Brevet FR3025512A1 — publié le 20160311

Procédé de préparation de la marmycine A et de ses analogues ainsi que leurs utilisations La présente invention concerne un procédé de préparation de la marmycine A et de ses analogues, de nouveaux analogues de la marmycine A, ainsi que leurs utilisations en tant que biomarqueurs, et notamment comme marqueurs d'organites, et en pharmacie, notamment en tant qu'antibiotiques, anticancéreux et antipaludiques. La marmycine A appartient à la famille des angucyclines, aux propriétés antibactérienne et cytotoxique. Elle est caractérisée par une structure polyaromatique, incluant un motif anthraquinone fusionné à un cycle aminopyranose par une liaison C- glycoside ainsi qu'une liaison N-glycoside sur ce même groupement osidique. La marmycine A possède donc une structure hexacyclique unique. Cette molécule naturelle a été isolée pour la première fois par Fenical et al. (W. Fenical, J. Nat. Prod. 2007, 70, 1406-1409) à partir de cultures d'un actinomycète issu de sédiments marins du genre Streptomyces. Ce produit naturel n'est donc que très peu disponible dans la nature et n'est actuellement plus disponible commercialement. De plus, la synthèse totale de cette molécule, qui permettrait son développement pharmaceutique, n'a pas encore été réalisée jusqu'à ce jour. Il existe donc un besoin pour un procédé de préparation de la marmycine A et de ses analogues, y compris pour de nouveaux analogues de la marmycine A. La présente invention a pour but de fournir un procédé de préparation par synthèse chimique de la marmycine A et de ses analogues. Il s'agit en particulier de fournir à partir de composés commerciaux une synthèse totale de la marmycine A et de ses analogues. La présente invention a également pour but de fournir de nouveaux analogues de la marmycine A. La présente invention a pour but de fournir des composés utiles en pharmacie, notamment dans le traitement des cancers, d'infections bactériennes et/ou du paludisme. La présente invention a également pour but de fournir des composés utiles en tant que biomarqueurs, et notamment comme marqueurs d'organites, en particulier en tant que marqueurs des lysosomes. La présente invention concerne un procédé pour la préparation d'un composé de formule (Il) : 3025512 2 R2 O R3 R4 R5 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, Ra, Rb, Rc, Rd et Re sont indépendamment les uns des autres un atome ou un groupe d'atomes ; n représentent le nombre de 5 radicaux Ra, Rb, Rd et Re et valent 2 ; ledit procédé comprenant une étape de couplage B d'un composé de formule (III) : R2 O R3 R4 R5 (III) dans laquelle les radicaux R1 à R6 sont tels que définis pour le composé de formule (II) et Rg est un groupe réactif avec le groupement NH2 du composé de 10 formule (IV), en particulier un groupe triflate, avec un composé de formule (IV) : (Re),O(Ra)n (Rd)n (Rb), Rc NH2 (IV) dans laquelle les radicaux Ra à Re et n sont tels que définis pour le composé de formule (II), ladite étape de couplage étant réalisée en présence d'un composé 15 comprenant du cuivre. La présente invention concerne selon une variante un procédé de préparation d'un composé de formule (II) : R-I ORg O R6 3025512 dans laquelle : R1, R2, R3, R4, R5 et R6 sont indépendamment les uns des autres choisis parmi le 5 groupe constitué de : H, OH, halogène, C(0)0H, =0 (=0 représente un atome d'oxygène lié par une double liaison covalente et la représentation des doubles liaisons aromatiques des composés est modifiée en conséquence), (C1-C10)alkyle, 0(C1-C10)alkyle, OC(0)(C1-C10)alkyle, (C2-C10)alcényle, C(0)0(C1-C10)alkyle, NH2, NH(C1- 10 C10)alkyle, NRC1-C10)alkyle12, NHC(0)(C1-C10)alkyle, N(C1-C1o)alkyle-C(0)(C1- C10)alkyle, C(0)NH2, C(0)N(C1-C10)alkyle, C(0)NRC1-C10)alkyleb,les oses et les groupes époxy, dans lesquels lesdits alkyles et/ou lesdits oses peuvent être substitués ; ou 15 R1 avec R2 et/ou R3 avec R4 et/ou R4 avec R5 et/ou R5 avec R6 forment avec les atomes de carbone auxquels ils se rattachent un groupement (C3-C10)cycloalkyle ou (C6-C10)aryle, lesdits groupements cycloalkyles ou aryles étant éventuellement substitués et dans lesquels au moins l'un des atomes de carbone peut éventuellement être remplacé par un hétéroatome, de préférence par un atome 20 d'oxygène ; les radicaux Ra sont indépendamment choisis les uns des autres parmi le groupe constitué de : H, OH, halogène, C(0)0H, =0, (C1-C10)alkyle, 0(C1-C10)alkyle, OC(0)(C1-C10)alkyle, (C2-C10)alcényle, C(0)0(C1-C10)alkyle, NH2, NH(C1- 25 C10)alkyle, NRC1-C1O)alkyle]2, NHC(0)(C1-C10)alkyle, N(CZ-C10)alkyle-C(0)(C1- C10)alkyle, C(0)NH2, C(0)N(C1-C10)alkyle, C(0)NRC1-C10)alkylek, et les groupements réactifs permettant de former une liaison C-C glycosidique, dans lesquels lesdits alkyles peuvent être substitués ; R4 R5 R1 3025512 4 les radicaux Rb, Rc et Re sont indépendamment choisis les uns des autres parmi le groupe constitué de : H, OH, halogène, C(0)OH, =0, (C1-Clo)alkyle, 0(CiC10)alkyle, OC(0)(Ci-C10)alkyle, (C2-Clo)alcényle, C(0)0(Ci-Clo)alkyle, NH2, NH(Ci-Clo)alkyle NRC,-C,o)alkyle]2, NHC(0)(Ci-C1o)alkyle, N(Ci-Clo)alkyle- 5 C(0)(Ci-Clo)alkyle, C(0)NH2, C(0)N(Ci-C10)alkyle, et C(0)NRC,-C,o)alkyle]2,dans lesquels lesdits alkyles peuvent être substitués ; les radicaux Rd sont indépendamment choisis les uns des autres parmi le groupe constitué de : H, OH, halogène, C(0)0H, =0, (C1-C1o)alkyle, 0(Ci-C10)alkyle, 10 OC(0)(Ci-Clo)alkyle, (C2-C1o)alcényle, C(0)O(C,-Clo)aIkyle, NH2, NH(Ci- Clo)alkyle, N[(Ci-Clo)alkylek, NHC(0)(Ci-Clo)alkyle, N(Ci-Clo)alkyle-C(0)(C1- C10)alkyle, C(0)NH2, C(0)N(C,-C10)alkyle, C(0)NRCi-Clo)alkylek, (C1-Clo)alkyle000-, le méthoxyméthyloxygène, et les groupements réactifs permettant de former une liaison O-C tel que AcO , dans lesquels lesdits alkyles peuvent être 15 substitués ; - n représentent le nombre de radicaux Ra, Rb, Rd et Re et valent 2 ; L'indice n des composés de l'invention souligne que les radicaux Ra, Rb, Rd et Re présents peuvent être identiques ou différents. 20 Plusieurs tentatives de synthèse totale de la marmycine A ont été effectuées. Cependant, la synthèse totale de ce produit naturel n'a jamais été à ce jour décrite, seule la C-3-desméthyl-marmycine A ayant été synthétisée de façon totale (N. Maugel et B.B. Snider, Organic Letters, 2009, vol.11, n °21, 4926-4929 et A. Zhang et al., J. Org. Chem. 25 2009, 74, 6111-6119). Cependant, la C-3-desméthyl-marmycine A ne présente pas les mêmes difficultés de synthèse car cette dernière ne comprend pas d'amine néopentylique contrairement à la marmycine A. En effet, la C-3-desméthyl-marmycine A ne comprend pas le groupement méthyle en position 3 sur l'ose. Or, les composés comprenant des alcools ou des amines néopentyliques tels que la marmycine A sont connus pour avoir 30 une faible réactivité. Les présents inventeurs ont découvert de manière totalement inattendue un nouveau procédé permettant la synthèse totale de la marmycine A et d'analogues. En particulier et de façon surprenante, les inventeurs ont découverts que le couplage B du noyau anthraquinone avec l'aminopyranose par la formation d'une liaison C-N glycosidique pouvait être réalisé en présence de cuivre, par exemple selon le principe du couplage d'Ullmann. 3025512 5 Cette réaction est très surprenante car le couplage de type Buchwald-Hartwig usuel pour ce type de réaction (cf. Org. Synth. 2002, 78, 23 D01: 10.15227/orgsyn.078.0023), effectué en présence de palladium, ne permet pas d'obtenir la liaison glycosidique C-N dans le présent cas. 5 Le couplage B selon l'invention permet notamment d'obtenir un bon rendement, de préférence au moins 30 % en composé de formule (Il) selon l'invention. De plus, pour la formation de l'anthraquinone, les inventeurs ont réalisé un couplage A de type Diels-Alder de façon surprenante en un seul réacteur. En effet, la réaction de Diels-Alder s'effectue normalement dans plusieurs réacteurs (J. Org. Chem., 10 2007, 72 (16), pp 6116-6126). Le procédé selon l'invention est donc simplifié par rapport aux réactions de Diels-Alder classiques. En dernière étape du procédé selon l'invention, les inventeurs ont mis au point de façon inattendue une étape de cyclisation C permettant d'aboutir à une structure pentacyclique. Cette étape de cyclisation peut notamment être réalisée selon deux 15 alternatives. Selon une première alternative de cyclisation Ca, une liaison C-C glycosidique est formée avec cyclisation intramoléculaire. De façon surprenante, cette cyclisation est notamment possible en présence d'acide tétrafluoroborique. Cette première alternative est particulièrement adaptée à la préparation de la marmycine A et de ses analogues, en 20 particulier les composés selon l'invention de formule (la). Selon une seconde alternative de cyclisation Cb, une liaison O-C est formée avec cyclisation intramoléculaire. De façon surprenante, cette cyclisation est notamment possible en présence d'une base pour la préparation de l'oxamarmycine A et de ses dérivés, en particulier pour obtenir les composés selon l'invention de formule (lb). 