Brevet FR2999176A1 — publié le 20140613

311-texte dépôt 2999176 1 PROCEDE DE SEPARATION D'ISO-ALCANES ET DE CYCLOALCANES A PARTIR D'UNE HUILE Domaine de l'invention La présente invention concerne un procédé de traitement d'un mélange de composés organiques, en particulier d'une huile, afin d'en récupérer différents constituants. Ce procédé a notamment pour objectif de permettre la séparation d'une fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes à partir d'un échantillon d'un mélange de composés organiques, ce procédé comprenant une étape de séparation par chromatographie liquide. Lorsqu'il est appliqué à un mélange organique de type huile minérale, le procédé de l'invention permet d'isoler des mélanges de composés biomarqueurs caractéristiques de l'origine de ces huiles, tels que notamment des diamandoïdes. La présente invention concerne par ailleurs un kit de séparation par chromatographie liquide ainsi qu'un dispositif de séparation par chromatographie liquide et d'analyse d'un échantillon, notamment d'un échantillon d'un mélange de composés organiques. L'invention concerne enfin l'utilisation d'un tel kit ou d'un tel dispositif pour séparer une fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes à partir d'un échantillon comprenant un mélange de composés organiques. Arrière-plan technique Le pétrole est une huile minérale formée d'un mélange de composés organiques piégés dans des formations géologiques très diverses. Ainsi, chaque gisement pétrolier recèle une qualité particulière de pétrole, déterminée par la proportion relative des différents composés organiques le constituant parmi lesquels des biomarqueurs. Ces composés organiques sont essentiellement des hydrocarbures, parmi lesquels des composés saturés : les n-alcanes, les iso-alcanes et les cycloalcanes, des composés aromatiques, des résines ou encore des asphaltènes. Parmi les cycloalcanes, on peut citer les diamandoïdes, les terpanes tricycliques, les hopanes, les stéranes. Parmi les iso-alcanes, on peut mentionner le prystane, le phytane. Les diamandoïdes sont des composés organiques saturés polycycliques à 3 dimensions qui se présentent sous forme de cage et peuvent être substitués, ou non, par des groupements alkyles. Parmi ces diamandoïdes, on peut citer, à titre non limitatif, l'adamantane (composé en C101-116), le diamantane (C14H20) ou encore le 34311-texte dépôt 2999176 2 triamantane (C18H24) ainsi que leurs homologues comprenant au moins une ramification alkyle. Ces diamandoïdes sont donc des constituants naturels du pétrole, que l'on dénomme également "huile" dans la suite de la présente description. Les 5 diamandoïdes sont couramment rencontrés dans les huiles à des concentrations supérieures à 1 ppm. En raison de leurs propriétés physico-chimiques uniques (haute stabilité thermique, points de fusion et de pression de vapeur élevés), les diamandoïdes présentent depuis plusieurs années un intérêt grandissant dans un grand nombre de 10 domaines (industrie pharmaceutique, médecine, nanotechnologie, micro-électronique,...) dont le domaine pétrolier. En outre, du fait de leur grande stabilité dans les huiles, il est intéressant de conduire des analyses, tant qualitatives que quantitatives, sur ces diamandoïdes pour avoir une meilleure compréhension des systèmes pétroliers, en particulier des huiles 15 biodégradées et craquées. De telles analyses permettent notamment d'évaluer la maturité géologique d'un champ d'huile et/ou le niveau de maturité thermique d'huiles, de distinguer deux huiles et/ou de caractériser des mélanges d'huiles, d'évaluer le degré d'avancement de biodégradation des huiles, de déterminer les corrélations huile/huile ou roche-mère/huile. L'intérêt des biomarqueurs présents dans 20 les huiles, et des diamandoïdes en particulier, pour réaliser ces analyses, explique la multiplication des études réalisées visant à séparer et/ou concentrer et/ou identifier les iso-alcanes et les cycloalcanes en général, et les diamandoïdes, en particulier. De telles analyses qualitatives et/ou quantitatives sont en général conduites par chromatographie gazeuse (GC) ou par chromatographie gazeuse couplée à de la 25 spectrométrie de masse (GC/MS). Les analyses isotopiques sont, quant-à-elles, réalisées par chromatographie gazeuse couplée à la spectrométrie de masse de rapport isotopique (GC/irMS). Toutefois, au vu de la grande variété des composés formant l'huile et de la quantité très faible de ces composés d'intérêt au sein d'une huile, il s'avère nécessaire 30 de préparer l'échantillon d'huile avant d'effectuer son analyse chromatographique (par GC, GC/MS ou GC/irMS) afin de purifier, d'isoler et/ou de concentrer les composés particuliers que l'on souhaite étudier. Ainsi, dans la littérature, sont décrits des procédés de séparation de fractions d'iso-alcanes et de cycloalcanes qui comprennent plusieurs étapes. 