Brevet FR3032709A1 — publié le 20160819

RESUME La présente invention se rapporte à des malto-oligo-saccharides dont la teneur en liaisons osidiques a 1-4 est comprise entre 70 % et 80 % du nombre total de liaisons osidiques de type 1-4. Le terme « malto-oligo-saccharides» fait ici référence à des saccharides comprenant au moins 2 unités saccharides, c'est-à-dire par exemple à des saccharides présentant un degré de polymérisation DP compris entre 2 et 30, lesdits saccharides comprenant au moins un glucide qui est le maltose. Le terme « polysaccharides », également utilisé dans la présente Demande, fait référence de manière plus large à des saccharides comprenant au moins 2 unités saccharides, c'est-à-dire par exemple à des saccharides présentant un degré de polymérisation DP compris entre 2 et 30. De manière particulièrement avantageuse, c'est le réglage fin de la teneur en liaisons osidiques a 1-4 qui conduit à des produits uniques et conformes à la présente invention, attestant d'un compromis idéal entre une richesse en fibres relativement importante et une très faible biodisponibilité du glucose vis-à-vis de l'organisme. On dispose ainsi de produits mixtes et encore jamais identifiés, offrant tous les bénéfices des aliments à base de fibres, avec une valeur nutritionnelle extrêmement faible. Un tel compromis est particulièrement intéressant à mettre en oeuvre dans des régimes alimentaires sains et équilibrés, mais aussi dans le traitement et/ou la prévention de la pathologie du diabète. L'invention porte également sur un procédé original et très simple de mise en oeuvre pour la fabrication de ces malto-oligo-saccharides, où un mélange entre une solution aqueuse de glucides riche en maltose, au moins un polyol et au moins un acide subit un traitement thermique à haute température (entre 130°C et 300°C) et sous pression réduite. Le choix des matières premières de départ et notamment de la solution aqueuse de glucides riche en maltose, mais aussi la durée du traitement font partie des leviers permettant de réguler la teneur en liaisons a 1-4 dans l'intervalle mentionné ci-dessus. Un dernier objet de la présente invention consiste en l'utilisation des malto-oligo-saccharides selon l'invention, en nutrition humaine et animale. PROBLEME TECHNIQUE ET ART ANTERIEUR Depuis plusieurs années, il existe un intérêt certain du grand public pour de nouveaux régimes alimentaires à base de fibres. Par fibres alimentaires, on entend les parties d'origine végétale qui ne sont pas hydrolysées par les enzymes au cours du phénomène de digestion. Ce sont des substances résiduelles provenant de la paroi cellulaire ou le cytoplasme des végétaux, constituées de mélanges complexes de glucides, qui ont été identifiés comme étant des polysaccharides non amylacés. Parmi les fibres alimentaires, on distingue les fibres insolubles des fibres solubles dans l'eau. L'avoine, 3032709 2 l'orge, les fruits, les légumes frais et les légumes secs (haricots, lentilles, pois chiches) constituent de bonnes sources de fibres solubles, tandis que les céréales complètes et le pain complet sont riches en fibres insolubles. Les fibres insolubles, comme la cellulose, les amidons résistants, les fibres de maïs (drêche) ou de soja, ont un rôle essentiellement mécanique dans le tractus gastro-intestinal. 5 Elles ne sont que très peu fermentées par la flore colique et contribuent à la réduction du temps de transit intestinal par effet de lest. Les fibres insolubles contribuent ainsi à prévenir la constipation en augmentant le poids des selles et en réduisant la durée du transit intestinal. Les fibres solubles, comme la pectine et l'inuline, non digestibles par les enzymes intestinales de 10 l'homme ou de l'animal, sont fermentées par la flore colique. Cette fermentation libère des acides gras à courte chaîne dans le côlon, qui ont pour effet de diminuer le pH de celui-ci et par voie de conséquence de limiter le développement de bactéries pathogènes et de stimuler le développement des bactéries bénéfiques. 15 A côté de ces composés majoritairement extraits des plantes, existent des molécules dérivées de l'amidon ou de ses produits d'hydrolyse partielle ou totale. Le polydextrose est par exemple synthétisé par polymérisation aléatoire du glucose en présence de sorbitol et d'un catalyseur acide adéquat (tel l'acide citrique) et à haute température. Ledit polydextrose est largement utilisé dans l'alimentation comme agent de charge et comme ingrédient à faible caloricité. 