Brevet FR3032106A1 — publié le 20160805

MICRODISPOSITIF POUR LA CAPTURE IN VIVO DE BIOMARQUEURS CELLULAIRES CIRCULANTS L'invention se situe dans le domaine des dispositifs de capture et de prélèvement de cellules d'intérêt présentes dans la circulation d'un flux 10 biologique tel que le sang et dont l'analyse après capture permet entre autre de porter un diagnostic. Depuis quelques années, la tendance dans l'identification et le traitement des cancers est à la personnalisation des soins, ce qui passe par l'étude fine des cellules tumorales. Habituellement ces cellules sont prélevées par biopsie. 15 Cependant une biopsie est invasive et des méthodes alternatives ont été mises au point pour l'éviter. Les tumeurs cancéreuses libèrent dans la circulation sanguine des cellules appelées « Circulating Tumor Cells » ou CTCs ; il est communément admis que ce phénomène apparaît à un stade précoce de la maladie. L'analyse 20 immunohistochimique de ces cellules permet de porter un diagnostic et d'apporter des informations notamment sur l'agressivité du cancer. Les CTC représentent donc un biomarqueur d'intérêt à tous les temps de la prise en charge de la maladie cancéreuse, diagnostic, pronostic et surveillance. Or les CTCs sont présentes en concentration extrêmement faible dans le 25 sang des patients atteints de cancer (environ 1/109 cellules sanguines normales). L'isolation de ces cellules est donc extrêmement difficile. On connait différents procédés pour procéder à cette isolation. Le système CellSearch® est basé sur une immunodétection. Il se fonde sur la présence à la surface de CTCs d'EpCAM, un antigène membranaire 30 spécifique des cellules d'origine épithéliale. Un échantillon de 7,5 ml de sang est centrifugé, puis mis en présence de nanoparticules ferromagnétiques -2 munies à leur surface d'anticorps anti-EpCAM. Les CTCs sont alors séparées des autres cellules par application d'un champ magnétique. L'inconvénient de ce système est double : - Il utilise un échantillon de sang très limité (7.5 ml ce qui correspond à 0.15 % du volume sanguin total), dans lequel le nombre de CTCs, compte tenu de leur faible concentration, est très faible, - Il ne permet pas de détecter les CTCs ayant perdu la protéine EpCAM lors de la transition épithélio-mésenchymateuse (EMT), ce qui représente environ 2/3 de la population totale de ces cellules ; d'autre part, il ne permet la détection que de cellules différenciées dont la durée de vie est limitée et qui ne sont pas les plus dangereuses. On connait d'autres approches pour isoler les CTCs in vitro à partir d'un échantillon sanguin, basées sur la taille des CTCs. En particulier, le système ISET (« Isolation by size of Epithelial Tumor Cells ») utilise la filtration d'un échantillon de sang sur une membrane en polycarbonate micro perforée ; dans ce système, les CTCs sont préalablement rigidifiées par application de paraformaldéhyde de façon à résister à la forte pression qui est appliquée. De façon générale, la sensibilité de la détection in vitro est réduite du fait du faible volume des échantillons. En effet, étant donné la rareté des CTCs dans le sang, leur présence dans un échantillon de quelques millilitres peut se chiffrer à quelques unités à un stade déjà avancé du cancer. Leur détection à des stades beaucoup plus précoces est de fait quasi-impossible. De WO 2010/145 824, on connait le système GILUPI® qui permet une détection in vivo. Ce système repose sur la fonctionnalisation d'une tige métallique à l'aide d'anticorps anti-EpCAM introduite dans la circulation sanguine. Ce système permet de s'affranchir de la limitation inhérente au faible volume des échantillons, mais elle reste limitée par la méthode de capture immunologique. L'invention a pour objectif de proposer un dispositif qui permette de 30 s'affranchir des inconvénients liés à l'échantillonnage et aux méthodes immunologiques pour isoler les biomarqueurs cellulaires circulants. A cet effet, elle propose un dispositif de capture in vivo de biomarqueurs cellulaires circulant dans un flux biologique animal ou humain, caractérisé en ce qu'il comporte un moyen de filtration prévu pour retenir lesdits biomarqueurs cellulaires, le moyen de filtration étant solidaire d'un support. Le dispositif selon l'invention se fonde sur les propriétés physiques des