Brevet FR3005576A1 — publié le 20141121

La présente invention concerne un procédé d'inactivation de protéines prions pathologiques dans un produit biologique ou un matériel susceptible d'être contaminé par une protéine prion pathologique. Plus particulièrement, l'invention concerne un procédé d'inactivation biologique, utilisant une méthionine sulfoxyde réductase (MSR). Arrière-plan technologique Les encéphalopathies spongiformes transmissibles (EST), également appelées maladies à prions, sont des maladies dégénératives du système nerveux central (SNC) qui touchent aussi bien l'homme (par exemple la maladie de Creutzfeldt-Jakob (MCJ) et le kuru) que l'animal (notamment la tremblante du mouton et l'encéphalopathie spongiforme bovine). L'agent étiologique de ces maladies est classé dans la catégorie des "agents transmissibles non conventionnels" (ATNC). La protéine du prion sous sa forme pathologique, appelée PrPsc, représente le marqueur des maladies à prions. Cette protéine est actuellement considérée comme l'élément porteur d'infectiosité retrouvé dans tous les cas d'infection par un ATNC, en particulier dans le cerveau. La PrPsc est capable de provoquer les symptômes des EST par inoculation intracérébrale chez un individu sain. En effet, l'agent responsable de la réplication ou propagation de la PrPsc serait la protéine prion pathologique elle-même car capable de se propager ou multiplier de façon exponentielle, en déformant les protéines prion saines en protéines prion pathologiques. La forme dite « pathologique » de la PrP, est donc la forme de la protéine dont la conformation est corrélée à l'apparition d'une EST chez l'animal humain ou non-humain infecté. La structure tridimensionnelle modifiée de la PrPsc par rapport à celle de la PrPc, lui confère des propriétés physico-chimiques atypiques, qui se traduisent par une plus grande résistance aux moyens de désinfection et de stérilisation habituels (chaleur, produits chimiques, enzymes, etc.). En outre, de nombreuses études visant à détecter la présence d'infectiosité sanguine dans les EST ont été menées ces dernières années (ref : Brown, P., Vox Sanguinis (2005) 89, 63-70). L'ensemble de ces travaux montre qu'une très faible infectiosité sanguine (10-30 Unités Infectieuses/m1) peut être mise en évidence expérimentalement dans certaines maladies à prions. L'utilisation dans l'industrie pharmaceutique de dérivés sanguins, tels que les protéines plasmatiques de la coagulation, connait un essor croissant depuis de nombreuses années. Et le principe de précaution associé à l'utilisation de tels produits implique qu'une procédure soit mise en place de manière systématique pour garantir au mieux l'élimination et/ou l'inactivation des protéines prions pathologiques éventuelles dans ces produits. Les procédés connus pour éliminer les protéines prions font le plus souvent appel à des moyens de rétention et/ou filtration, qui peuvent parfois conduire à une élimination concomitante et plus ou moins importante de protéines plasmatiques d'intérêts. Il existe donc un réel besoin d'un procédé permettant de décontaminer un produit biologique, et notamment un produit sanguin ou dérivé du sang, vis-à-vis des protéines prions pathologiques, qui n'appauvrisse pas ledit produit biologique. Résumé de l'invention Dans ce contexte, les inventeurs proposent d'utiliser une enzyme particulière, à savoir une méthionine sulfoxyde réductase (MSR), pour traiter un produit biologique et inactiver les protéines prions pathologiques potentiellement présentes. La MSR selon l'invention peut également être utilisée pour traiter un matériel, tel qu'un instrument chirurgical, une surface inerte ou autre. L'invention a donc pour objet un procédé d'inactivation de protéines prions pathologiques (PrPsc) dans un échantillon ou un matériel susceptible d'être contaminé par une protéine prion pathologique, dans lequel on met en contact l'échantillon ou le matériel susceptible d'être contaminé