20 De manière plus générale, les polymères de glucose sont classiquement fabriqués industriellement par hydrolyse des amidons naturels ou hybrides et de leurs dérivés. Ces hydrolysats d'amidon (dextrines, pyrodextrines, etc) sont ainsi produits par hydrolyse acide ou enzymatique d'amidon de céréales ou de tubercules. Ils sont en fait constitués d'un mélange de glucose et de polymères du 25 glucose, de poids moléculaires très variés. Lesdits hydrolysats présentent une large distribution de saccharides contenant à la fois des structures linéaires (liaisons osidiques a 1-4) et branchées (liaisons osidiques a 1-6). A titre d'exemples, les demandes de brevet EP 0 368 451 et US 5,264,568 décrivent un procédé de 30 préparation de pyrodextrines, dont on renforce les caractéristiques de fibres alimentaires par action d'une a-amylase ou de plusieurs a-amylases successivement sur une dextrine ou sur une pyrodextrine en solution et à haute température. Dans la demande de brevet EP 0 530 111, sont décrites des dextrines indigestibles obtenues par 35 extrusion d'un amidon de maïs acidifié déshydraté dans des conditions particulières. Ce traitement peut être complété par l'action d'une a-amylase thermorésistante. La société Demanderesse a elle-même également décrit dans sa demande de brevet EP 1 006 128 des maltodextrines branchées présentant entre 22 % et 35 % de liaisons osidiques 1-6 (à la fois de 40 type a et 13), une teneur en sucres réducteurs inférieure à 20 %, un indice de polymolécularité inférieur 3032709 3 à 5 et une masse moléculaire moyenne en nombre Mn au plus égale à 4500 g/mole. Ces maltodextrines branchées présentent surtout un caractère d'indigestibilité qui a pour conséquence de diminuer leur pouvoir calorique, en empêchant leur assimilation au niveau de l'intestin grêle ; elles constituent donc essentiellement une source de fibres indigestibles. 5 La société Demanderesse a aussi décrit et protégé dans sa demande de brevet WO 2013/128121 des maltodextrines hyperbranchées de faible poids moléculaire, i.e. présentant un dextrose équivalent (DE) compris entre 8 et 15 et un poids moléculaire Mw compris entre 1700 et 3000 Daltons, caractérisées par une teneur en liaisons osidiques 1-6 (à la fois de type a et p) comprise entre 30 % et 45 %, une 10 teneur en fibres indigestibles solubles comprise entre 75 % et 100 % (selon la méthode AOAC N° 2001-03) et de remarquables propriétés hypoglycémiantes, qu'elles traduisent in vitro comme in situ, par un effet limitant vis-à-vis de la digestion de maltodextrines standard. On connaît aussi la demande de brevet WO 2014/158777 qui décrit un carbohydrate utilisable comme 15 ingrédient alimentaire (notamment en tant qu'agent réducteur de calories) contenant à la fois des oligomères linéaires et branchés, dont le taux de sucre est compris entre 5 % et 25 % en poids de son poids sec, avec une teneur en fibres comprise entre 10 % et 70 % de son poids sec. Une autre de ses caractéristiques est de présenter une teneur en polysaccharides avec des poids moléculaires élevés, telle que sa viscosité soit inférieure à 16 000 cPs, à 100 °F et à une teneur en matière sèche de 75 %. 20 On connaît également les demandes de brevet US 7,608,436 et WO 2008/085529 décrivant un produit alimentaire à base d'oligosaccharides, faiblement digestible. Lesdits oligosaccharides présentent ici une teneur en oligomères branchés supérieure à la teneur en oligomères linéaires, et une concentration en oligomères non linéaires et de degré de polymérisation supérieure ou égale à 3 25 supérieure à 20 % en poids sec. On connaît enfin la demande de brevet WO 2014/145276 qui décrit des compositions à base de carbohydrates ayant un faible pouvoir calorique. Différentes familles de carbohydrates y sont décrites et revendiquées, notamment à travers leurs teneurs en molécules de degré de polymérisation 1 et 2, 30 en liaisons 1-6, en somme des liaisons 1-4 et 1-6, à travers le ratio entre les teneurs en liaisons 1-4 et 1-6, et enfin à travers leur poids moléculaire. Par ailleurs, on connaît les produits commercialisés sous les noms de PROMITOR (Tate & Lyle), FIBERSOL (MATSUTANI), LITESSE (DUPONT DANISCO) et NUTRIOSE (ROQUETTE), qui sont 35 tous des produits à base de polysaccharides, plus ou moins riches en fibres. De ce qui précède, il résulte que des innovations continuelles ont été réalisées au moins ces 10 dernières années, dans le domaine des produits riches en fibres et susceptibles de présenter des avantages pour l'homme dans le cadre de nouveaux régimes alimentaires plus sains et mieux 40 équilibrés. Il peut être notamment tout à fait intéressant de disposer d'un produit à la fois riche en 3032709 4 fibres, et susceptible de ne libérer que très peu de glucose lorsqu'il est digéré par l'organisme ou alternativement de présenter une cinétique de libération du glucose très longue vis-à-vis de l'organisme. Ce faisant, cette dernière propriété apparaît potentiellement très intéressante dans le cadre de régimes pour patients diabétiques et/ou en vue de limiter les risques d'exposition face à 5 cette pathologie. SOLUTION TECHNIQUE A cet égard, la société Demanderesse a poursuivi de nombreux travaux et des recherches 10 laborieuses, qui lui ont permis de mettre au point des produits répondant à cette attente. Les produits en question peuvent être définis comme des malto-oligo-saccharides, présentant notamment une teneur en liaisons a 1-4 comprise entre 70 % et 80 % du nombre total de liaisons 1-4. Comparativement aux produits de l'état de la technique connus de la Demanderesse, les malto-oligo- 15 saccharides de la présente Demande présentent des teneurs toute particulières en liaisons a 1-4 jamais décrites ou atteintes jusqu'alors. Parallèlement et selon les connaissances de la Demanderesse, il n'existe pas dans l'état de la technique de produits du type malto-oligo-saccharides présentant une teneur en liaisons a 1-4 comprise entre 70 % et 80 % du nombre total de liaisons 1-4. 