Brevet FR3006314A1 — publié le 20141205

NOUVEAU PROCÉDÉ DE SYNTRESE DE DÉRIVÉS N-ALKYLGLYCOSYL(DI)AMINE ET LEURS APPLICATIONS La présente invention a pour objet un nouveau procédé de synthèse sans solvant de dérivés N-alkyl-glycosyl(di)amine répondant à la formule générale (I) suivante : R1 N-(CH2)n-X R2 (I) L'invention concerne également l'utilisation de dérivés N-alkyl-glyeosyl(di)amine répondant à la formule générale (I) comme agents antibactériens et/ou antifongiques contre des phytopathogènes. Depuis plusieurs années, la synthèse de molécules bioactives à grand spectre d'action (antibactériens, antifongiques, antivirales, nématicides, éliciteurs de défenses naturelles), susceptibles d'inhiber et/ou d'éradiquer les phytopathogènes de plantes telles que la pomme de terre, la tomate, la vigne ou la betterave, a connu un intérêt grandissant. En effet, la synthèse de telles molécules revêt des enjeux économiques et environnementaux de premier ordre, ces molécules présentant une très haute valeur ajoutée et une éco-toxicité réduite, tout en satisfaisant aux critères de biocompatibilité et de biodégradabilité. La chimie mise en oeuvre pour la synthèse de ces molécules doit donc être une chimie à développement durable, régie par des principes tels que l'économie d'atomes, la conception de produits chimiques moins nocifs et plus sécuritaires, l'utilisation de solvants et auxiliaires plus sécuritaires, l'amélioration des rendements énergétiques, l'utilisation de matières premières renouvelables tels que les hydrates de carbones (sucres), la réduction de la quantité de produits dérivés, la catalyse. La présente invention s'inscrit dans cette lignée. Elle concerne un nouveau procédé de synthèse, dit « procédé par chimie verte », de dérivés N-alkyl-glycosyl(di)amine utilisés comme biocides contre des phytopathogènes. Des procédés de préparation de dérivés N(dialkylamino)alkyl-glyeasylamine ont en effet déjà été décrits dans l'art antérieur (Demande FR 2 767 134). Toutefois, ces synthèses ont toujours été réalisées en milieu solvant. Les composés N-alkyl-glycosyl(di)amine obtenus selon le procédé de l'invention sont des composés « bio-sourcés », potentiellement moins toxiques que les pesticides habituellement utilisés, et susceptibles de lutter contre les phytopathogènes présents dans les sols, telles que les bactéries de souche Gram-négatif responsables par exemple de la galle du collet induit par l'agent pathogène Agrobacterium tumefaciens, ou de la jambe noire chez la pomme de terre induit par Pectobacteriurn atrosepticum. En effet, il n'existe aucun moyen capable de lutter chimiquement contre la maladie de la jambe noire qui dévaste les champs de pomme de terre, ainsi que les tubercules en cours de stockage, seules des méthodes prophylactiques veillant à limiter leur dissémination sont aujourd'hui utilisées. Les inventeurs se sont donc donnés pour but de concevoir un procédé de synthèse de dérivés N-alkyl-glycosyl(di)amine par mécanosynthèse, plus sécuritaire que les procédés habituellement utilisés car n'utilisant pas de solvants organiques nocifs, ledit procédé conduisant à de très bons rendements. Les procédés par mécanosynthèse, auparavant destinés à la préparation de composés inorganiques, peuvent donc aujourd'hui être adaptés à la synthèse de composés glycosylés. Ainsi, le premier objet de l'invention concerne un procédé de synthèse sans solvant de dérivés N-alkyl-glycosyl(di)amine répondant à la formule générale (I) suivante : R1 N-(CH2)n-X R2 (1) dans laquelle : R1 est un radical glycosyle, et de préférence un résidu mono, oligo ou polysaccharidique, R2 représente un atome d'hydrogène, un radical glycosyle, ou un radical alkyle en C -C225 n est un nombre entier allant de 0 à 22, X représente un atome d'halogène, un radical alkyle, alcényle, aleynyle, un groupe hydroxyle, un groupe carboxyle ou carb aldéhyde, un groupe aryle ou hétéroaryle, ou un groupe -NR3R4, dans lequel R3 représente un atome d'hydrogène ou un radical glycosyle, et de préférence un résidu mono, oligo ou polysaccharidique, et R4 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en C1-C12, à la condition que n soit différent de 0 lorsque X est un groupe -NR3R4, ledit procédé comprenant les étapes suivantes : (i) le mélange dans un réacteur, de préférence dans un vibro-broyeur ou dans un réacteur pour broyage à billes à mouvement vibrationnel et à mouvement planétaire, d'un composé ose ou oside et d'une amine de formule R2NH-(CH2)'-X, et (ii) le broyage dudit mélange dans un broyeur à billes. Au sens de la présente invention, on entend par : Alkyle: un groupe aliphatique hydrocarboné saturé, linéaire ou ramifié, pouvant avoir de 1 à 22 atomes de carbone, de préférence 1 à 12 atomes de carbone, et encore plus préférentiellement 1 à 6 atomes de carbone. Le terme « ramifié » signifie qu'au moins un groupe alkyle inférieur tel qu'un méthyle ou un éthyle est porté par une chaîne alkyle linéaire. A titre de groupe alkyle, on peut mentionner par exemple les groupes méthyle, éthyle, n-propyle, i-propyle, n-butyle, t-butyle et n-pentyle, n-hexyle, n-heptyle, n-octyle, n-nonyle, ndécyle, n-undécyle, n-dodéeyle ; Alcényle : un groupe aliphatique hydrocarboné, linéaire ou ramifié, possédant une insaturation caractérisée par la présence d'une double liaison carbone-carbone. L'alcène a de préférence 2 à 12 atomes de carbone, et encore plus préférentiellement 2 à 6 atomes de carbone ; Alcynyle : un groupe aliphatique hydrocarboné, linéaire ou ramifié, possédant une insaturation caractérisée par la présence d'une triple liaison carbone-carbone. L'alcyne a de préférence 2 à 12 atomes de carbone, et encore plus préférentiellement 2 à 6 atomes de carbone ; Aryle : tout groupe fonctionnel ou substituant dérivé d'au moins un cycle aromatique ; un cycle aromatique correspond à tout groupe mono- ou polycyclique plan comportant un système TC délocalisé dans lequel chaque atome du cycle comporte une orbitale p, lesdites orbitales p se recouvrant les unes les autres ; parmi de tels groupes aryles, on peut mentionner les groupes phényle, biphényle, naphthalène et anthracène. Les groupes aryles de l'invention comprennent de préférence de 4 à 22 atomes de carbone, de manière préférée de 4 à 12 atomes de carbone, et de manière encore