Brevet FR2948028A1 — publié le 20110121

Association d'un inhibiteur de l'échangeur sodium-proton et d'un dérivé aminé de dihydro-1,3,5-triazine Domaine de l'invention L'invention concerne une association d'un inhibiteur de l'échangeur sodium-proton et d'un dérivé aminé de dihydro-1,3,5-triazine, utile pour le traitement et/ou la prévention de pathologies induites par une ischémie et/ou une reperfusion, notamment les complications cardiaques et rénales. Arrière plan technique Les ischémies myocardiques sont définies comme un déséquilibre entre besoins et apports en oxygène. Ce déséquilibre conduit à un désordre de la fonction cardiaque. Les ischémies myocardiques sont, dans la grande majorité des cas, causées par une insuffisance de la circulation sanguine coronarienne vers le tissu musculaire cardiaque, privant ainsi les cellules myocardiques de leur apport en oxygène ou diminuant drastiquement cet apport. Ces ischémies peuvent être dues à l'obstruction d'un vaisseau (thrombose), à la réduction du diamètre interne d'une artère (sténose), ou à une diminution du flux sanguin coronarien (hypoperfusion) tel que dans les états d'insuffisance circulatoire liés à un sepsis sévère avec choc endotoxinémique. A ce titre, il convient de noter que le sepsis sévère entraîne également un dysfonctionnement hémodynamique avec une dépression myocardique directe. A l'heure actuelle, toutefois, il n'est pas clair quel mécanisme est prédominant dans la diminution de la fonction du myocarde, l'hypoperfusion ou la dépression myocardique par des cytokines circulants. Les infarctus sont une des conséquences majeures des ischémies. Le terme d'infarctus définit un foyer circonscrit de nécrose tissulaire. Ainsi, l'infarctus du myocarde entraîne la destruction d'une partie du coeur du fait de la mort des cellules du muscle cardiaque. L'infarctus du myocarde est un événement très fréquent. A titre d'exemple, on estime qu'en France, environ 180 000 à 200 000 personnes par an sont affectées par cette maladie, prédominante chez l'homme. Elle apparaît, en priorité, chez les sujets ayant des facteurs de risques cardiovasculaires tels que la consommation de tabac, l'obésité, un diabète, une hyperlipidémie ou une hypertension artérielle. L'étendue de l'infarctus du myocarde est un élément déterminant pour la récupération fonctionnelle contractile du myocarde et du pronostic à long terme des patients. L'infarctus aigu du myocarde ("Acute Myocardial Infarction", "AMI") constitue une urgence cardiologique absolue qui implique une prise en charge par des services médicaux et hospitaliers spécialisés avec un traitement de la phase aiguë ayant pour but de reperfuser le muscle cardiaque ischémique et de prévenir et/ou limiter les complications possibles liées à l'infarctus entraînant fréquemment le décès des patients dans les premières heures ou les premiers jours. La reperfusion se définit comme le rétablissement d'une circulation sanguine adéquate au sein d'un tissu ischémique permettant d'atteindre à nouveau l'équilibre entre besoins et apports en oxygène. La reperfusion lors d'interruption complète du flux sanguin coronarien est généralement effectuée par désobstruction de l'artère occluse. Bien que la reperfusion protège incontestablement les cellules myocardiques de la mort cellulaire causée par la persistance de l'ischémie, elle s'accompagne aussi d'effets délétères sur la fonction contractile (sidération myocardique), le rythme cardiaque (survenue d'arythmies) et la perfusion tissulaire ("no-reflow"). Des données récentes indiquent même que la reperfusion peut aussi paradoxalement tuer une partie des cellules reperfusées (nécrose de reperfusion). Lors de la reperfusion de l'infarctus du myocarde, des médicaments appartenant à des classes thérapeutiques différentes telles que, par exemple, celles des inhibiteurs de l'agrégation plaquettaire comme l'acide acétylsalicylique, celle des bêta-bloquants, celle des inhibiteurs de l'enzyme de conversion (IEC) ou celle des statines ont un apport bénéfique sur le pronostic des patients. Toutefois, aucun de ces médicaments ou d'autres médicaments disponibles actuellement administrés lors de la reperfusion n'est capable de limiter la taille de l'infarctus du myocarde. Une situation ischémique peut également entraîner une altération du fonctionnement normal d'autres organes comme le rein (Zhao, Jing; Dong, and al. Guoji Bingli Kexue Yu