Brevet FR3035716A1 — publié le 20161104

La présente invention se rapporte à une machine et à des procédés de détection et/ou de quantification in vitro par analyse optique, notamment par fluorimétrie et/ou colorimétrie, d'au moins un analyte présent dans un échantillon, notamment un échantillon biologique. La présente invention trouve une application dans les instruments automatisés d'analyse in vitro dans le domaine clinique ou dans le domaine industriel. Dans le domaine clinique, l'analyse peut concerner un prélèvement biologique humain (urine, sang, salive, pus, liquide céphalo- rachidien, etc.), pour la détection ou la quantification d'analytes issus ou non d'un micro- organisme externe (bactérie, virus, parasite, anticorps, etc.), notamment sous la forme de tests immunologiques ou de tests de biologie moléculaire. Dans le domaine industriel, l'analyse peut concerner un échantillon de produit alimentaire, pharmaceutique ou cosmétique, par exemple pour contrôler la qualité microbiologique du produit sous la forme de tests microbiologiques. De tels tests microbiologiques vérifient généralement soit la stérilité (aucun microorganisme ne doit être présent), soit l'absence de bactéries pathogènes (à l'origine d'une infection), soit encore qu'une bactérie commensale (normalement présente chez l'homme et banale en faible concentration) n'est présente qu'en dessous d'un certain seuil. L'invention peut également trouver une application dans le domaine des analyses dynamiques, c'est-à-dire en temps réel, en l'occurrence dans les tests immunologiques et les tests de biologie moléculaire où les réactions immunologiques/biologiques peuvent être pilotées ou surveillées dans le temps. De tels systèmes ou procédés de détection et/ou de quantification in vitro sont connus, en particulier dans les instruments automatisés de diagnostic in vitro par fluorimétrie, comme par exemple dans les documents EP 0 864 089 B1, EP 0 871 863 Bi, EP 0 241 268 A1, US 5 757 013 A, EP 0 802 413, et WO 2004/055502 A2, qui emploient des sources de rayonnement du type source de lumière pulsé, lampe laser ou lampe à arc. 3035716 2 Le demandeur commercialise par ailleurs des machines selon ces principes sous la dénomination commerciale VIDAS®, notamment la machine VIDAS® 3, ou la machine VIDAS® Legacy BLUE. Ces machines permettent notamment une automatisation du processus d'analyse. 5 Dans les machines et procédés selon l'art antérieur, on trouve donc : - une ou plusieurs zones de réception destinées à recevoir chacune un échantillon à analyser ; des moyens de préparation et de réaction automatisés qui préparent l'échantillon et le font réagir avec des réactifs pour fournir une 10 solution de réaction ; - plusieurs zones d'analyse optique destinées à recueillir chacune une solution de réaction obtenue par réaction avec un échantillon. un dispositif de lecture optique capable de détecter et/ou quantifier la réponse optique de la solution de réaction à une stimulation 15 électromagnétique, le dispositif de lecture optique comportant au moins une source de rayonnement électromagnétique capable d'illuminer une zone d'analyse et un récepteur photoélectrique agencé pour recueillir un rayonnement optique provenant de la solution de réaction contenue dans la zone d'analyse et capable de détecter la 20 réponse optique de la solution de réaction. Dans les machines selon l'art antérieur, il est connu que le dispositif de lecture optique soit porté par un chariot mobile de la machine qui est motorisé et dont les déplacements sont commandés automatiquement pour amener le dispositif de lecture optique dans différentes positions 25 correspondant chacune à une zone d'analyse. Ainsi, une telle machine permet, avec un même dispositif de lecture mobile, de venir analyser la réponse lumineuse dans plusieurs zones d'analyse distinctes, successivement, ceci de manière automatisée. On notera donc que, dans ces machines, c'est bien le dispositif de lecture qui est mobile pour assurer la 30 lecture optique des différentes zones d'analyse, et non pas les zones qui seraient déplacées tour à tour devant un dispositif de lecteur fixe. Cela 3035716 3 nécessite donc de concevoir des dispositifs de lecture optique simples, puisqu'ils doivent être mobiles. Dans l'état de la technique, les machines mettent en oeuvre un procédé pour la détection et/ou la quantification automatisée in vitro 5 d'analytes contenus dans les échantillons, qui comporte généralement les étapes suivantes : - l'échantillon est mis en situation de réagir avec un ou plusieurs réactifs pour produire directement ou indirectement une solution de réaction comportant, en présence d'un analyte déterminé dans l'échantillon, un agent 10 ayant des propriétés optiques prédéterminées, notamment des propriétés de fluorescence ; - la solution de réaction est illuminée avec un rayonnement électromagnétique ; - la réponse optique de la solution de réaction est détectée; 15 - de la réponse optique est déduite la présence et/ou la quantification de l'analyte. De manière classique, l'analyse des signaux en provenance du ou des moyens photo-détecteurs s'effectue par un traitement analogique ou numérique, avec notamment un algorithme de détection d'une intensité 20 lumineuse à une fréquence/longueur d'onde prédéterminée qui est caractéristique de l'agent représentatif de la présence/quantité d'analyte à détecter. Pour cela, on utilise généralement un capteur photoélectrique et la réponse optique de la solution de réaction est filtrée par un filtre optique 25 agencé entre la zone d'analyse et le capteur photoélectrique ne laissant passer la lumière que pour une longueur d'onde ou une bande de longueurs d'onde. De la sorte, le capteur photoélectrique délivre un signal représentatif de l'intensité de la réponse optique à cette longueur d'onde ou une bande de longueurs d'onde. Le filtrage de la réponse optique de la solution de réaction 30 est une étape essentielle des procédés mis en oeuvre dans les machines connues car elle permet de distinguer la partie de réponse qui est liée à l'agent optique (en l'occurrence un agent fluorescent) et qui permet de 3035716 4 quantifier la présence de l'agent, d'une éventuelle partie de réponse optique qui pourrait être la simple transmission du rayonnement d'excitation et/ou qui pourrait provenir de sources de rayonnements optiques parasites. Les machines et procédés de l'art antérieur sont très satisfaisants sur 5 de nombreux points. Cependant, il est apparu le besoin de pouvoir améliorer encore la précision de mesure de ces machines, pour affiner les résultats. En parallèle il est apparu le besoin de pouvoir encore augmenter la capacité des machines, c'est-à-dire leur capacité à délivrer des résultats d'analyses plus nombreux, y compris sur un même échantillon, sans toutefois augmenter de 10 manière significative l'encombrement des machines. Dans ce but, l'invention propose une machine pour la détection et/ou la quantification automatisée in vitro d'analytes contenus dans des échantillons, du type comportant : - plusieurs zones d'analyse optique destinées à recueillir chacune une 15 solution de réaction obtenue par réaction avec l'échantillon, - un dispositif de lecture optique capable de détecter et/ou quantifier la réponse optique de la solution de réaction à une stimulation électromagnétique, le dispositif de lecture optique comportant au moins une source de rayonnement électromagnétique capable d'illuminer une zone 20 d'analyse et un récepteur photoélectrique agencé pour recueillir un rayonnement optique provenant de la solution de réaction contenue dans la zone d'analyse et capable de détecter la réponse optique de la solution de réaction. Le récepteur photoélectrique est porté par un chariot mobile de la 25 machine qui est motorisé et dont les déplacements sont commandés automatiquement pour amener le récepteur photoélectrique dans différentes positions correspondant chacune à une zone d'analyse. Selon l'invention le récepteur photoélectrique fait partie d'un spectromètre capable de délivrer une décomposition spectrale chromatique 30 de la réponse optique. 3035716 5 Selon d'autres caractéristiques, optionnelles, de l'invention, prises individuellement ou en combinaison : - le spectromètre est capable de délivrer une décomposition spectrale chromatique de la réponse optique sur au moins une plage utile de longueurs 5 d'onde entre deux longueurs d'onde Àmin et Amax, avec Àmax ? 2 x Amin ; - le spectromètre comporte un élément de dispersion chromatique et un capteur photoélectrique principal linéaire ou bi-dimensionel ; - le spectromètre comporte un circuit électronique qui est connecté au récepteur photoélectrique et qui délivre un signal électrique image de la 10 décomposition spectrale chromatique de la réponse optique ; - le signal électrique image est un signal analogique ; - la source de rayonnement est une source monochromatique ; - la source de rayonnement est une source polychromatique ; - le dispositif de lecture optique comporte des moyens de détection de 15 l'intensité du rayonnement émis par la source de rayonnement ; - les moyens de détection de l'intensité du rayonnement émis par la source de rayonnement incluent le spectromètre et un système de guidage qui guide une partie du rayonnement incident vers le spectromètre, sans passer par la zone d'analyse ; 20 - les moyens de détection de l'intensité du rayonnement émis par la source de rayonnement incluent un capteur photoélectrique secondaire, distinct du spectromètre, et un système de guidage qui guide une partie du rayonnement incident vers le capteur photoélectrique secondaire, sans passer par la zone d'analyse. 