Brevet FR3033699A1 — publié le 20160923

La présente invention se rapporte à un extrait de pivoine de Chine, Paeonia lactiflora, une composition comprenant ledit extrait et l'utilisation dudit extrait ou de la composition pour un traitement cosmétique et/ou dermo-pharmaceutique, notamment un traitement topique. La présente invention concerne notamment les industries des cosmétiques et de la dermo-pharmacie, qui fabriquent et/ou utilisent des produits destinés au traitement de la peau, y compris le cuir chevelu, des muqueuses et des phanères (tels que poils, cils, sourcils, ongles, cheveux) de mammifères, animaux ou humains, pour en améliorer l'apparence et/ou l'état général. Ces industries sont en demande croissante de nouveaux produits, en particulier en demande de nouveaux ingrédients actifs qui sont issus de plantes car ceux-ci permettent d'allier l'efficacité, la limitation des risques d'irritation et d'allergie, la diminution des effets secondaires, la biodégradabilité, avec les possibilités de labellisations / certifications et d'adéquation avec une logique de développement durable et/ou de commerce équitable. La présente invention a pour but de répondre à cette demande. La pivoine de Chine (Paeonia lactiflora), appelée parfois aussi pivoine blanche (Paeonia alba), est une espèce de plante herbacée vivace de la famille des Paeoniacées, originaire d'Asie centrale et orientale (de l'Est du Tibet en passant par le Nord de la Chine jusqu'à l'Est de la Sibérie). La pivoine de Chine est utilisée en médecine traditionnelle chinoise, où sa racine pelée, découpée en tranches est connue sous le nom de Radix Paeonia Alba bai shao yao. Depuis la nuit des temps, la pivoine de Chine, considérée comme plante magique, fut utilisée pour soigner les éruptions cutanées, les fièvres cycliques et favoriser la cicatrisation des plaies. Elle est reconnue comme antispasmodique, anticonvulsif, anti-inflammatoire et hypotenseur. La présente invention propose un extrait de pivoine de Chine riche en paeoniflorine pouvant être utilisé comme ingrédient actif en cosmétique obtenu par une extraction aqueuse, alcoolique ou hydroalcoolique de la racine de Pivoine de Chine Paeonia lactiflora. L'extrait de racine de pivoine de Chine selon l'invention contient principalement la paeoniflorine, qui est un glucoside monoterpénique, et des polyphénols. La demanderesse a montré qu'un tel extrait, grâce notamment à la composition en paeoniflorine possède des effets apaisants et anti-radicalaires particulièrement intéressants. La présente invention vise par conséquent les utilisations de l'extrait selon l'invention ou d'une composition le comprenant dans une matrice physiologiquement acceptable, notamment en cosmétique et dermo-pharmacie, pour apaiser la peau et le cuir chevelu irrité, pour traiter les peaux ternes, fatiguées, sensibles et réactives. Grâce à sa composition, l'extrait de racine de pivoine de Chine va permettre d'unifier et d'améliorer l'éclat du teint grâce à son action apaisante et antioxydante. L'extrait de pivoine de Chine selon l'invention peut ainsi être utilisé pour diminuer les rougeurs, améliorer la luminosité et l'uniformité de 3033699 2 la peau et protéger la peau des effets du soleil et de la pollution générant des radicaux libres qui sont ceux principalement responsables de la perte d'uniformité et d'éclat de la peau. Des tests in vivo et in vitro sont détaillés plus loin démontrant l'activité de l'extrait de racine de pivoine de Chine selon l'invention, notamment, la mise en évidence de l'effet apaisant directement 5 mesuré sur la peau (test in vivo) et de l'effet protecteur vis-à-vis des radicaux libres mesuré sur les fibroblastes de derme humain (test in vitro). Plusieurs études ont montré que l'homogénéité et la distribution de la couleur de la peau sur le visage contribue à la perception de la santé, l'âge et Pattractivité des visages humains. Des recherches récentes suggèrent qu'une diminution de l'homogénéité de la couleur de la peau conduit à des scores 'plus 10 