Brevet FR3010313A1 — publié le 20150313

La présente invention concerne l'utilisation de la technologie végétale concernant la biodiversité brésilienne pour augmenter la formation du système classique fonctionnel de la peau, comprenant une combinaison d'extrait de Guaçatonga (Casearia sylvestris) et d'extrait d'Aroeira (Schinus terebinthifolius raddi). La présente invention se réfère aussi à un mécanisme d'action multiple, à savoir la déposition d'élastine par augmentation de l'élastine et de la lysyle oxydase (LOX), et la réduction de sa dégradation par inhibition de l'enzyme élastase. La présente invention concerne en particulier l'utilisation de ladite technologie dans des compositions cosmétiques pour le traitement de signes de vieillissement de la peau. La peau recouvre la surface du corps humain et est constituée d'une portion épithéliale, l'épiderme, et d'une portion conjonctive, le derme. La peau est l'un des plus gros organes du corps humain et a de multiples fonctions telles que la protection de l'organisme contre la perte d'eau et contre le frottement, la transmission d'informations sur l'environnement au système nerveux central, la coopération avec la régulation thermique du corps, et l'excrétion de diverses substances, entre autres. L'épiderme est constitué d'un épithélium squameux stratifié kératinisé. Le derme, lui, est constitué d'un tissu conjonctif sur lequel repose l'épiderme et qui joint la peau au tissu sous-cutané. Le derme a une épaisseur qui varie en fonction de la région observée, en atteignant un maximum de 6 mm. Le derme est constitué essentiellement de deux couches : la couche papillaire superficielle, et la couche réticulaire plus profonde. La couche papillaire est mince et est constituée d'un tissu conjonctif lâche, qui forme les papilles dermiques. Des fibrilles de collagène spéciales sont présentes, lesquelles sont insérées depuis un côté dans , la membrane basale et pénètrent profondément dans le derme par l'autre côté. Ces fibrilles aident à fixer le derme à l'épiderme. La couche réticulaire, .elle, est plus épaisse, et est constituée d'un tissu conjonctif dense. Les deux couches contiennent de nombreuses fibres du système élastique, responsables de l'élasticité de la peau. Les fibres élastiques ou les fibres d'élastines constituent les composants principaux du système élastique de la peau. Ces fibres sont formées par polymérisation (jonction ou réticulation) de monomères appelés tropoélastine, cette dernière étant un précurseur de l'élastine. Ce processus de polymérisation n'est pas spontané, et il dépend du déclenchement de l'enzyme lysyle oxydase (LOX), qui aide à polymériser la tropoélastine en élastine. D'autre part, l'enzyme élastase est l'enzyme qui dégrade les fibres d'élastine de la peau. Durant le vieillissement de la peau et avec l'effet constant des rayons UV auxquels elle est exposée au cours des ans, il y a une réduction des mécanismes qui forment l'élastine, ce qui réduit par conséquent la quantité d'élastine dans la peau. Il y a parallèlement une augmentation de la dégradation de ces protéines, due à l'augmentation de l'enzyme élastase, qui est responsable de cette dégradatioit Les produits ayant pour but de retarder et/ou d'améliorer les symptômes du vieillissement cutané qui existent actuellement sur le marché n'ont pas une composition qui rehausse le_mécanisme d'action, proposée par la présente invention. Par ailleurs, il n'y a aucune description, dans la technique antérieure, d'un produit comprenant spécifiquement des extraits de guaçatonga et d'aroeira dans le but de retarder et/ou d'améliorer les symptômes du vieillissement cutané conformément à la présente invention. Il y a quelques produits qui ont pour objectif d'augmenter la production d'élastine dans la peau. Il n'y a toutefois pas de preuve qu'il y ait effectivement uné augmentation de la déposition d'élastine - par exemple, seule une augmentation de la tropoélastine soluble a été prouvée, sans preuve d'une déposition réelle. On parle parfois de l'augmentation du collagène ou de la réduction de la collagénase dans la peau, et que-ceci-devrait d'une certaine façon amplifier l'élasticité de la peau. Ce concept est erroné étant donné que les fibres de collagène sont associées à la fermeté de la peau, et non à son élasticité. Il y a aussi quelques produits qui promettent d'augmenter l'enzyme LOX et, en résultat, d'augmenter l'élastine fonctionnelle de la peau. Il n'y a toutefois pas de preuve d'une augmentation de la protéine tropoélastine