Brevet FR2998177A1 — publié le 20140523

UTILISATION D'UN EXTRAIT DE LEVURE POUR APAISER LA MUQUEUSE BUCCALE La présente invention se situe dans le domaine cosmétique, et plus particulièrement dans le domaine des soins cosmétiques et de l'hygiène de la cavité buccale. La présente invention concerne l'utilisation d'un extrait de levure pour protéger la muqueuse buccale des 10 dommages causés par des agressions extérieures mécaniques et/ou chimiques. La présente invention concerne également l'utilisation d'un extrait de levure pour apaiser, protéger l'intégrité et la fonction barrière physique de la muqueuse buccale. L'invention est également relative à l'utilisation dans une composition, d'un extrait de levure, en tant qu'agent actif activateur de l'expression des kératines 76, des lipides 15 intracellulaires et des molécules des jonctions adhérentes intercellulaires. Par la suite de la description on utilise indifféremment les termes « muqueuse buccale » et « muqueuse orale » pour se référer à l'épithélium de recouvrement de la cavité buccale. Les termes « cavité buccale » ou « cavité orale » selon l'invention englobent l'ensemble de la muqueuse orale, des glandes salivaires associées et des annexes kératiniques présentes 20 dans la cavité buccale, en particulier les dents, les gencives, la langue, et le palais. Toute la cavité buccale est revêtue d'une membrane muqueuse protectrice, la muqueuse buccale, qui contient de nombreux récepteurs sensoriels, notamment les récepteurs du goût de la langue. L'épithélium de la muqueuse buccale est de type pavimenteux stratifié (muqueuse buccale et de l'oesophage) et tend à se kératiniser au niveau des points de friction 25 importante (tissu gingival et palatin). L'épithélium buccal repose sur un tissu collagène dense appelé chorion relié aux muscles sous jacents par un tissu de soutien sous muqueux, dans lequel se trouvent de nombreuses glandes salivaires accessoires, séreuses et muqueuses. La fonction première de la muqueuse buccale est de constituer une barrière entre 30 l'environnement extérieur et le milieu intérieur pour protéger les tissus des dommages mécaniques, de la pénétration des microorganismes et des matériaux toxiques. C'est la couche la plus externe de l'épithélium de la muqueuse orale qui assure cette fonction grâce à deux types de barrières: une barrière physique constituée par la muqueuse buccale, elle-même assurée grâce à la forte cohésion intercellulaire (desmosomes, jonctions adhérentes), et une barrière chimique formée par les sécrétions de la peau (salive) qui permet de lutter contre les allergènes et les irritants et possède un rôle antibactérien. La barrière physique, est assurée par les acteurs protéiques, lipidiques et les interactions intercellulaires qui permettent de maintenir l'intégrité cellulaire de l'épithélium de la muqueuse buccale lors d'agressions extérieures mécaniques ou chimiques. Les kératines sont une famille de protéines présentes dans tous les épithéliums, qui forment les filaments intermédiaires et sont impliquées dans le maintien de l'intégrité cellulaire. Les profils d'expression des kératines dans les épithéliums stratifiés sont corrélés au programme de différenciation cellulaire. La kératine K76 est une kératine suprabasale qui apparait être spécifique à la muqueuse orale et gingivale (Bragulla et al. 2009). Les lipides intracellulaires, notamment les phospholipides, les sphingolipides, les acides gras et le cholestérol, sont des composants essentiels des membranes cellulaires et de la couche cornée des portions kératinsées de l'épithélium buccal et ils sont de ce fait également des composantes essentielles pour le maintien de l'intégrité des cellules. Les jonctions intercellulaires spécialisées participent aussi au maintien de l'intégrité de la barrière épithéliale. Les jonctions adhérentes sont des jonctions d'ancrage qui constituent des ceintures d'adhérence. Ce sont les composantes les plus apicales des jonctions épithéliales complexes et sont cruciales pour la formation et la cohésion des barrières épithéliales. Elles réunissent entre elles des cellules épithéliales adjacentes. Les jonctions adhérentes comprennent au moins quatre types de protéines transmembranaires : les Occludines, les Claudines, les molécules d'adhésion jonctionnelle et les Crumb (ou « Crb »). L'expression de la claudine- 1 est pertubée dans différentes conditions de stress de la muqueuse buccale. La Claudine-1 est indispensable au maintien de l'intégrité de la barrière de l'épithélium gingival (Fujita et al., 2012). On entend par l'expression « agressions extérieures », les agressions que peut produire l'environnement de type physique et/ou mécanique. A titre d'exemple, on peut citer des agressions causées par exemple par des produits chimiques tels que le tabac, l'alcool, ou encore les produits à caractère irritant tels que les tensioactifs, les conservateurs ou les solvants, ou des agressions mécaniques, telles que les abrasions, le brossage. Ces agressions extérieures aboutissent à une altération de la fonction barrière qui se traduit par un inconfort cutané au niveau de la muqueuse orale, des phénomènes sensoriels désagréables, tels que des tiraillements ou des démangeaisons, voire des saignements, des fragilités excessives et des rougeurs. Une bonne hygiène buccale permet d'éliminer les résidus alimentaires, les microorganismes et les composés irritants et inflammatoires de la muqueuse. Toutefois, de nombreux produits mis au point pour les soins et l'hygiène de la bouche et des dents, par exemple des dentifrices et des bains de bouche, contiennent des substances abrasives et des détergents. L'inconvénient de ces produits chimiques, par exemple du Sodium Lauryl Sulphate (SLS) ou de l'éthanol, est qu'ils produisent des irritations de la muqueuse buccale et altèrent ainsi la fonction barrière mécanique de l'épithélium buccal allant jusqu'à causer des ulcères (Moore et al., 2008 ; F. Koschier et al., 2011). Dans ce contexte, il est souhaitable de chercher à prévenir l'altération ou à rétablir la fonction barrière physique de la muqueuse buccale. La présente invention a pour objectif de résoudre tout ou partie des inconvénients cités précédemment. Les inventeurs ont mis en évidence une activité protectrice de la fonction barrière physique de la muqueuse buccale, d'un extrait de levure, décrit dans la présente invention. Il a notamment été mis en évidence que cet extrait de levure, a une forte activité protectrice spécifique de la muqueuse buccale vis-à-vis des dommages causés par des stress de type chimique ou mécanique. Cette nouvelle utilisation cosmétique de l'extrait de levures selon l'invention, pour augmenter le taux d'expression de composés intracellulaires essentiels au maintien de la barrière physique et de l'intégrité des cellules de la muqueuse orale permet ainsi d'ouvrir de nouvelles perspectives cosmétiques pour l'apaisement de la muqueuse buccale. Selon un premier aspect, la présente invention concerne l'utilisation d'un extrait de levure pour protéger la muqueuse buccale des dommages causés par des agressions extérieures chimiques et/ou mécaniques. L'invention et les avantages qui en découlent seront mieux compris à la lecture de la description. L'invention s'adresse aux mammifères en général, et plus particulièrement, aux êtres humains. Selon des caractéristiques particulières, l'invention concerne l'utilisation d'un extrait de levure pour protéger la fonction barrière physique de la muqueuse buccale. On entend par « renforcer la fonction barrière physique », que l'application sur la muqueuse saine d'un extrait de levure ou d'une composition cosmétique le comprenant permet d'augmenter le taux d'expression