Brevet FR3045380A1 — publié le 20170623

L'invention se rapporte à un extrait de graines de Passiflore, Passiflora incarnata ou edulis et préférentiellement edulis, particulièrement riche en polyphénols et un procédé de préparation d'un tel extrait. La présente invention porte également sur l'utilisation cosmétique, dermatologique ou thérapeutique d'une telle composition ou d'un tel extrait. L'invention concerne enfin un procédé de soin cosmétique de la peau, des phanères ou des muqueuses, consistant à administrer une telle composition ou un tel extrait. LES PASSIFLORES La famille des passiflores (Passiflora) est constituée d'environ 500 espèces. Les espèces sont souvent distribuées dans les régions chaudes tempérées et tropicales et notamment sur le continent américain, mais sont plutôt rares en Asie, Australie et Afrique tropicale. Botanique Les plantes se présentent sont forme d'arbrisseaux ou herbes grimpantes. Les feuilles sont alternes, parfois simples, lobées ou palmées. Les fleurs peuvent attendre 9 cm de diamètre, sont bisexuelles ou unisexuelles et régulières. Elles sont blanches et violettes et présentent des appendices pétaloïdes fins, garnis d'appendices filiformes symbolisant la couronne d'épines du Christ. Le fruit de 4 à 5 cm de longueur est ovalaire et souvent de couleur jaune à orangée. Les espèces les plus répandues sont notamment Passiflora incarnata (P. incarnata) et 25 Passiflora edulis (P. edulis). Eléments de Phytochimie P. incarnata : les constituants majeurs sont représentés par la famille des flavonoïdes qui sont présentes en grande quantité dans les feuilles. Les feuilles contiennent, en particulier, une forte teneur en isovitexine. Les feuilles de P. incarnata contiennent 30 également en faible quantité des alcaloïdes indoliques simples (harmane, harmine...), des sucres comme le raffinose, le saccharose, fructose, glucose, et des huiles essentielles 3045380 2 et du maltol décrit comme la molécule qui serait à l'origine des effets sédatifs et anticonvulsifiants attribués à cette plante. P. edulis : à partir d'un extrait méthanolique de feuilles séchées, un composés spécifiques a été identifié : la passiflorine - cyclopropane triterpène glycoside (E. 5 Bombardelli et al., 1975). Les feuilles de P. edulis contiennent en particulier de l'isoorientine, un flavonoïde qui n'est pas retrouvé dans l'espèce P. incarnata. Elles contiennent également des traces d'huile essentielle et d'alcaloïdes identiques à l'espèce P. incarnata. La pulpe du fruit contient des flavonoïdes, schaftoside, isoschaftoside, isoorientine, 10 orientine, isovitexine, dérivés de lutéoline (M.L. Zeraik, J.H. Yariwake - 2010), de l'acide ascorbique (environ 60 mg/100 g). La pulpe contient également des dérivés cyanogéniques glycosylés : la prunasine, la sambunigrine et l'amygdaline, ainsi que deux mandelonitrile I3-rutinosides récemment identifiés (D. Chassagne and J. Crouzet, 1998 ; D.S. Seigler, 2002). 15 Toxicologie Des constituants cyanogéniques sont présents essentiellement dans les parties aériennes de différentes variétés de passiflore. Caractéristiques de la graine Les graines constituent 6 à 12% du fruit de P. Edulis et elles contiennent : 20 des polyphénols dont le Piceatannol (structure proche du resveratrol) et son dimère la scirpusine B (S. Sano ; K. Sugiyama ; T. Ito, 2011), substances à effets vasorelaxant et anti-oxydant. de l'huile, (rendement de 18% après extraction par solvant) contenant des phytostérols (0.2% dont campestérol, stigmastérol, sitostérol, avenasterol) ; 60 à 73% d'acide linoléique (oméga 6), 14% à 20% d'acide oléique et 465 ppm de tocophérols (G. Piobom, N. Barou et al, 2006 ; R. de V.V. Lopes et al.). Des sucres et des protéines. ART ANTERIEUR Usage Alimentaire Le fruit semble être consommé depuis la préhistoire. Au XVIème siècle au Pérou, les magnifiques fleurs de passiflores étaient déjà considérées comme un remède et de 3045380 3 nombreuses espèces de passiflores sont toujours utilisées dans de nombreux pays dans les pratiques thérapeutiques courantes. Usage Médical Les passiflores (souvent les parties aériennes et parfois les fruits) sont souvent utilisées 5 partout dans le monde comme anxiolytique, sédatif, diurétique ou analgésique (« Passiflora : review update. K. Dhawan, S. Dhawan, A. Sharma, 2004 »). Le maltol et certains de ses dérivés seraient à l'origine de cet effet sédatif. Cette activité serait plus constante et plus significative pour l'espèce P. incarnata. Des extraits de P. incarnata seraient capables de lutter contre