Brevet FR3036962A1 — publié le 20161209

Composition cosmétique à base de Centella Asiatica La présente invention a pour objet une composition cosmétique à base de cellules de plantes ou d'extraits de cellules. De nombreuses compositions cosmétiques ont déjà été proposées pour agir sur la peau, en particulier pour assurer une action énergisante au niveau de la peau. Même si ces compositions avaient une certaine activité, on a remarqué qu'en utilisant des cellules de plantes particulières, il était possible d'obtenir une excellente activité cosmétique, en particulier énergisante pour la peau. L'invention a pour objet de manière spécifique une composition cosmétique contenant au moins (a) des cellules de Centella Asiatica ou un broyat de telles cellules, (b) un extrait de Saussurea involucrata, et (c) un support pour application cosmétique. La composition suivant l'invention présente avantageusement une ou plusieurs des caractéristiques suivantes, de préférence une combinaison de telles caractéristiques : - la composition contient au moins (a) des cellules dédifférenciées et élicitées de Centella Asiatica, de préférence sous forme de broyat, et (b) un extrait de Saussurea involucrata. - la composition contient au moins (a) un broyat de cellules dédifférenciées et élicitées de Centella Asiatica, et (b) des cellules dédifférenciées et élicitées de Saussurea involucrata sous forme d'un broyat de telles cellules. - la composition contient en outre un extrait de cellules choisies parmi la famille constituée de Araliaceae et Apiaceae, ledit extrait étant cosmétiquement acceptable. 3036962 2 - la composition contient également un extrait de cellules de plantes du genre Panax de la famille des araliaceae et/ou du genre Angelica ou Angelina de la famille des Apiaceae. - la composition contient un extrait de plante choisie parmi Panax Pseudoginseng, 5 Panax ginseng, Panax notoginseng, Angelica ou Angelina Sinensis, et un mélange de tels extraits. - la composition contient une quantité efficace de cellules de Centella Asiatica ou de broyat de telles cellules, et d'extrait de Saussurea involucrata, pour son utilisation pour assurer une activité cosmétique énergisante pour la peau et/ou sur 10 l'activité protéasomique de la peau. - la composition contient de 0, 02% à 10% en poids, de préférence de 0,05 à 0,5% en poids, en particulier de 0,06% à 0,2% en poids de cellules de Centella Asiatica ou un broyat de telles cellules, et de 0,02% à 10% en poids, de préférence de 0,05 à 0,5% en poids, en particulier de 0,06% à 0,2% en poids d'extrait de Saussurea 15 involucrata. - les cellules de Centella Asiatica sont des cellules dédifférenciées et élicitées, cultivé en milieu in vitro. - la composition contient un broyat de cellules dédifférenciées et élicitées de Centella Asiatica présentant une taille moyenne en poids de moins de 10!im, en 20 particulier de moins de 5gm, de préférence de moins de - la composition est adaptée pour un nettoyage de la peau. - la composition se présente sous la forme de poudre, de crèmes, de pâtes, de gels, de suspensions, de compositions fluides ou liquides, compositions solides ou semi-solides, stick, bâtons, crayon, gel solide ou semi-solide à libération 25 - la composition contient une quantité efficace de cellules de Centella Asiatica ou de broyat de telles cellules, et d'extrait de cellules de Saussurea involucrata, pour son utilisation pour induire une stimulation de la vitesse de respiration cellulaire basale de kératinocytes humains non perméabilisés d'au moins 5%, avantageusement d'au moins 20%, de préférence d'au moins 50%, en particulier d'au moins 75%, et/ou 3036962 3 pour son utilisation induire une stimulation de la vitesse de respiration mitochondriale de kératinocytes humains perméabilisés d'au moins 5%, avantageusement d'au moins 20%, de préférence d'au moins 50%, en particulier d'au moins 75%, en présence de pyruvate-malate, et/ou 5 pour son utilisation pour induire une stimulation du taux de synthèse de l'Adénisone Triphosphate (ATP) de kératinocytes humains non perméabilisés d'au moins 0,5%, avantageusement d'au moins 10%, de préférence d'au moins 20%, en particulier d'au moins 50%, plus particulièrement d'au moins 75%, et/ou pour son utilisation pour induire une stimulation du taux de synthèse de 10 l'Adénisone Triphosphate (ATP) mitochondriale de kératinocytes humains perméabilisés