Brevet FR3058056A1 — publié le 20180504

UTILISATION COSMÉTIQUE ET MÉTHODE POUR AMÉLIORER LES FONCTIONS PHYSIOLOGIQUES DE LA PEAU EN AUGMENTANT L'EXPRESSION D'UBIAD1 Domaine de l'invention La présente invention porte sur une utilisation cosmétique d'une composition comprenant un peptide de formule (I) ou son dérivé pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau, comprenant l'étape de mise en contact avec la peau, les phanères ou les cellules épidermiques incluant les kératinocytes avec ladite composition, et augmenter l'expression d'Ubiadl dans cette peau, ces phanères ou ces cellules épidermiques. La présente invention porte aussi sur une méthode pour augmenter l'expression d'Ubiadl. Plus spécifiquement, l'invention porte sur une méthode pour augmenter l'expression d'Ubiadl en utilisant le peptide de formule (I). Contexte La peau est un organe couvrant composé de l'épiderme, la jonction dermoépidermique, le derme, etc. La partie la plus à l'extérieur est l'épiderme, un épithélium multistratifié consistant essentiellement en kératinocytes liés étroitement les uns aux autres. La couche basale de l'épiderme comprend une couche de cellules prolifératives, principalement des kératinocytes et des mélanocytes qui sont ancrés dans la jonction dermoépidermique. Le derme est le tissu supportant la peau et est composé d'eau, de fibres d'élastine et de fibres de collagène (70% des fibres dermiques), enveloppées dans une matrice interstitielle de protéoglycanes. Les fibroblastes sont le principal composant cellulaire du derme et sont la source de la synthèse des fibres de collagène et des fibres d'élastine. Le vieillissement chronologique provoquera le déclin de l'anti-oxydation intrinsèque et de la réparation de la peau. En outre, la peau humaine est exposée à des facteurs de stress environnementaux incluant les rayonnements UV, la 3058056 2 pollution de l'air et des substances toxiques chimiques qui provoqueront le vieillissement de la peau. Des individus ont développé de nombreux produits afin d'améliorer les fonctions physiologiques de la peau, incluant des produits capables d'activer la 5 régénération des cellules, le renforcement de la matrice de collagène extracellulaire et d'élastine, et l'augmentation des niveaux de vitamines E, de CoQ10, et d'acide ascorbique. Cependant, l'identification de nouveaux mécanismes/cibles en matière de soin de la peau reste importante pour le développement de produits concernés. 10 Description de l'invention L'invention porte sur une utilisation cosmétique d'une composition comprenant le peptide de formule (I) ou son dérivé, 111-(AA)'-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2 (I) 15 dans laquelle AA représente un quelconque acide aminé ou un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers entre 0 et 4 ; R1 représente la fonction amine primaire de l'acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi l'acétyle, 20 le benzyle, le tosyle et le benzyloxycarbonyle ; R2 représente la fonction hydroxyle de l'acide carboxyle de l'acide aminé C-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi un alkyle C1 à C30, -NH2, -NHY et le groupe -NYY où Y représente un alkyle C1 à C4, 25 pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau, comprenant l'étape de mise en contact de la peau, des phanères ou des cellules épidermiques incluant les kératinocytes avec ladite composition et augmenter l'expression d'Ubiadl dans cette peau, ces phanères ou ces cellules épidermiques. Dans un mode de réalisation, le peptide de formule (I) comprend la 30 séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO : 2. 3058056 3 Dans un mode de réalisation, le peptide de formule (I) consiste en la séquence d'acides aminés SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO : 2, préférentiellement SEQ ID NO : 2. Dans un mode de réalisation, les cellules sont des kératinocytes, 5 préférentiellement des kératinocytes épidermiques. Dans un mode de réalisation, les peaux sont des organes incluant la peau et les phanères. Dans un mode de réalisation, la peau est préférentiellement un tissu épidermique, plus préférentiellement la couche épineuse et la couche basale de 10 l'épiderme. La composition de la présente invention peut augmenter l'expression d'Ubiadl qui peut améliorer les fonctions physiologiques de la peau, incluant par exemple la protection contre le stress oxydatif et la peroxydation lipidique, ainsi que la préservation de la fluidité/perméabilité de la membrane cellulaire. 15 La présente invention a une bonne perspective d'application dans le soin de la peau. Un autre objet de la présente invention est dirigé vers une méthode d'augmentation de l'expression d'Ubiadl dans les organes, les tissus ou les cellules, c.