Brevet FR3038606A1 — publié le 20170113

La pré. invention concerne une nouvelle o,---tdon thérapeutique de glycéropho[ Les ma... olines ,jE2.5 connt : Intestini ; et les cancers intestinal.rx. touchent une grande partie de la populati^ titrn :le con: connus pour leur application- anti-intH3rflmatoires antiturnelt peut citer, net7rnrne asplr ne à faibles doses (ce dernier étantrriorra, (dérivé d Tortes doses), 5-aminc-salicylique d'action s corticoïdes gui agissent oelon des - ,ecanismes l'aspirine r'll.--.1Pote cyclooxygénase II (COX II 10 également nommée C ')(-2) qui empêche :cès de l'a( arachidonique, donc la production de prostagla'nes pro- inflammatoires. Par ailleurs, l'acide 5-amino-salicy lhibe le chimiotactisme des leucoc,rtes la synthèse de ifinterleukine-8. Les .'K]es, quant à eux, inhiber': Vft.ifiammation via une régulation nége 15 de ...'..scription des cytokines pr,..nflammatoires. L'action des cortico s ue en amont, et sont donc susceptlole5 'fets secondaires, ruc-n.ment sur le système immunitaire. objectifs de fournir une' 77117erreiVe raitemen à proposés pc ial inflammatoi .ales et 20 .as cancLs ....:estinaux qui ne prcenterait pas, notamment' risques d'effets C;',:-..:ondaires sur le système immunitaire qt1-.. presentent les corticoïdes. Dans le cadre de l'inve les inventeurs ont mis en évidence, de façon totalernert: inattendue, que la 1-acétyl-2-docosahexaénoyl- 25 glycérophosphoenoline (AceDoPC), et plus généralement qu'un c de formule (I) : 3038606 2 OR1 R2X 0 / N+(C1-13 3 0- Fc.. dans laquelle : Rl représente un grcup,:: ,3cy - X représente 0' 1,4 et R2 représente gras insatu. liaisonç carbone-, ou I sous Ir proportion Par crPothles ou 30 hydrates, peuvent', .. e présent- soLp:-; forme quide, _, des solutions, des érru...sb 3, des su:- is ou 7!e.s sir_ ts I: ,'K::k:;s L peuvent par exemple, l -!s solvants orgi--- 3038606 10 tels - '?..s glycols, de .r.'" ue leurs s, dal :ion -es Une Tl ?ion sous f-.(::f-r1--e sirop ou d'exil- ou pour l'administration sous forme o :LA:tes peul: fr,:o-Iteru, ;Ingrédient actif conjointement avec un édu!corant ac .,;';que, un - ftlue, ainsi ri "un agent donnant di^ nr"t et u colorar roprié. I. nules l'ingrée.--^ -avec c ents cL ou des agents rnOE;Jila de, de mise en SC:74: on, comme a polyvinylpyrrolicbre_ édulcorant Cr.") L're Cte LI VS 10 d,' elon un autre ion a pour objet' comp- 5. de Fornrule (I), ou un de ses; sok/a1-...; pharmace ou hydrates, un e ,;,:omposition pharmaceutique ou issicament, un composé de IcYrrni (I) ou un che., ses sels ou solvats pharmac 15 acceptables ou tel que dans lE3 cadre de iiii-iven; association avec .s un excirient. ;)harrraceutiquement acceptE pour son utilistio;i dary.; traitement ;.il'une maladie ou affection intestinale où nution 1 _,;--;.---;sion et/ou de l'activité de la II .OX II) es =:,:ouh.,-D et/ou 20 - où une diminution e- de la EiCt- et/ou de I 27 est tée, et/ou - dans !ad,.^elle. nre.ssion (ou de l'activité elin cyclooxy . se H (COX II), et particuliEùr rie forte expression ivité de L COX II, contribue à pathckAique et/ou aux syn rElalac; od de 25 l'a --fe..