Brevet FR3018523A1 — publié le 20150918

METHODE DE TRACABILITE GEOGRAPHIQUE DES BOIS DE CHENE La présente invention est relative au contrôle de l'origine géographique des bois de chêne. L'origine du bois de chêne a une influence importante sur ses qualités technologiques et son adaptation à différentes utilisations. Par exemple, le bois de chêne utilisé en tonnellerie pour le façonnage des barriques exerce une influence importante sur les qualités organoleptiques des vins. Différentes études ont montré un rôle prépondérant de l'origine géographique des bois sur leurs caractéristiques physico-chimiques, responsables de cette influence. Depuis de nombreuses années, les acteurs professionnels de la filière tonnellerie (gestionnaires forestiers, mérandiers, tonneliers, viticulteurs et négociants-éleveurs) cherchent des outils fiables pour mieux caractériser les bois de chênes utilisés pour la maturation des vins et des alcools. Ils attachent une attention particulière aux notions de certification et de traçabilité, en particulier au niveau de l'origine géographique (notion de terroir). Cette origine affecte en effet la qualité et l'image de leurs produits finis. Les outils de certification et de traçabilité disponibles sont soit inexistants, soit d'une fiabilité médiocre, soit d'une utilisation difficile et ne répondant pas aux exigences de l'industrie (coût trop élevé et faible débit d'analyse). Il en est de même pour caractériser du matériel forestier de reproduction des chênes (e.g., graines, plants, arbres adultes, racines) pour des besoins de traçabilité et de caractérisation. Il est donc souhaitable de disposer de tests permettant de contrôler la conformité (ou l'origine) géographique des bois de chêne. De même, il est souhaitable de disposer de tests permettant la caractérisation et la traçabilité du matériel forestier de reproductions (graines, plants, arbres adultes, racines, etc.) Des études antérieures ont permis d'effectuer une analyse génétique de l'ADN chloroplastique des chênes blancs répartis sur l'ensemble du continent européen, et de mettre en évidence une structuration géographique très importante des différents variants étudiés (PETIT R.1 et al. Forest Ecology and Management 156, 5-26, 2002 ; DUMOLIN-LAPEGUE S et al. Genetics 146, 1475-1487, 1997), et notamment une forte différenciation entre les variants issus d'Europe de l'Est (Roumanie, Pologne, Ukraine) et ceux issus d'autres localisations. Ces observations ont permis depuis d'envisager l'utilisation des techniques de typage génétique basées sur la détection de polymorphismes de l'ADN chloroplastique, pour contrôler la provenance géographique de lots de bois. Toutefois, les analyses effectuées dans le cadre des études précédemment citées ont été mises en oeuvre à partir de matériel végétal (glands, feuilles, ou bourgeons), recueilli et conservé en vue de ces analyses, dans des conditions permettant d'éviter la dégradation de l'ADN. En revanche, dans le cas de bois destiné à être utilisé comme matière première, les conditions de récolte, de traitement et de stockage ne sont pas conçues pour permettre la conservation de l'ADN. Il a ainsi été observé sur des échantillons de bois que l'ADN chloroplastique est généralement fortement dégradé et en faible quantité. DUMOLIN-LAPÈGUE et al. (Mol. Ecol., 8, 2137-2140, 1999) ont montré qu'il était possible, moyennant une adaptation des protocoles utilisés précédemment, d'extraire et d'amplifier de l'ADN chloroplastique de bois de chêne, et de détecter des polymorphismes localisés dans une région non-codante de l'ADN chloroplastique localisée dans l'espaceur intergénique trnD-trnT (DT). Cependant, aucune association de ces polymorphismes avec l'origine géographique des bois analysés n'est rapportée dans cette publication. Le génome chloroplastique est accessible sur la base de données EVOLTREE disponible à l'adresse suivante : hups://w3.pierroton.inra.fr/QuercusPortal/index.php?p=GENOMIC_SEQ. Lors de travaux précédents, l'un des Inventeurs a identifié une combinaison de marqueurs polymorphes détectables sur de l'ADN chloroplastique extrait à partir d'échantillons de bois de chêne, permettant de différencier 5 haplotypes de chênes trouvés en France, et également de les différencier des haplotypes trouvés en Europe de l'Est (Demande de Brevet FR 02 10037). L'identification de l'haplotype de l'arbre dont est issu un échantillon de bois de chêne s'effectue, selon la Demande FR 02 10037, en distinguant les marqueurs polymorphes (allèles) par détermination de la taille des produits d'amplification (PCR suivie d'une électrophorèse), ou par détermination de la taille des fragments de digestion desdits produits d'amplification par une endonucléase de restriction appropriée (PCR-RFLP). Or, ces techniques sont difficilement applicables en routine dans un contexte industriel (lenteur de la mise en oeuvre de ces techniques, coût élevé, quantité limitée d'échantillons analysées simultanément, fiabilité). Les Inventeurs ont entrepris de rechercher des polymorphismes détectables sur de l'ADN chloroplastique extrait à partir d'échantillons de bois sec provenant de chênes blancs européens, et pouvant être corrélés à l'origine géographique de ces échantillons. Les Inventeurs ont sélectionné 35 marqueurs génétiques chloroplastiques correspondant tous à des SNP (Single Nucleotide Polymorphism ; mutations ponctuelles de type substitution) qui permettent d'identifier 15 variants chloroplastiques ou haplotypes (I à XV) ayant chacun une distribution géographique différente en Europe. Pour chaque marqueur sélectionné est indiqué ci-dessous le variant allélique présent dans chacun des 15 haplotypes qui ont été caractérisés. Chaque haplotype (identifié de I à XV) est caractérisé par une combinaison unique des variant alléliques aux 35 marqueurs (voir Figure 1). Caractéristiques des 35 marqueurs sélectionnés : - 5927 : différencie l'haplotype I de tous les autres haplotypes ; - 18495 : différencie les haplotypes I et H de tous les autres haplotypes. Il est 10 redondant avec le marqueur 50950 ; - 50950 : différencie les haplotypes I et II de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec le marqueur 18495 ; - 57422 : différencie les haplotypes II, III et IV de tous les autres haplotypes ; - 47098 : différencie les haplotypes II et III de tous les autres haplotypes ; 15 130177 : différencie l'haplotype IV de tous les autres haplotypes ; - 20072: différencie l'haplotype III de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec les marqueurs 21360 et 31657 - 21360 : différencie l'haplotype III de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec les marqueurs 20072 et 31657 ; 20 - 31657: différencie l'haplotype III de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec les marqueurs 20072 et 21360 ; - 67616: différencie les haplotypes III et IV de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec les marqueurs 21075 et 135449 ; - 21075 : différencie les haplotypes III et IV de tous les autres haplotypes. Il est 25 redondant avec les marqueurs 67616 et 135449 ; - 135449: différencie les haplotypes III et IV de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec les marqueurs 67616 et 21075 ; - 15195 : différencie l'haplotype XI de tous les autres haplotypes ; - 43667: différencie les haplotypes X et XI de tous les autres haplotypes. Il est 30 redondant avec le marqueur 78219 ; - 78219: différencie les haplotypes X et XI de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec le marqueur 43667 ; - 64288 : différencie les haplotypes IX, X, XI, XII et XIII de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec les marqueurs 35533, 40682, 76333, 87407, 64744 et 46545 ; - 35533 : différencie les haplotypes IX, X, XI, XII et XIII de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec les marqueurs 64288, 40682, 76333, 87407, 64744 et 46545 ; - 40682: différencie les haplotypes IX, X, XI, XII et XIII de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec les marqueurs 64288, 35533, 76333, 87407, 64744 et 46545 ; - 76333 : différencie les haplotypes IX, X, XI, XII et XIII de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec les marqueurs 64288, 35533, 40682, 87407, 64744 et 46545 ; - 87407: différencie les haplotypes IX, X, XI, XII et XIII de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 64744 et 46545 ; - 64744 : différencie les haplotypes IX, X, XI, XII et XIII de tous les autres 10 haplotypes. Il est redondant avec les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407 et 46545 ; - 46545 : différencie les haplotypes IX, X, XI, XII et XIII de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407 et 64744 ; - 152905: différencie les haplotypes I, IX, X, XI, XII et XIII de tous les autres haplotypes ; 15 - 122963 : différencie l'haplotype IX de tous les autres haplotypes ; - 67893 : différencie les haplotypes XII et XIII de tous les autres haplotypes ; - 134325 : différencie l'haplotype XII de tous les autres haplotypes ; - 10338 : différencie les haplotypes V, VI, VII et VIII de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec le marqueur 11649 ; 20 - 11649 : différencie les haplotypes V, VI, VII et VIII de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec le marqueur 10338 ; - 14911: différencie les haplotypes VII et VIII de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec le marqueur 35125 ; - 35125: différencie les haplotypes VII et VIII de tous les autres haplotypes. Il est 25 redondant avec le marqueur 14911 ; - 117423: différencie l'haplotype VIII de tous les autres haplotypes ; - 9665 : différencie l'haplotype VI de tous les autres haplotypes ; - 37175 : différencie l'haplotype XIV de tous les autres haplotypes. Il est redondant avec le marqueur 85563 ; 30 - 85563 : différencie l'haplotype XIV de tous les autres haplotypes. II est redondant avec le marqueur 37175 ; - OA : différencie l'haplotype XV de tous les autres haplotypes. L'inclusion de marqueurs dits redondants permet d'identifier les mêmes haplotypes que d'autres marqueurs ce qui permet d'augmenter la fiabilité des analyses et/ou de confirmer les analyses. Par exemple, les marqueurs dits redondants peuvent permettre de repérer des résultats anormaux en cas de contamination ou de mélange d'échantillons. Ces marqueurs (SNP) offrent l'avantage de pouvoir être utilisés sur de l'ADN dégradé et en faible quantité car les régions amplifiées sont de petite taille (environ 80 à 100 paires de bases) et l'ADN chloroplastique est présent en de nombreuses copies par cellule. De plus, du fait du mode d'hérédité maternelle de l'ADN chloroplastique, la structuration géographique pour ce type de polymorphismes est particulièrement forte. La détection de ces SNP peut être effectuée par spectrométrie de masse, qui est une technique applicable dans un contexte industriel. L'utilisation de ces marqueurs permet de mettre en oeuvre un test de conformité de l'origine géographique des bois de chênes européens. La présente invention a en conséquence pour objet l'utilisation d'une combinaison de marqueurs choisis dans le groupe constitué par : - un marqueur polymorphique dénommé 5927 constitué par une substitution A/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 1, - un marqueur polymorphique dénommé 18495 constitué par une substitution T/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 2, - un marqueur polymorphique dénommé 50950 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 3, - un marqueur polymorphique dénommé 57422 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 4, - un marqueur polymorphique dénommé 47098 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 5, - un marqueur polymorphique dénommé 130177 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 6, - un marqueur polymorphique dénommé 20072 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO 7, - un marqueur polymorphique dénommé 21360 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 8, - un marqueur polymorphique dénommé 31657 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 9, - un marqueur polymorphique dénommé 67616 constitué par une substitution T/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 10, - un marqueur polymorphique dénommé 21075 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 11, un marqueur polymorphique dénommé 135449 constitué par une substitution TIC localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 12, - un marqueur polymorphique dénommé 15195 constitué par une substitution AIT localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 13, - un marqueur polymorphique dénommé 43667 constitué par une substitution T/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 14, - un