Brevet FR3000064A1 — publié le 20140627

La présente invention concerne des composés de type spiroisoxazoline pour leur utilisation dans le traitement des infections bactériennes et mycobactériennes comme, par exemple, la tuberculose, la lèpre et les infections mycobactériennes atypiques. La présente invention concerne également de nouveaux composés utilisables en tant que médicament en particulier en tant que médicament pour le traitement d'infections bactériennes et mycobactériennes comme, par exemple, la tuberculose, la lèpre et les infections mycobactériennes atypiques. La présente invention concerne également des compositions pharmaceutiques comprenant, en tant que principe actif, au moins un des composés précités et éventuellement un antibiotique actif contre les bactéries et/ou mycobactéries, notamment un antibiotique activable par la voie de l'EthA. La présente invention concerne également des produits (kits) contenant au moins un des composés précités et au moins un antibiotique actif contre les bactéries et/ou mycobactéries, notamment un antibiotique activable selon la voie de l'EthA comme produits de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie antituberculeuse, antilépromateuse ou antimycobactérienne générale. La tuberculose tue 2 millions de personnes chaque année dans le monde. L'épidémie de sida et l'émergence de souches multi résistantes aux antibiotiques contribue à aggraver l'impact de cette maladie, considérée par l'Organisation Mondiale de la Santé comme responsable d'une épidémie mondiale de plus en plus dangereuse et comme une urgence sanitaire au niveau planétaire. Un nombre croissant de souches de Mycobacterium tuberculosis est aujourd'hui caractérisé par une multi résistance aux antibiotiques de première ligne que sont l'isoniazide (INH) et la rifampicine (RIF). Ces antibiotiques doivent alors être remplacés par des antibiotiques de seconde ligne comme l'éthionamide (ETH) auxquels les souches ne sont pas résistantes mais qui ont le désavantage de présenter un indice thérapeutique faible (l'indice thérapeutique d'un principe actif est le rapport de la dose thérapeutique à la dose toxique). Une stratégie consistant à augmenter l'activité de l'éthionamide 10 (ETH) en l'associant à un composé particulier a déjà été envisagée. En effet l'ETH est une prodrogue qui est transformée in vivo en une forme thérapeutiquement active par l'enzyme EthA (voir l'article "Activation of the prodrug ethionamide is regulated in mycobacteria" 2000 Journal of Biological Chemistry). Les résistances observées à l'ETH viennent du 15 fait que le répresseur transcriptionnel EthR de M. tuberculosis contrôle l'expression de l'enzyme EthA et limite la transformation de l'ETH en substance thérapeutiquement active. Un but de la présente invention est de proposer de nouveaux composés susceptibles de potentialiser l'activité des antibiotiques actifs 20 notamment contre les mycobactéries, en particulier les antibiotiques actifs contre les mycobactéries et activables par la voie EthA, comme, par exemple, tous les antibiotiques de la famille des thioamides et en particulier, l'éthionamide et le prothionamide. Un autre but de la présente invention est de proposer des composés 25 tels que précités qui permettent en combinaison avec un antibiotique actif contre les bactéries et/ou mycobactéries, notamment un antibiotique actif contre les mycobactéries et activable par la voie de l'EthA, d'obtenir à dose d'antibiotique égale une meilleure efficacité ou qui permettent de réduire la dose d'antibiotique précitée pour obtenir une efficacité donnée. Un autre but de la présente invention est de proposer des composés tels que précités qui soient simples et peu coûteux à produire. Un autre but de la présente invention est de proposer des composés tels que précités qui soient solubles de manière satisfaisante dans un fluide biologique. Un autre but de la présente invention est de proposer des composés tels que précités qui sont susceptibles d'être actifs en particulier par voie orale et/ou qui engendrent moins d'effets secondaires. Pour atteindre au moins un des objectifs précités, la présente invention propose donc des composés de formule générale (I) : o R2 (I) dans laquelle : m= 0 ou 1; n=0 ou 1; R1 représente un groupement choisi parmi les groupements suivants : les chaînes alkyles en Ci-05, linéaires ou ramifiées, les chaînes alkyles en C1-05 linéaires ou ramifiées et substituées en particulier substituées par au moins un atome de fluor (F), en particulier les chaînes alkyles en C 1-C3 linéaires ou ramifiées et substituées par au moins un atome de fluor (F) ou par un groupement cyclique saturé ou insaturé en C3-C6 ; les groupements cycliques saturés ou insaturés en