Brevet FR2977162A1 — publié le 20130104

NANOVECTEURS OU PARTICULES POLYMERES ET LEUR UTILISATION COMME MEDICAMENT ET/OU AGENT DE DIAGNOSTIC La présente invention concerne des nanovecteurs ou particules polymères et leur 5 utilisation comme médicament et/ou agent de diagnostic. Le ciblage d'agents thérapeutiques, quels que soient leurs domaines d'application, reste un challenge. L'administration directe d'une molécule active se heurte généralement à la possibilité d'une diffusion hors de la zone de traitement souhaitée. Dans le cas de molécules devant agir au niveau de cellules tumorales se pose le 1 o problème de la distinction entre cellules saines et anormales. Des mécanismes de défenses contre les agents exogènes existent à l'intérieur des cellules qui peuvent provoquer l'évacuation de ces agents thérapeutiques et conduire aux phénomènes de résistances de certaines lignées cancéreuses. Ces problèmes de ciblages ont donné lieu à de nombreux travaux. Les différentes stratégies développées peuvent être résumées par deux approches: ciblage actif et ciblage 15 passif. Le ciblage actif repose sur une interaction spécifique entre l'agent et la cellule, basée notamment sur l'utilisation des couples ligands-récepteurs ou antigène-anticorps. Le ciblage passif a pour objet l'augmentation des quantités d'agents délivrées en utilisant les propriétés physiologiques des cibles. Longtemps considérée comme devant donner des résultats moindres que le ciblage actif, cette approche a connu un récent développement suite à la nouvelle 20 stratégie proposée par Maeda en 1986 (Maeda H., Matsumara Y., Cancer Res., 1986, 46, 6387- 92) et reposant sur le concept de perméabilité et rétention accrue (EPR) propre aux tumeurs. Les systèmes développés doivent avoir trois propriétés essentielles: être inactif le temps du transport, permettre le ciblage vers la zone de traitement souhaitée et avoir un vecteur qui libère les drogues une fois cette zone atteinte. 25 Dans le cas particulier des agents antitumoraux, la zone de traitement est ici la cellule et le guidage de la drogue se fait sur la base de différences existant entre les cellules saines et tumorales, principalement en identifiant des protéines qui sont surexprimées à la surface de ces dernières (Papot S., Tranoy 1., Tillequin F., Florent J.-C., Gesson J.-P., Curr. Med Chem., Anti-Cancer Agents, 2002, 2, 155). Les composés les plus avancés obtenus sur ce principe sont en 30 phase I/II et le MylotargO est un des rares exemples utilisé en clinique (Wu A. M., Senter P. D., Nature Biotechnology, 2005, 23 (9), 1137-1146). Cette approche présente quelques inconvénients. La reconnaissance basée sur des récepteurs de surfaces surexprimés dans les cellules tumorales n'est pas totalement sélective des tumeurs. La cinétique de libération de la drogue peut être lente et, une fois libérée, elle doit franchir la membrane cellulaire rapidement pour éviter d'être véhiculée hors du voisinage de la tumeur. Par ailleurs, une fois internalisée par la cellule, la molécule doit trouver sa cible qui peut être cytoplasmique ou nucléaire. Afin de palier ces divers inconvénients, le besoin d'un ciblage dirigé, suivi de la pénétration cellulaire et se terminant avec la libération de la drogue dans la cellule est apparu. Dans cette nouvelle approche, le concept de guidage vers les cellules tumorales reste important et la diffusion possible vers des zones non souhaitées doit être évitée. Aux nombreux travaux réalisés pour le ciblage actif des agents antitumoraux, s'ajoute la conception de systèmes destinés au ciblage passif, tirant parti des différences physiologiques 1 o entre cellules saines et tumorales. Le développement anarchique des tumeurs induit une structure inhomogéne possédant une vascularisation importante et très perméable due à un espacement plus important des cellules endothéliales. Par ailleurs, ne disposant pas de système de drainage efficace, les tumeurs accumulent plus facilement les éléments extérieurs. Ces deux caractères permettent 15 entre autres une alimentation en nutriments plus importante nécessaire au développement rapide de ces cellules et favorisent également l'angiogénése. Ce phénomène a été appelé perméabilité et rétention accrue (EPR: enhanced permability and retention) et son exploitation a été proposée par Maeda et Matsumara. Ceci conduit à une extravasion préférentielle et à la rétention de molécules de poids 20 moléculaire élevé: plus celui-ci est élevé (>40 kDa) plus la circulation est lente et plus la molécule peut être piégée par EPR. Au contraire, les agents thérapeutiques de faible poids moléculaire peuvent être disséminés par circulation et diffusion (Fréchet J. M. J., Gillies E. R., Goodwin A. P., Bioconjugate Chem., 2004, 15, 1254 ; Patel V. F., Hardin J. N., Mastro J. M., Luw K. L., Zimmermann J. L., Ehlhardt W. J., Wood land J. M., Starling J. J., Bioconjugate 25 Chem., 1996, 7(4), 497 ; Ulbrich K., Subr V., Adv. Drug Delivery Rev., 2004, 56, 1023). Au niveau de la cellule eucaryote, le passage de petites molécules au travers des membranes se fait par diffusion naturelle. Le passage à travers cette membrane de macromolécules se fait normalement par un mécanisme appelé endocytose. Dans ce processus, les macromolécules interagissent avec des récepteurs à la surface de la cellule, provoquant une 30 modification de la membrane qui englobe la structure et produit par détachement interne un organite généralement appelé endosome. Lors de leur formation au niveau de la membrane cellulaire, ces endosomes atteignent rapidement un pH interne voisin de 6. Par un processus de maturation, ce pH est progressivement abaissé avec un déplacement perinucléaire où les endosomes se lient finalement aux lysosomes primaires, donnant un ensemble appelé lysosomes secondaires de pH interne très acide voisin de 5, réservoir d'hydrolases et dont la fonction est de dégrader les molécules incorporées en leurs éléments les plus simples (acides aminés, nucléosides, etc...). Ces éléments sont alors libérés par des canaux spécifiques dans le cytoplasme où ils pourront être utilisés. Trois voies d'endocytose ont été jusqu'à présent décrites (Kirkham M., Parton R. O., Biochimica et Biophysica acta, 2005, 1745, 273-286). Parmi les systèmes proposés antérieurement dans la littérature pour libérer une molécule dans la cellule (V. F. Patel, J. N. Hardin, J. M. Mastro, K. L. Law, J. L. Zimmermann, W. J. Ehlhardt, J. M. Woodland, J. J. Starling, Bioconjugate Chem. 1996, 7, 497; E. Leikauf, F. Barnekow, H. Kdster, Tetrahedron 1995, 51, 3793), le motif trityle a été exploité. Il permet de 1 o préparer des prodrogues acido sensibles uniquement pour des substances actives possédant des alcools ou des amines. La barrière membranaire peut être altérée par différents processus, notamment sous l'action de virus. En 1988 deux équipes, celle de Green et Lowenstein (Green M., Loewenstein P. M., Cell, 1988, 55, 1179) et celle de Frankel et Pabo (Frankel A. D., Pabo C. O., Cell, 1988, 15 55, 1189) ont mis en évidence la capacité de la protéine TAT du HIV-1 à traverser la membrane cellulaire. Cette observation a donné lieu à de nombreux travaux visant notamment à connaître la séquence minimum d'acides aminés nécessaires à ce passage ou à isoler d'autres protéines disposant des mêmes propriétés. Une mise au point propre à la protéine TAT a été publiée (Dowding S. F., Wading J.S., Avanced Drug Delivery Reviews, 2005, 57, 579) en 20 parallèle avec une revue générale sur les peptides pénétrant cellulaires (CPP: cellular penetrating peptide) avec un modèle mécanistique de cette internalisation (Zorko M., Langke V., Advanced Drug Delivery Reviews, 2005, 57, 529). Des différents travaux présentés, il ressort que si l'internalisation par l'utilisation de ces peptides est effective et largement utilisée, son mécanisme n'est pas encore clairement établi. 25 Un point commun semble être des interactions de surfaces avec des protéoglycanes qui amorcent le mécanisme. Selon les peptides ou la concentration à la surface de la cellule, cette internalisation peut être réalisée par endocytose classique, par endocytose activée par déplacement lipidique (Foerg C., Zieglr V., Fernandez-Carneado J., Giral E., Rennert R., Beck-Sickinger A. O., Merkle H. P., Biochemistry, 2005, 44, 72), ou par des voies n'utilisant pas 30 l'endocytose et non encore déterminées (Thoren P. E. O., Persson D., Lincoln P. Norden B., Biophysical chemistry, 2005,114,169). L'étude de la protéine TAT a montré que celle-ci évite la dégradation lysosomale mais peut être retenue dans les endosomes (Caron N. J., Quenneville S. P., Tremblay J. P. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2004, 319, 12). Par ailleurs, des polymères vecteurs sont développés qui perturbent la stabilité des endosomes, soit en provoquant l'éclatement de ce dernier (Bulmus V., Woodward M., Lin L., Murthy N., Stayton P., Hoffman A., Journal of Controled Release, 2003, 93,105), soit en modifiant le pH interne, comme dans le cas de polymères cationiques (riches en azote) tels que des polylysines ou polylysines modifiées par des imidazoles (Putnam D., Oentry C. A., Pack D. W., Langer R., Proc. Natl. Acad. Sci., 2001, 98 (3), 1200; Merdan T., Kopecek J., Kissel T., Advanced Drug Delivery Reviews, 2002, 54, 715). Utilisés par exemple dans le transport de l'ADN, ces polymères génèrent également des interactions de charges qui donnent des complexes compacts plus stables vis-à-vis des dégradations possibles. Des objets moléculaires ont ainsi été conçus de taille suffisante pour circuler lentement dans l'organisme et éviter l'élimination rénale (taille supérieure à 40 kDa) ou le piégeage par le système réticuloendothélial (taille supérieure à 200 kDa). Un ratio entre la masse molaire du système et son volume effectif doit être trouvé. Deux types d'applications sont notamment développées: les polymères biocompatibles (Pluronic®) (Kabanov A. V., Batrakova E. V., Alakhov V. Y., Adv. Drug. Dev. Reviews, 2002, 54, 759-779) et les liposomes (Doxil® = Polyéthylèneglycol-lipsomesdoxorubicine (Ceh B., Winterhalter M., Frederik P. M., Vallner J. J., Lasie D. D., Adv. Drug. Dev. Reviews, 1997, 24, 165-177)). Un des aspects importants de ces systèmes est leur capacité à fortement diminuer les phénomènes de résistances. Bien que le ciblage passif ait en soi démontré une amélioration thérapeutique pour les différentes molécules transportées (solubilité, toxicité), il est nécessaire de développer des systèmes dont le vecteur pourra être éliminé aisément avec les caractéristiques propres à l'endocytose et capables de libérer la drogue dans la cellule, et notamment dans les organites acides comme les endosomes (pH 6) ou les lysosomes (pH 5), en particulier dans la cellule cancéreuse, permettant ainsi d'éviter les effets secondaires importants observés en raison d'une action non sélective desdites molécules sur des cellules autres que cancéreuses. Par ailleurs, la demande WO 2006/008387 décrit des particules polymères stimulables notamment en milieu acide, présentant des fonctions réactives mais qui présentent l'inconvénient majeur de ne pas pouvoir comporter des fonctions réactives sensibles de part le procédé d'obtention desdites particules et d'autre part nécessitent la mise au point d'une synthèse spécifique pour chaque fonction réactive à utiliser. Un des aspects de l'invention est de fournir des nanovecteurs, sous forme de polymère ou non, comprenant au moins un principe actif, en particulier un modulateur épigénétique, et/ou au moins une sonde de détection et/ou un peptide de pénétration cellulaire, lesdits nanovecteurs étant susceptibles de pénétrer dans une cellule, notamment une cellule cancéreuse. Un autre aspect de l'invention est d'utiliser lesdits nanovecteurs comme médicament, notamment anticancéreux et/ou comme agent de diagnostic. Un troisième aspect de l'invention est de fournir des compositions pharmaceutiques comprenant lesdits nanovecteurs. Un dernier aspect de l'invention est de fournir des procédés de synthèse desdits nanovecteurs utilisables quels que soient le modulateur épigénétique ou la sonde de détection présents sur le nanovecteur. 1 o La présente invention concerne des nanovecteurs constitués par des chaînes polymères Pi de formule générale (I) suivante : dans laquelle: 15 - / représente une chaîne polymère P, notamment une chaîne polymère P contenant environ 30 à 10000 unités monomères, identiques ou différentes, dérivées de la polymérisation d'alcènes monocycliques dont le nombre d'atomes de carbone constitutifs du cycle est d'environ 4 à 12, ou d'alcènes polycycliques dont le nombre total d'atomes de carbone constitutifs des cycles est d'environ 6 à 20, 20 - t représente 0 ou 1, - q est un entier compris de 1 à 10, - u représente un entier de 0 à 10, - n représente 0 ou 1, - v représente 0 ou 1, 25 - X représente O, NH ou S, - RI et R'1 représentent indépendamment l'un de l'autre, lorsque t = 1, un groupe de formule (II) suivante : i O r O m (u) Ou: m et p représentent indépendamment l'un de l'autre un entier de 1 à l000, en particulier 50 à 340, notamment 70 à 200 r représente est un entier compris de 0 à Io, préférentiellement 0 ou 1, Ou, - RI représente, lorsque t = 0 un groupe de formule (III) suivante relié à un alcène monocyclique ou un alcène polycyclique: Alcène N =N monocyclique ou polycyclique 1 v `o'I P _ -r 1 o dans laquelle le nombre d'atomes de carbone constitutifs du cycle de l'alcène monocyclique est d'environ 4 à 12, et le nombre total d'atomes de carbone constitutifs des cycles de l'alcène polycyclique est d'environ 6 à 20, r, m et p étant tel que définis ci-dessus, Ou, 15 - RI représente lorsque t = 0, un groupe de formule (IV) suivante : m dans laquelle R4 représente : un groupe vinyle, un groupe éthyne, un groupe OR' ou SR", R' et R" représentant indépendamment l'un de l'autre, H, un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, et m étant tel que défini ci-dessus, 20 r représente est un entier compris de 0 à Io, préférentiellement 0, - R2 et R'2 représentent indépendamment l'un de l'autre : H ou un phényle substitué ou non par au moins : o un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, o un alkoxy en C1-C20, 25 o NRaRb où Ra et Rb représentent indépendamment l'un de l'autre H, un alkyle en C1-C20, l'alkyle pouvant former un cycle avec le ou les carbones en ortho de celui portant NRaRb, un cycloalkyle en C3-C20, o NO2, o CO2Rc, où Rc représente H, un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, un benzyle substitué ou non, o un acyle en C1-C20, notamment R2 et R'2 représentent le 2 ou 4-méthoxyphényle, le 2 ou 4-méthylphényle, le phényle, le 2,4-diméthoxyphényle, et lorsque n = 0 et v = 1, R3 est alors lié directement au carbone portant R2 et R'2, ou alors, - R2 et R'2 représentent ensemble, si n = 0 et v = O, le cycle de formule (Va) suivante: 1' dans laquelle