Brevet FR3050535A1 — publié le 20171027

DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention est relative à l'identification de marqueurs biologiques d'une maladie auto-immune ou inflammatoire chronique chez un individu, et tout particulièrement de la polyarthrite rhumatoïde (PR). L'invention décrit un procédé de détermination du niveau de ces nouveaux biomarqueurs, de nouveaux anticorps ainsi que leurs applications thérapeutiques, diagnostiques ou pronostiques. ART ANTERIEUR Les maladies auto-immunes sont généralement caractérisées par le déclenchement d'une réaction immunitaire, qui se traduit par une réaction inflammatoire, à l'égard de substances et/ou tissus normalement présents chez l'individu. Elles sont souvent mises en évidence, mais pas systématiquement, par la détection d'auto-anticorps dirigés contre des antigènes du « soi ». Ces maladies auto-immunes et inflammatoires chroniques sont des pathologies hétérogènes, pour lesquelles il existe une forte variabilité des phénotypes et des réponses aux traitements. Ainsi, le pronostic de ces maladies auto-immunes et inflammatoires chroniques est susceptible de varier considérablement au sein d'individus pourtant considérés comme atteints de la même pathologie. En particulier, la polyarthrite rhumatoïde est une maladie dégénérative inflammatoire chronique, caractérisée par une atteinte articulaire souvent bilatérale et symétrique, évoluant par poussées vers la déformation et la destruction des articulations atteintes. Le traitement symptomatique fait appel à des anti-inflammatoires non-stéroïdiens et à des corticostéroïdes. De nos jours, le méthotrexate est le traitement de référence. Des traitements « de fond » de la maladie sont activement recherchés, notamment par identification des cytokines et des cellules impliquées dans le processus inflammatoire de la maladie. Ces traitements font appel à des inhibiteurs spécifiques des cytokines et des cellules impliquées. On peut citer notamment l'Etanercept® et l'Infliximab®, inhibiteurs du TNF (Tumor Necrosis Factor). D'autres traitements mettent en oeuvre des antagonistes d'interleukines tels que des inhibiteurs de l'IL-1 (Anakinra®), du récepteur de l'IL-6 (MrA®) et les anti-CD20 (Rituximab®). Ces composés réduisent l'inflammation, et ralentissent l'évolution de la maladie. 3050535 2 Néanmoins, une forte variation de réponse est observée entre les patients atteints de polyarthrite rhumatoïde, qui ne répondent pas de manière similaire à ces traitements. On estime notamment que jusqu'à 30 % des patients ne répondent pas du tout aux biothérapies listées ci-dessus. 5 Il a été montré que l'IL-17 joue un rôle majeur dans les maladies inflammatoires, les maladies auto-immunes, certaines infections et le cancer. Ainsi, cette cytokine est maintenant considérée comme une cible thérapeutique potentielle pour de nombreuses maladies (Miossec, Korn, and Kuchroo, 2009, NEJM). Les deux formes majoritaires de cette cytokine sont dénommées IL-17A et IL-17F. L'IL-17A induit la 10 production de nombreuses cytokines et chémokines, telles que l'IL-6, le G-CSF, l'IL-113, et l'IL-8. Dans la polyarthrite rhumatoïde, l'IL-17 est présente aux sites d'inflammation et agit en amplifiant les effets inflammatoires d'autres composés tels que le TNF, ce qui en fait un acteur important dans la physiologie de la maladie. Cependant, les taux circulants d'IL-17 dans le plasma des patients sont souvent très faibles, et une très grande 15 hétérogénéité des taux circulants d'IL-17 est observée entre les patients. Des inhibiteurs de l'IL-17A, notamment des anticorps, ont été proposés pour le traitement de maladies inflammatoires, et différents essais cliniques sont en cours (Miossec et Kolls, 2012). Les premiers résultats obtenus indiquent qu'il est difficile de prédire quelle sera la réponse des patients à ces traitements, car une très forte variation individuelle 20 existe. Chez certains patients, le rôle de l'IL-17 dans le phénomène inflammatoire est important, alors que chez d'autres patients celui-ci est très faible. Un effort majeur doit être maintenant porté à la pré-sélection des patients dont l'état inflammatoire est directement dépendant de l'IL-17, car ce sont eux qui seraient bénéficiaires de ce type de traitement. 