25 L'invention concerne aussi un procédé pour la détection et/ou la quantification automatisée in vitro d'analytes contenus dans des échantillons, du type comportant les étapes suivantes : - mettre l'échantillon en situation de réagir avec un ou plusieurs réactifs pour produire directement ou indirectement une solution de réaction 30 comportant, en présence d'un analyte déterminé dans l'échantillon, un agent optique ayant au moins une propriété optique prédéterminée ; 3035716 6 - illuminer la solution de réaction avec un rayonnement électromagnétique ; - détecter la réponse optique de la solution de réaction ; - déduire de la réponse optique la présence et/ou la quantification de 5 l'analyte ; caractérisé en ce que le procédé met en oeuvre un ou plusieurs réactifs pour produire directement ou indirectement une solution de réaction comportant au moins deux agents optiques distincts ayant chacun au moins une propriété optique prédéterminée, les deux propriétés optiques 10 prédéterminées étant distinctes, et en ce qu'il comporte les étapes consistant à acquérir une décomposition spectrale chromatique de la réponse optique et à détecter séparément les deux propriétés optiques prédéterminées distinctes dans ladite décomposition spectrale. L'invention concerne aussi un autre procédé pour la détection et/ou la 15 quantification automatisée in vitro d'analytes contenus dans des échantillons, du type comportant les étapes suivantes : - mettre l'échantillon en situation de réagir avec un ou plusieurs réactifs pour produire directement ou indirectement une solution de réaction comportant, en présence d'un analyte déterminé dans l'échantillon, un agent 20 optique ayant au moins une propriété optique prédéterminée ; - illuminer la solution de réaction avec un rayonnement électromagnétique ; - détecter la réponse optique de la solution de réaction ; - déduire de la réponse optique la présence et/ou la quantification de 25 l'analyte ; caractérisé en ce que le procédé comporte les étapes consistant à : - acquérir une décomposition spectrale chromatique de la réponse optique ; - déterminer une relation théorique approximée de variation de 30 l'intensité en fonction de la longueur d'onde, image de la décomposition spectrale chromatique de la réponse optique ; 303 5 716 7 - déterminer, dans la relation théorique approximée de variation de l'intensité en fonction de la longueur d'onde, un décalage linéaire de l'intensité fonction linéaire de la longueur d'onde ; - déterminer une relation théorique corrigée de la variation de 5 l'intensité en fonction de la longueur d'onde, en corrigeant la relation théorique approximée en fonction du décalage linéaire. Selon d'autres caractéristiques, optionnelles, de l'invention, prises individuellement ou en combinaison : - l'étape consistant à déterminer une relation théorique approximée de 10 variation de l'intensité en fonction de la longueur d'onde, comprend l'étape d'ajuster une courbe à au moins une partie de la décomposition spectrale chromatique de la réponse optique ; - l'étape consistant à acquérir une décomposition spectrale chromatique de la réponse optique comporte une étape de dispersion 15 chromatique d'un faisceau optique issu de la réponse optique et de détection de l'intensité par composantes de longueurs d'onde distinctes du faisceau ainsi dispersé ; - le procédé comporte une étape de détection de l'intensité du rayonnement émis par la source de rayonnement ; 20 - le procédé comporte une étape de guidage d'une partie du rayonnement incident, sans passer par la zone d'analyse, et une étape consistant à acquérir une décomposition spectrale chromatique de ladite partie du rayonnement incident ; - le procédé comporte, avant l'étape consistant à acquérir une 25 décomposition spectrale chromatique du rayonnement incident, une étape de mélange de ladite partie du rayonnement incident et de la réponse optique de la solution de réaction. Diverses autres caractéristiques ressortent de la description faite ci-dessous en référence aux dessins annexés qui montrent, à titre 30 d'exemples non limitatifs, des formes de réalisation de l'objet de l'invention. 3035716 8 La figun 1 est une vue schématique en perspective d'une machine de détection et/ou de quantification in vitro par analyse optique, notamment par fluorimétrie et/ou colorimétrie, dans laquelle l'invention peut être intégrée, ladite machine intégrant plusieurs 5 barrettes comportant chacune une zone d'analyse. La figure 2 est une vue illustrant une barrette comportant une zone d'analyse ; - la figure 3 est une vue schématique en perspective illustrant un exemple de réalisation d'un chariot mobile portant un dispositif de 10 lecture optique pour lire la réponse optique d'une solution de réaction contenue dans une zone d'analyse ; - la f illustre un premier mode de réalisation de l'invention comportant un dispositif de lecture optique susceptible d'être monté sur un chariot mobile et comportant un spectromètre ; 15 - la figure = est une vue similaire à celle de la figure 4 illustrant un second mode de réalisation de l'invention ; - la figure 6 illustre une décomposition spectrale chromatique obtenue dans le cadre de l'invention ; La rigur_ ; illustre la superposition de trois décompositions spectrales 20 chromatiques obtenues séparément, par un procédé et un dispositif de l'invention, pour trois agents optiques séparés ; La..--,7urt_ 1_, illustre la décomposition spectrale chromatique obtenue, par un procédé et un dispositif de l'invention, pour une solution comprenant simultanément les trois agents optiques ; 25 La figure 9 illustre, en superposition avec la décomposition spectrale chromatique de la figure 8, une courbe S globale de modélisation de la décomposition spectrale de la tJgure ; la figure 1i illustre, en superposition avec la décomposition spectrale chromatique de la t :urci trois courbes composantes G525, G605, G705 de la courbe 30 S globale de modélisation. On a illustré sur la figure 1 une machine pour la détection et/ou la quantification automatisée in vitro d'analytes contenus dans des échantillons. 3035716 9 Plus précisément, on a illustré le cas d'une machine automatisée assurant non seulement les étapes de détection et/ou de quantification mais aussi une ou plusieurs étapes de préparation d'une solution de réaction à partir d'un échantillon. 5 La machine ici décrite correspond notamment à une machine du type commercialisé par la demanderesse sous la dénomination commerciale «VIDAS® 3 ». Ce type de machine permet de réaliser des analyses biologiques sur des échantillons biologiques de manière automatisée, et avec la possibilité de pratiquer, sur une même machine, différentes analyses sur 10 un même échantillon ou sur des échantillons différents. Une machine 10 de ce type est illustrée en vue schématique en perspective éclatée sur la 1Tgure 1. Dans une partie inférieure gauche, appelée partie pré-analytique 14 de la machine, on peut distinguer une série de trois tiroirs primaires 16 et un tiroir secondaire 18, qui sont agencés 15 côte-à-côte. Chacun de ces tiroirs 1C, 1C est prévu pour être mobile, indépendamment les uns des autres, entre une position de chargement et une position d'utilisation, ici par un coulissement linéaire selon une trajectoire horizontale perpendiculaire à une face avant de la machine, selon une direction X qualifiée de longitudinale. Les notions de « avant », 20 « arrière », « horizontal », « vertical » etc... sont utilisées ici à titre indicatif en référence à l'orientation normale d'une telle machine telle qu'illustrée sur les figures. Les tiroirs primaires 16 sont prévus pour recevoir par exemple des échantillons, des produits diluants, des réactifs, des produits de référence etc... contenus par exemple dans des récipients de formes variées. 25 Chaque tiroir primaire 16 peut ainsi porter plusieurs récipients, chaque récipient étant de préférence reçu dans un emplacement prédéterminé du tiroir primaire 16. Chacun des tiroirs primaires 16 peut être amovible de la machine pour permettre une préparation et un chargement des tiroirs en dehors de la machine, permettant ainsi de faire cette étape de préparation 30 pendant que la machine fonctionne avec d'autres tiroirs primaires en position d'utilisation. Chaque tiroir primaire 16 peut comporter, à son extrémité avant, une poignée de préhension. Le tiroir secondaire 18, dans cet exemple 3035716 10 d'application, est par exemple destiné à recevoir des outils d'analyse, par exemple des outils jetables utilisés par la machine dans le processus d'analyse automatisée. Ces outils, par exemple des embouts de pipette ou des coupelles de dilution, peuvent être portés par des plateaux amovibles 5 que l'on peut déposer, de préférence à des endroits prédéterminés, sur le tiroir secondaire 18. Le tiroir secondaire 11 peut lui aussi être amovible de manière à ce que plusieurs tiroirs secondaires 18 puissent être utilisés alternativement sur la machine. Par ailleurs, on distingue sur la figure 1 une partie droite de la 10 machine, parfois qualifié de partie analytique 20, et qui comporte elle aussi des emplacements pouvant par exemple recevoir des barrettes d'analyse, qui peuvent être jetables, telles que celles illustrées à la Fi_ -e 2. La barrette d'analyse 22 est une pièce généralement réalisée en matière plastique, notamment dans le cas où, comme dans cet exemple, elle est jetable. La 15 barrette 22 comporte un corps principal délimitant une série de réceptacles 24 ouverts vers le haut. La barrette est allongée selon une direction longitudinale de telle sorte que les réceptacles 24 sont alignés selon une rangée unique selon cette direction longitudinale qui est destinée à correspondre à la direction avant-arrière de la machine 10. Avant l'utilisation 20 de la barrette ", au moins certains des réceptacles 24, voire de préférence tous les réceptacles, sont refermés par un film étanche qui recouvre de manière hermétique la face supérieure de barrette 22, de sorte que les réceptacles 24 sont isolés les uns des autres. Avant l'utilisation de la barrette, les réceptacles 2 sont soit vides, soit remplis avec un produit qui 25 peut par exemple comprendre une solution tampon, une solution de lavage, un diluant, un réactif, etc... Toutefois, dans l'exemple illustré, le dernier réceptacle ou réceptacle arrière 2 de la barrette est destiné à coïncider géographiquement, lorsque la barrette est en place dans la machine dans une position d'utilisation, avec une zone d'analyse optique 26' de la 30 machine. Dans l'exemple illustré, une barrette est adaptée à un ou plusieurs types d'analyse par la nature des produits qui sont prévus dans les différents 3035716 11 réceptacles, dont tous ne seront pas nécessairement utilisés pour une analyse donnée. Dans la machine illustrée, la machine 10 est prévue pour recevoir simultanément plusieurs barrettes d'analyse 22. Ces barrettes 22 sont 5 prévues pour être disposées parallèlement l'une à l'autre, côte à côte, les barrettes étant ainsi alignées selon une direction transversale Y perpendiculaire à leur direction longitudinale X. Dans l'exemple illustré, la machine 10 est prévue pour pouvoir recevoir ainsi 12 barrettes d'analyse 22 côte-à-côte en position d'utilisation. Dans cette position, le réceptacle arrière 10 de chaque barrette 22 coïncide avec une zone d'analyse optique correspondante 26' de la machine. En d'autres termes, la machine comporte plusieurs zones d'analyse 26' et, dans le cas d'une machine utilisant des barrettes d'analyse telles que les barrettes 22, chaque zone d'analyse 26' de la machine est prévue pour recevoir le réceptacle arrière 26 d'une barrette. 