Y' représente : o O, o NRdRe où Rd et Re représentent indépendamment l'un de l'autre H, un alkyle en C1-C20, l'alkyle pouvant former un cycle avec le carbone l' ou 3', un cycloalkyle en C3-C20, l'atome d'azote présentant une charge positive associée à un anion monovalent, et Y représente o OR', où R' représente H, un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, o un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, 20 o un alcoxy en C1-C20, o NRfRg où Rf et Rg représentent indépendamment l'un de l'autre H, un alkyle en C1-C20 l'alkyle pouvant former un cycle avec le carbone 1 ou 3, un cycloalkyle en C3-C20, o NO2, 25 o CO2Rc, où Rc représente H, un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, un benzyle substitué ou non, o un acyle en C1-C20, ou, si n = 0 et v = O, le cycle de formule (Vaa) suivante: 10 15 (Vaa) ou dans laquelle A- représente un anion monovalent. - R2 et R'2 représentent ensemble le cycle de formule (Vb) suivante, n = 1 et v = 1 : 1 (Vb) 15 20 et Yi et Y2 représentent indépendamment l'un de l'autre : o OR', où R' représente H, un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, o un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, o un alcoxy en C1-C20, o NRhR; où Rh et Ri représentent indépendamment l'un de l'autre H, un alkyle en C1-C20, l'alkyle pouvant former un cycle avec le carbone 1 ou 3 dans la cas de Yi, et le carbone l' ou 3' dans le cas de Y2, un cycloalkyle en C3-C20, o NO2, o CO2Rc, où Rc représente H, un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, un benzyle substitué ou non, o un acyle en C1-C20, ou le cycle de formule (Vbb) suivante et n = 1 : (Vbb) - R3 représente un principe actif, en particulier un modulateur épigénétique, ou une sonde de détection, notamment fluorescente ou radio émettrice, ou un peptide de pénétration cellulaire (PPC), Par le terme « chaîne polymère P», il faut comprendre une substance composée d'un grand nombre de petites structures moléculaires de faible masse, identiques ou différentes, qui se lient entre elles, en chaîne ou en réseau, pour créer des molécules possédant une masse moléculaire élevée. La chaîne polymère P contient des unités monomères dérivés de la polymérisation 1 o d'alcène monocycliques ou polycycliques. Elle peut être de type polynorbornéne. En particulier, la chaîne polymère P contient d'environ 30 à 10000 unités monomères, identiques ou différentes, notamment 340 unités. En particulier, lesdites unités monomères sont dérivées de la polymérisation d'alcènes monocycliques constitués de 4 à 12 carbones ou d'alcènes polycycliques constitués de 6 à 20 15 carbones. Par l'expression « t représente 0 ou 1 », il faut comprendre que la chaîne polymère P peut être présente ou non. Lorsque t = 0, la chaîne polymère P n'est pas présente dans la formule générale (I). Ladite formule générale (I) correspond donc à la formule (I-a) suivante : Ri ]V 20 o (Pa) qui forme un composé comprenant des chaînes en fonction des motifs présents dans R1, tels que des motifs d'oxyde d'éthylène (CH2-CH2O). La chaîne peut également correspondre à, par exemple mais sans être limitée à ceux-ci, le (N- 25 (2-hydroxypropyl)méthacrylamide) (HMPA), le PEG, le pluronic® (copolymère d'oxyde d'éthylène et de propylène), le Dextran (polysaccharide branché constitué de plusieurs molécules de glucose), des polyamides, Lorsque t = 1, la chaîne polymère P est présente dans la formule générale (I) et il existe donc entre 1 et 10 structures identiques ou différentes de formule (I) présentes sur ladite chaîne 30 polymère. Le terme « particule sphérique» désigne une structure qui est constituée de plusieurs chaînes polymères P, notamment de 1012 à 1016, en particulier de 1014 à lois chaînes polymères P comprenant chacune la ou les molécule(s) de formule (I) identiques ou différentes et qui forment alors une particule sphérique ayant un diamètre moyen compris d'environ 5 nm à environ 100 µm en fonction des motifs présents dans R1, tels que des motifs (CH2-CH2O: (EO)), et de la chaîne polymère P présents dans la molécule. Préférentiellement, le diamètre des particules est compris d'environ 50 à 500 nm, en particulier 300 nm pour exploiter l'effet de perméabilité des tumeurs. Sur une particule, lorsque t= 1, il existe donc de 1012 à 1017 structures identiques ou 1 o différentes de formule (I-a), préférentiellement de loi' à 1016 Un autre avantage de l'invention est de pouvoir disposer de particules de tailles différentes. L'expression « q est un entier compris de 1 à 10 » signifie qu'au moins une molécule de formule (I-a) est présente sur une chaîne polymère P et que la chaîne polymère P peut 15 comporter jusqu'à 10 molécules de formule (I-a). Ladite particule sphérique peut donc être constituée : - de chaînes polymères P identiques, chaque chaîne polymère comprenant de une à 10 molécules de formule (I-a) identiques et peut être obtenue par copolymérisation de composés de formule (I-a) identiques (RI représentant un groupe de formule (III)) avec un alcène mono ou polycyclique, ou - de chaînes polymères Pi différentes, i variant de 1 à 10, par exemple de chaînes polymères P comprenant de 1 à 10 molécules de formule (I-a) portant un principe actif, et de chaîne polymères P2 comprenant de 1 à 10 molécules de formule (I-a) portant un fluorophore et peut être obtenue par copolymérisation de composés de formule (I-a) différents (RI représentant un groupe de formule (III)) avec un alcène mono ou polycyclique, - de chaînes R' l ne comprenant ni sonde de détection, ni principe actif, ni peptide de pénétration cellulaire (PPC) et ni triazole qui servent notamment à stabiliser la particule. 30 Le schéma A suivant dans le cas où l'alcène monocyclique est le norbornéne résume ces différents cas : 20 25 Principe actif Fluorophore Principe actif Fluorophore symbolise une chaîne PEO. SCHEMA A Dans toute la description, le nanovecteur ou nanovecteur polymère désigne aussi bien : une particule sphérique constituée de chaînes polymères Pi comprenant : - un composé de formule (I) (t = 1), ou - un composé ne comprenant pas de chaîne polymère P mais une molécule de formule (I-a) dans laquelle RI correspond à la formule (III), ou Z o - une molécule de formule (I-a) dans laquelle RI correspond à la formule (IV). Norbornène Triazole ^ z Triazole La structure de formule «X(CO)» correspond à un espaceur El entre R3 et le carbone portant R2 et R'2. L'expression «n représente 0 ou 1 » signifie que l'espaceur El formé par la structure de formule « X(CO) » est présent ou non dans le composé de formule (I). Lorsque n = 0, deux cas peuvent se présenter : - soit v = 1 et R3 est alors relié directement au carbone portant Rz et R'z, et la formule (I-a) correspond donc à la formule générale (I-b) suivante : R~ (1-b) - soit v = 0 et dans ce cas, Rz et R'z forment un cycle tel que défini ci-dessus, la 1 o formule (I-a) correspond donc à la formule générale (I-c) suivante : R~ \ /R'2 (1-c) Il est bien entendu que le composé de formule générale (I) ci-dessus définie peut représenter, lorsque t = 1 et q > 2, une particule ou nanovecteur sur laquelle sont greffées une ou plusieurs molécules de formule (I-a) et/ou une ou plusieurs molécules de formule (I-b) et/ou 15 une ou plusieurs molécules de formule (I-c). Lorsque t = 1, le groupe RI peut correspondre, par exemple, à l'une des formules II-a (lorsque r = 1) ou II-b (lorsque r = 0) suivantes : N= N e /ON O ` v \~ 0/p 0/m 0\ 0 p (Wb) 20 Lorsque t = 0, le groupe RI peut correspondre, par exemple, à l'une des formules (III-a) (lorsque r = 1) ou (III-b) (lorsque r = 0) suivantes : Alcène monocyclique ou polycyclique o Alcène monocyclique ou polycyclique O ' P (III-b) i 0 Lorsque t = 0, RI peut également correspondre à un composé de formule IV-a (lorsque r 10 = 1) ou (IV-b) (lorsque r = 0) suivantes : R4 O N o /m o m (IV-a) R4 0 m (IV-b) Le terme alkyle en C1-C20 utilisé dans la définition de R' et R" ainsi que dans toute la 15 description désigne un groupe alkyle linéaire ou ramifié comprenant 1 à 20 atomes de carbones. Par groupe alkyle linéaire en C1 à Czo il faut entendre: un groupe méthyle, un éthyle, un propyle, un butyle, un pentyle, un héxyle, un heptyle, un octyle un nonyle, un décyle, un undécyle, un dodécyle, le tridécyle, tétradécyle, le pentadécyle, l'héxadécyle, l'heptadécyle, 2 0 l'octadécyle, le nonadécyle et le eicosyle ainsi que tous leurs isomères. Par groupe alkyle ramifié, il faut comprendre un groupe alkyle tel que défini ci-dessus comprenant des substituants choisis parmi la liste des groupes alkyles linéaires définie ci-dessus, lesdits groupe alkyles linéaires étant également susceptible d'être ramifiés. Par groupe cycloalkyle en C3 à Czo il faut comprendre un groupe cyclopropyle, 25 cyclobutyle, cyclopentyle, cyclohéxyle, cycloheptyle, cyclooctyle, cyclononyle, cyclodécyle, cycloundécyle, cyclododécyle, cyclotridécyle, cyclotétradécyle, cyclopentadécyle, cyclohéxadécyle, cycloheptadécyle, cyclooctadécyle, cyclononadécyle et cycloeicosyle. De tels groupes cycloalkyles peuvent être eux-mêmes substitués par un groupe alkyle linéaire ou ramifié tel que défini ci-dessus. L'expression « principe actif » désigne toute molécule pharmaceutique susceptible d'avoir une efficacité dans une pathologie quelle qu'elle soit, chez un mammifère, en particulier un homme ou une molécule détectable par toute méthode adaptée. L'expression « modulateur épigénétique » désigne une molécule capable de réactiver des gènes régulateurs qui ont été réprimés dans les cellules tumorales de mammifère, notamment 1 o des cellules tumorales humaines, tels que par exemple les inhibiteurs d'ADN méthyle transférase qui inhibent la méthylation de l'ADN et réactivent des gènes silencieux induisant la différentiation, l'apoptose ou l'antiprolifération, ou les inhibiteurs d'histone déacétylase (HDACI ou HDI) permettant d'augmenter le niveau d'acétylation des histones et conduisant ainsi à la réexpression de gène silencieux. 15 L'expression « sonde de détection » désigne une molécule détectable par toute méthode adaptée, telle qu'une molécule fluorescente (ou fluorophore), par exemple, la fluorescéine, la rhodamine, ou une molécule radio-émettrice telle que le 99Technetium, ou des agents de contraste pour l'imagerie médicale tels que les lanthanides. Ledit modulateur ou la dite sonde sont reliés au carbonyle de l'espaceur X(CO) de la 20 formule générale (I) par une fonction OH, NH2 ou SH lorsque n = 1 ou au carbone portant Rz et R'z lorsque n = 0 et que v =1, L'expression « peptide de pénétration cellulaire » (CPP) désigne des peptides, tels que des polyarginines, polylysines, mais sans être limité à ceux-ci, susceptibles de faciliter la capture cellulaire. 25 Ledit peptide est relié par sa fonction a-aminée ou carboxylique ou par les fonctions présentes sur la chaîne latérale lorsqu'elles existent. Rz et R'z peuvent être identiques ou différents. Lorsque Rz et R'z sont identiques, le carbone porté par ces deux substituants est achiral. Par contre, lorsque Rz et R'z sont différents, le carbone portant les deux substituants est 30 chiral et la molécule de formule générale (I) peut être sous forme racémique, ou de chaque énantiomère (R) ou (S) pur ou d'un mélange des deux énantiomères compris dans la gamme de 0,01%(S)-99,9%(R) à 99,9%(S)-0,01%(R) à condition qu'aucun autre carbone asymétrique ne soit présent sur la molécule de formule (I). Si la molécule comprend un ou plusieurs autres carbones asymétriques, elle peut être de la même manière sous forme de racémique, ou de chaque énantiomère pur ou d'un mélange des énantiomères et la molécule de formule générale (I) correspond alors à un mélange de diastéréoisoméres. Lorsque Rz et R'z forment un cycle, Rz et R'z représentent indépendamment l'un de l'autre un phényle substitué ou non par un ou plusieurs substituants tels que définis ci-dessus, les deux Rz et R'z pouvant être alors identiques ou différents, le cycle étant de formule générale (V) ou (V') suivante : O, N (V) 1 o Lorsque le cycle de formule (V') est substitué par un azote, les substituants sont tels que définis ci-dessus pour Y' de la formule (Va) et l'azote est alors sous forme N+ tétravalent et est associé à un anion monovalent en guise de contre ion, tel que par exemple un halogénure, HCO3 , HSO4 , PF6 , CF3SO3 , CH3000 . Préférentiellement Rz et R'z représentent : 15 - le cycle de formule (Va) ci-dessus, et en particulier le cycle de formule (Vaa) et dans ce cas, n=0 et v=0, c'est-à-dire qu'il n'y a pas de groupe R3 présent sur la molécule de formule (I) et le cycle (Va) forme alors le fluorophore, ou - le cycle de formule (Vb), en particulier le cycle de formule (Vbb), et dans ce cas n=1 et la molécule de formule (I) présente alors un groupement R3 qui représente un 20 principe actif en particulier un modulateur épigénétique, ou un peptide de pénétration cellulaire mais pas une sonde de détection. Le composé de formule (I), lorsque q=1 et t=1, est donc constitué d'un triazole substitué : d'une part par RI lui-même lié à une chaîne polymère P, à un alcène monocyclique ou 25 polycyclique, ou à un substituant R4, et d'autre part par un méthylène ou biphénylméthyléne qui est lié le cas échéant à un principe actif en particulier un modulateur épigénétique, à une sonde de fluorescence ou à un peptide de pénétration cellulaire, optionnellement par l'intermédiaire d'un espaceur XC(0). Il peut comprendre également R' 1 qui est alors constitué uniquement de PEO. 30 Les composés de formule (I) ont un poids moléculaire compris de 40kDa à plus de d'environ 3200kDa, notamment plus d'environ 200kDa Les inventeurs ont de façon surprenante trouvé que la présence du triazole, synthétisé aisément par bioconjugaison (ou chimie « click ») permettait non seulement l'obtention aisée des composés de formule (I) quel que soit le groupe R3 présent sur celui-ci mais permettait toujours la formation d'un carbocation stable et donc la libération du principe actif en milieu acide. Un autre avantage de l'invention est que le poids moléculaire des composés de formule (I) et (Ia) leur permet de circuler longtemps dans les vaisseaux sanguins d'un mammifère, en particulier d'un homme, et notamment environ 24h, évitant ainsi leur élimination notamment pour les composés > 40kDa et leur permet d'être piégés par rétention et perméabilité accrue 1 o (Enhanced Permeability and Retention : EPR) puis internalisés par endocytose dans la cellule et de pouvoir libérer le principe actif ou la sonde de détection par la voie endosome/lysosome dans le système réticulo endothélial en raison du pH acide, par clivage de l'espaceur El, notamment pour les composés de plus de 200 kDa et en particulier pour les composés de plus de 3200kDa, ou par une voie autre pour les principes actifs sensibles au milieu acide qui 15 peuvent pénétrer le noyau à l'aide du mécanisme de complexes de pores nucléaires (Nuclear Pore Complexes : NPC) basé sur les signaux de localisation nucléaires (Nuclear Localization Signais :NLS). Une fois le principe actif libéré et/ou la sonde de détection libérée, la chaîne polymère P et les constituants autres que le principe actif ou la sonde de détection pourront être éliminés de 2 0 la cellule. Encore un autre avantage de l'invention est que le clivage du principe actif n'ayant lieu qu'à pH inférieur à 7, le composé de formule (I) peut circuler dans les vaisseaux sanguins sans être dégradé et pénètre donc dans la cellule sous sa forme complète. Encore un autre avantage de l'invention est que les composés de formule (I) étant conçus 25 à partir de structures à base de PEG, ils vont être également invisible aux macrophages, évitant ainsi leur élimination par lesdits macrophages et permettre ainsi le piégeage par EPR. Dans un mode de réalisation avantageux, la chaîne polymère P comprend plus de 10 molécules de formule (I-a) identiques ou différentes ou constituant un mélange d'une ou 30 plusieurs molécules identiques avec une ou plusieurs molécules différentes tel que défini ci-dessus. Dans un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne des nanovecteurs de formule générale (I) telles que définies ci-dessus, dans lesquelles les unités monomères sont dérivées de la polymérisation d'alcènes monocycliques, et sont de formule (Zl) suivante =[CH-RS-CH]= (Zl) dans laquelle RS représente une chaîne hydrocarbonée de 2 à 10 atomes de carbone, saturée ou non. Par « chaîne hydrocarbonée », il faut comprendre une chaîne alkyle en Cz à c.. Dans un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne des nanovecteurs de formule générale (I) telles que définies ci-dessus, dans lesquelles les alcènes monocycliques dont sont issues les unités monomères sont : - le cyclobuténe conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z 1 a) suivante : Zla - le cyclopenténe conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z lb) suivante : 17 Zlb - le cyclopentadiéne conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z 1 c) suivante Z1c - le cyclohexéne conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z 1 d) suivante Z1d - le cyclohexadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z 1 e) suivante Zle - le cycloheptène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z 1 f) suivante Z 1 f - le cyclooctène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z 1 h) suivante Zlh - le cyclooctapolyène, notamment le cycloocta-1,5-diene conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zli) suivante Zli - le cyclononène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z 1 j) suivante Z1j - le cyclononadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z 1 k) suivante Zlk - le cyclodécène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z 11) suivante Z11 - le cyclodéca-1,5-diène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z lm) suivante - le cyclododécéne conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z ln) suivante Zln - ou encore l'acétate du 2,3,4,5-tétrahydrooxepin-2-yl, le cyclopentadécéne, le paracyclophane, le ferrocenophane. Dans un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne des nanovecteurs de 1 o formule générale (I) telles que définies ci-dessus, dans lesquelles les unités monomères sont dérivées de la polymérisation d'alcènes polycycliques, et sont : - de formule (Z2) suivante =[CH-R6-CH]= (Z2) 15 dans laquelle R6 représente : * un cycle de formule a W1 W2 dans laquelle : . W représente -CHz-, ou un hétéroatome, ou un groupe -CHR7-, ou un groupe -CHRg-, R7 représentant une chaîne comprenant un polyoxyde d'éthylène de formule -(CHz-CHz-O)m , m étant tel que défini ci-dessus et Rg représentant une chaîne alkyle ou alcoxy en C1 à C,o, . Wi et W2, indépendamment l'un de l'autre, représentent H, ou une chaîne R7, ou un groupe Rg susmentionnés, ou forment en association avec les atomes de carbone qui les portent un cycle de 4 à 8 atomes de carbone, ce cycle étant le cas échéant substitué par une chaîne R7 ou un groupe Rg susmentionnés, . a représente une simple ou double liaison, 20 25 30 5 15 2977162 * ou un cycle de formule W' l W'2 \W dans laquelle : . W' représente -CHz-, ou un hétéroatome, ou un groupe -CHR7-, ou un groupe -CHRg-, R7 et Rg étant tels que définis ci-dessus, W'i et W'2, indépendamment l'un de l'autre, représentent -CHz-, ou un groupe -C(0), ou un groupe -CORS, ou un groupe -C-ORg, R7 et Rg étant tels que définis ci-dessus, - de formule (Z3) suivante H H +C\ R-C/ H H (Z3) dans laquelle R9 représente : * un cycle de formule W' 21 - \ (W"2) \ n2 20 dans laquelle : 25 ni et n2, indépendamment l'un de l'autre, représentent 0 ou 1, . W" représente -CHz-, ou un groupe -CHR7-, ou un groupe -CHRg-, R7 et Rg étant tels que définis ci-dessus, . W"i et W"2, indépendamment l'un de l'autre, représentent une chaîne hydrocarbonée de 0 à 10 atomes de carbone, * ou un cycle de formule 30 dans laquelle W" et W"a, indépendamment l'un de l'autre, représentent - CHz-, ou un groupe -CHR7-, ou un groupe -CHRg-, R7 et Rg étant tels que définis ci-dessus, * ou un cycle de formule "a dans laquelle W" et W"a, indépendamment l'un de l'autre, représentent - CHz-, ou un groupe -CHR7-, ou un groupe -CHRg-, R7 et Rg étant tels que définis ci-dessus. Dans un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne des nanovecteurs de 15 formule générale (I) telles que définies ci-dessus, dans lesquelles les alcènes polycycliques dont sont issues les unités monomères sont : - les monomères contenant un cycle cyclobuténe conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2a) suivante : O O O JN O (Z2a) - les monomères contenant un cycle cyclopenténe conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2b) suivante : 20 25 (Z2b) - le norbornène (bicyclo[2,2,1 ]hept-2-ène) conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2c) suivante : (Z2c) - le norbornadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères 1 o de formule (Z2d) suivante : 23 (Z2d) 15 - le 7-oxanorbornène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2e) suivante : O v_ 20 (Z2e) - le 7-oxanorborndiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2f) suivante : O 25 (Z2f) - le dimère du norbornadiéne conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3a) suivante : (Z3 a) - le dicyclopentadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z31)) suivante : 15 (Z3b) - le tetracyclododécadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3c) suivante : (Z3c) - ou le bicyclo[5,1,0]oct-2-ène, le bicyclo[6,1,0]non-4-éne. Dans un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne des nanovecteurs de formule générale (I) telles que définies ci-dessus, dans lesquelles les alcènes mono ou polycycliques dont sont issues les unités monomères sont : - le norbornéne (bicyclo [2,2,1 ]hept-2-éne) conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2c), - le tetracyclododécadiéne conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3c), - le dicyclopentadiéne conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3b), - le dimère du norbornadiéne conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3a - le cycloocta-1,5-diène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zli). Dans un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne un composé de formule générale (I) telles que définies ci-dessus, dans lesquelles le modulateur épigénétique est choisi parmi : - un nucléoside, en particulier la cytidine, l'uridine, l'adénosine, la guanosine, la thymidine ou l'inosine, - les inhibiteurs d'histones déacétylase (HDI), en particulier le Zolinzâ (SAHA), la trichostatine A (TSA), l'acide valproïque, MS-275 ou CI-994, ou - les inhibiteurs d'ADN méthyltransférases (DNMTI), en particulier la 5- azacytidine, la 5-aza-2'-deoxycytidine et la zébularine. Les nucléosides sont des glycosylamines constitués d'une nucléobase (ou base) liée à un ribose ou un désoxyribose via une liaison glycosidique ou une base liée à un analogue de ribose 25 comme dans la gemcitabine. L'activité biologique des inhibiteurs d'histones déacétylase (HDI ou inhibiteurs d'HDAC) conduit à une augmentation du niveau d'acétylation des histones qui permet la réexpression de gènes régulateurs de tumeurs silencieux dans les cellules tumorales. Le Zolinzâ (SAHA) possède la structure suivante : O HO, N H 30 SAHA lorsqu'il est présent est relié soit à l'espaceur X(CO) soit au carbone portant Rz et R'z de la formule (I) par l'hydroxyle de la fonction acide hydroxamique. La trichostatine (TSA) possède la structure suivante : O O \N~ TSA lorsqu'il est présent est relié soit à l'espaceur X(CO) soit au carbone portant R2 et 5 R'2 de la formule (I) par l'hydroxyle de la fonction acide hydroxamique ou par la fonction cétone voisine du cycle aromatique. L'acide valproïque possède la structure suivante : O HO L'acide valproïque lorsqu'il est présent est relié soit à l'espaceur X(CO), soit au 1 o carbone portant R2 et R'2 de la formule (I) par l'hydroxyle de la fonction acide. MS-275 possède la structure suivante : O MS-275 lorsqu'il est présent est relié soit à l'espaceur X(CO) soit au carbone portant R2 et R'2 de la formule (I) par la fonction amine de la partie aniline. 15 CI-994 possède la structure suivante : N,OH H N H N H2 H CI-994 lorsqu'il est présent est relié soit à l'espaceur X(CO) soit au carbone portant R2 et R'2 de la formule (I) par la fonction amine de la partie aniline. L'hyperméthylation des régions de l'ADN appelées îlots CpG est responsable de la 20 mauvaise activation des gènes promoteurs impliqués dans la régulation de la transcription. L'action des inhibiteurs d'ADN méthyltransférases (inhibiteurs de DNMT) résulte blocage de cette méthylation anormale. La 5-azacytidine possède la structure suivante: NH2 NON en un HO OH OH La 5-azacytidine est liée à l'espaceur X(CO) ou au carbone portant R2 et R'2 de la formule (I) par sa fonction alcool primaire, secondaires ou par l'amine. La 5-aza-2'-deoxycytidine (ou décitabine) possède la structure suivante: NH2 N~ N HO OH La 5-aza-2'-deoxycytidine est liée à l'espaceur X(CO) ou au carbone portant R2 et R'2 1 o de la formule (I) par sa fonction alcool primaire, secondaire ou amine. La zébularine possède la structure suivante: HO OH OH 15 La zébularine est liée à l'espaceur X(CO) ou au carbone portant R2 et R'2 de la formule (I) par sa fonction alcool primaire ou secondaire. Dans un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne des nanovecteurs de formule générale (I) telles que définies ci-dessus, dans lesquelles la sonde de détection est choisie parmi une substance fluorophore, notamment la rhodamine B ou la fluorescéine, les 20 coumarines, en particulier la 7-hydroxy-4-methylcoumarine, les bodipy, le texas red, les cyanines, en particulier les CY3 ou les CY5, ou une substance radio émettrice comme le 99 Technétium sous forme ligandée, ou des agents de contraste pour l'imagerie médicale comme les lanthanides (gadolinium). L'expression « substance fluorophore » désigne une substance chimique capable 5 d'émettre de la lumière de fluorescence après excitation. La rhodamine présente un squelette de structure suivante: + NH2 CI- H2N La fonction CO2H correspond alors à l'espaceur El. La rhodamine B présente la structure suivante : O ler Nom/ 10 La fonction CO2H correspond alors à l'espaceur El. La fluorescéine présente la structure suivante: HO 15 La fonction CO2H correspond alors à l'espaceur El. La 7-hydroxy-4-methylcoumarine présente la structure suivante: HO O O La fonction OH est alors reliée au carbone portant Rz et R'z de la formule (I) sans espaceur. Les Bodipy correspondent à l'abréviation de bore-dipyrométhene, et représentent une famille de colorants qui absorbent fortement dans l'UV et qui ont la propriété d'émettre une fluorescence étroite avec un rendement quantique important. Ils dérivent tous du 4,4-difluoro-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacéne ci-dessous: F F Le texas red présente la formule suivante : so.2c~ Les CY3 présentent la formule suivante : R représentant un alkyle, tel que méthyle, éthyle... Les CY5 présentent la formule suivante : R représentant un alkyle, tel que méthyle, éthyle...15 Le 99Technétium sous forme ligandée peut correspondre au technetium-gluceptate ou plus classiquement des complexes de type diethylene triamine pentacetate (DTPA) (Brain Research Protocols 8 (2001) 143-149, Non-invasive assessment of blood-brain barrier (BBB) permeability 99 using a gamma camera to detect technetium-gluceptate extravasation in rat brain. Pamela Esposito , Stanley Jacobson , Raymond Connolly , Daniela Gheorghe, Theoharis C. Theoharides ; Use of sequential dtpa clearance and high resolution computerized tomography in monitoring interstitial lung disease in dermatomyositis. C. Hell, E. Romas, B. Kikham. British Journal ofRheumatology 1996;35:164-166) Un agent de contraste est un composé qui augmente artificiellement le contraste 1 o permettant de visualiser une structure anatomique (par exemple, un organe) ou pathologique (par exemple, une tumeur) naturellement peu ou pas contrastée. Le principe de fonctionnement du produit de contraste dépend de la technique d'imagerie utilisée : en radiographie, la capacité du produit à absorber les rayons X est exploitée; en imagerie par résonance magnétique, les composés utilisés sont choisis en fonction 15 de leurs propriétés magnétiques; en échographie, des substances dont l'écho aux ultrasons est caractéristique sont utilisées. Dans un mode de réalisation avantageux, l'invention concerne des nanovecteurs de formule générale (I) telles que définies ci-dessus, dans lesquelles le peptide de pénétration cellulaire est choisi parmi les polylysines, les polyarginines, les polylysines imidazolées, ou des 20 mimétiques de polyglycines avec une chaîne porteuse d'un groupe terminal azoté. Dans les deux cas, la terminaison COOH ou NH2 peut être modifiée pour porter un alcyne pour la chimie click. Les différents composés cités sont représentés ci-dessous : k polylysine imidazolée et dérivés 1 25 polyarginines polylysine Dans lesquelles k est compris de 1 à 10. 