Brevet FR2966045A1 — publié le 20120420

DISPOSITIF RESORBABLE PERMETTANT LA LIBERATION PROLONGEE DE CHLORHEXIDINE DANS LA POCHE PARODONTALE Le domaine de la présente invention concerne un nouveau dispositif résorbable (biorésorbable) permettant la libération prolongée de chlorhexidine dans la poche parodontale. Les maladies parodontales sont des maladies inflammatoires d'origine infectieuse, ayant comme étiologie principale le biofilm bactérien bucco-dentaire. Elles intéressent les tissus de soutien de la dent regroupés sous le terme de parodonte à savoir la gencive, le ligament alvéolodentaire, le cément et l'os alvéolaire. Ces maladies se traduisant cliniquement par l'approfondissement du sillon gingivo-dentaire et la formation d'une poche parodontale par destruction progressive du système d'attache de la dent. L'objectif de la thérapeutique parodontale est l'assainissement de ces poches parodontales pour permettre leur cicatrisation. Classiquement, la thérapeutique comprend une phase non chirurgicale appelée thérapeutique initiale anti-infectieuse qui comporte des détartrages-surfaçages radiculaires (DSR) accompagnée de la mise en place d'un contrôle de plaque adéquat afin de permettre l'élimination du biofilm dentaire et du contenu pathogène de la poche et rendre ainsi les surfaces radiculaires compatibles avec une réattache des tissus parodontaux sur la surface radiculaire. Six à douze semaines après ce traitement, une réévaluation est réalisée et des thérapeutiques complémentaires (antibiothérapie, traitement chirurgical) sont proposées. Les thérapeutiques non chirurgicales de DSR à l'aveugle donnent des résultats limités pour des profondeurs de poches supérieures à 5 mm [Heitz-Mayfield et al., 2002]. L'état de l'art décrit : - thèse de Christian Gianella, "étude clinique sur l'effet de deux systèmes biodégradables pour 2 l'administration locale d'agents anti-infectieux dans les poches parodontales" (2006). Il est décrit qu'une libération de chlorhexidine dans la poche parodontale pendant 3 jours provoque une réduction significative des spirochètes et des bactéries mobiles pendant plus de 2 semaines, tandis qu'une libération sur 9 jours permet de réduire la flore parodontale à des taux négligeables pendant 11 semaines. - EP 388 220 : composition comprenant de la chlorhexidine et une matrice protéique insoluble dans l'eau ; permettant la libération retardée de chlorhexidine dans une poche parodontale sous forme d'un implant. Une spécialité commercialisée d'après cet enseignement est le Periochipe qui se présente sous la forme d'un petit rectangle orangé destiné à être inséré dans les poches parodontales qui présentent une profondeur minimum de 5 mm. Les dimensions du Periochipe sont 4 mm * 5 mm* 350 pm. Chaque Periochipe pèse approximativement 7,4 mg et contient 2,5 mg de digluconate de chlorhexidine (digCHX) dans une matrice biodégradable de gélatine hydrolysée (réticulé par du glutaraldéhyde), soit environ 340 mg de digCHX/g de Periochipe. Le Periochipe contient également de la glycérine et de l'eau purifiée. Cependant, ce dispositif ne libère en réalité la chlorhexidine que sur une période de quelques jours (jusqu'à 3 jours). - Chlosite gel de xanthane contenant 1,5 % de CHX (EP 122 399) ; - US 4 568 535 décrit des dispositifs d'éthylcellulose comprenant du métronidazole à insérer directement dans la poche parodontale pour le traitement des maladies parodontales ; en revanche, on note un manque de praticité de ces dispositifs car ils sont non 3 résorbables et on ne dispose pas d'information sur la libération ; - JP 2001/055306 divulgue un dispositif à base de pointe de papier et d'un principe actif apte à être inséré dans le canal pulpaire ; Il ressort de ce constat général qu'il est nécessaire de disposer d'un dispositif résorbable, à administrer directement dans la poche parodontale, qui présenterait une libération prolongée de chlorhexidine à dose bactéricide ou bactériostatique sur une période de temps supérieure à celle obtenue avec les dispositifs de l'art antérieur. Il a été remarqué, et ceci de manière surprenante et complètement inattendue, que ce problème technique pouvait être résolu grâce aux pointes de papier largement connues dans ce domaine technique qui, après avoir été rendues résorbables (de préférence par oxydation) et après imprégnation de principe actif, se révèlent être de très efficaces dispositifs de libération et totalement adaptés à une utilisation directe dans la poche parodontale. La présente invention concerne donc un dispositif résorbable permettant la libération prolongée d'un principe actif dans une poche parodontale pour le traitement thérapeutique de maladies parodontales, se présentant sous la forme d'un support cellulosique de dimensions adaptées à son insertion dans une poche parodontale, ledit support cellulosique ayant été rendu résorbable par oxydation avant d'y imprégner ledit principe actif. De préférence, ledit support cellulosique a été rendu résorbable par oxydation avant d'y incorporer ledit principe actif par imprégnation dans une solution aqueuse dudit principe actif. Selon une autre caractéristique de l'invention, le principe actif est un principe actif antiseptique, tel que le chlorure de cétalkonium et la chlorhexidine ou l'un de ses sels tels que le digluconate de chlorhexidine (digCHX), ou un 4 principe actif antibiotique, ou encore un principe actif anti-inflammatoire non stéroïdien, voire une association de principes actifs anti-inflammatoires non stéroïdiens avec de la chorhexidine ou l'un de ses sels tels que le digluconate. Selon une autre caractéristique de l'invention, le support cellulosique est une pointe de papier réalisée à partir de fibres de cellulose (homopolymère linéaire à base d'unités anhydroglucopyranose) reliées entre elles par des liaisons glycosidiques (31->4 (microfibrile). Selon une caractéristique avantageuse de l'invention, le support cellulosique est soumis à une réaction d'oxydation par immersion dans un mélange acide nitrique / acide phosphorique en présence de nitrite de sodium. Selon une autre caractéristique de l'invention, le rapport molaire HNO3/H3PO4 est inférieur à 1. Selon une caractéristique avantageuse de l'invention, le rapport molaire HNO3/H3PO4 est voisin de 1/2. Selon une autre caractéristique de l'invention, le rapport molaire HNO3/H3PO4 est voisin de 1/3. Selon une autre caractéristique de l'invention, le temps de résorption est supérieur à 2 semaines. Selon une autre caractéristique de l'invention, le temps de résorption est voisin de 28 jours. Selon une autre caractéristique de l'invention, le support cellulosique, après oxydation, est soumis à traitement additionnel de greffage de cyclodextrine ou de maltodextrine. Les pointes de papier sont connues en tant que dispositif pour assécher le canal pulpaire (enlever l'humidité), pour effectuer un prélèvement au sein de la poche parodontale, ces utilisations étant liées à ses propriétés absorbantes. On connaît également les pansements hémostatiques résorbables en cellulose oxydée régénérée de type SURGICEL. En revanche les pointes de papier ne sont pas connues en tant que support résorbable pour un système de libération d'une substance active. Par pointe de papier, on entend au sens de la présente invention tout support cellulosique pouvant être inséré dans la poche parodontale, soit de dimensions telles qu'elles définissent un volume compris entre 3 à 30 =3; et être facilement manipulable par le chirurgien-dentiste. De préférence, il s'agira de pointe de papier classiquement utilisée en dentisterie. Par exemple, il pourra s'agir de pointes papier fabriquées par Coltène/Whaledent (Langenau, Allemagne), référence Roeke' 340 080. Il s'agit de pointes de cellulose d'une longueur de 28 mm, stériles, de conicité 20 et dont l'extrémité la plus fine présente un diamètre de 80/100 mm. Leur poids moyen est de 12 mg. Elles sont commercialisées en dentisterie opératoire, et plus spécifiquement en endodontie, pour réaliser l'assèchement des canaux pulpaires après débridement. Le taux d'emport de ces pointes papier est de 170 Même humides, elles ne se déchirent pas, ni ne se délitent. La pointe de papier selon l'invention peut se présenter sous la forme d'un cône effilé de hauteur d'environ 25 à 30 mm et de diamètre de base d'environ 1 mm. Puisqu'il est difficile d'avoir une dimension standard, il est tout à fait envisageable qu'une fois la pointe insérée correctement, la longueur restante soit coupée pour ne pas gêner le patient. Le support cellulosique selon l'invention peut également se présenter sous une autre forme « prête à l'emploi » telle qu'un fil, une fibre, une éponge: par exemple un fil de 0,7 mm de diamètre et 25 mm de longueur, soit un volume de 10 =3 environ en particulier un volume cylindrique de section ovoïde (2-4 mm x 5-6 mm) et d'environ 1 mm d'épaisseur. 