 3057268 29 LPRWSGPIGVSW (SEQ PE14-25 3,44 0,8 - 300 Oui ID NO 4) (2,44- 4,85) APLPRWSGPIGVSWGL PE12-27 1,73 1,5 - 400 Oui (SEQ ID NO 3) (1,34- 2,24) GVSWGLR (SEQ ID NO PE22-28 > Non Oui 6) 1000 détectable Pour mieux comprendre les variations des niveaux de PE dans la pathologie de la dépression, l'ensemble des sérums humains provenant d'un centre clinique de l'Italie ont été recueillis et une mesure de la 5 concentration du PE effectuée. Dans la cohorte, il a été déterminé que la concentration de PE était significativement plus faible chez les patients atteints de trouble dépressif majeur (TDM) (18,9 ± 1,3 nM) que chez les témoins sains (23,7 ± 1,5 nM) (z = -2,11, p = 0,035) (Figure 2). Les patients avec un trouble 10 dépressif majeur traités pendant 12 semaines avec des antidépresseurs ont montré un niveau de PE significativement plus élevé qu'avant le traitement (21,0 ± 1,5 nM) (z = -1,98, p = 0,047) (figure 2). L'efficacité du traitement a été confirmée par la diminution significative de l'Echelle Montgomery-Asberg d'évaluation de la dépression (MADRS: Montgomery- 15 Asberg depression rating scale) MADRS (figure 2). En particulier, il a été démontré une diminution de 2,5 fois du score après douze semaines de traitement (T1). Discussion 20 Tel que démontré dans cet exemple l'anticorps utilisé reconnaît qu'une série de peptides dérivés du PE humain, ainsi que le PE lui-même et pas des peptides non-apparentés comme la neurotensine ou la somatostatine. 3057268 30 Tel que démontré, les peptides reconnus par l'anticorps ont des activités antidépresseurs tels que démontré par le test de la nage forcée chez la souris (figure 1D). Cet exemple démontre donc clairement que la concentration de 5 PE dans le sérum est régulée à la baisse, c'est-à-dire est inférieure chez les patients avec un trouble dépressif majeur (TDM) en comparaison avec des sujets sains. Cet exemple démontre également clairement que la concentration de PE varie avec un traitement antidépresseur et permet notamment chez des patients présentant une concentration de propeptide 10 inférieure à la normale un retour à la normale en corrélation avec l'évolution clinique du traitement de la dépression. Cet exemple démontre donc clairement que la concentration de propeptide est un marqueur de l'état dépressif et peut être utilisé pour détecter/déterminer un état dépressif, par exemple un trouble majeur 15 dépressif, et également pour déterminer/suivre l'efficacité d'un traitement antidépresseur. La concentration sérique de PE est un marqueur supplémentaire au marqueur niveau sérique connu, par exemple le BDNF [31]. Tel que démontré, la concentration sérique de PE est 20 significativement plus faible chez les patients avec un TDM, et en tenant compte du fait que les peptides mesurés dans le présent exemple ont été générés à partir de sortiline, une étude de la corrélation éventuelle avec le niveau et / ou l'expression sortiline a été effectuée. Fait intéressant, la variation de l'expression de la sortiline dans le sang a déjà été observée 25 chez les patients atteints de TDM. Tout d'abord, dans les cellules mononucléaires du sang, l'expression génique de la sortiline diminue avec l'amélioration clinique [23], tandis que la sortiline est surexprimée chez les patients souffrants de TDM, notamment chez les non-répondeurs [32]. D'autre part, dans le sérum humain, l'augmentation du niveau de la 30 sortiline est associée à l'état de dépression [24]. Les résultats obtenus démontrent que la concentration sérique du PE varie en fonction des symptômes de l'humeur chez l'homme, et