Brevet FR3057166A1 — publié le 20180413

Extrait d'Helichrysum italicum obtenu au moyen de solvants eutectiques profonds OBJET DE L'INVENTION La présente invention concerne un extrait particulier d'Helichrysum italicum, ainsi qu'une composition cosmétique le contenant et ses utilisations, notamment dans le traitement des signes cutanés du vieillissement. ARRIERE-PLAN DE L'INVENTION Les plantes du genre Helichrysum rassemblent différentes espèces d'immortelle, dont l'immortelle d'Italie ou Helichrysum italicum (également désignée par Helichrysum angustifolium D.C.). Plusieurs extraits d'immortelle ont déjà été décrits comme présentant des propriétés anti-âge. En particulier, il a été démontré dans la demande WO 03/018730 qu'une huile essentielle d'immortelle renfermant de l'acétate de néryle présentait notamment un effet anti-radicalaire. Un effet anti-oxydant et/ou anti-inflammatoire a par ailleurs été mis en évidence pour d'autres extraits d'Helichrysum contenant des flavonoïdes, obtenus notamment par chromatographie liquide à haute performance (Maffei et al., Journal of Chromatography, 537 (1991) 449-452) ou par extraction à l'aide d'huile de jojoba (WO 2013/050902). Il est en outre connu que des extraits aqueux d'Helichrysum italicum, riches en acide caféique, permettent de restructurer l'épiderme et de lisser la surface de la peau (FR 2 975 006). Les flavonoïdes constituent une classe de polyphénols renfermant le squelette ci-dessous : 3' 4' B A I C2 6' 5 4 Ils peuvent eux-mêmes être subdivisés en différentes catégories en fonction du carbone du cycle C sur lequel est fixé le cycle B, de la présence ou non d'une ou plusieurs insaturations sur le cycle C et/ou d'un groupement oxo en position 4 et/ou d'un groupement hydroxyle en position 3 du cycle C. 3057166 2 Une catégorie particulière de flavonoïdes est constituée des flavonols ayant la structure suivante : Parmi ceux-ci, on compte notamment les flavonols non substitués sur le cycle B, tels que la 5 baicaléine, les flavonols mono-hydroxylés sur le cycle B, tels que le kaempférol, et les flavonols di-hydroxylés sur le cycle B, tels que la quercétine et la quercétagétine. A la connaissance de la Demanderesse, ces flavonoïdes et leurs dérivés glycosylés ne sont pas présents en quantité détectable dans les huiles essentielles d'Helichrysum. En outre, les extraits d'Helichrysum contenant des flavonoïdes, tels que mentionnés précédemment, renferment uniquement des 10 flavonols des deux premiers types précités ou leurs glycosides. La Demanderesse a mis en évidence qu'un nouvel extrait d'Helichrysum, renfermant de manière caractéristique des hétérosides de flavonols dihydroxylés sur le cycle B, présentait non seulement des propriétés anti-oxydantes et anti-inflammatoires, mais également d'autres 15 propriétés biologiques avantageuses lui permettant d'exercer une activité anti-âge complète. Cet extrait peut être obtenu par extraction des parties aériennes, comprenant notamment les sommités fleuries, d'Helichrysum italicum à l'aide d'un mélange de solvants eutectiques profonds (ou NaDES pour "Natural Deep Eutectic Solvent"). 20 Les solvants de type NaDES sont des mélanges de composés d'origine naturelle présentant la propriété d'avoir une température de fusion unique et définie pour une composition déterminée ; le mélange eutectique présente alors certaines propriétés physiques qui sont celles des corps purs, et notamment la propriété d'avoir la même composition en phase liquide et en phase solide. 