Brevet FR3041253A1 — publié le 20170324

DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention a pour objet une composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle étant ou comprenant une solution électrolyte isotonique, ainsi qu'une méthode de soin cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle. La présente invention concerne également l'utilisation de la solution électrolyte isotonique en tant que solvant actif et un procédé de préparation de la solution électrolyte isotonique. ART ANTERIEUR La peau contient environ 70 % d'eau, soit environ 15 % de toute celle contenue dans le corps humain. Son rôle fondamental consiste à maintenir l'équilibre du milieu intérieur, à veiller à l'homéostasie et à éliminer les toxines. Le principe de l'homéostasie régit les échanges biologiques et exige qu'un liquide pour être biocompatible respecte au mieux le milieu intérieur des cellules. Le maintien de l'homéostasie est assuré par un ensemble de mécanismes complexes : maintien de la pression osmotique, de la pression partielle d'02 et de CO2, de la température, du pH, etc. Le respect de l'homéostasie est une condition importante pour la santé de l'organisme et de la peau : c'est un équilibre dynamique qui doit être sans cesse rétabli face aux modifications dues à l'environnement et au métabolisme. L'eau est le composant majoritaire des formulations cosmétiques ou dermatologiques pour le soin de la peau. L'eau utilisée en formulation est généralement une eau traitée, neutre et déminéralisée qui est alors réduite au simple rôle de solvant. Il existe donc un besoin, dans les domaines cosmétiques, dermatologiques ou nutritionnels pour un solvant actif isotonique en parfait équilibre physiologique avec le milieu intérieur de la peau. RESUME DE L'INVENTION Dans le cadre de la présente invention, les inventeurs ont découvert une solution électrolyte isotonique en parfait équilibre avec le milieu intercellulaire ou le plasma 3041253 2 sanguin. Elle contient les principaux sels minéraux et oligo-éléments sous forme ionique, c'est-à-dire tous les sels minéraux vitaux et l'intégralité des oligo-éléments existant à l'état naturel dans le plasma sanguin humain. De plus, elle possède un pouvoir tampon important, un pH compris entre 7.9 et 8.3 et une concentration saline voisine de 0.9 % (i.e. 5 concentration totale des sels minéraux et des oligo-éléments de la solution électrolyte et équivalente à celle du plasma humain). Le pouvoir tampon assure l'équilibre acide-base de l'organisme. Lorsque cette solution électrolyte isotonique est utilisée en remplacement de l'eau déminéralisée dans une formulation, le solvant devient actif 10 Dans un premier aspect, la présente invention concerne donc une composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle comprenant une solution électrolyte isotonique, caractérisée en ce que ladite solution électrolyte isotonique est constituée de : - 74 % en poids d'une eau de source, par rapport au poids total de la solution électrolyte isotonique, et 15 - 26 % en poids d'eau de mer, par rapport au poids total de la solution électrolyte isotonique. Dans un second aspect, l'invention concerne l'utilisation d'une solution électrolyte isotonique telle que définie ci-dessus en tant que solvant actif dans une composition 20 cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle. Dans un troisième aspect, l'invention concerne une méthode de soin cosmétique ou dermatologique comprenant l'administration, de préférence topique ou par voie orale, d'une composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle telle que définie ci-25 dessus. Dans un quatrième aspect, l'invention concerne un procédé de préparation d'une solution électrolyte isotonique telle que définie ci-dessus, comprenant les étapes suivantes : a) mélange de 74 % en poids de l'eau de source et de 26 % en poids de l'eau de mer, 30 par rapport au poids total de la solution électrolyte isotonique ; b) stérilisation du mélange obtenu, avantageusement par des procédés à froid, plus avantageusement par microfiltration à 0,2 .im ou par passage en osmose inverse ; c) éventuellement conditionnement de la solution obtenue, de préférence en sachet 3041253 3 sous vide, en ampoules ou en flacons. DEFINITIONS Par « solution électrolyte isotonique », au sens de l'invention, on entend une 5 solution qui a substantiellement la même concentration ionique que les liquides de l'organisme, en particulier du plasma sanguin et du milieu intracellulaire. L'isotonicité est caractérisée par la présence de tous les ions en concentration équivalente de celle du plasma sanguin ou