15 Dans la mesure où ce réceptacle arrière 26 contient une solution finale de réaction, cette solution finale de réaction est recueillie dans la zone d'analyse 26' correspondante. Le fonctionnement de la machine 10 illustrée va être décrit de manière succincte. Un opérateur charge, dans les récipients des tiroirs 20 primaires 16, un ou plusieurs échantillons à analyser. Il peut aussi charger, dans ces récipients, des produits nécessaires à la préparation de l'échantillon et/ou à la préparation de la réaction. Dans le tiroir secondaire 16, il aura procédé au chargement des produits nécessaires à la préparation. Dans l'exemple illustré, la machine d,' comporte des moyens de 25 préparation et de réaction automatisés qui préparent l'échantillon et le font réagir avec des réactifs pour fournir une solution finale de réaction dont la réponse optique à un rayonnement électromagnétique d'excitation permettra de déduire des résultats d'analyse. La machine 10 comporte pour ce faire un dispositif de pipetage 30 mobile 27 qui est de préférence mobile dans les trois directions : longitudinale X (avant/arrière), transversale Y (gauche/droite) et verticale Z (haut/bas). Ce dispositif de pipetage mobile 27 est capable de prélever un 3035716 12 embout de pipette individuel 28 (visible sur Fiera 2) dans le tiroir secondaire T et, à l'aide de cet embout de pipette individuel 28, de prélever ou déposer des produits (échantillons, réactifs, diluants, solutions tampon, etc...). Les produits peuvent être prélevés depuis les récipients des 5 tiroirs primaires ou depuis les réceptacles d'une barrette d'analyse. Les produits et échantillons prélevés peuvent être mélangés soit dans l'embout de pipette individuelle, soit dans des coupelles de dilution présentes dans le tiroir secondaire 1.8, soit dans l'un des réceptacles d'une des barrettes d'analyse 22. Pendant ces différentes étapes, l'analyte présent dans 10 l'échantillon est amené à réagir avec les produits, notamment avec les réactifs, avec lesquels il est mis en contact. Parmi les produits mis en oeuvre figure un précurseur d'un agent optique, cet agent optique ayant au moins une propriété optique prédéterminée (couleur, fluorescence, phosphorescence,...). 15 En fonction de la présence de l'analyte recherché, et en fonction éventuellement de sa concentration, le précurseur va causer la formation d'une quantité de cet agent optique dans une solution finale de réaction. Cette solution finale de réaction possède donc un agent optique, par exemple fluorescent, en une concentration qui témoigne de la présence de l'analyte 20 recherché dans l'échantillon initial. De manière connue, on cherche donc à déterminer la réponse optique de cette solution finale de réaction, et notamment à détecter la propriété optique prédéterminée de l'agent optique, pour en déduire un résultat d'analyse. De préférence, l'agent optique n'est présent dans la solution de réaction 25 ou ne possède la propriété optique prédéterminée qu'en présence de l'analyte déterminé. De préférence, l'intensité de la propriété optique prédéterminée est une fonction de la quantité ou concentration de l'analyte dans l'échantillon déterminé. Avantageusement, cette propriété optique prédéterminée est détectable par analyse d'une décomposition spectrale 30 chromatique d'un rayonnement émis par la solution de réaction lorsque ce rayonnement est soumis à un rayonnement électromagnétique incident. 3035716 13 L'agent optique est par exemple un agent fluorescent et la propriété optique prédéterminée est l'émission fluorescente, qui peut par exemple être caractérisée par une décomposition spectrale chromatique particulière lorsque cette solution de réaction est illuminée par un rayonnement 5 électromagnétique d'excitation adapté. L'agent optique pourrait aussi être un agent coloré auquel cas la propriété optique prédéterminée est la couleur, qui peut être déterminée par un spectre d'absorption chromatique lorsque cette solution de réaction est illuminée par un rayonnement électromagnétique incident adapté. On verra 10 toutefois dans ce cas que le système devrait fonctionner en transmission avec un alignement entre la source de rayonnement électromagnétique (ou une réflexion de celle-ci) et le récepteur. Pour ce faire, il est connu de disposer une certaine quantité de la solution finale de réaction dans une zone d'analyse optique 2( ', qui dans 15 l'exemple illustré, coïncide avec le réceptacle arrière de la barrette d'analyse 22 en position d'utilisation. Il est également connu, notamment de la machine VIDAS® 3 mentionnée plus haut, qu'un dispositif de lecture optique :1 soit utilisé, comportant au moins une source de rayonnement électromagnétique capable d'illuminer la zone d'analyse et un récepteur 20 photoélectrique agencé pour recueillir un rayonnement optique provenant de la solution de réaction contenue dans la zone d'analyse. Le dispositif de lecture peut ainsi détecter la réponse optique de la solution finale de réaction et, en fonction de cette lecture optique, il devient possible de déterminer la présence, voire la concentration, de l'agent optique spécifique de l'analyse. 25 On comprend donc du fonctionnement décrit ci-dessus que la machine 10 est capable d'avoir plusieurs barrettes d'analyse 12 simultanément engagées dans la machine 10 et donc capable de procéder en parallèle à autant d'analyses différentes, chacune étant susceptible de produire une solution finale de réaction dont il faut être capable de détecter la réponse 30 optique. On notera que deux barrettes d'analyse distinctes peuvent être utilisées et engagées en parallèle dans la machine pour faire deux analyses distinctes d'un même échantillon, pour faire la même analyse sur des 3035716 14 échantillons différents chargés dans un tiroir primaire 16, pour faire la même analyse sur deux parties d'un même échantillon, par exemple à titre de redondance, etc... . Dans ce cas, les deux réceptacles arrière '16 des deux barrettes sont destinés à coïncider avec autant de zones d'analyse optique 5 26' considérées alors comme recueillant chacune une solution finale de réaction à analyser. Pour ce faire, le dispositif de lecture optique 30 est monté sur un chariot mobile 32. Ce chariot mobile 32 est motorisé et ses déplacements sont commandés automatiquement par la machine 10 pour amener le 10 dispositif de lecture 30 dans différentes positions. Au moins certaines de ces positions correspondent à une zone d'analyse. Dans l'exemple illustré, le chariot mobile 32 est mobile uniquement selon une direction, en l'occurrence la direction transversale Y de la machine 10 pour pouvoir être amené dans des positions, selon la direction transversale, correspondant à la position 15 transversale de différentes zones d'analyse 26' coïncidant avec les réceptacles arrière des barrettes d'analyse 22 susceptibles d'être engagées dans la machine 10. De préférence, le chariot mobile 32 est susceptible d'être amené dans autant de positions différentes qu'il y a de zones d'analyse 26' différentes dans la machine. 20 On a illustré sur la filur, un exemple de réalisation possible pour des moyens de commande assurant le déplacement du chariot mobile 32. Le chariot mobile 32 comporte un châssis 34 qui, à son extrémité inférieure, coopère avec une glissière 5 qui assure le guidage du chariot mobile 32 selon la direction transversale Y. Par ailleurs, l'extrémité inférieure du châssis 25 _ est pourvue d'un système d'écrou 38 qui coopère avec une vis d'entraînement 40 s'étendant selon un axe transversal. La vis d'entraînement 40 est pilotée en rotation par un moteur électrique 42. On comprend donc que le pilotage adéquat du moteur électrique 42 dans un sens de rotation ou dans l'autre va provoquer, par l'intermédiaire du système vis/écrou formé de 30 la vis d'entraînement 40 et de l'écrou 38 lié au chariot le déplacement du chariot 32 selon la direction transversale, dans un sens ou dans un autre. Par ailleurs, un système de détection de position du chariot, qui peut reposer 3035716 15 par exemple sur les informations délivrées par un encodeur rotatif associé au moteur 42 ou sur les informations délivrées par des capteurs agencés sur la trajectoire du chariot mobile 32, peut avantageusement être prévu pour connaître la position du chariot mobile 32 le long de la glissière 36. La 5 glissière 36 est fixe dans la machine, et le moteur 42 ainsi que la vis 40 sont aussi fixes dans la machine si l'on excepte leur mouvement de rotation sur eux-mêmes. Ainsi, le moteur électrique 42 commande le déplacement du chariot 32. Le moteur électrique 42 est lui-même commandé par une unité centrale de commande de la machine 10. Bien entendu, d'autres moyens de 10 déplacement du chariot mobile pourraient être prévus. De même, le chariot mobile pourrait se déplacer sur une trajectoire linéaire comme dans l'exemple de réalisation, ou sur une trajectoire courbe ou encore avoir la capacité d'être déplacé selon deux directions, dans un plan, ou encore selon trois directions dans l'espace. De même, les moyens de commande assurant 15 le déplacement du chariot pourraient comprendre d'autres actionneurs et ou d'autres mécanismes de transformation du mouvement de l'actionneur en un déplacement du chariot. Dans l'exemple de réalisation illustré, le châssis 34 du chariot mobile comporte une zone de travail munie de deux surfaces inclinées l'une par 20 rapport à l'autre, s'étendant toutes les deux selon une direction transversale. Une première surface de travail 40, horizontale dans l'exemple de réalisation, est munie d'une première fenêtre 42. Une seconde surface de travail 44, contenant la direction transversale mais inclinée par rapport à la direction longitudinale, présente une seconde fenêtre - i. Ces deux surfaces 25 de travail sont destinées à être amenées en regard d'une zone d'analyse 26' afin que le dispositif de lecture puisse, au travers d'une des fenêtres, émettre un rayonnement électromagnétique d'excitation, par exemple un rayonnement optique dans le domaine visible, ultraviolet, ou infrarouge, en direction de la zone d'analyse 26', et de recueillir la réponse optique de la 30 zone d'analyse 26', au travers de l'autre fenêtre. On comprend donc que, dans l'exemple illustré sur les figures, le chariot 32 embarque à la fois une source de rayonnement 3 03 5 716 16 électromagnétique d'excitation et un récepteur photoélectrique. Cependant, en variante, on pourrait prévoir que seul le récepteur photoélectrique soit embarqué sur le chariot mobile 32, la source de rayonnement électromagnétique d'excitation étant par exemple fixe dans la machine. On 5 voit par ailleurs que, au moins dans le mode de réalisation illustré, le chariot 32 comporte une carte électronique 48 assurant notamment au moins en partie le pilotage et le traitement de signal de la source de rayonnement électromagnétique et du récepteur photoélectrique. Cette carte électronique 48 est mobile avec le chariot 32 et les signaux électriques utiles à la carte 10 t:8 sont transmis à une unité centrale de commande de la machine par un faisceau électrique 50 qui comporte de préférence au moins une partie flexible, donc déformable de manière réversible, pour permettre les mouvements du chariot. Ce faisceau A est par exemple relié à un bornier fixe de la machine 10. Dans l'exemple illustré, il est reçu dans un guide 15 déroulant F4 à maillons articulés pour en guider la déformation lors des déplacements du chariot, évitant ainsi que le faisceau ne vienne interférer dans le mécanisme de déplacement du chariot. On note par ailleurs que le chariot mobile 32 peut aussi embarquer d'autres dispositifs tels par exemple qu'un lecteur optique de codes-barres 56. De préférence, la carte 20 électronique 48 délivre en sortie des signaux électriques numériques. Ainsi, les signaux électriques qui sont transmis dans le faisceau électrique 50 sous forme numérique sont bien moins sensibles que des signaux analogiques aux perturbations qui peuvent être engendrées autour de ce faisceau. Un premier mode de réalisation d'un dispositif de lecture selon 25 l'invention, embarqué sur un chariot mobile 32, est illustré sur la figure 4. Dans cette vue en coupe par un plan perpendiculaire à la direction transversale de déplacement du chariot mobile, on trouve tout d'abord, fixée sur le châssis 34, une source de rayonnement électromagnétique destinée à exciter l'agent optique présent dans la solution finale de réaction 30 contenue dans la zone d'analyse 26'. Sur la figure 4, on a illustré d'ailleurs la présence d'un réceptacle arrière 26 d'une barrette 22 coïncidant avec une zone d'analyse 26', dans une position relative de travail par rapport au 3035716 17 dispositif de lecture 30 qui permet à ce dernier à la fois d'exciter l'agent optique et d'en détecter la réponse optique. Sur la figurt.. 