Brevet FR3022110A1 — publié le 20151218

APPÂT RODONTICIDE ET PROCÉDÉ DE LUTTE CONTRE DES RONGEURS CIBLES NUISIBLES METTANT EN OEUVRE UN TEL APPÂT L'invention concerne un appât rodonticide et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles mettant en oeuvre un tel appât. On connaît déjà des appâts capables de lutter contre des rongeurs cibles nuisibles provoquant une hémorragie létale pour ces derniers. De tels appâts comprennent en particulier une substance apte à inhiber une étape du cycle de la vitamine K et inactiver la cascade de la coagulation sanguine, en particulier mais non exclusivement chez les rongeurs nuisibles. On connait en particulier à cet effet l'utilisation de dérivés de la 4-hydroxycoumarine. EP 2 090 164 décrit que les anticoagulants de première génération -par exemple la warfarine, le coumachlor, le coumatetralyl et le coumafurylsont létaux par prises multiples de ces anticoagulants de première génération, et que les anticoagulants de deuxième génération -par exemple la bromadiolone, le difénacoum (ou diphénacoum), le brodifacoum, la diféthialone et le flocoumaféne sont létaux par prise unique d'une dose de l'un de ces anticoagulants de deuxième génération. Par ailleurs, EP 0 147 052 propose un appât rodonticide comprenant du brodifacoum dans une proportion de 50 ppm, ledit appât comprenant uniquement du trans-brodifacoum et étant sensiblement exempt de cis-brodifacoum. EP 0 147 052 décrit aussi que l'utilisation d'un tel appât permet de limiter la mortalité de mammifères autres que des rongeurs consommant un tel appât et d'oiseaux consommant un cadavre de rongeur empoisonné par un tel appât. L'un des problèmes soulevé par l'utilisation d'appâts comprenant de tels dérivés de la 4-hydroxycoumarine -notamment de brodifacoum- est que de tels appât disséminés aux abords de zones à protéger vis-à-vis des rongeurs cibles nuisibles sont certes efficaces sur les rongeurs cibles nuisibles mais présentent aussi des propriétés anticoagulantes du sang chez des espèces non cibles, notamment chez des animaux domestiques, chez des animaux sauvages prédateurs des rongeurs cibles et/ou charognards des rongeurs cibles -on parle d'intoxication secondaire-, en particulier d'oiseaux, notamment appartenant à des groupes d'oiseaux protégés. De tels appâts présentent aussi des propriétés anticoagulantes chez des espèces non cibles consommant accidentellement de tels appâts -on parle d'intoxication primaire-, en particulier chez l'homme. Bien que des traitements d'urgence existent pour soigner des hémorragies engendrées par de telles intoxications, des solutions alternatives doivent être trouvées pour limiter les inconvénients liés à l'utilisation de tels anticoagulants, en particulier vis-à-vis des espèces non cibles. L'invention vise donc à résoudre ce problème en proposant un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles qui présente une efficacité suffisante pour éliminer certaines populations de rongeurs cibles nuisibles, mais qui soit moins dangereux pour les animaux domestiques et les enfants consommant accidentellement une quantité d'un tel appât, mais aussi moins toxique -voire dénué de toxicité- pour des prédateurs ou charognards de rongeurs intoxiqués. L'invention concerne un appât rodonticide comprenant - un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, et ; - au moins un composé rodonticide par ingestion choisi parmi des composés rodonticides de structure chimique admettant une pluralité de stéréo-isomères de configuration, l'un des stéréo-isomères de configuration, dit stéréo-isomère moins rémanent, de la pluralité de stéréo-isomères de configuration : o présentant une rémanence hépatique chez les rongeurs cibles inférieure à la rémanence hépatique d'au moins un autre stéréo-isomère de la pluralité de stéréo-isomères de configuration, et ; o étant majoritaire dans le composé rodonticide ; et dans lequel le composé rodonticide est présent avec une proportion massique choisie pour être non létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant une période de 24 heures et pour être létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant plusieurs périodes consécutives de 24 heures. Dans tout le texte : - on désigne par « stéréo-isomères » d'un composé rodonticide, les isomères de ce composé rodonticide de même formule semi-développée, mais dont la position relative des atomes diffère dans l'espace. En particulier, on désigne par « stéréo-isomères de configuration » d'un composé rodonticide, ses isomères de même 5 formule semi-développée, mais dont la conversion de l'un en l'autre des stéréo-isomères de configuration nécessite une rupture/reformation d'une liaison covalente interatomique. Ainsi, l'expression « stéréo-isomères de configuration » n'englobe pas les isomères de conformation (ou « rotamères ») dont la conversion de l'un en l'autre des isomères de conformation ne s'accompagne que d'une rotation d'une partie de la 10 molécule selon l'axe d'une liaison a formée par recouvrement axial d'orbitales ; - l'expression selon laquelle « le stéréo-isomère moins rémanent est majoritaire dans le composé rodonticide », signifie que le composé rodonticide de l'appât rodonticide comprend majoritairement du stéréo-isomère moins rémanent, c'est-à-dire que le stéréo-isomère moins rémanent est majoritaire dans la pluralité de 15 stéréo-isomères de configuration du composé rodonticide. En particulier, dans un appât rodonticide selon l'invention : - la quantité du stéréo-isomère moins rémanent du composé rodonticide est supérieure à la quantité de chacun des autres stéréo-isomères de configuration du composé rodonticide ; 20 - la quantité du stéréo-isomère moins rémanent du composé rodonticide rapportée à la somme des quantités de chacun des stéréo-isomères du composé rodonticide est supérieure à 0,5 (50 %) : - la concentration (par exemple exprimée en g/L, en mole/L, en mole/g ou en g/g) du stéréo-isomère moins rémanent du composé rodonticide est supérieure à la 25 concentration de chacun des stéréo-isomères de configuration du composé rodonticide : - la concentration du stéréo-isomère moins rémanent du composé rodonticide rapportée à la somme des concentrations de chacun des stéréo-isomères du composé rodonticide est supérieure à 0,5 (50 %) : - la proportion du stéréo-isomère moins rémanent du composé rodonticide est supérieure à la proportion de chacun des stéréo-isomères de configuration du composé rodonticide. Dans un appât selon l'invention, la proportion du stéréo-isomère moins rémanent du composé rodonticide est de plus de 50 % par rapport au composé rodonticide total. Dans un appât selon l'invention comprenant un composé rodonticide admettant deux stéréo-isomères de configuration, dont un stéréo-isomère moins rémanent, la quantité et/ou la concentration dudit stéréo-isomère moins rémanent représente plus de la moitié (50 %) de la quantité et/ou de la concentration du composé rodonticide total (somme du composé rodonticide moins rémanent et du composé rodonticide plus rémanent). Dans un tel appât selon l'invention comprenant un composé rodonticide admettant deux stéréo-isomères de configuration, dont un stéréo-isomère moins rémanent, la proportion dudit stéréo-isomère moins rémanent est supérieure à 50 % -notamment supérieure à 80 %, de préférence comprise entre 70 % et 100 %, plus préférentiellement comprise entre 85 % et 100 %, encore plus préférentiellement comprise entre 75 % et 98 %- dans le composé rodonticide. Avantageusement et selon l'invention, la proportion du stéréo-isomère de plus faible rémanence hépatique chez les rongeurs cibles peut être de 20 l'ordre de 100 % dans le composé rodonticide. Les inventeurs ont observé que les stéréo-isomères de configuration d'un composé rodonticide dont la structure chimique admet une pluralité de -notamment au moins deux- stéréo-isomères de configuration ne présentent pas la même rémanence hépatique chez des rongeurs cibles nuisibles et que l'un des stéréo- 25 isomères de configuration du composé rodonticide est moins rémanent dans le foie de rongeurs cibles nuisibles. Les inventeurs ont observé qu'un appât rodonticide comprenant majoritairement du stéréo-isomère moins rémanent d'un composé rodonticide permet de limiter sa rémanence hépatique -et de façon plus générale la rémanence dudit stéréo- isomère dans le corps du rongeurs cible nuisible- mais permet aussi de conserver une efficacité rodonticide élevée. Un tel appât permet donc de limiter les risques d'intoxication secondaire (en diminuant la quantité de composé rodonticide dans le corps des rongeurs intoxiqués et des cadavres de rongeurs intoxiqués) mais aussi les risques d'intoxication primaire en diminuant la proportion massique de composé rodonticide dans l'appât. Les inventeurs ont observé qu'il est possible, de façon totalement surprenante et non décrite dans l'état de la technique, de diminuer la proportion massique d'un composé rodonticide dans un appât en laissant à disposition des rongeurs cibles une quantité d'appât suffisante pour que ceux-ci puissent ingérer, en plusieurs jours, une quantité létale de composé rodonticide et entrainer leur mort. L'appât rodonticide selon l'invention est donc adapté pour pouvoir être mis à disposition de rongeurs cibles nuisibles pour leur permettre une consommation soutenue ou réitérée pendant plusieurs jours et pour provoquer chez ces rongeurs cibles nuisibles une hémorragie létale. Un tel appât qui est aussi susceptible d'être consommé accidentellement -et donc de façon non réitérée- par des mammifères non cibles, par exemple par des animaux domestiques et, le cas échéant, par des humains, n'est donc susceptible