35 On peut notamment se reporter à la publication scientifique de L. Huang et al. ("A novel method for isolation of diamondoids from crude oils for compound-specific 34311-texte dépôt 2999176 3 isotope analysis" - Organic Geochemistry - 42 (2011) p.566-571) qui décrit un procédé en trois étapes: - une première étape de séparation par chromatographie liquide au travers d'une colonne comprenant un gel de silice activée pour recueillir une fraction 5 saturée d'hydrocarbures comprenant les n-alcanes et les hydrocarbures cycliques et branchés - une étape de concentration sous azote de cette fraction saturée d'hydrocarbures, - une deuxième étape de séparation de cette fraction saturée d'hydrocarbures 10 concentrée par chromatographie liquide au travers d'une colonne comprenant un tamis moléculaire (zéolithe de type silicalite ZSM-5) pour recueillir la fraction d'hydrocarbures cycliques et branchés. On peut également se reporter à la publication scientifique de M. Audino et al. ("Macrocyclic alkanes in crude oils and sediment extracts: enrichment using 15 molecular sieves" - Organic Geochemistry - 35 (2004) p.661-663) qui décrit un procédé comprenant au moins deux étapes de séparation chromatographique successives sur des colonnes comprenant chacune un tamis moléculaire déterminé, étant noté qu'une étape intermédiaire de filtration suivie d'une étape intermédiaire d'évaporation est nécessaire entre chaque étape de séparation chromatographique. 20 On observe que les procédés qui viennent d'être décrits comportent au moins deux étapes de séparation par chromatographie liquide pour aboutir à l'obtention de la fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes recherchée. En outre, les procédés décrits dans ces publications comprennent également au moins une étape intermédiaire d'évaporation des fractions intermédiaires collectées avant la deuxième étape de 25 séparation, cette étape intermédiaire d'évaporation étant éventuellement précédée d'une étape de filtration, comme dans la publication de M. Audino et al. Or, la multiplication des étapes augmente nécessairement les risques de perte et/ou de contamination des échantillons. Plus particulièrement, l'étape intermédiaire d'évaporation des fractions collectées peut entraîner la perte, plus ou moins partielle, 30 des composés les plus légers tels que les adamantanes. Le but de la présente invention est par conséquent de fournir un procédé de séparation par chromatographie liquide d'une fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes à partir d'un échantillon d'un mélange de composés organiques palliant au moins partiellement les inconvénients précités. 35 Plus particulièrement, l'invention se rapporte à un procédé de séparation qui permette d'isoler, à partir d'un échantillon d'un tel mélange de composés organiques, une fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes (contenant notamment les diamandoïdes) 34311-texte dépôt 2999176 4 et ce, en un minimum d'étapes, sans risque de contamination des échantillons et/ou de perte des composés, notamment des composés les plus légers, engendrées par des étapes intermédiaires d'évaporation et de filtration éventuelle des procédés de l'art antérieur. 5 Résumé de l'invention A cette fin, la présente invention propose un procédé de séparation d'une fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes à partir d'un échantillon d'un mélange de composés organiques comprenant une étape de séparation par chromatographie 10 liquide, cette étape de séparation comprenant : - l'introduction de l'échantillon dans une colonne (1) comprenant au moins deux phases stationnaires (11, 12), la première phase stationnaire (11) étant en un matériau capable d'adsorber les composés apolaires acycliques et la deuxième phase stationnaire (12) étant en un matériau capable d'adsorber les composés aromatiques et 15 les composés polaires, - l'élution par un éluant, et - la collecte de la fraction éluée. Suivant des modes de réalisation préférés, l'invention comprend une ou plusieurs des caractéristiques suivantes : 20 - le mélange de composés organiques provient d'un gisement de pétrole brut, d'huiles de schiste ou de coupes de pétrole. - le mélange de composés organiques comprend des biomarqueurs choisis parmi les adamantanes, les diamantanes et les triamantanes. - la première phase stationnaire (11) est en un matériau capable d'adsorber les n- 25 alcanes. - la première phase stationnaire (11) comprend une zéolithe de type aluminosilicate de sodium, avantageusement une zéolithe silicalite ZSM-5. Préférentiellement, la première phase stationnaire (11) est essentiellement constituée d'une zéolithe de type aluminosilicate de sodium, avantageusement une zéolithe 30 silicalite ZSM-5 - la deuxième phase stationnaire (12) est en un matériau capable d'adsorber les composés aromatiques et polaires. 