Brevet FR3013980A1 — publié le 20150605

COMPOSITION A BASE D'EAU DE MER ET D'EXTRAITS D'ALGUES A ACTIVITE ANTI-VIEILLISSEMENT CUTANE Domaine technique La présente invention se rapporte à une composition, destinée aux soins de la peau à visée cosmétique ou dermatologique, à base d'extraits d'algues obtenus à partir de cultures d'algues unicellulaires du genre symbiodinium (classe dynophycées,famille gymnodiniacées) et du genre isochrysis (classe prymnesiophycées, famille isochrysidacées) . Cette composition trouve notamment une application dans le domaine de la cosmétique, en particulier pour la lutte contre les signes du vieillissement cutané. Dans la description ci-dessous, les références entre crochets ([ ]) renvoient à la liste des références présentée à la fin du texte. Etat de la technique La peau est constituée de deux compartiments, l'un superficiel, l'épiderme, et l'autre plus profond, le derme, qui interagissent. Le derme fournit à l'épiderme un support solide. C'est également son élément nourricier. Il est principalement constitué de fibroblastes et d'une matrice extracellulaire composée elle-même principalement de glucosamino glycanes, de collagène et d'élastine. En dessous du derme se situe l'hypoderme riche en adipocytes. La perte de densité des peaux matures se traduit par une diminution de l'épaisseur et de la tonicité de la peau. Il existe de nombreux produits cosmétiques destinés à limiter les signes du vieillissement cutané. Cependant, il reste un fort besoin de produits efficaces, notamment ayant un effet stimulateur sur les cellules du derme et de l'hypoderme, et/ou notamment pour augmenter la production d'élastine et de glycosamino glycanes par des fibroblastes normaux de derme humain (NHDF) et pour augmenter la différenciation des pré-adipocytes en adipocytes. Description de l'invention La présente invention a précisément pour but de répondre à ces besoins et inconvénients de l'art antérieur. La Demanderesse est la première à avoir mis en évidence que l'utilisation d'une composition comprenant un extrait d'algue isochrysis galbana et un extrait d'algue symbodinium microadriaticum permet précisément de répondre efficacement au besoin précité. En particulier, les inventeurs ont, de manière inattendue, mis en évidence qu'une composition comprenant un extrait d'algue isochrysis galbana et un extrait d'algue symbodinium microadriaticum permet de prévenir, de retarder, de limiter les signes du vieillissement de la peau. La composition selon l'invention permet également de lutter contre les signes du vieillissement cutané, de lisser la peau du visage et du corps, de traiter les rides et les ridules de la peau. La Demanderesse est parvenue à démontrer qu'une composition selon l'invention possède avantageusement un effet stimulateur sur les cellules du derme et de l'hypoderme. Notamment, la composition de l'invention permet avantageusement d'augmenter la production d'élastine et de glycosamino glycanes par des fibroblastes normaux de derme humain (NHDF) et d'augmenter la différenciation des pré-adipocytes en adipocytes, ceci permettant avantageusement de redonner du volume à la peau profonde et de retrouver une peau plus turgescente caractéristique des peaux jeunes. Avantageusement, la Demanderesse est également parvenue à augmenter l'efficacité d'un extrait d'algue symbiodinium pour formuler une association avec un autre extrait d'algue. Notamment, la présente association répond aux problèmes posés ci-dessus d'une part en augmentant la production d'élastine et de glycosamino glycanes par des fibroblastes normaux de derme humain (NHDF) en culture à une concentration cent fois inférieure à celle d'un extrait de symbiodinium seul et d'autre part en augmentant la différenciation des pré-adipocytes en adipocytes. Avantageusement, l'association entre isochrysis galbana, symbiodinium microadriaticum, calcium et acide hyaluronique permet d'obtenir des effets similaires à ceux induits par l'association entre symbiodinium microadriaticum, calcium et acide hyaluronique à une concentration 100 fois inférieure. Un premier objet de l'invention se rapporte donc à une composition cosmétique ou dermatologique comprenant un extrait d'algue isochrysis galbana et un extrait d'algue symbiodinium microadriaticum. Par « extrait d'algue », on entend tout ou partie d'une algue. L'extrait d'algue peut être le résultat de l'action d'un solvant ou d'une technologie séparative sur une algue, des cellules d'algues ou des cellules d'algues éclatées. Par exemple, il peut s'agir de cellules entières, de fragment cellulaire ou de cellule éclatée, c'est-à-dire dont les membranes cellulaires ont été éclatées par un procédé connu de l'homme du métier. Un procédé de préparation peut être par exemple issu de M .A. Borowitzka et al. (M .A. Borowitzka ; L.J. Borowitzka, micro-algal biotechnology p381-394 Cambridge University Press 1988 ([2])). Avantageusement, l'action d'un solvant ou d'une technologie séparative sur le matériau de départ permet un enrichissement, dans l'extrait d'algue, en certains constituants de l'algue, et l'élimination de 2 0 constituants inutiles ou indésirables dans l'application envisagée présents dans le matériau de départ. La culture des algues peut être réalisée dans un milieu approprié, par exemple celui décrit dans M .A. Borowitzka et al. ([2]) et arrêtée lorsque la concentration est comprise entre 50000 et 1000000 cellules par ml. La culture 2 5 peut être centrifugée pour récolter les algues. La pâte d'algues obtenue peut être soit utilisée en l'état pour produire des suspensions d'algues unicellulaires standardisées, c'est-à-dire un nombre de cellules par millilitre compris entre 4.106 et 40.106, par exemple 10.106 ou 20.106, ou 30.106 ou 35.106, soit être modifiée par éclatement des cellules d'algues et par élimination des débris 30 membranaires par une technique séparative appropriée connue de l'homme du métier, comme la centrifugation ou la filtration par exemple. On entend par « composition », au sens de la présente invention, toute association entre les extraits d'algues utilisées dans l'invention. L'association selon l'invention peut être utilisée en tant que telle, c'est-à-dire sans adjuvant. A cet effet, la composition de l'invention est constituée d'un extrait d'algue isochrysis galbana et un extrait d'algue symbiodinium microadriaticum. Dans ce mode de réalisation, la composition de l'invention ne comporte que de l'extrait de isochrysis galbana et de l'extrait d'algue symbiodinium microadriaticum. Alternativement, l'association peut entrer dans la formulation d'une composition de produits cosmétiques tels que définis à l'article 2-1-a du règlement (EC) 1223-2009. Par exemple, l'association peut être incorporée dans un milieu physiologiquement acceptable, ou un milieu cosmétiquement acceptable, ou un milieu dermatologiquement acceptable. On entend par « milieu physiologiquement acceptable », un milieu compatible avec les matières kératiniques de l'être humain, en l'occurrence la 15 peau. On entend par « milieu cosmétiquement acceptable», un milieu sans odeur, couleur ou aspect désagréable pour l'utilisateur. On entend par « milieu dermatologiquement acceptable », un milieu qui ne génère pas de picotement, tiraillement ou rougeur inacceptable pour l'utilisateur. 