Brevet FR3060394A1 — publié le 20180622

Combinaison d'anticorps anti-CD303 et anti-AMHRII La présente invention a pour objet une nouvelle combinaison d'anticorps, notamment pour la prévention ou le traitement de cancers urogénitaux, de préférence le cancer de l'ovaire. Le cancer de l'ovaire est la cause principale des cancers gynécologiques, et constitue la cinquième cause de mortalité par cancer chez la femme, dont les trois origines histologiques sont les suivantes : - l'épithélium de surface (tumeur épithéliale avec différents sous-types) qui représente 85-90 % des cancers ovariens, - les cordons sexuels / stroma (tumeur de la granulosa (3% des cancers ovariens totaux)), qui représentent environ 10 % des tumeurs ovariennes, et - les cellules germinales qui représentent 5 % des cancers ovariens. Il est généralement asymptomatique pendant les premiers stades, ce qui lui vaut le surnom de « silent killer » (La Marca A., Volpe A. The Anti-Mullerian hormone and ovarian cancer. Human Reproduction Update, Vol.13, No.3 pp. 265-273, 2007). D'après la classification FIGO (Fédération internationale de Gynécologie et d'Obstétrique), il existe 4 stades pour lesquels le taux de survie diminue fortement dès le stade 2: Stade I: Tumeur limitée aux ovaires (taux de survie à 5 ans: 90-70%), Stade II: Tumeur dans un ou deux ovaires avec extension pelvienne (taux de survie à 5 ans : 70-40%), Stade III: Tumeur dans un ou deux ovaires avec extension extra pelvienne (taux de survie à 5 ans : 20%), et Stade IV: Métastases à distance à l'exclusion des métastases péritonéales (taux de survie à 5 ans : Des anticorps monoclonaux ont également été récemment développés tel que le cetuximab, qui est dirigé contre le récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR, Ozols R. F. et al., Focus on epithelial ovarian cancer, Cancer Cell. 2004, Jan ; 5(1) : 19-24). D'autres immunothérapies sont actuellement à l'étude, telles que celles avec l'abagovomab dirigé contre le CA-125, le bevacizumab dirigé contre le facteur de croissance endothéliale vasculaire (VEGF-A), le farletuzumab, dirigé contre le récepteur 3060394 2 alpha folique (FRA), ou des anticorps humanisés mutés anti-AMHRII (W02011/141653). Des thérapies ciblées, par exemple avec olaparib, sont également testées. Il existe cependant toujours un besoin pour optimiser la thérapie du cancer de l'ovaire, notamment lorsque le cancer présente une invasion de cellules effectrices 5 susceptibles d'induire une tolérance du cancer par le système immunitaire, tout en identifiant une thérapie qui soit mieux tolérée, et qui présente moins d'effets secondaires. Les inventeurs ont maintenant découvert que, de façon surprenante, l'association d'un anticorps anti-CD303 et d'un anticorps anti-AMHRII, est particulièrement efficace 10 contre les tumeurs ovariennes. Notamment, la combinaison de ces deux anticorps peut présenter un effet synergique sur le site de la tumeur. La présente invention concerne ainsi une composition pharmaceutique comprenant, dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable : 15 a. au moins un anticorps anti-CD303; et b. au moins un anticorps anti-AMHRII. La présente invention se rapporte également à des produits contenant : a. au moins un anticorps anti-CD303; et b. au moins un anticorps anti-AMHRII, 20 comme produits de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps, pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des cancers urogénitaux. L'invention concerne encore : 25 au moins un anticorps anti-AMHRII pour son utilisation pour la prévention ou le traitement de cancers urogénitaux en combinaison avec au moins un anticorps antiCD303; et au moins un anticorps anti-CD303 pour son utilisation pour la prévention ou le traitement de cancers urogénitaux en combinaison avec au moins un anticorps anti- 30 AMHRII. L'invention concerne également une méthode de traitement de cancers urogénitaux, qui comprend l'administration à un patient d'au moins un anticorps antiAMHRII et d'au moins un anticorps anti-CD303. 35 3060394 3 Selon la présente invention, le terme « anticorps » fait référence aussi bien à une immunoglobuline, qu'aux fragments et dérivés de cette immunoglobuline. Les immunoglobulines sont bien connues de l'homme du métier et sont constituées d'un assemblage de deux dimères constitués chacun d'une chaîne lourde et d'une chaîne 5 légère. Le complexe multimérique est assemblé par la liaison d'une chaîne légère et d'une chaîne lourde par un pont disulfure entre deux cystéines, les deux chaînes lourdes étant elles-mêmes également reliées entre elles par deux ponts disulfures. Chacune des chaînes lourdes et des chaînes légères est constituée d'une région constante et d'une région variable. Plus précisément, chaque chaîne légère est constituée 10 d'une région variable (VL) et d'une région constante (CL). Chaque chaîne lourde est constituée d'une région variable (VHS et d'une région constante constituée de trois domaines constants CH,, CH2 et CH3. Les domaines CH2 et CH3 composent le domaine Fc. Les régions variables de la chaîne légère et de la chaîne lourde sont constituées de trois domaines déterminant la reconnaissance de l'antigène (régions CDR, i.e. Complementary 15 Determining Regions) entourées de quatre domaines charpentes (régions FR ou Framework). Les anticorps anti-CD303 a) et anti-AMHRII b) peuvent être monoclonaux ou polyclonaux. De préférence, ce sont des anticorps monoclonaux. Les anticorps peuvent être de plusieurs isotypes, en fonction de la nature de leur 20 région constante : les régions constantes y, a, il, e et Ô correspondent respectivement aux immunoglobulines IgG, IgA, IgM, IgE et IgD. Avantageusement, les anticorps anti-CD303 a) et anti-AMHRII b) sont d'isotype IgG. En effet, cet isotype montre une capacité à induire efficacement une activité ADCC (« Antibody-Dependent Cellular Cytotoxicity », soit Cytotoxicité cellulaire dépendante de l'anticorps) chez le plus grand nombre 25 d'individus (humains). Les régions constantes y comprennent plusieurs sous-types : y1, y2, y3, ces trois types de régions constantes présentant la particularité de fixer le complément humain, et y4, créant ainsi les sous-isotypes IgG1, IgG2, IgG3, et IgG4. Avantageusement, les anticorps anti-CD303 a) et anti-AMHRII b) sont d'isotype IgG1 ou IgG2, de préférence IgG1. 30 Dans un aspect particulier de l'invention, les anticorps anti-CD303 a) et anti- AMHRII b) sont choisis parmi les anticorps murins, les anticorps chimériques, les anticorps humanisés et les anticorps humains. De préférence, l'anticorps anti-CD303 a) est un anticorps chimérique, et plus 35 préférentiellement un anticorps chimérique choisi parmi un anticorps chimérique murin/humain ou un anticorps chimérique humain/macaque. 