Brevet FR3023617A1 — publié le 20160115

Dispositif non invasif de détermination de la fertilité et/ou du sexe d'un oeuf, et procédé correspondant. 1. DOMAINE DE L'INVENTION Le domaine de l'invention est celui de l'aviculture. Plus précisément, l'invention concerne une technique non invasive de détermination de la fertilité d'un oeuf et/ou du sexe de celui-ci (c'est-à-dire le genre, mâle ou femelle, de l'embryon contenu dans l'ceuf s'il a été fécondé). 2. ARRIÈRE-PLAN TECHNOLOGIQUE On connaît depuis de nombreuses années, dans le domaine avicole, la problématique récurrente de la détermination de la fertilité et du sexe des oeufs avant leur éclosion. Traditionnellement, le sexage s'effectue sur le poussin d'un jour par une intervention humaine principalement via deux techniques : l'observation des plumes et l'observation du cloaque. Bien qu'efficaces, un inconvénient majeur de ces deux techniques est qu'elles interviennent trop tard dans le cycle de production. Par exemple, pour les poules pondeuses, il faut 21 jours d'incubation pour séparer les femelles des mâles (ces derniers étant éliminés). La détermination du genre des embryons à un stade précoce de l'incubation permettrait d'améliorer la production avicole, avec à la fois un gain de temps et un gain financier. Par conséquent, un certain nombre de techniques de détermination, plus ou moins invasives, ont été développées afin d'évaluer la fertilité et le sexe d'un oeuf d'oiseau non éclot. Une première technique connue est décrite dans le brevet US6029080, qui propose une méthode de détermination par résonance magnétique nucléaire. Cette technique permet de trier les oeufs en trois catégories: les oeufs contenant un embryon mâle, ceux contenant un embryon femelle et les oeufs clairs (non fécondés). Le tri s'effectue par l'observation, à travers la coquille, des organes reproducteurs. Plus particulièrement, l'observation n'est praticable qu'après refroidissement de l'ceuf afin de minimiser les mouvements de l'embryon. Un inconvénient de cette technique est que le refroidissement de l'ceuf engendre des perturbations dans le développement futur de l'embryon. Un autre inconvénient réside dans la mise en oeuvre relativement coûteuse d'une telle technique, induisant un frein à son développement industriel. Une deuxième technique connue est décrite dans la demande de brevet US2011/0144473, qui décrit l'utilisation de la spectroscopie UV. Cette technique consiste à émettre une onde dans l'ultraviolet de manière à provoquer une auto- fluorescence d'une région du germe (blastoderme). Pour déterminer le sexe de l'embryon, on calcule puis on compare un coefficient de décroissance à une base de données, suite à l'observation de la décroissance de l'auto-fluorescence après arrêt de l'émission de l'onde UV. Cependant, un inconvénient de cette technique est qu'elle requiert un accès au blastoderme par un prélèvement invasif. Une troisième technique connue est basée sur la spectroscopie infrarouge. Cette méthode, également invasive, consiste en l'introduction d'une sonde dans la région du germe, afin d'en caractériser les cellules constitutives par une spectroscopie infrarouge. Un inconvénient majeur des deuxième et troisième techniques connues est qu'elles sont invasives : elles nécessitent l'introduction d'instruments et le prélèvement de cellules dans le germe. Ces opérations ne sont donc pas sans risques pour le développement futur de l'embryon. Un autre inconvénient de ces deux techniques est le risque de contamination de l'ensemble de la couvée. Afin de pallier cet inconvénient majeur, une quatrième technique connue, non invasive, est décrite dans la demande de brevet US2013/0044210. Elle consiste en une analyse hyper-spectrale (c'est-à-dire de l'infrarouge moyen au proche UV) d'un spectre optique en réflexion de l'ceuf, en soustrayant la réponse spectrale de la coquille et en détectant les composants biologiques de l'ceuf. Cette technique permet de déterminer, dès le deuxième jour, si l'ceuf est fécondé et, au douzième jour, le genre de l'embryon. Un inconvénient majeur de cette technique est qu'elle nécessite des corrections pour s'affranchir de la coquille (soustraction de sa réponse spectrale) et des perturbations environnementales (lumière, humidité, etc.). À cet effet, chaque oeuf doit être posé sur un support spécifique, maintenant une distance connue entre la source de rayonnement, le détecteur et l'ceuf. Cette technique est donc difficilement ind ustria I isa ble. Du fait probablement des inconvénients précités, aucune des techniques connues citées précédemment n'a vraiment donné lieu à un développement industriel. 