la dépendance à la 10 morphine. Un effet anti-hypotenseur d'un extrait méthanolique d'écorces de fruits de P. edulis, ainsi qu'un effet hypocholestémiant d'un extrait de graines délipidées riches en fibres ont également été mis en évidence. Un effet anti-tumoral d'une décoction des fruits via l'inhibition de métalloprotéinases 15 matricielles (MMP2 et MMP9) impliquées dans l'invasion tumorale, les métastases et l'angiogénèse, a également été mis en évidence (S.S. Patel, 2009). Usages Dermo-cosmétiques Au Brésil, les feuilles de P. foetida sont utilisées par voie topique pour traiter les maladies cutanées d'origine inflammatoire, en particulier grâce à la présence de 20 l'isoorientine. A Maurice et Rodrigues, les décoctions de feuilles de P. suberosa sont également utilisées en bain pour traiter les maladies de peau. DESCRIPTION DE L'INVENTION La Demanderesse a découvert que les extraits de graines de passiflore, en 25 particulier Passiflora incarnata ou Passiflora edulis, et avantageusement Passiflora edulis, présentent des propriétés cosmétiques, pharmaceutiques et dermatologiques jamais décrites jusqu'à présent. En particulier, c'est la première fois que de tels extraits de graines de passiflore sont utilisés en tant que tels, pour leurs propriétés spécifiques. L'invention a ainsi pour objet un extrait polyphénolique de graines de Passiflore, 30 en particulier de graines de Passiflora incarnata ou de Passiflora edulis, plus particulièrement de Passiflora edulis, comprenant au moins 30% en poids de polyphénols, exprimés en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids de l'extrait 3045380 4 sec. Cette teneur équivaut à au moins 3 mg de polyphénols par millilitre d'extrait liquide. L'extrait selon la présente invention comprend avantageusement au moins 35% en poids de polyphénols, exprimés en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids 5 total dudit extrait sec, c'est-à-dire au moins 3,5 mg de polyphénols par millilitre d'extrait liquide. L'extrait selon la présente invention comprend plus avantageusement au moins 40% en poids de polyphénols, exprimés en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids total dudit extrait sec, c'est-à-dire au moins 4 mg de polyphénols par ml d'extrait 10 liquide. Parmi les polyphénols présents dans l'extrait selon l'invention, on retrouve majoritairement les dérivés catéchiques. Par « dérivés catéchiques » on entend, au sens de la présente invention, les flavoinoïdes de la famille de la catéchine, également connue sous le nom de catéchol. 15 Les dérivés catéchiques sont plus particulièrement des composés de formule générale (I) suivante : (I) dans laquelle : représente une liaison simple de configuration R ou S; 20 R1 représente OH ou un groupe galloyl de formule (II) suivante : 3045380 5 (II) ; et R2 représente H ou OH. Les dérivés catéchiques sont plus particulièrement des composés de formule générale (I) choisis dans le groupe constitué de : Nom Configuration R1 R2 (+)-catéchine 2R, 3S OH H (-)-épicatéchine 2R, 3R OH H (-)-catéchine 2S, 3R OH H (+)-épicatéchine 2S, 3S OH H (-)-épigallocatéchine 2R, 3R OH OH (-)-épicatéchine gallate 2R, 3R Groupe galloyl H (-)-épigallocatéchine gallate 2R, 3R Groupe galloyl OH (+)-gallocatéchine 2R, 3S OH OH (+)-gallocatéchine gallate 2R, 3S Groupe galloyl OH 5 L'extrait selon l'invention comprend avantageusement au moins 20 % en poids, en particulier au moins 24 % en poids de dérivés catéchiques, exprimés en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids de l'extrait sec. Ainsi, dans l'extrait selon l'invention, au moins 50% en poids, en particulier au moins 60% en poids des 10 polyphénols sont des dérivés catéchiques, exprimés en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids de polyphénols dans l'extrait sec. Avantageusement, l'extrait selon l'invention comprend en outre au moins 10% en poids d'acides organiques, notamment d'acide acétique, d'acide malique, d'acide 15 citrique ou leurs mélanges, par rapport au poids de l'extrait sec. 3045380 6 L'extrait selon l'invention est avantageusement obtenu par extraction solide/liquide des graines de Passiflore dans un solvant choisi parmi l'eau, les glycérols, les glycols, et leurs mélanges. Le solvant est plus particulièrement choisi parmi les mélanges binaires 5 eau/glycérol, eau/glycol, et leurs mélanges, avantageusement dans une proportion comprise entre 30 et 90% de glycérol et/ou de glycol dans l'eau. De préférence le solvant utilisé est choisi parmi les mélanges binaires eau/glycérol ou eau/propanediol, en particulier eau/propanediol, plus particulièrement eau/1,3-propanediol. 