3060394 4 Alternativement, de préférence, l'anticorps anti-CD303 a) est un anticorps humanisé, en particulier un anticorps chimérique dont la région constante des chaînes lourdes et légères est d'origine humaine. Le terme « anticorps chimérique » fait référence à un anticorps isolé, dans lequel 5 la séquence de chaque chaîne légère et/ou de chaque chaîne lourde qui le constitue comprend ou consiste en une séquence hybride issue d'au moins deux animaux distincts. Notamment, un anticorps chimérique contient une région variable de chaîne légère et une région variable de chaîne lourde sauvages murines, fusionnées avec les régions constantes humaines de chaîne légère et de chaîne lourde respectivement. Un anticorps 10 chimérique peut être préparé en utilisant les techniques de recombinaison génétique bien connues de l'homme du métier. Le terme « anticorps humanisé » fait référence à un anticorps issu d'un animal autre que l'homme dans lequel les séquences des chaînes lourdes et des chaînes légères autres que les CDR ont été remplacées par des séquences correspondantes d'un ou 15 plusieurs anticorps d'origine humaine. L'anticorps est donc majoritairement constitué de séquences humaines, mais sa spécificité pour l'antigène conférée par les CDRs est issue d'une autre espèce. En outre, certains des résidus des segments du squelette (dénommés FR) peuvent être modifiés pour conserver l'affinité de liaison (Jones et al-1986 ; Verhoeyen et al- 1988 ; Riechmann et al-1988). Les anticorps humanisés selon 20 l'invention peuvent être préparés par des techniques connues de l'homme de l'art telles les technologies de « CDR grafting », de « resurfacing », de SuperHumanisation, de « Human string content », de « FR libraries », de « Guided selection », de « FR shuffling et de « Humaneering », comme résumé dans la revue de Almagro et al-2008. 25 Comme indiqué ci-dessus, l'anticorps anti-CD303 et/ou l'anticorps anti-AMHRII selon l'invention peut également être présents sous la forme d'un fragment d'anticorps anti-CD303 et/ou d'un fragment d'anticorps anti-AMHRII, respectivement. Le terme « fragment » fait en particulier référence aux fragments Fab, F(ab)'2 ou Fd. 30 Le terme « Fab » fait référence à un fragment d'anticorps de masse moléculaire d'environ 50.000 Da et possédant une activité de liaison à l'antigène. Le fragment Fab est formé de la chaîne légère en entier (VL+CL) et d'une partie de la chaîne lourde (VH+CH1). Il peut être obtenu notamment par traitement des IgG par une protéase, la papaïne. 35 Le terme « F(ab')2 » fait référence à un fragment d'environ 100.000 Da et possédant une activité de liaison à l'antigène. Il correspond à l'association par un pont 3060394 5 disulfure (région charnière) de deux fragments Fab décrits ci-dessus. Il peut être obtenu par le traitement des IgG par une protéase, la pepsine. Le terme « Fd » correspond à la partie de la chaîne lourde qui est incluse dans le fragment Fab. Le fragment Fd est ainsi formé des domaines VH et CH1. 5 Comme indiqué ci-dessus, l'anticorps anti-CD303 et/ou l'anticorps anti-AMHRII selon l'invention peut également être présent sous la forme d'un dérivé d'anticorps antiCD303 a) et/ou d'un dérivé d'anticorps anti-AMHRII b), respectivement. Le terme « dérivé » fait en particulier référence aux dérivés scFv, et aux 10 multimères de scFv, comme le diabody, triabody ou tetrabody. Le terme « scFv » (single chain Fv) est un polypeptide VH:VL synthétisé en utilisant les gènes codant pour les domaines VL et VH et une séquence linker. Un scFv inclut les CDR maintenus dans une conformation appropriée, par exemple en utilisant des techniques de recombinaison génétique. 15 Les scFv peuvent également servir de modules de base pour le développement de structures multimériques (dimérique : « diabody », trimérique : « triabody », tétramérique : « tetrabody »). Le terme « diabody » fait référence à un dimère de scFv. Ce dimère de fragment a la propriété de maintenir la double valence que l'anticorps parent possède. Le diabody est 20 bivalent, mono ou bispécifique selon qu'il fixe deux antigènes identiques ou différents. Le terme « triabody » fait référence à l'association trivalente de scFv. Un triabody peut ainsi fixer trois antigènes identiques ou différents. Le terme « tétrabody » fait référence à l'association tétravalente de scFv. Un tétrabody peut fixer quatre antigènes identiques ou différents. 25 Le terme « cancers urogénitaux » fait référence aux cancers de l'appareil urogénital dans les organes masculins ou féminins. Il s'agit par exemple du cancer de la prostate, du cancer du testicule, du cancer du pénis, du cancer de l'endomètre, du cancer de la vulve et du vagin, du cancer de l'utérus, du cancer du col de l'utérus, du cancer de 30 l'ovaire, du cancer du rein, du cancer de la vessie. De préférence, le cancer urogénital est le cancer de l'ovaire. La présente invention concerne aussi une composition pharmaceutique comprenant, dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable, au moins un anticorps 35 anti-CD303, et au moins un fragment ou un dérivé d'anticorps anti-AMHRII. 3060394 6 La présente invention se rapporte également à des produits contenant au moins un anticorps anti-CD303, et au moins un fragment ou un dérivé d'anticorps anti-AMHRII, comme produits de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps, pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des cancers urogénitaux. 5 La présente invention concerne aussi une composition pharmaceutique comprenant, dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable, au moins un fragment d'anticorps anti-CD303, et au moins un anticorps anti-AMHRII ou l'un de ses fragments ou l'un de ses dérivés. La présente invention se rapporte également à des produits contenant au moins 10 un fragment d'anticorps anti-CD303, et au moins un anticorps anti-AMHRII ou l'un de ses fragments ou l'un de ses dérivés, comme produits de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps, pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des cancers urogénitaux. La présente invention concerne aussi une composition pharmaceutique 15 comprenant, dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable, au moins un dérivé d'anticorps anti-CD303, et au moins un anticorps anti-AMHRII ou l'un de ses fragments ou l'un de ses dérivés. La présente invention se rapporte également à des produits contenant au moins un dérivé d'anticorps anti-CD303, et au moins un anticorps anti-AMHRII ou l'un de ses 20 fragments ou l'un de ses dérivés, comme produits de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps, pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des cancers urogénitaux. La présente invention concerne aussi une composition pharmaceutique 25 comprenant, dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable, au moins un anticorps anti-AMHRII, et au moins un fragment ou un dérivé d'anticorps anti-CD303. La présente invention se rapporte également à des produits contenant au moins un anticorps anti-AMHRII, et au moins un fragment ou un dérivé d'anticorps anti-CD303, comme produits de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans 30 le temps, pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des cancers urogénitaux. La présente invention concerne aussi une composition pharmaceutique comprenant, dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable, au moins un fragment d'anticorps anti-AMHRII, et au moins un anticorps anti-CD303 ou l'un de ses fragments ou l'un de ses dérivés. 