Brevet FR2959992A1 — publié le 20111118

La présente invention concerne le domaine général des antiviraux et plus particulièrement, des agents antiviraux dirigés contre les Entérovirus. Plus précisément, l'invention concerne de nouveaux peptides qui présentent une activité inhibitrice d'une protéase (également nommée activité anti- protéasique), et en particulier des peptides qui présentent un intérêt pour le traitement prophylactique ou thérapeutique d'une infection par un Entérovirus, et notamment par un Rhinovirus ou un Echovirus. Les entérovirus sont des virus non-enveloppés à ARN simple brin de polarité positive. Ils appartiennent à la famille des Picornaviridae. Actuellement, différentes espèces d'entérovirus humains ont été identifiées : les entérovirus A, les entérovirus B (avec notamment les Echovirus dont l'ECHOvirus 6), les entérovirus C (avec les Poliovirus), les Entérovirus D et les Rhinovirus Humains (RVH) A (comprenant environs 75 membres dont le RVH-2), B (comprenant environ 25 membres), C et D. Ces espèces sont définies selon des critères phylogénétiques basés, notamment sur la partie du génome codant les protéines structurales. Les entérovirus peuvent être responsables de différents types de pathologies, bénignes ou sévères, telles que notamment des paralysies flasques aiguës, méningites aseptiques, syndrome pieds-mains-bouche, maladies respiratoires, rhumes, otites, sinusites, cardiopathies aiguës ou chroniques, diarrhées, pancréatites, atteintes oculaires, encéphalites... En particulier, la présentation clinique du RVH ne se limite pas au simple rhume, puisque ce virus est également associé aux otites moyennes aigues chez l'enfant (Pitkaranta, Virolainen et al. 1998) et aux sinusites chez l'adulte (Pitkaranta, Arruda et al. 1997). De plus, il peut être la cause de complications graves chez les sujets à risque tels que les patients asthmatiques (Nicholson, Kent et al. 1993) ou ceux souffrant d'immunodéficience. Aucun traitement spécifique contre le Rhinovirus Humain n'est disponible actuellement et aucun vaccin n'existe pour prévenir cette infection puisque près de 100 sérotypes différents du RVH ont été caractérisés. Le traitement de la maladie vise essentiellement à en soulager les symptômes. Différentes approches chimio-thérapeutiques ont tenté et tentent toujours de mieux combattre le RVH. Ces approches peuvent être classées en deux groupes et consistent à : le groupe : (1) inhiber l'étape de déshabillage du virus par fixation de différents ligands au niveau de la capside. Plusieurs composés synthétiques ont fait l'objet d'essais cliniques aux Etats-Unis : Disoxaril (WIN 51711), WIN 54954, Pleconaril (WIN 63843, picovir), Pirodavir (R 77975) et R 61837 (Patick, 2006). Aucun d'entre eux n'a été approuvé par l'US Food and Drug Administration. (2) empêcher l'attachement du virus sur son récepteur. Près de 90% des sérotypes du RVH utilisent le récepteur ICAM-1 pour se fixer aux cellules susceptibles d'être infectées. Ainsi, une des stratégies adoptées consiste à bloquer cette fixation en utilisant des formes solubles de ICAM-1 (sICAM-1) (Turner, Wecker et al. 1999; Turner 2001). Le Tremacamra (BIRR-4), mis au point par Boechringer Ingelheim, a été évalué dans 4 essais cliniques en double-aveugle (Turner, Wecker et al. 1999). Le Tremacamra est capable de réduire la gravité des rhumes provoqués de manière expérimentale qu'il soit administré avant ou après infection. Cette molécule semble, cependant, moins efficace quand elle est administrée à des temps variables de 12h et plus après infection. Par ailleurs, il a été rapporté qu'une réponse humorale peut se développer contre ces formes solubles de ICAM-1 et diminuer ainsi leur efficacité. (3) diminuer la réponse inflammatoire provoquée par l'infection par le RVH en utilisant des interférons. Les interférons sont au centre des réponses antivirales et anticancéreuses par l'intermédiaire de cascades de signalisation engendrées par leur fixation à des récepteurs spécifiques. Plusieurs études ont évalué l'efficacité d'un interféron alpha 2b recombinant dans la prévention ou le traitement de rhumes dus au RVH (Hayden, Albrecht et al. 1986; Sperber, Levine et al. 1989). Dans ces études, l'injection intranasale d'interféron s'est montrée efficace à la fois dans les rhumes « naturels » et expérimentaux, quand elle a été effectuée avant infection. Par contre, elle n'a eu peu ou pas d'effets, quand elle a été administrée chez des patients déjà infectés. Plusieurs effets secondaires, comme des saignements de la muqueuse nasale, ont également été relevés dans ces études. 2ème groupe : inhiber l'activité des protéases virales. Les protéases 3C (nommée 3Cpro) et 2A (nommée 2Apro) du rhinovirus sont des cibles thérapeutiques particulièrement intéressantes. En effet, elles jouent un rôle essentiel dans le cycle réplicatif du virus : elles catalysent la maturation du précurseur protéique viral et sont au centre des perturbations de certaines fonctions intracellulaires induites par l'infection par le Rhinovirus. Différents composés ont été testés pour leur capacité à inhiber l'activité de ces protéases. Le Rupintrivir (AG7088) et le Compound 1 pour la 3Cpro ; l'elastinal, le MPCMK (methoxysuccinyl-Ala-Ala-Pro-Val-chloromethylketone), le z-VAM.fmk et l'homophthalimide (LY353349) pour la 2Apro (Molla, Hellen et al. 1993; Wang, Johnson et al. 1998; Deszcz, Seipelt et al. 2004; Deszcz, Cencic et al. 2006). Aucun de ces composés n'est actuellement utilisé en thérapie et aucun essai clinique les incluant n'a été décrit dans la littérature. Plusieurs études ont également porté sur des peptides dérivés de la séquence de la polyprotéine du RVH (US5559025, CA208221, EP0263214 et EP0263202 notamment) qui présentent une activité inhibitrice de la 2Apro virale. Aujourd'hui, les besoins thérapeutiques pour le traitement des affections liées aux Rhinovirus, ne sont pas satisfaits. Aussi, dans ce contexte, la présente invention se propose de fournir de nouveaux dérivés peptidiques, utiles pour le traitement d'une infection par un Entérovirus, et en particulier par un Rhinovirus Humain. La présente invention a donc pour objet les peptides dont la partie C-terminale a la séquence X1-X2-X3-X4-X5-X6 dans laquelle : - X1 et X3, identiques ou différents, sont Leu, Ile ou Phe, ou un acide aminé non conventionnel dérivé de Leu, Ile ou Phe, X2 et X4, identiques ou différents, sont un acide aminé quelconque, X5 est Asn, Thr ou Gln, ou un acide aminé non conventionnel dérivé de Asn, Thr ou Gln, et X6 est un acide aminé hydrophobe. La présente invention a également pour objet les dérivés chimiques de tels peptides. Les peptides selon l'invention présentent une séquence peptidique X1-X2-X3-X4-X5-X6 C-terminale telle que définie ci-dessus qui correspond à un pseudo-substrat de la 2Apro du RVH-2 et qui mime la séquence P1-P6 (selon la nomenclature proposée par Schechter and Berger (Schechter and Berger 1968) du demi-site de clivage de certains substrats naturels de la 2Apro. Dans le cadre de l'invention, les inventeurs ont démontré que ce motif était directement impliqué dans l'interaction avec la 2Apro du RVH-2. De plus, les inventeurs ont démontré que les peptides selon l'invention présentent un spectre d'action plus large qui s'étend à d'autres 2Apro entérovirales, et donc plus largement aux 2Apro des entérovirus, et possiblement à toute protéase, virale ou non virale, en particulier ayant les mêmes propriétés catalytiques. En effet, une interaction in vitro entre ces peptides, et en particulier avec le peptide LVLQTM (SEQ ID N°9) de l'extrémité C-terminale de la protéine cellulaire RBM6 delta 6 et la 2Apro du RVH-2 a été mise en évidence. D'autre part, il a été démontré que de tels peptides se comportent comme des inhibiteurs réversibles de l'enzyme viral in vitro ainsi que dans des cellules de mammifères. De la même manière, il a été démontré que l'extrémité C-terminale de RBM6 delta 6 présente également des propriétés inhibitrices sur la 2Apro d'ECHOvirus 6, ce qui permet d'envisager les peptides selon l'invention comme des inhibiteurs des 2Apro entérovirales. L'invention concerne également, les peptides dont la partie C-terminale correspond à la