Brevet FR2987263A1 — publié le 20130830

UTILISATION COSMETIQUE D'UN PRINCIPE ACTIF ISSU DE FEUILLES D'AVERRHOA CARAMBOLA POUR UN EFFET AMINCISSANT La présente invention se rapporte à un principe actif particulier issu de feuilles d' Averrhoa carambola et son application sur la peau pour un traitement cosmétique amincissant et anti-cellulite. La cellulite touche fréquemment les femmes et se manifeste par un aspect 5 matelassé de la peau, dit en « peau d'orange » sur des zones précises du corps telles que les fesses et les cuisses. Elle correspond à un développement excessif de la masse grasse dans la couche profonde de la peau, le tissu adipeux. D'une manière générale, la cellulite résulte du stockage massif des graisses à la suite d'un déséquilibre souvent localisé entre la lipogenèse (synthèse et stockage 10 de triglycérides) et la lipolyse (hydrolyse des triglycérides stockés en acides gras et glycérol) au niveau des cellules du tissu adipeux, les adipocytes. Sous l'effet de divers facteurs hormonaux, métaboliques ou psychologiques, on assiste à une augmentation du nombre et du volume des adipocytes. Une multitude de mécanismes sont impliqués dans la formation de la cellulite, 15 tels que le captage des graisses, la lipogenèse, le stockage des graisses, la lipolyse, l'oxydation des acides gras ou encore la différenciation adipocytaire. Parmi ces mécanismes, on sait notamment que la bêta-oxydation est la principale voie de dégradation des acides gras, et qu'une augmentation de l'oxydation des acides gras permet d'induire une diminution des graisses dans l'organisme. 20 C'est pourquoi, l'objectif de l'invention est de proposer un principe actif cosmétique présentant un effet amincissant, capable de limiter le stockage des acides gras dans les adipocytes en augmentant l'oxydation des graisses. La première étape d'oxydation des graisses a lieu dans le cytoplasme, au niveau de la membrane externe mitochondriale où est située l'acylcoenzyme A synthase. Le composé formé sous l'action de cette enzyme, est un acylcoenzyme A (AcylCoA). Les AcylCoA à longues chaînes formés pénètrent ensuite dans les mitochondries par un système de navette cellulaire dépendant de la carnitine palmitoyltransférase I, nommée CPT-1, enzyme qui catalyse l'estérification des AcylCoA longues chaînes en L-carnitine pour les transporter dans les mitochondries. Ainsi, une augmentation de l'expression de la CPT-1 permet d'augmenter la 10 quantité d'acides gras oxydés dans les mitochondries amenant à une réduction des dépôts de graisses dans les adipocytes. Un objectif spécifique de l'invention est donc de proposer un principe actif cosmétique capable d'agir sur la CPT-1 pour augmenter l'oxydation et limiter le stockage des acides gras dans les adipocytes et obtenir un effet amincissant. 15 Pour répondre à son objectif la présente invention vise l'utilisation d'un hydrolysat de feuilles d'A verrhoa carambola. Le carambolier, Averrhoa carambola L., est un arbre fruitier originaire d'Asie de la famille des Oxalidacées. Aujourd'hui cultivé, on le retrouve également en Australie, en Amérique du Sud et dans les îles du Pacifique. 20 Les fruits acides sont consommés en jus, en salade de fruits, en confiture ou dans des sauces. Ils sont également utilisés traditionnellement, frais, séchés, en conserve ou en baume, afin de lutter contre les hémorragies et les hémorroïdes, de calmer la fièvre, de soigner les affections hépatiques et la diarrhée, de traiter l'eczéma, de soigner les affections oculaires et de stimuler la salivation. 