Brevet FR3003173A1 — publié le 20140919

SUBSTITUTS OSSEUX GREFFES PAR des PEPTIDES MIMETIQUES DE LA PROTEINE HUMAINE BMP-2 La présente invention appartient au domaine des matériaux de substitution destinés à la chirurgie réparatrice des tissus durs, tels que les os et les dents. Elle a pour objet un matériau de substitution osseuse pour la chirurgie orthopédique et dentaire présentant des propriétés ostéoinductrices s'exprimant de manière rapide et intense. Ce matériau est composé d'un support phosphocalcique fonctionnalisé de manière covalente avec une densité contrôlée, par un peptide mimétique de la protéine humaine BMP-2. Un procédé d'obtention de ce matériau est également objet de l'invention. Les méthodes de traitement conventionnelles pour la réparation des tissus osseux reposent sur la chirurgie et font appel à la pose d'implants, ainsi qu'a l'emploi de ciments de comblement. Ces substituts osseux, qui peuvent être des implants solides préformés, résorbables ou non, ou des matériaux plus ou moins pâteux préparés à partir de granules, de poudres à mélanger avec un solvant et se solidifiant après leur injection dans la zone à traiter, sont communément fabriqués à partir de composés phosphocalciques. En effet, ces composés sont largement utilisées en chirurgie osseuse car elles ils apportent une plus grande souplesse mécanique aux implants comparés aux implants métalliques, et il est possible de les formuler comme pièces solides ou comme des ciments de comblement. Elles Ils sont en outre appréciés pour leur compatibilité cytologique et leur rôle bénéfique dans la formation d'une nouvelle matrice osseuse minérale. Cependant, la consolidation de l'os peut prendre plusieurs mois. De ce fait, dans de nombreux cas, on observe des blessures, des défauts de régénération tissulaire, ou encore une croissance osseuse insuffisante pour obtenir le résultat souhaité. Pour répondre à ce problème, des recherches ont été menées pour accélérer la régénération de l'os à l'aide de protéines morphogénétiques osseuses (ou BMPs selon l'acronyme anglais pour bone morphogenetic proteins). Les protéines BMPs sont un groupe de facteurs de croissance connus pour induire la formation des tissus cartilagineux (chondrogenèse) et osseux (ostéogénèse) par différenciation des cellules mésenchymateuses in vivo. Elles interagissent avec des récepteurs spécifiques présents à la surface des cellules, ce qui entraîne leur activation. Parmi les différentes BMPs identifiées à ce jour, la BMP-2 a montré les meilleures capacités ostéogéniques. Cependant, si la protéine BMP-2 a eu un effet prometteur sur animaux, les résultats d'essais cliniques menés sur l'homme sont controversés quant aux effets obtenus (Carragee EJ, Hurwitz EL, Weiner BK. A critical review of recombinant human bone morphogenetic protein-2 trials in spinal surgery: emerging safety concerns and lessons learned. Spine J. 2011, 11, 471 - Kang JD. Another complication associated with rhBMP-2. Spine J. 2011; 11, 517). Son emploi soulève en outre d'autres problèmes. En particulier, du fait que la protéine BMP-2 a une demi-vie courte et est rapidement métabolisée, l'injection d'une dose relativement élevée est nécessaire pour induire une ostéogenèse suffisante durant un traitement long. Ceci accroît le risque de réactions immunitaires lors de l'administration au patient, qui peut entraîner un niveau de toxicité indésirable. Ce faisant, sa production à grande échelle est longue et très coûteuse. Enfin et surtout, les essais cliniques ont montré des résultats contradictoires quant à l'efficacité d'une administration directe en tant que substance inductrice du processus d'ostéosynthèse. Deux approches sont actuellement adoptées pour surmonter ces difficultés. La première consiste à transfecter le gène bmp-2 dans des cellules souches mésenchymateuses puis à faire exprimer la protéine BMP-2 par les cellules transgéniques. Cependant, les vecteurs contenant le gène bmp-2 sont pour la plupart des adénovirus qui pourraient être nocifs pour les cellules hôtes. En outre, un risque de mutations existe pour les gènes de l'hôte. L'emploi de vecteurs non viraux élimine ce risque, mais alors l'expression de la protéine BMP-2 est réduite. La seconde approche consiste à utiliser in vivo des peptides synthétiques de longueur inférieure à celle de la protéine complète, imitant l'activité ostéogénique de la protéine BMP-2. Les peptides sont conçus à partir de la séquence connue de la protéine, en recherchant des segments responsables de l'activité ostéogénique, et en modifiant éventuellement la séquence des acides aminés pour moduler, intensifier et renforcer cette activité. Ces peptides peuvent être apportés de différentes manières et sous différentes formes au niveau des zones à traiter. Le document US 7754683 décrit trois peptides de petite taille (moins de 30 acides aminés), obtenus par adjonction de groupements chimiques à la séquence native de la BMP-2 correspondant au récepteur 11 (20 acides aminés). Leur activité ostéoinductrice améliorée provient, selon les auteurs, de la présence de groupements anioniques actifs favorisant la minéralisation. Ils peuvent être formulés en solution et injectés directement dans la zone à traiter, ou encapsulés dans des microsphères polymériques à libération progressive, ou encore intégrés dans la chaîne d'un polymère biodégradable pour former un copolymère biodégradable, lequel est introduit dans la zone à consolider. Dans ce mode d'administration, les peptides une fois libérés sont rapidement dispersés et dégradés ce qui implique l'emploi de quantités encore importantes. Une formation osseuse ectopique non contrôlée est à craindre et est malheureusement vérifiée dans de tels systèmes. Il a aussi été proposé d'utiliser des greffons synthétiques ou des ciments de comblement mimant les propriétés ostéoinductrices se manifestant dans les tissus naturels. Les biomatériaux utilisés en chirurgie osseuse peuvent alors contenir des facteurs de croissance, telles que les protéines morphogénétiques osseuses (BMPs) pour favoriser la régénération osseuse. Le document US 2007/0160681 par exemple, décrit un matériau destiné à la greffe osseuse, et des structures pour l'ingénierie tissulaire, qui comporte un peptide de faible poids moléculaire (de 16 à 25 acides aminés) à activité ostéoinductrice, immobilisé à sa surface. Ce peptide ostéoinducteur est un segment d'une protéine telle que la BMP-2, de séquence identique à la séquence de la protéine native, qui est immobilisé à la surface du matériau à raison de 0,1 mg/cm2 à 10 mg/cm2. Les auteurs observent des effets remarquables au bout de huit semaines après implantation. Les résultats