Brevet FR3000411A1 — publié le 20140704

309--121231-texte 3000411 1 IMPACT DE BACTERIES SUR DES INTERFACES ENTRE DEUX FLUIDES NON MISCIBLES La présente invention concerne une chambre de confinement pour la réalisation de mesures relatives à l'impact de bactéries sur des interfaces entre deux fluides non miscibles, un dispositif de tensiométrie comprenant la chambre, et un procédé de réalisation de mesures relatives à l'impact de bactéries sur des interfaces entre deux fluides non miscibles avec la chambre. De nombreuses bactéries sont capables d'interagir avec des interfaces entre deux liquides non miscibles ou de s'adsorber sur de telles interfaces comme, par exemple, l'eau et les composés organiques hydrophobes ou HOC (de l'anglais « Hydrophobic Organic Compounds »), par exemple les hydrocarbures et les lipides. Dans de nombreux cas, ces bactéries utilisent les HOC comme source de carbone et d'énergie et développent un biofilm à l'interface. Ceci a été très souvent observé avec des bactéries dégradant des hydrocarbures et il a été montré que les biofilms sur HOC amélioraient l'accessibilité des bactéries à ces substrats très peu solubles dans l'eau. Des biofilms ou l'adsorption de cellules ont été observés sur des carburants pétroliers, du pétrole brut ainsi que sur des lipides comme les triglycérides ou de l'huile de cuisine dans une grande variété d'environnements tels que l'eau de mer, les réservoirs de carburant, ou encore les oléoducs. Ces biofilms sont impliqués ou soupçonnés d'être impliqués dans des processus naturels comme le cycle du carbone dans les écosystèmes. Ils jouent également un rôle bénéfique ou délétère dans des activités industrielles comme l'agro-alimentaire ou la production de pétrole. Leur étude est donc d'un grand intérêt en termes de recherche fondamentale et appliquée. Une étape critique du développement des biofilms est l'adsorption initiale de cellules à l'interface. A ce stade, les cellules détectent l'interface, produisent des biosurfactants et/ou des polymères et débutent le développement du biofilm. Il est donc utile d'appréhender les événements qui se produisent à ce stade. Ceci peut être réalisé par exemple en utilisant un tensiomètre à goutte dynamique permettant de suivre l'altération des propriétés rhéologiques de l'interface lors de l'adsorption des cellules. Pour être pertinentes ces mesures doivent être effectuées dans des conditions compatibles avec l'activité des bactéries. La tensiométrie n'a été utilisée que très rarement pour étudier l'impact des bactéries sur les interfaces huile-eau. Deux publications décrivent de telles expériences : 34309--121231-texte 3000411 2 - Kang ZW, Yeung A, Foght JM, Gray MR. « Mechanical properties of hexadecane-water interfaces with adsorbed hydrophobic bacteria », Colloids and Surfaces B-Biointerfaces. 2008 avr; 62(2):273-9; et - Klein BBP. « Behavior of Marinobacter hydrocarbonoclasticus SP 17 Cells 5 During Initiation of Biofilm Formation at the Alkane-Water Interface », Biotechnology & Bioengineering. 2010; 105(3):461-8. Toutefois, ces documents ne concernent que les bactéries aérobies. Par ailleurs, les tensiomètres commerciaux qui existent ne sont pas adaptés aux bactéries anaérobies. 10 Le but de la présente invention est de fournir un moyen de réalisation de mesures relatives à l'impact de bactéries sur des interfaces entre deux fluides non miscibles, palliant au moins partiellement les inconvénients précités. A cette fin, la présente invention propose une chambre de confinement pour la réalisation de mesures relatives à l'impact de bactéries sur des interfaces entre deux 15 fluides non miscibles. La chambre de confinement comprend un volume de réception adapté à contenir un premier fluide, un système d'introduction hermétique d'aiguille pour introduire de manière hermétique une aiguille dans la chambre et former une goutte d'un deuxième fluide dans le volume de réception, une fenêtre transparente alignée avec le volume de réception et adaptée à l'observation d'une