Brevet FR3049062A1 — publié le 20170922

Procédé de caractérisation d'un échantillon liquide comportant des particules Description DOMAINE TECHNIQUE Le domaine technique de l'invention est l'analyse optique d'un liquide comportant des particules, l'analyse optique étant couplée à une segmentation du liquide en une phase enrichie en particules et une phase appauvrie en particules. ART ANTERIEUR La mesure de la glycémie est une mesure couramment pratiquée à l'aide de dispositifs de mesures portables, utilisables à domicile, dans des applications dénommées « Point of Care », terme anglais signifiant au chevet du patient, ou chez le patient. Cette mesure peut être réalisée par une méthode optique, en mettant en oeuvre une réaction enzymatique entraînant la formation d'un indicateur coloré, par exemple à partir d'un sel de tétrazolium. Un échantillon sanguin est alors disposé entre une source de lumière et un photodétecteur, ce dernier mesurant une intensité de la lumière transmise par l'échantillon. Cependant, le taux d'hématocrite dans le sang peut avoir une influence sur la mesure. En effet, des particules sanguines, notamment les globules rouges, diffusent et/ou absorbent la lumière traversant l'échantillon, et il est nécessaire de prendre en compte cette perturbation. Une première option, pour s'affranchir de l'effet des particules, est de procéder préalablement à la mesure, à une hémolyse. C'est ce qui est décrit dans le brevet US5866349. Dans ce brevet, on décrit une méthode optique pour déterminer la concentration de glucose dans du sang total. Après une étape d'hémolyse, la méthode met en oeuvre la réaction enzymatique précédemment évoquée. Cependant, l'étape d'hémolyse peut présenter certains inconvénients : d'une part, elle constitue une étape additionnelle, supposant l'ajout d'un réactif de lyse ainsi qu'un temps d'attente pour que la quantité de particules lysées soit suffisante. D'autre part, comme indiqué dans la demande EP1875203, la lyse de particule peut libérer, dans le plasma sanguin, des composants intracellulaires susceptibles de réagir avec l'indicateur coloré. Ainsi, l'étape de lyse ajoute de la complexité et peut impacter la précision de la mesure. Des alternatives à l'hémolyse existent. Par exemple, le brevet EP1875203 décrit un dispositif permettant d'estimer une quantité de glucose dans un échantillon sanguin, sans mettre en oeuvre l'hémolyse. Le principe de mesure repose également sur la formation d'un indicateur coloré issu de la réduction d'un sel de tétrazolium. L'échantillon sanguin est couplé au 3049062 2 photodétecteur par deux lentilles, disposées successivement entre l'échantillon et le photodétecteur. Ces lentilles permettent d'augmenter le signal collecté par le photodétecteur. Le photodétecteur peut être un photodétecteur matriciel, de type CCD. Deux sources de lumière sont utilisées, l'une émettant dans une bande spectrale d'absorption de l'indicateur coloré, 5 l'autre émettant dans le proche infrarouge. La détection du rayonnement lumineux transmis par l'échantillon, illuminé dans l'infrarouge, permet de déterminer un taux d'hématocrite ; la détection du rayonnement lumineux transmis par l'échantillon dans la bande spectrale d'absorption de l'indicateur permet d'estimer une quantité de glucose, cette estimation étant corrigée du taux d'hématocrite préalablement déterminé. Mais la mise en oeuvre d'un système 10 optique complexe, basé sur deux lentilles hémisphériques, nuit à la compacité du dispositif, ainsi qu'à son coût. Plus généralement, au-delà du sang, l'analyse d'un liquide comportant des particules peut poser des problèmes liés à la présence desdites particules. Des procédés connus ont recours à une centrifugation de l'échantillon pour pouvoir effectuer une séparation efficace des particules. 15 Mais la centrifugation est une technique difficilement intégrable dans un dispositif de type point of care Elle suppose l'utilisation de pièces mobiles et des actuateurs puissants. Elle peut également entraîner une lyse de certaines particules. L'invention proposée adresse ce problème, en proposant une méthode simple, permettant d'obtenir une caractérisation d'un liquide comportant des particules. L'invention peut être mise 20 en oeuvre à l'aide d'un dispositif simple et peu couteux, ne nécessitant ni système optique complexe, ni l'illumination successive de l'échantillon par deux longueurs d'onde différentes. EXPOSE DE L'INVENTION Un premier objet de l'invention est un procédé de caractérisation d'un échantillon, ledit échantillon comportant des particules baignant dans un milieu liquide, le procédé comprenant 25 les étapes suivantes : a) illumination de l'échantillon à l'aide d'une source de lumière, apte à émettre une onde lumineuse incidente vers l'échantillon ; b) détection, à l'aide d'un photodétecteur, d'une onde lumineuse transmise par l'échantillon ainsi illuminé ; 30 c) caractérisation de l'échantillon en fonction d'une intensité de l'onde lumineuse détectée par le photodétecteur ; 3049062 3 le procédé étant caractérisé en ce qu'il comprend, préalablement à l'étape b), une étape d'application d'une onde acoustique dans l'échantillon, ladite onde acoustique formant des noeuds de pression et des ventres de pression dans l'échantillon, de manière à séparer, dans ce dernier, une partie appauvrie en particules et une partie enrichie en particules, de telle sorte 5 que lors de l'étape c) la caractérisation de l'échantillon est réalisée : - à partir de l'intensité de l'onde lumineuse transmise par la partie appauvrie ; - ou à partir de l'intensité de l'onde lumineuse transmise par la partie enrichie. Par onde lumineuse transmise, on entend une onde lumineuse résultant de l'illumination de l'échantillon par l'onde lumineuse incidente, après que cette dernière a traversé l'échantillon. 10 Les termes noeuds et ventres de pression désignent respectivement des zones de l'échantillon dans lesquelles l'amplitude de l'onde de pression acoustique est respectivement minimale et maximale. Sous l'effet de l'onde acoustique, les particules présentes dans l'échantillon peuvent se concentrer soit au niveau desdits noeuds de pression, soit au niveau des ventres de pression. 15 Selon un mode de réalisation, la caractérisation de l'échantillon comporte une estimation d'une quantité d'un analyte dans l'échantillon. L'étape c) comporte alors une estimation de la quantité de l'analyte en fonction d'une intensité de l'onde lumineuse détectée par le photodétecteur. Le procédé peut inclure, préalablement à l'étape b), un mélange de l'échantillon avec un réactif apte à modifier une propriété optique de l'échantillon. 