31 N mimétiques de polyglycines dans laquelle i varie de 2 à 10 et Rf représentent un alkyle en C1-C20 porteur de groupement azoté (NRaRb) ou un cycloalkyle en C3-C20 porteur d'un groupement azoté (NRaRb), avec a et b représentant un alkyle en C1-C20 ou un cycloalkyle en C3-C20. (NRaRb) peut aussi être sous la forme d'ammonium (NRaRbRc) avec a, b et c définis comme précédemment. Rg et Rh représentent un alcyne, ou un hydrogène ou un alkyle en C1-C20 ou un cycloalkyle en C3-C20. Rf peut éventuellement représenter un alcyne parmi les i répétitions. La présence d'un peptide de pénétration cellulaire (CPP) permet de faciliter la capture 1 o du composé de formule (I) par une cellule. Pour les molécules qui sont des bases faibles avec une accumulation possible dans le lysosome ou qui ne supportent pas l'activité d'hydrolyse du lysosome (tels que les nucléotides, les peptides, l'ADN), le contournement de la voie par endocytose au niveau de l'endosome est très important. Les polymères cationiques riches en azote tels que les polyarginines, les polylysines ou les polylysines modifiées par des imidazoles 15 (polylysines imidazolées) permettent de déstabiliser les endosomes par modification du pH conduisant à la rupture de la membrane de l'endosome. Par conséquent, les nanovecteurs porteurs de CPP sont également porteurs d'un ou plusieurs principe(s) actif(s) et optionnellement d'une ou plusieurs sonde(s) de détection. Selon un autre aspect, la présente invention concerne des composés de formule générale 20 (III) comme précurseur de la chaîne polymère P de formule (I). Selon un autre aspect, la présente invention concerne des nanovecteurs telles que définies ci-dessus, pour une utilisation en tant que médicament et/ou agent diagnostic. Les particules sphériques, lorsqu'elles ont été préalablement administrées à un mammifère et notamment un homme, et dans lesquelles q = 1 et R3 représente un principe actif, 25 sont utilisées comme médicament après libération du principe actif dans la cellule après internalisation par endocytose dans la cellule. Lorsque R3 représente une sonde de détection, les particules sphériques, lorsque qu'elles ont été préalablement administrées à un mammifère et notamment un homme, peuvent être utilisées comme agent diagnostic après libération de la sonde dans la cellule après 30 piégeage sélectif du composé par EPR et internalisation par endocytose par une cellule, en particulier tumorale permettant de diagnostiquer et/ou localiser une pathologie Cette même sonde de détection permet également de suivre le trafic cellulaire. Les particules sphériques, lorsque qu'elles ont été préalablement administrées à un mammifère et notamment un homme, et dans lesquelles des chaînes polymères différentes sont présentes, et comprenant par exemple au moins un principe actif et au moins une sonde de détection, sont utilisées aussi bien comme médicament que comme agent de suivi de l'internalisation du principe actif dans la cellule cible, notamment une cellule cancéreuse, après libération du principe actif et de la sonde de détection dans la cellule après internalisation des particules sphériques par endocytose dans la cellule. Dans un mode de réalisation avantageux, les nanovecteurs pour une utilisation en tant que médicament et/ou agent diagnostic sont des nanovecteurs dans lesquelles RI représente un 1 o groupe de formule (III). Encore un autre avantage de l'invention est que le composé de formule (I) qu'il soit sous forme de polymère (t = 1) ou sous forme d'alcène monocyclique ou polycyclique ( t = 0) peut toujours être piégé par EPR dans la cellule et ensuite subir l'endocytose et être utilisé ainsi en tant que médicament et/ou agent diagnostic. 15 Dans un mode de réalisation avantageux, les nanovecteurs pour une utilisation en tant que médicament et/ou agent diagnostic sont des nanovecteurs dans lequel RI représente un groupe de formule (IV). Encore un autre avantage de l'invention est que les nanovecteurs peuvent aussi être dépourvues de polymère (t = 0) ou d'alcène monocyclique ou polycyclique (t = 0 et Rl est de 20 formule IV) tout en permettant l'endocytose et étant utilisé également en tant que médicament et/ou agent diagnostic. Dans un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne des nanovecteurs telles que définies ci-dessus, pour une utilisation en tant que médicament et/ou agent diagnostic, dans lequel le principe actif, tel qu'un modulateur épigénétique, et/ou la 25 sonde de détection est libéré dans la cellule après endocytose par ladite cellule à un pH acide. Après pénétration dans la cellule par endocytose, le composé de formule générale (I) est internalisé dans l'endosome dans lequel le pH est de 6 permettant le commencement de l'hydrolyse du ou des groupe(s) R3 présent(s) et dont la maturation conduit au lysosome dans lequel le pH est de 5 permettant d'aboutir à l'hydrolyse complète du ou des groupes R3 et la 30 libération du ou des principes actifs dans le cytoplasme (figure 1). Dans un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne des nanovecteurs telles que définies ci-dessus, pour une utilisation en tant que médicament et/ou agent diagnostic, notamment pour le traitement et/ou le diagnostic de pathologies choisies parmi les maladies neurologiques, les processus inflammatoires, le cancer, les maladies du sang. Par l'expression « maladies neurologiques », il faut comprendre sans être limité à celles-ci, la maladie d'Alzheimer, la maladie de Parkinson, la sclérose en plaques, la neuropathie, la polynévrite, l'épilepsie, la méningite... L'expression «processus inflammatoire » désigne, sans être limité à celles-ci, l'arthrite, l'artérite, la colite, la conjonctivite, la cystite, la dermatite, l'encéphalite, l'endocardite, l'endométrite, la gastrite, la méningite, la myocardite, la myélite, la pancréatite, la péritonite, la sinusite, la tendinite. 1 o L'expression « le cancer » désigne, sans être limité à celles-ci, les cancers hématopoïétiques, les leucémies, les lymphomes, les carcinomes, les adénocarcinomes, les sarcomes, le mélanome, le carcinome de la tête et du cou, le cancer de l'oesophage, le cancer buccal et du pharynx, le cancer du larynx, le cancer de la vessie, le cancer colorectal, le cancer ovarien, le cancer de l'utérus, le cancer du pénis, le cancer de la vulve et du vagin, le cancer 15 cervical, le cancer de la prostate, le cancer rénal, le cancer de la peau, le cancer de l'os, le cancer des articulations et des cartilages articulaires, le cancer des testicules, le cancer de l'estomac, le cancer gastro-intestinal, le cancer génito-urinaire, le cancer du poumon, le thymome, le mésothéliome, le tératome, le cancer du cerveau, le cancer du foie, le cancer du pancréas, le gliome, le glioblastome, l'oligoastrocytome, le méningiome, l'adénome de 20 l'hypophyse, le glioblastome multiforme, le médulloblastome, l'épendymome, l'astrocytome anaplasique, l'oligodendrogliome, le cancer de la thyroïde, le cancer anaplasique de la thyroïde, l'hémangiosarcome, le sarcome de Kaposi, le lymphangiosarcome, les lymphomes malins ganglionnaires et extra-ganglionnaires, le lymphome de Hodgkin, les lymphomes non hodgkiniens indolents, le rétinoblastome. 25 L'expression « les maladies du sang » concerne les maladies qui touchent les érythrocytes, les leucocytes, et les plaquettes, et désigne, sans être limité à celles-ci : - les hémoglobinopathies, en particulier les thalassémies, la dépranocytose, l'hémoglobine C, la méthémoglobinémie, - les déficits enzymatiques, tels que la déficience en glucose-6-phosphate 30 déshydrogénase (G6PD ou G6PDH), le déficit en pyruvate kinase, - la baisse des numérations de cellules, telles que l'aplasie, les anémies, les leucopénies, les thrombocytopénies - l'augmentation des numérations cellulaires, telles que la leucocytose, la thrombocytose, - les hémopathies malignes telles que les lymphomes, les myélomes, la leucémie, l' érythropoïése, - les coagulopathies telles que les anomalies des plaquettes, l'hémostase primaire, les anomalies de protéines, les anomalies thrombotiques. Dans un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne des nanovecteurs telles que définies ci-dessus, pour une utilisation en tant que médicament et/ou agent diagnostic, notamment pour le traitement combinatoire de pathologies choisies parmi les maladies neurologiques, les processus inflammatoires, le cancer, les maladies du sang. Par « traitement combinatoire », il faut comprendre aussi bien des particules portant au 1 o moins deux principes actifs pour le traitement de pathologies différentes que des particules portant au moins deux principes actifs différents pour le traitement de la même pathologie. Par exemple, les mêmes particules peuvent comprendre un HDI et un inhibiteur de DNMT pour le traitement du mésothéliome pleural malin (MPM). Les HDI et DNMT sont des anticancéreux actuellement testés dans des essais cliniques 15 seuls ou en association dans le traitement de MPM. Cependant, des effets secondaires importants peuvent être observés avec ces traitements principalement en raison de l'action non sélective de ces molécules. Par conséquent, un avantage des particules de l'invention comprenant au moins deux principes actifs différents, en particulier un HDI et un inhibiteur de DNMT est de pouvoir 20 cibler sélectivement la cellule, en particulier la cellule cancéreuse. Selon un autre aspect, l'invention concerne une composition pharmaceutique comprenant comme principe actif des nanovecteurs telles que définies ci-dessus, en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. Par « composition pharmaceutique », on entend une composition comprenant un ou 25 plusieurs principe(s) actif(s) constitué de nanovecteurs et qui peut être administrée à un patient pour le traitement d'une pathologie telle que définie ci-dessus. Par « véhicule pharmaceutiquement acceptable », i1 faut comprendre toute substance autre que le principe actif dans un médicament. Son addition est destinée à conférer des caractéristiques physico-chimiques et/ou biochimiques pour favoriser l'administration au 30 produit final, en évitant de préférence les interactions chimiques covalentes avec les principes actifs. Dans un mode de réalisation avantageux, la composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus, est sous une forme susceptible d'être administrée par voie intraveineuse à une dose unitaire 5 mg à 500 mg. Les compositions pour administration par voie intraveineuse, peuvent être des solutions stériles ou des émulsions. Comme solvant ou véhicule, on peut employer l'eau, le propylène glycol, un polyéthylène glycol, des huiles végétales, en particulier l'huile d'olive, des esters organiques injectables, par exemple l'oléate d'éthyle. Ces compositions peuvent également contenir des adjuvants, en particulier des agents mouillants, isotonisants, émulsifiants, dispersants et stabilisants. L'administration à la dose unitaire ci-dessus peut être effectuée une seule fois par 24h ou répétée en fonction de la pathologie et de la prescription médicale. Dans un mode de réalisation avantageux, la composition pharmaceutique telle que définie ci-dessus, est sous une forme susceptible d'être administrée par voie intraveineuse à une dose comprise d'environ 0,05 µg/kg à environ 10 mg/kg. Selon un autre aspect, l'invention concerne des nanovecteurs constitués de chaînes polymères de formule générale (I) telles que définies ci-dessus, comprenant une étape de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle et une étape de bioconjugaison. Il est possible de synthétiser les nanovecteurs de l'invention suivant deux approches : - soit effectuer tout d'abord une étape de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle (ROMP) puis une étape clé de bioconjugaison (chimie click), - soit effectuer tout d'abord une étape clé de bioconjugaison (chimie click) puis une étape de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle (ROMP) (figure 2). L'étape de ROMP, bien connue de l'homme du métier, nécessite la mise en contact d'un catalyseur tel que : - le Bis(tricyclohexylphosphine)benzylidine ruthenium (IV) dichloride (PCy3)2C12Ru=CHPh): complexe de Grubbs de première génération (Grubbs et al., J. Am. Chem. Soc, 1996, 118, 100-110), - le tricyclohexylphosphine[1,3-bis(2,4,6-trimethyl-phenyl)-4,5-dihydro- imidazol-2-ylidene][benzylidene] ruthenium(IV) dichloride (H21mes)(PCy3)C12Ru=CHPh): complexe de Grubbs de seconde génération (Grubbs et al., Organic Letters, 1999, 1(6), 953-956), avec un alcène mono ou polycyclique (Chemtob A., Gnanou Y., Heroguez V., 30 Macromolecules, 2002, 35(25), 9262-9269) pour former le polymère. L'étape de bioconjugaison (ou chimie click) nécessite la mise en contact d'un alcyne avec un azoture en présence de Cu(I) pour obtenir le triazole correspondant. Encore un avantage de l'invention est de fournir un procédé faisant intervenir une étape clé de bioconjugaison entre deux composés l'un portant une fonction azoture et l'autre une fonction alcyne aisément accessibles, effectuée dans des conditions douces permettant un accès aisé à des particules comprenant des principes actifs et/ou sondes de détections variés et/ou sensibles et présentant d'autres fonctionnalités. Dans un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne un procédé de préparation de nanovecteurs constitués de chaîne polymères de formule générale (I) dans laquelle RI est un groupe de formule générale (II) tel que défini ci-dessus, caractérisé en ce que l'étape de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle est effectuée préalablement à l'étape de bioconjugaison. Dans un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne un procédé de 1 o préparation de nanovecteurs constitués de chaîne polymères de formule générale (I) dans laquelle RI est un groupe de formule générale (II) tel que défini ci-dessus, dans lequel l'étape de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle est effectuée préalablement à l'étape de bioconjugaison, tel que défini ci-dessus, comprenant les étapes suivantes : a. Préparation d'un composé de formule générale (VI-a) suivante comprenant un 15 alcène monocyclique ou polycyclique et une fonction azoture : Alcène monocyclique ou polycyclique m \ o~ p et r étant tel que défini précédemment, b. Mise en oeuvre de l'étape de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle 20 en présence d'un catalyseur pour former un composé de formule (VII) comprenant des fonctions azotures en surface d'un polymère: N= N \ N /p (vii) m, r, p et q étant tel que définis précédemment, Préparation d'un composé de formule générale (VIII) comprenant une fonction alcyne : c. 25 0 dans laquelle dans laquelle n, m, R2, R'z et R3 sont tels que définis précédemment et s représente 0 ou 1, s est un entier compris de 0 à 10, en particulier 0 ou 1, d. Mise en oeuvre de l'étape de bioconjugaison par mise en contact dudit composé de formule (VII) avec le composé de formule (VIII) en présence de cuivre pour obtenir des nanovecteurs constitués de chaîne polymérique de formule (I) dans laquelle RI est un groupe de formule (II). et R' l est présent ou non. 1 o Le composé de formule VI-a peut être préparé selon des techniques bien connues de l'homme du métier. En règle générale, dans l'étape a. l'alcène mono ou polycyclique méthanol est mis en réaction avec de l'oxyde d'éthylène en présence d'une base, en particulier le diphényleméthyle potassium (Héroguez V, Breunig S, Gnanou Y, Fontanille M, Macromolecules 1996, 29, 4459) 15 dans un solvant organique tel que le THF, à température ambiante pour former un dérivé de poly(éthyléne)oxyde contenant un alcène. Après