25 La présente invention a donc notamment pour avantage de permettre la synthèse totale de la marmycine A ou d'analogues, à partir de réactifs de départ disponibles commercialement. Ce procédé pouvant être mis en place à l'échelle industrielle, il permet donc d'obtenir la marmycine A et ses analogues en quantité suffisante pour leur développement pharmaceutique et leur commercialisation. Le procédé selon l'invention 30 permet notamment d'obtenir un rendement suffisant en marmycine A ou analogues. De nouveaux analogues, en particulier l'oxamarmycine A et ses dérivés, ont également ainsi pu être découverts. Les inventeurs ont également mis en évidence les propriétés de marquage d'organites présents notamment dans le cytosol, tels que par exemple les lysosomes, par 35 les composés de l'invention, et ainsi les propriétés anticancéreuse, antibiotique et antipaludique des composés selon l'invention. 3025512 6 Les inventeurs ont découvert que les composés selon l'invention ne s'accumulaient pas dans le noyau des cellules mais dans les organites cellulaires tels que les lysosomes. En particulier et sans vouloir être lié par une théorie, il semble que la marmycine A 5 et ses analogues s'accumulent dans les organites tels que par exemple les lysosomes et produisent des espèces réactives de l'oxygène (également appelées ROS - Reactive Oxygen Species). Ces espèces réactives de l'oxygène induiraient la perméabilisation des organites, en particulier de la membrane lysosomale, pouvant conduire à la libération de catepsines et d'autres hydrolases dans le cytosol. Cette perméabilisation pourrait dans 10 certains cas également conduire à la perméabilisation de la membrane externe des mitochondries. La perméabilisation des membranes de ces organites induirait alors l'apoptose des cellules (cf. Oncogene (2008) 27, 6434-6451). Ainsi la présente invention concerne des compositions pharmaceutiques comprenant des composés de l'invention, et les composés de l'invention pour leurs 15 utilisations thérapeutiques ou comme médicament. Ainsi la présente invention concerne une méthode de traitement thérapeutique. Ces applications sont décrites plus en détails dans les applications des composés de l'invention. 20 Définitions Dans le cadre de la présente invention, le terme « (C1-Clo)alkyle » désigne des radicaux hydrocarbonés aliphatiques saturés, en chaîne droite ou ramifiée, comprenant de 1 à 10 atomes de carbone, de préférence de 1 à 5 atomes de carbone. Une chaîne 25 ramifiée signifie qu'un ou plusieurs groupes alkyles inférieurs, tels que le méthyle, l'éthyle ou le propyle, sont liés à la chaîne alkyle linéaire principale. Les groupements alkyles préférés sont le méthyle, l'éthyle, le propyle ou l'isopropyle, en particulier le méthyle. Le terme « alkyle » comprend les groupes alkyles substitués dans lesquels un ou plusieurs atomes d'hydrogène sont substitués par un autre atome ou un groupe d'atomes. 30 Le terme « (C2-Clo)alcényle » désigne un groupe alkyle comprenant de 2 à 10 atomes de carbone, de préférence de 2 à 5 atomes de carbone, insaturé, c'est-à-dire comprenant au moins une double liaison carbone-carbone, et qui peut être linéaire ou ramifié. Comme exemple de groupe alcényle, on peut citer notamment l'éthényle, le propényle, le n-butényle, l'i-butényle, le 3-méthylbut-2-ényle, ou le n-pentényle. Le terme 35 « alcényle » comprend les groupes alcényles substitués dans lesquels un ou plusieurs atomes d'hydrogène sont substitués par un autre atome ou un groupe d'atomes. 3025512 7 Le terme « (C3-C1o)cycloalkyle » signifie un système de cycle non aromatique mono-ou multicyclique de 3 à 10 atomes de carbone, de préférence de 5 à 6 atomes de carbone dans lequel chaque atome substituable du cycle est éventuellement substitué. A titre d'exemple de cycloalkyle monocyclique, on peut citer notamment le cyclopentyle, le 5 cyclohexyle ou le cycloheptyle. Le terme « cycloalkyle » comprend les groupes cycloalkyles substitués dans lesquels un ou plusieurs atomes d'hydrogène sont substitués par un autre atome ou un groupe d'atomes. Le terme « aryle » désigne un système cyclique monocyclique ou multicyclique aromatique de 6 à 10 atomes de carbone dans lequel chaque atome substituable du cycle 10 est éventuellement substitué par un autre atome ou un groupe d'atomes. Comme exemple de groupes aryle, on peut citer notamment le phényle, le naphtalène et l'anthracène. Le terme « ose » (ou monosaccharide) désigne un monomère de glucides. Les oses possèdent au moins 3 atomes de carbone et comprennent notamment les trioses, 15 tétroses, pentoses, hexoses, désoxy-hexoses (fucose ou rhamnose), heptoses et nonoses. Les oses préférés selon l'invention sont les hexoses tels que pyranose, allose, altrose, galactose, glucose, gulose, idose, mannose, talose, fructose, sorbose et tagatose, de préférence le pyranose. Selon un mode particulier de réalisation, on entend par « ose » les composés de formule (IV) selon l'invention. 20 Le terme « époxy » désigne des groupements de formule suivante : 0 R R' dans laquelle R et R' sont indépendamment l'un de l'autre choisis parmi les groupements (C1-Clo)alkyle, 0(C1-C10)alkyle, OC(0)(C1-Clo)alkyle, (C2-Clo)alcényle, C(0)0(C1-C10)alkyle, NH(Ci-Clo)alkyle et N[(C1-C10)alkyle]2, dans lesquels lesdits alkyles peuvent être substitués. 25 Le terme « halogène » désigne un atome de chlore, brome, iode ou fluor. Le terme « hétéroatome » désigne un atome choisi parmi O, N, S ou P, de préférence O. Par « groupe réactif avec un groupement NH2 du composé de formule (IV) », on entend tout groupement permettant la formation d'une liaison C-N entre le composé de 30 formule (III) et le composé de formule (IV) selon l'invention, en particulier un groupe triflate. Le terme « groupement protecteur » désigne un groupement protégeant des groupements chimiques fonctionnels, en particulier les fonctions alcools, contre des réactions indésirables durant les réactions de synthèse. Des exemples de groupements 3025512 8 protecteurs sont donnés dans T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, New York (1999), et sont connus de l'homme du métier. On peut notamment citer CH3-C(0) 5 Procédé de préparation des composés de formule (II) Etape de couplage B Selon un mode de réalisation, le procédé de préparation d'un composé de formule (Il) selon l'invention est caractérisé en ce que l'étape de couplage B est effectuée en 10 présence d'un composé comprenant du cuivre, de formule Cu-X, X étant choisi parmi le groupe constitué de CI, Br, I, SO4 et OAc, de préférence de formule Cu-I. Selon un mode de réalisation l'étape de couplage B est effectuée en présence de 5 mol% à 25 mol%, de préférence entre 10 mol% et 20 mol%, de composé comprenant du cuivre. De préférence, l'étape de couplage B est effectuée en présence de 10 mol% ou 15 20 mol% de Cu-X. Selon un mode de réalisation, ladite étape de couplage B est réalisée en présence de 1 à 6 eq. du composé de formule (IV) tel que défini ci-dessus, de préférence 2, 3, 4 ou 5 eq. Selon un mode de réalisation, ledit couplage B est effectué en présence d'une base, par exemple K2003, de préférence en présence d'un solvant, par exemple le 20 benzène, le xylène, le toluène ou l'acétonitrile. Selon un mode réalisation, ladite étape de couplage B est réalisée en présence d'une base, par exemple de K2CO3, en quantité comprise entre 1 eq. et 4 eq., de