Brevet FR2985173A1 — publié le 20130705

TEINTURE DE FIBRES DE KERATINE AU MOYEN D'UN ANALOGUE INDOLIQUE La présente invention concerne la teinture des fibres de kératine. Plus précisément, 5 la présente invention concerne un agent de teinture et un procédé de teinture utilisant un analogue indolique comme colorant d'oxydation. Des procédés de teinture utilisant des agents de teinture par oxydation, tels que les phénylènediamines et les aminophénols, sont fréquemment utilisés pour colorer les fibres de kératine, en particulier les cheveux humains et équivalents, avec comme avantages que 10 la teinture est possible dans diverses tonalités de couleur, dure longtemps et ne prend pas plus de temps, entre autres. Par ailleurs, des analogues indoliques sont également utilisés comme agent de teinture par oxydation pour colorer la kératine. Par exemple, le dérivé indolique 5,6-dihydroxyindole est un précurseur de mélanine et polymérise en présence d'oxygène pour former un pigment de mélanine. Il est possible de colorer les cheveux, et 15 équivalents, en utilisant cette réaction. Par exemple, les documents de brevet 1 et 2 décrivent des agents de teinture par oxydation à l'air utilisant des dérivés indoliques, tels que le 5,6-dihydroxyindole. Document de brevet 1 : JP 2007-326 809 A Document de brevet 2 : JP 2009-137 877 A 20 Document de brevet 3 : JP 2004-510 798 W Document de brevet 4 : brevet japonais No. 4 743 954. On peut considérer que les analogues indoliques, tels que le 5,6-dihydroxyindole, sont très sûrs par rapport aux agents de teinture par oxydation tels que les phénylènediamines et les aminophénols. Cependant, leur problème spécifique est que leur 25 effet colorant est faible. Par conséquent, la présente invention a pour objet de proposer un procédé de teinture exerçant un effet colorant élevé tout en assurant une sécurité élevée par l'utilisation d'un analogue indolique comme colorant d'oxydation, et un agent de teinture utilisée à cette fin. Les présents inventeurs se sont plus particulièrement intéressés à une bilirubine 30 oxydase (abrégée par « BO » dans la suite du présent document), qui est un type d'enzyme d'oxydation, et ont envisagé la possibilité de l'utiliser pour teindre les cheveux en utilisant un analogue indolique comme colorant d'oxydation. En conséquence, il a été trouvé que la BO procure un effet colorant élevé. En outre, les présents inventeurs ont réussi à identifier des BO dotées d'une efficacité extrêmement élevée (c'est-à-dire des BO donnant des effets colorants particulièrement élevés) en mettant en oeuvre des expériences comparatives au moyen de diverses BO. Les inventions présentées ci-dessous sont principalement basées sur ces efforts. Bien que le document de brevet 3 mentionné ci-dessus, qui décrit un 5 procédé de teinture de fibres de kératine, présente une BO en tant qu'enzyme d'oxydation et un analogue indolique en tant que colorant d'oxydation, il ne décrit pas spécifiquement le cas dans lequel ceux-ci sont utilisés en combinaison (par exemple, des données expérimentales), et on ne sait donc pas du tout si l'utilisation en combinaison de ceux-ci est ou non réellement efficace pour teindre les fibres de kératine. En outre, la littérature ne 10 mentionne pas du tout les BO spécifiques trouvées par les présents inventeurs. [1] Un agent de teinture pour teindre des fibres de kératine, comprenant une bilirubine oxydase (EC1.3.3.5) dérivée de Myrothecium verrucaria ou de Bacillus Subtilis. [2] L'agent de teinture selon [1], dans lequel la bilirubine oxydase est constituée d'une protéine décrite à l'un ou l'autre des points (1) à (9) suivants : 15 (1) une protéine constituée de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2 ; (2) une protéine constituée d'une séquence d'acides aminés dans laquelle un ou plusieurs acide(s) aminé(s) est/sont muté(s), supprimé(s) ou ajouté(s) dans la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2, qui possède une activité de bilirubine oxydase ; (3) une protéine qui est codée par le polynucléotide de SEQ ID NO : 1 ; 20 (4) une protéine constituée de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 4 ; (5) une protéine constituée d'une séquence d'acides aminés dans laquelle un ou plusieurs acide(s) aminé(s) est/sont muté(s), supprimé(s) ou ajouté(s) dans la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 4, qui possède une activité de bilirubine oxydase ; (6) une protéine qui est codée par le polynucléotide de SEQ ID NO : 3 ; 25 (7) une protéine constituée de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 6 ; (8) une protéine constituée d'une séquence d'acides aminés dans laquelle un ou plusieurs acide(s) aminé(s) est/sont muté(s), supprimé(s) ou ajouté(s) dans la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 6, qui possède une activité de bilirubine oxydase ; (9) une protéine qui est codée par le polynucléotide de SEQ ID NO : 5. 