fonctionnalisation de la fonction alcool primaire libre du poly(éthyléne)oxyde comprenant une fonction alcène, par exemple par un groupe paratoluéne sulfonyle ou un groupe méthane sulfonyle, la réaction avec l'azoture de sodium conduit au composé (VI). Alcène monocyclique ou polycyclique ~o~\ N3 0 20 Le composé de formule (VI-a) est alors préparé par réaction de bioconjugaison du composé (VI) avec un poly(éthyléne)oxyde comprenant une fonction alcyne à une extrémité et une fonction alcool à l'autre par chimie click, dans un mélange de solvant tel que dichlorométhane-eau en présence de cuivre I, en particulier CuBr, puis fonctionnalisation de la 25 fonction alcool primaire restée libre. La réaction avec l'azoture de sodium conduit alors au composé (VI-a) dans lequel r = 1. La répétition de cette dernière étape permet l'obtention de composés (VI-a) dans lesquels r est compris de 2 à 10. Dans l'étape b., la réaction de ROMP est mise en oeuvre, le composé (VI-a) comprenant 30 l'alcène mono ou polycyclique est mis à réagir en présence d'un catalyseur tel que défini ci-dessus, en particulier le catalyseur de Grubbs de l'" génération dans un solvant tel qu'un mélange dichlorométhane/éthanol, à température ambiante et arrêt de la réaction par ajout d'un solvant tel que l'éther de vinyléthyle pour conduire au composé (VII). Si le composé (VI-a) ne comprend que des chaînes polymères P identiques, alors les particules formées ne comprennent qu'un seul type de chaînes polymères. Si le composé (VI-a) comprend des chaînes polymères différentes (P, P2, P3...), alors les particules formées comprennent plusieurs chaînes polymères différentes (P, P2, P3...) sans 5 pour autant modifier le nombre total de chaînes polymères sur les particules. Dans l'étape c., le dérivé (VIII) portant la fonction alcyne précurseur du triazole qui sera formé par l'étape clé de bioconjugaison est obtenu par réaction de R2(CO)R'2 (R2 et R'2 étant tels que définis ci-dessus et dont la synthèse est bien connue de l'homme du métier) avec un triméthyléthynyle silane en présence d'une base, telle que le butyle lithium pour conduire au 1 o dérivé alcool correspondant: OH (VIII-1) R'2 qui par réaction de bioconjugaison avec par exemple un groupe HO-CH2CH2-0-(CH2CH20)p- CH2CH2N3 permet l'obtention d'un groupe de formule (XI-1) : N=N HO\( ~ ~/N / OH (XI-1) 15 Le groupe de formule (XI-1) est ensuite mis à réagir avec une base, par exemple NaH et un halogénure de propargyle, par exemple le bromure de propargyle pour former le composé de formule générale (XI-2) : \ N=N \ O N OH (X1-2) 20 Le composé de formule (XI-2) est ensuite mis à réagir par exemple avec un paranitrophénylcarbonate ou le carbonyle diimidazole et substitué par un alcool, une amine, un acide... et permet l'obtention des composés de formule générale (VIII). L'étape d. fait intervenir la réaction de bioconjugaison clé entre l'alcyne (VIII) et l'azoture (VII) en présence de cuivre tel que décrite pour l'étape a. ci-dessus pour conduire aux 25 composés de formule générale (I) dans lesquels RI est un groupe de formule (II). Dans un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne un procédé de préparation de nanovecteurs constitués de chaîne polymères de formule générale (I) dans laquelle RI est un groupe de formule générale (II) et t = 1, ou de formule générale (III) et t = 0, tel que défini ci-dessus, dans lequel l'étape de bioconjugaison est effectuée préalablement à l'étape optionnelle de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle. Dans un mode de réalisation avantageux, la présente invention concerne un procédé de préparation de nanovecteurs dans lequel l'étape de bioconjugaison est effectuée préalablement à l'étape optionnelle de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle tel que défini ci- dessus, comprenant les étapes suivantes : a. Préparation d'un composé de formule générale (VI-a) suivante comprenant un alcène monocyclique ou polycyclique et une fonction azoture : Alcène monocyclique ou polycyclique o Ip N3 Om r (VI-a) 1 o m, r et p étant tels que définis précédemment, b. Préparation d'un composé de formule générale (VIII) comprenant une fonction alcyne : N=N O~i N~/ m (VIII) dans laquelle n et m sont tel que définis précédemment et s est un entier compris 15 de 0 à 10, R2, R'z et R3 sont els que définis ci-dessus. c. Mise en oeuvre de l'étape de bioconjugaison par mise en contact dudit composé de formule (VI-a) avec le composé de formule (VIII) en présence de cuivre pour obtenir les composés de formule générale (I) dans laquelle t = 0 et RI représente un groupe de formule (III). d. Optionnellement, mise en oeuvre de l'étape de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle en présence d'un catalyseur pour former des nanovecteurs constitués de chaîne polymères de formule générale (I) dans laquelle RI est un groupe de formule générale (II) et t = 1. Dans ce mode de réalisation, la mise en oeuvre de l'étape de polymérisation par ROMP conduit au composé de formule générale (I) dans lequel RI est un groupe de formule générale 20 25 (II). Si l'étape de polymérisation par ROMP n'est pas mise en oeuvre, le composé de formule générale (III) et t = 0 est alors obtenu. Le composé de formule VI-a est préparé selon la méthode décrite ci-dessus dont certaines sont indiquées dans la partie exemples. Les composés de formule VIII peuvent être préparés comme indiqué précédemment. Les composés de formule VIII dans lesquels s = 0 (VIII-a) portant la fonction alcyne précurseur du triazole formé par l'étape de bioconjugaison sont obtenus par réaction de R2(CO)R'2 avec un triméthyléthynyle silane en présence d'une base, telle que le butyle lithium pour conduire au dérivé alcool correspondant (VIII-b): VIII-b qui par réaction avec par exemple un paranitrophénylcarbonate ou le carbonyle diimidazole et substitution par un alcool, une amine, un acide... permet l'obtention des composés de formule générale (VIII-a) : O n R 3 (VIII-a) L'invention est illustrée par les figures 1 à 11 et les exemples qui suivent. DESCRIPTION DES FIGURES La figure 1 présente le suivi d'un nanovecteur (colloïde, sphère blanche) de l'invention comprenant un CPP (carré blanc), une sonde de détection fluorescente (carré gris) et un principe actif (carré noir), depuis sa circulation dans les vaisseaux sanguins jusqu'à la libération du principe actif dans le cytoplasme. Brièvement, le nanovecteur préalablement administrée à un mammifère par voie intraveineuse, après circulation dans les vaisseaux sanguins plusieurs heures est piégée par EPR au niveau de la cellule endothéliale puis internalisée par endocytose favorisée par le peptide CPP conduisant à l'internalisation du nanovecteur dans un endosome où le principe actif est en partie libéré en raison du pH de 6 existant dans l'endosome. La maturation de cet endosome aboutit à un lysosome dans lequel le pH de 5 finalise l'hydrolyse du principe actif et conduit à la libération du principe actif dans le cytoplasme. Une sortie précoce de l'endosome peut avoir lieu pour les composés sensibles au milieu acide qui peuvent pénétrer le noyau à l'aide du mécanisme de complexes de pores nucléaires (NPC) basé sur les signaux de localisation nucléaire (NLS). La figure 2 présente les deux alternatives possibles pour la synthèse des composés de l'invention : - Etape de biojugaison (click) puis étape de polymérisation par ouverture de cycle (ROMP), ou - Etape de polymérisation par ouverture de cycle (ROMP) puis étape de biojugaison (click). Les figures 3A et 3B présentent les courbes d'hydrolyse en milieu acide obtenues avec le composé 9d de l'exemple 5de l'invention à pH 4,3 ; 5,3 et 7,3. Figure 3A: Carré noir (ligne pointillée: pH 4,3 ; Cercles plein noirs (ligne pleine): pH5,3. Axe des abscisses : temps en minutes Axe des ordonnées : % d'hydrolyse Figure 3B : Carré noir : pH 7,3. Axe des abscisses : temps en heures Axe des ordonnées : % d'hydrolyse Les figures 4A et 4B présentent la taille des particules de l'invention mesurée par 2 o diffusion dynamique de la lumière (DLS) et microscopie électronique en transmission (TEM). Figure 4A : DLS : Distribution de taille par intensité Figure 4B : TEM Axe des abscisses : taille (diamètre en nm) Axe des ordonnées : Intensité (%) 25 Les figures 5A à 5C présentent la co-localisation des particules de l'invention (composé 16a) de l'exemple 14 avec les lysosomes après internalisation dans la cellule de la sonde de détection. Figure 5A : Particules (composé 16a) détectées par fluorescence. Figure 5B : Vésicules lysosomiales acides révélées par marquage avec un anticorps 30 anti-LAMP Figure 5C : superpositon de 5A et 5B montrant la colocalisation des particules avec les lysosomes. Les figures 6A et 6B présentent le ciblage sélectif de tumeurs (cellules de mésothéliome péritonéal malin (AK7)) par les particules (composé 16a de l'invention). Figure 6A : Souris porteuse d'une tumeur sous cutanée au niveau du bas du dos, à gauche. Sur le cliché correspondant à l'animal entier on peut voir une fluorescence seulement au niveau de la tumeur à 24h. Figure 6B : La photo correspond à la tumeur isolée et à plusieurs organes disséqués (rate en haut à droite, les 2 reins en bas à gauche et le foie en bas à droite. La fluorescence n'est observée qu'au niveau de la tumeur et pas dans la rate ni dans les reins. Le très faible signal résiduel détecté dans le foie correspond à un passage obligé des nanovecteurs de l'invention sans effet de rétention. La figure 7 présente le spectre RMN dans CDC13 du composé NB-PEO-OMs (12) . 1 o La figure 8 présente le spectre RMN dans CDC13 du composé NB-PEO-N3 (13). La figure 9 présente le spectre RMN dans CDC13 du composé NB-PEO-Rhodamine B (15a). La figure 10 présente le spectre RMN dans CDC13 du composé NB-PEO-Coumarine 15 (15b). La figure 11 présente le spectre RMN dans CDC13 du composé NB-PEO-CI-994 (17c). EXEMPLES 20 PARTIE CHIMIQUE DCM: dichlorométhane; ACN: acétonitrile; DMF: diméthylformamide; THF: tétrahydrofurane. CDC13 : Chloroforme deutéré A) Synthèse des motifs à cliquer 25 Exemple 1 : Préparation des bras acido sensibles : Composé 7c et 7d Les composés 7c (R2 et R'z = Ph) et 7d ((R2 et R'z = 4-OMe) sont préparés selon le schéma I suivant : HO~O v `o' ~/ o ~/ ~OH 1HO~O~o~o~OMs 2 Bru Cu(I) A une solution de 2 (1,0 g; 2,89 mmol; 1 eq.) dans 20 mL de DMF est ajouté NaN3, 10 (0,938 g; 14,43 mmol; 5 eq.) à température ambiante. La solution est agitée 2 jours et diluée avec du DCM et lavée à l'eau puis avec une solution saturée de NaCl. La phase organique est séchée avec MgSO4, filtrée et concentre sous vide. Le résidu est purifié (chromatographie flash, silice, éluant DCM/MeOH) pour donner l'azoture 3 sous forme d'huile visqueuse incolore (0,501 g; 2,29 mmol; 79%). 15 Rf (SiO2, DCM/MeOH (95/5)):0,33, iH NMR (CDC13, 400 MHz): 8 = 3,75 (t, 2H, J=4,1 Hz), 3,70 (m, 10H), 3,64 (dd, 2H, J=3,8 Hz, J= 5,1 Hz), 3,42 (t, 2H, J=5,0 Hz), 2,61 (bs, 1H). 1.2 : Préparation de 2-(2-(2-(2-(4-(hydroxydiphénylméthyl)-1H-1,2,3-triazol-l-yl)éthoxy) 20 éthoxy)éthoxy)éthanol (5c)5 OH Ph ph Dans 100 mL de mélange DCM/H20 (1/1) sont ajoutés 3 (2,015 g; 9,19 mmol; 1 eq.), 4c préparé selon Cadierno, V.; Francos, J.; Gimeno, J. Tet. Lett. 2009, 50, 4773. (1,914 g; 9,19 mmol; 1 eq.) et CuBr (0,264 g; 1,838 mmol; 0,2 eq.). La solution est agitée vigoureusement pendant 20 h puis extraite avec le DCM et lavée avec une solution saturée de NH4C1. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et concentre sous vide. Le produit brut est purifié (chromatographie flash, gel de silice, éluant DCM/MeOH) pour donner 5c sous forme d'huile (3,317 g; 7,76 mmol; 84%). Rf (SiO2, DCM/MeOH (95/5)):0,19, iH-NMR (acétone-d6, 400 MHz): 8 = 7,73 (s, 1H), 7,47-7,44 (m, 4H), 7,31-7,26 (m, 4H), 7,25-7,20 (m, 2H), 5,34 (s, 1H), 4,56 (t, 2H, J=5,21 Hz), 3,89 (t, 2H, J=4,20 Hz), 3,60-3,56 (m, 5H), 3,54-3,50 (m, 6H), 3,49-3,46 (m, 2H). 13C-NMR (acétone-d6, 100 MHz): 8 = 154,75, 148,12, 128,41, 128,16, 127,69, 124,38, 77,19, 73,47, 71,21, 71,17, 71,09, 70,17, 61,98, 50,68, 1.3 : Préparation de 2-(2-(2-(2-(4-(hydroxybis(4-méthoxyphényl)méthyl)-1H-1,2,3-triazol-1-yl) éthoxy)éthoxy)éthoxy)éthanol (5d) N'N OMe MeO Dans 100 mL de mélange DCM/H20 (1/1) sont ajoutés 3 (1,988 g; 9,07 mmol; 1 eq.), 4d préparé selon Gabbutt, C. D.; Heron, B. M.; Instone, A. C.; Thomas, D. A. Partington, S. M.; Hursthouse, M. B.; Gelbrich, T. Fur. J. Org. Chem. 2003, 7, 1220; (2,379 g; 9,07 mmol; 1 eq.) et CuBr (0,260 g; 1,814 mmol; 0,2 eq.). La solution est agitée vigoureusement pendant 20 h et extraite avec le DCM et lavée avec une solution saturée de NH4C1. La phase organique est séchée (MgSO4), filtrée et concentre sous vide. Le produit brut est purifié (chromatographie flash, gel de silice, éluant DCM/MeOH) pour donner 5d sous forme d'huile (3,463 g; 7,19 mmol; 79%). Rf (SiO2, DCM/MeOH (95/5)):0,15, 1.4 : Préparation de (1-(3,6,9,12-tetraoxapentadec-l4-ynyl)-1H-1,2,3-triazol-4-yl)diphényl méthanol (7c) OH Ph ph Dans 100 mL de THF sec contenant 5c (1,240 g; 2,90 mmol; 1 eq.) est ajouté à 0°C NaH (0,232 g; 5,8 mmol; 2 eq. ; 60% masse dans l'huile). La réaction est agitée pendant 2 heures et le bromure de propargyle (0,313 mL; 2,90 mmol; 1 eq.) dans le toluène (80% masse) est ajouté lentement. La réaction est laissée sous agitation 2 jours en laissant remonter la température. La réaction est stoppée par ajout à 0°C de solution saturée de NaCl et extraite avec du DCM. La phase organique est séchée (MgSO4), filtrée et concentrée sous vide. L'huile obtenue est purifiée (chromatographie flash, gel de silice, éluant DCM/MeOH) pour donner l'éther attendu 7c (0,774 g; 1,66 mmol; 57%) sous forme d'huile visqueuse. Une partie du diol 5c est convertie sous forme de diéther 6c qui traité pendant 12h par une solution ACN/KHSO4 1M donne totalement le monoéther 7c. Rf (SiO2, DCM/MeOH 95:5): 0,53 1H-NMR (acétone-d6, 400 MHz): 8 = 7,72 (s, 1H), 7,48-7,44 (m, 4H), 7,31-7,27 (m, 4H), 7,25-7,21 (m, 2H), 5,27 (s, 1H), 4,56 (t, 2H, J= 5,2 Hz), 4,15 (d, 2H, J= 2,4 Hz), 3,90 (t, 2H, J= 5,2 Hz), 3,61-3,56 (m, 6H), 3,54-3,50 (m, 6H), 2,92 (t, 1H, J= 2,4 Hz). 13C-NMR (acétone-d6, 100 MHz): 8 = 154,73, 148,12, 128,41, 128,16, 127,70, 124,34, 80,95, 77,20, 75,75, 71,22, 71,21, 71,19, 71,10, 70,97, 70,17, 69,81, 58,57, 50,70, 1.4 : Préparation de (1-(3,6,9,12-tetraoxapentadec-l4-ynyl)-1H-1,2,3-triazol-4-yl)bis (4-methoxyphenyl) méthanol (7d) ~N OMe MeO Dans 100 mL de THF sec contenant 5d (1,674 g; 3,43 mmol; 1 eq.) est ajouté à 0°C NaH (0,274 g; 6,46 mmol; 2 eq.; 60% masse dans l'huile). La réaction est agitée 2 heures et le bromure de propargyle (0,370 mL; 3,43 mmol; 1 eq.) dans le toluène (80% masse) est ajouté lentement. La réaction est agitée 2 jours en laissant remonter la température. La réaction est stoppée à 0°C par ajout de solution saturée de NaCl puis extraite avec du DCM. La phase organique est séchée (MgSO4), filtrée et concentre sous vide. L'huile obtenue est purifiée (chromatographie flash, gel de silice, éluant DCM/MeOH) pour donner le produit attendu 7d sous forme d'huile visqueuse (1,276 g; 2,43 mmol; 71%). Le diéther 6d également obtenu est converti en monoéther 7d par traitement avec ACN/KHSO4 1M. Rf (SiO2, DCM/MeOH 95:5): 0,28 iH-NMR (acétone-d6, 400 MHz): 8 = 7,68 (s, 1H), 7,33-7,31 (m, 4H), 6,85-6,82 (m, 4H), 5,09 (s, 1H), 4,54 (t, 2H, J= 5,2 Hz), 4,15 (d, 2H, J= 2,4 Hz), 3,88 (t, 2H, J= 5,2 Hz), 3,76 (s, 6H), 3,60-3,55 (m, 6H), 3,54-3,51 (m, 6H), 2,93 (t, 1H, J= 2,4 Hz). 