Brevet FR2967678A1 — publié le 20120525

DERIVES DE POLYSACCHARIDES COMPRENANT UN MOTIF MALEIMIDE ET REACTION DE COUPLAGE PAR CHIMIE THIO-CLIC La présente invention concerne le domaine des polysaccharides greffés et éventuellement fonctionnalisés, les procédés permettant de les obtenir et les matériaux comprenant de tels polysaccharides. L'invention peut permettre d'accéder à de nouveaux types de matériaux, comme des hydrogels, notamment en solution ou en surface, pouvant trouver de nombreuses applications dans les domaines biologique, médical, pharmaceutique et cosmétique. L'ingénierie des biomatériaux connaît depuis une quinzaine d'années un essor important lié notamment à l'émergence de nouvelles applications dans les domaines de la vectorisation et la reconstruction de tissus. L'efficacité de ces matériaux, par exemple destinés à véhiculer un médicament vers un organe cible ou restaurer un tissu, repose notamment sur leur capacité à communiquer avec leur environnement. Cette efficacité peut être liée à plusieurs paramètres incluant la nature chimique, les propriétés mécaniques des matériaux ainsi que leur aptitude à répondre à des stimuli extérieurs (pH, température, présence de biomolécules) par analogie aux systèmes vivants. Parmi les polymères utilisés pour produire de tels systèmes, les polysaccharides (PS) d'origine naturelle constituent des candidats de choix. Ils présentent généralement des caractéristiques de biocompatibilité et de biodégradabilité satisfaisantes et peuvent de plus présenter une activité biologique. Leur complexité chimique offre de multiples possibilités en termes de structure et/ou de propriété, et leur origine naturelle peut les rendre particulièrement attractifs d'un point de vue environnemental, toxicologique et/ou commercial. II est donc particulièrement souhaitable d'obtenir des nouveaux polymères d'origine naturelle modifiés, comme des polysaccharides modifiés, notamment afin d'obtenir des composés présentant des nouvelles propriétés ou des propriétés améliorées, par exemple épaississantes, gélifiantes ou dispersantes. Ces polymères modifiés ou les dérivés de ces polymères peuvent par ailleurs être d'une grande utilité dans les domaines cosmétiques, pharmaceutiques ou biomédicaux. Toutes ces raisons sont la cause des nombreuses synthèses de polysaccharides greffés et/ou fonctionnalisés qui sont décrites dans la littérature. Par exemple, la demande internationale WO 2009/063802 décrit la réaction de cycloaddition (dite de "Huisgen"), entre une entité polysaccharide (guar) fonctionnalisée par des groupements alcyne et un polyéther porteur de fonctions azoture, en présence d'un catalyseur au Cuivre I. Cette réaction permet de former, de manière régiospécifique, essentiellement du 1,2,3-triazole 1-4-disubstitué. La facilité de mise en oeuvre et la compatibilité de cette réaction avec d'autres fonctionnalités chimiques, entre autres, celles des sucres et des protéines, lui ont valu l'appellation de « chimie clic » (M. Meldal et al., Chem Rev. (2008), 108, 2952). Cette réaction de cycloaddition a été également utilisée par Crescenzi et al. WO 2008/031525 pour préparer des réseaux tridimensionnels à base d'acide hyaluronique. Plus particulièrement, celle-ci met en jeu une paire de polysaccharides dont l'un des deux au moins est l'acide hyaluronique. Le polysaccharide (PS) et l'acide hyaluronique portent chacun des motifs réactifs présentant par exemple un groupement azoture ou alcyne terminal conduisant selon un mécanisme de cycloaddition 1,3-dipolaire à la formation de réseaux tridimensionnels. Cependant, cette réaction de chimie clic peut être insatisfaisante par certains aspects, par exemple en termes de toxicité et/ou de facilité de mise en oeuvre, en particulier à cause de l'élimination du Cu(I) qui est toxique in vivo. Ainsi, même si de nombreuses synthèses de polysaccharides greffés et/ou fonctionnalisés ont été décrites dans la littérature, elles peuvent ne pas être satisfaisantes en termes de type de greffage et/ou de fonctionnalisation obtenu(s), de rendement, de simplicité de mise en oeuvre, d'innocuité, notamment du ou des solvant(s) utilisé(s) et/ou du ou des réactif(s) mis en oeuvre, de coût, d'écologie, de polyvalence et/ou d'efficacité. Par ailleurs, les polysaccharides modifiés décrits peuvent se révéler insatisfaisants en termes de fonctionnalité, de coût, de pureté, de réactivité, et/ou d'utilisation. Il demeure donc un besoin d'une méthode simple, efficace et sélective pour réaliser le greffage de molécules actives sur les polysaccharides et/ou leur réticulation chimique en milieu aqueux ou hydro-organique. La présente invention vise précisément à proposer un nouveau procédé de fonctionnalisation de polysaccharides, notamment par des molécules actives, ou leur réticulation, qui permette de résoudre en tout ou partie les problèmes évoqués ci-dessus. La présente invention a encore pour but de fournir de nouveaux dérivés de polysaccharides porteurs de motifs réactifs susceptibles d'être obtenus facilement et économiquement à l'échelle industrielle. Un autre objectif de l'invention est de fonctionnaliser efficacement et sélectivement un polysaccharide porteur de motifs réactifs par des molécules ou macromolécules, notamment actives, variées et/ou de le réticuler chimiquement. La présente invention a encore pour objectif de réaliser ces deux étapes réactionnelles dans des conditions douces, et/ou n'affectant pas ou peu la masse molaire du PS et des molécules à greffer. Enfin l'invention a encore pour objet de fournir des biomatériaux à base de polysaccharides modifiés pouvant se présenter sous la forme de polymères linéaires greffés, de films plans ou d'hydrogels pour des applications biomédicales, pharmaceutiques ou cosmétiques. La présente invention vise donc à résoudre les problèmes évoqués ci- dessus en tout ou partie. Selon un premier aspect, l'invention a pour objet un procédé de préparation d'un polysaccharide, en particulier un acide hyaluronique, greffé avec un motif comprenant un maléimide. Selon un deuxième aspect, l'invention a pour objet un polysaccharide, en particulier un acide hyaluronique, greffé avec un motif comprenant un maléimide. Selon un troisième aspect, l'invention a pour