d'être consommé par ces derniers qu'en quantité insuffisante pour provoquer une hémorragie mortelle. Avantageusement et selon l'invention, la proportion massique de composés rodonticides dans l'appât est inférieure à 200 ppm. Avantageusement, la proportion massique de composés rodonticides dans l'appât est inférieure à 100 ppm, notamment inférieure à 50 ppm. Dans un mode de réalisation préférentiel de l'invention, la proportion massique de composés rodonticides dans l'appât est inférieure à 50 ppm -notamment inférieure à 25 ppm, préférentiellement inférieure à 20 ppm, plus préférentiellement inférieure à 15 ppm, en particulier inférieure à 12 ppm, par exemple comprise entre 4 ppm et 12 ppm-. Avantageusement et selon l'invention, le composé rodonticide est choisi dans le groupe des substances inhibitrices du cycle de la vitamine K chez des rongeurs cibles. Avantageusement et selon l'invention, au moins un composé 5 rodonticide est choisi dans le groupe formé de la bromadiolone, du difénacoum, de la diféthialone, du brodifacoum et du flocoumafène. Avantageusement et selon l'invention, dans une variante d'un procédé selon l'invention, l'appât rodonticide peut comprendre, à titre de substance active rodonticide, un ou plusieurs composés rodonticides par ingestion admettant un 10 stéréo-isomère moins rémanent, le(s)dit(s) stéréo-isomère(s) moins rémanent(s) étant majoritaire(s) dans chaque composé rodonticide. Avantageusement et selon l'invention, en variante ou en combinaison, l'appât rodonticide peut comprendre toute autre substance anti-nuisible telle qu'une substance insecticide et/ou acaricide. 15 Le stéréo-isomère de configuration de la bromadiolone de plus faible rémanence hépatique est le stéréo-isomère de formule 3- [3-(4'-bromo- [1,1'- biphényl] -4-y1)-3 -hydroxy- 1 -phénylpropyll -4-hydroxy-2H- 1 -benzopyran- 2- one, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 3-hydroxy-1-phénylpropyle dudit stéréo-isomère sont de même configuration absolue déterminée selon la nomenclature de 20 Cahn, Ingold et Prelog. Le stéréo-isomère de configuration du difénacoum de plus faible rémanence hépatique est le stéréo-isomère de formule 3-(biphény1-4-y1)-1-(4- hydroxycoumarin-3-y1)-1,2,3,4-tétrahydronaphtalane dans lequel les deux carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalane dudit stéréo-isomère sont de même 25 configuration absolue déterminée selon la nomenclature de Cahn, Ingold et Prelog. Le stéréo-isomère de configuration de la diféthialone de plus faible rémanence hépatique est le stéréo-isomère de formule 3-(4'bromobipheny1-4-y1)- 1-(4-hydroxythiocoumarin-3-y1)-1,2,3,4-tétrahydronaphtalène, les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène dudit stéréo-isomère sont de même configuration absolue déterminée selon la nomenclature de Cahn, Ingold et Prelog. Le stéréo-isomère de configuration du brodifacoum de plus faible rémanence hépatique est le stéréo-isomère de formule 3-(4' bromobipheny1-4-y1)-1-(4- hydroxycoumarin-3-y1)-1,2,3,4-tétrahydronaphtalane, les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalane dudit stéréo-isomère sont de même configuration absolue telle que déterminée selon la nomenclature de Cahn, Ingold et Prelog. Le stéréo-isomère de configuration du flocoumafène de plus 10 faible rémanence hépatique est le stéréo-isomère de formule 3- [4-(4-trifluorométhy1benzy1oxy)phén y1-4-yll-1- (4-hydroxyc oumarin-3 -y1)-1,2,3 ,4- tétrahydronaphtalane, les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalane dudit stéréo-isomère sont de même configuration absolue telle que déterminée selon la nomenclature de Cahn, Ingold et Prelog. 15 En variante, l'invention concerne également un appât rodonticide comprenant au moins un composé rodonticide par ingestion choisi parmi des composés rodonticides à l'exclusion du brodifacoum. Avantageusement et selon l'invention, l'appât rodonticide comprend un excipient comestible pour les rongeurs cibles nuisibles et au moins un 20 composé rodonticide par ingestion. Avantageusement et selon l'invention, l'excipient comestible comprend au moins un aliment choisi dans le groupe formé des graines de céréale -notamment des graines de céréale décortiquées-, des moutures de graines de céréale, des farines de graines de céréale, des flocons de graines de céréale, du son de céréales, 25 des graines non céréalières, des moutures de graines non céréalières, des farines de graines non céréalières et des flocons de graines non céréalières. Avantageusement, l'excipient comestible peut comprendre au moins un aliment choisi dans le groupe formé des graines non céréalières, par exemple des graines de luzerne. Avantageusement, l'excipient comestible est choisi pour permettre la consommation de l'appât par des rongeurs cibles nuisibles. En particulier, l'excipient comestible est un excipient comestible non létal pour des rongeurs cibles nuisibles. En particulier l'excipient comestible n'est pas rodonticide en lui-même et est exempt de composés rodonticides. Avantageusement, l'excipient comestible comprend au moins un aliment choisi dans le groupe formé des aliments d' origine végétale et des aliments d'origine animale. Avantageusement, l'excipient comprend au moins un aliment choisi pour stimuler l'appétit des rongeurs cibles nuisibles. En particulier, cet aliment est choisi dans le groupe formé de graines d'une ou de plusieurs céréales, de graines décortiquées d'une ou de plusieurs céréales, des moutures de graines d'une ou de plusieurs céréales, des flocons de graines d'une ou de plusieurs céréales, du son d'une ou de plusieurs céréales et des farines de graines d'une ou de plusieurs céréales. À titre d'exemple, on choisit les céréales dans le groupe formé de l'avoine, du blé, de l'orge, du maïs, du soja et du riz. Avantageusement, l'aliment est choisi dans le groupe formé des aliments sucrés. Par exemple, il peut s'agir d'aliments comprenant au moins un sucre choisi dans le groupe formé du saccharose, du lactose, du fructose et du glucose. Il peut s'agir d'un sirop de sucre -par exemple, d'un sirop de sucre obtenu par hydrolyse de l'amidon- ou d'un sirop de sucre obtenu par hydrolyse de saccharose (sirop de sucre inverti), ou d'un sirop de sucre de betterave, ou d'un sirop d'érable, ou d'un sirop de sucre de canne, ou de stevia. Avantageusement, l'aliment est choisi dans le groupe formé des flocons et de la farine de l'albumen de noix de coco (coprah). Avantageusement, 25 l'aliment est choisi dans le groupe formé des noix, des noisettes et des amandes -râpées et/ou en poudre-. Avantageusement, l'aliment est choisi dans le groupe formé des graisses végétales, des huiles végétales (par exemple huile de colza, graisse de soja, huile de tournesol, beurre de cacao, huile d'arachides, beurre d'arachides, huile de maïs, huile de palme), des graisses animales et des huiles animales (beurre, saindoux, huile de poisson). Avantageusement, l'aliment est choisi dans le groupe formé des protéines animales. À titre d'exemple, on peut citer par exemple le lait en poudre 5 -notamment le lait écrémé en poudre-, les oeufs -notamment les oeufs en poudre- et les hydrolysats de protéines animales. Avantageusement et selon l'invention, l'excipient comestible comprend une quantité d'au moins un agent d'amertume pour des mammifères non cibles. Avantageusement, l'excipient comestible comprend du benzoate de dénatonium 10 à titre d'agent d'amertume. Avantageusement et selon l'invention, l'excipient comestible comprend au moins un colorant. Un tel colorant permet en particulier de donner audit appât une couleur aisément détectable et identifiable par un utilisateur, un fabricant ou un distributeur dudit appât rodonticide. 15 Avantageusement et selon l'invention, l'excipient comestible comprend au moins un conservateur apte à assurer sa conservation lors de son stockage. Avantageusement et selon l'invention, l'appât rodonticide peut être à l'état solide ou à l'état pâteux. Avantageusement, l'appât rodonticide est sous 20 forme d'un solide à l'état divisé -notamment sous forme de granulés- ou sous forme d'une poudre. Cependant, avantageusement et selon l'invention, l'appât rodonticide peut être à l'état liquide. Avantageusement et selon l'invention, l'un des stéréo-isomères 25 de configuration du composé rodonticide étant de plus forte rémanence hépatique chez des rongeurs cibles, sa proportion dans la pluralité de stéréo-isomères de configuration de la composition rodonticide est comprise entre 0 % (borne inclue) et 50 % (borne exclue). Avantageusement et selon l'invention, ledit stéréo-isomère moins rémanent d'au moins un composé rodonticide, -qui présente donc une rémanence hépatique chez des rongeurs cibles inférieure à la rémanence hépatique d'au moins un autre stéréo-isomère de la pluralité de stéréo-isomères de configuration de ce composé rodonticide- présente une rémanence hépatique chez des rongeurs cibles inférieure à la rémanence hépatique de chacun des autres stéréo-isomères de la pluralité de stéréo-isomères de configuration. Le stéréo-isomère moins rémanent peut donc être le stéréo-isomère le moins rémanent de la pluralité de stéréo-isomères de configuration du composé rodonticide. Avantageusement et selon l'invention, l'un des stéréo-isomères, dit stéréo-isomère plus rémanent, de configuration du composé rodonticide étant de plus forte rémanence hépatique chez des rongeurs cibles, sa proportion dans la pluralité de stéréo-isomères de configuration de l'appât est inférieure à 50 %, c'est-à-dire comprise entre 0 % et 50 % (borne exclue), de préférence comprise entre 0 % et 25 %. On entend par « stéréo-isomère plus rémanent » du composé rodonticide, le stéréo-isomère