biomarqueurs cellulaires circulant, taille et déformabilité. Les plaquettes ont une dimension de 2 à 4 pu et les globules rouges une dimension d'environ 7 ; les globules blancs ont des dimensions variables, de 7 à 25 pm, mais ils sont très déformables, ce qui leur permet de circuler dans les plus petits vaisseaux. Parmi les biomarqueurs cellulaires circulants, les cellules tumorales circulantes, en particulier, ont des dimensions variables, comprises entre 4 et 25 gm, mais ils sont très peu déformables. En conséquence, il est possible de prévoir un moyen de filtration qui retienne les biomarqueurs cellulaires circulants tels que les CTCs tout en laissant passer tous les autres composants du flux biologique dans des conditions in vivo, notamment de pression et de vitesse. Des exemples de flux biologiques sont le sang, la lymphe, l'urine... Des exemples de biomarqueurs cellulaires circulants pour lesquels le dispositif de capture est adapté sont les cellules stromales, épithéliales, les cellules souches, clusters ou agrégats de cellules tumorales, les cellules tumorales associées à tous types de cancer : cellules tumorales prostatiques, du cancer du sein, du colon,.., et les autres types cellulaires: monocytes (macrophages).Le dispositif selon l'invention est donc particulièrement adapté pour le diagnostic de différents types de cancers par le biais de la capture de cellules tumorales circulantes, notamment. On entend aussi par biomarqueurs cellulaires des éléments infestants de grande taille comme les parasites intra ou extracellulaires ou leurs oeufs. Par exemple, la leishmaniose peut être diagnostiquée par la présence de sa forme infectante, promastigote, d'une taille de 10 pm à 15 !.Lm. De même, la chistosomiase peut être diagnostiquée par la présence de ses oeufs d'une taille de 70 ?am à 200 gm. Le diagnostic d'autres maladies pourrait être envisagé suite à la capture d'autres biomarqueurs cellulaires circulants pouvant notamment présenter des anomalies. Le dispositif selon l'invention est prévu pour être placé dans le flux de la 5 circulation sanguine. Le moyen de filtration est donc associé à un support pour le rigidifier et/ou pour le retenir au sein du flux sanguin et permettre sa récupération. Le dispositif de capture peut comporter l'une ou l'autre des caractéristiques suivantes, seule ou en combinaison. 10 Avantageusement, le moyen de filtration peut comporter au moins une ouverture traversante dont les dimensions sont adaptées pour retenir les biomarqueurs cellulaires en fonction de leur taille et de leur défounabilité dans le flux sanguin. Les dimensions sont par exemple la profondeur et au moins une 15 dimension transversale. Avantageusement, l'au moins une ouverture peut être sensiblement circulaire ou sensiblement ovale ou sensiblement polygonale ou prend la forme d'une fente. L'invention n'est pas limitée par la forme des ouvertures, pour autant 20 bien sûr qu'elles soient traversantes. La forme et la dimension des ouvertures peut varier au sein de l'épaisseur du moyen de filtration afin de permettre la capture de différents types de biomarqueurs cellulaires à différentes épaisseurs. La paroi de ces ouvertures peut former un cône tronqué, mais de préférence elle forme un cylindre, c'est-à-dire comportant des génératrices 25 parallèles. Le moyen de filtration peut comporter seulement une ouverture, par exemple sous la forme d'une fente, rectiligne ou courbe, dont la dimension minimale est choisie pour pouvoir retenir les biomarqueurs cellulaires considérés ou plusieurs ouvertures, également ou inégalement réparties sur le 30 moyen de filtration, de même forme et dimension ou de forme et/ou de dimensions différentes. -5 Avantageusement, le moyen de filtration peut être plan. L'invention n'est pas limitée non plus par la forme du moyen de filtration, mais il est de préférence plan. Avantageusement le dispositif peut posséder une symétrie de révolution 5 autour d'un axe. Le dispositif de capture peut par exemple prendre la forme d'un cylindre ou d'un cône, ou d'un cylindre surmonté d'un cône ou d'une calotte sphérique. Dans un mode préféré de réalisation, le dispositif peut prendre la forme d'un cylindre creux, tronqué selon un plan parallèle à l'axe du cylindre et le 10 moyen de filtration peut former le fond du cylindre