20 On entend par « composition cosmétique », dans la présente invention, toute composition à visée cosmétique, c'est à dire esthétique, une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, par exemple l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires, les organes externes, les dents et les muqueuses externes. Avantageusement, une composition 25 cosmétique permet, exclusivement ou principalement de les protéger, parfumer, maintenir en bon état, modifier leur aspect ou en corriger les défauts superficiels. Dans la présente, on entend part « composition dermatologique » toute composition à visée dermatologique c'est à dire une composition pouvant être 30 mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, pour un traitement de la peau, des muqueuses et des phanères, ongles, cheveux, poils. On entend par « isochrysis galbana », au sens de la présente invention, une algue unicellulaire de la classe des prymnesiophycées, de la famille isochrysidacées. On entend par « symbiodinium microadriaticum », au sens de la présente invention, une algue unicellulaire de la classe dinophycées, de la famille gymnodiniacées. Il peut s'agir par exemple de xanthelles ou zooxanthelles. La composition de l'invention peut comprendre entre 0,01 et 80% en poids par rapport au poids total de ladite composition de l'extrait d'isochrysis. La composition peut par exemple comprendre entre 0,1 et 80%, ou entre 1 et 80%, ou entre 1 et 65%, ou entre 1 et 50%, ou entre 5 et 65%, ou entre 5 et 50%, ou entre 10 et 50%, ou entre 10 et 40%, par exemple 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% en poids par rapport au poids total de ladite composition de l'extrait d'isochrysis. La composition de l'invention peut comprendre entre 0,1 et 80% en poids par rapport au poids total de la composition de l'extrait de symbiodinium. La composition peut par exemple comprendre entre 1 et 80%, ou entre 1 et 65%, ou entre 1 et 50%, ou entre 5 et 65%, ou entre 5 et 50%, ou entre 10 et 50%, ou entre 10 et 40%, par exemple 10%, ou 20%, ou 30%, ou 40% en poids par rapport au poids total de ladite composition de l'extrait de symbiodinium. Plus particulièrement, la composition de l'invention peut comprendre entre 0,01 et 80% en poids par rapport au poids total de ladite composition de l'extrait d'isochrysis et entre 0,1 et 80% en poids par rapport au poids total de la composition. Par exemple, l'extrait d'algue symbiodinium peut être présent à une concentration comprise entre 20 et 80 %, par exemple 25%, 30%, 40%, 50%, 60% ou 70%, et l'extrait d'algue isochrysis à une concentration comprise entre 20 et 80% par exemple 25%, 30%, 40%, 50%, 60% ou 700,A , en poids par rapport au poids total de la composition. La proportion entre ledit extrait d'isochrysis et ledit extrait de symbiodinium est comprise entre 0,1 et 3. Par exemple, cette proportion peut être 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 1, 1,5, 2, 2,5 ou 3. La composition de l'invention peut comprendre une concentration en symbiodinium d'environ 104 à 1010 cellules /ml, ce qui correspond à une biomasse sèche comprise entre 0,00005 et 5% en poids total de la composition. On peut par exemple citer une concentration en symbiodinium dans la composition de 400.106 cellules /ml, ce qui correspond à une biomasse sèche de 0,2 % en poids total de la composition. La composition de l'invention peut comprendre une concentration en isochrysis d'environ 104 à 1010 cellules /ml, ce qui correspond à une biomasse sèche comprise entre 0,00005 et 5% en poids total de la composition. On peut par exemple citer une concentration en isochrysis dans la composition comprise entre 105 et 108, ou par exemple 400.106 cellules /ml, ce qui correspond à une biomasse sèche de 0,2 %. Par exemple, la composition selon l'invention peut comprendre une concentration en cellules d'algues isochrysis comprise entre 104 et 1010 cellules ou équivalent biomasse par ml de ladite composition, et une concentration en cellules d'algues symbiodinium comprise entre 104 et 1010 cellules ou équivalent biomasse par ml de ladite composition Par exemple, la composition peut contenir entre 105 et 108 cellules ou équivalent biomasse par ml de la composition, par exemple 400.106 cellules /ml. La composition selon l'invention peut comprendre en outre de l'eau de mer. L'eau de mer peut être naturelle ou synthétique. Eventuellement, elle peut être sélectivement dessalée. On entend par « sélectivement dessalée », au sens de la présente invention, toute eau de mer dans laquelle la concentration en ions chlore, sodium, et potassium a été diminuée ou toute eau de mer dans laquelle certains ions ont été éliminés. Toute technique connue de l'homme du métier peut être utilisée pour cette diminution ou cette élimination, par exemple une électrodialyse avec des membranes sélectives pour les ions monovalents. Avantageusement, la quasi-totalité des ions polyvalents, par exemple entre 70 et 99% des ions polyvalents, dont les oligo-éléments, peut être conservée. La composition de l'invention peut, par exemple, comprendre une concentration en sel (chlorure de sodium) de l'eau de mer comprise entre 0,5 et 15 g de chlorure de sodium (NaCI) par litre d'eau de mer, par exemple entre 2 et 15 g de NaCI par litre d'eau de mer, ou entre 5 et 10 g/I, par exemple 8 g/I, ou 8,5 g/I, ou 8,95 g/I. Avantageusement, cette concentration en sel de l'eau de mer permet la préservation de la barrière cutanée et/ou réduit la tendance hydrophobe des peaux sèches. Avantageusement, l'eau de mer utilisée peut comprendre du magnésium, par exemple entre 100 et 2000 mg/I d'ions magnésium, ou entre 500 et 2000 mg/I ou entre 1000 et 1500 mg/I par exemple 1300 mg/L. Avantageusement, la présence de magnésium permet une réduction des micro-crispations de la peau et/ou un lissage de la peau, une peau plus reposée et un ralentissement du vieillissement de la peau. Avantageusement, l'eau de mer utilisée peut comprendre du calcium. Il peut s'agir par exemple de 100 à 600 mg/I. Avantageusement, il permet l'accélération de la réparation de la barrière cutanée. Avantageusement, les extraits d'algues de la composition de l'invention peuvent être des cellules éclatées. On entend par « cellules éclatées », au sens de la présente invention, toute cellule dont la membrane est détruite en tout ou partie. Avantageusement, les cellules éclatées libèrent leur contenu cellulaire dans le milieu. Toute technique connue de l'homme du métier peut être utilisée, par exemple la technique d'éclatement par choc hyperbare, ou le processeur rotor-stator et mixeur, ou le processeur de type valve, les processeurs fluide à géométrie fixe, ou la pression constante associée à un orifice fixe (Oswald et al., Handbook of micro-algal culture : applied phycology and biotechnology A. Richmond-Q. Hu p282-4 WILEY (2013), ( [2] )) suivie éventuellement d'une centrifugation permettant avantageusement d'éliminer les chloroplastes et de diminuer de ce fait la coloration de l'extrait. Avantageusement, la composition de l'invention ne comprend pas de débris membranaires et cellulaires insolubles issus de l'éclatement des cellules. La composition de l'invention peut, en outre, comprendre un ou plusieurs actifs cosmétiques complémentaires, comme par exemple des agents anti-âge, des agents anti-rides, des agents hydratants, des filtres UV (ultra-violets), des agents antioxydants, des actifs stimulant la synthèse de macromolécules dermiques et/ou épidermiques et/ou empêchant leur dégradation, cette