marqueur polymorphique dénommé 78219 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 15, - un marqueur polymorphique dénommé 64288 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 16, - un marqueur polymorphique dénommé 35533 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 17, - un marqueur polymorphique dénommé 40682 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 18, - un marqueur polymorphique dénommé 76333 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 19, un marqueur polymorphique dénommé 87407 constitué par une substitution A/C 20 localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 20, - un marqueur polymorphique dénommé 64744 constitué par une substitution T/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 21, - un marqueur polymorphique dénommé 46545 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 22, 25 un marqueur polymorphique dénommé 152905 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 23, - un marqueur polymorphique dénommé 122963 constitué par une substitution A/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 24, - un marqueur polymorphique dénommé 67893 constitué par une substitution T/C 30 localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 25, - un marqueur polymorphique dénommé 134325 constitué par une substitution A/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 26, un marqueur polymorphique dénommé 10338 constitué par une substitution T/G localisée en position 44 de la séquence SEQ ID NO : 27, - un marqueur polymorphique dénommé 11649 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 28, - un marqueur polymorphique dénommé 14911 constitué par une substitution TIC localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 29, - un marqueur polymorphique dénommé 35125 constitué par une substitution C/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 30, - un marqueur polymorphique dénommé 117423 constitué par une substitution TIC localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 31, - un marqueur polymorphique dénommé 9665 constitué par une substitution TIC localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 32, un marqueur polymorphique dénommé 37175 constitué par une substitution T/G localisée en position 50 de la séquence SEQ ID NO : 33, un marqueur polymorphique dénommé 85563 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 34, et - un marqueur polymorphique dénommé OA constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 35, pour déterminer, à partir d'un échantillon de bois de chêne, l'haplotype de l'arbre dont est issu ledit bois. L'échantillon de bois de chêne peut être un échantillon de bois frais, c'est-à-dire du matériel végétal (e.g., feuille, bourgeon, gland, cambium, grume) ou un échantillon de bois sec (e.g., douelle), de préférence un échantillon de bois sec. Le bois de chêne est de préférence du bois de chêne blanc européen. Le terme « combinaison de marqueurs » désigne au moins 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33 ou 34 25 marqueurs ou les 35 marqueurs selon la présente invention. Une combinaison préférée de marqueurs selon la présente invention comprend les marqueurs ou est constituée des marqueurs : - 5927, - 18495 ou 50950, 30 - 57422, - 47098, - 130177; - 20072 ou 21360 ou 31657, - 67616 ou 21075 ou 135449, 15195, 43667 ou 78219, 64288 ou 35533 ou 40682 ou 76333 ou 87407 ou 64744 ou 46545, 152905, 122963, 67893, 134325, 10338 ou 11649, 14911 ou 35125, 117423, - 9665, 37175 ou 85563, 85563 ou 37175, et OA. La combinaison de marqueurs selon la présente invention peut être choisie en fonction de l'haplotype à différencier. Avantageusement, pour différencier l'haplotype I de tous les autres haplotypes on utilise le marqueur 5927 et au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 18495, 50950 et 152905. Pour différencier l'haplotype II de tous les autres haplotypes on utilise les marqueurs 18495 et/ou 50950 et les marqueurs 57422 et/ou 47098. Pour différencier l'haplotype III de tous les autres haplotypes on utilise au moins deux marqueurs choisis dans le groupe constitué par les marqueurs 57422, 47098, 20072, 21360, 31657, 67616, 21075 et 135449, et comprenant au moins le marqueur 20072, 21360 ou 31657. Pour différencier l'haplotype IV de tous les autres haplotypes on utilise le marqueur 130177 et au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 57422, 67616, 21075 et 135449. Pour différencier l'haplotype V de tous les autres haplotypes on utilise les marqueurs 10338 et/ou 11649, les marqueurs 14911 et/ou 35125 et le marqueur 9665. Pour différencier l'haplotype VI de tous les autres haplotypes on utilise le marqueur 9665 et au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 10338 et 11649. Pour différencier les haplotypes VII ou VIII de tous les autres haplotypes on utilise le marqueur 117423 et le marqueur 14911 ou 35125, et éventuellement le marqueur 10338 ou 11649. Pour différencier l'haplotype IX de tous les autres haplotypes on utilise le marqueur 122963 et au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905. Pour différencier l'haplotype X de tous les autres haplotypes on utilise le marqueur 43667 ou 78219 et le marqueur 15195, et éventuellement au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905. Pour différencier l'haplotype XI de tous les autres haplotypes on utilise le marqueur 15195 et au moins marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 43667, 78219, 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905. Pour différencier l'haplotype XII de tous les autres haplotypes on utilise le marqueur 134325 et au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545, 152905 et 67893. Pour différencier l'haplotype XIII de tous les autres haplotypes on utilise les marqueurs 67893 et 134325 et éventuellement au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905. Pour différencier l'haplotype XIV de tous les autres haplotypes on utilise les marqueurs 37175 et 85563. Pour différencier Phaplotype XV de tous les autres haplotypes on utilise le marqueur OA et au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 5927, 18495, 50950, 57422, 67616, 21075, 135449, 15195, 43667, 78219, 64288, 46545, 152905, 122963, 67893, 134325, 10338, 11649, 85563. 