25 Ils sont également considérés comme diurétiques. Moins utilisées que les fruits, les feuilles serviraient à apaiser les maux de tête et à soigner certaines affections cutanées. Des extraits de feuilles d'Averrhoa carambola ont déjà été décrits comme utiles pour des applications cosmétiques antivieillissement. Ces extraits sont généralement riches en composés polyphénoliques, principalement des flavones, mais ces produits ne présentent aucun effet amincissant. Or, de façon surprenante, l'utilisation d'un principe actif spécifique visé selon l'invention, à savoir l'utilisation d'un hydrolysat de feuilles d'Averrhoa carambola, permet d'obtenir un effet cosmétique amincissant. En particulier, lorsqu'il est appliqué sur la peau, il permet d'augmenter l'oxydation des acides gras dans les adipocytes notamment en agissant sur la CPT-1. L'invention vise donc un hydrolysat de feuilles d'Averrhoa carambola, pour son application comme principe actif amincissant dans une composition cosmétique à application cutanée. L'invention vise également spécifiquement un principe actif cosmétique caractérisé en ce qu'il s'agit d'un hydrolysat de feuilles d'Averrhoa carambola comprenant au moins 20% de carbohydrates et ne comprenant pas de composés polyphénoliques, ainsi qu'un procédé de traitement cosmétique amincissant qui consiste à appliquer sur la peau une composition cosmétique renfermant ce principe actif. La présente invention est maintenant décrite en détail. UTILISATION Selon un premier aspect, l'invention vise un hydrolysat de feuilles d'Averrhoa carambola pour son application comme principe actif cosmétique pour un effet amincissant. En particulier l'invention vise l'utilisation cosmétique d'un hydrolysat de feuilles d'Averrhoa carambola comme principe actif cosmétique pour un effet amincissant dans une composition cosmétique à application cutanée, notamment pour augmenter l'oxydation des acides gras dans les adipocytes. Préférentiellement, l'hydrolysat de feuilles d'Averrhoa carambola est capable d'augmenter la bêta-oxydation des acides gras en augmentant l'expression de la CPT-1 dans les adipocytes. L'augmentation de la bêta-oxydation des acides gras induit une diminution des 5 graisses stockées et donc un amincissement. Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, l'invention vise l'utilisation d'un principe actif tel que décrit en suivant. PRINCIPE ACTIF 10 L'invention concerne également un principe actif cosmétique spécifique caractérisé en ce qu'il s'agit d'un hydrolysat de feuilles d'Averrhoa carambola comprenant au moins 20% de carbohydrates et ne comprenant pas de composés polyphénoliques. Par « ne comprenant pas de composés polyphénoliques » au sens de l'invention on 15 entend une teneur en composés polyphénoliques inférieure à 0,1%, préférentiellement nulle. Le principe actif peut se présenter sous forme de liquide limpide de couleur ambrée. Il peut être défini par au moins une des caractéristiques exposées ci-après, 20 préférentiellement toutes. Matières sèches : Le taux de matières sèches d'un principe actif selon l'invention (mesuré par passage à l'étuve à 105°C en présence de sable d'un échantillon de poids initial donné jusqu'à obtention d'un poids constant) peut être compris 25 entre 10 et 90 g/I, préférentiellement entre 25 et 40 g/I. Mesure du pH : Le pH (mesuré par la méthode potentiométrique à température ambiante) peut être compris entre 3,0 et 5,0 préférentiellement entre 3,0 et 4,0. Carbohydrates : Détermination de la teneur en sucres totaux Le dosage de la teneur en sucres totaux peut être réalisé par la méthode de DUBOIS (DUBOIS M. et al., (1956), Analytical chemistry, 28, n°3 p. 350-356). En présence d'acide sulfurique concentré et de phénol, les sucres réducteurs donnent un composé jaune orangé. A partir d'une gamme étalon, on peut déterminer le taux de sucres totaux d'un échantillon. Le taux de sucres totaux d'un principe actif selon l'invention est préférentiellement compris entre 3,2 et 36g/I, encore plus préférentiellement entre 8 et 16 g/I. La teneur en sucres totaux peut aussi être exprimée en pourcentage par rapport à la matière sèche. Elle est préférentiellement comprise entre 20 et 64% en poids par rapport à la matière sèche. Protéines La teneur en protéines est déterminée par la méthode de KJELDHAL (Official method of analysis of the A.O.C. 1975, 12th ed. W Horwitz, E.D., New-York, p. 15-60). La teneur en protéines du principe actif est préférentiellement comprise entre 8,5 et 23% en poids par rapport à la matière sèche. Teneur en cendres brutes : La teneur en cendres brutes est déterminée par la pesée des résidus issus de l'incinération à 550°C dans un four à moufle électrique (VULCANTM 3.550-NDI). Le