obtenus jusqu'à présent montrent que de nombreux paramètres sont en jeu et doivent être pris en compte pour obtenir un système stable bien reconnu par l'organisme et qui stimule efficacement et durablement son activité ostéoinductrice. La connaissance des séquences actives des protéines impliquées n'est pas suffisante. En effet, la régulation de la différenciation osseuse est multiparamétrique, notamment du fait de l'influence des propriétés mécaniques et biochimiques du microenvironnement. Plus particulièrement, on sait que la physiologie de la cellule est affectée par une série de composants extracellulaires qui interagissent fortement avec les facteurs de croissance. Or, la coopération entre les substituts osseux et les facteurs de croissance dans ce microenvironnement n'a pas été étudiée jusqu'à présent. Les tentatives faites pour créer des matériaux bioactifs en y greffant des protéines ou des segments peptidiques mimétiques se sont avérées décevantes. Parmi les raisons pouvant être avancées à ce sujet, on peut retenir que les protéines macromoléculaires qui adhèrent à la surface d'un matériau ont tendance à se déplier de manière aléatoire, ce qui peut entraîner une activité biologique réduite et inhomogène en raison d'une exposition insuffisante des sites actifs. Ceci est également valable pour les peptides à l'état soluble. Lors de l'immobilisation des peptides par un greffage chimique covalent, le risque est grand qu'un mauvais repliement se produise, rendant les sites actifs inaccessibles. Il existe donc un besoin non satisfait à ce jour, de disposer d'un matériau utilisable en ostéochirurgie remplissant le rôle de substitut osseux et qui permette en même temps de promouvoir l'ostéoinduction et d'accélérer la formation osseuse, indépendamment de la condition physique particulière de chaque patient, sans risque immunitaire ou toxique. Les auteurs de la présente invention ont considéré que, pour une séquence particulière du peptide, la nature du support va jouer un rôle facilitant, ou au contraire répresseur, de l'activité ostéoinductrice. L'état des surfaces du support, la nature et la quantité des sites réactifs en surface, la densité du greffage, la nature de la liaison entre le peptide et le support, sont certainement des paramètres à prendre en compte dans la conception du substitut osseux répondant aux exigences précédemment énoncées. Les modes de préparation de substituts osseux associés à des facteurs de croissance influent forcément sur ces phénomènes. C'est dans ce contexte que les inventeurs ont mis au point un modèle expérimental pour caractériser le microenvironnement responsable de la différenciation cellulaire du lignage ostéoblastique. Dans le cadre de ces travaux, il a été trouvé qu'un segment peptidique déterminé peut induire une activité ostéoinductrice élevée, lorsqu'il est greffé de manière covalente sur un matériau phosphocalcique, avec une densité particulière. De manière surprenante, ce segment peptidique de taille réduite (une vingtaine d'acides aminés seulement) présente une efficacité élevée malgré un environnement fort différent de son environnement naturel. C'est un mime peptidique qui interagit avec son récepteur par des liaisons de types ionique, hydrogènes et hydrophobes. De manière encore plus surprenante, il a été mis en évidence que l'activité maximale ne se manifeste pas quand la densité peptidique augmente, mais pour des densités de peptides greffés en surface du matériau correspondant à des valeurs de l'ordre de quelques picomoles par mm2. Un but de la présente invention est ainsi de proposer un matériau implantable en tant que substitut osseux, ayant une action ostéoinductrice accrue, plus intense et plus rapide. Un autre but de l'invention est d'obtenir avec ce matériau un effet réparti de manière homogène dans toute la zone de cicatrisation, et perdurant suffisamment longtemps pour assurer une consolidation complète. Encore un but de l'invention est de disposer d'un substitut osseux pouvant être mis en oeuvre aisément, tant pour la fabrication de dispositifs prothétiques et d'implants divers, que pour la préparation de ciments de comblement. Un autre but de l'invention est de disposer d'un matériau de substitution osseuse greffé par un peptide mimétique de la protéine BMP-2, avec une concentration minimale et optimale. Bien entendu, ce matériau doit respecter toutes les normes de sécurité sanitaire et de (non) toxicité. Il doit aussi pouvoir être produit dans des conditions économiquement acceptables. Les objectifs ci-dessus sont atteints par la présente invention, laquelle a pour objet un matériau de substitution osseuse pour la chirurgie orthopédique et dentaire, lequel comprend : i) un support solide à base d'au moins un composé phosphocalcique présentant des groupements hydroxyles libres en surface, et ii) une quantité d'un peptide mimétique de la protéine humaine BMP-2 de séquence KIPKACCVPTELSAISMLYL (SEQ ID Nol ), ou d'un fragment ou d'un dérivé de ce peptide qui est un ligand interagissant avec le récepteur cellulaire BMP de type II, ladite quantité de peptide mimétique de la protéine BMP-2 étant greffée de manière covalente par son extrémité N-terminale au niveau desdits groupements hydroxyles, avec une densité inférieure à 5 pmol/rnm2 de surface du support solide. Les supports solides pouvant être utilisés pour la présente invention sont des composés phosphocalciques. Ces composés présentent naturellement des fonctions hydroxyles en surface, en nombre important mais variable selon leur nature exacte. Ceux qui sont utilisés en chirurgie osseuse sont essentiellement des hydroxyapatites et du phosphate tricalcique possédant tous des fonctions OH disponibles, mais d'autres composés pourraient aussi convenir. Le peptide est un peptide mimétique de la protéine humaine BMP-2 native ayant pour séquence (SEQ ID Nol ). La protéine humaine BMP-2 est bien connue pour son rôle dans la différentiation osseuse, en tant que ligand du récepteur cellulaire de type II. Sa séquence complète a été établie depuis plusieurs années (Zouani OF, Chollet C, Guillotin B, Durrieu MC. Differentiation of pre-osteoblast cells on poly(ethylene terephthalate) grafted with RGD and/or BMPs mimetic peptides. Biomaterials. 