Brevet FR2979542A1 — publié le 20130308

La présente invention concerne des hydrolysats de protéines de poisson pour leur utilisation dans la prévention et/ou le traitement de troubles métaboliques tels qu'un syndrome métabolique, en particulier associé à l'obésité. Les hydrolysats de protéines de poisson peuvent être obtenus par voie chimique ou par voie enzymatique. Dans le premier cas, l'hydrolyse des protéines est réalisée à l'aide d'un acide fort ou d'une base forte, dans des conditions strictes de pH. Ces conditions d'hydrolyse altèrent considérablement la qualité des hydrolysats obtenus. Dans le second cas, les hydrolysats sont obtenus par hydrolyse des protéines à l'aide d'enzymes endogènes ou d'enzymes exogènes. Ces conditions d'hydrolyse aboutissent à des hydrolysats de meilleure qualité, notamment en ce qui concerne l'hydrolyse à l'aide d'enzymes hétérogènes qui permet de contrôler le degré d'hydrolyse. De nombreuses études ont démontré que les hydrolysats issus des coproduits et produits de la pêche obtenus par voie enzymatique présentaient des propriétés nutritionnelles et fonctionnelles intéressantes (Quaglia et al. 1987; Shahidi et al. 1995; Liceaga-Gesualdo et al. 1999; Kristinsson et Rasco 2000; Liaset et al. 2003). En effet, la réaction d'hydrolyse enzymatique permet d'obtenir des peptides de poids moléculaires variés pouvant présenter des propriétés biologiques nouvelles par rapport à la protéine native. Par exemple, des études ont révélé que des hydrolysats de protéines de poissons, de crustacés et de mollusques, présentaient des propriétés anticoagulantes (Rajapakse et al. 2005), antiprolifératives de lignées cellulaires cancéreuses (Picot et al. 2006), réparatrices du tissu épithélial intestinal (Fitzgerald et al. 2005), antioxydantes (Chuang et al. 2000; Suetsuna et al. 2000; Kim et al. 2001; Suetsuna 2002; Wu et al. 2003; Jun et al. 2004; Suetsuna et al. 2004; Je et al. 2008; Raghavan et al. 2008), immunomodulatrices (Bogwald et al. 1996; Gildberg et al. 1996; Kotzamanis et al. 2007; Tang et al. 2008), et stimulatrices de la croissance de certaines lignées cellulaires (Ravallec-Plé et al. 2000; Guerard et al. 2001). C'est ainsi que ces dernières années, de nombreuses industries pharmaceutiques, cosmétiques ou alimentaires se sont intéressées aux propriétés fonctionnelles des hydrolysats de protéines de poisson ou de tout autre produit de la mer. Le syndrome métabolique, ou « syndrome X » ou encore « syndrome de résistance à l'insuline », peut être défini comme un état clinique résultant de la présence de plusieurs signes physiologiques parmi les suivants: pression artérielle élevée, taux sanguin de glucose à jeun élevé, taux sanguin de triglycérides élevés, taux sanguin de cholestérol HDL bas et présence d'une obésité abdominale. La définition du syndrome métabolique varie selon les pays ou les organismes de santé. Pour de nombreux spécialistes, il y a syndrome métabolique lorsque trois au moins des facteurs de risque précités sont observés. D'après de nombreux spécialistes encore, l'obésité abdominale est presque toujours observée chez les patients souffrant du syndrome métabolique. Chez presque tous les individus atteints du syndrome métabolique, on note un début de résistance à l'insuline. L'insuline est une hormone produite par le pancréas qui permet l'absorption du glucose et contribue à la régulation du taux de sucre dans le sang, c'est à dire, la glycémie. En cas d'insulino-résistance, l'absorption du glucose dans les cellules ne se produit plus. Pour remédier à la situation et maintenir un taux de glucose dans le sang adéquat, le pancréas doit produire plus d'insuline. Il s'en suit avec le temps une dérégulation du pancréas qui