liste n'étant pas limitative. Par exemple, un agent anti-âge peut être choisi parmi les agents anti-âge connus de l'homme du métier, comme par exemple_les agents anti-rides, les filtres UV, les vitamines en particulier B3, B8, B12 et B9, les agents hydratants, les agents desquamants, les agents améliorant la fonction barrière, les agents antioxydants, les agents dermodécontractants ou agents dermorelaxants, les agents anti-glycation, les agents stimulant la synthèse des macromolécules dermiques et/ou épidermiques et/ou empêchant leur dégradation, les agents stimulant la prolifération des fibroblastes ou des kératinocytes et/ou la différenciation des kératinocytes, les agents favorisant la maturation de l'enveloppe cornée, les inhibiteurs de NO-synthases, les antagonistes des récepteurs périphériques des benzodiazépines (PBR), les agents augmentant l'activité de la glande sébacée, les agents stimulant le métabolisme énergétique des cellules et les agents apaisants. Selon une variante particulière de l'invention, l'association selon l'invention est mise en oeuvre conjointement avec au moins un actif choisi parmi les actifs anti-rides, les filtres UV, les actifs antiâges, les agents antioxydants, les agents anti-glycation, les actifs stimulant la synthèse des macromoléculaires dermiques et/ou épidermiques, les agents stimulant la prolifération des fibroblastes ou des kératinocytes et/ou la différenciation des kératinocytes et leurs mélanges. Par exemple, ce ou ces actif(s) anti-âge pourra ou pourront être présent(s) dans la composition en une teneur allant de 0,001 à 20 % en poids, par exemple de 0,01 à 10 % en poids, et plus préférentiellement de 0,01 à 5 % en poids par rapport au poids total de ladite composition. Par exemple, un agent anti-rides peut être choisi parmi les agents antirides connus de l'homme du métier, par exemple l'acide ascorbique et ses dérivés, tels que l'ascorbyle phosphate de magnésium et le glucoside d'ascorbyle; le tocophérol et ses dérivés, tels que l'acétate de tocophéryle; l'acide nicotinique et ses précurseurs, tels que la nicotinamide; le glutathion et ses précurseurs, les extraits de plantes ; ainsi que les protéines végétales et leurs hydrolysats, tels que les hydrolysats de protéines de riz ou de soja; les extraits bactériens; les [alpha]-hydroxyacides; les [beta]-hydroxyacides, tels que l'acide salicylique et le lycopène; les sels de manganèse et de magnésium, en particulier les gluconates et leurs mélanges. Par exemple, le ou les agent(s) anti-rides additionnel(s) peut ou peuvent représenter au moins 0,05 %, de préférence au moins 0,5 % et plus préférentiellement au moins 1 % en poids par rapport au poids total de la composition le ou les contenant. Par exemple, un agent hydratant peut être choisi parmi les agents hydratants ou humectants connus de l'homme du métier, par exemple l'urée, des monosaccharides comme le mannose, l'acide hyaluronique, les AHA (Alpha Hydroxy Acid) , les BHA(Beta Hydroxy Acid) et leurs sels, les sels de l'acide pyrolidone carboxylique, des céramides, et notamment un céramide 5, du glycérol et/ou du karité. Le ou les agent(s) hydratant(s) additionnel(s) peut ou peuvent représenter au moins 0,05 %, de préférence au moins 0,5 % et plus préférentiellement au moins 1 % en poids par rapport au poids total de la composition le ou les contenant. A titre d'exemple, un filtre UV peut être choisi parmi les filtres UV connus de l'homme du métier, par exemple les anthranilates, en particulier l'anthranilate de menthyle; les benzophénones, en particulier la benzophénone-1, la benzophénone-3, la benzophénone-5, la benzophénone-6, la benzophénone-8, la benzophénone-9, la benzophénone-12, et préférentiellement la Benzophénone-2 (Oxybenzone), ou la Benzophénone-4 (Uvinul MS40® disponible chez B.A.S.F.); les benzylidènes-camphres; les benzimidazoles, en particulier le benzimidazilate (Neo Heliopan AP® disponible chez Haarmann et Reimer), ou l'acide phénylbenzimidazole sulfonique (Eusolex 232® disponible chez Merck); les benzotriazoles, en particulier le drométrizole trisiloxane, ou le méthylène bis-benzotriazolyltétraméthylbutylphénol (Tinosorb M® disponible chez Ciba); les cinnamates, en particulier le cinoxate, le cinnamate d'isoamyle, et préférentiellement l'éthocrylène, l'octylméthoxycinnamate (Parsol MCX® disponible chez Hoffmann La Roche), ou l'octocrylène (Uvinul 539® disponible 3013 980 10 chez B.A.S.F.); les dibenzoylméthanes, en particulier le butyl méthoxydibenzoylméthane (Parsol 1789®); préférentiellement la diéthylhexylbutamido-triazone (Uvasorb HEB® disponible chez 3V Sigma), l'éthylhexyltriazone (Uvinul T150® disponible chez B.A.S.F.), ou l'éthyl PABA 5 (benzocaïne); les salicylates, en particulier le salicylate d'éthylhexyle, l'homosalate, les triazines, en particulier l'anisotriazine (Tinosorb S® disponible chez Ciba); le drometrizole trisiloxane, l'oxyde de zinc, le dioxyde de titane. La quantité de filtre(s) dépend de l'utilisation finale souhaitée, et peut être déduite à cet effet par l'homme du métier. Elle peut aller par exemple de 1 à 30 % en 10 poids et mieux de 2 à 20 % en poids par rapport au poids total de la composition le ou les contenant. A titre d'exemple, un agent antioxydant peut être choisi parmi les agents antioxydants connus de l'homme du métier, par exemple les tocophérols et les tocotriénols; l'acide ascorbique et ses dérivés, en particulier l'ascorbyl 15 phosphate de magnésium et l'ascorbyl glucoside; les chélatants, le BHT (Butyl Hydroxy Toluene), le BHA (Butyl Hydroxy Anisole), le N,N'-bis(3,4,5- triméthoxybenzyl) éthylenediamine et ses sels, et leurs mélanges. Plus préférentiellement, on utilisera le tocopherol. Ainsi, une composition selon l'invention peut comprendre un ou des agent(s) antioxydant(s) dans une teneur 20 allant de 0,001 % à 10 % et préférentiellement de 0,01 % à 5 % en poids par rapport au poids total de la composition le ou les contenant. A titre d'exemple, un actif stimulant la synthèse de macromolécules dermiques et/ou épidermiques et/ou empêchant leur dégradation peut être choisi parmi ceux connus de l'homme du métier, par exemple l'acide 25 ascorbique, les peptides extraits de végétaux, tels que l'hydrolysat de soja commercialisé par la société BASF Beauty Care Solutions sous la dénomination commerciale Phytokine® l'extrait de malt tel que commercialisé sous la dénomination Collalift® par la société Engelhard Lyon; les peptides de riz tel que le Nutripeptide® de SILAB, les silanols tel que l'Algisium®, le cafeisilane®, 30 commercialisés par Exsymol et leurs mélanges. Avantageusement, une composition contenant une association selon l'invention peut être formulée dans un milieu physiologiquement acceptable qui est préférentiellement un milieu cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable. A ce titre, la composition selon l'invention peut se présenter sous toutes les formes galéniques normalement utilisées dans les domaines cosmétique ou dermatologique. Elle peut être notamment sous forme d'une solution aqueuse, hydroalcoolique, éventuellement gélifiée, d'une dispersion du type lotion éventuellement biphasée, d'une émulsion huile-dans-eau ou eaudans-huile ou multiple, d'un gel aqueux, d'une dispersion d'huiles dans une phase aqueuse, notamment à l'aide de sphérules, ces sphérules pouvant être des particules polymériques ou mieux, des vésicules lipidiques de type ionique