13C-NMR (acétone-d6, 100 MHz): 8 = 159,53, 155,34, 140,54, 129,38, 124,11, 113,64, 80,97, 10 76,65, 75,81, 71,22, 71,19, 71,10, 70,96, 70,18, 69,81, 58,59, 55,51, 50,66, B) Préparation des composés de formule I dans lesquels RI représente un groupe de formule (IV) Exemple 2 : Préparation de Ni-((1-(3,6,9,12-tetraoxapentadec-l4-ynyl)-1H-1,2,3-triazol-4-15 yl)diphénylméthoxy)-N8-phényloctanediamide (8c) Dans cet exemple, R3 est un modulateur épigénétique : SAHA Ph HN.~O Ph Dans 5 mL de DCM sec sous atmosphère d'azote sont ajoutés 7c (0,20 g ; 0,43 mmol ; 20 1 eq.) et une solution 2M de HCl dans l'éther (0,43 mL ; 0,86 mmol, 2 eq.). La solution est mise à reflux 2 heures puis le solvant co-évaporé avec du toluène pour donner le chlorure intermédiaire sous forme d'huile. A une solution de SAHA (0,340 g; 0,129 mmol, 3 eq.) dans NEt3 sec (0,24 mL, 1,72 mmol, 4 eq.) dans 5 mL de ACN est ajouté à température ambiante le chlorure précédent dissous dans un minimum de ACN. La solution est agitée 12 heures à 25 température ambiante. La solution est alors filtrée et lavée avec ACN pour récupérer le SAHA restant et le filtrat est concentré sous vide. Une purification du concentrat (chromatographie flash automatique, gel de silice, éluant DCM/EtOH/Et3N) donne la prodrogue 8c sous forme d'huile incolore (0,052 g ; 0,073 mmol ; 17%). L'alcool 7c restant est également récupéré. Rf (DCM/EtOH/Et3N 94:5:1)= 0,33 iH-NMR (acétone-d6, 400 MHz) : 8 = 9,75 (s, 1H), 9,08 (s, 1H), 7,69-7,65 (m, 3H), 7,46-7,41 (m, 4H), 7,34-7,25 (m, 8H), 7,04-7,00 (m, 1H), 4,57 (t, 2H, J= 5,1 Hz), 4,16 (d, 2H, J= 2,4 Hz), 3,88 (t, 2H, J= 5,2 Hz), 3,62-3,55 (m, 6H), 3,53-3,49 (m, 6H), 2,93 (t, 2H, J= 2,4 Hz), 2,31 (t, 2H, J= 7,5 Hz), 1,93 (t, 2H, J= 7,2 Hz), 1,60 (m, 2H), 1,39 (m, 2H), 1,25 (m, 2H), 1,12 (m, 2H). Exemple 3 : Préparation de Nl-((1-(3,6,9,12-tetraoxapentadec-l4-ynyl)-1H-1,2,3-triazol-4-yl)bis (4-methoxyphenyl)methoxy)-N8-phenyloctanediamide (8d) 1 o Dans cet exemple, R3 est un modulateur épigénétique : SAHA NH O Ph Dans 5 mL de DCM sec sous atmosphère d'azote sont ajoutés 7d 0,20 g (0,38 mmol ; 1 eq.) et une solution 2M de HCl dans l'éther (0,38 mL ; 0,76 mmol ; 2 eq.). La solution devient rouge 15 et est portée à reflux 2 heures. La solution est ensuite co-évaporée avec du toluène pour donner le chlorure intermédiaire sous forme d'huile rouge. A une solution de SAHA (0,302 g ; 1,14 mmol ; 3 eq.) et de NEt3 sec (0,21 mL ; 1,52 mmol ; 4 eq.) dans 5 mL de ACN sec est ajouté à température ambiante le chlorure précédent dissous dans un minimum de ACN. La couleur rouge disparaît après quelques minutes et la solution agitée 12 heures. La solution est filtrée et 20 lavée avec CAN pour récupérer le SAHA restant et le filtrat concentré sous vide. Le concentrat est purifié (chromatographie flash automatique, gel de silice, éluant DCM/EtOH/Et3N) pour donner la prodrogue 8d sous forme d'huile visqueuse (0,054 g ; 0,070 mmol ; 18%). L'alcool 7d restant est également récupéré. Rf (DCM/EtOH/Et3N 94:5:1)=0,29 25 1H-NMR (aceétone-d6, 400 MHz): 8 = 9,75 (s, 1H), 9,08 (s, 1H), 7,68-7,67 (m, 3H), 7,32-7,25 (m, 6H), 7,04-7,00 (m, 1H), 6,87-7,85 (m, 4H), 4,57 (t, 2H, J= 5,1 Hz), 4,16 (d, 2H, J= 2,4 Hz), 3,88 (t, 2H, J= 5,2 Hz), 3,79 (s, 6H), 3,62-3,56 (m, 6H), 3,54-3,50 (m, 6H), 2,93 (t, 1H, J= 2,4 Hz), 2,31 (t, 2H, J= 7,5 Hz), 1,93 (t, 2H, J= 7,2 Hz), 1,60 (m, 2H), 1,39 (m, 2H), 1,25 (m, 2H), 1,12 (m, 2H). OMe Exemple 4 : Préparation de N-(2-((1-(3,6,9,12-tétraoxapentadec-l4-ynyl)-1H-1,2,3-triazol-4-yl) diphénylmethylamino)phényl)-4-acétamidobenzamide (9c) Dans cet exemple, R3 est un modulateur épigénétique : CI-994 O N Ph Dans 5 mL DCM sec sous atmosphère d'azote sont additionnés 7c (0,20 g; 0,43 mmol; 1 eq.) et une solution 2M de HCl dans l'éther (0,43 mL; 0,85 mmol; 2 eq.). La solution est portée à reflux 2 heures. La solution est ensuite co-évaporée avec du toluène pour donner le 1 o chlorure intermédiaire sous forme d'huile. A une solution de CI-994 (0,231 g ; 0,90 mmol ; 2 eq.) et Et3N sec (0,24 mL ; 1,72 mmol ; 4 eq.) dans 5 mL de CAN sec est ajouté sous azote à température ambiante le chlorure précédent dissous dans quelques mL de ACN. La solution est agitée 12h à température ambiante. Le solvant est évaporé sous vide. Le CI-994 n'ayant pas réagit est récupérer par précipitation d'une solution d'acétone et le résidu purifié 15 (chromatographie flash, gel de silice, éluant DCM/MeOH/Et3N) pour donner le compose attendu 9c (0,142 mg; 0,17 mmol, 39%). L'alcool 7c n'ayant pas réagit est récupéré lors de la purification. 1H-NMR (acétone d6, 400 MHz): 8 = 9,44 (bs, 2H), 8,02 (d, 2H, J= 8,6 Hz), 7,82 (s, 1H), 7,77 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,65 (m, 4H), 7,24 (m, 5H), 7,18 (m, 2H), 6,70 (dt, 1H, J= 1,6 Hz, J= 8,1 20 Hz), 6,61 (dt, 1H, J= 1,3 Hz, J= 7,5 Hz), 6,17 (dd, 1H, J= 1,1 Hz, J= 8,2 Hz), 6,12 (s, 1H), 4,50 (t, 2H, J= 5,2 Hz), 4,14 (d, 2H, J= 2,4 Hz), 3,79 (t, 2H, J= 4,9 Hz), 3,59 (m, 2H) , 3,55 (m, 2H), 3,48 (m, 4H), 3,43 (m, 4H), 2,92 (t, 1H, J= 2,4 Hz), 2,12 (s, 3H). 13C-NMR (acéetone-d6, 100 MHz): 8 = 169,31, 152,91, 146,48, 143,54, 141,89, 129,90, 129,46, 128,94, 128,80, 127,69, 127,45, 126,82, 126,50, 125,92, 119,22, 118,61, 118,08, 80,95, 25 75,79, 71,21, 71,17, 70,97, 70,24, 69,80, 65,74, 58,58, 50,89, 24,41, 22,93, 15,20, Exemple 5 : Préparation de N-(2-((1-(3,6,9,12-tétraoxapentadec-l4-ynyl)-1H-1,2,3-triazol-4-yl)bis (4-méthoxyphényl)méthylamino)phényl)-4-acétamidobenzamide (9d) Dans cet exemple, R3 est un modulateur épigénétique : CI-994 HN OMe Dans 5 mL de DCM sec sous atmosphère d'azote sont ajoutés 7d (0,20 g; 0,38 mmol; 1 eq.) et une solution 2M de HCl dans l'éther (0,38 mL; 0,76 mmol; 2 eq.). La solution devenue rouge est agitée 2 heures. Le mélange est co-évaporé sous vide pour donner le chlorure sous forme d'huile rouge. A une solution de 5 mL de CAN sec contenant le CI-994 (0,205 g ; 0,76 mmol ; 2 eq.) et Et3N sec (0,21 mL ; 1,52 mmol ; 4 eq.) le chlorure précédent dissous dans quelques mL de ACN est ajoutée à température ambiante. La couleur rouge disparaît en quelques minutes et la solution est agitée 12h à température ambiante. Après concentration sous vide, le résidu est repris à l'acétone et le CI-994 restant est précipité. La solution obtenue 1 o est concentrée et purifiée (chromatographie flash automatisée, gel de silice, éluant DCM/EtOH/Et3N) pour donner 9d (0,087 g ; 0,112 mmol ; 29%) sous forme d'huile rosée. L'alcool 7d n'ayant pas régit est aussi récupéré. Rf (DCM/EtOH/Et3N 97:2:1): 0,24 1H-NMR (acetone-d6, 400 MHz) J: 8 = 9,47 (s, 1H), 9,42 (s, 1H), 8,02 (d, 2H), 7,78 (m, 3H), 15 7,51 (m, 4H), 7,24 (d, 1H), 6,79 (m, 4H), 6,73 (t, 1H), 6,62 (t, 1H), 6,19 (d, 1H), 5,99 (s, 1H), 4,49 (t, 2H), 4,14 (d, 2H), 3,80 (t, 2H), 3,73 (s, 6H), 3,59 (m, 2H), 3,55 (m, 2H), 3,48 (m, 4H), 3,43 (m, 4H), 2,92 (t, 1H), 2,12 (s, 3H). 13C-NMR (acetone-d6, 100 MHz): 8 = 158,2, 152,4, 142,4, 140,9, 137,384, 129,0, 128,8, 128,3, 126,3, 125,6, 125,4, 124,5, 118,1, 117,6, 116,8, 116,6, 112,8, 79,8, 74,7, 70,1, 70,0, 20 69,8, 69,1, 68,7, 63,8, 57,5, 54,3, 49,7, 23,3, C) Préparation des composés de formule I dans lesquels R1 représente un groupe de 25 formule (III) Exemple 6 : Préparation de l'azoture a-norbornenyl poly(oxyde d'éthylène) NB-PEO-N3 (13) (Schéma II) Dans toute la description, NB-PEO signifie a-norbornenyl poly(oxyde d'éthylène) (CsH5)2CHK THF, 25°C CHZOH McOH 10 11 N3 11 o OMs P-1 12 13 SCHEMA II 6.1 : Préparation de NB-PEO (11) Le macromonomére a-norbornenyl poly(oxyde d'éthylène) (NB-PEO) 11 a été obtenu par polymérisation par ouverture de cycle en métathèse de l'oxyde d'éthylène selon des protocoles expérimentaux décrits dans la littérature (Heroguez, V.; Breunig, S.; Gnanou, Y.; Fontanille, M., Macromolecules 1996, 29, (13), 4459-4464). Le norbonéne méthanol 10 (0,79 mL, 6,6 mmol), déprotoné avec du potassium de diphénylméthyl (9,5 mL, 0,61 mo1.L-1), est utilisé comme amorceur pour polymériser 0,37 mol d'oxyde d'éthylène (18,5 mL). Après 48h, la polymérisation est désactivée par 3 mL de méthanol acidifié. Le NB-PEO 11 est précipité dans du diéthyl éther et séché sous vide (rendement 91%). iH-NMR (ppm, CDC13, 400 MHz,) (relative integral): 8=3.6 (262H, m), 4.3 (2H, m), 5.9-6.1 (2H, m). 6,2 : Préparation de NB-PEO-OMs (12) 3,68 g de NB-PEO lyophilisé 11 (1,22 mmol) sont dissous dans 40 mL de THF anhydre puis 4 équivalents de TEA (0,68 mL, 4,9 mmol) sont ajoutés. 3,5 équivalents de chlorure de méthanesulfonyl (0,33 mL, 4,3 mmol) sont additionnés sous courant d'azote. La solution est agitée à température ambiante pendant une nuit et filtrée sur fritté. Le macromonomére anorbornenyl poly(oxyde d'éthylène) mésylé NB-PEO-OMs 12 obtenu est précipité dans 200mL de diéthyl éther, filtré sur fritté et séché sous vide (rendement 82%). iH-NMR (ppm, CDC13, 400 MHz,) (relative integral): 8=3.0-3.1 (3H, s), 3.6 (262H, m), 4.3 (2H, m), 5.9-6.1 (2H, m). 6.3 Préparation de NB-PEO-N3 (13) 0,64g de NB-PEO-OMs 12 (0,21 mmol) et 70 équivalents d'azoture de sodium (0,95 g, 14,6 mmol) sont dissous dans 20mL de DMF puis agité à température ambiante pendant 40 h. 120 mL de dichlorométhane sont ensuite ajoutés et la solution est lavée cinq fois avec de l'eau (5*60 mL). La phase organique est séchée sur Na2SO4 et filtrée sur fritté. Après évaporation du solvant par évaporateur rotatif, le résidu est dissous dans 25 mL de THF, précipité dans 150 mL de diéthyl éther et séché sous vide (rendement 86%). iH-NMR (ppm, CDC13, 400 MHz,) (relative integral): 8=3.3 (2H, t), 3.6 (262H, m), 5.9-6.1 (2H, m). Les composés de formule I dans lesquels RI représente un groupe de formule (III) sont préparés selon le schéma III o~( ^ I~ OH o~ ^OMs O P 10 OH 11 12 14a 20 SCHEMA III Exemple 7 : Préparation de NB-PEO-Rhodamine B (15a) Dans cet exemple, R3 est une sonde de détection : Rhodamine B 1 équivalent de NB-PEO-N3 13 (333,4 mg, 0,110 mmol), 1,5 équivalents d'alcyne de Rhodamine B 14a (85 mg, 0,165 mmol) et 2 équivalents de PMDETA (46 µL, 0,286 mmol) sont dissous dans 10 mL d'une solution dégazée de dichlorométhane/éthanol (35/65% V/V) et placés sous atmosphère inerte. 2 équivalents de CuBr sont ajoutés à la solution. La solution est agitée à température ambiante durant 6 jours. Après 6 jours, le solvant est évaporé et le polymère est dissous dans 10mL de dichlorométhane. La phase organique est lavée 10 fois 1 o avec de l'eau puis séchée avec Na2SO4, Le dichlorométhane est évaporé et le résidu est dissous dans 15 mL de THF, précipité dans 100mL de diéthyl éther puis séché sous vide pour conduire au produit 15a. Exemple 8 : Préparation de NB-PEO-Coumarine (15b) 15 Dans cet exemple, R3 est une sonde de détection : Coumarine ~N N \ /N 1 équivalent de NB-PEO-N3 13 (61,5 mg, 0,143 mmol), 2 équivalents d'alcyne de coumarine 14b (61 mg, 0,286 mmol) et 2 équivalents de PMDETA (0,06 mL, 0,286 mmol) sont dissous dans 10 mL d'une solution dégazée de dichlorométhane/éthanol (35/65% V/V) et 20 placés sous atmosphère inerte. 2 équivalents de CuBr sont ajoutés à la solution. La solution est agitée à température ambiante durant 6 jours. Après 6 jours, le solvant est évaporé et le polymère est dissous dans 20mL de dichlorométhane. La phase organique est lavée 10 fois avec de l'eau puis séchée avec Na2SO4, Le dichlorométhane est évaporé et le résidu est dissous dans 15 mL de THF, précipité dans 100mL de diéthyl éther puis séché sous vide pour conduire au composé 15b. Exemple 9 : Préparation de NB-PEO-CI-994 (17c) Dans cet exemple, R3 est un modulateur épigénétique : CI-994 1 équivalent de NB-PEO-N3 13 (523 mg, 0.133 mmol), 1.5 équivalents de 9c (exemple 4) (140 mg, 0.195 mmol) et 2 équivalents de PMDETA (54 µL, 0.26 mmol) sont dissous dans 5 mL de DMF dégazé et placés sous atmosphère inerte. 2 équivalents de CuBr sont ajoutés à la 1 o solution. . La solution est agitée à température ambiante durant 4 jours. Après 4 jours, le solvant est évaporé et le polymère est dissous dans 30mL de dichlorométhane. La phase organique est lavée 10 fois avec de l'eau puis séchée avec Na2SO4. Le dichlorométhane est évaporé et le polymère est dissous dans 20 mL de THF, précipité dans 100mL de diéthyl éther puis séché sous vide. 15 Exemple 10 : Préparation de NB-PEO-CI-994 (17d) Dans cet exemple, R3 est un modulateur épigénétique : CI-994 Ce composé est synthétisé de la même manière que dans l'exemple 9 en faisant réagir le composé 13 avec le composé 9d ci-dessus décrit Exemple 11 : Préparation de NB-PEO-SAHA (18c) Dans cet exemple, R3 est un modulateur épigénétique : SAHA Ce composé est synthétisé de la même manière que dans l'exemple 9. 25 Exemple 12 : Préparation de NB-PEO-SAHA (18d) Dans cet exemple, R3 est un modulateur épigénétique : SAHA Ce composé est synthétisé de la même manière que dans l'exemple 9. D) Préparation de composés de formule I dans lesquels RI représente un groupe de 30 formule (II) : composés de formule VII ou particules fonctionnelles avec sonde de détection (Rhodamine B 16a, coumarine 16b) ou modulateur épigénétique (CI-994 19c et 19d, SAHA 20c et 20d) Exemple 13 : Préparation des composés de formule VII 20 La copolymérisation de NB avec NB-PEO-N3 est effectuée à température ambiante dans un ballon de 100 mL, sous agitation et atmosphère inerte. Typiquement, 7 mg (8.5 10-6 mol) du catalyseur de Grubbs de 1"e génération sont dissous dans 3.6 mL d'une solution de dichlorométhane/éthanol dégazée (50/50% V/V). Le NB (0.28 g, 3 10-3 mol) et le NB-PEO-N3 (13) (0, 15 g, 3027 g.mol-1, 5.1 10-5 mol) sont dissous dans 5 mL d'une solution de dichlorométhane/éthanol dégazée (35/65% V/V) et additionnés, sous argon, à la solution de catalyseur. La désactivation du milieu réactionnel est effectuée par ajout de 0.1 mL d'éthyl vinyl éther. Les composés de formule VII sont ainsi obtenus. 1 o La caractérisation colloïdale est obtenue par diffusion dynamique de la lumière et par imagerie (microscopie électronique à transmission). La caractérisation chimique est obtenue par résonnance magnétique nucléaire. Exemple 14 : Préparation des composés 16a et 16b 15 Les composés sont préparés comme dans l'exemple 13 selon le schéma IV suivant : R = coumrine, rhodaminoyle m ROMP 16a, b SCHEMA IV Les composés 16a et 16b peuvent également être préparés selon le mode opératoire suivant : 20 0.85 équivalents (par rapport à la fonction azoture) d'alcyne de Rhodamine B (28 mg, 0.13 mmol) et 2 équivalents de PMDETA (6 µL, 0.03 mmol) sont dissous dans 1 mL de solution de dichlorométhane/éthanol dégazée (35/65% V/V) puis placés sous atmosphère inerte. 