C3-C6 et les groupements CN, CH2CN, CH2N3. R2 est choisi parmi les groupements suivants : phényle, benzyle éventuellement substitué en particulier benzyle substitué par un atome Cl ou F, naphatalènyle, phényle substitué, en particulier, phényle substitué par au moins une chaîne alkyle en Cl-C4, linéaire ou ramifiée, phényle substitué par au moins une chaîne alkyle en C 1-C4 linéaire ou ramifiée et substituée, en particulier substituée par au moins un atome de fluor (F), phényle substitué par au moins un groupement choisi parmi OCH3, OCF3, Cl, F, CH3S02 ou CF3, un groupement phényle dont deux atomes de carbone consécutifs sont substitués par un même groupement 0-CH2-0, un groupement cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle, cyclohexyle, les hétérocycles à 5 ou 6 sommets saturés ou insaturés comportant au moins un atome dans le cycle choisi parmi S, N et 0, en particulier les hétérocyles aromatiques à 5 ou 6 sommets comportant au moins un atome dans le cycle choisi parmi S, N et O. Selon l'invention m et n peuvent être égaux ou différents l'un de l'autre. Avantageusement, m=n=1. De tels composés s'avèrent être 20 particulièrement actifs en combinaison avec l'éthionamide sur les mycobactéries, en particulier sur M. tube rculosis. R1 peut représenter un groupement choisi parmi les groupements suivants :-CH2CF3, -CF2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2-isopropyle, cyclopropyle, cyclobutyle, -cyclopentyle, cyclopentènyle, -CH2-cyclopropyle, -CH2- 25 cyclobutyle, -CH2-cyclopentyle, phényle éventuellement substitué, en particulier phényle substitué par un atome de chlore (Cl) ou de fluor (F), benzyle éventuellement substitué, en particulier benzyle substitué par un atome Cl ou F, 0-phényle et thiophènyle. Les groupements R1 substitués précités peuvent être monosubstitués ou pluri-substitués. Selon un mode de réalisation, les 5 groupements précités sont monosubstitués ; le groupe phényle ou benzyle est alors substitué uniquement par un atome Cl ou un atome F. La position de cet atome Cl ou F n'est pas limitée selon l'invention, que le groupement phényle ou benzyle soit monosubstitué ou pluri-substitué. Ainsi, l'atome Cl ou F peut être en position ortho, méta ou para par 10 rapport au carbone du cycle benzénique lié au reste de la molécule de formule générale (I) ou par rapport au carbone du cycle benzénique lié au groupement CH2 lié au reste de la molécule de formule générale (I), dans le cas d'un groupement benzyle. Avantageusement, R1 est choisi parmi CH2CF3 et -(CH2)2CF3. Ces 15 deux radicaux procurent aux composés de l'invention une efficacité améliorée. Il semble que, en particulier lorsque R1= CH2CF3, le composé de l'invention est particulièrement efficace pour augmenter l'activité de l'éthionamide sur les mycobactéries et en particulier sur M. tube rculosis. Selon un mode de réalisation, R2 est choisi parmi les groupements 20 suivants : phényle, les groupements phényles substitués en ortho par OCH3, OCF3, Cl, F ou CF3, en particulier substitué par en ortho OCH3 ou Cl. Avantageusement, les groupements phényles sont monosubstitués en ortho par un radical choisi parmi OCH3, OCF3, Cl, F ou CF3, en particulier monosubstitué en ortho par OCH3 ou Cl. De tels radicaux 25 améliorent l'activité potentialisatrice de l'éthionamide des composés de l'invention. La position en ortho du substituant améliore l'activité potentialisatrice de l'éthionamide des composés de l'invention. Selon un autre mode de réalisation, R2 est choisi parmi les hétérocycles aromatiques à 5 ou 6 atomes dont au moins un atome 5 adjacent à l'atome de l'hétérocycle lié en position alpha par rapport à 0 Nç l'azote du cycle \ du composé de formule générale (I) de l'invention est un atome de soufre, un atome d'oxygène ou un atome d'azote. Selon l'invention, les hétérocycles à 5 ou 6 atomes peuvent donc comporter deux atomes choisis parmi les atomes S, N et O. Dans ce cas, 10 les deux atomes choisis parmi S, N et 0 peuvent être situés de part et d'autre de l'atome de l'hétérocycle lié au cycle au carbone en alpha de ,0 N\\ l'azote du cycle \ / dans la formule (I) et directement adjacent à ce dernier. L'atome de l'hétérocycle lié au cycle précité est avantageusement 15 un atome de carbone. Avantageusement, R2 est choisi parmi les groupements suivants De tels composés sont particulièrement efficaces en combinaison avec l'éthionamide pour lutter contre les mycobactéries, en particulier M. 20 tuberculosis. Selon un autre mode de réalisation, R2 est choisi parmi les groupements suivants : N 1 1 \N \1 N et Le composé de l'invention est avantageusement choisi parmi les composés suivants : s \ ; e e F 9 CI e 4 4 4 4, ,0 \ 4 4 - I .1 c 4 e 4 4 4 8 1790000E La présente invention