Brevet FR3047990A1 — publié le 20170825

INTRODUCTION L'objet de la présente invention concerne une néogoutte (c'est-à-dire une nanoparticule lipidique) comprenant un conjugué peptidique SDKP ou un analogue biologique de nature peptidique de celui-ci, un procédé d'obtention de cette néogoutte, ainsi que son utilisation cosmétique, de préférence topique, en tant qu'agent antirides ou restructurant de la peau. Plus particulièrement, l'objet de la présente invention concerne un conjugué peptidique SDKP ou un analogue biologique de nature peptidique de celui-ci, pour une telle utilisation. Le vieillissement de la peau est un phénomène complexe ayant des origines diverses, qui peuvent être extérieures (exposition au soleil, au froid, agents oxydants, etc.) ou intrinsèques (génétique, protéiques, etc.). La peau est un tissu, constitué de couches (épiderme, derme, et hypoderme, derme et épiderme étant liés par la jonction dermo-épidermique « JDE »), ayant le rôle de barrière de protection entre le milieu intérieur et extérieur. Le vieillissement de la peau se traduit en surface par - apparition de rides et ridules. Ceci est dû en partie par un relâchement des tissus cutanés et sous cutanés et à une perte d'élasticité de ces derniers. Ainsi, le derme assure la fonction fondamentale de cohésion de la peau et constitue une cible privilégiée du traitement antirides. La perte d'élasticité du derme/épiderme s'explique par la conjoncture de plusieurs phénomènes. Elle est due en partie par la diminution de la quantité de collagène et la réduction du taux de fibronectine dans le derme. De plus, les fibroblastes se transforment en fibrocytes ou disparaissent. A ceci, s'ajoute un aplatissement de la JDE qui perd ainsi progressivement ses ondulations caractéristiques diminuant en conséquence l'interface épiderme-derme. Les réseaux moléculaires de la peau se déstructurent : le squelette protéique se fragilise, les kératinocytes basaux montrent une adhérence moindre, ce qui a pour conséquence une altération des fonctions biologiques et de soutien de la JDF. Des moyens variés ont été proposés contre le vieillissement cutané, allant de la protection solaire au renforcement de la JDE en passa.nt par l'activation de ia régénération cellulaire. La molécule Ac-SDKP-OH est un tétrapeptide naturel (Acétyl- Sér ne-Acide aspartique-Lysine-ProlineOH) identifiée pour ses propriétés cosmétiques au niveau de la peau (EP 1 786 386, Bakala et al.). Toutefois, cette molécule s'hydrolyse très facilement, ce qui rend son exploitation commerciale délicate en particulier pour des compositions cosmétiques d'usage commun (i.e. stockées à 3047990 température ambiante, ouvertes et refermées à |a convenance du patient). La molécule est en outre très sensible à l'hydrolyse enzymatique. Il en est de même pour ses analogues couverts par EP 1 786 386. Ainsi, de par sa fragilité, yacoès aux couches les plus profondes de la peau par cette molécule est limite, restreignant ainsi l'effet du traitement. En effet, comme expliqué ci-dessus, le 5 vieillissement de la peau est dû en partie à des altérations de ses couches plus profondes (dermique en part(culier). Une solution envisagée à ceci a été de chercher à limiter l'hydrolyse enzymatique en ajoutant des groupements sur la molécule. Effectivement, d'une manière générale p us on « encombre » autour du peptide, moins on facilite l'hydrolyse par l'enzyme. Néanmoins, dans ce cas, lorsque AcSDKP a été substitué, en laboratoire un kit de dosage ELISA ne fonctionnait plus 10 impliquant que la molécule avait perdu son activité au moins partiellement. Ainsi, la substitution non-contrôlée du peptide AcSDKP ne permet pas de surmonter le problème technique lié à sa fragilité, même si le produit nu est actif en surface de la peau. Ainsi, il a été envisagé d'utiliser une formulation de type émulsioninanoémuision pour surmonter ces difficultés. En effet, i| est connu que la phase lipidique d'une émulsion permet une pénétration 15 améliorée dans la peau de principes actifs. Le document brevet FR 2 934 955 divulgue l'encapsulation d'agents thérapeutiques lipophiles ou amphiphiles dans des nanoémulsions. est divulgué dans FR 2 934 955 des rianocapsules fonctionnalisées par un cyclopeptide (cRGD) couplé à un co-tensioactif de greffage, le distéaroylophosphatidyléthalomaine poly(éthylène glycol) 5000 maléirnide, ce qui montre que ce 20 type de nanoémulsion est tout à fait compatible avec des peptides. Toutefois, le fragment peptidique étant hydrophile, il se positionne dans |a phase aqueuse de l'émulsion, là où il est susceptible de subir une hydrolyse, laquelle hydrolyse n'est absolument pas désirée. Le document brevet FR 2 991 196 divulgue des nanoparticules ciblantes comprenant un coeur constitué d'une phase lipidique (L1) ou d'une phase aqueuse (Al) au moins un agent tensioactif 25 comprenant une partie hydrophile et une partie lipophile ; une membrane interne entourant ledit coeur ; une membrane externe entourant ladite membrane interne ; et au moins un ligand de ciblage comprenant une partie lipophile et une partie hydrophile. De manière surprenante, la Demanderesse s'est aperçue que la stabilité et le profil d'action de la molécule « AcSDKP » pouvait être améliorés si le peptide était modifié pour être incorporé dans des 30 systèmes tels que décrits dans FR 2 934 955 ou encore FR 2 991 196 en remplaçant l'acétyle en N- terminale par une chaîne grasse, ou en ajoutant une chaîne grasse en C-terminale. Ce qui est particulièrement surprenant dans la présente invention, c'est que la Demanderesse a employé cette 3047990 technologie, en particulier celle du brevet FR 2 991 196, non pas pour enfouir le peptide dans la phase huileuse, là où la/les enzymes ne peuvent accéder, mais dans la phase aqueuse, accessible. En particulier dans l'utilisation des nanoparticules selon FR 2 991 196, au lieu d'encapsuler le peptide SDKP dans le coeur de la nanoparticule (pouvant être une phase aqueuse), la Demanderesse a formé 5 une nanoparticule au coeur lipidique, et a greffé une chaîne grasse à SDKP pour l'incorporer dans la nanoparticule de manière à ce que SDKP soit disposé vers l'extérieur de la nanoparticule. La Demanderesse s'est aperçue alors qu'en traitant des échantillons de peau, de manière surprenante, la couche dermique de la peau était atteinte, alors que le peptide aurait dû être dégradé avant d'atteindre cette couche. L'activité de SDKP sur la peau a été augmentée de manière significative 10 lorsque SDKP est placé vers l'extérieur d'une néogoutte au coeur lipidique comprenant au moins un agent tensioactif; une membrane interne entourant ledit coeur ; et une membrane externe entourant ladite membrane interne. Ainsi, la Demanderesse ne comprend pas encore très bien à quoi est due cette activité. Vraisemblablement l'activité (et/ou l'absence de fragilité) est au moins partiellement liée à la taille de la chaîne grasse greffée sur le brin peptidique SDKP et/ou la disposition originale du 15 peptide dans la phase aqueuse extérieure de la néogoutte. A cet égard, l'enseignement divulgué dans FR 2934955 serait tout à fait utilisable avec les nouvelles molécules SDKP greffées de la présente invention. RESUME DE L'INVENTION 20 L'objet de la présente invention concerne un conjugué peptidique, préférentiellement amphiphile, comprenant un brin peptidique de formule SDKP, ou un analogue biologique de celui-ci de nature peptidique, caractérisé en ce qu'au moins une chaîne grasse en C13-Cso , Préférentiellement en C14- C25-C30, ou encore en C20-C25, linéaire ou ramifiée, saturée ou insaturée, est greffée à l'extrémité N et/ou C terminale du brin peptidique, par exemple par l'intermédiaire d'un groupement 25 CO°=- et ou d'un atome d'oxygène. L'objet de la présente invention concerne en outre une néogoutte comprenant : un coeur constitué d'une phase lipidique (L1); au moins un agent tensioactif comprenant une partie hydrophile et une partie lipophile ; 30 une membrane interne entourant ledit coeur constitué d'une phase lipidique (L2), comprenant la partie lipophile dudit agent tensioactif; 3047990 4 une membrane externe, entourant ladite membrane interne, constituée d'une phase aqueuse (A1) comprenant la partie hydrophile dudit agent tensioactif ; et au moins un conjugué peptide comprenant un brin peptidique de formule SDKP, ou un analogue biologique de celui-ci de nature peptidique, caractérisé en ce qu'au moins une chaîne grasse en C3-050, préférentiellement en C4-C40, en C3-C30, ou encore en CFC25, linéaire ou ramifiée, saturée ou insaturée, est greffée à l'extrémité N et/ou C terminale du brin peptidique, par exemple par l'intermédiaire d'un groupement CO= et/ou d'un atome d'oxygène et ledit conjugué peptidique est tel que sa partie lipophile est dans la phase lipidique L2 et sa partie hydrophile dans la phase Al. 10 De plus la présente invention a pour objet un procédé de fabrication d'une néogoutte telle que définie ci-dessus, caractérisé en ce que ledit procédé comprend les étapes suivantes a. préparation d'une phase lipidique et d'une phase aqueuse, l'une au moins des deux phases comprenant un agent tensioactif, l'une au moins des deux phases 15 comprenant le brin peptidique de formule SDKP, ou un analogue biologique de celui- ci de nature peptidique, greffé d'une chaîne grasse telle que définie présentement ; b. émulsification de ladite phase lipidique et de ladite phase aqueuse conduisant à la formation de néogouttes, éventuellement sous pression ; c. récupération des néogouttes formées. 