2 équivalents de CuBr sont ajoutés à la solution. La solution est ajoutée à une dispersion de nanoparticules azotures précédemment synthétisée (exemple 13). La dispersion est placée sous 25 agitation à température ambiante pendant 4 jours pour obtenir le composé 16a. Exemple 15 : Préparation des composés 19c, 19d, 20c et 20d Les composés sont préparés comme dans l'exemple 13 selon le schéma V suivant : O~v \o~ `~N V P \p' \/°. \/° V ~N~N.,N Rx 17c,d(X =C1-994) 18c,d (X = SAHA) Rx = H, 4-Ome Rx ro o/\. ./\ N 19c,d(X =C1-994) 20c,d (X = SAHA) Rx Rx = H, 4-Ome SCHEMA V Les composés 19c,d et 20c,d, sont obtenus de la même manière a partir de NB-PEO-CI-5 994 (17c,d) ou NB-PEO-SAHA (18c,d) respectivement. La caractérisation colloïdale est obtenue par diffusion dynamique de la lumière et par imagerie (microscopie électronique à transmission). La caractérisation chimique est obtenue par résonnance magnétique nucléaire. 1 o PARTIE BIOLOGIQUE : Exemple 16 : Tests d'hydrolyse du composé 9d de l'invention à pH 4,3 ; 5,3 et 7,3 (physiologique). Le composé est placé en milieu acide (tampon citrate pour pH 4.3 et trisma pour pH 7.3 et la libération de CI-994 est suivie par HPLC. 15 Les résultats sont présentés dans les figures 3A et 3B et montrent que les composés de l'invention sont hydrolysés rapidement à pH 4,3 et 5,3 (figure 3) et beaucoup plus lentement à pH physiologique. Exemple 17 : Viabilité cellulaire en présence des composés de l'invention 17.1 Culture cellulaire Matériel biologique : Lignées cellulaires humaines de mésothéliomes (Meso 4, Mesol3, Meso 34, Meso 56, Meso 76 et Meso 95B) et d'adénocarcinomes pulmonaires (ADCA ; ADCA 3, ADCA 72, ADCA 117 et ADCA 153) établies au laboratoire Inserm U892 à partir de liquides pleuraux de patients ponctionnés au CHU de Nantes (Hôpital Laënnec, St-Herblain). Conditions de cultures : Cellules adhérentes poussant en monocouche sur support plastique (flasques) dans du milieu de 1 o culture complet stérile dont la composition est la suivante: RPMI 1640 (Gibco) + 10% Sérum de voeu foetal préalablement traité par choc thermique (30 minutes à 56°C) + glutamine (2mM) + pénicilline (100 IU/mL) / streptomycine (100µg/mL) 15 Les cellules sont maintenues en incubateur à 37°C (5% de CO2) sous atmosphère humide. Passage des cellules (80% de confluence) : Rinçage des cellules du RPMI 1640 seul Incubation à 37°C pendant 3-4 min avec de la trypsine/EDTA (2mL) 20 Neutralisation de la trypsine par ajout de 10mL de milieu complet Comptage des cellules sur lame de Malassez Ensemencement à la densité voulue pour les différentes applications. 17.2 Expériences de viabilité cellulaire 25 JO : Le matin, aspirer le milieu de culture. Laver avec 2m1 de PBS. Ajouter 2,5m1 de trypsine/EDTA. Laisser 3-4 minutes à 37°C. Ajouter 10 ml de RPMI 10% SVF pénicilline (100U/m1), streptomycine (100µg/ml) et L-glutamine (2mM). Dissocier les cellules par aspiration-refoulement. 30 Compter les cellules sur cellule de Malassez. Ensemencer 5000 cellules par puit de plaque 96 puits dans 180µ1 de RPMI 10% SVF pénicilline/streptomycine et Glutamine. Jl : Ajouter 10µ1 d'Uptiblue (Interchim). Laisser 2h à 37°C Lire au Typhoon (GE Healthcare). Préparer les milieux de traitement des cellules : Composés à tester dans du RPMI 10% SVF pénicilline/streptomycine et Glutamine. Aspirer le milieu puis ajouter les milieux de traitement (1800. J4: Faire 2 lavages avec 180µ1 de RPMI 10% SVF pénicilline/streptomycine et Glutamine. Ajouter 14,1 d'Uptiblue. Laisser 2h à 37°C Lire au Typhoon. 1 o Utilisation du Typhoon : Acquisition mode : Fluorescence Set-up - Filtre 580 BP et PMT 350 Définition : 200µM Plan focal : + 3mm 15 Ces expériences permettront d'évaluer la toxicité des différents composés formant les nanoparticules fonctionnalisées ainsi que la libération des inhibiteurs HDAC (iHD) dans les cellules par mesure de la viabilité cellulaire. Les résultats attendus sont notamment une diminution de la viabilité cellulaire en présence d'iHDAC libres. Ces expériences permettront également de définir la gamme de toxicité éventuelle des nanoparticules. 20 Exemple 18 : Internalisation des composés de l'invention 18.1 : BRET Modèle cellulaire : Cellules Met-5A (ATCC) 25 JO : Le matin, aspirer le milieu de culture des cellules Met-5A. Laver avec 2m1 de PBS. Ajouter 2,5m1 de trypsine/EDTA. Laisser 3-4 minutes à 37°C. Ajouter 10 ml de RPMI 10% SVF pénicilline (100U/m1), streptomycine (100µg/ml) et L-glutamine (2mM). 30 Dissocier les cellules par aspiration-refoulement. Compter les cellules sur cellule de Malassez. Ensemencer 200000 cellules par puits de plaque 6 puits dans 2m1 de RPMI 10% SVF pénicilline/streptomycine et Glutamine. 35 Jl : Transfection : phRluc-C 1 BrD + pEYFP-C 1 histone H3 Pour un puit de plaque 6 puits dans un eppendorf de 1,5m1 : - 600ng de phRluc-Cl BrD + 1500ng de pEYFP-Cl histone H3 dans 100µ1 de RPMI brut. - 600ng de phRluc-Cl BrD dans 100µ1 de RPMI brut. Ajouter 3µl d'attracten (Qiagen) directement dans le liquide. Homogénéiser en tapotant le tube avec le doigt. Laisser 20 minutes à température ambiante. Pendant ce temps, changer le milieu des cellules ensemencées à Jo par 2m1 de RPMI 10% SVF pénicilline/streptomycine et Glutamine. Ajouter le mélange ADN/attracten (100µ1) sur les cellules. Laisser 24h à 37°c sous 5% COz et en atmosphère humide. J2 : Laver le puit avec 1ml de PBS puis décrocher les cellules avec 300µ1 de trypsine/EDTA. Laisser 3-4 minutes à 37°C. Ajouter 2 ml de RPMI 10% SVF pénicilline (100U/m1), streptomycine (100µg/ml) et L-glutamine (2mM). Dissocier les cellules par aspiration-refoulement. Répartir 180µ1 de suspension cellulaire dans des puits de plaque 96 puits blanches (Optiplate, Berthold). Après 6h à 37°c, commencer les traitements en ajoutant 20µ1 de milieu de traitements (RPMI 10% SVF pénicilline, streptomycine et L-glutamine) comprenant les composés à tester dix fois concentrés. J3 : Sortir les cellules de l'incubateur et laver les cellules avec 45µ1 de PBS à température ambiante. Aspirer le PBS puis ajouter 45µ1 de PBS. Ajouter Sul par puits de coelentérazine h (Interchim) à 25µM. Attendre 10 minutes à température ambiante. Lire la plaque sur le Mithras (Berthold) Logiciel : Microwin 2000 Programme : BRET 3o Paramètres : Lecture à 485nm pendant 1 seconde puis lecture à 530nm pendant 1 seconde. La plaque est lue 5 fois. Les 5 valeurs obtenues pour un puit sont moyennées. Calcul du BRET : ((valeur 530nm phRluc-C1 BrD + pEYFP-C1 histone H3/valeur 480nm phRluc-C1 BrD + pEYFP-C1 histone H3)-(valeur 530nm phRluc-C1 BrD/valeur 480nm phRluc-C1 BrD)) x 1000 Unité : milli BRET unit (mBu) Ces expériences permettront d'évaluer la libération des inhibiteurs HDAC (HDI) dans les 5 cellules vivantes. Les résultats attendus sont une augmentation du signal de BRET en présence d'HDI libres. 18.2 : Microscopie de fluorescence: Internalisation des nanoparticules JO : Mettre des lamelles coverglass dans des puits de plaque 12 puits. Incuber les lamelles dans éthanol 100% (2mL/puits) pendant 1h, éliminer et laisser évaporer 1 o sous la hotte (environ 15 à 30 min). Rincer une fois au PBS : 1mL de PBS par puits. Mettre à sécher les lamelles sous la hotte (de 15 à 30 min). Aspirer le milieu de culture des cellules. Laver avec 2m1 de PBS. Ajouter 2,5m1 de trypsine/EDTA. Laisser 3-4 minutes à 37°C. 15 Ajouter 10 ml de RPMI 10% SVF pénicilline (100U/m1), streptomycine (100µg/ml) et L-glutamine (2mM). Dissocier les cellules par aspiration-refoulement. Compter les cellules sur cellule de Malassez. Ensemencer 50000 cellules par lamelles dans 1ml de RPMI 10% SVF 2 0 pénicilline/streptomycine et Glutamine. Jl : Incuber les cellules avec 21,5µg/ml de nanoparticules rhodamine B dans 1ml de milieu de culture pendant 2h30 dans les conditions de culture cellulaire. Les cellules sont lavées avec 1ml de PBS. 25 Les membranes des cellules sont marquées au PKH67 (Sigma) selon les instructions du fabricant. Les cellules sont fixées au paraformaldéhyde 4% (Sigma) dans le milieu de culture pendant 15 à 20 minutes à température ambiante contenant 1 µg/mL Hoechst (Sigma). Rinçage avec 1ml de PBS par puits, 3 fois. 30 Rincer les lamelles dans l'eau puis montage dans solution de montage. Montage des lamelles : Mettre 5µL de ProLong® Gold (Molecular Probes) par lamelle sur la lame A l'aide d'une aiguille et d'une pince, retirer la lamelle du puits, la plonger brièvement dans de l'eau stérile. Faire attention au sens de dépôt de la lamelle de façon à ce que les cellules se trouvent entre lame et lamelle. Fixation : une nuit à l'obscurité. Ces expériences doivent permettre d'observer la présence de points rouges (nanoparticules couplés à la rhodamine B) à l'intérieure d'un liseré vert (membrane plasmique). Ceci confirmera l'internalisation des nanoparticules par les cellules. 18.3 :Microscopie de fluorescence : Colocalisation Nanoparticules et compartiments intracellulaires acides JO : Mettre des lamelles coverglass dans des puits de plaque 12 puits. Incuber les lamelles dans éthanol 100% (2mL/puits) pendant 1h, éliminer et laisser évaporer sous la hotte (environ 15 à 30 min). Rincer une fois au PBS : 1mL de PBS par puits. Mettre à sécher les lamelles sous la hotte (de 15 à 30 min). Aspirer le milieu de culture des cellules. Laver avec 2m1 de PBS. Ajouter 2,5m1 de trypsine/EDTA. Laisser 3-4 minutes à 37°C. Ajouter 10 ml de RPMI 10% SVF pénicilline (100U/m1), streptomycine (100µg/ml) et L-2 0 glutamine (2mM). Dissocier les cellules par aspiration-refoulement. Compter les cellules sur cellule de Malassez. Ensemencer 50000 cellules par lamelles dans 1ml de RPMI 10% SVF pénicilline/streptomycine et Glutamine. 25 J1 : Incuber les cellules avec 21,5µg/ml de nanoparticules rhodamine B dans 1ml de milieu de culture pendant 2h30 dans les conditions de culture cellulaire. Les cellules sont lavées avec 1ml de PBS. Les membranes des cellules sont marquées au PKH67 (Sigma) selon les instructions du 30 fabricant. Les cellules sont fixées au paraformaldéhyde 4% dans le milieu de culture pendant 15 à 20 minutes à température ambiante (125µL de la solution mère à 32% (Sigma) dans 1ml de milieu de culture) contenant 1 µg/mL Hoechst (Sigma). Rinçage avec 1ml de PBS par puits, 3 fois. Perméabilisation pendant 5 minutes à T°C ambiante: 800µL par puits de PBS 1X Triton X100 0,05% Tween 0,05%. Rinçage avec 1mL de PBS par puits, 3 fois (1 rapide et 2 de 5min) Saturation pendant 10 à 20mn dans 800µL de PBS+BSA 1% (sans faire de rinçage) Incubation avec l'anticorps primaire anti-Lame (lµg/ml) dilué dans 600µL de PBS pendant 90 1 o mn à température ambiante. Rinçage avec 1mL de PBS par puits, 3 fois (1 rapide et 2 de 5min) Incubation avec l'anticorps secondaire fluorescent (Cy5 souris (Jackson) au 1/200) dilué dans 600µL de PBS+ pendant 60mn à température ambiante et à l'obscurité. Rinçage avec 1mL de PBS par puits, 3 fois (1 rapide et 2 de 5min) 15 Rincer les lamelles dans l'eau puis montage dans solution de montage. Montage des lamelles : Mettre 5µL de ProLong® Gold (Molecular Probes) par lamelle sur la lame A l'aide d'une aiguille et d'une pince, retirer la lamelle du puits, la plonger brièvement dans de l'eau stérile. 20 Faire attention au sens de dépôt de la lamelle de façon à ce que les cellules se trouvent entre lame et lamelle. Fixation : une nuit à l'obscurité. Les figures 5A à 5C présentent les résultats obtenus avec les particules 16a de l'invention et 25 montrent que les particules détectées dans la cellule co-localisent avec les vésicules lysosomiales et que par conséquent elles ont été internalisées par endocytose. 18.4 :Cytométrie en Flux (FACS) JO : Ensemencer les cellules en plaque 6 puits à la densité de 200000 cellules/puits dans du 30 milieu RPMI 10% SVF pénicilline (100U/m1), streptomycine (100µg/ml) et L-glutamine (2mM). J1 : Incuber les cellules avec des nanoparticules en suspension dans du milieu RPMI 10% SVF pénicilline (100U/m1), streptomycine (100µg/ml) et L-glutamine (2mM). (3,45 mg/mL) à 37°C ou sur glace pendant 2h30. Récupérer les cellules dans le surnageant et les cellules adhérentes par trypsination Culotter les cellules par centrifugation et faire 2 lavages avec du PBS froid pour éliminer toute trace de nanoparticules en suspension Transférer les cellules dans des petits tubes FACS pour l'analyse en cytométrie en flux (cytométre FACSCalibur/logiciel CellQuest Pro, BD Biosciences) Mesurer la taille et la granulométrie des cellules à l'aide des canaux FSC (« Forward SCatter» ) 1 o et SSC (« Side SCatter ») Analyser les données obtenues à l'aide du logiciel F1owJo (Tree Star). Exemple 19 : Biodistribution des nanovecteurs Des souris nude femelles sont injectées avec 3 millions d'AK7 (104,1) en sous-cutanée sur le flanc gauche. 15 3 semaines après, 0,02 mg/g de souris (104,1) de solution de nanovecteurs marqués à la rhodamine B sont injectées dans une des veines de la queue préalablement dilatée dans de l'eau chaude. Pendant cette étape, les souris sont maintenues en contention. Les animaux sont euthanasiés par élongation. 