10 En particulier, l'extrait selon l'invention contient avantageusement en poids par rapport à l'extrait sec obtenu : - Environ 40 % de polyphénols ; - Environ 10 % de sucres ; - Environ 11 % d'acides de fruits ; et 15 - Environ 5 % de protéines. De manière particulière, l'extrait selon l'invention ne comprend pas d'isoorientine, orientine, vitexine ou encore d'isovitexine. L'invention a également pour objet un procédé de préparation d'un extrait 20 polyphénoliques de passiflore en particulier de graines de Passiflora incarnata ou de Passiflora edulis, avantageusement de Passiflora edulis, comprenant au moins 30% en poids de polyphénols, exprimés en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids de l'extrait sec, ledit procédé comprenant au moins une étape d'extraction solide/liquide dans un solvant choisi parmi l'eau, les glycérols, les glycols, et leurs mélanges. 25 Avantageusement, ledit procédé de préparation d'un extrait polyphénolique de graines de passiflore selon l'invention comprend les étapes successives suivantes : a) broyage des graines ; b) éventuellement délipidation des graines, de préférence par pressage, extraction éthanolique ou extraction CO2 ; 30 c) extraction solide/liquide des graines broyées et éventuellement délipidées dans un solvant choisi parmi l'eau, les glycérols, les glycols, et leurs mélanges ; 3045380 7 d) séparation de la phase solide et de la phase liquide par décantation, et/ou centrifugation et/ou filtrations successives ; e) éventuellement séchage de l'extrait obtenu à l'étape d). 5 L'étape a) de broyage des graines peut être réalisée par des méthodes connues de l'homme du métier, notamment à l'aide d'un broyeur à couteaux, d'un broyeur à marteaux, etc. A l'étape c), la phase d'extraction solide/liquide est réalisée de préférence à une température comprise entre 20°C et 90°C, en particulier entre 30°C et 80 °C, plus 10 particulièrement entre 45 °C et 75°C, typiquement 70°C. La durée d'extraction est avantageusement comprise entre 30 minutes et 4h, en particulier entre lh et 3h, avantageusement elle est d'environ 2 heures. Avantageusement, le solvant d'extraction utilisé à l'étape c) est choisi parmi les mélanges binaires eau/glycérol, eau/glycol, et leurs mélanges, avantageusement dans 15 une proportion comprise entre 30 et 90% de glycérol et/ou de glycol dans l'eau. En particulier, le solvant d'extraction est choisi parmi les mélanges binaires eau/glycérol ou eau/propanediol, en particulier eau/propanediol, plus particulièrement eau/1,3- propanediol. Dans une variante avantageuse du procédé, préalablement à l'étape c), les 20 graines de passiflore sont délipidées. Avant d'être dispersées, les graines broyées peuvent être délipidées, notamment dans de l'éthanol. L'élimination des lipides permet une meilleure efficacité des étapes d'extraction et de filtrations. Il est également et préférentiellement possible d'utiliser des tourteaux de ces graines, c'est-à-dire le résidu issu de l'extraction préalable de l'huile par solvant, technique de CO2 supercritique par 25 exemple et préférentiellement par pressage mécanique. L'étape d) de séparation de la phase solide et de la phase liquide est réalisée par des méthodes connues de l'homme du métier, notamment par décantation, centrifugation et/ou filtrations successives jusqu'à parfaite limpidité et propreté microbiologique. 30 Avantageusement, l'extrait polyphénolique selon l'invention peut être stabilisé par l'étape de séchage e), par des procédés connus de l'homme de l'art. 3045380 8 L'étape de séchage peut, par exemple, être réalisée en présence d'un support de type, par exemple, maltodextrines ou fibres d'acacia (Fibregum® société CNI). La teneur en support varie typiquement selon un ratio allant de 0% à 80% de support par rapport au pourcentage de matière sèche obtenu dans la forme liquide de l'extrait. 5 L'extrait est préférentiellement séché par lyophilisation afin d'obtenir une poudre finale. La poudre finale comprend avantageusement 30 à 70% en poids de matière sèche de l'extrait, le complément à 100% étant le support de lyophilisation. Plus avantageusement la poudre finale comprend 50% de matière sèche issue de l'extrait et 50% de support de lyophilisation. 