séquence : X1-X2-X3-X4-X5-X6 précédemment définie, ainsi que ceux qui vont être définis dans la suite de la description, ainsi que la protéine RBM6 delta 6 sous une forme isolée, qui présentent une activité inhibitrice d'une protéase virale ou cellulaire, notamment une activité inhibitrice de la protéase 2A du rhinovirus et/ ou d'une protéase (virale ou non virale) ayant, en particulier, les mêmes propriétés catalytiques que la protéase 2A du rhinovirus. Selon un autre de ses aspects, l'invention a également pour objet la protéine RBM6 delta 6 sous une forme isolée et les peptides tels que précédemment définis, ainsi que ceux qui vont être définis dans la suite de la description, utilisés pour le traitement thérapeutique ou prophylactique d'un Entérovirus, ainsi que les compositions pharmaceutiques les comprenant, en association avec un excipient pharmaceutiquement acceptable. Avant de donner une description plus détaillée de l'invention, un certain nombre de définitions des termes employés pour définir l'invention, va être rappelé. Par « peptide », on entend tout enchaînement d'acides aminés, sans limitation supérieure de taille. Le terme peptide englobe donc les peptides de grande taille, classiquement qualifiés de protéines. Le terme « peptide » désigne un enchaînement de deux ou plusieurs acides aminés liés entre eux par des liaisons peptidiques ou par des liaisons peptidiques modifiées. Les acides aminés présents au sein des peptides selon l'invention, à moins qu'il n'en soit spécifié autrement, peuvent être des acides aminés naturels : Leucine (Leu), Glycine (Gly), alanine (Ala), Isoleucine (Ile), Valine (val), Sérine (Ser) Thréonine (Thr), Phénylalanine (Phe), Tryptophane (Trp), Tyrosine (Tyr), Proline (pro), Cystéine (Cys), Méthionine (Met), Asparagine (Asn), Glutamine (Gin), Arginine (Arg), Lysine (Lys), Histidine (His), Acide Aspartique (Asp), Acide glutamique (Glu) qui sont de conformation L, ou bien des acides aminés non naturels, nommés acides aminés non conventionnels tels que notamment les acides aminés ci-dessous Nle = L-norleucine ; Aabu = acide a-aminobutyrique ; Hphe = L-homophénylalanine ; Nva =_ L-norvaline ; Gabu = acide y-aminobutyrique ; Daia = D-alanine ; Dcys = D-cysteine; Dasp = acide D-aspartique; Dglu = acide D-glutamique ; Dphe = D-phénylalanine ; Dhis = D-histidine ; Dile = D-isoleucine ; Dlys = D-lysine ; Dieu = D-leucine ; Dmet = D-méthionine ; Dasn = D-asparagine ; Dpro = D-proline ; Dgln = D-glutamine ; Darg = D- arginine ; Dser = D-serine ; Dthr = D-thréonine ; Dval = D-valine ; Dtrp = D-tryptophan ; Dtyr = D-tyrosine ; Dorn = D-ornithine ; Aib = acide aminoisobutyrique ; Etg = L-éthylglycine ; Tbug = L-t-butylglycine ; Pen = pénicillamine ; Anap = a-naphthylalanine ; Chexa = cyclohexylalanine ; Cpen = cyclopentylalanine ; Cpro = aminocyclopropane carboxylate ; Norb = aminonorbornylcarboxylate ; Mala = L-a-méthylalanine ; Mcys = L-améthylcysteine ; Masp = acide L-a-méthylaspartique ; Mglu = acide L-améthylgiutamique ; Mphe = L-a-méthylphénylalanine ; Mhis = L-améthylhistidine ; Mile = L-a-méthylisoleucine ; Mlys = L-a-méthyllysine ; Mleu = L-a-méthylleucine ; Mmet = L-a-méthylméthionine ; Masn = L-améthylasparagine ; Mpro = L-a-méthylproline ; MgIn = L-a-méthylglutamine ; Marg = L-a-méthylarginine ; Mser = L-a-méthylsérine ; Mthr = L-améthylthréonine ; Mval = L-a-méthylvaline ; Mtrp = L-a-méthyltryptophan ; Mtyr = L-a-méthyltyrosine ; Morn = L-a-méthylornithine ; Mnle = La- méthylnorleucine ; Maabu = acide a-amino-a-méthylbutyrique ; Mnva = L-améthylnorvaline ; Mhphe = L-a-méthylhomophénylalanine ; Metg = L-améthyléthylglycine ; Mgabu = acide a-méthyl-y-aminobutyrique ; Maib = acide a-méthyiaminoisobutyrique ; Mtbug = L-a-méthyl4-butylglycine ; Mpen = a-méthylpenicillamine; Manap = a-méthyl-a-naphthylalanine ; Mchexa = a-méthylcyclohexylalanine ; Mcpen = a-méthylcyclopentylalanine ; Dmala = D-a-méthylaianine ; Dmorn = D-a-méthylornithine ; Dmcys = D-améthylcystéine ; Dmasp = acide a-méthylaspartique ; Dmglu = acide D-améthylgiutamique ; Dmphe = D-a-méthylphénylalanine ; Dmhis = D-améthylhistidine ; Dmile = D-a-méthylisoleucine ; Dmlys = D-a-méthyllysine ; Dmleu = D-a-méthylleucine ; Dmmet = D-a-méthylméthionine ; Dmasn = D-a-méthylasparagine ; Dmpro = D-a-méthylproline; Dmgln = D-améthylglutamine ; Dmarg = D-a-méthylarginine; Dmser = D-a-méthylserine ; Dmthr = D-a-méthylthréonine ; Dmval = D-a-méthylvaline ; Dmtrp = D-améthyltryptophan ; Dmtyr = D-a-méthyltyrosine ; Nmala = L-N- méthylalanine ; Nmcys = L-N-méthylcystéine ;Nmasp = acide L-N-méthylaspartique ; Nmglu = acide L-N-méthylglutamique ; Nmphe = L-N- méthylphénylalanine ; Nmhis = L-N-méthylhistidine ; Nmie = L-N-méthylisoleucine ; Nmlys = L-N-méthyllysine ; Nmleu = L-N-méthylleucine ; Nmmet = L-N-méthylméthionine ; Nmasn = L-N-méthylasparagine; Nmchexa = N-méthylcyclohexylalanine ; Nmgln = L-N-méthylglutamine ; Nmarg = L- N-méthylarginine ; Nmser = L-N-méthylsérine ; Nmthr = L-N-méthylthréonine ; Nmval = L-N-méthylvaline; Nmtrp = L-N-méthyltryptophan; Nmtyr = L-N-méthyltyrosine ; Nmorn = L-N-méthylornithine ; Nmne = L-N-méthylnorleucine Nmaabu = acide N-aminoa-méthylbutyrique ; Nmnva = L-N-méthylnorvaline ; Nmhphe = L-N- méthylhomophénylalanine ; Nmetg = L-N-méthyléthylglycine ; Nmgabu = acide N-méthyl-y-aminobutyrique ; Nmcpen = N-méthylcyclopentylalanine ; Nmtbug = L-N-méthyl-t butylglycine ; Nmpen = N-méthylpénicillamine ; Nmanap = N-méthyl-a-naphthylalanine ; Nmaib = acide N-méthylaminoisobutyrique ; Dnmala = D-N-méthylalanine; Dnmorn = D-N- méthylornithine ; Dnmcys = D-N-méthylcystéine ; Dnmasp = D-N-méthylaspartique acide ; Dnmglu = acide D-N-méthylglutamique ; Dnmphe = D-N-méthylphénylalanine ; Dnmhis = D-N-méthylhistidine ; Dnmile = D-N-méthylisoleucine ; Dnmlys = D-N-méthyllysine ; Dnmleu = D-N-méthylleucine ; Dnmmet = D-N-méthylméthionine ; Dnmasn = D-N- méthylasparagine ; Dnmpro = D-N-méthylproline ; Dnmgln = D-N-méthylglutamine ; Dnmarg = D-N-méthylarginine ; Dnmser = D-N-méthylsérine ; Dnmthr = D-N-méthylthréonine ; Dnmval = D-N-méthylvaline; Dnmtrp = D-N-méthyltryptophan ; Dnmthr = D-N-méthyltyrosine ; Nala = N-méthylglycine (sarcosine) ; Nasp = N-(carboxyméthyl)glycine ; Nglu = N-(2- carboxyéthyl)glycine ; Nphe = N-benzylglycine ; Nhhis = N-(imidazolyléthyl)glycine ; Nïle = N-(1-méthylpropyl)glycine ; Nlys = N-(4-aminobutyl)glycine ; Nleu = N-(2-méthylpropyl)glycine ; Nmet = N-(2-méthylthioéthyl)glycine ; Nhser = N-(hydroxyéthyl)glycine ; Nasn = N-(carbamylméthyl)glycine ; Ngln = N-(2 carbamyléthyl)glycine ; Nval = N-(1- méthyléthyl)glycine ; Narg = N-(3-guanidinopropyl)glycine ; Nhtrp = N-(3-indolyléthyl)glycine ; Nhtyr = N-(phydroxyphénéthyl)glycine ; Nthr = N-(1-hydroxyéthyl)glycine ; Ncys = N-(thiométhyl)glycine ; and Nom = N-(3- 2959992 8 aminopropyl)glycine ; Ncpro = N-cyclopropylglycine ; Ncbut = N- cyclobutyglycine ; Nchex = N-cyclohexylglycine ; Nchep = N- cycloheptylglycine ; Ncoct = N-cyclooctylglycine ; Ncdec = N- cyclodécylglycine ; Ncund = N-cycloundécylglycine ; Ncdod = N- 5 cyclododécylglycine ; Nbhm = N-(2,2-diphényléthyl)glycine ; Nbhe = N-(3,3- diphénylpropyl)glycine , Nnbhm = N-(N-(2,2- diphényléthyl)carbamylméthyl)glycine Nnbhe = N-(N-(3,3- diphénylpropyl)carbamylméthyl)glycine ; Nbmc = 1-carboxy-1-(2,2- diphényléthylamino)cyclopropane ; et Naeg = N-(2-aminoéthyl)glycine. 