35 La présente invention se rapporte également à des produits contenant au moins un fragment d'anticorps anti-AMHRII, et au moins un anticorps anti-CD303 ou l'un de ses 3060394 7 fragments ou l'un de ses dérivés, comme produits de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps, pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des cancers urogénitaux. La présente invention concerne aussi une composition pharmaceutique 5 comprenant, dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable, au moins un dérivé d'anticorps anti-AMHRII, et au moins un anticorps anti-CD303 ou l'un de ses fragments ou l'un de ses dérivés. La présente invention se rapporte également à des produits contenant au moins un dérivé d'anticorps anti-AMHRII, et au moins un anticorps anti-CD303 ou l'un de ses 10 fragments ou l'un de ses dérivés, comme produits de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps, pour son utilisation dans la prévention ou le traitement des cancers urogénitaux. La présente invention concerne ainsi une composition pharmaceutique 15 comprenant, dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable : a. au moins un anticorps anti-CD303; et b. au moins un anticorps anti-AMHRII. Par « véhicule pharmaceutiquement acceptable », on entend un milieu non toxique compatible avec un système biologique tel qu'une cellule, une culture cellulaire, un tissu 20 ou un organisme. L'invention se rapporte également à un produit contenant les deux agents actifs a) et b) susmentionnés, lesdits actifs étant combinés pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps, et dans la prévention ou le traitement des cancers 25 urogénitaux. Anticorps anti-CD303 L'anticorps anti-CD303 est un anticorps dirigé contre la protéine CD303. Cette protéine, également nommée BDCA-2, est exprimée de manière spécifique à la surface 30 des cellules dendritiques plasmacytoïdes, et est une protéine de type II appartenant aux lectines de type C. L'antigène CD303 humain (ou protéine CD303) est le membre C de la 4è" famille de domaine lectine de type C (CLEC4 ou « C-type lectin domain family 4, member C »). Il s'agit d'une glycoprotéine transmembranaire de type II de 213 acides aminés (accessible 35 dans Uniprot : Q8WTTO), comprenant un court domaine cytoplasmique sans motif de 3060394 8 signalisation évident (acides aminés 1-21), une région transmembranaire (acides aminés 22-44), et un domaine extracellulaire (acides aminés 45-213). Les cellules dendritiques plasmacytoïdes correspondent à une sous-population de cellules dendritiques, aussi appelée DC2. Les cellules dendritiques plasmacytoïdes sont 5 caractérisées par les marqueurs Lin- (CD3-, CD19-, CD20-, CD14-, CD56-), HLA-DR+, CD11c-, CD123+ et CD45RA+. Ces cellules ont aussi été caractérisées phénotypiquement : elles expriment les marqueurs CD4, CD303 et BDCA-4. Elles sont présentes dans les organes lymphoïdes et sont également en circulation dans le sang. Elles ont la capacité de sécréter de l'IFN de type I en présence d'une infection virale. Elles 10 peuvent favoriser la croissance des cellules tumorales et leur survie, en induisant notamment un environnement immunosuppressif dans l'environnement de la tumeur, par exemple en induisant la différenciation de lymphocytes T régulateurs (Treg). Ainsi, ces cellules présentent des propriétés immunosuppressives et/ou tolérogènes vis-à-vis de la tumeur. L'expression « propriétés immunosuppressives » se réfère aux propriétés des 15 cellules dendritiques de développer et maintenir l'immunosuppression dans l'environnement de la tumeur. L'expression « propriétés tolérogènes » signifie que les cellules dendritiques plasmacytoïdes ne vont pas induire de réponse immunitaire. L'utilisation d'anticorps anti-CD303 selon l'invention, par leur action cytotoxique, 20 permet avantageusement de supprimer les cellules dendritiques plasmacytoïdes infiltrant la tumeur. Les propriétés immunosuppressives et/ou tolérogènes vis-à-vis de la tumeur sont ainsi diminuées, avantageusement supprimées, ce qui améliore l'immunité antitumorale in situ. 25 De préférence, l'anticorps anti-CD303 selon l'invention est un anticorps monoclonal dirigé contre l'ectodomaine de l'antigène CD303 humain (SEQ ID NO :86). Avantageusement, l'anticorps anti-CD303 selon l'invention comprend des chaînes lourdes comprenant trois CDR-H (CDR de chaîne lourde selon la nomenclature IMGT) ayant les séquences d'acides aminés suivantes, ou des séquences ayant au moins 80% 30 d'identité avec les séquences suivantes, et des chaînes légères comprenant trois CDR-L (CDR de chaîne légère selon la nomenclature IMGT) ayant les séquences d'acides aminés suivantes, ou des séquences ayant au moins 80% d'identité avec les séquences suivantes : i) CDR1-H-famille 1: SEQ ID NO : 1, CDR2-H-famille 1: SEQ ID NO : 2, 35 CDR3-H-famille 1: SEQ ID NO : 3, CDR1-L-famille 1: SEQ ID NO : 4, CDR2-L-famille 1: SEQ ID NO : 5, CDR3-L-famille 1: SEQ ID NO : 6; ou 3060394 9 ii) CDR1-H-famille 2 : SEQ ID NO : 7, CDR2-H-famille 2: SEQ ID NO : 8, CDR3-H-famille 2: SEQ ID NO : 9, CDR1-L-famille 2: SEQ ID NO : 10, CDR2-L-famille 2: SEQ ID NO : 11, CDR3-L-famille 2: SEQ ID NO : 12. 5 L'expression « au moins 80% d'identité » signifie une identité de 80%, 81%, 82%, 83'3/0, 84`)/0, 85'3/0, 860/0, 870/0, 880/0, 890/0, 90`)/0, 91 %, 920/0, 93'3/0, 94`)/0, 95%, 96%, 97`)/0, 98%, 99% et 100%. Les pourcentages d'identité auxquels il est fait référence dans le cadre de la présente invention sont déterminés sur la base d'un alignement global des séquences à comparer, c'est-à-dire sur un alignement des séquences prises dans leur 10 intégralité sur toute la longueur en utilisant tout algorithme bien connu de l'homme du métier tel que l'algorithme de Needleman et Wunsch-1970. Cette comparaison de séquences peut être effectuée à l'aide de tout logiciel bien connu de l'homme du métier, par exemple le logiciel needle en utilisant le paramètre « Gap open » égal à 10.0, le paramètre « Gap extend » égal à 0.5 et une matrice « Blosum 62 ». Le logiciel needle est 15 par exemple disponible sur le site internet ebi.ac.uk world wide sous la dénomination « Align ». Lorsque le CDR ou la région variable d'un anticorps possède une séquence d'acides aminés ayant au moins 80%, de préférence au moins 85%, au moins 90%, au moins 91%, au moins 92%, au moins 93%, au moins 94%, au moins 95%, au moins 96%, 20 au moins 97%, au moins 98%, ou au moins 99% d'identité avec une séquence de référence, elle peut présenter des insertions, délétions ou substitutions par rapport à la séquence de référence. Lorsqu'il s'agit de substitutions, la substitution est de préférence réalisée par un acide aminé « équivalent », c'est-à-dire tout acide aminé dont la structure est proche de celle de l'acide aminé d'origine et est donc peu probable de modifier les 25 activités biologiques de l'anticorps, ou un acide aminé dont la structure diffère mais dont les propriétés intrinsèques sont connues pour être équivalentes à celles de l'acide aminé d'origine et ne modifiant par les activités biologiques de l'anticorps. Le Tableau 1 ci-dessous résume les séquences d'acides aminés des CDR-IMGT 30 des deux familles d'anticorps anti-CD303 pouvant être utilisées selon l'invention : Famille 1 Famille 2 CDR1-H GYTFTDYS (SEQ ID NO :1) GYTFTDXS (SEQ ID NO :7) CDR2-H ISXYYGDX (SEQ ID NO :2) INTETGXP (SEQ ID NO :8) CDR3-H ARNXXXYXXXY (SEQ ID XRNGYYVGYYAXDY (SEQ ID NO :3) NO :9) 3060394 10 CDR1-L QDIXNY (SEQ ID NO :4) SSVXY (SEQ ID NO :10) CDR2-L YTS (SEQ ID NO :5) STS (SEQ ID NO :11) CDR3-L QQGXTLPWT (SEQ ID NO :6) QQRRSYPXT (SEQ ID NO :12) Tableau 1. Séquences d'acides aminés des CDR des deux familles d'anticorps anti-CD303 pouvant être utilisées selon l'invention selon la nomenclature IMGT. Dans chaque séquence, X peut représenter n'importe quel acide aminé. 