âgé', 'moins sain' et 'moins attrayant' de la peau du visage chez les femmes et les hommes. Plus la peau est uniforme et le teint homogène, plus le visage humain parait jeune et plus la personne est attirante. Il ressort des tests donnés ci-après que l'extrait de racine de pivoine de Chine selon l'invention agit avantageusement sur l'homogénéité de la couleur et de la luminosité de la peau et permet ainsi 15 d'améliorer très nettement l'éclat du teint. Par « extrait » on entend selon l'invention un extrait pouvant être obtenu par les techniques usuelles d'extraction solide/liquide. A titre d'exemples, les techniques d'extraction usuelles pouvant être utilisées comprennent la macération, la simple décoction, la lixiviation, l'extraction sous reflux, l'extraction par fluide supercritique, l'extraction au moyen d'ultrasons ou de micro-ondes et les 20 techniques d'extraction à contre-courant. La proportion du matériel végétal par rapport au solvant peut varier entre 1:1 et 1:20 (p/p). Les racines de pivoine de Chine peuvent être utilisées sous forme fraîche ou sèche, concassées ou entières. Selon d'autres caractéristiques préférées de l'invention, afin d'extraire la fraction active de paeoniflorine et polyphénols et ceci avec un bon rendement, l'alcool utilisé pour le solvant 25 d'extraction est un alcool en Cl, C2, C3 ou C4, ou un polyol choisi parmi le pentane-diol, le sorbitol et l'hexanol, ou un mélange de ceux-ci. De préférence l'extraction est réalisée avec un alcool en Cl ou C2 et de préférence encore un mélange hydro-alcoolique de l'un de ces alcools ou un mélange de ceux-ci. Selon l'invention l'extrait peut être utilisé pur (débarrassé de son solvant d'extraction et 30 éventuellement notamment sous forme d'un extrait sec, par exemple lyophilisé) ou dilué dans un excipient ou matrice physiologiquement acceptable. De préférence l'extrait est utilisé dilué dans un excipient ou matrice physiologiquement acceptable, notamment une matrice aqueuse, hydro glycolique ou hydro alcoolique, ou formée par une émulsion eau-dans-huile, une émulsion huile-danseau, ou une microémulsion. La présente invention couvre ainsi également une composition comprenant un extrait tel que défini ci- dessus dans une matrice physiologiquement acceptable. 3033699 3 Selon l'invention, l'extrait ou la composition le contenant peuvent être utilisés pour traiter la peau et ses annexes notamment : - pour uniformiser la couleur de la peau en réduisant les rougeurs excessives et les taches pigmentaires, 5 - pour améliorer la luminosité de la peau, - pour illuminer et homogénéiser le teint - pour booster les défenses naturelles de la peau et favoriser la détoxification des cellules, - pour ralentir le vieillissement cutané et protéger la peau contre les effets néfastes et des radiations solaires et de la pollution, et/ou 10 - pour apaiser les peaux fragiles et sensibles (comprenant aussi le cuir chevelu). L'extrait selon l'invention peut être envisagé pour chacun de ces effets séparément ou globalement par exemple dans une visée éclat du teint / antipollution. La présente invention vise plus particulièrement une application cutanée. L'utilisation peut être cosmétique et/ou dermo-pharmaceutique. Elle est préférentiellement topique. 15 Selon d'autres caractéristiques avantageuses, l'extrait de racine de pivoine de Chine selon l'invention peut être utilisé en combinaison avec un ou plusieurs ingrédients actifs additionnels, permettant avantageusement d'offrir une palette de propriétés cosmétiques plus large, ou un renfort d'activité. Les ingrédients actifs additionnels peuvent être par exemple choisis parmi les actifs éclaircissants, antirougeurs, antitaches, calmants, pour le traitement des peaux sensibles, réactives, les filtres solaires 20 UV, les actifs hydratants, humectants, exfoliants, lissants, tonifiants, anti-âges, anti-rides et ridules, améliorant les propriétés mécaniques et élastiques, l'éclat du teint, les actifs détoxyfiants, antirepousse poil, agissant sur la barrière cutanée, anti-acnés, agissant