Brevet FR2959133A1 — publié le 20111028

FORMULATION PHARMACEUTIQUE ANTICANCEREUSE La présente invention concerne l'agent actif 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl- 1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one, et, en particulier, des compositions comprenant des 5 particules submicroniques de 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3- b]indol-2-one ayant une taille de particule moyenne effective d'environ 0,4 µm à environ 0,8 µm de diamètre. CONTEXTE DE L'INVENTION Il a été démontré que la 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one, qui a la structure de formule (I) : 15 est particulièrement puissante en tant qu'agent anticancéreux. La préparation, les propriétés physiques et les propriétés pharmacologiques bénéfiques de la 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one sont décrites dans, par exemple, WO2004/041817 (également brevet U.S. n° 7 390 818). 20 Avant que la 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one puisse être utilisée pour traiter des maladies chez des patients, cependant, elle doit être formulée dans des compositions pharmaceutiques qui peuvent être administrées aux patients ; par exemple, en une forme galénique adaptée pour administration intraveineuse. 25 La solubilité limitée de la 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one dans des solutions aqueuses et des solvants de formulation non aqueux cause des difficultés dans l'administration et le stockage de formulations contenant ce composé. 10 Cl Il est souhaité dans l'art des compositions pharmaceutiques comprenant de la 3-(2,4-dichlorophényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one qui peuvent être administrées à des concentrations plus élevées et dans un état stérile. Selon la présente invention, il est décrit une composition pharmaceutique comprenant des particules submicroniques de 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one qui sont adaptées pour administration intraveineuse à des concentrations plus élevées. RESUME DE L'INVENTION La présente invention concerne des particules submicroniques de 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one, ou un hydrate ou solvate de celle-ci, ayant une taille de particule moyenne effective d'environ 0,4 µm à environ 0,8 µm. La présente invention concerne en outre des compositions pharmaceutiques comprenant des particules submicroniques de 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one, ou un hydrate ou solvate de celle-ci, ayant une taille de particule moyenne effective d'environ 0,4 µm à environ 0,8 µm, un modificateur de surface, et facultativement un véhicule pharmaceutiquement acceptable. La présente invention concerne en outre des procédés de préparation de particules submicroniques de 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one, ou un hydrate ou solvate de celle-ci, ayant une taille de particule moyenne d'environ 0,4 µm à 0,8 µm et des compositions pharmaceutiques de celles-ci. La présente invention concerne en outre des procédés de traitement comprenant l'administration des particules submicroniques de la présente invention. DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION Définitions et Abréviations 30 Dans le présent contexte, et dans l'ensemble de la description de l'invention, les abréviations et symboles suivants, sauf indication contraire, doivent être entendus comme ayant les significations suivantes : MPEG-2000-DSPE Conjugué 1,2-distéaroyl-phosphatidyléthanolamine-méthylpolyéthyléneglycol-2000 qs quantité suffisante, c'est-à-dire une quantité suffisante pour obtenir un volume total indiqué µm micromètre Dans le présent contexte, et dans l'ensemble de la description de l'invention, les termes suivants, sauf indication contraire, doivent être entendus comme ayant les significations suivantes : Les termes « substance active » et « substance active », dans le présent contexte, désignent la 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one, ou un hydrate ou solvate de celle-ci. Les termes «composé de l'invention» et «particules submicroniques de l'invention », dans le présent contexte, désignent la 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydropyrido[2,3-b]indol-2-one, ou un hydrate ou solvate de celle-ci, ayant une taille de particule moyenne effective d'environ 0,4 µm à environ 0,8 µm de diamètre. Un aspect de l'invention est un procédé pour préparer les particules submicroniques de 25 l'invention en combinant des techniques de microprécipitation avec des techniques d'homogénéisation en utilisant la technologie NANOEDGETM Le procédé comprend les étapes de dissolution de la substance active dans un premier solvant miscible avec l'eau pour former une solution, mélange de la solution avec un deuxième 30 solvant aqueux pour former une pré-suspension ; et ajout d'énergie à la pré-suspension pour former des particules ayant une taille de particule moyenne effective d'environ 0,4 à environ 0,8 µm. La solubilité de la substance active doit être plus élevée dans le premier solvant miscible avec l'eau que dans le deuxième solvant aqueux. L'étape d'ajout d'énergie peut être conduite d'une façon quelconque où la pré-suspension est exposée à des forces de cavitation, de cisaillement ou de choc. Dans un aspect de l'invention, l'étape d'ajout d'énergie est une étape de recuit. Le recuit est défini dans cette invention comme étant le processus de conversion de matière qui est thermodynamiquement instable en une forme plus stable par application unique ou répétée d'énergie (chauffage direct ou contrainte mécanique), suivie par une relaxation thermique. Cette diminution d'énergie peut être obtenue par conversion de la forme solide d'une structure de réseau moins ordonnée à une structure de réseau plus ordonnée. En variante, cette stabilisation peut se produire par un réarrangement des molécules de tensioactif à l'interface solide-liquide. Le premier solvant selon la présente invention est un solvant ou mélange de solvants dans lequel la substance active est relativement soluble et qui est miscible avec le deuxième solvant. Des exemples de tels solvants comprennent, mais ne sont pas limités à : la polyvinylpyrrolidone, la N-méthyl-2-pyrrolidinone (également appelée N-méthyl-2- pyrrolidone), la 2-pyrrolidone, le diméthylsulfoxyde, le diméthylacétamide, l'acide lactique, le méthanol, l'éthanol, l'isopropanol, le 3-pentanol, le n-propanol, la glycérine, le butyléneglycol (butanediol), l' éthyléneglycol, le propyléneglycol, des monoglycérides mono-et diacylés (tels que le caprylate de glycéryle), le diméthylisosorbide, l'acétone, le diméthylformamide, le 1,4-dioxane, le polyéthylèneglycol (par exemple, PEG-4, PEG-8, PEG-9, PEG-12, PEG-14, PEG-16, PEG-120, PEG-75, PEG-150, des esters de polyéthylèneglycol (des exemples tels que le dilaurate de PEG-4, le dilaurate de PEG-20, l'isostéarate de PEG-6, le palmitostéarate de PEG-8, le palmitostéarate de PEG-150), des polyéthylèneglycol sorbitans (tel que l'isostéarate de PEG-20 sorbitan), des éthers de monoalkyle de polyéthylèneglycol (par exemple l'éther diméthylique de PEG-3, l'éther diméthylique de PEG-4), le polypropylèneglycol (PPG), l'alginate de polypropylène, le PPG-10 butanediol, l'éther de méthylglucose de PPG-10, l'éther de méthylglucose de PPG-20, l'éther stéarylique de PPG-15, le dicaprylate/dicaprate de propylèneglycol, le laurate de propyléneglycol. La substance active est dans un premier temps dissoute dans le premier solvant pour former une première solution. La substance active peut être ajoutée suivant la solubilité de la substance active dans le premier solvant particulier. Le chauffage du concentré d'environ 30 °C à environ 100 °C peut être nécessaire pour assurer la dissolution totale de la substance active dans le premier solvant. Le deuxième solvant aqueux selon la présente invention est l'eau, ou un mélange d'eau et d'un ou plusieurs solvants, dans lequel la substance active est relativement insoluble. Des exemples de tels solvants comprennent, mais ne sont pas limités à : l'eau, et des mélanges d'eau et de glycérine, et similaire. La deuxième solution comprend le deuxième solvant aqueux et un ou plusieurs modificateurs de surface tels qu'un tensioactif anionique, un tensioactif cationique, un tensioactif non ionique ou une molécule tensioactive biologique ajoutés à celle-ci. Des tensioactifs anioniques adaptés comprennent, mais ne sont pas limité à, le laurate de potassium, le laurylsulfate de sodium, le dodécylsulfate de sodium, des sulfates d' alkylpolyoxyéthylène, l'alginate de sodium, le dioctylsulfosuccinate de sodium, la phosphatidylcholine, le phosphatidylglycérol, la phosphatidylinosine, la phosphatidylsérine, l'acide phosphatidique et leurs sels, des esters de glycéryle, la carboxyméthylcellulose sodique, l'acide cholique et d'autres acides biliaires et des sels de ceux-ci. Des tensioactifs cationiques adaptés comprennent, mais ne sont pas limités à, des composés d'ammonium quaternaire, tels que le chlorure de benzalkonium, le bromure de cétyltriméthylammonium, le chlorure de lauryldiméthylbenzylammonium, des chlorhydrates d'acylcarnitine, ou des halogénures d'alkylpyridinium. En tant que tensioactifs anioniques, des phospholipides peuvent être utilisés. Des phospholipides adaptés comprennent, par exemple la phosphatidylcholine, la phosphatidyléthanolamine, le conjugué 1,2-distéaroyl-phosphatidyléthanolamine-méthylpolyéthylèneglycol-2000, la phosphatidylsérine, le phosphatidylinositol, le phosphatidylglycérol, l'acide phosphatidique, des lysophospholipides, des phospholipides d'oeuf ou de soja ou une combinaison de ceux-ci. Le phospholipide peut être salifié ou dessalé, hydrogéné ou partiellement hydrogéné ou naturel, semi-synthétique ou synthétique. Des tensioactifs non ioniques adaptés comprennent : des éthers d'alcool gras de polyoxyéthylène (Macrogol et Brij), des esters d'acide gras de polyoxyéthylène sorbitan (Polysorbates), des esters d'acide gras de polyoxyéthylène (Myrj), des esters de sorbitan (Span), le monostéarate de glycérol, des polyéthylèneglycols, des polypropylèneglycols, l'alcool cétylique, l'alcool cétostéarylique, l'alcool stéarylique, des alcools d' arylalkylpolyéther, des copolymères de polyoxyéthylène-polyoxypropylène (poloxomères), des polaxamines, la méthylcellulose, l' hydroxycellulose, l' hydroxypropylcellulose, l' hydroxypropylméthylcellulose, une cellulose non cristalline, des polysaccharides comprenant l'amidon et des dérivés d'amidon tels que l'hydroxyéthylamidon (HES), l'alcool polyvinylique, et la polyvinylpyrrolidone. Dans une forme préférée de l'invention, le tensioactif non ionique est un copolymère de polyoxyéthylène et de polyoxypropylène et de préférence un copolymère séquencé de propylèneglycol et d'éthylèneglycol. De tels polymères sont commercialisés sous le nom POLOXAMER également appelés parfois PLURONIC®, et commercialisés par plusieurs fournisseurs comprenant Spectrum Chemical et Ruger. Les esters d'acide gras de polyoxyéthylène comprennent ceux ayant des chaînes alkyle courtes. Un exemple d'un tel