Brevet FR2949682A1 — publié le 20110311

Utilisation d'un extrait de ficoïde glaciale en tant qu'ingrédient actif cosmétique La présente invention concerne une utilisation d'un extrait de ficoïde glaciale utile pour la protection, la régénération, l'hydratation de la peau humaine et l'amélioration de son aspect physique et esthétique. La ficoïde glaciale (nom botanique Mesembryanthemum crystallinum) est une plante de la famille des Aizoaceae. Plante halophyte, elle est capable de s'adapter à des milieux riches en sel mais possède aussi la faculté de résister à la sécheresse par son caractère succulent, lié à sa capacité de retenir une grande quantité d'eau dans ses tissus. Ses cellules épidermiques les plus externes forment d'ailleurs des vésicules ou papilles, conséquence de la quantité de sel importante absorbée par la plante. Ces vésicules donnent un aspect "givré" à la plante, d'où le nom de ficoïde glaciale (� iceplant � en anglais). Selon un premier aspect, l'invention concerne l'utilisation d'un extrait de ficoïde glaciale pour la protection et la régénération de la peau et des cheveux. L'extrait de ficoïde glaciale est en effet un agent cosmétique ou dermatologique intéressant. La peau est un organe vital à part entière qui se compose de trois tissus distincts, assumant chacun différents rôles grâce à différents types cellulaires et structures. L'hypoderme, situé en profondeur et constitué en majeure partie de lobules graisseux (adipocytes), assure une fonction de support primaire, de protection mécanique et thermique et joue aussi un rôle de stockage des réserves énergétiques. En position intermédiaire, le derme est aussi un tissu conjonctif investi majoritairement de fibroblastes et de protéines matricielles donnant à la peau ses qualités de compressibilité et d'élasticité connues. Au sein de la trame conjonctive, s'intercalent aussi d'autres cellules et structures, tel un important réseau circulatoire et nutritif, constitué des vaisseaux sanguins et des capillaires lymphatiques et les annexes épidermiques (poils, ongles, glandes pilosébacées et glandes sudoripares) qui prennent naissance dans le derme profond. Le tissu le plus en surface et donc le plus exposé est l'épiderme. Cet épithélium pluristratifié (Malpighien) et kératinisant, dont la partie la plus externe est la couche cornée, se compose de différentes cellules associées à de nombreuses fonctions de barrière de protection. Les majoritaires sont les kératinocytes qui, par leurs processus de prolifération/différenciation, aboutissent à la formation de la couche cornée connue pour son aspect et ses propriétés hydrophobes, compactes et étanches. Le rôle majeur de l'épiderme est d'apporter à la peau et donc au corps humain une première ligne de protection contre les agressions physiques chimiques, hydriques, bactériologiques... Le tissu conjonctif dermique joue, quant à lui, un rôle essentiel dans le support et le maintien de l'architecture cutanée. Les modifications de sa texture et de sa composition sont largement responsables des altérations de la peau qui surviennent au cours du vieillissement. Le relief de la couche cornée est, par ailleurs, directement conditionné par la qualité et la densité du derme qui la sous- tend. C'est en effet le tissu dermique qui confère à la peau ses qualités biomécaniques (compressibilité, extensibilité, étirabilité, fermeté...). Plus que l'épiderme, dont le renouvellement est rapide et constant, le derme subit des troubles importants liés à l'âge, par le vieillissement de ses cellules et de sa matière. En vieillissant, les fibroblastes sont de moins en moins réactifs et de moins en moins prolifératifs. De plus, les macro-molécules constitutives du derme telles que les fibres de collagène, les fibres élastiques, les protéoglycanes et les glycosaminoglycanes ont tendance à dégénérer et à se fragmenter. Leurs réseaux se désorganisent et se réorientent