Brevet FR3026952A1 — publié le 20160415

IT DE BULBE DE LILIUM POUR SON UTILISATION DANS LES DESORDRES OU PATHOLOGIES DE LA PEAU [0001] De nombreux désordres ou pathologies de la peau qui résultent d'une déviation ou d'un ralentissement métabolique sont aujourd'hui non traités ou traités par des traitements inappropriés. Parmi ceux-ci peuvent être cités, le vieillissement accéléré actinique, la cicatrisation traumatique, l'acné, les suites de traumatismes bactériens. [0002] Dans toutes ces situations qu'elles résultent d'agressions extérieures ou de désordres du métabolisme cellulaire, le fibroblaste considéré comme la cellule clé du derme est impliqué. [0003] En effet, le tissu épidermique et le tissu dermique sont séparés par une fine couche protéique appelée membrane basale. Elle est constituée principalement d'éléments matriciels comme les collagènes types IV et VII, l'héparane sulfate, la laminine type V et le nidogène. La membrane basale sert de lieu passage et surtout de stockage et de préservation pour les messages en provenance de l'épiderme et du derme en vue d'une libération ultérieure vers l'un et l'autre des 2 tissus. [0004] Le fibroblaste est responsable de la production de plus de 99% de la matrice extracellulaire (MEC) du derme sous forme de collagènes, de glycoprotéines (élastine fibronectine etc.), de protéoglycanes (chondroitine sulfate, dermatane sulfate, acide hyaluronique etc.) et des enzymes associées comme les metalloproteinases (MMPs), l'élastase et la hyaluronidase responsables du remodelage de la MEC. Dans les conditions normales, les cellules fibroblastiques ont un phénotype d'une cellule mésenchymateuse avec une activité principale de synthèse et de remodelage de la MEC. [0005] En revanche, dans certaines conditions comme la cicatrisation, le fibroblaste change de caractéristiques pour acquérir un phénotype différent lui permettant ainsi de répondre aux exigences du processus de réparation. Pour cela, le fibroblaste exprime l'alpha-actine et se transforme en myofibroblaste avec un profil protéique différent. [0006] Sans qu'ils soient liés par cette hypothèse les inventeurs ont émis l'hypothèse qu'il existe un signal pour chaque changement phénotypique des fibroblastes et ont cherché à reproduire le signal émis par les kératinocytes afin de restaurer le phénotype de croissance cutanée des fibroblastes du derme. [0007] Après de longues recherches, les inventeurs ont été surpris de mettre en évidence la présence d'un signal susceptible de transformer les fibroblastes en myofibroblastes dans le bulbe des /ilium. . , EXT 3026952 2 [0008] L'invention concerne ainsi un extrait organique de bulbe de /ilium pour une utilisation dans les désordres ou pathologies cutanés nécessitant un remodelage cellulaire ou une réparation tissulaire. [0009] Ces désordres ou pathologies cutanés nécessitant un remodelage cellulaire 5 ou une réparation tissulaire sont notamment : - la cicatrisation traumatique, les cicatrices chéloïdes, le vieillissement accéléré actinique, les brûlures et notamment les brûlures dues à la radiothérapie et l'acné. 10 [00010] L'invention concerne ainsi un extrait organique de bulbe de /ilium pour une utilisation dans la cicatrisation traumatique. [00011] L'invention concerne ainsi un extrait organique de bulbe de /ilium pour une utilisation dans le traitement des cicatrices chéloïdes. [00012] L'invention concerne ainsi un extrait organique de bulbe de /ilium pour une 15 utilisation dans le traitement du vieillissement accéléré actinique. L'invention concerne ainsi un extrait organique de bulbe de /ilium pour une utilisation dans le traitement des brûlures et notamment les brûlures dues à la