tensioactif est SOLUTOL®HS 15, hydroxystéarate de polyéthylène-660, fabriqué par BASF Aktiengesellschaft. Les molécules biologiques tensioactives comprennent des molécules telles que l'albumine, la caséine, l'héparine, l'hirudine ou d'autres protéines appropriées. Un agent d'ajustement du pH peut être ajouté à la deuxième solution tel que le phosphate de sodium dibasique, l'hydroxyde de sodium, l'acide chlorhydrique, le citrate, l'acétate, le lactate, la méglumine, ou similaire. La deuxième solution doit avoir un pH dans la plage d'environ 7 à environ 8,5. Dans un aspect de l'invention, le procédé pour préparer des particules de taille submicronique de l'invention comprend les étapes d'ajout de la première solution à la deuxième solution. Le taux d'ajout dépend de la taille du lot. Typiquement, pour un procédé de laboratoire à petite échelle (préparation de 1 litre), le taux d'ajout est d'environ 0,05 cm3 par minute à environ 10 cm3 par minute. Pendant l'ajout, les solutions doivent être sous agitation constante. Dans un aspect de l'invention, des solides cristallins sont formés de manière à créer une pré- suspension. Le procédé comprend en outre l'étape consistant à soumettre la pré-suspension à une étape de recuit pour convertir les particules amorphes, liquide surfondu ou solide semicristallin quelconques dans un état solide cristallin plus stable. Les particules résultantes auront une taille de particule effective moyenne d'environ 0,4 µm à environ 0,8 µm telle que mesurée par des procédés de diffusion dynamique de la lumière (par exemple, la spectroscopie de photocorrélation, la diffraction laser, la diffusion de lumière laser aux petits angles (LALLS), la diffusion de lumière laser aux angles moyens (MALLS), des procédés d'obscurcissement de la lumière (procédé Coulter, par exemple), la rhéologie, ou la microscopie (optique ou électronique)). L'étape d'ajout d'énergie met en oeuvre l'ajout d'énergie par sonication, homogénéisation, homogénéisation par circulation à contre-courant, microfluidisation, ou d'autres procédés de production de forces de choc, de cisaillement ou de cavitation. L'échantillon peut être refroidi ou chauffé pendant cette étape. Dans un aspect de l'invention, l'étape de recuit est effectuée par un homogénéisateur à espacement de piston tel que le modèle commercialisé par Avestin Inc. sous la désignation de produit EmulsiFlex-C160. Dans un autre aspect de l'invention, le recuit peut être effectué par ultrasonication en utilisant un appareil de traitement ultrasonore tel que l'appareil Vibra-Cell Ultrasonic Processor (600 W), fabriqué par Sonics and Materials, Inc. Dans un autre aspect supplémentaire de l'invention, le recuit peut être effectué par utilisation d'un appareil d'émulsification comme décrit dans le brevet U.S. n° 5 720 551. Suivant le taux de recuit, il peut être souhaitable d'ajuster la température de l'échantillon traité dans la plage d'approximativement -30 °C à 30 °C. En variante, afin d'effectuer un changement de phase souhaité dans le solide traité, il peut également être nécessaire de chauffer la pré-suspension à une température dans la plage d'environ 30 °C à environ 100 °C pendant l'étape de recuit. Dans un aspect différent de l'invention, le procédé pour préparer les particules submicroniques de l'invention comprend l'ajout d'un tensioactif ou d'une combinaison de tensioactifs à la première solution. Les tensioactifs peuvent être choisis parmi les groupes de tensioactifs anioniques, non ioniques et cationiques décrits ci-dessus. La présente invention concerne en outre des étapes additionnelles pour contrôler la structure cristalline du composé actif pour produire finalement une suspension du composé dans la plage de taille souhaitée et une structure cristalline souhaitée. Le terme « structure cristalline » désigne l'agencement des atomes dans le motif élémentaire du cristal. En général, des composés pharmaceutiquement actifs qui peuvent être cristallisés dans différentes structures cristallines sont dits polymorphes. L'identification des polymorphismes est une étape importante dans la formulation de médicament étant donné que différents polymorphismes du même médicament peuvent présenter des différences de solubilité, d'activité thérapeutique, de biodisponibilité, et de stabilité en suspension. En conséquence, il est important de contrôler la forme polymorphe de la substance active pour assurer la pureté du produit et la reproductibilité de lot à lot. Les étapes pour contrôler la forme polymorphe de la substance active comprennent l'ensemencement de la première solution (substance active dissoute dans la première solution), du deuxième solvant ou de la pré-suspension pour assurer la formation de la forme polymorphe souhaité. L'ensemencement comprend l'utilisation d'un composé d'ensemencement ou l'ajout d'énergie. Dans un aspect de l'invention, le composé d'ensemencement est la substance active sous la forme polymorphe souhaitée. En variante, le composé d'ensemencement peut également être une impureté inerte ou un composé organique ayant une structure similaire à celle de la forme polymorphe souhaitée telle qu'un sel biliaire. Le composé d'ensemencement peut être précipité dans la première solution. Ce procédé comprend les étapes d'ajout de la substance active en quantité suffisante pour dépasser la solubilité de la substance active dans le premier solvant pour former une solution sursaturée. La solution sursaturée est traitée pour précipiter la substance active sous la forme polymorphe souhaitée. Le traitement