Brevet FR3015977A1 — publié le 20150703

La présente invention concerne une forme cristallisée de chlorhydrate de tritoqualine ainsi qu'un procédé d'obtention. La tritoqualine, dont le nom chimique est la 7-amino-4,5,6-triéthoxy-3-(4- méthoxy-6-méthy1-7,8-dihydro-5H-[1,3]dioxolo [4,5-g] isoquinolin-5 -y1)-3 H- isobenzofuran- 1 -one est une molécule connue pour son action antihistaminique supposée ; c'est en particulier un inhibiteur enzymatique de la L-histidine décarboxylase. Il a été démontré depuis peu que cette activité était très faible ; en revanche son activité sur le récepteur 114 suscite un vif intérêt depuis quelques années. En particulier cette molécule a été largement étudiée dans le domaine des maladies inflammatoires digestives et plus particulièrement gastriques et oesophagiennes. Il a également été trouvé que la tritoqualine avait un intérêt dans le traitement des leucémies aigües et dans celui de la mucoviscidose, la broncho-pneumopathie chronique obstructive (BPC0) et de l'exacerbation de l'asthme. Ces diverses applications de la tritoqualine ont fait l'objet de nombreux brevets. Toutefois, l'utilisation optimale de la tritoqualine s'est heurtée à différents problèmes liés aux propriétés physico chimiques intrinsèques de la molécule, et en particulier à sa très faible solubilité (100 ppm dans l'eau à température ambiante). Différentes méthodes ont été utilisées pour accroître la solubilité et par conséquent la biodisponibilité de la tritoqualine, par exemple en passant par le stade du chlorhydrate de tritoqualine formé in situ par adjonction d'acide chlorhydrique à de la tritoqualine en solution. Celui-ci a une durée de demi-vie de quelques heures en solution aqueuse. La molécule se coupe au niveau des 2 carbones asymétriques entre le cycle isoquinoléine (cotarnine) et le cycle phtalique. Malgré de nombreux essais, il n'a jamais été possible d'isoler le chlorhydrate de tritoqualine sous forme cristallisée, ce qui aurait permis une plus grande reproductibilité des études cliniques menées avec cette molécule et une meilleure maîtrise de l'action de la tritoqualine lors de son administration aux patients. La présente invention concerne précisément le chlorhydrate de tritoqualine sous forme cristallisée ainsi qu'un procédé d'obtention de cette forme cristallisée. Un procédé préférentiel de synthèse du chlorhydrate cristallisé de tritoqualine va maintenant être décrit, la réaction étant globalement la suivante : Un mode opératoire va maintenant être décrit plus en détails. Dans un erlenmeyer de 500 ml muni d'un barreau aimanté et d'une agitation 5 magnétique, introduire à l'aide d'une spatule 30 g de tritoqualine base dans 45 ml d'éthanol absolu (1,5 volume) à température ambiante, puis ajouter rapidement et sous agitation rapide 6 ml d'acide chlorhydrique à 37 % (soit 1 équivalent molaire). Dès la fin de l'ajout de l'acide chlorhydrique, la tritoqualine base encore en suspension, se dissout progressivement dans l'éthanol en quelques minutes. Bien que cette 10 solution soit très concentrée (solution sursaturée), le chlorhydrate de tritoqualine reste en solution en raison d'un phénomène de surfusion. Ajouter progressivement de l'ordre de 120 ml d'éther éthylique (4 volumes) par fraction successive de 15 à 20 ml. Chaque ajout provoque un trouble de la solution par apparition d'une seconde phase. Cette opalescence disparaît au bout de quelques dizaines de secondes d'agitation à température ambiante et 15 la solution redevient claire et translucide. Poursuivre l'ajout de petites fractions d'éther éthylique. Lorsque les ajouts cumulés d'éther sont de l'ordre de 3 volumes, l'opalescence devient persistante, stopper l'ajout d'éther à ce moment précis et maintenir l'agitation pendant 15 mn à température ambiante ; le chlorhydrate de tritoqualine précipite progressivement durant cette phase. Ajouter le reliquat d'éther (à