10 Alternativement, la matière première de départ du procédé selon l'invention peut être un tourteau de graines de passiflore délipidées, notamment par pressage. Dans ce cadre et à titre d'exemple non limitatif, l'extrait polyphénolique selon l'invention peut être obtenu selon le procédé suivant : a') mise en solution de tourteau de graines de passiflore délipidées par pressage, à 15 10% de matière sèche dans l'eau ; b') extraction solide/liquide sous agitation pendant 2 heures à une température de 70°C ; c') purification par étapes de filtrations successives ; et d') filtration stérile. 20 L'extrait obtenu par le procédé selon l'invention, tel que décrit dans les paragraphes précédents, comprend avantageusement au moins 35% en poids, plus avantageusement au moins 40% en poids, de polyphénols, exprimés en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids de l'extrait sec. 25 Avantageusement, l'extrait obtenu par le procédé selon l'invention comprend au moins 20 % en poids, en particulier au moins 24 % en poids de dérivés catéchiques, exprimés en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids de l'extrait sec. Ainsi, dans l'extrait obtenu par le procédé selon l'invention, au moins 50% en poids, en particulier au moins 60% en poids des polyphénols sont des dérivés catéchiques 30 exprimés en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids de polyphénols dans l'extrait sec. 3045380 9 Avantageusement, l'extrait obtenu par le procédé selon l'invention comprend au moins 10% en poids d'acides organiques, notamment d'acide acétique, d'acide malique, d'acide citrique ou leurs mélanges, par rapport au poids de l'extrait sec. La présente invention a donc également pour objet un extrait de graines de 5 passiflore en particulier de graines de Passiflora incarnata ou de Passiflora edulis, avantageusement de Passiflora edulis, susceptible d'être obtenu par le procédé mentionné ci-dessus. Un tel extrait répond aux spécifications définies précédemment concernant l'extrait selon l'invention. 10 Dans la suite de la description, on parlera d'« extrait selon l'invention » pour désigner l'extrait en tant que tel, tel que défini ci-dessus, ou l'extrait susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'invention tel que décrit ci-dessus. L'invention a en outre pour objet une composition comprenant un extrait riche en polyphénols de graines de passiflore selon l'invention, en tant que principe actif, et le 15 cas échéant un excipient approprié. L'extrait selon l'invention est tel que défini dans les paragraphes ci-dessus concernant l'extrait en tant que tel et ceux concernant l'extrait susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'invention. La composition selon l'invention comprend avantageusement de 0,001 à 10% en poids, avantageusement de 0,01 à 5% en poids, dudit extrait polyphénolique de graines 20 de Passiflore selon l'invention, le poids de l'extrait étant exprimé en extrait sec, par rapport au poids total de la composition. La composition est avantageusement cosmétique, pharmaceutique ou dermatologique. Ladite composition est de préférence formulée pour être administrée par voie topique externe. 25 La composition selon l'invention peut comprendre en outre un ou plusieurs autres principes actifs. La composition selon l'invention peut être formulée sous la forme de différentes préparations adaptées à une administration topique. En particulier, les compositions topiques peuvent être notamment les crèmes, les 30 émulsions, les laits, les pommades, les lotions, les huiles, les solutions aqueuses ou hydro-alcooliques ou glycoliques, les poudres, les patchs, les sprays, les shampooings, les vernis ou tout autre produit pour application externe. 3045380 10 Selon sa nature (cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique), la composition selon l'invention peut en outre comprendre au moins un excipient cosmétiquement, pharmaceutiquement ou dermatologiquement acceptable. Notamment, la composition selon la présente invention peut en outre comprendre au moins un 5 adjuvant cosmétiquement, pharmaceutiquement ou dermatologiquement connu de l'homme du métier, choisi parmi les tensioactifs, les épaississants, les conservateurs, les parfums, les colorants, des filtres chimiques ou minéraux, les agents hydratants, les eaux thermales, etc. L'homme du métier sait adapter la formulation de la composition selon l'invention en utilisant ses connaissances générales. 