et/ou non-ionique, ou bien encore sous la forme d'une poudre, d'un sérum, d'une pâte ou d'un bâtonnet souple. Une composition selon l'invention peut avantageusement présenter un toucher ferme et compact à la prise. Elle peut être épaisse à l'application et se transformer ensuite, fondre et libérer de la fraîcheur. Ainsi, la composition peut comprendre tous les constituants usuellement employés dans l'application envisagée. On peut notamment citer comme constituants usuels : l'eau, en particulier l'eau de mer naturelle ou synthétique, les solvants, les huiles d'origine minérale, animale et/ou végétale notamment telles que détaillées ci-après, les cires telles que décrites ci-après, les matières colorantes, les charges, les tensioactifs, les gélifiants, les conservateurs. Avantageusement, la composition de l'invention comprend du calcium et de l'acide hyaluronique. La composition selon l'invention peut comprendre, en outre, au moins un milieu physiologiquement acceptable ou un solvant et/ou un conservateur. Avantageusement, la composition selon l'invention comprend, en outre, au moins un solvant choisi parmi l'éthanol, le propanol, l'isopropanol, le propane1,2-diol, le propane-1,3-diol, le butane-1,2-diol, le butane-1,3-diol, le butane-1,4- diol, le méthyl-2-propane-1,3-diol et le glycérol. Selon un mode de réalisation, les compositions sont caractérisées par une concentration cellulaire comprise entre 105 et 1010 cellules ou équivalent biomasse par ml, le milieu de suspension étant constitué du milieu de culture ou du surnageant de culture préalablement séparé, et si besoin d'un alcool ou polyol seul ou en mélange choisi parmi l'éthanol, le propanol, l'isopropanol, le propane-1,2-diol,le propane-1,3-diol, le butane-1,2-diol, le butane-1,3-diol,le butane-1,4-diol,le méthy1-2-propane-1,3-diol, le glycérol à une concentration comprise entre 0 et 60% en poids. La concentration en solvant peut être comprise entre 1 et 60 % en poids par rapport au poids total de ladite composition, par exemple entre 1 et 50%, ou entre 5 et 50%, ou entre 10 et 40%, ou entre 20 et 30%. Dans un mode de réalisation, les extraits d'isochrysis et de symbiodinium de la composition de l'invention peuvent renfermer chacun entre 0,1 et 60% d'éthanol en poids par rapport au poids total de ladite composition, par exemple 1%, 5%, 10%, 20%, 30% ou 40%. Dans un autre mode de réalisation, les extraits d'isochrysis et de symbiodinium peuvent renfermer chacun entre 0,1 et 50% de 2-methyl propane-1,3-diol, par exemple entre 1 et 50%, ou entre 5 et 50%, ou entre 10 et 40%, ou entre 20 et 30%. Dans un autre mode de réalisation, les extraits d'isochrysis et de symbiodinium peuvent renfermer chacun entre 0,1 et 60% de glycérine en poids par rapport au poids total de ladite composition, par exemple entre 1 et 50%, ou entre 5 et 50%, ou entre 10 et 40%, ou entre 20 et 30%. Dans un autre mode de réalisation, les extraits d'isochrysis et de symbiodinium peuvent renfermer chacun entre 0,1 et 60% de propane-1,3-diol en poids par rapport au poids total de ladite composition, par exemple entre 1 et 50%, ou entre 5 et 50%, ou entre 10 et 40%, ou entre 20 et 30%. Avantageusement, ces solvants sont bien au niveau cutané et ont des propriétés bacteriostatiques/fongisatiques. Les compositions selon l'invention peuvent contenir avantageusement au moins une phase grasse liquide. Avantageusement, les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous la forme d'émulsions. Les compositions selon l'invention peuvent avantageusement se présenter sous forme d'une émulsion obtenue par dispersion d'une phase aqueuse dans une phase grasse (E/H) ou d'une phase grasse dans une phase aqueuse (H/E), de consistance liquide ou semi-liquide du type lait, ou de consistance molle, semi-solide ou solide du type crème ou gel, ou encore d'émulsion multiple (E/H/E ou H/E/H). Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles. Les compositions de ce type peuvent avoir la forme d'un produit de soin ou de maquillage du visage et/ou du corps, et être conditionnée par exemple sous forme de crème en pot ou de fluide en tube ou en flacon pompe. Les émulsions contiennent généralement au moins un émulsionnant choisi parmi les émulsionnants amphotères, anioniques, cationiques ou non ioniques, utilisés seuls ou en mélange. Les émulsionnants sont choisis de manière appropriée suivant l'émulsion à obtenir (E/H ou H/E). Les émulsionnants sont généralement présents dans la composition, en une proportion pouvant aller par exemple de 0,3 à 30 % en poids, et de préférence de 0,5 à 20 % en poids par rapport au poids total de la composition. Pour les émulsions H/E, on peut citer par exemple comme émulsionnants, les tensioactifs non ioniques, et notamment les esters de polyols et d'acide gras à chaîne saturée ou insaturée comportant par exemple de 8 à 24 atomes de carbone et mieux de 12 à 22 atomes de carbone, et leurs dérivés oxyalkylénés, c'est-à-dire comportant des unités oxyéthylénés et/ou oxypropylénés, tels les esters de glycéryle et d'acide gras en C8-C24, et leurs dérivés oxyalkylénés; les esters de polyéthylène glycol et d'acide gras en C8- C24, et leurs dérivés oxyalkylénés; les esters de sorbitol et d'acide gras en C8-C24, et leurs dérivés oxyalkylénés ; les esters de sucre (sucrose, glucose, alkylglucose) et d'acide gras en C8-C24, et leurs dérivés oxyalkylénés; les éthers d'alcools gras; les éthers de sucre et d'alcools gras en C8-C24, et leurs mélanges. Comme exemples d'huiles utilisables dans la composition selon l'invention, on peut citer : les huiles hydrocarbonées d'origine naturelle, telles que le perhydrosqualène, les triglycérides liquides d'acides gras comportant de 4 à 10 atomes de carbone comme les triglycérides des acides heptanoïque ou octanoïque ou encore, par exemple les huiles de tournesol, de maïs, de soja, de courge, de pépins de raisin, de sésame, de noisette, d'abricot, de macadamia, d'arara, de tournesol, de ricin, d'avocat, les triglycérides des acides caprylique/caprique comme ceux vendus par la société Stearineries Dubois, l'huile de jojoba, l'huile de beurre de karité, les esters et les éthers de synthèse, notamment d'acides gras, comme les huiles de formules R1COOR2 et R1OR2 dans laquelle R1 représente le reste d'un acide gras comportant de 8 à 29 atomes de carbone, et R2 représente une chaîne hydrocarbonée, ramifiée ou non, contenant de 3 à 30 atomes de carbone, comme par exemple l'huile de Purcellin, l'isononanoate d'isononyle, le myristate d'isopropyle, le palmitate d'éthyl-2-hexyle, le stéarate d'octyl-2-dodécyle, l'érucate d'octyl-2-dodécyle, l'isostéarate d'isostéaryle; les esters hydroxyles comme l'isostéaryl lactate, l'octylhydroxystéarate, l'hydroxystéarate d'octyldodécyle, le diisostéaryl-malate, le citrate de triisocétyle, les heptanoates, octanoates, décanoates d'alcools gras; les esters de polyol, comme le dioctanoate de propylène glycol, le diheptanoate de néopentylglycol et le diisononanoate de diéthylèneglycol; et les esters du pentaérythritol comme le tétraisostéarate de pentaérythrityle, les hydrocarbures linéaires ou ramifiés, d'origine minérale ou synthétique, tels que les huiles de paraffine, volatiles ou non, et leurs dérivés, l'isohexadecane, l'isododecane, la vaseline, les polydécènes, le polyisobutène hydrogéné tel que l'huile de Parléam®, des huiles essentielles naturelles ou synthétiques telles que, par