30 [3] L'agent de teinture selon [1] ou [2], dans lequel les fibres de kératine sont des cheveux humains. [4] L'agent de teinture selon l'un quelconque de [1] à [3], qui est une combinaison avec un agent de teinture par oxydation constituée d'un dérivé d'indole ou d'un dérivé d' indoline. [5] L'agent de teinture selon [4], dans lequel l'agent de teinture par oxydation est 5 un agent de teinture par oxydation choisi dans le groupe constitué du 5,6-dihydroxyindole, de la 5,6-dihydroxyindoline, de l'acide 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylique, de l'acide 5,6-dihydroxyindoline-2-carboxylique, du 4-aminoindole et du 5-aminoindole. [6] L'agent de teinture selon [4] ou [5], qui est une forme à un composant contenant l'agent de teinture par oxydation et la bilirubine oxydase. 10 [7]L'agent de teinture selon [4] ou [5], qui est un type d'agent de teinture à deux composants constitué d'un premier élément contenant l'agent de teinture par oxydation et d'un second élément contenant la bilirubine oxydase. [8] Un procédé de teinture, comprenant une étape de traitement de fibres de kératine avec l'agent de teinture selon l'un quelconque de [1] à [7]. 15 [9] Le procédé de teinture selon [8], dans lequel le traitement est réalisé à un pH de 7,0 à 8,0. La figure 1 présente les résultats des tests de teinture. A partir de la gauche, sont présentés les résultats de la teinture de cheveux pour la mèche de cheveux non traités (exemple 27 de test (colorant seulement)), l'exemple 28 de test (peroxyde d'hydrogène), 20 l'exemple 34 de test (BO-3) et l'exemple 31 de test (BOII). Les valeurs numériques suivantes présentent chacune un degré de coloration des cheveux (AE*ab). 1. Agent de teinture Le premier aspect de la présente invention concerne un agent de teinture qui est 25 utilisé pour colorer des fibres de kératine (cheveux humains, poils ou équivalents de, par exemple, vaches, chevaux, moutons, chèvres, alpagas et lapins angora). L'agent de teinture de la présente invention contient une bilirubine oxydase (BO) (EC1.3.3.5), qui est une enzyme d'oxydation. L'agent de teinture de la présente invention agit sur un colorant d'oxydation pour exercer un effet colorant souhaité. Par conséquent, l'agent de teinture de 30 la présente invention est traditionnellement utilisé en combinaison avec un colorant d'oxydation. Dans le présent mémoire, l'expression « utilisé en combinaison » ou « est une combinaison avec » indique que le colorant d'oxydation et la BO sont utilisés en combinaison. Dans un exemple de mode de réalisation, l'agent de teinture de la présente invention se présente sous la forme d'une composition dans laquelle le colorant d'oxydation et la BO sont mélangés. L'agent de teinture de ce mode de réalisation est appelé agent de teinture à un composant. Par ailleurs, il est également possible de fournir l'agent de teinture de la présente invention sous la forme d'un kit comprenant un premier élément contenant le colorant d'oxydation et un second élément contenant la BO. L'agent de teinture de ce mode de réalisation est appelé agent de teinture à deux composants. Dans le cas de l'agent de teinture à deux composants, les éléments respectifs sont conditionnés dans des récipients ou compartiments séparés, et les deux éléments sont mélangés pour être utilisés. On peut dire que l'agent de teinture à un composant est supérieur à l'agent de teinture à deux composants, en ce qu'il est de constitution simple et qu'il peut faciliter l'utilisation. Dans le présent mémoire, l'expression « colorant d'oxydation » fait référence à un colorant qui nécessite une réaction d'oxydation pour le développement d'une couleur ou la teinture. Le colorant d'oxydation comprend « un précurseur de colorant » qui développe 15 une couleur par la polymérisation du précurseur lui-même, et « un adjuvant colorant (coupleur) » qui présente une tonalité de couleur inhérente en étant polymérisé avec le précurseur de colorant. Dans la présente invention, un analogue indolique est utilisé comme colorant d'oxydation. Divers analogues indoliques peuvent être utilisés. De préférence, un colorant d'oxydation approprié est choisi parmi les composés appartenant à 20 la famille des dérivés d'indole ou des dérivés d'indoline, ou leurs sels (par exemple, un sel d'addition à un acide comprenant un chlorhydrate, un bromhydrate, un sulfate, un tartrate, un lactate ou un acétate, ou équivalents). Des exemples spécifiques de dérivés d'indole et de dérivés d'indoline sont la 5,6-dihydroxyindoline, la N-méthyl-5,6-dihydroxyindoline, la N-éthyl-5,6-dihydroxyindoline, la N-butyl-5,6-dihydroxyindoline, la 4-hydroxy-5- 25 méthoxyindoline, la 6-hydroxy-7-méthoxyindoline, la 6,7-dihydroxyindoline, la 4,5- dihydroxyindoline, la 4-méthoxy-6-hydroxyindoline, la N-hexyl-5,6-dihydroxyindoline, la 2-méthyl-5,6-dihydroxyindoline, la 3-méthyl-5,6-dihydroxyindoline, la 4-hydroxyindoline, la 2,3-diméthy1-5,6-dihydroxyindoline, la 2-méthy1-5-éthy1-6-hydroxyindoline, la 2-méthy1-5-hydroxy-6(3-hydroxyéthylindoline, la 