Brevet FR3042122A1 — publié le 20170414

- 1 - Domaine technique La présente invention concerne une composition 5 pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend au moins une séquence d'acide nucléique codant au moins un néoantigène spécifique d'une tumeur, un poxvirus, et un anticorps antiCTLA4. La présente invention concerne également l'utilisation des compositions selon l'invention pour le traitement du 10 cancer. Technique antérieure Traditionnellement, dans le cadre des pathologies tumorales, les traitements consistent en l'utilisation de composés chimiques ou biologiques (chimiothérapie), de rayonnements (radiothérapie) et/ou de la chirurgie. Bien que d'immenses progrès aient été observés dans les dernières années avec des thérapies ciblées mettant notamment en oeuvre des anticorps monoclonaux ou d'autres molécules ciblant des récepteurs spécifiques, on observe toujours une mortalité importante et d'autres voies thérapeutiques sont toujours envisagées afin de faire diminuer la mortalité associée et/ou les effets secondaires liés à ces pathologies et à leurs traitements. Parmi les nouvelles voies thérapeutiques envisagées, on peut notamment citer la thérapie génique et l'immunothérapie. 15 L'idée d'immuniser contre des cellules cancéreuses préexistantes est basée sur l'observation que les cellules cancéreuses expriment des protéines mutées, des protéines glycosilées de façons aberrantes ou, dans le cas de tumeurs induites par infection virale, des protéines virales. Au sein 20 de la tumeur, l'expression de ces protéines n'entraine pas la production d'une réponse immunitaire efficace. En effet, la LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 2 - tumeur est notamment capable de créer un microenvironnement qui empêche l'initiation d'une réponse immunitaire ciblant ces antigènes et/ou les cellules qui les expriment. De plus, même si une réponse immunitaire est induite, elle n'arrive pas toujours à être efficace en raison de l'anergie qui règne dans la tumeur. Il a donc été postulé qu'il est plus efficace, en termes de réponse immunitaire générée d'injecter les antigènes associés aux cellules tumorales en une zone où le système immunitaire est actif. Parmi les antigènes associés aux tumeurs, on peut également citer les néoantigènes tumoraux issus de l'accumulation de mutations dans une population cellulaire ce qui conduit à la cancérisation. Ces mutations peuvent résulter par exemple de l'exposition aux rayons ultra-violets ou bien des substances cancérigènes du tabac ou d'autre nature. Certaines sont directement impliquées dans la cancérogenèse, d'autres sont simplement en situation de « passager » mais toutes, du fait du changement d'acides aminés dans la séquence d'une protéine ont le potentiel d'être considérées par le système immunitaire comme différentes du soi et donc antigéniques. Dans le cadre du traitement du cancer, la thérapie génique a été utilisée selon trois axes principaux. Le premier a consisté à injecter sur le site de la tumeur des gènes codant des molécules immunostimulatrices aptes à lever l'inhibition locale du système immunitaire. Par exemple, des gènes codant des interleukines ont été injectés directement à l'intérieur des tumeurs. La production locale d'interleukines était supposée permettre l'activité normale du système immunitaire et la destruction des cellules cancéreuses. Toutefois, les résultats obtenus avec ce type de stratégie ont été décevants. Un deuxième axe de recherche consiste à injecter dans les cellules cancéreuses des gènes codant des molécules LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 3 - cytotoxiques ou entrainant la production directe ou indirecte de molécules cytotoxiques. Cette stratégie est censée permettre la destruction des cellules tumorales et éventuellement le relargage d'antigènes dans l'organisme 5 permettant ainsi l'activation du système immunitaire. Le dernier axe de recherche a consisté à utiliser des acides nucléiques codant des antigènes associés aux tumeurs pour vacciner les patients. En effet, la production de l'antigène par les cellules du patient, plutôt que leur 10 injection in situ, permet d'envisager une meilleure présentation