Brevet FR2987264A1 — publié le 20130830

METHODES ET COMPOSITIONS POUR LE TRAITEMENT DE METASTASES CANCEREUSES Référence croisée Cette demande revendique le bénéfice de la demande provisoire des Etats-Unis portant le numéro de série 61/602 489, déposée le 23 février 2012, qui est incorporée ici à titre de référence dans sa totalité. Arrière-plan de l'invention Les métastases cancéreuses constituent la cause principale de rechute postopératoire ou post-traitement chez les patients cancéreux. Par exemple, les métastases osseuses, ou maladies osseuses métastasiques, constituant, parmi les métastases cancéreuses, une classe de métastases cancéreuses résultant d'une invasion tumorale primaire des os, constituent l'un des cas les plus courants de métastases de divers types de cancers humains (par exemple cancers du sein, du poumon, de la prostate et de la thyroïde). L'apparition de métastases osseuses engendre une morbidité sérieuse due à une douleur intraitable, une forte sensibilité aux fractures, une compression des nerfs et une hypercalcémie. Les métastases cancéreuses restent sensiblement réfractaires à une thérapie en dépit d'efforts intensifs pour développer un traitement. Résumé de l'invention Dans un aspect, il est mis ici à disposition un traitement d'une maladie ou d'un état associé à des métastases osseuses chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : R3 CH3 0 X OR Y. R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=O)-alkyle en C1 à Cg ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)mCH3 ; - R4 R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C2 à Cg, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à Cg, l'alcényle en C2 à Cg, l'alcynyle en C2 à Cg, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C2 à Cg, cycloalkyle en C3 à Cg, et halogénoalkyle en C1 à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; 10 R7 est un alkyle en C1 à Cg, OR5 ou NR5R6 ; m= 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament d'un tel composé. 15 Dans un autre aspect, il est mis ici à disposition des méthodes pour inhiber l'hypercalcémie d'une malignité chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : R3 CH3 R4 OR Y. R2 20 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=0)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)mCH3 ; 25 R4 est NR5R6, OR5, OC(=0)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C2 à Cg, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à Cg, l'alcényle en C2 à Cg, l'alcynyle en C2 à Cg, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants 30 choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=0)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C2 à Cg, cycloalkyle en C3 à Cg, et halogénoalkyle en C1 à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C, à C8 ; R7 est un alkyle en C1 à C8, OR5 ou NR5R6 ; m = 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament d'un tel composé. Dans un autre aspect, il est mis ici à disposition des méthodes pour inhiber la résorption osseuse chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : R3 CH R O n OR Y. R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=O)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)mCH3 ; R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en Cl à C8, l'alcényle en C2 à C8, l'alcynyle en C2 à C8, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C, à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à C8, et halogénoalkyle en C, à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; R7 est un alkyle en C1 à C8, OR5 ou NR5R6 ; m = 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou 30 promédicament d'un tel composé. Dans un autre aspect, il est mis ici à disposition des méthodes pour traiter des lésions ostéolytiques chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : o R4 R1.x Y. R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=0)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)mCH3 ; R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C2 à C8, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à Cg, l'alcényle en C2 à Cg, l'alcynyle en C2 à Cg, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C2 à Cg, cycloalkyle en C3 à Cg, et halogénoalkyle en C1 à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; R7 est un alkyle en C1 à Cg, OR5 ou NR5R6 ; n1 = 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament d'un tel composé. Incorporation à titre de référence Tous les brevets, demandes de brevet et publications, mentionnés dans cette description, sont incorporés ici à titre de référence dans la même mesure que si chaque brevet, demande de brevet ou publication individuel était spécifiquement et individuellement indiqué comme étant incorporé à titre de référence. Brève description des dessins Les nouvelles caractéristiques de l'invention sont présentées avec leurs particularités dans les revendications annexées. On aura une meilleure compréhension des caractéristiques et avantages de la présente invention en se référant à la description détaillée qui suit, laquelle présente des modes de réalisation illustratifs dans lesquels les principes de l'invention sont utilisés, et aux dessins joints, dans lesquels : Les Figures 1 a et 1 b montrent le changement relatif (%) de poids corporel durant l'étude (moyenne ± E.T.) (1a) et lors du sacrifice (1 b) des Groupes 1-5. Figure 1a : changement relatif (%) de poids corporel durant l'étude (moyenne ± E.T.). Le poids corporel lors du sacrifice, le poids corporel maximal et la perte de poids par rapport au poids corporel maximal ont été analysés statistiquement, et les résultats sont présentés sur les Figures 1 b, 2 et 2b (non représentée) respectivement. L'augmentation du poids corporel moyen du groupe témoin le jour 25 est due à l'euthanasie des animaux moribonds le jour 24. Figure 1 b : poids corporel lors du sacrifice (changement relatif par rapport au jour 0, moyenne ± E.T.). Une analyse statistique a été effectuée par analyse de variance ANOVA à un seul facteur avec transformation logarithmique suivie d'un test de Dunnett pour une comparaison avec le groupe témoin. Un astérisque (*) indique une différence statistiquement significative avec une valeur p Les Figures 6a et 6b montrent des résultats illustratifs de changement relatif entre le jour -4 et le jour 17 de l'activité de TRACP 5b sérique (moyenne ± E.T.) et de changement relatif entre le jour -4 et le jour 24 de l'activité de TRACP 5b sérique (moyenne ± E.T.) respectivement. Figure 6a : changement relatif entre le jour -4 et le jour 17 de l'activité de TRACP 5b sérique (moyenne ± E.T.). Une analyse statistique a été effectuée par analyse de variance ANOVA à un seul facteur avec transformation logarithmique suivie d'un test de Dunnett pour une comparaison avec le groupe témoin. Trois astérisques (***) indiquent une signification statistique avec une valeur p Les Figures 8a et 8b montrent le changement relatif entre le jour -4 et le jour 17 des valeurs de PINP sérique (moyenne ± E.T.) et le changement relatif entre le jour -4 et le jour 24 des valeurs de PINP sérique (moyenne ± E.T.), respectivement. Figure 8a : changement relatif entre le jour -4 et le jour 17 des valeurs de PINP sérique (moyenne ± E.T.). Une analyse statistique a été effectuée par analyse de variance ANOVA à un seul facteur avec transformation logarithmique suivie d'un test de Dunnett pour une comparaison avec le groupe témoin. Un astérisque (*) indique une différence statistiquement significative avec une valeur p Une analyse statistique a été effectuée par analyse de variance ANOVA à un seul facteur avec transformation logarithmique suivie d'un test de Dunnett pour une comparaison par paires avec le groupe témoin. Trois astérisques (***) indiquent une différence statistiquement significative avec une valeur p L'hypercalcémie est un taux élevé de calcium dans le sang. Elle peut être une découverte de laboratoire asymptomatique, mais, comme un taux élevé de calcium est souvent indicatif d'autres maladies, un bilan de santé devrait être entrepris si celui-ci persiste. Elle peut être due à une libération excessive de calcium squelettique, une absorption intestinale accrue de calcium, ou une excrétion rénale réduite de calcium. L'os est l'un des emplacements les plus courants pour les métastases. Bien que n'importe quel type de cancer soit capable de former des tumeurs métastasiques dans les os, le microenvironnement de la moelle tend à favoriser des types particuliers de cancer, comprenant les cancers de la prostate, du sein, et du poumon. En particulier dans le cancer de la prostate, les métastases osseuses tendent à être le seul site de métastases. Dans certains modes de réalisation, il est mis à disposition des méthodes pour traiter une maladie ou un état associé à des métastases osseuses chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, 25 d'une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : R4 Y. R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; 30 R est l'hydrogène ou C(=O)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)mCH3 ; R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à C8, l'alcényle en C2 à C8, l'alcynyle en C2 à C8, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à C8, et halogénoalkyle en C1 à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; 10 R7 est un alkyle en C1 à C8, OR5 ou NR5R6 ; m= 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament d'un tel composé. Dans certains modes de réalisation, le sujet 15 a un cancer du sein ou un cancer de la prostate. Dans certains modes de réalisation, le sujet est humain. Voir les Exemples 1-4. Dans certains modes de réalisation, le composé de cyclohexénone de structure R4 Y. R2 20 est préparé par voie synthétique ou semi-synthétique à partir de n'importe quel matériau de départ convenable. Dans d'autres modes de réalisation, le composé de cyclohexénone est préparé par fermentation ou analogue. Par exemple, le Composé 1 (également connu sous l'appellation AntroquinonolTM ou "Antroq") ou le Composé 3, dans certains cas, est préparé à partir de 4- 25 hydroxy-2,3-diméthoxy-6-méthylcyclohexa-2,5-diénone. Des exemples non limitatifs de composés sont illustrés ci-dessous. CH3 OH H O.CH3 8 O. CH3 3 H3C, 0 OH CO2H CH3 CH3 7 H3C, 0 OH 0, CH3 H3C, 0 OH O, ÇH3 CH3 OC H3 CH3 CH3 O 4 CH3 OH H3 H3 H3 OH CH3 ÇH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 15 ÇH3 ÇH3 CH3 H3c, T OH 0, CH3 ÇH3 CH3 H3C, 0 OH S. 2 H3c. ,---,-,-, o T OH 0, CH3 17 CH3 CH3 CH3 CH3 0 ,-- .. --- F H3C,0OH H3C,0 v OH o.CH3 o.CH3 19 20 Dans d'autres modes de réalisation le composé de cyclohexénone de 5 structure OH HO CH3 CH3 0 ,--- O 0.0 H3 11 16 O H3C,0 OH H3C ,0 OH OH OH C H3 CH3 CH3 CH3 O .-- .--- H H 3C -..0 OH O O. 14 CH3 CH3 CH3 >^. 0 O I-13C'OOH 15 0,CH3 CH3 CH3 CH3 --- NH2 CH3 CH3 CH3 CH3 O / H3C,c)OH 0, CH3 16 CH3 CH3 H N H3C.S OH 0,CH3 18 CH3 CH3 CH3 CH R4 n OR Y. R2 est isolé à partir d'extraits avec un solvant organique d'Antrodia camphorata. Dans certains modes de réalisation, le solvant organique est choisi parmi les alcools (par exemple méthanol, éthanol, propanol, ou analogue), les esters (par 5 exemple acétate de méthyle, acétate d'éthyle, ou analogue), les alcanes (par exemple pentane, hexane, heptane, ou analogue), les halogénoalcanes (par exemple chlorométhane, chloroéthane, chloroforme, chlorure de méthylène, et analogues) et analogues. Par exemple, les Composés exemplaires 1-7 sont isolés à partir d'extraits avec un solvant organique. Dans certains modes de 10 réalisation, le solvant organique est un alcool. Dans certains modes de réalisation, l'alcool est l'éthanol. Dans certains modes de réalisation, le composé de cyclohexénone est isolé à partir d'extraits aqueux d'Antrodia camphorata. Dans certains modes de réalisation, R est l'hydrogène, C(=O)C3H8, 15 C(=0)C2H5, ou C(=O)CH3. Dans certains modes de réalisation, R1 est l'hydrogène ou méthyle. Dans certains modes de réalisation, R2 est l'hydrogène, méthyle, éthyle, propyle, butyle, pentyle ou hexyle. Dans certains modes de réalisation, R3 est l'hydrogène, méthyle, éthyle, propyle, butyle, pentyle ou hexyle. Dans certains modes de réalisation, R4 est un halogène, 20 NH2, NHCH3, N(CH3)2, OCH3, 0C2H5, C(=O)CH3, C(=O)C2H5, C(=0)0CF-13, C(=O)0C2H5, C(=O)NHCH3, C(=O)NHC2H5, C(=O)NH2, OC(=O)CH3, OC(=O)C2H5, OC(=O)OCH3, OC(=O)0C2H5, OC(=O)NHCH3, OC(=0)NHC2H5, ou OC(=O)NH2. Dans certains modes de réalisation, R4 est C2H5C(CH3)20H, C2H5C(CH3)20CH3, CH2COOH, C2H5COOH, CH2OH, C2H5OH, CH2Ph, 25 C2H5Ph, CH2CH=C(CH3)(CHO), CH2CH=C(CH3)(C(=0)CH3), une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, aryle, ou glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à C8, l'alcényle en C2 à C8, l'alcynyle en C2 à C8, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi 30 NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à C8, et halogénoalkyle en C1 à C8. Dans certains modes de réalisation, R4 est R1,.x CH2CH=C(CH3)2. Dans certains modes de réalisation, le composé est ÇH3 ÇH3 ÇH3 ÇH3 0--, C H3 o, cH3 Dans certains modes de réalisation, il est mis à disposition des procédés pour inhiber l'hypercalcémie d'une malignité chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : R4 Y. R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=O)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)m- C F13 R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C2 à Cg, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à Cg, l'alcényle en C2 à Cg, l'alcynyle en C2 à Cg, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C2 à Cg, cycloalkyle en C3 à Cg, et halogénoalkyle en C1 à Cg ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en Cl à C8 ; R7 est un alkyle en Cl à Cg, OR5 ou NR5R6 ; m = 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament d'un tel composé. Dans certains modes de réalisation, le sujet a un cancer du sein ou un cancer de la prostate. Dans certains modes de réalisation, le sujet est humain. Voir les Exemples 1-4. Dans certains modes de réalisation, il est mis à disposition des méthodes pour inhiber la résorption osseuse chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : R3 CH3 O R4 R1.x OR Y. R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=O)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)m10 CH3 ; R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à C8, l'alcényle en C2 à C8, l'alcynyle en C2 à C8, l'aryle et le 15 glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à Cg, et halogénoalkyle en C1 à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; 20 R7 est un alkyle en C1 à Cg, OR5 ou NR5R6 ; m= 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament d'un tel composé. Dans certains modes de réalisation, le sujet 25 a un cancer du sein ou un cancer de la prostate. Dans certains modes de réalisation, le sujet est humain. Voir les Exemples 1-4. Dans certains modes de réalisation, il est mis à disposition des méthodes pour traiter des lésions ostéolytiques chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, du point de 30 vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : Dans certains modes de réalisation, il est mis à disposition des méthodes pour inhiber la résorption osseuse chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, dyp1:4nt de vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : R3 01-13 O Y. R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=O)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)m- CH3 ; R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à C8, l'alcényle en C2 à Cg, l'alcynyle en C2 à C8, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, ORS, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à C8, et halogénoalkyle en C1 à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; 20 R7 est un alkyle en C1 à C8, OR5 ou NR5R6 ; m= 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament d'un tel composé. Dans certains modes de réalisation, le sujet 25 a un cancer du sein ou un cancer de la prostate. Dans certains modes de réalisation, le sujet est humain. Voir les Exemples 1-4. Dans certains modes de réalisation, il est mis à disposition des méthodes pour traiter des lésions ostéolytiques chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, du point de 30 vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : R4 n OR Y. R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=O)-alkyle en C1 à Cs ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2),-nCH3 ; R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à C8, l'alcényle en C2 à C8, l'alcynyle en C2 à C8, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à C8, et halogénoalkyle en C1 à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; R7 est un alkyle en C1 à C8, OR5 ou NR5R6 ; m = 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou 20 promédicament d'un tel composé. Dans certains modes de réalisation, le sujet a un cancer du sein ou un cancer de la prostate. Dans certains modes de réalisation, le sujet est humain. Voir les Exemples 1-4. Les lésions ostéolytiques, également appelées lésions ostéoclastiques ou lésions lytiques en plus court, sont des zones caractéristiques 25 d'endommagement dû à un myélome. Quand un myélome envahit le tissu osseux, il provoque la formation de zones faibles. De plus, les cellules de myélome libèrent des produits chimiques qui conduisent aussi à une décomposition de l'os. Le résultat est la formation de lésions ayant un aspect "perforé", qui peuvent apparaître dans n'importe quel os du corps, mais que 30 l'on observe le plus