de configuration présentant une rémanence hépatique chez les rongeurs cibles supérieure à la rémanence hépatique de chacun des autres stéréo-isomères du composé rodonticide. L'invention s'étend également à un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles par dissémination d'une quantité d'appât comprenant un excipient comestible pour les rongeurs cibles nuisibles et une proportion massique d'au moins un composé rodonticide par ingestion par des rongeurs cibles nuisibles, ladite proportion massique et ladite quantité d'appât étant choisies ; - pour être non létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit 25 appât pendant une période de 24 heures, et ; - pour être létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant plusieurs périodes consécutives de 24 heures; dans lequel au moins un composé rodonticide est choisi parmi des composés rodonticides de structure chimique admettant une pluralité de stéréo-isomères de configuration, l'un des stéréo-isomères de configuration, dit stéréo-isomère moins rémanent, du composé rodonticide présentant une rémanence hépatique chez des rongeurs cibles inférieure à la rémanence hépatique d'au moins un autre stéréo-isomère de la pluralité de stéréo-isomères de configuration, ledit stéréo-isomère moins rémanent étant majoritaire dans le composé rodonticide. Avantageusement et selon l'invention, les périodes de 24 heures sont des périodes consécutives. On adapte donc la quantité d'appât disséminé de façon à permettre une consommation d'appât par des rongeurs cibles nuisibles pendant plusieurs jours consécutifs. En particulier, on adapte donc la quantité d'appât disséminé en fonction de la nature, du nombre et de l'appétit des rongeurs cibles nuisibles. Avantageusement et selon l'invention, la proportion massique de composé rodonticide dans l'appât est inférieure à 200 ppm. Avantageusement et selon l'invention, on adapte la quantité d'appât disséminé de façon à permettre une consommation d'appât par les rongeurs cibles pendant 2 jours à 7 jours -notamment de 3 à 4 jours-. Bien entendu, plus la proportion de composé rodonticide dans l'appât sera faible, plus la durée de la période de consommation d'appât par le rongeur cible nuisible devra être longue. Il convient donc de prévoir de mettre l'appât à disposition des rongeurs cibles nuisibles pendant une durée choisie pour empoisonner les rongeurs cibles nuisibles et les éliminer. Par ailleurs, il convient aussi d'adapter la durée de la période de consommation par les rongeurs cibles nuisibles à la nature du composé rodonticide. Avantageusement et selon l'invention, on dissémine une quantité d'appât suffisante pour être létale pour les rongeurs cibles nuisibles consommant quotidiennement de l'appât pendant au moins 2 périodes consécutives, notamment de 3 à 7 périodes consécutives, lesdites périodes étant chacune de 24 heures consécutives. Avantageusement et selon l'invention, la quantité d'appât disséminé et la proportion massique de composé rodonticide dans l'appât sont choisies pour permettre une ingestion quotidienne de composé rodonticide par un rongeur cible nuisible comprise entre 0,2 mg et 10 mg -notamment comprise entre 0,2 mg et 2 mg-par kilogramme de rongeur cible nuisible. Avantageusement et selon l'invention, on choisit la proportion massique de composé rodonticide dans l'appât et la quantité d'appât disséminé de façon à tuer des rongeurs cibles nuisibles en 4 jours à 12 jours successifs de consommation dudit appât. Avantageusement, on dissémine l'appât de façon à mettre ce dernier à disposition de rongeurs cibles nuisibles et permettre sa consommation. Un autre aspect indépendant de l'invention s'étend à un appât rodonticide comprenant : - un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, et ; - du flocoumafène de formule 3- [3- [44[4- (trifluorométhyl)phényl]méthoxy) chromèn-4-one de formule (V) : o phényll -1,2,3 ,4-tétrahydronaphthalan-1 -yll OH CF, (V) ; dans laquelle les carbones asymétriques 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphthalane du flocoumafène sont indiqués ; ledit flocoumafène présentant un stéréo-isomère de configuration, dit homo-stéréoisomère, dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalane sont de même configuration absolue, caractérisé en ce que ledit homo-stéréo-isomère du flocoumafène est majoritaire dans la pluralité de stéréo-isomères de configuration du flocoumafène. Avantageusement et selon cet aspect indépendant de l'invention, l'homo-stéréo-isomère du flocoumafène est de rémanence hépatique chez les rongeurs cibles inférieure à la rémanence hépatique d'au moins un autre stéréo-isomère de la pluralité de stéréo-isomères de configuration. Cet aspect indépendant de l'invention s'étend donc aussi à un procédé « one-shot » de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles par dissémination d'une quantité d'appât selon l'invention comprenant du flocoumafène et dans lequel la proportion du flocoumafène et la quantité d'appât disséminé sont choisies pour que l'appât soit létal pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant une unique période de 24 heures, l'homo-stéréo-isomère du flocoumafène étant majoritaire dans le flocoumafène. L'invention concerne également un appât rodonticide et un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles caractérisés en combinaison par tout ou partie des caractéristiques mentionnées ci-dessus ou ci-après. D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description suivante et des exemples illustratifs donnés à titre non limitatif et qui se réfèrent aux figures annexées dans lesquelles : - la figure 1 est un spectre de RMN du proton du trans-difénacoum 15 « DFC 1 » ; - la figure 2 est un spectre de RMN du proton du cis-difénacoum « DFC 2 » ; - la figure 3 est une représentation graphique de l'évolution de la teneur hépatique des stéréo-isomères du brodifacoum, 20 - la figure 4 est une représentation graphique de l'évolution de la teneur hépatique des stéréo-isomères de la diféthialone, - la figure 5 est une représentation graphique de l'évolution de la concentration hépatique des stéréo-isomères de la bromadiolone, - la figure 6 est une représentation graphique de l'effet de l'administration 25 répétée de doses (1 dose par jour pendant 3 jours) de bromadiolone selon l'invention sur le temps de coagulation (temps de Quick) du sang de rat. Pour l'élaboration d'un appât et la mise en oeuvre d'un procédé selon l'invention, on identifie le stéréo-isomère du composé rodonticide présentant la plus faible rémanence hépatique par analyse de la disparition des stéréo-isomères du foie de rongeurs -notamment de rats- ayant ingéré de l'un et/ou de l'autre des stéréo-isomères du composé rodonticide. Pour ce faire, on administre (à JO) à des rongeurs -notamment à des rats- une dose de composé rodonticide comprenant l'un et/ou l'autre des deux stéréo-isomères dudit composé rodonticide. On maintient en vie les rongeurs cibles par administration quotidienne d'une solution de vitamine K. On mesure la quantité de chacun des stéréo-isomères présents dans le foie des rats au cours du temps, par exemple à 1 jour après l'administration (J+1), 3 jours après l'administration (J+3), m jours après administration (J+m). À l'échéance, on sacrifie le rongeur, on prélève le foie du rongeur sacrifié, on extrait les composés rodonticides selon la méthode décrite dans l'article de revue intitulé « Validation of a New Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry Ion-Trap Technique for the Simultaneous Determination of Thirteen Anticoagulant Rodenticides, Drugs, or Natural Products. Fourel I. et al., (2010), Journal of Analytical Toxicology, 34, 95-102 ». On dose chacun des stéréo-isomères du composé rodonticides. On évalue l'évolution de la concentration hépatique de chacun des stéréo-isomères suite à l'administration du composé rodonticide. Le stéréo-isomère le moins rémanent dans le foie est le composé présentant la concentration hépatique la plus faible à un instant déterminé. Dans un procédé selon l'invention, on prépare un appât rodonticide dont la substance active comprend une proportion majoritaire du stéréo-20 isomère du composé rodonticide présentant la plus faible rémanence hépatique. On réalise un tel appât rodonticide par mélange de 5,0 mg de composé rodonticide, 11,0 mg de colorant bleu, 1 mg de benzoate de dénatonium et 1,024 g de solvant glycolé. On imprègne 98,959 g de grains de blé avec la composition obtenue ci-dessus. Les grains de blé imprégné sont séchés et conditionnés. 