du milieu intracellulaire. Par « eau de source », au sens de l'invention, on entend une eau issue d'eaux 10 souterraines, avantageusement naturellement propre à la consommation humaine. Par « eau de mer », au sens de l'invention, on entend une eau issue des mers et des océans de la Terre. DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION 15 Selon un premier aspect, la présente invention concerne une composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle comprenant une solution électrolyte isotonique, caractérisée en ce que ladite solution électrolyte isotonique est constituée de : - 74 % en poids d'une eau de source, par rapport au poids total de la solution électrolyte isotonique, et 20 - 26 % en poids d'eau de mer, par rapport au poids total de la solution électrolyte isotonique. La solution selon l'invention présente les mêmes caractéristiques ioniques que le milieu intercellulaire humain ou que le plasma sanguin. En particulier, la solution selon l'invention comprend de manière constante les ions 25 suivants : - chlorure (Cl) à une concentration comprise entre 3500 et 4000 mg/L, avantageusement entre 3700 et 3900 mg/L, plus avantageusement 3890 mg/L ; - calcium (Ca2+) à une concentration comprise entre 100 et 150 mg/L, avantageusement entre 110 et 150 mg/L, plus avantageusement 138 mg/L ; 30 - magnésium (Mg2+) à une concentration comprise entre 250 et 400 mg/L, avantageusement entre 300 et 350 mg/L, plus avantageusement 346 mg/L ; - Potassium (KI à une concentration comprise entre 100 et 200 mg/L, avantageusement entre 150 et 170 mg/L, plus avantageusement 150 mg/L ; et 3041253 4 - Sodium (Na+) à une concentration comprise entre 2500 et 3500 mg/L, avantageusement entre 2700 et 3500 mg/L, plus avantageusement 2783 mg/L. La solution selon l'invention présente avantageusement une concentration totale constante en ions chlorure, calcium, magnésium, potassium et sodium de 7.31 g/L. 5 La solution selon l'invention a avantageusement une conductivité comprise entre 1000 et 1500 52-1.cm-1, avantageusement de 1115 et 1130 52-1.cm-1, plus avantageusement de 1122 S2-1. cm-1. Le Tableau 1 suivant compare la composition ionique d'une solution selon l'invention et celle du plasma sanguin : 10 Tableau 1. solution selon Plasma humain l'invention sanguin* Conductivité (ffi.cm-1) 1122 1311 Principaux ions Concentration (mg/L) Chlorure 3890 3600 Calcium 138 110 magnésium 346 30 Potassium 150 16 Sodium 2783 3400 TOTAUX 7307 7300 *Valeurs normales - Source : Encyclopédie Larousse : « sang » La solution selon l'invention est donc bien une solution isotonique par rapport au plasma sanguin humain. 15 L'eau de source qui compose la solution selon l'invention comprend avantageusement les ions suivants, de manière constante : - chlorure (Cl-) à une concentration comprise entre 100 et 200 mg/L, avantageusement entre 160 et 200 mg/L, plus avantageusement 174 mg/L ; - calcium (Ca2+) à une concentration comprise entre 30 et 60 mg/L, 20 avantageusement entre 35 et 45 mg/L, plus avantageusement 40 mg/L ; - magnésium (Mg2+) à une concentration comprise entre 15 et 35 mg/L, avantageusement entre 10 et 20 mg/L, plus avantageusement 18 mg/L ; 3041253 5 - Potassium (KI à une concentration comprise entre 65 et 85 mg/L, avantageusement entre 70 et 80 mg/L, plus avantageusement 73 mg/L ; et - Sodium (Na+) à une concentration comprise entre 100 et 200 mg/L, avantageusement entre 80 et 120 mg/L, plus avantageusement 103 mg/L. 5 L'eau de source présente avantageusement une concentration totale constante en ions chlorure, calcium, magnésium, potassium et sodium de 0.41 g/L. L'eau de source a avantageusement une conductivité comprise entre 1000 et 1500 S2-1.cm-1, avantageusement de 1115 et 1130 S2-1.cm-1, plus avantageusement de 1122 S2- 1 -1 .C111 . 10 De préférence, l'eau de source est une eau souterraine prélevée avant tout traitement. L'eau de source provient avantageusement de l'Île de Molène. En particulier, l'eau de source est une eau souterraine captée par les forages situés sur le territoire de la commune de l'Île de Molène. Une telle eau de source est commercialisée sous le nom d'Eau de Molène®. 