de la solution sursaturée comprend le vieillissement de la solution pendant une période jusqu'à ce que la formation d'un cristal ou de cristaux soit observée pour former un mélange d'ensemencement. Il est également possible d'ajouter de l'énergie à la solution sursaturée pour amener la substance active à précipiter dans la solution sous la forme polymorphe souhaitée. L'énergie peut être ajoutée de différentes façons comprenant les étapes d'ajout d'énergie décrites ci-dessus. De l'énergie supplémentaire peut être ajoutée par chauffage ou exposition de la pré-suspension à une énergie électromagnétique, des sources de faisceau de particules ou de faisceau électronique. L'énergie électromagnétique comprend l'utilisation d'un faisceau laser, d'énergie électromagnétique dynamique, ou d'autres sources de rayonnement. Il est en outre envisagé d'utiliser des ultrasons, un champ électrique statique et un champ magnétique statique en tant que source d'ajout d'énergie. Dans un autre aspect de l'invention, des excipients et/ou véhicules pharmaceutiques additionnels peuvent être ajouté au premier solvant ou au deuxième solvant. Dans un mode de réalisation de l'invention, la substance active est dissoute dans un solvant miscible avec l'eau, la N-méthyl-2 pyrrolidone (NMP), filtrée de manière aseptique à travers un filtre stérilisant de 0,2 µm et précipitée dans une solution de tensioactif stérile (par filtration) (constituée de poloxamère 188, MPEG-2000-DSPE et glycérine dans un tampon phosphate de sodium ajustée en pH) pour former une suspension. Les particules de médicament en suspension sont réduites en taille en utilisant l'homogénéisation à haute pression. Le solvant est éliminé par centrifugation et le solide remis en suspension dans une solution de tensioactif stérile (par filtration). La dispersion est re-homogénéisée pour produire un produit en suspension. La suspension est ensuite chargée dans des flacons en verre, et conditionnée. Une composition pharmaceutique résultant de l'application des procédés décrits ci-dessus peut être administrée directement sous la forme d'une solution ou perfusion injectable. La stérilisation peut être effectuée par stérilisation séparée du concentré de médicament (médicament, solvant, et tensioactif facultatif) et du milieu diluant (eau, et tampons et tensioactifs facultatifs) avant mélange pour former la pré-suspension. Les procédés de stérilisation comprennent la filtration aseptique et la stérilisation par le peroxyde d'hydrogène en phase vapeur. Facultativement, une suspension sans solvant peut être produite par élimination du solvant après précipitation. Cela peut être effectué par centrifugation, dialyse, diafiltration, fractionnement par champ de force, filtration sous haute pression ou d'autres techniques de séparation connues dans l'art. Par exemple, l'élimination du premier solvant, tel que la N-méthyl-2-pyrrolidinone, le diméthylacétamide et similaire, ou des mélanges adaptés de ces substances solvantes, peut être effectuée par un à trois cycles de centrifugation successifs ; avec décantation et élimination du surnageant après chaque centrifugation. Un volume frais du deuxième solvant est ajouté aux matières solides résiduelles et le mélange est dispersé par homogénéisation. Des techniques de mélange sous cisaillement élevé peuvent être appliquées dans cette étape de reconstitution. De plus, dans le procédé décrit ci-dessus, tous les excipients indésirables tels que les tensioactifs peuvent être remplacés par un excipient plus souhaitable par utilisation des procédés de séparation décrits dans le paragraphe ci-dessus. Le solvant et les excipients précédents peuvent être rejetés avec le surnageant après centrifugation ou filtration. Un volume frais de la deuxième solution sans les excipients peut ensuite être ajouté. En variante, un nouveau tensioactif peut être ajouté. Par exemple, une suspension constituée de la substance active, de N-méthyl-2-pyrrolidinone (solvant), de poloxamère 188 (premier excipient), de glycérol et d'eau peut être remplacée par des phospholipides (nouveau tensioactif), du glycérol et de l'eau après centrifugation et élimination du surnageant. Un autre aspect de l'invention concerne les compositions pharmaceutiques comprenant les particules submicroniques de l'invention et un ou plusieurs modificateurs de surface. Un aspect particulier de l'invention concerne les compositions pharmaceutiques comprenant la suspension de médicament résultant de l'application du procédé décrit ci-dessus. Les compositions pharmaceutiques peuvent comprendre en outre un ou plusieurs véhicules pharmaceutiquement acceptables. Un aspect particulier de l'invention est une composition pharmaceutique comprenant de la 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one, ou un hydrate ou solvate de celle-ci, préparée par formulation des particules submicroniques de l'invention avec un ou plusieurs véhicules pharmaceutiquement acceptables. Les véhicules pharmaceutiquement acceptables comprennent au moins un composant choisi dans le groupe comprenant des véhicules pharmaceutiquement acceptables, des diluants, des enrobages, des adjuvants, des excipients, ou des véhicules, tel que des agents conservateurs, des charges, des agents délitants, des agents mouillants, des agents émulsifiants, des agents stabilisants, des agents d'ajustement du pH, des agents de suspension, des agents isotoniques, des agents colorants, des agents antibactériens, des agents antifongiques, d'autres agents thérapeutiques, suivant la nature du mode d'administration et des formes galéniques. Des agents de suspension exemplaires comprennent des alcools isostéaryliques éthoxylés, le polyoxyéthylène-sorbitol et des esters de sorbitan, la cellulose microcristalline, le 25 metahydroxyde d'aluminium, ou des mélanges de ces substances. Des agents antibactériens et antifongiques exemplaires pour la prévention de l'action de micro-organismes comprennent des parabènes, le chlorobutanol, le phénol, l'acide sorbique, et similaire. Des agents isotoniques exemplaires comprennent des glucides, le chlorure de sodium, et similaire. 