Brevet FR3010315A1 — publié le 20150313

COMPOSITION ANTIPARASITAIRE ORALE La présente invention concerne une composition pour utilisation en tant qu'antiparasitaire oral, la composition comprend un ou plusieurs des constituants suivants : une huile essentielle qui contient du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol ; une huile essentielle du genre Cinnamomum, Eugenia, Eucalyptus; ou une source de saponine. Elle concerne en outre un procédé de prévention ou traitement d'une infection parasitaire chez un animal, le procédé comprenant l'administration par voie orale audit animal d'une composition comprenant un ou plusieurs des constituants suivants : une huile essentielle qui contient du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol ; une huile essentielle du genre Cinnamomum, Eugenia, Eucalyptus; ou une source de saponine. Une infection parasitaire peut affecter tous les animaux. En particulier, les chiens et les chats sont des hôtes majeurs pour les parasites, au moins 80 % des chiens et des chats sont infectés par un type d'endoparasite. Dans des environnements d'élevage, entre 20 et 30 % des chiens et des chats sont particulièrement sujets à des parasites internes, tels que des coccidies. Une infection parasitaire peut causer des symptômes tels qu'une infestation par des vers, une douleur abdominale, des obstructions intestinales, une diarrhée et des vomissements conduisant finalement à une déshydratation, des problèmes de sommeil, une anémie, des douleurs musculaires ou articulaires, des allergies et/ou une fatigue. En particulier, les chats et les chiens sont les hôtes de nombreux parasites et par conséquent, un contact rapproché peut conduire à des risques accrus d'infection parasitaire chez des humains (zoonose). Des extraits de plante ont été utilisés en combinaison avec des médicaments chimiques, en particulier pour appliquer sur la peau des animaux sous forme de dépôt de médicaments antiparasitaires, voir par exemple EP0116401. Le problème avec ces procédés de dépôt est que la peau de l'animal devient irritée et peut causer un dommage de la peau. Par conséquent, il existe un besoin de développer d'autres médicaments et/ou aliments alternatifs pour animaux pour réduire une infection parasitaire, en particulier des endoparasites chez les chiens et/ou les chats pour réduire plus avant les risques de zoonose. La présente invention concerne une composition qui répond à ce besoin. La présente invention concerne une composition comprenant un ou plusieurs des constituants suivants : une huile essentielle qui contient du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol ; une huile essentielle du genre Cinnamomum, Eugenia, Eucalyptus; ou une source de saponine pour utilisation par voie orale en tant qu'antiparasitaire chez les animaux. Il a été démontré que la composition de la présente invention est efficace dans la réduction d'une infection parasitaire chez les animaux. De plus, il a été démontré que la composition de l'invention a un effet bénéfique lorsqu'elle comprend deux ou plus des constituants suivants : une huile essentielle qui contient du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol ; une huile essentielle du genre Cinnamomum, Eugenia, Eucalyptus; ou une source de saponine. L'effet peut être synergique. La présente invention concerne, pour tous ses aspects, un animal quelconque comprenant un humain. En particulier, la présente invention concerne un animal de compagnie tel qu'un chien ou un chat. Le premier aspect de cette invention concerne une composition pour utilisation en tant qu'antiparasitaire oral, la composition comprenant un ou plusieurs des constituants suivants : une huile essentielle qui contient du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol ; une huile essentielle du genre Cinnamomum, Eugenia, Eucalyptus; ou une source de saponine. De préférence, la composition selon l'invention comprend une huile essentielle contenant du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol, et une huile essentielle du genre Cinnamomum, Eugenia, ou Eucalyptus. L'utilisation d'un antiparasitaire comprend le traitement et/ou la prévention des symptômes d'une infection parasitaire. Le traitement comprend l'amélioration des symptômes d'infection parasitaire. La composition de la présente invention peut être utilisée contre des parasites, en particulier appartenant au phylum Apicomplexa. Apicomplexa