15 L'eau de mer qui compose la solution selon l'invention comprend avantageusement les ions suivants, de manière constante : - chlorure (Cl) à une concentration comprise entre 19500 et 19700 mg/L, avantageusement entre 19550 et 19650 mg/L, plus avantageusement 19600 20 mg/L; - calcium (Ca2+) à une concentration comprise entre 350 et 460 mg/L, avantageusement entre 380 et 440 mg/L, plus avantageusement 410 mg/L; - magnésium (Mg2+) à une concentration comprise entre 1250 et 1360 mg/L, avantageusement entre 1290 et 1325 mg/L, plus avantageusement 1315 mg/L ; 25 - Potassium (KI à une concentration comprise entre 350 et 460 mg/L, avantageusement entre 380 et 440 mg/L, plus avantageusement 415 mg/L ; et - Sodium (Na+) à une concentration comprise entre 11150 et 11350 mg/L, avantageusement entre 11200 et 11300 mg/L, plus avantageusement 11250 mg/L. 30 L'eau de mer présente avantageusement une concentration totale constante en ions chlorure, calcium, magnésium, potassium et sodium de 33 g/L. 3041253 6 L'eau de mer a avantageusement une conductivité comprise entre 53300 et 54000 S2-1.cm-1, avantageusement de 53500 et 53750 S2-1.cm-1, plus avantageusement de 53680 S2- 1 -1 .C111 . L'eau de mer est avantageusement prélevée au large des côtes nord de la Bretagne, 5 de préférence au large de l'Île de Molène, à 10 - 50 m de profondeur, de préférence par temps calme, de préférence lors des marées montantes. Au sens de la présente invention, on parle de « temps calme » lorsque la force de vent est comprise entre 0 et 4 sur l'échelle de Beaufort. 10 La composition des différentes eaux et solutions ci-dessus est analysée selon la méthode par colorimétrie automatisée selon la norme ANA-19.MOA.47.Q pour les ions chlorure, selon la méthode AAS Flamme et la norme NF EN ISO 7980 pour les ions calcium et magnésium, selon la méthode par AAS flamme selon la norme NF T90-020 pour les ions potassium et sodium. 15 La conductivité des différentes eaux et solutions ci-dessus est mesurée à 25 °C selon la méthode à la sonde suivant la norme NF EN 27888. Selon un mode de réalisation particulier de l'invention, la solution électrolyte isotonique telle que décrite ci-dessus est à usage pharmaceutique non stérile, c'est-à-dire qu'elle répond aux exigences de la Pharmacopée Européenne (8ème Edition) des 20 préparations pharmaceutiques pour usage pharmaceutique non stériles (chapitre 5.1.4: qualité microbiologique des préparations pharmaceutiques et des substances pour usage pharmaceutique non stériles). Selon un autre mode de réalisation de l'invention, la solution électrolyte isotonique 25 telle que décrite ci-dessus est stérile. Par définition, un produit stérile est un produit exempt de micro-organisme viable (NF EN 556). La probabilité théorique de l'existence d'un micro-organisme revivifiable ou d'un virus doit être égale ou inférieure à 10-6. Aucun micro-organisme ne doit pouvoir être mis en évidence par une quelconque méthode connue de l'homme du métier. On cherche en général à conserver cet état par un conditionnement 30 approprié (notion d'espace incontaminable). Ce conditionnement doit être étanche, protecteur et stockable sans danger d'ouverture jusqu'à utilisation. 3041253 7 Lorsque la composition selon l'invention est une composition nutritionnelle dermatologique ou cosmétique, la solution électrolyte isotonique est de préférence stérile ou à usage pharmaceutique non stérile. 5 La composition selon l'invention, comprenant la solution électrolyte isotonique est de préférence formulée sous forme de solution, solution buvable, sérum, lotion, spray, lait, émulsion huile dans eau, émulsion eau dans huile ou hydrogel. Avantageusement, la composition selon l'invention comprend en outre au moins un agent actif et au moins un excipient cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable. 10 De manière avantageuse, la composition selon l'invention est destinée à prévenir ou à traiter les signes du vieillissement cutané, les signes d'une peau sensible ou sensibilisée, et/ou d'une peau atopique. Le vieillissement cutané peut notamment être causé par une exposition aux rayons UV, le tabagisme, le stress ou encore une exposition à la pollution. 15 Les marques du vieillissement cutané que l'on cherche à estomper et/ou prévenir peuvent être par exemple des rides ou des ridules, une flaccidité, une perte de souplesse, de tonicité, de fermeté cutanée, une peau plus fine ou une peau sèche. La peau peut être sensible ou sensibilisée en raison d'une agression externe comme l'application sur la peau de produit irritant (par exemple les tensioactifs, les conservateurs, 20 le savon, l'eau dure à forte concentration de calcaire), ou en raison de l'environnement (comme par exemple les variations de températures ou le vent), ou encore en raison de frottements (comme par exemple le feu du rasoir). Les signes d'une peau sensible ou sensibilisée sont notamment l'apparition de rougeurs sur la peau, de sensation de tiraillements, une peau sèche. 