exemple, les huiles d'eucalyptus, de lavandin, de lavande, de vétiver, de litsea cubeba, de citron, de santal, de romarin, de camomille, de sarriette, de noix de muscade, de cannelle, d'hysope, de carvi, d'orange, de géraniol, de cade et de bergamote, les alcools gras ayant de 8 à 26 atomes de carbone, comme l'alcool cétylique, l'alcool stéarylique et leur mélange (alcool cétylstéarylique), l'octyl dodécanol, le 2-butyloctanol, le 2-hexyldécanol, le 2- undécylpentadécanol, l'alcool oléique ou l'alcool linoléique, les huiles fluorées partiellement hydrocarbonées et/ou siliconées comme celles décrites dans le document JP-A-2-295912 ([1]), les huiles de silicone comme les polyméthylsiloxanes (PDMS) volatiles ou non à chaîne siliconée linéaire ou cyclique, liquides ou pâteux à température ambiante, notamment les cyclopolydiméthylsiloxanes (cyclométhicones) telles que le cyclohexasiloxane et le cyclopentasiloxane; les polydiméthylsiloxanes comportant des groupements alkyle, alcoxy ou phényle, pendant ou en bout de chaîne siliconée, groupements ayant de 2 à 24 atomes de carbone; les silicones phénylées comme les phényltriméthicones, les phényldiméthicones, les phényltriméthylsiloxydiphényl- siloxanes, les diphényldiméthicones, les diphénylméthyldiphényl trisiloxanes, les 2-phényléthyltriméthylsiloxysilicates, et les polyméthylphénylsiloxanes, et leurs mélanges. On entend par " huile hydrocarbonée ", au sens de la présente invention, dans la liste des huiles citées ci-dessus, toute huile comportant majoritairement des atomes de carbone et d'hydrogène, et éventuellement des groupements ester, éther, fluoré, acide carboxylique et/ou alcool. Les autres corps gras pouvant être présents dans la phase huileuse sont par exemple les cires et les acides gras comportant de 8 à 30 atomes de carbone, comme l'acide stéarique, l'acide laurique, l'acide palmitique et l'acide oléique. A titre de cires pouvant être utilisées selon l'invention, on peut citer les cires d'origine animale telles que la cire d'abeilles, le spermaceti, la cire de lanoline et les dérivés de lanoline, les cires végétales telles que la cire de Carnauba, de Candellila, d'Ouricury, du Japon, le beurre de cacao ou les cires de fibres de liège ou de canne à sucre, les cires minérales, par exemple de paraffine, ou les cires microcristallines ou les ozokérites, les cires synthétiques parmi lesquelles les cires de polyéthylène, et les cires obtenues par synthèse de Fisher-Tropsch ou encore les cires de silicone, les huiles hydrogénées concrètes à 25°C telles que l'huile de ricin hydrogénée, l'huile de jojoba hydrogénée, l'huile de palme hydrogénée, le suif hydrogéné, l'huile de coco hydrogénée et les esters gras concrets à 25°C comme le stéarate d'alkyle en C20-C40 vendu sous la dénomination commerciale " KESTER WAX K82H " par la société KOSTER KEUNEN. Ces corps gras peuvent être choisis de manière variée par l'homme du métier afin de préparer une composition ayant les propriétés, par exemple de consistance ou de texture, souhaitées. La composition selon l'invention peuvent comprendre une huile volatile. On entend par « huile volatile », une huile susceptible de s'évaporer au contact des parties superficielles du corps humain en moins d'une heure, à température ambiante et pression atmosphérique. Le ou les solvants organiques volatils et les huiles volatiles de l'invention sont des solvants organiques et des huiles cosmétiques volatiles, liquides à température ambiante, ayant une pression de vapeur non nulle, à température ambiante et pression atmosphérique, allant en particulier de 0,13 Pa à 40 000 Pa (10-3 à 300 mm de Hg), en particulier allant de 1,3 Pa à 13 000 Pa (0,01 à 100 mm de Hg), et plus particulièrement allant de 1 ,3 Pa à 1300 Pa (0,01 à 10 mm de Hg). On peut citer comme huiles volatiles entre autres, les silicones cycliques ou linéaires renfermant de 2 à 6 atomes de silicium, telles que l'hexamethyldisiloxane, le decamethylcyclopentasiloxane, le dodecamethyl cyclohexasiloxane, le dodecamethylpentasiloxane, le decamethyltetrasiloxane, le butyltrisiloxane et l'éthyltrisiloxane. On peut aussi utiliser les hydrocarbures ramifiés tels que par exemple l'isododécane ainsi que les perfluoroalcanes volatiles tels que le dodécafluoropentane et le tétradécafluorohexane, vendus sous les dénominations de " PF 5050®" et " PF 5060®" par la Société 3M. La quantité de phase huileuse présente dans les compositions selon l'invention peut aller par exemple de 0,01 à 50 % en poids et de préférence de 0,1 à 30 % en poids par rapport au poids total de la composition. La composition selon l'invention peut comprendre en outre des élastomères de silicone comme les produits commercialisés sous les dénominations " KSG " par la société Shin-Etsu, sous les dénominations " Trefil ", " BY29 " ou " EPSX " par la société Dow Corning ou sous les dénominations " Gransil " par la société Grant Industries. La composition selon l'invention peut en outre comprendre au moins une matière colorante choisie par exemple parmi les pigments, les nacres, les colorants, les matériaux à effet et leurs mélanges. Ces matières colorantes peuvent être présentes en une teneur allant de 0,01 % à 50 % en poids, de préférence de 0,01 % à 30 % par rapport au poids total de la composition. La composition selon l'invention peut également comprendre, en outre, une charge notamment en une teneur allant de 0,01 % à 50 % en poids, par rapport au poids total de la composition de préférence allant de 0,01 % à 30 % en poids. Ces charges peuvent être minérales ou organiques de toute forme, plaquettaires, sphériques ou oblongues, quelle que soit la forme cristallographique (par exemple feuillet, cubique, hexagonale, orthorombique, ou amorphe). On peut citer la silice, le talc, le mica, le kaolin, la lauroyl-lysine, l'amidon, le nitrure de bore, les poudres de PTFE, les poudres de PMMA, les poudres de résine de methyl silsesquioxane (comme le Tospearl 145A de GE Silicone) , les particules hémisphériques creuses de résine de silicone (comme les NLK 500, NLK 506 et NLK 510 de Takemoto Oil and Fat), le sulfate de Baryum, le carbonate de calcium précipité, le carbonate et l'hydro-carbonate de magnésium, l'hydroxyapatite, les microcapsules de verre ou de céramique. La composition selon l'invention peut, en outre, contenir divers adjuvants couramment utilisés dans le domaine cosmétique, tels que des séquestrants, des parfums et des épaississants. Les quantités de ces différents adjuvants et leur nature seront choisies de manière à ne pas nuire aux propriétés de la 25 composition. Un autre objet de l'invention se rapporte à l'utilisation d'une composition selon l'invention pour prévenir et/ou retarder et/ou limiter les signes du vieillissement de la peau. En d'autres termes, l'invention peut se rapporter à une utilisation cosmétique pour un effet anti-âge. L'utilisation cosmétique peut être 30 destinée à prévenir et/ou retarder et/ou limiter les signes du vieillissement de la peau, et/ou lutter contre les signes du vieillissement cutané et/ou lisser la peau du visage et/ou du corps et/ou traiter les rides et les ridules de la peau. On entend par « signes du vieillissement de la peau » ou « signes cutanés du vieillissement », au sens de la présente invention, toutes modifications de l'aspect extérieur de la peau dues au vieillissement, qu'il soit chronobiologique et/ou photo-induit, comme par exemple