Brevet FR3044515A1 — publié le 20170609

MODELE DE LYMPHOME CUTANE PRIMITIF L'invention concerne un modèle animal de lymphome cutané primitif ainsi que des méthodes employant ce modèle pour évaluer les propriétés biologiques et génétiques des cellules tumorales de lymphome cutané primitif, ainsi que pour identifier ou évaluer l'efficacité d'un traitement contre un lymphome cutané primitif. ARRIERE PLAN TECHNOLOGIQUE Les lymphomes cutanés primitifs (LCP) sont des pathologies rares, dont il existe très peu de lignées cellulaires dans le monde. Ce manque de modèles cellulaires restreint fortement les études fonctionnelles qui permettraient de mieux comprendre la pathologie et restreint également les modèles murins correspondants qui permettraient de tester de nouvelles molécules efficaces pour traiter ce type de cancer. En effet, seuls quelques modèles de xénogreffes de cellules de LCP ont été décrits, soit par greffe chez des souris adultes immunodéficientes en sous cutané (efficace uniquement avec quelques unes des lignées les plus agressives), soit dans le foie de la souris immunodéficientes RAG2-/-yc-/- âgée de 2 à 7 jours (efficace uniquement sur deux lignées cellulaires, et peu reproductible). Aucun de ces modèles, après publication, n'a fait l'objet d'études plus poussées pour tester des molécules thérapeutiques sur les souris greffées et ainsi mettre en évidence de nouvelles thérapies pour traiter les LCP. L'absence de modèle in vivo de greffes de cellules de LCP ne permet pas d'évaluer de manière pré-clinique l'efficacité de thérapeutique générale ou ciblée. Il existe donc à l'heure actuelle un besoin urgent d'un modèle robuste, fortement reproductible et accessible techniquement pour faciliter le criblage à grande échelle de molécules thérapeutiques dirigées contre les LCP. RESUME DE L'INVENTION Selon un premier aspect, l'invention concerne un modèle animal non humain de lymphome cutané primitif (LCP), dans lequel des cellules de lymphome cutané primitif humain sont greffées dans le foie dudit animal. Dans un mode particulier de réalisation, ledit animal est un animal adulte. Selon une variante, ledit animal est un rongeur, en particulier une souris. Selon un autre mode de réalisation, l'animal est un animal immunodéficient, plus particulièrement une souris immunodéficiente telle qu'une souris NOD, une souris NOD/SCID ou plus préférentiellement une souris NSG (NOD.Cg-Prkdc"'d 112relwelSzJ). 3044515 2 Selon un mode de réalisation, les cellules greffées peuvent correspondre à des cellules primaires d'un patient atteint d'un LCP, notamment une lignée primaire d'un patient atteint d'un LCP de type T ou de type B, ou à une lignée cellulaire de LCP. Parmi les lignées cellulaires susceptibles d'être greffées, on 5 peut citer les lignées My-La, HUT78, HH, SeAx, MAC1, MAC2A et FE-PD. Selon un autre mode de réalisation de l'invention, les cellules sont injectées en intra-hépatique, notamment dans un ou plusieurs lobes du foie, sous la capsule hépatique de l'animal. Selon une variante de réalisation, les cellules sont injectées dans le foie via la veine porte. Selon un second aspect, l'invention concerne également un procédé de préparation d'un modèle animal de lymphome cutané primitif, comprenant l'injection de cellules de LCP humain dans le foie d'un animal non humain, plus particulièrement dans un ou plusieurs lobes du foie, sous la capsule hépatique dudit animal, ou par injection via la veine porte. Le procédé de préparation du modèle peut comprendre en outre l'élevage dudit animal pendant au moins 2 jours, en particulier pendant environ 2 à 5 jours, notamment pendant 2 ou 3 jours après injection des cellules, avant utilisation ultérieure du modèle animal produit dans l'une des applications décrites ci-dessous. Dans un mode particulier de réalisation, de 2 à 10 millions de cellules de LCP, par exemple 5 millions de cellules de LCP, sont injectées dans le foie de l'animal. Selon un troisième aspect, l'invention concerne un procédé d'évaluation de l'efficacité d'un traitement 25 contre un LCP, comprenant a) l'administration dudit traitement au modèle animal selon l'invention décrit ci-dessus; et b) la détermination de l'effet dudit traitement sur les tumeurs induites par la greffe dans le foie et/ou la dissémination ou la migration desdites cellules dans d'autres organes de l'animal. 