25 L'atopie est une prédisposition héréditaire à réagir de manière symptomatique à divers allergènes. La dermatite atopique se manifeste notamment par une sécheresse cutanée et des symptômes inflammatoires comprenant des rougeurs, des croûtes, un suintement et des démangeaisons. 30 Lorsque la composition selon l'invention est une composition cosmétique ou dermatologique, la solution électrolyte isotonique peut être utilisée en remplacement de l'eau déminéralisée. L'eau déminéralisée est couramment utilisée dans les formulations 3041253 8 cosmétiques en tant que solvant de la phase aqueuse ; en la remplaçant par une solution selon l'invention, le solvant devient un solvant actif. La composition cosmétique ou dermatologique selon l'invention présentera alors une charge de sels minéraux et d'oligo-éléments en équivalence avec le plasma sanguin 5 humain. Cette richesse et diversité des sels minéraux et des oligo-éléments présents en parfait équilibre physiologique avec le milieu intérieur de la peau permet : - de préserver la vie cellulaire : la solution selon l'invention apporte un substrat parfait pour rééquilibrer les carences minérales et bloquer les mécanismes de mortalité ou de dégénérescence ; 10 - d'activer les mécanismes de renouvellement et de réparation des cellules ; et - de ralentir le vieillissement accéléré par l'émission des radicaux libres et le faible rendement énergétique. La solution électrolyte isotonique peut également être utilisée en remplacement du Sérum physiologique dans les préparations dermatologiques. La solution selon l'invention 15 présentera alors une meilleure tolérance, préservera la vie cellulaire, stimulera les mécanismes de régénération et optimisera le rendement énergétique. La solution selon l'invention permet donc des applications en cosmétologie et dermatologie pour rééquilibrer les carences minérales de la peau, activer le métabolisme des cellules, préserver la durée de vie cellulaire donc lutter contre leur vieillissement 20 accéléré et relancer les fonctions vitales. Lorsque la composition selon l'invention est une composition nutritionnelle, elle peut être un complément alimentaire ou une boisson. La solution électrolyte isotonique selon l'invention est assimilable par simple 25 osmose par l'organisme qui se régule grâce à cet apport équilibré en sels minéraux et en oligo-éléments et dont le dosage correspond à l'équilibre organique. La solution selon l'invention peut agir sur le terrain déficitaire qui favorise l'apparition des maladies. Elle permet à l'organisme de combler ses carences, de retrouver son équilibre et de faire face lui-même à ses agressions. Elle a donc une action préventive 30 en limitant les risques de maladie. Elle rééquilibre l'organisme humain tout en ne présentant aucune toxicité. Aujourd'hui de plus en plus de personnes sont carencées en sels minéraux et en oligoéléments, et subissent les conséquences d'un terrain déséquilibré, acidifié par le stress 3041253 9 ou par une alimentation inadéquate, par la prise d'excitants, de médicaments, le manque d'exercice : déminéralisation, fatigue chronique, insomnie... Il est donc possible de stimuler les forces vitales de n'importe quel organisme en régénérant sont milieu intérieur appauvri duquel se nourrissent les cellules. La solution selon l'invention peut permettre 5 cette stimulation. Dès que ce milieu retrouve sa vitalité, les cellules peuvent à nouveau y puiser les éléments nécessaires à leur fonctionnement optimum. La solution selon l'invention permet donc des applications nutritionnelles à visée anti-âge, rééquilibrant les carences minérales, antifatigue, ou pour la récupération après l'effort, pour tout âge et sans contre-indications. 10 Dans un deuxième aspect, la présente invention concerne l'utilisation d'une solution électrolyte isotonique telle que définie ci-dessus en tant que solvant actif et osmotique dans une composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle. La composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle est 15 avantageusement destinée à prévenir ou à traiter les signes du vieillissement cutané, les signes d'une peau sensible ou sensibilisée et/ou d'une peau atopique. En particulier, la présente invention concerne l'utilisation d'une solution électrolyte isotonique telle que définie ci-dessus pour préserver la vie des cellules humaines (ou la longévité cellulaire), favoriser leur multiplication et optimiser leur activité mitochondriale. 