préférence 2 eq. Selon un mode de réalisation, ladite étape de couplage B est réalisée en présence 25 d'un solvant tel que le toluène ou l'acétonitrile, de préférence en présence de toluène. Selon un autre mode de réalisation, ladite étape de couplage B est réalisée en présence de Cu-I en tant que catalyseur, de K2003 en tant que base et de toluène en tant que solvant, de préférence en reflux. Selon un mode de réalisation, ladite étape de couplage B est réalisée à une 30 température comprise entre 75°C et 170°C, de préféence entre 130°C et 170°C, plus préférentiellement entre 140°C et 160°C. Selon un rode de réalisation, ladite étape de couplage B est réalisée à une température de 140 °C,150°C ou 160°C. Selon un autre mode de réalisation, ladite étape de couplage B est réalisée pendant au moins 24h, de préférence entre 24h et 72h. 35 Selon un mode de réalisation particulier, la réaction est effectuée en présence de 20 mo% de Cu-I, 2 eq. de K2003 et de toluène, à 160°C. 3025512 9 Etape de couplage A Selon un mode de réalisation, le procédé selon l'invention comprend en outre l'étape de couplage A d'un composé de formule (V) : R2 O R-1 5 ORh O (V) dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis pour la formule (II), Y étant un groupe réactif avec l'atome de carbone porteur du groupement R3 du composé de formule (VI) et Rh étant un groupement protecteur, de préférence un groupement CH3-C(0), avec un composé de formule (VI) : R3 10 pour obtenir un composé de formule (III') : R-1 R4 R5 (11r) en présence d'un solvant organique de préférence de toluène ou de xylène, de préférence en présence de toluène. 15 Selon un mode de réalisation, Y est choisi par F, Cl, Br et I, de préférence Br. Selon un mode de réalisation, la réaction est réalisée en reflux. Selon un mode de réalisation, ladite étape de couplage A est réalisée à une température comprise entre 80°C et 120°C. Selon un mode de réalisation particulier, l'étape de couplage A comprend les 20 étapes suivantes : i) étape de couplage A telle que décrite ci-dessus ; ii) évaporation du milieu, de préférence dans un bain à une température comprise entre 50°C et 70°C, par exemple 60 °C ; iii) ajout d'au moins un alcool, de préférence le méthanol ou l'éthanol, de préférence 25 le méthanol ; 3025512 10 iv) ajout d'une base, par exemple le carbonate de potassium et déprotection de la fonction alcool avec départ du groupement Rh ; et v) obtention du composé de formule (III') tel que défini ci-dessus. De préférence l'étape iii) est réalisée sous agitation pendant au moins 1h. Selon 5 un mode de réalisation, l'ensemble des étapes i) à iv) de l'étape de couplage A est effectué dans un seul réacteur (« one pot »). Selon un mode réalisation, le procédé selon l'invention comprend en outre une étape supplémentaire d'activation du composé de formule (III') par substitution de l'atome d'hydrogène de l'alcool par un groupement Rg réactif avec le groupement NH2 du 10 composé de formule (IV) selon l'invention, par exemple -502-CF3 obtenu typiquement par réaction avec l'anhydride triflique, de formule F3C-502-0-502-CF3, pour obtenir un composé de formule (III) suivante : R4 R5 ORg O R6 (III) Selon un mode de réalisation, cette étape supplémentaire d'activation est réalisée 15 en présence d'une base, notamment une base aminée comme par exemple la triéthylamine, de préférence en présence de d'un solvant apolaire tel que par exemple le dichlorométhane. Selon un mode de réalisation, ladite réaction d'activation est conduite à une température comprise entre -65°C et -85°C. 20 Procédé de préparation des composés de formules (la) et (lb) Etape de cyclisation C Selon un mode de réalisation, le procédé selon l'invention comprend en outre une 25 étape de cyclisation C dudit composé de formule (II), pour former une structure pentacyclique. Selon un mode de réalisation particulier, le procédé selon l'invention est un procédé de préparation d'un composé de formule (la) suivante : 3025512 11 R2 R6 R4 R5 (la) dans laquelle les radicaux R1 à R6 et Ra à Re sont tels que définis pour les composés de formule (II), ledit procédé comprenant une étape de cyclisation Ca par glycosylation C-C d'un composé de formule (II) tel qu'obtenu selon l'invention, par exemple en présence 5 d'HBF4 pour former le composé de formule (la). Selon un mode de réalisation particulier, l'étape de cyclisation Ca est réalisée en présence d'HBF4 OEt2 ou HBF4 par exemple à 50% m/m en solution aqueuse. Selon un mode particulier de réalisation, l'étape de cyclisation Ca est réalisée avec une quantité comprise entre 0,5 eq. et 5 eq d'HBF4 OEt2 et plus particulièrement 1, 2 ou 3 eq. d'HBF4 10 OEt2. Selon un autre mode de réalisation, l'étape de cyclisation Ca est réalisée en présence de 50 % à 70 % m/m en solution aqueuse d'HBF4, de préférence 60% m/m en solution aqueuse d'HBF4. Selon un mode de réalisation, la réaction est réalisée en présence d'acétonitrile, 15 de préférence en reflux. De préférence, la réaction est conduite pendant au moins 3h, de préférence entre 4h et 24h. Selon un mode de réalisation, l'étape de cyclisation Ca est réalisée de façon indirecte en faisant réagir un composé de formule (II) tel que défini ci-dessus avec HBF4, puis en faisant réagir le produit de la réaction en présence d'HBF4 et d'acétonitrile, de 20 préférence en reflux, afin d'obtenir un composé de formule (la) selon l'invention. Selon un autre mode de réalisation, l'étape de cyclisation Ca est réalisée de façon directe, en faisant réagir un composé de formule (II) en présence d'HBF4 ou d'HCI et d'acétonitrile, de préférence en reflux. Selon un autre mode de réalisation particulier, le procédé selon l'invention est un 25 procédé de préparation de composés de formule (lb) suivante : R2 O R3 Rd R4 (Re) n R5 (Ra) n 3025512 12 dans laquelle les radicaux R1 à R6 et Ra à Re sont tels que définis pour les composés de formule (11), et comprenant une étape de cyclisation Cb par formation d'une liaison O-C d'un composé de formule (11) tel qu'obtenu selon l'invention, en milieu basique, de préférence en présence de NaH par former le composé de formule (lb). 5 Selon un mode de réalisation, on utilise au moins une base pouvant déprotoner un alcool. On utilise de préférence NaH. Selon un mode de réalisation, l'étape de cyclisation Cb est effectuée en présence de dichlorométhane. Selon un autre mode de réalisation, la réaction de cyclisation Cb est réalisée à une température comprise entre -20°C et0°C, de préférence entre -5°C et 0°C, 10 plus préférentiellement à 0°C. Selon un mode particulier de réalisation, le procédé de préparation des composés de formule (la) selon l'invention comprend les étapes suivantes : i) étape de couplage A selon l'invention, ii) étape de couplage B selon l'invention, et 15 iii) étape de cyclisation Ca selon l'invention. Selon un autre mode particulier de réalisation, le procédé de préparation des composés de formule (lb) selon l'invention comprend les étapes suivantes : i) étape de couplage A selon l'invention, ii) étape de couplage B selon l'invention, et 20 iii) étape de cyclisation Cb selon l'invention. Composés de formules (la), (lb), (Il), (III), (III'), (IV), (V) et (VI) Les modes de réalisation particuliers ci-dessous s'appliquent aux composés de 25 formules (la), (lb), (Il), (III), (III'), (IV), (V) et (VI) selon l'invention. Selon une variante, lorsqu'au moins un des radicaux Ra est choisi parmi les groupements réactifs permettant de former une liaison C-C glycosidique, les radicaux Rd sont indépendamment choisis les uns des autres parmi le groupe constitué de : H, OH, halogène, C(0)OH, =0, (C1-Clo)alkyle, 0(Ci-C10)alkyle, OC(0)(Ci-C10)alkyle, (02- 30 C,o)alcényle, C(0)0(Ci-C,o)alkyle, NH2, NH(Ci-Clo)alkyle, Nel-C10)alkylek, (Cl- Clo)alkyle-000- et le méthoxyméthyloxygène, dans lesquels lesdits alkyles peuvent être substitués. Selon une seconde variante, lorsqu'au moins un des radicaux Rd est choisi parmi les groupements réactifs permettant de former une liaison O-C tel que AcO, les radicaux 35 Ra sont indépendamment choisis les uns des autres parmi le groupe constitué de : H, OH, halogène, C(0)OH, =0, (C1-Clo)alkyle, 0(Ci-C10)alkyle, OC(0)(Ci-Clo)alkyle, (Cl- 3025512 13 