4-hydroxypropylindoline, la 2-hydroxy- 30 3-méthoxyindoline, la 6-hydroxy-5-méthoxyindoline, la 6-hydroxyindoline, la 5-hydroxyindoline, la 7-hydroxyindoline, la 7-aminoindoline, la 5-aminoindoline, la 4-aminoindoline, l'acide 5,6-dihydroxyindoline-2-carboxylique, la 1-méthy1-5,6- dihydroxyindoline, le 4,5-dihydroxyindole, le 5,6-dihydroxyindole, le 6,7-dihydroxyindole, 5 le N-méthy1-5,6-dihydroxyindole, le N-éthyl-5,6-dihydroxyindole, le N-hexy1-5,6- dihydroxyindole, le 2-méthyl-5,6-dihydroxyindole, le 3-méthy1-5,6-dihydroxyindole, le 4-hydroxyindole, le 2,3-diméthyl-5,6-dihydroxyindole, le 2-méthyl-5-éthyl-6-hydroxyindole, le 2-méthy1-5-hydroxy-6(3-hydroxyéthylindole, le 4-hydroxypropylindole, le 2-hydroxy-3-méthoxyindole, le 4-hydroxy-5-méthoxyindole, le 6-hydroxy-7-méthoxyindole, le 6-hydroxy-5-méthoxyindole, le 6-hydroxyindole, le 5-hydroxyindole, le 7-hydroxyindole, le 7-aminoindole, le 6-aminoindole, le 5-aminoindole, le 4-aminoindole, l'acide 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylique et le 1-méthy1-5,6-dihydroxyindole. Dans un exemple préféré de mode de réalisation, un ou deux type(s) d'agents de teinture par oxydation choisis dans le groupe constitué du 5,6-dihydroxyindole, de la 5,6-dihydroxyindoline, de l'acide 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylique, de l'acide 5,6-dihydroxyindoline2-carboxylique, du 4-aminoindole et du 5-aminoindole est/sont utilisé(s). Un ou deux type(s) de colorants d'oxydation est/sont utilisé(s) pour l'agent de teinture de la présente invention. L'utilisation en combinaison de deux ou plus de deux colorants d'oxydation est efficace pour améliorer l'effet colorant, ajuster la couleur (tonalité de la couleur) et équivalents. Plus précisément, il est préférable d'utiliser en combinaison un colorant d'oxydation qui est classé parmi les précurseurs de colorant et un colorant d'oxydation qui est classé parmi les adjuvants colorants. La quantité d'incorporation du colorant d'oxydation n'est pas spécifiquement limitée, et la quantité d'incorporation peut être déterminée en prenant en compte la caractéristique du colorant d'oxydation utilisé, le résultat attendu et équivalents. Dans le cas de l'agent de teinture à un composant, le colorant d'oxydation peut être incorporé en une quantité, par exemple, de 0,01 % à 20 % en poids, de préférence de 0,05 % à 10 % en poids, de manière davantage préférée de 0,01 % à 1 % en poids, par rapport à la quantité totale de l'agent de teinture. Dans le cas de l'agent de teinture à deux composants, le colorant d'oxydation peut être incorporé en une quantité, par exemple, de 0,01 % à 20 % en poids, de préférence de 0,05 % à 10 % en poids, de manière davantage préférée de 0,01 % à 1 % en poids, par rapport à la quantité totale du premier élément dans lequel le colorant d'oxydation doit être contenu. Comme composant contribuant à la coloration, un colorant direct peut être incorporé en plus du colorant d'oxydation. En incorporant le colorant direct, l'effet colorant peut être amélioré et la tonalité de la couleur de la coloration peut être ajustée. Des exemples de colorants directs comprennent le 2-amino-4-nitrophénol, le 2-amino-5- nitrophénol, la 1-amino-4-méthylaminoanthraquinone, le chlorhydrate de nitro-pphénylènediamine, la 1,4-diaminoanthraquinone, la nitro-p-phénylènediamine, l'acide picramique, le picramate de sodium, le sulfate de 2-amino-5-nitrophénol, le résorcinol, le sulfate de nitro-p-phénylènediamine, le sulfate de p-nitro-o-phénylènediamine, le sulfate de p-nitro-m-phénylènediamine, l'orange naturel 6 (2-hydroxy-1,4-naphthoquinone), l'orange acide 8, le violet acide 17, le bleu brillant Remazol, le bleu Evans et le bleu acide 80. La quantité d'incorporation du colorant direct n'est également pas spécifiquement limitée. Dans le cas de l'agent de teinture à un composant, le colorant direct peut être 10 incorporé en une quantité, par exemple, de 0,01 % à 20 % en poids par rapport à la quantité totale de l'agent de teinture. Dans le cas de l'agent de teinture à deux composants, le colorant direct est incorporé dans le premier élément dans lequel le colorant d'oxydation doit être contenu et/ou dans le second élément dans lequel la BO doit être contenue. La quantité d'incorporation est dans ce cas, par exemple, de 0,01 % à 20 % en poids par 15 rapport à la quantité totale du premier élément ou, par exemple, de 0,01 % à 20 % en poids par rapport à la quantité totale du second élément. En outre, deux ou plus de deux types de colorants directs peuvent être utilisés en combinaison, de la même manière qu'avec les colorants d'oxydation. 