-à-d. les phanères ou les cellules épidermiques incluant les 20 kératinocytes pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau, comprenant la mise en contact des organes, des tissus ou des cellules avec une composition contenant le peptide de formule (I) ou un dérivé de ce dernier, R1-(AA).-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2 (I) dans laquelle 25 AA représente un quelconque acide aminé ou un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers entre 0 et 4 ; R1 représente la fonction amine primaire de l'acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi l'acétyle, le benzyle, le tosyle, et le benzyloxycarbonyle ; 30 R2 représente la fonction hydroxyle de l'acide carboxyle de l'acide aminé C-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être 3 0 5 8 0 5 6 4 sélectionné parmi un alkyle C1 à C30, -NH2, -NHY et le groupe -NYY où Y représente un alkyle C1 à C4. Brève description des figures 5 Figure 1 : Expression de la protéine Ubiadl dans une peau normale. (A) Immunodétection d'Ubiadl (vert) et d'ADN coloré au DAPI (bleu), Ubiadl est positif dans la couche épineuse et la couche basale de l'épiderme (lentille d'objectif x20, échelle graphique = 31 Ftm). (B) Immunodétection d'Ubiadl (vert) et d'ADN coloré au DAPI (bleu), 10 Ubiadl apparaît avec une localisation périnucléaire étroite, polarisée (comme des organites) (lentille d'objectif x63, échelle graphique = 10 !Im). (C) Immunodétection d'Ubiadl (vert), de Giantine (rouge) et d'ADN coloré au DAPI (bleu), colocalisation de protéines (jaune) dans des cultures de kératinocytes humains, le coefficient de corrélation de Pearson pour les cellules 15 au milieu du champ est relativement élevé 0,79 et 0,77 (lentille d'objectif x63, échelle graphique = 10 gm). Figure 2: L'expression augmentée d'Ubiadl dans des kératinocytes humains par le peptide inducteur d'Ubiadl et les conséquences. 20 (A) Immunotransfert d'Ubiadl après des passages successifs de culture de kératinocytes (E signifie passage précoce, L signifie passage tardif) et immunotransfert d'Ubiadl après traitement avec 1 µM (1%) du peptide inducteur d'Ubiadl. (B) qPCR d'Ubiadl après traitement avec 1 111\4 (1%) du peptide inducteur 25 d'Ubiadl. (C) Images de microscopie électronique représentatives de kératinocytes traités avec le peptide inducteur d'Ubiadl et doublement colorés avec de l'acétate uranyle et du citrate de plomb (échelle graphique des photos à gauche = 1 ; échelle graphique des photos à droite = 0,5 1.1m). 30 3 0 5 80 5 6 5 Figure 3 : Effet de protection de l'expression augmentée d'Ubiadl sur des kératinocytes (A) Mesure d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) cellulaires dans des kératinocytes exposés pendant 1 heure à 200 !IM d'hydroperoxyde de cumène 5 en utilisant le marqueur CellROX vert (lentille d'objectif x20, échelle graphique = 31 itm). (B) Graphique de quantification CellROX avec une analyse de variance à un facteur, affichant des diamants des moyennes d'intervalle de confiance (vert). La ligne à travers chaque diamant représente la moyenne de groupe. La 10 portée verticale de chaque diamant représente l'intervalle de confiance de 95% pour chaque groupe. La moyenne du grand échantillon est représentée par une ligne noire horizontale. (C) Peroxydation lipidique dans des kératinocytes exposés pendant 1 heure à 200 µM d'hydroperoxyde de cumène (BODIPY réduit en rouge ; BODIPY 15 oxydé en vert) (lentille d'objectif x20, échelle graphique = 31 i_tm). (D) Graphique de quantification de peroxydation lipidique avec une analyse de variance à un facteur, affichant des diamants des moyennes d'intervalle de confiance (vert). La ligne à travers chaque diamant représente la moyenne de groupe. La portée verticale de chaque diamant représente 20 l'intervalle de confiance de 95% pour chaque groupe. La moyenne du grand échantillon est représentée par une ligne noire horizontale. (E) Immunodétection de 3-nitrotyrosine (vert), coloration de F-actine avec la phalloïdine (rouge) et ADN coloré au DAPI (bleu) dans des kératinocytes soumis à un stress d'espèces nitriques réactives (lentille d'objectif x20, échelle 25 graphique = 31 gm). (F) Graphique de quantification 3 NT avec une analyse de variance à un facteur, affichant des diamants de moyennes d'intervalle de confiance (vert). La ligne à travers chaque diamant représente la moyenne de groupe. La portée verticale de chaque diamant représente l'intervalle de confiance de 95% pour 30 chaque groupe. La moyenne du grand échantillon est représentée par une ligne noire horizontale. 