10 Dans le cadre de l'invention, le ternie général « acide aminé » désigne donc les acides aminés naturels et les acides aminés non naturels, nommés acides aminés non conventionnels. Par « acide aminé non conventionnel dérivé d'un acide aminé naturel », on entend un aminoacide appartenant à la liste ci-dessus dont le nom 15 comporte le nom de l'acide aminé naturel dont il est le dérivé. Par « dérivé chimique » des peptides selon l'invention, on entend des peptides qui comportent un ou plusieurs groupements additionnels qui ne sont naturellement pas présents sur des séquences peptidiques. De tels groupements ont, par exemple, pour fonction d'améliorer leur solubilité ou 20 leur demi-vie en milieu biologique (tel que, par exemple, le groupement Z -C(0)OBz avec Bz = benzyle qui permet au peptide de mieux franchir la membrane plasmique des cellules), ou encore de réduire leur toxicité ou des effets secondaires indésirables, ou encore de former une liaison covalente irréversible avec leur protéine cible (tel que, par exemple, le groupement fmk 25 = fluorométhylcétone qui peut former un lien covalent avec une cystéine catalytique du centre actif d'un enzyme) pour notamment effectuer des études cristallographique. Egalement, de façon à améliorer leur résistance à la dégradation in vivo, les peptides selon l'invention peuvent être sous forme protégée. Compte tenu de l'application des peptides selon l'invention, la 30 forme de protection doit évidemment être une forme biologiquement compatible et doit être, de préférence, compatible avec une utilisation en prophylatique et en thérapeutique. De nombreuses formes de protection biologiquement compatibles, bien connues de l'homme de l'art, peuvent être envisagées. A titre d'exemple, on peut citer l'acylation ou l'acétylation de l'extrémité amino-terminale, ou l'amidation ou l'estérification de l'extrémité carboxy-terminale du peptide. Ainsi, les peptides selon l'invention pourront être substitués sur leur extrémité N-terminale par un groupement acétyle, un groupement benzoyle, un groupement tosyle ou un groupement benzyloxycarbonyle (Z), ou sur leur extrémité C-terminale par amidation de la fonction hydroxyle du groupement -COOH par un groupement NYY avec Y qui représente une chaîne alkyle, notamment de 1 à 4 atomes de carbone, ou par estérification par un groupement alkyle, notamment de 1 à 4 atomes de carbone. Il est également possible que les deux extrémités du peptide soient protégées. Par peptide ou protéine « purifié » ou « isolé », on entend que le peptide ou la protéine en question est obtenu sous une forme substantiellement exempte de macromolécules du même type. C'est-à-dire que de préférence, le peptide ou la protéine en question représente au moins 75% en masse, préférentiellement au moins 85% en masse, et plus préférentiellement au moins 95% en masse, voire plus de 98% en masse des macromolécules biologiques présentes du même type (mais de l'eau, des tampons ou des molécules de faibles masses moléculaires, notamment inférieurs à 1000 daltons peuvent être présentes). Les procédés de purification sont connus de l'homme du métier. Une protéine d'origine naturelle peut, par exemple, être purifiée à partir de lysats et extraits cellulaires, du surnageant du milieu de culture, par des méthodes utilisées individuellement ou en combinaison, telles que le fractionnement, les méthodes de chromatographie, les techniques d'immunoaffinité à l'aide d'anticorps mono ou polyclonaux spécifiques, etc Dans le cadre de l'invention, les peptides peuvent présenter n'importe quelle taille, mais comprennent au moins les 6 acides aminés X1-X2-X3-X4-X5- X6 (NH2->COOH) tels que définis dans le cadre de l'invention. Lorsque plus de 6 acides aminés sont présents au sein des peptides selon l'invention, la liaison à la séquence XI-X2-X3-X4-X5-X6 se fait via X1. Chacun des acides aminés présents au sein des peptides selon l'invention peut être un acide aminé naturel ou non conventionnel. Les peptides selon l'invention comportent, par exemple, de 6 à 1000 acides aminés. Néanmoins, lorsque les peptides selon l'invention devront être administrés dans une composition pharmaceutique, en fonction de la nature de cette composition, il pourra être avantageux que leur taille ne dépasse pas 50, voire 20 amino-acides. Selon un mode de réalisation particulier, ces peptides correspondront à des peptides artificiels. C'est-à-dire qu'ils ne correspondront pas à la séquence entière d'une protéine biologique. Par « protéine biologique », on entend toute protéine présente à l'état naturel et produite naturellement par un organisme vivant, et notamment la protéine RBM6 delta 6 de séquence : MWGDSRPANR TGPFRGSQEE RFAPGWNRDY PPPPLKSHAQ ERHSGNFPGR DSLPFDFQGH SGPPFANVEE HSFSYGARDG PHGDYRGGEG PGHDFRGGDF SSSDFQSRDS SQLDFRGRDI HSGDFRDREG PPMDYRGGDG TSMDYRGREA PHMNYRDRDA HAVDFRGRDA PPSDFRGRGT YDLDFRGRDG SHADFRGRDL SDLDFRAREQ SRSDFRNRDV SDLDFRDKDG TQVDFRGRGS GTTDLDFRDR DTPHSDFRGR HRSRTDQDFR GREMGSCMEF KDREMPPVDP NILDYIQPST QDREHSGMNV NRREESTHDH TIERPAFGIQ KGEFEHSETR EGETQGVAFE HESPADFQNS QSPVQDQDKS QLSGREEQSS DAGLFKEEGG LDFLGRQDTD YRSMEYRDVD HRLPGSQMFG YGQSKSFPEG KTARDAQRDL QDQDYRTGPS EEKPSRLIRL SGVPEDATKE EILNAFRTPD GMPVKNLQLK EYNTGNSNDP GQRSYPGVCI KPGFLVLQTM (SEQ ID N°1) dont la séquence ADN a été soumise le 9 octobre 2007 dans GenBank et porte la référence F1156542). Par « activité inhibitrice d'une protéase», on entend une activité inhibitrice minimale de 50% sur au moins un test de référence pour mesurer l'activité inhibitrice sur ladite protéase. Pour la protéase 2A du Rhinovirus 2, on pourra prendre comme test de référence un test d'hydrolyse du substrat calorimétrique TRPIITTA (SEQ ID N°18)-pNa, et notamment le test décrit dans les exemples ci-après. Le terme « traitement » désigne toute mesure thérapeutique prophylactique ou suppressive d'une maladie ou désordre conduisant à un effet clinique souhaitable ou à tout effet bénéfique, incluant notamment la suppression ou la diminution de un ou plusieurs symptômes, la régression, le ralentissement ou la cessation de la progression du virus ou du désordre qui y est associé. Par « quantité thérapeutiquement efficace », on désigne toute quantité 5 d'une composition qui améliore un ou plusieurs des paramètres caractéristiques de l'affection virale traitée. Certains modes de mise en oeuvre de l'invention vont maintenant être décrits de manière plus précise. L'invention a notamment pour objet des familles plus spécifiques de 10 peptides tels que précédemment définis. Notamment, l'invention concerne les peptides qui correspondent à la séquence X1-X2-X3-X4-X5-X6 telle que précédemment définie, ainsi que les dérivés chimiques de tels peptides. Pour ces différents peptides, ceux dont la partie C-terminale correspond à la séquence X1-X2-X3-X4-X5-X6 telle que précédemment définie, 15 ou ceux qui correspondent exactement à cette séquence, X6 est, par exemple, un acide aminé choisi parmi Leu, Cys, Val, Met, Pro, Tyr, Ile, Ala, Phe, Trp et les acides aminés non conventionnels dérivés de Leu, Cys, Val, Met, Pro, Tyr, Ile, Ala, Phe et Trp. En particulier, X6 est un acide aminé choisi parmi Leu, Cys, Val, Met, et est, de préférence, Met. En effet, la présence 20 d'une méthionine dans une telle position favorise l'interaction du peptide avec la protéase ciblée. C'est ce qui a été démontré dans la publication de (Deszcz, Cencic et al. 2006), pour la protéase 2Apro du RVH où le composé zVAD.fmk, un inhibiteur de caspases capable d'inhiber à la fois l'activité des 2Apro du RVH et CBV4 in vitro et la réplication de ces virus, a été modifié par 25 ajout d'un groupement méthyl ester sur l'aspartate (résidu aspartate remplacé par une méthionine) en position P1 dans zVAD.fmk et a permis de limiter l'action de ce composé sur les protéases 2A et, ainsi, augmenter sa spécificité vis-à-vis des protéases virales. Le nature de X2 et X4 n'est pas déterminante : par exemple, X2 et X4 30 identiques ou différents, sont un acide aminé choisi parmi Val, Lys, Sern Thr, Arg, Cys, His, Phe, Tyr et Gln et les acides aminés non conventionnels dérivés de ces derniers. Les peptides dont la partie C-terminale correspond à un hexapeptide choisi parmi : IKLVTL (SEQ ID N°2), LSLVTL (SEQ ID N°3), FRLTTL (SEQ ID N°4), LCLHTC (SEQ ID N°5), LFLYTC (SEQ ID N°6), LYIYTV (SEQ ID N°7), LKLQTV (SEQ ID N°8), LVLQTM (SEQ ID N°9), LRLKNL (SEQ ID N°10), LRLRNL (SEQ ID N°11), ainsi que les peptides qui correspondent exactement à un hexapeptide choisi parmi IKLVTL (SEQ ID N°2), LSLVTL (SEQ ID N°3), FRLTTL (SEQ ID N°4), LCLHTC (SEQ ID N°5), LFLYTC (SEQ ID N°6), LYIYTV (SEQ ID N°7), LKLQTV (SEQ ID N°8), LVLQTM (SEQ ID N°9), LRLKNL (SEQ ID N°10), LRLRNL (SEQ ID N°11), ainsi que leurs dérivés chimiques, sont des exemples particuliers de peptides selon l'invention. L'hexapeptide LVLQTM (SEQ ID N°9), détecté à l'extrémité C-terminale de la protéine RBM6 delta 6, ainsi que ses dérivés chimiques, est particulièrement préféré. Les peptides selon l'invention peuvent être obtenus par protéolyse ou de manière synthétique, par voie chimique. En particulier, les peptides selon