est un grand groupe de protistes unicellulaires. Ce groupe de protistes comprend des organismes classés comme étant des coccidies, des grégarines, des piroplasmes, des hémogrégarines et des plasmodium. De préférence, le parasite est de la classe Conoidasida. La composition de l'invention peut être utilisée contre des parasites de la classe Conoidasida. Les Conoidasida comprennent deux sous-classes : les coccidies ou les grégarinies. De préférence, le parasite est de la sous-classe des coccidies. La composition de la présente invention peut être utilisée pour traiter une coccidiose. De préférence, la composition traite une infection parasitaire contre des parasites du genre Isospora, Neospora ou Toxoplasma. De manière préférée entre toutes, la composition de la présente invention peut traiter une coccidiose contre l'espèce de parasite Neospora caninum ou Toxoplasma gondii. La composition de la présente invention comprend une ou plusieurs huiles essentielles contenant du gamma-terpinène. Les terpinènes sont un groupe d'hydrocarbures isomères classés en tant que terpènes qui sont naturellement présents dans les plantes et les fleurs. Les terpinènes ont la formule moléculaire C10H16 et diffèrent les uns des autres par la position des doubles liaison carbone-carbone. Les terpinènes comprennent (a) l'alpha-terpinène, ([3) le bêtaterpinène, (y) le gamma-terpinène ou (ô) le delta-terpinène, en particulier le gammaterpi nène. Les huiles essentielles sont des mélanges volatils d'esters, d'aldéhydes, d'alcools, de cétones, de terpènes, de monoterpènes, de sesquiterpènes, de phénols et d'oxydes, qui peuvent être préparés à partir de n'importe quelle partie d'une plante. Les procédés pour extraire des huiles essentielles à partir de plantes, par exemple par distillation ou extraction par solvant, sont usuellement connus dans l'art. Les huiles essentielles peuvent être extraites à partir de parties quelconques des plantes, par exemple les feuilles, les fleurs, les tiges, l'écorce, les semences ou les racines. De préférence, l'huile essentielle est extraite à partir des feuilles. Des huiles essentielles contenant du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol comprennent le genre Satureja, Thymus, Trachyspermum, Origanum ou Melaleuca. Les composés peuvent également être synthétiques, ou isolés à partir de sources naturelles. Un mélange de composés provenant de sources naturelles ou synthétiques peut être utilisé. En particulier, l'huile de sarriette peut être obtenue à partir des feuilles de Satureja Montana, l'huile de thym peut être obtenue à partir des feuilles de Thymus vulgaris ou Thymus zygis, l'huile d'origan peut être obtenue à partir des feuilles d'Origanum vulgare. L'huile essentielle contenant du gamma-terpinène peut être de l'un quelconque des genres Satureja, Thymus, Trachyspermum, Origanum ou Melaleuca. La composition de la présente invention comprend une ou plusieurs huiles essentielles du genre Cinnamonum, Eugenia, Eucalyptus. L'huile essentielle du genre Cinnamonum peut être de cannelle. L'huile essentielle du genre Eugenia peut être de clou de girofle. L'huile essentielle du genre Eucalyptus peut être d'eucalyptus. De préférence, l'huile essentielle est de cannelle. La cannelle est une épice qui est obtenue à partir de l'écorce interne d'arbres de Cinnamonum. La cannelle comprend Cinnamomum verum, Cinnamomum burmanii, Cinnamomum loureuros ou Cinnamomum cassia. De préférence, l'huile de cannelle est extraite à partir de Cinnamonum cassia (également appelé cannelier de Chine). De manière préférée entre toutes, l'huile de cannelle est extraite à partir des feuilles de Cinnamonum cassi. Le clou de girofle est une épice qui est obtenue à partir des boutons de fleurs d'un arbre de la famille des Myrtaceae. En particulier, l'huile de clou de girofle est extraite à partir des boutons de fleur de Syzygium aromaticum. De préférence, le clou de girofle est Eugenia caryophyllus. L'eucalyptus est un genre d'arbres et arbustes à fleurs de la famille des Myrtaceae comportant plus de 700 espèces. En particulier, l'huile d'eucalyptus est extraite d'Eucalyptus globulus. De préférence, l'huile d'eucalyptus est extraite des feuilles d'Eucalyptus globulus. Les saponines sont des composés chimiques naturellement présents dans différentes plantes et peuvent également être trouvées dans des organismes marins. Les saponines peuvent être