par une protéine prion pathologique avec au moins une méthionine sulfoxyde réductase (MSR). Dans un mode de réalisation particulier, la MSR est immobilisée, préférentiellement par liaison covalente, sur un support solide, plus préférentiellement, par réticulation simple. Selon l'invention, le procédé d'inactivation peut être utilisé pour traiter un échantillon biologique et notamment un produit sanguin ou dérivé du sang. Brève description des figures La Figure 1 est une représentation schématique de la réaction d'oxydation/réduction des méthionines. Description détaillée de l'invention Definitions Dans le contexte de l'invention, une « protéine prion pathologique » s'entend de la forme anormale de la protéine prion (PrP). La protéine prion PrP est généralement une 15 sialoglycoprotéine ancrée à la membrane plasmique par un phosphatidyl glycolipide (GPI), présente à l'état naturel dans les cellules et impliquée dans leur fonctionnement normal. La forme normale de la protéine, c'est-à-dire non pathologique, est généralement appelée PrPc. La forme « pathologique » de la PrP, appelée PrPsc, consiste en une isoforme de la protéine non pathologique (incluant ses formes intermédiaires ou nucléiques). 20 Par « inactivation » on entend que la protéine prion perd sa capacité à induire un changement de conformation des protéines prion native et/ou à induire une maladie neurodégénérative. L'inactivation n'est pas nécessairement associée à une dégradation de la protéine qui, elle, implique une dégradation de la structure peptidique. L'inactivation de la PrPsc peut 25 notamment consister en un retour à la forme native non pathologique de la protéine prion. Par « décontamination » d'un échantillon ou matériel, on entend que la protéine prion pathologique susceptible d'être présente dans/sur ledit échantillon ou matériel est inactivée. Préférentiellement, on considère qu'un échantillon ou matériel est décontaminé lorsqu'il n'est 30 plus possible de mesurer d'infectiosité associée à la protéine prion PrPsc dans ledit échantillon ou matériel. Par « échantillon», on désigne toute source de matière susceptible d'être contaminée par et de contenir une protéine prion pathologique. Une telle source de matière peut par exemple être 10 un échantillon biologique, un produit cosmétique ou pharmaceutique, un produit issu du génie génétique, un produit alimentaire, une boisson, cette liste n'étant pas limitative. De préférence il s'agit d'un échantillon biologique, par exemple un liquide biologique ou un tissu ou extrait de tissu, tel qu'un tissu de colonne vertébrale et notamment de la moelle épinière. L'échantillon peut également être une composition dérivée d'une source humaine ou animale, comme les hormones de croissance ou les extraits cellulaires, comme les extraits pituitaires. Une telle composition peut en effet être contaminée par une protéine prion pathologique. Dans le cas d'un liquide biologique, celui-ci peut être du sang ou un dérivé, du plasma sanguin, de la lymphe, de l'urine, du lait, etc. cette liste n'étant pas limitative. De manière préférentielle, l'échantillon est un produit sanguin ou un dérivé, par exemple un dérivé plasmatique ou un concentré de protéine plasmatique. Methionine sulfoxyde réductase Les MSR sont des protéines enzymatiques présentes chez un grand nombre d'organismes tant eucaryotes que procaryotes, impliquées dans la régénération des protéines portant des résidus méthionine sulfoxyde (MetSO). Plus précisément, les MSR permettent de catalyser la réaction de réduction des MetSO en méthionines. L'oxydation des méthionines au sein d'une protéine, notamment sous l'action de dérivés réactifs de l'oxygène (ROS), s'accompagne souvent d'une perte de fonctionnalité de ladite protéine. Il a été démontré que la protéine prion, dans sa forme pathologique, contient une quantité importante de MetSO (Canello et al. Biochemistry 2008, 47, 8866-8873). L'invention propose d'utiliser une MSR dans le traitement