Brevet FR3039153A1 — publié le 20170127

NOUVEAUX COMPOSÉS POLYAZOTÉS ET LEURS UTILISATIONS COMME CHROMOPHORES FLUORESCENTS La présente invention a pour objet de nouveaux composés polyazotés, notamment des composés comprenant un motif 1,3a,6a-triazapentalène, et leurs utilisations comme chromophores fluorescents. Elle a également pour objet l'utilisation de ces composés notamment dans le domaine de l'imagerie biologique ou de la microscopie par fluorescence. Au cours des vingt dernières années, l'utilisation de la fluorescence dans la chimie du vivant a connu une expansion considérable. Elle rencontre actuellement des applications dans les biotechnologies, en cytométrie en flux, dans le diagnostic médical, dans le séquençage d'ADN, en imagerie cellulaire, etc. Dans de nombreuses applications, la haute sensibilité de cette technique a notamment permis de remplacer certains marqueurs basés sur des éléments radioactifs, dont l'application est hautement délicate. L'expansion de ces techniques a été consacrée en 2008, lors de la reconnaissance des applications de la GFP (Green Fluorescent Protein). Les technologies actuelles font de la fluorescence un domaine d'importance capitale dans la science du vivant. Parmi les diverses classes de marqueurs fluorescents, les fluorophores organiques se démarquent grâce à leur propriétés photophysiques uniques. Ces derniers sont représentés principalement par les Cyanines, les Fluoresceines, les Rhodamines, les Alexa fluor et les Bodipy. Leurs emplois au sein de différents domaines sont divers et variés. Bien que largement utilisés, ces composés souffrent encore de défauts qui diminuent leur étendue d'action dans le domaine de la biologie. En particulier, ces composés présentent l'inconvénient d'avoir un faible déplacement de Stokes dû à la proximité énergétique des ondes d'émission et d'absorption (de l'ordre de 20 nm pour les Cyanines, 10-20 nm pour les Bodipy, 30 nm pour les Fluoresceines et 20 nm pour les Rhodamines). Il s'agit également de composés avec des structures chimiques complexes, obtenus par des voies de synthèses fastidieuses. Certains de ces composés présentent également une faible solubilité dans les milieux aqueux. 3039153 2 Il existe donc à ce jour un besoin de fournir des composés fluorescents obtenus par des voies de synthèse simples, de préférence solubles en milieu aqueux, et présentant un déplacement de Stokes élevé. 5 Un but de la présente invention consiste à fournir de nouveaux composés fluorescents, notamment solubles dans l'eau. L'invention a également pour but de fournir de nouveaux composés polycycliques fluorescents de faible poids moléculaire par rapport aux composés connus à ce jour. io L'invention a également pour but de fournir de nouveaux composés fluorescents présentant des déplacements de Stokes importants et des rendements quantiques élevés, en particulier supérieurs à 10%, notamment jusqu'à 55% dans le dichlorométhane, et des coefficients d'absorption élevés, de préférence jusqu'à 18000. 15 L'invention a également pour but de fournir de nouveaux composés fluorescents stables en milieu aqueux à pH acide, neutre et basique. Un but de la présente invention consiste à fournir de nouveaux composés fluorescents destinés à la préparation de bioconjugués pour la détection de molécules biologiques. 20 Ainsi, la présente invention concerne l'utilisation comme chromophore fluorescent d'un composé de formule (I) : II NZx (I) A3 Il A4 \ 2 dans laquelle : - Al est -N- ou -0(Y1)- ; - A2 est -N- ou -0(Y2)- ; - A3 est -N- ou -0(Y3)- ; - A4 est -N- ou -0(Y4)- ; l'un au moins des Al, A2, A3 et A4 représentant -N- ; 25 30 3039153 3 - Y1, Y2, Y3 et Y4 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe constitué de : H, des groupes électrodonneurs et des groupes électroattracteurs, 5 ou Y1 et Y2 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, et/ou Y2 et Y3 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 io atomes, et/ou Y3 et Y4 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, 15 - X1 est -N- ou -0(Y5)- ; - X2 est -N- ou -0(Y6)- ; - X3 est -N- ou -0(Y7)- ; - Y5, Y6 et Y7 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe 20 constitué de H, des groupes électrodonneurs et des groupes électroattracteurs, OU Y5 et Y6 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 atomes, 25 et/ou Y6 et Y7 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 atomes, ledit composé de formule (I) pouvant être sous forme de sel ou de stéréoisomère 30 pur ou sous forme de mélange d'énantiomères et/ou de diastéréoisomères, y compris de mélanges racémiques, ou sous forme de tautomères, 3039153 4 à l'exception du composé de formule : La présente invention concerne également en tant que tels les composés de 5 formule (I) suivante : /Ai_...