poids du résidu est calculé en déduisant la tare. La teneur en minéraux est exprimée en pourcentage par rapport à la matière sèche. La teneur en cendres brutes est comprise entre 22,5 et 39%. Teneur en acides uroniques La teneur en acides uroniques est déterminée selon la méthode suivante. Le produit de l'acide uronique avec le tétraborate de sodium, donne en présence du méta-hydroxydiphényl, une coloration rose permettant le dosage au spectrophotomètre à 520nm. L'intensité de coloration est proportionnelle à la quantité d'acides uroniques. Les lectures sont réalisées à partir d'une gamme étalon d'acide galacturonique allant de 10 à 100mg/I. La teneur en acides uroniques est exprimée en équivalent d'acide galacturonique. La teneur en acides uroniques d'un principe actif selon l'invention est préférentiellement comprise entre 5 et 17% par rapport au poids total de la matière sèche du principe actif. Composés phénoliques Les composés phénoliques forment en présence de ferricyanure de potassium des composés colorés, détectables à 715nm. L'intensité de coloration est proportionnelle à la quantité de composés phénoliques. Les lectures sont réalisées à partir d'une gamme étalon d'acide gallique allant de 40 à 120 mg/I. Les résultats obtenus pour les étalons permettent de tracer une droite densité optique en fonction de la concentration et le taux de polyphénols des échantillons est lu directement sur cette droite. La teneur en composés phénoliques d'un principe actif selon l'invention est inférieure à 0,1% par rapport au poids total de la matière sèche du principe actif. PROCEDE D'OBTENTION Le principe actif selon l'invention tel que décrit précédemment peut être obtenu préférentiellement par un procédé comprenant une hydrolyse, préférentiellement une hydrolyse enzymatique de feuilles a'Averrhoa carambola. Un procédé particulièrement adapté comprend au moins la succession des étapes suivantes : - solubilisation de poudre de feuilles d'Averrhoa carambola dans l'eau, préférentiellement à raison d'au moins 20g/I, - hydrolyse enzymatique, en vue d'hydrolyser les carbohydrates, - inactivation des activité enzymatiques résiduelles par traitement thermique, - ajout d'un adjuvant pour éliminer les composés phénoliques de façon à ce que le taux de composés phénoliques soit inférieur à 0,1% en poids de matière sèche du principe actif final, - séparation des phases soluble et insoluble, préférentiellement par filtration, décantation ou centrifugation, - filtration de la phase soluble et récupération du filtrat afin d'éliminer les molécules de haut poids moléculaire supérieur, - concentration du filtrat, - filtration et filtration stérilisante. Des étapes de décoloration et de désodorisation de la phase soluble, peuvent être envisagées. Les paramètres des différentes étapes doivent préférentiellement être ajustés 20 afin d'obtenir des extraits comprenant au moins 20% de carbohydrates et ne comprenant pas de composés polyphénoliques (teneur en composés polyphénoliques inférieure à 0,1%). PROCEDE COSMETIQUE DE SOIN DE LA PEAU 25 Le principe actif selon l'invention peut être intégré dans des compositions cosmétiques dans différentes formes galéniques, adaptées à l'administration par voie topique cutanée. Ces compositions peuvent être utilisées pour un traitement cosmétique topique amincissant, en particulier un procédé cosmétique de soin de la peau humaine, destiné à un effet amincissant, comprenant l'application topique d'une composition comprenant un hydrolysat de feuilles d'Averrhoa carambola, en particulier d'une composition renfermant entre 0,01 et 5% en poids de principe(s) actif(s) obtenu(s) à partir d'Averrhoa carambola selon la présente invention. EXEMPLE Un exemple non limitatif de procédé d'obtention et un exemple de principe actif obtenu sont présentés en suivant. Exemple 1 : procédé d'obtention du principe actif selon l'invention Un exemple de procédé d'obtention d'un principe actif selon l'invention, comprend la mise en oeuvre des étapes suivantes : - solubilisation de 20g/I de poudre de feuilles d'Averrhoa carambola dans l'eau, - hydrolyse enzymatique à l'aide d'une