plus préférée de 5 ou 6 atomes de carbone ; Hétéroaryle : tout groupe fonctionnel ou substituant dérivé d'au moins un cycle aromatique tel que défini ci-dessus et contenant au moins un hétéroatome choisi parmi P, S, et N; parmi les groupes hétéroaryles, on peut mentionner les groupes furane, pyridine, pyrrole, thiophène, imidazole, pyrazole, oxazole, isoxazole, thiazole, triazole, tétrazole, pyridine, pyrazine, pyrimidine, pyridazine, benzofurane, isobenzofiirane, indole, isoindole, benzothiophène, benzo[c]thiophène, benzimidazole, indazole, benzoxazole, benzisoxazole, benzothiazole, quinoléine, isoquinoléine, quinoxaline, quinazoline, cinnoline, purine, et acridine. Les groupes aryles de l'invention comprennent de préférence de 4 à 22 atomes de carbone, de manière préférée de 4 à 12 atomes de carbone, et de manière encore plus préférée de 5 ou 6 atomes de carbone ; Les atomes d'halogène sont choisis parmi les atomes de brome, de chlore, de fluore et d'iode, et de préférence parmi les atomes de brome, de chlore et d'iode. Le composé ose ou oside de l'invention est un mono, oligo ou polysaccharide pouvant comprendre de 1 à 20 unités monosaccharidiques. On entend par composé ose tout sucre réducteur susceptible de réagir avec une amine nucléophile. On entend par composé oside tout sucre comportant un site électrophile en position autre qu'anomère susceptible de réagir avec une amine nucléophile. Avantageusement, l'unité saccharidique est choisie parmi le thréose, l'érytrose, le désoxyribose, le ribose, le xylose, le rhamnose, le fucose, le glycérose, l'arabinose, le lyxose, l'altrose, le gulose, l'idose, le talose, le glucose, le mannose, le fructose, le sorbotose, le galactose, le raffinose, le mélézitose, et de manière préférée parmi le rhamnose, le galactose ou le glucose. Le procédé de l'invention peut comprendre une étape préalable au cours de laquelle l'amine de formule R2NH-(CH2)'-X est mélangée à un auxiliaire, de préférence à l'aide d'un mortier, ledit auxiliaire pouvant être neutre ou basique et choisi parmi la silice (Si02), l'alumine (A1203), les argiles et les carbonates. Cette étape préalable de mélange avec un auxiliaire améliore de façon quantitative le rendement de la synthèse, les inventeurs ayant observé une amélioration des rendements de 40-60% à 75-97% lors d'un mélange préalable de l'amine avec un auxiliaire. On entend par auxiliaire un agent qui permet une meilleure dispersion des poudres, Il peut être inerte chimiquement ou non, et être choisi parmi la silice, l'alumine, les argiles telles que les argiles montmorillonite K10 ou KSF, et les carbonates tels que les carbonates de sodium ou de potassium. Au cours de l'étape (i), le rapport molaire du composé ose ou oside à l'amine peut être compris entre 1/1 et 1/1,2. L'étape (ii) de broyage peut durer au moins 1 heure, et de préférence de 1 à 4 heures. Au cours de cette étape (ii), le broyeur fonctionne de préférence à une fréquence comprise entre 20 et 50 Hz, et de préférence 50 Hz. Selon un mode de réalisation préférée, le réacteur et/ou les billes du broyeur sont en inox, en carbure de tungstène ou en zircon. Le réacteur et les billes du broyeur sont de préférence constitués du même matériau. Selon un mode de réalisation particulièrement préféré, les billes du broyeur et le mélange du composé ose ou oside et de l'amine de formule R2NH-(CI-12),-X représentent au moins 1/3 du volume du réacteur. Le procédé de l'invention peut également comprendre une étape (iii) supplémentaire de purification et/ou de filtration. Lorsque le procédé de l'invention est réalisé sans étape d'imprégnation préalable, l'étape (iii) est de préférence une étape de purification sur silice. Lorsque le procédé de l'invention est réalisé avec une étape préalable d'imprégnation, l'étape (iii) est de préférence une étape de filtration sur silice, sur colonne ou fritté. Le procédé de l'invention peut comprendre une étape (iv) subséquente de 10 transformation du dérivé N-alkyl-glycosyl(di)amine de formule (I) en un sel de N-alkylglycosyl(di)ammonium quaternaire par réaction avec un agent de quaternisation de foilitule R5-Y dans lequel : R5 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en C1-C22, et Y représente un atome d'halogène, un groupe sulfate R60-S02-0- ou un groupe 15 sulfonate R6-S02-0-, dans lesquels R6 est un radical alkyle en Cl-Cu., les groupes sulfonates pouvant être des groupes triflate, tosylate, mésylate ou nosylate. Selon un mode de réalisation préféré, les dérivés N-alkyl-glycosyl(di)ammonium quaternaires de l'étape (iv) sont obtenus après réaction du dérivé N-alkyl-glycosyl(di)amine avec un excès d'agent de quatemisation dans un vibro-broyeur ou un réacteur pour broyage à 20 billes à mouvement vibrationnel ou planétaire. Le N-alkyl-glycosyl(di)arnmonium quaternaire obtenu répond à la formule (Il) suivante : R1 ,R5 / N-(CH2)n-X, Y- R2 (II) 25 dans laquelle RI, R2, n et X sont tels que définis précédemment, et R5 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en Ci-C22, et Y représente un ion halogénure, un ion sulfate R60-S02-0- ou un ion sulfonate R6-S02-0-, dans lesquels R6 est un radical alkyle en C1-C12, les ions sulfonates pouvant être des ions triflate, tosylate, mésylate ou nosylate, 30 à la condition que n soit différent de 0 lorsque X est un groupe -NR3R.4. L'excès d'agent de quaternisation peut être compris entre 1,5 et 10 équivalents molaires par rapport aux dérivés 1V-alkyl-glyeosyl(di)amine de formule (I), et de préférence entre 2,5 et 5 équivalents molaires. Lors de l'étape (iv), le broyage peut durer au moins 2h, et de préférence 7h. La purification des dérivés N-alkyl-glycosyl(di)ammonium quaternaires peut être réalisée selon un procédé comprenant une étape d'acétylation, suivie d'une étape d'évaporation et d'une étape de décantation avec un solvant organique et de l'eau distillée. Au cours de l'étape d'acétylation, l'ion y- peut se transformer en ion carboxylate R6-000, dans lesquels R6 est un radical alkyle en C1-C12. Enfin, une étape de lyophilisation ou de séchage de la phase aqueuse, et une étape de filtration sur gel de silice peuvent être réalisées pour isoler les dérivés N-alkyl-glycosyl(di)ammonium quaternaires. De manière préférée, la purification des dérivés N-alkyl-glyeosyl(di)ammonium