et de l'élastine fonctionnelle. Quelques produits n'agissent qu'avec le mécanisme anti-élastase sous forme isolée, tandis que d'autres ne s'avèrent pas avoir un mécanisme d'action dans le système élastique. Il y a encore des produits qui sont utilisés à des fins d'anti-élastase ou, dans la plupart des cas, pour la protection de l'élastine, mais sous forme isolée, sans preuve d'une augmentation de la quantité d'élastine et de son dépôt. Il y a encore des produits qui contiennent des hydrolysats d'élastine dans leur composition et, de cette façon, ils promettent une augmentation de l'élasticité de la peau et de sa capacité à régénérer et produire de l'élastine. Ce concept est erroné parce que l'élastine ne pénètre pas dans la'peau et, par conséquent, les effets- promis ne sont pas atteints. Finalement, il y a encore des produits qui promettent une amélioration de la fonctionnalité des fibres élastiques au moyen d'un extrait de graines d'aneth, et il est dit que cet extrait augmente la concentration de LOX. Toutefois, l'augmentation de la concentration de LOX seule ne garantit pas une augmentation de l'élastine. Il est ,ainsi possible de noter qu'aucun produit disponible sur le marché n'a une approche multifocale agissant sur de multiples mécanismes du système élastique pour la déposition d'élastine fonctionnelle, à la manière de la composition comprenant les extraits végétaux de guaçatonga et d'aroeira, proposée par la présente invention. En ce qui concerne les documents de la technique antérieure dans le domaine technologique de la présente invention, le document US 2004/0258676 concerne une composition pour réguler l'élastogenèse dans des cas d'élastogenèse anormale ou pathologique, comprenant une isoforme de l'enzyme LOX, ainsi qu'une méthodologie de criblage pour sélectionner des compositions capables d'agir sur l'élastogenèse (formation d'élas'tine). Ledit document, contrairement à la présente invention, concerne la stimulation de l'activité de l'enzyme LOX uniquement dans des cas d'états d'élastogenèse pathogénique OU anormale ou insuffisante, tels qu'une fibrose ou une élastose solaire. D'autre part, la présente invention concerne une combinaison spécifique d'extraits de guaçatonga et d'aroeira, qui fonctionne conjointement avec trois mécanismes biologiques spécifiquement relatifs au système élastique de la peau, à savoir une augmentation de la tropoélastine (précurseur de l'élastine), une augmentation de l'enzyme LOX dans les cellules normales et en bonne santé, et une réduction de l'activité d'élastase. En dépit d'une description de l'action sur l'une des enzymes liées au système élastique de la peau, il n'y a ni mention ni suggestion, dans le document, de l'utilisation combinée de guaçatonga et d'aroeira, et encore moins de l'action sur le système élastique dans son entier. Le document ne décrit pas non, plus la stimulation de l'activité de l'enzyme LOX dans un état autre que pathogénique ou anormal. Le document US 2002/064538 divulgue pour sa part un procédé pour contrôler l'élasticité de la peau, comprenant une étape consistant à utiliser un composé qui inhibe ou induit l'expression de protéine ou d'ARNm de tropoélastine dans les kératinocytes. Ledit document ne revendique que la modulation de la tropoélastine. Ledit document ne décrit pas la réduction de l'activité d'élastase ou l'augmentation du dépôt d'élastine sur la peau. Par ailleurs, les extraits de plantes utilisés dans la présente invention ne sont ni utilisés ni même suggérés en tant que composants possibles de la composition divulguée dans la technique antérieure. Ledit document ne décrit pas non plus l'utilisation combinée de guaçatonga et d'aroeira pour une action sur le système élastique dans son entier. D'autre part, le document WO 2006/053415 divulgue la mise à disposition d'extraits de plantes listés dans les Tableaux 1 à 5 et leurs utilisations en dermatologie avec un effet inhibiteurs sur les protéases MMP1, 3, 9 et l'élastase des leucocytes humains. Toutefois, ledit document concerne uniquement l'inhibition de protéases. La présente invention, au contraire, comme déjà mentionné ci-dessus, a une approche multifocale sur le système élastique, au vu d'augmenter le dépôt d'élastine sur la peau et, en même temps, empêcher sa dégradation avec l'utilisation combinée d'aroeira et de guaçatonga. Le document en question ne cite pas l'augmentation du dépôt d'élastine sur la peau, et la composition des extraits de plantes utilisés dans cette invention-là n'est pas englobée