3. OBJECTIFS DE L'INVENTION L'invention, dans au moins un mode de réalisation, a notamment pour objectif de pallier ces différents inconvénients de l'état de la technique. Plus précisément, dans au moins un mode de réalisation de l'invention, un objectif est de fournir une technique de détermination de la fertilité et/ou du sexe d'un oeuf, qui soit non invasive (pas de pénétration de la coquille par un outil quelconque, ni aucun prélèvement d'échantillon dans l'ceuf) et plus simple à mettre en oeuvre, et donc plus facilement industrialisable, que la quatrième technique connue précitée. Un autre objectif, dans au moins un mode de réalisation de l'invention est de fournir une telle technique qui soit fiable. 4. EXPOSÉ DE L'INVENTION Ces objectifs, ainsi que d'autres qui apparaîtront plus clairement par la suite, sont atteints à l'aide d'un dispositif non invasif de détermination de la fertilité et/ou du sexe d'un oeuf, comprenant des moyens d'obtention d'une réponse spectrale d'au moins une portion d'au moins une couche de la coquille, y compris sa surface, à un signal lumineux incident, et des moyens de détermination de la fertilité et/ou du sexe de l'ceuf en fonction de la réponse spectrale obtenue. Le principe général de l'invention consiste donc à obtenir une réponse spectrale d'au moins une couche de la coquille à un signal lumineux incident et à déterminer la fertilité et/ou le sexe de l'ceuf selon cette réponse spectrale. Ainsi, ce mode de réalisation particulier de l'invention repose sur une approche tout à fait nouvelle et inventive de détermination non invasive de la fertilité et/ou du sexe d'un oeuf, puisqu'elle s'appuie sur une spectroscopie de la surface et/ou de l'intérieur de la coquille de l'ceuf. En effet, comme détaillé plus bas, les inventeurs ont émis l'hypothèse que les substances discriminantes, existant dans toutes les cellules de l'embryon et jouant un rôle dans la différenciation sexuelle, ne se concentraient pas exclusivement dans les gonades, mais se diffusent dans l'ceuf par l'intermédiaire du liquide allantoïdien et peuvent en partie infime mais mesurable, être présentes à la surface et à l'intérieur de la coquille. On rappelle que dans la quatrième technique connue (seule technique non invasive connue des inventeurs), on cherche au contraire à s'affranchir de la réponse spectrale de la coquille en la soustrayant de celle de l'ceuf, pour ne conserver que la réponse spectrale du contenu de l'ceuf (comprenant l'albumine, le vitellus et le disque germinal). Le signal lumineux incident est soit un signal lumineux mono-longueur d'onde (i.e. présentant une longueur d'onde unique), soit un signal lumineux multi-longueur d'onde, présentant au moins deux longueurs d'onde (successivement ou simultanément). Selon une caractéristique particulière, le signal lumineux incident comprend au moins une longueur d'onde comprise entre 200 et 1100 nm. Cette plage de longueurs d'onde permet un fonctionnement optimal. Selon un aspect particulier de l'invention, les moyens d'obtention de la réponse spectrale comprennent des moyens de focalisation adaptés pour focaliser le signal lumineux incident sur une portion de surface et/ou une portion interne de ladite au moins une couche de la coquille. De tels moyens permettent de focaliser le signal lumineux sur une couche précise de la coquille à examiner. Selon un aspect particulier, les moyens de focalisation sont adaptés pour focaliser le signal lumineux incident sur une portion de la surface extérieure d'une couche externe de la coquille. L'avantage de focaliser sur la surface de la coquille est que le signal réfléchi (par exemple un signal Raman réfléchi) est plus riche, l'absorption étant moindre. Selon un aspect particulier, les moyens de focalisation comprennent une sonde, possédant une distance de focalisation D par rapport à une lentille, et un embout dont une première extrémité est solidaire de la sonde et placée à une distance dl de la lentille, et dont une seconde extrémité est destinée à