ne peut plus secréter d'insuline, et l'apparition du diabète de type 2. La résistance à l'insuline est aussi associée à un risque plus élevé d'hypertension et de maladies cardiovasculaires, car elle s'accompagne d'une augmentation des taux de cholestérol et de triglycérides, qui peuvent endommager les parois artérielles. De plus, la résistance à l'insuline est fortement liée à l'obésité. L'obésité est, elle, souvent associée à une inflammation systémique chronique et à des dysfonctionnements métaboliques liés aux cytokines et hormones synthétisées et sécrétées par les adipocytes. En effet, en plus d'être un organe de stockage, le tissu adipeux est un organe endocrinien impliqué dans la régulation de la balance énergétique et du métabolisme lipidique et glucidique via les sécrétions d'insuline, d'adiponectine, de leptine, et autres adipocytokines liées à l'inflammation. En particulier, l'obésité favorise l'apparition de stéatose qui se caractérise par une infiltration de triglycérides au niveau du foie avec une rétention anormale des lipides par les cellules et une anomalie dans la synthèse et la dégradation des triglycérides. Cette stéatose au niveau du foie provoque une inflammation du foie et plus globalement l'obésité entraîne une inflammation chronique des tissus. Ceci favorise la résistance des cellules à l'insuline et l'apparition d'un diabète de type II. En effet, l'inflammation du tissu adipeux provoque une libération des cytokines qui vont se fixer sur les récepteurs de l'insuline à la surface des cellules en bloquant le message normalement transmis par l'insuline. Il en résulte une résistance à l'insuline. Les hormones intervenant dans la résistance à l'insuline sont l'interleukine-6 (IL-6), le tumor necrosis factor alpha (TNFa), la leptine, le plasminogen Activator inhibitor-1 (PAI-1) et l'adiponectine. Dans ce contexte, la société demanderesse, qui a orienté ses recherches sur les troubles du métabolisme, notamment sur le syndrome métabolique, a pu identifier des hydrolysats obtenus à partir de l'hydrolyse enzymatique d'une source de protéines de poissons présentant des propriétés fonctionnelles intéressantes chez le mammifère, en particulier chez l'homme. L'invention concerne ainsi un hydrolysat de protéines de poisson obtenu par hydrolyse enzymatique d'au moins une source de protéines choisie parmi le groupe composé des poissons Micromesistius poutassou, Clupea harengus, Scomber scombrus, Sardina pilchardus, Trisopterus esmarki, Trachurus spp., Gadus morhua, Pollachius virens, Melanogrammus aeglefinus, Coryphaenoides rupestris, des poissons appartenant à l'ordre des siluriformes, ladite hydrolyse enzymatique étant réalisée par une enzyme endopeptidase dérivée de Bacillus subtilis, pour la prévention, la limitation et/ou le traitement des troubles du métabolisme. En particulier, un tel trouble du métabolisme comprend l'hyperinsulinémie, la résistance à l'insuline, l'intolérance au glucose, l'hyperglycémie, la dyslipidémie, le diabète de type 2, le diabète gestationnel, la stéatose hépatique non alcoolique, l'inflammation chronique et/ou le syndrome métabolique. Préférentiellement, un tel trouble du métabolisme est un syndrome métabolique, en particulier associé à l'obésité. Préférentiellement encore, le syndrome métabolique comprend l'hypersinsulinémie, la résistance à l'insuline, l'intolérance au glucose, l'hyperglycémie, l'obésité, la dyslipidémie, le diabète de type 2, le diabète gestationnel, la stéatose hépatique non alcoolique, l'inflammation chronique ou un mélange de deux, préférentiellement trois de ces troubles physiologiques. Les exemples qui suivent montrent, en effet, qu'un hydrolysat selon l'invention possède une activité significative