Brevet FR3007980A1 — publié le 20150109

Utilisation cosmétique d'un extrait Sanicula europaea. La présente invention concerne l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour augmenter l'expression des small proline rich proteins SPR-1B et SPR-2A. La présente invention concerne aussi l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour renforcer la cohésion de la structure du stratum corneum, et donc renforcer la barrière cutanée. La présente invention concerne enfin l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour traiter les peaux sèches et / ou déshydratées. La fonction principale de l'épiderme est d'assurer une barrière protectrice entre l'organisme et l'environnement extérieur. Plusieurs types de barrière sont mis en jeu. Une première barrière chimique et biochimique permet de lutter contre les allergènes et les irritants. Elle possède un rôle antibactérien grâce au pH acide de la couche cornée et à la présence d'enzymes hydrolytiques et de peptides antimicrobiens. Une seconde barrière immunologique grâce aux constituants du système immunitaire inné et acquis. Une troisième barrière hydrique grâce à la présence de jonctions serrées dans la couche granuleuse, des lipides intercornéocytaires et du facteur naturel d'hydratation (FNH) présent dans le stratum disjunctum. Enfin une barrière physique assurée grâce à la forte cohésion intercellulaire dont sont responsables les nombreux desmosomes. Elle permet à l'épiderme de résister aux agressions extérieures. La couche cornée absorbe une partie du rayonnement ultraviolet grâce d'une part à la mélanine et d'autre part à la présence en quantité importante d'acide urocanique, un dérivé de l'histidine. En ce sens, le stratum corneum peut être considéré comme une première ligne de défense vis-à-vis des agressions extérieures. Ainsi, le stratum corneum, en raison de sa situation à l'interface entre le corps et l'environnement, est exposé en permanence aux oxydants, notamment aux ultraviolets (UV), aux oxydants chimiques, aux polluants atmosphériques et aux microorganismes. L'a-tocophérol est l'antioxydant hydrophobe majeur du stratum corneum, par la protection de la peroxydation lipidique et la stabilisation des bicouches lipidiques. Le stratum corneum contient un certain nombre d'enzymes antioxydants endogènes comme la catalase, la superoxyde dismutase, et la glutathion peroxydase, les deux premiers étant les principaux antioxydants du stratum corneum. Le stratum corneum est constitué de cornéocytes. Les cornéocytes contiennent essentiellement une matrice dense enserrant des filaments au sein d'une enveloppe protéique caractéristique, l'enveloppe cornée. Cette paroi, apposée à la face interne de la membrane plasmique, présente une structure hautement résistante, qui résulte de l'établissement de ponts disulfures et de liaisons covalentes ou ponts isopeptidiques e-(c-glutamyl) lysine entre différents précurseurs protéiques, sous l'action d'enzymes, les transglutaminases. Les molécules de l'enveloppe cornée des cornéocytes sont très nombreuses. Parmi elles, les plus connues et les plus étudiées sont la loricrine et l'involucrine. Ces molécules forment l'enveloppe cornée en s'associant par des ponts di-sulfures et surtout des liaisons NE (y glutamine) lysine grâce à des transglutaminases TG k/e dont l'activité catalytique ne se manifeste que dans la couche granuleuse. La loricrine et l'involucrine sont présentes et détectables en immunohistochimie dans le cytoplasme des kératinocytes de la couche granuleuse de l'épiderme interfolliculaire, mais elles ne sont associées à aucune structure morphologiquement individualisable. La proportion relative de ces molécules est maintenant chiffrée : la loricine représente à elle seule 70% des molécules de l'enveloppe cornée et est donc très largement la plus abondante, alors que l'involucrine ne représente que 2%. Les autres molécules de l'enveloppe cornée sont l'élafine (anciennement dénommée cysteine richprotein) 6%, les SPRs (smali proline richproteins, SPR1, SPR2, SPR3 anciennement cornifins ou pancornulins) 5%, la cystatine a 5%. À ces molécules, il faut rajouter 8% de filaggrine, 2% de filaments intermédaires de kératine, les desmoplakines et l'envoplakine. L'involucrine sert d'amorce à la fixation des autres molécules de l'enveloppe cornée. Elle est aussi liée de même que l'envoplakine aux lipides du cément intercellulaire par des liaisons covalentes. Les Small Proline Rich Proteins (SPRs) humaines forment