25 Dans un procédé selon l'invention, le composé rodonticide est choisi parmi des composés rodonticides de structure chimique admettant une pluralité de stéréo-isomères de configuration, l'un des stéréo-isomères de configuration du composé rodonticide présentant une rémanence hépatique chez des rongeurs cibles inférieure à la rémanence hépatique d'au moins un autre stéréo-isomère et étant présent en proportion majoritaire dans la pluralité de stéréo-isomères de configuration de la composition rodonticide. Dans une variante d'un procédé selon l'invention, le composé rodonticide est du difénacoum : 3- (b iphény1-4-y1)-1 - (4-hydroxyc oumarin-3 -y1)- 1,2,3 ,4- tétrahydronaphatalane ou 3- [3-(1,11-b iphény1)-4-yl- 1,2,3 ,4-tétrahydro- 1-n aphth alényl] - 4-hydroxy-2H- 1-benz opyran-2-one ou 2-hydroxy-3- [3-(4-phénylphény1)-1-tétralinyl]4-chroménone dans la nomenclature IUPAC ("International Union of Pure and Applied Chemistry") de formule (I) ci-après : (I) ; dans laquelle sont identifiés les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphatalane du difénacoum. On peut réaliser une séparation des deux stéréo-isomères de configuration du difénacoum (DFC) par chromatographie HPLC sur colonne de phase inverse INERTSIL®ODS2 d'une longueur de 150 mm et 4,6 mm de diamètre interne. La phase stationnaire inverse présente une porosité de 80À et une surface spécifique de 500 m2/g. La phase mobile est constituée d'un mélange d'acétonitrile (62 %), d'isopropanol (3 %) et d'acétate d'ammonium (35 %) ajusté à pH 4 avec de l'acide acétique. Le débit de la phase mobile est de 1,5 mL/min et la détection est réalisée par spectrophotométrie à 260 nm. On détecte et on collecte un stéréo-isomère de configuration « DFC 1 » dont le temps de rétention est de l'ordre de 5,74 min et un autre stéréo-isomère de configuration « DFC 2 » distinct de « DFC 1 » dont le temps de rétention est de l'ordre de 4,87 min. La séparation des isomères « DFC 1 » et « DFC 2 » peut être effectuée par chromatographie liquide ultra performante (UPLC, waters) sur une chaine 25 Acquity Waters comprenant une colonne Acquity UPLC BEH C18 de granulométrie de 1,7 !am et de dimensions 2,1 x 50 mm à 35°C. La phase mobile est formée d'un gradient d'une solution aqueuse d'acide trifluoroacétique (TFA, 0,1 %) et d'une solution de TFA 0,1 % dans l'acétonitrile. Le débit de la phase mobile est de 0,6 mL/min. Le temps de rétention de l'isomère le plus retenu (« DFC 1 ») est de 8,2 min et celui de l'isomère le moins retenu (« DFC 2 ») est de l'ordre de 7,3 min. La séparation des isomères « DFC 1 » et « DFC 2 » peut aussi être réalisée par chromatographie liquide à haute pression (HPLC) sur une colonne XBridge C18 (dimensions 4,6 x 150 mm et granulométrie de 5 !am) et avec une phase mobile formée à 45 % d'une solution aqueuse de TFA 0,1 % et 55 % d'une solution de TFA à 0,1 % dans l'acétonitrile. Le débit de la phase mobile est de 1,2 mL/min. Le temps de rétention de l'isomère le plus retenu (« DFC 1 ») est de 23,7 min et celui de l'isomère le moins retenu (« DFC 2 ») est de l'ordre de 21,0 min. Le spectre RMN du proton du stéréo-isomère de configuration « DFC 1 » (ou trans) du difénacoum est représenté en figure 1 et le spectre RMN du proton du stéréo-isomère de configuration « DFC 2 » (ou cis) du difénacoum est représenté en figure 2. Le spectre RMN du proton du « DFC 1 » présente un triplet (4,5399 ppm, 4,5644 ppm et 4,5876 ppm) caractéristique du proton porté par le carbone 1 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphatalane. En comparaison, le spectre RMN du proton du « DFC 2» présente un quadruplet (4,8180 ppm, 4,8374 ppm, 4,8550 ppm et 4,8721 ppm) caractéristique du proton porté par le carbone 1 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphatalane. Difénacoum - Inhibition du complexe 1 de la vitamine K époxyde réductase (VKORC1) in vitro par les isomères « DFC 1 » et « DFC 2» du difénacoum Le pouvoir inhibiteur de l'activité vitamine K époxyde réductase (VKOR, "Vitamin K epoxide reductase") de microsomes de foies de rats sensibles aux AVK's par les deux isomères « DFC 1 » et « DFC 2 » purifiés a été évalué. L'analyse des courbes d'inhibition de l'activité VKOR en fonction de la concentration en « DFC 1 » ou « DFC 2 » montre des valeurs de constantes d'inhibition (Ki) de 30 nM pour l'isomère « DFC 1 » et de 60 nM pour l'isomère « DFC 2 ». Le pouvoir inhibiteur sur la cible toxicologue de chacun des deux isomères est donc similaire. Difénacoum - Rémanence hépatique des isomères « DFC 1 » et « DFC 2 » chez le rat mâle À JO, on réalise un gavage per os de rats de laboratoire (rats Sprague Dawley, Charles River, Saint germain sur l'Arbresle, France) mâles, âgés de 8 semaines et de masse corporelle de l'ordre de 200 g avec un mélange comprenant 56 % de l'isomère « DFC 1 » et 44 % de l'isomère « DFC 2» à raison de 5,2 mg de difénacoum par kilogramme de rat. On maintient les rats en vie par injection sous-cutanée quotidienne d'une solution de vitamine K à raison de 1 U par rat. À J+1, J+3, J+5, J+10, J+14 et J+21, 4 rats sont anesthésiés par l'isoflurane puis sacrifiés, les foies sont prélevés et congelés jusqu'à analyse. Les teneurs hépatiques moyennes des isomères « DFC 1 » et « DFC 2 » sont analysées par HPLC, données au tableau 1 ci-après. Teneur hépatique, laglg J+1 J+3 J+5 J+10 J+21 Trans 4,22 1,05 0,25 0,1 0,17 Cis 16,82 8,28 4,86 1,85 1,41 Tableau 1 Dès J+1, La teneur moyenne de l'isomère « DFC 1 » dans le foie de rats est plus faible que la teneur moyenne de l'isomère « DFC 2 » dans le foie de rats gavés avec sensiblement la même quantité d'isomère du difénacoum. L'isomère « DFC 1 » présente une rémanence hépatique significativement plus faible que l'isomère « DFC 2 ». Difénacoum - Analyse comparative de l'efficacité rodonticide d'appâts comprenant 50 ppm de « DFC 1 » ou de « DFC 2 » par ingestion en plusieurs prises (« multi-feeding ») On réalise des appâts rodonticides par dispersion d'une quantité 25 de difénacoum dans une pâte à base de farine et de matière grasse végétale et de façon que l'appât contienne 50 mg de difénacoum par kilogramme d'appât (50 ppm de difénacoum). On réalise : - un appât rodonticide selon l'invention comprenant majoritairement du 5 trans-difénacoum (91 % de trans-difénacoum « DFC 1 » et 9 % de cis-difénacoum « DFC 2 »), et - à titre de comparaison des appâts comprenant : o 4 % de « DFC 1 » et 96 % de « DFC 2 », et ; o 38 % de « DFC 1 » et 62 % de « DFC 2 ». 10 Des rongeurs (10 rats Sprague Dawley (SD), dont 5 mâles et 5 femelles 5) sont placés dans des cages individuelles. Pendant 4 jours (J1, J2, J3 et J4), chaque rat est approvisionné avec une quantité d'appât suffisante pour satisfaire son appétit. A l'issue de ces 4 jours, une alimentation exempte d'appât est donnée. On mesure par pesée la consommation quotidienne de chaque appât. A la mort de l'animal, 15 le foie de l'animal mort est prélevé, congelé et conservé jusqu'à l'analyse de la teneur hépatique en stéréo-isomères de configuration du difénacoum. La consommation quotidienne moyenne d'appât par les rats et la période de survenue de la mort des animaux (mortalité) sont données au tableau 2 ci-après ainsi que le taux de mortalité des rats (%). Trans- Masse moyenne d'appât Survenue de la Mortalité, % difénacoum quotidiennement consommé, mort / g/jour Cis-difénacoum 91/9 12,9 J4 à J8 100% 38/62 12,5 J4 à J9 100% 4/96 11,8 J5 à J9 100% 20 Tableau 2 L'appât selon l'invention (91/9) est consommé par des rats avec la même quantité moyenne quotidienne que des appâts (2/98 ou 18/82) non enrichis en trans-difénacoum. La période de survenue de la mort des animaux ayant consommé l'appât selon l'invention est plus courte (J4-J8) que la période de survenue de la mort des animaux ayant consommé les appâts 38/62 (J4 à J9) et 4/96 (J5 à J9). Difénacoum : Analyse comparative de l'efficacité rodonticide 5 d'appâts comprenant 15 ppm de « DFC 1 » ou de « DFC 2 » par ingestion en plusieurs prises (« multi-feeding ») On prépare des appâts contenant 15 mg de l'isomère « DFC 1 » du difénacoum par kilogramme d'appât (15 ppm de difénacoum). Des rongeurs (10 rats domestiques, dont 5 mâles et 5 femelles) sont placés dans des cages individuelles. 10 Pendant 4 jours (J1, J2, J3 et J4), 50 g d'appât suscité sont mis à disposition de chaque rat. A l'issue de ces 4 jours, une alimentation exempte de rodonticide est donnée. On mesure par pesée la consommation moyenne quotidienne de chaque appât par kilogramme de rongeur. On réalise un appât rodonticide par dispersion d'une quantité de 15 difénacoum dans une pâte à base de farine et de matière grasse végétale et de façon que l'appât contienne 15 mg de difénacoum par kilogramme d'appât (15 ppm de difénacoum), ledit appât comprenant majoritairement du trans-difénacoum (sensiblement 100 %de « DFC 1 »). Des rongeurs (10 rats Sprague Dawley (SD), dont 5 mâles et 5 20 femelles) sont placés dans des cages individuelles et traités comme décrit ci-dessus. La consommation quotidienne moyenne d'appât par les rats et la période de survenue de la mort des animaux (mortalité) ainsi que le taux de mortalité des rats (%) sont données au tableau 3 ci-après. DFC 1: DFC 2 Masse moyenne d'appât Survenue de la Mortalité quotidiennement consommé, mort g/jour 100 : 0 14,8 J5 à J8 70% Tableau 3 L'appât faiblement dosé en difénacoum (15 ppm) comprenant majoritairement du « DFC 1 »(trans-difénacoum) permet l'obtention d'un taux de mortalité de 70 % en minimisant les risques d'intoxication primaire par ingestion accidentelle de cet appât secondaires. Dans une autre variante d'un procédé selon l'invention, le composé rodonticide est de la bromadiolone : 343-(4'-bromo[1,1'-bipheny1]-4-y1)-3- hydroxy-l-phénylpropy11-4-hydroxy-2H-1-benzopyran-2-one ou 3- [3- [444- bromophén yl)phén yll -3-hydroxy- 1-phénylpropyll -2-hydroxychromèn-4- one de formule (II) ci-après : (II). dans laquelle sont identifiés les carbones 1 et 3 du groupement 3-hydroxy-1phénylpropyle de la bromadiolone. La séparation des stéréo-isomères de configuration de la bromadiolone peut être réalisée sur gel de silice en couche mince ou sur colonne Nova-15 pak®Silica cartouche « flash » de silice avec une phase mobile formée de 70 % d'éther de pétrole et 30 % de chloroforme (débit de 1 mL/min). On peut analyser ce même mélange par chromatographie liquide à haute pression (HPLC) sur une colonne XBridge C18 (dimensions 4,6 x 150 mm et granulométrie de 5 !am) et avec une phase mobile formée d'une solution comprenant 20 40 % d'eau (TFA 0,1 %) et 60 % d' acétonitrile (TFA 0,1 %). Le débit de la phase mobile est de 1,2 mL/min. Le temps de rétention du stéréo-isomère de configuration le plus retenu est de 8,35 min et celui du moins retenu est de l'ordre de 7,79 min. On peut réaliser une séparation des