dans la, composition de la présente invention. La présente invention concerne une composition cosmétique comprenant de 0,0001 à 10 %, en poids de la composition totale, d'un extrait de guaçatonga (Casearia sylvestris), de 0,00005 à 10 %, en poids de - la composition totale, d'un extrait d'Aroeira (Schinus terebinthifollus -raddi) et des adjuvants acceptables en cosmétique, destinée à prévenir et/ou traiter des signes de vieillissement de la peau. La présente invention comprend en outre l'utilisation d'extrait ,de Guaçatonga (Casearia sylvestris) et d'extrait d'Aroeira (Schinus terebinthifollus raddi) dans la préparation d'une composition cosmétique destinée à prévenir et/ou traiter 5 des signes de vieillissement de la peau, ainsi que l'utilisation de cette composition pour simultanément augmenter la tropoélastine, augmenter l'enzyme lysyle oxydase (LOX) et réduire l'activité de l'élastààe dans le derme. 10 La présente invention concerne en outre un procédé pour prévenir et/ou traiter des signes de vieillissement de la peau, qui comprend l'application de ladite composition cosmétique sur la peau. La présente invention comprend en outre un procédé 15 pour préparer ladite composition cosmétique selon la présente invention. La Figure 1 représente une analyse comparative de l'expression relative du gène de LOX entre un groupe témoin et un groupe traité avec différentes 20 concentrations de l'échantillon de l'extrait de guaçatonga. La Figure 2 représente une analyse de l'expression relative du gène de tropoélastine entre un groupe témoin et un groupe traité avec différentes concentrations de 25 l'échantillon de l'extrait de guaçatonga. La Figure 3 représente-le résultat de l'analyse d'activité d'élastase par l'intermédiaire de sa C150 en présence de l'extrait d'Aroeira, en comparaison avec un inhibiteur d'élastase spécifique. 30 La Figure 4 représente le résultat d'une analyse de déposition d'élastine danà des explants de peau humaine en présence d'extraits de guaçatonga et d'aroeira, soit isolés soit en mélange, en comparaison avec un témoin non traité. 35 La Figure 5 représente l'effet de l'extrait de guaçatonga sur la production de tropoélastine (mg/ml) dans des cellules RFL-6 après 48 heures-d'incubation. Les donnéep représentent la moyenne ± écart-type (** p La Figure 12 représente l'effet de l'extrait de guaçatonga et de mélanges de guaçatonga et d'aroeira sur la production de fibuline-5 (ng/ml) dans deS' fibroblastes humains. Les données représentent la moyenne ± écart-type. (** p La présente invention concerne l'utilisation d'extraits de plantes pour augmenter la formation d'élastine et réduire sa dégradation, en inversant ainsi l'état généré par le vieillissement de la peau. Comme déjà mentionné ci-dessus, durant le vieillissement, il y a une réduction de la formation d'élastine de la peau et, en même temps, une augmentation de la dégradation de cette protéine, ce qui provoque une réduction de l'élasticité de la peau et une tendance à la formation de rides et à la flaccidité. La présente invention met à disposition une composition comprenant des extraits de plantes qui amplifient la formation d'élastine et réduisent sa dégradation, en améliorant ainsi l'aspect de la peau traitée par .1a technologie selon la présente invention: La technologie selon la présente invention agit sur trois mécanismes biologiques étroitement apparentés au système élastique de la peau : l'augmentation de la tropoélastine (précurseur d'élastine), l'augmentation de l'enzyme LOX (l'enzyme responsable de la réticulation de la tropoélastine pour la formation d'élastine), et la réduction de l'activité d'élastase (l'enzyme qui dégrade l'élaStine). On met ainsi à disposition une approche multifocale du système élastique, dans le but d'augmenter le dépôt d'élastine sur la peau et, en même _temps, d'empêcher sa dégradation. Conformément à la présente invention, on utilise deux extraits de plantes ayant des mécanismes d'action différents et complémentaires : extrait de guaçatonga (Casearia sylvestris) et extrait d'aroeira ou "faux poivrier à baies roses" (Schinus terebinthifolius raddi). Le premier agit en augmentant l'expression du gène qui produit les monomères de tropoélastine et aussi du gène qui produit l'enzyme lysyle oxydase (LOX). Ainsi, l'extrait de guaçatonga augmente l'expression de gènes. Cette augmentation de l'expression génique conduit à une augmentation des protéines tropoélastine et LOX. La LOX formée agit en liant les tropoélastines formées, ce qui