être en contact avec l'ceuf, l'embout présentant une distance d2 entre les première et seconde extrémités, avec d2=D-dl. Un tel embout permet donc à la sonde d'être toujours à la même distance de la surface de l'ceuf. En d'autres termes, l'embout permet une adaptabilité aisée du dispositif à toutes tailles d'ceufs, sans réglage supplémentaire. L'industrialisation d'un tel dispositif est donc naturellement envisageable. La distance entre la lentille de la sonde et l'ceuf étant fixée par l'embout calibré en longueur, la distance de focalisation D peut aisément être réglée en modifiant la longueur d'onde du signal lumineux incident. Un tel aspect permet également une grande précision du dispositif. De plus, le réglage et la maintenance d'un tel positif sont facilités puisque seule la longueur d'onde est considérée comme variable. Selon un aspect particulier, les moyens d'obtention de la réponse spectrale comprennent une sonde, ou ladite sonde, adaptée pour transmettre le signal lumineux incident vers l'ceuf et pour recevoir, avec un angle de réflexion nul, un signal lumineux réfléchi résultant d'une réflexion par l'ceuf du signal lumineux incident. De cette façon, même si le signal lumineux réfléchi est relativement faible, une telle sonde permet d'assurer et d'optimiser la récupération du signal réfléchi. Dans un mode particulier de l'invention, la sonde est une sonde de type Raman. Une telle sonde permet une grande précision dans la transmission du signal incident et dans la réception du signal réfléchi. Selon un aspect particulier de l'invention, les moyens de détermination de la fertilité et/ou du sexe de l'ceuf comprennent des moyens de comparaison de la réponse spectrale obtenue avec au moins une réponse spectrale de référence. Une telle comparaison permet de faciliter la détermination de la fertilité et/ou du sexe de l'ceuf. En effet, les moyens de comparaison permettent d'éviter de déterminer précisément quelles sont les substances discriminantes présentes, mais de comparer l'allure générale du spectre obtenu avec un ou plusieurs spectres de référence. Selon un aspect particulier de l'invention, ladite au moins une réponse spectrale de référence appartient au groupe comprenant : - une première réponse spectrale de référence pour des oeufs non fécondés ; - une deuxième réponse spectrale de référence pour des oeufs fécondés et contenant un embryon mort ; - une troisième réponse spectrale de référence pour des oeufs fécondés et contenant un embryon mâle ; et - une quatrième réponse spectrale de référence pour des oeufs fécondés et contenant un embryon femelle. L'invention concerne également un procédé non invasif de détermination de la fertilité et/ou du sexe d'un oeuf, comprenant une étape d'obtention d'une réponse spectrale d'au moins une portion d'au moins une couche de la coquille à un signal lumineux incident, et une étape de détermination de la fertilité et/ou du sexe de l'ceuf en fonction de la réponse spectrale obtenue. 5. LISTE DES FIGURES D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description suivante, donnée à titre d'exemple indicatif et non limitatif, et des dessins annexés, dans lesquels : - la figure 1 présente la structure simplifiée d'un oeuf fécondé ; - la figure 2 est une vue en coupe de la structure de la coquille d'un oeuf; - la figure 3 présente un dispositif de détermination de la fertilité et/ou du sexe d'un oeuf, selon un mode de réalisation particulier de l'invention ; - la figure 4 présente un mode de réalisation particulier de la sonde apparaissant sur la figure 3; et - la figure 5 illustre un exemple de spectre obtenu avec le dispositif de la figure 3. 6. DESCRIPTION DÉTAILLÉE D'UN MODE DE REALISATION Sur toutes les figures du présent document, les éléments et étapes identiques sont désignés par une même référence numérique. Les inventeurs sont partis de plusieurs constats, à savoir : 1. La différenciation sexuelle de l'embryon ne résulte pas essentiellement de l'action d'hormones sur les gonades. 2. Les cellules somatiques ont une identité sexuelle autonome. 3. Les principales substances participant à la détermination femelle comprennent : a. des protéines telle que la FOXL2 impliquée dans le maintien de la fonction ovarienne ; b. des oestrogènes comme par exemple l'estradiol secrété par l'ovaire de l'embryon; c. des enzymes tels que la MHM ou l'Aromatase (CYP19A1) qui aide à la conversion d'hormones stéroïdiennes en oestrogène; d. du matériel génétique tel que le gène HINTW (ou WPKCI) présent dans plusieurs tissus de l'embryon femelle ainsi que les gènes DAX1, WNT4, FET1. 