4, on voit que le dispositif de lecture comporte une source de rayonnement électromagnétique qui, dans ce mode de réalisation 5 est fixée sur le châssis - du chariot mobile 32, en dessous de la première surface de travail 42. Elle peut être avantageusement orientée de manière à émettre un rayonnement électromagnétique d'excitation en direction de la zone d'analyse 26' au travers de la première fenêtre 42. Toutefois, un dispositif de guidage optique tel qu'une fibre optique, un ou plusieurs 10 miroirs, un ou plusieurs prismes, etc... peuvent être utilisés pour guider le rayonnement de la source 7' vers la première fenêtre t2, auquel cas la source , pourrait être disposée autrement sur le chariot mobile, par exemple en étant montée sur la carte électronique 48. La source de rayonnement électromagnétique peut être une source de rayonnement dans 15 le domaine optique, c'est-à-dire un rayonnement dont la longueur d'onde est comprise entre 10 nm et 1 mm, incluant notamment les rayonnements ultraviolets, la lumière visible et les rayonnements infrarouges. Dans l'exemple illustré, la source 58 est une source monochromatique. Cependant, en variante, on peut envisager une source polychromatique, ayant un 20 spectre chromatique discret, ou continu ou mixte. De même, la source 58 peut être constituée d'un composant unique, par exemple un filament incandescent, une diode électroluminescente, une diode laser, ou un tube fluorescent, ou être constituée de plusieurs composants combinés, de même type ou de types différents. Le rayonnement issu de la source peut 25 éventuellement être conditionné par un système de conditionnement pouvant comporter, comme illustré sur la 1, un filtre chromatique 60 (par exemple passe-haut, passe-bas, passe-bande, et/ou polarisant, etc...), un diaphragme (non représenté), une ou plusieurs lentilles CL Par exemple, un filtre 60 laissant passer les longueurs d'ondes utiles pour l'excitation, 30 permet de limiter la présence d'autres longueurs d'ondes qui pourraient perturber la mesure. Le système de conditionnement est de préférence porté par le châssis 34 et agencé entre la source 58 et la première fenêtre 42. 303 5 7 1 6 18 Dans l'exemple illustré, il est prévu, au niveau de la fenêtre 42, un séparateur de faisceau, par exemple sous la forme d'une lame à faces parallèles partiellement réfléchissante 63, ou d'un prisme semi-réfléchissant, qui prélève une partie du rayonnement émis par la source 58 pour un besoin 5 qui sera décrit plus loin. Dans l'exemple illustré, le séparateur de faisceau 63 comprend donc une lame semi-réfléchissante, à faces parallèles, qui est agencée au niveau de la fenêtre 42 entre la source 58 et la zone d'analyse 2e'. Elle s'étend dans un plan qui forme un angle à 45° par rapport à une direction principale d'incidence I du rayonnement électromagnétique émis 10 par la source C. Comme illustré sur les Laures 4 et 5, le rayonnement incident émis par la source 58 illumine la zone d'analyse 26'. Dans l'exemple illustré on voit que la zone d'analyse 26', qui coïncide avec le réceptacle arrière 26 d'une barrette d'analyse dans l'exemple illustré, présente au moins une fenêtre d'entrée du rayonnement incident, réalisée en matériaux 15 transparent pour le rayonnement de la source. Dans le cas présent, cette fenêtre est constituée par un pan de paroi latérale de du réceptacle arrière 26 qui s'étend sensiblement perpendiculairement à une direction principale d'incidence I du rayonnement électromagnétique émis par la source 58. Ainsi, la solution de réaction finale contenue dans la zone d'analyse est 20 illuminée par le rayonnement émis par la source 5G. Dans l'exemple illustré, le chemin optique le plus court entre la source de rayonnement électromagnétique d'excitation __ et la zone d'analyse 26' s'étend selon une ligne droite, au sens que le système de conditionnement optique du rayonnement d'excitation émis par la source 58 ne provoque pas 25 de changement de direction de l'axe optique entre ces deux éléments. Ce chemin optique le plus court définit donc une direction principale incidente I pour le rayonnement électromagnétique d'excitation émis par la source en direction de la zone d'analyse 26'. Dans l'exemple illustré, on voit que cette direction principale incidente I est inclinée par rapport à la première 30 face de travail e D du châssis 34 d'un angle qui peut être compris entre 30 et 60 degrés, par exemple 45°, ces valeurs étant simplement illustratives de l'exemple de réalisation. Cette direction principale incidente I est 3035716 19 sensiblement parallèle à la seconde surface de travail 44 du châssis. Dans l'exemple, la lame partiellement réfléchissante 63 présente une surface plane semi-réfléchissante qui est orientée avec un angle, par exemple à 45°, par rapport à la direction principale incidente I pour permettre de réfléchir 5 une partie de l'intensité du faisceau, par exemple 50% ou moins, vers un canal de référence, tel que cela sera décrit plus loin, en laissant l'autre partie de l'intensité du faisceau se diriger vers la zone d'analyse Selon un aspect de l'invention, le chariot mobile 32 comporte un récepteur photoélectrique qui dans, l'exemple illustré, fait partie d'un 10 spectromètre 64. Le spectromètre utilisé dans l'exemple de réalisation illustré est un composant opto-électronique capable de délivrer un signal électronique représentatif de la décomposition spectrale chromatique d'un rayonnement reçu par le spectromètre. Pour un rayonnement électromagnétique dans le 15 domaine de l'optique, notamment dans le domaine du visible, de l'infrarouge et/ou de l'ultraviolet, le rayonnement étant considéré comme une superposition d'ondes élémentaires monochromatiques, cette décomposition est une représentation de la distribution de l'intensité de chaque onde élémentaire en fonction de la longueur d'onde de l'onde élémentaire. 20 De par l'installation du spectromètre 64 sur le chariot mobile 32, le rayonnement reçu par le spectromètre peut notamment comprendre la réponse optique de la solution finale de réaction contenue dans une zone d'analyse 26', lorsque cette dernière est illuminée par le rayonnement électromagnétique d'excitation émis par la source 58. 25 Dans l'exemple illustré, le spectromètre 64 comporte essentiellement un diaphragme d'entrée 66, un élément de dispersion chromatique 68 et un capteur photoélectrique 70. Le spectromètre 34 présente un champ de vision correspondant à la portion de l'espace vu par le capteur photoélectrique 70 au travers de 30 l'élément de dispersion chromatique 6E et du diaphragme d'entrée _ Dans l'exemple illustré, le spectromètre 64 est agencé sur le châssis de manière que, pour une position déterminée du chariot mobile 32, son 3035716 20 champ de vision, au travers d'un système de conditionnement optique du récepteur, englobe la zone d'analyse 26' correspondante de manière qu'un rayonnement optique émis par une solution finale de réaction contenue dans la zone d'analyse 26' soit dirigé par le système de conditionnement optique 5 du récepteur vers le diaphragme d'entrée 66 du spectromètre selon une direction adéquate. Le système de conditionnement optique du récepteur peut être porté par le châssis 34 et être agencé entre le spectromètre et la seconde fenêtre 46. Le système de conditionnement optique du récepteur peut, de manière optionnelle, comporter notamment un filtre chromatique 10 (non présent dans l'exemple de réalisation de la figure 4, mais qui pourrait être par exemple un filtre passe-haut, passe-bas, passe-bande, et/ou polarisant, etc...), un diaphragme (non représenté), une ou plusieurs lentilles 74. Un dispositif de guidage optique tel qu'une fibre optique, un ou plusieurs miroirs, un ou plusieurs prismes, un guide optique de forme tronconique, tel 15 qu'illustré à la figure 4, etc. peuvent être utilisés pour guider le rayonnement depuis la seconde fenêtre 46 vers le spectromètre r: -_, de préférence vers le diaphragme d'entrée 61, selon une direction d'entrée prédéfinie. Par exemple, le système de conditionnement optique du récepteur peut être prévu pour délivrer, à l'entrée du spectromètre, un 20 faisceau collimaté de rayonnement en provenance de la zone d'analyse 26'. Le diaphragme d'entrée C": peut être un diaphragme ponctuel, sensiblement circulaire et perpendiculaire à la direction d'entrée prédéfinie du spectromètre ou, de préférence, un diaphragme linéaire réalisé sous la forme d'une fente. 25 Le capteur photoélectrique 70 peut être un capteur linéaire ou un capteur bidimensionnel. Il peut s'agir d'un capteur de technologies CCD ou CMOS ou autre. L'élément de dispersion chromatique 68 provoque une dispersion chromatique d'un faisceau incident, au sens qu'un faisceau incident 30 polychromatique, par exemple un faisceau parallèle, voit, par interaction avec l'élément de dispersion chromatique, ses différentes composantes chromatiques être déviées de leur trajectoire d'un angle qui est dépendant 3035716 21 de la longueur d'onde de la composante chromatique considérée. Un élément de dispersion chromatique 68 peut comporter un réseau de diffraction. Un réseau de diffraction peut notamment comporter une série de fentes parallèles (réseau en transmission), ou de rayures réfléchissantes (réseau en 5 réflexion). Ces fentes ou rayures sont espacées de manière régulière, l'espacement étant appelé le « pas » du réseau. Un élément de dispersion chromatique 68 pourrait aussi être réalisé sous la forme d'un ou plusieurs dioptres, par exemple par utilisation d'un prisme de réfraction, dans lequel la dispersion chromatique est obtenue par réfraction, voire sous la forme d'une 10 combinaison d'un ou plusieurs dioptres et d'un ou plusieurs réseaux de diffraction. Dans l'exemple illustré, le réseau de diffraction est ici représenté comme faisant partie d'une surface de réflexion concave renvoyant le rayonnement dispersé vers le capteur photoélectrique, ce qui permet une plus grande compacité du spectromètre. 