20 En outre, c'est grâce à une approche originale associant les techniques de résonance magnétique nucléaire du proton (RMN 1H) et de chromatographie en phase gazeuse que la Demanderesse est parvenue à dégager l'influence du paramètre retenu (i.e. la teneur en liaisons a 1-4 relative à la totalité des liaisons 1-4) sur la teneur en fibres du produit final et la biodisponibilité du glucose vis-à-vis de l'organisme. 25 La RMN donne en effet accès aux proportions en liaisons osidiques totales en a 1-4 et a 1-6 d'une part, et aux autres liaisons osidiques d'autre part. Quant à la spectrométrie de masse, elle permet d'accéder aux proportions en liaisons osidiques totales en 1-4, 1-6, 1-2 et 1-3 mais ce, sans indication quant à la nature de l'anomérie. Cette dernière technique est mise en oeuvre dans le cadre de la 30 méthode bien connue de l'homme du métier dite de HAKOMORI, et permettant justement de quantifier les teneurs en liaisons osidiques totales en 1-4, 1-6, 1-2 et 1-3. Cette méthode décrite pour la première fois il y a plus de 50 ans (HAKOMORI, S., 1964, J. Biol. Chem., 55, 205) est aujourd'hui largement utilisée dans le monde scientifique (voir notamment la demande de brevet EP 1 006 128 déjà citée dans la présente Demande). 35 3032709 5 C'est sur la base de ces travaux et d'une telle approche que la Demanderesse a démontré la criticité de la teneur en liaisons a 1-4 relativement à la totalité des liaisons osidiques de type 1-4, en vue d'obtenir: 5 un apport en fibres suffisant en vue de maintenir les effets bénéfiques précités liés à un régime riche en fibres, une biodisponibilité en glucose extrêmement faible, et notamment bien inférieure à celle affichée par la majorité des produits commerciaux disponibles à ce jour. 10 Cette biodisponibilité en glucose fait référence au taux de glucose libéré après digestion par les enzymes intestinales. De manière tout à fait avantageuse, la régulation très précise de la teneur en liaisons a 1-4 relativement à la totalité des liaisons osidiques de type 1-4 dans l'intervalle précité est le principal 15 levier pour aboutir au compromis idéal entre cet apport suffisant en fibres et cette biodisponibilité extrêmement faible en glucose. De plus, c'est au moyen d'un procédé très simple que la Demanderesse est parvenue à synthétiser les malto-oligo-saccharides qui font l'objet de la présente invention. De manière très schématique, ce 20 procédé consiste initialement à fournir une solution aqueuse de glucides riche en maltose, à ajouter au moins un polyol et au moins un acide, puis à réaliser un traitement thermique à haute température (entre 130°C et 300°C) sous pression réduite. Enfin, il convient d'indiquer que dans toute la présente Demande, le taux de fibres, le taux de glucose 25 libéré ou accessible après digestion enzymatique ainsi que les teneurs en liaisons osidiques sont déterminés selon des protocoles stricts qui font l'objet d'une description très détaillée dans la partie expérimentale relative à ladite Demande. 30 DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION Un premier objet de la présente invention repose sur un procédé de fabrication de malto-oligosaccharides comprenant les étapes consistant à : 35 a) fournir une solution aqueuse d'au moins 2 glucides, caractérisée en ce que 40 % à 95 % du poids sec de ladite solution est constitué de maltose, b) mettre la solution aqueuse résultant de l'étape a) en présence d'au moins un polyol, et d'au moins un acide minéral ou organique, c) augmenter éventuellement la teneur en matière sèche de la solution aqueuse résultant de 40 l'étape b) jusqu'à au moins 75 % en poids de son poids total, 3032709 6 d) réaliser un traitement thermique sur la solution aqueuse résultant de l'étape b) ou éventuellement de l'étape c), à une température comprise entre 130°C et 300°C et sous une dépression comprise entre 50 et 500 mbars. 5 La première étape du procédé selon l'invention consiste à fournir une solution aqueuse de glucides, dont 40 % à 95 % de son poids sec est constitué de maltose. Selon une variante de l'invention tout particulièrement préférée, la dite solution aqueuse résultant de l'étape a) contient en outre du glucose. 