objet un procédé de préparation d'un polysaccharide, en particulier un acide hyaluronique, greffé avec un motif comprenant un maléimide fonctionnalisé par un motif thioéther. Selon un quatrième aspect, l'invention a pour objet un polysaccharide, en particulier un acide hyaluronique, greffé avec un motif comprenant un maléimide fonctionnalisé par un motif thioéther. Selon un cinquième aspect, l'invention a pour objet une composition comprenant un polysaccharide greffé avec un motif comprenant un maléimide et/ou au moins un polysaccharide greffé fonctionnalisé par un motif thioéther. Selon un sixième aspect, l'invention a pour objet un matériau comprenant un polysaccharide greffé avec un motif comprenant un maléimide, un polysaccharide greffé avec un motif comprenant un maléimide fonctionnalisé par un motif thioéther, une composition comprenant un polysaccharide greffé avec un motif comprenant un maléimide et/ou un polysaccharide greffé avec un motif comprenant un maléimide fonctionnalisé par un motif thioéther. Dans la présente description, l'expression « motif comprenant un maléimide ou au moins un maléimide » est équivalente à l'expression « motif maléimide », l'expression « greffé par un motif comprenant un maléimide ou au moins un maléimide » est équivalente à l'expression « greffé maléimide », l'expression « motif comprenant un maléimide ou au moins un maléimide fonctionnalisé par un motif thioéther » est équivalente à l'expression « motif maléimide greffé thioéther », et l'expression « greffé par un motif comprenant un maléimide ou au moins un maléimide fonctionnalisé par un motif thioéther » est équivalente à l'expression « greffé maléimide fonctionnalisé thioéther ». La figure 1 est une représentation schématique de la synthèse d'un hydrogel d'acide hyaluronique selon l'invention. La Figure 2 présente des images de microscopie à force atomique de la surface d'un film d'hydrogel selon l'invention. La Figure 3 représente l'évolution de la viscosité en fonction du temps d'un mélange HA-maléimide et PEG-(SH)4 selon l'invention. Selon un aspect, l'invention a donc pour objet un procédé de préparation de polysaccharide, encore appelé PS, acide greffé avec un motif comprenant un maléimide comprenant au moins les étapes suivantes consistant à : a) faire réagir un maléimide de Formule A suivante O /NH2 N- Kn O Formule A dans laquelle : - n représente un nombre entier allant de 2 à 10, et - X représente un motif du type CRI R2, dans lequel RI et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement alkylène, comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire, ramifié ou cyclique, un groupement aryle, éventuellement substitué, ou un groupement arylalkyle, notamment benzyle, avec au moins un polysaccharide acide choisi parmi les polysaccharides acides naturels et leurs dérivés et les dérivés acides de polysaccharides neutres, par exemple portant un motif présentant un acide carboxylique, notamment un groupement carboxyméthyle, en présence d'agent couplant, comme un carbodiimide, et de sulfo-NHS de Formule suivante : N- OH Nad %O \ô dans un solvant comprenant, voire consistant en : un solvant choisi dans le groupe consistant en l'eau, les solvants polaires aprotiques, et leurs mélanges, en particulier ledit solvant polaire aprotique est choisi parmi le DMF, le DMSO, le méthanol, l'éthanol, l'isopropanol, le butanol, et leurs mélanges, et b) récupérer le polysaccharide acide greffé avec un motif comprenant du maléimide. Le maléimide peut répondre à la Formule A dans laquelle n représente un nombre entier allant de 1 à 6, en particulier de 2 à 4 et en particulier 2. Le maléimide peut répondre à la Formule A dans laquelle X représente CH2. Selon un mode de réalisation particulier, le maléimide répond à la Formule A dans laquelle : - n représente un nombre entier allant de 1 à 6, notamment de 2 à 4 et en particulier 2, et - X représente CH2. Tout particulièrement, le maléimide réagit avec le polysaccharide sur des fonctions acides. Ainsi, le motif comprenant au moins un maléimide peut être lié au polysaccharide par une liaison amide. En particulier, l'étape a) est effectuée dans l'eau ou dans un mélange eau/DMF, eau/DMSO, eau/éthanol, ou eau/isopropanol, notamment à un ratio allant de 4/1 à 1/1 (v/v). La réaction de l'étape a) peut être effectuée à un pH allant de 4 à 6, notamment de 4,5 à 5,5 et en particulier de 4,75 à 5,0. La réaction de l'étape a) peut être effectuée à une température allant de 0 à 50°C, notamment de 4 à 20 °C. La réaction de l'étape a) peut comprendre une teneur en agent couplant, notamment un carbodiimide, par exemple l'EDC, allant de 0,1 à 8 équivalents molaires, en particulier de 0,2 à 6 équivalents molaire par rapport aux fonctions acide carboxylique du PS. La réaction de l'étape a) peut comprendre une teneur en sulfoNHS allant de 0,1 à 4 équivalents molaires par rapport aux fonctions acide carboxylique du PS. Tout particulièrement, l'étape a) ne comprend pas l'utilisation d'hydroxybenzotriazole, encore appelé HOBT. La quantité d'agent couplant, notamment une carbodiimide, par exemple l'EDC peut être d'environ deux équivalents par rapport au sulfoNHS. Le maléimide de Formule A peut être présent à une teneur allant de 0,5 à 80 % équivalent par rapport à l'unité de répétition. La réaction de l'étape a) peut avoir lieu à une concentration en polysaccharide allant de 1 à 20 g/L, notamment de 2 à 10 g/L, voire de 3 à 8 g/L. Le taux de greffage molaire peut aller de 1 à 100 %, notamment de 2 à 50 %, en particulier de 5 à 40 %, tout particulièrement de 7 à 36 %, voire de 8 à 30 par unité de répétition du polysaccharide. Le taux de greffage molaire s'entend du nombre de moles de motif de greffage par mole d'unité de répétition du polysaccharide. Le polysaccharide acide peut être choisi parmi les polysaccharides acide naturels et leurs dérivés et les dérivés acides de polysaccharides neutres, par exemple portant un motif présentant un acide carboxylique comme le groupement carboxyméthyle. Le polysaccharide acide naturel peut être choisi parmi les poly(galacturonate)s, l'héparine et ses dérivés, l'acide hyaluronique et ses dérivés, les alginates, les chondroïtine sulfates, la pectine et ses dérivés. En particulier, le