-N ic^ - \ (I) HN._,-)(A37 A3 --......N/ I 1 A4 \ 2 X---(-----"X dans laquelle : 10 - Al est -N- ou -0(Y1)- ; - A2 est -N- ou -0(Y2)- ; - A3 est -N- ou -0(Y3)- ; - A4 est -N- ou -0(Y4)- ; 15 l'un au moins des Al, A2, A3 et A4 représentant -N- ; - Y15 Y25 Y3 et Y4 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe constitué de : H, des groupes électrodonneurs et des groupes électroattracteurs, 20 ou Y1 et Y2 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, et/ou Y2 et Y3 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, 25 un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, et/ou Y3 et Y4 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, 30 - X1 est -N- ou -0(Y6)- ; - X2 est -N- ou -0(Y6)- ; 3039153 5 - X3 est -N- ou -C(Y7)- ; - Y5, Y6 et Y7 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe constitué de H, des groupes électrodonneurs et des groupes électroattracteurs, 5 ou Y5 et Y6 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 atomes, et/ou Y6 et Y7 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, io un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 atomes, ledit composé de formule (I) pouvant être sous forme de sel ou de stéréoisomère pur ou sous forme de mélange d'énantiomères et/ou de diastéréoisomères, y 15 compris de mélanges racémiques, ou sous forme de tautomères, à l'exception des composés suivants : 20 N N- , ....,N,.....N -, NN 1 , \ N...... N:-....," -,..,_ .:.-...------..N/ 1 , + h NO2 1 N -,..,. ..7----'Ni -----r- N------Kii )------'5-NNO2 N 02N 25 ,CF N I / .1\102 O2NNN 02 , \ NO N+ 2 , NO2 N O2NNN NO2 02N 02 30 3039153 6 Selon l'invention, le composé de formule (I) peut exister sous différentes formes tautomères. Aussi, la présente invention a également pour objet les formes tautomères des composés de formule (I). 5 En particulier, les composés de formule (I) peuvent être aussi représentés par la formule suivante : 10 Selon l'invention, le terme "chromophore fluorescent" désigne une molécule pouvant réémettre de la lumière après excitation avec un rendement quantique supérieur à 0,001 (0,1%). Selon l'invention, le terme "(hétéro)cycloalkyle" englobe à la fois les termes 15 "cycloalkyle" et "hétérocycloalkyle", ces termes étant tels que définis ci-après. Selon l'invention, le terme "(hétéro)aryle" englobe à la fois les termes "aryle" et "hétéroaryle", ces termes étant tels que définis ci-après. Selon l'invention, lorsque des groupes Y, et Y,±1 (i étant un entier allant de 1 à 6) forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe 20 (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 atomes, ces groupes cycliques peuvent être soit un monocycle soit des bicycles ou mêmes des (poly)cycles. Ils peuvent donc également former des cycles fusionnés eux-mêmes. Selon l'invention, le terme "groupe électrodonneur" désigne un atome ou groupe d'atome qui partage une partie de sa densité électronique avec un système 25 conjugué voisin (ici le motif de la formule (I)) par résonnance (effet mésomère) ou effet inductif. Parmi les groupes électrodonneurs préférés, on peut citer les groupes hydroxy, alcoxy, thiol, alkylthio, alkyle, alcène, alcyne, amino, alkylamino et aryle, lui-même porteur d'un ou plusieurs groupes électrodonneurs. 30 Selon l'invention, le terme "groupe électroattracteur" désigne un atome ou groupe d'atome qui attire, généralement par résonnance ou effet inductif, une partie de la densité électronique d'un voisin (ici le motif de la formule (I)) sur lequel il est fixé. Parmi les groupes électroattracteurs préférés, on peut citer les groupes halogénoalkyle, nitro, acyle, carboxyle, ester, formyle, sulfonyle, trifluorométhyle, 3039153 7 cyano, halogène et aryle, lui-même porteur d'un ou plusieurs groupes électroattracteurs. Selon un mode de réalisation, dans la formule (I) selon l'invention, Y1, Y2, Y3 5 et Y4 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe constitué de : H, halogène, (C1-C6)alkyle, (C6-C10)aryle, (C2-C6)alcényle, (C2-C6)alcynyle, ON, hydroxy, (01-06)alcoxy, thiol, (01-06)alkylthio, (0H2),S02-0R, où n = 1-6, CH2S02-NRaRb, NO2, SO3Ra, NRaRb, C(0)0Ra, C(0)Ra, et C(0)NRaRb, Ra et Rb représentant H ou un groupe (01-06)alkyle. lo Lorsque Y2, Y3 et Y4 sont choisis parmi les groupes (01-06)alkyle, (06- 010)aryle, (02-06)alcényle ou (02-06)alcynyle, ceux-ci peuvent comprendre en outre au moins un substituant. Parmi ces substituants, on peut citer les groupes suivants : amino, hydroxy, thiol, oxo, halogène, alkyle, alcoxy, alkylthio, alkylamino, aryloxy, arylalcoxy, cyano, trifluorométhyle, carboxy ou carboxyalkyle. 15 Selon un mode de réalisation, dans la formule (I) selon l'invention, Y6, Y6 et Y7 représentent, indépendamment les uns des autres, un atome d'hydrogène ou un atome d'halogène, ou sont choisis dans le groupe constitué de : . un groupe (01-06)alkyle, (03-06)cycloalkyle ou (06-010)aryle, 20 ledit groupe (06-010)aryle étant éventuellement substitué par au moins un substituant choisi parmi : halogène, ON, (01-06)alkyle, OH, (01-06)alcoxY, C(0)0R, et NRaRb, Ra et Rb représentant H ou un groupe (01-06)alkyle, . un groupe hétéroaryle comprenant de 5 à 10 chaînons et contenant de 1 à 4 hétéroatomes choisis parmi 0, S ou N, ledit groupe hétéroaryle étant 25 éventuellement substitué par au moins un substituant choisi parmi : halogène, ON, (01-06)alkyle, OH, (01-06)alcoxy, C(0)0R, et NRaRb, Ra et Rb représentant H ou un groupe (01-06)alkyle, . NO2, . 