à la fois sur plusieurs états physiologiques révélant un trouble du métabolisme. Selon une caractéristique de l'invention, ledit hydrolysat n'induit pas de limitation de la prise alimentaire ou de phénomène de satiété. Selon un mode de réalisation de l'invention, l'hydrolysat de protéines de poisson présente: - la répartition du profil moléculaire suivant : de 33 à 39 % de molécules de poids moléculaire inférieur à 300 Da, de 34 à 37 % de molécules dont le poids moléculaire est compris entre 300 et 1 000 Da, de 21 à 24 % de molécules dont le poids moléculaire est compris entre 1 000 et 3 000 Da, de 3 à 4 % de molécules dont le poids moléculaire est compris entre 3 000 et 5 000 Da et de 1 à 2 % de molécules dont le poids moléculaire est compris entre 5 000 et 10 000 Da, - une teneur en lipides inférieure à 1 %, en pourcentage de produit brut, - une teneur en glucides inférieure à 4 %, en pourcentage de produit brut, - une teneur en protéines supérieure à 80 %, en pourcentage de produit brut, - une teneur en matière minérale comprise entre 5 et 10 %, en pourcentage de produit brut. Il présente également avantageusement la composition en acides aminés suivante : Acide glutamique 16,9 %, Acide aspartique 11,7 %, Lysine 10 %, Leucine 8,2 %, Arginine 6,3 %, Alanine 6,8 %, Valine 4,8 %, Isoleucine 4,4 %, Glycine 5 %, Thréonine 4,5 %, Sérine 4,4 %, Tyrosine 3,2 %, Phénylalanine 3,9 %, Méthionine 2,6 %, Proline 3,4 %, Histidine 2 %, Cystine 1 %, Tryptophane 0,8 %, en pourcentage en poids par rapport au poids total d'acides aminés. Un tel hydrolysat ainsi que son procédé d'obtention est décrit dans la demande de brevet n° 08 00753 déposée par la société demanderesse, publiée sous le n° FR 2 927 336. Préférentiellement, la source de protéines de poisson comprend la pulpe obtenue à partir du filet du ou des poissons. Préférentiellement encore, l'hydrolysat de protéines de poisson est obtenu par un procédé d'obtention comprenant: - le broyage d'au moins une source de protéines choisie parmi le groupe composé des espèces de poissons Micromesistius poutassou, Clupea harengus, Scomber scombrus, Sardina pilchardus, Trisopterus esmarki, Trachurus spp., Gadus morhua, Pollachius virens, Melanogrammus aeglefinus, Coryphaenoides rupestris, de poissons appartenant à l'ordre des siluriformes, en présence d'eau, de manière à récupérer la pulpe dudit ou desdits poissons, - l'hydrolyse enzymatique de ladite source de protéines à une température comprise entre 50 et 75°C, pendant 1 à 5 heures, après l'ajout d'une enzyme endopeptidase dérivée de Bacillus subtilis de manière à obtenir un mélange réactionnel, - l'arrêt de ladite hydrolyse enzymatique par inactivation desdites enzymes après élévation de la température dudit mélange réactionnel à un niveau non inférieur à 70°C, pendant 8 à 20 minutes, - la séparation de l'hydrolysat de protéines obtenu du reste du mélange réactionnel. Avantageusement, ladite hydrolyse enzymatique est réalisée selon un ratio enzyme/source de protéines compris entre 0,01 et 2 %, préférentiellement égal à 0,75 %, et à une température d'hydrolyse égale à 55°C. L'enzyme endopeptidase dérivée de Bacillus subtilis est préférentiellement une métalloendopeptidase, ou bacillolysine, appartenant à la classe EC 3.4.24.28 de la classification EC établie par la Commission des enzymes et publiée par l'Union internationale de biochimie et de biologie moléculaire (IUBMB) en 1992. L'hydrolysat de protéines de poisson tel que défini précédemment peut ainsi être utilisé pour la fabrication d'un complément alimentaire, ou d'une composition pharmaceutique ou nutraceutique, destiné au traitement et/ou à la prévention des troubles métaboliques, tels qu'un syndrome