6 Le support cellulosique peut également se présenter sous une forme « à découper » ou « à mettre en forme » avant d'insérer le dispositif dans la poche parodontale tel qu'un morceau de coton ou une pelote de fil, ou encore d'un cube (4 mm x 4 mm), d'un parallélépipède (2-4 mm x 5-6 mm), ou bien d'un film rectangulaire (3 mm x 5 mm). L'obtention d'une cinétique de libération prolongée et plus constante de la chlorhexidine a pour but d'augmenter l'efficacité thérapeutique du dispositif vis à vis des germes pathogènes de la poche parodontale. Ce dispositif présente l'avantage d'agir plus longtemps sur la flore pathogène afin d'atteindre les conditions d'une modification durable de cette flore et le déplacement des équilibres bactériens vers un retour à une flore compatible avec la santé parodontale. Oxydation de la cellulose (+ évaluation du taux de résorption du support) . La cellulose est une molécule entièrement naturelle et biodégradable dans l'environnement ; cependant, elle ne l'est pas par notre organisme (absence de cellulases), on ne peut donc l'utiliser telle quelle. En revanche, si la cellulose subit une oxydation sélective, cela lui confère toute une série de propriétés remarquables en vue d'applications médicales : biorésorption, activité hémostatique et antimicrobienne, chélation et échangeur d'ions. La maîtrise de l'étape d'oxydation va conditionner fondamentalement les caractéristiques de résorption de nos supports. L'oxydation de la cellulose mise en oeuvre dans le cadre de la présente invention s'effectue selon le principe de la méthode décrite par Kumar et Yang en 2002 (Kumar V., Yang T., HNO3/H3PO4-NaNO2 mediated oxidation of cellulose - preparation and characterization of bioabsorbable oxidized celluloses in high yields and with different levels of oxidation. Carbohydrate Polymers, 2002, 48(4) 403-412 : les supports (M et PP) sont immergés dans un mélange d'acides nitrique et phosphorique, en présence de nitrite de sodium, le catalyseur. Les solutions acides de différentes compositions sont préférentiellement réalisées à partir : - d'acide phosphorique H3PO4 à 85 %(Fisher Scientific, CAS 7664 38-2), - d'acide nitrique HNO3 à 65 % (Fisher Scientific, CAS 7697-37-2), - de nitrite de sodium (Sigma Aldrich, CAS 7632-00-0). Les mélanges acides (de volume constant égal à 10 mL) sont définis par un rapport molaire N/P, où N est la quantité d'acide nitrique et P, la quantité d'acide phosphorique. Les mélanges utilisés sont de type 9/1, 2/1, 1/1, 1/1,5, 1/2, 1/3, 1/4, 1/5 et 1/9. Avant traitement, les pointes de papier sont lavées à l'eau chaude pendant 3h30. Les échantillons sont ensuite séchés à l'étuve ventilée à 104°C pendant 1 h, placés au dessiccateur 1/2 h, puis pesés sur une balance de précision. On réalise dans un bécher de 250 mL un mélange de 10 mL des deux acides de telle sorte à obtenir un rapport N/P déterminé. Ce mélange a un volume total de 10 mL pour 10 pointes (chacune correspond à 0,12 g de cellulose), puis on plonge les pointes à l'aide d'une tige de verre dans la solution acide pour les imprégner. On ajoute ensuite 0,12 g de nitrite de sodium puis, après homogénéisation, on recouvre le bécher pour limiter la diffusion de vapeurs rousses qui se forment. Après 24 h, les supports sont extraits de la solution acide et lavés à l'eau distillée jusqu'à ce que le pH des eaux de lavage soit égal à 7. On fait un lavage final dans 500 mL d'une solution de PBS (Phosphate Buffer Saline, pH 7.4 (United States Pharmacopeia 32).). 