Linchuang Zazhi (2007), 27(6), 539-544) ou le cerveau (Zhu, Xia-Ling, Neuroscience Letters, 2009). Ces dernières années, différentes études précliniques ont mis en évidence la capacité des inhibiteurs de l'échangeur sodium-proton (NHE) dans des situations d'hypoperfusion cardiaque, à protéger les tissus cardiaques risquant d'être détruits par le déclenchement d'un événement ischémique aigu. La protection des tissus cardiaques par les inhibiteurs NHE concerne tout type de lésions ou pathologies causées par une hypoperfusion, de l'arythmie cardiaque à une hypercontraction du muscle cardiaque ainsi que la perte provisoire de fonction à la nécrose des tissus cardiaques, associée à des lésions irréversibles. L'échangeur sodium-proton (NHE) joue un rôle important dans les situations ischémiques aigues. Le mécanisme d'action de ces inhibiteurs de NHE consiste en ce qu'ils réduisent l'influx accru d'ions sodium dans les tissus hypoperfusés, par activation du NHE due à l'acidification intracellulaire. Ceci retarde l'accumulation excessive de sodium dans les tissus. Dans la mesure où les transports d'ions sodium et calcium sont couplés l'un à l'autre dans les tissus cardiaques, ceci empêche les surcharges potentiellement létales des cellules cardiaques en calcium. Par ailleurs, il est connu du brevet européen EP 1250 328, des dérivés aminés de dihydro-1,3,5-triazine de formule générale (I) suivante : R2 H R4 (I) Il a pu être démontré que ces composés présentaient une activité antidiabétique dans un modèle expérimental de diabète non insulinodépendant, induit chez le rat par la Streptozotocine. La présente invention découle de la mise en évidence inattendue, par les inventeurs, que l'association d'un inhibiteur de l'échangeur sodium-proton et d'un dérivé aminé de dihydro-1,3,5-triazine de formule (I) permet d'améliorer le traitement et/ou la prévention de maladies associées à l'ischémie et/ou la reperfusion, notamment les complications cardiaques et rénales. Plus particulièrement, il a été mis en évidence que le composé E 008, permettait de réduire la production de ROS par le complexe I de la chaîne respiratoire des cellules endothéliales, en inhibant le flux électronique inverse. En outre, ce R1'NIlNN.R3 NON R5 R6 composé permet d'empêcher la perte de potentiel de la membrane mitochondriale et de réduire l'ouverture du pore transitoire de perméabilité (PTP) mitochondrial, notamment lors d'évènements d'ischémie et/ou de reperfusions. Ces effets, combinés à ceux des inhibiteurs NHE, tels que le cariporide, permettent d'améliorer le traitement ou la prévention des lésions, troubles ou maladies associés à une ischémie-reperfusion. La présente invention a ainsi pour objet une association d'un inhibiteur NHE et d'un composé de formule générale (I) : R2 H R4 R1'N\/N\/N.R3 NxTN R5 R6 dans laquelle : • R1, R2, R3, et R4 sont choisis indépendamment parmi les groupes : - H, - alkyle (C1-C20) substitué ou non par halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), cycloalkyle (C3-C8), alkènyle (C2-C20) substitué ou non par halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkyne (C2-C20) substitué ou non par halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), cycloalkyle (C3-C8) substitué ou non par alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), - hétérocycloalkyle (C3-C8) portant un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi N, O, S et substitué ou non par alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05) - aryl (C6-C14) alkyle (C1-C20) substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, - aryle (C6-C14) substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, - hétéroaryle (C1-C13) portant un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi N, O, S et substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6- (I) C14) alkoxy (Cl-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, R1 et R2, d'une part, et R3 et R4, d'autre part, pouvant former avec l'atome d'azote un cycle à n chaînons (n compris entre 3 et 8) comprenant ou non un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi N, O, S et pouvant être substitué par un ou plusieurs groupements suivants : amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, • R5 et R6 sont choisis indépendamment parmi les groupes : - H, - alkyle (C1-C20) substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, - alkényle (C2-C20) substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, - alkynyle (C2-C20) substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, -cycloalkyle (C3-C8) substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, - hétérocycloalkyle (C3-C8) portant un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi N, O, S et substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, -aryle (C6-C14) substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, -hétéroaryle (C1-C13) portant un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi N, O, S et substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, - aryl (C6-C14) alkyle (C1-05) substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, R5 et R6 pouvant former avec l'atome de carbone sur lequel ils sont fixés un cycle à m chaînons (m compris entre 3 et 8) comprenant ou non un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi N, O, S et pouvant être substitué par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (Cl-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, ou pouvant former avec l'atome de carbone un reste polycyclique en C10-C30 substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, R5 et R6 pouvant également représenter ensemble le groupement =0 ou =S, l'atome d'azote d'un groupe hétérocycloalkyle ou hétéroaryle pouvant être substitué par un groupe alkyle (Cl-05), cycloalkyle (C3-C8), aryle(C6-C14), aryl(C6-C14)alkyle(C1-05) ou acyle(C1-C6), ainsi que les formes tautomères, énantiomères, diastéréoisomères et épimères et les sels pharmaceutiquement acceptables. La présente invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant une association telle que définie ci-dessus et un véhicule pharmaceutiquement acceptable. La présente invention concerne également une association telle que définie ci-dessus pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention d'une pathologie associée à une ischémie et/ou une reperfusion. La présente invention concerne également l'utilisation d'une association telle que définie ci-dessus, pour la préparation d'un médicament destiné à la prévention et/ou au traitement d'une pathologie associée à une ischémie et/ou une reperfusion. La présente invention concerne également une méthode de prévention et/ou de traitement d'une pathologie associée à une ischémie et/ou une reperfusion chez un patient, dans laquelle on administre au patient une quantité prophylactiquement ou thérapeutiquement efficace d'une association telle que définie ci-dessus. Description détaillée de l'invention Par cycle à m chaînons formé par R5 et R6, on entend en particulier un cycle saturé tel qu'un groupe cyclohexyle, pipéridinyle ou tétrahydropyrannyle. Par groupe polycyclique formé par R5 et R6, on entend un groupe polycyclique carboné éventuellement substitué et en particulier un reste de stéroïde. Un groupe particulier de composés de formule (I) est celui dans laquelle R5 est l'hydrogène. Un autre groupe particulier de composés de formule (I) est celui dans laquelle R5 et R6 forment avec l'atome de carbone sur lequel ils sont fixés un cycle à m chaînons, (m compris entre 3 et 8) comprenant ou non un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi N, O, S et pouvant être substitué par un ou plusieurs groupements suivants: alkyle (C1-05), amino, hydroxy, alkylamino(C1-05), alkoxy(C1-05), alkylthio(C1-05), aryle (C6-C14), aryl(C6-C14)-alkoxy(C1-05), ou forment avec l'atome de carbone un reste polycyclique en Cl 0-C30 substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (Cl C5), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle. Un autre groupe particulier de composés de formule (I) est celui dans laquelle R5 et R6 sont choisis indépendamment parmi les groupes : alkyle (C1-C20) substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle. L'invention se rapporte également aux formes tautomères, aux énantiomères, diastéréoisomères, épimères et aux sels organiques ou minéraux des composés de formule générale (I). Les composés de l'invention de formule (I) définis tels que précédemment possédant une fonction suffisamment acide ou une fonction suffisamment basique ou les deux, peuvent inclure les sels correspondants d'acide organique ou minéral ou de base organique ou minérale pharmaceutiquement acceptables. En particulier, les composés de formule générale (I) possèdent des atomes d'azote basiques qui peuvent être monosalifiés ou disalifiés par des acides organiques