présentes dans les familles botaniques des Quillajaceae, Caryophyllaceae, Sapindaceae, Aceraceae, Hippocastanceae, Cucurbitancae, Araliaceae ou Asparagaceae. De préférence, une source de saponine est dérivée de la famille des Asparagaceae. En particulier, la source de saponine est dérivée du genre Yucca. De manière préférée entre toutes, la source de saponine est dérivée de l'espèce Yucca schidigera. La source de saponine peut être trouvée dans différentes parties de la plante telles que les feuilles, les tiges, les racines, les bulbes, les fleurs et les fruits. Les procédés d'extraction de la source de saponine à partir de plantes sont connus. Les saponines sont des glycosides bipolaires composés d'un ou plusieurs fragments de glycoside hydrophile combinés avec un dérivé de triterpène. Le nombre de chaînes de saccharide liées peut varier en termes de longueur de 1 à 11, de préférence de 2 à 5. Les chaînes de saccharide peuvent être linéaires et/ou ramifiées. La source de saponine peut être stéroïdienne. De préférence, la saponine est une sapogénine stéroïdienne telle que la diosgénine, la sarsapogénine, la smilagénine, la tigonénine, l'hécogénine, la 9-déshydrohécogénine, la gitogénine, la chlorogénine, la yuccagénine, la samogénine, la manogénine, la 9- déshydromanogénine ou la kammogénine. Avantageusement, la source de saponine est un mélange de sapogénines stéroïdiennes. Une composition préférée comprend une ou plusieurs huiles essentielles contenant du gamma-terpinène, et une ou plusieurs huiles essentielles de cannelle, de clou de girofle ou d'eucalyptus. De préférence, la composition contient de l'origan en tant qu'huile essentielle contenant du gamma-terpinène. De manière préférée entre toutes, la composition comprend des huiles essentielles d'origan et de cannelle ou d'origan et de clou de girofle. La composition de l'invention est une composition quelconque qu'un animal peut consommer en tant que partie de son alimentation. La composition peut être un liquide, un comprimé ou un aliment. De préférence, la composition peut être un aliment. Elle peut être un aliment quelconque, tel qu'un produit sec, un produit semi-humide, un produit alimentaire humide ou un liquide et comprend un complément alimentaire, une friandise ou un en-cas. Par conséquent, l'invention concerne des produits alimentaires standard, comprenant des liquides, ainsi que des friandises pour animaux de compagnie (par exemple, des barres de friandise, des aliments à mâcher pour animaux domestiques, une friandise croustillante, des barres de céréales, des en-cas, des biscuits et des produits sucrés) et des compléments. La composition peut être incorporée dans une matrice d'amidon gélatinisée, ou dans des aliments ou compléments secs ou humides quelconques. Les procédés d'incorporation sont connus dans l'art. La composition peut également être un produit humide. L'aliment est de préférence un produit pour animal de compagnie commercialisé. Un tel produit est, de préférence, commercialisé en tant que produit pour alimentation/administration à un animal de compagnie, en particulier un chat de compagnie ou un chien de compagnie. Un aliment sec pour animal de compagnie typique contient environ 10 à 40 % de protéines brutes et environ 5 à 40 % de graisses, le reste étant des glucides, comprenant des fibres alimentaires et des cendres. Un produit mouillé ou humide typique contient (sur une base de matière sèche) environ 40 % de graisses, 50 % de protéines et le reste étant des fibres et des cendres. L'aliment de l'invention peut être un produit sec (avec approximativement 5 à approximativement 15 % d'humidité), un produit semi-humide (avec approximativement 15 à approximativement 70 % d'humidité) ou un produit humide (avec approximativement 70 à approximativement 90 % d'humidité). L'aliment de l'invention est de préférence produit sous la forme d'un produit sec contenant approximativement 5 % à approximativement 15 % d'humidité. L'aliment sec préféré est plus préférablement présenté sous la forme d'un petit biscuit, par exemple des croquettes. Les autres composants de l'aliment ne sont pas essentiels pour l'invention et des produits standards typiques peuvent être inclus. Les ingrédients combinés de l'aliment selon l'invention peuvent apporter l'ensemble des vitamines et minéraux recommandés pour l'animal particulier en question (un aliment complet et équilibré). L'aliment peut être