10 Dans la présente Demande, on identifie à travers les glucides ceux de ces composés dont le degré de polymérisation : est égal à 1 tels que notamment le glucose, le galactose et le fructose, est égal à 2 tels que notamment le maltose, le sucrose, le lactose et le tréhalose, 15 est compris entre 3 et 9, tels que notamment à la fois les maltodextrines et d'autres composés sans ce-glucans comme le raffinose, le stachyose, les fructo et galacto oligosaccharides, le polydextrose et l'inuline, est supérieur ou égale à 10, tels que notamment à la fois l'amylose, l'amylopectine, les amidons modifiés, mais aussi les composés non amylacés comme notamment la cellulose, 20 l'hémicellulose, les hydrocolloïdes. Dans cette étape, le maltose et les autres glucides peuvent être apportés sous forme de produits secs (poudres) ou alternativement sous forme liquide. S'il s'agit de produits secs, il convient de leur ajouter de l'eau de manière à réaliser la solution aqueuse objet de l'étape a). La forme liquide est appelée 25 « sirop » et consiste en une solution aqueuse d'au moins un glucide. Une variante préférée de l'invention consiste à mélanger un sirop contenant au moins un glucide et au moins un glucide sous forme de produit sec. Selon cette variante, le mélange est facilité si on porte la température à au moins 50°C et au plus 90°C. 30 La solution aqueuse résultant de l'étape a) présente une teneur en matière sèche d'au moins 50 %, préférentiellement d'au moins 70 %, très préférentiellement d'au moins 80 % en poids de son poids total, et dans tous les cas d'au plus 95 % en poids de son poids total. Un sirop d'au moins un glucide particulièrement préféré est un sirop dont la distribution des degrés de 35 polymérisation (DP) est la suivante : de 1 % à 5 % de composés ayant un degré de polymérisation de 1 de 40 % à 75 % de composés ayant un degré de polymérisation de 2 de 10 % à 25 % de composés ayant un degré de polymérisation de 3 40 de 5 % à 10 % de composés ayant un degré de polymérisation entre 4 inclus et 8 inclus 3032709 7 - de 1 % à 15 % de composés ayant un degré de polymérisation entre 9 inclus et 20 inclus - de 1 % à 15 % de composés ayant un degré de polymérisation supérieur strictement à 20 chacun de ces % étant exprimé en % du poids total des glucides contenus dans ledit sirop, et la 5 somme de ces % étant égale à 100 %. Parmi les sirops les plus préférés, on peut citer le sirop commercialisé par la société Demanderesse sous le nom Sirop de glucose 5774, dont la répartition des degrés de polymérisation est concordante avec les gammes énumérées ci-dessus. 10 La deuxième étape du procédé selon l'invention consiste à mettre la solution aqueuse de glucides précédemment décrite en présence d'au moins un polyol, et d'au moins un acide minéral ou organique. Le mélange est facilité si on porte la température du milieu à au moins 50°C et au plus 90°C. 15 Le polyol mis en oeuvre dans le procédé conforme à l'invention pourra notamment être choisi, sans pour autant que ce choix ne soit exhaustif, parmi le glycérol, l'érythritol, le xylitol, l'arabitol, le ribitol, le sorbitol, le dulcitol, le mannitol, le maltitol, l'isomaltitol, le lactitol et leurs mélanges, plus préférentiellement parmi le sorbitol, le mannitol et le maltitol, le polyol le plus préféré étant le maltitol. 20 Le polyol représente 5 % à 30 %, préférentiellement 5 % à 25 %, très préférentiellement 5 % à 10 en poids de la somme des poids secs de glucides, dudit polyol et de l'acide. Le polyol est introduit sous forme d'une solution aqueuse, avec une teneur en matière sèche comprise entre 20 % et 90 %, préférentiellement entre 25 % et 85 %, et très préférentiellement entre 30 % et 80 25 % en poids de son poids total. Alternativement, le polyol peut être initialement sous forme anhydre ; dans ce cas, il peut être dissout directement par introduction dans le sirop contenant au moins un glucide, ou il peut être mis préalablement en solution aqueuse par dissolution dans l'eau. Le procédé conforme à la présente invention met aussi en oeuvre un acide minéral ou organique, 30 préférentiellement organique, en tant que catalyseur de la réaction de polymérisation. Cet acide organique peut être choisi de manière non exhaustive parmi l'acide citrique, sulfurique, fumarique, succinique, gluconique, chlorhydrique, hydrochlorhydrique et les mélanges de ces acides, l'acide citrique étant le plus préféré. 35 Dans tous les cas, l'acide choisi ne devra pas présenter une volatilité trop importante, et ne devra pas présenter d'incompatibilité ou de points de vigilance à l'égard d'une future utilisation dans les domaines de la nutrition humaine et animale. La quantité d'acide mise en oeuvre est ici comprise entre 0,5 % et 2 %, préférentiellement entre 0,5 % 40 et 1,5 %, et est très préférentiellement d'environ 1 % en poids dudit acide par rapport au poids sec de 3032709 8 glucides, du polyol et dudit acide. Dans tous les cas, l'homme du métier saura adapter la quantité d'acide mise en oeuvre, prenant notamment en considération les questions de neutralisation ultérieure, liée à l'emploi d'un éventuel excès dudit acide. L'acide en question peut être utilisé sous forme d'une solution aqueuse avec une