25 La température de fusion de l'eutectique est inférieure à la température de fusion du mélange des mêmes corps dans d'autres proportions. Les constituants des solvants eutectiques profonds sont capables de former ensemble des liaisons hydrogène fortes. On pense que les solvants de type NaDES sont présents dans les cellules végétales où ils permettent de synthétiser et stocker une diversité de métabolites non hydrosolubles tels que les flavonoïdes (Y. DaI et al., Analytica Chimica Acta (2013) 766:61-68). Il a déjà été suggéré de les utiliser comme solvants 3057166 3 d'extraction de matières végétales (Y. H. Choi et al., Plant Physiology (2011) 156:1701-1705 ; WO 2011/155829) ou pour protéger des aliments contre l'oxydation ou la dégradation acide (WO 2015/165738). Toutefois, à la connaissance de la Demanderesse, il n'a encore jamais été suggéré d'utiliser ces solvants pour extraire des flavonoïdes d'Helichrysum italicum. RESUME DE L'INVENTION L'invention a ainsi pour objet un extrait d'Helichrysum italicum, caractérisé en ce qu'il renferme des hétérosides de flavonols dont le cycle B est dihydroxylé. Elle a également pour objet une composition cosmétique comprenant cet extrait dans un milieu physiologiquement acceptable. Elle a encore pour objet l'utilisation cosmétique de cet extrait, par application topique sur la 15 peau, pour prévenir ou traiter les signes du vieillissement cutané et/ou comme agent apaisant. FIGURES La Figure 1 représente la variation d'induction d'IL-8 par un extrait selon l'invention, testé à deux concentrations. 20 DESCRIPTION DETAILLEE Comme indiqué précédemment, la présente invention porte sur un nouvel extrait d'Helichrysum italicum, qui se caractérise en ce qu'il renferme des hétérosides de flavonols dont le cycle B est 25 dihydroxylé. Ces hétérosides de flavonols comprennent en particulier au moins un hétéroside, en particulier un 0-hexoside, de quercétagétine et/ou de quercétine, plus particulièrement un 0-hexoside de quercétagétine et un O-hexoside-O-rhamnoside de quercétine. L'extrait selon l'invention peut renfermer au moins 50 ppm d'hétérosides de flavonols, tel que mesuré par chromatographie liquide haute performance couplée à la spectrométrie de masse. 30 Un tel extrait est notamment susceptible d'être obtenu par extraction des parties aériennes d'Helichrysum italicum à l'aide d'un mélange de solvants eutectiques profonds (ci-après désigné par "solvant NaDES"). 5 10 3057166 4 Dans une forme d'exécution préférée de l'invention, ce mélange de solvants est constitué de : (a) au moins deux solvants respectivement choisis dans au moins deux groupes distincts constitués (i) des acides carboxyliques, (ii) du glucose, (iii) du fructose, (iv) du sucrose, (v) du lactose, (vi) du tréhalose, (vii) des polyols et (viii) des composés azotés constitués de la choline, 5 de ses sels inorganiques et des acides aminés et (b) éventuellement de l'eau. Parmi les solvants précités, l'acide carboxylique est avantageusement choisi dans le groupe constitué par les oxo-acides, tels que l'acide pyruvique ; les mono- ou polyhydroxyacides, tels que les acides malique, citrique, lactique, tartrique, ascorbique, glucuronique et neuraminique ; 10 et les acides dicarboxyliques, tels que les acides oxalique, adipique, maléique, fumarique, succinique, aconitique, malonique et oxalique. De son côté, le polyol est de préférence choisi dans le groupe constitué par les alcools de sucre tels que le mannitol, le sorbitol, l'inositol, le ribitol, le galactitol, l'érythritol et le xylitol ; la 15 glycérine ; le 1,3-propanediol ; et le propylène glycol. En outre, des exemples d'acides aminés peuvent être choisis dans le groupe constitué par la proline et l'alanine. 