parallèlement à la jonction dermo-épidermique, notamment sous l'action d'enzymes de dégradations des protéines matricielles, les MMP (Matrix Metallo Proteases) aussi appelées collagénases ou elastases. Avec l'âge, les synthèses de ces macromolécules ne sont plus assurées par les fibroblastes. Ces phénomènes d'altération du tissu dermique provoquent en surface un défaut d'organisation de l'épiderme et d'une façon plus visible et plus directe, une perte de fermeté pouvant aller jusqu'à la ptose cutanée et/ou la formation de rides. Par sa position externe, la peau est un organe particulier qui est particulièrement exposé et qui subit les stress environnementaux (variations thermiques, variations hydriques, irradiations physiques liées aux UV...). Ceux-ci contribuent et accélèrent l'apparition des phénomènes précités. L'extrait de ficoïde glaciale présente une action au niveau du tégument humain, notamment l'épiderme et le derme. Il a en effet été découvert que l'extrait de ficoïde glaciale permet de protéger et/ou de régénérer la peau, et ainsi d'améliorer son aspect physique et esthétique. Tout d'abord, l'extrait de ficoïde glaciale peut être utilisé pour hydrater la peau, notamment le derme et l'épiderme. De plus, l'extrait de ficoïde glaciale peut être utilisé pour lutter contre le vieillissement cutané et protéger la peau des agressions extérieures, notamment les stress hydriques, thermiques et solaires. En particulier, l'extrait de ficoïde glaciale a une action anti-oxydante et plus particulièrement anti-radicalaire. L'extrait de ficoïde glaciale peut en outre être utilisé pour stimuler la prolifération des fibroblastes et/ou protéger la viabilité des kératinocytes. En effet, l'extrait de ficoïde glaciale présente la propriété de relancer le processus de prolifération des fibroblastes et de les protéger vis à vis des stress hydriques et solaires. L'extrait permet aussi de protéger la viabilité des kératinocytes en condition de stress thermiques et hydriques et de protéger leur métabolisme en condition normale. Ainsi, l'extrait de ficoïde glaciale stimule le renouvellement des tissus dermique et épidermique à titre préventif. L'extrait de ficoïde glaciale peut être préparé de différentes manières : sur plante fraîche ou sèche, de préférence sur plante broyée, à l'aide de solvants polaires type eau, éthanol, glycérine, glycols... Néanmoins, le procédé de préparation de l'extrait ne met de préférence pas en oeuvre de solvant. En effet, l'eau présente dans la ficoïde glaciale suffit à solubiliser les molécules extractibles. De préférence, l'extrait de ficoïde glaciale utilisé est obtenu par : (A) broyage de ficoïde glaciale, à une température inférieure à la température de congélation de la ficoïde glaciale, ce par quoi on obtient un broyat végétal comprenant des éléments solides au sein d'un milieu liquide ; (B) ajout au broyat végétal de l'étape (A) d'au moins une enzyme propre à lyser tout ou partie des éléments solides présents dans le broyat végétal obtenu. Ce procédé est décrit dans la demande de brevet FR 08 58921 déposée le 22 décembre 2008. L'extrait de ficoïde glaciale obtenu par ce procédé présente l'avantage de comprendre à la fois le contenu des cellules végétales présentes dans la ficoïde glaciale et le contenu des parois de ces cellules végétales. Ce procédé de préparation permet avantageusement d'enrichir l'extrait en composés pariétaux, notamment glucidiques simples (glucose, fructose, rhamnose, arabinose, mannose, acides uroniques) et sous forme d'oligomères. De plus, l'extraction réalisée assure une extraction plus efficace que lorsque l'on met uniquement en oeuvre soit une enzymolyse, soit une extraction par cryobroyage, jusqu'à + 300% de sucres pariétaux supplémentaires. A l'issue de ces étapes, un milieu liquide est obtenu, qui comprend les composés et/ou principes actifs à l'état dissous ou dispersé, ce milieu liquide pouvant être aisément