polysaccharide acide naturel est choisi parmi les poly(galacturonate)s, l'acide hyaluronique et ses dérivés, les alginates, les chondroïtine sulfates, la pectine et ses dérivés. Par « dérivé », on entend au sens de la présente invention un composé qui se déduit d'un autre par une simple addition ou une substitution. Dans le cas présent un polysaccharide dérivé d'un polysaccharide peut présenter des fonctions hydroxyles substituées ou modifiées en autres fonctions. Par exemple des fonctions hydroxyles peuvent être transformées en fonctions esters ou amides, ou encore des fonctions hydroxyles peuvent être protégées, notamment par des groupements protecteurs, en particulier tels que défini dans Green's Protective Groups in Organic Synthesis 4th ed. Tout particulièrement un dérivé comprend moins de 20 % en nombre de fonctions modifiées. Les dérivés acides de polysaccharides neutres peuvent être des dérivés de cellulose ou de dextrane, de maltodextrine, d'amidon, de pullulane, en particulier présentant un motif acide, notamment de type carboxyméthyle, notamment à une teneur molaire allant de 5 à 500 %, en particulier de 7 à 300 %, voire de 10 à 100 %, et tout particulièrement de 12 à 50 % par unité de répétition. Par « dérivé acide », on entend au sens de la présente invention des polysaccharides neutres sur lesquels sont greffés des motifs portant un acide carboxyliques, par exemple par greffage sur une fonction hydroxyle de motif carboxyméthyle. Le polysaccharide peut comprendre un nombre d'unité de répétition allant de 10 à 20 000, notamment de 15 à 15 000. Selon un mode de réalisation particulier, lors de l'étape b) le polysaccharide greffé avec un motif comprenant du maléimide est récupéré en solution. Le procédé selon l'invention peut permettre d'obtenir des polysaccharides greffés ne présentant pas une modification significative de leur masse molaire, c'est-à-dire que les polysaccharides greffés ne subissent pas de manière significative une dégradation ou une réticulation non désirée. Cette variation de masse molaire peut être inférieure ou égale à 20 %, en particulier calculée par rapport à la masse molaire théorique du polysaccharide 20 greffé. Selon un mode de réalisation particulier, l'invention concerne un procédé de préparation d'acide hyaluronique greffé avec un motif comprenant un maléimide comprenant au moins les étapes suivantes consistant à : a) faire réagir un maléimide de Formule A suivante : O /NH2 N- Kn 25 o Formule A dans laquelle : - n représente un nombre entier allant de 2 à 10, - X représente un motif du type CRI R2 dans lequel RI et R2 représentent, 30 indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement alkylène, comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire, ramifié ou cyclique, un groupement aryle, éventuellement substitué, ou un groupement arylalkyl, notamment benzyle, avec au moins un, notamment un, acide hyaluronique, en présence d'agent couplant, comme un carbodiimide, et du sulfo-NHS de 5 Formule suivante : N- OH \/s% NaO O O dans un solvant comprenant, voire consistant en : un solvant choisi dans le groupe consistant en l'eau, les solvants polaires aprotiques, et leurs mélanges, en particulier ledit solvant polaire aprotique 10 est choisi parmi le DMF, le DMSO, le méthanol, l'éthanol, l'isopropanol, le butanol, et leurs mélanges, et b') récupérer l'acide hyaluronique greffé avec un motif comprenant du maléimide. 15 Les conditions réactionnelles peuvent être telles que définies ci-dessus. L'acide hyaluronique peut répondre à la Formule suivante : OH dans laquelle 20 - n' peut aller de 10 à 10 000, notamment de 15 à 7 000, - R3 représente H, Na ou un motif de Formule A' tel que défini ci-dessous. En particulier, ledit motif de Formule A' est présent à taux de greffage molaire allant de 1 à 100 %, notamment de 2 à 50 %, en particulier de 5 à 40 %, tout particulièrement de 7 à 36 %, voire de 8 à 30 % par unité de répétition de 25 l'acide hyaluronique. Selon un autre de ses aspects, l'invention a pour objet un polysaccharide greffé avec un motif comprenant du maléimide, ledit motif répondant à la Formule A' suivante : - Kn HN- O Formule A' dans laquelle - n représente un nombre entier allant de 2 à 10, - X représente un motif du type CRI R2 dans lequel RI et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement alkylène, comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire, ramifié ou cyclique, un groupement aryle, éventuellement substitué, ou un groupement arylalkyl, notamment benzyle. Le motif comprenant du maléimide peut répondre à la Formule A' dans laquelle n représente un nombre entier allant de 1 à 6, en particulier de 2 à 4 et en particulier 2. Le motif comprenant du maléimide peut répondre à la Formule A' dans laquelle X représente CH2. Selon un mode de réalisation particulier, le motif comprenant du maléimide répond à la Formule A' dans laquelle : - n représente un nombre entier allant de 1 à 6, en particulier de 2 à 4 et en particulier 2, - X représente CH2. Le motif comprenant le maléimide peut en particulier être présent sur le polysaccharide sur des fonctions acides. Ainsi, le motif peut être lié au polysaccharide par une liaison amide. Le taux de greffage molaire peut aller de 1 à 100 %, notamment de 2 à 50 %, en particulier de 5 à 40 %, tout particulièrement de 7 à 36 %, voire de 8 à 30 0/0 par unité de répétition du polysaccharide. Le taux de greffage s'entend du nombre de moles de substituant comprenant du maléimide par unité de répétition du polysaccharide. Le polysaccharide acide peut être choisi parmi les polysaccharides acide naturels et leurs dérivés et les dérivés acides de polysaccharides neutres, par exemple portant un motif présentant un acide carboxylique comme le groupement carboxyméthyle. Le polysaccharide acide naturel peut être choisi parmi les poly(galacturonate)s, l'héparine et ses dérivés, l'acide hyaluronique et ses dérivés, les alginates, les chondroïtine sulfates, la pectine et ses dérivés. Plus particulièrement, le polysaccharide acide naturel est choisi parmi les poly(galacturonate)s, l'acide hyaluronique et ses dérivés, les alginates, les chondroïtine sulfates, la pectine et ses dérivés. Les dérivés acides de polysaccharides neutres peuvent