47098, 130177, 20072, 21360, 31657, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 9665, 37175 et 14911, 35125, 117423, La présente invention a également pour objet un procédé pour déterminer l'haplotype de l'arbre dont est issu un échantillon de bois de chêne, caractérisé en ce qu'il comprend l'amplification, à partir de l'ADN chloroplastique extrait dudit échantillon, de fragments comprenant des marqueurs polymorphes selon la présente invention tels que définis ci-dessus, de préférence les 35 marqueurs polymorphes tels que définis ci-dessus, et la détermination de la forme allélique de chacun desdits marqueurs présente dans le produit d'amplification. Cette détermination s'effectue par des méthodes classiques, connues en elles-mêmes de l'homme du métier. La distinction entre les allèles peut notamment s'effectuer par détection des marqueurs (SNP) par spectrométrie de masse. D'autres méthodes permettant de détecter des SNP ont été décrites dans l'art antérieur, notamment par Perkel J. (Nature Methods, 5, 447-453, 2008). En particulier, pour caractériser les allèles de chaque marqueur SNP, il peut être nécessaire d'amplifier la région génomique correspondante. Pour cela, il peut être utilisé des amorces PCR dont les séquences nucléotidiques peuvent être obtenues à partir des séquences des marqueurs à amplifier. Avantageusement on peut utiliser les amorces PCR représentées à la Figure 3. Les fragments amplifiés par PCR peuvent être ensuite analysés sur spectromètre de masse grâce à des amorces d'extension spécifiques distinguant les deux variants connus au site a. 0 polymorphe. Les séquences nucléotidiques de ces amorces d'extension peuvent également être obtenues à partir des séquences des marqueurs à amplifier. Avantageusement on peut utiliser les amorces d'extension représentées à la Figure 3. Les méthodes d'extraction de l'ADN chloroplastique d'un échantillon de bois sont 5 bien connues de l'homme du métier (voir par exemple PETIT Ri et al. Forest Ecology and Management 156, 5-26, 2002 ; Csaikl UM et al. Forest Ecology and Management 156, 211222, 2002; Demande de Brevet FR 02 10037). Un mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 5927 et au moins un fragment 10 d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 18495, 50950 et 152905, pour déterminer l'haplotype I, Un autre mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant les marqueurs 18495 ou 50950 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant les marqueurs 57422 ou 47098, pour 15 déterminer l'haplotype II. Un autre mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend l'amplification de fragments d'ADN chloroplastique comprenant les marqueurs 57422, 47098, 20072, 21360, 31657, 67616, 21075 et/ou 135449, à condition qu'il comprend au moins l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant les marqueurs 20072, 21360 20 ou 31657, pour déterminer l'haplotype III. Un autre mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 130177 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 57422, 67616, 21075 et 135449, pour déterminer l'haplotype IV. 25 Un autre mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 10338 ou 11649, un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 14911 ou 35125 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 9665, pour déterminer l'haplotype V. Un autre mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend 30 l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 9665 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 10338 ou 11649, pour déterminer l'haplotype VI. Un autre mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 117423 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 14911 ou 35125 et éventuellement un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 10338 ou 11649, pour déterminer l'haplotype VII ou VIII. Un autre mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend 5 l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 122963 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905, pour déterminer l'haplotype IX. Un autre mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend 10 l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 43667 ou 78219 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 15195 et éventuellement un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905, pour déterminer l'haplotype X. 15 Un autre mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 15195 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 43667, 78219, 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905, pour déterminer l'haplotype XI. 20 Un autre mode de mise en oeuvre du procédé confon le à l'invention comprend l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 134325 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545, 152905 et 67893, pour déterminer l'haplotype XII. 25 Un autre mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 67893 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 134325 et éventuellement un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905, pour déterminer 30 l'haplotype XIII. Un autre mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 37175 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 85563, pour déterminer l'haplotype XIV. Un autre mode de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention comprend l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur OA et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant 5927, 18495, 50950, 57422, 47098, 130177, 20072, 21360, 31657, 67616, 21075, 135449, 15195, 43667, 78219, 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545, 152905, 122963, 67893, 134325, 10338, 11649, 14911, 35125, 117423, 9665, 37175 et 85563, pour déterminer l'haplotype XV. La présente invention a également pour objet des combinaisons d'amorces d'amplification permettant la mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention. Ces amorces d'amplification peuvent être obtenues à partir des séquences encadrant les 10 marqueurs à amplifier. En particulier : des amorces Convenant pour l'amplification du marqueur 5927 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 1, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 36 et 37 ; 15 - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 18495 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 2, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 54 et 55 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 