Brevet FR3041643A1 — publié le 20170331

NOUVEAUX LIPIDES AMPHIPHILES RAMIFIES DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention concerne de nouveaux lipides amphiphiles ramifiés. En particulier, la présente invention concerne de nouveaux lipides amphiphiles ramifiés de formule générale (II). La présente invention propose également un procédé de synthèse pour lesdits composés de formule (II), à partir des composés amphiphiles insaturés de formule générale (I). L'invention concerne également l'utilisation des composés de formule générale (II) et des lipoplexes obtenus par formulation des composés de formule générale (II) pour des applications dans lesquelles on recherche des propriétés de fusion améliorées, notamment la transfection. [CH3-(CH2) (CH=CH-CH2CH=CH-CH2 CI-12)-1-1 n /, P q \ \_( N t CH3-(C1-12) (CH=CH-CH2 CH=CH-CH2-f1-127-1:2 n P. « \ /R1 R2 /R2 R1 \ [CH3-(CH2) CH-C1-1-CH2--1-H-CH CI-12)-1-1t n /ii, P a a L3-Z (II) \ \ CH-yH-CH2rcH2)-2 kR3 p, cr ÉTAT DE LA TECHNIQUE Les lipides amphiphiles cationiques constituent une vaste classe de vecteurs couramment utilisés pour la vectorisation des acides nucléiques (ADNp, siARN, ARNm) in vitro ou in vivo. Depuis les travaux pionniers de Felgner et al. (Felgner, P.L.G.; Gadek, T.R.; Holm, M.; Roman, R.; Chan, H.W.; Wenz, M.; Northrop, J.P.; Ringold, M.G.; Danielsen, M. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 1987, 84, 7413-7417), des efforts ont été faits pour proposer de a L3-Z (I) CH3-(CH2) @H-CH-CH n' 1 I R3 R4 3041643 2 nouvelles structures de lipides amphiphiles cationiques permettant d'améliorer l'efficacité de la transfection et d'élargir la connaissance des mécanismes de transfection. La transfection est effectuée grâce à des agrégats supramoléculaires formés par l'association d'un lipide amphiphile cationique avec de l'ADN (lipoplexes). Après 5 l'internalisation cellulaire de ces lipoplexes qui se produit par voie d'endocytose, la libération de la matière nucléique des endosomes vers le cytosol est nécessaire pour éviter la dégradation de la matière chargée à l'intérieur des lysosomes. Différentes stratégies fondées sur une approche moléculaire ont été explorées pour favoriser la déstabilisation de la membrane endosomale ou agir sur la stabilité des 10 lipoplexes après leur internalisation cellulaire. Ainsi de nouveaux lipides amphiphiles cationiques pouvant être protonés dans les endosomes (effet d'éponge à protons) ou clivés par une réaction enzymatique ou redox dans le cytosol ont été proposés pour destabiliser la membrane endosomale. Une autre stratégie pour améliorer l'efficacité de transfection consiste à améliorer la 15 stabilité et les propriétés de fusion des lipoplexes (a) Ewert, K.; Slack, N.L.; Ahmad, A.; Evans, H.M.; Lin, A.J.; Samuel, C.E.; Safinya, C.R. Curr Med Chem., 2004,11, 133-49 ; b) Dan, N.; Danino, D. Adv Colloid Interface Sci., 2014, 205, 230-9). Des travaux ont notamment rapporté une amélioration des transfections en associant des co-lipides comme la 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoetanolamine (DOPE) avec un lipide 20 amphiphile cationique. Cette amélioration est attribuée à la propension de la DOPE à adopter une phase hexagonale inversée qui est connue pour être plus fusogène que les phases lamellaires. Une autre stratégie pour produire des phases non lamellaire consiste à agir sur la forme moléculaire des lipides amphiphiles cationiques. Ewert et al. ont rapporté la synthèse des lipides amphiphiles cationiques possédant un groupe de tête dendritique (Ewert, K.K.; Evans, H.M.; Zidovska, A.; Boux sein N.F.; Ahmad, A.; Safinya, C.R. J. Am. Chem. Soc. 2006, 128, 3998-4006). La forme de cette tête polaire cationique a induit la formation de phases hexagonales Hi lorsqu'ils sont inclus dans une formulation binaire. Des efficacités de transfection élevées ont été observées sur des lignées cellulaires connues pour être 3041643 3 difficiles à transfecter. Lindberg et al ont montré que l'incorporation de deux chaînes phytanyl (chaînes C 16-alkyles méthylés) dans la structure de lipo-phosphoramidate cationique produit une phase hexagonale inversée après la formulation dans l'eau (Lindberg, M.; Carmoy, N. ; Le Gall, T.; Fraix, A.; Berchel, M. ; Lorilleux, C.; Couthon- 5 Gourvès, H. ; Bellaud, P. ; Fautrel, A. ; Jaffrès, P.A.; Lehn, P.; Montier, T. Biomaterials 2012, 33, 6240-6253). De bonnes efficacités de transfection in vivo ont été obtenues avec ce vecteur. Malgré tous ces travaux il existe toujours un besoin pour le développement de nouveaux vecteurs. 10 11 est également souhaitable que ces nouveaux lipides amphiphiles soient obtenus par des voies de synthèse optimisées pour la production à grande échelle nécessaire pour des expériences in vivo. Cependant, il existe toujours un besoin pour le développement d'une nouvelle méthode de synthèse permettant d'obtenir de nouveaux lipides amphiphiles ramifiés à partir d'une modification simple des structures lipides amphiphiles existantes, 15 permettant une forte modularité et n'impliquant pas une synthèse de novo, c'est-à-dire en synthétisant complètement la molécule souhaitée. DÉFINITIONS Dans la présente invention, les termes ci-dessous sont définis de la manière suivante : 20 - "agent de visualisation" : concerne un composé ayant la capacité de visualiser une structure anatomique ou pathologique. "alcényle" : concerne toute chaîne hydrocarbonée linéaire ou ramifiée, portant au moins une double liaison, de 2 à 12 atomes de carbone, de préférence de 2 à 6 atomes de carbone, tel que par exemple éthényle, 2-propényle, 2-butényle, 3-butényle, 2- 25 pentényle et ses isomères, 2-hexényle et ses isomères, 2,4-pentadiényl. "alcynyle" : concerne toute chaîne hydrocarbonée linéaire ou ramifiée, portant au moins une triple liaison, de 2 à 12 atomes de carbone, de préférence de 2 à 6 atomes 3041643 4 de carbone, tel que par exemple éthynyle, 2-propynyle, 2-butynyle, 3-butynyle, 2- pentynyle et ses isomères, 2-hexynyle et ses isomères. "acylamino" : concerne les groupes -NRC(0)alkyle, -NRC(0)cycloalkyle, - NRC(0)cycloalcényl, -NRC(0)alcényl, -NRC(0)alcynyle, -NRC(0)aryle, - 5 NRC(0)hétéroaryle and -NRC(0)hétérocyclique, dans lesquels R est un hydrogène ou un alkyle tel que défini ci-dessous. "alkyle" : concerne toute chaîne hydrocarbonée linéaire ou ramifiée saturée, de 1 à 12 atomes de carbone, de préférence de 1 à 6 atomes de carbone, tel que par exemple méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, n-butyle, sec-butyle, isobutyle, tertio-butyle, 10 pentyle et ses isomères (e.g. n-pentyle, iso-pentyle), hexyle et ses isomères (e.g. n- hexyle, iso-hexyle), et de manière encore plus préférentielle de 1 à 3 carbones, tel que par exemple méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle. "alkyle amino" : concerne le groupe -NHR dans lequel R est un alkyle tel que défini ci-dessus. 15 "alkylaryle" : concerne un groupement comportant un groupement aryle tel de défini ci-dessus lié de manière covalente à un groupement alkyle tel que défini ci-dessus et relié par le groupement aryle. "alkyloxy" : concerne tout groupe -O-alkyle. "alkyloxycarbonyle" : concerne tout groupe -C(0)-0-alkyle. 20 - "amine" : concerne le groupe -NH2. "aminocarbonyle" : concerne les groupes -C(0)NR'R" dans lesquels R' et R" indépendamment choisi parmi le groupe comprenant hydrogène, alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, cycloalkyle, cycloalcényle, hétéroaryle et hétérocyclique, et dans lesquels R' et R" sont éventuellement reliés entre eux avec l'azote auquel ils sont liés 25 pour former un groupe hétérocyclique ou hétérocyclique substitué, tel que par exemple une pipérazine substituée. "aminothiocarbonyle" : concerne les groupes -C(S)NR'R" dans lesquels R' et R" indépendamment choisi parmi le groupe comprenant hydrogène, alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, cycloalkyle, cycloalcényle, hétéroaryle et hétérocyclique, et dans 3041643 5 lesquels R' et R" sont éventuellement reliés entre eux avec l'azote auquel ils sont liés pour former un groupe hétérocyclique ou hétérocyclique substitué, tel que par exemple une pipérazine substituée. "amphiphile" : concerne une espèce chimique possédant à la fois au moins un groupe 5 hydrophile et au moins un groupe hydrophobe. Les triglycérides ne sont pas des espèces amphiphiles ; Selon un mode de réalisation de l'invention, les composés de formule (II) ne sont pas des triglycérides. "aryle" : concerne un système mono- ou polycyclique de 5 à 20, de préférence de 6 à 12, atomes de carbone possédant un ou plusieurs noyaux aromatiques (quand il y a 10 deux noyaux, il est fait référence à un biaryle) parmi lesquels on peut citer le groupe phényle, le groupe biphényle, le groupe 1-naphtyle, le groupe 2-naphtyle, le groupe tétrahydronaphtyle, le groupe indanyle, et le groupe binaphtyle. "arylalkyle" : concerne un groupement comportant un groupement alkyle tel de défini ci-dessus lié de manière covalente à un groupement aryle tel que défini ci- 15 dessus et relié par le groupement alkyle. "contre-ion" : concerne un ion mobile de signe contraire. Des exemples non-limitatifs de ces contre-ions comprennent les ions des métaux alcalins, des métaux alcalino-terreux, des métaux de transition, ammonium, pyridinium, chlorure, bromure, iodure, tosylates, triflates, méthylsulfate. 