fourni sous la forme d'un complément alimentaire. Le complément alimentaire peut être une poudre, une sauce, une garniture, un biscuit, une croquette, un sachet ou un comprimé qui peut être administré avec ou sans aliment additionnel. Lorsque le complément alimentaire est administré avec un aliment additionnel, le complément alimentaire peut être administré séquentiellement, simultanément ou séparément. Le complément alimentaire peut être mélangé avec l'aliment, aspergé sur l'aliment, ou servi séparément. En variante, le complément alimentaire peut être ajouté à un liquide fourni comme boisson tel que de l'eau ou du lait. L'aliment est de préférence un produit cuit. Il peut incorporer de la viande ou un matériau d'origine animale (tel que du boeuf, du poulet, de la dinde, de l'agneau, du poisson, du plasma sanguin, de la moelle osseuse, etc., ou un ou plusieurs de ceux-ci). En variante, le produit peut être sans viande (de préférence, comprenant un substitut de viande tel que du soja, du gluten de maïs ou un produit de soja) afin de fournir une source de protéine. L'aliment peut contenir des sources de protéine additionnelles telles qu'un concentré de protéine de soja, des protéines de lait, du gluten, etc. L'aliment peut contenir en outre une source d'amidon telle qu'une ou plusieurs céréales (par exemple, le blé, le maïs, le riz, l'avoine, l'orge, etc.), ou peut être sans amidon. L'aliment de l'invention peut être utilisé seul ou en combinaison avec un aliment complet équilibré qui apporte l'ensemble des vitamines et minéraux recommandés pour le chien en question, par exemple, comme décrit dans National Research Council, 1985, Nutritional Requirements for Dogs, National Academy Press, Washington DC (ISBN:0-309-03496-5); ou Association of American Feed Control Officiais, Official Publication 1996. Ces valeurs s'appliquent à une composition pour alimentation d'un animal, en particulier un animal de compagnie, tel qu'un chien ou un chat. La quantité totale d'huile essentielle / saponine est de 0,01 à 1000 mg/kg (ppm) d'aliment (solide ou liquide). La quantité d'huile essentielle / saponine peut être dans la plage de 0,01 à 500 mg/kg (ppm), 0,01 à 100 mg/kg (ppm), 0,01 à 50 mg/kg (ppm), 0,01 à 1 mg/kg (ppm), 100 à 1000 mg/kg (ppm), 100 à 500 mg/kg (ppm), 50 à 100 mg/kg (ppm), ou égale à 50mg/kg (ppm), ou une combinaison quelconque de ces quantités d'aliment (liquide commercialisé). Le deuxième aspect de l'invention concerne un procédé de prévention ou de traitement d'une infection parasitaire chez un animal. Il a été démontré que la composition de l'invention produit, entre autres, une diminution d'une infection et d'une prolifération parasitaire, in vitro. La composition de l'invention prévient et/ou traite une infection parasitaire chez les animaux, comprenant la prévention d'une zoonose et la prévention et/ou le traitement dans un environnement de chenil d'élevage. En particulier, il existe un souhait dans le domaine des aliments pour animaux domestiques et de la santé des animaux de compagnie de fournir un aliment comprenant des compléments adaptés pour maintenir la santé des animaux de compagnie. En particulier, il existe un souhait de produire des aliments adaptés pour favoriser ou maintenir la santé d'animaux de compagnie déjà sains en tant qu'aliments préventifs. En particulier, le deuxième aspect de l'invention concerne un procédé pour prévenir et/ou traiter une infection parasitaire chez un animal, comprenant l'amélioration des symptômes d'infection parasitaire. Le procédé comprend l'administration audit animal d'une composition qui comprend un ou plusieurs des constituants suivants : une huile essentielle qui contient du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol ; une huile essentielle du genre Cinnamomum, Eugenia, Eucalyptus; ou une source de saponine. L'animal peut avoir besoin de cette composition. La présente invention concerne, pour tous les aspects, un animal quelconque, comprenant un humain. En particulier, la présente invention concerne un animal de compagnie tel qu'un chien, un chat ou tout autre animal qui souffre ou est susceptible de souffrir d'une infection parasitaire. Étant donné qu'un nombre significatif de chiens et/ou chats sont des hôtes pour des parasites, ils sont donc susceptibles d'infection parasitaire. Dans des modes de réalisation particuliers, le procédé comprend l'administration audit animal