concerne également les composés précités pour leur utilisation en tant que médicament, en particulier, pour leur utilisation dans le traitement des infections bactériennes et mycobactériennes, notamment dans le traitement de la tuberculose, de la lèpre ou de mycobactérioses atypiques. La présente invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant, en tant que principe actif, au moins un composé de formule générale (I) telle que précitée et un excipient phannaceuticalement acceptable. Au sein des compositions pharmaceutiques conformes à l'invention, le ou les composés utilisés en tant qu'ingrédient(s) actif(s) peuvent être utilisés en une quantité permettant d'administrer des doses unitaires comprises entre 0,3 mg et 1 g environ. Au sein des compositions pharmaceutiques conformes à l'invention et lorsqu'il(s)est(sont) présent(s), le ou les antibiotiques activables par la voie enzymatique de l'EthA sont avantageusement utilisés en une quantité permettant d'administrer des doses unitaires égales ou inférieures aux doses habituellement recommandées par l'OMS (WHO, Treatment of tuberculosis: Guidelines for National Programmes. 2003; WHO/CDS/TB2003.313.), les organisations sanitaires nationales ou non gouvernementales, ou les laboratoires pharmaceutiques compétents. L'Homme du Métier est à même de choisir un ou plusieurs excipients pharmaceutiquement acceptables en fonction de la voie d'administration de la composition pharmaceutique. Bien entendu, l'Homme du Métier veillera à cette occasion à ce que le ou les excipients utilisés soient compatibles avec les propriétés intrinsèques attachées à la composition conforme à la présente invention. En outre, la forme du médicament ou de la composition pharmaceutique (par exemple, une solution, une suspension, une émulsion, des comprimés, des gélules, des suppositoires, etc...) dépendra de la voie d'administration choisie. Ainsi, au sens de la présente Invention, le médicament ou la composition pharmaceutique peut être administré(e) par n'importe quelle voie appropriée, par exemple par la voie orale, anale, locale (topique, par exemple), systémique, intraveineuse, intramusculaire ou mucosale, ou bien en utilisant un patch, ou encore sous forme encapsulée dans, ou immobilisée sur, des liposomes, des microparticules, des microcapsules, associée à des nanoparticules et analogues. On peut notamment citer, à titre d'exemples non limitatifs d'excipients appropriés pour une administration par voie orale, le talc, le lactose, l'amidon et ses dérivés, la cellulose et ses dérivés, les polyéthylèneglycols, les polymères d'acide acrylique, la gélatine, le stéarate de magnésium, des matières grasses animales, végétales ou synthétiques, les dérivés de la paraffine, les glycols, les stabilisants, les conservateurs, les anti-oxydants, les agents mouillants, les anti-agglomérants, les dispersants, les émulsionnants, les agents modifiants du goût, les agents de pénétrations, de solubilisation, etc... .Les techniques de formulation et d'administration des médicaments et compositions pharmaceutiques sont bien connues dans la technique ici considérée, l'Homme du Métier pouvant notamment se référer à l'ouvrage Remington's Pharmaceutical Sciences, dernière édition. La présente Invention a également pour objet l'utilisation d'au moins un composé selon l'invention pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention et/ou au traitement des infections bactériennes, de préférence mycobactériennes, et tout particulièrement de la tuberculose, de la lèpre ou de mycobactérioses atypiques. Avantageusement, la composition pharmaceutique comprend en outre, en tant que principe actif, au moins un antibiotique actif contre les bactéries et/ou mycobactéries, choisi notamment parmi les antibiotiques activables par la voie enzymatique de l'EthA, en particulier parmi Véthionamide, le prothionamide, l'isoxyl et le thiacétazone qui sont des exemples d'antibiotiques activables par la voie EthA. La présente invention n'est néanmoins pas limitée à ces antibiotiques. La présente invention concerne également un kit ou produit contenant au moins un composé de formule (I) et au moins un antibiotique actif contre les bactéries et/ou mycobactéries choisi, notamment, parmi les antibiotiques activables par la voie enzymatique de l'EthA, comme produits de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie antituberculeuse, anti-lépromateuse ou anti-mycobactérienne générale. DEFINITIONS On définit au sens de la présente invention le groupement thiophènyle comme un groupement cyclique comportant 4 atomes de carbone et un atome de soufre. Lorsqu'il n'est pas précisé qu'un groupement est substitué, celui-25 ci n'est pas substitué, au sens de la présente