Brevet FR3012976A1 — publié le 20150515

L'invention concerne le domaine des dispositifs de filtration de fluide biologique, notamment du sang. L'invention est tout spécialement adaptée à isoler des cellules particulières présentes dans un liquide, notamment le sang, par exemple des cellules tumorales ou des cellules trophoblastiques présentes dans un échantillon sanguin prélevé sur un individu. On connait des procédés et des machines de filtration de type ISET tels que décrit par exemple dans les demandes FR 2 782 730, FR 2 824 144 et WO 91/11245. Ces procédés ont été développés pour offrir des méthodes de diagnostic non invasives et précoces permettant de rechercher des cellules rares dans des échantillons sanguins prélevés sur des patients. Ces méthodes consistent à filtrer un échantillon de liquide, éventuellement additionné d'une solution tampon spécifique, au travers d'un filtre poreux dont la taille des pores est calibrée pour être inférieure à une dimension minimale des cellules recherchées. Les cellules recherchées ne peuvent franchir les pores du filtre et forment alors sur ce dernier un résidu cellulaire de filtration qui peut être récupéré et analysé. Ces dispositifs présentent un certain nombre d'inconvénients, en particulier les filtres utilisés sont tels que des cellules du liquide peuvent s'accumuler dans les pores au cours de la filtration. Une proportion importante des pores peut alors se boucher et conduire à un colmatage du filtre. Même lorsque le colmatage n'est pas total mais seulement partiel, les cellules accumulées dans les pores génèrent des bruits de mesure important lors de l'analyse ultérieure du résidu de filtration accumulé sur le filtre, en étant par exemple la source de marquages fluorescents parasites lors d'une immunocytochimie. II existe par conséquent le besoin de proposer un dispositif réalisant une filtration améliorée des cellules contenues dans un échantillon liquide en prévenant le blocage de cellules dans les pores traversant. Ci-après, un exposé de l'invention telle que caractérisée dans les revendications. Selon un premier aspect, l'invention a pour objet un dispositif de filtration d'un fluide biologique comprenant : - un réservoir de fourniture de liquide adapté pour contenir un fluide biologique, - une membrane associée de manière étanche au réservoir de fourniture de liquide et comprenant une zone filtrante traversable par le fluide biologique selon une direction d'écoulement traversant, la zone filtrante étant adaptée pour retenir une portion du fluide biologique ayant une caractéristique prédéterminée, et pour laisser une autre portion du fluide biologique la traverser, - un système de circulation, en amont de la zone filtrante selon la direction d'écoulement traversant, adapté pour guider le fluide biologique au niveau de la zone filtrante selon une direction de circulation comprenant au moins une composante transverse à la direction d'écoulement traversant. Grace à ces dispositions, on optimise l'écoulement du fluide biologique au niveau du filtre. Selon une réalisation, le système de circulation comprend un corps présentant une ouverture amont et un passage en communication fluidique avec l'ouverture amont, le passage définissant la direction de circulation. Selon une réalisation, le passage comprend une ouverture aval en direction de la zone filtrante. Selon une réalisation, le corps présente la forme d'une plaque mince s'étendant normalement à la direction d'écoulement traversant, comprenant une face amont munie de l'ouverture amont et d'une face aval opposée à la face amont, et comportant l'ouverture aval. Selon une réalisation, la plaque mince est assemblée au réservoir de fourniture de liquide. Selon une réalisation, le système de circulation comprend également une portion du réservoir de fourniture de liquide coopérant avec la plaque mince pour définir un canal. Selon une réalisation, le système de circulation est assemblé au réservoir de fourniture de liquide. Selon une réalisation, le système de circulation comprend une portion d'assemblage au réservoir de fourniture de liquide, et une portion déflectrice d'écoulement. Selon une réalisation, le système de circulation comprend une paroi périphérique, et la portion déflectrice s'étend radialement vers l'intérieur depuis la paroi périphérique. Selon une réalisation, la portion déflectrice d'écoulement présente une forme en hélice. Selon une réalisation, la direction de circulation forme un angle d'au moins 45°, de préférence d'au moins 60° avec la direction d'écoulement traversant. Selon une réalisation, le système de circulation et la membrane définissent entre eux une chambre pour le fluide biologique. Selon une réalisation, le réservoir de fourniture de liquide comprend une portion de réservoir et une portion de filtration en communication fluidique l'une avec l'autre, la portion de réservoir étant d'étendue supérieure à celle de la portion de filtration selon une direction transverse à la direction d'écoulement traversant, la portion de filtration recevant le système de circulation. Selon une réalisation, la caractéristique prédéterminée est une taille de cellule. Selon une réalisation, le système de circulation comprend une embouchure et une sortie, l'aire de la sortie étant supérieure à celle de l'embouchure. Selon une réalisation, le système de circulation comprend une sortie allongée selon la direction de circulation, la largeur de la sortie croissant à mesure que l'on s'éloigne de l'embouchure selon la direction de circulation. Selon une réalisation, le système de circulation comprend une embouchure, l'aire de l'embouchure étant 40 inférieure à l'aire de la zone filtrante. Selon une réalisation, le système de circulation comprend au moins un bord séparateur adapté pour séparer un écoulement amont de fluide biologique en au moins deux parties. 