34311-texte dépôt 2999176 5 - la deuxième phase stationnaire (12) comprend une silice imprégnée de nitrate d'argent. Préférentiellement, la deuxième phase stationnaire (12) est essentiellement constituée d'une silice imprégnée de nitrate d'argent - la colonne (1) comprend en outre une troisième phase stationnaire (13) en un 5 matériau capable d'adsorber les composés dont la polarité est supérieure à la polarité des composés adsorbés par le matériau de la deuxième phase stationnaire (12). - la troisième phase stationnaire (13) est en un matériau capable d'adsorber les composés de haut poids moléculaire et/ou hétéro-atomiques, notamment les hétéroalkyles comprenant au moins un atome choisi parmi : N, S et 0, et/ou les 10 résines et asphaltènes avec des masses moléculaires comprises entre 300 et 10 000 g/mol environ. - la troisième phase stationnaire (13) comprend une silice choisie parmi une silice vierge, une silice greffée par des groupes aminoalkyles, notamment aminopropyles et une silice greffée par des groupes cyanoalkyles et préférentiellement 15 par des groupes cyanopropyles. Préférentiellement, la troisième phase stationnaire (13) est essentiellement constituée d'une silice choisie parmi une silice vierge, une silice greffée par des groupes aminoalkyles, notamment aminopropyles et une silice greffée par des groupes cyanoalkyles et préférentiellement par des groupes cyanopropyles. 20 - en suivant le sens de l'élution, l'éventuelle troisième phase stationnaire (13) est disposée avant la deuxième phase stationnaire (12), la deuxième phase stationnaire (12) étant elle-même disposée avant la première phase stationnaire (11). - l'étape de séparation par chromatographie liquide est une étape de séparation par chromatographie basse pression, dans laquelle la phase liquide est éluée sous une 25 pression inférieure à 25 bars, avantageusement comprise entre 3 et 10 bars et, de préférence, comprise entre 7 et 9 bars. - l'éluant est choisi parmi l'isooctane, le n-octane et leurs mélanges, avantageusement l'iso-octane. - le procédé comprend en outre au moins une étape de préparation de 30 l'échantillon préalable à l'étape de séparation, cette étape de préparation étant choisie parmi une étape de mise en solution, une étape de filtration, une étape de chauffage ou la combinaison de deux ou plus de ces étapes. 34311-texte dépôt 2999176 6 La présente invention permet de surmonter les inconvénients des procédés de l'art antérieur. Elle fournit plus particulièrement un procédé de séparation d'une fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes à partir d'un échantillon d'un mélange de composés organiques, en particulier d'une huile minérale, à la fois simple et rapide, et 5 comprenant un nombre d'étapes limité par rapport aux procédés de l'art antérieur. Le procédé de séparation selon l'invention permet en particulier d'éviter les risques de contamination et/ou de perte de certains des composés présents dans l'échantillon d'huile, risques qui sont inhérents à la multiplication des étapes des procédés de l'art antérieur, et notamment aux étapes intermédiaires d'évaporation, éventuellement 10 précédées d'étapes intermédiaires de filtration. Ce résultat est atteint grâce à la mise en oeuvre d'une étape de séparation par chromatographie liquide réalisée au moyen d'une colonne chromatographique comprenant au moins deux phases stationnaires, la première phase stationnaire étant en un matériau capable d'adsorber les composés apolaires acycliques présents dans 15 l'échantillon et une deuxième phase stationnaire étant en un matériau capable d'adsorber les composés aromatiques et polaires présents dans l'échantillon d'huile. Eventuellement, une troisième phase stationnaire capable de retenir les composés très polaires peut être prévue. Ainsi, la fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes, qui comprend en particulier 20 les diamandoïdes, est recueillie en sortie de colonne tandis les autres composés présents dans l'échantillon, tels que les n-alcanes, les composés aromatiques, les résines et les asphaltènes, et éventuellement les hétéroalkyles, sont adsorbés sur les phases stationnaires de la colonne. Si le procédé de séparation selon l'invention permet d'optimiser, en une étape, la 25 sélectivité de la séparation chromatographique par rapport aux procédés connus de l'art antérieur, il permet également de recueillir, en sortie de colonne, une fraction plus importante d'iso-alcanes et de cycloalcanes par rapport à la teneur initiale de ces composés dans l'échantillon d'huile. On peut notamment recueillir plus de 85% des iso-alcanes et des cycloalcanes présents dans l'échantillon du mélange de composés 30 organiques, tandis que les méthodes de séparation actuelles permettent de recueillir au mieux 50% des iso-alcanes et des cycloalcanes présents dans un échantillon. L'invention s'applique plus particulièrement aux fractions huileuses issues du pétrole. Notamment, elle s'applique au pétrole brut et aux mélanges d'huiles issus du raffinage du pétrole brut. 35 Le procédé de séparation selon l'invention présente également l'avantage d'être facilement reproductible, de conférer des résultats fiables et ce, avec des temps d'analyse plus courts que ceux des procédés de l'art antérieur. 