20 Ainsi, l'oojet de la présente invention concerne une formulation cosmétique comprenant une ou plusieurs néogouttes telles que définies présentement. 30 En outre, la présente invention concerne une nano-émulsion comprenant : au moins une phase lipidique dispersée (L3), et au moins une phase aqueuse continue (A2) dans laquelle la phase aqueuse comporte au moins un tensioactif, caractérisée en ce qu'à l'interface entre la phase aqueuse (A2) et la phase lipidique (1.1) se trouve au moins un conjugué peptidique selon la présente invention et/ou en ce que ladite nano-émulsioncnmprend au moins une néogoutte selon la présente invention dans laquelle éventuellement les lipides de (L.1) et (L3), ou (12) et (L3) sont identiques. L'objet de la présente invention concerne ega ement une utilisation cosmétique de préférence par application topique, d'un conjugué peptidique, d'une néogoutte, d'une nano-émulsion ou d'une 3047990 formulation cosmétique selon la présente invention pour restructurer ou préserver l'aspect de la peau, en particulier en profondeur au niveau dermique. Plus précisément, l'objet de la présente invention concerne ainsi une utilisation cosmétique telle que ci-dessus caractérisée en ce qu'il s'agit d'une utilisation antivieillissement. DEFINITIONS « Conjugué peptidique brin pepticiique » Un « brin peptidique » est un polymère d'acides aminés, lesquels acides aminés sont reliés entre eux par au moins une liaison peptidique ou pseudopeptidique. Une « liaison peptidique » relie un 10 groupement carbonyle CO et un groupement aminé NH dans un peptide. La liaison peptidique est donc une liaison amide reliant deux acides aminés entre eux. Ainsi les acides am nés sont dits « condensés » car ils ont perdu au moins une molécule d'eau pour former la ou les liaisons peptidiques dans lesquels ils sont impliqués. Un « conjugué peptidique » est un brin peptidique conjugué, i.e. lié, à un fragment moléculaire d'une autre nature, par exemple une chaîne hydrocarbonée en C12 ou en 15 C16. Il est admis dans l'art que un peptide comprenant un nombre X d'acides aminé, il s'agit en réalité d'un nombre X d'acides aminés condensés, i.e. ayant chacun perdu une molécule d'eau(s'ils sont reliés !es uns aux autres par une liaison peptidique, typiquement). « Liaison pseudo peptidique » Ainsi, un peptide contient généralement entre 2 et environ quatre-vingt acides aminés, vo ne plus, la 20 limite supérieure n'étant pas clairement définie. Un peptide comprenant deux résidus d'acides aminés est un dipeptide ; un peptide comprenant trois résidus d'acides aminés est un tripeptide ; un peptide comprenant deux résidus d'acides aminés est un tétrapeptide ; et ainsi de suite. L'expression « acide aminé » comprend toute molécule présentant au moins un acide carboxylique, au moins une amine et au moins un carbone reliant l'amine et l'acide carboxylique. Des acides 25 aminés pouvant être utiUsésdons|ecadrede la présente invention sont tous types d'acides aminés, qu'ils soient naturels ou non, et en particulier ceux trouvés dans la séquence « SDKP ». Ainsi les acides aminés qui seront plus souvent retrouvés dans le cadre de la présente invention seront choisis parmi la sérine (« Ser », «S »), l'acide aspartique (« Asp », « D »), la lysine (« Lys », « K >), la proline (« Pro », « p e) leurs dérivés tels que leurs énantiomères, leurs diastéréoisomères, leurs isomères de 30 positions, et leurs formes dites « protégées ». 3047990 6 Par formes dites « protégés » d'acides aminés, il est compris que les groupements fonctionnels de ces acides aminés sont substitués ou masqués par des groupements dits protecteurs adéquats choisis parmi ceux cités dans les ouvrages de référence Greene, uProtective Groups |n Organic Synthesis", Wiley, New York, 2007 4e édition et/ou Harrison et al. "Compendium of Synthetic Organic IVIethods'-, Vol. 1 à 8 1 Wiley & sons, 1971 to 1996). Par « isomère de position », il est compris que certains des acides aminés tels que l'alanine peuvent se présenter avec des variations structurelles bien connues de l'homme du m tier. Par exemple, l'alanine peut bien entendu se présenter sous sa forme alpha « a-Ala », mais également béta « 10 (beta)-Ala » 5-Ala ». A l'exception du cas de l'alanine qui comprends dans le cadre de la présente invention à la fois la forme alpha et la forme béta, les formes alpha d'acides aminés naturels sont toutefois privilégiées. Dans|ecadnpde la présente invention les « acides aminés naturels » sont Lys, Ala,Gin, Hiu. La glycine 15 peut être considérée comme acide aminé naturel, mais e e ne comprend pas de carbone asymétrique. Par« énantiomères ou « diasté éoisomères »), i|estcomphsque les carbones asymétriques du squelette peptidKiue sont de configuration R ou 5 définissant ainsi des acides aminés (condensés) L 20 ou D. Em o pour des questions de coûts de production liés à la pureté énantiomérim_ ou diastéréornérique des acides aminés engagés dans ka synthèse peptidique, il peut être avantageux par exemple de synthétiser les peptides selon la présente invention avec un/des mélanges d'acides 25 aminés de formes D et L. Le résultat de la synthèse est donc un mélangediastéréomérique de peptides selon la présente invention. Lin objet de présente invention concerne donc un mélange diastéréoisomérique de peptide ayant au moins un acide aminé condensé CO_ en toutes proportions. Avantageusement le ou les acides aminés condensés est/sont racémique(s). 30 Par « mélange racémique », il est compris que le m ange d'énantiomères est d'environ 50/50 % en ds de chacun des énantiomères. Le terme « environ » comprend des variations de ± 10% pour chacun des énantiomères dans le mélange. Ainsi, un mélange racémique » couvre un mélange 40/60% en poids d'un mélange de Po 3047990 7 deux énantiomères. N.B. : En toute rigueur, l'expression « mélange DA concerne les acides aminés avant leur incorporation dans les peptides. Toutefois, expérimentalement, l'utilisation d'un mélange racémique d'un acide aminé dans la synthèse d'un peptide de petite taille, comme c'est le cas selon la présente invention, permet d'obtenir un mélange d'environ 50/50% de diastéréoisomères du peptide synthétisé. Ainsi, par abus de langage, il est commun dans le domaine de faire référence à un « mélange racémique » d'un acide aminé condensé dans un peptide donné. Il est évident qu'il s'agit dans ce cas d'un mélange de diastéroisomères comme expliqué ci-dessus. De manière avantageuse, les proportions d'acides aminés utilisés pour la synthèse des peptides selon 10 la présente . ntion sont supérieurs ou égaux à 80%/20% en poids de chacun des énantiomères par rapport à la quantité totale de l'acide aminé (c'est-à-dire L et D) considéré. Dans le cadre de la présente invention, pour considérer qu'un acide amin st L ou D, il faut qu'il ait une proportion supérieure ou égale à 90%j10% en poids de chacun des énantiomères par rapport à 15 la quantité totale de l'acide aminé (c'est-à-dire L et D) considéré. Préférentiellement, les acides aminés « naturels » des peptides de formule (I) sont de forme L. Les peptides relativement restreints en nombre d'acides aminés, comme ceux selon la présente invention, sont relativement faciles à synthétiser en phase liquide et/ou sur support solide. Ceci est 20 un avantage indéniable de la présente invention. Par « synthèse en phase liquide », il est compris les techniques d. imie organique en phase liqu de à toutes échelles de grandeurs/volumes/poids confondues (c'est-à-dire des techniques adaptées à l'échelle du laboratoire de recherche - par exemple le milligramme, jusqu'aux quantités industrielles - 25 par exemple la tonne). Par « synthèse survupportso|ide » il est compris les techniques de chimie organique sur support solide, et en particulier les techniques adaptées a |a synthèse peptidique sur support solide. Par exemple, des techniques de synthèse pepticlique sont décrites dans l'ouvrage de Paul Lloyd- 30 Williams, Fernando Albericio, Ernest Giralt, "Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins", CRC Press, 1997 ou Houben- Weyl, "Methods of Organic Chemistry, Synthesis of Peptides and Peptidomimetics", Vol E 22a, Vol E 22b, Vol E 22c, Vol E 22d., M. Goodmann Ed., Georg Thierne Verlag, 2002. 