Brevet FR2973381A1 — publié le 20121005

La présente invention a pour objet de nouveaux composés oligosaccharides, une composition cosmétique comprenant un ou plusieurs de ces composés ainsi que leurs sels pharmaceutiquement acceptables, et l'utilisation de ces composés ou de cette composition pour maintenir l'intégrité des molécules constituantes de la matrice extracellulaire et/ou diminuer les processus de glycation et/ou d'hyperkératinisation. Le fenugrec (ou Trigonella foenum-graecum L.) est une plante herbacée, originaire d'Asie mineure, appartenant à la famille des fabacées. Les fleurs du fenugrec d'un blanc jaunâtre donnent des fruits sous forme de gousses renfermant des graines anguleuses de couleur brun clair. Du fait de leur arôme caractéristique, ces graines sont souvent utilisées dans différents produits alimentaires (tels que par exemple le Viandox®) ou comme épice dans des plats traditionnels. Divers procédés d'extraction menés sur le fenugrec ont été décrits dans l'art antérieur. Certains procédés d'extraction menés sur le fenugrec, en particulier sur ses graines, ont permis l'extraction de composés de type polyphénols auxquels sont associés différentes propriétés cosmétiques. Ainsi, la demande de brevet JP 2010-0229924 décrit un procédé d'extraction menée sur des graines de fenugrec par trempage dans l'éthanol durant une semaine. L'extrait obtenu, qui contient des composés de type polyphénols mais pas de sucres, est utilisé comme promoteur de la production de collagène et d'acide hyaluronique. D'autres procédés d'extraction menés sur le fenugrec, en particulier sur ses graines, ont permis l'extraction de polysaccharides de type galactomannane auxquels sont associés différentes propriétés. Ainsi, de manière générale, les polysaccharides sont obtenus à partir de graine de fenugrec par extraction aqueuse à des températures allant de 50 à 100°C, suivie d'une précipitation alcoolique. De telles conditions opératoires permettent l'extraction de certains polysaccharides de type galactomannanes contenus dans le fenugrec, mais ne permettent pas leur dégradation en oligosaccharides de faible poids moléculaire. Ainsi, la demande de brevet WO-A-95/21199 décrit des polysaccharides de formule générale : CH2OH CH2OH OH H OH \ H OH N\ O H p H OHI H OH CH2 CH2 n n étant supérieur à 100 ; ainsi que leur utilisation comme agent nutraceutique. Ces 5 galactomannanes sont préparés par extraction aqueuse à des températures allant de 80 à 90°C menée sur le fenugrec, suivie d'une précipitation alcoolique. La demande de brevet FR-A-2661833 décrit quant à elle un procédé d'extraction menée sur des graines de fenugrec par trempage dans l'eau à 45°C suivie d'une filtration visant à ne conserver que les polysaccharides ayant un poids moléculaire 10 inférieur à 300 kDa. L'utilisation des polysaccharides ainsi obtenus dans des compositions cosmétiques ou pharamcologiques ralentissant le vieillissement dermique ou nourrissant le derme est également citée. Cependant, outre le fait qu'aucune donnée expérimentale ne vient étayer cette affirmation, l'effet anti-âge escompté ne peut correspondre qu'à un effet tenseur sur la couche cutanée surperficielle, les 15 polysccharides ne pouvant pas pénétrer dans le derme pour agir au niveau cellulaire. De ce fait, l'effet sur le vieillissement espéré ne peut être que de courte durée. Or, la peau est soumise en permanence à de nombreux stress intrinsèques et/ou extrinsèques tels que les UV, la pollution, la chaleur, le froid, les différentes 20 pathologies, les blessures, l'inflammation, le vieillissement ou encore l'activité hormonale. Malgré la présence de différents systèmes de protection intrinsèques, la peau finit par être abîmée par la succession de ces agressions, ce qui se traduit notamment par une altération de l'architecture cutanée conduisant à une altération des structures et des fonctions cutanées. 25 Ces changements structuraux peuvent être principalement attribués à une désorganisation de la matrice extracellulaire, elle-même induite par une diminution et/ou une modification des molécules constituantes telles que le collagène, l'acide hyaluronique, l'élastine ou encore la fibronectine. Les principaux facteurs responsables de cette désorganisation de la matrice extracellulaire sont donc : - la diminution de la biosynthèse ou l'augmentation de la dégradation des molécules constituantes ; - et/ou l'augmentation des modifications de ces molécules constituantes impliquant notamment les phénomènes de glycation et d'hyperkératinisation. La glycation, correspondant à une réaction de Maillard, dépend des possibilités de rencontre entre les molécules de glucose circulantes et les groupements aminés libres existant soit à l'extrémité N-terminale des chaînes polypeptidiques, soit sur les chaînes latérales de lysine. Ces réactions sont plus fréquentes dans les espaces extracellulaires et les tissus conjonctifs où le glucose circule librement et où les protéines telles que le collagène, l'élastine ou encore la fibronectine ont des durées de vie relativement longues. La réaction de glycation se déroule en trois étapes : i) initiation avec la formation d'un produit d'Amadori ; ii) propagation par glyco-oxydation ; iii) terminaison avec la formation des produits de glycation avancée (PGA) notamment la pyrraline liée à un résidu d'acide aminé et la pentosidine liée à deux acides aminés, 20 créant ainsi une liaison croisée entre deux chaînes peptidiques. Ces liaisons croisées modifient les propriétés biophysiques des protéines. Les protéines glyquées se forment au gré des hasards des rencontres moléculaires. La fixation du glucose en certains points des molécules est de nature à masquer certaines séquences importantes pour la fonction des protéines. Dans certaines conditions, les groupes 25 glyqués peuvent réagir avec l'oxygène et devenir des radicaux oxygénés, constituant ainsi un autre facteur de modification progressive des protéines expliquant certains phénomènes de vieillissement. Le collagène est un