Brevet FR3025217A1 — publié le 20160304

La présente demande concerne le domaine de la culture de protistes, particulièrement des microalgues et/ou des cyanobactéries. L'invention s'adresse particulièrement à un procédé de culture, caractérisé en ce que les conditions particulières de la culture en termes d'éclairage et de nutriments permettent d'obtenir une biomasse constituée de protistes, particulièrement de microalgues et/ou des cyanobactéries, présentant au moins une quantité en chlorophylle faible, avantageusement très faible et une quantité en métabolites d'intérêt produits par lesdits protistes élevée. Les microalgues et/ou les cyanobactéries, présentent un potentiel d'utilisation 10 important dans beaucoup de domaines dont on citera par exemple la production de biocarburant, la dépollution, particulièrement des eaux usées, l'alimentation humaine ou animale, la cosmétique, la médecine. Les protistes, particulièrement les microalgues et/ou les cyanobactéries sont intéressants comme source additionnelle de nourriture, car ils peuvent être source de 15 protéines, de fibres, de lipides, ou encore d'autres métabolites d'intérêt comme par exemple des agents antioxydants, particulièrement des caroténoïdes ou des phycobiliprotéines. La biomasse obtenue selon le procédé selon l'invention peut être utilisée native, avantageusement séchée, mais aussi transformée, par exemple réduite sous forme zo de farines. La biomasse obtenue, ou ses dérivés, peuvent être utilisés dans l'alimentation humaine ou animale, comme supplément nutritionnel ou incorporés en petite quantité dans des aliments, où ils peuvent remplacer par exemple les oeufs et les matières grasses, par exemple pour la panification. 25 Certains protistes, particulièrement certaines microalgues et/ou cyanobactéries sont des êtres mixotrophes, capables à la fois d'hétérotrophie (absorption de matière organique dans le milieu de culture) et d'autotrophie (utilisation de la lumière pour capter le carbone via la photosynthèse). La mixotrophie est également appelée photo-hétérotrophie. La notion de mixotrophie est étendue à l'utilisation de la lumière 30 non seulement pour la photosynthèse, mais également comme signal lumineux pouvant induire une réponse du métabolisme : par exemple la synthèse de pigments. La mixotrophie à dominante hétérotrophe permet de produire des molécules d'intérêt en couplant à la fois les avantages de l'autotrophie et de l'hétérotrophie. Elle 3 0 2 5 2 1 7 2 consiste à introduire une composante lumineuse de faible intensité et de courte durée. Comme en hétérotrophie, le substrat organique nourrit les microalgues pour produire de grandes quantités de biomasse, mais cette fois le chloroplaste et les autres organites capteurs d'énergie lumineuse de la cellule sont activés. 5 Ces capteurs d'énergie lumineuse ou photorécepteurs sont présents dans des organites, comme le stigma, qui est considéré comme un ceil primitif qui permet aux cellules flagellées qui en disposent de se déplacer en fonction de la quantité et de la qualité de la lumière. Les autres organites photosensibles sont le chloroplaste, le chronoplaste ou le chromoplaste. Ces photorécepteurs peuvent permettent d'augmenter la productivité de la cellule mais ils ont aussi un rôle de transduction de signal qui induit la synthèse de toutes les molécules pouvant être métabolisées par les protistes, particulièrement par les microalgues et/ou les cyanobactéries, dont en particulier les métabolites d'intérêt. Comme indiqué précédemment, les métabolites d'intérêt, produits par les protistes présentent un intérêt industriel majeur particulièrement dans les domaines de la nutrition, de la cosmétique, de la chimie verte et de l'énergie. Ces métabolites d'intérêt sont variés, tels que par exemple des carbohydrates, des protéines, des acides aminés, avantageusement des acides aminés essentiels et des pigments, particulièrement des pigments photosynthétiques, dont les principaux sont les chlorophylles, les caroténoïdes ou encore les phycobiliprotéines. Il existe plusieurs sortes de chlorophylles, (chlorophylles a, b, c, d et f), qui diffèrent entre elles par les détails de leur structure moléculaire, et, d'autre part, par leurs propriétés spécifiques d'absorption. La chlorophylle "a" est le pigment photosynthétique le plus commun du règne végétal ; il se retrouve dans tous les végétaux terrestres et aquatiques. Ses pics d'absorption de la lumière se trouvent à 430 nm et à 660 nm. La chlorophylle "b" se retrouve chez les microalgues, mais en quantité moindre. Ses pics d'absorption sont centrés à 450 nm et 645 nm. Le terme de caroténoïde regroupe les carotènes (a, 3, c, y, b ou -carotène, lycopène et phytoène) et les xanthophylles (astaxanthine, anthéraxanthine, citranaxanthine, cryptoxanthine, canthaxanthine, diadinoxanthine, diatoxanthine, flavoxanthine, fucoxanthine, lutéine, néoxanthine, rhodoxanthine, rubixanthine, siphonaxanthine, violaxanthine, zéaxanthine). Les caroténoïdes sont des pigments plutôt orange et jaune, liposolubles. Ils sont synthétisés par toutes les algues, toutes les plantes vertes et par de nombreux champignons et bactéries (dont les 3025217 3 cyanobactéries). Ils sont absorbés par les animaux et les êtres humains dans leur nourriture. Les caroténoïdes ont deux principaux pics d'absorption situés autour de 440 nm et 475 nm. Les caroténoïdes jouent un rôle important dans la nutrition et la santé, car 5 plusieurs sont des provitamines A, et certains présentent aussi des activités anti- cancer et antioxydantes. Ils stimulent en outre la synthèse d'anticorps. Certains d'entre eux sont largement utilisés dans l'industrie agro-alimentaire pour leurs propriétés colorantes, et également dans les industries cosmétique et pharmaceutique pour leurs propriétés antioxydantes et leur capacité de 10 photoprotection. Certains caroténoïdes présentent un grand intérêt, comme la lutéine et l'astaxanthine, cette dernière particulièrement pour son important pouvoir antioxydant. Les phycobiliprotéines sont des pigments hydrosolubles que l'on retrouve dans le phycobilisome, complexe photosynthétique présent notamment chez les 15 cyanobactéries et certaines microalgues. Il existe quatre types de phycobiliprotéines : la phycocyanine et la phycoérythrine, l'allophycocyanine et la phycoérythrocyanine. La phycocyanine a un pic d'absorption situé entre 610 nm et 655 nm et la phycoérythrine entre 490 nm et 570 nm. Chez les plantes, les caroténoïdes sont des pigments accessoires de la 20 photosynthèse, qui ont deux rôles principaux : un rôle de collecteur de lumière (transfert à la chlorophylle de l'énergie lumineuse qu'ils absorbent dans les gammes du spectre situées entre le violet et le rouge) et un rôle photoprotecteur (récupération de l'énergie de la chlorophylle en particulier en cas d'excès de lumière) dont la présence permet à la chlorophylle d'éviter les dégradations dues à la photooxydation. 25 Il existe une souche de microalgues du genre Chlorelle (chlorelle protothecoides) qui entre dans la composition de nombreux aliments, car cette souche présente la particularité de détruire sa chlorophylle en conditions d'hétérotrophie, c'est à dire quand le milieu contient une source de carbone. Il existe également des souches mutantes déficientes en pigments (US/2013/0122181). 