2010 Nov;31(32):8245- 53). La séquence peptidique SEQ ID Nol est un segment de la protéine native, qui comprend 20 acides aminés. Le peptide mimétique selon l'invention est un segment de 20 acides aminés de la protéine BMP-2, spécialement sélectionné pour son activité ostéoinductrice. Il est qualifié de mimétique car il constitue un ligand interagissant avec le récepteur cellulaire BMP de type II. Il peut être identique, ou être un homologue dérivé du peptide natif à savoir de même taille que celui-ci mais dans lequel certains acides aminés ont été remplacés. Des fragments actifs de ce peptide peuvent aussi être utilisés comme mimes peptidiques et mis en oeuvre pour réaliser la présente invention. De manière générale, le peptide mimétique selon l'invention peut être tout peptide dérivé du peptide natif défini par SEQ ID Nol, pour autant qu'il conserve son activité ostéoinductrice. Les fragments ou dérivés selon la présente invention sont tels qu'ils conservent la propriété de ligand du récepteur cellulaire BMP de type II que possède le peptide de séquence SEQ ID Nol. Le procédé de fabrication préféré du peptide mimétique est la synthèse chimique. Toute technique connue de l'homme de l'art peut être utilisée. Par exemple, le peptide peut être synthétisé en phase solide par la méthode de Krieger DE et al., Proc Nat Acad Sci U.S.A. 1976;(73(9):3160-4. Le segment peptidique est greffé de manière covalente, ce qui signifie qu'il est immobilisé sur la matrice minérale du support solide. Ce peptide est linéaire et comprend en particulier la séquence peptidique de six acides aminés ISMLYL, qui est apparue aux inventeurs comme décisive pour que l'activité ostéoinductrice se manifeste. De ce fait, il est avantageusement fixé par son extrémité N-terminale au niveau desdits groupements hydroxyles du support. De manière surprenante, il a été trouvé que pour obtenir un effet satisfaisant, la densité de peptides greffés au support doit être inférieure à 5.10-12 mol/mm2 de surface (soit 5 pmol/mm2 de surface). Le système s'est révélé avoir une activité ostéoinductrice marquée très rapidement (dans les premières heures) après implantation. Les peptides greffés sont stables et capables d'induire durablement une fonction d'induction ostéogénique. On peut penser que cette action très rapide et intense est liée à une densité de peptides optimale mais aussi à la préservation d'une conformation tridimensionnelle correcte. Une densité plus forte pourrait affecter le repliement du peptide et donc son activité. Il est précisé que la densité de peptide greffé, qui est inférieure à 5 pmol/mm2 de surface, n'est pas nulle. On pourra cependant greffer des quantités très faibles pouvant aller jusqu'à 0,2 pmol/mm2 de surface, tout en conservant une activité inductrice des récepteurs BMP. Cependant, si une densité très faible est à même d'activer les récepteurs BMP de la membrane de la cellule, elle peut ne pas être suffisante pour induire une différenciation accélérée et intense. C'est pourquoi, selon une caractéristique avantageuse de l'invention, la densité prédéterminée dudit peptide greffé à la surface du support solide est comprise dans un intervalle pouvant aller de 0,3.10-12 mol/mm2 à 4,5.10-12 mol/mm2. De manière préférée, elle est comprise dans l'intervalle allant de 1,0.10-12 mol/mm2 à 1,6.10-12 mol/mm2. De manière encore préférée, cette densité molaire peut être de l'ordre de 1,2.10-12 mol/mm2, ce qui correspond pour le peptide de séquence SEQ ID Nol, à une densité massique de l'ordre de 2,76.10-3 mg/mm2. Selon une caractéristique avantageuse du matériau selon l'invention, ledit peptide comprend une cystéine à son extrémité N-terminale. De la sorte, une fonction thiol est disponible à l'extrémité du segment peptidique, qui pourra aisément réagir avec un site présent sur le support solide, induisant par la même occasion l'orientation correcte du peptide durant le greffage. Ce faisant, on souhaite aussi que la cystéine terminale ait l'exclusivité de la réaction de greffage : il est préférable que d'autres acides aminés présents dans le peptide ne réagissent pas avec le site de fixation du support solide. C'est pourquoi, selon une autre caractéristique avantageuse du matériau selon l'invention, dans ledit peptide mimétique, chacune des cystéines est remplacée par une sérine. Dans le cas présent, les deux cystéines présentes dans le peptide SEQ ID No 1 sont remplacées par deux sérines. Cette substitution s'est avérée d'autant plus opportune qu'elle a permis de remédier à la formation spontanée de couches peptidiques en surface du support. Ce phénomène, attribué à la formation de ponts disulfures entre les cystéines de différents peptides, a été identifié comme une limitation importante à l'accessibilité du peptide, et a ainsi été surmonté par la présente invention. Selon l'invention, un peptide dérivé de celui défini par la séquence ID No 1 peut être par exemple un peptide de séquence ID No 2. Celui-ci est dérivé du peptide ci-dessus par une possible substitution d'au plus quatre acides aminés. Ainsi, dans le matériau selon l'invention, ledit peptide mimétique peut être un dérivé du peptide de la protéine humaine BMP-2, de séquence : KX1PKX2SSX3PTEX4SAISMLYL dans laquelle X1, X2, X3 et X4 sont des acides aminés non polaires, identiques ou différents. Les acides aminés non polaires sont notamment les acides aminés naturels choisis parmi la glycine, l'alanine, la valine, la leucine, la méthionine ou l'isoleucine. Ce peptide est linéaire et comprend en particulier la séquence peptidique de six acides aminés ISMLYL. Il peut être complété par une cystéine à son extrémité N-terminale, comme suit (SEQ ID No 2) : Nterminus-CKX1PKX2SSX3PTEX4SAISMLYL-Cterminus Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le peptide est lié au support solide par l'intermédiaire d'un agent de couplage bifonctionnel comprenant un agent de fonctionnalisation de surface associé à un agent de liaison. Ledit agent de couplage bifonctionnel peut comprendre un organosilane, de préférence le (3-aminopropyI)- triéthoxysilane (noté APTES), lequel peut être associé au N-succinimidy1-3- maléimidopropionate (encore appelé ou réticulent SMP). De manière connue, un espaceur peut être introduit. Les supports solides mis en oeuvre pour réaliser le matériau objet de la présente invention sont à base de composés phosphocalciques, qui sont aptes à être utilisés dans le domaine de la chirurgie osseuse, y compris en dentisterie. Leur structure chimique est telle qu'ils possèdent des groupements hydroxyles libres en surface, bien que dans des proportions variables. Les supports solides peuvent être constitués d'un seul composé, par exemple une hydroxyapatite, ou avoir une composition biphasique, comme c'est le cas des mélanges d'hydroxyapatite et de phosphate de calcium. C'est pourquoi, selon un mode particulier de réalisation du matériau objet de la présente invention, ledit au moins un composé phosphocalcique est de l'hydroxyapatite (HAP), du phosphate tricalcique (TCP), ou un mélange de ceux-ci. D'autres matériaux phosphocalciques connus de l'homme du