Brevet FR2967063A1 — publié le 20120511

La présente invention est dans le domaine du soin de la peau, des produits topiques, des compléments alimentaires ou des aliments fonctionnels destinés au soin de la peau. La peau humaine est constituée par trois compartiments à savoir un compartiment superficiel, l'épiderme, le derme et un compartiment profond, l'hypoderme. Ce dernier compartiment est essentiellement constitué d'un type de cellules spécialisées dans l'accumulation et le stockage des graisses, les adipocytes. L'hypoderme est le réservoir énergétique de l'organisme. L'épiderme humain naturel est composé principalement de trois types de cellules qui sont les kératinocytes, les mélanocytes et les cellules de Langerhans. Chacun de ces types cellulaires contribue par ses fonctions propres au rôle essentiel joué par la peau. Le derme fournit à l'épiderme un support solide tout en étant également son élément nourricier. Il est principalement constitué de fibroblastes et d'une matrice extracellulaire composée elle-même principalement de collagène, d'élastine et d'une substance dite substance fondamentale, composants synthétisés par les fibroblastes. La matrice extracellulaire (MEC) de la peau humaine est constituée de diverses macromolécules responsables de la résistance mécanique de la peau, de sa souplesse et de son élasticité, ainsi que des fonctions physiologiquement importantes (hydratation, thermorégulation et régulation de la perméabilité de la peau). Les macromolécules de la MEC ont été arbitrairement classées en quatre familles. Les deux premières sont constituées de macromolécules fibreuses et structurales, les collagènes et l'élastine, alors que les deux autres sont des glycoconjugués (glycoprotéines et protéoglycanes). Lors d'une perte de poids et notamment au cours des régimes amincissants, le déstockage rapide des adipocytes entraîne une diminution importante de la tension exercée par l'hypoderme sur les tissus de soutien. Par conséquent, le derme n'étant plus sous tension, le tissu conjonctif perd progressivement de sa cohésion et ceci essentiellement par dépolymérisation des protéoglycanes et par diminution de la quantité des glycosaminoglycannes. On comprend alors à la lecture de ce qui précède l'importance des glycosaminoglycanes dans la structure des tissus, particulièrement de la peau et/ou des muqueuses, et l'importance qu'il y a à combattre leur diminution pour ainsi lutter en particulier contre l'apparence de peau molle. De manière inattendue, les inventeurs ont constaté que l'utilisation d'extrait de grenade s'avérait tout particulièrement efficace, pour stimuler la synthèse des glycosaminoglycanes dans la peau. Par ce mécanisme et en particulier chez l'adulte, cette utilisation peut ainsi permettre de raffermir des peaux relâchées, des peaux moins fermes suite à des modifications de poids (telles que dans les régimes, les grossesses...) ou dans l'accompagnement des gestes de chirurgie esthétique du type lifting ou injections de « fillers ». La grenade ou pomme-grenade (pomegranate en anglais) est le fruit du grenadier (Punica granatum), arbuste de la famille des Lythracées. Ce fruit cultivé depuis plusieurs milliers d'années a de nombreux mérites qui sont, pour certains, connus depuis très longtemps. Ses effets bénéfiques vis-à-vis de l'hypertension ont été décrits ainsi que ses effets préventifs des cancers de la prostate et du sein ou retardant la détérioration des cartilages dont est responsable l'ostéoarthrite. Son effet raffermissant n'avait auparavant été décrit que pour des peaux ayant subi les effets de l'âge (vieillissement chronologique) et/ou du soleil (photo-vieillissement). C'est par exemple le cas dans la demande de brevet US 2003/091665. Dans la demande KR 20030055950 est décrite l'utilisation topique d'un extrait de grenade pour prévenir ou traiter les effets de l'âge. Il n'a cependant jamais été évoqué dans l'art antérieur l'effet raffermissant de la grenade sur des peaux ayant subi une modification de poids ou ayant subi un acte de chirurgie esthétique. Ainsi, la présente invention concerne, selon l'un de ses aspects, l'utilisation cosmétique d'une quantité efficace d'au moins un extrait de grenade, comme agent raffermissant de la peau d'un sujet ayant subi une modification de poids ou préalablement, simultanément et/ou postérieurement à un acte de chirurgie esthétique. Cette action raffermissante vient de la stimulation par cet extrait de grenade de la synthèse des glycosaminoglycannes dans la peau. Cette néosynthèse de GAGs permet au tissu conjonctif d'améliorer sa cohésion et ainsi d'assurer tout son rôle de soutien de la peau. Par "quantité efficace", on entend, au sens de la présente invention, une quantité suffisante pour obtenir l'effet attendu. Par « extrait de grenade », on entend aussi bien les extraits de fruit, les extraits de