Brevet FR2951089A1 — publié le 20110415

La présente invention concerne un insert de diffusion pour l'analyse de membrane, un kit, une cellule, une unité et un procédé de diffusion permettant notamment de réaliser des mesures de pénétration transmembranaire. On entend par l'expression « analyse de membrane » tout type d'analyse dans ou au travers de membranes telle que notamment la pénétration de molécules ou substances dans ou au travers de membrane. De telles membranes peuvent être artificielles ou naturelles telles que par exemple des épithéliums provenant de tout type d'organisme vivant, biologique ou non, cutanés ou non. Plus particulièrement, l'expression « molécules ou substances » est employée pour désigner toute molécule naturelle, synthétique ou semisynthétique, ainsi que les groupements de molécules non forcément identiques, ces molécules étant dans une phase liquide, semi-liquide, semi-solide, gazeuse ou vapeur. L'expression « molécules ou substances » est également employée pour désigner tout agent biologique comme des virus, des toxines, des débris bactériens, des médiateurs cellulaires, des chemokines, des cytokines, ou encore des facteurs de croissance. Les cellules de diffusion telles que les cellules de Franz (Franz T.J, J Invest Dematol, 64 : 190-195; 1975) sont couramment utilisées, notamment pour déterminer la pénétration cutanée de substances exogènes. Les cellules de Franz sont principalement constituées d'un compartiment donneur superposé à un compartiment récepteur, les compartiments donneur et récepteur étant séparés par une barrière formée par une membrane cutanée. Le compartiment donneur est destiné à recevoir une solution donneuse contenant les molécules à étudier et le compartiment récepteur est destiné à recevoir une solution réceptrice UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CL/SL destinée à collecter ce qui aura traversé la membrane cutanée. De manière connue, les compartiments donneur et récepteur comportent des rainures circulaires prévues, en regard l'une de l'autre, dans l'épaisseur de leurs parois destinées à être en contact avec la membrane cutanée. Ces rainures circulaires sont aptes à recevoir la périphérie de la membrane cutanée et un jonc bloquant la membrane cutanée afin de la tendre entre les compartiments donneur et récepteur. La membrane cutanée ainsi tendue et bloquée, présente une surface « utile » qui peut alors être exposée à des molécules placées dans la solution donneuse. A intervalle de temps régulier, la solution réceptrice est prélevée afin de doser les molécules qui ont traversé la membrane cutanée et une nouvelle solution réceptrice lui est alors substituée. Pour ce faire, le compartiment récepteur est pourvu d'un ou de plusieurs conduits permettant l'alimentation et le prélèvement de la solution réceptrice. Au moyen de cette technique, le dosage de substances présentes dans la solution réceptrice prélevée permet à la fois de déterminer la quantité de molécules ayant traversé la membrane cutanée et le flux de pénétration exprimé en nano gramme/cm2/heure. En pratique, avant d'utiliser les cellules de Franz 25 pour mesurer la pénétration cutanée, on procède aux différentes étapes successives suivantes : a) on récupère de la peau issue de déchets post opératoires (bloc opératoire), b) on dégraisse la peau récupérée en élimination le 30 tissu adipeux (couche hypodermique), c) on ajuste l'épaisseur des lambeaux de peau en utilisant un Dermatome permettant d'obtenir une membrane cutanée d'épaisseur calibrée, d) on découpe des sections circulaires ayant un UNIFC1-FR-1_TEXTE DEPOSE CL/SL diamètre prédéterminé, e) on contrôle l'épaisseur de chaque membrane cutanée. Entre les étapes b) et c), les lambeaux de peau peuvent être conservés, congelées à une température de - 20°C pendant une période de 6 à 12 mois. Une fois l'étape e) réalisée, les membranes cutanées circulaires, d'épaisseur prédéfinie, peuvent être individuellement déposées sur une cellule de Franz. La face profonde du derme est orientée vers la solution réceptrice prévue dans le compartiment récepteur et est censée remplacer le liquide interstitiel de la peau. Le montage ainsi obtenu est maintenu en position au moyen d'une pince adaptée pour serrer le compartiment donneur contre le compartiment récepteur, coinçant ainsi la membrane cutanée tenue par le jonc. L'ensemble est laissé au repos pendant 90 à 120 minutes afin de s'équilibrer avec le milieu ou l'atmosphère environnant. L'intégrité de la membrane cutanée est enfin vérifiée au moyen d'un Tewametre avant la mise en oeuvre du test de pénétration à proprement parlé. Ces opérations de préparation et de montage sont fastidieuses à réaliser, répétitives et nécessitent beaucoup de temps de manipulation ce qui rallonge d'autant les délais de réalisation de ces analyses. De plus, il est fréquent, lors de la préparation des mesures, qu'il se forme une bulle d'air, située sous la membrane cutanée. Lorsque la bulle d'air est détectée par l'opérateur, elle doit être évacuée de la surface de la membrane cutanée en faisant pivoter la cellule de diffusion pour guider la bulle d'air vers l'embouchure du conduit du compartiment récepteur. Cette étape supplémentaire est source de perte de temps. De plus elle est mal pratique à réaliser. Lorsque la bulle d'air n'est pas détectée, les résultats de la mesure de la pénétration transmembranaire UNIFC7-FR-1 TEXTE DEPOSE CUSL sont faussés. En effet, dans ce cas, toute la surface « utile » de la membrane n'est pas utilisée et donc l'interprétation des résultats est impossible. La présente invention vise à remédier à ces inconvénients et propose un insert de diffusion, un kit de diffusion, une cellule de diffusion, une unité de diffusion et un procédé de diffusion permettant notamment de réaliser des analyses de pénétration transmembranaire de manière plus rapide et plus aisée tout en augmentant la fiabilité des résultats. L'invention concerne tout d'abord un insert de diffusion, notamment pour le maintien d'une membrane, cet insert de diffusion comportant au moins une cupule définissant un compartiment donneur destiné à recevoir une solution donneuse, la base de la cupule délimitant au moins un orifice axial destiné à être obturé par une surface « utile » de la membrane, l'insert de diffusion comportant au moins : - un élément de pincement apte à coopérer avec la cupule pour délimiter au moins une surface de pincement portée par l'élément de pincement et une surface d'appui portée par la cupule, la membrane étant destinée à être coincée entre les surface de pincement et surface d'appui, - un élément de blocage agencé pour bloquer au moins axialement l'élément de pincement par rapport à la cupule, et, - un élément de déformation apte à coopérer avec l'élément de pincement pour tendre la surface « utile » de la membrane, remarquable en ce que l'élément de déformation comporte une surface de déformation apte à déformer la membrane, et en ce que l'élément de déformation est apte à coopérer avec la cupule pour préserver un dégagement latéral directement tangent à la surface de déformation de l'élément de UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CLSL - 5 - déformation recouvert de la membrane tendue. Cet insert de diffusion permet de préparer à l'avance un stock de membranes. Lorsqu'une analyse est demandée, on dispose donc d'un stock de membranes prêtes à l'emploi. Les temps de préparation des membranes sont donc masqués d'où un délai de réalisation des analyses de pénétration transmembranaire largement raccourci. Les étapes de préparation peuvent également être concentrées de manière à être