est 3057268 31 un biomarqueur supplémentaire de la dépression, en addition ou en remplacement du BDNF et/ou le VEGF [24]. De plus, la possible utilisation ultérieure de la Spadine comme thérapie efficace contre la pathologie, un peptide pour lequel le taux sérique pourrait également être contrôlé, va 5 certainement grandement améliorer les perspectives de nouvelles stratégies pour gérer efficacement la dépression dans le monde. Cet exemple démontre donc clairement que la présente invention permet notamment la détection/détermination de l'état dépressif, le suivi de l'efficacité d'un traitement sur la dépression, la mesure de la 10 concentration et/ou la détection du propeptide ou PE de séquence: QDRLDAPPP PAAPLPRWSGP IGVSWGLRAAAAGGAFPRGGR WRR (SEQ ID NO1) dans un échantillon biologique, notamment en utilisant l'anticorps AB1 dans l'exemple 1 décrit ci-dessus. 15 Exemple 2: procédé d'obtention des anticorps AB1 et AB2 et détermination de leurs spécificités Les deux anticorps ont été préparés à partir de lapin et les volumes obtenus sont environ 200 ml de chaque. Dans les protocoles expérimentaux, ces anticorps sont utilisés à des dilutions de 1/1000 et 20 1/5000. Les techniques utilisées pour mesurer le niveau du pro-peptide dans le sang sont multiples, immunologique ou fluorescence. Le dosage du peptide peut être obtenu avec 100 pl de sang et reproductible. La figure 1 indique les spécificités de liaisons en fonctions des anticorps. 25 En particulier, l'anticorps AB1 et AB2 ont été obtenu par injection chez deux lapins, à savoir Oryctolagus cuniculus, de la spadine couplée à la KLH (protéine « Keyhole limpet hemocyanin ») (AB1) ou de la mini-spadine (PE 22-28) couplée à la KLH (AB2) au jour 0, JO (1mg), jour 7, J7 (1mg), jour 14, J14 (1mg) et jour 29, J29 (1mg). Les prélèvements 30 sanguins, à savoir 20 ml ont été effectués au jour 27 (J27) et au jour 42 (J42). Le sérum polyclonal a été obtenu par centrifugation à 1200xg pendant 10 min. Le sérum polyclonal correspondant au surnageant a été 3057268 32 récupéré. La réponse immunitaire a été contrôlée par ELISA pour chaque anticorps. Les anticorps contenus dans le sérum ont été conservés à 20°C. 5 Exemple 3 : procédé de détection / suivi de l'efficacité d'un traitement sur la dépression Dans l'exemple ci-dessous les expériences sont réalisées avec les anticorps polyclonaux AB1 décrits dans les exemples 1 et 2 ci-dessus. Une mesure de la concentration sérique du peptide de 10 séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR est réalisée selon le procédé décrit dans l'exemple 1. La cohorte d'individus contrôles était composée de 49 volontaires sains non apparentés qui sont sélectionnés pour le diagnostic 15 de troubles DSM-IV Axe I par des psychologues experts en utilisant le Mini-International Neuropsychiatric Interview (MINI) [30]. Seuls des volontaires sains sans antécédents d'abus ou de dépendance à la drogue ou à l'alcool et sans antécédents personnels ou familiaux au premier degré de troubles psychiatriques étaient recrutés dans l'étude. En outre, 20 l'absence de maladies neurologiques pertinentes à savoir l'épilepsie, le syndrome de Parkinson, était obligatoire pour l'inclusion dans l'étude. Enfin, les sujets qui obtiennent un score inférieur à 27/30 au Mental State Examination Mini (MMSE) étaient exclus de l'étude. Une moyenne de la concentration mesurée dans les 25 échantillons de sujets contrôles était effectuée et la valeur obtenue correspondait à la concentration de référence (Cref) d'un individu sain. Une mesure de la concentration sérique (Cm) du peptide de séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR était 30 réalisée dans un échantillon d'un individu. Une comparaison de la concentration (Cm) du peptide mesurée chez le sujet dépressif avec la concentration de référence (Cref) du sujet 3057268 33 sain est effectuée via le calcul d'un score (S1) selon la formule suivante : S1= Cm/Cref, une valeur de S1 inférieur à 1 indiquant que l'individu à partir duquel a été obtenu l'échantillon est dépressif. Dans cet exemple un suivi de l'efficacité d'un traitement sur la 5 dépression est effectué. La cohorte de patients était composée de patients ayant un trouble dépressif majeur (TDM) avec une dépression modérée à sévère qui répondaient aux critères du système de classification du manuel diagnostique et statistique IV des troubles mentaux (DSM-IV). Le 10 diagnostic de la dépression unipolaire a été confirmé par une entrevue clinique structurée pour les troubles DSM-IV Axe I (SCID-I). Les critères d'exclusions étaient les suivants: a) un retard mental ou d'un trouble cognitif; b) une histoire de vie de schizophrène, schizo affectif, ou d'un trouble bipolaire; c) trouble de la personnalité, la toxicomanie, l'abus ou la 15 dépendance de l'alcool, le trouble obsessionnel compulsif, ou d'un trouble de stress post-traumatique comme diagnostic primaire; et d) comorbidité avec un trouble de l'alimentation. Une mesure de la concentration sérique du peptide de séquence 20 QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR est réalisée selon le procédé décrit dans l'exemple 1 préalablement à l'administration de tout traitement anti-dépresseur. En particulier la mesure de la concentration a été effectuée à partir d'un échantillon sanguin. La concentration était mesurée indépendamment pour chaque patient 25 préalablement à tout traitement. La concentration mesurée était de 19 nM. Les patients ont été ensuite traités en monothérapie avec des inhibiteurs de la recapture de la sérotonine (SSRI), des inhibiteurs sélectifs de la sérotonine-noradrénaline (SNRI), les antidépresseurs tricycliques (TCA) ou des antidépresseurs noradrénergiques et spécifiques des 30 sérotoninergiques (ANSS). 3057268 34 Le mode d'administration, la fréquence, le dosage et la posologie correspondaient à celle de la notice d'utilisation ou aux indications mentionnées dans le dictionnaire Vidal. Une mesure de la concentration sérique du peptide de 5 séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFP RGGRWRR est réalisée selon le procédé décrit dans l'exemple 1 après 12 semaines de traitement a été effectuée indépendamment pour chaque patient. La concentration mesurée était de de 21 nM. 10 Une comparaison de la concentration (Cm) du peptide mesurée chez le patient dépressif avec la concentration de référence (Cref) a été effectuée via le calcul d'un score (S1) selon la formule suivante : 51= Cm/Cref, une valeur de S1 inférieur à 1 indiquant que l'individu à partir duquel a été obtenu l'échantillon est dépressif. 15 Une Comparaison des valeurs de concentrations mesurée a été mesurée via le calcul d'un score (S2) selon la formule suivante : S2 = C2 / C1 (C1, concentration avant traitement, C2, concentration après traitement). Lorsque la valeur de S2 était supérieure à 1,2 le traitement administré était un antidépresseur efficace. 20 Ce résultat a été confirmé par une évaluation de l'état psychologique du patient via une évaluation des critères du système de classification du manuel diagnostique et statistique IV des troubles mentaux (DSM-IV). 3057268 Liste de références 1. Wong, M. & Licinio, J. Research and treatment approaches to depression. Nat Rev Neurosci. 