une famille multigénique composée de 4 sous-classes (SPR1, SPR2, SPR3 et SPR4), le tout organisé en cluster sur une région de 170 kb du complexe de différenciation épidermique. Ce cluster compte au total 11 gènes : SPR1A, SPR1B, 7 gènes SPR2, SPR3 et enfin SPR4. Les SPRs sont également divisés en 2 groupes en fonction de leur orientation transcriptionelle : SPR1A, SPR1B, SPR3 et SPR4 sont orientés du centromère vers le télomère et les 7 gènes SPR2, orientés du télomère vers le centromère. Ces gènes ont été mis en évidence suite à l' irradiation UV de kératinocytes en culture. D'autres expérimentations ont ensuite permis de constater que leur expression était stimulée lors de la différenciation kératinocytaire. Les Small Proline Rich Proteins (SPRs) sont des précurseurs de l'enveloppe cornée et présentent une importante homologie au niveau de leurs séquences N et C-terminales avec l'involucrine et la loricrine. Mais la caractéristique principale des SPRs repose sur la structure polypeptidique de leur segment central, avec la répétition en tandem d'une séquence de huit (SPR1 et SPR3) ou neuf (SPR2) acides aminés dont le motif très conservé est lysine -proline - glutamate- proline. Les SPRs ont une taille variant de 72 à 169 acides aminés. L'induction de leur synthèse protéique s'effectue durant le processus de différenciation épidermique, hormis pour SPR4 ou seulement une exposition aux UV induit sa synthèse. De même, la synthèse de SPR1B ainsi que de SPR2B est induite, notamment par une exposition aux UV. Les SPRs contribuent donc de manière 'significative à la constitution de l'enveloppe cornée, donc à la barrière cutanée. La demanderesse a mis en évidence de manière surprenante l'effet d'un extrait de Sanicula europaea sur l'augmentation de l'expression de deux Small Proline Rich Proteins : SPR-1B et des SPR-2A. On peut donc avantageusement utiliser un extrait de Sanicula europaea pour augmenter l'expression des SPR-1B et des SPR-2A, pour renforcer la cohésion de la structure du stratum corneum, pour renforcer la barrière cutanée et donc pour traiter les peaux sèches et/ou déshydratées. Sanicula europaea (aussi appelée sanicle) est une plante herbacée vivace de 20 à 50 cm, de la famille des Apicaceae. Elle affectionne les sous-bois ombragés des montagnes de basse altitude. Sainte Hildegarde de Bingen au XIIème siècle a fait de cette plante une panacée qui n'est tombée dans l'oubli qu'au début du XXème siècle. Sa grande réputation provenait essentiellement de sa vertu vulnéraire pour soigner les coups et les blessures. C'est ainsi qu'elle a pris son nom sanicle déformation de sanare qui veut dire soigner. La feuille de sanicle était utilisée en cataplasme pour apaiser les brûlures, les contusions et les piqûres d'insecte ou d'animal venimeux, en infusion pour ce même usage ou pour guérir angine ou infection broncho-pulmonaire. Elle permettait de réduire la rougeur, dissoudre localement le venin, empêcher l'oedème de se développer ou favoriser l'expectoration. La composition cosmétique, objet de la présente invention, contient un extrait de Sanicula europaea. Il s'agit préférentiellement d'un extrait hydrosoluble des parties aériennes (feuilles, fleurs et tiges) de Sanicula europaea. De façon avantageuse, cet extrait est un extrait hydro alcoolique des parties aériennes de Sanicula europaea et de préférence il est stabilisé par du glycérol. De préférence il s'agit d'un extrait hydro alcoolique obtenu selon un procédé comprenant au moins les étapes suivantes : - séchage des parties aériennes ; - broyage ; - extraction ethanol/eau (80 :20) ; - filtration ; - concentration sous vide par évaporation des solvants d'extraction ; - ajustement de la concentration (ajout de glycérol). L'extrait de Sanicula europaea utilisé dans la composition selon l'invention, est un liquide légèrement visqueux jaune - marron et d'odeur caractéristique. Il présente les caractéristiques analytiques suivantes : pH = 3.5 - 5.0 Densité relative : 1.050 - 1.200 Indice de réfraction : 1.370 - 1.400 Rapport plante sèche/extrait = 1/10 De préférence la composition cosmétique selon l'invention comprend de 0,01 à 10 % d'extrait de Sanicula europaea en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition. Avantageusement, la composition comprend de 0,01 à 5 % d'extrait de Sanicula europaea en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition. Les compositions selon l'invention peuvent encore comprendre un ou plusieurs agents de formulation