20 Par propriété optique, on entend l'absorption ou de la diffusion de l'échantillon dans une ou plusieurs bandes spectrales. Il peut s'agir d'une couleur de l'échantillon. Selon un mode de réalisation, le réactif est apte à former un indicateur coloré dans l'échantillon, sous l'effet dudit analyte. La quantité d'indicateur coloré formée dépend généralement de la quantité d'analyte, par selon une fonction croissante de ladite quantité d'analyte. 25 La caractérisation peut comprendre une estimation d'un nombre de particules composant l'échantillon, ou une détermination d'une propriété optique du milieu liquide dans lequel baignent les particules, ou une détermination d'une évolution temporelle de ladite propriété optique. Avantageusement, le photodétecteur est un capteur d'image, de telle sorte que : 30 - l'étape b) comprend l'acquisition d'une image de l'onde lumineuse transmise par l'échantillon ; - l'étape c) comprend une identification, sur ladite image, d'une région d'intérêt correspondant à au moins une partie appauvrie en particules, ou à au moins une partie 3049062 4 enrichie en particules, la caractérisation étant réalisée à partir de la région d'intérêt ainsi identifiée. Selon une variante, il n'y a pas d'optique de grossissement, entre le capteur d'image et l'échantillon. 5 Le procédé peut comporter l'une quelconque des caractéristiques suivantes, prises isolément ou en combinaison : l'échantillon est maintenu sur un support fluidique, l'application de l'onde acoustique étant réalisée au moyen d'un transducteur électromécanique, notamment piézoélectrique, agissant sur ledit support fluidique de façon à propager l'onde 10 acoustique dans ledit échantillon. Le support fluidique peut être une chambre fluidique, définissant une épaisseur de l'échantillon selon une direction de la propagation de l'onde lumineuse incidente. l'onde acoustique appliquée à l'échantillon est une onde stationnaire ; l'échantillon comporte un liquide corporel, en particulier du sang ; 15 les particules sont des globules rouges. Un autre objet de l'invention est un dispositif pour caractériser un échantillon, comportant des particules baignant dans un milieu liquide, le dispositif comportant : - une source de lumière, agencée pour émettre une onde lumineuse incidente se propageant vers un support fluidique, apte à maintenir l'échantillon ; 20 - un photodétecteur, configuré pour détecter une onde lumineuse transmise par l'échantillon, maintenu sur ledit support fluidique, lorsqu'il est illuminé par ladite onde lumineuse incidente ; - un processeur, apte à caractériser l'échantillon en fonction d'une intensité de l'onde lumineuse détectée par le photodétecteur ; 25 le dispositif étant caractérisé en ce qu'il comporte un transducteur électromécanique, configuré pour former une onde acoustique se propageant dans ledit échantillon, maintenu sur le support fluidique, de manière à séparer, dans ledit échantillon, une partie appauvrie en particules et une partie enrichie en particules, de telle sorte que le processeur est configuré pour caractériser l'échantillon : 30 - à partir de l'intensité de l'onde lumineuse transmise par la partie appauvrie ; ou à partir de l'intensité de l'onde lumineuse transmise par la partie enrichie. 3049062 5 Le dispositif peut comporter l'une des caractéristiques suivantes, prises isolément ou selon les combinaisons techniquement réalisables : le transducteur électromécanique comporte un transducteur piézoélectrique ou une pluralité de transducteurs piézoélectriques ; 5 le transducteur électromécanique est apte à appliquer une pression sur ledit support fluidique, de manière à former une onde acoustique dans un échantillon maintenu sur ledit support fluidique. Le photodétecteur est de préférence un capteur d'image. Dans ce cas, le processeur est apte à identifier, sur au moins une image acquise par le capteur d'image, une région d'intérêt 10 correspondant à une partie appauvrie en particules, ou à une partie enrichie en particules, le processeur étant configuré pour caractériser l'échantillon à partir de la région d'intérêt ainsi identifiée. Selon un mode de réalisation, il n'y a pas d'optique de grossissement, entre le support fluidique et le capteur d'image. Le support fluidique peut être une chambre fluidique, configurée pour confiner l'échantillon 15 entre la source de lumière et le photodétecteur. Cette chambre fluidique peut notamment définir une épaisseur de l'échantillon, par exemple une épaisseur constante, selon une direction de propagation de l'onde lumineuse incidente. D'autres avantages et caractéristiques ressortiront plus clairement de la description qui va suivre de modes particuliers de réalisation de l'invention, donnés à titre d'exemples non limitatifs, et 20 représentés aux figures énumérées ci-dessous. FIGURES La figure 1A représente un dispositif selon un mode de réalisation de l'invention, illustrant un échantillon placé dans une chambre fluidique couplée à un transducteur, le transducteur n'étant pas activé. La figure 1B illustre une configuration similaire à la figure 1A, le transducteur étant 25 activé. La comparaison des figures 1A et 1B permet de comprendre l'effet technique lié à l'activation d'un tel transducteur. La figure 1C représente un exemple de chambre de fluidique pouvant accueillir un échantillon. La figure 1D schématise des conditions géométriques propices à l'établissement d'une onde de pression stationnaire dans une chambre fluidique. 30 La figure 2 représente une image réalisée avec un dispositif tel que représenté selon la figure 1B, l'échantillon comportant du sang dilué dans un tampon. 3049062 6 Les figures 3A et 3B représentent respectivement des images d'un échantillon dit de référence respectivement sans et avec activation de transducteurs couplés à la chambre fluidique, cette dernière étant similaire à l'exemple présenté sur la figure 1C. Les figures 4A et 4B représentent des images respectives de deux échantillons de test lors du 5 dosage d'une quantité de glucose, ces images étant obtenues 109 secondes après activation des transducteurs piézoélectriques. La figure 5A représente l'évolution, en fonction du temps, de l'intensité moyenne des parties appauvries des images de l'échantillon de référence et de deux échantillons de test. La figure 5B représente l'évolution, en fonction du temps, d'un ratio représentatif de l'intensité 10 moyenne des parties appauvries en particules respectivement des images de l'échantillon de référence et de deux échantillons de test, sur l'intensité moyenne de la partie appauvrie en particules de l'image de l'échantillon de référence. Les figures 6A, 6B et 6C représentent des images de trois échantillons de test présentant des taux d'hématocrite respectivement égaux à 41%, 25% et 10%. 