Brevet FR2962332A1 — publié le 20120113

Propofol pour utilisation comme médicament antiviral La présente invention a pour objet une nouvelle utilisation du propofol portant sur la fabrication de médicaments pour prévenir et/ou traiter des infections virales 5 chez l'homme et l'animal. Le propofol est la dénomination commune internationale (DCI) du (2,6-diisopropylphénol) de formule (A) c1~3 OH (A) 10 Le propofol est un anesthésique général administré par voie veineuse et est d'action rapide et brève. Il existe sous deux forme commerciales : le disoprofol ® et le diprivan ®. Les travaux des Inventeurs sur le propofol ont permis de mettre en évidence 15 que, de manière surprenante, ce composé possédait également une forte action virucide contre les virus à enveloppe et tout particulièrement contre les virus grippaux, spécialement contre celui de la grippe aviaire. L'invention vise donc le propofol pour utilisation comme médicaments afin de 20 prévenir et/ou traiter les infections dues à des virus à enveloppes. Lors de l'élaboration des médicaments, les principes actifs (propofol), utilisés en quantité thérapeutiquement efficaces, sont mélangés avec les véhicules pharmaceutiquement acceptables pour le mode d'administration choisi. Ces 25 véhicules peuvent être solides ou liquides de manière à fournir des émulsions, des suspensions ou des solutions. Ainsi pour une administration par voie orale, les médicaments sont préparés sous forme de gélules, comprimés, dragées, capsules, pilules, poudres par exemple dans des capsules de gélatine, cachets, granulés, gouttes, sirops et analogues. Pour l'administration par voie injectable (intraveineuse, sous-cutanée, intramusculaire), les médicaments se présentent sous forme de solutions stériles ou stérilisables. Les médicaments de l'invention peuvent être également administrés sous 10 forme d'aérosols. De tels médicaments peuvent renfermer de 250 mg à 1 g de principe actif par unité. 15 Les doses à administrer seront déterminées en fonction de l'état du patient ou de l'animal à traiter. Ces composés peuvent être utilisés seuls ou en association avec d'autres médicaments antiviraux. Le propofol utilisé comme défini plus haut, permet de disposer de médicaments de grande valeur pour le traitement d'infections virales et de leurs symptômes virologiques et immunitaires, induits par des virus à enveloppe. 25 L'invention vise plus particulièrement le propofol pour utilisation comme médicaments pour prévenir et/ou traiter les infections dues à des « orthomyxovirus », responsables de grippes et tout spécialement les infections dues à des virus grippaux de type A en particulier les sous-types H5, H7 et H9 qui provoquent la grippe aviaire chez toutes les espèces d'oiseaux, sauvages ou domestiques. De 30 telles infections peuvent devenir fortement contagieuses et entraîner une mortalité élevée dans les élevages industriels, par exemple de poulets ou de dindes et peuvent se propager à d'autres espèces animales comme le porc et d'autres mammifères. 20 On mesure donc l'intérêt de l'invention qui fournit de nouveaux médicaments antiviraux de grande efficacité. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention seront rapportés dans les 5 exemples qui suivent. Etude de l'effet antiviral du propofol sur un modèle létal d'infection d'oeufs de poule avec le virus Influenza A. 10 Le but de cette étude est de montrer les propriétés antivirales du propofol mis en contact avec une suspension virale de virus Influenza A à quatre concentrations, compatibles avec les concentrations atteignables dans les milieux biologiques à la suite d'une administration du propofol par voie générale (orale ou parentérale). 15 Préparation des compositions de propofol 15 mg de propofol ont été dissous dans 5 ml de polyéthylèneglycol (PEG) 400. La solution a été diluée dans une série de mélanges PEG400/eau pour préparation injectable (eau ppi) contenant chacune des proportions croissantes d'eau jusqu'à obtention d'une solution dénommée « SI » contenant 1 mg de propofol par ml du 20 mélange PEG400/eau (50/50 ; V/V). La formulation à 5% de propofol a été diluée dans l'eau ppi. Quatre concentrations ont été préparées soit avec une composition de propofol hydrodispersible à 5% de principe actif dilué dans l'eau, soit avec des 25 solutions du produit d'essai pur en poudre dissous dans le mélange PEG400/eau en proportions égales : la concentration de 625 pg/ml a été obtenue avec la composition à 5% diluée dans l'eau et toutes les autres concentrations dans le mélange PEG/eau à proportions égales. Afin d'éviter les reprécipitations lors d'adjonction d'eau, 