conduit au dépôt effectif des fibres d'élastine sur la peau. L'extrait de guaçatonga est obtenu par traitement en autoclave. La voie d'obtention est aqueuse et, dans celle-ci, les feuilles sont d'abord séchées dans un four et broyées dans un broyeur à couteaux. Dans un mode de réalisation préféré, les feuilles sont placées dans un autoclave avec de l'eau en un rapport de 1/10 (1 partie de plante pour 10 parties d'eau). L'extraction a lieu à une température de 121°C pendant une période de temps de 1 heure. La solution extraite résultante est ensuite filtrée dans un filtre presse, utilisant un élément filtrant en toile grossière, par exemple, à la température ambiante. Après la filtration, on ajoute du dioxyde de silicium (20 %) et des agents conservateurs. L'extrait aqueux est ensuite séché au moyen d'un séchoir par pulvérisation. Le résultat »est un extrait raffiné marron (en poudre) de feuilles de guaçatonga. Le deuxième extrait, quand à lui, agit en inhibant 35 l'activité de l'enzyme élastase. De façon plus spécifique, en présence d'élastase, l'extrait inhibe le fonctionnement de cette enzyme, en l'empêchant de se lier à son substrat habituel (l'élastine). L'activité de l'enzyme est donc réduite, c'est-à-dire que ledit extrait contribue à réduire la dégradation de l'élastine (un résultat de l'activité d'élastase). Le procédé pour préparer l'extrait d'aroeira convenant pour la présente invention est décrit dans la demande de brevet WO 2011/020167. L'obtention de l'extrait d'aroeira se déroule sous pression de vapeur d'eau à partir de feuilles d'aroeira. Il y a ensuite une extraction aqueuse sous pression de vapeur en un rapport de 1/7 (1 partie de plante pour 7 parties de solvant d'extraction (eau) à une température de 85°C à 150°C et sous une pression de 1,60 à 2,40 kgf/cm2). La solution résultante est ensuite filtrée dans un filtre presse à une température de 85°C à 95°C et concentrée en étant réduite de 3 volumes. Un raffinage/une précipitation à l'éthanol a lieu avec un rapport de 1/3, et est suivi d'un refroidissement (0°C à 10°C) et d'une évaporation de l'éthanol. Finalement, le filtrat est séché dans un séchoir par pulvérisation, ce qui donne un extrait raffiné de Schinus terebinthifolius. L'extrait obtenu est sous la forme d'une poudre sèche marron contenant des protéines, des flavonoïdes, des coumarines, des sucres (20 %), des tanins condensés (20 %), et de l'acide gallique (12 %). La présente invention concerne par conséquent une composition cosmétique pour prévenir et/ou traiter des signes du vieillissement de la peau, comprenant de -0,0001 à 10 %, en poids de la composition, d'un extrait de guaçatonga, de 0,00005 à 10 %, en poids de la composition, d'un extrait d'aroeira, et des adjuvants acceptables en cosmétique. De préférence, la composition selon la présente invention comprend -0,005 à 5 %, mieux encore 0,01 à 1 %, en poids de la composition, d'un extrait de guaçatonga, et de 0,0005 à 5 %, mieux encore de 0,00125 à 1 %, en poids- de la composition, d'un extrait d'aroeira. On présente ci-après quelques exemples - de manière non pas restrictive, mais plutôt représentative d'adjuvants inertes et d'agents inertes compatibles avec les propriétés de la composition décrite ici, qui de plus peuvent être employés dans la présente composition cosmétique. - Eau l'eau est la base de divers modes de réalisation préférés de la composition cosmétique de la présente invention, en agissant comme un véhicule pour les autres composants. Les compositions de la présente invention comprennent de préférence de l'eau déminéralisée ou distillée en un pourcentage adéquat (q.s.p.) pour atteindre 100 % de la formulation, par rapport au poids total de la présente composition. Bien 15 entendu, d'autres véhicules acceptables en cosmétique peuvent être utilisés dans la présente invention : - Agents antioxydants : BHT, BHA, tocophérol et/ou ses dérivés, catéchines, tanins et/ou leurs dérivés, composés phénoliques, entre autres ; 20 - Agents conservateurs méthylparabens, propylparabens, isothiazolinones, phénoxyéthanol ; - Agents filmogènes : gomme de gélose, carraghénane, alginates, gomme arabique, gélatine ; - Agents chélatants : EDTA, acide citrique, acide 25 étidronique ; - Agents de réticulation microcristallins support : dextranes, acrylates de méthyle, PHB, PHA ; - Agents polymères et/ou agents copolymères copolymères siliconés, polymères de siloxane et/ou 30 silicone modifiée, copolymères d'acrylates ; - Agents dénaturants : benzoate de dénatonium ; - Agents