cellulaire des kératines 76, des lipides et des claudines-1. L'extrait de levure a une action localisée au niveau de l'épithélium buccal et il permet de calmer les irritations de la muqueuse buccale provoquées par des stress de type mécaniques et/ou chimiques ou encore les inconforts. Selon des caractéristiques particulières, l'invention concerne l'utilisation d'un extrait de levure pour apaiser la muqueuse buccale. Selon des caractéristiques particulières, l'invention concerne l'utilisation d'un extrait de levure pour maintenir l'intégrité et la morphologie des cellules de la muqueuse buccale. Selon des caractéristiques particulières, l'invention concerne l'utilisation d'un extrait de levure pour stimuler l'expression de kératine, des lipides intracellulaires et des molécules des jonctions serrées intercellulaires. De manière préférée, l'invention concerne l'utilisation d'un extrait de levure pour augmenter le taux d'expression cellulaire des kératines 76 et/ou des lipides intracellulaires et/ou des Claudines-1 intercellulaires. Avantageusement l'extrait de levure selon l'invention permet de stimuler la production de kératine, des lipides intracellulaires et des molécules des jonctions adhérentes intercellulaires par les cellules de la muqueuse buccale, sans provoquer de réaction toxique ou allergique. Le terme "extrait" désigne toute substance isolée, obtenue à partir de la matière première que constituent les levures. L'agent actif peut se définir comme étant une molécule ou un ensemble de molécules susceptibles d'apporter des modifications ou des modulations au fonctionnement d'un système biologique. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, l'extrait de levures est un extrait de levures du genre Kluyveromyces et/ou du genre Saccharomyces. Bien entendu l'hydrolysat peut être préparé à partir de levures d'au moins l'une quelconque des nombreuses variétés et espèces appartenant au genre Saccharomyces et/ou d'au moins l'une quelconque des nombreuses variétés et espèces appartenant au genre Kluyveromyces. Selon un mode de réalisation préférée, ledit agent actif provient de l'hydrolyse de protéines de levure choisies parmi l'espèce Saccharomyces cerevisiae, l'espèce Kluyveromyces lactis et/ou l'espèce Kluyveromyces marxianus. Toute méthode d'extraction ou de purification connue de l'homme du métier peut être utilisée afin de préparer l'extrait de levure selon l'invention. Préférentiellement, l'extrait de levure est obtenu par un procédé qui comprend : - une étape d'extraction des protéines d'origine végétale, - une étape d'hydrolyse contrôlée qui libère des composés peptidiques biologiquement actifs. De très nombreuses protéines de levure sont susceptibles de contenir des peptides bioactifs au sein de leur structure. L'hydrolyse ménagée permet de dégager ces composés de nature peptidique. Il est possible, mais non nécessaire pour réaliser l'invention, d'extraire soit les protéines concernées d'abord et de les hydrolyser ensuite, soit d'effectuer l'hydrolyse d'abord sur un extrait brut et de purifier les composés de nature peptidique ensuite. Selon une méthode de réalisation de l'invention actuellement préférée, l'hydrolysat de levure est un extrait aqueux. Par extrait aqueux, on entend tout ensemble de composés solubles dans l'eau ou dans tout solvant constitué totalement ou partiellement d'eau. Les extraits selon l'invention sont notamment des extraits aqueux purifiés. On peut en particulier citer des solvants aqueux. Par solvant aqueux, on entend tout solvant constitué totalement ou partiellement d'eau. On peut citer l'eau elle-même, le glycérol, les solvants hydroalcooliques en toutes proportions ou encore les solvants constitués d'eau et d'un composé comme le propylène glycol ou le butylène glycol en toutes proportions. Cet hydrolysat peut être obtenu par dissolution dans l'eau, l'alcool ou l'éther, puis par concentration de cette solution en faisant intervenir l'évaporation ou la distillation. Toute méthode d'extraction ou de purification connue de l'homme du métier peut être utilisée pour préparer l'hydrolysat selon l'invention. Un mode particulier de mise en oeuvre du procédé d'obtention de l'extrait de levure selon l'invention est décrit ci-dessous. Dans une première étape, les levures sont mises en culture de manière classique dans un milieu adapté à leur développement, de préférence en présence de lactose. Elles sont récoltées par centrifugation puis mises en suspension dans une solution tampon, préférentiellement un tampon phosphate. Dans une seconde étape, ces cellules sont éclatées à l'aide d'une presse de french ou à l'aide d'un broyeur à bille, la majorité des composants membranaires insolubles étant écartés par centrifugation ou par filtration. Le lysat de levures est mis en suspension dans une solution alcaline contenant un produit adsorbant de type polyvinylpolypyrrolidone (PVPP) insoluble (0,01 -20 %) ; en effet il a été observé que les opérations d'hydrolyses et de purifications ultérieures étaient facilitées par ce moyen. La fraction soluble, contenant les protéines, les glucides et éventuellement des lipides, est recueillie après des étapes de centrifugation et de filtration. Cette solution brute constituant alors une première forme de l'extrait. Ce filtrat peut être alors recueilli et remis en solution. Une fraction, riche en composés de nature peptidique, peut alors être isolée par précipitation en milieu alcoolique ou par une solution saline. Le précipité est ensuite lavé à l'aide d'un solvant organique tel que, par exemple, l'éthanol ou le butanol puis le solvant est évaporé par séchage sous vide. Les composants solubles et les acides nucléiques sont ainsi écartés. Le précipité riche en protéines est remis en solution dans l'eau ou un autre solvant et constitue alors une forme plus purifiée de l'hydrolysat. La fraction soluble, comprenant les protéines, des glucides et éventuellement des lipides, est recueillie après des étapes de centrifugation et de filtration. Cette solution brute est ensuite hydrolysée dans des conditions ménagées pour générer des composés peptidiques, des polypeptides et des peptides solubles. L'hydrolyse se définit comme étant une réaction chimique impliquant le clivage d'une molécule par de l'eau, cette réaction pouvant se faire en milieu neutre, acide ou basique. Selon l'invention, l'hydrolyse est réalisée par voie chimique et/ou de façon avantageuse par des enzymes protéolytiques. Selon des caractéristiques particulières, l'hydrolyse est réalisée par des protéases végétales ou issues de biotechnologie en particulier la bromélaine, l'alcalase, la flavourzym. Avantageusement les enzymes protéolytiques permettent une meilleure des protéines et facilite la filtration. L'hydrolyse conduit alors à l'obtention de polypeptides de faibles poids moléculaires inférieurs à 5 kDa et plus particulièrement une fraction importante inférieure à 2,5 kDa. Une fois ces différentes hydrolyses effectuées, une étape de désactivation thermique est nécessaire pour inactiver ces enzymes. Après filtration, la solution obtenue constitue une première forme avantageuse d'extrait peptidique de levure selon l'invention. L'extrait peptidique de levure peut être encore purifié afin de sélectionner les poids moléculaires et la nature des peptides générés. La purification s'effectue avantageusement par des étapes d'ultrafiltrations successives à travers des filtres de porosité décroissante, en conservant les filtrats à chaque étape et/ ou par une méthode de type chromatographique, afin d'enrichir spécifiquement l'hydrolysat en peptides bioactifs. Selon un autre mode de réalisation de l'hydrolysat de levure selon l'invention, l'étape d'hydrolyse peut