teneur en matière sèche comprise entre 20 % et 90 %, préférentiellement 5 entre 25 % et 85 %, et très préférentiellement entre 30 % et 80 % en poids de son poids total. Alternativement, ledit acide peut être initialement sous forme anhydre ; dans ce cas, il peut être dissout directement par introduction dans le sirop de glucides, ou il peut être mis préalablement en solution aqueuse par dissolution dans l'eau. 10 De manière préférée, l'homme du métier mettant en oeuvre le procédé selon la présente invention cherchera à obtenir une teneur en matière sèche pour le milieu réactionnel incluant le mélange de glucides, le polyol et l'acide, comprise entre 20 % et 98 %, préférentiellement entre 25 % et 95 %, et très préférentiellement entre 30 % et 95 % en poids de son poids total. Il saura adapter cette teneur en matière sèche, notamment en fonction de la richesse souhaitée pour le mélange réactionnel, mais 15 aussi entre autre en tenant compte de la viscosité du milieu (eu égard à d'éventuels problématiques de pompabilité et/ou transfert du milieu résultant). Il saura également l'adapter en vue de limiter ou même d'éviter, s'il le souhaite, l'étape c) optionnelle consistant à augmenter la teneur en matière sèche à hauteur d'au moins 75 % en poids sec de la solution aqueuse contenant les glucides, le polyol et l'acide. 20 La troisième étape du procédé selon l'invention est optionnelle puisqu'elle consiste, le cas échéant, à augmenter la teneur en matière sèche de la solution aqueuse résultant de l'étape b) jusqu'à au moins 75 % en poids de son poids total. Ceci est réalisé sous forme d'un traitement thermique, notamment à une température comprise entre 60°C et 150°C, préférentiellement entre 80°C et 120°C. De manière 25 préférée, on appliquera une dépression comprise entre 50 mbars et 500 mbars, préférentiellement entre 100 mbars et 400 mbars. La durée de cette étape est comprise entre 4 et 20 heures. L'homme du métier saura adapter les paramètres temps, température et pression, notamment en fonction de sa teneur en matière sèche initiale et de la teneur en matière sèche qu'il souhaite obtenir au final. 30 La quatrième étape du procédé selon l'invention consiste à réaliser un traitement thermique sur la solution aqueuse résultant de l'étape b) ou éventuellement de l'étape c), à une température comprise entre 130°C et 300°C et sous une dépression comprise entre 50 et 500 mbars. C'est sous ces conditions que s'effectue la réaction de polymérisation. 35 Cette étape est réalisée dans un réacteur de polymérisation, équipé de dispositifs de chauffe et permettant de travailler sous pression réduite. Un tel réacteur peut notamment consister en un four de polymérisation, ou un four sous vide. Alternativement, l'opération d'ajustement de la matière sèche et de polymérisation est réalisée dans le même réacteur, qui dispose avantageusement des moyens et dispositifs précités. 40 3032709 9 La réaction de polymérisation est conduite à une température comprise entre 130°C et 300°C, préférentiellement entre 150°C et 200°C. L'eau générée par la réaction est évacuée de manière continue par évaporation. Cette opération est conduite sous pression réduite, notamment à une pression comprise entre 50 mPa et 500 mPa. Parallèlement, ladite réaction est conduite pendant un 5 temps compris entre 5 minutes et 4 heures, préférentiellement entre 5 minutes et 2 heures. La température et le temps de réaction sont des variables interdépendantes. Il conviendra de veiller à ne pas élever trop la température de manière à éviter tout phénomène de pyrolyse et/ou de dégradation thermique des produits (une telle dégradation pouvant altérer les propriétés sensorielles 10 du produit alimentaire fabriqué au final). Néanmoins, le temps de réaction diminue d'autant que la température augmente, en vue d'une polymérisation complète. De ce point de vue, les produits selon la présente invention peuvent tout à fait bien être fabriqués à une température de l'ordre de 250°C et avec un temps de séjour de 10 minutes, qu'à une température d'environ 180°C et un temps de séjour d'environ 90 minutes. 15 Un deuxième objet de la présente invention consiste en des malto-oligo-saccharides susceptibles d'être obtenus selon le procédé défini précédemment. Ces malto-oligo saccharides présentent une teneur en liaisons cc 1-4 comprise entre 70 % et 80 % du nombre total de liaisons osidiques 1-4. 20 Un autre objet de la présente invention consiste en des malto-oligo-saccharides présentant une teneur en liaisons a 1-4 comprise entre 70 % et 80 % du nombre total de liaisons osidiques 1-4. Ces malto-oligo-saccharides, objets de la présente invention sont également caractérisés en ce qu'ils 25 présentent une teneur en liaisons a 1-6 comprise entre 40 % et 50 % du nombre total de liaisons osidiques 1-6. Ces malto-oligo-saccharides sont également caractérisés en ce qu'ils présentent une teneur en fibres comprise entre 50 % et 70 %. 