graine de Punica granatum et leurs mélanges en toutes proportions. Avantageusement, on utilise un extrait de fruit - ou extrait de grenade - cet extrait pouvant provenir de toutes les parties de la grenade. L'extrait de grenade préférentiel selon la présente invention sera un extrait de fruit entier ou encore plus préférentiellement un jus de fruit entier (souvent appelé « extrait de jus de fruit de grenade » par les fournisseurs). L'extrait de grenadier peut-être obtenu à partir de toute partie du grenadier et en particulier à partir du fruit incluant la graine. Par extrait, on entend aussi bien un mélange brut de parties du végétal grossièrement réduites en morceaux et du solvant d'extraction que des fractions ou préparations plus ou moins élaborées des principes actifs solubilisés lors de l'extraction. On peut utiliser un extrait total, c'est-à-dire un extrait comprenant l'ensemble des fractions présentes dans les parties de Punica granatum, éventuellement dépourvue des parties cellulosiques (ligneuses). Selon un autre mode de mise en oeuvre de l'invention, on utilisera au moins un extrait enrichi en certaines fractions. L'extrait peut être obtenu par toute méthode de préparation d'un extrait végétal connue de l'homme du métier. En particulier, l'extrait peut être obtenu par la macération de la partie du végétal dans l'eau, ou dans un solvant composé d'un mélange d'eau et d'un solvant organique par exemple eau-alcool, ou encore eau-acétone, ou encore eau-propylène glycol, ou encore eau-butylene glycol. Le rapport plante/solvant peut varier par exemple et sans limitation de 1/4 à 1/20. Avantageusement, la préparation de l'extrait débute par le broyage des parties du végétal suivi d'une macération dans le solvant d'extraction pendant plusieurs heures. L'extraction peut être réalisée sous agitation pour en améliorer la performance. L'extraction peut être réalisée à température ambiante ou en augmentant la température par exemple à 50°C ou encore à 60°C. Une fois l'extraction réalisée, la solution est filtrée. La solution ainsi obtenue peut être concentrée par tout procédé connu de l'homme de l'art. De même la solution obtenue peut être lyophilisée par toute 40 méthode classique de lyophilisation. On obtient ainsi une poudre. L'extraction à partir du fruit de grenadier incluant la graine peut aboutir, selon un procédé particulier de réalisation, à la préparation d'une huile essentielle. L'extrait sous forme de solution concentrée, de même que l'extrait sous forme de poudre, de même que l'extrait sous forme d'huile essentielle peut être repris dans un milieu approprié pour la consommation par voie orale pour l'homme. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, l'extrait est choisi parmi les extraits aqueux et les extraits alcooliques ou hydro-alcooliques de Punica granatum. L'extrait peut être introduit sous la forme d'une poudre lyophilisée, d'un liquide ou d'une huile et/ou le cas échéant sous une forme concentrée. De tels extraits sont par exemple commercialisés par la société DRACO Natural 15 Products sous les noms commerciaux «Pomegranate Seed Oil » ou « Pomegranate Powdered Extract , 40% » ou par la société Naturex sous le nom « Extrait de jus de fruit de grenade » ou « Pomegranate extract 40% », ou par la société MMP Inc. sous le nom commercial « Pomegranate Juice extract E40 » ou par la société Blue California sous le nom commercial « Pomegranate Extract 20 70% », ou encore par la société Guillin Layn Natural Ingredients sous le nom commercial « Pomegranate Seed P.E » ou enregistrés par exemple avec le numéro CAS 84961-57-9. Il est entendu que le choix des extraits de grenade est effectué en tenant compte 25 de la finalité de la composition les comportant, c'est-à-dire destinée à une application topique ou à une administration transcutanée ou à une administration orale ou à une administration par voie aérienne. Par le terme « prévenir », on entend « diminuer le risque de développer ». Par le terme « traiter », sauf indication contraire, on entend toute action visant à améliorer le confort, le bien-être d'un individu, ce terme couvre donc aussi bien atténuer, soulager que curer. 