Brevet FR3039404A1 — publié le 20170203

Le secteur technique de la présente invention est celui des compositions destinées à traiter la peau des patients en modifiant les phénomènes d'interaction de nature glycobiologique. On sait que les interactions de nature glycobiologique fonctionnent par l'intermédiaire de protéines d'adhésion, les lectines, qui reconnaissent des ligands osidiques. Les lectines peuvent être libres (extra ou intracellulaire) ou transmembranaires. Les lectines 10 reconnaissent de manière spécifique des ligands mono- et oligosaccharides. Les lectines spécifiques pour des monosaccharides sont classifiées en cinq groupes, selon l'ose pour lequel elles présentent la plus forte affinité: le mannose (Man), le 15 fucose (Fuc), le galactose (Gal) et N-acétylgalactosamine (GalNAc), le N-acétylglucosamine (G1cNAc), et l'acide sialique (NeuAc, acide N-acétylneuraminique). Les similarités structurales entre monosaccharides sont déterminantes pour la spécificité des lectines. Par exemple, 20 la plupart des lectines qui reconnaissent le Gal se lient aussi au GalNAc. Certaines lectines peuvent reconnaître le mannose et le fucose telles que DC-SIGN de mammifère. Les lectines sont des protéines ubiquitaires présentes dans tous les organismes vivants (eucaryotes ou procaryotes) 25 et non vivants (dans l'enveloppe de certains virus). Il existe une grande variété de lectines qui présentent une très grande diversité structurale. Le nombre de structures cristallographiques de lectines est toujours en croissance, et on connaît aujourd'hui la structure 30 tridimensionnelle d'environ 770 lectines. Les lectines animales sont réparties dans des familles très différentes. Les trois familles les plus étudiées sont les galectines, les lectines de type C et les siglecs : - les Galectines reconnaissent les structures 35 lactosaminiques. Elles ont par exemple un rôle dans la migration et la ré-épithélialisation. - Les lectines du type C présentent un CRD (Carbohydrate Recognition Domain) bien conservé qui implique un atome de 3039404 2 calcium dans l'interaction protéine-sucre (Drickamer 1993). Les lectines de type-C sont soit circulantes, soit attachées aux surfaces cellulaires par la présence d'un segment transmembranaire. On y retrouve DC SIGN, DECTIN-1 et 5 LANGERIN. Elles ont un rôle par exemple dans l'immunité innée. - Les Siglecs, ou lectines de type I, constituent une famille de lectines qui reconnaissent l'acide sialique (Crocker 2002). Elles sont membres de la superfamille 10 immunoglobuline et adoptent un repliement de type immunoglobuline. Les lectines interviennent chez les individus dans les mécanismes de communication, de mobilité, de différenciation, de reconnaissance immune, de ré-épithélialisation. 15 Par exemple, un faible taux de « Mannose Binding Lectine » (MBL : lectine soluble) a été associé à certaines infections cutanées. MBL peut être également associé aux sérines protéase (MASPs) et est essentiel pour la réponse immunitaire innée et les premières défenses contre des 20 pathogènes. Egalement des lectines membranaires comme DC-SIGN ou DECTIN-1 participent aux réponses immunitaires innées par reconnaissance des ligands glycosylés en provenance de bactéries, de virus, de cellules circulantes, de toxines, 25 d'hormones. Toute altération dans ces systèmes de reconnaissance par interaction glycobiologique peut induire par exemple une modification de la réponse immune innée. Le demandeur a découvert de manière totalement fortuite 30 et avec surprise qu'une eau minérale ou minéralisée incorporant l'une et l'autre des Archées et/ou leurs extraits, (désignés tous deux dans la suite de la description par Archées) pouvait moduler les interactions de nature glycobiologique des cellules du corps humain. 35 Le but de la présente invention est de mettre à la disposition de l'homme de l'art une composition apte à assurer et développer les défenses immunitaires des patients. 