quaternaires est réalisée selon un procédé comprenant une étape d'acétylation mettant en oeuvre un mélange d'anhydride acétique avec un composé acide ou un mélange d'anhydride acétique avec un composé basique ou un mélange de chlorure d'acétyle avec un composé basique. Le mélange préféré utilisé pour l'acétylation est le mélange d'anhydride acétique et de triflate de cérium. L'invention concerne également les composés susceptibles d'être obtenus selon le procédé de l'invention, et répondant à la formule générale (I) suivante : R1 N-(CH2)n-X R2 (I) dans lesquels : R1 est un radical glyeosyle, de préférence un résidu mono, oligo ou polysaecharidique, R2 représente un atome d'hydrogène, un radical glycosyle, ou un radical alkyle en C1-C22, n est un nombre entier allant de 0 à 22, X représente un atome d'halogène, un radical alkyle, alcényle, aleynyle, un groupe hydroxyle, un groupe carboxyle ou earbaldéhyde, un groupe aryle ou hétéroaryle, ou un groupe -NR3R4, dans lequel R3 représente un atome d'hydrogène ou un radical glycosyle, de préférence un résidu mono, oligo ou polysaccharidique, et R4 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en C1-C12, à la condition que n soit différent de 0 lorsque X est un groupe -NR3R4, pour son utilisation comme agent antibactérien et/ou antifongique contre les phytopathogènes suivants : Agrobacterium turnefaciens, Pectobacterium atrosepticum, Fusarium sambucinum et Fusarium roseum, les phytopathogènes Pectobacterium atrosepticum, Fusarium sambucinum et Fusarium roseum étant des phytopathogènes de pommes de terre. Enfin, l'invention concerne des composés susceptibles d'être obtenus selon le procédé de l'invention, et répondant à la formule générale (II) suivante : R1 R5 /N-(C112)n-X, Y- R2 (II) dans laquelle R1, R2, n et X sont tels que définis précédemment, et : R5 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en C1-C22, et - Y représente un ion halogénure, un ion sulfate R60-S02-0- ou un ion sulfonate R6-S02-0', dans lesquels R6 est un radical alkyle en C1-C12, les ions sulfonates pouvant être des ions triflate, tosylate, mésylate ou nosylate, à la condition que n soit différent de 0 lorsque X est un groupe -NR3R4, pour son utilisation comme agent antibactérien et/ou antifongique contre les phytopathogènes, notamment contre les phytopathogènes tels que : Agrobacterium tumefaciens, Pectobacterium atrosepticum, Fusarium sambucinum et Fusarium roseum, les phytopathogènes Pectobacterium atrosepticum, Fusarium sambucinum et Fusarium roseum étant des phytopathogènes de pommes de terre. Outre les dispositions qui précèdent, l'invention comprend encore d'autres dispositions qui ressortiront du complément de description qui suit, qui se rapporte à des exemples de mise en oeuvre du procédé de l'invention pour la synthèse de dérivés N-alkylglycosyl(di)amine répondant à la formule générale (1) et de dérivés N-alkylglycosyl(di)ammonium quaternaire répondant à la formule générale (II), ainsi qu'à la Figure I annexée qui illustre l'activité antibactérienne de composés N-alkyl-glycosylamine contre Pectobacterium atrosepticum (CFBP 6276) et Agrobacterium turnqfaciens (NT1(pZNLR4)). MATÉRIEL ET MÉTHODES Caractérisation : Les produits décrits dans les exemples ci-après ont été caractérisés par chromatographie sur couche mince sur des plaques en verre ou d'aluminium MERCK recouverte d'un gel de silice 60 F254 de 0,25 mm d'épaisseur pour la phase directe. La révélation a été réalisée par pulvérisation d'une solution de ninhydrine ou de molybdate de cérium, suivi d'un chauffage de la plaque. Les purifications par chromatographie sur colonne ont été effectuées en phase liquide sur colonne ouverte. La phase stationnaire utilisée est le gel de silice Merck 60 (70-230 mesh 10 ASTM) (0,063-0,200 gm). Les spectres de R.MN du proton ('H) et du carbone (13C) ont été réalisés sur des spectromètres Brulcer Advance 300. Les valeurs des déplacements chimiques (S) sont exprimées en partie par million (pprn). Les constantes de couplage .1 sont exprimées en Hertz (Hz). La multiplicité des signaux est indiquée à l'aide des abréviations suivantes : 15 s = singulet d = doublet dd= doublet de doublet t = triplet m ------ multiplet Les spectres de masse ont été réalisés sur un spectromètre de masse de type Q-Tuf Tandem en polarité positive. Les échantillons sont ionisés par éleetrospray avec détection RID. D'autres spectres ont été effectués sur un spectromètre WATERS ZQ en mode électrospray également. Les composés ont été préalablement dissous dans du méthanol. 20 Exemple 1 : Préparation d'un composé la de formule : OH 0,71 g (12,5 mmol) de propargylamine est mélangé à 3 g d'alumine neutre (A1203). Les réactifs sont ensuite mélangés et broyés dans un mortier à l'aide d'un pilon pendant 2 25 minutes. 2,21 g de L-rhamnose monohydrate (12,2 rnmol) sont ajoutés dans le mortier. Le mélange est broyé par le pilon pendant 2 minutes supplémentaires, puis introduit dans une jarre en inox munie de 4 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée dans un broyeur à billes type vibrationnel Spex 8000M et agitée pendant 1h30. Le brut réactionnel est dissous à reflux dans 200 mL d'éthanol, puis filtré sur un fritté comportant 50 g de silice et lavé avec 100 mL d'éthanol chaud. Après évaporation de l'éthanol sous pression réduite, un solide jaune est obtenu. Un lavage avec 10 mL de diéthyl éther à 40°C permet d'obtenir 2,3 g (94%) d'un 5 composé la sous forme de poudre jaune-pâle. Mélange d'isomères a, 3 : u/13: 88/12; Isomère a: 111 NMR (CD30D) : ô 4.25 (d, 1H, J=1.1 Hz, H-1), 3.86 (dd, 1H, J=3.3, 1.1 Hz, H-2), 3,67 ( dd, 1H, J=16.3, 2.5 Hz, -TIN-CH2-), 3.58 (dd, 1H, .1=16.4, 2.5 Hz, -HNCH2-), 3.46 (dd, 1H, J=9.2, 3.3 Hz, H-3) ; 3.32 (t, 1H, J=9.2 Hz, H-4), 3.26-3.16 (m, 1H, H- 10 5), 2.63 (t, 1H, J-2.5 Hz, HCI---C-), 1.35 (d, 3H, J=6.1 Hz, H-6). 13C NMR (CD30D) ô 88.2 (C-1), 75.8 (C-3), 74.6 (C-5), 74.0 (C-4), 72.8 (C-2 et HCaC-), 34.5 (-HN-CH2-), 18.0 (C-6). Spectrométrie de masse basse résolution: m/z [M+Nar masse calculée = 224,1102 masse mesurée = 224,3 15 Exemple 2 : Préparation d'un composé lb de formule : OH H ti"niy OH H 0,45 g (6,1 mmol) de butylamine est mélangé à 1,5 g de silice (Si02). Les réactifs sont ensuite mélangés et broyés dans un mortier à l'aide d'un pilon pendant 2 minutes. 