ou minéraux. De préférence, R6 est un groupe alkyle (C1-C20), notamment un groupe méthyle. De préférence, R1 et/ou R2 représente(nt) un groupe alkyle (C1-C20), notamment un groupe méthyle. De préférence, R3 et/ou R4 représente(nt) un atome d'hydrogène. De préférence, R1 et R2 sont un groupe méthyle et R3 et R4 représentent un hydrogène. Parmi les composés de formule (I) préférés, on peut citer notamment le composé E 008 de formule (la): CH3 H H CSN` /N` /NHZ 3 T T NyN CH3 (la) ainsi que ses formes tautomères, énantiomères, diastéréoisomères et épimères et/ou sels pharmaceutiquement acceptables de celui-ci, De préférence, l'inhibiteur NHE est un inhibiteur de NHE-1. A titre d'exemple, on peut citer notamment l'amiloride, ou le cariporide : 00 O NH H3C--S N'NH2 3HC CH3 2 Cariporide Comme autres exemples d'inhibiteurs NHE, on peut citer les dérivés sulfonyl- ou sulfinyl- benzoyl guanidine de formule (I) décrits comme inhibiteurs de NHE dans la demande de brevet EP 758 644, notamment le composé A de formule : Amiloride H2 R6SO R2 (I) (A) Plus préférentiellement, l'inhibiteur NHE est le cariporide ou un sel pharmaceutiquement acceptable de celui-ci. Selon un deuxième aspect, l'invention concerne une composition pharmaceutique comprenant une association telle que définie ci-dessus. Selon un autre aspect, l'invention concerne une association telle que définie ci-dessus pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention de maladies associées à l'ischémie-reperfusion, notamment les complications cardiaques ou rénales. Comme exemple de pathologies cardiaques, on peut citer notamment l'arythmie cardiaque, l'infarctus du myocarde, ou l'hypertrophie cardiaque, celle-ci induisant généralement une insuffisance cardiaque. Selon la présente invention, les radicaux � alkyle � représentent des radicaux hydrocarbonés saturés, en chaîne droite ou ramifiée, de 1 à 20 atomes de carbone, de préférence de 1 à 5 atomes de carbone. On peut notamment citer, lorsqu'ils sont linéaires, les radicaux méthyle, éthyle, propyle, butyle, pentyle, hexyle, octyle, nonyle, décyle, dodécyle, hexadécyle, et octadécyle. On peut notamment citer, lorsqu'ils sont ramifiés ou substitués par un ou plusieurs radical alkyle, les radicaux isopropyle, tert-butyl, 2-éthylhexyle, 2-méthylbutyle, 2-méthylpentyle, 1 -méthylpentyle et 3-méthylheptyle. Les radicaux � alkoxy � selon la présente invention sont des radicaux de formule ûO-Alkyle, l'alkyle étant tel que défini précédemment. � Alkylthio � désigne un groupe alkyl-S-, le groupe alkyle étant tel que défini ci-dessus. � Alkylamino � désigne un groupe alkyl-NH-, le groupe alkyle étant tel que défini ci-dessus. Parmi les atomes d'halogène, on cite plus particulièrement les atomes de fluor, de chlore, de brome et d'iode. Les radicaux � alkényle � représentent des radicaux hydrocarbonés, en chaîne droite ou linéaire, et comprennent une ou plusieurs insaturations éthyléniques. Parmi les radicaux alkényle, on peut notamment citer les radicaux allyle ou vinyle. Les radicaux � alkynyle � représentent des radicaux hydrocarbonés, en chaîne droite ou linéaire, et comprennent une ou plusieurs insaturations acétyléniques. Parmi les radicaux alkynyle, on peut notamment citer l'acétylène. Le radical � cycloalkyle � est un radical hydrocarboné mono-, bi- ou tri- cyclique saturé ou partiellement insaturé, non aromatique, de 3 à 10 atomes de carbone, tel que notamment le cyclopropyle, cyclopentyle, cyclohexyle ou adamantyle, ainsi que les cycles correspondants contenant une ou plusieurs insaturations. Les radicaux � hétérocycloalkyles � désignent les systèmes mono ou bicycliques, saturés ou partiellement insaturés, non aromatiques, de 3 à 8 atomes de carbone, comprenant un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi N, O ou S. � Aryle � désigne un système aromatique hydrocarboné, mono ou bicyclique de 6 à 10 atomes de carbone. Parmi les radicaux aryle, on peut notamment citer le radical phényle ou naphtyle, plus particulièrement substitué par un moins un atome d'halogène. Les radicaux � arylalkyles � ou � aralkyles � sont des radicaux aryl-alkyl-, les groupes aryles et alkyles étant tels que définis ci-dessus. Parmi les radicaux arylalkyle, on peut notamment citer le radical benzyle ou phénétyle. � Aryloxy � désigne un groupe aryl-O-, le groupe aryl étant tel que défini ci-dessus. � Arylalkoxy � désigne un groupe aryl-alkoxy-, les groupes