récupéré, typiquement par une simple filtration et/ou par centrifugation. Le procédé peut comprendre, suite à l'étape (B), une étape (C) où on filtre le milieu obtenu à l'issue de l'étape (B), puis où on centrifuge le filtrat obtenu. Avantageusement, dans ce cas, le surnageant de la centrifugation peut à nouveau être filtré. Ce procédé peut être conduit en l'absence de solvant dans les étapes (A) et/ou (B), de préférence dans les étapes (A) et (B) (introduction des enzymes sous forme sèche, et en tout état de cause sous la forme la plus concentrée possible), ce qui permet d'obtenir un extrait de ficoïde glaciale particulièrement riche en principes actifs et constitué essentiellement des composés de la ficoïde glaciale elle-même, non dilués dans un milieu dispersant, et donc entièrement naturel. Le broyage réalisé dans l'étape (A) peut être conduit selon toute méthode de cryobroyage ou cryoextraction connue en soi. Par exemple, le broyage réalisé peut être conduit en utilisant des dispositifs de type presse, pilon ou broyeur à marteau. L'étape (A) est spécifiquement conduite en plaçant la ficoïde glaciale à une température inférieure à sa température de congélation, et de préférence en conservant la ficoïde glaciale à une température inférieure à sa température de congélation pendant toute la durée de l'étape (A). Pour ce faire, et compte tenu de l'échauffement dû au broyage, il est préférable de conduire l'étape (A) à une température maintenue inférieure d'au moins 5°C à la température de congélation de la ficoïde glaciale, et plus préférentiellement inférieure d'au moins 10°C, voire d'au moins 15°C à sa température de congélation. Typiquement, l'étape (A) est conduite en portant la ficoïde glaciale à une température inférieure à -10°C, et plus préférentiellement inférieure ou égale à -18°C. La ficoïde glaciale est plus avantageusement portée à des températures inférieures, par exemple en la plongeant dans un milieu cryogénique de type azote liquide (-196°C). L'étape (A) peut être conduite sur une ficoïde glaciale précongelée ou surgelée aux températures précitées préalablement à l'étape (A). Une autre possibilité est de réaliser l'étape (A) sur de la ficoïde glaciale fraîche qui n'est portée à une température inférieure à sa température de congélation qu'au moment de la mise en oeuvre de l'étape (A), typiquement en plongeant la ficoïde glaciale dans l'azote liquide ou un autre fluide cryogénique, ou en versant un fluide cryogénique de type azote liquide sur la ficoïde glaciale fraîche (par exemple dans un dispositif de broyage (broyeur, pressoir, mortier) où la ficoïde glaciale fraîche a été initialement introduite). A titre de méthodes de cryobroyage ou de cryoextraction utilisables dans le cadre de l'étape (A), on peut par exemple citer celles du type décrit dans la demande FR 2 652 265. Dans l'étape (B), le broyat végétal qui a été obtenu à l'issue de l'étape (A) est traité par au moins une enzyme. L'enzyme employée (ou le mélange (� cocktail �) d'enzymes employé) vise à digérer, en tout ou partie, les éléments solides présents dans le broyat végétal, ce par quoi on libère dans le milieu liquide tout ou partie des composés ou principes actifs présents dans ces éléments solides. Dans cette étape (B), le milieu liquide présent dans le broyat végétal est propre à servir de solvant pour les enzymes employées, ce qui permet d'introduire les enzymes à l'état non solvaté. Les enzymes utilisables dans le cadre de l'étape (B) peuvent notamment être choisies parmi les cellulases, les hemicellulases, les pectinases, les xylanases, et les mélanges de ces enzymes. Des mélanges comprenant une association d'au moins une cellulase ; au moins une pectinase ; et au moins une hémicellulase se révèlent en particulier intéressants. A titre d'exemple d'enzymes bien adaptées à la mise en oeuvre de l'étape (B), on peut notamment citer les enzymes suivantes : l'exopolygalacturonase, l'endopolygalacturonase, la polygalacturonase, la rhamnogalacturonane hydrolase, la rhamnogalacturonane lyase, la rhamnogalacturonane acétylestérase, la rhamnohydrolase, la galacturonohydrolase, la xylogalacturonane hydrolase, la pectine acétylestérase, la pectine méthylestérase, l'endo-arabinase, la bêta-arabinofuranosidase, la bêta-1,4-galactanase, la bêta-1,3-galactanase, la bêta-galactosidase, l'alpha-galactosidase, la féruloyl acétyl estérase, l'alpha-fucosidase, la bêta-apiosidase, l'alpha-rhamnosidase, la bêtarhamnosidase, l'alpha-arabinopyranosidase, la bêta-glucuronidase, l'alpha- glucuronidase, la bêta-xylosidase, l'alpha-xylosidase ; la pectine méthylestérase, la pectine lyase ou la pectate lyase, l'endoxylanase ou l'endo-beta-glucanase. Des enzymes commerciales intéressantes pour la mise en oeuvre de l'invention sont notamment les cellulases du type de la cellulyve AN3500 �; les pectinases du type de la peclyve V extraction liquide �; les hémicellulases du type de la Feedlyve AXC 1500L� ou la Feedlyve AGL 1500P�. Quelle que soit sa nature exacte, l'enzyme est employée dans l'étape (B) à une température où elle est efficace, et, de préférence aux alentours de (et plus préférentiellement à une température égale à) sa température optimale d'activité. Cela nécessite généralement de réchauffer le milieu entre l'étape (A) et l'étape (B). A cet effet, on peut par exemple laisser le milieu de l'étape (A) se réchauffer jusqu'à température ambiante, ou bien chauffer plus activement le milieu en évitant dans ce dernier cas toute surchauffe qui pourrait dégrader l'enzyme (typiquement en plaçant le milieu dans un milieu thermostaté (bain marie ou bain d'huile par exemple), ou bien encore en contrôlant la vitesse de montée en température). De préférence, l'extrait de ficoïde glaciale utilisé est un extrait des parties aériennes de ficoïde glaciale. L'extrait de ficoïde glaciale, seul ou en combinaison avec d'autres ingrédients actifs, peut être incorporé dans une composition cosmétique ou dermatologique destinée à la protection, la régénération, l'hydratation et/ou l'amélioration des qualités de la peau et des cheveux. Ainsi, selon un deuxième aspect, l'invention concerne une composition cosmétique pour la protection et la régénération de la peau et des cheveux comprenant un véhicule cosmétiquement acceptable et un extrait de ficoïde glaciale. L'extrait de la composition peut notamment être obtenu par : (A) broyage de ficoïde glaciale, à une température inférieure à la température de congélation de la ficoïde glaciale, ce par quoi on obtient un broyat végétal comprenant des éléments solides au sein d'un milieu liquide ; (B) ajout au broyat végétal de l'étape (A) d'au moins une enzyme propre à lyser tout ou partie des éléments solides présents dans le broyat végétal obtenu. Par � véhicule cosmétiquement acceptable �, on entend un véhicule adapté pour une utilisation en contact avec des cellules humaines cutanées, en particulier les cellules de l'épiderme, sans toxicité, irritation, réponse allergique indue et similaire, et proportionné à un rapport avantage/risque raisonnable. La composition cosmétique comprend de préférence de 0,0001 à 5 % en poids, notamment 0,0005 à 0,5% en poids d'extrait de ficoïde glaciale par rapport au poids total de la composition. La composition cosmétique peut être sous la forme d'onguent, de crème, d'huile, de lait, de pommade, de poudre, de tampon imbibé, de solution, de gel, de spray, de lotion, de suspension, de savon ou de shampooing. De préférence, la composition est sous forme de gel aqueux ou hydroalcoolique, de crème aqueuse ou hydroalcoolique, d'huile, ou de lotion aqueuse ou hydroalcoolique. La composition peut également être sous la forme d'émulsion huile dans eau, eau dans huile, ou multiple. L'application de la composition selon l'invention est généralement effectuée par voie topique. Toutefois, la