10 Les modes d'administration, les posologies et les formes galéniques optimales des compositions selon l'invention peuvent être déterminés selon les critères généralement pris en compte dans l'établissement d'un traitement pharmaceutique, dermatologique ou cosmétique adapté à un patient ou à un animal, comme par exemple l'âge ou le poids corporel du patient ou de l'animal, la gravité de son état général, la 15 tolérance au traitement, les effets secondaires constatés, le type de peau. L'invention a également pour objet un extrait selon l'invention ou une composition selon l'invention pour son utilisation pour prévenir et/ou traiter des troubles ou pathologies de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères, 20 avantageusement des réactions inflammatoires, des réactions d'oxydation, des désordres liés à des attaques radicalaires liées ou non à la pollution, des troubles de la barrière ou de l'homéostasie, du vieillissement, notamment du vieillissement chronologique et/ou actinique, de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères. L'invention a également pour objet un extrait selon l'invention ou une 25 composition selon l'invention pour son utilisation pour prévenir et/ou traiter des troubles vasculaires et/ou des altérations du tissu adipeux. L'invention a également pour objet l'utilisation d'un extrait de graines de passiflores selon l'invention ou d'une composition selon l'invention, pour la fabrication d'une composition cosmétique, pharmaceutique ou dermatologique pour prévenir et/ou 30 traiter des troubles ou pathologies de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères, avantageusement des réactions inflammatoires, des réactions d'oxydation, des désordres liés à des attaques radicalaires liées ou non à la pollution, des troubles de la barrière ou 3045380 11 de l'homéostasie, du vieillissement, notamment du vieillissement chronologique et/ou actinique, de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères. L'invention a également pour objet l'utilisation d'un extrait de graines de passiflores selon l'invention ou d'une composition selon l'invention, pour la fabrication 5 d'une composition cosmétique, pharmaceutique ou dermatologique pour prévenir et/ou traiter des troubles vasculaires et/ou des altérations du tissu adipeux. L'invention a en outre pour objet une méthode pour prévenir et/ou traiter des troubles ou pathologies de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères, avantageusement des réactions inflammatoires, des réactions d'oxydation, des désordres 10 liés à des attaques radicalaires liées ou non à la pollution, des troubles de la barrière ou de l'homéostasie, du vieillissement, notamment du vieillissement chronologique et/ou actinique, de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères, comprenant l'administration, notamment l'administration topique, d'une quantité efficace d'un extrait de graines de passiflores selon l'invention ou d'une composition selon 15 l'invention, à un sujet en ayant besoin. L'invention a en outre pour objet une méthode pour prévenir et/ou traiter des troubles vasculaires et/ou des altérations du tissu adipeux, comprenant l'administration, notamment l'administration topique, d'une quantité efficace d'un extrait de graines de passiflores selon l'invention ou d'une composition selon l'invention, à un sujet en ayant 20 besoin. En particulier, la composition ou l'extrait selon l'invention est destiné(e) à la prévention et/ou au traitement des réactions inflammatoires, des réactions d'oxydation, des désordres liés à des attaques radicalaires liées au stress environnemental, tel que la pollution, les UV, la cigarette, etc., des troubles de la barrière ou de l'homéostasie, du 25 vieillissement, notamment du vieillissement chronologique et/ou actinique, de la peau, des phanères (cheveux et ongles) et/ou des muqueuses (gencives, parodontes, muqueuses génitales) immature(s), normale(s) ou mature(s)/âgée(s). Notamment, la composition ou l'extrait selon l'invention est destiné(e) à la prévention et/ou au traitement des troubles liés à des réactions inflammatoires et/ou 30 radicalaires provoqués par des expositions UV, et/ou à des polluants ou des réactions intrinsèques, et engendrant ainsi un vieillissement accéléré, des troubles de la barrière, des troubles vasculaires, des rougeurs, etc. 3045380 12 Notamment, la composition ou l'extrait selon l'invention est destiné(e) à lutter contre le vieillissement de la peau, notamment contre le vieillissement chronologique et/ou actinique. Les troubles ou pathologies de la peau cité(e)s ci-dessus sont plus 5 particulièrement des troubles vasculaires, la dermatite atopique, l'eczéma, la dermatite irritative, la peau sensible, la peau réactive, la peau avec rougeur, l'érythème cutané, la peau âgée ou photoâgée, la peau photosensibilisée, les coups de soleil et les inflammations dues aux rayons de toutes sortes. L'invention concerne également un procédé de soin cosmétique de la peau et/ou 10 des phanères et/ou des muqueuses, en vue d'améliorer leur état et/ou leur aspect, consistant à administrer une composition ou un extrait selon la présente invention, avantageusement par voie topique externe. L'invention concerne un procédé de soin cosmétique de la peau, en vue d'en prévenir le vieillissement, consistant à appliquer sur la peau une composition ou un 15 extrait selon la présente invention. Les exemples qui suivent permettent d'illustrer l'invention. 