30 Selon un mode particulier de réalisation, le traitement est administré de 2 à 5 jours, en particulier 3 jours, après la greffe des cellules de LCP humain dans le foie du modèle animal. Selon un autre mode de réalisation, l'efficacité du traitement est évaluée de 10 à 15 jours, en particulier 12 jours, après l'administration dudit traitement. 10 15 20 35 3044515 3 L'invention concerne par ailleurs, selon un quatrième aspect, un procédé d'étude ou d'évaluation d'une propriété de tumorigenèse, de migration ou d'invasion dans les organes de cellules de LCP humain, comprenant l'étude de ladite propriété dans le modèle animal selon l'invention. 5 BREVE DESCRIPTION DES FIGURES La figure 1 présente des coupes d'organes de souris ayant reçu une xénogreffe de LCP, marquées par immunohistochimie au moyen d'un anticorps anti-HLA-ABC (HLA) et contre-colorées à l'hématoxyline de Mayer (HES). 10 La figure 2 présente le modèle de xénogreffe hépatique selon l'invention. (a) schéma représentant un protocole de xénogreffe intrahépatique et de traitement au Méthotrexate selon l'invention; (b) tableau présentant les ratio poids de foie / poids de l'animal à J15 après greffe, montrant que le Méthotrexate réduit fortement la formation de tumeur hépatique; (c) confirmation de la réduction de la formation 15 des tumeurs hépatiques par immunohistochimie anti-HLA-ABC sur des coupes de foie; (d) antigène HLA-ABC détecté par cytométrie en flux dans différents organes des souris: une réduction significative du nombre de cellules portant l'antigène HLA-ABC a été observée dans les poumons et les rates des souris traitées au Méthotrexate (ns: non significatif; METHO: Méthotrexate). 20 DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION La présente invention concerne un modèle animal non humain de lymphome cutané primitif (LCP), dans lequel des cellules de LCP humain sont greffées dans le foie dudit animal. 25 Selon un mode préféré de réalisation, l'animal servant à la production du modèle est un rongeur, notamment un rat ou une souris, plus particulièrement une souris. L'animal sera avantageusement choisi parmi les animaux immunodéficients, notamment un rongeur immunodéficient tel qu'une souris immunodéficiente. Parmi les souris immunodéficientes connues utilisables dans le cadre de la présente invention, on pourra citer les souris NOD, NOD/SCID, BXN, RAG, RAG2, RAG-yC, ou encore la 30 souris NSG (ou NOD.Cg-Prkdc"'d 112relwelSzJ). La souris NSG fait partie des souris les plus immunodéficientes décrites à ce jour. Elle combine les caractéristiques du fond génétique NOD/ShiLtJ, la mutation de l'immunodéficience combinée sévère (ou severe combined immunodeficiency en anglais, ou SCID), et une déficience en chaîne gamma du récepteur à l'IL2. Elle est caractérisée par une absence de cellules matures B et T, et par l'absence de cellules NK 35 fonctionnelles. 3044515 4 L'animal peut être un animal nouveau né, un jeune animal ou un animal adulte. De préférence, l'animal sélectionné est un animal adulte, notamment une souris âgée de 8 à 10 semaines. Les cellules de LCP humain utilisées pour établir le modèle de la présente invention peuvent 5 notamment être des cellules de lymphome T cutané de différents sous-types, notamment des trois principaux sous-types que sont le mycosis fongoïde (MF), le syndrome de Sézary (SS) et le lymphome cutané à grandes cellules anaplasiques (cALCL pour primary CD30+ cutaneous anaplastic large-cell lymphoma en anglais). Les cellules de LCP humain utilisées pour établir le modèle peuvent être des cellules primaires de LCP de patient humain atteint d'une LCP. Selon une variante de ce mode de 10 réalisation, les cellules utilisées sont des cellules primaires de LCP de type T. Selon une autre variante de ce mode de réalisation, les cellules utilisées sont des cellules primaires de LCP de type B. Selon un autre mode de réalisation, lesdites cellules de LCP humain correspondent à des lignées cellulaires dérivées de LCP humain telles que les lignées My-La, HUT78, HI-T, SeAx, MAC1, MAC2A et FE-PD. Les cellules de LCP humain greffées peuvent être des cellules de LCP agressif ou indolent, ou encore 15 correspondre à des cellules représentatives