Brevet FR2967868A1 — publié le 20120601

Utilisation d'une composition alimentaire dans le traitement et/ou la prévention des douleurs neuropathiques induites par un agent anticancéreux L'invention concerne l'utilisation d'une composition alimentaire dans le traitement et/ou la prévention des douleurs neuropathiques induites par un agent anticancéreux, notamment les sels de platine, et plus particulièrement l'oxaliplatine. L'invention concerne aussi des modalités particulières de traitement de patients atteints de cancer, à l'aide de ces agents anticancéreux. L'oxaliplatine (Eloxatine®) est un anticancéreux appartenant à la famille des sels de platine. Aujourd'hui, l'oxaliplatine est utilisé en chimiothérapie adjuvante dans le traitement des cancers coliques après résection, des carcinomes oesophagiens, des adénocarcinomes gastriques et pancréatiques (Louvet et al. 2002), dans certains hépatocarcinomes (Yen et al. 2008) et certains carcinomes ovariens (Chollet et al. 1996). L'oxaliplatine a également démontré une efficacité thérapeutique dans les cancers pulmonaires non à petites cellules (Monnet et al. 1998) et les lymphomes non Hodgkiniens (Germann et al. 1999). A dose thérapeutique, l'oxaliplatine entraîne une neurotoxicité dose-limitante et très fréquente. La neurotoxicité induite par l'oxaliplatine se décline sous deux formes : aiguë et chronique. La neurotoxicité aiguë apparait au cours ou juste au décours de la perfusion d'oxaliplatine, chez plus de 900/0 des patients traités. Elle se caractérise par des paresthésies et des dysesthésies au niveau des membres et de la région péri-orale, parfois accompagnées de symptômes moteurs tels que des crampes, des spasmes tétaniques ou des myotonies (Pasetto et al. 2006; Kiernan 2007). Ces symptômes sont tous déclenchés ou exacerbés par une exposition au froid. Ils sont le plus souvent réversibles mais réapparaissent lors d'une nouvelle perfusion d'oxaliplatine. Les symptômes d'hyperalgie (exacerbation de la sensibilité à un stimulus douloureux) thermique au froid et au chaud sont caractéristiques des neuropathies induites par l'oxaliplatine (Attal et al. 2009). Les symptômes aigus ont été attribués à une canalopathie, atteinte fonctionnelle des canaux ioniques membranaires (Argyriou et al. 2008). La neurotoxicité chronique cumulative succède à la neurotoxicité aiguë. La neurotoxicité chronique se développe progressivement chez 10 à 200/0 des patients après administration d'une dose cumulée de 750 à 850 mg/m2 d'oxaliplatine et peut avoir comme conséquence l'arrêt du traitement (de Gramont et al. 2000; Andre et al. 2004). La neuropathie sensorielle périphérique se caractérise par une symptomatologie persistante entre les cures d'oxaliplatine, regroupant une prolongation des paresthésies, une perte de sensibilité superficielle et profonde, une ataxie et l'apparition de douleurs spontanées. A l'heure actuelle, il n'existe aucun traitement spécifique des neuropathies iatrogènes. Les douleurs neuropathiques sont souvent décrites comme difficiles à traiter et résistantes aux traitements antalgiques conventionnels. Le traitement de ces syndromes douloureux repose principalement sur l'utilisation d'antidépresseurs et d'anticonvulsivants qui ne permettent qu'un soulagement partiel des troubles nociceptifs (Saif en al. 2005). Les neuropathies induites par les sels de platine n'affectent pas seulement la qualité de vie des patients puisque des pauses thérapeutiques, des réductions de doses ou l'arrêt du traitement peuvent réduire les chances de survie (Oldenburg et al. 2009). Dans ce contexte, il existe une réelle nécessité d'innovation thérapeutique pour la prise en charge des douleurs neuropathiques induites par les sels de platine. Dans ce contexte, les récepteurs N-méthyl-D-aspartate (NMDA) sont des récepteurs ionotropiques au glutamate, exprimés à la surface des cellules nerveuses le long des voies nociceptives. Les récepteurs NMDA situés au niveau de la moelle épinière jouent un rôle dans l'apparition des douleurs neuropathiques en initiant un processus physiopathologique appelé sensibilisation centrale (Woolf et al. 1991). La sensibilisation centrale conduit à un état d'hyperexcitabilité post-synaptique pouvant induire une hyperalgie et une allodynie (Latremoliere et a1.2009). Des études précliniques sur différents modèles animaux de neuropathie traumatique et métabolique ont montré que l'administration d'antagonistes des récepteurs NMDA (comme le MK801) permet de supprimer l'hypersensibilité douloureuse. Cependant, l'utilisation de ces antagonistes en clinique demeure limitée par l'apparition d'effets secondaires importants d'ordre cognitif, comme une amnésie partielle, des effets psychotomimétiques et une ataxie. Afin de prévenir les douleurs neuropathiques, il apparait donc nécessaire d'adopter une stratégie thérapeutique basée sur la modulation de l'activation pathologique des récepteurs NMDA sans inhiber leur activation physiologique. Les polyamines (spermine, spermidine, putrescine et cadavérine) sont