Brevet FR2953725A1 — publié le 20110617

La présente invention concerne un procédé pour obtenir un extrait à partir d'inflorescences de macela-docampo, ou camomille des champs (Achyrocline satureioides). La présente invention concerne aussi des compositions cosmétiques, pharmaceutiques et vétérinaires contenant l'extrait susdit, ainsi que l'utilisation et un procédé de mise en oeuvre dudit extrait. Description de l'état de la technique Achyrocline satureioides, également appelée macela- do-campo, est une plante de la famille des Asteraceae, que l'on trouve en Argentine, en Uruguay, au Brésil et au Paraguay, et qui est largement utilisée en médecine traditionnelle. Il s'agit d'une plante annuelle, de hauteur moyenne avec des inflorescences jaunes, que l'on trouve couramment au Brésil, principalement dans les états de la région du Sud (Marques, 1995 ; Marques & Barros, 2000). Elle peut se propager à partir des graines (Ikuta, 1993 ; Marques, 1995 ; Marques & Barros, 2000) ou par repiquage de boutures (Pardo, 1995). On dispose aussi de données écrites concernant la production en serre (Marques & Barros, 2001) et l'évaluation du potentiel des semences pour une exploitation en culture agricole (Ikuta, 1993 ; Marques, 1995 ; Marques & Barros, 2000). La macela-do-campo est une herbe annuelle, monoïque, ramifiée, poussant jusqu'à une hauteur de 1,5 mètre, recouverte de poils blancs. Elle a des feuilles alternes, complètes, sessiles, linéaires et lancéolées, pouvant avoir jusqu'à 12 cm de longueur et 1,8 cm de largeur. Elle a un capitule avec deux types de fleurs, se rencontrant dans une panicule en corymbe ; des fleurs jaune or, avec un ou deux centres hermaphrodites, en corolle tubuleuse, ainsi que quatre ou cinq fleurs marginales, qui sont féminines avec une corolle filiforme. Son fruit est en akène, glabre et marron (SIMÔES et al., 1998 ; MEDEIROS et al., 2005). Des études pharmacologiques sur les extraits et inflorescences mettent en évidence des activités sédatives, analgésiques, anti-inflammatoires et antispasmodiques (Simôes, 1988 ; Oliveira et al., 2001), une activité antimicrobienne contre Staphylococcus aureus (Lemos, 2000), une activité vasorelaxante (Hnatyszyn et al., 2004), une activité anti-hyperglycémiante (Carney et al., 2002) et une activité hépato-protectrice (Kadarian et al., 2002). Il a également été rapporté qu'elle est couramment utilisée pour traiter diverses douleurs, divers problèmes digestifs (D'Âvila, 1910 ; Ritter et al., 2002) et, plus récemment, pour perdre du poids (Dickel et al., 2007). Des procédés d'extraction pour obtenir l'extrait d'Achyrocline satureioides (macela-do-campo) et, plus spécifiquement, son utilisation dans des compositions destinées à prévenir et traiter des réactions inflammatoires, sont déjà connus. Dans ce contexte, on peut mettre en avant le brevet brésilien PI0103468-5, qui décrit un procédé d'extraction des composés actifs d'Achyrocline satureioides. Le produit résultant de ce procédé peut potentiellement être utilisé dans la préparation de médicaments pour le traitement de perturbations gastro- intestinales résultant d'une indigestion (effet antispasmodique) et pour le traitement d'états inflammatoires et d'infections virales topiques liées à l'herpès. Fondamentalement, le procédé d'extraction faisant l'objet de ce document brésilien, comprend les étapes suivantes préparation du matériau constitué des inflorescences d'Achyrocline satureioides séchées et broyées ; mise en contact de ce matériau avec un milieu de macération contenant un solvant organique polaire tel qu'un alcool en Cl à C4, éventuellement en mélange avec de l'eau ; séparation des solides présents dans le mélange d'extraction d'avec la phase liquide ; traitement de la solution avec des agents adjuvants, par exemple du dioxyde de silicium colloïdal ; et séchage de l'extrait résultant. Après consultation d'un document rédigé par les mêmes inventeurs (Bassani et al. 1997), et antérieur audit brevet, on a appris que le procédé consiste en une macération qui utilise une solution de solvant en une proportion de 7,5 % (poids/volume), soit 7,5 g de plante pour 100 ml de solution de solvant. En outre, pour chaque phase du procédé d'extraction constituant l'objet de ce document de l'état de la technique, le mélange peut de préférence être un mélange d'éthanol et d'eau en une proportion de 80 % d'éthanol et 20 % d'eau ou avec des concentrations croissantes d'éthanol allant jusqu'à 100 % d'éthanol. Dans ce contexte, il convient d'observer que ce document brésilien de l'état de la technique décrit un procédé lent, du fait de l'utilisation d'une macération, l'extraction ayant lieu à la température ambiante et pouvant prendre de 24 à 160 heures, d'après ce document. En outre, le procédé a un faible rendement d'extraction des composés présentant un intérêt, à savoir de la quercétine et de la 3-0-méthylquercétine, parce que l'extrait séché contenant ces composés en contient au plus 0,9391 % et 0,7294 %, respectivement. On sait aussi que, dans ce document de brevet de l'état de la technique, la 3-0-méthylquercétine est dosée en même temps que la lutéoline, ce qui a pour résultat que la teneur en 3-0-méthylquercétine est même inférieure à 0,7294 %. En relation avec l'utilisation d'extraits d'Achyrocline satureioides dans des produits cosmétiques et pharmaceutiques, référence est faite au brevet japonais JP10226619, qui décrit une préparation pour la peau, à usage externe, présentant une action antioxydante afin d'empêcher l'oxydation des composants lipidiques, utilisant l'extrait d'une plante du genre Achyrocline, telle que la macela-do-campo (Achyrocline satureioides), par exemple. Ce document japonais décrit un procédé qui met en jeu les fleurs, les tiges, les racines, les feuilles et les graines de l'espèce appartenant au genre Achyrocline. Toutefois, l'homme du métier sait que les substances présentant un intérêt pour le bénéfice du présent brevet, à savoir la quercétine et la 3-0-méthylquercétine, sont concentrées dans les inflorescences et ne se trouvent pas en des quantités appropriées dans les autres organes, tels que les feuilles, les tiges et les racines, pour la production d'un extrait séché qui soit concentré en ces substances. Le brevet JP 59044313 décrit une composition antibactérienne qui est utile en tant que cosmétique efficace dans le traitement de l'acné, etc., utilisant de la quercétine en tant que composant actif, et de la rutine et de l'isorhamnétine ou du 3-0-rutinoside en tant que composants essentiels et auxiliaires. L'activité antibactérienne de la composition est élevée à un pH faiblement acide, d'environ 5,0 à 5,5, et la composition est appropriée pour le traitement de l'acné contre Propionibacterium acnes. La concentration en quercétine est de préférence de 0,2 à 0,6 % en poids. De même, la demande de brevet US 2004/0170581 décrit des préparations cosmétiques qui contiennent une quantité efficace d'au moins un ester dérivé de l'acide caféique. L'une des activités attribuées à ces esters se base sur son potentiel anti-inflammatoire. Ce document américain indique en outre les sources pour obtenir l'acide caféique. Le mécanisme anti-inflammatoire des esters d'acide caféique décrits par ce document se base sur leur action inhibitrice de la libération de médiateurs pro-inflammatoires par les mastocytes, les éosinophiles et les basophiles. Le brevet US 7 192 611 décrit un procédé pour traiter l'arthrose, qui comprend l'administration d'une composition à base de flavonoïdes ayant un cycle B non substitué et, éventuellement, d'un véhicule physiologiquement acceptable. Parmi les sources revendiquées comme étant des options pour l'extraction des flavonoïdes susdits, sont citées les espèces du genre Achyrocline. La demande de brevet US 2008/0070875 décrit une composition pour le traitement de l'acné, qui contient un antimicrobien / des molécules d'un ou plusieurs polyphénols anti-inflammatoires, y compris la quercétine et l'acide rosmarinique, en combinaison avec de l'acide salicylique et/ou des sels salicylates dans un véhicule cosmétique. Elle concerne également un procédé pour traiter l'acné par administration topique d'une composition en une quantité efficace du point de vue thérapeutique afin de réduire les rougeurs et taches associées à l'acné. Ce document ne mentionne pas la macela-do-campo en tant que source d'ingrédients actifs à utiliser dans le traitement de l'acné. Par conséquent, ce document américain concerne directement le potentiel anti-inflammatoire (inhibition de