3058056 6 (G) Mesure d'intégrité de membrane plasmique avec une sonde TMA-DPH (bleue) dans des kératinocytes exposés pendant une heure à 2 mM d'hydroperoxyde de cumène (lentille d'objectif x20), échelle graphique = 31 5 (H) Graphique de quantification TMA-DPH avec analyse de variance à un facteur, affichant des diamants de moyennes d'intervalle de confiance (vert). La ligne à travers chaque diamant représente la moyenne de groupe. La portée verticale de chaque diamant représente l'intervalle de confiance de 95% pour chaque groupe. La moyenne du grand échantillon est représentée par une ligne 10 noire horizontale. Description détaillée L'invention porte sur une utilisation cosmétique d'une composition comprenant le peptide de formule (I) ou son dérivé, 15 Ri-(AA)n-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2 (I) dans laquelle AA représente un quelconque acide aminé ou un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers entre 0 et 4 ; R1 représente la fonction amine primaire de l'acide aminé N-terminal, libre 20 ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi l'acétyle, le benzyle, le tosyle, et le benzyloxycarbonyle ; R2 représente la fonction hydroxyle de l'acide carboxyle de l'acide aminé C-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi un alkyle Cl à C30, -NH2, -NHY et le groupe -NYY où Y 25 représente un alkyle de Ci à C4, pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau comprenant l'étape de mise en contact de la peau, des phanères ou des cellules épidermiques incluant les kératinocytes avec ladite composition et augmenter l'expression d'Ubiadl dans cette peau, ces phanères ou ces cellules épidermiques. 30 Ubiadl (aussi connu sous le nom de Terel) a été cloné en 2001 (McGarvey 3058056 TW, et al., Oncogene 2001 ; 20:1042-51). Les inventeurs de la présente invention ont découvert qu'Ubiadl est localisé dans les kératinocytes de l'épiderme. L'imagerie microscopique légère de la colocalisation d'Ubiadl et de la Giantine (une protéine de la famille des Golgines) a défini les domaines de 5 Golgi alors que la coloration du réseau plus large d'Ubiadl a pointé vers le réseau mitochondrial. Les inventeurs ont découvert que l'expression augmentée d'Ubiadl est accompagnée d'une amélioration significative du profil ultra structurel des kératinocytes de la mitochondrie et du complexe de Golgi. Un effet positif sur les composants de la mitochondrie notée ci-dessus est bénéfique 10 pour les énergies cellulaires des kératinocytes. Les dommages oxydatifs sur l'ADN mitochondrial et les protéines dans les kératinocytes sont liés à la diminution des fonctions physiologiques de la peau, telles que le vieillissement. En outre, les inventeurs ont par ailleurs trouvé qu'Ubiadl joue des rôles importants dans la prévention des cellules de la peau contre ce stress oxydatif et 15 cette peroxydation lipidique. L'expression augmentée d'Ubiadl dans les cellules de la peau telles que les kératinocytes peut diminuer efficacement le stress oxydatif et la peroxydation lipidique. De plus, l'expression augmentée d'Ubiadl contribue également à la préservation de la fluidité/perméabilité de la membrane cellulaire. 20 Le terme « peptide » fait référence à une chaîne de deux ou plusieurs acides aminés liés les uns aux autres par des liaisons peptidiques. L'expression « le peptide de la présente invention » fait référence au peptide de formule (I). Le peptide de la présente invention peut être obtenu, soit par une synthèse chimique classique (dans la phase solide ou dans la phase homogène liquide), soit par 25 synthèse enzymatique (Kullman et al. J. Biol. Chem., 1980, vol. 225, p. 8234) à partir d'acides aminés constituants. Dans un mode de réalisation, le peptide de la présente invention peut être d'origine naturelle ou synthétique. Pour améliorer la résistance à la dégradation, il peut être nécessaire de modifier le peptide de façon à obtenir une forme protégée du peptide de la 30 présente invention. La modification doit être effectuée sous une forme physiologiquement acceptable ou cosmétiquement acceptable. Dans un mode de 3058056 8 réalisation, la fonction amine primaire de l'acide aminé N-terminal du peptide de la présente invention peut faire l'objet d'une acylation ou d'une acétylation. De préférence, le groupe protecteur de l'acide aminé N-terminal peut être sélectionné parmi l'acétyle, le benzyle, le tosyle et le benzyloxycarbonyle. Dans 5 un mode de réalisation, la fonction hydroxyle de l'acide aminé C-terminal du peptide de la présente invention peut faire l'objet d'une amidation ou d'une estérification. De préférence, le groupe protecteur de l'acide aminé C-terminal peut être sélectionné à partir d'alkyle Ci à C30, -NH2, -NHY et du groupe -NYY où Y représente un alkyle C1 à C4. 