Brevet FR3026950A1 — publié le 20160415

PROCEDE DE PREPARATION DE PLASMA UNIVERSEL Domaine technique La présente invention concerne un plasma universel lyophilisé ou une fraction de plasma sanguin universel lyophilisée, sécurisé viralement, dépourvue d'anticorps antiA et anti-B, et compatible avec tous les groupes sanguins, ainsi que son procédé d'obtention. Arrière-plan technologique Le "plasma sanguin" ou "plasma" est le composant liquide du sang, dans lequel les cellules sanguines sont en suspension. Le plasma est susceptible d'être séparé du sang total par centrifugation ou filtration à travers une membrane. Le plasma sanguin est constitué essentiellement d'eau, de protéines plasmatiques (principalement l'albumine et des anticorps) et des facteurs de coagulation dont le fibrinogène. Le plasma sanguin est utilisé en thérapeutique pour le traitement de coagulopathies graves avec effondrement de tous les facteurs de coagulation ainsi que pour le traitement d'hémorragies aiguës, avec déficit global des facteurs de coagulation. Actuellement, le plasma thérapeutique généralement utilisé est du plasma frais congelé (PFC) issu de dons qualifiés biologiquement (tests immunohématologiques, recherche de virus VIH, VHC et VHB par amplification des acides nucléiques) et qui peut être sécurisé vis-à-vis des pathogènes par quarantaine ou traitement physico-chimique. Un tel plasma nécessite une conservation à une température inférieure ou égale à - 25°C, ce qui implique que son administration ne peut s'effectuer qu'après décongélation dans des conditions spécifiques. De plus, ce type de plasma ne peut être conservé plus d'un an, ce qui génère des pertes conséquentes. Enfin, ce plasma thérapeutique doit être utilisé avec précaution puisque son administration doit respecter les règles de délivrance basées sur les compatibilités ABO des receveurs. Au-delà de l'utilisation de plasma compatibles, la transfusion de plasma iso-groupe doit donc être privilégiée afin d'éviter tout risque d'hémolyse post-transfusionnelle par incompatibilité ABO. Du fait des restrictions liées à son utilisation et à sa conservation et donc sa disponibilité, un tel plasma frais congelé s'avère inadapté à une application dans des conditions d'urgence, notamment dans le milieu hospitalier ou sur le terrain hors milieu hospitalier (lieux d'accidents ou de catastrophes, zones difficiles d'accès, zones à accès restreint ou inexistant aux chaines du froid, terrains d'opérations militaires). 35830FR141008 texte dépôt 3026950 2 Il existe donc un besoin pour un plasma répondant aux contraintes du milieu hospitalier et non hospitalier, susceptible d'être conservé à température ambiante, exempt de toute forme de contamination bactérienne, virale ou parasitaire et compatible avec n'importe quel receveur, indépendamment de son groupe sanguin 5 ABO. La demande W02012/022914 décrit un procédé d'obtention d'un plasma lyophilisé, issu d'un mélange de plasma de donneurs sélectionnés et appartenant exclusivement au groupe sanguin AB ou aux groupes sanguins A ou B. Le procédé 10 décrit dans la demande W02012/022914 ne peut être mis en oeuvre avec des donneurs appartenant au groupe sanguin O. La demande US20110008459 décrit un plasma universel obtenu en mélangeant les plasmas de donneurs de groupes sanguins A et B et éventuellement AB à 15 l'exclusion de tout plasma provenant de donneurs de groupe sanguin O. Résumé de l'invention Les inventeurs ont développé un procédé de préparation d'un plasma universel lyophilisé dont les caractéristiques répondent à des exigences de conservation et 20 d'utilisation encore non satisfaites et ceci, quel que soit le groupe sanguin auquel appartient ce plasma. Ainsi l'invention concerne un procédé de préparation d'un plasma universel lyophilisé ou une fraction de plasma sanguin lyophilisée, comprenant les étapes suivantes : 25 a) Mélange de plasma unitaire obtenu à partir d'un échantillon de donneurs, b) Elimination des anticorps anti-A et anti-B présentes dans le plasma par chromatographie d' immunoaffinité, et c) Lyophilisation du plasma universel issu de l'étape b). 