être réalisée directement sur les levures récoltées après centrifugation ou sur les fractions obtenues après éclatement cellulaire. Des étapes de filtrations et de stérilisation sont par la suite réalisées. L'utilisation d'extraits peptidiques, et en particulier d'extraits peptidiques de bas poids moléculaires, présente de nombreux avantages en cosmétique. Outre le fait de générer des composés peptidiques qui ne préexistaient pas dans le mélange protéique de départ, l'hydrolyse et la purification permettent d'obtenir un mélange de composés peptidiques plus stables, de composition plus facilement reproductible et ne provoquant pas de réactions allergiques en cosmétique. Selon des caractéristiques particulières, l'extrait de levure selon l'invention comprend essentiellement des composés peptidiques de bas poids moléculaires. Préférentiellement, l'extrait peptidique de levure selon l'invention comprend essentiellement des composés peptidiques de poids moléculaire inférieur à 2,5 kDa. L'une quelconque des formes plus ou moins purifiées de l'hydrolysat est alors solubilisée dans de l'eau ou dans tout mélange contenant de l'eau, puis stérilisée par ultrafiltration. L'extrait de levure, obtenu selon l'invention, est analysé qualitativement et quantitativement pour ses caractéristiques physico-chimiques et sa teneur en composés 20 peptidiques. On entend par composés peptidiques, les fragments de protéines, les peptides et les acides aminés libres présents dans le mélange. Les peptides, acides aminés et fragments de protéines sont dosés selon les techniques classiques, bien connues de l'homme du métier. Ainsi, selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, l'extrait de levure a un pH compris entre 4 et 5, et préférentiellement, entre 4 et 4,5. Avantageusement ce pH acide 25 favorise la dissolution des protéines dans l'eau et stabilise les protéines. L'extrait de levure selon l'invention a un poids sec titrant entre 0,1 et 8 g/1, et de manière préférée entre 0,1 et 5 g/1, et comprend : - entre 0,1 et 5 g/1 de composés peptidiques en poids d'extrait sec, - et entre 0,1 et 2 g/1 de sucres en poids d'extrait sec. 30 L'extrait est alors dilué dans de l'eau ou dans tout mélange de solvant contenant de l'eau, puis stérilisée par filtration stérilisante (0,2 mn). On procède à une phase de dilution dans de l'eau ou dans tout mélange contenant de l'eau, puis cette dilution est stérilisée par ultrafiltration afin d'obtenir un hydrolysat peptidique caractérisé par une concentration en protéines de 30 et 70 % du poids total de l'extrait sec, plus particulièrement cette concentration est de 40 et 50 % du poids total de l'extrait sec. Les solvants utilisés sont physiologiquement acceptables et classiquement utilisés par l'homme du métier, choisis parmi le glycérol, l'éthanol, le propanediol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, ou tout mélange de ces solvants. Selon des caractéristiques particulières, on utilise de 30 à 80% de solvant. De préférence on solubilise dans 70% de glycérol. L'avantage d'utiliser un pourcentage de solvant est que cela permet d'avoir une activité résiduelle de l'eau inférieure à 0,7 ce qui limite les contaminations de l'extrait Préférentiellement, après dilution l'extrait de levure selon comprend : entre 1,5 et 3,5 g/1 de composés peptidiques en poids d'extrait sec, et environ 0,3 g/1 de sucres en poids d'extrait sec. Ainsi, l'agent actif selon l'invention est avantageusement solubilisé dans un ou plusieurs solvants physiologiquement acceptables, tels que l'eau, le glycérol, l'éthanol ou tout mélange de ces solvants. L'agent actif dilué est ensuite stérilisé par ultrafiltration. Après cette étape de dilution, l'agent actif peut être encapsulé ou inclus dans un vecteur cosmétique ou pharmaceutique tels que les liposomes ou toute autre microcapsule utilisée dans le domaine de la cosmétique ou adsorbé sur des polymères organiques poudreux, des supports minéraux comme les talcs et bentonites et plus généralement solubilisé dans, ou fixé sur, tout vecteur physiologiquement adapté. L'extrait de levure selon l'invention peut être utilisé dans une composition cosmétique ou de soin de la cavité buccale. La composition peut comprendre une quantité d'extrait de levure nécessaire afin d'obtenir le résultat recherché, à savoir, protéger la muqueuse buccale 25 des dommages causés par des agressions mécaniques ou chimiques. Selon un mode de réalisation avantageux, l'extrait de levure selon l'invention est présent dans les compositions de l'invention à une concentration comprise entre 0,001 % et 5 % environ, et préférentiellement à une concentration comprise entre 0,01 % et 1 % environ par rapport au poids total de la composition finale. 30 Les compositions selon l'invention peuvent être appliquées par toute voie appropriée, notamment orale ou topique sur la muqueuse buccale, et leurs formulations sont adaptées par l'homme du métier à leur application sur une surface de la cavité buccale, en particulier pour des compositions cosmétiques ou d'hygiène de la bouche. Dans des modes de réalisation particuliers, la composition selon l'invention peut être une solution liquide adaptée pour irriguer, rincer ou vaporiser ; un dentifrice tel qu'une poudre, une pâte ou un gel pour les dents, un gel parodontal ; un liquide adapté à recouvrir la surface des dents (par exemple un liquide blanchissant) ; un chewing-gum ; un film ou une bande non soluble, soluble ou partiellement soluble (par exemple une bande blanchissante pour les dents) ; une composition encapsulable (par exemple une gélule) ; une lingette ; un implant, une solution de rinçage de la bouche ; une mousse : un fil dentaire ; etc. . Ces compositions comprennent un milieu physiologiquement adapté selon l'invention, c'est-à-dire un milieu qui convient à une utilisation en contact avec la surface de la cavité buccale, sans risque par exemple de toxicité, d'incompatibilité, d'instabilité, ou encore de réponse allergique. Dans un mode de réalisation, la composition selon l'invention comprend au moins un ingrédient humectant, un matériel abrasif, une base, et une quantité efficace d'un extrait de levure selon l'invention. Pour certaines formes souhaitables conformes a l'invention, la composition orale peut être de nature solide ou se présenter sous forme de pate, comme c'est le cas pour les poudres dentifrices, les comprimés dentifrices, les pâtes dentifrices ou les crèmes dentifrices. La base de telles préparations orales solides ou pâteuses contiennent une matière de polissage ou abrasif dentaire qui est compatible avec la composition. Des agents de polissage appropriés comprennent l'alumine hydratée, l'alumine calcinée, la silice, y compris la silice acide, neutre ou alcaline, un gel de silice hydratée, le phosphate dicalcique dihydrate, le metaphosphate de sodium ou de potassium, le phosphate tricalcique et autres phosphates, le carbonate de calcium, le silicate d'aluminium, les silicates de zirconium, le phosphate dicalcique anhydre, le pyrophosphate de calcium, l'orthophosphate de magnésium, le phosphate trimagnésique, le carbonate de calcium, l'alumine, l'alumine hydratée, le silicate d'aluminium, le silicate de zirconium, la silice, la bentonite et leurs mélanges, des matières plastiques telles qu'un polymethacrylate, la bentonite, et leurs mélanges. Des matières de polissage préférées comprennent l'alumine calcinée, l'alumine hydratée et un gel de silice hydratée. On utilise des ingrédients humectants, dans les compositions de la présente invention, pour prévenir le durcissement de la composition et son dessèchement lors de son exposition à l'air. Des exemples d'humectants sont les alcools polyhydriques tels que la