50950 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 3, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ 20 ID NO : 90 et 91 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 57422 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 4, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 93 et 94 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 47098 peuvent être 25 obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 5, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO 87 et 88 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 130177 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 6, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO: 126 et 127; 30 - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 20072 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 7, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 57 et 58 ; des amorces convenant pour obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: ID NO : 63 et 64 ; - des amorces convenant pour 5 obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: ID NO: 66 et 67; - des amorces convenant pour obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: ID NO : 102 et 103 ; 10 des amorces convenant pour obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: ID NO : 60 et 61 ; - des amorces convenant pour I obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 15 ID NO : 132 et 133 ; - des amorces convenant pour obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: ID NO : 51 et 52; - des amorces convenant pour 20 obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: ID NO : 81 et 82; - des amorces convenant pour obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: ID NO: 111 et 112; 25 des amorces convenant pour obtenues à. partir du fragment SEQ ID NO: ID NO : 96 et 97 ; - des amorces convenant pour obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 30 ID NO : 72 et 73 ; - des amorces convenant pour obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: ID NO : 78 et 79 ; l'amplification du marqueur 21360 peuvent être 8, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ l'amplification du marqueur 31657 peuvent être 9, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ l'amplification du marqueur 67616 peuvent être 10, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ l'amplification du marqueur 21075 peuvent être 11, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ 'amplification du marqueur 135449 peuvent être 12, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ l'amplification du marqueur 15195 peuvent être 13, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ l'amplification du marqueur 43667 peuvent être 14, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ l'amplification du marqueur 78219 peuvent être 15, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ l'amplification du marqueur 64288 peuvent être 16, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ l'amplification du marqueur 35533 peuvent être 17, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ l'amplification du marqueur 40682 peuvent être 18, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 76333 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 19, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 108 et 109 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 87407 peuvent être 5 obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 20, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO: 117 et 118; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 64744 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 21, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 99 et 100 ; 10 - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 46545 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 22, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 84 et 85 ; des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 152905 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 23, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ 15 ID NO : 135 et 136 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 122963 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 24, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 123 et 124 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 67893 peuvent être 20 obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 25, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 105 et 106 ; des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 134325 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 26, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO :129 et 130; 25 des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 10338 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 27, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 42 et 43 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 11649 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 28, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ 30 ID NO : 45 et 46 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 14911 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 29, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 48 et 49 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 35125 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 30, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 69 et 70 ; des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 117423 peuvent être 5 obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 31, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 120 et 121 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 9665 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 32, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 39 et 40 ; 10 - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 37175 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 33, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 75 et 76 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur 85563 peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 34, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ 15 ID NO : 114 et 115 ; - des amorces convenant pour l'amplification du marqueur OA peuvent être obtenues à partir du fragment SEQ ID NO: 35, telles que la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 138 et 