15 La figure 7 représente l'évolution, en fonction du temps, l'aire cumulée des surfaces claires des figures 6A, 6B et 6C, ces surfaces claires représentant les parties appauvries de l'échantillon. La figure 8 est une courbe de calibration obtenue en fonction des essais présentés en lien avec les figures 6A, 6B, 6C et 7. La figure 9 illustre un autre mode de réalisation de l'échantillon. 20 EXPOSE DE MODES DE REALISATION PARTICULIERS La figure 1A représente un exemple de dispositif 1 objet de l'invention. Une source de lumière 11 est apte à émettre une onde lumineuse 12, dite onde lumineuse incidente, dans une bande spectrale d'illumination, en direction d'un échantillon 20, selon un axe de propagation Z. L'échantillon 20 comporte un milieu liquide 22 ainsi que des particules 21 baignant dans ce 25 milieu liquide. L'échantillon 20 peut notamment comprendre un liquide corporel, par exemple du sang. Il peut notamment s'agir de sang total. Les particules 21 peuvent être des particules sanguines, et plus particulièrement des globules rouges. Il peut également s'agir de cellules, de microorganismes, par exemple des bactéries ou des levures, des microalgues, des microbilles, ou des gouttelettes insolubles dans le milieu liquide, par exemple des nanoparticules lipidiques. 30 De préférence, les particules 21 ont un diamètre, ou sont inscrites dans un diamètre, inférieur à 1 mm, et de préférence inférieure à 100 um. Il s'agit de microparticules (diamètre inférieur à 1 mm) ou de nanoparticules (diamètre inférieur à 1 um). Le milieu liquide 22, dans lequel baignent 3049062 7 les particules, peut être une phase liquide d'un liquide corporel, d'un milieu de culture ou d'un liquide prélevé dans l'environnement ou dans un procédé industriel. La distance D entre la source de lumière 11 et l'échantillon 20 est de préférence supérieure à 1 cm. Elle est de préférence comprise entre 1 et 30 cm, typiquement 5 cm. 5 La source de lumière 11 peut être une diode électroluminescente ou une source de lumière laser comme une diode laser. La source de lumière 11 peut comporter un filtre optique 19, notamment un filtre passe-bande, permettant d'ajuster la bande spectrale d'illumination de l'onde lumineuse incidente 12. Un tel filtre optique est optionnel. La bande spectrale d'illumination de l'onde lumineuse émise par la source de lumière 11 est adaptée à un spectre 10 d'absorption d'un indicateur coloré 24 décrit dans la suite de la description. L'échantillon 20 est contenu dans une chambre fluidique 15. La chambre fluidique 15 est par exemple une micro-cuvette, d'utilisation courante dans les dispositifs de type point of care, dans laquelle l'échantillon 20 pénètre, par exemple par capillarité. Sur la figure 1A, on a représenté deux parois longitudinales 16, 17, désignées respectivement par les termes paroi supérieure et 15 paroi inférieure, transparentes et distantes de 150 um. La distance entre ces deux parois longitudinales 16, 17, selon l'axe de propagation Z, correspond à l'épaisseur e de l'échantillon. Cette dernière varie typiquement entre 20 um et 1 cm, et est de préférence comprise entre 50 um et 500 um, par exemple 150 um. Les parois latérales de la chambre fluidique, s'étendant parallèlement à l'axe de propagation Z, ne sont pas représentées. 20 La chambre fluidique 15 est disposée entre la source de lumière 11 et un capteur d'image 30, apte à établir une image 1m, dite image de transmission, d'une onde lumineuse 14 transmise par l'échantillon 20. Le capteur d'image 30 s'étend selon un plan de détection P, de préférence parallèlement, ou sensiblement parallèlement aux parois longitudinales 16, 17 de la chambre fluidique 15. Le terme sensiblement parallèlement signifie que les deux éléments peuvent ne 25 pas être rigoureusement parallèles, une tolérance angulaire de quelques degrés, inférieure à 20° ou à 10° étant admise. Le capteur d'image 30 comporte une matrice de pixels, de type CCD (de l'anglais Charge Coupled Device) ou un CMOS (de l'anglais Complementary Metal-Oxyde Semiconductor). Les capteurs d'image dont le pas inter pixel est inférieur à 3µm sont préférés, car ils permettent d'obtenir 30 des images avec une résolution spatiale satisfaisante. 3049062 8 On remarque, dans cet exemple, l'absence d'optique de grossissement entre le capteur d'image 30 et l'échantillon 20. Cela n'empêche pas la présence éventuelle de microlentilles de focalisation au niveau de chaque pixel du capteur d'image 30. Cela permet de former une image 1m, dite de transmission, d'une onde lumineuse 14 transmise par l'échantillon en 5 minimisant la distance entre l'échantillon 20 et le capteur d'image 30. Cela permet d'utiliser un dispositif d'analyse particulièrement simple et compact. Ainsi, en l'absence d'optique de grossissement, la distance d entre l'échantillon et les pixels du photodétecteur est de préférence inférieure à 2 cm, voire à 1 cm, et préférentiellement comprise entre 50 um et 2 cm, de préférence comprise entre 100 um et 2 mm. 10 Un processeur 32, par exemple un microprocesseur, est apte à traiter les images lm acquises par le capteur d'image 30. En particulier, le processeur est un microprocesseur relié à une mémoire programmable 33 dans laquelle est stockée une séquence d'instructions pour effectuer les opérations de traitement d'image et de calcul décrites dans cette description. Le processeur peut être relié à un écran d'affichage 34. 