3047990 Typiquement, ces synthèses tant en phase liquide que sur support solide) passent par une stratégie couplage-déprotection ». Cette stratégie consiste en l'activation de l'extrémité C-terrninale (c'est-à-dire le COOH) d'un acide aminé/brin pepticlique, de sa mise en présence avec un autre acide aminé ou brin peptidique, dont l'extrémité N-terminale c'ext'à'dire le NH2) est libre. L'activation se fait par des techniques classiques de couplage par l'utilisation de DCC, de BOP, de PyBOP, d'anhydrides, d'anhydrides mixtes, chlorure d'acides, etc. Ces techniques de couplage peuvent être utilisées en variantes pour introduire des chaînes grasses reliées au reste de la molécule par l'intermédiaire de groupement CO ou oxygène. 10 Les acides aminés ou brin peptidiques engagés dans la réaction sont conveneblement protégés afin de permettre ce couplage sélectivement entre les deux extrémités N et C-terminales voulues. Les fonctions pouvant réagir sont bien entendues masquées ou liées à des groupements protecteurs adéquats, tels que décrits ci-dessus. L'étape de « couplage-déprotection » est répétée autant de fois que nécessaire avec les acides amines/brins peptidiques voulus afin d'obtenir le peptide voulu. Le peptide final, s'il est supporté par une résine, est détaché. Les groupements protecteurs sont i3brs retirés. Les deux dernières étapes peuvent être faites en même temps dans le cas de synthèse sur support solide. De telles stratégies sont bien connues dans l'état de la technique. Par exemple, la protection du groupe amine de l'acide 20 aminé peut être effectuée par un groupe tert-butyloxycarbonyle (désigné ci ou un groupe -9-fluorénylméthyloxycarbonyle désigné ci-après par Fmoc- représentéper la formu e : NHR N.B. : « NFIR ei-cl -sus repésentant l'amine gr ëeoar|eF OC. 25 La protection est effectuée selon les procédés connus de l'art antérieur. Par exemple, la protection par le groupe Boc- peut être obtenue en faisant réagir l'acide aminé avec le di-tert-butylpyrocarbonate (Boc20). Ces techniques sont très courantes dans le domaine, s bien qu'il est régulièrement fait mention de « 30 stratégies Bec ou Fmoc » pour la synthèse des peptides. 3047990 Par exemple, les peptides se on la présente invention sont synthétisés par un enchaînement de cycles de déprotection/coupia-e préférentiellement par la stratégie Fmoc tBu. L'avancement de chaque étape de déprotection/couplage est suivi par les techniques usuelles telles que la spectrométrie de masse. Avantageusement, l'extrémité N-terminale libre du peptide n'ayant pas réagie dans la réaction de couplage, est acétylée à l'aide d'une solution d'anhydride acétique (étape dite de « capping »). 10 L'étape finale de déprotection des chaînes latérales est effectuée préférentiellement en milieu acide, plus préférentiellement en présence d'acide trifluoroacétique (TFA). Avantageusement, la synthèse s'effectue sur support solide, tel que sur des résines Rink amide, CTR (de type « chlorotrityle »), Wang, etc., et l'étape de déprotection finale acide permet en outre de 5 détacher (« cliver ») le peptide de la résine. Les techniques de purifications usuels de peptides, tels que la précipitation, la cristallisation, la chromatographie liquide (en phase normale ou préférentiellement en phase inverse et à haute pression) sont appliquées aux peptides obtenus. 20 « Peptide SDKP » Le terme « SDKP » représente un brin peptidique de structure : 25 Avanta ..usement les acides aminés sont de configuration L : 3047990 10 Les groupements fonctionnels (e.g. NH2, OH, COOH) peuvent être sous forme protonée ou déprotonée selon le pH environnant. Ces groupements peuventégalement être protégés par des groupements protecteur classiques tels que trouvés dans les ouvrages "Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley, New York, 2007 4e édition et/ou Harrison et ai. "Compendium of Syntnetic Organic Methods", Vol. 1 à 8 U. Wiley & sons, 1971 to 1996}. Ainsi typiquement, les fonctions COOH peuvent être protégés par un groupement ester tel que OtBu, OMe, OEt, ou encore 0-benzyle, la fonction OH par un éther de tBu' Me, Et, ou benzyle, et NH? par un groupement acido-labile tel que boc oa basolabile tel que Fmoc. « Analogue biologique » Dans le cadre de la présente invention, un «analogue biologique» est un composé présentant des propriétés biologiques similaires à la molécule |nitia|e considérée, ici Ac-SDKP-OH. Dans le cadre de la présente invention, cet analogue biologique est un analogue biologique de nature peptidique, 15 présentant avantageusement « SD », « SDK », ou « SDKP » dans sa séquence. De manière préférée, le brin « SD « SOK », ou v SDKP » est compris dans les 1O derniers acides aminés de l'extrémité N- terminale de l'analogue biologique peptidique. De manière plus préférée, le brin « SD », « SDK », ou « SDKP » est compris dans les 5 derniers acides aminés de l'extrémité N-terminale de l'analogue biologique peptidique. De manière encore plus préférée, |e brin « SD », « SDK », ou « SDKP 3> st à 20 l'extrémité N-terminale de l'analogue biologique peptidique. Avantageusement, l'analogue biologique de nature peptidique comprend moins de 20 acides aminés, plus avantageusement moins de 10 acides aminés, et encore plus avantageusement, il comprend moins de 6 acides aminés, ou moins de 5 acides aminés. Les analogues peptidiques de Ac-SDKP sont 25 bien connus dans l'art et illustrés par exemple dans les articles Ma X et al. (Int I Cardiol. 2014 Aug 1;175(2):376-8), Zhuo ]Let al (Am Physiol Heart Cire Physiol. 2007 Feb;292(2), Gaudron S. et a|. (Stem Cells, 1999,17, 2,100-106 ;.1. Med. Chem., 1997,40, 24, 3963-3968) ou encore dans la demande de brevet internationale W02004096292 (et les références dont il est fait mention dans cette demande). 3047990 11 Par exemples des analogues identifiés dans l'art antérieur Ac-SDKP-OH sont : N-acétyl-Ser(CH2- NH)-Asp-Lys-Pro-OH ; N-acétyl-Ser-Asp(CH2-NH)-Lys-Pro-OH ; N-acétyl-Ser-Asp-Lys(CH2-NH)-Pro-OH ; N- acétyl-Ser-Asp-Lys-Pro-NH2; N-acétyl-Ser-Asp-Lys-OH. Il est implicite dans le cadre de la présente invention que le fragment « Ac dans ces molécules peut être remplacé par une chaîne grasse. « Chaîne grasse » Par « chaîne grasse », selon la présente invention, il est compris toute chaîne linéaire ou ramifiée de nature organique ou (partiellement) inorganique hydrophobe, préférentiellement comprenant au moins 3 atomes (lorsque cette valeur n'est pas précisée) liés successivement les uns aux autres. Cette 10 chaîne grasse peut être hydrocarbonée exclusivement, ou comprendre des hétéroatomes tels que 0, S, Si, N, F, Cl, Br, I ou P. De manière préférée, les chaînes grasses selon la présente invention sont des chaînes hydrocarbonées exclusivement, éventuellement insaturées, pouvant comprendre un ou plusieurs 15 noyaux aromatiques (i.e. phényle). Ainsi, la chaîne grasse peut être en C11-Cso linéaire ou ramifiée, saturée ou insaturée. « Alkyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C13-050 » 20 L'expression v alkyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en o'[5», représente une chaîne hydrocarbonée saturée, linéaire ou ramifiée, comportant de 13 à 50 atomes de carbone, comme par exemple un groupement n-tridécyle (C13 n-tétradécyle (C14), n-pentadécyle (C15), nhexadécyle (16). n-heptadécyie (C17), n-octadécyle (C18), n-nonadécyle (C19), n-eicosyle (C20), 1- méthyl-dodécyle (C13), 2-méthyl-dodécyle (C 3), 1-éthyl-undécyle (C13), 2-éthyl-undécyle (C13), etc. 25 Les alkyles peuvent être substitués ou non. Préférentiellement les alkyles peuventêtre substitués par un ou plusieurs halogènes tels que F, CI, Br, I, ou par d'autres fragments tels que OH, SH, NO2, COOH. Les alkyles peuvent en outre comprendre ou consister en une partie cyclique., tel qu'un motif cyclohexyl, ou cyclopentyl. 