30 Ces malto-oligo-saccharides sont également caractérisés en ce qu'ils présentent un taux de glucose libéré ou accessible après digestion enzymatique compris entre 1 % et 12 %, plus préférentiellement entre 3 et 9%. 35 Un dernier objet de la présente invention concerne l'utilisation des malto-oligo-saccharides selon l'invention ou susceptibles d'être obtenus selon procédé défini précédemment en nutrition humaine et animale. A titre non limitatif, les malto-oligo-saccharides selon l'invention ou susceptibles d'être obtenus selon 40 procédé défini précédemment peuvent être incorporés dans des compositions ou produits destinés à 3032709 10 l'ingestion et à l'administration orale tels que diverses denrées alimentaires comme les confiseries, les pâtisseries, les crèmes glacées, les pâtes à mâcher, les chewing-gums, les boissons, les confitures, les soupes, les préparations à base de lait, les yaourts, les gâteaux, les aliments préparés pour animaux, les compléments alimentaires, les produits pharmaceutiques, vétérinaires, diététiques ou 5 hygiéniques tels que par exemple les élixirs, les sirops contre la toux, les tablettes ou les comprimés, les pastilles, les solutions d'hygiène buccale, les pâtes et les gels dentifrices. Les exemples qui suivent permettront de mieux appréhender la présente invention, sans pour autant en limiter la portée. 10 3032709 11 EXEMPLES METHODES EXPERIMENTALES 5 Dans toute la présente Demande, les teneurs en liaisons osidiques sont déterminées par RMN, et par la méthode de HAKOMORI. La RMN permet d'accéder aux proportions en liaisons alpha 1,4 et alpha 1-6 d'une part, et aux autres liaisons osidiques d'autre part. 10 La méthode d'HAKOMORI permet d'accéder aux teneurs en liaisons osidiques totales en 1-4, 1-6, 1-2 et 1-3. En ce qui concerne la RMN, on utilise un spectromètre à transformée de Fourier Avance III (Bruker Spectrospin), opérant à 400MHz, et utilisant des tubes RMN de 5 mm, à 60°C. De manière plus 15 générale, on peut utiliser tout autre spectromètre à transformée de Fourier, pour peu que ledit spectromètre soit équipé avec tous les accessoires permettant la réalisation et l'exploitation d'un spectre du proton, ainsi que d'un accessoire permettant de travailler à des températures supérieures à la température ambiante. On utilise de l'eau deutériée, ou D20, (min 99 %), Euryso Top (groupe CEA, Gif-sur-Yvette, France) et du sel sodique de l'acide 3-triméthylsilyl-1-propane sulfonique, ou TSPSA 20 (Aldrich, réf 178837). Le mode opératoire des expériences est le suivant : Introduire 10 mg d'échantillon et 0,75 mL de D20 dans un tube RMN. Boucher le tube, mélanger, puis placer dans un bain-marie. 25 Après dissolution, retirer le tube du bain-marie et laisser refroidir à température ambiante. Ajouter 50 !IL d'une solution de TSPSA à 10 mg/g dans D20. Adapter le spinner sur le tube et placer le tout dans l'aimant. Effectuer l'acquisition, sans suppression de solvant, avec un temps de relaxation d'au moins 10 s et sans rotation, après les réglages appropriés de l'instrument (field, lock phase et shims) 30 Utiliser une fenêtre spectrale comprise entre au moins -0.1 ppm et 9 ppm, en se référant au signal des méthyles du TSPSA calibré à 0 ppm. Le spectre est exploité après transformation de Fourier, correction de phase et soustraction de la ligne de base en mode manuel (sans multiplication exponentielle, LB=GB=0). Les résultats sont exploités 35 de la manière suivante : - Intégrer les signaux ; on pourra notamment se référer à la figure 1 / 2 pour les bornes d'intégration. 3032709 12 - Normaliser à 600 le signal S5 correspondant aux protons non échangeables d'une unité anhydroglucose (H2, H3, H4, H5 et 2H6) ; le reste du signal correspondant à l'ensemble des protons H1 (liaisons et terminaisons réductrices). Relever les valeurs de S1 (H1 alpha (1,4), S2 (H1 alpha réducteur) et S3 (H1 alpha (1,6)). 5 Déterminer les bêta-réducteurs S4 en réalisant l'opération S2*0.6/0,4. Calculer S6 en réalisant l'opération S6 = 100 - (S1+S2+S3+S4) Déterminer les proportions de liaison alpha-(1,4), alpha-(1,6) et autres liaisons, en faisant la somme des 3 surfaces respectives (S1, S3 et S6) et en les normalisant à 100 pour les exprimer en % (soit %i = Si*100/(S1+S3+S6)). 10 Surface Bornes d'intégration Types de intégrée (en ppm) liaisons S1 5.45 5.26 H1 a-(1,4) S2 5.26 5.19 H1 a-réducteurs S3 5.04 4.88 H1 a-(1,6) S5 4.32 3.10 Autres Protons (H2, H3, H4 etc ...) soit 6 protons Tableau 1 La méthode de HAKOMORI est celle décrite dans la publication de 1964, J. Biol. Chem., 55, 205. 15 Dans toute la présente Demande, le taux de glucose libéré ou accessible après digestion enzymatique est déterminé selon la méthode suivante. - Peser 0,3 g sec de produit à tester. 