15 La chambre fluidique 15 est reliée mécaniquement à un premier transducteur électromécanique 41, apte à propager une onde acoustique ultrasonore dans l'échantillon 20. Le terme ultrasonore désigne le fait que la fréquence de l'onde acoustique est supérieure à 15 kHz et inférieure à 1 GHz. Dans cet exemple, le premier transducteur 41 est un transducteur piézoélectrique, apte à entraîner une vibration d'une paroi de la chambre fluidique 15, en l'occurrence la paroi 20 supérieure 16, ce qui entraîne la formation d'une onde acoustique 45 se propageant dans l'échantillon 20, et cela à une fréquence d'excitation du transducteur piézoélectrique. La fréquence d'excitation correspond généralement à une fréquence de résonance du transducteur 41, le fonctionnement de ce dernier étant optimal à une telle fréquence. Cette fréquence de résonance dépend du transducteur, ce dernier pouvant également être désigné 25 par le terme résonateur. Généralement, un transducteur piézoélectrique comporte un matériau piézoélectrique disposé entre deux électrodes. Sa fréquence de résonance dépend de sa forme, notamment son épaisseur. Le premier transducteur 41 peut être directement placé au contact de la chambre fluidique 15, ou placé sur un élément d'interface, ce dernier assurant un meilleur couplage entre l'onde mécanique produite par le transducteur et l'onde acoustique formée dans 30 l'échantillon 20. Les particules 21 en suspension dans l'échantillon 20 se trouvent alors placées dans un champ de pression acoustique, et subissent une force, dite force acoustique, pouvant engendrer un 3049062 9 déplacement desdites particules. En fonction d'un paramètre caractérisant ces particules, désigné par le terme facteur de contraste, les particules se concentrent soit dans les noeuds de pression 46, c'est-à-dire les zones de l'échantillon dans lesquelles l'amplitude de l'onde de pression est minimale, ou dans les ventres de pression 47, c'est-à-dire les zones de l'échantillon 5 dans lesquelles l'amplitude de l'onde de pression est maximale. Ainsi, le recours à une onde acoustique 45 permet d'obtenir une concentration des particules 21 selon le champ de pression formé dans l'échantillon et du facteur de contraste des particules. Lorsque l'échantillon 20 comporte des particules sanguines, il a été observé que les globules rouges ont tendance à s'accumuler au niveau des noeuds de pression 46. Le recours à une onde acoustique 45 permet 10 alors une segmentation spatiale de l'échantillon 20 en des zones 20a appauvries en particules, ou zones déplétées, et en des zones 20b enrichies en particules. L'invention permet une séparation des particules sans déplacement de la chambre fluidique 15 dans laquelle l'échantillon est confiné. Dans l'échantillon, les particules 21 ne subissent pas un mouvement de rotation autour d'un même axe de rotation, comme dans les procédés de centrifugation de 15 l'art antérieur. De préférence, l'onde acoustique 45 appliquée à l'échantillon 20 est stationnaire. Dans ce cas, la longueur d'onde X de l'onde acoustique 45 est avantageusement déterminée en fonction des dimensions de la chambre fluidique 15. Une condition peut notamment être qu'une dimension longitudinale L, selon laquelle se propage l'onde acoustique, est un multiple de la demi-longueur 20 d'onde. Cette condition, illustrée sur la figure 1D, est notamment utile lorsque ladite dimension longitudinale est faible, typiquement de l'ordre de la longueur d'onde X ou de quelques longueurs d'onde. La formation d'une onde stationnaire est avantageuse, car elle permet d'obtenir des ventres ou des noeuds de pression dont la position n'évolue pas significativement dans le temps. La dimension longitudinale L de la chambre fluidique peut être supérieure à 10 25 fois la longueur d'onde X, auquel cas il est possible de former une onde pseudo-stationnaire sans ajustement précis de la longueur d'onde vis-à-vis de cette dimension. Le terme pseudostationnaire désigne le fait que l'onde comporte une composante progressive, mais que le déplacement des ventres 47 ou des noeuds de pression 46 est suffisamment faible pour que le déplacement des particules 21, sous l'effet de cette composante progressive, soit négligeable 30 pendant la durée d'acquisition, par le capteur d'image 30, d'une image lm de l'onde lumineuse 14 transmise par l'échantillon 20. La durée d'une telle acquisition est typiquement de l'ordre de 1 seconde, ou est inférieure ou égale à 1 seconde. 3049062 10 La figure 1C représente un mode de réalisation selon lequel le chambre fluidique est couplée à deux transducteurs 41 et 42, orientés orthogonalement l'un à l'autre. Un premier transducteur 41 est apte à former une première onde acoustique se déplaçant selon l'axe Y, tandis qu'un deuxième transducteur 42 est apte à former une deuxième onde acoustique se déplaçant selon 5 l'axe X. Cette configuration permet une répartition bidimensionnelle des noeuds et des ventres de pression dans le plan XY. On a schématisé, sur la figure 1C, une répartition matricielle des ventres de pression 47 dans le cas idéal dans lequel le premier transducteur 41 et le deuxième transducteur 42 forment respectivement une onde stationnaire de même longueur d'onde, ce qui conduit à une répartition régulière et bidimensionnelle des ventres de pression 47. 10 La figure 2 représente une image expérimentale d'un premier échantillon de volume 80 p.I comportant 46.8 p.I de sang dilué dans 33.2 p.I de tampon Tris-Glycine. Pour obtenir cette image, l'échantillon 20 a été disposé dans une chambre fluidique 15 de forme parallélépipédique, de longueur L = 2 cm, de largeur .e = 2 cm et d'épaisseur e = 150 p.m. Cette chambre fluidique est placée à 5 cm d'une source de lumière. La source de lumière est une diode électroluminescente 15 émettant dans une bande spectrale d'émission centrée sur une longueur d'onde de 660 nm. Il s'agit d'une diode électroluminescente fournie par le fournisseur CooILED, sous la référence pE illumination system 244 5100 red. Il est préférable que la largeur de la bande spectrale d'émission soit inférieure à 100 nm, cette largeur correspondant à une largeur à mi-hauteur du pic d'émission. 20 La chambre fluidique 15 comporte une lame supérieure transparente 16, en verre, et d'épaisseur 150 p.m. Elle comporte également une lame inférieure 17, en verre, d'épaisseur 1 mm. La lame inférieure est disposée à une distance d de 1 cm du capteur d'image 30, ce dernier étant un capteur CMOS Hamamatsu digital camera C11440 22 CU. La plaque supérieure 16 est reliée à deux transducteurs piézoélectriques Noliac NCE 51 orientés 25 orthogonalement l'un à l'autre, comme représenté sur la figure 1C. Chaque transducteur est alimenté par un signal d'excitation dont la tension crête-crête est de 14 V, un déphasage de 90° étant appliqué entre le signal d'excitation du premier transducteur 41 et le signal d'excitation du deuxième transducteur 42. La fréquence de résonance de ces transducteurs est de 3 MHz. On a tout d'abord ajusté expérimentalement une fréquence de résonance de la chambre 30 fluidique 15, tenant compte du couplage entre les transducteurs 41, 42 et ladite chambre fluidique, ainsi que de l'impédance acoustique de l'échantillon 20. Cette détermination a été effectuée en utilisant un échantillon de calibration constitué d'une solution aqueuse comportant 3049062 11 des billes de polystyrène de diamètre 40 um. On a observé, visuellement, qu'une segmentation optimale des billes de polystyrène se produisait