d'un échantillon ou matériel susceptible d'être contaminé par une protéine prion pathologique, afin d'inactiver ladite protéine prion pathologique. Selon l'invention, la MSR utilisée peut être d'origine naturelle, et notamment d'origine végétale, bactérienne ou animale, ou synthétique ou semi-synthétique. Chez l'homme notamment, il existe deux formes de MSR, la MSRA et la MSRB, impliquées respectivement dans la réduction de la Méthionine-S-Sulfoxyde et de la Méthionine-RSulfoxyde (cf Figure 1). Plus précisément, un même gène msra (situé sur le chromosome 8p23.1) code quatre isoformes MSRA1 (RefSeq ARN NM 012331), MSRA2 (RefSeq ARN NM 001135670), MSRA3 (RefSeq ARN NM 001135671) et MSRA4 (RefSeq ARN NM 001199729), présentes dans les mitochondries, le cytosol et/ou le noyau des cellules. De même, il existe trois gènes msrb chez l'homme, msrb 1 (sur le chromosome 16p13.3), msrb2 (sur le chromosome 10p12) et msrb3 (sur le chromosome 12q14.3), codant respectivement les isoformes MSRB1 (Ref. Seq ARN NM 016332), MSRB2 (Ref. Seq ARN NM 012228), MSRB3.A (Ref. Seq ARN NM 198080) et MSRB3.B (codée par trois variants différents : Ref. Seq ARN NM 001031679, Ref. Seq ARN NM 001193460, RefSeq ARN NM 001193461), présentes dans les mitochondries, le réticulum endoplasmique, le cytosol et/ou le noyau des cellules. La MSR peut être une MSR sauvage ou native, ou une MSR recombinante, dérivée ou mutante ayant une séquence substantiellement homologue à une MSR native. L'expression « séquence substantiellement homologue » comprend toute séquence soumise à une ou plusieurs substitutions, additions et/ou délétions, de préférence conservatives. Les expressions « substitutions, additions et/ou délétions conservatives » expriment tout remplacement, ajout ou suppression d'un résidu acide aminé par un autre, sans altération majeure de la conformation générale et/ou de l'activité biologique (de réduction des MetSO en methionines) de la MSR. La substitution conservative inclut, sans s'y limiter, le remplacement par un acide aminé ayant des propriétés similaires (comme par exemple la forme, la polarité, le potentiel de liaison hydrogène, l'acidité, la basicité, l'hydrophobicité et autres). Les acides aminés ayant des propriétés similaires sont bien connus dans l'art. La MSR utilisée peut être un variant d'une MSR sauvage présentant une activité biologique équivalente ou supérieure par rapport à l'activité de la forme sauvage, ces variants incluant notamment des variants issus de variations alléliques naturelles et/ou des isoformes de MSR trouvées naturellement chez les individus d'une même espèce, et toute forme ou degré de glycosylation ou autre modification post-traductionnelle. Sont aussi compris les homologues ou dérivés de MSR qui présentent la même ou une activité biologique supérieure par rapport à l'activité d'une forme sauvage et/ou qui présentent une identité de séquence d'au moins 80%, de préférence d'au moins 85%, de préférence encore d'au moins 90%. Dans un mode de réalisation préféré, la MSR utilisée est une MSR humaine. Notamment, la MSR peut être l'une quelconque des MSRA ou MSRB humaines ci-dessus. Dans un autre exemple de réalisation, la MSR utilisée est une MSR bactérienne. Il est également possible d'utiliser simultanément plusieurs MSR pouvant le cas échéant être d'origines différentes. La MSR selon l'invention peut être préparée par toutes les techniques classiques de purification, par synthèse peptidique et notamment par synthèse chimique, par génie génétique, ou autre. Dans le cas où la MSR est une MSR recombinante, elle peut être obtenue par un procédé classique de production de protéines recombinantes, comprenant le transfert d'un vecteur dans une cellule hôte, dans des conditions permettant l'expression de la protéine recombinante codée par le vecteur, et la récupération de la protéine ainsi produite. Le vecteur peut être préparé selon les méthodes couramment utilisées par l'homme du métier, et les clones