20 - Ajouter 75 ml de tampon maléate de Na pH 7,00 à 0,1 mol/I (Fluka, référence 63 180). Agiter jusqu'à la dissolution du produit. Placer les flacons au bain marie pendant 15 minutes, pour que la température de la solution soit de 37°C. Prélever 0,75 ml de la solution initiale et ajouter 0,075 g de pancréatine de porc après le 25 prélèvement de la solution initiale (Sigma, référence P7545) ; cette opération correspond à l'origine des temps Incuber à 37°C au bain thermostaté sous agitation pendant 30 minutes. Réaliser un prélèvement de 0,75 ml. - Ajouter 0,40 g de muqueuse intestinale de rat (Sigma, référence 11630). 30 - Incuber pendant 3h30 à 37°C au bain thermostaté sous agitation. 3032709 13 Réaliser pendant ces 3h30 des prélèvements de 0,75 ml aux temps 60, 120, 180 et 240 minutes. Arrêter la réaction enzymatique en plaçant les prélèvements dans un bain à sec à 100°C, pendant 10 minutes. 5 Réaliser le dosage du glucose des prélèvements (méthode enzymatique standard GOD). Calculer le taux de glucose libéré lors de la digestion du produit (exprimé en cY0) : concentration en glucose en g/L du prélèvement * (100/matière sèche du produit) * (volume du digestat en m1/1000) * (100/poids du produit humide en g). 10 Dans toute la présente Demande, le taux de fibres est mesuré selon la méthode AOAC N ° 2001-03. PRODUITS SELON L'INVENTION Dans les essais n° 1 à 3, on a réalisé 3 produits selon le procédé conforme à la présente invention. 15 On dispose d'un sirop de glucose 5774 commercialisé par la société ROQUETTE à 85 % de matière sèche. Ce sirop est dilué à 50 °Bx. On prépare 1 kilo de matière avec les % massiques mentionnés dans le tableau ci-dessous, dans un 20 bécher en verre. Ledit bécher est placé sur une plaque chauffante, sous agitation avec un barreau aimanté réglé à 500 tpm, la température étant réglée à 60°C. Une fois cette température atteinte, on introduit, sous forme de poudre, dans le bécher le glucose commercialisé sous le nom de Dextrose Anhydre C, par la société ROQUETTE. 25 On ajoute ensuite à cette solution aqueuse sous forme poudre les produits suivants : - le maltitol commercialisé sous le nom SWEETPEARL P200 par la société ROQUETTE - L'acide citrique commercialisé par la société SIGMA, de pureté supérieure ou égale à 99,5 Les % massiques des constituants sont donnés dans le tableau 2, pour les essais n° 1, 2 et 3 qui 30 représentent l'invention. Essai n° 1 2 3 Flolys D57 81 68 68 (85 % de MS) Glucose 9 22.2 22.2 Maltitol 9 8.9 8.9 Acide citrique 1 0.9 0.9 Tableau 2 3032709 14 Après dissolution complète des poudres, soit quelques minutes, le mélange est limpide. On prélève alors 120 grammes du mélange qui sont transférés dans une barquette en aluminium commercialisé par la société PRO'JET sous la référence KPL1001. Les barquettes sont placées dans une étuve sous vide pendant 20 heures à 80°C puis 6 heures à 5 120°C. Une dépression de 125 mbars est appliquée dans l'étuve. On obtient alors une matière sèche de 95,0 %. Les barquettes avec le produit sec sont alors placées dans une seconde étuve préalablement chauffée à 200°C, l'ensemble étant mis sous une dépression de 125 mbars. On retire les barquettes 90 minutes plus tard. 10 Le produit est alors dilué avec de l'eau à 30 % de matière sèche. Pour chacun des 3 essais précédents, la Demanderesse a déterminé : le % en liaisons osidiques alpha 1-4 du nombre total de liaisons osidiques 1-4 15 le % en liaisons osidiques alpha 1-6 du nombre total de liaisons osidiques 1-6 la teneur en fibres en % le taux de glucose libéré en % 20 PRODUITS HORS INVENTION La Demanderesse a également déterminé ces mêmes paramètres pour les produits suivants : NUTRIOSE FB06 commercialisé par la société Demanderesse (essai n°4) 25 NUTRIOSE FB10 commercialisé par la société Demanderesse (essai n° 5) LITESSE ULTRA commercialisé par la société DUPONT DANISCO (essai n° 6) PROMITOR 70 commercialisé par la société TATE & LYLE (essai n° 7) PROMITOR 85 commercialisé par la société TATE & LYLE (essai n° 8) FIBERSOL 2 commercialisé par la société MATSUTANI (essai n° 9) 30 IMO 500 commercialisé par la société (essai n°10) L'ensemble des résultats a été rapporté dans le tableau 3, de même que sur la figure 2 / 2. 3032709 15 Produit alpha 1-4 (%) alpha 1-6 (%) fibres (%) glucose (%) LITESSE 67 46 81 --- MALTO-OLIGO- 72 40 58 6 SACCHARIDE 1 (MOS 1) MALTO-OLIGO- 78 43 55 4 SACCHARIDE 2 (MOS 2) MALTO-OLIGO- 72 42 60 8 SACCHARIDE 3 (MOS 3) NUTRIOSE FB06 85 52 83 20 NUTRIOSE FB10 86 44 74 22 PROMITOR 85 88 60 76 15 PROMITOR 70 90 50 60 34 FIBERSOL 2 82 70 90 13 IMO 500 100 95 0 100 Tableau 3 5 On peut constater de manière remarquable que tous les produits commerciaux appartenant à l'état de la technique et riches en fibres, présentent une teneur en liaisons osidiques alpha 1-4 supérieure à 80 %, celle-ci étant comprise dans un intervalle très restreint, entre 80 % et 90 %. Par ailleurs, l'ensemble de ces produits présente une teneur en fibres d'au moins 60 %, et une teneur 10 en glucose disponible systématiquement supérieure à 10 %, dans la plupart des cas supérieure à 15 %, et même parfois supérieure à 20 %. A l'inverse, les 3 produits selon l'invention possèdent une teneur en liaisons osidiques a 1-4 comprise entre 70 % et 80 %. On constate que, de manière particulièrement avantageuse, ces produits 15 possèdent une richesse en fibres importante, puisque celle-ci se situe aux alentours de 60 %. Enfin, les 3 produits selon l'invention présentent une très faible teneur en glucose disponible, à des niveaux encore jamais atteints dans le passé. Aussi, seuls ces produits présentent le compromis idéal entre un produit riche en fibres, et donc parfaitement adapté dans des régimes alimentaires sains et équilibrés, et un produit avec une très faible biodisponibilité du glucose vis-à-vis de l'organisme, donc 20 parfaitement adapté à des patients diabétiques ou dans des régimes visant à diminuer la sensibilité à cette pathologie. 