20 Dans une forme d'exécution particulièrement préférée de l'invention, le mélange de solvants formant le solvant NaDES est constitué de fructose, de glycérine et d'eau, de préférence dans un rapport massique de 50:25:25. Avant sa mise en oeuvre dans la préparation de l'extrait selon l'invention, le solvant NaDES peut 25 être lui-même préparé par chauffage du mélange des solvants jusqu'à faire fondre ses constituants solides, par exemple pendant une durée de 0,5 à 3h à une température de 50 à 80°C, généralement sous agitation, pour obtenir un liquide fondu, puis éventuellement refroidissement à température ambiante. En outre, les parties aériennes d'Helichrysum italicum peuvent être préalablement broyées et/ou séchées. L'extraction peut être effectuée par mise en 30 contact de la plante éventuellement séchée et/ou broyée avec le solvant NaDES à une température de 25°C à 95°C, par exemple de 60 à 80°C, pendant une durée allant de 0,5 à 24h, par exemple de 2 à 4 h. Le rapport massique de la plante éventuellement séchée et/ou broyée au solvant NaDES peut aller de 1:99 à 50:50, par exemple de 1:99 à 10:90. A l'issue de cette étape d'extraction, le liquide et le résidu solide obtenus peuvent être séparés par toute technique 3057166 5 connue de l'homme de l'art et notamment par centrifugation, décantation ou pressage, de préférence par essorage centrifuge. L'extrait brut ainsi obtenu peut ensuite être clarifié par filtration et éventuellement stérilisé. 5 La présente invention porte également sur une composition cosmétique comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, un extrait d'Helichrysum italicum tel que défini précédemment. L'extrait selon l'invention peut avantageusement représenter de 0,001 à 5% en poids et 10 préférentiellement de 0,01 à 2% en poids, par rapport au poids total de la composition. Cette composition renferme généralement un milieu physiologiquement acceptable, en particulier cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne génère pas de picotements ou de rougeurs incompatibles avec une utilisation cosmétique. Ce milieu renferme de préférence une 15 phase aqueuse et éventuellement une phase grasse. On préfère que la composition se présente sous forme d'émulsion huile-dans-eau ou eau-dans-huile. La phase aqueuse peut notamment contenir, outre de l'eau, au moins un constituant choisi parmi les gélifiants aqueux et les actifs hydrophiles tels que les humectants. 20 Par "gélifiant aqueux", on désigne un composé polymérique capable d'immobiliser des molécules d'eau en s'hydratant et d'augmenter ainsi la viscosité de la phase aqueuse. Un tel gélifiant peut être choisi parmi : les polysaccharides, tels que : la cellulose et ses dérivés, les amidons modifiés, le carraghénane, l'agar agar, la gomme de xanthane et les gommes végétales 25 telles que la gomme de guar ou de caroube ; les polymères synthétiques et notamment les homopolymères d'acrylate de sodium avantageusement réticulés, ainsi que les copolymères acryliques, en particulier les copolymères d'acrylate de sodium et/ou de (méth)acrylate d'alkyle et/ou de (méth)acrylate d'hydroxyalkyle et/ou de (méth)acrylate de (polyéthoxy)alkyle, avec au moins un autre monomère, avantageusement l'acide 2-acrylamido-2-méthylpropane sulfonique 30 (AMPS), ces copolymères étant de préférence réticulés; et leurs mélanges. De son côté, la phase grasse peut comprendre une ou plusieurs huiles volatiles et/ou non volatiles. Des exemples d'huiles volatiles sont les alcanes ramifiés, tels que l'isododécane, et les alcanes linéaires en Cio-C13. Comme huiles non volatiles, on peut citer notamment : 3057166 6 - les esters d'acides et de mono-alcool choisis parmi : les mono- et polyesters d'acides linéaires saturés en C2-C10 (de préférence en C6-C10) et de mono-alcools linéaires saturés en C10-C18 (de préférence C10-C14), les mono- et polyesters d'acides linéaires saturés en C10-C20 et de mono-alcools ramifiés ou insaturés en C3-C20 (de préférence C3-C10) ; les mono- et polyesters 5 d'acides ramifiés ou insaturés en C5-C20 et de mono-alcools ramifiés ou insaturés en C5-C20 ; les mono- et polyesters d'acides ramifiés ou insaturés