10 Dans un mode de réalisation, le peptide de la présente invention comprend la séquence suivante : Ala-Val-Leu-Ala-Gly (SEQ ID NO : 1). Dans un autre mode de réalisation, le peptide de la présente invention comprend la séquence suivante : Ala-Val-Leu-Ala-Gly-NH2 (SEQ ID NO : 2). Dans un autre mode de réalisation, le peptide de la présente invention consiste en la séquence d'acides 15 aminés SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO : 2, de préférence SEQ ID NO : 2. Dans un autre mode de réalisation, la présente invention comprend l'utilisation d'un mélange d'Ala-Val-Leu-Ala-Gly (SEQ ID NO : 1) et d'Ala -Val-Leu-Ala-GlyNH2 (SEQ ID NO : 2). Dans un mode de réalisation, l'organe est la peau. Le terme « peau » inclut 20 de façon constante la peau et les « phanères ». Les phanères incluent toutes les kératines annexes présentes à la surface du corps, en particulier les poils, les cils, les sourcils, les ongles et les cheveux. La peau comprend l'épiderme, la jonction dermoépidermique, le derme, etc. L'épiderme comprend par ailleurs une couche cornée, une couche granuleuse, une couche épineuse et une couche 25 basale. Dans un mode de réalisation, les tissus sont des tissus épidermiques, de préférence la couche épineuse et la couche basale de l'épiderme. Dans un mode de réalisation, les cellules sont des kératinocytes, de préférence des kératinocytes épidermiques. Dans un mode de réalisation, l'invention porte sur une méthode pour 30 augmenter l'expression d'Ubiad 1 dans les kératinocytes, comprenant la mise en contact des organes ou des tissus incluant les kératinocytes, c.-à-d. la peau, les 3058056 9 phanères ou les cellules épidermiques, incluant les kératinocytes, avec un peptide ou une composition incluant le peptide, dans laquelle le peptide est sélectionné à partir du peptide de SEQ ID NO : 1, le peptide de SEQ ID NO : 2 et la combinaison de ceux-ci. 5 L'invention porte aussi sur l'utilisation cosmétique du peptide de formule (I) pour augmenter l'expression d'Ubiadl dans les kératinocytes pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau, Ri-(AA).-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2 (I) dans laquelle 10 AA représente un quelconque acide aminé ou l'un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers entre 0 et 4 ; R1 représente la fonction amine primaire de l'acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi l'acétyle, le benzyle, le tosyle, et le benzyloxycarbonyle ; 15 R2 représente la fonction hydroxyle de l'acide carboxyle de l'acide aminé C-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi un alkyle Ci à C30, -NH2, -NHY et le groupe -NYY où Y représente un alkyle Ci à C4. Dans un mode de réalisation, le peptide de formule (I) comprend ou 20 consiste en des séquences d'acides aminés suivantes : SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO : 2, de préférence SEQ ID NO : 2. Le peptide de la présente invention est avantageusement solubilisé dans un ou plusieurs solvants physiologiquement ou cosmétiquement acceptables, tels que l'eau, le glycérol, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le 25 dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, ou tout mélange de ces solvants. L'expression « physiologiquement ou cosmétiquement acceptable » signifie que le solvant choisi est approprié pour entrer en contact avec la peau sans causer de toxicité ou de réactions d'intolérance. Dans un mode de réalisation, le peptide de la présente invention 30 peut être dissous dans un ou plusieurs solvants cosmétiquement acceptables, sélectionnés parmi l'eau, le glycérol, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène 3058056 10 glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, ou tout mélange de ces solvants. Le peptide de la présente invention peut être encapsulé ou contenu dans un vecteur cosmétique tel que des liposomes ou toute autre microcapsule utilisée 5 dans le domaine cosmétique ou adsorbé dans des polymères organiques poudreux, des transporteurs de minéraux tels que les talcs et les bentonites. Par conséquent, la présente invention porte aussi sur une composition comprenant le peptide de formule (I) qui peut augmenter l'expression d'Ubiadl dans les kératinocytes de la peau. L'invention porte aussi sur l'utilisation du 10 peptide de formule (I) comme ingrédient actif pour augmenter l'expression d'Ubiadl dans les kératinocytes de la peau dans une composition de soin cosmétique. L'invention porte aussi sur une méthode de soin cosmétique pour améliorer l'expression d'Ubiadl dans les kératinocytes de la peau, comprenant l'administration d'une composition de soin cosmétique comprenant le peptide 15 de formule (I) sur la peau. La composition de la présente invention peut en particulier avoir la forme d'une solution aqueuse, hydroalcoolique ou huileuse ; d'une émulsion huile dans eau ou d'une émulsion eau dans huile ou d'émulsions multiples ; d'un gel aqueux ou anhydre ; d'un colloïde. Ces compositions peuvent aussi avoir la 20 forme de crèmes, de suspensions, ou de poudre, appropriées pour une application sur la peau, les membranes muqueuses, les lèvres et/ou les phanères. Ces compositions peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'apparence d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'une crème, d'une