(.,-.1on camposés de fc, de (I) tels que définis dans le cadre de se.ls et suivais pharù ;Jduement et hyc LiJiisatior s ;a fabr :arion ;; un médicarrKrv. pour le ent, er; partulier chez .humain, une telle pathologie ou 30 .^;Dn ; et les le traitieff;ent ;tune telle pathc::,1 gie ou affection dans s une :5. efficace, et en ,rticuMer l'eau 3038606 11 d'un romp, sé de foret _ le défini dans le cadre de l'invention, ou d'un de ses solvats 'utiquement acceptables ou hydrates, est administr: un patient hurnaH ç'nJïl nécessitant un tel traitement. D'une(_,'»on générale, tol_,H /atlantes précédemment pour les composés (I) sont Jles mutatis fnui:ai;Uis üux médicaments, coma Iti(ms, méthodes Hisations ls:ttant en oeuvre ces cc,rriposés. Selon des mode_ rs des composit médicaments, méthodes et utilisILV.r 1 iinv composition, ledit médicament, ladite méthode c ladite utilisac ura VuNisation de 10 ladite composition ou dudit médk-7.ament ^d. dLLIVIL dtânti-agrégation plaque re, et en particulier pour c )ntre les maladies cardio- vascula.:. es, y compris l'athéro.r--- les insuffisances ou déficiences en acHes gras essentiels, parlyuller dans le aau, notamment déc-i,e dans la demande 7Q, pour une actvft 15 modulF- r-idibant l'activité du uculier décrite dans la deman: - -013/037862. Les exem ° cl-après perTru?,t-1:::n1:: cri ..,..str,771 lir mais r aucun rrni selon le ,a JuunJu 'vvo (3B413, par t77ns-estérification de la position .57-I de 1-p,,,lrditoyi,.2- docosahexaénoyl-,, ::.--?rophosphocholine (P-H par !ipare en présence d'acétate ci vire et en absence d'e 25 ,!cte d'Ac( - )PC. L'AceDoPC a été soumis aux tests suivants 1. Cell ?.s en La lignée ceiluicur r29 parentale (HT29 ant d'un adénocarcinome colique, cultivée en monoc le confluence en milieu DMEM Huccos Modifled EdlP Medium) coi 30 10% de Sérum feau Fcet déd rmp rrrH ul. 1 '0 de l Streptomycine. 20 eE 3038606 12 2. , s ave r )oI La r É isoMico dans l'E'- compEraIlvement aux contrôles cellu ncuhés avec la même concentrUordéthanol. d9n-ratkn du Bre 5- L. Jrno-2'- deoxyuridine ni toside-sy', e la thymidine, dans l'ADN cpurs d ication. 10 4, 'E - ,sions éiq L','.2i:ossion totiques BdI-2 et. HSP-27 ont urées par imm ï. r 1g) a in antic commercial spécifiqi )urni société Sigma-Aldrich selon 15 méthoiologie recomnutrldée par r sseur. L'actk, ptotique prot ï a été établie c littérature 'e3oL 3ax at the rate o pour BdI-2 sionc 20 cancer prognosis. Bloc: ysica Acta 1741 (2005) 25-77 Paul-Samojedm Da Koko cadiusz - jedny, LF 'r.77 ilazurek, Robert Partyka, Zu r eusz opo d 5`,' ::rrrr; Rev., C>nre 2 (9) nr .47-656. S. . Jj-1. ArJ:1 irfl 25 :onol:itui,',,e,y si - ende, osis in colorectal cancer The Bcl 2 family: regulators ' r c . . Jen- i. 200 - Pour HSP27 : Heat shock prote the turnGri carcinoma ceil clones. Cancer Ras. 30 Fromentin A, Bonnotte B, Favre L r id Jo Milner, rat colon 1;58(23):54f Garrido Cl, ^rrigo AP, ehlen Solary E, 3038606 13 Apoptosis Versus Cell Differen. Rote of F Sh C['..K Proteins HSP90, HSP70 and HSP27. Prion 2007, (1), p53-60. Unneau, Aurelie de Sebastic il, Celine Didelot & Carmen Garrido. L'expressien de Viso-forme indu clo-oxygénase-2 (COX II) a été mesurée de a r manière avec'. s fourni par la société Abcam. 