être des dérivés de cellulose ou de dextrane, de maltodextrine, d'amidon, de pullulane, en particulier présentant un motif acide, notamment de type carboxyméthyle, notamment à une teneur molaire allant de 5 à 500 %, en particulier de 7 à 300 %, voire de 10 à 100 %, et tout particulièrement de 12 à 50 % par unité de répétition. Le polysaccharide peut comprendre un nombre d'unité de répétition allant de 10 à 20 000, notamment de 15 à 15 000. Le polysaccharide greffé avec un motif comprenant du maléimide peut être instable et peut donc être tout particulièrement obtenu et conservé en solution dans l'eau, en particulier à une dilution allant de 0,01 à 5 g/I, tout particulièrement de 0,1 à 4 g/I, voire de 1 à 2 g/I. L'invention concerne encore une composition, en particulier une solution, notamment aqueuse, comprenant un polysaccharide greffé avec un motif comprenant du maléimide. Cette composition peut encore comprendre un conservateur. La présente solution peut ainsi comprendre un agent anti-oxydant et/ou un agent antibactérien, par exemple du mannitol ou de l'azoture de sodium. Selon un mode de réalisation particulier, le polysaccharide est de l'acide hyaluronique, encore appelé HA, en particulier présentant un nombre d'unités de répétition allant de 10 à 10 000, notamment de 15 à 7 000. L'acide hyaluronique greffé avec un motif comprenant au moins un maléimide peut répondre à la Formule B suivante : Formule B dans laquelle - n' peut aller de 10 à 10 000, et en particulier de 15 à 7 000, et - R3 représente H, Na ou un motif comprenant du maléimide de Formule A' En particulier, le taux de greffage molaire en motif comprenant du maléimide de Formule A' va de 1 à 100 %, notamment de 2 à 50 %, en particulier de 5 à 40 %, tout particulièrement de 7 à 36 %, voire de 8 à 30 % par unité de répétition de l'acide hyaluronique. Tout particulièrement, l'acide hyaluronique greffé avec un motif comprenant du maléimide est obtenu par le procédé décrit ci-dessus. L'acide hyaluronique greffé avec un motif comprenant du maléimide peut être instable et peut donc être tout particulièrement obtenu et conservé en solution dans l'eau, en particulier à une dilution allant de 0,01 à 5 g/I, tout particulièrement de 0,1 à 4 g/I, voire de 1 à 2 g/I. L'invention concerne encore une composition, en particulier une solution, notamment aqueuse, comprenant un acide hyaluronique greffé avec un motif comprenant du maléimide. Cette composition peut encore comprendre un conservateur. La présente solution peut ainsi comprendre un anti-oxydant et/ou un antibactérien, par exemple du mannitol ou de l'azoture de sodium. Selon un troisième aspect, l'invention a pour objet un procédé de préparation de polysaccharide acide greffé maléimide fonctionnalisé par un motif thioéther comprenant au moins les étapes suivantes consistant à : c) faire réagir un composé thiol, R4-SH, avec un polysaccharide greffé avec un motif comprenant du maléimide, en particulier avec un polysacharide greffé tel que décrit ci-dessus, d) récupérer le polysaccharide acide greffé maléimide fonctionnalisé par un motif thioéther, notamment de Formule C. Tout particulièrement ce procédé est effectué à la suite du procédé de préparation polysaccharide greffé avec un motif comprenant un maléimide, notamment que décrit ci-dessus. Tout particulièrement, le procédé est effectué avec un composé thiol comprenant plusieurs fonctions thiols, ce qui peut permettre une réticulation. L'étape c) peut être effectuée après que le polysaccharide greffé avec un motif comprenant un maléimide soit purifié, notamment par ultrafiltration. Le polysaccharide greffé avec un motif comprenant un maléimide peut en particulier être utilisé dans l'étape c) sans avoir été séché, notamment par lyophilisation, ou concentré à une concentration provoquant des réactions indésirables. Cette réaction peut être effectuée dans un solvant choisi parmi l'eau, l'éthanol, l'isopropanol et leurs mélanges, en particulier un mélange d'eau et d'éthanol ou d'isopropanol. La réaction de l'étape c) peut être effectuée sur une durée allant de 5 min. à 12 h, notamment de 10 min. à 5 h, en particulier de 30 min. à 2 h. La réaction de l'étape c) peut être effectuée à une température allant de 0 à 40°C, notamment de 4 à 30°C et en particulier de 4 à 25°C. Tout particulièrement, une quantité équimolaire du composé thiol est utilisée par rapport au motif comprenant du maléimide. Le maléimide peut être fonctionnalisé avec un ou plusieurs thiols. Lorsque plusieurs thiols sont utilisés, ils peuvent être additionnés soit séquentiellement, soit en étant ajoutés et mis à réagir en même temps. En particulier deux ou trois thiols d' « intérêt » peuvent être utilisés. En particulier, ces thiols d'intérêt peuvent interagir entre eux, notamment après greffage, en particulier afin d'obtenir une fonctionnalisation « complexe » à plusieurs composantes. Tout particulièrement, le composé thiol réagit de façon quantitative avec le motif maléimide. Il peut être utilisé en défaut ou en quantité équimolaire. Afin de limiter ou d'éviter toute perte de thiol lors de la fonctionnalisation du maléimide, notamment lorsqu'une faible quantité de ce thiol est disponible ou lorsqu'il est onéreux, il peut être souhaitable de l'utiliser en défaut par rapport au motif comprenant un maléimide. Dans ce cas, il peut être souhaitable d'ajouter ensuite un autre thiol, par exemple de l'acide mercaptopropionique. Ceci peut être utile afin de faire réagir les maléimides restant et ainsi éviter qu'ils ne réagissent de manière indésirable. Ainsi, les maléimides réactifs restants sur la chaîne polysaccharidique peuvent être « neutralisés » par addition d'un thiol dit « quencheur », par exemple de l'acide mercaptopropionique. Le composé thiol peut être tout type de thiol. Il peut par exemple être choisi parmi: - les alkyles thiols, notamment les alkyles linéaires, ramifiés ou cycliques, par exemple du pentanethiol, du décanethiol, - les aryles thiols, notamment les hétéroaryles, comprenant par exemple un atome d'azote et/ou de soufre, - les polymères synthétiques, appartenant notamment à la famille des polyéthers, comme les poly(éthylène glycol)s, portant au moins une fonction thiol, Pluronics portant au moins