Brevet FR2983201A1 — publié le 20130531

PROCEDE DE PREPARATION D'UNE MATRICE EN HYDROGEL PAR PHOTOPOLYMERISATION DESCRIPTION DOMAINE TECHNIQUE La présente invention a trait à un procédé 5 de préparation d'une matrice en hydrogel par photopolymérisation, cette matrice pouvant être caractérisée par des zones distinctes contiguës pouvant présenter un gradient de rigidité de l'ordre du kPa/}gym et une rigidité comprise entre 100 Pa et 500 kPa. 10 Ce procédé peut trouver application dans la conception de matrices destinées à être utilisées pour la discrimination de cellules, en particulier de cellules saines et cancéreuses. Il est connu que les cellules interagissent 15 avec leur environnement, qu'il soit cellulaire ou matriciel. Trois facteurs essentiels influencent la survie cellulaire via leur capacité d'adhésion, de migration et de prolifération : 20 -les contraintes géométriques ; -l'environnement chimique ; et -l'environnement mécanique, tel que l'action de forces ou contraintes externes, les propriétés mécaniques de la matrice avec laquelle les 25 cellules sont en contact. Il est établi, notamment depuis les travaux de Lo et al. (Biophys.J., 79, 144-152) que les cellules sont sensibles aux propriétés élastiques de la matrice, sur laquelle elles se trouvent. Pour chaque type cellulaire, un seuil minimal de rigidité peut exister, au-dessous duquel la cellule ne parvient pas à adhérer malgré une chimie de surface favorable. Au-dessus de ce seuil, les cellules adhèrent et survivent. Il a été observé, notamment, que des cellules isolées migrent vers les zones de la matrice où la rigidité est la plus élevée, cet effet étant d'autant plus marqué, que la matrice présente une rigidité voisine de celle correspondant à la rigidité seuil du type cellulaire considéré. Toutefois, les cellules cancéreuses présentent une réponse à la rigidité, qui diffère des cellules saines. Sur la base du constat fait ci-dessus, il apparaît tout à fait envisageable d'effectuer une localisation, un guidage et/ou un tri cellulaire avec des matrices (ou substrats), dont les propriétés mécaniques sont modulées spatialement (par le biais de zones différentes présentant des rigidités distinctes) et dont les propriétés chimiques de surface sont uniformes. Des matrices répondant à ces critères peuvent être des matrices polymériques du type hydrogel présentant une juxtaposition de zones de rigidités différentes. L'intérêt de ce type de matrices est multiple, en ce sens que : -la préparation de ce type de matrices peut être plus simple que celle des puces chimiques ; -le matériau constitutif de ces matrices se caractérise par une importante longévité (notamment, une absence de dégradation à l'échelle du mois) ; -la possibilité d'une fonctionnalisation de surface sélective couplée aux motifs de rigidité. Différentes tentatives d'élaboration de matrices du type hydrogel présentant une juxtaposition 5 de zones de rigidités différentes ont été proposées dans l'art antérieur, et notamment par photopolymérisation par voie solution. Ainsi, certains auteurs ont utilisé les outils de la microfluidique pour établir un gradient 10 des constituants à réticuler, reléguant ainsi la technique de photopolymérisation à un intérêt uniquement pratique et non technologique. Les gradients de rigidité (de l'ordre du kPa/mm dans le meilleur des cas) sont limités par la microfluidique et non par la 15 photopolymérisation. D'autres auteurs ont choisi de photopolymériser une solution homogène à travers un masque, notamment dans le document Tse et al. (Curr.Protoc. Cell. Biol. 10.16.1-10.16.16, June 2010), 20 les propriétés de la solution utilisée et les conditions opératoires permettant d'obtenir uniquement une durée de polymérisation de l'ordre de la minute et un gradient de rigidité de l'ordre du kPa/mm. Avec une telle durée de polymérisation, les espèces chimiques 25 comprises dans la solution diffusent aisément d'une zone à l'autre au cours du processus de polymérisation, ce qui nuit à la résolution des zones formées et, qui plus est, génère une uniformisation de rigidité par diffusion de matière entre les zones plus éclairées et 30 les zones moins éclairées lors de la photopolymérisation. Au vu de ce qui existe dans le domaine de la préparation des matrices susmentionnées, les auteurs de la présente invention se sont proposé de mettre au point un procédé de préparation d'une matrice polymérique présentant des zones (ou motifs) de rigidité distinctes, permettant d'obtenir des zones de rigidité distinctes dans des durées de polymérisation inférieures à celles obtenues dans l'art antérieur, le gradient de rigidité entre deux zones contiguës pouvant être de l'ordre du kPa/pm. EXPOSÉ DE L'INVENTION Les auteurs ont découvert, de manière surprenante, qu'en utilisant dans la solution polymérique une combinaison d'ingrédients spécifiques, il est ainsi possible d'obtenir des matrices présentant les avantages mentionnées ci-dessus. Ainsi, l'invention a trait à un procédé de préparation d'une matrice du type hydrogel comprenant au moins deux zones contiguës de rigidités distinctes, ledit procédé comprenant une étape de photopolymérisation d'une solution comprenant un ou plusieurs composés polymérisables et un initiateur de photopolymérisation, par application d'une lumière sur toute la solution et selon une intensité différente au niveau d'au moins deux zones de la solution, moyennant quoi il résulte une matrice d'hydrogel comprenant au moins deux zones contiguës de rigidités distinctes, caractérisé en ce que l'étape de photopolymérisation est réalisée en présence d'un catalyseur de polymérisation. En jouant sur l'utilisation combinée d'un initiateur de photopolymérisation et d'un catalyseur de polymérisation dans la solution comprenant le ou les composés polymérisables et ainsi de la technique de photopolymérisation amorcée, l'on accède à une durée de polymérisation (qui peut être de l'ordre de la seconde) considérablement amoindrie par rapport au cas où la photopolymérisation est induite uniquement par l'utilisation simple d'un initiateur de photopolymérisation. Cette propriété (à savoir, une durée de photopolymérisation amoindrie) se traduit par les avantages suivants : -une limitation du phénomène de diffusion des réactifs (monomères, initiateur et catalyseur) d'une zone à l'autre lors du processus de photopolymérisation, ce qui permet, au final, l'obtention de zones de rigidités distinctes présentant une meilleure résolution ; -la possibilité d'obtenir, en jouant sur une