d'au moins 0,5%, avantageusement d'au moins 10%, de préférence d'au moins 20%, en particulier d'au moins 50%, en présence de pyruvate-malate, et/ou pour son utilisation pour induire une stimulation de la somme (taux de 15 synthèse de l'Adénisone Triphosphate (ATP) cellulaire + taux de synthèse de l'Adénosine monophosphate (AMP) cellulaire + taux de synthèse de l'Adénosine Diphosphate cellulaire (ADP)) d'au moins 10%, avantageusement d'au moins 20%, de préférence d'au moins 50%, en particulier d'au moins 100% de kératinocytes humains non perméabilisés après 5 jours de contact, tout en 20 maintenant avantageusement un ratio de la charge énergétique entre 0, 74 et 0, 85, et/ou pour son utilisation pour permettre une différentiation et une prolifération de kératinocytes humains en culture, et/ou pour son utilisation pour permettre une meilleure cohésion des cellules des 25 kératinocytes de la peau humaine, et/ou pour son utilisation pour assurer un effet de force vitale pour la peau, et/ou pour son utilisation pour assurer un effet hydratant par NMF, et/ou pour son utilisation pour assurer un effet d'homéostasie, et/ou pour son utilisation pour assurer une cohésion cellulaire des kératinocytes, 30 et/ou 3036962 4 pour son utilisation pour assurer un effet de renouvellement cellulaire par prolifération et différenciation des cellules cutanées. Le procédé de fabrication de cellules dédifférentiées et élicitées est 5 avantageusement un procédé du type décrit dans W003/077881. Dans le présent mémoire, par cellules végétales dédifférenciées, on entend toute cellule végétale ne présentant aucun des caractères d'une spécialisation particulière et capable de vivre par elle-même et non en dépendance avec d'autres 10 cellules. Les cellules végétales dédifférenciées peuvent être obtenues à partir de matériel végétal issu de plante entière ou de partie de plante comme les feuilles, les tiges, les fleurs, les pétales, les racines, les fruits, leur peau, l'enveloppe les protégeant, 15 les graines, les anthères, la sève, les épines, les bourgeons, l'écorce, les baies, et des mélanges de ceux-ci. Préférentiellement, les cellules végétales dédifférenciées sont obtenues à partir d'écorce, de feuilles, de bourgeons et de la peau des fruits. 20 Les cellules végétales dédifférenciées utilisables selon l'invention peuvent être obtenues à partir de végétaux obtenus par culture in vivo ou issu de culture in vitro. Par culture in vivo on entend toute culture de type classique c'est à dire en sol à 25 l'air libre ou en serre ou encore hors sol ou en milieu hydroponique. Par culture in vitro, on entend l'ensemble des techniques connues de l'homme du métier qui permet de manière artificielle l'obtention d'un végétal ou d'une partie d'un végétal. La pression de sélection imposée par les conditions physico- 30 chimiques lors de la croissance des cellules végétales in vitro permet d'obtenir un 3036962 5 matériel végétal standardisé, exempt de contaminations et disponible tout au long de l'année contrairement aux plantes cultivées in vivo. Préférentiellement selon l'invention on utilise des cellules végétales dédifférenciées issues de culture in vitro. L'élicitation des cellules est de 5 préférence opérée avec les cellules dans un milieu de culture, Les cellules végétales dédifférenciées utilisables selon l'invention peuvent être obtenues par toute méthode connue de l'art antérieur. A cet égard on peut citer les méthodes décrites par E.F. George et P.D. Sherrington dans Plant Propagation by tissue culture, handbook and directory of commercial laboratories (Exegetics Ltd 10 1984). Les milieux de culture utilisables selon l'invention sont ceux généralement connus de l'homme du métier. On peut citer à titre d'exemples les milieux de Gamborg, Murashige et Skoog, Heller, White etc.... On trouvera dans "Plant Culture Média : formulations and uses" de E.F. George, DJM Puttock et H.J George (Exegetics 15 Ltd 1987, tome 1 & 2) des descriptions complètes de ces milieux. Préférentiellement selon l'invention on prépare les cellules végétales dédifférenciées cultivées sur milieu de Murashige et Skoog. 