Brevet FR3037656A1 — publié le 20161223

PROCÉDÉ D'ÉVALUATION DU RISQUE DE CONTRACTER LA DIARRHÉE DU VOYAGEUR ET TROUSSE POUR LA MISE EN OEUVRE DE CE PROCÉDÉ L'invention concerne un procédé d'évaluation du risque 5 de contracter la diarrhée du voyageur ou turista, ainsi qu'une trousse d'essai ou kit permettant la mise en oeuvre de ce procédé. Arrière-plan de l'invention 10 La diarrhée du voyageur ou turista est l'infection la plus courante affectant les voyageurs, puisqu'on estime qu'elle se manifeste dans 20 à 50% des voyages de courte durée. On comprend donc qu'elle soit très connue et ce, sous de nombreuses appellations, aussi variées qu'amusantes, 15 telles que « complainte de l'été », « course de Turquie », « gallop grec », « danse aztèque Il s'agit d'une infection du type gastro-entérite se manifestant par une diarrhée, à laquelle s'ajoutent d'autres symptômes comme des douleurs et crampes abdominales, des 20 nausées, des vomissements et, plus rarement, de la fièvre et du sang dans les selles. Elle survient normalement dans les pays à faible niveau d'hygiène alimentaire ou hydrique. L'infection est le plus souvent d'origine bactérienne 25 (80% des cas), parfois virale et beaucoup plus rarement parasitaire. Elle peut se transmettre par les aliments, par l'eau contaminée par des matières fécales, par des mouches, etc. Bien qu'elle soit une maladie généralement bénigne et 30 d'évolution favorable même sans traitement chez des sujets normaux, elle peut durer de 3 à 6 jours, ce qui signifie qu'elle constitue un réel désagrément et peut gâcher un séjour. On considère d'ailleurs qu'elle est suffisamment 3037656 2 gênante pour obliger à des changements de programme de voyage dans presque 25% des cas. Il n'existe à ce jour pas de médicament préventif ni aucun vaccin contre la turista. Il convient donc de prendre des précautions et la règle d'or des voyageurs est en la matière « peel it, boil it, cook it or forget », en d'autres termes, il faut soi-même éplucher, faire bouillir, cuire ou oublier les aliments, pour s'assurer de leur innocuité. Toutefois, ceci n'est pas toujours possible et il faut bien se sustenter. C'est pourquoi les voyageurs se munissent généralement de médicaments traitant la turista. Malheureusement, ceux-ci peuvent à terme entraîner la sélection de bactéries résistantes que le voyageur emportera avec lui lors de son retour dans pays d'origine. Ces bactéries inexistantes ou peu existantes dans ce pays risquent alors de contaminer la population locale, ce qui constituerait une catastrophe. De plus, pour la turista comme pour toute maladie, il vaut toujours mieux prévenir que guérir. Exposé sommaire de l'invention De façon surprenante, les inventeurs sont parvenus à concevoir une solution au problème posé par la turista, solution qui ne soit pas du type curatif, mais bien du type 25 préventif. En effet, plutôt que de proposer un nouveau traitement de la turista, ils ont mis au point un procédé permettant, avec une fiabilité très élevée, d'éviter d'en être victime. Plus précisément, l'invention a trait à un procédé 30 d'évaluation du risque de contracter la diarrhée du voyageur, comprenant les étapes successives suivantes : 3037656 3 - on prélève un échantillon d'un aliment destiné à être ingéré et susceptible de provoquer la diarrhée du voyageur ; et - on met l'échantillon en contact avec un substrat 5 comprenant un matériau test pour la détection de l'agent ou des agents responsable(s) de la diarrhée du voyageur. Selon un autre aspect, l'invention se rapporte à une trousse d'essai ou kit, comprenant au moins : - un dispositif de prélèvement d'échantillon(s) ; et 10 - un substrat comprenant un matériau test pour la détection de l'agent ou des agents responsable(s) de la diarrhée du voyageur. Selon un autre mode de réalisation, l'invention a trait à un appareil d'évaluation du risque de contracter la 15 diarrhée du voyageur, comprenant : - au moins un substrat comprenant un matériau test pour la détection de l'agent ou des agents responsable(s) de la diarrhée du voyageur; - au moins un dispositif de prélèvement d'échantillon ; 20 - des moyens de détection du résultat du test ; et - des moyens de communication de ce résultat à un utilisateur. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention vont maintenant être décrits en détail dans l'exposé 25 suivant. Exposé détaillé de l'invention Procédé selon l'invention Selon l'invention, on commence par prélever un 30 échantillon de l'aliment à tester. Si celui-ci est solide ou serai-solide, par exemple s'il s'agit d'un petit pois, on peut utiliser tout moyen approprié, par exemple une pincette ou une spatule stérile, 3037656 4 et introduire l'échantillon dans un petit récipient tel qu'un petit sac ou une petite bouteille, en vue de l'homogénéiser par agitation. Une partie de l'échantillon solide est ensuite déposée sur le substrat directement à 5 partir du sac ou de la bouteille OU en utilisant à nouveau la pincette ou spatule. Si l'aliment est liquide, comme dans le cas d'un jus de fruits, d'un cocktail ou d'une soupe, on peut se servir par exemple d'un compte-gouttes, d'une pipette ou d'un tampon 10 d'extraction pour le prélèvement de l'échantillon liquide et son dépôt sur le substrat. Un seul prélèvement est normalement suffisant. Cependant, pour plus de sécurité, on peut déposer deux ou trois gouttes du même échantillon sur le substrat, en 15 laissant un espace entre eux afin qu'ils ne se touchent pas. Selon l'invention, le substrat comprend un matériau test pour la détection de l'agent responsable de la diarrhée du voyageur. De préférence, le matériau test comprend un matériau test pour la détection d'Escherichia coli 20 entérotoxinogène (ETEC) au moins. En effet, il est connu au moins depuis la publication du brevet étasunien n° US 4 411 888 (1983) que la principale cause de la turista est l'Escherichia coli entérotoxinogène. De préférence, le substrat comprend au moins deux zones 25 séparées, l'une servant de témoin et l'autre servant de test, l'échantillon étant alors mis en contact avec chacune de ces zones. De plus, la zone de test comprend préférablement au moins deux anticorps monoclonaux différents dirigés contre 30 les entérotoxines d'ETEC. Il est en outre avantageux de viser au moins les entérotoxines ST et LT d'ETEC. Il est souhaitable d'avoir recours à un matériau test du type visuel, en particulier immuno-chromatographique, de 3037656 5 façon à ce que la réaction se traduise par un changement de couleur visible à l'oeil nu. Le substrat peut se présenter sous la forme d'un papier imprégné du matériau test, tel qu'un papier absorbant, par 5 exemple un papier du type buvard. Une fois l'échantillon déposé sur le matériau test, le résultat peut apparaître immédiatement ou quelques instants plus tard, en fonction du matériau test utilisé. Il est préférable de patienter, par exemple au moins 5 secondes et 10 on peut généralement estimer à 3 minutes le temps maximal de réaction. Une fois ce temps de réaction écoulé, on prend connaissance du résultat. Dans le cas particulier d'un matériau immuno- 15 chromatographique, un changement de couleur doit normalement se produire dans la zone témoin et si une réaction entre l'échantillon d'aliment testé et le matériau test a eu lieu, un changement de couleur apparaît également dans la zone test. 20 En revanche, si un seul changement de couleur est visible dans la zone témoin, l'échantillon n'est pas contaminé par ETEC. Si jamais un changement de couleur est observé uniquement dans la zone test, il faut conclure à une 25 invalidité de l'essai et le test devrait être répété. Kit selon l'invention Le kit selon l'invention n'a pas pour but de traiter la turista mais simplement d'éviter d'en être victime. 30 Pour cela, il comprend au moins : - un dispositif de prélèvement d'échantillon(s) ; et 3037656 6 - un substrat comprenant un matériau test pour la détection de l'agent ou des agents responsable(s) de la diarrhée du voyageur. Ce matériau test est de préférence un matériau test 5 pour la détection d'Escherichia coli entérotoxinogène (ETEC) au moins. Il s'agit de préférence d'un matériau test comportant au moins deux anticorps monoclonaux différents dirigés contre les entérotoxines d'ETEC et en particulier visant les formes ST et LT d'ETEC au moins. 