4. Les principales substances participant à la détermination mâle comprennent : a. des hormones, comme par exemple l'AMH responsable de la régression des voies génitales supérieures femelles ; b. du matériel génétique, tel que le gène DMRT1 qui participe à la formation des testicules ou le SOX9 participant à la formation des gonades. Les substances précitées (aussi appelées par la suite « substances discriminantes ») sont de différents types : - des produits de dégradation issus de la biosynthèse, comme l'aromatase qui indique la présence de stéroïdes, l'hormone AMH présente dans le liquide allantoïdien en plus grande quantité pour l'embryon femelle que pour le mâle, l'enzyme MHM ou le gène HINTW ; - des stéroïdes, comme l'estradiole sont également présents dans le liquide allantoïdien. Les inventeurs ont émis l'hypothèse que ces substances discriminantes, existant dans toutes les cellules de l'embryon et jouant un rôle dans la différenciation sexuelle, ne se concentraient pas exclusivement dans les gonades, mais se diffusent dans l'ceuf par l'intermédiaire du liquide allantoïdien et peuvent en partie infime mais mesurable, soit migrer vers et à travers la coquille (lors de l'évacuation de la vapeur d'eau ou du CO2), soit s'incruster dans la coquille. Selon leur taille, elles se retrouvent donc soit à la surface de la coquille, soit incrustées dans la coquille (par exemple dans les membranes coquillières). Comme illustré sur la figure 1, un oeuf 1 comprend une coquille 10 et un contenu intérieur comprenant lui-même l'albumine 20, le vitellus 30 et le disque germinal 40. Comme illustré sur la figure 2, la coquille 10 comprend une superposition de six couches, à savoir (en partant de l'albumine 20) : la membrane coquillère interne 11, la membrane coquillère externe 12, la couche mamillaire 13, la couche palissade 14 traversée par les pores 17, une monocouche de cristaux verticaux (15) et enfin la cuticule 16 enveloppant l'ensemble des couches minérales. Comme indiqué plus haut, et illustré sur la figure 1, une pluralité de substances discriminantes 50 sont présentes non seulement dans le contenu intérieur (et plus précisément dans l'albumine 20), mais aussi à la surface et/ou à l'intérieur de la coquille 10. Bien que faible, la présence et la quantité de ces substances discriminantes 50 à la surface et/ou dans la coquille 10 sont alors mesurables par spectroscopie. On présente maintenant, en relation avec la figure 3, un dispositif 100 de détermination de la fertilité et/ou du sexe d'un oeuf, selon un mode de réalisation particulier de l'invention. La spectroscopie Raman est une technique d'analyse non destructive permettant de caractériser la composition moléculaire et la structure d'un matériau. Cette technique est basée sur la détection des photons diffusés inélastiquement suite à l'interaction de l'échantillon avec un faisceau de lumière monochromatique (diffusion Raman). La différence de fréquence entre le photon excitateur et le photon réfléchi renseigne sur la nature chimique de la substance (molécule) à l'origine de la diffusion. Autrement dit, la diffusion Raman est le phénomène physique par lequel un milieu est capable de modifier légèrement la fréquence de la lumière qui y circule. Ce décalage en fréquence correspond à un échange d'énergie entre le rayon lumineux et le milieu. Cet échange peut avoir plusieurs causes : vibrations du cristal ou de la molécule, excitations magnétiques, etc. La mesure de ce décalage permet de remonter à certaines propriétés du milieu. Dans le mode de réalisation particulier décrit ci-après, on utilise la spectroscopie Raman afin de déterminer la fertilité et/ou le sexe d'un oeuf. Il est clair cependant que la présente invention n'est pas limitée à ce type de spectroscopie, mais peut être mise en oeuvre avec toute technique permettant d'obtenir la réponse spectrale d'au moins une portion d'au moins une couche de la coquille. Le principe général de la technique proposée est le suivant : une faible surface de la coquille reçoit au moins une onde électromagnétique