30 35 45 On décrit maintenant brièvement les figures des dessins. La figure 1 est un schéma correspondant à un éclaté d'un système de filtration selon un premier mode de réalisation. La figure 2 est une vue en coupe sectionnelle verticale de la partie supérieure du système de filtration de la figurel. La figure 2a est une vue de détail en grossissement de la figure 2 (y inclus le filtre inférieur). Les figures 3a et 3b sont des vues respectivement de dessus et de dessous d'une plaque d'un système de circulation équipant la partie supérieure représentée sur la figure 2. La figure 4 est une vue en perspective de dessus de la plaque des figures 3a et 3b et d'une membrane équipant la partie supérieure. Les figures 5a et 5b sont des vues en coupe selon les lignes 5a-5a et 5b-5b sur la figure 3a pour le système de circulation. La figure 6 est, pour un deuxième mode de réalisation, une vue réunissant deux demi-coupes prises selon un angle l'une par rapport à l'autre, d'une partie déjà représentée sur la figure 2a pour un premier mode de réalisation. La figure 7 est une vue en perspective du système de circulation pour le deuxième mode de réalisation. Ci-après un exposé détaillé de plusieurs modes de réalisation de l'invention assorti d'exemples et de référence aux dessins. On notera que les dessins ne sont pas nécessairement à l'échelle et en particulier que les proportions et les dimensions des pores de filtration de la membrane ainsi que leurs dimensions d'épaisseurs ont été considérablement agrandies pour permettre une représentation schématique des éléments du dispositif selon l'invention. L'invention est relative à un dispositif 1 pour retenir des cellules rares contenues dans un échantillon liquide 3 ayant un volume nettement supérieur à une centaine de microlitres, par exemple de quelques millilitres, par exemple entre un et cinquante millilitres. L'invention peut être appliquée à tout échantillon de liquide contenant des cellules rares à isoler. Elle s'applique tout particulièrement à l'isolement de cellules rares dans un échantillon sanguin, par exemple des cellules tumorales ou des cellules trophoblastiques présentes dans un échantillon sanguin prélevé sur un individu. L'échantillon sanguin peut auparavant avoir été dilué dans un tampon liquide approprié comme cela est connu de l'état de l'art. Du fait de leur rareté particulière, les cellules sont présentes en nombre extrêmement faible dans les échantillons sanguins étudiés, typiquement seulement quelques cellules par échantillon voir une cellule unique, et ce malgré les volumes importants des échantillons sanguins en question, compris entre un et cinquante millilitres.45 On peut opérer une absorption et/ou une aspiration du liquide progressive et délicate afin de conserver autant que possible les cellules rares sur le filtre en prévenant le franchissement forcé du filtre par ces cellules ou leur endommagement par une dépression trop importante. Dans tous les cas, le déplacement du fluide biologique, que ce soit sous l'effet de la gravité, de l'inertie, par aspiration ou absorption est désigné par le terme générique « écoulement ». A cette fin et en se référant tout d'abord aux figures 1 et 2, un dispositif de filtration 1 selon un mode de réalisation de l'invention comprend une membrane 4 de filtration de l'échantillon liquide 3. Le dispositif 1 peut comprendre un moyen de réception de liquide filtré 5. Le dispositif 1 peut comprendre en outre un réservoir de fourniture de liquide 6 comportant une cavité 7 apte à contenir un liquide et en particulier l'échantillon liquide 3. Le réservoir de liquide 6 et le moyen de réception de liquide filtré 5 sont séparés l'un de l'autre par la membrane 4 de filtration. On définit par « direction d'écoulement traversant » la direction générale selon laquelle un échantillon liquide 3 s'écoule depuis le réservoir de fourniture de liquide 6 en direction du moyen de réception de liquide filtré 5 à travers la membrane 4 en régime stationnaire, nonobstant de possibles perturbations ou turbulences locales localisées transitoires ou permanentes. La membrane 4 est portée par la pince porte-membrane 18 en aval du système de circulation 24. Par « amont » et « aval », on fait référence à la direction générale normale d'écoulement de l'échantillon liquide 3 à travers la membrane 4. Ainsi, le réservoir de fourniture de liquide 6 est apte à contenir une quantité de liquide comprise entre un et cinquante millilitres, de préférence comprise entre deux et vingt millilitres, de préférence environ douze millilitres. Dans une variante de l'invention non-illustrée sur les schémas, l'échantillon liquide 3 peut être fourni par un circuit d'alimentation en liquide de façon par exemple à permettre l'intégration d'un dispositif selon l'invention dans un système d'analyse sanguine automatisé. La cavité 7 est munie d'une ouverture de fourniture de liquide 8 par laquelle du liquide est apte à être fourni à la membrane 4 de filtration. La membrane 4 de filtration comporte une entrée de liquide 9 et une sortie de liquide 10 opposées l'une de l'autre. Le moyen de réception de liquide filtré 5 comporte un accès de liquide 11. L'accès de liquide 11 du moyen de réception