une fonction thiol, à la famille des poly(N-alkylacrylamide)s, comme le (poly(N-isopropylacrylamide)), portant au moins une fonction thiol, - les mono-, oligo- ou polysaccharides portant au moins une fonction thiol, par exemple à l'extrémité réductrice ou le long de la chaîne oligoou polysaccharidique, - les peptides portant au moins une fonction thiol, - les oligonucléotides portant au moins une fonction thiol, - les composés comprenant au moins deux fonctions thiols, notamment deux, trois, quatre, cinq ou six fonctions thiol, et - les composés actifs, notamment les composés pharmaceutiquement actifs, portant au moins une fonction thiol. Par exemple le composé thiol peut être un stéroïde, notamment l'alphathiocholestérol, un oligo- ou un polypeptide, notamment comprenant de la sérine. Le thiol peut encore être un dérivé des composés cités ci-dessus, mais aussi par exemple être un dérivé de : - stéroïde, comme le cholestérol, - peptide, par exemple comprenant la séquence d'aminoacide arginineglycine-acide aspartique, Arg-Gly-Asp, appelée plus communément RGD), - de cyclodextrine, comme le 61-amino-61-deoxycyclomaltoheptaose. Les dérivés thiols, en particulier de molécules d'intérêt, peuvent être obtenus en greffant une fonction thiol, par exemple : - par greffage de la cystéamine, notamment avec des composés portant une fonction acide carboxylique, ou - par greffage de l'acide mercaptopropionique, notamment avec des composés portant une fonction alcool ou amine. Selon un autre mode de réalisation particulier le composé thiol comprend plusieurs fonctions thiols, notamment 1, 2, 3 ou 4. Il peut par exemple s'agir de dérivés de poly(éthylene glycol)s commercialisés par Shearwater (http://www.creativepegworks.com). Le composé thiol peut être : - un composé de type CZ4_r(O(CH2CH2O)gCH2CH2SH)r dans lequel Z représente H ou un groupe alkyle, notamment comprenant de 1 à 18 atomes de carbone, q représente un nombre entier allant de 2 à 150, notamment de 4 à 100, et en particulier de 5 à 75, et r représente un nombre entier allant de 1 à 4, ou - un composé de type HSCH2CH2O(CH2CH2O),CH2CH2SH dans lequel s représente un nombre entier allant de 10 à 500, notamment de 20 à 250, tout particulièrement de 25 à 150. La présence de ces motifs réactifs sur le HA permet le greffage efficace et contrôlé en milieu aqueux de molécules ou macromolécules actives variées et/ou sa réticulation chimique via une réaction « thiol-clic ». Cette réaction est orthogonale à une grande variété de groupements fonctionnels, ce qui permet par exemple d'incorporer physiquement des biomolécules ou biomacromolécules complexes (médicaments, peptides), voire des cellules dans le mélange réactionnel pendant la synthèse des biomatériaux à base de HA. Tout particulièrement, l'invention a pour objet un procédé de préparation d'acide hyaluronique greffé fonctionnalisé par un motif thioéther comprenant au moins les étapes suivantes consistant à : c) faire réagir un composé thiol, R4-SH, avec un acide hyaluronique greffé avec un motif comprenant du maléimide, en particulier avec un acide hyaluronique greffé tel que décrit ci-dessus, d) récupérer l'acide hyaluronique greffe maléimide fonctionnalisé par un thioéther, notamment par un thioéther de Formule C, et en particulier l'acide hyaluronique est l'acide hyaluronique de Formule D. Selon encore un autre de ses aspects, l'invention a pour objet un polysaccharide greffé maléimide fonctionnalisé par un groupement thioéther, ledit greffage fonctionnalisé par un groupement thioéther pouvant répondre à la Formule C suivante : HN- N- (fin Formule C dans laquelle - n représente un nombre entier allant de 2 à 10, - X représente un motif du type CRI R2 dans lequel RI et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement alkylène, comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire, ramifié ou cyclique, un groupement aryle, éventuellement substitué, ou un groupement arylalkyle, notamment benzyle, et - R4 représente au moins un, en particulier un, deux, trois ou quatre, groupement(s) comprenant au moins 1 atome de carbone, notamment au moins 3 atome de carbone, notamment au moins 5 atomes de carbone, en particulier au moins 6 atomes de carbone, ledit groupement peut bien entendu être substitué. Le(s) groupement(s) R4 peu(ven)t en particulier provenir d'un(de) composé(s) thiol tel que défini ci-dessus. Le polysaccharide greffé maléimide fonctionnalisé thioéther peut présenter un taux de greffage en motif comprenant du maléimide fonctionnalisé de Formule C allant de 1 à 100 %, notamment de 2 à 50 %, en particulier de 5 à 40 %, tout particulièrement de 7 à 36 %, voire de 8 à 30 % par unité de répétition du polysaccharide. Tout particulièrement, tous les motifs maléimides sont fonctionnalisés. La fonctionnalisation pouvant être faite par un ou plusieurs thiols différents. Le groupement R4 peut provenir de tout type de thiol. Ce groupement R4 provenant composé thiol peut provenir de composés tels que décrits ci-dessus ou des composés choisis parmi : - les alkyles thiols, notamment les alkyles linéaires, ramifiés ou cycliques, par exemple du pentanethiol, du décanethiol, - les aryles thiols, notamment les hétéroaryles, comprenant par exemple un atome d'azote et/ou de soufre, - les polymères synthétiques, appartenant notamment à la famille des polyéthers, comme les poly(éthylène glycol)s, portant au moins une fonction thiol, Pluronics portant au moins une fonction thiol, à la famille des poly(N-alkylacrylamide)s (poly(N-isopropylacrylamide)) portant au moins une fonction thiol, - les mono-, oligo- ou polysaccharides portant au moins une fonction thiol, par exemple à l'extrémité réductrice ou le long de la chaîne oligoou polysaccharidique, - les peptides portant au moins une fonction thiol, - les oligonucléotides portant au moins une fonction thiol, - les composés comprenant au moins deux fonctions thiols, notamment deux, trois, quatre, cinq ou six fonctions thiol, et - les composés actifs, notamment les composés pharmaceutiquement actifs, portant au moins une fonction thiol. Par exemple le groupement R4 dérivé du composé thiol peut provenir d'un stéroïde, notamment l'alpha-thiocholéstérol, un oligo- ou un polypeptide. Le thiol peut encore être