invention. Lorsque la position du substituant n'est pas précisée, le terme phényle substitué concerne tout groupement phényle dont au moins un atome d'hydrogène est remplacé par un groupement ou un atome tel qu'indiqué. De préférence, pour R2, le groupement phényle est monosubstitué, de préférence monosubstitué par un groupement OCH3, un atome de chlore ou un atome de fluor. Il peut néanmoins comprendre au moins deux substituants. La position ortho du substituant porté par le phényle fait référence à l'atome de carbone du groupement phényle qui est lié à l'atome de ,0 N\ carbone en position alpha par rapport à l'azote du cycle \ des composés de l'invention. Les hétérocycles à 5 ou 6 atomes peuvent saturés ou insaturés. Ils peuvent comprendre une ou plusieurs double-liaison. Ils peuvent également être des cycles aromatiques. Ainsi, au sens de la présente invention, les termes hétérocycles aromatiques à 5 ou 6 sommets comportant au moins un atome choisi parmi N, 0 et S dans le cycle englobent, notamment, les hétérocycles aromatiques à 5 ou 6 sommets comportant au moins un atome d'azote dans le cycle et uniquement un ou des atomes N en tant qu'hétéroatome dans le cycle, les hétérocyles aromatiques à 5 ou 6 sommets, en particulier à 5 sommets, comportant au moins un atome 0 dans le cycle et uniquement un ou des atomes 0 en tant qu'hétéroatome(s) dans le cycle, les hétérocyles aromatiques à 5 ou 6 sommets comportant au moins un atome S dans le cycle et uniquement un ou des atomes S en tant qu'hétéroatome(s) dans le cycle, les hétérocyles aromatiques à 5 ou 6 sommets, en particulier à 5 sommets, comportant au moins un atome d'azote dans le cycle et/ou au moins un atome 0 ou S dans le cycle en tant qu'hétéroatomes, En particulier, les hétérocycles aromatiques à 5 ou 6 sommets comportant deux hétéroatomes différents ou identiques choisis parmi S, N et 0 font partie des hétérocycles aromatiques à 5 ou 6 sommets selon l'invention. On définit ici les mycobactérioses atypiques comme étant les mycobactérioses causées par au moins une mycobactérie autre que M. Tuberculinum et en particulier les mycobactérioses impliquant M. Kansasii. Au sens de la présente invention, le terme « traitement » désigne le traitement curatif et/ou le traitement prophylactique des infections précitées. Le terme « traitement » englobe toute amélioration de l'état du patient, en particulier toute diminution de la quantité de bactéries présentes dans un moins un site d'infection du patient. On définit au sens de la présente invention, un antibiotique activable par la voie de l'EthA, toute substance qui, au moins in vitro réagit avec l'enzyme EthA pour produire une substance ayant des propriétés antibiotiques. L'Homme du métier est à même de déterminer si un antibiotique est activable par la voie de l'EthA, par exemple, en appliquant la méthode décrite dans la publication suivante : "Activation of the prodrug ethionamide is regulated in mycobacteria" 2000 Journal of Biological Chemistry. On définit au sens de la présente invention, un antibiotique actif contre les bactéries et/ou mycobactéries, tout agent susceptible de limiter 25 ou de réduire au moins in vitro la prolifération d'une bactérie et/ou d'une mycobactérie, en particulier M. tuberculosis. Un agent susceptible de détruire, au moins in vitro une mycobactérie, notamment M. tuberculosis est également un antibiotique actif contre les mycobactéries, au sens de la présente invention. Parmi les antibiotiques actifs contre les mycobactéries et activables par la voie de l'EthA, on peut citer l'éthionamide, le prothionamide, l'isoxyl, le thiacétazone et les mélanges d'au moins deux de ces antibiotiques. L'antibiotique au sens la présente invention peut aussi être un antibiotique activable par une autre voie de bioactivation que celle précitée. PARTIE EXPERIMENTALE SYNTHESES Les spectres RMN 1H et 13C ont été réalisés à température ambiante sur un appareil BrukerTM DPX 300 à 300 MHz. Les déplacements chimiques sont indiqués en partie par million (ppm). Les assignements ont été réalisés en utilisant les expériences à une dimension (1D) 1H et 13C ou à deux dimensions (2D) HSQC et COSY. Les spectres de masse ont été réalisés sur une LCMS-MS équipée d'un système triple quadripole (Varian 1200ws) ou sur une LCMS Waters Alliance Micromass ZQ 2000. Les réactifs et solvants commerciaux ont été utilisés sans purification ultérieure. 