Brevet FR2937455A1 — publié le 20100423

Méthode in vitro modélisant la consistance générée in vivo par un aliment au entes de .digestion La présente invention a pour objet une méthode de mesure in a. consistance générée par un aliment au niveau de l'estomac et &d'intestin,. La digestion est un mécanisme complexe, qui commence par la dégradation mécanique et chimique des nutriments dans la bouche. La salive contient des enzymes qui débutent la digestion, des agents qui empêchent la prolifération de bactéries et lubrifie les aliments pour faciliter la déglutition. La nourriture mastiquée 10 descend jusque dans l'estomac grâce aux mouvements péristaltiques (contractions rythmées) de l'oesophage. Dans l'estomac, qui peut contenir jusqu'à environ deux litres de nourriture, les aliments sont mélangés aux sécrétions gastriques contenant de l'acide chlorhydrique et des enzymes protéolytiques telles que la pepsine, qui poursuivent le 15 processus de dégradation. Le contenu de l'estomac, appelé chyme acide, est vidangé selon une cinétique sigmoi'dale, dans l'intestin grêle, où le pH remonte à des valeurs proches de la neutralité. Long de plus de 6 mètres, l'intestin grêle est le principal organe de digestion et assure la plus grande partie de l'absorption des nutriments dans la 20 circulation sanguine, Le chyme transitera ensuite vers le gros intestin. L'augmentation de la consistance du bol au niveau gastrique est susceptible de ralentir la vidange gastrique et d'augmenter la durée de diffusion des nutriments au niveau intestinal ce qui participerait a la sensation de satiété. I1 a par exemple été montré que l'augmentation de la consistance du bol alimentaire, épaissi ou gélifié par 25 des fibres texturantes induit une distension gastrique, générant ainsi une sensation de satiété Oad CL, Rayment P., Spiller RC, Marciani L., de Celis Alonso Traynor Mela Peters 11.P,F. and Gowland P.A.,(2004); vivo imag î ng f intragastric gelat.ion and its effect on satiety in humans. Nutr: 2293-2300). Au niveau intestinal, il .a été montré que la modificatiun du volume du chyme prolonge 30 la diffusion des nutriments et réduit notamment la vitesse d'apparition postprandiale du glucose, induisant une limitation du pic de glycémie et einsulinérnie. Une relation entre l'augmentation de la viscosité, par exemple d'une boisson enrichie en fibres, et la diminution de la glycémie et de 1� insulinémie postprandiales a été montrée par Edwards et al en 1987 (Edwards C.A., Craigen L., Davison P,, Tomlin J., Su{gden K.., Johnson LT. and Read.Wa,.Viscosity of food gums &tenta:cd in vitro related to their bypoglycaernie actions. at in aflifr A(uer; :7),. Il semble donc qu'un contrôle de la consistance du bol alimentaire au cours de la digestion influe sur la réponse glyeémique et/ou insulinémique, et permette de prolonger la sensation de satiété. 10 Pour les produits alimentaires visant à diminuer la réponse glycérnique ou insulinèmique Wou à prolonger le sentiment de satiété, il est donc primordial de connaître l'évoltition de la consistance du bol alimentaire au cours des premières étapes de la digestion (gastrique et intestinale). Il est également important de 15 s'assurer, avant toute commercialisation, que l'augmentation de consistance générée par l'ingestion de l'aliment ou encore la taille des particules de l'aliment n'augmente pas de manière trop importante dans le tractus gastro-intestinal, ce qui entrainerait également des risques potentiels d'occlusion pour le consommateur. 20 Les mesures de viscosité du bol alimentaire pendant la digestion s'effectuent in vivo au moyen de sondes introduites par les voies nasales et descendant jusqu'à l'estomac. Ces méthodes sont d'une part très incontbrtables pour le sujet, et ne permettent par ailleurs pas de mesurer l'évolution de la viscosité du bol au-delà de l'estomac, et notamment au. niveau de l'intestin, constituant pourtant une étape 25 majeure de la digestion. Une autre méthode in vivo consiste à introduire des traceurs dans les nutriments pour suivre leur vitesse de digestion. Ces traceurs donnent une vitesse globale de digestion entre l'absorption par la bouche et la défécation, mais ne permettent pas de connaître la viscosité du bol alimentaire dans l'estomac et dans l'intestin. En outre, ces rn&hodes in vivo deviennent vite fastidieuses et 30 coûteuses lorsque leurs résultats doivent être validés sur un panel de plusieurs di/aines de sujets pour être représentatifs. Certains modèles in vitro extrêmement complexes ont été développés, tels que par exemple un modèle se basant sur un système dynamique et mu lti- compartimenté (estomac, duodénum, jéjunum et iléon) piloté et contrôlé en continu par ordinateur, décrit dans le brevet US 5,525,305 déposé par la société Nederlandse Organisatie voor Toegepast-Natuumetenschappelijk Orderzoek TNO. Ce procédé reproduit dans des conditions les plus physiologiques possibles, en terme de temps et de conditions de pH notamment, les mouvements péristaltiques, les sécrétions d'enzymes digestives, le transit intestinal et l'absorption des produits de digestion et permet de donner des informations sur le devenir chimique des aliments au cours de la digestion (par exemple, vitesse d'apparition des sucres) ou sur la survie de certains composants (tels que les bactéries probiotiques) dans le tractus gastro-intestinal. Cc dispositif dynamique et mufti-compartimenté n-mclut cependant pas la détermination de la viscosité du bol alimentaire. Il est donc nécessaire de réaliser des 1.5 prélèvements occasionnels d'échantillons et d'effectuer une mesure déportée sur un viscosimètre ou rhéomètre. Cependant, le prélèvement d'échantillons dans ce type de système penurbe la simulation du processus de digestion, générant une variation de volume qui peut être significative par rapport au volume circulant ou encore perturber la régulation de pH. En outre, la présence de particules de grosse taille au 20 sein de l'aliment pose des problèmes de mesure rhéologique, les viscosimètres Ïhnctionnant avec un entrefer fin (entre 50 microns et 1 cm) ne pouvant accommoder des particules macroscopiques. Par conséquent, un tel procédé est non seulement difficile et coûteux à mettre en oeuvre, mais il ne permet pas de mesurer la viscosité gastrique et intestinale de 25 manière continue, nécessaire pour anticiper les effets in vivo de certains nutriments ingérés, en particulier les polysaccharides non digestibles, sur les réponses glyçémiques et insulinémiques et sur la satiété. Il existe donc un besoin pour un procédé in vitro simple et reproductible de 30 prévision de l'évolution de la consistance du bol alimentaire au cours des principales phases de la digestion, et qui soit représentatif des conditions physiologiques in vivo. La présente invention propose donc un modèle in vitro de mesure cil continu de révolution de la consistance générée par un aliment au niveau de l'estomac et de l'intestin.. En effet, les méthodes connues de mesure de viscosité d'un mélange fluide, c'est-à-dire s'écoulant sous son propre poids, imposent un arrêt de l'agitation pour mesurer la viscosité afin, d'une part. de ne pas perturber la mesure de viscosité et d'autre part de prévenir tout choc éventuel entre l'appareil de mesure de la viscosité et l'agitateur, ces deux appareils étant souvent fragiles et/ou coûteux. Il n'est donc 10 pas possible, sur la. base des dispositifs connus de mesure de la viscosité, de mesurer de manière continue l'évolution de la viscosité d'un mélange - par exemple par l'ajout de nouveaux composés ou modifications des conditions opératoires - sans interrompre l'agitation dudit mélange. Seule une succession de mesures ponctuelles de viscosité peut être obtenue, entrainant un décalage entre l'évolution de la viscosité 15 réelle du mélange et l'évolution de la viscosité mesurée in vitro. De plus, dans le cas d'un mélange biphasique, tel des particules solides partiellement hydrophiles dispersées dans un liquide, et dont la solubilisation est progressive, il n'est pas possible de mesurer la viscosité dès les premières étapes du processus de digestion dans la mesure où le mélange est trop hétérogène et le prélèvement non représentatif. 