30 « Aryle » Par groupement « aryle », on entend un groupement aromatique, comportant de préférence de 5 à 18 atomes de carbone, comprenant un ou plusieurs cycles et comprenant éventuellement un ou plusieurs hétéroatome(s) en particulier un oxygène, un azote ou un soufre, comme par exemple un 3047990 12 groupement phényle, furane, indole, pyridine, naphtalène, anthracène, etc. De préférence, par groupement « aryle », il est compris le groupement phényle. « Alkyle-aryle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en Cll-050 » 5 Dans la présente invendon, "expression « Alkyle-aryle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C21-05,0 » représente un fragment alkyle en Ci à C45 comme défini ci-dessus, dans lequel au moins un atome d'hydrogène a été remplacé par au moins un groupement aryle, dans lequel la somme totale des atomes de carbones présents dans l'alkyle-aryle est compris entre 21 et 50. Les alkyle-aryles selon la présente invention peuvent être substitués ou non. Préférentiellement les alkyle- 10 aryles selon la présente invention peuvent être substitues par un ou plusieurs halogènes tels que F, Cl, Br, I, ou par d'autres fragments tels que OH, SH, NO2, NH?, COOH. Par exemple, les alkyles en C1 C4s substitués par un mu plusieurs aryles comprennent les groupements 1-phénylheptyle, 2-phénylheptile, 3-phénylheptyle, 4-phénylheptile, 5-phénylheptyle, 6-phénylheptile, 7-phénylheptyie, 1-phényloctyle, 2-phényloctyle, 3-phényloctyle, 4-phényloetyle, 5- 15 phényloctyle, 6-phényloctyle, 7-phényloctyle, 8-phényloctyle, 1-phénylnanyle, 2-phénylnonyl, etc., 1-naphthyl-propyle, 2-naphthyl-propyle, 3-naphthyl-propyle, 1-anthracyl-methyle, etc. De manière préférée, |es alkyles en Cl à C4,-, substitués par un ou plusieurs aryles son, de alkyles en C7-C44 substitués par au moins un phényle. De manière encore plus préférée, les alkyles en C1 à C45 substitués par un ou plusieurs aryles sont de alkyles en C12-C44 substitués par au moins un phényle. 20 « Alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C13-05c » Dans la présente invention, xpression « alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en Ci2,-05c » représente un fragment hydrocarboné comprenant au moins une insaturation,c'eot-à'di,e une double raison covalente. Les alcényles selon la peuvent être substitués ou non. Préférentiellement les alcènyles peuvent être substitués par un ou plusieurs halogènes tels que F, Cl, 25 Br, 1, ou par d'autres fragments tels que OH, SH, NO2, NH2. COOK Des exemples de tels alcényles sont un groupement n-1-tridécènyle (C13), n-2-tridécènyle (C13), n-3- tridécènyle (C13), n-4-tridécènyle (C13), n-5-tridécènyle (C13)' n-6-tridécènyle (C13). n-7-tridécènyie (C13), n-8-tridécènyle (C13), n-9-tridécènyie (C13), n-10-tridécényle (C13 n-11-tridécènyle (C13), n12-tridécènyle (C13), n-1-tétradécènyle (C14), n-1-pentadécényle (C15), 1-hexadécènyle (16 n-1, heptadécènyle (C17), 1-octadécènyle (C18), n-1-nonadécènyle (C19), n-1-eicosènyle (C20), etc. 3047990 13 Les alcènyles peuvent être substituéa ou non. Préférentiellement i.ealcenyles peuvent substitués par un ou p|usiowco halogènes tek ,, Br I ou par d'autres fragments tels que H, NO?' NH2, COOH. « Guanidine » ou « guanidini rn » un groupemen guanidine es1 représenté ile : NH H2N-- Ce groupement esttypiquement relié à une autre molécule par l'un des atomes d'azote dans !a représentation d-dessus. La protanation de cette guanidine forme un cation stabilisé par résonance. La charge positive, dans ce cas permet une lipophilicité à ce groupement. C'e-,t typiquemunt le cas de:s ret-onépar exemples, ugnicriter |a |ipophi|icîté d'un brin peptidiqu,... Sels narmace ~entaocectab|es» selon la presenua invention, expression «se|s pharmaceutique. -erit acceptb!es » concerne un sel d'addition d'acide formé de préférencp par des acides libresnarmacounquement acceptables. Un sel d'addition d'acide peut e e obtenu cfacide(s) ort.anique(s) comme l'acide 15 chlorhydrique, l'acide ni Ide ! ,5ohonque acide ..i'furin cide brd l'acide iodhydrique, l'acide nitreux et l'acide phosphoreux, ou à d'acide(s rganique(s) non fexique(s tels qu'un composés que. mono / dicarboxy un groupe phényle a|canoate substitué, hvdroxy --leanoate, alkandloate, les acides nron-imic.i aliphatiqi. aromatiques des acides 20 s sels non toxiques pharrnaceutpguernent peuvent ::ulfate, pyrosuifate, un bisulfate, sulfite un bisulfite, un nitri--)te un micrio ydrcgénopllospilate, rilinydrogénophosnhte, un .rnétaphouina-itc, i3n ovrophospnatc, chlorire, u, bromure, un te. , , fluorure, i, ,,p, propionate décanoate, caprylate, un acrylate , un formia i isobutylate, vn cap, 'pU3r,-,:-D: un propiobtr, un oxalate, un maLonate suecine 25 rdr.,:ow, b,.:- nzoa te, cr-k un rnàthyibenzeate, un dinitrobenzoate, , oxybenzdne, un nné.tho;r,:%,fhnrizo n nliti-i!;-Dte, un téréphtArte, benzènesulfonate, 1 toluèricsulfen , un chloroben nc un xyienesultonate, un phényLacéta , un phénylpropionate, niu. ; un citrate. 1dctate, , hydroxybutylate, ..i g1ycoiate malate, un tartrate, un 3047990 14 méthanesulfonate, u propanesulfona'e, un aphtalène-1-sulfonate, un naphtal ne-2-sulfonate et un mandélate. Les sels d'additions acides de la présente invention peuvent é e prépares par les procédés classiques ison n us de l'homme du metie Par exemple, les composés dE la présente invention sont dissous dans une solution aqueuse acide. Ensuite, le sel est obtenu par précipitation de la solution en utilisant un solvant organique miscible à l'eau tel que le méthanol, l'éthanol, l'acétone ou Ilacétonitrile. Les sels peuvent être obtenus par tout autre moyen connu. Des sels pharmaceutiquement acceptables métalliques peuvent être préparés en utilisant une ou plusieurs bases. Le métal alcalin ou le sel de métal alcalin peut etre obtenu par les procédés suivants: 10 dissolution du composé dans un excès d'hydroxyde de métal alcalin ou dans une solution d'hydroxyde de méta: alcalino-terreux; filtration du sel de composé non soluble; évaporation de la solution et séchage de ceitii-ci. A ce moment, le sel de métal est de préférence préparé dans une forme pharmaceutiqueme. appropriée e que qu'un sel de sodium, potassium ou sel de calcium. « Néogoutte » 15 Dans le cadre de la présentee invention, les pcptidcs actifs peuvent être insérés dans une nanoparticule telle que divulgué dans FR29911 Cette nanoparticule comprend plusieurs phases lipidiques/aqueuses. De par ses propriétés particulières trouvées avec peptides de l'invention, la Demanderesse a attribué le nom de « néogoutte » à ces nanoparticules. « Phase lip 20 Par « phaselipidique» selon la présente invention, i| est compris toute phase présentant une affinité avec les solvants organiques et les lipides (huiles ou cires) et évitant d'être en contact avec un solvant polaire, comme Veau. Il peut s'agir des corps gras tels que définis dans FR2934955 et FK 91196. Par exemple, |a phase lipidique peut comprendre des phospholipidiques tels que définis dans en page 7, lignes 7 à 13 de FR2934955, de la lécithine telle que définie en page 7, lignes 14 à 1Q 25 de FR2934955, des acides gras tels que définis en page 7, lignes 20 à 25 de FR2934955 les lipides amphiphnes tels que divulgué de la page 13, ligne 8 à page 14 ligne 30 de FR2991196. « Agent tensioactif » Dans le cadre de la présente invention, l'expression « agent tensioactif' ,esprésente une molécule amphiphile présentant deux parties de polarités différentes, yun lipohile (apolaire et l'autre 30 hydrophile (polaire}. L'agent tensioactif peut être ionique, non-ionique ou zwiterrionique cationique 3047990 15 et anionique). Par exemple, les tensioactifs selon la présente invention peuvent être choisis dans ceux