Brevet FR2961106A1 — publié le 20111216

MEDICAMENT HOMEOPATHIQUE A ACTIVITE ANTI-CANCEREUSE DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention est relative au domaine des médicaments employés dans le traitement de cancers, dont notamment les mélanomes, les carcinomes, les cancers de la thyroïde, les cancers colorectaux, les cancers du sein, de la prostate et du poumon. En particulier, l'invention concerne un médicament homéopathique dénommé Ruta graveolens 9CH utilisé dans la prévention et/ou le traitement de cancers, plus spécifiquement dans le traitement de différentes formes du mélanome. ARRIERE-PLAN TECHNOLOGIQUE Le mélanome est le deuxième cancer chez l'homme en termes de nombre d'années de vie perdues. Durant les dix dernières années, son incidence a augmenté de façon plus importante (3 à 5% par an) que les autres types de cancer, à l'exception du cancer bronchique chez la femme. En l'an 2000, il était estimé qu'un individu sur 100 développerait un mélanome dans le courant de sa vie et qu'un patient sur 2 aurait moins de 50 ans. Ce type de cancer devient inéluctablement un problème majeur de santé publique. Le mélanome est une tumeur maligne de très mauvais pronostic avec un risque élevé de métastases ganglionnaires et viscérales. Au cours des dernières années, le mécanisme tumoral a été étudié et les mécanismes sous-tendant la progression tumorale peu à peu expliqués. On connaît déjà de nombreux principes actifs plus ou moins efficaces dans le traitement des différentes formes de cancer. La présente invention s'inscrit dans la recherche de nouveaux traitements du cancer sous 25 ses différentes formes, à l'aide de principes actifs pharmaceutiques connus pour d'autres indications. Dans ce contexte, les inventeurs se sont intéressés aux médicaments homéopathiques obtenus à partir d'un extrait de la plante Ruta graveolens L. (Rue fétide), appartenant à la famille des Rutaceae. Cette plante est originaire d'Europe, de la région méditerranéenne 30 en particulier, mais elle est largement répandue dans toutes les régions tropicales et tempérées. Jusqu'à présent, les principales indications cliniques des dilutions homéopathiques de Ruta graveolens L. concernent la traumatologie et la rhumatologie en cas d'entorses 35 simples ou compliquées, de douleurs des luxations, de tendinites, périostites, périarthrites, lombalgies, lombosacralgies. Ruta graveolens L. est alors souvent prescrit en basse (5CH) ou moyenne (7CH) dilution. Les mêmes dilutions homéopathiques de Ruta graveolens L. sont prescrites en ophtalmologie en cas d'asthénopies et troubles de l'accommodation ou de surmenage oculaire. Pathak S et al. [Pathak S, Multani AS, Banerji P, Banerji P. "Ruta 6 selectively induces cet/ death in brain cancer cells but proliferation in normal peripheral blood lymphocytes: A nove/ treatment for human brain cancer". Int J OncolOct; 23:975-982,2003] ont testé l'association de 2 médicaments homéopathiques Ruta graveolens (6CH, 1CH et teinture mère Q) et Calcarea phosphorica 3DH sur des patients souffrant de cancers cérébraux intracrâniens et sur des cultures de cellules tumorales (cellules de gliome humain MGR1, de mélanome métastasique murin K1735x et de leucémie murine HL-60) et des cultures de cellules lymphoïdes humaines normales. L'action de Ruta graveolens 6CH avec Calcarea phosphorica 3DH induit les voies de signalisation de l'apoptose au niveau des cellules tumorales et notamment au niveau des cellules tumorales cérébrales (augmentation du nombre d'aberrations chromosomiques de 6 fois, réduction significative des télomères, arrêt des cellules en phase G2/M supérieure de 3 fois par rapport au contrôle). Cette association de médicaments possède un effet plutôt mitogène au niveau des cellules lymphoïdes normales (augmentation du nombre de cellules en phase mitotique par rapport au contrôle) et semble être différente en fonction du type cellulaire testé. De plus, l'association Ruta graveolens 6CH avec Calcarea phosphorica 3DH protège les cellules lymphoïdes normales des dommages génétiques induits par le peroxyde d'hydrogène (H202), alors qu'elle a un effet synergique avec H202, délétère sur les cellules tumorales testées. De manière générale, ces travaux montrent que l'association