20 DESCRIPTION DES FIGURES La Figure 1 représente le pourcentage d'activation du NrF2 par un extrait selon l'invention. La Figure 2 représente l'Immunomarquage de la Claudine 4 dans des explants de peau traités par le BaP (Protocole 1) 25 La Figure 3 représente l'Immunomarquage de la filaggrine dans des explants de peau traités par le BaP+Nicotine (Protocole 2) La Figure 4 représente l'Immunomarquage de la loricrine dans des explants de peau traités par le BaP+Nicotine (Protocole 2) La Figure 5 représente l'Immunomarquage du Collagène I dans des explants de 30 peau traités par le BaP+Nicotine (Protocole 2) La Figure 6 représente l'Immunomarquage de l'Elastine dans des explants de peau traités par le BaP (Protocole 1) 3045380 13 La Figure 7 représente l'Immunomarquage de la fibronectine dans des explants de peau traités par le BaP (Protocole 1) La Figure 8 représente l'aspect visuel de comète après électrophorèse de kératinocytes humains normaux traités. La Figure 8A correspond à un échantillon de 5 contrôle négatif, la Figure 8B à un échantillon de contrôle UV et la Figure 8C à un extrait selon l'invention à 0.001 %. EXEMPLE Exemple 1 : extrait selon l'invention 10 Un extrait polyphénolique est obtenu selon le procédé suivant : a) mise en solution de tourteau de graines de Passiflore edulis délipidées par pressage et broyées, à 10% de matière sèche dans un mélange 1, 3-propanediol / eau 70/30 p/p ; b) extraction sous agitation 2h à 70°C ; 15 c) élimination de la plante résiduelle par filtration grossière ; et d) purification de l'extrait obtenu par filtrations dont une filtration stérile supplémentaire. L'extrait polyphénolique liquide ainsi obtenu présente les caractéristiques suivantes (% 20 sur Extrait Sec): - Extrait sec (étuve): 0,9% (m/m) - Teneur en polyphénols totaux (par spectrophotométrie - en équivalent acide gallique) : 43% - Teneur en dérivés catéchiques (par HPLC - en équivalent acide gallique) : 22,3 25 - Teneur en acide malique (par kit enzymatique) : 5,4% - Teneur en acide citrique (par kit enzymatique): 3,7% - Teneur en Protéines (par Kjeldahl x 6.25) : 4,5% 30 Exemple 2 : extrait selon l'invention Un extrait polyphénolique est obtenu selon le procédé suivant : 3045380 14 a) mise en solution de 13.3% graines de Passiflore edulis non délipidées et broyées dans un mélange 1, 3 - propanediol / Eau 70/30 b) extraction sous agitation 2h à 70°C c) élimination de la plante résiduelle par filtration grossière 5 d) purification de l'extrait obtenu par filtrations, dont une filtration stérile supplémentaire. L'extrait polyphénolique liquide ainsi obtenu présente les caractéristiques suivantes (% sur Extrait Sec) : 10 - Extrait sec (étuve) : 1.07 % (m/m) - Teneur en polyphénols totaux (par spectrophotométrie - équivalent acide gallique) : 40% - Teneur en Protéines (Kjeldahl x 6.25) : 5,7% 15 Exemple 2 : Activité biologique de l'extrait selon l'invention 1. Potentiel biologique Le potentiel Biologique d'un extrait selon l'invention a été recherché grâce à un test de modulation de l'expression génique sur des Fibroblastes Humains Normaux (FHN) et 20 sur des épidermes humains reconstruits et mélanisés. Ainsi, l'expression de 46 gènes impliqués dans divers voies physiologiques de l'Epiderme (Barrière, pigmentation, inflammation...) et du Derme (Cicatrisation, élasticité, fermeté...) a été étudiée par PCR-array. 25 Matériel et méthodes : Des fibroblastes humains normaux (FHN) et des épidermes reconstruits mélanisés ont été incubés pendant 24h en présence d'un extrait selon l'invention, tel qu'obtenu dans l'exemple 1, à 0,002% et 0,05% (p/v) pour les FHN ou à 0,002% et 0,005% (p/v) pour les épidermes reconstruits, et en présence de TGF-f31 à 2Ong/m1 sur les FHN ou en 30 présence de Vitamine D3 à 1nM sur les épidermes reconstruits (contrôles de validation des essais). Au terme du traitement, les ARN ont été extraits et les expressions géniques ont été analysées par qRT-PCR à l'aide de carte TaqMan ciblant les fonctions clés du derme et de l'épiderme. 