glycérine, le sorbitol, le xylitol, ou les polyethyleneglycol de bas poids moléculaire. Les polyethyleneglycols utilisés comme humectants dans la présente invention ont un poids moléculaire moyen limite à 1000 kDa, par exemple d'environ 200-1000, de préférence environ 400-800, et mieux encore environ 550-650 kDa. Dans certains modes de réalisation de l'invention, un composé fournissant du fluor est présent dans la préparation orale. Ces composés peuvent être légèrement solubles dans l'eau ou complètement solubles dans l'eau. Ils sont caractérisés par leur aptitude à libérer des ions fluorure dans l'eau et par une absence pratique de réactivité avec les autres composes de la préparation orale. Parmi ces substances, on peut citer les fluorures minéraux, comme les sels solubles de métaux alcalins, de métaux alcalino-terreux et de métaux lourds, par exemple le fluorure de sodium, le fluorure de potassium, le fluorure d'ammonium, un fluorure de cuivre comme le fluorure cuivreux, le fluorure de zinc, un fluorure d'étain comme le fluorure stannique ou le chlorofluorure stanneux, le fluorure de baryum, le fluosilicate de sodium, le fluosilicate d'ammonium, le fluozirconate de sodium, le monofluophosphate de sodium, les mono- et di-fluophosphates d'aluminium et le pyrophosphate de sodium-calcium fluoré. On préfère utiliser les fluorures des métaux alcalins et de l'étain, comme le fluorure de sodium et le fluorure stanneux, le monofluophosphate de sodium et leurs mélanges. Optionnellement, les compositions décrites ici peuvent comprendre d'autres ingrédients facultatifs tels que des agents antitartres, des agents antiplaques, des polymères carboxylates anioniques, des ingrédients pour modifier la viscosité, des surfactants, des arômes, des 20 pigments, des agents pour le traitement de la sécheresse buccale. Dans des modes de réalisations particuliers, la composition orale selon l'invention comprend un ou plusieurs agents antitartre pour prévenir et/ou réduire la formation de calculs. Par exemple, le système antitartre peut inclure du tetrasodium pyrophosphate (TSPP) ou du sodium tripolyphosphate (STPP). Le phosphate et les sels de phosphate sont 25 généralement utilisés sous la forme d'espèces cationiques solubles totalement ou partiellement neutralisée (par exemple potassium, sodium ou sels d'ammonium, ou une combinaison de ceux-ci). Dans un autre mode de réalisations, la composition orale selon l'invention comprend une ou plusieurs sources d'ions stanneux acceptables oralement, utilisée pour, par exemple 30 pour réduire la gingivite, la plaque dentaire, la formation de calculs ou la sensibilité des dents. Par exemple, le fluorure stanneux, et d'autres halides stanneux tels que le dihydrate de Chlorure stanneux, le pyrophosphate stanneux, des sels de carboxylate stanneux organiques tels que le formate, l'acétate, le gluconate, lactate, tartrate, oxalate, malonate et citrate, le glyoxide éthylène stanneux. Dans un autre mode de réalisations, la composition orale selon l'invention comprend une source d'ions Zinc acceptable oralement pour son utilisation comme antimicrobien, anticalculs et rafraichisseur d'haleine. La source d'ions Zinc comprend par exemple l'acétate, le gluconate, le citrate le glycinate, le sulfate, l'oxyde de Zinc. Dans un autre mode de réalisations, la composition orale selon l'invention comprend un sialagogue acceptable oralement. Par sialagogue on entend un agent stimulant la production de salive, utilisé pour réduire la sécheresse buccale. Les sialagogues adaptés comprennent les acides alimentaires tels que les acides citrique, malique, lactique, succinique, ascorbique, fumarique et tartrique. Dans un autre mode de réalisations, la composition orale selon l'invention comprend un agent anti-plaque, par exemple, le cuivre, le magnésium ou le strontium stanneux ; les copolyols de dimethicone tels que le cétyl dimethicone copolyol; des enzymes telles que la papaïne, la glucoamylase et la glucose oxydase ; l'urée ; le lactate de calcium, les polyacrylates de strontium ; les agents chélateurs tels que les acides citriques ou tartriques et les sels de métaux alcalins. Ces compositions comprennent, en outre, tout additif communément utilisé dans le domaine d'application envisagé ainsi que les adjuvants nécessaires à leur formulation, tels que des co-solvants acceptable oralement (éthanol, glycérol, alcool benzylique, humectant...), des épaississants, des diluants, des émulsionnants, des antioxydants, des colorants, des pigments, des charges, des conservateurs, des parfums, des absorbeurs d'odeur, des huiles essentielles, des oligo-éléments, des acides gras essentiels, des tensioactifs, des polymères filmogènes, des filtres chimiques ou minéraux, des agents hydratants ou des eaux thermales etc. Dans tous les cas, l'homme de métier veillera à ce que ces adjuvants ainsi que leurs proportions soient choisis de telle manière à ne pas nuire aux propriétés avantageuses recherchées de la composition selon l'invention. On utilise des agents tensioactifs organiques acceptable oralement, dans les compositions de la présente invention, pour obtenir une action prophylactique accrue, faciliter l'obtention d'une dispersion complète de l'extrait de levures dans toute la cavité buccale et rendre les présentes compositions davantage acceptables du point de vue cosmétique. La substance tensioactive organique est de préférence de nature anionique, non ionique ou ampholytique et elle est de préférence utilisée comme substance détergente conférant des propriétés détersives et moussantes à la composition. Comme exemples convenables de substances tensioactives anioniques, on peut citer les monosulfates solubles dans l'eau des monoglycerides des acides gras supérieurs, comme le sel de sodium du monoglyceride monosulfate des acides gras hydrogènes de 1 'huile de noix de coco, les (alkyl supérieur)sulfates. comme le laurylsulfate de sodium, les alkylarylsufonates comme le dodecylbenzenesulfonate de sodium, les alkyl s supérieurs sul foacetates, les esters d'acides gras supérieurs du 1,2-dihydroxypropanesulfonate et les acylamides aliphatiques supérieurs satures des composes aminoacides carboxyliques a chaine aliphatique courte comme ceux comportant 12 a 16 atomes de carbone dans les radicaux acide gras, alkyle ou acyle, et les substances analogues. Les amides dernièrement mentionnes sont par exemple la N-lauroylsarcosine et les sels de sodium, de potassium et d'ethanolamine de la Nlauroyl, N-myristoyl- ou N-palmitoylsarcosine qui doivent être essentiellement exempts de savon ou d'acide gras supérieur similaire. Des exemples de tensioactifs non ioniques solubles dans l'eau sont les produits de condensation de l'oxyde d'éthylène avec divers composes réactifs contenant de l'hydrogène, régissant avec l'oxyde d'éthylène et présentant de longues chaines hydrophobes (par exemple des chaines aliphatiques d lenviron 12 a 20 atomes de carbone), ces produits de condensation ("ethoxameres") contenant des fractions polyoxyethylene hydrophiles et étant notamment des produits de condensation du poly(oxyde d'éthylène) avec les acides gras, les alcools gras, les amides gras, les polyalcools (par exemple le monostéarate de sorbitol) et le poly(oxyde de propylène). II est possible d'utiliser, un agent gélifiant non ionique (agent épaississant), y compris des gommes naturelles et synthétiques telles que l'hydroxyethylcellulose, l'hydroxymethylcellulose, la methylcellulose, etc. L'agent gélifiant préféré est l'hydroxyethyl-cellulose. On peut aussi utiliser des sels de bicarbonates adaptés à leur utilisation sur la surface de la cavité buccale. Des sels de bicarbonate convenables sont par exemple le bicarbonate de sodium, de