en résultant peuvent être introduits dans la cellule hôte, par des méthodes standard, telles que la lipofection, l'électroporation ou le choc thermique. La cellule hôte peut notamment être une bactérie, levure, un champignon ou une cellule de mammifère. Il est également possible de produire la MSR dans un organisme transgénique par exemple dans une plante, ou dans le lait d'un mammifère transgénique non humain tel qu'une chèvre, un lapin ou un porc. La sécrétion de MSR par les glandes mammaires, permettant sa sécrétion dans le lait du mammifère transgénique, implique le contrôle de l'expression de la MSR de manière tissu-dépendante. De telles méthodes de contrôle sont bien connues de l'homme du métier. Le contrôle de l'expression est effectué grâce à des séquences permettant l'expression de la protéine vers un tissu particulier de l'animal. Il s'agit notamment des séquences promotrices WAP, bêta-caséine, bêta-lactoglobuline et des séquences peptides signal. Le procédé d'extraction de protéines d'intérêt à partir du lait d'animaux transgéniques est décrit dans le brevet EP 0 264 166. Toute isoforme de MSR existant en raison notamment d'un épissage alternatif du gène peut être utilisée. De même, il est possible d'utiliser en tant que MSR une partie biologiquement active d'une MSR native. Par « partie biologiquement active », on entend que la MSR utilisée présente une activité biologique (de réduction d'une MetSO en methionine) au moins équivalente à l'activité de la protéine native. Selon l'invention, on peut par exemple utiliser une MSRA d'origine humaine, par exemple comprenant une séquence telle que : la séquence SEQ ID N°2 codant la MSRA1, qui peut être synthétisée à partir de la séquence nucléotidique SEQ ID N°1 ; la séquence SEQ ID N°4 codant la MSRA2, qui peut être synthétisée à partir de la séquence nucléotidique SEQ ID N°3 la séquence SEQ ID N°6 codant la MSRA3, qui peut être synthétisée à partir de la séquence nucléotidique SEQ ID N°5 la séquence SEQ ID N°8 codant la MSRA4, qui peut être synthétisée à partir de la séquence nucléotidique SEQ ID N°7. Dans un autre exemple, on utilise une MSRB d'origine humaine, par exemple comprenant une séquence telle que la séquence SEQ ID N°10 codant la MSRB1, qui peut être synthétisée à partir de la séquence nucléotidique SEQ ID N°9 la séquence SEQ ID N°12 codant la MSRB2, qui peut être synthétisée à partir de la séquence nucléotidique SEQ ID N°11 la séquence SEQ ID N°14 codant la MSRB3A, qui peut être synthétisée à partir de la séquence nucléotidique SEQ ID N°13 la séquence SEQ ID N°16, SEQ ID N°18 ou SEQ ID N°20, correspondant à trois variants de MSRB3 pouvant être synthétisés à partir de la séquence nucléotidique SEQ ID N°15, SEQ ID N°17 ou SEQ ID N°19, respectivement. Dans un exemple de mise en oeuvre particulier, la MSR utilisée comprend au moins une partie biologiquement active d'une des isoformes de la MSRA humaine choisie parmi la séquence peptidique SEQ ID N°2, SEQ ID N°4, SEQ IDN°6 et SEQ ID N°8. Dans un autre exemple de mise en oeuvre particulier, la MSR utilisée comprend au moins une partie biologiquement active d'une des isoformes de la MSRB humaine choisie parmi la séquence peptidique SEQ ID N°10, SEQ ID N°12, SEQ IDN°14 , SEQ ID N°16, SEQ ID N°18 et SEQ ID N°20. Dans un exemple particulier, la MSR est une enzyme recombinante. 30 Dans un autre exemple, on utilise une combinaison d'au moins deux MSR synthétisées chacune à partir d'une des séquences nucléotidiques ci-dessus et/ou présentant chacune au moins une partie biologiquement active d'une des séquences peptidique ci-dessus. Traitement de l'échantillon ou du matériel Selon l'invention, l'échantillon ou matériel à traiter est mis en contact avec au moins une MSR pendant un temps suffisant pour permettre l'inactivation des protéines prions pathologiques potentiellement présentes. Préférentiellement, l'échantillon est mis en contact avec la MSR pendant un temps compris entre 10 et 120 