3045380 15 Résultats et conclusion: 5 Les résultats sont présentés dans les tableaux 2 et 3 ci-dessous et montrent notamment que l'extrait selon l'invention, en faisant varier l'expression génique de certains marqueurs, a un intérêt particulier dans les activités suivantes : - l'homéostasie et la structure de la matrice extracellulaire dermique (1 MMP3) ; et 10 - la Jonction Dermo-Epidermique (71 LAMC2). Plus particulièrement, les polyphénols de l'extrait selon l'invention ont permis de moduler l'expression génique de gènes impliqués dans les défenses anti-oxydantes et le phénomène de l'Hormesis (71 HMOX1, FTL et G6PD). 15 Cela démontre que l'extrait selon l'invention a une activité antioxydante, anti- radicalaire et anti-âge. Tableau 2 - Screening sur FHN Extrait selon Extrait selon l'invention à l'invention à 0,002% 0,05% QR* p-value QR* p-value Heme oxygenase (HMOX1) - - 4,0641 0,0025 Ferritin, Light polypeptide (FTL) - - 2,3263 0,0221 Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) - - 1,7197 0,0218 Matrix metalloproteinase 1 (MMP1) - - 0,6052 0,0282 Matrix metalloproteinase 3 (MMP3) 0,5513 0,0173 - - 20 * Niveau d'expression génique exprimé en quantité relative (QR) par rapport au contrôle non traité =1 25 3045380 16 Tableau 3 - Screening sur Epidermes reconstruits Extrait selon Extrait selon l'invention à l'invention à 0,002% 0,05% QR* p-value QR* p-value Laminin subunit gamma-2 (LAMC2) 2,2309 0,0387 4,1885 0,0165 Proopiomelanocortin (POMC) 2,3447 0,0398 1,7019 0,0183 Melanocyte-stimulating hormone receptor (MC1R) 0,7109 0,0175 0,6188 0,0127 Cytosolic phospholipase A2 (PLA2G4A) 0,6829 0,0391 - - L-dopachrome tautomerase (DCT) - - 0,4637 0,0296 * Niveau d'expression génique exprimé en quantité relative (QR) par rapport au contrôle non traité =1 5 2. Activité inductrice de l'Hormesis et de la détoxification cellulaire Une molécule Hormétique (ou Hormétine) est une substance ayant un effet biphasique, qui à faible dose va avoir un effet bénéfique mais qui à forte dose aura l'effet inverse (Ex : Prooxydant ou Antioxydant). Une Hormétine est également décrite comme étant 10 une molécule reproduisant les effets d'un léger stress sur l'organisme mais qui en retour va permettre à la cellule de se protéger de futures agressions et ainsi protéger l'organisme de diverses maladies (cancers) ou phénomènes physiques liés à l'âge (vieillissement cutanée, mauvaise cicatrisation...) ou encore des effets nocifs de l'environnement (UV, pollution...). 15 Les analyses suivantes permettent d'étudier l'activité inductrice de l'Hormesis et de la détoxification cellulaire d'un extrait selon l'invention. A- Activation de la translocation du facteur de transcription NrF2 : L'effet de l'extrait selon l'invention a été évalué vis-à-vis de l'activation de la 20 translocation du Nrf2, précurseur de la cascade responsable de la réponse hormétique et de certaines voies de détoxification de l'organisme. Matériel et méthodes Des kératinocytes HaCaT transfectés ARE-Luciférase, contenant le plasmide Nqol 25 Antioxydant Response Element (ARE) qui est un plasmide spécifique de l'activation du NrF2 et la luciférase (gène rapporteur), ont été traités pendant 6h à 37°C par un extrait 3045380 17 selon l'invention, tel qu'obtenu dans l'exemple 1, à des concentrations allant de 0,01% à 0,0005% (p/v) et par une référence positive le Ter-butylhydroquinone à 20uM. A la fin du traitement les tapis cellulaires sont lyses, l'activité de la luciférase est dosée grâce à un « Luciferase Assay Kit » de chez PROMEGA et la teneur en protéines de 5 chaque lysat est dosée par la méthode de Bradford (BioRad). Résultats et conclusion Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 4 et à la Figure 1. Ces résultats montrent que l'extrait selon l'invention a induit une augmentation de l'activité du Nrf2 10 dans les noyaux et donc une translocation de celui-ci à travers la membrane nucléaire montrant une activation de ce facteur de transcription. Cela démontre que l'extrait selon l'invention a une activité antioxydante, antiradicalaire et anti-âge. 15 Tableau 4 - Activité Nrf2 dans des HaCaT ARE-Luciférase (RLU = Relative Luciferase Activity) Activité NRF2 Activation (moyenne normalisée RLU/pg de protéines) (%) Control 0 0 Tert-butylhydroquinone 20uM 23216,4 100 *** Extrait selon l'invention à 0,0005% 4149,6 18 * Extrait selon l'invention à 0,001% 8178,2 35 *** Extrait selon l'invention à 0,005% 9998,6 