de différents stades de la maladie, par exemple des cellules d'un LCP précoce ou avancé. Pour générer le modèle animal de l'invention, les cellules de LCP humain sont injectées dans le foie de l'animal choisi. Toute injection permettant la colonisation du foie par les cellules de LCP humain 20 est envisagée dans le cadre de la présente invention. A titre illustratif, les cellules de LCP humain peuvent être injectées dans un ou plusieurs lobes du foie, plus particulièrement sous la capsule hépatique. Alternativement, les cellules peuvent être injectées dans le foie via la veine porte. Selon un mode particulier de réalisation, de 2 à 10 millions de cellules de LCP humain, notamment de 25 2 à 5 millions de cellules, sont injectées dans le foie de l'animal. A titre illustratif, dans le cas de l'injection des cellules dans le foie d'une souris adulte (e.g. une souris âgée de 8 à 10 semaines), l'injection de 2 à 10 millions de cellules peut être réalisée, notamment de 2 à 5 millions, avec notamment une injection de 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5 ou encore 5 millions de cellules. 30 Un volume approprié sera injecté, selon l'animal employé dans la constitution du modèle animal et le nombre de cellules à injecter. A titre illustratif, pour l'injection intrahépatique sous la capsule hépatique d'une souris adulte, un volume de 50 u.L maximum sera injecté. La prise de greffe dans le foie de l'animal peut être évaluée selon plusieurs modalités. A titre 35 illustratif, les trois modalités expérimentales suivantes peuvent être employées, après sacrifice de l'animal : 3044515 5 i) Le poids du foie et le poids de chaque animal est mesuré, notamment à l'aide d'une balance de précision. Le rapport poids du foie / poids de l'animal est alors calculé. Ce rapport sera considéré comme pathologique, et donc indicatif d'une prise de greffe, s'il est supérieur à 5%. Pour les prises de tumeurs les plus agressives, l'invasion tumorale peut 5 être visible à l'oeil nu. ii) Une biopsie du foie, et éventuellement d'autres organes (notamment rein, rate, poumon, coeur, etc.) peut être réalisée. Chaque morceau peut être ensuite fixé, notamment au formol 4%, en particulier sur la nuit à température ambiante, avant inclusion en bloc de paraffine. Des coupes de chaque bloc de paraffine, notamment de 3um d'épaisseur, sont réalisées 10 avant immunomarquage spécifique grâce à un anticorps qui permet de détecter les cellules humaines (notamment un anticorps anti-HLA). iii) Le reste de chaque organe non fixé au formol peut être remis en culture, en cellules isolées (e.g. par dissociation mécanique au scalpel). A titre illustratif, les cellules peuvent être mises en culture dans un milieu de culture adapté (notamment un milieu RPMI) 15 supplémenté d'additifs appropriés, notamment de 20% de sérum de veau foetal dans des conditions de cultures adaptées (e.g. à 37°C dans une atmosphère de 5% de CO2). Un immunomarquage peut ensuite être réalisé grâce à un anticorps qui permet de détecter les cellules humaines (notamment un anticorps anti-HLA). Associé à un anticorps secondaire marqué approprié permettant ensuite de détecter le pourcentage de cellules humaines dans 20 chaque organe par rapport au nombre de cellules total (humaines et souris). La détection peut notamment être réalisée au moyen d'un cytomètre en flux. Après injection des cellules de LCP humain dans le foie de l'animal, ce dernier est élevé durant un temps adapté à la prise de la greffe, notamment pendant au moins 2 jours, en particulier pendant 25 environ 2 ou 3 jours après injection des cellules. L'animal est ensuite utilisé dans l'un des procédés décrits ci-dessous. Le modèle animal selon l'invention peut avantageusement être utilisé dans un procédé d'évaluation de l'efficacité d'un traitement contre un LCP, comprenant. 