1 g de L- 20 rhamnose monohydrate (5,5 mmol) est rajouté dans le mortier. Le mélange est broyé par le pilon pendant 2 minutes supplémentaires, puis introduit dans une jarre en inox munie de 4 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée dans un broyeur à billes type vibrationnel Spex 8000M et agitée pendant 1h30. Le brut réactionnel est dissous à reflux dans 100 mL d'éthanol, puis filtré sur un fiitté 25 comportant 50 g de silice et lavé avec 50 mL d'éthanol chaud. Après évaporation de l'éthanol sous pression réduite, un solide blanc-cassé est obtenu. Un lavage avec 10 mL de diéthyl éther à 40°C, suivi d'une filtration sur fritté, permet d'obtenir 1,15g (86%) d'un composé lb sous forme de poudre blanche. Mélange d'isomères ct, : a/r3 : 93/7 ; Isomère a : 1H NMR (CD30D) : ô 4.07 (d, 1H, J=1.1 Hz, H-1), 3.81 (dd, 1H, J=3.3, 1.1 Hz, H-2), 3.44 (dd, 1H, J=9.2, 3.3 Hz, H-3) ; 3.31 (t, 1H, J=9.2 Hz, H-4), 3.25-3.16 (m, 1H, H-5), 3.00-2.91 (m, 1H, -11N-CH2-), 2.66-2.58 (m, 1H, -HN-CH2-), 1.55-1.35 (m, 4H, - CH2-CH2-), 1.31 (d, 3H, J-5.9 Hz, 11-6), 0.97 (t, 3H, J-7.2 Hz, CH3-CF12). 13C NMR (CD30D) ô 88.8 (C-1), 76.4 (C-3), 75.1 (C-5), 74.6 (C-4), 73.5 (C-2), 46.4 (-1-IN-CH2-), 33.6, 21.9 (-CH2-CH2-), 18.5 (C-6), 14.7 (CH3-C112). Spectrométrie de masse haute résolution : m/z [M+H] masse calculée = 220,1549 masse mesurée = 220,1546 Exemple 3 : Préparation d'un composé Ic de formule : OH N OH H 0,79 g (6,1 mmol) d'oetylamine est mélangé à 1,5 g de silice (Si02). Les réactifs sont ensuite mélangés et broyés dans un mortier à l'aide d'un pilon pendant 2 minutes. 1 g de Lrhamnose monohydrate (5,5 mmol) est rajouté dans le mortier. Le mélange est broyé par le pilon pendant 2 minutes supplémentaires, puis introduit dans une jarre en inox munie de 4 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée dans un broyeur à billes type vibrationnel Spex 8000M et agitée pendant 1h30. Le brut réactionnel est dissous à reflux dans 100 mL d'éthanol, puis filtré sur un fritté comportant 50 g de silice et lavé avec 50 mL d'éthanol chaud. Après évaporation de l'éthanol sous pression réduite, un solide blanc-cassé est obtenu. Un lavage avec 10 mL de diéthyl éther à 40°C suivi d'une filtration sur fritté permet d'obtenir 1,29 g (85%) d'un composé Ic sous forme de poudre blanche. Mélange d'isomères a, : a/P : 93/7; Isomère u: NMR (CD30D) : ô 4.07 (d, 1H, J=1.2 Hz, H-1) ; 3.81 (dd, IH, J=3.3, 1.2 Hz, H-2) ; 3.44 (dd, 1H, J-9.2, 3.3 Hz, H-3) ; 3.31 (t, 1H, J=9.2 Hz, H-4) ; 3.23-3.16 (m, 1H, H-5) ; 3.00-2.80 (m, 1H, -HN-Cl/2-) ; 2.66-2.57 (m, 1H, -HN-CH2-) ; 1.57-1.35 (m, 12H, -CH2-CH2-) ; 1.31 (d, 3H, J=6.9 Hz, H-6) ; 0.93 (t, 3H, J=6.6 Hz, CH3CH2)- 13C NMR (CD30D) : ô 86.9 (C-1), 74.6 (C-3), 73.2 (C-5), 72.7 (C-4), 71.7 (C-2), 44.9 (-HN-CH2-), 31.6, 29.4, 29.0, 28.9, 27.0, 22.3 (-CH2-CH2-), 16.7 (C-6), 13.0 (C113-0-12). Spectrométrie de masse haute résolution: m/z [M+1-1}-1- masse calculée = 276,2175 masse mesurée = 276,2182 Exemple 4 Préparation d'un composé Id de formule : OH OH N OH H 1 g (6,6 mmol) de décylamine est mélangé à 1,5 g de silice (Si02). Les réactifs sont ensuite mélangés et broyés dans un mortier à l'aide d'un pilon pendant 2 minutes, 1 g de Lrhamnose monohydrate (5,5 mmol) est rajouté dans le mortier. Le mélange est broyé par le pilon pendant 2 minutes supplémentaires, puis introduit dans une jarre en inox munie de 4 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée dans un broyeur à billes type vibrationnel Spex 8000M et agitée pendant 1h30. Le brut réactionnel est dissous à reflux dans 100 mL d'éthanol, puis filtré sur un fritté comportant 50 g de silice et lavé avec 50 mL d'éthanol chaud. Après évaporation de l'éthanol sous pression réduite, un solide blanc-cassé est obtenu. Un lavage avec 10 mL de diéthyl éther à 40°C suivi d'une filtration sur fritté permet 15 d'obtenir 1,58 g (95%) d'un composé Id sous forme de poudre blanche. Mélange d'isomères a, 13 : a/13 : 93/7; Isomère u: NMR (C1330D) : 4.07 (d, 1H, J-1.2 Hz, H-1) ; 3.80 (dd, 1H, J=3.3, 1.2 Hz, H-2) ; 3.44 (dd, 1H, J=9.2, 3.3 Hz, H-3) ; 3.31 (t, 1H, J=9.2 Hz, H-4) ; 3.23-3.16 (m, 1H, H-5) ; 3.00-2.80 (m, 1H, -HN-C112-) ; 2.66-2.57 (m, 1H, -HN-CH2-) ; 1.56-1.35 (m, 16H, 20 -CH2-CH2-) ; 1.31 (d, 3H, J-6.9, H-6) ; 0.93 (t, 3H, J=6.6 Hz, CH3-CF12). 13C NMR (CD3OD) 86.9 (C-1), 74.6 (C-3), 73.2 (C-5), 72.7 (C-4), 71.7 (C-2), 44.9 (-FIN-CH2-), 31.6, 29.4, 29.0, 28.9, 27.0, 22.3 (-CH2-CH2-), 16.7 (C-6), 13.0 (CH3-CH2). Spectrométrie de masse haute résolution: m/z [M+Hr masse calculée = 304,2488 masse mesurée = 304,2496 25 Exemple 5 : Préparation d'un composé le de formule : OH 1,18 g (6,3 mmol) de dodécylamine est mélangé à 1 g de silice (Si02). Les réactifs sont ensuite mélangés et broyés dans un mortier à l'aide d'un pilon pendant 2 minutes. 1 g de L-rhamnose monohydrate (5,5 mmol) est rajouté dans le mortier. Le mélange est broyé par le pilon pendant 2 minutes supplémentaires, puis est introduit dans une jarre en inox munie de 4 5 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée dans un broyeur à billes vibrationnd type Spex 8000M et agitée pendant 1h30. Le brut réactionnel est dissous à reflux dans 100 mL d'éthanol, puis filtré sur un fritté comportant 50 g de silice et lavé avec 50 mL d'éthanol chaud. Après évaporation de l'éthanol sous pression réduite, un solide blanc est obtenu. 10 Un lavage avec 10 mL de diéthyl éther à 40°C permet d'obtenir 1,53g (85%) d'un composé le sous forme de poudre blanche. Mélange d'isomères a, p : a/P : 92/8; Isomère u: 1F1 NMR (CD30D) : 5 4.07 (cl, IH, J=1.1 Hz, H-1), 3.81 (dd, III, J=3.3, 1.1 Hz, 11-2), 3.44 (dd, 1H, J=9.2, 3.3 Hz, H-3) ; 3.31 (t, 1H, J=9.2 Hz, H-4), 3.25-3.18 (m, 15 1H, H-5), 2.98-2.89 (m, 1H, -HN-CH2-), 2.66-2.57 (m, 1H, -1-1N-CH2-), 1.57-1.45 (m, 2H, - FIN-CH2-CH2-), 1.43-1.26 (m, 23H, -CH2-CH2- et H-6), 0.93 (t, 3H, J=7.0 Hz, CH3-CH2-). 