20 Il convient donc d'attendre que le mélange obtienne une consistance relativement homogène afin d'opérer un prélèvement, ce qui ne permet pas de suivre l'intégralité de la niais seulement de caractériser la phase finale. L'invention a donc pour objet, selon un premier aspect, une méthode in vitro 25 modélisant l'évolution de la consistance générée in vivo par un aliment au cours de sa digestion, comprenant les étapes suivantes a, Broyage de l'aliment pour reproduire la dégradation mécanique opérée au cours de la mastication, h. Mélange sous agitation de l'aliment broyé à une solution modélisant le fluide 30 gastrique dans la cuve d'un réacteur couplé à tin rhéomètre, pendant une durée correspondant à la digestion gastrique, c. Ajustement sous agitation du mélange réactionnel pour modéliser Ies conditions de digestion intestinale pendant une durée correspondant à la digestion intestinale,. le rhéomètre étant. muni. d'un agitateur permettant d'homogénéiser le mélange et d'en mesurer la viseosité de manière simultanée. Par �de manière simultanée � dans la phrase ci-dessus, on entend, au sens de la présente demande, que l'agitateur permet à la fois la mesure de la viscosité, .t l'agitation, et conduit les deux opérations en même temps. 10 En particulier, l'invention a pour objet une méthode in vitro modélisant la consistance générée in vivo par un aliment au cours de sa digestion, comprenant les étapes suivantes : a. Broyage de l'aliment jusqu'à obtention de particules de taille moyenne comprise 15 entre 5 1.un et 30001.un Préparation d'une solution modélisant le fluide gastrique comprenant de l'eau maintenue à un pH acide compris entre 1 et 4 et une enzyme, protéolytique par exemple de type pepsine, ladite enzyme étant présente en une teneur allant de 0,025 à 2,5 '1/0 en poids de la solution de fluide gastrique 20 Mélange sous agitation de l'aliment obtenu en a. à la solution obtenue en h. dans la cuve d'un réacteur couplée à un rhéomètre, pendant une durée allant de 30 minutes à 4 heures, ledit réacteur étant maintenu à une température comprise entre 35 et 40'C , de préférence de 36 et 38°C; d, Ajustement du pl' dans le réacteur jusqu'à une valeur comprise entre 5 et 7,5 et 25 ajout de 0,03 à 3 % en poids, de sels biliaires et de 0,04 à 4 % en poids de pancréatine, ces pourcentages étant exprimés en poids par rapport au poids du mélange contenu dans la cuve du réacteur, et maintien du mélange sous agitation pendant une durée allant de 1 à 8, de préférence de 1 à 4 heures, le rhéomètre est équipé d'un agitateur permettant d'homogénéiser le mélange et d'en 30 mesurer la viscosité de manière simultanée. Par consistance générée � in vivo � par un aliment au cours de sa digestion on entend, au sens de la présente demande, la consistance générée par un aliment au cours de sa digestion chez un mammilZre QQQ nogastrique, et de préférence chef l'homme. Lorsque l'aliment est liquide la consistance est évaluée par une mesure de viscosité. Lorsque l'aliment est viscoélastique, la consistance est évaluée par une mesure de viscoélasticité. Suivi de l'évolution de la consistance du bol La méthode selon la présente invention permet une mesure en continu de la consistance générée in vivo par un aliment au cours de sa. digestion, et notamment au 10 cours du passage dans l'estomac et l'intestin grêle. Lorsque le bol alimentaire reste globalement liquide au cours des phases gastro-intestinales, la méthode selon l'invention permet de mesurer l'évolution de la viscosité au cours du temps, à vitesse de cisaillement et température constantes. La 1.5 viscosité est définie comme la résistance à l'écoulement d'un liquide. En régime permanent d'écoulement de cisaillement, la viscosité (en Pa.$) est définie comme le rapport entre la contrainte de cisaillement (en Pa) et la vitesse de cisaillement (en .20 Viscosité de cisaillement = contrainte de cisaillement /.vitesse de cisaillement Les fluides simples constitués de petites molécules ou les solutions diluées de macromolécules ont un comportement dit Newtonien, c'est-à-dire que la viscosité ne dépend que de la température. 25 Les fluides plus complexes, dits non-Newtoniens, voient leur viscosité également varier en fonction de la vitesse de cisaillement et/ou du temps de mesure. On ne peut plus simplement définir une valeur unique de viscosité (à une température donnée), mais on parle de � viscosité apparente �, relative aux conditions de mesure. Dans ce 30 cas, pour connaître le comportement d'un tel fluide, il convient de réaliser une courbe d'écoulement, c'est-à-dire mesurer la viscosité sur une plage de vitesses de cisaillement ce peut être fait dans le cadre de l'invention. Dans le cas où l'aliment contiendrait des composants induisant une texturation du bol alimentaire, par exemple des gélifiants fonctionnels dans les conditions gastro-intestinales, la mesure de la viscosité par cisaillement tend à casser la structure en cours de formation. Dans ce cas, un mode de réalisation particulier consiste à substituer l'agitation en phase gastrique ou intestinale, servant à la mesure de la viscosité, par des mesures oscillatoires à très faible déformation, permettant de laisser le bol se structurer quasiment au repos. De telles mesures sont connues pour permettre la détermination des modules viscoélastiques G' (module élastique. relatif à la partie solide) et G'' (module visqueux, relatif à la partie liquide). (Stet, J, F, 1992, Rheological Methods in Food Process Engineering, Second Fdition, Freeman Press, USA). En pratique, la défôrmation pouvant être imposée est comprise entre 0,01à 1%, de préférence 0,1%, avec une fréquence de 0,01 Ilz à l() Hz, de préférence Iliz. La pale exerce donc des mouvements oscillatoires de très thible amplitude, ce qui ne perturbe pas la structuration du bol alimentaire. Il est ainsi possible de suivre une gélification se produisant au sein du bol, par exemple initiée par des interactions ioniques entre chaînes de polymères (polysaccharides ou protéines) chargées et des sels spécifiques. Si la gélification a lieu en phase gastrique, la lllllllllll in vitro selon l'invention modélisant la consistance générée in vivo par un aliment au cours de sa digestion, comprend les étapes suivantes a.. Broyage de l ment jusqu'à obtention de particules de taille moyenne comprise entre 5 urn et 3 mm ; b. Préparation d'une solution modélisant le fluide gastrique comprenant de l'eau maintenue à un pH acide compris entre 1 et 4 et une enzyme protéolytique par exemple de type pepsine, ladite enzyme étant présente en une teneur allant de 0,025 à 2,5 % en poids de la solution de fluide gastrique ; Mélange de l'aliment obtenu en a. à la solution obtenue en b. dans la cuve d'un réacteur jusqu'à obtention d'un mélange homogène, 2937455 $ d. Mesure de la viscoélasticité du mélange, pendant une durée allant de 30 minutes à 8 heures, ledit réacteur étant maintenu à une température comprise entre 36 et 38'C l'appareil permettant la mesure de la viscoélasticité du mélange produisant une déformation sinusoïdale: comprise entre 0,01% et. 1%, de préférence 0%, et une fréquence de 0,01 Hz à 10 Hz de préférence 1112,, Dans le cas d'une gélification en phase gastrique, conduisant à l'obtention d'un solide, le test ne peut être poursuivi en conditions intestinales, la phase mélange nécessaire à l'obtention des conditions intestinales étant rendue impossible pat la structure solide du bol gastrique. 