Brevet FR3018193A1 — publié le 20150911

COMPRIME VAGINAL MUCO-ADHESIF A LIBERATION PROLONGEE DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention concerne un comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée tout particulièrement utile dans le traitement des candidoses vulvovaginales ou candidoses vulvovaginales récidivantes. ARRIERE PLAN DE L'INVENTION La candidose vulvovaginale (CVV) est une infection mycosique affectant près de 7075% des femmes en âge de procréer. Environ 40-50% d'entre elles présenteront une récidive. Entre 5 à 8% des femmes sont quant à elles affectées par une CVV récidivante (survenue d'au moins 4 épisodes par an). L'agent pathogène responsable de ces candidoses est généralement Candida albicans. Chez une femme saine, la flore urogénitale comprend près de 50 espèces différentes de microorganismes. Parmi les microorganismes, 95% de la population sont constitués de diverses souches de lactobacilles, aussi appelés " bacilles de Dôderlein" qui sont indicateurs de la flore vaginale saine. Ces lactobacilles jouent un rôle de protection contre les pathogènes par divers mécanismes : production de peroxyde d'hydrogène, production d'acide lactique, production de bactériocines, inhibition de l'adhésion et de l'expansion des pathogènes. En particulier, ces lactobacilles maintiennent un pH acide par la production d'acide lactique à partir du glycogène présent dans le mucus vaginal. Ainsi, la croissance de nombreux pathogènes de la flore vaginale tels que Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasme, Mobiluncus et surtout Candida albicans est inhibée grâce à cet environnement défavorable à leur développement. La flore vaginale normale est ainsi principalement composée de lactobacilles formant un biofilm protecteur à la surface de la muqueuse. Les lactobacilles spécifiques du vagin sont notamment Lactobacillus crispatus, Lactobacillus jensenii et Lactobacillus vaginalis. Le développement des candidoses vulvovaginales semble être favorisé par une rupture de l'équilibre de la flore urogénitale observée notamment par la diminution de la population de lactobacilles induisant la colonisation du milieu par un pathogène. Les CVV, tout particulièrement les CVV récidivantes, affectent négativement le confort de certaines femmes. Leurs traitements engendrent des dépenses de santé importantes et s'avèrent difficiles du fait de la pathogénèse multifactorielle de cette affection (traitements antibiotiques, grossesse, stress,...). Typiquement, les CVV sont traitées au moyen d'actifs antifongiques par traitement systémique ou local. Les traitements proposés s'avèrent contraignants, en particulier les traitements locaux (ovules vaginaux). En effet, la posologie des antifongiques par voie locale est généralement journalière se traduisant par une observance plus faible et donc des risques de récidives accrues. Par ailleurs, les effets secondaires des antifongiques peuvent conduire à une perturbation de la flore vaginale normale, accentuant ainsi les risques de récidive par une destruction de la flore naturelle. Les actifs antifongiques sont également susceptibles d'engendrer des phénomènes d'irritation et de sécheresse vaginale associés à une sensation désagréable de pertes lors de la fonte des ovules vaginaux. Un besoin existe donc pour la mise à disposition de moyens permettant de traiter efficacement les CVV et d'augmenter le confort des femmes de manière à limiter les problèmes d'observance et ainsi réduire les récidives, tout particulièrement permettant de traiter efficacement les CVV au moyen de probiotiques. BREVE DESCRIPTION DE L'INVENTION La présente invention porte sur un comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée comprenant au moins une souche probiotique du genre Lactobacillus comprimée avec un excipient approprié pour conférer au comprimé ses propriétés de muco-adhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée. La présente invention porte également sur un procédé de préparation d'un comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée comprenant les étapes suivantes : a. Mélange d'au moins une souche probiotique du genre Lactobacillus avec un excipient approprié pour conférer au comprimé ses propriétés de muco- adhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée ; b. Compression du mélange obtenu à l'étape a. avec une contrainte de compression allant de 50 à 400 MPa.35 BREVE DESCRIPTION