de l'antigène plus conforme à ce qui se passe au niveau des cellules cancéreuses. Toutefois, la réponse anti tumorale observée dans le cadre de ces différents traitements, n'est pas beaucoup 15 meilleure que les réponses cliniques observées dans le cadre de traitements classiques. Il est par conséquent souhaitable de disposer de nouveaux produits et/ou de nouvelles méthodes permettant un contrôle prolongé du volume tumoral et l'augmentation du taux 20 de survie des patients traités. Résumé de l'invention La présente invention concerne une composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend au moins 25 une séquence d'acide nucléique codant au moins un néoantigène spécifique d'une cellule cancéreuse, au moins un poxvirus, et un anticorps anti-CTLA4. La combinaison spécifique de ces trois composants permet d'obtenir une réponse immunitaire ciblée contre le ou 30 les néoantigènes codés par la séquence d'acide nucléique. Le poxvirus permet à la fois d'améliorer la transfection de la séquence d'acide nucléique et d'améliorer la qualité de la réponse immune générée contre le ou les néoantigènes. LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 4 - L'anticorps anti-CTLA-4 permet également d'améliorer la réponse immunitaire contre le ou les néoantigènes. L'utilisation d'une séquence d'acide nucléique permet d'envisager une production rapide et personnalisée de la 5 séquence codant pour le ou les néoantigènes. En effet, les techniques actuelles permettent de séquencer intégralement le patrimoine génétique des cellules cancéreuses d'un patient et d'identifier les mutations spécifiques par comparaison constitutionnel du patient. Si ces mutations sont non- 10 synonymes, appartiennent à des séquences codantes et exprimées par la tumeur, et sont de par leurs caractéristiques supposées immunogènes alors ces dernières peuvent être utilisées pour induire l'immunisation contre la tumeur. Les mutations dans le génome des tumeurs et les 15 néoantigènes qui en résultent sont une combinatoire unique restreinte à la tumeur d'un patient donné, voire aux clones qui composent cette tumeur. L'utilisation des néoantigènes comme moyen d'immunisation d'un patient contre ses propres cellules 20 tumorales est un concept nouveau. Sa mise en oeuvre est rendue compliquée par la nécessité de produire en un temps court une préparation pharmaceutique personnalisée correspondant aux néoantigènes portés par la tumeur d'un patient donné. Jusqu'à ce jour l'immunisation thérapeutique en 25 oncologie a fait appel à deux grandes catégories de produits. La première consiste à administrer, le plus souvent par injection, des peptides ou protéines supposés être des antigènes présents dans la tumeur, le tout en présence de substances adjuvantes dont l'emploi soulève parfois des 30 réticences. La deuxième consiste en l'administration d'acides nucléiques codant pour des antigènes supposés être présents dans la tumeur mais correspondant le plus souvent à des protéines exprimées préférentiellement par la tumeur mais qui ne sont pas nécessairement différentes de la version non- LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 5 - tumorale et ne satisfont pas nécessairement à la définition d'un néoantigène. De ces deux classes de produits les immunothérapies par thérapie génique, en particulier celles reposant sur l'emploi 5 de vecteurs viraux, ont montré de façon reproductible une efficacité significative dans le traitement des tumeurs. Les immunothérapies par thérapie génique, a fortiori celles à base virale, sont naturellement perçues par le système immunitaire comme un signal de danger. Elles sont plus 10 immunogènes et ne nécessitent en principe pas l'emploi d'adjuvants. La composante virale, en particulier s'il s'agit d'un poxvirus, est source d'une réponse immunitaire innée favorable au développement d'une réponse immunitaire adaptative contre les antigènes exprimés. 