503H, 30 . un groupe NR,Ra, R, et Rd représentant H ou un groupe (01-06)alkyle, ou pouvant former un groupe hétéro(02-05)cycloalkyle avec l'atome d'azote qui les porte ; . un groupe OR,, Re représentant H, un groupe (01-06)alkyle ou un groupe (06-010)aryle ; et 35 3039153 8 . un groupe de formule (A) suivante : (A) 1 iCl B \ 0---\\ 5 Dans le cadre de la présente invention, on entend par groupe (Ct-C,) un groupe comprenant une chaîne carbonée pouvant avoir de t à z atomes de carbone, par exemple Cl-06 une chaîne carbonée qui peut avoir de 1 à 6 atomes de carbone. Dans le cadre de la présente invention, le terme "atome d'halogène" désigne les atomes fluor, chlore, brome ou iode. lo Selon l'invention, le terme "alkyle" désigne des groupes aliphatiques hydrocarbonés, saturés, linéaires ou ramifiés comprenant, sauf mention contraire, de 1 à 6 atomes de carbone. A titre d'exemples, on peut citer les groupes méthyle, éthyle, n-propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, tertbutyle ou pentyle. Selon l'invention, le terme "cycloalkyle" désigne des groupes carbonés 15 cycliques comprenant, sauf mention contraire, de 3 à 6 atomes de carbone. A titre d'exemples, on peut citer les groupes cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle ou cyclohexyle. Selon l'invention, le terme "halogénoalkyle" désigne un groupe alkyle tel que défini ci-dessus, dans lequel un ou plusieurs des atomes d'hydrogène est(sont) 20 remplacé(s) par un atome d'halogène. A titre d'exemple, on peut citer les fluoroalkyles, en particulier CF3 ou CHF2. Selon l'invention, le terme "alcoxy" désigne un radical -0-alkyle où le groupe alkyle est tel que précédemment défini. A titre d'exemples, on peut citer les groupes -0-(01-04)alkyle, et en particulier le groupe -0-méthyle, le groupe -0-éthyle, comme 25 groupe -0-C3alkyle, le groupe -0-propyle, -0-isopropyle, et comme groupe -0- C4alkyle, le groupe -0-butyle, -0-isobutyle, -0-tertbutyle. Selon l'invention, les groupes aryles sont des groupes aromatiques cycliques comprenant entre 6 et 10 atomes de carbone. A titre d'exemples de groupes aryles, on peut citer les groupes phényle ou naphtyle. 30 Selon l'invention, le terme "hétéroaryle" désigne un groupe monocyclique ou bicyclique aromatique de 5 à 10 chaînons contenant de 1 à 4 hétéroatomes choisis parmi 0, S ou N. Selon l'invention, le terme hétéroaryle bicyclique inclue les bicycles aromatiques fusionnés. A titre d'exemples, on peut citer les groupes imidazolyle, thiazolyle, oxazolyle, 35 furanyle, thiophényle, pyrazolyle, oxadiazolyle, tétrazolyle, pyridinyle, pyrazinyle, 3039153 9 pyrimidinyle, pyridazinyle, indolyle, benzofuranyle, benzothiophényle, benzoxazolyle, benzimidazolyle, indazolyle, benzothiazolyle, isobenzothiazolyle, benzotriazolyle, quinoléinyle, isoquinoléinyle. A titre d'hétéroaryle comprenant 5 à 6 atomes, dont 1 à 4 atomes d'azote, on 5 peut notamment citer les groupes représentatifs suivants : pyrrolyle, pyrazolyle, 1,2,3-triazolyle, 1,2,4-triazolyle, tétrazolyle et 1,2,3-triazinyle. On peut également citer, à titre d'hétéroaryle, le thiophényle, l'oxazolyle, le furazanyle, le 1 ,2,4-thiadiazolyle, le naphthyridinyle, le quinoxalinyle, le phtalazinyle, l'imidazo[1,2-a]pyridine, l'imidazo[2,1-b]thiazolyle, le cinnolinyle, le benzofurazanyle, 10 l'azaindolyle, le benzimidazolyle, le benzothiophényle, le thiénopyridyle, le thiénopyrimidinyle, le pyrrolopyridyle, l'imidazopyridyle, le benzoazaindole, le 1,2,4- triazinyle, l'indolizinyle, l'isoxazolyle, l'isoquinolinyle, l'isothiazolyle, le purinyle, le quinazolinyle, le quinolinyle, l'isoquinolyle, le 1 ,3,4-thiadiazolyle, le thiazolyle, l'isothiazolyle, le carbazolyle, ainsi que les groupes correspondants issus de leur 15 fusion ou de la fusion avec le noyau phényle. Selon l'invention le terme "hétérocycloalkyle" désigne un groupe monocyclique ou bicyclique saturé ou partiellement insaturé de 4 à 10 chaînons, comprenant de un à trois hétéroatomes choisis parmi 0, S ou N, le groupe hétérocycloalkyle pouvant être rattaché au reste de la molécule par un atome de carbone ou par un 20 hétéroatome. Selon l'invention, le terme hétérocycloalkyle bicyclique inclue les bicycles fusionnés. A titre d'hétérocycloalkyle saturé comprenant de 5 à 6 atomes, on peut citer l'oxétanyle, le tétrahydrofuranyle, le dioxolanyle, le pyrrolidinyle, l'azépinyle, l'oxazépinyle, le pyrazolidinyle, l'imidazolidinyle, le tétrahydrothiophényle, le 25 dithiolanyle, le thiazolidinyle, le tétrahydropyranyle, le tétrahydropyridinyle, le dioxanyle, le morpholinyle, le pipéridinyle, le pipérazinyle, le tétrahydrothiopyranyle, le dithianyle, le thiomorpholinyle, ou l'isoxazolidinyle. Selon l'invention, le terme "alkylthio" désigne un groupe -S-alkyle, le groupe alkyle étant tel que défini ci-dessus. 30 Selon l'invention, le terme "alkylamino" désigne un groupe -NH-alkyle ou N(alkyle)2, le groupe alkyle étant tel que défini ci-dessus. Selon l'invention, le terme "aryloxy" désigne un groupe -0-aryle, le groupe aryle étant tel que défini ci-dessus. Selon l'invention, le terme "arylalcoxy" désigne un groupe aryl-alcoxy-, les 35 groupes aryles et alcoxy étant tels que définis ci-dessus. 3039153 10 Selon l'invention, le terme "carboxyalkyle" désigne un groupe H000-alkyl-, le groupe alkyle étant tel que défini ci-dessus. Comme exemple de groupes carboxyalkyles, on peut citer notamment le carboxyméthyle ou le carboxyéthyle. Selon l'invention, le terme "carboxyle" désigne un groupe COOH et le terme 5 "oxo" désigne un groupe C(0). Les radicaux "alkyle", "cycloalkyle", "aryle", "hétéroaryle" et "hétérocycloalkyle" susmentionnés peuvent être substitués par un ou plusieurs substituants. Parmi ces substituants, on peut citer les groupes suivants : amino, hydroxy, thiol, oxo, halogène, alkyle, alcoxy, alkylthio, alkylamino, aryloxy, 10 arylalcoxy, cyano, trifluorométhyle, carboxy ou carboxyalkyle. Lorsqu'un radical alkyle est substitué par un groupe aryle, on parle de radical "arylalkyle" ou "aralkyle". Les radicaux "arylalkyles" ou "aralkyles" sont des radicaux aryl-alkyl-, les groupes aryles et alkyles étant tels que définis ci-dessus. Parmi les radicaux arylalkyles, on peut notamment citer le radical benzyle ou phénéthyle. 