Brevet FR2990698A1 — publié le 20131122

LACCASE DE PODOSPORA ANSERINA ET SES APPLICATIONS La présente invention se rapporte à une nouvelle laccase isolée à partir de Podospora anserina, à son procédé de préparation ainsi qu'à son utilisation notamment pour la délignification du papier, comme décolorant, dépolluant et désodorisant ou encore pour réduire l'oxygène. Les laccases sont des enzymes à cuivre qui oxydent les polyphénols en utilisant l'oxygène comme accepteur final d'électrons. Elles sont présentes dans les plantes, dans de très nombreux champignons (dégradation de la lignine) ainsi que dans quelques bactéries. La structure des laccases est telle que leur site actif est constitué de 4 atomes de cuivre, un de type 1 (Ti), isolé, responsable de l'oxydation des phénols et un cluster de 3 atomes de cuivre (un de type 2, T2, et deux de type 3, T3) responsable de l'activation du 02. Le mécanisme d'action des laccases et notamment le rôle du centre métallique, reste mal connu ; il est admis un mécanisme en deux temps : 1. le cuivre Ti arrache un électron au substrat ; 2. l'électron est transféré au centre T2/T3 sur une distance d'environ 12,5 À. Après complète réduction du centre trinucléaire, la réduction de l'oxygène moléculaire intervient. OH 4 e 4e 4 02 20H2 4 02 20H2 OH Lip^-Pakymérisation Schéma général de la réaction d'oxydation des phénols par les laccases Les inventeurs ont maintenant identifié une nouvelle laccase produite par Podospora anserina qui présente des caractéristiques plus avantageuses que les laccases disponibles dans le commerce, notamment celle de Trametes versicolor. Selon un premier objet, l'invention se rapporte à la laccase purifiée et 25 isolée de Podospora anserina de SEQ. ID. N°1 ; cette enzyme correspond à une protéine prédite par le séquençage du génome de Podospora anserina (traduite à partir du gène