Ruta graveolens 6CH avec Calcarea phosphorica 3DH peut induire une réduction des gliomes cérébraux humains in vivo, en détruisant sélectivement les cellules de gliomes, sans nuire aux cellules normales (protection des lymphocytes normaux en induisant une division cellulaire dans les cellules hématopoïétiques). Preethi et al., 2006 [Preethi KC, Kuttan G, Kuttan R "Anti-tumour activity of Ruta graveolens extract". Asian Pac J Cancer Prev, vol 7, 2006, 439-443] enseigne que Ruta graveolens 200CH a une activité anti-tumorale chez la souris vis-à-vis de "Ehrlich Ascites Carcinoma". De la même manière, le traitement de 10 à 12 jours par Ruta graveolens 200CH de ces mêmes lignées de souris présentant des tumeurs solides (injection sous-cutanée de cellules EAC ou DLA) permet de réduire de 8 à 22 fois le volume de la tumeur environ 30 jours post-injection par rapport au contrôle. Preethi et al., 2006 indique également que Ruta graveolens 200CH est actif contre la carcinogénèse chimique dans le foie. Sunila et al., 2007 [Sunila ES, Kuttan G, Preethi KC, Kuttan R. Effect of homeopathic medicines on transplanted tumors in mice. Asian Pacific J Cancer Prev. 2007; 8:390-394] révèle que l'administration de Ruta graveolens 200CH à des souris porteuses de tumeurs ou du lymphome de Dalton, permet d'augmenter d'environ 50% le temps de survie de ces souris. Hari Kumar et al., 2007 [Hari Kumar KB, Sunila ES, Kuttan G, Preethi KC, Venugopal CN, Kuttan R. Inhibition of chemically induced carcinogenesis by drugs used in homeopathic medicine. Asian Pac J Cancer Prev. 2007; 8(l):98-102.] montre lui aussi que des souris Swiss Albinos présentant un sarcome hépatique chimiquement induit, et traitées pendant 20 semaines par Ruta graveolens 200CH, présentent un retard dans l'apparition de leur tumeur. Le traitement de ces souris par Ruta graveolens 200 CH permet ainsi d'augmenter de manière significative leur survie par rapport à un groupe contrôle et induit également une réduction du taux de certaines enzymes hépatiques (Gamma-GT...) ou des marqueurs d'anomalie hépatique (bilirubine). Il ressort de cette revue de l'art antérieur que les dilutions homéopathiques de Ruta graveolens 200CH & 6CH sont connues pour avoir des propriétés anticancéreuses. BREVE DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION Les inventeurs ont mis en évidence le fait que, de manière surprenante et très spécifique, les dilutions homéopathiques moyennes de Ruta graveolens 9CH peuvent être utilisées 25 pour traiter le cancer chez l'animal et plus spécialement chez l'homme. En particulier, les inventeurs ont découvert que Ruta graveolens L. sous forme de dilution homéopathique 9CH, inhibe plus particulièrement l'invasion tumorale et la croissance ou le développement de la tumeur. 30 La présente invention concerne donc une composition pharmaceutique comprenant ou obtenue à partir d'une dilution homéopathique 9CH de Ruta graveolens pour utilisation: - comme médicament anticancéreux; - dans la prévention et/ou le traitement du cancer; 35 - ou pour prévenir et/ou traiter le cancer.20 Ruta graveolens 9CH inhibe plus particulièrement l'invasion tumorale et le développement de la croissance de la tumeur. Ce médicament peut être utilisé seul ou en association avec d'autres médicaments homéopathiques ou agents chimiothérapiques conventionnels. Ruta graveolens 9CH peut être utilisé sous différentes formes pharmaceutiques et sous différentes voies d'administrations. Dé initions Ces définitions sont données à titre d'exemples non limitatifs. Dans tout le présent exposé, "tout" singulier désigne indifféremment un singulier ou un 10 pluriel. Au sens de l'invention, le terme "Ruta graveolens L." ou rue officinale appartient à la division des Magnoliophyta, à la classe des Magnoliopsida, à l'ordre des Sapindales, à la famille des Rutaceae et au genre Ruta. Au sens de la présente invention, un médicament homéopathique est défini par le 15 parlement européen et du conseil selon la directive 2001/83/CE. Un médicament homéopathique est obtenu à partir de produits, substances ou compositions, appelés souches homéopathiques d'origine végétale, animale ou de produits chimiques (minéraux ou organiques), par la méthode des déconcentrations successives. Cette déconcentration est réalisée par des opérations successives de division de la souche dans un véhicule 20 (dilution ou trituration) au 1/100 (centésimales) ou au 1/10 (décimales), et par des opérations de dynamisations successives. Le nombre d'opérations ainsi effectuées définit la hauteur de dilution. Ainsi, les médicaments homéopathiques sont habituellement désignés par le nom latin de la souche suivi de l'indication du degré de dilution. 