aryles et alkoxy étant tels que définis ci-dessus. Les radicaux � hétéroaryles � désignent les systèmes aromatiques comprenant un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi l'azote, l'oxygène ou le soufre, mono ou bicyclique, de 5 à 10 atomes de carbone. Parmi les radicaux hétéroaryles, on pourra citer le pyrazinyle, le thiényle, l'oxazolyle, le furazanyle, le pyrrolyle, le 1,2,4-thiadiazolyle, le naphthyridinyle, le pyridazinyle, le quinoxalinyle, le phtalazinyle, l'imidazo[1,2-a]pyridine, l'imidazo[2,1-b]thiazolyle, le cinnolinyle, le triazinyle, le benzofurazanyle, l'azaindolyle, le benzimidazolyle, le benzothiényle, le thiénopyridyle, le thiénopyrimidinyle, le pyrrolopyridyle, l'imidazopyridyle, le benzoazaindole, le 1,2,4-triazinyle, le benzothiazolyle, le furanyle, l'imidazolyle, l'indolyle, le triazolyle, le tétrazolyle, l'indolizinyle, l'isoxazolyle, l'isoquinolinyle, l'isothiazolyle, l'oxadiazolyle, le pyrazinyle, le pyridazinyle, le pyrazolyle, le pyridyle, le pyrimidinyle, le purinyle, le quinazolinyle, le quinolinyle, l'isoquinolyle, le 1,3,4-thiadiazolyle, le thiazolyle, le triazinyle, l'isothiazolyle, le carbazolyle, ainsi que les groupes correspondants issus de leur fusion ou de la fusion avec le noyau phényle � Carboxyalkyle � désigne un groupe HOOC-alkyl-, le groupe alkyle étant tel que défini ci-dessus. Comme exemple de groupes carboxylakyles, on peut citer notamment le carboxyméthyle ou le carboxyéthyle. L'expression � sels pharmaceutiquement acceptables � fait référence aux sels d'addition acide relativement non toxiques, inorganiques et organiques, et les sels d'addition de base, des composés de la présente invention. Ces sels peuvent être préparés in situ pendant l'isolement final et la purification des composés. En particulier, les sels d'addition acide peuvent être préparés en faisant réagir séparément le composé purifié sous sa forme épurée avec un acide organique ou inorganique et en isolant le sel ainsi formé. Parmi les exemples de sels d'addition acide on trouve les sels bromhydrate, chlorhydrate, sulfate, bisulfate, phosphate, nitrate, acétate, oxalate, valerate, oléate, palmitate, stéarate, laurate, borate, benzoate, lactate, phosphate, tosylate, citrate, maléate, fumarate, succinate, tartrate, naphthylate, mésylate, glucoheptanate, lactobionate, sulfamates, malonates, salicylates, propionates, méthylènebis-b-hydroxynaphtoates, acide gentisique, iséthionates, di-p-toluoyltartrates, methanesulfonates, éthanesulfonates, benzenesulfonates, p-toluenesulfonates, cyclohexyl sulfamates et quinateslaurylsulfonate, et analogues (Voir par exemple S.M. Berge et al. � Pharmaceutical Salts � J. Pharm. Sci, 66 :p.1-19 (1977)). Les sels d'addition acide peuvent également être préparés en faisant réagir séparément le composé purifié sous sa forme acide avec une base organique ou inorganique et en isolant le sel ainsi formé. Les sels d'addition acide comprennent les sels aminés et métalliques. Les sels métalliques adaptés comprennent les sels de sodium, potassium, calcium, baryum, zinc, magnésium et aluminium. Les sels de sodium et de potassium sont préférés. Les sels d'addition inorganiques de base adaptés sont préparés à partir de bases métalliques qui comprennent hydrure de sodium, hydroxyde de sodium, hydroxyde de potassium, hydroxyde de calcium, hydroxyde d'aluminium, hydroxyde de lithium, hydroxyde de magnésium, hydroxyde de zinc. Les sels d'addition aminés de base adaptés sont préparés à partir d'amines qui ont une alcalinité suffisante pour former un sel stable, et de préférence comprennent les amines qui sont souvent utilisées en chimie médicinale en raison de leur faible toxicité et de leur acceptabilité pour l'usage médical : ammoniac, éthylènediamine, N-méthyl-glucamine, lysine, arginine, ornithine, choline, N,N'- dibenzyléthylenediamine, chloroprocaïne, diéthanolamine, procaïne, N-benzylphénéthylamine, diéthylamine, pipérazine, tris(hydroxymethyl)-aminométhane, hydroxyde de tétraméthylammonium, triéthylamine, dibenzylamine, éphénamine, dehydroabiétylamine, N-éthylpiperidine, benzylamine, tétra-méthylammonium, tétraéthylammonium, méthylamine, diméthylamine, triméthylamine, éthylamine, acides aminés de base, par exemple lysine et arginine, et dicyclohexylamine, et analogues. Les composés de formule générale (I) peuvent être préparés par application ou adaptation de toute méthode connue en soi de et/ou à la