30 Ainsi, hormis certains mutants et certaines souches sauvages d'algues telles que celles ci-dessus décrites, la grande majorité des microalgues vertes présente un taux de chlorophylle important, ce qui les rend peu appréciées en raison de leur goût, et également du manque d'appétence de la couleur verte. Dès lors leur utilisation, 3025217 4 comme précédemment décrit, est soit limitée, soit rendue complexe si l'on veut réduire la quantité de chlorophylle dans la biomasse utilisée dans l'utilisation désirée. Il demeure donc un besoin en une biomasse de protistes, pauvre en chlorophylle mais riche en ses autres métabolites d'intérêt, qui pourrait être issue de la culture de 5 souches de protistes, particulièrement de microalgues et/ou de cyanobactéries communes et communément utilisés en culture. Par commune ou communément utilisés en culture, on entend ici des protistes présentant ou non normalement dans des conditions de culture standard un taux important de chlorophylle. Il serait donc intéressant de disposer d'un procédé de 10 culture qui permette d'obtenir une biomasse desdits protistes, pauvre en chlorophylle, mais riche en ses autres métabolites d'intérêt. Un tel procédé devrait permettre, si nécessaire, de réduire les quantités de pigments chlorophylliens lors de la culture desdits protistes, présentant normalement en culture standard un taux important de chlorophylle, mais surtout d'augmenter substantiellement la quantité de 15 métabolites d'intérêt produits par la culture. La présente invention vise à fournir un tel procédé de culture de protistes, particulièrement de microalgues et/ou de cyanobactéries, qui pourrait permettre de mieux cibler la répartition des pigments dans les protistes produits, afin d'obtenir des protistes appauvris en chlorophylle, tout en maintenant naturellement un taux de zo métabolites d'intérêt élevé. Une telle biomasse pourrait par la suite être utilisée comme il est connu, soit sous sa forme native, éventuellement séchée, soit sous la forme d'un dérivé comme par exemple sous la forme de farines, dans tous les domaines d'utilisation connus des microalgues ou de leurs dérivés (farines ou autres). Par exemple, on peut 25 souligner que la dite biomasse ou ses dérivés présenterait un intérêt particulier en nutrition, puis qu'appauvrie en chlorophylle et donc présentant alors un goût et une couleur verte amoindris, voire inexistants, rendant ainsi les produits les incluant plus appétents. Les inventeurs ont montré, de manière surprenante et après de longues 30 recherches, qu'une culture de protistes dans un milieu comprenant au moins une source de carbone, et comprenant au moins une étape d'éclairage par un rayonnement présentant un spectre étroit de longueur d'onde centrée à une longueur d'onde donnée, peut permettre d'obtenir une biomasse pauvre en chlorophylle et riche en métabolites d'intérêt. En effet, les inventeurs ont montré qu'un éclairage par 3025217 5 un rayonnement présentant un spectre étroit centré sur une longueur d'onde précise sera absorbé par les métabolites d'intérêt mais très peu par la chlorophylle. De plus, selon les paramètres d'illumination qui sont appliqués lors d'une culture de protistes, particulièrement de microalgues et/ou de cyanobactéries, il est possible 5 d'orienter la production de métabolites et notamment de pigments. Ainsi, la combinaison d'une lumière discontinue sous forme de flashs et d'un rayonnement présentant un spectre étroit centré sur une longueur d'onde précise, peut encore améliorer les résultats obtenus en termes de production de métabolites d'intérêt. 10 La combinaison d'une lumière discontinue sous forme de flashs et d'un spectre lumineux particulier peut être obtenue par l'emploi de toutes sources lumineuses connues, particulièrement par l'emploi de diodes électroluminescentes (DEL). Les longueurs d'ondes peuvent être choisies afin de correspondre ou se rapprocher du pic d'absorption des métabolites d'intérêt recherchés, par exemple des caroténoïdes 15 et/ou des chlorophylles et/ou des phycobiliprotéines. L'induction de l'accumulation d'un métabolite en particulier peut être obtenue tout en limitant l'accumulation des autres métabolites présents dans la cellule. De plus, la forte intensité lumineuse peut être limitée à la longueur d'onde choisie correspondant audit métabolite d'intérêt afin de limiter la production de chlorophylle. 20 Un éclairage de la culture de microalgues par une lumière de longueur d'onde centrée sur une longueur d'onde choisie correspondant au sommet du pic d'absorption d'un métabolite d'intérêt et dont le spectre ne s'étend pas au-delà de 25 nm de chaque côté peut permettre d'éviter l'accumulation de chlorophylle par les protistes qui en produisent sans autre influence notable sur le développement 25 desdits protistes en culture, particulièrement sur l'accumulation des autres métabolites d'intérêt contenus dans lesdits protistes. Le procédé de culture réalisé avec un éclairage de ce type et avec un milieu de culture comprenant une source carbonée, utilisé par exemple sur une souche de microalgues produisant de la chlorophylle, peut permettre l'obtention d'une biomasse 30 avec un contenu en chlorophylle inférieur à 500 ppm, voire moins de 100 ppm, encore plus préférentiellement moins de 2 ppm, particulièrement, tout en maintenant une production de métabolites d'intérêt normale voire améliorée. 3 0 2 5 2 1 7 6 Un autre avantage du procédé selon l'invention réside dans le fait que ledit procédé peut permettre d'augmenter le contenu en métabolites d'intérêt dans la biomasse obtenue de façon industrielle. Ainsi, l'invention a pour objet premier un procédé de culture de protistes, 5 particulièrement de microalgues et/ou de cyanobactéries, dans un milieu de culture comprenant au moins une source de carbone, et comprenant au moins une étape d'éclairage par un rayonnement présentant un spectre étroit de longueur d'onde centrée sur une longueur d'onde choisie correspondant au sommet du pic d'absorption d'un métabolite d'intérêt. 10 Par étroit, on entend selon l'invention que le spectre de lumière utilisé est centré sur une longueur d'onde donnée et ne s'étend de chaque côté de ladite longueur d'onde sur pas plus de 25 nm. On comprend de ce qui précède que l'invention consiste en une variante (conditions d'éclairage particulières) de n'importe quel procédé de culture de 15 protistes, particulièrement de microalgues et/ou de cyanobactéries, connu, variante qui permet sur la base d'un procédé de culture connu d'obtenir une biomasse particulière. Ainsi, selon l'invention, les conditions de culture des souches de protistes, pourront être les conditions connues et utilisées pour cultiver les souches de 20 protistes, utilisées. Avantageusement, on utilisera les conditions qui permettront le meilleur rendement en biomasse. L'homme du métier saura intégrer l'étape d'éclairage selon l'invention dans un procédé connu, afin d'obtenir une biomasse la plus importante possible, qui réponde aux critères selon l'invention en taux de chlorophylle, et en taux de métabolites d'intérêt, particulièrement en taux de 25 caroténoïdes et/ou de phycobiliprotéines. A cet égard, on pourra citer les procédés décrits par Cordero et al. (Marine Drugs, 2011, 9 :1607-1624) et Bumbak et al. (Appl Microbiol Biotechnol, 2011, 91 : 31-46). Il pourra être privilégié les procédés permettant un rendement en biomasse 30 important. Comme exemple de