30 Des exemples de diluants, solvants, véhicules, agents solubilisants, agents stabilisants, émulsifiants et stabilisants d'émulsion, comprennent l'eau, le chloroforme, le saccharose, l'éthanol, l'alcool isopropylique, le carbonate d'éthyle, l'acétate d'éthyle, l'alcool benzylique, l'alcool tétrahydrofurfurylique, le benzoate de benzyle, des polyols, le propylèneglycol, le 1,3-butyléneglycol, le glycérol, les polyéthylèneglycols, le diméthylformamide, Tween® 60, Spart 60, l'alcool cétostéarylique, l'alcool myristylique, le monostéarate de glycéryle et le laurylsulfate de sodium, des esters d'acide gras de sorbitan, et similaire, ou des mélanges adaptés de ces substances. Les compositions pharmaceutiques administrées par injection peuvent être administrées par injection transmusculaire, intraveineuse, et/ou intrapéritonéale. Les compositions de la présente invention sont formulées dans des solutions liquides. De plus, les compositions peuvent être formulées sous forme solide et redissoutes ou mises en suspension immédiatement avant utilisation. La dose journalière totale du composé de cette invention administrée à un patient en doses uniques ou divisées peut être en des quantités, par exemple, d'environ 0,001 à environ 100 mg/kg de poids corporel par jour et particulièrement de 0,01 à 10 mg/kg/jour. Par exemple, chez un adulte, les doses sont généralement d'environ 0,01 à environ 50, en particulier de 0,01 à 10 mg/kg de poids corporel par jour par administration intraveineuse. Le pourcentage de substance active dans une composition peut varier, mais il doit constituer une proportion telle qu'une dose adaptée soit obtenue. Des concentrations de dose unitaire peuvent contenir des quantités telles que des sous-multiples de celles-ci puissent être utilisés pour constituer la dose journalière. Évidemment, plusieurs formes galéniques de dose unitaire peuvent être administrées approximativement simultanément. Une dose peut être administrée aussi fréquemment que nécessaire afin d'obtenir l'effet thérapeutique souhaité. Certains patients peuvent répondre rapidement à une dose plus élevée ou plus faible et peuvent trouver des doses de maintenance plus faibles suffisantes. Pour d'autres patients, il peut être nécessaire de suivre des traitements à long terme au taux de 1 à 4 doses par jour, selon les exigences physiologiques de chaque patient particulier. Il va sans dire que, pour d'autres patients, il sera nécessaire de prescrire pas plus d'une ou deux doses par jour. Les formulations peuvent être présentées dans des récipients monodoses ou multidoses, par exemple des ampoules scellées et des flacons avec des bouchons élastomères. Les compositions pharmaceutiques de la présente invention contiennent de préférence une quantité pharmaceutiquement efficace des particules submicroniques de l'invention. Dans la détermination de la quantité ou dose efficace, plusieurs facteurs sont pris en compte par le diagnosticien traitant, comprenant, mais non limités à : l'espèce de mammifère ; sa taille, son âge, et sa santé générale ; la maladie spécifique en question ; le degré ou l'avancement ou la gravité de la maladie ; la réponse du patient individuel ; le mode d'administration ; les caractéristiques de biodisponibilité de la préparation administrée ; le régime posologique choisi ; l'utilisation de médicament concomitant ; et d'autres circonstances associées. Les compositions pharmaceutiques de la présente invention peuvent être administrées avec d'autres agents thérapeutiques et/ou prophylactiques et/ou médicaments qui ne sont pas médicalement incompatibles avec celles-ci. Tous les composants des présentes compositions doivent être pharmaceutiquement acceptables. Dans le présent contexte, un composant « pharmaceutiquement acceptable » est un composant qui est adapté pour utilisation avec des humains et/ou d'autres animaux sans effets secondaires indésirables imprévus (tels que toxicité, irritation et réponse allergique) en proportion avec un rapport bénéfice/risque raisonnable. La présente invention concerne en outre l'utilisation des compositions pharmaceutiques de l'invention en médecine. La 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one présente une activité in vitro et in vivo indiquant qu'elle est un inhibiteur puissant de la prolifération de cellules tumorales, et, en tant que telle, peut être utilisée dans le traitement ou la prévention de maladies causées ou exacerbées par la prolifération de cellules tumorales. En particulier, les particules submicroniques de l'invention peuvent être utilisées dans le traitement de tumeurs solides, à la fois de tumeurs solides primaires et métastasiques, de carcinomes et de cancers, en particulier : le cancer du sein ; le cancer du poumon ; le cancer de l'intestin grêle, le cancer du côlon et du rectum ; le cancer des voies respiratoires, de l'oropharynx et de l'hypopharynx ; le cancer de l'oesophage ; le cancer du foie, le cancer de l'estomac, le cancer