34311-texte dépôt 2999176 7 Le procédé de séparation selon l'invention peut être mis en oeuvre à l'échelle analytique (quelques pl d'échantillon) ou à l'échelle préparative (quelques centaines de pl d'échantillon, typiquement de l'ordre de 30014 Les conditions de séparation à l'échelle analytique par chromatographie liquide basse pression peuvent être 5 directement extrapolées par l'homme du métier à l'échelle préparative au moyen de calculs de routine. L'invention se rapporte également à un procédé de séparation de diamandoïdes à partir d'un échantillon d'un mélange de composés organiques. Ce procédé comprend la mise en oeuvre du procédé de séparation tel que décrit ci-dessus suivie d'une étape de 10 séparation des diamandoïdes à partir de la fraction éluée. L'invention se rapporte en outre à un kit de séparation par chromatographie liquide. Un tel kit comprend une colonne (1) munie d'une entrée (la) permettant l'introduction de produits et de l'éluant et d'une sortie (lb) permettant la récupération des fractions éluées, la colonne (1) comprenant au moins deux phases stationnaires, la 15 première phase stationnaire (11) étant en un matériau capable d'adsorber les composés apolaires acycliques et la deuxième phase stationnaire (12) étant en un matériau capable d'adsorber les composés aromatiques et polaires. Suivant des modes de réalisation préférés, le kit selon l'invention comprend une ou plusieurs des caractéristiques suivantes : 20 - la colonne (1) comprend en outre une troisième phase stationnaire (13) en un matériau capable d'adsorber les composés dont la polarité est supérieure à la polarité des composés adsorbés par le matériau de la deuxième phase stationnaire (12). - la première phase stationnaire (11) est en un matériau capable d'adsorber les n-alcanes et comprend, avantageusement, une zéolithe de type aluminosilicate de 25 sodium, avantageusement une zéolite silicalite ZSM-5. - la deuxième phase stationnaire (12) est en un matériau capable d'adsorber les composés aromatiques et polaires et comprend, avantageusement, une silice imprégnée de nitrate d'argent. - la troisième phase stationnaire (13) est en un matériau capable d'adsorber les 30 composés de haut poids moléculaire et/ou hétéro-atomiques. La troisième phase stationnaire comprend, avantageusement, une silice choisie parmi une silice vierge, une silice greffée par des groupes aminoalkyles en particulier aminopropyles et une 34311-texte dépôt 2999176 8 silice greffée par des groupes cyanoalkyles et préférentiellement par des groupes cyanopropyles. - en suivant le sens de l'élution, l'éventuelle troisième phase stationnaire (13) est disposée avant la deuxième phase stationnaire (12), la deuxième phase stationnaire 5 (12) étant elle-même disposée avant la première phase stationnaire (11). L'invention se rapporte également à un dispositif de séparation par chromatographie liquide et d'analyse d'un échantillon. Un tel dispositif comprend un kit tel que décrit ci-dessus, - des moyens d'introduction (5), dans la colonne (1), de l'échantillon, 10 - des moyens d'introduction (4), dans la colonne (1), d'au moins un éluant, - éventuellement des moyens de mise sous pression de la colonne (1), - éventuellement des moyens de détection et d'analyse (7) des fractions éluées, et - des moyens de collecte (8) des fractions éluées. 15 Selon un mode particulier de réalisation, le procédé de séparation selon l'invention est mis en oeuvre au moyen du kit et/ou au moyen du dispositif conformes à l'invention. L'invention se rapporte enfin à une utilisation du kit et/ou du dispositif pour séparer une fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes notamment de diamandoïdes à 20 partir d'un échantillon comprenant un mélange de composés organiques, ce mélange pouvant notamment provenir d'un gisement de pétrole brut, d'huiles de schiste ou de coupes de pétrole. Brève description des figures La figure 1 représente un schéma de principe d'un mode de réalisation du 25 dispositif de séparation par chromatographie liquide et d'analyse selon l'invention, ce dispositif comprenant le kit de séparation par chromatographie liquide selon l'invention. La figure 2 représente un schéma de détail d'un mode de réalisation du kit de séparation par chromatographie liquide selon l'invention. 