modulation spatiale de l'intensité à l'échelle de la largeur de zone que l'on souhaite obtenir (par exemple, de l'ordre de 1 pm), des zones étroites et contiguës de rigidités distinctes avec un gradient de rigidité entre deux zones très raide (par exemple, de l'ordre du kPa/pm). Comme mentionné ci-dessus, il est fait usage, dans le cadre du procédé de l'invention, d'une solution comprenant un ou plusieurs composés polymérisables, un initiateur de photopolymérisation et un catalyseur de polymérisation, ceci n'excluant pas le fait que la solution puisse contenir d'autres ingrédients. Il s'entend que le ou les composés polymérisables utilisés sont des composés précurseurs du matériau hydrogel, qui va constituer la matrice, à savoir un matériau du type gel obtenu en milieu aqueux, ces matériaux hydrogels pouvant être, par exemple : -des polyacrylamides ; -des polyéthylèneglycols comprenant des 10 motifs répétitifs issus de la polymérisation de composés acrylates ou méthacrylates ; -des polysaccharides, éventuellement modifiés (par exemple, des polysaccharides modifiés comprenant des motifs répétitifs issus de la 15 polymérisation de composés acrylates) ; -des (co)polymères issus de la polymérisation de composés diacrylates et/ou (méth)acrylates ; -des alcools polyvinyliques comprenant des 20 motifs répétitifs issus de la polymérisation de composés acrylates ou méthacrylates ; -des dextranes comprenant des motifs répétitifs issus de la polymérisation de composés (méth)acrylates ; 25 -des polyfumarates de propylène et des dérivés de ceux-ci, comme des poly(fumarate de propylène-co-éthylèneglycol) ; et -des combinaisons de ceux-ci. Le ou les composés polymérisables peuvent 30 être des monomères ou encore des oligomères ou polymères comportant au moins une fonction polymérisable. Les composés polymérisables utilisés peuvent être ainsi : -pour l'obtention de polyacrylamides, des monomères acrylamides ; -pour l'obtention de polyéthylèneglycols comprenant des motifs répétitifs issus de la polymérisation de composés acrylates et/ou méthacrylates, des composé acrylates et/ou méthacrylates mis en présence de polyéthylèneglycols, la fonction polymérisable étant située au niveau de ces composés acrylates et/ou méthacrylates ; -pour l'obtention de polysaccharides 15 modifiés par des composés acrylates, des monomères acrylates (qui seront mis en présence de composés polysaccharides) ; -pour l'obtention de (co)polymères issus de la polymérisation de composés diacrylates et/ou 20 (méth)acrylates, des monomères diacrylates et/ou (méth)acrylates ; -pour l'obtention d'alcools polyvinyliques comprenant des motifs répétitifs issus de la polymérisation de composés acrylates ou méthacrylates 25 d'alcools polyvinyliques, des alcools polyvinyliques mis en présence de composés acrylates et/ou méthacrylates, la fonction polymérisable étant située au niveau de ces composés acrylates et/ou méthacrylates ; 30 -pour l'obtention des dextranes comprenant des motifs répétitifs issus de la polymérisation de SR 50911 FG 8 composés (méth)acrylates, des monomères (méth)acrylates mis en présence de composés dextranes ; -pour l'obtention de polyfumarates de propylène et des dérivés de ceux-ci, des monomères fumarates de propylène. Les initiateurs de photopolymérisation susceptibles d'être utilisés peuvent être des initiateurs de la famille des cétones aromatiques, des composés acridines, des composés fluorones. A titre d'exemples de cétones aromatiques, on peut mentionner : -les cétals benzyliques, que ceux répondant à la formule suivante OR' 0 Il tels : C---C OR dans lesquels R et R' peuvent représenter un groupe alkyle ; -des composés benzoïnes ; -des cétones a-aminoaromatiques ; -des composés phosphines ; -des composés benzophénones ; -de la thioxanthone. Comme composés phosphines, on peut 25 mentionner les composés vendus sous la dénomination Irgacure, tel que l'Irgacure 819®, de formule suivante : Ph désignant un groupe phényle. Les catalyseurs de polymérisation, qui sont responsables de la forte accélération de la vitesse de réaction de photopolymérisation, sont avantageusement des composés amines. Lorsque l'initiateur de photopolymérisation présente une grande réactivité vis-à-vis du ou des composés polymérisables présents en solution, un composé du type amine primaire ou amine secondaire peut être suffisant. Dans ce cas, le composé amine réagit avec un initiateur de photopolymérisation pour former un radical libre, ce dernier réagissant avec l'oxygène par une réaction de peroxydation, le composé amine pouvant ainsi être considéré comme jouant le rôle indirect de piège à oxygène (ce dernier étant un frein à une réaction radicalaire en chaîne). Lorsque l'initiateur de photopolymérisation 20 présente une efficacité moyenne vis-à-vis du ou des composés polymérisables, le composé amine peut être un intermédiaire réactionnel entre l'initiateur de photopolymérisation et le ou les composés polymérisables, remplissant ainsi un rôle de 25 catalyseur. Dans ce cas, le composé amine est avantageusement un composé du type amine tertiaire. A titre d'exemple de composé amine susceptible d'assurer le rôle de catalyseur de polymérisation, on peut citer la n-propylamine. Outre les ingrédients susmentionnés (monomère(s), initiateur et catalyseur), la solution peut comprendre : -des colorants (tel que du bleu de méthylène), de sorte à ajuster la longueur d'onde de la lampe de l'initiateur de photopolymérisation ; -des agents de réticulation ; -de l'eau, de préférence, désionisée ; et -les mélanges de ceux-ci. Comme agents de réticulation, on peut citer des monomères comprenant au moins deux fonctions polymérisables, par exemple, des monomères bisacrylamides, tels que le N,N'-méthylènebisacrylamide. A titre d'exemple, la solution comprend de l'acrylamide, un initiateur de photopolymérisation de formule suivante : Ph désignant un groupe phényle, de la n-propylamine en tant que catalyseur de polymérisation, de la N,N'-méthylènebisacrylamide en tant qu'agent de réticulation et de l'eau. Comme mentionné ci-dessus, il est appliqué une lumière sur toute la solution (pour engendrer une photopolymérisation de l'intégralité de la solution en hydrogel) et selon une intensité différente au niveau d'au moins deux zones contiguës de la solution, moyennant quoi il résulte une matrice d'hydrogel comprenant au moins deux zones contiguës de rigidités distinctes. En d'autres termes, cela signifie que l'on applique une lumière, par exemple, une lumière UV, et plus spécifiquement, une lumière