25 W02015/186106 enseigne notamment des procédés in vitro mettant en oeuvre le niveau d'IL-17 fonctionnelle (IPDL) en tant que biomarqueur, pour déterminer les chances de réponse d'un patient atteint d'un état inflammatoire chronique à l'administration d'un anticorps anti-IL17. 30 Ainsi, il demeure un besoin d'identifier de nouveaux marqueurs de ces maladies auto-immunes et inflammatoires chroniques, et en particulier de la polyarthrite rhumatoïde. Il demeure également un besoin d'identifier de nouveaux procédés et outils 3050535 3 pour le diagnostic, pronostic et/ou traitement de ces maladies auto-immunes et inflammatoires chroniques. RESUME DE L'INVENTION 5 La présente invention décrit un biomarqueur de maladies auto-immunes ou inflammatoires chroniques, basé sur la détection dans un échantillon biologique d'un auto-anticorps anti-IL-17, lequel peut être déterminé soit au regard d'un niveau total, soit en complexe avec l'Interleukine-17. La présente invention concerne donc un procédé in vitro pour évaluer le 10 pronostic d'une maladie auto-immune ou inflammatoire chronique chez un individu, comprenant les étapes suivantes : a) déterminer (i) le niveau d'un auto-anticorps anti-IL-17 et/ou (ii) le niveau d'un complexe [IL-17/auto-anticorps anti-IL-17] dans un échantillon biologique dudit individu, et 15 b) comparer le niveau d'auto-anticorps et/ou de complexe déterminé à l'étape a) avec une valeur de référence, la dite comparaison étant indicative du pronostic d'une maladie auto-immune ou inflammatoire chronique chez le dit individu. Parmi ces maladies auto-immunes ou inflammatoires chroniques, la polyarthrite rhumatoïde (PR) est tout particulièrement considérée. 20 Les précédents procédés permettent aussi d'identifier des populations particulières d'individus, telles que des populations particulières d'individus atteints de polyarthrite rhumatoïde, pour lesquelles un principe actif inhibiteur de l'IL-17 est administrable. 25 La connaissance de ce nouveau biomarqueur permet notamment les applications diagnostiques et/ou pronostiques suivantes : (i) déterminer le risque de sévérité, en particulier de destruction osseuse, chez un individu affecté d'une maladie auto-immune ou inflammatoire chronique, et en 30 particulier d'une polyarthrite rhumatoïde ; 3050535 4 (ii) déterminer les chances de réponse d'un individu atteint d'une maladie auto-immune ou inflammatoire chronique, à un traitement comprenant l'administration d'un principe actif inhibiteur de l'IL-17, tel qu'un anticorps anti-IL17. (iii) déterminer l'efficacité d'un traitement ou d'une prévention d'une 5 destruction osseuse d'un individu atteint d'une maladie auto-immune ou inflammatoire chronique, ledit traitement ou la dite prévention consistant en l'administration d'un principe actif inhibiteur de l'IL-17, tel qu'un anticorps anti-IL-17. En particulier, la présente invention décrit un procédé in vitro de sélection 10 d'anticorps pour traiter (i) une maladie auto-immune ou inflammatoire chronique, et/ou (ii) une destruction osseuse associée à la dite maladie, comprenant les étapes suivantes : a) déterminer la présence (i) d'un auto-anticorps anti-IL-17 et/ou (ii) d'un complexe [IL-17/auto-anticorps anti-IL-17] dans un échantillon biologique d'un individu évalué par ledit procédé in vitro ou selon la revendication 1 ; 15 b) sélectionner un auto-anticorps anti-IL-17 ou une cellule productrice d'un auto-anticorps anti-IL-17 à partir d'un échantillon biologique du dit individu ; le dit auto-anticorps étant apte à traiter la dite maladie, et/ou la dite destruction osseuse. La présente invention concerne également un procédé in vitro pour distinguer 20 une polyarthrite rhumatoïde destructrice d'une polyarthrite rhumatoïde non destructrice chez un individu, comprenant les étapes suivantes : a) déterminer (i) le niveau d'un auto-anticorps anti-IL-17 et/ou (ii) le niveau d'un complexe [IL-17/auto-anticorps anti-IL-17] dans un échantillon biologique dudit individu, et 25 b) comparer le niveau d'auto-anticorps et/ou de complexe déterminé à l'étape a) avec une valeur de référence, la dite comparaison étant indicative d'une polyarthrite rhumatoïde destructrice ou non destructrice chez le dit individu. La présente invention concerne également un anticorps anti-IL-17 isolé pour le 30 traitement ou la prévention (i) d'une polyarthrite rhumatoïde destructrice et/ou (ii) d'une polyarthrite rhumatoïde chez un individu ne produisant pas d'auto-anticorps anti-IL-17, ou d'une destruction osseuse associée à l'un quelconque des groupes (i) ou (ii). 