Brevet FR3044871A1 — publié le 20170616

APPÂT RODONTICIDE COMPRENANT DU BRODIFACOUM ET PROCÉDÉ DE LUTTE CONTRE DES RONGEURS CIBLES NUISIBLES L'invention concerne un appât rodonticide comprenant du brodifacoum et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles. 5 L'invention concerne aussi un procédé de séparation des stéréo-isomères de configuration du brodifacoum. L'invention concerne donc le domaine technique de la lutte contre le développement de populations de rongeurs cibles nuisibles. On sait de EP 0 147 052 que le stéréo-isomère « trans » du brodifacoum est métabolisé plus rapidement que le stéréo-isomère « cis » dans 10 les tissus d'espèces non-cible et non-rongeurs et que ce stéréo-isomère « trans » du brodifacoum permet de diminuer les risques d'empoisonnement de ces espèces non-cible. En particulier EP 0 147 052 décrit un appât rodonticide comprenant du brodifacoum sous forme de stéréo-isomère « trans » dans une proportion de 50 ppm. 15 Un tel appât est susceptible d'être consommé par des animaux autres que des rongeurs cibles nuisibles lorsqu'il est mis à la disposition de rongeurs cibles nuisibles. Il peut être consommé directement (consommation primaire) par des animaux domestiques ou des animaux de compagnie. Il peut aussi être consommé accidentellement par des humains. Une telle consommation 20 peut produire chez ces animaux domestiques, chez ces animaux de compagnie ou chez des humains un empoisonnement qui peut être létal. En outre, une fraction du brodifacoum de ces appâts rodonticides peut être ingérée (consommation secondaire) par des animaux -notamment par des oiseaux- prédateurs ou charognards de rongeurs nuisibles et 25 notamment de rongeurs cibles nuisibles affaiblis ayant consommé un tel appât rodonticide. Cette consommation secondaire est susceptible d'entraîner à terme la mort de ces animaux prédateurs ou charognards qui peuvent être des animaux -notamment des oiseaux- appartenant à des espèces protégées. L'invention vise donc à pallier ces inconvénients en 30 proposant un appât rodonticide comprenant du brodifacoum et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles qui sont en même temps efficaces pour 3044871 2 contrôler des populations de rongeurs cibles nuisibles et qui permettent aussi de limiter les risques d'empoisonnement d'animaux non-cible -notamment des animaux domestiques ou d'élevage, des animaux de compagnie ou des humains-consommant accidentellement un tel appât rodonticide. L'invention vise donc à pallier ces inconvénients en proposant un appât rodonticide comprenant du brodifacoum et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles qui sont en même temps efficaces pour contrôler les populations de rongeurs cibles nuisibles et qui permettent aussi de limiter les risques d'empoisonnement secondaire d'animaux -par exemple de renards ou d'oiseaux- sauvages prédateurs de rongeurs cibles nuisibles affaiblis ayant consommé de l'appât rodonticide ou d'animaux sauvages charognards de cadavres de rongeurs cibles nuisibles empoisonnés. L'invention vise aussi à proposer un appât rodonticide comprenant du brodifacoum et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles 15 nuisibles dont la mise en oeuvre est en accord avec les règles de bon usage -notamment vis à vis de la protection des oiseaux, et en particulier des rapaces-. L'invention vise aussi à proposer un appât rodonticide comprenant du brodifacoum et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles qui sont respectueux de l'environnement, de la santé humaine et des 20 animaux non cibles -notamment des oiseaux, et en particulier des rapaces-. L'invention vise aussi à proposer un appât rodonticide comprenant du brodifacoum et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles qui ne nécessitent pas, pour contrôler une population de rongeur cibles nuisibles, d'utiliser