139. Avantageusement, les amorces sélectionnées pour former une combinaison d'amorces, 20 utilisable pour la mise en oeuvre du procédé selon la présente invention, sont choisies dans le groupe de paires d'amorces constitué par : la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 36 et 37, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 54 et 55, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 90 et 91, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO 93 et 94, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 87 et 88, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 25 126 et 127, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 57 et 58, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 63 et 64, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 66 et 67, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 102 et 103, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 60 et 61, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 132 et 133, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 51 et 52, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 81 et 82, la 30 paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 111 et 112, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 96 et 97, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 72 et 73, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 78 et 79, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 108 et 109, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 117 et 118, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 99 et 100, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 84 et 85, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 135 et 136, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 123 et 124, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 105 et 106, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 129 et 130, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 42 et 43, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 45 et 46, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 48 et 49, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 69 et 70, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 120 et 121, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 39 et 40, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 75 et 76, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 114 et 115, et la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 138 et 139. Il est ainsi possible de tester la conformité géographique (i.e., du type chloroplastique) d'un échantillon de bois de chêne avec celle annoncée, par consultation des informations disponibles sur la répartition des différents haplotypes de chênes européens, et le cas échéant en complétant ces informations par des analyses complémentaires de détermination des haplotypes présents dans la région, forêt ou parcelle d'où est supposé provenir le lot de bois à tester. Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions non-limitatives, qui ressortiront des exemples non limitatifs de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention, ainsi qu'aux figures annexées : Figure 1 : tableau indiquant les 15 haplotypes détectés en utilisant différentes combinaisons alléliques (SNP) parmi les 35 marqueurs selon l'invention. A chacun des haplotypes I à XV correspond une combinaison spécifique d'allèles parmi les marqueurs. Figure 2 : tableau représentant les séquences nucléotidiques des 35 marqueurs. Pour chaque marqueur, la séquence entourant le SNP est donnée. Le SNP est identifié par des crochets [X/X]. Les deux allèles possibles pour chaque SNP sont indiqués entre ces crochets. Les séquences d'amorces PCR sont indiquées en gras de part et d'autre du SNP et la séquence d'une amorce d'extension est soulignée (voir Figure 3). Figure 3 : tableau représentant les séquences des amorces d'amplification par PCR et d'extension pour les 35 marqueurs selon l'invention. EXEMPLE 1 DÉTERMINATION DE L'HAPLOTYPE D'ÉCHANTILLONS DE BOIS SEC OU FRAIS Méthodes générales Les analyses sont effectuées en laboratoire stérile, en prenant les précautions usuelles pour éviter toute contamination par de l'ADN étranger. A réception, les échantillons sont dépoussiérés, chaque échantillon est stocké dans un sachet unique en papier ou en plastique, éventuellement en présence d'un agent dessiccateur (par exemple gel de silice) pour finir le séchage, et conservé à température ambiante jusqu'à l'extraction et l'analyse de l'ADN. Extraction de l'ADN L'extraction d'ADN chloroplastique est réalisée à l'aide du kit DNEASY Plant de QIAGEN, en suivant le protocole du fabricant, à l'exception de l'ajout de polyvinylpyrrolidone (PVP) dans le tampon de lyse. Les ADN extraits sont stockés à une température de -20°C. Purification de l'ADN Les ADN sont systématiquement purifiés à l'aide du kit PCR One Step Inhibitor Removal Kit de Zymo Research. Amplification de l'ADN Les 35 marqueurs SNP sont amplifiés simultanément à l'aide de la technique iPLEX Gold de Sequenom, en suivant le protocole du fabricant. Les amorces de PCR et d'extension sont décrites à la Figure 3. Génotypage des 35 marqueurs SNP Les profils de chaque individu pour chaque marqueur sont interprétés à l'aide du logiciel TYPER 4.0 de Sequenom afin de générer un fichier de génotypes, sur le même modèle que celui présenté à la Figure I. Puis, pour chaque échantillon, le profil génétique des 35 marqueurs est comparé avec les profils présentés à la Figure 1 de référence, afin de déterminer l'haplotype correspondant à l'échantillon. EXEMPLE 2 : TEST DE CONFORMITÉ D'UN LOT DE BOIS AVEC UNE ORIGINE GÉOGRAPHIQUE ANNONCEE On teste l'hypothèse nulle H, = le lot de bois provient bien de l'origine géographique annoncée. Le nombre total d'échantillons de bois testés dans le lot est appelé N. Pour chaque haplotype i identifié dans le lot, on note p(i) sa fréquence dans la région annoncée comme correspondant à l'origine géographique du lot (pays, région, forêt, parcelle de forêt...). Si p(i) 0,05 (l'haplotype est relativement fréquent dans la région annoncée), on considère que la probabilité de rencontrer l'haplotype i dans l'échantillon est suffisamment élevée pour que sa détection ne permette pas de mettre en cause l'origine du lot. Pour évaluer la conformité du lot de bois avec l'origine annoncée, on calcule la probabilité