COX-2) d'extraits issus des espèces appartenant au genre Achyrocline. La demande de brevet US 2004/0220119 décrit un procédé pour traiter des maladies à médiation par l'action de COX et LOX. Ce procédé se base sur l'application locale d'une composition contenant des flavonoïdes ayant un cycle B non substitué et au moins un flavane. L'une des options revendiquées en tant que source pour l'obtention des flavonoïdes ayant un cycle B non substitué comprend les espèces végétales appartenant au genre Achyrocline. Comme le sait l'homme du métier, les chaînes enzymatiques COX et LOX sont directement liées aux mécanismes inflammatoires. Par conséquent, ce document se réfère au potentiel anti-inflammatoire des extraits d'espèces appartenant au genre Achyrocline. De plus, ces documents américains ne concernent pas directement le domaine cosmétique et, par conséquent, les bases des compositions à usage topique capables de stabiliser les flavonoïdes ayant un cycle B non substitué ne sont pas décrites en détail. A la lecture de la description qui suit de la présente invention, on peut en conclure qu'aucun document de l'état de la technique n'a pour objet un procédé d'extractions alcooliques et/ou hydro-alcooliques multiples des inflorescences d'Achyrocline satureioides (macela-do-campo), avec pour résultat un extrait contenant en même temps de la quercétine et de la 3-0-méthylquercétine à une concentration élevée. En outre, l'extrait de macela-do-campo résultant du procédé de la présente invention a des activités anti-inflammatoires, antioxydantes et antimicrobiennes. Sont également décrites ci-après, des compositions cosmétiques, pharmaceutiques et vétérinaires contenant l'extrait susdit de macela-do-campo, destinées à la prévention et au traitement cosmétique et pharmaceutique de pathologies découlant de processus inflammatoires, d'infections microbiennes et de lésions cellulaires dues à des processus oxydatifs. Objet de l'invention La présente invention a pour objet un procédé d'extraction d'inflorescences d'Achyrocline satureioides (macela-do-campo) ayant pour résultat l'obtention d'un extrait contenant des concentrations élevées de quercétine et de 3-0-méthylquercétine, avec des rendements élevés et utilisant peu d'éthanol. Cette invention a aussi pour objet des compositions cosmétiques, pharmaceutiques et vétérinaires contenant un extrait de macela-do-campo ayant des concentrations élevées de quercétine et de 3-0-méthylquercétine, obtenu par ledit procédé d'extraction d'inflorescences d'Achyrocline satureioides (macela-do-campo). Cette invention a également pour objet l'utilisation et un procédé de mise en oeuvre d'un extrait d'inflorescences d'Achyrocline satureioides dans le traitement de l'acné, afin, entre autres, de nettoyer la peau. Résumé de l'invention L'invention a pour objet un procédé d'obtention d'un extrait séché, normalisé en quercétine et 3-0- méthylquercétine, d'inflorescences d'Achyrocline, comprenant les étapes suivantes, consistant à : A) broyer des inflorescences d'Achyrocline satureioides pour obtenir un matériau de plantes broyées ; B) soumettre les plantes broyées à au moins quatre étapes séquentielles d'extraction hydro-alcoolique à une température de 60°C à 80°C, pendant 3 à 4 heures pour chaque étape, afin d'obtenir 4 extraits hydro- alcooliques intermédiaires ; C) combiner les 4 extraits hydro-alcooliques intermédiaires ; D) concentrer le mélange d'extraits hydro-alcooliques intermédiaires afin d'obtenir jusqu'à un maximum de 20 % de la masse initiale des extraits hydroalcooliques intermédiaires ; E) sécher la matière obtenue en D). La présente invention a aussi pour objet une composition cosmétique et une composition pharmaceutique, comprenant, dans un véhicule physiologiquement acceptable, un extrait d'inflorescences de macela-do-campo obtenu par le procédé d'extraction d'inflorescences d'Achyrocline satureioides décrit ci-dessus. Brève description des figures La Figure 1 illustre un schéma d'un mode de réalisation préféré du procédé d'extraction faisant l'objet de la présente invention ; La Figure 2 illustre le résultat de l'expérimentation sur le profil phytochimique d'extraits obtenus avec le procédé faisant l'objet de la présente invention ; La Figure 3 illustre le résultat de l'expérimentation de chromatographie sur couche mince haute performance réalisée avec trois exemples d'extraits obtenus par le procédé faisant l'objet de la présente invention ; La Figure 4 illustre le résultat du test de phototoxicité en ce qui concerne l'extrait de macela-docampo obtenu par le procédé faisant l'objet de la présente invention ; La Figure 5 illustre le résultat du test de cytotoxicité en ce qui concerne l'extrait de macela-docampo obtenu par le procédé faisant l'objet de la présente invention ; La Figure 6 illustre, à gauche, la séparation des composés de l'extrait d'inflorescences de macela-do-campo avec un système solvant chloroforme/acétate d'éthyle/méthanol/eau (60/32/12/8), révélée avec du NP/PEG. Le côté droit montre les halos d'inhibition formés après 72 heures d'incubation avec P. acnes ATCC 6538 et révélés avec du chlorure de tétrazolium (TTC) ; La Figure 7 illustre le résultat du test d'activité de l'extrait d'inflorescences de macela-do-campo dans un modèle de fibroblastes avec induction au LPS ; La Figure 8 illustre le résultat du test d'activité de l'extrait d'inflorescences de macela-do-campo dans un modèle de fibroblastes avec induction aux UVB ; La Figure 9 illustre le résultat de l'expérimentation sur l'activité anti-inflammatoire de l'extrait d'inflorescences de macela-do-campo dans un modèle de lignage de kératinocytes humains (HaCaT) par l'induction de la production de cytokines par Propioniumbacterium acnes inactivé à la chaleur (80°C, 30 minutes) ; La Figure 10 illustre le résultat du test d'activité antioxydante de l'extrait de macela-do-campo obtenu par le procédé faisant l'objet de la présente invention ; La Figure 11 illustre le résultat du test de Concentration Inhibitrice Minimum (CIM) pour deux lots et le support ; La Figure 12 illustre le résultat du test de Concentration Inhibitrice Minimum (CIM) pour un troisième lot, la quercétine et le support. Description détaillée de l'invention La présente invention décrit un procédé d'extraction pour obtenir un extrait standardisé de quercétine et de 3-0-méthylquercétine à partir d'inflorescences d'Achyrocline satureioides, comprenant les étapes suivantes, consistant à . broyer des inflorescences d'Achyrocline satureioides pour obtenir un matériau de plante broyée ; soumettre ce matériau végétal à au moins quatre étapes séquentielles d'extraction éthanolique ou hydro-alcoolique (de préférence au moins 50 % du solvant étant un alcool), à une température de 60°C à 80°C, pendant 3 à 4 heures pour chaque étape, afin d'obtenir 4 extraits hydro-alcooliques intermédiaires ; combiner les 4 extraits hydro-alcooliques intermédiaires ; concentrer le mélange des extraits hydro-alcooliques intermédiaires jusqu'à un maximum de 20 % de la masse initiale ; sécher la matière résultante. De préférence, les étapes séquentielles d'extraction hydro-alcoolique sont réalisées sous reflux, pendant 12 heures, et comprennent les stades suivants : i) extraction d'un extrait intermédiaire avec une solution hydro-alcoolique 1/30 (p/p de matériau de plante broyée/solution d'extraction) pendant 3 à 4 heures, de préférence pendant au moins 3 heures, à une température de 60 à 80°C, de préférence à 80°C, pour obtenir une première solution extraite ; ii) re-extraction de l'extrait hydro-alcoolique de i), avec une solution hydro-alcoolique dans une proportion de 1/20 (p/p de matière végétale/solution d'extraction) pendant 3 heures à une température de 80°C, pour obtenir ainsi une deuxième solution extraite ; iii) combinaison des première et deuxième solutions extraites, pour obtenir une troisième solution extraite ; iv) extraction d'un lot frais de plante broyée, avec ladite troisième solution extraite, dans la proportion de 1/30 (p/p de plante broyée/solution extraite des stades i) et ii), pendant 3 heures à une température de 80°C ; v) re-extraction de l'extrait hydro-alcoolique du stade iv) avec une solution hydro-alcoolique, dans une proportion de 1/16 (p/p d'extrait hydroalcoolique/solution hydro-alcoolique) pendant 3 heures à 80°C pour obtenir une solution extraite finale. Le procédé d'extraction faisant l'objet de la présente invention est très efficace (rendement allant jusqu'à 64,62 % en ce qui concerne la quercétine conformément au mode