8 Le but de ces lavages est d'éliminer toutes traces de réactifs et d'acidité résiduelle qui pourraient avoir un effet négatif sur la biocompatibilité des dispositifs. Les pointes sont ensuite séchées à l'air ambiant. L'influence du rapport N/P sur la cinétique de résorption a été étudiée. Plus préférentiellement, on choisira un rapport N/P = 1/2 qui est le meilleur compromis entre le taux de résorption maximal atteint et la vitesse de résorption de la pointe papier (voir figure 1). Evaluation du taux de résorption La cinétique de résorption de nos supports en cellulose oxydée constitue notre critère principal d'efficacité de la réaction. En effet, plus les supports présentent un taux d'oxydation élevé, plus leur temps de résorption est court. Le nombre croissant de fonctions -COOH va entraîner une affinité accrue de la cellulose avec les milieux aqueux. Cette affinité va provoquer un gonflement de la structure, qui peut désunir la cohésion des chaînes entre elles et provoquer une dépolymérisation mais aussi provoquer une hydrolyse des chaînes. Le temps de résorption souhaité en clinique est préférentiellement de 28 jours. Afin d'évaluer la cinétique de résorption des supports oxydés, ceux-ci sont séchés à l'étuve ventilée à 104°C pendant 1 h, puis placés au dessiccateur pendant 30 min et pesés afin de définir leur masse initiale. Chaque échantillon est immergé dans 50 mL de solution de tampon phosphate (Phosphate Buffer Saline, pH 7.4 (United States Pharmacopeia 32). L'ensemble est placé dans une enceinte thermostatée à 37°C sous agitation à 100 tr/min (agitateur incubateur). A intervalles réguliers, une pointe papier est prélevée de la solution de tampon phosphate, séchée dans une étuve à 104°C pendant 1 h puis pesée. La mesure de la masse après séchage permet de calculer le taux de résorption : Mf - Mi Taux résorption = * 100 Mi avec Mi : masse initiale Mf : masse finale L'étude de résorption vise à obtenir une pointe papier (PP) résorbable en 28 jours en milieu tamponné (tampon phosphate, pH = 7,4). Ceci permet ensuite de valider sur ce critère les paramètres d'oxydation (rapport N/P) adéquats. La figure 1 présente la cinétique de résorption des PP oxydées selon des rapports N/P différents en milieu tamponné (tampon phosphate, pH = 7,4) en fonction du temps. Deux grands profils de cinétiques de résorption se dégagent. D'une part, la résorption des PP oxydées selon des rapports N/P > 1 (1/1, 2/1, 9/1) qui ont une perte de masse inférieure à 30 % de leur masse initiale au bout de 28 jours. D'autre part, la résorption des PP oxydées selon des rapports N/P La quantité d'acide phosphorique doit être supérieure à la quantité d'acide nitrique, soit N/P Des taux de résorption 80-85 % sont obtenus pour les pointes papier. Par comparaison, le Periochipe a un taux de résorption proche de 70 Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, une étape de greffage de dextrines peut être effectuée (cyclodextrines ou maltodextrines) en mettant en oeuvre des 10 procédés connus dans l'état de la technique tels que ceux décrits dans . EP 115 7156 pour amélioration des propriétés adsorbantes des fibres = procédé de traitement de fibre ; EP 116 5621 = pur procédé de préparation de copolymère de CD (chauffage entre 100 et 200°C pendant 1 min à 60 min) ; EP 182 4531 = biomatériaux porteurs de CD, libération progressive et retardée de molécules actives. Matériel de greffage : Les cyclodextrines Découvertes par Villiers en 1891, les cyclodextrines (CD)6 sont des oligomères cycliques du glucose issus de la dégradation enzymatique de l'amidon par les cycloglucosyltransférases. Les CD sont des molécules composées de plusieurs unités de glucose formant une cavité capable d'accueillir d'autres molécules. Trois grandes familles de CD "natives" sont connues ; elles se différencient par la taille de leur cavité : alpha-CD(a-CD): 6 unités de glucose, bêta-C D(R-CD): 7 unités de glucose, gamma-CD(y-CD): 8 unités de glucose. Ce sont des molécules cristallines, homogènes et constituées par l'assemblage d'unités glucopyranose reliées par des liaisons alpha-1,4. Elles se présentent sous la forme d'un godet. L'extérieur de la molécule regroupe les fonctions hydroxyle. L'intérieur regroupe les fonctions étheroxyde et les liaisons C-H. Cette structure confère donc à la surface extérieure des molécules un caractère hydrophile et un caractère hydrophobe à l'intérieur. Les cyclodextrines restent cependant des molécules apolaires. A partir des trois principales CD, de nombreux dérivés ont été développés par amination, alkylation (principalement méthylation), estérification des groupements hydroxyle. Par 11 exemple, l'hydroxypropyl-P-cyclodextrine ou HP-13-CD est obtenue par la substitution du groupe hydroxyle de la R-CD par