DES FIGURES La figure 1 représente les résultats de l'étude de la libération de la souche Lcr35® à partir de la poudre commerciale (Lcr regenerans®) et du comprimé selon la présente invention (comprimé LP). La figure 2 représente l'évolution du délitement du comprimé de la présente invention dans le milieu SVF au cours du temps (96h). La figure 3 représente l'évolution de la viabilité de la souche Lcr35® (In) en fonction du temps en condition de stabilité accélérée selon le référentiel ICH (40°C) pour une poudre libre et pour les comprimés contenant la souche formulée (Lcr regenerane). La figure 4 représente les résultats de l'étude de la croissance de la souche Lcr35® à partir du comprimé selon la présente invention. La figure 5 représente les résultats de l'étude d'inhibition de la croissance de C. aibicans par la souche Lcr35® issue du comprimé selon la présente invention. DEFINITIONS Le terme « UFC » désigne l'unité de mesure reconnue par l'homme du métier pour quantifier les bactéries capables de fonder une colonie et signifie précisément « Unité Formant Colonie ». Le terme API signifie « Active Pharmaceutical Ingredient » également appelé substance active. Le terme « probiotique » désigne des microorganismes vivants qui administrés en quantité suffisante confèrent un effet bénéfique sur la santé de l'hôte. L'expression « propriétés de muco-adhésion à la paroi vaginale » se définit comme étant l'adhésion de deux surfaces dont l'une est un épithélium. Les propriétés de mucoadhésion à la paroi vaginale peuvent être déterminées par différentes méthodes, telles que décrites dans la référence European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, 85, (2013) 843-853. En particulier, les propriétés de muco-adhésion à la paroi vaginale peuvent être évaluées en déterminant le temps nécessaire pour détacher une forme galénique d'une muqueuse. L'expression « comprimé à libération prolongée » désigne un comprimé dans lequel la vitesse de libération de la substance active est ralentie, la libération de la substance active étant étalée dans le temps (par opposition à une libération immédiate « flash »). De préférence, l'expression « comprimé à libération prolongée » désigne un comprimé assurant la diffusion du principe actif sur une durée plus longue que la libération conventionnelle souvent assimilée à une dose flash. DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION Les inventeurs ont mis au point une forme galénique incluant des probiotiques permettant de combiner efficacité de traitement et confort des femmes lors de la prise médicamenteuse conduisant avantageusement à une augmentation de l'observance du traitement des CVV et ainsi évitant leurs récidives. L'invention porte donc sur un comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée comprenant au moins une souche probiotique du genre Lactobacillus comprimée avec un excipient approprié pour conférer audit comprimé ses propriétés de muco-adhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée. Le comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée peut comprendre une ou plusieurs souches probiotiques du genre Lactobacillus. La forme galénique mise au point par les inventeurs permet une libération prolongée d'une souche lactobacillaire tout en intégrant des propriétés de muco-adhésion sur la paroi vaginale, limitant les désagréments chez la femme, et de libération prolongée permettant ainsi d'outrepasser les problèmes de posologie et de risque de récidives (associées à la résistance du pathogène). Le comprimé de la présente invention est destiné à une administration locale. L'application pourra être effectuée par la patiente ou bien à l'aide d'un applicateur adapté à la forme du comprimé pour en faciliter l'administration. L'administration de souches probiotiques du genre Lactobacillus est connue pour promouvoir la santé vaginale. En particulier, des souches probiotiques du genre Lactobacillus utiles pour traiter les CVV et prévenir leurs récidives peuvent être telles que décrites dans WO 2014/009349. Le comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée selon la présente invention comprend de préférence une souche probiotique du genre Lactobacillus choisie parmi Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus iners, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus jensenii, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus vaginalis, Lactobacillus