Brevet FR3058061A1 — publié le 20180504

NOUVELLE UTILISATION D'OLIGONUCLEOTIDES DOUBLE BRIN La présente invention concerne une nouvelle utilisation d' oligonucléotides double brin, et plus particulièrement une utilisation selon un nouveau mode d'administration. Depuis la découverte du mécanisme d'ARN interférence en 1998, des efforts considérables ont été entrepris pour développer le potentiel thérapeutique de cet outil pour les maladies humaines. Les micro RNAs (miRNAs) sont des petits ARN codés par le génome de tous les organismes eucaryotes. Après transcription et maturation, ils sont chargés dans un complexe protéique : RNA Induced Silencing Complex (RISC). Lorsqu'ils s'hybrident avec un ARN messagers (ARNm) soit ils induisent sa coupure, conduisant à la dégradation de l'ARNm, soit ils inhibent sa traduction en protéine. Les ARN interférents ou Small Interfering RNA (siRNAs) sont des oligonucléotides double brins synthétiques qui lorsqu'ils s'hybrident avec un ARNm miment l'action des miRNAs. Utiliser un siRNA comme médicament pour produire un effet thérapeutique demande une méthode efficace pour délivrer le siRNA dans les cellules de l'organe ou de la tumeur cible ; cette méthode doit être cliniquement acceptable, non toxique et ne pas déclencher de réaction immunitaire indésirable. La plupart des utilisations thérapeutiques nécessitent que le siRNA soit délivré de façon systémique dans l'organisme. Dans ce but, les siRNAs ont été chimiquement conjugués ou incorporés dans différents types de molécules, comme des lipides, des polymères, des peptides, des dendrimères, des dérivés de la polyéthylènimine, des nanoparticules, des sphères magnétiques, ou des nanostructures inorganiques ou organiques collectivement appelés agents de vectorisation. La charge négative des siRNAs facilite leur association avec des carriers cationiques tels que des compositions lipidiques ou polymériques. De très nombreux outils de vectorisation ont été développés pour les siRNAs. Plusieurs sont utilisés dans des essais thérapeutiques chez l'homme, dans différentes indications. Le consensus le plus général dans la communauté scientifique et médicale est de dire que les siRNAs non vectorisés sont inefficaces, et qu'ils doivent être stabilisés et vectorisés pour être actifs (Scomparin et al., 2015). 3058061 2 Cependant, la mise au point de ces outils de vectorisation est une étape complexe. Il a été montré que plusieurs classes d'agents de vectorisation, du fait de leur nature chimique ou structurale, ou du fait de leur association avec un siRNA, présentaient des effets toxiques ou déclenchaient une réponse immunitaire indésirable chez l'animal ou les humains (Robbins et 5 al., 2009) ce qui n'est pas le cas avec des siRNAs non vectorisés (Heidel et al., 2004). De plus ces agents de vectorisation adressent souvent préférentiellement les siRNAs dans certains organes, en particulier le foie, ce qui limite leur utilisation thérapeutique dans d'autres organes. Différentes méthodes ont déjà été proposées pour administrer des siRNAs non 10 vectorisés de façon systémique et inhiber l'expression d'un gène dans un tissu ou dans une tumeur. La première méthode proposée, dite hydrodynamique, a été d'injecter par voie intraveineuse une solution saline contenant le siRNA en quelques secondes et dans un grand volume : 1.8 mL chez la souris, correspondant à plus de la moitié de son volume sanguin (McCaffrey et al., 2002). Cette méthode est inapplicable à l'homme et aux animaux de grande 15 taille. D'autres auteurs ont utilisé une administration de siRNAs non vectorisés par voie intrapéritonéale chez la souris. Cette méthode est efficace et permet d'inhiber l'expression de la cible du siRNA, et d'inhiber la croissance de tumeurs xenogreffées chez des souris. Ceci est illustré dans la littérature (Delloye-Bourgeois et al., 2009; Pannequin et al., 2007). 20 L'injection intrapéritonéale de siRNAs dirigés contre le récepteur des androgènes (siAR-1) (Compagno et al., 2007) ou contre la thrombospondine-1 (siTSP1-1) (Firlej et al., 2011) inhibe efficacement la croissance de tumeurs prostatiques xenogreffées chez des souris. La voie intrapéritonéale est efficace chez l'animal mais elle est complexe à utiliser chez l'homme, notamment du fait de risques infectieux chez l'homme, et usuellement restreinte au traitement 25 de pathologies touchant le péritoine ou les organes intrapéritonéaux comme les ovaires. L'administration de siRNAs non vectorisés par voie intraveineuse a également été testée. Cependant, comme d'autres oligonucléotides, les siRNAs injectés par voie intraveineuse sont éliminés par filtration rénale (van de Water et al., 2006). Il n'existe donc pas à ce jour de mode d'administration d' oligonucléotides double brin, 30 permettant de les adresser efficacement dans de nombreux organes cibles, notamment dans la prostate, et/ou dans des tumeurs, dans le but de prévenir et/ou traiter des pathologies. Il existe un réel besoin de fournir un tel moyen. 3058061 3 L'un des buts de l'invention est ainsi de fournir des modes d'administration permettant d'adresser efficacement des oligonucléotides double brin dans de nombreux organes cibles, notamment dans la prostate, et/ou dans des tumeurs, afin de prévenir et/ou traiter des pathologies résultant directement ou indirectement de l'expression d'un gène, 5 l'oligonucléotide double brin ciblant l'ARNm transcrit à partir de ce gène. L'un des autres buts de l'invention est de fournir des modes d'administration d'oligonucléotides double brin qui soient efficaces et plus simples que les méthodes nécessitant un agent de vectorisation. 10 *Dans un premier et deuxième aspect, la présente invention repose sur les résultats inattendus des Inventeurs selon lesquels l'administration d'oligonucléotides double brin par un mode d'administration systémique continue permet d'adresser efficacement des oligonucléotides double brin dans de nombreux organes cibles et/ou à des tumeurs. 15 Dans ce premier aspect, l'invention concerne ainsi une composition comprenant au moins un oligonucléotide double brin, ledit oligonucléotide s'hybridant avec un ARNm, codant ou non codant, dont il induit la dégradation ou dont il inhibe la traduction, l'expression dudit ARNm ou de la protéine pour laquelle il code étant impliquée dans une pathologie, la composition étant utilisée pour la prévention et/ou le traitement de ladite pathologie, ladite 20 composition étant formulée pour un mode d'administration systémique continue. Un « oligonucléotide » selon la présente invention s'entend d'un polynucléotide comprenant de 2 à 100, notamment 5 à 50, de préférence 13 à 25 et plus particulièrement 19, 25 Un « oligonucléotide double brin » selon la présente invention s'entend plus particulièrement d'un siRNA qui comprend un brin dit « guide » et un brin dit « passager ». 30 Plus précisément, lorsque l'oligonucléotide double brin est un siRNA, le brin guide qui est chargé dans le complexe RISC s'hybride avec une région d'un ARNm dont il est 20 ou 21 nucléotides. De « 2 à 100 » signifie 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100. 3058061 4 complémentaire. L'ARNm est alors coupé par RISC puis dégradé, ou bien sa traduction est empêchée. La protéine correspondant à cet ARNm ne peut donc plus être synthétisée. Selon l'invention, l'expression « formulée pour un mode d'administration » peut également signifier « administrée par un mode d'administration ». 5 Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition susmentionnée comprenant au moins un oligonucléotide double brin dans une solution ne contenant pas d'agent de vectorisation ou dans laquelle l' oligonucléotide double brin n'est pas associé à un agent de vectorisation. Un « agent de vectorisation » selon la présente invention s'entend des composés 10 contenant des macromolécules qui forment des complexes avec les oligonucléotides, à l'exclusion des sels ou des sucres simples. L'expression « une solution ne contenant pas d'agent de vectorisation » signifie que les oligonucléotides double brin selon la présente invention peuvent être utilisés sans agents de vectorisation de façon à s'affranchir de potentiels effets toxiques ou immunologiques liés à 15 ces agents. Une telle solution correspond par exemple à une solution aqueuse, ladite solution aqueuse pouvant être additionnée de sucres, notamment de dextrose, d'une solution saline, notamment une solution saline tamponnée. Dans un aspect préféré de l'invention, le siRNA est préparé dans de l'eau contenant 0.9% de NaCl. Dans un aspect particulier, ledit mode d'administration systémique selon l'invention 20 est choisi parmi le groupe comprenant ou étant constitué du mode d'administration sous- cutané, intrapéritonéal, intraveineux, intramusculaire, intradermique, intranasal, intravaginal, intrarectal, sublingual ou oral. Dans un aspect préféré selon l'invention, ledit mode d'administration systémique continue est sous-cutané. Ce mode d'administration spécifique est nommé « siDeliv ». 