5. Mes' --es pr_ :aglandines. Les prostaglandines D2 et E2 (romm.ées égaI7rr7nt PGE2 c PGD2) --)résentatives de la voie générale ,:le biosynthèse prosta mes in et prostaglandines pro-inf-nmatoires isu (COX ont été mesurées par chromatographie liquide à haute performance couplée à la. spectrométrie de masse en tandem (LC-MS/MS), méthodologie utilisée par la platebrme IBiSA de Lipidomiq rp:7.--Uortnelle (IMBL-INSA de 15 Ces prostaglandines ont rnesurées sur les cellules ulture et en présence des iso-formes de _.rases cc r.sttuCie et inductible pures. 20 La FigurE., e . 'vc l'exp COX II à différe .e 1, 2 et 20 1. L ente ui de ta sé7..r":q.',H: de PGE2 en l'absence d'AceDoP2E te concentrat-kr, 'le 20 pM n de la p :ior d r ules HT29P à 25 ur,pr,,-,ntes concert Cc d'Ace[ .>C (1, 2, 20 et 1.:1 Figure 4 présente l'év 1e Vexpre;ro cl-2 à différentes concentrations d'Acel 1. 2 et 20 1.. 1.7 e 5 présente rirotéique de HSP-27 canc.entHlions d'AceDoPC ( 30 rez p risque ; Cr : contrôle qui a été fait sans AceDoPC, c'est-à-dire en p-':r nce -le son solvant:. 3 0 3 8606 14 Les résulta 'S ésentés sur ces figures montrent que sur lescs iira!es tu - l'exnref:t-;Ti protéique de la cyclo-oxygénase inductible COX II est diminuée c 1/3 par 20 d'AceDoPC (F - rte diminution envi re 8l)/o en mesurart .-ésultat résultat qui est e ia mrreie concer d'AceDoPC pass 1 additionnelle l'activité de COX 1)résentés tiqus ttpi,ti sur lit . 10 Les résultats présentés Fuie t-it-tetit-cent - que la prolifération des cer.ites cancéreuses est inhibée dienvftetrr 50% à une conceritrelioit tit,1 crAceDoPC (Fi; - l'expressictr des deux protéines anti-apoptotiques Bd-2 et est significative aux faibles concentrations d'AceDoPC ' - les 15 Fig. 4 et 5 respectivement). L'AuttlitttoPC présente donc une t'ttttie anti proliférative su :e11 cancéreuses, certainement liée à la.s.tt;us resslon des deux pru, unti- apoptotiques et diminution de l'exprestttic.g.le COX IL Les essai5 - sés sur cyclo-oxygénafitte 'irifiée ont été menés pour 20 comparer l'effet crAceDoPC à son équiva' Bétyle (1-lyso-2-D 7'2) et à son ana ttp,),t..! acétylé sans DHA (1-a 'le-PC), étant don DHA est connu pour inhiber les COX purifies (Rau GH, Radha E, I 117(2) : 549-555). Les résultats sont présentés dans I' 1 E'::t 7 1-après. Les résultats sont. présentés en nr:Tti, et. repre,7-ttntitter.tlti somme 25 + PGE2, puis ne de trois mesure LI SD (déviation ou erreur standard), e ée. 3038606 Tableau 2 : Effet des composés : 1-lyso-2-DHA-PC, 1-acétyl-2-oléoyl-PC et AceDoPC sur la protéine COX I de mouton (40 unités de COX I/échantillon) Contrôle 1-1yso-2- 1-acety1-2- AceDoPC DHA-PC oleoyl-PC (100 pM) (100 pM) (100 pM) 77.1 40.7 71.2 30.8 71.6 21.7 46.4 12.5 47.0 25.2 43.7 9.8 moyenne+SD 65.2+1.0a 29.2+10.1b" 53.8+15.2b 24.4+5.7b- Inhibition 55.21% 17.48% 62.58% 10 Les nombres portant la même lettre en exposant ne sont pas significativement différents les uns des autres ; a et b indiquent donc deux valeurs significativement différentes. Les astérisques permettent de préciser le niveau de signification. * : p REVENDICATIONS1. - Cor osé de formule (I) 17 OR1 R2X N 4"( CH3)3 Formule (I) rep rite un groupe