les rides et ridules, la peau flétrie, la peau molle, la peau amincie, la peau terne et sans éclat, le manque d'élasticité et/ou de tonus de la peau, mais également toutes modifications internes de la peau qui ne se traduisent pas systématiquement par un aspect extérieur modifié, comme par exemple toutes dégradations internes de la peau, particulièrement des fibres de collagène, consécutives à une exposition aux rayonnements ultra-violets, qui peuvent avoir comme conséquence l'amincissement du derme. Un autre objet de l'invention se rapport à un procédé de traitement cosmétique pour prévenir et/ou retarder et/ou limiter les signes du vieillissement de la peau, et/ou pour lutter contre les signes du vieillissement cutané et/ou lisser la peau du visage et/ou du corps et/ou traiter les rides et les ridules de la peau, consistant à appliquer sur la peau une composition de l'invention. Dans le cas de traitement ou l'utilisation cosmétique pour retarder ou 2 0 prévenir les signes du vieillissement, l'application peut notamment être renouvelée avant, pendant et/ou après une exposition aux rayonnements U.V. Les procédés de traitement cosmétique ou utilisation cosmétique selon l'invention sont en particulier efficaces pour diminuer les signes du vieillissement et diminuer l'âge apparent des sujets qui l'appliquent. 25 L'association ou la composition de l'invention peut être appliquée sur les zones de peau concernées par les désordres contre lesquels on veut lutter. Ces zones sont notamment la peau du visage, du cou des bras et des mains, mais aussi des régions corporelles comme les jambes, les cuisses ou l'abdomen ou toute zone à traiter. 30 Le procédé de traitement cosmétique de la peau ou l'utilisation cosmétique de l'invention peut être appliquée sur tout type de peau, par exemple une peau âgée, par exemple sur la peau du visage et/ou du cou, ou une peau jeune, afin de limiter le vieillissement prématuré dû aux facteur extérieurs D'autres avantages pourront encore apparaître à l'homme du métier à la lecture des exemples ci-dessous, illustrés par les figures annexées, donnés à titre illustratif. LEGENDES DES FIGURES Figure 1 : la figure 1 représente l'effet du produit « lso/Symbio/Ca/HA » sur la néosynthèse des GAGs. Les GAGs néosynthétisés sont donnés en dpm/puis en fonction du témoin, du produit « lso/Symbio/Ca/HA » à 0,4 pg/mL, du produit « lso/Symbio/Ca/HA » à 2 pg/mL et du produit « lso/Symbio/Ca/HA » à 10 pg/mL. Figure 2 : la figure 1 représente l'effet du produit « Symbio/Ca/HA » sur la néosynthèse des GAGs. Les GAGs néosynthétisés sont donnés en dpm/puis en fonction du témoin, du produit « Symbio/Ca/HA » à 40 pg/mL, du produit « Sym bio/Ca/HA » à 200 pg/mL et du produit « Symbio/Ca/HA » à 1000 pg/mL. Figure 3 : la figure 3 représente l'effet du produit « lso/Symbio/Ca/HA » sur la néosynthèse de l'élastine. L'élastine néosynthétisée est donnée en dpm/puis en fonction du témoin, du produit « lso/Symbio/Ca/HA » à 0,4 pg/mL, du produit « lso/Symbio/Ca/HA » à 2 pg/mL et du produit « lso/Symbio/Ca/HA » à 10 pg/mL. Figure 4 : la figure 4 représente l'effet du produit « Symbio/Ca/HA » sur la néosynthèse de l'élastine. L'élastine néosynthétisée est donnée en dpm/puis en fonction du témoin, du produit « Symbio/Ca/HA » à 40 pg/mL, du produit « Symbio/Ca/HA » à 200 pg/mL et du produit « Symbio/Ca/HA » à 1000 pg/mL.30 EXEMPLES Exemple 1 : Culture des algues L'algue unicellulaire isochrysis galbana (prymnesiophycées/isochrysidacées) est cultivée dans un milieu de culture approprié dont la composition est telle que définie ci-dessous: ml mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l pg/l pg/l pg/l pg/l pg/l pg/l pg/l pg/l L'algue unicellulaire symbiodinium microadriaticum est cultivée séparément de manière identique. Lorsque la concentration en algue dans un milieu de culture tel que décrit ci dessus atteint 5.104 à 107 cellules / ml, la culture est arrêtée et est alors centrifugée pour récolter les algues. La pâte d'algues obtenue est ensuite standardisée par dispersion dans le milieu de culture jusqu'à une concentration de 400x106 cellules / ml. Eau de mer (salinité totale 35 g/1) qs-1000 NA2 E DTA 30-60 Nitrate (K ou Na NO3) 50-2000 Dihydrogénophosphaste ( K ou Na H2PO4) 10-100 Mn2+ 0,1-1 Fe3+ 0,5-20 Zn2+ 5-200 Co2+ 5-150 Mo (Na Mo04, 2H20 par exemple) 1-20 Cu2+ (CuCl2 par exemple) 5-100 Thiamine 2-50 Pyridoxine 2-50 Cyanocobalamine 0,01-1 Biotine 0,01-115 Exemple 2 : Préparation d'eau de mer sélectivement dessalée L'eau de l'Océan Atlantique est prélevée au large des côtes Bretagne Sud et sélectivement dessalée par électrodialyse. La composition finale est la suivante: NaCI 9.0 g/I mg2+ 1.20 g/I Ca2+ 0.35 g/I K+ 0.05 g/I Les compositions cosmétiques (exemples 3 à 7) ci-dessous sont fabriquées par mélange des composés mentionnés dans les quantités correspondantes indiquées en gramme. « qsp » signifie « quantité suffisante pour ». Exemple 3 : Composition cosmétique Composition test 1 eau de mer de salinité 35g/I qsp 100 dispersion de symbiodinium 400x106cellules/m I (exemple 1) 50,000 CaCl2 0,120 Acide hyaluronique 0,040 Une augmentation de 105%-86% et 33% de la synthèse de glycosaminoglycane et une augmentation de la synthèse d'élastine de 49%- 42% et 38%par des fibroblastes normaux de derme humain est obtenue pour des ajouts respectivement de 1000-200 et 40 pg/ml de la composition test 1 au milieu de culture des fibroblastes. Exemple 4 : Composition cosmétique Composition test 2 eau de mer de salinité 35g/I qsp 100 dispersion de symbiodinium 400x106cellules/m I (exemple 1) 50,000 dispersion d'isochrysis 400x106cellules/m1 (exemple 1) .......................38,000 CaCl2 0,120 Acide hyaluronique 0,040 Une augmentation de 65% de la synthèse de glycosaminoglycane et une augmentation de la synthèse d'élastine de 38% par des fibroblastes normaux de derme humain est obtenue pour un ajout de 0,4 pg/ml de la composition test 2 au milieu de culture des fibroblastes. Une augmentation de la conversion adipocytaire de 34% est obtenue avec un ajout de 1pg/m1 de la composition test 2 au milieu de culture des préadipocytes Exemple 5 : Composition cosmétique Composition test 3 eau de mer de salinité 35g/I qsp 100 dispersion de symbiodinium 400x106cellules/m1 (exemple 1) 5,000 dispersion d'isochrysis 40x106cellules/m1 (exemple 1) .......................38,000 CaCl2 0,006 Acide hyaluronique ...................................................................... 0,002 2-methyl, propane-1,3-diol.......................................................... .....0,900 2-phenoxy ethanol................................................................... .....0,300 Methylparaben............................................................. ................ 