25 Dans un aspect particulier, l'invention concerne également une composition comprenant au moins un oligonucléotide double brin dans une solution ne contenant pas d'agent de vectorisation, ledit oligonucléotide s'hybridant avec un ARNm, codant ou non codant, dont il induit la dégradation ou dont il inhibe la traduction, l'expression dudit ARNm ou de la protéine pour laquelle il code étant impliquée dans une pathologie, ladite composition 30 étant formulée pour un mode d'administration systémique continue choisi parmi le groupe comprenant ou étant constitué du mode d'administration sous-cutané, intrapéritonéal, 3058061 5 intraveineux, intramusculaire, intradermique, intranasal, intravaginal, intrarectal, sublingual ou oral. La pathologie selon l'invention est une pathologie humaine ou animale. La pathologie selon l'invention est plus particulièrement associée à l'expression du récepteur des 5 androgènes (AR), ou de la Thrombospondine-1 (TSP1), ou du facteur de transcription FoxP3, ou Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGF). La pathologie selon l'invention, qu'elle soit associée à l'expression d'AR, ou de la TSP1, ou de FoxP3, ou du VEGF, est plus particulièrement une tumeur primaire, une tumeur métastatique, ou une pathologie associée à la présence de cellules suppressives ou 10 immunosuppressives. Selon l'invention, ladite tumeur primaire est un cancer de l'anus, de l'appendice, de la bouche, des bronches et/ou des voies aériennes supérieures, du canal biliaire, de la cavité nasale et paranasale, du cerveau, du coeur, du col de l'utérus, du colon, du corps de l'utérus, de l'estomac, du foie, des glandes salivaires, de la gorge, de la langue, des lèvres, du 15 nasopharynx, de l'oesophage, des os, de l'ovaire, du pancréas, de la parathyroïde, du pénis, de la plèvre, du poumon, de la prostate, du rectum, du rein, du sein, des surrénales, des testicules, de la tête et du cou, du thymus, de la thyroïde, de l'urètre, du vagin, de la vésicule biliaire, de la vessie, de la vulve, un cancer gastro-intestinal, un lymphome, un mélanome ou un cancer de la peau hors mélanome, un myélome, un sarcome, une leucémie, un mésotheliome, un 20 cholangiocarcinome, un ostéosarcome, un glioblastome, un astrocytome, un oligodendrogliome, un chondrosarcome, un liposarcome, un rhabdomyosarcome, ou un pheochromocytome, collectivement nommés tumeurs primaires dans la suite de la description, ou les métastases de n'importe laquelle de ces tumeurs primaires se développant dans d'autres organes. 25 L'expression « pathologie associée à la présence de cellules suppressives ou immunosuppressives » signifie que lesdites cellules suppressives ou immunosupressives facilitent le développement d'une pathologie et notamment l'initiation, l'implantation ou le développement d'une tumeur ou sa dissémination métastatique. Ce terme regroupe en particulier les lymphocytes T régulateurs, également appelés T suppresseurs, les lymphocytes 30 Th17 et les MDSC (myeloid-derived suppressor cells). 3058061 6 Dans un aspect particulièrement préféré, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle au moins un oligonucléotide comprend ou est constitué par l'un des couples tels qu'encadrés dans le Tableau 6 suivant : -siAR-1 constitué de : SEQ ID NO : 1, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité 5 avec ladite SEQ ID NO : 1 et SEQ ID NO : 2, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 2 ; -siAR- lb constitué de : SEQ ID NO : 3, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 3 et SEQ ID NO : 4, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 4 ; 10 -siAR-2 constitué de : SEQ ID NO : 5, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 5 et SEQ ID NO : 6, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 6 ; -siAR-2b constitué de : SEQ ID NO : 7, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 7 et SEQ ID NO : 8, ou une séquence ayant au moins 80% 15 d'identité avec ladite SEQ ID NO : 8 ; -siAR-3 constitué de : SEQ ID NO : 9, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 9 et SEQ ID NO : 10, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 10 ; -siAR-3b constitué de : SEQ ID NO : 11, ou une séquence ayant au moins 80% 20 d'identité avec ladite SEQ ID NO : 11 et SEQ ID NO : 12, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 12 ; -siAR-4 constitué de : SEQ ID NO : 13, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 13 et SEQ ID NO : 14, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 14 ; 25 -siAR-4b constitué de : SEQ ID NO : 15, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 15 et SEQ ID NO : 16, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 16 ; -siAR-5 constitué de : SEQ ID NO : 17, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 17 et SEQ ID NO : 18, ou une séquence ayant au moins 30 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 18 ; 3058061 7 5 10 15 20 25 30 -siAR-5b constitué de : SEQ ID NO : 19, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 19 et SEQ ID NO : 20, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 20 ; -siVEGF-1 constitué de : SEQ ID NO : 21, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 21 et SEQ ID NO : 22, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 22 ; -siVEGF-lb constitué de : SEQ ID NO : 23, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 23 et SEQ ID NO : 24, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 24 ; -siTSP1-1 constitué de : SEQ ID NO : 25, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 25 et SEQ ID NO : 26, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 26 ; -siTSP1-lb constitué de : SEQ ID NO : 27, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 27 et SEQ ID NO : 28, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 28 ; -siTSP1-2 constitué de : SEQ ID NO : 29, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 29 et SEQ ID NO : 30, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 30 ; -siTSP1-2b constitué de : SEQ ID NO : 31, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 31 et SEQ ID NO : 32, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 32 ; -siTSP1-3 constitué de : SEQ ID NO : 33, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 33 et SEQ ID NO : 34, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 34 ; -siTSP1-3b constitué de : SEQ ID NO : 35, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 35 et SEQ ID NO : 36, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 36 ; -siTSP1-4 constitué de : SEQ ID NO : 37, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 37 et SEQ ID NO : 38, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 38 ; 3058061 8 -siTSP1-4b constitué de : SEQ ID NO : 39, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 39 et SEQ ID NO : 40, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 40 ; -siTSP1-5 constitué de : SEQ ID NO : 41, ou une séquence ayant au moins 80% 5 d'identité avec ladite SEQ ID NO : 41 et SEQ ID NO : 42, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 42 ; -siTSP1-5b constitué de : SEQ ID NO : 43, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 43 et SEQ ID NO : 44, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 44 ; 10 -siFoxP3-1 constitué de : SEQ ID NO : 45, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 45 et SEQ ID NO : 46, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 46 ; -siFoxP3-lb constitué de : SEQ ID NO : 47, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 47 et SEQ ID NO : 48, ou une séquence ayant au moins 15 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 48 ; -siFoxP3-2 constitué de : SEQ ID NO : 49, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 49 et SEQ ID NO : 50, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 50 ; -siFoxP3-2b constitué de : SEQ ID NO : 51, ou une séquence ayant au moins 80% 20 d'identité avec ladite SEQ ID NO : 51 et SEQ ID NO : 52, ou une séquence ayant au moins 80% d'identité avec ladite SEQ ID NO : 52. Tableau 6 : Couples d'oligonucléotides selon la présente invention Tel que défini dans le Tableau 5, dans l'invention, les couples d'oligonucléotides siAR-1, 25 siAR-lb, siAR-2, siAR-2b, siAR-3, siAR-3b, siAR-4, siAR-4b, siAR-5, siAR-5b sont collectivement dénommés famille des siRNAs-AR. Tel que défini dans le Tableau 5, dans l'invention, les couples d'oligonucléotides siVEGF-1, siVEGF-lb sont collectivement dénommés famille des siRNAs-VEGF. Tel que défini dans le Tableau 5, dans l'invention, les couples d'oligonucléotides 30 siTSP1-1, siTSP1-1b, siTSP1-2, siTSP1-2b, siTSP1-3, siTSP1-3b, siTSP1-4, siTSP1-4b, siTSP1-5, siTSP1-5b sont collectivement dénommés famille des siRNAs-TSP1. 3058061 9 Tel que défini dans le Tableau 5, dans l'invention, les couples d'oligonucléotides siFOXP3-1, siFOXP3-1b, siFOXP3-2, siFOXP3-2b, sont collectivement dénommés famille des siRNAs-FOXP3. L'expression « au moins 80% d'identité avec une séquence » signifie 80%, 81%, 82%, 5 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% et 100%, notamment 90%, 95% et 99%. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ledit au moins un oligonucléotide est un mélange d' oligonucléotides. 10 Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ledit mélange est un mélange de deux couples d' oligonucléotides. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ledit mélange est un mélange de trois couples 15 d' oligonucl éotides. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ledit mélange d'oligonucléotides comprend ou est constitué des couples suivants : - un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 20 des siRNAs-AR avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-VEGF, et en particulier le couple siAR-1 et le couple siVEGF-1 ; - un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-AR avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-TSP1, et en particulier le couple siAR-1 et le couple siTSP1-1 ; 25 un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-AR avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-FoxP3, et en particulier le couple siAR-1 et le couple siFoxP3-2 ; - un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-VEGF avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le 30 Tableau 5 des siRNAs-TSP1, et en particulier le couple siVEGF-1 et le couple siTSP1-1 ; 3058061 10 - un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-VEGF avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-FoxP3, et en particulier le couple siVEGF-1 et le couple siFoxP3-2 ; - un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 5 des siRNAs-TSP1 avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-FoxP3, et en particulier le couple siTSP1-1 et le couple siFoxP3-2 ; - un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-VEGF avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans la table 5 des siRNAs-TSP1, et avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille 10 définie dans le Tableau 5 des siRNAs-FoxP3, et en particulier le couple siVEGF-1 avec le couple siTSP1-1 et avec le couple siFoxP3-2 ; - un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-VEGF avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans la table 5 des siRNAs-TSP1, avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie 15 dans le Tableau 5 des siRNAs-AR, et en particulier le couple siVEGF-1 avec le couple siTSP1-1 et avec le couple siAR-1. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ledit mode d'administration systémique continue est sous-cutané et ledit au moins un oligonucléotide est choisi parmi les couples : siAR-1, siAR-lb, 20 siAR-2, siAR-2b, siAR-3, siAR-3b, siAR-4, siAR4b, siAR-5, siAR-5b, siVEGF-1, siVEGF- lb, siTSP1-1, siTSP1-1b, siTSP1-2, siTSP1-2b, siTSP1-3, siTSP1-3b, siTSP1-4, siTSP1-4b, siTSP1-5, siTSP1-5b, siFoxP3-1, siFoxP3-1b, siFoxP3-2, siFoxP3-2b. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ladite pathologie est n'importe laquelle des tumeurs primaires 25 susmentionnées, ou des métastases d'une de ces tumeurs primaires se développant dans d'autres organes, et ledit au moins un oligonucléotide est choisi parmi les couples : siAR-1, siAR-lb, siAR-2, siAR-2b, siAR-3, siAR-3b, siAR-4, siAR4b, siAR-5, siAR-5b, siVEGF-1, siVEGF-lb, siTSP1-1, siTSP1-1b, siTSP1-2, siTSP1-2b, siTSP1-3, siTSP1-3b, siTSP1-4, siTSP1-4b, siTSP1-5, siTSP1-5b, siFoxP3-1, siFoxP3-1b, siFoxP3-2, siFoxP3-2b. 30 Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ladite pathologie est un cancer du sein, ou un mélanome, ou un glioblastome, ou un cancer du rein, ou un cancer du foie, ou un cancer de la vessie, ou des 3058061 11 métastases d'un de ces cancers se développant dans d'autres organes, et ledit au moins un oligonucléotide est choisi parmi les couples : siAR-1, siAR-lb, siAR-2, siAR-2b, siAR-3, siAR-3b, siAR-4, siAR4b, siAR-5, siAR-5b, siVEGF-1, siVEGF-lb, siTSP1-1, siTSP1-1b, siTSP1-2, siTSP1-2b, siTSP1-3, siTSP1-3b, siTSP1-4, siTSP1-4b, siTSP1-5, siTSP1-5b, 5 siFoxP3-1, siFoxP3-1b, siFoxP3-2, siFoxP3-2b, et en particulier le couple siAR-1, ou le couple siVEGF-1, ou le couple siTSP1-1, ou le couple siFoxP3-1, seuls ou en association deux à deux ou trois à trois. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ladite pathologie est un cancer de la prostate ou des métastases 10 de ce cancer se développant dans d'autres organes, et ledit au moins un oligonucléotide est choisi parmi les couples siAR-1, siAR-lb, siAR-2, siAR-2b, siAR-3, siAR-3b, siAR-4, siAR4b, siAR-5, siAR-5b, siVEGF-1, siVEGF-lb, siTSP1-1, siTSP1-1b, siTSP1-2, siTSP1- 2b, siTSP1-3, siTSP1-3b, siTSP1-4, siTSP1-4b, siTSP1-5, siTSP1-5b, siFoxP3-1, siFoxP3- lb, siFoxP3-2, siFoxP3-2b, et en particulier le couple siAR-1, ou le couple siVEGF-1, ou le 15 couple siTSP1-1, ou le couple siFoxP3-2, seuls ou en association deux à deux ou trois à trois et plus particulièrement le couple siAR-1. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle la séquence de l'un des brins dudit oligonucléotide est différente de : 20 - SEQ ID NO : 53 (GGGUUAUGUCUAUGUUCAUUCUU), ou - SEQ ID NO : 54 (GGAAUGGCCUGUGCUUUCUCAUU) Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ladite composition est formulée pour un mode d'administration à une dose thérapeutiquement efficace, et notamment à des doses de 0.005 mg/kg/jour à 30 25 mg/kg/jour, notamment 0.01 mg/kg/jour à 10 mg/kg/jour, et plus particulièrement de 0.01 mg/kg/jour à 2 mg/kg/jour chez l'homme. De «0.005 mg/kg/jour à 30 mg/kg/jour » s'entend de toutes les doses comprises de 0.005 mg/kg/jour à 30 mg/kg/jour, par exemple 0.008 ; 0.01 ; 0.05 ; 0.1 ; 0.5 ; 1.0 ; 1.5 ; 10.0 ; 10.5; 14.0; 14.5 ; 20 ; 20.5 ; 25 ; 25.5 ; 29.5 mg/kg/jour. 30 Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ladite composition est formulée pour un mode d'administration, en continu et en sous-cutané, à une dose thérapeutiquement efficace, et notamment à des 3058061 12 doses de 0.005 mg/kg/jour à 30 mg/kg/jour, notamment 0.01 mg/kg/jour à 10 mg/kg/jour et plus particulièrement de 0.01 mg/kg/jour à 2 mg/kg/jour. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ladite composition est formulée pour un mode d'administration, 5 en continu et en intrapéritonéal, à une dose thérapeutiquement efficace, et notamment à des doses de 0.005 mg/kg/jour à 30 mg/kg/jour, notamment 0.01 mg/kg/jour à 10 mg/kg/jour et plus particulièrement de 0.01 mg/kg/jour à 2 mg/kg/jour. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ladite composition est formulée pour un mode d'administration, 10 en continu et en intramusculaire, à une dose thérapeutiquement efficace, et notamment à des doses de 0.005 mg/kg/jour à 15 mg/kg/jour, notamment 0.01 mg/kg/jour à 10 mg/kg/jour et plus particulièrement de 0.01 mg/kg/jour à 2 mg/kg/jour. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ladite composition est formulée pour un mode d'administration, 15 en continu et en intradermique, à une dose thérapeutiquement efficace, et notamment à des doses de 0.005 mg/kg/jour à 15 mg/kg/jour, notamment 0.01 mg/kg/jour à 10 mg/kg/jour et plus particulièrement de 0.01 mg/kg/jour à 2 mg/kg/jour. Selon l'invention, et dans un aspect particulier, ledit oligonucléotide peut présenter des modifications chimiques telles que des modifications chimiques sur le brin sens ou antisens, 20 sur un ou plusieurs nucléotides situés aux extrémités terminales 3' ou 5', et/ou sur un ou plusieurs nucléotides constituant le squelette interne. Lesdites modifications chimiques selon l'invention se situent sur le ribose et/ou la base et/ou l'acide phosphorique. Lesdites modifications chimiques selon l'invention comprennent au moins une substitution du groupement OH en 2' du ribose par un groupement 2'-O-methyl 25 RNA (2'OMe) ou 2'-O-methoxyethyl (2'MOE) ou 2'-fluoro (2'F) ou 2'-fluoro-f3- arabinonucleotide (FANA), une allylation de l'oxygène en 2' en aminoethyl-, guanidinoethyl, cyanoethyl- ou alkyl, un remplacement du groupement phosphodiester par un phosphorothioate, une alkylation ou une thiolation de un ou plusieurs nucléotides du siRNA, le remplacement d'un ribonucléotide par un desoxyribonucléotide, ou le remplacement d'un 30 nucléotide par un Locked Nucleic Acid (LNA). Dans un autre aspect particulier, ledit oligonucléotide selon l'invention est dépourvu de modification chimique. 3058061 13 Dans un aspect particulier, ledit oligonucléotide selon l'invention est dépourvu de modification chimique, et comporte deux désoxynucléotides débordant à l'extrémité 3', notamment deux désoxythymidines. Dans un autre aspect particulier, ledit oligonucléotide selon l'invention est dépourvu 5 de modification chimique, et ne comporte pas deux désoxynucléotides débordant à l'extrémité 3', notamment deux désoxythymidines. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ledit oligonucléotide est utilisée en association avec au moins un agent anti-angiogénique et/ou un agent anti-tumoral et/ou un agent immunothérapeutique. 