3039404 3 L'invention a donc pour objet une composition cosmétique et/ou dermatologique et/ou thérapeutique pour la stimulation et/ou régulation du système humain de reconnaissance immunitaire de la peau et des muqueuses, caractérisée en ce 5 qu'elle comprend à titre de principe actif 0,001 à 1% d' Archées et 1 à 99,999% en masse d'une eau minérale ou minéralisée comprenant au moins : - entre 40 mg/1 et 600 mg/1 de calcium, et/ou de sels et/ou de dérivés de celui-ci, - entre 12,5 mg/1 et 125 mg/1 de magnésium, et/ou de sels et/ou de dérivés de celui-ci, - entre 4 mg/1 et 42 mg/1 de silicium, et/ou de sels et/ou de dérivés de celui-ci, les autres ingrédients étant constitués par des composés 15 admissibles dans les domaines cosmétique et/ou dermatologique et/ou thérapeutique, et ladite composition assurant une interaction des molécules glycosylées avec des lectines. Par Archées, on entend les Archées elles-mêmes ou leurs extraits de membranes, de cytoplasmes, d'organites ou de 20 noyaux ou également les molécules et métabolites que ces Archées peuvent produire. Selon une caractéristique de l'invention, le calcium et le magnésium et/ou les sels et/ou les dérivés de ceux-ci présents dans l'eau minérale ou minéralisée se trouvent dans 25 un rapport massique Ca/Mg compris entre 1 et 10. Selon une autre caractéristique de l'invention, le calcium et le silicium et/ou les sels et/ou les dérivés de ceux-ci présents dans l'eau minérale ou minéralisée se trouvent dans un rapport massique Ca/Si compris entre 1 et 30 20. Selon encore une autre caractéristique de l'invention, les Archées sont présentes dans une proportion massique de 0,05% et l'eau minérale ou minéralisée dans une proportion massique de 1 à 15% pour la stimulation du système humain de 35 reconnaissance immunitaire. Selon encore une autre caractéristique de l'invention, les Archées sont présentes dans une proportion massique de 0,05% et l'eau minérale ou minéralisée dans une proportion 3039404 4 massique supérieure ou égale à 30% pour la régulation inflammatoire du système humain de reconnaissance immunitaire. Selon encore une autre caractéristique de l'invention, 5 les Archées sont présentes dans une proportion massique de 0,05% et l'eau minérale ou minéralisée dans une proportion massique de 10%. Selon encore une autre caractéristique de l'invention, les Archées sont présentes dans une proportion massique de 10 0,05% et l'eau minérale ou minéralisée dans une proportion massique de 30%. Selon encore une autre caractéristique de l'invention, l'eau minérale est constituée par l'Eau Thermale d'Uriage, l'eau, l'Eau Thermale d'Avène, l'Eau Thermale de La Roche-15 Posay, ou l'Eau Thermale de Saint-Gervais. Selon encore une autre caractéristique de l'invention, la composition selon l'invention se présente sous la forme d'un spray aérosol nasal et des doses unitaires nasales ou oculaires. 20 Un tout premier avantage de la composition selon l'invention réside dans l'effet surprenant de l'augmentation de l'intensité des interactions de néoglycoprotéines sur les récepteurs osidiques à la surface de kératinocytes (NHEK) et à la surface de bactéries (S.aureus, S.epidermidis, P.acnes) 25 en présence des deux principes actifs selon l'invention. Un autre avantage de la présente invention réside dans l'augmentation de l'interaction des lectines de type C (DCSIGN, DECTIN-1, LANGERIN). Un autre avantage encore de la présente invention réside 30 dans l'augmentation progressive de l'intensité d'interaction pour les lectines DECTIN-1 et LANGERIN qui diminue à 15% pour s'annuler à 20%. Un autre avantage encore de la présente invention réside dans le renforcement des défenses de l'organisme. Cette 35 propriété nouvelle peut être utilisée avantageusement dans des compositions cosmétiques et/ou dermatologiques et/ou thérapeutiques comprenant à titre d'actifs une eau minérale ou minéralisée. 