métabolique, l'hyperinsulinémie, la résistance à l'insuline, l'intolérance au glucose, l'hyperglycémie, la dyslipidémie, le diabète de type 2, le diabète gestationnel, la stéatose hépatique non alcoolique et/ou l'inflammation chronique, en particulier le syndrome métabolique notamment associé à l'obésité. Plus particulièrement encore, le syndrome métabolique s'accompagne de l'hyperinsulinémie, la résistance à l'insuline, l'intolérance au glucose, l'hyperglycémie, dyslipidémie, le diabète de type 2, le diabète gestationnel, l'inflammation chronique ou d'un mélange de deux, préférentiellement de trois de ces troubles physiologiques. L'invention concerne encore une méthode de traitement et/ou de prévention thérapeutique chez le mammifère, en particulier chez l'homme, des troubles métaboliques précités, la méthode consistant à administrer par voie orale un hydrolysat de protéines de poisson tel que défini précédemment. Les caractéristiques de l'invention mentionnées ci-dessus, ainsi que d'autres, apparaîtront plus clairement à la lecture de la description suivante d'un exemple de réalisation, ledit exemple se voulant illustratif et non limitatif. Les Figs. 1, 2 et 3 illustrent des dosages de l'insuline en iLtg/1 en fonction du temps en minutes réalisés chez des groupes de souris ayant reçu un régime contrôle (normolipidique), un régime hyperlipidique (Fig. 1), un régime contrôle (normolipidique) additionné d'un hydrolysat selon l'invention (Fig. 2) ou un régime hyperlipidique additionné d'un hydrolysat selon l'invention (Fig. 3), Les Figs. 4 et 5 illustrent les mesures de la glycémie en mg/dl en fonction du temps en minutes réalisées chez des groupes de souris ayant reçu un régime contrôle (normolipidique), un régime contrôle (normolipidique) additionné d'un hydrolysat selon l'invention (Fig. 4), un régime hyperlipidique ou un régime hyperlipidique additionné d'un hydrolysat selon l'invention (Fig. 5), La Fig. 6 illustre le dosage du cholestérol plasmatique en g/1 réalisé chez des groupes de souris ayant reçu un régime contrôle (normolipidique), un régime hyperlipidique, un régime contrôle (normolipidique) additionné d'un hydrolysat selon l'invention ou un régime hyperlipidique additionné d'un hydrolysat selon l'invention, La Fig. 7 illustre les dosages des triglycérides en g/l réalisés chez des groupes de souris ayant reçu un régime contrôle (normolipidique), un régime hyperlipidique, un régime contrôle (normolipidique) additionné d'un hydrolysat selon l'invention ou un régime hyperlipidique additionné d'un hydrolysat selon l'invention. Exemple 1: Hydrolysat de protéines obtenu à partir de merlan bleu Le merlan bleu (Micromesistius poutassou) est pêché en Atlantique Nord au large de Terre-Neuve. Les poissons sont débités en filets qui sont ensuite broyés de manière à en obtenir la pulpe. Cette pulpe de poisson constitue une source de protéines pour la production de l'hydrolysat. La pulpe est conservée à -20°C jusqu'à utilisation. Trois kilos de la pulpe de merlan bleu préalablement décongelée sont mélangés à de l'eau selon un rapport massique de 1. La température est portée à 55°C et une enzyme endopeptidase dérivée de Bacillus subtilis, commercialisée sous le nom de Corolase N par la société AB Enzyme (Feldbergstra13e 78, D-64293, Darmstadt, Germany) est alors ajoutée dans le mélange réactionnel selon un ratio enzyme/source de protéines de 0,75 %. La réaction d'hydrolyse est menée pendant 2 heures puis l'enzyme est inactivée par élévation de la température du milieu réactionnel à 85°C. Cette température est 30 maintenue durant 15 minutes. L'hydrolysat de protéines de merlan bleu obtenu, dénommé par la suite H1, est ensuite filtré sur un tamis (grillage de 2mm/2mm) de manière à