portée de l'homme du métier, notamment celles décrites par Larock dans Comprehensive Organic Transformations, VCH Pub., 1989, ou par application ou adaptation des procédés décrits dans EP 1 250 328. Les composés pharmaceutiques selon l'invention peuvent être présentés sous des formes destinées à l'administration par voie parentérale, orale, rectale, permuqueuse ou percutanée. Les compositions pharmaceutiques incluant ces composés de formule (I) seront donc présentées sous forme de solutés ou de suspensions injectables ou flacons multi-doses, sous forme de comprimés nus ou enrobés, de dragées, de capsules, de gélules, de pilules, de cachets, de poudres, de suppositoires ou de capsules rectales, de solutions ou de suspensions, pour l'usage percutané dans un solvant polaire, pour l'usage permuqueux. Les excipients qui conviennent pour de telles administrations sont les dérivés de la cellulose ou de la cellulose microcristalline, les carbonates alcalinoterreux, le phosphate de magnésium, les amidons, les amidons modifiés, le lactose pour les formes solides. Pour l'usage rectal, le beurre de cacao ou les stéarates de polyéthylèneglycol 20 sont les excipients préférés. Pour l'usage parentéral, l'eau, les solutés aqueux, le sérum physiologique, les solutés isotoniques sont les véhicules les plus commodément utilisés. La posologie peut varier dans les limites importantes (0.5 mg à 1000 mg) en fonction de l'indication thérapeutique et de la voie d'administration, ainsi que de 25 l'âge et du poids du sujet. L'expression � lésions, troubles ou maladies associées à une ischémiereperfusion � désigne l'ensemble des lésions, troubles ou maladies dont le déclenchement ou l'entretien trouve son origine, au moins partiellement, dans 30 l'ischémie et/ou la reperfusion. Elle désigne également les lésions, troubles ou maladies qui sont la conséquence d'un évènement ischémique et/ou de reperfusion. De préférence, l'association selon l'invention est utile pour le traitement et/ou la prévention des complications cardiaques, notamment d'arythmies cardiaques, d'infarctus du myocarde ou l'insuffisance cardiaque. Selon un autre mode préférentiel, l'association est utile pour le traitement ou la prévention de complications rénales. Selon un autre mode de réalisation préférentiel, l'association est utile pour le traitement et/ou la prévention de complications cérébrales, notamment d'accidents vasculaires cérébraux. Exemple Evaluation de l'effet combiné protecteur de E 008 et d'un inhibiteur de l'échangeur Na+/H+ sur des dommages vasculaires induits par une ischémie/reperfusion L'objectif de cette étude est d'évaluer l'effet ajouté potentiel de la combinaison d'un inhibiteur de l'échangeur Na+/H+ et du composé E 008, un inhibiteur de la production d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) sur des dommages vasculaires induits par une ischémie/reperfusion, en mesurant l'effet de cette combinaison sur la perte du potentiel de membrane mitochondrial induite par une ischémie/reperfusion. Matériel et méthodes Culture cellulaire La lignée de cellules endothéliales microvasculaires dermiques humaines immortalisées HMEC-1 a été utilisée. Traitement Les cellules ont été traitées selon le schéma suivant : - groupe témoin : pas de traitement, suivi d'une ischémie de 60 min et une reperfusion de 120 min. groupe E 008 : incubation avec le composé E 008 à une concentration de de 10 micromolaire à 10 millimolaire pendant 30 min suivie d'une ischémie de 60 min et une reperfusion de 120 min. - groupe Metformine : incubation avec le composé Metformine à une concentration de 10 micromolaire à 10 millimolaire pendant 30 min suivie d'une ischémie de 60 min et une reperfusion de 120 min. - groupe Cariporide : incubation avec le cariporide à une concentration de 1 à 100 micromolaire pendant 30 min suivie d'une ischémie de 60 min et une reperfusion de 120 min. - groupe E 008 + cariporide : incubation avec le composé E 008 à une concentration de 10 micromolaire à 10 millimolaire et le cariporide à une concentration de 1 à 100 micromolaire pendant 30 min suivie d'une ischémie de 60 min et une reperfusion de 120 min. - groupe Metformine + cariporide : incubation avec le composé Metformine à une concentration de 10 micromolaire à 10 millimolaire et le cariporide à une concentration de 1 à 100 micromolaire pendant 30 min suivie d'une ischémie de 60 min et une reperfusion de 120 min. Mesure du