de réalisation préféré), avec une consommation réduite de solvant. On a utilisé au total 546,875 litres d'éthanol pour 28,13 kg d'inflorescences de macela-do-campo, ou en d'autres termes 19,44 litres d'éthanol par kg d'inflorescences de macela-do-campo. C'est un procédé propre (sans sous-produits indésirables et sans utilisation de solvants nuisibles pour l'environnement), conduisant à un résultat optimisé par rapport à la technique existante. Il fournit un extrait contenant 3 fois plus de quercétine que celui décrit dans le document PI0103468-5, en utilisant moins d'éthanol, et en contenant aussi de la 0-3-méthyl- quercétine. Il présente une constitution idéale pour une utilisation en tant qu'anti-inflammatoire, antioxydant et antimicrobien, comme cela sera détaillé plus loin. Les proportions préférées d'éthanol et d'eau utilisées dans les étapes d'extraction sont de 1/1 (p/p) d'éthanol/eau ou de 1,25/1 (v/v) d'éthanol/eau, la quantité d'eau pouvant être réduite jusqu'à ce que seul l'éthanol soit utilisé. Conformément au procédé de la présente invention, les composés chimiques quercétine (CAS 117-39-5) et 3-0- méthylquercétine (CAS 1486-70-0) sont conservés et concentrés dans l'extrait résultant final. On ne trouve pas dans la littérature technique de données décrivant la présence de ces deux composés en même temps et en des proportions similaires à celles obtenues par ce procédé, en partant des inflorescences de macelado-campo. Lors de l'évaluation du procédé faisant l'objet de la présente invention, on peut remarquer que l'un des avantages du procédé susdit est son faible coût car les solvants sont facilement disponibles et bien connus. L'équipement est conventionnel et a un impact réduit sur l'environnement du fait de la moindre quantité de résidus organiques éliminés après le procédé. La raison de cela est que l'alcool évaporé peut être réutilisé pour une nouvelle extraction d'inflorescences de macela-do-campo. Dans un mode de réalisation préféré de la présente invention, le procédé pour obtenir l'extrait de macela-docampo comprend les étapes suivantes, consistant à : i) broyer des inflorescences de macela-do-campo dans un broyeur à couteaux pour obtenir l'ingrédient végétal broyé ; ii) mélanger l'ingrédient végétal broyé avec une solution d'extraction hydro-alcoolique en une proportion de 1/1 (p/p), en utilisant comme alcool de l'éthanol à 96°G.L., la proportion initiale étant de 1 partie d'ingrédient végétal pour 30 parties de solution hydro-alcoolique, sur la base des poids des matériaux. Effectuer l'extraction des composés pendant une durée d'au moins 3 heures à une température de 80°C dans un réacteur fermé ; iii) filtrer le mélange obtenu en ii) afin d'obtenir un premier extrait hydro-alcoolique intermédiaire et un premier résidu constitué des composants non extraits de l'ingrédient végétal ; iv) mélanger le premier résidu constitué des composants non extraits de l'ingrédient végétal avec une solution d'extraction hydro-alcoolique fraîche, constituée d'un mélange d'éthanol à 96°G.L. et d'eau en une proportion de 1/1 (p/p). Le poids de solution d'extraction hydro-alcoolique devant être ajouté représente les 2/3 du poids de la première solution d'extraction hydro-alcoolique, avec une durée d'extraction de 3 heures et à une température de 80°C dans un réacteur fermé ; v) filtrer le mélange obtenu en iv) afin d'obtenir un deuxième extrait hydro-alcoolique intermédiaire et un deuxième résidu constitué des composants non extraits de l'ingrédient végétal ; vi) broyer une deuxième quantité d'ingrédient végétal pour obtenir une deuxième quantité d'ingrédient végétal broyé ; vii) mélanger les premier et deuxième extraits hydroalcooliques intermédiaires avec la deuxième quantité d'ingrédient végétal broyé obtenu en vi), en une proportion de 1/30 (p/p d'ingrédient végétal/solution d'extraction hydro-alcoolique) pendant une durée de 3 heures à une température de 80°C (plage : de 60°C à 80°C) dans un réacteur fermé ; viii)filtrer le mélange obtenu en vii) afin d'obtenir un troisième extrait hydro-alcoolique intermédiaire et un troisième résidu constitué des composants non extraits de l'ingrédient végétal ; ix) mélanger le troisième résidu constitué des composants non extraits de l'ingrédient végétal avec une nouvelle solution hydro-alcoolique, constituée d'un mélange d'éthanol à 96°G.L. et d'eau en une proportion de 1/1 (p/p). Le poids de la nouvelle solution d'extraction hydro-alcoolique devant être ajoutée représente 11/20 du poids du troisième extrait hydro-alcoolique intermédiaire, avec une durée d'extraction de 3 heures et une température de 80°C dans un réacteur fermé ; x) filtrer le mélange obtenu en ix) afin d'obtenir un quatrième extrait hydro-alcoolique intermédiaire et un quatrième résidu constitué des composants non extraits de l'ingrédient végétal ; xi) évaporer l'éthanol du mélange obtenu en x) par évaporation assistée par le vide (température de 60°C, vide de 700 mm Hg) jusqu'à ce que la masse corresponde à environ 25 % de la masse du mélange obtenu en x) ; xii) mélanger le concentré de xi) avec un véhicule approprié pour la mise en oeuvre d'un séchage dans un sécheur par pulvérisation, ce véhicule étant de préférence de la maltodextrine en une proportion maximale en poids de 50 % des solides attendus dans le produit une fois sec ; xiii)atomiser la suspension obtenue en xii) dans un sécheur par pulvérisation avec une température d'entrée de 185°C et une température de sortie de °C. Dans l'un des modes de réalisation préférés de la présente invention, l'étape finale de concentration est effectuée dans un concentreur sous vide à une température de 60°C et sous un vide de 600 mm Hg, où l'extrait hydroalcoolique final susdit est concentré environ au quart. Après l'étape de concentration, on ajoute à la solution un polysaccharide en une proportion de 50 % en poids par rapport à l'extrait sec estimé présent dans la solution, celui-ci étant de préférence de la maltodextrine non génétiquement modifiée. D'autres matières que l'on peut également ajouter à ce stade sont le dioxyde de silicium, un amide et la cyclodextrine. On soumet ce mélange à un séchage dans un sécheur par pulvérisation (température d'entrée de 180 à 185°C et température de sortie de 80 à 85°C, sous agitation) afin d'obtenir un extrait séché. A titre d'exemple, l'équipement que l'on peut utiliser dans le procédé faisant l'objet de la présente invention est le suivant : Broyeur : broyeur à marteaux avec des ouvertures de tamis de 5 et 10 mm ; Réacteur : capacité de 750 litres ; Concentreur • • concentreur à évaporation par convection, capacité de production 50 à 200 kg/h, puissance nominale 7,5 kW ; Sécheur par pulvérisation sécheur-atomiseur, écoulement à co-courant avec un disque rotatif, capacité d'évaporation de l'eau 15 à 25 litres/heure. La quantité d'éthanol évaporé dans l'étape finale de concentration sera déterminée par des alcoomètres et réutilisée dans un nouveau procédé d'extraction de macelado-campo. Il est nécessaire d'effectuer au moins 4 étapes d'extraction distinctes et séquentielles afin d'obtenir un 14 extrait de macela-do-campo, comprenant sous forme concentrée les composés auxquels on s'intéresse. Si on utilise une seule étape d'extraction, on ne peut pas obtenir la concentration requise. De plus, le volume de solvant utilisé peut être proportionnellement bien inférieur à celui utilisé dans une seule étape car le solvant peut être réutilisé dans des étapes successives. L'utilisation d'autres solvants ou la mise en oeuvre d'autres procédés pour obtenir l'extrait de macela-do- campo peut avoir pour résultat la perte d'au moins l'un des composants chimiques présentant un intérêt la quercétine et/ou la 3-0-méthylquercétine. Durant le procédé de la présente invention, les solvants utilisés pour l'extraction sont à la base de l'éthanol et de l'eau pour l'extraction, en une proportion de 15,55 kg d'eau et 15,55 kg d'éthanol par kg d'ingrédient végétal devant être soumis au procédé d'extraction. Pour chaque phase d'extraction du procédé selon la présente invention, le mélange peut de préférence être de l'éthanol/eau (1/1 en p/p) jusqu'à de l'éthanol exclusivement. Avec la mise en oeuvre de toutes les étapes susmentionnées, on obtient un extrait de macela-do-campo normalisé en quercétine et 3-0-méthylquercétine, par un procédé d'extraction avec un rendement allant jusqu'à 67,4 % par rapport au poids de quercétine. Les concentrations de quercétine et de 3-0-méthylquercétine vont respectivement jusqu'à 301 % et 262 % par rapport au poids de quercétine (CAS 117-39-5) et de 3-0- méthylquercétine (CAS 1486-70-0) présentes dans les inflorescences. La teneur réelle obtenue par le procédé va jusqu'à 3,01 % pour la quercétine et jusqu'à 2,62 % pour la 3-0-méthylquercétine. L'extrait séché a été obtenu à partir d'un ingrédient végétal ayant une teneur de 1,00 % de quercétine sur une base sèche. La Figure 1 illustre un schéma d'un exemple d'un mode de réalisation préféré du procédé d'extraction faisant l'objet de la présente invention. L'extrait séché d'inflorescences d'Achyrocline satureioides (macela-do-campo) résultant du procédé selon la présente invention est constitué fondamentalement de concentrations élevées des flavonoïdes quercétine et 3-0-méthylquercétine. Cet extrait séché normalisé présente des activités anti-inflammatoires, antioxydantes et antimicrobiennes. Les facteurs devant être contrôlés dans ce procédé sont en particulier les suivants : la proportion de la composition du mélange d'extraction hydro-alcoolique devrait être d'une partie en poids d'éthanol pour une partie en poids d'eau ; la température utilisée dans les étapes d'extraction devrait être de 60°C à 80°C ; la durée d'extraction devrait être de 3 heures à 4 heures ; la température du séchage, lorsqu'il est effectué dans un sécheur par pulvérisation, devrait être comprise de 180° à 185°C à l'entrée du matériau et de 80°C à 85°C en ce qui concerne la température de sortie du matériau ; la séquence des étapes d'extraction et la quantité introduite dans l'équipement lors de ces étapes devraient être respectées. Les avantages résultant de l'emploi du procédé selon la présente invention sont les suivants : le procédé d'obtention d'un extrait de macela-docampo est très efficace rendement de 60 % par rapport au poids de quercétine (CAS 117-39-5) ; les solvants utilisés dans les étapes d'extraction sont peu coûteux et réutilisables. En outre, l'éthanol est une source naturellement renouvelable. C'est un procédé propre avec un résultat optimisé ; l'extrait contient de la quercétine (CAS 117-39-5) et de la 3-0-méthylquercétine (CAS 1486-70-0) à des concentrations élevées. Ces deux composés chimiques ne sont pas trouvés à de telles concentrations dans des extraits obtenus par extraction en une seule étape. De même, le procédé à une seule étape donne une concentration de quercétine trois fois inférieure à celle obtenue avec le procédé de la présente invention l'extrait obtenu a diverses activités et, par conséquent, peut être utilisé pour des produits anti-inflammatoires, anti-acnéiques, antimicrobiens et antioxydants, pour le traitement d'un dysfonctionnement de l'érection et pour le traitement pharmacologique de l'asthme bronchique ; l'extrait peut remplacer partiellement ou totalement un complexe antioxydant parce qu'il fonctionne comme un antioxydant dans la formulation ; l'utilisation de l'extrait augmente la teneur en matières végétales de formulations cosmétiques ; l'extrait obtenu est considéré comme un produit naturel et d'origine végétale ; l'obtention de l'extrait susdit a un bon rapport coût/avantage pour les classes de produits pharmaceutiques, cosmétiques et vétérinaires auxquelles il est destiné ; l'extrait n'affecte pas la couleur, l'odeur et l'aspect du produit. Exemple du procédé de préparation de l'extrait de macela-do-campo L'exemple qui suit représente un mode de réalisation préféré du procédé de préparation de l'extrait de macela- do-campo de la présente invention, et ne doit pas être interprété comme une limitation de l'invention susdite. Dans ce contexte, il faut comprendre que la présente invention peut être réalisée sous d'autres modes de réalisation, y compris tous les équivalents possibles. i) Broyer les inflorescences de macela-do-campo dans un broyeur à lames afin d'obtenir l'ingrédient végétal broyé ; ii) Mélanger l'ingrédient végétal broyé avec une solution d'extraction hydro-alcoolique en une proportion de 1/1 (p/p), en utilisant comme alcool de l'éthanol à 96°G.L., la proportion initiale étant de 1 partie en poids d'ingrédient végétal pour 30 parties en poids de solution hydro-alcoolique. Effectuer l'extraction des composés pendant une durée de 4 heures à une température de 80°C dans un réacteur fermé ; iii) Filtrer le mélange obtenu en ii) sur un filtre ayant une spécification de porosité de 60 mesh, afin d'obtenir un premier extrait hydro-alcoolique intermédiaire et un premier résidu constitué des composants non extraits de l'ingrédient végétal ; iv) Mélanger le premier résidu constitué des composants non extraits de l'ingrédient végétal avec une solution d'extraction hydro-alcoolique fraîche, constituée d'un mélange d'éthanol à 96°G.L. et d'eau en une proportion de 1/1 (p/p). Le poids de solution d'extraction hydro-alcoolique devant être ajoutée devrait représenter au maximum les 2/3 du poids de la première solution d'extraction hydro-alcoolique, avec une durée d'extraction de 4 heures et une température de 80°C dans un réacteur fermé ; v) Filtrer le mélange obtenu en iv) sur un filtre ayant une spécification de porosité de 60 mesh, afin d'obtenir un deuxième extrait hydro-alcoolique intermédiaire et un deuxième résidu constitué des composants non extraits de l'ingrédient végétal ; vi) Broyer une deuxième quantité d'ingrédient végétal dans un broyeur à couteaux pour obtenir une deuxième quantité d'ingrédient végétal broyé ; vii) Mélanger les premier et deuxième extraits hydroalcooliques intermédiaires avec la deuxième quantité d'ingrédient végétal broyé obtenu en vi), en une proportion de 1/30 (p/p d'ingrédient végétal/solution d'extraction hydro-alcoolique), pendant une période de 4 heures à une température de 80°C dans un réacteur fermé ; viii)Filtrer le mélange obtenu en vii) sur un filtre ayant une spécification de porosité de 60 mesh afin d'obtenir un troisième extrait hydro-alcoolique intermédiaire et un troisième résidu constitué des composants non extraits de l'ingrédient végétal ; ix) Mélanger le troisième résidu constitué des composants non extraits de l'ingrédient végétal avec une solution hydro-alcoolique fraîche, constituée d'un mélange d'éthanol à 96°G.L. et d'eau en une proportion de 1/1 (p/p). Le poids de la nouvelle solution d'extraction hydro-alcoolique devant être ajoutée représente 11/20 du poids du troisième extrait hydro-alcoolique intermédiaire, avec une durée d'extraction de 4 heures et une température de 80°C dans un réacteur fermé ; x) Filtrer le mélange obtenu en ix) sur un filtre ayant une spécification de porosité de 60 mesh afin d'obtenir un quatrième extrait hydro-alcoolique intermédiaire et un quatrième résidu constitué des composants non extraits de l'ingrédient végétal ; xi) Evaporer l'éthanol du mélange obtenu en x) par évaporation assistée par le vide (température de 40 à 60°C, vide de 600 à 700 mm Hg) jusqu'à ce que le poids corresponde à environ 25 % du poids du mélange obtenu en x) ; xii) Mélanger le concentré obtenu en xi) avec un véhicule (support) approprié pour réaliser un séchage dans un sécheur par pulvérisation, ce véhicule étant la maltodextrine (ou éventuellement le dioxyde de silicium, un amide ou la cyclodextrine) en une proportion maximale en poids de 50 % des solides attendus dans le produit une fois sec ; xiii)Atomiser la suspension obtenue en xii) dans un sécheur par pulvérisation avec une température d'entrée de 180 à 185°C et une température de sortie de 80 à 85°C. Expérimentations et Tests 1. Expérimentation par chromatographie liquide haute performance (CLHP) Le résultat de l'expérimentation sur le profil phytochimique comparatif, par CLHP, sur les trois lots obtenus par le procédé d'extraction décrit dans l'exemple ci-dessus est illustré sur la Figure 2 annexée. Le Tableau 1 ci-dessous présente les teneurs en quercétine et 3-0-méthylquercétine présentes dans les lots susdits d'extrait d'inflorescences de macela-do-campo. Tableau 1 Echantillon Composé Teneur Ecart Coefficient moyenne Type de variation Quercétine 2,95 % 0,01 % 0,21 % Lot 1 3-0- 2, 62 % 0, 01 % 0, 47 % méthylquercétine Quercétine 2,60 % 0,01 % 0,21 % Lot 2 3-0- 2,30 % 0,01 % 0,42 % méthylquercétine Quercétine 3,01 % 0,02 % 0,72 % Lot 3 3-0- 2, 60 % 0, 01 % 0, 44 % méthylquercétine On a déterminé la teneur moyenne par le procédé analytique quantitatif de chromatographie liquide haute performance (CLHP) sur des échantillons en triple, avec deux injections consécutives dans chaque aliquote. L'analyse des teneurs en quercétine (CAS 117-39-5) et 3-0-méthylquercétine (CAS 1486-70-0) a été utilisée pour vérifier la reproductibilité du procédé de fabrication des trois lots. En résumé, des aliquotes ont été prélevés sur les 3 lots, avec une moyenne située entre 2,6 % et 3,0 % de quercétine et entre 2,3 % et 2,6 % de 3-0-méthylquercétine. Les échantillons ont été dilués dans du méthanol et soumis à une analyse par CLHP. Les caractéristiques du système chromatographique sont les suivantes . Colonne : Merck Lichrospher 100RP18e (4,6 x 250 mm . 