casei, Lactobacillus reuteri et leurs combinaisons. De préférence, la souche probiotique du genre Lactobacillus est Lcr35® (Lactobacillus rhamnosus). Le comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée selon la présente invention comprend généralement de 105 à 1011 UFC de la souche probiotique du genre Lactobacillus ou de la combinaison de souches, de préférence de 109 à 1010 UFC de la dite souche ou de ladite combinaison, par gramme de comprimé. Typiquement, le comprimé vaginal mucoadhésif à libération prolongée selon la présente invention comprend de 109 à 1011 UFC de la souche probiotique du genre Lactobacillus ou de la combinaison de souches par gramme de comprimé après fabrication (teneur mesurée le jour de la fabrication). Typiquement, le comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée selon la présente invention comprend au moins 107 UFC de la souche probiotique du genre Lactobacillus ou de la combinaison de souches par gramme de comprimé après stockage pendant 36 mois à 25°C. De manière avantageuse, le comprimé selon la présente invention permet de conserver la dose de la souche probiotique tout en étalant la libération de cette dose dans le temps. Ceci permet de diminuer la posologie pour améliorer l'observance des patientes tout en allongeant la durée de l'effet thérapeutique afin d'éviter une récidive. La souche probiotique du genre Lactobacillus est de préférence sous forme lyophilisée. Le comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée selon la présente invention comprend un excipient approprié pour conférer au comprimé ses propriétés de muco- adhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée. De tels excipients sont connus de l'homme du métier. Des exemples d'excipients pouvant convenir sont décrits dans Advanced Drug Delivery System Reviews, 57 (2005), 1692-1712. L'excipient peut être choisi parmi le chitosan et ses dérivés, les pectines, les polyéthylènes glycols, l'alginate de sodium, les acides polyacryliques, les dérivés cellulosiques tels que la carboxyméthylcellulose sodique, l'hydroxypropylméthylcellulose ou la cellulose microcristalline, les gommes, les Carbopol® et leurs combinaisons. De préférence, le comprimé selon la présente invention comprend de l'hydroxypropylméthylcellulose (HPMC). Le comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée selon la présente invention comprend généralement de 1 à 40 % en poids par rapport au poids total du comprimé d'un excipient conférant au comprimé ses propriétés de muco-adhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée. De préférence, le comprimé comprend de 5 à 25 % en poids par rapport au poids total du comprimé dudit excipient, voire il comprend 10 % en poids dudit excipient. De manière avantageuse, les excipients tels que décrits ci-dessus permettent une libération prolongée dans le temps de la souche probiotique. En particulier, il a été montré que le comprimé de la présente invention permet une libération progressive de la souche contrairement à la libération immédiate de la souche dans un milieu à partir de la poudre commerciale (à posologie équivalentes) (Figure 1), la poudre commerciale étant la poudre contenue dans les gélules (gélules, Lcr regenerans®) commercialisées sous le nom de Gynophilus® par la société PROBIONOV. Plus précisément, il a été montré que le comprimé de la présente invention permet d'aboutir à des quantités de bactéries équivalentes à la poudre commerciale au niveau du plateau de libération et cela pour une quantité initiale de bactéries dans la forme pharmaceutique de l'ordre de 109 UFC/g. D'autre part, il a été montré que le délitement du comprimé s'étale sur au moins 72h permettant une prolongation de la libération de la souche Lcr35® (Figure 2). Ainsi, le comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée selon la présente invention peut être administré tous les 3-7 jours, soit un comprimé tous les 3, 4, 5, 6 ou 7 jours. Typiquement, les gélules sont administrées une fois par jour. L'administration du comprimé de la présente invention permet donc de diminuer les prises médicamenteuses et ainsi, d'améliorer l'observance des patientes. La souche probiotique du genre Lactobacillus, de préférence sous forme lyophilisée, et l'excipient conférant au comprimé ses propriétés de muco-adhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée sont comprimés pour donner le comprimé de la présente