avec une fréquence du signal d'excitation de 2.415 MHz. Une telle fréquence d'excitation a été appliquée sur les transducteurs 41, 42 après que la 5 chambre fluidique 15 a été remplie avec l'échantillon de calibration précédemment décrit. La figure 2 représente une image obtenue après activation des transducteurs. On observe des régions claires 20a réparties selon une distribution bidimensionnelle, ainsi que des régions sombres 20b. Les régions sombres correspondent aux noeuds de pression, dans lesquelles les particules se concentrent, pour former les parties enrichies 20b. L'onde lumineuse incidente 12 10 subie une importante atténuation par ces particules, ce qui explique la faible intensité de l'onde 14 transmise par l'échantillon 20 au niveau de ces parties 20b concentrées en particules. A l'inverse, les régions claires correspondent aux parties 20a de l'échantillon appauvries en particules 21 du fait de l'application de l'onde acoustique 45. Cette image montre que sous l'effet de l'onde acoustique 45, la transmission optique de l'échantillon n'est plus homogène : 15 elle est faible dans les parties 20b de l'échantillon enrichies en particules et élevée dans les parties appauvries 20a. Par transmission optique, on entend une comparaison entre l'intensité i14 de l'onde transmise par l'échantillon sur l'intensité i12 de l'onde incidente à l'échantillon. La transmission optique Tr est classiquement exprimée sous la forme d'une comparaison, comparaison pouvant 20 notamment prendre la forme d'un ratio tel que Tr = -i14 . Sans application de l'onde acoustique 112 45, la transmission optique d'un échantillon est homogène, du fait de la répartition homogène des particules. L'application de l'onde acoustique 45 permet d'obtenir une distribution spatiale hétérogène de la transmission optique, cette dernière présentant des minimas au niveau des parties enrichies 20b et des maximas au niveau des parties appauvries 20a. Lorsque l'échantillon 25 est du sang, chaque partie appauvrie est essentiellement composée de plasma et chaque partie enrichie est essentiellement composée de globules rouges. L'application de l'onde acoustique, couplée à une détection d'une onde lumineuse transmise par l'échantillon, au niveau d'une partie appauvrie 20a, permet alors d'estimer la transmission optique Tr du plasma. D'une façon plus générale, et c'est un point essentiel de l'invention, la combinaison d'une onde 30 acoustique et de la mesure de l'intensité de l'onde lumineuse transmise par un échantillon permet d'estimer une transmission optique d'une zone appauvrie en particules de l'échantillon, ou d'une zone enrichie en particules de cet échantillon. 3049062 12 Les inventeurs ont mis en oeuvre l'invention pour effectuer un dosage d'un analyte 26, et en particulier du glucose, dans le sang. Les principes de détection du glucose dans un échantillon sanguin par la mise en oeuvre de réactions enzymatiques aboutissant à la formation d'un indicateur coloré sont décrits dans les brevets US3964974 et US5866349. D'une façon générale, 5 cette méthode colorimétrique est basée sur : l'oxydation du glucose par NAD (acronyme de nicotinamide adenine dinucleotide) agissant en tant que cofacteur, en présence de GDH (acronyme de glucose dehydrogenase), aboutissant à la formation de NADH + H+ (acronyme de acide dihydronicotinique amide adenine dinucleotide) ; 10 la réduction d'un sel de tétrazolium par NADH + H+, en présence de diaphorase (dihydrolipoyl dehydrogenase), réaction aboutissant à la formation d'un indicateur coloré 24, dont la concentration est représentative de la concentration de glucose dans l'échantillon. Le sel de tétrazolium utilisé peut être du MTT, acronyme de bromure de 3-(4,5- 15 diméthylthiazolyl-2-yl)-2,5-diphényltetrazolium, auquel cas l'indicateur coloré est le Formazan, de couleur violette. Le terme indicateur coloré désigne une espèce chimique ayant une couleur particulière, et dont la formation dans l'échantillon est apte à modifier le spectre d'absorption ou le spectre de transmission de l'échantillon. 20 Aussi, le procédé comporte une étape de mélange de l'échantillon 20 avec un réactif 23, permettant la formation d'un indicateur coloré 24 en réagissant avec l'analyte 26 présent dans l'échantillon 20, cet analyte étant, dans cet exemple, le glucose. Le réactif 23 peut comporter de la GDH, du NAD, de la Diaphorase et du MU. La formation de l'indicateur coloré 24 représentatif de l'analyte 26 entraîne une diminution de 25 la transmission optique de l'échantillon, et notamment dans le plasma, dans une bande spectrale d'absorption (ou bande spectrale de coloration) de l'indicateur coloré. Il est connu que cette bande spectrale s'étend entre 370 et 700 nm, avec un maximum d'absorption vers X=565 nm. Ainsi, lorsqu'un dosage de glucose est mis en oeuvre, il est usuel de déterminer l'atténuation optique de l'échantillon analysé à 660 nm, cette dernière étant d'autant plus marquée que la 30 concentration de glucose est importante. L'atténuation Att désigne le complémentaire de la transmission, de telle sorte que Att = 1- Tr. 3049062 13 Un échantillon de référence a été constitué. Cet échantillon de référence comporte 46.8 ul de sang, la concentration en glucose étant de 20 mM, 20 ul de MTT et 13.2 ul de tampon salin. L'échantillon de référence ne comporte ni le cofacteur (NAD) ni les enzymes, en l'occurrence GDH, permettant, sous l'effet du glucose, la formation de l'agent (NADH + H+) responsable de la 5 réduction du MTT en un indicateur coloré. La figure 3A représente une image de l'échantillon 20de référence avant activation des transducteurs 41,42. La figure 3B montre une image de l'échantillon de référence après application d'une onde acoustique, dans l'échantillon 20, par les transducteurs. A l'instar de la figure 2, on observe la formation de régions appauvries claires 20a et des régions enrichies sombres 20b. 10 On a ensuite réalisé des images de d'un premier et d'un deuxième échantillon de test, ces échantillons étant désignés par test1 et test2. Chaque échantillon de test a la composition suivante : sang : 46.8 ul ; MU : 20 ul ; 15 Tampon salin : 10 ul ; Mutatorase : 0.8 ul ; GDH : 0.8 III ; Diaphorase : 0.8 ul ; NAD : 0.8 ut 20 Les figures 4A et 4B représentent des images respectives du premier et du deuxième échantillon de test, ces images ayant été acquises respectivement 172 secondes et 175 secondes après ajout du réactif 23 permettant la formation de l'indicateur coloré 24. On observe une séparation du plasma et des particules sanguines, essentiellement les globules