2, 343-351 (2001). 5 2. Moller HJ. Suicide, suicidality and suicide prevention in affective disorders. Acta Psychiatr Scand; 418 (suppl) : 73-80 (2003). 3. Nestler, E. et al. Neurobiology of depression. Neuron 34, 13-25 (2002). 4. Baghai TC, Volz HP, Moller HJ. Drug treatment of depression in the 10 2000s: An overview of achievements in the last 10 years and future possibilities.World J Biol Psychiatry; 7(4):198-222 (2006). 5. Weilburg JB. An overview of SSRI and SNRI therapies for depression. Manag Care. Jun; 13 (6 Suppl Depression): 25-337 (2004). 15 6. Manji HK, Gottesman II, Gould TD. Signal transduction and genes-to- behaviors pathways in psychiatric diseases. Sci STKE; 207 : pe49 (2003). 7. Reus VI, Wolkowitz OM. Antiglucocorticoid drugs in the treatment of depression. Expert Opin Investig Drugs ; 10 : 1789-96 (2001). 20 8. Griebel G, Simiand J, Steinberg R, et al. 4-(2-Chloro-4-methoxy-5- methylpheny1)-N-[(1S)-2-cyclopropy1-1-(3- fluoro-4- methylphenypethyl]5-methyl-N-(2-propyny1)-1, 3- thiazol-2-amine hydrochloride (SSR125543A), a potent and selective corticotrophinreleasing factor(1) receptor antagonist. II. Characterization in rodent 25 models of stress-related disorders. J Pharmacol Exp Ther ; 301 : 333- 45 (2002). 9. Kramer MS, Cutter N, Feighner J, et al. Distinct mechanism for antidepressant activity by blockade of central substance P receptors. Science ; 281 : 1640-1645 (1998). 30 10. Skolnick P. Antidepressants for the new millennium. Eur J Pharmacol ; 375: 31-40 (1999). 3057268 36 11. Kempermann G, Kronenberg G. Depressed new fleurons. Adult hippocampal neurogenesis and a cellular plasticity hypothesis of major depression. Biol Psychiatry ; 54 : 499-503 (2003). 12. Malberg JE, Schecter LE. Increasing hippocampal neurogenesis: a 5 novel mechanism for antidepressant drugs. Curr Pharm Des; 11 : 145-155 (2005) 13. Duman, R. & Monteggia, L. A neurotrophic model for stress-related mood disorders. Biol Psychiatry. (9, 1116-1127 (2006). 14. Henn FA, Vollmayr B. Neurogenesis and depression: etiology or 10 epiphenomenon? Biol Psychiatry; 56 : 146-50.(2004). 15. Perlis, R. H., Moorjani, P., Fagerness, J., Purcell, S., Trivedi, M. H., Fava, M., Rush, A. J., Smoller, J. W.,. Pharmacogenetic Analysis of Genes Implicated in Rodent Models of Antidepressant Response: Association of TREK1 and Treatment Resistance in the STAR(*)D 15 Study. Neuropsychopharmacology. Nov;33(12):2810-9 (2008) 16. Bentley, S.M., Pagalilauan, G.L., Simpson, S.A., 2014. Major depression. Med Clin North Am 98, 981-1005. 17. Thomas, L., Kessler, D., Campbell, J., Morrison, J., Peters, T.J., Williams, C., Lewis, G., Wiles, N., 2013. Prevalence of treatment- 20 resistant depression in primary care: cross-sectional data. Br J Gen Pract 63, e852-858. 18. Jani, B.D., McLean, G., Nicholl, B.I., Barry, S.J., Sattar, N., Mair, F.S., Cavanagh, J., 2015. Risk assessment and predicting outcomes in patients with depressive symptoms: a review of potential role of 25 peripheral blood based biomarkers. Front Hum Neurosci 9, 18. 19. Schmidt, H.D., Shelton, R.C., Duman, R.S., 2011. Functional biomarkers of depression: diagnosis, treatment, and pathophysiology. Neuropsychopharmacology 36, 2375-2394. 20. Allen, A.P., Naughton, M., Dowling, J., Walsh, A., Ismail, F., Shorten, 30 G., Scott, L., McLoughlin, D.M., Cryan, J.F., Dinan, T.G., Clarke, G., 2015. Serum BDNF as a peripheral biomarker of treatment-resistant 3057268 37 depression and the rapid antidepressant response: A comparison of ketamine and ECT. J Affect Disord 186, 306-311. 