15 Une famille particulière de composés selon l'invention, et utilisés comme chromophores fluorescents, est constituée des composés de formule (I) dans laquelle Al est -N-. Une telle famille de composés répond à la formule (II) suivante : 20 A( Ny (Il) AIL N 's, - 2 A2, A3, A4, X1, X2 et X3 étant tels que définis ci-dessus dans la formule (I). 25 Une autre famille particulière de composés selon l'invention, et utilisés comme chromophores fluorescents, est constituée des composés de formule (I) dans laquelle Al et A4 sont -N-, A2 est -C(Y2)- et A3 est -C(Y3)-. Cette famille de composés, dérivés de pyrazine, répond à la formule (III) 30 suivante : Y Nx ---X 2 Y2, Y3, X1, X2 et X3 étant tels que définis ci-dessus dans la formule (I). 35 3039153 11 De préférence, dans la formule (III), Y2 et Y3 sont H ou un groupe électroattracteur. Préférentiellement, dans la formule (III), Y2 et Y3 sont H. Une autre famille particulière de composés selon l'invention, et utilisés comme 5 chromophores fluorescents, est constituée des composés de formule (I) dans laquelle Y2 et Y3 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe phényle, éventuellement substitué. Parmi les éventuels substituants du groupe phényle, on peut par exemple citer les groupes amino, hydroxy, thiol, oxo halogène, alkyle, alcoxy, alkylthio, 10 alkylamino, aryloxy, arylalcoxy, cyano, trifluorométhyle, carboxy ou carboxyalkyle. Une telle famille de composés répond à la formule (IV) suivante : 15 A1 N\ + N---- (IV) 1\n)1(1 A2 \ X2 Xr--- Al, A2, X1, X2 et X3 étant tels que définis ci-dessus dans la formule (I), R représentant H ou au moins un substituant choisi parmi les substituants mentionnés ci-dessus. De préférence, dans la formule (IV), Al et A2 sont -N-. 20 De préférence, dans la formule (IV), R est H. Une autre famille particulière de composés selon l'invention, et utilisés comme chromophores fluorescents, est constituée des composés de formule (I) dans laquelle X1 est -0(Y6)-, X2 est -0(Y6)- et X3 est -0(Y7)-. 25 Une telle famille de composés répond à la formule (V) suivante : AA1N I I (V) A3 -^,1\1/ ------ A4 30 Y7 Al, A2, A3, A4, Y5, Y6 et Y7 étant tels que définis ci-dessus dans la formule (I). 3039153 12 Selon un mode de réalisation, dans la formule (V), Al et A4 sont -N- et A2 et A3 sont -CH-. Une telle sous-famille de composés répond à la formule (V-1) suivante : Ii N -......._, Y5 (V-1) N----- N --- 5 Y7 Y55 Y6 et Y7 étant tels que définis ci-dessus dans la formule (I). De préférence, dans la formule (V) ou (V-1), un seul des Y5, Y6 et Y7 est io différent de H. Une sous-famille de composés de formule (V) est constituée par des composés de formule (V-2) ci-dessous : N\ 15 15 1 i\II-.....7Y5 (V-2) e------.1\1/ ---- Y6 Y5 et Y6 étant tels que définis ci-dessus dans la formule (I). 20 Une sous-famille de composés de formule (V) est constituée par des composés de formule (V-3) ci-dessous : I \ , N -.....'. (V-3) "-----Nli 25 Y7 Y6 et Y7 étant tels que définis ci-dessus dans la formule (I). Une autre famille particulière de composés selon l'invention, et utilisés comme chromophores fluorescents, est constituée des composés de formule (I) dans 30 laquelle X1 est -CH-, X2 est -0(Y6)- et X3 est -CH-, Y6 étant différent de H. 3039153 13 Une telle famille de composés répond à la formule (VI) suivante : Al A N ± N--....,. AL ......_..N, ------ A4 \....:-_---...- 5 Y6 (VI) Al, A2, A3, A4 et Y6 étant tels que définis ci-dessus dans la formule (I). Les composés de formule (VI) correspondent aux composés de formule (V) dans laquelle Y6=Y7=H. Selon un mode de réalisation, dans la formule (VI) susmentionnée, Al et A4 sont -N- et A2 et A3 sont -CH-. Cette famille de composés répond à la formule (VI-1) (VI-1) De préférence, dans les formules (VI) ou (VI-1), Y6 représente un atome 20 d'hydrogène ou un atome d'halogène, notamment Br ou I, ou est choisi dans le groupe constitué de : . un groupe (C6-C10)aryle, de préférence phényle, éventuellement substitué par au moins un substituant, de préférence en para, choisi parmi : CN, (ClC6)alcoxy, C(0)0R, et NRaRb, Ra et Rb représentant H ou un groupe (Cl- 25 C6)alkyle, . un groupe hétéroaryle comprenant de 5 à 10 chaînons et contenant de 1 à 4 hétéroatomes choisis parmi 0, S ou N, de préférence thiophényle ou pyrimidinyle, . NO2, et 30 . un groupe de formule (A) telle que définie ci-dessus. Une autre famille particulière de composés selon l'invention, et utilisés comme chromophores fluorescents, est constituée des composés de formule (I) dans laquelle X1 est -0(Y5)-, X2 est -CH- et X3 est -CH-, Y5 étant différent de H. 35 Une telle famille de composés répond à la formule (VII) suivante : 10 15 suivante : .....-\. ...>":-N, Y6 Y6 étant tel que défini ci-dessus dans la formule (I). N\ + N-..- d 3039153 14 AA,........-N \ N=-_,Y5 (VII) AI3I "'-^,Ni ----- A4 \->---...