interface entre le 20 premier fluide et la goutte du deuxième fluide, et un système de contrôle de gaz présent dans la chambre. Suivant des modes de réalisation préférés, la chambre de confinement comprend une ou plusieurs des caractéristiques suivantes : - le système d'introduction hermétique d'aiguille comprend un septum ; 25 - la chambre comprend en outre un autre septum pour introduire une autre aiguille dans la chambre et injecter le premier fluide dans le volume de réception ; - le système de contrôle de gaz comprend une entrée de gaz et une sortie de gaz en communication de fluide avec le volume de réception ; 30 - la chambre comprend en outre une autre fenêtre transparente alignée avec le volume de réception et la fenêtre transparente adaptée à l'observation d'une interface entre le premier fluide et la goutte du deuxième fluide, l'autre fenêtre transparente étant adaptée à l'éclairage de la goute du deuxième fluide pendant l'observation ; 35 - la chambre comprend en outre un système de régulation de la température au sein du volume de réception ; 34309--121231-texte 3000411 3 - la chambre comprend en outre une boîte, un couvercle et un joint en caoutchouc entre le couvercle et la boîte, la chambre comprenant en outre des verrous adaptés à maintenir sous pression le couvercle sur le joint ; et/ou - la boîte est de forme générale parallélépipédique rectangle, de côté présentant 5 une longueur inférieure à 20 cm. Selon un autre aspect, l'invention propose également un dispositif de tensiométrie comprenant la chambre de confinement décrite ci-dessus et une aiguille introduite hermétiquement dans la chambre et adaptée à former la goutte de deuxième fluide dans le volume de réception. 10 Suivant un mode de réalisation de préféré, le dispositif de tensiométrie comprend en outre un système d'observation de l'interface entre le premier fluide et la goutte du deuxième fluide aligné avec la fenêtre transparente et le volume de réception. Selon un autre aspect, l'invention propose également un procédé de réalisation 15 de mesures relatives à l'impact de bactéries sur des interfaces entre deux fluides non miscibles avec la chambre de confinement décrite ci-dessus. Le procédé comprend l'introduction d'une aiguille dans la chambre par le système d'introduction hermétique d'aiguille ; l'évacuation d'oxygène présent dans la chambre par le système de contrôle de gaz ; l'injection d'une solution de bactéries anaérobies dans le volume de 20 réception ; la formation d'une goutte d'huile dans le volume de réception par l'aiguille ; et l'observation de l'interface entre la solution de bactéries anaérobies et la goutte d'huile par la fenêtre transparente. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description qui suit d'un mode de réalisation préféré de l'invention, donnée à titre 25 d'exemple et en référence au dessin annexé. Les figure 1 et 2 représentent un schéma d'un exemple de la chambre de confinement. La figure 3 représente un schéma d'un exemple de dispositif de tensiométrie. La figure 4 représente un exemple d'un procédé utilisant la chambre de 30 confinement. Les figures 5-7 représentent des exemples de mesures de tensiométrie réalisées avec la chambre de confinement. Selon l'invention, on propose une chambre de confinement pour la réalisation de mesures relatives à l'impact de bactéries sur des interfaces entre deux fluides non 35 miscibles. La chambre comprend un volume de réception adapté à contenir un premier fluide. La chambre comprend également un système d'introduction hermétique d'aiguille pour introduire de manière hermétique une aiguille dans la chambre et 34309--121231-texte 3000411 4 former une goutte d'un deuxième fluide dans le volume de réception. La chambre comprend également une fenêtre transparente alignée avec le volume de réception et adaptée à l'observation d'une interface entre le premier fluide et la goutte du deuxième fluide. Par ailleurs, la chambre comprend un système de contrôle de gaz 5 présent dans la chambre. Une telle