21. Nase, S., Kohler, S., Jennebach, J., Eckert, A., Schweinfurth, N., Gallinat, J., Lang, U.E., Kuhn, S., 2016. Role of Serum Brain Derived 5 Neurotrophic Factor and Central N-Acetylaspartate for Clinical Response under Antidepressive Pharmacotherapy. Neurosignals 24, 1-14. 22. Chen, Z.Y., leraci, A., Teng, H., Dall, H., Meng, C.X., Herrera, D.G., Nykjaer, A., Hempstead, B.L., Lee, F.S., 2005. Sortilin controls 10 intracellular sorting of brain-derived neurotrophic factor to the regulated secretory pathway. J Neurosci 25, 6156-6166. 23. Belzeaux, R., Formisano-Treziny, C., Loundou, A., Boyer, L., Gabert, J., Samuelian, J.C., Feron, F., Naudin, J., Ibrahim, E.C., 2010. Clinical variations modulate patterns of gene expression and define 15 blood biomarkers in major depression. J Psychiatr Res 44, 1205- 1213. 24. Buttenschon, H.N., Demontis, D., Kaas, M., Elfving, B., Molgaard, S., Gustafsen, C., Kaerlev, L., Petersen, C.M., Borglum, A.D., Mors, O., Glerup, S., 2015. Increased serum levels of sortilin are associated 20 with depression and correlated with BDNF and VEGF. Transi Psychiatry 5, e677. 25. Munck Petersen, C., Nielsen, M.S., Jacobsen, C., Tauris, J., Jacobsen, L., Gliemann, J., Moestrup, S.K., Madsen, P., 1999. Propeptide cleavage conditions sortilin/neurotensin receptor-3 for 25 ligand binding. EMBO J 18, 595-604. 26. Mazella, J., Zsurger, N., Navarro, V., Chabry, J., Kaghad, M., Caput, D., Ferrara, P., Vita, N., Gully, D., Maffrand, J.P., Vincent, J.P., 1998. The 100-kDa neurotensin receptor is gp95/sortilin, a non-G-proteincoupled receptor. The Journal of biological chemistry 273, 26273- 30 26276. 27. Mazella, J., Petrault, O., Lucas, G., Deval, E., Beraud-Dufour, S., Gandin, C., El-Yacoubi, M., Widmann, C., Guyon, A., Chevet, E., 3057268 38 Taouji, S., Conductier, G., Corinus, A., Coppola, T., Gobbi, G., Nahon, J.L., Heurteaux, C., Borsotto, M., 2010. Spadine, a sortilinderived peptide, targeting rodent TREK-1 channels: a new concept in the antidepressant drug design. PLoS Biol 8, e1000355. 5 28. Heurteaux, C., Lucas, G., Guy, N., El Yacoubi, M., Thummler, S., Peng, X.D., Noble, F., Blondeau, N., Widmann, C., Borsotto, M., Gobbi, G., Vaugeois, J.M., Debonnel, G., Lazdunski, M., 2006. Deletion of the background potassium channel TREK-1 results in a depression-resistant phenotype. Nat Neurosci 9, 1134-1141. 10 29. Lee, B.S., Huang, J.S., Jayathilaka, L.P., Lee, J., Gupta, S. 2016. Antibody production with synthetic peptides. High resolution imaging of cellular proteins, vol 1474 of the series Methods in Molecular Biology, 25-47. 30. Sheehan, D.V., Lecrubier, Y., Sheehan, K.H., Amorim, P., Janavs, J., 15 Weiller, E., Hergueta, T., Baker, R., Dunbar, G.C., 1998. The Mini- International Neuropsychiatric Interview (M.I.N.I.): the development and validation of a structured diagnostic psychiatric interview for DSM-IV and ICD-10. J Clin Psychiatry 59 Suppl 20, 22-33;quiz 34-57. 31. Molendijk, M.L., Spinhoven, P., Polak, M., Bus, B.A., Penninx, B.W., 20 Elzinga, B.M., 2014. Serum BDNF concentrations as peripheral manifestations of depression: evidence from a systematic review and meta-analyses on 179 associations (N=9484). Mol Psychiatry 19, 791-800. 32. Belzeaux, R., Bergon, A., Jeanjean, V., Loriod, B., Formisano- 25 Treziny, C., Verrier, L., Loundou, A., Baumstarck-Barrau, K., Boyer, L., Gall, V., Gabert, J., Nguyen, C., Azorin, J.M., Naudin, J., Ibrahim, E.C., 2012. Responder and nonresponder patients exhibit different peripheral transcriptional signatures during major depressive episode. Transi Psychiatry 2, e185. 