tronqué. Avantageusement le support peut comporter au moins une ouverture traversante sensiblement circulaire ou sensiblement ovale ou sensiblement polygonale ou prend la forme d'une fente. L'invention n'est pas limitée non plus par la présence ou l'absence 15 d'ouvertures traversantes dans le support, leur forme ou leur nombre, pouvant être différents de ceux des ouvertures présentes sur le moyen de filtration. Avantageusement, le dispositif peut être réalisé en une résine photosensible. Le dispositif, membrane et support, peut être réalisé par lithographie 20 laser tridimensionnelle ou photolithographie conventionnelle: on polymérise la résine à l'endroit où elle est irradiée, puis la résine non polymérisée est dissoute. Avantageusement, le dispositif peut être réalisé en un matériau biocompatible ou il peut être recouvert d'un matériau biocompatible, par 25 exemple un polymère tel que le parylène ou il peut être recouvert d'une couche métallique biocompatible (Au, Ti,...). Avantageusement, le dispositif de capture peut être fonctionnalisé à l'aide d'un composé anti-thrombotique tel que l'héparine de façon à éviter le risque de thrombose ou de coagulation. 30 L'invention porte également sur un dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires, comportant au moins un dispositif de capture de -6 biomarqueurs selon l'invention fixé sur un moyen d'introduction du dispositif de capture dans un vaisseau de flux biologique. Il est avantageux que le dispositif de capture soit associé à un moyen d'introduction afin de l'introduire facilement au sein d'un vaisseau de flux biologique, notamment un vaisseau sanguin, une artère ou de préférence une veine, ou un vaisseau lymphatique. Bien entendu, le dispositif de prélèvement peut comporter plusieurs dispositifs de capture, pouvant être différents les uns des autres, notamment en ce qui concerne la forme et le diamètre des ouvertures. Dans une variante, le moyen d'introduction du dispositif de capture dans la circulation sanguine peut former le support. Dans cette variante, il y a identité entre le support du moyen de filtration et le moyen d'introduction. Avantageusement, le moyen d'introduction du dispositif de capture dans 15 la circulation sanguine peut comporter une languette. Une fine languette, par exemple métallique, peut servir de moyen d'introduction du dispositif de capture dans le vaisseau sanguin. Avantageusement, la languette peut comporter un alliage métallique ou un matériau composite à base de résine et de fibres. 20 Il peut s'agir d'un acier inoxydable ou d'un alliage de Nickel et de Titane tel que le Nitinol, connu pour ses propriétés de biocompatibilité et sa flexibilité. En effet, la languette doit être en un matériau suffisamment flexible pour pouvoir s'insérer selon l'axe longitudinal du vaisseau sanguin. Dans le cas d'une languette en acier inoxydable ou en matériau 25 composite, celle-ci peut être recouverte d'un matériau biocompatible tel que le parylène ou d'une couche métallique biocompatible (Au, Ti,...). Le dépôt de matériau biocompatible permet également d'apporter de la rigidité à la languette ou d'améliorer sa tenue mécanique. Avantageusement, le moyen d'introduction peut comporter un premier 30 moyen de protection du moyen de filtration prévu pour éviter le détachement du moyen de filtration. Il est avantageux de protéger le moyen de filtration du dispositif de capture, voire le dispositif de capture dans son ensemble, afin d'éviter son détachement du moyen d'introduction lors de la manoeuvre d'introduction ou de retrait, A cet effet le dispositif de prélèvement peut comporter un premier moyen de protection. Une fonction de ce premier moyen de protection peut aussi être également de centrer le dispositif de prélèvement par rapport au flux dans le vaisseau sanguin, et aussi par rapport au cathéter lorsqu'il est introduit dans un cathéter. Avantageusement, le premier moyen de protection peut comporter au 10 moins un plot fixé sur le moyen d'introduction. Le moyen d'introduction peut par exemple comporter deux plots encadrant le ou les dispositifs de capture et suffisamment éloignés pour ne pas perturber le flux sanguin. Avantageusement, le moyen d'introduction peut comporter un second 15 moyen de protection prévu pour protéger un vaisseau sanguin dans lequel il est amené à être