15 La conception et la production pharmaceutique d'un virus génétiquement modifié exprimant les séquences codant pour un ou plusieurs néoantigènes présents dans la tumeur d'un patient est une option techniquement faisable mais cependant il s'agit d'une opération longue et coûteuse très 20 difficilement généralisable. A l'inverse la production de plasmides, ou d'acides nucléiques linéaires fermés double-brins, ou d'autres vecteurs d'expression génétiques codant pour un ou plusieurs néoantigènes est une opération simple, relativement peu 25 onéreuse, réalisable en quelques semaines tout au plus. Le principe de co-injection d'un acide nucléique codant pour un ou plusieurs néoantigènes et d'un virus, en particulier d'un poxvirus, est de nature à permettre la production dans un temps court d'une préparation 30 pharmaceutique personnalisée correspondant aux néoantigènes portés par la tumeur d'un patient tout en bénéficiant de la présence d'un virus apportant le signal de danger utile au développement de la réponse immunitaire. LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 6 - De surcroît le poxvirus de par la composante phospholipidique de sa membrane est de nature à favoriser la pénétration de l'acide nucléique dans les cellules présentes au voisinage du point d'injection, et par conséquent 5 l'expression des protéines antigéniques pour lesquelles code l'acide nucléique. La séquence d'acide nucléique dans le cas d'un vecteur d'expression à ADN, favorise la reconnaissance par des senseurs spécifiques de l'ADN double brin dans le cytoplasme 10 des cellules dans lesquelles ces vecteurs ont pénétré. Cette reconnaissance est à l'origine d'une réponse biologique favorable à la réponse immunitaire. La séquence d'acide nucléique et le poxvirus ont donc des voies d'actions différentes qui se complètent et 15 permettent d'obtenir une meilleure réponse. Un avantage supplémentaire du poxvirus réside dans sa capacité à être modifié pour éventuellement exprimer des antigènes tumoraux supplémentaires qui peuvent être exprimés et présentés au site d'injection en plus des néoantigènes. On 20 peut citer à titre d'exemple les protéines E6 et E7 d'HPV dans le cas d'une tumeur induite par ce virus, ou bien encore la protéine MUC1 dans les cas des adénocarcinomes. Les anticorps anti-CTLA4 sont des inhibiteurs d'un point de contrôle négatif de la réponse immunitaire. Ils ont 25 jusque-là été administrés par voie systémique, intraveineuse, avec une efficacité significative, tout au moins dans le traitement du mélanome malin cutané et le cancer du poumon non à petites cellules, mais au prix d'effets indésirables non négligeables. 30 La co-administration d'un anticorps ou fragment d'anticorps anti-CTLA4, est de nature à renforcer la réponse immunitaire induite par une immunothérapie, en particulier la combinaison d'un vecteur d'expression génétique et d'un poxvirus. Pour cela des doses réduites à 1/20ème ou moins de LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 7 - la dose systémique usuelle sont supposées suffisantes. A ces doses et après co-injection la concentration dans le ganglion de drainage du point d'injection est supposée être plus élevée que par voie systémique alors que la concentration systémique 5 elle-même est grandement réduite, le risque d'effet indésirable également. Dans le cadre de la présente invention, le terme « séquence d'acide nucléique» fait référence à une séquence d'acide nucléique codante de type ADN ou ARN. Cette séquence 10 d'acides nucléiques n'est pas incluse dans un génome viral, ni encapsulée dans une particule virale. Selon un mode de réalisation de l'invention, ladite séquence d'acide nucléique est sélectionnée dans le groupe comprenant les plasmides et les vecteurs d'ADN linéaire ou 15 d'ARN. Selon un mode de réalisation de l'invention, ladite séquence d'acide nucléique est nue c'est-à-dire qu'elle n'est pas associée à des molécules favorisant sa pénétration dans des cellules eucaryotes comme, par exemple, des polymères 20 cationiques, des protéines virales, des lipides et/ou des liposomes. Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, ladite séquence d'acide nucléique est un acide nucléique linéaire fermé double-brin. De plus, les acides nucléique 25 linéaires fermés par leur mode de production s'accompagnent de très peu de résidus de production, en particulier bactériens, ce qui permet d'éviter de lourdes étapes de purification et permet une utilisation plus rapide et moins onéreuse. 