souvent dans la colonne vertébrale, le crâne, le pelvis et les côtes. Un peu de terminologie pharmaceutique et médicale Sauf mention contraire, les termes suivants utilisés dans cette demande, y compris la description et les revendications, ont les définitions indiquées ci- dessous. Il convient de noter que, telles qu'utilisées dans la description et les revendications annexées, les formes au singulier "un", "une" et "le/la" englobent les référents au pluriel, sauf mention contraire expressément dictée par le contexte. Sauf indication contraire, on emploie des procédés conventionnels de spectroscopie de masse, RMN, CLHP, chimie des protéines, biochimie, techniques de recombinaison d'ADN, et pharmacologie. Dans cette demande, l'utilisation de "ou" ou "et" signifie "et/ou", sauf mention contraire. En outre, l'utilisation du terme "comprenant" ainsi que d'autres formes telles que "comprennent", "comprend" et "y compris" n'est pas limitative. Les entêtes de sections sont utilisés ici à des fins d'organisation et ne doivent pas être considérés comme limitant la matière en objet décrite. Un groupe "alkyle" se réfère à un groupe hydrocarboné aliphatique. Le groupe alkyle peut être un groupe alkyle saturé (ce qui signifie qu'il ne contient aucune double liaison carbone-carbone ou triple liaison carbone-carbone) ou bien le groupe alkyle peut être un groupe alkyle insaturé (ce qui signifie qu'il contient au moins une double liaison carbone-carbone ou triple liaison carbone- carbone). Le fragment alkyle, qu'il soit saturé ou insaturé, peut être ramifié ou linéaire. Le groupe "alkyle" peut avoir 1 à 12 atomes de carbone (à chaque fois qu'elle apparaît ici, une plage numérique telle que "1 à 12" se réfère à chaque entier dans la plage indiquée ; par exemple "1 à 12 atomes de carbone" signifie 25 que le groupe alkyle peut être constitué de 1 atome de carbone, 2 atomes de carbone, 3 atomes de carbone, etc., jusqu'à 12 atomes de carbone, y compris cette valeur, bien que la présente définition couvre aussi l'occurrence du terme "alkyle" où aucune plage numérique n'est indiquée). Le groupe alkyle des composés décrits ici peut être désigné par "alkyle en C1 à C8" ou des 30 désignations similaires. A titre d'exemple uniquement, "alkyle en C1 à C8" indique qu'il y a un, deux, trois, quatre, cinq, six, sept ou huit atomes de carbone dans la chaîne alkyle. Dans un aspect, l'alkyle est choisi dans le groupe constitué par méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, n-butyle, isobutyle, sec-butyle, et t-butyle. Des groupes alkyle typiques comprennent, mais sans 35 aucunement s'y limiter, méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, sec-butyle, tert-butyle, pentyle, néopentyle, hexyle, allyle, but-2-ényle, but-3- ényle, cyclopropyl-méthyle, cyclobutylméthyle, cyclopentylméthyle, cyclohexylméthyle, et analogues. Dans un aspect, l'alkyle est un alkyle en Cl à Cg. Le terme "aikylène" se réfère à un radical alkyle divalent. N'importe lequel des groupes alkyle monovalents mentionnés ci-dessus peut devenir un alkylène par abstraction d'un deuxième atome d'hydrogène sur l'alkyle. Dans un aspect, l'alkylène est un aikylène en Cl à C. Dans un autre aspect, l'alkylène est un alkylène en C1 à Cg. Des groupes alkylène typiques comprennent, mais sans s'y limiter, -CH2-, -CH(CH3)-, -C(CH3)2-, -CH2CH2-, -CH2CH(CH3)-, -CH2C(CH3)2-, -CH2CH2CH2-, -CH2CH2CH2CH2-, et analogues. Tel qu'utilisé ici, le terme "aryle" se réfère à un cycle aromatique dans lequel chacun des atomes formant le cycle est un atome de carbone. Les cycles aryle sont formés de cinq, six, sept, huit, neuf ou plus de neuf atomes de carbone. Les groupes aryle sont éventuellement substitués. Dans un aspect, l'aryle est un phényle ou un naphtalényle. Dans un aspect, l'aryle est un phényle. Dans un aspect, l'aryle est un aryle en C6 à C10. En fonction de la structure, un groupe aryle peut être un monoradical ou un diradical (c'est-à-dire un groupe arylène). Dans un aspect, l'arylène est un arylène en C6 à C10. Des exemples d'arylène comprennent, mais sans s'y limiter, phény1-1,2-ène, phény1-1,3-ène, et phény1-1,4-ène. Le terme "aromatique" se réfère à un cycle plan ayant un système d'électrons D' délocalisé contenant 4n+2E] électrons, où n est un entier. Les cycles aromatiques peuvent être formés de cinq, six, sept, huit, neuf, dix, ou 25 plus de dix atomes. Les aromatiques sont éventuellement substitués. Le terme "aromatique" englobe les groupes tant aryle carbocycliques ("aryle", par exemple phényle) qu'aryle hétérocycliques (ou "hétéroaryle" ou "hétéroaromatiques") (par exemple pyridine). Le terme englobe les groupes monocycliques ou polycycliques condensés (c'est-à-dire les cycles qui 30 partagent des paires adjacentes d'atomes de carbone). Le terme "halogéno" ou, en variante, "halogène" ou "halogénure" signifie fluoro, chloro, bromo ou iodo. Le terme "lactone" se réfère à un ester cyclique qui peut être observé sous forme de produit de condensation d'un groupe alcool -OH et d'un groupe 35 acide carboxylique -COOH dans la même molécule. Il est caractérisé par un cycle fermé constitué de deux ou plus de deux atomes de carbone et d'un seul atome d'oxygène, avec un groupe cétone =0 dans l'un des carbones adjacents à l'autre oxygène. Le terme "hétérocycle" ou "hétérocyclique" se réfère à des cycles 5 hétéroaromatiques (également appelés hétéroaryles) et à des cycles hétérocycloalkyle (également appelés groupes hétéroalicycliques) contenant un à quatre hétéroatomes dans le ou les cycles, chaque hétéroatome du ou des cycles étant choisi parmi 0, S et N, chaque groupe hétérocyclique ayant de 4 à 10 atomes dans son système cyclique, à la condition qu'un cycle 10 quelconque ne contienne pas deux atomes O ou S adjacents. Les groupes hétérocycliques non aromatiques (également appelés hétérocycloalkyles) comprennent les groupes ayant seulement 3 atomes dans leur système cyclique, mais les groupes hétérocycliques aromatiques doivent avoir au moins 5 atomes dans leur système cyclique. Les groupes hétérocycliques 15 comprennent les systèmes cycliques benzo-condensés. Un exemple d'un groupe hétérocyclique à 3 chaînons est aziridinyle. Un exemple d'un groupe hétérocyclique à 4 chaînons est azétidinyle. Un exemple d'un groupe hétérocyclique à 5 chaînons est thiazolyle. Un exemple d'un groupe hétérocyclique à 6 chaînons est pyridyle, et un exemple d'un groupe 20 hétérocyclique à 10 chaînons est quinolinyle. Des exemples de groupes hétérocycliques non aromatiques sont pyrrolidinyle, tétrahydrofuranyle, dihydrofuranyle, tétrahydrothiényle, oxazolidinonyle, tétrahydropyranyle, dihydropyranyle, tétrahydrothiopyranyle, pipéridinyle, morpholinyle, thiomorpholinyle, thioxanyle, pipérazinyle, aziridinyle, azétidinyle, oxétanyle, 25 thiétanyle, homopipéridinyle, oxépanyle, thiépanyle, oxazépinyle, diazépinyle, thiazépinyle, 1,2,3,6-tétrahydropyridinyle, pyrrolin-2-yle, pyrrolin-3-yle, indolinyle, 2H-pyranyle, 4H-pyranyle, dioxanyle, 1,3-dioxolanyle, pyrazolinyle, dithianyle, dithiolanyle, dihydropyranyle, dihydrothiényle, dihydro-furanyle, pyrazolidinyle, imidazolinyle, imidazolidinyle, 3-azabicyclo[3.1.0]hexanyle, 3- 30 azabicyclo[4.1.0]heptanyle, 3H-indolyle et quinolizinyle. Des exemples de groupes hétérocycliques aromatiques sont pyridinyle, imidazolyle, pyrimidinyle, pyrazolyle, triazolyle, pyrazinyle, tétrazolyle, furyle, thiényle, isoxazolyle, thiazolyle, oxazolyle, isothiazolyle, pyrrolyle, quinolinyle, isoquinolinyle, indolyle, benzimidazolyle, benzofuranyle, cinnolinyle, indazolyle, indolizinyle, 35 phtalazinyle, pyridazinyle, triazinyle, isoindolyle, ptéridinyle, purinyle, oxadiazolyle, thiadiazolyle, furazanyle, benzofurazanyle, benzothiophényle, benzothiazolyle, benzoxazolyle, quinazolinyle, quinoxalinyle, naphtyridinyle, et furopyridinyle. Les groupes ci-dessus peuvent être C-rattachés ou N-rattachés lorsque c'est possible. Par exemple, un groupe dérivé de pyrrole peut être pyrrol-1-yle (N-attaché) ou pyrrol-3-yle (C-attaché). En outre, un groupe dérivé d'imidazole peut être imidazol-1-yle ou imidazol-3-yle (les deux N-attachés) ou imidazol-2-yle, imidazol-4-yle ou imidazol-5-yle (tous C-attachés). Les groupes hétérocycliques comprennent les systèmes cycliques benzo-condensés. Les hétérocycles non aromatiques peuvent être substitués par un ou deux fragments oxo (=0), tels que pyrrolidin-2-one. Le terme "alcényle", tel qu'utilisé ici, signifie un hydrocarbure linéaire, ramifié ou cyclique (auquel cas il serait appelé également "cycloalcényle") contenant de 2 à 10 carbones et contenant au moins une double liaison carbone-carbone formée par l'élimination de deux hydrogènes. Dans certains modes de réalisation, en fonction de la structure, un groupe alcényle est un monoradical ou un diradical (c'est-à-dire un groupe alcénylène). Dans certains modes de réalisation, les groupes alcényle sont éventuellement substitués. Des exemples illustratifs d'alcényle comprennent, mais sans s'y limiter, éthényle, 2-propényle, 2-méthyl-2-propényle, 3-butényle, 4-pentényle, 5- hexényle, 2-heptényle, 2-méthyl-1-heptényle, et 3-décényle. Le terme "alcynyle", tel qu'utilisé ici, signifie un hydrocarbure linéaire, ramifié ou cyclique (auquel cas il serait appelé également "cycloalcynyle") contenant de 2 à 10 carbones et contenant au moins une triple liaison carbone-carbone formée par l'élimination de quatre hydrogènes. Dans certains modes 25 de réalisation, en fonction de la structure, un groupe alcynyle est un monoradical ou un diradical (c'est-à-dire un groupe alcynylène). Dans certains modes de réalisation, les groupes alcynyle sont éventuellement substitués. Des exemples illustratifs d'alcynyle comprennent, mais sans s'y limiter, éthynyle, propynyle, butynyle, pentynyle, hexynyle, heptynyle, et analogues. 30 Le terme "alcoxy", tel qu'utilisé ici, signifie un groupe alkyle, tel que défini ici, rattaché au fragment moléculaire parent par l'intermédiaire d'un atome d'oxygène. Des exemples illustratifs d'alcoxy comprennent, mais sans s'y limiter, méthoxy, éthoxy, propoxy, 2-propoxy, butoxy, tert-butoxy, pentyloxy, et hexyloxy. 35 Le terme "cycloalkyle", tel qu'utilisé ici, signifie un radical monocyclique ou polycyclique qui contient seulement du carbone et de l'hydrogène, et englobe ceux qui sont saturés, partiellement insaturés, ou entièrement insaturés. Les groupes cycloalkyle englobent les groupes ayant de 3 à 10 atomes sur le cycle. Des exemples représentatifs de ces composés cycliques comprennent, mais sans s'y limiter, les fragments suivants : CC> CO > o 0 O 0 CO c>. Dans certains modes de réalisation, en fonction de la structure, un groupe cycloalkyle est un monoradical ou un diradical (par exemple un groupe cycloalkylène). Les termes "halogénoalkyle", "halogénoalcényle", "halogénoalcynyle" et "halogénoalcoxy", tels qu'utilisés ici, comprennent des structures alkyle, alcényle, alcynyle et alcoxy dans lesquelles au moins un hydrogène est remplacé par un atome d'halogène. Dans certains modes de réalisation dans lesquels deux ou plus de deux atomes d'hydrogène sont remplacés par des atomes d'halogène, les atomes d'halogène sont tous identiques. Dans d'autres modes de réalisation dans lesquels deux ou plus de deux atomes d'hydrogène sont remplacés par des atomes d'halogène, les atomes d'halogène ne sont pas tous identiques. Les termes "fluoroalkyle" et "fluoroalcoxy" comprennent des groupes halogénoalkyle et halogénoalcoxy, respectivement, dans lesquels l'halogène est le fluor. Dans certains modes de réalisation, les halogénoalkyles sont éventuellement substitués. Le terme "glucosyle", tel qu'utilisé ici, comprend les groupes glucosyle de forme D ou L, dans lesquels le groupe glucosyle est rattaché sur le cycle glucose via un groupe hydroxyle quelconque. Le terme "acceptable", en rapport avec une formulation, une composition ou un ingrédient, tel qu'utilisé ici, signifie une absence d'effet néfaste persistant sur l'état de santé général du sujet qui est traité. Antrodia est un genre de champignon de la famille Meripilaceae. L'espèce Antrodia a des corps de fructification qui typiquement reposent à plat ou s'étalent hors de la surface de croissance, l'hyménium étant exposé à l'extérieur ; les bords peuvent être retournés de façon à former des crochets étroits. La plupart des espèces sont trouvées dans les forêts tempérées et boréales, et provoquent une pourriture brune. Certaines des espèces de ce genre ont des propriétés médicinales, et ont été utilisées à Taiwan sous forme de médecine traditionnelle. Le terme "support", tel qu'utilisé ici, se réfère à des composés ou agents chimiques relativement non toxiques qui facilitent l'incorporation d'un composé dans des cellules ou tissus. Le terme "co-administration", ou analogue, tel qu'utilisé ici, est destiné à englober l'administration d'agents thérapeutiques sélectionnés à un seul patient, et est destiné à englober les régimes de traitement dans lesquels les agents sont administrés par des voies d'administration identiques ou différentes ou à des moments identiques ou différents. Le terme "diluant" se réfère à des composés chimiques qui sont utilisés pour diluer le composé présentant un intérêt avant délivrance. Les diluants peuvent aussi être utilisés pour stabiliser des composés parce qu'ils peuvent fournir un environnement plus stable. Les sels dissous dans des solutions tamponnées (qui peuvent également réaliser un contrôle ou un maintien du pH) sont utilisés en tant que diluants dans la technique et comprennent, mais sans s'y limiter, la solution salée tamponnée au phosphate. Les expressions "quantité efficace" ou "quantité efficace du point de vue thérapeutique", telles qu'utilisées ici, se réfèrent à une quantité suffisante d'un agent ou d'un composé qui est administré qui va soulager dans une certaine mesure un ou plusieurs des symptômes de la maladie ou de l'état qui est traité. Le résultat peut être une réduction et/ou un soulagement des signes, symptômes, ou causes d'une maladie, ou n'importe quelle autre altération souhaitée d'un système biologique. Par exemple, une "quantité efficace" pour un usage thérapeutique est la quantité de la composition comprenant un composé tel que décrit ici qui est nécessaire pour réaliser une réduction cliniquement significative de symptômes d'une maladie. Une quantité "efficace" appropriée dans un quelconque cas individuel peut être déterminée par des techniques telles qu'une étude de doses croissantes. Les termes "amplifier" ou "amplification", tels qu'utilisés ici, signifient une augmentation ou une prolongation soit de la puissance soit de la durée d'un effet souhaité. Ainsi, en ce qui concerne une amplification de l'effet d'un agent thérapeutique, le terme "amplification" se réfère à l'aptitude à augmenter ou prolonger, soit en puissance soit en durée, l'effet d'autres agents thérapeutiques sur un système. Une "quantité amplificatrice efficace", telle qu'utilisée ici, se réfère à une quantité adéquate pour amplifier l'effet d'un autre agent thérapeutique dans un système souhaité. Un "métabolite" d'un composé divulgué ici est un dérivé de ce composé qui est formé quand le composé est métabolisé. L'expression "métabolite actif" se réfère à un dérivé biologiquement actif d'un composé qui est formé quand le composé est métabolisé. Le terme "métabolisé", tel qu'utilisé ici, se réfère à la somme des processus (y compris, mais sans s'y limiter, des réactions d'hydrolyse et des réactions catalysées par des enzymes) dans lesquels une substance particulière est changée par un organisme. Ainsi, les enzymes peuvent produire des altérations structurelles spécifiques dans un composé. Par exemple, le cytochrome P450 catalyse diverses réactions d'oxydation et de réduction tandis que les uridine diphosphate glucuronyltransférases catalysent le transfert d'une molécule d'acide glucuronique activée en alcools aromatiques, alcools aliphatiques, acides carboxyliques, amines et groupes sulfhydryle libres. Les métabolites des composés divulgués ici sont éventuellement identifiés soit par administration de composés à un hôte et analyse d'échantillons tissulaires de l'hôte, soit par incubation de composés avec des cellules hépatiques in vitro et analyse des composés résultants. L'expression "combinaison pharmaceutique", telle qu'utilisée ici, signifie un produit qui résulte du mélange ou de la combinaison de plusieurs ingrédients actifs et englobe les combinaisons tant fixes que non fixes des ingrédients actifs. L'expression "combinaison fixe" signifie que les ingrédients actifs, par exemple un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) et un co-agent sont tous deux administrés à un patient simultanément sous la forme d'une seule entité ou dose. L'expression "combinaison non fixe" signifie que les ingrédients actifs, par exemple un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) et un co-agent sont administrés à un patient sous la forme d'entités séparées, simultanément, concurremment ou successivement sans limites de temps intervenantes spécifiques, cette administration apportant des taux efficaces des deux composés dans le corps du patient. Ce dernier cas s'applique aussi à une thérapie de cocktail, par exemple l'administration de trois ingrédients actifs ou plus. L'expression "composition pharmaceutique" se réfère à un mélange d'un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) avec d'autres composants chimiques, tels que des véhicules, stabilisants, diluants, agents dispersants, agents de mise en suspension, agents