30 Sur les figures 3A et 3B, sont reportés deux chromatogrammes issus de l'analyse par chromatographie gazeuse avec détecteur à ionisation de flamme (GC/FID), la figure 3A correspondant au chromatogramme d'un échantillon avant mise en oeuvre du procédé de séparation selon l'invention et la figure 3B correspondant au chromatogramme d'une fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes collectée après mise 35 en oeuvre du procédé de séparation selon l'invention. 34311-texte dépôt 2999176 9 Sur les figures 4A et 4B, sont reportés deux chromatogrammes issus de l'analyse par chromatographie gazeuse couplée à de la spectrométrie de masse en courant ionique total (GC/MS) avec image TIC en mode SIM (Single Ion Monitoring), la figure 4A correspond au chromatogramme de ce même échantillon avant mise en 5 oeuvre du procédé de séparation selon l'invention et la figure 4B correspond au chromatogramme d'une fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes collectée après mise en oeuvre du procédé de séparation selon l'invention. Sur les figures 5A, 5B, 6A et 6B, sont reportés quatre chromatogrammes issus de l'analyse par chromatographie gazeuse couplée à de la spectrométrie de masse en 10 courant ionique total (GC/MS) avec image TIC en mode SIM (Single Ion Monitoring), les figures 5A et 6A correspondent aux chromatogrammes du même échantillon avant mise en oeuvre du procédé de séparation selon l'invention et les figures 5B et 6B correspondent aux chromatogrammes d'une fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes collectée après mise en oeuvre du procédé de séparation selon 15 l'invention. Plus particulièrement, les figures 5A et 5B illustrent la fenêtre de temps comprise entre 20 et 40 minutes, qui correspond à la fenêtre de temps de rétention des adamantanes, tandis que les figures 6A et 6B illustrent la fenêtre de temps comprise entre 40 et 60 minutes, qui correspond à la fenêtre de temps de rétention des diamantanes. 20 La figure 7 est un histogramme représentatif du pourcentage d'élimination des n- alcanes dans la fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes après mise en oeuvre du procédé selon l'invention. La figure 8 est un histogramme représentatif du pourcentage de collecte des diamandoïdes dans la fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes recueillie après mise en 25 oeuvre du procédé selon l'invention. Afin de permettre l'identification des diamandoïdes repérés par leur abréviation couramment utilisée telle qu'elle apparaît sur les figures 5B, 6B et 8, on pourra se reporter au tableau 1 ci-dessous qui précise, pour chaque diamandoïde, sa formule brute, son numéro d'enregistrement CAS ainsi que son abréviation. 30 34311-texte dépôt 2999176 10 Composés Abréviations Formule brute N ° CAS Adamantane A CioHis 281-23-2 1-Me-adamantane 1-MA C111-118 768-91-2 1,3-diMe-adamantane 1,3-dMA C121-120 702-79-4 1,3,5-triMe-adamantane 1,3,5-tMA C131122 707-35-7 1,3,5,7-tetraMe-adamantane 1,3,5,7-tetraMA C141124 1687-36-1 2-Me-adamantane 2-MA C111-118 700-56-1 Cis-1,4-diMe-adamantane 1,4-dMA,cis C121-120 24145-89-9 Trans-1,4-diMe-adamantane 1,4-dMA,trans C121-120 24145-88-8 1,3,6-triMe-adamantane 1,3,6-tMA C131122 24139-37-5 1,2-diMe-adamantane 1,2dMA C121-120 16207-81-1 Cis-1,3,4-triMe-adamantane 1,3,4-tMA,cis C131122 24145-90-2 Trans-1,3,4-triMe-adamantane 1,3,4-tMA,trans C131122 24145-91-3 1,2,5,7-tetraMe-adamantane 1,2,5,7-tetraMA C141124 34946-70-7 1-Et-adamantane 1-EA C121-120 770-69-4 1-Et-3-Me-adamantane 1-E-3-MA C131122 1687-34-9 1-Et-3,5-diMe-adamantane 1-E-3,5-dMA C141124 1687-35-0 2-Et-adamantane 2-EA C121-120 14451-87-7 Diamantane D C141-120 2292-79-7 4-Me-diamantane 4-MD C151122 28375-86-2 4,9-diMe-diamantane 4,9-dMD C161124 70459-27-7 1-Me-diamantane 1-MD C151122 26460-76-4 1,4 et 2,4-diMe-diamantane 1,4 & 2,4-dMD C161124 74340-66-8 74340-67-9 4,8-diMe-diamantane 4,8-dMD C161124 70340-68-0 TriMe-diamantane tMD C171126 3-Me-diamantane 3-MD C151122 30545-28-9 3,4-diMe-diamantane 3,4-dMD C161124 70340-69-1 Triamantane T C18H24 13349-10-5 9-Me-triamantane 9-MT C191126 67615-85-4 DiMe-triamantane dMT C211-130 Tableau 1 34311-texte dépôt 2999176 11 Description détaillée L'invention concerne en premier lieu un procédé de séparation d'iso-alcanes et de cycloalcanes à partir d'un échantillon de composés organiques par un procédé 5 comprenant au moins une étape de chromatographie. Cette étape de chromatographie est mise en oeuvre au moyen d'une colonne comprenant une succession de deux ou trois phases stationnaires. La première phase stationnaire est en un matériau capable d'adsorber les composés apolaires acycliques, notamment les n-alcanes. La deuxième phase 10 stationnaire (12) est en un matériau capable d'adsorber les composés aromatiques et les composés polaires (résines, asphaltènes). La troisième phase stationnaire, qui est optionnelle, est en un matériau capable d'adsorber les composés dont la polarité est supérieure à la polarité des composés adsorbés par le matériau de la deuxième phase stationnaire, notamment les composés de masse moléculaire