potassium ou d'ammonium. On peut aussi utiliser tout agent de sapidité convenable ou tout agent édulcorant approprie. Des agents de sapidité convenables sont par exemple les essences ou huiles essentielles, comme 1 essence de menthe verte, l'essence de menthe poivrée, l'essence de Wintergreen, l'essence de sassafras, l'essence de girofle, l'essence de sauge, l'essence d'eucalyptus, l'essence de marjolaine, l'essence de cannelle, l'essence de citron et l'essence d'orange, et le salicylate de méthyle. Des agents édulcorants convenables comprennent le saccharose, le lactose, le maltose, le sorbitol, le xylitol, le cyclamate de sodium, la perillartine, 1 'APM (ester méthylique de l'aspartylphenylalanine), la saccharine et analogues. Diverses autres substances peuvent être incorporées dans les préparations orales selon l'invention, par exemple des agents de blanchiment, des agents conservateurs, des silicones, des composes de la famille de la chlorophylle, et/ou des substances a base d'ammonium comme l'urée, le phosphate diammonique et leurs mélanges. Ces adjuvants, lorsqu'ils sont présents, sont incorporés dans les préparations en des quantités qui ne perturbent pratiquement pas les propriétés et les caractéristiques désirées. Il est bien entendu que l'extrait de levure selon l'invention peut être utilisé seul ou bien en association avec au moins un autre principe actif, dans une composition cosmétique, destinés à favoriser l'action de l'extrait de levure selon l'invention, notamment, la prévention et/ou le traitement des désordres liés à la fonction barrière de la muqueuse buccale ou l'apaisement de la muqueuse buccale. On peut citer, de manière non limitative, des principes actifs peptidiques, par exemple le peptide dérivé de la HMG-CoA réductase humaine (FR 2 915395, Ashland) , GP4GTM (FR 2 817 748, Ashland), le peptide CollaxylTM (FR 2 827 170, Ashland), le Peptide Vinci 01 Tm (FR 2 837 098, Ashland), le Peptide Vinci02TM (FR 2 841 781, Ashland), l'ATPeptideTM (FR 2 846 883, Ashland). On peut citer également, des extraits de végétaux, tels que l'extrait de lin (Lipigénine TM, FR2956818, Ashland), l'extrait d'Artémia sauna (FR 2 817 748, Ashland). D'autres principes actifs adaptés comprennent des agents blanchissants, tels que le bioxyde de titane, des agents actifs parodontaux, des rafraîchisseurs de l'haleine, des agents de contrôle des odeurs. Il est possible d'utiliser également des ingrédients actifs sur la sensibilité des dents, par exemple la capsaïcine, l'eugénol, les sels de potassium ou de strontium. D'autres agents actifs utilisés sont, par exemple, des agents cicatrisants, apaisants, des agents anti-radicalaires, tels que le coenzyme Q10, les rétinoïdes, la vitamine D, la vitamine C, la vitamine B5, l'acide folique, la nicotinamide, la thiamine, la riboflavine, les bioflavonoïdes ou encore la pyridoxine. On peut citer en outre, des agents stimulant la synthèse de macromolécules dermiques, des agents hydratants, antibactériens, antifongiques, anti-inflammatoires, anesthésiques, des agents modulants la différenciation, la pigmentation ou la dépigmentation dentaire ou cutanée, etc. Selon un troisième aspect, l'invention consiste encore en un procédé de traitement cosmétique destiné à apaiser la muqueuse buccale, caractérisé en ce que l'on applique topiquement sur la muqueuse buccale à traiter un extrait de levure ou une composition le comprenant. Des modes de réalisation particuliers de ce procédé de traitement cosmétique résultent également de la description précédente. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront mieux à la lecture des exemples et des figures donnés à titre illustratif et non limitatif. La Figure 1 montre sous la forme d'un histogramme le taux d'expression intracellulaire de la kératine K76, des lipides intracellulaires totaux et neutres, et de la claudine-1 sur les HOK traités avec l'extrait de levure à 0,25%, ou 0,5%, en comparaison avec les cellules contrôle non traitées. La Figure 2 montre sous la forme d'un histogramme le rapport de cellules HOK endommagées/cellules totales, lorsque les cellules sont prétraitées ou non par l'extrait de levure (0,25% ou 0,5%) puis soumises à un stress par un détergent (SDS 0,05%) ou non soumises au stress (contrôle). La Figure 3 montre sous la forme d'un histogramme le taux d'IL-la relarguée dans le milieu de culture des épithéliums oraux reconstruits lorsque les cellules sont prétraitées ou 20 non par l'extrait de levure (0,5%) puis soumises à un stress par un détergent (SDS 0,1%) ou non soumises au stress (contrôle). Exemple 1 : Préparation d'un hydrolysat peptidique de levure (Saccharomyces cerevisiae) L'agent actif est obtenu à partir d'un extrait de levure de l'espèce Saccharomyces 25 cerevisiae. Les levures sont cultivées dans un milieu adapté à leur développement puis centrifugées pour récupérer une biomasse. La biomasse est ensuite broyée dans un broyeur à billes. Ensuite, le broyat est remis en suspension dans de l'eau à une concentration de 100 grammes par litre avant une hydrolyse 30 enzymatique entre 40 et 60°C pendant 2 heures. Après hydrolyse, l'extrait est centrifugé puis soumis à une dilution dans un mélange eau-glycérol. L'extrait est ensuite filtré avant stérilisation. On obtient alors un hydrolysat contenant une quantité de composés de nature protéique et peptidique représentant environ entre 30 et 70 % du poids total de l'extrait sec, plus particulièrement cette quantité est comprise entre 40 et 50 % du poids total de l'extrait sec. La détermination de la composition en acides aminés de l'agent actif selon l'invention a également été réalisée. Après un dosage des protéines et des peptides par la méthode de Lowry, une hydrolyse acide est réalisée, pour réduire tous les peptides à l'état d'acides aminés libres. Un exemple de composition en acides aminés de l'hydrolysat est donné dans le tableau suivant. Les valeurs sont exprimées en pourcentage d'acides aminés pour 100 g de protéines. Exemple 2 Mise en évidence de l'effet de l'extrait de levure sur la synthèse de la kératine K76 Le but de cette étude est de déterminer si l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, possède un effet sur la synthèse de la kératine K76, exprimée par la muqueuse orale. Pour cela, un immuno-marquage de cette kératine est réalisée sur des kératinocytes humains de la muqueuse orale, traités par le peptide. Protocole : Des cellules HOK (Human Oral Keratinocytes) sont traitées par une solution contenant l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, pendant 2 minutes. Puis, du milieu de culture est rajouté, de manière à mimer l'effet de dilution par la salive. Après une heure, le milieu est remplacé par du milieu neuf sans actif. Ce protocole d'application est répété 2 fois par jour, pendant 2 jours. Des cellules contrôle cultivées en parallèle ne reçoivent pas d'actif. Puis, la stimulation de la kératine 76 est recherchée par une technique d'immunomarquage sur cellules. Pour cela, les cellules sont fixées et mises au contact d'un premier anticorps anti-K76 (guinea pig polyclonal, Progen, dilué au 1/100ème), pendant 1h30, à température ambiante et sous agitation. Puis, après rinçage, un second anticorps conjugué à un marqueur fluorescent est ajouté et incubé pendant 1 heure à l'obscurité (goat anti-guinea pig Alexa Fluor®, Invitrogen, dilution 1/1000ème). Après rinçage, les lames sont finalement montées puis observées avec un microscope à fluorescence. L'intensité de fluorescence est mesurée sur 3 clichés par le logiciel Image-Pro Analyser. Résultats : Les résultats, illustrés par la figure 1, ont montré une augmentation significative de l'intensité de fluorescence représentative de la kératine 76, sur