de liquide filtré 5 et la sortie de liquide 10 de la membrane 4 peuvent présenter chacun une forme générale surfacique plate et être en contact l'un avec l'autre. L'accès de liquide 11 du moyen de réception de liquide filtré 5 peut ainsi présenter une forme générale de disque ou de polygone ayant une dimension maximale sensiblement comprise entre cinq et cinquante millimètres, de préférence environ vingt millimètres. Dans le mode de réalisation décrit, le dispositif de filtration 1 comporte une partie supérieure 16 et une partie inférieure 17 montées de manière amovible l'une sur l'autre. Dans l'exemple de réalisation présenté, la membrane 4 est portée par la partie supérieure 16 mais elle pourrait le cas échéant être portée par la partie inférieure 17, voire simplement interposée entre ces deux parties. Dans l'exemple présenté, on prévoit une pince porte-membrane 18. La pince porte-membrane 18 fait partie de la partie supérieure 16. La pince porte-membrane 18 porte la membrane 4. Dans un exemple de réalisation, la pince porte-membrane est montée extérieure au réservoir de fourniture de liquide 6. C'est-à-dire que le réservoir de fourniture de liquide 6 comprend une surface radialement intérieure 19 en contact avec l'échantillon liquide 3, et une surface radialement extérieure 20 opposée. La pince porte-membrane 18 comporte une jupe cylindrique 21 entourant le réservoir de fourniture de liquide 6. La jupe cylindrique 21 comporte une surface radialement intérieure 22 qui est radialement extérieure à la surface radialement extérieure 20 du réservoir de fourniture de liquide 6. Le réservoir de fourniture de liquide 6 s'étend axialement entre une extrémité d'alimentation 23 et l'ouverture de fourniture de liquide 8. Le réservoir de fourniture de liquide 6 comprend une portion de réservoir et une portion de filtration 48, représentée sur la figure 2a, en communication fluidique l'une avec l'autre, la portion de réservoir étant d'étendue L supérieure à celle I de la portion de filtration selon une direction transverse à la direction d'écoulement traversant, la portion de filtration étant munie d'un système de circulation 24. Au niveau de l'ouverture de liquide 8, le système de circulation 24 est assemblé au réservoir de fourniture de liquide 6. Par exemple, le système de circulation 24 comprend une pièce rapportée 27, assemblée au réservoir de fourniture de liquide 6. Par exemple, le réservoir de fourniture de liquide 6 comporte une bague annulaire 25 radialement interne projetant radialement vers l'intérieur depuis la surface radialement intérieure 19 du réservoir de fourniture de liquide 6, et comprenant une surface de réception 26 orientée normalement à l'axe Z. Le système de circulation 24 peut par exemple comporter, à titre de pièce rapportée, une plaque 27 comportant une épaisseur faible par rapport à ses dimensions transversales. La forme de la pièce rapportée dans un plan normal à sa direction d'épaisseur est sensiblement complémentaire de la forme de la surface radialement interne 19 du réservoir de fourniture de liquide 6 à l'emplacement de l'assemblage entre ces deux composants. On prévoit un montage de la pièce rapportée et du réservoir de fourniture de liquide 6 sensiblement étanche à l'échantillon liquide 3. Par exemple, la pièce rapportée comprend une surface de contact 28 qui repose sur la surface de réception 26 du réservoir de fourniture de liquide 6 en utilisation normale. Ce contact définit la position d'assemblage de la pièce rapportée et du réservoir de fourniture de liquide 6. Par ailleurs, la pièce rapportée est montée serrée dans le réservoir de fourniture de liquide 6. La face périphérique 29 de la pièce rapportée peut par exemple comprendre un bourrelet périphérique faisant saillie, et déformable élastiquement pour permettre ce montage serré. La pièce rapportée comprend une face supérieure 30 tournée en direction de l'extrémité d'alimentation 23, et une face inférieure 31 opposée. Un passage 32 s'étend dans la pièce rapportée entre les faces supérieure 30 et inférieure 31. En pratique, dans l'exemple présenté, on utilise deux passages 32. Ainsi, la pièce rapportée est utilisée comme un diviseur de flux. Selon les modes de réalisation, on prévoit un ou plusieurs passages identiques ou similaires. La pièce rapportée étant montée de façon étanche sur le réservoir de fourniture de liquide 6, le ou les passages 32 est/sont, dans ce mode de réalisation, le seul moyen pour l'échantillon liquide 3 de passer en direction de la membrane 4. Toutefois, en variante, on pourrait prévoir qu'une partie de l'échantillon fluide 3 passe entre la pièce rapportée et la surface radialement interne 19 du réservoir de fourniture de liquide 6 dans une direction aval, par exemple en espaçant les bourrelets selon la circonférence. Un canal 35 guide l'échantillon liquide depuis la zone en amont du système de circulation 24 en direction de la membrane 4. Ce canal 35 est délimité par des parois qui, dans l'exemple présenté, sont distribuées entre la plaque 27 et la bague annulaire 25. Ainsi, dans le présent mode de réalisation une partie du réservoir de fourniture de liquide 6, notamment la bague annulaire 25 fait partie du système de circulation 24. Cette disposition permet de réaliser un canal de forme complexe avec deux pièces fabriquées par des procédés simples. Par exemple, la plaque 27 peut ainsi être facilement moulée. Le canal 35 dirige l'échantillon liquide 3 selon une direction de circulation qui comprend au moins une composante transverse à