minutes, et encore plus préférentiellement pendant un temps compris entre 15 et 60 minutes. Préférentiellement, la mise en contact est maintenue jusqu'à une diminution de la charge infectieuse en-dessous d'un titre mesurable par les techniques bien connues de l'homme du métier tel que le western blot ou les essais d'infectiosité. Avantageusement, la mise en contact de l'échantillon ou matériel à traiter avec la MSR se fait à pH alcalin, préférentiellement à un pH supérieur à 8 et encore plus préférentiellement supérieur à 9. Dans un exemple de réalisation, la MSR est sous forme d'une composition solide ou liquide, qui peut être directement ajoutée dans l'échantillon à traiter. Dans le cas d'un matériel, tel qu'un instrument chirurgical, ledit matériel peut être immergé dans une solution comprenant la MSR. Lorsque l'échantillon à traiter est un échantillon liquide, l'étape de mise en contact avec la MSR peut être réalisée sous agitation, par exemple agitation mécanique, afin d'optimiser l'inactivation des PrPsc. Préférentiellement, le procédé selon l'invention est conduit à une température inférieure à 100°C, plus préférentiellement inférieure à 80°C et encore plus préférentiellement à une température inférieure à 60°C. Dans certains cas, et notamment pour le traitement d'un échantillon non biologique, il est possible de prévoir une étape de traitement thermique, notamment à des températures supérieures à 60°C, préférentiellement supérieures à 80°C et encore plus préférentiellement supérieures à 100°C en amont et/ou en aval de l'étape d'inactivation des PrPsc par la MSR. Dans certains cas, l'utilisation de MSR peut être couplée à l'utilisation, simultanée ou non, d'un composé chimique susceptible de dénaturer les protéines, tel qu'un détergent et notamment le sodium dodecyl sulfate (SDS), ou un sel chaotropique et notamment l'urée et les sels de guanidine. Optionnellement, le procédé d'inactivation de l'invention est mis en oeuvre en présence de NADH ou NADPH. Dans ce mode de réalisation particulier, le procédé de l'invention comprend donc en outre l'ajout de NADH ou NADPH, de préférence à l'échantillon susceptible d'être contaminé par une protéine prion pathologique, tel que du plasma ou un produit plasmatique. Le NADH ou NADPH (Nicotinamide adénine dinucléotide hydrogéné ou Nicotinamide adénine dinucléotide phosphate hydrogéné) est un coenzyme présent de façon intracellulaire et est la source principale d'électrons utilisés dans les réactions biosynthétiques dans la cellule. Il est également utilisé dans les mécanismes de protection contre le stress oxydant et les espèces réactives de l'oxygène. Dans un mode de réalisation approprié pour une application industrielle, la MSR est immobilisée selon diverses techniques d'immobilisation connues de l'homme du métier. La MSR peut alors être mise en contact avec l'échantillon à traiter. Ces différentes techniques d'immobilisation empêchent la migration de la MSR dans le produit et permettent de s'affranchir de certaines étapes de purification. Par ces différentes techniques, la MSR peut également être réutilisée et permettre la rentabilité du procédé mise en oeuvre. Typiquement, la MSR est immobilisée par liaison covalente sur un support solide préalablement amidifié. Pour une amidation induite par le bromure de cyanogène, on utilise préférentiellement des supports de type polysaccharides, tels que la cellulose, l'agarose, et le sepharose, et des supports sous forme de gel de silice ou de verre poreux. Pour une amidation par activation avec une carbodiimide, on utilise préférentiellement des supports acides, notamment, des silices ou plastiques fonctionnalisés. Pour une amidation par activation avec l'éthylchloroformate, on utilise préférentiellement des supports diols, notamment des polysaccharides, un gel de silice ou du verre poreux. Particulièrement, la MSR est immobilisée par réticulation simple à l'aide d'un agent réticulant, notamment le glutaraldéhyde. Applications