20 Dans un troisième aspect, la présence invention porte sur une méthode de soin cosmétique ou dermatologique comprenant l'administration, de préférence topique ou orale, d'une composition cosmétique ou dermatologique telle que définie ci-dessus. Une telle composition est avantageusement destinée à prévenir ou à traiter les 25 signes du vieillissement cutané, les signes d'une peau sensible ou sensibilisée et/ d'une peau atopique. Dans un autre aspect, la présente invention porte sur un procédé de préparation d'une solution électrolyte isotonique telle que définie ci-dessus comprenant les étapes suivantes : 30 a) mélange de 74 % en poids d'eau de source et de 26 % en poids d'eau de mer, par rapport au poids total de la phase aqueuse isotonique ; b) stérilisation du mélange obtenu, avantageusement par des procédés à froid, plus avantageusement par microfiltration à 0,2 iam ou par passage en osmose inverse ; 3041253 10 c) éventuellement, conditionnement de la solution obtenue, de préférence en sachet ou ampoules ou emballages sous vide. L'eau de source et l'eau de mer sont telles que définies ci-dessus. De même, la solution électrolyte isotonique ainsi obtenue présente les mêmes caractéristiques et propriétés que 5 celle décrite ci-dessus. Dans le cadre de la présente invention, on entend par « stérilisation », un procédé qui rend un produit stérile et qui permet de conserver cet état pour une période de temps précisée (CEN). En d'autres termes, c'est une opération permettant d'éliminer ou de tuer 10 les micro-organismes portés par des milieux inertes contaminés, le résultat de cette opération étant l'état stérile (AFNOR NF T 72 101). Les exemples qui suivent visent à illustrer la présente invention. 15 EXEMPLES Exemple 1 : Préparation d'une solution électrolyte selon l'invention Une solution électrolyte selon l'invention est préparée selon le procédé suivant : a) l'eau de source Eau de Molène ® est pompée directement dans un forage et expédiée dans la journée ; 20 b) l'eau de mer est pompée avec une pompe inox au large de l'île de Molène, à 30 m de profondeur par temps calme lors des marées montante et conditionnée dans un container inox ou plastique stérile ; c) 74 % d'eau de source de Molène et 26 % d'eau de mer pure sont mélangées pour obtenir une solution électrolyte isotonique aux propriétés osmotiques (composée 25 d'eau de mer et d'eau de source en mélange isotonique) ; d) le mélange obtenu est introduit dans une cuve en inox dont la surface interne est recouverte avec un liner ; e) microfiltration à 0.2 microns ou passage en osmose inverse ; et f) conditionnement de la solution obtenue en sachet ou container stérile. 3041253 11 Exemple 2 : Dosage des principaux ions d'une solution électrolyte selon l'invention Analyse comparative avec le plasma sanguin humain Les concentrations ioniques de la solution ainsi obtenue à l'exemple 1 sont mesurées selon la méthode par colorimétrie automatisée selon la norme ANA-19.MOA.47.Q pour les ions 5 chlorure, selon la méthode AAS Flamme et la norme NF EN ISO 7980 pour les ions calcium et magnésium, selon la méthode par AAS flamme selon la norme NF T90-020 pour les ions potassium et sodium. Le tableau 1 ci-dessous compare les différentes concentrations en ions de la solution électrolyte obtenue dans l'exemple 1 avec celles du plasma sanguin humain et du sérum 10 physiologique reconstitué : solution selon Plasma humain Sérum physiologique l'invention sanguin* reconstitué (eau saline) Conductivité (ffi.cm-1) 1122 1311 Principaux Concentration (g/L) ions Chlorure 3.89 3.60 3.65 Calcium 0.14 0.11 0.10 magnésium 0.35 0.03 0.02 Potassium 0.15 0.16 0.16 Sodium 2.78 3.40 3.27 TOTAUX 7.31 7.30 7.20 Sulfates 0.72 0.72 0.048 Phosphore 0.00 0.04 0.036 Silicates 0.00 Cuivre 0.00 0.001 Fer 0.00 0.001 Iode 0.002 Manganèse 0.03 Zinc 0.007 TOTAUX 8.07 8.06 7.28 3041253 12 *Valeurs normales - Source : Encyclopédie Larousse : « sang » Tableau 1. La concentration des principaux sels minéraux et oligo-éléments de la préparation de la 5 solution osmotique selon l'invention est donc isotonique par rapport à celle relevée dans le plasma sanguin humain. C'est donc une solution électrolyte qui possède une conductivité similaire à celle mesurée dans le plasma sanguin, c'est-à-dire sa capacité à conduire le courant électrique. Les sels minéraux et les oligo-éléments sont à l'état ionisé et donc chargés électriquement 10 ce qui donne à leur forme une bio-biodisponibilité et permet les échanges osmotiques. Exemple 3 : Test de viabilité cellulaire - Analyse comparative entre la solution électrolyte selon l'invention et l'eau déminéralisée et le sérum physiologique Objectif de l'étude Cette étude concerne la détermination de la capacité in vitro de la solution selon 15 l'invention d'influencer positivement la prolifération cellulaire et l'activation mitochondriale. Conditions expérimentales Matériels Le modèle expérimental est représenté par des fibroblastes dermiques humains (ATCC- 20 CRL-2703). Le test de prolifération est réalisé en utilisant: - Les cultures de cellules traitées pendant 24 heures, - Les cultures de cellules traitées pendant 48 heures, - Les cultures de cellules traitées pendant 72 heures. 