24h après l'injection, la biodistribution des nanovecteurs est observée par imagerie de 2 o fluorescence (Biospace Lab, Excitation : 580nm et Emission : 630nm). Les images sont analysées avec le logiciel Photo vision + 1.3 (Biospace Lab). Les résultats sont présentés dans la figure 6. La figure 6 montre que 24h après l'injection, par voie intra-veineuse, des nanovecteurs 25 (composés 16a), on obtient une localisation très majoritairement au niveau de la tumeur. Cette observation valide ainsi la compatibilité des nanovecteurs avec un ciblage de la tumeur par l' effet EPR. 5 REVENDICATIONS1. Nanovecteurs constitués par des chaînes polymères Pi de formule générale (I) suivante : (R'1)u 1. j dans laquelle: , - représente une chaîne polymère P, notamment une chaîne polymère P contenant environ 30 à 10000 unités monomères, identiques ou différentes, dérivées 10 de la polymérisation d'alcènes monocycliques dont le nombre d'atomes de carbone constitutifs du cycle est d'environ 4 à 12, ou d'alcènes polycycliques dont le nombre total d'atomes de carbone constitutifs des cycles est d'environ 6 à 20, - t représente 0 ou 1, - q est un entier compris de 1 à 10, 15 - u est un entier compris de 0 à 10, - n représente 0 ou 1, - v représente 0 ou 1, - X représente O, NH ou S, - RI et R'1 représentent indépendamment l'un de l'autre, lorsque t = 1, un groupe de 20 formule (II) suivante : O / p O O m r (u) ou: 25 m et p représentent indépendamment l'un de l'autre un entier de 1 à 1000, en particulier 50 à 340, notamment 70 à 200 r représente est un entier compris de 0 à 10, préférentiellement 0 ou 1,ou, - RI représente, lorsque t = 0 un groupe de formule (III) suivante relié à un alcène monocyclique ou un alcène polycyclique: 64 Alcène monocyclique ou polycyclique i o o m _r dans laquelle le nombre d'atomes de carbone constitutifs du cycle de l'alcène monocyclique est d'environ 4 à 12, et le nombre total d'atomes de carbone constitutifs des cycles de l'alcène polycyclique est d'environ 6 à 20, r, m et p étant tels que définis ci-dessus, ou, - RI représente lorsque t = 0, un groupe de formule (IV) suivante : O m dans laquelle R4 représente : un groupe vinyle, un groupe éthyne, un groupe OR' ou 15 SR", R' et R" représentant indépendamment l'un de l'autre, H, un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, et m étant tel que défini ci-dessus, r représente est un entier compris de 0 à 10, préférentiellement 0, - R2 et R'2 représentent indépendamment l'un de l'autre : H ou un phényle substitué ou non par au moins : 20 o un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, o un alkoxy en C1-C20, o NRaRb où Ra et Rb représentent indépendamment l'un de l'autre H, un alkyle en C1-C20, l'alkyle pouvant former un cycle avec le carbone en ortho de celui portant N, un cycloalkyle en C3-C20, 25 o NO2, o CO2Rc, où Rc représente H, un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, un benzyle substitué ou non, o un acyle en C1-C20, notamment R2 et R'2 représentent le 2 ou 4-méthoxyphényle, le 2 ou 4-30 methylphényle, le phényle, le 2,4-diméthoxyphényle,et lorsque n = 0 et v = 1, R3 est alors lié directement au carbone portant R2 et R'2, ou alors, - R2 et R'2 représentent ensemble, si n = 0 et v = O, le cycle de formule (Va) suivante: dans laquelle Y' représente : o O, o NRdRe où Rd et Re représentent indépendamment l'un de l'autre H, un alkyle en C1-C20, l'alkyle pouvant former un cycle avec le carbone l' ou 3', un cycloalkyle en C3-C20, l'atome d'azote présentant une charge positive associée à un anion monovalent, et Y représente o OR', où R' représente H, un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, o un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, 15 o un alcoxy en C1-C20, o NRfRg où Rf et Rg représentent indépendamment l'un de l'autre H, un alkyle en C1-C20 l'alkyle pouvant former un cycle avec le carbone 1 ou 3, un cycloalkyle en C3-C20, o NO2, 20 o CO2Rc, où Rc représente H, un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, un benzyle substitué ou non, o un acyle en C1-C20, ou, si n = 0 et v = O, le cycle de formule (Vaa) suivante: dans laquelle A- représente un anion monovalent. 10 (Vaa) 25 ou- R2 et R'2 représentent ensemble le cycle de formule (Vb) suivante, n = 1 et v = 1 : 1 66 (Vb) 10 et Yi et Y2 représentent indépendamment l'un de l'autre : o OR', où R' représente H, un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, o un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, o un alcoxy en C1-C20, o NRhR; où Rh et Ri représentent indépendamment l'un de l'autre H, un alkyle en C1-C20, l'alkyle pouvant former un cycle avec le carbone 1 ou 3 dans la cas de Yi, et le carbone l' ou 3' dans le cas de Y2, un cycloalkyle en C3-C20, o NO2, o CO2Rc, où Rc représente H, un alkyle en C1-C20, un cycloalkyle en C3-C20, un benzyle substitué ou non, o un acyle en C1-C20, ou le cycle de formule (Vbb) suivante et n = 1 : (Vbb) - R3 représente un principe actif, en particulier un modulateur épigénétique, une sonde de détection, notamment fluorescente ou radio émettrice, ou un peptide de pénétration cellulaire (PPC), 25 2. Nanovecteurs selon la revendication 1, dans lesquels les unités monomères sont dérivées de la polymérisation d'alcènes monocycliques, et sont de formule (Z 1) suivante 15 20=[CH-RS-CH]= (Zl) dans laquelle RS représente une chaîne hydrocarbonée de 2 à 10 atomes de carbone, saturée ou non. 3. Nanovecteurs selon la revendication 1 ou 2, dans lesquels les alcènes monocycliques dont sont issues les unités monomères sont : - le cyclobuténe conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de 1 o formule (Z 1 a) suivante : Zla - le cyclopenténe conduisant à un polymère comprenant des unités monomères 15 de formule (Z lb) suivante : 67 Zlb - le cyclopentadiéne conduisant à un polymère comprenant des unités 20 monomères de formule (Z 1 c) suivante Z1c - le cyclohexéne conduisant à un polymère comprenant des unités monomères 25 de formule (Z 1 d) suivante Z1d - le cyclohexadiéne conduisant à un polymère comprenant des unités 30 monomères de formule (Z 1 e) suivanteZ1e - le cycloheptène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères 5 de formule (Z 1 f) suivante Z 1 f - le cyclooctène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de 1 o formule (Z 1 h) suivante Z1h - le cyclooctapolyène, notamment le cycloocta-1,5-diene conduisant à un 15 polymère comprenant des unités monomères de formule (Zli) suivante Zli - le cyclononène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères 20 de formule (Z 1 j) suivante Z1j- le cyclononadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zlk) suivante Zlk - le cyclodécène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z 11) suivante Z11 le cyclodéca-1,5-diène conduisant à un polymère comprenant des unités 15 monomères de formule (Z lm) suivante Zlm 20 - le cyclododécène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z ln) suivante10 15 20 25 30 Zln ou encore l'acétate du 2,3,4,5-tétrahydrooxepin-2-yl, le cyclopentadécéne, le 5 paracyclophane, le ferrocenophane. 4. Nanovecteurs selon la revendication 1, dans lesquels les unités monomères sont dérivées de la polymérisation d'alcènes polycycliques, et sont : - de formule (Z2) suivante =[CH-R6-CH]= (Z2) dans laquelle R6 représente : * un cycle de formule W- a W1 W2 dans laquelle : . W représente -CHz-, ou un hétéroatome, ou un groupe -CHR7-, ou un groupe -CHRg-, R7 représentant une chaîne comprenant un polyoxyde d'éthylène de formule -(CHz-CHz-O)m , m étant tel que défini ci-dessus et Rg représentant une chaîne alkyle ou alcoxy en C1 à C,o, . Wi et W2, indépendamment l'un de l'autre, représentent H, ou une chaîne R7, ou un groupe Rg susmentionnés, ou forment en association avec les atomes de carbone qui les portent un cycle de 4 à 8 atomes de carbone, ce cycle étant le cas échéant substitué par une chaîne R7 ou un groupe Rg susmentionnés, . a représente une simple ou double liaison, * ou un cycle de formule W' l W'2 \ W' 10 15 20 25dans laquelle : . W' représente -CHz-, ou un hétéroatome, ou un groupe -CHR7-, ou un groupe -CHRg-, R7 et Rg étant tels que définis ci-dessus, . W'i et W'z, indépendamment l'un de l'autre, représentent -CHz-, ou un groupe -C(0), ou un groupe -CORS, ou un groupe -C-ORg, R7 et Rg étant tels que définis ci-dessus, - de formule (Z3) suivante H H +C\ R-C/ H H (Z3) dans laquelle R9 représente : * un cycle de formule (W 1) ni \ (W 2) n2 dans laquelle : . ni et n2, indépendamment l'un de l'autre, représentent 0 ou 1, . W" représente -CHz-, ou un groupe -CHR7-, ou un groupe -CHRg-, R7 et Rg étant tels que définis ci-dessus, . W" I et W"2, indépendamment l'un de l'autre, représentent une chaîne hydrocarbonée de 0 à 10 atomes de carbone, * ou un cycle de formule W' 305dans laquelle W" et W"a, indépendamment l'un de l'autre, représentent - CHz-, ou un groupe -CHR7-, ou un groupe -CHRg-, R7 et Rg étant tels que définis ci-dessus, * ou un cycle de formule 10 "a dans laquelle W" et W"a, indépendamment l'un de l'autre, représentent - CHz-, ou un groupe -CHR7-, ou un groupe -CHRg-, R7 et Rg étant tels que définis ci-dessus. 5. Nanovecteurs selon la revendication 1 ou 4, dans lesquels les alcènes polycycliques dont sont issues les unités monomères sont : - les monomères contenant un cycle cyclobuténe conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2a) suivante : u 20 000 (Z2a) - les monomères contenant un cycle cyclopenténe conduisant à un polymère 25 comprenant des unités monomères de formule (Z2b) suivante : 15(Z2b) - le norbornène (bicyclo [2,2,1 ]hept-2-ène) conduisant à un polymère 5 comprenant des unités monomères de formule (Z2c) suivante : (Z2c) 10 - le norbornadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2d) suivante : 73 15 (Z2d) - le 7-oxanorbornène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2e) suivante : O 20 (Z2e) - le 7-oxanorborndiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2f) suivante : O v_ 25 (Z2f) - le dimère du norbornadiéne conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3a) suivante :(Z3 a) - le dicyclopentadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z31)) suivante : 15 (Z3b) - le tetracyclododécadiene conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3c) suivante : (Z3c) - ou le bicyclo[5,1,0]oct-2-ène, le bicyclo[6,1,0]non-4-éne. 6. Nanovecteurs selon l'une des revendications 1 à 5, dans lesquels les alcènes mono ou polycycliques dont sont issues les unités monomères sont : - le norbornène (bicyclo[2,2,1 ]hept-2-ène) conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z2c - le tetracyclododécadiene conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3c), - le dicyclopentadiène conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Z3b), - le dimère du norbornadiène conduisant à un polymère comprenant des unités 1 o monomères de formule (Z3a), - le cycloocta-1,5-diene conduisant à un polymère comprenant des unités monomères de formule (Zli). 7. Nanovecteurs selon l'une des revendications 1 à 6, dans lesquels le modulateur 15 épigénétique est choisi parmi : - un nucléoside, en particulier la cytidine, l'uridine, l'adénosine, la guanosine, la thymidine ou l'inosine, - les inhibiteurs d'histones déacétylase (HDI), en particulier le Zolinzâ (SAHA), la trichostatine A (TSA), l'acide valproïque, MS-275 ou CI-994, ou 20 - les inhibiteurs d'ADN méthyltransférases (DNMTI), en particulier la 5-azacytidine, la 5-aza-2'-deoxycytidine et la zébularine. 8. Nanovecteurs selon l'une des revendications 1 à 6, dans lesquels la sonde de détection est choisie parmi une substance fluorophore, notamment la rhodamine B 25 ou la fluorescéine, les coumarines, en particulier la 7-hydroxy-4-methylcoumarine, les bodipy, le texas red, les cyanines, en particulier le CY3 ou le CY5, ou une substance radio émettrice comme le 99Technétium sous forme ligandée, ou des agents de contraste pour l'imagerie médicale comme les lanthanides (gadolinium). 30 9. Nanovecteurs selon l'une des revendications 1 à 6, dans lesquels le peptide de pénétration cellulaire est choisi parmi les polylysines, les polyarginines, les polylysines imidazolées, ou des mimétiques de poly glycines avec une chaine porteuse d'un groupe terminal azoté 10. Nanovecteurs tels que définis dans l'une des revendications 1 à 9, pour une utilisation en tant que médicament et/ou agent diagnostic. 11. Nanovecteurs selon la revendication 10, pour leur utilisation dans le traitement et/ou le diagnostic de pathologies choisies parmi les maladies neurologiques, les processus inflammatoires, le cancer, les maladies du sang 12. Nanovecteurs selon la revendication 10, pour leur utilisation dans le traitement 1 o combinatoire de pathologies choisies parmi les maladies neurologiques, les processus inflammatoires, le cancer, les maladies du sang. 13. Composition pharmaceutique comprenant comme principe actif des nanovecteurs telles que défini dans l'une des revendications 1 à 9, en association avec un 15 véhicule pharmaceutiquement acceptable. 14. Composition pharmaceutique selon la revendication 13, sous une forme susceptible d'être administrée par voie intraveineuse à une dose unitaire 5 mg à 500 mg. 15. Procédé de préparation de nanovecteurs constitués de chaîne polymères de formule générale (I) telles que définies dans l'une des revendications 1 à 9, comprenant une étape de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle et une étape de bioconjugaison. 16. Procédé de préparation de nanovecteurs constitués de chaîne polymères de formule générale (I) dans laquelle RI est un groupe de formule générale (II) selon la revendication 15, caractérisé en ce que l'étape de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle est effectuée préalablement à l'étape de bioconjugaison. 17. Procédé de préparation de nanovecteurs selon la revendication 15 ou 16, dans lequel l'étape de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle est effectuée préalablement à l'étape de bioconjugaison, comprenant les étapes suivantes : 20 25 30a. Préparation d'un composé de formule générale (VI-a) suivante comprenant un alcène monocyclique ou polycyclique et une fonction azoture : Alcène monocyclique O ou polycyclique \ o m 10 15 20 25 m, r et p étant tels que définis dans la revendication 1, b. Mise en oeuvre de l'étape de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle en présence d'un catalyseur pour former un composé de formule (VII) comprenant des fonctions azotures en surface d'un polymère: - / [V- N 1 N (vin m, r, p et q étant tels que définis dans la revendication 1, c. Préparation d'un composé de formule générale (VIII) comprenant une fonction alcyne : N--=N O~i N m 0 (VIII) dans laquelle n, m, R2, R'z et R3 sont tel que définis dans la revendication 1 et s est un entier compris de 0 à 10, en particulier 0 ou 1, d. Mise en oeuvre de l'étape de bioconjugaison par mise en contact dudit composé de formule (VII) avec le composé de formule (VIII) en présence de cuivre pour obtenir des nanovecteurs constitués de chaîne polymérique de formule (I) dans laquelle RI est un groupe de formule (II). 18. Procédé de préparation de nanovecteurs constitués de chaîne polymères de formule générale (I) dans laquelle RI est un groupe de formule générale (II) et t = 1, ou de formule générale (III) et t = 0, selon la revendication 15, dans lequel l'étape de bioconjugaison est effectuée préalablement à l'étape optionnelle de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle. j \ - r O /m 3 q78 19. Procédé de préparation selon la revendication 18, comprenant les étapes suivantes : a. Préparation d'un composé de formule générale (VI-a) suivante comprenant un alcène monocyclique ou polycyclique et une 5 fonction azoture : Alcène monocyclique ou polycyclique m, r et p étant tel que défini dans la revendication 1, b. Préparation d'un composé de formule générale (VIII) comprenant une 1 o fonction alcyne : m ° (vol) dans laquelle n, m, R2, R'z et R3 sont tels que définis dans la revendication 1 et s est un entier compris de 0 à 10, 15 c. Mise en oeuvre de l'étape de bioconjugaison par mise en contact dudit composé de formule (VI-a) avec le composé de formule (VIII) en présence de cuivre pour obtenir les composés de formule générale (I) dans laquelle t = 0 et RI représente un groupe de formule (III). 20 d. Optionnellement, mise en oeuvre de l'étape de polymérisation par métathèse d'ouverture de cycle en présence d'un catalyseur pour former des nanovecteurs constitués de chaîne polymères de formule générale (I) dans laquelle RI est un groupe de formule générale (II) et t =1. Ip o m 25