introduit. Il est avantageux de protéger les parois du vaisseau sanguin du corps étranger que représente le moyen de prélèvement. Avantageusement, le dispositif de prélèvement peut comporter une pièce 20 terminale fixée à l'extrémité du moyen d'introduction et formant un premier et/ou un second moyen de protection. Avantageusement, la pièce terminale peut comporter au moins une arche. Par arche, on entend une pièce allongée courbe comportant une première et une seconde extrémité, pouvant être reliée à la languette par au moins une 25 de ses extrémités. Lorsque la pièce terminale est fixée à l'extrémité du dispositif de prélèvement, l'au moins une arche prend appui de façon non agressive sur la paroi du vaisseau et centre le dispositif à l'intérieur du vaisseau et du cathéter lorsqu'un cathéter est utilisé. L'au moins une arche peut également être prévue 30 pour protéger le dispositif de capture. Dans une autre variante, le moyen d'introduction peut comporter au voisinage de son extrémité au moins une arche longitudinale formant un premier et/ou un second moyen de protection. Avantageusement, le dispositif de prélèvement peut être recouvert de 5 matériau biocompatible tel que le parylène. Avantageusement, le dispositif de prélèvement peut être fonctionnalisé à l'aide d'un composé anti-thrombotique, par exemple l'héparine. Avantageusement, le dispositif de prélèvement peut comporter un moyen de préhension de façon à le rendre apte à être utilisé dans un cathéter. 10 Le dispositif de prélèvement peut comporter un « stopper », c'est-à-dire moyen de préhension tel qu'un un bouchon en plastique, placé sur l'extrémité distale du moyen d'introduction, facilitant la préhension du dispositif et servant de butée lors de l'introduction du dispositif dans le cathéter. On appelle extrémité distale du moyen de prélèvement l'extrémité qui est à 15 l'opposé de celle qui comporte le dispositif de capture. Avantageusement, le dispositif de prélèvement peut être inséré dans un cathéter. Un cathéter de perfusion, éventuellement fonctionnalisé grâce à un composé anti-thromb oti que tel que 1 ' héparine, guide et protège 20 avantageusement le moyen de prélèvement. Le cathéter est introduit dans le vaisseau sanguin, le moyen de prélèvement est rentré à l'intérieur du cathéter, puis le moyen de prélèvement est poussé hors du cathéter pour être placé dans le flux sanguin. A l'issue du prélèvement, la manoeuvre inverse est réalisée : rentrée du moyen de prélèvement dans le cathéter, retrait du cathéter. Les 25 cellules capturées peuvent ensuite être facilement récupérées, comptées, marquées immunologiquement et mises en culture. Les avantages du dispositif selon l'invention sont les suivants : - Il n'utilise que les propriétés physiques (taille, déformabilité) des biomarqueurs cellulaires, on s'affranchit donc de la détection 30 d'antigènes membranaires, -9 - La circulation sanguine est utilisée directement comme système fluidique, Le volume de sang analysé est bien plus important ; le dispositif peut analyser 100 ml de sang en 5 minutes, soit un volume 10 à 100 fois supérieur à celui analysé par les systèmes qui utilisent un échantillon, Le nombre de captures peut être augmenté en augmentant le temps de prélèvement et en prévoyant un dispositif comportant plusieurs dispositifs de capture, - Il est applicable à n'importe quel type de biomarqueur cellulaire circulant précédemment cité en adaptant sa géométrie, notamment la taille des ouvertures. L'invention concerne également : un dispositif de capture de biomarqueurs cellulaires selon l'invention pour une utilisation à des fins diagnostiques, un dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires selon l'invention pour une utilisation à des fins diagnostiques, notamment à des fins de diagnostic du cancer. Des modes de réalisation et des variantes seront décrits ci-après, à titre 20 d'exemples non limitatifs, avec référence aux dessins annexés dans lesquels : La figure 1 représente en perspective un dispositif de capture, la figure lA étant une vue agrandie d'une partie de ce dispositif, Les figures 2A et 2B représentent en perspective des variantes de moyens de filtration, la figure 2C représente en perspective une 25 variante de dispositif de capture, Les figures 3A et 3B représentent les extrémités de deux