deux stéréo-isomères de configuration de la bromadiolone par chromatographie HPLC sur colonne de phase 25 inverse « LiChrospher®100 RP-18 Endcapped, Merck » d'une longueur de 250 mm et OH OH 4 mm de diamètre interne. La phase stationnaire inverse présente une granulométrie de !am et une surface spécifique de 220 m2/g. La phase mobile est constituée d'un mélange de méthanol (72 %) et d'eau (28 %) acidifiée avec H3PO4 0,0025 M. Le débit de la phase mobile est de 1,0 mL/min et la détection est réalisée par spectrophotométrie 5 à 260 nm. On détecte et on collecte un premier stéréo-isomère de configuration de la bromadiolone « BR 1 » dont le temps de rétention est de l'ordre de 19,44 min et un deuxième stéréo-isomère de configuration de la bromadiolone « BR 2 » dont le temps de rétention est de l'ordre de 21,71 min. L'analyse de ce même mélange et la préparation des isomères « BR 1 » et « BR 2 » est aussi réalisée par chromatographie liquide à haute pression (HPLC) sur une colonne XBridge C18 (dimensions 4,6 x 150 mm) et avec une phase mobile formée d'un gradient des compositions A et B dont les caractéristiques sont données au tableau 4 ci-après. Le débit de la phase mobile est de 1 mL/min, la température de la colonne est maintenue à 40°C et la détection est réalisée à 265 nm. Le volume d'injection est de 10 lat. Temps d' élution, min Composition A Composition B H20 + 0,2 % (v/v) H3PO4 Méthanol 0 40% 60% 20% 80% 20,1 40% 60% 40% 60% Tableau 4 Le temps de rétention du stéréo-isomère de configuration le plus retenu (BR 2) est de 17,9 min et celui du moins retenu (BR 1) est de l'ordre de 17,1 min. Il est à noter que le remplacement du méthanol par de 20 l'acétonitrile lors de la séparation des isomères « BR 1 » et « BR 2 » est de nature à inverser l'ordre d' élution des deux isomères. L'étude par RMN du proton (1H-RMN) des isomères « BR 1 » et « BR 2 » de la bromadiolone dans CDC133 permet de déterminer que : - les carbones 1 et 3 du groupement 3-hydroxy-1-phénylpropyle du stéréo-isomère de configuration « BR 1 » de la bromadiolone sont de même configuration absolue telle que déterminée selon la nomenclature de Cahn, Ingold et Prelog et que ; - les carbones 1 et 3 du groupement 3-hydroxy-1-phénylpropyle du stéréo-5 isomère de configuration « BR 2 » de la bromadiolone sont de configurations absolues distinctes telle que déterminées selon la nomenclature de Cahn, Ingold et Prelog. Bromadiolone - Inhibition du complexe 1 de la vitamine K époxyde réductase (VKORC1) in vitro par les isomères « BR 1 » et « BR 2» de la bromadiolone 10 Le pouvoir inhibiteur de deux préparations enrichies en isomères « BR 1 » et « BR 2 » a été évalué en utilisant la mesure de l'activité vitamine K époxyde réductase (VKOR, "Vitamin K epoxide reductase") catalysée par des microsomes de foies de rats sensibles aux AVK's. Les isomères de la bromadiolone sont partiellement purifiés par chromatographie HPLC sur gradient (A/B) tel que décrit 15 ci-dessus. La préparation enrichie en « BR 1 » est constituée à 96 % de l'isomère « BR 1 » et à 4 % de l'isomère « BR 2 ». La préparation enrichie en « BR 2 » est constituée de 96 % de l'isomère « BR 2 » et de 4 % de l'isomère « BR 1 ». L'analyse des courbes d'inhibition de l'activité VKOR en fonction de la concentration en inhibiteur révèle des valeurs de constantes d'inhibition (Ki) de 30 nM pour l'isomère 20 « BR1 » et de 50 nM pour l'isomère « BR2 ». Le pouvoir inhibiteur sur la cible toxicologue de chacun des deux isomères est donc similaire. Bromadiolone - Rémanence hépatique des isomères « BR 1 » et « BR 2 » chez le rat À JO, on réalise un gavage de rats de laboratoire (rats Sprague 25 Dawley, Charles River, Saint germain sur l'Arbresle, France) de masse corporelle de l'ordre de 200 g avec un mélange (96/4) enrichi en isomère « BR 1 » ou avec un mélange (2/98) enrichi en isomère « BR2 » à raison de 3,0 mg de bromadiolone par kilogramme de rat. On maintient les rats en vie par injection sous-cutanée quotidienne d'une solution de vitamine K à raison de 0,1 U par rat. À J+1, J+3, J+7, J+14 et J+21, 4 rats sont anesthésiés par l'isoflurane puis sacrifiés, les foies sont prélevés et congelés jusqu'à analyse. Les teneurs hépatiques moyennes de la bromadiolone totale dans le mélanges (96/4) enrichi en isomère « BR 1 » (a) et dans le mélange et (2/98) enrichi en isomère « BR2 » (0) sont analysées par HPLC et données au tableau 5 ci-après et représentés en figure 5 (le symbole (a) représente l'isomère « BR1 » et le symbole (0) représente l'isomère « BR 2 »). Mélange Teneur hépatique en Bromadiolone totale, lag/g J+1 J+3 J+7 J+14 J+21 BR 1/BR 2 (96/4) 8,27 ± 2,72 2,34 ± 0,43 1,57 ± 0,21 0,99 ± 0,06 0,92 ± 0,08 BR 1/BR 2 (2/98) 18,62 ± 2,22 14,70 ± 1,06 5,20 ± 0,75 2,67 ± 1,07 0,99 ± 0,07 Tableau 5 Dès J+1, La teneur moyenne en bromadiolone dans le foie de rats gavés avec le mélange enrichi en isomère « BR 1 » (96/4) est plus faible que la teneur 10 moyenne en bromadiolone dans le foie de rats gavés avec le mélange enrichi en isomère « BR 2 » (2/98). L'isomère « BR 1 » présente une rémanence hépatique significativement plus faible que l'isomère « BR 2 », notamment chez le rat mâle. Bromadiolone - Rémanence hépatique des isomères « BR 1 » et « BR 2 » chez le rat femelle 15 On prépare par l'une des méthodes de chromatographie précédemment décrites les compositions enrichies en isomères « BR 1 » ou « BR 2 » suivantes : - BR 1/BR 2; 80/20; - BR 1/BR 2; 20/80. 20 On procède avec les rats femelles de la même façon qu'avec les rats mâles comme décrit ci-dessus. Les teneurs hépatiques moyennes des isomères BR 1 et BR 2 des rats femelles sont analysées par HPLC et données au tableau 6 ci-après. Mélanges Bromadiolone Teneur hépatique, lag/g J+1 J + 3 J + 5 J + 9 Mélange BR 1 19,47 9,05 1,19 80/20 BR 2 5,92 3,54 1,29 Total 25,39 12,6 2,47 Mélange BR 1 8,43 2,15 0,87 0,18 20/80 BR 2 24,02 22,05 15,55 7 Total 32,45 24,2 16,42 7,18 Tableau 6 L'administration à JO d'une dose de 3,8 mg du mélange d'isomères (BR 1/ BR 2; 80/20) de la bromadiolone par kilogramme de rat femelle (de masse corporelle moyenne de l'ordre de 200 g) et l'analyse de la teneur hépatique des isomères « BR 1 » et « BR 2 » à J+1, J+3 et J+9 permet d'observer que la concentration hépatique de l'isomère « BR 1 » diminue plus rapidement que la concentration hépatique de l'isomère « BR 2 ». L'isomère« BR 1 » est donc moins rémanent dans le foie de rats femelles que l'isomère « BR 2 ». Bromadiolone - Administration en plusieurs ingestions (« multi10 feeding ») On administre quotidiennement par gavage et pendant trois jours (JO, J+1 et J+2) à des groupes de 3 rats de laboratoire (rats Sprague Dawley de 200 g) mâles ou femelles, une composition de bromadiolone comprenant 96 % de l'isomère « BR 1 » et 4 % de l'isomère « BR 2 » à raison : 15 - de 0,05 mg de bromadiolone par kilogramme de rat, ou ; - de 0,1 mg de bromadiolone par kilogramme de rat, ou ; - de 0,25 mg de bromadiolone par kilogramme de rat, ou ; - de 0, 5 mg de bromadiolone par kilogramme de rat, ou ; - de 0,75 mg de bromadiolone par kilogramme de rat. 20 Sur ces rats, on prélève du sang et on réalise à J+3 une mesure du temps de coagulation sanguine (temps de Quick, exprimé en secondes). Les résultats obtenus sont donnés en figure 6 sur laquelle les histogrammes hachurés représentent les temps de coagulation des rats femelles et les histogrammes pleins représentent les temps de coagulation des rats mâles. L'administration répétée une fois par jour pendant trois jours de 5 0,25 mg du mélange enrichi (96/4) en isomère « BR 1» de la bromadiolone est suffisant pour obtenir un effet anticoagulant, une hémorragie chez le rat (mâle ou femelle) et sa mort. Bromadiolone - Appât comprenant 50 ppm de bromadiolone pour ingestion en plusieurs prises (« multi-feeding ») par des rongeurs 10 On prépare des appâts rodonticides à base de farine et de matière grasse végétale et contenant 50 mg de bromadiolone par kilogramme d'appât (50 ppm de bromadiolone). On réalise de tels appâts avec des compositions de bromadiolone comprenant : - 93 % d'isomère « BR 1 » et 7 % d'isomère « BR 2» (93/7), ou ; 15 - 2 % d'isomère « BR 1 » et 98 % d'isomère « BR 2» (2/98), ou ; - 18 % d'isomère « BR 1 » et 82 % d'isomère « BR 2» (18/82). Des rongeurs (15 rats Sprague Dawley (SD), dont 9 mâles et 6 femelles et 15 rats sauvages, dont 9 mâles et 6 femelles) sont placés dans des cages individuelles. Pendant 4 jours (J1, J2, J3 et J4), chaque rat est approvisionné avec une 20 quantité d'appât suffisante pour satisfaire son appétit. À l'issue de ces 4 jours, une alimentation exempte d'appât est donnée. On mesure par pesée la consommation quotidienne de chaque appât. À la mort de l'animal, le foie de l'animal mort est prélevé, congelé et conservé jusqu'à l'analyse de la teneur hépatique en isomères de la bromadiolone. 