réalisées par du personnel dédié, laissant à d'autres personnes de qualifications différentes la responsabilité des analyses de pénétration transmembranaire. Le dégagement latéral permet, lors de l'utilisation de l'insert dans une cellule de diffusion, d'éviter le problème de bulle d'air. Les résultats obtenus à l'issue de l'analyse de pénétration transmembranaire sont donc exploitables sans aucune suspicion d'erreur liée à la présence d'une éventuelle bulle d'air. De manière avantageuse, l'un au moins des élément de pincement, élément de blocage, élément de déformation se présente de préférence sous la forme générale d'un anneau et/ou l'une au moins des surface de pincement, surface d'appui, surface de déformation, se présente sous la forme générale d'une couronne. Selon un premier mode de réalisation, le fond de la cupule définit la surface d'appui, l'insert de diffusion comporte un anneau de maintien définissant au moins l'élément de pincement et l'élément de déformation, l'anneau de maintien comportant au moins un décrochement latéral délimitant une première couronne de dimensions supérieures à celles de l'orifice axial, et une seconde couronne axialement distante de la première couronne et de dimensions inférieures à celles de l'orifice axial pour pouvoir le traverser, la face inférieure de la première couronne définissant la surface de pincement, l'extrémité UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE_CL/SL 2951089 - 6 de la seconde couronne définissant l'élément de déformation. Selon un second mode de réalisation, la cupule est prolongée dans sa partie inférieure par un embout 5 proéminant définissant l'élément de déformation, l'élément de pincement et l'élément de déformation étant formés de pièces distinctes, l'élément de pincement étant agencé pour pouvoir être emmanché sur l'embout. Les deux modes de réalisation décrits précédemment 10 permettent de placer la membrane de sorte que sa surface « utile », tendue sur la couronne de déformation, soit directement tangente à un dégagement latéral permettant l'évacuation spontanée d'une bulle d'air éventuellement formée sous la membrane lors de son montage sur l'insert de 15 diffusion. De manière avantageuse, la cupule et au moins l'un des éléments de pincement, élément de blocage sont respectivement pourvus de formes d'emboîtement complémentaires destinées à coopérer entre-elles pour 20 bloquer au moins axialement l'élément de pincement par rapport à la cupule. La membrane peut ainsi être solidarisée de manière fiable à la cupule entre l'élément de pincement et la cupule. Dans un mode de réalisation préféré, les formes 25 d'emboîtement complémentaires comportent au moins un filetage extérieur et un filetage intérieur aptes à s'emboîter, l'un au moins des filetage extérieur/intérieur étant prévu sur la cupule, l'autre filetage intérieur/extérieur étant respectivement prévu sur l'un au 30 moins des élément de pincement, élément de blocage. Dans un mode de réalisation préféré, les formes d'emboîtement complémentaires comportent au moins une nervure et au une rainure aptes à s'emboîter, l'une au moins des nervure/rainure étant prévue sur la cupule, UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE_CLISL - 7 - l'autre rainure/nervure étant respectivement prévue sur l'un au moins des éléments de pincement, élément de blocage. De manière avantageuse, l'insert de diffusion comporte au moins un élément de rappel prévu entre l'élément de pincement et l'élément de blocage et tendant à les éloigner l'un de l'autre. L'élément de pincement, l'élément de blocage, l'élément de déformation et l'élément de rappel peuvent 10 avantageusement être formés d'une pièce unique. L'insert de diffusion est facile à préparer et à utiliser. Il permet la préparation à l'avance et en nombre d'inserts de diffusion membranaires prêts à l'usage. Il autorise néanmoins la préparation d'inserts de diffusion 15 juste avant usage. L'invention concerne également un kit de diffusion comportant un boîtier pourvu d'un fond et d'un couvercle aptes à se refermer l'un sur l'autre pour définir au moins un logement de stockage. Ce kit de diffusion est 20 remarquable en ce qu'il contient, dans son logement de stockage, au moins un insert de diffusion tel que décrit précédemment. Le kit de diffusion permet de stocker un ou des inserts de diffusion rassemblés dans un même boîtier. Les 25 conditions de préparation et les caractéristiques des membranes maintenues dans les inserts de diffusion peuvent être résumées sur une étiquette collée au boîtier et permettant l'identification rapide et fiable des inserts de diffusion. 30 De manière avantageuse, le boîtier est pourvu d'au moins une entretoise, apte à recevoir la cupule de manière à préserver un espace libre entre la surface de déformation et le fond du boîtier. Les inserts de diffusion peuvent ainsi être conservés pour stockage ou transport, sans UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CL/SL - 8 - risque de détérioration de la membrane. L'invention concerne également une cellule de diffusion notamment pour l'analyse de pénétration transmembranaire, la cellule de diffusion comportant au moins un compartiment récepteur destiné à recevoir une solution réceptrice, au moins un conduit relié au compartiment récepteur. Cette cellule de diffusion est remarquable en ce qu'elle comporte des moyens de fixation d'au moins un insert de diffusion tel que décrit précédemment, les moyens de fixation étant agencés pour que la membrane soit au moins en contact avec, ou immergée dans, la solution réceptrice, le compartiment récepteur et les moyens de fixation étant agencés pour ménager un espace libre latéral tangent au dégagement latéral de l'insert de diffusion. La cellule de diffusion ainsi construite facilite l'évacuation spontanée de toute bulle d'air qui se serait éventuellement formée sous la membrane. De plus, cette cellule de diffusion autorise le montage facile et rapide des inserts de diffusion, limitant donc les temps de manipulation. Le fond du compartiment récepteur est avantageusement agencé pour présenter un profil incliné définissant une zone de profondeur maximale de la solution réceptrice. On peut donc prélever de manière précise la solution réceptrice au point le plus bas du compartiment récepteur, en étant assuré de prélever la quantité maximale de solution réceptrice contenant les molécules à quantifier. La cellule de diffusion peut en outre comporter des moyens de réglage agencés pour adapter au moins l'espace séparant le fond de la membrane en fonction de la hauteur de solution réceptrice contenu dans le compartiment récepteur. La cellule de diffusion peut ainsi servir à différentes campagnes de mesures de volumes différents sans UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CL/SL 2951089 - 9 - nécessiter de matériel supplémentaire. Ces moyens de réglage peuvent également permettre de régler l'inclinaison du fond. L'invention concerne également une unité de 5 diffusion, comprenant une pluralité de cellules de diffusion disposées adjacentes. Cette unité de diffusion est remarquable en ce qu'elle comprend des cellules de diffusion telles que décrites précédemment, chaque cellule de diffusion étant raccordée par son conduit à un récipient 10 de récupération individuel destiné à recevoir la solution réceptrice après pénétration transmembranaire. L'invention concerne enfin un procédé de diffusion notamment pour l'analyse de la pénétration transmembranaire d'une membrane, ce procédé de diffusion comprenant au moins 15 les étapes suivantes : a) la préparation de la membrane, b) le montage de la membrane dans une