5 }gym) Système : isocratique Phase mobile : acide phosphorique 0,5 % / méthanol (1/1 v/v) Température : 25°C Débit : 0,6 ml/min Longueur d'onde : 370 nm Volume d'injection : 20 µl Temps de passage : 55 minutes Etalon : quercétine dihydratée (CAS 117-39-5) Note : la concentration de 3-0-méthylquercétine (CAS 1486-70-0) a été déterminée en tant que quercétine (CAS 117-39-5) parce qu'elles ont le même groupe chromophore. II. Expérimentation par chromatographie sur couche mince haute performance (CCM-HP) La Figure 3 illustre l'évaluation phytochimique par CCM-HP que l'on a effectuée pour identifier les autres composés non observés par CLHP. L'expérimentation démontre que l'extraction d'autres composés est également reproductible sur les trois lots. Ont été identifiés d'autres composés chimiques, à savoir l'apigénine et l'acide chlorogénique. Un criblage utilisant des techniques de chromatographie sur couche mince a permis de comparer les temps de rétention d'étalons de référence et les colorations obtenues après formation de dérivés avec des réactifs spécifiques. Pour l'évaluation des substances identifiées, les plaques chromatographiques ont été soumises à la formation de dérivés avec le réactif NP/PEG et on les a évaluées sous une lumière UV à 365 nm. Le réactif NP/PEG est constitué d'un mélange 1/1 d'une solution éthanolique à 5 % de polyéthylèneglycol 4000 et d'une solution méthanolique à 1 % de diphénylborate d'aminoéthanol. III. Tests de cytotoxicité et de phototoxicité On a évalué la phototoxicité et la cytotoxicité sur l'un des lots de l'extrait de macela-do-campo produit conformément au procédé de l'exemple ci-dessus. On a effectué l'étude de phototoxicité dans le but d'évaluer le potentiel phototoxique sur des fibroblastes de la souche permanente 3T3 en présence et en l'absence de lumière UVA. On a effectué l'étude de cytotoxicité dans le but d'évaluer le potentiel cytotoxique d'une substance au moyen d'une méthodologie in vitro qui évalue le potentiel de cytotoxicité de la substance testée, sur des fibroblastes de la souche permanente 3T3 à différentes concentrations. La Figure 4 annexée illustre le résultat du test de phototoxicité concernant l'extrait de macela-do-campo. La Figure 5 annexée illustre le résultat du test de cytotoxicité concernant l'extrait de macela-do-campo. En résultat, on en conclut que l'extrait de macela- do-campo obtenu par le procédé selon la présente invention ne présente de potentiel phototoxique à aucune des concentrations testées, et que le potentiel cytotoxique est faible, avec une CI50 de 0,5 mg/ml. Par conséquent, l'extrait séché de macela-do-campo susdit peut être indiqué pour un usage topique chez les êtres humains. IV. Halo d'inhibition dans une culture de Propionibacterium acnes On a effectué cette expérimentation afin de déterminer le potentiel bactériostatique de l'extrait d'inflorescences de macela-do-campo résultant du procédé selon la présente invention, ou plutôt la capacité qu'a l'extrait d'inhiber le développement de colonies de Propionibacterium acnes. Pour ces tests, on a mis en oeuvre 0,5 % de l'extrait séché d'inflorescences de macela-do-campo dans une formulation cosmétique de base (base A). On a comparé les mesures des halos d'inhibition de l'extrait séché de macela-do-campo mis en oeuvre dans une formulation cosmétique de base avec celles du produit pharmaceutique disponible sur le marché BENZAC AC®, produit par Galderma, qui contient 5% de peroxyde de benzoyle à titre d'ingrédient actif. Le Tableau 2 montre les résultats obtenus dans le 25 test. Tableau 2 Formulations testées Halo mesuré Base A - Pas d'extrait Absent Base A - 0,10 % d'extrait Absent Base A - 0,25 % d'extrait Absent Base A - 0,50 % d'extrait 10,0 mm Base A - 1,50 % d'extrait 15,0 mm BENZAC AC® 5,0 % 10,0 mm Sur la base des résultats indiqués ci-dessus, on peut observer que la composition cosmétique de base contenant 0,5 % d'extrait de macela-do-campo présente les mêmes résultats que le produit de référence BENZAC AC®, alors qu'elle a une concentration d'ingrédient actif antimicrobien 10 fois inférieure dans sa formulation. Il est également démontré que la base cosmétique pour la mise en oeuvre de l'extrait ne présente aucune capacité d'inhibition de Propionibacterium acnes. V. Concentration inhibitrice minimale (CIM) Des tests ont été réalisés pour évaluer les concentrations inhibitrices minimum sur Propionibacterium acnes, de trois lots de l'extrait séché d'inflorescences de macela-do-campo, produit selon le procédé de la présente invention. La procédure utilisée pour ce test est la suivante : Préparation de l'inoculum : le micro-organisme à utiliser dans le test est répliqué dans un récipient en verre contenant 10 ml de bouillon de culture stérilisé (TSB) ; - le récipient est incubé à 35°C +/- 2°C pendant 24 heures ; - la procédure ci-dessus est répétée pendant deux jours consécutifs ; - 100 microlitres du bouillon TSB sont distribués sur une microplaque à l'exception de la colonne 1 ; la colonne 1 est inoculée avec 200 microlitres de l'échantillon à tester, préalablement préparé et solubilisé ; - des dilutions sont effectuées en transférant 100 microlitres de la colonne 1 à la colonne 2 et 100 microlitres de la colonne 2 à la colonne 3 et ainsi successivement jusqu'à la colonne 10. Les colonnes 11 et 12 sont réservées respectivement pour les témoins de l'inoculum et du milieu TSB ; les dilutions une fois réalisées, 20 microlitres de chaque micro-organisme à tester sont inoculés dans tous les puits de la microplaque à l'exception de la colonne 12 (témoin du milieu de culture) ; - les microplaques inoculées sont incubées avec les bactéries à 35°C +/- 2°C pendant 48 heures et les microplaques inoculées avec des levures et des moisissures sont incubées à 25°C +/- 2°C pendant 72 heures. La plaque sur laquelle a été inoculé Propionibacterium acnes a été incubée, dans des conditions anaérobies à 35°C +/- 2°C pendant 96 heures ; - après la période d'incubation, on effectue la lecture en observant le trouble des puits ; - les échantillons sont pesés et dilués dans le véhicule éthanol 96°G.L./eau distillée (1/1) selon les poids et volumes ci-dessous . Echantillon quercétine BDP 009960 BDB 009960 BDP 009960 Eau MM2-7016 P1001 P1002 P1003 Teneur en 100,0 2,95 2,60 3,01 quercétine Poids de 29,1 1005,9 1122,2 990,9 l'échantillon (mg) Dilution 100,0 100,0 100,0 100,0 initiale (ml) La dilution a été aidée par application de micro-ondes pendant 30 minutes. Après dilution, les échantillons sont filtrés par gravité sur un papier qualité filtre. Les dilutions ont été calculées pour que les lots de l'échantillon BDP 009960 contiennent la même concentration de quercétine entre eux et par rapport à la concentration de la quercétine pure diluée. Les concentrations préparées n'ont pas permis de 25 déterminer la CIM, mais les résultats montrent que pour chaque lot, dénommé PI001, PI002 et PI003, les CIM sont inférieures à 0,020, 0,022 et 0,019 mg/ml, respectivement, comme cela est montré sur les Figures 11 et 12 annexées et dans les tableaux ci-dessous : Tableau 3 : 1 2 2 4 5 6 à 3 fia 11 12 ~â l5`,.,. ' ;LM. ' 5l5' 1,25/ ' ' 122t 2314. D15-7, `.37$ 523 ` 22Ss lt 'r,Ll TSB 7' 5 1484' .5742' 5,537 2'13;' 5,5583' : 348" V,3 ' `,2y32r 8;..512 B 1-5, 5 ;LM. 515;' 1,25/ ù25 2 314, D.157, R 273: 5235 2 22Ss 1 765 ...2587 5.1484' 5,57 42' 5,537 1 5,5185' 5 2582 4$ 5,223' 8,5512 ' 0,81,e.:1r, ;. 512' 15255 5.555, 515. 1.257., 5525 '3'14 1571 ^ 275' 5:525; 0,82G' trs?r} TSP. ...2587' ti.1454' 15.5 42' û .2371' u 01:35' 50223' *2.245 ..22;21' ,, 512' ,855e 8,5512 ' D 11.22'2 5.51 k., 2.508. 1...553,. 5 7 .1; 5351; :,178' 5,538' 5,54-4.,, 1,222' k u'3 s ,5, 2.2513' ,..1453' r 2e 3,5385 ' u 21:31' X81' 54e ..1;.12:1' 0 ,2071 1 ` 3 5'^.35 E 11.22'.3., 5.b11.' 5.538, 1402' 51: 2.;351: u. ..24e' 0311 53138855 i 5 233 .5;B 5281x' ^ '1455' 87 22' 0,C355 ' 0,2155,2' 0, 05'1 lt222.5 ,322 F 11.3.l 81.' 5.&12 1.4 _. ,_ 51:: ,351:: 0,17 ' 5,03x? u 0 4:? 5222 3n.:;uL3:} 'T:-:5B ;23i 5;145 ~f' . ,iv. Vif' ud ~::9~,' v.31it;~' u:5û5'1' u. ..:,4t3' lr.