10 Le dispositif de prélèvement peut être de nature très variée, il peut s'agir, comme indiqué précédemment pour un aliment solide, d'une pincette ou d'une spatule stérile accompagnée d'un petit récipient tel qu'un petit sac ou d'une petite bouteille en vue d'homogénéiser l'échantillon 15 par agitation. Pour un aliment liquide, on utilise de préférence un compte-gouttes. Bien entendu, le kit selon l'invention peut comprendre un ou plusieurs types de dispositifs de prélèvement pour 20 aliment liquide et/ou un ou plusieurs types de dispositifs de prélèvement pour aliment solide. Quant au substrat décrit ci-dessus, il peut se présenter sous la forme d'une bandelette et le kit selon l'invention peut en prévoir plusieurs. Le kit selon l'invention peut contenir plusieurs substrats identiques et/ou plusieurs substrats différents. Chaque substrat peut être spécialisé ou adapté à la région à laquelle il est destiné. On peut par exemple, concevoir un substrat ou un kit pour l'Amérique du Sud, un 30 autre pour l'Afrique ou un autre encore pour le Moyen-Orient ou l'Asie... Le kit selon l'invention est éventuellement muni d'un agent anti-humidité tel que des particules de silice. 3037656 7 Bien qu'il soit prévu pour être conservé à température ambiante (25°C), il est souhaitable de le réaliser sous une forme résistante à la chaleur. Il est de préférence scellé lors de sa fabrication pour 5 éviter toute contamination avant utilisation. Le matériau test est avantageusement choisi d'une grande sensibilité et spécificité. Ainsi, en cas d'utilisation correcte, la fiabilité du test est normalement supérieure à 90%. Il s'ensuit qu'il 10 n'est en principe pas nécessaire de refaire plusieurs fois le même test sur un aliment donné. Chaque substrat est normalement à usage unique. Chaque dispositif de prélèvement est aussi normalement à usage unique car si un utilisateur devait le nettoyer ou le laver 15 après utilisation, il risquerait de le contaminer et de fausser le test suivant. De manière générale, le kit selon l'invention est prévu pour être facilement transportable et utilisable par tout un chacun. 20 Selon un autre mode de réalisation, l'invention a trait à un appareil d'évaluation du risque de contracter la diarrhée du voyageur, comprenant : - au moins un substrat comprenant un matériau test pour la détection de l'agent ou des agents responsable(s) de la 25 diarrhée du voyageur, tel que décrit précédemment ; - au moins un dispositif de prélèvement d'échantillon(s) comme décrit précédemment ; - des moyens de détection du résultat du test ; et - des moyens de communication de ce résultat à un 30 utilisateur. Ces moyens de détection peuvent réaliser une détection visuelle du résultat. Ils peuvent notamment détecter un changement de couleur du matériau test. 3037656 8 Puis, ils transmettent ce résultat aux moyens de communication. Ceux-ci peuvent être de nature très diverse. Ils peuvent être électroniques, filaires ou sans fil, etc. Grâce à eux, le résultat peut être visualisé par l'allumage 5 d'une LED (diode électroluminescente), il peut aussi être envoyé sous forme de message écrit (SMS...) en utilisant un réseau téléphonique ou sans fil (WIFI...), il peut être sonore (sonnerie, bip, etc.) et/ou peut consister en une vibration. Concrètement, l'appareil peut se présenter sous la 10 forme d'un boîtier et être disposé, par exemple, à l'intérieur d'un restaurant. Un touriste voulant être rassuré sur l'hygiène du restaurant peut prélever un échantillon de son plat et aller l'introduire dans l'appareil. Il saisit ensuite sur un clavier son numéro de 15 téléphone et retourne à sa place dans le restaurant. Un moment plus tard, il reçoit sur son téléphone un signal lui indiquant qu'il peut - ou ne devrait pas - consommer l'aliment testé. 