sur la sécrétion de sebum, matifiants, unifiants, anti-inflammatoires, anti-oxydants, anti-radicalaires, anti-glycants, contours des yeux (anti-cernes et anti-poches), favorisant la circulation sanguine, peptides, vitamines etc. Ces 25 ingrédients actifs peuvent être obtenus à partir de matériaux végétaux, comme des extraits végétaux ou des produits de culture végétale ou de fermentation. Plus spécifiquement, l'extrait de racine de pivoine de Chine selon l'invention peut être combiné avec au moins l'un des composés choisis parmi les composés vitaminés, groupe B, C, E, F, D et A notamment, les composés comme la niacinamide ou le tocophérol, les composés rétinoïdes comme le 30 rétinol, l'hexamidine, l'acide a-lipoïque, le resvératrol ou la DHEA, les peptides (comme le Matrixy10, le Matrixy103000 ou le Matrixyl0 Synthe'6 commercialisés par Sederma) et composés blanchissants ou éclaircissants qui sont des ingrédients actifs classiques utilisés dans les compositions topiques cosmétiques ou dermo-pharmaceutiques. Les agents blanchissants ou éclaircissant peuvent notamment être choisis parmi la vitamine C et les 35 dérivés de l'acide ascorbique (l'acide éthyl-ascorbique, le glucoside d'ascorbyle, le magnésium- ascorbyle-phosphate, le sodium-ascorbyle-phosphate, le disodium-ascorbyle-sulfate, le 3033699 4 tétraisopalmitate d'ascorbyle, la niacinamide, l'extrait de racine de réglisse (Glycyrrhiza glabra (licorice) root extract), l'arbutine, l'acide kojique, l'alpha-bisabolol, l'acide élagique, l'acide linoléique, l'acide m-tranexamique, l'hydroquinone, les corticoïdes, le mercure, les dérivés aminophénol, le N-cholesteryloxycarbonyl-para-aminophénol et le N-éthyloxycarbonyl-para- 5 aminophénol ; les dérivés iminophénol, l'acide L-2-oxothiazolidine-4-carboxylique ou procystéine, et ses sels et esters, et les extraits (i.e. extrait de mûre (Broussonetia extract), de réglisse (Lycoris aurea extract), extrait de placenta, de scutellaire, l'huile soluble de réglisse (i.e. proposée par Maruzen), les extraits de camomile (i.e. proposée par Kao)), le t-AMCHA le 4MSK (proposés par Shiseido), l'adénosine monophosphate disodium (APM proposé par Otsuka) et le rucinol (Pola). 10 Les agents éclaircissants et/ou blanchissants utilisables dans la présente invention incluent également les produits commerciaux MelaclearTM, EtiolineTM, MelaslowTM, WonderlightTM, InexwhiteTM, et LumiskinTm/LumisphereTm proposés par Sederma, et NAB Asefetida extractTM (Arch Chemicals, Inc.), ActiwhiteTM (BASF), Tego Pep 4 EvenTM (Evonik), Synerlight 2TM (Gatefossé), ClerilysTM (Greentech), AA2GTM (Hayashibara), Uninontan U 34TM (Induchem), B-WhiteTM, TyrostatTm, et 15 Melanostatine 5TM (Lucas Meyer - Unipex), NanoWhiteTM (Mibelle AG Cosmetics), MelavoidTM (Provital SA), Cellactive WhiteTM (Rahn GmbH), EmblicaTM (Rona), InexwhiteTM (Sederma), AzeloglicinaTM (Sinerga), Sepicalm VGTM et Sepiwhite MSHTM (Seppic), WhitonylTM (Silab), AxolightTM (Soliance), et Symwhite 377TM (Symrise). Les agents éclaircissants et/ou blanchissants la peau préférés sont la vitamine C et les dérivés de 20 l'acide ascorbique (acide éthyle ascorbique, glucoside d'ascorbyle, le magnésium-ascorbyle- phosphate, le sodium-ascorbyle-phosphate, le disodium-ascorbyle-sulfate, le tétraisopalmitate d'ascorbyle), la niacinamide, l'extrait de racine de réglisse (Glycyrrhiza glabra (licorice) root extract), et l'arbutine. La présente invention sera mieux comprise à la lumière de la description qui va suivre. 25 Préparation des compositions Par « milieu physiologiquement acceptable » on entend selon la présente invention, sans être limitatif, une solution aqueuse ou hydro alcoolique, une émulsion eau-dans-huile, une émulsion huile-dans-eau, une microémulsion, un gel aqueux, un gel anhydre, un sérum, une dispersion de vésicules, une poudre. « Physiologiquement acceptable » signifie que les compositions conviennent à une utilisation topique ou 30 transdermique, en contact avec les muqueuses, les phanères (ongles, cheveux, poils), le cuir chevelu et la peau de mammifère et plus particulièrement humaine, des compositions pouvant être ingérées ou injectées dans la peau, sans risque de toxicité, d'incompatibilité, d'instabilité, de réponse allergique, et autres. Ce « milieu physiologiquement acceptable » forme ce que l'on appelle classiquement l'excipient de la 35 composition. 