ou additifs d'usage connu et classique dans les compositions cosmétiques et dermatologiques tels que, à titre d'exemples et de façon non limitative, des adoucissants, des colorants, des actifs filmogènes, des tensioactifs, des parfums, des conservateurs, des émulsionnants, des huiles, des glycols, des vitamines comme la vitamine E, des filtres UV, etc... Grâce à ses connaissances en matière de cosmétique, l'homme du métier saura quels agents de formulation ajouter aux compositions de l'invention et en quelles quantités en fonction des propriétés recherchées. Les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous toute forme connue de l'homme du métier dans le domaine de la cosmétologie et de la dermatologie sans autre restriction galénique que l'application sur le visage, les cheveux et sur le corps. De façon avantageuse, les compositions selon l'invention se présentent sous la forme d'un gel, d'une crème, d'une lotion, d'une huile, d'un lait, d'un spray, etc... La présente invention concerne l' utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour augmenter l'expression des SPR-1B et des SPR-2A. La présente invention concerne aussi l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour renforcer la cohésion de la structure du stratum corneum. De même, la présente invention concerne 10 l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour renforcer la barrière cutanée. La présente invention concerne également l'utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour traiter 15 les peaux sèches et/ou déshydratées. Enfin, la présente invention concerne un procédé de traitement cosmétique des peaux sèches et/ou déshydratées, comprenant l'application d'une composition 20 cosmétique comprenant un extrait de Sanicula europaea. Les exemples ci-après concernent, d'une part l'évaluation de l'effet d'un extrait de Sanicula europaea sur l'expression des SPR-1B et des SPR-2A et d'autre part des 25 compositions objets de la présente invention. Les exemples font référence aux figures suivantes dans lesquelles : la figure 1-A représente l'immunofluorescence (TRITC) de la protéine SPR1B pour le 30 témoin excipient. la figure 1-B représente l'immunofluorescence (TRITC) de la protéine SPR1B pour l'excipient avec 0,4% d'extrait de sanicula europaea, observation au microscope NIKON 50i (objectif x20). - la figure 2 représente l'expression de la protéine SPR1B exprimée en intensité de fluorescence par surface de stratum corneum. la figure 3-A représente l'immunofluorescence (TRITC) de la protéine SPR2A pour le témoin excipient. la figure 3-B représente l'immunofluorescence (TRITC) de la protéine SPR2A pour l'excipient avec 0,4% d'extrait de sanicula europaea, observation au microscope NIKON 50i (objectif x20). - la figure 4 représente l'expression de la protéine SPR2A exprimée en intensité de fluorescence par surface de stratum corneum. I.EVALUATION DE L'ACTIVITE D'UN EXTRAIT DE SANICULA EUROPAEA SUR L'EXPRESSION DES SPRS A.MATERIEL ET METHODE 1)MATERIEL Des épidermes reconstruits (0,63 cm2) de 17 jours ont été pré-cultivés en plaque 24 puits contenant 300p1 de milieu de maintenance, pendant 24 heures. Puis 2mg/cm2 de produit à tester ont été déposés sur la face cornée de chaque épiderme. L' essai a été conduit en triplicate après 72 heures de contact des produits avec les épidermes reconstitués Skinethic®. On utilise 3 lots d'épiderme reconstitués : - Lot 1 : 3 épidermes témoins ne recevant aucun produit. - Lot 2 : 3 épidermes traités recevant le produit excipient. - Lot 3 : 3 épidermes traités recevant le produit excipient plus l'extrait de Sanicula europaea à hauteur de 0,4% du mélange. Formulation de l'excipient : Dimethicone & PEG/PPG-18/18 Dimethicone 2,00 Dimethicone 7,00 Phenyl Trimethicone 6,00 Butyloctyl Salicylate 5,00 Aqua 75,90 Disodium EDTA - 0,1 Sodium Chloride 1 Phenoxyethanol 0,6 Parfum 0,4 Alcool 2,00 2)METHODE Evaluation du marquage SPRR1B et SPRR2A après traitement immunohistochimique des épidermes reconstitués. Les épidermes témoins ne recevant aucun produit et les épidermes recevant les produits à l'étude pendant 72 heures de contact, ont été congelés à -180°C. Après inclusion en blocs de paraffine, ces épidermes ont été coupés au microtome (épaisseur 5gm, 2 coupes par lame) puis maintenues à température ambiante jusqu'à la réalisation des immunomarquages. Les lames déparaffinées ont été rincées puis incubées pendant 1 heure à température ambiante dans la solution d'anticorps primaire, anti- SPPR1B