des molécules chargées positivement qui proviennent essentiellement de l'alimentation. Les polyamines interviennent dans le processus algique en modulant positivement l'activité des récepteurs NMDA. Ainsi, Rivat et al. (2008) ont montré qu'un régime alimentaire sans polyamines pendant 7 jours permettait de diminuer l'hypersensibilité douloureuse sur des modèles animaux de mono-arthrite (injection tibio-tarsiale d'adjuvant de Freund) et de mononeuropathie périphérique (ligature lâche du nerf sciatique) (Rivat et al. 2008). L'utilisation de compositions alimentaires à faible teneur en polyamines destinées à lutter contre la sensibilisation, la mémorisation et la chronicisation de la douleur, et plus particulièrement de douleurs d'origine inflammatoire, incisionnelle de type chirurgical ou encore d'origine monoarthritique, impliquant la sous-unité NR2-B du récepteur NMDA est connue dans le document EP 1 648 431. L'association d'un régime alimentaire appauvri en polyamines et de la prise de docetaxel (Taxotère) a été décrite sous l'angle efficacité thérapeutique et prise d'analgésique (Cipolla et al, 2010). L'oxaliplatine développe cependant une neurotoxicité spécifique, sous les deux formes aiguë et chronique dont il a été question plus haut, contre laquelle la pharmacopée actuelle se révèle quasiment impuissante. Il existe donc un besoin extrêmement important d'une méthode pour traiter spécifiquement les douleurs neuropathiques induites par les sels de platine, et plus particulièrement I'oxaliplatine. Un premier objectif de l'invention est donc de fournir une méthode de prévention et/ou de traitement des douleurs neuropathiques induites par les sels de platine, notamment l'oxaliplatine. Un second objectif de l'invention est de fournir une telle méthode de prévention et/ou de traitement n'ayant pas ou très peu d'effets secondaires. Un troisième objectif de l'invention est de fournir une telle méthode de prévention et/ou de traitement, afin de limiter les pauses, les réductions de dose ou les risques d'arrêt de la chimiothérapie, et favorisant donc les chances de survie du patient. Un quatrième objectif de l'invention est de fournir une telle méthode de prévention et/ou de traitement, permettant d'augmenter ou d'optimiser le régime de dose par une meilleure gestion des effets indésirables neurologiques de ces anticancéreux. Un cinquième objectif est de fournir une méthode de traitement du cancer par chimiothérapie, dans certains groupes de patients. Ainsi la présente invention a tout d'abord pour objet une composition alimentaire à usage humain à faible teneur en polyamines pour une utilisation dans le traitement et/ou la prévention des douleurs neuropathiques induites par un sel de platine, et notamment l'oxaliplatine. Elle a aussi pour objet l'utilisation d'une composition alimentaire à faible teneur en polyamines pour la fabrication d'un aliment thérapeutique destiné au traitement et/ou à la prévention des douleurs neuropathiques induites par un sel de platine, et notamment l'oxaliplatine. Elle a encore pour objet une méthode de traitement et/ou de prévention des douleurs neuropathiques induites par un sel de platine, et notamment l'oxaliplatine, comprenant l'administration à un patient d'une composition alimentaire ou d'un aliment thérapeutique à faible teneur en polyamines. Suivant une caractéristique, l'usage de la composition alimentaire ou aliment thérapeutique s'accompagne, chez le patient qui le consomme : - d'une diminution de la transmission glutamatergique excitatrice au niveau de la corne dorsale de la moelle épinière, et/ou - d'une diminution des concentrations tissulaires de glutamate et/ou de sa forme de stockage glutamine au niveau de la corne dorsale de la moelle épinière. L'invention a aussi pour objet une composition alimentaire à usage humain à faible teneur en polyamines pour une utilisation pour induire chez le patient qui le consomme une diminution de la transmission glutamatergique excitatrice au niveau de la corne dorsale de la moelle épinière, et/ou une diminution des concentrations tissulaires de glutamate et/ou de sa forme de stockage glutamine au niveau de la corne dorsale de la moelle épinière. Cette utilisation induit une diminution, suppression et/ou prévention des douleurs neuropathiques, notamment iatrogènes. L'invention vise aussi la méthode de traitement et/ou de prévention des douleurs neuropathiques, notamment iatrogènes, comprenant l'administration d'une composition alimentaire à faible teneur en polyamines destinée à produire ces effets. Notamment le patient ciblé est un patient qui est traité ou va être traité avec un agent anticancéreux, notamment un sel de platine et de préférence l'oxaliplatine. Cette méthode vise à diminuer, supprimer et/ou prévenir des douleurs neuropathiques, notamment d'origine médicamenteuse, en particulier telles que celles induites par un agent anticancéreux, notamment un sel de platine, et plus particulièrement l'oxaliplatine. Cette composition alimentaire ou aliment