3039404 5 Un autre avantage de l'invention réside dans la possibilité de faire varier l'action des Archées et de l'eau minérale ou minéralisée en fonction du pourcentage de celles-ci dans la composition. Ainsi, un pourcentage faible d'eau, 5 par exemple inférieur ou égal à 15% en masse, combiné aux Archées, stimule des défenses immunitaires tandis qu'un pourcentage d'eau supérieur ou égal à 30% et d'Archées régule ces défenses immunitaires. D'autres caractéristiques, détails et avantages de 10 l'invention seront mieux compris à la lecture du complément de description qui va suivre de modes de réalisation donnés à titre d'illustration. Une composition comprenant à titre de principe actif des Archées et une eau minérale ou minéralisée riche en oligo- éléments et sels minéraux permet d'agir potentiellement sur l'interaction de molécules glycosylées (ligands) avec des lectines impliquées dans les mécanismes d'immunité innée, particulièrement au niveau des kératinocytes et des Les Archées peuvent être issues d'une source 20 hydrothermale continentale souterraine d'eau minérale ou minéralisée. Les Archées sont des micro-organismes procaryotes de petite taille sans noyau, qui ne se distinguent pas des bactéries sur le plan morphologique. Leur spécificité a été mise en évidence en 1977 par les travaux de 25 Carl Woese et George E. Fox. Un nouvel arbre phylogénétique a été publié fondé sur les séquences des molécules d'ARN ribosomique 16S (ARNr 16S) des organismes étudiés, arbre dans lequel les procaryotes étaient scindés en deux branches distinctes, celui des Bactéries et 30 celui des Archées. Ces analyses ont montré que les séquences des ARNr 16S des Archées étaient pratiquement aussi éloignées des séquences des ARNr 16S des bactéries que de celles des ARNr 18S des Eucaryotes. 35 L'originalité des Archées a été rapidement confirmée par l'analyse de leurs glycérolipides membranaires. Alors que les glycérolipides des bactéries et des Eucaryotes sont formés par l'estérification d'une molécule de glycérol par deux 3039404 6 molécules d'acide gras, les glycérolipides des Archées (archaeol) sont formés par l'éthérification d'une molécule de glycérol par deux molécules d'isoprénol (des alcools à longue chaîne branchés). De plus, les glycérolipides d'Archées 5 présentent une isomérie optique inversée par rapport à ceux des bactéries et des Eucaryotes (le carbone central du glycérol étant asymétrique, les molécules de glycérolipides existent en effet sous deux formes isomériques, tout comme les acides aminés ou les sucres des acides nucléiques). 10 Les Archées ont longtemps été vues comme des organismes essentiellement extrêmophiles présents notamment dans les sources hydrothermales océaniques, les sources chaudes volcaniques ou encore les lacs salés, mais on en a découvert depuis dans tout une variété de biotopes qui ne sont pas 15 nécessairement extrêmes, tels que le sol, l'eau de mer, des marécages, la flore intestinale et même le nombril humain. Les Archées seraient particulièrement nombreuses dans les océans, et celles faisant partie du plancton constitueraient l'un des groupes d'organismes les plus abondants de la Terre. Les Archées interviennent par ailleurs de façon non négligeable dans le cycle du carbone et le cycle de l'azote. On ne connaît pas vraiment d'exemple d'Archées pathogènes ou parasites, mais elles sont souvent mutualistes ou commensales. Les Archées méthanogènes de l'intestin humain et 25 des ruminants participent ainsi favorablement à la digestion. Toutefois, aucune utilisation des Archées n'a été proposée dans le domaine des soins cutanés. Le demandeur a mené de nouvelles recherches pour mettre en évidence la présence éventuelles d'Archées tout 30 particulièrement dans les eaux thermales et les eaux classiques, et plus particulièrement dans les eaux thermales d'Uriage, et pour les identifier. En conséquence, des prélèvements d'eau minérale thermale ont été collectés en