Brevet FR2982612A1 — publié le 20130517

REVENDICATIONS1) Procédé d'extraction des toxines de Bacillus thuringiensis var. israelensis de matières végétales caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : a) Broyage de la matière végétale ; b) Ajout d'un tampon d'extraction en proportion de 2 à 10 en poids par rapport au poids de la matière végétale, le tampon d'extraction comprenant de l'eau, du carbonate de sodium en quantité suffisante pour que le pH du tampon soit compris entre 10 et 13, 1% à 4% de BSA et 0.5% à 1% de détergent non- ionique ; c) Sonification de la matière végétale ; d) Incubation de la matière végétale à une température inférieure à 50°C pendant au moins une heure ; e) Récupération du surnageant comprenant les toxines Bacillus thuringiensis var. israelensis. 2) Procédé d'extraction selon la revendication 1 caractérisé en ce que le détergent non ionique est le Tween20. 3) Procédé d'extraction selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que le tampon d'extraction a un pH de 10.5 comprend 50mM de carbonate de sodium, 2% de BSA et 1% de Tween20. 4) Procédé d'extraction selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que l'étape de sonification est effectuée sur glace à une puissance de 100W. 5) Procédé d'extraction selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que l'étape d'incubation est effectuée à 37°C pendant au moins une heure. 6) Procédé d'extraction selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que le surnageant est récupéré par centrifugation. 7) Procédé de détection d'au moins une toxine de Bacillus thuringiensis var. israelensis choisie parmi Cry4Aa, Cry4Ba, Cry11a et Cyt1Aa dans une matière végétale caractérisé en ce qu'il comprend l'extraction des toxines de Bacillus thuringiensis var. israelensis des matières végétales par le procédé d'extractionselon l'une des revendications 1-6 et la détection d'au moins une desdites toxines dans le surnageant obtenu à l'issue de l'extraction. 8) Procédé de détection selon la revendication 7 caractérisé en ce qu'au moins une toxine de Bacillus thuringiensis var. israelensis choisie parmi Cry4Aa, Cry4Ba, Cry11a et Cyt1Aa est détecté à l'aide d'un anticorps spécifique de cette toxine. 9) Procédé de détection selon l'une des revendications 7-8 caractérisé en ce que l'étape de détection est effectuée par ELISA. 10) Procédé de détection selon l'une des revendications 7-9 caractérisé en ce qu'il comprend le dosage qu'au moins une toxine de Bacillus thuringiensis var. israelensis choisie parmi Cry4Aa, Cry4Ba, Cry11a et Cyt1Aa. 15