éliminer les matières solides, puis récupéré dans un récipient. La fraction récupérée dans le récipient est alors centrifugée pendant 30 plus ou moins 5 minutes, à une vitesse comprise entre 4000 et 7000 RPM. Après élimination du culot, le surnageant est récupéré, lyophilisé puis conservé dans un endroit frais et sec, à l'abri de la lumière. Le surnageant peut également être atomisé. Exemple 2: Hydrolysat de protéines obtenu à partir d'autres espèces de poisson selon l'invention Des hydrolysats de protéines de maquereau (H2) (scomber scombrus), chinchard (H3) (Trachurus spp.), grenadier (H4) (Coryphaenoides rupestris), tacaud (H5) (Trisopterus esmarki), sardine (H6) (Sardina pilchardus), hareng (H7) (Clupea harengus), panga (H8) (poissons appartenant à l'ordre des siluriformes), lieu noir (H10) (Pollachius virens), cabillaud (H9) (Gadus morhua) et églefin (H11) (Melanogrammus aeglefinus) ont été préparés selon le procédé de l'exemple 1. Exemple 3: Analyses physico-chimiques des hydrolysats de protéines obtenus selon les exemples 1 et 2 Une détermination des poids moléculaires des peptides constitutifs de chaque hydrolysat de protéines H1 à H11 est réalisée par chromatographie d'exclusion 20 stérique (SEC-HPLC). L'hydrolysat de protéines sous forme de poudre après lyophilisation est suspendu dans de l'eau ultra pure à raison de 20 mg/mL, puis filtré sur une membrane de 0,45 iam et analysé par filtration sur gel avec une colonne Superdex Peptide HR 10/30, commercialisée par la société Pharmacia. La matrice de la colonne est 25 composée d'un gel poreux réticulé (diamètre 13-15itm) d'agarose et de dextrane d'un volume total de 24 mL. Son domaine de fractionnement est compris entre 100 et 7000 Da. La colonne est montée sur une chaîne HPLC, commercialisée par la société Dionex, qui est équipée d'une pompe (module Dionex P680). La mesure est réalisée par un détecteur d'ultra violets multi longueur d'ondes (module Dionex UVD 170 U). 30 L'hydrolysat de protéines H1 est élué par une phase mobile contenant de l'acétonitrile, de l'eau et du TFA. L'élution dure environ 1H à un débit de 0.5mL/min. La répartition des poids moléculaires est calculée à partir des paramètres d'une droite de calibration obtenue après le passage dans la colonne de marqueurs de poids moléculaires connus suivants: Cytochrome C (12 400 Da), aprotinine (6 511 Da), gastrine I (2 126 Da), substance P (1 348 Da), substance P fragment 1-7 (900 Da), glycine (75 Da) et leupeptine (463 Da). Les données sont collectées grâce au logiciel Chromeleon (Dionex). Les pourcentages des poids moléculaires sont calculés à l'aide d'un logiciel (GPC Cirrus de chez Polymer Laboratories). La longueur d'onde d'acquisition est de 214 nm. La répartition des poids moléculaires en fonction dW/logM est donnée par le logiciel. Le pourcentage de l'aire sous la courbe correspond au pourcentage de molécules. La répartition des poids moléculaires par classe de taille est donnée dans le Tableau 1. La répartition des poids moléculaires par classe de taille est donnée dans le Tableau 1 suivant. Le pourcentage de l'aire sous la courbe correspond au pourcentage de molécules peptidiques. Tous les hydrolysats montrent un profil de répartition des poids moléculaires identique. Tableau 1 Classes H1 H2 H3 H4 H5 H6 H7 H8 H9 H10 H11 10 1- 2 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 La composition en acides aminés de l'hydrolysat de protéines H1 est donnée dans le Tableau 2 et est obtenue en suivant les indications de la Directive Européenne 98/64/CE et de la norme NF EN ISO 13904-octobre 2005. Tableau 2 Acide aminé Pourcentage d'acide aminé Acide aminé Pourcentage d'acide aminé Acide glutamique 16,9 Glycine 5 Lysine 10 Thréonine 4,5 