15 Dans l'exemple illustré, le chemin optique le plus court entre la zone d'analyse 26' et le diaphragme d'entrée 68 du spectromètre 7 s'étend selon une ligne droite, au sens que le système de conditionnement optique de la réponse optique ne provoque pas de changement de direction de l'axe optique. Ce chemin optique le plus court définit donc une direction principale 20 retour R de la réponse optique depuis la zone d'analyse 26' vers le spectromètre 34. Dans l'exemple illustré, on voit que cette direction principale retour R est perpendiculaire à la seconde surface de travail 44 du châssis. On notera donc que, de préférence, notamment pour une analyse par fluorimétrie, avec détection d'agent optiques fluorescents, la direction 25 principale d'incidence I, prise dans le sens allant de la source 58 vers la zone d'analyse 26', et la direction principale retour R, prise dans le sens allant de la zone d'analyse 26' vers le spectromètre 64 ne sont pas à la fois parallèles et de même sens. Au contraire, elles forment entre elles un angle minimal par exemple d'au moins 45°, avec la convention que des directions parallèles 30 mais prises dans des sens opposés forment entre elles un angle de 180°. Dans l'exemple illustré, la direction principale d'incidence I et la direction principale retour R sont perpendiculaires, ce qui permet de limiter les risques 303 5 7 1 6 22 de parasitage de la réponse lumineuse par le rayonnement incident. En variante, la direction principale d'incidence I, prise dans le sens allant de la source 58 vers la zone d'analyse 26', et la direction principale retour R, prise dans le sens allant de la zone d'analyse 26' vers le spectromètre 64, 5 pourraient être parallèles ou quasiment parallèles, mais de sens opposés, avec la source 58 et le spectromètre agencés du même côté de la zone d'analyse 26'. De préférence, le réceptacle arrière 26 présente une fenêtre de sortie de la réponse optique qui s'étend sensiblement perpendiculairement à la direction principale retour R. 10 Dans le cas d'une analyse par transmission, notamment pour une analyse colorimétrique par la détection d'un agent optique de type chromatique, la direction principale d'incidence I et la direction principale retour R sont de préférence alignées à l'entrée et à la sortie de la zone d'analyse 26', avec ainsi la direction principale d'incidence I, prise dans le 15 sens allant de la source 58 vers la zone d'analyse 26', et la direction principale retour R, prise dans le sens allant de la zone d'analyse 26' vers le spectromètre Cl. qui seraient parallèles et de même sens, sauf utilisation d'un réflecteur pour défléchir l'un des deux faisceaux. Avantageusement, l'élément de dispersion 68 et le capteur 20 photoélectrique 70 sont agencés à l'intérieur d'un boîtier 76 dans lequel est formé le diaphragme d'entrée 66. Bien entendu, pour des raisons de compacité du dispositif, on cherchera à utiliser un spectromètre 64 de faibles dimensions. Différentes versions de spectromètres utilisables dans le cadre de l'invention sont 25 proposées par exemple par la société japonaise HAMAMATSU PHOTONICS KK, 325-6, Sunayama-cho, Naka-ku, Hamamatsu City, Shizuoka Pref., 4308587, Japan. Par exemple il est possible d'utiliser, dans le cadre de l'invention, un des spectromètres de la gamme « Mini-Spectrometer », telle la référence C10988MA-01, ou de la gamme « Micro-Spectrometer », telle la 30 référence C12666MA, ou la référence C12880MA. Dans l'exemple illustré, le boîtier 76 est un boîtier parallélépipédique qui comporte une paroi avant 7te tournée en direction de la seconde fenêtre 303 5 7 1 6 23 46 et orientée sensiblement perpendiculairement à une direction principale d'entrée du rayonnement dans le spectromètre. En effet, la paroi avant 78 est munie, sensiblement en son centre, du diaphragme d'entrée CC ici réalisé sous la forme d'une fente. À l'intérieur du boîtier 76, la surface de réflexion 5 concave portant le réseau de diffraction renvoie un faisceau incident, sous la forme d'une dispersion chromatique, en direction du capteur photoélectrique 70 qui est agencé contre la face interne de la paroi avant 78. Le capteur photoélectrique 70 est ainsi décalé latéralement par rapport à la fente d'entrée 66 et sa surface sensible est tournée vers l'arrière du 10 boîtier 7.), en regard de la surface de réflexion portant le réseau de diffraction I:. Une telle construction a l'avantage d'une très grande compacité permettant à un tel spectromètre d'être contenu dans un boîtier 76 dont le volume peut être inférieur à 10 cm3. Le spectromètre 64 délivre un signal électronique représentatif de la 15 décomposition spectrale chromatique du rayonnement entrant au travers du diaphragme d'entrée 66. Ce signal électronique est produit par un circuit électronique associé au capteur photoélectrique 70. Le circuit électronique peut être intégré au boîtier 76, accolé à celui-ci, ou être au moins en partie porté par la carte électronique 48 liée au chariot mobile 34. Ce signal 20 électronique peut comprendre un signal analogique, mais il comporte de préférence un signal numérique moins sensible aux perturbations. Ce signal peut être entièrement numérique. Il est avantageusement transmis à l'unité centrale de commande de la machine par le faisceau électrique "1. De préférence, le spectromètre est capable de délivrer une 25 décomposition spectrale chromatique de la réponse optique sur au moins une plage utile de longueurs d'onde s'étendant entre une première longueur d'onde et une seconde longueur d'onde double de la première. Par exemple, une plage utile de longueurs d'onde peut s'étendre entre deux longueurs d'onde Àrnin et Àmaxf avec &lux 2 x Àrnin. En effet, l'utilisation d'un 30 spectromètre embarqué sur le chariot mobile 34 permet d'obtenir des informations sur la composition du spectre de la réponse optique. L'analyse de ces informations sur une certaine plage, significative, permet, comme on 3035716 24 le verra plus tard, d'affiner les résultats de l'analyse. Bien entendu, la plage utile du spectromètre est choisie pour correspondre aux propriétés optiques particulières de l'agent optique que l'on souhaite détecter dans la solution finale de réaction. Avantageusement, la plage utile du spectromètre ". sera 5 telle qu'elle pourra couvrir deux propriétés optiques prédéterminées distinctes, notamment deux longueurs d'onde distinctes, correspondant chacune à au moins 2 agents optiques distincts, voire plus de 2 agents optiques distincts. On comprend qu'une machine telle que décrite ci-dessus est 10 avantageusement utilisée lorsque la solution de réaction comporte au moins un agent fluorescent dont la présence et/ou la quantité dans la solution de réaction dépend de la présence et/ou de la quantité d'un analyte recherché dans l'échantillon. Bien entendu, on veille alors à ce que le spectre d'émission de l'agent fluorescent est au moins partiellement compris dans la 15 plage utile de longueurs d'onde du spectromètre. De préférence, le rayonnement électromagnétique d'excitation émis par la source de rayonnement 58 présente un spectre qui est distinct du spectre d'émission de l'agent optique recherché. Encore plus préférentiellement, les deux spectres sont disjoints au sens que chacun d'eux est contenu dans une 20 plage de longueurs d'ondes et que les deux plages de longueur d'ondes ne se chevauchent pas. Cela permet notamment de limiter encore le risque de parasitage de la réponse lumineuse par le rayonnement d'excitation. Le dispositif de lecture optique peut par ailleurs comporter des moyens de détection de l'intensité du rayonnement émis par la source de 25 rayonnement. Ces moyens peuvent comporter un circuit ou algorithme d'estimation de l'intensité émise par la source 58 en fonction par exemple des paramètres de contrôle de la source 58 et de caractéristiques connues de la source. Cependant ces moyens peuvent comprendre un détecteur 30 photoélectrique mesurant l'intensité effective du rayonnement d'excitation émis par la source 58. 3035716 25 Dans l'exemple de réalisation illustré sur la figure 4, les moyens de détection de l'intensité du rayonnement émis par la source de rayonnement d'excitation incluent un capteur photoélectrique secondaire 80, distinct du spectromètre 64. Le capteur photoélectrique secondaire 80 est par 5 exemple une photodiode. Le capteur photoélectrique secondaire 80 est sensible à la longueur d'onde ou pour la plage de longueurs d'onde émise par la source 58. Avantageusement, le dispositif de lecture optique comporte un système de guidage du rayonnement d'excitation qui guide une partie du 10 rayonnement incident vers le capteur photoélectrique secondaire, sans passer par la zone d'analyse. Dans l'exemple de réalisation de la f j:_, ce système de guidage comporte par exemple le séparateur de faisceau, par exemple sous la forme d'une lame semi-réfléchissante à faces parallèles 63, qui dirige une partie du rayonnement émis par la source 58 vers le capteur 15 secondaire :0. Cette partie du rayonnement émis, qui est séparée par le séparateur de faisceau 63, sera désignée comme étant le faisceau de référence. Le système de guidage peut comporter un filtre 82 et/ou par exemple une ou plusieurs lentilles, voire un ou plusieurs éléments parmi des fibres optiques, des prismes, des miroirs et/ou un guide optique de forme 20 tronconique, tel qu'illustré à la figure 4 en aval de filtre 82, pour acheminer le faisceau de référence vers le capteur secondaire 80. Le faisceau de référence ne traverse pas la zone d'analyse 26' dans son trajet entre la source 58 et le capteur secondaire De la sorte, le capteur secondaire 80 est capable de délivrer une information, par exemple sous la forme d'un 25 signal électrique de référence, qui est une image de l'intensité du rayonnement émis par la source 58. On a illustré sur la figure 5 un deuxième mode de réalisation de l'invention qui est identique en tout point au premier mode de réalisation illustré à la f -e :, sauf en ce qui concerne les moyens de détection de 30 l'intensité du rayonnement émis par la source 58, et la présence éventuelle d'un filtre 72 sur la trajectoire de la réponse lumineuse.. Contrairement au mode de réalisation de la figure 4, ces moyens de détection de l'intensité du 3035716 26 rayonnement émis par la source 58 ne font pas appel à un capteur secondaire distinct du spectromètre 64 mais font appel au spectromètre 64 pour détecter l'intensité du rayonnement émis par