cellule de diffusion telle que décrite précédemment, c) l'analyse de la membrane par le biais de la 20 cellule de diffusion telle que décrite précédemment. Ce procédé permet de préparer la membrane en temps masqué et d'obtenir des résultats de pénétration transmembranaire fiables. L'invention est décrite ci-après, à titre d'exemple 25 non limitatif, en référence aux dessins annexés sur lesquels : - La figure 1 est une section de l'insert de diffusion selon l'invention - Les figures 2 et 3 sont des sections d'une première 30 et d'une deuxième variante de réalisation de l'insert de diffusion selon l'invention ; - Les figures 4 et 5 sont chacune, une demie-section et demie-vue d'une troisième et d'une quatrième variante de réalisation de l'insert de diffusion selon l'invention ; UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CUSL - 10 - - La figure 6 est une section d'un kit de diffusion selon l'invention comportant deux insert de diffusion de la figure 1 ; - La figure 7 est une section d'une cellule de 5 diffusion selon l'invention comportant un insert de diffusion de la figure 1 ; - Les figures 8A et 8B sont des sections d'une cinquième variante de réalisation de l'insert de diffusion selon l'invention, cet insert de diffusion comportant un 10 élément de rappel et étant représenté respectivement avant et après mise en tension de la membrane ; - Les figures 9A et 9B sont des sections d'une sixième variante de réalisation de l'insert de diffusion selon l'invention, cet insert de diffusion comportant un 15 élément de rappel et étant représenté respectivement avant et après mise en tension de la membrane. L'insert de diffusion selon l'invention est notamment destiné à être utilisé pour effectuer des analyses de pénétration dites pénétration transmembranaire sur des 20 membranes que l'insert de diffusion sert à maintenir tendues pendant qu'une solution donneuse est appliquée sur la membrane. On analyse ensuite le temps de la pénétration de la solution donneuse et la solution ayant traversé la membrane. Les membranes utilisées peuvent être 25 artificielles ou naturelles, biologiques ou non, cutanées ou non. En référence à la figure 1, l'insert de diffusion 1 comporte une cupule 2, un élément de pincement 3, un élément de blocage 4, un élément de déformation 6 et une 30 membrane 5. La cupule 2 définit un compartiment donneur 20 destiné à recevoir une solution donneuse (non représentée). Dans cet exemple, la cupule 2 a une forme globalement cylindrique pourvue dans sa partie inférieure d'un UNIFC1-FR-1_TEXTE DEPOSE CUSL - 11 - retour 21 définissant un orifice axial 22 cylindrique. La partie supérieure de la cupule 2 comporte une ouverture 23 qui peut être pourvue d'un couvercle (non représenté). La face supérieure du retour 21 définit une surface d'appui 24 sur laquelle la membrane 5 est posée. L'orifice axial 22 est ainsi obturé par la membrane 5. La cupule 2 reçoit, dans le compartiment donneur 20, un anneau de maintien 8 formant simultanément l'élément de pincement 3 et l'élément de déformation 6, et destiné à tendre et déformer la membrane 5 de sorte qu'elle présente une surface « utile » exploitable de manière fiable. L'insert de diffusion 1 comporte un anneau de maintien 8 dont les dimensions extérieures sont inférieures aux dimensions intérieures de l'ouverture 23 pour permettre l'insertion de l'anneau de maintien 8 dans la cupule 2, par le dessus de la membrane 5 disposée au fond de la cupule 2. L'anneau de maintien 8 est pourvu d'un décrochement latéral délimitant une surface de pincement 30 de l'élément de pincement 3, et une couronne de déformation 31 de l'élément de déformation 6. La surface de pincement 30 de l'anneau de maintien 8 a des dimensions comparables à celles de la surface d'appui 24 de la cupule 2 et est destinée à venir en regard de cette surface d'appui 24. La couronne de déformation 31 a un diamètre extérieur inférieur au diamètre intérieur de l'orifice axial 22 pour permettre son insertion dans l'orifice axial 22. De plus, la couronne de déformation 31 a une hauteur supérieure à celle de la paroi de l'orifice axial 22. Ainsi, lorsque l'anneau de maintien 8 est logé au fond de la cupule 2, la surface de pincement 30 vient coincer la membrane 5 contre la surface d'appui 24 et la couronne de déformation 31 traverse l'orifice axial 22 jusqu'à dépasser sous la cupule 2 pour tendre et déformer la membrane 5. La membrane 5 présente alors une surface « utile » plane et tendue qui dépasse UNIFC1-FR-1_TEXTE DEPOSE CUSL 2951089 12 - sous la cupule 2. La tension de la membrane 5 varie avec la position de la couronne de déformation 31 dans l'orifice axial 22. La couronne de déformation 31, recouverte par la membrane 5, est la zone la plus basse de l'insert de 5 diffusion 1 et est entourée par un dégagement latéral circulaire. Aussi, si lors du montage de la membrane 5 dans la cupule 2, une bulle d'air s'est formée sous la membrane 5, cette bulle d'air peut s'évacuer librement sur le côté de la membrane 5, par le dégagement latéral, sans 10 rester coincée. Toute la surface « utile » de la membrane 5 peut ainsi être utilisée. Aussi, les résultats pourront être exploités de manière fiable, la surface « utile » de la membrane 5 correspondant bien à la surface de référence pour l'interprétation des résultats des mesures. 15 Dans cet exemple, l'anneau de maintien 8 est bloqué en position dans la cupule 2 par un élément de blocage 4. L'élément de blocage 4 se présente sous la forme générale d'un anneau de dimensions extérieures inférieures aux dimensions intérieures de l'ouverture 23 pour permettre 20 l'insertion de l'élément de blocage 4 par le dessus de l'anneau de maintien 3 dans la cupule 2. La cupule 2 est pourvue, sur sa face intérieure, d'un filetage intérieur 25 et l'élément de blocage 4 est pourvu, sur sa face extérieure, d'un filetage extérieur 40 de dimensions 25 complémentaires à celles du filetage intérieur 25. L'élément de blocage 4 peut ainsi être vissé dans la cupule 2 jusqu'à venir en appui contre l'anneau de maintien 8, plaqué dans le fond de la cupule 2 et coinçant la membrane 5. Sur la figure 1, l'élément de blocage 4 est 30 représenté en cours de vissage, laissant un jeu entre sa face inférieure et la face supérieure de l'anneau de maintien 8. Il est bien entendu qu'avant utilisation de l'insert de diffusion 1, l'élément de blocage 4 sera vissé complètement. Cette construction particulière permet en UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE_CLISL 2951089 - 13 - outre de ne pas tendre la membrane 5 ou de ne la tendre que faiblement avant son utilisation et donc d'éviter de la solliciter inutilement et prolonger ainsi la durée pendant laquelle elle peut être conservée. 