radiothérapie. [00013] L'invention concerne ainsi un extrait organique de bulbe de /ilium pour une utilisation dans le traitement de l'acné. 20 [00014] Par leur fréquence, les plaies traumatiques sont définies comme une interruption de l'intégrité du revêtement cutané ou muqueux, elles peuvent être d'étiologies très diverses. Le plus souvent d'origine mécanique, thermique ou chimique, les plaies peuvent aussi résulter de pathologies évolutives préexistantes, 25 par exemple des ulcérations. [00015] Les chéloïdes sont des tumeurs fibreuses bénignes (non cancéreuses) de la peau qui se développent habituellement sur une lésion de la peau. La formation d'une chéloïde n'est pas déterminée par la gravité de la lésion, elles se forment à la suite d'une cicatrisation anormale d'une plaie, lorsque les fibroblastes produisent des 30 quantités excessives de collagène. [00016] Le vieillissement extrinsèque qui est lié aux facteurs de l'environnement ou vieillissement actinique correspond à des modifications cliniques, histologiques et fonctionnelles caractéristiques de la peau liées à l'exposition solaire chronique et siégeant donc sur les zones photo-exposées. Il existe une relation entre le 35 vieillissement cutané, et en particulier vieillissement actinique, et la survenue des cancers cutanés car ils ont en commun certaines modifications cellulaires liées à l'irradiation solaire. 3026952 3 [00017] Les brûlures sont des lésions de la peau (couche de cellules recouvrant l'intérieur des organes creux en contact avec l'air) dues à la chaleur. Les causes de brûlures sont très nombreuses et peuvent être directement causées par les flammes (liste non exhaustive), être d'origine chimique (acide, fluor etc.), mécanique 5 (frottement, érosion cutanée) ou électrique. [00018] Parmi les pathologies cutanées, l'acné est considérée comme la pathologie cutanée la plus répandue chez l'homme et notamment chez les adolescents. [00019] La pathogenèse se manifeste au niveau des follicules pilosébacées et est 10 attribuée à de multiples facteurs comme : la prolifération de Propionibacterium acnes (P. acnes) l'hyperkératinisation folliculaire la présence d'une activité proinflammatoire - la régulation de la stéroïdogenèse 15 - l'augmentation de la production du sébum - l'altération de la qualité des lipides sébaciques [00020] L'augmentation des excrétions du sébum et surtout l'altération de la qualité des lipides sébaciques constituent les deux évènements majeurs associés au développement de l'acné. Ainsi il a été observé au niveau des lésions acnéiques une 20 baisse du taux d'acide linoléique, une diminution du rapport acides gras monoinsaturés/acides gras polyinsaturés liée à une activité désaturase importante et une augmentation du taux des lipides altérés (oxydation, lipopéroxydation, etc.). Ces altérations peuvent interférer avec certaines voies métaboliques et notamment la voie des PPARs induisant ainsi au niveau des sébocytes les activités 5-lipoxygénase et 25 cyclooxygénase responsables de la production des lipides proinflammatoires. [00021] Par ailleurs, les kératinocytes, les sébocytes et les macrophages des glandes pilosébacées peuvent être activés par P. acnes via différents récepteurs (TLR, CD1, CD14 etc.). Cette activation conduit, au niveau des lésions acnéiques, à une libération des cytokines/chémokines à caractère proinflammatoire. 30 [00022] Les hormones sexuelles mâles (androgènes) jouent un rôle crucial dans la pathogenèse de l'acné et notamment dans la phase initiale du développement de la maladie. Ainsi, il a été observé une expression plus élevée des androgènes et leurs récepteurs au niveau des glandes sébacées. Ces dernières expriment toute la machinerie enzymatique nécessaire à la production de la testostérone à partir du 35 cholestérol ou du DHEA (déshydroepiandrostérone) comme la 5a-réductase. Les androgènes agissent en stimulant à la fois la prolifération des sébocytes et la lipogenèse. 