Clo)alkenyle, C(0)0(Ci-C,o)alkyle, NH2, NH(Ci-C,o)alkyle et NRCi-Clo)alkyle12, dans lesquels lesdits alkyles peuvent être substitués. Selon un mode de réalisation particulier, les groupements réactifs permettant de former une liaison C-C glycosidique sont choisis parmi OH et les groupements 0(C-- 5 Cio)alkyle, de préférence OH et OMe. Selon un mode de réalisation, Ra est OH ou 0(Ci-C4)alkyle, par exemple méthoxy. Selon un mode de réalisation, Rb est H. Selon un mode de réalisation, Rc est un (C1-Clo)alkyle, de préférence un (Cl- 10 C4)alkyle. Selon un mode de réalisation, Rc est un méthyle. Selon un mode de réalisation, Rd est OH ou un méthoxyméthyloxygène. Selon un mode de réalisation, Rd n'est pas un groupement AcO. Selon un mode de réalisation, Rd n'est pas un groupement OH. Selon un mode de réalisation, Rb est H et Rc est un méthyle. Selon un mode de 15 réalisation, Rb est H, Rc est un méthyle et Re est un méthyle. Selon un mode de réalisation, R1, R2, R5 et R6 sont H. Selon un mode de réalisation, R1, R5 et R6 sont H et R2 est un halogène, de préférence Cl, ou H. Selon un mode de réalisation, R3 et R4 forment avec les atomes de carbone auxquels ils se rattachent un groupement (C6-Clo)aryle, de préférence un phényle, 20 éventuellement substitué; Selon un mode réalisation, R3 et R4 forment avec les atomes de carbone auxquels ils se rattachent un phényle ou un cyclohexyle substitué par au moins substituant choisi parmi le groupe constitué de OH, méthyle, =0. De préférence, ledit phényle ou cyclohexyle est substitué par un, deux ou trois 25 substituants indépendamment choisis les uns des autres parmi OH, CH3 et =0. Selon un mode de réalisation, lorsque R3 et R4 forment ensemble un phényle, ledit phényle n'est pas substitué par un méthyle. Selon un mode de réalisation, les oses, les cycloalkyles et les aryles des radicaux R1 à R6 peuvent être substitués au moins une fois par un substituant choisi parmi le 30 groupe constitué de OH, halogène, C(0)0H, =0, (C1-Clo)alkyle, 0(C1-Clo)alkyle, OC(0)(Ci-C10)alkyle, (C2-Clo)alcényle, C(0)0(Ci-Clo)alkyle, NH2, NH(Ci-Clo)alkyle, NRCi-Clo)alkylek, et les alkyles compris dans les radicaux Ra, Rb, Rc, Rd et Re sont substitués par au moins un substituant choisi parmi le groupe constitué de OH, halogène, C(0)0H, =0, 0(C,- 35 Cio)alkyle, OC(0)(Ci-C10)alkyle, (C2-Clo)alcényle, C(0)0(Ci-Clo)alkyle, NH2, NH(Ci- Clo)alkyle, NRCi-Clo)alkyle12. 3025512 14 Selon un mode de réalisation, les oses, les cycloalkyles et les aryles des radicaux R1 à R6 peuvent être substitués au moins une fois par un substituant choisi parmi le groupe constitué de CH3, OH, =0, COOH, COMe et NMe2, de préférence par Me, et les alkyles compris dans les radicaux Ra, Rb, Rc, Rd et Re sont substitués par un au moins 5 un substituant choisi parmi le groupe constitué de OH, =0, COOH, COMe, NMe2. La présente invention concerne également un composé de formule (Il), susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'invention. La présente invention concerne également un composé de formule (la) susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'invention. 10 La présente invention concerne également un composé de formule (lb) susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'invention. La présente invention concerne un composé de formule (Il) suivante : R2 O R3 R-I R4 R5 O NH Rc (Rb) (Ra), R6 (Re), dans laquelle, les radicaux R1 à R6, Ra à Re et n sont tels que définis selon l'invention. 15 Selon un mode de réalisation, Rc est un (C1-Clo)alkyle, de préférence un méthyle. Selon un mode de réalisation, l'invention concerne un composé de formule (Il) telle que définie ci-dessus, à l'exception des composés pour lesquels R3 et R4 forment avec les atomes de carbone auxquels ils se rattachent un groupement phényle. La présente invention concerne un composé de formule (la) suivante : R4 R5 20 Rc (la) dans laquelle, les radicaux R1 à R6, Ra à Re et n sont tels que définis selon l'invention, à l'exception des composés pour lesquels R3 et R4 forment avec les atomes de carbone auxquels ils se rattachent un groupement phényle, et à l'exception des composés suivants : 25 3025512 15 La présente invention concerne un composé de formule (lb) suivante : R2 O R3 Rd R4 (Re) n R5 (Ra) n 5 dans laquelle, les radicaux R1 à R6, Ra à Re et n sont tels que définis selon l'invention. Selon un mode de réalisation, les composés de formules (la) et/ou (lb) sont de configuration suivante : R4 R4 R5 R5 10 La présente invention concerne également les composés spécifiques suivants : Me e OMe OMe Selon un mode de réalisation, lesdits composés sont de formules suivantes : 3025512 16 e Selon un aspect particulier, l'invention concerne les composés synthétiques non naturels de formule (la) ou (lb). Selon un autre aspect, l'invention concerne les composés 5 de formules (la) et (lb) sous forme cristalline, et plus particulièrement la marmycine A sous la forme cristalline référencée sous le numéro CCDC1015494 (Cambridge Cristallography Data Center). La présente invention concerne également le composé synthétique non naturel spécifique suivant : 10 Marmycine A Utilisations des composés de formule (la), (lb) et (Il) La présente invention concerne également un composé de formule (la), (lb) ou (Il) 15 pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention des cancers, d'infections bactériennes et/ou du paludisme. La marmycine A est notamment connue comme ayant des propriétés cytotoxiques sur des lignées cancéreuses humaines du sein, de la prostate, du poumon, du colon, des ovaires et des leucémies (W. Fenical, J. Nat. Prod. 2007, 70, 1406-1409). 20 La marmycine A et ses analogues s'accumulent dans les organites tels que les lysosomes et produisent des espèces réactives de l'oxygène (également appelées ROS - Reactive Oxygen Species) dans ces derniers. Ces espèces réactives de l'oxygène induiraient la perméabilisation de la membrane des organites. Cette perméabilisation induirait alors l'apoptose des cellules (cf. Oncogene (2008) 27, 6434-6451). Or, la 25 perméabilisation de la membrane lysosomale en particulier est un processus perturbé 3025512 17 dans les cellules cancéreuses. Les composés selon l'invention sont donc utiles notamment dans le traitement des cancers. On entend par « cancers », des tumeurs malignes solides ou "liquides" (également appelés cancers hématologiques) et/ou leurs métastases. Par "métastase" on entend les 5 tumeurs malignes secondaires formées par la migration de cellules cancéreuses à une autre localisation que celle de la tumeur maligne de départ. Les cancers hématologiques comprennent notamment les myélomes, les lymphomes et les leucémies. Plus particulièrement, les composés de formule (la), (lb) ou (Il) selon l'invention sont utiles dans le traitement et/ou la prévention des cancers choisi parmi les leucémies, 10 le cancer du colon, des ovaires, du sein, de la prostate, de l'utérus, du poumon, de la vessie, du cerveau, de l'estomac, du pancréas, du foie, de l'intestin, de la tête et du cou et de la peau, de préférence le cancer du sein, de la prostate, du poumon, du colon, des ovaires et des leucémies. On entend par « infections bactériennes » les pathologies dues à la contamination 15 de l'organisme par des bactéries. On entend par « paludisme » ou malaria, la maladie infectieuse potentiellement mortelle due à un parasite du genre Plasmodium tels que Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium ovale, et Plasmodium malariae, propagée par la piqûre de certaines espèces de moustiques anophèles. 20 De préférence, les composés de formule (lb) sont utiles dans le traitement et/ou la prévention des cancers, d'infections bactériennes et/ou du paludisme. De préférence, les composés de formule (la) sont utiles dans le traitement et/ou la prévention du paludisme. La présente invention vise également un composé de formule (la), (lb) ou (Il) telle 25 que définie selon l'invention pour son utilisation en tant que médicament, de préférence un composé de formule (lb) pour son utilisation en tant que médicament. La présente invention concerne également l'utilisation d'un composé de formule (la), (lb) ou (Il) pour la préparation d'un médicament pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention d'un cancer, d'une infection bactérienne et/ou du paludisme. 