épaississants, et/ou excipients. La composition pharmaceutique facilite l'administration du composé à un organisme. De multiples techniques d'administration d'un composé existent dans la technique et comprennent, mais sans s'y limiter, les administrations par voies intraveineuse, orale, parentérale, ophtalmique, pulmonaire, topique, et par aérosol. Le terme "sujet" ou "patient" englobe les mammifères. Des exemples de mammifères comprennent, mais sans s'y limiter, n'importe quel membre de la classe des mammifères : les humains, les primates non humains tels que les chimpanzés, d'autres espèces de singes et de grands singes ; les animaux de fermes, tels que le bétail, les chevaux, les moutons, les chèvres, les suidés ; les animaux domestiques tels que les lapins, les chiens et les chats ; les animaux de laboratoire y compris les rongeurs, tels que les rats, les souris et les cochons d'Inde, et analogues. Dans un mode de réalisation, le mammifère est un humain. Les termes "traiter", "traitant" ou "traitement", tels qu'utilisés ici, comprennent le fait de soulager, réduire ou améliorer au moins un symptôme d'une maladie ou d'un état, empêcher des symptômes supplémentaires, inhiber la maladie ou l'état, par exemple arrêter le développement de la maladie ou de l'état, soulager la maladie ou l'état, provoquer une régression de la maladie ou de l'état, soulager un état provoqué par la maladie ou l'état, ou stopper les symptômes de la maladie ou de l'état, de manière prophylactique et/ou thérapeutique. Voies d'administration Les voies d'administration convenables comprennent, mais sans s'y limiter, les administrations par voies orale, intraveineuse, rectale, parentérale, ophtalmique, pulmonaire, trans-muqueuse, transdermique, vaginale, otique, nasale, topique, et par aérosol. De plus, à titre d'exemple uniquement, une délivrance par voie parentérale englobe les injections intramusculaires, sous-cutanées, intraveineuses, intramédullaires, ainsi que les injections intrathécales, intraventriculaires directes, intra-péritonéales, intralymphatiques, et intranasales. Dans certains modes de réalisation, un composé tel que décrit ici est administré localement plutôt que de manière systémique, par exemple via injection du composé directement dans un organe, souvent en une préparation retard ou une formulation à libération prolongée. Dans des modes de réalisation spécifiques, les formulations à action prolongée sont administrées par implantation (par exemple par voie sous-cutanée ou intramusculaire) ou par injection intramusculaire. En outre, dans d'autres modes de réalisation, le médicament est délivré dans un système de délivrance ciblée de médicament, par exemple dans un liposome revêtu d'un anticorps spécifique d'un organe. Dans ces modes de réalisation, les liposomes sont ciblés vers et captés sélectivement par l'organe. Dans encore d'autres modes de réalisation, le composé tel que décrit ici se présente sous la forme d'une formulation à libération rapide, sous la forme d'une formulation à libération prolongée, ou sous la forme d'une formulation à libération intermédiaire. Dans encore d'autres modes de réalisation, le composé décrit ici est administré par voie topique. Dans certains modes de réalisation, le composé de cyclohexénone, ou un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament de celui-ci, est administré par voie parentérale ou intraveineuse. Dans d'autres modes de réalisation, le composé de cyclohexénone, ou un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament de celui-ci, est administré par injection. Dans certains modes de réalisation, le composé de cyclohexénone, ou un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament de celui-ci, est administré par voie orale. Composition pharmaceutique/formulation Dans certains modes de réalisation, il est mis à disposition des composés de structure : R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=O)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2),,- CH3 ; R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à C8, l'alcényle en C2 à C8, l'alcynyle en C2 à C8, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=0)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à C8, et halogénoalkyle en C1 à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; R7 est un alkyle en C1 à C8, OR5 ou NR5R6 ; m= 1-12 ; et n = 1-12 ; ou un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou 20 promédicament d'un tel composé. Dans certains modes de réalisation, R est l'hydrogène, C(=O)C3H8, C(=O)C2H5, ou C(=O)CH3. Dans certains modes de réalisation, chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, éthyle, propyle, butyle, pentyle, hexyle, heptyle, ou octyle. Dans certains modes de réalisation, R2 est 25 l'hydrogène ou méthyle. Dans certains modes de réalisation, R2 est l'hydrogène, méthyle, éthyle, propyle, butyle, pentyle ou hexyle. Dans certains modes de réalisation, R3 est l'hydrogène, méthyle, éthyle, propyle, butyle, pentyle ou hexyle. Dans certains modes de réalisation, R4 est un halogène, NH2, NHCH3, N(CH3)2, OCH3, 0C2H5, C(=O)CH3, C(=O)C2H5, C(=O)OCH3, 30 C(=O)0C2H5, C(=O)NHCH3, C(=O)NHC2H5, C(=O)NH2, OC(=O)CH3, OC(=O)C2H5, OC(=O)OCH3, OC(=O)0C2H5, OC(=O)NHCH3, OC(=O)NHC2H5, ou OC(=O)NH2. Dans certains modes de réalisation, R4 est C2H5C(CH3)20H, 30 R3 CH R4 n OR C2H5C(CH3)20CH3, CH2COOH, C2H5COOH, CH2OH, C2H5OH, CH2Ph, C2H5Ph, CH2CH=C(CH3)(CHO), CH2CH=C(CH3)(C(=O)CH3), une lactone à 5 ou 6 chaînons, aryle, alkyle en C1 à Cg, ou glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'aryle, l'alkyle en C1 à Cg et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=0)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à Cg, et halogénoalkyle en C1 à Cg. Dans certains modes de réalisation, R4 est CH2COOH, C2H5COOH, CH2OH, C2H5OH, CH2Ph, C2H5Ph, CH2CH=C(CH3)(CHO), CH2CH=C(CH3)(C(=O)CH3), une lactone à 5 ou 6 chaînons, aryle, ou glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=0)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C2 à Cg, cycloalkyle en C3 à Cg, et halogénoalkyle en C1 à Cg. Dans certains modes de réalisation, le composé est choisi dans le groupe constitué par CH3 ÇH3 C H3 ÇH3 H3C OH S. CH3 CH3 CH3 , CH3 ÇH3 CH3 HO OH O.CH3 ÇH3 CH3 CH3 CH; CH3 OH CH3 OH H3 CH3 CH3 CH3 OH CH3 H3CCrYO H O. CH3 CH3 cH3 CO2H CH3 OC H3 CH3 CH3 O H3C,0 OH 0,CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 OH H3c.o T,,-,'--,, OH O. CH3 , H3C.NOH H 0.r....,Li113 0 OH OH HO CH3 CH3 / O OH O H3C.o O H3C,s OH O.CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 / H H3C,0 OH O.CH3 H3C, 0 OH O (D,CH3 CH3 CH3 CH3 /.\./ H3c, ,---..,,, o OH O. CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 O ./ H3c, ,-.,_ ,...-, o OH 0.CH3 , et CH3 CH3 CH3 --"" NH2 H3C.0 OH O. CH3 CH3 CH3 CH3 0 F fl3C'00H 0.CH3 CH3 Dans certains modes de réalisation, le composé est choisi dans le 5 groupe constitué par CH3 CH3 CH3 CH3 o. 0 s. CH3 CH3 CH3 CH3, CH3 CH3 HO OH CH3 CH3 H3C.0 CH3 CH3 CH3 H3 0 OH CH3 CH3 CH3 CH3 0 H CH3 H3C.0 OH O. CH3 CH3 H3C.NOH OH CO2H OH O.CH3 CH3 CH3 OH CH3 C H3 H3C,0 OH 0,C H3 CH3 / H H3C, 0 OH 0,C H3 O Ç H3 , /.\7' CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 H3C. 0 OH 0, C H3 C H3 O O H3C, 0 OH o,CH3 Ç H3 O H 3C ,00ii 0. CH3 Ç H3 O CH3 CH3 NH2 CH3 CH3 CH3 / F CH3 CH3 H N H3C,s OH 0,C H3 H3C, 0 OH o, C H3 , et CH3 CH3 CH3 H3C.0 v OH O. CH3 Dans certains modes de réalisation, il est mis à disposition des compositions pharmaceutiques comprenant une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : R3 CH3 O R n OR Y. R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=0)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)m10 CH3 R4 est NR5R6, OR5, OC(=0)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à C8, l'alcényle en C2 à C8, l'alcynyle en C2 à C8, l'aryle et le 15 glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=0)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à C8, et halogénoalkyle en C1 à Cg ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; 20 R7 est un alkyle en C1 à C8, OR5 ou NR5R6 ; m= 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament d'un tel composé ; et un excipient pharmaceutiquement 25 acceptable. Dans certains modes de réalisation, les composés décrits ici sont formulés dans des compositions pharmaceutiques. Dans des modes de réalisation spécifiques, les compositions pharmaceutiques sont formulées d'une manière conventionnelle, par utilisation d'un ou plusieurs véhicules physiologiquement acceptables comprenant des excipients et des auxiliaires qui facilitent la transformation des composés actifs en préparations qui peuvent être utilisées en pharmacie. Une formulation appropriée dépend de la voie d'administration choisie. N'importe quels techniques, véhicules et excipients pharmaceutiquement acceptables sont utilisés de la façon convenable pour formuler les compositions pharmaceutiques décrites ici : Remington : The Science and Practice of Pharmacy, Dix-neuvième Ed. (Easton, Pa. : Mack Publishing Company, 1995) ; Hoover, John E., Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvanie 1975 ; Liberman, H.A. et Lachman, L., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980 ; et Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, septième Ed. (Lippincott Williams & Wilkins 1999). Il est mis ici à disposition des compositions pharmaceutiques comprenant un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) et un ou plusieurs diluants, excipients ou véhicules pharmaceutiquement acceptables. Dans certains modes de réalisation, les composés décrits sont administrés sous la forme de compositions pharmaceutiques dans lesquelles un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) est mélangé avec d'autres ingrédients actifs, comme dans le cas d'une thérapie combinée. On englobe ici toutes les combinaisons d'agents actifs indiquées dans la section des thérapies combinées ci-dessous et dans toute cette description. Dans des modes de réalisation spécifiques, les compositions pharmaceutiques comprennent un ou plusieurs composés (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici). Une composition pharmaceutique, telle qu'utilisée ici, se réfère à un mélange d'un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) avec d'autres composants chimiques, tels que des véhicules, stabilisants, diluants, agents dispersants, agents de mise en suspension, agents épaississants, et/ou excipients. Dans certains modes de réalisation, la composition pharmaceutique facilite l'administration du composé à un organisme. Dans certains modes de réalisation, mettant en pratique les méthodes de traitement ou l'utilisation, présentés ici, des quantités efficaces du point de vue thérapeutique de composés (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) sont administrées dans une composition pharmaceutique à un mammifère ayant une maladie ou un état devant être traité. Dans des modes de réalisation spécifiques, le mammifère est un humain. Dans certains modes de réalisation, les quantités efficaces du point de vue thérapeutique vont varier en fonction de la gravité de la maladie, de l'âge et de l'état de santé relatif du sujet, de la puissance du composé utilisé, et d'autres facteurs. Les composés décrits ici sont utilisés seuls ou en combinaison avec un ou plusieurs agents thérapeutiques servant de composants de mélanges. Dans un mode de réalisation, un composé (c'est-à-dire un composé de 10 cyclohexénone décrit ici) est formulé dans une solution aqueuse. Dans des modes de réalisation spécifiques, la solution aqueuse est choisie, à titre d'exemple uniquement, parmi un tampon physiologiquement compatible, tel que la solution de Hank, la solution de Ringer, ou une solution salée physiologique tamponnée. Dans d'autres modes de réalisation, un composé 15 (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) est formulé pour une administration par voie trans-muqueuse. Dans des modes de réalisation spécifique, les formulations à usage trans-muqueux comprennent des agents de pénétration qui sont appropriés pour que la barrière soit traversée par perméation. Dans encore d'autres modes de réalisation dans lesquels les 20 composés décrits ici sont formulés pour d'autres injections par voie parentérale, des formulations appropriées comprennent des solutions aqueuses ou non aqueuses. Dans des modes de réalisation spécifiques, ces solutions comprennent des tampons et/ou excipients physiologiquement compatibles. 25 Dans un autre mode de réalisation, les composés décrits ici sont formulés pour être administrés par voie orale. Les composés décrits ici, comprenant un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici), sont formulés par combinaison des composés actifs avec par exemple des véhicules ou excipients pharmaceutiquement acceptables. Dans divers modes 30 de réalisation, les composés décrits ici sont formulés dans des formes posologiques à usage oral qui comprennent, à titre d'exemple uniquement, des comprimés, poudres, pilules, dragées, capsules, liquides, gels, sirops, élixirs, bouillies, suspensions et analogues. Dans certains modes de réalisation, les préparations pharmaceutique à 35 usage oral sont obtenues par mélange d'un ou plusieurs excipients solides avec un ou plusieurs des composés décrits ici, éventuellement broyage du mélange résultant, et traitement du mélange de granules, après addition d'auxiliaires souhaitables, si on le souhaite, pour former des comprimés ou des coeurs de dragées. Des excipients convenables sont en particulier des charges telles que les sucres, y compris le lactose, le saccharose, le mannitol ou le sorbitol ; des préparations cellulosiques telles que par exemple l'amidon de maïs, l'amidon de blé, l'amidon de riz, l'amidon de pomme de terre, la gélatine, la gomme adragante, la méthyl-cellulose, la cellulose microcristalline, l'hydroxypropyl-méthylcellulose, la carboxyméthylcellulose sodique ; ou d'autres comme la polyvinylpyrrolidone (PVP ou povidone) ou le phosphate de calcium. Dans des modes de réalisation spécifiques, on ajoute éventuellement des agents délitants. Les agents délitants comprennent, à titre d'exemple uniquement la croscarmellose sodique réticulée, la polyvinylpyrrolidone, la gélose, ou l'acide alginique ou un sel de celui-ci tel que l'alginate de sodium. Dans un mode de réalisation, les formes posologiques, telles que les coeurs de dragées et les comprimés, sont dotées d'un ou plusieurs enrobages convenables. Dans des modes de réalisation spécifiques, on utilise des solutions de sucre concentrées pour enrober la forme posologique. Les solutions de sucre contiennent éventuellement des composants additionnels, tels que, à titre d'exemple uniquement, la gomme arabique, le talc, la polyvinyl- pyrrolidone, le gel carbopol, le polyéthylèneglycol, et/ou le dioxyde de titane, des solutions de laquage, et des solvants organiques ou mélanges de solvants convenables. Des colorants et/ou pigments sont aussi éventuellement ajoutés aux enrobages à des fins d'identification. De plus, on utilise éventuellement les 25 colorants et/ou pigments pour caractériser différentes combinaisons de doses de composés actifs. Dans certains modes de réalisation, des quantités efficaces du point de vue thérapeutique d'au moins l'un des composés décrits ici sont formulées dans d'autres formes posologiques à usage oral. Les formes posologiques à 30 usage oral comprennent les capsules ajustées faites de gélatine, ainsi que les capsules scellées molles faites de gélatine et d'un plastifiant, tel que le glycérol ou le sorbitol. Dans des modes de réalisation spécifiques, les capsules ajustées contiennent les ingrédients actifs en mélange avec une ou plusieurs charges. Les charges comprennent, à titre d'exemple uniquement, le lactose, 35 des liants tels que les amidons, et/ou des lubrifiants tels que le talc ou le stéarate de magnésium, et éventuellement des stabilisants. Dans d'autres modes de réalisation, les capsules molles contiennent un ou plusieurs composés actifs qui sont dissous ou mis en suspension dans un liquide convenable. Des liquides convenables comprennent, à titre d'exemple uniquement, une ou plusieurs huiles grasses, la paraffine liquide, ou le polyéthylèneglycol liquide. De plus, des stabilisants sont éventuellement ajoutés. Dans certains modes de réalisation, des quantités efficaces du point de vue thérapeutique d'au moins l'un des composés décrits ici sont formulées pour une administration par voie buccale ou sublinguale. Les formulations convenant pour une administration par voie buccale ou sublinguale comprennent, à titre d'exemple uniquement, les comprimés, les tablettes, ou les gels. Dans encore d'autres modes de réalisation, les composés décrits ici sont formulés pour être injectés par voie parentérale, y compris des formulations convenant pour une injection de bolus ou une perfusion continue. Dans des modes de réalisation spécifiques, les formulations injectables se présentent sous une forme posologique unitaire (par exemple dans des ampoules) ou dans des récipients multidoses. Des conservateurs sont éventuellement ajoutés aux formulations injectables. Dans encore d'autres modes de réalisation, les compositions pharmaceutiques d'un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) sont formulées sous une forme injectable par voie parentérale, telle qu'une suspension, solution ou émulsion stérile dans un véhicule huileux ou aqueux. Les formulations injectables par voie parentérale contiennent éventuellement des agents de formulation tels que des agents de mise en suspension, stabilisants, et/ou dispersants. Dans des modes de réalisation spécifiques, les formulations pharmaceutiques pour administration par voie parentérale comprennent des solutions aqueuses des composés actifs sous une forme soluble dans l'eau. Dans des modes de réalisation additionnels, des suspensions des composés actifs sont préparées sous la forme de suspensions injectables huileuses appropriées. Des solvants ou véhicules lipophiles utilisables dans les compositions pharmaceutiques décrites ici comprennent, à titre d'exemple uniquement, des huiles grasses telles que l'huile de sésame, ou des esters d'acides gras synthétiques, tels que l'oléate d'éthyle ou des triglycérides, ou des liposomes. Dans certains modes de réalisation spécifiques, les suspensions injectables aqueuses contiennent des substances qui augmentent la viscosité de la suspension, telles que la carboxyméthylcellulose sodique, le sorbitol, ou le dextrane. La suspension contient éventuellement des stabilisants ou agents convenables qui augmentent la solubilité du composé pour permettre la préparation de solutions 5 fortement concentrées. En variante, dans d'autres modes de réalisation, l'ingrédient actif est sous forme de poudre pour une reconstitution avec un véhicule convenable, par exemple de l'eau stérile apyrogène, avant utilisation. Dans un aspect, les composés (c'est-à-dire les composés de cyclohexénone décrits ici) sont préparés sous la forme de solutions injectables 10 par voie parentérale, comme décrit ici ou connu dans la technique, et administrés avec un injecteur automatique. Les injecteurs automatiques, tels que ceux divulgués dans les brevets US N° 4 031 893, 5 358 489 ; 5 540 664 ; 5 665 071, 5 695 472 et le document W0/2005/087297 (chacun incorporé ici à titre de référence pour cette description) sont connus. En général, tous les 15 injecteurs automatiques contiennent un volume de solution qui comprend un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) devant être injecté. En général, les injecteurs automatiques comprennent un réservoir pour contenir la solution, qui est en communication de fluide avec une aiguille pour délivrer le médicament, ainsi qu'un mécanisme pour déployer automatiquement 20 l'aiguille, insérer l'aiguille dans le patient et délivrer la dose au patient. Des exemples d'injecteurs délivrent environ 0,3 ml, 0,6 ml, 1,0 ml ou un autre volume convenable de solution à une concentration de 0,5 mg à 50 mg d'un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) par ml de solution. Chaque injecteur est capable de délivrer une seule dose du composé. 