3033699 5 Pour l'utilisation selon l'invention, la quantité efficace d'extrait de racine de pivoine de Chine, c'est-à-dire son dosage, dépend de divers facteurs, comme l'âge, l'état de la peau du patient, etc. Une quantité efficace signifie une quantité non toxique suffisante pour obtenir l'effet désiré. Pour les utilisations selon l'invention et pour être présent en quantité efficace, l'homme du métier est 5 capable d'ajuster la quantité d'extrait en fonction de l'effet désiré, notamment en fonction du taux de paeoniflorine de l'extrait de racine de pivoine de Chine. Tous les pourcentages et ratios utilisés dans la présente invention sont par poids de la composition totale et toutes les mesures sont faites à 25°C à moins que cela ne soit précisé autrement. Le choix de l'excipient de la composition est effectué en fonction des contraintes liées à l'extrait 10 (stabilité, solubilisation, etc.) et le cas échéant de la forme galénique envisagée ensuite pour la composition. L'extrait peut être incorporé dans une composition au moyen d'une solution aqueuse, ou être solubilisé grâce à des solubilisants usuels physiologiquement acceptables, comme par exemple et sans limiter à cette liste : l'éthanol, le propanol, l'isopropanol, le propylène glycol, la glycérine, le butylène 15 glycol, ou le polyéthylène glycol ou toute combinaison. Il peut être également intéressant de solubiliser l'extrait à l'aide d'émulsifiants. On peut également utiliser un support poudre. Les compositions adaptées à la présente invention sont généralement préparées par des méthodes usuelles bien connues par l'homme de l'art de la fabrication des compositions topiques et orales et les compositions pour l'injection. De telles méthodes peuvent impliquer un mélange d'ingrédients dans 20 une ou plusieurs étapes pour obtenir un état uniforme, avec ou sans chauffage, refroidissement, etc. Les différentes formes galéniques pouvant contenir l'extrait de racine de pivoine de Chine selon l'invention se présentent sous toute forme à savoir crèmes, lotions, onguents laits ou crèmes, gels, émulsions, dispersions, solutions, suspensions, nettoyants, fonds de teint, préparations anhydres (sticks en particulier baume à lèvres, huiles pour le corps et le bain), gels pour la douche et le bain, 25 shampooings et lotions de soin du cheveu, laits ou crèmes pour les soins de la peau ou des cheveux, lotions ou laits démaquillants, lotions, laits ou crèmes anti-solaires, lotions, laits ou crèmes de bronzage artificiel, crèmes, mousses, gels ou lotions de pré rasage, de rasage, ou après-rasage, maquillage, rouges à lèvres, mascaras ou vernis à ongles, "essences" de peau, sérums, matériels adhésifs ou absorbants, patchs transdermiques, ou poudres, lotions, laits ou crèmes émollientes, 30 sprays, huiles pour le corps et le bain, bases de fond de teint, pommades, émulsions, colloïdes, suspensions compactes ou solides, crayons, formulations pulvérisables, brossables, fards à joues, rouges, eyeliners, lipliners, gloss pour lèvres, poudres pour le visage ou le corps, mousses ou gels coiffants, conditionnants pour ongles, baumes à lèvres, conditionnants de peau, hydratants, laques, savons, exfoliants, astringents, produits dépilatoires solutions ondulantes permanentes, formulations 35 anti-pelliculaires, compositions anti-transpirantes ou antiperspirantes, notamment sticks, « roll-on » déodorants, désodorisants, pulvérisations pour nez et ainsi de suite. Ces compositions peuvent également se présenter sous la forme de bâtons pour les lèvres destinés soit à les colorer, soit à éviter 3033699 6 les gerçures, ou de produits de maquillage pour les yeux ou des fards et fonds de teint pour le visage. Les