la source 58. De manière similaire au mode de réalisation de la fi-ur- 4, les moyens de détection 5 comportent un système de guidage du faisceau de référence qui est prélevé par le séparateur de faisceau 64. Le système de guidage peut comprendre des éléments identiques ou similaires à ceux qui ont été évoqués pour le système de guidage dans le mode de réalisation précédent. En revanche, le système de guidage conduit le faisceau de référence au diaphragme d'entrée 10 66 du spectromètre 64. Ce mode de réalisation est avantageux en ce qu'il ne nécessite pas de composant optoélectronique distinct pour la détection de l'intensité du signal électromagnétique émis par la source 58. On notera que le système de guidage du faisceau de référence, dans ce second mode de réalisation, assure lui aussi que le faisceau de référence ne passe pas par la 15 zone d'analyse 26'. De plus, dans l'exemple illustré, le faisceau de référence ne passe pas par un filtre après sa réflexion par le séparateur de faisceaux Ce second mode de réalisation est particulièrement avantageux dans le cas où le spectre d'émission de la source rr est distinct, préférentiellement 20 disjoint, de la propriété optique caractéristique de l'agent optique que l'on souhaite détecter. En effet, dans ce cas, l'information de décomposition spectrale fournie par le spectromètre - permettra d'identifier très clairement et distinctement le ou les pics d'intensité correspondant à des longueurs d'onde distinctes pour, d'un côté, le rayonnement émis par la 25 source 58 et, d'un autre côté, le rayonnement correspondant à la réponse optique de la solution finale de réaction analysée. On notera que, dans ce second mode de réalisation, le faisceau de référence peut éventuellement être mélangé à la réponse optique en provenance de la zone d'analyse avant l'entrée au travers du diaphragme rr 30 du spectromètre 6.1. Toutefois, en variante de ce second mode de réalisation, on pourrait aussi prévoir d'acheminer alternativement uniquement l'un ou l'autre du 3 03 5 716 27 faisceau de référence ou de la réponse lumineuse vers le spectromètre 64, en occultant l'autre. Dans ce cas, le spectromètre 64 détermine successivement l'intensité du faisceau de référence puis la décomposition spectrale chromatique de la réponse optique de la zone d'analyse 26'. Cette 5 variante, qui conserve l'avantage d'un capteur photoélectrique unique, peut être utile en cas de chevauchement au moins partiel du spectre du rayonnement d'excitation émis par la source - avec le spectre de la réponse optique de la zone d'analyse 5'. On notera que, dans le mode de réalisation de la 1.-= ._:e ;, on peut 10 prévoir, à titre optionnel, un filtre optique 72 sur la trajectoire de la réponse lumineuse. De préférence, un tel filtre laisse passer les longueurs d'onde de la plage utile du spectromètre, nécessaires à la détection des agents optiques recherchés. L'absence d'un filtre sur la trajectoire de la réponse lumineuse permettrait cependant de faire fonctionner le système avec des 15 agents optiques différents qui émettent des longueurs d'ondes différentes, sans nécessiter d'adaptation physique. De même, la présence d'un filtre sur la trajectoire du faisceau de référence est possible, mais optionnelle. L'absence d'un tel filtre, comme illustré sur la figure 5, permet de faire fonctionner le système avec des sources 58 de longueurs d'ondes 20 différentes, sans nécessiter d'adaptation physique du système. Dans la suite, on décrira un procédé d'analyse, tel que permis par l'utilisation d'une machine selon l'invention, dans le cadre d'une application dans laquelle l'agent optique fluorescent émet un rayonnement ayant une longueur d'onde définie ou une plage étroite de longueurs d'onde définie ou 25 ayant une décomposition spectrale présentant un ou plusieurs pics caractéristiques dans une plage de longueurs d'onde définie. Bien entendu, le spectromètre L. possède une plage utile couvrant cette longueur d'onde ou cette plage de longueurs d'onde correspondant à l'agent fluorescent. Avantageusement, l'agent fluorescent est choisi pour que sa fluorescence 30 soit déclenchée par l'excitation d'un rayonnement dont la longueur d'onde est différente de la longueur d'onde de fluorescence ou de la plage de longueurs d'onde de fluorescence. Par exemple, l'invention peut être utilisée 303 5 7 1 6 28 dans le cadre d'une application mettant en oeuvre un agent fluorescent communément appelé 4-MU (4-méthylumbelliférone) qui est susceptible d'être excité par un rayonnement dans le domaine ultraviolet, par exemple par un rayonnement ayant une longueur d'onde de 370 nm (+/- 5 nm), et 5 qui émet un rayonnement de fluorescence dans une plage de longueurs d'onde dont le pic est situé à environ 450 nm (mais dont la plage de rayonnement peut s'étendre de 375 à 550 nm environ). Un autre exemple d'agent fluorescent est le « QuantaBlu® », disponible auprès de Thermo Fisher Scientific, Pierce Biotechnology, P.O. Box 117, Rockford, IL 61105 10 United States, qui présente un pic d'émission de fluorescence à 420 nm lorsque excité avec un rayonnement d'excitation à 325 nm. Du même fournisseur, on peut utiliser par exemple les agents Qdot® 605, Qdot® 705, ou Qdot® 525. A chaque fois, il faut cependant prendre soin de veiller à ce que la source lumineuse soit adaptée pour qu'elle émette bien un 15 rayonnement d'excitation approprié. Sur la figure C, on a illustré la décomposition spectrale chromatique délivrée par le spectromètre "3, dans le cas où a été placée, dans une zone d'analyse 26', une solution contenant un agent fluorescent 4-MU, cette zone d'analyse étant illuminée par la source de rayonnement d'excitation 58 20 constituée dans le cas présent d'une diode électroluminescente dans le domaine ultraviolet émettant notamment dans une plage de longueurs d'onde étroite de 370 nm +/- 5 nm. Le graphe de la figures G donne, en ordonnée, une grandeur image d'une intensité d'une composante chromatique du rayonnement, en fonction, selon l'axe des abscisses, de la 25 longueur d'onde LO de la composante chromatique du rayonnement reçu par le spectromètre 64. Le signal délivré par le spectromètre 64 est un signal S irrégulier. Cependant, ce signal présente une forme générale qui de toute évidence présente un pic d'intensité dont le maximum est atteint aux alentours de 30 450 nm de longueur d'onde. Toutefois, on remarque que, de part et d'autre du pic d'intensité qui s'étend approximativement de 350 à 550 nm, le signal S n'est pas nul. Cette partie non nulle du signal témoigne de perturbations 3035716 29 ou d'éléments parasites qui ne sont pas directement liés à la fluorescence de l'agent fluorescent. Un deuxième aspect de l'invention consiste donc à proposer un procédé permettant de mieux isoler la caractéristique intéressante du signal délivré 5 par le spectromètre, caractéristique qui correspond effectivement à la propriété optique caractéristique de l'agent optique que l'on veut détecter et/ou quantifier. Aussi, selon un aspect de l'invention, il est proposé un procédé permettant d'affiner le résultat obtenu par une analyse. 10 Un tel procédé pourra être utilisé pour la détection et/ou la quantification automatisée in vitro d'analytes contenus dans des échantillons. Il pourra avantageusement être mis en oeuvre à l'aide d'une machine selon l'invention. Dans un tel procédé, on peut mettre l'échantillon en situation de réagir 15 avec un ou plusieurs réactifs pour produire directement ou indirectement une solution de réaction comportant, en présence d'un analyte déterminé dans l'échantillon, un agent ayant au moins une propriété optique prédéterminée, par exemple une couleur, une phosphorescence, une luminescence. De préférence, l'agent optique n'est présent dans la solution de réaction ou ne 20 possède la propriété optique prédéterminée qu'en présence de l'analyte déterminé. De préférence, l'intensité de la propriété optique prédéterminée est une fonction de la quantité ou concentration de l'analyte dans l'échantillon déterminée. Avantageusement, cette propriété optique prédéterminée est détectable par analyse d'une décomposition spectrale 25 chromatique d'un rayonnement émis par la solution de réaction lorsque ce rayonnement est soumis à un rayonnement électromagnétique incident. L'agent optique est par exemple un agent fluorescent et la propriété optique prédéterminée est alors l'émission fluorescente, qui peut par exemple être caractérisée par une décomposition spectrale chromatique particulière. 30 Cette étape peut être mise en oeuvre dans la machine telle que décrite ci-dessus ou peut-être réalisée dans une autre machine ou manuellement ou par tout autre moyen. 303 5 7 1 6 30 Ensuite, le procédé prévoit d'illuminer la solution de réaction avec un rayonnement électromagnétique d'excitation. Pour ce faire, la solution de réaction est disposée dans une zone d'analyse, coïncidant par exemple avec le réceptacle arrière 26 d'une barrette d'analyse 17 telle que décrite ci- 5 dessus. L'illumination peut être réalisée par la source E"__ de la machine décrite ci-dessus. Le procédé prévoit de détecter la réponse optique de la solution de réaction et de déduire de la réponse optique la présence et/ou la quantification de l'analyte. Avantageusement, la détection de la réponse 10 optique se fait grâce à la machine décrite ci-dessus et notamment par interprétation de la décomposition spectrale chromatique de la réponse optique qui est obtenue grâce au spectromètre 64. Selon une étape du procédé, on détermine une relation théorique approximée de variation de l'intensité en fonction de la longueur d'onde, 15 image de la décomposition spectrale chromatique de la réponse optique. Cette relation théorique approximée peut être obtenue de manière graphique ou de manière mathématique. Elle est obtenue avantageusement par toute méthode connue d'ajustement de courbe. Ces méthodes d'ajustement de courbes peuvent comprendre un ajustement par la méthode 20 des moindres carrés. Sur la t7=-Ire 6, on a représenté un exemple dans lequel on a identifié deux parties de cette relation théorique. Une partie Ti qui correspond au mieux au pic d'intensité s'étendant entre 350 et 550 nanomètres environ. Cette partie Ti peut être prédéfinie comme étant une courbe polynomiale ou 25 une courbe de Gauss ou tout autre courbe paramétrique, et il est alors possible, par des méthodes de régression connues, de déterminer la partie Ti de la relation théorique. Une partie T2 de la relation théorique est une relation linéaire qui correspond au mieux au signal S en dehors du pic d'intensité s'étendant entre 350 et 550 nanomètres. Cette partie T2 de la 30 relation théorique peut être déterminée par exemple par régression linéaire. Ainsi, on peut déterminer que, dans la relation théorique approximée de variation de l'intensité en fonction de la longueur d'onde, un décalage 3035716 31 linéaire de l'intensité, fonction linéaire de la longueur d'onde, affecte l'ensemble de la courbe. Dans l'exemple illustré, ce décalage linéaire peut être assimilé à la partie linéaire ';2 de la relation théorique. Dans la réalité, ce décalage linéaire peut être lié par exemple au moins en partie à une 5 absorption différentielle du rayonnement par le matériau constituant le réceptacle arrière '.