pâte ou d'une mousse. Elles peuvent aussi exister sous forme solide, telle qu'un 25 bâtonnet ou être appliquées sur la peau avec un aérosol. Dans un mode de réalisation, la composition de la présente invention est une composition de soin cosmétique. La composition de la présente invention inclut tout additif communément utilisé dans le domaine cosmétique ainsi que tout adjuvant nécessaire à sa 30 formulation, tel que les co-solvants (éthanol, glycérol, alcool benzylique, humectant, etc.), les agents épaississants, les diluants, les émulsifiants, les 3 0 5 80 5 6 11 antioxydants, les agents colorants, les écrans solaires, les pigments, les agents de remplissage, les conservateurs, les parfums, les agents d'absorption d'odeur, les huiles essentielles, les oligo-éléments, les acides gras essentiels, les tensioactifs, les polymères filmogènes, les filtres chimiques ou minéraux, les 5 agents hydratants ou l'eau thermale, et ainsi de suite. Il est possible par exemple de citer les polymères solubles dans l'eau d'un type naturel, tels que les polysaccharides ou les polypeptides, les dérivés cellulosiques de type méthylcellulose ou hydroxypropyle métylcellulose ou les polymères synthétiques, les poloxamères, les carbomères, les siloxanes, PVA ou PVP et en 10 particulier les polymères vendus par la société ISP. Quel que soit le cas, l'homme de métier s'assurera que ces adjuvants ainsi que leurs proportions sont choisis de façon à ne pas contrer les propriétés avantageuses recherchées dans la composition selon l'invention. Ces adjuvants peuvent, par exemple, être présents dans des concentrations variant de 0,01 à 15 20% du poids total de la composition. Lorsque la composition de l'invention est une émulsion, la phase lipidique peut représenter 5 à 80% en poids et de préférence 5 à 50% en poids par rapport au poids total de la composition. Les émulsifiants et co-émulsifiants utilisés dans la composition seront choisis à partir de ceux qui sont utilisés conventionnellement dans le domaine envisagé. 20 Par exemple, ils peuvent être utilisés dans une proportion allant de 0,3 à 30% en poids par rapport au poids total de la composition. Dans un mode de réalisation, le peptide de la présente invention est présent dans la composition dans une concentration entre 0,0005-500 IuM, de préférence 0,01-5 FtM, sur la base du poids total de la composition. 25 Bien sûr, le peptide de la présente invention peut être utilisé seul ou en association avec d'autres agents actifs. Par exemple, la composition de soin cosmétique de la présente invention contient, en plus, au moins un autre agent actif destiné à améliorer les fonctions physiologiques de la peau tels que les régénérants, les agents antivieillissement, les antirides, les épaississants, les 30 anti-radicaux libres, les agents contre la glycation, les hydratants, les antibactériens, les antifongiques, les kératolytiques, les relaxants musculaires, 3058056 12 les exfoliants et les agents toniques, les agents stimulant la synthèse des macromolécules dermiques ou du métabolisme énergétique, les agents modulant la différenciation cutanée, la pigmentation ou la dépigmentation, les agents stimulant la croissance des ongles ou des cheveux, les agents stimulant la 5 microcirculation, les écrans solaires ou les agents inhibiteurs de métalloprotéinase. Dans un mode particulier de l'invention, l'expression augmentée du gène Ubiadi dans les kératinocytes de la peau peut effectivement engendrer une diminution du stress oxydatif et de la peroxydation lipidique dans les kératinocytes de la peau, ce qui aide à la prévention du vieillissement de la 10 peau. Dans un mode de réalisation, la composition de la présente invention comprendra, en plus du peptide de la présente invention : - des écrans solaires, des écrans contre les infrarouges et les ultraviolets - des agents anti-radicaux libres, 15 - de la DHEA (déhydroépiandrostérone), - au moins un composé activateur du cytochrome C, et/ou ; - un (ou plusieurs) composé activateur d'aquaporine et/ou ; - un (ou plusieurs) composé activateur de sirtuine et/ou ; - un (ou plusieurs) composé augmentant l'adhésion des cellules et/ou ; 20 - un (ou plusieurs) composé augmentant la production des protéines de la matrice du type collagène ou laminine, etc. ; - un (ou plusieurs) composé modulateur de protéine HSP ; - un (ou plusieurs) composé augmentant l'énergie des cellules ; - un (ou plusieurs) composé modulateur de la pigmentation tel qu'un 25 extrait peptidique de levure, amarante, graine de lin, haricot, cacao, maïs, soja, tournesol, colza ou pois ; - un (ou plusieurs) composé améliorant la fonction de barrière de la peau ; - un (ou plusieurs) composé protecteur des mitochondries. - de la vitamine A et notamment l'acide rétinoïque, le rétinol, le propionate 30 de rétinol, le palmitate de rétinol, - de la vitamine