compositions selon l'invention incluent des produits de beauté, des produits personnels de soin et des préparations pharmaceutiques. On peut également envisager une composition sous la forme d'une mousse ou encore sous forme de composition pour aérosol comprenant également un agent propulseur 5 sous pression. Les compositions selon l'invention peuvent aussi être à usage bucco-dentaire, par exemple une pâte dentifrice. Dans ce cas, les compositions peuvent contenir des adjuvants et additifs usuels pour les compositions à usage buccal et notamment des agents tensioactifs, des agents épaississants, des agents humectants, des agents de polissage tels que la silice, divers ingrédients actifs comme les fluorures, en 10 particulier le fluorure de sodium, et éventuellement des agents édulcorants somme le saccharinate de sodium. L'extrait de racine de pivoine de Chine dans le cadre de la présente invention peut être utilisé sous forme de solution, de dispersion, d'émulsion, de pâte ou de poudre, individuellement ou en pré-mélange ou être véhiculée individuellement ou en pré-mélange par des vecteurs comme les 15 macrocapsules, les microcapsules ou les nanocapsules, les macrosphères, les microsphères, ou les nanosphères, les liposomes, les oléosomes ou les chylomicrons, les macroparticules, les microparticules ou les nanoparticules, macroéponges, les microéponges ou les nanoéponges, les microémulsions ou les nanoémulsions, ou adsorbé sur des polymères organiques poudreux, les talcs, bentonites, spores ou exines et autres supports minéraux ou organiques. 20 L'extrait de racine de pivoine de Chine dans le cadre de la présente invention peut être utilisé sous n'importe quelle forme, dans une forme liée, incorporée ou adsorbée sur des macro -, micro -, et nanoparticules, ou sur macro-, micro- et nanocapsules, pour le traitement des textiles, des fibres naturelles ou synthétiques, des laines, et tous matériaux destinés à entrer en contact avec la peau et qui peuvent être employés dans l'habillement, les sous-vêtements de jour ou de nuit, les mouchoirs, ou les 25 tissus, afin d'exercer son effet cosmétique par l'intermédiaire de ce contact peau/textile et permettre une délivrance topique continue. Méthode de traitement cosmétique La présente invention propose également une méthode de traitement topique de la peau et de ses annexes, notamment de la perte d'uniformité de la couleur de la peau, des dommages cutanés induits 30 par les agressions extérieures telles que la pollution, et des peaux sensibles et réactives (y compris le cuir chevelu), comprenant l'application topique d'une quantité efficace d'une composition selon l'invention comprenant un extrait de racine de pivoine de Chine telle que définie ci-dessus. Par « traitement topique », on entend une application qui est destinée à agir à l'endroit où elle est appliquée : peau, dont le cuir chevelu, muqueuse, annexes (ou phanères, tels que les ongles). 35 L'utilisation topique selon l'invention peut particulièrement viser les peaux jeunes ou matures, tolérantes ou sensibles, les peaux mixtes, sèches ou grasses, les peaux ethniques. 3033699 7 Des améliorations de l'apparence et de l'état général de la peau, des muqueuses et des phanères peuvent être obtenues par application topique de manière régulière comme par exemple de façon quotidienne. Le praticien appréciera le traitement topique cosmétique qui comprendra une composition contenant 5 l'extrait de racine de pivoine de Chine, ce traitement pouvant être réalisé par exemple en appliquant topiquement la composition décrite dans la présente invention, selon une technique habituellement utilisée pour appliquer une telle composition. La composition topique est appliquée au moins une fois chaque jour pour une période d'au moins une semaine, mais elle peut être appliquée plusieurs fois par jour pendant des périodes plus longues, durant 2, 4, 8 ou 12 semaines, en fonction de la concentration 10 en paeoniflorine dans la composition. De préférence, un extrait selon l'invention comprend au moins 5% de paeoniflorine, de préférence encore au moins 8%. De préférence, il sera préconisé pour un traitement cosmétique selon l'invention de 0,001% à 5% de paeoniflorine, de préférence de 0,01 à 2%, de préférence encore de 0,1 à 1%, via une application au moins une fois par jour pour une période d'au moins une semaine. 