substrat privilégié de la glycation. La glycation inhibe les interactions de polymérisation homotypiques entre deux molécules de collagène mais 30 aussi les interactions hétérotypiques entre macromolécules différentes et peut également modifier les interactions entre le collagène de la matrice extracellulaire et les cellules adjacentes. Les kératines sont des protéines du cytosquelette appartenant à la famille des protéines 35 de filaments intermédiaires. Les réseaux protéiques filamenteux supracellulaires composés de kératine assurent en partie la résistance aux frictions mécaniques répétées que subit la peau. Les kératines participent également à la différenciation des épithéliums. Leur expression, en temps normal finement régulée, est fortement augmentée et plus étendue à la suite d'altérations de la peau (dues par exemple à l'acné, des plaies, le vieillissement, des lésions UV, l'assèchement, des brûlures, l'érythème, ou encore des inflammations) ou dans les épithéliums stratifiés subissant une différenciation anormale ou une hyperprolifération (à la suite par exemple de psoriasis, de dermatofibromes ou encore de carcinomes). Ces hyperkératinisations sont responsables de modifications de la structure de la matrice extracellulaire corrélées à une activation (prolifération et différenciation) des kératinocytes induisant ainsi une altération des structures et des fonctions cutanées. Des phénomènes identiques se produisent au niveau des différentes annexes cutanées telles que les follicules pileux, les glandes sudoripares apocrines ou encore les ongles, et en particulier au niveau des cheveux ou des poils. Ainsi, tout phénomène de glycation et/ou d'hyperkératinisation se traduit notamment par un relâchement tissulaire et par une perte d'élasticité, de fermeté, de tonicité, d'uniformité de la teinte et/ou de la texture de surface cutanée et/ou capillaire. 20 Par voie de conséquence, dans le cadre du développement de nouveaux actifs cosmétiques utiles pour prévenir ou traiter les signes de vieillissements cutané et/ou capillaire intrinsèques et/ou extrinsèques, notamment l'altération des structures et des fonctions cutanées et/ou capillaires, de l'altération de la régénération tissulaire, de l'altération de la microcirculation cutanée et/ou capillaire, de l'altération de la 25 détoxification cutanée, de la perte de l'uniformité et/ou de l'éclat et/ou de la brillance de la teinte (cutanée et/ou capillaire), de l'altération de la texture de surface cutanée (apparition de rides, de poches, de sécheresse cutanée, etc.) et/ou capillaire (cheveux cassant), de l'altération de l'architecture cutanée et/ou capillaire (induisant notamment la chute des cheveux), il est souhaitable d'identifier des composés permettant le 30 maintien de l'intégrité des molécules constituantes de la matrice extracellulaire, en particulier en limitant la dégradation de ces molécules constituantes, et/ou des composés permettant la diminution des processus de glycation et/ou d' hyperkératinisation. 35 Or, il a maintenant été trouvé de façon tout à fait surprenante que la dégradation radicalaire des polysaccharides extraits de fenugrec permettait d'obtenir des15 oligosaccharides de faible poids moléculaire, c'est-à-dire inférieur ou égal à 100.000 Daltons, permettant non seulement un maintien de l'intégrité des molécules constituantes de la matrice extracellulaire en limitant leur dégradation, mais également une diminution des processus de glycation et/ou d'hyperkératinisation. I1 a ainsi été trouvé de façon totalement inattendue que les oligosaccharides ainsi préparés permettent de retarder le vieillissement cutané et/ou capillaire intrinsèques et/ou extrinsèques, notamment l'altération des structures et des fonctions cutanées et/ou capillaires, l'altération de la régénération tissulaire, l'altération de la microcirculation cutanée et/ou capillaire, l'altération de la détoxification cutanée, la perte de l'uniformité et/ou de l'éclat et/ou de la brillance de la teinte (cutanée et/ou capillaire), l'altération de la texture de surface cutanée (apparition de rides, de poches, de sécheresse cutanée, etc.) et/ou capillaire (cheveux cassant), l'altération de l'architecture cutanée et/ou capillaire (induisant notamment la chute des cheveux). La présente invention a donc pour objet un oligosaccharide de formule générale (I) ~ R6 R7 R11 dans laquelle : - R' à R'2 sont choisis indépendamment les uns des autres et indépendamment pour chaque unité galactose et/ou mannose comme étant un groupe hydroxy, alkyloxy, carboxy, alkoxycarbonyl, acyloxy, sulfate ou phosphate; ou un groupement -OCH2Ra, dans lequel Ra représente un groupe hydroxy, alkyloxy, acyloxy, sulfate ou phosphate; - n est un entier inférieur ou égal à 100 et est choisi de manière à ce que le poids 25 moléculaire soit inférieur ou égal à 100.000 Daltons ; ainsi que son sel pharmaceutiquement acceptable. Les oligosaccharides selon la présente invention n'ont jamais été décrits auparavant. Ces composés permettent un non seulement un maintien de l'intégrité des molécules constituantes de la matrice extracellulaire en limitant leur dégradation, mais également une diminution des processus de glycation et/ou d'hyperkératinisation. Ces composés peuvent donc être utilisés dans le cadre de la prévention et/ou du traitement des signes de vieillissement cutané et/ou capillaire intrinsèques et/ou extrinsèques, notamment l'altération des structures et des fonctions cutanées et/ou capillaires, de l'altération de la régénération tissulaire, de relâchement tissulaire, de l'altération de la microcirculation cutanée et/ou capillaire, de l'altération de la détoxification cutanée, de la perte de l'uniformité, de l'éclat et de la brillance de la teinte (cutanée et/ou capillaire), de l'altération de la texture de surface cutanée (apparition de rides, de poches, sécheresse cutanée, etc.) et/ou capillaire (cheveux cassant), de l'altération de l'architecture cutanée et/ou capillaire (induisant notamment la chute des cheveux), ou