10 Si la gélification a lieu en phase intestinale, la méthode in vitro, selon l'invention modélisant la consistance générée in vivo par un aliment au cours de sa digestion, comprend les étapes suivantes : a. Broyage de l'aliment jusqu'à obtention de particules de taille moyenne comprise 1.5 entre 5 .1.tIn et 3 mm h. Préparation d'une solution modélisant le fluide gastrique comprenant de l'eau maintenue à un pH acide compris entre 1 et 4 et une enzyme protéolytique par exemple de type pepsine, ladite enzyme étant présente en une teneur allant de 0,025 à 2,5 % en poids de la solution de fluide gastrique 20 c. Mélange sous agitation de l'aliment obtenu en a. à la solution obtenue en h. dans la cuve d'un réacteur couplée à un appareil de mesure de la viscosité, pendant une durée allant de 30 minutes à 4 heures, ledit réacteur étant maintenu à une température comprise entre 36 et 38'C ; Ajustelnent du pH dans le réacteur jusqu'à une valeur comprise entre :5 et 7,5 et 25 ajout de 0,03 à 3 ) 0 en poids, de sels biliaires et de 0,04 à 4 0,i, en poids de pancréatine, ce pourcentages étant exprimés en poids par rapport au poids du mélange contenu dans la cuve du réacteur, et maintien du mélange sous agitation jusqu'à obtention d'un mélange homogène d. Mesure de la viscoélasticité du mélange, 30 l'appareil permettant la mesure de la viscosité à l'étape e étant muni d'un agitateur permettant d'homogénéiser le mélange et d'en mesurer la viscosité de manière simultanée, et la mesure de la viscoélasticité à l'étape e en effectuant une déformation sinusoidale comprise entre 0,01% et 1%. de prélé r 0,1 , et une fréquence de 0,01 Hz à Io Hz, & préférence Illz. Pour compléter la présente méthode, dans le cas d'un suivi de viscosité, il est intéressant de réaliser des courbes d'écoulement du bol alimentaire aux phases gastrique et intestinale qui permettront d'évaluer le caractère fluide rhéo-fiuidifiant ou éventuellement thixotrope du bol alimentaire. Ces courbes d'écoulement sont bien connues de ['homme de l'art. 10 La vitesse de cisaillement (ou la contrainte est progressivement augmentée (avec un pas linéaire ou logarithmique) et la viscosité correspondante et mesurée. Ensuite, la vitesse ou contrainte est progressivement diminuée et la viscosité est mesurée. I,a courbe de la viscosité obtenue en fonction de la vitesse est appelée rhéogramme. Un 1.5 rhéogramrne � plat �, avec une viscosité constante, indique que le fluide est Newtonien. Une diminution de la viscosité avec la vitesse de cisaillement indique un caractère rhéo-fluidifiant, souvent lié à des phénomènes d'orientation et -dans le cas de 20 composés polymères- de désenchevêÛement des chaînes dans le champ de cisaillement. Une chute importante de viscosité pouvant atteindre deux ou trois ordres de grandeur, peut ainsi être observée en augmentant progressivement la vitesse de cisaillement. 25 Une augmentation de viscosité avec la vitesse de cisaillement peut indiquer un comportement rhéo-épaississant, pouvant être lié à l'existence d'agrégation ou de bloquage de l'écoulement s'opérant dans le champ de cisaillement, ou la sortie du régime laminaire d'écoulement, conduit à la formation de turbulences locales qui augmentent la valeur de viscosité apparente. 30 Le caractère. thixotrope est quant à lui évalué par comparaison de la -courbe. d'écoulement structuration partielle du fluide, qui est déstructuré, souvent réversiblement, par le cisaillement perçu. Selon un mode préféré de réalisation, l'appareil permettant la mesure de la viscosité apparente ou de la viscoélasticité du mélange est un rhéomètre haute performance de type 1C R300 à palier à air, commercialisé par la société .Anton Paar-Physica. Le rhéomètre est équipé d'un agitateur (ou sonde) présentant une géométrie permettant l'homogénéisation du mélange dans lequel elle est introduite. En particulier, l'agitateur peut se présenter sous forme d'hélice ou d'anere pour éviter la sédimentation ou au contraire le crémage de grosses particules dans le mélange, de manière telle que le milieu soit le plus homogène possible. 1.5 L'agitateur peut notamment être calibré en utilisant la procédure décrite par Ail et al (Ait-Kali, A., !Marchai, Ph., Chaplin. L., Chrissemam, A.S and Bousmina, M.L, 2002, Canadian Journal of Chemical Engineering, vol 80, 6, 1166-1174). Le principe de cette calibration consiste à évaluer pour chaque agitateur les 20 constantes K tau (reliant la contrainte de cisaillement et le couple résistant) et K gamma (reliant la vitesse de cisaillement et la vitesse de rotation). Cette évaluation est réalisée par recours à des fluides modèles, Newtonien ou rhéofluiditiant, dom les paramètres rhéologiques sont mesurés sur un viscosimètre ou rhéomètre équipée d'une géométrie conventionnelle de type cylindre coaxial. 25 L'analogie entre les mesures effectuées sur le fluide modèle avec la géométrie conventionnelle et le nouvel agitateur permettent de déterminer les deux constantes K tau et K gamma avec une incertitude de l'ordre de 10%. Ces constantes sont ensuite insérées dans le logiciel du rhéomètre, qui peut ensuite être pilotée par la vitesse ou contrainte de cisaillement, conformément a un fonctionnement normal. 30 Selon un mode préféré de réalisation, le rhéomètre. possède un. couple maximal au moins égal a 1.50 mNm et un couple minimum inférieur ou égal à0,25 micro m. 10 Le rhéomètre peut notamment être couplé à un ordinateur équipé d't n logiciel d'acquisition de données US 200ä1 ledit logiciel permettant de piloter le rhéomètre de manière automatisée, c'est-à-dire que les différents événements d'agitation (à une vitesse définie et pendant un temps donné) mentionnés plus haut ne nécessitent pas l'intervention d'un opérateur d'enregistrer toutes les données afin d'en effectuer une analyse complète et différée. 10 Selon un mode préféré de réalisation, l'agitateur permettant d'homogénéiser le mélange et d'en mesurer la viscosité de manière simultanée se compose d'au moins une pale hélicoïdale (1) entrainée en rotation autour d'un axe vertical (2), correspondant à celui la cuve d'un réacteur et d'une barre de support (3) et perpendiculaire à l'axe, située a l'extrémité inférieure dudit axe. 15 Par hélicoïdale, on entend que la pale présente ta forme par exemple d'un escalier spiralé et non la forme d'une courbe qui commence en un point central puis s'en éloigne de plus en plus en même temps qu'elle tourne autour. 20 Selon un mode préféré de réalisation illustré aux figures 1 et 2, l'agitateur comprend. au moins deux pales hélicoïdales coaxiales, disposées de manière symétrique par rapport à l'axe vertical. En particulier, l'agitateur peut comprendre entre 2 et 6 pales hélicoïdales, par exemple 2, 3 ou 4 pales. 