25 DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION Les cancers plus particulièrement concernés par l'invention sont de préférence 30 choisis dans le groupe constitué par les mélanomes, les carcinomes, les cancers de la thyroïde, du colon-rectum, du sein, de la prostate et du poumon. Les dilutions homéopathiques de Ruta graveolens 9CH sont spécifiquement actives contre les mélanomes. 35 S'agissant du mécanisme d'action, la composition selon l'invention est spécialement adaptée pour une utilisation comme agent inhibiteur de la croissance tumorale et/ou du processus d'invasion tumorale. Avantageusement, la composition selon l'invention, est constituée par une solution aqueuse, alcoolique ou hydroalcoolique obtenue par dilution d'un extrait de Ruta graveolens L. Selon une variante, la composition selon l'invention est caractérisée en ce qu'elle 5 comprend une solution aqueuse, alcoolique ou hydroalcoolique obtenue par dilution 9CH d'un extrait de Ruta graveolens L. Selon une autre variante, la composition selon l'invention est caractérisée en ce qu'elle qu'elle est constituée par une forme sèche préparée à l'aide d'une solution aqueuse, 10 alcoolique ou hydroalcoolique obtenue par dilution 9CH d'un extrait de Ruta graveolens L. Pour optimiser son efficacité, la composition selon l'invention peut comprendre en outre au moins une autre molécule pharmaceutiquement active dans la prévention et/ou le 15 traitement du cancer. Sur la plan de la galénique, la composition selon l'invention est de préférence formulée pour une administration par voie orale, nasale, intramusculaire, intraveineuse ou sous-cutanée. 20 Selon un autre de ses aspects, l'invention vise l'utilisation de la composition selon l'invention pour l'obtention (la fabrication) d'un médicament anticancéreux ou d'un médicament destiné à une utilisation préventive et/ou thérapeutique basée sur l'inhibition du développement tumoral et/ou du processus d'invasion tumorale. 25 Avantageusement, l'administration du médicament est une administration par voie orale, nasale, intramusculaire, intraveineuse ou sous-cutanée, de préférence par voie orale. Selon encore un autre de ses aspects, l'invention vise une association médicamenteuse comprenant la composition selon l'une au moins des revendications 30 précédentes et au moins un médicament homéopathique ou allopathique. L'invention sera mieux comprise à l'aide des exemples qui suivent et des figures annexées qui s'y réfèrent. 35 DESCRIPTION DES FIGURES - La figure 1 montre un graphe donnant le volume tumoral (mm) des souris cancéreuses traitées avec la solution de Ruta graveolens 9CH et avec le témoin (cf. exemple 3). NB : p EXEMPLES Les exemples qui suivent décrivent la préparation d'un médicament homéopathique Ruta graveolens 9CH et d'un témoin, la mesure de l'effet de Ruta graveolens 9CH sur la croissance tumorale in vivo chez des souris présentant une forme de mélanome murin induit par voie sous-cutanée et par voie intraveineuse. 1. Mode de préparation de Ruta graveolens 9CH Ruta graveolens 9CH est un médicament homéopathique préparé suivant la monographie 2371 de la pharmacopée européenne 6.1 de 2008 intitulée Méthodes de préparation des souches homéopathiques et déconcentration. Ruta graveolens 9CH est préparée à partir de la partie aérienne fraîche non ligneuse récoltée avant la floraison de Ruta Graveolens L. (matière première) qui satisfait aux exigences de la monographie Préparations homéopathiques (1038) et constitue la matière première. En fait, 80,43 kg de Ruta Graveolens L. sont mélangés à 108,43 kg d'alcool pur et 8,257 kg d'eau osmosée dans une cuve en inox lors de la phase de macération. Cette phase s'étend sur une période de 37 jours avec une agitation manuelle quotidienne. Ensuite, le mélange est exprimé à l'aide d'une presse