l'invention peuvent être obtenus par synthèse chimique en phase solide ou en phase homogène liquide, ou bien par synthèse enzymatique, ou par génie génétique, selon les techniques bien connues de l'homme de l'art. Les peptides selon l'invention, mais également la protéine RBM6 delta 6 dont la fonction biologique n'avait pas encore été identifiée, sont particulièrement intéressants sur les plans prophylactique et thérapeutique, pour le traitement des Entérovirus, chez les mammifères et, en particulier chez l'homme, et en particulier des Rhinovirus humains, tel que le RVH-2, des Echovirus tel que l'ECHO-6 humain, ou encore des poliovirus et des coxsackievirus dont la protéase 2A entérovirale présente de fortes homologies avec la 2Apro d'ECHO 6 dont l'activité est aussi inhibée par le motif LVLQTM (SEQ ID N°9). Les peptides selon l'invention et la protéine RBM6 delta 6 isolée pourront donc être utilisés en tant que médicament pour le traitement de rhumes, otites, sinusites, ou encore de paralysies flasques aiguës, méningites aseptiques, syndrome pieds-mains-bouche, maladies respiratoires, cardiopathies aiguës ou chroniques, diarrhées, pancréatites, atteintes oculaires, encéphalites. Plus généralement, les peptides selon l'invention et la protéine RBM6 delta 6 isolée pourront être utilisés pour inhiber une protéase virale ou une protéase cellulaire telles que l'élastase, les chymotrypsine-like protéases et les caspases (Skern, Sommergruber et al. 1991). En effet, la protéase 2A des Entérovirus est une cystéine protéase dont l'activité peut être modulée par des inhibiteurs connus de protéases cellulaires. Ainsi, la P2A du RVH-14 et du poliovirus de type 1 est inhibée par des inhibiteurs spécifiques de l'élastase (Molla, Hellen et al. 1993). Bien entendu, les peptides selon l'invention et la protéine RBM6 delta 6 isolée pourront être utilisés pour inhiber des protéases virales ou non virales, autres que les 2Apro des Entérovirus, si ces protéases présentent des propriétés catalytiques proches de la 2Apro virale. Une des applications est l'utilisation d'un peptide selon l'invention ou de la protéine RBM6 delta 6 dans la préparation de lysats cellulaires, notamment pour compléter des cocktails d'inhibiteurs de protéases. Néanmoins, selon un de ses aspects essentiels, l'invention concerne les peptides selon l'invention, ainsi que la protéine RBM6 delta 6 isolée, pour leur utilisation en tant que médicaments, ainsi que les compositions pharmaceutiques contenant l'un des peptides selon l'invention ou la protéine RBM6 delta 6 isolée, en association avec au moins un excipient pharmaceutique convenable. Par excipient pharmaceutique convenable ou acceptable, on entend tout composé ou véhicule entrant dans une composition pharmaceutique qui ne provoque pas ou quasiment pas de réactions secondaires et qui permet, par exemple, de faciliter l'administration des peptides selon l'invention, d'augmenter leur durée de vie et/ou leur efficacité dans l'organisme, d'augmenter leur solubilité, ou encore d'améliorer leur conservation. Ces excipients pharmaceutiquement acceptables sont bien connus de l'homme du métier et seront adaptés, par ce dernier, en fonction de la nature et du mode d'administration des peptides selon l'invention. Le peptide peut, par exemple, être solubilisé dans un ou plusieurs solvants pharmaceutiquement acceptables, classiquement utilisés par l'homme du métier, comme, par exemple, l'eau, le glycérol, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, la vaseline, une huile végétale et tout mélange de ces solvants. Le peptide peut également être formulé dans un vecteur pharmaceutique, comme les liposomes, ou adsorbé sur des polymères organiques poudreux, des supports minéraux comme les talcs et bentonites, et plus généralement solubilisé dans, ou fixé sur, tout vecteur pharmaceutiquement acceptable. Les peptides selon l'invention pourront, par exemple, être administrés par voie orale, sublinguale, sous-cutanée, intramusculaire, intra-veineuse, topique, intratrachéale, intranasale, transdermique, rectale ou intraoculaire. Leurs modes d'administration, posologies et formes galéniques optimaux seront déterminés selon les critères généralement pris en compte dans l'établissement d'un traitement adapté à un patient comme par exemple l'âge ou le poids corporel du patient, la gravité de son état général, la tolérance au traitement et les effets secondaires constatés. Le peptide sera présent au sein de la composition, en une quantité thérapeutiquement efficace. Par exemple, un peptide selon l'invention pourra être présent dans les compositions de l'invention à une concentration comprise entre 0,0005 et 500 ppm (parties par million, poids/poids) environ, et préférentiellement à une concentration comprise entre 0,01 et 5 ppm environ par rapport au poids total de la composition finale. Un peptide selon l'invention peut être utilisé seul ou bien en association avec au moins un autre agent actif, dans une composition pharmaceutique. Les peptides selon l'invention pourront notamment être utilisés en association avec un inhibiteur de protéases déjà connu et/ou avec un composé en cours d'évaluation. L'invention a donc également pour objet les compositions pharmaceutiques contenant de telles associations. D'autres aspects et avantages de l'invention seront mieux compris au vu des exemples ci-après qui permettent d'illustrer l'invention, mais n'ont aucun caractère limitatif. Ces exemples se réfèrent aux figures annexées : La Figure 1 présente un alignement des extrémités C-terminales des peptides identifiés en double hybride. Le motif séquentiel commun L-X-L-XT/N-Z (où X est un acide aminé quelconque et Z un acide aminé hydrophobe) est présenté et aligné avec les résidus P6-P1 de différents sites de clivage connus de la 2Apro. La Figure 2 présente les résultats d'expériences dites de « pull-down » conduites en présence de la 2Apro du RVH-2 et du peptide LVLQTM (SEQ ID N°9). Des lysats bactériens contenant les protéines Sreptag-SUMO, Stretag-SUMO-SEQ ID N°9 ou RVH-2 2Apro-(His)6 ont été mélangés deux à deux et soumis à une chromatographie d'affinité sur billes magnétiques recouvertes de Strep-Tactin. Les complexes fixés ont été séparés sur gel d'acrylamide SDS-PAGE et colorés au Bleu de Coomassie. piste 1 : Streptag-SUMO et RVH-2 2Apro-(His)6 piste 2 : Streptag-SUMO-LVLQTM et RVH-2 2Apro-(His)6 piste 3 : 2Apro-(His)6 du RVH-2 purifiée sur billes de Nickel. Les Figures 3A et 3B présentent des expériences de reconstitution d'un site de clivage complet de la 2Apro du RVH-2 ou d'ECHO 6 à partir du peptide LVLQTM (SEQ ID N°9). Des luciférases recombinantes (61 kDa) contenant les sites hybrides LVLQTM-GPSDM (SEQ ID N°14) ou PIIITTAGPSDM (SEQ ID N°16) ont été synthétisées dans un système de transcription/traduction in vitro en présence de 35S-méthionine et incubées avec de la 2Apro-(His)6 du RVH-2 (figure 3A) ou la 2Apro-(His)6 d'ECHO 6 (figure 3B) recombinantes. Des prélèvements du milieu d'incubation ont été effectués aux temps 15, 30, 45 et 60 minutes puis les protéines ont été séparées par SDS-PAGE et analysées par fluorographie. La Figure 4 présente les pourcentages d'inhibition du peptide StrepTag-SUMO- SEQ ID N°9 sur l'activité de clivage de la 2Apro du RVH-2 in vitro. Le clivage du substrat colorimétrique TRPIITTA(SEQ ID N°18)-p- nitroanilide (25 pM) spécifique de la 2Apro du RVH-2 a été mesuré in vitro en présence de différentes concentrations de la protéine Streptag-SUMO contenant ou non le peptide LVLQTM (SEQ ID N°9). Les mesures d'absorbance ont été effectuées en continue à 405 nm pendant 10 min et la vitesse initiale de chaque réaction a été déterminée. Le pourcentage d'inhibition pour une concentration donnée de protéine Streptag-SUMO ou StrepTag-SUMO- SEQ ID N°9 a été calculé en faisant le rapport des vitesses initiales de réaction déterminées en présence et en l'absence de la protéine. Les valeurs de pourcentage d'inhibition données résultent de la moyenne des valeurs obtenues à partir de 3 expériences indépendantes. Les écart-types sont également représentés. La Figure 5 présente l'inhibition in cellulo de l'activité eIF-4Gase de la 2Apro du RVH-2 par le peptide LVLQTM (SEQ ID N°9). Le