3026952 4 [00023] La plupart des traitements actuels sont basés sur 3 activités principales : Antibiotique : il s'agit généralement d'un traitement par voie orale pour inhiber la croissance de P. acné. Cette bactérie observée pour la première fois en 1896 au niveau des lésions 5 d'acné a été considérée depuis comme la cause principale de la pathologie. Cependant P. acnes fait partie du microbiote cutané normal même en dehors de toute pathologie. Anti-inflammatoire : il s'agit d'une panoplie de plusieurs traitements ayant pour effets d'inhiber l'inflammation : 10 o Isotrétindine o Inhibiteurs d'ectopéptidases qui stimulent l'expression d'antagonistes d'IL-1 o Benzoyle-peroxydes, H202 O Gel Depsone 5% 15 o Nanoparticules de sphingosine-1 phosphate O DNAse I o Agents responsables du blocage du métabolisme d'acide rétinoïque Anti-androgénique : il s'agit de traitements à base de 20 contraceptifs comme ethinyl-estradiol. [00024] Le rôle du derme dans la pathogenèse de l'acné n'a jamais été évoqué dans la littérature alors que le derme et l'épiderme sont intimement liés avec beaucoup d'échanges dans les 2 sens. En effet, le tissu épidermique et le tissu dermique sont 25 séparés par une fine couche protéique appelée membrane basale. Elle est constituée principalement d'éléments matriciels comme les collagènes types IV et VII, l'héparane sulfate, la laminine type V et le nidogène. La membrane basale sert de lieu passage et surtout de stockage et de préservation pour les messages en provenance de l'épiderme et du derme en vue d'une libération ultérieure vers l'un et l'autre des 2 30 tissus. [00025] On a vu précédemment que dans certaines conditions comme la cicatrisation, le fibroblaste change de caractéristiques pour acquérir un phénotype différent lui permettant ainsi de répondre aux exigences du processus de réparation. Pour cela, le fibroblaste exprime l'alpha-actine et se transforme en myofibroblaste 35 avec un profil protéique différent. Il est possible d'émettre comme hypothèse que ces messages nouvellement synthétisés jouent un rôle important dans la régulation de la pathogenèse de l'acné. 3026952 5 [00026] Dans les exemples ci-après décrits les inventeurs ont mis en oeuvre l'objectivation des effets fonctionnels de ce signal par une série d'essais. [00027] La présente invention concerne également l'utilisation d'un extrait de /ilium 5 dans le traitement topique de l'acné. [00028] Elle concerne plus particulièrement un extrait organique de bulbe de /ilium pour utilisation dans le traitement de l'acné. [00029] Dans un mode de réalisation, le Oum est le lilium davidii. [00030] L'extrait est obtenu par des techniques classiques connues de l'homme de 10 l'art. L'extrait végétal est obtenu par les techniques classiques d'extraction solide/liquide, la phase solide étant constituée par la matière végétale et la phase liquide étant constituée par le ou les solvants. [00031] Les méthodes utilisables seules ou en combinaison sont : > La macération, dans laquelle la phase de contact est maintenue à température 15 ambiante. > La décoction ou reflux, dans laquelle la phase de contact est maintenue à température d'ébullition du solvant. > La digestion, dans laquelle la phase de contact est maintenue à une température intermédiaire aux deux premiers cas. 20 > L'infusion consistant à verser sur le solide le solvant bouillant et laisser refroidir durant un temps donné. > La lixiviation ou percolation qui consiste à faire passer