25 Dans encore d'autres modes de réalisation, les composés (c'est-à-dire les composés de cyclohexénone décrits ici) sont administrés par voie topique. Les composés décrits ici sont formulés dans diverses compositions pouvant être administrées par voie topique, telles que des solutions, suspensions, lotions, gels, pâtes, bâtonnets de médicament, baumes, crèmes ou pommades. 30 Ces compositions pharmaceutiques contiennent éventuellement des solubilisants, stabilisants, agents amplifiant la tonicité, tampons, et conservateurs. Dans encore d'autres modes de réalisation, les composés (c'est-à-dire les composés de cyclohexénone décrits ici) sont formulés pour être administrés 35 par voie transdermique. Dans des modes de réalisation spécifiques, les formulations à usage transdermique emploient des dispositifs de délivrance par voie transdermique et des timbres de délivrance par voie transdermique et peuvent être des émulsions lipophiles ou des solutions aqueuses tamponnées, dissoutes et/ou dispersées dans un polymère ou un adhésif. Dans divers modes de réalisation, ces timbres sont construits pour une délivrance d'agents pharmaceutiques continue, pulsée ou à la demande. Dans des modes de réalisation additionnels, la délivrance par voie transdermique d'un composé (c'est-à-dire d'un composé de cyclohexénone décrit ici) est accomplie au moyen de timbres iontophorétiques et analogues. Dans certains modes de réalisation, les timbres transdermiques délivrent un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) de manière contrôlée. Dans des modes de réalisation spécifiques, l'absorption est ralentie par l'utilisation de membranes contrôlant la vitesse ou par piégeage du composé à l'intérieur d'un gel ou d'une matrice polymère. Dans des modes de réalisation alternatifs, on utilise des amplificateurs d'absorption pour augmenter l'absorption. Les véhicules ou amplificateurs d'absorption comprennent des solvants absorbables et pharmaceutiquement acceptables qui facilitent le passage à travers la peau. Par exemple, dans un mode de réalisation, les dispositifs transdermiques sont sous la forme d'un bandage comprenant un élément d'envers, un réservoir contenant le composé éventuellement avec des véhicules, éventuellement une barrière contrôlant la vitesse pour délivrer le composé à la peau de l'hôte à une vitesse contrôlée et prédéterminée sur une période de temps prolongée, et des moyens pour fixer le dispositif à la peau. Les formulations à usage transdermique décrites ici peuvent être 25 administrées au moyen de divers dispositifs qui ont été décrits dans la technique. Ces dispositifs comprennent par exemple, mais sans s'y limiter, ceux des brevets US N° 3 598 122, 3 598 123, 3 710 795, 3 731 683, 3 742 951, 3 814 097, 3 921 636, 3 972 995, 3 993 072, 3 993 073, 3 996 934, 4 031 894, 4 060 084, 4 069 307, 4 077 407, 4 201 211, 4 230 105, 4 292 299, 4 292 30 303, 5 336 168, 5 665 378, 5 837 280, 5 869 090, 6 923 983, 6 929 801 et 6 946 144. Les formes posologiques à usage transdermique décrites ici peuvent incorporer certains excipients pharmaceutiquement acceptables qui sont conventionnels dans la technique. Dans un mode de réalisation, les 35 formulations à usage transdermique décrites ici comprennent au moins trois composants : (1) une formulation d'un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) ; (2) un amplificateur de pénétration ; et (3) un adjuvant aqueux. De plus, les formulations à usage transdermique peuvent comprendre des composants additionnels, tels que, mais sans s'y limiter, des agents gélifiants, des crèmes et des bases de pommade, et analogues. Dans certains modes de réalisation, les formulations à usage transdermique contiennent en outre un matériau d'envers tissé ou non tissé pour amplifier l'absorption et empêcher la formulation transdermique d'être retirée de la peau. Dans d'autres modes de réalisation, les formulations à usage transdermique décrites ici maintiennent un état saturé ou sursaturé pour favoriser la diffusion dans la peau. Dans d'autres modes de réalisation, les composés (c'est-à-dire les composés de cyclohexénone décrits ici) sont formulés pour être administrés par inhalation. Diverses formes pouvant être administrées par inhalation comprennent, mais sans s'y limiter, les aérosols, brouillards ou poudres. Les compositions pharmaceutiques d'un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) sont commodément délivrées sous la forme d'une présentation en spray aérosol dans des bidons pressurisés ou un nébuliseur, avec utilisation d'un propulseur convenable (par exemple le dichlorodifluorométhane, le trichlorofluorométhane, le dichlorotétrafluoroéthane, le dioxyde de carbone ou un autre gaz convenable). Dans des modes de réalisation spécifiques, la dose unitaire d'un aérosol pressurisé est déterminée par la disposition d'une valve pour délivrer une quantité dosée. Dans certains modes de réalisation, des capsules et cartouches, par exemple et à titre d'exemple uniquement, de gélatine, pour une utilisation dans un inhalateur ou insufflateur, sont formulées de manière à contenir un mélange en poudre du composé et d'une base de poudre convenable telle que le lactose et l'amidon. Les formulations à usage intranasal sont connues dans la technique et sont décrites par exemple dans les brevets US N° 4 476 116, 5 116 817 et 6 391 452, qui sont chacun incorporés ici spécifiquement à titre de référence. Les formulations qui comprennent un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici), qui sont préparées conformément à ces techniques et à d'autres techniques bien connues dans ce domaine, sont préparées sous la forme de solutions dans de la solution salée, employant de l'alcool benzylique ou d'autres conservateurs convenables, des fluorocarbures, et/ou d'autres agents solubilisants ou dispersants connus dans la technique. Voir par exemple Ansel, H. C. et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, sixième Ed. (1995). De préférence, ces compositions et formulations sont préparées avec des ingrédients pharmaceutiquement acceptables et non toxiques convenables. Ces ingrédients peuvent être trouvés des sources telles que dans REMINGTON : THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY, 21ème édition, 2005, qui est un ouvrage de référence dans ce domaine. Le choix de véhicules convenables dépend fortement de la nature exacte de la forme posologique à usage nasal souhaitée, par exemple des solutions, suspensions, pommades, ou gels. Les formes posologiques à usage nasal contiennent généralement de grandes quantités d'eau en plus de l'ingrédient actif. Des quantités mineures d'autres ingrédients tels que des agents d'ajustement du pH, des émulsionnants ou des agents dispersants, des conservateurs, des tensioactifs, des agents gélifiants, ou des agents tampons et d'autres agents stabilisants et/ou solubilisants, peuvent aussi être présentes. La forme posologique à usage nasal devrait de préférence être isotonique vis-à-vis des sécrétions nasales. Pour une administration par inhalation, les composés décrits ici peuvent être sous la forme d'un aérosol, d'un brouillard ou d'une poudre. Les compositions pharmaceutiques décrites ici sont commodément délivrées sous la forme d'une présentation en spray aérosol dans des bidons pressurisés ou un nébuliseur, avec utilisation d'un propulseur convenable, par exemple le dichlorodifluorométhane, le trichlorofluorométhane, le dichlorotétrafluoroéthane, le dioxyde de carbone ou un autre gaz convenable. Dans le cas d'un aérosol pressurisé, l'unité posologique peut être déterminée par la disposition d'une valve pour délivrer une quantité dosée. Les capsules et cartouches, par exemple et à titre d'exemple uniquement, de gélatine, pour une utilisation dans un inhalateur ou insufflateur, peuvent être formulées de manière à contenir un mélange en poudre du composé décrit ici et d'une base de poudre convenable telle que le lactose et l'amidon. Dans encore d'autres modes de réalisation, les composés (c'est-à-dire les composés de cyclohexénone décrits ici) sont formulés dans des compositions à usage rectale telles que des lavements, des gels à usage rectal, des mousses à usage rectal, des aérosol à usage rectal, des suppositoires, des suppositoires de gelée, ou des lavements à rétention, contenant des bases de suppositoire conventionnelles telles que le beurre de cacao ou d'autres glycérides, ainsi que des polymères synthétiques tels que la polyvinylpyrrolidone, le PEG, et analogues. Dans les formes en suppositoire des compositions, une cire à bas point de fusion telle que, mais sans s'y limiter, un mélange de glycérides d'acides gras, éventuellement en combinaison avec du beurre de cacao, est d'abord fondue. Dans certains modes de réalisation, les compositions pharmaceutiques sont formulées de n'importe quelle manière conventionnelle utilisant un ou plusieurs véhicules physiologiquement acceptables comprenant des excipients et auxiliaires qui facilitent la transformation des composés actifs en préparations qui peuvent être utilisées en pharmacie. Une formulation appropriée dépend de la voie d'administration choisie. N'importe quels techniques, véhicules et excipients pharmaceutiquement acceptables sont éventuellement utilisés selon ce qui est approprié et compris dans la technique. Des compositions pharmaceutiques comprenant un composé (c'est-à-dire un composé de cyclohexénone décrit ici) peuvent être fabriquées d'une manière conventionnelle, telle que, à titre d'exemple uniquement, au moyen de procédés conventionnels de mélange, dissolution, granulation, fabrication de dragées, lévigation, émulsification, encapsulation, piégeage ou compression. Les compositions pharmaceutiques contiennent au moins un véhicule, diluant ou excipient pharmaceutiquement acceptable et au moins un composé (c'est-à-dire les composés de cyclohexénone décrits ici) décrit ici à titre d'ingrédient actif. L'ingrédient actif est sous forme d'acide libre ou de base libre, ou sous la forme d'un sel pharmaceutiquement acceptable. De plus, les procédés et compositions pharmaceutiques décrits ici comprennent l'utilisation de formes cristallines (également appelées polymorphes) ainsi que de métabolites actifs de ces composés ayant le même type d'activité. Tous les tautomères des composés décrits ici sont incorporés à l'intérieur de la portée des composés présentés ici. De plus, les composés décrits ici englobent les formes non solvatées ainsi que solvatées avec des solvants pharmaceutiquement acceptables tels que l'eau, l'éthanol, et analogues. Les formes solvatées des composés présentés ici sont également considérées comme étant divulguées ici. De plus, les compositions pharmaceutiques contiennent éventuellement d'autres agents médicinaux ou pharmaceutiques, des véhicules, des adjuvants, tels que des agents conservateurs, stabilisants, mouillants ou émulsionnants, des promoteurs de solution, des sels pour réguler la pression osmotique, des tampons, et/ou des substances ayant une valeur thérapeutique. Les procédés pour la préparation de compositions comprenant les 5 composés décrits ici comprennent la formulation des composés avec un ou plusieurs excipients ou véhicules inertes et pharmaceutiquement acceptables pour former un solide, un semi-solide ou un liquide. Les compositions solides comprennent, mais sans s'y limiter, les poudres, comprimés, granules dispersibles, capsules, cachets, et suppositoires. Les compositions liquides 10 comprennent les solutions dans lesquelles un composé est dissous, les émulsions comprenant un composé, ou une solution contenant des liposomes, micelles ou nanoparticules comprehant un composé tel que divulgué ici. Les compositions semi-solides comprennent, mais sans s'y limiter, les gels, suspensions et crèmes. La forme des compositions pharmaceutiques décrites 15 ici englobe les solutions ou suspensions liquides, les formules solides convenant pour former une solution ou suspension dans un liquide avant utilisation, ou les émulsions. Ces compositions contiennent aussi éventuellement des quantités mineures de substances auxiliaires non toxiques, telles que des agents mouillants ou émulsionnants, des agents tampons du pH, 20 et ainsi de suite. Dans certains modes de réalisation, la composition pharmaceutique comprenant au moins un composé (c'est-à-dire les composés de cyclohexénone décrits ici) prend, à titre d'illustration, la forme d'un liquide où les agents sont présents en solution, en suspension ou les deux. Typiquement 25 quand la composition est administrée sous la forme d'une solution ou suspension, une première portion de l'agent est présente en solution et une deuxième portion de l'agent est présente sous forme particulaire, en suspension dans une matrice liquide. Dans certains modes de réalisation, une composition liquide contient une formulation de gel. Dans d'autres modes de 30 réalisation, la composition liquide est aqueuse. Dans certains modes de réalisation, les suspensions pharmaceutiques aqueuses contiennent un ou plusieurs polymères servant d'agents de mise en suspension. Les polymères comprennent les polymères solubles dans l'eau tels que les polymères cellulosiques, par exemple 35 l'hydroxypropylméthylcellulose, et les polymères insolubles dans l'eau tels que les polymères carboxyliques réticulés. Certaines compositions pharmaceutiques décrites ici comprennent un polymère muco-adhésif, choisi par exemple parmi la carboxyméthylcellulose, un Carbomer (polymère d'acide acrylique), le poly(méthacrylate de méthyle), le polyacrylamide, un polycarbophile, un copolymère d'acide acrylique/acrylate de butyle, l'alginate de sodium, et le dextrane. Les compositions pharmaceutiques contiennent aussi éventuellement des agents solubilisants pour faciliter la solubilisation du composé (c'est-à-dire les composés de cyclohexénone décrits ici). L'expression "agent solubilisant" 10 englobe généralement les agents qui ont pour résultat la formation d'une solution micellaire ou d'une solution vraie de l'agent. Certains tensioactifs non-ioniques acceptables, par exempté le polysorbate 80, sont des agents solubilisants utiles, tout comme peuvent l'être les glycols acceptables du point de vue ophtalmique, les polyglycols, par exemple le polyéthylèneglycol 400, et 15 les éthers de glycol. En outre, les compositions pharmaceutiques contiennent éventuellement un ou plusieurs agents d'ajustement du pH ou agents tampons, y compris des acides tels que les acides acétique, borique, citrique, lactique, phosphorique et chlorhydrique ; les bases telles que l'hydroxyde de sodium, le phosphate de 20 sodium, le borate de sodium, le citrate de sodium, l'acétate de sodium, le lactate de sodium et le tris-hydroxyméthylaminométhane ; et les tampons tels que le citrate/dextrose, le bicarbonate de sodium et le chlorure d'ammonium. Ces acides, bases et tampons sont incorporés en la quantité requise pour maintenir le pH de la composition dans une plage acceptable. 