élevée tels que les résines 15 et asphaltènes avec des masses moléculaires comprises entre 300 et 10 000 g/mol environ et/ou les composés hétéroatomiques, notamment ceux à base de N, S et/ou O. L'homme du métier connait les matériaux susceptibles de satisfaire chacune de ces trois conditions et peut, par un simple test de routine, vérifier si un matériau convient ou non à cette utilisation. Il peut notamment tester, pour chaque famille de composés, 20 si elle est retenue ou non sur un support, dans les conditions d' élution qui sont décrites ci-dessous dans la partie expérimentale. Avantageusement, chacune des phases stationnaires est choisie pour retenir au moins 95 % en masse, par rapport à la masse totale de l'échantillon, des composés énumérés ci-dessus respectivement pour chaque phase stationnaire, mieux, au moins 98%, encore mieux, au moins 99%. 25 Avantageusement encore, les phases stationnaires sont choisies pour permettre l'élution au travers de la colonne de chromatographie d'au moins 70 % en masse, par rapport à la masse totale de l'échantillon, des composés iso-alcanes et cycloalcanes, et notamment les composés d'intérêt énumérés ci-dessus, mieux au moins 75%, encore mieux, au moins 80%, préférentiellement au moins 85%, avantageusement au moins 30 90%, et encore plus avantageusement au moins 95%. Le procédé de séparation de l'invention concerne plus particulièrement les mélanges de composés organiques provenant d'un gisement de pétrole brut, d'huiles de schiste ou de coupes de pétrole. Ce procédé concerne plus particulièrement les mélanges de composés organiques comprenant, outre un ou plusieurs composés tels 35 que décrits ci-dessus et que l'on cherche à éliminer, un ou plusieurs composés d'intérêt choisis notamment parmi : des cycloalcanes, et l'on peut citer les diamandoïdes, notamment les adamantanes, les diamantanes et les triamantanes, les 34311-texte dépôt 2999176 12 terpanes tricycliques, les hopanes, les stéranes ; des iso-alcanes, et l'on peut mentionner le prystane, le phytane. Les phases stationnaires sont désignées sous le nom de première, seconde et troisième phase stationnaire dans l'ensemble de la description en référence à leur 5 ordre d'introduction dans la colonne de chromatographie. Lorsque la colonne de chromatographie est éluée, l'éluant traverse tout d'abord la troisième phase stationnaire (si présente), puis la seconde, puis la première phase stationnaire. Le procédé de l'invention peut inclure, outre l'étape d' élution décrite ci-dessous de façon détaillée, d'autres étapes, notamment des étapes de préparation 10 d'échantillons, mais aussi des étapes de traitement des fractions éluées. Enfin, on peut prévoir que le procédé comprenne un traitement de la colonne après élution des composés d'intérêt (biomarqueurs iso-alcanes et cycloalcanes) de façon à recueillir certains composants de l'échantillon qui ont été retenus sur l'une des phases stationnaires. 15 Description de modes de réalisation de l'invention D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description qui suit d'un mode de réalisation préféré de l'invention, donné à titre d'exemple et en référence aux figures annexées. 20 Dispositif de séparation La figure 1 représente un schéma de principe d'un mode de réalisation du dispositif de séparation par chromatographie liquide et d'analyse d'une fraction d'isoalcanes et de cycloalcanes à partir d'un échantillon d'un mélange de composés 25 organiques selon l'invention. Ce dispositif de séparation peut avantageusement mettre en oeuvre le kit de séparation par chromatographie liquide selon l'invention tel que représenté sur la figure 2. Le dispositif de séparation comprend une colonne 1 qui est une colonne d'extraction sur phase solide, également dénommée colonne SPE. 30 Cette colonne 1 est reliée en amont par des moyens de connexion 2 à un système de pompe 3. Ce système de pompe 3 est lui-même relié en amont à des moyens d'introduction 4 de la phase mobile ou éluant. Les moyens d'introduction 5 de l'échantillon du mélange de composés organiques peuvent être connectés en amont de la colonne 1 au moyen d'un dispositif 35 d'injection situé en aval du système de pompe 3 (variante non représentée sur la figure 1). Mais, de manière avantageuse, et comme schématisé sur la figure 1, les moyens d'introduction 5 de l'échantillon sont également directement connectés au système de 34311-texte dépôt 2999176 13 pompe 3, ce qui présente l'avantage de limiter les risques de pollution et/ou de perte de composés présents dans l'échantillon du fait de l'absence de joint. La colonne 1 est reliée en aval, par des moyens de connections 6, à des moyens de détection et d'analyse 7 des composés formant la fraction éluée. Ces moyens de 5 détection et d'analyse 7, qui peuvent par exemple être constitués par un réfractomère différentiel, sont eux-mêmes connectés à des