10 Selon l'invention, le terme agent anti-angiogénique signifie un agent destiné à inhiber la formation de vaisseaux sanguins, notamment en inhibant l'expression ou la fonction de VEGF, FGF2, PDGF, HGF, MET, FLT3, VEGFR1, VEGFR2, VEGFR3, KIT, TIE1, TIE2, RET, TRKB, AXL. De tels agents sont notamment Cilengitide, Vandetanib, Lenalidomide, Thalidomide, Arsenic Trioxide, Bevacizumab, ou encore des agents listés dans le Tableau 1. 15 Selon l'invention, un agent immunothérapeutique est un agent qui a pour objectif de stimuler, notamment par une vaccination, et/ou de rétablir une réponse immunitaire, notamment par l'inhibition des cellules immunosuppressives ou suppressives, et/ou par inhibition de l'anergie des lymphocytes. Les immunothérapies au sens de l'invention sont notamment les thérapies mettant en oeuvre l'administration de cytokines, d'anticorps ciblant 20 les points de contrôle et de régulation du système immunitaire (check-point immunitaires, par exemple PD1, PDL1, CTLA4, Tigit), le traitement par des lymphocytes T, génétiquement modifiés (Car-T) ou non, ou par des cellules dendritiques, la vaccination, les traitements antihelminthes. Un tel agent est notamment choisi parmi Ipilimumab, nivolimumab, T-Vec, Sipuleucel-T, Blinatumomab, Pembrolizumab, ou parmi les agents du Tableau 2. 25 Selon l'invention, un agent anti-tumoral ou chimiothérapeutique est un agent possédant des propriétés anti-cancéreuses choisi parmi : les agents alkylants, les agents antimétabolites, les antibiotiques cytotoxiques, les inhibiteurs de topoisomérase I, les inhibiteurs de topoisomérase II, les antibiotiques anti-tumoraux, les agents génotoxiques, les inhibiteurs de la PARP, les agents anti-microtubules. Un tel agent est par exemple choisi parmi : 30 Bendamustine, Temozolomide, Mechlorethamine, Cyclophosphamide, Carmustine, Cisplatine, Busulfan, Thiotepa, Decarbazine, Pentostatine, Methotrexate, Pemetrexed, Floxuridine, Fluorouracil, Cytarabine, Mercaptopurine, Thiguanine, Rubitecan, Mitomycine 3058061 14 C, Daunorubicin, Doxorubicine, Bleomycin, Plicamycin, Mitoxantrone HC1, Oxaliplatine, Vinorelbine, BMS 184476, Vincristine sulfate, Vinblastine, Taxotere, Taxol, ou encore les agents mentionnés dans les Tableaux 3 et 4. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation 5 susmentionnée, dans laquelle ladite composition comprend un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNA-AR en association avec un agent anti-tumoral et/ou un agent immunothérapeutique et/ou un agent antiangiogénique. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ladite composition comprend un couple d'oligonucléotides 10 appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-FoxP3 en association avec un agent anti-tumoral et/ou un agent immunothérapeutique et/ou un agent antiangiogénique. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ladite composition comprend un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-TSP1 en association avec un 15 agent anti-tumoral et/ou un agent immunothérapeutique et/ou un agent antiangiogénique. Dans un aspect particulier, l'invention concerne une composition pour son utilisation susmentionnée, dans laquelle ladite composition comprend un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-VEGF en association avec un agent anti-tumoral et/ou un agent immunothérapeutique et/ou un agent antiangiogénique. 20 Dans tous les aspects de la présente invention, ledit oligonculéotide peut être associé à un agent de vectorisation, qu'il soit associé à une molécule d'adressage ou qu'il ne soit pas associé à une molécule d'adressage. Selon l'invention, une molécule d'adressage est une molécule adressant l'oligonucléotide soit de façon passive vers une tumeur, comme par exemple du PEG, soit de 25 façon active vers un type cellulaire particulier, comme par exemple les cellules endothéliales ou les cellules cancéreuses. Par exemple et de façon non exhaustive, une molécule d'adressage peut être, un aptamère, un anticorps, la transferrine, un peptide RGD, un ligand, ou un ribozyme, cette molécule d'adressage ciblant une molécule exprimée à la surface des cellules ciblées, comme par exemple un récepteur ou le PSMA (Prostate Specific Membrane Antigen). 30 De plus, ledit oligonucléotide peut être associé à une molécule d'adressage, qu'il soit associé à un agent de vectorisation ou qu'il ne soit pas associé à un agent de vectorisation. 3058061 15 Dans un aspect préféré, ledit oligonucléotide est associé à une molécule d'adressage et n'est pas associé à un agent de vectorisation. Dans un aspect préféré, ledit oligonucléotide n'est pas associé à une molécule d'adressage et n'est pas associé à un agent de vectorisation. 5 Dans un deuxième aspect, l'invention concerne également un dispositif contenant un moyen d'administration systémique et continu d'une composition formulée pour un mode d'administration systémique continue comprenant au moins un oligonucléotide double brin ledit oligonucléotide s'hybridant avec un ARNm codant ou non codant dont il induit la 10 dégradation ou dont il inhibe la traduction, l'expression dudit ARNm ou de la protéine pour laquelle code ledit ARNm étant impliquée dans une pathologie, et la composition étant utilisée pour la prévention et/ou le traitement de ladite pathologie. Dans un aspect particulier, ledit moyen d'administration systémique est choisi parmi une pompe osmotique, une pompe-seringue, une pompe élastomérique, une pompe 15 péristaltique, une pompe multi-canaux, une pompe contrôlée par le patient, une pompe « intelligente », ou une pompe « patch ». Il peut également être envisagé de mettre les oligonucléotides secs dans un dispositif qui une fois mis sous la peau capture l'eau des tissus, et libère le produit en solution. Le dispositif peut être mécanique ou électronique. Il peut être porté à l'extérieur ou 20 implanté chirurgicalement, par exemple sous la peau, ou dans le péritoine, ou en intramusculaire. De façon non exhaustive ces dispositifs utilisables en clinique humaine sont : - des pompes osmotiques, composées d'un réservoir souple entouré d'un compartiment contenant un gel salin qui en s'hydratant compresse le réservoir interne en forçant l'expulsion du liquide. Ce mécanisme est utilisé dans les pompes Duros de la société 25 Durect, et est similaire à celui des pompes Alzet qui sont uniquement autorisés pour une utilisation chez les animaux ; - des seringues automatisées (par exemple : McKinley T34 ou T60, Bodyguard 323, AD syringe driver (Cardinal health), MS drivers (Smiths Medical)) ; - des pompes en élastomère : le produit est contenu dans un réservoir compressible lui- 30 même contenu dans un ballon exerçant une pression contrôlée sur le réservoir interne et forçant l'expulsion du liquide (par exemple : Accufuser (WOO YOUNG Medical), Dosi-fuser (spirit medical), Exacta (Gamastech)) ; 3058061 16 - des pompes péristaltiques : une tubulure flexible est comprimée mécaniquement pour délivrer le contenu (par exemple : iPrecio, SP100 (APT instruments)) ; - des pompes multicanaux ou simple canal contrôlées par le patient : le produit peut être délivré depuis plusieurs contenants, à des débits différents. Ces pompes sont équipées 5 d'un dispositif permettant l'aministration d'une dose sur demande du patient (par exemple : Accucheck, one touch ping (Animas), Accufuser) ; - des pompes « patch » : le réservoir de produit adhère directement à la peau et contient un système intégré, sans tubulure, d'administration (par exemple : CeQurPaQ, Omnipod (Insulet), Finesse (Calibra), V-Go (Valeritas)) ; 10 - des pompes dites « intelligentes » équipées de dispositifs de sécurité qui modulent l'administration du produit en fonction de paramètres prédéfinis ou mesurés chez le patient (par exemple : miniMed 530G, paradigm Veo (medtronics), Vibe (Animas)) ; - des pompes implantables (par exemple : Replenish minipump, Medtronic, Duros Durect, Infusaid, promedos). Ces pompes permettent de délivrer de faibles volumes du 15 produit thérapeutique, à des débits précis ou de façon automatique à des intervalles de temps prédéfinis. Dans un aspect particulier, ledit oligonucléotide administré par le dispositif susmentionné est associé à un agent de vectorisation et/ou est associé à une molécule d'adressage. 