chambre permet une réalisation de mesures relatives à l'impact de bactéries sur des interfaces entre deux fluides non miscibles améliorée. La chambre de confinement est une chambre prévue pour confiner (i.e. encapsuler) par exemple deux fluides non miscibles. Ainsi, la chambre de 10 confinement permet un certain contrôle des conditions physico-chimiques auxquelles sont soumis les deux fluides dont l'interface est à l'étude. La chambre de confinement est ici prévue/adaptée pour la réalisation de mesures, e.g. physico-chimiques. Les deux fluides non miscibles placés dans la chambre seront donc l'objet de telles mesures. En l'occurrence, ces mesures peuvent comprendre toutes mesures relatives à 15 l'impact de bactéries sur des interfaces entre les deux fluides non miscibles. Les deux fluides étant non miscibles, il se forme des interfaces entre les volumes disjoints de chacun d'entre eux. En présence de bactéries, ces interfaces peuvent éventuellement présenter un comportement particulier, en tous cas que l'on peut vouloir étudier à travers des mesures. Ainsi, la chambre de confinement est prévue pour une présence 20 de bactéries en son sein. La chambre comprend un volume de réception adapté à contenir un premier fluide (e.g. une solution aqueuse contenant des bactéries). Le volume de réception peut être défini par tout récipient à l'intérieur de la chambre, tel une cuvette, ou bien éventuellement directement formé dans une ou plusieurs parois de la chambre elle- 25 même. La chambre comprend également un système d'introduction hermétique d'aiguille pour introduire de manière hermétique une aiguille dans la chambre et former une goutte d'un deuxième fluide dans le volume de réception. Le système d'introduction hermétique est adapté à ce qu'une aiguille puisse être introduite dans la 30 chambre, e.g. par et/ou via le système d'introduction. L'aiguille ainsi introduite peut être une aiguille prévue pour former une goutte d'un deuxième fluide (e.g. une huile, e.g. un hydrocarbure tel un alcane ou du pétrole) et présenter les dimensions et caractéristiques adéquates à cette fonction. Le système d'introduction hermétique permet l'introduction de l'aiguille de telle sorte que la goutte est formée dans le 35 volume de réception, et donc dans le premier fluide lorsque le volume de réception contient effectivement le premier fluide. Le système d'introduction hermétique permet donc la formation d'une interface interfluides dans la chambre, entre le premier fluide 34309--121231-texte 3000411 5 et le deuxième fluide (non miscibles dans le cas envisagé où le premier fluide est une solution aqueuse contenant des bactéries et le deuxième fluide est une huile, e.g. un hydrocarbure). La chambre comprend également une fenêtre transparente alignée avec le 5 volume de réception et adaptée à l'observation d'une interface entre le premier fluide et la goutte du deuxième fluide. En d'autres termes, sur une paroi de la chambre, une fenêtre transparente, e.g. en verre ou en matière plastique, est disposée de telle sorte qu'elle permet l'observation de l'interface ci-dessus mentionnée. La chambre permet ainsi la réalisation de mesures sur l'interface, e.g. relatives à l'impact sur l'interface de 10 bactéries éventuellement contenues dans le premier fluide qui peut être une solution aqueuse contenant de telles bactéries, via l'observation de l'interface par la fenêtre transparente, e.g. à l'oeil, au microscope, ou par une caméra. Par ailleurs, le système d'introduction de l'aiguille permettant de former la goutte du deuxième fluide est hermétique. Egalement, la chambre comprend un 15 système de contrôle de gaz présent dans la chambre. Grâce à ces éléments, la chambre permet de soumettre l'intérieur de la chambre à une quelconque atmosphère voulue, éventuellement anoxique (i.e. sans oxygène). En effet, le système d'introduction permet une introduction « hermétique » de l'aiguille, en ce sens que lorsque l'aiguille est introduite, l'air environnant la chambre ne pénètre pas (ou ne