les HOK traités avec l'actif, en comparaison avec les cellules contrôle (jusqu' à +26% à 0.25% d'actif). Conclusion : l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, a montré un effet positif sur la synthèse de la kératine K76, spécifique de la muqueuse orale. Exemple 3 Mise en évidence de l'effet de l'extrait de levure sur le taux de lipides intracellulaires: Le but de cette étude est de déterminer si l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, peut exercer un effet sur le taux de lipides intracellulaires, en utilisant des cultures de kératinocytes humains de la muqueuse orale. Pour visualiser les lipides, une coloration par le Nile Red est effectuée après traitement des cellules par l'actif. Protocole : Des cellules HOK (Human Oral Keratinocytes) sont traitées par une solution contenant le peptide pendant 2 minutes. Puis, du milieu de culture est rajouté, de manière à mimer l'effet de dilution par la salive. Après une heure, le milieu est remplacé par du milieu neuf sans actif. Ce protocole d'application est répété 2 fois par jour, pendant 2 jours. Des cellules contrôle cultivées en parallèle ne reçoivent pas d'actif. Puis, la stimulation des lipides intracellulaires est recherchée par la coloration Nile Red. Après fixation des cellules par le paraformaldehyde, une solution de Nile Red (Sigma) est ajoutée pendant 10 minutes, à l'obscurité. Puis, après rinçage, les lames sont montées et observées avec un microscope à fluorescence. Le filtre rouge permet d'observer les lipides totaux et le filtre jaune-orangé, les lipides neutres dont le cholestérol. L'intensité de fluorescence est mesurée sur 3 clichés par le logiciel Image-Pro Analyser. Résultats : Les résultats, illustrés par la figure 1, montrent que, après traitement par l'extrait de levure, le taux de lipides intracellulaires est significativement augmenté, dans les HOK, en comparaison avec les cellules contrôle. L'analyse d'image montre une augmentation des lipides totaux (+42% à 0.25 % d'actif), ainsi qu'une augmentation des lipides neutres (+64% à 0.25%). Conclusion : L'extrait de levure montré un effet positif sur le taux de lipides intracellulaires, sur des kératinocytes oraux en culture. Exemple 4 Mise en évidence de l'effet de l'extrait de levure sur une protéine des jonctions serrées, la claudine-1 : Le but de cette étude est de déterminer si l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, peut avoir un effet sur une protéine constituant les jonctions serrées, la claudine-1, étant donné l'implication de cette protéine dans ce type de jonction intercellulaire, et par conséquent, dans l'intégrité de la muqueuse orale. Protocole : Des cellules HOK (Human Oral Keratinocytes) sont traitées par une solution contenant l'extrait de levure pendant 2 minutes. Puis, du milieu de culture est rajouté, de manière à mimer l'effet de dilution par la salive. Après une heure, le milieu est remplacé par du milieu neuf sans actif Ce protocole d'application est répété 2 fois par jour, pendant 2 jours. Des cellules contrôle cultivées en parallèle ne reçoivent pas d'actif. Puis, la claudine- 1 est détectée dans les cellules contrôle et traitées par immuno-fluorescence. Pour cela, les cellules préalablement fixées sont incubées avec un premier anticorps anticlaudine-1 (rabbit polyclonal, Abcam, dilution 1/50ème), pendant 5h, à température ambiante et sous agitation. Puis, après rinçage, un second anticorps conjugué à un marqueur fluorescent est ajouté et incubé pendant 1 heure à l'obscurité (donkey anti-rabbit Alexa Fluor®, Invitrogen, dilution 1/1000ème). Après rinçage, les lames sont finalement montées puis observées avec un microscope à fluorescence. L'intensité de fluorescence localisée au niveau des jonctions est mesurée sur 3 clichés par le logiciel Image-Pro Analyser. Résultats : Les résultats, illustrés par la figure 1, indiquent que dans les cellules traitées par l'extrait de levure, l'intensité de marquage de la claudine-1 au niveau des jonctions cellulaires est plus intense, comparé aux cellules contrôle (pouvant atteindre + 31% à 0.25%). Conclusion : l'extrait de levure, permet d'augmenter l'expression de la claudine-1 dans les jonctions serrées, ce qui pourrait permettre d'aider à maintenir l'intégrité de la muqueuse orale. Exemple 5 Effet protecteur de l'extrait de levure sur la morphologie des kératinocytes de la muqueuse orale, soumis à un stress : Le but de cette étude est de rechercher un effet protecteur de l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, sur les kératinocytes de la muqueuse orale soumis à un stress. Dans ce but, des kératinocytes oraux sont prétraités par l'extrait de levure, puis soumis à un stress mimant le type de stress auquel est soumise la muqueuse orale. Deux types de stress ont été reproduits dans les conditions in vitro, le stress par un détergent (SDS) et le stress par une solution alcoolique (éthanol). Protocole : Des cellules HOK (Human Oral Keratinocytes) sont traitées par une solution contenant l'extrait de levure pendant 2 minutes. Puis, du milieu de culture est rajouté, de manière à mimer l'effet de dilution par la salive. Après une heure, le milieu est remplacé par du milieu neuf sans actif Ce protocole d'application est répété 2 fois par jour, pendant 2 jours. Des cellules contrôle cultivées en parallèle ne reçoivent pas d'actif De manière à placer les cellules en condition de stress, une solution de SDS à 0.05% est mise au contact des cellules pendant 2 minutes, puis rincée, et appliquée ainsi 2 fois par jour. Le même protocole de stress a été réalisé en présence d'une solution d'éthanol à 15%. En parallèle, des cellules sont gardées en condition non stressée. Après 24h, la morphologie cellulaire est étudiée par la coloration Hématoxyline et Eosine (H&E). Les cellules endommagées sont dénombrées à l'aide du logiciel Volocity® et rapportées au nombre de cellules totales. Résultats : Les résultats sont montrés sur la figure 2. L'application du stress SDS ou éthanol entraîne une forte augmentation du rapport cellules endommagées/cellules totales, visualisées par la coloration H&E. Lorsque l'actif est appliqué avant le stress, ce rapport diminue de manière significative. Conclusion : Les effets engendrés par l'application d'une solution de SDS ou d'éthanol sur les kératinocytes oraux ont été observés principalement au niveau membranaire, et s'accompagnent d'une perte de l'intégrité cellulaire. Lorsque l'extrait de levure est appliqué avant le stress, la baisse des dommages cellulaires suggère que l'application de l'actif a eu pour conséquence de protéger les cellules contre ces types de stress. Exemple 6 Effet protecteur l'extrait de levure sur l'intégrité des jonctions serrées, mises en évidence par le marquage de la claudine-1 sur des kératinocytes de la muqueuse orale, soumis à un stress : Le but de cette étude est de démontrer si l'application d'une solution contenant l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, sur des kératinocytes oraux peut contribuer à la maintenance des jonctions cellulaires, et en particulier à l'intégrité des jonctions serrées, mises en évidence par l'immuno-détection de la claudine-1. Protocole : Des cellules HOK (Human Oral Keratinocytes) sont traitées par une solution contenant l'extrait de levure pendant 2 minutes. Puis, du milieu de culture est rajouté, de manière à mimer l'effet de dilution par la salive. Après une heure, le milieu est remplacé par du milieu neuf sans actif. Ce protocole d'application est répété 2 fois par jour, pendant 2 jours. Des cellules contrôle cultivées en parallèle ne reçoivent pas d'actif. De manière à placer les cellules en condition de stress, une solution de SDS à 0.05% est mise