incorporés dans des compositions cosmétiques utiles pour le traitement ou la prévention de tels symptômes. Dans le cadre de la présente invention : - l'expression «poids moléculaire » se réfère indifféremment à la molécule seule ou au mélange de molécules et représentent alors dans ce cas une valeur moyenne ; - on entend par « sel pharmaceutiquement acceptable » tout sel d'addition avec un acide minéral ou organique par action d'un tel acide au sein d'un solvant organique ou aqueux tel qu'un alcool, une cétone, un éther ou un solvant chloré, et qui soit acceptable d'un point de vue pharmaceutique. A titre d'exemple de tels sels, on peut citer les sels suivants : benzènesulfonate, bromhydrate, chlorhydrate, citrate, éthanesulfonate, fumarate, gluconate, iodate, iséthionate, maléate, méthanesulfonate, méthylène-bis-b-oxynaphtoate, nitrate, oxalate, palmoate, phosphate, salicylate, sulfate, tartrate, théophyllinacétate et p-toluènesulfonate ; - on entend par un groupe alkyle, une chaîne hydrocarbonée saturée, monovalente, linéaire ou ramifiée, comportant de 1 à 6 atomes de carbone, tels que les groupes suivants : méthyle, éthyle, n-propyle, iso-propyle, n-butyle, sec-butyle, iso-butyle, tertbutyle, pentyle, hexyle. - le terme « alkyle » tel que défini ci-dessus conserve la même définition quand il intègre le nom d'un groupe, par exemple dans le groupe alkyloxy. Ainsi, parmi les groupes alkyloxy, on peut citer les groupes méthoxy, éthoxy, n-propoxy, iso-propoxy, n-butoxy, iso-butoxy, sec-butoxy, tert-butoxy, pentyloxy ; - une étape de « concentration sous pression réduite » désigne une étape visant à évaporer l'eau contenue dans un extrait à une pression de 50 à 100 mm de Hg et à une température allant de 40 à 50°C. Préférentiellement, la présente invention a pour objet un oligosaccharide de formule générale (I) telle que définie ci-dessus dans laquelle les substituants R' à R'2 sont choisis indépendamment les uns des autres et indépendamment pour chaque unité galactose et/ou mannose comme étant un groupe hydroxy, alkyloxy, acyloxy, sulfate ou phosphate; ou un groupement -OCH2Ra, Ra étant tel que défini précédemment. De façon tout à fait préférée, la présente invention a pour objet un oligosaccharide de formule générale (I) telle que définie ci-dessus dans laquelle les substituants R' à R'2 sont choisis pour chaque unité galactose et/ou mannose comme étant un groupe hydroxy. Les oligosaccharides de formule générale (I) tels que définis précédemment ont un poids moléculaire moyen inférieur ou égal à 100.000 Daltons. Préférentiellement, la présente invention a pour objet un oligosaccharide de formule générale (I) tel que défini précédemment dans laquelle n est choisi de manière à ce que le poids moléculaire soit supérieur ou égal à 5.000 Daltons et inférieur ou égal à 100.000 Daltons. De préférence encore, n est choisi de manière à ce que le poids moléculaire soit supérieur ou égal à 5.000 Daltons et inférieur ou égal à 50.000 Daltons. De façon toute à fait préférée, n est choisi de manière à ce que le poids moléculaire soit supérieur ou égal à 5.000 Daltons et inférieur ou égal à 10.000 Daltons. Les oligosaccharides selon la présente invention sont préparés par dégradation radicalaire de polysaccharides de type galactomannanes extraits de fenugrec. La présente invention a donc pour objet un procédé de préparation d'oligosaccharides tels que définis précédemment comprenant les étapes suivantes : a) dispersion de la poudre de fenugrec dans l'eau à une température allant de 20°C à 100°C, le pH de la solution allant de 4 à 8 ; b) ajout progressif de peroxyde d'hydrogène (H2O2), la température de la solution allant de 20°C à 100°C, le pH de la solution allant de 4 à 8 ; c) maintient sous agitation, la température de la solution allant de 20°C à 100°C, le pH de la solution allant de 4 à 8 ; d) filtration ou centrifugation à température ambiante ; e) concentration sous pression réduite ; f) purification des molécules de faible poids moléculaire obtenues par : - ultrafiltration tangentielle sur des membranes de 5, 10 ou 30 kDa puis 5 atomisation en fine poudre; ou - précipitation alcoolique, filtration, lavage et séchage du précipitat obtenu. Le procédé de dégradation selon la présente invention permet l'obtention de molécules 10 de faible poids moléculaire avec un rendement de production élevé, de l'ordre de 30% par rapport à la masse sèche de poudre de fenugrec utilisée. L'étape a) du procédé de dégradation selon la présente invention consiste en la dispersion de poudre de fenugrec dans l'eau. 15 La poudre de fenugrec peut être préparée à partir de toute partie de la plante, notamment les feuilles, les racines et/ou les graines. De préférence, la poudre est préparée à partir des graines de fenugrec. De préférence la dispersion s'effectue sous agitation à une vitesse allant de 500 à 2.500 tours/minute, de préférence allant de 1.000 à 2.000 tours/minute. 20 La dispersion s'effectue à une température allant de 20°C à l00°C, de préférence à une température allant de 40°C à 90°C, de préférence encore à une température allant de 50 à 80°C. Durant la dispersion, le pH de la solution peut varier de 4 à 8, de préférence le pH de la solution varie de 5 à 7,5. Pour maintenir le pH de la solution à ces valeurs, tout moyen 25 connu de l'homme du métier peut être utilisé. Préférentiellement, on ajoutera de la soude 5N ou de la potasse 5N. La concentration en polysaccharides dans l'eau après dispersion pourra varier en fonction des besoins de l'homme du métier et du matériel utilisé. Préférentiellement, la concentration en polysaccharides pourra être de 1 à 1.000 g/1, de préférence encore de 1 30 à 100 g/1, de façon toute à fait préférée de 10 à 50 g/1. L'étape b) du procédé de dégradation selon la présente invention consiste en l'ajout progressif de peroxyde d'hydrogène. De préférence, le rapport massique entre l'extrait de Fenugrec et le peroxyde d'hydrogène ajouté est de 1/1. Le peroxyde d'hydrogène 35 ajouté sera préférentiellement choisi comme étant du H2O2 à 35%. L'ajout de peroxyde d'hydrogène s'effectue de façon progressive. De préférence, l'ajout de peroxyde d'hydrogène se fera de façon continue sur une période allant de 30 minutes à 5 heures. L'ajout de peroxyde d'hydrogène s'effectue à une température allant de 20°C à 100°C, 5 de préférence à une température allant de 40°C à 90°C, de préférence encore à une température allant de 50 à 80°C. Durant l'ajout de peroxyde d'hydrogène, le pH de la solution peut varier de 4 à 8, de préférence le pH de la solution varie de 5 à 7,5. Pour maintenir le pH de la solution à ces valeurs, tout moyen connu de l'homme du métier peut être utilisé. 