5 Dans une variante de réalisation non représentée, l'insert de diffusion comporte des moyens de mesure des propriétés physico-chimiques de la membrane et des moyens de caractérisation de la membrane. A cet effet, l'élément de blocage peut être pourvu de capteurs ou de sondes de 10 mesures par exemple d'humidité, de température, de PH, de courant, de tension ou de toute autre mesure physique ou chimique. Les figures 2 à 5 et 8A à 9B représentent des variantes de réalisation de l'insert de diffusion de la 15 figure 1. Les éléments fonctionnellement similaires à ceux de la figure 1 portent les mêmes références. En référence à la figure 2, selon une première variante de réalisation, l'insert de diffusion 1 comporte une cupule 2, un élément de pincement 3, un élément de 20 blocage 4, un élément de déformation 6 et une membrane 5. La cupule 2 a une forme globalement cylindrique et définit un compartiment donneur 20. Le fond de la cupule 2 est pourvu d'un retour 21 définissant un orifice axial 22 cylindrique. La face inférieure du retour 21 définit une 25 surface d'appui 24 sous laquelle la membrane 5 est appliquée. L'orifice axial 22 est ainsi obturé par la membrane 5. Le fond de la cupule 2 est prolongé axialement vers le bas par un embout 26 dont l'extrémité libre forme une couronne de déformation 27 de la membrane 5 définissant 30 l'élément de déformation 6. L'insert de diffusion 1 comporte un anneau d'engagement 9 formant l'élément de pincement 3 et coopérant avec l'embout 26 pour former l'élément de blocage 4. Les dimensions intérieures de l'anneau UNIFC1-FR-1_TEXTE DEPOSE CL/SL 2951089 - 14 - d'engagement 9 sont supérieures aux dimensions extérieures de l'embout 26 pour permettre l'emmanchement de l'anneau d'engagement 9 autour de l'embout 26, par-dessous la membrane 5. La face supérieure de l'anneau d'engagement 9 5 délimite une surface de pincement 30 destinée à venir coincer la membrane 5 contre la surface d'appui 24 lorsque l'anneau d'engagement 9 est emmanché sur l'embout 26 portant la membrane 5. La membrane 5 présente alors une surface « utile » plane et tendue dont la tension varie 10 selon l'engagement de l'anneau d'engagement 9 sur l'embout 26. L'anneau d'engagement 9 a une hauteur inférieure à celle de l'embout 26 lui permettant, une fois emmanché sur l'embout 26 portant la membrane 5, de laisser dépasser la couronne de déformation 31 recouverte par la 15 membrane 5 sous le niveau de l'anneau d'engagement 9. Ainsi, la couronne de déformation 27 recouverte par la membrane 5 est la zone la plus basse de l'insert de diffusion 1 et est entourée par un dégagement latéral circulaire permettant l'évacuation spontanée d'une 20 éventuelle bulle d'air formée sous la surface « utile » tendue de la membrane 5, fiabilisant l'interprétation des mesures comme décrit précédemment. En référence à la figure 3, selon une deuxième variante de réalisation, l'insert de diffusion 1 comporte 25 une cupule 2, un élément de pincement 3, un élément de blocage 4, un élément de déformation 6 et une membrane 5. La cupule 2 a une forme globalement cylindrique et définit un compartiment donneur 20. Le fond de la cupule 2 est pourvu d'un retour 21 définissant un orifice axial 22 30 cylindrique. La face supérieure du retour 21 définit une surface d'appui 24 sur laquelle la membrane 5 est posée. L'orifice axial 22 est ainsi obturé par la membrane 5. Le fond de la cupule 2 est prolongé axialement vers le bas par un embout 26 pourvu d'une rainure 28 circulaire. UNIFC1-FR-1_TEXTE DEPOSE CL/SL 2951089 - 15 - L'insert de diffusion 1 comporte un anneau d'engagement 9 formant l'élément de pincement 3 et l'élément de déformation 6. Par ailleurs, l'anneau d'engagement 9 coopère avec l'embout 26 pour former 5 l'élément de blocage 4. Les dimensions extérieures de l'anneau d'engagement 9 sont inférieures aux dimensions intérieures de l'embout 26 pour permettre l'insertion de l'anneau d'engagement 9 dans l'embout 26, par-dessus la membrane 5, pour maintenir, tendre et déformer la 10 membrane 5. La face latérale externe de l'anneau d'engagement 9 est pourvue d'une nervure 32 circulaire, de dimensions complémentaires à celles de la rainure 28 circulaire. La rainure 28 et la nervure 32 sont destinées à coopérer pour coincer la membrane 5 et définir ainsi 15 l'élément de pincement 3 lorsque l'anneau d'engagement 9 est inséré dans l'orifice axial 22. La face inférieure de l'anneau d'engagement 9 forme une couronne de déformation 31 de la membrane 5 définissant l'élément de déformation 6. L'anneau d'engagement 9 a une hauteur 20 supérieure à celle de l'embout 26 lui permettant, une fois emmanché sur l'embout 26 portant la membrane 5, de laisser dépasser la couronne de déformation 31 recouvert par la membrane 5 sous le niveau de l'anneau d'engagement 9. Ainsi, la couronne de déformation 31 est la zone la plus 25 basse de l'insert de diffusion 1 et est entourée par un dégagement latéral circulaire permettant l'évacuation spontanée d'une éventuelle bulle d'air formée sous la surface « utile » tendue de la membrane 5, fiabilisant l'interprétation des mesures comme décrit précédemment. Un 30 élément de blocage (non représenté) peut également être combiné à l'anneau d'engagement 9. En référence à la figure 4, selon une troisième variante de réalisation, l'insert de diffusion 1 comporte une cupule 2, un élément de pincement 3, un élément de UNIFC1-FR-1_TEXTE DEPOSE_CL/SL - 16 - blocage 4, un élément de déformation 6 et une membrane 5. La cupule 2 a une forme globalement cylindrique et définit un compartiment donneur 20. Dans sa hauteur, la cupule 2 comporte un retour 21 intérieur définissant un orifice axial 22 cylindrique. La face supérieure du retour 21 définit une surface d'appui 24 sur laquelle la membrane 5 est posée. L'orifice axial 22 est ainsi obturé par la membrane 5. Le fond de la cupule 2 est prolongé axialement vers le bas par un embout 26. La paroi externe de la cupule 2 se prolonge au-delà du retour 21 et est pourvue, en son extrémité inférieure, de fenêtres latérales 29 débouchant en partie inférieure de la cupule 2 et ménageant des dégagements latéraux. L'insert de diffusion 1 comporte un anneau d'engagement 9 formant l'élément de pincement 3 et l'élément de déformation 6. Par ailleurs, l'anneau d'engagement 9 coopère avec l'embout 26 pour former l'élément de blocage 4. Les dimensions extérieures de l'anneau d'engagement 9 sont inférieures aux dimensions intérieures de l'ouverture 23 pour permettre l'insertion de l'anneau d'engagement 9 dans la cupule 2, par-dessus la membrane 5 disposée au fond de la cupule 2 pour maintenir, tendre et déformer la membrane 5. L'anneau d'engagement 9 est pourvu d'un décrochement délimitant une surface de pincement 30 définissant l'élément de pincement 3, et une couronne de déformation 31 de la membrane 5 définissant l'élément de déformation 6. La surface de coincement 30 de l'anneau d'engagement 9 a des dimensions comparables à celles de la surface d'appui 24. La couronne de déformation 31 a un diamètre extérieur inférieur au diamètre intérieur de l'embout 26 pour permettre son insertion au travers de l'orifice axial 22. De plus, la couronne de déformation 31 a une hauteur supérieure à celle de l'embout 26, dimensionnée pour que, lorsque l'anneau UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE_CLISL 2951089 - 17 - d'engagement 9 est logé au fond de la cupule 2, la couronne de déformation 31 dépasse sous le niveau supérieur des fenêtres latérales 29 de la cupule 2. Ainsi, si lors du montage de la membrane 5 dans la cupule 2, une bulle d'air 5 s'est formée sous la membrane 5, cette bulle d'air peut s'évacuer librement sur le côté de la membrane 5 au travers du dégagement latéral formé par les fenêtres latérales 29. La membrane 5 peut ainsi être utilisée sur une surface « utile » connue correspondant à la surface déterminée par 10 la couronne de déformation 31, fiabilisant l'interprétation des mesures comme décrit précédemment. Un élément de blocage (non représenté) peut également être combiné à l'anneau d'engagement 9. En référence à la figure 5, selon une quatrième 15 variante de réalisation, l'insert de diffusion 1 comporte une cupule 2, un élément de pincement 3, un élément de blocage 4, un élément de déformation 6 et une membrane 5. Cet insert de diffusion 1 est sensiblement similaire à l'insert de diffusion 1 de la figure 4. Il s'en différencie 20 par la forme de la cupule 2. Dans cet exemple, le fond de la cupule 2 est pourvu d'un retour 21 définissant un orifice axial 22 et une surface d'appui 