---- 5 Al, A2, A3, A4 et Y5 étant tels que définis ci-dessus dans la formule (I). Les composés de formule (VII) correspondent aux composés de formule (V) dans laquelle Y6=Y7=H. Selon un mode de réalisation, dans la formule (VII) susmentionnée, Al et A4 10 sont -N- et A2 et A3 sont -CH-. Cette famille de composés répond à la formule (VII-1) suivante : N\ (VII-1) 1NZ N1/ Y5 N----- ----. 15 Y5 étant tel que défini ci-dessus dans la formule (I). De préférence, dans les formules (VII) ou (VII-1), Y5 représente NO2, un halogène, notamment I, un groupe aryle, notamment phényle, ou un groupe ORe, Re représentant H ou un groupe (C1-C6)alkyle. 20 Une autre famille particulière de composés selon l'invention, et utilisés comme chromophores fluorescents, est constituée des composés de formule (I) dans laquelle l'un au moins des X1 et X2 est -N- et X3 est -0(Y7)-. Dans cette famille de composés, on peut mentionner les sous-familles 25 suivantes : - composés de formule (VIII) suivante : AA,N \ + (VIII) A3 ------....i\j/ A4 30 Y7 Al, A2, A3, A4, Y6 et Y7 étant tels que définis ci-dessus dans la formule (I) ; et 3039153 15 - composés de formule (IX) suivante : Ar .1\1\ All / A4 (IX) 5 Y7 Al, A2, A3, A4, Y5 et Y7 étant tels que définis ci-dessus dans la formule (I) ; Selon un mode de réalisation, dans la formule (VIII), Y6 et Y7 sont H. io Selon un mode de réalisation, dans la formule (IX), Y5 et Y7 sont H. Selon un mode de réalisation, dans la formule (IX), Y5 est NO2 et Y7 est H. Selon un mode de réalisation, dans les formules (VIII) et (IX), Al et A4 sont -Net A2 et A3 sont -CH-. 15 Une autre famille particulière de composés selon l'invention, et utilisés comme chromophores fluorescents, est constituée des composés de formule (I) dans laquelle Y6 et Y7 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)aryle, éventuellement substitué, de préférence un groupe phényle ou un groupe pyrazine. 20 De préférence, pour cette famille de composés, X1 est -CH-. Une autre famille particulière de composés selon l'invention, et utilisés comme chromophores fluorescents, est constituée des composés de formule (VIII) dans laquelle Y6 et Y7 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un 25 groupe aryle, éventuellement substitué, de préférence un groupe phényle. Une autre famille particulière de composés selon l'invention, et utilisés comme chromophores fluorescents, est constituée des composés de formule (V-2) dans laquelle Y5 et Y6 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un 30 groupe (hétéro)aryle, éventuellement substitué, de préférence un groupe phényle ou pyrazinyle. Une autre famille particulière de composés selon l'invention, et utilisés comme chromophores fluorescents, est constituée des composés de formule (V-3) dans laquelle Y6 et Y7 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un 3039153 16 groupe (hétéro)aryle, éventuellement substitué, de préférence un groupe phényle ou pyrazinyle. La présente invention concerne également en tant que tels les composés de formule (II), (III), (IV), (V), (V-1), (V-2), (V-3), (VI), (VI-1), (VII), (VII-1), (VIII) et (IX) 5 telles que définies ci-dessus. La présente invention concerne également une composition aqueuse comprenant au moins un composé de formule (I) telle que définie ci-dessus. io La présente invention concerne également un composé de formule (r) suivante : /Ai N ic^ --- \ p11 1\1_,--v ,s3 -----.......N/ Tl A4 (r) X dans laquelle : - Al est -N- ou -0(Y1)- ; - A2 est -N- ou -0(Y2)- ; - A3 est -N- ou -0(Y3)- ; - A4 est -N- ou -0(Y4)- ; l'un au moins des Al, A2, A3 et A4 représentant -N- ; - Y1, Y25 Y3 et Y4 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe constitué de : H, des groupes électrodonneurs et des groupes 25 électroattracteurs, ou peuvent représenter un groupe de formule -L-Z, L représentant un bras espaceur comprenant de 1 à 10 atomes de carbone et Z représentant un groupe réactif susceptible de se lier à une molécule biologique, ou Y1 et Y2 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un 30 groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, et/ou Y2 et Y3 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, 15 20 3039153 17 et/ou Y3 et Y4 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, 5 - X1 est -N- ou -0(Y5)- ; - X2 est -N- ou -0(Y6)- ; - X3 est -N- ou -0(Y7)- ; - Y5, Y6 et Y7 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe io constitué de H, des groupes électrodonneurs et des groupes électroattracteurs, ou représentent un groupe de formule -L-Z, L et Z étant tels que définis ci-dessus, OU Y5 et Y6 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 15 atomes, et/ou Y6 et Y7 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 atomes, 20 ledit composé de formule (I') pouvant être sous forme de sel ou de stéréoisomère pur ou sous forme de mélange d'énantiomères et/ou de diastéréoisomères, y compris de mélanges racémiques, ou sous forme de tautomères, dans laquelle l'un au moins des 11 - Y Y2 1 - Y3 1 - Y4 1 - Y5 1 - Y6 et Y7 est un groupe de formule - 25 -L-Z. Les composés de formule (I') sont des composés dérivés des composés de formule (I). Ces composés comprennent au moins un groupe -L-Z comme défini plus haut et sont utilisés pour préparer des conjugués comme décrit plus loin. Ils 30 sont donc destinés au couplage ultérieur avec des molécules biologiques telles que définies ci-après. De préférence, dans la formule (I'), L est un radical (01-010)alkylène, un radical (06-010)arylène, un radical -(02-06)alcynylène ou un radical -(02-06)alcynyle(Ci-06)alkylène-. 