incidente de longueur définie. Selon la technique employée, le spot généré (aussi appelé ci-après « point ou zone de focalisation ») aura par exemple un diamètre de quelques microns à 150 microns. L'onde incidente est réfléchie à la même fréquence pour la plus grande part, et à des fréquences différentes pour une partie infime. Selon le type de spectroscopie employée, on exploite l'une ou l'autre des ondes réfléchies. Dans le mode de réalisation présenté, le dispositif 100 comprend : - des moyens 200 d'obtention d'une réponse spectrale d'au moins une portion d'au moins une couche de la coquille 10 d'un oeuf 1. Ces moyens 200 comprennent une source de lumière 101, une première fibre optique 102, une sonde 110, un embout 104, une deuxième fibre optique 105 et un spectromètre 106; - des moyens 300 de détermination de la fertilité et/ou du sexe de l'ceuf 1 en fonction de la réponse spectrale obtenue. Ces moyens 300 comprennent un calculateur 107, une base de données 109 et un afficheur 108. La source de lumière 101 est par exemple un laser, apte à fournir un signal lumineux incident. Plus particulièrement, le signal lumineux fourni par le laser 101 est par exemple une onde électromagnétique de longueur d'onde unique, préférentiellement située entre 200 et 1100 nm (et encore plus préférentiellement entre 500 et 700nm). Dans une variante (spectroscopie multi-longueur d'onde), le signal lumineux incident est multi-longueur d'onde, avec au moins deux longueurs d'onde (successives ou simultanées) comprises chacune entre 200 et 1100 nm. Cette variante permet d'obtenir un spectre plus complet, et par conséquent des résultats plus fiables. Elle permet également de s'affranchir de la fluorescence. La sonde 110 et l'embout 104 forment ensemble des moyens de focalisation. La première fibre optique 102 est destinée à transmettre le signal lumineux incident à la sonde 110. L'embout 104 est calibré en longueur et solidaire de la sonde 110. Il permet à la sonde 110 d'être située à distance constante de l'ceuf 1. Une première extrémité de l'embout 104 est solidaire de la sonde 110, et une deuxième extrémité de l'embout 104 est destinée à venir en contact avec l'ceuf 1. La réponse du signal lumineux réfléchi par la surface de la coquille 10 de l'ceuf 1 étant relativement faible, la sonde 110 est, dans un mode de réalisation particulier, adaptée pour récupérer le signal réfléchi dans le même axe que le signal incident. Ce type de sonde est plus communément connu sous le nom de sonde Raman. Le principe de fonctionnement d'une telle sonde Raman 110 est illustré figure 4. Le signal lumineux incident issu de la première fibre optique 102 est collimaté au moyen d'une première lentille 111. Une lumière collimatée est une lumière dont les rayonnements sont sensiblement parallèles et se déploient lentement quand ils se propagent. En d'autres mots, c'est une lumière qui ne se disperse pas avec la distance (en théorie), ou qui sera très peu dispersée (en pratique). Ce signal collimaté est ensuite focalisé, par l'intermédiaire d'une deuxième lentille 112, en un point ou une zone de focalisation 113, situé(e) à la surface ou à l'intérieur de la coquille 10 à examiner. Le point de focalisation 113 est aussi appelé spot. Les première et deuxième lentilles (111, 112) étant fixes, la distance de focalisation ne peut être modifiée que par variation de la longueur d'onde du signal lumineux incident. On définit ici la distance de focalisation D de la sonde 110 comme la distance entre la deuxième lentille 111 et le spot 113. Dans une implémentation particulière (illustrée sur la figure 3), le spot 113 se situe sur la surface extérieure de la couche 16 externe de la coquille 10. A cet effet, la longueur d2 de l'embout 104 est obtenue selon la formule : d2=D-dl, avec dl la distance séparant une première extrémité de l'embout 104 (solidaire de la sonde 104) et la lentille 112. Une deuxième extrémité de l'embout 104, situé à la distance d2 de la première extrémité, est destinée à être en contact avec la surface externe de l'ceuf. Dans cette implémentation particulière, le signal lumineux incident est réfléchi (par la portion de la surface de l'ceuf qui correspond au spot 113) et le signal réfléchi est collecté/collimaté par la même lentille 112, puis dirigé au moyen d'un miroir dichroïque 114 vers le spectromètre 