24 sur laquelle la membrane 5 est posée. L'orifice axial 22 est ainsi obturé par la membrane 5. Le fond de la cupule 2 est prolongé par 25 un embout 26 pourvu de fenêtres latérales 29 débouchant en partie inférieure de la cupule 2 et ménageant des dégagements latéraux. Cet insert de diffusion 1 comporte un anneau d'engagement 9 sensiblement similaire à celui de la figure 4 et coopérant de manière similaire avec la 30 cupule 2. Ainsi, lorsque l'anneau d'engagement 9 est positionné au fond de la cupule 2, la couronne de déformation 31 recouverte par la membrane 5 dépasse sous le niveau supérieur des fenêtres latérales 29 de la cupule 2 autorisant l'évacuation spontanée d'une éventuelle bulle UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CUSL 2951089 - 18 - d'air formée sous la membrane 5. La membrane 5 peut ainsi être utilisée avec une surface « utile » connue correspondant à la surface déterminée par la couronne de déformation 31, fiabilisant l'interprétation des mesures 5 comme décrit précédemment. Un élément de blocage (non représenté) peut également être combiné à l'anneau de maintien 3. En référence aux figures 8A et 8B, selon une cinquième variante de réalisation, l'insert de diffusion 1 10 comporte une cupule 2, un élément de pincement 3, un élément de blocage 4, un élément de déformation 6 et une membrane 5. Cet insert de diffusion 1 comporte de plus un élément de rappel 7 prévu entre l'élément de pincement 3 et l'élément de blocage 4 et tendant à les éloigner l'un de 15 l'autre. La cupule 2 a une forme globalement cylindrique et définit un compartiment donneur 20. Dans cet exemple, la cupule 2 a une forme globalement cylindrique pourvue dans sa partie inférieure d'un retour 21 définissant un orifice 20 axial 22 cylindrique dont la face supérieure définit une surface d'appui 24 sur laquelle la membrane 5 est posée. L'orifice axial 22 est ainsi obturé par la membrane 5. La partie supérieure de la cupule 2 comporte une ouverture 23 qui peut être pourvue d'un couvercle (non représenté). La 25 cupule 2 reçoit, dans le compartiment donneur 20, un anneau d'engagement 9 destiné à bloquer la membrane 5, à la déformer et à tendre sa surface « utile ». Comme détaillé plus loin, l'anneau d'engagement 9 forme l'élément de pincement 3, l'élément de déformation 6 30 et l'élément de blocage 4. Les dimensions extérieures de l'anneau d'engagement 9 sont inférieures aux dimensions intérieures de l'ouverture 23 pour permettre l'insertion de l'anneau d'engagement 9 dans la cupule 2, par le dessus de la membrane 5 disposée au fond de la cupule 2. UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE_CLISL - 19 - L'anneau d'engagement 9 est pourvu d'une nervure 32, s'étendant vers l'extérieur, de préférence circulaire et destinée à coopérer avec des rainures 28 prévues dans la cupule 2. La nervure 32 est prévue élastiquement déformable afin qu'elle puisse se déformer pour passer d'une rainure 28 à une autre. L'anneau d'engagement 9 peut ainsi être déplacé axialement dans la cupule 2 entre une position « au repos » (représentée à la figure 8A) dans laquelle la membrane 5 n'est pas ou peu sollicitée et une position « d'utilisation » (représentée à la figure 8B) dans laquelle la membrane 5 est tendue et déformée pour présenter une surface « utile » exploitable. Dans chacune de ces positions, l'anneau d'engagement 9 est bloqué axialement dans la cupule 2 par la nervure 32 logée dans une des rainures 28. La nervure 32 et les rainures 28 définissent ainsi l'élément de blocage 4. Comme décrit ultérieurement en référence aux figures 9A et 9B, les rainures 28 et la nervure 32 peuvent être remplacées par des filetages. Dans sa partie inférieure, l'anneau d'engagement 9 est pourvu d'un prolongement axial formant une couronne de déformation 31 définissant l'élément de déformation 6. Cette couronne de déformation 31 a un diamètre extérieur inférieur au diamètre intérieur de l'orifice axial 22 pour permettre son insertion dans l'orifice axial 22. De plus, la couronne de déformation 31 a une hauteur supérieure à l'épaisseur du retour 21. Ainsi, lorsque l'anneau d'engagement 9 est dans sa position « d'utilisation », logé au fond de la cupule 2, la couronne de déformation 31 traverse l'orifice axial 22 jusqu'à dépasser sous la cupule 2. L'anneau d'engagement 9 est également pourvu d'une languette 33 flexible formant l'élément de rappel 7. Cette languette 33 est de préférence circulaire et continue le UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CUSL 2951089 - 20 - long de la périphérie de l'anneau d'engagement 9. Dans une variante de réalisation non représentée, la languette est discontinue et composée de plusieurs tronçons pouvant fléchir indépendamment les uns des autres. La languette 33 5 est destinée à prendre appui sur la périphérie de la membrane 5 pour la plaquer contre la surface d'appui 24 et forme donc une surface de coincement 30 définissant l'élément de pincement 3. Cette languette 33 est déformable élastiquement entre un état « au repos » (représenté à la 10 figure 8A) et un état « fléchi » (représenté à la figure 8B). Lorsque l'anneau d'engagement 9 est dans sa position « au repos », la languette 33 est dans son état « au repos » et la membrane 5 n'est que peu ou pas sollicitée. 15 Pour coincer, tendre et déformer la membrane 5, on visse l'anneau d'engagement 9 dans la cupule 2. Ce vissage a pour effet de déformer élastiquement la languette 33 en élargissant la surface de coincement 30 et en rapprochant la couronne de déformation 31 de la membrane 5. Après son 20 déplacement axial, lorsque l'anneau d'engagement 9 est dans sa position « d'utilisation », la languette 33 est dans son état « fléchi » et la membrane 5, coincée entre la languette 33 et la surface d'appui 24, est tendue par l'élargissant du diamètre de la surface de coincement 30 25 définie par la languette 33. De plus, la membrane 5 est déformée par l'appui de la couronne de déformation 31. Ainsi, la membrane 5 présente alors une surface « utile » plane et tendue. La tension de la membrane 5 augmente avec l'insertion de l'anneau de maintien 3 dans la cupule 2. La 30 couronne de déformation 31, recouverte par la membrane 5, est la zone la plus basse de l'insert de diffusion 1 et est entourée par un dégagement latéral circulaire permettant l'évacuation spontanée d'une éventuelle bulle d'air formée sous la surface « utile » tendue de la membrane 5, UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CUSL 2951089 - 21 - fiabilisant l'interprétation des mesures comme décrit précédemment. Comme pour l'insert de diffusion de la figure 1, la construction particulière de l'insert de diffusion 1 des 5 figures 8A et 8B permet en outre de pré-monter l'insert de diffusion 1, l'anneau d'engagement 9 n'étant pas vissé à fond dans la cupule 2, la membrane 5 étant non ou peu tendue ce qui permet de prolonger la durée pendant laquelle elle peut être conservée avant utilisation. 10 En référence aux figures 9A et 9B, selon une sixième variante de réalisation, l'insert de diffusion 1 est sensiblement similaire à celui des figures 8A et 8B et comporte un élément de pincement 3, un élément de blocage 4, un élément de déformation 6, un élément de 15 rappel 7 et une membrane 5. Il s'en différencie principalement par le fait que l'élément de rappel 7 est indépendant de l'élément de blocage 4. Dans cet exemple, la cupule 2 comporte un filetage intérieur 25 et l'insert de diffusion 1 comporte un élément 20 de blocage 4 en forme d'anneau, sensiblement similaire à celui de la figure 1 et pourvu d'un filetage extérieur 40 coopérant avec le filetage intérieur 25 de la cupule 2. L'insert de diffusion 1 comporte un anneau de plaquage 90 formant l'élément de pincement 3 et l'élément 25 de déformation 6. Les dimensions extérieures de l'anneau de plaquage 90 sont inférieures aux dimensions intérieures de l'ouverture 23 pour permettre l'insertion de l'anneau de plaquage 90 dans la cupule 2, par le dessus de la membrane 5 disposée au fond de la cupule 2. 