de texture : cires végétales, hydrocarbures minéraux, paraffine, cire d'abeilles, cire blanche, spermacéti de baleine, beurre de cacao, beurre de karité, 35 cire de canne à sucre ; - Emollients : paraffine liquide, huile de palme, beurre de cupuaçu, lécithine, acides aminés du lait, protéine de petit lait, protéine végétale, huiles végétales, phospholipides, céramides, céramide de passiflore, sphingolipides, lanoline, huile d'amande, carbonate de dicapryle, élastomère de silicone, cyclométhicone ; - Agents mouillants et/ou agents hydratants glycérine, propylèneglycol, acide hyaluronique, urée, PCA ; - Agents conditionnants sels d'ammonium quaternaire, silicones, siloxanes ; - Autres agents actifs cosmétiques, par exemple extraits de plantes, polysaccharides, qui ont une fonction de traitement du vieillissement de la peau ; et - Agents protégeant contre les rayons UV (écrans 15 solaires) : méthoxycyanamate d'octyle, benzophénones, etc. Ladite composition est préparée par incorporation simultanée de deux extraits dans la fraction aqueuse de la composition. 20 La composition selon la présente invention peut être sous différentes formes pharmaceutiques,_ comme .par exemple une crème, un gel, une suspension, ou un savon de toilette. La présente invention concerne en outre un procédé 25 pour prévenir et/ou traiter les signes du vieillissement de la peau par application topique de la composition selon la présente invention. Un autre objet de la présente invention consiste à utiliser des extraits de guaçatonga et d'aroeira dans la 30 préparation d'une composition cosmétique pour prévenir et/ou traiter les signes du vieillissement de la peau.. Afin d'évaluer l'effet d'une amplification de l'expression génique de tropoélastine et de LOX dans des cellules cutanées traitées avec de l'extrait de 35 guaçatonga à des concentrations non cytotoxiques, on a effectué une quantification des gènes par la technique RT-PCR (amplification en chaîne par polymérase utilisant une transcriptase inverse,) en temps réel. Les résultats sont comparés à un témoin non testé. Les cellules utilisées sont des fibroblastes de la lignée RFL. On a pesé l'extrait de guaçatonga produit par le procédé susmentionné et on l'a directement solubilisé dans du milieu de culture Ham-F12 + 2 % de sérum de veau foetal. Les concentrations testées étaient de 0,1, 0,05 et 0,01 mg/ml pour l'échantillon aqueux. On a incubé la lignée cellulaire RFL avec du TGF-?, connu en tant qu'inducteur de l'expression de LOX, et de l'acide ellagique, connu en tant qu'inducteur de tropoélastine, qui sont les gènes présentant un intérêt pour la ,présente invention. On a simultanément incubé d'autres cellules, dans les mêmes conditions que celles indiquées ci-dessus, avec de l'extrait de guaçatonga. La période d'incubation était de 18 heures. Puis on a collecté le matériau cellulaire pour extraire l'ARN des cellules et synthétiser de l'ADNc. Pour les réactions PCR en temps réel, on a utilisé des systèmes d'amplification Taqman, spécifiques de LOX et de la tropoélastine, en plus du gène de GAPD servant de témoin endogène. L'analyse de l'expression concernant LOX est représentée sur la Figure 1. Est présentée une comparaison entre le groupe témoin et le groupe traité avec différentes concentrations de l'échantillon d'extrait de guaçatonga. L'extrait à 0,1 mg/ml présentait une augmentation relative de 2 CT dans l'expression génique de LOX par rapport au témoin, ce qui signifie une augmentation de 200 %. On a également effectué une analyse de l'expression concernant la tropoélastine entre le groupe témoin et le groupe traité avec différentes concentrations de l'échantillon d'extrait de guaçatonga (voir la Figure 2). L'extrait à 0,1 mg/ml présentait une augmentation relative de 4 CT dans l'expression génique de la tropoélastine par rapport au témoin, ce qui signifie une augmentation de 400 %. Afin de prouver l'activité de l'extrait d'aroeira présent dans la composition selon la présente invention, on a mesuré l'activité d'élastase (des neutrophiles humains) au moyen d'un kit, à savoir "EnzChek Elastase Kit Assay". Ce kit contient de l'élastine bovine issue de ligament du cou, marquée au fluorophore BODIPY PL. La coupure de ce composé par l'enzyme élastase génère des fragments fluorescents qui absorbent à 485 nm et émettent une fluorescence à 535 nm. Ceci rend possible, par utilisation d'un spectrophotomètre, de surveiller l'activité d'élastase pendant une certaine période de temps. La coupure de l'élastine et, par