30 La présente invention concerne également une méthode de traitement et/ou prévention des cancers, d'infections bactériennes et/ou du paludisme comprenant l'administration à un patient d'un moins un composé de formule (la), (lb) et/ou (Il). La présente invention vise également des compositions, de préférence pharmaceutiques, comprenant au moins un composé de formule (la), (lb) et/ou (Il). 35 La présente invention concerne donc des compositions pharmaceutiques comprenant, en tant que principe actif, au moins un composé de formule (la), (lb) et/ou (Il) 3025512 18 selon l'invention. Ces compositions pharmaceutiques contiennent une dose efficace d'au moins un composé de formule (la), (lb) et/ou (Il) selon l'invention, ou un sel pharmaceutiquement acceptable, ainsi qu'au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable. Lesdits excipients sont choisis selon la forme pharmaceutique et le mode 5 d'administration souhaité, parmi les excipients habituels qui sont connus de l'homme du métier. Les compositions pharmaceutiques peuvent contenir d'autres composés actifs. Dans les compositions pharmaceutiques de la présente invention pour l'administration orale, sublinguale, sous-cutanée, intramusculaire, intra-veineuse, topique, locale, intratrachéale, intranasale, transdermique ou rectale, le principe actif de formule 10 (la), (lb) et/ou (Il) tel que défini selon l'invention, ou un sel de celui-ci, peut être administré sous forme unitaire d'administration, en mélange avec des excipients pharmaceutiques classiques, aux animaux et aux êtres humains pour le traitement et/ou la prévention des maladies mentionnées ci-dessus. Les formes unitaires d'administration appropriées comprennent les formes par voie 15 orale telles que les comprimés, les gélules molles ou dures, les poudres, les granules et les solutions ou suspensions orales, les formes d'administration sublinguale, buccale, intratrachéale, intraoculaire, intranasale, par inhalation, les formes d'administration topique, transdermique, sous-cutanée, intramusculaire ou intraveineuse, les formes d'administration rectale et les implants. Pour l'application topique, on peut utiliser les 20 composés selon l'invention dans des solutions, émulsions, crèmes, gels, pommades ou lotions, sans limitation particulière à cet égard. La présente invention concerne également l'utilisation d'un composé de formule (la), (lb) ou (Il) pour le marquage d'un organite, de préférence le lysosome. La présente invention concerne également l'utilisation d'un composé de formule 25 (la), (lb) ou (Il) en tant que marqueur ou biomarqueur, par exemple d'au moins un organite, de préférence le lysosome. La présente invention concerne également un procédé de détection d'au moins un lysosome comprenant la mise en contact d'au moins une cellule, de préférence de type eucaryote, avec un composé de formule (la), (lb) ou (Il). 30 La présente invention concerne également un procédé de marquage d'au moins un lysosome comprenant la mise en contact d'au moins une cellule de préférence de type eucaryote, avec un composé de formule (la), (lb) ou (Il). Selon un mode de réalisation particulier, ledit procédé de détection comprend en outre les étapes suivantes : 35 - mise en contact de cellules vivantes avec au moins un composé de formule (la), (lb) ou (Il) ; 3025512 19 - détection de la présence éventuelle des composés de l'invention dans le cytosol, et plus particulièrement dans les lysosomes. Selon une variante, le procédé de détection comprend la détection de la présence éventuelle des composés de l'invention par des moyens d'enregistrement de la 5 fluorescence. Selon une variante, le procédé de détection comprend la détection de la présence éventuelle des composés de l'invention par immunodétection. Selon une variante, le procédé de détection comprend la détection des lysosomes et des composés de l'invention. 10 Avantageusement, l'invention concerne une méthode d'évaluation de la prolifération cellulaire mettant en oeuvre un procédé de détection selon l'invention. L'invention concerne également un kit de marquage biologique comprenant au moins un composé de formule (la), (lb) ou (II). Avantageusement ce kit comprend également au moins un composé détectable par imagerie, comme par exemple un 15 composé fluorophore ou au moins un anticorps. Description des figures Les figures 1, 2 et 3 montrent l'activité cytotoxique de la marmycine A et de la doxorubicine (agent intercalant utilisé dans le traitement du cancer). 20 La figure 1 montre le pourcentage de viabilité cellulaire en fonction de la concentration en ptM de la marmycine A (trait plein) ou de la doxorubicine (trait en pointillés) des cellules U2OS (lignée cancéreuse ostéosarcome). La figure 2 montre le pourcentage de viabilité cellulaire en fonction de la concentration en ptM de la marmycine A (trait plein) ou de la doxorubicine (trait en 25 pointillés) des cellules A2780 (lignée cancéreuse ovarienne). Les 1050 obtenus sont de 9,8 ptM pour la marmycine A et 0,06 ptM pour la doxorubicine. La figure 3 montre le pourcentage de viabilité cellulaire en fonction de la concentration en ptM du composé 33 (trait plein épais), de la doxorubicine (trait en pointillés) ou d'étoposide (trait plein fin) des cellules HT1080 (lignée de fibrosarcome). 30 La figure 4 représente des photographies obtenues par la fluorescence dans lesquelles : « DAPI » représente le marquage au niveau du noyau cellulaire par le DAPI (4',6'-diamidino-2-phénylindole) ; «Doxorubicin » représente le marquage de la doxorubicine au niveau du noyau cellulaire; «DAPI/Marmycin A » représente le marquage au niveau cellulaire par le DAPI et le marquage de la Marmycine A au niveau des 35 lysosomes. 3025512 20 La figure 5 représente des photographies obtenues par fluorescence dans lesquelles : « Marmycin A » représente le marquage et la localisation de la Marmycine A, « DND-22 » représente le marquage et la localisation des lysosomes ; « Merge » représente la colocalisation de la Marmycine A et des lysosomes ; « ZOOM » représente 5 une photographie avec un grossissement sur une zone particulière de la photographie « Merge » montrant la colocalisation de la Marmycine A et des lysosomes. La figure 6 représente des photographies obtenues par fluorescence dans lesquelles : « DAPI » représente le marquage au niveau du noyau cellulaire par le DAPI ; « GFP-Lamp1 » représente le marquage des lysosomes par l'anticorps anti-LAMP1 ; 10 « Marmycin A » représente le marquage et la localisation de la Marmycine A ; « MERGE » représente la colocalisation de la Marmycine A et des protéines lysosomales GFP-Lamp1 au niveau des lysosomes, et de DAPI au niveau du noyau cellulaire. La figure 7 représente une analyse par Western Blot dans laquelle « 4 ! » représente la Doxorubicine et « 1 ! » la Marmycine A. 15 EXEMPLES Exemple 1 : Synthèse des composés de formules (V) et (VI) selon l'invention 20 La synthèse du diénophile 5 (composé de formule (V)) est réalisée selon le schéma 1. Le composé 8 (fournisseur Aldrich) est protégé dans des conditions classiques sous forme de naphthalène diacétylé 9 qui est ensuite bromé en milieu acide (voir Kitani, Y.; Morita, A.; Kumamoto, T.; Ishikawa, T. Helvetica Chimica Acta 2002, 85, 1186 Carreno, M.C. et al Chem. Eur. J. 2000, 6, 906 Shis, C.; Swenton, J.S. J. Org. Chem. 25 1982, 47, 2825). Schéma 1 Préparation d'un composé de formule (V) OAc OAG 8 g 5 OH Ac:,0, Et3N OAc DNITAP NBS De M, 0:-0 AcOH.1-120 30 3025512 21 Le diène 15 (composé de formule (VI)) est préparé à partir du composé 10 commercialement disponible (fournisseur Aldrich) selon le schéma 2. Une première étape de bromation est d'abord réalisée. Le composé 11 est protégé en acétale 12 en présence d'éthylène glycol et d'une quantité catalytique d'acide. La réaction est réalisée à une 5 concentration de 0,4 M en moins de 2 heures au reflux du benzène. Le composé 12 est transformé en 13 par une étape de couplage pallado-catalysée afin d'y greffer la chaîne vinylique. La déprotection de 13 en 14 se fait en milieu acide doux pour éviter l'isomérisation de la double liaison et la formation d'une cétone a-13 insaturée. L'action de bromure de 10 méthylmagnésium en présence de chlorure de cérium à froid permet la formation du diène désiré 15 de manière racémique. Me OH MeMgBr, CeCI3 THF, 0°C ta -4( 80% ° LiBF4 MeCN, H2O 75% Schéma 2 Préparation d'un composé de formule (VI) Br2, PPh3 HO OH Benzène O APTS 0°C Benzène, A 74% 55% Br 11 OH 10 Br 12 MgBr Pd(PPh3)4 THF, A 75% O 15 14 13 15 Exemple 2 : Etape de couplage A et préparation d'un composé de formule (III) selon l'invention 20 Le composé 16 (composé de formule (III')) est préparé selon le schéma 3 suivant : Schéma 3 Etape de couplage A et préparation d'un composé de formule (III) Me 100`C.. 78 01-1 0 01f 0 16 3 en se' oc.t 15 3025512 22 Les composés 5 et 15 sont portés au reflux du toluène pendant 16 heures, le milieu subit ensuite une évaporation lente d'environ 1 heure à l'évaporateur rotatif dans un bain à 60 °C. Le milieu est repris dans le Me0H et reste sous agitation dans le noir 5 pendant 4 heures. 