20 (2) Enzyme Dans la présente invention, une enzyme d'oxydation BO est utilisée. Plus précisément, une BO dérivée de Myrothecium verrucaria ou une BO dérivée de Bacillus Subtilis est utilisée. En d'autres termes, la bactérie d'origine produisant la BO utilisée dans la présente invention est Myrothecium verrucaria ou Bacillus Subtilis. La bactérie 25 productrice peut être une souche sauvage (une souche séparée de la nature, qui n'a pas été soumise à une mutation ou à un traitement de modification, tel qu'une modification génétique) ou une souche mutante. Une BO qui est produite par un organisme transformé obtenu par l'introduction du gène de la BO de Myrothecium verrucaria dans un microorganisme hôte est un BO dérivé de Myrothecium verrucaria. La même chose s'applique à 30 la BO dérivée de Bacillus Subtilis. Comme précédemment mentionné, une BO qui est produite par une technique de recombinaison génétique (BO recombinante) peut également être utilisée. Des exemples spécifiques de bactéries productrices de BO utilisées dans la présente invention comprennent les souches Myrothecium verrucaria MT-1 (FERM-BP 653 (voir Agricultural and Biological Chemistry, Vol. 45, p. 2383-2384 (1981))), Myrothecium verrucaria IFO 6113, Myrothecium verrucaria IFO 6133, Myrothecium verrucaria IFO 6351, Myrothecium verrucaria IFO 9056 et Bacillus Subtilis ATCC 23857. Une préparation purifiée d'une bilirubine oxydase peut être obtenue par la culture en phase liquide ou solide de ces souches selon un procédé classique, et la mise en oeuvre d'une extraction, d'un relargage, d'une dialyse, d'un échange d'ions, d'une perméation sur gel ou équivalents à partir du liquide de culture. La séquence d'acides aminés de la BO dérivée de la souche Myrothecium verrucaria MT-1 est représentée par SEQ ID NO : 2 (pleine longueur, comprenant une séquence signal) et SEQ ID NO : 4 (pleine longueur, séquence signal non incluse). Dans un exemple de mode de réalisation de la présente invention, une BO constituée d'une protéine selon l'un quelconque des points (1) à (6) suivants est utilisée. Par ailleurs, la 15 séquence de SEQ ID NO : 1 est une séquence de gène codant la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2, et la séquence de SEQ ID NO : 3 est une séquence de gène codant la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 4. (1) Une protéine constituée de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2 ; (2) une protéine constituée d'une séquence d'acides aminés dans laquelle un ou 20 plusieurs acide(s) aminé(s) est/sont muté(s), supprimé(s) ou ajouté(s) dans la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2, qui possède une activité de bilirubine oxydase ; (3) une protéine qui est codée par le polynucléotide de SEQ ID NO : 1 ; (4) une protéine constituée de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 4 ; (5) une protéine constituée d'une séquence d'acides aminés dans laquelle un ou 25 plusieurs acide(s) aminé(s) est/sont muté(s), supprimé(s) ou ajouté(s) dans la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 4, qui possède une activité de bilirubine oxydase ; (6) une protéine qui est codée par le polynucléotide de SEQ ID NO : 3. La BO dérivée de la souche Bacillus Subtilis ATCC 23857 est un composant protéique du sporoderme et possède habituellement la séquence d'acides aminés de 30 SEQ ID NO : 6. Par conséquent, dans un exemple de mode de réalisation de la présente invention, une BO constituée d'une protéine selon l'un quelconque des points (7) à (9) suivants est utilisée. Par ailleurs, la séquence de SEQ ID NO : 5 est une séquence de gène codant la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 6. (7) Une protéine constituée de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 6 ; (8) une protéine constituée d'une séquence d'acides aminés dans laquelle un ou plusieurs acide(s) aminé(s) est/sont muté(s), supprimé(s) ou ajouté(s) dans la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 6, qui possède une activité de bilirubine oxydase ; (9) une protéine qui est codée par le polynucléotide de SEQ ID NO : 5. Pour une description détaillée de la BO dérivée de Bacillus Subtilis, on peut se référer au document de brevet 4 (brevet japonais No. 4 743 854). La BO dérivée de Myrothecium verrucaria est disponible dans le commerce auprès d'Amano Enzyme Inc., sous le nom de produit BO « Amano » 3, qui est abrégé par BO-3, et la BO dérivée de Bacillus Subtilis est disponible dans le commerce auprès d'Asahi Kasei Pharma Corporation sous le nom de produit bilirubine oxydase, qui est abrégé par BODII, respectivement, et ces BO disponibles dans le commerce peuvent également être utilisées dans la présente invention. (3) Autres composants En plus des composants respectifs mentionnés ci-dessus, d'autres composants (composants facultatifs) peuvent être contenus dans l'agent de teinture de la présente invention. Les composants facultatifs peuvent être, par exemple, des agents réducteurs tels que des composés alcalins, l'acide thiolactique, le sulfite de sodium et la N-acétyl-L- cystéine, des tensioactifs, des composants à base d'huile, des silicones, des agents épaississants, des solvants, l'eau, des agents de chélation, des acides aminés, divers sels, des agents hydratants, des agents antiseptiques, des agents