30 Dans sa partie inférieure, l'anneau de plaquage 90 est pourvu d'un prolongement axial formant une couronne de déformation 31 définissant l'élément de déformation 6. Cette couronne de déformation 31 a un diamètre extérieur inférieur au diamètre intérieur de l'orifice axial 22 pour UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CUSL - 22 - permettre son insertion dans l'orifice axial 22. De plus, la couronne de déformation 31 a une hauteur supérieure à l'épaisseur du retour 21. L'anneau de plaquage 90 est également pourvu d'une languette 33, flexible, formant l'élément de rappel 7, similaire à celle des figures 8A et 8B. Cette languette 33 est destinée à prendre appui sur la périphérie de la membrane 5 pour la plaquer contre la surface d'appui 24 et forme donc une surface de coincement 30 définissant l'élément de pincement 3. Cette languette 33 est déformable élastiquement entre un état « au repos » (représenté à la figure 9A) et un état « fléchi » (représenté à la figure 9B). Pour coincer, tendre et déformer la membrane 5, on visse l'élément de blocage 4 dans la cupule 2. Ce vissage a pour effet de plaquer l'anneau de plaquage 90 contre la membrane 5 et de provoquer la déformation élastique de la languette 33 en élargissant la surface de coincement 30. Ce vissage a également pour effet de rapprocher la couronne de déformation 31 de la membrane 5. L'anneau de plaquage 90 étant disposé entre la membrane 5 et l'élément de blocage 4, l'élément de blocage 4 peut être vissé sans que la membrane 5 ne soit sollicitée en rotation. Dans l'état « fléchi » de la languette 33, la membrane 5 est tendue par l'élargissant du diamètre de la surface de coincement 30 et déformée par l'appui de la couronne de déformation 31. La couronne de déformation 31, recouverte par la membrane 5, est la zone la plus basse de l'insert de diffusion 1 et est entourée par un dégagement latéral circulaire permettant l'évacuation spontanée d'une éventuelle bulle d'air formée sous la surface « utile » tendue de la membrane 5, fiabilisant l'interprétation des mesures comme décrit précédemment. Comme pour l'insert de diffusion des figures 8A et 8B, la construction particulière de l'insert de UNIFC1-FR-t TEXTE DEPOSE CUSL 2951089 - 23 - diffusion 1 des figures 9A et 9B permet de pré-monter l'insert de diffusion 1 sans mettre la membrane 5 sous sa tension d'utilisation. Selon une variante de réalisation non représentée, 5 sensiblement similaire à celle des figure 9A et 9B, l'anneau de plaquage forme l'élément de pincement seulement, sans former l'élément de déformation. L'anneau de plaquage comporte, à cet effet, une languette élastiquement déformable, formant l'élément de rappel, dont 10 l'extrémité inférieure définit la surface de coincement et dont l'extrémité supérieure est en appui contre l'élément de blocage. L'élément de blocage est pourvu d'un prolongement axial qui forme la couronne de déformation. Ce prolongement axial traverse le diamètre intérieur de la 15 languette élastique afin de prendre appui sur la membrane et de la déformer. L'utilisation de cet insert de diffusion est sensiblement similaire à celle de l'insert de diffusion 1 des figures 9A et 9B. Les inserts de diffusion 1 décrits ont globalement 20 des formes cylindriques. Il est bien entendu que ces inserts de diffusion 1 peuvent avoir toute autre forme. Les inserts de diffusion 1 selon l'invention permettent donc de préparer, en temps masqué, des échantillons de membrane, par exemple cutanée, à analyser. 25 Ils permettent donc un gain de temps notable. De plus, en supprimant le risque de bulle d'air, ils fiabilisent de manière importante les mesures effectuées. Les membranes utilisées avec les kits de diffusion 1 peuvent bien entendu être de toute nature telle que des membranes cutanées 30 reconstruites et des membranes biologiques d'autre nature provenant par exemple de l'intestin, de la cornée ou des muqueuses. Lorsqu'elles sont cutanées, les membranes peuvent provenir de zones anatomiques différentes et de donneurs différents. UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE_CL/SL - 24 - Lorsqu'une mesure transmembranaire doit être réalisée, les inserts de diffusion 1 permettent d'effectuer directement l'analyse, sans temps d'attente pendant les étapes de préparation et de caractérisation de la membrane. L'insert de diffusion 1 selon l'invention peut être transporté ou stocké dans un kit de diffusion 100 tel que celui représenté sur la figure 6. Dans cet exemple, le kit de diffusion 100 comporte un boîtier 101 pourvu d'un fond 102 et d'un couvercle 103. Le fond 102 comporte un épaulement permettant au couvercle 103 de s'emboîter et de délimiter un logement de stockage 104 clos. Le boitier 101 a une forme générale parallélépipédique et comporte des cloisons longitudinales 105 (dont une seulement est représentée sur la figure 6) et transversales (non représentées). Ces cloisons délimitent des espaces de stockage individuels, par exemple six, dans chacun desquels un insert de diffusion 1 est placé. Les inserts de diffusion 1 peuvent ainsi être transportés et/ou stockés sans risque de détérioration. Le kit de diffusion 100 peut également être utilisé pour transporter des kits de diffusion 1 avant que les membranes 5 ne soient fixées dessus. Chaque boitier 101 peut avantageusement porter une étiquette (non représentée) sur laquelle sont résumées les données d'identification des kits de diffusion 1 qu'il contient. Cette étiquette est par exemple une étiquette autocollante. On indiquera par exemple sur cette étiquette la date de collecte de la membrane ; la zone anatomique de prélèvement de la membrane ; le phototype, l'âge, le sexe du donneur ; l'épaisseur, le diamètre, la mesure d'intégrité de la membrane ; la date limite d'utilisation recommandée ainsi qu'un code barre correspondant au kit de diffusion 100. Dans une variante de réalisation non représentée, le boîtier comporte des entretoises, par exemple disposées sur UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CL/SL - 25 - le fond du boîtier et sur lesquelles les cupules des inserts de diffusion sont posées. Ces entretoises se présentent par exemple sous la forme d'anneau dont l'épaisseur est supérieure à la partie proéminente de la couronne de déformation de manière à préserver, sous chacune des membranes tendues, un espace libre. Les membranes ne risquent ainsi pas de frotter ou de toucher le fond du boîtier ce qui aurait pour effet de nuire à leur intégrité. Dans une autre variante de réalisation non représentée, le couvercle du boîtier peut être articulé par rapport au fond du boîtier. Les kits de diffusion 100 contenant des inserts de diffusion 1 peuvent être conservés de 6 à 12 mois à une température de - 20 °C. Ils permettent donc de conserver et de transporter, en toute sécurité, des inserts de diffusion 1 sans risquer de les dégrader. Ils permettent de plus de limiter la manipulation individuelle de chaque insert de diffusion 1, limitant d'autant les risques de détérioration et générant des gains de temps et de personnel. Afin d'effectuer une mesure de pénétration transmembranaire, le kit de diffusion 1 peut être utilisé au sein d'une cellule de diffusion 200 telle qu'illustrée par la figure 7. Sur cette figure, le