une fonction 2-hydroxypropyléther. Les propriétés des cyclodextrines varient en fonction du nombre d'unités de glucopyranose constituant les molécules. Les CD sont des molécules cages capables d'accueillir d'autres molécules. L'inclusion peut être soit partielle, soit totale. Le phénomène part du principe d'hydrophobie de la cavité interne de la CD et du substrat aromatique. D'une part, le substrat aromatique est en interaction avec l'eau, d'autre part, il existe des molécules d'eau au sein de la cavité de la CD. En présence de l'un et de l'autre, le cycle aromatique chasse les molécules d'eau et pénètre dans la cavité. Le système se retrouve dans un état thermodynamiquement plus favorable. L'inclusion ne se produira que lorsqu'il y aura complémentarité stérique entre l'hôte et l'invitée. En effet, la complexion d'un substrat dans la CD dépend de sa géométrie. Le substrat ou la partie lipophile du substrat doit avoir une taille compatible avec le diamètre de cavité de la CD. La stabilité du complexe dépend de cette géométrie. Une molécule trop petite n'aura pas suffisamment d'interactions et, au contraire, une molécule trop grande ne pourra pénétrer la cavité de la CD. La R-CD (de qualité technique) et la HP-13-CD (de qualité pharmaceutique) utilisées dans notre étude sont commercialisées par Roquette (Kleptose®, Kleptose HPO ou Kleptose HPBO, Lestrem, France). La y -CD et la HP-Y CD (de qualité pharmaceutique) utilisées sont commercialisées par Wacker Chemie (Cavamax0, Burghausen, Allemagne). La maltodextrine La maltodextrine (MX) est un oligomère de l'amidon. Celle utilisée possède un Dextrose Equivalent (DE) égal à 19 et est constituée d'environ 10 unités glycosidiques. Les unités de glucose sont reliées entre elles par des liaisons alpha-1,4. Sa composition chimique est proche de celle des cyclodextrines mais sa structure est différente, puisqu'elle est linéaire et ne présente donc pas de cavité. Le nom commercial de la MX utilisée est Glucidex 19DO ; elle est fabriquée par Roquette® (Lestrem, France). La solution utilisée pour greffer les dextrines sur les pointes papier contient de l'acide citrique (CTR), un catalyseur et la bêta-cyclodextrine (0-CD) ou la maltodextrine (MX) en proportions respectives de 10/3/10 (en g/100 mL de solution). Le greffage de cyclodextrine ou de maltodextrine sur les pointes papier oxydées implique une imprégnation de la pointe papier par la solution de dextrine au foulard (le foulard utilisé est un foulard Roaches® EHP 350). Les paramètres choisis sont : vitesse 2 m/min, pression 1,9 bar ; séchage pendant 5 min à 90°C en rame de finition (la rame de finition est une rame Roaches® Mini Thermo) ; fixation en étuve à température comprise entre 130 et 180 degrés Celsius et pendant un temps compris entre 2 et 30 minutes ; lavage des pointes papier à l'eau chaude pendant 3 h 30 ; séchage des pointes papier en étuve 1 h à 104°C. La quantité de dextrine fixée est évaluée par le gain de masse subi par l'échantillon lors du traitement : Mf - Mi G(%) = * 100 Mi avec Mi : masse avant greffage de la dextrine Mf : masse après traitement 13 De façon surprenante, le greffage diminue la vitesse de résorption. Le dispositif obtenu libère ainsi le principe actif plus longtemps, et la vitesse de libération est plus régulière. Une étude de résorption sur les pointes papier oxydées greffées par la RCD et MX afin de mesurer l'effet du greffage sur la résorption a également été réalisée. Les résultats obtenus sont illustrés aux figures 2 et 3 qui représentent la résorption des pointes de papier oxydées greffées respectivement avec MX et avec RCD. Si l'on n'observe pas de différence notable entre les pointes papier oxydées 1/1 et les pointes papier oxydées greffées 1-1RCD et 1/1MX, il en est tout autrement pour les autres taux d'oxydation. On remarque un effet protecteur du greffage pour les taux d'oxydation 1/2, 1/3 et 1/4, qui une fois greffées voient diminuer leur taux de résorption maximal de l'ordre de 20 à 30 De plus, la vitesse de résorption est plus lente et plus progressive dans le temps. Pour remplir nos objectifs, les taux oxydation retenus sont 1/2 et 1/3. Optimisation des paramètres de greffage : Les paramètres de greffage optimaux doivent être définis pour les PP, puisqu'ils vont conditionner la fonctionnalisation et la libération de la CHX. Il faut donc définir la température, le temps de fixation pour chaque dextrine ainsi que la concentration de la solution de greffage. L'étude de ces paramètres a été réalisée pour la R-CD et la MX, sur des PP oxydées 1/2. La première étude a consisté à vérifier l'influence du temps et de la température de réaction. La concentration de la solution d'imprégnation était fixée à [10/3/10]. La figure 4 représente l'évolution du gain de masse observée sur les PPO 1/2 en fonction du temps et de la température de réaction. 