anti-UV, des alcools, des alcools polyhydriques, des substances aromatisantes et équivalents. Un composé alcalin peut également être incorporé dans l'agent de teinture de la présente invention. Quand un agent de teinture contient un composé alcalin, le gonflement des fibres de kératine est amélioré lors de l'application de l'agent de teinture, ce qui améliore l'effet colorant. La quantité d'incorporation du composé alcalin est prédéfinie de façon qu'un pH souhaité (par exemple, pH de 7,0 à 10,0) soit atteint lors de l'utilisation. Un exemple de quantité d'incorporation de l'agent de teinture à un composant est de 0,01 % à 20 % en poids par rapport à la quantité totale de l'agent de teinture. Par ailleurs, dans le cas de l'agent de teinture à deux composants, le composé alcalin est en principe incorporé dans le premier élément dans lequel le colorant d'oxydation doit être incorporé, et la quantité d'incorporation est, par exemple, de 0,01 % à 20 % en poids par rapport à la quantité totale du premier élément (cependant, le composé alcalin peut être incorporé dans le second élément au lieu d'être incorporé dans le premier élément, ou le composé alcalin peut être incorporé à la fois dans le premier et le second élément). De plus, des exemples spécifiques de composés alcalins peuvent comprendre les composés aminés, tels que la monoéthanol-amine, la monoisopropanolamine, la triéthanolamine et la diéthanolamine, et les composés inorganiques, tels que l'ammoniaque, l'hydroxyde de sodium, l'hydroxyde de potassium, le carbonate d'ammonium, le carbonate de sodium, l'hydrogénocarbonate de sodium, le carbonate de potassium et l'hydrogénocarbonate de potassium. L'agent de teinture de la présente invention est préparé sous la forme d'une pâte (crème), d'un aérosol, d'un gel, d'un liquide et d'une mousse. Dans le cas de l'agent de teinture à deux composants constitué du premier élément (comprenant le colorant d'oxydation) et du second élément (comprenant la BO), la forme du premier élément n'est pas nécessairement identique à celle du second élément. 2. Procédé de teinture Le second aspect de la présente invention concerne un procédé de teinture utilisant l'agent de teinture de la présente invention. Dans le procédé de teinture de la présente invention, les fibres de kératine sont traitées avec l'agent de teinture de la présente invention en présence d'oxygène (c'est-à-dire, sous une atmosphère d'oxygène). Dans le cas de l'agent de teinture à un composant, par exemple, l'agent de teinture est dilué si nécessaire (la dilution n'est pas essentielle), puis appliqué sur les fibres de kératine (par exemple, des cheveux humains). En variante, les fibres de kératine sont immergées dans une solution dans laquelle l'agent de teinture est dissous. Dans le cas de l'agent de teinture à deux composants, par exemple, le premier 25 élément et le second élément sont mélangés (si nécessaire, ils peuvent être dilués ou dissous dans un solvant), puis appliqués sur les fibres de kératine. Il est également possible d'en appliquer un (le premier élément ou le second élément) sur les fibres de kératine, puis d'appliquer l'autre sur les fibres de kératine, de façon que les deux éléments soient mélangés sur les surfaces et équivalents des fibres de kératine. En variante, il est également 30 possible d'immerger les fibres de kératine dans une solution dans laquelle le premier élément et le second élément sont dissous. Grâce aux opérations mentionnées ci-dessus, l'agent de teinture est mis en contact avec les fibres de kératine. Ensuite, cet état de contact est maintenu pendant une durée nécessaire à l'obtention de la coloration souhaitée. A ce moment, une conservation de la chaleur ou un chauffage est également possible pour renforcer l'effet colorant ou pour effectuer une teinture rapide ou efficace. Dans le cas où les fibres de kératine sont des cheveux humains, par exemple dans le cas où les cheveux humains sont colorés selon le procédé de teinture de la présente invention, le contact est maintenu pendant environ 10 minutes à 2 heures, de préférence pendant environ 20 minutes à 1 heure. Le pH pendant le traitement dépend de l'agent de teinture utilisé. Cependant, il est également possible d'ajuster le pH en utilisant séparément un agent d'ajustement du pH. Par exemple, le pH pendant le traitement est de 7,0 à 9,0. Comme on le verra dans les exemples suivants, dans le cas où la BO est utilisée, un effet colorant puissant est obtenu même à un pH relativement bas. Sur la base de cette découverte, dans un exemple de mode de réalisation de la présente invention, le traitement est mené à un pH de 7,0 à 8,0. En adoptant cette condition de pH, l'endommagement d'une matière à teindre selon la teinture peut être diminué Cette condition est particulièrement efficace pour colorer les cheveux humains, et il devient possible de diminuer l'endommagement des cheveux humains et la stimulation de la peau (cuir chevelu). Après le traitement