3050535 5 La présente invention concerne également l'utilisation d'un anticorps anti-IL17 isolé pour la préparation d'un médicament pour le traitement ou la prévention (i) d'une polyarthrite rhumatoïde destructrice et/ou (ii) d'une polyarthrite rhumatoïde chez un individu ne produisant pas des auto-anticorps anti-IL-17, ou d'une destruction osseuse 5 associée à l'un quelconque des groupes (i) ou (ii). La présente invention concerne également un anticorps anti-IL-17 humain isolé, obtenu à partir d'un échantillon biologique d'un individu atteint de polyarthrite rhumatoïde et produisant des auto-anticorps anti-IL-17. Le dit échantillon biologique peut comprendre, ou être constitué par, une 10 cellule productrice du dit anticorps anti-IL-17. LEGENDE DES FIGURES Figure 1 : Principe de détection d'auto-anticorps anti-IL-17 et de complexes IL-17/anticorps anti-IL-17. 15 Les autoanticorps anti-IL-17 sont détectés dans le plasma par un test ELISA de compétition (A). L'IL-17 et le plasma sont combinés pour promouvoir la fixation de l'IL17 et de l'anticorps anti-IL-17. L'anti-IL-17 et des anticorps non pertinents ont été utilisés respectivement comme contrôles positifs et négatifs. Un anticorps anti-IL17 de détection a été ensuite ajouté. Le mélange est ensuite transféré vers des plaques comprenant 20 l'anticorps de capture anti-IL-17 humaine. Les complexes [IL-17/auto-anticorps anti-IL-17] sont détectés dans le plasma par un test ELISA indirect (B). Dans une plaque 96 puits comprenant l'anticorps de capture anti-IL-17, du plasma pré-incubé avec du sérum de cheval est rajouté. Le complexe immun (CI) contrôle positif a été formé in vitro à partir de 500 ng de IL-17 et 5 1.1g/m1 25 d'anticorps humain anti-IL1-17 humaine. Un anticorps de chèvre anti-Fragment Fc d'IgG humaine (anti-IgG Fc humaine) conjugué à la peroxydase a été utilisé pour la révélation. Figure 2 : Détection de complexes IL-17/anticorps anti-IL-17 dans le plasma de patients souffrant de polyarthrite rhumatoïde destructrice et non- 30 destructrice, par rapport à des donneurs sains. 3050535 6 Une courbe standard à huit points est déterminée à partir de dilutions en série (2-fold) et testée avec le contrôle positif formé in vitro à partir de 500 ng de IL-17 et 5 1.1g/m1 d'anticorps humain anti-IL1-17 humaine (A). Les complexes immuns (CI) sont détectés dans le plasma de 30 donneurs sains 5 et de 60 patients atteints de polyarthrite rhumatoïde (PR) avec ou sans destruction osseuse. Pour chaque échantillon de plasma, une courbe standard de dilutions en série (2-fold) a été testée poiur déterminer les titres de complexes immuns (B). Le niveau moyen de complexes immuns [IL-17/auto-anticorps anti-IL-17] dans les groupes PR non destructeur vs. PR destructeur sont représentés (C). Le test de Mann- 10 Whitney montre une différence (p value) statistiquement significative (* REVENDICATIONS1. Procédé in vitro pour évaluer le pronostic d'une maladie auto-immune ou inflammatoire chronique chez un individu, comprenant les étapes suivantes : a) déterminer (i) le niveau d'un auto-anticorps anti-IL-17 et/ou (ii) le niveau d'un complexe [IL-17/auto-anticorps anti-IL-17] dans un échantillon biologique dudit individu, et b) comparer le niveau d'auto-anticorps et/ou de complexe déterminé à l'étape a) avec une valeur de référence, la dite comparaison étant indicative du pronostic d'une maladie auto-immune ou inflammatoire chronique chez le dit individu. 2. Procédé in vitro selon la revendication 1, dans lequel la maladie auto-immune ou inflammatoire chronique est choisie parmi : une polyarthrite rhumatoïde, un psoriasis, un rhumatisme psoriasique, une spondylarthrite ankylosante, une slérose en plaques, une maladie de Crohn, une vascularite, une maladie cardio-vasculaire associée, une myosite, une hépatite, une néphropathie inflammatoire et auto-immune, une dermatose à neutrophiles, une maladie de Verneuil et une uvéite. 3. Procédé in vitro selon l'une des revendications précédentes, dans lequel la maladie auto-immune ou inflammatoire chronique est une polyarthrite rhumatoïde (PR). 