UV-A, à la solution selon une distribution d'intensité modulée spatialement, de sorte à accéder à la répartition souhaitée de zones contiguës de rigidités distinctes (sachant que, selon l'intensité lumineuse appliquée, cela influe sur le taux de réticulation de l'hydrogel et donc sur sa rigidité). La distribution d'intensité modulée spatialement peut être obtenue par : (i) l'utilisation, au-dessus de la solution à traiter, d'un masque, par exemple un masque comprenant un ou plusieurs niveaux de gris, dont l'opacité reflète le taux de réticulation souhaité ; ou (ii) une source lumineuse modulée spatialement en intensité par un réseau d'interférences, un réseau de diffraction ou un motif holographique. Lorsqu'il est utilisé un masque, le 30 matériau constitutif de ce masque est choisi en fonction de : (i) l'absorption du matériau absorbant dans la plage de longueur d'ondes de la lampe utilisée lors de la photopolymérisation ; (ii) la résolution des zones (ou motifs) souhaitées. Lorsqu'il s'agit de réaliser des motifs de taille submicronique, le masque peut consister : -en un substrat en verre ou quartz recouvert selon une disposition appropriée à l'obtention des motifs souhaités de couches de métaux ou oxydes métalliques ; -en un substrat en cristaux liquides ; -en un substrat en matériau thermoplastique (tel qu'un polyméthacrylate, un polycarbonate, un 15 polystyrène) obtenu par thermomoulage ou gravure ionique. Lorsqu'il s'agit de réaliser des motifs de taille de 10 }gym ou plus, le masque peut consister en un film plastique traité par impression laser ou en un 20 assemblage de films opaques ou réflectants. Lorsqu'il s'agit de réaliser des motifs plus complexes, il s'entend qu'il faudra utiliser des modulations d'intensité plus complexes que des modulations simplement binaires, qui peuvent être mises 25 en oeuvre grâce à l'utilisation d'un masque comportant une répartition de niveaux de gris nécessaire à l'obtention des motifs souhaités. Ce type de masque peut consister en une plaque de verre ou quartz recouverte, sur une face, par une couche métallique 30 (par exemple, en chrome), qui est lithographiée et/ou gravée de sorte à créer différents niveaux de gris. De préférence, la lumière est appliquée sur la solution via un masque, de sorte à délimiter des zones d'intensité lumineuse distinctes. Dans ce cas, le procédé de l'invention peut 5 comprendre une étape préalable de préparation du masque. En fonction de la matrice en hydrogel souhaitée, l'homme du métier pourra être amené à procéder à des opérations préliminaires avant 10 d'effectuer l'étape de photopolymérisation en tant que telle. Les opérations préliminaires peuvent être les suivantes : (i) le choix des ingrédients constitutifs 15 de la solution, comme les composés polymérisables (dont le choix sera fixé par le matériau hydrogel que l'on souhaite obtenir), l'initiateur de photopolymérisation, qui peut être choisi en fonction de la longueur d'onde de la source lumineuse et la résolution spatiale des 20 motifs de rigidité souhaitée et le catalyseur de polymérisation, qui peut être choisi en fonction de la nature de l'initiateur de photopolymérisation ; (ii) l'évaluation de la durée seuil pour polymériser la solution par la source lumineuse, 25 sachant que plus le gradient de rigidité souhaité est fort (par exemple, de 1 kPa/pm), plus la durée seuil doit être faible (par exemple, de l'ordre de la seconde), ce qui peut amener à devoir adapter la concentration en initiateur et/ou catalyseur pour 30 accélérer ou ralentir la réaction de photopolymérisation en fonction du gradient de rigidité souhaité ; (iii) la caractérisation de la rigidité en fonction de la puissance transmise et de la durée pour une illumination homogène, ce qui peut constituer un repère pour le choix des paramètres d'application de la lumière lors de la photopolymérisation (ces paramètres pouvant être aussi qualifiés de paramètres d'illumination) ; (iv) à partir de la caractérisation susmentionnée, la sélection du contraste d'illumination entre les motifs rigides et les motifs dits « mous » (en comparaison aux motifs rigides), cette sélection pouvant passer par le choix des niveaux de gris pour les masques, le choix du gradient d'intensité pour les motifs holographiques. La photopolymérisation est réalisée, avantageusement en atmosphère inerte (par exemple, azote ou argon) de sorte à éviter la présence d'oxygène, qui inhibe la réaction de polymérisation. Il est ainsi possible, en plus de travailler en atmosphère inerte, de procéder au dégazage de la solution, de sorte à éliminer l'oxygène présent dans cette solution. La photopolymérisation est conduite, 25 classiquement, à une température où la solution reste liquide, à savoir à une température s'échelonnant classiquement entre 0 et 100°C. Comme évoqué plus haut, les matrices préparées selon le procédé de l'invention peuvent se 30 caractériser par des zones contiguës présentant un gradient de rigidité de l'ordre de 1 kPa/pm, avantageusement, une rigidité comprise en 100 Pa et 500 kPa et, avantageusement, une largeur de zones de l'ordre de 1 }gym. Des matrices de ce type peuvent être en un 5 hydrogel issu de la polymérisation de l'acrylamide et du N,N'-méthylènebisacrylamide. Du fait que ces matrices peuvent permettre des sauts de rigidité de plusieurs kPa sur une échelle inférieure à la taille d'une cellule biologique, c'est 10 donc tout naturellement que ces matrices peuvent trouver application dans le confinement de cellules, le tri de cellules, la localisation de cellules, ou encore comme outils de diagnostic pour la détermination des organes cibles des cellules métastasiques, les cellules 15 présentant une réponse à la rigidité différente selon leurs types. Concernant la localisation de cellules, les matrices obtenues selon le procédé de l'invention peuvent permettre de localiser les cellules, par 20 exemple, de type épithéliale, endothéliale, fibroblastique, astrocyte ou musculaire, ces cellules ayant pour particularité de migrer vers les zones dont la rigidité est la plus importante. Il peut être envisageable, par exemple, de concevoir des matrices 25 comportant des zones de rigidité organisées de telle sorte à constituer des routes à cellules, à savoir, par exemple, des canaux dont la rigidité est supérieure aux zones adjacentes à ces canaux, permettant ainsi une concentration des cellules dans ces canaux. Qui plus 30 est, s'il est prévu un gradient de rigidité à l'intérieur même des canaux, les cellules migreront dans la direction