B3 et notamment la niacinamide, le niconitate de 3058056 13 tocophérol, - de la vitamine B5, de la vitamine B6, de la vitamine B12, du panthénol, - de la vitamine C et notamment de l'acide ascorbique, du glucoside ascorbyle, du tétrapalmitate ascorbyle, du magnésium et du phosphate ascorbyle s de sodium, - des vitamines E, F, H, K, PP et du coenzyme Q10, - un inhibiteur de métalloprotéinase, un activateur de l'inhibiteur tissulaire de métalloprotéinase (TIMP), - des acides aminés et notamment arginine, ornithine, hydroxyproline, 10 dipalmitate d'hydroxyproline, palmitoglycine, hydroxylysine, méthionine et ses dérivés, acides aminés N-acylés, - des peptides naturels ou synthétiques, incluant les di -, tri-, tétra pentaet hexapeptides et leurs dérivés lipophiles, isomères et complexes avec d'autres molécules telles que des ions métalliques (c.-à-d. le cuivre, le zinc, le 15 manganèse, le magnésium et d'autres), des peptides vendus sous les noms commerciaux MATRIXYL®, ARGIRELINE®, COLLAXYLTM, PEPTIDE VINCI O2TM, CHRONOGENTM, LAMINIXYL ISTM, - des extraits peptidiques de plante obtenus par hydrolyse ou tout autre procédé tel qu'un extrait de soja, extrait de petit épeautre, extrait de vitis 20 vinefira, extrait de colza, extrait de graine de lin, extrait de riz, extrait de maïs ou extrait de pois, extrait de caroube, extrait de haricot, extrait de fève, - un extrait de levure, un extrait d'artémia sauna, - de l'acide déhydroacétique (DHA), - des phytostérols naturels ou synthétiques, 25 - des alpha- et bêta-hydroxyacides, des silanols, - des sucres aminés, de la glucosamine, de la D-glucosamine, du N- acétylglucosamine, du N-acétyl-D-glucosamine, de la mannosamine, du Nacétylmannosamine, de la galactosamine, du N-acétylgalactosamine, - des polyphénols, des isoflavones, des flavonoïdes, tels qu'un extrait de 30 raisin, extrait de pin, extrait d'olive, - des lipides tels que les céramides ou les phospholipides, 3058056 14 - des huiles animales telles que les squalènes ou squalanes, - des huiles végétales telles que l'huile d'amande, l'huile de noix de coco, l'huile de ricin, l'huile de jojoba, l'huile d'olive, l'huile de colza, l'huile d'arachide, l'huile de tournesol, l'huile de germe de blé, l'huile de germe de 5 maïs, l'huile de soja, l'huile de coton, l'huile d'alfafa, l'huile de pavot, l'huile de graine de citrouille, l'huile d'onagre, l'huile de millet, l'huile d'orge, l'huile de seigle, l'huile de carthame, l'huile de passion, l'huile de noisette, l'huile de palme, l'huile de noyau d'abricot, l'huile d'avocat, l'huile de calendula, les huiles végétales éthoxylées, ou le beurre de karité. Les composés mentionnés ci- 10 dessus peuvent être naturels tels que les hydrolysats peptidiques de plantes mais aussi synthétiques, tels que les composés peptides. L'expression « entrer en contact » fait référence à l'application du peptide de la présente invention ou d'une composition incluant ce dernier sur la surface d'un organe ou d'un tissu incluant des kératinocytes, c.-à-d. la peau, les 15 phanères ou les cellules épidermiques incluant les kératinocytes. Le peptide de la présente invention ou une composition incluant ce dernier peut être appliqué par voie topique sur un individu. Le terme « individu » fait référence à un mammifère, y compris sans s'y limiter, à un humain. « Application topique » fait référence à l'application, à l'étalement du peptide de la présente invention 20 ou à une composition le contenant, à la surface de la peau ou d'une membrane muqueuse. Dans un mode de réalisation, le peptide de la présente invention ou la composition le contenant est appliqué sur les parties du corps humain exposées à l'environnement, incluant sans s'y limiter, la tête, le visage, la tête et le cou, le front, la cavité de le nez, le cou, le bras et la jambe. 25 L'expression « fonctions physiologiques améliorées de la peau » signifie toutes les modifications de l'apparence extérieure de la peau et des phanères, par exemple, l'amélioration des signes de vieillissement de la peau et du photo-vieillissement. « Les signes de vieillissement de la peau ou photo-vieillissement » font référence à tous les changements dans l'apparence externe 30 de la peau et des phanères dus au vieillissement, tels que par exemple, l'amincissement de la peau, l'affaissement, la perte d'hydratation et l'atonie, les 3 0 5 8 0 5 6 15 rides profondes et les lignes fines, la perte de fermeté et de tonicité, l'atrophie dermique, la perte d'homogénéité du teint de la peau, les cernes, ou toute autre dégradation interne de la peau résultant de l'exposition aux rayonnements ultraviolets, les taches brunes et taches de vieillissement. Les taches brunes 5 également connues sous le nom de « lentigo solaire », « lentigo senilis », « taches de vieillesse » « taches de rousseur séniles », sont des imperfections de la peau associées au vieillissement et au photo-vieillissement dues à l'exposition aux rayonnements ultraviolets du soleil. Leurs couleurs varient de marron clair à rouge ou noir et elles sont situées dans des endroits exposés le plus souvent au 10 soleil, particulièrement les mains, le visage, les épaules, les bras et le front, et le crâne, s'il est chauve. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, l'expression augmentée du gène Ubiadl dans les kératinocytes de la peau peut donner les améliorations ci-dessus, incluant par exemple les améliorations des signes du vieillissement de la peau et du photo-vieillissement, la diminution des 15 rides, des cernes, etc. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention deviendront plus clairs au regard des exemples suivants fournis à titre d'illustration et sans objectif restrictif. Exemples 20 1. Matériels et méthodes 1.1 Structure du peptide inducteur d'Ubiadl La séquence d'acides aminés du peptide inducteur d'Ubiadl est Ala-Val- Leu-Ala-Gly-NH2 (SEQ ID NO: 2) et le peptide inducteur d'Ubiadl est synthétisé artificiellement. La solution de travail était 1 1..1M. 25 1.2 Anticorps et sondes Les anticorps principaux utilisés étaient l'anti-Ubiadl (sc-377013, Santa Cruz Biotechnology, Heidelberg, Allemagne), l'anti-Giantine (ab24586, Abcam, Cambridge, RU), anti-3-Nitrotyrosine (ab61392, Abcam). Des anticorps 30 secondaires couplés à l'Alexa Fluor® ont été utilisés (Sondes moléculaires, Eugene, OR, USA). Une sonde Alexa Fluor® 594 Phalloïdine a été utilisée pour 3058056 16 la détection de F-actine (A12381, sondes moléculaires). Une sonde Ce11ROX verte a été utilisée pour suivre le ROS intracellulaire (C10444, sondes moléculaires). C 11-BODIPY (581/591) a été utilisé pour suivre la peroxydation lipidique (C10445, sondes moléculaires). Une sonde TMA-DPH a été utilisée à 5 2 gIVI dans des expériences de fluidité de membrane (43060, Sigma, St. Louis, MO, USA). 1.3 Interférence ARN Ubiadl siRNA (HSS179099, Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) a été 10 transfecté avec la lipofectamine RNAiMAX (Invitrogen). Après 48 heures, les cellules ont été prélevées et analysées par réaction en chaîne par polymérase quantitative. Pour le contrôle négatif, des duplexes Stealth RNAi contrôle négatif (Invitrogen) avec un contenu en GC moyen ont été utilisés, conformément à la recommandation du fabricant. 15 1.4 Culture de cellules Des kératinocytes épithéliaux humains normaux ont été isolés à partir de peau obtenue par chirurgie esthétique chez des femmes en bonne santé qui avaient donné leur consentement éclairé. Les kératinocytes ont été cultivés dans 20 un milieu sans sérum avec un facteur de croissance épidermique humain recombinant et un extrait hypophysaire bovin (Gibco, Auckland, NZ), et 0,1 mg/ml PrimocinTM (Invivogen, San Diego, CA, USA). 1.5 Test Transcriptase inverse -PCR 25 L'ARN total a été extrait en utilisant le kit d'isolation mirVana miRNA conformément aux instructions du fabricant (Ambion, Austin, TX, USA). L'ARN total a été retranscrit avec le kit de transcription inverse à haute capacité ADNc (Applied Biosystems, Branchburg, NJ, USA). La réaction en chaîne par polymérase en temps réel a été effectuée selon la méthode Taqman, en utilisant 30 le mélange TaqMan Universal PCR Master Mix (Applied Biosystems) avec le système StepOnePlus Real-time PCR (Applied Biosystems). L'expression 3058056 17 relative des niveaux de chaque gène cible a été calculée selon la méthode deltadelta-CT. 1.6 Analyse par Western blot 5 Les kératinocytes ont été lysés dans un tampon RIPA (Thermo Scientific, Rockford, IL, USA) contenant un cocktail d'inhibiteur de protéase et de l'EDTA (Thermo Scientific). La concentration de protéines a été déterminée en utilisant le kit de test de protéine BCA (Thermo Scientific) et des quantités égales de protéine totale ont été chargées dans un gel 4 à 12% NuPage Bis-Tris 10 (Invitrogen) et transférées sur des membranes de nitrocellulose en utilisant le système iBlot dry blotting (Invitrogen). Des sites de liaison non spécifiques ont été bloqués et les membranes ont ensuite été marquées avec des anticorps appropriés, et développées en utilisant le kit de substrat à forte sensibilité SuperSignal West Femto Maximum Sensitivity Substrate (Thermo Scientific). 15 1.7 Immunofluorescence Des cellules fixées par méthanol ont été perméabilisées dans 0,1% de triton X100, bloquées dans 1% de solution ASB. Les cellules ont été incubées avec des anticorps primaires dilués dans une solution saline tamponnée au phosphate, 20 suivi d'une incubation avec des anticorps secondaires couplés à l'Alexa Fluor (Invitrogen). L'acquisition d'images a été réalisée en utilisant un microscope Axiovert 200M (Cari Zeiss, Oberkochen, Allemagne). Des photos ont été prises avec une caméra Exi bleue (Qimaging, Surrey, BC, Canada) couplée au logiciel d'acquisition Volocity (Perkin Elmer, Waltham, MA, USA). La colocalisation 25 d'Ubiadl et de Giantine a été effectuée par une approche statistique (17) éliminant ainsi le biais de l'interprétation visuelle. Le coefficient de corrélation de Pearson a été utilisé comme paramètre statistique pour quantifier le degré de colocalisation. 