1 (n=1 and m=1) 2 (n=0 and m=1) 3 (n=0 and m=0) a)tBuOK, Etp, Ph3(CH3)P+,I- Figure 1 : Schéma de synthèse des intermédiaires 1 à 3. Synthèse des intermédiaires 1, 2 et 3. Le tert-butoxyde de potassium (1.5 mmoles) est additionné à la suspension sous argon, d'iodure de triphénylméthylphosphonium (1.5 mmoles) dans l'éther anhydre (2.0 mL). Le mélange est porté à reflux durant lh et vire alors au jaune. Le composé cétonique est ensuite additionné par portions. Après 30 minutes d'agitation à température ambiante, l'analyse par CCM indique que la réaction est achevée. Le milieu réactionnel est alors hydrolysé à l'aide d'eau distillée (1 mL), et extrait par deux fois à l'aide d'éther. Les phases organiques jointes sont séchées sur MgSO4 et concentrées à sec. Le résidu obtenu est purifié sur colonne de gel de silice (éluant cyclohexane / acétate d'éthyle) pour donner le produit attendu sous forme d'huile incolore. 1-N-Boc-4-methylenepiperidine (1). NMR 1H (CDC13, 300 MHz) 8(PPm) 1.47 (s, 9H, CH3 Boc), 2.18 (t, 4H, J=5.9 Hz, CH2), 3.42 (t, 4H, 15 J=5.8 Hz, CH2N), 4.74 (s, 2H, =CH2). 70% rendement. [(M-tBu),Hr 142.1. Pureté >95%. 1-N-Boc-3-methyleneazetidine (2). NMR 1H (CDC13, 300 MHz) 8 (PPm) 1.46 (s, 9H CH3 Boc), 4.49 (t, 4H, J=2.7 Hz, CH2), 4.99 (q, 2H, J=2.4 Hz, CH2). 69% rendement. [(M-tBu),H] 114.3. Pureté >95%. 20 1-N-Boc-3-methylenepyrrolidine (3). NMR 1H (CDC13, 300 MHz) (ppm) 1.48 (s, 9H, CH3 Boc), 2.55 (t, 2H, J=7.2 Hz, CH2), 3.48 (m, 2H, CH2), 3.93 (m, 2H, CH2), 4.98 (m, 2H, =CH2). 83% rendement. [(MtBu),H] 128.1. Pureté >95%. Schéma de synthèse des composés 4, 5 et 10 c)+ CFICH2)2COOH NBoc CF, a) H step 1 4 r\--- CF step 3 c)+ CFICH,),COOH N-0 N° NBoc step 2 8e Schéma de synthèse des composés 6 à 9 step 3 CF, 16 N-OH N.OH d) R H R CI + étape 2' 6a-7a 6b-7b 1 e) étape 2" 6c-7c 6-9 Schéma de synthèse des composés 11 à 59 b) étape 2 8c-29c HO.. 0 )1. 4 R H étape 1 R H 8a-29a 8b-29b Conditions opératoires: (a) NH2OH.HC1, CH2C12, pyridine, RT; (b) Na0C1 13%, CH2C12, 0°C to RT, (c) (i) HC1 (4M) in 1,4-dioxane, (ii) R'-CO2H, HOBt, EDCI.HC1, DIEA, DMF, (d) NCS, DMF, RT, (e) 1-N-Boc-4-methylene piperidine, Et3N, THF, RT; ei) HC1 (4M) in 1,4-dioxane, (ii) CF3(CH2)2-CO2H, HOBt, EDCI.HC1, DIEA, DMF. 5 Etape 1: synthèse des oximes: Le chlorhydrate d'hydroxylamine (1 mmole) est additionné à la solution d'aldéhyde (1 mmole) dans le dichlorométhane (860 1,1_,) et la pyridine (80 Le mélange est ensuite agité à température ambiante. L'avancement et la fin de la réaction sont suivis par chromatographie sur couche mince (CCM). Du 10 dichlorométhane est ajouté puis la phase organique est lavée à l'aide d'eau distillée, séchée sur MgSO4 et concentrée à sec. L'oxime ainsi obtenue est utilisée sans nécessité de purification ultérieure. Etape 2: Procédure pour la synthèse des intermédiaires 8e à 29c. La solution d'hypochlorite de sodium (solution 13% en chlore, 3.4 mL) est 5 additionnée à la solution d' oxime (1 mmole) et d'alcène 1, 2 ou 3 (0.8 mmoles) dans le CH2C12 abaissée à 0°C. Le mélange est agité à température ambiante jusqu'à ce que la réaction soit achevée. Les deux phases sont séparées et la phase organique est alors successivement lavée à l'aide d'HC1 1N (2 fois), d'une solution saturée en NaHCO3 et de 10 saumure avant d'être évaporée sous pression réduite. Si nécessaire, le dérivé spiroisoxazoline obtenu est purifié par HPLC préparative ou sur chromatographie flash (éluant cyclohexane / acétate d'éthyle). Etape 2' et 2": Procédure pour la synthèse des dérivés 6b-6c et 7b-7c. Le N-chlorosuccinimide (1 mmole) est ajouté à la solution d'oxime 15 (1 mmole) dans le DMF (1.9 mL). Après lh d'agitation à température ambiante, (le contrôle LC/MS indiquant la fin de la reaction), le DMF est évaporé sous pression réduite. Le résidu obtenu est repris dans le CH2C12, puis est lavé par 2 fois à l'aide de saumure. La phase organique est séchée sur Mg504 et concentrée à sec. La solution de triéthylamine (2 20 mmoles) dans le THF (32 mL) est additionnée goutte à goutte, durant 4h, à la solution de chloro-oxime et de 1-N-Boc-4-méthylène-pipéridine (1.3 mmoles) dans le THF (32 mL). Le milieu réactionnel est agité à température ambiante. Le chlorhydrate de triéthylamine ainsi formé est éliminé par filtration et le THF est évaporé sous pression réduite. Le 25 résidu obtenu est repris dans le dichlorométhane et est lavé successivement à l'aide d'une solution d'HC1 1N et de saumure. La phase organique est ensuite séchée sur MgSO4 et concentrée à sec. Le résidu recueilli est purifié sur colonne de gel de silice (éluant (CH2C12/Et0Ac). Etape 3: déprotection du groupement N-Boc. La solution d'HC1 4N dans le dioxane (2.2 mL) est additionnée à la solution de N-Boc-amine (1 mmole) dans le dioxane (4.4 mL). Le milieu réactionnel est agité à température ambiante. Une fois la réaction terminée (suivi par CCM), le précipité formé est essoré sur verre fritté et utilisé sans purification ultérieure dans l'étape de couplage. Couplage avec les acides carboxyliques: La solution d'acide carboxylique (1.5 mmoles), d'EDCI.HC1 (1.5 mmoles), d'HOBt (0.5 mmoles) et de diisopropyléthylamine (4 mmoles) dans le DMF est agitée à température ambiante durant 15 minutes. Le chlorhydrate de spiroisoxazoline (1 mmole) y est ensuite ajouté. La réaction étant achevée au bout de 2h de d'agitation (suivi par LC/MS), le solvant est évaporé sous pression réduite. Le résidu obtenu est repris dans le dichlorométhane et est lavé successivement à l'aide d'HC1 1N (2 fois), d'une solution saturée en NaHCO3 et de saumure. La phase organique est ensuite séchée sur MgSO4 et concentrée à sec. Le composé est alors purifié par HPLC préparative. Evaluation de l'activité des composés Le test cellulaire de potentialisation de l'éthionamide Le test utilisé permet de vérifier que ces composés sont capables de potentialiser l'activité bactéricide de l'éthionamide sur des macrophages 25 infectés par M. tuberculosis. Ce test est un test de « High Content Screening » (HCS) ou criblage à contenu dense. Les tests HCS sont réalisés sur des cultures cellulaires qui permettent d'étudier certains caractères phénotypiques d'un microorganisme (bactérie par exemple) dans un environnement donné. Les changements phénotypiques observés peuvent aller de l'augmentation (ou la diminution) de la production de certaines protéines marquées à la modification de la morphologie du microorganisme étudié. La méthode est décrite dans la publication suivante : " Ethionamide Boosters: Synthesis, Biological Activity, and Structure-Activity Relationships of a Series of 1,2,4-Oxadiazole EthR Inhibitors " 2011 Journal of Medicinal Chemistry. Ce test a pour but de déterminer la concentration en ligand nécessaire pour potentialiser dix fois l'activité de l'éthionamide (ETH). Pour mesurer la concentration de ligand nécessaire pour potentialiser dix fois l'activité de l'ETH, on se place à une concentration constante en éthionamide (04g/mL ce qui correspond au Me' de sa 15 CMI99). En faisant varier la concentration en ligand on peut déterminer la concentration nécessaire pour inhiber 50% de la pousse bactérienne, c'est-à-dire la concentration nécessaire pour potentialiser dix fois l'activité de l'éthionamide. Cette concentration sera notée EC50. Mesure de la solubilité 20 401.1L d'une solution à 10mM dans le DMSO de l'échantillon est ajoutée à 1,96mL de Me0H ou de PBS à pH 7.4. Les échantillons sont alors agités pendant 24h à TA, centrifugés pendant 5min puis filtrés sur des filtres de taille 0.45,tm. 20puL de chaque solution est alors ajoutée à 180e de Me0H puis analysée par LC-MS. La solubilité est déterminée 25 comme le ratio des aires des signaux de masses PBS/Me0H. ACTIVITES BIOLOGIQUES MESUREES Le tableau I suivant regroupe les formules des composés de l'invention testés ainsi que les valeurs des EC50 mesurées expérimentalement selon le protocole précité. TABLEAU I N° Composé RMN [MH]+ EC50 (Rn BDM 44636 1H (CD2C12, 300 MHz): 5(ppm) 2.22 (m, 1H), 2.52 (m, 5H), 3.48 (m, 2H), 3.61-3.98 (m, 4H), 7.47 (m, 3H), 7.70 (m, 2H). 327 0.53 326.32 g/mol 13C (CD2C12, 75 MHz): 8(ppm) 26.6 and 27.1 (q, J=2.9Hz), 29.0 (q, J=29.5Hz), 35.6, 37.2, 41.2 and 41.6, 44.9, 45.5, 55.7, 56.5, 89.7 and 91.2, 126.5, 128.7, 129.1, 130.3, 127.6 (q, J=271.1Hz), 156.5 and 156.6, 167.9 and 168.2. 19F (CD2C12, 282 MHz): 8(ppm) -67.00, -66.98. 4 1H (CD2C12, 300 MHz): BDM_44635 312.29 g/mol â(ppm) 2.26-2.56 (m, 4H), 3.65 (s, 2H), 4.21 and 4.34 (2d, 2H, J=11.1 and 10.5Hz), 4.32 and 4.50 (2d, 2H, J=9.3 and 9.3Hz), 7.46 (m, 3H), 7.68 (m, 2H). 13C (CD2C12, 75 MHz): 313 0.11 5(ppm) 24.3 (q, J=3.1Hz), 28.8 (q, J=28.4Hz), 44.5, 61.5, 63.7, 80.2, 126.6, 128.8, 130.5, 127.1 (q, J=279.5 Hz), 156.8, 169.1. 19F (CD2C12, 282 MHz): Ô(ppm) -37.12. 6 BDM_41774 1H (CDC13, 300 MHz): 5 (ppm) 1.69 (m, 2H), 1.94 (m, 2H), 2.46 (m, 4H), 3.12 (s, 2H), 3.24 (m, 1H), 3.52 (m, 2H), 4.26 (m, 1H), 7.04 (q, 1H, J=5.1 and 3.6Hz), 7.16 (dd, 1H, J=3.6 and 1.1Hz), 7.38 (dd, 1H, J=5.1 and 1.1Hz). 347 0.03 346.37 g/mol N-0 BDM_41776 347.36 g/mol 7 s i N -CI (CDC13, 300 MHz): 5 (ppm) 1.72 (m, 2H), 1.95 (m, 2H), 2.45 (m, 4H), 3.29 (s, 2H), 3.33 (m, 1H), 3.58 (m, 2H), 4.15 (m, 1H), 7.41 (d, 1H, J=3.2Hz), 7.86 (d, 1H, J=3.2Hz). 13C (CDC13, 75 MHz): 5 (ppm)25.9, 29.6 (q, J=29.1Hz), 35.4, 36.2, 37.9, 39.0, 45.2, 85.7, 121.3, 127.1 (q, J=274.0Hz), 143.5, 153.8, 157.7, 168.0. 348 0.04 1H (CD2C12, 300 MHz): BDM_44783 5(ppm) 0.91 (d, 6H, J=6.6 Hz), 1.40-1.58 (m, 3H), 1.71 (m, 2H), 1.91 (m, 2H), 3.12 (s, 2H), 321 0.13 3.35 (m, 1H), 3.58 (m, 2H), 4.04 (m, 1H), 7.07 (m, 2H), 7.17 (m, 2H), 7.40 (m, 2H). BDM_44780 1H (CDC13, 300 MHz): ô (ppm) 1.79 (m, 2H), 1.90 (m, 4H), 2.16 (m, 2H), 2.42 (t, 2H, J=7.2Hz), 3.29 (s, 2H), 3.33 (m, 1H), 3.58 (m, 2H), 4.03 (m, 1H), 7.45 (d, 1H, J=3.2Hz), 7.86 (d, 1H, J=3 .2Hz). 