la direction d'écoulement traversant de l'échantillon biologique entre le réservoir de fourniture de liquide 6 et le moyen de réception de liquide filtré 5. Si, pour fixer les idées, la direction d'écoulement traversant de l'échantillon biologique est la direction Z, alors la direction de circulation comprend une composante dans le plan orthogonal à la direction Z. Un tel canal 35 permet de générer dans la chambre 33 un écoulement de l'échantillon liquide 3 partiellement horizontal, c'est-à-dire tangentiel à la surface supérieure de la zone filtrante de la membrane. Ces dispositions permettent de distribuer l'échantillon liquide 3 de façon contrôlée sur les pores de la membrane, de balayer avec un jet liquide la surface supérieure de la zone filtrante de la membrane pour éviter des dépôts obstruants, et/ou de réduire les contraintes mécaniques dues à l'échantillon liquide 3 sur la membrane. Dans l'exemple particulier représenté, le canal 35 comporte une embouchure 37 côté amont, et une sortie 38 côté aval. Entre ces deux régions, le canal est orienté de manière à défléchir l'échantillon liquide selon la direction de circulation. Pour ce faire, on prévoit une surface déflectrice 39 de canal orientée par rapport à la direction d'écoulement traversant. Dans l'exemple présenté, la surface déflectrice 39 comporte d'une part une première portion de surface déflectrice, réalisée dans la plaque 27, en alignement avec l'embouchure 37 selon la direction d'écoulement. De plus, la surface déflectrice 39 comprend une deuxième portion de surface déflectrice, réalisée dans la bague annulaire 25. Le canal 35 comporte ainsi plusieurs portions : - A partir de l'embouchure 37, une première portion, réalisée exclusivement dans la plaque 27, dans laquelle les parois de canal guident l'échantillon liquide de manière orientée par rapport à la direction d'écoulement traversant, - Une deuxième portion, réalisée à la fois dans la plaque 27 et la bague annulaire 25, et comprenant une partie de la sortie 38, et - Une troisième portion, réalisée uniquement dans la plaque 27, comprenant le reste de la sortie 38. Le passage 32 généré dans la plaque 27 peut par exemple comporter une forme, vue de dessus, en spirale entre une première extrémité, correspondant à l'embouchure 37, et une deuxième extrémité opposée. La première extrémité est par exemple réalisée radialement plus extérieure que la deuxième extrémité, ce qui génère une composante radiale pour la direction de circulation. L'étendue angulaire de la spirale est de l'ordre de 360° entre ses deux extrémités. Vu dans l'épaisseur, le passage 32 s'étend entre l'embouchure 37 et une sortie aval 40 de la plaque 27. La sortie aval 40 présente la forme d'un serpentin en spirale, de largeur constante mesurée transversalement à la direction spirale. Alors que, vu de dessus, la première extrémité du passage 32 est prévue au niveau de la bague annulaire 25, le passage 32 s'étend progressivement radialement vers l'intérieur, de sorte qu'à mesure que l'on progresse radialement vers l'intérieur le long du passage 32, l'obstruction de la sortie aval 40 par la bague annulaire 25 décroit, et la section de l'ouverture 38 augmente, comme on peut le voir en comparant les figures 5a et 5b. La largeur de la sortie 38 croît d'une mesure en-, à une mesure em à mesure qu'on s'éloigne de l'embouchure 37. La surface déflectrice 39 génère une composante circonférentielle pour la direction de circulation. La direction de circulation peut être considérée comme celle de la tangente au front liquide sortant du système de circulation au niveau du système de circulation. Ainsi, la direction de circulation peut être considérée comme une direction courbe. Si on réalise plusieurs passages, comme dans l'exemple présent avec deux passages, ils peuvent être imbriqués les uns dans les autres comme représenté. La membrane 4 est portée par la pince porte-membrane 18 de toute manière appropriée, la manière spécifique illustrée ici n'étant qu'un exemple de réalisation. La membrane 4 s'étend entre une première face d'extrémité 36 et une deuxième face d'extrémité 41. La première face d'extrémité 36 est orientée en direction du système de circulation 24, et la deuxième face d'extrémité 41 lui est opposée. La membrane 4 et le système de circulation 24 sont assemblés l'un à l'autre de manière étanche à l'échantillon liquide 3. Ainsi, la membrane 4 et le système de circulation 24 définissent entre eux une chambre 33. Dans l'exemple purement illustratif donné, la membrane 4 et le système de circulation 24 sont montés étanches l'un par rapport à l'autre par l'intermédiaire d'un joint supérieur 34. En particulier, ici, le joint supérieur 34 est assemblé au réservoir de fourniture de liquide 6. Le joint supérieur 34 est en contact avec la membrane 4 selon une surface de contact périphérique fermée autour de la zone de filtration. Dans l'exemple présenté, la chambre 33 étanche est donc définie entre la face inférieure 31 du système de circulation 24, la portion d'extrémité aval du réservoir de fourniture de liquide 6, le joint supérieur 34 et la membrane 4. Un déplacement de liquide dans le dispositif 1 peut être permis de la façon suivante. L'ouverture de fourniture de liquide 8 de la cavité 7 est associée à l'entrée de liquide 9 de la membrane 4 tandis que la sortie de liquide 10 de la membrane 4 est associée à l'accès de liquide 11 du moyen de réception de liquide filtré 5. Le dispositif 1 peut présenter une symétrie de révolution autour d'un axe longitudinal Z et le réservoir