rouges, les zones claires 20a permettant de déterminer la transmission optique du plasma. Ces images ont été répétées dans 25 le temps, à une cadence de 1 image par seconde. On a observé un assombrissement progressif des zones claires 20a, sous l'effet de la formation de l'indicateur coloré 24 du fait des réactions enzymatiques préalablement décrites. Les inventeurs ont quantifié l'évolution de l'intensité i14 de l'onde 14 transmise par l'échantillon de référence ref et les deux échantillons de test tests, test2, en limitant l'analyse des images 30 acquises aux régions d'intérêts formées par les différentes parties 20a appauvries en particules. Pour cela, un seuillage en intensité a été appliqué sur chacune de ces images, de façon à exclure les différentes régions sombres de l'analyse, ces dernières étant représentatives des parties enrichies 20b de l'échantillon 20. De ce fait, chaque image seuillée ne comporte que les régions 3049062 14 claires, correspondant aux parties appauvries 20a. Sur chaque image seuillée, l'intensité moyenne des pixels des différentes zones claires a été déterminée. La figure 5A représente l'évolution, en fonction du temps, de l'intensité moyenne des pixels des zones claires, et cela respectivement pour l'échantillon de référence ref, le premier échantillon de test test1 et le 5 deuxième échantillon de test test2. L'unité de l'axe des abscisses est la seconde, tandis que l'axe des ordonnées représente l'intensité moyenne exprimée en niveaux de gris. Pour chaque échantillon de test, l'instant initial, à l'origine de l'axe des abscisses, correspond à l'ajout du réactif 23 permettant le déclenchement de la réaction enzymatique aboutissant à la formation de l'indicateur coloré 24. Les courbes sont tracées à partir de l'instant correspondant à 10 l'actionnement des transducteurs. Sur l'échantillon de référence ref, l'intensité moyenne des zones claires augmente puis tend à se stabiliser, témoignant d'une segmentation progressive de l'échantillon en parties claires 20a et en parties sombres 20b. Sur les deux échantillons de test, l'intensité moyenne augmente, sous l'effet de la segmentation, 15 puis diminue et se stabilise à des niveaux comparables, du fait de la formation progressive de l'indicateur coloré, tendant à assombrir lesdites parties appauvries 20a. Sur l'échantillon de référence et les deux échantillons de test, les inventeurs ont normalisé l'intensité de chaque image seuillée par l'intensité moyenne, au même instant, de l'image seuillée de l'échantillon de référence. La courbe représenté sur la figure 5B représente, pour 20 chaque échantillon, l'évolution, en fonction du temps, de l'intensité de chaque image seuillée sur l'intensité moyenne de l'image seuillée de l'échantillon de référence. En considérant que l'intensité moyenne des zones claires de l'image de référence correspond à l'intensité de l'onde incidente, on obtient alors une grandeur représentative la transmission optique du plasma, c'est-à-dire du milieu liquide 22 dans lequel baignent les globules rouges, en fonction du temps. 25 On constate une diminution significative de cette transmission, puis une stabilisation. Ainsi, en se basant sur un étalonnage, réalisée avec des échantillons de test dans lesquels la quantité d'analyte est connue, l'invention permet une estimation d'une quantité d'analyte dans un échantillon inconnu, sur la base de l'intensité moyenne des différentes zones claires de l'image. L'étape d'ajout d'un réactif 23 apte à modifier une propriété optique de l'échantillon en fonction 30 d'une quantité d'analyte 26 est optionnelle. L'invention peut également être appliquée à l'analyse d'une propriété optique d'une ou plusieurs zones appauvries 20a de l'échantillon, de façon à caractériser le milieu liquide 22 dans lequel baignent les particules 21. Lorsque 3049062 15 l'échantillon est du sang, l'invention permet d'observer, par exemple, une coloration pathologique du plasma. Dans ce cas, les forces acoustiques permettent une segmentation de l'échantillon en parties appauvries 20a et en parties enrichies 20b, comme préalablement décrit. Le capteur d'image 30 permet de visualiser une image /m représentative de cette segmentation. 5 A partir de chaque zone claire de l'image, correspondant à une partie appauvrie 20a, une estimation d'une propriété optique du milieu liquide 22 dans lequel baignent les particules 21, est réalisée. Il peut s'agir d'une détermination de la couleur ou d'une détermination d'une transmission optique ou d'une absorption optique du milieu liquide 22. Ce procédé peut comprendre une étape de comparaison de ladite propriété optique estimée avec une propriété 10 optique d'un échantillon de référence connu, déterminée lors d'un étalonnage. Une application de l'invention peut concerner le domaine de la production de microalgues. L'invention permet de suivre l'évolution du milieu liquide dans lequel baignent les microalgues, par exemple en examinant un changement de couleur sous l'effet du relargage de chlorophylle par lesdites microalgues. L'invention peut être également être appliquée à la culture cellulaire, 15 en examinant une éventuelle évolution d'une propriété optique d'un milieu de culture, par exemple sous l'effet d'une variation du pH. Le milieu de culture peut alors comporter un indicateur coloré dont la couleur change en fonction du pH. Les figures 6A à 6C représentent des images acquises en observant du sang dans lequel le taux d'hématocrite est variable. Plus le taux d'hématocrite est élevé, plus l'aire des parties appauvries 20 20a diminue et plus l'aire des parties enrichies 20b augmente. Sur les images acquises par le capteur d'image 30, plus le taux d'hématocrite est élevé, plus la surface des zones claires diminue, et plus la surface des zones sombres augmente. Les figures 6A à 6C ont été obtenues en utilisant trois échantillons de test testa, test4, tests obtenus à partir de sang humain, dans lesquels le taux d'hématrocrite est respectivement égal 25 à 41%, 25% et 10%. Ces échantillons ont été obtenus par prélèvement sanguin sur donneur humain, le sang prélevé présentant un taux d'hématocrite de 41%. Les taux d'hématrocrite de 10% et 25% résultent d'une dilution du sang par son propre plasma, ce dernier ayant été extrait par centrifugation. Les figures 6A à 6C ont été acquises en mettant en oeuvre un dispositif similaire à celui décrit en lien avec la détermination de la glycémie, un seul transducteur 30 piézoélectrique étant utilisé. Le volume de chaque échantillon de test est de 90 pl. On a acquis des images /m à l'aide du capteur