moyens de collecte 8 de la fraction éluée isolée à partir de l'échantillon. On peut, selon une variante, prévoir que le dispositif de séparation selon l'invention comporte des moyens de collecte 8, mais pas de moyens d'analyse et que 10 l'analyse des fractions éluées soit réalisée séparément. L'ensemble constitué par la colonne 1 et les moyens de connexion 2, 6 est connu sous la terminologie de module DASiTM (Dissolve Absorb Sample injection). Un tel module est couramment utilisé pour l'introduction, dans une colonne chromatographique, de composés présentant une forte viscosité ou une faible 15 solubilité. La mise en oeuvre d'un tel module permet un changement aisé de la colonne 1 après son utilisation. Selon l'invention, la colonne 1 comprend de manière générale au moins deux phases stationnaires. Avantageusement, le dispositif de séparation comporte des moyens 20 d'automatisation du procédé (non représentés), en particulier des moyens permettant le contrôle de l'introduction des échantillons dans les colonnes, et/ou la récupération des fractions éluées en sortie de colonne, et/ou le contrôle des moyens d'analyse, et/ou la récupération et le stockage des données analytiques. De tels moyens (ordinateurs et logiciels) sont bien connus de l'homme du métier. 25 Kit de séparation Dans l'illustration de la figure 2, qui représente une version avantageuse du kit de séparation par chromatographie liquide de l'invention, la colonne 1 est munie d'une entrée la et d'une sortie lb. La longueur de la colonne 1 est typiquement comprise 30 entre 5 et 15 cm, avantageusement entre 7 et 10 cm et, préférentiellement, entre 7 et 8 cm tandis que son diamètre intérieur est typiquement compris entre 1,5 et 3 cm, avantageusement entre 1,5 et 2 cm et, préférentiellement, entre 1,5 et 1,7 cm. La colonne 1 de la figure 2 comprend trois phases stationnaires 11, 12, 13. La première phase stationnaire 11 est en un matériau capable d'adsorber les 35 composés apolaires acycliques de l'échantillon et, plus particulièrement, les n-alcanes. Avantageusement, la première phase stationnaire 11 comprend une zéolithe choisie parmi les zéolithes de type aluminosilicate de sodium, en particulier celles appartenant 34311-texte dépôt 2999176 14 à la famille des pentasiles. De préférence, dans ces zéolithes, le rapport molaire Si sur Al vérifie : Si/Al>10. On peut citer par exemple la zéolithe de type ZSM-5 de formule chimique : NanAlnSi96,0192.16H20 (0 REVENDICATIONS1. Procédé de séparation d'une fraction d'iso-alcanes et de cycloalcanes à partir d'un échantillon d'un mélange de composés organiques comprenant une étape de séparation par chromatographie liquide, cette étape de séparation comprenant : - l'introduction de l'échantillon dans une colonne (1) comprenant au moins deux phases stationnaires (11, 12), la première phase stationnaire (11) étant en un matériau capable d'adsorber les composés apolaires acycliques et la deuxième phase stationnaire (12) étant en un matériau capable d'adsorber les composés aromatiques et les composés polaires, - l'élution par un éluant, et - la collecte de la fraction éluée. Procédé de séparation selon la revendication 1, dans lequel le mélange de composés organiques provient d'un gisement de pétrole brut, d'huiles de schiste ou de coupes de pétrole. Procédé de séparation selon la revendication 1 ou selon la revendication 2 dans lequel le mélange de composés organiques comprend des biomarqueurs choisis parmi les adamantanes, les diamantanes et les triamantanes. Procédé de séparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans lequel la première phase stationnaire (11) est en un matériau capable d'adsorber les n-alcanes. Procédé de séparation selon la revendication 4, dans lequel la première phase stationnaire (11) comprend une zéolithe de type aluminosilicate de sodium, avantageusement une zéolithe silicalite ZSM-5. Procédé de séparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans lequel la deuxième phase stationnaire (12) est en un matériau capable d'adsorber les composés aromatiques et polaires. Procédé de séparation selon la revendication 6, dans lequel la deuxième phase stationnaire (12) comprend une silice imprégnée de nitrate d'argent. Procédé de séparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, dans lequel la colonne (1) comprend en outre une troisième phase stationnaire (13) en un matériau capable d'adsorber les composés dont la polarité est supérieure à la 10 2. 15 3. 204. 5. 25 6. 7. 