invention. De préférence, la souche probiotique et l'excipient sont comprimés par une contrainte de compression allant de 50 à 400 MPa, plus particulièrement de 200 à 250 MPa. De manière préférée, la contrainte de compression est de 250 MPa. Il est bien connu qu'il est nécessaire de maîtriser la stabilité de toute formulation pharmaceutique comprenant une souche probiotique au cours de sa durée de vie (de sa fabrication à sa consommation) pour que l'effet thérapeutique attendu puisse être observé. Il est également connu que la viabilité des bactéries est sensible aux procédés de fabrication (et notamment lors de l'étape de compression) et aux conditions et durées de stockage. De manière inattendue, les inventeurs ont mis en évidence que le stress subi par la souche probiotique lors de la compression n'affecte pas négativement la stabilité (viabilité) de la souche en conditions accélérées de stockage (40°C). En limitant la surface d'échange avec le milieu extérieur, la compression permet même d'augmenter la stabilité de la souche par comparaison avec la poudre libre (taux de destructions plus faibles pour les comprimés par rapport à la poudre libre) (Figure 3). Ainsi, les comprimés de la présente invention peuvent garantir l'administration d'une dose utile de probiotique et garantir ainsi l'observation de l'effet thérapeutique recherché. Le comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée selon la présente invention peut en outre comprendre des excipients pharmaceutiquement acceptables bien connus de l'homme du métier. En particulier, le comprimé peut comprendre des cryoprotecteurs, conservateurs, lubrifiants, agents d'écoulement, liants, diluants et leurs combinaisons. De préférence, le comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée selon la présente invention comprend en outre entre 0.1 et 99% en poids d'excipients pharmaceutiquement acceptables bien connus de l'homme du métier par rapport au poids total du comprimé. Le comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée selon la présente invention peut en outre comprendre des principes actifs ayant une action complémentaire. En particulier, le comprimé peut comprendre des hormones (estriol, progestérone,...), des agents antiinflammatoires, des agents bactéricides et/ou des agents antifongiques. L'homme du métier saura déterminer quels principes actifs peuvent être avantageusement combinés avec une souche probiotique du genre Lactobacillus. Le comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée selon la présente invention peut être utilisé dans le traitement des candidoses vulvovaginales et des candidoses vulvovaginales récidivantes. Ainsi, dans un aspect, la présente invention porte sur une méthode de traitement des candidoses vulvovaginales ou candidoses vulvovaginales récidivantes comprenant l'administration à une femme, par voie locale, d'un comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée comprenant une souche probiotique du genre Lactobacillus comprimée avec un excipient approprié pour conférer audit comprimé ses propriétés de muco-adhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée. Le composé peut être administré une fois tous les 3-7 jours, soit un comprimé tous les 3, 4, 5, 6 ou 7 jours. Selon les indications (traitement de confort, traitement d'une récidive ou traitement d'une récidive et rééquilibration de la flore), l'administration pourra être renouvelée deux, quatre ou six fois. La présente invention porte également sur un procédé de préparation d'un comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée comprenant les étapes suivantes : a. Mélange d'au moins une souche probiotique du genre Lactobacillus avec un excipient approprié pour conférer audit comprimé ses propriétés de mucoadhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée, optionnellement des excipients pharmaceutiquement acceptables et/ou principes actifs ayant une action complémentaire ; b. Compression du mélange obtenu à l'étape a. avec une contrainte de compression allant de 50 à 400 MPa pour obtenir d'un comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée. La souche probiotique, l'excipient conférant les propriétés de muco-adhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée, les principes actifs ayant une action complémentaire et les excipients pharmaceutiquements acceptables sont tels que décrits précédemment. EXEMPLES Etude de la viabilité de