composition peut également être administrée par voie orale, notamment lorsqu'elle est sous forme de complément alimentaire. Selon un troisième aspect, l'invention concerne l'utilisation d'un extrait de ficoïde glaciale, notamment un extrait tel qu'obtenu par le procédé susmentionné, pour la préparation d'une composition cosmétique destinée à la protection et/ou la régénération de la peau et des cheveux, notamment l'hydratation de la peau, la lutte contre le vieillissement cutané, la protection de la peau des agressions extérieures, notamment les stress hydriques et solaires, la stimulation de la prolifération des fibroblastes et/ou la protection de la viabilité des kératinocytes. EXEMPLES Dans les exemples suivants, l'extrait de ficoïde glaciale a été préparé comme suit. L'extraction a été réalisée sur des parties aériennes de plants de ficoïde glaciale (Mesembryanthemum crystallinum) cultivés en serre, la récolte des parties aériennes ayant été effectuée au bout de 3 mois environ. Les parties aériennes ainsi récoltées ont été utilisées dans les extractions décrites ci-après, soit à l'état frais, soit après congélation. Le cas échéant, la congélation des parties aériennes a été effectuée à -18°C. Cryobroyage On a introduit 500 g du matériau végétal, à l'état congelé, dans un mortier. On a versé de l'azote liquide dans ce mortier et le matériau ainsi porté à -196°C a été broyé au pilon jusqu'à l'obtention d'une poudre (cryobroyat). Enzymolyse Le cryobroyat obtenu à l'issue de l'étape précédente a été transféré dans un bécher placé dans un bain-marie à 50°C (qui correspond à la température optimale de fonctionnement des enzymes employées dans cette étape). Lorsque la température a atteint le point de fusion, et que le cryobroyat est devenu liquide, on y a ajouté 2,5 g d'un cocktail enzymatique comprenant, en masse par rapport à la masse totale du cocktail enzymatique : 33.3% de cellulyve AN3500 � (cellulase) ; 33.3% de peclyve V extraction liquide �(pectinase), 33.3% d'un mélange d'hémicellulases comprenant, en masse par rapport à la masse dudit mélange : 50% de Feedlyve AXC 1500L� et 50% de Feedlyve AG L 1500P�) Si besoin est, le pH du milieu est ajusté à 4,5, la quantité d'acide ou de base à introduire pour réguler le pH étant alors négligeable (quelques microlitres tout au plus). En outre aucun solvant (eau par exemple) n'est ajouté, le cryobroyat décongelé ayant une teneur en eau suffisante pour assurer la dispersion des enzymes. 8 Le mélange obtenu a été agité par une hélice, à 400 tours/minute pendant 1 heure ; puis à 250 tours/minute pendant 7 heures. Le mélange obtenu à l'issue de ces différents traitements a été filtré, sur une toile de nylon de 55 �m. Le filtrat a été centrifugé à 18500 g pendant 15 minutes. Le surnageant est filtré sur plaque de cellulose de seuil de coupure de 3 à 7 �m. On a ainsi obtenu un extrait végétal de ficoïde glaciale. Exemple 1 : activité de l'extrait de ficoïde glaciale sur la prolifération des fibroblastes Différentes études ont été réalisées sur des fibroblastes dermiques humains normaux obtenus par méthode enzymatique de plasties abdominales ou mammaires ensemencés en monocouche dans les conditions de culture adéquates avec du milieu DMEM (milieu de Dulbecco (� Dulbecco/Vogt modified Eagle's minimal essential medium � en anglais) - Invitrogen�). Après 24h de culture, les cellules ont été traitées avec 0,5 % en volume/volume d'extrait de ficoïde glaciale. A terme, la viabilité cellulaire a été évaluée par quantification de l'activité métabolique des déshydrogénases mitochondriales, par mesure d'hydrolyse du MTT (MéthylThiazoleTétrazolium - Sigma Aldrich�) après 1, 2, 3 et 6 jours de culture (Chaque condition a été réalisée quatre fois et l'expérience, renouvelée deux fois). Les données du tableau 1 concernent le pourcentage de viabilité des fibroblastes en fonction des traitements. Le témoin positif correspond à