20 "cycloalkyle" : concerne un groupement alkyle cyclique ou polycyclique, comportant de 3 à 8 atomes de carbone ; de préférence un groupement cyclopropyle, cyclopentyle ou cyclohexyle. "cycloalcényle" : concerne un groupement alcényle cyclique ou polycyclique, comportant de 3 à 8 atomes de carbone; de préférence un groupement 25 cyclopropèneyle, cyclopentèneyle ou cyclohexèneyle. "dialkylamino" : concerne le groupe -NRR' dans lequel R et R' sont des alkyles tel que défini ci-dessus. "hétérocycle" : concerne un groupement non aromatique, complètement saturé ou partiellement insaturé (par exemple, un composé cyclique comportant de 3 à 7 atomes, 3041643 6 un composé bicyclique comportant de 7 à 11 atomes) qui possède au moins un hétéroatome sur l'un des cycles carbonés. Chaque cycle du groupement hétérocycle contenant un hétéroatome peut avoir 1, 2, 3 ou 4 hétéroatomes sélectionné parmi l'azote, l'oxygène et/ou le soufre, les atomes de soufre et d'azote pouvant être 5 optionnellement oxydés et l'atome d'azote potentiellement quaternaire. Le groupe hétérocyclique peut être attaché à tout hétéroatome ou atome de carbone du cycle, où la valence le permet. Les cycles des hétérocycles polycycliques peuvent être fusionnés, pontés et / ou reliés par un ou plusieurs atomes spiro. Des exemples non-limitatifs de ces cycles comprennent les groupes aziridinyle, oxiranyle, thiiranyle, 10 piperidinyle, azetidinyle, 2-imidazolinyle, pyrazolidinyle imidazolidinyle, isoxazolinyle, oxazolidinyle, isoxazolidinyle, thiazolidinyle, isothiazolidinyle, piperidinyle, succinimidyle, 3H-indolyle, indolinyle, isoindolinyle, 2H-pyrrolyle, 1- pyrrolinyle, 2-pyrrolinyle, 3-pyrrolinyle, pyrrolidinyle, 4H-quinolizinyle, 2- oxopiperazinyle, piperazinyle, homopiperazinyle, 2-pyrazolinyle, 3-pyrazolinyle, 15 tetrahydro-2H- pyranyle, 2H-pyranyle, 4H-pyranyle, 3,4-dihydro-2H-pyranyle, oxetanyle, thietanyle, 3-dioxolanyle, 1 ,4-dioxanyle, 2,5-dioximidazolidinyle, 2- oxopiperidinyle, 2-oxopyrrolodinyle, indolinyle, tetrahydropyranyle, tetrahydrofuranyle, tetrahydrothiophenyle, tetrahydroquinolinyle, tetrahydroisoquinolin-1 -yle, tetrahydroisoquinolin-2-yle, tetrahydroisoquinolin-3- 20 yle, tetrahydroisoquinolin-4-yle, thiomorpholin-4-yle, thiomorpholin-4-ylsulfoxide, thiomorpholin-4- ylsulfone, 1 , 3-dioxolanyl, 1 ,4-oxathianyle, 1 ,4-dithianyl, 1 ,3,5- trioxanyle, 1 H-pyrrolizinyle, tetrahydro-1 ,1-dioxothiophenyle, Nformylpiperazinyle, and morpholin-4-yle. "hétéroaryle" : concerne mais n'est pas limité à des cycles aromatiques de 5 à 12 25 atomes de carbone qui sont fusionnés ou liés de manière covalente, typiquement contenant 5 à 6 atomes; au moins un des carbones aromatiques dans au moins un des cycles est remplacé par l'oxygène, l'azote ou le soufre, l'azote et le soufre peuvent potentiellement être oxydés et l'azote potentiellement sous forme quaternaire. De tels cycles peuvent être fusionnés avec un aryle, cycloalkyle, hetéroaryle ou hétérocycle. Des exemples non-limitatifs de ces cycles comprennent les groupes pyrrolyle, furanyle, thiophenyle, pyrazolyle, imidazolyle, oxazolyle, isoxazolyle, thiazolyle, 3041643 7 isothiazolyle, triazolyle, oxadiazolyle, thiadiazolyle, tetrazolyle, oxatriazolyle, thiatriazolyle, pyridinyle, pyrimidyle, pyrazinyle pyridazinyle, oxazinyle, dioxinyle, thiazinyle, triazinyle, imidazo [2, 1 -h] [1 ,3]thiazolyle, thieno [3 ,2-b] furanyle, thieno [3 ,2- h] thiophenyle, thieno [2,3 -d] [1 ,3]thiazolyle, thieno [2,3 -d] imidazolyle, 5 tetrazolo[1,5-a]pyridinyle, indolyle, indolizinyle, isoindolyle, benzofuranyle, isobenzofuranyle, benzothiophenyle, isobenzothiophenyle, indazolyle, benzimidazolyle, 1,3-benzoxazolyle, 1,2-benzisoxazolyle, 2,1- benzisoxazolyle, 1,3- benzothiazolyle, 1 ,2-benzoisothiazolyle, 2,1-benzoisothiazolyle, benzotriazolyle, 1,2,3 -benzoxadiazolyle, 2,1 ,3 -benzoxadiazolyle, 1,2,3 -benzothiadiazolyle, 2,1,3 - 10 benzothiadiazolyle, thienopyridinyle, purinyle, imidazo[1,2-a]pyridinyle, 6-oxo- pyridazin-1(6H)-yle, 2-oxopyridin-1 (2H)-yle, 6-oxo-pyrudazin-1(6H)-yle, 2- oxopyridin-1(2H)-yle, 1,3- benzodioxolyle, quinolinyle, isoquinolinyle, cinnolinyle, quinazolinyle, quinoxalinyle. "hétérocycle neutre protonable" : concerne mais n'est pas limité des cycles 15 aromatiques de 5 à 12 atomes de carbone qui sont fusionnés ou liés de manière covalente, typiquement contenant 5 à 6 atomes; au moins un des carbones aromatiques dans au moins un des cycles est remplacé par l'azote et pouvant être protoné. Des exemples non-limitatifs de ces cycles comprennent les groupes imidazole, pyridine, pyridazine, pyrimidine, pyrazine, quinoleine, quinoxaline, 20 indole. "groupe polaire" : concerne un groupe hydrophile. "groupe réactif' : concerne un groupe capable de réagir avec un autre groupe chimique pour former une liaison covalente, c'est à dire réactif de manière covalente sous des conditions réactionnelles appropriées, et représentant généralement un point 25 de fixation pour une autre substance. Le groupe réactif est un groupement présent sur les composés de la présente invention qui est capable de réagir chimiquement avec un groupe fonctionnel sur un composé différent pour former une liaison covalente. Les groupes réactifs comprennent en général les groupes nucléophiles, électrophiles et les groupes photo activables. 30 "halogéno" : concerne les groupes fluoro, chloro, bromo, ou iodo. 3041643 8 - "halogène" : concerne les atomes de fluor, chlore, brome et iode, préférentiellement concerne les atomes de chlore, de brome et d'iode. "linker" ou " groupe de liaison " : se réfère à une liaison covalente ou un groupement comprenant une série de liaisons covalentes stables, le groupement 5 comportant de 1 à 40 atomes plurivalents choisis dans le groupe constitué de C, N, O, S et P ; liant de façon covalente une groupement, une fonction de couplage ou un groupe vectorisant au reste du ligand de l'invention. Le nombre d'atomes plurivalents dans un linker peut être, par exemple, 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 20, 25 ou 30. Un linker peut être linéaire ou non-linéaire ; certains linkers ont des 10 chaînes latérales ou des groupes fonctionnels pendants (ou les deux). Des exemples de tels chaînes latérales sont des modificateurs d'hydrophilicité, par exemple des groupes solubilisants comme, par exemple, sulfo (-SO3H ou -S03-) ou carboxylate (-000-). Dans un mode de réalisation, un linker est composé de toute combinaison de liaisons simples, doubles, triples ou aromatiques carbone-carbone, carbone-azote, 15 azote-azote, carbone-oxygène et carbone-soufre. Les linkers peuvent à titre d'exemple consister en une combinaison de groupements choisis parmi les groupes alkyle, -C(0)NH-, -C(0)O-, -NI-1-, -S-, -0-, -C(0)- , -S(0)n- où n est égal à 0, 1 ou 2 ; cycles à 5 ou 6 chaînons monocycliques et chaînes latérales fonctionnelles (par exemple sulfo, hydroxy ou carboxy). En outre, lorsque le linker lie une fonction de 20 couplage au reste du ligand de l'invention, ladite fonction de couplage peut ensuite être mise à réagir avec une substance réactive ayant des propriétés vectorisantes, conduisant à un ligand dans lequel le linker lie un groupe vectorisant au reste du ligand. Dans ce cas, le linker contient typiquement un résidu d'une fonction de couplage (tels que par exemple le groupe carbonyle d'un ester, le groupe triazolo 25 résultant d'une réaction click entre un azoture et un alcyne, ou le groupe - NHC(=S)NH- résultant du couplage d'une amine sur une fonction isothiocyanate). - "lipide" : concerne une chaine carbonée linéaire ou ramifiée, saturée, insaturée ou polyinsaturée. Ce motif peut être accroché à la structure d'un amphiphile par un groupement fonctionnel. 30 - "lipoplexe" : concerne un complexe acide nucléique- liposome ; ledit acide nucléique pouvant être l'ADN, le siARN ou l'ARNm. 3041643 9 "liposome" : concerne une vésicule artificielle formée par des bicouches lipidiques concentriques, emprisonnant entre elles des compartiments aqueux. Les liposomes sont obtenus à partir d' amphiphiles. "sel organique" : concerne un composé ionique composé de cations et d'anions 5 formant un produit neutre et sans charge nette, au moins l'un desdits ions étant de nature organique, c'est-à-dire étant un composé carboné ; Des exemples non-limitatifs de ces sels organiques comprennent les sels ammonium, phosphonium, et imidazolium. "transfection" : concerne l'introduction de matériel génétique exogène dans des 10 cellules eucaryotes. - "UV" : concerne la partie du spectre électromagnétique allant d'environ 300 nm à environ 400 nm. - Les linkers phosphorés sont tels que définis ci-dessous dans lequel R, R', R", R' , R"" et R" " ' sont des alkyles ou alkylene tel que défini ci-dessus : 15 alkylphosphate O /R- - \R' alkylphosphonate alkylphosphonite R P II-N --R 1-°/ alkylphosphoramidate alkylphosphoramide alkylthiophosphate 4 /R 0-1 ---°'/ \R' -F-N \ri 7+ e P-N +R"-N 20 alkylthiophosphonate alkylthiophosphoramidate alkylthiophosphoramide 3041643 10 DESCRIPTION DÉTAILLÉE Composés La présente invention concerne un composé amphiphile de formule générale (II) : 1-i R2 R2 RIS n q a CF13-(CH2) (CH-à-I-CH2 à-1-C1-1-CF121-(C1-12)-1-1 CH3-(CH2) (CH-CH-CH2h_( CH-CH-CH CI-12)-e m ^ n' I 1 / , 1 1 P cc R3 R4 R4 R3 L3-Z (II) 5 dans laquelle : Li et L2 représentent chacun indépendamment une liaison simple ou un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes alkyle, aryle, alkylaryle, arylalkyle, alkyloxy, alkyloxycarbonyle ; L3 représente un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes alkyle, 10 alkylphosphoramidates, alkylthiophosphoramidates, alkylphosphate, alkylthiophosphate, alkylphosphonite, alkylphosphonate, alkylthiophosphonate, alkylphosphoramide, alkylthiophosphoramide, alkyloxy ou amine ; Z est un groupe fonctionnel polaire, ledit groupe étant cationique, anionique, zwitterionique ou neutre ; 15 a représente 0 ou 1 ; n, n', q et q' représentent chacun indépendamment un nombre entier de 1 à 15 ; m, m', p et p' représentent chacun indépendamment un nombre entier de 0 à 4 à condition que : au moins un de m et p est différent de 0 ; 20 au moins un de m' et p' est différent de 0 ; Ri et R2 représentent l'un un hydrogène et l'autre un groupe thioether de formule S-L4-R5 et R3 et R4 représentent l'un un hydrogène et l'autre un groupe thioether de formule -S-L4-R5 tel que : 3041643 11 L4 représente une liaison simple ou un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes aminocarbonyle, acylamino, alkylaminocarbonyle, aminothiocarbonyle, alkyloxycarbonyle, alkyle, aryle, cycloalkyle, alkylaryle, arylalkyle, alkyloxy, polyéthylène glycol (PEG), polypropylène glycol (PPG), 5 un peptide ou une combinaison de ceux-ci; éventuellement interrompu ou terminé par -O , S , SO2 ou une combinaison de ceux-ci; éventuellement comprenant en outre un résidu d'un groupe réactif par lequel L4 est relié à Rs ; Rs représente un atome d'hydrogène, ou : groupe polaire choisi dans le groupe des sels organiques de type 10 ammonium, phosphonium, et imidazolium et des hétérocycles neutres protonables ; un groupe réactif choisi dans le groupe comprenant le groupe N3, amino, alkylamino, COOH, amide, maléimide, alcyne, SH, OH, ester, ester activé, acide carboxylique activé, halogéno, nitro, nitrile, isonitriles, acrylamide, 15 aldéhyde, cétone, acétals, cétals, anhydride, thiocyanate, isothiocyanate, isocyanate, hydrazines, hydrazides, hydrazones, éthers, oxydes, cyanates, diazo, diazonium, sulfures, disulfures, sulfoxydes, sulfones, acides sulfoniques, acides sulfiniques, sulfates, acides sulféniques, amidines, imides, imines, imidates, nitrones, hydroxylamines, oximes, acides 20 hydroxamiques, acides thiohydroxamique, allènes, ortho-esters, sulfites, énamines, ynamines, urées, pseudo-urées, semicarbazides, carbodiimides et carbamates ; ou un groupe bioactif choisi parmi les prodrogues, les amino-acides, les peptides, les protéines, les anticorps, les enzymes, les polysaccharides, les 25 nucléosides, les nucléotides, les oligonucléotides, les fluorophores, les chromophores, les radio-isotopes, les carboranes, et des combinaisons de ceux-ci. Le composé de l'invention présente l'avantage d'être fonctionnalisable ou fonctionnalisé. Selon un mode de réalisation, la fonctionnalisation est réalisée à partir de Rs lorsque Rs 30 représente un groupe réactif. Selon un mode de réalisation, les hétérocycles neutres protonables représentent les groupes imidazole et pyridine. 