20 Des particularités et détails de compositions suivant l'invention ressortiront de la description suivante d'exemples de réalisation donnés à titre d'exemple uniquement. Des tests démontrant l'efficacité du mélange de cellules des compositions 25 cosmétiques selon l'invention seront décrits ci-après. Dans ces tests, on a utilisé les produits suivants provenant de cellules végétales : 1. Broyat de cellules de Centella asiatica Bl. 30 Ce broyat de cellules a été préparé de la manière suivante : 3036962 6 Etape 1 : Préparation de cellules dédifférenciées et cultivés dans un milieu de culture in vitro 5 Cette étape de préparation de cellules dédifférenciées de Centella asiatica a été réalisée de manière classique, avec des étapes de repiquage successif, à partir de tiges. Le milieu de culture utilisé est un milieu Gamborg B5 complet (G5893) commercialisé par Sigma-Aldrich (Allemagne). D'autres milieux de culture sont 10 possibles. Etape 2 : repiquage des cellules dédifférenciées de l'étape 1 dans un milieu de culture in vitro pour le développement et l'élicitation des cellules. 15 Le développement avec élicitation des cellules de l'étape 1 a été opéré dans un milieu in vitro (par exemple Gamborg B5) sous une atmosphère gazeuse contenant de l'oxygène et du CO2 (air enrichi en CO2 pour que sa teneur est de 2 à 5% en volume) selon un cycle comprenant 100 périodes de faible luminosité avec une luminosité de moins de 10 lux ( de 1 à 5 lux) pendant 1 heure sous une 20 atmosphère constitué d'air humide (humidité relative de 75%) enrichi de CO2 (pour que la teneur en CO2 soit de 5%) et présentant une température de 30°C, ces périodes de développement/élicitation sous faible (voire sans) luminosité étant séparées l'une de l'autre par une période de luminosité de plus de 100000 lux pendant 1 heure sous une atmosphère constituée d'air humide (humidité relative 25 de 75%) enrichi de CO2 (pour que la teneur en CO2 de l'atmosphère soit de 5%) et présentant une température de 45°C. Le passage d'un état d'obscurité à un état éclairé est réalisé par le déplacement d'une paroi opaque. Cette culture est opérée en chambre blanche. 30 Etape 3 : Extraction des cellules dédifférenciées et élicitées en milieu de culture in vitro, par exemple par filtration du milieu de culture suivi d'une ou de plusieurs 3036962 7 étapes de lavage, en particulier opérées pour ne pas détruire la structure des membranes des cellules. Etape 4 : Séchage ou lyophilisation des cellules dédifférenciées et élicitées en 5 milieu de culture in vitro, cette opération de séchage étant avantageusement opérée pour ne pas détruire la structure des membranes des cellules. Cette étape est avantageusement opérée à une température inférieure à 60° C, par exemple entre -60° C et 50°C. 10 Etape 5 : broyage. Le broyage est opéré pour que la taille des particules soit inférieure à 5011m. Il est intéressant d'effectuer l'opération de broyage des cellules dédifférentiées et élicitées en présence d'un ou de plusieurs agents ou excipients de la composition cosmétique de manière à assurer la libération des 15 phytoalexines et autres composés provenant des cellules dans au moins certains agents de la composition cosmétique. Le broyage a été opéré de manière à obtenir une taille moyenne en poids des particules de moins de 31.tm (comprise entre 1 et 211m). 20 2. Préparation d'un extrait de Saussurea involucrata El Des plantes dédifférentiées de Saussurea involucrata cultivées in vitro ont été nettoyées. La partie aérienne des plantes, y compris des fleurs, a été séchée et broyée en une poudre de moins de 50trm (granulométrie moyenne en poids). 1 kg 25 de cette poudre a été soumise à une extraction avec de l'éthanol à 70%, trois fois sous reflux pendant 2 heures. L'extrait alcoolique a été séché sous vide jusqu'à obtention d'un sirop brunâtre. Ce sirop est ensuite mélangé à de l'eau distillée pour obtenir un extrait à 5% en poids. 30 3. Préparation d'un extrait de Panax Pseudoginseng E2 3036962 8 On a opéré de manière identique que pour la préparation de l'extrait de Saussurea involucrata, à partir de plantes Panax Pseudoginseng. 3. Préparation d'un extrait de Angelica sinensis E3 On a opéré de manière identique que pour la préparation de l'extrait de Saussurea involucrata, à partir de plantes Angelica sinensis. 