Brevet FR2958118A1 — publié le 20111007

UTILISATION D'AU MOINS UN THIOSULFINATE OU THIOSULFONATE DE DIALKYLE POUR RÉDUIRE LE NOMBRE D'APICOMPLEXES CHEZ UN ANIMAL MONOGASTRIQUE L'invention concerne l'utilisation d'au moins un thiosulfinate ou thiosulfonate de dialkyle pour réduire le nombre d'apicomplexes présents chez des animaux monogastriques, tels que la volaille. Arrière-plan de l'invention Les apicomplexes ou sporozoaires sont des organismes unicellulaires qui sont des parasites des vertébrés ou des invertébrés. Ces parasites peuvent provoquer des pathologies diverses. Ainsi, par exemple, la coccidiose aviaire, qui est une infection protozoaire intestinale universelle perturbant gravement l'alimentation et la croissance de la volaille, est provoquée par plusieurs parasites du groupe des apicomplexes, en particulier du genre Eimeria, qui infestent l'intestin et se propagent d'un animal à l'autre par ingestion d'oocystes infectés. Les Néospora et cryptosproridies, d'autres organismes appartenant au groupe des apicomplexes, peuvent également infester l'intestin des animaux. Toutes ces infections entraînent des pertes économiques pour l'industrie de l'élevage et il n'existe à l'heure actuelle aucun vaccin efficace contre elles. Les stratégies classiques de contrôle de ce type d'infections sont très coûteuses car elles reposent principalement sur la chimio-prophylaxie. De plus, l'émergence continuelle de souches résistant aux médicaments, comme les souches d'Eimeria, combinée au durcissement de la réglementation et aux interdictions de 2 l'utilisation de médicaments contre les coccidies dans l'élevage industriel de la volaille, obligent à de nouvelles approches et stratégies de contrôle des maladies. En raison de la complexité de l'immunité de l'hôte et du cycle de vie des parasites, il s'avère particulièrement difficile de mettre au point de nouvelles stratégies d'intervention ou de nouveaux vaccins contre les apicomplexes. La tendance actuelle est alors d'utiliser des vaccins à base de parasites vivants pour contrôler la coccidiose. Il y a dans le commerce, au niveau mondial, au moins dix vaccins de ce type. Tous ces vaccins recourent à des oocystes vivants infectés pour produire une infection réelle qui est destinée à déclencher une immunisation naturelle qui protège les poulets âgés de 3 à 4 semaines, ce qui correspond à l'âge où se déclare la majorité des cas de coccidiose. Cette technique de vaccination a l'inconvénient majeur que les oocystes vivants ne peuvent être produits que par des poulets vivants, ce qui demande beaucoup de travail et implique de nombreuses manipulations. Exposé sommaire de l'invention L'invention a pour but majeur de lutter contre les apicomplexes présents dans l'organisme d'animaux monogastriques. Les recherches menées par les inventeurs leur ont permis de trouver des agents capables de détruire les apicomplexes. De façon surprenante, ces agents sont des composés connus, les thiosulfinates et les thiosulfonates de dialkyle, en particulier, le thiosulfinate de di(n-propyle) et le thiosulfonate de di(n-propyle), qui seront appelés respectivement PTS et PTSO dans la suite de la description. L'utilisation de ces composés s'est révélée particulièrement efficace pour détruire les apicomplexes, en particulier les Eimeria. En outre, ces composés peuvent être produits indépendamment de l'animal auxquels ils sont destinés, c'est-à-dire sans nécessiter d'oocystes, à partir de produits naturels ou par synthèse organique. Par ailleurs, ils présentent l'avantage surprenant d'être efficaces même à très faibles doses. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention vont maintenant être décrits en détail dans l'exposé qui suit et qui est donné en référence à la figure unique annexée qui est un diagramme comparatif représentent la réduction du nombre de sporozoïtes en fonction des composés utilisés. Exposé détaillé de l'invention Les thiosulfinates et thiosulfonates de di-alkyle sont des composés répondant à la formule F suivante : R - SOa - S - R' dans laquelle : R et R', identiques ou différents, représentent chacun un groupement alkyle ; et a vaut 1 ou 2. De préférence, les groupements alkyle R et R' comprennent de 1 à 5 atomes de carbone. De plus, on utilise plus particulièrement comme groupements R et R', des groupements propyle, généralement n-propyle. Au sein d'un même composé de formule F, les groupements R et R' sont de préférence identiques. Pour un thiosulfinate de dialkyle, dans la formule F, a vaut 1. 4 Pour un thiosulfonate de dialkyle, a vaut 2. Comme composé(s) de formule F, il est avantageux d'utiliser un thiosulfinate de dipropyle et/ou un thiosulfonate de dipropyle, en particulier le PTS et/ou le PTSO. En effet, bien que le PTS puisse être un produit de synthèse, on peut avantageusement l'extraire de plantes appartenant à la famille des alliacées (selon la classification phylogénétique APG) et en particulier au genre Allium, qui est un membre de cette famille. Les plantes les plus connues appartenant au genre Allium sont le poireau (Allium ampeloprasum), l'oignon (Allium cepa L.), l'ail cultivé (Allium sativum L.), l'échalote (Allium ascalonicum), la ciboule (Allium fistulosum L.) et la ciboulette (Allium schoenoprasum L.). Selon l'invention, on utilise de préférence un extrait d'ail cultivé (Allium Sativum L.). Il s'agit en général d'un extrait de bulbe d'ail. Le PTSO peut être obtenu par synthèse ou décomposition 20 (ou oxydation) du PTS. L'obtention du PTS par extraction et du PTSO est notamment décrite dans la demande de brevet EP-A1-1 721 534, de la page 15, ligne 34, à la page 16, ligne 26. Les thiosulfinates peuvent également être obtenus selon 25 le procédé décrit dans la demande de brevet FR-A-2 813 884. Bien entendu, on peut utiliser des mélanges en toutes proportions de - plusieurs thiosulfinates de dialkyle ; - plusieurs thiosulfonates de dialkyle ; 30 - au moins un thiosulfinate de dialkyle et au moins un thiosulfonate de dialkyle. Des études ont montré que les animaux, en particulier, les volailles, ne développent pas de résistance contre ces composés, ce qui rend leur utilisation dans l'élevage industriel particulièrement intéressante. Le PTS et/ou le PTSO peuvent être utilisés à titre prophylactique ou thérapeutique. 5 Pour leur utilisation à titre prophylactique, on peut ajouter le ou les thiosulfinate et/ou thiosulfonate de dialkyle à la nourriture pour les animaux, par exemple, en les mélangeant quotidiennement à leur ration. La quantité mise en œuvre est alors généralement de 2 mg 10 par kg à 60 mg par kg de matière sèche d'aliment. On peut éventuellement les diluer dans l'eau servie aux animaux, à raison de 1 à 30 mg/1 d'eau, sur la base de la quantité moyenne bue par l'animal. L'invention s'applique aux animaux monogastriques tels 15 quel la volaille, en particulier les poulets. Exemple comparatif On a testé les propriétés anti-parasitiques des composés suivants 20 - une oléorésine de capsicum (pigment Capiscum frutescens) contenant 6% en poids d'un mélange de capsaïcine et de dihydrocapsaïcine ; - du carvacrol - du cinnamaldéhyde ; 25 - de la curcumine ; - de l'anéthol - du PTS selon l'invention ; - du PTSO selon l'invention ; et - un extrait selon l'invention appelé « Garlicon 40 » 30 contenant 400 ppm de composés organo-sulfurés caractéristiques de l'ail/oignon, 6,7% en poids de PTS et 34,3% en poids de PTSO. 6 On a préparé une première série d'échantillons constitués d'une solution aqueuse contenant 100 ppm des composés à tester précités et une deuxième série d'échantillons contenant seulement 10 ppm de ces composés. Ensuite, afin de pouvoir tester l'effet des composés précités sur des Eimeria, on a procédé comme suit. On s'est procuré des oocystes fraîchement sporulés d'Eimeria tenella que l'on a conservés à 4°C dans une solution de dichromate de potassium à 2,5% (poids/volume) jusqu'à utilisation. Puis, on a stérilisé les oocystes à l'eau de Javel avant d'isoler des sporozoïtes. On a détruit mécaniquement les parois des oocystes pendant 5 à 7 secondes