20 Dans un aspect particulier, ledit oligonucléotide administré par le dispositif susmentionné n'est pas associé à un agent de vectorisation et/ou n'est pas associé à une molécule d'adressage. Dans un aspect particulier, ledit au moins un oligonucléotide qui est administré par ledit dispositif comprend ou est constitué par l'un des couples suivants : siAR-1, siAR-lb, 25 siAR-2, siAR-2b, siAR-3, siAR-3b, siAR-4, siAR4b, siAR-5, siAR-5b, siVEGF-1, siVEGF- lb, siTSP1-1, siTSP1-1b, siTSP1-2, siTSP1-2b, siTSP1-3, siTSP1-3b, siTSP1-4, siTSP1-4b, siTSP1-5, siTSP1-5b, siFoxP3-1, siFoxP3-1b, siFoxP3-2, siFoxP3-2b. *Dans un troisième aspect, la présente invention repose également sur les résultats 30 inattendus des Inventeurs selon lesquels l'administration d'oligonucléotides double brin, ciblant la Thrombospondine-1 ou le VEGF, par un mode d'administration systémique 3058061 17 continue, en intracérébral ou en intrathécal, permet également d'adresser efficacement lesdits oligonucléotides double brin. Ainsi, et dans ce troisième aspect, la présente invention concerne une composition comprenant au moins un oligonucléotide double brin, ledit oligonucléotide s'hybridant avec 5 un ARNm codant ou non codant dont il induit la dégradation ou dont il inhibe la traduction, l'expression dudit ARNm ou de la protéine pour laquelle il code étant impliquée dans une pathologie, la composition étant utilisée pour la prévention et/ou le traitement de ladite pathologie, ladite composition étant formulée pour un mode d'administration systémique continue, en intracérébral ou en intrathécal, ledit oligonucléotide comprenant ou étant 10 constitué par au moins l'un des couples suivants : siVEGF-1, siVEGF-lb, siTSP1-1, siTSP1- lb, siTSP1-2, siTSP1-2b, siTSP1-3, siTSP1-3b, siTSP1-4, siTSP1-4b, siTSP1-5, siTSP1-5b. Dans un aspect de l'invention, ladite composition pour son utilisation susmentionnée en continue et en intracérébral, est notamment utilisée pour la prévention et/ou le traitement d'un cancer du cerveau, notamment un glioblastome. Lorsque la pathologie est un cancer du 15 cerveau, notamment un glioblastome, les couples d' oligonucléotides sont plus particulièrement choisis parmi : siVEGF-1, siVEGF-lb, siTSP1-1, siTSP1-1b, siTSP1-2, siTSP1-2b, siTSP1-3, siTSP1-3b, siTSP1-4, siTSP1-4b, siTSP1-5, siTSP1-5b. Dans un aspect particulier de l'invention, ladite composition pour son utilisation susmentionnée, est formulée pour un mode d'administration à une dose thérapeutiquement 20 efficace en intracérébral ou intrathécal continue, en particulier à des doses de 0,01 mg/kg/jour à 10 mg/kg/jour, notamment 0,01 mg/kg/jour à 2 mg/kg/jour. Dans un aspect particulier de l'invention, dans ladite composition pour son utilisation susmentionnée en intracérébral ou en intrathécal, ledit au moins un oligonucléotide est associé à un agent de vectorisation et/ou est associé à une molécule d'adressage. 25 Dans un aspect particulier de l'invention, dans ladite composition pour son utilisation susmentionnée en intracérébral ou en intrathécal, ledit oligonucloétide n'est pas associé à un agent de vectorisation et/ou n'est pas associé à une molécule d'adressage. *Dans un quatrième aspect, la présente invention repose également sur les résultats 30 inattendus des Inventeurs qui ont mis en évidence de nouveaux oligonucléotides double brin ciblant FoxP3. 3058061 18 Les oligonucléotides ciblant FoxP3 sont plus particulièrement utilisés pour cibler les cellules suppressives ou immunosuppressives dans tous les types de cancers, et en particulier les lymphocytes T suppresseurs également appelés lymphocytes T régulateurs. Les oligonucléotides ciblant FoxP3 sont aussi utilisés pour cibler des cellules cancéreuses 5 exprimant ce facteur de transcription. Dans un aspect particulier, la présente invention concerne également un oligonucléotide double brin inhibant la synthèse du facteur de transcription FoxP3, dans lequel ledit oligonucléotide comprend ou est constitué par l'un des couples suivants : siFoxP3-1, siFoxP3-1b, siFoxP3-2 ou siFoxP3-2b. 10 Dans un aspect particulier, la présente invention concerne également un oligonucléotide double brin inhibant la synthèse du facteur de transcription FoxP3, dans lequel ledit oligonucléotide comprend ou est constitué par l'un des couples suivants : siFoxP3-1, siFoxP3-1b, siFoxP3-2 ou siFoxP3-2b pour son utilisation comme médicament ou pour son utilisation pour la prévention et/ou le traitement d'une pathologie associée à 15 l'expression du facteur de transcription FoxP3. Dans un aspect particulier, la présente invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant comme substance active un oligonucléotide double brin comprenant ou étant constitué par l'un des couples suivants : siFoxP3-1, siFoxP3-1b, siFoxP3-2 ou siFoxP3-2b, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. 20 Selon l'invention, ledit véhicule pharmaceutiquement acceptable peut être une solution ne contenant pas d'agent de vectorisation. Dans un aspect particulier, dans ladite composition pharmaceutique susmentionnée, ledit oligonucléotide peut être en association avec un agent de vectorisation. Dans un aspect particulier, dans ladite composition pharmaceutique susmentionnée, 25 ledit oligonucléotide est associé à une molécule d'adressage. Dans un aspect particulier, dans ladite composition pharmaceutique susmentionnée, ledit oligonucléotide n'est pas associé à une molécule d'adressage. Dans un aspect particulier, l'invention concerne également une composition comprenant ou étant constitué par l'un des couples suivants : siFoxP3-1, siFoxP3-1b, 30 siFoxP3-2 ou siFoxP3-2b, pour son utilisation comme médicament ou pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3. 3058061 19 Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3 comprend un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-TSP1 avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le 5 Tableau 5 des siRNAs-FoxP3, et en particulier le couple siTSP1-1 avec le couple siFoxP3-2. Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3 comprend un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-AR avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le 10 Tableau 5 des siRNAs-FoxP3, et en particulier le couple siAR-1 avec le couple siFoxP3-2. Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3 comprend un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-VEGF avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le 15 Tableau 5 des siRNAs-FoxP3, et en particulier le couple siVEGF-1 avec le couple siFoxP3-2. Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3 comprend un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-VEGF, avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le 20 Tableau 5 des siRNAs-TSP1, avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-FoxP3, et en particulier le couple siVEGF-1 avec le couple siTSP1-1, avec le couple siFoxP3-2. Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3 25 comprend un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-AR, avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-TSP1, avec un couple d'oligonucléotides appartenant à la famille définie dans le Tableau 5 des siRNAs-FoxP3, et en particulier le couple siAR-1 avec le couple siTSP1-1, avec le couple siFoxP3-2. 30 Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3 est administrée par (ou formulée pour) un mode d'administration systémique, en continu ou 3058061 20 en bolus, notamment un mode d'administration sous-cutané, intrapéritonéal, intraveineux, intramusculaire, intradermique, intranasal, intravaginal, intrarectal, sublingual, oral, intracérébral ou intrathécal. Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention 5 et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3 est administrée à une dose thérapeutiquement efficace, et notamment à des doses de 0.005 mg/kg/jour à 30 mg/kg/jour, notamment 0,01 mg/kg/jour à 10 mg/kg/jour et plus particulièrement de 0.01 mg/kg/jour à 2 mg/kg/jour. Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention 10 et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3 est utilisée en association avec au moins un agent anti-angiogénique et/ou un agent antitumoral et/ou un agent immunothérapeutique. Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3 15 est utilisée en association avec au moins un agent anti-angiogénique et/ou un agent anti- tumoral et/ou un agent immunothérapeutique, pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps. L'expression « séparée ou étalée dans le temps » signifie également « successives ». Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention 20 et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3, ledit oligonucléotide présente des modifications chimiques. Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3, ledit oligonucléotide est dépourvu de modification chimique. 25 Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3, ledit oligonucléotide est dépourvu de modification chimique et comporte deux désoxynucléotides débordant à l'extrémité 3', notamment deux désoxythymidines. Dans un aspect particulier, ladite composition pour son utilisation dans la prévention 30 et/ou le traitement d'une pathologie associée à l'expression du facteur de transcription FoxP3, ledit oligonucléotide est dépourvu de modification chimique et ne comporte pas deux désoxynucléotides débordant à l'extrémité 3', notamment deux désoxythymidines. 3058061 21 Tableau 1 : Exemples d'agents anti-angiogéniques (Drug name) pouvant être utilisés dans la présente invention 3058061 22 Cvtokinel. trent Cleeekinete:s end ee'.412. tueneb ittes D y-1,9n re.^...'pe,.;e. tees f'nr NA NA Ute:" k^net tr, AL1114, stre:S -inet.K;M H,gh edrnirulie es: lt Tableau 2 : Exemples d'agents immunothérapeutiques (Modality) pouvant être utilisés dans 5 la présente invention 3058061 23 LtiteàteLF Ph eeeeeete.-J eynee>2eree.-ente vezeeje..