hydraulique et filtré à l'aide de filtres spécifiques de 101um puis de 1µm afin d'obtenir une solution parfaitement limpide. Cette solution constitue la teinture mère et contient au moins 0,08% de rutine et entre 0,03 et 0,09% de furanocoumarines. On ajoute alors 29,7 ml d'eau stérile (Fresenius) à 0,30g de la teinture mère dans un flacon carré de 45 ml sous hotte à flux laminaire. Ce mélange est alors agité selon les recommandations de la pharmacopée française Xe édition 6e supplément de 1983 afin d'obtenir Ruta graveolens 1CH. Ensuite, 1,98 ml d'eau stérile sont ajoutés à 0,02 ml de Ruta graveolens 1CH dans un tube de 5 ml sous hotte à flux laminaire, puis la solution est agitée de la même manière que lors de l'étape précédente afin d'obtenir Ruta graveolens 2CH. Les mêmes opérations de fabrication sont répétées jusqu'à l'obtention de Ruta graveolens 7CH. Ensuite, 29,70 ml d'eau stérile sont ajoutés à 0,30 ml de Ruta graveolens 7CH dans un flacon carré de 45,0 ml sous hotte à flux laminaire puis la solution est agitée comme précédemment afin d'obtenir Ruta graveolens 8CH. Dès lors, 83,16 ml d'eau stérile sont ajoutés à 0,84 ml de Ruta graveolens 8CH dans un flacon rond de 125 ml sous hotte à flux laminaire puis la solution est agitée comme précédemment afin d'obtenir Ruta graveolens 9CH. Cette solution est alors filtrée avec des filtres de 0,2 µm. Des ampoules bouteilles de 2 ml sont stérilisées à l'étuve (160°c pendant 2 heures) puis remplies sous hotte à flux laminaire et sous vide avec Ruta graveolens 9CH. 2. Mode de préparation du témoin Le témoin utilisé dans les expérimentations correspond à de l'eau stérile (Fresenius). Des ampoules bouteilles de 2 ml sont stérilisées à l'étuve (160°c pendant 2 heures) puis remplies sous hotte à flux laminaire avec cette eau stérile. 3. Mesure de l'effet de Ruta graveolens 9CH in vivo après injection sous cutanée de cellules tumorales Les effets de Ruta graveolens 9CH ont été étudiés sur le processus d'invasion tumoral in vivo. Les souris utilisées appartiennent à la lignée C57BL/6 et sont regroupées par lots de 10 individus. A JO, on leur injecte au niveau du flanc gauche en sous cutanée un volume de 100 id d'une solution contenant 2.5.105 de cellules B 16F 1 (cellules de mélanome murin). La solution d'injection contient du NaCl 0,85%. Dans le groupe témoin, on injecte chaque matin et à chaque souris 100 id d'eau stérile contenue dans une ampoule à usage unique par voie intra péritonéale (IP) à raison d'une injection/jour tout au long du suivi de la progression tumorale. Dans le groupe traité, on injecte chaque matin et à chaque souris 100 gl de Ruta graveolens 9CH contenue dans une ampoule à usage unique par voie intra péritonéale (IP) à raison d'une injection/jour tout au long du suivi de la progression tumorale. L'effet de Ruta graveolens 9CH dans le groupe traité est évalué par la mesure de la cinétique du volume tumoral et comparé au groupe témoin. Le volume de la tumeur est déterminé selon la formule suivante : v=1/2 A x B2 où A correspond à la plus large dimension de la tumeur alors que B correspond à la plus petite dimension de la tumeur (Wald M, Olejar T, Sebkova V, Zadinova M, Boubelik M, Pouckova P. Mixture of trypsin, chymotrypsin and papain reduces formation of metastases and extends survival time of C57B16 mice with syngeneic melanoma B16. Cancer Chemother Pharmacol. 2001 Jul 47; 47:S16-22). L'effet de Ruta graveolens 9CH dans le groupe traité est aussi évalué par le calcul du temps de survie des souris par rapport au groupe témoin, sachant que la taille de la tumeur ne peut pas excéder 1000 mm3. Une souris dont le volume dépasserait 1000 mm3 est sacrifiée et considérée comme morte. Pour cette étude in vivo, les volumes tumoraux sont comparés entre le groupe traité Ruta graveolens 9CH et le groupe témoin à l'aide d'un test non paramétrique u-test Mann et Whitney. Le résultat de l'effet de Ruta graveolens 9CH sur la progression tumorale in vivo est présenté à J14 (soit 14 jours après l'injection des cellules tumorales) sur la figure 1. Ruta graveolens 9CH ralentit le développement tumoral de manière statistiquement significative par rapport à un traitement témoin. Le résultat de l'effet de Ruta graveolens 9CH sur la survie des animaux