14 Pour un rapport d'oxydation HNO3/H3PO4 égal à 1/2, le maximum de gain de masse s'observe pour une température de 160°C et un temps de 10 min. Au-delà de cette température et de ce temps, le support se dégrade de manière trop importante pour calculer un gain de masse correct. Le tableau 5 regroupe les gains de masse obtenus pour les temps et températures sélectionnés : Tableau 5 : Paramètres de fonctionnalisation optimaux selon le rapport HNO3/H3PO4 et la dextrine utilisée Pointe papier oxydée 1/2 13-CD MX Température (°C) 160 160 Temps (min) 10 10 Gain masse ( ) 7, 6 13, 2 La deuxième étude a consisté à vérifier l'influence de la concentration du bain d'imprégnation. Elle a été réalisée sur des PPO 1/2 ; le temps de réaction est fixé à 10 min, la température de réaction est fixée à 160°C et les concentrations des solutions d'imprégnation ont été fixées à [2,5/0,75/2,5], [5/1,5/5], [10/3/10] et [15/4,5/15]. Les résultats sont illustrés sur la figure 5 annexée, représentant l'évolution du gain de masse des pointes papier oxydées selon un rapport HNO3/H3PO4 égal à 1/2 en fonction de la concentration de la solution d'imprégnation. L'augmentation de la concentration de la solution d'imprégnation entraîne une augmentation du gain de masse. Cette augmentation est linéaire jusqu'à une concentration [10/3/10]. Au delà, on observe un effet de saturation. Il est donc judicieux de travailler à une concentration fixe de [10/3/10] pour obtenir un gain de masse optimum et reproductible. Au vu des résultats, la fonctionnalisation par les CD ou les MX n'est pas indispensable pour résoudre le problème 15 technique de l'invention mais cela apporte une protection de la cellulose (biorésorption plus contrôlée et plus prolongée dans le temps), et une libération plus prolongée (près de 28 jours contre seulement 14 jours pour les pointes papier oxydées seulement) Imprégnation par la CHX, de préférence par le digluconate de chlorhexidine imprégnation pendant 1H dans la solution mère de digluconate de chlorhexidine à 20 % en masse (w/w); essorage par foulardage des pointes papier. Les paramètres choisis sont : vitesse 2, pression 1,9 bar ; séchage des pointes papier après foulardage pendant 15 min à 90°C. Une solution de digCHX concentrée à 40 % (w/w) a également été testée selon le même protocole. D'après les figures 6 et 7, représentant respectivement la cinétique de libération et la quantité de CHX libérée dans le PBS (Phosphate Buffer Saline, pH 7.4 (United States Pharmacopeia 32), selon le rapport d'oxydation des pointes papier et de la dextrine greffée, il apparaît que dans chaque cas la libération de digCHX est progressive et s'étend sur 27 jours. On constate que les PPO 1-2 libèrent 25 % de CHX de plus que le Periochip® dans le cas où la solution de digCHX est concentrée à 20% et 50 % de plus si la digCHX est concentrée à 40 %). Les résultats sont donnés avec une incertitude de ± 10 à 15 % (calcul de l'écart type sur 6 échantillons dans chaque cas). Pour les PPO greffées, la 1-2 MX présente les mêmes performances que le Periochip® si la solution de digCHX est concentrée à 20%, et elle est supérieure de 25 % si la digCHX est concentrée à 40 %). 