30 1.8 Fluorescence immunohistologique Des échantillons de peau humaine ont été obtenus par chirurgie esthétique 3 0 5 8 0 5 6 18 sur des femmes en bonne santé qui avaient donné leur consentement éclairé. Après l'élimination de tissu gras sous-cutané, du tissu a été utilisé pour prendre 6 mm de biopsies à l'emporte pièce, fixées dans du formaldéhyde et traitées dans le processeur automatisé Shandon Hypercenter XP (Shandon Ltd., Runcor, 5 RU) pour l'inclusion de paraffine. Des sections de 4 Jim d'épaisseur ont été découpées avec un microtome (Shandon) et collectées sur des lamelles de verre recouvertes de polylysine (Menzel Glâser, Braunschweig, Allemagne) pour l'immunocoloration. La récupération de l'antigène enzymatique pepsine et le chauffage ont été effectués avant l'incubation avec l'anticorps d'Ubiadl . 10 1.9 Microscopie électronique Les kératinocytes cultivés, traités avec le peptide à une concentration de 1 gM pendant 48 heures ont été fixés dans une solution de Karnovsky (Emsdiasum, Hatfield, PA, USA) pendant 1 h à température ambiante et laissés 15 pendant 12 h à 4°C. Les cellules ont été ensuite soigneusement retirées de la boîte de pétri, agglomérées par une brève centrifugation et lavées avec 0,1 M de tampon cacodylate de sodium. Les granulés ont été régulièrement traités à l'acide osmique, déshydratés dans des bains successifs à concentration croissante d'éthanol et infiltrés avec ; et incorporés dans, une résine d'epon- 20 epoxy à faible viscosité. Des sections ultraminces de couleur d'interférence gris- argent ont été découpées et doublement colorées à l'acétate d'uranyle et au citrate de plomb, puis examinées au microscope électronique de transmission Zeiss 10. Des photos microscopiques ont été prises avec une caméra numérique Gatan (Gatan, Pleasanton, CA, USA). 25 1.10 Analyse statistique Toutes les expériences ont été répétées, la quantification de la fluorescence a été effectuée en mesurant l'intensité fluorescente de la coloration qui a été normalisée par zone cellulaire. La peroxydation lipidique dans les cellules a été 30 quantifiée conformément aux directives du fabricant avec des ratios de signal du canal 590 au canal 510. Les analyses statistiques ont été effectuées en utilisant 3058056 19 le logiciel JMP (SAS, Cary, NC, USA). Le test de normalité des données a été effectué avec le test Shapiro-Wilk. L'analyse à un facteur de variance (ANOVA) a été utilisée pour déterminer s'il y avait des différences significatives entre les moyennes de deux ou plusieurs groupes indépendants. La différence entre deux 5 moyennes a été effectuée avec un test-t de Student. Une valeur-p REVENDICATIONS1. Utilisation cosmétique d'une composition comprenant un peptide de formule (I) ou son dérivé, R1-(AA)n-Ala-Val-Leu-Ala-Gly-(AA)p-R2 (I) dans laquelle AA représente un quelconque acide aminé ou un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers entre 0 et 4 ; R1 représente la fonction amine primaire de l'acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur qui peut être sélectionné parmi l'acétyle, le benzyle, le tosyle, et le benzyloxycarbonyle ; R2 représente la fonction hydroxyle de l'acide carboxyle de l'acide aminé C-terminal, libre ou substituée par un groupe protecteur pouvant être sélectionné parmi un alkyle Cl à C30, -NH2, -NHY et le groupe -NYY où Y représente un alkyle de Ci à C4, pour améliorer les fonctions physiologiques de la peau comprenant l'étape de mise en contact de la peau, des phanères ou des cellules épidermiques incluant les kératinocytes avec ladite composition et augmenter l'expression d'Ubiadl dans cette peau, ces phanères ou ces cellules épidermiques. 2. Utilisation cosmétique selon la revendication 1, dans laquelle le peptide de la formule (I) comprend la séquence d'acide aminé SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO :2. 3. Utilisation cosmétique selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle le peptide de la formule (I) consiste en la séquence d'acide aminé SEQ ID NO : 1 ou SEQ ID NO : 2, de préférence SEQ ID NO:2. 4. Utilisation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 1-3, dans laquelle les cellules sont des kératinocytes épidermiques. 3058056 21 5. Utilisation cosmétique selon l'une quelconque des revendications 1-4, dans laquelle la peau est des tissus épidermiques. 6. Utilisation cosmétique selon la revendication 5, dans laquelle les tissus épidermiques sont la couche épineuse et la couche basale de l'épiderme.