35 Cette utilisation est particulièrement pertinente, pour prévenir et/ou traiter la peau relâchée, ledit relâchement étant préférentiellement dû à une modification et/ou à une diminution du taux des glycosaminoglycanes dans le derme. Cette utilisation peut aussi être pertinente pour maintenir et/ou restaurer les 40 propriétés biomécaniques (notamment l'élasticité et/ou le tonus) de la peau et/ou l'élasticité et/ou la tonicité et/ou la fermeté de la peau et/ou pour atténuer l'aspect 30 de la cellulite et/ou l'aspect de la peau d'orange et/ou encore pour traiter les vergetures ou prévenir leur apparition. La modification de poids et notamment la perte de poids sera préférentiellement due à un régime amincissant ou à la grossesse. L'acte de chirurgie esthétique sera préférentiellement choisi parmi le lifting, la liposuccion et l'injection de produits de comblement. Le terme « lifting » désigne de façon générale toutes les opérations destinées à corriger l'affaissement de la peau, et par exemple l'affaissement des pommettes et des creux au milieu des joues. Un lifting peut ainsi être également réalisé, le cas échéant, par un acte de chirurgie esthétique. Par « chirurgie esthétique », on entend désigner, au sens de l'invention, la chirurgie visant notamment à corriger les disgrâces physiques congénitales (nez, oreilles, menton) ou acquises à la puberté (hypotrophie mammaire, surcharges graisseuses localisées), dans les suites de grossesses (déformation de la paroi abdominale) ou du fait du vieillissement (visage, paupières, cou, seins). A titre d'acte de chirurgie esthétique, on peut ainsi également citer, de façon non limitative, la blépharoplastie, la plastie abdominale (ou abdominoplastie), la rhinoplastie, la plastie mammaire, la lipoaspiration ou encore la lipostructure. On peut aussi utiliser des injections de produits tenseurs comme les toxines botuliniques (e.g. BotoxO) pour atténuer les rides sur le visage. Le principe de la liposuccion en chirurgie esthétique est d'introduire des canules dans de très petites incisions, ces canules étant connectées à un circuit fermé dans lequel sera créée une pression négative permettant ainsi d'aspirer la graisse dans les zones visées. Comme exemples de « produits de comblement » (autrement appelés « fillers »), peuvent être cités : le collagène bovin (e.g. ZydermO, ZyplastO), l'hydroxylapatite de calcium, l'acide hyaluronique (e.g. RestylaneO, HylaformO, SculptraO), le collagène humain comme AutologenO, CosmoDermO, CosmoPlastO et DermalogenO, la matière grasse, les "fillers" synthétiques comme l'ArtecollO et JUVÉDERMO Injectable Gel®. Les produits tenseurs comme les toxines botuliques (e.g. BotoxO) peuvent aussi être utilisés en combinaison avec les produits de comblement.40 La quantité efficace de l'extrait de grenade sera préférentiellement mise en oeuvre à une teneur pouvant varier de 0,0001 à 1000/0 en poids, notamment de 0,001 à 200/0 en poids ou 0,01 à 150/0 en poids, plus particulièrement de 0,1 à 100/0 en poids, et encore plus préférentiellement de 0,5 à 50/0 en poids par rapport au poids total de la composition en contenant. La teneur en extrait de grenade dans les compositions pour la voie topique sera préférentiellement de 0,001 à 200/0 en poids, plus préférentiellement de 0,1 à 100/0 en poids, et encore plus préférentiellement de 0,5 à 50/0 en poids par rapport au poids total de la composition en contenant. La teneur en extrait de grenade dans les compositions pour la voie orale sera préférentiellement comprise entre 15 et 1000/0 en poids. En administration orale, la composition pourra donc être constituée, dans un mode de réalisation particulier de l'invention, uniquement d'extrait de grenade. Toutefois, cette teneur en extrait de grenade sera comprise plus préférentiellement entre 15 et 600/0 en poids et encore plus préférentiellement entre 15 et 300/0 en poids par rapport au poids total de la composition en contenant. L'invention a pour autre objet l'utilisation de la grenade, pour la préparation d'une composition cosmétique ou pharmaceutique pour l'application topique ou l'administration orale et/ou parentérale destinée à prévenir et/ou traiter les désordres de la peau liés à une diminution des glycosaminoglycanes. La présente invention concerne une composition, notamment cosmétique et/ou dermatologique destinée plus particulièrement à la prévention et/ou au traitement des peaux qualifiées de peaux relâchées. Cette composition, préférentiellement utile selon ce qui est défini précédemment, peut comprendre, dans un milieu physiologiquement acceptable, une quantité efficace d'au moins un extrait de grenade associé à au moins un agent stimulant les macromolécules du derme ou empêchant leur dégradation. Comme agent stimulant les macromolécules du derme ou empêchant leur dégradation, on peut citer ceux qui agissent : - soit sur la synthèse du collagène, tels que les peptides de synthèse tels que la iamin, le biopeptide CL ou palmitoyloligopeptide commercialisé par la société SEDERMA ; les peptides extraits de végétaux, tels que l'hydrolysat de soja commercialisé par la société COLETICA sous la dénomination commerciale Phytokine® ; et les hormones végétales telles que les auxines et les Iignanes. - soit sur la synthèse d'élastine, tels que l'extrait de Saccharomyces cerevisiae commercialisé par la société LSN sous la dénomination commerciale Cytovitin® ; et l'extrait d'algue Macrocystis pyrifera commercialisé par la société SECMA sous la dénomination commerciale Kelpadelie® ; - soit sur la synthèse des glycosaminoglycanes, tels