25 La ou chacune des pales hélicoïdales peu(veri)tcomprendre entre un demi (figure 2) ûsoit rotation de 180''-ét plusieurs pas ou spires d'hélice, par exemple deux ou trois pas, de préférence 1 pas (figures 1 et 3) - rotation de 360. L'augmentation du nombre de pas d'hélice constituant l'agitateur peut notamment permettre d'augmenter le cisaillement du mélange et/'m l'aptitude au pompage de la géométrie 30 de l'agitateur, ce qui peut notamment être, utile lorsque le mélange est visqueux et/ou concentré en particules, Une pale hélicoïdale (1) peut être eonstituée de tiges plates (comme représenté sur les figures 1 à 3), incurvées ou semi-hélieokiales, voire de tiges circulaires. En particulier, les tiges constituant la pale peuvent être métalliques, et présenter, en combinaison, avec cette caractéristique ou non, une épaisseur comprise entre 1 et 3 min et une largeur comprise entre 2 et. $ mm. Selon un mode préféré de réalisation, une pale hélicoïdale (1) n'est pas en contact avec l'axe vertical, ce qui permet au mélange réactionnel de circuler entre l'axe et la pale, 10 Lorsqu'elle est entrainée en rotation, une pale hélicoïdale crée une aspiration qui tend à déplacer le mélange -réactionnel vers le haut de la cuve du réacteur (ou pompage vertical du mélange réactionnel), ce qui améliore l'efficacité du mélange, en particulier lors des phases de dispersion des poudres (aliment broyé, enzymes) ou des 15 liquides (acide et soude concentrés) dans l'eau. L'extrémité inférieure de lapale hélicoïdale est fixée à la. barre de support radiale (3)ä et notamment ta rune des extrémités de 1abarre deseport. radiale. 20 Pour renfôreer la structure de l'agitateur, l'extrémité supérieure de la ou des pales (1) peut être fixée à une seconde barre radiale (4), parallèle à la barre de support radiale (3)- Ln particulier, lorsque l'agitateur comprend deux pales hélicoïdales coaxiales (figure 25 2 ou 3), symétriques par rapport à l'axe vertical (2), lesdites pales (1) sont connectées entre elles au niveau de leur extrémité inférieure par la barre de support (3) et au niveau de leur extrémité supérieure par la seconde barre radiale (4), parallèle à la barre de support. L'épaisseur de ces barres de support peut être comprise entre 1 mm et 3mm. 3() Selon un mode particulier de réalisation, l'agitateur comprend deux pales hélicoïdales coaxiales (figure 3), symétriques par rapport à l'axe vertical (2), formant une spire d'hélice, connectées entre elles au niveau de leur extrémité inférieure par la barre de support (3), a.0 niveau de leur extrémité .supérieure. par le seconde barre radiale. (4),. parallèle à. la barre de support (3),. et hauteur d'une demi-spire, par une troisième barre (5) parallèle àl.a.barre d e support,. L'ensemble de la géométrie peut de préférence être réalisé en acier inoxydable pour résister aux conditions modélisées, et résister à la délibrmation dans le cas de fluides visqueux. De préférence encore, la géométrie est réalisée à l'aide de soudures et avantageusement possède des soudures non débordantes, de manière à ne pas générer localement de turbulences ce qui fausserait la mesure de viscosité. 10 L'axe vertical (2) peut notamment être cylindrique. et présenter un diamètre compris entre 5 et 9 mm. La barre de support radiale (3) peut être constituée de lames plates, incurvées ou serti-hélicoïdales, voire de tiges circulaires. Cette barre de support radiale permet, lorsqu'elle est entrainée en rotation, de prévenir la sédimentation du mélange 15 réactionnel, Préférentiellement, la ou les pales hélicoïdales s'étend sur sensiblement la totalité de la hauteur et/ou du diamètre de l'enceinte réactionnelle à laquelle elle est destinée. De même, la barre de support radiale s'étend sur sensiblement la totalité du diamètre de l'enceinte. 20 La rigidité de la pale (ou de l'agitateur) est importante pour ne pas générer d'artefacts de mesure de viscosité Erg particulier, le Mutile occupé par la ou les pales (correspondant au volume du cylindre qui. circonscrit la pale) représente 30 à. 7o% du volume. dela .cuve, préférence de 35 à 60%, plus préférentiellement de 35 à 50 % et plus 25 préférentiellement encore (.1e.ä l'ordre de 40%. En particulier, volume occupé par lai ou les ,pales (correspondant au. volume Cylindre qui. circonscrit la.. pale) représente 30. à 80% du volume du mélange, de préférence de 4(1 à 70%, préférentiellement de .50 à. 65 trip et plus préférentiellement encore environ 60%. De même, la barre de support radiale occupe sensiblement la totalité du diamètre de l'enceinte à laquelle elle est destinée, et de préférence entre 70 et 95 % du diamètre de la cuve, plus préférentiellement environ 85% du diamètre de la cuve. La barre de support radiale peut être constituée de lames plates, incurvées ou semihélicoïdales, voire de tiges circulaires. Cette barre de support radiale permet, lorsqu'elle est entrainée en rotation, de prévenir la sédimentation du mélange réactionnel Selon un mode préféré de réalisation, le mélange selon rinvention est fluide,..e'cst-à-1 dire, s'écoule sous son. propre poids,. et notamment présente une texture de fluide à. visqueuse. Modélisation des étapes de digestion gastrique et intestinales La méthode selon l'invention propose un modèle :In vitro de mesure en continu de la consistance générée par un aliment au cours des étapes de digestion gastrique et intestinale. -Pour cela, il convient de reproduire la digestion mécanique de la bouche, fluide gastrique et les conditions intestinales. Reproduction de la dégradation mécanique opérée au cours de la .mastication. La dégradation mécanique qui se produit dans la bouche peut être reproduite par un broyage de l'aliment préalable à toute mesure de la viscosité. Le produit broyé peut être mélangé à de l'enta ou à une solution modélisant la. salive pour s'approcher le plus possible des conditions in vivo. Cependant, le mélange avec: une solution aqueuse peut générer une paie compacte difficile à disperser lors de la modélisation des phases ultérieures de la digestion. C'est notamment le cas des produits solides secs ou faiblement humides comprenant des composants rhéo-épaississants, tels que des fibres viscosifiantes. Pour ces aliments. le broyage à sec est préféré. 15 20 25 Dans le cas d'aliments secs c'est-à-dire présentant une teneur en eau inférieure ou égale à 5% en poids, par rapport au poids total de la composition, le broyage permet notamment d'obtenir un aliment sous forme de particules présentant une taille d'au moins 5 gm, de préférence comprise entre 5 lm et 3000 &m, avec une médiane allant de préférence de 200 à 800 !am, et plus préférentiellement environ 500 i.tm. Un tel broyage peut. notamment être .effectué-au moyen d'un mixeur ménager IO par exemple vendu sous référence Rondo 500 par la société SEB.. Dans le cas d'aliments � humides � c'est-à-dire présentant une teneur en eau supérieure à 5% en poids, par rapport au poids total de la composition, la modélisation de la digestion mécanique de la bouche peut également être obtenue par 15 broyage de l'aliment. Les particules obtenues sont plus grossières que celles résultant du broyage d'aliments secs, et peuvent notamment présenter une taille d'au moins 5 latin de préférence allant de 500 à 2000 tarin. de préférence allant de 700 à 1500 gai, et plus préférentiellement de l'ordre de 1000 gm. 20 Enfin, .dans le cas. d'aliments fluides tels que des boissons, l'étape de broyage est inutile, et n'est pais effectuée.. A titre indicatif; l'aliment sec ou humide peut représenter entre 50 et 200 g pour un volume de phase gastrique allant de 250 à 400 i nli. L'homme du métier 25 ajustera ces valeurs pour que l'aliment puisse être dispersé dans le liquide gastrique, sans toutefois faire déborder le réacteur au moment de l'agitation. Selon un mode préféré de réalisation, la méthode selon l'invention permet de modéliser in vitro la consistance générée in vivo par un aliment sec au cours de sa 30 digestion. Modélisation. de digestion. au niveau gastrique. La digestion. gastrique est modélisée par l'adjonction d'une solution présentant une composition proche du fluide gastrique. Le fluide gastrique (ou suc gastrique) sécrété par l'estomac, contient des agents comme l'acide chlorhydrique et certaines enzymes, comme la pepsine qui lyse les protéines. IO Des compositions modélisant le fluide gastrique sont connues de l'art antérieur, Il en va de même pour les conditions de digestion intestinale. A titre illustratif; des modèles de reproduction des conditions gastriques et intestinales ont été décrits par Englyst K. N., 11udson G. J., Englyst Il. N., 2000, Eneyclopedia Anaixtical Chemiwry., Me ers R. A. Chichester: John Wiley & Sons Ltd, 2000: 4246-4262. 