mentionné ci-dessus, les fibres de kératine sont généralement lavées et finalement séchées. Par exemple, de l'eau, un détergent ou équivalents peut être utilisé pour le lavage. Comme exemples de moyens utilisés pour le séchage, on peut mentionner le séchage à l'air (séchage naturel), le séchage à l'air chaud, le séchage rotatif, le séchage par aspiration, le séchage au tonneau et équivalents. Dans le procédé de teinture de la présente invention, l'oxydation et la polymérisation du colorant d'oxydation sont provoquées par l'action de la BO, pour ainsi colorer les fibres de kératine. Dans la présente invention, puisqu'une enzyme est utilisée pour la réaction d'oxydation, l'endommagement de la matière à teindre associé au traitement de teinture est minime. En outre, l'éventualité d'observer des effets indésirables (réponse allergique) sur le cuir chevelu et équivalents est diminuée dans le cas d'une application sur les cheveux. L'agent de teinture de la présente invention permet d'effectuer une teinture efficace tout en diminuant l'endommagement des fibres de kératine et 30 équivalents. Exemples L'effet colorant de chaque enzyme dans le cas de l'utilisation d'un analogue indolique comme colorant a été étudié. 1. Procédé (1) Enzymes utilisées Une BO dérivée de Myrothecium verrucaria (Amano Enzyme Inc., nom de produit : BO « Amano » 3, abréviation : BO-3). Une BO dérivée de Bacillus Subtilis (Asahi Kasei Pharma Corporation, nom de produit : bilirubine oxydase, abréviation : BODII, code produit : T-188). Une BO dérivée de Trachyderma tsunodae (Takara Bio Inc., nom de produit : bilirubine oxydase « TAKARA »). Une laccase dérivée de Trametes sp. (Daiwa Fine Chemicals Co., Ltd.). Une laccase dérivée de Rhus vernificerea (Sigma-Aldrich). (2) Préparation de la base de colorant capillaire 2 % d'EMALEX HC-20 (Nihon-Emulsion Co., Ltd.), 1 % d'acide lactique et des agents de teinture par oxydation (5,6-dihydroxyindole, 4-aminoindole et 5-aminoindole) ont été dissous en des quantités prédéterminées respectives dans de l'eau distillée, et le pH a été ajusté à un niveau prédéterminé au moyen de monoéthanolamine. Ensuite, 1,5 % d'hydroxyéthylcellulose a été ajouté, le mélange a été poursuivi et de l'eau distillée a été ajoutée de façon que le poids final puisse être de 80 %. Ensuite, une enzyme ou du peroxyde d'hydrogène a été ajouté pour que le poids soit de 100 % à la fin. (3) Test de coloration capillaire 2 g de la base de colorant capillaire ont été appliqués par mèche de cheveux blancs humains (10 cm, 1 g, fabriquée par Beaulax) (effectué à n = 3). Une réaction a été réalisée à 30 °C pendant 30 minutes (la mèche a été retournée à la moitié du temps après 15 minutes). La mèche a été lavée avec de l'eau puis avec 1 % de SDS, et un lavage avec de l'eau a été réalisé jusqu'à ce que la couleur disparaisse. Finalement, la mèche a été séchée à l'air pendant une nuit. 20 (4) Evaluation de la teinte Au moyen d'un spectromètre CM-700d (fabriqué par Konica Minolta Optics, Inc.), une mesure a été réalisée selon un champ de vision de 10°, une lumière du jour D65 et en mode SCE. Au moyen du système CIEL*a*b, une évaluation a été réalisée sur la base de la 5 différence de couleur par rapport à des cheveux blancs non traités (AE*ab). L* représente une valeur de luminosité. La valeur est comprise dans la plage allant de 0 à 100, et une valeur élevée indique une luminance élevée. De plus, a* indique une couleur. La valeur est comprise dans la plage allant -60 à + 60, une valeur plus proche du - indiquant un vert plus intense et une valeur plus proche du + indiquant un rouge plus intense. b* indique une 10 couleur. La valeur est comprise dans la plage allant -60 à + 60, une valeur plus proche du - indiquant un bleu plus intense et une valeur plus proche du + indiquant un jaune plus intense. AE*ab est une valeur calculée par [(AL)2 + (Aa)2 + (Ab)2]1/2, et est une unité qui est généralement utilisée pour évaluer la couleur des cheveux. AE*ab est calculé par la différence entre les valeurs de critère (les valeurs mesurées des cheveux blancs avant 15 teinture) et les valeurs de L*, a* et b*. La relation entre le degré de différence de couleur et AE*ab est présentée dans le tableau 1. Tableau 1 Remarques critiques sur le degré de différence de couleur AE*ab Différence très légère 0 - 0,5 Différence légère 0,5 - 1,5 Différence jusqu'à un degré détectable 1,5 - 3,0 Différence importante 3,0 - 6,0 Différence très importante 6,0 - 12,0 Devient un autre système de couleur 12,0 ou plus 2. Résultats (1) Test 1 de coloration capillaire (le 5,6-dihydroxyindole a été utilisé (0,3 % en poids). La teinture a été réalisée à un pH de 7,0). Les résultats du test 1 de coloration capillaire sont présentés dans le tableau 2. 