le solvant à travers la biomasse. [00032] Ces méthodes seront couramment combinées entre-elles ou avec d'autres 25 procédés comme la distillation, l'entraînement à la vapeur, la rectification, etc. [00033] Les solvants utilisés seront potentiellement divers et successifs ou utilisé en mélange. [00034] Ces méthodes pourront être améliorées par le recours à des techniques comme les hautes pressions (CO2 supercritique), les micro-ondes, les ultrasons, etc. 30 [00035] Dans un mode de réalisation l'extrait organique de/i7ü/mn selon l'invention est obtenu par macération dans un milieu organique, suivi d'une concentration par distillation du solvant sous vide modéré. [00036] Le milieu organique est constitué par un solvant choisi dans le groupe comprenant l'acétone ou le méthanol. 35 [000]7] L'extrait est incorporé dans des compositions dermatologiques en mélange ou en association avec un ou plusieurs excipients ou véhicules appropriés pour l'application sur la peau. 3026952 6 [00038] Dans un mode de réalisation l'invention concerne un extrait organique de bulbe de /ilium caractérisé en ce qu'il est incorporé dans un véhicule choisi dans le groupe constitué par les émulsions simples ou complexes et les huiles. [00039] Dans un mode de réalisation, il est incorporé dans un véhicule sous une 5 forme choisie dans le groupe constitué par un soluté, une suspension, une dispersion et/ou une forme vésiculaire. [00040] Dans un mode de réalisation le véhicule se présente sous une forme choisie dans le groupe constitué des lotions, crème, lait, gel, gel crème, poudre, bâtonnet 10 solide, aérosol, mousse, huile, lotion et spray. [00041] Le véhicule approprié à la préparation des compositions comprenant l'extrait de /ilium peut être préparé selon des techniques bien connues de l'homme de l'art, et notamment celles destinées à la préparation d'émulsions. [00042] Dans un mode de réalisation, le véhicule approprié est une émulsion ou une 15 huile. De telles émulsions sont choisies de préférence dans le groupe consistant en une émulsion simple, une émulsion complexe, une émulsion huile-dans-l'eau (H/E), une émulsion eau-dans-l'huile (E/H), une émulsion huile-dans l'eau - dans l'huile (H/E/H), et eau - dans l'huile - dans l'eau (E/H/E). [00043] Le véhicule approprié à une application cosmétique se présente sous une 20 forme choisie dans le groupe consistant en une crème, un lait, un gel, un gel crème, une poudre, un bâtonnet solide, un aérosol, une mousse, une huile, une lotion et un spray. [00044] Par ailleurs, les compositions selon l'invention peuvent comprendre en outre des adjuvants de formulation ou excipients choisis dans le groupe comprenant les 25 corps gras, les solvants organiques, les épaississants ioniques ou non ioniques, les adoucissants, les antioxydants, les opacifiants, les stabilisants, les émollients, les silicones, les oc-hydroxyacides, les agents anti-mousse, les agents hydratants, les vitamines, les parfums, les conservateurs, les tensioactifs, les charges, les séquestrants, les polymères, les propulseurs, les agents alcalinisants ou acidifiants, les 30 émulsionnants, les contrôleurs de viscosité, les stabilisateur d'émulsion, les agents conditionneurs, les agents solubilisants et les colorants. [00045] Parmi les agents émulsionnants, on citera plus particulièrement les agents tensio actifs anioniques, cationiques ou amphiphiles comme les Brij, les Tween, les polyoxyethylènes ou les esters de polyoxyethylène, les lécithines, les céramides, les 35 pseudo céramides, les cérarnides quaternisés. [00046] Comme agents épaississants ou gélifiants, on citera les gommes d'origine végétale, d'origine bactérienne ou d'origine animale comme par exemple