d'une composition comprenant un ou plusieurs des constituants suivants : une huile essentielle qui contient du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol ; une huile essentielle du genre Cinnamomum, Eugenia, Eucalyptus; ou une source de saponine. La composition peut comprendre une ou plusieurs huiles essentielles contenant du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol, comprenant le genre Satureja, Thymus, Trachyspermum, Origanum ou Melaleuca; et une ou plusieurs huiles essentielles de cannelle, de clou de girofle ou d'eucalyptus. De préférence, la composition contient de l'origan en tant qu'huile essentielle contenant du gamma-terpinène et du carvacrol. De manière préférée entre toutes, cette composition comprend des huiles essentielles d'origan et de cannelle ou d'origan et de clou de girofle. De plus, le procédé est, de préférence, administré à un animal, en particulier un animal de compagnie tel qu'un chien et/ou un chat, qui souffre d'une infection parasitaire et a besoin d'une amélioration des symptômes de l'infection parasitaire ou besoin d'améliorer d'autres symptômes d'une infection parasitaire. Il peut s'agir, par exemple, d'un jeune animal de compagnie, tel qu'un chiot, ou un animal de compagnie plus âgé. Lorsque la composition est un aliment, l'aliment peut être administré dans un régime alimentaire conformément au régime alimentaire usuel de l'animal de compagnie. L'aliment peut constituer 100 % de l'alimentation de l'animal de compagnie ou une proportion plus faible, suivant le niveau de prévention ou de traitement requis. L'aliment permet que la composition soit administrée aisément, de manière à éviter la nécessité de supplémenter l'alimentation de l'animal de compagnie. De plus, l'aliment peut être administré par le propriétaire de l'animal de manière à éviter une supervision constante par un vétérinaire. L'aliment peut être disponible dans un magasin quelconque vendant des produits pour animal de compagnie ou peut être disponible auprès d'un vétérinaire, ou d'un éleveur. Dans le présent contexte, le terme « administration » comprend en outre l'alimentation ou un autre procédé d'administration orale. D'autres moyens d'administration peuvent comprendre des comprimés, des capsules, une injection, des suppositoires ou d'autres moyens adaptés quelconques. Les caractéristiques préférées du premier aspect de l'invention s'appliquent mutatis mutandis au deuxième aspect de l'invention. Dans un troisième aspect de l'invention, il est mis à disposition une composition comprenant deux ou plus des huiles essentielles suivantes des genres Cinnamomum, Eugenia, Satureja, Thymus, Trachyspermum, orignum, Eucalyptus ou Melaleuca. De préférence, la composition comprend une huile essentielle choisie parmi l'huile de sarriette, de thym, d'origan ou d'arbre à thé et une huile essentielle choisie parmi la cannelle, le clou de girofle ou l'eucalyptus. De préférence, la composition contient de l'origan. De manière préférée entre toutes, la composition comprend des huiles essentielles d'origan et de cannelle ou d'origan et de clou de girofle. Les caractéristiques préférées des premier et deuxième aspects de l'invention s'appliquent mutatis mutandis au troisième aspect de l'invention. Dans un quatrième aspect de l'invention, il est mis à disposition une composition comprenant une source de saponine et une ou plusieurs huiles essentielles contenant du gamma-terpinène et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol, ou une huile essentielle du genre Cinnamomum, Eugenia ou Eucalyptus. De préférence, la composition peut comprendre une ou plusieurs huiles essentielles contenant du gamma-terpinène et une ou plusieurs huiles essentielles de cannelle, de clou de girofle ou d'eucalyptus. De préférence, la composition contient de l'origan en tant qu'huile essentielle contenant du gamma-terpinène. De manière préférée entre toutes, cette composition comprend des huiles essentielles d'origan et de cannelle ou d'origan et de clou de girofle. Les caractéristiques préférées des premier, deuxième et troisième aspects de l'invention, s'appliquent mutatis mutandis au quatrième aspect de l'invention. La présente description comprend un procédé pour préparer la composition de l'invention. La composition peut comprendre des véhicules adaptés qui sont connus dans l'art, par exemple, le dioxyde de silice, la maltodextrine, la gomme arabique ou