~~ tv 5.531 ' .,;ûû~•.. lve:D â`=1îL ..:. _ .' l~3 '. lo ae8ulr 4:e :.:c: ve~..,Ï ye 52118 i' 3CL13 Notes . Les concentrations sont indiquées en mg/ml d'échantillon ; (*) = concentration calculée en tant que quercétine 10 présente dans l'échantillon TSB = milieu de culture «Veiculo» = véhicule «1110C-U10» = inoculum 15 Tableau 4 : 1 2. 3 4 5 7 E 2 111. Il 1c û.. 4. @55 2.4 1:;222 0..5Î: 5310 5.lF5 07. "22. 512 ,kt 22 2.1'42Y 4 274e ` 2:F3 J vl:2 2':0222' 2 47 O,MZ3 5.12 s` ,22 ::U~ 1c. T.~ ^ 2, 2$ 4,555 2.477 1,233 0, 511$ 8 115 5".1 ç5 5577 ~ ~5,.08.g 3 2\.1'1 415 ]~ ['::L: 2-? '.1-72'1' k1.., a~ 558 .".311138 533' 5. ,'1,,47` .55523' )J..,.3 `' '.1.4o 2.`22 4.2`55 :2247? 1.232 2.81 ;318 2.1b5 37 1L224 .51,~ :.^ S:j1.o 7.' 52•)83.. ,14.g1' a.u7481 0.01:$x 2,X43' û.: x4? 2202 55512' 5,5'236 _3=t D 5.2`315 5.1455 5,5:23 ;.;@2â4 5,51:82 2.2,:21 2215 52222 11 5,555 T SE: 2,221 , 1455 5,5728 55354 ,51:22 231 5.5545 52132x? 5,5511 .220 F 5,2212 5455. ..8725 0,5384 5,513_ 52221 55.3145 55323 5,1'11 5.5558. r& 8.' T v t x512 ve c,12@ a1a ~,_: u r :u]v % e+al va t:1 r :: M: . , ieict..1b T5ti li ÿuti ::155 .4 .i â;: 'j 1 L:1SS }~g; i; 7~\Y Ci Y i711 NgxA 3 •7';~k7, : ~L ^ Tî Notes . Les concentrations sont indiquées en mg/ml 20 d'échantillon ; (*) = concentration calculée en tant que quercétine5 présente dans l'échantillon TSB = milieu de culture «Veiculo» = véhicule «inoculo» = inoculum La valeur de CIM trouvée pour la quercétine standard d'une pureté de 100 % est de 0,0364 mg/ml. Etant donné que la dilution maximum de l'extrait de macela-do-campo testé pour les trois lots est d'environ 0,002 mg/ml et sachant que la MIC pour cet extrait est dans une plage de valeur inférieure à celle-ci, il peut être conclu que la puissance de cet extrait en ce qui concerne son activité d'inhibition de la croissance de Propionibacterium acnes est au moins du même ordre de grandeur que celle de la quercétine elle-même dans un état de pureté maximum. En outre, considérant la concentration en quercétine des lots PI001, PI002 et PI003, à savoir 2, 95, 2,60 et 3,01 %, il est à noter que la concentration de quercétine présente dans la dilution maximale de l'extrait de macela-do-campo des trois lots qui ont encore une activité d'inhibition de la croissance de Propionibacterium acnes est d'environ 0,0006 mg/ml, c'est-à-dire une concentration approximativement 60 fois plus faible que la CIM de la quercétine. Ainsi, bien qu'il n'ait pas été possible d'atteindre la dilution maximale desdits extraits de macela-do-campo pour déterminer la CIM, il est clair que l'activité d'inhibition de la croissance de Propionibacterium acnes in vitro ne peut pas seulement être attribuée à la présence de quercétine dans cet extrait obtenu selon le procédé de la présente invention. D'autres produits chimiques, tels que la 3-0-méthylquercétine contribuent à l'effet global de l'extrait pour autant que son activité soit concernée. 2735 VI. Bio-autographie de Propionibacterium acnes On a effectué des expérimentations bio-autographiques pour déterminer les classes des composés présents dans l'extrait d'inflorescences d'Achyrocline satureioides, responsables de l'activité antibactérienne contre Propionibacterium acnes. La bio-autographie consiste en une séparation chromatographique des composés par CCM-HP et l'inoculation subséquente de la culture sur la plaque chromatographique. La Figure 6 annexée illustre, sur sa gauche, la séparation des composés de l'extrait d'inflorescences de macela-do-campo avec le système solvant chloroforme/acétate d'éthyle/méthanol/eau (60/32/12/8) et leur révélation avec du NP/PEG. Le côté droit de cette figure présente les halos d'inhibition formés après 72 heures d'incubation avec P. acnes ATCC 6538 et révélés avec du chlorure de tétrazolium (TTC). Les résultats obtenus dans l'expérimentation de bioautographie démontrent que les flavonoïdes quercétine et 3-0-méthylquercétine sont les principaux ingrédients responsables de l'activité antimicrobienne. VII. Activité anti-inflammatoire sur un modèle de fibroblastes dans un modèle d'inflammation induite par le LPS (lipopolysaccharide de membrane de bactérie Gram négative) et par irradiation aux UVB On a évalué le potentiel anti-inflammatoire de l'extrait séché d'inflorescences de macela-do-campo par dosage de cytokines pro-inflammatoires, en utilisant une culture de fibroblastes cutanés humains. On a utilisé le lipopolysaccharide de membrane de bactérie Gram négative (LPS) ou une irradiation aux UVB pour induire la stimulation pour la production des cytokines IL-6, IL-8 et de la prostaglandine PGE-2 dans des fibroblastes humains en culture avec différentes concentrations de l'extrait. La Figure 7 illustre le résultat du test d'activité de l'extrait d'inflorescences de macela-do-campo dans un modèle de fibroblastes avec induction au LPS. La Figure 8 illustre le résultat du test d'activité de l'extrait d'inflorescences de macela-do-campo dans un modèle de fibroblastes avec induction aux UVB. On en conclut que, dans le modèle de stimulation au LPS, l'extrait provoque une réduction significative de la sécrétion de PGE-2 à des concentrations comprises entre 0,003 mg/ml et 0,03 mg/ml. Dans le modèle de stimulation aux UVB, on observe une réduction significative de la sécrétion d'IL-6 et d'IL-8 à une concentration de 0,03 mg/ml, et une inhibition de PGE-2 à des concentrations comprises entre 0,001 mg/ml et 0,03 mg/ml. En accord avec les données analysées, l'extrait de macelado-campo présente une activité anti-inflammatoire sur les fibroblastes de la peau (derme) humaine in vitro. VIII.Activité anti-inflammatoire dans un modèle in vitro de culture de kératinocytes humains On a évalué le potentiel anti-inflammatoire de l'extrait séché d'inflorescences de macela-do-campo par dosage de cytokines pro-inflammatoires, en utilisant une culture de kératinocytes de la lignée HaCat. On a utilisé Propioniumbacterium acnes inactivé pour induire la production d'IL-8 dans des kératinocytes de la lignée HaCat en culture avec différentes concentrations de l'extrait, que l'on obtient couramment par exemple avec du LPS (lipopolysaccharide de membrane de bactérie Gram négative). La Figure 9 annexée illustre le résultat de l'expérimentation sur l'activité anti-inflammatoire de l'extrait d'inflorescences de macela-do-campo dans un modèle de lignée de kératinocytes humains (HaCat) avec induction par Propioniumbacterium acnes. On en conclut que, dans le modèle de stimulation par P. acnes, l'extrait d'inflorescences de macela-do-campo obtenu par le procédé selon la présente invention réalise une réduction de plus de 30 % de la sécrétion d'IL-8 à des concentrations comprises entre 0,003 mg/ml et 0,03 mg/ml. En accord avec les données analysées, l'extrait de macela- do-campo présente une activité anti-inflammatoire potentielle sur les kératinocytes humains de la lignée HaCat in vitro. IX. Test d'activité antioxydante On a effectué des tests de l'activité antioxydante sur le DPPH de l'extrait séché de macela-do-campo obtenu au moyen d'un sécheur par pulvérisation. Les tests indiquent que la CI50 de l'activité antioxydante a été obtenue avec une concentration d'extrait séché de macelado-campo de 0,02 mg/ml. A titre d'étalon pour le test susdit, on a utilisé le Trolox (un dérivé de vitamine E, vendu par Hoffman LaRoche) pour lequel la CI50 de l'activité antioxydante est obtenue à 0,005 mg/ml. Par conséquent, on peut en conclure que l'extrait séché de macela-do-campo a une efficacité antioxydante extrêmement élevée, qui n'est que 4 fois inférieure à celle du Trolox. La Figure 10 illustre le résultat du test d'activité antioxydante de l'extrait de macela-do-campo obtenu par le procédé selon la présente invention. Composition cosmétique et/ou pharmaceutique comprenant l'extrait de macela-do-campo La composition cosmétique et/ou pharmaceutique faisant l'objet de la présente invention contient un véhicule physiologiquement acceptable et de 0,1 % à 5,0 % en poids, de préférence de 0,1 % à 0,5 % en poids, par rapport au poids total de la composition, d'extrait d'inflorescences de macela-do-campo obtenu par le procédé d'extraction d'inflorescences d'Achyrocline satureioides selon la présente invention. Une composition cosmétique, pharmaceutique ou vétérinaire faisant l'objet de la présente invention, comprenant un extrait d'Achyrocline satureioides obtenu par le procédé de la présente invention est la seule qui présente une activité antioxydante, anti-inflammatoire et antimicrobienne due aux quantités élevées de quercétine et de 3-0-méthylquercétine. Du