concurrence de 4 20 volumes) afin de parfaire le rendement de cristallisation. Maintenir l'agitation pendant une demi-heure supplémentaire. L'agitation doit être suffisante pour permettre d'obtenir une suspension d'apparence homogène. Si l'agitation est trop faible, le chlorhydrate de tritoqualine décante dans le fond de l'erlenmeyer ; a contrario, si l'ajout de l'éther est trop rapide (c'est-à-dire sans attendre que 25 l'opalescence ne disparaisse entre deux ajouts d'éther, alors le chlorhydrate de tritoqualine est de très mauvaise qualité : il ne précipite pas convenablement et conduit à un produit plus ou moins amorphe et collant (une sorte de gel incolore et visqueux gorgé de solvant) ou un mélange de cristaux et de gel amorphe très collant. 2 H3C' H3C OCH3 H3C 0 HCl/Et0H I-13C NH2 Et20 Tritoqualine Base Tritoqualine Chlorhydrate Lorsque l'opération de cristallisation est mené convenablement selon le procédé ci- dessus, la suspension obtenue est filtrée sous pression réduite sur verre fritté n°3 ou 4; la filtration est rapide et le gâteau ne colmate pas le filtre. Le gâteau est d'aspect très blanc et les eaux mères sont incolores à légèrement 5 jaunes. Il est néanmoins préférable de procéder à un lavage piston du gâteau avec 20 ml (2 volumes) d'éther éthylique supplémentaires. Les jus de filtration et les jus de lavage sont réunis et remis sous agitation pendant 1 heure supplémentaire en refroidissant progressivement l'ensemble à 5 °C. Un second jet précipite à nouveau. Celui-ci est filtré puis est traité de la même façon que le premier jet de 10 cristallisation. Masse du l' jet après séchage : 28,0 g soit un rendement de 87 % Masse du 2ème jet après séchage : 3.6 g soit au total 31.6 g de chlorhydrate cristallisé de tritoqualine. Masse théorique attendue : 32,3 g / Rendement global = 98 % 15 Les propriétés physico chimiques comparatives de la tritoqualine base et du chlorhydrate cristallisé de tritoqualine sont réunies dans le tableau ci-dessous. Tritoqualine PF °C Solubilité Stabilité à la lumière dans l'eau dans l'éthanol Base C26H32N208 Masse molaire : 500.5 184°C 150 ppm (pratiquement insoluble et hydrophobe) 2.5 g/1 à 20°C, Jaunit progressivement après quelques jours d'exposition à la lumière naturelle 50 g/1 au reflux de l'éthanol Chlorhydrate C26H33C1 N208 Masse molaire : 537 Décom- position à T hydrophile et soluble à pH 300 g/1 à 20°C, se décompose au reflux en cotarnine Stable à la lumière naturelle pendant plusieurs semaines. > 170°C 20 Par ailleurs, le chlorhydrate de tritoqualine est très peu soluble voire insoluble dans les éthers ; il est en revanche soluble dans les alcools primaires, l'acétone et la méthyl éthyl cétone. Différentes analyses ont été menées afin d'établir que le produit formé est bien le chlorhydrate de tritoqualine. Ainsi, le spectre IR du chlorhydrate de tritoqualine illustré dans le graphe ci-dessous fait bien apparaître une bande large à 2400 cm-1 caractéristique du groupe ammonium. 30 35 40 45 100 15 20 . . . MCO 4000 120tOOMM 2800 2000 17O 11 - 1800. .1280 1000 7110 1km 25 En revanche cette bande n'apparaît pas sur le spectre IR de la tritoqualine base illustré dans le graphe ci-dessous. 4000 2000 2000 1000 1000 1201000/01 1/am 102.6 141' 400 27.5 DB 02.6 90 67.5 OD 02.6 - D 00 Le spectre RMN 1H et 13C, non représenté ici, confirme bien qu'il s'agit du chlorhydrate de tritoqualine. Par ailleurs, le dosage des ions chlorures est de 6,7 % et correspond à la formation d'un monochlorhydrate. La synthèse d'un dichlorhydrate (un sur l'azote de la quinoléine et un second sur l'amine primaire) a été tentée en ajoutant deux équivalents d'acide chlorhydrique. On obtient toujours le monochlorhydrate identique à celui précédemment décrit. Enfin, il est intéressant de noter que le chlorhydrate de tritoqualine présente le 10 même profil d'impuretés que celui de la tritoqualine base utilisée pour sa