30 a) l'administration dudit traitement au modèle animal selon l'invention décrit ci-dessus; et b) la détermination de l'effet dudit traitement sur les tumeurs induites par la greffe dans le foie et/ou la dissémination et/ou la migration desdites cellules dans d'autres organes de l'animal. Selon la présente invention, le traitement peut correspondre à toute substance susceptible d'avoir un 35 effet curatif ou préventif contre un LCP humain, y compris des prodrogues de telles substances. Le traitement peut correspondre à des molécules dont les propriétés anti-tumorales sont déjà connues. Alternativement, le traitement testé n'a jamais été rapporté comme possédant des propriétés anti- 3044515 6 tumorales, la présente invention pouvant permettre le criblage à grande échelle de nombreuses substances pour leur effet contre les LCP. L'administration du traitement est réalisée par toute voie appropriée, notamment par voie orale, intramusculaire, intraveineuse, intra artérielle, intra-péritonéale, cutanée, sous-cutanée ou intranasale. Par ailleurs, plusieurs substances peuvent être administrées en 5 combinaison, simultanément ou de manière séparée dans le temps, afin de déterminer l'effet de ladite combinaison, qu'il s'agisse d'une synergie, d'un antagonisme ou d'une redondance d'action. Le traitement est administré au modèle animal après greffe, notamment après au moins 2 jours, en particulier après environ 2 à 5 jours, notamment après 2 ou 3 jours après injection des cellules de LCP 10 dans le foie de l'animal. Par ailleurs, l'homme du métier adaptera le régime et/ou la posologie à la substance administrée. Par exemple, la substance à tester pourra être administrée une seule fois le premier jour du traitement, sans autre administration avant l'évaluation de l'effet dudit traitement. Alternativement, la substance pourra être administrée à plusieurs reprises tout au long du protocole de traitement. Par exemple, ladite substance peut être administrée quotidiennement sur toute la durée du 15 protocole, une ou plusieurs fois par jour. L'efficacité du traitement est évaluée après une durée appropriée permettant d'observer un effet thérapeutique. A titre illustratif, l'efficacité peut être évaluée de 10 à 15 jours après administration de la substance à l'animal. Par exemple, l'efficacité du traitement peut être évaluée, 10, 11, 12, 13, 14 ou 20 15 jours après administration de la substance. Selon un mode particulier de réalisation, l'efficacité du traitement est évaluée 11, 12 ou 13 jours après son administration, notamment 12 jours après. Avantageusement, les cellules de LCP humain greffées étant à la fois issues d'un animal différent (cellules humaines greffées dans le foie d'un animal non humain) et originaires d'un tissu différent du 25 foie, elles seront facilement détectées et/ ou tracées dans l'organisme du modèle animal de l'invention par des moyens bien connus de l'art permettant la discrimination de cette origine animale et/ou tissulaire. Ainsi, la présence ou l'absence de cellules de LCP humain dans le modèle animal de l'invention pourra notamment être déterminée par immunomarquage spécifique grâce à un anticorps anti-HLA (de l'anglais human leukocyte antigen) ou d'un anticorps spécifique des cellules tumorales, 30 qui permettent de détecter des cellules immunitaires humaines présentes dans un échantillon prélevé sur l'animal, notamment dans une biopsie de foie ou de tout autre organe dans lequel une étude de l'invasion des cellules de LCP humain est souhaitée. Alternativement, les cellules issues d'une biopsie pratiquée dans l'un des organes ou tissus de l'animal peuvent être mises en culture, puis marquées au moyen d'un anticorps anti-HLA pour ensuite déterminer le pourcentage de cellules humaines (et donc 35 de cellules de LCP humain, ou dérivées de LCP humain) présent dans ledit organe ou tissu au moyen d'un cytomètre en flux. 3044515 7 Un traitement efficace est identifié lorsque le nombre et/ou la taille des tumeurs induites par la greffe dans le foie et/ou dans d'autres organes de l'animal est diminué. Alternativement, un traitement sera jugé efficace en cas d'observation d'une stabilisation du nombre et/ou de la taille et/ou de la dissémination à d'autres organes de cellules greffées dérivant d'un LCP agressif et/ou avancé. Selon 5 un mode particulier de réalisation de cet aspect, l'effet du traitement est comparé à l'effet de le la greffe des mêmes cellules de LCP humain sur un animal (ou sur plusieurs animaux) non traité, ou à l'effet d'un traitement placebo administré à un animal (ou à plusieurs animaux) greffés avec les mêmes cellules de LCP humain, utilisé comme contrôle. Dans ce mode de réalisation, l'animal non traité avec la drogue (i.e. n'ayant reçu que la greffe de LCP, ou que la greffe de LCP puis l'injection 10 d'un traitement placebo) développe des tumeurs, et la comparaison de la condition contrôle avec le traitement thérapeutique permet l'observation d'une diminution, voire d'une abolition complète, des tumeurs. Selon un mode alternatif de réalisation, l'effet du traitement est comparé à l'effet d'un traitement de référence. Par exemple, le traitement de référence peut correspondre à un traitement au Méthotrexate. Ce mode alternatif de réalisation pourra être avantageusement mis à profit afin de 15 sélectionner les traitements plus efficaces, ou aussi efficaces, que le traitement de référence, ou afin de sélectionner les traitements susceptibles de présenter moins d'effets secondaires que le traitement de référence. L'invention concerne par ailleurs, un procédé d'étude ou d'évaluation d'une propriété de tumorigenèse, 20 de migration et/ou d'invasion dans les organes de cellules de LCP humain, comprenant l'étude de ladite propriété dans le modèle animal selon l'invention. Ce procédé met en oeuvre les propriétés de la greffe décrite ci-dessus, notamment la possibilité de discriminer aisément les cellules qui en sont dérivées au moyen de techniques connues de l'homme du métier. 25 EXEMPLES Matériel et méthodes Lignées cellulaires 30 Quatre lignées de LCP agressif (My-La, HUT78, HI-I et MAC2A) et deux lignées de LCP indolent (FE-PD et MAC1) ont été utilisées. Elles ont été cultivées à 37°C en atmosphère régulée à 5% de CO2 dans du milieu RPMI contenant 10% de sérum de veau foetal (SVF), à l'exception des cellules FE-PD cultivées en milieu IMDM supplémenté de 20% de SVF. 35 Essai en agar mou 3044515 8 5x104, 10x104 ou 5x105 cellules / puits (plaques 6 puits) ont été cultivées en agar mou afin de déterminer la capacité clonogénique des lignées cellulaires de LCP, selon un protocole publié précédemment (Chevret et al., 2014, Telomerase functions beyond telomere maintenance in primary cutaneous T-cell lymphoma, Blood 123(12) : 1850-1859). 5 Xénogreffes intra-hépatiques La douleur est prise en compte, les animaux recevant 30 minutes avant l'opération une injection de Vetergesic (Buprenorphine) de 3pg (soit 10004 par voie intrapéritonéale. Les souris sont ensuite 10 rasées sur l'abdomen. 5x106 cellules ont été greffées dans le foie de souris adultes (8 à 10 semaines) NSG immunodéficientes (NOD.Cg-Prkdc'd Il2rellwe/SzJ) selon les modalités suivantes : - anesthésie à l'isoflurane 2,5 %, désinfection à l'alcool 70% puis incision d'environ 5 mm sur la ligne blanche de la peau au niveau de l'épigastre (les animaux sont placés en décubitus dorsal) ; 15 - la même incision est ensuite réalisée au niveau du péritoine situé sous la peau ; - un lobe du foie est ensuite externalisé par pression des deux côtés de la cage thoracique, afin de procéder à une injection sous la capsule hépatique de 50e maximum d'une suspension cellulaire contenant les 5 millions de cellules dans un liquide stérile (milieu de culture adapté sans sérum) à l'aide d'une aiguille à insuline (Thermo® seringue de 304L aiguille 29G x1/2 20 taille 0,33x12mm) ; - l'organe est ensuite replacé dans la cavité abdominale après rinçage au sérum physiologique ; - les plans péritonéaux et cutanés sont recousus à l'aide de fil de suture 5.0 ; - durant la totalité de l'opération, la température corporelle de l'animal est maintenue à l'aide d'un tapis chauffant 25 Le poids des animaux a été mesuré quotidiennement, et leur état de santé a été surveillé durant tout le protocole. 4 à 5 semaines après la greffe, les souris ont été sacrifiées, le poids du foie et le poids de chaque animal ont été mesurés et le ratio poids du foie / poids de l'animal a été calculé. Les foies, rates, reins, coeurs et poumons ont été fixés dans 4% de formol pour utilisation ultérieure en immunohistochimie. Un total de 60 souris a été greffé en intra-hépatique avec la 30 lignée cellulaire My-La. Dix souris ont été greffées avec chacune des autres lignées cellulaires (HUT78, FE-PD, HH, MAC1, MAC2A) Immunohistochimie 35 Un marquage à l'hématoxyline de Mayer et une immunohistochimie HLA-ABC ont été réalisés sur des sections de 4tm d'épaisseur d'organes de souris fixés au formol inclus dans de la paraffine (anticorps Abcam