procédé on pourra citer celui décrit par exemple par Doucha et Livansky (J Appl Phycol, 2012, 24 (1) : 35-43). Plus particulièrement cette étape pourra être intégrée dans les procédés décrits par la demanderesse dans les demandes n°W02013/136027 et W02012/035262 302 5 2 17 7 Selon l'invention, l'éclairage peut être produit par tout moyen connu de l'homme du métier, notamment une ou plusieurs lampes, un ou plusieurs tubes, une ou plusieurs diodes électroluminescentes (DELs). Les inventeurs ont démontré que le procédé est encore plus efficace lorsque 5 l'éclairage est réalisé par une ou plusieurs diode(s) électroluminescente(s) (DEL). Ainsi, selon une variante de l'invention, l'éclairage peut être réalisé par une ou plusieurs DELs. Les DELs sont de préférence des DELs du commerce. A titre d'exemple, on citera les DEL provenant de chez Seoul Optodevice Co., LTD (Corée du Sud), de chez Nichia Corporation (Japon), ou encore de chez SunLED Corporation (Etats-Unis). Selon le procédé de l'invention, ledit milieu de culture peut être soumis au rayonnement lumineux pendant un temps suffisant correspondant au moins au temps nécessaire pour que les critères de taux de chlorophylle et taux de métabolites d'intérêt désirés soient remplis ; ce temps dépendra bien entendu du 15 procédé de culture dans lequel cette étape d'éclairage sera incluse. Plus particulièrement, les conditions de mixotrophie peuvent être obtenues dans des conditions d'éclairage discontinu et/ou variable au cours du temps. Par éclairage discontinu, il faut entendre un éclairage ponctué par des périodes d'obscurité. L'éclairage peut notamment être sous forme de flashs. Un flash, au sens zo de l'invention, est un éclairage lumineux de durée donnée. Selon l'invention, à propos de l'éclairage, trois notions sont à considérer : la fréquence ou le nombre de flashs par unité de temps, la durée du flash et l'intensité de la lumière émise. En termes de fréquence selon l'invention, on définit, selon le nombre de flashs 25 par unité de temps utilisé dans le procédé selon l'invention deux types d'éclairage : - Un éclairage à basse fréquence dont le nombre de flashs peut être compris entre environ 2 et 3,6 104 par heure (5,4.10-4 Hz à 10 Hz), préférentiellement entre 3 et 3,6 103 par heure (8,3.10-4 Hz à 1 Hz). On entend bien ici que le nombre de flashs par heure peut prendre toutes les valeurs comprises entre 2 et 36000 sans qu'il soit 30 nécessaire de toutes les citer (2, 3, 4,..., 35598, 35599, 36000). - Un éclairage à haute fréquence dont le nombre de flashs peut être compris entre environ 3,6 x104 et 5,4 x 109 (10 Hz à 1,5.106 Hz) par heure, préférentiellement entre 3,6x105 et 5,4x109 (100 Hz à 1,5.106 Hz). On entend bien ici que le nombre de flashs par heure peut prendre toutes les valeurs comprises entre 3,6 x105 et 5,4 x 3025217 8 109 sans qu'il soit nécessaire de toutes les citer (36000, 36001, 36002,..., 5399999998, 5399999999, 5400000000). En termes de durée selon l'invention, quelle que soit la fréquence d'éclairage choisie, la durée du flash peut être comprise entre 1/150000 de seconde et 1799 5 secondes (29 minutes et 59 secondes). Bien évidement lorsque l'on utilise un éclairage à haute fréquence la durée du flash pourra être préférentiellement comprise entre 1/150000 de seconde et 1/10 de seconde. Et lorsque l'on utilise un éclairage à basse fréquence la durée du flash pourra être préférentiellement comprise entre 1/10 de seconde et 1799 secondes (29 10 minutes et 59 sec). En termes d'intensité lumineuse selon l'invention, l'intensité de la lumière apportée sous forme de flashs peut être comprise entre 5 et 1000 pmol. m-2. s-1, de préférence entre 5 et 500 pmol. m-2. s-1, ou 50 et 400 pmol. m-2. s-1, et plus préférentiellement entre 150 et 300 pmol. m-2. s-1 (1 pmol. m-2. s-1 correspond à 1pE 15 rr1-2. s-1 (Einstein), unité souvent utilisée dans la littérature). Selon l'invention le nombre de flashs par heure peut être choisi en fonction de l'intensité et de la durée des flashs (voir ci-dessus). Selon l'invention les notions de fréquence, de durée et d'intensité lumineuse s'appliquent à l'éclairage tel que le prévoit l'invention, c'est-à-dire à l'éclairage produit 20 par la source lumineuse choisie, avantageusement par une DEL, émettant un rayonnement lumineux de spectre étroit centré à une longueur d'onde donnée correspondant au sommet du pic d'absorption d'un métabolite d'intérêt et pendant les temps considérés selon l'invention. Selon un autre mode de réalisation de l'invention, l'éclairage peut être variable, 25 ce qui signifie que l'éclairage n'est pas interrompu par des phases d'obscurité, mais que l'intensité lumineuse varie au cours du temps. Cette variation de l'intensité de lumière est régulière et peut être périodique ou cyclique. Selon l'invention, on peut aussi procéder à un apport lumineux alliant des phases d'éclairage continues et discontinues. 30 Par éclairage variable, on entend que l'intensité de la lumière varie de manière régulière au moins deux fois par heure. Un exemple des conditions d'éclairage adaptées au procédé selon l'invention est décrit dans la demande internationale de la demanderesse publiée le 22 mars 2012 sous le N° W02012/035262. 3025217 9 L'éclairage peut présenter, de préférence, des variations d'intensité dont l'amplitude est généralement comprise entre 5 pmol. m-2. s-1 et 2000 pmol. m-2. s-1, de préférence entre 50 et 1500, plus préférentiellement entre 50 et 200 pmol. m-2. s-1. Selon un mode de réalisation préféré, l'éclairage présente des variations 5 d'intensité dont l'amplitude est comprise entre 5 et 1000 pmol.m-2.s-1, de préférence entre 5 et 400 pmol.m-2.s-1, ces variations ayant lieu entre 2 et 3600, de préférence entre 2 et 200 fois par heure. Ces conditions de culture permettent d'apporter une quantité définie de lumière. Cet apport lumineux peut comporter des phases d'éclairage discontinu et/ou 10 variable, avec des variations d'intensité pouvant avoir des amplitudes identiques ou différentes. Avantageusement selon l'invention le procédé peut comprendre, simultanément ou indépendamment, toute autre étape nécessaire à la croissance de la biomasse comme par exemple sans être limitatif une ou plusieurs étape(s) de culture sans 15 lumière ou encore une ou plusieurs étape(s) de récupération de la biomasse. Le procédé selon l'invention découlera bien évidement du procédé choisi par l'homme du métier pour cultiver la souche de protiste choisie auquel il ajoutera une (ou plusieurs) étape(s) d'éclairage de la culture. Les conditions de culture seront donc dépendantes du procédé choisi. En particulier la température de culture 20 dépendra de la souche choisie. D'une manière générale la culture selon le procédé pourra s'effectuer à une température comprise entre 15°C et 38°C, avantageusement entre 22°C et 32°C. Selon l'invention la source carbonée peut être choisie parmi toute source carbonée connue et utilisable selon la souche choisie. L'homme du métier saura 25 sans difficulté choisir la source carbonée la mieux adaptée à la souche à cultiver. A titre d'exemple on peut citer comme source carbonée utilisable le glucose, des dérivés de cellulose, du lactate, de l'amidon, du lactose, du saccharose, de l'acétate ou encore du glycérol. Le substrat carboné organique contenu dans le milieu de culture peut consister 30 en des molécules complexes ou en un mélange de substrats. Les produits issus de la biotransformation de l'amidon, par exemple à partir de maïs, de blé ou de pomme de terre, notamment les hydrolysats de l'amidon, qui sont constitués de molécules de petite taille, constituent, par exemple, des substrats carbonés organiques adaptés à la culture en mixotrophie des protistes selon l'invention. 