de la rigidité croissante. Concernant le tri de cellules, les matrices obtenues selon le procédé de l'invention peuvent permettre d'effectuer le tri, par exemple, entre des cellules gliales et des neurones. Les cellules gliales sont le support mécanique et chimique de la croissance des neurones dans le cerveau. Actuellement, les études in vitro sur des neurones primaires sont limitées par la difficulté de gérer la présence des cellules gliales. La présence de ces cellules permet de reproduire un environnement chimique proche des conditions in vivo mais rend très délicat l'organisation spatiale des neurones, car ces derniers poussent sur le tapis de cellules gliales. Sachant que les cellules gliales ne poussent pas sur des substrats de faible rigidité, il peut être envisageable avec des matrices présentant des zones rigides et des zones plus rigides de réaliser la culture concomitante de neurones et de cellules gliales avec une ségrégation de ces deux types de cellules, moyennant quoi l'on pourrait obtenir l'organisation d'un réseau de neurones « purs » dans un environnement chimique de cellules gliales. Concernant la détermination des organes 25 cibles des cellules métastasiques, il est connu que certaines tumeurs disséminent des cellules métastasiques dans des organes lointains, comme celles du sein ou des poumons, qui se disséminent dans les poumons, les reins, les os ou le cerveau. Sachant que 30 les taux de prolifération et de migration des cellules cancéreuses sont maximaux sur des matrices au niveau des zones de rigidité correspondant à celle de l'invention, l'on pourrait envisager de concevoir, conformément au procédé de l'invention, des matrices contenant des bandes de rigidité choisies en fonction des phénotypes attendus (le phénotype cellulaire dominant dans chacune des bandes étant celui visant l'organe, qui présente cette même rigidité). L'invention va être, à présent, décrite à la lumière d'un exemple de mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention, cet exemple n'étant fourni qu'à titre d'illustration de l'invention et n'en constituant en aucun cas une limitation. BRÈVE DESCRIPTION DES DESSINS La figure 1 représente une vue du dispositif mis en oeuvre dans le cadre de l'exemple 1. La figure 2a représente un graphique illustrant l'évolution de la hauteur h (en pm) de la matrice obtenue pour l'exemple 1 en fonction de la distance d (en pm) (0 correspondant à la délimitation entre la zone illuminée à travers la zone transparente du masque et la zone illuminée à travers la zone de niveau de gris). La figure 2b représente un graphique illustrant l'évolution de la rigidité Y (en kPa) de la matrice obtenue pour l'exemple 1 en fonction de la distance d (en pm) (0 correspondant à la délimitation entre la zone illuminée à travers la zone transparente du masque et la zone illuminée à travers la zone de niveau de gris). La figure 2c représente une photographie de la matrice obtenue pour l'exemple 1, après ensemencement cellulaire. La figure 3 représente une vue du dispositif mis en oeuvre dans le cadre de l'exemple 2. La figure 4 représente un graphique illustrant l'évolution de la rigidité Y (en kPa) de la matrice obtenue pour l'exemple 2 en fonction de la distance d (en pm). La figure 5 représente une photographie de la matrice obtenue pour l'exemple 2, après ensemencement cellulaire. La figure 6 représente une vue du dispositif mis en oeuvre dans le cadre de l'exemple 3. La figure 7 représente un graphique illustrant l'évolution de la rigidité Y (en kPa) de la matrice obtenue à l'exemple 3 en fonction d'une distance d (en pm) par rapport au centre du canal de cette matrice (cette distance au centre ayant pour valeur 0 au niveau de l'abscisse). La figure 8 représente une photographie de la matrice obtenue pour l'exemple 3, après ensemencement cellulaire. La figure 9 représente une vue du dispositif mis en oeuvre dans le cadre de l'exemple 4. La figure 10 représente un graphique illustrant l'évolution de la rigidité Y (en kPa) de la matrice obtenue pour l'exemple 4 en fonction de la distance d (en pm). La figure 11 représente une photographie de la matrice vue de dessus obtenue pour l'exemple 4. EXPOSÉ DÉTAILLÉ DE MODES DE RÉALISATION PARTICULIERS EXEMPLE 1 Cet exemple illustre la préparation d'une matrice en hydrogel comportant deux zones de rigidité distinctes impliquant les étapes suivantes : -une étape de préparation d'une lamelle de verre destinée à servir de support à la matrice en hydrogel (a) ; -une étape de préparation d'un masque (b) ; -une étape de préparation de la matrice en hydrogel (c). a) Préparation de la lamelle Une lamelle de verre basale est nettoyée avec une solution de soude à 0,1 mol/L pendant 10 minutes. Elle est ensuite rincée intensivement à l'eau puis à l'éthanol. On l'immerge ensuite pendant 5 minutes dans une solution d'APTMS (3- aminopropyltriméthoxysilane) à 10% dans l'éthanol (5m1 d'APTMS pour 45mL d'éthanol), sous agitation lente. La lamelle est ensuite rincée à l'éthanol puis laissée pendant 10 minutes sous agitation lente dans un bain d'éthanol. Après un rinçage simple à l'eau désionisée, la lamelle est immergée dans une solution de glutaraldéhyde à 0,5% dans l'eau pendant 25 minutes. Elle est ensuite rincée intensivement à l'eau et séchée fortement. On obtient ainsi une lamelle de verre présentant des fonctions aldéhydes à sa surface, qui vont permettre le greffage covalent de l'hydrogel en polyacrylamide, qui va être préparé subséquemment. b) Préparation d'un masque Une lame de microscopie optique (26 mm x 76 mm) est lavée dans une solution d'eau 5 oxygénée/acide sulfurique concentré en proportion 1:1, pendant 20 minutes. Une plaque de silicium clivée est fixée sur la moitié gauche de la lame. Elle sert à cacher la partie transparente avant de procéder au dépôt. Ensuite lnm de titane puis 4 nm de chrome sont 10 déposés à l'aide d'un évaporateur à canon d'électrons de type Plassys. La lame est ensuite rendue hydrophobe par un traitement Optool (Daikin DSX) : immersion pendant 1 minute dans l'Optool dilué à 1/1000 dans du 15 perfluorohexane. Puis la lame est laissée 1 heure dans de la vapeur d'eau à 80°C. Enfin, elle est immergée sous agitation lente pendant 10 minutes dans du perfluorohexane. La lame obtenue est représentée sur la 20 figure 1 par la référence 1, cette lame comprenant deux zones : -une zone transparente 3 ; -une zone 5 couverte d'une couche de 5 nm (1 nm de titane et 4 nm de chrome) (dite zone de niveau 25 de gris), contiguë à la zone