l'adjonction de SVNN (5 % en volume/volume, sérum de veau nouveau né, Invitrogen�) et le témoin négatif, au milieu de culture seul (DMEM seul, Invitrogen�) qui sert de base 100. Tableau 1 : Pourcentage de viabilité des fibroblastes en fonction des traitements. Durée du % de Viabilité des Fibroblastes Humains Normaux traitement Témoin négatif Témoin positif Ficoïde Glaciale (0,5%) J1 100 106 99 J2 100 133 104 J3 100 136 124 J6 100 139 149 Cet exemple montre que l'adjonction de l'extrait de ficoïde glaciale dans le milieu de culture permet aux fibroblastes de mieux proliférer et donc de stimuler leur renouvellement cellulaire à hauteur de 49% après une cinétique de 6 jours. Exemple 2 : activité de l'extrait de ficoïde glaciale sur la protection et la réparation des fibroblastes face à un stress hydrique Des cultures de fibroblastes humains normaux ont été réalisées et soumises à un stress hydrique (cellules sans milieu de culture) pendant 2,5h. 24h après les stress, la viabilité résiduelle des cellules a été évaluée par quantification de l'activité métabolique des déshydrogénases mitochondriales, par mesure d'hydrolyse du MTT (MéthylThiazoleTétrazolium - Sigma Aldrich�). Les traitements avec l'extrait de ficoïde glaciale étaient préventif (avant le stress) et curatif (après le stress) et à 0,5% ou 5.10-2% en volume/volume de ficoïde glaciale. Ces stress occasionnent une mortalité cellulaire : la viabilité résiduelle est en moyenne de 70%. Les données du tableau 2 ci-après concernent le pourcentage de viabilité résiduelle des fibroblastes en fonction des traitements. Le témoin interne correspond à l'adjonction de SVNN (5% en volume/volume) et le témoin négatif, au milieu de culture seul (DMEM (Dulbecco/Vogt modified Eagle's minimal essential medium), Invitrogen� + 1 % en poids/volume SVNN) ayant subi le stress, qui sert de base 100 dans chaque condition pour les calculs. Chaque condition a été réalisée deux fois et l'expérience, renouvelée deux fois. Tableau 1 : Pourcentage de viabilité des fibroblastes en fonction des traitements. Viabilité des cellules DMEM 1% DMEM 5% Ficoïde Ficoïde soumises à un SVNN (témoin SVNN Glaciale Glaciale stress avec négatif) (témoin positif) (0,5%) (5.10-2%) traitements Traitement curatif 100% 98% 120% 118% Traitement préventif 100% 111°/o 116% 117% Les traitements n'entraînent pas de modifications de la viabilité cellulaire en conditions normales ; en conditions de stress, des effets protecteurs sont observés pour les deux types de traitement. L'extrait de ficoïde glaciale permet donc non seulement de protéger l'activité métabolique des fibroblastes en condition de stress hydrique mais aussi de réparer les dommages liés à ce stress. Exemple 3 : activité de l'extrait de ficoïde glaciale sur la protection des fibroblastes face à un stress solaire Des cultures de fibroblastes humains normaux obtenus par méthode enzymatique de plasties abdominales ou mammaires, ont été réalisées dans les mêmes conditions que celles de l'exemple 1 et soumises à un stress physique (UV) délivré par une dose énergétique d'irradiation en un temps déterminé par un irradiateur solaire (SUNTEST CPS+, 760W/m2 pendant 16 minutes). Cette dose énergétique d'irradiation a été déterminée afin de provoquer environ 50% de mortalité cellulaire. Elle permet d'observer, par une augmentation du pourcentage de viabilité cellulaire, tout effet bénéfique de l'extrait de ficoïde glaciale sur le métabolisme cellulaire. 24h après ce stress, les analyses suivantes ont été réalisées : dosage fluorimétrique au CellTiter-Blue qui permet de quantifier l'activité métabolique mitochondriale correspondant à la viabilité cellulaire résiduelle avec ou sans irradiation, dosage par colorimétrie à la sulforhodamine B les protéines cellulaires totales. Comme dans l'exemple 2, le traitement (0,5%; 5.10-2% et 5.10-3% en volume/volume) a été réalisé avant et/ou après le stress. Le témoin interne est le DMEM, seul (témoin négatif). Chaque condition a été réalisée trois fois et l'expérience, renouvelée deux fois. Les résultats sont consignés dans les tableaux 3 et 4 suivants : Tableau 3 : Pourcentage de viabilité des fibroblastes en fonction des traitements. 