un dérivé des composés cités ci-dessus, mais aussi par exemple être un dérivé de : - stéroïde, comme le cholestérol, - peptide, par exemple comprenant la séquence d'aminoacide arginineglycine-acide aspartique, Arg-Gly-Asp, appelée plus communément RGD, - de cyclodextrine, comme le 61-amino-61-deoxycyclomaltoheptaose. Les dérivés thiols, en particulier de molécules d'intérêt, peuvent être obtenus en greffant une fonction thiol, par exemple : - par greffage de la cystéamine, notamment avec des composés portant une fonction acide carboxylique, ou - par greffage de l'acide mercaptopropionique, notamment avec des composés portant une fonction alcool ou amine. Plus généralement, le groupement R4 dérivé du composé thiol peut provenir de tout type de thiol, en particulier tel que décrit dans la présente description. Selon un mode de réalisation particulier le groupement R4 dérivé du composé thiol comprend plusieurs fonctions thiols, notamment 1, 2, 3 ou 4. Il peut par exemple s'agir de dérivés de poly(éthylene glycol)s commercialisés par Shearwater (http:livmw.creativepegworks.com), en particulier ces composés présentent une fonction thiol en bout de chaine. Le groupement R4 peut par exemple provenir de : - un composé de type CZ4_r(O(CH2CH2O)gCH2CH2SH)r dans lequel Z représente H ou un groupe alkyle, , notamment comprenant de 1 à 18 atomes de carbone, q représente un nombre entier allant de 2 à 150, notamment de 4 à 100, et en particulier de 5 à 75, et r représente un nombre entier allant de 1 à 4, ou - un composé de type HSCH2CH2O(CH2CH2O),CH2CH2SH dans lequel s représente un nombre entier allant de 10 à 500, notamment de 20 à 250, tout particulièrement de 25 à 150. Le polysaccharide peut être linéaire ou réticulé. En particulier dans ce dernier cas, il peut permettre l'obtention de matériaux tridimensionnels. Tout particulièrement, le polysaccharide greffé fonctionnalisé par un groupement thioéther est un acide hyaluronique, en particulier de Formule D suivante : OH Formule D dans laquelle - n' peut aller de 10 à 10 000, et en particulier de 15 à 7 000, et 10 - R5 représente H, Na ou un greffage fonctionnalisé par un groupement thioéther répondant à la Formule C telle que définie ci-dessus. En particulier ce composé présente un taux de greffage molaire en motif comprenant du maléimide fonctionnalisé thioéther allant de 1 à 100 %, notamment de 2 à 50 %, en particulier de 5 à 40 %, tout particulièrement de 7 à 36 %, voire de 15 8 à 30 % par unité de répétition de l'acide hyaluronique. La fonctionnalisation peut être effectuée par un ou plusieurs thiols différents. L'invention a encore pour objet les polysaccharides susceptibles d'être obtenus par les procédés selon l'invention. 20 Selon un quatrième aspect, l'invention a pour objet une composition comprenant, voire consistant en au moins un polysaccharide greffé avec un motif comprenant au moins un maléimide et/ou au moins un polysaccharide greffé fonctionnalisé par un motif thioéther. Selon un cinquième aspect, l'invention a pour objet un matériau 25 comprenant - au moins un polysaccharide greffé selon l'invention et/ou susceptible d'être obtenu ou obtenu selon un procédé de l'invention, et/ou - au moins une composition comprenant un polysaccharide greffé selon l'invention et/ou susceptible d'être obtenu ou obtenu selon un procédé 30 de l'invention. Ledit matériau peut permettre de former des gels en surface ou des gels en solutions in situ. En particulier, la présente invention concerne la formation de films de gels en surface par dépôts alternés de polysaccharides portant un motif comprenant un maléimide et de composés, notamment de polymères portant au moins deux fonctions thiol. Ces films peuvent notamment servir de support pour la culture cellulaire, être utilisés comme revêtements d'implants biomédicaux, ou permettre la libération contrôlée de principes actifs. La présente invention concerne donc également un procédé comprenant une étape de fixation de polysaccharide portant un motif comprenant un maléimide sur une surface solide présentant des fonctions thiols réagissant sur le maléimide. La présente invention concerne encore la formation de gels chimiques en solution pouvant être obtenus par mélange de polymères fonctionnels, notamment portant une ou plusieurs fonction(s) thiol, avec un polysaccharide portant un motif comprenant du maléimide. Ce type de gel étant éventuellement injectable, en particulier en vue d'applications biomédicales. Les polysaccharides greffés par un motif comprenant un maléimide peuvent encore être fonctionnalisés avec des composés actifs, notamment pharmaceutiquement actifs, ou des dérivés de ces composés, portant une fonction thiol, ou avec des polymères bioactifs. Ces matériaux pouvant ainsi permettre un adressage fin de la drogue. Exemples Exemple 1 : réaction de couplage HA + peptide RGD fonctionnalisé SH L'acide hyaluronique (HA) de masse molaire moyenne en masse (Mw, g/mol) 200000 (0.100 g, 0.25 mmol) est solubilisé dans de l'eau distillée (16 mL) (Cp-3C* avec C*, la concentration critique de recouvrement dans le PBS (phosphate buffer saline à pH 7.4). A cette solution est ensuite additionnée successivement : chlorure de sodium (0.219 g, 3.74 mmol), N-(2-aminoéthyl)maleimide (0.095 g, 0.375 mmol), N-hydroxysulfosuccinimide (sulfo-NHS) (0.054 g, 0.25 mmol) et 1-éthyl-3-[3-(diméthylamino)propyl]-carbodiimide (EDC) (0.095 g, 0.50 mmol). Le pH du mélange réactionnel est ajusté à 4.75 par addition d'une solution d'acide 35 chlorhydrique 0.2 M et maintenu à cette valeur pendant la réaction par addition d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium 0.2 M. La réaction est laissée sous vive agitation à température ambiante jusqu'à une stabilisation du pH (environ 4 heures). La solution de HA modifié est ensuite diluée par de l'eau distillée pour atteindre un volume de 60 mL et la solution est transférée pour l'étape de diafiltration (membrane Amicon YM10 de seuil de coupure 10000 Da). Les lavages de la solution se font avec de l'eau distillée à 20 °C jusqu'à ce que le perméat ait une conductivité équivalente à celle de l'eau distillée. Après l'étape de diafiltration, la solution de HA-maléimide est additionnée de PBS concentré pour atteindre une concentration