30 Les acides nucléiques linéaires fermés sont bien connus de l'homme du métier, leur structure, leurs fonctions et les procédés permettant leur production sont notamment décris dans les documents CN103080337, EP2601312, GB201013153, JP2013535210, US2013216562, W012017210, AU2010209532, LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 8 - CA2751130, CN102301010, DK2391731, EA021069, EA201101141, EP2391731, EP2612925, ES2400890, GB200901593, HK1159693, IL213930, IN05006CN2011, JP2012516147, KR20110107846, MX2011007937, NZ594004, SG173102, US2012282283, US9109250, 5 W010086626. Dans le cadre de la présente invention, le terme « néoantigène associé à une cellule cancéreuse » fait référence à une protéine exprimée par la cellule cancéreuse sous une forme mutée par comparaison avec la séquence 10 constitutionnelle du patient. Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, l'anticorps anti-CTLA-4 et préférentiellement choisi dans le groupe comprenant l'ipilimumab et le tremelimumab. Il peut également s'agir d'un fragment d'anticorps dirigé contre 15 CTLA-4 ou de toute molécule contenant un paratope dirigé spécifiquement contre le CTLA4. Par souci de clarté, il est précisé que le terme « anticorps anti-CTLA4 » ne concerne pas les acides nucléiques codant un antidorps anti-CTLA4. Selon un mode de réalisation préféré, ladite séquence 20 d'acide nucléique comprend en outre les éléments de régulation assurant l'expression du ou des néoantigènes spécifiques d'une cellule cancéreuse dans les cellules eucaryotes. Selon un mode de réalisation préféré, les éléments de 25 régulation assurant l'expression du ou des néoantigènes associé à une cellule cancéreuse dans les cellules eucaryotes comportent un promoteur de la transcription du gène et une région d'initiation de la traduction dans les cellules hôtes. Ladite séquence d'acide nucléique peut comprendre plusieurs 30 séquences codant chacune un néoantigène différent associé aux tumeurs. Dans le cas d'une pluralité de néoantigènes, les séquences codant ces derniers peuvent être placées sous la dépendance d'éléments de régulation identiques ou différents. LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 9 - Selon un mode de réalisation préféré, le poxvirus est vivant ou tué. Selon un mode de réalisation préféré, le poxvirus ne comprend pas de séquences hétérologues. 5 Selon un mode de réalisation préféré, le poxvirus dérive d'un virus de la vaccine, d'un canaripox ou d'un fowlpox. Selon un mode de réalisation préféré, ledit poxvirus dérive d'un virus de la vaccine sélectionné parmi les souches 10 Copenhague, Wyeth et Ankara modifiée (MVA). Selon un mode de réalisation préféré, ledit poxvirus dérive d'un virus de la vaccine de la souche Copenhague. Selon un mode de réalisation préféré, ledit poxvirus dérive d'un virus de la vaccine de la souche MVA. 15 Dans le cadre de la présente invention, le terme « dérive » entend signifier que ledit virus appartient à ladite souche. Selon un autre mode de réalisation préféré, ledit poxvirus comporte une séquence d'ADN hétérologue codant au 20 moins la région essentielle d'un antigène associé à une cellule cancéreuse. Selon un mode de réalisation préféré, les séquences d'ADN codant au moins la région essentielle d'un antigène associé à une cellule cancéreuse sont sous le contrôle d'un 25 promoteur d'un gène du poxvirus. Selon un mode de réalisation préféré, les séquences codant au moins la région essentielle d'un antigène associé à une cellule cancéreuse sont placées sous le contrôle d'un promoteur d'un gène d'un virus de la vaccine et, notamment 30 d'un promoteur sélectionné parmi les promoteurs des gènes thymidine kinase (TK), 7,5K, H5R et K1 L. Selon un mode de réalisation encore plus préféré, ledit promoteur est le promoteur du gène de la protéine 7,5 K du virus de la vaccine. LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 10 - Selon un mode de réalisation préféré, les séquences d'ADN codant au moins la région essentielle d'un antigène associé à une cellule cancéreuse sont insérées à l'intérieur d'une région non essentielle du virus utilisé. 