métier peuvent également être utilisés. On note que des additifs ou autres ingrédients peuvent être ajoutés au composé phosphocalcique, soit pour les besoins du procédé de fabrication, soit à des fins thérapeutiques (vitamines, antibiotiques par exemple). L'ajout de ces additifs, qui sont toujours employés en quantités minimes, est connu et ne fera pas l'objet d'une description particulière dans le cadre de la présente invention. De manière particulièrement intéressante, il a été trouvé que le matériau greffé par le peptide mimétique objet de l'invention peut être obtenu à partir d'un support solide, quel que soit son degré de fractionnement et sa forme cristalline. Il peut notamment être obtenu à partir d'un support cristallin poreux, tel qu'une céramique, mais aussi à partir d'un support amorphe tel qu'une poudre d'un composé phosphocalcique, ou à partir de nanoparticules phosphocalciques. Selon un mode de réalisation de l'invention, le support solide est une céramique sous forme de granulés ou de blocs. Dans ce cas, la taille des objets soumis au greffage peut être de type granulés (c'est-à-dire de l'ordre de un à quelques millimètres) ou de la taille d'un bloc (c'est-à-dire de l'ordre de quelques millimètres ou du centimètre). Cette caractéristique est particulièrement avantageuse pour préparer des matériaux selon l'invention sous la forme de blocs massifs préformés, pouvant remplacer un greffon à implanter pour combler une lacune importante de la structure osseuse. Elle ouvre également la possibilité d'une application en ingénierie tissulaire, où le matériau pourra être utilisé comme matériau support pour une croissance tissulaire avant implantation (appelé scaffold en anglais), afin de favoriser la régénération osseuse. Il convient de souligner que, de manière inattendue et très avantageuse, le matériau obtenu sous forme de bloc massif présente une activité ostéoinductrice tout aussi élevée que celle des formes plus fractionnées (poudre ou granulés), indiquant que le peptide a été greffé dans la masse. Il se pourrait donc qu'un composé céramique ayant une porosité comprise entre 55% et 75% en volume avec des pores de 300 à 500 microns, la surface de la porosité reste accessible en profondeur au peptide, et ce malgré la sensibilité de ce type de molécule aux diverses interactions physiques et chimiques fortes qui étaient attendues dans tel un environnement. Selon un autre mode de réalisation de l'invention, le support solide est sous la forme d'une poudre amorphe ou de nanoparticules. Dans ce cas, la taille des particules constituant le support solide peut être de quelques micromètres pour les poudres, et peut aller de quelques dizaines de nanomètres jusqu'à environ 200 nm pour les nanoparticules. La surface présentant des groupements hydroxyles disponibles pour réagir avec le peptide d'intérêt est donc très élevée. Avantageusement, le matériau selon l'invention peut se présenter avec un support solide sous la forme d'une poudre amorphe ou de nanoparticules en suspension aqueuse. Des ciments et des nanogels (gels de nanoparticules en suspension) de comblement osseux peuvent ainsi être formulés. Ces matériaux pourront être stockés sous cette forme et mis en oeuvre directement par le praticien. Finalement, on pourra utiliser pour la préparation du matériau innovant, un support solide déjà connu et utilisé par les chirurgiens, qui n'auront ainsi pas à modifier leurs protocoles opératoires. De la sorte, le chirurgien dispose d'une gamme de matériaux lui permettant de choisir la forme la plus adéquate pour l'acte chirurgical envisagé, aucune adaptation particulière n'étant nécessaire par rapport aux produits auxquels il a l'habitude de recourir. Ceci représente un avantage non négligeable de l'invention. Quel que soit le support solide choisi, il offre en surface une grande quantité de sites OH pouvant être greffés. Le matériau décrit ci-dessus, comprenant un substitut osseux présentant des fonctions hydroxyles libres, associé avec son peptide mimétique de la BMP-2 immobilisé de manière covalente par son extrémité N-terminale, induit une rapide différenciation et une prolifération ostéoblastique. Par ailleurs, il induit une forte interaction entre les cellules de la moelle osseuse telles que les cellules souches mésenchymateuses, les ostéoblastes et les cellules vasculaires. Des clusters cellulaires sont formés qui témoignent d'un pouvoir régénérateur intense de ces matériaux greffés. Les résultats obtenus témoignent donc de la création d'un microenvironnement cellulaire comprenant les peptides mimétiques de la BMP-2, qui favorise la régénération osseuse dans une courte période de temps. La présente invention vise également un protocole de préparation d'un matériau constituant un tel microenvironnement cellulaire. Le matériau selon l'invention peut être préparé à partir de différents substrats phosphocalciques, céramiques, poudres amorphes ou nano-cristaux, par greffage d'un peptide tel que défini précédemment, à condition que le procédé mis en oeuvre permette de contrôler la quantité de peptide mimétique de la protéine BMP-2 qui est greffée de manière covalente par son extrémité N-terminale au niveau desdits groupements hydroxyles, de sorte qu'elle soit inférieure à 5 pmol/rnm2 de surface du composé phosphocalcique. Pour ce faire, un procédé a été mis au point qui est également un objet de la présente invention. Ainsi, selon l'invention, est revendiqué un procédé de préparation d'un matériau de substitution osseuse selon l'une des revendications précédentes, comprenant i) un support solide à base d'au moins un composé phosphocalcique présentant des groupements hydroxyles libres en surface, et ii) une quantité d'un peptide mimétique de la protéine humaine BMP-2 de séquence KIPKACCVPTELSAISMLYL (SEQ ID Nol ), ou d'un fragment ou d'un dérivé de ce peptide qui est un ligand du récepteur cellulaire de type II, le procédé comprenant essentiellement les étapes consistant à : a) faire réagir une partie des groupements hydroxyles dudit composé phosphocalcique avec un agent de fonctionnalisation puis avec un agent de liaison pour obtenir un support solide ayant une densité prédéterminée inférieure à 5.10-12 molimm2 (soit 5 pmolimm2) de sites modifiés en surface, b) faire réagir le support solide ainsi modifié avec une solution contenant ledit peptide en excès pour obtenir un matériau ayant ladite densité prédéterminée de sites greffés par ledit peptide. L'étape a), qui comporte deux réactions successives, permet de réaliser une modification d'un nombre déterminé de sites hydroxyles libres présents à la surface du composé phosphocalcique, à l'aide d'un agent de couplage bifonctionnel