3041643 12 Selon un mode de réalisation, Li et L2 représentent chacun indépendamment une liaison simple ou un groupe alkyloxy. Selon un mode de réalisation, L3 représente un linker choisi parmi les groupes alkyle, alkylphosphate, alkylphosphonate, alkylphosphoramidate, alkylthiophosphoramide, 5 alkyloxy ou amine. Selon un mode de réalisation préféré, L3 représente un groupe alkylphosphoramidate. Selon un autre mode de réalisation préféré, L3 représente un groupe alkyloxy. Selon un mode de réalisation, L4 représente une liaison simple ou un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes alkyles, aryle, cycloalkyle, alkylaryl, 10 arylalkyl, polyéthylène glycol(PEG) et polypropylène glycol (PPG). Selon un mode de réalisation, L4 représente une liaison simple ou un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes alkyle, cycloalkyle, aryl-alkyl. Dans ces modes de réalisation, L4 est de préférence choisi parmi les groupes Cl-C12 alkyl, cycloalkyl et aryl-alkyl. De manière plus préférentielle L4 est choisi parmi les groupes benzyl, cyclohexyl, propyl, 15 hexyl, heptyl, undecyl et dodecyl. Selon un mode de réalisation, Rs représente un atome d'hydrogène, un groupe polaire choisi dans le groupe des sels organiques de type ammonium, phosphonium, et imidazolium et des hétérocycles neutres protonables ou un groupe réactif choisi dans le groupe OH, acide carboxylique, amine, fonction thiol protégée, azoture, aldehyde, ou un 20 groupe bioactif choisi parmi les prodrogues, les fluorophores, les chromophores, les radio-isotopes ou les carboranes. Rs représente préférentiellement un atome d'hydrogène, un groupe OH ou des prodrogues. Rs représente plus préférentiellement un atome d'hydrogène, un groupe OH ou une prodrogue de l'ibuprofène. Selon un mode de réalisation, Z représente un groupe fonctionnel polaire cationique 25 sélectionné parmi les groupes ammonium quaternaire, ammonium tertiaire, ammonium secondaire, tels que les groupes ammonium peuvent être inclus dans une chaine aliphatique, un cycle à 5 chaînons, un hétérocycle à 5 chaînons comprenant 1, 2 ou 3 atomes d'azote, un hétéroaryle à 5 chainons comprenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, un cycle à 6 chaînons, un hétérocycle à 6 chaînons comprenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, 3041643 13 un hétéroaryle à 6 chainons comprenant 1 ou 2 atomes d'azote, phosphonium, tels que les groupes phosphonium peuvent être inclus dans une chaine aliphatique, un cycle à 5 chaînons, un cycle à 6 chaînons, arsonium, tels que les groupes arsonium peuvent être inclus dans une chaine aliphatique et une combinaison de ceux-ci. Selon un mode de 5 réalisation préféré, Z représente un groupe fonctionnel polaire cationique sélectionné parmi les groupes ammonium quaternaire, tels que les groupes ammonium peuvent être inclus dans une chaine aliphatique, un hétéroaryle à 6 chainons comprenant 1 ou 2 atomes d'azote, phosphonium, tels que les groupes phosphonium peuvent être inclus dans une chaine aliphatique, et arsonium, tels que les groupes arsonium peuvent être inclus dans 10 une chaine aliphatique et une combinaison de ceux-ci. Dans ces modes de réalisation, Z est de préférence un groupe ammonium quaternaire, phosphonium et arsonium plus préférentiellement, Z est un ammonium quaternaire et encore plus préférentiellement Z est une fonction -N±Me3 Selon un autre mode de réalisation, Z représente un groupe fonctionnel polaire 15 zwitterionique sélectionné parmi les groupes aminocarboxylate, aminosulfonate, carboxybetaïne telle que le groupe ammonium peut être inclus dans une chaine aliphatique, un cycle à 5 chaînons, un hétérocycle à 5 chaînons comprenant 1, 2 ou 3 atomes d'azote, un cycle à 6 chaînons, un hétérocycle à 6 chaînons comprenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, une fonction sulfobetaïne telle que le groupe ammonium peut être 20 inclus dans une chaine aliphatique, un cycle à 5 chaînons, un hétérocycle à 5 chaînons comprenant 1, 2 ou 3 atomes d'azote, un cycle à 6 chaînons, un hétérocycle à 6 chaînons comprenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, une fonction bétaïne telle que le groupe ammonium peut être inclus dans une chaine aliphatique, un cycle à 5 chaînons, un hétérocycle à 5 chaînons comprenant 1, 2 ou 3 atomes d'azote, un cycle à 6 chaînons, un 25 hétérocycle à 6 chaînons comprenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, une fonction phosphobetaïne telle que le groupe ammonium peut être inclus dans une chaine aliphatique , un cycle à 5 chaînons, un hétérocycle à 5 chaînons comprenant 1, 2 ou 3 atomes d'azote, un cycle à 6 chaînons, un hétérocycle à 6 chaînons comprenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d'azote, une phosphorylcholine, une fonction phosphocholine et une 30 combinaison de ceux-ci. Selon un mode de réalisation préféré, Z représente un groupe fonctionnel polaire zwitterionique sélectionné parmi une fonction sulfobetaïne telle que 3041643 14 le groupe ammonium peut être inclus dans une chaine aliphatique, un cycle à 5 chaînons, un hétérocycle à 5 chaînons comprenant 1, 2 ou 3 atomes d' azote, un cycle à 6 chaînons, un hétérocycle à 6 chaînons comprenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d' azote, et une fonction phosphobetaïne telle que le groupe ammonium peut être inclus dans une chaine 5 aliphatique, un cycle à 5 chaînons, un hétérocycle à 5 chaînons comprenant 1, 2 ou 3 atomes d' azote, un cycle à 6 chaînons, un hétérocycle à 6 chaînons comprenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d' azote. Dans ces modes de réalisation, Z est de préférence une fonction sulfobetaïne telle que le groupe ammonium est inclus dans une chaine aliphatique, plus préférentiellement, Z est une fonction -N±Me2-(CH2)3-S03-. 10 Selon un autre mode de réalisation, Z représente un groupe fonctionnel polaire neutre sélectionné parmi les groupes amino, alkylamino, dialkylamino, tels que le groupe dialkylamino peut être inclus dans une chaine aliphatique, un cycle à 5 chaînons, un hétérocycle à 5 chaînons comprenant 1, 2 ou 3 atomes d'azote, un cycle à 6 chaînons, un hétérocycle à 6 chaînons comprenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d' azote, polyéthylène glycol 15 (PEG) et une combinaison de ceux-ci. Selon un mode de réalisation préféré, Z représente un groupe fonctionnel polaire neutre sélectionné parmi les groupes dialkylamino, tels que le groupe dialkylamino peut être inclus dans une chaine aliphatique, un cycle à 5 chaînons, un hétérocycle à 5 chaînons comprenant 1, 2 ou 3 atomes d' azote, un cycle à 6 chaînons, un hétérocycle à 6 chaînons comprenant 1, 2, 3 ou 4 atomes d' azote et 20 polyéthylène glycol (PEG). Dans ces modes de réalisation, Z est de préférence un groupe dialkylamino inclus dans une chaine aliphatique ou un polyéthylène glycol, préférentiellement, Z est un groupe -NMe2. Selon un autre mode de réalisation, Z représente un groupe fonctionnel polaire anionique sélectionné parmi les groupes carboxylate, sulfonate, sulfate, ou phosphate et une 25 combinaison de ceux-ci. Selon un mode de réalisation préféré, Z représente un groupe fonctionnel polaire anionique sélectionné parmi les groupes carboxylate, sulfate, ou phosphate. Selon un mode de réalisation, le composé de l'invention est cationique. Selon un autre mode de réalisation, le composé est neutre. Selon un autre mode de réalisation, le 30 composé est zwitterionique. Selon un autre mode de réalisation, le composé est anionique. 3041643 15 Selon un mode de réalisation, a est égal à 1. Selon un mode de réalisation, a est égal à 0. Selon un mode de réalisation, n est égal à n', m égal à m', p égal à p' et q égal à q'. Selon un mode de réalisation, la somme de m et p est égale à 2. Selon un autre mode de réalisation, la somme de m et p est égale à 1. Selon un mode de réalisation, la somme de 5 m' et p' est égale à 2. Selon un autre mode de réalisation, la somme de m' et p' est égale à 1. Selon un mode de réalisation, n, n', q et q' représentent chacun indépendamment un nombre entier de 4 à 10, préférentiellement de 6 à 9. Selon un mode de réalisation spécifique, n et n' sont égaux à 7 et q et q' sont égaux à 8. 10 Selon un mode de réalisation préféré, le composé de l'invention est un composé de formule (lla) : Ri R2 R2 Ri (11a) CH3-(CH2) (CH-CH-CH à1-1-1-CH CH2)---0 0 nm P a Nii / ps/P\k, ,, , , CF13-(CF12) (CH-CH-CF12-1-TCH-CH-CH2)-1C112)-u IN-(un2)-L i- I I / % I I % I P' ci r R3 R4 m' R4 R3 R6 dans laquelle Ri, R2, R3, R4, Z, n, n', m, m', p, p', q et q' sont tels que définis ci-dessus, R6 représente un hydrogène ou un alkyle et r représente un nombre entier de 1 à 10. 15 Selon un mode de réalisation, r représente un nombre entier de 1 à 7, préférentiellement un nombre entier de 1 à 4. Selon un autre mode de réalisation préféré, le composé de l'invention est un composé de formule (Ilb) : Ri R2 R2 Ri CH3-(CI-12) (à-1-à-i-C1-12 2 àH-CH-CH CH n p 2 0 CH3-(C1-12) (CH-CH-CH27(ÇH-(CH-CH-0 n , /p, g. R3 R4 m' R4 R3 (11b) CH2)-Z . 