5 Avantageusement, l'anticorps anti-CD303 selon l'invention comprend trois CDR-H (CDR de chaîne lourde selon la nomenclature IMGT) ayant les séquences d'acides aminés suivantes, ou des séquences ayant au moins 80% d'identité avec les séquences suivantes, et trois CDR-L (CDR de chaîne légère selon la nomenclature IMGT) ayant les séquences d'acides aminés suivantes, ou des séquences ayant au moins 80% d'identité 10 avec les séquences suivantes : i) CDR1-H-122A2 : SEQ ID NO : 13, CDR2-H-122A2: SEQ ID NO : 14, CDR3-H-122A2: SEQ ID NO : 15, CDR1-L-122A2: SEQ ID NO : 16, CDR2- L-122A2: SEQ ID NO : 17, CDR3-L-122A2: SEQ ID NO : 18; ii) CDR1-H-102E9 : SEQ ID NO : 19, CDR2-H-102E9: SEQ ID NO : 20, 15 CDR3-H-102E9: SEQ ID NO : 21, CDR1-L-102E9: SEQ ID NO : 22, CDR2- L-102E9: SEQ ID NO : 23, CDR3-L-102E9: SEQ ID NO : 24; iii) CDR1-H-104C12 : SEQ ID NO : 25, CDR2-H-104C12: SEQ ID NO : 26, CDR3-H-104C12: SEQ ID NO : 27, CDR1-L-104C12: SEQ ID NO : 28, CDR2-L-104C12: SEQ ID NO : 29, CDR3-L-104C12: SEQ ID NO : 30; 20 iv) CDR1-H-114D11: SEQ ID NO : 31, CDR2-H-114D11 : SEQ ID NO : 32, CDR3-H-114D11: SEQ ID NO : 33, CDR1-L-114D11: SEQ ID NO : 34, CDR2-L-114D11: SEQ ID NO : 35, CDR3-L-114D11: SEQ ID NO : 36; ou v) CDR1-H-104E10: SEQ ID NO: 37, CDR2-H-104E10: SEQ ID NO: 38, CDR3-H-104E10: SEQ ID NO: 39, CDR1-L-104E10: SEQ ID NO: 40, 25 CDR2-L-104E10: SEQ ID NO: 41, CDR3-L-104E10: SEQ ID NO : 42. Avantageusement, l'anticorps anti-CD303 selon l'invention possède des chaînes lourdes et légères dont les régions variables ont les séquences d'acides aminés suivantes ou des séquences ayant au moins 80% d'identité avec les séquences suivantes : 30 i) Anticorps 122A2: chaîne lourde : SEQ ID NO : 43, chaîne légère : SEQ ID NO : 48, ii) Anticorps 102E9: chaîne lourde : SEQ ID NO : 44, chaîne légère : SEQ ID NO : 49, 3060394 11 iii) Anticorps 104C12: chaîne lourde : SEQ ID NO : 45, chaîne légère : SEQ ID NO : 50, iv) Anticorps 114D11: chaîne lourde : SEQ ID NO : 46, chaîne légère : SEQ ID NO : 51, ou 5 v) Anticorps 104E10: chaîne lourde : SEQ ID NO : 47, chaîne légère : SEQ ID NO : 52. Le Tableau 2 ci-dessous résume les séquences d'acides aminés des CDRs et des régions variables des chaînes lourdes et légères des anticorps anti-CD303 selon 10 l'invention : Anticorps 122A2 Chaîne lourde CDR1-H-IMGT-122A2 GYTFTDYS (SEQ ID NO : 13) CDR2-H-IMGT-122A2 ISTYYGDS (SEQ ID NO : 14) CDR3-H-IMGT-122A2 ARNGNFYVMDY (SEQ ID NO : 15) VH-122A2 QVQLQQSGAELVRPGVSVKISCKGSGYTFTDYSMHWVK QSHAKSLEW IGVISTYYGDSNYNQKFKGKATMTVDKSST TAYMELARLTSEDSAIYYCARNGNFYVMDYWGQGTSVTV SS (SEQ ID NO : 43) Chaîne légère CDR1-L-IMGT-122A2 QDISNY (SEQ ID NO : 16) CDR2-L-IMGT-122A2 YTS (SEQ ID NO : 17) CDR3-L-IMGT-122A2 QQGNTLPWT (SEQ ID NO : 18) VL-122A2 DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISNYLNWYQQKP DGTVKLLIYYTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTISNLDQ EDIATYFCQQGNTLPWTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO : 48) Anticorps 102E9 Chaîne lourde CDR1-H-IMGT-102E9 GYTFTDYS (SEQ ID NO : 19) CDR2-H-IMGT-102E9 INTETGEP (SEQ ID NO : 20) CDR3-H-IMGT-102E9 TRNGYYVGYYAMDY (SEQ ID NO : 21) VH-102E9 QIHLVQSGPDLKKPGETVKISCKASGYTFTDYSMHWVKQ APGKGLKWMGWINTETGEPTYADDFKGRFAFSLESSAST AFLQINNLKNEDTSTYFCTRNGYYVGYYAMDYWGQGTSV TVSS (SEQ ID NO : 44) 3060394 12 Chaîne légère CDR1-L-IMGT-102E9 SSVIY (SEQ ID NO : 22) CDR2-L-IMGT-102E9 STS (SEQ ID NO : 23) CDR3-L-IMGT-102E9 QQRRSYPFT (SEQ ID NO : 24) VL-102E9 QIVLTQSPAIMSASPGEKVTITCSASSSVIYIHWFQQKPGT SPKLWIYSTSYLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISRMEAED AATYYCQQRRSYPFTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO : 49) Anticorps 104C12 Chaîne lourde CDR1-H-IMGT-104C12 GYTFTDYS (SEQ ID NO : 25) CDR2-H-IMGT-104C12 ISPYYGDT (SEQ ID NO : 26) CDR3-H-IMGT-104C12 ARNDDYYRFAY (SEQ ID NO : 27) VH-104C12 QVQLQQSGAELVGPGVSVKISCKGSGYTFTDYSMHWVK QSHAKSLEW IGVISPYYGDTNYNQKFKGKATMTVDKSSS TAYMELASLTSEDSAIYFCARNDDYYRFAYWGQGTLVTV SA (SEQ ID NO : 45) Chaîne légère CDR1-L-IMGT-104C12 QDINNY (SEQ ID NO : 28) CDR2-L-IMGT-104C12 YTS (SEQ ID NO : 29) CDR3-L-IMGT-104C12 QQGKTLPWT (SEQ ID NO : 30) VL-104C12 DLQMTQTPSSLSASLGDRVTISCRASQDINNYLSWYQEK PDGTFKLLIYYTSRLHSGVPSRFSGSGSGTDYSLTVRNLE QEDIGTYFCQQGKTLPWTFGGGTKLEIR (SEQ ID NO : 50) Anticorps 114D11 Chaîne lourde CDR1-H-IMGT-114D11 GYTFTDSS (SEQ ID NO : 31) CDR2-H-IMGT-114D11 INTETGGP (SEQ ID NO : 32) CDR3-H-IMGT-114D11 ARNGYYVGYYALDY (SEQ ID NO : 33) VH-114D11 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYTFTDSSMHWVQQ APNKGLKWMGW INTETGGPTYADDFKGRFAFSLETSART AYLQINNLKNEDTATYFCARNGYYVGYYALDYWGQGTSV TVSS (SEQ ID NO : 46) Chaîne légère CDR1-L-IMGT-114D11 SSVFY (SEQ ID NO : 34) 3060394 13 CDR2-L-IMGT-114D11 STS (SEQ ID NO : 35) CDR3-L-IMGT-114D11 QQRRSYPYT (SEQ ID NO : 36) VL-114D11 QIVLTQSPAIMSASPGEKVTITCSASSSVFYMHWFQQKPG TSPKLWIYSTSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISRMEAE DAATYYCQQRRSYPYTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO : 51) Anticorps 104E10 Chaîne lourde CDR1-H-IMGT-104E10 GYTFTDYS (SEQ ID NO : 37) CDR2-H-IMGT-104E10 INTETGEP (SEQ ID NO : 38) CDR3-H-IMGT-104E10 ARNGYYVGYYAMDY (SEQ ID NO : 39) VH-104E10 QIQLVQSGPELKKPGETVKISCKASGYIFIDYSMHWVKQ APGKGLKVVMGWINTETGEPTYADDFKGRFAFSLETSATT AYLQINNFKNEDTATYFCARNGYYVGYYAMDYWGQGTS VTVSS (SEQ ID NO : 47) Chaîne légère CDR1-L-IMGT-104E10 SSVIY (SEQ ID NO : 40) CDR2-L- IMGT-104E10 STS (SEQ ID NO : 41) CDR3-L- IMGT-104E10 QQRRSYPYT (SEQ ID NO : 42) VL-104E10 QIVLIQSPAIMSASPGEKVTMTCSASSSVIYMHWFQQKP GTSPKLWIYSTSNLASGVPARFSGSGSGTSYSLTISRMEA EDAATYYCQQRRSYPYTFGGGTKLEIK (SEQ ID NO : 52) Tableau 2. Séquences d'acides aminés des CDR1, CDR2, et CDR3 des chaînes lourdes et légères selon la nomenclature IMGT, et des fragments VH et VL des anticorps anti-CD303 selon l'invention. 5 De préférence, l'anticorps anti-CD303 selon l'invention présente une région constante humaine, préférentiellement une région constante humaine d'isotype IgG1. Les séquences préférées de région constante des chaînes lourde ou légère humaines, SEQ ID NO : 53 et SEQ ID NO : 54, d'isotype IgG1, sont présentées dans le Tableau 3 ci-dessous. 10 Région constante de chaîne lourde humaine ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGAL TSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTK VDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTP EVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRV 3060394 14 préférée (IgG1) VSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVY TLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTP PVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKS LSLSPG (SEQ ID NO :53) Région RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNA constante de chaîne légère LQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQ humaine GLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID NO :54) préférée (IgG1) Tableau 3. Séquences préférées de région constante de chaînes lourde et légère humaines SEQ ID NO : 53 et SEQ ID NO : 54. Ainsi, l'anticorps anti-CD303 selon l'invention comprend avantageusement les 5 chaînes lourde et légère décrites dans le Tableau 4 ci-dessous. Anticorps Chaîne lourde Chaîne légère 122A2 Fusion SEQ ID NO : 43-SEQ ID Fusion SEQ ID NO : 48-SEQ ID NO:54 (SEQ ID NO:60) ( NO:53 (SEQ ID NO:55) 102E9 Fusion SEQ ID NO : 44-SEQ ID Fusion SEQ ID NO : 49-SEQ ID NO:54 (SEQ ID NO:61) ( NO:53 (SEQ ID NO:56) 104C12 Fusion SEQ ID NO : 45-SEQ ID Fusion SEQ ID NO : 50-SEQ ID NO:54 (SEQ ID NO:62) NO:53 (SEQ ID NO:57) 114D11 Fusion SEQ ID NO : 46-SEQ ID Fusion SEQ ID NO : 51-SEQ ID NO:54 (SEQ ID NO:63) NO:53 (SEQ ID NO:58) 104E10 Fusion SEQ ID NO : 47-SEQ ID Fusion SEQ ID NO : 52-SEQ ID NO:54 (SEQ ID NO:64) ( NO:53 (SEQ ID NO:59) Tableau 4. Séquences d'acides aminés des chaînes lourdes et légères des anticorps anti-CD303 selon l'invention. 