clivage du facteur cellulaire eIF-4G (220 kDa) a été étudié dans des cellules A549 surexprimant RBM6 delta 6274-520 et/ou RVH-2 2Apro pendant 48h. Des extraits protéiques ont été préparés, analysés par SDS-PAGE et transférés sur membrane de nitrocellulose. Les échantillons ont ensuite été incubés avec un anticorps polyclonal de lapin anti-eIF-4G puis un anticorps secondaire anti-lapin couplé à la peroxydase. Le contrôle correspond à des cellules A549 mises en présence du produit de transfection seul. La Figure 6 présente l'inhibition de l'infection par le RVH-2 dans les cellules A549 surexprimant RBM6 delta 6274-520. Des cellules A549 surexprimant transitoirement RBM6 delta 6274-520, RBM6 delta 6274-514 ou la protéine SUMO utilisée à titre de témoin négatif ont été infectées par le RVH-2 à une MOI de 1 pendant 20h. L'effet antiviral a été déterminé par la mesure de la DICT50 (dose infectieuse 50 % en culture de tissu sensible) 1) Identification de partenaires de la protéase 2A du RVH-2 par la technique du double-hybride chez la levure, afin d'identifier des inhibiteurs antiviraux ciblant cet enzyme La protéine de fusion LexA-RVH-2 2Apro a été utilisée comme appât pour cribler une banque d'ADNc de placenta humain. Pour cela, la séquence codant pour la P2A du RVH-2 (MGPSDMYVHVGNLIYRNLHLFNSEMHESILVSYSSDLIIYRTNTVGDDYIPSCDCTQ ATYYCKHKNRYFPITVTSHDWYEIQESEYYPKHIQYNLLIGEGPCEPGDCGGKLLCKH GVIGIVTAGGDNAFIDLRHFHCAEEQ, SEQ ID N°12) a été synthétisée en optimisant les codons en usage dans la levure et clonée dans le vecteur pB27 en fusion à LexA. Cette construction a été séquencée et utilisée comme appât pour cribler une banque d'ADNc de placenta humain insérés dans le vecteur P6 (Vojtek and Hollenberg 1995). Le criblage à haut débit de 53,1 millions de clones selon l'approche décrite par Fromont-Racine et al. (Fromont-Racine, Rain et al. 1997) a permis de sélectionner 51 partenaires potentiels. Pour chacun d'entre eux, l'ADNc a été amplifié par PCR et séquencé aux extrémités 5' et 3' pour identifier le gène correspondant dans la base de données GenBank (NCBI). Un indice de confiance PBS (pour Predicted Biological Score) a été attribué à chacune des interactions identifiées (Formstecher, Aresta et al. 2005). Cet indice reflète la réalité biologique des interactions détectées par cette technique (Rain, Selig et al. 2001; Wojcik, Boneca et al. 2002). Parmi les 51 clones isolés, deux présentaient un PBS significatif. Ces derniers codaient pour l'extrémité C-terminale (résidus 274 à 520) de la protéine cellulaire RBM6 delta 6 (GenBank : F1156542) qui résulte de l'épissage alternatif du pré-ARNm RBM6 (Timmer, Terpstra et al. 1999). L'alignement de l'extrémité C-terminale de chacun de ces 51 peptides a permis d'en isoler 10 différents (dont un correspondait à l'extrémité de RBM6 delta 6, LVLQTM, SEQ ID N°9) qui avaient en commun à leur extrémité C-terminale le motif peptidique X1-X2-X3-X4-X5-X6 dans lequel - X1 et X3, identiques ou différents, sont Leu ou Ile, - X2 et X4, identiques ou différents, sont un acide aminé quelconque, - X5 est Asn ou Thr, et - X6 est un acide aminé hydrophobe, ainsi que les dérivés chimiques de tels peptides. Les 10 peptides sont les suivants IKLVTL (SEQ ID N°2), LSLVTL (SEQ ID N°3), FRLTTL (SEQ ID N°4), LCLHTC (SEQ ID N°5), LFLYTC (SEQ ID N°6), LYIYTV (SEQ ID N°7), LKLQTV (SEQ ID N°8), LVLQTM (SEQ ID N°9), LRLKNL (SEQ ID N°10) et LRLRNL (SEQ ID N°11). La Figure 1 présente les séquences peptidiques complètes des clones isolés comprenant les dits peptides. Dans la nomenclature internationale, le site de clivage entre les résidus P1 et Pl' d'un substrat de protéase est représenté de la manière suivante (Schechter and Berger 1968) : NH2-P5-P4-P3-P2-P1-P1'-P2'-P3'-P4'-P5'-000H. Le motif X1-X2-X3-X4-X5-X6 tel que défini dans le cadre de l'invention mime en partie le demi-site de clivage P4-P1 présenté Figure 1 (p4LXTXp1) de plusieurs substrats naturels connus des 2Apro des entérovirus. De plus, les motifs p3QTMp1 et p4LQTp2 de RBM6 delta 6 sont identiques à ceux retrouvés aux mêmes positions au niveau des sites de clivage par RVH-2 2Apro de PABP1 (Poly A Binding Protein) et de la jonction VP1-2Apro de la polyprotéine du RVH-62 respectivement, comme le montre la Figure 1. Pour la suite de l'étude, le peptide LVLQTM dérivé de RBM6 delta 6, SEQ ID N°9 (extrémité C-terminale de RBM6 delta 6) a été sélectionné car il possède une méthionine en P1, résidu décrit par ailleurs pour renforcer considérablement l'interaction avec la 2Apro du RVH-2 (Sommergruber, Ahorn et al. 1992). 2) Le peptide LVLQTM, SEQ ID N°9 de la protéine RBM6 delta 6 interagit in vitro avec la protéase 2A du R VH-2 Le peptide LVLQTM, SEQ ID N°9 de RBM6 delta 6 a été choisi afin de valider in vitro dans des expériences de type « pull-down », les résultats obtenus précédemment in vivo dans la levure. La protéase 2A du RVH-2 est clonée dans le vecteur de surexpression pSCodonl.2 (Eurogentec) entre les sites de restriction NdeI et XhoI et en fusion avec une étiquette (His)6 du côté C-terminal. La séquence nucléotidique codant pour le motif LVLQTM, SEQ ID N°9 est clonée dans le vecteur pET-SUMO (Invitrogen), entre deux sites de restriction BsaI, en phase à l'extrémité C-terminale de la protéine SUMO. L'étiquette Streptag WSHPQFEK (SEQ ID N°13) est ajoutée du côté N-terminal de la protéine fusion SUMO- SEQ ID N°9. Cette construction est transférée dans le vecteur pSCodonl.2. De la même manière, un plasmide pSCodonl.2[streptag-SUMO] est construit pour servir de contrôle dans les expériences décrites ci-après. Ces plasmides sont utilisés pour transformer la souche E.coli B de type SE1 [F-, CmR, ompT, Ion, hsdSB(rB-, mB-), gal, dcm, DE3 (lacI, T7polymerase sous le contrôle du promoteur PIacUV5), ccdB+] et produire les protéines exprimées par chacune de ces constructions. Pour cela, les bactéries sont mises en culture dans un milieu d'auto-induction ZYP-5052 (Studier 2005) à 37°C pendant 5-6 heures sous agitation. Elles sont ensuite transférées à 20°C pendant 16 à 18 heures. Les cellules sont lysées avec un mélange de détergeants (BugBuster, Novagen). Les lysats ainsi obtenus, sont rassemblés deux à deux (StrepTag-SUMO-SEQ ID N°9 et RVH-2 2Apro-(His)6 ou StrepTag-SUMO et RVH-2 2Apro-(His)6) et soumis à une chromatographie d'affinité sur billes magnétiques recouvertes de Strep-Tactin (Qiagen) pendant une heure. Les complexes protéiques fixés aux billes après plusieurs lavages sont séparés sur gel d'acrylamide SDS-PAGE et colorés par du Coomassie Brillant Blue R250. De cette façon, il a été démontré que RVH-2 2Apro-(His)6 co-élue avec StrepTag-SUMO-SEQ ID N°9 mais pas avec StrepTag-SUMO, comme la montre la Figure 2, en comparant les pistes Streptag-SUMO+ RVH-2 2Apro et Streptag-SUMO-LVLQTM+RVH-2 2Apro. Ainsi, le motif SEQ ID N°9 est nécessaire et suffisant pour interagir in vitro avec la protéase 2A du RVH-2, ce qui confirme les résultats obtenus en double-hybride. 3) Reconstitution d'un site de clivage complet de la 2Apro du RVH-2 à partir du peptide SEQ ID N°9 L'hypothèse que le peptide LVLQTM, SEQ ID N°9 mime un demi-site de clivage de substrats connus de la protéase 2A du RVH-2 a été vérifiée dans une série d'expériences où un site hybride LVLQTM-GPSDM (SEQ ID N°14) a été synthétisé. Ce site contient en positions P6-P1 le peptide LVLQTM (SEQ ID N°9) dérivé de RBM6 delta 6 et en positions P1'-P5' la séquence GPSDM (SEQ ID N°15) correspondant aux résidus trouvés dans le site de clivage VP1-P2A (PIITTA-GPSDM, SEQ ID N°16) de la 2Apro de la polyprotéine du RVH-2. Les séquences nucléotidiques codant pour LVLQTM-GPSDM (SEQ ID N°14) ou PIITTA-GPSDM (SEQ ID N°16) sont insérées entre les sites Nhel et BgIII d'une séquence nucléotidique codant pour un peptide reliant les domaines N et C-terminaux d'une luciférase recombinante dans le vecteur pGloSensorTM-10F (Promega). Les protéines correspondantes sont synthétisées dans un système de transcription/traduction in vitro en présence de [35S]-méthionine (TNT SP6 High Yield Wheat Germ Master Mix, Promega). Le tout est incubé 2h à 25°C. Parallèlement, la protéase 2A du RVH-2 est clonée dans le vecteur pSCodonl.2 (Eurogentec) entre les sites de restriction Ndel et Xhol en fusion