conséquent l'activité de l'enzyme élastase, sont d'autant plus importantes que l'intensité de fluorescence mesurée est forte. On a comparé le potentiel inhibiteur de l'élastase de l'extrait d'aroeira avec le potentiel de l'inhibiteur d'élastase spécifique, à savoir la'N-méthoxysuccinyl-AlaAla-Pro-Val-chlorométhYlcétone. On a effectué les analyses avec un temps de réaction de 500 minutes, c'est-à-dire 8 heures et 20 minutes, et on a utilisé l'élastase à une concentration de 0,25 U/ml. L'extrait d'aroeira présentait une inhibition de l'enzyme de 30 % à une concentration de 0,5 g/ml. Des concentrations plus fortes interfèrent avec l'analyse, et elles n'ont pas pu être testées. La CI50 est de 0,31 mg/ml (voir la Figure 3). On a testé les extraits de guaçatonga et d'aroeira isolés ou en mélange afin de démontrer l'augmentation de la quantité ou du dépôt d'élastine dans le tissu humain. On a effectué ce test en traitant des explants de peau humaine avec lesdits extraits. On a sélectionné des fragments de peau de l'abdomen de femmes de type caucasien âgées de 20 à 55 ans, et on a testé chaque condition en triple biologique (trois donneurs différents). On a dilué les extraits dans du milieu de culture et on les a appliqués aux'explants pendant 14 jours avec 5 changements au cours de cette période (24 + 72 + 48 + 48 + 72 + 72 heures). O'n a testé chaque condition en triple biologique (trois donneurs différents). Après la période d'incubation, on a préparé les échantillons conformément à des procédures standard pour analyse histologique et on les a colorés à l'orcéine. On a effectué la quantification de l'élastine par analyse d'image (24 images par traitement). Le mélange de guaçatonga et d'aroeira à des concentrations respectives de 0,025 mg/ml donnait une augmentation de 36 % de la quantité-d'élastine cutanée par rapport au témoin (explants non traités). L'extrait d'aroeira seul donnait une augmentation de 29 % de l'élastine (inférieure à celle du mélange). L'augmentation d'élastine déposée conférée par l'extrait de guaçatonga isolé n'était pas significative, mais le mélange des deux extraits générait la plus forte augmentation d'élastine obtenue dans le test (36 %) (voir la Figure 4). Finalement, on a en outre effectué des dosages de l'expression de protéines (tropoélastine, LOX, fibuline, fibrilline, et MMP-12) dans une monocouche cellulaire. On a testé les extraits de guaçatonga et d'aroeira dans des cultures cellulaires monocouches pour l'expression d'élastine, de LOX, de fibrilline-1 (en utilisant les lignées RFL), de MMP-12 et de fibuline-5 (dans des fibroblastes de peau humaine). Les cellules RFL sont maintenues dans du milieu HAM-F12 (Invitrogen, 11765) et les fibroblastes- dans. du milieu_ RPMI 1640 (Gibco, 61870-010), tous deux supplémentés de 10 % de sérum de veau foetal. On a utilisé le facteur TGF-PI (10 ng/ml) en tant qu'étalon pour le test de production de protéine élastine, LOX, fibrilline-1 et fibuline-5 ; on a utilisé l'interleukine-1P (30 ng/ml) et la dexaméthasone (5 pM) ensemble en tant qu'étalons pour la stimulation et la réduction de MMP-12. De plus, on a aussi utilisé l'acide ellagique (10 ng/ml) dans le test de production d'élastine. On,a testé l'extrait de guaçatonga à 0,01, 0,05 et 0,1 mg/ml dans les tests avec des fibroblastes (MMP-I2 et fibuline-5) et à 0,01, 0,1 et 0,2 mg/ml dans les tests avec des cellules RFL (élastine, LOX, fibrilline-1), ces valeurs respectant les cytotoxicités respectives dans le modèle (voir les Figures 5 à 9). On a testé des mélanges de guaçatonga (A) et d'aroeira (B) à des concentrations respectives de 0,1 mg/ml (A) + 0,025 mg/ml (B), 0,05 mg/ml (A) + 0,0125 mg/ml (B) et 0,01 mg/ml (A) + 0,01 mg/ml (B) dans tous les tests (élastine, LOX, fibrilline-1, MMP-12 et fibuline-5) (voir les Figures 10 à 14). Pour ces tests, on a soumis les cellules, maintenues dans un four humide à 37°C en présence de 5 % de 002, à une trypsination à 80-90 % de confluence et on les a ensemencées sur des lamelles à 96 puits (Nunc, USA). Une heure avant les traitements, on a changé le milieu de culture pour un milieu supplémenté de 2 % de sérum de veau foetal (témoin de base) ou un milieu avec 2 % de sérum de veau foetal contenant les étalons tels que décrits .ci-dessus. Pour les traitements, on a pesé les échantillons et on les a dilués dans du milieu de culture pour atteindre les concentrations décrites ci-dessus, et on les a appliqués aux cellules pendant 48 heures. Au bout de 48 heures, on a collecté le surnageant pour