transparente, cette lame constituant un masque destiné à être interposé entre un flux lumineux (indiqué par une flèche sur la figure indiquant qu'il s'agit d'un flux UV-A à 2W/cm2) et la solution (représentée par la 30 référence 7) déposée sur la lame de verre 9 susmentionnée et destinée à être photoréticulée en vue SP 50911 FG 21 de constituer la matrice visée, à savoir une matrice présentant deux zones contiguës présentant une rigidité distincte, ces zones correspondant à la géométrie de celle du masque. Un deuxième masque est préparé de la même manière, que celle définie ci-dessus, si ce n'est que la zone dite de niveau de gris est constituée d'une couche de 1 nm de titane, sur laquelle est déposée 19 nm de chrome. c) Préparation de la matrice en hydrogel De l'Irgacure 8198 (1,7 mg) est pesé dans un flacon opaque aux rayons ultraviolets. On y ajoute de la n-propylamine (10 pL). L'ensemble est chauffé à 50°C pendant 2 minutes. Après chauffage, on obtient une solution homogène et transparente. De l'acrylamide (250 pL d'une solution à 40%), du N,N'- méthylènebisacrylamide (250 pL d'une solution à 2%) et de l'eau désionisée (490 pL) sont ajoutés. L'ensemble est homogénéisé doucement à la pipette, pour limiter l'incorporation d'oxygène. 30 pL de la solution obtenue sont déposés sur la lamelle de verre de 30 mm préparée selon le 25 protocole explicité ci-dessus. La lamelle est placée sur un porte-échantillon présentant des cales d'épaisseur, qui permettent de maintenir un espacement de 40 pm entre la lamelle et le masque préparé préalablement, déposé sur les cales d'épaisseur. 30 L'ensemble (masque, solution, lamelle) est illuminé à l'aide d'une lampe fibrée Eleco UVP281 (2W/cm2) pendant 20 secondes, tel que cela est illustré sur la figure 1. Cet ensemble est ensuite plongé dans l'eau pour détacher le masque de la matrice en hydrogel ainsi formée à l'aide d'une pince. La matrice en hydrogel est rincée 3 fois avec de l'eau désionisée. Deux essais ont été effectués selon les mêmes modalités : -un premier essai avec le masque comportant une zone de niveau de gris (constituée par une couche de 1 nm de titane et 4 nm de chrome) ; et -un second essai avec le masque comportant une zone de niveau de gris (constituée par une couche de 1 nm de titane et 19 nm de chrome). Pour ces deux essais, il a été procédé à 15 une détermination de la topographie de surface ainsi que de la rigidité de la matrice obtenue. Pour déterminer la topographie de surface, il a été procédé à la mesure de la hauteur de la matrice en fonction de la distance d par rapport à la 20 délimitation entre la zone illuminée à travers la zone transparente (cette délimitation ayant pour valeur 0 au niveau de l'abscisse) et la zone illuminée à travers la zone de niveau de gris du masque, les résultats étant reportés sur la figure 2a, qui représente l'évolution 25 de la hauteur h (en pm) en fonction de la distance d (en pm), cette distance étant explicitée dans la partie supérieure du graphique par la représentation des zones du masque au travers desquelles a été pratiquée l'illumination. 30 Que ce soit pour le premier essai (courbe a) ou pour le second essai (courbe b), l'on constate une diminution substantielle de la hauteur de la matrice dès lors que l'on passe de la zone illuminée à travers la zone transparente du masque à la zone illuminée à travers la zone de niveau de gris du masque. Pour déterminer la rigidité de la matrice obtenue, il a été procédé à la mesure de la rigidité locale de l'hydrogel par microscopie à force atomique (AFM) en milieu aqueux (marque JPK). La résistance de la matrice à l'enfoncement d'une pointe est enregistrée. Un scan de 400 pm est effectué à travers la frontière. Les scans sont réalisés avec un pas de lOpm. Il en résulte une série de courbes d'indentation. Chaque courbe est traitée selon le protocole du fabricant avec un modèle d'indentation élastique. Chaque point du graphe est la moyenne de 3 mesures réalisées sur 3 points espacés de 10 pm dans une direction parallèle à la frontière. Les résultats sont reportés sur la figure 2b représentant l'évolution de la rigidité Y (en kPa) en fonction de distance d (en pm) par rapport à la délimitation entre la zone illuminée à travers la zone transparente (cette délimitation ayant pour valeur 0 au niveau de l'abscisse) et la zone illuminée à travers la zone de niveau de gris du masque. Que ce soit pour le premier essai (courbe a) ou le second essai (courbe b), il ressort qu'il y a une diminution substantielle de la rigidité, dès lors que l'on passe de la zone illuminée à travers la zone transparente du masque (cette zone illuminée pouvant être qualifiée de zone rigide) à la zone illuminée à travers la zone de niveau de gris du masque (cette zone illuminée pouvant être qualifiée de zone molle), le gradient de rigidité pouvant être de l'ordre du kPa/pm, notamment pour le second essai. Il a également été procédé à une culture cellulaire sur les matrices obtenues ci-dessus. De façon préalable, la matrice est fonctionnalisée avec de la fibronectine. Pour ce faire, la lamelle de verre de diamètre 30 mm, sur laquelle est polymérisé l'hydrogel, est collée au fond d'une boîte de Pétri percée de diamètre 35 mm. L'eau est retirée de la boîte, lmg de Sulfo SDA (Pierce) (correspondant à un succinimidylester diazirine) est dissous dans 2,27 mL d'eau désionisée stérile. La solution obtenue est déposée sur la matrice et laissée 2 heures dans le noir. Après ce temps, elle est aspirée à la pipette et 2 mL d'une solution de fibronectine à 25 mg/mL dans du PBS stérile est déposée pendant 1 heure. La boîte est toujours conservée dans le noir. Cette dernière solution est aspirée à la pipette et la boîte est placée sous la lampe Eleco UVP281 (2 W/cm2) pendant 3 min. La matrice est rincée 3 fois avec du PBS (sel tampon phosphate) stérile. Des cellules HUVEC (qui correspondent à des cellules endothéliales humaines matures isolées à partir de la veine de cordon ombilical) sont ensemencées à une densité de 2000 cellules/cm2 dans le milieu M199, 20% FCS (sérum foetal de veau), 2% LSGS (qui est un supplément de croissance à faible teneur en sérum), 1% ATAM (antibiotiques (pénicilline, streptomycine) + antimycotique, Invitrogen). Comme il ressort de la figure 2c, qui est une photographie faite par microscopie à contraste de phase, avec un agrandissement 20x sur un microscope inversé 24 heures après l'ensemencement, il y traversée d'une cellule de la délimitation entre la zone molle et la zone rigide. Le profil topographique