25 La consommation quotidienne moyenne d'appât par les rats et le délai moyen de la mort des animaux (mortalité) sont données au tableau 7 ci-après. Appât Masse moyenne d'appât Survenue de la Mortalité, % BR 1 / BR 2 quotidiennement consommé, mort g/jour 93/7 11,45 J4 à J9 100 2/98 11,6 J4 à J8 100 18/82 12,25 J4 à J9 100 Tableau 7 Les résultats des dosages hépatiques (en ltg/g) de chacun des stéréo-isomères de configuration BR 1 et BR 2 sont présentés au tableau 8 ci-après dans lequel BR 1 / BR 2 représente le rapport de la quantité (molaire ou massique) de stéréo-isomère « BR 1 » et de la quantité de stéréo-isomère « BR 2 » dans l'appât mis à disposition des rats et le terme « Résidu » représente le pourcentage de bromadiolone (BR 1 et BR 2) détectée dans le foie des rats testés rapportée à la quantité totale de bromadiolone ingérée par chaque rat. BR 1 / BR 2 Teneur hépatique, lag/g Résidu, % BR 1 BR 2 93/7 7,26 ± 7,55 3,14± 1,03 3,7 ± 2,41 18/82 0,80 ± 0,37 20,16 ± 6,22 8,70 ± 4,83 2/98 0 26,74 ±6,04 10,4 ±3,84 Tableau 8 - Ingestion en plusieurs prises (« multi-feeding ») La teneur moyenne en bromadiolone dans le foie des rats morts est de 87lag par rat traité avec l'appât 93/7 et de 231 !Lig par rat traité avec l'appât 2/98. Le pourcentage de résidu de bromadiolone est minimisé par l'utilisation de l'appât 93/7 comprenant une proportion majoritaire de stéréo-isomère « BR 1 » de la bromadiolone en comparaison avec l'utilisation des appâts 15 bromadiolone 2/98 et 18/82 comprenant une proportion majoritaire de stéréo-isomère « BR 2 ». Il est à noter que : - chez les rats SD traités avec l'appât 93/7, la proportion de « BR 2 » dans le foie est de 27 % par rapport à la bromadiolone totale du foie et constitue près d'un tiers des résidus de bromadiolone ; - chez les rats sauvages traités avec l'appât 93/7, la proportion de « BR 2 » 5 dans le foie est de 37 % par rapport à la bromadiolone totale du foie et constitue plus d'un tiers des résidus de la bromadiolone. Un appât enrichi en stéréo-isomère de configuration « BR 1 », c'est-à-dire un appât comprenant les isomères « BR1 » et « BR 2 » dans une proportion de 95/5, voire 98/2 est donc de nature à limiter les résidus de bromadiolone dans le foie 10 de rongeurs et leur toxicité secondaire vis-à-vis de prédateurs des rongeurs ou de charognards de cadavres de rongeurs. Bromadiolone - Appât comprenant 15 ppm de bromadiolone pour ingestion en plusieurs prises (« multi-feeding ») par des rongeurs On prépare des appâts rodonticides à base de farine et de matière 15 grasse végétale et contenant 15 mg de bromadiolone par kilogramme d'appât (15 ppm de bromadiolone). On réalise de tels appâts avec des compositions de bromadiolone comprenant : - 96 % d'isomère « BR 1 » et 4 % d'isomère « BR 2» (96/4), ou ; - 2 % d'isomère « BR 1 » et 98 % d'isomère « BR 2» (2/98). 20 Des rongeurs (10 rats Sprague Dawley (SD), dont 5 mâles et femelles) âgés de 8 semaines et de 200 g environ sont placés dans des cages individuelles. Pendant 4 jours (J1, J2, J3 et J4), chaque rat est approvisionné avec une quantité d'appât suffisante pour satisfaire son appétit. À l'issue de ces 4 jours, une alimentation exempte d'appât est donnée. On mesure par pesée la consommation 25 quotidienne de chaque appât. À la mort de l'animal, le foie de l'animal mort est prélevé, congelé et conservé jusqu'à l'analyse de le teneur hépatique en isomères de la bromadiolone. 1. Appât BR 1/ BR 2; 96/4 à 15 ppm de bromadiolone La quantité moyenne d'appât quotidiennement consommé par chacun des 10 rats SD est de 13,2 g (±3,3g). Tous les rats meurent entre J4 et J7. La quantité moyenne de bromadiolone ingérée par les rats SD est de 0,79 mg (± 0,19 mg), soit 0,76 mg (± 0,19 mg) de stéréo-isomère BR 1 et 0,03 mg (± 0,008 mg) de stéréo-isomère BR 2. La teneur hépatique résiduelle moyenne de la bromadiolone totale exprimée en !Lig de bromadiolone par gramme de foie de rat à la mort du rat est de 10,61 ltg/g. Les teneurs hépatiques résiduelles moyennes de chacun des stéréo-isomères BR 1 et BR 2 à la mort du rat sont respectivement de 9,61 lag/g et 0,99 ltg/g. 2. Appât BR 1/ BR 2; 2/98 à 15 ppm de bromadiolone À titre comparatif, la quantité moyenne d'appât quotidiennement consommé par chacun des 10 rats SD est de 13,8 g (±2,4g). Les rats meurent en général entre J4 et J8, un rat mourant à J10. La quantité moyenne de bromadiolone ingérée par les rats SD est de 0,832 mg (± 0,145 mg), soit 0,016 mg (± 0,003 mg) d'isomère BR 1 et 0,816 mg (± 0,143 mg) d'isomère BR 2. La teneur hépatique résiduelle moyenne de la bromadiolone totale exprimée en !Lig de bromadiolone par gramme de foie de rat à la mort du rat est de 18,53 ltg/g. Les teneurs hépatiques résiduelles moyennes des isomères BR 1 et BR 2 à la mort du rat sont respectivement de 0,24 lag/g et 18,29 ag/g. Un appât comprenant une proportion majoritaire de stéréo-20 isomère BR 1 de la bromadiolone permet donc de limiter la quantité de bromadiolone résiduelle dans les cadavres des rongeur ayant consommé cet appât, tout en conservant une efficacité rodonticide soutenue par rapport à un appât comprenant une proportion majoritaire de stéréo-isomère BR 2 de la bromadiolone. L'invention vise donc un procédé de lutte contre des rongeurs 25 cibles nuisibles dans lequel on dissémine une quantité d'appât rodonticide comprenant une proportion majoritaire de stéréo-isomère « BR 1 » dans la bromadiolone. Dans une autre variante d'un procédé selon l'invention, le composé rodonticide est du brodifacoum : 3-(4'bromobiphény1-4-y1)-1-(4- hydroxycoumarin-3-y1)-1,2,3,4-tétrahydronaphtalène de formule (III) ci-après : (III) ; dans laquelle sont identifiés les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphtalène du brodifacoum. La séparation des stéréo-isomères de configuration du 5 brodifacoum peut être réalisée sur gel de silice en couche mince avec une phase mobile formée d'éther de pétrole (70 %), d'acétate d'éthyle (6 %) et de dichlorométhane (24 %) -dont les conditions sont directement transposables sur colonne flash (50lam)- et permet de séparer un premier isomère du brodifacoum dont le front de référence (front du composé / front du solvant) est de 0,17 et un deuxième isomère du brodifacoum 10 dont le front de référence est de 0,28. On peut aussi réaliser une séparation des deux stéréo-isomères de configuration du brodifacoum par chromatographie sur cartouche flash de silice (25g). La phase mobile est constituée d'éther de pétrole (70 %), de dichlorométhane (24 %) et d'alcool éthylique (25 %). Le débit de la phase mobile est de 15 mL/min et la détection 15 est réalisée par spectrophotométrie à 300 nm. On obtient un premier stéréo-isomère de configuration dont le temps de rétention est compris entre 6 et 8 min et un deuxième stéréo-isomère de configuration dont le temps de rétention est compris entre 12 et 16 min. La pureté des stéréo-isomères de configuration du brodifacoum 20 est confirmée par chromatographie liquide ultra performante (UPLC, waters) sur une colonne Acquity UPLC BEH C18 de granulométrie de 1,7 !am et de dimensions 2,1 x 50 mm. La phase mobile est formée d'une solution d' acétonitrile et d'acide trifluoroacétique (TFA). Le débit de la phase mobile est de 0,6 mL/min et le volume d'injection est de 1 !al. La détection est réalisée à 254 nm. Le temps de rétention du 25 stéréo-isomère de configuration le plus retenu (« BDF 1 ») et de moindre rémanence hépatique est de 2,3 min et le temps de rétention du stéréo-isomère de configuration le moins retenu et de plus forte rémanence (« BDF 2 ») est de l'ordre de 2,1 min. On peut aussi réaliser une séparation des deux stéréo-isomères de configuration du brodifacoum par chromatographie sur colonne Zorbax Eclipse (150x4,6) de 5 !am de granulométrie maintenue à 40°C. La phase mobile est constituée d'acétonitrile (72 %) et d'une solution aqueuse d'acide phosphorique à 0,0025 N (28 %). La détection est réalisée par spectrophotométrie à 260 nm. On obtient un stéréo-isomère de configuration dont le temps de rétention est de l'ordre de 6,02 min et un autre stéréo-isomère de configuration dont le temps de rétention est de l'ordre de 6,73 min. Les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalène du stéréo-isomère de configuration du brodifacoum le plus retenu (« BDF 1 » ou transbrodifacoum) et de moindre rémanence hépatique sont de même configuration absolue telle que déterminée selon la nomenclature de Cahn, Ingold et Prelog. Brodifacoum - Rémanences hépatique et plasmatique des stéréo- isomères de configuration chez le rat On administre par voie orale à des rats de laboratoire (rats Sprague Dawley, Charles River, Saint germain sur l'Arbresle, France) mâles, âgés de 8 semaines et pesant de l'ordre de 200 g, une solution enrichie en l'un des stéréo- isomères de configuration du brodifacoum (BDF 1 ou BDF 2) dans un mélange de gavage. On administre (à JO) à 20 rats la solution comprenant le « BDF 1 » et à 20 rats la solution comprenant le « BDF 2 » de façon que la quantité de brodifacoum ingérée par chaque rat soit de l'ordre de 3 mg de brodifacoum par kilogramme de rat. Les 40 rats gavés sont traités quotidiennement par administration 25 par voie sous cutanée d'une dose de vitamine K1 à raison de 0,1U pour 200g de poids de rat vif. À 1 jour (J+1), 3 jours (J+3), 7 jours (J+7), 14 jours (J+14) et 21 jours (J+21) après le gavage, on sacrifie 4 rats préalablement anesthésiés à l'isoflurane, on prélève le foie des rats sacrifiés puis on extrait du foie et on dose la quantité de brodifacoum présent dans le foie des rats gavés. Les résultats sont donnés au tableau 9 ci-après dans lequel les teneurs hépatiques de brodifacoum sont la moyenne des teneurs mesurées sur 4 rats et exprimées en !Lig de brodifacoum par gramme de foie et représentés en figure 3 dans laquelle la teneur hépatique en brodifacoum des rats traités avec le mélange enrichi en « BDF 1 » est représentée par des carrés pleins (a) et la teneur hépatique en brodifacoum des rats traités avec le mélange enrichi en « BDF 2 » est représentée par des cercles ouverts (0). Mélange Teneur hépatique en brodifacoum total, lug/g J+1 J+3 J+7 J+14 J+21 Riche en BDF 1 12,65 ± 0,99 8,29 ± 0,83 3,10 ± 0,92 1,56 ± 0,22 1,12 ± 0,07 Riche en BDF 2 29,84 ± 3,31 24,24 ± 3,76 9,55 ± 3,29 8,08 ± 0,25 3,09 ± 0,58 Tableau 9 La teneur moyenne en brodifacoum dans le foie de rats ayant 10 ingérés la solution enrichie en BDF 1 est plus faible que la teneur moyenne en brodifacoum dans le foie de rats ayant ingérés la