finale standard en constituants du tampon (NaCl 137 mM, KCI 2.7 mM, phosphate de sodium dibasique 10 mM, phosphate de potassium monobasique 2 mM et pH de 7.4). Le peptide de type RGD de formule gly-arg-gly-asp-ser provenant de la société Genecust (0.029 g, 0.050 mmol) de formule suivante NH2 H2N~ N est alors ajouté à la solution de HA-maléimide précédente. Après avoir laissé le milieu réactionnel sous agitation à 4 °C sous atmosphère d'azote pendant 12 h, l'acide mercaptopropionique en excès (0.022 mL, 0.25 mmol) est ajouté et le mélange est de nouveau agité à 4 °C sous atmosphère d'azote pendant 12 h. Le HA-maléimide/thiolRGD résultant est ensuite purifié par diafiltration (membrane Amicon YM10 de seuil de coupure 10000 Da, lavage avec de l'eau distillée). Le HA-maléimide/thiolRGD final est isolé après lyophilisation avec un rendement de 70 %. L'analyse RMN 'H du dérivé de HA final donne un taux de greffage molaire de 20 en motifs peptidiques de type RGD. RMN 1H (D2O, 400 MHz, 80 °C, b (ppm)) : 1,55-1,83 (m, 3 CH2 arginine), 2,60 (m, CH2CO, mercatopropionamide), 2,93 (m, CH2 acide aspartique), 3,12 (t, CASH), 3,25-4,00 (m, massif des protons des sucres du squelette HA), 3,87 (t, CH2 glycine), 4,31-4.58 (m, protons anomères du HA, CH arginine, CH acide aspartique, CH sérine). Exemple 2 : Formation d'un gel d'acide hyaluronique sur un support solide Le gel est fabriqué au sein d'un puits contenant une lame de verre fonctionnalisée par du 3-aminopropyltriméthoxysilane. Le thiol-acide de formule HS-(CH2-CH2-0)77-0OOH (MW = 3400 g/mol provenant de la société Shearwater) (5 mg, 0.00147 mmol) est ensuite couplé avec les fonctions amine de la surface de verre (diamètre : 22 mm) par une réaction de couplage de type peptidique. Cette réaction est effectuée dans un tampon MES (2-(N-Morpholino) éthanesulfonate de sodium) 0.02M (MES) à pH 6.5 (2 mL) en présence de 1-éthyl-3-(3-dimethylamino-propyl)carbodiimide (4.7 mg, 0.025 mmol) et de N- hydrosulfosuccinimide (2.7 mg, 0.012 mmol) pendant 4 h à température ambiante. Le puits est ensuite rincé deux fois durant 1 min avec le tampon MES. Des solutions de HA-maléimide obtenues selon la procédure décrite dans l'exemple 1 (Cp = 1.5 g/L dans le PBS, 2 mL) et de poly(éthylène glycol) tétrathiol (PEG(SH)4) (MW = 2200 g/mol provenant de la société Shearwater) de formule suivante (Cp = 2.5 g/L dans le PBS, 2 mL) sont ensuite alternativement déposées dans le puits. Après 20 minutes d'adsorption à température ambiante, le puits est rincé deux fois durant 1 min à l'aide du tampon PBS. La séquence est répétée jusqu'à l'obtention d'un film comprenant n paires de 25 couches (n allant de 4 à 20 ), noté (HA-mal/PEG(SH)4)n. Celui-ci est alors additionné d'une solution de HA-maléimide marqué à la fluorescéine (Cp = 1.5 g/L dans le PBS, 2 mL) permettant de confirmer la formation du film par microscopie de fluorescence. Le dérivé HA-maléimide marqué à la fluorescéine est préparé par couplage de la cystéamine avec l'ester succinimidyle 30 de la 5-(and-6)-carboxyfluoresceine. La figure 1 est une représentation schématique d'un hydrogel de HA selon l'invention, et en particulier tel qu'obtenu dans cet exemple 2. La Figure 2 présente des images de microscopie à force atomique de la surface d'un film d'hydrogel (HA-mal/PEG(SH)4) obtenu selon l'exemple 2. 35 Exemple 3 : Formation d'un hydrogel d'acide hyaluronique La réaction thiol-maléimide décrite dans l'exemple 2 peut-être appliquée également en solution aqueuse. SH20 Lorsqu'un dérivé HA-maléimide est mis en présence de poly(éthylène glycol) tétrathiol, on observe la formation de pontages chimiques interchaines. Celle-ci a été mise en évidence par mesure de la viscosité en fonction du temps à 25 °C d'une solution de HA-maléimide (HA de MW = 200 000 g/mol, taux de greffage de 0.20) juste après l'addition de PEG-(SH)4 (MW = 2 200 g/mol provenant de la société Shearwater). La Figure 3, représente l'évolution de la viscosité en fonction du temps à 25 °C du mélange HA-maléimide/PEG-(SH)4 (^) et d'une solution de HA initial (MW = 200 000 g/mol) (^) dans du PBS. Le gradient de gradient de cisaillement étant fixé à 1 s-1 Cette Figure 3 montre que la viscosité du mélange préparé juste avant la mise en place sur le rhéomètre croit de façon abrupte, traduisant l'établissement de pontages chimiques interchaines. Celle-ci se stabilise après environ 2 h indiquant ainsi que la réaction est terminée.15 REVENDICATIONS1. Polysaccharide acide greffé maléimide fonctionnalisé par un groupement thioéther, ledit greffage fonctionnalisé par un groupement thioéther répondant à la Formule C suivante : HN- N- (fin O Formule C dans laquelle - n représente un nombre entier allant de 2 à 10, - X représente un motif du type CRI R2 dans lequel RI et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement alkylène, comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire, ramifié ou cyclique, un groupement aryle, ou un groupement arylalkyle, et - R4 représente au moins un groupement comprenant au moins 1 atome de carbone. 2. Polysaccharide selon la revendication 1, caractérisé en ce que le taux de greffage en motif maléimide fonctionnalisé thioéther de Formule C va de 1 20 à 100 % par unité de répétition du polysaccharide. 3. Polysaccharide selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que R4 provient de composés choisis parmi : - les alkyles thiols, notamment les alkyles linéaires, ramifiés ou cycliques, 25 par exemple du pentanethiol, du décanethiol, - les aryles thiols, notamment les hétéroaryles, comprenant par exemple un atome d'azote et/ou de soufre, - les polymères synthétiques, appartenant notamment à la famille des polyéthers, comme les poly(éthylène glycol)s, portant au moins une 30 fonction thiol, à la famille des poly(N-alkylacrylamide)s (poly(N- isopropylacrylamide)) portant au moins une fonction thiol, 23 - les mono-, oligo- ou polysaccharides portant au moins une fonction thiol, par exemple à l'extrémité réductrice ou le long de la chaîne oligoou polysaccharidique, - les peptides portant au moins une fonction thiol, - les oligonucléotides portant au moins une fonction thiol, et - les composés actifs, notamment les composés pharmaceutiquement actifs, portant au moins une fonction thiol, - les stéroïdes, - les cyclodextrines, - les composés comprenant au moins deux fonctions thiol, et - les poly(éthylene glycol)s, en particulier présentant au moins une fonction thiol en extrémité de chaine, tout particulièrement à chaque extrémité de chaine. 