divulgués dans FR2991196 et/ou FR2934955, tels que ceux trouvés de la page 4, ligne 28 à page 6, ligne 3 de FR2991196, ou page 11, ligne 19 à page 12 ligne 11 de FR 2934955. « Voie topique » Par « voie topique », il est compris l'administration des peptides et/ou des compositions contenant les peptides directement sur les zones de peau à traiter. « Utilisation antivieillissement » L'objet de la présente invention a notamment pour but une utilisation antivieillissement, i.e. le vieillissement intrinsèque de la peau. 10 Par « vieillissement intrinsèque de la peau », il est compris qu'il s'agit d'une altération naturelle de la peau en fonction du temps, se caractérisant par l'apparition de rides, ridules, crevasses, etc. L'objet de la présente invention concerne également un kit antivieillissement. Par « kit antivieillissement » il est compris un dispositif comprenant un ensemble d'éléments dont au moins un élément est destiné à réparer le vieillissement intrinsèque de la peau et dont au moins un 15 élément comprend ou consiste en un peptide selon l'invention. Préférentiellement ledit peptide est compris dans une composition selon l'invention. DESCRIPTION DETAILLEE L'objet de la présente invention concerne plus particulièrement un conjugué peptidique tel que 20 décrit ci-dessus, caractérisée en que ledit conjugué est de formule (I) suivante : R1-X1-X2-X3-X4-A1-R2 dans laquelle : , étant du côté N-terminal, est un atome d'hydrogène, ou une chaîne grasse choisie 25 parmi un groupe alkyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en Co-Cm, un groupe alkyle-aryle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en Cn-050, un groupe alcényle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C13-050, un groupe R3-00-, R3° °CO- ou R3-000- dans lequel R3 est un groupe alkyle ou alcenyle substitué ou non 3047990 16 substitué, linéaire ou ramifié en C:3-C4n |es substitutions incluant F, Cl, ou tout hétéroatome ou groupe d'hétéroatomes lipophile tel qu'une guanidine ou un guanidinium, st un condensat de L)-sérine, - X2 est un conclensat de (L) etiou (D cide aspartique ou (L) et/ou (D) acide X3 est un condensat de (L) et/ ou (D) lysine' L) et/ou (D) arginine ou ( D) ornithine, - X. est un condensat de (L) et ou (D) proline, - X4, ou X3 et étant optionnellement absents, 10 - les liaisons reliant X X-, X3 .e cas échéant, et X3 à Xe, le cas échéant, pouvant être des liaisons peptidiques ou pseudopeptidiques, - A1 est une I a son covalente, un groupement NH ou un atome d'oxy e, R? est un atome d'hydrogene, ou une chaîne grasse choisie parmi un groupe alkyle substitué ou non substitué linéaire ou ramifié en Ci.3-05c, un groupe alkyle-aryle 15 substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C7--Cbu, un groupe alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C13-05D, un groupe RI-CO-, ou R4-000- dans lequel R4 est un groupe alkyle ou alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C-les substitutions incluant F., Cl, ou tout hétéroatome ou groupe d'hétéroatomes lipophile tel qu'un groupement guanidine ou guanidinium, 20 - RI et R2 ne pouvant être conjointement des atomes d'hydrogène, ou l'un de ses sels pharma ceutiquement acceptables. Par « condensat », il est compris dans le contexte de la présente invention la partie restante de l'acide aminé suite à la formation de la liaison peptidique entre deux acides aminés (dans le cas d'une réaction entre deux acides aminés), une molécule d'eau ayant té éliminée. Par exemple dans 25 le cas de la serine : 3047990 17 Condensat de Serine Dans la figure ci-dessus, chaque étape de condensation, l'élimination de H20 implique que OH ou H est fourni par la serine. Néanmoins, même si l'acide aminé n'est pas condensé sur ses deux extrémités (N-terminale et C-terminale), par abus de langage, il est considéré qu'il s'agit d'un condensat. Ceci explique d'ailleurs pourquoi en chimie peptidique, la nomenclature s'accorde à ajouter un H en N-terminai ou un OH C-terminal, In cas échéant : Mn-OH. Tout ceci fait partie des connaissances générales de l'homme du métier. 10 L'objet de la présente invention concerne également une néogoutte telle que définie ci-dessus caractérisée en ce que le conjugué peptidique couplé à cette néogoutte est de formule (I) telle que définie ci-dessus, dans laquelle : R1, étant du côté N-terminal, est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C3-050, un groupe alkyle-aryle substitué ou non 15 substitué, linéaire ou ramifié en C8-050, un groupe alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C3-050, un groupe R3-00-, R3-000- ou R3-000- dans lequel R3 est un groupe alkyle ou alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C3-050, les substitutions incluant F, Cl, ou tout hétéroatome ou groupe d'hétéroatomes lipophile tel qu'un groupement guanidine ou guanidinium, et 20 R2 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C3-050, un groupe alkyle-aryle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en CB-050, un groupe alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C3-050, un 1 ère condensation (N-terminal) 2énle condensation (C-terminal) Condensa de Serine Condensat de Sérne 1120) Sérine 1 ere condensation N H NE12 condensation :N-terminal) H O (C-terminal) 3047990 18 groupe ou Ri-OCO- dans lequel R4 est un groupe alkyle ou alcenyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C3-050, les substitutions incluant F, Cl, ou tout hétéroatome ou groupe d'hétéroatomes lipophile tel qu'un groupement guanidine ou guanidinium. De manière préférée, l'objet de la présente invention concerne en outre une néogoutte telle que définie ci-dessus caractérisée en ce que Ri est un groupe alkyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C6-C,c, préférentiellement en C u un groupe R3-CO-dans lequel R3 est un groupe alkyle ou alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en Cs-C30, préférentiellement en Cg-C20, les substitutions incluant F, Cl, ou tout hétéroatome ou groupe d'hétéroatomes lipophile tel 10 qu'un groupement guanidine ou guanidinium. En outre, l'objet de la présente invention concerne des neogouttes telle que définies ci-dessus, comprenant un conjugué peptidique selon la présente invention, préférentiellement de formule A)' caractérisé en ce que le peptide est présent en surface de la néogoutte. 15 De manière typique, lors de la fabrication dcsnéneouttesre|on la présente invent on, le conjugué peptidique (I) se réparti entre la phase aqueuse libre et la couche superficielle desdites néogouttes. En d'autres termes, une portion du conjugué peptidique (I) s'attache à la néogoutte par le biais de sa chaîne grasse et l'autre portion de conjugué peptidique I) reste libre dans la phase aqueuse. Cette repart tion du conjugué peptidique sPlon la présente invention varie selon la nature de la chaîne 20 grasse sur ledit conjugué peptidiqueplus la chaîne grasse est grande, naturellement, plus la proportion de conjugué peptidique lié à la néogoutte est grande. Cette répartition du conjugué peptidique varie également, mais dans une moindre mesure selon |a nature de la phase Li et/ou Ainsi, s'il faut au minimum que la chaîne grasse du conjugué peptide (|) comprenne 3 atomes de carbone pour commencer à constater des néogouttes liées avec des conjugués peptidique (I) 25 conjugué peptidique (l) comprenant une chaîne grasse de 10 à 15 atomes de carbone induira de manière typique un taux de liaison aux néogouttes compris entre 0 et 50% en poids. Par exemple un conjugué peptidique (I) comprenant une chaîne grasse de 12 atomes de carbone induira typiquement un taux de liaison aux néogouttes d'environ 25 à 30% en poids dans les conditions classiques selon la présente invention. Ainsi, de manière générale, la néogoutte telle que définie ci- 30 dessus est caractérisée en ce qu'elle comprend entre 5 et 95% en poids de conjugué peptidique (I à la néogoutte, avantageusement entre 10 et 80% en poids, plus avantageusement entre 20 et 50% en poids, encore plus avantageusement entre 25 et 50% en poids vis-à-vis de la quantité totale de ugué peptidique 3047990 19 De manière avantageuse, les néogouttes selon la présente invention sont diluées dans un solvant aqueux, préférentiellement comprenant au moins 50% d'eau en poids/poids total, plus préférentiellement au moins 75% d'eau, encore