modes de réalisation d'un dispositif de prélèvement, - La figure 4 représente l'extrémité d'un dispositif de prélèvement comportant deux moyens de protection, - 10- - Les figures 5A et 5B représentent l'extrémité d'un dispositif de prélèvement et une pièce terminale de protection, la figure 5C est une vue agrandie de la figure 5B, Les figures 6A et 6B représentent l'extrémité d'un dispositif de prélèvement comportant un moyen de protection et de centrage dans deux variantes. Le dispositif de capture 100 illustré en figure 1 comporte un support cylindrique 110 tronqué selon un plan parallèle à l'axe X-X' du cylindre, c'est-à-dire que ce support comporte une partie plane 111 et une partie arrondie 112. Comme il sera vu plus loin, la partie plane 111 est utile pour la fixation du dispositif sur un moyen d'introduction ; cependant le dispositif pourrait être fixé par une génératrice d'un cylindre non tronqué ou sur les arêtes de la génératrice du cylindre tronqué. A une première extrémité le cylindre est fermé par un fond plan 120 et il 15 est ouvert à son autre extrémité. Le fond 120 constitue le moyen de filtration du dispositif 100 sous la forme d'une membrane filtre. Comme il est visible sur la figure 1A, la membrane filtre 120 comporte une série d'ouvertures traversantes 121 de forme cylindrique de section circulaire de même diamètre. Le dispositif de capture 100 est prévu pour être placé dans la circulation 20 sanguine, l'ouverture étant orientée vers l'amont de la circulation de façon à ce que les biomarqueurs recherchés pénètrent dans le dispositif de capture et soient retenus par le filtre 120. Il importe que ces biomarqueurs ne s'échappent pas du dispositif de capture une fois qu'ils y sont entrés. Or dans certaines configurations, les simulations numériques ont montré qu'il pouvait 25 exister des boucles de remise en circulation à l'intérieur du dispositif et que les biomarqueurs pouvaient s'en échapper. Dans le cas du dispositif cylindrique illustré en figure 1, ce phénomène se produit lorsque le support 110 comporte les mêmes ouvertures 121 que le filtre 120. Dans le mode de réalisation préféré illustré en figure 1, la partie arrondie 112 du support ne comporte pas 30 d'ouverture et permet de garder un flux substantiellement laminaire lors de la traversée du dispositif par le flux sanguin. Les figures 2A, 213 et 2C illustrent d'autres modes de réalisation du dispositif de capture. En figures 2A et 2B, les dispositifs 101, 102 comportent un moyen de filtration qui prend la forme d'un paraboloïde de révolution, le support du moyen de filtration dans ce cas étant constitué par un moyen d'introduction tel qu'une languette. Le dispositif 101 comporte des ouvertures circulaires, le dispositif 102 comporte des ouvertures polygonales. Ces dispositifs peuvent être tronqués ou munis d'une base ou socle pour faciliter leur fixation sur un moyen d'introduction comme mentionné précédemment en référence à la figure 1. La figure 2C illustre un dispositif de capture 103 comportant un filtre plan 104 maintenu par un support 105 comprenant deux montants 105a, 105b reliés par une traverse 105e parallèle au plan du filtre 104. Les dimensions du dispositif sont adaptées à sa mise en oeuvre dans un vaisseau sanguin ; il ne doit pas perturber la circulation sanguine afin de ne 15 pas créer de risque de thrombose notamment. Dans le cas du dispositif 100 illustré en figure 1, les dimensions sont les suivantes : - Diamètre compris entre 50 j_tm et 1,7 mm, de préférence voisin de 200 pm, 20 - Longueur comprise entre 50 1.1m et 3 mm, de préférence voisine de 150 pm, - Diamètre des ouvertures compris entre 1 pm et 100 pm d'une façon générale pour les biomarquetus cellulaires cités précédemment et entre 1 pin et 25iim pour les CTCs ; de façon surprenante, et à titre 25 d'exemple non limitatif, on a trouvé que pour les cellules tumorales de lignées prostatiques PC3 de diamètre compris entre 12 pm et 25 pm, le dispositif de capture était très sensible au diamètre des ouvertures, le diamètre optimum étant dans ce cas voisin de 12 !lm ; Lorsque rouveiture prend la forme d'une fente, sa dimension 30 transversale est comprise entre 1 pin et 100 pm, de préférence comprise entre 1 gm et 25 p,m, de préférence voisine de 12 um, - 12 - Les ouvertures peuvent être de forme