au contact des cellules pendant 2 minutes, puis rincée, et appliquée ainsi 2 fois par jour. Ce protocole a aussi été réalisé en présence d'une solution d'éthanol à 15% avec un temps de contact de 30 secondes. En parallèle, des cellules sont gardées en condition non stressée. Après 24h, un marquage par immuno-fluorescence de la claudine-1, protéine des jonctions serrées, est réalisé de la manière suivante. Après fixation, les cellules sont incubées avec un premier anticorps anti-claudine-1 (rabbit polyclonal, Abcam, dilution 1/50ème), pendant 5h, à température ambiante et sous agitation. Puis, après rinçage, un second anticorps conjugué à un marqueur fluorescent est ajouté et incubé pendant 1 heure à l'obscurité (donkey anti-rabbit Alexa Fluor®, Invitrogen, dilution 1/1000ème). Après rinçage, les lames sont finalement montées puis observées avec un microscope à fluorescence. L'intensité de fluorescence localisée au niveau des jonctions est mesurée sur 3 clichés par le logiciel Image-Pro Analyser.30 Résultats : L'application d'une solution contenant du SDS ou de l'éthanol entraîne une désorganisation des jonctions serrées, comme le montre l'immuno-marquage de la claudine1, sur les kératinocytes oraux. De plus, l'intensité de marquage de la claudine-1 apparait diminuée par le stress SDS. Lorsque les keratinocytes ont été traités par l'actif, avant d'être exposés au stress, un maintien de l'intégrité des jonctions membranaires a été observé pour les deux types de stress, ainsi qu'une augmentation de l'intensité de marquage de la claudine-1, en comparaison avec le contrôle SDS sans prétraitement. Conclusion : En conclusion, cette étude montre que l'extrait de levure a contribué à maintenir l'intégrité des jonctions serrées, sur des kératinocytes oraux en condition de stress. Exemple 7 Effet protecteur de l'extrait de levure démontré par la baisse du taux de relar2a2e de l'interleukine-1 a, sur des kératinocytes de la muqueuse orale, soumis à un stress Le but de cette étude est de démontrer l'effet l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, sur le taux de relargage de l'interleukine-1a, cytokine pro-inflammatoire, induite par une solution de SDS ou d'éthanol, sur des kératinocytes issus de la muqueuse orale. Protocole : Des cellules HOK (Human Oral Keratinocytes) sont traitées par une solution contenant le peptide pendant 2 minutes. Puis, du milieu de culture est rajouté, de manière à mimer l'effet de dilution par la salive. Après une heure, le milieu est remplacé par du milieu neuf sans actif. Ce protocole d'application est répété 2 fois par jour, pendant 2 jours. Des cellules contrôle cultivées en parallèle ne reçoivent pas d'actif. De manière à placer les cellules en condition de stress, une solution de SDS à 0.05% est mise au contact des cellules pendant 2 minutes, puis rincée, et appliquée ainsi 2 fois par jour. Ce protocole a aussi été réalisé en présence d'une solution d'éthanol à 15% avec un temps de contact de 30 secondes. En parallèle, des cellules sont gardées en condition non stressée. Après 24h, les surnageants de culture sont prélevés et un dosage ELISA de l'IL-la est réalisé (R&D System). Résultats : Notre modèle nous permet d'observer l'augmentation du relargage de l'interleukine-la en présence de SDS ou d'éthanol. L'application l'extrait de levure avant la mise au contact des cellules avec l'agent irritant a permis de réduire la quantité d'IL-la relarguée. Conclusion : L'effet protecteur de l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, a ainsi été mis en évidence, dans le cas où les kératinocytes oraux sont placés en présence d'un agent irritant, tel que le SDS ou l'éthanol. Exemple 8 Effet protecteur de l'extrait de levure sur la morphologie des épithéliums oraux reconstruits, soumis à un stress : Le but de cette étude a été de démontrer l'effet protecteur de l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, sur la morphologie cellulaire, en utilisant un modèle d'épithélium oral reconstruit. Les dommages cellulaires ont été induits par l'application d'une solution de détergent contenant du SDS, à la surface des épithéliums. Protocole : Des épithéliums oraux placés pendant 5 jours à l'interface air-liquide ont été utilisés. Ils ont été traités de manière topique par l'extrait de levure, appliqué pendant 2 minutes, 2 fois par jour, pendant 2 jours. Puis une solution contenant 0.1% de SDS a été appliquée pendant 2 minutes, puis rincée, 2 fois par jour, pendant un jour. En parallèle, des épithéliums ont été gardés en condition non traitée et/ou non stressée. Le jour suivant, les épithéliums sont découpés et utilisés pour l'analyse histologique. En particulier, de manière à visualiser la morphologie cellulaire, une coloration hématoxyline & éosine (H&E) est réalisée. Résultats : L'application d'une solution de SDS à la surface des épithéliums oraux reconstruits a induit une perte de la cohésion intercellulaire, observée dans les couches superficielles et supra-basales de l'épithélium. L'application de l'extrait de levure avant le stress a permis de préserver la structure de l'épithélium, comme le montre la réduction des dommages cellulaires et le maintien de la cohésion intercellulaire. Conclusion : Cette étude nous a permis de démontrer l'effet protecteur de l'extrait de levure sur la morphologie cellulaire, dans un modèle d'épithélium oral reconstruit soumis à un stress irritant. Exemple 9 Effet protecteur de l'extrait de levure sur les 'onctions serrées, mises en 5 évidence par le marquage de la claudine-1, sur des épithéliums oraux reconstruits, soumis à un stress : Le but de cette expérience est de montrer qu'une solution contenant l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, appliquée sur des épithéliums oraux reconstruits, permet une protection des jonctions cellulaires, en particulier des jonctions serrées, lorsqu'ils sont 10 soumis à un stress de type détergent. Protocole : Des épithéliums oraux reconstruits placés pendant 5 jours à l'interface air-liquide ont été utilisés. Ils ont été traités de manière topique par l'extrait de levure, appliqué pendant 2 minutes, 2 fois par jour, pendant 2 jours. Puis une solution contenant 0.1% de 15 SDS a été appliquée pendant 2 minutes, puis rincée, 2 fois par jour, pendant un jour. En parallèle, des épithéliums ont été gardés en condition non traitée et/ou non stressée. Le jour suivant, les épithéliums sont découpés de leur support, fixés, puis utilisés pour l'immunodétection de la claudine-1. Les épithéliums sont incubés avec un premier anticorps anti-claudine-1 (rabbit 20 polyclonal, Abcam, dilution 1/200ème), pendant lh, à température ambiante et sous agitation. Puis, après rinçage, un second anticorps conjugué à un marqueur fluorescent est ajouté et incubé pendant 1 heure à l'obscurité (donkey anti-rabbit Alexa Fluor®, Invitrogen, dilution 1/1000ème). Après rinçage, les lames sont finalement montées puis observées avec un microscope à fluorescence. 25 L'intensité de fluorescence localisée au niveau des jonctions est mesurée sur 3 clichés par le logiciel Image-Pro Analyser. 