106. Afin d'optimiser le signal reçu par le spectromètre 106, le signal dirigé au moyen d'un miroir dichroïque 114 passe au préalable à travers un filtre optique 115 passe-haut, destiné à éliminer la diffusion Rayleigh, est ensuite focalisé par une troisième lentille 116, et est enfin transmis au spectromètre 106 par la deuxième fibre optique 105. Le spectromètre 106 analyse le signal reçu et fournit une réponse spectrale aux moyens 300 de détermination de la fertilité et/ou du sexe de l'ceuf 1. Au sein des moyens 300 de détermination de la fertilité et/ou du sexe de l'ceuf 1, le calculateur 107 et la base de données 109 forment des moyens de comparaison. Ces derniers permettent d'exploiter la réponse spectrale transmise par le spectromètre 106 et de la comparer avec une bibliothèque de réponses spectrales de référence. Cette comparaison porte soit sur l'amplitude d'une ou plusieurs raies de la réponse spectrale, soit sur l'allure de l'ensemble de la réponse spectrale. Dans une mise en oeuvre particulière, on utilise les quatre réponses spectrales de référence suivantes : - une première réponse spectrale de référence, pour les oeufs non fécondés ; - une deuxième réponse spectrale de référence, pour les oeufs fécondés et contenant un embryon mort ; - une troisième réponse spectrale de référence, pour les oeufs fécondés et contenant un embryon mâle ; - une quatrième réponse spectrale de référence, pour les oeufs fécondés et contenant un embryon femelle. Dans une variante, le groupe des oeufs non fécondés et celui des oeufs fécondés mais contenant un embryon mort peuvent être regroupés en un seul et même groupe. En d'autres termes, les première et quatrième réponses spectrales de référence sont une seule et même réponse spectrale de référence. L'afficheur 108 permet d'afficher la réponse spectrale obtenue, ainsi que le résultat de la comparaison de celle-ci avec la base de données des réponses spectrales de référence. L'obtention de la base de données 109 comprend par exemple les étapes suivantes : - Etape 1: sur une couvée (« couvée de configuration »), un spectre Raman (réponse spectrale de la coquille selon la technique décrite plus haut en relation avec les figures 3 et 4) est relevé sur chaque oeuf à différents jours d'incubation; - Etape 2 : une corrélation est réalisée afin de déterminer les zones qui diffèrent d'un spectre à l'autre (zones de détermination). Cette méthode permet de classer les spectres en catégories (réponses spectrales de référence). - Etape 3 : le sexage des poussins permet ensuite de classer ces catégories, c'est- à-dire d'associer à chaque catégorie l'une des informations suivantes : « embryon mâle », « embryon femelle » et « oeuf clair ou embryon mort ». Les étapes 1 à 3 peuvent être réitérées sur plusieurs « couvées de configuration ». La base de données 109 est ainsi enrichie par l'apport régulier de nouvelles mesures. L'algorithme de décision quant à la fertilité et/ou au sexe d'un oeuf comprend par exemple les étapes suivantes, pour chaque oeuf d'une couvée donnée (« couvée à tester ») : - Etape a : un spectre Raman (réponse spectrale de la coquille selon la technique décrite plus haut en relation avec les figures 3 et 4) est relevé sur l'ceuf à tester; - Etape b : la qualité de la mesure est évaluée sur chaque zone de détermination (cf. définition plus haut), par exemple en calculant la dérivée première et la dérivée seconde du spectre. Le critère de qualité est par exemple calculé en prenant en compte la dynamique de mesure représentée par la déviation maximale de la mesure dans la zone, la variabilité des données représentée par le nombre d'inversion de pente dans la zone donnée par la dérivée première et le niveau de bruit donné par l'écart-type de la dérivée seconde dans la zone. - Etape c : si le critère de qualité est suffisant, le spectre est comparé, par corrélation sur les zones de détermination, avec les différents spectres de référence de la base de données, afin d'en déterminer la catégorie et donc le genre (parmi « embryon mâle », « embryon femelle » et « oeuf clair ou embryon mort »). La figure 5 illustre un exemple de réponse spectrale (spectre) obtenue avec le dispositif 100 de la figure 3. Ce spectre est représentatif d'une combinaison des réponses des substances 50 présentes à la surface et/ou à l'intérieur