potentiel de membrane mitochondrial Afin de mesurer le potentiel mitochondrial, les cellules ont été incubées, pendant toute la durée du traitement ci-dessus, avec la sonde fluorescente tétraméthylrhodamine méthylester (TMRM) à une concentration de 30 nM. Elles ont été analysées en microscopie confocale avant le traitement, après 60 min d'ischémie, après 90 min de reperfusion et après 120 min de reperfusion. Résultats Dans le groupe témoin comme dans les groupes traités, la période d'ischémie (60mn) n'a pas modifié le potentiel de membrane mitochondrial. En revanche, la reperfusion de 90 min a entraîné une perte importante du potentiel de membrane mitochondrial dans le groupe témoin. Le potentiel membranaire a même disparu au bout de 120 min de reperfusion, ce qui implique que les cellules sont mortes. Au contraire, les cellules traitées avec l'E 008 ont vu leur potentiel de membrane mitochondrial protégé des dommages induits par la reperfusion. L'association NHE et E 008 permet de démontrer un effet synergique protecteur vis-à-vis de l'ischémie et de la reperfusion, cet effet synergique pouvant 5 se traduire par une diminution significative des doses de E 008 employées. REVENDICATIONS1. Association d'un inhibiteur de l'échangeur sodium-proton (NHE) et d'un composé de formule (I) : R2 H R4 R1,N Il Il NN,R3 N> 2. Association selon la revendication 1, dans laquelle R5 est l'hydrogène.30 3. Association selon la revendication 1, dans laquelle R5 et R6 : forment avec l'atome de carbone sur lequel ils sont fixés un cycle à m chaînons (m compris entre 3 et 8), comprenant ou non un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi N, O, S et pouvant être substitué par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (Cl-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle, ou forment avec l'atome de carbone un reste polycyclique en Cl0-C30 substitué ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle. 4. Association selon la revendication 1, dans laquelle R5 est un groupe alkyle (C2-C20) substitué par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle. 5. Association selon la revendication 1, dans laquelle R5 et R6 sont choisis parmi des groupes alkyle (C1-C20) substitués ou non par amino, hydroxy, thio, halogène, alkyle (C1-05), alkoxy (C1-05), alkylthio (C1-05), alkylamino (C1-05), aryl (C6-C14) oxy, aryl (C6-C14) alkoxy (C1-05), cyano, trifluorométhyle, carboxy, carboxyméthyle ou carboxyéthyle. 6. Association selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle R6 est un groupe alkyle (C1-C20). 7. Association selon la revendication 6, dans laquelle R6 est un groupe méthyle. 8. Association selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans laquelle RI et/ou R2 représente(nt) un groupe alkyle (C1-C20). 9. Association selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, dans laquelle R1 et R2 représentent un groupe méthyle. 10. Association selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans laquelle R3 et/ou R4 représente(nt) un atome d'hydrogène. 11. Association selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé de formule (I) est le composé de formule (la): CH3 H C,N (NrNH2 3 I NYN CH3 (la) ou ses formes tautomères, énantiomères, diastéréoisomères et sels pharmaceutiquement acceptables. 12. Association selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle l'inhibiteur NHE est le cariporide ou un sel pharmaceutiquement 15 acceptable de celui-ci. 13. Composition pharmaceutique comprenant une association selon l'une quelconque des revendications 1 à 12. 20 14. Association selon l'une quelconque des revendications 1 à 12 pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention de lésions, troubles ou maladies associées à l'ischémie et/ou la reperfusion. 15. Association selon la revendication 14 pour son utilisation dans le 25 traitement et/ou la prévention de complications cardiaques. 16. Association selon la revendication 15 pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention de l'arythmie cardiaque, de l'infarctus du myocarde ou de l'insuffisance cardiaque. épimères et/ou 30 17. Association selon la revendication 14 pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention de complications rénales. 18. Association selon la revendication 14 pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention de complications cérébrales, notamment des accidents cardiovasculaires cérébraux.