thérapeutique est notamment constitué(e) d'un mélange nutritif comprenant moins de 1600 picomoles/g de polyamines par rapport au poids de la composition, notamment une teneur inférieure ou égale à 1000, en particulier inférieure ou égale à 600, plus particulièrement inférieure ou égale à 400, de préférence inférieure ou égale à 200 picomoles/g. Par polyamines, on entend tout particulièrement la putrescine, la spermidine, la spermine et la cadavérine. Par douleurs neuropathiques induites, on entend toute douleur apparaissant comme une conséquence directe d'une lésion ou d'une pathologie affectant le système somato-sensoriel (Treede et al. 2008) provoquée par l'administration d'un médicament anticancéreux, et notamment associées à des troubles nociceptifs aigus et chroniques, l'allodynie et l'hyperalgie mécanique ainsi que l'hypersensibilité thermique au froid. Dans un mode de réalisation de l'invention, le mélange nutritif ne comprend pas de polyamines. Selon l'invention, le mélange nutritif présent dans la composition alimentaire comprend moins de 400 picomoles/g de putrescine, moins de 400 picomoles/g de spermidine, moins de 400 picomoles/g de spermine et moins de 400 picomoles/g de cadavérine, de préférence moins de 100 picomoles/g de putrescine, moins del 00 picomoles/g de spermidine, moins del 00 picomoles/g de spermine et moins de 100 picomoles/g de cadavérine. Selon l'invention, le mélange nutritif comprend au moins une substance naturelle, au moins une composition synthétique et/ou leur mélange. De manière avantageuse, la substance naturelle selon l'invention est choisie parmi les aliments à usage humain. Selon l'invention, les aliments naturels sont choisis en suivant les prescriptions du guide nutritionnel pour un régime alimentaire pauvre en polyamines publié par la société NUTRIALYS (www.guerir.org/magazine/guide-nutritionnel-nutrialys). Selon l'invention, la composition synthétique est choisie parmi toutes les compositions synthétiques dont la teneur en polyamines est conforme à l'invention, et inférieure à 1600 picomoles/g de composition. La composition synthétique selon l'invention peut notamment être choisie parmi les compositions alimentaires décrites dans les documents EP 0 703 731 et EP 1 648 431. La composition synthétique selon l'invention peut également être choisie parmi les produits POLYDOL® et CASTASE® commercialisés par la société NUTRIALYS. La composition ou l'aliment à faible teneur en polyamines selon l'invention est administrée au patient antérieurement, simultanément ou postérieurement au traitement par le sel de platine. Selon une variante de l'invention, la composition ou l'aliment à faible teneur en polyamines constitue la totalité de la ration journalière alimentaire d'un être humain. Selon une autre variante de l'invention, la composition ou l'aliment à faible teneur en polyamines représente une part de la ration journalière alimentaire d'un être humain, ladite ration comprenant en outre des glucides, des lipides, des protéines, des vitamines, des minéraux et des électrolytes en quantités suffisantes pour répondre aux besoins nutritionnels journaliers d'un être humain. Un exemple de ration incluant les quantités adéquates de glucides, lipides, protéines, vitamines, minéraux et électrolytes est décrit dans le document EP 0 703 731. Un autre objet de la présente demande concerne un sel de platine, notamment l'oxaliplatine, pour son utilisation dans le traitement du cancer de patients subissant ou ayant subi un régime alimentaire appauvri en polyamines. Un autre objet encore de l'invention est l'utilisation d'un sel de platine, notamment l'oxaliplatine, pour le traitement du cancer de patients subissant ou ayant subi un régime alimentaire appauvri en polyamines. Un autre objet encore de l'invention est une méthode de traitement anticancéreux, dans laquelle on administre un sel de platine, notamment l'oxaliplatine, à un patient subissant ou ayant subi un régime alimentaire appauvri en polyamines. Le patient subissant ou ayant subi un régime alimentaire appauvri en polyamines consomme ou a consommé une composition alimentaire ou un aliment thérapeutique selon l'invention. S'appliquent ici l'ensemble des caractéristiques et modalités d'usage des compositions et aliments thérapeutiques définis plus haut. La figure 1 montre l'effet d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur l'hypersensibilité mécanique induite par l'oxaliplatine. La figure 2 montre l'effet d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur l'hypersensibilité thermique induite par l'oxaliplatine. La figure 3 montre l'effet d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur l'hypersensibilité thermique induite par l'oxaliplatine. La figure 4 montre l'effet d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur l'hypersensibilité mécanique induite par des injections répétées d'oxaliplatine. La figure 5 montre l'effet d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur l'hypersensibilité au froid induite par des injections répétées