25 De plus, les compositions pharmaceutiques contiennent éventuellement un ou plusieurs sels en la quantité requise pour porter l'osmolalité de la composition dans une plage acceptable. Ces sels comprennent ceux ayant des cations sodium, potassium ou ammonium et des anions chlorure, citrate, ascorbate, borate, phosphate, bicarbonate, sulfate, thiosulfate ou bisulfite ; des 30 sels convenables comprennent le chlorure de sodium, le chlorure de potassium, le thiosulfate de sodium, le bisulfite de sodium et le sulfate d'ammonium. D'autres compositions pharmaceutiques contiennent éventuellement un ou plusieurs conservateurs pour inhiber l'activité microbienne. Des 35 conservateurs convenables comprennent les substances contenant du mercure tels que le merfen et le thiomersal ; le dioxyde de chlore stabilisé ; et les composés d'ammonium quaternaire tels que le chlorure de benzalkonium, le bromure de cétyltriméthylammonium et le chlorure de cétylpyridinium. Encore d'autres compositions pharmaceutiques contiennent un ou plusieurs tensioactifs pour amplifier la stabilité physique ou à d'autres fins. Des tensioactifs non-ioniques convenables comprennent les glycérides d'acides gras polyoxyéthylénés et les huiles végétales, par exemple l'huile de ricin hydrogénée polyoxyéthylénée (60) ; et les alkyléthers et alkylphényléthers polyoxyéthylénés, par exemple l'octoxynol 10, l'octoxynol 40. Encore d'autres compositions pharmaceutiques peuvent contenir un ou plusieurs antioxydants pour amplifier la stabilité chimique lorsque c'est nécessaire. Des antioxydants convenables comprennent, à titre d'exemple uniquement, l'acide ascorbique et le métabisulfite de sodium. Dans certains modes de réalisation, les compositions pharmaceutiques 15 en suspension aqueuse sont conditionnées dans des récipients monodose non refermables. En variante, on utilise des récipients multidoses refermables, auquel cas il est typique d'incorporer un conservateur dans la composition. Dans des modes de réalisation alternatifs, on emploie d'autres systèmes de délivrance pour composés pharmaceutiques hydrophobes. Les liposomes et 20 les émulsions sont des exemples de véhicules de délivrance ou de supports dans ces systèmes. Dans certains modes de réalisation, on emploie aussi des solvants organiques tels que la N-méthylpyrrolidone. Dans des modes de réalisation additionnels, les composés décrits ici sont délivrés au moyen d'un système à libération prolongée, tel que des matrices semi-perméables de 25 polymères hydrophobes solides contenant l'agent thérapeutique. Divers matériaux de libération prolongée sont utiles ici. Dans certains modes de réalisation, des capsules à libération prolongée libèrent les composés pendant quelques heures et jusqu'à plus de 24 heures. En fonction de la nature chimique et de la stabilité biologique du réactif thérapeutique, on peut employer 30 des stratégies additionnelles pour stabiliser les protéines. Dans certains modes de réalisation, les formulations décrites ici comprennent des antioxydants, des agents chélatant les métaux, des composés contenant un thiol et/ou autres agents stabilisants en général. Des exemples de tels agents stabilisants comprennent, mais sans s'y limiter : (a) 35 d'environ 0,5 % à environ 2 % p/v de glycérol, (b) d'environ 0,1 % à environ 1 % p/v de méthionine, (c) d'environ 0,1 % à environ 2 % p/v de monothioglycérol, (d) de l'EDTA d'environ 1 mM à environ 10 mM, (e) d'environ 0,01 % à environ 2 % p/v d'acide ascorbique, (f) de 0,003 % à environ 0,02 % p/v de polysorbate 80, (g) de 0,001 % à environ 0,05 % p/v de polysorbate 20, (h) l'arginine, (i) l'héparine, (j) le sulfate de dextrane, (k) les cyclodextrines, (I) le polysulfate de pentosane et autres héparinoïdes, (m) les cations divalents tels que le magnésium et le zinc ; ou (n) leurs combinaisons. Traitements combinés En général, les compositions décrites ici et, dans des modes de réalisation où un traitement combiné est employé, d'autres agents, n'ont pas à devoir être administrés dans la même composition pharmaceutique et, dans certains modes de réalisation, en raison de caractéristiques physiques et chimiques différentes, ils sont administrés par des voies différentes. Dans 15 certains modes de réalisation, l'administration initiale est effectuée conformément à des protocoles établis, et ensuite, sur la base des effets observés, le clinicien qualifié peut modifier la dose, les modes d'administration et les moments d'administration. Dans certains modes de réalisation, les doses efficaces du point de vue 20 thérapeutique vont varier quand les médicaments sont utilisés dans des combinaisons de traitement. Le traitement combiné comprend en outre des traitements périodiques qui commencent et s'arrêtent à divers moments pour faciliter la gestion clinique du patient. Pour les traitements combinés décrits ici, les doses des composés co-administrés varient en fonction du type de co25 médicament employé, du médicament spécifique employé, de la maladie, du trouble ou de l'état qui est traité, et ainsi de suite. On comprend que, dans certains modes de réalisation, le régime posologique pour traiter, prévenir ou améliorer le ou les états pour lesquels un soulagement est recherché, est modifié en fonction de divers facteurs. Ces 30 facteurs comprennent le trouble dont souffre le sujet, ainsi que l'âge, le poids, le sexe, le régime alimentaire, et l'état médical du sujet. Ainsi, dans d'autres modes de réalisation, le régime posologique réellement employé varie largement et par conséquent s'écarte des régimes posologiques présentés ici. Il est prévu que soient couvertes des combinaisons de composés (c'est-35 à-dire le composé de cyclohexénone décrit ici) avec d'autres agents anticancéreux. Dans certains modes de réalisation, des exemples d'agents anticancéreux comprennent, mais sans s'y limiter, les suivants : cisplatine (CDDP), carboplatine, procarbazine, méchloréthamine, cyclophosphamide, camptothécine, ifosfamide, melphalan, chlorambucil, busulfan, nitrosurée, dactinomycine, daunorubicine, doxorubicine, bléomycine, plicomycine, mitomycine, étoposide (VP16), tamoxifen, raloxifène, agents se liant aux récepteurs d'oestrogènes, taxol, gemcitabine, navelbine, inhibiteurs de la protéine farnésyle transférase, transplatine, 5-fluorouracile, vincristine, vinblastine et méthotrexate, d'autres inhibiteurs de topoisomérase (par exemple irinotécan, topotécan, camptothécine, etc.) ou n'importe quel agent apparenté dérivé des précédents. Les combinaisons des composés de cyclohexénone et d'autres agents anticancéreux décrites ici envisagent des régimes thérapeutiques et de traitement supplémentaires avec d'autres agents dans certains modes de réalisation. Ces régimes thérapeutiques et de traitement supplémentaires peuvent comprendre une autre thérapie anticancéreuse dans certains modes de réalisation. En variante, dans d'autres modes de réalisation, les régimes thérapeutiques et de traitement supplémentaires comprennent d'autres agents utilisés pour traiter des états complémentaires associés au cancer ou un effet secondaire d'un tel agent dans la thérapie combinée. Dans encore d'autres modes de réalisation, des adjuvants ou amplificateurs sont administrés avec une thérapie combinée décrite ici. Les thérapies anticancéreuses additionnelles comprennent une chimiothérapie, une radiothérapie, une immunothérapie, une thérapie génique, une opération chirurgicale ou d'autres thérapies qui sont capables d'affecter négativement le cancer chez un patient, par exemple en tuant des cellules cancéreuses, en induisant une apoptose des cellules cancéreuses, en réduisant la vitesse de croissance des cellules cancéreuses, en réduisant l'apparition ou le nombre de métastases, en réduisant la taille d'une tumeur, en inhibant la croissance d'une tumeur, en réduisant l'apport de sang à une tumeur ou à des cellules cancéreuses, en favorisant une réponse immunitaire contre les cellules cancéreuses ou une tumeur, en empêchant ou inhibant la progression d'un cancer, ou en augmentant la durée de vie d'un sujet cancéreux. Dans certains modes de réalisation, il est mis à disposition des compositions pour traiter une maladie ou un état associé à des métastases osseuses, comprenant une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : R3 CH R4 R1...x OR Y.R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=O)-alkyle en Cl à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)mCH3 ; R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en Cl à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en Cl à C8, l'alcényle en C2 à C8, I'alcynyle en C2 à C8, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en Cl à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à C8, et halogénoalkyle en Cl à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en Ci à C8 ; R7 est un alkyle en Cl à C8, OR5 ou NR5R6 ; m = 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament d'un tel composé. Exemples Exemple 1 Préparation des composés de cyclohexénone exemplaires Dans un flacon, on place cent grammes de mycélium, de corps de fructification ou d'un mélange des deux, provenant d'Antrodia camphorata. On ajoute dans le flacon une quantité appropriée d'eau et d'alcool (solution à 70- 100 % d'alcool) et on agite à 20-25°C pendant au moins 1 heure. On filtre la solution sur un filtre et une membrane de 0,45 pm et on collecte le filtrat sous forme d'extrait. On soumet le filtrat d'Antrodia camphorata à une analyse par chromatographie liquide haute performance (CLHP). On effectue la séparation sur une colonne RP18, la phase mobile étant constituée de méthanol (A) et de 0,3 % d'acide acétique (B), avec les conditions de gradient suivantes : 0-10 min dans 95 % - 20 % de B, 10-20 min dans 20 % - 10 % de B, 20-35 min dans 10 % - 10 % de B, 35-40 min dans 10 - 95 °A. de B, à un débit de 1 ml/min. On surveille l'effluent de colonne avec un détecteur UV-visible. On collecte les fractions collectées entre 21,2 et 21,4 min et on les concentre, ce qui donne le composé 5, un produit liquide jaune pâle. On analyse que le composé 5 est la 4-hydroxy-5-(11-hydroxy-3,7,11- triméthyldodéca-2,6-diény1)-2,3-diméthoxy-6-méthylcyclohex-2-énone ayant une masse moléculaire de 408 (formule moléculaire : C24114005). RMN-1H (CDCI3) E (ppm) = 1,21, 1,36, 1,67, 1,71, 1,75, 1,94, 2,03, 2,07, 2,22, 2,25, 3,68, 4,05, 5,71 et 5,56. RMN-13C (CDCI3) E (ppm) : 12,31, 16,1, 16,12, 17,67, 25,67, 26,44, 26,74, 27,00, 30,10, 40,27, 43,34, 59,22, 60,59, 71,8, 120,97, 123,84, 124,30, 131,32, 134,61, 135,92, 138,05, 160,45, et 197,11. H3 H3 H3 H3 O OH CH3 0,C H3 5 Composé 5 : 4-hyd roxy-5-(11-hydroxy-3,7,11-triméthyl-dodéca-2,6-diényI)-2 ,3- 20 diméthoxy-6-méthylcyclohex-2-énone On collecte les fractions collectées entre 23,7 et 24,0 min et on les concentre, ce qui donne le composé 7, un produit liquide jaune pâle. On analyse que le composé 7 est la 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-5-(11-méthoxy3,7,11-triméthyldodéca-2,6-diény1) -6-méthylcyclohex-2-énone ayant une masse 25 moléculaire de 422 (C25H4205). RMN-1H (CDCI3) ^ (ppm) = 1,21, 1,36, 1,71, 1,75, 1,94, 2,03, 2,07, 2,22, 2,25, 3,24, 3,68, 4,05, 5,12, 5,50, et 5,61. RMN13C (CDCI3) Il (ppm) : 12,31, 16,1, 16,12, 17,67, 24,44, 26,44, 26,74, 27,00, 37,81, 39,81, 40,27, 43,34, 49,00, 59,22, 60,59, 120,97, 123,84, 124,30, 135,92, 138,05, 160,45 et 197,12. ÇH3 ÇH3 ÇH3 ÇH3 OC H3 H3C. 0 OH CH3 0.0 H3 7 Composé 7 : 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-5-(11-méthoxy-3,7,11-triméthyldodéca2,6-diény1) -6-méthylcyclohex-2-énone On collecte les fractions collectées à 25 et 30 min et on les concentre, ce qui donne de la 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-6-méthy1-5-(3,7,11- triméthyldodéca-2,6,10-triényl)cyclohex-2-énone (composé 1), un produit liquide marron-jaune pâle. L'analyse du composé 1 indique la formule moléculaire C24H3804, une masse moléculaire de 390 et un point de fusion de 48 à 52°C. Les spectres de RMN indiquent ce qui suit : RMN-1H (CDCI3) ^ (ppm) = 1,51, 1,67, 1,71, 1,75, 1,94, 2,03, 2,07, 2,22, 2,25, 3,68, 4,05, 5,07, et 5,14 ; RMN-13C (CDCI3) ^ (ppm) : 12,31, 16,1, 16,12, 17,67, 25,67, 26,44, 26,74, 27,00, 39,71, 39,81, 40,27, 43,34, 59,22, 60,59, 120,97, 123,84, 124,30, 131,32, 135,35, 135,92, 138,05, 160,45, et 197,12. ÇH3 ÇH3 CH3 CH3 CH3 H3C,00H O. CH3 Composé 1 : 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-6-méthy1-5-(3,7,11-triméthyldodéca2 ,6,10-triényl)cyclohex-2-énone On obtient le composé 6, un métabolite du composé 1, à partir d'échantillons d'urine de rats alimentés avec le composé 1 dans une étude sur animaux. On détermine que le composé 6 est la 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-6- méthyl-5-(acide 3-méthy1-2-hexénoïque)cyclohex-2-énone ayant une masse moléculaire de 312 (C16H2406). On obtient le composé 4, que l'on détermine être la 3,4-dihydroxy-2-méthoxy-6-méthy1-5-(3,7,11-triméthyldodéca-2,6,10- triényl)cyclohex-2-énone (masse moléculaire 376, C23H3604), quand le composé 1 se trouve dans des conditions supérieures à 40°C pendant 6 25 heures. o.C H 3 CH3 53 CH3 H3c. o OH OH 4 C 0 2 H O H 3 C 0 CH3 CH3 CH3 En variante, on peut préparer les composés exemplaires en partant de 4-hydroxy-2,3-diméthoxy-6-méthylcyclohexa-2,5-diénone, ou analogue. De façon similaire, on isole d'autres composés de cyclohexénone de 5 structure R4 Y. R2 à partir d'Antrodia camphorata ou on les prépare par voie synthétique ou semisynthétique à partir des matériaux de départ convenables. Une personne ayant une connaissance ordinaire de la technique va facilement utiliser les conditions 10 appropriées pour une telle synthèse. Exemple 2 Effets du composé 1 dans un modèle de métastases osseuses de cancer du sein 15 Les patients ayant un cancer du sein développent typiquement des métastases osseuses. Presque tous les patients ayant un cancer du sein en phase terminale ont des métastases osseuses. Les métastases osseuses provoquées par le cancer du sein sont ostéolytiques, en provoquant une forte perte osseuse qui conduit à un risque fortement augmenté de fractures. Bien 20 que la tumeur primaire puisse être retirée avec succès, la maladie peut déjà s'être propagée aux os. Dans ce cas, la maladie peut développer d'autres métastases viscérales et osseuses. Il n'y a actuellement pas de traitement curatif efficace pour prévenir ou traiter les métastases osseuses. L'objectif de cette étude était de tester l'efficacité de trois doses 25 différentes du composé exemplaire 1 de l'Exemple 1 sur les métastases osseuses de cancer du sein chez des souris nues athymiques femelles dans une étude de 25 jours sur une base préventive. Les 5 groupes expérimentaux suivants étaient inclus dans l'étude : 1. groupe témoin recevant le véhicule (p.o. deux fois par jour) 2. groupe de référence recevant de l'acide zolédronique (s.c. les jours 1 et 14) + le véhicule (p.o. deux fois par jour) 3. groupe de test recevant 15 mg/kg de composé de test (p.o. deux fois par jour) 4. groupe de test recevant 30 mg/kg de composé de test (p.o. deux fois par jour) 5. groupe de test recevant 45 mg/kg de composé de test (p.o. deux fois par jour) Le véhicule est l'huile de maïs. Tous les groupes comprenaient 15 souris âgées de 5 semaines au début de l'étude. Les animaux ont été randomisés en fonction de leurs poids corporels en cinq groupes. Le jour 0, les animaux ont reçu une inoculation intracardiaque de cellules de cancer du sein humain. On a déterminé les poids corporels deux fois par semaine. Lors du sacrifice, on a quantifié les lésions ostéolytiques et la charge tumorale corporelle totale par imagerie aux rayons X et par fluorescence, respectivement. Le composé de test et le véhicule ont été administrés par gavage oral deux fois par jour. Des échantillons de sang pour analyser TRACP 5b ont été collectés les jours 0, 17 et 24. Les animaux ont été sacrifiés le jour 25, ou avant s'ils étaient devenus moribonds. Des échantillons tissulaires de tibia et de fémur gauches et droits ont été collectés à des fins histologiques et encastrés dans de la paraffine pour des analyses histomorphométriques futures éventuelles. Une nécropsie macroscopique a été effectuée sur tous les animaux à la fin de l'étude, et tous les signes macroscopiques ont été 25 enregistrés. Matériels et équipement Composé de test On a obtenu le composé de test 1 (99 %, 1005 mg/ml) sous forme 30 liquide. On a préparé trois solutions mères 50x dans de l'huile de maïs (75 mg/ml, 150 mg/ml et 225 mg/ml) et on les a stockées dans l'obscurité à +4°C. On a préparé les solutions d'administration à 1,5, 3,0 et 4,5 mg/ml à partir des solutions mères en diluant les solutions mères dans de l'huile de maïs à 1/50. On a préparé les solutions d'administration une fois par semaine et on les a 35 stockées dans l'obscurité à +4°C. Le volume administré était de 10 ml/kg. On a administré le composé de test par gavage oral deux fois par jour à des intervalles entre administrations de 10-14 heures. Les administrations ont été effectuées à la même heure chaque jour. Composé de référence En tant que composé de référence, on a utilisé de l'acide zolédronique. On a dilué 100 pl de concentré pour perfusion à 4 mg/5 ml de Zometa® (Novartis Pharma GmbH, Nuremberg, Allemagne) dans 3,9 ml de solution salée stérile (0,9 % de NaCI) pour obtenir la concentration d'administration de 0,02 mg/ml. On a préparé cette solution une seule fois durant l'étude et on l'a stockée à +4°C. Le volume d'administration était de 5 ml/kg, soit une dose de 0,1 