plus préférentiellement au moins 90% d'eau, ter qu'au moins 95%, au moins 97% ou au moins 99% d'eau. De manière préférée, cette dilution est d'au moins 1 1 en poids poids néogouttes : poids solvant aqueux), préférentiellement au moins 1 : 5 (poids néogouttes : poids solvant aqueux), plus préférentiellement au moins 1 7 (poids néogouttes : poids solvant aqueux) De manière toute préférée, cette dilution est comprise entre 1 : 5 en poids (poids néogouttes : poids solvant aqueux) et 1 : 100 (poids néogouttes : poids solvant aqueux), avanatageusement comprise entre 1 : 5 en poids (poids néogouttes : poids solvant aqueux) 10 et 1 : 50 (poids néogouttes : poids solvant aqueux), telle que environ 1 : 10 (poids neogouttes : poids sp|vantoqueux) Ainsi, l'objet de la présente invention concerne one néogoutte tee que définie ci-dessus caractérisée en ce que ladite néogoutte comprend au moins Vun des constituants suivants: au moins un acide gras en Cb-C3u, éventuellement hydrogéné et ou sous forme d'ester de glycol, dans la phase (L1), un ester d'acide gras en Ci-C3u de polyoxyéthylène ( 0 100) comme agent tensioactif, au moins un acide gras en C5-C30, éventuellement hydrogéné et ou sous forme d'ester de glycol, dans la phase (L2), et/ou 20 au moins un conservateur par exemple de type phénoxyéthanol dans la phase (A1). Plus précisément, l'objet de la présente invention concerne une néogoutte telle que définie ci-dessus caractérisée en ce que le conjugué peptidique comprend la séquence (L)S-(L)D-(L)K-(L)P. 25 L'objet de la présente invention concerne en outre un procédé de fabrication de la néogoutte selon la présente invention. Le procédé est proche de celui décrit dans FR2991196 (cf. page 17, ligne 26 à page 19, ligne7 à ceci près que le conjugué peptidieue (principe actif) selon la présente invention est greffé sur |æ partie extérieure et non le coeur de la néogoutte. Ceci peut se faire en ajoutant le conjugué peptidique lors de la formation de la néogoutte ou après. De manière préférée de par les 30 affinités du conjugué peptidique selon la présente invention, celui-ci va se positionner de manière naturelle en surface de la néogoutte. Toutefois I également possible d'additionner ce conjugué peptidique précisément au moment de la formation de la membrane interne L2 par les techniques décrites dans FR2991196., 3047990 20 Ainsi, l'objet de la présente invention concerne une composition cosmétique comprenant un conjugué peptidique selon la présente invention à une teneur comprise entre 1.10-g% et 10% en poids relatif à la quantité totale de ladite composition. Préférentiellement, le conjugué peptidique selon ra présente invention est compris dans ladite composition cosmétique dans une néogoutte selon la présente invention. De manière avantageuse, la composition cosmétique selon la présente invention contient le conjugué peptidique à une teneur comprise entre 1.10-7% et 1% en poids, plus avantageusement à une teneur comprise entre 1.10-6% et 0.1% en poids, voire à une teneur comprise. entre 2.10-6% et 0.01% en poids. De manière toute préférée, la teneur en conjugué peptidique selon la présente invention est d'environ 5.10-6% en poids. 10 Un mode de réalisation particulier selon la présente invention concerne une composition cosmétique comprenant un analogue de SDKP telle que définie ci-dessus, par exemple un conjugué peptidique de formule I), avec en outre Ac-SDKP-OH et/ou Ac-SDKP-NH2. De manière préférée, Ac-SDKP-OH et/ou Ac-SDKP-NH2 est compris au moins partiellement dans la néogoutte selon la présente invention. 15 La composition cosmétique selon la présente invention peut être conditionnée dans tout moyen apte à son application, tel qu'un pot, un tube, un flacon, un spray, une boite. La composition cosmétique selon la présente invention peut être administrée de manière topique 20 une ou plusieurs fois par jour, préférentiellement au moins une fois le matin et une fois le soir. La composition cosmétique peut se présenter sous forme d'une crème, d'un ge d'une Vtion, d'un sérum ou encore d'une pâte. FIGURES 25 L'histogramme de la figure 1 représente les variations de l'isotropie suite à l'étude comparative selon l'exemple 4 ci-dessous. te produit B comprend du Lauroyl-SDKP-OH, tandis que le placebo A est une formulation de néogoutte exempt d'analogues de SDKP. Il peut être vu l'effet significatif sur le relief de la peau isotropie - orientation des lignes de la peau) du produit B vis-à-vis du placebo. 30 L'histogramme de la figure 2 représente les variations de la densité du derme suite à l'étude comparative selon l'exemple 4 ci-dessous. Le produit B comprend du Lauroyl-SDKP-OH, tandis que le placebo A est une formulation de néogoutte exempt d'analogues de SDKP. Il peut être vu l'effet significatif sur la densité du derme du produit B vis-à-vis du placebo. 3047990 21 L'histogramme de la figure 3 représente l'appréciation globale et caractéristiques organoleptiques des produits (facilité d'application, texture légère et agréable, pénétration rapide, application, produit non gras, parfum). Il peut être vu que les formulations testées présentent des caractéristiques organoleptiques et des appréciations générales similaires et acceptables. E.XEMPLE5 Exemple 1 : Synthèses du composé « lauroyl-SDKP-OH » La synthèse décrite ci-dessous est à but d'illustration. Elle peut par exemple s'effectuer sur support solide (résine) en stra ég Fmoc sur robot pour des quantités inférieure à 50 mg et en manuel pour 10 desquantitéssupëheupesi Les taux de charges des résines et les concentrations des réactifs (agents de couplage, bases, acides, agents de piégeage « scavengers » en anglais)) peuvent varier selon la pratique courante dàns l'art. - Les ma ieres premières utilisées peuvent être: -des acides aminés naturels protégés sur leurs extrémités N-terminale (protection Fmoc) et 15 sur leurs chaines latérales groupements protecteurs acido-labiles et donc compatibles avec la stratégie Fmoc). -des activateurs (HOBT/DIC). Ces produits sont éliminés par lavage tout au long de la synthèse, puis lors de la phase de précipitation et enfin lors de la phase de purification. -des suivants de lavage (DM F. DCM). Ces produits sont éliminés par lavage tout au long de la 20 synthèse, puis lors de la phase de précipitation et enfin lors de la phase de purification. -résine Wang préchargée avec l'acide aminé Fmoc-L-Pro. Le taux de charge nitial, rédui de la résine en proline peut varier mais est typiquement compris entre 0,1 et 2,0 mol/g de résine, préférentiellement entre 0,5 et 1,5 mol/g, plus préférentiellement d'environ 0,75 mol/g ± 10%. La résine est éliminé par simple filtration à l'issu de synthèse. 25 - les bases usuelles pour retirer Fmoc sont utilisées telles que la triéthyle amine, DEL, pipéridine, etc. La pipéridine a été en particulier utilisée ici. - les acides usuels pour retirer le peptide du support ont été utilisés (e.g. TFA, HCI, Acide acétique, etc.). Dans le cas des résine « Wang », du TFA (acide trifluoroacétique) avec un piégeur « scavenger »), tels que des dérivés de silicium usuels dans l'art e.g. TI5). 3047990 22 - Le déroulé de la synthèse est le suivant: -Point de départ : résine préchargée avec la Fmoc-Proline ; 1. Greffage du second acide aminé, lysine: -Déprotection de la proline supportée avec de la pipéridine (par ex pl 20% dans du DMF) afin de retirer le groupement Fmoc ; - 3 séries de lavages au Dur ; - Couplage de Fmoc-L-Lys(Boc)-OH sur le peptide en élongation par l'utilisation de HOBt, DCI ; - 3 séries de lavages au DMF ; 10 - Acétylation par l'utilisation d'anhydride acétique ou le chlorure d'acyle équivalent afin de bloquer les éventuelles amines de Pro n'ayant pas réagies. - 3 séries de lavages au DMF ; 2. Greffage de l'acide aspartique Fmoc-L-Asp(OtBu)-OH : Les mêmes étapes que pour le greffage de la lysine sont reproduites pour l'acide 15 aspartique. 3. Greffage de la sérine Fmoc-L-Ser(tbu)-OH: Les mêmes étapes que pour le greffage de la lysine/acide aspartiques sont reproduites pour la sérine. 