30 REVENDICATIONS1. Anticorps polyclonaux (AB1) dirigés contre le peptide de séquence APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2) (Spadine et/ou PE). 2. Anticorps polyclonaux (AB2) dirigés contre les peptides comprenant la séquence GVSWGLR (SEQ ID NO 6) (Mini-Spadine). 3. Anticorps polyclonaux selon la revendication 1, ledit anticorps se lie aux peptides choisis dans le groupe comprenant : QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR (SEQ ID NO 1), APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2), APLPRWSGPIGVSWGL (SEQ ID NO 3), LPRWSGPIGVSW (SEQ ID NO 4), et WSGPI (SEQ ID NO 5) à l'exception du peptide GVSWGLR (SEQ ID NO 6) seul. 4. Anticorps polyclonaux selon la revendication 2, ledit anticorps se lie aux peptides choisis dans le groupe comprenant : QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGRWRR (SEQ ID NO 1), APLPRWSGPIGVSWGLR (SEQ ID NO 2) et GVSWGLR (SEQ ID NO 6). 5. Procédé de fabrication des anticorps selon l'une quelconque des revendications 1 ou 3 comprenant : a. administration d'une composition comprenant un peptide de séquence APLPRWSGPIGVSWGLR à un animal b. récupération de l'anticorps dudit animal, et c. isolement dudit anticorps. 6. Procédé de fabrication des anticorps selon l'une quelconque des revendications 2 ou 4 comprenant : a. administration d'une composition comprenant un peptide de séquence GVSWGLR à un animal 3057268 40 b. récupération de l'anticorps dudit animal, et c. isolement dudit anticorps Utilisation in-vitro des anticorps selon l'une quelconque des 5 revendications 1 à 4 pour la détection/dosage de la spadine dans un échantillon biologique. Utilisation in-vitro des anticorps selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 pour la détection de la mini-spadine dans un 10 échantillon biologique. Utilisation in-vitro des anticorps selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 pour la détection du peptide de séquence SEQ ID NO 1 à partir d'un échantillon biologique d'un individu afin de 15 détecter d'un état dépressif. 10. Procédé in-vitro de détection /détermination de la dépression chez un patient comprenant les étapes suivantes a. Mesure de la concentration (Cm) du peptide de séquence 20 QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPRGGR WRR (SEQ ID NO 1) avec des anticorps selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 dans un échantillon biologique d'un individu dépressif, b. Comparaison de la concentration du peptide mesurée à l'étape 25 a) avec une concentration de référence (Cref) d'un individu sain et calcul d'un score (Si) selon la formule suivante : S1= Cm/Cref une valeur de S1 inférieur à 1 indiquant que l'individu à partir duquel a été obtenu l'échantillon est dépressif. 30 11. Procédé de suivi de l'efficacité d'un traitement sur la dépression comprenant : 3057268 41 a) Mesure de la concentration Cl du peptide de séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPR GGRWRR (SEQ ID NO 1) avec des anticorps selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 dans un échantillon 5 biologique d'un individu, b) Mesure de la concentration C2 du peptide de séquence QDRLDAPPPPAAPLPRWSGPIGVSWGLRAAAAGGAFPR GGRWRR (SEQ ID NO 1) avec des anticorps selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 dans un échantillon biologique dudit individu après ledit traitement, c) Comparaison des valeurs de concentration et calcul d'un score (S2) selon la formule suivante : S2 = C2 / Ci, une valeur de S2 supérieure à 1,2 indiquant que le traitement est un 15 antidépresseur efficace.