avec une étiquette (His)6 du côté C-terminal. Ce plasmide est utilisé pour transformer une souche E.coli B de type SE1 [F-, CmR, ompT, Ion, hsdSB(rB-, mB-), gal, dcm, DE3 (lad, T7polymerase sous le contrôle du promoteur PlacUV5), ccdB+]. La 2Apro du RVH-2 a été produite en cultivant les bactéries dans un milieu d'auto-induction ZYP-5052 (Studier 2005) à 37°C pendant 5-6 heures sous agitation, puis à 20°C pendant 16 à 18 heures. Les cellules sont lysées avec du BugBuster (Novagen), centrifugées à 40000g pendant 15 min et le surnageant de centrifugation obtenu est soumis à une chromatographie d'affinité sur résine de nickel (HIS-SelectTM HF Nickel resin, Sigma). La 2Apro purifiée à près de 95% est dialysée contre un tampon D (100mM Tris-HCI, pH 7.5, 200 mM NaCl, 4 mM DTT) et concentrée sur colonne Vivaspin (Sartorius Stedium Biotech). Elle est stockée à -20°C dans le tampon D contenant 50% de glycérol. Les luciférases radioactives (13 pL) synthétisées précédemment et contenant les sites de coupure LVLQTM-GPSDM (SEQ ID N°14) ou PIITfAGPSDM (SEQ ID N°16) sont incubées pendant 45 min à 30°C en présence de 2 pg de RVH-2 2Apro(His)6 recombinante et 13 pL de tampon de réaction 2X (100mM HEPES/NaOH, pH 7.9, 200 mM NaCl, 2 mM EDTA, 10mM DU). Des aliquots du mélange de réaction sont prélevés 15 min, 30 min, 45 min et 1h après le début de l'incubation. Les protéines sont séparées par SDS-PAGE et analysées par fluorographie (Figure 3A). La Figure 3A montre que la luciférase contenant le site LVLQTMGPSDM (SEQ ID N°14 - 61 kDa) est clivée en deux fragments de 25 kDa et 36 kDa dans les 15 premières minutes de la réaction avec la même efficacité que celle observée pour le site naturel de clivage PIITTA-GPSDM (SEQ ID N°16). Ainsi, ces résultats démontrent que le motif LVLQTM, SEQ ID N°9 de RBM6 delta 6 se comporte comme un authentique demi-site de clivage P6-P1 de la 2Apro du RVH-2, présentant donc de ce fait les caractéristiques attendues pour un inhibiteur de la 2Apro. 4) Le peptide LVLQTM-GPSDM, SEQ ID N°14 est clivé par la 2Apro d'ECHOvirus 6 Selon la même stratégie que celle décrite précédemment, la coupure du site LVLQTM-GPSDM (SEQ ID N°14) par la 2Apro d'ECHOvirus 6 (MGAFGQQSGAVYVGNYRVVNRHLATHTDWQNCVWEDYNRDLLVSTTTAHGCDTI ARCHCTSGVYFCASRNKHYPWFEGPGLVEVQESEYYPKRYQSHVLLAAGLSEPGDC GGILRCEHGVIGIVTMEGWGFADVRDLLWLEDDAMEQLEHHHHHH, SEQ ID N°17), un autre membre du genre entérovirus, a été étudiée. Dans ces expériences, la 2Apro de ECHO 6 est clonée dans le vecteur pSCodonl.2 (Eurogentec) entre les sites de restriction Ndel et XhoI en fusion avec une étiquette (His)6 du côté C-terminal. Ce plasmide est utilisé pour transformer une souche E.coli B de type SE1 et produire la 2Apro d'ECHO 6 selon les conditions de culture et de purification décrites pour la 2Apro du RVH-2. Les luciférases radioactives (13 pL) contenant les sites de coupure LVLQTM-GPSDM (SEQ ID N°14) ou PIITTA-GPSDM (SEQ ID N°16) sont incubées pendant 45 min à 30°C en présence de 2 pg de 2Apro(His)6 d'ECHO 6 purifiée et 13 pL de tampon de réaction 2X (100mM HEPES/NaOH, pH 7.9, 200 mM NaCl, 2 mM EDTA, 10mM DTT). Des aliquots du mélange de réaction sont prélevés 15 min, 30 min et 45 min après le début de l'incubation. Les protéines sont séparées par SDS-PAGE et analysées par fluorographie (Figure 3B). La Figure 3B montre que la 2Apro d'ECHO 6 présente les mêmes caractéristiques de clivage du substrat LVLQTM-GPSDM (SEQ ID N°14) que la 2Apro du RVH-2 avec une digestion complète du site en moins de 15 min. Ceci démontre que le motif LVLQTM (SEQ ID N°9) est aussi reconnu comme un authentique demi-site de clivage par la 2Apro d'ECHO 6. Comme cette dernière présente une forte homologie de séquence avec les 2Apro d'autres entérovirus (poliovirus, Coxsackievirus), il est tout à fait envisageable d'appliquer ces résultats à l'ensemble des 2Apro des Entérovirus. 5) Le peptide L VLQTM inhibe l'activité de clivage de la 2Apro du RVH-2 in vitro L'hydrolyse du substrat colorimétrique TRPIITTA(SEQ ID N°18)-pnitroanilide (SEQ ID N°18-pNA) spécifique de la 2Apro du RVH-2 a été mesurée in vitro en présence de la protéine Streptag-SUMO fusionnée ou non au peptide LVLQTM, SEQ ID N°9. Ce substrat contient les résidus P6-SEQ ID N°18-Pi du site de coupure VP1-2Apro de la polyprotéine du rhinovirus 2. Le clivage de ce peptide entre l'alanine à la position Pi et le pNA libère la p-nitroaniline de couleur jaune dont l'absorbance est mesurée à 405 nm (Wang, Sommergruber et al. 1997). Le test d'activité est effectué à 25°C dans un volume final de 1 mL avec un tampon contenant 100 mM de NaCl, 50 mM d'HEPES/NaOH pH8, 1 mM d'EDTA et 10 mM de DU. Différentes concentrations des protéines recombinantes StrepTag-SUMO- SEQ ID N°9 ou StrepTag-SUMO sont pré- incubées avec 0,2 pM de 2Apro du RVH-2 pendant 5 min. Puis 25 pM de substrat sont ajoutés pour initier la réaction. Les mesures d'absorbance sont effectuées en continue à 405 nm pendant 10 min pour déterminer la vitesse initiale de chaque réaction. Le pourcentage d'inhibition pour une concentration donnée de peptide StrepTag-SUMO- SEQ ID N°9 a été calculé en faisant le rapport des vitesses initiales de réaction déterminées en présence et en l'absence de peptide. Les valeurs de pourcentage d'inhibition données à la Figure 4 résultent de la moyenne des valeurs obtenues à partir de 3 expériences indépendantes. Les écart-types sont également représentés. En présence de 25 pM de substrat et 25 pM de protéine StrepTag-SUMO- SEQ ID N°9, la vitesse initiale de la réaction de clivage est réduite de 80% par rapport au témoin sans peptide. La protéine Streptag-SUMO n'a pas d'effet sur la réaction. Ainsi, ces résultats indiquent donc que le motif LVLQTM (SEQ ID N°9) inhibe spécifiquement et significativement le clivage de SEQ ID N°18-pNA par la 2Apro du RVH-2 in vitro. En conclusion, les résultats présentés précédemment montrent que : (i) la protéine cellulaire RBM6 delta 6 possède un motif C-terminal LVLQTM (SEQ ID N°9) nécessaire et suffisant pour interagir avec la 2Apro du RVH-2, (ii) ce motif mime la séquence des résidus aux positions P6-P1 du site de clivage par la 2Apro de la polyprotéine du RVH et inhibe l'activité de 15 clivage de cet enzyme, (iii) ce motif est un pseudo-substrat de la 2Apro du RVH-2 mais aussi de la 2Apro d'ECHO 6, ce dernier enzyme présentant de fortes homologies avec les 2Apro d'autres membres du même genre (Coxsackievirus, Poliovirus), 20 (iv) l'IC50 de 10 pM mesurée pour le peptide LVLQTM (SEQ ID N°9) est bien inférieure à celle mesurée (600 pM) pour des peptides inhibiteurs de la 2Apro du poliovirus (Ventoso, Barco et al. 1999) et sensiblement égale à celle proposée pour le z.LSTT.fmk, un inhibiteur irréversible de la 2Apro du Coxsackievirus B3 (Badorff, Berkely et al. 2000). 25 6) Le fragment C-terminal de RBM6 delta 6, RBM6 delta 6274 520, inhibe l'activité de clivage de la 2Apro du RVH-2 dans les cellules A549 Afin de valider in cellulo les résultats obtenus précédemment in vitro, la forme tronquée RBM6 delta 6274-520 identifiée en double hybride a été 30 surexprimée dans les cellules A549 (épithélium pulmonaire humain) et les effets de ce fragment sur le clivage de eIF-4G (activité eIF-4Gase) par la 2Apro du RVH-2 ont été étudiés. Dans cette étude, les cellules A549 sont maintenues en culture dans un milieu DMEM (milieu modifié Dulbecco, BioWhittaker) complémenté avec 10% (v/v) de sérum de veau foetal, 2 mM de L-glutamine, 100 U/mL de pénicilline et 100 pg/mL de streptomycine, dans un incubateur à 37°C et dans une atmosphère saturée en humidité contenant 5 % de CO2. A confluence, les cellules sont détachées du support par traitement à la trypsine-EDTA et réensemencées dans une fiole de culture contenant 15 mL de milieu frais. La veille de la transfection, les cellules A549 sont ensemencées dans des boîtes de culture 6 cm (Corning) pour atteindre 80% de confluence au moment de la transfection. Les vecteurs pCiNeo[2xStreptag-RBM6 delta 6274-520] et/ou p3xFlag[3xFlag-RVH-2 2Apro] sont transfectés en utilisant les réactifs NanoJuice (Novagen) selon les recommandations du fabricant. Un contrôle « produits de transfection seuls » est effectué. 