des voies biliaires, le cancer de la vésicule biliaire, le cancer du pancréas ; les cancers du tractus urinaire, comprenant le rein, l'urothélium et la vessie ; les cancers de l'appareil génital féminin, comprenant le cancer de l'utérus, du col de l'utérus et des ovaires, le chorioépithéliome et le cancer trophoblastique ; les cancers de l'appareil génital masculin, comprenant le cancer de la prostate, des vésicules séminales et des testicules, les tumeurs des cellules germinales ; les cancers des glandes endocrines, comprenant le cancer de la thyroïde, de l'hypophyse et des glandes surrénales ; les cancers de la peau, comprenant les hémangiomes, les mélanomes et les sarcomes, comprenant le sarcome de Kaposi ; les tumeurs du cerveau, des nerfs, des yeux et des méninges, comprenant les astrocytomes, les gliomes, les glioblastomes, les rétinoblastomes, les neurinomes, les neuroblastomes, les schwannomes et les méningiomes ; les tumeurs solides résultant de tumeurs malignes hématopoïétiques, comprenant les leucémies, les chloromes, les plasmocytomes, les mycoses fongoïdes, le lymphome T ou la leucémie, un lymphome non hodgkinien, des hémopathies malignes ou des myélomes. Un aspect de l'invention est un procédé de traitement de maladies causées ou exacerbées par la prolifération de cellules tumorales qui comprend l'administration à un patient nécessitant un tel traitement d'une quantité pharmaceutiquement efficace de 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one, ou un hydrate ou solvate de celle-ci, ayant une taille de particule moyenne effective d'environ 0,4 à environ 0,8 µm, ou une quantité pharmaceutiquement efficace d'une composition pharmaceutique de la présente invention. Un autre aspect de l'invention est un procédé de traitement de tumeurs solides, à la fois de tumeurs solides primaires et métastasiques, de carcinomes et de cancers, en particulier : le cancer du sein ; le cancer du poumon ; le cancer de l'intestin grêle, le cancer du côlon et du rectum ; le cancer des voies respiratoires, de l'oropharynx et de l'hypopharynx ; le cancer de l'oesophage ; le cancer du foie, le cancer de l'estomac, le cancer des voies biliaires, le cancer de la vésicule biliaire, le cancer du pancréas ; les cancers du tractus urinaire, comprenant le rein, l'urothélium et la vessie ; les cancers de l'appareil génital féminin, comprenant le cancer de l'utérus, du col de l'utérus et des ovaires, le chorio-épithéliome et le cancer trophoblastique ; les cancers de l'appareil génital masculin, comprenant le cancer de la prostate, des vésicules séminales et des testicules, les tumeurs des cellules germinales ; les cancers des glandes endocrines, comprenant le cancer de la thyroïde, de l'hypophyse et des glandes surrénales ; les cancers de la peau, comprenant les hémangiomes, les mélanomes et les sarcomes, comprenant le sarcome de Kaposi ; les tumeurs du cerveau, des nerfs, des yeux et des méninges, comprenant les astrocytomes, les gliomes, les glioblastomes, les rétinoblastomes, les neurinomes, les neuroblastomes, les schwannomes et les méningiomes ; les tumeurs solides résultant de tumeurs malignes hématopoïétiques, comprenant les leucémies, les chloromes, les plasmocytomes, les mycoses fongoïdes, le lymphome T ou la leucémie, un lymphome non hodgkinien, des hémopathies malignes ou des myélomes, ledit procédé comprenant l'administration à un patient nécessitant un tel traitement d'une quantité pharmaceutiquement efficace de 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydropyrido[2,3-b]indol-2-one, ou d'un hydrate ou solvate de celle-ci, ayant une taille de particule moyenne effective d'environ 0,4 à environ 0,8 µm, ou une quantité pharmaceutiquement efficace d'une composition pharmaceutique de la présente invention. Un aspect de la présente invention est l'utilisation de 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one, ou un hydrate ou solvate de celle-ci, ou un sel pharmaceutiquement acceptable de celle-ci, ayant une taille de particule moyenne effective d'environ 0,4 à environ 0,8 µm dans la fabrication de produits médicinaux pour le traitement de maladies causées ou exacerbées par la prolifération de cellules tumorales. Un autre aspect de l'invention est l'utilisation de compositions pharmaceutiques comprenant des particules submicroniques de 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydropyrido[2,3-b]indol-2-one pour le traitement de maladies causées ou exacerbées par la prolifération de cellules tumorales. Selon la présente invention, le composé de l'invention peut être administré en combinaison avec une (ou plusieurs) substance(s) active(s) anticancéreuse(s), en particulier des composés antitumoraux, tels que des agents d'alkylation, tels que des alkylsulfonates (busulfan), la dacarbazine, la procarbazine, les moutardes à l'azote (la chlorméthine, le melphalan, le chlorambucil), le cyclophosphamide ou l'ifosfamide ; les nitroso-urées, telles que la carmustine, la lomustine, la sémustine ou la streptozocine ; des alcaloïdes antinéoplasiques, tels que la vincristine ou la vinblastine ; des taxanes, tels que le paclitaxel ou le taxotère ; des antibiotiques antinéoplasiques, tels que l' actinomycine ; des agents intercalants, des antimétabolites antinéoplasiques, des antagonistes de folate ou le méthotrexate ; des inhibiteurs de synthèse de purine ; des analogues de purine, tels que la mercaptopurine ou la 6-thioguanine ; des inhibiteurs de synthèse de pyrimidine, des inhibiteurs d'aromatase, la capécitabine ou des analogues de