acyle, en particulier un acétyle, - X représ , Sou NH, et - R2 reprÉ. -7nte un acyle gras insaturé comprenant au _doubles liaisons carbone-ca. pore, ou un de ses hydrates, sels ou solvats pharmaceutiquement acceptabl 10 sous la forme d'un isomère pur ou d'un mélange d'isomères en Wu__ proport ou médicament ou composition pha ,aceutique corrç',?.nant un tel composé de formule (1) ou un de ses hydrates, sels ou solvats pharmaceutiquement acceptables, sous la forme d'un isomère pur ou d'un mélange d'isomères en toutes proportions, pour son utilisation dans le traitemen ,:tancer intestinal ou d'une inflammation intestinale. 2 - Composé de formule (I) : OR1 R2X N °(CH3)3 Formule (I) 3038606 18 dans laquelle : - R1 représente un groupe acyle, en particL:Lr in acétyle, - X représente 0, S ru NH, et - R2 représer '27.; un acyle gras insatu comprenant au moins deux doubles liaisons carbone-c4i uJne, ou un cie ses hydrates, uL dhum uceLduuement acc- sous la forme d'un isorrdn cni Jun mélange d'isomères e; proportions, ou iment ou - rmaceuti omprenant un tel nnmdaé 10 c1,2 iuue (I) ou un de ses hydrates, sels ou solvats nh7.-p-p-Tiacou..iqueinent sous la forme d - mère pur ou d'un ru: cPi.,::rrenères en proportions., pour son utilisaUon dans le traitemerd J une maladP7 nu affection : - où une diminution du l'expression et/ou la 15 cyclooxygénase II (COX II) est souhaitée, et/ou - où une diminL du Je l'exprE_ de la BcI-2 et/ou de la HSP-27 est souhaitée ,/ru 20 l'expression et/ou de l'activité de In cyclooxygénase II ijculier une forte expression et/ou a;Limité de la COX II, :at ligue aux symptôm malacu, ,de Jon. 3 - Composé, ---;-'-..ament e!! mposiJcn pharmaceutique pour utilisation, seb.:)n ndication 1 cc 2 caractérisé en ce que R1 représi un groline qui comprend c préférence de 2 à 6 At(111PÇ rI carhn 25 e- par dc R1 est u jroupe -COR3, avec R3 ii r-- :hyl yle, n-pr - iso-propyle, n-butyle, ter-butylE 4 - Composé, meuicament ou compostLon ,--uuque pour son une des revendications 1 à 7, caractérisé e7 ce que R2 est, parmi : les diènes ou triènes conjugués, eamment parmi les diènes EE, ZE et EZ, les diènes ZZ J rdfurés, et les tr---ies EZE, EEZ, ZEE, ZEZ, EEE et ZZZ, les tnènes EZE et ZZZ « du:--éférés, 3038606 19 gras polyinsaturat --..Dinprenant 2, 3, 4, 5 (7 a-carbone séparées par Dtarr.ie de carbone, lesquels !e7 'ais: u c3rbone-carbone sont toutes de configuration Z, et plus nt = .as correspondant à un acide gras n-3 ou n- 6, * !ours dérivés, et leurs métaboltb.s. - Composé, médicament , .rosition pharmaceuUque pour son utilisation, selon l'une des revendications 1 à 4 caractérisé en ce: R2 représente un acyle gras triène E gué ou correspond à la parti,.: acyle 10 d.. nPA, ARA, LNA ou LA. osé, médicament ou co b.Dr, pharmaceutique pour son utilisation, _elon l'une des revendicat,..'.....I caractérisé en ce q e le con-posé de formule (I) ut est le 1-acéW .c..).;ahexu;:no),,1- glycerophosr cht)ne: 15 meaicamen c tion pharrr u sation, selon l'une des re. I. à 6, dans icait rrtlie inflammatoire intestinale. ,..titlx1 notamment podr le traitement ou de la r-i----- - e de Crohn, ou dans le traitenlent de diverticuP-J:es con 20