Le procédé selon l'invention peut être utilisé pour traiter toute sorte d'échantillon ou matériel, solide ou liquide, susceptible de contenir des protéines prions pathologiques. Notamment, le procédé selon l'invention peut être appliqué à n'importe quel liquide, produit alimentaire ou biologique, matériel, dispositif, instrument etc. Par exemple, les MSR selon l'invention peuvent être utilisées dans des procédés de stérilisation de matériel médical, tel que des instruments chirurgicaux. De même, les MSR peuvent être utilisées pour désinfecter des surfaces, et notamment des paillasses de laboratoire ou le sol de certaines fabriques/usines dans lesquelles des produits susceptibles d'être contaminés par des PrPsc sont traités. Les MSR peuvent également être utilisées lors de la préparation de compositions 20 pharmaceutiques ou cosmétiques, et notamment des compositions incorporant un produit dérivé du sang. De même, les MSR peuvent être utilisées dans des procédés de préparation et/ou conditionnement de produits alimentaires, et notamment de produits alimentaires incorporant 25 des produits carnés ou des produits issus d'animaux, tels que le lait. Validation du procédé d'inactivation par titrage de l'infectiosité L'efficacité de l'inactivation des protéines prions pathologiques dans un échantillon ou 30 matériel par le procédé selon l'invention peut être vérifiée par titrage de l'infectiosité, dont le marqueur est justement ladite protéine de conformation pathologique. Dans le cas d'un échantillon, notamment biologique, il est possible de procéder à plusieurs dilutions, tout particulièrement avec des dilutions sériées ou successives dudit échantillon avant titrage. Ces dilutions permettent d'affiner la quantification de l'infectiosité. Par exemple, l'échantillon traité est dilué dans du tampon de charge selon une progression géométrique, également appelée « pas de dilution ». Le pas de dilution est de préférence de 3. Chaque point de dilution est alors soumis à un test de détection des protéines prions pathologiques. A des fins de comparaison, on peut mener le même titrage en parallèle sur un échantillon non traité. Le titrage peut être effectué au moyen de toute méthode de titrage connue de l'homme du métier. En particulier il peut être effectué sur le modèle de la méthode appelée « TCIA » décrite dans les documents W02005022148 et W02006117483 (notamment les exemples de référence A et B), ou de la méthode combinant « TCIA » et « PMCA » décrite dans la demande W02009/125139. Dans un mode de réalisation de l'invention, la méthode de calcul du titre est la méthode de Spearman - Karber (Schmidt N.J., Emmous R.W., Diagnostic Procedures for viral, ricketsial and chlaveydial Infection, 1989, hème Edition). Cette méthode suppose la dilution de l'échantillon à tester selon une progression géométrique, c'est-à-dire de raison constante entre les dilutions successives, et un ensemencement d'un volume constant (en général 0,150 ml) de chaque dilution dans cinq puits au moins. Le facteur de dilution le plus couramment utilisé est le facteur décimal. Cette méthode est décrite en détails dans la demande de brevet W02010/026346. Le procédé de l'invention sera mieux compris à l'aide du complément de la description qui va suivre et qui ne limite pas la portée de l'invention. EXEMPLE : Test d'inactivation du prion pathogène Différentes concentrations de MSR sont mises en incubation dans un échantillon de broyat de cerveau contenant un mélange de PrPc/PrPsc et l'impact de la MSR est mesuré par le dosage semi-quantitatif de résistance à la protéinase K analysé en western blot. La MSR est la MSR A spécifique des stéréoisomères S de la méthionine-S-sulfoxide. Plus particulièrement, une quantité de NADH ou NADPH jouant le rôle de coenzyme peut être ajoutée dans le milieu d'incubation. Matériel Le broyat de cerveaux contient des formes infectieuses de prion et la MSR A utilisée est sous forme de cryotubes préparés