362 0.07 1H (CD2C12, 300 MHz): BDM_41420 5 (ppm) 1.36-1.88 (m, 2H), 1.90-2.04 (m, 2H), 2.45-2.61 (m, 4H), 3.16 (s, 2H), 3.42 (m, 1H), 3.56 (m, 2H), 4.18 (m, 1H), 7.47 (m, 3H), 7.70 (m, 2H). 341 0.02 340.35 g/mol 13C (CD2C12, 75 MHz): 5 (ppm) 25.8, 29.5 (q, J=39.1Hz), 35.5 and 36.2, 39.4 and 42.6, 45.3, 84.1, 126.5, 128.7 and 130.0, 127.6 (q, J=275.3 Hz), 156.4, 167.8. N-0 1H (CDC13, 300 MHz): BDM_41781 354.38 g/mol 5(ppm) 1.69 (m, 2H), 1.94 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 2.45 (m, 4H), 3.10 (s, 2H), 3.25 (m, 1H), 355 2.50 3.53 (m, 2H), 4.26 (m, 1H), 7.19 (d, 2H, J=7.9Hz), 7.54 (d, 2H, J=5.0Hz). 1F1 (CDC13, 300 MHz): BDM_41789 382.43 g/mol N-0 8(ppm) 1.25 (d, 6H, J=6.9Hz), 1.69 (m, 2H), 1.94 (m, 2H), 2.43 (m, 4H), 2.89 (qp, 1H, J=13.8 and 6.9Hz), 3.11 383 ND (s, 2H), 3.26 (m, 1H), 3.54 (m, 2H), 4.26 (m, 1H), 7.26 (d, 2H, J=8.2Hz), 7.56 (dt, 2H, J=8.3 and 1.9Hz). 1F1 (CDC13, 300 MHz): BDM_41793 396.46 g/mol 43(ppm) 1.30 (s, 9H), 1.66 (m, 2H), 1.92 (m, 2H), 2.42 (m, 4H), 3.08 (s, 2H), 3.22 (m, 1H), 397 ND 3.50 (m, 2H), 4.24 (m, 1H), 7.38 (d, 2H, J=8.6Hz), 7.54 (d, 2H, J=8.6Hz). BDM_41938 370.37 g/mol N-0 / 1H (CDC13, 300 MHz): â(ppm) 1.66 (m, 2H), 1.94 (m, 2H), 2.40 (m, 4H), 3.22 (s, 2H), 3.25 (m, 1H), 3.52 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 4.23 (m, 1H), 6.91 (m, 2H), 7.35 (td, 1H, J=7.5 and 1.7Hz), 7.70 (dd, 1H, J=7.7 and 1.7Hz). 371 0.02 1H (CD2C12, 300 MHz): BDM_43097 370.37 g/mol Ô(ppm) 1.71 (m, 2H), 1.94 (m, 2H), 2.55 (m, 4H), 3.14 (s, 2H), 3.38 (m, 1H), 3.58 (m, 2H), 371 0.29 3.85 (s, 3H), 4.17 (m, 1H), 6.99 (m, 1H), 7.21 (m, 2H), 7.35 (t, 1H, J=7.8Hz). BDM_41935 1H (CDC13, 300 MHz): 5(ppm) 1.68 (m, 2H), 1.94 (m, 2H), 2.46 (m, 4H), 3.09 (s, 2H), 3.25 (m, 1H), 3.53 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 4.26 (m, 1H), 6.90 (m, 1H), 7.56 (m, 1H). 370.37 g/mol 16 371 ND 1H (CD2C12, 300 MHz): BDM_43116 400.40 g/mol 8(ppm) 1.82 (m, 2H), 1.95 (m, 2H), 2.55 (m, 4H), 3.13 (s, 2H), 3.43 (m, 1H), 3.65 (m, 2H), 3.89 (s, 6H), 4.15 (m, 1H), 6.90 (d, 1H, J=8.4Hz), 7.07 (dd, 1H, J=8.3 and 2.0Hz), 7.35 (d, 1H, J=1.9Hz). 401 ND BDM_41797 384.36 g/mol 1H (CDC13, 300 MHz): 8(ppm) 1.69 (m, 2H), 1.95 (m, 2H), 2.48 (m, 4H), 3.08 (s, 2H), 3.25 (m, 1H), 3.54 (m, 2H), 4.27 (m, 1H), 6.02 (s, 2H), 6.81 (d, 1H, J=8.1Hz), 6.99 (dd, 1H, J=8.1 and 1.7Hz), 7.27 (d, 1H, J=1.5Hz). 385 1.30 BDM_41791 424.35 g/mol 1H (CDC13, 300 MHz): â(ppm) 1.70 (m, 2H), 1.94 (m, 2H), 2.45 (m, 4H), 3.10 (s, 2H), 3.24 (m, 1H), 3.53 (m, 2H), 4.26 (m, 1H), 7.24 (m, 2H), 7.66 (dt, 2H, J=9.0 and 2.7Hz). 425 BDM_41933 1H (CDC13, 300 MHz): â(ppm) 1.72 (m, 2H), 1.98 (m, 2H), 2.47 (m, 4H), 3.14 (s, 2H), 3.27 (m, 1H), 3.55 (m, 2H), 4.29 (m, 1H), 7.66 (d, 1H, J=8.3Hz), 7.75 (d, 1H, J=8.2Hz). 408.35 g/mol 24 409 BDM_41799 1H (CDC13): ô (ppm) 0.91 (d, 6H, J = 6.29Hz), 1.48 (m, 3H), 1.64 (m, 2H), 1.93 (m, 2H), 2.33 (m, 2H), 3.28 (s, 2H), 3.42 (m, 1H), 3.59 (m, 2H), 4.04 (m, 1H), 7.27 (m, 1H), 7.70 (td, 1H, J = 7.67Hz, J = 1.77Hz), 8.00 (dt, 1H, J = 7.99Hz, J = 1.03Hz), 8.58 (m, 1H). 316 1.30 BDM_41932 1H (CDC13): 8 (ppm) 0.92 (d, 6H, J = 6.29Hz), 1.49 (m, 3H), 1.65 (m, 2H), 1.98 (m, 2H), 2.33 (m, 2H), 3.27 (s, 2H), 3.30 (m, 1H), 3.54 (m, 2H), 4.19 (m, 1H), 7.27 (m, 3H), 7.61 (dd, 1H, J = 7.29Hz, J = 1.81Hz). 349 1.30 BDM_41934 1H (CDC13): (ppm) 0.90 (d, 6H, J = 6.26Hz), 1.48 (m, 3H), 1.70 (m, 2H), 1.93 (m, 2H), 2.31 (m, 2H), 3.10 (s, 2H), 3.26 (m, 1H), 3.49 (m, 2H), 4.21 (m, 1H), 7.63 (d, 1H, J = 8.29Hz), 7.73 (d, 1H, J = 8.24Hz). 383 ND BDM_41936 1H (CDC13): 3 (ppm) 0.90 (d, 6H, J = 6.26Hz), 1.48 (m, 3H), 1.61 (m, 2H), 1.91 (m, 2H), 2.31 (m, 2H), 3.07 (s, 2H), 345 ND 3.26 (m, 1H), 3.51 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 4.19 (m, 1H), 6.89 (m, 1H), 7.55 (m, 1H). BDM_41939 1F1 (CDC13): (ppm) 0.91 (d, 6H, J = 6.30Hz), 1.48 (m, 3H), 1.62 (m, 2H), 1.92 (m, 2H), 2.32 (m, 2H), 3.22 (s, 2H), 3.27 (m, 1H), 3.57 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 4.18 (m, 1H), 6.92 (m, 2H), 7.35 (td, 1H, J = 7.46Hz, J = 1.74Hz), 7.70 (dd, 1H, J = 7.68Hz, J = 1.72Hz). 345 0.63 BDM_43103 1F1 (CD2C12): 8 (pPm) 1.72 (m, 2H), 1.86 (m, 4H), 2.15 (m, 2H), 2.43 (m, 2H), 3.29 (s, 2H), 3.34 (m, 1H), 3.52 (m, 389 0.77 2H), 4.10 (m, 1H), 7.33 (m, 2H), 7.46 (m, 1H), 7.61 (m, 1H). FF BDM_41941 1H (Me0D): â (ppm) 1.74 (m, 6H), 2.13 (m, 2H), 2.52 (t, 2H, J = 7.20Hz), 3.26 (s, 2H), 3.40 (m, 1H), 3.49 (m, 1H), 3.65 (m, 1H), 3.99 (m, 1H), 7.40 (m, 3H), 7.65 (m, 2H). FF 355 1.00 BDM_43119 1H (CD2C12): 6 (PPm) 1.75 (m, 2H), 1.86 (m, 4H), 2.15 (m, 2H), 2.42 (m, 2H), 3.07 (s, 3H), 3.16 (s, 2H), 3.34 (m, 1H), 3.52 (m, 2H), 4.11 (m, 1H), 7.85 (ddt, 2H, J = 8.65Hz, J = 1.94Hz), 7.97 (ddt, 2H, J = 8.65Hz, J = 1.72Hz). 