triplicate à l'émergence de la source et 35 sur différents points du circuit d'alimentation pour détecter la présence d'Archées dans l'eau minérale thermale. La détection s'effectue par la méthode très sensible de qPCR. Dans un premier temps, une "pan"-détection générale 3039404 7 pour les Procaryotes a été effectuée, couvrant respectivement 98% et 94.6% des séquences de gènes codant pour l'ARNr des Bactéries et des Archées. Dans un second temps a été effectuée une détection spécifique des séquences de gènes 5 codant pour les ARNr d'Archées. Pour la première « pan »-détection Procaryotes, il s'agissait des amorces suivantes: 344F: 5'-ACggggYgCAgCAggCgCgA-3' 806R: 5'-ggACTACVSgggTATCTAAT-3' 10 Pour les ARNr 16S spécifique des Archées, ce sont les amorces suivantes : 340F : 5'-CCCTAYggggYgCASCAg-3' 1000R : 5'-ggCCATgCACYWCYTCTC-3' Les résultats obtenus indiquent la présence d'Archées 15 dans les prélèvements d'eau minérale effectués à la source hydrothermale d'Uriage. On a donc incorporé les Archées dans l'eau minérale ou minéralisée pour obtenir les effets surprenants indiqués plus haut. Par eau minérale ou minéralisée riche en oligo-éléments 20 et sels minéraux, on entend une eau comprenant au moins, relativement à de l'eau commune (robinet ou même bouteille), de hautes proportions notamment des éléments suivants : calcium, magnésium, silicium ainsi que les sels et les dérivés de ceux-ci à laquelle on adjoint les Archées. Les essais effectués avec une eau minéralisée confectionnée à partir de ses composants individuels à laquelle on ajoute le pourcentage indiqué d'Archées permettent de confirmer les propriétés indiquées. Dans la présente invention, on a effectué les essais avec les Archées et une eau minérale ou minéralisée à titre de principe actif, en particulier l'Eau Thermale d'Uriage (ETU), présentant la composition suivante pour un résidu sec de 11 000 mg/1 : - Calcium : 600 mg/l, - Magnésium : 125 mg/l, - Potassium : 45,5 mg/1, - Sodium : 2360 mg/1, - Sulfates : 2860 mg/l, 3039404 8 - Chlorures : 3500 mg/l, - Bicarbonates : 390 mg/1, - Silicium : 42 mg/l, - Zn : 160 pg/l, 5 - Mn : 154 pg/l, - Cu : 75 pg/l, - Fe : 15 pg/l. L'ETU est reconnue comme l'une des eaux thermales minérales les plus équilibrées en oligoéléments et sels 10 minéraux. Elle présente avant une action hydratante efficace lorsqu'elle est appliquée en spray de façon locale. Cette eau thermale offre donc une source d'eau minérale combinée avec les Archées tout à fait avantageuse dans la mise en oeuvre de l'invention. Il va se soi qu'on peut utiliser n'importe 15 quelle autre eau thermale pourvue qu'elle présente une composition analogue. Il est évident pour l'homme de l'art que des eaux minérales équivalentes ou minéralisées non naturelles sont possibles si elles sont utilisées dans des proportions 20 adéquates pour les éléments importants soulignés ci-dessus ou les sels et dérivés de ceux-ci. Ainsi, on peut très bien utiliser dans des proportions adéquates l'Eau Thermale d'Avène qui comprend 42,7 mg/1 de calcium, 21,2 mg/1 de magnésium, 14 mg/1 de silice, ou l'Eau Thermale de La Roche- 25 Posay qui comprend 140 mg/1 de calcium et 30 mg/1 de silicates, ou encore l'Eau Thermale de Saint-Gervais qui comprend 236 mg/1 de calcium, 28,1 mg/1 de magnésium en combinaison avec les Archées. Typiquement, le calcium et le magnésium sont 30 naturellement présents dans les eaux minérales selon l'invention selon un rapport massique respectif Ca/Mg compris entre 1 à 10. Les essais suivants ont été effectués avec l'eau thermale minérale d'Uriage. 