0,180 Propylparaben............................................................. .................0,030 Une application de la composition test 3 pendant 28 jours par 11 volontaires âgées de 68 ans en moyenne s'est traduite par une augmentation significative de la densité du derme de 12%. Exemple 6 : Crème de jour Une composition de crème de nuit a la composition suivante : eau de mer de salinité 14g/1 qsp 100 dispersion de symbiodinium 400x106cellules/m1 (exemple 1) 0,500 dispersion d'isochrysis à 40x106 cellules/m 1 3,800 methylparaben 0,300 propylparaben 0,070 butyl paraben 0,030 phenoxyethanol 0,500 panthenol 0,400 allantoin 0,100 2-methyl propane-1,3-diol 3,500 polydimethyl siloxane volatil 23,000 PEG/PPG 18/8 polydimethylsiloxane 1,500 polymethyloctylsiloxane 5,000 chlorure de calcium anhydre 0,030 L-arginine 0,800 1-lysine 0,200 tetrahydroxypropylethylenediam ine 0,500 disodium phenyl dibenzimidazole tetrasulfonate 2,000 disodium stearyl sulfosuccinamate 1,000 ceteareh-20 1,400 glycine soja sterols 0,900 cetearyl glucoside 1,500 cetearyl alcohol 1,500 pentaerythrityl distearate 0,500 cetyl palmitate 4,000 myristyl myristate 1,500 phenyltrimethicone 0,300 dimethicone 0,700 cyclopentasiloxane 2,000 C12-15 alkyl benzoate 4,000 Ethylhexyl methoxycinnamate 6,000 acrylates/vinyl isodecanoate crosspolymer 0,300 acrylates/C10-30 alkyl acrylate crosspolymer 1,200 methylsilanol mannuronate 4.000 tocopherols 0,300 linoleic acid 0,300 retinyl palmitate 0,100 parfum 0,300 Exemple 7 : Crème de nuit Une composition de crème de nuit a la composition suivante : eau de mer de salinité 14g/I qsp 100 dispersion de symbiodinium 400x106cellules/m1(exemple 1) 0,500 dispersion d'isochrysis à 40x106 cellules/mi 5,000 methylsilanol mannuronate 4,000 g lyceri n 5,000 methyl propanediol 4,000 benzoic acid 0,300 phenethyl alcohol 0.500 zinc sulphate 0,200 potassium hydroxide 0,080 xanthan gum 0,400 polyglycyl-10 stearate 0,400 isodecyl neopentanoate 5,000 cetyl alcohol 3,000 cetyl ricinoleate 3,000 glyceryl stearate 1,000 oryzanol 1,000 caprylic/capric triglyceride 2,000 dimethicone 5,000 lecith in 0,500 inulin lauryl carbamate 0,600 polyacrylam ide 2,400 c11-13 isoparaffine 0,400 laureth-7 0,200 tocopherols 0,200 parfum 0,400 polymethylsilsesquioxane 1,500 Exemple 8: Effets sur la néosynthèse des glycosaminoglycanes d'une composition comprenant un extrait d'algue isochrysis galbana et un extrait d'algue symbiodinium microadriaticum et d'une composition 5 comprenant un extrait d'algue symbiodinium microadriaticum 1.1 MATERIELS ET METHODES 1.1.1 Principe L'effet des produits à l'essai sur la néosynthèse des GAGs (glycosaminoglycanes) a été évalué par la mesure de l'incorporation de 10 glucosamine radiomarquée dans les glycosaminoglycanes nouvellement synthétisés par des fibroblastes dermiques humains. Les glycosaminoglycanes sont des composants essentiels de la matrice extracellulaire du derme. Ce sont des macromolécules complexes à pouvoir hygroscopique important ; les GAGs retiennent l'eau dans les tissus cutanés et participent au maintien de la 'tonicité' 15 de la peau. 1.1.2 Produits à l'essai Le produit «Iso/Symbio/Ca/HA» est composé d'un extrait d'algue isochrysis galbana, d'un extrait d'algue symbiodinium microadriaticum, de calcium et d'acide hyaluronique, aux pourcentages suivants : 20 Isochrysis dispersion à 400 106 cell/m I 38 Symbiodinium dispersion à 400 106 cell/ml 50 Solution aqueuse à 1.2% de chlorure de sodium 10 Solution aqueuse à 2% d'acide hyaluronique 2 Le produit «Symbio/Ca/HA» est composé d'un extrait d'algue symbiodinium 5 microadriaticum, de calcium et d'acide hyaluronique, aux pourcentages suivants : Eau de mer à 35 g/I de salinité 38 Symbiodinium dispersion à 400 106 cell/ml 50 Solution aqueuse à 1.2% de chlorure de sodium 10 10 Solution aqueuse à 2% d'acide hyaluronique 2 1.1.3 Réactifs SVF (Sérum de veau foetal) : Biopredic International TGF131(Transforming Growth Factor p1): Promocell, référence C63504 15 Rétinol (vitamine A) : Sigma, référence R7632 D-[6-3H] Glucosamine : Perkin-Elmer, référence NET190A CPC (CetylPyrimidium Chlorure) : Sigma C9002 Chondroitine sulfate : Sigma, référence C8529 Pico Fluor 40 : Perkin-Elmer, référence 6013349 20 Soluène : Perkin-Elmer, référence 6003038 Solution de rinçage des cultures de fibroblastes après l'incubation : tampon PBS (Phosphate Buffered Saline) pH 7,4 formule standard Milieux de culture : Biopredic International Autres réactifs : SIGMA, de qualité analytique. 2 5 1.1.4 Système d'essai Cultures en monocouche de fibroblastes dermiques humains isolés d'un fragment de peau humaine collecté après une opération de plastie abdominale : FIB101035 (femme de 30 ans). Culture jusqu'à confluence des monocouches, à 37°C, dans une atmosphère humide avec 5% de CO2. Milieu de culture MCF : milieu MEM (milieu Essentiel Minimum)/M199 (Biopredic international) (3/4, 1/4 ; v/v) additionné de pénicilline (50 UI/ml), de streptomycine (50 pg/ml) et de SVF (10 %, v/v). Milieu d'incubation des fibroblastes (MIF) = MEM/M199 (3/4, 1/4 ; v/v) additionné de pénicilline (50 UI/ml), de streptomycine (50 pg/ml), de SVF (2 %, v/v) et de 1 pCi/ml de glucosamine marquée au tritium. 1.1.5 Préparation du produit de référence et des produits à l'essai Produit de référence Association de TGF61 et de rétinol : dilution dans le milieu MIF ; testée à 10 ng/ml en TGF61 et 100 nM en rétinol. Produits à l'essai Les produits «Iso/Symbio/Ca/HA» et «Symbio/Ca/HA» sont dispersés (2 mg/mL; p/v) dans le milieu de culture des fibroblastes. Après sonication (utilisation d'une tige à ultra-sons), les suspensions sont centrifugées 10 minutes à 4000 rpm. Les surnageants sont considérés comme des solutions à 2 mg/m L. Les concentrations testées sont indiquées dans le tableau ci-dessous : Concentration en pg/mL Iso/Symbio/Ca/HA 0,4 2 10 Symbio/Ca/HA 40 200 1000 1.1.6 Protocole d'incubation Les cultures de fibroblastes (tapis confluents) sont incubées en milieu MIF, en présence du produit de référence ou des produits à l'essai. Temps d'incubation : 3 jours Témoin : cellules incubées en absence de produit de référence ou de produit à l'essai. Témoin DMSO : cellules incubées en absence de produit de référence ou de produit à l'essai, mais en présence de 0,1% de DMSO (solvant du rétinol). Conditions d'incubation : 37°C, en atmosphère humide contenant 5 % de CO2. Réplicates : 3 1.1.7 Evaluation des effets - A la fin de l'incubation, les milieux de culture sont récupérés et introduits dans des microtubes ; les tapis cellulaires sont rincés avec du PBS ; ce milieu de rinçage est mélangé avec le surnageant correspondant. -Dans chaque microtube, ajout de 100 pg de chondroitine sulfate (rôle de « carrier » lors des précipitations au CPC). -Précipitation des GAG par ajout de CPC (concentration finale de 1%) et incubation une nuit à température ambiante ; après centrifugation 10 minutes à 15000 g, élimination des surnageants contenant la glucosamine radiomarquée non incorporée ; rinçage des culots par du CPC 1% ; nouvelle centrifugation 10 minutes à 15000 g et élimination des surnageants Solubilisation des précipités avec du Soluène ; leur radioactivité, déterminée en scintillation liquide (compteur II), est directement proportionnelle à la quantité de GAGs néosynthétisés lors de l'incubation des cellules avec la glucosamine radiomarquée. 1.1.8 Traitement des données Expression des résultats : en dpm (désintégration par minute) par puits de culture et en pourcentage du groupe témoin. Tests statistiques effectués sur les valeurs en dpm. Test de la différence entre les moyennes des différents groupes par analyse de la variance à un facteur (ANOVA 1 ; a Comparaison de la moyenne de chaque groupe traité à celle du groupe 'témoin' correspondant : test de Dunnett (a Exemple 9: Effets sur la néosynthèse de l'élastine d'une composition comprenant un extrait d'algue isochrysis galbana et un extrait d'algue symbiodinium microadriaticum et d'une composition comprenant un extrait d'algue symbiodinium microadriaticum 2.1 MATERIELS ET METHODES 2.1.1 Principe L'effet des produits à l'essai sur la néosynthèse de l'élastine a été évalué par la mesure de l'incorporation de glycine radiomarquée dans l'élastine néosynthétisée par les fibroblastes dermiques. La glycine est un acide aminé majeur de l'élastine, elle y représente un acide aminé sur trois. L'élastine a été extraite des autres protéines dermiques radiomarquées en milieu alcalin chaud. Le TGFB et l'acide ascorbique ont été utilisés comme produits de référence de la néosynthèse de l'élastine. 