pénètre que de 20 manière au moins relativement limitée) dans la chambre. Le système de contrôle de gaz permet quant à lui d'évacuer le gaz présent dans la chambre et de le remplacer par tout gaz voulu. Cela permet par exemple d'évacuer l'oxygène à l'intérieur de la chambre. Ainsi, la chambre permet la réalisation de mesures relatives à l'impact de 25 bactéries sur des interfaces entre deux fluides non miscibles sous atmosphère contrôlée. Les mesures peuvent donc être mieux adaptées aux conditions réelles, suivant le type de bactéries à l'étude. La chambre peut par exemple être utilisée pour toute mesure de tensiométrie nécessitant une atmosphère contrôlée, notamment une atmosphère anoxique. Par conséquent, la chambre de confinement permet par exemple 30 de mesurer l'altération des propriétés interfaciales (e.g. tension interfaciale et/ou viscoélasticité interfaciale) entre deux fluides/liquides non miscibles dans des conditions compatibles avec l'activité et la croissance des bactéries anaérobies. Egalement, la chambre est polyvalente en ce sens qu'elle est utilisable pour tout type de bactérie. 35 De telles mesures peuvent se révéler particulièrement utiles dans le cadre d'une étude des conditions d'exploitation d'un réservoir d'hydrocarbures. On peut donc utiliser la chambre dans un procédé comprenant une étude incluant de telles mesures 34309--121231-texte 3000411 6 au moins sur des interfaces entre une huile prélevée dans un réservoir d'hydrocarbures et une solution aqueuse contenant une souche bactérienne, e.g. anaérobie, également prélevée dans le réservoir. Un tel procédé peut être suivi d'une production effective des hydrocarbures présents dans le réservoir. 5 Un exemple de la chambre de confinement va maintenant être décrit en référence aux figures 1 et 2, qui montrent un schéma du même exemple de chambre de confinement 10, la figure 2 présentant une vue ouverte permettant de voir l'intérieur de la chambre 10 de l'exemple. La chambre de confinement 10 est particulièrement simple à mettre en oeuvre, et permet une utilisation pour réaliser des mesures avec des 10 appareils de mesures, e.g. des tensiomètres à goutte, déjà existants. La chambre 10 comprend une cuvette 12 formant le volume de réception adapté à contenir un premier fluide. La cuvette 12 est, dans l'exemple, transparente. La cuvette 12 peut être en verre. Cela permet l'observation de la cuvette 12 par la fenêtre transparente 14 alignée avec la cuvette 12. La fenêtre transparente 14 est ainsi adaptée 15 à l'observation d'une interface entre le premier fluide et une goutte d'un deuxième fluide. En effet, la chambre 10 comprend également, sur sa paroi supérieure, un système d'introduction hermétique 24 d'aiguille pour introduire de manière hermétique une aiguille dans la chambre et former la goutte du deuxième fluide dans la cuvette 12. Le système d'introduction hermétique 24 comprend un septum 27, qui 20 peut être amovible et/ou, comme dans l'exemple, occuper l'emplacement d'un orifice 25 réalisé sur la paroi supérieure de la chambre 10. Le septum 27 comprend une paroi en un matériau qui a tendance à retrouver sa forme lorsqu'il est déformé, e.g. du caoutchouc. Le septum 27, qui est dans l'exemple déporté sur la diagonale au-dessus de la cuvette 12, permet donc, de façon simple et peu coûteuse, qu'une aiguille (e.g. 25 recourbée) soit introduite dans le septum 27 et débouche donc dans la cuvette 12, pour y former une goutte (e.g. montante) du deuxième fluide (e.g. huileux, donc moins dense), le tout de manière que la chambre reste (e.g. quasiment) hermétique par la suite. Par ailleurs, la chambre 10 comprend le système de contrôle de gaz présent dans 30 la chambre. Le système de contrôle de gaz de l'exemple comprend une entrée de gaz 30 sur une paroi latérale et une sortie de gaz (non représentée car sur la paroi opposée dans l'exemple). L'entrée de gaz 30 et la sortie de gaz sont en communication de fluide avec l'intérieur de la chambre 10, y compris la cuvette 12. L'entrée de gaz 30 peut