15 La composition topique est préférentiellement appliquée sur le visage et le cou, mais peut être appliquée sur toute partie de peau nécessitant une amélioration esthétique, où la composition reste sur la zone de peau à traiter, et préférentiellement n'est pas retirée ou rincée de la peau. À titre d'exemple, pour un traitement cosmétique du visage, la Directive Européenne sur les Cosmétiques a fixé une quantité standard d'application d'une crème de 2,72 mg/cm2/jour/personne et pour une lotion pour le 20 corps de 0,5 mg/cm2/jour/personne. Pour une composition (notamment une crème) destinée au visage comprenant de préférence 0,1 à 1% de paeoniflorine, un taux en mg/cm2/jour/personne compris entre environ 0,003 et 0,03 sera donc préférentiellement mis en oeuvre pour un traitement cosmétique selon l'invention. Pour une composition cosmétique (par exemple une lotion) destinée au corps comprenant de 0,1% à 25 1% de paeoniflorine, un taux en mg/cm2/jour/personne compris entre 0,0005 et 0,005 sera donc préférentiellement mis en oeuvre pour un traitement cosmétique selon l'invention. Il faut comprendre également que, tels qu'utilisés ici, les termes traiter et traitement incluent et englobent la réduction, l'amélioration, la progression, l'allègement, et/ou l'élimination des imperfections cosmétiques d'une peau normale, notamment liées au vieillissement. Les compositions 30 de la présente invention ainsi que les méthodes conviennent à une utilisation pour traiter les imperfections de la peau dans de nombreuses zones de la peau, incluant sans s'y limiter, le visage, le front, les lèvres, le cou, le décolleté, les bras, les mains, le corps, les jambes, les genoux, les pieds, la poitrine, le dos, les fesses, et autres, et également les annexes telles que les ongles. La présente invention convient également à une utilisation capillaire pour traiter le cuir chevelu. 35 L'un des grands avantages de la présente invention réside dans la possibilité de pouvoir procéder, chaque fois que nécessaire ou souhaitable, à des traitements "doux" localisés et sélectifs grâce au 3033699 8 mode d'application par voie topique, non invasifs. Une application peut être réalisée de manière très localisée à l'aide d'une seringue ou d'une micro-canule. Il est aussi toutefois possible d'envisager une composition selon l'invention destinée à être injectée en sous-cutané. 5 Selon d'autres particularités, le procédé de traitement cosmétique selon l'invention peut être associé avec un ou plusieurs autres procédés de traitement visant la peau, comme par exemple les traitements par luminothérapie, par la chaleur ou par aromathérapie. Selon l'invention, il est possible de proposer des dispositifs à plusieurs compartiments ou kits destinés à la mise en oeuvre du procédé décrit ci-dessus, et qui pourrait comprendre, à titre d'exemple, et sans 10 que ce soit limitatif, dans un premier compartiment une composition contenant l'extrait de racine de pivoine de Chine et dans un second compartiment une composition contenant un autre actif et/ou excipient, les compositions contenues dans lesdits premier et second compartiments étant ici considérées comme composition de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps notamment dans l'un des traitements définis ci-dessus. 