3 équivalents de carbonate de potassium sont ensuite ajoutés afin d'obtenir après traitement le produit désiré 16. Une étape d'activation de l'alcool 16 par l'anydride triflique en présence de triéthylamine dans le dichlorométhane à basse température permet d'obtenir le composé 3 (composé de formule (III)). 10 Exemple 3 : Synthèse de l'aminopyranose Suivant la procédure décrite dans la littérature, (cf. Raymond N. Russell, Theresa M. Weigel, Oksoo Han, Hung-wen Liu. Carbohydrate Research, Volume 201, Issue 1, 15 15 June 1990, Pages 95-114 (b)Brimacombe, J. S.; Hanna, R.; Saeed, M. S.; Tucker, L. C. N. J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1 1982, 2583-2587.) le composé 4 est préparé à partir du L-rhamnopyranose 7 (fournisseur Alfa Aeser). Après la protection dans des conditions standard par le benzylidène en position 2 et 3, le composé 17 subit une nouvelle protection par action du MOMCI (ou méthyle 20 chlorométhyle éther) en position 4. L'utilisation d'une base forte sur le composé 18 permet une déprotection sélective pour former la cétone 19 en position 3. Le composé 19 réagit avec l'O-benzylhydroxylamine en présence d'acétate de sodium pour former l'intermédiaire 20. En présence de chlorure de cérium et de méthyllithium le composé 20 est sélectivement méthyle en 21 qui subit une hydrogénolyse pour obtenir le produit 25 désiré 4, selon le schéma 4 ci-dessous. Schéma 4 Synthèse de l'aminopyranose MeD 7 18 NH,OBn .OMe AcÔNa, Et0H, ta 900, , `...ÇONACI DIPEA, 91% rdlr M-. P.h .P S . DM F. HO 19 Me:. MOMO 3025512 23 Exemple 4 : Etape de couplage B, préparation des composés de formule (Il) selon l'invention Exemple 4.1 : 5 Le couplage B selon l'invention a été réalisé une première fois selon le schéma 5 suivant : Schéma 5 Etape de couplage B M -0 Me MOMC) 22 4 10 Le couplage B est réalisé en présence de K2003 dans le toluène à reflux avec 20 mol% Cu-I, 2 éq. de K2003, 3 éq. de 4 dans le toluène à 160 °C pendant 72 heures. Un rendement de 33% est obtenu. Des conditions opératoires différentes ont également été testées, comme le montre le tableau 1 ci-dessous. 15 Tableau 1 Catalyseur (mol%) Equiv. 4 Base (equiv.) Solvant T°C t(h) Rendement (%) Cul 10 2 K2003 2 Toluène 140 72 33 Cul 20 3 K2003 2 Toluène 140 24 22-32 Cul 20 1 (2 eq K2003 2 Toluène 150 24 14 23) Cul 20 3 K2003 2 Toluène 150 24 33 Cul 20 2 K2003 3 Toluène 150 24 18 Cul 10 3 K2003 1.4 CH3CN 150 24 3 Cul 20 5 K2003 2 Toluène 160 72 33 3025512 24 Exemple 4.2 : Le couplage B selon l'invention a été réalisé également selon le schéma 6 suivant. 5 Schéma 6 Etape de couplage B Un rendement de 33% est également obtenu. Dans un tube sec avec septum ont été mélangés sous argon, le triflate 3 (34.00 mg, 0.081 mmol), le catalyseur Cul (3.08 mg, 0.016 mmol, 20% mol), et K2CO3 (22.3 mg, 10 0.162 mmol, 2 equiv.), puis l'amine 4 a été ajoutée (88.64 mg, 0.405 mmol, 5 equiv.) dissoute dans 4 mL de toluène sec. Puis le septum a été replacé sur le bouchon sous argon et la reaction s'est faite à 160 QC pendant 72 h. Ensuite, le milieu a été refroidi, lavé avec une solution saturée de NaHCO3 (5 mL), et extrait avec du DCM (3x5 mL). Les couches organiques ont été 15 séchées sur du Na2SO4 et le solvant a été éliminé sous vide. Une purification par flash- chromatographie sur gel de silice (heptane/AcOEt, 8 :2) a été ensuite effectuée. 13.05 mg du composé 27 (33%, 8-(((2S,3R,4R,6R)-6-methoxy-3- (methoxymethoxy)-2,4-dimethyltetrahydro-2H-pyran-4-yl)amino) -3-methyltetraphene-7,12- dione) ont été obtenus sous forme de solide violet. 20 1H RMN (300 MHz, CDCI3) b 10.56 (s, 1H), 8.35 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.29 - 8.17 (m, 1H), 7.81 - 7.62 (m, 2H), 7.57 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.46 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.89 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 4.63 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 4.31 (dq, J = 9.4, 6.2 Hz, 1H), 3.48 (s, 3H), 3.28 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 3.14 (s, 3H), 2.77 (d, J = 14.7 Hz, 1H), 1.82 (dd, J = 14.8, 4.2 Hz, 1H), 1.65 (s, 3H), 1.39 (d, J = 6.3 Hz, 3H).13C NMR (126 MHz, CDCI3) b 187.33, 25 490.2224, trouvé : 490,2225. 0Tf 0 3 e 20''.D niù1 I K2`- 4 u me. ri H2 160 185.15, 151.03, 138.46, 137.16, 136.42, 135.50, 134.22, 134.20, 131.96, 128.82, 128.58, 128.45, 127.74, 123.06, 120.54, 115.62, 113.84, 99.09, 97.56, 87.49, 64.48, 56.81, 55.75, 54.90, 38.38, 26.54, 21.73, 18.70. HRMS (ESI-TOF) calculé pour C29H32N06 [M+H]+ 30 3025512 25 Exemple 5: Etape de cyclisation Ca, préparation des composés de formule Na) selon l'invention Exemple 5.1 : 5 Les composés 30 et 31 sont mis en présence d'1.5 éq de HBF4 (50% w/w en solution aqueuse) au reflux de CH3CN. Le produit de cyclisation 1 est obtenu avec un rendement de 17%. Ainsi, en une seule étape, la cyclisation mais également la déprotection du MOM sont réalisées, afin d'obtenir le produit naturel (schéma 7). 10 Schéma 7 Etape de cyclisation Ca HBF4 CH3CN, reflux, 7h o e 0 30 R Omom 31 R HO, Me 1 Plusieurs essais ont été réalisés, comme le montre le tableau 2 ci-dessous. 15 Tableau2 Acide Equiv. Solvant T°C t(h) Rendement (%) HBF40Et2 1 CH3CN reflux 4 12 HBF4 50 (3/0 1,5 CH3CN reflux 24 7 m/m sol.aqueuse HBF4 50 (3/0 1 CH3CN reflux 7 11 m/m sol.aqueuse HBF4 50 (3/0 60 mol% CH3CN reflux 7 12 m/m sol.aqueuse HCI 2 CH3CN reflux 8 8 En particulier, avec 60% en mol de HBF4 au reflux de l'acétonitrile, le produit 1 est obtenu avec un rendement de 13%. 20 3025512 26 Exemple 5.2 : Une solution du composé 27 (21.00 mg, 0.0429 mmol) et de HBF4 (5 gL, 0.0429 mmol, 1 equiv.) dans 2 mL de CH3CN a été mise sous reflux pendant 8h. Le mélange a été ensuite refroidi, dilué dans du dichlorométhane (5 mL) et lavé 5 avec une solution saturée de NaHCO3 (3x5 mL). La phase organique a été séchée sur Na2SO4 et le solvant a été évaporé sous vide. Une chromatographie préparative sur couche mince utilisant de l'heptane/AcOEt (1:1) en tant qu'éluant a permis d'obtenir 2.3 mg de Marmycine A avec un rendement de 13% La recristallisation par évaporation d'un mélange CH2Cl2:Heptane a permis 10 d'obtenir des aiguilles de cristal rouges. 1H RMN (950 MHz, CDCI3) b 9.59 (s, 1H), 9.55 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.31 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.60 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 8.8, 1.7 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.85 - 4.80 (m, 1H), 3.22 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 3.17 (dq, J = 9.2, 6.0 Hz, 1H), 2.56 (s, 1H), 2.19 (ddd, J = 13.2, 3.2, 1.2 Hz, 1H), 1.87 (dd, J = 13.2, 15 1.8 Hz, 1H), 1.55 (s, 1H), 1.27 (d, J = 6.0 Hz, 1H). 130 NMR (239 MHz, CDCI3) b 186.53, 185.77, 148.75, 138.81, 136.56, 136.47, 136.15, 134.72, 134.65, 132.21, 128.82, 128.54, 128.31, 127.80, 127.42, 122.34, 116.13, 111.35, 79.16, 69.36, 69.33, 51.76, 35.05, 25.03, 21.73, 18.43. HRMS (ESI-TOF) calculé pour C26H24N04 [M+H]+ 414.1700, trouvé 414.1703. 