ï 1...,r1r rriellr,9 Pberrnectvtke 0,ofi 44,erÈ .1 Tableau 4: Exemples d'agents anti-tumoraux (Drug Name) pouvant être utilisés dans la présente invention 3058061 25 Les séquences des siRNAs de la présente invention sont indiquées dans le Tableau 5 ci-dessous : NO : séquence Séquence 5' - 3' brin siRNA espèce Famille SEQ ID NO : 1 GACUCAGCUGCCCCAUCCAPT1R1T1 siAR-1 Brin 1 siAR-1 Brin 2 siAR-1 , , , siRNA-AR SEQ ID NO : 2 UGGAUGGGGCAGCUGAGUCR1T1R1T1 h r so, si c SEQ ID NO : 3 GACUCAGCUGCCCCAUCCA siAR-1 Brin lb siAR-1 Brin 2b siAR-lb SEQ ID NO : 4 UGGAUGGGGCAGCUGAGUC h r so, si c SEQ ID NO : 5 GACUCAGCUGCCCCAUCCACGRM[dT] siAR-2 Brin 1 siAR-2 Brin 2 siAR-2 h, r, so, si, c SEQ ID NO : 6 CGUGGAUGGGGCAGCUGAGUCR1T1R1T1 SEQ ID NO : 7 GACUCAGCUGCCCCAUCCACG siAR-2 Brin lb siAR-2 Brin 2b siAR-2b h, r, so, si, c SEQ ID NO : 8 CGUGGAUGGGGCAGCUGAGUC SEQ ID NO : 9 UCCCCAAGCCCAUCGUAGAR1T1R1T1 siAR-3 Brin 1 siAR-3 Brin 2 siAR-3 h SEQ ID NO : 10 UCUACGAUGGGCUUGGGGAR1T1R1T1 SEQ ID NO : 11 UCCCCAAGCCCAUCGUAGA siAR-3 Brin lb siAR-3 Brin 2b siAR-3b h SEQ ID NO : 12 UCUACGAUGGGCUUGGGGA SEQ ID NO : 13 GUAGUUGUGAGUAUCAUGAR1T1R1T1 siAR-4 Brin 1 siAR-4 Brin 2 siAR-4 h SEQ ID NO : 14 UCAUGAUACUCACAACUACR1T1R1T1 SEQ ID NO : 15 GUAGUUGUGAGUAUCAUGA siAR-4 Brin lb siAR-4 Brin 2b siAR-4b h SEQ ID NO : 16 UCAUGAUACUCACAACUAC SEQ ID NO : 17 GCAUCAGUUCGCUUUUGACR1T1R1T1 siAR-5 Brin 1 siAR-5 Brin 2 siAR-5 h SEQ ID NO : 18 GUCAAAAGCGAACUGAUGCR1T1R1T1 3058061 26 NO : séquence Séquence 5' - 3' brin siRNA espèce Famille SEQ ID NO : 19 GCAUCAGUUCGCUUUUGAC siAR-5 Brin lb siAR-5 Brin 2b siAR-5b h SEQ ID NO : 20 GUCAAAAGCGAACUGAUGC SEQ ID NO : 21 AUGUGAAUGCAGACCAAAGAAR1T1R1T1 siVEGF-1 Brin 1 siVEGF-1 Brin 2 siVEGF-1 h, r, so, si, c siRNA-VEGF SEQ ID NO : 22 UUCUUUGGUCUGCAUUCACAUPT1R1T1 SEQ ID NO : 23 AUGUGAAUGCAGACCAAAGAA siVEGF-1 Brin lb siVEGF-1 Brin 2b siVEGF-lb h, r, so, si, c SEQ ID NO : 24 UUCUUUGGUCUGCAUUCACAU SEQ ID NO : 25 CCUUGACAACAACGUGGUGR1T1R1T1 siTSP1-1 Brin 1 siTSP1-1 Brin 2 siTSP1-1 , , , siRNA-T SP 1 SEQ ID NO : 26 CACCACGUUGUUGUCAAGGR1T1R1T1 h r so, si c SEQ ID NO : 27 CCUUGACAACAACGUGGUG siTSP1-1 Brin lb siTSP1-1 Brin 2b siTSPl-lb , , SEQ ID NO : 28 CACCACGUUGUUGUCAAGG h r so, si c SEQ ID NO : 29 UACCCGAGACGAUUGUAUGR1T1R1T1 siTSP1-2 Brin 1 siTSP1-2 Brin 2 siTSP1-2 h SEQ ID NO : 30 CAUACAAUCGUCUCGGGUAR1T1R1T1 SEQ ID NO : 31 UACCCGAGACGAUUGUAUG siTSP1-2 Brin lb siTSP1-2 Brin 2b siTSPl-2b h SEQ ID NO : 32 CAUACAAUCGUCUCGGGUA SEQ ID NO : 33 GCCAGAACUCGGUUACCAUPT1R1T1 siTSP1-3 Brin 1 siTSP1-3 Brin 2 siTSPl-3 so SEQ ID NO : 34 AUGGUAACCGAGUUCUGGCR1T1R1T1 SEQ ID NO : 35 GCCAGAACUCGGUUACCAU siTSP1-3 Brin lb siTSP1-3 Brin 2b siTSPl-3b so SEQ ID NO : 36 AUGGUAACCGAGUUCUGGC 3058061 27 NO : séquence Séquence 5' - 3' brin siRNA espèce Famille SEQ ID NO : 37 CCAACAAACAGGUGUGCAMT1R1T1 siTSP1-4 Brin 1 siTSP1-4 Brin 2 siTSP1-4 h SEQ ID NO : 38 UUGCACACCUGUUUGUUGGR1T1R1T1 SEQ ID NO : 39 CCAACAAACAGGUGUGCAA siTSP1-4 Brin lb siTSP1-4 Brin 2b siTSP1-4b h SEQ ID NO : 40 UUGCACACCUGUUUGUUGG SEQ ID NO : 41 GCAACUACCUGGGUCACUAR1T1R1T1 siTSP1-5 Brin 1 siTSP1-5 Brin 2 siTSP1-5 so SEQ ID NO : 42 UAGUGACCCAGGUAGUUGCR1T1R1T1 SEQ ID NO : 43 GCAACUACCUGGGUCACUA siTSP1-5 Brin lb siTSP1-5 Brin 2b siTSP1-5b so SEQ ID NO : 44 UAGUGACCCAGGUAGUUGC SEQ ID NO : 45 CACAACAUGGACUACUUCAR1T1R1T1 siFoxP3-1 Brin 1 siFoxP3-1 Brin 2 siFoxP3-1 h, r, so, si, c siRNA-FoxP3 SEQ ID NO : 46 UGAAGUAGUCCAUGUUGUGR1T1R1T1 SEQ ID NO : 47 CACAACAUGGACUACUUCA siFoxP3-1 Brin lb siFoxP3-1 Brin 2b siFoxP3-lb h, r, so, si, c SEQ ID NO : 48 UGAAGUAGUCCAUGUUGUG SEQ ID NO : 49 CAUGGACUACUUCAAGUUCR1T1R1T1 siFoxP3-2 Brin 1 siFoxP3-2 Brin 2 siFoxP3-2 h, r, so, si, c SEQ ID NO : 50 GAACUUGAAGUAGUCCAUGR1T1R1T1 SEQ ID NO : 51 CAUGGACUACUUCAAGUUC siFoxP3-2 Brin lb siFoxP3-2 Brin 2b siFoxP3-2b h, r, so, si, c SEQ ID NO : 52 GAACUUGAAGUAGUCCAUG Tableau 5 : Les oligonucléotides de la présente invention. 3058061 28 Pour chacune des séquences numérotées de 1 à 52 (première colonne) : - La seconde colonne indique la séquence dans l'orientation 5' vers 3'. La notation [dT][dT] est utilisée pour indiquer la présence de deux désoxythymidines débordantes. 5 - La troisième colonne indique la dénomination de l'oligonucléotide. - La quatrième colonne indique le nom du siRNA constitué par l'association d'un oligonucléotide de type brin 1 (respectivement lb) ou d'un oligonucléotide dont la séquence présente au moins 80% d'identité avec cet oligonucléotide de type brin 1 et d'un oligonucléotide de type brin 2 (respectivement 2b) ou d'un oligonucléotide 10 dont la séquence présente au moins 80% d'identité avec cet oligonucléotide de type brin 2 (respectivement 2b). - La cinquième colonne indique si le siRNA constitué par l'association des deux oligonucléotides dont la séquence est à 100% identique à celle inscrite en colonne 2 s'hybride avec un ARNm humain (h), de rat (r), de souris (s), de singe (si) ou de 15 chien (c). - La sixième colonne indique la famille à laquelle appartient le siRNA. 3058061 29 Lorsque les siRNAs indiqués dans le Tableau 5 sont constitués de deux oligonucléotides simple brin dont la séquence est à 100% identique à celle inscrite dans le Tableau, ces siRNAs ont de plus les caractéristiques suivantes : Le siRNA siAR-2 est décrit dans la demande PCT/FR2002/003843. La séquence cible 5 (c'est-à-dire la séquence de l'ARNm à laquelle le brin guide de ce siRNA s'hybride) de ce siRNA est présente chez l'homme dans tous les ARNm codant pour le récepteur des androgènes, que ce récepteur soit sauvage, muté, ou qu'il présente des variations d'épissage conduisant à la délétion partielle ou totale du domaine de liaison des hormones (variant AR-V7 par exemple). Le siRNA siAR-1 correspond au siAR-2 délété de 2 nucléotides à 10 l'extrémité 3'. La conservation de la séquence cible d'un siRNA entre l'homme et d'autres espèces animales est avantageuse car elle augmente fortement la probabilité que les résultats des études précliniques, notamment celles de toxicologie, soient prédictives des effets chez l'humain. 15 Les séquences cibles des siRNA siAR-1, siAR-lb, siAR-2, siAR-2b sur l'ARNm codant le récepteur des androgènes sont conservées chez de nombreuses espèces dont l'homme, le rat, la souris, le singe, le chien. La sequence cible des siRNA siAR-3 et siAR-3b est située sur l'ARNm humain codant pour le récepteur des androgènes. Cette séquence cible n'est que partiellement conservée chez 20 les autres espèces. La sequence cible des siRNA siAR-4 et siAR-4b est située sur l'ARNm humain codant pour le variant V7 du récepteur des androgenes exprimé notamment dans les cancers de la prostate résistants à la castration. Cette séquence cible n'est que partiellement conservée chez les autres espèces. 25 Le siRNA AR-5 est décrit dans la demande PCT/FR2002/003843. La séquence cible de ce siRNA et du siRNA AR-5b est située sur l'ARNm humain codant pour le récepteur des androgènes présentant la mutation T877A fréquemment retrouvée dans les cancers de la prostate. Cette séquence cible n'est que partiellement conservée chez les autres espèces. Le siRNA siVEGF-1 est décrit dans la demande de brevet PCT/FR2002/003843. La 30 séquence cible des siRNA siVEGF-1, siVEGF-lb sur l'ARNm codant le VEGF est conservée chez de nombreuses espèces dont l'homme, le rat, la souris, le singe, le chien. 3058061 30 Les siRNAs siTSP1-1, siTSP1-1b, siTSP1-2 et siTSP1-2b ont été décrits dans la demande PCT/EP2010/061156. La séquence cible des siRNA siTSP1-1, siTSP1-lb sur l'ARNm codant la Thrombospondine-1 est conservée chez de nombreuses espèces dont l'homme, le rat, la souris, le singe, le chien. 5 La séquence cible des siRNA siTSP1-2 et le siTSP1-2b sur l'ARNm humain codant la Thrombospondine-1 est partiellement conservée chez les autres espèces. Les siRNAs siTSP1-3, siTSP1-3b, siTSP1-4, siTSP1-4b, siTSP1-5, siTSP1-5b sont les siRNAs correspondant aux shRNAs mentionnés dans la demande de brevet US2011/0166199. Les siRNAs siFOXP3-1, siFoxP3-1b, siFOXP3-2 et siFoxP3-2b sont nouveaux et sont 10 décrits pour la première fois dans la présente demande de brevet. Les séquences cible de ces siRNAs sont situées sur l'ARNm humain codant le facteur de transcription FoxP3 et sont conservées chez de nombreuses espèces dont l'homme, le rat, la souris, le singe, le chien. Références : 15 Compagno, D., C. Merle, A. Morin, C. Gilbert, J. Mathieu, A. Bozec, C. Mauduit, M. Benhamed, and F. Cabon. 2007. SIRNA-Directed In Vivo Silencing of Androgen Receptor Inhibits the Growth of Castration-Resistant Prostate Carcinomas. PLoS ONE 2:e1006. Delloye-Bourgeois, C., E. Brambilla, M.-M. Coissieux, C. Guenebeaud, R. Pedeux, V. Firlej, 20 F. Cabon, C. Brambilla, P. Mehlen, and A. Bernet. 2009. Interference With Netrin-1 and Tumor Cell Death in Non-Small Cell Lung Cancer. J. Nati. Cancer Inst. 101:237247. Firlej, V., J.R.R. Mathieu, C. Gilbert, L. Lemonnier, J. Nakhlé, C. Gallou-Kabani, B. Guarmit, A. Morin, N. Prevarskaya, N.B. Delongchamps, and F. Cabon. 2011. 25 Thrombospondin-1 Triggers Cell Migration and Development of Advanced Prostate Tumors. Cancer research 71:7649-7658. Heidel, J.D., S. Hu, X.F. Liu, T.J. Triche, and M.E. Davis. 