2.1.2 Produits à l'essai Le produit «Iso/Symbio/Ca/HA» est composé d'un extrait d'algue isochrysis galbana, d'un extrait d'algue symbiodinium microadriaticum, de calcium et d'acide hyaluronique, selon les pourcentages suivants : Isochrysis dispersion à 400 106 cell/m I 38 Symbiodinium dispersion à 400 106 cell/ml 50 Solution aqueuse à 1.2% de chlorure de sodium 10 Solution aqueuse à 2% d'acide hyaluronique 2 Le produit «Symbio/Ca/HA» est composé d'un extrait d'algue symbiodinium microadriaticum, de calcium et d'acide hyaluronique, selon les pourcentages suivants : Eau de mer à 35 g/I de salinité 38 Symbiodinium dispersion à 400 106 cell/ml 50 Solution aqueuse à 1.2% de chlorure de sodium 10 2 0 Solution aqueuse à 2% d'acide hyaluronique 2 2.1.3 Réactifs SVF (Sérum de veau foetal) : Biopredic International TGFB1(Transforming Growth Factor p1): Promocell, référence C63504 25 Acide ascorbique : Sigma, référence A0278 [U-14C] Glycine : Perkin-Elmer, référence NEC276 Pico Fluor 40 : Packard, référence 6013349 Solution de rinçage des cultures de fibroblastes après l'incubation : tampon PBS (Phosphate Buffered Saline) pH 7,4 formule standard Milieux de culture : Biopredic International Autres réactifs : SIGMA, de qualité analytique 2.1.4 Système d'essai Cultures en monocouche de fibroblastes dermiques humains isolés d'un fragment de peau humaine collecté après une opération de plastie abdominale : FIB101035 (femme de 30 ans). Culture jusqu'à confluence des monocouches, à 37°C, dans une atmosphère 10 humide avec 5% de CO2. Milieu de culture MCF : milieu MEM/M199 (3/4, 1/4 ; v/v) additionné de pénicilline (50 UI/ml), de streptomycine (50 pg/ml) et de SVF (10 %, v/v). Milieu d'incubation des fibroblastes (MIF) = MEM/M199 (3/4, 1/4 ; v/v) additionné de pénicilline (50 UI/ml), de streptomycine (50 pg/ml), de SVF (2 %, 15 v/v) et de 1 pCi/ml de glycine radiomarquée au 14C. 2.1.5 Préparation du produit de référence et des produits à l'essai Produit de référence Association de TGF131 et d'acide ascorbique : dilution dans le milieu MIF ; 20 testée à 10 ng/ml en TGF131 et 100 pg/ml en acide ascorbique. Produits à l'essai Les produits «Iso/Symbio/Ca/HA» et «Symbio/Ca/HA» sont dispersés (2 mg/mL; p/v) dans le milieu de culture des fibroblastes. Après sonication (utilisation d'une tige à ultra-sons), les suspensions sont centrifugées 10 25 minutes à 4000 rpm. Les surnageants sont considérés comme des solutions à 2 mg/m L. Les concentrations testées sont indiquées dans le tableau ci-dessous : Concentration en pg/mL Iso/Symbio/Ca/HA 0,4 2 10 Symbio/Ca/HA 40 200 1000 2.1.6 Protocole d'incubation Les cultures de fibroblastes (tapis confluents) sont incubées en milieu MIF, en présence du produit de référence ou des produits à l'essai. Temps d'incubation : 3 jours Témoin : cellules incubées en absence de produit de référence ou de produit à l'essai. Conditions d'incubation : 37°C, en atmosphère humide contenant 5 % de CO2. Réplicates : 3 2.1.7 Evaluation des effets - A la fin de l'incubation, les milieux de culture sont éliminés ; les tapis cellulaires sont rincés 3 fois avec du PBS (élimination de la glycine radiomarquée non incorporéee). -Les cellules sont solubilisées par ajout de NaOH 0,1N (incubation 30 minutes à 37°C) ; les puits sont rincés avec du NaOH 0,1N ; ce milieu de rinçage est poolé avec l'hydrolysat correspondant. -Les protéines du lysat cellulaire sont ensuite hydrolysées 10 minutes à 100°C. L'élastine, protéine résistante à cette hydrolyse alcaline, est récupérée par centrifugation 15 minutes à 15000 g ; rinçage des culots par NaOH 0,1N ; nouvelle centrifugation 15 minutes à 15000 g et élimination des surnageants. - Solubilisation des culots avec du Soluène ; leur radioactivité, déterminée en scintillation liquide (compteur II), est directement proportionnelle à la quantité d'élastine néosynthétisée lors de l'incubation des cellules avec la glycine radiomarquée. 2.1.8 Traitement des données Expression des résultats : en dpm par puits de culture et en pourcentage de variation par rapport au groupe témoin. Tests statistiques effectués sur les valeurs en dpm. Test de la différence entre les moyennes des différents groupes par analyse de la variance à un facteur (ANOVA 1 ; a REVENDICATIONS1. Composition cosmétique ou dermatologique comprenant un extrait d'algue isochtysis galbana et un extrait d'algue symbiodinium microadriaticum. 2. Composition selon la revendication 1, ladite composition comprenant entre 0,01 et 80% en poids par rapport au poids total de ladite composition dudit extrait d'isochrysis et entre 0,1 et 80% en poids par rapport au poids total de ladite composition dudit extrait de symbiodinium. 3. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, dans laquelle la proportion entre ledit extrait d'isochrysis et ledit extrait de symbiodinium est comprise entre 0,1 et 3. 4. Composition selon l'une quelconque des revendication 1 à 3, dans laquelle lesdits extraits d'isochrysis et de symbiodinium renferment chacun entre 0,1 et 60% d'éthanol en poids par rapport au poids total de ladite composition. 5. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle lesdits extraits d'isochrysis et de symbiodinium renferment chacun entre 0,1 et 50% de 2-methyl propane-1,3-diol. 6. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle lesdits extraits d'isochrysis et de symbiodinium renferment chacun entre 0,1 et 60% de glycérine en poids par rapport au poids total de ladite composition. 3013 980 38 7. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle lesdits extraits d'isochrysis et de symbiodinium renferment chacun entre 0,1 et 60% de propane-1,3-diol en poids par rapport au poids total de ladite composition. 5 8. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant une concentration en cellules d'algues isochrysis comprise entre 104 et 1010 cellules ou équivalent biomasse par ml de ladite composition, et une concentration en cellules d'algues symbiodinium 10 comprise entre 104 et 1010 cellules ou équivalent biomasse par ml de ladite composition. 9. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant en outre de l'eau de mer sélectivement dessalée 15 comprenant entre 0,5 et 15 g/L de chlorure de sodium_par litre d'eau de mer. 10. Composition selon la revendication 8, dans laquelle lesdites cellules d'algues sont éclatées. 20 11. Utilisation cosmétique d'une composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour prévenir et/ou retarder et/ou limiter les signes du vieillissement de la peau. 25 12. Procédé de traitement cosmétique pour prévenir et/ou retarder et/ou limiter les signes du vieillissement de la peau, et/ou pour lutter contre les signes du vieillissement cutané et/ou lisser la peau du visage et/ou du corps et/ou traiter les rides et les ridules de la peau, consistant à appliquer sur la peau une composition cosmétique telle que définie 30 dans l'une des revendications 1 à 11.