kit de diffusion 1 représentée correspond à celui de la figure 1. Il est bien entendu que d'autres variantes de kit de diffusion 1 peuvent être utilisées avec la cellule de diffusion 200 décrite ci-après. La cellule de diffusion 200 comporte une enceinte 201, par exemple thermo régulée, dans laquelle est placé un compartiment récepteur 202 destiné à recevoir une solution réceptrice 203. La cellule de diffusion 200 comporte un conduit d'alimentation 204 et un conduit de UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CL/SL - 26 - prélèvement 205 plongés dans le conteneur récepteur 202 en deux endroits différents. Le conduit d'alimentation 204 permet d'alimenter le compartiment récepteur 202 avec la solution réceptrice 203 avant pénétration transmembranaire. Le conduit de prélèvement 205 permet de prélever tout ou partie de la solution réceptrice 203 après pénétration transmembranaire. La cellule de diffusion 200 peut être utilisée en statique, à savoir dans un premier temps en alimentant la solution réceptrice 203 avant pénétration transmembranaire et dans un second temps en prélevant la solution réceptrice 203 après pénétration transmembranaire. La présence simultanée du conduit d'alimentation 204 et du conduit de prélèvement 205 permet également d'utiliser la cellule de diffusion 200 en dynamique, à savoir une alimentation et un prélèvement continus de la solution réceptrice 203 pendant la pénétration transmembranaire. Dans une autre variante de réalisation non représentée, la cellule de diffusion ne comporte qu'un seul conduit servant successivement à l'alimentation et au prélèvement de la solution réceptrice. Dans ce cas, la cellule de diffusion sera utilisée en statique seulement. Le compartiment récepteur 202 est délimité par des parois latérales 208 et un fond 209. Dans l'exemple représenté, le fond 209 est disposé de manière inclinée. Cette configuration particulière permet de définir une zone de profondeur maximale de la solution réceptrice 203 dans laquelle le conduit de prélèvement 205 est plongé afin de prélever, au mieux, les molécules issues de la pénétration transmembranaire. Ces molécules ont en effet tendance à couler dans la solution réceptrice 203. Le compartiment récepteur 202 est avantageusement réalisé en matériau hydrophobe, transparent ce qui permet à ses parois latérales 208 et de ne pas retenir la solution réceptrice 203. UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CL/SL - 27 - La cellule de diffusion 200 comporte des moyens de fixation d'un insert de diffusion 1 permettant d'immerger la membrane 5 dans la solution réceptrice 203, ou au moins de mettre la membrane 5 au contact de la solution réceptrice 203, tout en préservant un espace libre latéral tangent au dégagement latéral de l'insert de diffusion 1. Dans l'exemple représenté, le compartiment récepteur 202 comporte un couvercle 206 pourvu d'une (ou de plusieurs) ouverture(s) couplée(s chacune) à un manchon 207 s'étendant verticalement vers l'intérieur du compartiment récepteur 202. Le manchon 207 a une forme et des dimensions adaptées pour recevoir un insert de diffusion 1. La paroi intérieure du manchon 207 peut comporter un repère permettant de régler la hauteur de positionnement de l'insert de diffusion 1 de sorte que la couronne de déformation 31 dépasse en dessous du manchon 207 pour préserver un espace libre latéral par lequel la bulle d'air éventuellement formée sous la membrane 5 peut s'évacuer spontanément. Dans une variante de réalisation non représentée, le manchon est pourvu d'une butée basse jusqu'à laquelle l'insert de diffusion est enfoncé pour régler sa hauteur de positionnement. Dans une variante de réalisation non représentée, le kit de diffusion est inséré dans le manchon formant les moyens de fixation de sorte que la couronne de déformation portant la membrane ne dépasse pas en dessous de l'extrémité libre du manchon. Dans ce cas, l'extrémité libre du manchon sera pourvue de fenêtres latérales similaires à celles de la cupule des figures 4 et 5. On insèrera le kit de diffusion jusqu'à ce que la couronne de déformation portant la membrane soit visible dans les fenêtres latérales. Ainsi, les fenêtres latérales définissent un espace libre latéral directement tangent au UNIFC1-FR-1 TEXTE DEPOSE CUSL - 28 - dégagement latéral ménagé par la couronne de déformation autour de la surface « utile » tendue de la membrane. Toute bulle d'air qui se serait formée sous la membrane peut ainsi s'évacuer spontanément par le biais du dégagement latéral et de l'espace libre latéral. La cellule de diffusion 200 comporte avantageusement un agitateur, par exemple un doigt 210, plongé dans la solution réceptrice 203 et animé magnétiquement d'un mouvement de rotation permettant d'assurer une agitation vigoureuse de la solution réceptrice 203. Dans une variante de réalisation (non représentée) les moyens de fixation peuvent comporter un plateau porté par les parois latérales du compartiment récepteur, ce plateau étant pourvu d'une (ou de plusieurs) ouverture(s). La face supérieure du plateau reçoit l'appui de la périphérie des inserts de diffusion, dont la couronne de déformation portant la membrane est insérée dans l'ouverture de manière à être mise en contact avec la solution réceptrice et à ménager un espace libre latéral. Dans une autre variante de réalisation non représentée, le fond du compartiment récepteur est couplé à des moyens de réglage permettant d'adapter sa hauteur et/ou son inclinaison. Dans le premier cas, la contenance du compartiment récepteur peut être adaptée à la quantité de solution réceptrice contenue dans la cellule de diffusion. Dans le second cas, l'inclinaison peut être modifiée. L'invention concerne également une unité de diffusion (non représentée) comprenant plusieurs cellules de diffusion disposées de manière adjacente et permettant de réaliser des tests de pénétration transmembranaire en série. Cette cellule de diffusion comporte un réceptacle dans lesquelles les cellules de diffusion sont disposées. Chaque cellule de diffusion est individuellement raccordée par un conduit de prélèvement à un récipient de UNIFC1-FR-1_TEXTE DEPOSE CUSL - 29 - récupération. Ainsi, à chaque cellule de diffusion peut correspondre une série attitrée de mesures. Les cellules de diffusion peuvent être alimentées par un conduit d'alimentation unique comportant plusieurs têtes d'alimentation, chaque cellule de diffusion étant couplée à une tête d'alimentation. Il est bien entendu que les exemples décrits ne sont que des illustrations particulières et en aucun cas limitatives des domaines d'application de l'invention. L'Homme de l'art pourra apporter des aménagements de taille, de forme et de matériau à l'exemple de réalisation particulier sans pour autant sortir du cadre de la présente invention. UNIFCI-FR-1 TEXTE DEPOSE CVSL REVENDICATIONS1 - Insert de diffusion (1) notamment pour le maintien d'une membrane (5), ledit insert de diffusion (1) comportant au moins une cupule (2) définissant un compartiment donneur (20) destiné à recevoir une solution donneuse, la base de ladite cupule (2) délimitant au moins un orifice axial (22) destiné à être obturé par une surface « utile » de ladite membrane (5), ledit insert de diffusion (1) comportant au moins : - un élément de pincement (3) apte à coopérer avec ladite cupule (2) pour délimiter au moins une surface de pincement (30 ; 32) portée par ledit élément de pincement (3) et une surface d'appui (24 ; 28) portée par ladite cupule (2), ladite membrane (5) étant destinée à être coincée entre lesdites surface de pincement (30 ; 32) et surface d'appui (24 ; 28), - un élément de blocage (4) agencé pour bloquer au moins axialement ledit élément de pincement (3) par rapport à ladite cupule (2), et - un élément de déformation (6) apte à coopérer avec 20 ledit élément de pincement (3) pour tendre ladite surface « utile » de ladite membrane (5), caractérisé en ce que ledit élément de déformation (6) comporte une surface de déformation (27 ; 31) apte à déformer ladite membrane (5), et en ce que ledit élément de 25 déformation (6) est apte à coopérer avec ladite cupule (2) pour préserver un dégagement latéral directement tangent à ladite surface de déformation (27 ; 31) dudit élément de déformation (6) recouvert de ladite membrane (5) tendue. 