43 *** Extrait selon l'invention à 0,01% 6324,6 27 *** * 0,01 REVENDICATIONS1. Extrait polyphénolique de graines de Passiflore, en particulier de graines de Passiflora incarnata ou de Passiflora edulis, comprenant au moins 30% en poids de polyphénols, exprimés en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids de l'extrait sec. 2. Extrait selon la revendication 1, comprenant au moins 35%, avantageusement au moins 40%, en poids de polyphénols, exprimés en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids de l'extrait sec. 3. Extrait selon la revendication 1 ou 2, dans lequel au moins 50% en poids desdits polyphénols sont des dérivés catéchiques, exprimés en équivalent d'acide gallique, par rapport au poids de polyphénols dans l'extrait sec. 4. Extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans lequel ledit extrait comprend au moins 10% en poids d'acides organiques, notamment d'acide acétique, d'acide malique, d'acide citrique ou leurs mélanges, par rapport au poids de l'extrait sec. 5. Extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'il est obtenu par extraction solide/liquide des graines de Passiflore dans un solvant choisi parmi l'eau, les glycérols, les glycols, et leurs mélanges. 25 6. Extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce qu'il est obtenu par extraction solide/liquide des graines de Passiflore dans un solvant choisi parmi les mélanges binaires eau/glycérol, eau/glycol, et leurs mélanges, avantageusement dans une proportion comprise entre 30 et 90% de glycérol et/ou de glycol dans l'eau. 30 20 7. Procédé de préparation d'un extrait polyphénolique des graines de passiflore tel que défini selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, ledit procédé comprenant 3045380 34 au moins une étape d'extraction solide/liquide dans un solvant choisi parmi l'eau, les glycérols, les glycols, et leurs mélanges. 8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes 5 successives suivantes : a) broyage des graines ; b) éventuellement délipidation des graines, de préférence par pressage, par extraction éthanolique ou par extraction CO2 supercritique ; c) extraction solide/liquide des graines broyées et éventuellement délipidées 10 dans un solvant choisi parmi l'eau, les glycérols, les glycols, et leurs mélange ; d) séparation de la phase solide et de la phase liquide par décantation, et/ou centrifugation et/ou filtrations successives ; et e) éventuellement séchage de l'extrait obtenu à l'étape d). 15 9. Procédé selon la revendication 7 ou 8, caractérisé en ce que ledit solvant d'extraction solide/liquide est choisi parmi les mélanges binaires eau/glycérol, eau/glycol, et leurs mélanges, avantageusement dans une proportion comprise entre 30 et 90% de glycérol et/ou de glycol dans l'eau. 10. Composition comprenant en tant que principe actif, un extrait polyphénolique de graines de Passiflore tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 6 ou d'un extrait susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications 7 à 9, et avantageusement un excipient approprié. 11. Composition selon la revendication 10, comprenant de 0,001 à 10% en poids, avantageusement de 0,01 à 5% en poids, dudit extrait polyphénolique de graines de Passiflore, le poids de l'extrait étant exprimé en extrait sec, par rapport au poids total de la composition. 25 30 12. Extrait selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 ou extrait susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications 7 à 9 ou 3045380 35 composition selon l'une quelconque des revendications 10 et 11 pour son utilisation pour prévenir et/ou traiter : des troubles ou pathologies de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères, avantageusement des réactions inflammatoires, des réactions 5 d'oxydation, des désordres liés à des attaques radicalaires liées ou non à la pollution, des troubles de la barrière ou de l'homéostasie, du vieillissement, notamment du vieillissement chronologique et/ou actinique, de la peau et/ou des muqueuses et/ou des phanères, et/ou des troubles vasculaires, et/ou 10 des altérations du tissu adipeux. 13. Procédé de soin cosmétique de la peau et/ou des phanères et/ou des muqueuses, en vue d'améliorer leur état et/ou leur aspect, consistant à administrer un extrait tel que défini selon l'une quelconque des revendications 1 à 6 ou un extrait 15 susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications 7 à 9 ou une composition cosmétique telle que définie selon l'une quelconque des revendications 10 et 11.