d'images 30 précédemment décrit. On a sélectionné, sur chaque image /m acquise par le capteur d'image, une région d'intérêt dans 3049062 16 laquelle la segmentation de l'image en zones sombres et zones claires est stable dans le temps. Les figures 6A à 6C représentent cette région d'intérêt respectivement pour les trois échantillons considérés. La figure 7 montre, dans chaque région d'intérêt, l'évolution temporelle de la surface cumulée des zones claires, cette dernière étant exprimée en mm2. Cette surface 5 cumulée est représentative des zones appauvries 20a dans chaque échantillon de test. De même que pour l'exemple précédent, cette surface cumulée a été obtenue par un seuillage en intensité de façon à exclure les différentes zones sombres dont le niveau d'intensité est inférieur à un seuil. On observe également qu'au bout d'une durée d'environ 65 secondes, l'aire de la surface cumulée se stabilise, ce qui témoigne d'une certaine stabilité dans la segmentation des 10 particules. On observe que plus le taux d'hématocrite est élevé, plus la surface cumulée des zones claires de l'image diminue. Ainsi, sur la base d'un étalonnage à l'aide d'échantillons de test connus, l'invention permet de déterminer un taux d'hématocrite par une segmentation de l'échantillon 20 en zones appauvries 20a et zones enrichies 20b, et par une observation de la surface 15 représentative de ces zones, ou d'un ratio entre lesdites zones. La figure 8 montre une courbe d'étalonnage, obtenue sur la base des échantillons test3, test4, tests, et permettant d'estimer un taux d'hématocrite (axe des abscisses, l'unité étant le %) en fonction de l'inverse la surface cumulée des zones appauvries 20a dans un échantillon (axe des ordonnées, l'unité étant le mm-2). De façon plus générale, l'invention permet une estimation d'une quantité de particules 21 20 présentes dans l'échantillon liquide 20. L'invention peut également être mise en oeuvre en réalisant des mesures de fluorescence. L'onde lumineuse incidente 12 peut induire une fluorescence de l'échantillon 20, par exemple une fluorescence d'un label fluorescent présent dans des particules 21. Un filtre optique peut être interposé entre l'échantillon et le capteur d'image 30, centré sur une longueur d'onde de 25 fluorescence du label fluorescent. L'image acquise par le capteur d'image 30 permet une quantification des particules fluorescentes. Ainsi, l'invention permet de caractériser un échantillon 20 comportant des particules 21 baignant dans un milieu liquide 22, en : en estimant une quantité de particules 21 dans l'échantillon ; 30 en déterminant une propriété optique, ou son évolution au cours du temps, du milieu liquide 22 dans lequel baignent les particules 21. Lorsque cette propriété optique varie 3049062 17 en fonction d'un analyte, l'invention permet de déterminer la quantité dudit analyte dans l'échantillon. Dans les essais qui précèdent, on a mis en oeuvre un capteur d'image 30, ce qui constitue une configuration avantageuse. En effet, à l'aide d'un tel capteur, les parties appauvries et enrichies 5 peuvent être aisément identifiées et segmentées par des procédés simples de traitement d'image. De plus, l'onde acoustique 45 n'est pas forcément stationnaire et l'invention est applicable, à l'aide d'un capteur d'image, lorsque la variation spatiale des zones appauvries 20a et des zones enrichies 20b est négligeable devant la durée d'acquisition d'une image. Cependant, l'utilisation d'un photodétecteur non résolu spatialement, par exemple une 10 photodiode, est possible, mais cela suppose une connaissance préalable de la localisation des zones enrichies 20b ou des zones appauvries 20a, de telle sorte le photodétecteur soit : soit couplé optiquement à une zone appauvrie ou à une zone enrichie ; soit disposé en regard d'une zone appauvrie ou d'une zone enrichie. Cela suppose la formation d'une onde acoustique stationnaire et une localisation précise du 15 photodétecteur par rapport auxdites zones appauvries 20a ou desdites zones enrichies 20b. Le recours à un capteur d'image est moins contraignant, les zones appauvries et enrichies pouvant être identifiées sur les images acquises par le capteur selon des procédés classiques de segmentation, tels le seuillage. Selon un mode de réalisation, représenté sur la figure 9, le capteur d'image 30 est placé selon 20 une géométrie de réflexion, et non en transmission comme dans les modes de réalisation précédemment décrits. Le capteur d'image 30 est apte à former une image d'une onde 14' transmise par l'échantillon, après avoir été réfléchie par un élément réfléchissant 18. Ce dernier peut être un support réfléchissant sur lequel est disposée la chambre fluidique 15, soit un dépôt réfléchissant formé sur la lame inférieure 17. L'élément réfléchissant 18 peut être une surface 25 blanche, une surface métallisée ou un miroir. Le dispositif 1' illustré sur la figure 9 est un dispositif en réflexion. Dans les exemples décrits ci avant, l'échantillon est confiné dans une chambre fluidique 15. L'invention s'applique également à un échantillon déposé sur un support fluidique, ce dernier pouvant se limiter à une simple lame transparente, l'échantillon étant déposé sur cette lame. 30 Au-delà du dosage du glucose dans un échantillon sanguin, l'invention pourra s'appliquer au dosage d'un analyte dans un liquide comportant des particules, en mettant en oeuvre une segmentation avantageuse du liquide en au moins une zone appauvrie en particules et une zone 3049062 18 enrichie en particules. L'échantillon peut notamment comprendre un liquide corporel, l'analyte pouvant être le glucose, le cholesterol, ou d'autres éléments tels des protéines ou des cellules. Par ailleurs, au-delà du dosage d'un analyte, l'invention pourra s'appliquer à d'autres types de caractérisation d'un échantillon, par exemple une caractérisation d'un milieu liquide 22 dans 5 lequel les particules 21 sont en suspension, ou une détermination d'une quantité desdites particules 21. La détermination d'une couleur du plasma sanguin, de la couleur d'un milieu de culture de microalgues ou de cellules, ainsi que l'estimation d'un taux d'hématocrite ont été données en exemple. L'invention trouvera des applications dans la caractérisation de liquides corporels, à des fins 10 d'aide à un diagnostic. Mais les applications dépassent le domaine des liquides corporels et l'invention pourra être mise en oeuvre pour caractériser des échantillons liquides prélevés dans l'environnement, ou concernant différents domaines industriels, par exemple, et de façon non exhaustive le domaine de la culture cellulaire, le domaine de l'agroalimentaire, le domaine de la culture de microorganismes tels que des microalgues. 