10 Préférentiellement, on ajoutera de la soude 5N ou de la potasse 5N. L'étape c) du procédé de dégradation selon la présente invention consiste en l'agitation du mélange extrait de Fenugrec/peroxyde d'hydrogène. De préférence l'agitation s'effectue à une vitesse allant de 100 à 2.000 tours/minute, de 15 préférence encore à une vitesse allant de 300 à 1.000 tours/minute. De préférence, l'agitation sera maintenue pendant une période allant de 30 minutes à 5 heures, de préférence encore pendant une période allant de 30 minutes à 3 heures, de façon toute à fait préférée pendant une période allant de 1 heure à 2 heures. L'agitation s'effectue à une température allant de 20°C à 100°C, de préférence à une 20 température allant de 40°C à 90°C, de préférence encore à une température allant de 50 à 80°C. Durant l'agitation, le pH de la solution peut varier de 4 à 8, de préférence le pH de la solution varie de 5 à 7,5. Pour maintenir le pH de la solution à ces valeurs, tout moyen connu de l'homme du métier peut être utilisé. Préférentiellement, on ajoutera de la 25 soude 5N ou de la potasse 5N. L'étape d) du procédé de dégradation selon la présente invention consiste en une étape de filtration ou de centrifugation visant à éliminer les particules insolubles de la solution. 30 Pour procéder à la filtration, tout moyen connu de l'homme du métier peut être utilisé. Préférentiellement, la filtration du milieu sera réalisée sur diatomée par filtration frontale. Pour procéder à la centrifugation, tout moyen connu de l'homme du métier peut être utilisé. Préférentiellement, le milieu sera centrifugé pendant 10 minutes à 10.000 g et à 35 température ambiante. L'étape e) du procédé de dégradation selon la présente invention consiste en une étape de concentration du milieu par évaporation de l'eau présente dans l'extrait. Pour procéder à cette concentration, tout moyen connu de l'homme du métier peut être utilisé. Préférentiellement, cette étape se déroulera sous une pression allant de 50 et 100 mm de Hg, et à une température allant de 40 à 50°C. L'étape f) du procédé de dégradation selon la présente invention consiste en purification des oligosaccharides de faibles poids moléculaire. Dans le cas d'une ultrafiltration tangentielle, celle-ci sera préférentiellement effectuée 10 sur des membranes de 5, 10 ou 30 kDaltons. Dans le cas d'une précipitation alcoolique suivie d'une filtration, d'un lavage et d'un séchage, tout moyen connu de l'homme du métier peut être utilisé. Préférentiellement, la précipitation sera effectuée à l'aide d'un alcool qui pourra par exemple être choisi comme étant l'isopropanol ou l'éthanol. Préférentiellement, le précipitat obtenu pourra 15 être filtré sur fritté ou sur toile. D'autre part, le procédé de dégradation selon la présente invention peut être conduit en l'absence ou en présence d'un catalyseur. Ainsi, de façon optionnelle, le procédé de dégradation selon la présente invention peut être conduit en présence d'un catalyseur 20 choisi parmi les cations divalents tels que par exemple Cul+ ou Fe2+. Le catalyseur pourra être ajouté à l'étape b), c) et/ou d) du procédé selon l'invention. Les oligosaccharides selon la présente invention peuvent donc être utilisés en cosmétique pour maintenir l'intégrité des molécules constituantes de la matrice 25 extracellulaire et/ou diminuer les processus de glycation et/ou d'hyperkératinisation. Ainsi, un autre objet de la présente invention concerne l'utilisation cosmétique d'un ou plusieurs oligosaccharides selon la présente invention comme agent pour la prévention et/ou le traitement du vieillissement cutané ou capillaire intrinsèques et/ou extrinsèques, notamment l'altération des structures et des fonctions cutanées et/ou 30 capillaires, de l'altération de la régénération tissulaire, de l'altération de la microcirculation cutanée et/ou capillaire, de l'altération de la détoxification cutanée, de la perte de l'uniformité et/ou de l'éclat et/ou de la brillance de la teinte (cutanée et/ou capillaire), de l'altération de la texture de surface cutanée (apparition de rides, de poches, de sécheresse cutanée, etc.) et/ou capillaire (cheveux cassant), de l'altération de 35 l'architecture cutanée et/ou capillaire (induisant notamment la chute des cheveux) sont généralement attribués au vieillissement cellulaire. Préférentiellement, la présente invention a pour objet l'utilisation cosmétique d'un ou plusieurs oligosaccharides selon la présente invention comme agent pour la prévention et/ou le traitement de l'altération des structures et des fonctions cutanées et/ou capillaires, de l'altération de la régénération tissulaire, de la perte de l'uniformité et/ou de l'éclat et/ou de la brillance de la teinte (cutanée et/ou capillaire), de l'altération de la texture de surface cutanée (apparition de rides, de poches, de sécheresse cutanée, etc.) et/ou capillaire (cheveux cassant), de l'altération de l'architecture cutanée et/ou capillaire (induisant notamment la chute des cheveux). La présente invention a également pour objet une composition cosmétique comprenant, à titre de principe actif, un ou plusieurs oligosaccharides de faible poids moléculaires tels que décrits précédemment. Les compositions selon la présente invention peuvent être formulées sous toute forme galénique appropriée à leur administration. Les compositions selon la présente invention