pyrimidine, tels que le fluoro-uracile, la gemcitabine, la cytarabine et la cytosine arabinoside ; le bréquinar ; des inhibiteurs de topoisomérase, tels que la camptothécine ou l'étoposide ; des agonistes et antagonistes hormonaux anticancéreux, comprenant le tamoxifène ; des inhibiteurs de kinase, l'imatinib ; des inhibiteurs de facteur de croissance ; des anti-inflammatoires, tels que le polysulfate de pentosan, des corticostéroïdes, la prednisone ou la dexaméthasone ; des anti-topoisomérases, tels que l'étoposide, des anthracyclines, comprenant la doxorubicine, la bléomycine, la mitomycine et la mithramycine ; des complexes de métaux anticancéreux, des complexes de platine, le cisplatine, le carboplatine ou l'oxaliplatine ; l'interféron-alpha, le triphénylthiophosphoramide ou l'altrétamine ; des agents antiangiogenèse ; la thalidomide ; des adjuvants immunothérapeutiques ; ou des vaccins. La préparation et les propriétés de la 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydropyrido[2,3-b]indol-2-one, ou un hydrate ou solvate de celle-ci, ayant une taille de particule moyenne effective entre environ 0,4 à environ 0,811m, et des compositions pharmaceutiques de celle-ci sont décrites dans la section expérimentale suivante. Un matériau de départ de 3- (2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one adapté pour les procédures présentement décrites comprend, mais n'est pas limité à, la 3-(2,4-dichlorophényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one préparée par les procédures décrites dans WO2004/041817. Exemple 1 .......................................................................... .......................................................................... .......................................................................... .................................. . ...Étape Instructions 1. Préparation du concentré de médicament et de la solution de tensioactif 1.1. Distribuer la substance active dans un récipient en verre. 1.2. Peser de la N-méthylpyrrolidone, chauffer à pas plus de 65 °C, et ajouter lentement la poudre de médicament pesée de 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido [2,3-b]indol-2-one. 1.3. Mélanger les deux composants sous chauffage afin de faciliter la dissolution. Ceci est le concentré de médicament. 1 1.4. Distribuer du Poloxamère 188, MPEG-2000-DSPE, de la glycérine, du phosphate de sodium dibasique anhydre. 1.5. Peser approximativement 70 % de la quantité d'eau pour injection (WFI) dans un récipient de préparation. 1.6. Ajouter et dissoudre tous les composants de l'étape 1.4. 1.7. Mesurer et enregistrer le pH (cible : 7,8, la plage est de 7,6 à 8,0). Ajuster le pH si nécessaire, en utilisant de l'hydroxyde de sodium ou de l'acide chlorhydrique. Ceci est la solution de tensioactif. : 2. Filtration stérile 2.1. Filtrer le concentré de médicament à travers un filtre de 0,2 µm. 2 2.2. Filtrer la solution de tensioactif à travers un filtre de 0,2 µm et un filtre de 0,1 µm. 2.3. Essai de charge biologique avant la filtration à 0,2 µm pour le concentré de20 .......................................................................... .......................................................................... .......................................................................... .................................... médicament et avant filtration à 0,1 µm pour la solution de tensioactif. : 3. Microprécipitation et homogénéisation 3.1. Charger la solution de tensioactif (de l'étape 2.2) dans un récipient en acier inoxydable (SS) de 101. 3.2. Ajouter le concentré de médicament (de l'étape 2.1) en mélangeant. 3 3.3. Homogénéiser la suspension sous pression élevée (10 000 +/- 2 000 psi). 3.4. Maintenir la suspension dans un récipient en acier inoxydable de 10 1 pendant pas moins de 2 heures. 3.5. Rincer l'homogénéisateur en utilisant de la solution de tensioactif additionnelle et transférer la solution dans le récipient SS de 10 1 de manière à diluer plus avant la : ; suspension 4. Élimination du solvant 4.1. Transférer la suspension dans des flacons de centrifugation (1 1 chacun). 4.2. Centrifuger pour séparer les particules solides et le surnageant (7 200 tours/min, 4 60 minutes par cycle). 4.3. Éliminer le surnageant et remplacer par de la solution de tensioactif fraîche (préparée dans l'étape 1.7). 4.4. Répéter les étapes 4.1 à 4.3, trois fois au total. ... 5. Homogénéisation 5.1. Transférer la suspension dans un récipient SS de 10 1, raccordé à un homogénéisateur. 5.2. Homogénéiser jusqu'à ce que la taille de particule cible soit obtenue (10 000 à 20 000 psi) ù Prélever des échantillons pendant le traitement pour mesurer la taille : ; de particu le. .......................................................................... .......................................................................... ................................. 6. Centrifugation (FCR faible) 6 6.1. Transférer la suspension dans des flacons de centrifugation. 6.2. Centrifuger sous une force centrifuge relative faible (à 1000 tours/min, pour un rotor . Sorva . ll .. SLC-6000) . pendant .. 15 . . . minutes. : ; : 7. Ajustement de l'activité 7.1. Transférer la suspension dans un récipient SS de 10 1. 7 7.2. Mesurer l'activité du médicament. 7.3. Ajuster comme requis pour cibler de 22,5 à 27,5 mg/ml en utilisant de la solution de tensioactif (étape 1.7). 8 Traitement de filtration 8.1. Filtrer la suspension à travers des filtres de 10 et 6 µm. 8 8.2. Analyser les matières étrangères associées au procédé, les traces de polymère, les taux de métaux, le pH et le titre. 