13C NMR (CD30D) : 87.0 (C-1), 74.6 (C-3), 73.2 (C-5), 72.7 (C-4), 71.7 (C-2), 44.9 (-HN-CH2-), 31.6, 29.0, 26.9, 22.3, 33.6 (-CH2-CH2-), 16.7 (C-6), 13.0 (CH3-CF12). Spectrométrie de masse haute résolution : m/z [M+H] masse calculée = 332,2801 20 masse mesurée 332,2816 Exemple 6 : Préparation d'un composé If de fotimule : H OH N OH H N 01 OH 0,5 g (3,49 mmol) de 1,8-diaminooctane est mélangé à 1,26 g de L-rhamnose 25 monohydrate (6,93 mmol) dans un mortier à l'aide d'un pilon pendant 2 minutes, puis introduit dans une jarre en inox munie de 4 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée dans un broyeur à billes vibrationnel type Spex 8000M et agitée pendant 3h20. Le brut réactionnel est dissous à reflux dans 100 triL d'éthanol, puis évaporé sous pression réduite pour obtenir 1,45 g (96%) d'un composé If sous forme de poudre blanche. 30 Mélange d'isomères a, (3 : a/P : 84/16; Isomère a : 1H NMR (DMSO-d6) : ô 4.63 (d, 2H, J=4.8 Hz, OH-4) ; 4.56 (d, 2H, J=5.1 Hz, OH-2) ; 4.53 (d, 2H, J=5.1 Hz, OH-3) ; 3.90 (m, 2H, H-1), 3.54 (t, 2H, J-3,7, H-2), 3.2 (d, 2H, J=6 Hz, H-3) ; 3.10-2.80 (m, 4H, H-4, H-5), 2.82-2.72 (m, 2H, -HN-CH2-) ; 2.512.35 (m, 2H, -HN-CH2-) ; 2.10 (s ; 2H, -NH-) ; 1.47-1.32 (m, 12H, -CH2-CH2-), 1.14 (d, 6H, J=5.7, H-6). 13C NMR (DMSO-d6) : ô 87.6 (C-1), 74.9 (C-3), 73.0 (C-5), 72.8 (C-4), 72.0 (C-2), 45.3 (-11N-CH2-), 30.4, 29.4, 27.3 (-CH2-CH2-), 18.6 (C-6). Spectrométrie de masse haute résolution: nez [M+Hr masse calculée = 437,2866 masse mesurée = 437,2872 Exemple 7 Préparation d'un composé 1g de formule : H N OH H 4 H 01 OH OH 0,5 g (2,9 mmol) de diaminodécane est mélangé à 1,06 g de L-rhamnose monohydrate (5,8 mmol) dans un mortier à l'aide d'un pilon pendant 2 minutes. Puis le mélange est 15 introduit dans une jarre en inox munie de 4 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée dans un broyeur à billes vibrationnel type Spex 8000M et agitée pendant 3h20. Le brut réactionnel est dissous à reflux dans 100 mL d'éthanol puis évaporé sous pression réduite pour obtenir 1,29 g (96%) du composé If sous forme de poudre blanche. Mélange d'isomères a, : a/I3 : 75/25; 20 Isomère a : 1H NMR (DMSO-d6) : (5 4,63 (d, 2H, J=4.8 Hz, OH-4) ; 4,55-4,51 (m, 4H, OH-2, OH-3) ; 3.90 (m, 211, 11-1), 3.54 (dd, 2H, J=3.3, 1.1 Hz, H-2), 3.19 (m, 2H, H-3) ; 3.08-2.98 (m, 4H, H-4, H-5), 2,82-2,74 (m, 2H, -HN-CH2-) ; 2.51-2.35 (m, 2H, -HN-CH2-) ; 2.10 (s, 2H, -NH-) ; 1.45-1.18 (m, 16H, -CH2-CH2-), 1.11 (d, 6H, J=6.3, H-6). 13C NMR (DMSO-d6) ô 87.1 (C-1), 74.4 (C-3), 72.5 (C-5), 72,3 (C-4), 71.5 (C-2), 25 44.8 (-HN-CH2-), 29.9, 29.0, 26.8 (-CH2-CH2-), 18.1 (C-6). Spectrométrie de masse haute résolution: m/z [M+H]4 masse calculée = 465,3179 masse mesurée = 465,3176 30 Exemple 8 Préparation d'un composé Ih de formule : OH OH OH OH H 6 OH OH 1 g (5 mmol) de 1,12-diaminododécane est mélangé à 1,81 g de L-rhamnose monohydrate (10 mrnol) dans un mortier à l'aide d'un pilon pendant 2 minutes. Le mélange est ensuite introduit dans une jarre en inox munie de 4 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée dans un broyeur à billes vibrationnel type Spex 8000M et agitée pendant 3h20. Le brut réactionnel est dissous à reflux dans 100 mL d'éthanol, puis évaporé sous pression réduite pour obtenir 2,4 g (98%) du composé 1h sous forme de poudre blanche. Mélange d'isomères ct, f3 : a/ri : 90/10; Isomère NMR (CD30D) : 5 4.07 (d, 2H, J-1.1 Hz, 11-1), 3.81 (dd, 2H, J-3.3, 1.1 Hz, H-2), 3.44 (dd, 2H, J-9.2, 3.3 Hz, H-3) ; 3.31 (t, 2H, J-9.2 Hz, H-4), 3.25-3.18 (m, 2H, H-5), 2.98-2.90 (m, 2H, -2-), 2_66-2.57 (m, 2H, -N-CH2-), 1.57-1.30 (m, 20H, -CH2-CH2- ), 1.31 (d, 6H, J=8.7, H-6). 13C NMR (CD30D) 5 86.0 (C-1), 74.6 (C-3), 73.2 (C-5), 72.7 (C-4), 71,7 (C-2), 44.9 (-HN-CH2-), 29,0, 28.5, 22.3(-CH2-CH2-), 16.7 (C-6). Spectrométrie de masse haute résolution: m/z [M+Hr masse calculée = 493,3513 masse mesurée = 493,3492 Exemple 9 : Préparation d'un composé Ii de formule: OH NH2 1g (5 rnrnol) de 1,12-cliaminododécane est mélangé à 0,90 g de L-rhamnose rnonohydrate (4,9 mrnol) dans un mortier à l'aide d'un pilon pendant 2 minutes, puis introduit dans une jarre en inox muni de 4 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée 25 dans un broyeur à billes vibrationnel type Spex 8000M et agitée pendant 3h20. Le brut est purifié par chromatographie sur gel de silice avec un mélange dichlorométhane/méthanol dont les proportions varient graduellement de 100/0 à 50/50 pour obtenir 1,31g (76%) d'un composé Ii sous forme de poudre blanche. Mélange d'isomères et, p : u/13 : 96/4; Isomère u: 'H NMR (CD30D) : 5 4.07 (d, 1H,1=0.9 Hz, H-1) ; 3.81 (dd, 1H, 1=3.3, 0.9 Hz, H-2) ; 3.45 (dd, 1H, J=9.3, 3.3 Hz, H-3) ; 3.31 (t, 1H, 1=9.2 Hz, H-4) ; 3.23-3.14 (m, 1H, H-5) ; 2.99-2.90 (m, 1H, -HN-CH2-) ; 2.66 (t, 2H, 1=7.5 Hz, CH2-NH2) ; 2.65-2.57 (m, 1H, -FIN-CH2-) ; 1.60-1.30 (m, 20H, -CH2-CH2-) ; 1.31 (d, 6H, 1=6 Hz, H-6) I3C NMR (CD30D) 86.9 (C-1), 74.5 (C-3), 73.2 (C-5), 72.7 (C-4), 71.6 (C-2), 44.9 (-HN-CH2-), 41.2 (-HN-CH2-), 32.5, 29.6, 29.2, 27.0, 26.6 (-CH2-CH2-), 16.7 (C-6). Spectrométrie de masse haute résolution: na/z [M+Hr masse calculée = 347,2910 masse mesurée = 347,2903 H 9 1,13 g (6,2 mmol) de dodécylamine est mélangé à 1 g de silice (Si02). Les réactifs sont ensuite mélangés et broyés dans un mortier à l'aide d'un pilon pendant 2 minutes. 1 g de glucose (5,5 mmol) est rajouté dans le mortier. Le mélange est broyé par le pilon pendant 2 minutes supplémentaires, puis est introduit dans une jarre en inox munie de 4 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée dans un broyeur à billes vibrationnel type Spex 8000M et agitée pendant 1h30. Le brut réactionnel est dissous à reflux dans 100 mL d'éthanol, puis filtré sur un fritté 20 comportant 50 g de silice et lavé avec 50 mL d'éthanol chaud. Après évaporation de l'éthanol sous pression réduite, un solide blanc est obtenu. Un lavage avec 10 mL de diéthyl éther à 40°C permet d'obtenir 1,56g (81%) du composé Ij sous forme de poudre blanche. Mélange d'isomères a, 13. Le ratio n'a pas été déterminé précisément, toutefois 25 l'isomère [3 est majoritaire. Isomère 13 : NMR (CD30D) : 3.91-3.76 (m, 2H, H-1, H-6a), 3.74-3.61 (m, 1H, H-6b), 3.40-3.20 (m, 3H, H-3, H-4, H-5) ; 3.09 (t, 1H, 1=8.7 Hz, H-2), 2,98-2,85 (ni, 1H, - HN-012-), 2.71-2.60 (m, 1H, -HN-CH2-), 1.56-1.20 (m, 20H, -CH2-CH2), 0.93 (t, 3H,1=6.8 Hz, CH3-CH2-). Exemple 10 : Préparation d'un composé Ij de formule : HO HO HO 13C NMR (CD30D) : 91.8 (C-1), 78.9 (C-3 et C-5), 74.9 (C-2), 71.8 (C-4), 62.8 (C6), 47.2 (-HN-CH2-), 33.0, 30.4, 28.3, 23.7 (-CH2-CH2-), 14.4 (CH3-CH2-). Spectrométrie de masse haute résolution: intz [M+Hr masse calculée = 348,2750 masse mesurée = 348.2758 Exemple 11 Préparation d'un composé 1k de formule : HO OH 0 OFIL1')N H 1,13 g (6,2 mmol) de dodécylamine est mélangé à 1 g de silice (Si02). Les réactifs sont ensuite mélangés et broyés dans un mortier à l'aide d'un pilon pendant 2 minutes. 