de fourniture de liquide 6, la membrane 4 et le moyen de réception de liquide filtré 5 peuvent être alignés et juxtaposés selon cet axe longitudinal Z. On notera que l'axe longitudinal Z peut être vertical mais peut également être incliné voire horizontal sans que le dispositif n'en soit affecté. En particulier si l'axe longitudinal Z est incliné ou horizontal, le dispositif 1 pourra ne pas présenter de symétrie de révolution autour de cette axe pour faciliter le remplissage du réservoir de fourniture de liquide 6 et la circulation du liquide dans le dispositif 1. La membrane 4 de filtration comporte une structure rigide 4' lui permettant d'être manipulée et assemblée à des composants mécaniques du système, et une zone de filtration 4". La zone de filtration 4" est d'épaisseur inférieure à celle de la structure rigide 4', et est entourée par celle-ci. La zone de filtration 4" comporte un ou plusieurs pores de filtration 12 traversants. Une pluralité de pores de filtration 12 traversants relient chacun l'entrée de liquide 9 à la sortie de liquide 10 au moyen d'une surface intérieure de pore de filtration. A cette fin, les pores de filtration 12 comportent chacun une ouverture d'entrée de pore de filtration à l'endroit de l'entrée de liquide 9 et une ouverture de sortie de pore de filtration 15 à l'endroit de la sortie de liquide 10. La membrane 4 forme ainsi un filtre poreux. On notera que, typiquement, les pores 12 peuvent être sensiblement alignés selon la direction générale d'écoulement traversant. Comme expliqué ci-dessus, l'échantillon liquide 3 va s'écouler en direction de la membrane 4 en passant à travers le système de circulation 24. L'ouverture 37 de faible section permet en outre de réguler le flux de liquide parvenant sur la membrane 4. L'écoulement de l'échantillon liquide 3 dans le système de circulation 24 va dévier l'échantillon liquide de la direction d'écoulement traversant. Celui-ci va s'écouler selon une direction de circulation comprenant une composante transversale à la direction d'écoulement traversant, notamment dans le cas présent une composante circonférentielle et une composante radiale. La section de l'ouverture 38 va s'élargir au fur et à mesure le long de la progression de l'échantillon liquide 3 selon la direction de circulation, de manière à générer un écoulement dans la chambre 33 particulièrement adapté à la filtration. Comme on a tenté de le représenter sur la figure 4, le fluide biologique s'écoule dans la chambre sous l'effet conjoint de l'orientation qui lui est donnée par le canal 35 et de la gravité et/ou de l'aspiration. On a représenté en pointillés un exemple de la trajectoire d'une partie de l'échantillon liquide 3. La direction de circulation est donc représentée comme tangente à la nappe d'échantillon liquide en sortie du canal 35. Cette direction de circulation forme un angle a avec la direction d'écoulement traversant Z. L'angle a est important, au moins de l'ordre de 45°, voire de l'ordre de 60°. De cette manière, du liquide de l'échantillon de liquide 3 peut circuler, et doit circuler, depuis le réservoir de fourniture de liquide 6 jusqu'au moyen de réception de liquide filtré 5, à travers la membrane 4, et en particulier à travers les pores de filtration 12 de la membrane 4. La zone filtrante 4" est adaptée pour retenir une portion du fluide biologique ayant une caractéristique prédéterminée, et pour laisser une autre portion du fluide biologique la traverser. Par exemple, la portion du fluide biologique est une ou plusieurs cellules, et la caractéristique prédéterminée est une taille minimale de cellule. L'ouverture d'entrée de chaque pore traversant 12 est adaptée pour retenir les cellules rares recherchées dans l'échantillon liquide 3. Ainsi, une dimension maximale de l'ouverture d'entrée de chaque pore traversant 12 peut avantageusement être choisie de façon à être inférieure à une dimension minimale moyenne des cellules rares recherchées et, autant que possible, supérieure aux dimensions des constituants de l'échantillon de liquide 3 qu'il n'est pas souhaitable d'isoler (par exemple des micro-organismes, cellules ou éléments du plasma sanguin non recherchés). En outre, dans un mode de réalisation, une dimension maximale de l'ouverture de sortie 15 de chaque pore traversant 12 peut être supérieure à la dimension maximale de l'ouverture d'entrée dudit pore traversant 12. Dans l'ensemble de la description, on entend par « dimension maximale » d'un élément considéré, la plus grande distance séparant deux points de l'élément. Ainsi, si l'élément considéré est un disque, une « dimension maximale » est par exemple un diamètre de ce disque. Si l'élément est un cube, une « dimension maximale » est par exemple une diagonale de ce cube. La surface intérieure de chaque pore traversant 12 présente donc une forme générale de tronc, en particulier une forme générale tronconique. De cette façon, dès lors que les constituants de l'échantillon de liquide 3 qu'il n'est pas souhaitable d'isoler ont franchi l'ouverture d'entrée du pore, la section de ce dernier va en s'agrandissant en direction de l'ouverture de sortie 15 réduisant ainsi fortement la probabilité de voir lesdits constituants se bloquer et s'accumuler dans le pore. Dans un mode de réalisation de l'invention plus particulièrement adapté à retenir des cellules rares telles que des cellules tumorales ou des trophoblastes contenues dans un échantillon liquide 3, les ouvertures d'entrée des pores traversant 12, à l'endroit de l'entrée de liquide 