Brevet FR3048287A1 — publié le 20170901

PROCEDE DE DETECTION D'ACCOUCHEMENT IMMINENT DESCRIPTION Domaine technique La présente invention se rapporte à un procédé de détection/prédiction in-vitro d'accouchement imminent et à un dispositif de mise en oeuvre du dit procédé. La présente invention trouve, notamment une application dans le domaine médical, le domaine diagnostique, en particulier dans le domaine obstétrique. Dans la description ci-dessous, les références entre crochets ([ ]) renvoient à la liste des références présentée à la fin du texte. Etat de la technique Durant la grossesse, les femmes peuvent être soumises à différents facteurs et/ou évènements susceptibles de mettre en danger la grossesse et/ou de provoquer un accouchement prématuré ou de déclencher l'accouchement. Un accouchement prématuré est un facteur de risque à la fois pour la mère mais également pour l'enfant à naitre. Un accouchement prématuré est dans 50% des cas précédé d'une menace d'accouchement prématuré c'est-à-dire la survenue d'association de modifications cervicales et de contractions utérines régulières et douloureuses entre les 22 et 36ème semaines d'aménorrhées. Les accouchements prématurés sont responsable de 75% la mortalité néonatale, de la moitié des déficits neurologiques et représente la première cause d'hospitalisation en cours de grossesse, soit environ 60 000 hospitalisations par an. En fonction de la date d'accouchement, et de l'âge du foetus, il existe différent type de maternité afin d'assurer les soins correspondants aux nouveau-nés. 3048287 2 Les maternités de niveau I disposent d'une unité d'obstétrique et permettent la prise en charge des grossesses normales. Ces maternités assurent une présence pédiatrique permettant l'examen du nouveau-né et la prise en charge auprès de la mère d'un certain nombre de situations 5 fréquentes et sans gravité. Les maternités de niveau II disposent d'une unité d'obstétrique et d'une unité de néonatalogie. Elles permettent une prise en charge des grossesses à risques modérés et des nouveau-nés nécessitant une surveillance particulière, mais pas de soins en réanimation. 10 Les maternités de niveau III disposent d'une unité d'obstétrique, d'une unité de néonatalogie et d'une unité de réanimation néonatale. Elles permettent une prise en charge des grossesses à haut risque et des nouveau-nés présentant un risque à la naissance, il peut s'agir notamment des grands prématurés moins de 33 semaines. 15 Un accouchement prématuré peut se produire chez des femmes dites à risque, par exemple présentant une hypertension, un diabète gestationnelle, mais également chez des femmes ne présentant pas de tels facteurs, dite à faible risques. De nombreuses études et recherche ont été réalisées sur le 20 travail et/ou l'accouchement prématuré. Toutefois, il n'existe pas actuellement de moyens/procédé totalement fiable de prédiction de ce travail/accouchement prématuré. Les moyens connus pour le traitement du travail/accouchement prématuré sont des moyens pharmacologiques qui sont utilisés une fois le travail en cours. Il s'agit par exemple dans le cas de 25 travail prématuré à 30 semaines d'aménorrhées, de protocole pharmacologique avec administration de tocolytique, par exemple du tractocile pendant 48 heures, de nifédipine, accompagné le cas échéant d'une administration de corticoïdes pour la maturation des poumons du foetus. 30 II existe donc un réel besoin de trouver un procédé / un moyen de prédiction/détection d'accouchement imminent pour mieux contrôler le 304 82 87 3 risque de prématurité, en particulier un procédé permettant une prise en charge anticipée/rapide des femmes enceintes. Des recherches de « marqueurs » ont été effectuées afin d'essayer d'élaborer / d'identifier des marqueurs utiles pour la prédiction 5 d'accouchement prématuré. Par exemple, la longueur du col échographique, la présence de la fibronectine foetale, IGFBP-1 et de la PAMG-1 dans les sécrétions cervico-vaginales ont été étudiés. L'IGFBP-1 et de la fibronectine sont considérés comme des marqueurs de maturité du col. Il a été décrit qu'une combinaison de ces marqueurs pourraient 10 éventuellement améliorer la prédiction d'un accouchement prématuré [6]. En particulier, Eroglu et al a décrit que la