tronconique, le diamètre variant de 1 à 100 um environ pour les biomarqueurs cellulaires, de préférence d'environ 15 um à environ 8 um pour les CTCs, de façon à retenir les biomarqueurs cellulaires et plus particulièrement les CTCs à l'intérieur des ouvertures, - Epaisseur de la paroi du support et de la membrane filtre comprise entre 5 gin et 20 um, de préférence voisine de 9 um ; Dans le cas d'une membrane filtre plane et rectangulaire telle qu'illustrée en figure 2C, des dimensions caractéristiques des montants seront compris entre 50 um et 1,5 mm. Le dispositif de capture peut être réalisé à partir d'une résine photosensible travaillée par lithographie laser à 3 dimensions ou toute autre technique de lithographie adaptée aux dimensions du dispositif. En ce qui concerne la biocompatibilité, l'invention propose deux options : Soit la résine utilisée est biocompatible, Soit le dispositif une fois fabriqué est recouvert d'un film de biocompatibilité tel que le parylène ou en métal biocompatible tel que Au, Ti.... Le dispositif de capture de l'invention n'est pas limité par la description qui précède. Notamment : Le plan de troncage pourrait être angulairement décalé par rapport à l'axe X-X'. Le support pourrait présenter une autre forme que cylindrique, par exemple conique, sphérique, tronquée ou non tronquée par un plan, - Lorsque le support ne possède pas d'axe de révolution, la forme du support n'est pas limitée à l'utilisation de deux montants et d'une traverse, - La membrane filtre pourrait être placée selon une section du cylindre et non en constituer le fond, c'est-à-dire que le support 110 pourrait comporter une partie en aval du flux sanguin, - 13 - Le fond 120 du cylindre, formant la membrane filtre du dispositif 100, pourrait ne pas être plan, mais par exemple prendre la forme d'une calotte hémisphérique ou d'un cône. La figure 3A illustre un dispositif de prélèvement 300 comportant un dispositif de capture 100 fixé sur un moyen d'introduction, ici une languette 200, par la partie plane 111 du support 110, au voisinage de l'extrémité 201 de la languette. Il peut être fixé par soudure ou dépôt métallique ou utilisation d'une colle ou résine biocompatibles. La languette 200 est en Nitinol, qui est un alliage de Nickel et de Titane et qui a la propriété d'être biocompatible et flexible ce qui permet de faciliter son introduction dans le vaisseau sanguin. Dans le cas où elle serait constituée d'un autre matériau, non biocompatible, elle serait recouverte, à un stade de sa fabrication, d'un film de matériau biocompatible tel que le parylène. La largeur de la languette est comprise entre 300 lm et 1,5 mm, de préférence voisine de 900 pin, de façon à être compatible avec le diamètre interne des cathéters dans lesquels la languette peut être insérée. Dans le cas d'une languette en Nitinol, son épaisseur est comprise entre 50 um et 76 pin. Une fois découpée, elle fait quelques centimètres de longueur, par exemple 5 cm, mais la longueur effectivement introduite dans la circulation sanguine est limitée à I cm ou 2 cm. La figure 3B illustre un mode de réalisation dans lequel le support de la membrane 130 est constitué par la languette 200. La membrane filtre est fixée sur la languette 200 par un bord 131 de telle sorte à présenter une ouverture destinée à être orientée vers l'amont du flux sanguin. La membrane filtre est configurée de telle sorte à ne pas perturber le flux sanguin. Un risque associé au dispositif de prélèvement 300 est que le ou les dispositifs de capture 100 se détachent de la languette 200 et entrent dans la circulation sanguine, par exemple au moment de l'introduction ou du retrait du dispositif de prélèvement. A cet effet, tel qu'illustré en figure 4, la languette 200 comporte des premiers moyens de protection sous la forme de plots 210, fixés sur la languette 200 de part et d'autre d'un ou plusieurs dispositifs de - 14 - capture 100 dans le sens longitudinal. Les plots illustrés en figure 4 présentent une forme de "tonneau" à sommet arrondi, mais ils pourraient présenter une forme cylindrique, hémisphérique, tronconique.., pour autant qu'ils se présentent sous la forme d'un corps relativement massif à l'échelle du dispositif et de formes arrondies pour ne pas perturber la circulation sanguine ni blesser la paroi du vaisseau. Les