20 dans laquelle Ri, R2, R3, R4, Z, n, n', m, m', p, p', q et q' sont tels que définis ci-dessus et s représente un nombre entier de 1 à 10. 3041643 16 Selon un mode de réalisation, s représente un nombre entier de 1 à 7, préférentiellement un nombre entier de 1 à 4. Selon un mode de réalisation, le composé de l'invention est sélectionné dans le groupe comprenant les composés du tableau ci-dessous pour lesquels X- représente un contre- 5 ion : II- la s o 0 \ I I S ID \ C)/ 0 O \N N H II- lb S S 0 0 x Il P (:) G 0 / \N N X H II- 1C S CDN? S P --..(:).--- / \ N G 0 N X H H- 2a S 0 0 S \JI C) P > 0 0 /N N H II- S S 0ss, il 0 2b P\ Ci G 0/ Ni\k H H- S 0 0 2c S .01 --.0...- /P\ N 0 0 N H 3041643 17 II- s o o 3a S Nil (D.- e - ,P. ,....-...........,N., X 0 N H 3b -II s 0 0 S Nil (:) 0 - P\ N X O/ N H II - o 0 3c s ..11 (:) S P. - ,..- ,....'..> 0 ( 0 N X H II - OES o o 4a S .,Il (-2> 0 O /P N ,N\ X H II - OES O o 4b S xii P ',. N 0 0 N,...,,,,. H 3041643 18 II- Q4c 0 0 S \,ii G di^N1\1( ex H H- s S o 1 5a ON e e x II- 5b S 1 s O N G c> X II- S S 0 5c 0,),N G C> X II- S OH 6a S oNP , (1) e 0/NN H OH II- S S OH 6b Omo NII P o e / \N 0 N H OH II- S OH 0 NII0 6c S 9.-- G 0/P \N--.N ' X H OH 3041643 19 II- SOH 7a 0 P0 Nil (i e 0/ \N N X H S OH II- SO H 7b 0 0 ONil P G / \N () N X S OH H II- S...."....'..' '/".....'/"..0 H 7c 0 0 Nil CS P 0/ \N---, N-ex S OH H II- s 8a °0 mou .0> °s\ *0 0> \N.^...'N...,.......".'...S, 8 0 H S H- S 8b Nil 0P --...C) (% ,f) 0/ \ N N'S'OC) H S II- S 8c (:),9 P o'p o' `r\J".)s-oe H S II- 9a HO. H OS °N1 I 0,, \N',-...'.....'N..., H S 3041643 20 II- HO...............-S HOs 0 Nil0 I 9b 0/P \N N.--.. H II- HOS S II 9c HO SNI I P 0/ \NN.,,.. H II- - o o s 0 so,o I 10a - 0 S 0., \N ..---,,,, N ^.. H 0 II- - o O_\ s 0 Nil0 10b * 0 S P 0 0,, \N.,---,.....'.N ., H II- - o S oN;:; 10c * 0-\ 0/P \N.---.'. N ., H 0 0 3041643 21 Dans un mode de réalisation, le contre-ion représente anion sélectionné parmi les anions chlorure, bromure, iodure, tosylates, triflates, méthylsulfate, préférentiellement le contre-ion représente un anion sélectionné parmi les anions chlorure, bromure, iodure. Selon un mode de réalisation, le composé II-1 est un mélange de composés II-la, II-lb et 5 II-1c. De la même manière, le composé II-X est un mélange de composés II-Xa, II-Xb et II-Xc. L'invention concerne également un liposome comprenant au moins un composé de l'invention tel que décrit ci-dessus. En particulier, l'invention concerne un liposome présentant une phase hexagonale et comprenant au moins l'un des composés de formule 10 (II), (IIa) ou (IIb). Selon un mode de réalisation préféré, le liposome présente une phase hexagonale et comprend au moins un composé de formule (IIa). Selon un autre mode de réalisation préféré, le liposome présente une phase hexagonale et comprend au moins un composé de formule (Ilb). Selon un mode de réalisation, le liposome comprend uniquement des composés qui sont 15 cationiques, c'est-à-dire avec Z étant un groupe fonctionnel polaire cationique, de formule (II), (IIa) ou (Ilb). Selon un mode de réalisation préféré, le liposome comprend uniquement des composés cationiques de formule (IIa). Selon un autre mode de réalisation préféré, le liposome comprend uniquement des composés cationiques de formule (Ilb). 20 Selon un mode de réalisation, le liposome est formé à partir d'au moins un composé neutre de formule (II), (IIa) ou (Ilb) en association avec au moins un lipide amphiphile cationique non ramifié. Selon un mode de réalisation préféré, le liposome est formé à partir d'au moins un composé neutre de formule (IIa) en association avec au moins un lipide amphiphile cationique non ramifié. Selon un mode de réalisation, le lipide 25 cationique non ramifié peut être le N-[1-(2,3- dioleyloxy)propylJ-N,N,Ntrimethylammonium chloride (DOTMA) ou le composé I-1 de l'invention. Selon un mode de réalisation, le liposome présente une phase hexagonale. Selon un mode de réalisation, le liposome présente une phase hexagonale directe. Selon un mode de réalisation, le liposome présente une phase hexagonale inverse. 3041643 22 Les liposomes de l'invention peuvent être obtenus selon des méthodes connues de l'homme du métier. Selon un mode de réalisation, les liposomes peuvent être préparés par évaporation du solvant organique dans lequel sont dissous les lipides amphiphiles de l'invention, puis à 5 les remettre en suspension dans un solvant aqueux. Cette opération doit se dérouler à une température supérieure à celle de transition de phase des lipides de l'invention. L'invention concerne également un lipoplexe comprenant au moins un composé de l'invention tel que décrit ci-dessus. En particulier, l'invention concerne un lipoplexe présentant une phase hexagonale et comprenant au moins l'un des composés de formule 10 (II), (IIa) ou (IIb). Selon un mode de réalisation, le lipoplexe comprend uniquement des composés qui sont cationiques, c'est-à-dire avec Z étant un groupe fonctionnel polaire cationique, de formule (II), (IIa) ou (Ilb). Selon un mode de réalisation préféré, le lipoplexe comprend uniquement des composés cationiques de formule (Ha). Selon un autre mode de réalisation préféré, le lipoplexe comprend uniquement des composés 15 cationiques de formule (Ilb). Selon un mode de réalisation, le lipoplexe est formé à partir d'au moins un composé neutre de formule (II), (IIa) ou (Ilb) en association avec au moins un lipide amphiphile cationique non ramifié de formule (I). Selon un mode de réalisation préféré, le lipoplexe comprend au moins un composé neutre de formule (IIa) ainsi qu'au moins un lipide 20 amphiphile cationique non ramifié de formule (I). Selon un mode de réalisation, le lipide cationique non ramifié peut être la DOTMA ou le composé I-1. Selon un mode de réalisation, le lipoplexe présente une phase hexagonale. Selon un mode de réalisation, le lipoplexe présente une phase hexagonale directe. Selon un mode de réalisation, le lipoplexe présente une phase hexagonale inverse. 25 Les lipoplexes de l'invention peuvent être obtenus selon des méthodes connues de l'homme du métier. Les lipoplexes sont préparés en mélangeant une quantité donnée d'ADN avec les lipides amphiphiles de l'invention. Selon un mode de réalisation les rapports de charge des lipoplexes peuvent être compris entre 0.3 et 15.0, préférentiellement entre 0.5 et 8.0. 3041643 23 Procédé Les composés de l'invention peuvent être obtenus selon des réactions connues de l'homme du métier. L'invention concerne également un procédé pour fabriquer les composés de l'invention. 5 En particulier, l'invention concerne un procédé de synthèse chimique permettant de moduler facilement et rapidement la structure des lipides amphiphiles préexistants au niveau de leur partie lipidique au moyen d'une réaction de type thiol-ène. L'invention concerne également le procédé pour produire un composé de formule (II), R1 R2 R2 Ri L3-Z (II) [CH3-(CH2) (CH--à-I-CH2H-CH-CH CI-12)-1-11\ n /al P q CF-13-(CF-12) (CH-CH-CF-121-(CH-CH-CF12)-(C1-12)-1-2 R3 R I I 4 m / . R4 1 1R3 P. q' 10 dans laquelle Li et L2 représentent chacun indépendamment une liaison simple ou un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes alkyle, aryle, alkylaryle, arylalkyle, alkyloxy, alkyloxycarbonyle ; L3 représente un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes 15 alkyle, alkylphosphoramidates, alkylthiophosphoramidates, alkylphosphate, alkylthiophosphate, alkylphosphonite, alkylphosphonate, alkylthiophosphonate, alkylphosphoramide, alkylthiophosphoramide, alkyloxy ou amine ; Z est un groupe fonctionnel polaire, ledit groupe étant cationique, anionique, 20 zwitterionique ou neutre ; a représente 0 ou 1 ; n, n', q et q' représentent chacun indépendamment un nombre entier de 1 à 15; 3041643 24 m, m', p et p' représentent chacun indépendamment un nombre entier de 0 à 4 à condition que : au moins un de m et p est différent de 0 ; au moins un de m' et p' est différent de 0 ; 5 Ri et R2 représentent l'un un hydrogène et l'autre un groupe thioether de formule -S-L4-Rs et R3 et R4 représentent l'un un hydrogène et l'autre un groupe thioether de formule -S-L4-Rs dans laquelle : L4 représente une liaison simple ou un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes aminocarbonyle, acylamino, 10 alkylaminocarbonyle, aminothiocarbonyle, alkyloxycarbonyle, alkyle, aryle, cycloalkyle, alkylaryle, arylalkyle, alkyloxy, polyéthylène glycol (PEG), polypropylène glycol (PPG), un peptide ou une combinaison de ceux-ci; éventuellement interrompu ou terminé par -0-, -S-, -S02- ou une combinaison de ceux-ci; éventuellement comprenant en outre un résidu 15 d'un groupe réactif à travers lequel L4 est relié à Rs ; Rs représente un atome d'hydrogène, ou : groupe polaire choisi dans le groupe des sels organiques de type ammonium, phosphonium, et imidazolium et des hétérocycles neutres protonables ; 20 un groupe réactif choisi dans le groupe comprenant le groupe N3, amino, alkylamino, COOH, amide, maléimide, alcyne, SH, OH, ester, ester activé, acide carboxylique activé, halogéno, nitro, nitrile, isonitriles, acrylamide, aldéhyde, cétone, acétals, cétals, anhydride, thiocyanate, isothiocyanate, isocyanate, hydrazines, hydrazides, 25 hydrazones, éthers, oxydes, cyanates, diazo, diazonium, sulfures, disulfures, sulfoxydes, sulfones, acides sulfoniques, acides sulfiniques, sulfates, acides sulféniques, amidines, imides, imines, imidates, nitrones, hydroxylamines, oximes, acides hydroxamiques, acides thiohydroxamique, allènes, ortho-esters, sulfites, énamines, 30 ynamines, urées, pseudo-urées, semicarbazides, carbodiimides, carbamates ; ou 3041643 25 un groupe bioactif choisi parmi les prodrogues, les amino-acides, les peptides, les protéines, les anticorps, les enzymes, les polysaccharides, les nucléosides, les nucléotides, les 5 oligonucléotides, les fluorophores, les chromophores, isotopes, les carboranes, et des combinaisons de ceux-ci; les radio- comprenant les étapes suivantes : i) faire réagir un composé de formule (I) [CH3-(CH2) (CH=CH-C1-127(CH=CH-CH2-'-(C1-12)-1-11 n P q \ a L3-z (I) \ f \ CH3-(C1-12) (CH=CH-CH2 CH=CH-CH2-\CI-127-1:2 n' / . P cr dans laquelle Li, L2, L3, Z, a, n, n', m, m', p, p', q et q' sont tels que définis ci- 10 dessus ; avec