que le produit de fermentation du lait par Lactobacillus vulgaris, commercialisé par la société BROOKS sous la dénomination commerciale Biomin yogourth® ; l'extrait d'algue brune Padina pavonica commercialisé par la société ALBAN MÜLLER sous la dénomination commerciale HSP3® ; et l'extrait de Saccharomyces cerevisiae disponible notamment auprès de la société SILAB sous la dénomination commerciale Firmalift® ou auprès de la société LSN sous la dénomination commerciale Cytovitin® ; - soit sur la synthèse de la fibronectine, tels que l'extrait de zooplancton Satina commercialisé par la société SEPORGA sous la dénomination commerciale GP4G® ; l'extrait de levure disponible notamment auprès de la société ALBAN MÜLLER sous la dénomination commerciale Drieline® ; et le palmitoyl pentapeptide commercialisé par la société SEDERMA sous la dénomination commerciale Matrixil® ; - soit sur l'inhibition des sérine protéases telles que I'élastase leucocytaire ou la cathepsine G. On peut citer : l'extrait peptidique de graines de légumineuse (Pisum sativum) commercialisé par la société LSN sous la dénomination commerciale Parelastyl® ; les héparinoïdes ; et les pseudodipeptides tels que l'acide {2-[acétyl-(3-trifluorométhyl-phényl)-amino]-3-méthyl-butyrylamino} acétique. Les compositions selon l'invention sont généralement administrées par voie topique, par voie orale ou par voie parentérale. La voie d'administration préférentielle sera la voie orale. Par « composition administrée ou appliquée par voie topique », on entend les compositions dermocosmétiques à base d'extrait de grenade selon l'invention qui sont de préférence destinées au traitement de la peau et peuvent se présenter sous forme d'onguent, de crèmes, de laits, de pommades, de poudres, de tampons imbibés, de solutions, de gels, de sprays, de lotions, ou de suspensions. Elles peuvent également se présenter sous forme de microsphères ou nanosphères ou de vésicules lipidiques ou polymériques ou de patchs polymériques et d'hydrogels permettant une libération contrôlée mais aussi des patchs à visée locale. Ces compositions par voie topique peuvent se présenter soit sous forme anhydre, soit sous forme aqueuse selon l'indication dermocosmétique. La voie topique permet de déployer toutes les propriétés des actifs au niveau d'un site précis, sur les zones à traiter. On pourra utiliser des crèmes, lotions, etc... L'administration des composés selon l'invention peut aussi se faire par voie orale ou parentérale par injection sous cutanée ou intradermique. Les voies orale et parentérale ont, quant à elles, l'avantage d'agir de façon plus globale sur l'ensemble de la peau et dans ces couches profondes. Pour la voie parentérale, on privilégiera l'administration par patch à visée systémique et la voie intradermique, intraépidermique (par micro aiguille, courant, radiofréquences, mésothérapie...). Les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous toutes les formes galéniques normalement utilisées selon la voie d'utilisation. En particulier, la composition selon l'invention peut être une composition alimentaire pour la consommation humaine. Il peut s'agir en particulier d'aliments complets nutritionnels, de boissons, d'eaux minérales, de soupes, de suppléments diététiques et d'aliments de remplacement, de barres nutritionnelles, de confiserie, de produits à base de lait ou à base de lait fermenté, de yaourts, de poudres à base de lait, de produits de nutrition entérale, de compositions pour enfants et/ou nourrissons, de produits à base de céréales ou de produits à base de céréales fermentées, de glaces, de chocolat, de café, de produits « culinaires » tels que de la mayonnaise, de la purée de tomate ou des assaisonnements pour salades. Selon un autre objet, la présente invention concerne un procédé cosmétique de traitement et/ou de prévention du relâchement de la peau d'un sujet, comprenant au moins une étape d'application topique sur la peau et/ou d'administration orale d'une quantité efficace d'au moins un extrait de grenade ou d'une composition en contenant telle que définie ci-dessus, selon la technique d'utilisation habituelle de ces compositions, préalablement, simultanément et/ou postérieurement à une étape de perte de poids dudit sujet ou préalablement, simultanément et/ou postérieurement à un acte de chirurgie esthétique. Par exemple : l'application topique peut être faite par étalement sur une zone du corps, voire par massage pour faire pénétrer, de crèmes, de gels, de sérums, de lotions, de laits de démaquillage ou de compositions après-solaires sur la peau. Le procédé selon l'invention peut comprendre une administration ou une application unique. Selon un autre mode de réalisation, l'administration ou l'application est répétée par exemple 2 à 3 fois quotidiennement sur une journée ou plus et généralement sur une durée prolongée d'au moins 4 semaines, voire 4 à 15 semaines, avec le cas échéant une ou plusieurs périodes d'interruption. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, l'extrait de grenade sera administré oralement. Dans ce cas, l'extrait de grenade sera préférentiellement administré à une dose journalière entre 0,5 et 2500 mg/jour, plus précisément entre 5 et 500 mg/jour. Le sujet sera préférentiellement une femme venant d'accoucher, plus précisément 10 une femme dans l'année ou dans les six mois suivant son accouchement, ou un sujet suivant un régime amincissant. En ce qui concerne les produits destinés à être appliqués notamment sur la peau, il peut s'agir de solutions aqueuses, hydroalcooliques ou huileuses, de 15 dispersions du type des solutions ou dispersions du type lotion ou sérum, d'émulsions de consistance liquide ou semi-liquide du type lait, de suspensions ou émulsions, du type crème, de gel aqueux ou anhydre, de microémulsions, de microcapsules, de microparticules, ou de dispersions vésiculaires de type ionique et/ou non ionique. 20 Les compositions cosmétiques et/ou dermatologiques, plus particulièrement concernées par une application topique, peuvent se présenter notamment sous forme de solutions aqueuses, hydroalcooliques ou huileuses, de dispersions du type des solutions ou dispersions du type lotion ou sérum, d'émulsions de 25 consistance liquide ou semi-liquide du type lait, obtenues par dispersion d'une phase grasse dans une phase aqueuse (HIE) ou inversement (E/H), ou de suspensions ou émulsions de consistance molle, semi-solide ou solide du type crème, de gel aqueux ou anhydre, ou encore de microémulsions, de microcapsules, de microparticules, ou de dispersions vésiculaires de type ionique 30 et/ou non ionique. Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles. Ces compositions peuvent notamment constituer des crèmes de nettoyage, de protection, de traitement ou de soin pour le visage, pour les mains, pour les pieds, pour les grands plis anatomiques ou pour le corps, (par exemple crèmes de jour, crèmes de nuit, crèmes démaquillantes, crèmes de fond de teint, crèmes anti- 35 solaires), des produits de maquillage comme des fonds de teint fluides, des laits de démaquillage, des laits corporels de protection ou de soin, des laits après-solaires, des lotions, gels ou mousses pour le soin de la peau, comme des lotions de nettoyage ou de désinfection, des lotions anti-solaires, des lotions de bronzage artificiel, des compositions pour le bain, des compositions déodorantes contenant 40 un agent bactéricide, des gels ou lotions après-rasage, des crèmes épilatoires, ou des compositions contre les piqûres d'insectes. Les compositions selon l'invention peuvent également consister en des préparations solides constituant des savons ou des pains de nettoyage. Lorsque la composition de l'invention est une émulsion, la proportion de la phase grasse peut aller de 5 à 80 % en poids, et de préférence de 5 à 50 % en poids par rapport au poids total de la composition. Les huiles, les émulsionnants et les coémulsionnants utilisés dans la composition sous forme d'émulsion sont choisis parmi ceux classiquement utilisés dans le domaine cosmétique et/ou dermatologique. L'émulsionnant et le coémulsionnant peuvent être présents, dans la composition, en une proportion allant de 0,3 à 30 % en poids, et de préférence de 0,5 à 20 % en poids par rapport au poids total de la composition. Lorsque la composition de l'invention est une solution ou un gel huileux, la phase grasse peut représenter plus de 90 % du poids total de la composition. De façon connue, la composition cosmétique et/ou dermatologique de l'invention peut contenir également des adjuvants habituels dans le domaine cosmétique pharmaceutique et/ou dermatologique, tels que les gélifiants hydrophiles ou lipophiles, les actifs hydrophiles ou lipophiles, les conservateurs, les antioxydants, les solvants, les parfums, les charges, les filtres, les bactéricides, les absorbeurs d'odeur et les matières colorantes. Les quantités de ces différents adjuvants sont celles classiquement utilisées dans le domaine considéré, et par exemple de 0,01 à 20 % du poids total de la composition. Ces adjuvants, selon leur nature, peuvent être introduits dans la phase grasse et/ou dans la phase aqueuse. Comme matières grasses utilisables dans l'invention, on peut citer les huiles minérales comme par exemple le polyisobutène hydrogéné et l'huile de vaseline, les huiles végétales comme par exemple une fraction liquide du beurre de karité, huile de tournesol et d'amandes d'abricot, les huiles animales comme par exemple le perhydrosqualène, les huiles de synthèse notamment l'huile de Purcellin, le myristate d'isopropyle et le palmitate d'éthyl hexyle, et les huiles fluorées comme par exemple les perfluoropolyéthers. On peut aussi utiliser des alcools gras, des acides