15 De tels modèles sont extrêmement précis et peuvent s'avérer fastidieux à mettre en oeuvre, notamment par la quantité d'enzymes à mettre en oeuvre au niveau intestinal. L'homme du métier choisira les modèles de digestion mécanique de la 20 bouche, et de conditions gastriques ou intestinales adaptés au degré de corrélation souhaité entre le modèle in vitro et les résultats in' ivo. Il est du mérite de la société demanderesse d'avoir identifié des modèles simplifiés des conditions gastriques ou intestinales, permettant d'antie kper l'évolution 25 de la consistance d'un aliment au cours des phases de digestion gastrique et intestinale, qui soit facile et rapide à mettre en œuvre, En particulier, les modèles simplifiés des conditions gastriques ou intestinales identifiés, corrélés à la méthode de suivi en continu de l'évolution de la consistance 30 selon la présente hwention,. 'permettent, en environ 4 heures:, de prévoir le comportement rhéologique de n'importe quel aliment au. cours de la digestion. in ivo. En outre, cette méthode.peut ètre automatisée en grande partie voire totalement (.incluant l I' introduction dés acides, (rases, ou enzytnes), et. permet une misé en route simple,. sans intervention humaine Les conditions gastriques peuvent être modélisées par une solution comprenant de l'eau maintenue à un pH acide compris entre 1 et 4 et une enzyme protéolytique par exemple de type pepsine, ladite enzyme étant présente en une teneur allant de 0,025 à 2,5 % en poids, par rapport au poids total de la solution. La pepsine dégrade les protéines du bol. alimentaire en hydrolysant les liaisons peptidiques des acides aminés aromatiques.. La pepsine pouvant être utilisée selon l'invention peut être une pepsine porcine telle que la Pepsine P7000 commercialisée par la société Sigma Aldrich. 1.0 Selon un. mode préféré de réalisation, l'enzyme protéolytique par exemple la pepsine est présente en une teneur allant de 0,025 à 2,5 % en poids, par rapport au poids total d.e la .solutionä de préférence de 0,1 à en poids, et plus préférentiellement environ 0ä25 tria en. poids. 1.5 L'eau utilisée pour modéliser les conditions gastriques est de préférence de l'eau déminéralisée. Elle est maintenue à un pH acide compris entre 1 et 4. L'acidification de la solution peut notamment être obtenue par l'adjonction de solutions acides. Selon un mode préféré de réalisation de l'invention, l'eau est maintenue acide 20 par l'adjonction d'une solution concentrée d'acide chlorhydrique, notamment ayant une concentration molaire de l'ordre de 4N de manière à faire varier au minimum le volume modélisant le fluide gastrique. En particulier, levolurtie occupé par le tuélange peut représenter entre et 25 90 % du volume de la euvei du. réacteur, .dé préférence entre 70 et 80%, et plus préférentiellement de l'ordre de 75% du volume de la cuve du réacteur. Le volume du niélange correspond à 1a somme. de la partie liquide et. de la partie intégrée sèche ou humide. La modélisation de la digestion au niveau gastrique passe par un mélange de l'aliment broyé obtenu pour reproduire la digestion mécanique de la bouche, avec le fluide gastrique simplifié précédemment décrit. Le mélange peut notamment être effectué à une vitesse de cisaillement comprise entre IO sa et 1000 et de préférence entre 50 et 300 s* Comme expliqué précédemment, dans le cas d'un mélange biphasique, tel que la dispersion de particules solides partiellement hydrophiles dans un liquide, et dont la solubilisation est progressive, il n'est pas possible de mesurer la viscosité dès 10 les premières étapes du processus de digestion dans la mesure où le mélange est trop hétérogène et le prélèvement non représentatif, Il peut être préférable, selon un mode particulier de réalisation, d'augmenter sensiblement la vitesse d'agitation lors de la modélisation d'une nouvelle phase de digestion (correspondant à l'adjonction d'enzyme, d'acide ou de bas� pendant une 1.5 courte durée pour accélérer l'homogénéisation du mélange. En particulier, la modélisation de l'étape de digestion au niveau gastrique comprend les étapes suivantes a. Préparation d'une solution modélisant le fluide gastrique comprenant de l'eau 20 maintenue à un pH acide compris entre 1 et 4 et une enzyme protéolytique par exemple de type pepsine, ladite enzyme étant présente en une teneur allant de 0,015 à 2,5 °e, en poids de la solution de fluide gastrique b. Broyage optionnel de l'aliment: e.Mélange sous tarte agitation, par exemple 50 à 300 s-E, de l'aliment 25 éventuellement broyé en b. à la solution obtenue en a. dans la cuve d'un réacteur couplée à un rhéomètre , pendant une durée allant de 2 à 30 minutes , ledit réacteur étant maintenu à une température comprise entre 35 à 40"C, puis ajustement du p11 à la valeur cible comprise entre 1 et 4 ; d. Mélange sous agitation, par exemple 1 à 100 s-1, dans la cuve d'un réacteur couplé 30 à un rhéomètre, pendant une durée comprise de 30 minutes à 4 heures, à une température comprise entre 36°C et 38"C. En particulier, le mélange peut se faire au sein d'une enceinte réactionnelle (appelée réacteur), de préférence thermostat& pour maintenir le milieu gastrique à une température comprise entre 35 et 40''Cä de préférence entre 36 à 39°C, et plus préférentiellement encore entre 36 et 38"C, représentative de la température de l'estomac in vivo chez un mammifère monogastrique, et de préférence l'homme. Le pH est maintenu entre 1 et 4, et de préférence environ 2. La durée de la modélisation de la digestion au niveau gastrique peut être 10 comprise entre 30 minutes et 4 heures, La présente invention vise toutefi,ds à proposer une méthode in vitro rapide à mettre en oeuvre et en adéquation avec les résultats in vivo. Dans ce but, la durée de la modélisation de la digestion au niveau gastrique peut être comprise entre 30 minutes et 90 minutes, et peut notamment être de l'ordre 1.5 de 70 minutes. Modélisation. de digestion au. niveau. intestinal Suite à l'étape de gastrique, les conditions de l'enceinte 20 réadtionnelle sont .ajustées pour représenter au mieux les conditions intestinales notamment en augmentant. le pli du mélange ,jusqu'à urne valeur .......e entre 5,5 et 7 et en ajoutant de 0,03 3 en poids, de sels biliaires etde 0,04 à en poids de pttncratine, ces pourcentages étant exprimes en poids. par rapport au poids d'a mélange contenu. dans là cuve d'un réacteur, et en maintenant le Mélange sous 25 agitation pendant une durée allant de 1 à8 heures. En particulier, le p11 du mélange est augmenté par l'adjonction d'une solution basique concentrée. La base présente in vivo dans l'intestin est du bicarbonate de sodium. Cependant, cette base présente l'inconvénient de produire du gaz et donc de 30 mousser lorsqu'elle est introduite dans la cuve du réacteur, même en une faible teneur et augmente ainsi la valeur de viscosité. Aussi, la base utilisée de manière préférée selon l'invention peut être de la soude concentrée, par exemple en une concentration molaire de l'ordre de 4N de manière à faire varier aux minimum le volume modélisant le fluide intestinal. La modélisation des conditions intestinales passe par l'adjonction de sels biliaires et de pancréatine; Usuellement secrétés par le foie et stockés dans la vésicule biliaire, les sels biliaires permettent la fragmentation des gros globules de lipides alimentaires conduisant ainsi à la fànnation de micrngouttelettes. Les sels biliaires pouvant être utilisés dans la méthode selon l'invention sont notamment des sels biliaires d'origine porcine, tels