des minéraux d'aluminosilicate. La composition peut être incorporée dans une matrice d'amidon gélatinisé. La présente description comprend un procédé pour préparer l'aliment de l'invention. L'aliment peut être fabriqué selon un procédé quelconque connu dans l'art, par exemple comme décrit dans Waltham Book of Dog and Cat Nutrition, éd. ATB Edney, chapitre de A. Rainbird, intitulé « A Balanced Diet » aux pages 57 à 74, Pergamon Press Oxford. Par exemple, un procédé pour la fabrication d'un aliment tel que défini présentement comprend (i) le mélange d'ingrédients conjointement avec la composition qui comprend une ou plusieurs huiles essentielles contenant du gamma-terpinène, une huile essentielle de cannelle, de clou de girofle, d'eucalyptus, ou une source de saponine et (ii) la formation d'un aliment, en particulier un aliment pour animaux de compagnie. Un chauffage/cuisson peut être appliqué à l'un quelconque ou plusieurs des ingrédients avant, pendant ou après le mélange. Le mélange peut se présenter sous une forme adaptée pour la composition ou l'administration. La composition peut être ajoutée au mélange sous la forme d'une pulvérisation, d'un revêtement, ou être incorporée dans une matrice d'amidon gélatinisé. Les procédés d'inclusion de la composition sont connus dans l'art. L'importance de la présente invention concerne les propriétés bénéfiques d'une ou plusieurs des huiles essentielles et/ou de la source de saponine. En particulier, un effet qui est supérieur à l'effet cumulé peut être observé. La combinaison des huiles essentielles et/ou de la source de saponine dans la composition de la présente invention peut produire un effet synergique en termes de l'une ou plusieurs des actions suivantes : réduction d'une infection et/ou prolifération parasitaire, prévention d'une infection et/ou prolifération parasitaire, diminution des risques de zoonose et traitement d'une infection parasitaire, en particulier la coccidiose. Un bénéfice supplémentaire est observé lorsqu'une huile essentielle contenant du gamma-terpinène et une huile essentielle de cannelle, de clou de girofle ou d'eucalyptus sont combinées dans la composition. En particulier, lorsque l'huile essentielle contenant du gamma-terpinène est une huile de sarriette, de thym, d'origan ou d'arbre à thé et la deuxième huile essentielle est de cannelle, de clou de girofle ou d'eucalyptus. De préférence, la composition contient de l'origan. De manière préférée entre toutes, la composition comprend les huiles essentielles d'origan et de cannelle ou d'origan et de clou de girofle. L'invention est décrite ci-après en référence aux exemples et figures suivants, qui sont présentés à titre d'illustration uniquement et ne doivent pas être considérés comme limitant l'invention. La figure 1 représente les 7 solutions d'huiles essentielles et source de saponine utilisées. Les solutions sont désignées par les lettres A à H. La figure 2A représente un schéma du protocole de prolifération appliqué. La figure 2B représente la microscopie de fluorescence de cellules HFF infectées par différents inocula parasitaires de Toxoplasma gonclii. La figure 3 représente les résultats d'un test d'inhibition de la prolifération du parasite Neospora caninum en présence de différentes huiles essentielles à différentes concentrations. Le résumé des résultats et les CI50 sont présentés dans le tableau 1. La figure 4 représente les résultats comparatifs de CI50 de 7 huiles essentielles (origan (E) testé à 50 ppm et 100 ppm) et de viabilité cellulaire. La figure 5 représente les résultats d'un test d'inhibition de prolifération de Toxoplasma gondllavec un cocktail d'huiles essentielles EB (origan et clou de girofle). La figure 6 représente différentes combinaisons d'huiles essentielles testées. Exemples L'étude vise à déterminer une activité antiparasitaire de sept huiles essentielles sur le micro-organisme intracellulaire Neospora caninum, mais également de combinaisons de ces huiles sur Toxoplasma gondii. Les travaux sont axés sur la capacité de prolifération du parasite en présence de ces solutions contenant les huiles essentielles et l'invasion après prétraitement. Sept solutions d'huiles essentielles et une solution avec une source de saponine ont été testées (voir figure 1 : A à H). Afin de solubiliser les huiles essentielles, les huiles ont été diluées dans du diméthylsulfoxyde (DMSO) et ensuite étalées dans le