référence Ab70328 utilisé au 1/100e). Les coupes ont été analysées au moyen du 3044515 9 scanner Pannoramic Scan (3DHISTECH) et du logiciel Pannoramic Viewer 1.15.4 ou en utilisant un microscope LEICA DMR couplé à une caméra NIKON DS-FI2 et le logiciel d'imagerie NIS BR. Traitement in vivo au Méthotrexate 5 2x106 cellules My-La ont été greffées en intra-hépatique dans le foie de vingt souris NSG. Trois jours après la greffe, dix souris ont été traitées avec 0,5 mg/kg de Méthotrexate (Mylan Pharmaceuticals), ou du DMSO en tant que contrôle. Le traitement a été administré quotidiennement par injection intrapéritonéale pendant 12 jours. Après sacrifice (jour 15 après la greffe), les organes ont été fixés au 10 formol 4% pour procéder à des expériences d'immunohistochimie, ou dissociées mécaniquement pour réaliser des cultures cellulaires avant analyse par cytométrie en flux (FACS). Détection de cellules humaines par FACS 15 L'antigène HLA-ABC a été détecté sur les cellules en suspension obtenues à partir des organes des souris en utilisant un anticorps primaire (Ab70328, Abcam) et un anticorps secondaire couplé au marqueur Alexa Fluor® 488 (Ab150153). La détection a été faite par la Plateforme de Cytométrie de l'Université de Bordeaux en utilisant un appareil BD FACS Canto II et le logiciel FlowJo. 20 Analyses statistiques Les données ont été analysées en fonction du nombre de variables dépendantes et de la nature des variables dépendantes et indépendantes. Le test de Wilcoxon-Mann Whitney ou le test de student pour données appariées ont été utilisés pour l'analyse statistique non paramétrique, ces tests étant adaptés 25 pour une taille d'échantillon inférieure à 30. Le seuil de signification a été choisi à P REVENDICATIONS1. Modèle animal non humain de lymphome cutané primitif, dans lequel des cellules de lymphome cutané primitif humain sont greffées dans le foie dudit animal, ledit animal étant un animal adulte. 2. Modèle animal selon la revendication 1, l'animal étant un rongeur immunodéficient. 3. Modèle animal selon la revendication 2, le rongeur immunodéficient étant une souris NSG. 4. Modèle animal selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, les cellules greffées étant des cellules primaires d'un patient atteint d'un lymphome cutané primitif, notamment des cellules de LCP de type T ou de type B. 5. Modèle animal selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, les cellules greffées correspondant à une lignée cellulaire de lymphome cutané primitif. 6. Modèle animal selon la revendication 5, ladite lignée cellulaire étant choisie dans le groupe constitué des lignées My-La, HUT78, HH, SeAx, MAC1, MAC2A et FE-PD. 7. Modèle animal selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, les cellules étant greffées dans le foie sous la capsule hépatique ou par injection via la veine porte. 8. Procédé de préparation d'un modèle animal de lymphome cutané primitif, comprenant l'injection de cellules de lymphome cutané primitif humain dans le foie d'un animal non humain. 9. Procédé selon la revendication 8, comprenant en outre l'élevage dudit animal pendant au moins 3 jours. 10. Procédé selon la revendication 8 ou 9, comprenant l'injection de 2 à 10 millions de cellules. 11. Procédé d'évaluation de l'efficacité d'un traitement contre un lymphome cutané primitif, comprenant: a) l'administration dudit traitement au modèle animal selon l'une quelconque des revendications 1 à 7; et b) la détermination de l'effet dudit traitement sur les tumeurs induites par la greffe dans le foie et/ou la dissémination et/ou la migration desdites cellules dans d'autres organes de l'animal. 3044515 12. Procédé selon la revendication 11, le traitement étant administré de 2 à 5 jours, en particulier 3 jours, après la greffe des cellules de lymphome cutané primitif humain dans le foie du modèle animal. 13. Procédé selon la revendication 11 ou 12, la détermination de l'effet dudit traitement étant réalisée pendant 10 à 15 jours, en particulier 12 jours. 14. Procédé d'étude ou d'évaluation d'une propriété de tumorigenèse, de migration ou d'invasion dans les organes de cellules de lymphome cutané primitif humain, comprenant l'étude de ladite propriété dans le modèle animal selon l'une quelconque des revendications 1 à 7.