peuvent ainsi être formulées sous forme de crème, gel, lotion, lait, émulsion huile dans eau ou eau dans huile, solution, onguent, pulvérisateur, huile corporelle, lotion après-rasage, savon, bâton protecteur des lèvres, bâton et crayon pour maquillage. Les compositions selon la présente invention contiennent un ou plusieurs oligosaccharides selon la présente invention à des teneurs allant de 0,005% à 75% en poids total de la composition, préférentiellement de 0,01% à 25%, préférentiellement encore de 0,1% à 5%. Pour la préparation de ces compositions, un ou plusieurs oligosaccharides de faible poids moléculaires selon la présente invention ou un ou plusieurs de leurs sels pharmaceutiquement acceptables sont mélangés aux excipients classiquement utilisés dans le domaine cosmétique. Les compositions selon la présente invention peuvent prendre la forme d'une crème dans laquelle un ou plusieurs oligosaccharides de faible poids moléculaires selon la présente invention ou un ou plusieurs de leurs sels pharmaceutiquement acceptables sont associés aux excipients couramment utilisés en cosmétologie.30 Les compositions selon la présente invention peuvent prendre la forme de gels dans les excipients appropriés tels que les esters de cellulose ou d'autres agents gélifiants, tels que le carbopol, le sepinov (polyacrylate), la gomme guar, etc. Les compositions selon la présente invention peuvent aussi prendre la forme d'une lotion ou d'une solution dans lesquelles un ou plusieurs oligosaccharides de faible poids moléculaires selon la présente invention ou un ou plusieurs de leurs sels pharmaceutiquement acceptables sont sous forme encapsulée. Les microsphères suivant l'invention peuvent par exemple être constituées de corps gras, d'agar et d'eau. Un ou plusieurs oligosaccharides de faible poids moléculaires selon la présente invention ou un ou plusieurs de leurs sels pharmaceutiquement acceptables peuvent être incorporés dans des vecteurs de type liposomes, glycosphères, cyclodextrines, dans des chylomicrons, des macro-, micro-, nano-particules ainsi que les macro-, micro- et nanocapsules et aussi être absorbés sur des polymères organiques poudreux, les talcs, bentonites et autres supports minéraux. Ces émulsions jouissent d'une bonne stabilité et peuvent être conservées pendant le temps nécessaire pour l'utilisation à des températures comprises entre 0 et 50°C sans qu'il y ait sédimentation des constituants ou séparation des phases. Les compositions selon la présente invention peuvent aussi contenir des additifs ou des adjuvants usuels en cosmétologies, comme par exemple des agents antimicrobiens ou des parfums mais aussi des lipides d'extraction ou de synthèse, des polymères gélifiants et viscosifiants, des tensio-actifs et des émulsifiants, des principes actifs hydro- ou liposolubles, des extraits de plantes, des extraits tissulaires, des extraits marins, des actifs de synthèse. Les compositions selon la présente invention peuvent aussi comprendre d'autres principes actifs complémentaires choisis pour leur action, par exemple pour l'effet amincissant, l'effet anti-cellulite, l'effet raffermissant, l'effet hydratant, l'effet anti-âge, l'activité antimicrobienne, l'activité anti-oxydante, l'activité anti-radicalaire, l'effet cicatrisant, l'effet tenseur, l'effet anti-ride, l'activité chélatante, l'activité complexante et séquestrante, l'effet apaisant, l'effet anti-cernes, l'effet anti-rougeurs, l'activité émolliente, l'effet démêlant capillaire, l'activité anti-pelliculaire, l'effet stimulant de la repousse du cheveu, l'effet inhibant la chute du cheveu, l'effet gainant capillaire, l'activité épilatoire, l'activité limitant la repousse du poil, l'activité participant au renouvellement cellulaire, l'activité modulant la réponse inflammatoire, l'activité participant au maintien de l'ovale du visage, mais également la protection solaire, l'activité anti-irritante, la nutrition cellulaire, la respiration cellulaire, les traitements anti-séborrhéiques, la tonicité cutanée, la protection du cheveu. Lorsque les compositions selon la présente invention contiennent des principes actifs complémentaires, ceux-ci sont généralement présents dans la composition à une 5 concentration suffisamment élevée pour qu'ils puissent exercer leur activité. Les compositions selon la présente invention sont de préférence utilisées quotidiennement et appliquées une ou plusieurs fois par jour. 10 Les compositions selon la présente invention sont très bien tolérées, elles ne présentent aucune toxicité et leur application sur la peau, pour des périodes de temps prolongées, n'implique aucun effet systématique. Les compositions selon la présente invention peuvent donc être utilisées pour maintenir 15 l'intégrité des molécules constituantes de la matrice extracellulaire et/ou diminuer les processus de glycation et/ou d'hyperkératinisation et donc pour prévenir et/ou traiter les signes de vieillissement cutané et/ou capillaire intrinsèques et/ou extrinsèques, notamment l'altération des structures et des fonctions cutanées et/ou capillaires, de l'altération de la régénération tissulaire, de relâchement tissulaire, de l'altération de la 20 microcirculation cutanée et/ou capillaire, de l'altération de la détoxification cutanée, de la perte de l'uniformité, de l'éclat et de la brillance de la teinte (cutanée et/ou capillaire), de l'altération de la texture de surface cutanée (apparition de rides, de poches, sécheresse cutanée, etc.) et/ou capillaire (cheveux cassant), de l'altération de l'architecture cutanée et/ou capillaire (induisant notamment la chute des cheveux). 25 La présente invention est illustrée de manière non limitative par les exemples suivants. Exemple 1 - Préparation d'oli2osaccharides selon l'invention 30 Extraction de polysaccharides de type galactomannanes L'extraction des polysaccharides est réalisée en dispersant 20 grammes de poudre de fenugrec dans 1 litre d'eau à 95 °C sous vive agitation (1.000 trs/min) pendant 2 heures. 