3025217 10 Les quantités de sources carbonées utilisées selon le procédé dépendront bien évidement de la souche choisie. L'homme du métier saura là encore sans difficulté adapter les quantités de source carbonée à la souche à cultiver sous forme pure ou en mélange. 5 Selon un mode de réalisation de l'invention, le substrat carboné organique pourra avoir une concentration comprise entre 5 mM et 1,5 M, de préférence 50 mM et 800 mM. La culture peut être réalisée par toute technique de culture connue, par exemple en fioles ou en réacteur, mais aussi en fermenteurs ou encore dans tout contenant 10 apte à la croissance de protistes, particulièrement de microalgues et/ou de cyanobactéries, comme par exemple des bassins de type "raceway", à condition que ladite technique permette de mettre en contact les microalgues avec au moins la source carbonée, et en outre permette la présence d'au moins une source de lumière émettant dans les longueurs d'onde présentant un spectre étroit de longueur d'onde 15 centrée sur une longueur d'onde choisie correspondant au sommet du pic d'absorption d'un métabolite d'intérêt recherché, dont l'action sur la culture pourra conduire à la biomasse désirée c'est-à-dire une biomasse appauvrie en chlorophylle et riche en métabolite d'intérêt. Avantageusement ladite source de lumière émettant dans les longueurs d'onde présentant un spectre étroit pourra en outre être apte à zo émettre des flashs. Le procédé selon l'invention peut en outre comprendre une étape de récupération des protistes cultivés. Ladite récupération des protistes, peut être réalisée par toute technique permettant la récupération de la biomasse, notamment les méthodes de filtration, gravimétrique ou sous pression réduite, de décantation, ou 25 bien encore des méthodes de précipitation suivie d'une filtration gravimétrique. Selon une variante de l'invention on pourra soumettre en outre la culture de protistes à une carence en azote et/ou (simultanément ou indépendamment) à une forte intensité lumineuse. Les inventeurs ont en effet montré que la culture de protistes, particulièrement de 30 microalgues et/ou de cyanobactéries, lorsque au moins la combinaison des facteurs suivants est réunie : - présence d'une source de carbone ; - soumission pendant un temps suffisant à au moins un éclairage présentant un spectre étroit de longueur d'onde comprise entre 450nm et 500nm ; 3 0 2 5 2 1 7 11 - concentration en azote réduite ; et - forte intensité lumineuse, conduit à la production d'une biomasse non seulement pauvre en chlorophylle mais comprenant une quantité de caroténoïdes au moins normale voire améliorée. 5 Par carence en azote il est entendu selon l'invention une concentration en azote (sous toute forme connue) dans le milieu de culture qui pourra être comprise entre 0 et 0,5 mM, de préférence entre 0 et 100 pM. L'invention concerne également la biomasse susceptible d'être obtenue par l'une quelconque des variantes du procédé selon l'invention. 10 La biomasse susceptible d'être obtenue selon le procédé de l'invention peut être bien évidement utilisée dans tous les domaines connus d'utilisation des protistes, particulièrement de microalgues et/ou de cyanobactéries, particulièrement en alimentation et/ou cosmétique. On sait qu'une biomasse de protistes susceptible d'être obtenue selon l'invention 15 peut être utilisée après récolte soit directement, éventuellement séchée, soit après transformation. En particulier les biomasses de protistes, particulièrement de microalgues et/ou de cyanobactéries, sont connues pour pouvoir être utilisées sous la forme de farines entrant dans des compositions alimentaires ou sous forme de compléments alimentaires. 20 La biomasse de protistes susceptible d'être obtenue selon l'invention peut être transformée en farine selon tout procédé connu de l'homme du métier. On peut ainsi envisager par exemple que les protistes obtenus puissent être séparés du milieu de culture, lyses et réduits en particules fines (diamètre moyen de 10 microns), puis séchées. 25 L'invention concerne également toute utilisation de la biomasse de protistes, susceptible d'être obtenue selon l'invention dans tout domaine connu d'utilisation desdits protistes, particulièrement la production de biocarburant, la dépollution, particulièrement des eaux usées, l'alimentation humaine ou animale, la cosmétique, la médecine, préférentiellement l'alimentation humaine ou animale, la cosmétique. 30 La biomasse obtenue après culture de protistes selon le procédé de l'invention peut permettre d'obtenir en particulier une farine appauvrie en chlorophylle (moins de 500 ppm, avantageusement moins de 100 ppm, très avantageusement moins de 2 ppm), et riche en métabolite d'intérêt. 3025217 12 L'invention concerne donc une farine susceptible d'être obtenue après transformation d'une biomasse de protistes, particulièrement de microalgues et/ou de cyanobactéries, susceptible d'être obtenue par le procédé selon l'invention. Quelle que soit la forme d'utilisation du produit susceptible d'être obtenu par le 5 procédé selon l'invention (biomasse native ou transformée), ledit produit peut être utilisé pur ou mélangé à d'autres ingrédients classiquement utilisés, particulièrement en alimentation ou en cosmétique. L'invention concerne également tout produit pouvant comprendre au moins de la biomasse de protistes, particulièrement de microalgues et/ou de cyanobactéries, 10 susceptible d'être obtenue selon l'invention. L'invention concerne aussi tout produit pouvant comprendre au moins de la farine issue de la transformation de la biomasse de protistes, particulièrement de microalgues et/ou de cyanobactéries, susceptible d'être obtenue selon l'invention. L'invention a particulièrement pour objet le procédé de culture selon l'invention 15 appliqué à la culture de microalgues, lesdites microalgues pouvant être choisies parmi les classes des Chlorophyceae et des Trebouxiophyceae, qui sont deux classes d'algues vertes très proches phylogénétiquement (Lewis and McCourt, 2004 Am. J. Bot., 91 (10) : 1535-1556). La classification des microalgues, basée à l'origine sur des caractéristiques morphologiques et biochimiques, a été plusieurs fois 20 remaniée pour intégrer les données génétiques au fur et à mesure de leur disponibilité. Il est apparu que certains genres comme Chlorella et Chlamydomonas sont polyphylétiques, c'est à dire qu'ils se retrouvent dans plusieurs classes. Par exemple, on retrouve des membres du genre Chlorella dans les classes des Chlorophyceae et des Trebouxiophyceae. Parmi la classe des Chlorophyceae, les 25 souches choisies appartiendront avantageusement aux genres Scenedesmus, Desmodesmus, Monoraphidium et Chlorella. Parmi la classe des Trebouxiophyceae, les souches choisis appartiendront avantageusement au genre Chlorella. Lorsque les microalgues sont du genre Chlorella, elles pourront être choisies parmi les espèces C. acuminata, C. anitrata, C. antarctica, C. botryoides, C. 30 