milieu de culture de cellules (DMEM) supplémenté avec 10 % de sérum foetal bovin (D10). Le DMSO a également été utilisé à une concentration finale ne dépassant pas 0,1 %. Des cultures séparées des deux parasites, Toxoplasma gonagi et Neospora caninum, ont été préparées in vitro dans des cellules humaines de type HFF (Human Foreskin Fibroblasts : fibroblastes de prépuce humain), cultivées à 37 °C sous 5 % de CO2 dans un milieu D10. Les deux cultures étaient similaires, l'inoculum utilisé pour les différents essais était le même, 105 parasites par puits. Il a été observé que la culture de Neospora caninum est plus lente que celle de Toxoplasma gondii: Exemple 1 : test de prolifération du parasite Neospora caninum en présence d'huiles essentielles La prolifération du parasite dans les cellules a été mesurée par comptage de la radioactivité spécifique de l'uracile tritié incorporé et comparée au témoin sans huile essentielle (100 % de prolifération). L'essai a été effectué dans des plaques à 24 puits et l'essai total a duré environ 24 heures. Le témoin positif a été obtenu en utilisant de la pyriméthamine (CI50 : 0,1 pg/ml). La figure 3 représente la CI50 de chaque solution d'huile essentielle testée à différentes concentrations en présence de Neospora caninum. Le tableau 1 (ci-dessous) résume les résultats de l'exemple 1 sur la figure 3. Les valeurs représentent l'inhibition de la prolifération. Les résultats en gras représentent la CI50 de chaque huile essentielle testée. Tableau 1 Huile 12,5 ppm 25 ppm 50 ppm 100 ppm 200 ppm 400 ppm 800 ppm essentielle A 43,7 % 84,3 % 95,3 % 94,5 % (cannelle) B 21,0 % 58,7 % 78,0 % (clou de girofle) C 4,6 % -3,1 % 42,2 % 85,2 % (sarriette) D 6,0 % 43,8 % 41,1 (thym) E 26,7 % 53,9 % 75,9 (origan) F -1,6 % 23,9 % 15,0 % 20,7 % 69,5 0/0 (eucalyptus) G 7,9 % 18,7 % 11,6 % 24,5 0/0 (arbre à thé) Exemple 2 L'inhibition de la prolifération a été mesurée par incorporation d'uracile tritié dans Toxoplasma gond!! ( ) et Neospora caninum (r A ) et la viabilité de cellules HFF a été évaluée en utilisant le test au MTT (1111111 ). Les résultats sont représentés sur la figure 4. La figure 4 montre que chaque huile essentielle, à la concentration donnée, a des propriétés d'inhibition de la prolifération des parasites tout en maintenant une viabilité de cellules HFF proche de 80 %. Il peut être observé que pour des huiles ayant une activité pesticide, les concentrations 10 CI50 obtenues à partir de Toxoplasma gon& sont les mêmes que pour Neospora caninum. Cependant, les huiles F et G ont peu ou pas d'action sur l'inhibition de la prolifération de Neospora caninum. Exemple 3 : test de prolifération de Toxoplasma gond!! en présence d'un ensemble de 15 combinaisons d'huiles essentielles L'ensemble de combinaisons d'huiles essentielles est : AB, AE, AD et BE. Pour chaque combinaison, une conception factorielle 3 x 3 a été définie. La CI50 théorique a été ajustée au taux de prolifération d'inhibition mesuré et a ensuite été utilisée en tant que base pour effectuer des dilutions et obtenir 9 rapports différents 20 des 2 huiles essentielles combinées dans un cocktail, comme représenté sur la figure 6. Pour chaque combinaison, 9 tests d'inhibition de la prolifération de Toxoplasma gond!! ont été effectués (toutes les données ne sont pas présentées). Comme précédemment, l'inhibition de la prolifération a été mesurée par incorporation d'uracile tritié. La figure 5 représente l'effet synergique du cocktail BE sur la prolifération de 25 Toxoplasma Gondi!. L'huile essentielle B seule à 100 ppm correspond à une CI58 (58 % d'inhibition de la prolifération). L'huile essentielle E seule à 75 ppm correspond à une CI88 (88 % d'inhibition de la prolifération). En supposant une relation indépendante entre les deux huiles sur l'inhibition de la prolifération, un cocktail d'huile essentielle B à CI58/2 = 30 CI29 avec l'huile essentielle E à CI88/4 = CI22 conduit à un effet additionnel attendu de CI22 + CI29 = CI51 (51 % d'inhibition de la prolifération). La mesure de l'inhibition de prolifération d'un tel cocktail (B à CI22 combiné avec E à CI29) a mis en évidence une inhibition de prolifération mesurable surprenante de 87 % (CI87). Cette différence hautement significative met clairement en évidence un effet synergique du cocktail BE sur la prolifération de Toxoplasma Gondii. Bilan des cocktails Le tableau 2 (ci-dessous) comprend tous les résultats sur l'inhibition de la prolifération 5 de Toxoplasma gon& en présence des 36 lots d'huiles essentielles. Tableau 2 CI 50/4 CI 50/4 CI 50/4 CI 50/2 CI 50/2 CI 50/2 CI 50 CI 50 CI 50 CI 50/4 CI 50/2 CI 50 CI 50/4 CI 50/2 CI 50 CI 50/4 CI 50/2 CI 50 AB 16,4 % 34,3 % 63,5 % 16,7 % 39,3 % 63,2 % 47,6 % 75,2 % 82,4 % AE 45,5 % 53,3 % 85,7 % 23,1 % 53,5 % 86,0 % 57,0 % 67,0 °/o ' . 