25 - Les cultures cellulaires sans aucun traitement - témoin non traité, CTR (pendant les mêmes périodes expérimentales) Le test d'activation mitochondrial a été effectué en utilisant: - Les cultures de cellules traitées pendant 8 heures - Les cultures de cellules traitées pendant 24 heures 30 - Les Cultures de cellules sans aucun traitement - témoin non traité, CTR (pendant les mêmes périodes expérimentales) 3041253 13 Préparation du modèle expérimental et exposition des cellules Une détermination préliminaire de la viabilité, à partir de 100%, a été réalisée par le test MTT pour choisir les concentrations de produits à utiliser dans le test in vitro. Le produit 5 n'a pas montré d'effet cytotoxique et les concentrations suivantes ont été utilisées pour effectuer des essais: 100%, 50% et 25%. Le milieu de dilution est le milieu cellulaire. La détermination de la viabilité et le test de prolifération des cellules ont été effectuées en comparaison avec une solution saline et de l'eau distillée. 10 Test MTT - test de viabilité préliminaire et test de la prolifération cellulaire Test de viabilité préliminaire: le milieu de culture contenant la solution selon l'invention à des concentrations scalaires de 100% a été ajouté dans les puits contenant les cellules en confluence. Les cellules ont été exposées à chaque solution pendant 24 heures. A la fin de la période d'incubation, la coloration MTT a été réalisée afin d'évaluer la viabilité cellulaire 15 par rapport au témoin non traité (CTR) Test de prolifération cellulaire: le milieu de culture contenant la solution selon l'invention à des concentrations scalaires de 100% a été ajouté aux puits contenant des cellules non en confluence et précédemment traités avec un milieu de maintenance sans sérum. Les cellules ont été exposées à chaque solution pendant 24, 48 et 72 heures. A la fin de la 20 période d'incubation, la coloration MTT a été réalisée afin d'évaluer la viabilité cellulaire par rapport au témoin non traité (CTR) Test MTT: le milieu MTT est préparé en ajoutant 15 mg de MTT ((bromure de 344,5- diméthylthiazol-2-y1)-2,5-diphényl tétrazolium) à 30 ml de milieu de culture. Après exposition des cellules à la solution selon l'invention, elles ont été lavées avec 200 pl de 25 PBS. Après élimination de la solution de lavage, 200 pl du milieu MTT sont ajoutés à chaque puits de culture et on incube ensuite pendant 4 heures à 37 ° C et 5% de CO2. A la fin de la période d'incubation, le milieu MTT est éliminé et 200 pl de solution de solubilisation MTT (10% de Triton X-100 plus 0,1 N HC1 dans de l'isopropanol anhydre) sont ajoutés. 30 La plaque est agitée sur une plaque rotative de 20 à 30 minutes, afin de garantir que tous les cristaux sont dissous à partir des cellules et ont formé une solution homogène. L'absorbance est mesurée à 570 nm sur un lecteur de microplaques, avec lecture de fond à 690 nm. 3041253 14 Les résultats sont exprimés en pourcentage de viabilité cellulaire par rapport à une culture de cellules de contrôle non traitées. Evaluation de l'activité mitochondriale 5 A chaque temps expérimental, les cellules ont été recueillies, soumises à centrifugation et remises en suspension dans du milieu de culture avec JC1 (1 ug/m1). Après 15 minutes d'incubation à 37 °C, les échantillons ont été mesurés avec un cytofluorimètre Pas III équipé d'un filtre pour lecture JC 1 . Les résultats ont été élaborés pour obtenir des valeurs de fluorescence correspondant à 10 différentes activités mitochondriales. Résultats Test de la viabilité cellulaire Le tableau 2 ci-dessous résume les résultats obtenus du test de la viabilité cellulaire. Concentration Viabilité cellulaire (%) (% par rapport au milieu cellulaire) Solution Sérum physiologique Solution déminéralisée selon (traditionnellement (traditionnellement l'invention utilisé en pharmacie) utilisée en cosmétique) 100.00 80.83 16.04 14.41 50.00 89.48 74.89 87.40 12.50 96.55 95.52 95.73 Tableau 2. 15 Le traitement des fibroblastes dermiques humains avec 100% de la solution selon l'invention permet de préserver dans sa quasi-totalité la vie cellulaire alors que dans les deux autres milieux le taux de mortalité cellulaire atteint 84-86%, c'est-à-dire une mortalité cellulaire dans sa quasi-totalité. Ce test démontre la capacité de la solution osmotique selon l'invention de maintenir la vie 20 des cellules avec pratiquement aucune altération en créant probablement un environnement cellulaire ou physiologique qui recrée un équilibre homéostasique pour la vie et la survie des cellules de la peau. Test de la prolifération cellulaire 25 Le tableau 3 ci-dessous résume les résultats obtenus du test de la prolifération cellulaire. 