25 Tableau 2 Exemples de test 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 5,6-dihydroxyind ole 0,3 EMALEX HC20 2 Acide lactique 1 Carboxyéthylcell alose 1,5 BOD II (Asahi Kasei Pharma) - - 0,02 0,10 0,20 - - - - - - - - - - - - B0-3 (Amano Enzyme) - - - - - 0,01 0,05 0,10 - - - - - - - - - BO (Takara Bio) - - - - - - - - 0,01 0,04 0,09 - - - - - - Laccase (Daiwa Fine Chemicals Co., Ltd.) - - - - - - - - - - - 0,003 0,006 0,031 - - - Laccase (Sigma) - - - - - - - - - - - - - - 0,003 0,006 0,031 H202 3 - - - - Monoéthanolami ne Ajusté à pH 7 Eau purifiée Ajuste à 100 g Propriété de teinture des cheveux AE*ab (N = 3 ; valeur moyenne) 5,3 12,5 33,2 28,7 25,2 13,5 18,1 17,7 11,5 10,2 9,0 6,3 6,5 7,2 7,7 6,5 10,8 Comme on peut le voir dans le tableau 2, les exemples de test 3 à 5 dans lesquels BODII (Asahi Kasei Pharma Corporation) a été utilisée et les exemples de test 6 à 8 dans lesquels BO-3 (Amano Enzyme Inc.) a été utilisée présentent de meilleures propriétés de teinture des cheveux que celles obtenues dans les exemples de test 1 et 2. Il a ainsi été trouvé que la BO dérivée de Myrothecium verrucaria et la BO dérivée de Bacillus Subtilis donnent un meilleur effet colorant que le peroxyde d'hydrogène. Par ailleurs, les exemples de test 9 à 17 dans lesquels d'autres enzymes ont été utilisées présentent des effets colorants des cheveux inférieurs à l'effet colorant des cheveux obtenu avec le peroxyde d'hydrogène. (2) Test 2 de coloration capillaire (le 5,6-dihydroxyindole a été utilisé (0,3 % en poids). La teinture a été réalisée à un pH de 9,0). Les effets colorants dans les cas où la teinture a été réalisée en condition alcaline (pH 9,0) ont été comparés. Les résultats sont présentés dans le tableau 3. Tableau 3 Exemples de test 18 19 20 21 22 23 24 25 5,6-dihydroxyindole 0,3 EMALEX HC-20 2 Acide lactique 1 Carboxyéthylcellulose 1,5 BOD II (Asahi Kasei Pharma) - - 0,02 0,10 0,20 - - - BO-3 (Amano Enzyme) - - - - - 0,01 0,05 0,10 H202 Monoéthanolamine Ajusté à pH 7 Eau purifiée Ajusté à 100 g Propriété de teinture des cheveux AE*ab (N - 3 ; valeur moyenne) 9,2 16,3 29,6 26,6 24,5 11,9 14,6 13,4 Si l'on compare le tableau 2 et le tableau 3, on peut observer qu'un meilleur effet colorant des cheveux peut être obtenu quand la teinture des cheveux est réalisée à un pH de 20 7 plutôt qu'un pH de 9 dans le cas où BODII ou BO-3 est utilisée. En outre, la différence entre la propriété de coloration des cheveux du peroxyde d'hydrogène et la propriété de coloration des cheveux de la BO devient plus importante à un pH de 7. A partir de ces résultats, on peut dire que la teinture de cheveux dans des conditions plus douces pour les cheveux est possible au moyen de la BO. (3) Test 3 de coloration capillaire (le 5,6-dihydroxyindole a été utilisé (1,0 % en poids). La teinture a été réalisée à un pH de 9,0). Les effets colorants dans les cas où la concentration de l'agent de teinture par oxydation (5,6-dihydroxyindole) a été augmentée (incorporé à 1,0 % en poids par rapport à la totalité de la base de teinture) ont été comparés. Les résultats sont présentés dans le 10 tableau 4 et sur la figure 1. Tableau 4 Exemples de test 26 27 28 29 30 31 32 33 5,6-dihydroxyindole 1 EMALEX HC-20 2 Acide lactique 1 Carboxyéthylcellulose 1,5 BOD II (Asahi Kasei Pharma) - - 0,02 0,10 0,20 - - - BO-3 (Amano Enzyme) - - 0,01 0,05 0,10 H202 - 3 - - - - - - Monoéthanolamine Ajusté à pH 7 Eau purifiée Ajusté à 100 g Propriété de teinture des cheveux AE*ab (N = 3 ; valeur moyenne) 13,8 17,7 37,4 40,3 37,1 18,7 29,3 31,7 15 Si l'on compare les exemples de tests 3 à 5 du tableau 1 et les exemples de test 28 à 30 du tableau 4 et si l'on compare les exemples de test 6 à 8 du tableau 1 et les exemples de test 31 à 33 du tableau 4, on peut observer que l'effet colorant des cheveux est amélioré par l'augmentation de la quantité ajoutée de 5,6-dihydroxyindole. (4) Test 4 de coloration capillaire (d'autres dérivées indoliques ont été utilisés. La 20 teinture a été réalisée à un pH de 7,0). Les effets colorants dans le cas où le 4-aminoindole et le 5-aminoindole ont été utilisés respectivement comme agent de teinture par oxydation ont été étudiés. Les résultats sont présentés dans le tableau 5. Tableau 5 Exemples de test 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 I 47 4-aminoindole 0,5 5-aminoindole 0,5 EMALEX HC-20 2 Acide lactique 1 Carboxyéthylcellulose 1,5 BOD II (Asahi Kasei Pharma) _ _ 0,02 0,10 0,20 - - - - - - - - - B0-3 (Amano Enzyme) - - - - - 0,01 0,05 0,10 Laccase (Daiwa Fine Chemicals Co., Ltd.) 0,003 0,006 0,031 Laccase (Sigma) 0,003 0,006 0,031 H202 - 3 - - - - - - - - - - - - Monoéthanolamine Ajusté à pH 7 Eau purifiée Ajusté à 100 g Propriété de teinture des cheveux AE*ab (N = 3 ; valeur moyenne) 6,4 31,1 33,4 39,9 38,9 21,9 26,6 31,5 6,5 5,9 5,6 5,7 4,8 5,8 Dans les cas où le 4-aminoindole et le 5-aminoindole ont été utilisés, la BODII et la BO-3 (exemples de test 36 à 41) présentent des propriétés de coloration équivalentes à celle du peroxyde d'hydrogène (exemple de test 35). Par ailleurs, aucun effet colorant des cheveux n'a été observé avec les autres enzymes (exemples de test de 42 à 47). 