en C5-C20 et de mono-alcools linéaires en C2-C4 ; - les triglycérides d'acides gras en C6-C12, tels que les triglycérides d'acides caprylique et caprique et la triheptanoïne ; 10 - les acides gras ramifiés et/ou insaturés en C10-C20 (tels que les acides linoléique, laurique et my ri sti que) ; - les alcools gras ramifiés et/ou insaturés en C10-C20 (tels que l'octyldodécanol et l'alcool oléylique) ; - les hydrocarbures tels que le squalane (C30), notamment le squalane végétal extrait de l'huile 15 d'olive, et l'hémisqualane (C15) ; - les carbonates de dialkyle, tels que le dicaprylyl carbonate et le diéthylhexyl carbonate ; - les dialkyléthers tels que le dicaprylyl éther ; et - leurs mélanges. On peut également citer les huiles végétales qui contiennent un ou plusieurs des constituants 20 précités. Comme esters d'acides et de monoalcools, on peut notamment citer les monoesters tels que le mélange de caprate et caprylate de coco, le macadamiate d'éthyle, l'ester éthylique de beurre de karité, l'isostéarate d'isostéaryle, l'isononanoate d'isononyle, l'isononanoate d'éthylhexyle, le 25 néopentanoate d'hexyle, le néopentanoate d'éthylhexyle, le néopentanoate d'isostéaryle, le néopentanoate d'isodécyle, le myristate d'isopropyle, le myristate d'octyldodécyle, le palmitate d'isopropyle, le palmitate d'éthylhexyle, le laurate d'hexyle, le laurate d'isoamyle, le nonanoate de cétostéaryle, le capylate de propylheptyle et leurs mélanges. D'autres esters utilisables sont les diesters d'acides et de monoalcools tels que l'adipate de disopropyle, l'adipate de 30 diéthylhexyle, le sébaçate de diisopropyle et le sébaçate de diisoamyle. Des exemples d'huiles végétales sont notamment les huiles de germe de blé, de tournesol, d'argan, d'hibiscus, de coriandre, de pépins de raisin, de sésame, de maïs, d'abricot, de ricin, de karité, d'avocat, d'olive, de soja, l'huile d'amande douce, de palme, de colza, de coton, de 3057166 7 noisette, de macadamia, de j oj oba, de luzerne, de pavot, de potimarron, de sésame, de courge, de cassis, d'onagre, de lavande, de bourrache, de millet, d'orge, de quinoa, de seigle, de carthame, de bancoulier, de passiflore, de rosier muscat, d'Echium, de cameline ou de camélia. 5 La phase grasse peut en outre comprendre au moins un structurant de phase grasse. Par "structurant de phase grasse", on entend un composé capable d'épaissir les huiles contenues dans la composition, choisi notamment parmi les cires, les gélifiants de phase grasse et les corps gras pâteux, ainsi que leurs mélanges. 10 Le terme "cire" désigne, dans le contexte de cette description, un corps gras solide à 25°C, à changement d'état solide / liquide réversible, ayant un point de fusion généralement compris entre 30 et 160°C, de préférence entre 50 et 90°C, tel que mesuré par Calorimétrie à Balayage Différentiel (DSC). Des exemples de cires sont en particulier les cires d'origine animale ou 15 végétale, telles que les cires d'abeille, de candelilla, de carnauba ou d'acacia ; les huiles végétales hydrogénées et éventuellement modifiées par l'acide isostéarique, notamment les huiles de colza, de soja, de tournesol, de jojoba, de coprah et de ricin hydrogénées ; les esters d'acides gras linéaires saturés en C14-C30 et d'alcools gras linéaires saturés en C16-C36 ; les acides linéaires et saturés en Cio-C30 ; les alcools linéaires et saturés en Cs-C30 ; et leurs mélanges. Ces 20 cires peuvent se trouver sous forme micronisée, c'est-à-dire sous la forme d'une poudre dont les particules présentent une taille moyenne en nombre inférieure ou égale à 50 lm, et notamment allant de 0,5 à 50 um, de préférence allant de 1 à 30 um, voire allant de 3 à 20 um, où la « taille moyenne en nombre » correspond à la dimension donnée par la distribution granulométrique statistique à la moitié de la population, dite D50. 