9, présentent une densité surfacique de l'ordre de 1 x 105 pores/cm2, au moins. Pour permettre un élargissement appréciable de l'ouverture de sortie 15 des pores par rapport à l'ouverture d'entrée des pores, la zone de filtration de la membrane 4 peut présenter une épaisseur adaptée. Ainsi, l'entrée de liquide 9 de la membrane 4 peut présenter une forme générale surfacique plate 16. La sortie de liquide 10 peut également présenter une forme générale surfacique plate 17, lesdites formes générales surfaciques plates 16,17 étant sensiblement parallèles entre elles. L'entrée de liquide 9 et la sortie de liquide 10 peuvent alors être séparées par une distance d'épaisseur sensiblement comprise entre vingt et soixante-cinq micromètres et de préférence entre vingt et cinquante micromètres, encore plus préférentiellement entre 20 et trente micromètres. La distance d'épaisseur est mesurée selon une direction d'épaisseur perpendiculaire à la forme générale surfacique plate 16 de l'entrée de liquide 9. La direction d'épaisseur peut en particulier être sensiblement parallèle avec l'axe longitudinal Z. En variante, les pores traversants 12 peuvent n'être pas tronconiques, et peuvent être par exemple cylindriques, notamment cylindriques de révolution ou de section hexagonale. Pour permettre une filtration rapide de l'échantillon liquide, l'entrée de liquide 9 et la sortie de liquide 10 de la membrane 4 peuvent présenter chacune une forme générale de disque ou de polygone ayant une dimension maximale sensiblement comprise entre cinq et dix millimètres. L'entrée de liquide 9 et la sortie de liquide 10 du moyen de filtration 4 peuvent être de formes sensiblement identiques. De façon plus générale, la zone filtrante de la membrane 4 présente une forme générale cylindrique ou polyédrique ayant une dimension maximale sensiblement comprise entre dix et vingt millimètres. Comme décrit ci-avant, dans un mode de réalisation avantageux de l'invention, la zone filtrante de la membrane 4 a une distance d'épaisseur faible devant les dimensions maximales de l'entrée de liquide 9 et de la sortie de liquide 10. La membrane 4 présente ainsi la forme d'une pastille plate. Elle est avantageusement faite d'une pièce unique, rigide et intégrale. Dans l'exemple de la figure 1, la membrane 4 présente une symétrie de révolution autour de la direction d'épaisseur mais il est à noter que la membrane 4 peut également avoir une forme de polyèdre, par exemple de polyèdre à base carré. Il adopte alors par exemple une forme de pastille carré, rectangulaire ou polygonale. La membrane 4 s'étend entre une première face d'extrémité 36 et une deuxième face d'extrémité 41, lesdites première et deuxième faces d'extrémité comportant respectivement l'entrée de liquide 9 et la sortie de liquide10. La seconde face d'extrémité 41 de la membrane 4 a avantageusement une dimension maximale supérieure à la dimension maximale de la sortie de liquide 10, de façon à présenter une partie périphérique 42 non poreuse. La première face d'extrémité 36 peut présenter également une dimension maximale supérieure à la dimension maximale de l'entrée de liquide 9, de façon à présenter également une partie périphérique 42 non poreuse. La dimension maximale de la seconde face d'extrémité 41 peut être sensiblement égale à la dimension maximale de la membrane 4 lorsque l'épaisseur de cette dernière est faible devant la dimension maximale de la seconde face d'extrémité 41. 20 La membrane 4 forme alors une plaque de faible épaisseur comportant une partie périphérique non-poreuse. La partie périphérique 42 de la membrane 4 présente alors une forme générale en anneau circulaire ou polygonal. La partie périphérique 42 a une dimension maximale intérieure sensiblement comprise entre cinq et dix millimètres et une dimension maximale extérieure sensiblement comprise entre dix et vingt millimètres. 25 La partie périphérique 42 de la membrane 4 comporte une portion d'assemblage 43 adaptée pour assembler la membrane périphérique à un autre composant du dispositif 1. Dans l'exemple particulier, la portion d'assemblage 43 est assemblée à la pince porte-membrane 18. La portion d'assemblage peut comprendre quelques parties de la portion la plus radialement extérieure de la membrane 4. L'assemblage peut être à demeure ou amovible par 30 tout moyen approprié. La partie périphérique 42 peut également comprendre une partie d'étanchéité 44. La partie d'étanchéité 44 est par exemple une couronne périphérique sur la face supérieure de la partie périphérique 42 de la membrane 4 qui est en contact avec le joint supérieur 34. 35 La partie périphérique 42 de la membrane 4 peut comporter un revêtement adhésif inactif, en particulier une colle activable par pression ou une colle recouverte d'une membrane de protection détachable. De cette façon il est possible de réaliser un encollage ultérieur de la membrane 4 sur un support d'observation 40 externe (non représenté), par exemple pour pratiquer une observation des cellules rares retenue sur la membrane 4. A cette fin, il est encore avantageux que la membrane 4 comporte, ou soit entièrement réalisé en, un matériau transparent dans des longueurs d'onde du spectre visible. 