35 Le mélange est ensuite filtré à chaud (80 à 95°C) sur diatomée (50 g) sur un verre fritté 1. L'extrait de fenugrec est ensuite précipité dans 3 volumes d'éthanol 96°(à 4°C) sous agitation (500 trs/min) pendant 2 heures. Le précipitat est récupéré sur filtre toile (porosité 500 µm) puis lavé avec 100 ml d'éthanol 96°, essoré puis séché (à 35 °C pendant 12 heures). Finalement, le précipitat est broyé puis tamisé sur 5001um afin d'obtenir une fine poudre de polysaccharides de type galactomannanes extraits de fenugrec. Production d'oligosaccharides selon l'invention 30 g de polysaccharides de type galactomannanes ainsi obtenus sont dissous dans 1 litre d'eau (80 °C, pH 7-7,5) sous vive agitation (1.500 trs/min). 15 On ajoute 133 ml d'une solution d'H2O2 à 35% pendant 1 heure à un débit de 2.22 ml/min à 80°C et en maintenant à pH 7-7,5 par ajout continu de NaOH (5M). Après ajout complet de l'H2O2, l'agitation est maintenue durant 3 heures supplémentaires (500 trs/min) à 80°C en maintenant le pH entre 7-7,5 par ajout de 20 NaOH (5M). On laisse le milieu revenir à 25 °C et on filtre sur diatomée (ou centrifuger à 10.000g, 10 minutes, 25°C) pour éliminer les insolubles. 25 Le filtrat est ensuite concentré sous pression réduite à 40 °C jusqu'à un volume correspondant à 1/5 du volume initial. Le concentrât est alors précipité dans 5 volumes d'éthanol 96° à 4°C sous agitation (500 trs/min) pendant 1 heure. Le précipitât est récupéré par filtration sur verre Fritté 2 (porosité inférieure à 100 microns), trituré puis lavé avec 50 ml d'éthanol pendant 30 minutes puis filtré sur verre Fritté 2. Finalement, le précipitât est séché à l'étuve (40°C, 1 nuit) puis broyé en fine poudre. Le rendement de production des oligosaccharides est de 60-70%. 30 35 Analyse Analyse des sucres constitutifs On hydrolyse les oligosaccharides obtenus au TFA 1N et on procède aux analyses des 5 sucres constitutifs par chromatographie ionique (HPAEC) en se référant à des bases de données monosaccharides pour l'identification. Détermination du poids moléculaire Analyse par chromatographie d'exclusion stérique (SEC MALLS) avec l'utilisation de 10 2 colonnes de chromatographie OHPAK SB 804 et 806 HQ (Shodex). Galactomannanes Exemple 2 : Production d'oli2osaccharides selon l'invention en continu 15 Préparation On disperse 30g de poudre de fenugrec dans 1 litre d'eau à 90 °C sous vive agitation (1.000 trs/min) pendant 2 heures. Le mélange est filtré à chaud sur diatomée (50g) sur verre fritté 1. 20 L'extrait de polysaccharides de type galactomannanes extraits obtenu est maintenu sous vive agitation (1.000 trs/min) à 80 °C et pH 7-7,5. On ajoute au milieu 40 ml d'une solution d'H2O2 à 35% pendant 1 heure à un débit de 0.55 ml/min à 60°C et en maintenant à pH 7-7,5 par ajout de NaOH (5M). Après ajout complet de 1' H2O2 (en 1 heure environ), l'agitation est maintenue durant 3 25 heures (500 trs/min) à 80°C et pH 7-7,5. Le filtrat est ensuite concentré sous pression réduite à 40 °C jusqu'à un volume correspondant à 1/5ème du volume initial. Le concentrât est alors précipité dans 5 volumes d'éthanol 96° à 4°C sous agitation (500 trs/min) pendant 1 heure. Le précipitât obtenu est récupéré par filtration sur verre Ratio massique Galactose Mannose Poids moléculaires (majoritaires) X20 kDa Fritté 2 (porosité inférieure à 100 microns), trituré puis lavé avec 50 ml d'éthanol 96° pendant 30 minutes puis filtré sur verre Fritté 2. Finalement, le précipitât est séché à l'étuve (40°C, 1 nuit) puis broyé en fine poudre. Le rendement de production des oligosacchaires est de 60-70%. Analyse Analyse des sucres constitutifs On hydrolyse les oligosaccharides obtenus au TFA 1N et on procède aux analyses des sucres constitutifs par chromatographie ionique (HPAEC) en se référant à des bases de 10 données monosaccharides pour l'identification. Détermination du poids moléculaire Analyse par chromatographie d'exclusion stérique (SEC MALLS) avec l'utilisation de 2 colonnes de chromatographie OHPAK SB 804 et 806 HQ (Shodex). Galactomannanes Ratio massique Poids moléculaires (majoritaires) Galactose Mannose k;20 kDa 15 Exemple 3 : Production d'oli2osaccharides selon l'invention en continu et purification par UFT On disperse 30g de poudre de fenugrec dans 1 litre d'eau à 90 °C sous vive agitation (1.000 trs/min) pendant 2 heures. On ajoute ensuite au milieu 40 ml d'une solution d'H2O2 à 35% pendant 1 heure à un 25 débit de 0.60 ml/min à 60°C et en maintenant à pH 5-8 par ajout de NaOH (5M). Après ajout complet de l'H2O2 (en 1 heure environ), l'agitation est maintenue durant 3 heure (500 trs/min) à 80°C et pH 5-8. Le mélange est ensuite filtré à chaud sur diatomée (50g) sur verre fritté 1. L'élimination 20 des particules insolubles peut être également réalisée par centrifugation (10.000g, 15 minutes, 22°C). Le filtrat est alors concentré par ultrafiltration tangentielle sur membrane de 5 kilo 5 daltons jusqu'à l'obtention d'un extrait concentré à 10% en matière sèche. Le concentrât peut finalement être atomisé afin d'obtenir une forme sèche (poudre) des oligosaccharides selon l'invention. 10 Analyse Analyse des sucres constitutifs On hydrolyse les oligosaccharides obtenus au TFA 1N et on procède aux analyses des sucres constitutifs par chromatographie ionique (HPAEC) en se référant à des bases de données monosaccharides pour l'identification. 