4. Polysaccharide selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce qu'il est choisi parmi : - les polysaccharides acide naturels, notamment les poly(galacturonate)s, l'héparine et ses dérivés, l'acide hyaluronique et ses dérivés, les alginates, les chondroïtine sulfates, la pectine et ses dérivés, et - les dérivés acides de polysaccharides neutres, notamment des dérivés acides de cellulose, de dextrane, de maltodextrine, d'amidon, de pullulane, en particulier présentant un motif acide, notamment de type carboxyméthyle, notamment à une teneur molaire allant de 5 à 500 %, en particulier de 7 à 300 %, voire de 10 à 100 %, et tout particulièrement de 12 à 50 % par unité de répétition, tout particulièrement le polysaccharide est un acide hyaluronique. 5. Polysaccharide greffé avec un motif comprenant du maléimide, ledit motif répondant à la Formule A' suivante : O - HN- 0 Formule A' dans laquelle- n représente un nombre entier allant de 2 à 10, et - X représente un motif du type CRI R2 dans lequel RI et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement alkylène, comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire, ramifié ou cyclique, un groupement aryle, ou un groupement arylalkyl. 6. Polysaccharide selon la revendication 5, caractérisé en ce que le taux de greffage molaire va de 1 à 100 % par unité de répétition du polysaccharide 10 7. Polysaccharide selon la revendication 5 ou 6, caractérisé en ce qu'il est choisi parmi : - les polysaccharides acide naturels, notamment les poly(galacturonate)s, l'héparine et ses dérivés, l'acide hyaluronique et ses dérivés, les 15 alginates, les chondroïtine sulfates, la pectine et ses dérivés, et - les dérivés acides de polysaccharides neutres, notamment des dérivés acides de cellulose, de dextrane, de maltodextrine, d'amidon, de pullulane, en particulier présentant un motif acide de type carboxyméthyle, notamment à une teneur molaire allant de 5 à 500 %, 20 en particulier de 7 à 300 %, voire de 10 à 100 %, et tout particulièrement de 12 à 50 % par unité de répétition, tout particulièrement le polysaccharide est un acide hyaluronique 8. Procédé de préparation d'un polysaccharide acide greffé maléimide 25 fonctionnalisé par un motif thioéther, notamment tel que décrit selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, comprenant au moins les étapes suivantes consistant à : c) faire réagir un composé thiol, R4-SH, avec un polysaccharide greffé avec un motif comprenant du maléimide, en particulier tel que décrit selon 30 l'une quelconque des revendications 5 à 7, d) récupérer le polysaccharide acide greffé maléimide fonctionnalisé par un motif thioéther, notamment de Formule CHNN- (fin O Formule C dans laquelle - n représente un nombre entier allant de 2 à 10, - X représente un motif du type CRI R2 dans lequel RI et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement alkylène, comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire, ramifié ou cyclique, un groupement aryle, ou un groupement arylalkyle, et - R4 représente au moins un, en particulier un, deux, trois ou quatre, groupement(s) comprenant au moins 1 atome de carbone, notamment au moins 3 atome de carbone, notamment au moins 5 atomes de carbone, en particulier au moins 6 atomes de carbone. 9. Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce qu'elle est effectuée dans un solvant choisi parmi l'eau, l'éthanol, l'isopropanol et leurs mélanges, en particulier un mélange d'eau et d'éthanol ou d'isopropanol. 10. Procédé selon la revendication 8 ou 9, caractérisé en ce que le thiol est utilisé en quantité équimolaire ou en défaut, notamment dans ce dernier cas un thiol dit « quencheur » est ensuite additionné. 11. Procédé de préparation d'un polysaccharide acide greffé maléimide, notamment tel que décrit selon l'une quelconque des revendications 5 à 7, comprenant au moins les étapes suivantes consistant à : a) faire réagir un maléimide de Formule A suivante o /NH2 N- Kn 5 10 15 20 2512. 13.30Formule A dans laquelle : - n représente un nombre entier allant de 2 à 10, - X représente un motif du type CRI R2, dans lequel RI et R2 représentent, indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un atome d'halogène, un groupement alkylène, comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, linéaire, ramifié ou cyclique, un groupement aryle, ou un groupement arylalkyle, avec au moins un polysaccharide acide choisi parmi les polysaccharides acides naturels et leurs dérivés et les dérivés acides de polysaccharides neutres, par exemple portant un motif présentant un acide carboxylique, notamment un groupement carboxyméthyle, en présence d'agent couplant, comme un carbodiimide, et de sulfo-NHS de Formule suivante : NaO/ %O ~ô dans un solvant comprenant, voire consistant en : un solvant choisi dans le groupe consistant en l'eau, les solvants polaires aprotiques, et leurs mélanges, en particulier ledit solvant polaire aprotique est choisi parmi le DMF, le DMSO, le méthanol, l'éthanol, l'isopropanol, le butanol, et leurs mélanges, et b) récupérer le polysaccharide acide greffé avec un motif comprenant du maléimide. Procédé selon la revendication 11, caractérisée en ce que l'étape a) est effectuée dans l'eau ou dans un mélange eau/DMF, eau/DMSO, eau/éthanol, ou eau/isopropanol. Procédé selon la revendication 11 ou 12, caractérisée en ce que l'étape a) est effectuée à un pH allant de 4 à 6, notamment de 4,5 à 5,5 et en particulier de 4,75 à 5,0. N- OH 14. Procédé selon l'une quelconque des revendication 11 à 13, caractérisée en ce que l'étape a) a lieu à une concentration en polysaccharide allant de 1 à 20 g/L, notamment de 2 à 10 g/L, voire de 3 à 8 g/L. 15. Matériau comprenant au moins un polysaccharide tel que défini selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, susceptible d'être obtenu ou obtenu par un procédé tel que défini selon l'une quelconque des revendications 8 à 14, ou une composition comprenant un tel polysaccharide.10