4. Procédé in vitro selon l'une des revendications précédentes, pour évaluer le pronostic d'une maladie auto-immune ou inflammatoire chronique chez un individu pour (i) déterminer le risque de destruction osseuse chez le dit individu affecté de la dite maladie auto-immune ou inflammatoire chronique; et/ou (ii) déterminer les chances de réponse du dit individu atteint de la dite maladie auto-immune ou inflammatoire chronique, à un traitement comprenant l'administration d'un principe actif inhibiteur de 1'IL-17; et/ou (iii) déterminer l'efficacité d'un traitement ou d'une prévention d'une destruction osseuse du dit individu atteint de la dite maladie auto-immune ou inflammatoire chronique, ledit traitement ou la dite prévention consistant en l'administration d'un principe actif inhibiteur de l'IL-17 ; dans lequel la comparaison à l'étape b) est indicative du dit risque de destruction osseuse, des dites chances de réponse au dit traitement, et/ou de l'efficacité du dit traitement ou de la dite prévention d'une destruction osseuse. 3050535 27 5. Procédé in vitro de sélection d'anticorps pour traiter (i) une maladie auto-immune ou inflammatoire chronique, et/ou (ii) une destruction osseuse associée à la dite maladie, comprenant les étapes suivantes : a) déterminer le niveau (i) d'un auto-anticorps anti-IL-17 et/ou (ii) d'un complexe [IL-17/auto-anticorps anti-IL-17] dans un échantillon biologique d'un individu évalué selon la revendication 1 ; b) sélectionner un auto-anticorps anti-IL-17 ou une cellule productrice d'un auto-anticorps anti-IL-17 à partir d'un échantillon biologique du dit individu ; le dit auto-anticorps étant apte à traiter la dite maladie, et/ou la dite destruction osseuse. 6. Procédé in vitro pour distinguer une polyarthrite rhumatoïde (PR) destructrice d'une PR non destructrice chez un individu, comprenant les étapes suivantes : a) déterminer (i) le niveau d'un auto-anticorps anti-IL-17 et/ou (ii) le niveau d'un complexe [IL-17/auto-anticorps anti-IL-17] dans un échantillon biologique dudit individu, et b) comparer le niveau d'auto-anticorps et/ou de complexe déterminé à l'étape a) avec une valeur de référence, la dite comparaison étant indicative d'une polyarthrite rhumatoïde (PR) destructrice ou non destructrice chez le dit individu. 7. Procédé in vitro selon l'une des revendications précédentes, dans lequel l'étape a) consiste à déterminer le niveau d'un auto-anticorps anti-IL-17 dans le dit échantillon biologique. 8. Procédé in vitro selon l'une des revendications précédentes, dans lequel l'étape a) consiste à déterminer le niveau d'un complexe [IL-17/auto-anticorps anti-IL-17] dans le dit échantillon biologique. 9. Procédé in vitro selon l'une des revendications précédentes, dans lequel l'échantillon biologique est choisi parmi : du sang total, du plasma, du sérum, du liquide synovial, du liquide céphalo-rachidien, du liquide pleural, et du liquide péritonéal. 10. Procédé in vitro selon l'une des revendications précédentes, dans lequel l'échantillon biologique est choisi parmi du sang total, du plasma, et du sérum. 11. Procédé in vitro selon l'une des revendications précédentes, dans lequel l'auto-anticorps anti-IL-17 est un auto-anticorps anti-IL-17A ; et le complexe [IL-17/autoanticorps anti-IL-17] est un complexe [IL-17A/auto-anticorps anti-IL-17A]. 3050535 28 12. Procédé in vitro selon l'une des revendications précédentes, dans lequel l'étape a) est mise en oeuvre sous la forme d'un test ELISA. 13. Procédé in vitro selon l'une des revendications précédentes, comprenant une étape de détermination, dans un échantillon biologique du dit individu, du niveau d'un polypeptide choisi parmi : les cytokines IL-17A, IL-17F, IL-25, IL-23, le facteur de transcription RORyt, et les récepteurs IL-17RA, IL-17RB, IL-17RC, les auto-anticorps dirigés contre IL-la, les auto-anticorps dirigés contre IL-8 et/ou les auto-anticorps dirigés contre l'ostéopontine. 14. Un anticorps anti-IL-17 isolé, pour le traitement ou la prévention (i) d'une polyarthrite rhumatoïde destructrice ou (ii) d'une polyarthrite rhumatoïde chez un individu ne produisant pas d'auto-anticorps anti-IL-17, ou d'une destruction osseuse associée à l'un quelconque des groupes (i) ou (ii). 15. Un anticorps anti-IL-17 humain isolé, obtenu à partir d'un échantillon biologique d'un individu atteint de polyarthrite rhumatoïde et produisant des auto-anticorps anti-IL-17.