à partir de 2*100 pg de MSR A (Abcam) purifiée à 95 % à 1 mg/m1 avec une activité spécifique de 36U/mg, une unité conduisant à l'oxydation d' 1 iamole de NADPH à 30°C à pH 7.4, soit 2*3.6 UI. Les tubes sont aliquotes par 0.5 UI et sont donc au total de 14. Test à la protéinase K On utilise le test à la protéinase K suivi d'une révélation en western blot pour détecter la PrPsc. En effet, la PrPsc est davantage résistante aux traitements à base de protéase. Ainsi, la digestion par la protéinase est une étape préalable au Western Blot et digère principalement la PrPc. L'étape de détection ultérieure ne détecte donc plus la forme non pathologique de la protéine car celle-ci a été digérée par la protéase. Méthode i) On dilue l'échantillon de broyat de cerveaux aux deux concentrations les plus basses analysables pour le test de sensibilité à la protéinase K dans un tampon de phosphate de sodium (disodique) 50 mM, pH = 7.5, 50 mM NaC1 (tampon de dilution) ; ii) On ajoute 0.5 UI ou 1 UI (1 cryotube ou 2 cryotubes) en rinçant le cryotube avec 50 pl de tampon de dilution dans 1 ml de chaque concentration soit 2 concentrations d'enzyme par concentration de prions. Chaque échantillon est réalisé indépendamment et en duplicat (8 échantillons au total). Des témoins 1 ml sans enzyme aux mêmes dilutions avec un ajout de 60 pl de tampon de dilution sont également réalisés (2 échantillons) ; iii) On incube les 10 tubes 1 h à 37°C ; et iv) On réalise le test de sensibilité à la protéinase K sur chacun des échantillons. 25 30 REVENDICATIONS1- Procédé d'inactivation de protéines prions pathologiques (PrPsc) dans un échantillon ou un matériel susceptible d'être contaminé par une protéine prion pathologique, dans lequel on met en contact l'échantillon ou le matériel susceptible d'être contaminé par une protéine prion pathologique avec au moins une méthionine sulfoxyde réductase (MSR). 2- Procédé d'inactivation selon la revendication 1, dans lequel la méthionine sulfoxyde réductase. est une MSR humaine. 3- Procédé d'inactivation selon la revendication 1 ou 2, dans lequel la méthionine sulfoxyde réductase est une méthionine sulfoxyde réductase A (MSRA). 4- Procédé d'inactivation selon l'une des revendications 1 à 2, dans lequel la méthionine 15 sulfoxyde réductase est une méthionine sulfoxyde réductase B (MSRB). 5- Procédé d'inactivation selon l'une des revendications 1 à 4, dans lequel la méthionine sulfoxyde réductase est d'origine naturelle. 20 6- Procédé d'inactivation selon l'une des revendications 1 à 4, dans lequel la méthionine sulfoxyde réductase est d'origine synthétique. 7- Procédé d'inactivation selon l'une des revendications 1 à 4, dans lequel la méthionine sulfoxyde réductase a été produite par recombinaison génétique. 25 8- Procédé d'inactivation selon l'une des revendications 1 à 7, dans lequel l'échantillon susceptible d'être contaminé par une protéine prion pathologique est un produit biologique et notamment un produit sanguin, tel que du plasma ou un produit plasmatique. 30 9- Procédé d'inactivation selon l'une des revendications 1 à 8, dans lequel l'étape d'inactivation des protéines prions pathologiques par la MSR est conduite à une température inférieure à 60°C. 10- Procédé d'inactivation selon l'une des revendications 1 à 9, comprenant en outre une étape de traitement thermique de l'échantillon ou matériel susceptible d'être contaminé par une protéine prion pathologique, à une température supérieure à 60°C, avant ou après l'étape d'inactivation des protéines prions pathologiques par la MSR . 11- Procédé d'inactivation selon l'une des revendications 1 à 10, comprenant l'ajout de NADH ou NADPH à l'échantillon ou matériel susceptible d'être contaminé par une protéine prion pathologique. 10 12- Procédé d'inactivation selon l'une des revendications 1 à 11, dans lequel la MSR est immobilisée, préférentiellement par liaison covalente, sur un support solide, plus préférentiellement, par réticulation simple.