15 Ingrédients additionnels Le CTFA ("International cosmetic ingredient dictionary & handbook (13ème Ed. 2010) publié par "the Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Association, Inc.", Washington, D.C.) décrit une grande variété, sans limitation, d'ingrédients cosmétiques et pharmaceutiques habituellement utilisés dans l'industrie du soin de la peau, qui conviennent pour être utilisés comme ingrédients additionnels dans 20 les compositions selon la présente invention. D'autres actifs de soin de la peau et capillaire qui sont particulièrement utiles en combinaison avec la composition peuvent être trouvés dans la documentation commerciale de CRODAROM et sur le site www.crodarom.fr et de même dans la documentation commerciale de SEDERMA et sur le site www. sederma. fr. 25 A) Exemple d'obtention d'un extrait de racine de pivoine de Chine selon l'invention Matériel végétal : racines sèches et concassées. Solvant d'extraction : une solution d'éthanol à 30% (p/p). Mode opératoire : l'extraction est réalisée sous agitation à reflux. La durée d'extraction est d'environ 3H. Après extraction, le mélange est refroidi et l'extrait liquide est séparé de la partie solide (plante). 30 La phase solide est lavée par 1 à 3 fois sa masse initiale avec le solvant d'extraction. L'ensemble des phases liquides ainsi obtenues sont mélangées pour être ensuite filtrées. A ce stade, l'extrait total est traité par évaporation du solvant d'extraction jusqu'à son élimination totale. La concentration est faite sous vide ou sous pression atmosphérique. Le rendement du processus d'extraction, concentré obtenu par rapport à la plante, varie de 5 à 50%. 35 Ce mode opératoire permet avantageusement d'obtenir un extrait de racine de pivoine de Chine riche en paeoniflorine. 3033699 9 L'extrait de racine de pivoine de Chine ainsi obtenu est titré à 8-12% en poids de paeoniflorine par rapport au poids de l'extrait sec, identifiés par chromatographie liquide haute pression et titré à environ 4% en polyphénols totaux, quantifiés par spectrométrie. L'extrait « concentré » (ou extrait « mou ») peut être utilisé dans une composition selon l'invention tel 5 quel ou sous forme de poudre après atomisation, lyophilisation, ou autre séchage. Une telle composition peut être plus ou moins concentrée en extrait et donc en paeoniflorine selon sa fonction. Selon un mode de réalisation avantageux, une composition selon l'invention formant un ingrédient pour l'industrie des cosmétiques et de la dermopharmacie, comprendra l'extrait selon l'invention dilué dans une matrice, par exemple glycérine/eau, de manière à contenir un taux minimum de 0,08% de 10 paeoniflorine, en général compris entre 0,08% et 0,22%, et de 0,04% de polyphénols totaux. B) Évaluations in vitro : 1) Mise en évidence de l'effet protecteur et préventif de l'extrait selon l'invention vis-à-vis des ROS (espèces réactives de l'oxygène) But de l'étude 15 La peau peut être définie comme la première défense contre l'environnement en raison de son exposition constante à des oxydants, notamment les rayons ultraviolets (UV) et autres polluants de l'environnement tels que les gaz d'échappement du carburant diesel, la fumée de cigarette, les hydrocarbures halogènes, les métaux lourds et l'ozone (03). L'exposition à des agents pro-oxydants environnementaux conduit à la formation de ROS et la génération de molécules bioactives qui peuvent 20 endommager les cellules de la peau. Les ROS sont responsables de l'augmentation de la pigmentation de la peau, les taches de vieillesse, et de la diminution de la microcirculation de la peau, avec pour résultat un teint gris et terne en raison de cette pollution environnementale. Le but de la présente étude était d'évaluer la capacité anti-oxydante d'un extrait selon l'invention de pivoine de Chine sur des fibroblastes humains normaux (FHN) suite à un stress H202. 25 La mesure est réalisée avec une sonde spécifique fluorescente (DCFH (2',7'-dichlorofluorescine)) dont l'intensité est proportionnelle au niveau de ROS. La sonde DCFH est une méthode courante pour mesurer les ROS telles que R02., RO., NO2., CO3.