3041253 15 Concentration Prolifération cellulaire (%) (% par rapport au milieu cellulaire) Solution Sérum physiologique Solution déminéralisée selon (traditionnellement (traditionnellement l'invention utilisé en pharmacie) utilisée en cosmétique) 32,03% 24,70% 23,64% 100.00 ± 1,84% ± 0,84% ± 0,33% 24 h 102,36% 81,91% 85,22% 25.0 0,67% ± 0,50% ± 0,17% 34,35% 27,72% 24,98% 100.00 ± 0,84% ± 0,37% ± 0,18% 48 h 112,41% 90,50% 99,91% 25.0 0,73% ± 0,37% ± 0,37% 32,31% 24,43% 23,36% 100.00 ± 2,26% ± 0,67% ± 0,17% 72 h 91,78% 84,31% 99,49% 25.0 4,52% ± 0,50% ± 0,17% Tableau 3. Les résultats de ces tests démontrent la capacité de la formule isotonique selon l'invention à accroitre la prolifération cellulaire, c'est-à-dire la régénération des cellules et leur 5 multiplication, et ce comparativement à l'eau déminéralisée et le sérum physiologique. Cette stimulation est significative, comme le montre les données statistiques du tableau 4. : T-test 24 h 48 h 72 h 100 % solution selon l'invention vs 100 % sérum p = 0.0196 p = 0.0021 p = 0.0102 physiologique 25 % solution selon l'invention vs 25 % sérum p = 0.0002 p = 0.0000 p = 0.0612 physiologique Tableau 4. 10 La solution osmotique selon l'invention favorise donc le renouvellement des cellules. 3041253 16 Test de mesure de l'activité mitochondriale La synthèse des résultats de ces tests est donnée dans le tableau 5 ci-dessous : Temps Milieu Solution selon Solution selon Solution selon CTR l'invention à l'invention à l'invention à 100 % 50 % 25 % Mitochondries 88.8 % 91.1 % 97.4 % 93.8 % non actives ± 1,6 % ± 1.5 % ± 1.3 % ± 1.1 % 8h Mitochondries 11.2 % 8.9 % 2.6 % 6.2 % active ± 1.3 % ± 1.3 % ± 1.8 % ± 1.2 % Mitochondries 88.8 % 90.3 % 96.3 % 92.9 % non actives ± 0.9 % ± 1.6 % ± 1.2 % ± 1.7 % 24 h Mitochondries 11.2 % 9.7 % 3.7 % 7.1 % active ± 1.7 % ± 1.4 % ± 1.2 % ± 1.4 % Tableau 5. 5 Le nombre des mitochondries actives dans les cellules traitées avec la solution osmotique n'est pas supérieur à celui des cellules traitées avec le milieu de culture témoin. Cependant, alors que dans les cellules de contrôle, la quantité de mitochondries actives est constante pendant 24H, dans les cellules traitées avec la solution osmotique, il y a une augmentation du nombre de mitochondries actives sur la même période : 10 * +8.9% entre 8H et 24 H dans la solution osmotique à la concentration de 100% * +42.3 % entre 8H et 24 H dans la solution osmotique à la concentration de 50% * +14.5% entre 8H et 24 H dans la solution osmotique à la concentration de 25%. La solution osmotique selon l'invention modifie positivement l'environnement cellulaire en augmentant significativement l'activité mitochondriale. Elle a donc un effet bénéfique 15 sur le rendement énergétique des cellules. Les conséquences de cet effet bénéfique sont reconnues : la cellule produit moins de radicaux libres et vieillit moins vite. Conclusion Le traitement des cellules humaines avec la solution osmotique selon l'invention améliore 20 l'environnement cellulaire en augmentant la durée de vie et la viabilité cellulaire et leur capacité de renouvellement tout en activant l'activité mitochondriale. 3041253 17 La solution osmotique selon l'invention préserve la vie cellulaire alors que les cellules ne survivent pas dans l'eau déminéralisée ou le sérum physiologique. Les mécanismes de renouvellement cellulaire sont stimulés de façon significative et de façon plus importante que dans les deux autres milieux. Les mécanismes de réparation et 5 de régénération sont améliorés. Enfin, l'activité mitochondriale étant plus importante, la solution osmotique selon l'invention réduit le stress oxydatif car les cellules vieillissent moins vite et produisent moins de radicaux libres. La solution osmotique selon l'invention osmotique est donc un milieu de vie en équilibre physiologique avec le milieu originel des cellules. Elle en 10 préserve l'homéostasie. Elle peut le remplacer. REVENDICATIONS1. Composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle comprenant une solution électrolyte isotonique, caractérisée en ce que ladite solution électrolyte isotonique est constituée de : 74 % en poids d'une eau de source, par rapport au poids total de la solution électrolyte isotonique, et - 26 % en poids d'eau de mer, par rapport au poids total de la solution électrolyte isotonique. 