que ceux commercialisés par la société Sigma Aldrich sous la dénomination Bile Extraie{ porcine B8631. Selon un mode préféré de réalisation, les sels biliaires sont présents en une teneur allant de 0,03 à 3 °A) en poids, par rapport au poids total de la solution, de préférence de 0,1 à 1,5 % en poids, et plus préférentiellement environ 0.3 ° en poids. pancréatine est une enzyme issue du suc pancréatique. La pancréatine pouvant être utilisée selon l'invention peut être une pencréatine issue du pore telle chie la. pancréatite P7545 corntnercialisée pair la. société Sinma Aldrich. Selon un mode préféré de réalisation, la pancréatine est présente en une teneur allant de 0,04 à 4 % en poids, par rapport au poids total de la solution, de préférence de 0,1 à 1,5 % en poids, et plus préférentiellement environ 0,25 °.'o en poids. En particulier, les conditions intestinales peuvent être modélisées dans la même enceinte thermostatée que celle utilisée pour modéliser les conditions gastriques, pour maintenir le milieu intestinal à une température comprise entre 35 et 40'C, de préférence entre 36 et 39'C et plus préférentiellement entre 36 et 38°C, représentative de la température du petit intestin in vivo chez un mammifère mouogastriq ne, et de il'homme nnt amMent. En particulier, la modélisation de l'étape de digestion au niveau intestinal peut comprendre les étapes suivantes a. Mélange sous forte agitation, par exemple 50 à 300 pendant une durée de 2 à 30 minutes, au cours duquel le pli est ajusté dans le réacteur jusqu'à une valeur comprise entre 5 et 7.5 et sont ajoutés de 0,03 à 3 % en poids de sels biliaires et de 0,04 à 4 % en poids de pancréatine, ces pourcentages étant exprimés en poids par rapport au poids du mélange contenu dans la cuve du réacteur; h. Maintien du mélange sous agitation, par exemple 1 à 100 s-1, pendant une durée 10 allant de 1 à 8 heures.: Le pli est maintenu entre 5 et 7, 5, et de préférence nviron 6,3 La durée de la modélisation de la digestion au niveau intestinal peut être 1.5 comprise entre 1 et 8 heures, et de préférence entre 1 et 4 heures. Comme déjà explique la présente invention vise toutefois à proposer une méthode in vitro rapide à mettre en oeuvre et en adéquation avec les résultats in vivo. Dans cette optique, la durée de la modélisation de la digestion an niveau intestinal sera comprise entre 1 et 2 heures, et notamment sera de l'ordre de 90 20 minutes. Mesure du.pFl et de la température La mesure continue du pH dans la méthode selon l'invention peut notamment 25 être effectuée à l'aide d'un contrôleur PI-IM290 (Radiometer analytical) interfacé à un ordinateur pour l'enregistrement en continu des données et d'une sonde pH de type pC2401-8. Avant tonte, utilisation, l'agitateur est calibré à l'aide de 2 solutions étalons 30 pli 4 et 7. La sonde de pfl est ensuite maintenue au dessus des pales de l'agitateur afin. de pas perturber de viscosité. De même, la température du milieu réactionnel peut être contrôlée en continu par le biais d'une sonde de température maintenue au dessus des pâles de la géométrie afin de ne pas perturber la mesure de viscosité. Selon un mode particulièrement préféré, l'invention a pour objet une méthode in vitro modélisant la consistance générée in vivo par un aliment sec au cours de sa digestion, comprenant les étapes suivantes a. Broyage de 20 à 200 g d'aliment sec jusqu'à obtention de particules de taille 10 moyenne de l'ordre de 500 jtm (mesure au tamis); b. Préparation d'une solution modélisant le fluide gastrique comprenant de 250 à 450 mL d'eau maintenue à un pH acide compris entre 1 et 4 et une enzyme protéolytique par exemple de type pepsine, ladite errzyme étant présente en une teneur d'environ 0,25 % en poids de la solution de fluide gastrique 15 e. Mélange sous agitation de l'aliment obtenu en a. à la solution obtenue en b. dans la cuve d'un réacteur couplé à un rhéomètre, pendant une durée allant de l'ordre de 70 minutes, ledit réacteur étant maintenu 'à tille température de l'ordre de 37'C d. Ajustement du pl l dans le réacteur jusqu'à une valeur d'environ 6,3 et ajout de 0,3 % en poids, de sels biliaires et de 0,4 % en poids de pancréatite, ces 20 pourcentages étant exprimés en poids par rapport au poids du mélange contenu dans la. cuve d'un réacteur, et maintien du mélange sous agitation pendant une durée d'environ 90 minutes_ caractérisée en ce que le rhéomètre est équipé d'un agitateur de géométrie hélicoïdale permettant d'homogénéiser le mélange et d'en mesurer la viscosité de manière 25 simultanée. En particulier, l'invention a pour objet une méthode in vitro modélisant la consistance générée in vivo par un aliment au cours de sa digestion, comprenant les étapes suhantes 30 a. Broyage de l'aliment jusqu'à obtention de particules de tailles comprises entre , microns et 3 mm b. Préparation d'une solution modélisant le fluide gastrique comprenant de l'eau maintenue à un pH acide compris entre 1 et 4 et une enzyme protéolytique par exemple de type pepsine. ladite enzyme étant présente en une teneur allant de 0,025 à 2,5 % en poids de la solution de fluide gastrique ; c. Mélange sous forte agitation, par exemple entre 50 et 300 s r, de l'aliment obtenu en a. à la solution obtenue en b. dans la cuve d'un réacteur couplé à un rhéométre, pendant une durée allant de 2 à 30 minutes , ledit réacteur étant maintenu à une température comprise entre 35 à 40"C, puis ajustement du pli à :la valeur cible comprise entre 1 et 4 d. Mélange sous agitation, par exemple 1 à l0() s-', dans la cuve du réacteur couplé tIt une mesure de viscosité, pendant une durée comprise de 30 minutes à 4 heures, à. 10 une température comprise entre 36°C et 38T e. Réalisation d'une courbe d'écoulement par augmentation progressive de la vitesse de cisaillement de 0.01 s"l 1000 s4 pendant 3 minutes, puis diminution progressive de la vitesse de cisaillement entre 1000 et 0,001. f Mélange sous forte agitation, par exemple 150 et 300 pendant une durée de 2 15 minutes à 30 minutes, au cours duquel le pl-1 est ajusté dans le réacteur jusqu'à une valeur comprise entre 5 et 7.5 et sont ajoutés de 0,03 à 3 % en poids, de sels biliaires et de 0,04 à 4 % en poids de pancréatine, ce pourcentages étant exprimés en poids par rapport au poids du mélange contenu dans la cuve du réacteur, g. Maintien du mélange sous agitation, par exemple 1. à 100 pendant une durée 20 allant de 1 à 8 heures, puis h Réalisation d'une courbe d'écoulement par augmentation progressive de la vitesse de cisaillement de 0,01 s"J a 1000 pendant 3 minutes, puis diminution progressive de la vites de cisaillement entre 1000 s'l et 0,001 25 Le rhéomètre étant équipé d'un agitateur permettant d'homogénéiser le mélange et d'en mesurer la viscosité de manière simultanée. Comme explicité précédemment, les appareils et les méthodes de mesure de viscosité connus de l'art antérieur ne permettent pas de mesurer l'évolution de la 30 viscosité dans un milieu fluide de manière continue. La présente invention a donc pour objet, selon un autre aspect, une méthode de mesure en continu de la consistance d'un mélange dans la cuve d'un réacteur caractérisée en ce que l'appareil de mesure de la viscosité est équipé d'un agitateur permettant d'homogénéiser le mélange et d'en mesurer la viscosité de manière simultanée, ledit agitateur se composant d'au moins une pale hélicoïdale entraide en rotation autour d'un axe sensiblement vertical, correspondant à celui du réacteur et d'une barre de support radiale et perpendiculaire à l'axe, située à l'extrémité inférieure dudit axe, tel que défini précédemment. La présente invention a également pour objet un rhéomètre équipé d'un agitateur permettant d'homogénéiser le mélange et d'en mesurer la viscosité de 10 manière simultanée, ledit agitateur comprenant au moins une pale hélicoïdale entrainée en rotation autour d'un axe sensiblement vertical, correspondant à celui du réacteur et une barre de support radiale et perpendiculaire à l'axe, située à l'extrémité inférieure dudit axe, tel que défini précédemment. 