plots 210 sont suffisamment proches du dispositif de capture 100 pour lui procurer une protection mais assez éloignés, par exemple séparés d'environ 1 mm, pour ne pas perturber le flux sanguin autour du dispositif de capture 100. Les plots 210 collés sur la languette peuvent être avantageusement constitués de résine et fabriqués avec le même procédé de fabrication que le dispositif de capture 100, sans que ceci soit limitatif Un autre avantage des plots 210 est qu'ils peuvent participer à la 15 fonction de centrage du dispositif de prélèvement dans le vaisseau et/ou dans un cathéter. Un autre risque associé au dispositif de prélèvement 300, compte tenu notamment du temps de capture de plusieurs minutes, est celui d'endommager la paroi du vaisseau dans lequel il est inséré. A cet effet l'invention propose 20 deux seconds moyens de protection : Les figures 5B et 5C illustrent une languette 200 munie d'une pièce terminale 220 prévue pour se fixer sur la languette, au voisinage de son extrémité ; cette partie terminale 220 forme deux arches 221, 222 réunies à une première extrémité commune 223, et dont les secondes 25 extrémités 224a, 224b sont libres ; cette pièce terminale 220 se fixe sur la languette 200 d'une part en réunissant l'extrémité commune 223 et l'extrémité 201 de la languette, d'autre part en fixant les secondes extrémités 224a, 224b sur des faces opposées de la languette ; ces arches 221, 222 prennent appui de façon non agressive 30 sur la paroi du vaisseau et le protègent ; elles protègent également de - 15 - l'arrachement le dispositif de capture 100 fixé sur la languette 200 entre les premières et secondes extrémités de ces arches ; La figure 6A illustre une languette 200 dont une lamelle 231, 232 est détachée de chacun des bords 202, 203 de la languette 200 et forme une arche, les extrémités 231a, 231b, 232a, 232b de ces lamelles restant attachées à la languette ; les lamelles 231, 232 s'étendent de part et d'autre du plan de la languette 200 de sorte que, comme dans le cas de la figure 5, ces arches protègent le vaisseau et centrent le dispositif de prélèvement 300 dans le vaisseau. Dans la variante de la 10 figure 6B, seules les extrémités aval 231a, 232a restent attachées aux bords 202, 203 de la languette 200; les lamelles 231, 232 sont légèrement vrillées de telle sorte que les extrémités amont 23 lb, 232b ont été détachées des bords de la languette 200 et sont fixées sur le plan de la languette et de part et d'autre. Bien entendu l'invention 15 concerne également la configuration symétrique, où seules les extrémités amont 23 lb, 232b des lamelles restent attachées aux bords de la languette et où ce sont les extrémités aval qui sont fixées sur le plan de la languette et de part et d'autre. L'invention n'est pas limitée par la description qui précède : 20 Le moyen d'introduction pourrait ne pas être plan et prendre une autre forme, par exemple celle d'un cylindre ou d'un fil, Le dispositif de prélèvement 300 pourrait comporter plusieurs dispositifs de capture, par exemple alignés longitudinalement ou en quinconce, de façon à ne pas trop perturber le flux sanguin ou 25 transversalement sur la languette 200, les dispositifs de capture pouvant être différents deux à deux notamment en termes de forme, de taille, de dimension et de taille des ouvertures. REVENDICATIONS1. Dispositif (100, 101, 102, 103) de capture in vivo de biomarqueurs cellulaires circulant dans un flux biologique animal ou humain, caractérisé en ce qu'il comporte un moyen de filtration (104, 120) prévu pour retenir lesdits biomarqueurs cellulaires, ledit moyen de filtration étant solidaire d'un support (105, 110). 2. Dispositif de capture de biomarqueurs cellulaires selon la revendication 1, caractérisé en ce que le moyen de filtration (104, 120) 10 comporte au moins une ouverture traversante (121) dont les dimensions sont adaptées pour retenir lesdits biomarqueurs. 3. Dispositif de capture de biomarqueurs cellulaires selon la revendication 2, caractérisé en ce que l'au moins une ouverture (121) est sensiblement circulaire ou sensiblement ovale ou sensiblement polygonale ou 15 prend la forme d'une fente. 