conductrix, C. conglomerata, C. desiccata, C. emersonii, C. fusca, C. glucotropha, C. homosphaera, C. infusionum, C. luteoviridis, C. marina, C. miniata, C. minutissima, C. mirabilis, C. nocturne, C. oocystoides, C. ovalis, C. parasitica, C. parva, C. peruviana, C. protothecoides, C. pyrenoidosa, C. regularis, C. rugosa, C. saccharophila, C. saline, C. sorokiniana, C. spaerckii, C. stigmatophora, C. 3025217 13 subsphaerica, C. variabilis, C. variegata, C. vulgaris, C. xanthella, C. zopfingiensis. Avantageusement, selon l'invention, les algues du genre Chlorella pourront être des algues choisies parmi les espèces C. sorokiniana, C. vulgaris et C. saccharophila. Lorsque les microalgues sont du genre Scenedesmus, elles pourront être 5 choisies parmi les espèces S. abundans, S. aciculatus, S. aculeolatus, S. aculeotatus, S. acuminatus, S. acutiformis, S. acutus, S. aldavei, S. ambuehlii, S. anhuiensis, S. anomalus, S. apicaudatus, S. apiculatus, S. arcuatus, S. aristatus, S. armatus, S. arvernensis, S. bacillaris, S. baculiformis, S. bajacalifomicus, S. balatonicus, S. basiliensis, S. bernardii, S. bicaudatus, S. bicellularis, S. bidentatus, 10 S. bijuga, S. bijugatus, S. bijugus, S. brasiliensis, S. breviaculeatus, S. brevispina, S. caribeanus, S. carinatus, S. caudato-aculeolatus, S. caudatus, S. chlorelloides, S. circumfusus, S. coalitus, S. costatogranulatus, S. crassidentatus, S. curvatus, S. decorus, S. denticulatus, S. deserticola, S. dileticus, S. dimorphus, S. disciformis, S. dispar, S. distentus, S. ecornis, S. ellipsoideus, S. ellipticus, S. falcatus, S. 15 fenestratus, S. grahneisii, S. granulatus, S. gujaratensis, S. hanleyi, S. helveticus, S. heteracanthus, S. hindakii, S. hirsutus, S. hortobagyi, S. huangshanensis, S. hystrix, S. incrassatulus, S. indianensis, S. indicus, S. intermedius, S. jovais, S. jugalis, S. kerguelensis, S. kissii, S. lefevrei, S. littoralis, S. longispina, S. Longus, S. mirus, S. multistriatus, S. naegelii, S. nanus, S. oahuensis, S. obliquus, S. obtusus, S. 20 olvaltemus, S. opoliensis, S. ovaltemus, S. pannonicis, S. papillosum, S. parisiensis, S. parvus, S. pecsensis, S. perforatus, S. planctonicus, S. plarydiscus, S. platydiscus, S. pleiomorphus, S. polessicus, S. polyglobulus, S. polyspinosus, S. praetervisus, S. prismaticus, S. producto-capitatus, S. protuberans, S. pseudoarmatus, S. pyrus, S. quadrialatus, S. quadricauda, S. quadrispina, S. 25 raciborskii, S. reginae, S. reniformis, S. rostrato-spinosus, S. rotundus, S. schnepfii, S. securiformis, S. semipulcher, S. senilis, S. serrato-perforatus, S. serratus, S. serrulatus, S. setiferus, S. smithii, S. soli, S. sooi, S. spinosus, S. spinulatus, S. striatus., S. subspicatus, S. tetradesmiformis, S. tricostatus, S. tschudyi, S. vacuolatus, S. velitaris, S. verrucosus, S. vesiculosus, S. weberi, S. wisconsinensis, 30 S. wuhanensis, S. wuhuensis. Avantageusement selon l'invention les algues du genre Scenedesmus pourront être des algues choisies parmi les espèces S. abundans, S. armatus et S. obliquus. Lorsque les microalgues sont du genre Desmodesmus, elles pourront être choisies parmi les espèces D. abundans (dans toutes ses variantes), D. aculeolatus, 3025217 14 D. ambuehlii, D. armatus (dans toutes ses variantes), D. arthrodesmiformis, D. asymmetricus, D. baconii, D. bicaudatus, D. bicellularis, D. brasiliensis (dans toutes ses variantes), D. caudato-aculeatus (dans toutes ses variantes), D. communis (dans toutes ses variantes), D. costatogranulatus (dans toutes ses variantes), D. cuneatus, 5 D. curvatocornis, D. denticulatus (dans toutes ses variantes), D. dispar, D. echinulatus, D. elegans, D. eupectinatus, D. fennicus, D. flavescens (dans toutes ses variantes), D. gracilis, D. grahneisii, D. granulatus, D. hystricoides, D. hystrix, D. insignis, D. intermedius (dans toutes ses variantes), D. itascaensis, D. kissii, D. komarekii (dans toutes ses variantes), D. lefevrei (dans toutes ses variantes), D. 10 lunatus, D. magnus, D. maximus (dans toutes ses variantes), D. microspina, D. multicauda, D. multiformis, D. multivariabilis (dans toutes ses variantes), D. opoliensis (dans toutes ses variantes), D. pannonicus, D. perdix, D. perforates (dans toutes ses variantes), D. perforatus, D. pirkollei, D. pleiomorphus, D. polyspinosus, D. protuberans, D. pseudodenticulatus, D. pseudohystrix, D. pseudoserratus, D. 15 quadricaudatus, D. regularis, D. santosii, D. schnepfii, D. serratoides, D. serratopectinatus, D. serratus, D. sp. CL1, D. sp. HegewalD. 1987-51, D. sp. Itas2/24S-1d, D. sp. Itas6/3T-2d, D. sp. Itas6/3T-2W, D. sp. Itas8/18S-6d, D. sp. Mary6/3T-2d, D. sp. NDem6/3P-3d, D. sp. NDem9/21T-10W, D. sp. Tow10/11T-12W, D. sp. Tow10/11T-17W, D. sp. Tow10/11T-1VV, D. sp. Tow10/11T-2W, D. sp. Tow10/11T- 20 3W, D. sp. Tow10/11T-6W, D. sp. Tow10/11T-8W, D. sp. Tow6/16T-10W, D. sp. Tow6/16T-15W, D. sp. Tow6/16T-16W, D. sp. Tow6/16T-17W, D. sp. Tow6/16T26W, D. sp. Tow6/16T-31W, D. sp. Tow6/16T-32W. , D. sp. Tow6/16T-35W, D. sp. Tow6/16T-8W, D. sp. Tow6/16T-9W, D. sp. Tow6/3T-11d, D. sp. Tow8/18P-13W, D. sp. Tow8/18P-14W, D. sp. Tow8/18P-1d, D. sp. Tow8/18P-25W, D. sp. Tow8/18P- 25 3W, D. sp. Tow8/18P-4W, D. sp. Tow8/18T-10W, D. sp. Tow8/18T-23W, D. sp. Tow8/18T-25W, D. sp. Tow8/18T-5W, D. sp. WTwin8/18P-2d, D. spinosus, D. spinulatus, D. subspicatus (dans toutes ses variantes), D. tropicus (dans toutes ses variantes), D. ultrasquamatus. Avantageusement, selon l'invention, les algues du genre Desmodesmus pourront 30 être des algues choisies parmi les espèces D. istacaensis, D.intermedius et D. costado-granulatus. Lorsque les microalgues sont du genre Monoraphidium, elles pourront être choisies parmi les espèces M. braunii, M. circinale, M. contortum, M. convolutum, M. dybowskii (dans toutes ses variantes), M. griffithii, M. minutum, M.neglectum, 3025217 15 M.pusillum, M. saxatile, M. terrrestre, M. sp. AKS-5, M. sp. Dek19, M. sp. FXY-10, M. sp. GK12, M. sp. IKA11, M. Itas (dans toutes ses variantes), M. sp. KMMCC (dans toutes ses variantes), M. sp. LUCC004, M. sp.N°5F4, M. sp. NTAI03, M. sp. PTP1, M. sp. PTP4, M. sp. SS. 5 Avantageusement, selon l'invention, les algues du genre Monoraphidium pourront être des algues choisies parmi les espèces M. minutum, M. circinale et M. sp. GK12. Selon cette variante de l'invention, la culture peut être réalisée avec au moins une source de lumière émettant dans les longueurs d'onde présentant un spectre 10 étroit centré sur une longueur d'onde comprise entre 450 nm et 500 nm, de préférence comprise entre 460 nm et 490 nm, très préférentiellement centrée à 475 nm, dont l'action sur la culture pourra conduire à une biomasse appauvrie en chlorophylle (moins de 500 ppm, avantageusement moins de 100 ppm, très avantageusement moins de 2 ppm), et riche en agents antioxydants, particulièrement 15 riche en caroténoïdes (carotènes et xanthophylles, particulièrement lutéine et/ou astaxanthine), en quantité comprise entre 1000 et 10000 ppm, avantageusement entre 2000 et 5000 ppm, répondant ainsi à un besoin, particulièrement dans l'industrie alimentaire, parce que plus appétentes, ayant meilleur goût, apportant des antioxydants en quantité importante et pouvant être utilisable dans l'alimentation zo animale ou humaine. L'invention a donc également pour objet une biomasse d'au moins une souche de microalgues choisie parmi les genres Scenedesmus, Desmodesmus, Monoraphidium et Chlorella, susceptible