à l'aide d'un broyeur à billes ayant des billes de 0,5 mm. Le produit obtenu a ensuite été incubé pendant 45 minutes à 41°C dans une solution tampon de PBS contenant 0,014 mol/1 d'acide taurodésoxycholique et 0,25% en poids de trypsine pour libérer les sporozoïtes. Les fluides libérés par l'excystation ont été filtrés et les sporozoïtes recueillis ont été lavés trois fois avec du milieu RPMI-1640 sous agitation à 2100 tours par minutes pendant 10 minutes à 4°C. On a ensuite préparé des solutions de 106 sporozoïtes par millilitre que l'on a laissé incuber avec le même volume d'échantillon de composé à tester pendant 24 heures. Puis, on a mesuré la viabilité des sporozoïtes suivant 30 la méthode d'exclusion du trypan bleu. Les résultats sont visualisés sur la figure unique annexée où les nombres situés au-dessus de chaque bâton indiquent le pourcentage d'inhibition du composé 7 correspondant et les nombres figurant à la suite du nom du composé sa concentration. Une mesure a également été effectuée avec une solution témoin (dépourvue de composé à tester) appelée « Control » sur la figure. Il apparaît, d'une part, que tous les composés testés à une concentration de 100 ppm, sauf l'anéthol, ont un effet d'inhibition ou destruction des sporozoïtes d'Eimeria tenella marqué (d'au moins 61%) et, d'autre part, que la curcumine, le cinnamladéhyde, le carvacrol, le PTS et le PTSO ou l'extrait Garlicon 40 sont les plus performants (au moins 74%). De plus, on constate avec étonnement que seuls le PTS et le PTSO présentent un efficacité élevée, respectivement, de 87% et 61%, à un taux de concentration de seulement 10 ppm. Qui plus est, de façon surprenante, le PTSO a même une efficacité plus élevée à 10 ppm qu'à 100 ppm. Revendications1.- Utilisation prophylactique d'au moins un composé répondant à la formule F suivante : R - SOa - S - R' dans laquelle : R et R', identiques ou différents, représentent chacun 10 un groupement alkyle ; et a vaut 1 ou 2 ; pour réduire le nombre d'apicomplexes chez un animal monogastrique. 15 2.- Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle, dans la formule F, les groupements R et R' sont des groupements alkyle comprenant de 1 à 5 atomes de carbone. 3.- Utilisation selon la revendication 2, dans laquelle, 20 dans la formule F, les groupements R et R' sont des groupements propyle. 4. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, dans laquelle les groupements R et R' sont identiques. 5.- Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, dans laquelle, dans la formule F, a vaut 1. 6.- Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle dans 30 le composé de formule F est le thiosulfinate de dipropyle. 7.- Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, dans laquelle, dans la formule F, a vaut 2. 25 9 8.- Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle dans le composé de formule F est le thiosulfonate de dipropyle. 9.- Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, dans laquelle le ou les composé(s) de formule F se présente(nt) au moins en partie sous la forme d'un extrait de plante appartenant à la famille des alliacées. 10.- Utilisation selon la revendication 9, dans laquelle le ou les composé(s) de formule F se présente(nt) au moins en partie sous la forme d'un extrait de plante appartenant au genre Allium. 11.- Utilisation selon la revendication 10, dans laquelle la plante du genre Allium est l'ail cultivé (Allium Sativum L.). 12.- Utilisation selon l'une des revendications 1 à 11, dans 20 laquelle l'animal monogastrique est une volaille. 13.- Utilisation selon l'une des revendications 1 à 12, dans laquelle les apicomplexes sont des coccidies. 25 14.- Utilisation selon la revendication 13, dans laquelle les coccidies sont des Eimeria. 15.- Utilisation selon l'une des revendications 1 à 14, à raison de 2 à 60 mg/kg de matière sèche d'aliment ou de 1 à 30 30 mg/l d'eau de boisson.10 16.- Utilisation selon l'une des revendications 1 à 15, dans laquelle les apicomplexes sont des Neospora ou des Crysporidies.