3. Conclusion Des colorants possédant des propriétés allergènes élevées sur la peau (p-phénylènediamine et équivalents) sont actuellement utilisés dans de nombreux agent de teinture. En outre, puisque du peroxyde d'hydrogène est généralement utilisé pour oxyder (développement de la couleur) les colorants et que les agents de coloration capillaire sont généralement utilisés en conditions alcaline (traditionnellement à un pH de 9 à 10), les cheveux, le cuir chevelu et équivalents sont facilement endommagés lors d'une teinture des cheveux. Grâce à l'étude présentée ci-dessus, il a été trouvé que des BO sont efficaces pour effectuer une teinture au moyen d'un dérivé indolique à faible propriété allergène, et un effet colorant excellent peut être obtenu sans peroxyde d'hydrogène. En outre, il a été trouvé que la BO dérivée de Myrothecium verrucaria et la BO dérivée de Bacillus Subtilis donnent des effets colorants particulièrement excellents. Par ailleurs, il a également été trouvé que la BO dérivée de Myrothecium verrucaria et/ou la BO dérivée de Bacillus Subtilis agissent parfaitement bien sur le dérivé indolique en condition douce (pH 7). Ceci indique que ces BO permettent de teindre les cheveux dans des conditions qui endommagent beaucoup moins les cheveux, le cuir chevelu et équivalents, en d'autres termes l'utilisation des BO est extrêmement avantageuse dans un usage pratique. L'agent de teinture de la présente invention est utilisé pour teindre les fibres de kératine. Plus précisément, la présente invention est efficace pour la coloration des 25 cheveux. Bien entendu, l'invention n'est pas limitée aux exemples de réalisation ci-dessus décrits et représentés, à partir desquels on pourra prévoir d'autres modes et d'autres formes de réalisation, sans pour autant sortir du cadre de l'invention. Le contenu intégral des articles, des publications de brevet, des brevets et équivalents qui sont clairement indiqués 30 dans le présent mémoire est incorporé à la présente à titre de référence. REVENDICATIONS1. Agent de teinture pour teindre des fibres de kératine, comprenant une bilirubine oxydase (EC1.3.3.5) dérivée de Myrothecium verrucaria ou de Bacillus Subtilis. 2. Agent de teinture selon la revendication 1, dans lequel la bilirubine oxydase est 5 constituée d'une protéine décrite à l'un ou l'autre des points (1) à (9) suivants : (1) une protéine constituée de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2 ; (2) une protéine constituée d'une séquence d'acides aminés dans laquelle un ou plusieurs acide(s) aminé(s) est/sont muté(s), supprimé(s) ou ajouté(s) dans la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 2, qui possède une activité de bilirubine oxydase ; 10 (3) une protéine qui est codée par le polynucléotide de SEQ ID NO : 1 ; (4) une protéine constituée de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 4 ; (5) une protéine constituée d'une séquence d'acides aminés dans laquelle un ou plusieurs acide(s) aminé(s) est/sont muté(s), supprimé(s) ou ajouté(s) dans la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 4, qui possède une activité de bilirubine oxydase ; 15 (6) une protéine qui est codée par le polynucléotide de SEQ ID NO : 3 ; (7) une protéine constituée de la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 6 ; (8) une protéine constituée d'une séquence d'acides aminés dans laquelle un ou plusieurs acide(s) aminé(s) est/sont muté(s), supprimé(s) ou ajouté(s) dans la séquence d'acides aminés de SEQ ID NO : 6, qui possède une activité de bilirubine oxydase ; 20 (9) une protéine qui est codée par le polynucléotide de SEQ ID NO : 5. 3. Agent de teinture selon la revendication 1 ou 2, dans lequel les fibres de kératine sont des cheveux humains. 25 4. Agent de teinture selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, qui est une combinaison avec un agent de teinture par oxydation constituée d'un dérivé d'indole ou d'un dérivé d' indoline. 5. Agent de teinture selon la revendication 4, dans lequel l'agent de teinture par oxydation 30 est un agent de teinture par oxydation choisi dans le groupe constitué du 5,6-dihydroxy-indole, de la 5,6-dihydroxyindoline, de l'acide 5,6-dihydroxyindole-2-carboxylique, de l'acide 5,6-dihydroxyindoline-2-carboxylique, du 4-aminoindole et du 5-aminoindole. 6. Agent de teinture selon la revendication 4 ou 5, qui est une forme à un composant 5 contenant l'agent de teinture par oxydation et la bilirubine oxydase. 7. Agent de teinture selon la revendication 4 ou 5, qui est un type d'agent de teinture à deux composants constitué d'un premier élément contenant l'agent de teinture par oxydation et d'un second élément contenant la bilirubine oxydase. 10 8. Procédé de teinture, comprenant une étape de traitement de fibres de kératine avec l'agent de teinture selon l'une quelconque des revendications 1 à 7. 9. Procédé de teinture selon la revendication 8, dans lequel le traitement est réalisé à un pH 15 de 7,0 à 8,0.