4. Dispositif de capture de biomarqueurs cellulaires l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le moyen de filtration (104, 120) est plan. 5. Dispositif de capture de biomarqueurs cellulaires selon 20 l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il possède une symétrie de révolution autour d'un axe (X-X`). 6. Dispositif de capture de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que le support (110) prend la forme d'un cylindre creux, tronqué selon un plan parallèle à l'axe (X-X') du 25 cylindre, le moyen de filtration (120) fonuant le fond du cylindre tronqué. 7. Dispositif de capture de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le support (110) comporte au moins une ouverture traversante sensiblement circulaire ou sensiblement ovale ou sensiblement polygonale ou prend la forme d'une fente.- 17 8. Dispositif de capture de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il est réalisé en une résine photosensible. 9. Dispositif de capture de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il est réalisé en un matériau biocompatible ou en ce qu'il est recouvert d'un matériau biocompatible. 10. Dispositif de capture de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il est fonctionnalisé 10 à l'aide d'un composé anti-thrombotique. 11. Dispositif de prélèvement (300) de biomarqueurs cellulaires, caractérisé en ce qu'il comporte au moins un dispositif de capture (100, 101, 102, 103) de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications I à 10 fixé sur un moyen d'introduction (200) dudit dispositif 15 de capture dans un vaisseau de flux biologique. 12. Dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires selon la revendication 11, caractérisé en ce que le moyen d'introduction (200) dudit dispositif de capture dans la circulation sanguine forme le support du moyen de filtration (130). 20 13. Dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications 11 ou 12, caractérisé en ce que le moyen d'introduction dudit dispositif de capture dans la circulation sanguine comporte une languette (200). 14. Dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires 25 selon la revendication 13, caractérisé en ce que la languette comporte un alliage métallique ou un matériau composite à base de résine et de fibres. 15. Dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications 11 à 14, caractérisé en ce que le moyen d'introduction (200) comporte un premier moyen de protection du moyen de 30 filtration, prévu pour éviter le détachement du moyen de filtration.- 18 - 16. Dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires selon la revendication 15, caractérisé en ce que le premier moyen de protection comporte au moins un plot (210) fixé sur le moyen d'introduction (200). 17. Dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications 11 à 16, caractérisé en ce que le moyen d'introduction (200) comporte un second moyen de protection prévu pour protéger un vaisseau sanguin dans lequel il est amené à être introduit. 18. Dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications 15 ou 17, caractérisé en ce qu'il comporte une pièce terminale (220) fixée à l'extrémité (201) du moyen d'introduction (200) et formant un premier et/ou un second moyen de protection. 19. Dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires selon la revendication 18, caractérisé en ce que la pièce terminale (220) 15 comporte au moins une arche (221, 222). 20. Dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications 15 ou 17, caractérisé en ce que le moyen d'introduction (200) comporte au voisinage de son extrémité (201) au moins une arche longitudinale (231, 232) formant un premier et/ou un second moyen 20 de protection. 21. Dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications 11 à 20, caractérisé en ce qu'il est recouvert d'un matériau biocompatible. 22. Dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires 25 selon l'une des revendications 11 à 21, caractérisé en ce qu'il est fonctionnalisé à l'aide d'un composé anti-thrombotique. 23. Dispositif de prélèvement de biomarqueurs cellulaires selon l'une des revendications 11 à 22, caractérisé en ce qu'il comporte un moyen de préhension de façon à le rendre apte à être utilisé dans un cathéter.- 19 - 24. Ensemble de prélèvement de biomarqueurs cellulaires comprenant un cathéter et un dispositif de prélèvement selon l'une des revendications 11 à 23 ledit dispositif étant inséré dans le cathéter.