être reliée à une bouteille de gaz (généralement un mélange CO2/N2 pour les 35 bactéries anaérobies) équipée d'un régulateur de pression. La sortie de gaz peut être connectée à un tuyau permettant l'évacuation du gaz et empêchant l'air de rentrer dans 34309--121231-texte 3000411 7 la chambre. Le système de contrôle de gaz de l'exemple est simple, mais tout autre système permettant un contrôle de gaz dans la chambre 10 peut être implémenté. La chambre 10 comprend en outre un autre système d'introduction hermétique 20 d'aiguille, pour injecter le premier fluide dans le volume de réception, ici la cuvette 5 12. Cet autre système d'introduction comprend ici le septum 22. Le septum 22 est prévu pour introduire une autre aiguille dans la chambre 10 et injecter le premier fluide dans la cuvette 12. Le septum 22, qui est dans l'exemple aligné à la verticale au-dessus de la cuvette 12, permet une injection du premier fluide après avoir effectué le contrôle de l'atmosphère dans la chambre 10. Cela permet d'adapter l'atmosphère 10 de la chambre 10 au premier fluide. Par exemple, si le premier fluide est une solution aqueuse contenant une suspension bactérienne anaérobie, cela permet de rendre l'atmosphère de la chambre anoxique avant injection du premier fluide. Alternativement, l'injection du premier fluide pourrait se faire par le septum 27, par exemple si celui-ci est assez large. Mais avoir un septum 22 distinct permet de 15 dissocier l'aiguille servant à injecter le premier fluide et l'aiguille servant à former la goutte de deuxième fluide, ce qui facilite la préparation des conditions expérimentales. La chambre 10 comprend en outre une autre fenêtre (non représentée) transparente alignée avec la cuvette 12 et la fenêtre transparente 14. L'autre fenêtre peut être similaire à la fenêtre 14 en termes de matériau et de dimensions. Dans 20 l'exemple, l'autre fenêtre est sur la paroi latérale de la chambre 10 opposée à la paroi avant (i.e. la paroi portant la fenêtre 14). L'autre fenêtre transparente est adaptée à l'éclairage de la goute du deuxième fluide pendant l'observation par la fenêtre 14. Ainsi, l'interface interfluides est plus visible et l'observation est facilitée. La chambre 10, dans cet exemple, comprend en outre un système de régulation 25 de la température au sein du volume de réception. Le système de régulation de la température permet d'encore mieux adapter les conditions régnant dans la chambre aux conditions réelles auxquelles les bactéries utilisées, pour une étude donnée, sont soumises. La régulation de la température permet également d'effectuer des mesures de tensiométrie plus facilement interprétables, car à température contrôlée. Le système 30 de régulation de la température comprend la base 32 de la chambre 10 qui peut être un bloc de régulation de la température en laiton. Une entrée d'eau 34 et une sortie d'eau 36 (qui éventuellement peuvent indifféremment jouer le rôle l'une de l'autre) assurent une circulation d'eau à travers le bloc régulation 32 pour contrôler la température de la chambre 10. Les entrée 34 et sortie 36 d'eau peuvent par exemple être connectées à un 35 bain d'eau thermostatée à circulation. Le système de régulation de la température comprend également le support de cuvette 38, e.g. métallique pour favoriser les échanges thermiques. 34309--121231-texte 3000411 8 Comme on le voit sur la figure, la chambre 10 comprend une boîte 40 recouverte d'un couvercle 42. La boîte 40 comprend la base 32 en laiton, les entrée 34 et sortie 36 d'eau, les entrée 30 et sortie de gaz, la fenêtre 14 et l'autre fenêtre (opposée à la fenêtre 14). Le couvercle 42 comprend quant à lui les septa 22 et 24. Les parois 5 latérales de la boîte 40 et/ou le couvercle 42 peuvent être en polychlorure de vinyle (PVC). La boîte 40 et son couvercle 42 peuvent ainsi former une enceinte contenant à l'intérieur la cuvette 12 (et son support 38). La boîte 40 (ou l'enceinte formée avec le couvercle) est de forme générale parallélépipédique rectangle, et peut