16 Dernière étape optionnelle de stérilisation finale : EVALUATION DES DISPOSITIFS SELON L'INVENTION Evaluation microbiologique L'étude microbiologique a permis de vérifier la persistance de l'activité antiseptique de nos supports cellulosiques imprégnés de digCHX et de la comparer à celle du Periochip® . Les supports ont été mis en présence de plasma issu de sang humain. Au cours du temps, le digCHX est progressivement libéré par les supports qui perdent petit à petit leur activité. Le test de Kirby-Bauer utilisé pour l'étude microbiologique à permis de mesurer la chute d'activité biocide des supports en fonction de leur temps de séjour dans le plasma issu de sang humain. Les pointes utilisées étaient des pointes papier réduites à une longueur de 10 mm et des Periochip®. Ces échantillons ont été placés dans des puits contenant chacun un volume de 1 mL de plasma issu de sang humain, hormis les échantillons qui ont servi de référence pour le temps de contact nul. Au bout de 24 h de contact, le plasma issu de sang humain est retiré de tous les puits, les échantillons destinés au test de Kirby-Bauer pour un temps de contact de 24 heures sont prélevés et le plasma issu de sang humain a été renouvelé dans tous les autres puits. L'opération a été répétée au bout de 2, 3, 4, 6, 8,10 et 12 jours. Après extraction du plasma issu de sang humain, les pointes ont été placées sur une gélose cystéinée préalablement ensemencée par les bactéries (0,1 mL de suspension bactérienne à 105bactéries/mL répartie uniformément sur la gélose). Après 72 h d'incubation, un halo d'inhibition est apparu autour des pointes testées, quand celles-ci présentaient une dose d'antiseptique suffisante. Il correspond à la zone où l'antiseptique a migré et inhibé la croissance des bactéries. Le diamètre de ce halo d'inhibition a été mesuré et tracé en fonction du temps de contact (compris entre 0 et 12 jours) du dispositif avec le plasma issu de sang humain. Le but de cette étude était de déterminer et de comparer l'activité bactéricide ou bactériostatique des pointes papier au Periochip®. Fusobacterium nucleatum est une bactérie Gram négatif, anaérobie, en forme de bâtonnet aux extrémités effilées, reconnue comme faisant partie de la flore bactérienne sous-gingivale. Elle est également la bactérie la plus fréquemment isolée et représente 7 à 10 % des bactéries isolées dans la plaque sous-gingivale. C'est une bactérie fortement associée aux parodontites. Fusobacterium nucleatum active différents maillons de la cascade qui aboutit à la destruction du parodonte. La présence de cette bactérie est également un pré-requis à l'établissement d'une flore plus pathogène Les résultats d'activité antibactérienne sur Fusobacterium nucleatum, après séjour dans du plasma issu de sang humain, de PP imprégnées de digCHX, de PPO 1/2 imprégnées de digCHX, de PPO 1/2 MX imprégnées de digCHX et du Periochip®, sont rassemblés dans la figure 8. La figure 8 montre une activité antibactérienne prolongée des PPO 1/2 imprégnées de digCHX ainsi que des PPO 1/2 MX imprégnées de digCHX comparé au Periochip®. Sur Fusobacterium nucleatum, l'activité antibactérienne du Periochip® se limite à 4 jours (soit 1 jour de plus qu'une simple pointe papier imprégnée de digCHX). Dans les premiers jours, on observe un halo d'inhibition important dû à la libération immédiate et abondante de digCHX (phénomène appelé « effet burst ». Toutefois, cette libération de digCHX par le Périochip® ne se prolonge pas sur une longue période. En revanche, l'activité antibactérienne des PPO 1/2 imprégnées et des PPO 1/2 MX imprégnées de digCHX est prolongée jusque 10 jours, avec une vitesse de libération plus 18 régulière, avec un « effet burst » moins prononcé que dans le cas de Périochip®. Le digCHX est donc libéré de manière plus progressive dans le temps. Ce test montre l'efficacité du dispositif selon l'invention, par comparaison avec le produit commercial. Nous avons comparé les pointes papier au Periochip® (en termes de CHX libérée en gramme de digCHX par gramme de dispositifs mais aussi en pourcentage de digCHX libérée en fonction du temps). Les résultats apparaissent dans les figures 9 à 11 annexées, représentant respectivement la Comparaison Periochip®/(pointe papier oxydée et/ou greffée 1/2) en termes de digCHX libérée en gramme de digCH par gramme de support en fonction du temps, la Comparaison Periochip®/(pointe papier oxydée et/ou greffée 1/2) en termes de digCHX libérée en gramme de digCHX par gramme après 22 jours et la Comparaison Periochip®/(pointe papier oxydée et/ou greffée 1/2) en termes de CHX libérée en pourcentage en fonction du temps. Ces cinétiques ont été suivies par un dosage spectrophotométrique de digCHX dans la solution surnageante (Phosphate Buffer Saline, pH 7.4 (United States Pharmacopeia 32). Au bout