35 3039153 18 Selon un mode de réalisation particulier, dans la formule (I'), le groupe -L-Z est choisi parmi les groupes suivants : . un groupe de formule (B) suivante : Rc / 5 \ (B) Rd dans laquelle : *i est un nombre entier allant de 1 à 10, *FI, représente H ou un groupe (C1-C6)alkyle, et 10 *Rd représente H, un groupe (C1-C6)alkyle ou un groupe -COOAlk, Alk représentant un groupe (C1-C6)alkyle ; ou . un groupe de formule (C) suivante : 0 15 / 100°C) puis efroidie sous atmosphère inerte 5 d'argon, avec des solvants également anhydres : l'acétonitrile, le toluène et le tétrahydrofurane sont séchés par passage sur la colonne d'une station, le dichlorométhane est distillé sur hydrure de calcium, la triéthylamine et le 1,4- dioxane sont distillés sur hydroxyde de potassium, et le DMF anhydre conservé sous tamis est disponible chez ALFA Aesar. 10 Le 1H-pyrazole, le 2-iodo-1-nitrobenzène, le 4-(3H)-pyrimidinone, le (1H)- 1,2,3-triazole, le 4-nitro-1H-pyrazole, le n-BuLi, l'hydrazine monohydrate, le 4- pyrazoleboronique pinacol ester, le tert-butyl prop-2-ynylcarbamate, le Pd(Ph3)202 , le P(PPh3)4, et le carbonate de césium sont disponibles chez ALDRICH. 15 Le 1,2,4(1H)-triazole, le D,L-propargylglycine, le 3-iodo-1H-pyrazole, le phényl acétylene et le 1-éthyny1-4-méthoxybenzène sont disponibles chez ACROS. Le 2,3-dichloropyrazine, le 2,6-dichloropyrazine, le 4-iodo-1H-pyrazole, le 4- bromo-1H-pyrazole et le N-iodosuccinimide sont disponibles chez APOLLO Scientific UK. 20 Le 1,2-dichlorobenzène, le 3-nitro-1,2,4-(1H)-triazole, le 1,3-dithiane, 4-(N,N- diméthylamino)phénylboronique, et carbonate de potassium sont disponibles chez ALFA Aesar. I - SCHEMAS REACTIONNELS 25 Synthèse du noyau [benzol-1,3a,6a-triazapentalène a) b) N (x) \^...........--"' 30 a) pyrazole (1éq), 0u20 (0.1éq), 0s2003 (2éq), DMF, 10000; b) P(OEt)3 (22éq), 176°C, MW. 3039153 24 Synthèse du noyau [pyrimidino]-1,3a,6a-triazapentalène H H H N0 c) N0 d) MN 0 Il Il N N N I (18) I I N3 g) N N (20) (x) C) NIS (1.1éq), AcOH, 50°C. d) pyrazole (1.5éq), CO (0.05éq), K2003(2éq), salicylaldoxime (0.2éq), DMF, 170°C, MW ; e) POCk (20éq), 110°C ; f) NaN3 (2éq), 5 DMF ; g) 1,2-dichlorobenzène, 165°C. Synthèse des structures de type [pyrazino]-1,3a,6a-triazapentalène R5 N Cl R5N..N3 k) R5 F%N h) ) R4 NCI 'N R1 R4 N R2 R3 R4 N Cl h) N2H4.H20 (2.1éq) ; i) NaNO2 (1.1éq), AcOH/H20 ; j) K2CO3 (2éq), ACN, 10 82°C ; k) 1,2-dichlorobenzène, 165°C. II - SYNTHESE DES INTERMEDIAIRES 15 1-(2-nitrophenyI)-1H-pyrazole (1) Pyrazo le C3H7N302 Cu20, Cs2CO3 MW: 189,17 g .rnorl DMF 20 Dans un ballon placé sous argon, le pyrazole (3g, 0.012mol, 1éq), le 2-iodo-1- nitrobenzène (1.2g, 0.018mol, 1.5éq), l'oxyde de cuivre(I) (0.17g, 0.001mol, 0.1éq), le Cs2CO3 (7.9g, 0.024mo1, 2éq) et le DMF anhydre (25mL) sont introduits. La suspension obtenue est laissée sous agitation à 100°C pendant 20h. Après retour à 25 température ambiante, le milieu réactionnel est concentré à sec. Le résidu récupéré 3039153 25 est repris à l'acétate d'éthyle et est lavé plusieurs fois avec une solution saturée de chlorure de sodium. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et concentrée à sec. Le mélange brut est purifié par chromatographie sur colonne de gel de silice (éther de pétrole/acétate d'éthyle : 7/3 ; dépôt solide). Le produit (1) est 5 obtenu avec un rendement de 75% (1.7g) sous forme d'une poudre jaune. RMN(1H, 250 MHz, chloroforme-d) ô 7.88 (dd, J= 8.0, 1.5 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 7.4, 1.4 Hz, 1H), 7.62 - 7.57 (m, 1H), 7.56 - 7.47 (m, 1H). RMN(13C, 400 MHz, chloroforme-d) ô 142.74, 133.43, 130.19, 128.80, 126.73, 125.48, 108.63. SM (10+) m/z 190 (M+H±), 212 (M+Na+). 10 1-Nitropyrazole (2) HNO3 \\N C3H3N302 NO2 MW: 113,08 g.rno1-1 (2) 15 AcOH, Ac20 A une suspension de pyrazole (2g, 0.03mol, 1éq) dans l'acide acétique (6mL) à 0°C, l'acide nitrique fumant (1.5mL, 0.036mo1, 12éq) est ajouté goutte à goutte. L'anhydride acétique (4mL, 0.041mol, 1.4éq) est ajoutée en dernier. Le mélange réactionnel est laissé sous agitation pendant 30min à 0°C puis pendant 17h à 20 température ambiante. Le suivi est réalisé par CCM dans éther de pétrole/acétate d'éthyle (7:3). Dans le milieu sont ajoutés 35mL d'eau froide, le précipité formé est récupéré par filtration et est lavé à l'eau glacée. Le produit attendu (2) est obtenu sous forme d'une poudre blanche avec un rendement de 86% (2.9g). RMN (1H, 250 MHz, DMSO-d6) ô 7.97 (dd, J= 3.0, 0.8 Hz, 1H), 7.06 (dd, J= 1.7, 0.9 Hz, 1H), 5.88 25 (dd, J= 3.0, 1.7 Hz, 1H). 3-Nitropyrazole (3) 30 \\N benzonitrile NO2 C3H3N302 NO2 ,N H MW: 113,08 g.rno1-1 (2) (3) Une solution de 1-nitropyrazole (2) (2.9g, 0.026mo1, 1éq) dans 36mL de benzonitrile est chauffée à 180°C pendant 5h. Après retour à température ambiante, l'heptane (100mL) est ajouté. Le précipité blanc formé est récupéré par 35 filtration et est rincé à l'heptane pour donner le produit (3) sous forme d'une poudre 3039153 26 blanche avec un rendement de 58% (1.7g). RMN (1H, DMSO-d6, 250MHz): Ô 13.14 (1H, s, H), 8.03 (1H, d, J1=2.5Hz, H5), 7.03 (1H, d, J1=2.5Hz, H4). 