fait de la présence, dans la composition, de l'extrait de macela-do-campo obtenu par le procédé selon la présente invention - contenant des concentrations élevées de quercétine et de 3-0-méthylquercétine -, la composition cosmétique et/ou pharmaceutique de la présente invention possède une activité anti-inflammatoire, antioxydante et antimicrobienne. La composition cosmétique et/ou pharmaceutique peut être utilisée pour prévenir et traiter l'acné, spécifiquement du fait de ses activités anti-inflammatoire et antimicrobienne contre Propionibacterium acnes et de son activité antioxydante. Parmi les exemples de dommages dus à des réactions inflammatoires, microbiennes et oxydatives, on peut citer : les rides, les signes de photo-vieillissement cutané, la cellulite, l'acné, la dyschromie cutanée et la dermatite topique, l'hypersensibilité de la peau (derme), entre autres. Egalement, comme elle présente de fortes concentrations de ces composés chimiques, cette composition peut aussi être utilisée dans le cadre d'un dysfonctionnement de l'érection et pour le traitement pharmacologique de l'asthme bronchique(référence est faite aux articles scientifiques décrits dans ce qui suit). Un extrait éthanolique d'inflorescences d'Achyrocline satureioides présente une activité de relaxation des muscles lisses du corps caverneux de cochon d'Inde. Cette activité est due principalement aux molécules quercétine et 3-0-méthylquercétine présentes dans l'extrait à raison respectivement de 0,02 % (p/p) et de 0,07 % (p/p). Ces composés, sous forme isolée, présentent la même activité relaxante (Hnatyszyn et al., 2004). Le mécanisme d'action de cette activité conférée par la 3-0-méthylquercétine et supposément aussi par la quercétine réside dans l'inhibition de l'enzyme phosphodiestérase par l'augmentation subséquente des médiateurs cAMP et cGMP, avec une réduction de la concentration de Ca intracellulaire (Ko, et al. 2001). Dans une autre étude, il a été prouvé que la quercétine est un puissant inhibiteur de PDE 5A, avec une CI50 de 1,9 pM, tandis que la 3-0-méthylquercétine est moins sélective vis-à-vis de cette enzyme, avec une CI50 de 86,9 pM (Lines & Ono, 2006). L'inhibition de PDE 5A représente le même mécanisme que celui par lequel le sildénafil facilite la vasodilatation, en facilitant ainsi l'érection chez les humains présentant un dysfonctionnement de l'érection. On peut en conclure que la quercétine et la 3-0-méthylquercétine contenues dans l'extrait d'Achyrocline satureioides font partie des molécules responsables de l'activité de relaxation des muscles lisses du corps caverneux chez le cochon d'Inde et cela pourrait justifier une utilisation de l'extrait normalisé d'Achyrocline satureioides objet dans la présente invention sous la forme d'un médicament pour le traitement pharmacologique du dysfonctionnement de l'érection chez les humains. Dans un modèle expérimental in vitro de l'activité de relaxation musculaire sur la trachée de cochon d'Inde, il a été montré que la 3-0-méthylquercétine est capable de provoquer la relaxation du muscle lisse des trachées qui ont été pré-contractées avec de l'histamine, du carbachol, du KC1 et de la forskoline, par un mécanisme d'inhibition enzymatique compétitive de la phosphodiestérase. Cette inhibition a pour résultat la réduction d'AMPc et de GMPc, avec une réduction subséquente du Ca+ intracellulaire, avec pour effet une relaxation musculaire (Ko et al., 2002). Dans une autre étude, il a été démontré que la 3-0- méthylquercétine est un inhibiteur double des phosphodiestérases 3 et 4 (PDE3/4), en étant davantage sélective pour PDE3 que pour PDE4, avec des CI50 respectives de 1,6 pM et 28,5 pM (Chiu & Chang, 1998 et Ko et al., 2007). Les inhibiteurs doubles de PDE 3/4 sont plus efficaces pour maîtriser l'asthme que les inhibiteurs simples de PDE4. Ces résultats indiquent que l'extrait normalisé, obtenu selon la présente invention, peut être indiqué pour une utilisation dans des produits pharmaceutiques et vétérinaires destinés au traitement pharmacologique de l'asthme bronchique et d'autres pathologies mettant en jeu une hypersensibilité bronchique. Les exemples les plus pertinents de produits que l'on peut préparer à partir de l'extrait de macela-do-campo de la présente invention ou à partir des compositions cosmétiques et pharmaceutiques comprenant l'extrait susdit sont les suivants . • un lait hydratant pour le corps ; • un lait hydratant pour le visage ; • une lotion hydratante pour le corps ; • une lotion hydratante pour le visage ; • des gels ; • des produits pour le cuir chevelu ; • des protecteurs ou écrans solaires pour adultes ou enfants, destinés ou non à un usage concomitant avec une pratique sportive ; • des produits hydratants pour le corps ou le visage ; • des produits anti-imperfections (soin de la peau) pour le corps ou le visage ; • des produits raffermissants pour le corps ou le visage ; • des produits auto-bronzants ; • des insectifuges ; • des produits hydratants éclaircissants pour la peau du corps ou du visage ; • des préparations pharmaceutiques destinées à une application topique ; • des préparations cosmétiques pour le corps ou le visage à usage pédiatrique ; • des préparations cosmétiques à action localisée, spécifiquement pour la région péri-oculaire, le contour des lèvres, les lèvres, à effet antiimperfections et anticernes sous les yeux, entre autres ; • des produits anti-acné ; • des produits pour éclaircir la peau ; • des compositions pharmaceutiques pour le traitement de dermatoses spécifiques ; • des bases de rouge à lèvres et de cire ; • des bases de fard à joues et de pigmentation ; • des poudres pour le visage ; • tout produit de maquillage pour la zone des yeux ; • des produits anticellulite ; • des produits pour peau sensible ; • des toniques ; • des dentifrices ; • des bains de bouche. Composants de la composition Extrait de macela-do-campo L'extrait de macela-do-campo est obtenu par un procédé d'extraction d'inflorescences d'Achyrocline satureioides selon le procédé de la présente invention décrit ici. Véhicule L'eau est la base de plusieurs modes de réalisation préférés de la composition cosmétique de la présente invention, en agissant comme véhicule pour les autres composants. Les compositions de la présente invention comprennent de l'eau, de préférence déminéralisée ou distillée, en un pourcentage approprié (q.s.) pour compléter à 100 % la formulation sur la base du poids total de la présente composition. Naturellement, d'autres véhicules acceptables en cosmétique peuvent être utilisés dans la présente invention. Composants facultatifs On va ci-après lister quelques exemples d'adjuvants cosmétiques compatibles avec les propriétés de la composition décrite ici -donnés de manière non restrictive, mais uniquement à des fins d'illustration- et qui de plus peuvent être employés dans la présente composition cosmétique et/ou pharmaceutique destinée à prévenir et traiter des dommages dus à des réactions inflammatoires, microbiennes et oxydatives/lipoperoxydatives : Agents antioxydants : BHT, tocophérol et/ou ses dérivés, catéchols, tanins et/ou leurs dérivés, composés phénoliques et hydroquinone, entre autres ; - Agents conservateurs méthylparabens, propylparabens, isothiazolinones, phénoxyéthanol ; - Agents filmogènes gomme de gélose, gomme de carraghénane, alginates, gomme arabique, gélatine ; - Agents formant pour un réseau microcristallin de support : dextranes, acrylates de méthyle, PHB, PHA ; - Agents polymères et/ou agents copolymères . copolymères de silicone, polymères de siloxane et/ou de silicone modifiée, copolymères d'acrylate ; - Agents dénaturants : benzoate de dénatonium ; - Agents de consistance cires végétales, hydrocarbonates minéraux, paraffine, cire d'abeille, cire blanche, spermacéti, beurre de cacao, beurre de karité, cire de canne à sucre ; - Emollients : paraffine liquide, huile de palme, beurre de cupuaçu (Theobrama grandiflorum), lécithine, acides aminés du lait, protéine de blé, protéines végétales, phospholipides, huiles végétales, céramides, céramide de passiflore, sphingolipides, spermacéti, lanoline, huile d'amande, carbonate de dicapryle, élastomères de silicone, cyclométhicone ; - Agents humectants et/ou agents hydratants glycérine, propylèneglycol, acide hyaluronique, urée, PCA ; Agents conditionnants sels d'ammonium quaternaires, silicones, siloxanes ; et - Agents actifs. La présente composition cosmétique et/ou pharmaceutique présente d'autres caractéristiques physico- chimiques qui sont appropriées et sans danger pour l'utilisateur du produit final. 