d'être obtenue par le procédé selon l'invention, particulièrement une biomasse appauvrie en chlorophylle et riche en 25 agents antioxydants, particulièrement riche en caroténoïdes, ladite biomasse pouvant comprendre moins de 500 ppm, avantageusement moins de 100 ppm, très avantageusement moins de 2 ppm de chlorophylle et riche en une quantité en agents antioxydants, particulièrement en caroténoïdes (carotènes et xanthophylles, particulièrement lutéine et/ou astaxanthine), comprise entre 1000 et 10000 ppm, 30 avantageusement entre 2000 et 5000 ppm. Certaines souches de microalgues produisent naturellement de la lutéine et en moindre quantité, de l'astaxanthine. Il est possible de favoriser la production d'astaxanthine par rapport à la lutéine en apportant une forte intensité lumineuse 3025217 16 et/ou en utilisant un milieu carencé en azote (Cordero et al., Mar. Drugs 2012, 10, 2069-2088). Avantageusement la production en astaxanthine peut être améliorée par rapport à la production de lutéine en apportant une forte intensité lumineuse et en utilisant un 5 milieu carencé en azote. Les inventeurs ont en effet montré que la culture d'au moins une souche de microalgues choisie parmi les genres Scenedesmus, Desmodesmus, Monoraphidium et Chlorella, présentant au moins la combinaison des facteurs suivants : - présence d'une source de carbone ; 10 - soumission pendant un temps suffisant à au moins un éclairage présentant un spectre étroit de longueur d'onde comprise entre 450 nm et 500 nm ; - concentration en azote réduite ; et - forte intensité lumineuse. peut conduire à la production d'une biomasse non seulement pauvre en chlorophylle 15 et comprenant une quantité d'agents antioxydants, particulièrement des caroténoïdes, au moins normale voire améliorée, mais également dont la production en astaxanthine est favorisée par rapport à la production en lutéine. L'astaxanthine a un pouvoir oxydant bien supérieur à la lutéine, stimule le système immunitaire, et présente des effets anti-inflammatoires. Il peut donc être 20 donc très intéressant d'augmenter la quantité d'astaxanthine, même si cela suppose une baisse de la quantité de lutéine. Ainsi, selon une autre variante de l'invention, une culture d'au moins une souche de microalgues choisie parmi les genres Scenedesmus, Desmodesmus, Monoraphidium et Chlorella, peut être soumise à au moins une source de lumière 25 émettant dans les longueurs d'onde présentant un spectre étroit centré sur une longueur d'onde comprise entre 450 nm et 500 nm, de préférence comprise entre 460 nm et 490 nm, très préférentiellement centrée à 475 nm, à une carence en azote et/ou (simultanément ou indépendamment) à une forte intensité lumineuse. Par carence en azote il est entendu selon l'invention une concentration en azote 30 (sous toute forme connue) dans le milieu de culture qui pourra être comprise entre 0 et 0,5 mM, de préférence entre 0 et 100 pM. Plus précisément selon cette variante, la biomasse ainsi produite possède un taux de lutéine compris entre 10 ppm et 1500 ppm, avantageusement entre 100 ppm 3025217 17 et 500 ppm et un taux d'astaxanthine compris entre 10 ppm et 1000 ppm, avantageusement entre 200 ppm et 500 ppm. L'invention concerne également la biomasse susceptible d'être obtenue par l'une quelconque des variantes du procédé selon l'invention. 5 Particulièrement le procédé de culture de microalgues selon l'invention incluant une étape de carence en azote peut permettre d'obtenir une biomasse appauvrie en chlorophylle (moins de 500 ppm, avantageusement moins de 100 ppm, très avantageusement moins de 2 ppm), riche en agents antioxydants, en particulier en caroténoïdes (carotènes et xanthophylles, particulièrement lutéine et/ou 10 astaxanthine) en quantité comprise entre 1000 ppm et 10000 ppm, avantageusement entre 2000 ppm et 5000 ppm dont en particulier de la lutéine en une quantité comprise entre 1000 et 10000, avantageusement entre 2000 ppm et 5000 ppm, et/ou de l'astaxanthine en une quantité comprise entre 10 ppm et 1000 ppm, avantageusement entre 200 ppm et 500 ppm. 15 L'invention concerne donc également cette biomasse en microalgues susceptible d'être obtenue par le procédé selon l'invention incluant ou non une étape de carence en azote. Selon l'invention, il est aussi possible de transformer ladite biomasse en une farine répondant à un besoin en particulièrement dans l'industrie alimentaire, parce 20 que plus appétentes, ayant meilleur goût, apportant des antioxydants en quantité importante et pouvant être utilisable dans l'alimentation animale ou humaine. L'invention concerne donc une farine susceptible d'être obtenue après transformation de ladite biomasse de microalgues susceptible d'être obtenue par le procédé selon l'invention incluant ou non une étape de carence en azote. 25 Quelle que soit la forme d'utilisation du produit susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'invention incluant une étape de carence en azote (biomasse native ou transformée), ledit produit peut être utilisé pur ou mélangé à d'autres ingrédients classiquement utilisés, particulièrement en alimentation ou en cosmétique. L'invention concerne également tout produit pouvant comprendre au moins de la 30 biomasse de microalgues susceptible d'être obtenue par le procédé selon l'invention, incluant ou non une étape de carence en azote. L'invention concerne aussi tout produit pouvant comprendre au moins de la farine issue de la transformation de la biomasse de microalgues susceptible d'être 3 0 2 5 2 1 7 18 obtenue par le procédé selon l'invention, incluant ou non une étape de carence en azote. Les phycobiliprotéines sont présentes chez les cyanobactéries et certaines microalgues appartenant aux embranchements des Rhodophyta, Glaucophyta et 5 Cryptophyta. Il existe quatre types de phycobiliprotéines : l'allophycocyanine, la phycocyanine, la phycoérythrine et la phycoérythrocyanine. Ces pigments peuvent être utilisés dans des domaines applicatifs variés tels que les marqueurs fluorescents pour des tests analytiques (phycoérythrine et allophycocyanine), comme colorant dans l'industrie 10 agroalimentaire et cosmétique (phycocyanine et phycoérythrine). La phycocyanine est également étudiée pour ses propriétés pharmacologiques comme agent antioxydant, anti-inflammatoire, neuroprotecteur et hépatoprotecteur. Selon Sørensen et al. 2013 (J Sci Food Agric. Sep;93(12):2933-8), la phycocyanobiline, qui est un constituant de la phycocyanine, présente un intérêt 15 pharmacologique important. En effet, la phycocyanobiline peut être réduite par voie enzymatique en phycocyanorubine qui est structurellement similaire à la bilirubine, un antioxydant naturel circulant dans le plasma et qui protège de l'oxydation des lipides. Un taux de bilirubine plasmatique élevé a été lié à une baisse de la fréquence de certaines formes de cancer et de diabète et peut protéger contre les infections zo grippales. Les phycobiliprotéines sont toutes constituées d'un pigment central, l'allophycocyanine, qui a pour rôle de capter l'énergie lumineuse émise par fluorescence par la phycoérythrine et la phycocyanine lorsqu'elles sont excitées par la lumière. L'allophycocyanine transmet à son tour cette énergie à la chlorophylle 25 pour prendre part à la photosynthèse. L'invention a particulièrement pour objet le procédé de culture selon l'invention appliqué à