15 REVENDICATIONS1. Procédé de caractérisation d'un échantillon (20), comportant des particules (21) baignant dans un milieu liquide (22), le procédé comprenant les étapes suivantes : a) illumination de l'échantillon (20) à l'aide d'une source de lumière (11), apte à émettre une onde lumineuse incidente (12) se propageant vers l'échantillon ; b) détection, à l'aide d'un photodétecteur (30), d'une onde lumineuse (14, 14') transmise par l'échantillon ainsi illuminé ; c) caractérisation de l'échantillon en fonction d'une intensité (i14) de l'onde lumineuse détectée par le photodétecteur ; le procédé étant caractérisé en ce qu'il comprend, préalablement à l'étape b), une étape d'application d'une onde acoustique (45) dans l'échantillon, ladite onde acoustique (45) formant des noeuds de pression (46) et des ventres de pression (47) dans l'échantillon, de manière à séparer, dans ce dernier, une partie appauvrie en particules (20a) et une partie enrichie en particules (20b), de telle sorte que lors de l'étape c) la caractérisation de l'échantillon (20) est réalisée : à partir de l'intensité de l'onde lumineuse transmise par la partie appauvrie (20a) ; ou à partir de l'intensité l'onde lumineuse transmise par la partie enrichie (20b). 2. Procédé selon la revendication 1, dans lequel les particules (21) présentes dans l'échantillon se concentrent, sous l'effet de ladite onde acoustique (45), soit au niveau des noeuds de pression (46), soit au niveau des ventres de pression (47). 3. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel la caractérisation comprend une estimation d'une quantité d'un analyte (26) dans l'échantillon (20), cette estimation étant réalisée, lors de l'étape c) : à partir de l'intensité de l'onde lumineuse transmise par ladite partie appauvrie (20a) ; ou à partir de l'intensité de l'onde lumineuse transmise par ladite partie enrichie (20b). 4. Procédé selon la revendication 3, comportant, préalablement à l'étape b), un mélange de l'échantillon (20) avec un réactif (23) apte à modifier une propriété optique de l'échantillon sous l'effet de l'analyte (26). 3049062 20 5. Procédé selon la revendication 4, dans lequel le réactif (23) est apte à former un indicateur coloré (24) dans l'échantillon (20), sous l'effet de l'analyte (26). 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel le photodétecteur (30) est un capteur d'image, de telle sorte que : 5 l'étape b) comprend l'acquisition d'au moins une image (/m) de l'onde lumineuse (14, 14') transmise par l'échantillon (20) ; l'étape c) comprend une identification, sur ladite image (Im), d'une région d'intérêt correspondant à au moins une partie (20a) de l'échantillon, appauvrie en particules, 10 ou d'une région d'intérêt correspondant à au moins une partie (20b) de l'échantillon, enrichie en particules, la caractérisation de l'échantillon (20) étant réalisée à partir de la région d'intérêt (20a, 20b) ainsi identifiée. 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel il n'y a pas 15 d'optique de grossissement entre le capteur d'image (30) et l'échantillon (20). 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'échantillon est maintenu sur un support fluidique (15), l'application de l'onde acoustique (45) étant réalisée au moyen d'un transducteur électromécanique (41, 42), notamment piézoélectrique, agissant sur ledit support fluidique de façon à propager l'onde acoustique (45) dans ledit échantillon. 20 9. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'onde acoustique (45) appliquée à l'échantillon (30) est une onde stationnaire. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'onde acoustique (45) est appliquée au moyen d'une pluralité de transducteurs électromécaniques (41,42). 25 11. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel l'échantillon (20) comporte un liquide corporel. 12. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel les particules (21) sont des globules rouges. 3049062 21 13. Dispositif (1, 1') pour caractériser un échantillon (20), comportant des particules (21) baignant dans un milieu liquide (22), le dispositif comportant : - une source de lumière (11), agencée pour émettre une onde lumineuse incidente (12) se propageant vers un support fluidique (15), apte à maintenir l'échantillon (20); 5 - un photodétecteur (30), configuré pour détecter une onde lumineuse (14, 14') transmise par un échantillon (20), maintenu sur ledit support fluidique (15), lorsqu'il est illuminé par ladite onde lumineuse incidente ; - un processeur (32), apte à caractériser l'échantillon (20) en fonction d'une intensité de l'onde lumineuse détectée par le photodétecteur (30) ; 10 le dispositif étant caractérisé en ce qu'il comporte un transducteur électromécanique (41,42), configuré pour appliquer une onde acoustique (45) se propageant dans l'échantillon (20), maintenu sur le support fluidique (15), de manière à séparer, dans l'échantillon (20), une partie appauvrie (20a) en particules et une partie enrichie (20b) en particules, de telle sorte que le processeur (32) est configuré pour caractériser l'échantillon : 15 à partir de l'intensité de l'onde lumineuse transmise par la partie appauvrie (20a) ; à partir de l'intensité de l'onde lumineuse transmise par la partie enrichie (20b). 14. Dispositif selon la revendication 13, dans lequel le transducteur électromécanique (41,42) comporte un transducteur piézoélectrique ou une pluralité de transducteurs piézoélectriques ; 15. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 13 ou 14, dans lequel le transducteur 20 électromécanique applique une pression sur ledit support fluidique (15), de manière à former une onde acoustique (45) dans l'échantillon (20) maintenu par ledit support fluidique. 16. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 13 à 15, dans lequel le photodétecteur est un capteur d'image, apte à acquérir une image (/m) de l'onde (14, 14') transmise par l'échantillon (20), le processeur (32) étant apte à identifier, sur ladite image, 25 une région d'intérêt correspondant à au moins une partie (20a) appauvrie en particules ou une région d'intérêt correspondant à au moins une partie (20b) enrichie en particules, et à caractériser l'échantillon (20) à partir de la région d'intérêt ainsi identifiée. 17. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 13 à 16, dans lequel il n'y a pas 30 d'optique de grossissement entre le capteur d'image (30) et le support fluidique (15).