20 Exemple 6 : Etape de cyclisation Cb, préparation des composés de formule (lb) selon l'invention Des composés de formule (lb) ont également été obtenus à partir des composés 25 28 et 32. En milieu basique fort, les produits 33 (oxamarmycine) et 34 sont obtenus, avec des rendements respectifs de 52% et 65%, comme montré par le schéma 8 ci-dessous. Schéma 8 Etape de cyclisation Cb NaH DCM, 0 °C (52 %) 0 30 0 Me 'NH Me 0 C5Me 33 Me0 NH 0 'Me ° Me 28 3025512 27 NaH DCM, 0 °C (65 %) 0 Me 'NH O o Me 6Me 34 Me0 NH 0 'Me ° OH Me 32 Une solution du composé 28 (5.00 mg, 0.0112 mmol) dans 2mL de DMF sec a été refroidie à 0°C et a été ajoutée à NaH (2.70 mg, 0.1123 mmo1,10 equiv.): 5 après 2h à cette température, la réaction a été stoppée avec Me0H. Le solvant a été évaporé sous vide et une chromatographie préparative sur couche mince utilisant de éther de pétrole/AcOEt (8:2) en tant qu'éluant a permis d'obteni 2.54 mg d'O-Marmycine avec un rendement de 52 % (solide violet). 1H NMR (300 MHz, CDCI3) b 9.65 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 9.40 (s, 1H), 8.37 (d, J = 8.6 Hz, 10 1H), 8.07 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.58 (m, 2H), 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 3.94 (dq, J = 12.1, 6.1 Hz, 1H), 3.81 (dd, J = 9.8, 1.3 Hz, 1H), 3.28 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 2.28 (d, J = 14.8 Hz, 1H), 2.06 (dd, J = 14.6, 4.7 Hz, 1H), 1.38 (s, 3H), 15 HRMS (ESI-TOF) calculé pour C27H26N05 [M+H]+ 444.1805, trouvé 444.1826. Exemple comparatif 7 : Couplage effectué selon la réaction de Buchwald-Hartwig 20 Exemple 7.1 : Le composé 22 est obtenu dans les conditions décrites dans le schéma 3 à partir de l'alcool commercialement disponible, et l'amine 23 est également commerciale (fournisseur Aldrich). La réaction est effectuée selon le schéma suivant : 25 Schéma 9 Couplage effectué selon la réaction de Buchwald-Hartwig. 1.31 (d, J= 6.2 Hz, 3H). 130 NMR (126 MHz, CDCI3) b 186.01, 185.61, 145.39, 138.58, 136.73, 136.58, 135.08, 134.08, 131.92, 129.62, 129.38, 128.90, 128.72, 127.77, 122.59, 119.66, 117.69, 112.88, 97.52, 79.61, 62.13, 55.58, 48.38, 41.89, 28.49, 21.72, 17.45. 0 f 0 22 r 23 24 25 3025512 28 Différents catalyseurs, ligands et solvants ainsi que différentes bases et températures ont été testés (cf. Tableau 3). Dans le meilleur des cas, seulement 13% du produit 24 a été observé. Le reste est du produit d'hydrolyse 25 et du réactif 22 qui n'a 5 pas réagi. Tableau 3 Catalyseur Ligand Base Solvant T°C t(h) Rendement (%) (mol%) (equiv.) PÉI(Élta.)2 BINAP NaO'Bu Toluène 110 16h Pt1(0A c.)5 BINAP Nal:113u Toluène 110 17h traces Pd (0.,4 c) DPPF 052003 Toluène 110 20h [%Ci(aliy1)] DPPF NaO'Bu Toluène 110 20h Pd (0A c) BINAP 052003 Toluène 110 22h Pd(OA cr) BINAP 052003 CH3CN Reflux 48h P11(021 c) BINAP 052003 DMF Reflux 8h traces Pd(OA c)12: P(Ph3)3 052003 Toluène 110 48h Pd(0 A c) BINAP NaO'Bu THF Reflux 48h Pd(0 A c), BINAP 052003 DMF 150 30 traces min Pd(02,1012 BINAP 052003 Toluène 160 min 30 traces Pd(0 A0'2' BINAP NaO'Bu Toluène 180 m35 13 PÉI(OA c)2f BINAP NaO'Bu Toluène 110 35 4 in min a) 5% Pd, 5% L, 1.4 eq base, 1.2 eq L Cl b) 10`)0Pd, 15% L, 2 eq. Base, 2 eq. LiCI c) 5%Pd, 10%L, 2 eq. Base, 2 eq. LiCI d) 5% Pd, 10% L, 1 eq base, 1 eq LiCI e) 10 15`)0Pd, 15% L, 1.2 eq base f) 15`)0Pd, 15% L, 1.2 eq base, 1.4 eq LiCI. Exemple 7.2 : Le couplage a également été réalisé entre le triflate 22 et l'aminopyranose 4. Le rendement a chuté à 3% et beaucoup de produit d'hydrolyse 25 a été observé (schéma 15 10). Schéma 10 Couplage effectué selon la réaction de Buchwald-Hartwig. 3025512 29 M 22 4 o 25 Par conséquent, le couplage B selon l'invention permet d'obtenir un rendement d'au moins 30 % en composé de formule (II), nettement supérieur au rendement obtenu 5 avec un couplage de type Buchwald-Hartwig. Exemple comparatif 8 : Essai de cyclisation effectué en présence d'un acide La voie de la C-glycosylation intramoléculaire favorisée par un acide de Lewis ou 10 de Bronsted a été testée. Une large étude a été menée en faisant varier l'acide (BF3 Et20, TMSOTf, ScOTf, InOTf, PPTS, APIS, Cp2HfC12/AgC104 ) sans résultats probants. Seules la déprotection du composé 27 en 28, et la formation de l'aminoanthraquinone 29 ont été été observés. 15 Schéma 11 Cyclisation en présence d'un acide Contrairement aux conditions opératoires de cyclisation Ca et Cb selon l'invention, la cyclisation en présence d'un acide n'a pas permis d'obtenir les composés souhaités. 20 Exemple 9 : Activité cytotoxique des composés selon l'invention Des essais de prolifération cellulaire ont été réalisés de la manière suivante pour 25 démontrer l'activité cytotoxique des composés de l'invention : Des cellules U2OS et A2780 achetées auprès de l'ATCC, ont été maintenues dans des milieux de McCoy's 5A ou RPMI 1640, respectivement, supplémentés avec 10% de 3025512 30 sérum bovin (« fetal bovine serum » (FBS)), et de 1X Antibiotic-Antimycotic (tous de Gibco®) à 37 °C avec 5% de CO2. La mesure de viabilité cellulaire a été mise en oeuvre en étalant 2000 cellules par puits dans une plaque de 96 puits. La N-Acétyl Cystéine (NAC, A9165 Sigma) ou l'inhibiteur de Pan-caspase zVAD-FMK (550377 de BD 5 pharmingen) ont été prétraités pendant 1 heure ou 30 minutes avant le traitement avec la Marmycine A, respectivement. Le réactif « CellTiter-Blue® Reagent» (20p1/puits) a été ajouté après 24, 48, ou 72 heures de traitement, et les cellules ont été incubées pendant une heure avant la détection par fluorescence (560(20)Ex/590(10)Em) en utilisant un dispositif « Perkin Elmer Wallac 1420 Victor2 Microplate Reader ». 10 Le même protocole est utilisé pour évaluer la viabilité cellulaire des cellules HT1080 en présence du composé 33 de l'exemple 6 (dénommé Oxaméthoxymarmycine ou « Oxamethoxymarmycin » en anglais), de la doxorubicine, ou d'étoposide. Les résultats sont représentés sur les figures 1 à 3. Sur la figure 1, les IC50 (« IC50 » représentant la concentration inhibitrice médiane 15 des cellules par le composé évalué) obtenues sont de 10,3 1..1M pour la marmycine A et 0,11.1M pour la doxorubicine, à 72 heures. Sur la figure 2, les 1050 obtenues sont de 9,8 1..1M pour la marmycine A et 0,06 1..1M pour la doxorubicine, à 72 heures. Sur la figure 3, les 1050 obtenues sont de 75 1..1M pour l'Oxaméthoxymarmycine, de 20 0,0351.1M pour la doxorubicine, et de 0.51.1M pour l'étoposide, à 72 heures. Exemple 10 : Localisation cellulaire des composés selon l'invention Des cellules U2OS cultivées avec moins de 40% de confluence ont été traitées pendant 24 heures avec 10 1..1M de composé sauf indication contraire. Le marqueur LysoTrackere Blue DND-22 (L7525, Molecular Probes®) a été ajouté 30 minutes avant fixation. GFP-Lamp1 a été transfecté de manière transitoire selon les instructions commerciales. Pour résumer, 5 mL of CellLight® Lysosomes-GFP BacMam 2.0 (010596, Life Technologies) ont été mélangés avec 2001.1M de milieu de culture U2OS et ajoutés à chaque puits d'une plaque de 24 puits. Après incubation toute la nuit (16 heures), les cellules ont été lavées et traitées avec la Marmycine A comme indiqué à l'exemple 9. Pour l'analyse par immunofluorescence, les cellules ont été fixées 12 minutes dans 2% de formaldehyde/PBS, perméabilisées 10 min avec 0.1% Triton X/PBS et fixées pendant 1h avec 5% BSA, 0.2% Tween-20/PBS (tampon fixateur ou « blocking buffer »). Des lamelles couvre-objet ont été incubées avec des anticorps anti-LAMP1, p62, dilués à 1/100 dans le 3025512 31 tampon fixateur toute la nuit à 4 °C. Les cellules ont été ensuite lavées 3 fois avec 0.2% Tween-20/PBS, et incubées comme décrit ci-dessus avec un anticorps secondaire conjugué Alexa 488 anti-souris « anti-mouse Alexa 488-conjugated secondary antibody » (A11029, lnvitrogen) dilué à 1/500 dans le tampon fixateur. Les lamelles couvre-objet ont été lavées comme décrit ci-dessus et montées avec un milieu de montage VectaShielde pour analyse par fluorescence avec ou sans DAPI (Vector Laboratories Ltd). Les images obtenues ont été prises avec un microscope Leica (Zeiss) et analysées avec le logiciel ImageJ. La figure 4 à 6 représente des photographies obtenues par fluorescence. La figure 4 illustre par la comparaison des différentes photographies que la Marmycine A n'est pas localisée au niveau du noyau cellulaire, mais à l'emplacement des lysosomes. La figure 5 illustre la colocalisation de la Marmycine A avec les lysosomes. La Marmycine A est donc présente et s'accumule dans les lysosomes. La figure 6 illustre également que la Marmycine A s'accumule dans les lysosomes. Exemple 11 : Western blot Les cellules avec le traitement indiqué selon l'exemple 10 ont été lavées deux fois dans du PBS et lysées avec un tampon Laemmli 2X. Les extraits cellulaires ont été portés à ébullition pendant cinq minutes à 100 °C et quanifiés avec le dispositif Nanodrop 2000 (Thermal Scientific). 