synthèse. Dans l'exemple préférentiel de synthèse précédemment décrit, l'éthanol est utilisé comme solvant, mais d'autres alcools pourraient être utilisés, en particulier les alcools aliphatiques inférieurs, par exemple le méthanol ou l'isopropanol. Bien que donnant des rendements moins élevés et une cristallisation plus aléatoire, il a également été possible de 15 dissoudre la tritoqualine base en présence d'acide chlorhydrique dans l'acétone ou la méthyl éthyl cétone, ou bien encore dans des dérivés glycolés tel que le glyme, également dénommé diméthyl glycol, le diglyme, également dénommé di(2-méthoxyéthyl)éther, ou le diéthylène glycol monométhyl éther. De même l'éther éthylique utilisé lors de la cristallisation du chlorhydrate de 20 tritoqualine pourrait être remplacé par un autre éther, comme par exemple le ter-butyl méthyl éther ou le tétrahydrofurane. Le chlorhydrate de tritoqualine ainsi obtenu est hydrophile et soluble en solution aqueuse à pH 3,0 le chlorhydrate de tritoqualine précipite, mais, de façon tout à fait intéressante, cette précipitation se fait sous forme de très fines particules, donnant alors à la solution l'aspect d'un lait et augmentant ainsi de façon substantielle la biodisponibilité de la tritoqualine qui voit sa surface de contact considérablement augmentée. 30 On comprendra mieux ainsi l'importance d'une forme cristallisée de chlorhydrate de tritoqualine qui, contrairement à la tritoqualine base qui est hydrophobe et pratiquement insoluble, est à la fois hydrophile et soluble. Il est apparu en outre, de façon tout à fait inattendue, qu'il existe une différence très importante de solubilité dans les alcools et les glycols entre la tritoqualine base et le chlorhydrate de tritoqualine, ce dernier étant beaucoup plus soluble que la tritoqualine base. Cette solubilité accrue du chlorhydrate de tritoqualine dans les alcools et les glycols permet ainsi d'accéder à des formulations inaccessibles par un autre moyen. Par ailleurs, le chlorhydrate de tritoqualine est très stable comme cela ressort du tableau ci-dessus. Cette stabilité tout à fait inattendue par rapport à la faible stabilité à la lumière de la tritoqualine base permet de préparer des compositions pharmaceutiques contenant la tritoqualine sous forme de son chlorhydrate pour les usages thérapeutiques précédemment cités. 15 20 25 30 35 40 45 REVENDICATIONS1. Chlorhydrate de tritoqualine caractérisé en ce qu'il se présente sous forme cristallisée. 2. Chlorhydrate selon la revendication 1 caractérisé en ce qu'il est soluble et hydrophile à pH 3,0. 3. Procédé d'obtention du chlorhydrate selon l'une des revendications 1 ou 2 caractérisé en ce qu'il consiste à dissoudre de la tritoqualine base dans un alcool, notamment un alcool aliphatique inférieur, ou dans un dérivé glycolé, en présence d'acide chlorhydrique jusqu'à obtenir une solution en état de sursaturation. 4. Procédé selon la revendication 3 caractérisé en ce que l'alcool est de l'éthanol. 5. Procédé selon la revendication 3 caractérisé en ce que le dérivé glycolé est le diméthyl glycol, le di(2-méthoxyéthyl)éther, ou le diéthylène glycol monométhyl éther. 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 3 à 5 caractérisé en ce que ladite solution fait ensuite l'objet d'un traitement par un éther. 7. Procédé selon la revendication 6 caractérisé en ce que ledit éther est l'éther éthylique. 8. Procédé selon l'une des revendications 6 ou 7 caractérisé en ce que ledit traitement se fait par ajouts successifs de fractions d'éther. 9. Procédé selon la revendication 8 caractérisé en ce que, avant d'effectuer un nouvel ajout d'éther, on attend que la solution ne soit plus opalescente. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 6 à 9 caractérisé en ce que la proportion d'éther utilisée est de 4 volumes pour 1,5 volume d'alcool ou de dérivé glycolé permettant la dissolution de la tritoqualine.30