la culture de cyanobactéries, lesdites cyanobactéries pouvant être choisies parmi les classes des Cyanophyceae. L'invention a également pour objet un procédé de culture de microalgues 30 cultivées selon le procédé de l'invention, lesdites microalgues pouvant être choisies parmi les embranchements des Rhodophyta, Glaucophyta et Cryptophyta. La phycoérythrine, de couleur pourpre, a un pic d'absorption maximal à 565-575 nm et la phycocyanine, de couleur bleue, a un pic d'absorption maximal situé à 615- 3025217 19 640 nm. L'allophycocyanine a quant à elle une couleur bleu-vert et un pic d'absorption maximal situé à 650-655 nm. La phycoérythrine peut être produite en grande quantité par la majorité des microalgues et particulièrement par les microalgues appartenant aux 5 embranchements Rhodophyta dont on peut citer les souches et les espèces Porphyridium cruentum et Rhodosorus marinus et Cryptophyta, dont on peut citer les genres et espèces Campylomonas, Chilomonas dont l'espèce Chilomonas paramecium, Chroomonas, Cryptomonas dont l'espèce Cryptomonas erosa, Falcomonas, Geminigera, Guillardia, Hemiselmis, Plagioselmis, Proteomonas, 10 Rhodomonas, Storeatula, Teleaulax, Goniomonas dont l'espèce Goniomonas truncata. De même, la phycoérythrine peut également être produite en grande quantité par certaines cyanobactéries comme les souches du genre Gloeothece dont on peut citer les espèces Gloeothece abiskoensis, Gloeothece aggregata, Gloeothece 15 baileyana, Gloeothece confluens, Gloeothece cyanochroa, Gloeothece dubia, Gloeothece endochromatica, Gloeothece filiformis, Gloeothece fusco-lutea, Gloeothece incerta, Gloeothece interspersa, Gloeothece kriegeri, Gloeothece linearis, Gloeothece membranacea, Gloeothece neocaledoniense, Gloeothece opalothecata, Gloeothece palea, Gloeothece parvula, Gloeothece prototypa, zo Gloeothece rhodochlamys, Gloeothece rupestris, Gloeothece samoensis, Gloeothece subtilis, Gloeothece tepidariorum, Gloeothece tophacea, Gloeothece ustulata, Gloeothece vibrio, Gloeothece violacea et du genre Gloeotrichia dont on peut citer les espèces Gloeotrichia aethiopica, Gloeotrichia andrenszkyana, Gloeotrichia atra, Gloeotrichia echinulata, Gloeotrichia flagelliformis, Gloeotrichia 25 ghosei, Gloeotrichia indica, Gloeotrichia intermedia, Gloeotrichia jugnetii, Gloeotrichia kamtschatica, Gloeotrichia kurziana, Gloeotrichia letestui, Gloeotrichia longiarticulata, Gloeotrichia longicauda,_Gloeotrichia murgabica, Gloeotrichia natans, Gloeotrichia pilgeri, Gloeotrichia pisum, Gloeotrichia punctulata, Gloeotrichia rabenhorstii, Gloeotrichia raciborskii, Gloeotrichia satina, Gloeotrichia spiroides, 30 Gloeotrichia tuzsonii. La phycocyanine peut être produite principalement par les cyanobactéries et certaines microalgues appartenant à l'embranchement des Rhodophyta. Chez les cyanobactéries, on pourra citer les souches appartenant à la classe des Cyanophyceae, particulièrement les souches appartenant aux genres Nodularia, 3 0 2 5 2 1 7 20 Nostoc, Nostochopsis, Phormidium et plus particulièrement les espèces Anabaena marina, Anabaena sp., Aphanizomenon flos-aquae, Arthronema africanum, Spirulina fusiformis, Spirulina maxima, Spirulina platensis, Arthrospira platensis, Spirulina sp., Synechocystis sp., Synechococcus elongates, Synechococcus lividus, 5 Synechococcus vulcanus et Synechococcus sp.. Chez les microalgues de l'embranchement des Rhodophyta, on pourra citer les souches des espèces Galdieria sulphuraria et Porphyridium aeruginum. Par application du procédé selon l'invention, il est possible d'augmenter de façon significative la production de phycobiliprotéines en illuminant les protistes d'intérêt 10 avec une lumière focalisée sur les longueurs d'ondes qui sont principalement absorbées par le pigment ciblé par rapport à une lumière blanche ou une lumière moins focalisée sur une longueur d'onde. Plus précisément, une illumination centrée sur 570 ± 25 nm permettra d'augmenter la synthèse et l'accumulation de phycoérythrine chez les cyanobactéries 15 et les microalgues concernées précédemment citées. De la même manière, une illumination centrée sur une longueur d'onde de 630 ± 25 nm permettra de favoriser la synthèse et l'accumulation de phycocyanine chez les cyanobactéries et les microalgues concernées précédemment citées. L'allophycocyanine est commune à toutes les souches productrices de 20 phycobiliprotéines. La demanderesse a pu observer que l'éclairage particulier qui est mis en oeuvre dans le cadre de cette invention permet également d'augmenter l'accumulation de ce pigment. Ainsi, l'invention concerne le procédé selon l'invention, caractérisé en ce que la culture est réalisée avec au moins une souche de cyanobactéries ou de microalgues 25 et avec au moins une source de lumière émettant dans les longueurs d'onde présentant un spectre étroit centré sur une longueur d'onde comprise entre 545 nm et 595 nm, de préférence comprise entre 560 nm et 580 nm, très préférentiellement centrée à 570 nm. L'invention concerne aussi le procédé selon l'invention, caractérisé en ce que la 30 culture est réalisée avec au moins une souche de cyanobactéries ou de microalgues et avec au moins une source de lumière émettant dans les longueurs d'onde présentant un spectre étroit centré sur une longueur d'onde comprise entre 605 nm et 655 nm, de préférence comprise entre 615 nm et 645 nm, très préférentiellement centrée à 630 nm. 3 0 2 5 2 1 7 21 L'invention concerne donc également l'utilisation du procédé selon l'invention pour la production de phycobiliprotéines par des cyanobactéries et les microalgues. L'invention concerne particulièrement l'utilisation du procédé selon l'invention pour la production de phycoérythrine par les cyanobactéries et les microalgues avec 5 un éclairage de longueur d'onde centrée à 570 ± 25 nm. L'invention concerne aussi l'utilisation du procédé selon l'invention pour la production de phycocyanine par les cyanobactéries et les microalgues avec un éclairage de longueur d'onde centrée à 630 ± 25 nm. L'invention concerne enfin l'utilisation du procédé selon l'invention pour la 10 production d'allophycocyanine par les cyanobactéries et les microalgues avec un éclairage de longueur d'onde centrée à 570 ± 25 nm et/ou à 630 ± 25 nm. L'invention concerne également la biomasse susceptible d'être obtenue par l'une quelconque des variantes du procédé selon l'invention. L'invention concerne donc également cette biomasse en microalgues susceptible 15 d'être obtenue par le procédé selon l'invention incluant ou non une étape de carence en azote. L'invention concerne donc une farine susceptible d'être obtenue après transformation de ladite biomasse de microalgues susceptible d'être obtenue par le procédé selon l'invention incluant ou non une étape de carence en azote. 20 L'invention concerne également tout produit pouvant comprendre au moins de la biomasse de microalgues susceptible d'être obtenue par le procédé selon l'invention, incluant ou non une étape de carence en azote. L'invention concerne aussi tout produit pouvant comprendre au moins de la farine issue de la transformation de la biomasse de microalgues susceptible d'être 25 obtenue par le procédé selon l'invention, incluant ou non une étape de carence en azote. Les exemples qui suivent illustrent la présente demande sans toutefois la limiter. Exemple 1 : Production de pigments chlorophylliens et caroténoïdes par les m icroalgues Scenedesmus et Desmodesmus. 