n'influence pas l'organisation cellulaire. Les cellules traversent la frontière de rigidité en se positionnant perpendiculairement à la frontière (comme illustré sur la figure 2c). Dans le cas où la topographie influencerait le comportement cellulaire, les cellules devraient s'aligner sur la frontière, ce qui n'est manifestement pas le cas. EXEMPLE 2 Cet exemple illustre la préparation d'une matrice comportant des zones de rigidités distinctes sous forme de lignes de 10 pm alternées avec des lignes de 40 pm impliquant les étapes suivantes : -une étape de préparation d'une lamelle de verre destinée à servir de support à la matrice (a) ; -une étape de préparation d'un masque (b) ; -une étape de préparation de la matrice en 25 hydrogel (c) a) Préparation de la lamelle La lamelle est préparée de la même façon 30 que, dans l'exemple 1 explicité ci-dessus. b) Préparation d'un masque Une lame de microscopie optique (26 mm x 76 mm) est lavée dans une solution d'eau oxygénée/acide sulfurique concentré en proportion 1:1, pendant 20 minutes. Sur cette lame, 1 nm de titane puis 9 nm de chrome sont déposés à l'aide d'un évaporateur à canon d'électrons de type Plassys. Une résine du type AZ1512HS (disponible chez Clariant) diluée à 50% dans son solvant AZ-EB (qui est un solvant propylèneglycolmonométhyléther acétate) est déposée sur la lame côté chromé à l'aide d'une tournette, moyennant quoi l'on obtient une épaisseur de résine de 600nm. Elle est recuite 2 minutes à 120°C. Elle est illuminée à travers un masque Sodalime présentant le motif désiré pendant 2 secondes (aligneur MJB4 à 30 mW/cm2). Après développement (AZ-Developer + eau désionisée 1:1, 1 minute), la lame est rincée intensivement à l'eau désionisée. Puis la lame est placée dans un réacteur de gravure de type DPS, et gravée pendant 30 secondes à l'aide d'un traitement au chlore (2/3 C12:1/3 02) sous une pression entre 10 et 25 mTorr. La résine est retirée par un plasma 02 de 30 secondes dans le réacteur DPS. La lame est ensuite rendue hydrophobe par un traitement Optool (Daikin DSX) : immersion pendant 1 minute dans l'Optool dilué à 1/1000 dans du perfluorohexane. Puis la lame est laissée 1 heure dans de la vapeur d'eau à 80°C. Enfin, elle est immergée sous agitation lente pendant 10 minutes dans du perfluorohexane. Le masque est représenté sur la figure 3 par la référence 11, ce masque comprenant une alternance entre des zones transparentes 13 (non recouvertes de titane et de chrome) consistant en des lignes de 10 pm de largeur et des zones 15 consistant en des lignes de 40 pm de largeur couvertes d'une couche de 10 nm d'épaisseur (1 nm de titane et 9 nm de chrome) (ces zones pouvant être qualifiées de zones de niveau de gris). Ce masque est destiné à être interposé entre un flux lumineux (indiqué par une flèche sur la figure indiquant qu'il s'agit d'un flux UV-A à 2 W/cm2) et la solution (représentée par la référence 17) déposée sur la lame de verre 19 susmentionnée et 15 destinée à être photoréticulée en vue de constituer la matrice visée, à savoir une matrice présentant des zones contiguës présentant une rigidité distincte, à savoir des lignes de 10 pm de largeur alternées avec des lignes de 40 pm de largeur. 20 c) Préparation de la matrice en hydrogel La matrice en hydrogel est préparée de la même façon que, dans l'exemple 1 explicité ci-dessus. 25 Il a été procédé à une détermination de la rigidité de la matrice obtenue. Pour ce faire, la rigidité locale du gel est mesurée à l'aide d'un microscope à force atomique en milieu aqueux (marque JPK). La résistance du gel à 30 l'enfoncement de la pointe est enregistrée. Un scan de 100 pm est effectué à partir du centre du réseau de lignes espacées de 40 pm. Les scans sont réalisés avec un pas de 5 pm. Il en résulte une série de courbes d'indentation. Chaque courbe est traitée selon le protocole du fabricant avec un modèle d'indentation élastique. Chaque point du graphe est la résultante de moyenne de mesure sur deux courbes. Les résultats sont reportés sur la figure 4 représentant l'évolution de la rigidité Y (en kPa) en fonction d'une distance d (en pm). Le point d'abscisse 0 correspond approximativement au centre du réseau. L'allure de la courbe atteste de la présence de canaux de rigidité distants d'environ 40 pm, ces canaux de rigidité correspondant aux zones illuminées à travers les zones transparentes du masque susmentionné. Il a également été procédé à une culture cellulaire sur les matrices obtenues ci-dessus. De façon préalable, la matrice est fonctionnalisée avec de la fibronectine. Pour ce faire, la lamelle de verre de diamètre 30 mm, sur laquelle est polymérisé l'hydrogel, est collée au fond d'une boîte de Pétri percée de diamètre 35 mm. L'eau est retirée de la boîte, 1 mg de Sulfo SDA (Pierce) (correspondant à un succinimidylester diazirine) est dissous dans 2,27 mL d'eau désionisée stérile. La solution obtenue est déposée sur la matrice et laissée 2 heures dans le noir. Après ce temps, elle est aspirée à la pipette et 2 mL d'une solution de fibronectine à 25 mg/mL dans du PBS stérile est déposée pendant 1 heure. La boîte est toujours conservée dans le noir. Cette dernière solution est aspirée à la pipette et la boîte est placée sous la lampe Eleco UVP281 (2 W/cm2) pendant 3 min. La matrice est rincée 3 fois avec du PBS stérile. Des cellules LN229 (cellules tumorales de glioblastome extraites du cortex frontal droit pariétoocciputal) sont ensemencées à une densité de 5000 cellules/cm2 dans un milieu DMEM (milieu minimum essentiel de Eagle modifié par Dubelcco) complété avec 10% FBS et 1% ATAM. Comme il ressort de la figure 5, qui est une photographie faite par microscopie à contraste de phase, avec un agrandissement 20x sur un microscope inversé 2 heures après l'ensemencement, il y a concentration des cellules le long des zones illuminées à travers les zones transparentes du masque, ces zones correspondant aux zones rigides (et correspondant aux canaux de rigidité susmentionnés). EXEMPLE 3 Cet exemple illustre la préparation d'une matrice comportant des zones de rigidités distinctes impliquant les étapes suivantes : -une étape de préparation d'une lamelle de verre destinée à servir de support à la matrice (a) ; -une étape de préparation d'un masque (b) ; -une étape de préparation de la matrice en hydrogel (c)30 a) Préparation de la lamelle La lamelle est préparée de la même façon que, dans l'exemple 1 explicité ci-dessus. b) Préparation d'un masque Une lame de microscopie optique (26 mm x 76 mm) est