4. Addition du fragment lauroyl sur l'amine de la sérine 20 -Déprotection de la sérine avec de la pipéridine (20% dans du DMF) afin de retirer le groupement Fmoc ; - 3 séries de lavages au DMF ; - ajout de chlorure de lauroyle en présence de pyridine, ajout suivi par test à la ninhydrine (classique dans l'art) jusqu'à conversion complète ; 25 - 3 séries de lavages au DMF ; 3047990 23 5. clivage du peptide de la résine et déprotection - traitement de la r sine par un mélange de TFA/TIS/H20, 95/2.5/2.5 - 3 précipitations à l'éther, centrifugation. Mise en solution d'une partie du culot pour analyse - Déroulé de l'analyse post synthèse: L'analyse s'effectue sur une LiPLC ACQUITY Class WATERS et sur colonne BEH C18, 150x2.1rn rn - 0 à 100% d'acétonitrile en 8.5 min, puis 100% à 0% d'acétonitrile en 2 min, débit : 0.6 rremin 10 L'analyse en spectrométrie de masse s'effectue sur Système LC/MS WATERS composé de 2695 Separation Module Alliance; Colonne X-Bridge C18, 3,5pm, 4,6x150 mm ; 2996 Photodiode Array Detector ; SQ Mass Detector 2 (Analyseur quadripôle et Source ES+), débit : 0.6 ml/min: - 3 à 7% d'acétonitrile en 15 min, - puis un plateau à 97% d'acétonitrile pendant 2 m n, 15 - puis 97% à 3% d'acétonitrile en 2 min, puis un plateau à 3% d'acétonitrile pendant 2 min. Déroulé de la purification: la purification s'effectue sur une HPLC préparative de marque waters LC4000 et sur colonne Vydac denali 50 x 300 mm, 10 micron dans un mélange H20(0.1% TFA)/Acétonitrile (0.1% 20 TFA) Déroulé de l'analyse post purification: Analyse des fractions collectées sur HPLC selon |e protocole décrit ci-dessus Les fractions correspondantes au cahier des charges sont regroupées yophilisées, puis réa nalysées en HPLC et en spectrométrie de masse selon les protocoles décrits ci-dessus. 3047990 24 Le produit final est essentiellement constitué du peptide Lauroyl-SDKP-OH, à plus de 90%. Les puretés présentes sont des peptides de délétion tels que Ac-P-OH, Ac-KP-OH, Ac-DKP- OH. Les solvants, activateurs, protections,... sont éliminés au fur et à mesure de la synthèse, lors de la précipitation à l'éther (volatile) puis lors de la purification et enfin de la lyophilisation. Exemple 2 : Préparation de néogoutte Une néogoutte selon la présente invention peut -,re préparée selon le mode opératoire divulgué dans FR2991196 sur la base des quantités selon le tableau 1 suivant : Tableau 1: Composés impliqués dans la préparation de la néogoutte : Phase aqueuse Phase lipidique Stéarate de PEG 40 Pa K6 Phospholipides Huile d'olive Composé Cire Eau Phospholipon commercial Myrj 540 Upocire Nom auroy -SDKP-OH Solution 1% Fournisseur asse (mg) % masse dans le procédé 0 75,00 Croda 215 10,75 Lipoid 4 2,25 115 5,75 Gatte 115 5,75 eative Peptide 9 0,4995 Gen Pep 0,01 0,0005 10 N.B. es mé.rnes composés que ceux décrits dans 29 196 ont _te mtUisesdany le cadre de |a présente invention. Il a pu être également constaté des possibilités de modifications de cette formulation lors du procédé de fabrication des néogouttes décrite ci-dessous: 3047990 25 la quantité d'eau peut être comprise entre de 60 à 90% en masse par rapport à la masse totale des composés impliqués, par exemple 77,2%; - la quantité de stéaratede PEG 40 peut être comprise entre de 5 à 2O%en masse par rapport à la masse totale des composés impliqués, par exemple 9,2%; la quantité de phospholipides peut être comprise entre 1,5 et 3% en masse par rapport à la masse totale des composés impliqués, par exemple 1,75%; - la quantité de huile d'olive peut être comprise entre 3 et 10% en masse par rapport à la masse totale des composés impliqués, par exemple 4,49%; la quantité de cire peut être comprise entre 3 et 10% en masse par rapport à la masse 10 totale des composés impliqués, préférentiellement de même masse que l'huile d'olive, par exemple 4,49 - la quantité de Palmitoyl-KTTKS peut par exemple être comprise entre 0,01 et 10% en masse par rapport à la masse totale des composés impliqués, par exemple 0,05%; la quantité de Lauroyl-SDKP-01-1 peut par exemple être comprise entre 0,00001 et 1% en 15 masse par rapport à la masse totale des composés impliqués, par exemple 0,00006%. A. Préparation de la phase aqueuse La phase aqueuse a été préparée en solubilisant le tensioactif Myrj S40, dissous dans du tampon phosphate salin (PBS) 1X, dans l'eau. 20 B. Préparation de la phase lipidiqu 30 La phase lipidique a été préparée en mélangeant de l'huile de soja (Soybean oil, Sigma Aldrich), de la paraffine (Semi-synthetic glycerides, Suppocire NC, Gattefosse' France), des phospholipides de graine de soja (Phospholipon 75, Lipoid, Allemagne) et 0.1% en masse de fluorophore DU (1,1'-Dioctadecy1- 3,3,31'3:-tetramethylindocarbocyanine perchlorate, Sigma Aldrich). La phase lipidique ainsi préparée 25 contient 16% en masse de phospholipides et 84% en masse de lipides. C. Préparation des néogouttes par ultrasonication 20% de la phase lipidique ont été dispersés dans 80% de la phase aqueuse, conduisant à un méla possédant un ratio. phospholipides/Myrj 540 de 0,18 et un ratio Myrj 540/(huile f cire d 0,55. L'émulsification du mélange a ensuite été réalisée avec une sonde ultrasonique de 3 mm uivant des 30 cycles de sonication lOs ON / 30s OFF) pendant 10 min. 3047990 26 Les suspensions de nanoémulsions peuvent ensuite être dialysées contre 500 mL de PBS 1X pendant une nuit. Puis, elles ont été récupérées, diluées à une teneur de 10% en masse,filtrées à travers des pores de 0,2 pm et enfin conservées à 4"'C jusqu'à leur utilisation. Exemple 3 : Dilution Il est possible de diluer les néogouttes selon présente invention. Un solvant hydrophile peut être utilisé à cette fin. Typiquement de l'eau est utilisée. Il est aussi possible d'ajouter des conservateurs, des antimicrobiens, ou tout autre composé (e.g. excipient communément utilisé dans les formulations cosmétiques, ciermo-cosmétiques et/ou pharmaceutiques. 10 D'un point de vue pratique, la dilution des néogouttes s'effectue simplement en additionnant un solvant de dilution (e.g. l'eau) à la formulation concentrée de néogoutte (telle que fabriquée dans l'exemple 2 ci-dessus). L'addition du solvant de dilution peut être faite sous agitation (e.g. par turbine), ou agitation peut être effectuée après l'addition du solvant de dilutio. Ainsi, toutes les néogouttes décrites présentement peuvent être diluées dans des solutions 15 aqueuses, par exemple au 1 5 , 1/10', 1/20èr" ou encore 1/50''' voir procédure détaillée ci- dessous). Par exemple, les néogouttes de l'exemple 2 peuvent être diluées au 111e"' dans une solution aqueuse. Une solution aqueuse est alors ajoutée sous agitation à la formulation obtenue selon l'exemple 2 jusqu'à ce que la solution initiale soit diluée au 1/1e" 9 volumes de solution 20 aqueuse de dilution ajoutés à volume de la formulation selon l'exemple 2). Exemple 4 : Tests comparatifs Dans le cadre de la présente ven un test clinique comparatif entre des néogouttes sans lauroyl-SDKP-OH et des néogouttes avec Lauroyl-SDKP-OH a été effectué sur des volontaires saints. Dans le cas des formulations comprenant les néogouttes sans Lauroyl-SDKP-Oli, |æ portion 25 manquante de Lauroyl-SDKP-Del dans les néogouttes a été comblée par du « Myrj S40 », La quantité de Lauroyi SDKP-OH dosée dans les néogouttes dans le produit fini utilisé dans le cadre de ces expériences était inférieure à 1.10-'% n masse par rapport à la masse totale de formulation. Néanmoins, même à ces taux de concentration, des effets physiologiques ont été rapportés. 3047990 1) Effet lissant Un effet lissant significatif a été mesuré vs placebo dans 75% des cas dès 14 jours avec une rugosité moyenne diminuée de 11%. Variations jusqu'à -19% 2) Effet anti-rides Un effet anti-rides significatif a été mesuré vs placebo dans 81% des cas dès 14 jours et 77% à.128 avec une variation du relief de -14% et -16% respectivement. Variations jusqu'à -59% 3) Effet restructurant / anti-âge Un effet restructurant ,/ anti-âge significatif a été mesuré dans 81% des cas à 114 et 69% 128 avec une augmentation de l'isotropie de 12 et 14% respectivement, Variations jusqu'à +28%. Ces résuitats sont résumés sur la figure 1. 4) Effet redensifiant Un effet redensifiant a été mesuré chez 68% des cas à.114 et 90% à 0, avec une augmentation moyenne de la densité de la peau de respectivement 12% et 37%. Ces résultats sont résumés sur la figure 2. 5) Effet sur l'épaisseur de derme Une augmentation significative de l'épaisseur du derme a été mesurée Ltez 72%des patients. 