l'analyse respective. Les résultats ont été analysés par Anova puis par le test de Dunnet, employé quand l'analyse de variance a détecté des différences significatives entre les groupes. Dans tous les groupes étudiés, ceux dont les valeurs P étaient inférieures à 0,05 ont été considérés comme étant statistiquement significatifs. Pour la quantification de la tropoélastine, on a utilisé le kit de détection d'élastine Fastin (Biocolo, Belfast, Irlande) conformément au protocole suggéré par le fabricant. On a précipité l'élastine contenue dans les échantillons dans des tubes de microcentrifugatioh ap-rès. avoir ajouté 1 ml de réactif précipité (acide trichloroacétique et arginine), et on a incubé à 0°C. pendant 24 heures. Après avoir centrifugé les tubes (10 000 x g) pendant 10 minutes, on a jeté le surnageant et on a remis le culot d'élastine en suspension dans 1 ml de TPPS (21,23-porphinesulfonate de 5,10,15,20- tétraphényle) et 200 pl de sulfate d'ammonium saturé à 90 % pour former le complexe élastine/colorant. Après avoir agité les tubes pendant 60 minutes, on les a de nouveau centrifugés (10 000 x g) pendant 10 minutes, on a évacué le surnageant et on a remis le complexe en suspension dans 1 ml de réactif de dissociation (HC1- guanidine et 1-propanol), en permettant ainsi la formation du complexe coloré, dont on a mesuré l'absorbance à 513 nm. On a déterminé la concentration d'élastine en se basant sur la courbe d'étalonnage et en utilisant l'étalon de tropoélastine fourni par le fabricant du kit. Pour quantifier la fibrilline-1, on a utilisé un kit de dosage immuno-enzymatique (ELISA en sandwich) 20 disponible dans le commerce (USCN Life Science, E90593Ra). On a ajouté des échantillons de surnageant des cultures cellulaires à la lamelle à 96 puits, et on a incubé à 37°C pendant 2 heures. Puis on a ajouté sur la lamelle l'anticorps couplé à de la biotine, et on a de 25 nouveau incubé à 37°C pendant 1 heure. On a ensuite lavé la lamelle, on a ajouté de l'avidine conjugué à de la HRP, et on a une fois de plus incubé la lamelle à 37°C pendant 30 minutes. Au bout de 20 minutes de réaction, on a interrompu celle-ci en ajoutant du H2SO4 2 N et on a 30 effectué la lecture sur un lecteur de micro-lamelle à 450 nm. Les taux de fibrilline-.l_ sont exprimés en ng/ml et ont été calculés à partir des valeurs de référence obtenues avec une courbe d'étalonnage construite avec des concentrations connues de la cytokihe recombinée. 35 Pour quantifier la fibuline-5, on a utilisé un kit de dosage immuno-enzymatique (ELISA en sandwich) disponible dans le commerce (USCN Life Science, E9315Hu). Le protocole de dosage est le même que celui décrit pour la fibrilline-1. Les taux de fibuline-5 sont exprimés en ng/ml et ont été calculés à partir des valeurs de référence obtenues avec une courbe d'étalonnage construite avec des concentrations connues de la cytokine recombinée. Pour quantifier la LOX, on a utilisé un kit de dosage immuno-enzymatique (ELISA en sandwich) disponible dans le commerce (USCN Life Science, C92580Ra). Le protocole de dosage est le même que celui décrit pour la fibrilline-1 et la fibuline-5. Les taux de LOX sont exprimés en ng/ml et ont été calculés à partir des valeurs de référence obtenues avec une courbe d'étalonnage construite avec des concentrations connues de la cytokine recombinée. Pour quantifier la MMP-12, on a pré-incubé des fibroblastes de peau humaine avec IL-1 pendant 6 heures, puis on les a incubés avec les principes actifs et les matières premières pendant 24 heures de plus, avant de collecter les surnageants. Pour quantifier la MMP-12, on a utilisé un kit de dosage immuno-enzymatique (ELISA en sandwich) disponible dans le commerce (USCN Life Science, E90402Hu). Les taux de MMP-12 sont exprimés en ng/ml et ont été calculés à partir des valeurs de référence obtenues avec une courbe d'étalonnage construite avec des concentrations connues des cytokines recombinées. Les résultats des tests in vitro mentionnés ci-dessus- démontrent que l'extrait de guaçatonga présente une efficacité pour toutes les périodes finales évaluées et concernant le mécanisme de dépôt des fibres élastiques sur la peau, c'est-à-dire que l'extrait induit une augmentation de la production des protéines tropoélastine, fibuline-5, fibrilline-1, et de-l'enzyme LOX (voir les Figures 5 à 8). Eu outre, l'extrait agit aussi sur la réduction de la production de la protéine MMP-12 (élastase), induite par préjudice d'IL-1, un Mécanisme qui empêche la dégradation de la fibre