solution enrichie en BDF 2 après gavage desdits rats avec la même quantité de brodifacoum. L'isomère « BDF 1 » (trans-brodifacoum) le plus retenu dans les conditions chromatographiques UPLC décrites ci-dessus présente une rémanence hépatique diminuée significativement par 15 rapport à la rémanence hépatique de l'isomère « BDF 2 » (cis-brodifacoum). L'invention vise donc un procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles dans lequel on dissémine une quantité d'appât rodonticide comprenant une proportion majoritaire d'isomère « BDF 1 » par rapport au « BDF 2 ». Dans une autre variante d'un appât rodonticide selon l'invention, le 20 composé rodonticide est de la diféthialone : 3-(4'bromobipheny1-4-y1)-1-(4- hydroxythiocoumarin-3-y1)- 1,2,3 ,4-tétrahydronaphtalane ou 3-[3-[4-(4- bromophényl)pheny11-1-tétraliny11-2-hydroxy-4-thiochroménone de formule (IV) ci-après : (TV); dans laquelle sont identifiés les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphtalane de la diféthialone. La séparation des stéréo-isomères de configuration de la diféthialone peut être réalisée sur gel de silice avec une phase mobile formée d'éther de pétrole (80 %), d'acétate d'éthyle (4 %) et de dichlorométhane (16 %) -dont les conditions sont transposables sur colonne flash (50lam)- et permet de séparer un premier isomère de la diféthialone dont le front de référence (front du composé / front du solvant) est de 0,27 et un deuxième isomère de la diféthialone dont le front de référence est de 0,31. On peut réaliser une séparation des deux stéréo-isomères de configuration de la diféthialone par chromatographie HPLC sur colonne de phase inverse INERTSIL®ODS2 d'une longueur de 150 mm et 4,6 mm de diamètre interne. La phase stationnaire inverse présente une porosité de 80À et une surface spécifique de 500 m2/g. La phase mobile est constituée d'un mélange d'acétonitrile (62 %), d'isopropanol (3 %) et d'acétate d'ammonium (35 %) ajusté à pH 4 avec de l'acide acétique. Le débit de la phase mobile est de 1,5 mL/min et la détection est réalisée par spectrophotométrie à 260 nm. On détecte et on collecte un stéréo-isomère de configuration dont le temps de rétention est de l'ordre de 11,8 min et un stéréo-isomère de configuration dont le temps de rétention est de l'ordre de 10,4 min. La pureté des premier et deuxième stéréo-isomères de configuration est confirmée par chromatographie liquide ultra performante (UPLC, waters) sur une colonne Acquity UPLC BEH C18 de granulométrie de 1,7 !am et de dimensions 2,1 x 50 mm à 35°C. La phase mobile est formée d'un gradient obtenu par addition d'une solution d' acétonitrile comprenant 0,1 % d'acide trifluoroacétique (TFA) dans de l'eau complémentée avec 0,1 % de TFA. Le débit de la phase mobile est de 0,6 mL/min. Le temps de rétention du stéréo-isomère de configuration le plus retenu (« DFT 1 ») est de 4,1 min et celui du moins retenu (« DFT 2 ») est de l'ordre de 3,9 min. L'étude par RMN du proton (11-I-RMN) de l'isomère « DFT 1» de la diféthialone dans CDC133 montre que cet isomère est le stéréo-isomère de configuration « trans » dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphtalane sont de même configuration absolue. Diféthialone - Rémanences hépatique des stéréo- isomères de 10 configuration chez le rat On administre par voie orale (« peros ») à des rats de laboratoire (rats Sprague Dawley, Charles River, Saint germain sur l'Arbresle, France) mâles, âgés de 8 semaines et pesant de l'ordre de 200 g, une solution d'un mélange des deux stéréo-isomères de configuration de la diféthialone (« DFT 1 » 54 % et « DFT 2» 15 46 %) dans un mélange de gavage. Pour éviter l'hémorragie, les rats gavés sont traités quotidiennement par administration par voie sous cutanée d'une dose de vitamine K1 à raison de 0,1U pour 200 g de poids de rat vif. A 1 jour (J+1), 3 jours (J+3), 7 jours (J+7), 14 jours (J+14) et 21 jours (J+21) après le gavage, on sacrifie 4 rats préalablement anesthésiés à l'isoflurane, 20 on prélève le foie des rats sacrifiés puis on extrait du foie et on dose la quantité de chacun des stéréo-isomères de configuration de la diféthialone présents dans le foie des rats gavés. Les résultats sont donnés au tableau 10 ci-après dans lequel les teneurs hépatiques de diféthialone sont la moyenne des teneurs mesurées sur 4 rats et exprimées en ltg de diféthialone par g de foie (lag/g) et représentés en figure 4 dans 25 laquelle la teneur du « DFT 1 » dans le foie est représentée par des cercles ouverts (0) et la teneur du « DFT 2 » dans le foie est représentée par des carrés pleins (a). Teneur hépatique J+1 J+3 J+7 J+14 J+21 DFT 1, lag/g 8,55 5,23 2,40 0,38 0,19 DFT 2, lag/g 8,98 5,49 3,58 1,69 1,44 Tableau 10 La teneur moyenne de l'isomère « DFT 1 » dans le foie de rats est plus faible que la teneur moyenne de l'isomère « DFT 2 » dans le foie de rats après gavage desdits rats avec la même quantité d'isomère de diféthialone. L'isomère « DFT 1 » le plus retenu dans les conditions chromatographiques décrites ci-dessus présente une rémanence hépatique significativement diminuée par rapport à la rémanence hépatique de l'isomère « DFT 2 ». Diféthialone - Appât de lutte contre des rats à base de diféthialone On prépare deux types d'appâts comprenant chacun une proportion massique de diféthialone de 15 ppm (soit 15 mg de diféthialone par kilogramme d'appât) : - l' type d'appât comprenant à titre de substance active 94 % d'isomère « DFT 1 » et 6 % d'isomère « DFT 2 », et - 2ème type d'appât comprenant à titre de substance active 1 % d'isomère « DFT 1 » et 99 % d'isomère « DFT 2 ». Dans des cages individuelles, on met à disposition de 10 rats (5 rats mâles et 5 rats femelles) de laboratoire (rats Sprague Dawley, Charles River, Saint germain sur l'Arbresle, France) âgés de 8 semaines et de 200 g de masse corporelle, continument pendant 4 jours une quantité du premier type d'appât (comprenant majoritairement du « DFT 1 ») suffisante pour satisfaire la nutrition de chacun de ces 10 rats. On met aussi à disposition de 10 autres rats une quantité du deuxième type d'appât (comprenant majoritairement du « DFT 2 ») suffisante pour satisfaire la nutrition de chacun de ces 10 autres rats A l'issue de ces 4 jours, on redonne aux rats une alimentation exempte de rodonticide. On mesure quotidiennement la quantité d'appât consommé par chacun des 10 rats vivants. À la mort de chaque animal, le foie de chaque animal est collecté et la teneur en diféthialone de chaque foie est mesurée. La quantité moyenne hépatique de diféthialone est exprimée en lug de diféthialone relevée par gramme de foie de rat. La proportion hépatique moyenne (proportion hépatique, % (« DFT 1 ») ; proportion hépatique, % (« DFT 2 »), et proportion hépatique, % (« diféthialone »)) représente la proportion de diféthialone résiduelle dans le foie des rats par rapport à la quantité totale de diféthialone ingérée. Les résultats sont donnés au tableau 11 ci-après. DFT 1/ DFT 2 DFT 1/DFT 2 94/6 1/99 Quantité moyenne d'appât consommé, g 53,76 53,54 Diféthialone 1 consommée (moyenne), lug 758,02 8,03 Diféthialone 2 consommée (moyenne), ltg 48,38 795,07 Diféthialone consommée (moyenne), ltg 806,4 803,1 Diféthialone 1 hépatique (moyenne), lug/g 8,06 0,17 Diféthialone 2 hépatique (moyenne), lug/g 0,74 16,33 Diféthialone hépatique (moyenne), lug/g 8,80 16,50 Proportion hépatique, % (« DFT 1 ») 6,1 0,1 Proportion hépatique, % (« DFT 2 ») 0,6 13,7 Proportion hépatique, % (« diféthialone ») 6,7 13,8 Tableau 11 Dans le groupe de rats traité avec le l' type d'appât (« DFT 1 »), deux rats sont morts à J+3 (1 mâle, 1 femelle), un rat est mort à J+4 (1 mâle), deux rats sont morts à J+5 (2 mâles), deux rats sont morts à J+7 (2 femelles), deux rats sont morts à J+8 (2 femelles) et un rat est mort à J+9 (1 mâle). Dans le groupe de rats traité avec le 2ème type d'appât (« DFT 2 »), quatre rats sont morts à J+4 (2 mâles, 2 femelles), deux rats sont morts à J+5 (1 mâle, 1 femelle) et quatre rats sont morts à J+6 (2 mâles, deux femelles). La quantité de diféthialone résiduelle dans le foie des cadavres de rats est deux fois plus faible lorsque les rats ingèrent l'appât DFT 1 (8,8 ltg/g) plutôt que l'appât DFT 2 (16,5 ug/g). La quantité de diféthialone résiduelle dans le cadavre des rats est deux fois plus faible lorsque les rats ingèrent l'appât DFT 1 (6,7 !Lig) plutôt que l'appât DFT 2 (13,8 !Lig). L'appât selon l'invention est aussi efficace que l'appât comprenant en majorité du DFT 2 et est moins dangereux pour les animaux non cibles susceptibles de consommer des rongeurs empoisonnés ou des cadavres de rongeurs empoisonnés. Diféthialone - Appât de lutte contre des rats « Rattus norvegicus » à base de diféthialone On met à disposition de rats "Rattus norvegicus" sensibles à la warfarine : - A) un appât solide à base de blé selon l'invention comprenant 100 % de 15 DFT 1 dans la diféthialone à raison de 10 ppm ou 5 ppm de diféthialone dans l'appât, ou - B) un appât solide à base de blé selon l'invention comprenant 100 % de DFT 1 dans la diféthialone à raison de 25 ppm ou 10 ppm de diféthialone dans l'appât, ou 20 - C) un appât solide à base de blé à titre de comparaison et comprenant 100 % de DFT 2 dans la diféthialone à raison de 25 ppm ou 10 ppm de diféthialone dans l'appât. Les taux de mortalité des rats obtenus avec chacun de ces appâts (A à C) selon les modalités décrites sont donnés au tableau 12 ci-après en fonction de 25 la proportion (en ppm ou mg/kg) de diféthialone dans l'appât et du nombre de jours successifs de prise d'appât par les rats. Appât Proportion Nombre de jours Mortalité A) 100 % DFT 1 10 ppm 3 jours 80 % A) 100 % DFT 1 5 ppm 3 jours 50 % B) 100 % DFT 1 25 ppm 1 jour 90 % B) 100 % DFT 1 10 ppm 1 jour 30 % C) 100 % DFT 2 25 ppm 1 jour 90 % C) 100 % DFT 2 10 ppm 1 jour 100 % Tableau 12 Un appât rodonticide selon l'invention comprenant majoritairement du DFT 1 (appâts A) et B)) présente une efficacité rodonticide élevée dès lors qu'il est mis à dispositions des rongeurs de façon à permettre une consommation en une seule prise ou répétée sur plusieurs jours. Du fait de la faible rémanence hépatique du DFT 1, un tel appât selon l'invention limite les risques d'empoisonnement de mammifères non-cibles consommant accidentellement un tel appât et les risques d'empoisonnement d'oiseaux prédateurs ou charognards de rongeurs morts ou vifs ayant consommé un tel appât. Dans une autre variante d'un appât rodonticide selon l'invention, le composé rodonticide est du flocoumafène : 3- [3- [4-([4- (trifluorométhyl)phényl]méthoxy) phényll -1,2,3 ,4-tétrahydronaphth alan-1 -yll chromen-4-one de formule (V) ci-après : o o OH CF, (V) ; dans laquelle sont identifiés les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4- tétrahydronaphthalane du flocoumafène. La séparation des stéréo-isomères de configuration du flocoumafène peut être réalisée sur gel de silice avec une phase mobile formée d'éther de pétrole (70 %), d'acétate d'éthyle (6 %) et de dichlorométhane (24 %) -dont les conditions sont transposables sur colonne flash (50lam)- permet de séparer un premier stéréo-isomère de configuration du flocoumafène dont le front de référence (front du composé / front du solvant) est de 0,15 et un deuxième stéréo-isomère de configuration du flocoumafène dont le front de référence est de 0,26. Il est aussi possible de séparer les deux stéréo-isomères de configuration du flocoumafène par chromatographie HPLC sur colonne de phase inverse « LiChrospher®100 RP-18 Endcapped, Merck » d'une longueur de 125 mm et 4 mm de diamètre interne. La phase stationnaire inverse présente une granulométrie de 5 !am et une surface spécifique de 350 m2/g. La phase mobile est constituée d'un mélange de méthanol (75 %) et d'eau (25 %) acidifiée avec H3PO4 0,01N. Le débit de la phase mobile est de 1,0 mL/min et la détection est réalisée par spectrophotométrie à 220 nm. On détecte et on collecte un stéréo-isomère de configuration (FL 1) dont le temps de rétention est de l'ordre de 21,05 min et un stéréo-isomère de configuration (FL 2) dont le temps de rétention est de l'ordre de 19,17 min. Le stéréo-isomère de configuration « FL1 » est le stéréo-isomère dans lequel les carbones 1 et 3 du groupement 1,2,3,4-tétrahydronaphtalane sont de même configuration absolue. Flocoumafène - Rémanences hépatique des stéréo-isomères de 20 configuration du flocoumafène chez le rat mâle et le rat femelle On administre par voie orale (« peros ») à des rats de laboratoire (rats Sprague Dawley, Charles River, Saint germain sur l'Arbresle, France) mâles ou femelles, âgés de 8 semaines et pesant entre 180 et 200 g, une solution comprenant les deux isomères du flocoumafène (« FL 1 » et « FL 2 ») en proportions 59/41 dans un 25 mélange d'huile végétale et de DMSO à 5 % de façon que la quantité de flocoumafène ingérée par chaque rat soit de l'ordre de 2,3 mg par kilogramme de rat. Les rats gavés sont traités quotidiennement par administration par voie sous cutanée d'une dose de vitamine K1 à raison de 1U par rat. À 1 jour (J+1), 3 jours (J+3), 7 jours (J+7), 14 jours (J+14) et 21 jours (J+21) après le gavage, on sacrifie 4 rats préalablement anesthésiés à l'isoflurane, on prélève le foie des rats sacrifiés puis on extrait du foie et on dose les quantités de chacun des stéréo-isomères de configuration (FL 1 et FL 2) du flocoumafène dans le foie des rats gavés. Les résultats obtenus sur les rats mâles et les rats femelles sont donnés respectivement aux tableaux 13 et 14 ci-après dans lesquels les teneurs hépatiques de chacun des stéréo-isomères de configuration (FL 1 et FL 2) du flocoumafène sont la moyenne des teneurs mesurées sur 4 rats et exprimées en microgramme (tg) par gramme de foie. Teneur hépatique, la g/g J+1 J+3 J+7 J+14 J+21 FL 1 5,37 ± 0,19 3,09 ± 0,26 1,30 ± 0,04 0,57 ± 0,09 0,41 ± 0,06 FL 2 6,01 ± 0,59 7,14 ± 2,2 2,71 ± 0,42 1,26 ± 0,25 0,9 ± 0,1 Tableau 13 (rats mâles) Teneur hépatique, la g/g J+1 J+3 J+7 J+14 J+21 FL 1 8,02 ± 2,25 4,3 ± 0,85 1,84 ± 0,21 1,02 ± 0,18 0,56 ± 0,13 FL 2 10,85 ± 3,05 8,15 ± 1,55 6 ± 0,86 3,60 ± 1,39 2,50 ± 0,35 Tableau 14 (rats femelles) La teneur moyenne de l'isomère « FL 1 » dans le foie de rats mâles et des rats femelles est plus faible que la teneur moyenne de l'isomère « FL 2 ». L'isomère « FL 1 » le plus retenu dans les conditions chromatographiques décrites ci-dessus présente une rémanence hépatique significativement diminuée par rapport à la rémanence hépatique de l'isomère « FL 2 ». L'invention peut faire l'objet de nombreuses variantes sans sortir de la portée de protection revendiquée. Elle vise en particulier un procédé de lutte 20 contre des rongeurs cibles nuisibles et un appât rodonticide pour la mise en oeuvre d'un tel procédé dans lesquels on choisit tout composé rodonticide présentant un stéréo- isomère de configuration de rémanence hépatique inférieure à la rémanence hépatique d'au moins un autre stéréo-isomère de configuration et on prépare un appât dans lequel ce stéréo-isomère de moindre rémanence hépatique est majoritaire parmi les stéréo-isomère de configuration du composé rodonticide. REVENDICATIONS1/ - Appât rodonticide comprenant : - un excipient comestible pour des rongeurs cibles nuisibles, et ; - au moins un composé rodonticide par ingestion choisi parmi des 5 composés rodonticides de structure chimique admettant une pluralité de stéréo-isomères de configuration, l'un des stéréo-isomères de configuration, dit stéréo-isomère moins rémanent, de la pluralité de stéréo-isomères de configuration : o présentant une rémanence hépatique chez les rongeurs cibles inférieure à la rémanence hépatique d'au moins un autre stéréo-isomère de la pluralité de 10 stéréo-isomères de configuration, et ; o étant majoritaire dans la pluralité de stéréo-isomères de configuration ; et dans lequel le composé rodonticide est présent avec une proportion massique choisie pour être non létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant une période de 24 heures et pour être létale pour des rongeurs cibles nuisibles 15 consommant dudit appât pendant plusieurs périodes consécutives de 24 heures. 2/ - Appât selon la revendication 1, caractérisé en ce que la proportion massique de composés rodonticides dans l'appât est inférieure à 200 ppm. 3/ - Appât selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que le composé rodonticide est choisi dans le groupe des substances inhibitrices du 20 cycle de la vitamine K chez des rongeurs cibles. 4/ - Appât selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le composé rodonticide est choisi dans le groupe formé de la bromadiolone, du difénacoum, de la diféthialone, du brodifacoum et du flocoumafène. 5/ - Appât selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce 25 que l'excipient comestible comprend au moins un aliment choisi dans le groupe formé des graines de céréale, des moutures de graines de céréale, des farines de graines de céréale, des flocons de graines de céréale, du son de céréales, des graines non céréalières, des moutures de graines non céréalières, des farines de graines non céréalières et des flocons de graines non céréalières.6/ - Appât selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que l'un des stéréo-isomères, dit stéréo-isomère plus rémanent, de configuration du composé rodonticide étant de plus forte rémanence hépatique chez des rongeurs cibles, sa proportion dans la pluralité de stéréo-isomères de configuration de l'appât est inférieure à 50 %. 7/ - Procédé de lutte contre des rongeurs cibles nuisibles par dissémination d'une quantité d'appât comprenant un excipient comestible pour les rongeurs cibles nuisibles et une proportion massique d'au moins un composé rodonticide par ingestion par des rongeurs cibles nuisibles, ladite proportion massique et ladite quantité d'appât étant choisies ; - pour être non létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant une période de 24 heures, et ; - pour être létale pour des rongeurs cibles nuisibles consommant dudit appât pendant plusieurs périodes consécutives de 24 heures ; dans lequel au moins un composé rodonticide est choisi parmi des composés rodonticides de structure chimique admettant une pluralité de stéréo-isomères de configuration, l'un des stéréo-isomères de configuration, dit stéréo-isomère moins rémanent, de la pluralité de stéréo-isomères de configuration présentant une rémanence hépatique chez des rongeurs cibles inférieure à la rémanence hépatique d'au moins un autre stéréo-isomère de la pluralité de stéréo-isomères de configuration, ledit stéréo- isomère moins rémanent étant majoritaire dans le composé rodonticide. 8/ - Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que la proportion massique de composé rodonticide est inférieure à 200 ppm. 9/ - Procédé selon l'une des revendications 7 ou 8, caractérisé en ce que la quantité d'appât disséminé et la proportion massique de composé rodonticide dans l'appât sont choisies pour permettre une ingestion quotidienne de composé rodonticide par un rongeur cible nuisible comprise entre 0,2 mg et 10 mg par kilogramme de rongeur cible nuisible.10/ - Procédé selon l'une des revendications 7 à 9, caractérisé en ce qu'on dissémine une quantité d'appât suffisante pour être létale pour les rongeurs cibles nuisibles consommant quotidiennement de l'appât pendant au moins 2 périodes consécutives.