de 2 jours, le dispositif selon l'invention a libéré 40 % de principe actif alors que le Periochip® en a libéré plus de 80 De même au bout de 10 jours, le dispositif selon l'invention a libéré 75 % du principe actif alors que le Periochip® en a libéré plus de 90 La comparaison Periochip®/PPO 1/2 MX montre une libération plus progressive dans les premiers jours pour les pointes papier. La quantité de CHX libérée au final est similaire. La comparaison Periochip®/PPO 1/2 montre une libération plus progressive dans les premiers jours pour la pointe papier. La quantité de digCHX libérée au final est supérieure de l'ordre de 25 Finalement, plusieurs conclusions peuvent être dégagées, à savoir : Les pointes papier vierges ou oxydées libèrent une plus grande quantité de digCHX que les pointes papier greffées et les pointes papiers oxydées greffées qui leur sont associées. L'oxydation apporte donc une augmentation significative de digCHX libérée pour les pointes papiers. Les pointes papier oxydées 1/1 et 1/2 libèrent la plus grande quantité de digCHX. Cependant les pointes papier oxydées 1/1 ne se résorbent pas. D'autre part la figure 3 montre que les pointes papier 1/3 ont tendance à se résorber trop rapidement. Les pointes papier 1/2 apparaissent donc comme optimales vis-à-vis de l'application visée. A titre de comparaison, les pointes papier oxydées greffées 1/2 MX apparaissent également intéressantes. Le greffage diminue certes la quantité de digCHX libérée. Toutefois, les études de résorption effectuées sur les pointes papier oxydées greffées ont montré l'intérêt du greffage. En effet, celui-ci permet d'obtenir une résorption beaucoup plus progressive dans le temps. De plus, la libération de digCHX est également plus progressive au cours du temps. Ainsi, les pointes papier 1/2 MX sont également validées d'autant qu'une augmentation de la concentration de la solution de 20 à 40% en digCHX permettrait de libérer davantage de digCHX (voir figure 7). REVENDICATIONS1. Dispositif résorbable permettant la libération prolongée d'un principe actif dans une poche parodontale pour le traitement thérapeutique de maladies parodontales, caractérisé en ce qu'il se présente sous la forme d'un support cellulosique de dimensions adaptées à son insertion dans une poche parodontale, ledit support cellulosique ayant été, rendu résorbable par oxydation avant d'y imprégner ledit principe actif. 2. Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce que le principe actif est un principe actif antiseptique, tel que le chlorure de cétalkonium et la chlorhexidine ou l'un de ses sels tels que le digluconate de chlorhexidine, ou un principe actif antibiotique, ou encore un principe actif anti-inflammatoire non stéroïdien, voire une association de principes actifs anti-inflammatoires non stéroïdiens avec de la chorhexidine ou l'un de ses sels tels que le digluconate. 3. Dispositif selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que le support cellulosique est une pointe de papier réalisée à partir de fibres de cellulose (homopolymère linéaire à base d'unités anhydroglucopyranose) reliées entre elles par des liaisons glycosidiques (31->4 (microfibrile). 4. Dispositif selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le support cellulosique est soumis à une réaction d'oxydation par immersion dans un mélange acide nitrique / acide phosphorique en présence de nitrite de sodium. 5. Dispositif selon la revendication 4, caractérisé en ce que le rapport molaire HNO3/H3PO4 est inférieur à 1. 6. Dispositif selon la revendication 5, caractérisé en ce que le rapport molaire HNO3/H3PO4 est voisin de 1/2. 21 7. Dispositif selon la revendication 5, caractérisé en ce que le rapport molaire HNO3/H3PO4 est voisin de 1/3. 8. Dispositif selon l'une des revendications 4 à 7, caractérisé en ce que le rapport molaire HNO3/H3PO4 est choisi pour obtenir un temps de résorption supérieur à 2 semaines. 9. Dispositif selon la revendication 8, caractérisé en ce que le rapport molaire HNO3/H3PO4 est choisi pour obtenir un temps de résorption voisin de 28 jours. 10. Dispositif selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que le support cellulosique, après oxydation, est soumis à traitement additionnel de greffage de cyclodextrine ou de maltodextrine.