un agent rodonticide à forte dose et qui sont respectueux de 25 l'environnement, de la santé humaine et des animaux non cibles -notamment des oiseaux-. L'invention vise aussi à proposer un appât rodonticide comprenant du brodifacoum et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles qui sont susceptibles de pouvoir être utilisés pour lutter contre des 30 rongeurs cibles nuisibles résistants à des appâts connus de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles. 3044871 3 L'invention vise aussi à proposer une alternative à des appâts rodonticides connus. Pour ce faire, l'invention concerne un appât rodonticide comprenant : 5 - au moins un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, et ; - un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère El, du brodifacoum, à l'exclusion d'un mélange racémique dudit énantiomère E1 et d'un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère E4, du brodifacoum 10 distinct dudit énantiomère El ; o ledit énantiomère El présentant, par analyse chromatographique d'une composition de brodifacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration du brodifacoum effectuée dans des conditions décrites ci-après et à la température de 21,5°C, un temps de rétention ti ; o ledit énantiomère E4 présentant, par analyse chromatographique d'une composition de brodifacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration du brodifacoum effectuée dans ces mêmes conditions, un temps de rétention t4 ; les temps de rétention t1 et t4 étant de valeurs telles que ti 78,9 et m/z 521,1 -> 135,1 correspondant aux signaux du brodifacoum. Un chromatogramme obtenu est 20 représenté en figure 1 à titre d'exemple. Les valeurs des temps de rétention de chacun des stéréo-isomères de configuration du brodifacoum sont, dans les conditions décrites, de : - t1 = 15,4 min pour ledit énantiomère El selon l'invention ; - t2 = 17,2 min pour l'énantiomère E2 du diastéréoisomère D2,3 ; 25 - t3 = 19,9 min pour l'énantiomère E3 du diastéréoisomère D2,3, et ; - t4 = 26,3 min pour ledit énantiomère E4. Les valeurs des temps de rétention t1, t2, t3 et t4 sont susceptibles de varier selon des variations des conditions chromatographiques et notamment avec la température de la colonne de chromatographie. Cependant, 30 dans ces conditions chromatographiques, l'ordre d'élution des stéréo-isomères de configuration du brodifacoum reste inchangé. À titre indicatif, pour une variation 3044871 25 de température de quelques degrés Celsius, la valeur du temps de rétention (t1) dudit énantiomère E1 peut varier entre 15,0 min et 15,7 min, la valeur du temps de rétention (t2) de l'énantiomère E2 du diastéréoisomère D2,3 peut varier entre 16,9 min et 17,5 min, la valeur du temps de rétention (t3) de l'énantiomère E3 du 5 diastéréoisomère D2,3 peut varier entre 18,8 min et 20,0 min et la valeur du temps de rétention (t4) dudit énantiomère E4 peut varier entre 26,0 min et 27,5 min. Rémanence hépatique des énantiomères des diastéréoisomères du brodifacoum chez le rat On administre par voie orale (« peros ») à des rats de 10 laboratoire (rats Sprague Dawley, Charles River, Saint germain sur l'Arbresle, France) mâles et femelles, âgés de 8 semaines et pesant entre 180 et 200 g, une solution comprenant du brodifacoum dans un mélange d'huile végétale et de DMSO à 5 % de façon que la quantité de brodifacoum ingérée par chaque rat soit de l'ordre de 3,4 mg de brodifacoum par kilogramme de rat. Les rats gavés sont 15 traités quotidiennement par administration par voie sous cutanée d'une dose de vitamine K1 à raison de 1U par rat de façon à maintenir les rats en vie pendant la durée de l'expérience. Le rapport de la quantité dudit diastéréoisomère D2,3 sur la quantité de brodifacoum dans la solution de gavage comprenant du brodifacoum 20 est de 70% et le rapport de la quantité dudit diastéréoisomère