1. le milieu avec sérum (milieu complet) des cellules est remplacé par un milieu sans sérum (2 mM de L-glutamine, 100 U/mL de pénicilline et 100 pg/mL de streptomycine) avant la transfection 2. pour chaque boîte 6 cm, 300 pL de milieu sans sérum sont mélangés à 3 pL de « transfection core reagent » et 4,5 pL de « transfection booster » 20 3. incubation 5 min à température ambiante 4. ajout de 5 pg de pCiNeo[2xStreptag-RBM6 delta 6274-524] et 3 pg de pCiNeo[2xStreptag] ou 5 pg de p3xFlag[3xFlag-RVH-2 2Apro] et 3 pg de pCiNeo[2xStreptag] ou 5 pg de p3xFlag[3xFlag-RVH-2 2Apro] et 3 pg de pCiNeo[2xStreptag-RBM6 delta 6274-520] 25 5. incubation 15 min à température ambiante 6. ajout du mélange de transfection aux cellules 7. incubation des cellules pendant 4h à 37°C dans une atmosphère saturée en humidité contenant 5 % de CO2 8. le milieu sans sérum est remplacé par du milieu complet 30 9. les cellules sont incubées à 37°C dans une atmosphère saturée en humidité contenant 5 % de CO2 pendant 48h Les protéines cellulaires sont extraites après 48h de transfection selon le protocole suivant : 1. le milieu de culture est aspiré 2. les cellules sont rincées 2 fois au PBS 1X froid 3. les cellules sont incubées 15 min dans la glace avec la solution de lyse Mammalian Protein Extraction Reagent (Roche) supplémentée avec un cocktail d'inhibiteurs de protéases (Complete protease inhibitor Cocktail, Roche) (100 pL par boîte). 4. le tout est récolté dans un eppendorf 1,5 mL 5. centrifugation 15 min 15000 x g à 4°C 6. le surnageant est transféré dans un nouvel eppendorf La concentration des protéines ainsi extraites est déterminée en utilisant la solution The Better Bradford Assay Kit (Pierce). 60 pg de protéines de chaque échantillon sont mélangés à du Laemmli 6X, chauffés 5 min à 100°C puis déposés pour analyse sur gel d'acrylamide 6%. Après migration à 90 V pendant environ 2h, les protéines sont transférées sur une membrane de nitrocellulose pendant 1h30 à 400 mA. La membrane est ensuite saturée avec du lait 5% (dilué dans du TBS 1X) pendant 1h à température ambiante puis incubée sur la nuit à 4°C avec un anticorps anti- eIF-4G (polyclonal de lapin) dilué au 1000e dans la solution de saturation. La membrane est incubée 1h à température ambiante avec un anticorps antilapin couplé à la peroxydase (GE Healthcare) dilué au 2000e dans la solution de saturation. La membrane est lavée 4 fois 20 min avec du TBS-tween (0,1%) puis soumise à analyse. Les solutions 1 et 2 du kit Pierce ECL Detection sont utilisées selon les instructions fournies et les films (Amersham hyperfilm, GE Healthcare) sont utilisés pour détecter le signal. Lorsque RBM6 delta 6274-520 qui contient le peptide LVLQTM, SEQ ID N°9 et la 2Apro du RVH-2 sont co-exprimées dans les cellules A549, l'activité eIF-4Gase de la 2Apro est inhibée, comme le montre la Figure 5, en 30 comparant les pistes RVH-2 2Apro et RVH-2 2Apro + RBM6 delta 6274.520. 7) L'expression du fragment C-terminal de RBM6 delta 6 (RBM6 delta 6274.520,) inhibe l'infection des cellules A549 par le RVH-2 Après avoir démontré que la forme tronquée RBM6 delta 6274-520 contenant à son extrémité C-terminale la séquence LVLQTM (SEQ ID N°9), inhibe l'activité eIF-4Gase de la 2Apro du RVH-2 in cellulo, l'effet inhibiteur potentiel de ce fragment sur le cycle infectieux du RVH-2 dans les cellules A549 a été étudié. Dans cette étude, des cellules A549 sont maintenues en culture dans du milieu DMEM (milieu modifié Dulbecco, BioWhittaker) complémenté avec 10% (v/v) de sérum de veau foetal, 2 mM de L-glutamine, 100 U/mL de pénicilline et 100 pg/mL de streptomycine. L'incubation est réalisée à 37°C dans une atmosphère saturée en humidité contenant 5 % de CO2. A confluence, les cellules sont détachées du support par traitement à la trypsine-EDTA et réensemencées dans une fiole de culture contenant 15 mL de milieu frais. La veille de la transfection, les cellules A549 sont ensemencées dans des plaques 6-puits pour atteindre 80% de confluence au moment de la transfection. Les vecteurs d'expression pCiNeo[2xStreptag-RBM6 delta 6274-5201 ou pCiNeo[2xStreptag-RBM6 delta 6274-514] ou pCDNA3[Streptag-SUMO] sont transfectés en utilisant les réactifs Nano]uice (Novagen) selon les recommandations du fabricant. RBM6 delta 6274-514 correspond à la forme tronquée RBM6 delta 6274.520 identifiée en double hybride sans la séquence C-terminale LVLQTM (SEQ ID N°9). SUMO est une protéine utilisée ici à titre de témoin. 1. le milieu avec sérum (milieu complet) des cellules est remplacé par un milieu sans sérum (2 mM de L-glutamine, 100 U/mL de pénicilline et 100 pg/mL de streptomycine) avant la transfection 2. pour chaque puits d'une plaque 6-puits, 200 pL de milieu sans sérum sont mélangés à 2 pL de « transfection core reagent » et 3 pL de 30 « transfection booster » 3. incubation 5 min à température ambiante 4. ajout de 4 pg de pCiNeo[2xStreptag-RBM6 delta 6274.520] ou 4 pg de pCiNeo[Streptag-RBM6 delta 6274-514] ou 4 pg de pCDNA3[Streptag-SUMO] 5. incubation 15 min à température ambiante 6. ajout du mélange de transfection aux cellules 7. incubation des cellules pendant 4h à 37°C dans une atmosphère saturée en humidité contenant 5 % de CO2 8. le milieu sans sérum est remplacé par du milieu complet 9. les cellules sont incubées à 37°C dans une atmosphère saturée en humidité contenant 5 % de CO2 pendant 24h Les cellules sont infectées par le RVH-2 à une MOI 1, c'est-à-dire qu'en théorie chaque cellule est infectée par une particule virale, après 24h de transfection selon le protocole suivant : 1. le milieu de culture est aspiré 2. les cellules sont rincées une fois avec du milieu DMEM 2% sérum, 2 mM de L-glutamine, 100 U/mL de pénicilline et 100 pg/mL de streptomycine 3. les cellules sont inoculées avec le virus et 1,5 mL de milieu DMEM 2% sérum sont ajoutés 4. les cellules ainsi inoculées sont incubées à 34°C pendant 20h 20 Le surnageant des cellules infectées est prélevé 20h après infection par le RVH-2. Les surnageants sont titrés sur des cellules MRC5 et la DICT50 est déterminée par la méthode de Reed et Muench (Reed L.J. 1938) selon le protocole suivant : 25 1.Les cellules MRC5 sont maintenues en culture dans du milieu EMEM 2% sérum, 2 mM de L-glutamine, 100 U/mL de pénicilline, 100 pg/mL de streptomycine et 2% hepes 1M et ensemencées dans des plaques 24 puits 5 jours avant inoculation avec le RVH-2. Elles sont confluentes le jour de l'infection. 30 2. Le jour de l'infection, huit dilutions de raison 10, de 10-1 à 10-8 sont réalisées pour chaque échantillon de façon à inoculer 100 pL de chaque dilution sur 6 puits par plaque 24 puits. 3. Le milieu de survie des cellules (1,4 mL) est changé avant distribution des suspensions virales sur plaque. 4. 100 pL de suspension virale non diluée sont distribués sur 6 cupules de plaques 24 puits. 5.De la même façon, 100 pL de chaque dilution de virus sont distribués sur 6 cupules de plaques 24 puits. Plusieurs témoins sans virus sont également réalisés. 6.Les plaques sont incubées à 34°C pendant 5 jours. 7. Le 5' jour, la DICT50 est calculée selon la méthode de Reed et Muench. Cette expérience a été répétée 3 fois. Dans les cellules surexprimant RBM6 delta 6274-520 (fragment qui 15 contient à son extrémité C-terminale le peptide LVLQTM, SEQ ID N°9), le titre viral atteint 105'5 DICT50/mL alors que pour les cellules surexprimant la protéine témoin (SUMO), le titre obtenu de 10''5 DICT50/mL, est environ 100 fois plus élevé. RBM6 delta 6274-520 réduit la production des virus RVH-2 dans les cellules A549. Dans les cellules surexprimant RBM6 delta 6274-514 20 (fragment qui ne contient pas à son extrémité C-terminale le peptide LVLQTM, SEQ ID N°9), le titre viral obtenu de 1073 DICT50/mL démontre que la séquence LVLQTM SEQ ID N°9 située à l'extrémité C-terminale de RBM6 delta 6274-520 est responsable de la baisse de production virale dans les cellules A549. 25 Badorff, C., N. Berkely, et al. (2000). "Enteroviral protease 2A directly cleaves dystrophin and is inhibited by a dystrophin-based substrate analogue." 1 Biol Chem 275(15): 11191-11197. Deszcz, L., R. Cencic, et al. (2006). "An antiviral peptide inhibitor that is 30 active against picornavirus 2A proteinases but not cellular caspases." 