1 g de galactose (5,5 mmol) est ajouté dans le mortier. Le mélange est broyé par le pilon pendant 2 minutes supplémentaires, puis introduit dans une jarre en inox muni de 4 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée dans un broyeur à billes vibrationnel type Spex 8000M et agitée pendant 1h30. Le brut réactionnel est dissous à reflux dans 100 mL d'éthanol puis filtré sur un fritté comportant 50 g de silice et lavé avec 50 mL d'éthanol chaud. Après évaporation de l'éthanol sous pression réduite, un solide blanc est obtenu. Un lavage avec 10 mL de diéthy1 éther à 40°C permet d'obtenir 1,70g (89%) du composé 11( sous forme de poudre blanche. Mélange d'isomères a, (3 : le ratio n'a pas été déterminé précisément, mais l'isomère est majoritaire. Isomère 13 : 111 NMR (CD30D) : Ô 3.90 (dd, 1H, 1-2.3, 11.6 Hz, H-6a), 3.84 (d, 1H, 14.4 Hz, H-1) 3.77-3.69 (m, 2H, H-3, H-6b), 3.52-3.45 (m, 2H, H-4, H-5) ; 3.43 (t, 1H, 1-8,4 Hz, H-2), 2.99-2.85 (m, 1H, -HN-CH2-), 2.71-2.58 (m, 1H, -HN-CH2-), 1.57-1.22 (m, 20H, -CH2-CH2-), 0.93 (t, 3H, J-7.0 Hz, CH3-CH2-). 13C NMR (CD30D) : (592.4 (C-1), 77.5 (C-3), 75.8 (C-5), 72.4 (C-2), 70.6 (C-4), 62.6 (C-6), 47.1 (-HN-CH2-), 33.0, 30.4, 30.3, 28.4, 23,7 (-CH2-CH2-), 14.4 (CH3-CH2-). Spectrométrie de masse haute résolution : in/z {M+Hr masse calculée - 348,2750 masse mesurée --- 348,2757 HO30 Exemple 12 : Préparation d'un composé Ha de formule : Ac OAc OAc -OAc 0,88 g (6,2 mmol) d'iodométhane est mélangé à 1,5 g de silice (Si02). 0,5 g (2,4 5 mmol) du composé la (exemple 1) est ensuite ajouté à ce mélange, puis introduit dans une jarre en inox munie de 4 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée dans un broyeur à billes vibrationnel type Spex 8000M et agitée pendant 5h. Le brut réactionnel est dissous dans 50 mL d'éthanol, puis filtré sur un fritté comportant 50 g de silice et lavé avec 50 rriL d'éthanol chaud. Après évaporation d'éthanol 10 sous pression réduite, une huile jaune est obtenue. Le produit brut obtenu est ensuite dissous dans 5 mL d'anhydride acétique et 0,03 g de trifiuorométhanesulfonate (triflate) de cérium est ajouté. Le mélange est agité à 50°C pendant 2h. La solution est séchée sous pression réduite, puis diluée avec 30 mL d'eau. Les produits secondaires formés sont extraits 3 fois avec 30 mL d'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est 15 séchée par lyophilisation. Le produit obtenu est purifié par chromatographie sur colonne sur gel de silice (avec un mélange dichlorométhane/méthanol : 8/2) pour obtenir 0,43 g (49%) d'un composé Ha se présentant sous la forme d'une huile jaune. Mélange d'isomères a, p : le ratio n'a pas été déterminé précisément, mais l'isomère a est majoritaire. 20 Isomère a : 1H NMR (D20) : 5.28 (m, 1H, H-3) ; 5.21 (t, IH, J=2.3 Hz, H-4) ; 5.10 (d, 1H, J--0.8 Hz, H-1) ; 4.88 (dd, 1H, J=2.7, 0.8 Hz, H-2) ; 4.65-4.36 (dd, 2H, J=5.8, 2.4 Hz, -N-CH2-) ; 4.13-4.02 (m, 1H, H-5) ; 3.42 (s, 3H, -N(CH3)2) ; 3.40 (m, 4H, -N(CH3)2 et ; 3.06 (s, 3H, CH3C0-) ; 2.22-2.19 (3s, 9H, CH3C0-) ; 1.42 (d, 3H, J--6.2 Hz, H-6). 13C NMR (D20) : ô 172.6, 172.1, 172.0 (CO) ; 90.8 (C-1), 73.6 (C-5), 72.5 (C-3), 69.9 25 (C-3 et HC-----C), 64.8 (C-2), 53.7 (-N-CH2-), 48.4, 47.7 (-N(CH3)2), 41.83 (CH3C0-) ; 19.9 (CH3-00-) ; 16.0 (C-6). Spectrométrie de masse basse résolution: m/z [M] masse calculée - 356,1704 masse mesurée 355,8 30 Exemple 13 : Préparation d'un composé 11l3 de formule : OAc N+ 1 -1 0,81 g (5,7 mmol) d'iodométhane est mélangé à 1,5 g de silice (Si02). 0,5 g (2,3 mmol) du composé II (exemple 2) est ensuite ajouté à ce mélange, puis introduit dans une 5 jarre en inox munie de 4 billes en inox de 13 mm de diamètre. La jarre est placée dans un broyeur à billes vibrationnel type Spex 8000M et agitée pendant 5h. Le brut réactionnel est dissous dans 50 mL d'éthanol, puis filtré sur un fritté comportant 50 g de silice et lavé avec 50 mL d'éthanol chaud. Après évaporation de l'éthanol sous pression réduite, une huile incolore est obtenue. 10 Le produit brut obtenu est ensuite dissous dans 5 mL d'anhydride acétique et 0,03 g de tfifluorométhanesulfonate (trifiate) de cérium est ajouté. Le mélange est agité à 50°C pendant 2h. La solution est séchée sous pression réduite, puis diluée avec 30 mL d'eau. Les produits secondaires formés sont extraits 3 fois avec 30 mL d'acétate d'éthyle. La phase aqueuse est séchée par lyophilisation. Le produit obtenu est purifié par chromatographie sur colonne sur 15 gel de silice (avec un mélange dichlorométhane/méthanol : 8/2) pour obtenir 0,38 g (44%) d'un composé 111) se présentant sous la forme d'une huile jaune-pâle. Mélange d'isomères a, f3: le ratio n'a pas été déterminé précisément, toutefois l'isomère a est majoritaire. Isomère a: H NMR (D20) : 6.0 (d, 1H, J=2.8 Hz, H-1) ; 5.36 (dd, 1H, J=2,8, 10.80 20 Hz, H-2) ; 5.21 (t, 1H, J=10.0 Hz, H-3) ; 5.18 (m, 1H, H-4) ; 4.21-4.13 (m, 1H, H-5) ; 3.60- 3.39 (in, 2H, -N-CH2-) ; 3.26-3.21 (2s, 6H, -N(CH3)2) ; 2.39-2.21, 2.10 (3s, 9H, CH3-COo) ; 1,83-1.40 (m, 4H, -CH2-CH2-), 1.47 (d, 3H, J-6.1 Hz, H-6), 1.06 (t, 3H, J=7,4 Hz, CH3-CH2). 13C NMR (D20) : (5171.8, 171.6 (CO) ; 90.0 (C-1) ; 74.2 (C-5) ; 71.6 (C-3) ; 69.9 (C4) ; 66.1 (C-2) ; 64.8 (-Noah-) ; 49.1, 47.7 (-N-(CH3)2) ; 24.0, 19.1 (-CH2-CH2-) ; 20.2, 20.0, 25 19.7 (CH3-00); 16.5 (C-6) ; 12.7 (-CH2-CH3). Spectrométrie de masse basse résolution m/z [M]masse calculée = 374,2173 masse mesurée = 373,9 Tests d'activité biologique des composés de formule (I) : I/ Activité antibactérienne L'activité antibactérienne des dérivés rhamnosylamines de type N-alkyl- glycosyl(di)arnine de formule (I) synthétisés selon le procédé de l'invention a été évaluée sur deux bactéries : Agrobacterium tumefaciens NT1(pZNLR4) (Cha et aL, 1998) et Pectobacterium atrosepticum (CFBP 6276). Agrobacterium tumefaciens est une alpha-protéobactéria et Pectobacterium atrosepticum est une gamma-protéobactéria. Ce sont des bactéries rhizosphériques phytopathogènes. Agrobacterium tumefaciens est responsable d'une maladie appelée « galle du collet » qui se traduit