1. Elle est stable sur une période d'au moins deux ans ; 2. Elle présente une texture convenable durant l'application, elle ne colle pas et n'est pas huileuse ; 3. Elle s'étale aisément ; 4. Elle ne rend pas la peau grasse après application ; 5. Elle n'est pas comédogène ; 6. Elle n'est ni phototoxique ni cytotoxique ; 7. Elle n'est pas allergénique ; 8. Elle n'est pas sensibilisante ; 9. Elle ne provoque aucun type de réaction indésirable ou de lésion cutanée ou oculaire, que ce soit dans des conditions normales d'utilisation ou dans des conditions de transpiration forcée ; 10 Elle a une homogénéité et une stabilité excellentes ; 11 Comme elle n'irrite pas la peau, elle est plus confortable et elle peut être utilisée sur une base journalière ou même plusieurs fois par jour ; 12. Elle présente une stabilité chimique appropriée ; 13. Elle comprend un extrait multifonctionnel de macelado-campo qui présente des activités antimicrobiennes, antioxydantes et anti-inflammatoires. Elle est également de préparation peu coûteuse, préparation qui ne nécessite pas l'addition d'antioxydants et de conservateurs complexes ; 14. L'extrait de macela-do-campo a une couleur plaisante et une odeur, qui n'ont pas d'effet sur le résultat final de la composition ; 15 L'extrait présente des caractéristiques organoleptiques (douceur, texture et brillant) qui sont idéales pour des compositions cosmétiques à usage topique ; 16. L'extrait combat les inflammations spécifiques induites par les composants chimiques présents dans la membrane de Propionibacterium acnes. Exemple d'une composition cosmétique et/ou pharmaceutique comprenant un extrait de macela-do-campo Les exemples qui suivent représentent des modes de réalisation préférés de compositions cosmétiques et/ou pharmaceutiques destinées à prévenir et traiter les dommages dus à des réactions inflammatoires, microbiennes et oxydatives, et par conséquent ne doivent pas être interprétés comme limitatives. Dans ce contexte, il faut comprendre que la présente invention englobe d'autres modes de réalisation possibles, y compris tous leurs équivalents possibles. Dans le Tableau 5 qui suit, est décrit un exemple d'un mode de réalisation (formulation) de la composition cosmétique et/ou pharmaceutique, objet de la présente invention. - Exemple 1 - Lotion astringente avec macela-do-campo Tableau 5 : Phase Composant Quantité (% en poids) 1 Glycérine végétale bidistillée 2,00 1 Eau déminéralisée Qsp 1 Glycéreth-26 3,00 2 Zinc pca 0,75 3 Acide salicylique 0,50 3 Eau déminéralisée 5,00 3 Extrait de macela-do-campo 0,10 3 Alcool éthylique neutre hydraté 20,00 organique 3 Solution de benzoate de dénatonium à 0,0006 20 % p/v 4 Huile de ricin hydrogénée 2,00 Acétate de tocophéryle 0,25 5 Parfum 0,10 5 Alpha-bisabolol garanti naturel 0,50 5 Méthyl-4-isothiazolin-3-one 0,07 5 Phénoxyéthanol 0,40 6 Eau déminéralisée 3,00 6 Hydroxyde de sodium 0,05 5 Préparation de la composition cosmétique de l'Exemple 1 a. Homogénéiser les composants de la phase 1 ; b. Ajouter à la phase obtenue en (a.), les composants de la phase 2 et homogénéiser ; c. Ajouter à la phase obtenue en (b.), les composants de la phase 3, préalablement solubilisés, et homogénéiser ; d. Chauffer les composants de la phase 4 jusqu'à ce qu'ils soient complètement solubilisés et ensuite refroidir ; e. Quand la température est inférieure à 40°C, solubiliser les composants de la phase 5 dans la phase 4 et ajouter à la phase principale (obtenue en (c.) et homogénéiser ; f. Ajouter à l'eau les composants de la phase 6, préalablement solubilisés, et homogénéiser. Références Bibliographiques CARNEY, J.R. et al. Achyrofuran, a new antihyperglycemic dibenzofuran from the South American medicinal plant Achyrocline satureioides. J. Nat. Prod., 65 (2) : 203-205, 2002. CHAN AL, Huang HL, Chien HC, Chen CM, Lin CN, Ko WC. Inhibitory effects of quercetin derivatives on phosphodiesterase isozymes and high-affinity [(3) H]-rolipram binding in guinea pig tissues. Invest New Drugs. Oct ; 26 (5) : 417-24, 2008. D'ÂVILA, M.C. Medicinal flora of Rio Grande do Sul. 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Procédé d'extraction pour obtenir un extrait standardisé de quercétine et de 3-0-méthylquercétine, à partir d'inflorescences de macela-do-campo (Achyrocline satureioides), caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes consistant à : A) broyer des inflorescences d'Achyrocline satureioides pour obtenir un matériau de plante broyée ; B) soumettre ce matériau de plante broyée à au moins quatre étapes séquentielles d'extraction hydroalcoolique à une température de 60 à 80°C, pendant 3 à 4 heures à chaque étape, pour obtenir 4 extraits hydro-alcooliques intermédiaires ; C) combiner les 4 extraits hydro-alcooliques intermédiaires ; D) concentrer le mélange d'extraits hydro-alcooliques intermédiaires afin d'obtenir au maximum 20 % de la masse initiale d'extraits hydro-alcooliques intermédiaires ; et E) sécher la matière obtenue en D). 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que dans l'étape B), les étapes séquentielles d'extraction hydro-alcoolique, sont mises en oeuvre au reflux, pendant 12 heures, et comprennent les étapes suivantes consistant à : i) extraire un extrait intermédiaire avec une solution hydro-alcoolique 1/30 (p/p de matériau de plante broyée/solution d'extraction) pendant une durée de 3 à 4 heures, de préférence d'au moins 3 heures, à une température de 60 à 80°C, de préférence 80°C, pour obtenir une première solution extraite ; ii) ré-extraire l'extrait hydro-alcoolique de i) avec une solution hydro-alcoolique dans un rapport de 1/20(p/p de matière végétale/solution d'extraction), pendant une durée de 3 heures à une température de 80°C, pour obtenir une deuxième solution extraite ; iii) combiner les première et deuxième solutions extraites pour obtenir une troisième solution extraite ; iv) extraire un lot frais de plante broyée avec ladite troisième solution extraite dans un rapport de 1/30 (en p/p de plante broyée/solution extraite des étapes 1 et 2) pendant une durée de 3 heures à une température de 80°C ; v) ré-extraire l'extrait hydro-alcoolique de l'étape iv) avec une solution hydro-alcoolique dans un rapport de 1/16 (p/p extrait hydro-alcoolique/solution d'extraction) pendant 3 heures à 80°C pour obtenir une solution extraite finale. 3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'étape C) est effectuée dans un concentreur sous vide à une température de 60°C et sous une pression de 600 mm Hg (80.10 3 Pa) . 4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ladite solution extraite finale est 5 fois plus concentrée que la solution initiale. 5. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que, dans l'étape D), un support approprié pour une atomisation est ajouté dans une proportion de 50 % en poids et le séchage subséquent est effectué dans un sécheur atomiseur. 6. Composition cosmétique et/ou pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend un véhicule physiologiquement acceptable, et 0,1 à 5,0 % en poids, par rapport au poids total de la composition, de l'extrait secd'inflorescences de macela-do-campo (Achyrocline satureioides) obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5. 7. Composition cosmétique et/ou pharmaceutique selon la revendication 6, caractérisée en ce qu'elle est destinée au traitement et à la prévention des dommages dus à des réactions inflammatoires, microbiennes et d'oxydation/lipoperoxydation. 8. Composition cosmétique et/ou pharmaceutique selon la revendication 7, caractérisée en ce que les dommages dus à des réactions inflammatoires, microbiennes et d'oxydation/lipoperoxydation comprennent les rides, le photo-vieillissement cutané, l'acné, la cellulite et l'hypersensibilité de la peau (derme). 9. Utilisation d'un extrait standardisé de quercétine et de 3-0-méthylquercétine obtenu à partir d'inflorescences de macela-do-campo (Achyrocline satureioides) selon le procédé de l'une quelconque des revendications 1 à 5, pour la préparation d'une composition cosmétique et/ou pharmaceutique pour le traitement ou la prévention des dommages dus à des réactions inflammatoires, microbiennes et d'oxydation/lipoperoxydation. 10. Utilisation selon la revendication 9, caractérisée en ce que lesdits dommages dus à des réactions inflammatoires, microbiennes et d'oxydation/lipoperoxydation, comprennent les rides, le photo-vieillissement cutané, l'acné, la cellulite et l'hypersensibilité de la peau (derme).