Acide aspartique 11,7 Sérine 4,4 Leucine 8,2 Tyrosine 3,2 Arginine 6,3 Phénylalanine 3,9 Alanine 6,8 Méthionine 2,6 Valine 4,8 Proline 3,4 Isoleucine 4,4 Histidine 2 Cystine 1 Tryptophane 0,8 La teneur en protéines est supérieure à 80 %, en pourcentage de produit brut (norme NF V18-120-Mars 1997 corrigée KJELDAHL). La teneur en lipides est inférieure à 1%, en pourcentage de produit brut (selon la directive européenne 98/64/CE). La valeur énergétique de l'hydrolysat de protéines H1 est d'environ 350 Kca1/100g. La teneur en glucides est inférieure à 4 % (déduite à partir des teneurs en protéines et glucides et de la valeur énergétique). Exemple 4: Activités biologiques d'un hydrolysat de protéines de merlan 10 bleu Hl L'hydrolysat de protéines H1 a été testé vis-à-vis de son activité sur le syndrome métabolique. Pour ce faire, 88 souris de 5 semaines, fournies par le centre d'élevage Harlan, 15 ont été placées dans des cages au sein d'une pièce à température et humidité contrôlées, en cycle jour-nuit inversé (nuit de 8h à 20h). Après une période d'adaptation de 10 jours, les animaux ont été soumis à un régime hyper-lipidique pendant 3 semaines et le gain de poids des animaux a été mesuré tout au long de cette expérience (pesée des souris 2 fois par semaine). Cette première expérimentation avait 20 pour but d'effectuer une sélection des animaux. Un régime standard leur a ensuite été donné pendant 4 semaines. 72 souris C3H mâles ont ainsi été sélectionnées et réparties en groupes: - 3 groupes recevant des régimes normo-lipidiques incluant 0% (groupe contrôle nommé C), 50 % (groupe nommé C 50% ou C-50) ou 80% (groupe nommé C 80% ou 25 C-80) d'hydrolysat de protéines de poisson H1, en pourcentage par rapport à l'énergie totale apportée par les protéines. - 3 groupes recevant des régimes hyper-lipidiques incluant 0% (groupe témoin nommé HL), 50% (groupe nommé HL 50% ou HL-50) ou 80% (groupe nommé HL 80% ou HL-80) d'hydrolysat de protéines de poisson H1, en pourcentage par rapport à 30 l'énergie totale apportée par les protéines. Tableau 3 : composition des régimes (g/Kg de régime final) C HL C50% HL50% C80% HL80% H1 0 0 175 230 280 368 Protéines lait 196 250 98 125 39,2 50 Amidon 573,4 367,8 507,1 277,5 467,4 223,3 Saccharose 93,3 59,9 82,6 45,2 76,1 36,4 Huile de 40 225 40 225 40 225 soja Sels 35 35 35 35 35 35 minéraux Vitamines 10 10 10 10 10 10 Cellulose 50 50 50 50 50 50 Choline 2,3 2,3 2,3 2,3 2,3 2,3 Dans ce qui suit, tous les résultats sont exprimés sous la forme de moyenne ± écart- type. Les effets des régimes ont été analysés à l'aide du logiciel SAS. Les différences entre groupes ont été étudiées par ANOVA (Proc GLM, SAS version 6.11, Cary, NC, USA). En cas de significativité du modèle (p Les dosages de l'insuline réalisés sur les groupes témoins C et HL (Fig.1) montrent que l'ingestion du régime hyperlipidique (HL) augmente l'insulinémie. Les dosages de l'insuline réalisés sur les groupes ayant reçu l'hydrolysat H1 dans un régime normolipidique dont 50% ou 80% de la part énergétique protéique est constituée de l'hydrolysat H1, c'est à dire les groupes C-50, C-80 et HL-50, HL-80 (Figs. 2 et 3), montrent que l'ajout de l'hydrolysat au régime Contrôle C et au régime HL diminue significativement l'insulinémie. De même, il ressort des Figs 4 et 5 que l'ajout de l'hydolysat H1 dans un régime normo-lipidique (groupe C) et hyperlipidique (groupe HL) diminue de manière significative la glycémie. En effet, les souris sous régime contrôle (C) avaient la même valeur de glycémie basale (Fig. 4). Par contre, une diminution significative de la glycémie au court du temps a été observée chez les souris sous régime enrichi en hydrolysat Hl. La courbe des souris nourries