15 mg de propofol ont été entièrement dissous dans 5 ml de PEG400, puis des aliquots ont 30 été dilués dans des mélanges successifs PEG/eau jusqu'à l'obtention d'une solution à 1 mg/ ml contenant autant de PEG que d'eau. Préparation des oeufs Les oeufs de poule utilisés sont exempts d'organismes pathogènes spécifiés et sont désignés par oeufs « EOPS » ou « SPF » (« specified pathogen free »). Les oeufs ont été avant l'essai incubés 10 jours à 36°C dans un incubateur à rotation de 180° par cycle de 4h automatique et à air pulsé, avec une hygrométrie constante de 55+/- 5%. Les oeufs ont été mirés avant l'essai afin d'éliminer les oeufs clairs ou les embryons morts. Préparation de l'inoculum viral Le virus Influenza A a été obtenu de l'Institut Pasteur (Laboratoire de la 10 Grippe, Paris) via Texcell, 91 Evry et propagé sur oeufs EOPS embryonnés de poule (TEX010CK). La préparation titrée a été conservée congelée en milieu « PBS » (« phosphate buffered saline ») (DIFCO) en ampoules de 2 ml à 25 Expérimentations Les préparations du produit de test et la suspension virale ont été mises en présence 5 minutes à 37°C avant injection à 50 oeufs au 10-11 ème jour d'incubation, par voie chorio-allantoïque. 500 pl de solution contenant le principe actif propofoi aux doses de 625 et 500 30 pg, puis 250 pl de solution contenant le principe actif aux doses de 32 et 8 pg, ont été laissés 5 minutes à l'étuve à 37°C en microtubes avec 250 pl de suspension virale à chacune des deux concentrations, puis injectés aux oeufs au 10ème jour d'incubation. Les oeufs ont, après les injections, été incubés quatre jours, mirés chaque jour, puis les embryons ont été observés directement et les liquides allantoïques ont été récoltés et poolés par groupe et conservés congelés à une température inférieure à -70°C pour un éventuel test d'hémagglutination. Résultats Le tableau 1 donne les résultats de survie des embryons après l'inoculation (par mirage jusqu'à J+3). Le tableau 1 donne également les résultats lorsque le virus est mis en présence d'un anticorps neutralisant ou encore en présence de formaldéhyde (le formaldéhyde étant connu pour son action inactivante ou neutralisante vis-à-vis des virus). Tableau 1 Traitement J +1 J +2 J +3 J +4 PEG+eau 3/3 3/3 3/3 2/3 Virus + Anticorps neutralisant 2/2 2/2 2/2 2/2 Virus 1/100 3/3 2/3 2/3 1/3 Virus 1 /10 2/2 0/2 0/2 0/2 Virus1/10 +formaldéhyde 2/2 2/2 2/2 2/2 V1/10+propofol à 8pg 4/5 1/5 0/5 0/5 V1/10+ propofol à 32pg 4/5 4/5 1/5 1/5 V1/10+ propofol à 500pg 5/5 5/5 0/5 0/5 V1/10+ propofol à 625pg 4/4 4/4 2/4 0/4 V1/100+ propofol à 8pg 3/5 1/5 0/5 0/5 V1/100+ propofol à 32pg 5/5 5/5 5/5 3/5 V1/100+ propofol à 500pg 5/5 5/5 5/5 2/5 V1 /100+ propofol à 625pg 4/4 4/4 4/4 4/4 Le modèle d'infection expérimentale à virus Influenza A sur oeufs EOPS embryonnés de poule d'origine Lohmann a donné des résultats cohérents, le virus seul provoquant la mort de tous les embryons en 2 à 4 jours (à 2,5 x 104 pfu par oeuf), le virus neutralisé ou inactivé par le formaldéhyde ne provoquant pas la mort des embryons. L'activité antivirale a été observée à partir de la dose de 32 pg (dans 0,5 ml d'inoculum pour des oeufs de 50-60 g), la concentration la plus élevée de 625 pg ayant permis, dans les conditions d'expérimentation, la survie de tous les oeufs du lot. Les résultats obtenus montrent l'efficacité antivirale du propofol à des doses de virus Influenza A, correspondant in vivo à au moins 1 ppm (1 pg de propofol par g de tissu). REVENDICATIONS1/ Propofol répondant à la formule (A) : G4 OH c" pour utilisation comme médicaments afin de prévenir et/ou traiter les infections dues à des virus à enveloppes. 2/ Profofol selon la revendication 1, caractérisé en ce que les 10 médicaments sont préparés pour une administration par voie orale. 3/ Propofol selon la revendication 2, caractérisé en ce que les médicaments se présentent sous formes de gélules, comprimés, dragées, capsules, pilules, poudres par exemple dans des capsules de gélatine, cachets, granulés, 15 gouttes, sirops et analogues. 4/ Propofol selon la revendication 1, caractérisé en ce que les médicaments sont préparés pour une administration par voie injectable. 20 5/ Propofol selon la revendication 1, caractérisé en ce que les médicaments sont préparés pour une administration sous forme d'aérosol. 6/ Propofol selon selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que les médicaments renferment de 250 mg à 1 g de principe actif 25 par unité. 7/ Propofol selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que les virus grippaux de type A appartiennent aux sous-types H5, H7 et H9. C3 (A)5