gras comme par exemple l'acide stéarique et comme par exemple des cires notamment de paraffine, carnauba et la cire d'abeilles. On peut aussi utiliser des composés siliconés comme les huiles siliconées et par exemple les cyclométhicone et diméthicone, les cires, les résines et les gommes siliconées. Ces composés peuvent être fonctionnalisés ou non. Comme émulsionnants utilisables dans l'invention, on peut citer par exemple le stéarate de glycérol, le polysorbate 60, le mélange alcool cétylstéarylique/alcool cétylstéarylique oxyéthyléné à 33 moles d'oxyde d'éthylène vendu sous la dénomination Sinnowax AC par la société HENKEL, le mélange de PEG-6/PEG-32/Glycol Stéarate vendu sous la dénomination de Tefose® 63 par société GATTEFOSSE, le PPG-3 myristyl éther, les émulsionnants siliconés tels que le cétyldiméthicone copolyol et le mono- ou tristéarate de sorbitane, le stéarate de PEG-40, le monostéarate de sorbitane oxyéthyléné (200E). Comme solvants utilisables dans l'invention, on peut citer les alcools inférieurs, notamment l'éthanol et l'isopropanol, le propylène glycol. Comme gélifiants hydrophiles, on peut citer les polymères carboxyliques tel que le carbomer, les copolymères acryliques tels que les copolymères d'acrylates/alkylacrylates, les polyacrylamides et notamment le mélange de polyacrylamide, C13-14-Isoparaffine et Laureth-7 vendu sous le nom de Sepigel 305° par la société SEPPIC, les polysaccharides comme les dérivés cellulosiques tels que les hydroxyalkylcelluloses et en particulier les hydroxypropylcellulose et hydroxyéthylcellulose, les gommes naturelles telles que les guar, caroube et xanthane et les argiles. Comme gélifiants lipophiles, on peut citer les argiles modifiées comme les bentones, les sels métalliques d'acides gras comme les stéarates d'aluminium et la silice hydrophobe, ou encore l'éthylcellulose et le polyéthylène. Les compositions cosmétiques et/ou dermatologiques comprenant au moins un extrait de grenade, plus particulièrement concernées par l'invention peuvent aussi être utilisées pour des injections intradermiques (traitement de mésothérapie) ou via de nouveaux instruments type électrophorèse, patchs transdermiques, micro aiguilles, radiofréquence... Un « milieu physiologiquement acceptable » est selon l'invention un milieu cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptable compatible avec la peau, les muqueuses, les ongles et/ou les cheveux. Par « milieu cosmétiquement acceptable », on entend un milieu sans aspect désagréable, et qui ne génère pas de picotement, de tiraillement ou de rougeur inacceptable pour l'utilisateur. Dans la description et dans les exemples suivants, sauf indication contraire, les pourcentages sont des pourcentages en poids et les plages de valeurs libellées sous la forme "entre ... et ..." incluent les bornes inférieure et supérieure précisées. Les ingrédients sont mélangés, avant leur mise en forme, dans l'ordre et dans des conditions facilement déterminées par l'homme de l'art. Les exemples ci-après sont présentés à titre illustratif et non limitatif du domaine de l'invention. Exemple 1 : démonstration de l'effet revendiqué 1. Matériel et méthode 1.1. Modèle biologique - Tissus : 36 épidermes de 13 jours Episkin TM (J13). - Conditions de culture : 37°C, 5% CO2. - Milieu de culture : Milieu de différenciation lot n°09-DIFF-010 (Néosynthèse des GAGs totaux). 1.2. Composés testés et références Extrait testé Aspect/Stock Solution Dilution Concentrations age stock testées E1 (Draco) 'Poudre 10 mg/mi Milieu de 0.001 mg/mi Extrait de - Stockage à en DMSO différenciation grenade : +4°C à l'abri ou PBS extrait de de la lumière fruit entier E2 (Naturex, - Poudre 100 mg/ml Milieu de 0.005 mg/ml Avignon, - Stockage à en DMSO différenciation France) _ +4°C à l'abri ou PBS Extrait de de la lumière grenade : extrait de jus de fruit entier 1.3. Test préliminaire de cytotoxicité - Plaques : 96 puits - Cellules/puits : 10000 NHEK en milieu Keratinocyte-SFM - Gamme de concentrations testées : cf. Tableau 1 - Nombre de réplicats : 6 - Contact cellules/composé : 48 heures - Paramètres d'évaluation : réduction du MTT et observations morphologiques au microscope (objectif x10) La transformation du sel de tétrazolium incolore (MTT : 3-(4,5-diméthyl thiazol-2-yl)-2,5 diphényl-tetrazolium bromide) en cristaux bleus de formazan, solubles dans le DMSO, est proportionnelle à l'activité de la succinate déshydrogénase (une enzyme mitochondriale). En conséquence, la transformation du MTT en cristaux de formazan par la succinate déshydrogénase est proportionnelle au nombre de cellules vivantes. Les cellules ont été incubées en présence de MTT puis ont été dissociées et les cristaux de formazan ont été solubilisés. La densité optique (DO) à 540 nm, représentative du nombre de cellules vivantes, a été mesurée sur un lecteur de plaques (SoftMax, Molecular Devices). 