30 Le procédé de l'invention permet in fine l'obtention d'un "plasma lyophilisé" ou "plasma cryodesséché", grâce à une étape de lyophilisation appropriée. Le plasma obtenu après reconstitution du plasma lyophilisé dans un solvant de reprise, répond aux exigences réglementaires auxquelles sont soumis les plasmas actuellement utilisés en thérapeutique, en particulier les concentrations en facteurs de coagulation sont 35 satisfaisantes (par exemple la concentration en facteur VIII est supérieure ou égale à 0,5 UI/mL) et il n'y a pas d'activation de la coagulation. 35830FR141008 texte dépôt 3026950 3 Dans un mode de réalisation particulier, l'étape b) est réalisée au moyen d'une chromatographie d'immunoaffinité sur un support dont la matrice est greffée de groupes oligosaccharidiques antigéniquement similaires aux groupes sanguins A et/ou B, par exemple selon les techniques décrites dans la demande W02007/077365 ou 5 utilisant une matrice telle que décrite dans les demandes FR 13 56635 ou FR 13 56636. Dans un mode de réalisation particulier, lesdits donneurs appartiennent au groupe sanguin sélectionné parmi le groupe sanguin A, le groupe sanguin B, le groupe sanguin AB et/ou le groupe sanguin O. 10 Dans un mode de réalisation particulier, le plasma universel issu de l'étape b) présente une teneur en anticorps anti-A et/ou une teneur en anticorps anti-B contenue dans le plasma universel telle que le plasma universel présente un résultat négatif au test de Coombs à la dilution 1/64. Dans un mode de réalisation particulier, le procédé de préparation d'un plasma universel peut comprendre en outre une étape 15 d'inactivation virale et/ ou une étape d'ultrafiltration. La présente invention concerne également un plasma universel, de préférence un plasma universel dans lequel la teneur en anticorps anti-A et la teneur en anticorps anti-B sont telles que le plasma universel présente un résultat négatif au test de Coombs à la dilution 1/64 20 La présente invention concerne également l'utilisation d'un tel plasma universel pour le traitement de patients souffrant d'hémorragies sévères, notamment d'origine traumatique, en remplacement de multiples facteurs de la coagulation, en situation d'urgence losqu'un concentré de facteur de coagulation n'est pas disponible, en cas de déficit sévère en vitamine K, ou chez les patients atteints de purpura 25 thromb otique thromb ocytopénique. D'autres caractéristiques et avantages de la présente invention apparaîtront à la lecture de la description détaillée qui suit et du mode de réalisation préféré de l'invention, donnée à titre d'exemple. 30 Description détaillée Par "plasma unitaire", on entend du plasma recueilli à partir d'un seul individu donneur. Ce plasma unitaire peut être préparé à partir du sang total ou être recueilli par aphérèse. Préférentiellement, dans le cadre de cette invention, les plasmas 35 unitaires constituant le mélange de plasmas de l'étape a) du procédé de l'invention sont 35830FR141008 texte dépôt 3026950 4 recueillis par aphérèse. Préférentiellement, les plasmas unitaires constituant le mélange de plasmas de l'étape a) répondent aux mêmes exigences réglementaires auxquelles sont soumis les plasmas actuellement utilisés en thérapeutique ou pour le fractionnement. Ils respectent donc les exigences en vigueur, notamment en termes de 5 taux de facteurs d'hémostase. Les individus donneurs doivent donc respecter les critères réglementaires d'éligibilité au don du plasma. Préférentiellement, les plasmas unitaires sont obtenus à partir de donneurs masculins ou exempts d'anticorps antiHLA. En outre, dans le contexte de la présente invention, les donneurs doivent présenter un bilan d'hémostase normal et caractérisé par un taux de facteur VIII au 10 moins égal à 0,9 UI/mL. Par "donneur", on entend un individu susceptible de faire don de son sang ou des composants sanguins. Par "mélange de plasmas" ou "pool de plasma ", on entend un mélange de plasmas unitaires. Préférentiellement, un « mélange de plasmas » ou « pool de 15 plasma » correspond à un mélange d'au moins 2 plasmas unitaires, encore plus préférentiellement d'au moins 10 plasmas unitaires. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, un « mélange de plasmas » ou « pool de plasmas » correspond à un mélange d'au moins 2 000 plasmas unitaires différents. Dans un autre mode de réalisation particulier de l'invention, un 20 « mélange de plasmas » ou « pool de plasma » correspond à un mélange d'au moins 10 000 plasmas unitaires différents. Dans le contexte de l'invention, le « pool de plasma » peut être un pool de plasma thérapeutique ou un pool de plasma pour fractionnement. Selon l'invention, le pool de plasma est avantageusement déleucocyté pour sécuriser le plasma vis-à-vis des risques de transmission du prion ou d'autres 25 agents infectieux. Avantageusement, le plasma déleucocyté selon l'invention possède une teneur limite en leucocytes résiduels REVENDICATIONS1. Procédé de préparation d'un plasma universel lyophilisé ou d'une fraction de plasma sanguin lyophilisée, comprenant les étapes suivantes : a) Mélange de plasma unitaire obtenu à partir d'un échantillon de donneurs, b) Elimination des anticorps anti-A et anti-B présents dans le plasma par chromatographie d'immunoaffinité, et c) Lyophilisation du plasma universel issu de l'étape b). 10 2. Procédé de préparation d'un plasma universel selon la revendication 1, dans lequel l'étape a) est réalisée sans aucune sélection préalable de donneurs. 3. Procédé de préparation d'un plasma universel selon la revendication 1, dans lequel 15 l'étape b) est réalisée au moyen d'une chromatographie d'immunoaffinité sur un support greffé de groupes oligosaccharidiques antigéniquement similaires aux groupes sanguins A et/ou B. 4. Procédé de préparation d'un plasma universel selon la revendication 3, dans 20 lequel les groupes oligosaccharidiques représentent des trisaccharides correspondants aux épitopes des groupes sanguins A et/ou B. 5. Procédé de préparation d'un plasma universel selon la revendication 4, dans lequel les trissacharides, correspondant à l'épitope du groupe sanguin A, 25 présentent la structure N-acétylgalactosamine (Ga1NAc) - Galactose (Gal) - Fucose (Fuc) et ceux correspondant à l'épitope du groupe sanguin B, présentent la structure Galactose-Galactose-Fucose. 6. Procédé de préparation d'un plasma universel selon la revendication 1, dans lequel 30 lesdits donneurs appartiennent au groupe sanguin sélectionné par le groupe sanguin A, le groupe sanguin B, le groupe sanguin AB et/ou le groupe sanguin O. 7. Procédé de préparation d'un plasma universel selon la revendication 1, dans lequel 35 le plasma universel issu de l'étape b) présente une teneur en anticorps anti-A et/ ou en anticorps anti-B contenue dans le plasma universel telle que le résultat du test de Coombs est négatif à la dilution 1/64. 35830FR150318 3026950 2 8. Procédé de préparation d'un plasma universel selon la revendication 1, comprenant en outre une étape de sécurisation biologique. 9. Procédé de préparation d'un plasma universel selon la revendication 8, dans lequel 5 l'étape de sécurisation biologique est réalisée par inactivation virale au moyen d'un solvant/détergent, de préférence en utilisant un solvant/détergent dialysable ou filtrable. 10. Procédé de préparation d'un plasma universel selon la revendication 1, comprenant en outre une étape ultrafiltration. 11. Procédé de préparation d'un plasma universel selon la revendication 10, caractérisé en ce que l'étape d'ultrafiltration est associée à une étape de dialyse 12. Plasma universel lyophilisé obtenu selon le procédé des revendications 1 à 11. 13. Plasma universel lyophilisé dans lequel la teneur en anticorps anti-A et la teneur en anticorps anti-B est conforme à un résultat négatif au test de Coombs à la dilution 1/64. 14. Plasma selon la revendication 13 obtenu sans sélection préalable des donneurs. 15. Plasma selon la revendication 13 ou 14 obtenu avec des donneurs qui appartiennent aux groupes sanguins A, B, AB et 0. 25 16. Plasma universel obtenu selon le procédé des revendications 1 à 11, pour le traitement de patients souffrant d'hémorragies sévères, notamment d' origine traumatique, en remplacement de multiples facteurs de la coagulation, en situation d'urgence lorsqu'un concentré de facteur de coagulation n'est pas disponible, en 30 cas de déficit sévère en vitamine K, ou chez les patients atteints de purpura thrombotique thrombocytopénique. 35830FR150318