de la coquille 10 de l'ceuf 1. La comparaison de ces spectres avec les spectres d'échantillons biologiques référencés dans la littérature permet d'associer aux bandes visibles la présence de certains composés ou molécules. À titre d'exemple, on associe les bandes A au carbonate de calcium, les bandes B aux caroténoïdes, C à l'ADN, D aux structures lipidiques et protéiques et E à la phénylalanine. La comparaison à la base de données s'effectue sur ces bandes mais également sur des bandes intermédiaires où les signaux sont plus faibles comme dans la zone 800 à 900 cm'. Dans encore un autre mode de réalisation, la longueur d2 de l'embout 104 est calculée de façon que le point de focalisation 113 soit situé dans l'une des couches de la coquille 10. En d'autres mots, on recherche la présence des substances discriminantes 50 non plus à la surface extérieure de la couche externe 16 de la coquille 10, mais à l'intérieur de l'une des couches (11, 12, 13, 14, 15 et 16) formant la coquille 10. REVENDICATIONS1. Dispositif non invasif de détermination de la fertilité et/ou du sexe d'un oeuf (1), caractérisé en ce qu'il comprend des moyens (200) d'obtention d'une réponse spectrale d'au moins une portion d'au moins une couche de la coquille (10), y compris sa surface, à un signal lumineux incident, et des moyens (300) de détermination de la fertilité et/ou du sexe de l'ceuf (1) en fonction de la réponse spectrale obtenue. 2. Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce que le signal lumineux incident comprend au moins une longueur d'onde comprise entre 200 et 1100 nm. 3. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que les moyens (200) d'obtention de la réponse spectrale comprennent des moyens (110, 104) de focalisation adaptés pour focaliser le signal lumineux incident sur une portion de surface (113) et/ou une portion interne de ladite au moins une couche de la coquille (10). 4. Dispositif selon la revendication 3, caractérisé en ce que les moyens de focalisation (110, 104) sont adaptés pour focaliser le signal lumineux incident sur une portion de la surface extérieure d'une couche externe (16) de la coquille (10). 5. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 3 et 4, caractérisé en ce que les moyens de focalisation (110, 104) comprennent une sonde (110), possédant une distance de focalisation D par rapport à une lentille (112), et un embout (104) dont une première extrémité est solidaire de la sonde et placée à une distance dl de la lentille (112), et dont une seconde extrémité est destinée à être en contact avec l'ceuf, l'embout présentant une distance d2 entre les première et seconde extrémités, avec d2=D-dl. 6. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que les moyens (200) d'obtention de la réponse spectrale comprennent une sonde (110), ou ladite sonde, adaptée pour transmettre le signal lumineux incident vers l'ceuf (1) et pour recevoir, avec un angle de réflexion nul, un signal lumineux réfléchi résultant d'une réflexion par l'ceuf (1) du signal lumineux incident. 7. Dispositif selon la revendication 6, caractérisé en ce que la sonde (110) est une sonde de type Raman. 8. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que les moyens (300) de détermination de la fertilité et/ou du sexe de l'ceuf (1)comprennent des moyens de comparaison (107, 109) de la réponse spectrale obtenue avec au moins une réponse spectrale de référence. 9. Dispositif selon la revendication 8, caractérisé en ce que ladite au moins une réponse spectrale de référence appartient au groupe comprenant : - une première réponse spectrale de référence pour des oeufs non fécondés ; - une deuxième réponse spectrale de référence pour des oeufs fécondés et contenant un embryon mort ; - une troisième réponse spectrale de référence pour des oeufs fécondés et contenant un embryon mâle ; et - une quatrième réponse spectrale de référence pour des oeufs fécondés et contenant un embryon femelle. 10. Procédé non invasif de détermination de la fertilité et/ou du sexe d'un oeuf (1), caractérisé en ce qu'il comprend une étape d'obtention d'une réponse spectrale d'au moins une portion d'au moins une couche de la coquille (10) à un signal lumineux incident, et une étape de détermination de la fertilité et/ou du sexe de l'ceuf (1) en fonction de la réponse spectrale obtenue.