ou SPRR2A. Après lavage, les coupes sont incubées pendant 1 heure à température ambiante avec la solution d'anticorps secondaires couplé au TRITC. Les lames sont rincées puis sont incubées avec une solution DAPI pour marquer les noyaux cellulaires. Les coupes ont été observées à l'aide d'un microscope NIKON 50i (objectif x20). Les saisies d'images (n=12) ont été réalisées à l'aide d'une caméra pilotée par un logiciel NIS-elements. Les images de fluorescence TRITC indiquent les régions de localisation de SPRR1B ou SPRR2A. Elles sont analysées par le logiciel d'analyse d'image NIS-elements. L'analyse est réalisée au niveau du stratum corneum. B.RESULTATS Les résultats sont présentés dans les 10 tableaux qui suivent ; ils sont exprimés en unité arbitraire de fluorescence. L'intensité est rapportée .à la surface du stratum corneum. 1) EXPRESSION DE SPR1B 15 Erreur standard de la moyenne (sem) Moyenne 1129,56 Excipient + Sanicle 0,4% 16719,55 Expression SPRR1B (intensité de fluorescence/surface stratum corneum) Excipient 10962,73 661,37 2) EXPRESSION DE SPR2A C.CONCLUSION Dans nos conditions expérimentales, l'extrait de Sanicula europaea formulé dans l'excipient appliqué en topique à la surface d'un épiderme reconstruit module l'expression des protéines constitutives de l'enveloppe cornée SPRR1B et SPRR2A. La surexpression de ces 2 protéines de la famille des Small Proline Rich Proteins permet de renforcer l'enveloppe cornée en assurant sa résistance. II.EXEMPLES LOTION TONIQUE DISODIUM EDTA 0,20 SODIUM CITRATE 0,20 SODIUM CHLORIDE 0,75 GLYCOLS 3,00 EXTRAIT SANICULA EUROPAEA 1,00 PARFUM Q.S. CONSERVATEURS Q.S. Erreur standard de la moyenne (sem) Moyenne Excipient 952,75 1786,74 207747,76 Excipient + Sanicle 0,4% 15227,92 Expression SPRR2A (intensité de fluorescence/surface stratum corneum) COLORANTS Q.S. EAU DEMINERALISEE Q.S.P 100 GEL -CREME ACRYLATES/C10-30 ALKYL ACRYLATE CROSSPOLYMER 0,35 SODIUM 0,10 HYDROXYETHYL ACRYLATE/SODIUM ACRYLOYLDIMETHYL TAURATE COPOLYMER 1,00 CETEARYL ETHYLHEXANOATE 2,00 DIMETHICONE 1,00 GLYCOLS 7,00 EXTRAIT SANICULA EUROPAEA 1,00 CONSERVATEURS Q.S. PARFUM Q.S. EAU DEMINERALISEE Q.S.P 100 EMULSION H/E CETEARYL ALCOHOL & CETEARYL GLUCOSIDE 4,30 GLYCERYL STEARATE & PEG-100 STEARATE 2,70 PENTAERYTHRITYL DISTEARATE 2,00 STEARETH-21 0,50 BEURRE DE KARITE 2,00 PARAFFINUM LIQUIDUM 8,00 CAPRYLIC/CAPRIC TRIGLYCERIDE 10,00 DIMETHICONE 5,00 ACRYLATES/C10-30 ALKYL ACRYLATE CROSSPOLYMER 0,25 XANTHAN GUM 0,20 GLYCOLS 5,00 EXTRAIT SANICULA EUROPAEA 1,00 CONSERVATEURS Q.S. TROMETHAMINE Q.s.pH EAU DEMINERALISEE Q.S.P 100 EMULSION E/H (PROTECTEUR SOLAIRE) DIMETHICONE 13,00 DIMETHICONE & PEG/PPG-18/18 DIMETHICONE 2,00 DIMETHICONE & TITANIUM DIOXIDE & POLYGLYCERYL-3 & POLYDIMETHYLSILOXLYETHYL & 15 DIMETHICONE & ALUMINIUM HYDROXIDE & STEARIC ACID 30,00 ETHYLHEXYL METHOXYCINNAMATE 6,50 TINOSORB M 6,00 ISODODECANE 5,00 20 ALCOHOL 3,00 SODIUM CHLORIDE 1,00 EXTRAIT SANICULA EUROPAEA 0,50 CONSERVATEURS Q.S. PARFUM Q.S. 25 EAU DEMINERALISEE Q.S.P 100 REVENDICATIONS1) Utilisation d'un extrait de Sanicula europaea pour renforcer la cohésion de la structure du stratum corneum. 2) Utilisation selon la revendication 1, pour renforcer la barrière cutanée. 3) Utilisation selon les revendications 1 ou 2, pour traiter les peaux sèches et/ou déshydratées. 4) Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle l'extrait de Sanicula europaea est un extrait des parties aériennes de la plante. 5) Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle l'extrait de Sanicula europaea est un extrait hydrosoluble. 6) Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle l'extrait de Sanicula europaea est un extrait hydro-alcoolique. 7) Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, comprenant de 0,01 à 10 % d'extrait de Sanicula europaea en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition, de préférence de 0,01 à 5 % d'extrait de Sanicula europaea en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition. 8) Utilisation cosmétique selon l'une quelconque des revendications précédentes comprenant en outre un ou plusieurs agents de formulation ou additifs tels que des adoucissants, des colorants, des agents filmogènes, des tensio-actifs, des parfums, des conservateurs, des émulsionnants, des huiles, des glycols, filtres UV, et des vitamines. 9) Procédé de traitement cosmétique des peaux sèches et/ou déshydratées, comprenant l'application d'une composition cosmétique comprenant un extrait de Sanicula europaea.