la gomme guar, les gommes gellane, les gommes rhanonosoft ou encore la gomme arabique. On 3026952 7 pourra également citer les agents gélifiants synthétiques comme les polymères d'acrylamide, des polymères d'acide acrylique ou méthacrylique ou les copolymères d'acide acrylique, comme les carbomères. Dans un mode de réalisation ils peuvent être choisis parmi les acides polyacryliques réticulés, les gommes de guar et de 5 xanthane, et les celluloses modifiées ou non telles que la gomme de guar hydroxypropylée, la méthylhydroxyéthyl-cellulose (MHEC) et l'hydroxypropylméthylcellulose (HPMC). [00047] Comme silicone on citera la diméthicone ou l'hexamethylsilane. [00048] Les corps gras peuvent être constitués par une huile ou une cire ou leurs 10 mélanges, et comprennent également les acides gras, les alcools gras et les esters d'acides gras. Les huiles peuvent être choisies parmi les huiles animales, végétales, minérales ou de synthèse et notamment parmi l'huile de vaseline, l'huile de paraffine, les huiles de silicone, volatiles ou non, les isoparaffines, les poly-a-oléfines, les huiles fluorées et perfluorées. De même, les cires peuvent être choisies parmi les cires 15 animales, fossiles, végétales, minérales ou de synthèse connues en soi. [00049] Parmi les solvants organiques, on peut citer les alcools et polyols inférieurs. [00050] L'invention concerne également un extrait organique de bulbe de /intim pour une utilisation dans le traitement des pathologies nécessitant un remodelage cellulaire 20 ou une réparation tissulaire, caractérisé en ce que la teneur en extrait sec dans les compositions comprenant ledit extrait est comprise entre 2,5 10-3 et 2 °h en poids total de la composition. [00051] Dans un mode de réalisation la teneur en extrait sec est comprise entre 0,01 et 0,2 0/0 en poids total de la composition. 25 [00052] Dans un mode de réalisation la teneur en extrait sec est de 0,05 % en poids total de la composition. [00053] Dans un mode de réalisation la dose journalière pour le traitement de l'acné est comprise entre 0,5 et 1,5 g par jour de composition ci-dessus définie. 30 [00054] L'invention concerne également une composition caractérisée en ce qu'elle comprend au titre de principe actif un extrait organique de bulbe de /ilium. [00055] Dans un mode de réalisation ce la composition, le /ilium est le !ilium davidii. [00056] L'invention concerne également une composition caractérisée en ce que l'extrait de /ilium est obtenu par macération dans un milieu organique, suivi d'une 35 concentration par distillation du solvant sous vide modéré, le milieu organique étant constitué par un solvant choisi dans le groupe comprenant l'acétone ou le méthanol. 3026952 8 [00057] Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprend un véhicule choisi dans le groupe constitué par les émulsions simples ou complexes et les huiles. [00058] Dans un mode de réalisation, le véhicule se présente sous une forme choisie 5 dans le groupe constitué des lotion, crème, lait, gel, gel crème, poudre, bâtonnet solide, aérosol, mousse, huile, lotion et spray. [00059] Dans un mode de réalisation la teneur en extrait organique de bulbe de /ilium dans la composition est comprise entre 0,2 et 5 % en poids total de la composition. Dans un mode de réalisation elle est comprise entre 0,5 et 5 0/0 en poids 10 total de la composition [00060] Dans un mode de réalisation la composition selon l'invention est caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un autre principe actif pharmaceutique ou cosmétique. 