25 REVENDICATIONS1 - Procédé de fabrication de malto-oligo-saccharides comprenant les étapes consistant à : a) fournir une solution aqueuse d'au moins 2 glucides, caractérisée en ce que 40 % à 95 % du poids sec de ladite solution est constitué de maltose, b) mettre la solution aqueuse résultant de l'étape a) en présence d'au moins un polyol, et d'au moins un acide minéral ou organique, c) augmenter éventuellement la teneur en matière sèche de la solution aqueuse résultant de l'étape b) jusqu'à au moins 75 % en poids de son poids total, d) réaliser un traitement thermique sur la solution aqueuse résultant de l'étape b) ou éventuellement de l'étape c), à une température comprise entre 140°C et 300°C et sous une dépression comprise entre 50 et 500 mbars 2 - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la solution aqueuse résultant de l'étape a) contient du glucose. 3 - Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que la solution aqueuse résultant de l'étape a) présente une teneur en matière sèche d'au moins 50 %, préférentiellement d'au moins 70 %, très préférentiellement d'au moins 80 % en poids de son poids total, et dans tous les cas d'au plus 95 en poids de son poids total. 4 - Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le polyol est choisi parmi le glycérol, l'érythritol, le xylitol, l'arabitol, le ribitol, le sorbitol, le dulcitol, le mannitol, le maltitol, l'isomaltitol, le lactitol et leurs mélanges, plus préférentiellement parmi le sorbitol, le mannitol et le maltitol, le polyol le plus préféré étant le maltitol. 5 - Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que l'acide lorsqu'il est organique est choisi parmi l'acide citrique, sulfurique, fumarique, succinique, gluconique, chlorhydrique, hydrochlorhydrique et les mélanges de ces acides, l'acide citrique étant le plus préféré. 6 - Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que l'étape c) est réalisée sous forme d'un traitement thermique, à une température comprise entre 60°C et 150°C, préférentiellement entre 80°C et 120°C. 7 - Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que l'étape c) est réalisée sous une dépression comprise entre 50 mbars et 500 mbars, préférentiellement entre 100 mbars et 400 mbars. 3032709 17 8 - Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que l'étape d) est réalisée entre 150 °C et 200°C 9 - Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que l'étape d) est réalisée à une pression 5 comprise entre 50 mPa et 500 mPa. 10 - Malto-oligo-saccharides susceptibles d'être obtenus selon le procédé tel que revendiqué dans l'une quelconque des revendications 1 à 9 présentant une teneur en liaisons a 1-4 comprise entre 70 % et 80 du nombre total de liaisons osidiques 1-4. 10 11 - Malto-oligo-saccharides selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'ils présentent une teneur en liaisons a 1-6 comprise entre 40 % et 50 % du nombre total de liaisons osidiques 1-6. 12 - Malto-oligo-saccharides selon l'une quelconque des revendications 10 ou 11, caractérisés en ce 15 qu'ils présentent une teneur en fibres comprise entre 50 % et 70 %. 13 - Malto-oligo-saccharides selon l'une quelconque des revendications 10 à 12, caractérisés en ce qu'ils présentent un taux de glucose libéré ou accessible après digestion enzymatique compris entre 1 et 12 %, plus préférentiellement entre 3 et 9%. 20 14 - Malto-oligo-saccharides présentant une teneur en liaisons a 1-4 comprise entre 70 % et 80 du nombre total de liaisons osidiques 1-4. 15 - Malto-oligo-saccharides selon la revendication 14, caractérisés en ce qu'ils présentent une teneur 25 en liaisons a 1-6 comprise entre 40 % et 50 % du nombre total de liaisons osidiques 1-6. 16 - Malto-oligo-saccharides selon l'une quelconque des revendications 14 ou 15, caractérisés en ce qu'ils présentent une teneur en fibres comprise entre 50 % et 70 %. 30 17 - Malto-oligo-saccharides selon l'une quelconque des revendications 14 à 16, caractérisés en ce qu'ils présentent un taux de glucose libéré ou accessible après digestion enzymatique compris entre 1 % et 12 %, plus préférentiellement entre 3 et 9%. 18 - Utilisation des malto-oligo-saccharides selon l'une quelconque des revendications 10 à 17 en 35 nutrition humaine et animale.40