5 Selon un mode de réalisation préféré, la région non essentielle est le gène TK. Dans le cas où ledit poxvirus dérive d'un virus de la vaccine de la souche Copenhague les séquences codant au moins la région essentielle d'un antigène associé à une cellule 10 cancéreuse sont préférentiellement insérées au niveau du locus TK et/ou KIL dudit virus de la vaccine. Dans le cas où ledit poxvirus dérive d'un virus de la vaccine de la souche MVA, les séquences codant au moins la région essentielle d'un antigène associé à une cellule 15 cancéreuse sont préférentiellement insérées au niveau de l'une au moins des zones d'excision I à VI dudit virus de la vaccine et, notamment II et/ou III. La présente invention concerne également une composition selon l'invention comprenant en outre un support 20 pharmaceutiquement acceptable permettant son administration par injection à l'homme ou à l'animal. Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, ledit support pharmaceutiquement acceptable permet l'injection de ladite composition via un dispositif 25 d'injection sans aiguilles. Dans le cadre de la présente invention, le terme « dispositif d'injection sans aiguilles » fait référence à un dispositif pour les injections intradermiques, sous-cutanées ou intramusculaires, d'un principe actif liquide à usage 30 thérapeutique en médecine humaine ou vétérinaire mettant en oeuvre un jet de liquide sous pression pour pénétrer les tissus. Le liquide peut être plus ou moins visqueux, un mélange de liquide, ou un gel. LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 11 - L'administration d'acides nucléiques nécessite en général l'emploi d'une technique d'électroporation couplée à l'injection. L'injection sous pression par un système sans aiguille est une autre solution. Elle a aussi l'avantage du 5 fait de l'injection sous pression d'assurer une meilleure diffusion dans les espaces tissulaires. Son emploi autorise aussi si nécessaire la préparation extemporanée d'un mélange de produits à injecter. L'emploi d'un système d'injection sous pression sans aiguille est de nature à favoriser une 10 meilleure pénétration tissulaire qu'avec une aiguille 5 classique et donc la transfection d'un plus grand nombre de cellules. L'objectif est de favoriser ainsi la réponse immunitaire contre les néoantigènes exprimés par la séquence d'acide nucléique. 15 La présente invention concerne également un ensemble departies comprenant une séquence d'acide nucléique codant au moins un néoantigène spécifique d'une cellule cancéreuse, au moins un poxvirus, et un Anticorps ou fragment d'anticorps dirigé contre CTLA4. 20 Ledit ensemble de parties peut notamment être utilisé pour préparer extemporanément une composition selon l'invention. La présente invention concerne également l'utilisation d'une composition selon l'invention pour le traitement d'un 25 cancer ou d'une tumeur. La présente invention concerne également l'utilisation d'une composition selon l'invention pour le traitement d'un cancer du col de l'utérus, de la sphère ORL ou de toute autre tumeur induite par le virus HPV, d'un cancer du foie lié au 30 virus de l'hépatite chronique B ou C, ou d'un cancer exprimant la protéine MUC1. Description des modes de réalisation LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 12 - Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, les cellules cancéreuses d'un patient à traiter sont analysées à partir d'une biopsie ou pièce opératoire.. L'ADN et l'ARN des cellules cancéreuses, ainsi que l'ADN 5 constitutionnel issu d'une prise de sang, sont extraits et séquencés. La séquence ADN des cellules saines est comparée à la séquence ADN des cellules cancéreuses et les mutations somatiques comprises dans des régions codantes et exprimées 10 sont identifiées. Les séquences mutées codantes et exprimées sont traitées à l'aide d'algorithmes permettant de définir pour chaque patients quelles mutations sont potentiellement les plus antigéniques 10et peuvent servir de cible. Ces séquences 15 mutées, non synonymes, codantes, exprimées, spécifiques des cellules cancéreuses du patient, appelées néoantigènes, sont ensuite générées par synthèse d'ADN ou d'ADN puis mises sous la forme d'un vecteur d'expression (plasmide ou acide nucléique