lavée dans une solution d'eau oxygénée/acide sulfurique concentré en proportion 1:1, pendant 20 minutes. Sur cette lame, une résine du type AZ1512HS (disponible chez Clariant) est déposée à l'aide d'une tournette à raison de 2500 tours/min pendant 120 secondes. Elle est recuite 2 minutes à 100°C. Elle est illuminée 35 secondes avec une lampe UV de 6 mW/cm2 filtrée sur la longueur d'onde 365 nm à travers un masque PDF imprimé sur un transparent et présentant une ligne noir de 100 pm de largeur. Le motif est développé à l'aide du développeur AZ-EBR pendant 30 secondes. Après développement, la lame est de nouveau recuite 2 minutes à 120°C. 1 nm de titane puis 4 nm de chrome sont déposés à l'aide d'un évaporateur à canon d'électrons de type Plassys. Ensuite la lame est immergée 1 minute dans l'acétone, afin de retirer la ligne de résine. Il en résulte un canal de 100 pm transparent au milieu de la lame chromée. La lame est ensuite rendue hydrophobe par un traitement Optool (Daikin DSX) : immersion pendant 1 minute dans l'Optool dilué à 1/1000 dans du perfluorohexane. Puis la lame est laissée 1 heure dans de la vapeur d'eau à 80°C. Enfin, elle est immergée sous agitation lente pendant 10 minutes dans du perfluorohexane. Le masque obtenu est représenté sur la figure 6 par la référence 21, ce masque comprenant une zone transparente 23 (non recouvertes de titane et de chrome) consistant en une ligne de 100 pm de largeur et deux zones 25 encadrant la zone 23, ces deux zones étant couvertes d'une couche de 5 nm d'épaisseur (1 nm de titane et 4 nm de chrome) (ces zones pouvant être qualifiées de zones de niveau de gris). Ce masque est destiné à être interposé entre un flux lumineux (indiqué par une flèche sur la figure indiquant qu'il s'agit d'un flux UV-A à 2 W/cm2) et la solution (représentée par la référence 27) déposée sur la lame de verre 29 susmentionnée et destinée à être photoréticulée en vue de constituer la matrice visée, à savoir une matrice présentant des zones contiguës présentant une rigidité distincte, à savoir, dans ce cas, une zone centrale rigide encadrées par deux zones d'extrémité molles. c) Préparation de la matrice en hydrogel La matrice en hydrogel est préparée de la 25 même façon que, dans l'exemple 1 explicité ci-dessus, si ce n'est que la durée d'illumination n'est que de 8 s. Il a été procédé à une détermination de la rigidité de la matrice obtenue. 30 Pour ce faire, la rigidité locale du gel est mesurée à l'aide d'un microscope à force atomique en milieu aqueux (marque JPK). La résistance du gel à l'enfoncement de la pointe est enregistrée. Un scan de 200 pm est effectué à travers le canal. Les scans sont réalisés avec un pas de 10 pm. Il en résulte une série de courbes d'indentation. Chaque courbe est traitée selon le protocole du fabricant avec un modèle d'indentation élastique. Chaque point du graphe est la résultante de moyenne de deux mesures effectuées sur deux points distincts de 10 pm parallèlement au canal. Les résultats sont reportés sur la figure 7 représentant l'évolution de la rigidité Y (en kPa) en fonction de la distance d (en pm) par rapport au centre du canal (cette distance au centre ayant pour valeur 0 au niveau de l'abscisse). Au regard de l'allure de la courbe, il ressort l'existence d'un canal de rigidité correspondant à la zone illuminée à travers la zone transparente du masque. Il a également été procédé à une culture cellulaire sur les matrices obtenues ci-dessus. De façon préalable, la matrice est fonctionnalisée avec de la fibronectine. Pour ce faire, la lamelle de verre de diamètre 30 mm, sur laquelle est polymérisé l'hydrogel, est collée au fond d'une boîte de Pétri percée de diamètre 35 mm. L'eau est retirée de la boîte, 1 mg de Sulfo SDA (Pierce) (correspondant à un succinimidylester diazirine) est dissous dans 2,27 mL d'eau désionisée stérile. La solution obtenue est déposée sur la matrice et laissée 2 heures dans le noir. Après ce temps, elle est aspirée à la pipette et 2 mL d'une solution de fibronectine à 25 pg/mL dans du PBS stérile est déposée pendant 1 heure. La boîte est toujours conservée dans le noir. Cette dernière solution est aspirée à la pipette et la boîte est placée sous la lampe Eleco UVP281 (2 W/cm2) pendant 3 5 min. La matrice est rincée 3 fois avec du PBS stérile. Des cellules Hela (cellules immortelles extraites d'une tumeur maligne du col de l'utérus) sont ensemencées à une densité de 5000 cellules/cm2 dans un milieu DMEM complété avec 10% FBS et 1% ATAM. 10 Comme il ressort de la figure 8, qui est une photographie faite par microscopie à contraste de phase, avec un agrandissement 20x sur un microscope inversé 2 heures après l'ensemencement, il y a concentration des cellules le long du canal 15 susmentionné, ce canal correspondant à la zone de rigidité la plus importante de la matrice. EXEMPLE 4 Cet exemple illustre la préparation d'une 20 matrice comportant des zones de rigidités distinctes se présentant sous forme d'un premier réseau de lignes de 6 pm de largeur alternées avec des lignes de 2 pm de largeur et d'un deuxième réseau de lignes de 4 pm de largeur alternées avec des lignes de 2 pm de largeur 25 impliquant les étapes suivantes : -une étape de préparation d'une lamelle de verre destinée à servir de support à la matrice (a) ; -une étape de préparation d'un masque (b) ; -une étape de préparation de la matrice en 30 hydrogel (c). a) Préparation de la lamelle La lamelle est préparée de la même façon que, dans l'exemple 1 explicité ci-dessus. b) Préparation d'un masque Une lame de microscopie optique (26 mm x 76 mm) est lavée dans une solution d'eau oxygénée/acide sulfurique concentré en proportion 1:1, pendant 20 minutes. Sur cette lame, 1 nm de titane puis 4 nm de chrome sont déposés à l'aide d'un évaporateur à canon d'électrons de type Plassys. Une résine du type AZ1512HS (disponible chez Clariant) diluée à 50% dans son solvant AZ-EBR (qui est un solvant propylèneglycolmonométhyléther acétate) est déposée sur la lame côté chromé à l'aide d'une tournette, moyennant quoi l'on obtient une épaisseur de résine de 600nm. Elle est recuite 2 minutes à 120°C. Elle est illuminée à travers un masque Sodalime présentant le motif désiré pendant 2 secondes (aligneur MJB4 à 30 mW/cm2). Après développement (AZ-Developer + eau désionisée 1:1, 1 minute), la lame est rincée intensivement à l'eau désionisée. Puis la lame est placée dans un réacteur de gravure de type DPS, et gravée pendant 30 secondes à l'aide d'un traitement au chlore (2/3 C12:1/3 02) sous