4-(1H)-Nitropyrazole (4) 5 II H2SO4 NO2 03H3N302 N, N, MW: 113,08 g.rno1-1 H H (4) HNO3 io Dans un ballon contenant l'acide sulfurique à 95% (22mL) refroidi à 0°C, le pyrazole (3g, 43.9mmol, 1éq) est introduit par des petites portions. Après 5 min d'agitation à froid, la température du milieu réactionnel est montée à 55°C. L'acide nitrique (3.2mL, 48.3mmol, 1.1éq) est ensuite ajouté goutte à goutte tout en maintenant la température constante de 55°C. Le mileu réactionnel est laissé sous 15 agitation à cette température pendant 3h. Après retour à température ambiante, le mélange réactionnel est basifié avec du carbonate de sodium solide solide et est extrait 3 fois à l'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont rassemblées, lavées avec une solution saturée en chlorure de sodium, séchées sur MgSO4, filtrées et concentrées à sec. Le 4-nitro-(1H)-pyrazole (4) est obtenu sous forme d'une poudre 20 jaune avec un rendement de 89% (4,4g). RMN (1H, DMSO-d6, 250MHz): Ô 13.91 (se, 1H), 8.54 (se, 2H). 1H-Pyrazol-3(2H)-one (5) 25 0 / .---...,/ "-- Nr''\,,----...- EST-L- . N- Non 12600 0 0 14H06 , fluorescent N, --- \,--- DS54 N 461 411 508 2400 (À = 461) ---_-- DS28 , 384 420 516 4300 (À = 420) REVENDICATIONS1. Utilisation comme chromophore fluorescent d'un composé de formule Al^ N ic^ 111\1_,--, A3 -----.......N/ r A4 (I) X dans laquelle : - Al est -N- ou -0(Y1)- ; - A2 est -N- ou -0(Y2)- ; - A3 est -N- ou -0(Y3)- ; - A4 est -N- ou -0(Y4)- ; 15 l'un au moins des Al, A2, A3 et A4 représentant -N- ; - Y1, Y2, Y3 et Y4 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe constitué de : H, des groupes électrodonneurs et des groupes électroattracteurs, 20 ou Y1 et Y2 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, et/ou Y2 et Y3 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, 25 un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, et/ou Y3 et Y4 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, 30 - X1 est -N- ou -0(Y5)- ; - X2 est -N- ou -0(Y6)- ; - X3 est -N- ou -0(Y7)- ; 10 3039153 79 - Y5, Y6 et Y7 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe constitué de H, des groupes électrodonneurs et des groupes électroattracteurs, OU Y5 et Y6 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 atomes, et/ou Y6 et Y7 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 atomes, ledit composé de formule (I) pouvant être sous forme de sel ou de stéréoisomère pur ou sous forme de mélange d'énantiomères et/ou de diastéréoisomères, y compris de mélanges racémiques, ou sous forme de tautomères, 15 à l'exception du composé de formule : N...,....,.-N\-- 1 /N___.---::.' N \N-.."----N 2. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle, dans la formule (I), Yl, Y2, Y3 et Y4 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe 20 constitué de : H, halogène, (C1-C6)alkyle, (C6-C10)aryle, (C2-C6)alcényle, (C2-C6)alcynyle, ON, hydroxy, (01-06)alcoxy, thiol, (01-06)alkylthio, (0H2),S02-0R, où n = 1-6, CH2S02-NRaRb, NO2, SO3Ra, NRaRb, C(0)01=1,, C(0)Ra, et C(0)NRaRb, Ra et Rb représentant H ou un groupe (01-06)alkyle. 25 3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle, dans la formule (I), Y5, Y6 et Y7 représentent, indépendamment les uns des autres, un atome d'hydrogène ou un atome d'halogène, ou sont choisis dans le groupe constitué de : . un groupe (01-06)alkyle, (03-06)cycloalkyle ou (06-010)aryle, ledit groupe (06-010)aryle étant éventuellement substitué par au moins un 30 substituant choisi parmi : halogène, ON, (01-06)alkyle, OH, (01-06)alcoxy, C(0)0R, et NRaRb, Ra et Rb représentant H ou un groupe (01-06)alkyle, 5 3039153 5 10 80 . un groupe hétéroaryle comprenant de 5 à 10 chaînons et contenant de 1 à 4 hétéroatomes choisis parmi 0, S ou N, ledit groupe hétéroaryle étant éventuellement substitué par au moins un substituant choisi parmi : halogène, ON, (01-06)alkyle, OH, (01-06)alcoxy, C(0)0Ra et NRaRb, Ra et Rb représentant H ou un groupe (01-06)alkyle, . NO2, . SO3H, . un groupe NR,Rd, R, et Rd représentant H ou un groupe (01-06)alkyle, ou pouvant former un groupe hétéro(02-05)cycloalkyle avec l'atome d'azote qui les porte ; . un groupe ORe, Re représentant H, un groupe (01-06)alkyle ou un groupe (06-010)aryle ; et . un groupe de formule (A) suivante : 1 (A) 4. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle Al et A4 sont -N-, A2 est -0(Y2)- et A3 est -0(Y3)-. 5. Composé de formule (I) suivante : (I) A A1.......-1\1- \ + N--- m2 / --X JI I 1 A4 X2 dans laquelle : - Al est -N- ou -0(Y1)- ; - A2 est -N- ou -0(Y2)- ; - A3 est -N- ou -0(Y3)- ; - A4 est -N- ou -0(Y4)- ; l'un au moins des Al, A2, A3 et A4 représentant -N- ; 3039153 81 - Y1, Y2, Y3 et Y4 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe constitué de : H, des groupes électrodonneurs et des groupes électroattracteurs, 5 ou Y1 et Y2 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, et/ou Y2 et Y3 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 io atomes, et/ou Y3 et Y4 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, 15 - X1 est -N- ou -0(Y5)- ; - X2 est -N- ou -0(Y6)- ; - X3 est -N- ou -0(Y7)- ; - Y5, Y6 et Y7 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe 20 constitué de H, des groupes électrodonneurs et des groupes électroattracteurs, OU Y5 et Y6 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 atomes, 25 et/ou Y6 et Y7 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 atomes, ledit composé de formule (I) pouvant être sous forme de sel ou de stéréoisomère 30 pur ou sous forme de mélange d'énantiomères et/ou de diastéréoisomères, y compris de mélanges racémiques, ou sous forme de tautomères, 3039153 82 à l'exception des composés suivants : , NO2 NN I , NO2 _ NO2 10 NN 5 2 NO2 N NO2 02N N-'***-N1 \ 02 N['(;..