un thiol Rs-L4-SH dans lequel L4 et Rs tels que défini ci-dessus, en présence d'au moins un initiateur de radicaux ; ii) optionnellement, faire réagir le produit de la réaction (i) avec une molécule bioactive, choisie parmi les prodrogues, les amino-acides, les peptides, les 15 protéines, les anticorps, les enzymes, les polysaccharides, les nucléosides, les nucléotides, les oligonucléotides, les fluorophores, les chromophores, les radio-isotopes, et les carboranes, et des combinaisons de ceux-ci. Les modes de réalisation préférés de Li, L2, L3, L4, Z, a, ii, n', m, m', p, p', q et q', Ri, R2, R3 et R4 définis pour le composé (II) ci-dessus s'appliquent également au procédé et 20 aux réactifs, c'est-à-dire le composé (I) et le composé Rs-L4-SH. Selon un mode de réalisation, l'étape (i) est généralement effectuée en présence d'un excès de thiol. Selon un mode de réalisation, l'étape (i) est effectuée en présence d'une quantité de thiol comprise entre 1,1 équivalents et 50 équivalents, préférentiellement entre 1,1 et 5 équivalents, plus préférentiellement entre 1,1 et 4 équivalents. Selon un mode de 25 réalisation, lorsque le composé de formule (I) comporte une insaturation, l'étape (i) est effectuée en présence d'une quantité de thiol supérieure ou égale à 1,1 équivalent. Selon 3041643 26 un mode de réalisation, lorsque le composé de formule (I) comporte deux insaturations, l'étape (i) est effectuée en présence d'une quantité de thiol supérieure ou égale à 2,1 équivalents. Selon un mode de réalisation, lorsque le composé de formule (I) comporte x insaturations, l'étape (i) est effectuée en présence d'une quantité de thiol supérieure ou 5 égale à (x +0,1) équivalents. Selon un mode de réalisation, l'étape (i) est généralement effectuée en présence d'au moins un initiateur de radicaux. Selon un mode de réalisation, l'initiateur de radicaux peut être thermoactivable ou photoactivable, dans lequel de préférence, l'initiateur de radicaux thermoactivable est choisi dans le groupe comprenant des composés diazotés 10 tels que l'azobisisobutyronitrile (AIBN), le 2,2'-azobis[2-(2-imidazoline-2- yl)propane]dihydrochloride, azobis (2-amidinopropane)dihydrochloride (ABAH), ou l'acide azo-bis-cyanopentanoique et l'initiateur de radicaux photo-activable est choisi dans le groupe comprenant la camphorquinone, la benzophenone, les dérivés de la benzophenone, l'acetophenone, les dérivés de l'acetophenone, tels que l' a- 15 hydroxycycloalkyl phenyl cetones ou la 2-hydroxy-2-methyl-l-phenylpropanone, les dialcoxyacetophenones, tel que la 2,2-diméthoxy-2-phenylacetophenone, les a-hydroxyou a -amino-acetophenones, tel que la (4-methylthiobenzoy1)-1-methyl-lmorpholinoethane, préférentiellement l'acetophenone et les dérivés de l'acetophenone, plus préférentiellement la 2,2-diméthoxy-2-phenylacetophenone. 20 Selon un mode de réalisation, l'étape (i) est généralement effectuée en présence d'au moins un initiateur de radicaux thermo-activable. Selon un autre mode de réalisation, l'étape (i) est généralement effectuée en présence d'au moins un initiateur de radicaux photo-activable. Selon un mode de réalisation préférentiel, l'étape (i) est effectuée en présence de la 2,2-diméthoxy-2-phenylacetophenone. Selon un mode de réalisation 25 préférentiel, l'étape (i) est effectuée en présence d'un initiateur de radicaux photo- activable. Selon un mode de réalisation préférentiel, l'étape (i) est effectuée en présence uniquement de la 2,2-diméthoxy-2-phenylacetophenone. Selon un mode de réalisation, l'étape (i) est effectuée en présence de d'initiateur de radicaux à une teneur de 0.1 % à 50% en mol par rapport au lipide amphiphile non ramifié 30 de formule (I), préférentiellement, à une teneur de 0.1 % à 25% en mol par rapport au 3041643 27 lipide amphiphile non ramifié de formule (I) et de manière encore plus préférentielle à une teneur de 0.5% à 15% en mol par rapport au lipide amphiphile non ramifié de formule (I). Selon un mode de réalisation, l'étape (i) est effectuée en l'absence de solvant. Selon un 5 mode de réalisation, l'étape (i) est effectuée à température ambiante. Selon un mode de réalisation, l'étape (i) est effectuée sous radiation UV. Selon un mode de réalisation, l'étape (i) est effectuée sous une atmosphère inerte. Selon un mode de réalisation, le composé obtenu est purifié à l'aide de techniques chromatographiques connues de l'homme du métier. 10 Utilisations L'invention concerne également l'utilisation d'un composé de l'invention ou d'un liposome de l'invention ou d'un lipoplexe de l'invention pour des applications dans lesquelles on recherche des propriétés de fusion améliorées. Selon un mode de réalisation l'invention concerne l'utilisation d'un composé de 15 l'invention ou du lipoplexe obtenu par formulation d'un composé de l'invention pour la transfection c'est-à-dire délivrance de gènes in vivo ou in vitro. Selon un mode de réalisation, l'invention concerne l'utilisation d'un composé de l'invention ou du lipoplexe obtenu par formulation d'un composé de l'invention pour la délivrance de prodrogues, de sensibilisateurs ou d'agent de visualisation. 20 Selon un mode de réalisation, l'invention concerne l'utilisation d'un composé de l'invention ou du lipoplexe obtenu par formulation d'un composé de l'invention pour la thérapie génique, les traitements topiques (dermatologie, ophtalmologie) ou cosmétiques ou des activités bactéricides. 3041643 28 BRÈVE DESCRIPTION DES FIGURES Figure 1 est un ensemble de spectres RMN 31P (écho de Hahn) des composés I-1, II-1, II-2, II-3, II-4 et II-8 (en mélange avec le composé I-1 avec un ratio 1/1) réalisés à température ambiante. 5 Figure 2 concerne l'évaluation de la condensation d'ADN par les différents composés de l'invention, et formulés soit seuls (-) soit avec la DOPE (+). A représente un gel d'agarose 1% après migration (0,1 1..tg ADN par puits ; B est un graphique représentant la fluorescence de la bande d'ADN basse par rapport au rapport de charge. La fluorescence de la bande d'ADN basse a été quantifiée puis exprimée en pourcentage de la fluorescence 10 maximale, mesurée pour de l'ADN nu non complexé. Figure 3 est un histogramme montrant l'efficacité de transfection in vitro de cellules C2C12 au moyen des composés de l'invention et des contrôles le composé I-1 et le DOTMA. Le seuil de positivité (trait en pointillé) est déterminé avec des cellules non transfectées (exposées à de l'ADN nu, non complexé ; "ADN"). RC, rapport de charge. 15 Figure 4 est un histogramme montrant la viabilité de cellules C2C12 après transfection in vitro au moyen des composés de l'invention et des contrôles le composé I-1 et le DOTMA. La viabilité de cellules non transfectées (exposées à de l'ADN nu, non complexé ; "ADN") est utilisée comme référence (valeur 100%, trait en pointillés). RC, rapport de charge. 20 Figure 5 est un histogramme montrant l'efficacité de transfection et viabilité cellulaire des composés à chaines grasses ramifiées exprimées par rapport à celles obtenues avec le composé à chaines grasses linéaires. Pour chaque composé, les valeurs considérées ont été celles obtenues au rapport de charge pour lequel le pic d'efficacité a été atteint. 25 EXEMPLES La présente invention se comprendra mieux à la lecture des exemples suivants qui illustrent non-limitativement l'invention. 3041643 29 SYNTHESE Abréviations ADN : acide désoxyribonucléique ARN : acide ribonucléique 5 siARN : petit ARN interférent ARNm : ARN messager °C : degré Celsius DOTMA : N41-(2,3- dioleyloxy)propylJ-N,N,N-trimethylammonium chloride DCC : N,N'-dicyclohexylcarbodiimide 10 DMEM : milieu minimum essentiel d'Eagle modifié par Dulbecco éq. : équivalent EGFP-Luc : Protéine fluorescente verte amélioré - luciférase ils : microseconde Ppm : parties par million 15 RC : rapport de charge RMN : résonance magnétique nucléaire TMS : tétraméthylsilane UV : ultra-violet Matériel 20 Les solvants utilisés ont été purifiés selon les méthodes usuelles. Les substrats de départ ont été fournis par Aldrich, TCI ou Alfa Aesar et utilisés sans purification supplémentaire. Le 2-((bis(E)-octadec-9-en-l-yloxy)phosphoryl)amino)- N,N,N-trimethylethanaminium iodide (réactif I-1) a été synthétisé selon la littérature. (Le Corre, S.S. ; Berchel, M. ; Belmadi, N. ; Denis, C. ; Haelters, J.P. ; Le Gall, T. ; Lehn, 25 P. ; Montier, T. ; Jaffrès, P.A. Org. Biomol. Chem., 2014, 12, 1463-1474.). 0 0 \sui Sei 0 O/ N I H I-1 3041643 30 Tous les composés ont été caractérisés par spectroscopie par résonance magnétique nucléaire (RMN) 1H (500.13 ou 400.133 ou 300.135 MHz), 13C (125.773 ou 75.480 MHz) and 31P (161.970 ou 121.498 MHz) (Spectromètres Bruker AC 300, Avance DRX 400 et Avance DRX 500). Les constantes de couplages J sont données en Hertz. Les abréviations 5 suivantes sont utilisées : s pour singulet, d pour doublet, t pour triplet, q pour quadruplet, qt pour quintuplet, m pour multiplet, dd pour doublet de doublets et dt pour doublet de triplets. Les composés ont également été caractérisés par spectrométrie de masse (Bruker Autoflex MALDI TOF-TOF III LRF200 CID). 10 Résultats 1) Synthèse des réactifs zwitterioniques 0'? 's, m + CH3-(CH2HCH=CH-CH2)-(CH=CH-CH2)-(CH2TO H P 9' CH3-(CH2)-(CH=CH-CH2 CH=CH-CH2)-(CH2)-0 P 9 M p Os ,0 '1\i\.,1\1/\.)S: G CH3-(CH2HCH=CH-CH2)-(CH=CH-CH2 CH2)-0 H 0 A une solution de phosphoramide de dioléyle (1 éq) dans le chloroforme, est ajoutée la propanesulfone (1,2 éq). Le milieu réactionnel est agité pendant 72 h à température 15 ambiante. Le produit brut obtenu est ensuite purifié par chromatographie flash sur une colonne de gel de silice. Le composé suivant a été synthétisé suivant la méthode décrite ci-dessus. Composé I-2 : Rendement : 44 %, 31P RMN : S (ppm, référence 85 % H3PO4 : 0 ppm dans CDC13) : 9,4 ; 1H RMN : S (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CDC13) : 0,85 à 0,89 20 (t, 3JH_H= 6,8 Hz, 6 H, CH3-CH3), 1,21 à 1,29 (m, 46 H, CH2 chaine grasse), 1,62 à 1,65 (m, 4 H, CH2-CH2-0-P), 1,96 à 2,01 (m, 8 H, CH2-CH=CH-CH2), 2,19 à 2,26 (m, 2 H, ±N-CH2-CH2-CH2-S), 2,89 à 2,91 (m, 2 H, ±N-CH2-CH2-CH2-S), 3,24 (s, 6 H, (CH3)2N+), 3,41 à 3,47 (m, 2 H, ±N-CH2-CH2), 3,51 à 3,61 (m, 2 H, N-CH2-CH2-±N-CH2), 3,67 à 3,72 (m, 2 H, N-CH2-CH2-±N-CH2), 3,90 à 3,96 (m, 4 H, CH2-0-P), 4,82 à 5,00 (m, 1 H, CH3-(C 2 CH=CH-CH2 CH=CH-CH2)-(CH2)-0 3041643 31 P-NH), 5,29 à 5,37 (m, 4 H, CH=CH) ; 13C RMN : S (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CDC13) : 14,2 (CH3-CH2), 25,5 (CH2 chaine grasse), 27,2 (CH2 chaine grasse), 28,9 à 30,5 (CH2 chaine grasse), 31,9 (CH2 chaine grasse), 51,3 ((CH3)21\i±), 67,0 (CH2-0-P), 129,9 à 130,2 (CH=CH). 