avec le régime HL contrôle (groupe HL) est une courbe caractéristique d'animaux diabétiques (Fig. 5). En effet, la courbe est beaucoup plus arrondie, signe que le glucose est moins rapidement utilisé par l'organisme. Le régime HL 80% engendre une différence de glycémie dès le niveau basal. Cependant, après 120 min, les deux régimes (HL-50 et HL-80) provoquent une diminution significative de la glycémie des souris par rapport au régime témoin HL. De ce fait, l'ingestion de l'hydrolysat H1 entraîne une amélioration significative de la tolérance au glucose. Mesure du taux de cholestérol plasmatique et dosage des triglycérides Le plasma des souris des différents groupes a été récupéré après abattage. Les échantillons sous forme d'aliquots ont été conservés à -20°C. Les dosages enzymatiques du cholestérol total dans le sérum et le plasma ont été réalisés à l'aide du kit Cholesterol RTU ®. Les dosages des triglycérides ont été réalisés à l'aide du Kit RANDOX ®. L'ajout de l'hydrolysat H1 au régime Contrôle C et au régime HL à la concentration de 80% de l'apport énergétique, diminue significativement la concentration du cholestérol plasmatique (Fig. 6) ainsi que la concentration des triglycérides plasmatiques (Fig. 7). Dosage des cytokines: La technique du Luminex a été utilisée pour doser des cytokines impliquées dans l'inflammation soit interleukine-6 (IL-6) le tumor necrosis factor alpha (TNFa), la leptine et deux adipocytokines : le plasminogen Activator inhibitor-1 (PAI-1) et l'adiponectine. Les résultats sont présentés dans le Tableau 4 ci-dessous : Tableau 4 IL-6 (ng/ml) TNFa (ng/ml) Leptine (ng/ml) PAI-1 (ng/ml) Adiponectine (mg/ml) C 5.6±1.2 3.8±2.5 8123±2180 7634±781 1.43±0.24 C-50 4.8±1.4 3.4±2.1 7769±843 7849±839 1.32±0.26 C-80 5.7±1.2 3.7±2.2 6896±1034 7353±994 1.35±0.26 HL 9.5±1.2 4.7±2.2 1456±1641 9412±781 1.24±0.42 HL-50 6.6±1.2* 4.2±2.2 9740±1030* 8406±781 1.32±0.44 HL-80 4.6±1.2* 4.1±2.2 6123±798* 7108±781* 1.12±0.25 * P Il est en outre noté que l'ingestion de l'hydrolysat H1 ne modifie pas la prise alimentaire et n'induit pas de phénomène de satiété (données publiées dans la demande de brevet WO 2010/149778). REVENDICATIONS1) Hydrolysat de protéines de poisson obtenu par hydrolyse enzymatique d'au moins une source de protéines choisie parmi le groupe composé des poissons Micromesistius poutassou, Clupea harengus, Scomber scombrus, Sardina pilchardus, Trisopterus esmarki, Trachurus spp., Gadus morhua, Pollachius virens, Melanogrammus aeglefinus, Coryphaenoides rupestris, des poissons appartenant à l'ordre des siluriformes, ladite hydrolyse enzymatique étant réalisée par une enzyme endopeptidase dérivée de Bacillus subtilis, pour la prévention et/ou le traitement des troubles du métabolisme. 2) Hydrolysat selon la revendication 1, caractérisé en ce que le trouble du métabolisme comprend l'hyperinsulinémie, la résistance à l'insuline, l'intolérance au glucose, l'hyperglycémie, la dyslipidémie, le diabète de type 2, le diabète gestationnel, la stéatose hépatique non alcoolique, l'inflammation chronique et/ou le syndrome métabolique. 3) Hydrolysat selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que le trouble du métabolisme est un syndrome métabolique, en particulier associé à l'obésité. 4) Hydrolysat selon la revendication 3, caractérisé en ce que le syndrome métabolique comprend l'hyperinsulinémie, la résistance à l'insuline, l'intolérance au glucose, l'hyperglycémie, l'obésité, la dyslipidémie, le diabète de type 2, le diabète gestationnel, la stéatose hépatique non alcoolique, l'inflammation chronique ou un mélange de deux, préférentiellement trois de ces troubles physiologiques. 