réalisé par un agent de fonctionnalisation auquel on associe un agent de liaison qui sera alors apte à réagir avec le peptide d'intérêt. L'étape b) réalise la réaction entre l'agent de liaison et le peptide mimétique. La densité de groupes hydroxyles modifiés à l'étape a) est contrôlée par la maîtrise des conditions réactionnelles, en particulier les durées d'incubation successives du support avec les deux agents réactifs. Les différents composés phosphocalciques ayant naturellement plus ou moins de sites OH libres, le temps de réaction sera ajusté pour que soit modifiée une quantité de sites voulue définie au préalable. Dans un second temps, le peptide d'intérêt est greffé, dans des conditions réactionnelles telles que les sites précédemment modifiés vont réagir avec le peptide. Même si tous les sites modifiés du support ne réagissent pas avec le peptide mimétique, il n'en reste pas moins qu'une certaine proportion définie de sites modifiés est greffée avec le peptide, cette proportion étant reproductible dans des conditions opératoires fixées. C'est donc à l'étape a) qu'est déterminée la densité de greffage qui sera finalement obtenue. La densité de sites modifiés à l'issue de l'étape a) est généralement supérieure à la densité de sites greffés par le peptide à l'issue de l'étape b). Les conditions du procédé sont donc ajustées pour obtenir un support solide ayant une densité prédéterminée de sites modifiés puis greffés en surface. Dans ces conditions, il semble que la formation d'une mono-couche de peptide est favorisée, avec un encombrement stérique maîtrisé et sans interférences marquées entre groupes peptidiques voisins, de sorte que le repliement des peptides n'est pas affecté. Selon une caractéristique préférée du procédé objet de l'invention, à l'étape a) on fait réagir une partie des groupements hydroxyles dudit composé phosphocalcique avec un agent de fonctionnalisation puis avec un agent de liaison pour obtenir, à l'étape b) un support solide ayant une densité prédéterminée de sites greffés en surface allant de 0,3.10-12 molimm2 à 4,5.10-12 molimm2, de préférence de 1,0.10-12 molimm2 à 1,6.1012 molimm2. On crée ainsi un support modifié avec un assemblage constituant un agent de couplage bifonctionnel. Il est formé par exemple d'un composé choisi parmi les organosilanes, tel que le (3-aminopropy1)-triéthoxysilane (ou APTES), qui peut être associé à un agent de liaison de la famille des succinimidyl, tel que le N-succinimidy1-3-maléimidopropionate (réticulent SMP) ou un dendron contenant plusieurs fonctions maléimides.35 Dans un mode particulier de mise en oeuvre du procédé objet de l'invention, à l'étape a) on place le support solide dans une solution de (3-aminopropy1)-triéthoxysilane à 10-2M dans l'hexane anhydre pendant 1 à 5 heures, puis dans une solution de N-succinimidy1-3- maléimidopropionate à une molarité comprise entre 10-3M et 10-2M dans le DMF pendant 1 à 3 heures, pour obtenir ladite densité prédéterminée de sites hydroxyles modifiés en surface dudit support solide. Par exemple, on peut utiliser une solution de SMP à 2.10-3M dans le DMF. Selon une autre caractéristique préférée du procédé objet de l'invention, à l'étape b) on place le support solide modifié dans une solution aqueuse contenant ledit peptide à une molarité comprise entre 10-5M et 10-2M, pendant 15 à 30 heures. De manière avantageuse, on peut travailler avec une solution aqueuse de peptide à 10-3M, qui est alors en large excès. La durée d'incubation est suffisante pour que la réaction des peptides avec les sites modifiés à l'étape a) soit maximale. De préférence selon l'invention, ledit peptide est greffé de manière covalente sur les sites modifiés à l'étape a) par son extrémité N-terminale. Si le peptide a une cystéine en position N-terminale, c'est le groupe thiol de la cystéine qui réagit sur la partie maléimide du réticulent SMP. Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, avant chacune des deux réactions de l'étapes a) le support solide est séché sous vide secondaire, à une température de l'ordre respectivement de 100°C et de 70°C. Le séchage est effectué dans un four thermostaté et se prolonge quelques heures. On se débarrasse ainsi de toute trace de solvant et notamment de l'eau potentiellement présente autour, et le cas échéant dans la porosité de support solide, ce qui améliore le rendement des réactions avec une reproductibilité élevée. En effet, à l'étape a), la réaction de l'agent de fonctionnalisation avec le matériau support en présence de traces d'eau conduit à la formation d'un réseau de polysiloxanes qui perturbe la fixation ultérieure des peptides. On peut éviter l'apparition de ce réseau tridimensionnel de chaînes polymériques, en chauffant sous vide le matériau. Le vide secondaire (ou vide poussé) est défini comme correspondant à des pressions de 10-3 à 10-7 mbar (soit de 0,1 à 10-5 pascal). Cette modalité joue donc un rôle notable pour obtenir une monocouche. Selon une caractéristique avantageuse du procédé innovant, on réalise après l'étape b), un rinçage à l'eau du matériau de substitution osseuse obtenu, jusqu'à élimination complète des peptides en excès, ce qui inclut ici les peptides non greffés mais juste adsorbés. De la sorte, on élimine les peptides n'ayant pas formé de liaison covalente avec l'agent de liaison. Cette phase de rinçage peut avoir une importance sensible dans l'activité ostéoinductrice que va manifester le matériau. On a émis l'hypothèse à ce sujet que les sites greffés pouvaient être masqués par des composés adsorbés mais non immobilisés de façon covalente, notamment des peptides en excès, que l'organisme du patient devrait éliminer avant que les segments peptidiques greffés soient accessibles et puissent entrer en action. Selon une caractéristique préférée du procédé de préparation du matériau de substitution osseuse selon l'invention, le composé phosphocalcique est de l'hydroxyapatite (HAP), du phosphate tricalcique (TCP), ou un mélange de ceux-ci. L'homme du métier sait fabriquer de tels composés et leurs mélanges. Il est également connu de choisir l'un ou l'autre en fonction de l'usage visé. Ainsi, ledit support solide peut être choisi parmi : - une céramique formulée en granulés ou en blocs, pour obtenir ledit matériau de substitution osseuse sous la même forme, - une poudre amorphe apte à être mise en suspension dans une phase aqueuse pour obtenir ledit matériau de substitution osseuse sous forme d'un ciment de comblement, - des nanoparticules aptes à être mises en suspension dans une phase aqueuse pour obtenir ledit matériau de substitution osseuse sous forme d'un gel de comblement. La présente invention sera