2 Virol 80(19): 9619-9627. Deszcz, L., J. Seipelt, et al. (2004). "Antiviral activity of caspase inhibitors: effect on picornaviral 2A proteinase." FEBS Lett 560(1-3): 51-55. Formstecher, E., S. Aresta, et al. (2005). "Protein interaction mapping: a Drosophila case study." Genome Res 15(3): 376-384. Fromont-Racine, M., 3. C. Rain, et al. (1997). 'Toward a functional analysis of the yeast genome through exhaustive two-hybrid screens." Nat Genet 16(3): 277-282. Hayden, F. G., J. K. Albrecht, et al. (1986). "Prevention of natural colds by contact prophylaxis with intranasal alpha 2-interferon." N Engl J Med 314(2): 71-75. Molla, A., C. U. Hellen, et al. (1993). "Inhibition of proteolytic activity of poliovirus and rhinovirus 2A proteinases by elastase-specific inhibitors." J Virol 67(8): 4688-4695. Nicholson, K. G., J. Kent, et al. (1993). "Respiratory viruses and exacerbations of asthma in aduits." BMJ 307(6910): 982-986. Pitkaranta, A., E. Arruda, et al. (1997). "Detection of rhinovirus in sinus brushings of patients with acute community-acquired sinusitis by reverse transcription-PCR." J Clin Microbiol 35(7): 1791-1793. Pitkaranta, A., A. Virolainen, et al. (1998). "Detection of rhinovirus, respiratory syncytial virus, and coronavirus infections in acute otitis media by reverse transcriptase polymerase chain reaction." Pediatrics 102(2 Pt 1): 291-295. Rain, J. C., L. Selig, et al. (2001). 'The protein-protein interaction map of Helicobacter pylori." Nature 409(6817): 211-215. Reed L.J., H. M. (1938). "a simple method of estimating 50 per cent end-points." Am J Hvq 27: 493-497. Schechter, I. and A. Berger (1968). "On the active site of proteases. 3. Mapping the active site of papain; specific peptide inhibitors of papain." Biochem Biophys Res Commun 32(5): 898-902. Skern, T., W. Sommergruber, et al. (1991). "Substrate requirements of a human rhinoviral 2A proteinase." Virology 181(1): 46-54. Sommergruber, W., H. Ahorn, et al. (1992). "Cleavage specificity on synthetic peptide substrates of human rhinovirus 2 proteinase 2A." J Biol Chem 267(31): 22639-22644. Sperber, S. J., P. A. Levine, et al. (1989). "Ineffectiveness of recombinant interferon-beta serine nasal drops for prophylaxis of natural colds." Infect Dis 160(4): 700-705. Studier, F. W. (2005). "Protein production by auto-induction in high density shaking cultures." Protein Expr Purif 41(1): 207-234. Timmer, T., P. Terpstra, et al. (1999). "A comparison of genomic structures and expression patterns of two closely related flanking genes in a critical lung cancer region at 3p21.3." Eur J Hum Genet 7(4): 478-486. Turner, R. B. (2001). "The treatment of rhinovirus infections: progress and potential." Antiviral Res 49(1): 1-14. Turner, R. B., M. T. Wecker, et al. (1999). "Efficacy of tremacamra, a soluble intercellular adhesion molecule 1, for experimental rhinovirus infection: a randomized clinical trial." JAMA 281(19): 1797-1804. Ventoso, I., A. Barco, et al. (1999). "Genetic selection of poliovirus 2Apro- binding peptides." J Virol 73(1): 814-818. Vojtek, A. B. and S. M. Hollenberg (1995). "Ras-Raf interaction: two-hybrid analysis." Methods Enzymol 255: 331-342. Wang, Q. M., R. B. Johnson, et al. (1998). "Dual inhibition of human rhinovirus 2A and 3C proteases by homophthalimides." Antimicrob Agents Chemother 42(4): 916-920. Wang, Q. M., W. Sommergruber, et al. (1997). "Cleavage specificity of human rhinovirus-2 2A protease for peptide substrates." Biochem Biophys Res Commun 235(3): 562-566. Wojcik, J., I. G. Boneca, et al. (2002). "Prediction, assessment and validation of protein interaction maps in bacteria." J Mol Biol 323(4): 763-770. REVENDICATIONS1 - Peptides dont la partie C-terminale correspond à la séquence : X1-X2-X3-X4-X5-X6 dans laquelle XI et X3, identiques ou différents, sont Leu, Ile ou Phe, ou un acide aminé non conventionnel dérivé de Leu, Ile ou Phe, X2 et X4, identiques ou différents, sont un acide aminé quelconque, - X5 est Asn, Thr ou Gln, ou un acide aminé non conventionnel dérivé de Asn, Thr ou Gln, et - X6 est un acide aminé hydrophobe, ainsi que les dérivés chimiques de tels peptides, à l'exception de la protéine RBM6 delta 6. 2 - Peptides selon la revendication 1 caractérisés en ce que leur partie C-terminale correspond à la séquence : X1-X2-X3-X4-X5-X6 dans laquelle : X1 et X3, identiques ou différents, sont Leu, Ile ou Phe, de préférence Leu ou Ile, - X2 et X4, identiques ou différents, sont un acide aminé quelconque, - X5 est Asn, Thr ou Gln, de préférence Asn ou Thr, et - X6 est un acide aminé hydrophobe, ainsi que les dérivés chimiques de tels peptides, à l'exception de la protéine RBM6 delta 6. 3 - Peptides selon la revendication 1 ou 2 caractérisés en ce qu'ils correspondent à la séquence X1-X2-X3-X4-X5-X6 telle que définie à la revendication 1 ou 2, ainsi que les dérivés chimiques de tels peptides. 4 - Peptides selon l'une des revendications précédentes caractérisés en ce que X6 est un acide aminé choisi parmi Leu, Cys, Val, Met, Pro, Tyr, Ile, Ala, Phe, Trp et les acides aminés non conventionnels dérivés de Leu, Cys, Val, Met, Pro, Tyr, Ile, Ala, Phe et Trp. 5 - Peptides selon l'une des revendications précédentes caractérisés en ce que X6 est un acide aminé choisi parmi Leu, Cys, Val, Met, et de préférence 30 est Met. 6 - Peptides selon l'une des revendications précédentes caractérisés en ce que X2 et X4 identiques ou différents, sont un acide aminé choisi parmi Val, Réponse notification d'irrégularités du 26 Août 2 5 9992 32 Lys, Sern Thr, Arg, Cys, His, Phe, Tyr et Gin et les acides aminés non conventionnels dérivés de ces derniers. 7 - Peptides selon l'une des revendications précédentes caractérisés en ce que leur *partie C-terminale correspond à un hexapeptide choisi parmi : 5 IKLVTL (SEQ ID N°2), LSLVTL (SEQ ID N°3), FRLTTL (SEQ ID N°4), LCLHTC (SEQ ID N°5), LFLYTC (SEQ ID N°6), LYIYTV (SEQ ID N°7), LKLQTV (SEQ ID N°8), LVLQTM (SEQ ID N°9), LRLKNL (SEQ ID N°10), LRLRNL (SEQ ID N°11), et de préférence à l'hexapeptide LVLQTM (SEQ ID N°9). 10 8 - Peptides selon l'une des revendications précédentes caractérisés en ce qu'ils sont choisis parmi : IKLVTL (SEQ ID N°2), LSLVTL (SEQ ID N°3), FRLTTL (SEQ ID N°4), LCLHTC (SEQ ID N°5), LFLYTC (SEQ ID N°6), LYIYTV (SEQ ID N°7), LKLQTV (SEQ ID N°8), LVLQTM (SEQ ID N°9), LRLKNL (SEQ ID N°10), LRLRNL (SEQ ID N°11) et de préférence est 15 l'hexapeptide LVLQTM (SEQ ID N°9), ainsi que leurs dérivés chimiques. 9 - Peptide choisi parmi les peptides selon l'une des revendications précédentes et la protéine RBM6 delta 6 isolée, pour son utilisation dans le traitement thérapeutique ou prophylactique d'un Entérovirus. 10 - Peptide selon l'une des revendications 1 à 9, en tant que 20 médicament pour le traitement thérapeutique ou prophylactique d'une affection choisie parmi les rhumes, otites, sinusites, paralysies flasques aiguës, méningites aseptiques, syndrome pieds-mains-bouche, maladies respiratoires, cardiopathies aiguës ou chroniques, diarrhées, pancréatites, atteintes oculaires et encéphalites. 25 11 - Peptide selon l'une des revendications 1 à 9, pour son utilisation dans le traitement thérapeutique ou prophylactique d'un Rhinovirus, et notamment d'un Rhinovirus Humain tel que le RVH-2, ou d'un ECHOvirus. 12 - Peptide selon l'une des revendications 1 à 11 caractérisé en ce qu'il présente une activité inhibitrice d'une protéase cellulaire ou virale. 13 - Peptide selon la revendication 12 caractérisé en ce qu'il présente une activité inhibitrice de la protéase 2A du Rhinovirus Humain, et en particulier du RVH-2. Réponse notification d'irrégularités du 26 Août 2(0" 5 9992 33 14 - Peptide selon la revendication 12 caractérisé en ce qu'il présente une activité inhibitrice d'une protéase cellulaire ou virale, autre que la protéase 2A du rhinovirus. 15 - Composition pharmaceutique comprenant un peptide choisi parmi 5 les peptides selon l'une des revendications 1 à 14, en association avec un excipient pharmaceutiquement acceptable. 16 - Composition selon la revendication 15 pour le traitement d'un Entérovirus, et en particulier du Rhinovirus ou de l'ECHOvirus. 17 - Utilisation d'un peptide selon l'une des revendications 1 à 8 et 12 à 10 14, pour la préparation de lysats cellulaires.