433 BDM_43095 1H (CD2C12): 5 (PPm) 1.09 (m, 3H), 1.52 (m, 10H), 2.18 (m, 1H), 2.37 (m, 2H), 3.14 (s, 2H), 327 REVENDICATIONS: 1. Composé de type spiroisoxaline de formule générale (1) : 0 ,R1 112 R2 (I) dans laquelle : m= 0 ou 1 ; n=0 ou 1; R1 représente un groupement choisi parmi les groupements suivants : les chaînes alkyles en Cl -05, linéaires ou ramifiées, les chaînes alkyles en Cl -05 linéaires ou ramifiées et substituées en particulier substituées par au moins un atome de fluor (F), en particulier les chaînes alkyles en Cl -C3 linéaires ou ramifiées et substituées pax au moins un atome de fluor (F) ou par un groupement cyclique saturé ou insaturé en C3-C6, les groupements cycliques saturés ou insaturés en C3-C6 et les groupements CN, CH2CN et CH2N3, phényle éventuellement substitué, en particulier phényle substitué par un atome Cl ou F, benzyle éventuellement substitué, en particulier benzyle substitué par un atome Cl ou F, 0-phényle et thiophènyle ; R2 est choisi parmi les groupements suivants : phényle, benzyle, naphatalènyle, phényle substitué, en particulier phényle substitué par au moins une chaîne alkyle en Cl -C4, linéaire ou ramifiée, phényle substitué par au moins une chaîne alkyle en Cl -C4, linéaire ou ramifiée et substituée, en particulier substituée par au moins un atome de fluor (F), phényle substitué par un groupement choisi parmi OCH3, OCF3, CL F, CH3S02 et CF3, un groupement phényle dont deux atomes de carbone consécutifs sont substitués par un même groupement 0-CH2-0, un 47groupement cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle, cyclohexyle et les hétérocycles comportant 5 ou 6 sommets, saturés ou insaturés comportant au moins un atome choisi parmi S, N et 0 dans le cycle, en particulier les hétérocycles aromatiques à 5 ou 6 sommets comportant au moins un atome choisi parmi S, N et 0 dans le cycle. 2. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que m=n=1. 3. Composé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que RI est choisi parmi les groupements suivants : -CH2CF3, -CF2CF3, - (CH2)2CF3, -CT12-isopropyle, cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle, cyclopentènyle, -CH2-cyclopropyle, -C1I-I2cyclobutyle, CH2cyclopentyle, phényle éventuellement substitué, en particulier phényle substitué par un atome Cl ou F, benzyle éventuellement substitué, en particulier benzyle substitué par un atome Cl ou F, 0-phényle et thiophènyle. 4. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que R1 est choisi parmi -CH2CF3 et -(CH2)2CF3. 5. Composé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que R2 est choisi parmi les groupements suivants : phényle, les groupements phényle substitués en ortho par OCH3, OCF3, Cl, F ou CF3, en particulier substitué par OCH3 ou Cl. 6. Composé selon l'une quelconque des revendications I à 4, caractérisé en ce que R2 est choisi parmi les hétérocycles aromatiques à 5 ou 6 sommets qui comportent au moins un atome choisi parmi les atomes S, N et 0 adjacent à l'atome de l'hétérocycle lié au carbone en alpha de ,0 N\\ l'azote du cycle de la formule (I). 7. Composé selon la revendication 5, caractérisé en ce que R2 est choisi parmi les groupements suivants : 48 8. Composé selon l'une quelconque de revendications 1 à 4, caractérisé en ce que R2 est choisi parmi les groupements suivants : NI 22 i*N et 9. Composé selon la revendications 1 caractérisé en ce qu'il est choisi parmi les composés suivants : N-0 N-0 S ,S N N-0 49 -n -n -n - -n 10. Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 9 pour leur utilisation en tant que médicament. .5 > ; , ; N-0 , ; ; e ; 51 11. Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 9 pour leur utilisation dans le traitement des infections bactériennes et rnycobactériennes, notamment dans le traitement de la tuberculose, de la lèpre ou des mycobactérioses atypiques. 12. Composition pharmaceutique comprenant, en tant que principe actif, au moins un composé selon l'une quelconque des revendications I à 9 et un excipient pharmaceuticalernent acceptable. 13. Composition selon la revendication 12, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre, en tant que principe actif, au moins un antibiotique 10 actif contre les bactéries et/ou mycobactéries, notamment choisi parmi les antibiotiques activab les par la voie enzymatique de l'EthA. 14. Produit contenant au moins un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9 et au moins un antibiotique actif contre les bactéries et/ou mycobactéries et notamment choisi parmi les 15 antibiotiques activables par la voie enzymatique de l'EthA, en particulier un antibiotique choisi parmi l'éthionamide, le prothionamide, l'isoxyl et le thiacétazone, comme produit de combinaison en thérapie antituberculeuse, anti-lépromateuse ou anti-mycobactérierme générale. 20 52