#1 de la barrette d'analyse 22. Sur cette base, on peut alors déterminer une relation théorique corrigée de la variation de l'intensité en fonction de la longueur d'onde, en corrigeant la relation théorique approximée en fonction du décalage linéaire. Par 10 exemple, on peut tout simplement soustraire point par point le décalage linéaire de la relation théorique approximée. Par cette soustraction, on aboutit ainsi à une courbe corrigée TC, que l'on peut assimiler à la partie de la réponse optique purement liée à la propriété caractéristique de l'agent optique, par exemple sa propriété de fluorescence. 15 De la courbe corrigée TC on peut déduire un pic d'intensité correspondant à l'intensité maximale ou correspondant à la valeur moyenne d'intensité sur la largeur du pic. On comprend donc que la décomposition spectrale chromatique obtenue dans ce procédé, ce qui est rendu possible par l'utilisation d'un 20 spectromètre dans la machine selon l'invention, permet d'utiliser des valeurs de mesure de la réponse optique, en dehors du domaine de longueurs d'onde de la propriété caractéristique de l'agent optique, pour affiner la détection dans le domaine de longueurs d'onde de la propriété caractéristique de l'agent optique. 25 Par ailleurs, il a été vu que, dans l'art antérieur, les machines connues mettent en oeuvre des procédés dans lesquels, au sein d'une même barrette d'analyse, on ne peut conduire qu'une seule analyse du fait de la détection d'un seul agent optique dans une solution finale de réaction donnée contenue dans une zone d'analyse donnée. 30 Selon l'invention, il est proposé un nouveau procédé permettant, dans le cadre d'une même analyse, d'obtenir plus d'informations. Ce procédé peut 3035716 32 être mis en oeuvre en utilisant une machine selon l'invention telle que décrite plus haut, utilisant un spectromètre. De même que le procédé décrit plus haut, ce procédé peut être mis en oeuvre, notamment à l'aide d'une machine selon l'invention, pour la détection 5 et/ou la quantification automatisée in vitro d'analytes contenus dans des échantillons. De manière similaire à ce qui a été décrit plus haut, ce procédé comporte les étapes suivantes : - mettre l'échantillon en situation de réagir avec un ou plusieurs réactifs pour produire directement ou indirectement une solution de réaction 10 comportant, en présence d'un analyte déterminé dans l'échantillon, un agent optique ayant au moins une propriété optique prédéterminée; - illuminer la solution de réaction avec un rayonnement électromagnétique ; - détecter la réponse optique de la solution de réaction ; 15 - déduire de la réponse optique la présence et/ou la quantification de l'analyte. Dans le détail, ces différentes étapes peuvent être identiques ou similaires aux étapes correspondantes décrites dans le cadre du procédé précédent. Ces détails ne sont donc pas répétés ici. 20 Ce nouveau procédé met en oeuvre un ou plusieurs réactifs pour produire directement ou indirectement une solution de réaction comportant au moins deux agents optiques distincts ayant chacun au moins une propriété optique prédéterminée (couleur, fluorescence, phosphorescence, ..., telle que définie plus haut), les deux propriétés optiques prédéterminées, 25 correspondant chacune à un agent optique, étant distinctes. Ainsi, les deux agents optiques peuvent présenter une couleur différente, une fluorescence différente, une phosphorescence différente, ... toutes propriétés qui peuvent être distinguées par leur décomposition spectrale chromatique. Le procédé comporte les étapes consistant à acquérir une 30 décomposition spectrale chromatique de la réponse optique, et à détecter séparément les deux propriétés optiques prédéterminées distinctes dans ladite décomposition spectrale. 3035716 33 De préférence, le procédé prévoit d'acquérir une décomposition spectrale unique, sous un rayonnement électromagnétique incident donné. Dans ce cas, les propriétés optiques seront détectées séparément au sens qu'elles pourront être chacune identifiées dans une même décomposition 5 spectrale. Par exemple, chaque propriété optique pourra se traduire par la présence d'un pic d'intensité ayant un maximum pour une longueur d'onde différente. Dans ce cas, les pics d'intensité correspondront de préférence à des plages de longueurs d'ondes distinctes, plus préférentiellement disjointes. 10 En variante, le procédé prévoit d'acquérir plusieurs décompositions spectrales chromatiques, acquises en illuminant la zone d'analyse avec des rayonnements électromagnétiques incidents différents (notamment différents par leur décomposition spectrale chromatique). Dans ce cas, les propriétés optiques prédéterminées distinctes seront détectées séparément au sens 15 qu'elles pourront être chacune identifiées dans des décompositions spectrales chromatiques distinctes. L'étape de détection d'une propriété optique prédéterminée peut être réalisée en détectant l'absence de cette propriété optique prédéterminée. Ce procédé peut être mis en oeuvre pour détecter la présence d'au 20 moins deux analytes distincts dans l'échantillon. Dans ce cas, les différents agents optiques correspondent à des analytes distincts. Il peut aussi être mis en oeuvre pour détecter au moins deux réactions distinctes mettant en oeuvre un même analyte. Dans ce cas, les différents agents optiques correspondent à des réactions distinctes pour un même analyte. 25 Dans tous les procédés décrits ci-dessus, l'étape consistant à acquérir une décomposition spectrale chromatique de la réponse optique comporte une étape de dispersion chromatique d'un faisceau optique issu de la réponse optique et une étape de détection de l'intensité par composantes de longueurs d'onde distinctes du faisceau ainsi dispersé. 30 De même, chacun des procédés ci-dessus peut comporter une étape de détection de l'intensité du rayonnement émis par la source de rayonnement. 303 5 7 1 6 34 Cette étape peut comporter une étape de guidage d'une partie du rayonnement incident, sans passer par la zone d'analyse, et une étape consistant à acquérir une décomposition spectrale chromatique de ladite partie du rayonnement incident formant un faisceau de référence, 5 notamment grâce à un spectromètre, tel que mis en oeuvre dans le dispositif illustré à la figu-1 r. Dans ce cas, avant l'étape consistant à acquérir une décomposition spectrale chromatique du rayonnement incident, on peut prévoir une étape de mélange de ladite partie du rayonnement incident et de la réponse optique de la solution de réaction, par exemple comme mis en 10 oeuvre dans le dispositif illustré à la Par ailleurs, l'invention peut être perfectionnée en utilisant un procédé et un système tel que décrit dans le document W0-2013/045807. Dans ce document, il est décrit un système et un procédé de modulation de la source et de démodulation des signaux de détection et de référence, dans le but 15 d'améliorer le rapport signal / bruit de la mesure de détection. Le système et le procédé sont décrits dans le document W0-2013/045807 dans le cadre où il n'y a qu'un seul signal de détection. Le même principe de modulation et de détection peut être appliqué dans le cadre de l'invention. On peut ainsi, moduler la source de rayonnement 58 en amplitude à une fréquence / 20 longueur d'onde porteuse. Ensuite, on peut configurer le signal de sortie du spectromètre, analogique ou numérique, qui couvre une plage utile de longueurs d'onde, en une série de N signaux élémentaires qui sont chacun représentatifs de l'intensité du signal recueilli par le spectromètre pour une longueur d'onde élémentaire ou plage élémentaire de longueurs d'onde. De 25 préférence, les N longueurs d'onde élémentaires ou gammes élémentaires de longueurs d'onde couvrent la plage utile de longueurs d'onde, de préférence de manière continue ou quasi-continue. Pour chaque signal élémentaire, ou au moins pour une série, de préférence représentative, de ces signaux élémentaires, on peut individuellement mettre en oeuvre le système et le 30 procédé de modulation et de démodulation décrits dans le document WO2013/045807. En appliquant cet enseignement à l'ensemble des signaux élémentaires, ou à une série de ces signaux, le résultat est une 303 5 7 1 6 décomposition spectrale chromatique de la réponse optique qui présente un meilleur rapport signal / bruit, c'est-à-dire une décomposition moins perturbée par le bruit ambiant à la mesure. L'invention n'est pas limitée aux exemples décrits et représentés car 5 diverses modifications peuvent y être apportées sans sortir de son cadre. Partie Expérimentale Ce qui suit présente une expérience montrant la capacité d'une 10 machine et d'un procédé selon l'invention d'acquérir, en une seule acquisition, la réponse lumineuse correspondant à trois agents optiques, avec la capacité de quantifier la présence de chaque agent optique. Dans cette expérience, trois agents optiques ont été utilisés commercialisés par Thermo Fisher, 3747 N. Meridian Road, PO Box 117, 15 Rockford, IL 61105 USA : Agent A : F(ab')2-Goat anti-Mouse IgG (H+L) Secondary Antibody, Qdot® 605 conjugate; Agent B : F(ab')2-Goat anti-Mouse IgG (H+L) Secondary Antibody, Qdot® 705 conjugate; 20 Agent C : F(ab')2-Goat anti-Mouse IgG (H+L) Secondary Antibody, Qdot® 525 conjugate La source lumineuse utilisée est une source monochromatique émettant dans l'ultra-violet (370 nm +/- 5nm) pour exciter les molécules 25 Des solutions des agents A, B, et C ont été préparées en utilisant un agent tampon CHES (acide N-Cyclohexyl-2-aminoethanesulfonic), avec un pH de 9.2 30 303 5 7 1 6 36 5 Solutions ont été préparées : Sol 1 Agent C 200 nM Sol 2 Agent A 20 nM Sol 3 Agent A 200 nM Sol 4 Agent B 20nM Sol 5 Agent A 20nM Agent B 20nM Agent C 200nM Un volume de 250 microlitres de chaque solution a été placé dans une 5 zone d'analyse et la réponse lumineuse de chaque solution a été acquise grâce à une machine selon l'invention. Sur la figure 7 on a superposé les décompositions spectrales des réponses lumineuses obtenues séparément pour les solutions 1, 2 et 4. Chaque décomposition spectrale présente donc un pic bien identifié. Les 10 courbes sont exprimées en unités d'intensité relative RU de la réponse lumineuse, en fonction de la longueur d'onde À en nm. Sur la I igure 8, on a illustré la décomposition spectrale de la réponse lumineuse obtenue séparément pour la solution 5, comprenant un mélange des trois agents. On y retrouve les trois pics, donc on voit la possibilité de 15 détecter séparément, dans une même analyse, trois agents optiques distincts. La courbe est exprimée en unités d'intensité relative RU de la réponse lumineuse, en fonction de la longueur d'onde À en nm. En utilisant les données de la décomposition spectrale illustrée à la -_]re 8, on a appliqué un algorithme de régression gaussienne dynamique 20 pour discriminer les réponses dues aux trois agents optiques. Ainsi, le signal de la figure 3 a été modélisé par la somme de trois fonctions gaussiennes appelées respectivement G525, G605 et G705, centrées chacune sur le pic de fluorescence de l'agent optique correspondant avec: 3035716 37 1 (X-ii1)2 x e 20.1 Xe (X-112)2 X e G525g, Ai, 1 =A1 x G605(X, A2, cr2, = A2 X /22) 20-2 (X3-/23)2 G705(X, A3, o-3, = A3 X 2n-o-2 1 p3) 2'13 2n-o-3 où : - X est la Variable, qui correspond ici à la longueur d'onde - A, a et p sont des paramètres relatifs à l'amplitude, I' écart-type et la valeur moyenne de la chaque fonction gaussienne. 