mg/kg. On a administré le composé de référence s.c. deux fois dans l'étude : les jours 1 et 14. Véhicule Le véhicule est l'huile de maïs (Sigma-Aldrich). Matériaux primaires, animaux, et équipement primaire On a obtenu des souris nues athymiques femelles (Hsd : Athymic nude- nu) auprès de Harlan Laboratories B.V. (Horst, Pays-Bas). Les cellules de cancer du sein humain MDA-MB-231SA-GFP6 proviennent à l'origine du Prof. Theresa Guise (Université de l'Indiana, Indianapolis, IN, USA) et elles ont été transfectées avec le vecteur pTurboGFP-N (Evrogen JSC, Moscou, Russie). Description du système de test utilisé Cette expérience utilise un modèle animal qui ressemble étroitement aux caractéristiques d'une maladie ou d'un état métastasique de cancer du sein chez les humains. Ce modèle peut être efficacement utilisé pour tester les effets de médicaments anticancéreux candidats sur les métastases osseuses de cellules du cancer du sein. Dans ce modèle, des cellules de cancer du sein humain sont inoculées dans le ventricule cardiaque gauche de souris nues athymiques femelles âgées de 5 semaines. Cette souche de souris est immunodéficiente, ce qui permet une propagation rapide des cellules cancéreuses humaines. Dans les deux semaines suivant l'inoculation, les animaux développent des métastases osseuses ostéolytiques qui peuvent être visualisées par radiographie aux rayons X. De plus, on observe des métastases dans les tissus mous chez environ 40 % des animaux, en particulier dans les glandes surrénales. Au bout de 3 semaines, les métastases osseuses sont clairement visibles sur des radiographies aux rayons X et les 5 animaux ont développé une cachexie et ont perdu beaucoup de poids. Les animaux sont typiquement sacrifiés 3-4 semaines après inoculation, et leurs pattes arrière sont collectées pour une analyse histomorphométrique ultérieure. Le modèle animal de métastases osseuses proposé ici peut être commodément utilisé pour tester des médicaments candidats qui se sont 10 avérés, dans des études préliminaires, affecter une ou plusieurs des suivantes : 1) la croissance de cellules cancéreuses ; 2) l'invasion de cellules cancéreuses ; 3) la migration de cellules cancéreuses ; 4) une angiogenèse ; 5) la fonction ou la différenciation des ostéoclastes. Ce modèle peut aussi être utilisé pour découvrir de nouvelles indications pour des médicaments existants, 15 en offrant aux sociétés pharmaceutiques un moyen pour trouver de nouvelles indications pour des médicaments brevetés qui se sont déjà avérés être efficaces pour certaines autres indications. Procédures 20 Manipulation des animaux et culture cellulaire Pour cette étude, on a utilisé des souris nues athymiques femelles (Hsd Athymic nude-nu, obtenues auprès de Harlan, Pays-Bas). Les animaux étaient âgés de 5 semaines, et ils pesaient environ 16-22 g au début de l'étude. Les souris sont des animaux exempts de pathogènes spécifiques (SPF) et 25 élevées en isolation. Pour une qualification dans l'étude, les animaux doivent être d'âge correct et en bonne santé clinique. La période de quarantaine et d'acclimatation des souris était d'une semaine. L'allocation aux groupes a été effectuée par une procédure de randomisation basée sur le poids corporel. Les animaux ont été marqués avec des marques d'oreille. Les souris étaient logées 30 en Scantainer® à raison de 5 souris par cage. Pour les inoculations intracardiaques et l'imagerie, on a anesthésié les souris avec des injections i.p. de xylazine (4-5 mg/ml) et de kétamine (75-92 mg/ml). On a utilisé une analgésie (buprénorphine 3 mg/kg p.o. dans l'eau de boisson) pour les 5 derniers jours de l'étude. 35 On a inoculé des cellules de cancer du sein humain MDA-MB-231SA- GFP6 (105 cellules dans 0,1 ml de PBS) dans le ventricule cardiaque gauche des souris le jour 0, ce qui a conduit au développement de métastases osseuses typiques de la maladie. Surveillance des animaux On a pesé les animaux deux fois par semaine et on a ajusté les doses en conséquence. Les 5 derniers jours de l'étude, on a pesé et observé les animaux chaque jour pour surveiller la progression de la maladie. L'apparition de quelconques signes cliniques a été enregistrée sur des formulaires de suivi. On a donné des analgésiques à tous les animaux pendant les 5 derniers jours de l'expérience. 10 animaux ont été retrouvés morts ou ont dû être euthanasiés en raison de difficultés respiratoires (voir le Tableau 1). A la nécropsie, on a trouvé un oesophage percé et de l'huile dans la cavité thoracique. Un animal a été euthanasié en raison d'une paraplégie avant le jour 22 (voir le Tableau 1), 15 animaux ont dû être euthanasiés entre les jours 22 et 24 de l'expérience (voir le Tableau 1). Ils ont été pesés et radiographiés, et des échantillons d'os ont été préparés. Deux animaux ont été retirés de l'analyse finale en raison d'une 20 croissance excessive de cellules cancéreuses dans les poumons et la cavité thoracique, indiquant que l'inoculation de cellules cancéreuses avait été ratée (voir le Tableau 1). Un animal du groupe témoin a été retiré parce qu'il n'avait pas de lésions osseuses observables (limite de séparation 0,5 mm2). De façon 25 proportionnelle, un animal des groupes 2 et 4 sans lésions osseuses observables a été retiré de l'analyse (voir le Tableau 1). Il n'y avait aucun animal sous la limite de séparation dans les groupes 3 et 5. 58 Tableau 1 Résultats de la surveillance des animaux : N final avec cellules de cancer du sein Groupe Nombre d'animaux Traitement N final Animaux morts (id) Moment de la mort Notes (jour d'étude) 1 1-15 Témoin 15 9 25 Pas de lésions osseuses observables 2 1-15 Acide zolédronique 9 1 25 Pas de lésions osseuses observables 5 15 CEsophage percé 8 25 Métastases pulmonaires 9 25 Métastases pulmonaires 11 15 CEsophage percé 12 19 OEsophage percé 3 1-15 Composé 1 30 mg/kg/j 14 6 19 OEsophage percé 4 1-15 Composé 1 60 mg/kg/j 12 3 25 Pas de lésions osseuses observables 9 21 Paraplégique, euthanasié avant j22 11 9 CEsophage percé 5 1-15 Composé 1 90 mg/kg/j 10 2 13 CEsophage percé 3 14 CEsophage percé 5 13 CEsophage percé 8 13 CEsophage percé 13 15 CEsophage percé Echantillonnage de sang et analyses de marqueurs osseux On a collecté des échantillons de sang pour analyser l'isoforme 5b de la phosphatase acide résistante au tartrate (TRACP 5b) à partir de la veine saphène avant l'inoculation des cellules cancéreuses et les jours 14 et 24. On a collecté les échantillons de sérum dans des tubes à gel de sérum de 100 pl, préparés dans l'heure suivant l'échantillonnage, que l'on a divisés en deux aliquotes et stockés à -70°C. On a analysé la TRACP 5b sérique en utilisant la trousse MouseTRAPTM (IDS Ltd, Boldon, Royaume-Uni). Imagerie fluorescente et radiographie aux rayons X On a surveillé les métastases par imagerie de la fluorescence émise par les cellules MDA-MB-231SA-GFP6 en utilisant le système d'imagerie LT 9 GFP LT-MACIMSYSPLUSC (Lightools Research, Encinitas, USA). La longueur d'onde d'excitation utilisée était de 470/40 nm et la longueur d'onde d'émission de 515 nm. On a réalisé une imagerie des animaux en position sur le ventre et en décubitus dorsal et on a déterminé la surface fluorescente par GFP (moyenne des deux images) à partir des images avec le logiciel d'analyse d'image MetaMorph. Sacrifice, autopsie, et collecte d'échantillons A la fin de l'étude (jours 22-25), on a pesé les animaux et on les a sacrifiés par dislocation cervicale sous anesthésie. On a effectué une nécropsie de tous les animaux. Les découvertes macroscopiques ont été enregistrées sur les formulaires de suivi. Des échantillons tissulaires ex vivo des pattes arrière (tibias et fémurs gauches et droits) ont été collectés pour une analyse histomorphométrique éventuelle dans le futur. Les échantillons d'os ont été fixés dans la formaline tamponnée neutre à 10 % pendant 2-3 jours, puis décalcifiés dans de I'EDTA à 10 % pendant deux semaines, et finalement traités avec une technique habituelle à la paraffine pour des analyses histologiques. Analyse statistique On a effectué l'analyse statistique avec SPSS (version 15.0). On a déterminé la moyenne et l'écart-type de chaque paramètre. Un animal du 35 groupe témoin n'ayant pas de lésions osseuses observables (limite de séparation 0,5 mm2) a été retiré de l'analyse. De façon proportionnelle, un animal des groupes 2 et 4 sans lésions osseuses observables a été retiré de l'analyse. Il n'y avait aucun animal sous la limite de séparation dans les groupes 3 et 5. Toutes les analyses statistiques ont été effectuées sous la forme de tests bilatéraux. La distribution normale des valeurs résiduelles et l'homogénéité de variance ont été vérifiées avant analyses ultérieures. Dans le cas où ces suppositions étaient enfreintes, on a appliqué soit une transformation logarithmique soit une transformation appropriée (par exemple racine carrée, inverse). Si les suppositions étaient assertées telles quelles ou 10 après transformation, on a utilisé une analyse de variance ANOVA à un seul facteur pour étudier si les valeurs obtenues parmi les groupes étaient statistiquement significatives (avec p L'augmentation du poids corporel moyen du groupe témoin le jour 25 est due à l'euthanasie des animaux moribonds le jour 24. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. Sur la Figure 2, le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. Paraplégie et cachexie Les animaux présentant une perte de fonction d'un membre quelconque étaient considérés paraplégiques. Les animaux étaient considérés cachectiques quand 2 des 3 conditions suivantes étaient satisfaites : colonne vertébrale courbée, déshydratation, et/ou réduction du poids maximal de 20 % ou plus. Une analyse statistique a été effectuée par utilisation du test exact de Fischer. On n'a pas observé de différences statistiquement significatives. Groupes : le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. Tableau 2 Proportion d'animaux paraplégies et cachectiques Témoin Acide Composé Composé Composé zolédronique 1 1 1 30 60 90 mg/kg/j mg/kg/j mg/kg/j 21,4 16,7 20 % de 21,4 11,1 cachectiques Valeur P 1,000 1,000 1,000 1,000 Signification . NS NS NS NS % de 28,6 22,2 57,1 8,3 20,0 paraplégiques Valeur P 1,000 0,252 0,330 1,000 Signification NS NS NS NS Analyse radiographique La Figure 3a montre la surface de lésion ostéolytique totale (mm2) lors du sacrifice (moyenne ± E.T.) des Groupes 1-5. L'ostéolyse était inhibée dans les groupes 2, 4 et 5. La Figure 3b montre la surface de lésion ostéolytique moyenne (mm2) lors du sacrifice (moyenne ± E.T.). Les lésions ostéolytiques étaient aussi plus petites dans les groupes 2, 4 et 5. La Figure 3c montre le nombre de lésions ostéolytiques lors du sacrifice (moyenne ± E.T.). Il y avait moins de lésions ostéolytiques dans les groupes 2 et 5, mais plus dans le groupe 3. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. Analyse de fluorescence La Figure 4 montre la charge tumorale totale du corps (mm2) lors du sacrifice (moyenne ± E.T.) des Groupes 1-5. Les résultats sont représentés par la moyenne des zones fluorescentes dans deux images (position sur le ventre et en décubitus dorsal) de chaque animal. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. TRACP 5b sérique La phosphatase acide résistante au tartrate (TRACP) est une enzyme qui est exprimée en grandes quantités par les ostéoclastes de résorption osseuse, les macrophages inflammatoires et les cellules dendritiques. Deux formes de TRACP circulent dans le sang humain : TRACP 5a dérivée des macrophages et des cellules dendritiques, et TRACP 5b dérivée des ostéoclastes. Des données récentes ont démontré l'utilité de TRACP 5b en tant que marqueur du nombre d'ostéoclastes et de la résorption osseuse, et de TRACP 5a en tant que marqueur d'états inflammatoires. La Figure 5 montre le changement relatif (%) de l'activité de phosphatase acide résistante au tartrate 5b (TRACP 5b) dans le sérum durant l'étude (moyenne ± E.T.) des Groupes 1-5. Les résultats d'analyses statistiques sont présentés sur les Figures 6a et 6b. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. La Figure 6a montre le changement relatif entre le jour -4 et le jour 17 de l'activité de TRACP 5b dans le sérum (moyenne ± E.T.). L'activité de TRACP 5b était réduite dans le groupe 2. La Figure 6b montre le changement relatif entre le jour -4 et le jour 24 de l'activité de TRACP 5b dans le sérum (moyenne ± E.T.). L'activité de TRACP 5b était réduite dans le groupe 2. Comparés au groupe 1 (témoin), les groupes 4 et 5 présentaient une activité de TRACP 5b réduite le jour 24, cependant pas de manière aussi significative que le groupe 2. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. PINP sérique Le propeptide N-terminal de procollagène I (PINP) dans le sérum est un marqueur sensible de formation d'os chez les humains. Le PINP sérique est apparu comme un marqueur fiable du renouvellement des os chez les humains et est habituellement utilisé pour surveiller la formation d'os. La Figure 7 montre le changement relatif (%) des valeurs de PINP 5 sérique durant l'étude (moyenne ± E.T.) des groupes 1 à 5. Les résultats d'analyses statistiques sont présentés sur les Figures 8a et 8b. La Figure 8a montre le changement relatif entre le jour -4 et le jour 17 des valeurs de PINP sérique (moyenne ± E.T.). L'activité de PINP était réduite dans le groupe 2 (enregistrée le jour 17). La Figure 8b montre le changement relatif entre le jour 10 -4 et le jour 24 des valeurs de PINP sérique (moyenne ± E.T.). Comparés au groupe 1 (témoin), les groupes 2 et 5 présentaient une activité de PINP réduite le jour 24. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient 15 reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. Histomorphométrie La Figure 9 montre la surface d'os cortical (mm2, moyenne ± E.T.) des Groupes 1-5. La Figure 10 montre des résultats illustratifs de surface intra20 osseuse (espace de moelle osseuse avec os trabéculaire inclus). La surface intra-osseuse était plus importante dans les groupes 2 et 3. De plus, la Figure 11 illustre la surface d'os trabéculaire (par rapport à la surface intra-osseuse) et la Figure 12 illustre la surface de tumeur (par rapport à la surface intraosseuse). La surface d'os trabéculaire était augmentée dans le groupe 2 et la 25 surface de tumeur était augmentée dans le groupe 3. La Figure 13 montre le nombre d'ostéoclastes à l'interface tumeur-os (par rapport à la longueur d'interface tumeur-os, #/mm). On n'a pas observé de différences statistiquement significatives. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et 30 de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. Résumé des résultats 35 Le Tableau 3 présente un résumé des résultats indiqués plus haut. Une flèche vers le haut (^) indique une augmentation et une flèche vers le bas (^) indique une diminution. Un astérisque (*) indique une valeur statistiquement significative avec une valeur p Exemple 3 Effets du composé 1 dans un modèle de métastases osseuses de cancer de la prostate Les patients ayant un cancer de la prostate développent typiquement 5 des métastases osseuses. Presque tous les patients ayant un cancer de la prostate en phase terminale ont des métastases osseuses. Les métastases osseuses provoquées par le cancer de la prostate sont principalement ostéoblastiques, en provoquant une forte douleur osseuse et aussi en augmentant le risque de fractures. Bien que la tumeur primaire puisse être 10 retirée avec succès, la maladie peut déjà s'être propagée aux os. Dans ce cas, la maladie peut développer d'autres métastases viscérales et osseuses. Il n'y a actuellement pas de traitement curatif efficace pour prévenir ou traiter les métastases osseuses. L'objectif de cette étude était de tester l'efficacité de trois doses 15 différentes du composé de test 1 sur les métastases osseuses de cancer de la prostate chez des souris nues athymiques mâles dans une étude de 5 semaines sur une base préventive. Les 5 groupes expérimentaux suivants étaient inclus dans l'étude : 1. groupe témoin recevant le véhicule (p.o. deux fois par jour) 20 2. groupe de référence recevant de l'acide zolédronique (s.c. les jours 1 et 14) + le véhicule (p.o. deux fois par jour) 3. groupe de test recevant 15 mg/kg de composé de test (p.o. deux fois par jour) 4. groupe de test recevant 30 mg/kg de composé de test (p.o. deux 25 fois par jour) 5. groupe de test recevant 45 mg/kg de composé de test (p.o. deux fois par jour) Le véhicule est l'huile de maïs. Tous les groupes comprenaient 15 souris âgées de 7 semaines au début de l'étude. Les animaux ont été 30 randomisés en fonction de leurs poids corporels en cinq groupes. Le jour 0, les animaux ont reçu une inoculation intratibiale de cellules de cancer de la prostate humain. On a déterminé les poids corporels deux fois par semaine. Le développement des lésions ostéoblastiques et ostéolytiques a été suivi aux rayons X. Le composé de test et le véhicule ont été administrés par gavage 35 oral deux fois par jour. Les animaux ont été sacrifiés le jour 35. Des cancer de la prostate humain PC-3 (ATCC). Dans ce modèle, des cellules de cancer de la prostate humain sont inoculées dans le tibia proximal gauche souris nues athymiques mâles âgées de 5-7 semaines. Cette souche de souris est immunodéficiente, ce qui permet 5 une propagation rapide des cellules cancéreuses humaines. Les lésions osseuses sont mixtes, en étant principalement ostéolytiques mais en contenant aussi une composante ostéoblastique. Dans les quatre semaines suivant