0/0 de viabilité cellulaire (CTB) plaque non irradiée plaque irradiée à 760W/m2-16min Témoin 100 53 préventif 101 40 FG 0,5% curatif 102 36 curatif+préventif 102 31 préventif 101 42 FG 5.10-2% curatif 103 49 curatif+préventif 103 47 préventif 103 55 FG 5.10-3% curatif 104 48 curatif+préventif 104 46 Tableau 4 : Pourcentage de viabilité des fibroblastes en fonction des traitements. 0/0 de protéines totales 0/0 de protéines totales (SRB) rapportées au % de viabilité cellulaire plaque non plaque plaque non plaque irradiée irradiée à irradiée irradiée à 760W/m2- 760W/m2- 16min 16min Témoin 100 61 100 115 préventif 103 58 102 145 FG 0,5% curatif 98 54 96 150 curatif+préventif 103 53 101 171 préventif 109 56 108 133 FG 5.10-2% curatif 107 59 104 120 curatif+préventif 106 57 103 121 préventif 106 60 103 109 FG 5.10-3% curatif 103 59 99 123 curatif+préventif 103 60 99 130 Les résultats montrent que l'extrait de ficoïde glaciale stimule le métabolisme des fibroblastes en condition de stress solaire, sans pour autant augmenter leur viabilité résiduelle. L'extrait de ficoïde glaciale prévient et répare les dommages cellulaires provoqués par les radiations solaires. Exemple 4 : activité de l'extrait de ficoïde glaciale sur la stimulation du métabolisme des kératinocytes Des cultures de kératinocytes humains normaux (KHN) obtenus par méthode enzymatique de plasties abdominales ou mammaires ont été réalisées en KSFM (keratinocytes serum free medium, invitrogen�) et traitées avec l'extrait de ficoïde glaciale (0,5%; 5.10-2% et 5.10-3% en volume/volume). Des dosages de viabilité et des dosages protéiques ont été réalisés à l'issue de 5 jours de culture. Le témoin correspond au KFSM seul. Les résultats sont consignés dans le tableau 5 suivant : Tableau 5 : Pourcentage de viabilité des kératinocytes en fonction des traitements. 0/0 protéines 0/0 totales de protéines totales rapportées au % de viabilité cellulaire Témoin 100 100 FG 0,5% Traitement total 96 98 FG 5.10-2% Traitement total 114 114 FG 5.10-3% Traitement total 124 120 Les résultats montrent que l'extrait de ficoïde glaciale ne stimule pas la viabilité des kératinocytes mais stimule leur métabolisme protéique. Exemple 5 : activité de l'extrait de ficoïde glaciale sur la protection des kératinocytes face à un stress hydrique Des cultures de kératinocytes humains normaux ont été réalisées et soumises à un stress hydrique (cellules sans milieu de culture) pendant 2,5h. 24h après les stress, la viabilité résiduelle des cellules a été évaluée par quantification de l'activité métabolique des déshydrogénases mitochondriales, par mesure d'hydrolyse du MTT (MéthylThiazoleTétrazolium). Les traitements avec l'extrait de ficoïde glaciale étaient préventif (avant le stress) et curatif (après le stress) et à 0,5% ou 5.10-2% en volume/volume de ficoïde glaciale. Ces stress occasionnent une mortalité cellulaire : la viabilité résiduelle est en moyenne de 70-80%. Les données du tableau 6 ci-après concernent le pourcentage de viabilité résiduelle des kératinocytes en fonction des traitements. Chaque condition a été réalisée trois fois et l'expérience, renouvelée deux fois. Le témoin négatif correspond au milieu de culture seul (KSFM) ayant subi le stress, qui sert de base 100 dans chaque condition pour les calculs. Tableau 6 : Pourcentage de viabilité des kératinocytes en fonction des traitements. Viabilité des cellules KSFM Ficoïde Ficoïde soumises à un (témoin Glaciale Glaciale stress avec négatif) (0,5%) (5.10-2%) traitements Traitement curatif 100% 116% 120% Traitement préventif 100% 116% 138% Les traitements n'entraînent pas de modifications de la viabilité