10 Anticorps anti-AMHRII 3060394 15 L'anticorps anti-AMHRII est un anticorps dirigé contre le récepteur de l'hormone anti-mullérienne de type II. L'hormone anti-mullérienne humaine (AMH) est une glycoprotéine de 560 acides aminés, membre de la famille des TGF-[3. C'est une hormone émise par les cellules de 5 Sertoli du testicule foetal, qui provoque la dégénérescence du canal de Müller. Elle est exprimée chez l'adulte dans les cellules de Sertoli et de Leydig (testicule) et les cellules de la granulosa (ovaire). Elle joue un rôle dans l'activité de l'ovaire adulte de régulation de la folliculogenèse. La séquence de l'AMH humaine est accessible dans Uniprot sous la référence P03971. 10 Le récepteur de l'hormone anti-mullérienne de type II (AMHR-II) est un peptide de 573 acides aminés et possède une activité sérine-thréonine kinase. Il est impliqué dans la régression du canal de Müller associé au développement du système de reproduction de l'homme. Il s'atrophie chez l'homme où il ne forme que l'utricule prostatique et l'hydatide sessile, mais persiste chez la femme où il est à l'origine des trompes, de l'utérus et de la 15 plus grande partie du vagin. Ce récepteur est fréquemment exprimé sur les cellules épithéliales tumorales d'ovaire humaines. La séquence de l'AMHRII humaine est accessible dans Uniprot sous la référence Q16671. De préférence, l'anticorps anti-AMHRII selon l'invention dérive de l'anticorps 20 monoclonal murin 12G4, décrit notamment dans la demande W02008/053330. De préférence, l'anticorps anti-AMHRII selon l'invention est un anticorps humanisé et muté, ou des fragments ou dérivés de celui-ci, possédant une affinité au moins égale à celle de l'anticorps chimérique correspondant non muté et une spécificité vis-à-vis du récepteur AMHRII et ne déclenchant pas de réaction immune. 25 Dans un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne un anticorps monoclonal humanisé 12G4 muté tel que défini ci-dessus, possédant une chaîne légère et une chaîne lourde choisies parmi les suivantes: De préférence, l'anticorps anti-AMHRII selon l'invention présente : 30 a) une chaîne légère comprenant ou constituée d'une région variable dont la séquence en acides aminés est représentée par: - SEQ ID NO:65, ou - SEQ ID NO:66, ou 35 - SEQ ID NO:67, ou - SEQ ID NO:68, 3060394 16 et d'une région constante dont la séquence en acides aminés est représentée par SEQ ID NO:69, b) une chaîne lourde comprenant ou constituée d'une région variable dont la 5 séquence en acides aminés est représentée par: - SEQ ID N0:70, - SEQ ID NO:71, - SEQ ID N0:72, - SEQ ID N0:73, 10 - SEQ ID NO:74, et d'une région constante dont la séquence en acides aminés est représentée par SEQ ID NO: 75. Dans un mode de réalisation avantageux, l'anticorps anti-AMHRII selon l'invention 15 présente : a) une chaîne légère constituée de la séquence en acides aminés représentée par: - SEQ ID NO: 76, et 20 b) une chaîne lourde constituée de la séquence en acides aminés représentée par: - SEQ ID NO: 77, (anticorps 3C_23) ou, a) une chaîne légère constituée de la séquence en acides aminés représentée - SEQ ID NO: 78, et b) une chaîne lourde constituée de la séquence en acides aminés représentée 30 par: - SEQ ID NO: 79, (anticorps 6B_78) OU, 35 a) une chaîne légère constituée de la séquence en acides aminés représentée 25 par: par: 3060394 17 - SEQ ID NO: 80, et b) une chaîne lourde constituée de la séquence en acides aminés représentée par: - SEQ ID NO: 81, 5 (anticorps 3C 23K) OU, a) une chaîne légère constituée de la séquence en acides aminés représentée 10 par: - SEQ ID NO:82, et b) une chaîne lourde constituée de la séquence en acides aminés représentée par: - SEQ ID NO: 83, 15 (anticorps 4C_35) OU, a) une chaîne légère constituée de la séquence en acides aminés représentée 20 par: - SEQ ID NO: 84, et b) une chaîne lourde constituée de la séquence en acides aminés représentée par: - SEQ ID NO: 85, 25 (anticorps 5B_42). De préférence, l'anticorps anti-AMHRII selon l'invention comprend trois CDR-H (CDR de chaîne lourde selon la nomenclature IMGT) ayant les séquences d'acides aminés suivantes, ou des séquences ayant au moins 80% d'identité avec les séquences 30 suivantes, et trois CDR-L (CDR de chaîne légère selon la nomenclature IMGT) ayant les séquences d'acides aminés suivantes, ou des séquences ayant au moins 80% d'identité avec les séquences suivantes : CDR1-H 3C_23 : GYTFTSHY (SEQ ID NO :87), CDR2-H 3C_23: IYPGDDST (SEQ ID NO:88), CDR3-H 3C_23: TRGDRFAY (SEQ ID NO:89), CDR1-L 35 3C_23: SSVRY (SEQ ID NO:90), CDR2-L 3C_23: PTS et CDR3-L 3C_23: LQWSSYPWT (SEQ ID NO:91). 3060394 18 Ces 6 CDRs sont ceux présents dans l'anticorps 3C_23 et dans l'anticorps 3C 23K. De préférence, l'anticorps anti-AMHRII selon l'invention comprend : 5 a) une chaîne légère constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ ID NO: 76, et b) une chaîne lourde constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ ID NO: 77, (anticorps 3C_23) ou, 10 a) une chaîne légère constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ ID NO: 80, et b) une chaîne lourde constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ ID NO: 81, (anticorps 3C 23K). 15 Les anticorps anti-CD303 et anti-AMHRII selon l'invention peuvent, chacun indépendamment, être produits dans une cellule hôte, un animal non-humain transgénique ou une plante transgénique comprenant au moins un acide nucléique codant pour un tel anticorps, ses fragments ou dérivés, ou un vecteur contenant un tel acide nucléique. 20 De préférence, l'anticorps anti-CD303 et/ou l'anticorps anti-AMHRII selon l'invention sont produits par transgénèse, notamment dans un animal non-humain transgénique ou une plante transgénique. La cellule hôte peut être d'origine procaryote ou eucaryote, et peut notamment être choisie parmi les cellules bactériennes, les cellules d'insecte, de plantes, de levure ou de 25 mammifères. L'anticorps selon l'invention peut alors être produit en cultivant la cellule hôte dans des conditions appropriées. Une cellule hôte selon l'invention peut notamment être obtenue par transformation d'une lignée cellulaire par le(s) vecteur(s) d'expression des chaînes lourde et légère d'un anticorps selon l'invention, et séparation des différents clones cellulaires obtenus. La lignée cellulaire transformée est de préférence d'origine 30 eucaryote, et peut notamment être choisie parmi les cellules d'insecte, de plantes, de levure ou de mammifères. Des lignées cellulaires appropriées pour la production d'anticorps incluent notamment les lignées choisies parmi : SP2/0 ; YB2/0 ; IR983F ; le myélome humain Namalwa ; PERC6 ; les lignées CHO, notamment CHO-K-1, CHOLec10, CHO-Lec1, CHO-Lec13, CHO Pro-5, CHO dhfr-, ou lignée CHO délétée pour les 35 deux allèles codant pour le gène FUT8 et/ou le gène GMD ; Wil-2; Jurkat; Vero; Molt -4; COS-7; 293-HEK; BHK; K6H6; NSO; SP2/0-Ag 14, P3X63Ag8.653, lignée de cellule de 3060394 19 canard embryonnaire EB66® (Valneva) ; les lignées d'hépatome de rat H4-II-E (DSM ACC3129), et H4-II-Es (DSM ACC3130) (voir W02012/041768), NM-H9D8 (DSM ACC2806), NM-H9D8-E6 (DSM ACC 2807), et NM H9D8-E6Q12 (DSM ACC 2856) (voir W02008/028686). 