15 Détermination du poids moléculaire Analyse par chromatographie d'exclusion stérique (SEC MALLS) avec l'utilisation de 2 colonnes de chromatographie OHPAK SB 804 et 806 HQ (Shodex). Galactomannanes Exemple 4 : Etude transcriptomique réalisée sur des fibroblastes humains cultivés in-vitro 25 Une étude transcriptomique a été réalisée sur des fibroblastes humains cultivés in-vitro en absence ou en présence d'oligosaccharides préparés selon les exemples 1 à 3 à la concentration de 0,1% en poids (soit 0, l g d'oligosaccharides pour 100g de milieu de culture cellulaire). Ratio massique Galactose Mannose Poids moléculaires (majoritaires) k;20 kDa 20 Lorsque les deux cultures cellulaires de fibroblastes sont arrivées à confluence, leurs ARN totaux respectifs sont extraits puis reverse transcrits en ADN complémentaires mono brin (ADNc) respectifs marqués de façon différentielle (les ADNc issus des ARN extraits des fibroblastes cultivés dans la condition témoin sont marqués à la cyanine Cy3 et les ADNc issus des ARN extraits des fibroblastes cultivés dans la condition test sont marqués à la cyanine Cy5). Ces deux types d'ADNc sont poolés et hybridés sur une puce à ADN contenant les 44.000 séquences du génome humain. La lecture de la puce permet de déterminer la surexpression (marquage Cy5 supérieur au marquage Cy3 pour la séquence génétique hybridée concernée) et la sous-expression (marquage Cy5 inférieur au marquage Cy3 pour la séquence génétique hybridée concernée) des gènes induites par le traitement des fibroblastes avec les oligosaccharides selon la présente invention. Lors de cette étude, il a été mis en évidence que les oligosaccharides utilisés entraînent notamment la surexpression du gène SAA1 et la sous-expression du gènes MAL codant pour les protéines portant les mêmes noms et impliquées dans le métabolisme des molécules constituantes de la matrice extracellulaire. En effet, la surexpression du gène SAA1 permet une activation de la biosynthèse d'acide hyaluronique, un des constituants majeur de la matrice extracellulaire et la sous-expression du gène MAL qui permettant ainsi une inactivation des métalloprotéinases matricielles impliquées dans la dégradation des collagènes (le second constituant majeur de la matrice extracellulaire). Ces deux activités permettent une protection de l'intégrité de la matrice extracellulaire. Cette étude a également mis en évidence que les oligosaccharides utilisés entraînent la surexpression du gène SOD2 et la sous-expression des gènes HK3, ISM1 et KRT16 codant pour les protéines portant les mêmes noms et impliquées dans la modulation des processus de glycation et d'hyperkératinisation. En effet, la surexpression SOD2 permet d'augmenter la protection de l'organisme et donc de la peau contre les molécules oxygénées réactives (radicaux libres et molécules oxydantes) responsables notamment de l'initiation et de l'amplification du phénomène de glycation. La sous-expression des gènes HK3 et ISM1 permet une diminution des concentrations en glucose dans les espaces extracellulaires et donc une diminution de l'étape de propagation, par glyco-oxydation, du phénomène de glycation. Cela permet donc une modulation du phénomène de glycation impliqué dans l'altération des structures et des fonctions cutanées et/ou capillaires. La sous-expression du gène KRT16 permet quant à elle une repression du phénomène d'hyperkératinisation intervenant à la suite d'une altération de la peau (acnée, plaies, vieillissement, lésions UV, assèchement, brûlure, érythème, inflammation, agressions extérieures, etc.). En conclusion, l'étude transcriptomique a permis de mettre en évidence que les composés de la présente invention permettent un maintien de l'intégrité des molécules constituantes de la matrice extracellulaire et une diminution des processus de glycation et d'hyperkératinisation permettant ainsi une préservation des structures et des fonctions cutanées et/ou capillaires. Exemple 5 : Etude in-vitro de la 2lvcation sur une solution d'albumine Cette étude a permis d'étudier l'effet des oligosaccharides préparés selon l'un des exemples 1 à 3 sur la formation des produits de glycation avancée (PGA) en présence de glucose et en comparaison avec l'aminoguanidine (molécule de référence). Lors de cette étude, cinq conditions ont été testées : - condition témoin négatif : solution d'albumine (10 mg/ml dans tampon phosphate 200 20 mM, pH 7,4) + glucose (200 mM), - condition témoin positif : solution d'albumine (10 mg/ml dans tampon phosphate 200 mM, pH 7,4) + aminoguanidine (1 mM) + glucose (200 mM), - trois conditions test avec les oligosaccharides: - solution d'albumine (10 mg/mL dans tampon phosphate 200 mM, pH 7,4) + 25 oligosaccharides selon la présente invention à la concentration de 0,25% en poids + glucose (200 mM), - solution d'albumine (10 mg/ml dans tampon phosphate 200 mM, pH 7,4) + oligosaccharides selon la présente invention à la concentration de 0,5% en poids + glucose (200 mM), 30 - solution d'albumine (10 mg/ml dans tampon phosphate 200 mM, pH 7,4) + oligosaccharides selon la présente invention à la concentration de 1% en poids + glucose (200mM). Ces cinq conditions ont été incubées à 37°C pendant 14 jours. Les produits de glycation 35 avancée (PGA) ont été déterminés à l'aide du kit ELISA Usen Life Science Inc. Wuhan. Brièvement, la plaque fournie du kit Usen Life Science Inc. Wuhan a été pré - coatée avec un anticorps spécifique pour les PGA. Les standards ou les échantillons sont alors ajoutés aux puits appropriés de la plaque avec un anticorps polyclonal biotine-conjugué spécifique pour les PGA. Après, l'avidine conjuguée à la peroxydase est ajoutée à chaque puits de la microplaque puis incubé. Une solution de substrat de TMB est ensuite ajoutée à chaque puits. Seuls les puits qui contiennent les PGA, l'anticorps biotine-conjugué et l'avidine enzyme-conjuguée montre un changement de couleur. La réaction enzyme/substrat est stoppée par addition d'une solution d'acide sulfurique et le changement de couleur est mesuré par spectrophotométrie à une longueur d'onde de 450 nm. La concentration des PGA dans les échantillons est alors déterminée en comparant la densité optique des échantillons à la courbe standard. Les résultats obtenus montrent que l'aminoguanidine à 1 mM (témoin positif) entraîne une diminution significative (53%) du taux de produits de glycation avancée (PGA) et que les composés de la présente invention aux concentrations de 0,25g, 0,5g et 1g de composés pour 100 ml de milieu de culture cellulaire (soit à 0,25%, 0,5% et 1% en poids) entraînent une diminution significative des PGA respectivement de 15%, 25% et 30%. En conclusion, cette étude montre que les oligosaccharides