d'oxaliplatine. La figure 6 montre l'effet d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur l'hypersensibilité au froid induite par des injections répétées d'oxaliplatine. La figure 7 montre l'interprétation des différentes variations métaboliques observées en fonction des différents types de régime. Les différents objets de l'invention et leurs modes de réalisation seront mieux compris à la lecture des exemples qui suivent. Ces exemples sont donnés à titre indicatif, sans caractère limitatif. Exemples : Pour chacun des exemples suivants : Les expérimentations ont été menées sur des rats mâles Sprague-Dawley pesant 150 à 175 grammes en début d'étude (Charles River, Saint-Aubin-lès-Elbeuf, France). Les rats ont été répartis dans des cages en plastique à raison de 4 rats par cage. Les cages ont été entreposées dans une salle climatisée à 22°C ± 2°C, avec une hygrométrie contrôlée (500/0), un éclairage cyclique jour/nuit de 12 heures et un accès libre à l'eau et à la nourriture. L'oxaliplatine (Merckx, France) a été reconstitué dans une solution de glucose 50/0 (Freeflex®, Fresenius Kabi, France) à la concentration de 1 mg/mL afin d'obtenir un volume injectable de 6 mL/kg par voie intrapéritonéale et de 2 mL/kg par voie intraveineuse. Deux types de compositions ont été utilisées : - une composition contenant une quantité de polyamines équivalente à celle présente dans l'alimentation quotidienne (Putrescine : 54 mg/kg, Cadavérine : 37 mg/kg, Spermidine : 27 mg/kg ,Spermine : 7 mg/kg), - une composition à faible teneur en polyamines comprenant moins de 1600 picomoles/g polyamines (Putrescine Les différents types de régimes (régime à base d'une composition comprenant une teneur normale en polyamines ou PCD (Polyamine Containing Diet) et régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines ou PDD (Polyamine Deficient Diet)) ont été instaurés dès l'arrivée des rats dans l'animalerie, soit une semaine avant le début des expérimentations. Les traitements (oxaliplatine ou glucose 50/0) ont été randomisés au sein de chaque cage, soit 2 animaux traités par oxaliplatine et 2 animaux contrôles par cage. Les rats ont bénéficié d'une semaine d'acclimatation avant le début des expérimentations. Durant cette période d'acclimatation, les rats sont habitués aux conditions d'hébergement et à la préhension par le manipulateur effectuant les tests. Pour le test de préférence de place thermique, les rats sont placés en éclairage s cyclique inversé, afin que leurs capacités d'exploration soient maximales au cours des expérimentations qui ont lieu la journée. Tous les tests comportementaux ont été réalisés en aveugle, par rapport au traitement (oxaliplatine ou véhicule) et à l'alimentation (avec ou à faible teneur en polyamines). Deux modèles animaux de neuropathies induites par l'oxaliplatine ont été utilisés : Pour le modèle animal de neuropathie aiquë induite par l'oxaliplatine chez le rat : les troubles nociceptifs sont induits par une administration unique d'oxaliplatine (OXA) par voie intrapéritonéale à la dose de 6 mg/kg. Les animaux du groupe contrôle (CT) ont reçu une injection de véhicule (solution de glucose à 5°/O) (Ling et al. 2007b). Pour le modèle animal de neuropathie chronique induite par l'oxaliplatine chez le rat : l'oxaliplatine (OXA) est administré par voie intraveineuse à la dose de 2 mg/kg. Les animaux du groupe contrôle (CT) ont reçu une injection de véhicule (solution de glucose à 5°/O). Les injections sont réalisées à JO-4-7-11-14-18-21-25, soit une dose cumulée de 16mg/kg sur 4 semaines (Ling et al. 2007a). Les tests comportementaux suivants ont été utilisés : Test du Von Frey électronique L'appareil du von Frey électronique (Bioseb®, Chaville, France) comporte un manche portatif constitué d'une pointe en plastique reliée à un capteur de force. Les rats sont placés dans des boîtes en plexiglas (30cm x 30cm x 25cm) sans fond, disposées sur un support grillagé surélevé. Après une période d'habituation des rats pendant 15 minutes, on applique la pointe perpendiculairement au centre des 5 coussinets plantaires de chaque patte postérieure. La pression appliquée est augmentée graduellement jusqu'à provoquer un réflexe de flexion de la patte. L'intensité du stimulus, pression maximale appliquée (exprimée en grammes), est automatiquement enregistrée par l'appareil lors du retrait de la patte. La valeur correspond au seuil nociceptif mécanique (allodynie/hyperalgie) de l'animal. Trois mesures sont réalisées à 15 minutes d'intervalle minimum. Le calcul de la moyenne et de l'écart-type des 3 mesures est ensuite réalisé. Test de préférence de place thermique Le test de préférence de place thermique (Bioseb~, Chaville, France) est constitué de deux plaques métalliques contiguës entourées par une enceinte en plexiglas opaque. Le rat est alors introduit dans l'enceinte et libre de se déplacer d'une plaque à l'autre. La première plaque, dite « plaque de référence », est maintenue à température ambiante (25-30°C) et la seconde plaque, dite « plaque test », est maintenue à une température froide. A l'aide d'une caméra infrarouge reliée à un ordinateur, le temps que l'animal passe sur chaque plaque est mesuré, ainsi que le nombre de déplacement entre les deux plaques. Chaque session dure 3 minutes. L'habituation des animaux consiste à placer les rats sur l'appareil pendant 3 minutes plusieurs fois par jour en maintenant les deux plaques à une température de 25°C. Dans ces conditions, les rats passent autant de temps sur chaque plaque, ne montrant aucune préférence de place. Trois couples de températures ont été choisis pour les expérimentations en fonction du modèle étudié : Modèle de neuropathie aiguë à l'oxaliplatine : 12°C vs 25°C et 19°C vs 25°C Modèle de neuropathie chronique à l'oxaliplatine : 20°C vs 30°C Pour l'évaluation de l'impact préventif d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur la neuropathie aigue induite par l'oxaliplatine : l'injection d'oxaliplatine a été réalisée à J0, soit une semaine après l'instauration des régimes PCD ou PDD. Les tests de nociception ont été réalisés avant l'induction des troubles nociceptifs par injection d'oxaliplatine (J0, seuils de base) puis répétés à J2, J3, J4, J7 et J9. Le test de l'Open Field a été réalisé 3 jours après l'injection d'oxaliplatine, c'est-à-dire à l'acmé des troubles nociceptifs. Pour l'évaluation des variations métaboliques induites par un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines au sein de la corne dorsale de la moelle épinière par spectroscopie RMN du proton, les seuils nociceptifs ont été déterminés juste avant le sacrifice des animaux par décapitation. La moelle épinière des rats a ensuite été rapidement prélevée pour isoler la corne dorsale de L4 à L6. Les prélèvements ont été réalisés à J3 (acmé des troubles nociceptifs) et à J9 (retour des seuils nociceptifs à leur valeur normale). Chaque échantillon tissulaire prélevé a été immédiatement plongé dans de l'azote liquide puis conservé à -80°C jusqu'à l'analyse. L'extraction des métabolites polaires a été réalisé en suivant le protocole suivant : afin d'obtenir une quantité de tissu suffisante pour l'analyse par spectroscopie 'HRMN, les prélèvements tissulaires de moelle épinière issus de 2 rats avec les mêmes conditions de traitement ont été regroupés. L'extraction des métabolites a été réalisée selon le protocole décrit par Angenstein et al. (2008) et selon les recommandations de Beckonert et al. (2007) (Beckonert et al. 2007; Angenstein et al. 2008). Toutes les étapes du protocole ont été réalisées dans la glace ou à 4°C. Les tissus prélevés ont été déposés dans des tubes Eppendorf de 1,5 mL. Un volume de 5 mL d'acide perchlorique 6% (conservé à 4°C) par gramme de tissu a été ajouté dans chaque tube. Les tissus ont été ensuite découpés grossièrement à l'aide de ciseaux. L'acide perchlorique 6% permet de dissoudre les tissus et d'en extraire les métabolites. Après ultrasonication, l'échantillon a été vortexé pendant 30 secondes puis centrifugé à 14000 rpm pendant 15 minutes. Le surnageant a été récupéré et le pH a été ajusté à 11 avec une solution de KOH 10%. Une centrifugation à 14000 rpm pendant 10 minutes a permis d'éliminer le précipité de perchlorate de potassium. Le surnageant contenant les métabolites tissulaires extraits a été congelé à -80°C puis lyophilisé pendant une nuit. Avant l'analyse spectroscopique par 11-1-RMN, l'échantillon lyophilisé a été reconstitué avec 600 µL d'eau deutérée (D2O) contenant 1 mM de sel de sodium d'acide 2,2,3,3-d4 3- (Trimethylsilyl)propionique TSP-d4, Sigma Aldrich). Le TSP-d4 est utilisé comme référence interne de concentration et son déplacement chimique sur chaque spectre acquis par 1H-RMN est de 0 ppm. L'acquisition des spectres RMN est ensuite effectuée de la manière suivante : une acquisition de spectres à une dimension (1 D) a été réalisée grâce à un spectromètre RMN Brucker AC 400 Mhz (Plateau technique RMN, Ecole Nationale Supérieure de Chimie de Clermont-Ferrand). Avant chaque acquisition, une présaturation a été programmée pour atténuer le signal de l'eau résiduelle présente dans l'échantillon. De même, le nombre de scans (ns) ou nombre d'accumulations au cours de l'acquisition a été fixé à 32. Ces 2 conditions (présaturation et ns=32) permettent d'améliorer le rapport signal sur bruit. Chaque métabolite présent dans un extrait tissulaire donné a pu être identifié sur le spectre ID 'H-RMN en fonction de son déplacement chimique (exprimé en ppm), grâce à des bases de données spécifiques (Fan 1996; Govindaraju et al. 2000; http://www.hmdb.ca). Puis, la concentration de chaque métabolite identifié sur le spectre ID a été calculée. L'aire sous chaque pic attribué à un métabolite d'intérêt a été mesurée grâce au logiciel de traitement des spectres (TopSpinTM, Brucker), puis cette aire a été comparée directement à celle du TSP-d4 dont la concentration a été initialement fixée à I mm. La concentration de chaque métabolite d'intérêt a été ainsi calculée, exprimée en mol/g de tissu. Cette