87,2 % gelefe 81,5 % 73,8 °/o 85,2 % ,:-e'Wee BE 27,7 % 52,1 % 79,6 % AD 19,4 % 0,3 % 31,9 % 16,0 % 20,2 % 53,5 % 54,1 % 60,0 % 69,6 % À 50-90 % d'inhibition de prolifération > 90 % d'inhibition de prolifération Les valeurs représentent l'inhibition de la prolifération. Les zones grisées représentent 10 les combinaisons présentant une inhibition de la prolifération du parasite comprise entre 50 et 90 %. Les zones hachurées représentent celles permettant d'inhiber la prolifération de plus de 90 °h. Conclusion 15 Différents essais sur les deux parasites ont donné des résultats très similaires. La combinaison d'huiles essentielles a, dans certains cas, augmenté la capacité d'inhibition de la prolifération des composés. Cela suggère que les huiles essentielles peuvent agir de façon synergique. Cela est particulièrement vrai pour les combinaisons AE (données non présentées) et BE, l'effet mesuré du cocktail étant significativement plus élevé que 20 l'effet additionnel prévu des deux huiles essentielles prises seules. Il est également important de noter que tous les éléments testés n'ont pas d'effets cytotoxiques sur les cellules HFF (intégrité monocouche). REVENDICATIONS1. Composition pour utilisation en tant qu'antiparasitaire oral, la composition comprenant l'un ou plusieurs de : i) une huile essentielle qui contient du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol ; ii) une huile essentielle du genre Cinnamomum, Eugenia, ou Eucalyptus; iii) une source de saponine. 2. Composition pour utilisation selon la revendication 1, qui comprend une huile essentielle contenant du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol, et une huile essentielle du genre Cinnamomum, Eugenia, ou Eucalyptus. 3. Composition pour utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, dans laquelle l'huile essentielle qui contient du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol, comprend celles du genre Satureja, Thymus, Trachyspermum, Origanum ou Melaleuca. 4. Composition pour utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, qui comprend une ou plusieurs huiles essentielles du genre Cinnamomum, Eugenia, ou Eucalyptus. 5. Composition pour utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans laquelle la source de saponine contient un mélange de sapogénines stérokliennes. 6. Composition pour utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, pour utilisation chez un chat ou un chien. 7. Composition pour utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, qui est un liquide, un comprimé ou un aliment. 8. Composition pour utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, qui est incorporée dans une matrice d'amidon gélatinisé, ou est un produit humide. 9. Composition pour utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, dans laquelle le parasite est du phylum Apicomplexa, de préférence de la classe Conoidasida. 10. Composition pour utilisation selon la revendication 9, dans laquelle le parasite est Neospora caninum ou Toxoplasma gondii. 11. Composition comprenant deux ou plus des huiles essentielles du genre Cinnamomum, Eugenia, Satureja, Thymus, Trachyspermum, Orignum, Eucalyptus ou Melaleuca. 12. Composition comprenant une source de saponine et l'une ou plusieurs de : i) une huile essentielle qui contient du gamma-terpinène, et/ou du carvacrol, et/ou du thymol, et/ou du terpinénol, et/ou de l'eucalyptol et/ou de l'eugénol ; ii) une huile essentielle du genre Cinnamomum, Eugenia, ou Eucalyptus. 13. Procédé pour la préparation d'une composition selon l'une quelconque des revendications 11 ou 12 comprenant le mélange des ingrédients et éventuellement la 20 présentation du mélange sous une forme adaptée pour la composition ou l'administration. 14. Procédé selon la revendication 13, dans lequel la composition est ajoutée au mélange sous la forme d'une pulvérisation, d'un revêtement ou incorporé dans une 25 matrice d'amidon gélatinisé. 15. Composition selon l'une quelconque des revendications 11 ou 12 pour utilisation en tant qu'antiparasitaire.