35 Pour effectuer les essais, on a utilisé des cellules humaines qui sont des kératinocytes normaux à partir de cellules fournies en cryotubes. Ces cellules sont cultivées et multipliées en plaques de 96 puits de manière à obtenir un 3039404 9 tapis de cellules à confluence ayant 8 à 10 générations à celles des cellules de départ. Les cellules sont lavées plusieurs fois avec une solution tampon classique (PBS) à 4 °C. Puis chaque néoglycoprotéine, diluée en tampon PBS 5 contenant 0,025% de sérum albumine bovine (BSA), est déposée sur les puits de cellules. Les plaques sont incubées pendant 4 heures à +4°C. Après incubation, les puits sont lavés doucement avec du PBS (200 vil, 3 lavages) puis les intensités de fluorescence sont lues après ajout de 100 pl de PBS dans 10 chaque puits. Pour étudier l'inhibition par l'eau thermale dans laquelle les Archées sont incorporées, on mélange cette eau avec les néoglycoprotéines de manière à obtenir des concentrations finales en eau de 10, 20 et 30% en masse. 15 Pour évaluer l'action potentielle des Archées combinées avec l'eau thermale sur l'expression des récepteurs osidiques à la surface des cellules, cette eau est ajoutée directement au milieu de culture de manière à obtenir une concentration finale en eau thermale et d'Archées de 10, 20 et 30% en masse 20 48 heures avant l'examen. Les résultats obtenus montrent que l'eau thermale incorporant les Archées entraîne un renforcement des intensités d'interaction des oses ou des glycannes avec les récepteurs osidiques des kératinocytes exprimés à la surface 25 des cellules en fonction de la concentration d'eau. On obtient également un renforcement des intensités d'interaction des oses ou des glycannes avec les récepteurs osidiques des bactéries. Ainsi, les bactéries Staphylococcus aureus et 30 Propiobacterium acnes présentent une augmentation de l'interaction uniquement de la néoglycoprotéine mannosylée alors que Staphylococcus epidermidis montre une augmentation d'interaction avec toutes les néoglycoprotéines. L'eau thermale incorporant les Archées, selon 35 l'invention, permet donc d'entretenir et de renforcer les interactions de nature glycobiologique dans la matrice extracellulaire, mais également entre la matrice et les cellules. En effet, les glycosaminoglycannes (GAG) 3039404 10 interagissent avec des « GAG binding proteins » au sein de la matrice elle-même mais également avec les cellules environnantes permettant ainsi le maintien des tissus. L'eau thermale et les Archées permettent ce maintien et le 5 renforcent. Il en est de même des autres eaux thermales citées auparavant incorporant les Archées. Pour déterminer l'activité d'interaction procurée par l'eau minérale ou minéralisée combinée avec les Archées, on a effectué les essais suivants. Les études effectuées sont 10 menées avec des lectines recombinantes humaines sélectionnées en fonction de leur action dans l'immunité et/ou l'homéostasie cutanée. DC-SIGN : cette lectine est impliquée dans l'immunité innée ; c'est un marqueur des cellules dendritiques 15 (lesquelles n'expriment pas la langerine). Dectine-1 : c'est un récepteur de b-glucannes, composant majeur de la paroi cellulaire des levures et mycobactéries. Dectin-1 est exprimé au niveau des cellules monocytaires et des lymphocytes T et B. Cette lectine est connue pour des 20 fonctions d'interaction vis-à-vis des pathogènes. Langerine, CD207 : c'est un marqueur des cellules de Langerhans qui reconnaît les motifs mannose, N-acétylglucosamine et fucose. Galectine 3 : au niveau de la peau, Gal 3 est exprimée 25 par les cellules dendritiques, les kératinocytes, les mélanocytes, les fibroplastes et les cellules épithéliales. Ficoline 2 : cette lectine est exprimée à la surface cellulaire sous forme soluble. Cette famille de lectines possède une affinité pour les motifs acétylés et présente des 30 propriétés en terme de reconnaissance de micro-organismes et d'activation de la cascade du complément pour conduire à leur destruction. On a comparé le comportement d'interaction directe entre chaque couple respectif de ligand-lectine, en présence ou non 35 de différentes concentrations d'eau thermale. A cette fin, chaque ligand a été déposé à une concentration correspondant à 50% du maximum de fixation sur la lectine respective. 