mieux comprise, et des détails en relevant apparaîtront, grâce à la description qui va être faite de certains modes de réalisation, en relation avec les figures annexées, dans lesquelles : La Fig. 1 présente le spectre atomique de l'azote d'un matériau greffé par un peptide, objet de l'invention (Fig. 1B) et du support solide avant greffage (Fig. 1A). La Fig. 1C est un cliché en microscopie à fluorescence illustrant la présence du peptide greffé sur ce même matériau. La Fig. 2 présente des images de microscopie confocale illustrant la différenciation de cellules souches mésenchymateuses humaines de moelle osseuse après 48h au contact d'un matériau selon l'invention. La Fig. 3 est un graphique illustrant le niveau d'expression du facteur Runx2 et du facteur MyoD après 62h de contact des mêmes cellules avec deux matériaux selon l'invention. La Fig. 4 présente des images de microscopie confocale illustrant la différenciation de cellules pré-ostéoblastiques après 48h au contact de deux matériaux selon l'invention. La Fig. 5 est une représentation quantitative de l'activité de la phosphatase alcaline après 48 heures de culture des mêmes cellules avec les mêmes deux matériaux. La Fig. 6 est un graphique illustrant le niveau d'expression du facteur Runx2 après 48h de contact des mêmes cellules avec les mêmes deux matériaux selon l'invention. La Fig. 7 représente des images en microscopie confocale de cellules endothéliales cultivées durant 48 heures au contact de deux matériaux selon l'invention. La Fig. 8 est un graphique montrant la prolifération des cellules endothéliales après 48 heures de culture cellulaire au contact des mêmes deux matériaux. La Fig. 9 est un graphique montrant l'activité de la phosphatase alcaline de tri-cultures cellulaires après 62 heures au contact de deux matériaux selon l'invention. La Fig. 10 est un graphique montrant la prolifération des précurseurs ostéoblastiques après 62 heures de culture cellulaire sur ces mêmes matériaux. La Fig. 11 est un graphique illustrant le niveau d'expression du facteur Runx2 après 62h de contact des mêmes cellules avec les deux mêmes matériaux. La Fig. 12 présente le spectre atomique de l'azote d'un matériau nanoparticulaire greffé par un peptide objet de l'invention (Fig.12B) et du support solide avant greffage (Fig. 12A). La Fig. 13 représente le taux d'expression du facteur Runx2 par RT-PCR en fonction de la densité du peptide P1 greffé en surface d'un support modèle. EXEMPLE 1 : Matériau céramique greffé par un peptide mimétique P1 Support : Dans le mode de réalisation présenté ci-après, le support solide est un matériau céramique contenant 65% d'hydroxyapatite et 35% de TOP. Le matériau a une porosité de l'ordre de 65% à 75%. Il est disponible dans le commerce, par exemple sous la marque CERAFORM® de TEKNIMED. Il est utilisé sous forme de cubes de 6 mm de côté. Peptide : Le peptide P1 de séquence BMP-2mp1 suivant, mimétique de la protéine BMP-2 a été synthétisé par GeneCust Europe, Luxembourg. CKIPKASSVPTELSAISMLYL C'est un peptide linéaire contenant la séquence (ISMLYL), dérivé du peptide SEQ ID No2: CKX1PKX2SSX3PTEX4SAISMLYL, avec X1 = lie, X2 = Ala, X3 = Val et X4 = Leu. Mode opératoire (Etape a) (1) Mettre le support sous vide (10-5 torr) à 100°C pendant 16 heures. (2) Sous atmosphère Argon, mettre le support avec l'APTES à 10-2M dans l'hexane anhydre pendant 2 heures. (3) Rincer avec sonication. (4) Sécher sous vide (10-5 torr) à 70 °C pendant 16h. (5) Ajouter l'agent de liaison SMP à une concentration de 2.10-3M dans le DMF et incuber pendant 2 heures sous atmosphère Argon. (6) Rincer plusieurs fois dans le DMF, puis sécher à 70 °C sous vide (10-5 torr). On obtient un support modifié. Mode opératoire (Etape b) (7) Ajouter la solution peptidique du peptide P1 (10-3M) au support modifié ainsi obtenu et incuber sous atmosphère normale à température ambiante pendant 18h. (8) Effectuer des rinçages pendant une semaine. On obtient le matériau M1 greffé par P1 (cube de 6 mm de côté). Caractérisation : présence de la séquence peptidique La composition atomique de la céramique greffée M1 a été comparée à celle de la céramique non traitée (support solide pris comme référence). Les mesures ont été réalisées par spectroscopie à photoélectrons aux rayons X (Tableau 1). Tableau 1 atome Référence (% atomique) Matériau M1 (% atomique) P2p 10,5 10,55 C1s 33,5 34,52 Ca2p 15,59 13,93 Ois 39,4 38,39 N1s non détecté 2,61 Le spectre d'azote (N1s) en surface des deux matériaux (M1 et référence) obtenu par spectroscopie à photoélectrons aux rayons X est présenté aux Fig. 1A et 1B. Les résultats montrent l'apparition dans le matériau M1, d'un spectre d'azote à environ 3%, prouvant la présence de séquence peptidique sur le support céramique. Dans la masse : Des cubes du matériau M1 obtenu comme décrit ci-dessus ont été fractionnés en un granulat de moins de 1 mm de diamètre, et soumis à un rinçage pendant 1 mois. Différents points relevés par spectroscopie à photoélectrons aux rayons X ont montré la présence d'azote à hauteur d'environ 1,5%, alors qu'aucune trace d'azote n'est détectée dans les supports céramiques non modifiés. On a donc une greffage en profondeur du support céramique M1. Caractérisation : densité de peptide greffé Le matériau céramique M1 a été caractérisé afin de déterminer la densité exacte de peptides greffés en surface du support solide. Pour cela, un peptide fluorescent Pif a été préparé et greffé au support solide pour obtenir un matériau M1f. Le peptide Pif est le peptide P1 augmenté à son extrémité C terminale d'un fluorochrome, ici l'isothiocyanate de fluorescéine (en abrégé FITC). La densité moyenne de peptide Pif en surface du matériau M1 mesurée par microscopie à fluorescence est de 1,52 pmol/rnm2. EXEMPLE 2 : Matériau céramique greffé par un peptide mimétique P2 Support : Le support solide est un cube de céramique (65% d'hydroxyapatite et 35% de TCP), identique à celui de l'Exemple 1. Peptide : Le peptide P2 de séquence BMP-2mp2 suivante, mimétique de la protéine BMP-2 a été synthétisé par GeneCust Europe, Luxembourg : CKLPKVSSLPTEASAISMLYL C'est un peptide linéaire contenant la séquence minimale (ISMLYL), dérivé du peptide de séquence CKX1PKX2SSX3PTEX4SAISMLYL (SEQ ID No2), avec X1 = Leu, X2 = Val, X3 = Leu et X4 = Ala. Mode opératoire : Le protocole de greffage est identique à celui de l'Exemple 1. On obtient le matériau greffé M2. Caractérisation de M2: Les résultats sont similaires à ceux obtenus pour le matériau Ml. EXEMPLE 3 : Activité ostéogénique des matériaux céramiques greffés M1 et M2 L'activité des matériaux M1 et M2 décrits et préparés conformément aux exemple ci- dessus a été évaluée au contact de trois types cellulaires séparément et ensemble au sein d'une même culture cellulaire. Les trois types cellulaires sont les cellules présentes majoritairement au sein de la moelle osseuse. Il s'agit des cellules souches mésenchymateuses, de cellules pré-ostéoblastiques et de cellules endothéliales. 