15 [00061] Dans un mode de réalisation ledit principe actif pharmaceutique est choisi dans le groupe constitué par les anti-inflammatoires. [00062] Dans un mode de réalisation ledit principe actif cosmétique peut être choisi parmi les filtres solaires actifs dans l'UV-A et/ou l'UV-B, hydrophiles ou lipophiles. Ces filtres sont par exemple choisis dans le groupe comprenant les dérivés cinnamiques, 20 les dérivés salicyliques, les dérivés du camphre, les dérivés de la triazine, les dérivés de la benzophénone, les dérivés du dibenzoylméthane, les dérivés de p,pdiphénylacrylate, les dérivés de l'acide p-aminobenzoïque, les polymères filtres et les silicones filtres. 25 EXEMPLES Exemple 1 Préparation d'un extrait hydroalcoolique de Lilium Davidii. [00063] Environ 5 kg de bulbes de lilium davidii son réceptionnés et identifiés avant 30 d'être lavés à l'eau douce. Après référencement des lots ils sont broyés et séchés. [00064] L'étape de macération dans environ 15 L d'acétone est mise en oeuvre selon la Directive 88/344. [00065] La concentration de l'extrait obtenu après filtration est effectuée par une première évaporation sous vide à environ 40 °C (250 mm Hg). Un premier test 35 d'activité est effectué par la mesure de l'expression de l'alpha actine par les fibroblastes. [00066] On obtient après élimination totale du solvant environ 1g d'extrait. 4 3026952 9 5 Exemple 2 Compositions comprenant un extrait organique de bulbe de/ilium davidii. [00067] Des compositions selon l'invention ont décrites ci-après. Composition 1 : Principe actif : Extrait de Lilium davidii 2,500 °h 10 Excipients : Polydecene hydrogéné S96 Glycérine 596 Triglycérides capryliques/capriques 4% Esters tribehenin PEG 20 3,5 0/0 Squalane 396 15 Alcool méthylbenzylique 0,6 0/0 Tocophétyl acétate 0,5 0/0 Ethyl hexyll glycérine 0,4 0/0 Carbomère 0,3 0/0 Gomme xanthane 0,3 0/0 20 Glycol caprylique 0,2 0/0 1,2 hexane diol 0,2 0/0 Hydroxyde de sodium 0,2 0/0 Disodium EDTA 0,1 0/0 Eau qsp 25 Composition 2 : Principe actif : Extrait de Lilium davidii 5,0 0/0 Excipients : Polydecene hydrogéné S9/0 30 Glycérine 596 Triglycérides capryliques/capriques 4 % Esters tribehenin PEG 20 3,5 0/0 Squalane 396 Alcool méthylbenzylique 0,6 0/0 35 Tocophétyl acétate 0,5 % Ethyl hexyll glycérine 0,4 0/0 Carbomère 0,39/0 Gomme xanthane O,39/0 Glycol caprylique 0,2 0/0 1,2 hexane diol 0,2 % Hydroxyde de sodium O,296 Disodium EDTA 0,1 0/0 Eau qsp 3026952 10 Exemple 3 Effet d'une compositon selon l'invention sur l'expression de a-SMA par les fibroblastes humains. 5 [00068] Le but de cet essai est de mesurer les taux d'expression de o-actine après traitement des fibroblastes avec l'extrait acétonique d'une crème contenant un extrait de Lilium. [00069] Il est basé sur la quantification de l'intensité de fluorescence à l'aide du 10 spectrofluorimètre après immunomarquage des cellules par un anticorps primaire anti- a-actine suivi d'une réaction avec un second anticorps couplé à la fluorescéine (FITC). Préparation de l'extrait : [00070] Un extrait obtenu selon l'exemple 1, est mis en suspension dans la solution 15 d'éthanol absolu. Pour notre essai, 3 dilutions ont été préparées; 40nng, 20mg, et 10mg/m1 d'éthanol. Et pour chaque dilution, Spi ont été mélangés avec 1 ml de milieu de culture. Ce qui donne une concentration finale de 200pg, 100pg, et 50pg/m1 de milieu de culture. 20 Traitement des cellules fibroblastiques : [00071] Les cellules en cultures confluentes sont trypsinées, comptées puis ensemencées dans des lames à 8 puits à une densité de 50.000 cellules /puits. Après une nuit d'incubation, les surnageants sont éliminés et du milieu neuf seul (puits témoin) ou contenant les différentes concentrations de l'extrait est rajouté dans des 25 puits correspondants. Les cultures sont alors incubées pendant 48 heures. Fixation des cellules : [00072] Après 2 jours d'incubation, les cellules sont fixées et perméabilisées pendant 30 minutes à température ambiante dans une solution de paraformaldehyde à 4% 30 contenant 0.1% de triton X-100. Saturation des sites non spécifiques : [00073] Afin d'éviter le bruit de fond à la suite d'une fixation d'anticorps sur des sites non spécifiques, les cellules fixées sont incubées en présence du tampon P8S 35 contenant 0.5% de BSA pendant 15 nninutesàtennpérature ambiante. 