par la formation d'une tumeur au site d'infection. Les bactéries du genre Agrobacterium sont résistantes à de nombreux antibiotiques de type bêta-lactame. Pectobacterium atrosepticum est l'agent bactérien responsable de la jambe noire ou pourriture molle chez plusieurs plante-hôtes, principalement la pomme de terre et également d'autres plantes telles que l'endive, la betterave sucrière, la tomate ou encore la carotte. Pour chaque molécule, la Concentration Minimale Inhibitrice (CMI), ainsi que la Concentration Minimale Bactéricide (CMB) a été évaluée, La CMI est la plus faible concentration de molécules (en kig/mL) inhibant toute culture 20 visible après 36h de culture à 30°C. La CMB est la plus faible concentration de molécule (en gg/mL) laissant moins de 0,01% de survivants de l'inoculum de départ après 36h de culture à 30°C. Pour définir la CMI et la CMB de chaque molécule, des cultures de chacune de deux souches bactériennes sont mises en place selon le protocole suivant : 20 11.1_, d'une solution à 25 106 UFC/mL de bactérie (Agrobacterium tumefaciens ou Pectobacterium atrosepticum) sont ajoutés à 10 itL de solution comprenant la molécule à tester solubilisée dans du DMSO ou du méthanol, et ajusté à un volume final de 200 lit dans du milieu TY (tryptone 5g/L et extrait de levure 3g/L). La gamme de concentration testée pour chacune des molécules est comprise entre 500 et 0,5 ilg,/mL. La CMI est déterminée après 36h d'incubation à 30°C par une lecture 30 de densité optique à 600 nm. La CMB est déterminée par étalement de 100 pt de milieu issu de la culture précédente sur un milieu TY gélose. La concentration la plus faible pour laquelle aucune colonie ne pousse sur la boîte est la CMB. Deux expériences sont répétées en parallèle pour chaque échantillon. Le 4-nitropyridine-N-oxide (4-NP0), produit commercial Sigma (CAS number : 112433-0) est utilisé comme molécule bactériostatique de référence avec une CMI de 125 kig/mL. Les résultats présentés dans le Tableau 1 ci-après correspondent aux valeurs des CMI (en ti,g/mL) de certaines N-alkyl-glycosyl(di)amine de formule (I) synthétisées vis-à-vis des bactéries Agrobacterium tumefaciens et Pectobacterium atrosepticum. Tableau 1 CMI de N-alkyl-glycosyl(di)amine de formule (I) Te Id le If 1g Ih Ii Ij Ik 4-NPO Pectobacterium atrosepticum 62,5 62,5 16 250 125 62,5 8 16 16 125 Agrobacterium tumefaciens 125 62,5 4 > 500 125 62,5 16 8 2 125 Une inhibition de la croissance des bactéries a été observée pour les composés Ie, Id, le, If, 1g, Ih, Ii, 1j, 1k et comparée au 4-NPO qui est la molécule bactériostatique de référence, après 36h d'incubation à 30°C. Les résultats rassemblés dans le Tableau 2 ci-après correspondent aux valeurs des CMB (en iig/mL) des N-alkyl-glycosyl(di)amine de formule (I) synthétisées vis-à-vis des 15 bactéries Agrobacterium tumefaciens et Pectobacterium atrosepticum. Tableau 2 CMB de N-alkyl-glycosyl(di)amine de formule (I) Ie Id le If 1g 1h li Ij 1k 4-NPO Pectobacterium atrosepticum > 500 250 16 - 250 125 16 32 - Agrobacterium tumefaciens - 250 8 - 250 500 32 16 Les composés N-alkyl-glycosyl(di)amine de formule (I) synthétisées ont montré une 20 activité bactéricide vis-à-vis des bactéries Agrobacterium tumefaciens et Pectobacterium atrosepticum, préférentiellement les composés Id, le, Ig, Ih, Ii, Ij et 1k. L'impact des composés N-alkyl-glycosyl(di)amine de formule (I) a été mesurée via les CMI et CMB des mélanges de composés Ie/Ih, le/Id, Ih/Id (ratios 50/50 en g/g). Le même protocole d'évaluation antibactérienne que celui décrit précédemment avec les composés des N-alkyl-glycosyl(di)amine de formule (1) a été appliqué pour ces mélanges. Les Tableaux 3 et 4 suivants rassemblent les résultats CMI et CMB obtenus après évaluation antibactérienne des mélanges de composés Ie/Ib, Ie/id, Ihild Tableau 3 : CMI des mélanges de composés Ielh, fead, IbIId Ie/Ih le/Id Ihnd Pectobaderium atroseptieum 16 32 62,5 Agrobacterium tumqfaciens 8 8 125 Tableau 4 : CMB des mélanges de composés le/lh, ih/fd Ierth Iedd Ihfid Pectobaeterium atroseptieum 62,5 62,5 125 Agrobacterium turnefaciens 62,5 32 125 Ces résultats montrent que les molécules obtenues ont des activités antibactériennes qui pourraient être exploitées pour protéger différentes plantes comme la pomme de terre contre des bactéries phytopathogènes. Par ailleurs, les associations des composés N-alkylglycosyl(di)amine de formule (I) montrent également un effet de synergie. III Activité antifongique L'activité antifongique des dérivés rhamnosylamines de type N-alkylglycosyl(di)amine de formule (I) synthétisés selon le procédé de l'invention a été évaluée sur deux champignons : Fusarium raseum et Fusarium sambueinurn. Pour cela, 500 pt de solution comprenant le dérivé rhamnosylamine de type N-alkyl-glycosyl(di)amine de formule (I) à tester (solubilisée dans du DM50 ou du méthanol) sont mélangés à 19,5 mL de milieu gélosé malt (Sigma aldrich) permettant la croissance de ces deux isolats de Fusarium. Un spot de 10 1.LL de culture de chaque Fusarium est ensuite déposé au centre de chaque boîte de Pétri. Après 10 jours d'incubation à 20°C, les diamètres de croissance sont mesurés. La concentration en composé N-alkyl-glycosyl(di)amine de formule (I) peut varier de 0,1 à25 ptmol/mL. La croissance des Fusariums sur milieux contenant les différentes molécules est comparée à celle obtenue uniquement avec le DMSO ou le méthanol. Les premiers essais ont été réalisés avec le composé Ij à des concentrations variant de 1 à 25 innol/mL. Les résultats obtenus sont exprimés en pourcentage d'inhibition de croissance mycélienne et sont rassemblés dans le Tableau 5. Tableau 5 : Effets du composé Ij sur la croissance de Fusarium roseum et Fusarium sambucinum à différentes concentrations (1 à 25 jenol/mL) 1 2,5 5 10 20 25 Fusarium roseum 100% 100% 100% 100% 100% 100% Fusarium sambucinum 50% 50% 100% 100% 100% 100% Le même protocole d'évaluation antifongique que celui décrit précédemment avec le composé Ij a été appliqué pour les composés Id, Te, 111 et Ii à des concentrations de 10 et 20 1.1mol/mL. Les résultats obtenus sont regroupés dans le Tableau 6. Tableau 6 : Effets des composé Id, le, Ih et Ii sur la croissance de Fusarium roseum et Fusarium sambucinum à 10 et 20 pnol/mL Fusarium roseum