8.3. Transférer la suspension dans une cuve en acier inoxydable avec un mélangeur supérieur. ... 9. Remplissage et étiquetage 9.1. Charger la suspension dans des flacons (volume de remplissage 10,8, 10,2 à 11,4 ml). 9.2. Purger les flacons avec un espace de tête d'azote, boucher et sceller. 9.3. Essuyer chaque flacon. 9 9.4. Effectuer une inspection visuelle de 100 % des flacons remplis et scellés. Rejeter les flacons qui comportent des défauts de verre ou d'étanchéité, ou des particules visibles. 9.5. Étiqueter les flacons individuels, en utilisant des étiquettes amovibles/repositionnables. 9.6. Emballer les flacons dans un emballage secondaire et étiqueter l'emballage ....................... . .......................................................................... .......................................................................... .......................................................................... ............. .......................................................................... .......................................................................... .......................................................................... .................................... secondaire pour identifier le produit et le numéro de lot. Exemple 2 dessous : Quantité Matériau Substance active 25 mg (2,5 % m/v) Poloxamère 188, NF/EP 5 mg (0,5 % m/v) MPEG-2000-DSPE 2 mg (0,2 % m/v) Phosphate de sodium dibasique, anhydre, USP/EP 1,42 mg (0,14 % m/v) Glycérine, USP/EP 22,5 mg (2,25 % m/v) Eau stérile pour injection, USP qs pour 1 ml pH 6,0 à 9,0 15 Exemple 3 L'analyse de taille de particule est effectuée sur un granulomètre à diffraction laser Horiba LA-920. Un échantillon représentatif est dispersé dans de l'eau filtrée, RO dans le circulateur de l'instrument avec une vitesse d'agitation de 2 jusqu'à ce qu'un % de transmittance de 20 lampe entre 75 et 85 % soit obtenu. Les données sont analysées avec un RRI de 137AO01I, la base de distribution est le volume, et la forme de la distribution est standard. Taille de particule (diffraction laser) D50 : 0,4 à 0,8 µm Un exemple d'une composition pharmaceutique de la présente invention est décrit ci-5 10 25 REVENDICATIONS1. Composition pharmaceutique comprenant des particules comprenant de la 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one et un modificateur de surface, ladite 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one ayant une taille de particule moyenne effective d'environ 0,4 µm à environ 0,8 µm et un modificateur de surface. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que lesdites particules sont dans une phase cristalline. 3. Composition selon la revendication 2, caractérisée en ce que le modificateur de surface est choisi dans le groupe constitué d'un tensioactif anionique, un tensioactif cationique, un tensioactif non ionique ou une molécule tensioactive biologique. 4. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le modificateur de surface est le conjugué 2-distéaroyl-phosphatidyléthanolamine-méthyl-polyéthylèneglycol-2000. 20 5. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que le modificateur de surface est un poloxamère. 6. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que la composition est formulée pour une administration choisie dans le groupe constitué des administrations orale, 25 par inhalation, rectale, nasale, buccale, sublinguale, vaginale, colonique, parentérale, intracisternale ou intrapéritonéale. 7. Composition selon la revendication 1, comprenant en outre un ou plusieurs excipients pharmaceutiquement acceptables. 8. Composition selon la revendication 1, comprenant en outre un ou plusieurs véhicules pharmaceutiquement acceptables. 30 9. Composition de la revendication 1, caractérisé en ce que la 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one est présente dans ladite composition en une quantité entre environ 25 mg/ml et 75 mg/ml. 10. Procédé pour préparer des particules contenant de la 3-(2,4-dichloro-phényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one comprenant la dissolution de 3-(2,4-dichlorophényl)-1,6-diméthyl-1,9-dihydro-pyrido[2,3-b]indol-2-one dans un premier solvant miscible avec l'eau pour former une solution, mélange de la solution avec un deuxième solvant aqueux pour former une pré-suspension ; et ajout d'énergie à la pré-suspension pour former des particules ayant une taille de particule moyenne effective entre environ 0,4 à environ 0,8 µm. 11. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que la solution comprend un modificateur de surface. 12. Procédé selon la revendication 10, caractérisé en ce que le deuxième solvant aqueux comprend un modificateur de surface. 13. Forme galénique comprenant la composition selon la revendication 1. 14. Forme galénique selon la revendication 13 sous la forme d'une suspension. 15. Composition pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite composition est formulée pour administration intraveineuse. 16. Composition pharmaceutique selon la revendication 15 sous la forme d'une suspension. 17. Procédé de traitement d'une maladie causée ou exacerbée par la prolifération de cellules tumorales qui comprend l'administration à un patient nécessitant un tel traitement 30 d'une quantité pharmaceutiquement efficace de la composition selon la revendication 1. 18. Utilisation de la composition pharmaceutique selon la revendication 1 pour le traitement de maladies causées ou exacerbées par la prolifération de cellules tumorales.