3026952 11 Imrnunofluorescence indirecte: [00074] Après 3 rinçages dans le tampon PBS, la protéine a-SMA est révélées à l'aide de la technique d'immunofluorescence indirecte en utilisant un anticorps spécifique (monoclonal de souris ; Santa-Cruz). 150p1 d'anticorps préalablement dilué dans le 5 tampon PBS-BSA est alors rajouté dans chaque puits. Après 45 minutes d'incubation à température ambiante, les puits sont rincés 3 fois avec du PBS. 150p1 de la solution du second anticorps anti-immunoglobulines de souris conjugué à la fluorescéine sont rajoutés dans chaque puits. Après 30 minutes d'incubation à température ambiante et à l'abri de la lumière, le tapis cellulaire est rincé 4 fois de suite avec le Tampon PBS. 10 Mesure de la fluorescence : [00075] Les cellules sont alors lysées à l'abri de la lumière grâce à un tampon de lyse permettant la mise en solution de la fluorescéine. Les surnageants fluorescents ainsi obtenus sont transférés dans des microplaques noires puis lus au spectrofluorimètre 15 (Fluoroskan) à une longueur d'onde d'excitation de 485 nm et à une longueur d'onde d'émission de 518 nm. Résultats : Valeur 1 Valeur 2 Valeur 3 Moyenne Ecartype Contrôle 0,544 0,518 0,495 0,519 0,020 Lilium:50 0 779 0,796 0,786 0,787 O'007 Lilium:100 pq 0,971 0,91 | 0,942 0,941 0,025 Lilium:200 . 0 836 0 938 0 852 0 875 0 045 20 Tableau I Conclusion : [00076] Les résultats ci-dessus illustrés au graphique de la figure 1, montrent une 25 augmentation très significative de l'expression de a-actine par les fibroblastes humains en culture après 48 heures d'incubation en présence de l'extrait de Lilium. Cette induction est observée quelle que soit la dilution de l'extrait utilisé. Toutefois, on note des variations au niveau de la réponse cellulaire en fonction des concentrations utilisées. Ainsi, si des concentrations supérieures à 50 pg sont plus efficaces, les 30 cellules semblent mieux répondre à la concentration médiane de 100pg/ml. 3026952 12 Exemple 4 Mise en évidence d'une relation effet-dose de l'extrait de lilium davidii sur l'expression d'a-actine SM par des fibroblates 5 Selon le même protocole une relation effet-dose est mise en évidence. Les résulats obtenus sont rassemblés dans le tableau 2 et illustrés aux Figures 2 et 3. 0,033 O/433 0,711 0,034 0,826 0,034 0 933 | 0,031 0 841 0 044 Contrôle 1 rnô/rn1 2 mg/mi 5 mq/nril 10 mg/nril 20 mg/m1 50 mg/m1 Valeur 1 0,474 0.57/ 0,727 0,746 0,800 0,967 0,880 0,394 0,539 0,646 0,666 0,805 0,893 0,862 O.431 O533 0,621 0,722 0,874 0.940 O780 0,016 0,010 0,023 0,017 0,017 0,015 0,022 Valeur 2 Valeur 3 Moyenne S.D 1/2 S.D U550 0O19 0 665 0 045 10 Tableau 2 [00077] Une relation effet-dose est clairement démontrée sur l'expression d'a-actine SM par des fibroblastes. 15 Exemple 5 Mise en évidence d'une relation effet-dose de l'extrait de num davidii sur la transformation du phénotype des fibroblastes en myofibroblastes par comptage des 20 points focaux. [00078] Le protocole mis en oeuvre est celui décrit dans J.A. Grimaud et al. Experentia 15, 1977, 33(7) 890-892. 