25 Par "gélifiants de phase grasse", il est fait référence aux composés modifiant la rhéologie de la phase grasse par formation d'un réseau tridimensionnel. Comme composés de ce type, on peut notamment citer les argiles (en particulier les bentonites et les hectorites) modifiées hydrophobes, notamment par du chlorure de di-stéaryl di-méthyl ammonium ; les silices 30 pyrogénées modifiées hydrophobes ; le palmitate et le myristate de dextrine ; les polyamides, les copolymères oléfine(s) / styrène, les poly(acrylates d'alkyle) ; les glycérides d'acides gras (de préférence linéaires et saturés) en C16-C26 tels que le composé Nomcort® HKG ; les dérivés de cellulose et les mélanges en contenant ; et leurs mélanges. Certaines huiles végétales hydrogénées peuvent également être considérées comme des gélifiants de phase grasse. 3057166 8 Enfin, les corps gras pâteux utilisables comme structurants de phase grasse sont définis comme des corps gras à changement d'état liquide / solide réversible, présentant à l'état solide une organisation cristalline anisotrope et comportant à une température de 23°C une fraction liquide 5 et une fraction solide. On préfère utiliser les beurres végétaux. Les beurres de karité, de cacao et de mangue constituent des exemples de tels corps gras pâteux. La composition utilisée selon l'invention peut par ailleurs comprendre un ou plusieurs émulsionnants, parfums, conservateurs, séquestrants, anti-oxydants, ajusteurs de pH, filtres 10 UV, charges pulvérulentes, pigments, colorants et leurs mélanges. Selon une forme d'exécution préférée, cette composition renferme en outre au moins un actif anti-âge, en particulier un actif adapté à prévenir et/ou traiter les rides, le relâchement cutané et/ou la formation de taches pigmentaires, qui peut notamment être choisi parmi les agents anti- 15 radicalaires, les agents stimulant la différenciation et/ou la prolifération des kératinocytes et/ou des fibroblastes ; les agents stimulant la synthèse de glycosaminoglycanes et/ou de collagène et/ou de fibrilles d'ancrage dermo-épidermique ; les agents prévenant la dégradation du collagène et/ou des glycosaminoglycanes et/ou des fibrilles d'ancrage dermo-épidermique ; les agents anti-glycation ; les agents dépigmentants et/ou inhibant la mélanogénèse ; et leurs 20 mélanges. En variante et/ou en plus, la composition selon l'invention peut comprendre au moins un actif à effet neuronal. Des exemples de tels actifs anti-âge et/ou à effet neuronal sont notamment : l'acide ascorbique, ses sels, ses éthers et ses esters, notamment le glucoside d'ascorbyle ; l'adénosine ; le ribose ; 25 les extraits de miel ; les protéines et glycoprotéines, extraites notamment d'amande douce ; les protéines végétales hydrolysées, notamment issues du riz, des graines d'hibiscus ou du lupin ; les polypeptides et les pseudodipeptides, tels que le chlorhydrate de carcinine, le palmitoyl pentapeptide-4 (Pal-Lys-Thr-Thr-Lys-Ser) et le palmitoyl tripeptide-38 commercialisés notamment par SEDERMA sous les dénominations commerciale Matrixyl® 3000 et Matrixyl® 30 Synthe'6, respectivement, le palmitoyl tripeptide-8 commercialisé par la société LUCAS MEYER sous la référence commerciale Nutrazen®, le pentapeptide-18 commercialisé par la société LIPOTEC sous la dénomination commerciale Leuphasyl® Solution, le sh-decapeptide9 commercialisé par la société SANDREAM sous la dénomination commerciale Neoendorphin® et le palmitoyl hexapeptide-52 commercialisé par la société INFINITEC sous 3057166 9 la référence commerciale X50 Myocept® Powder ; les silanes tels que le mannuronate de méthylsilanol ; les arabinoxylanes, extraits en particulier de farine de seigle et les galactoarabinanes, issus notamment du mélèze ; l'acide hyaluronique