de la présente invention 20 entraînent une diminution du processus de glycation au niveau des protéines. Exemple 6 : Etude in-vitro réalisée sur des fibroblastes humains en culture 25 Une étude in-vitro a été réalisée sur des fibroblastes humains en culture en absence d'oligosaccharides préparés selon les exemples 1 à 3 et en présence de glucose à trois concentrations (150 mM, 200 mM et 250 mM) (condition témoin négatif), ou en présence d'aminoguanidine (1 mM) et de glucose à trois concentrations (150 mM, 200 mM et 250 mM) (condition témoin positif), ou en présence d'oligosaccharides préparés 30 selon les exemples 1 à 3 à la concentration de 1% en poids (correspondant à 1g de molécules à tester pour 100 ml de milieu de culture cellulaire) et en présence de trois concentrations de glucose (150 mM, 200 mM et 250 mM). Les fibroblastes humains ont été cultivés selon les conditions décrites précédemment 35 durant 7 jours. A la fin de cette période, les cellules ont été prélevées puis soniquées trois fois 5 secondes avant d'être extraites avec 1 ml d'une solution éthanol : diéthyl ether (3:1 (v:v)). Le surnageant a été analysé pour déterminer le taux de PGA par le kit ELISA Usen Life Science Inc. Wuhan dont l'utilisation a été décrite dans l'exemple précédent. Cette étude a permis d'évaluer l'effet des composés testés sur la formation des produits de glycation avancés (PGA) au niveau des fibroblastes humains en culture en présence de différentes concentrations de glucose. Les résultats obtenus montrent que l'aminoguanidine à 1 mM (traitement pendant 7 jours) entraîne une diminution significative (40%, 43% et 45%) du taux des produits de la glycation avancée (PGA) respectivement en présence des trois concentrations de glucose (150 mM, 200 mM et 250 mM). Le traitement des cellules, pendant 7 jours, avec les composés de la présente invention (à la concentration de 1% en poids) en présence de 150, 200 ou 250 mM de glucose permet une diminution significative des PGA respectivement de 22%, 24% et 22%. En conclusion cette étude montre que les oligosaccharides de la présente invention entraînent une diminution du processus de glycation au niveau des cellules humaines. Exemple 7 : Etude in-vitro réalisée sur des fibroblastes humains en culture Une étude in-vitro a été réalisée sur des fibroblastes humains en culture en absence d'oligosaccharides préparés selon les exemples 1 à 3 et en présence de glucose 25 radiomarqué au carbone 14 (condition témoin négatif), ou en présence d'aminoguanidine (1 mM) et de glucose radiomarqué au carbone 14 (condition témoin positif), ou en présence de différentes concentrations d'oligosaccharides préparés selon les exemples 1 à 3 et en présence de glucose radiomarqué au carbone 14. 30 Les fibroblastes humains ont été cultivés selon les conditions décrites précédemment durant 7 jours. A la fin de cette période, les cellules ont été lavées puis prélevées avant d'être soniquées (3 fois 5 secondes) et extraites avec 1 ml d'une solution éthanol : diéthyl ether (3:1 (v:v)). Le surnageant a été analysé pour déterminer le taux des PGA par la détection de la radioactivité. 35 Cette étude a permis d'évaluer l'effet des composés testés sur l'incorporation du glucose radiomarqué au carbone 14 dans les produits de glycation au niveau des fibroblastes humains en culture. Les résultats obtenus montrent que l'aminoguanidine à lmM (traitement pendant 7 jours) entraîne une diminution significative (41%) de l'incorporation du glucose radiomarqué au carbone 14 montrant ainsi une diminution significative de 41% du taux de produits de glycation avancée (PGA). Le traitement des cellules, pendant 7 jours, avec les composés de la présente invention aux concentrations de 0,25%, 0,5% et 1% en poids permet une diminution significative de l'incorporation du glucose radiomarqué au carbone 14, donc du taux de produits de glycation avancée, respectivement de 13%, 20% et 26%. Exemple 8 : Etude in-vitro réalisée sur des épidermes reconstitués Une étude in-vitro réalisée sur des épidermes reconstitués cultivés en absence d'oligosaccharides préparés selon les exemples 1 à 3 (condition témoin négatif), ou en présence de vitamine A apportée à la concentration de 0,83 mM (condition témoin positif), ou en présence de molécules à tester à la concentration de 1% en poids (correspondant à 1g de molécules à tester pour 100 ml de milieu de culture cellulaire). Cette étude a permis d'évaluer l'effet des composés testés sur la différenciation épidermique (intensité de marquage de la filaggrine). Les résultats obtenus montrent que la vitamine A à la concentration de 0,83mM entraîne une diminution significative (75%) de l'intensité de marquage de la filaggrine et que les composés de la présente invention à la concentration de 1% en poids (soit à 1g de composés pour 100 ml de milieu de culture cellulaire) entraînent une diminution significative (50%) de l'intensité de marquage de la filaggrine et donc de la différenciation épidermique. En conclusion, cette étude montre que les oligosaccharides de la présente invention entraînent une diminution de la différenciation épidermique.35 Plus généralement, les résultats des études in-vitro rapportées ci-dessus mettent en évidence le rôle important des composés de la présente invention dans la protection contre le processus de glycation, et dans la diminution de la différenciation épidermique. Cette protection contre le processus de glycation permet un maintien de l'intégrité de la matrice extracellulaire en empêchant la modification des molécules constituantes. Ceci corrélé à une diminution de la différenciation épidermique permet un maintien de l'intégrité épidermique et cutanée. Les études rapportées ci-dessus mettent également en avant le rôle important des composés de la présente invention dans la limitation de la dégradation des molécules constituantes de la matrice extracellulaire permettant ainsi le maintien de l'intégrité de ces molécules et donc le maintien de l'intégrité épidermique et cutanée.