élastique (sans confirmation des données d'expression génique suggérant une augmentation de la production d'élastase) (voir la Figure 9). L'extrait d'aroeira, bien qu'il induise l'expression génique de tropoélastine et de LOX, n'induit pas la production des protéines respectives. Toutefois, l'extrait présente une efficacité dans les autres mécanismes évalués, conduisant à la production des fibres élastiques, comme la production des protéines fibrilline- 1 et fibuline-5. Par ailleurs, cet extrait présente une différence d'inhibition de l'activité de l'enzyme élastase (dosage biochimique) atteignant 89 % (1 mg/mi). De plus, pour cet extrait, il a été possible d'observer une augmentation de la quantité de fibres élastiques dans les explants cutanés, reflétant éventuellement le potentiel de protection contre la dégradation de l'élastine. En résumé, les résultats montrent que l'extrait de guaçatonga est le seul échantillon, parmi ceux testés, qui présente un potentiel d'action sur tous les mécanismes évalués (augmentation de l'élastine, de la fibuline-5, de la fibrilline-1, de la LOX, et réduction de la MMP-12). Il est intéressant de noter que l'extrait d'aroeira présente une différence de réduction de l'activité de l'enzyme élastase, en plus d'une réduction de sa production, suggérant que l'utilisation conjointe des échantillons pourrait moduler le dépôt et la dégradation des fibres élastiques. Exemples de formulations selon la présente invention Exemple 1 : émulsion % en poids de la composition finale Eau déminéralisée BHT- EDTA disodique - Benzoate de sodium - Extrait d'aroeira - 0,0001 à 10 % Homopolymère d'aide acrylique sodique Gomme xanthane, C1911 B - Extrait de guaçatonga - 0,0001 à 10 % Acétate de tocophéryle (vitamine E) Exemple 2 : émulsion Extrait de guaçatonga - 0,0001 à 10 % Propylèneglycol - Gomme xanthane C1911 B - Hydroxyde de sodium - Benzoate de sodium - Extrait d'aroeira - 0,0001 à 10 % Homopolymère d'acide acrylique sodique Glutathion Acide étidronique REVENDICATIONS1. Composition cosmétique caractérisée en ce qu'elle comprend 0,0001 à 10 %, en poids de la composition totale, d'extrait de guaçatonga (Casearia sylvestris), 0,00005 à 10 %, en poids de la composition totale, d'extrait d'aroeira (Schinus terebinthifolius raddi) et des adjuvants acceptables en cosmétique. 2. Composition cosmétique selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'extrait de guaçatonga est présent à une concentration de 0,005 à 5 % en poids de la composition, et l'extrait d'aroeira est présent à une concentration de 0,0005 à 5 % en poids de la composition. 3. Composition cosmétique selon la revendication 2, caractérisée en ce que l'extrait de guaçatonga est présent à une concentration de 0,01 à 1 % en poids de la composition, et l'extrait d'aroeira est présent à une concentration de 0,00125 à 1 % en poids de la composition. 4. Composition cosmétique selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce qu'elle est sous la forme d'une 25 crème, d'un gel, d'une suspension, ou d'un savon de toilette. 5. Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce qu'elle est 30 destinée à être utilisée dans la préparation et/ou le traitement de signes du vieillissement de la peau. 6. Utilisation d'extrait de guaçatonga (Casearia Sylvestris) et d'extrait d'aroeira (Schinus 35 terebinthifolius raddi), caractérisée en ce qu'elle réside dans la préparation d'une composition cosmétique telle que définie dans l'une .quelconque desrevendications 1 à 5 pour prévenir et/ou traiter des signes du vieillissement de la peau. 7. Utilisation d'extrait de guaçatonga (Casearia Sylvestris) et d'extrait d'aroeira (Schinus terebinthifolius raddi), caractérisée en ce qu'elle réside dans la préparation d'une composition cosmétique telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 5 pour simultanément augmenter la 10 tropoélastine, augmenter l'enzyme lysyle oxydase (LOX), et réduire l'activité de l'élastase dans le derme. 8. Utilisation d'une composition cosmétique telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 15 5, caractérisée en ce qu'elle réside simultanément dans l'augmentation de la tropoélastine, l'augmentation de l'enzyme lysyle oxydase (LOX) et la réduction de l'activité de l'élastase dans le derme. 20 9. Procédé pour prévenir et/ou traiter des signes du vieillissement de la peau, caractérisé en ce qu'il comprend l'application sur la peau d'une composition cosmétique telle que définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 5. 25