être de côté(s) présentant une longueur inférieure à 20 cm, de préférence inférieure à 15 cm, et/ou 10 supérieure à 5 cm, par exemple égale à environ 10 cm. Ainsi, la chambre 10 peut être utilisée avec des tensiomètres de dimensions classiques, de la manière qui sera décrite plus tard. Sur les figures, on voit que la chambre 10 comprend également un joint 44 entre le couvercle 42 et (la bordure supérieure de) la boîte 40. La chambre 10 comprend 15 également un joint de même type entre le bloc 32 et (la bordure inférieure de) la boite 40. Le joint 44 est (au moins relativement) hermétique, de manière à autoriser le contrôle de gaz envisagé. Le joint 44 peut par exemple être en silicone, ou en caoutchouc. La chambre 10 peut alors comprendre des verrous 46 adaptés à maintenir sous pression le couvercle 42 sur le joint 44, et par ce biais à réaliser une fermeture 20 hermétique et sous pression entre le couvercle 42 et la boîte 40. Pour une implémentation simple, on peut utiliser des verrous en deux parties avec un crochet e.g. sur le couvercle 42 et un anneau e.g. sur la boîte 40 coopérant avec le crochet en position fermée, e.g. des verrous de type « grenouillères ». La chambre 10 de l'exemple comprend quatre verrous 46 de la sorte, de chaque côté de la boîte 40, deux 25 d'entre eux étant représentés sur les figures. La chambre de confinement, par exemple la chambre 10 des figures 1 et 2, peut avantageusement être intégrée à un dispositif de tensiométrie (ou tensiomètre) par ailleurs classique. Un dispositif de tensiométrie est un dispositif servant à réaliser des mesures de tensions interfaciales entre deux fluides non miscibles, tel que décrit dans 30 les publications de Kang et al. et de Klein précédemment mentionnées. Un exemple d'un tel dispositif de tensiométrie va maintenant être décrit en référence à la figure 3. Le dispositif de tensiométrie 50 de la figure 3 comprend la chambre 10 des figures 1 et 2 et une aiguille recourbée 52 introduite hermétiquement (lorsque le 35 dispositif de tensiométrie est en cours d'utilisation) dans la chambre 10 et adaptée à former la goutte de deuxième fluide dans le volume de réception. Dans le cas de la 34309--121231-texte 3000411 9 chambre 10, l'aiguille est introduite dans le septum 27 et débouche à l'intérieur de la cuvette 12. On utilise un tel dispositif de tensiométrie typiquement en plaçant une solution aqueuse contenant des bactéries dans le volume de réception, la cuvette 12 lorsqu'il 5 s'agit de la chambre 10, l'injection se faisant au travers du septum 22. On forme ensuite une goutte d'hydrocarbure au bout de l'aiguille recourbée, reliée à une seringue et débouchant dans la cuvette 12 afin de former une interface eau/huile. L'observation de la déformation de la goutte d'hydrocarbures par la fenêtre (e.g. la fenêtre 14) permet d'obtenir des valeurs de tensions interfaciales. 10 L'huile étant moins dense que l'eau, et dans l'exemple des figures 1 et 2 où la boîte 40 est prévue pour être disposée verticalement sur sa base 32, et où le couvercle 42 et le septum 22 viennent donc au-dessus de la cuvette 12, l'aiguille peut être recourbée vers le haut en son extrémité, de sorte à former un U (ou encore un crochet). Cela rend le dispositif plus approprié pour l'utilisation prévue. 15 Il est possible par ailleurs de faire osciller la goutte en actionnant la seringue et de mesurer la variation de tension interfaciale qui résulte de ces oscillations afin de déterminer le module élastique interfacial ainsi que son angle de phase. Un tel dispositif de tensiométrie permet par ailleurs d'effectuer des mesures d'angle de contact. Par exemple, le dispositif peut comprendre une lame plate à 20 l'intérieur de la chambre 10 disposée (potentiellement) juste au- dessus de l'extrémité de l'aiguille qui s'incurve vers le haut. Le dispositif peut alors comprendre un système de déplacement vertical de l'aiguille, de sorte à approcher autant que nécessaire la goutte au contact de la lame. Cela permet alors d'observer l'angle de contact entre la goutte et la lame, et de faire sa mesure. 