25 Les résulats obtenus sont rassemblés dans le tableau 3 et illustrés à la figure 4. Valeur 1 Valeur 2 Valeur 3 Valeur 4 Valeur 5 moyenne écart-type' Contrôle 1,000 2,000 2,000 1,000 1,000 1,400 0,548 50pg/m1 4,000 4,000 5,000 4,000 2,000 3,800 1,095 100 pg/ml 10,000 10,000 9,000 9,000 11,000 9,800 0,837 Tableau 3 30 3026952 13 Exemple 6 Essai clinique sur patients [00079] La composition 1 a été testée sur des patients ayant fait l'objet d'un scoring 5 de leurs lésions initiales durant 3 semaines de traitement avec une application journalière de la compositions sur les zones à traiter. Symptômes O 1 2 3 4 gradation acne O 30 gradation des papules O 30 gradation des pustules O 21 gradation des nodules/kystes O S Tableau 4 : Standardisation des lésions cliniques de l'acné pour évaluation dans les 10 essais cliniques durée du traitement avant après une semaine après deux semaines après trois semaines grade des lésions grade de la séborrhée 6.833 ± 4.209 5.967 ±3.6Q7 4.833 ± 3.464 4.200 ± 3.266 2.267 ± 0.740 2.000 ± 0.830 1.400 ± 0.563 1.300 ± 0.596 Tableau 5 : Degré des lésions séborrhéiques avant et après traitement Note : La séborrhée n'entre pas dans le tableau clinique de l'acné, elle est évaluée séparément Tableau 6 : Grade des lésions avant et après traitement 25 N=30 ; *P 0.05 [00080] Une diminution acnéiques a été obtenue. statistiquement très significative (P REVENDICATIONS1. Extrait organique de bulbe de /ilium pour une utilisation dans le traitement des désordres et pathologies cutanés nécessitant un remodelage cellulaire ou une réparation tissulaire. 2. Extrait selon la revendication 1, pour une utilisation dans dans le traitement de la cicatrisation traumatique. 3. Extrait selon la revendication 1, pour une utilisation dans le traitement des cicatrices chéloïdes. 4. Extrait selon la revendication 1, pour une utilisation dans le traitement du vieillissement actinique. 5. Extrait selon la revendication 1, pour une utilisation dans le traitement des brûlures et notamment les brûlures dues à la radiothérapie. 6. Extrait selon la revendication 1, pour une utilisation dans le traitement de l'acné. 7. Extrait selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le lilium est le lilium davidii. 8. Extrait selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il est obtenu par macération dans un milieu organique, suivi d'une concentration par distillation du solvant sous vide modéré. 9. Extrait selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il est incorporé dans un véhicule choisi dans le groupe constitué par les émulsions simples ou complexes et les huiles. 10. Composition caractérisée en ce qu'elle comprend au titre de principe actif un extrait organique de bulbe de lilium. 3026952 16 11. Composition selon la revendication 10, caractérisée en ce que le lilium est le !ilium davidii. 12. Composition selon l'une quelconque des revendications 10 ou 11, caractérisée 5 en ce que l'extrait de /ilium est obtenu par macération dans un milieu organique, suivi d'une concentration par distillation du solvant sous vide modéré. 13. Composition selon l'une quelconque des revendications 10 à 12, caractérisée en ce qu'elle comprend un véhicule choisi dans le groupe constitué par les émulsions 10 simples ou complexes et les huiles. 14. Composition selon la revendication 13, caractérisée en ce que le véhicule se présente sous une forme choisie dans le groupe constitué des lotion, crème, lait, gel, gel crème, poudre, bâtonnet solide, aérosol, mousse, huile, lotion et spray. 15 15. Composition selon l'une quelconque des revendications 10 à 14, caractérisée en ce que la teneur en extrait dans la composition est comprise 0,2 et 5 % en poids total de la composition. 20 16. Composition selon l'une quelconque des revendications 10 à 15, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un autre principe actif pharmaceutique ou cosmétique.