l'inoculation, une partie des animaux a déjà développé certaines lésions osseuses, qui peuvent être visualisées par radiographie aux rayons X. A 7 10 semaines, les métastases osseuses sont clairement visibles. Les animaux sont sacrifiés 7 à 8 semaines après inoculation, et leurs os sont collectés pour une analyse histomorphométrique ultérieure. Le modèle de métastases osseuses proposé ici peut être commodément utilisé pour tester des médicaments candidats qui se sont avérés, dans des 15 études préliminaires, affecter une ou plusieurs des suivantes : 1) la croissance de cellules cancéreuses ; 2) une angiogenèse ; 3) la fonction ou la différenciation des ostéoclastes. Ce modèle peut aussi être utilisé pour découvrir de nouvelles indications pour des médicaments existants, en offrant aux sociétés pharmaceutiques un moyen pour trouver de nouvelles indications 20 pour des médicaments brevetés qui se sont déjà avérés être efficaces pour certaines autres indications. Procédures Manipulation des animaux et culture cellulaire 25 Pour cette étude, on a utilisé des souris nues athymiques mâles (Hsd : Athymic nude-nu, obtenues auprès de Harlan, Pays-Bas). Les animaux étaient âgés de 7 semaines, et ils pesaient environ 18-25 g au début de l'étude. Les souris sont des animaux exempts de pathogènes spécifiques (SPF) et élevés en isolation. Pour une qualification dans l'étude, les animaux devaient être 30 d'âge correct et en bonne santé clinique. La période de quarantaine et d'acclimatation des souris était de 7 jours. L'allocation aux groupes a été effectuée par une procédure de randomisation basée sur le poids corporel. Les animaux ont été marqués avec des marques de queue et d'oreille. Les souris étaient logées en Scantainer® à raison de 5 souris par cage. En cas de 35 bagarre, certains des animaux ont dû être isolés. Pour les inoculations intratibiales, on a anesthésié les souris avec des injections i.p. de xylazine (5-6 mg/ml) et de kétamine (92-109 mg/ml). Pour l'imagerie aux rayons X, on a anesthésié les souris par inhalation d'isoflurane. On a utilisé une analgésie (buprénorphine : soit 0,1 mg/kg s.c. deux fois par jour soit 3 mg/kg p.o. dans l'eau de boisson) pendant 2 jours après l'inoculation intratibiale (première dose s.c., puis dans l'eau de boisson) et pour les 5 derniers jours de l'étude (dans l'eau de boisson). On a inoculé des cellules de cancer de la prostate humain PC-3 (106 cellules dans 20 pl de PBS) dans le tibia proximal gauche des souris le jour 0, 10 ce qui a conduit au développement de métastases osseuses. Le placement correct de l'aiguille aura été vérifié aux rayons X avant l'inoculation des cellules. Dans le cas d'un mauvais placement, les cellules ont été inoculées à la place dans le tibia proximal droit. 15 Surveillance des animaux On a pesé les animaux deux fois par semaine et on a ajusté les doses en conséquence. Les 5 derniers jours de l'étude, on a pesé et observé les animaux chaque jour pour surveiller la progression de la maladie. L'apparition de quelconques signes cliniques a été enregistrée sur des formulaires de suivi. 20 On a donné des analgésiques à tous les animaux pendant les 5 derniers jours de l'expérience. 6 animaux ont été retrouvés morts ou ont dû être euthanasiés en raison de difficultés respiratoires (voir le Tableau 4). A la nécropsie, on a trouvé un oesophage percé et de l'huile dans la cavité thoracique. Un animal a été 25 euthanasié en raison d'une hémorragie dans la tumeur le jour 30 (voir le Tableau 4). Il a été pesé et des échantillons d'os ont été préparés. 71 Tableau 4 : résultats de la surveillance des animaux : N final avec cellules de cancer de la prostate Groupe Nombre Traitement N Animaux morts Moment de la Notes d'animaux final (id) mort (jour d'étude) 1 1-15 Témoin 15 - 2 1-15 Acide zolédronique 15 - 3 1-15 Composé 1 30 14 15 23 CEsophage percé mg/kg/j 4 1-15 Composé 1 60 14 10 30 Hémorragie dans la mg/kg/j 15 23 tumeur CEsophage percé 5 1-15 Composé 1 90 11 7 25 CEsophage percé mg/kg/j 9 12 Trouvé mort 12 23 CEsophage percé 15 23 CEsophage percé CEsophage percé Radioqraphie aux rayons X On a surveillé le développement de lésions ostéoblastiques et ostéolytiques par radiographie aux rayons X au bout de 4 semaines et avant le sacrifice des animaux. Les animaux ont été anesthésiés et radiographiés en 5 position antéropostérieure avec le système Faxitron Specimen Radiographic System MX-20 D12 (Faxitron Corp. Illinois, USA) utilisant le logiciel Faxitron Dicom 3.0. Au moins une radiographie des deux pattes arrière a été prise pour chaque animal à chaque occasion de rayons X (31 kV, 10 secondes, grossissement 2x). Le nombre des lésions et leur surface dans les pattes 10 arrière ont été déterminés à partir des images avec le logiciel d'analyse d'image MetaMorph. Sacrifice, autopsie, et collecte d'échantillons A la fin de l'étude (jour 35), on a pesé les animaux et on les a sacrifiés 15 par dislocation cervicale sous anesthésie. On a soutiré un échantillon de sang terminal pour des analyses futures éventuelles. On a effectué une nécropsie de tous les animaux. Les découvertes macroscopiques ont été enregistrées sur les formulaires de suivi. Des échantillons tissulaires ex vivo des pattes arrière (tibias et fémurs gauches et droits) ont été collectés pour une analyse 20 histomorphométrique éventuelle dans le futur. Les échantillons d'os ont été fixés dans la formaline tamponnée neutre à 10 % pendant 2-3 jours, puis décalcifiés dans de l'EDTA à 10 % pendant deux semaines, et finalement traités avec une technique habituelle à la paraffine pour des analyses histologiques. 25 Analyse statistique On a effectué l'analyse statistique avec SPSS (version 19.0). On a déterminé la moyenne et l'écart-type de chaque paramètre. Toutes les analyses statistiques ont été effectuées sous la forme de tests bilatéraux. La 30 distribution normale des valeurs résiduelles et l'homogénéité de variance ont été vérifiées avant analyses ultérieures. Dans le cas où ces suppositions étaient enfreintes, on a appliqué soit une transformation logarithmique soit une autre transformation appropriée (par exemple racine carrée, inverse). Si les suppositions étaient assertées telles quelles ou après transformation, on a 35 utilisé une analyse de variance ANOVA à un seul facteur pour étudier si les valeurs obtenues parmi les groupes étaient statistiquement significatives (avec p Analyse radiographique Le Tableau 5a présente des données de fractures et de lésions ostéoblastiques le jour 28. Les images aux rayons X ont été évaluées qualitativement (oui ou non) pour les lésions ostéoblastiques (OB) et les fractures (FR). Les réactions ostéoblastiques sont le plus souvent une formation analogue à un cal en réponse à des fractures. Une analyse statistique a été effectuée avec utilisation du test exact de Fischer. Un astérisque (*) indique une différence statistiquement significative avec une valeur p Tableau 5a Fractures et lésions ostéoblastiques le jour 28 Jour 28 Témoin Acide Composé zolédronique 1 30 mg/kg/j Lésions 0,0 0,0 0,0 ostéoblastiques Valeur p 1,000 1,000 Signification NS NS Fractures 33,3 0,0 0,0 Valeur p 0,042 0,042 Signification * Composé Composé 1 1 60 90 mg/kg/j mg/kg/j 0,0 9,1 1,000 0,423 NS NS 0,0 36,4 0,042 1,000 * NS Tableau 5b Fractures et lésions ostéoblastiques lors du sacrifice Sacrifice Témoin Acide Composé Composé Composé zolédronique 1 1 1 30 60 90 mg/kg/j mg/kg/j mg/kg/j Lésions 66,7 0,0 35,7 21,4 45,5 ostéoblastiques Valeur p 0,000 0,143 0,025 0,423 Signification NS NS Fractures 66,7 0,0 21,4 21,4 36,4 Valeur p 0,000 0,025 0,025 0,233 Signification NS La Figure 16a montre des résultats illustratifs de la surface de lésion ostéolytique totale (mm2) le jour 28 (moyenne ± E.T.). Les résultats sont représentés par la somme des surfaces des lésions osseuses dans les tibias et fémurs droits et gauches / animal. La surface de lésion ostéolytique totale le jour 28 était réduite dans les groupes 2 et 4. Il y avait aussi une tendance similaire dans le groupe 5. La Figure 16b montre des résultats illustratifs de surface de lésion ostéolytique totale (mm2) lors du sacrifice (moyenne ± E.T.). Les résultats sont représentés par la somme des surfaces des lésions osseuses dans les tibias et fémurs droits et gauches / animal. La surface de lésion ostéolytique totale lors du sacrifice était réduite dans les groupes 2 et 4. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. La Figure 17a présente des résultats illustratifs de surface de lésion ostéolytique moyenne (mm2) le jour 28 (moyenne ± E.T.). Les résultats sont représentés par les surfaces moyennes des lésions osseuses individuelles dans les tibias et fémurs droits et gauches / animal. Les lésions ostéolytiques étaient réduites dans les groupes 2 et 5 le jour 28. Il y avait aussi une tendance similaire dans le groupe 4. La Figure 17b présente des résultats illustratifs de surface de lésion ostéolytique moyenne (mm2) lors du sacrifice (moyenne ± E.T.). Les résultats sont représentés par les surfaces moyennes des lésions osseuses individuelles dans les tibias et fémurs droits et gauches / animal. Les lésions ostéolytiques étaient réduites dans les groupes 2 et 4 lors du sacrifice. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. La Figure 18a montre le nombre de lésions ostéolytiques le jour 28 (moyenne ± E.T.). Les résultats sont représentés par le compte de lésions osseuses individuelles dans les tibias et fémurs droits et gauches / animal. Il y avait davantage de lésions ostéolytiques dans le groupe 2 parce que les lésions individuelles étaient empêchées de fusionner les unes avec les autres. La Figure 18b montre le nombre de lésions ostéolytiques lors du sacrifice (moyenne ± E.T.). Les résultats sont représentés par le compte de lésions osseuses individuelles dans les tibias et fémurs droits et gauches / animal. Il y avait davantage de lésions ostéolytiques dans le groupe 2 parce que les lésions individuelles étaient empêchées de fusionner les unes avec les autres. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. Histomorphométrie La Figure 19 montre des résultats illustratifs de la surface d'os cortical (mm2, moyenne ± E.T.) des Groupes 1-5. La surface d'os cortical était augmentée dans le groupe 2. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. La Figure 20 montre des résultats illustratifs de surface intra-osseuse (espace de moelle osseuse avec os trabéculaire inclus) des Groupes 1-5. On n'a pas observé de différences statistiquement significatives. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. La Figure 21 montre des résultats illustratifs de surface d'os trabéculaire (par rapport à la surface intra-osseuse) des Groupes 1-5. La surface d'os trabéculaire était augmentée dans tous les groupes traités. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. La Figure 22a montre la surface de tumeur intra-osseuse (par rapport à la surface intra-osseuse) et la Figure 22b présente des données de surface de tumeur totale. La surface de tumeur intra-osseuse était réduite dans les groupes 2 et 4 et la surface de tumeur totale était réduite dans le groupe 2. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. La Figure 23 présente des données illustratives du nombre d'ostéoclastes à l'interface tumeur-os (par rapport à la longueur d'interface tumeur-os, #/mm) des Groupes 1-5. Le nombre d'ostéoclastes à l'interface tumeur-os était réduit dans le groupe 2. Le groupe 1 avait reçu le véhicule (huile de maïs) à 20 ml/kg/jour p.o. ; le groupe 2 avait reçu le véhicule à 20 ml/kg/jour p.o. et de l'acide zolédronique à 0,1 mg/kg s.c. les jours 1 et 14 ; les groupes 3, 4 et 5 avaient reçu des doses de composé 1 de 30, 60 et 90 mg/kg/jour p.o., respectivement. Résumé des résultats Le Tableau 6 présente un résumé des résultats. Une flèche vers le haut (Cl) indique une augmentation et une flèche vers le bas (U) indique une diminution. Un astérisque (*) indique une valeur statistiquement significative avec une valeur p Tableau 6 : résumé des résultats Procédé/Paramètre Acide Composé 1 30 mg/kg/j Composé 1 Composé 1 zolédronique NS 60 mg/kg/j 90 mg/kg/j NS NS NS NS NS ^* NS NS NS ^** ^** Poids corporel NS NS NS NS Changement relatif de poids corporel lors du sacrifice Poids maximal relatif Jour d'étude du poids maximal Perte relative de poids corporel par rapport au poids maximal Analyse radiographique Lésions NS NS NS NS ostéoblastiques, j28 Lésions ^*** NS ^* NS ostéoblastiques, sacrifice Fractures, j28 ^* ^* ^* NS Fractures, sacrifice ^*** ^* ^* NS Surface de lésion ostéolytique totale, j28 ^*** NS ^* NS Surface de lésion ostéolytique totale, sacrifice ^*** NS ^** NS Surface de lésion ostéolytique moyenne, j28 ^*** NS NS ^* Surface de lésion ostéolytique moyenne, sacrifice ^*** NS ^* NS Compte de lésions ostéolytiques total, j28 ^* NS NS NS Compte de lésions ostéolytiques total, sacrifice ^** NS NS NS Histomorphométrie Surface intra-osseuse NS NS NS NS Surface d'os cortical iii .. NS NS NS Surface d'os trabéculaire ^*** ^* ^*** ^* Surface de tumeur intra-osseuse ^. NS ^* NS Surface de tumeur totale ^. NS NS NS Nombre d'ostéoclastes ^... NS NS NS à l'interface tumeur-os Conclusions L'acide zolédronique empêche la formation de lésions ostéolytiques et ostéoblastiques et les fractures. L'augmentation du compte de lésions ostéolytiques est le résultat de lésions individuelles qui ont été empêchées de fusionner les unes avec les autres. L'acide zolédronique augmente les surfaces d'os tant cortical que trabéculaire, comme cela a été quantifié par histomorphométrie, et réduit le nombre d'ostéoclastes à l'interface tumeur-os. L'acide zolédronique n'a pas d'effet sur le poids corporel. L'acide zolédronique réduit la surface de tumeur tant intra-osseuse que totale. Le composé 1 augmente le poids corporel maximal obtenu à une dose de 60 mg/kg/j. La perte de poids corporel est également augmentée en comparaison avec le groupe témoin dans les groupes ayant reçu 60 et 90 mg/kg/j de composé 1. Toutefois, la perte de poids n'est que d'environ 6 %, et cette valeur n'est pas pathologique. Le composé 1 à une dose de 60 mg/kg/j réduit la surface des lésions ostéolytiques. Le composé 1 à des doses de 30 et 60 mg/kg/j inhibe les fractures le jour 28 et lors du sacrifice. La dose de 60 mg/kg/j inhibe aussi les réactions ostéoblastiques lors du sacrifice. Toutes les doses de composé 1 augmentent la surface d'os trabéculaire, et la dose de 60 mg/kg/j est la plus efficace. Le composé 1 n'a pas d'effet sur le nombre d'ostéoclastes à l'interface tumeur-os. Le composé 1 à une dose de 60 mg/kg/j réduit la surface de tumeur intra-osseuse, mais n'a pas d'effet sur la surface de tumeur totale. En conclusion, le composé 1 a des effets positifs de protection osseuse dans ce modèle agressif de métastases osseuses de cancer de la prostate, et il réduit aussi la surface de tumeur intra-osseuse à une dose de 60 mg/kg/j. Exemple 4 Innocuité et efficacité du composé 1 chez des patients avant un cancer du sein avec lésions osseuses métastasiques L'objectif de cette étude est de déterminer le bénéfice clinique de deux 10 protocoles de dosage différents du composé 1 chez des patients ayant des lésions osseuses métastasiques secondaires à un cancer du sein. Mesures de résultats primaires Taux de morbidité squelettique (SMR) global annuel [intervalle de temps 15 : 12 mois] [désigné comme problème d'innocuité : Non] On calcule le SMR en faisant la somme de tous les événements squelettiques apparentés (SRE) qui apparaissent durant la période d'observation et en la divisant par le rapport "jours de période d'observation / 365,25" pour chaque participant. Un SRE est défini par : une fracture osseuse 20 pathologique, une compression de la moelle épinière, une opération chirurgicale d'un os tant curative que prophylactique, une radiothérapie d'un os, ou une hypercalcémie liée à une malignité. Mesures de résultats secondaires 25 Pourcentage de participants subissant un ou des événements squelettiques apparentés (SRE) [intervalle de temps : 12 mois] [désigné comme problème d'innocuité : Non] Les événements squelettiques apparentés (SRE) sont définis par : - une fracture osseuse pathologique telle qu'une fracture par 30 compression vertébrale ou non vertébrale - une compression de la moelle épinière identifiée par un diagnostic positif documenté par une preuve aux rayons X - une opération chirurgicale d'un os tant curative que prophylactique - une radiothérapie d'un os, y compris palliative, thérapeutique ou 35 prophylactique - une hypercalcémie liée à une malignité, définie par un calcium sérique corrigé > 12 mg/dl (3,00 mmo1/1) ou un taux réduit d'hypercalcémie qui est symptomatique et qui requiert un traitement actif autre qu'une réhydratation. Fréquence annuelle de quelconques événements squelettiques 5 apparentés (SRE) [intervalle de temps : 12 mois] [désigné comme problème d'innocuité : Non] Les événements squelettiques apparentés (SRE) sont définis par : - une fracture osseuse pathologique, par exemple vertébrale ou non vertébrale 10 - une compression de la moelle épinière identifiée par une preuve aux rayons X - une opération chirurgicale d'un os tant curative que prophylactique - une radiothérapie d'un os, y compris palliative, thérapeutique ou prophylactique 15 - une hypercalcémie liée à une malignité, définie par un calcium sérique corrigé > 12 mg/dl (3,00 mmol/l) ou un taux réduit d'hypercalcémie qui est symptomatique et qui requiert un traitement actif autre qu'une réhydratation. La fréquence annuelle pour chaque SRE est calculée de la même manière que le SMR global annuel. 