D1,4 sur la quantité de brodifacoum dans la solution de gavage comprenant du brodifacoum est de 30%. À 1 jour (J+1), 2 jours (J+2), 5 jours (J+5), 7 jours (J+7) et 9 jours (J+9) après le gavage, on euthanasie 3 rats mâles et 3 rats femelles 25 préalablement anesthésiés à l'isoflurane, on prélève le foie des rats euthanasiés puis on extrait du foie et on dose les quantités de chacun des énantiomères des diastéréoisomères du brodifacoum présents dans le foie des rats gavés. Les résultats obtenus sur les rats (mâles et femelles) sont donnés au tableau 1 ci-après dans lequel les valeurs de la concentration de chacun des énantiomères du 30 brodifacoum dans le foie sont la moyenne des valeurs mesurées sur 6 rats et exprimées en nanogramme (ng) par gramme de foie. 3044871 26 Concentration J+1 J+2 J+5 J+7 J+9 hépatique, ng/g Énantiomère El 2956,5 2025,5 1487 892 442 Énantiomère E2 7425 4980 3400 1869,5 1054 Énantiomère E3 13563,5 8700 8911,5 7762,5 5862,5 Énantiomère E4 2484,5 1921 1533 1311 860 Tableau 1 La figure 2 représente l'évolution du pourcentage de la quantité massique de chaque énantiomère (E1 et E4) du diastéréoisomère D1,4 et de chaque énantiomère (E2 et E3) du diastéréoisomère D2,3 par rapport à la 5 quantité de brodifacoum retenue dans le foie des rats gavés et euthanasiés à J+1, J+2, J+5, J+7 et J+9. Le pourcentage dudit énantiomère El est représenté par des colonnes à hachures obliques, le pourcentage dudit énantiomère E4 est représenté par des colonnes blanches, le pourcentage dudit énantiomère E2 est représenté par des colonnes à hachures horizontales et le pourcentage dudit énantiomère E3 est 10 représenté par des colonnes noires. Les proportions respectives de chacun des énantiomères (E1 et E4) du diastéréoisomère D1,4 et des énantiomères (E2 et E3) du diastéréoisomère D2,3 dans le brodifacoum de la composition de gavage sont représentées en colonne « X » figure 2 et sont de 15% pour l'énantiomère El et de 15% pour l'énantiomères E4 et de 35% pour l'énantiomère E2 du 15 diastéréoisomère D2,3 et de 35% pour l'énantiomère E3 du diastéréoisomère D2,3. Le pourcentage dudit énantiomère El selon l'invention diminue au cours du temps dans le foie des rats gavés. Ledit énantiomère El selon l'invention est moins rémanent dans le foie des rats gavés que ne l'est l'énantiomère E4, que ne l'est l'énantiomère E3 et que ne l'est le brodifacoum. 20 Ledit énantiomère El permet la réalisation d'appâts rodonticides et la mise en oeuvre de procédés utilisant de tels appâts qui sont efficaces et respectueux de l' environnement. Il va de soi que l'invention peut faire l'objet de nombreuses variantes de réalisation et applications. En particulier, un appât rodonticide et un 25 procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles sont sujets à des infinités de 3044871 27 variantes tant dans la formulation de l'appât rodonticide que dans les modes de mise en oeuvre du procédé. REVENDICATIONS1/ - Appât rodonticide comprenant : - au moins un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, et ; - un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère El, du brodifacoum, à l'exclusion d'un mélange racémique dudit énantiomère E1 et d'un stéréo-isomère de configuration, dit énantiomère E4, du brodifacoum distinct dudit énantiomère E1 ; o ledit énantiomère El présentant, par analyse chromatographique 10 d'une composition de brodifacoum comprenant quatre stéréo-isomères de configuration du brodifacoum effectuée dans des conditions décrites ci-après et à la température de 21,5°C, un temps de rétention ti ; o ledit énantiomère E4 présentant, par analyse chromatographique d'une composition de brodifacoum comprenant quatre stéréo-isomères de 15 configuration du brodifacoum effectuée dans ces mêmes conditions, un temps de rétention t4 ; les temps de rétention t1 et t4 étant de valeurs telles que t1