4. Préparation d'un extrait de Panax notoginseng (E4) On a opéré de manière identique que pour la préparation de l'extrait de Saussurea involucrata, à partir de plantes Panax notoginseng. Préparation de mélanges à tester Les mélanges suivants ont été testés pour déterminer leurs efficacités ou propriétés au niveau de la peau (épiderme reconstitué Synthetic): Mélange 1 : ce mélange Ml a été préparé en mélangeant du broyat de cellules de 20 Centella Asiatica B1 avec de la glycérine végétale, le broyat BI représentant 20% en poids du mélange. Mélange 2 : ce mélange M2 a été préparé en mélangeant de la glycérine végétale avec du broyat de cellules Centella Asiatica (B1) et un extrait de Saussurea 25 involucrata (El), la teneur de B1 dans le mélange étant de 20% en poids, tandis que celle en El est de 20% en poids. Mélange 3 : ce mélange M3 a été préparé en mélangeant de la glycérine végétale avec du broyat de cellules Centella Asiatica (B1), un extrait de Saussurea 30 involucrata (El), et un extrait Panax Pseudoginseng (E2), la teneur de B1 dans le 5 10 15 3036962 9 mélange étant de 20% en poids, tandis que celle en El et en E2 est à chaque fois de 10% en poids. Mélange 4 : ce mélange M4 a été préparé en mélangeant de la glycérine végétale 5 avec du broyat de cellules Centella Asiatica (B1), un extrait de Saussurea involucrata (El), un extrait Panax Pseudoginseng (E2), un extrait de Angelina Sinensis (E3) et un extrait de Panax notoginseng (E4), la teneur de B1 dans le mélange étant de 20% en poids, tandis que celle en El, E2, E3 et E4 est à chaque fois de 5% en poids. 10 Mélange 5 : ce mélange M5 est placebo et est constitué uniquement de glycérine végétale. Mélange 6 : ce mélange M6 a été préparé en mélangeant de la glycérine végétale 15 avec l'extrait de Saussurea involucrata (El) présent à raison de 20% en poids dans le mélange. Test 1 : Evaluation de l'effet de mélanges sur le métabolisme énergétique et 20 physiologique sur de la peau reconstituée SKINETHIC® (vendue par Episkin Lyon France) par détermination du relargarge du CO2 au niveau de l'épiderme L'étude a été réalisée sur des épidermes reconstitués SKINETHIC®. Après avoir placé une quantité de mélange sur l'épiderme reconstitué, l'activité du 25 métabolisme cellulaire et le pouvoir oxygénant du métabolisme sont mesurés par la détermination de la métabolisation du D-(14C)-glucose-6-phosphate (288 mCi/mmol, NEN, France) et par le dosage du 14CO2. Pour évaluer l'activité des mélanges, le test a été opéré en conditions 30 physiologiques et en conditions asphyxiées. Pour ces conditions asphyxiées, 3036962 10 l'asphyxie des épidermes a été réalisée par une privation d'oxygène 24 heures avant de placer une quantité de mélange sur l'épiderme. Le 14C02 libéré à partir du métabolisme du D-(14C)-glucose-6-phosphate a été 5 évalué par la capture du 14CO2 sur des filtres placés au dessus des épidermes. Le D_ ( ,14 C)-glucose-6-phosphate a été mis au contact avec l'épiderme pendant toute la durée du traitement par un mélange pendant 24 heures. A la fin du temps de traitement (24 heures), les filtres sont récupérés et la radioactivité des filtres est mesurée par un compteur à scintillation. 10 La quantité de mélange appliquée sur un épiderme est exprimée en % en poids par rapport au poids de l'épiderme reconstitué. 3036962 11 Test 1.1 Epiderme traité avec les mélanges M8 (contrôle), M1 (pas l'invention), M2, M3 et M4, en conditions physiologiques mélange appliqué % en poids demesure libéré du 14CO2accroissement mélange en % du taux de libération par rapport au contrôle appliqué Par(cPm) rapport au poids de l'épiderme M5 1,0 1648 +/- 91 - contrôle négatif M1 pas selon 1,0 1750 +/- 95 +6 l'invention M6 pas selon 1,0 REVENDICATIONS1. Composition cosmétique contenant au moins (a) des cellules de Centella Asiatica ou un broyat de telles cellules, (b) un extrait de Saussurea involucrata, et (c) un support pour application cosmétique. 2. Composition suivant la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle contient au moins (a) des cellules dédifférenciées et élicitées de Centella Asiatica, de 10 préférence sous forme de broyat, et (b) un extrait de Saussurea involucrata. 3. Composition suivant la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle contient au moins (a) un broyat de cellules dédifférenciées et élicitées de Centella Asiatica, et (b) un extrait de Saussurea involucrata. 4. Composition suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle contient en outre un extrait de plantes de la famille constituée de Araliaceae et Apiaceae, ledit extrait étant cosmétiquement acceptable. 