5 Un animal non-humain transgénique selon l'invention peut être obtenu par injection directe du ou des gène(s) d'intérêt dans un oeuf fertilisé (Gordon et al-1980). Un animal non-humain transgénique peut également être obtenu par introduction du ou des gène(s) d'intérêt dans une cellule souche embryonnaire et préparation de l'animal par une méthode d'agrégation de chimère ou une méthode d'injection de chimère (voir 10 Manipulating the Mouse Embryo, A Laboratory Manual, Second edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press (1994); Gene Targeting, A Practical Approach, IRL Press at Oxford University Press (1993)). Un animal non-humain transgénique peut également être obtenu par une technique de clonage dans laquelle un noyau, dans lequel le ou les gène(s) d'intérêt a été introduit, est transplanté dans un oeuf énucléé (Ryan et al-1997; 15 Cibelli et al-1998, W000/26357). Un animal non humain transgénique produisant un anticorps d'intérêt peut être préparé par les méthodes ci-dessus. L'anticorps peut alors être accumulé dans l'animal transgénique et purifié, notamment à partir du lait ou des oeufs de l'animal. Pour la production d'anticorps dans le lait d'animaux non humains transgéniques, des procédés de préparation sont notamment décrits dans W090/04036, 20 W095/17085, WO01/26455, W02004/050847, W02005/033281, W02007/048077. Des procédés de purification de protéines d'intérêt à partir du lait sont également connus (voir WO01/26455, W02007/106078). Les animaux non humains transgéniques d'intérêt incluent notamment la souris, le lapin, le rat, la chèvre, les bovins (notamment la vache), et les volailles (notamment le poulet). 25 Une plante transgénique selon l'invention peut être choisie parmi toute plante permettant la production d'anticorps. De nombreux anticorps ont déjà été produits dans des plantes transgéniques et les technologies nécessaires à l'obtention d'une plante transgénique exprimant un anticorps d'intérêt et à la récupération de l'anticorps sont bien connues de l'homme du métier (voir Stoger et al-2002, Fisher et al-2003, Ma et al-2003, 30 Schillberg et al-2005). Il est également possible d'influencer la glycosylation obtenue dans les plantes pour obtenir une glycosylation proche de celle des anticorps humains naturels (sans xylose), mais avec en outre une faible fucosylation, par exemple à l'aide de petits ARNs interférents (Forthal et al-2010). 35 L'anticorps anti-CD303 et l'anticorps anti-AMHRII sont présents, selon l'invention, soit dans une composition pharmaceutique, soit comme produits de combinaison. 3060394 20 Ils peuvent donc être combinés avec des excipients pharmaceutiquement acceptables, et éventuellement des matrices à libération prolongée, comme des polymères biodégradables. 5 La composition pharmaceutique ou le produit de combinaison peut être administré par voie orale, sublinguale, sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse, intra-artérielle, intrathécale, intra-oculaire, intra-cérébrale, transdermique, pulmonaire, locale ou rectale. Les anticorps peuvent alors être administrés sous forme unitaire d'administration, en mélange avec des supports pharmaceutiques classiques. Des formes unitaires 10 d'administration comprennent les formes par voie orale telles que les comprimés, les gélules, les poudres, les granules et les solutions ou suspensions orales, les formes d'administration sublinguale et buccale, les aérosols, les implants sous-cutanés, transdermique, topique, intrapéritonéale, intramusculaire, intraveineuse, sous-cutanée, intrathécale, les formes d'administration par voie intranasale et les formes d'administration 15 rectale. De préférence, la composition pharmaceutique ou le produit de combinaison contient un véhicule pharmaceutiquement acceptable pour une formulation susceptible d'être injectée. Il peut s'agir en particulier de formules isotoniques, stériles, de solutions salines, ou de compositions lyophilisées, qui, lors de l'addition d'eau stérilisée ou de 20 sérum physiologique selon les cas, permettent la constitution de solutés injectables. Les formes pharmaceutiques appropriées pour une utilisation injectable comprennent des solutions aqueuses stériles ou des dispersions, des formulations huileuses, et des poudres stériles pour la préparation extemporanée de solutions injectables stériles ou de dispersions. Dans tous les cas, la forme doit être stérile et doit 25 être fluide dans la mesure où elle doit être injectée par seringue. Elle doit être stable dans les conditions de fabrication et de stockage et doit être préservée contre l'action contaminante de micro-organismes, comme les bactéries et les champignons. Les dispersions selon l'invention peuvent être préparées dans du glycérol, des polyéthylèneglycols liquides ou leurs mélanges, ou dans des huiles. Dans des conditions 30 normales de stockage et d'utilisation, ces préparations contiennent un conservateur pour empêcher la croissance des micro-organismes. Le véhicule pharmaceutiquement acceptable peut être un solvant ou milieu de dispersion. La fluidité convenable peut être maintenue, par exemple, par l'utilisation d'un tensioactif. La prévention de l'action de micro-organismes peut être provoquée par divers 35 agents antibactériens et antifongiques. Dans de nombreux cas, il sera préférable d'inclure 3060394 21 des agents isotoniques. L'absorption prolongée des compositions injectables peut être provoquée par l'utilisation dans les compositions d'agents retardant l'absorption. Les solutions injectables stériles sont préparées en incorporant les substances actives en quantité requise dans le solvant approprié avec plusieurs des autres 5 ingrédients énumérés ci-dessus, le cas échéant, suivie d'une stérilisation par filtration. En règle générale, les dispersions sont préparées en incorporant les divers ingrédients actifs stérilisés dans un véhicule stérile qui contient le milieu de dispersion basique et les autres ingrédients requis parmi ceux énumérés ci-dessus. Dans le cas de poudres stériles pour la préparation de solutions injectables stériles, les procédés de préparation préférés sont 10 le séchage sous vide et la lyophilisation. Lors de la formulation, les solutions seront administrées d'une manière compatible avec la formulation posologique et en une quantité thérapeutiquement efficace. Les formulations sont facilement administrées dans une variété de formes galéniques, telles que les solutions injectables décrites ci-dessus, mais les capsules de libération de médicament et similaires peuvent également être 15 utilisés. Pour l'administration parentérale dans une solution aqueuse par exemple, la solution doit être convenablement tamponnée et le diluant liquide rendu isotonique avec suffisamment de solution saline ou de glucose. Ces solutions aqueuses particulières conviennent particulièrement pour une administration intraveineuse, intramusculaire, sous-cutanée et intrapéritonéale. À cet égard, les milieux aqueux stériles qui peuvent être 20 utilisés sont connus de l'homme de l'art. Le niveau de dose thérapeutiquement efficace spécifique pour un patient particulier dépendra d'une variété de facteurs, y compris le trouble qui est traité et la gravité de la maladie, l'activité du composé spécifique employé, la composition spécifique utilisée, l'âge, le poids corporel, la santé générale, le sexe et le régime alimentaire du 25 patient, le moment de l'administration, la voie d'administration, le taux d'excrétion du composé spécifique utilisé, la durée du traitement, ou encore les médicaments utilisés en parallèle. L'invention est maintenant illustrée avec les exemples suivants. EXEMPLES : Exemple 1 : Impact de l'élimination des pDC sur les activités ADCC et phagocytose d'anticorps anti-AMHRII 1.1- Principe de l'étude 30 35 3060394 22 Les pDC sont responsables de la différenciation des T régulateurs (Moseman EA, 2004 ; Martin-Gayo E, 2010) entre autre par l'interaction ICOS/ICOSL, (ho, T., 2007 ; Faget, J. 2012 ; Faget, J. 2013). Les T régulateurs ainsi différenciés exercent