5 2) Synthèse des composés de l'invention 2.1) Chimie click avec des lipides amphiphiles [CH3-(CH2 CH=CH-CH2 cH3-(cH2HcH=cH-c1-12 CH=CH-CH2CH2)-Li1 CH)-,\ _ 2_2 CH=CH-CH2 L L3-Z + R5-1_4-SH R1 R2 R2 R1 CH-CH-CH2 à1-1-1-CH2)-(C1-12)-1-11\ P L3-Z CH3-(CH2HCH-CH-CH2 ,; I R3 R4 Le composé de formule (I) (1 éq) et le thiol (3,5 éq) sont mélangés dans un tube en verre, qui est placé dans un bain à ultra-sons jusqu'à la dissolution totale du composé de formule 10 (I) (10 à 20 minutes). Le mélange est dégazé sous argon, avant l'addition de la 2,2- dimethoxy-2-phenylacetophenone (10% en masse). La solution est placée sous UV, à température ambiante, pendant 4 heures. Le produit brut obtenu est ensuite purifié par chromatographie flash sur une colonne de gel de silice. Les composés suivants ont été synthétisés suivant la méthode décrite ci-dessus. 15 Composés II-1 : Rendement : 42 % (120 mg) ; 31P RMN : S (ppm, référence 85% H3PO4: 0 ppm dans CHC13) = 8,6 ; 1H RMN : S (ppm, référence TMS: 0 ppm dans CHC13) = 0,84 à 0,91 (m, 12H, CH3-CH2), 1,30 à 1,66 (m, 76H, CH2 chaine grasse), 2,43 à 2,47 (t, 3JH-H = 8,0Hz, 4H, CH2-S), 2,50 à 2,56 (qt, 3JH_H = 6Hz, 2H, (CH2)2CH-S), 3,45 (s, 9H, +N(CH3)3), 3,55 à 3,63 (m, 2H, CH2-NH), 3,85 à 3,88 (m, 2H, CH2-+N(CH3)3), 3,95 à 20 3,99 (m, 4H, CH2-0-P), 4,40 à 4,53 (m, 1H, NH); 13C RMN : S (ppm, référence TMS: 0 ppm dans CHC13) = 13,8 (CH3-CH2), 22,3 à 31,6 (CH2 chaine grasse), 34,6 (CH2-CHCH2), 35,9 (CH2-NH), 45,6 (CH-S), 54,5 (+N(CH3)3), 66,4 (CH2-+N(CH3)3), 66,8 (d, 2Jc- (I) DPMA [CH3-(cH2 hv H-CH-CH2H2)-e q. 3041643 32 P = 5,2Hz, CH2-0-P) ; MALDI-TOF : [M]+ calculé pour C53H112N203PS2= 919,785, [M]± mesuré = 919,775 ; Composés II-2 : Rendement : 65 % (150 mg) ; RMN 31P : Ô (ppm, référence 85% H3PO4: 0 ppm dans CHC13) = 8,6 ; RMN 111 : Ô (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CHC13) = 5 0,85 à 0,88 (t, 3Jx-H= 6,4 Hz, 12H, CH3-CH2), 1,24 à 1,66 (m, 76H, chaine grasse), 2,43 à 2,47 (t, 3JH_H = 8,0Hz, 4H, CH2-S), 2,51 à 2,55 (qt, 3JH_H = 8,0Hz, 2H, (CH2)2CH-S), 3,45 (s, 9H, +N(CH3)3), 3,50 à 3,61 (m, 2H, CH2-NH), 3,83 à 3,86 (m, 2H, CH2- +N(CH3)3), 3,95 à 4,00 (m, 4H, CH2-0-P), 4,30 à 4,43 (m, 1H, NH) ; RMN 13C : Ô (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CHC13) = 13,9 (CH3-CH2), 22,5 ppm à 31,8 (CH2 chaine 10 grasse), 34,8 (CH2-CH-CH2), 36,0 (CH2-NH), 45,8 (CH-S), 54,7 (+N(CH3)3), 66,6 (CH2- +N(CH3)3), 66,9 (d, 2Jc_p = 5,3Hz, CH2-0-P) ; MALDI-TOF: [M]+ calculé = 1087,975 ;[M]+ mesuré pour C65H136N203PS2 = 1087,972 ; Composé II-3 : Rendement : 58 % (150 mg) ; 31P RMN : 8(ppm, référence 85% H3PO4: 0 ppm dans CHC13) = 8,7 ; 1H RMN : Ô (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CHC13) = 15 0,83 à 0,91 (m, 6H, CH3-CH2), 1,25 à 1,68 (m, 60H, chaine grasse), 2,45 à 2,51 (qt, J1-1-H = 6,4Hz, 2H, (CH2)2CH-S), 3,43 (s, 9H, +N(CH3)3), 3,48 à 3,52 (m, 2H, CH2-NH), 3,68 (s, 4H, CH2-Ph), 3,83 à 3,86 (m, 2H, CH2-+N(CH3)3), 3,96 to 4,01 (m, 4H, CH2-0-P), 4,30 à 4,45 (m, 1H, NH), 7,19 à 7,33 (m, 10H, CH aromatique) ; 13C RMN: Ô (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CHC13) = 14,1 (CH3-CH2), 22,6 à 31,8 (CH2 chaine grasse), 20 34,5 ((CH2)2-CH-S), 35,0 (CH2-Ph), 45,3 ((CH2)2-CH-S), 54,8 ((CH3)3N+), 66,6 (CH2- +N(CH3)3), 67,1 (d, 2Jp_c= 5,3ppm, CH2-0-P), 126,7 (CH aromatique), 128,3 à 129,0 (CH aromatique), 138,9 (quaternaire C) ; MALDI-TOF : [M]+ calculé pour C55HiooN203PS2 = 931,691 ; [M]+ mesuré = 931,686 ; Composé II-4 : Rendement : 51 % (133 mg) ; 31P RMN : Ô (ppm, référence 85% H3PO4: 25 0 ppm dans CHC13) = 8,6 ;1H RMN : Ô (ppm, référence TMS: 0 ppm dans CHC13) = 0,81 à 0,87 (t,3JH_H = 8 Hz, 6H, CH3-CH2), 1,24 à 1,90 (m, 80H, chaine grasse), 2,58 à 2,62 (m, 4H, CH-S-CH), 3,53 (s, 9H, +N(CH3)3), 3,50 à 3,60 (m, 2H, CH2-NH), 3,83 à 3,85 (m, 2H, CH2-+N(CH3)3), 3,93 à 3,98 (m, 4H, CH2-0-P), 4,30 à 4,40 (m, 1H, NH) ; 13C RMN : Ô (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CHC13) = 14,1 (CH3-CH2), 22,6 à 31,9 (CH2 30 chaine grasse), 34,3 (CH2 cyclohexyle), 35,5 ((CH2)2-CH-S), 36,2 (CH2-NH), 42,6 (CH 3041643 33 cyclohexyle), 44,2 ((CH2)2-CH-S), 54,9 (+N(CH3)3), 66,7 (CH2-+N(CH3)3), 67,1 (P-0- CH2) ; MALDI-TOF : [M]+ calculé pour C53Hio8N203PS2 = 915,753, rml mesuré = 915,741 ; Composé II-5 : Rendement : 61 % (199 mg) ; 1H RMN : S (ppm, référence TMS : 0 ppm 5 dans CDC13) = 0,83 à 0,87 (t, 3JH_H = 6,6 Hz, 12H), 1,23 à 1,24 (m, 73H, CH2 chaine grasse), 1,35 à 1,37 (m, 12H, CH2 chaine grasse), 1,46 à 1,54 (m, 16H, CH2-CH2-S, CH2- CH-S and CH2 chaine grasse), 2,41 à 2,45 (t, 3JH_H = 7,4 Hz, 4H, CH2-S), 2,48 à 2,55 (qt, 3JH-H = 7,3 Hz, 2H, (CH2)-CH-S), 3,37 à 3,56 (m, 15H, OCH2 et +N(CH3)3), 3,65 à 3,69 (m, 1H, OCH), 3,95 à 3,99 (m, 2H, OCH2) ; 13C RMN: S (ppm, référence TMS: 0 ppm 10 dans CDC13) = 14,1 (CH3-CH2), 22,7 (CH2 chaine grasse), 26,0 (CH2 chaine grasse), 26,2 (CH2 chaine grasse), 26,8 (CH2 chaine grasse), 29,0à 29,9 (CH2 chaine grasse), 30,35 (CH2-S-CH), 31,90 (CH2 chaine grasse), 34,91 (CH2 chaine grasse), 46,88 ((CH2)2-CHS), 54,79 (+N(CH3)3), 67,93 (OCH2), 68,38 (OCH2), 69,31 (OCH2), 72,01 (OCH2), 73,63 (OCH) ; 15 Composé II-6 : Rendement : 48 % (140 mg) ; 31P RMN : S (ppm, référence 85 % H3PO4: 0 ppm dans CDC13) : 8,3 ; 1H RMN : S (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CDC13) : 0,85 à 0,89 (t, 3JH_H = 8 Hz, 6 H, CH3-CH2), 1,24 à 1,56 (m, 75 H, CH2 chaine grasse), 1,49 à 1,56 (m, 12 H, CH2 chaine grasse), 1,63 à 1,66 (m, 4 H, CH2-CH2-O), 1,95 à 2,06 (m, 4 H, CH2-CH2-OH), 2,43 à 2,47 (t, 3JH_H= 7,2 Hz, 4 H, CH2-S), 2,51 à 2,54 (m, 2 H, CH- 20 S), 3,44 (s, 9 H, (CH3)3N+), 3,48 à 3,58 (m, 2 H, ±N-CH2-CH2), 3,59 à 3,63 (t, 3JH_H= 6,8 Hz, 4 H, CH2-OH), 3,85 à 3,88 (m, 2 H, CH2-0-P), 3,96 à 4,01 (m, 4 H, CH2-0-P), 4,51 à 4,62 (m, 1 H, NH-P) ; 13C RMN : S (ppm, référence TMS: 0 ppm dans CDC13) : 14,1 (CH3-CH2), 22,6 à 36,0 (CH2 chaine grasse), CH2-S), 39,2 (CH2-NH-P), 45,9 ((CH2)2- CH-S), 54,8 (+N(CH3)3), 62,8 (CH2-CH2-OH), 66,5 (CH2-+N(CH3)3), 67,2 à 67,3 (d, 2JH- 25 H= 22 Hz, CH2-0-P) ; Composé II-7 : Rendement : 23 % (65 mg) ; 31P RMN: S (ppm, référence 85 % H3PO4 : 0 ppm dans CDC13) : 8,2 ; 1H RMN : S (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CDC13) : 0,86 à 0,89 (t, 3JH_H= 6,4 Hz, 6 H, CH3-CH2), 1,24 à 1,37 (m, 68 H, CH2 chaine grasse), 1,46 à 1,66 (m, 16 H, CH2 chaine grasse), 2,29 à 2,40 (m, 4 H, CH2-CH2-OH), 2,44 à 2,47 (t, 30 3JH-H = 7,2 Hz, 4 H, CH2-S), 2,51 à 2,53 (m, 2 H, CH-S), 3,45 (s, 9 H, (CH3)3N+), 3,47 à 3041643 34 3,54 (m, 2 H, ±N-CH2-CH2), 3,59 à 3,63 (t, 3Jx_H= 6,8 Hz, 4 H, CH2-0H), 3,86 à 3,88 (m, 2 H, CH2-NH-P), 3,97 à 4,02 (m, 4 H, CH2-0-P), 4,51 à 4,62 (m, 1 H, NH-P) ; 13C RMN : Ô (ppm, référence TMS: 0 ppm dans CDC13) : 14,1 (CH3-CH2), 22,7 à 36,1 (CH2 chaine grasse et CH2-S and CH2-CH2-OH), 45,9 (CH-S), 54,9 ((CH3)3N+), 62,8 (CH2-OH), 66,5 5 (CH2-NH-P), 67,4 à 67,5 (d, 2Jp-c= 21 Hz, CH2-0-P) ; Composé II-8 : Rendement : 51 %, 31P RMN : Ô (ppm, référence 85 % H3PO4 : 0 ppm dans CDC13) : 9,5, 1H RMN : Ô (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CDC13) : 0,86 à 0,88 (t, 3JH_H= 6,8 Hz, 12 H, CH3-CH2), 1,24 à 1,57 (m, 89 H, CH2 chaine grasse), 1,63 à 1,64 (m, 4 H, CH2-CH2-0-P), 2,18 à 2,26 (m, 2 H, ±N-CH2-CH2-CH2-S), 2,42 à 2,46 (t, 3Jx-x 10 = 7,4 Hz, 4 H,CH2-S-CH(CH2)2), 2,49 à 2,54 (st, 3JH_H = 6,2 Hz, 2 H, CH2-S-CH(CH2)2), 2,88 à 2,90 (m, 2 H, CH2-S-0), 3,22 (s, 6 H, (CH3)2N+), 3,42 à 3,47 (m, 2 H, CH2-NH), 3,50 à 3,60 (m, 2 H, P-NH-CH2), 3,66 à 3,69 (m, 2 H, ±N-CH2-CH2-CH2-S), 3,91 à 3,95 (m, 4H, CH2-CH2-0-P), 4,81 à 4,91 (m, 1 H, P-NH) ; 13C RMN : Ô (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CDC13) : 14,1 (CH3-CH2), 22,7 (CH2 chaine grasse), 25,7 (CH2 chaine 15 grasse), 26,8 (CH2 chaine grasse), 27,0 (CH2 chaine grasse), 29,1 à 30,0 (CH2 chaine grasse), 30,4 (CH2-S-CH(CH2)2), 31,9 (CH2 chaine grasse), 34,9 à 35,1 (CH2 chaine grasse), 46,0 (CH2-S-CH(CH2)2), 51,5 ((CH3)2N+), 66,9 (CH2-0-P) ; Composé II-9 : 31P RMN : Ô (ppm, référence 85% H3PO4 : 0 ppm dans CDC13): 10,1, 1H RMN : Ô (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CDC13): 0,85 à 0,88 (t, 3Jx-H = 6 Hz, 6 H, 20 CH3-CH2), 1,27 à 1,55 (m, 56 H, CH2 chaine grasse), 1,62 à 1,37 (m, 4 H, CH2-CH2-O- P), 1,79 à 1,85 (m, 4 H, CH2-S-CH-(CH2)2), 1,99 à 2,14 (m, 2 H, HO-CH2-CH2-CH2-S), 2,21 (s, 6 H, (CH2)2-N), 2,36 à 2,39 (t, 3JH_H= 5,8 Hz, 2 H, CH2-S-CH-(CH2)2), 2,55 à 2,61 (m, 6 H, HO-CH2-CH2-CH2-S and CH2-CH2-N), 2,92 à 2,98 (m, 2 H, P-NH-CH2), 3,20 à 3,31 (m, 1H, P-NH-CH2), 3,71 à 3,76 (m, 4 H, HO-CH2-CH2-CH2-S), 3,93 à 3,99 25 (m, 4 H, CH2-0-P). 3041643 2.2) Fonctionnalisation par un groupe bioactif CH3-(CH2)-H-(CH2)-1-1 CH3-(CH2)n' H-(CH2)-I-2 S,L4-0H s.. I L3-Z R-8-0H L4-0H O 0 )LR DCC CH3-(CH2)-CH-(CH2)-1-1 0H3-(0H2)-0H-(CH2 L2 n' I L'ester RC(0)OH (2 éq) et le composé ramifié II (1 éq) sont mélangés dans le dichlorométhane anhydre. Après l'addition du DCC (2,2 éq), le milieu réactionnel est mis 5 sous agitation pendant une nuit. Le composé obtenu est purifié par chromatographie flash sur une colonne de gel de silice. Le composé suivant a été synthétisé suivant la méthode C. Composé II-10 : Rendement : 15%, 31P RMN : S (ppm, référence 85% H3PO4 : 0 ppm dans CDC13) : 10,1 ; 1H RMN : S (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CDC13) : 0,85 à 10 0,89 (m, 18 H, CH3-CH2 and (CH3)2-CH), 1,26 à 1,48 (m, 68 H, CH2 chaine grasse and CH3-CH-Ph), 1,63 à 1,66 (m, 4 H, CH2-CH2-O), 1,79 à 1,84 (m, 4 H, S-CH2-CH2-CH2- 0), 2,24 (s, 6 H, (CH3)2-N), 2,38 à 2,45 (m, 12 H, CH2-C(0)-0-CH2, CH2-S and CH-S and CH2-N(CH3)2), 3,89 à 3,02 (m, 4 H, CH2-NH-P), 3,34 à 3,42 (m, 1 H, NH-P), 3,66 à 3,68 (m, 2 H, CH3-CH-Ph), 3,94 à 3,96 (m, 4 H, CH2-0-P), 4,12 à 4,15 (t, 3JH_H= 6,3 Hz, 15 4 H, CH2-0-C(0)-CH2), 7,06 à 7,08 (d, 3JH_H = 8 Hz, 4 H, H2 H6 / H2' H6'), 7,17 à 7,19 (d, 3h-14i= 8 Hz, 4 H, H3 H5 / H3' H5') ; 13C RMN : S (ppm, référence TMS : 0 ppm dans CDC13): 13,4 (CH3-CH2), 17,5 (CH3-CH-Ph), 22,4 ((CH3)2-CH), 22,65 (CH2 chaine grasse), 25,6 (CH2 chaine grasse), 26,5 à 26,7 (CH2 chaine grasse et CH2-S), 29,0 à 31,9 (CH2 chaine grasse), 34,8 (CH2 chaine grasse), 38,4 (CH2-NH-P), 44,8 à 46,0 (CH2- 20 N(CH3)2 and CH2-N(CH3)2 and CH-CH3), 59,5 (CH-S), 63,3 (CH2-0-C(0)-CH2), 66,3 (CH2-0-P), 127,1 (C3 C5 / C3' C5'), 129,3 (C2 C6 / C2' C6'), 137,7 (C4/ C4'), 140,4 (C1/ Cr), 174,6 (CH2-C(0)-0-CH2). 