20 Temps moyen avant le ou les premiers événements squelettiques apparentés (SRE) [intervalle de temps : 12 mois] [désigné comme problème d'innocuité : Non] Le temps moyen avant le premier événement squelettique apparenté (SRE) est défini par le temps écoulé depuis une randomisation jusqu'à la date 25 de la première apparition d'un quelconque SRE qui comprend au moins l'un des suivants : radiothérapie d'un os, fracture osseuse pathologique, compression de la moelle épinière, opération chirurgicale d'un os, et hypercalcémie liée à une malignité (HCM). Du fait du petit nombre de SRE, une estimation de Kaplan-Meier n'atteint jamais une probabilité d'échec > 25 % ; 30 par conséquent, on ne détermine pas le temps moyen et les 25ème et 75ème percentiles. Pour cette raison, seul le pourcentage estimé de patient sans SRE est rapporté à chaque point de temps. Pourcentage de participants exempts d'événements squelettiques apparentés (SRE) [intervalle de temps : 12 mois] [désigné comme problème 35 d'innocuité : Non] Le pourcentage de participants exempts de SRE est défini par une estimation de Kaplan-Meier des participants exempts de quelconques d'événements squelettiques apparentés (SRE) à chaque point de temps. Les événements squelettiques apparentés (SRE) sont définis par : - une fracture osseuse pathologique, vertébrale ou non vertébrale - une compression de la moelle épinière identifiée aux rayons X - une opération chirurgicale d'un os tant curative que prophylactique - une radiothérapie d'un os (palliative, thérapeutique ou prophylactique) - une hypercalcémie liée à une malignité, définie par un calcium sérique corrigé > 12 mg/dl (3,00 mmol/l) ou un taux réduit d'hypercalcémie qui est symptomatique et qui requiert un traitement autre qu'une réhydratation. Note de douleur osseuse composite d'après le bref questionnaire d'inventaire de douleur (BPI) [intervalle de temps : au départ, mois 3, mois 6, mois 9 et mois 12] [désignée comme problème d'innocuité : Non] La douleur osseuse est déterminée au moyen d'une note de douleur obtenue par utilisation du bref questionnaire d'inventaire de douleur (BPI). Le BPI peut produire trois notes de douleur : douleur paroxystique, une note de douleur composite, et une note d'interférence de douleur. Dans cette étude, on utilise la note de douleur composite, qui est la moyenne des questions 3, 4, 5 et 6 du questionnaire. La douleur est notée sur une échelle de 0 (pas de douleur) à 10 (douleur aussi terrible qu'on peut l'imaginer). Le résultat est indiqué par la note moyenne pour les participants au départ, et après 3, 6, 9 et 12 mois de traitement. Evaluation de la douleur d'après une échelle de note verbale (VRS) 25 basée sur une valeur de note moyenne [intervalle de temps : au départ, mois 3, mois 6, mois 9 et mois 12] [désignée comme problème d'innocuité : Non] L'intensité de la douleur au repos et en mouvement est notée par le patient au moyen d'une échelle de note verbale à 6 points validée (VRS) et se réfère à la douleur qui est apparue durant la dernière semaine avant la 30 détermination. La valeur de note moyenne est la moyenne de toutes les notes observées (aucune = 0, très légère = 1, légère = 2, modérée = 3, importante = 5 et très importante = 6) à chaque point de temps. Utilisation de médicaments analgésiques en fonction de l'échelle de note analgésique [intervalle de temps : au départ, mois 3, mois 6, mois 9 et mois 12] 35 [désignée comme problème d'innocuité : Non] La note d'analgésique utilisée pour cette étude est modifiée par rapport à l'échelle de notes d'analgésique de groupe d'oncologie de radiothérapie (RTOG). L'échelle représente le type de médicament administré, de 0 à 4, où : 0 = aucun ; 1 = analgésiques mineurs (aspirine, AINS, acétaminophen, propoxyphène, etc.) ; 2 = tranquillisants, antidépresseurs, myorelaxants, et stéroïdes ; 3 = narcotiques légers (oxycodone, mépéridine, codéine, etc.) ; 4 = narcotiques forts (morphine, hydromorphone, etc.). Le résultat est représenté par la note moyenne pour les participants, au départ et après 3, 6, 9 et 12 mois de traitement. Détermination de la note de performance du groupe d'oncologie de coopérative de l'Est (ECOG) [intervalle de temps : au départ, mois 3, mois 6, mois 9 et mois 12] [désignée comme problème d'innocuité : Non] La note de performance ECOG a 4 valeurs. 0 = patient complètement actif, capable d'effectuer toutes les activités d'avant la maladie ; 1 = activité énergique restreinte, mais ambulatoire et peut effectuer des travaux légers ou sédentaires ; 2 = ambulatoire et capable de prendre soin de lui-même mais incapable de travailler. Actif pendant environ 50 % des heures de veille ; 3 = capacité limitée à prendre soin de lui-même, confiné au lit/fauteuil pendant plus de 50 % des heures de veille ; 4 = complètement invalide ; ne peut pas prendre soin de lui-même. Totalement confiné au lit/fauteuil. Le résultat est indiqué par la note moyenne pour les participants, au départ et après 3, 6, 9 et 12 mois de traitement. Branches Interventions attribuées Expérimentale : tous les 3 mois Médicament : composé 1 Composé 1 sous la forme d'une perfusion Composé 1 sous la forme d'une intraveineuse (i.v.) de 15 minutes (au moins) perfusion intraveineuse (i.v.) de tous les trois mois. La dose du médicament 15 minutes (au moins). La dose étudié va être la même que celle du médicament étudié va être la administrée avant l'entrée dans l'étude, c'est-à-dire 50 mg ou une dose réduite. Les même que celle administrée avant l'entrée dans l'étude, c'est- patients randomisés vont recevoir un à-dire 50 mg ou une dose maximum de 4 perfusions dans ce groupe. réduite. Branches Interventions attribuées Expérimentale : toutes les 4 semaines Médicament : composé 1 Composé 1 sous la forme d'une perfusion Composé 1 sous la forme d'une intraveineuse (i.v.) de 15 minutes (au moins) perfusion intraveineuse (i.v.) de toutes les 4 semaines. La dose du 15 minutes (au moins). La dose médicament étudié va être la même que du médicament étudié va être la celle administrée avant l'entrée dans l'étude, c'est-à-dire 50 mg ou une dose réduite. Les même que celle administrée avant l'entrée dans l'étude, c'est- patients randomisés dans ce groupe vont à-dire 50 mg ou une dose recevoir jusqu'à 12 perfusions. réduite. Eligibilité Ages éligibles pour l'étude : 18 ans et plus Genre éligible pour l'étude : femelle Volontaires en bonne santé : non acceptés Critères Critères d'inclusion : patientes de 18 ans et plus ; ayant donné un consentement informé écrit ; ayant un cancer du sein de stade IV confirmé histologiquement avec au moins une confirmation radiologique de métastases osseuses. Statut de performance de groupe d'oncologie de coopérative de l'Est (ECOG) 1 an. Critères d'exclusion : traitements avec des composés de cyclohexénone autres que le composé 1 à n'importe quel moment avant l'entrée dans l'étude. Créatinine sérique > 3 mg/d1 (265 pmo1/1) ou clairance de créatinine calculée (formule de Cockcroft-Gault) (CLCr) 12 mg/dl (3,0 mmo1/1). Problème dentaire actif en cours, y compris infection des dents ou des mâchoires (maxillaire ou mandibulaire) ; traumatisme dentaire ou d'un dispositif 25 de fixation, ou diagnostic récurrent ou antérieur d'ostéonécrose de la mâchoire (ONJ), d'os exposé dans la bouche, ou de cicatrisation lente après opération dentaire. Opération des dents ou des mâchoires (par exemple extraction, implants) récente (dans les 6 semaines) ou prévue. Patientes enceintes (avec un test de grossesse positif avant l'entrée dans l'étude) ou allaitantes. Femmes susceptible de porter un enfant et n'utilisant pas de méthodes efficaces de contrôle des naissances (par exemple abstinence, contraceptifs oraux ou implants, dispositifs intra-utérins, diaphragme vaginal ou éponge, ou préservatif avec spermicide). Historique de non acceptation de régimes médicaux ou comportement potentiellement non fiable. Sensibilité connue à un ou plusieurs des médicaments de l'étude ou à une classe du ou des médicaments de l'étude. Patientes ayant un ou plusieurs états médicaux graves qui, au vu du chercheur, sont prohibitifs d'une participation à l'étude. Utilisation d'un quelconque autre agent de recherche dans les 30 jours précédents. Exemple 5 : formulation à usage parentéral Pour préparer une composition pharmaceutique à usage parentéral pouvant être administrée par injection, on dissout 90 mg d'un composé ou de son sel décrit ici dans du DMSO puis on mélange avec 10 ml de solution salée à 0,9 % stérile. On incorpore le mélange dans une forme posologique unitaire convenant pour une administration par injection. Exemple 6 : formulation à usage oral Pour préparer une composition pharmaceutique à usage oral, on mélange 90 mg d'un composé 1 exemplaire avec 90 mg d'huile de maïs. On incorpore le mélange dans une forme posologique unitaire à usage oral dans une capsule, qui convient pour une administration par voie orale. Dans certains cas, on mélange 90 mg d'un composé décrit ici avec 750 mg d'amidon. On incorpore le mélange dans une forme posologique unitaire à usage oral telle qu'une capsule de gélatine dure qui convient pour une administration par voie orale.35 Exemple 7 : formulation à usage sublingual (tablette dure) Pour préparer une composition pharmaceutique devant être délivrée par voie buccale, telle qu'une tablette dure, on mélange 90 mg d'un composé décrit ici avec 420 mg de sucre en poudre, puis on mélange avec 1,6 ml de sirop de maïs léger, 2,4 ml d'eau distillée, et 0,42 ml d'extrait de menthe. On mélange doucement le mélange et on le verse dans un moule pour former une tablette convenant pour une administration par voie buccale. Exemple 8 : composition pour inhalation Pour préparer une composition pharmaceutique devant être délivrée par inhalation, on mélange 20 mg d'un composé décrit ici avec 50 mg d'acide citrique anhydre et 100 ml de solution à 0,9 % de chlorure de sodium. On incorpore le mélange dans une unité de délivrance par inhalation, telle qu'un nébuliseur, qui convient pour une administration par inhalation. Exemple 9 : formulation de gel à usage rectal Pour préparer une composition pharmaceutique devant être délivrée par voie rectale, on mélange 90 mg d'un composé décrit ici avec 2,5 g de méthylcellulose (1500 mPa), 100 mg de méthylparaben, 5 g de glycérine et 100 20 ml d'eau purifiée. Puis on incorpore le mélange en gel résultant dans des unités de délivrance par voie rectale, telles que des seringues, qui conviennent pour une administration par voie rectale. Exemple 10 : composition de gel à usage topique 25 Pour préparer une composition de gel pharmaceutique à usage topique, on mélange 90 mg d'un composé décrit ici avec 1,75 g d'hydroxypropylcellulose, 10 ml de propylène-glycol, 10 ml de myristate d'isopropyle et 100 ml d'alcool purifié USP. On incorpore ensuite le mélange en gel résultant dans des récipients, tels que des tubes, qui conviennent pour une 30 administration par voie topique. Bien que des modes de réalisation préférés de la présente invention aient été présentés et décrits ici, il apparaîtra de façon évidente à l'homme du métier que ces modes de réalisation sont proposés à titre d'exemple uniquement. De nombreux changements, variantes et substitutions 35 apparaîtront maintenant à l'homme du métier sans s'écarter de l'invention. Il convient de comprendre que diverses alternatives aux modes de réalisation de l'invention décrits ici peuvent être employées dans la mise en pratique de l'invention. Il est prévu que les revendications qui suivent définissent la portée de l'invention et que les procédés et structures rentrant à l'intérieur du cadre de ces revendications et leurs équivalents soient couverts par celle-ci. REVENDICATIONS1. Composition pharmaceutique pour utilisation dans le traitement d'une maladie ou d'un état associé à des métastases osseuses, comprenant l'administration, à un sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un composé de structure : R3 CH O R1. X OR Y. R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=O)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)mCH3 ; R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à C8, l'alcényle en C2 à C8, l'alcynyle en C2 à C8, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à C8, et halogénoalkyle en C1 à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; R7 est un alkyle en C1 à C8, OR5 ou NR5R6 ; m = 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament d'un tel composé. 2. Composition pharmaceutique pour utilisation dans l'inhibition d'une hypercalcémie due à une malignité chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : R4R1.x OR Y. R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ; R est l'hydrogène ou C(=O)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2),,- CI-13 ; R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C2 à Cg, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à Cg, l'alcényle en C2 à Cg, l'alcynyle en C2 à Cg, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C2 à Cg, cycloalkyle en C3 à Cg, et halogénoalkyle en C1 à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; R7 est un alkyle en C1 à Cg, OR5 ou NR5R6 ; m = 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou 20 promédicament d'un tel composé. 3. Composition pharmaceutique pour utilisation dans l'inhibition de la résorption osseuse chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un 25 composé de cyclohexénone de structure : 89 R3 CH3 R4 n R4 Y. R2 dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le soufre ;R est l'hydrogène ou C(=O)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)mCH3 ; R4 est NR5R6, OR5, OC(=0)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un 5 halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à Cg, l'alcényle en 02 à C8, l'alcynyle en C2 à C8, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=0)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, 10 alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à C8, et halogénoalkyle en C1 à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; R7 est un alkyle en C1 à Cg, OR5 ou NR5R6 ; m= 1-12 ; et 15 n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou promédicament d'un tel composé. 4. Composition pharmaceutique pour utilisation dans le traitement 20 de lésions ostéolytiques chez un sujet, comprenant l'administration, au sujet en ayant besoin, d'une quantité efficace, du point de vue thérapeutique, d'un composé de cyclohexénone de structure : R3 CH3 n OR R4 Y. dans laquelle chacun de X et Y est indépendamment l'oxygène, NR5 ou le 25 soufre ; R est l'hydrogène ou C(=0)-alkyle en C1 à C8 ; chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, méthyle, ou (CH2)mCH3 ; R4 est NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)OR5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, un 30 halogène, une lactone à 5 ou 6 chaînons, alkyle en Ci à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à Cg, aryle, glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'alkyle en C1 à C8, l'alcényle en 02 à C8, l'alcynyle en 02 à Cg, l'aryle et leglucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=O)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à C8, alcényle en C2 à C8, alcynyle en C2 à C8, cycloalkyle en C3 à C8, et halogénoalkyle en C1 à C8 ; chacun de R5 et R6 est indépendamment l'hydrogène ou un alkyle en C1 à C8 ; R7 est un alkyle en C1 à C8, OR5 ou NR5R6 ; m = 1-12 ; et n = 1-12 ; ou d'un sel pharmaceutiquement acceptable, métabolite, solvate ou 10 promédicament d'un tel composé. 5. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans laquelle le sujet a un cancer du sein ou un cancer de la prostate. 15 6. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à dans laquelle R est l'hydrogène, C(=O)C3H8, C(=O)C2H5, ou C(=O)CH3. 7. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans laquelle chacun de R1, R2 et R3 est indépendamment l'hydrogène, 20 méthyle, éthyle, propyle, butyle, pentyle, hexyle, heptyle, ou octyle. 8. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, dans laquelle R1 est l'hydrogène ou méthyle. 25 9. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, dans laquelle R2 est l'hydrogène ou méthyle. 10. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, dans laquelle R4 est un halogène, NH2, NHCH3, N(CH3)2, OCH3, 0C2H5, 30 C(=O)CH3, C(=O)C2H5, C(=O)OCH3, C(=O)0C2H5, C(=O)NHCH3, C(=O)NHC2H5, C(=O)NH2, OC(=O)CH3, OC(=O)C2H5, OC(=O)OCH3, OC(=O)OC2H5, OC(=O)NHCH3, OC(=O)NHC2H5, ou OC(=O)NH2. 11. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, 35 dans laquelle R4 est C2H5C(CH3)20H, C2H5C(CH3)20CH3, CH2COOH,C2H5COOH, CF-1201-1, C2H5OH, CH2Ph, C2H5Ph, CH2CH=C(CH3)(CHO), CH2CH=C(CH3)(C(=O)CH3), une lactone à 5 ou 6 chaînons, aryle ou glucosyle, où la lactone à 5 ou 6 chaînons, l'aryle et le glucosyle sont éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C3 à Cg, cycloalkyle en C3 à Cg et halogénoalkyle en C1 à C8. 12. Composition selon la revendication 11, dans laquelle R4 est un alkyle en C1 à Cg éventuellement substitué par un ou plusieurs substituants choisis parmi NR5R6, OR5, OC(=O)R7, C(=0)0R5, C(=O)R5, C(=O)NR5R6, alkyle en C1 à Cg, alcényle en C2 à Cg, alcynyle en C3 à Cg, cycloalkyle en C3 à Cg et halogénoalkyle en C1 à C8. 13. Composition selon la revendication 12, dans laquelle R4 est CH2CH=C(CH3)2. 14. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans laquelle ledit composé est ÇH3 ÇH3 ÇH3 ÇH3 C H3 I-13C '00H o,CH3