des mécanismes d'immunosuppression sur les fonctions des autres cellules du système immunitaire, 5 notamment les cellules NK, via le contact cellule/cellule mais également via la sécrétion de cytokines immuno-modulatrice comme IL-10, IL-35 et TGF-3 (Liu, C 2016). Par effet cascade, il est ainsi possible d'étudier l'impact de l'élimination des pDC sur l'activité d'un agent anti-cancéreux spécifique d'une tumeur impliquant une activation des pDC in situ. Notamment, l'effet protecteur des anticorps anti-CD303 ciblant les pDC peut 10 être démontré par l'étude corrélative de la diminution ou élimination des cytokines IL-10 et TGF-I3 dans l'environnement tumoral et son impact sur les fonctions effectrices d'un agent anti-cancéreux administré, spécifique de la tumeur (anticorps anti-AMHRII). En effet, selon ce modèle, les anticorps anti-CD303 déplétant les pDC entraînent une limitation des effets immunosuppresseurs des T régulateurs et ainsi une limitation de leur sécrétion d'IL- 15 10 et TGF-[3. Cette limitation de sécrétion d'IL-10 et TGF-3 est corrélée à une meilleure ADCC des cellules NK, validant l'effet stimulateur indirect des anticorps anti-CD303 sur l'action anti-cancéreuse des anticorps anti-AMHRII. 1.2- Effet de l'IL-10 et TGF-3 sur l'activité ADCC de l'anti-AMHRII 20 Des cellules COV434 (35000 cellules/puits) exprimant AMHRII sont incubées dans une plaque 96 puits à fond plat avec des cellules NK et des concentrations croissantes d'anticorps anti-AMHRII, en présence ou non d'IL-10 (5 et 50 ng/ml), de TGF-3 (5 et 50 ng/ml) ou d'IL-10 + TGF-3 (5 et 50 ng/ml pour chacune des cytokines) pendant 16 heures à 37°C. 25 Après incubation, le surnageant est collecté. La lyse des cellules cibles induite par les anticorps anti-AMHRII est mesurée de façon chromogénique en quantifiant l'enzyme intracellulaire lactate déshydrogénase (LDH) relarguée dans le surnageant par les cellules cibles lysées (Roche Diagnostics - Cytotoxicity Detection Kit LDH). 30 Le pourcentage de lyse est calculé selon la formule suivante : % lyse = [(ER - SR) / (100 - SR)] - [(NC - SR) / (100 - SR)] Où ER et SR représentent respectivement les relargages expérimental (ER) et spontané (SR) de LDH, et NC représente la cytotoxicité naturelle des cellules NK. Les résultats (% lyse) sont exprimés en fonction du facteur de dilution de l'anticorps. Pour 35 chaque anticorps, la valeur d'« activité 50% » correspond au facteur de dilution de 3060394 23 l'anticorps nécessaire pour induire 50% de la valeur plateau obtenue pour cet anticorps. Cette valeur a été calculée avec le logiciel PRISM. Conclusion : Par effet cascade, la comparaison du pourcentage de lyse observable en 5 l'absence de cytokines l'IL-10 et/ou TGF-I3 avec le pourcentage de lyse observable en présence de ces mêmes cytokines, permet d'évaluer l'impact de la déplétion des pDC présents sur le site tumoral. Il peut ainsi être démontré que les anticorps anti-CD303 permettent de potentialiser indirectement l'effet des anticorps anti-cancéreux anti-AMHRII. 10 1.3- Effet de l'IL-10 et TGF-13 sur la phagocytose induite par l'anti-AMHRII Les monocytes sont différenciés en macrophages CD16+ (M2 like) pendant 2 jours en RPM I 1640 + 10 % SVF + M-CSF 50 ng/ml pendant 48h. Les cellules SKBR3 et macrophages sont marqués avec PKH-67 (fluorescence verte) et PKH-26 (fluorescence rouge), respectivement. 15 Les cellules SKBR3 sont opsonisées avec 10 pg/m1 de l'anticorps AMHRII ou avec un anticorps irrelevant puis incubées avec les macrophages (1.105 de chaque cellules/puits) en absence ou en présence de différentes concentrations d'IL-10 (5 et 50 ng/ml) seule, de TGF-F3 (5 et 50 ng/ml) seul et d'IL-10 + TGF-F3 (5 et 50 ng/ml). Après 3h d'incubation à 37°C, les cellules sont plaées sur une cellule de comptage 20 (Mallassez) et observées avec un microscope à fluorescence. Le pourcentage de phagocytose est évalué en comptant le nombre de macrophages (au moins 100 macrophages) contenant des cellules COV434. Conclusion : Par effet cascade, la comparaison du pourcentage de phagocytose 25 observable en l'absence de cytokines l'IL-10 et/ou TGF-I3 avec le pourcentage de lyse observable en présence de ces mêmes cytokines, permet d'évaluer l'impact de la déplétion des pDC présents sur le site tumoral. Il peut ainsi être démontré que les anticorps anti-CD303 permettent de potentialiser indirectement l'effet des anticorps anticancéreux anti-AMHRII. 30 Exemple 2: Effet d'un anticorps anti-CD303 sur l'activation des cellules T régulatrices (Trea) 2.1- Rôle de l'anti-CD303 sur le phénotype et l'expansion des Treg en PBMC 3060394 24 Les cellules mononucléées (PBMC) sont isolées à partir d'un tube de sang prélevé sur anti-coagulant. Les cellules Treg sont identifiées et phénotypiquement caractérisées par cytométrie en flux sur la base de 3 marqueurs : CD4, CD25 et Fox-P3. Différentes quantités de l'anticorps anti-CD303 (de 1 ng à 10 pg/m1) sont ajoutées aux 5 PBMC en présence d'IL-2 (500 U/ml). Le nombre de Treg et leur phénotype est suivi au cours du temps (1 à 4 jours). Dans les mêmes conditions, des billes coatées avec anti-CD3 / anti-CD28 pour stimuler la prolifération T sont ajoutées dans un ratio Treg / billes de 4 / 1 pour vérifier l'activation des Treg. 10 Conclusion : Il peut ainsi être démontré que les anticorps anti-CD303, en l'absence de pDC, n'ont pas d'impact sur l'expansion et le phénotype immunosuppresseur des T régulateurs. 15 2.2- Rôle de l'anti-CD303 sur le phénotype et l'expansion de Treg purifiés en présence de pDC Les cellules Treg (CD4+, CD25±) sont purifiées à partir de PBMC grâce à un procédé en 2 étapes : déplétion des cellules CD4 négatives (cellules positives pour les marqueurs CD8, CD14, CD15, CD16, CD19, CD36, CD56, CD123, TCRy/ô, et CD235a) puis sélection 20 positive des cellules CD25±. Des pDC purifiées ou des lignées pDC (e.g. obtenues selon le procédé décrit dans Maeva CAL-1) sont ajoutées dans un ratio Treg / pDC de 100, 10 et 1. Différentes quantités de l'anticorps anti-CD303 (de 1 ng à 10 pg/m1) sont ajoutées au mélange Treg / pDC en présence d'IL-2 (500 U/ml). Le nombre de Treg et leur phénotype est suivi au cours du 25 temps (1 à 4 jours). Dans les mêmes conditions, des billes coatées avec anti-CD3 / anti-CD28 pour stimuler la prolifération T sont ajoutées dans un ratio Treg / billes de 4 /1 pour vérifier l'activation des Treg. Un témoin négatif en absence de pDC est établi, de façon à vérifier l'impact (attendu 30 neutre) de l'anti-CD303 directement sur les Treg. Conclusion : L'observation sur plusieurs jours de l'expansion et de la différenciation des Treg purifiés en présence de pDC, après administration d'anticorps anti-CD303 peut permettre de montrer que l'administration d'anti-CD303 est efficace pour diminuer ou 35 supprimer les propriétés immunosuppressives des pDC. 3060394 25 Exemple 3 : Déplétion des pDCs humaines via un anticorps anti-CD303 in vivo dans le traitement du cancer de l'ovaire 3.1- Génération d'un modèle d'étude reproductif d'une situation pathologique chez 5 l'homme Afin d'étudier l'effet d'un anticorps anti-CD303 dans le traitement du cancer de l'ovaire, un modèle de souris humanisée 'humanized tumor mouse model' (HTM) peut être utilisé. Il est caractérisé par le développement d'un système immunitaire mature humain et la croissance de cellules de cancers de l'ovaire humaines qui ont été au préalable co- 10 transplantées avec les cellules souches hématopoïétiques humaines. Ce modèle permet avantageusement de réunir plusieurs éléments pertinents pour la reproductibilité des conditions in vivo: présence de pDCs humaines qui seules expriment à leur surface la cible CD303, présence d'infiltration de cellules Treg humaines, présence de cellules tumorales humaines exprimant à leur surface AMHRII, molécule ciblée par un 15 anti-AMHRII et un hôte murin immunocompétent (cellules effectrices de type NK pour l'activité ADCC). Brièvement, des souris NOD-scid IL2Rynull (NSG) peuvent être obtenues, par exemple auprès des Laboratoires Jackson, puis hébergées dans un établissement spécialisé sans pathogène. Les nouveau-nés seront irradiés (1 Gy) pendant leurs 48 premières heures de 20 vie et 3 heures plus tard transplantées par injection intra-hépatique avec 2,5x105 cellules CD34+ humaines isolées à partir de sang du cordon ombilical (CB) en présence de cellules tumorales 3x106 Cov434-AMHRII-Luc (exprimant la luciférase pour un suivi en bioluminescence). 