25 L'observation peut se faire automatiquement grâce à un système d'observation de l'interface entre le premier fluide et la goutte du deuxième fluide qui est aligné avec la fenêtre transparente et le volume de réception. Le système d'observation peut être une caméra enregistrant les images de la goutte d'huile qui se déforme. En outre, dans l'exemple de la chambre 10, le dispositif de tensiométrie peut comprendre (ou 30 être utilisé avec) un système d'éclairage aligné avec la fenêtre transparente 14, la zone de la cuvette 12 où la goutte se forme, et l'autre fenêtre. Le système d'éclairage est « derrière » la chambre 10 si l'on se réfère aux figures 1 et 2. Un procédé de réalisation de mesures relatives à l'impact de bactéries sur des interfaces entre deux fluides non miscibles avec la chambre de confinement, par 35 exemple la chambre 10 des figures 1 et 2, va maintenant être décrit en référence à la figure 4. 34309--121231-texte 3000411 10 Le procédé comprend une première phase d'installation du matériel expérimental. La première phase comprend l'introduction S10 d'une aiguille dans la chambre par le système d'introduction hermétique d'aiguille. Dans le cas des exemples 5 précités, lorsque l'aiguille est recourbée en son extrémité, l'aiguille peut être introduite en la crochetant par son bout recourbé dans le septum amovible 27 que l'on loge par la suite dans l'orifice 25 du couvercle. Le procédé peut ensuite comprendre le raccord de l'aiguille à une seringue contenant le deuxième fluide, e.g. une huile. Le procédé peut ensuite comprendre la fermeture hermétique du couvercle 42 sur la boîte 10 40 avec les verrous 46. La première phase du procédé comprend ensuite l'évacuation S20 d'oxygène présent dans la chambre par le système de contrôle de gaz, rendant ainsi l'atmosphère de la chambre anoxique. Cela permet d'ensuite injecter S30 une solution de bactéries anaérobies dans le volume de réception, sans risque pour les bactéries. On peut en 15 outre également contrôler la température de la chambre, par exemple avec un système de contrôle tel que décrit précédemment, par exemple dans le cas de la chambre 10 en faisant circuler de l'eau à une température appropriée entre l'entrée 34 et la sortie 36. Le procédé comprend ensuite une deuxième phase d'expérimentation à proprement parler. 20 La deuxième phase comprend la formation S40 d'une goutte d'huile dans le volume de réception par l'aiguille. On peut ainsi faire « osciller » une goutte d'huile tel que décrit précédemment. Enfin, on observe S50 l'interface entre la solution de bactéries anaérobies et la goutte d'huile par la fenêtre transparente. Cette observation peut se faire par une caméra tel que mentionné précédemment et peut conduire à des 25 mesures de tensions interfaciales et d'élasticité ou à des mesures d'angles de contact avec une lame. La chambre peut en outre être placée sur un support réglable en inclinaison et/ou en hauteur, de sorte que les fenêtres soient alignées avec un axe caméra-lampe du tensiomètre. 30 Exemple : La chambre 10 des figures 1 et 2 a été utilisée avec succès dans le procédé de la figure 3 pour réaliser des mesures relatives à l'impact de différentes bactéries anaérobies sur des interfaces hexadécane-eau. Une eau contenant une souche de 35 bactéries anaérobies différente a été injectée S30 dans la cuvette 12, puis une goutte d'hexadécane a été formée S40 dans l'eau injectée et observée S50 par une caméra qui 34309--121231-texte 3000411 11 a filmé le comportement de la goutte. On en a ensuite dérivé de manière classique des mesures de tension interfaciale (IFT) et d'élasticité. Les figures 5-7 représentent des résultats obtenus. Ces figures représentent la tension interfaciale en fonction du temps respectivement pour la souche 6273 prélevée 5 dans un réservoir au Congo et à 52°C, la souche Termotaga elfii à 60°C, et la souche Clostridum acetobutylicum à 37°C. Globalement, on a ainsi pu mettre en évidence une