20 Exemple Un test a été effectué sur un cocktail de fruits (ananas, melon, pastèque et pêche). A l'aide d'un petit compte-goutte du kit selon l'invention, on a prélevé du jus du cocktail et l'a déposé sur un substrat en papier buvard 25 comportant une zone de détection ayant trois fenêtres immuno-chromatographiques : une première pour le témoin, une deuxième pour la détection des entérotoxines SL d'ETEC et une troisième pour la détection des entérotoxines LT d'ETEC. Chaque fenêtre recevait une goutte de jus. Après soixante secondes environ, on a observé la présence de trois taches de couleur rose/violette : deux lignes dans les fenêtres de test et une dans la fenêtre témoin. On en a donc déduit que le résultat était positif, 3037656 9 ce qui voulait dire que le risque de souffrir de turista en cas d'avalement du cocktail était très élevé. S'il n'était apparu qu'une seule ligne de couleur rose/violette dans la fenêtre témoin, on en aurait conclu 5 que l'aliment n'était pas contaminé par ETEC. Mais si une coloration s'était manifestée dans l'une ou dans les deux fenêtres de test sans apparaître dans la fenêtre témoin, cela aurait voulu dire que le test était erroné et il aurait fallu le refaire. 10 REVENDICATIONS1.- Procédé d'évaluation du risque de contracter la diarrhée du voyageur, comprenant les étapes successives suivantes : - on prélève un échantillon d'un aliment destiné à être ingéré et susceptible de provoquer la diarrhée du voyageur ; et on met l'échantillon en contact avec un substrat comprenant un matériau test pour la détection de l'agent ou des agents responsable(s) de la diarrhée du voyageur, qui est un matériau pour la détection au moins d'Escherichia coli entérotoxinogène (ETEC). 2.- Procédé selon la revendication 1, dans lequel 15 l'échantillon est liquide. 3.- Procédé selon la revendication 2, dans lequel l'échantillon est prélevé à l'aide d'un compte-gouttes. 20 4.- Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, dans lequel le substrat comprend au moins deux zones séparées, l'une servant de témoin et l'autre servant de test, et l'échantillon est mis en contact avec chacune de ces zones. 25 5.- Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, dans lequel on utilise un substrat en papier buvard comportant une zone de détection ayant trois fenêtres immunochromatographiques : une première servant de témoin, une deuxième pour la détection des entérotoxines SL d'ETEC et 30 une troisième pour la détection des entérotoxines LT d'ETEC. 3037656 2 6.- Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, comportant une étape supplémentaire consistant à patienter avant de prendre connaissance du résultat. 5 7- Procédé selon la revendication 6, dans lequel on patiente pendant 5 secondes à 3 minutes. 8.- Kit comprenant au moins : - un dispositif de prélèvement d'échantillon(s) ; et 10 - un substrat comprenant un matériau test pour la détection de l'agent ou des agents responsable(s) de la diarrhée du voyageur, qui est un matériau pour la détection au moins d'Escherichia coli entérotoxinogène (ETEC). 9.- Kit selon la revendication 8, dans lequel le matériau pour la détection d'Escherichia coli entérotoxinogène (ETEC) comprend au moins deux zones séparées, l'une servant de témoin et l'autre servant de test. 10.- Kit selon la revendication 9, comprenant un substrat en papier buvard comportant une zone de détection ayant trois fenêtres immuno-chromatographiques : une première servant de témoin, une deuxième pour la détection des entérotoxines SL d'ETEC et une troisième pour la détection des entérotoxines LT d'ETEC. 11.- Kit selon l'une des revendications 8 à 10, dans lequel le matériau test est du type visuel. 12.- Kit selon la revendication 11, dans lequel le matériau test est du type immuno-chromatographique. 3037656 3 13.- Kit selon l'une des revendications 8 à 12, dans lequel le dispositif de prélèvement d'échantillon(s) est un compte-gouttes. 5 14.- Kit selon l'une des revendications 8,9 et 11 à 13, dans lequel le substrat comprend un papier du type buvard. 15.- Appareil comprenant : - au moins un substrat comprenant un matériau test pour 10 la détection de l'agent ou des agents responsable(s) de la diarrhée du voyageur, qui est un matériau pour la détection au moins d'Escherichia coli entérotoxinogène (ETEC) ; - au moins un dispositif de prélèvement d'échantillon(s) ; 15 - des moyens de détection du résultat du test ; et - des moyens de communication de ce résultat à un utilisateur.