et ses sels ; les polyphénols, extraits en particulier de mimosa ; les alpha-hydroxyacides, dont ceux extraits de 5 citron; les extraits aqueux de plantes telles que le trèfle d'eau, la pensée sauvage, la prêle des champs, le chardon aux ânes (Onopordum acanthium), le millefeuille (Achillea millefolium, contenu notamment dans le produit Neurobiox® de la société BASF), l'embelia (Embelia concinna, telle que commercialisée par la société SEPPIC), le figuier de Barbarie (Opuntia ficus indica, commercialisé notamment par MIBELLE AG BIOCHEMISTRY sous la dénomination 10 commerciale AquaCacteen ), la sauge (Salvia officinalis, vendue notamment par PROVITAL GROUP), Vitex negundo (commercialisé notamment par les LABORATOIRES EXPANSCIENCE sous la référence commerciale Neurovity®), la châtaigne, la papaye, l'arganier, l'avoine, le tournesol, la pâquerette, la pivoine ou l'aneth ; les extraits aqueux d'algues et notamment de coralline, de janie rouge, d'Ungaria pinnatifada, d'Alaria esculenta 15 ou de Nannochlorosis oculata ; les huiles essentielles, notamment d'immortelle ou de myrte ; les gluconates de zinc et/ou de cuivre ; et leurs mélanges. En variante ou en plus, la composition utilisée selon l'invention peut comprendre au moins un polymère tenseur, c'est-à-dire capable de tendre la peau par action mécanique et de réduire ainsi 20 l'apparence des rides et des ridules. Il peut s'agir d'un polymère synthétique ou naturel, en particulier d'un polysaccharide, notamment d'un extrait d'algue ou de plancton marin ou d'une gomme végétale. Cette composition peut se présenter sous toute forme adaptée à une application topique sur la 25 peau et notamment sous forme de lait, de crème, de lotion, de gel ou de masque. Il s'agit généralement d'une composition non rincée. Elle peut être utilisée, par application topique sur la peau, pour prévenir ou traiter les signes du vieillissement cutané et/ou comme agent apaisant. Il est ainsi possible de prévenir et/ou réduire 30 la formation de rides et ridules, le relâchement cutané et/ou la perte d'éclat du teint, notamment en renforçant la barrière cutanée, en augmentant la différenciation des kératinocytes, en protégeant la peau contre le stress oxydant et en prévenant la glycation des protéines cutanées. Pour ce faire, la composition selon l'invention peut être appliquée sur la peau du visage et/ou 3057166 10 du corps, plus particulièrement sur le visage et/ou le décolleté, à raison d'une à deux fois par jour, de préférence matin et/ou soir. EXEMPLES 5 L'invention sera mieux comprise à la lumière des exemples suivants, qui sont donnés à titre purement illustratif et n'ont pas pour but de limiter la portée de l'invention, définie par les revendications annexées. 10 Exemple 1 : Préparation d'un extrait selon l'invention On a préparé un extrait selon l'invention suivant le procédé décrit ci-dessous. Les parties aériennes fleuries sèches d'Helichrysum italicum ont été broyées à l'aide d'un broyeur à couteaux équipé d'une grille de maille 12 mm. Le solvant d'extraction a séparément 15 été préparé par mélange pendant 1 à 2h à 70°C de fructose, de glycérine et d'eau dans un rapport massique de 50:25:25, conduisant à un liquide limpide et incolore. Le solvant a été introduit dans un réacteur auquel la plante broyée a été ajoutée dans un rapport massique plante sèche broyée / solvant de 5/95. L'extraction a été effectuée pendant 3h à 70°C sous agitation continue. On a ensuite procédé à une séparation liquide / solide au moyen d'une essoreuse centrifuge, puis 20 l'extrait brut a été clarifié par filtration frontale sur différents grades de plaques de filtration en profondeur. L'extrait clarifié a alors été filtré sur une cartouche contenant une membrane ayant un seuil de coupure de 0,22 um. On a ainsi obtenu un extrait sous forme de liquide ambré. 