est présenté sur la 20 figure 2. Nous montrons ici que Ruta graveolens 9CH améliore le temps de survie des animaux par rapport au groupe témoin traité avec H2O. 4. Mesure de l'effet de Ruta graveolens 9CH in vivo après injection intraveineuse de cellules tumorales 25 Cette mesure vise à étudier les effets de Ruta graveolens 9CH sur le développement de métastases pulmonaires in vivo par l'évaluation du nombre de nodules présents au niveau des poumons après l'injection de cellules tumorales par voie intraveineuse. Les souris utilisées appartiennent à la lignée C57BL/6 et sont regroupées par lots de 8 individus. A JO, on leur injecte au niveau de la veine de la queue un volume de 100 gl d'une solution 30 contenant 2.5.105 de cellules B16F10 (cellules de mélanome murin). La solution d'injection contient du NaCl 0,85%. Dans le groupe témoin, on injecte chaque matin et à chaque souris 100 µl d'eau stérile contenue dans une ampoule à usage unique par voie intra péritonéale (IP) à raison d'une injection/jour tout au long du suivi de la progression tumorale. 35 Dans le groupe traité, on injecte chaque matin et à chaque souris 100 gl de Ruta graveolens 9CH contenue dans une ampoule à usage unique par voie intra péritonéale (IP) à raison d'une injection/jour tout au long du suivi de la progression tumorale. 5 L'effet de Ruta graveolens 9CH dans le groupe traité est évalué par le nombre de nodules présents au niveau des poumons de la souris et comparé au groupe témoin. Le nombre de nodules pulmonaires est compté visuellement par l'expérimentateur après prélèvement des poumons. Le résultat de l'effet de Ruta graveolens 9CH sur la progression tumorale in vivo est présenté à J16 (soit 16 jours après l'injection des cellules tumorales) sur la figure 3. Ruta graveolens 9CH diminue significativement le nombre de nodules pulmonaires par rapport à un traitement témoin. REVENDICATIONS1. Composition comprenant ou obtenue à partir d'une dilution homéopathique 9CH de Ruta graveolens, pour utilisation comme médicament anticancéreux. 2. Composition selon la revendication 1 pour la prévention et/ou le traitement d'un cancer de préférence choisi dans le groupe constitué par les mélanomes, les carcinomes, les cancers de la thyroïde, du colon-rectum, du sein, de la prostate et du poumon. 10 3. Composition selon la revendication 1 ou 2 pour utilisation comme agent inhibiteur de la croissance tumorale et/ou du processus d'invasion tumorale. 4. Composition selon l'une au moins des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle est constituée par une solution aqueuse, alcoolique ou hydroalcoolique 15 obtenue par dilution d'un extrait de Ruta graveolens L. 5. Composition selon l'une au moins des revendications 1 à 3, caractérisée en ce qu'elle comprend une solution aqueuse, alcoolique ou hydroalcoolique obtenue par dilution 9CH d'un extrait de Ruta graveolens L. 6. Composition selon l'une au moins des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle est constituée par une forme sèche préparée à l'aide d'une solution aqueuse, alcoolique ou hydroalcoolique obtenue par dilution 9CH d'un extrait de Ruta graveolens L. 7. Composition selon l'une au moins des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre au moins une autre molécule pharmaceutiquement active dans la prévention et/ou le traitement du cancer. 30 8. Composition selon l'une au moins des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle est formulée pour une administration par voie orale, nasale, intramusculaire, intraveineuse ou sous-cutanée. 9. Utilisation de la composition selon l'une au moins des revendications 35 précédentes pour l'obtention d'un médicament anticancéreux ou d'un médicament destiné à une utilisation préventive et/ou thérapeutique basée sur l'inhibition du développement tumoral et/ou du processus d'invasion tumorale. 20 25 10. Utilisation de la composition selon la revendication 9, caractérisée en ce que l'administration du médicament est une administration par voie orale, nasale, intramusculaire, intraveineuse ou sous-cutanée, de préférence par voie orale. 11. Association médicamenteuse comprenant la composition selon l'une au moins des revendications précédentes et au moins un médicament homéopathique ou allopathique.