1.4. Synthèse des glycosaminoglycanes sur EpiskinTM - Culture et traitement A réception, les épidermes reconstruits EpiskinTM ont été placés en plaques 24 puits contenant 2 ml de milieu de différenciation et cultivés pendant 24 heures. Après incubation, les épidermes ont été placés en plaques 12 puits en milieu de différenciation contenant ou non (témoin) les composés à testés ou la référence et incubés pendant 72 heures. Un contrôle DMSO à 0.50/0 a été réalisé en parallèle. Pour la mesure de la néosynthèse des GAGs, la [3H]-glucosamine pour la néosynthèse des GAGs totaux) a été ajouté pendant les 24 dernières heures d'incubation. Toutes les conditions ont été réalisées en n=3 pour la néosynthèse des GAGs (totaux) et en n=1 pour le contrôle histologique. - Mesure de l'incorporation de radioactivité dans les GAGs A la fin du traitement, les glycosaminoglycanes ont été extraits séparément des milieux de culture et des épidermes à l'aide de tampon chaotropique (Tris/HCI 50 mM, guanidine 4 M, EDTA 5 mM, pH 8.0) puis purifiés par chromatographie d'échange d'ions (adsorption des molécules anioniques sur billes de Q-Sepharose et désorption des molécules peu et moyennement anioniques avec une solution d'urée 6 M + NaCl 0.2 M). La radioactivité incorporée dans les molécules restées sur le support (GAGs, majoritairement) a été mesurée par scintillation liquide. Les résultats ont été exprimés en pourcentage de variation de la synthèse des GAGs totaux par rapport au témoin. 1.5. Traitement des données Les données brutes ont été transférées et traitées sous le logiciel Microsoft Excel®. Les comparaisons intergroupes ont été réalisées à l'aide du test T de Student. Formules utilisées dans ce rapport : 15 Le pourcentage de stimulation est calculé suivant la formule suivante : Valeur Stimulation (%) = X 100 - 100 Moyenne du témoin L'erreur standard de la moyenne (esm) représente l'écart de la moyenne de l'échantillon par rapport à la moyenne de la vraie population. L'esm est calculé en 20 divisant le Sd par la racine carrée de la taille de l'échantillon. Le pourcentage de viabilité est obtenu selon la formule suivante = (DO composé DO témoin) x 100- 25 2. Résultats 2.1 Test préliminaire de cytotoxicité Les résultats des tests de viabilité au MTT et l'observation des tapis cellulaires ont 30 conduit à sélectionner les concentrations à tester dans la suite de l'étude. Aucune toxicité sur les cellules n'a été décelée aux concentrations testées (voir Figure 1). 2.2. Effets des composés sur la synthèse des GAGs épidermiques 35 - Synthèse des GAGs totaux sur EpiskinTM L'incorporation de [3H]-glucosamine a été mesurée dans les GAGs présents dans les milieux de culture (Figure 1). Au niveau basal, l'incorporation de [3H]-glucosamine dans les GAGs libérés dans le milieu de culture était quasiment 40 négligeable par rapport à celle mesurée dans les épidermes (40/0 du total). 10 Le contrôle DMSO, testé à 0.5%, a eu tendance à stimuler l'incorporation de [3H]-glucosamine dans les GAGs de la fraction intra-épidermique (20% du stimulation) alors qu'aucun effet n'a été observé au niveau des GAGs libérés dans le milieu de culture. L'extrait correspondant à l'extrait de fruit entier E1, testé à 0.001 mg/ml, a significativement stimulé l'incorporation de [3H]-glucosamine dans les GAGs libérés dans le milieu de culture (99% de stimulation). L'extrait correspondant au jus de fruit entier E2, testé à 0.005 mg/ml, a significativement stimulé l'incorporation de [3H]-glucosamine dans les GAGs libérés dans le milieu de culture (208% de stimulation). 15 3. Conclusion Les extraits de grenade E1 et E2, ainsi testés, ont démontré leur capacité à stimuler la néosynthèse des GAGs totaux libérés dans les milieux de culture (facteur 2 environ). Exemple 2: Exemples de compositions 2.1. composition de gel unidose Principe actif % poids Extrait de grenade : extrait de jus de fruit 10 entier (Naturex, Avignon, France) Lycopene 10 Lactobacillus johnsonii 10 Excipients Sirop de sucre 50 Maltodextrine 17 Gomme Xanthane 0,8 Benzoate de sodium 0,2 Eau Qsp 100 On peut prendre une dose de 200 à 400 ml par jour. 20 25 .2. Composition de capsule mg/capsule Extrait de grenade : extrait de fruit entier 15 (Draco, Avignon, France) Lactobacillus paracasei 1010 cfu Glycérine 150 Stéarate de magnésium 0,02 Arôme naturel 1 On peut prendre une à trois de ces capsules par jour. 2.3. Composition de capsule On adjoint à la formulation de l'exemple 2.2 un complexe vitaminique comportant 10 60 mg de vitamine C, 100 pg de vitamine E et 6 mg de beta carotène. 2.4. Composition de capsule On adjoint à la formulation de l'exemple 2.2 un complexe vitaminique comportant 15 100 mg de vitamine C, 100 pg de vitamine E et 6 mg de lycopene par capsule. 