3041643 36 ETUDES DES PROPRIETES PHYSICO-CHIMOUES DES LIPOSOMES ET LIPOPLEXES 1) Organisation structurale - Etude par RMN 31P - Préparation de l'échantillon 5 Une solution mère d'un lipide cationique est préparée dans le chloroforme. Un volume de solution mère correspondant à une masse en lipide comprise entre 50 mg et 100 mg est pipetté dans un tube à hémolyse et le chloroforme est évaporé sous flux de N2 de façon à obtenir un film lipidique. 500 !IL d'eau est ensuite ajouté et le mélange est soumis aux ultrasons jusqu'à dispersion totale du film lipidique. Le mélange est lyophilisé pendant 10 une nuit. Un volume d'eau distillé est ensuite ajouté afin d'obtenir une solution de concentration de 100 mg.mL-1. De façon à assurer l'équilibre de l'échantillon, trois cycles -198 °C / 50 °C sont effectués : l'échantillon est placé à -198 °C (azote liquide) pendant 5 min, ensuite l'échantillon est placé dans un bain marie à 50 °C pendant 30 min et passé au vortex. 15 - Condition d'acquisition Les spectres RMN 31P ont été acquis avec une séquence écho de Hahn (90 °-T-180°-tacq). Les paramètres d'acquisition ont été les suivants : fenêtre spectral de 200 KHz, une impulsion rc/2 d'une durée de 4,88 µs, un délai de recyclage de 5 s et un délai d'écho de 40 i..ts. Le nombre d'acquisitions dépend du volume de l'échantillon et de la température 20 d'acquisition, et est compris entre 128 et 1700 scans. La température de l'échantillon est équilibrée pendant 30 min avant le début de l'acquisition. Le bruit Lorentzian est filtré sur l'ensemble de la fenêtre spectrale avant la transformée de Fourier sur le sommet de l'écho. Des vésicules de dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC) font office de référence externe en RMN 31P. La déconvolution des spectres a été réalisée avec le logiciel 25 TOPSPIN et dmfit-2009 (Massiot D, Fayon F, Capron M, King I, Le Calvé S, Alonso B, et al. Magn. Reson. Chem., 2002, 40, 70-76). 3041643 37 - Résultats La figure 1 montre très clairement par RMN 31P à température ambiante (Séquence écho de Hahn) que le composé non ramifié (I-1) s'auto-organise en milieu hydraté sous forme lamellaire tandis que les composés ramifiés de l'invention (ramification obtenus par 5 réaction de type thiol-ène ; Composés II-1, II-2, II-3, II-4) génèrent des agrégats supramoléculaires adoptant une structuration hexagonale. Le spectre RMN 31P, enregistré dans les mêmes conditions, de la co-formulation 1/1 (ratio molaire) du composé cationique non-ramifié I-1 et du co-lipide zwitterionique et ramifié II-8, montre que le co-lipide entraine la formation d'agrégats supramoléculaires de structure hexagonale. 10 Cette structuration peut donc être induite par la présence dans la co-formulation d'un lipide neutre (zwiterionique) ramifié par réaction thiol-ène. 2) Mesure de la taille et du potentiel zêta - Préparation des échantillons Les lipides cationiques ont été formulés en solution liposomale par la méthode 15 d'hydratation d'un film lipidique. Dans un premier temps, une fraction d'une solution concentrée du lipide cationique est placée dans un tube en verre et évaporée de façon à donner un film lipidique fin. 1 mL d'eau est ensuite ajouté au film et le film est hydraté pendant 3 jours à 4 °C. La solution est ensuite passée au vortex (1 min) et aux ultrasons (30 à 60 min) à 45 kHz. Ensuite 150 µL de la solution liposomale est diluée dans 1,5 mL 20 d'eau stérile. Après filtration (200 !lm) de la solution liposomale, la taille et le potentiel zêta des liposomes et lipoplexes sont déterminés. - Conditions d'acquisition La taille et le potentiel zêta () des liposomes et des lipoplexes ont été mesuré avec un Zetasizer Nano ZS (Malvern Instruments) à 25 °C après une dilution appropriée des 25 formulations. Pour les mesures des lipoplexes, chaque essai a utilisé 40 mg d'ADN plasmidique dans l'eau avec la quantité requise du lipide cationique étudié afin de former des lipoplexes avec des rapports de charge allant de 0,5 à 8,0. Pour les mesures des 3041643 38 liposomes, une quantité de lipide équivalente à un mélange ayant un rapport de charge de 1.0 dans l'eau a été utilisée. - Résultats Composé Taille (nm) PdI Potentiel Zêta (mV) APZ (mV) I-1 94 0,26 + 54 4 II-1 99 0,26 + 33 7 II-2 148 0,15 + 37 5 II-3 187 0,36 + 44 5 II-4 137 0,19 + 50 7 II-8 + I-1 (1/1) 136 0,2 + 48 6 II-5 230 0,30 + 24 6 II-6 188 0,30 + 58 7 II-7 132 0,20 + 53 8 Ces données de taille montrent que les agrégats supramoléculaires formés selon la 5 méthode d'hydratation d'un film lipidique suivie d'une étape de sonication, ont des tailles très usuelles comprises entre 90 et 230 nm. Les indices de polydispersité (PdI) témoignent du caractère relativement homogène de ces tailles dans les échantillons. Le potentiel zeta de ces échantillons, qui est toujours positif, correspond à des valeurs usuelles pour des amphiphiles cationiques ou des co-formulations comportant au moins un amphiphile 10 cationique. ETUDE BIOLOGIQUE Matériel Cellules et conditions de culture. La lignée cellulaire C2C12 est utilisée comme exemple ; il s'agit de myoblastes immortalisés de souris. Ces cellules sont cultivées en 15 milieu DMEM (Lonza) supplémenté en sérum décomplémenté (10%), L-Glutamine (2 mM) et pénicilline (100 U/mL) + streptomycine (100 pg/mL). Les cellules sont maintenues dans une étuve à 37°C sous atmosphère humide et 5% de CO2. ADN plasmidique. Le plasmide rapporteur luciferase pEGFP-Luc (Clontech) est utilisé dans ces tests. 3041643 39 Méthodes Formation des lipoplexes. Les lipoplexes sont préparés en OptiMEM (Gibco) en mélangeant différentes quantités d'un composé donné de l'invention avec 5 p.g d'ADN, afin de former des lipoplexes [lipide/ADN] caractérisés par des rapports de charges 5 (+/-) compris entre 0.5 et 8.0. Condensation d'ADN. Du bromure d'éthidium est intercalé dans l'ADN avant d'être mélangé avec les composés à tester. La condensation d'ADN est ensuite évaluée par électrophorèse en gel d'agarose. De l'ADN seul (non complexé) est utilisé comme référence. 10 Transfection in vitro. Les composés sont testés en transfection transitoire de cellules cultivées in vitro. Le protocole utilisé est celui qui a été décrit précédemment dans plusieurs publications scientifiques (Felgner P.L. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1987, 84, 7413-7417; Le Gall T. et al., J. Med. Chem. 2010, 53, 1496-1508). Brièvement, 24 h avant la transfection proprement dite, les cellules sont ensemencées en plaques 96 15 puits à la densité de 12 500 cellules par puits. Les complexes [lipide/ADN] sont déposés directement dans le milieu de culture des cellules, à raison de 0.25 p.g d'ADN par puits. Au terme d'environ 36 h d'incubation, le milieu de culture est éliminé puis les cellules sont lysées par 75 pt de Passive Lysis Buffer (Promega) 0.5X par puits. Après 24 h de stockage à -20°C, chaque lysat est utilisé pour doser les protéines totales, mesurer 20 l'activité luciférase et faire un test de viabilité cellulaire. Efficacité de transfection. L'activité luciferase est déterminée avec le kit Luciferase Assay System (Promega). Les protéines totales sont quantifiées au moyen d'un test colorimétrique BCA assay (Interchim). L'efficacité de transfection est calculée en rapportant l'activité luciferase à la quantité de protéines totales ; elle est exprimée en unité 25 relative de lumière par mg de protéines (URL/mg). Viabilité cellulaire. La viabilité cellulaire est évaluée au moyen du kit Vialight (Lonza). Des cellules témoins (non traitées) sont utilisées comme référence (viabilité 100%). 3041643 Résultats La capacité des composés à condenser un ADN est évaluée en utilisant les propriétés de fluorescence de ce dernier lorsqu'il est incubé en présence de bromure d'éthidium. La condensation d'ADN s'accompagne d'une exclusion du bromure d'éthidium intercalé. La 5 réduction de fluorescence qui en résulte permet ainsi de renseigner sur le degré de compaction de l'ADN obtenu grâce à un composé donné. La Figure 2 montre que les composés ramifiés de l'invention compactent l'ADN mais de façon moins complète que les composés non ramifiés (I-1). Les lipoplexes sont ensuite utilisés en transfection de cellules in vitro. La Figure 3 illustre 10 les résultats obtenus en transfection in vitro de cellules C2C12 au moyen de lipoplexes formés à partir de différents lipides amphiphiles cationiques ramifiés selon l'invention (II-2, II-4 et II-5) ou de lipides amphiphiles cationiques non ramifiés tel que le I-1 ou le DOTMA. Tous les composés testés se révèlent efficaces pour délivrer de l'ADN plasmidique à 15 l'intérieur de cellules C2C12, des cellules connues pour être relativement difficiles à transfecter. Cependant, comparativement au composé à chaines grasses linéaires I-1, les composés à chaines grasses ramifiées II-2 et II-4 permettent d'obtenir des efficacités de transfection significativement plus élevées, avec un gain pouvant atteindre jusque 40 fois la référence (Figure 3). En outre, ces meilleures efficacités sont obtenues tout en 20 conservant une bonne viabilité cellulaire comme le montre la Figure 4. Comparativement au DOTMA, le dérivé à chaines grasses ramifiées II-5 atteint des efficacités de transfections moins élevées mais il permet de maintenir une bonne viabilité cellulaire, même à rapport de charge élevé (Figure 5). Ces résultats indiquent qu'une ramification des chaines grasses des lipides cationiques 25 peut permettre d'augmenter le pouvoir transfectant et/ou d'améliorer la biocompatibilité, c'est-à-dire réduire sa toxicité, selon le lipide cationique de départ et la ramification introduite. REVENDICATIONS1. Composé amphiphile de formule générale (II) : Ri R2R2 R1 H -(CH2) (CH CH CH2hCH CH CH2 ) (CI-12)-1-1 n \ / , 1 P cl CH3-(CH2) CH CH-CF12 CH-CH-CF-12 CF-14-1-2 I I I I P cl' R3 R4 ""' R4 R3 dans laquelle : Li et L2 représentent chacun indépendamment un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes alkyle, aryle, alkylaryle, arylalkyle, alkyloxy, alkyloxycarbonyle ; L3 représente un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes alkyle, alkylphosphoramidates, alkylthiophosphoramidates, alkylphosphate, alkylthiophosphate, alkylphosphonite, alkylphosphonate, alkylthiophosphonate, alkylphosphoramide, alkylthiophosphoramide, alkyloxy ou amine ; Z est un groupe fonctionnel polaire, ledit groupe étant cationique, anionique, zwitterionique ou neutre ; a représente 0 ou 1 ; n, n', q et q' représentent chacun indépendamment un nombre entier de 1 à 15 ; m, m', p et p' représentent chacun indépendamment un nombre entier de 0 à 4 à condition que : - au moins un de m et p est différent de 0 ; - au moins un de m' et p' est différent de 0 ; 3041643 42 Ri et R2 représentent l'un un hydrogène et l'autre un groupe thioether de formule - S-1,4-Rs et R3 et R4 représentent l'un un hydrogène et l'autre un groupe thioether de formule -S-1,4-Rs tel que : L4 représente un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes 5 aminocarbonyle, acylamino, alkylaminocarbonyle, aminothiocarbonyle, alkyloxycarbonyle, alkyle, aryle, cycloalkyle, alkylaryle, arylalkyle, alkyloxy, polyéthylène glycol (PEG), polypropylène glycol (PPG), un peptide ou une combinaison de ceux-ci; éventuellement interrompu ou terminé par -0-, -S-, S02- ou une combinaison de ceux-ci; éventuellement comprenant en outre un 10 résidu d'un groupe réactif pars lequel L4 est relié à Rs ; Rs représente un atome d'hydrogène, ou : groupe polaire choisi dans le groupe des sels organiques de type ammonium, phosphonium, et imidazolium et des hétérocycles neutres protonables ; 15 un groupe réactif choisi dans le groupe comprenant le groupe N3, amino, alkylamino, COOH, amide, maléimide, alcyne, SH, OH, ester, ester activé, acide carboxylique activé, halogéno, nitro, nitrile, isonitriles, acrylamide, aldéhyde, cétone, acétals, cétals, anhydride, thiocyanate, isothiocyanate, isocyanate, hydrazines, hydrazides, hydrazones, éthers, oxydes, cyanates, 20 diazo, diazonium, sulfures, disulfures, sulfoxydes, sulfones, acides sulfoniques, acides sulfiniques, sulfates, acides sulféniques, amidines, imides, imines, imidates, nitrones, hydroxylamines, oximes, acides hydroxamiques, acides thiohydroxamique, allènes, ortho-esters, sulfites, énamines, ynamines, urées, pseudo-urées, semicarbazides, carbodiimides et carbamates ; ou un groupe bioactif choisi parmi les prodrogues, les amino-acides, les peptides, les protéines, les anticorps, les enzymes, les polysaccharides, les nucléosides, les nucléotides, les oligonucléotides, les fluorophores, les 3041643 43 chromophores, les radio-isotopes, les carboranes, et des combinaisons de ceux-ci. 2. Composé selon la revendication 1, de formule (IIa) R2 Ri CH-CH-CI-12C1-12)-0 0 / \ P cl N, I I P CH CH CH2) (cH2)--o ni---(cH2)--z / \ P cl' R6 dans laquelle Ri, R2, R3, Ra, Z, n, n', m, m', p, p', q et q' sont tels que définis dans la revendication 1 ; R6 représente un hydrogène ou un alkyle ; r représente un nombre entier de 1 à 10. 3. Composé selon la revendication 1, de formule (IIb) R1 R2 CH3-(CH2) (CH-CH-CF-12 CH3-(CF12)n. (9F-1 91-1 C112 R3 R4 m' 144 R3 (11a) R2 R1 CH-CH-CH2 R1 R2 CH3-(CH2) (CH-6I-CH2 CH3-(CH2) @H CH CH2) (CH-CH-CH R3 R4 r3 n' I I P CH2 CI-12)-°\/L (11b)q.CF12)-Z dans laquelle Ri, R2, R3, Ra, Z, n, n', m, m', p, p', q et q' sont tels que définis dans la revendication 1 ; s représente un nombre entier de 1 à 10. 3041643 44 4. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, sélectionné dans le groupe comprenant les composés : II- la --------...--------....-------s 0 0 Nil S P (:),/ / \ 0 N H II- ..--"--,..-"-----^--s oNil0 lb '--..'------....,------'zS P ,o, e Oz \Nz-,..,. N ,, X H II- le ...'..--.......',---...',---s 0 0 \ , i i --,..'-----......"-....zS P ---,C).-- 0/ \N N 6 ' X H II- s °`P P 0 2a S Or \N N X H II- S °`P P -,...,,C)..- 0 2b S Oz \N ...------,,, IN .,.... X H II- S 0N9 2c S P ---,Ci Or \N '---...',' N 0 X H 3041643 45 II- s o N0 ; CD, 3a afr S '.. N ^-- ., ,.. 0 N....---..,, H H - 41 oN9 0 0 3b s O,, \N'..---,..._'N.,, X S H II- S o 0 3c 3c S \ H '--, C),"" ,, P \ ,,----,....'. N ,, ex 0 N H II- OE S oN9 -.Ci G 4a S ,,, ID\ .....---..'.. N,, X 0 N H H- OE S o 9 4b S Np-....e...- '. \ ...,..'.. N ,, X 0 N,- H 3041643 46 II-4c s 0 0 S \ Il P---.2.--- °/ \NN eX H H- S S o 1 5a o,,,,,N ® II- S s o 1 5b 0 8 ,-11%1 c). X II- S S 0 1 5c o,),,,,,'N -: 0 0 X II- S OH 6a S 0 Nil0 P --.....0.-- 9 ', \ ....-, ,IN,, X 0 N `-' H OH II- S OH 6b S °N9 -.. 0.- e d \NN'._. X H OH II- S OH Ox 9 6c S P --.9 / \ .N Ox pi-, 0 OH 3041643 47 H- s OH 7a S 0 N i i P--...C).-- e 0/ \N N X H OH II- S s OH 7b 0 o Nil P\ ,..,,C'N' 8 , x O/ N OH H II- S OH 7c S S 0 0N II e N --. X /P\ .., N--- 0X OH H H- S 0 Nil0 8a S G qs , o P\N '','NS'. 0 0 H II- S S 0 8b 0 N II 0S ,0 ' , /p \ ,...-,..,N.,..---- .,---..',oe 0 [N \.. H- S 0 0 8c S in ® 0, p p-..., --- .,.., , \ ....,, Pi '..,...'....",..', 0, G 0 N 0 H II- HO---''''''''S oNS? 9a HO',,,S OzP \N,..--.'...,...N., H 3041643 48 II- HOS o Nil0 9b HO--S P \ FN1 N H II- Hcr's ON9 I 9c HO,...___,--,,S P / \ .---..'.N,, 0 N H II- o oN9 10a . o 0,-P\N ,---.' N H s S / . 0-7 o II- o s 0,9 10b . o-\ P I S 0/ \N.---..',N,, 0 H . 0 II- o s 0,, o 10c - 0---\ S 0/P \NN H 0 * 0 dans lequel X- représente un contre-ion. 3041643 49 5. Liposome comprenant au moins l'un des composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 caractérisé en ce qu'il présente une phase hexagonale. 6. Lipoplexe comprenant au moins l'un des composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 caractérisé en ce qu'il présente une phase hexagonale. 5 7. Procédé pour produire un composé de formule (II), 1:1 R2 \ /R2 Ri [CH3-(CH2) (CH CH CH2CH CH-CH2 ) (CH2)-L1 /rn' ID cl L3-Z (ID) CH3-(CH2) (CH CH CH2) (CH CF1-CH2ncH27-1-2 143 144 dans laquelle : Li et L2 représentent chacun indépendamment un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes alkyle, aryle, alkylaryle, arylalkyle, alkyloxy, 10 alkyloxycarbonyle ; L3 représente un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes alkyle, alkylphosphoramidates, alkylthiophosphoramidates, alkylphosphate, alkylthiophosphate, alkylphosphonite, alkylphosphonate, alkylthiophosphonate, alkylphosphoramide, alkylthiophosphoramide, alkyloxy ou amine ; 15 Z est un groupe fonctionnel polaire, ledit groupe étant cationique, anionique, zwitterionique ou neutre ; a représente 0 ou 1 ; n, n', q et q' représentent chacun indépendamment un nombre entier de 1 à 15 ; m, m', p et p' représentent chacun indépendamment un nombre entier de 0 à 4 à 20 condition que : au moins un de m et p est différent de 0 ; au moins un de m' et p' est différent de 0 ; 3041643 50 Ri et R2 représentent l'un un hydrogène et l'autre un groupe thioether de formule S-L4-R5 et R3 et R4 représentent l'un un hydrogène et l'autre un groupe thioether de formule -S-1,4-R5 dans laquelle : 1.4 représente un linker, préférablement le linker est choisi parmi les groupes 5 aminocarbonyle, acylamino, alkylaminocarbonyle, aminothiocarbonyle, alkyloxycarbonyle, alkyle, aryle, cycloalkyle, alkylaryle, arylalkyle, alkyloxy, polyéthylène glycol (PEG), polypropylène glycol (PPG), un peptide ou une combinaison de ceux-ci; éventuellement interrompu ou terminé par -0-, -S-, S02- ou une combinaison de ceux-ci; éventuellement comprenant en outre un 10 résidu d'un groupe réactif à travers lequel L4 est relié à R5 ; R5 représente un atome d'hydrogène, ou : - groupe polaire choisi dans le groupe des sels organiques de type ammonium, phosphonium, et imidazolium et des hétérocycles neutres protonables ; 15 - un groupe réactif choisi dans le groupe comprenant le groupe N3, amino, alkylamino, COOH, amide, maléimide, alcyne, SH, OH, ester, ester activé, acide carboxylique activé, halogéno, nitro, nitrile, isonitriles, acrylamide, aldéhyde, cétone, acétals, cétals, anhydride, thiocyanate, isothiocyanate, isocyanate, hydrazines, hydrazides, 20 hydrazones, éthers, oxydes, cyanates, diazo, diazonium, sulfures, disulfures, sulfoxydes, sulfones, acides sulfoniques, acides sulfiniques, sulfates, acides sulféniques, amidines, imides, imines, imidates, nitrons, hydroxylamines, oximes, acides hydroxamiques, acides thiohydroxamique, allènes, ortho-esters, sulfites, énamines, ynamines, 25 urées, pseudo-urées, semicarbazides, carbodiimides, carbamates ; ou - un groupe bioactif choisi parmi les prodrogues, les amino-acides, les peptides, les protéines, les anticorps, les enzymes, les polysaccharides, les nucléosides, les nucléotides, les oligonucléotides, les fluorophores, 3041643 51 les chromophores, les radio-isotopes, les carboranes, et des combinaisons de ceux-ci ; comprenant les étapes suivantes : i) faire réagir un composé de formule (I) [CF13-(CH2) (Ci-iCI-1 CH2) (CH---CH CH2 ) (C1-12)-1-1 \ a L3-Z (I) dans laquelle a, Li, L2, L3, Z, n, n', m, m', p, p', q et q' sont tels que définis ci-dessus ; avec un composé Rs-L4-SH dans lequel L4 et Rs sont tels que défini ci-dessus, en présence d'au moins un initiateur de radicaux avec ; 10 ii) optionnellement, faire réagir le produit de la réaction (i) avec une molécule bioactive, choisie parmi les prodrogues, les amino-acides, les peptides, les protéines, les anticorps, les enzymes, les polysaccharides, les nucléosides, les nucléotides, les oligonucléotides, les fluorophores, les chromophores, les radio-isotopes, et les carboranes, et des combinaisons de ceux-ci. 15 8. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4 pour son utilisation en transfection, pour la délivrance de prodrogues, de sensibilisateurs ou d'agent de visualisation, pour la thérapie génique, des traitements topiques ou des activités bactéricides. 9. Liposome selon la revendication 5 pour son utilisation en transfection, pour la 20 délivrance de prodrogues, de sensibilisateurs ou d'agent de visualisation, pour la thérapie génique, des traitements topiques ou des activités bactéricides. CH3-(CH2) (CFICH-CH2) (CHCH-C1-12-`"(C1-12)-1- n ' m' P cl' 5 3041643 52 10. Lipoplexe selon la revendication 6 pour son utilisation en transfection, pour la délivrance de prodrogues, de sensibilisateurs ou d'agent de visualisation, pour la thérapie génique, des traitements topiques ou des activités bactéricides.