2004. Lack of interferon response in animals to naked siRNAs. Nat Biotechnol 22:1579-1582. McCaffrey, A.P., L. Meuse, T.T. Pham, D.S. Conklin, G.J. Hannon, and M.A. Kay. 2002. 30 RNA interference in adult mice. Nature 418:38-39. Pannequin, J., N. Delaunay, M. Buchert, F. Surrel, J.-F. Bourgaux, J. Ryan, S. Boireau, J. Coelho, A. Pélegrin, P. Singh, A. Shulkes, M. Yim, G.S. Baldwin, C. Pignodel, G. Lambeau, P. Jay, D. Joubert, and F. Hollande. 2007. [beta]-Catenin/Tcf-4 Inhibition After Progastrin Targeting Reduces Growth and Drives Differentiation of Intestinal Tumors. Gastroenterology 133:1554-1568. Robbins, M., A. Judge, and I. MacLachlan. 2009. siRNA and Innate Immunity. Oligonucleotides 19:89-102. 3058061 31 Scomparin, A., D. Polyak, A. Krivitsky, and R. Satchi-Fainaro. 2015. Achieving successful delivery of oligonucleotides - From physico-chemical characterization to in vivo evaluation. Biotechnology Advances 33:1294-1309. van de Water, F.M., O.C. Boerman, A.C. Wouterse, J.G.P. Peters, F.G.M. Russel, and R. 5 Masereeuw. 2006. Intravenously administered short interfering rna accumulates in the kidney and selectively suppresses gene function in renal proximal tubules. Drug metab dispos 34:1393-1397. L'invention sera mieux illustrée par les exemples et les figures suivantes. Les 10 exemples ci-après visent à éclaircir l'objet de l'invention et illustrer des modes de réalisation avantageux, mais en aucun cas vise à restreindre la portée de l'invention. Légende des figures : Figure 1 : Représentation schématique de la méthode de quantification d'un siRNA par RT- 15 qPCR. Exemple de gamme de référence. Figure 2 : Croissance des tumeurs 22RV1 traitées quotidiennement par un siRNA contrôle ou par siAR-1 à 0.12 mg/kg injectés par voie intraveineuse. Courbe grise : siRNA-Contrôle ; courbe noire : siAR-1 Figure 3 : Croissance des tumeurs C4-2 traitées quotidiennement par un siRNA contrôle ou 20 par siAR-1 injecté par voie sous cutanée aux doses indiquées. Abscisse : temps de traitement en jours ; ordonnée : volume tumoral en mm3. Symboles blancs et courbe grise : traitement par le véhicule (NaC1 0.9%) ; Courbe en pointillés : siAR-1, 0.12 mg/kg ; courbe noire : siAR-1, 1 mg/kg. Figure 4 : Inhibition de la croissance de tumeurs prostatiques humaines C4-2 xenogreffées 25 sur des souris Nude âgées de 8 semaines et recevant une infusion sous-cutanée continue de solution saline ou de siAR-1 aux doses indiquées. . Abscisse : temps de traitement en jours ; ordonnée : volume tumoral en mm3. Symboles blancs et courbe grise : traitement par le véhicule (NaC1 0.9%) ; Symboles gris : siAR-1, 0. 2 mg/kg/jour ; courbe noire : siAR-1, 2 mg/kg/jour. 30 Figure 5 : Quantification de siTSP1-1 dans différents organes de souris ayant reçu une administration continue sous cutanée de ce siRNA pendant 2 semaines à la dose de 10 mg/kg/jour. Ordonnée : concentration tissulaire de siTSP 1-1, en Moles/L. 3058061 32 Figure 6 : Quantification de siAR-1 dans différents organes de souris ayant reçu une administration continue sous cutanée de ce siRNA pendant un mois à la dose de 10 mg/kg/jour. Ordonnée : concentration tissulaire de siAR-1, en Moles/L. Figure 7 : Quantification de siAR-1 dans différents organes de singes ayant reçu une 5 administration continue sous cutanée de ce siRNA pendant un mois à la dose de 5 mg/kg/jour. Ordonnée : concentration tissulaire de siAR-1, en Moles/L. Figure 8 : Quantification au cours du temps de siAR-1 dans le sérum de singes Cynomolgus ayant reçu une administration continue sous cutanée de différentes doses de siAR-1. Abscisse : temps en semaine ; Ordonnée : concentration tissulaire de siAR-1, en 10 Moles/L. Courbe gris clair, dose de 0.05 mg/kg/jour ; Courbe gris foncé : dose de 0.5mg/kg/jour ; courbe noire : dose de 5 mg/kg/jour. Figure 9 : Poids corporel et poids de différents organes de souris mâles traitées pendant 1 mois par infusion sous-cutanée continue de siAR-1 aux doses indiquées (en mg/kg/jour) barres blanches : véhicule (NaC1 0.9%) ; barres gris clair, 0.2 mg/kg/jour ; barres gris 15 foncé : 2 mg/kg/jour ; barres noires 10 mg/kg/jour. Figure 10 : Immunodétection du récepteur des androgènes dans la prostate de souris traités par siAR-1 par infusion sous cutanée continue pendant 1 mois. De gauche à droite les photos sont représentatives des prostates de souris traitées par le véhicule (NaC1 0.9%), ou siAR-1 aux doses de 0.2 mg/kg/jour, 2 mg/kg/jour, 10 mg/kg/jour. 20 Figure 11 : Immunodétection du récepteur des androgènes dans la prostate de rats traités par siAR-1 par infusion sous cutanée continue pendant 2 semaines aux doses indiquées. De gauche à droite les photos sont représentatives des protsates de rats traitées par le véhicule (NaC1 0.9%), ou siAR-1 aux doses de 0.1 mg/kg/jour ou 0.9 mg/kg/jour. Figure 12 : Quantification du PSA dans le sérum de singes Cynomolgus avant traitement, ou 25 après traitement pendant 1 mois par infusion sous cutanée continue de solution saline ou de SXL01 à la dose de 5 mg/kg/jour. Ordonnée : PSA sanguin en pg/ml. La limite de détection du test ELISA (LLOQ ou lower limit of quantification) est de 120 pg/ml. Les valeurs inférieures à cette valeur sont arbitrairement indiquées comme 119 pg/ml. Figure 13 : Immunodétection de la TSP1 et des vaisseaux sanguins (marquage CD31) dans 30 des tumeurs de glioblastome U87 implantées dans le cerveau de souris nude traitées pendant 15 jours par administration intracérébrale continue de siTSP1-1 (noté siRNA TSP1) ou d'un siRNA contrôle. 3058061 33 Figure 14 : Inhibition de l'expression de FoxP3 par transfection dans les cellules prostatiques C4-2 par un siRNA contrôle (cont) ou siFoxP3-1 ou siFoxP3-2. Ordonnée : quantité de l'ARNm FoxP3, normalisé par la quantité d'ARNm Cyclophiline A. Les valeurs sont rapportées à celle mesurée dans les cellules transfectées par un siRNA contrôle. 5 EXEMPLES Exemple 1 : Matériel et Méthodes 1. Préparation des pompes osmotiques Les siRNAs sont dilués en solution saline (PBS ou eau additionnée de 0.9% de NaC1) à la 10 concentration nécessaire pour atteindre l'administration de la quantité désirée sur une période de 24h. Cette concentration est calculée en tenant compte du volume horaire délivré par la pompe, comme indiqué par le fabricant (Alzet) Le débit horaire des pompes, suivant leur volume et la durée de délivrance du produit varie de 0.1 à 141/heure. La pompe est remplie stérilement et implantée sous la peau des animaux traités (souris, rats, singes). Les pompes 15 sont maintenues en place de quelques jours et jusqu'à 4 semaines suivant le modèle de pompe utilisé. Chez les singes, une à 4 pompes ont été implantées sous la peau en fonction de la dose totale à délivrer. Une étude préalable a montré que des solutions stériles de siRNAs en solution saline sont stables pendant au moins 4 semaines à 37°C. 20 2. Quantification de siRNAs par une méthode de RT-PCR quantitative modifiée Pour quantifier les siRNAs dans les échantillons biologiques, les inventeurs ont développé une méthode de reverse transcription suivie d'une PCR quantitative (RT-qPCR). Pour chaque siRNA, une amorce tige-boucle présentant 8 nucléotides débordants est synthétisée, les 8 nucléotides étant complémentaires des 8 nucléotides de l'extrémité 3' du brin guide (antisens) 25 du siRNA. Après une étape de reverse transcription, le produit obtenu est amplifié par PCR à l'aide de deux amorces, l'une s'hybridant avec la région correspondant à la boucle de l'amorce de reverse transcription. Les 12 nucléotides en 3' de la seconde amorce ayant une séquence ADN correspondant aux 12 nucléotides de l'extrémité 5' du cDNA nouvellement synthétisé après reverse transcription du brin guide du siRNA. La détection de l'amplification 30 est réalisée de façon continue par la dégradation d'une sonde fluorescente Taqman ou par incorporation de SybrGreen. 3058061 34 Une gamme de siRNA double brins, de 10' à 109 copies dans la réaction de RT, diluées dans de l'eau est réalisée et traitée en même temps que les échantillons par RT-qPCR. La Figure 1 représente schématiquement la méthode de RT-qPCR et un exemple de gamme montrant la relation entre le nombre de copies présentes dans la réaction et le CT (cycle threshold ou seuil 5 d'amplification) obtenu. Les échantillons biologiques dans lesquels les siRNAs sont quantifiés sont de différentes origines : ^ Des ARN totaux extraits à partir de fragments de tissus de poids connu supposés contenir le siRNA. Ces ARN sont extraits par des méthodes conventionnelles telles que par la 10 méthode au phénol-chloroforme (extraction au trizol). Après extraction, ils sont dilués dans de l'eau ; ^ Du sérum. Dans ce cas, un volume connu de sérum est dilué dans de l'eau contenant un inhibiteur de RNAse au 1/100° ou davantage dilué si la concentration de siRNA est très élevée. 