1- Activité vis-à-vis des cellules souches mésenchymateuses Des cellules souches mésenchymateuses humaines de la moelle osseuse (fournies par la société LONZA) ont été cultivées pendant 96 heures sur des supports céramiques non modifiés et des supports céramiques M1 et M2 greffés respectivement par les peptides P1 et P2. L'engagement ostéogénique des cellules après 48 heures de culture sur les matériaux M1 et M2 greffés par le peptide P1 et P2 a été repéré par microscopie confocale. Les images obtenues révèlent la forme cellulaire grâce à un marquage cytoplasmique par le CMFDA (Fig. 2C), le facteur de transcription ostéogénique maître Runx2 étant marqué par un anticorps anti-Runx2, représenté à la Fig. 2B, et le noyau étant marqué par le DAPI (Fig. 2A), et un cliché fusionné (Merge, Fig 2D). On constate que l'ensemble des cellules souches mésenchymateuses exprime de manière très intense le facteur de transcription Runx2 témoignant d'un engagement des cellules vers un lignage ostéoblastique. Une quantification du taux d'expression de ce facteur Runx2 dans les matériaux M1 et M2 par rapport à un support céramique non modifié a été établie par quantification de la fluorescence à partir d'images confocales sur au moins 60 cellules. Différentes régions du matériau ont été inspectées au centre, et en périphérie), un effet homogène de différenciation cellulaire a été observé. Le facteur de transcription myogénique MyoD, témoignant d'un engagement cellulaire myoblastique a été effectué lors du marquage cellulaire en tant que contrôle négatif. Les mesures ont été faites 62 heures après la mise en contact des cellules et des matériaux M1 et M2. Les résultats obtenus sont rapportés sur la Fig. 3. On trouve 80% d'augmentation de l'expression du facteur Runx2 pour le matériau M1 et 68% pour le matériau M2, par rapport au matériau de référence. Aucune trace d'augmentation de l'expression du facteur de transcription MyoD n'a été observée. (*p Après 48 heures de culture cellulaire sur les matériaux M1 et M2, les précurseurs ostéoblastiques ont été mis en évidence par marquage cytoplasmique au CMFDA. Les images obtenues en microscopie confocale sont présentées à la Fig. 4. Après 48h de culture cellulaire, l'activité phosphatase alcaline a été déterminée. Elle est multipliée par environ 400 dans les cellules pré-ostéoblastiques au contact des matériaux M1 et M2, par rapport à l'activité des cellules cultivées sur support céramique non modifié (Fig. 5) révélant une expression intense de la phosphatase alcaline. Une différence significative est observée entre les cellules cultivées sur le support céramique non modifié et les matériaux greffés M1 et M2. (*p Les tricultures cellulaires comprenant des cellules souches mésenchymateuse humaines de la moelle osseuse, des précurseurs ostéoblastiques et des cellules endothéliales, ont été mises en contact des matériaux M1 et M2 et d'un support non greffé pris pour référence, pendant 62 heures. Les images obtenues en microscopie confocale (non reproduites) montrent la formation de clusters cellulaires (ou réseaux de cellules) très importants. L'activité de la phosphatase alcaline a été déterminée après 62 heures de culture (Fig. 9). Une différence significative est observée entre les cellules cultivées sur des supports céramiques non modifiés et les matériaux greffés M1 et M2, puisqu'elle est 650 fois plus élevée (* P EXEMPLE 5 : Matériau nanoparticulaire greffé par le peptide mimétique P1 Dans le mode de réalisation présenté ci-après, le matériau obtenu est un gel de nanoparticules d'hydroxyapatite en suspension dans l'eau. Support : Le support solide est constitué de nanoparticules d'hydroxyapatite (nano-bâtonnets de taille sub-micronique) se présentant à l'état de poudre, après lyophilisation. Ce sont des particules denses (non poreuses) caractérisées par une surface spécifique élevée. Peptide : Le peptides P1 tel que décrit précédemment est utilisé. Mode opératoire : Le protocole de greffage est identique à celui de l'Exemple 1. A l'issue des étapes a) et b), on obtient le matériau nanoparticulaire greffé NP1, à l'état de poudre. Puis, la poudre greffée est mise en suspension dans l'eau, pour obtenir un gel de nanoparticules d'hydroxyapatite en suspension dans l'eau (5 mg/mi). Il est composé de nano-bâton nets dans l'eau, avec un taux de matière sèche de l'ordre de 30%. Caractérisation : présence de la séquence peptidique La composition atomique des nanoparticules greffées NP1 a été comparée à celle de nanoparticules non traitée (support solide pris comme référence). Les mesures ont été réalisées par spectroscopie à photoélectrons aux rayons X (Tableau 2). Tableau 2 atome Référence (% atomique) Matériau NP1 (% atomique) P2p 11,4 11,25 C1s 19,9 20,15 Ca2p 17,39 18,83 01s 48,5 48,89 N1s non détecté 3,61 Le spectre d'azote (N1s) en surface des deux matériaux (NP1 et référence) obtenu par spectroscopie à photoélectrons aux rayons X est présenté aux Fig. 12A et 12B. Les résultats montrent l'apparition dans le matériau NP1, d'un spectre d'azote à environ 4%, prouvant la présence de séquence peptidique sur le support nanoparticulaire. Caractérisation : densité en peptide greffé La densité exacte de peptides greffés en surface du matériau NP1 a été déterminée par microscopie à fluorescence à l'aide de peptides P1 fluorescents. Les résultats démontrent qu'un greffage covalent sur le support NP1 est bien obtenu. En outre, les images de microscopie électronique à transmission obtenues des nanoparticules céramiques aux différents stades du protocole de greffage montrent que la méthode de greffage n' a pas affecté les dimensions des nanoparticules. De manière plus générale c'est la possibilité d'un greffage peptidique sur des supports nanoparticulaires qui est validée. EXEMPLE 6 : Optimisation de la densité de greffage Le peptide P1 a été greffé de manière covalente sur un support modèle, à trois densités différentes. Le support est en polyéthylène téréphtalate (PET). Les densités sont de 0,4 pmol/rnm2, 1,2 pmol/rnm2 et 4,3 pmol/rnm2. Le taux d'expression du facteur Runx2 par RT- PCR en fonction de la densité du peptide P1 greffé en surface d'un support modèle a été mesuré pour ces trois densités (Fig. 13). Le meilleur niveau d'expression du gène Runx2 est obtenu pour 1,2 pmol/rnm2 de densité peptidique, ce qui correspond à une activité maximale de différenciation cellulaire. L'activité obtenue est en outre stable dans le temps (après 1 semaine de culture) : à 96h de culture, on observe une augmentation continue de l'expression du facteur Runx2 (environ 42%). REVENDICATIONS1.