technique analytique a permis d'identifier et de quantifier 18 métabolites extraits à partir de la corne dorsale de la moelle épinière (Tableau 1). Tableau 1 Classes Métabolites Abréviations Déplacements chimiques (ppm) Dérivés bioénergétiques Myoinositol Myl 3,66-3,58 Alanine Ala 1,52-1,43 R-hydroxybutyrate BHB 1,24-1,19 Créatine totale tCr ; 3,04-3,01 Succinate Succ 2,415-2,395 Neurotransmetteurs Acide y-aminobutyrique GABA 2,24-2,17 et dérivés "` "` " Glutamate Glu 2,34-2,26 Glutamine Gln 3,80-3,74 Aspartate Asp ; 2,70-2,66 .................... Y N-acét laspartate NAA 2,04-2,00 N-acétylaspartylglutamate NAAG 2,07-2,04 ..Dérivés lipidiques et Choline ` Cho 3,21-`3,185 phospholipidiques Phosphocholine PC 3,24-3,22 Phosphatidylcholine PtC ; 3,29-3,26 ÿ....ï ....cero.p hos.phocholin e GPC , GI 3,31-3,29 Zo Les concentrations moyennes et les écart-types sont présentés sous forme d'histogrammes en pourcentage du groupe contrôle (rats non traités avec une alimentation contenant des polyamines, PCD CT). Adénosine phosphates AXP 8,28-8,25 Lactate Lac ; 1,36-1,30 Acétate Ace 1,93-1,91 Pour l'évaluation de l'impact préventif d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur la neuropathie chronique induite par l'oxaliplatine : dès leur arrivée à l'animalerie, un régime PDD a été instauré pour la moitié des cages. Les tests de nociception ont été réalisés avant l'induction de la neuropathie (J0, seuils de base), une fois par semaine pendant les injections et après l'arrêt du traitement durant 15 jours (à J0, J2, J8, J16, J23, J30 et J36). Le test de l'Open Field a été réalisé à J31. Pour l'évaluation de l'impact curatif d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur la neuropathie chronique induite par l'oxaliplatine : tous les rats ont été initialement soumis à un régime normal (PCD) une semaine avant le début des expérimentations. Une fois que la neuropathie a été bien établie (J 15), la moitié des rats a été nourrie avec un régime PDD jusqu'à la fin de l'étude. Les tests de nociception ont été réalisés avant l'induction de la neuropathie (J0, seuils de base), une fois par semaine pendant les injections et après l'arrêt du traitement durant 15 jours (à J0, J4, J11, J15, J18, J25, J32 et J39). L'analyse statistique des données a été réalisée en utilisant le logiciel STATA v10 (StataCorp). Une analyse de variance (ANOVA) suivie d'un test post hoc de Tuckey Kramer sont réalisés pour comparer les résultats des différents groupes. Pour comparer les groupes 2 à 2 à chaque temps, un test de Kruskal-Wallis avec correction de Bonferroni a été appliqué. Pour l'étude métabolomique de la corne dorsale de la moelle épinière, une analyse discriminante par régression PLS (partial least squares regression) a été réalisée à partir des données spectrales en utilisant le logiciel Simca-P+12 (Umetrics). L'analyse PLS a permis de classifier les métabolites dont la contribution est la plus importante dans la discrimination entre les différents groupes de traitements. La VIP (variable importance in the projection) a été calculée pour chaque métabolite et est utilisée comme critère pour sa valeur discriminante (Chong et al. 2005). La valeur limite de la VIP a été choisie pour mettre en évidence les 5 métabolites les plus discriminants entre 2 groupes distincts.30 Exemple 1 : évaluation de l'impact préventif d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur la neuropathie aiguë induite par l'oxaliplatine par le test du von Frey électronique (figure 1) Les résultats montrent qu'une hypersensibilité mécanique est observée 2 jours après l'injection d'oxaliplatine chez les rats soumis à un régime PCD (PCD OXA). Cette hypersensibilité persiste pendant 4 jours et disparaît complètement dès le 7è' jour après l'injection d'oxaliplatine. Chez les rats traités par oxaliplatine soumis à un régime PDD (PDD OXA), aucune variation de l'hypersensibilité mécanique n'a pu être mise en évidence. La déplétion exogène en polyamines permet de supprimer l'allodynie/hyperalgie mécanique induite par l'oxaliplatine mais n'engendre pas d'effet analgésique. En effet, aucune différence au niveau des seuils mécaniques n'apparaît entre les animaux contrôles soumis à un régime PDD (PDD CT) et les animaux contrôles soumis à un régime PCD (PCD CT). Exemple 2: évaluation de l'impact préventif d'un réqime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur la neuropathie aiquë induite par l'oxaliplatine par le test de préférence de place thermique 12°C vs 25°C (figure 2) Les résultats montrent que les rats traités par oxaliplatine et soumis à un régime PDD passent en moyenne autant de temps sur la plaque test que les animaux contrôles, ne montrant aucune hypersensibilité au froid. Exemple 3: évaluation de l'impact préventif d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur la neuropathie aiquë induite par l'oxaliplatine par le test de préférence de place thermique 19°C vs 25°C (figure 3) Les résultats montrent que les rats traités par oxaliplatine et soumis à un régime PDD