2.5. Composition de capsule mg/capsule Vitamine C 60 Extrait de grenade : jus de fruit entier 5 (Naturex, Avignon, France) Glycérine 150 Stéarate de magnésium 0,02 Arôme naturel 2 20 On peut prendre une à trois de ces capsules par jour. 2.6. Composition de capsule On adjoint à la formulation de l'exemple 2.5 un complexe vitaminique comportant 25 60 mg de vitamine C, 100 pg de vitamine E et 6 mg de beta carotène. 2.7. Composition de capsule 1610 On adjoint à la formulation de l'exemple 2.5 un complexe vitaminique comportant 100 mg de vitamine C, 100 pg de vitamine E et 6 mg de lycopène par capsule. 2.8. Composition de lotion pour les jambes sous forme de spray (% en poids) Extrait de grenade : jus de fruit entier 5,00 (Naturex, Avignon, France) Vitamine E 0,05 Isopropanol 40,00 Conservateur 0,35 Eau qsp 100,00 2.9. Composition de crème raffermissante pour le soin du corps (% en poids) Extrait de grenade : jus de fruit entier (Naturex, 5,00 Avignon, France) Vitamine E 0,05 Isopropanol 40,00 Stéarate de glycérol 1,00 Alcool cétylstéarylique/alcool cétylstéarylique 3,00 oxyéthyléné à 33 moles OE (Sinnowax AO vendu par la société Henkel) Alcool cétylique 1,00 Diméthicone (DC 200 Fluid vendu par la société Dow 1,00 Corning) Huile de vaseline 6,00 Myristate d'isopropyle (Estol IPM 1514 vendu par 3,00 Unichema) Glycérine 20,00 Conservateur 0,30 Eau qsp 100,00 2.10. Composition de gel pour le soin du corps (% en poids) Extrait de grenade : 5,00 extrait de fruit entier (Draco, Avignon, France) Vitamine E 0,05 Vitamine C 2,50 Isopropanol 40,00 Conservateur 0,30 Eau qsp 100,00 2.11. Composition de lotion en patch pour le soin du corps (% en poids) Extrait de grenade : jus de 5,00 fruit entier (Naturex, Avignon, France) Vitamine E 0,05 Isopropanol 40,00 Conservateur 0,30 Eau qsp 100,00 REVENDICATIONS1. Utilisation cosmétique non thérapeutique d'une quantité efficace d'au moins un extrait de grenade, comme agent raffermissant de la peau d'un sujet ayant subi une modification de poids ou préalablement et/ou postérieurement à un acte de chirurgie esthétique. 2. Utilisation selon la revendication précédente, dans laquelle la 10 quantité efficace d'au moins un extrait de grenade, est mise en oeuvre à raison de 0,0001% à 1000/0, par rapport au poids total d'une composition en contenant. 3. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour prévenir et/ou traiter la peau relâchée. 4. Utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que ledit relâchement est dû à une modification et/ou à une diminution du taux des glycosaminoglycanes dans le derme. 20 5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour maintenir et/ou restaurer les propriétés biomécaniques de la peau et/ou l'élasticité et/ou la tonicité et/ou la fermeté de la peau. 6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, 25 pour atténuer l'aspect de la cellulite et/ou l'aspect de la peau d'orange et/ou pour traiter les vergetures ou prévenir leur apparition. 7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ladite modification de poids est due à un régime 30 amincissant ou à la grossesse. 8. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que ledit acte de chirurgie esthétique est choisi parmi le lifting, la liposuccion et l'injection de produits de comblement. 9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'extrait de grenade est un extrait de fruit entier. 10. Composition cosmétique et/ou dermatologique, utile selon l'une 40 quelconque des revendications 2 à 9, comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, une quantité efficace d'au moins un extrait de 15 35grenade associé à au moins un agent stimulant les macromolécules du derme ou empêchant leur dégradation choisi parmi la iamin, le palmitoyloligopeptide; les peptides extraits de végétaux, les auxines et les lignanes, un extrait de Saccharomyces cerevisiae, un extrait d'algue Macrocystis pyrifera, un produit de fermentation du lait par Lactobacillus vu/pris, un extrait d'algue brune Padina pavonica; un extrait de zooplancton Salina, le palmitoyl pentapeptide; un extrait peptidique de graines de Pisum ; les héparinoïdes ; et l'acide {2-[acétyl-(3-trifluorométhyl-phényl)-amino]-3-méthyl-butyrylamino} acétique. 11. Procédé cosmétique non thérapeutique de traitement et/ou de prévention du relâchement de la peau d'un sujet, comprenant une étape d'administration orale ou d'application topique sur la peau d'une quantité efficace d'au moins un extrait de grenade ou d'une composition en contenant, préalablement, simultanément et/ou postérieurement à une étape de perte de poids dudit sujet ou préalablement et/ou postérieurement à un acte de chirurgie esthétique. 12. Procédé selon la précédente revendication, caractérisé en ce que l'extrait de grenade est pris oralement à une dose journalière entre 0,5 et 2500 20 mg/jour. 13. Procédé selon l'une quelconque des revendications 11 et 12 dans lequel ledit sujet est un sujet suivant un régime amincissant.