25 3.2- Méthode pouvant être utilisée pour tester l'activité de l'anticorps anti-CD303 Dès que la tumeur est visible par bioluminescence (IVIS), les souris HTM sont traitées avec 20 mg/kg d'anticorps anti-AMHRII par voie péritonéale toutes les semaines et avec l'anticorps anti-CD303 à la dose 30mg/kg tous les 3 jours par voie intraveineuse. Le suivi de l'efficacité du traitement est réalisé en bioluminescence, la survie des animaux 30 ainsi que la survie en absence de tumeurs sont monitorées. Des prélèvements sanguins sont réalisés au cours de l'étude afin de s'assurer de l'efficacité de l'anticorps anti-CD303 sur la déplétion des pDCs dans ce contexte tumoral. Les différentes conditions testées sont ainsi avantageusement les suivantes (10 animaux par groupe) : 35 1. HTM + anti-AMHRII 3060394 26 2. HTM + anti-CD303 3. HTM + anti- AMHRI I + anti-CD303 5 4. HTM + isotype Contrôle Conclusion : Le modèle murin HTM peut être avantageusement utilisé pour évaluer l'effet indirect de 10 l'administration d'un anticorps anti-CD303 sur l'effet de l'agent anti-tumeur d'ovaire, l'anticorps anti-AMHRII, dans des conditions reproduisant une situation physiologique in vivo, en comparant notamment les résultats obtenus en condition 3 ci-dessus, avec d'une part ceux obtenus en condition 1, et d'autre part ceux obtenus en condition 2. Ce modèle est ainsi utile pour pouvoir évaluer le bénéfice, avantageusement l'effet 15 synergique, d'administrer un anticorps anti-CD303 en combinaison à l'administration d'un anticorps anti-AMHRII dans une tumeur de l'ovaire. 20 REVENDICATIONS1. Composition pharmaceutique comprenant, dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable : a. au moins un anticorps anti-CD303; et b. au moins un anticorps anti-AMHRII. 2. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, dans lesquels les anticorps a) et b) sont choisis parmi les anticorps murins, les anticorps chimériques, les anticorps humanisés et les anticorps humains. 3. Composition pharmaceutique selon la revendication 1 ou 2, dans lesquels l'anticorps anti-CD303 est un anticorps monoclonal dirigé contre l'ectodomaine de l'antigène CD303 humain. 4. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, 2 ou 3, dans lequel l'anticorps anti-CD303 comprend les CDRs suivants : CDR1-H-IMGT-122A2 GYTFTDYS (SEQ ID NO :13) CDR2-H-IMGT-122A2 ISTYYGDS (SEQ ID NO :14) CDR3-H-IMGT-122A2 ARNGNFYVMDY (SEQ ID NO :15) CDR1-L-IMGT-122A2 QDISNY (SEQ ID NO :16) CDR2-L-IMGT-122A2 YTS (SEQ ID NO :17) CDR3-L-IMGT-122A2 QQGNTLPWT (SEQ ID NO :18) ou bien CDR1-H-IMGT-102E9 GYTFTDYS (SEQ ID NO :19) CDR2-H-IMGT-102E9 INTETGEP (SEQ ID NO : 20) CDR3-H-IMGT-102E9 TRNGYYVGYYAMDY (SEQ ID NO : 21) CDRI-L-IMGT-102E9 SSVIY (SEQ ID NO : 22) CDR2-L-IMGT-102E9 STS (SEQ ID NO : 23) CDR3-L-IMGT-102E9 QQRRSYPFT (SEQ ID NO : 24) ou bien CDRI-H-IMGT-104C12 GYTFTDYS (SEQ ID NO : 25) CDR2-H-IMGT-104C12 ISPYYGDT (SEQ ID NO : 26) CDR3-H-IMGT-104C12 ARNDDYYRFAY (SEQ ID NO : 27) 20 3060394 2 CDRI-L-IMGT-104C12 QDINNY (SEQ ID NO : 28) CDR2-L-IMGT-104C12 YTS (SEQ ID NO : 29) CDR3-L-IMGT-104C12 QQGKTLPWT (SEQ ID NO : 30) ou bien CDR1-H-IMGT-114D11 GYTFTDSS (SEQ ID NO : 31) CDR2-H-IMGT-114D11 INTETGGP (SEQ ID NO : 32) CDR3-H-IMGT-114D11 ARNGYYVGYYALDY (SEQ ID NO : 33) CDRI-L-IMGT-114D11 SSVFY (SEQ ID NO : 34) CDR2-L-IMGT-114D11 STS (SEQ ID NO : 35) CDR3-L-IMGT-114D11 QQRRSYPYT (SEQ ID NO : 36) 5 ou bien CDRI-H-IMGT-104E10 GYTFTDYS (SEQ ID NO : 37) CDR2-H-IMGT-104E10 INTETGEP (SEQ ID NO : 38) CDR3-H-IMGT-104E10 ARNGYYVGYYAMDY (SEQ ID NO : 39) CDRI-L-IMGT-104E10 SSVIY (SEQ ID NO : 40) CDR2-L-IMGT-104E10 STS (SEQ ID NO : 41) CDR3-L-IMGT-104E10 QQRRSYPYT (SEQ ID NO : 42) 5. Composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1 à 4, dans lequel l'anticorps anti-AMRHII comprend: 10 a) une chaîne légère comprenant ou constituée d'une région variable dont la séquence en acides aminés est représentée par: - SEQ ID NO:65 , ou - SEQ ID NO:66, ou 15 - SEQ ID NO:67, ou - SEQ ID NO:68, et d'une région constante dont la séquence en acides aminés est représentée par SEQ ID NO:69, b) une chaîne lourde comprenant ou constituée d'une région variable dont la séquence en acides aminés est représentée par: - SEQ ID NO:70, - SEQ ID NO:71, - SEQ ID NO:72, 3060394 3 - SEQ ID NO:73, - SEQ ID NO:74, et d'une région constante dont la séquence en acides aminés est représentée par SEQ ID NO: 75. 5 6. Composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1 à 4, dans lequel l'anticorps anti-AMRHII comprend: a) une chaîne légère constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ 10 ID NO: 76, et b) une chaîne lourde constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ ID NO: 77, ou, a) une chaîne légère constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ 15 ID NO: 78, et b) une chaîne lourde constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ ID NO: 79, ou, a) une chaîne légère constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ 20 ID NO: 80, et b) une chaîne lourde constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ ID NO: 81, ou, a) une chaîne légère constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ ID NO:82, et b) une chaîne lourde constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ ID NO: 83, ou, a) une chaîne légère constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ ID NO: 84, et b) une chaîne lourde constituée de la séquence en acides aminés représentée par SEQ ID NO: 85. 7. Composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1 à 4, dans lequel l'anticorps anti-AMRHII comprend trois CDR de chaîne lourde ayant les séquences d'acides aminés suivantes, ou des séquences ayant au moins 80% 3060394 4 d'identité avec les séquences suivantes, et trois CDR de chaîne légère ayant les séquences d'acides aminés suivantes, ou des séquences ayant au moins 80% d'identité avec les séquences suivantes : - CDR1-H 3C_23 : GYTFTSHY (SEQ ID NO :87), 5 CDR2-H 3C_23: IYPGDDST (SEQ ID NO:88), CDR3-H 3C_23: TRGDRFAY (SEQ ID NO:89), CDR1-L 3C_23: SSVRY (SEQ ID NO:90), CDR2-L 3C 23: PTS et CDR3-L 3C_23: LQWSSYPWT (SEQ ID NO:91). 10 8. Composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1 à 7, dans lequel l'anticorps anti-CD303 et/ou l'anticorps anti-AMHRII est choisi parmi les Fab, F(ab)'2, Fd, scFv et les multimères de scFv. 15 9. Composition pharmaceutique selon l'une des revendications 1 à 8, pour son utilisation dans la prévention ou le traitement de cancers urogénitaux. 10. Composition pharmaceutique pour son utilisation selon la revendication 9, dans lequel le cancer urogénital est le cancer de l'ovaire. 20