Fusarium sambucinum 10 20 10 20 Id 100% 100% 100% 100% le 100% 100% 100% 100% lh 100% 100% 100% 100% Ii 100% 100% 100% 100% Les composés N-alkyl-glycosyl(di)amine de formule (I) ont une très forte activité 20 inhibitrice contre Fusarium roseum et Fusarium sambucinum. REVENDICATIONSI) Procédé de synthèse d'un composé N-alkyl-glycosyl(di)amine répondant à la formule générale (1) suivante : N-(CH2)n-X R2 (1) dans laquelle : - R1 est un radical glycosyle, - R2 représente un atome d'hydrogène, un radical glycosyle, ou un radical alkyle en Ci-C22, n est un nombre entier allant de 0 à 20, X représente un atome d'halogène, un radical alkyle, alcényle, alcynyle, un groupe hydroxyle, un groupe carboxyle ou carbaldéhyde, un groupe aryle ou hétéroaryle, ou un groupe -NR3R4, dans lequel R3 représente un atome d'hydrogène ou un radical glycosyle, et R4 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en CI-C12, à la condition que n soit différent de 0 lorsque X est un groupe -NR3R4, ledit procédé comprenant les étapes suivantes : (i) le mélange dans un réacteur d'un composé ose ou oside et d'une amine de formule R2NH-(CH2)n-X, et (ii) le broyage dudit mélange dans un broyeur à billes. 2) Procédé selon la revendication 1 dans lequel l'étape de réaction entre le composé ose ou oside et l'amine de formule R2NH-(CH2),-X se fait sans solvant. 25 3) Procédé selon la revendication 1 ou la revendication 2 dans lequel le composé ose ou oside est un mono, oligo ou polysaccharide comprenant de 1 à 20 unités monosaccharidiques. 30 4) Procédé selon l'une des revendications 1 à 3 dans lequel le composé ose ou oside est un mono, oligo ou polysaccharide dont l'unité saccharidique est choisie parmi lethréose, l'érytrose, le désoxyribose, le ribose, le xylose, le rhamnose, le fucose, le glycérose, l'arabinose, le lyxose, l'allose, l'altrose, le gulose, l'idose, le talose, le glucose, le mannose, le fructose, le sorbotose, le galactose, le raffinose, le mélézitose. 5) Procédé selon la revendication 4 dans lequel l'unité sacchariclique est le rhamnose, le galactose ou le glucose. 6) Procédé selon l'une des revendications 1 à 5 dans lequel le rapport molaire du composé ose ou oside à l'amine est compris entre 1/1 et 1/1,2. 7) Procédé selon l'une des revendications 1 à 6 dans lequel les billes du broyeur et le mélange du composé ose ou oside et de l'amine de formule R2NH-(CH2)11-X représentent au moins 1/3 du volume du réacteur. 8) Procédé selon l'une des revendications 1 à 7 dans lequel le réacteur et/ou les billes du broyeur sont en inox, en carbure de tungstène ou en zircon. 9) Procédé selon l'une des revendications 1 à 8 dans lequel le réacteur et les billes du broyeur sont constitués du même matériau. 10) Procédé selon l'une des revendications 1 à 9 dans lequel l'étape (ii) de broyage dure au moins 1 heure, et de préférence de 1 à 4 heures. 11) Procédé selon l'une des revendications 1 à 10 dans lequel le broyeur fonctionne à une fréquence comprise entre 20 et 50 Hz, et de préférence 50 Hz. 12) Procédé selon l'une des revendications 1 à 11 comprenant une étape préalable au cours de laquelle l'amine de formule R2NH-(CH2)'-X est imprégnée sur un auxiliaire. 13) Procédé selon la revendication 12 dans lequel l'auxiliaire est choisi parmi la silice (Si02), l'alumine (A1203), les argiles et les carbonates. 14) Procédé selon l'une des revendications 1 à 13 comprenant une étape (iii) de purification ou de filtration. 15) Procédé selon l'une des revendications 1 à 13 comprenant une étape (iv) de transformation du dérivé N-alkyl-glycosyl(di)amine de formule (I) en un sel de Nalkyl-glycosyl(di)ammonium quaternaire par réaction avec un agent de quaternisation de formule R5-Y dans lequel : R5 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en Ci-C22, et Y représente un atome d'halogène, un groupe sulfate R60-S02-0- ou un groupe sulfonate R6-S02-0, dans lesquels R6 est un radical alkyle en C1-C12. 16) Composé susceptible d'être obtenu selon le procédé des revendications 1 à 14, et répondant à la formule générale (1) suivante N-(CH2)n-X R2 (I) dans lesquels : R1 est un radical glycosyle, R2 représente un atome d'hydrogène, un radical glycosyle, ou un radical alkyle en C1-C22, n est un nombre entier allant de 0 à 22, X représente un atome d'halogène, un radical alkyle, alcényle, alcynyle, un groupe hydroxyle, un groupe carboxyle ou carbaldéhyde, un groupe aryle ou hétéro aryle, ou un groupe -NR3R4, dans lequel R3 représente un atome d'hydrogène ou un radical glycosyle, et R4 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en C1-C129 à la condition que n soit différent de 0 lorsque X est un groupe -NR3R4, pour son utilisation comme agent antibactérien et/ou antifongique contre les phytopathogènes. 17) Composé susceptible d'être obtenu selon le procédé de la revendication 15, et répondant à la formule générale (II) suivanteRi R5 / N-(C1-12)n-X, YR2 (Il) dans lesquels : - RI est un radical glycosyle, - R2 représente un atome d'hydrogène, un radical glycosyle, ou un radical alkyle en Ci-C22, n est un nombre entier allant de 0 à 22, X représente un atome d'halogène, un radical alkyle, alcényle, alcynyle, un groupe hydroxyle, un groupe carboxyle ou carbaldéhyde, un groupe aryle ou hétéroaryle, ou un groupe -NR3R4, dans lequel R3 représente un atome d'hydrogène ou un radical glycosyle, et R4 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en C1-C12, R5 représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle en Ci-C22, et - Y représente un ion halogénure, un ion sulfate IW-S02-0- ou un ion sulfonate R6-802-0-, dans lesquels R6 est un radical alkyle en Ci -C12, à la condition que n soit différent de 0 lorsque X est un groupe -NR3R4, pour son utilisation comme agent antibactérien et/ou antifongique contre les phytopathogènes. 18) Composé de formule (1) ou (II) pour son utilisation selon la revendication 16 ou la revendication 17, dans laquelle les phytopathogènes sont les suivants : Agrobacterium tutnefaciens, Pectobacterium atrosepticum, Fusarium sambucinum et Fusarium roseum. 19) Composé de formule (I) ou (II) pour son utilisation selon la revendication 18, dans laquelle les phytopathogènes sont les phytopathogènes de pomme de terre suivants : Pectobacterium atrosepticurn, Fusarium sarnbucinum et Fusarium roseum.