de détecter simultanément les haplotypes rares (p(i) REVENDICATIONS1. Utilisation d'une combinaison de marqueurs choisis dans le groupe constitué par : - un marqueur polymorphique dénommé 5927 constitué par une substitution A/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : I, - un marqueur polymorphique dénommé 18495 constitué par une substitution T/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 2, un marqueur polymorphique dénommé 50950 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 3, - un marqueur polymorphique dénommé 57422 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 4, 10 un marqueur polymorphique dénommé 47098 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 5, - un marqueur polymorphique dénommé 130177 constitué par une substitution AIG localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 6, un marqueur polymorphique dénommé 20072 constitué par une substitution T/G 15 localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 7, - un marqueur polymorphique dénommé 21360 constitué par une substitution AIG localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 8, - un marqueur polymorphique dénommé 31657 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 9, 20 - un marqueur polymorphique dénommé 67616 constitué par une substitution TIC localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 10, - un marqueur polymorphique dénommé 21075 constitué par une substitution AIG localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 11, - un marqueur polymorphique dénommé 135449 constitué par une substitution T/C 25 localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 12, - un marqueur polymorphique dénommé 15195 constitué par une substitution AIT localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 13, - un marqueur polymorphique dénommé 43667 constitué par une substitution T/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 14, 30 - un marqueur polymorphique dénommé 78219 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 15, un marqueur polymorphique dénommé 64288 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 16,- un marqueur polymorphique dénommé 35533 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 17, - un marqueur polyrnorphique dénommé 40682 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 18, - un marqueur polymorphique dénommé 76333 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 19, - un marqueur polymorphique dénommé 87407 constitué par une substitution A/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 20, - un marqueur polymorphique dénommé 64744 constitué par une substitution TIC localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 21, - un marqueur polymorphique dénommé 46545 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 22, - un marqueur polymorphique dénommé 152905 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 23, - un marqueur polymorphique dénommé 122963 constitué par une substitution A/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 24, - un marqueur polymorphique dénommé 67893 constitué par une substitution T/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 25, un marqueur polymorphique dénommé 134325 constitué par une substitution A/C 20 localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 26, - un marqueur polymorphique dénommé 10338 constitué par une substitution T/G localisée en position 44 de la séquence SEQ ID NO : 27, - un marqueur polymorphique dénommé 11649 constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 28, 25 - un marqueur polymorphique dénommé 14911 constitué par une substitution T/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 29, - un marqueur polymorphique dénommé 35125 constitué par une substitution C/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 30, - un marqueur polymorphique dénommé 117423 constitué par une substitution T/C 30 localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 31, - un marqueur polymorphique dénommé 9665 constitué par une substitution T/C localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 32, - un marqueur polymorphique dénommé 37175 constitué par une substitution T/G localisée en position 50 de la séquence SEQ ID NO : 33,- un marqueur polymorphique dénommé 85563 constitué par une substitution T/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 34, et un marqueur polymorphique dénommé OA constitué par une substitution A/G localisée en position 51 de la séquence SEQ ID NO : 35, pour déterminer, à partir d'un échantillon de bois de chêne, l'haplotype de l'arbre dont est issu ledit bois. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que la combinaison de marqueurs comprend : - le marqueur 5927 et au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les 10 marqueurs 18495, 50950 et 152905, - les marqueurs 18495 et/ou 50950 et les marqueurs 57422 et/ou 47098, - au moins deux marqueurs choisis dans le groupe constitué par les marqueurs 57422, 47098, 20072, 21360, 31657, 67616, 21075 et 135449, et comprenant au moins le marqueur 20072, 21360 ou 31657, 15 - le marqueur 130177 et au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 57422, 67616, 21075 et 135449, - les marqueurs 10338 et/ou 11649, les marqueurs 14911 et/ou 35125 et le marqueur 9665, - le marqueur 9665 et au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les 20 marqueurs 10338 et 11649, - le marqueur 117423 et le marqueur 14911 ou 35125, et éventuellement le marqueur 10338 ou 11649, - le marqueur 122963 et au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905, 25 - le marqueur 43667 ou 78219 et le marqueur 15195, et éventuellement au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905, - le marqueur 15195 et au moins marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 43667, 78219, 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905, 30 - le marqueur 134325 et au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545, 152905 et 67893, - les marqueurs 67893 et 134325 et éventuellement au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905,- les marqueurs 37175 et 85563, - le marqueur OA et au moins un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 5927, 18495, 50950, 57422, 47098, 130177, 20072, 21360, 31657, 67616, 21075, 135449, 15195, 43667, 78219, 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545, 152905, 122963, 67893, 134325, 10338, 11649, 14911, 35125, 117423, 9665, 37175 et 85563. 