30 Des cultures de Scenedesmus abundans et Desmodesmus pannonicus sont réalisées en flasques de 250 mL avec 50 mL de milieu de culture BG11 enrichi en azote (Rippka et al., 1979). Le substrat carboné utilisé est du glucose à 10 g/L. La température de culture est fixée à 26°C. Les conditions d'éclairage sont les suivantes: 3025217 22 - Pour l'hétérotrophie : les cultures sont maintenues dans l'obscurité. - Pour la mixotrophie: les cultures sont éclairées en flashs (0,5 hertz, 1800 flashs par heure) avec une intensité de 200 pmol.m-2.s-1. L'apport de lumière est obtenu par des lampes DEL dont la longueur d'onde s'étend de 450 nm à 500nm, le 5 pic étant centré à 475 nm, pour la mixotrophie limitée à la lumière bleue. Pour la mixotrophie « blanche », les DEL utilisées couvrent un spectre lumineux de 370 à 700 nm, avec 3 pics centrés à 445, 550 nm et 630 nm. Après 7 jours de culture, les cellules sont centrifugées puis lyophilisées. Les méthodes d'extraction des pigments sont connues de l'homme du métier. Le tableau ci-dessous présente les résultats de 3 répliquats biologiques. Souche Mode trophique Chlorophylle a Chlorophylle Lutéine (ppm) b (ppm) (ppm) Scenedesmus Hétérotrophie 99 (± 40) 58 (± 29) 68 (± 27) abundans Scenedesmus Mixotrophie 210 (± 31) 304 (± 58) 3189 (± 245) abundans "bleue" (450-500 nm) Scenedesmus Mixotrophie 7705 (± 354) 2101 (± 287) 3568 (± 332) abundans "blanche" Desmodesmus hétérotrophie 270 (± 36) 540 (±134) 54 (± 11) pannonicus Desmodesmus Mixotrophie 235 (± 76) 688 (± 66) 1857 (±163) pannonicus "bleue" (450-500 nm) Desmodesmus Mixotrophie 13886 (±204) 4217 (±157) 2289 (± 141) pannonicus "blanche" L'essai réalisé ici démontre les avantages du procédé selon l'invention. On constate en effet que la culture en mixotrophie "bleue" permet d'obtenir une biomasse à faible teneur en chlorophylle a ou b par rapport à une culture en 15 mixotrophie "blanche" avec un taux de lutéine quasiment identique mais largement amélioré par rapport à une culture en hétérotrophie. La mixotrophie "bleue" combine les avantages de l'hétérotrophie en terme de quantité de chlorophylle a ou b et de la Mixotrophie blanche en termes de lutéine. 20 REVENDICATIONS1. Procédé de culture de protistes, particulièrement de microalgues et/ou de cyanobactéries, dans un milieu de culture comprenant au moins une source de carbone, et comprenant au moins une étape d'éclairage par un rayonnement présentant un spectre étroit de longueur d'onde centrée sur une longueur d'onde choisie correspondant au sommet du pic d'absorption d'un métabolite d'intérêt. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'éclairage est sous forme de flashes. 3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que le nombre de flashs est compris entre 2 et 3,6 104 par heure, préférentiellement entre 3 et 3,6 x 103 par heure, ou entre 3,6 x 104 et 5,4 x 109 par heure, préférentiellement entre 3,6 x 105 et 5,4 x 109. 4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'éclairage est continu et que l'intensité lumineuse varie au cours du temps. 5. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que l'intensité de la lumière est comprise entre 5 et 1000 pmol. m-2. s -1, de préférence entre 5 et 500 pmol. m-2. s-1, ou 50 et 400 pmol. m-2. s', et plus préférentiellement entre 150 et 300 pmol. m-2. s-1. 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 4 ou 5, caractérisé en ce que les variations de l'intensité lumineuse ont une amplitude comprise entre 5 pmol. m-2. s-1 et 2000 pmol. m-2. s-1, de préférence entre 50 et 1500, plus préférentiellement entre 50 et 200 pmol. m-2. s-1. 7. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la culture est réalisée avec au moins une source de lumière émettant dans les longueurs d'onde présentant un spectre étroit centré sur une longueur d'onde comprise entre 450 nm et 500 nm, de préférence comprise entre 460 nm et 490 nm, très préférentiellement centrée à 475 nm. 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce qu'en outre la culture de microalgues est soumise à une carence en azote. 9. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que la culture est réalisée avec des microalgues choisies parmi les classes 3025217 24 des Chlorophyceae et des Trebouxiophyceae, avantageusement choisies parmi les genres Scenedesmus, Desmodesmus, Monoraphidium et Chlorella. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que la culture est réalisée avec au moins une source de lU-Mière émettant dans les longueurs d'onde présentant un spectre étroit centré sur une longueur d'onde comprise entre 545 nm et 595 nm, de préférence comprise entre 560 nm et 580 nm, très préférentiellement centrée à 570 nm. 11. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que la culture est réalisée avec au moins une source de lumière émettant dans les longueurs d'onde présentant un spectre étroit centré sur une longueur d'onde comprise entre 605 nm et 655 nm, de préférence comprise entre 615 nm et 645 nm, très préférentiellement centrée à 630 nm. 12. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que la culture est réalisée avec au moins une source de lumière émettant dans les longueurs d'onde présentant un spectre étroit centré sur une longueur d'onde comprise entre 545 nm et 595 nm, de préférence comprise entre 560 nm et 580 nm, très préférentiellement centrée à 570 nm et que la culture est réalisée avec au moins une source de lumière émettant dans les longueurs d'onde présentant un spectre étroit centré sur une longueur d'onde comprise entre 605 nm et 655 nm, de préférence comprise entre 615 nm et 645 nm, très préférentiellement centrée à 630 nm. 13. Procédé selon l'une quelconque des revendications 10 à 12, caractérisé en ce que la culture est réalisée avec des microalgues choisies parmi les embranchements des Rhodophyta, Glaucophyta et Cryptophyta ou avec des cyanobactéries choisies parmi la classe des Cyanophyceae. 14. Biomasse susceptible d'être obtenue par le procédé tel que décrit dans l'une quelconque des revendications 1 à 13. 15. Utilisation de la biomasse telle que décrite à la revendication 14, pour la production de biocarburant, la dépollution, particulièrement des eaux usées, l'alimentation humaine ou animale, la cosmétique, la médecine, préférentiellement l'alimentation humaine ou animale, la cosmétique 16. Utilisation de la biomasse telle que décrite à la revendication 14, pour la production d'une farine. 3025217 25 17. Farine susceptible d'être obtenue après transformation de la biomasse telle que décrite à la revendication 14. 18. Utilisation du procédé tel que décrit dans l'une quelconque des revendications 1 à 13 pour la production de métabolite d'intérêt. 19. Métabolites d'intérêt susceptibles d'être produits par l'utilisation d'une biomasse obtenue par le procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, particulièrement les phycobiliprotéines, encore plus particulièrement la phycoérythrine et/ou la phycocyanine et/ou l'allophycocyanine. 20. Produits comprenant au moins un métabolite d'intérêt susceptibles d'être obtenu par l'utilisation d'une biomasse obtenue par le procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, particulièrement les phycobiliprotéines, encore plus particulièrement la phycoérythrine et/ou la phycocyanine et/ou l'allophycocyanine.