6) Effet Hydratant 25 Un effet hydratant significatif à été mesuré vs placpbo Variations jusqu'à +20% 7) Effet tonifiant Une amélioration significative de la tonic té de la peau a été mesurée chez 53% des sujets. 30 Ces résultats sont résumés sur la figure 3. Ces résultats particulièrement encourageants montrent l'intérêt du choix de la technologie selon le brevet FR2991196A appliq à une formule modifiée de SDKP selon la présente invention. 20 10 15 REVENDICATIONS1. Conjugué peptidique comprenant un brin peptidique de formule SDKP, ou un analogue biologique de celui-ci de nature peptidique comprenant moins de 20 acides aminés, caractérisé en ce qu'au moins une cha lie grasse en C13-050 linéaire ou ramifiée, saturée ou insaturée, est greffée à l'extrémité N et/ou C terminale du brin peptidique, par exemple par l'intermédiaire d'un groupement C=0 et/ou d'un atome d'oxygène. 2. Conjugué peptidique ou analogue biologique de celui-ci selon la revendication 1 caractérisée en que ledit conjugué est de formule (I) suivante : R1-X1-X2-X3-X4-A1-R2 10 (I) dans laquelle : R1, étant du côté N-terminal, est un atome d'hydrogène, ou une cha ne grasse choisie parmi un groupe alkyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C13-050, un groupe alkyle-aryle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C21-050, un groupe 15 alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C13-050, un groupe R3-CO-, R3- OCO- ou R3-000- dans lequel R3 est un groupe alkyle ou alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C13-C49, les substitutions incluant F, Cl, ou tout hétéroatome ou groupe d'hétéroatomes lipophile tel qu'une guanidine ou un guanidinium, 20 - X1 est un condensat de (L)-sérine, - X2 est un condensat de (L) et/ou (D) acide aspartique ou (L) et/ou (D) acide glutamique, X3 est un condensat de (L) et/ou (D) lysine, (L) et/ou (D) arginine ou (L) et/ou (D) ornithine, - X4 est un condensat de (L) et/ou (D) proline, 25 X4, ou X3 et X4, étant optionnellement absents, - les liaisons reliant X1 à X2, X2 à X3 le cas échéant, et X3 à X4 le cas échéant, pouvant être des liaisons peptidiques ou pseudopeptidiques, - Al est une liaison covalente, un groupement NH ou un atome d'oxygène, 3047990 29 R2 est un atome d'hydrogène, ou une cha lie grasse choisie parmi un groupe alkyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C13-050, un groupe alkyle-aryle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C21-050, un groupe alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C13-050, un groupe R4-CO-, ou R4-000- dans lequel R4 est un groupe alkyle ou alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C13-050, les substitutions incluant F, Cl, ou tout hétéroatome ou groupe d'hétéroatomes lipophile tel qu'un groupement guanidine ou guanidinium, - R1 et R2 ne pouvant être conjointement des atomes d'hydrogène, ou l'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 10 3. Nanoparticule lipidique comprenant : un coeur constitué d'une phase lipidique (L1); au moins un agent tensioactif comprenant une partie hydrophile et une partie lipophile ; une membrane interne entourant ledit coeur constitué d'une phase lipidique (L2), comprenant la partie lipophile dudit agent tensioactif; 15 une membrane externe, entourant ladite membrane interne, constituée d'une phase aqueuse (A1) comprenant la partie hydrophile dudit agent tensioactif ; et au moins un conjugué peptide comprenant un brin peptidique de formule SDKP, ou un analogue biologique de celui-ci de nature peptidique comprenant moins de 20 acides aminés, caractérisé en ce qu'au moins une cha ne grasse en C3-050 linéaire ou ramifiée, 20 saturée ou insaturée, est greffée à l'extrémité N et/ou C terminale du brin peptidique, par exemple par l'intermédiaire d'un groupement C=0 et/ou d'un atome d'oxygène et ledit conjugué peptidique est tel que sa partie lipophile est dans la phase lipidique L2 et sa partie hydrophile dans la phase Al. 4. Nanoparticule lipidique selon la revendication 3 caractérisée en ce que le conjugué 25 peptidique est de formule (I) telle que définie selon la revendication 2, dans laquelle : R1, étant du côté N-terminal, est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C3-050, un groupe alkyle-aryle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C8-050, un groupe alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C3-050, un groupe R3-00-, R3-000- ou R3-000- dans lequel R3 est un 30 groupe alkyle ou alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C3-050, les substitutions incluant F, Cl, ou tout hétéroatome ou groupe d'hétéroatomes lipophile tel qu'un groupement guanidine ou guanidinium, et 3047990 30 R2 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C3-050, un groupe alkyle-aryle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C8-050, un groupe alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C3-050, un groupe R4-CO-, ou R4-000- dans lequel R4 est un groupe alkyle ou alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C3-050, les substitutions incluant F, Cl, ou tout hétéroatome ou groupe d'hétéroatomes lipophile tel qu'un groupement guanidine ou guanidinium. 5. Nanoparticule lipidique selon la revendication 4 caractérisée en ce que R1 est un groupe alkyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C6-C30, préférentiellement en C10-C20, ou un groupe R3-CO- dans lequel R3 est un groupe alkyle ou alcènyle substitué ou non substitué, linéaire ou ramifié en C5-C30, préférentiellement en C9-C20, les substitutions incluant F, Cl, ou tout hétéroatome ou groupe d'hétéroatomes lipophile tel qu'un groupement guanidine ou guanidinium. 6. Nanoparticule lipidique selon l'une quelconque des revendications 3 à 5 caractérisée en ce que ladite nanoparticule lipidique comprend au moins l'un des constituants suivants: au moins un acide gras en C5-C30, éventuellement hydrogéné et/ou sous forme d'ester de glycol, dans la phase (L1), un ester d'acide gras en C1-C30 de polyoxyéthylène (10- 100) comme agent tensioactif, au moins un acide gras en C5-C30, éventuellement hydrogéné et/ou sous forme d'ester de glycol, dans la phase (L2), et/ou au moins un conservateur par exemple de type phénoxyéthanol dans la phase (A1). 7. Nanoparticule lipidique selon l'une quelconque des revendications 3 à 6 caractérisée en ce que le conjugué peptidique comprend la séquence (L)S-(L)D-(L)K-(L)P. 8. Procédé de fabrication d'une Nanoparticule lipidique selon l'une quelconque des revendications 3 à 7, caractérisé en ce que ledit procédé comprend les étapes suivantes : a. préparation d'une phase lipidique et d'une phase aqueuse, l'une au moins des deux phases comprenant un agent tensioactif, l'une au moins des deux phases comprenant le brin peptidique de formule SDKP, ou un analogue biologique de celui-ci de nature peptidique, greffé d'une cha île grasse telle que définie selon l'une quelconque des revendications 3 à 7 ; b. émulsification de ladite phase lipidique et de ladite phase aqueuse conduisant à la formation de nanoparticules lipidiques, éventuellement sous pression ; c. récupération des nanoparticules lipidiques formées. 3047990 31 9. Formulation cosmétique comprenant une ou plusieurs nanoparticules lipidiques selon l'une quelconque des revendications 3 à 7. 10. Nano-émulsion comprenant : au moins une phase lipidique dispersée (L3), et 5 au moins une phase aqueuse continue (A2) dans laquelle la phase aqueuse comporte au moins un tensioactif, préférentiellement de type polyalkoxylé, caractérisée en ce qu'à l'interface entre la phase aqueuse (A2) et la phase lipidique (L1) se trouve au moins un conjugué peptidique selon la revendication 1 ou 2 et/ou en ce que ladite nano-émulsion comprend au moins une nanoparticule lipidique selon l'une quelconque des 10 revendications 3 à 7 dans laquelle éventuellement les lipides de (L1) et (L3), ou (L2) et (L3) sont identiques. 11. Utilisation cosmétique de préférence par application topique, d'un conjugué peptidique selon la revendication 1 ou 2, d'une nanoparticule lipidique selon l'une quelconque des revendications 3 à 7, d'une nano-émulsion selon la revendication 10 ou d'une formulation 15 cosmétique selon la revendication 9 pour restructurer ou préserver l'aspect de la peau, en particulier en profondeur au niveau dermique. 12. Utilisation cosmétique selon la revendication 11 caractérisée en ce qu'il s'agit d'une utilisation antivieillissement.