passent en moyenne autant de temps sur la plaque test que les animaux contrôles, ne montrant aucune hypersensibilité au froid. Exemple 4 : effet préventif d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur la neuropathie chronique induite par l'oxaliplatine par le test du von Frey électronique (figure 4) Les résultats montrent que l'hypersensibilité mécanique développée chez les 30 animaux avec un régime PDD est moins intense que celle développés chez les rongeurs soumis à un régime PCD, cette différence apparaît dès J4 (-10% ; p Pour le groupe de rats traités par oxaliplatine soumis à un régime PCD, on observe une chute du temps passé sur la plaque test (20°C) par rapport à la plaque de référence (30°C) dès la première injection d'oxaliplatine par rapport au groupe de rats contrôle. Cette diminution du temps passé sur la plaque test devient significative à partir de la 2ème injection d'oxaliplatine soit à J4. La différence est maximale à J4 (-46% ; p 0.05). Exemple 7 : évaluation des variations métaboliques induites par un réqime à base d'une composition à faible teneur en polyamines au sein de la corne dorsale de la moelle épinière par spectroscopie RMN du proton sur la neuropathie aigue induite par l'oxaliplatine Les variations des métabolites extraits de la corne dorsale de la moelle épinière ont été mesurées par spectroscopie RMN du proton à partir de spectres à une dimension (ID). Les concentrations moyennes de chaque métabolite (exprimées en mol/g de tissu) en fonction des différentes conditions expérimentales sont présentées dans le tableau 2 (J+3) et le tableau 3 (J+9). Tableau 2 Métabolites PCD CT PCD OXA PDD CT PDD OXA AXP 0,210 ± 0,015 0,168 ± 0,163 ± 0,016 0,142 ± 0,021 0,023 Lac 6,629 ± 0,481 5,718 ± 5,606 ± 0,278 4,787 ± 0,517 0,881 Ace 0,324 ± 0,063 0,206 ± 0,407 ± 0,168 0,331 ± 0,138 0,063 Myl 3,011 ± 0,220 2,629 ± 2,572 ± 0,229 2,289 ± 0,204 0,332 Ala 0,346 ± 0,143 0,365 ± 0,380 ± 0,045 0,307 ± 0,036 0,058 BHB 0,504 ± 0,085 0,502 ± 0,526 ± 0,056 0,492 ± 0,059 0,051 tCr 3,337 ± 0,256 2,635 ± 2,681 ± 0,199 2,517 ± 0,197 0,280 Succ 0,376 ± 0,097 0,711 ± 0,317 ± 0,019 0,292 ± 0,083 0,242 GABA 2,294 ± 0,098 2,069 ± 2,266 ± 0,112 1,838 ± 0,155 0,293 Glu 0,385 ± 0,240 0,711 ± 0,318 ± 0,019 0,292 ± 0,083 0,242 Gln 0,577 ± 0,196 0,578 ± 0,488 ± 0,050 0,483 ± 0,032 0,071 Asp 0,729 ± 0,262 1,011 ± 0,652 ± 0,116 0,651 ± 0,116 0,351 NAA 2,435 ± 0,493 2,272 ± 2,140 ± 0,190 1,721 ± 0,156 0,371 NAAG 0,618 ± 0,174 0,568 ± 0,479 ± 0,042 0,433 ± 0,054 0,086 Cho 1,315 ± 0,065 1,225 ± 1,193 ± 0,070 1,077 ± 0,128 0,158 PC 1,024 ± 0,116 0,958 ± 0,931 ± 0,054 0,832 ± 0,081 0,103 PtC 0,730 ± 0,096 0,615 ± 0,549 ± 0,053 0,499 ± 0,035 0,057 GPC 0,345 ± 0,055 0,285 ± 0,267 ± 0,016 0,232 ± 0,025 0,014 Tableau 3 Métabolite PCD CT PCD OXA PDD CT PDD OXA s AXP 0,174 ± 0,031 0,185 ± 0,137 ± 0,161 ± 0,050 0,058 0,033 Lac 5,465 ± 0,735 4,789 ± 5,260 ± 5,266 ± 0,453 0,934 0,184 Ace 0,170 ± 0,022 0,142 ± 0,414 ± 0,324 ± 0,104 0,040 0,146 2967868 1s Myl 2,507 ± 0,128 2,702 ± 2,200 ± 2,215 ± 0,260 0,734 0,181 Ala 0,303 ± 0,025 0,430 ± 0,301 ± 0,357 ± 0,072 0,227 0,063 BHB 0,432 ± 0,051 0,340 ± 0,481 ± 0,453 ± 0,073 0,098 0,027 tCr 2,704 ± 0,489 2,461 ± 2,375 ± 2,509 ± 0,551 0,432 0,530 Succ 0,482 ± 0,156 0,343 ± 0,353 ± 0,280 ± 0,080 0,087 0,084 GABA 1,298 ± 0,704 1,577 ± 1,942 ± 1,617 ± 0,330 0,393 0,242 Glu 0,488 ± 0,245 0,440 ± 0,424 ± 0,517 ± 0,106 0,173 0,175 Gln 0,609 ± 0,157 0,498 ± 0,455 ± 0,195 ± 0,186 0,095 0,109 Asp 0,775 ± 0,192 0,658 ± 0,757 ± 0,637 ± 0,207 0,147 0,112 NAA 2,183 ± 0,260 2,040 ± 2,005 ± 1,887 ± 0,228 0,282 0,079 NAAG 0,512 ± 0,036 0,493 ± 0,467 ± 0,436 ± 0,119 0,132 0,017 Cho 0,899 ± 0,295 1,110 ± 1,180 ± 0,927 ± 0,142 0,291 0,066 PC 1,247 ± 0,352 0,837 ± 0,942 ± 0,899 ± 0,178 0,255 0,117 PtC 0,590 ± 0,109 0,591 ± 0,437 ± 0,487 ± 0,068 0,133 0,106 GPC 0,270 ± 0,026 0,293 ± 0,226 ± 0,209 ± 0,035 0,090 0,052 L'intégration de ces variations métaboliques dans les différentes voies biochimiques cellulaires est proposée dans la figure 7 et interprétée en discussion. Les variations de concentrations des métabolites sont normalisées par rapport aux contrôles (groupe 1). Trois jours après l'injection d'oxaliplatine, les concentrations tissulaires d'acétate (Ace, -36%, p A J+3, l'oxaliplatine induit une augmentation des concentrations de glutamate dans la corne dorsale de la moelle épinière des rats traités recevant une alimentation normale. Sans être lié à une théorie, cette augmentation de glutamate peut contribuer à la transmission du message douloureux à l'origine des troubles nociceptifs induits par l'oxaliplatine. Chez les rats contrôles recevant une alimentation à faible teneur en polyamines, une diminution de glutamate est observée à J+3 et à J+9. Chez les rats traités par oxaliplatine et recevant une alimentation à faible teneur en polyamines, la concentration tissulaire de glutamate diminue significativement à J+3. Une explication de l'effet préventif du régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur l'apparition des