15 Uhivention a également pour objet un appareil permettant la mesure in vitro modélisant la consistance générée in riva par un aliment au cours de sa digestion, comprenant un rhéomètre équipé d'un agitateur permettant d'homogénéiser le mélange et d'en mesurer la viscosité de manière simultanée, ledit agitateur comprenatit au moins une pale hélicoïdale entrainèe en rotation autour d'un axe 20 sensiblement vertical, correspondant celui la cuve du réacteur et une, barre de support radiale et perpendiculaire à l'axe, située à l'extrémité inférieure dudit axe, tel que défini précédemment. La présente invention sera illustrée plus en détails dans les exemples ci-après. 25 Les figures 1, 2 et 3 représentent des agitateurs selon l'invention comprenant une ou deux pales hélicoïdales, vus de côté en élévation. La figure 4 représente différentes étapes du protocole de digestion in vitro; La figure 5 représente l'évolution cinétique de viscosité obtenue avec un biscuit et une biscotte riche en fibres (quantité incorporée : 100g dans 350 ml). Les phases 30 gastriques et intestinales sont représentées en trait épais; 1,a figure 6 représente l'évolution cinétique de viscosité obtenue avec un biscuit commercial et un prototype contenant 6% de gomme guar native (quantité incorporée : 50g dans 400 ml). Les phases gastriques et intestinales sont représentées en trait épais. La figure 7 représente l'évolution cinétique de viscosité obtenue avec un prototype contenant 6% de gonurie guar native (quantité incorporée : 50g dans 400 ml). 3 vitesses différents e ont été utilisées dans les phases gastriques et intestinales, représentées en trait épais. La figure 8 représente la courbe d'écoulement obtenue en fin de phase gastrique évolution cinétique de viscosité obtenue avec un prototype contenant 6% de guar natif {quantité incorporée : 50g dans 400 ml}. Les carrés blancs représentent les valeurs moyennes de viscosité apparente mesurées pendant les phases intestinales aux différentes vitesses (1, 10 et 100 s- l). La figure 9 représente la courbe d'écoulement obtenue en fin de phase intestinale évolution cinétique de viscosité obtenue avec un prototype contenant 6% de guai natif (quantité incorporée: 50g dans 400 ml). Les carrés blancs représentent les 1.5 valeurs moyennes de viscosité apparente mesurées pendant les phases intestinales aux différentes vitesses (1, 10 et 100 s-1 ). Exemple : comparaison entre une biscotte (Heudebert Fibres -i-)i et un biscuit (Lu Petit Déjeuner Coco Noisettes) Une quantité de 100g de biscuit ou de biscotte ont été broyées pendant 20 secondes dans un broyeur ménager (SEB Rondo 500). Le protocole suivant a ensuite été utilisé : a) préparation du fluide gastrique simplifié (dissolution de 0,25% de pepsine et ajustement du pH à 2) avec agitation à 100 s"l pendant 5 minutes. b) dispersion de la poudre à 150 s-1 pendant 20 minutes, puis ajustement à p1-12, .30 cyphose gastriqU&O 10 ;s:' pendant 70 minutes - d) courbe d'écoulement de 0,01 s à 150 s"' puis retour de 150 s" a 0,01 sil. Le cycle est effectué en 6 minutes (trois minutes pour la courbe aller et trois minutes pour la courbe retour). -i passage en conditions intestinales avec remontée du pH à 6. , ojout de (1,4% de pancréatine et 0,3% de sels biliaires .. .. .. f) phase intestinale à 10 s- pendant 90 minutes 20 5 g) courbe d'écoulement de 0,01 s-1 à 150 s-1 puis retour de 150 s-1 à 0,01 s-l. Le cycle est effectué en 6 minutes La. figure 4 montre les différentes phases du test La ligure 5 montre le profil de viscosité obtenu, les phases gastriques et intestinales étant distinguées par un trait plus épais (cf graphe). Les comportements observés sont très différents entre le biscuit et la biscotte : Le biscuit Petit Déjeuner génére une faible augmentation de viscosité et une évolution très limitée entre les phases gastriques et intestinales. La biscotte génère utae viscosité significativement plus élevée et .qui 15 augmente jusqu'au début ile la phase intestin..., suite a quoi.. une chute pmeessive est observée. Ces résultats peuvent interprétés sur la base de l'état de l'amidon dans le produit. L'amidon est plus ou moins totalement gélatinisé dans la biscotte, car le 20 procédé de fabrication implique une hydratation importante de la pâte et deux traitements thermiques successifs. Lors de la dispersion en conditions gastriques, le développement de viscosité est du à la solubilisation des chaînes d'amylose, qui sont des polysaccharides linéaires de forte masse molaire. En conditions intestinales, la chute progressive de viscosité est vraisemblablement due à l'hydrolyse de l'amidon 25 par la pancréatine intestinale. Une telle dégradation de l'amidon gélatinisé par la pancréatine a déjà été confirmée par d'autres tests in vitro, montrant par exemple l'apparition de glucides simples (Englyst K. N.. Hudson G. J., Englyst Il. N., 2000. Encyclopedia of Analytical Chemistry,, Meyers R. A. Chichester: John Wiley Sons bd, 2000 4246-4262). La méthodologie développée permet d'obtenir une 30 signature rhéologique de ce processus, qui complète les résultats de l'att antérieur. Dans le cas d'un biscuit Lu Petit Déjeuner, la structure pseudo-cristalline native de l'amidon est préservée ou seulement faiblement altérée. Les variations de viscosité dans les phases gastriques et intestinales sont donc très limitées, l'amylose 35 restant au sein des grains damido ll. Ceci confirme les mesures réalisées in vitro (par10 exemple sur la base de la méthodologie d'Englyst mentionnée plus haut) et in vivo, notamment les mesures d'index glycémique, montrant une libération lente progressive de glucose et donc un amidon lentement digestible pour ces biscuits. Exemple 2 incorporation �le gomme guar native dans un biscuit Les conditions opératoires sont identiques à celles de l'exemple 1, à l'exception d'une quantité de biscuit incorporée plus faible : 50g dans 400 ml de fluide gastrique. La figure 6 montre l'évolution comparée de la viscosité pour un biscuit contrôle (lu Petit Déjeuner Coco Noisettes) et un biscuit prototype contenant 6% de gomme guar native. 15 Les évolutions cinétiques sont comparables, en ce sens qu'un plateau de viscosité est rapidement atteint. La gomme guar est un polysaccharide soluble dans l'eau froide, ce qui explique que la dissolution de, la gomme guar soit rapide à 37-'C. La viscosité apparente (à 10 s-1) du biscuit à la gomme par est 50 fois 20 supérieure a celle du biscuit sans gomme guar en conditions castriques et proche de la viscosité de la biscotte de l'exemple 1. Cependant, contrairement à la biscotte, la viscosité du biscuit à la gomme guar ne chute pas en conditions intestinales. Ceci s'explique par le hait que la gomme guai' n'est pas sensible aux enzymes digestives et se comporte comme une fibre alimentaire. Le protocole in vitro permet donc bien de `>-'i retrouver que la viscosité de libres alimentaires n'est pas affectée par les conditions de digestion intestinale. Voir la Figur°e.6 30 Exemple 3 : impact de la vitesse d'agitation sur la cinétique d'évolution de la viscosité :Les conditions opératoires sont les mêmes que celles de l'exemple 2, à l'exception des vitesses d'agitation dans les phases gastriques et intestinales, qui IO varient entre 3 valeurs : 1, 10 et IO() s-1, avec deux répétitions pour chacune de ces vitesses. Le biscuit contenant 6% de gomme guar native de l'exemple 2 est incorporé