combinaison de la fibronectine / IGFBP-1 et de la longueur échographique du col REVENDICATIONS1. Procédé de détection/prédiction in-vitro accouchement imminent, comprenant une étape de recherche simultanée, dans un prélèvement de sécrétions vaginales ou cervicales, des marqueurs du groupe constitué de la protéine 1 de liaison au facteur de croissance Insulinomimétique intacte (IGFBP-1A), de la protéine 1 de liaison au facteur de croissance Insulinomimétique intacte et/ou un fragment N- Terminal de la protéine 1 de liaison au facteur de croissance Insulinomimétique (IGFBP-1 B) et de l'interleukine 6 (IL-6), un accouchement imminent est détecté/prédit lorsque au moins deux des marqueurs du groupe constitué de la protéine 1 A de liaison au facteur de croissance Insulinomimétique (IGFBP-1A), de la protéine 1 B de liaison au facteur de croissance Insulinomimétique (IGFBP-1B) et de l'interleukine 6 (IL-6), sont détectés. 2. Procédé selon la revendication 1 dans lequel la recherche est effectuée avec au moins un anticorps de capture dirigé contre l'IL-6, au moins un anticorps de capture dirigé contre l'IGFBP-1A et au moins un anticorps de capture dirigé contre l'IGFBP-1 B. 3. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes dans lequel la recherche est effectuée à partir d'un prélèvement de sécrétions vaginales ou cervicales dilué dans une solution tampon. 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes dans lequel le procédé comprend l'ajustement d'au moins un des paramètres choisis parmi le volume, le pH, la force ionique du milieu tampon. 3048287 44 5. Procédé selon la revendication 4 dans lequel le procédé comprend l'ajustement d'au moins un des paramètres choisis parmi la concentration des anticorps de capture, ledit ajustement étant spécifique à l'IL-6, à l'IGFBP-1 A ou à l'IGFBP-1 B. 5 6. Procédé selon la revendication 4 ou 5 dans lequel le procédé comprend l'ajustement d'au moins un des paramètres choisis parmi la concentration des anticorps de capture, ledit ajustement étant spécifique à l'IL-6, à l'IGFBP-1A et/ou l'IGFBP-1 B. 10 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 4 à 6 dans lequel le pH de la solution tampon est de 5 à 10. 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 15 précédentes dans lequel ladite étape de recherche comprend une étape de révélation effectuée avec au moins un anticorps marqué anti IGFBP-1A, au moins un anticorps marqué anti IGFBP-1 B et au moins un anticorps marqué anti IL-6. 20 9. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'IGFBP-1 A est détecté à partir d'une concentration de 40 ng/ml. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 25 précédentes, dans lequel l'IGFBP-1 B est détectée à partir d'une concentration de 20 ng/mL intacte et/ou de 10 ng/ml du fragment N-Ter d'IGFBP-1. 11. Procédé selon l'une quelconque des revendications 3 0 précédentes, dans lequel l'IL-6 est détectée à partir d'une concentration de 0,25 ng/ml. 3048287 45 12. Dispositif de mise en oeuvre du procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 11 comprenant: - une zone (1) de dépôt d'un échantillon - une zone (2) comprenant des anticorps anti IGFBP-1 A, des 5 anticorps anti IGFBP-1 B et des anticorps anti IL-6 marqués. - une zone (3) de révélation comprenant des anticorps de capture dirigés contre IGFBP-1 A, - une zone (4) de révélation comprenant des anticorps de capture dirigés contre l'IGFPB-1 B, 10 - une zone (5) de révélation comprenant des anticorps de capture dirigés contre IL-6. 13. Dispositif selon la revendication 12 dans lequel la zone de dépôt (1) est choisi dans le groupe comprenant un papier absorbant et 15 un support en fibre de verre. 14. Dispositif selon la revendication 12 ou 13 dans lequel la zone de révélation (4) et/ou (5) est une membrane de nitrocellulose. 20 15. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 12 à 14 dans lequel la zone (2) et/ou (3) est un support en fibre de verre. 16. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 12 à 15 dans lequel les zones (1), (2) et/ou (3) est un support en fibre de 25 verre ou de nitrocellulose. 17. Utilisation du dispositif selon l'une quelconque des revendications 12 à 16 pour la mise en oeuvre du procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 11. 30