5) Hydrolysat selon l'une des revendications 1 à 4, dans laquelle l'hydrolysat de protéines de poisson présente: - la répartition du profil moléculaire suivant : de 33 à 39 % de molécules de poids moléculaire inférieur à 300 Da, de 34 à 37 % de molécules dont le poids moléculaire est compris entre 300 et 1 000 Da, de 21 à 24 % de molécules dont le poids moléculaire est compris entre 1 000 et 3 000 Da, de 3 à 4 % de molécules dont le poids moléculaire est compris entre 3 000 et 5 000 Da et de 1 à 2 % de molécules dont le poids moléculaire est compris entre 5 000 et 10 000 Da, - une teneur en lipides inférieure à 1 %, en pourcentage de produit brut, - une teneur en glucides inférieure à 4 %, en pourcentage de produit brut, - une teneur en protéines supérieure à 80 %, en pourcentage de produit brut,- une teneur en matière minérale comprise entre 5 et 10 %, en pourcentage de produit brut. 6) Hydrolysat selon l'une des revendications précédentes, dans laquelle l'hydrolysat de protéines de poisson est obtenu par un procédé d'obtention 5 comprenant: - le broyage d'au moins une source de protéines choisie parmi le groupe composé des espèces de poissons Micromesistius poutassou, Clupea harengus, Scomber scombrus, Sardina pilchardus, Trisopterus esmarki, Trachurus spp., Gadus morhua, Pollachius virens, Melanogrammus aeglefinus, Coryphaenoides rupestris, de 10 poissons appartenant à l'ordre des siluriformes, en présence d'eau, de manière à récupérer la pulpe dudit ou desdits poissons, - l'hydrolyse enzymatique de ladite source de protéines à une température comprise entre 50 et 75°C, pendant 1 à 5 heures, après l'ajout d'une enzyme endopeptidase dérivée de Bacillus subtilis de manière à obtenir un mélange 15 réactionnel, - l'arrêt de ladite hydrolyse enzymatique par inactivation desdites enzymes après élévation de la température dudit mélange réactionnel à un niveau non inférieur à 70°C, pendant 8 à 20 minutes, - la séparation de l'hydrolysat de protéines obtenu du reste du mélange 20 réactionnel. 7) Hydrolysat selon l'une des revendications précédentes, dans laquelle ladite hydrolyse enzymatique est réalisée selon un ratio enzyme/source de protéines compris entre 0,01 et 2 %, préférentiellement égal à 0,75 %, et à une température d'hydrolyse égale à 55°C. 25 8) Hydrolysat selon l'une des revendications précédentes, dans laquelle ledit hydrolysat n'induit pas de limitation de la prise alimentaire ou de phénomène de satiété. 9) Hydrolysat selon l'une des revendications précédentes, dans laquelle ledit hydrolysat est issu du merlan bleu. 30 10) Composition comprenant un hydrolysat de protéines de poisson tel que défini dans l'une des revendications 1 à 9 pour son utilisation dans le traitement et/ou à la prévention des troubles du métabolisme. 11) Composition selon la revendication 10, caractérisée en ce que le trouble du métabolisme comprend l'hyperinsulinémie, la résistance à l'insuline, l'intolérance auglucose, l'hyperglycémie, la dyslipidémie, le diabète de type 2, le diabète gestationnel, la stéatose hépatique non alcoolique, l'inflammation chronique et/ou le syndrome métabolique, en particulier le syndrome métabolique associé à l'obésité. 12) Composition selon la revendication 10 ou 11, caractérisée en ce que ledit syndrome métabolique comprend l'hyperinsulinémie, la résistance à l'insuline, l'intolérance au glucose, l'hyperglycémie, l'obésité, la dyslipidémie, le diabète de type 2, le diabète gestationnel, la stéatose hépatique non alcoolique, l'inflammation chronique ou un mélange de deux, préférentiellement trois de ces troubles physiologiques. 13) Composition selon l'une des revendications 10 à 12, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'un complément alimentaire, d'une composition pharmaceutique ou nutraceutique.