30 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. polarité des composés adsorbés par le matériau de la deuxième phase stationnaire (12). Procédé de séparation selon la revendication 8, dans lequel la troisième phase stationnaire (13) est en un matériau capable d'adsorber les composés de haut poids moléculaire et/ou hétéro-atomiques, notamment les hétéroalkyles comprenant au moins un atome choisi parmi : N, S et O. Procédé de séparation selon la revendication 8 ou la revendication 9, dans lequel la troisième phase stationnaire (13) comprend une silice choisie parmi une silice vierge, une silice greffée par des groupes aminoalkyles, notamment aminopropyles et une silice greffée par des groupes cyanoalkyles et préférentiellement par des groupes cyanopropyles. Procédé de séparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, dans lequel, en suivant le sens de l'élution, l'éventuelle troisième phase stationnaire (13) est disposée avant la deuxième phase stationnaire (12), la deuxième phase stationnaire (12) étant elle-même disposée avant la première phase stationnaire (11). Procédé de séparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, dans lequel l'étape de séparation par chromatographie liquide est une étape de séparation par chromatographie basse pression, dans laquelle la phase liquide est éluée sous une pression inférieure à 25 bars, avantageusement comprise entre 3 et 10 bars et, de préférence, comprise entre 7 et 9 bars. Procédé de séparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, dans lequel l'éluant est choisi parmi l'isooctane, le n-octane et leurs mélanges, avantageusement l'iso-octane. Procédé de séparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, comprenant en outre au moins une étape de préparation de l'échantillon préalable à l'étape de séparation, cette étape de préparation étant choisie parmi une étape de mise en solution, une étape de filtration, une étape de chauffage ou la combinaison de deux ou plus de ces étapes. Procédé de séparation de diamandoïdes à partir d'un échantillon d'un mélange de composés organiques comprenant la mise en oeuvre du procédé de séparation selon l'une quelconque des revendications 1 à 14 suivie d'une étape de séparation des diamandoïdes à partir de la fraction éluée.16. Kit de séparation par chromatographie liquide comprenant une colonne (1) munie d'une entrée (la) permettant l'introduction de produits et de l'éluant et d'une sortie (lb) permettant la récupération de l'éluat, la colonne (1) comprenant au moins deux phases stationnaires, la première phase stationnaire (11) étant en un matériau capable d'adsorber les composés apolaires acycliques et la deuxième phase stationnaire (12) étant en un matériau capable d'adsorber les composés aromatiques et polaires. Kit selon la revendication 16, dans lequel la colonne (1) comprend en outre une troisième phase stationnaire (13) en un matériau capable d'adsorber les composés dont la polarité est supérieure à la polarité des composés adsorbés par le matériau de la deuxième phase stationnaire (12). Kit selon la revendication 16 ou 17, dans lequel la première phase stationnaire (11) est en un matériau capable d'adsorber les n-alcanes et comprend, avantageusement, une zéolithe de type aluminosilicate de sodium, avantageusement une zéolite silicalite ZSM-5. Kit selon l'une quelconque des revendications 16 à 18, dans lequel la deuxième phase stationnaire (12) est en un matériau capable d'adsorber les composés aromatiques et polaires et comprend, avantageusement, une silice imprégnée de nitrate d'argent. Kit selon l'une quelconque des revendications 17 à 19, dans lequel la troisième phase stationnaire (13) est en un matériau capable d'adsorber les composés de haut poids moléculaire et/ou hétéro-atomiques, et comprend, avantageusement, une silice choisie parmi une silice vierge, une silice greffée par des groupes aminoalkyles en particulier aminopropyles et une silice greffée par des groupes cyanoalkyles et préférentiellement par des groupes cyanopropyles. 21. Kit selon l'une quelconque des revendications 16 à 20, dans lequel, en suivant le sens de l'élution, l'éventuelle troisième phase stationnaire (13) est disposée avant la deuxième phase stationnaire (12), la deuxième phase stationnaire (12) étant elle-même disposée avant la première phase stationnaire (11). 30 22. Dispositif de séparation par chromatographie liquide et d'analyse d'un échantillon comprenant : un kit selon l'une quelconque des revendications 16 à 21, des moyens d'introduction (5), dans la colonne (1), de l'échantillon, 17. 18. 19. 20.25des moyens d'introduction (4), dans la colonne (1), d'au moins un éluant, éventuellement des moyens de mise sous pression de la colonne (1), éventuellement des moyens de détection et d'analyse (7) des fractions éluées, et - des moyens de collecte (8) des fractions éluées. 23. Utilisation du kit selon l'une quelconque des revendications 16 à 21 et/ou du dispositif selon la revendication 22 pour séparer une fraction d'iso-alcanes et/ou de cycloalcanes, notamment de diamandoïdes à partir d'un échantillon comprenant un mélange de composés organiques, ce mélange pouvant notamment provenir d'un gisement de pétrole brut, d'huiles de schiste ou de coupes de pétrole.