3. Procédé pour déterminer l'haplotype de l'arbre dont est issu un échantillon de bois de chêne, caractérisé en ce qu'il comprend l'amplification, à partir de l'ADN chloroplastique extrait dudit échantillon, de fragments comprenant des marqueurs polymorphes tels que définis à la revendication 1, et la détermination de la forme allélique de chacun desdits marqueurs présente dans le produit d'amplification. 4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que les fragments d'ADN comprennent les marqueurs 5927, 18495, 50950, 57422, 47098, 130177, 20072, 21360, 31657, 67616, 21075, 135449, 15195, 43667, 78219, 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545, 152905, 122963, 67893, 134325, 10338, 11649, 14911, 35125, 117423, 9665, 37175 et 85563 et OA tels que définis à la revendication 1. 5. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'il comprend : - l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 5927 et au moins un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 18495, 50950 et 152905, - l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant les marqueurs 18495 ou 50950 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant les marqueurs 57422 ou 47098, - l'amplification de fragments d'ADN chloroplastique comprenant les marqueurs 57422, 47098, 20072, 21360, 31657, 67616, 21075 et/ou 135449, à condition qu'il comprenne 25 au moins l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant les marqueurs 20072, 21360 ou 31657, - l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 130177 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 57422, 67616, 21075 et 135449, 30 - l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 10338 ou 11649, un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 14911 ou 35125 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 9665,- l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 9665 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 10338 ou 11649, - l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 117423 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 14911 ou 35125 et 5 éventuellement un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 10338 ou 11649, - l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 122963 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905, - l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 10 43667 ou 78219 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 15195 et éventuellement un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905, - l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 15 15195 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe constitué par les marqueurs 43667, 78219, 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905, - l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 134325 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le groupe 20 constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545, 152905 et 67893, - l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 67893 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 134325 et éventuellement un fragment d'ADN chloroplastique comprenant un marqueur choisi dans le 25 groupe constitué par les marqueurs 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545 et 152905, - l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 37175 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur 85563, ou - l'amplification d'un fragment d'ADN chloroplastique comprenant le marqueur OA 30 et un fragment d'ADN chloroplastique comprenant 5927, 18495, 50950, 57422, 47098, 130177, 20072, 21360, 31657, 67616, 21075, 135449, 15195, 43667, 78219, 64288, 35533, 40682, 76333, 87407, 64744, 46545, 152905, 122963, 67893, 134325, 10338, 11649, 14911, 35125, 117423, 9665, 37175 et 85563. 6. Combinaison d'amorces pour la mise en oeuvre du procédé selon l'une quelconque des revendications 3 à 4, caractérisée en ce que les amorces sélectionnées pour former ladite combinaison d'amorces sont choisies dans le groupe de paires d'amorces constitué par : la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 36 et 37, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 54 et 55, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 90 et 91, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 93 et 94, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 87 et 88, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 126 et 127, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 57 et 58, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 63 et 64, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 66 et 67, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 102 et 103, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 60 et 61, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 132 et 133, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 51 et 52, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO 81 et 82, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 111 et 112, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 96 et 97, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 72 et 73, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 78 et 79, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 108 et 109, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 117 et 118, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 99 et 100, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 84 et 85, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 135 et 136, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 123 et 124, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 105 et 106, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 129 et 130, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 42 et 43, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 45 et 46, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 48 et 49, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 69 et 70, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 120 et 121, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 39 et 40, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 75 et 76, la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 114 et 115, et la paire d'amorces de séquences SEQ ID NO : 138 et 139.