--.>------N 02N 15 6. Composition aqueuse comprenant au moins un composé de formule (I) selon la revendication 5. 7. Composé de formule (I') suivante : (r) Nx A11 -A4 X2 )( dans laquelle : - Al est -N- ou -C(Y1)- ; - A2 est -N- ou -C(Y2)- ; - A3 est -N- ou -C(Y3)- ; - A4 est -N- ou -C(Y4)- l'un au moins des Al, A2, A3 et A4 représentant -N- ; - Y1, Y25 Y3 et Y4 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe constitué de : H, des groupes électrodonneurs et des groupes 20 25 30 3039153 83 électroattracteurs, ou peuvent représenter un groupe de formule -L-Z, L représentant un bras espaceur comprenant de 1 à 10 atomes de carbone et Z représentant un groupe réactif susceptible de se lier à une molécule biologique, 5 ou Y1 et Y2 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, et/ou Y2 et Y3 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 io atomes, et/ou Y3 et Y4 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, 15 - X1 est -N- ou -0(Y5)- ; - X2 est -N- ou -0(Y6)- ; - X3 est -N- ou -0(Y7)- ; - Y5, Y6 et Y7 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe 20 constitué de H, des groupes électrodonneurs et des groupes électroattracteurs, ou représentent un groupe de formule -L-Z, L et Z étant tels que définis ci-dessus, OU Y5 et Y6 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 25 atomes, et/ou Y6 et Y7 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 atomes, 30 ledit composé de formule (I') pouvant être sous forme de sel ou de stéréoisomère pur ou sous forme de mélange d'énantiomères et/ou de diastéréoisomères, y compris de mélanges racémiques, ou sous forme de tautomères, dans laquelle l'un au moins des 1, _ Y Y2, - Y3, - Y4, - Y5, - Y6 et Y7 est un groupe de formule - -L-Z. 3039153 84 8. Composé de formule (I') selon la revendication 7, dans laquelle Z est choisi dans le groupe constitué des halogènes, des acides carboxyliques, des esters de succinimide, des esters de tétrafluorophényle, des azotures d'acyle, des 5 anhydrides, des halogénures d'acide, des acrylamides, des alcools, des amines, des alcynes, des aminooxyacétamides, des azotures, des imidoesters, des esters de sulfonate, des halogéno-acétamides, des halogénures d'alkyle, des halogénures de sulfonyle, des hydrazines, des hydrazides, des isocyanates, des isothiocyanates, des tétrazines et des maléimides. 10 9. Conjugué comprenant une molécule biologique et un composé de formule (I) selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans lequel ledit composé de formule (I) est lié à la molécule biologique par l'intermédiaire d'un linker, ladite molécule biologique étant choisie dans le groupe constitué des 15 anticorps, des protéines, des peptides, des glucides, des lipides, des polysaccharides, des acides gras, des acides aminés, des acides désoxyribonucléiques, des acides ribonucléiques, des oligonucléotides, des médicaments et des ligands. 20 10. Conjugué selon la revendication 9, de formule (I") suivante : A11 / X , I 1 A4 X2 dans laquelle : - Al est -N- ou -C(Y1)- ; - A2 est -N- ou -C(Y2)- ; - A3 est -N- ou -C(Y3)- ; - A4 est -N- ou -C(Y4)- l'un au moins des Al, A2, A3 et A4 représentant -N- ; - Y1, Y2, Y3 et Y4 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe constitué de : H, des groupes électrodonneurs et des groupes 35 électroattracteurs, ou peuvent représenter un groupe de formule -L'-Z', L' 25 30 3039153 85 représentant un linker et Z' représentant une molécule biologique choisie dans le groupe constitué des anticorps, des protéines, des peptides, des glucides, des lipides, des polysaccharides, des acides gras, des acides aminés, des acides désoxyribonucléiques, des acides ribonucléiques, des oligonucléotides, des 5 médicaments et des ligands, ou Y1 et Y2 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, io et/ou Y2 et Y3 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 atomes, et/ou Y3 et Y4 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 30 15 atomes, - X1 est -N- ou -0(Y5)- ; - X2 est -N- ou -0(Y6)- ; - X3 est -N- ou -0(Y7)- ; 20 - Y5, Y6 et Y7 sont choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe constitué de H, des groupes électrodonneurs et des groupes électroattracteurs, ou représentent un groupe de formule -L'-Z', L' et Z' étant tels que définis ci-dessus, 25 OU Y5 et Y6 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 atomes, et/ou Y6 et Y7 forment ensemble, avec les atomes de carbone qui les portent, un groupe (hétéro)cycloalkyle ou un groupe (hétéro)aryle comprenant de 5 à 10 30 atomes, ledit composé de formule (I") pouvant être sous forme de sel ou de stéréoisomère pur ou sous forme de mélange d'énantiomères et/ou de diastéréoisomères, y compris de mélanges racémiques, ou sous forme de tautomères, 35 3039153 86 dans laquelle l'un au moins des 1, - Y Y2, - Y3, - Y4, - Y5, - Y6 et Y7 est un groupe de formule - -L'-Z'. 11. Utilisation d'un conjugué selon la revendication 9 ou 10, pour la 5 détection par fluorescence d'une molécule biologique.