3057166 11 Exemple 2 : Caractérisation de l'extrait On a comparé la composition en polyphénols de l'extrait de l'Exemple 1 avec celle d'extraits huileux et aqueux d'Helichrysum italicum. L'extrait huileux a été obtenu comme suit. On a 5 mélangé 9% en poids de poudre de plante séchée et broyée avec 91% d'une huile de tournesol désodorisée à l'aide d'ultrasons, dans un récipient refroidi à 10°C. L'extraction a été réalisée pendant 30 min, sous ultrasons, avec une agitation de 500 tours/min. L'extraction a été poursuivie au micro-ondes sous un flux d'azote de 0,4 L/min. Les phases solide et liquide huileuse obtenues ont été séparées par décantation, puis la phase huileuse a été filtrée et stockée 10 sous atmosphère inerte, à l'abri de la lumière. Matériel - Chromatographie liquide ultra haute performance (Agilent Technologies, USA) - Injecteur automatique 1290 series 15 - Détecteur à barrette de diodes (DAD) 1260 series - Spectromètre de Masse : Esquire 6000 (Bruker Daltonics, Bremen) équipé d'une source d'ionisation Electrospray (ESI). Préparation des échantillons 20 L'extrait aqueux a été dilué au 10'' dans un mélange Me0H/H20 (50/50). L'extrait selon l'invention été dilué au 5'' dans un mélange Me0H/H20 (50/50). L'extrait huileux a été préparé par dissolution de 2g de d'extrait huileux dans lmL d'hexane. Cette solution huileuse a été extraite 3 fois par 2mL d'un mélange Me0H/H20 (60/40). Les phases Me0H/H20 ont ensuite été regroupées. 25 Méthode d'analyse Les solutions obtenues après dilution/extraction ont été filtrées sur filtre PTFE (0,45 !am) puis injectées (1pL) sur une colonne Agilent C18 (2,1 mm x 100 mm ; 1,8 !am) à une température maintenue à 25°C et à un débit de 0,4 mL/min. On a utilisé comme solvants : A = H20/HCOOH 30 (0,1%) et B = ACN/HCOOH (0,1%). Le gradient d'élution des polyphénols était le suivant : 3057166 12 Temps (min.) % Solvant B 0 5 2 18,3 6 29 6,5 31,7 9,5 38,3 11,5 71 15 95 16 100 17 100 17,2 5 20,2 5 Tableau 1 : gradient d'élution des polyphénols 5 A la sortie du détecteur à barrette de diode, l'éluant a été injecté dans le spectromètre de masse. Les analyses ont été réalisées en mode négatif ou positif. Les spectres de LC-MS ont été acquis sur l'ensemble de la gamme des masses (m/z) allant de 100 à 1400. L'ensemble des données a ensuite été collecté et traité par le logiciel Hystar version 3.0. 10 Résultats Composé Extrait Invention Extrait huileux aqueux Isomère d'acide chlorogénique n.d 22,8 ± 0,7 17,7 ± 0,5 Acide chlorogénique n.d 68,9 ± 1,5 9,6 ± 0,3 Isomère d'acide chlorogénique n.d 17,2 ± 0,9 10,3 ± 0,5 Acide dicaféoyl glucarique n.d 31,0 ± 0,8 2,4 ± 0,1 Acide caféique n.d 18,8 ± 0,9 38,1 ± 0,3 Acide dicaféoyl glucarique n.d n.d n.d Quercetagétine-O-hexoside n.d 49,4 ± 1,9 n.d Flavonoïde-O-hexoside n.d 28,4 ± 1,3 n.d Acide dicaféoyl quinique n.d 75,0 ± 2,6 n.d Acide dicaféoyl quinique n.d 32,4 ± 1,3 REVENDICATIONS1. Extrait d'Helichrysum italicum, caractérisé en ce qu'il renferme des hétérosides de flavonols dont le cycle B est dihydroxylé. 2. Extrait selon la revendication 1, caractérisé en ce que les hétérosides de flavonols comprennent au moins un hétéroside, notamment un 0-hexoside, de quercétagétine et/ou de quercétine. 3. Extrait selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce qu'il renferme au moins 50 ppm d'hétérosides de flavonols. 4. Composition cosmétique comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, un extrait d'Helichrysum italicum selon l'une quelconque des revendications 1 à 3. 5. Utilisation cosmétique d'un extrait d'Helichrysum italicum selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, par application topique sur la peau, pour prévenir ou traiter les signes du vieillissement cutané et/ou comme agent apaisant.