30 2 - Insert de diffusion (1) selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'un au moins desdits élément de pincement (3), élément de blocage (4), élément de déformation (6) se présente sous la forme générale d'un UNIFC1-FR-1 SUITE NOTIFICATION CUSL- 31 - anneau. 3 - Insert de diffusion (1) selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que l'une au moins desdites surface de pincement (30 ; 32), surface d'appui (24 ; 28), surface de déformation (27 ; 31), se présente sous la forme générale d'une couronne. 4 - Insert de diffusion (1) selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le fond de ladite cupule (2) définit ladite surface d'appui (24), en ce que ledit insert de diffusion (1) comporte un anneau de maintien (8) définissant au moins ledit élément de pincement (3) et ledit élément de déformation (6), ledit anneau de maintien (8) comportant au moins un décrochement latéral délimitant une première couronne de dimensions supérieures à celles dudit orifice axial (22), et une seconde couronne axialement distante de ladite première couronne et de dimensions inférieures à celles dudit orifice axial (22) pour pouvoir le traverser, la face inférieure de ladite première couronne définissant ladite surface de pincement (30), l'extrémité de ladite seconde couronne définissant ledit élément de déformation (31). 5 - Insert de diffusion (1) selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que ladite cupule (2) est prolongée dans sa partie inférieure par un embout proéminant définissant ledit élément de déformation (6), ledit élément de pincement (3) et ledit élément de déformation (6) étant formés de pièces distinctes, ledit élément de pincement (3) étant agencé pour pouvoir être emmanché sur ledit embout. UNIFC1-FR-1 SUITE NOTIFICATION CUSL- 32 - 6 - Insert de diffusion (1) selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que ladite cupule (2) et au moins l'un desdits élément de pincement (3), élément de blocage (4) sont respectivement pourvus de formes d'emboîtement complémentaires (25, 40 ; 28, 32) destinées à coopérer entre-elles pour bloquer au moins axialement ledit élément de pincement (3) par rapport à ladite cupule (2). 7 - Insert de diffusion (1) selon la revendication 6, caractérisé en ce que lesdites formes d'emboîtement complémentaires (25, 40 ; 28, 32) comportent au moins un filetage extérieur (40) et un filetage intérieur (25) aptes à s'emboîter, l'un au moins desdits filetage extérieur (40)/intérieur (25) étant prévu sur ladite cupule (2), l'autre filetage intérieur (25)/extérieur (40) étant respectivement prévu sur l'un au moins desdits élément de pincement (3), élément de blocage (4). 8 - Insert de diffusion (1) selon la revendication 6, caractérisé en ce que lesdites formes d'emboîtement complémentaires (25, 40 ; 28, 32) comportent au moins une nervure (32) et au une rainure (28) aptes à s'emboîter, l'une au moins desdites nervure (32)/rainure (28) étant prévue sur ladite cupule (2), l'autre rainure (28)/nervure (32) étant respectivement prévue sur l'un au moins desdits élément de pincement (3), élément de blocage (4). 9 - Insert de diffusion (1) selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il comporte au moins un élément de rappel (7) prévu entre ledit élément de pincement (3) et ledit élément de blocage (4) et tendant à les éloigner l'un de l'autre. UNIFC1-FR-1 SUITE NOTIFICATION _CIAL 2951089 - 33 - 10 - Insert de diffusion (1) selon la revendication précédente, caractérisé en ce que ledit élément de pincement (3), ledit élément de blocage (4), ledit élément 5 de déformation (6) et ledit élément de rappel (7) sont formés d'une pièce unique. 11 - Kit de diffusion (100) comportant un boîtier (101) pourvu d'un fond (102) et d'un 10 couvercle (103) aptes à se refermer l'un sur l'autre pour définir au moins un logement de stockage (104), caractérisé en ce qu'il contient, dans son logement de stockage (104), au moins un insert de diffusion (1) selon l'une quelconque des revendications précédentes. 15 12 - Kit de diffusion (100) selon la revendication précédente, caractérisé en ce que ledit boîtier (101) est pourvu d'au moins une entretoise, apte à recevoir ladite cupule (2) de manière à préserver un espace libre entre 20 ladite surface de déformation (27 ; 31) et ledit fond (102) dudit boîtier (101). 13 - Cellule de diffusion (200) notamment pour l'analyse de pénétration transmembranaire , ladite cellule 25 de diffusion (200) comportant au moins un compartiment récepteur (202) destiné à recevoir une solution réceptrice (203), au moins un conduit (204, 205) relié audit compartiment récepteur (202), caractérisée en ce qu'elle comporte des moyens de fixation (207) d'au moins un 30 insert de diffusion (1) selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, lesdits moyens de fixation (207) étant agencés pour que ladite membrane (5) soit au moins en contact avec ladite solution réceptrice (203), ledit compartiment récepteur (202) et lesdits moyens de UNIFC1-FR-1 SUITE NOTIFICATION CUSL 2951089 - 34 - fixation (207) étant agencés pour ménager un espace libre latéral tangent audit dégagement latéral dudit insert de diffusion (1). 5 14 - Cellule de diffusion (200) selon la revendication précédente, caractérisée en ce que le fond (209) dudit compartiment récepteur (202) est agencé pour présenter un profil incliné définissant une zone de profondeur maximale de ladite solution réceptrice (203). 10 15 - Cellule de diffusion (200) selon l'une quelconque des revendications 13 et 14, caractérisée en ce qu'elle comporte des moyens de réglage agencés pour adapter au moins l'espace séparant ledit fond (209) de ladite 15 membrane (5) en fonction de la hauteur de solution réceptrice (203) contenu dans ledit compartiment récepteur (202). 16 - Unité de diffusion comprenant une pluralité de 20 cellules de diffusion (200) disposées adjacentes, caractérisée en ce qu'elle comprend des cellules de diffusion (200) selon l'une quelconque des revendications 13 à 15, chaque cellule de diffusion (200) étant raccordée par son conduit (204, 205) à un récipient 25 de récupération individuel destiné à recevoir ladite solution réceptrice (203) après pénétration transmembranaire. 17 - Procédé de diffusion notamment pour l'analyse de 30 la pénétration transmembranaire d'une membrane (5), ledit procédé de diffusion comprenant au moins les étapes suivantes : a) la préparation de ladite membrane (5), b) le montage de ladite membrane (5) dans une cellule UNIFCI-FR-1 SUITE NOTIFICATION CUSL 2951089 - 35 - de diffusion, c) l'analyse de ladite membrane (5) par le biais de ladite cellule de diffusion, caractérisé en ce que, lors de ladite étape de préparation, 5 on utilise un insert de diffusion (1) selon l'une quelconque des revendications 1 à 10 et en ce que, lors de ladite étape de montage, on utilise une cellule de diffusion (200) selon l'une quelconque des revendications 13 à 15. 10 UNIFC1-FR-1 SUITE NOTIFICATION CL/SL