30 Résultats : L'application d'une solution de SDS à la surface des épithéliums a induit des dommages cellulaires et en particulier, une désorganisation des jonctions intercellulaires, comme le montre l'immun-marquage de la claudine-1. De plus, l'intensité du marquage est diminuée sous l'effet du stress. Sur les épithéliums préalablement traités par l'extrait de levure, les jonctions cellulaires apparaissent préservées, et le niveau de claudine-1 est augmenté, en comparaison avec des épithéliums stressés non prétraités. De plus, en l'absence de stress, le taux de claudine-1 a également été augmenté (+56% par rapport au contrôle non traité). Conclusion : Cette expérience a permis de révéler l'effet protecteur de l'extrait de levure sur les jonctions cellulaires de l'épithélium oral, et en particulier sur les jonctions serrées et sur une de leur protéine, la claudine-1. Exemple 10 Effet protecteur de l'extrait de levure sur l'épithélium oral reconstruit, démontré par la baisse du taux de relargage de l'interleukine-1 a, en présence d'un stress de type détergent : Le but de cette étude est de mettre en évidence l'effet protecteur de l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, sur l'épithélium oral reconstruit soumis à un stress de type détergent, en évaluant le taux de relargage de l'interleukine-la. Protocole : Des épithéliums oraux reconstruits placés pendant 5 jours à l'interface air- liquide ont été utilisés. Ils ont été traités de manière topique par l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, appliqué pendant 2 minutes, 2 fois par jour, pendant 2 jours. Puis une solution contenant 0.1% de SDS a été appliquée pendant 2 minutes, puis rincée, 2 fois par jour, pendant un jour. En parallèle, des épithéliums ont été gardés en condition non traitée et/ou non stressée. Le lendemain, le milieu de culture des épithéliums est prélevé puis analysé par ELISA, afin de déterminer le taux d'interleukine IL-la sécrétée. Résultats : Les résultats sont montrés sur la figure 3. L'application d'une solution contenant du SDS a induit une augmentation du taux d'IL-la relarguée dans le milieu de culture des épithéliums oraux reconstruits. Lorsque les épithéliums oraux ont été traités par une solution contenant l'extrait de levure, le taux d'IL-1a a été significativement réduit, indiquant une baisse de l'effet irritant du SDS. Conclusion : l'extrait de levure permet donc de réduire l'effet irritant provoqué par une solution de SDS sur l'épithélium oral en culture, permettant ainsi de protéger cet épithélium. Exemple 11 Effet protecteur de l'extrait de levure, sur la morphologie des 5 épithéliums gingivaux reconstruits, soumis à un stress mécanique : Le but de cette étude a été de démontrer l'effet protecteur l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, sur la morphologie cellulaire, en utilisant un modèle d'épithélium gingival reconstruit soumis à un stress de type mécanique. Dans ce but, un modèle de stress mécanique a été créé en plaçant la tête d'une brosse à 10 dent à la surface d'un épithélium gingival reconstruit et en provoquant un mouvement de la brosse, de manière à mimer le brossage. Protocole : Des épithéliums gingivaux reconstruits placés pendant 5 jours à l'interface air-liquide ont été utilisés. Ils ont été traités de manière topique par l'extrait de levure, 15 appliqué pendant 2 minutes, 2 fois par jour, pendant 2 jours. Puis la tête d'une brosse à dent est mise au contact des épithéliums, sous agitation pendant 2 minutes, 2 fois par jour, pendant un jour. En parallèle, des épithéliums ont été gardés en condition non traitée et/ou non stressée. Le lendemain, les épithéliums sont découpés et utilisés pour l'analyse histologique. En particulier, de manière à visualiser la morphologie cellulaire, une 20 coloration hématoxyline & éosine (H&E) est réalisée. Résultats : Le stress mécanique mimant le brossage a entraîné une perte de cohésion des couches superficielles de l'épithélium reconstruit, ainsi que des dommages cellulaires dans les couches basales et supra-basales. L'application d'une solution contenant l'extrait de 25 levure avant le brossage a permis de préserver la structure de l'épithélium, comme le montre la réduction des dommages cellulaires et le maintien de la cohésion intercellulaire. Conclusion : Cette étude nous a permis de démontrer l'effet protecteur de l'extrait de levure sur la morphologie cellulaire, dans un modèle d'épithélium gingival reconstruit 30 soumis à un stress mécanique, mimant le brossage. Exemple 12 Effet protecteur de l'extrait de levure sur l'épithélium gingival reconstruit, démontré par la baisse du taux de relargage de l'interleukine-1 ot, en présence d'un stress mécanique: Le but de cette étude est de mettre en évidence l'effet protecteur de l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, sur l'épithélium gingival reconstruit soumis à un stress de type mécanique, en évaluant le taux de relargage de l'interleukine-la (IL-1a). Protocole : Des épithéliums gingivaux reconstruits placés pendant 5 jours à l'interface air-liquide ont été utilisés. Ils ont été traités de manière topique par l'extrait de levure, appliqué pendant 2 minutes, 2 fois par jour, pendant 2 jours. Puis la tête d'une brosse à dent est mise au contact des épithéliums, sous agitation pendant 2 minutes, 2 fois par jour, pendant un jour. En parallèle, des épithéliums ont été gardés en condition non traitée et/ou non stressée. Le lendemain, le milieu de culture des épithéliums est prélevé puis analysé par ELISA, afin de déterminer le taux d'interleukine IL-la sécrétée. Résultats : Le stress mécanique induit par l'application de la tête de brosse à dent, mimant le brossage, a induit une augmentation du taux d'IL-la sécrétée dans le milieu de culture des épithéliums gingivaux reconstruits. Lorsque les épithéliums gingivaux ont été traités par une solution contenant l'extrait de levure, le taux d'IL-la a été significativement réduit, indiquant une baisse de l'irritation induite par le stress mécanique. Conclusion : l'extrait de levure, obtenu selon l'exemple 1, permet donc de réduire l'effet irritant provoqué par le stress mécanique sur l'épithélium gingival en culture, permettant ainsi de protéger cet épithélium. REVENDICATIONS1. Utilisation cosmétique d'un extrait de levure provenant de l'hydrolyse des protéines de levure pour renforcer la fonction barrière physique de la muqueuse buccale 2. Utilisation d'un extrait de levure selon la revendication 1, pour apaiser la muqueuse buccale. 3. Utilisation d'un extrait de levure selon l'une des revendications 1 à 2, pour maintenir l'intégrité et la morphologie des cellules de la muqueuse buccale. 4. Utilisation d'un extrait de levure selon l'une des revendications 1 à 3, pour stimuler l'expression de kératine, des lipides intracellulaires et des molécules des jonctions adhérentes intercellulaires. 5. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que l'extrait de levures est un extrait de levures du genre Kluyveromyces et/ou du genre Saccharomyces. 6. Utilisation d'un extrait de levure selon l'une des revendications 1 à 5, pour protéger la muqueuse buccale des dommages causés par des agressions extérieures chimiques et/ou mécaniques. 7. Utilisation d'un extrait de levure selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que l'extrait de levure contient au moins 0,1 à 5 g/1 de composés peptidiques en poids d'extrait sec, 0,1 à 2 g/1 de sucres en poids d'extrait sec et comprend essentiellement des composés peptidiques de poids moléculaire inférieur à 5 kDa. 8. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que l'extrait de levure est utilisé dans une composition cosmétique ou de soin de la cavité buccale en une quantité représentant de 0,001 % et 5 % environ, et préférentiellement à une concentration comprise entre 0,01 % et 1 % du poids total de la composition.' 9. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que la composition se présente sous une forme adaptée à l'application par voie orale topique comprenant un milieu physiologiquement adapté. 10. Procédé de traitement cosmétique destiné à apaiser la muqueuse buccale, caractérisé en ce que l'on applique topiquement sur la muqueuse buccale à traiter un extrait de levure ou une composition le comprenant selon l'une quelconque des revendications 1 à 9.