troubles nociceptifs induits par l'oxaliplatine peut être l'inhibition de la transmission glutamatergique excitatrice au niveau de la corne dorsale de la moelle épinière, impliquant les récepteurs NMDA. Les concentrations tissulaires de glutamine, forme de stockage astrocytaire du glutamate (Zwingmann et al. 2005), diminuent à J+3 et à J+9 dans la moelle épinière des rats traités par oxaliplatine et recevant une alimentation à faible teneur en polyamines. En revanche, ces concentrations ne varient pas par rapport à ceux des animaux contrôles à J+3 et à J+9. Sur la base de ces observations métaboliques, il est fortement envisageable que l'association d'un traitement par oxaliplatine et d'un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines entraîne un ralentissement global du métabolisme des neurones de la corne dorsale de la moelle épinière, au niveau de la transmission glutamatergique. Ces perturbations métaboliques ne sont pas engendrées par un défaut d'apport exogène en glucose, substrat énergétique majeur des cellules, car les taux de R-hydroxybutyrate, corps cétonique consommé en cas de carence en glucose, restent constants quelles que soient les conditions de traitement. Les résultats ci-dessus ont permis de mettre en évidence un effet préventif d'un régime alimentaire à base d'une composition à faible teneur en polyamines sur les troubles nociceptifs thermiques et mécaniques induits par l'administration aiguë d'oxaliplatine. De plus, un régime à base d'une composition à faible teneur en polyamines permet de prévenir l'apparition des troubles neuropathiques après ii administration d'oxaliplatine. L'instauration d'un tel régime 15 jours après l'apparition de la neuropathie permet également de reverser l'hypersensibilité thermique. D'un point de vue mécanistique et sans être lié à une théorie, l'effet préventif du régime sur la neurotoxicité aiguë induite par l'oxaliplatine peut être dû à une modulation des concentrations tissulaires de glutamate au niveau de la corne dorsale de la moelle épinière. Références bibliographiques citées - Andre T, Boni C, Mounedji-Boudiaf L, Navarro M, Tabernero J, Hickish T, Topham C, Zaninelli M, Clingan P, Bridgewater J, Tabah-Fisch I, de Gramont A. Oxaliplatin, fluorouracil, and leucovorin as adjuvant treatment for colon cancer. N Engl J Med 2004;350(23):2343-2351. - Angenstein F, Hilfert L, Zuschratter W, Altrock W D, Niessen HG, Gundelfinger ED. 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Composition alimentaire à faible teneur en polyamines pour une utilisation dans le traitement et/ou la prévention des douleurs neuropathiques induites par un sel de platine, la composition étant constituée d'un mélange nutritif comprenant moins de 1600 picomoles/g de polyamines par rapport au poids de la composition. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le sel de platine est l'oxaliplatine. 3. Composition selon la revendication 1 ou 2 caractérisée en ce que le mélange nutritif comprend une teneur en polyamines inférieure à 400, de préférence inférieure à 200 picomoles/g de composition. 4. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisé en ce que le mélange nutritif comprend moins de 400 picomoles/g de putrescine, moins de 400 picomoles/g de spermidine, moins de 400 picomoles/g de spermine et moins de 400 picomoles/g de cadavérine. 5. Composition selon la revendication précédente caractérisée en ce que le mélange nutritif comprend moins de 100 picomoles/g de putrescine, moins de 100 picomoles/g de spermidine, moins de 100 picomoles/g de spermine et moins de 100 picomoles/g de cadavérine. 6. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisée en ce que le mélange nutritif comprend au moins une substance naturelle, au moins une composition synthétique et/ou leur mélange. 7. Composition selon la revendication précédente caractérisée en ce que la substance naturelle est choisie parmi les aliments à usage humain. 8. Composition selon la revendication 6 caractérisée en ce que la composition synthétique est' choisie parmi toutes les compositions synthétiques dont la teneur en polyamines est inférieure à 1600 picomoles/g de composition. 9. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 â 8 pour une utilisation pour induire chez le patient qui la consomme une diminutionde la transmission glutamatergique excitatrice au niveau de la corne dorsale de la moelle épinière, 10. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 8 pour une utilisation pour induire chez le patient qui la consomme une diminution des concentrations tissulaires de glutamate et/ou de sa forme de stockage glutamine au niveau de la corne dorsale de la moelle épinière. 11. Sel de platine pour son utilisation dans le traitement du cancer de patients subissant ou ayant subi un régime alimentaire appauvri en polyamines, lesdits patients consommant ou ayant consommé une so composition selon les revendications 1 à 10. 12. Sel de platine selon la revendication précédente, caractérisé en ce qu'il s'agit de l'oxaliplatine.