diminution de la tension interfaciale à l'interface eau-hexadécane en présence des souches testées. La vitesse de modification des propriétés interfaciales est la principale différence entre les 10 souches bactériennes testées lors de cette expérience. Il semble donc que la capacité à abaisser la tension interfaciale (IFT) serait partagée par de nombreuses souches. Il est important de noter que les abaissements d'IFT mesurés ici n'étaient pas assez importants pour avoir un impact sur la mobilisation de pétrole sans l'intervention d'autres facteurs. Cependant, ils mettent bien en évidence une interaction des bactéries 15 avec l'interface. 34309--121231-texte REVENDICATIONS1. Chambre de confinement (10) pour la réalisation de mesures relatives à l'impact de bactéries sur des interfaces entre deux fluides non miscibles, comprenant : - un volume de réception (12) adapté à contenir un premier fluide, - un système d'introduction hermétique (24) d'aiguille pour introduire de manière hermétique une aiguille dans la chambre et former une goutte d'un deuxième fluide dans le volume de réception, - une fenêtre transparente (14) alignée avec le volume de réception et adaptée à l'observation d'une interface entre le premier fluide et la goutte du deuxième fluide, et - un système de contrôle de gaz présent dans la chambre. 2. Chambre selon la revendication 1, dans laquelle le système d'introduction hermétique d'aiguille comprend un septum (22). 3. Chambre selon la revendication 2, comprenant en outre un autre septum (20) pour introduire une autre aiguille dans la chambre et injecter le premier fluide dans le volume de réception. 4. Chambre selon l'une des revendications 1 à 3, dans laquelle le système de contrôle de gaz comprend une entrée de gaz (30) et une sortie de gaz en communication de fluide avec le volume de réception. 5. Chambre selon l'une des revendications 1 à 4, comprenant en outre une autre fenêtre transparente alignée avec le volume de réception et la fenêtre transparente adaptée à l'observation d'une interface entre le premier fluide et la goutte du deuxième fluide, l'autre fenêtre transparente étant adaptée à l'éclairage de la goute du deuxième fluide pendant l'observation. 6. Chambre selon l'une des revendications 1 à 5, comprenant en outre un système de régulation de la température (34,36, 32, 38) au sein du volume de réception. 7. Chambre selon l'une des revendications 1 à 6, comprenant une boîte (40), un couvercle (42) et un joint en caoutchouc (44) entre le couvercle et la boîte, la chambre 34309--121231-texte 3000411 13 comprenant en outre des verrous adaptés à maintenir sous pression le couvercle sur le joint. 8. Chambre selon la revendication 7, dans laquelle la boîte est de forme générale 5 parallélépipédique rectangle, de côté présentant une longueur inférieure à 20 cm. 9. Dispositif de tensiométrie comprenant : - la chambre selon l'une des revendications 1 à 8 ; et - une aiguille introduite hermétiquement dans la chambre et adaptée à former la 10 goutte de deuxième fluide dans le volume de réception. 10. Dispositif de tensiométrie selon la revendication 9, comprenant en outre un système d'observation de l'interface entre le premier fluide et la goutte du deuxième fluide aligné avec la fenêtre transparente et le volume de réception. 15 11. Procédé de réalisation de mesures relatives à l'impact de bactéries sur des interfaces entre deux fluides non miscibles avec une chambre selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, comprenant : - l'introduction (S10) d'une aiguille dans la chambre par le système 20 d'introduction hermétique d'aiguille ; - l'évacuation (S20) d'oxygène présent dans la chambre par le système de contrôle de gaz ; - l'injection (S30) d'une solution de bactéries anaérobies dans le volume de réception ; 25 - la formation (S40) d'une goutte d'huile dans le volume de réception par l'aiguille ; et - l'observation (S50) de l'interface entre la solution de bactéries anaérobies et la goutte d'huile par la fenêtre transparente.