carbohydrase, - inactivation de l'activité enzymatique résiduelle par traitement thermique pendant 4 heures, - ajout d'un adjuvant, type PVPP, - séparation des phases soluble et insoluble, préférentiellement par décantation, - filtration de la phase soluble et récupération du filtrat afin d'éliminer les molécules de poids moléculaire supérieur à 20 000 ba, - concentration du filtrat, - filtration et filtration stérilisante sur filtres 0,22m. Exemple 2 : principe actif selon l'invention obtenu Le principe actif obtenu par la mise en oeuvre du procédé de l'exemple 1 présente les caractéristiques suivantes : - aspect : liquide limpide - couleur : ambrée - teneur en matières sèches : 36,2g/I - pH : 3,6 - teneur en sucres totaux : 56,1 % en poids par rapport à la matière sèche, - teneur en cendres : 26,2% en poids par rapport à la matière sèche - teneur en protéines totaux : 8,6% en poids par rapport à la matière sèche, - teneur en acides uroniques : 6,6% en poids par rapport à la matière sèche - teneur en polyphénols : 0,0015% en poids par rapport à la matière sèche. 15 EVALUATION DE L'EFFET AMINCISSANT DU PRINCIPE ACTIF SELON L'INVENTION Un essai a été réalisé pour illustrer l'invention. Le principe actif utilisé pour cette étude est celui de l'exemple 2. L'étude a été menée dans le but d'évaluer l'effet d'un hydrolysat de feuilles 20 d'Averrhoa carambola sur l'expression de la carnitine palmitoyltransférase I, CPT-1. Elle a été réalisée par PCR quantitative sur des pré-adipocytes humains différenciés en adipocytes humains. Le protocole opératoire est le suivant. 25 A JO, les pré-adipocytes sont ensemencés dans un milieu de culture et incubés à 37°C. A J1, le milieu de culture est éliminé et remplacé. A J4, le milieu de culture est à nouveau éliminé et remplacé par un milieu de culture contenant ou non le principe actif de l'exemple 2 à 0,5% et 1% (V/V). Les cellules sont ensuite incubées à 37°C. A J7 et J9, les cellules sont traitées comme à J4. A J11, les cellules sont récupérées et les ARN totaux extraits. Les ARN extraits ont été reverse-transcripts et les ADN complémentaires obtenus analysés par la technique de PCR quantitative. Les ARNm (ARN messager) de CPT-1 ont été analysés. Les résultats obtenus en pourcentage d'ARNm de CPT-1 sont présentés dans le tableau ci-dessous Taux d'ARNm CPT-1 (%) Témoin 100 Principe actif selon l'invention 0,5% 111 Principe actif selon l'invention 1% 121 Ces résultats montrent bien qu'un hydrolysat de feuilles d'Averrhoa carambola permet d'augmenter l'expression de la CPT-1 des adipocytes humains. Testé à 1%, dans les conditions de cette étude, le principe actif de l'exemple 2 permet notamment d'augmenter l'expression de la CPT-1 de 21%. REVENDICATIONS1. Principe actif cosmétique, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un hydrolysat de feuilles d'Averrhoa carambola comprenant au moins 20% de carbohydrates et comprenant moins de 0,1% de composés polyphénoliques en poids de matières sèches. 2. Principe actif cosmétique selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un hydrolysat enzymatique. 3. Principe actif cosmétique selon l'une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu'il présente au moins une des caractéristiques suivantes - un taux de matières sèches compris entre 25 et 40g/I, - une teneur en carbohydrates comprise entre 20 et 64% en poids de matières sèches. 4. Principe actif cosmétique caractérisé en ce qu'il s'agit d'un hydrolysat de feuilles d'Averrhoa carambola ou un principe actif selon l'une des précédentes revendications, pour son application comme principe actif destiné à présenter un 15 effet amincissant, dans une composition cosmétique à administration cutanée. 5. Principe actif selon la revendication 4, pour son application comme principe actif destiné à augmenter l'oxydation des acides gras dans une composition cosmétique à administration cutanée. 6. Principe actif selon la revendication 4 ou 5, pour son application comme principe actif destiné à augmenter l'expression de la carniti ne palmitoyltransférase I dans les adipocytes dans une composition cosmétique à administration cutanée.