15 45 Ainsi, le moyen de filtration 4 peut avantageusement comporter un matériau choisit parmi un polysulfone, un polyéthylène ou encore un verre. Afin d'améliorer encore les propriétés de filtration de la membrane 4 et de diminuer la quantité de cellules restant bloquées dans les pores 12 de la membrane 4, il est possible de conférer des propriétés hautement hydrophiles à la partie filtrante de la membrane 4. Ainsi, la surface intérieure de chaque pore 12 traversant peut présenter des propriétés hautement hydrophiles. La surface intérieure de chaque pore 12 traversant est recouverte d'une couche hautement hydrophile telle qu'une couche de Poly(vinylpyrrolidinone), d'acide hyaluronique ou de dioxyde de titane. La couche hautement hydrophile a une épaisseur Ec inférieure à un micromètre. Les pores traversants peuvent par exemple être réalisés par un procédé comportant au moins une étape de microlithographie, de gravure laser, de bombardement de particules, d'attaque chimique ou de lithographie par nano-impression. Dans un mode de réalisation de l'invention, le moyen de réception de liquide filtré 5 comporte un dispositif d'aspiration de liquide adapté pour créer une dépression au niveau de la sortie de liquide 10 de la membrane, par exemple au moyen d'une pompe reliée à un réservoir placé en contact étanche à l'air avec la membrane. Dans un autre mode de réalisation de l'invention, le moyen de réception de liquide filtré 5 comporte un matériau poreux apte à absorber du liquide par capillarité à travers la membrane 4. Le moyen de réception de liquide filtré 5 peut être apte à recevoir une quantité de liquide nettement supérieure à une centaine de microlitres, et en particulier supérieure à un millilitre, par exemple une quantité de liquide comprise entre un et cinquante millilitres. Dans des modes de réalisation d'un dispositif 1 selon l'invention, le moyen de réception de liquide filtré 5 est apte à recevoir une quantité de liquide comprise entre deux et vingt millilitres, de préférence environ douze millilitres. Le dispositif 1 selon l'invention peut permettre de mettre en oeuvre un procédé pour retenir des cellules contenues dans un échantillon liquide, par exemple de la façon suivante. Un tel procédé peut comprendre une étape de remplissage de la cavité 7 du réservoir de fourniture de liquide 6 par l'échantillon de liquide 3 contenant les cellules. Puis ce procédé peut comporter une étape de filtration (le cas échéant générée par une aspiration) de l'échantillon de liquide 3 au cours de laquelle du liquide de l'échantillon de liquide 3 s'écoule selon la direction de circulation dans la chambre 33 puis passe à travers la membrane 4 en direction du moyen de réception de liquide filtré 5, par exemple par capillarité. Enfin, une étape ultérieure comporte la récupération de la zone filtrante de la membrane 4 après la filtration du liquide de l'échantillon de liquide 3. A cette fin, la membrane 4 peut avantageusement être montée de façon amovible sur la partie supérieure du dispositif de filtration 1. Ainsi, le dispositif de filtration 1 comporte une partie d'étanchéité 46 disposée entre la membrane 4 et le réservoir de fourniture de liquide 6 à l'endroit de l'ouverture de fourniture de liquide 8. La partie d'étanchéité 46 est en particulier apte à faire étanchéité entre la membrane 4 et le réservoir de fourniture de liquide 6 de façon à permettre un passage du liquide présent dans la cavité 7 à travers la membrane 4. La membrane 4 peut également être montée de manière étanche avec le moyen de réception de liquide filtré 5. A cet effet, le moyen de réception de liquide filtré 5 porte un joint inférieur 47. Le joint inférieur 47 réalise l'étanchéité entre le moyen de réception de liquide filtré 5 et la membrane 4. Le joint inférieur 47 est par exemple réalisé symétrique du joint supérieur 34 par rapport à la membrane 4. Quand le moyen de réception de liquide filtré 5 et le réservoir de fourniture de liquide 6 sont assemblé l'un avec l'autre, la membrane 4 est maintenue serrée entre les joints supérieur 34 et inférieur 47. Une fois l'étape de filtration accomplie, la partie inférieure 17 peut être désassemblée de la partie supérieure 16. La membrane 4 est alors accessible. La membrane 4 peut être récupérée par tout moyen approprié pour tout traitement approprié ultérieur. Dans le mode de réalisation présenté ci-dessus, le système de circulation 24 est réalisé par l'assemblage de la pièce rapportée 27 et de la bague annulaire 25 du réservoir de fourniture de liquide 6. Toutefois, en variante, le système de circulation 24 pourrait être un ensemble intégré assemblé au réservoir de fourniture de liquide 6 sans que ce dernier ne fasse partie du système de circulation 24. Un exemple de réalisation en est représenté sur les figures 6 et 7. Dans ce mode de réalisation, pour simplifier, on utilise le même réservoir de fourniture de liquide 6 que dans le premier mode de réalisation, mais ceci est purement illustratif. Dans ce cas, on peut utiliser la bague annulaire 25 pour la rétention du système de circulation 24 sur le réservoir de fourniture de liquide 6. Dans ce mode de réalisation, le système de circulation 24 comporte une pièce 48 monobloc comportant une surface radialement extérieure 49 complémentaire de la surface radialement intérieure 19 du réservoir de fourniture de liquide 6. A proximité de son extrémité aval, la pièce 48 comporte un épaulement 50. L'épaulement 50 est supporté par la bague annulaire 25. La pièce 48 en interne comporte une paroi externe 51 et une ouverture centrale. La paroi externe 51 comprend la surface radialement extérieure 49 et une surface radialement intérieure 52 opposée. Un filet 53 s'étend dans l'ouverture centrale et s'étend radialement vers l'intérieur depuis la surface radialement intérieure 52. Le filet 53 s'étend aussi de l'embouchure 37 à la sortie 