linéaire fermé ou ARN). Selon un mode de réalisation 20 préféré de l'invention, en utilisant la méthode décrite dans la demande de brevet EP2391731, La séquence d'acide nucléique codant un ou plusieurs néoantigènes associés à la tumeur du patient est placée, à l'intérieur de l'acide nucléique linéaire fermé, sous la dépendance des séquences nécessaires 25 à son expression en cellules eucaryotes. Ainsi, ladite séquence est préférentiellement placée en aval d'un promoteur d'expression eucaryote et en amont d'une séquence de terminaison de la transcription. II peut s'agir d'un promoteur eucaryote fort et en particulier d'un promoteur 30 précoce du CMV. Le promoteur est soit d'origine virale, soit d'origine cellulaire. Comme promoteur viral autre que CMV on peut citer le promoteur précoce ou tardif du virus SV40 ou le promoteur LTR du virus du Sarcome de Rous. Comme promoteur cellulaire, on peut citer le promoteur d'un gène du LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 13 - cytosquelette, tel que par exemple le promoteur de la desmine, ou encore le promoteur de l'actine. Préférentiellement, un intron pourra être intégré à l'intérieur de ladite séquence codant un ou plusieurs néoantigènes associés à la tumeur du 5 patient. En effet, certains introns sont connus pour augmenter la transcription des séquences d'acides nucléiques. Le Poxvirus utilisé dans la composition est préférentiellement un virus MVA. Ce dernier dérive de la souche Ankara du virus de la vaccine par passages successifs 10 sur des cellules d'embryons de poulet. Ces différents passages ont entrainé l'atténuation de ce virus qui a ainsi pu être utilisé dans les dernières campagnes de vaccination contre la variole. La description des différentes souches de MVA, les 15 méthodes permettant d'insérer éventuellement des gènes exogènes dans son génome ainsi que les méthodes de production, et de purification de ce virus sont notamment accessibles dans les documents W00168820, W00242480, W003008533, W003048184, W003053463, W003054175, W003088994, W003097675, 20 W003097844, W003097845, W003097846, W004048582, W004048606, 15W005054484, W006089690, W008028665, W008045346, W008131926, W008131927, W008138533, W009052328, W009152969, W010057650, W010060632, W010102822, W011042180, W011092029, W012010280, W012048817, W012059243, W013083254, W013189611, W014019718, 25 W014037124, W014062778, W014063832, W09813500, W09915692. Le poxvirus pourra également comprendre des séquences codant d'autres antigènes spécifiques de la tumeur dont est atteint le patient. Par exemple, les séquences codant les antigènes E6 et E7 d'HPV ou les séquences codant les antigènes 30 NS3, NS4, NS5B, de HCV, ou la protéine Mucl anormalement glycosilée dans les tumeurs. Enfin, la composition selon l'invention comprendra préférentiellement un anticorps ou fragment d'anticorps antiCTLA4, encore plus préférentiellement de l'ipilimumab. Dans LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 14 - le cadre de la présente invention, le terme anticorps désigne également les anticorps bispécifiques comprenant au moins un paratope spécifique du CTLA-4. De façon préférée, la composition selon l'invention 5 comprend en outre un support pharmaceutiquement acceptable. Dans le cadre de la présente invention, le terme "support pharmaceutiquement acceptable" entend désigner tous les supports, solvants, diluants, excipients, adjuvants, milieux de dispersion, et analogues, compatibles avec une 10 administration pharmaceutique. La composition à utiliser dans l'invention est convenablement tamponnée afin d'être appropriée pour une utilisation humaine à un pH physiologique ou légèrement basique. 15 La composition selon l'invention peut être administrée au patient par une variété de modes d'administration comme par exemple les voies sous-cutanée, intradermique, intramusculaire, intraveineuse, intrapéritonéale, intratumorale, intravasculaire, intra-artérielle. 20 Les injections peuvent être faites avec des seringues et des aiguilles conventionnelles, mais préférentiellement via un dispositif d'injection sans aiguilles de types bioject(r). L'administration de la composition selon l'invention 25 peut avoir lieu en dose unique ou répétée après un certain intervalle de temps allant d'un jour à un an. Préférentiellement l'administration aura lieu de façon hebdomadaire sept fois de suite puis ensuite une fois toutes les trois semaines. 