une pression entre 10 et 25 mTorr. La résine est retirée par un plasma 02 de 30 secondes dans le réacteur DPS. La lame est ensuite rendue hydrophobe par un traitement Optool (Daikin DSX) : immersion pendant 1 minute dans l'Optool dilué à 1/1000 dans du perfluorohexane. Puis la lame est laissée 1 heure dans de la vapeur d'eau à 80°C. Enfin, elle est immergée sous agitation lente pendant 10 minutes dans du perfluorohexane. Le masque est représenté sur la figure 9 par la référence 31, ce masque comprenant un premier réseau de lignes 33 de 6 pm de largeur couvertes (dites lignes de niveau de gris) alternées avec des lignes 35 de 2 pm de largeur (lignes transparentes) et d'un deuxième réseau de lignes 37 de 4 pm de largeur couvertes (dites lignes de niveau de gris) alternées avec des lignes 39 de 2 pm de largeur (lignes transparentes, c'est-à-dire non recouvertes de titane et de chrome). Ce masque est destiné à être interposé entre un flux lumineux (indiqué par une flèche sur la figure indiquant qu'il s'agit d'un flux UV-A à 2 W/cm2) 20 et la solution (représentée par la référence 41) déposée sur la lame de verre 43 susmentionnée et destinée à être photoréticulée en vue de constituer la matrice visée, à savoir une matrice présentant un premier réseau de lignes de 6 pm de largeur (lignes 25 molles) alternées avec des lignes de 2 pm de largeur (lignes rigides) et d'un deuxième réseau de lignes de 4 pm de largeur (lignes molles) alternées avec des lignes de 2 pm de largeur (lignes rigides). 30 c) Préparation de la matrice en hydrogel La matrice en hydrogel est préparée de la même façon que, dans l'exemple 1 explicité ci-dessus. Il a été procédé à une détermination de la rigidité de la matrice obtenue. Pour ce faire, la rigidité locale du gel est mesurée à l'aide d'un microscope à force atomique en milieu aqueux (marque JPK). La résistance du gel à l'enfoncement de la pointe est enregistrée. Un scan de 30 pm est effectué à partir du centre du réseau de lignes espacées de 6 pm. De manière identique, un scan de 20 pm est effectué à partir du centre du réseau de lignes espacées de 4 pm. Les scans sont réalisés avec un pas de 1 pm. Il en résulte une série de courbes d'indentation. Chaque courbe est traitée selon le protocole du fabricant avec un modèle d'indentation élastique. Chaque point du graphe est la moyenne de deux mesures effectuées sur deux points distants de 10 pm parallèlement aux lignes. Les résultats sont reportés sur la figure 10 représentant l'évolution de la rigidité Y (en kPa) en fonction d'une distance d (en pm). L'origine d=0 sur chacun des courbes correspond aux centres des réseaux de lignes espacées respectivement de 4 pm (pointillés gris) et de 6 pm (ligne continue noire). Deux courbes sont représentées : une courbe a) pour le premier réseau de lignes (alternance de lignes molles de 6 pm alternées avec des lignes rigides de 2 pm) et une courbe b (alternance de lignes molles de 4 pm alternées avec des lignes rigides de 2 pm). L'allure de ces deux courbes atteste de la présence de canaux de rigidité localisés au niveau des lignes rigides, ces canaux de rigidité étant espacées de 6 pm (courbe a) ou 4 pm (courbe b), le gradient de rigidité étant très important notamment pour le premier réseau de lignes entre lignes rigides et lignes molles, cette disposition étant attestée par la figure 11, représentant une photographie de la matrice obtenue vue de dessus.10 REVENDICATIONS1. Procédé de préparation d'une matrice du type hydrogel comprenant au moins deux zones contigües de rigidités distinctes comprenant une étape de photopolymérisation d'une solution comprenant un ou plusieurs composés polymérisables et un initiateur de photopolymérisation, par application d'une lumière sur toute la solution et selon une intensité différente au niveau d'au moins deux zones de la solution, moyennant quoi il résulte une matrice d'hydrogel comprenant au moins deux zones contigües de rigidités distinctes, caractérisé en ce que l'étape de photopolymérisation est réalisée en présence d'un catalyseur de polymérisation. 2. Procédé selon la revendication 1, dans lequel la matrice du type hydrogel est en un matériau choisi parmi : -des polyacrylamides ; -des polyéthylèneglycols comprenant des motifs répétitifs issus de la polymérisation de composés acrylates ou méthacrylates ; -des polysaccharides, éventuellement modifiés ; -des (co)polymères issus de la polymérisation de composés diacrylates et/ou (méth)acrylates ; -des alcools polyvinyliques comprenant des motifs répétitifs issus de la polymérisation de composés acrylates ou méthacrylates ;' ST 50911 FG 38 -des dextranes comprenant des motifs répétitifs issus de la polymérisation de composés (méth)acrylates ; -des polyfumarates de propylène et des 5 dérivés de ceux-ci ; et -des combinaisons de ceux-ci. 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, dans lequel l'initiateur de photopolymérisation est 10 choisi parmi les cétones aromatiques, les composés acridines et les composés fluorones. 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel le catalyseur 15 de polymérisation est un composé amine. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel la solution comprend, en outre, un ou plusieurs ingrédients choisis 20 parmi les colorants, les agents de réticulation, l'eau et les mélanges de ceux-ci. 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel la lumière est 25 appliquée sur la solution via un masque, de sorte à délimiter des zones d'intensité lumineuse distinctes. 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel la lumière est 30 appliquée selon une distribution d'intensité modulée spatialement.SEP 50911 FG 38 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans lequel la solution comprend de l'acrylamide, un initiateur de 5 photopolymérisation de formule suivante : Ph désignant un groupe phényle, 10 de la n-propylamine en tant que catalyseur de polymérisation, de la N,N'-méthylènebisacrylamide en tant qu'agent de réticulation et de l'eau. 9. Procédé selon l'une quelconque des 15 revendications précédentes, dans lequel la matrice de type hydrogel comprend au moins deux zones contigües de rigidités distinctes présentant un gradient de rigidité de l'ordre de 1 kPa/pm. 20 10. Matrice de type hydrogel comprenant au moins deux zones contigües de rigidités distinctes présentant un gradient de rigidité de l'ordre de 1 kPa/pm. 25 11. Matrice selon la revendication 10, qui est issue de la polymérisation de l'acrylamide et du N,N'-méthylènebisacrylamide.