cellulaire en conditions normales. En conditions de stress des effets protecteurs sont observés 25 pour les deux types de traitement. L'extrait de ficoïde glaciale permet donc non seulement de protéger l'activité mitotique des kératinocytes en condition de stress hydrique mais aussi de mieux réparer les dommages liés à ce stress. Exemple 6 : activité de l'extrait de ficoïde glaciale sur la protection des kératinocytes face à un stress thermique Des cultures de kératinocytes humains normaux ont été réalisées et soumises à un stress thermique chaud (45°C pendant 2h30) ou à un stress froid (4°C pendant 2h30). 24H après les stress, la viabilité résiduelle des cellules a été évaluée par quantification de l'activité métabolique des déshydrogénases mitochondriales, par mesure d'hydrolyse du MTT (MéthylThiazoleTétrazolium). Les traitements avec l'extrait de ficoïde glaciale (0,5% et 5.10-2% en volume/volume) étaient préventif (avant le stress) et curatif (après le stress). Ces stress occasionnent une mortalité cellulaire : la viabilité résiduelle est en moyenne de 40-60 %. Les données du tableau 7 ci-après concernent le pourcentage de viabilité résiduelle des kératinocytes en fonction des traitements. Chaque condition a été réalisée trois fois et l'expérience, renouvelée 2 fois. Le témoin négatif correspond au milieu de culture seul (KSFM) ayant subi le stress, qui sert de base 100 dans chaque condition pour les calculs. Tableau 7 : Pourcentage de viabilité des kératinocytes en fonction des traitements. Viabilité des KSFM Ficoïde Ficoïde cellules soumises (témoin Glaciale Glaciale à un stress négatif) (0,5%) (5.10-2%) CHAUD Traitement curatif 100% 127% 112% Traitement 100% 102% 106% préventif Viabilité des KSFM Ficoïde Ficoïde cellules soumises (témoin Glaciale Glaciale à un stress négatif) (0,5%) (5.10-2%) FROID Traitement curatif 100% 111 % 96% Traitement préventif 100% 126% 123% Le tableau montre que l'extrait de ficoïde glaciale présente des activités complémentaires sur la viabilité des kératinocytes en condition de stress thermiques chaud et froid.5 REVENDICATIONS1.- Utilisation d'un extrait de ficoïde glaciale pour la préparation d'une composition cosmétique ou dermatologique destinée à la protection et/ou la régénération de la peau et des cheveux. 2.- Utilisation selon la revendication 1, pour l'hydratation de la peau. 3.- Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 2, pour lutter contre le vieillissement cutané et protéger la peau des agressions extérieures, notamment les stress hydriques, thermiques et solaires. 4.- Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, pour stimuler la prolifération des fibroblastes et/ou protéger la viabilité des kératinocytes. 5.- Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle l'extrait de ficoïde glaciale est obtenu par : (A) broyage de ficoïde glaciale, à une température inférieure à la température de congélation de la ficoïde glaciale, ce par quoi on obtient un broyat végétal comprenant des éléments solides au sein d'un milieu liquide ; (B) ajout au broyat végétal de l'étape (A) d'au moins une enzyme propre à lyser tout ou partie des éléments solides présents dans le broyat végétal obtenu. 6.- Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, où l'extrait de ficoïde glaciale est un extrait des parties aériennes de ficoïde glaciale. 7.- Composition cosmétique pour la protection et la régénération de la peau et des cheveux comprenant un véhicule cosmétiquement acceptable et un extrait de ficoïde glaciale. 8.- Composition cosmétique selon la revendication 7, comprenant 0,0001 à % en poids d'extrait de ficoïde glaciale par rapport au poids total de la composition. 5 9.- Composition cosmétique selon la revendication 7 ou 8, sous la forme d'onguent, de crème, d'huile, de lait, de pommade, de poudre, de tampon imbibé, de solution, de gel, de spray, de lotion, de suspension, de savon ou de shampooing.10