100 pg de lysat de protéines ont été séparés avec un gel 4-20% MiniPROTEAN® TGX Stain-FreeTM (BioRad) et transférés sur membrane nitrocellulose (Amersham). Les tâches ont été détectées avec différents anticorps, tels que anti-F3-actin (ab8226, Abcam), anti-p62 (610833, BD Transduction LaboratoriesTM), anti-H2AX (PA1- 14198, Thermal Scientific), anti-gH2AX (Ser139) (#2577, Cell Signaling), anti-p21, antip53 (1C12) (#2524, Cell Signaling), anti-p-p53, anti-LC3B (#2775, Cell Signaling), antiBID dilués à 1/1000 dans 5% BSA, 0.1% Tween-20/TBS. L'analyse par western Blot montre précisément que la Marmycine A (« 1 ! ») induit une réponse n'endommageant que légèrement l'ADN qui est dépendante de la caspase, ce qui est en accord avec l'absence de marquage direct du génome, alors que la Doxorubicine (« 4 ! ») engendre une réponse endommageant l'ADN (phosphorylation de H2AX sur la ser139, phosphorylation de P53, induction de P21). REVENDICATIONS1. Procédé pour la préparation d'un composé de formule (II) : R2 O R3 R4 R5 dans laquelle R1, R2, R3, R4, R5, R6, Ra, Rb, Rc, Rd et Re sont indépendamment les uns des autres un atome ou un groupe d'atomes, - n représentent le nombre de radicaux Ra, Rb, Rd et Re et valent 2 ; ledit procédé comprenant une étape de couplage B d'un composé de formule (III) : R4 R5 (III) dans laquelle les radicaux R1 à R6 sont tels que définis pour le composé de formule (II) et Rg est un groupe réactif avec le groupement NH2 du composé de formule (IV), en particulier un groupe triflate, avec un composé de formule (IV) : (Rd)n (Rb) n Rc NH2 (IV) dans laquelle les radicaux Ra à Re et n sont tels que définis pour le composé de formule (II), ladite étape de couplage étant réalisée en présence d'un composé comprenant du cuivre. ORg 0 R6 3025512 33 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'étape de couplage B est effectuée en présence d'un composé comprenant du cuivre, de formule Cu-X, X étant choisi parmi le groupe constitué de Cl, Br, I, SO4 et OAc, de préférence de formule Cu-I. 5 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que l'étape de couplage B est effectuée en présence de 5 mol% à 25 mol%, de préférence entre 10 mol% et 20 mol%, de composé comprenant du cuivre. 10 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le couplage est effectué en présence d'une base, par exemple K2CO3, de préférence en présence d'un solvant, par exemple le toluène ou l'acétonitrile. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant en 15 outre l'étape de couplage A d'un composé de formule (V) : R2 O Ri ORh O (V) dans laquelle R1 et R2 sont tels que définis à la revendication 1, Y étant un groupe réactif avec l'atome de carbone porteur du groupement R3 du composé de formule (VI) et Rh étant un groupement protecteur, de préférence un groupement CH3- 20 C(0), avec un composé de formule (VI) : R3 pour obtenir un composé de formule (III') : R1 3025512 34 dans lesquelles les radicaux R1 à R6 sont tels que définis dans la revendication 1, en présence de toluène ou de xylène. 6. Procédé de préparation d'une structure pentacyclique comprenant : 5 la préparation d'un composé de formule (Il) selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, et une étape de cyclisation C dudit composé de formule (Il). 10 7. Procédé de préparation d'un composé de formule (la) suivante : R4 R5 dans laquelle les radicaux R1 à R6 et Ra à Re et n sont tels que définis à la revendication 1, ledit procédé comprenant une étape de cyclisation Ca par glycosylation C-C d'un composé de formule (Il) tel qu'obtenu selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, en 15 présence d'HBF4 pour former le composé de formule (la). 8. Procédé de préparation de composés de formule (lb) suivante : R2 O R3 R6 Rc (Rb)n (lb) Rd (Re)n (Ra)n dans laquelle les radicaux R1 à R6 et Ra à Re et n sont tels que définis à la revendication 20 1, ledit procédé comprenant une étape de cyclisation Cb par formation d'une liaison O-C d'un composé de formule (Il) tel qu'obtenu selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, en milieu basique, de préférence en présence de NaH par former le composé de formule (lb). R4 R5 9. Procédé, selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, dans lequel : 3025512 35 R1, R2, R3, R4, R5 et R6 sont indépendamment les uns des autres choisis parmi le groupe constitué de :H, OH, halogène, C(0)OH, =0, (C1-Clo)alkyle, 0(C,Clo)alkyle, OC(0)(Ci-C10)alkyle, (C2-Clo)alcényle, C(0)0(Ci-Cio)alkyle, NH2, NH(Ci-Cio)alkyle, NUCt-Cio)alkylek, NHC(0)(Ci-Clo)alkyle, N(Cl-C10)alkyleC(0)(Ci-Cio)alkyle, C(0)NH2, C(0)N(Ci-Cio)alkyle, C(0)NRCi-Clo)alkylek, les oses et les groupes époxy, dans lesquels lesdits alkyles et/ou lesdits oses peuvent être substitués ; ou R1 avec R2 et/ou R3 avec R4 et/ou R4 avec R5 et/ou R5 avec R6 forment avec les 10 atomes de carbone auxquels ils se rattachent un groupement (C3-Cio)cycloalkyle ou (C6-Cio)aryle, lesdits groupements cycloalkyles ou aryles étant éventuellement substitués et dans lesquels au moins l'un des atomes de carbone peut éventuellement être remplacé par un hétéroatome, de préférence par un atome d'oxygène ; 15 les radicaux Ra sont indépendamment choisis les uns des autres parmi le groupe constitué de : H, OH, halogène, C(0)OH, =0, (C1-Clo)alkyle, 0(C1-Cio)alkyle, OC(0)(Ci-Cio)alkyle, (C2-Clo)alcényle, C(0)0(Ci-C1o)alkyle, NH2, NH(ClClo)alkyle, NRCi-Cio)alkylek NHC(0)(Ci-Clo)alkyle, N(Ci-Clo)alkyle-C(0)(Cr 20 Cio)alkyle, C(0)NH2, C(0)N(Ci-C1o)alkyle, C(0)NRC1-Clo)alkylek, et les groupements réactifs permettant de former une liaison C-C glycosidique, dans lesquels lesdits alkyles peuvent être substitués ; les radicaux Rb, Rc et Re sont indépendamment choisis les uns des autres parmi 25 le groupe constitué de : H, OH, halogène, C(0)OH, =0, (C1-C1o)alkyle, 0(C1- Clo)alkyle, OC(0)(Ci-C10)alkyle, (C2-Clo)alcényle, C(0)0(Ci-Cio)alkyle, NH2, NH(Cl-Clo)alkyle, NRCi-Clo)alkylek, NHC(0)(Ci-C1o)alkyle, N(C1-C10)alkyleC(0)(Ci-Clo)alkyle, C(0)NH2, C(0)N(Ci-Cio)alkyle, et C(0)NRCi-Clo)alkylel2, dans lesquels lesdits alkyles peuvent être substitués ; les radicaux Rd sont indépendamment choisis les uns des autres parmi le groupe constitué de : H, OH, halogène, C(0)OH, =0, (C1-Clo)alkyle, 0(C1-Cio)alkyle, OC(0)(Ci-Clo)alkyle, (C2-Cio)alcényle, C(0)0(Cl-Clo)alkyle, NH2, NEI(CiClo)alkyle, NRCi-Clo)alkyle12, NHC(0)(Ci-Cio)alkyle, N(Ci-C1o)alkyle-C(0)(Cr Cio)alkyle, C(0)NH2, C(0)N(Ci-Cio)alkyle, C(0)NRCi-C1o)alkylek, (C1-C1o)alkyle- C00-, le méthoxyméthyloxygène, et les groupements réactifs permettant de 3025512 36 former une liaison 0-C tel que Ac0 , dans lesquels lesdits alkyles peuvent être substitués. 10. Composé de formule (la) suivante : R4 R5 Rc 5 (la) dans laquelle, les radicaux R1 à R6 et Ra à Re et n sont tels que définis à la revendication 1 ou 9, à l'exception des composés pour lesquels R3 et R4 forment avec les atomes de carbone auxquels ils se rattachent un groupement phényle, et à l'exception des composés suivants : 10 Me HO 11. Composé de formule (lb) suivante : 15 dans laquelle, les radicaux R1 à R6 et Ra à Re et n sont tels que définis à la revendication 1 ou 9. 12. Composition pharmaceutique comprenant un composé de formule (la), (lb) ou (Il) 20 tel que défini à l'une quelconque des revendications 1, 9, 10 ou 11. R4 R5 R6 Rc (Rb)n (lb) (Ra) n Rd (Re) n 3025512 37 13. Composé de formule (la), (lb) ou (II) tel que défini à l'une quelconque des revendications 1, 9, 10 ou 11, pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention des cancers, d'infections bactériennes et/ou du paludisme. 5 14. Composé de formule (la), (lb) ou (II) tel que défini à l'une quelconque des revendications 1, 9, 10 ou 11, pour son utilisation comme biomarqueur ou dans le marquage d'un organite cellulaire, de préférence un lysosome. 10