la souche Lcr35® Des comprimés de 650 mg contenant la souche Lcr35® (API Lcr regenerans®, 100% en poids) ont été fabriqués à 4 contraintes de compression différentes : 100, 200, 300 et 400 MPa puis placés dans des piluliers en verre fermés hermétiquement. Des piluliers contenant la poudre libre (témoin) ont également été suivis. Selon le référentiel ICH relatif au suivi des stabilités des produits pharmaceutiques, le suivi de la stabilité de la souche a été effectué en conditions accélérées (40°C) afin d'évaluer le taux de destruction associé à chaque contrainte de compression. Les points de contrôles ont été effectués à 0, 1, 2, 3, 4, 5 et 6 mois. Les résultats obtenus sont exprimés en UFC/g. A partir de ces données, le graphique de la figure 3 a été obtenu par le calcul du logarithme népérien de Nt (avec Nt la quantité de bactéries présentes au temps t). Les taux de destruction sont obtenus grâce à la pente de la droite représentant In(Nt/No) en fonction du temps. Les taux de destruction associés à l'étude de stabilité en conditions accélérées pour la poudre et les comprimés sont présentés dans le tableau ci-dessous : Contrainte de Taux de destruction k compression (MPa) (R2) Lcr regenerans® 0 1.0274 (0.97) 100 0.7727 (0.99) 200 0.9058 (0.97) 300 0.8367 (0.97) 400 0.9124 (0.91) Les taux de destruction associés aux contraintes de compression démontrent un impact plus important des conditions de stockage sur la poudre (taux de destruction >1,0) par rapport aux comprimés fabriqués aux différentes contraintes de compression (taux de destructions Préparation du comprimé LP Le comprimé LP est préparé par mélange de 900 mg d'API Lcr regenerans® et 100 mg d'HPMC et comprimé avec une contrainte de compression de 250 MPa. Libération de la souche Lcr35 à partir de la poudre commerciale (Lcr regenerans ) et du comprimé selon la présente invention (comprimé LP) Le terme « poudre commerciale » désigne l'API Lcr regenerans®. Des gélules comprenant l'API Lcr regenerans® sont disponibles commercialement (Gynophilus®). 250 ml de milieu SVF (Simulated Vaginal Fluid) ajusté à pH 4,2 sont préparés dans un erlenmeyer pour l'essai. L'échantillon est introduit dans le milieu à To. L'erlenmeyer est ensuite placé sur une plaque d'agitation à 75 rpm elle-même placée dans une étuve à 37°C. A intervalles réguliers 1m1 de milieu est prélevé pour réaliser la quantification des bactéries présentes dans le SVF (dénombrement sur gélose MRS) puis 1m1 de milieu frais est replacé. Les résultats obtenus après un suivi de 24 heures sont présentés à la figure 1. Un suivi visuel du comprimé a également été effectué sur cet essai (96h) afin d'évaluer l'état de l'unité dans le milieu. Le délitement du comprimé de la présente invention est évalué en heure. Un délitement complet est défini par la disparition de la forme comprimé pour l'obtention d'une suspension. Après mise en contact avec le milieu SVF de 900 mg de poudre commerciale (quantité équivalente à la quantité d'API présente dans le comprimé LP), une mise à disposition immédiate des bactéries dans le milieu est observée. La quantité administrée au To est retrouvée à tous les temps de prélèvements. Ceci démontre la libération immédiate et totale de la souche à partir de la forme gélule une fois la capsule dissoute. En comparaison, le comprimé LP placé dans le milieu libère progressivement la souche et ce de manière contrôlée. Cette libération dite contrôlée s'évalue par l'augmentation de la quantité des bactéries dans le milieu sur les premières heures de suivi (2, 4, 6 et 24h) pour atteindre un maximum équivalent à la poudre après 24h. La libération de la souche à partir de la forme « comprimé » est contrôlée sur les premières heures afin de coloniser progressivement le milieu pour atteindre une valeur seuil (24h) équivalente à la poudre libre à posologie égale. La valeur seuil est de l'ordre de 109 UFC dans le milieu. Le comprimé conserve son intégrité pendant 24h en formant une matrice polymérique au travers de laquelle, la souche Lcr35® est libérée. Ensuite, un délitement progressif de l'unité est observé. La libération est ainsi prolongée jusqu'au délitement total du comprimé qui est observé après 72h d'incubation dans le SVF. Le milieu est ainsi saturé en lactobacillus permettant d'obtenir un effet thérapeutique sur plusieurs jours conduisant à une diminution de la posologie. Dans le cadre de la présente invention, un comprimé