38 aval. Le filet 53 peut donc présenter une forme en hélice. La surface tournée vers l'amont du filet fait partie de la surface déflectrice 39. Le filet 53 peut agit comme un diviseur de flux, divisant l'écoulement fluide en deux. On utilise le bord amont du filet comme bord séparateur. Ainsi, un passage 32 est défini entre la face amont du filet et la face aval du filet situé en amont de celui-ci. On peut utiliser plusieurs filets, de manière à diviser l'écoulement en une pluralité de jets répartis sur la zone filtrante 4" de la membrane filtrante 4 en aval du système de circulation 24. Dans le présent exemple, on utilise deux filets pour diviser l'écoulement en trois jets de fluides au niveau de la zone filtrante 4" de la membrane.45 REVENDICATIONS1. Dispositif de filtration d'un fluide biologique comprenant : - un réservoir de fourniture de liquide (6) adapté pour contenir un fluide biologique, - une membrane (4) associée de manière étanche au réservoir de fourniture de liquide et comprenant une zone filtrante (4") traversable par le fluide biologique selon une direction d'écoulement traversant (Z), la zone filtrante étant adaptée pour retenir une portion du fluide biologique ayant une caractéristique prédéterminée, et pour laisser une autre portion du fluide biologique la traverser, - un système de circulation (24), en amont de la zone filtrante selon la direction d'écoulement traversant (Z), adapté pour guider le fluide biologique au niveau de la zone filtrante selon une direction de circulation comprenant au moins une composante transverse à la direction d'écoulement traversant. 2. Dispositif de filtration d'un fluide biologique selon la revendication 1, dans lequel le système de circulation (24) comprend un corps (27) présentant une ouverture amont (37) et un passage (32) en communication fluidique avec l'ouverture amont (37), le passage (32) définissant la direction de circulation. 3. Dispositif de filtration selon la revendication 2, dans lequel le passage (32) comprend une ouverture aval (40) en direction de la zone filtrante. 4. Dispositif de filtration selon la revendication 3, dans lequel le corps (27) présente la forme d'une plaque mince s'étendant normalement à la direction d'écoulement traversant (Z), comprenant une face amont (30) munie de l'ouverture amont (37) et d'une face aval (31) opposée à la face amont, et comportant l'ouverture aval (40). 5. Dispositif de filtration selon la revendication 4, dans lequel la plaque mince est assemblée au réservoir de fourniture de liquide (6). 6. Dispositif de filtration selon la revendication 4 ou 5, dans lequel le système de circulation (24) comprend également une portion (25) du réservoir de fourniture de liquide (6) coopérant avec la plaque mince pour définir un canal (35). 7. Dispositif de filtration selon l'une des revendications 1 à 5, dans lequel le système de circulation (24) est assemblé au réservoir de fourniture de liquide (6). 8. Dispositif de filtration selon la revendication 7, dans lequel le système de circulation (24) comprend une portion d'assemblage au réservoir de fourniture de liquide (6), et une portion déflectrice (39) d'écoulement. 9. Dispositif de filtration selon la revendication 8, dans lequel le système de circulation (24) comprend une paroi périphérique (51), et dans lequel la portion déflectrice (39) s'étend radialement vers l'intérieur depuis la paroi périphérique (51). 10. Dispositif de filtration selon la revendication 8 ou 9, dans lequel la portion déflectrice (39) d'écoulement présente une forme en hélice. 11. Dispositif de filtration selon l'une des revendications 1 à 10, dans lequel la direction de circulation forme un angle d'au moins 45°, de préférence d'au moins 60° avec la direction d'écoulement traversant (Z). 12. Dispositif de filtration selon l'une des revendications 1 à 11, dans lequel le système de circulation (24) et la membrane (4) définissent entre eux une chambre (33) pour le fluide biologique. 13. Dispositif de filtration selon l'une des revendications 1 à 12, dans lequel le réservoir de fourniture de liquide (6) comprend une portion de réservoir et une portion de filtration (48) en communication fluidique l'une avec l'autre, la portion de réservoir étant d'étendue (L) supérieure à celle (I) de la portion de filtration (48) selon une direction transverse à la direction d'écoulement traversant, la portion de filtration recevant le système de circulation (24). 14. Dispositif de filtration selon l'une des revendications 1 à 13, dans lequel la caractéristique prédéterminée est une taille de cellule. 15. Dispositif de filtration selon l'une des revendications 1 à 14 dans lequel le système de circulation (24) comprend une embouchure (37) et une sortie (38), l'aire de la sortie (38) étant supérieure à celle de l'embouchure (37). 16. Dispositif de filtration selon la revendication 15 dans lequel le système de circulation comprend une sortie (38) allongée selon la direction de circulation, la largeur de la sortie (38) croissant à mesure que l'on s'éloigne de l'embouchure (37) selon la direction de circulation. 17. Dispositif de filtration selon l'une des revendications 1 à 16 dans lequel le système de circulation comprend une embouchure (37), l'aire de l'embouchure étant inférieure à l'aire de la zone filtrante. 18. Dispositif de filtration selon l'une des revendications 1 à 17, dans lequel le système de circulation (24) comprend au moins un bord séparateur adapté pour séparer un écoulement amont de fluide biologique en au moins deux parties.