15 Les valeurs des CT obtenus pour chaque échantillon sont comparées à celles obtenues pour la gamme. Ceci permet de calculer le nombre de copies de siRNA présent dans l'échantillon dosé. Les valeurs sont alors rapportées d'abord à la quantité d'ARN total reverse transcrit, puis au poids de tissu dont les ARN ont été extraits, et les résultats finaux sont exprimés en moles/L (M) en considérant que la densité de tous les tissus est de 1g/cm3. Les valeurs 20 mesurées dans le sérum sont rapportées au volume de sérum utilisé dans la réaction et exprimés en M. 3. Lignées cellulaires Les lignées cellulaires utilisées dans les exemples sont des lignées cellulaires issues de tumeurs de prostate chez l'homme : 25 ^ LNCaP : lignée androgéno-dépendante ; ^ C4-2 et 22RV1 : lignées cellulaires de cancer de la prostate résistantes à la castration. Ces cellules, et en particulier les 22RV1, expriment des variants d'épissage du récepteur des androgènes, notamment dépourvus du domaine de liaison de l'hormone et transcriptionnellement actifs en absence d'hormone. 30 3058061 35 4. Greffe de cellules tumorales chez les souris Les tumeurs sont obtenues par injection sous cutanée dans le flanc de cellules tumorales. Seuls les animaux sur lesquels la prise tumorale est constatée sont inclus dans l'étude et randomisés pour recevoir le traitement ou le traitement contrôle. Les injections de siRNAs en 5 bolus par voie intraveineuse (IV) sont effectuées quotidiennement, celles par voie sous cutanée (SC) sont effectuées 5 jours par semaine. Tous les siRNAs sont dilués dans du PBS ou dans de l'eau pour injection additionnée de 0.9% de NaCl. Lorsqu'elles sont utilisées, les pompes osmotiques (par exemple pompes Alzet) sont implantées en sous cutané sur le dos des souris, du côté opposé à la tumeur. 10 Le volume des tumeurs est estimé en mesurant à l'aide d'un pied à coulisse le plus grand (D) et le plus petit (d) diamètre des tumeurs. Le volume est calculé par la formule V= Dxdxdx0.5. En fin d'expérience, les animaux sont sacrifiés, différents tissus sont disséqués, les ARN extraits et les siRNAs présents dans ces ARN sont quantifiés. Tous les protocoles expérimentaux utilisés ont été validés par les comités d'éthique et 15 autorités réglementaires françaises. Ils sont mis en oeuvre de façon à limiter le nombre d'animaux utilisés et à éviter toute souffrance inutile. 5. siRNAs utilisés Les siRNAs utilises dans les exemples sont ceux du Tableau 5. Lorsqu'un indiqué, un siRNA contrôle (sans ARNm cible) a été utilisé. La séquence de ce 20 siRNA est : SEQ ID NO 55 : 5'UAGCAAUGACGAAUGCGUA[dT][dT] SEQ ID NO 56 : 5'UACGCAUUCGUCAUUGCUA[dT][dT] Exemple 2 : Absence d'inhibition de la croissance tumorale par des siRNAs injectés par voie 25 intraveineuse en bolus. Des souris nude mâles de 9 semaines ont été xénogreffées en sous cutané sur le flanc avec 4.5x106 cellules 22RV1. Après randomisation, les souris ont reçu une injection intraveineuse quotidienne de siRNA contrôle ou de siAR-1 à la dose de 0.12 mg/kg jusqu'au jour du sacrifice des souris. Les résultats sont présentés dans la Figure 2. 3058061 36 Il n'y a pas d'inhibition de la croissance tumorale dans le groupe ayant reçu siAR-1 par rapport au groupe contrôle. Exemple 3 : absence d'inhibition de la croissance tumorale par des siRNAs injectés par voie 5 sous cutanée en bolus Des souris nude mâles de 9 semaines ont été xénogreffées en sous cutané sur le flanc avec 1x106 cellules C4-2. Après randomisation, les souris ont reçu une injection intraveineuse quotidienne de siRNA contrôle ou de siAR-1 à la dose de 0.12 mg/kg jusqu'au jour du sacrifice des souris. Les résultats sont présentés dans la Figure 3. 10 Il n'y a pas d'inhibition de la croissance tumorale dans le groupe ayant reçu siAR-1 par rapport au groupe contrôle. Exemple 4 : Inhibition de la croissance tumorale par des siRNAs administrés par voie sous cutanée continue. 15 Des souris males nude âgées de 8 semaines ont été implantées en sous-cutané avec des cellules C4-2. Les souris développant des tumeurs ont été randomisées lorsque les tumeurs atteignaient 200mm3. Des pompes osmotiques contenant le véhicule (NaC1 0.9%) ou le siRNA siAR-1 (noté SXL01) dilué dans ce véhicule de façon à délivrer une quantité de 0.02, 0.2 ou 2 mg/kg/jour de siAR-1 ont alors été implantées en sous-cutané sur le flanc opposé à 20 celui de la tumeur. La croissance tumorale a été mesurée en fonction du temps. Les résultats sont présentés à la Figure 4. Une inhibition statistiquement significative (p REVENDICATIONS1. Composition comprenant au moins un oligonucléotide double brin, ledit oligonucléotide - s'hybridant avec un ARNm, notamment un ARNm codant la Thrombospondine-1 (TSP1), le facteur de transcription FoxP3, le Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGF) ou le récepteur des androgènes (AR), dont il induit la dégradation ou dont il inhibe la traduction, l'expression dudit ARNm ou de la protéine pour laquelle il code étant impliquée dans une pathologie, pour son utilisation dans la prévention et/ou le traitement de ladite pathologie, ladite composition étant formulée pour un mode d'administration systémique continu. 2. Composition pour son utilisation selon la revendication précédente, dans laquelle ledit au moins un oligonucléotide comprend ou est constitué par l'un des couples suivants : siTSP1- 1 , siTSP 1- 1 b, siTSP 1 -2, siTSP 1 -2b, siTSP 1 -3, siTSP 1 -3 b, siTSP I -4, siTSP 1 -4b, siTSP 1 -5, siTSP I -5b, siFoxP3-1 siFoxP3- lb, siFoxP3-2, siFoxP3-2b, siVEGF-1 , siVEGF- lb, siAR-1 , siAR- 1 b, siAR-2, siAR-2b, siAR-3, siAR-3b, siAR-4, siAR4b, siAR-5, siAR-5b, tels qu'indiqués dans le Tableau 6. 3. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit mode d'administration systémique est choisi parmi le groupe comprenant ou étant constitué du mode d'administration sous-cutanée, intrapéritonéale, intraveineuse, intramusculaire, intradermique, intranasale, intravaginale, intrarectale, sublinguale, orale, et est notamment un mode d'administration systémique continue et sous-cutanée. 4. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ladite pathologie est une tumeur primaire, une tumeur métastatique, ou une pathologie associée à la présence de cellules suppressives ou immunosuppressives, et est notamment un cancer de l'anus, de l'appendice, de la bouche, des bronches et/ou des voies aériennes supérieures, du canal biliaire, de la cavité nasale et paranasale, du cerveau, du coeur, du col de l'utérus, du colon, du corps de l'utérus, de l'estomac, du foie, des glandes salivaires, de la gorge, de la langue, des lèvres, du nasopharynx, de l'oesophage, des os, de l'ovaire, du pancréas, de la parathyroïde, du pénis, de la plèvre, du poumon, de la prostate androgénoindépendant, du rectum, du rein, du sein, des surrénales, des testicules, de la tête et du cou, du thymus, de la thyroïde, de l'urètre, du vagin, de la vésicule biliaire, de la vessie, de la vulve, un 40 3 0 5 806 1 cancer gastro-intestinal, un lymphome, un mélanome ou un cancer de la peau hors mélanome, un myélome, un sarcome, une leucémie, un mésotheliome, un cholangiocarcinome, un ostéosarcome, un glioblastome, un astrocytome, un oligodendrogliome, un chondrosarcome, un liposarcome, un rhabdomyosarcome, ou un pheochromocytome, ou les métastases de ces cancers se développant dans d'autres organes, et est notamment le cancer de la prostate. 5. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ladite composition est formulée pour un mode d'administration à une dose thérapeutiquement efficace, et notamment de 0.005 mg/kg/jour à 30 mg/kg/jour, notamment 0,01 mg/kg/jour à 10 mg/kg/jour et plus particulièrement de 0.01 mg/kg/jour à 2 mg/kg/jour. 6. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit au moins un oligonucléotide est dépourvu de modifications chimiques ou présente des modifications chimiques, et notamment dans laquelle ledit au moins un oligonucléotide comporte deux désoxynucléotides débordants à l'extrémité 3', notamment deux désoxythymidines. 7. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit oligonucléotide est utilisé en association avec au moins un agent anti-angiogénique et/ou un agent anti-tumoral et/ou un agent immunothérapeutique. 8. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit au moins un oligonucléotide est dans une solution contenant un agent de vectorisation ou ne contenant pas d'agent de vectorisation. 9. Composition pour son utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit au moins un oligonucléotide est dans une solution, et est associé ou non à une molécule d' adressage. 10. Dispositif contenant un moyen d'administration systémique continue d'une composition comprenant au moins un oligonucléotide double brin, ledit au moins un oligonucléotide comprend ou est constitué par l'un des couples suivants : siTSP1-1, siTSP1-1b, siTSP1-2, 41 3058061 siTSP1-2b, siTSP1-3, siTSP1-3b, siTSPl-4, siTSP1-4b, siTSP1-5, siTSP1-5b, siFoxP3-1, siFoxP3-lb, siFoxP3-2, siFoxP3-2b, siVEGF-1, siVEGF-lb, siAR-1, siAR-lb, siAR-2, siAR2b, siAR-3, siAR-3b, siAR-4, siAR4b, siAR-5, siAR-5b, tels qu'indiqués dans le Tableau 6. 42