3039404 11 Les résultats obtenus montrent que l'interaction de ligands avec les lectines recombinantes humaines évolue de manière différente selon les lectines en présente d'eau thermale combinée avec les Archées. Dans la majorité des cas, 5 ces interactions sont sensibles à des concentrations de 20 et 30% d'eau thermale. En revanche, la présence d'Archées à 0,05% en masse et d'eau thermale à 10% renforce nettement l'interaction des lectines DC-SIGN, Langerine et Dectine-l. L'eau thermale combinée avec les Archées présente donc 10 une action générale de contribution et de renforcement des interactions glycobiologiques avec toutefois certaines spécificités en fonction de la lectine considérée. REVENDICATIONS1. Composition cosmétique et/ou dermatologique et/ou thérapeutique pour la stimulation et/ou régulation du système humain de reconnaissance immunitaire de la peau et des muqueuses, caractérisée en ce qu'elle comprend à titre de principe actif 0,001 à 1% d'Archées et 1 à 99,999% en masse d'une eau minérale ou minéralisée comprenant au moins : - entre 40 mg/1 et 600 mg/1 de calcium, et/ou de sels et/ou de dérivés de celui-ci, - entre 12,5 mg/1 et 125 mg/1 de magnésium, et/ou de sels et/ou de dérivés de celui-ci, - entre 4 mg/1 et 42 mg/1 de silicium, et/ou de sels et/ou de dérivés de celui-ci, les autres ingrédients étant constitués par des composés 15 admissibles dans les domaines cosmétique et/ou dermatologique et/ou thérapeutique, et ladite composition assurant une interaction des molécules glycosylées avec des lectines. 2. Composition cosmétique et/ou dermatologique et/ou thérapeutique selon la revendication 1, caractérisée en ce 20 que le calcium et le magnésium et/ou les sels et/ou les dérivés de ceux-ci présents dans l'eau minérale ou minéralisée se trouvent dans un rapport massique Ca/Mg compris entre 1 et 10. 3. Composition cosmétique et/ou dermatologique et/ou 25 thérapeutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que le calcium et le silicium et/ou les sels et/ou les dérivés de ceux-ci présents dans l'eau minérale ou minéralisée se trouvent dans un rapport massique Ca/Si compris entre 1 et 20. 30 4. Composition cosmétique et/ou dermatologique et/ou thérapeutique selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que les Archées sont présentes dans une proportion massique de 0,05% et l'eau minérale ou minéralisée dans une proportion massique de 1 à 15% pour la stimulation 35 du système humain de reconnaissance immunitaire. 5. Composition cosmétique et/ou dermatologique et/ou thérapeutique selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que les Archées sont présentes dans une 3039404 13 proportion massique de 0,05% et l'eau minérale ou minéralisée dans une proportion massique supérieure ou égale à 30% pour la régulation inflammatoire du système humain de reconnaissance immunitaire. 5 6. Composition cosmétique et/ou dermatologique et/ou thérapeutique selon la revendication 4, caractérisée en ce que les Archées sont présentes dans une proportion massique de 0,05% et l'eau minérale ou minéralisée dans une proportion massique de 10%. 10 7. Composition cosmétique et/ou dermatologique et/ou thérapeutique selon la revendication 5, caractérisée en ce que les Archées sont présentes dans une proportion massique de 0,05% et l'eau minérale ou minéralisée dans une proportion massique de 30%. 8. Composition cosmétique et/ou dermatologique et/ou thérapeutique selon l'une quelconque des revendication 1 à 7, caractérisée en ce que l'eau minérale est constituée par l'Eau Thermale d'Uriage,l'eau, l'Eau Thermale d'Avène, l'Eau Thermale de La Roche-Posay, ou l'Eau Thermale de Saint- Gervais. 9. Composition cosmétique et/ou dermatologique et/ou thérapeutique selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que la composition selon l'invention se présente sous la forme d'un spray aérosol nasal et des doses unitaires nasales ou oculaires.