- Matériau de substitution osseuse pour la chirurgie orthopédique et dentaire, caractérisé en ce qu'il comprend : i) un support solide à base d'au moins un composé phosphocalcique présentant des groupements hydroxyles libres en surface, et ii) une quantité d'un peptide mimétique de la protéine humaine BMP-2 de séquence KI PKACCVPTELSAISMLYL (SEQ ID Nol ), ou d'un fragment ou d'un dérivé de ce peptide qui est un ligand interagissant avec le récepteur cellulaire BMP de type II, ladite quantité de peptide mimétique de la protéine BMP-2 étant greffée de manière covalente par son extrémité N-terminale au niveau desdits groupements hydroxyles, avec une densité inférieure à 5.10-12 mol/mm2 de surface du support solide. 2.- Matériau selon la revendication 1 caractérisé en ce que la densité dudit peptide greffé à la surface du support solide est comprise dans l'intervalle allant de 0,3.1012 mol/mm2 à 4,5.10-12 mol/mm2, de préférence allant de 1,0.10-12 mol/mm2 à 1,6.10-12 mol/mm2. 3.- Matériau selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que ledit peptide comprend une cystéine à son extrémité N-terminale. 4.- Matériau selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que dans ledit peptide chacune des cystéines est remplacée par une sérine. 5.- Matériau selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que ledit peptide est un dérivé du peptide mimétique de la protéine humaine BMP-2, de séquence (SEQ ID No 2) CF% PKX2SSX3PTEX4SAISMLYL dans laquelle X1, X2, X3 et X4 sont des acides aminés non polaires, identiques ou différents. 6.- Matériau selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le peptide est lié au support solide par l'intermédiaire d'un agent de couplage bifonctionnel comprenant un agent de fonctionnalisation de surface associé à un agent de liaison..- Matériau selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que ledit au moins un composé phosphocalcique est de l'hydroxyapatite, du phosphate tricalcique, ou un mélange de ceux-ci. 8.- Matériau selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le support solide est une céramique sous forme de granulés ou de blocs. 9.- Matériau selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que ledit support solide est sous la forme d'une poudre amorphe ou de nanoparticules. 10.- Matériau selon la revendication précédente, caractérisé en ce que le support solide est sous la forme d'une poudre amorphe ou de nanoparticules en suspension aqueuse. 11.- Procédé de préparation d'un matériau de substitution osseuse selon l'une des revendications précédentes, comprenant i) support solide à base d'au moins un composé phosphocalcique présentant des groupements hydroxyles libres en surface, et ii) une quantité d'un peptide mimétique de la protéine humaine BMP-2 de séquence KIPKACCVPTELSAISMLYL (SEQ ID Nol ), ou d'un fragment ou d'un dérivé de ce peptide qui est un ligand du récepteur cellulaire de type II, le procédé étant caractérisé en ce qu'il comprend essentiellement les étapes consistant à : a) faire réagir une partie des groupements hydroxyles dudit composé phosphocalcique avec un agent de fonctionnalisation puis avec un agent de liaison pour obtenir un support solide ayant une densité prédéterminée de sites modifiés en surface, b) faire réagir le support solide ainsi modifié avec une solution contenant ledit peptide en excès pour obtenir un matériau ayant une densité prédéterminée inférieure à 5.10-12 molimm2 de sites greffés par ledit peptide. 12.- Procédé de préparation d'un matériau de substitution osseuse selon la revendication précédente caractérisé en ce que à l'étape a) on fait réagir une partie des groupements hydroxyles dudit composé phosphocalcique avec un agent de fonctionnalisation puis avec un agent de liaison pour obtenir, à l'étape b) un support solideayant une densité prédéterminée de sites greffés en surface allant de 0,3.10-12 molimm2 à 4,5.10-12 molimm2, de préférence de 1,0.10-12 molimm2 à 1,6.10-12 molimm2. 13.- Procédé de préparation d'un matériau de substitution osseuse selon l'une des revendications 11 ou 12, caractérisé en ce que à l'étape a) on place le support solide dans une solution de (3-aminopropyI)-triéthoxysilane à 10-2M dans l'hexane anhydre pendant 1 à 5 heures, puis dans une solution de N-succinimidy1-3-maléimidopropionate à une molarité comprise entre 10-3M et 10-2M dans le DMF pendant 1 à 3 heures, pour obtenir ladite densité prédéterminée de sites hydroxyles modifiés en surface dudit support solide. 14.- Procédé de préparation d'un matériau de substitution osseuse selon l'une des revendications 11 à 13, caractérisé en ce que à l'étape b) on place le support solide modifié dans une solution aqueuse contenant ledit peptide à une molarité comprise entre 10-5M et 10-2M pendant 15 à 30 heures. 15.- Procédé de préparation d'un matériau de substitution osseuse selon l'une des revendications 11 à 14, caractérisé en ce que ledit peptide est greffé de manière covalente sur les sites modifiés à l'étape a) par son extrémité N-terminale. 16.- Procédé de préparation d'un matériau de substitution osseuse selon l'une des revendications 11 à 15, caractérisé en ce que avant chacune des deux réactions de l'étapes a) le support solide est séché sous vide secondaire, à une température de l'ordre de 100°C et 70°C respectivement. 17.- Procédé de préparation d'un matériau de substitution osseuse selon l'une des revendications 11 à 16, caractérisé en ce que après l'étape b), on réalise un rinçage à l'eau du matériau de substitution osseuse obtenu jusqu'à élimination complète des peptides en excès. 18.- Procédé de préparation d'un matériau de substitution osseuse selon l'une des revendications 10 à 17, caractérisé en ce que ledit composé phosphocalcique est de l'hydroxyapatite, du phosphate tricalcique, ou un mélange de ceux-ci. 25 30.- Procédé de préparation d'un matériau de substitution osseuse selon la revendication 18, caractérisé en ce que ledit support solide est choisi parmi : - une céramique formulée en granulés ou en blocs, pour obtenir ledit matériau de substitution osseuse sous la même forme, - une poudre amorphe apte à être mise en suspension (ou formulée ?) dans une phase aqueuse pour obtenir ledit matériau de substitution osseuse sous forme d'un ciment de comblement, - des nanoparticules aptes à être mises en suspension dans une phase aqueuse pour obtenir ledit matériau de substitution osseuse sous forme d'un gel de comblement. 10