10 2. Composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle selon la revendication 1, caractérisée en ce que la solution électrolyte isotonique comprend les ions suivants: chlorure (CP) à une concentration comprise entre 3500 et 4000 mg/L, 15 avantageusement entre 3700 et 3900 mg/L, plus avantageusement 3890 mg/L ; calcium (Ca2÷) à une concentration comprise entre 100 et 150 mg/L, avantageusement entre 110 et 150 mg/L, plus avantageusement 138 mg/L ; - magnésium (Mg2+) à une concentration comprise entre 250 et 400 mg/L, avantageusement entre 300 et 350 mg/L, plus avantageusement 346 mg/L ; 20 - Potassium (K+) à une concentration comprise entre 100 et 200 mg/L, avantageusement entre 150 et 170 mg/L, plus avantageusement 150 mg/L ; et Sodium (Na+) à une concentration comprise entre 2500 et 3500 mg/L, avantageusement entre 2700 et 3500 mg/L, plus avantageusement 2783 mg/L. 25 3. Composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que la solution électrolyte isotonique présente une concentration totale en ions chlorure, calcium, magnésium, potassium et sodium de 7.31 g/L. 30 4. Composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que la solution électrolyte 3041253 isotonique a une conductivité comprise entre 1000 et 1500 12-1.cm-1, avantageusement de 1115 et 1130 0-1.cm-I, plus avantageusement de 1122 f1"l.cm-l . 5. Composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle selon l'une 5 quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que l'eau de source comprend les ions suivants : chlorure (CF) à une concentration comprise entre 100 et 200 mg/L, avantageusement entre 160 et 200 mg/L, plus avantageusement 174 mg/L ; calcium (Ca2±) à une concentration comprise entre 30 et 60 mg/L, avantageusement entre 35 et 45 mg/L, plus avantageusement 40 mg/L ; magnésium (Mg2+) à une concentration comprise entre 15 et 35 mg/L, avantageusement entre 10 et 20 mg/L, plus avantageusement 18 mg/L ; Potassium (KI à une concentration comprise entre 65 et 85 mg/L, avantageusement entre 70 et 80 mg/L, plus avantageusement 73 mg/L ; et Sodium (Na+) à une concentration comprise entre 100 et 200 mg/L, avantageusement entre 80 et 120 mg/L, plus avantageusement 103 mg/L. 6. Composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que l'eau de source est l'eau de 20 source de l'Île de Molène. 7. Composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce qu'elle est formulée sous forme de solution, solution buvable, sérum, lotion, spray, lait, émulsion huile dans eau, émulsion eau 25 dans huile ou hydrogel. 8. Composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre au moins un agent actif et au moins un excipient cosmétiquement ou dermatologiquement 30 acceptable. 9. Composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisée en ce,v'elle est destinée àprévenir ou à 3041253 traiter les signes du vieillissement cutané, les signes d'une peau sensible ou sensibilisée et/ou d'une peau atopique. 10. Utilisation d'une solution électrolyte isotonique telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 9 en tant que solvant actif dans une composition cosmétique ou dermatologique ou nutritionnelle, avantageusement destinée à prévenir ou à traiter les signes du vieillissement cutané, les signes d'une peau sensible ou sensibilisée et/ou d'une peau atopique. 10 11. Méthode de soin cosmétique comprenant l'administration, de préférence topique ou orale, d'une composition cosmétique ou nutritionnelle telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 9 et avantageusement destinée à prévenir ou à traiter les signes du vieillissement cutané, et les signes d'une peau sensible ou sensibilisée. 15 12. Composition dermatologique telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 9, pour son utilisation dans une méthode de soin dermatologique, avantageusement pour prévenir ou traiter les signes du vieillissement cutané, les signes d'une peau sensible ou sensibilisée et/ou d'une peau atopique. 13. Procédé de préparation d'une solution électrolyte isotonique telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 9, comprenant les étapes suivantes : a) mélange de 74 % en poids de l'eau de source et de 26 % en poids de l'eau de mer, par rapport au poids total de la solution électrolyte isotonique ; b) stérilisation du mélange obtenu, avantageusement par des procédés à froid, plus avantageusement par microfiltration à 0,2 itm ou par passage en osmose inverse ; c) éventuellement, conditionnement de la solution obtenue, de préférence en sachet ou ampoules ou emballages sous vide.