-, et surtout OH. et 0N002. Cytotoxicité Aucune variation du nombre de cellules n'a été observée quelle que soit la concentration du produit 30 testé. Préparation des échantillons Un extrait de pivoine de Chine comprenant 0,1% paeoniflorine a été utilisé à deux concentrations : Référence Extrait selon l'invention Taux de paeoniflorine (°/0) Cl 1,0% 0,001 C2 3,0% 0,003 3033699 10 Les tests suivants ont également été réalisés : - Un contrôle négatif : le taux de ROS est quantifié dans les FHN en présence de H202 sans aucun produit à tester. - Des cellules non traitées : le taux de ROS est quantifié dans les FHN sans aucun produit à tester ni 5 stress H202. - Un contrôle positif : le taux de ROS est quantifié dans les FHN avec du Trolox0 (500uM) en présence de H202. Chaque expérience a été réalisée trois fois (N=3). Conditions de test et mesures 10 Conditions de test : les FHN sont t propagées dans le milieu de croissance (DMEMc). Les cultures sont maintenues à 37°C dans une atmosphère humidifiée à 5% de CO2. Traitement : les solutions de produits à tester sont ajoutées aux FHN et incubées pendant 24H avant l'application du stress. Les cellules sont incubées avec la sonde fluorescente DCFH. 15 Les cellules sont ensuite exposées à H202 pendant 2' à 600p.M en présence du produit à tester. Mesures : après l'induction du stress, la fluorescence est mesurée à 585nm (excitation : 485nm). La quantité de ROS est proportionnelle à la fluorescence. Les noyaux des cellules sont colorés au colorant Hoechst pour les besoins de quantification des cellules et de normalisation. 20 Statistiques : application du test de Shapiro-Wilk, le calcul statistique étant ensuite réalisé à l'aide du test t de Student t pour les valeurs paramétriques (test bilatéral pour les séries non appareillées). Le niveau 0,05 a été choisi comme point d'acceptation minimal de la signification statistique. Résultats Le niveau de fluorescence (UFA/puit) est rapporté au nombre de cellules (cellules/puit) des puits 25 correspondants de manière à éliminer toute variation pouvant venir du nombre de cellules de chaque puit. Les résultats sont exprimés en unités UFA/106cellules. Les données sont présentées en tant que moyennes ± écart type (n=3) dans le tableau suivant : Concentration 0% 1% 3% Trolox® 500iuM - H202 Quantité de ROS 23523 5011 1380 -79 p REVENDICATIONS1. Extrait de pivoine de Chine riche en paeoniflorine pour une utilisation en tant qu'ingrédient actif cosmétique, caractérisé en ce qu'il est obtenu par une extraction aqueuse, alcoolique ou hydroalcoolique de la racine de Pivoine de Chine Paeonia lactiflora. 2. Extrait selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'alcool utilisé pour le solvant d'extraction est un alcool en Cl, C2, C3 ou C4, ou un polyol choisi parmi le pentane-diol, le sorbitol et l'hexanol, ou un mélange de ceux-ci. 3. Extrait selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'alcool est l'éthanol ou le méthanol. 4. Composition comprenant un extrait selon l'une des revendications 1 à 3 dans une matrice physiologiquement acceptable. 5. Utilisation de l'extrait selon l'une des revendications 1 à 3, pour la fabrication d'une composition cosmétique ou dermo-pharmaceutique. 6. Utilisation de l'extrait selon l'une des revendications 1 à 3 ou de la composition selon la revendication 4 pour un traitement cosmétique non thérapeutique de la peau et de ses annexes. 7. Utilisation selon la revendication 6 pour un traitement topique. 8. Utilisation selon la revendication 6 ou 7, pour un traitement pour apaiser les peaux fragiles et sensibles. 9. Utilisation selon l'une des revendications 6 à 8, pour un traitement pour améliorer l'éclat du teint en homogénéisant la couleur de la peau et sa luminosité. 10. Utilisation selon l'une des revendications 6 à 9, pour un traitement pour protéger la peau vis-à-vis des effets néfastes de la pollution et des radiations solaires sur l'éclat du teint. 11. Utilisation selon la revendication 8, pour un traitement du cuir chevelu sensible et réactif. 12. Extrait selon l'une des revendications 1 à 3 ou composition selon la revendication 4, pour un traitement médical. 13. Extrait ou composition selon la revendication 12 pour un traitement topique. 14. Extrait ou composition selon la revendication 12 ou 13 pour un traitement anti-radicalaire, apaisant et/ou anti-rougeur.