5 Ainsi, le modèle utilisé pour modéliser la courbe de la ire illustrant la décomposition spectrale de la réponse lumineuse obtenue séparément pour la solution 5 peut s'écrire : S(X, 0.1,111, A2, (72,122, A2, c13,113) = G525(111, cri, + G605(A2,o-2,1i2) + e705(A3,o-3,p3) 10 Le vecteur de paramètres à résoudre par optimisation comprend donc neuf paramètres : P = oi, A2, 0-2, 1-12,A3, cr3, P3) Le processus d'optimisation utilisé est celui disponible par le logiciel Matlab et utilisant l'algorithme appelé « Flexible Simplex Method ». Cet 15 algorithme minimise la fonction de coût qui est la somme quadratique des erreurs, représentant l'erreur entre le modèle (avec les valeurs instantanées des paramètres du vecteur pour l'itération considérée) et la courbe expérimentale. A chaque itération, le vecteur P est modifié selon l'algorithme et la somme quadratique des erreurs est vérifiée. Les itérations sont arrêtées 20 lorsqu'on on atteint une erreur inférieure à un seuil donné qui dépend de la précision souhaitée. Les valeurs initiales de paramètres, utilisées pour le processus d'optimisation, sont : 3035716 38 A 1 0 610 00 A20 o20 1120 A30 03o 1-130 1000 525 21270 170 - 30270 1000 705 15270 Ce vaik:Irs :mettent d'aboutir r..:)1 ::.1'£:nt à la soluon, mais d'autres valeurs initale7., puurr.,ient être utlisées. Le résu l'optimisation a dQnné les paramètres suivants (7rr( l'u a1 p.1 Al a2 la2 A2 a3 i.,'' A3 144 523 19g76 145 603 54023 988 700 54574 La f j illustre la courbe de la fonction S obtenue avec ces paramètres optimisés, en superposition avec la courbe de la figure 8. Les courbes sont exprimées en unités d'intensité relative RU de la réponse 10 lumineuse, en fonction de la longueur d'onde À en nm. Les trois fonctions G525, G605 et G705 définies avec ces paramètres optimisés permettent d'extraire de la réponse lumineuse globale illustrée à la .igure 8 les réponses lumineuses dues individuellement à chaque agent optique. En se référant à une échelle de calibration adéquate, on peut 15 aisément quantifier la concentration de chaque agent optique dans la solution unique analysée. La fi: n illustre les trois fonctions G525, G605 et G705 obtenues avec ces paramètres superposés avec la courbe de la iigur- . Les courbes sont exprimées en unités d'intensité relative RU de la réponse lumineuse, en 20 fonction de la longueur d'onde À en nm. Cette expérience montre comment une machine et/ou un procédé selon l'invention peuvent être mis en oeuvre pour quantifier, en une seule analyse, la présence de plusieurs agents optiques distincts qui peuvent témoigner de plusieurs réactions d'analyse. REVENDICATIONS1. Machine pour la détection et/ou la quantification automatisée in vitro d'analytes contenus dans des échantillons, du type comportant : plusieurs zones d'analyse optique (26') destinées à recueillir chacune une solution de réaction obtenue par réaction avec l'échantillon, un dispositif de lecture optique CO) capable de détecter et/ou quantifier la réponse optique de la solution de réaction à une stimulation électromagnétique, le dispositif de lecture optique comportant au moins une source de rayonnement électromagnétique (58) capable d'illuminer une zone d'analyse (II) et un récepteur photoélectrique (70) agencé pour recueillir un rayonnement optique provenant de la solution de réaction contenue dans la zone d'analyse et capable de détecter la réponse optique de la solution de réaction, et du type dans lequel le récepteur photoélectrique (70) est porté par un chariot mobile (32) de la machine qui est motorisé et dont les déplacements sont commandés automatiquement pour amener le récepteur photoélectrique dans différentes positions correspondant chacune à une zone d'analyse (26'), caractérisé en ce que le récepteur photoélectrique (70) fait partie d'un spectromètre (64) capable de délivrer une décomposition spectrale chromatique de la réponse optique. 2 - Machine selon la revendication 1, caractérisée en ce que le spectromètre ( _) est capable de délivrer une décomposition spectrale chromatique de la réponse optique sur au moins une plage utile de longueurs d'onde entre deux longueurs d'onde Àmin et Àrilaxi avec Àmax ?». 2 X Àmin- 3 - Machine selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que le spectromètre comporte un élément de dispersion chromatique (68) et un capteur photoélectrique principal (70) linéaire ou bi-dimensionel. 4 - Machine selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce 30 que le spectromètre (64) comporte un circuit électronique qui est connecté au récepteur photoélectrique (`, ,) et qui délivre un signal électrique image de la décomposition spectrale chromatique de la réponse optique. 3035716 40 5 - Machine selon la revendication 4, caractérisée en ce que le signal électrique image est un signal analogique. 6 - Machine selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la source de rayonnement est une source monochromatique. 5 7 - Machine selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que la source de rayonnement est une source polychromatique. 8 - Machine selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le dispositif de lecture optique comporte des moyens de détection de l'intensité du rayonnement émis par la source de rayonnement. 10 9 - Machine selon la revendication 8, caractérisée en ce que les moyens de détection de l'intensité du rayonnement émis par la source de rayonnement incluent le spectromètre ( 1 et un système de guidage qui guide une partie du rayonnement incident vers le spectromètre, sans passer par la zone d'analyse (26'). 15 10 - Machine selon la revendication 8, caractérisée en ce que les moyens de détection de l'intensité du rayonnement émis par la source de rayonnement incluent un capteur photoélectrique secondaire (80), distinct du spectromètre (64), et un système de guidage qui guide une partie du rayonnement incident vers le capteur photoélectrique secondaire, sans 20 passer par la zone d'analyse 11 - Procédé pour la détection et/ou la quantification automatisée in vitro d'analytes contenus dans des échantillons, du type comportant les étapes suivantes : mettre l'échantillon en situation de réagir avec un ou plusieurs réactifs 25 pour produire directement ou indirectement une solution de réaction comportant, en présence d'un analyte déterminé dans l'échantillon, un agent optique ayant au moins une propriété optique prédéterminée ; - illuminer la solution de réaction avec un rayonnement électromagnétique ; détecter la réponse optique de la solution de réaction ; - déduire de la réponse optique la présence et/ou la quantification de l'analyte ; 3035716 41 caractérisé en ce que le procédé met en oeuvre un ou plusieurs réactifs pour produire directement ou indirectement une solution de réaction comportant au moins deux agents optiques distincts ayant chacun au moins une propriété optique prédéterminée, les deux propriétés optiques 5 prédéterminées étant distinctes, et en ce qu'il comporte les étapes consistant à acquérir une décomposition spectrale chromatique de la réponse optique et à détecter séparément les deux propriétés optiques prédéterminées distinctes dans ladite décomposition spectrale. 12 - Procédé pour la détection et/ou la quantification automatisée in vitro 10 d'analytes contenus dans des échantillons, du type comportant les étapes suivantes : mettre l'échantillon en situation de réagir avec un ou plusieurs réactifs pour produire directement ou indirectement une solution de réaction comportant, en présence d'un analyte déterminé dans l'échantillon, un 15 agent optique ayant au moins une propriété optique prédéterminée ; illuminer la solution de réaction avec un rayonnement électromagnétique ; détecter la réponse optique de la solution de réaction ; déduire de la réponse optique la présence et/ou la quantification de 20 l'analyte ; caractérisé en ce que le procédé comporte les étapes consistant à : acquérir une décomposition spectrale chromatique de la réponse optique ; déterminer une relation théorique approximée de variation de 25 l'intensité en fonction de la longueur d'onde, image de la décomposition spectrale chromatique de la réponse optique ; - déterminer, dans la relation théorique approximée de variation de l'intensité en fonction de la longueur d'onde, un décalage linéaire de l'intensité fonction linéaire de la longueur d'onde ; 30 déterminer une relation théorique corrigée de la variation de l'intensité en fonction de la longueur d'onde, en corrigeant la relation théorique approximée en fonction du décalage linéaire. 303 5 7 1 6 42 13 - Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce que l'étape consistant à déterminer une relation théorique approximée de variation de l'intensité en fonction de la longueur d'onde, comprend l'étape d'ajuster une courbe à au moins une partie de la décomposition spectrale chromatique de 5 la réponse optique. 14 - Procédé selon l'une des revendications 11 à 13, caractérisé en ce que l'étape consistant à acquérir une décomposition spectrale chromatique de la réponse optique comporte une étape de dispersion chromatique d'un faisceau optique issu de la réponse optique et de détection de l'intensité par 10 composantes de longueurs d'onde distinctes du faisceau ainsi dispersé. 15 - Procédé selon l'une des revendications 11 à 14, caractérisé en ce qu'il comporte une étape de détection de l'intensité du rayonnement émis par la source de rayonnement. 16 - Procédé selon l'une des revendications 11 à 15, caractérisé en ce 15 qu'il comporte une étape de guidage d'une partie du rayonnement incident, sans passer par la zone d'analyse, et une étape consistant à acquérir une décomposition spectrale chromatique de ladite partie du rayonnement incident. 17 - Procédé selon la revendication 16, caractérisé en ce qu'il comporte, 20 avant l'étape consistant à acquérir une décomposition spectrale chromatique du rayonnement incident, une étape de mélange de ladite partie du rayonnement incident et de la réponse optique de la solution de réaction. 25