5. Composition suivant la revendication précédente, caractérisée en ce qu'elle contient également un extrait de plantes du genre Panax de la famille des araliaceae et/ou du genre Angelica ou Angelina de la famille des Apiaceae. 25 6. Composition suivant la revendication 5, caractérisée en ce qu'elle contient un extrait de Panax Pseudoginseng, Panax ginseng, Panax notoginseng, Angelica ou Angelina Sinensis, et un mélange de tels extraits. 7. Composition suivant l'une quelconque des revendications précédentes, 30 caractérisée en ce qu'elle contient une quantité efficace de cellules de Centella Asiatica ou de broyat de telles cellules, et d'extrait de Saussurea involucrata, pour 15 20 3036962 26 son utilisation pour assurer une activité énergisante pour la peau et/ou sur l'activité protéasomique de la peau. 8. Composition suivant l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce 5 qu'elle contient de 0, 02% à 10% en poids, de préférence de 0,05 à 0,5% en poids, en particulier de 0,06% à 0,2% en poids de cellules de Centella Asiatica ou de broyat de telles cellules, et de 0,02% à 10% en poids, de préférence de 0,05 à 0,5% en poids, en particulier de 0,06% à 0,2% en poids d'extraits de Saussurea involucrata. 9. Composition suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle contient un broyat de cellules dédifférenciées et élicitées de Centella Asiatica présentant une taille moyenne en poids de moins de 101.1m, en particulier de moins de 5gm, de préférence de moins de liam. 10. Composition suivant l'une quelconque des revendications précédentes, adaptée pour un nettoyage de la peau. 11. Composition suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme de poudre, de crèmes, de pâtes, de gels, de suspensions, de compositions fluides ou liquides, compositions solides ou semi-solides, stick, bâtons, crayon, gel solide ou semi-solide à libération 12. Composition suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle contient une quantité efficace de cellules de Centella Asiatica ou un broyat de telles cellules, et d'extrait de Saussurea involucrata, pour son utilisation pour induire une stimulation de la vitesse de respiration cellulaire basale de kératinocytes humains non perméabilisés d'au moins 5%, avantageusement d'au moins 20%, de préférence d'au moins 50%, en particulier d'au moins 75%, et/ou 3036962 27 pour son utilisation pour induire une stimulation de la vitesse de respiration mitochondriale de kératinocytes humains perméabilisés d'au moins 5%, avantageusement d'au moins 20%, de préférence d'au moins 50%, en particulier d'au moins 75%, en présence de pyruvate-malate, et/ou 5 pour son utilisation pour induire une stimulation du taux de synthèse de l'Adénisone Triphosphate (ATP) de kératinocytes humains non perméabilisés d'au moins 0,5%, avantageusement d'au moins 10%, de préférence d'au moins 20%, en particulier d'au moins 50%, plus particulièrement d'au moins 75%, et/ou pour son utilisation pour induire une stimulation du taux de synthèse de 10 l'Adénisone Triphosphate (ATP) mitochondriale de kératinocytes humains perméabilisés d'au moins 0,5%, avantageusement d'au moins 10%, de préférence d'au moins 20%, en particulier d'au moins 50%, en présence de pyruvate-malate, et/ou pour son utilisation pour induire une stimulation de la somme (taux de 15 synthèse de l'Adénisone Triphosphate (ATP) cellulaire + taux de synthèse de l'Adénosine monophosphate (AMP) cellulaire + taux de synthèse de l'Adénosine Diphosphate cellulaire (ADP)) d'au moins 10%, avantageusement d'au moins 20%, de préférence d'au moins 50%, en particulier d'au moins 100% de kératinocytes humains non perméabilisés après 5 jours de contact, tout en 20 maintenant avantageusement un ratio de la charge énergétique entre 0, 74 et 0, 85, et/ou pour son utilisation pour permettre une différentiation et une prolifération de kératinocytes humains en culture, et/ou pour son utilisation pour permettre une meilleure cohésion des cellules des 25 kératinocytes de la peau humaine, et/ou pour son utilisation pour assurer un effet de force vitale pour la peau, et/ou pour son utilisation cosmétique pour assurer un effet hydratant par NMF, et/ou pour son utilisation pour assurer un effet d'homéostasie, et/ou 30 pour son utilisation pour assurer une cohésion cellulaire des kératinocytes, et/ou 3036962 28 pour son utilisation pour assurer un effet de renouvellement cellulaire par prolifération et différenciation des cellules cutanées. 5