peut être considéré «à libération prolongée » lorsqu'est observée une libération progressive de la souche probiotique (par opposition à une libération flash). Tout particulièrement, un comprimé peut être considéré « à libération prolongée » lorsqu'une libération progressive de la souche probiotique est observée lors de la mise en oeuvre de la méthode décrite ci-dessus. Une libération peut être considérée progressive lorsqu'elle croit sur une plage d'au moins deux heures lors de la mise en oeuvre de la méthode décrite ci-dessus. Capacités de croissance de la souche Lcr35® libérée du comprimé LP Un mini-fermenteur (500 ml) est utilisé comme enceinte close pour évaluer la croissance de la souche. Le milieu utilisé est le MRS qui est préalablement ajusté à pH 4,2 (pH vaginal). Après stérilisation du montage expérimental, un comprimé LP est placé dans le milieu MRS (250 ml) qui est maintenu à 37°C et agité à 200 rpm (hélice). Le suivi de la croissance s'effectue par prélèvements réguliers du milieu pour un dénombrement après dilution sur gélose MRS. Le volume prélevé est remplacé par du milieu frais après chaque prélèvement. Les résultats sont présentés à la figure 4. Ils démontrent la capacité de la souche à se régénérer et à croître une fois libérée du comprimé et ce, jusqu'à des valeurs proches de 1010 UFC dans le milieu. Cette étude confirme qu'en plus d'être libérée du comprimé (cf. ci-dessus), la souche conserve sa capacité de multiplication et de colonisation une fois en contact avec un milieu favorable à son développement. La colonisation du milieu par la souche est un élément indispensable à l'obtention de l'effet thérapeutique sur les CVV et les CVV récidivantes mais également à la restauration d'une flore vaginale saine. Inhibition de la croissance de la souche pathogène C. albicans en contact avec le comprimé LP Un certain nombre d'études in vitro et in vivo ont démontré la capacité du Lactobacillus 20 rhamnosus Lcr35® : - à s'implanter dans l'épithélium vaginal, ainsi que la longévité d'une telle implantation (Coudeyras S, Jugie G, Vermerie M, Forestier C. Adhesion of human probiotic Lactobacillus rhamnosus to cervical and vaginal cells and interaction with vaginosis and vaginitis-associated pathogens. 2008. Infectious diseases in obstetrics and 25 gynecology ; Coudeyras S, Jugie G, Vermerie M, Forestier C. Adhesion of the probiotic Lactobacillus Lcr35 to immortalized human cervical and vaginal epithelial cells, Infect Dis Obstet Gynecol. 2008; 2008: 549640) ; - et à inhiber la croissance de germes pathogènes responsables de vaginoses bactériennes (Gardnerella vaginalis et Prevotella bivia) mais aussi de mycoses (Candida albicans) en produisant diverses substances microbicides (Coudeyras S, Jugie G, Vermerie M, Forestier C. Adhesion of human probiotic Lactobacillus rhamnosus to cervical and vaginal cells and interaction with vaginosis and vaginitis- associated pathogens. 2008. Infectious diseases in obstetrics and gynecology; A. Nivoliez, O. Camares, M. Paquet-Gachinat, S. Bornes, C. Forestier, P. Veisseire, Influence of manufacturing processes on in vitro properties of the probiotic strain Lactobacillus rhamnosus Lcr35®, J. Biotechnol. 160 (2012) 236-241). Le but de développer une telle forme pourrait permettre de traiter autant en curatif que préventif les CVV. Pour cela, la souche doit pouvoir agir sur la souche pathogène une fois libérée du comprimé. Ici, la capacité d'inhibition est testée contre la souche pathogène: C. albicans. Le comprimé LP de ladite invention est mis en contact direct avec une culture de C. albicans. Pour cela, une pré-culture de la souche pathogène C. albicans est réalisée dans du milieu Sabouraud (AES, Bruz, France) à 25°C. En proportions équivalentes, la pré-culture est mise en contact avec un milieu MRS (Biomérieux, Mercy l'étoile, France) contenant un comprimé LP. Un deuxième pilulier est suivi sans la présence du comprimé pour évaluer la croissance de la souche pathogène seule (C. albicans témoin). Le suivi s'est effectué sur 96h à 37°C. A chaque point de contrôle (0, 2, 4, 24, 48, 72, 96h), un dénombrement de la souche pathogène est réalisé sur gélose Sabouraud incubée à 25°C pendant 5 jours. Les résultats obtenus sont présentés à la figure 5. Le contact du comprimé LP avec une culture de C. albicans permet d'inhiber significativement la croissance du pathogène au bout de 24h conduisant à son inhibition complète