30 Le dosage approprié peut être adapté en fonction de divers paramètres, en particulier le mode d'administration, la composition utilisée, l'âge, la santé, et le poids de l'organisme hôte, la nature et l'étendue des symptômes, le type de traitement associé, la fréquence du traitement. LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG 3042122 - 15 - L'homme du métier est capable de déterminer les quantités adaptées de chaque élément à l'intérieur de la composition selon l'invention. A titre d'exemple, le poxvirus peut être utilisé à une quantité comprise entre 104 à 109 pfu, 5 la séquence d'acide nucléique nue en une quantité comprise entre 10 pg et 20 mg, et l'anticorps anti-CTLA4 en une quantité comprise entre 10 ng et 20 mg par injection. De façon préférentielle, la composition selon l'invention peut être utilisée en conjonction avec la 10 radiothérapie, la chimiothérapie la chirurgie et/ou d'autres produits d'immunothérapie tels les anticorps anti PD1 et 5 anti-PDL1, ou la combinaison de plusieurs de ces traitements à la fois. LIMAC5-FR-2P1 TEXTE DEPOSE SO-AG REVENDICATIONS1- Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend au moins une séquence d'acide nucléique codant au moins un néoantigène spécifique d'une cellule cancéreuse, au moins une particule virale de type poxvirus, et un anticorps anti-CTLA4. 2- Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite séquence d'acide nucléique comprend en outre les éléments de régulation assurant l'expression dudit ou desdits antigène(s) spécifique(s) d'une cellule cancéreuse dans les cellules eucaryotes. 3- Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que ladite séquence d'acide nucléique est choisie dans le groupe comprenant les plasmides, les vecteurs d'ADN linéaire fermé, ou encore des molécules d'ARN. 4- Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que ladite séquence d'acide nucléique est un acide nucléique linéaire fermé. 5- Composition selon l'une des revendications 2 à 4, caractérisée en ce que les éléments de régulation assurant l'expression du ou des néoantigènes spécifiques d'une cellule cancéreuse dans les cellules eucaryotes comportent un promoteur de la transcription du gène et une région d'initiation de la traduction dans les cellules hôtes. 6- Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que ledit poxvirus est non- LIMACS-FR-2P1_TEXTE DEPOSE_SO-AG 3042122 - 17 - recombinant ou bien comporte une séquence d'ADN hétérologue codant au moins la région essentielle d'un antigène associé à une cellule cancéreuse. 5 7- Composition selon l'une des revendications précédente caractérisée en ce que le poxvirus est vivant ou tué. 8- Composition selon l'une des revendications 6 ou 7 d'ADN codant au moins associé à une cellule promoteur d'un gène du 10 caractérisée en ce que les séquences la région essentielle d'un antigène cancéreuse sont sous le contrôle d'un poxvirus utilisé. 15 9- Composition selon l'une des revendications précédentes caractérisée en ce que la particule de poxvirus dérive d'un virus de la vaccine, d'un canaripox ou d'un fowlpox. 20 10- Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comporte un support pharmaceutiquement acceptable permettant son administration par injection à l'homme ou à l'animal. 25 11- Composition selon la revendication précédente caractérisée en ce que ledit support pharmaceutiquement acceptable permet l'injection de ladite composition via un dispositif d'injection sans aiguilles. 30 12- Composition selon l'une des revendications précédentes, destinée à être utilisée pour le traitement d'un cancer ou d'une tumeur. LIMACS-FR-2P1_TEXTE DEPOSE_SO-AG 3042122 - 18 - 13- Composition selon la revendication 12, destinée à être utilisée pour le traitement d'un cancer du col de l'utérus, de la sphère ORL ou de toute autre tumeur induite par le virus HPV, d'un cancer du foie lié au virus de 5 l'hépatite chronique C, ou d'un cancer exprimant la protéine MUCl. LIMACS-FR-2P1_TEXTE DEPOSE_SO-AG