après 48h de co-culture. La souche Lcr35® libérée à partir du comprimé LP conserve donc ses capacités d'inhibition du pathogène. En ayant une libération prolongée de la souche Lcr35® et donc une action prolongée contre la croissance du pathogène, la souche libérée du comprimé pourra ensuite se réimplanter dans la cavité vaginale pour un retour à l'équilibre naturel de la flore. Muco-adhésion du comprimé LP Des essais ont été réalisés sur des parois vaginales de porc fraîchement excisées. Le protocole est le suivant. / Mise en place de la muqueuse vaginale et du comprimé Les essais sont effectués sous un Poste de Sécurité Microbiologique de manière stérile. Le milieu SVF pH 4.2 est préchauffé à 37°C (50 ml par échantillon). Une portion de muqueuse vaginale permettant de recouvrir le fond d'un flacon stérile est prélevée. Le fond du flacon est recouvert avec de la colle cyanoacrylate puis la muqueuse est disposée de manière à obtenir une surface uniforme. La muqueuse est mouillée avec du SVF pH 4.2 (environ 1m1) puis, le comprimé est placé sur la muqueuse en exerçant une pression avec le doigt (20 secondes). Sont ensuite versés lentement dans le flacon les 50 ml de SVF préchauffé, qui est ensuite refermé. / Essai de muco-adhésion dans le SVF pH 4,2 Le flacon est placé sur un banc d'agitation à 75 rpm, à 37°C, jusqu'à détachement du comprimé de la surface vaginale. Le suivi de la muco-adhésion s'effectue toutes les 30 minutes pendant 7h puis, à partir de 24h, toutes les heures jusqu'à son détachement ou son délitement. Le pouvoir muco-adhésif du comprimé est exprimé en heure. Ce protocole a été appliqué au comprimé LP de ladite invention ainsi qu'à la gélule commerciale. Les résultats ont montrés que la gélule présente une muco-adhésion très limitée (2h±17min) tandis que le comprimé LP muco-adhésif adhère à la paroi sur une durée de 21h±1h. Une fois détaché, le comprimé peut ensuite évoluer dans le milieu pour libérer la souche au fil de son délitement. Le délitement total du comprimé dans le milieu est également observé au bout de 72h d'incubation. Le paramètre de muco-adhésion est un paramètre fondamental afin de maintenir la forme dans la cavité sur un temps suffisamment long pour permettre l'implantation de la souche dans la cavité vaginale puis l'inhibition du pathogène.30 REVENDICATIONS1. Comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée comprenant au moins une souche probiotique du genre Lactobacillus comprimée avec un excipient approprié pour conférer audit comprimé ses propriétés de muco-adhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée. 2. Comprimé selon la revendication 1 dans lequel la souche probiotique est choisie parmi Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus iners, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus jensenii, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus vaginalis, Lactobacillus casei, Lactobacillus reuteri et leurs combinaisons, de préférence la souche probiotique est Lactobacillus rhamnosus. 3. Comprimé selon la revendication 1 ou 2 comprenant de 105 à 1011 UFC de ladite souche probiotique du genre Lactobacillus par gramme de comprimé. 4. Comprimé selon l'une des revendications précédentes dans lequel ledit excipient est l'hydroxypropylméthylcellulose. 5. Comprimé selon l'une des revendications précédentes comprenant de 1 à 40% en poids dudit excipient par rapport, au poids total du comprimé. 6. Comprimé selon l'une des revendications précédentes dans lequel ladite souche probiotique et ledit excipient sont comprimés avec une contrainte de compression allant de 50 à 400 MPa. 7. Comprimé selon l'une des revendications précédentes comprenant en outre des cryoprotecteurs, conservateurs, lubrifiants, agents d'écoulement, liants, diluants et leurs combinaisons. 8. Comprimé selon l'une des revendications précédentes pour utilisation dans le traitement des candidoses vulvovaginales ou candidoses vulvovaginales récidivantes. 9. Procédé de préparation d'un comprimé vaginal muco-adhésif à libération prolongée selon l'une des revendications précédentes comprenant les étapes suivantes : a. Mélange d'au moins une souche probiotique du genre Lactobacillus avec un excipient approprié pour conférer audit comprimé ses propriétés de mucoadhésion à la paroi vaginale et de libération prolongée ; b. Compression du mélange obtenu à l'étape a. avec une contrainte de compression allant de 50 à 400 MPa.