à hauteur de 50g dans 40() ml de fluide gastrique, La figure 7montre les résultats obtenus Quelle que soit la vitesse, la dissolution du guar est terminée après les 20 minutes de dispersion à 150 s-1 et 37"C. La viscosité est constante au niveau des 10 phases gastrique et intestinale. Cependant, les viscosités apparentes mesurées avec une vitesse de 1 s-1 sont irrégulières. ce qui pourrait traduire des mouvements lents du mélange réactionnel. A 10 s-I et 100 s-1, on observe un niveau de viscosité plus faible que celui à 1 s-1, mais plus régulier et plus reproductible. Les courbes d'écoulement obtenues à la tin des phases gastriques et 1.5 intestinales après agitation aux vitesses indiquées (1, 10 et 100 s-1) sont montrées sur les figures 8 et 9. La viscosité apparente moyenne mesurée dans les phases gastriques et intestinales aux trois vitesses est également reportée. Les courbes d'écoulement sont quasiment superposables. malgré des 20 différences significatives de valeurs de viscosité apparente dans les phases gastriques et intestinales, selon la vitesse de cisaillement, Ce résultat montre que la cinétique de solubilisation de la gomme guar native ne dépend pas de la vitesse de cisaillement appliquée pendant la phase gastrique, qui 25 varie pourtant entre 1 et 100 s- 1. Les variations de viscosité apparente observées sont liées au caractère rhéo -fluidifiant des solutions de gomme guar (c'est-à-dire à la diminution de viscosité apparente avec la vitesse de cisaillement). Ceci est confirmé par le fait que les valeurs moyennes obtenues dans les phases gastriques et intestinales (symbolisées par des carrés vides sur les figures 5 et 6) se superposent 30 bien avec les courbes d'écoulement obtenues à la fin de ces phases. Revendications1. Méthode ire vitro modélisant la consistance générée:- ire vivo par aliment au . . ours de..sa digestio n comprenant les etapes suivantes :. , . a. Broyage de l'aliment pour reproduire dégradation. mécanique opérée au cours de la mastication, b. Mélange sous agitation de l'aliment broyé à une solution modélisant IO le fluide gastrique dans la cuve d'un réacteur couplée à un rhéomètre, pendant une durée correspondant à la digestion gastrique, c. Ajustement sous agitation du mélange réactionnel pour modéliser les conditions de digestion intestinale pendant une durée correspondant à la digestion intestinale, 15 le rhéomètre étant muni d'un agitateur permettant d'homogénéiser le mélange et d'en mesurer la viscosité de manière simultanée. 2.. Méthôde selon revendication -1 dans laquelle l'aliment est un. aliment sec. 20 3. Méthode selon la revendication 1, dans laquelle l'aliment obtenu à l'issu de l'étape de broyage se présente sous la fOnne de particules de taille d'au moins 5 t.tm de préférence comprise entre 5trn et 3 mm, de préférence de l'ordre de 500 à 700 1,tm. 25 4. Méthode selon la revendication 1, dans laquelle la solution modélisant le fluide gastrique comprend de l'eau maintenue à un pl-I acide compris entre 1 et 4 et une enzyme protéolytique par exemple de type pepsine., ladite enzyme étant présente en une teneur allant de 0,025 a 2,5' en poids de la solution de fluide gastrique. 30 5. Méthode selon. la revendication 1, dans laquelle le mélange entre l'aliment broyé, et la solution modélisant -le fluide gastrique s'effectue sous agitation au sein d'une enceinte réactionnelle thermostatée maintenant le .milieu à une température de 35 à 40°C, de préférence 36 à 39'C et plus prélZrentiellement de l'ordre cle 37'C et couplée à un appareil de mesure de la viscosité. 6. Méthode selon la revendication 1, dans laquelle la modélisation des conditions de digestket intestinale s'effectue par ajustement du pH dans le réacteur jusqu'à une valeur comprise entre 5 et 7.5 et ajout de 0,03 à 3 '!4' en poids, de sels biliaires et de 0,04 à 4 % en poids de pancréatine, ces pourcentages étant exprimés en poids par rapport au poids du mélange contenu dans la cuve du réacteur, ledit mélange étant maintenu sous agitation pendant une durée allant de 1 à 4 heures. 7. Méthode selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée 10 en ce que l'agitateur se compose d'au moins une pale hélicoïdale (1) entrainée en rotation autour d'un axe vertical (2), correspondant à celui de la cuve du réacteur et d'une barre de support (3) et perpendiculaire à l'axe, située à l'extrémité inférieure dudit axe. 15 8... Méthode selon la revendication 7ä. caractérisée en ce que l'agitateur comprend entre. 2 et 6 pales hélicoïdales coaxiales, disposées de manière symétrique. par rapport à. l'axe vertical.. 9. Méthode selon. Ierevendicàtion 7 on 8, caractérisée en ce que la ou les .pales 20 hélicoïdales. comprend entre un demi et plusieurs pas ou spires d'hélice, de préférence 'l .pàs, 10. Méthode selon la revendication 7 à 9, caractérisée en ce que l'agitateur comprend deux pales hélicoïdales coaxiales, symétriques par rapport à l'axe vertical 25 , comprenant une spire d'hélice, connectées entre elles au niveau de leur extrémité inférieure par la barre de support (3), au niveau de leur extrémité supérieure par la seconde barre radiale parallèle à la barre de support, et à hauteur d'une demi spire, par une troisième barre (5) parallèle à la barre de support, 30. 1.1. Méthode selon la. revendication 7 Eta 9., caractérisée en ce que l'agitateur est en acier inoxydable. 12. Méthode in vitro modélisant la consistance générée in vivo par un aliment au cours de sa digestion selon la revendication 1, comprenant les étapes suivantes : a, Broyage de l'aliment jusqu'à obtention de particules de taille comprise entre itnr et 300(1 tin; b. Préparation d'une solution modélisant le fluide gastrique comprenant de l'eau maintenue à un pli aride compris entre 1 et 4 et une enzyme protéolytique par exemple de type pepsine, ladite enzyme étant présente en une teneur allant de 0,025 à 2,5 'Yo en poids de la solution de fluide gastrique Mélange sous agitation de l'aliment obtenu en a, à la solution obtenue en b. dans la cuve d'un réacteur couplée à un rhéomètre, pendant une durée allant de 30 minutes à 4 heures, ledit réacteur étant maintenu à une température comprise entre 35 et 40 Ûtr d. Ajustement du pH dans le réacteur jusqu'à une valeur comprise entre 5 et 7.5 et ajout de 0,03 à 3 % en poids, de sels biliaires et de 0,04 à 4 % en poids de 1.5 pancréatine, ce pourcentages étant exprimés en poids par rapport au poids du mélange contenu dans la cuve dtl réacteur, et maintient du mélange sous agitation pendant une durée allant de 1 à 8 heures, Le rhéomètre est équipé d'un agitateur permettant d'homogénéiser :le mélange et d'en mesurer la viscosité de manière simultanée. 20 13, Méthode selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que les étapes de mesure de la viscosité sont remplacées par des mesures oscillatoires à faible déformation, permettant la mesure de la viscoélasticité lorsque la consistance du bol devient viscoélastique, 25 14. Méthode selon la revendication 13, comprenant les étapes suivantes lorsque le bol devient viscoélastique en phase gastrique a. Broyage de l'aliment jusqu'à obtention de particules taille moyenne comprise entre 5 !am et 3 mm ; b. Préparation d'une solution modélisant le fluide gastrique comprenant 30 de l'eau maintenue à un pH acide compris entre 1 et 4 et une enzyme protéolytique par exemple de type pepsine, ladite enzyme étant présente en une teneur allant de 0,025 à 2,5 % en poids de la solution de fluide gastriquec. Mélange de l'aliment obtenu en a. à la solution obtenue en b. dans. la cuve d'un réacteur jusqu'à obtention d'un mélange homogène, d. Mesure de la viscoélasticité du mélange, pendant une durée allant de 30 minutes à 4 heures, ledit réacteur étant maintenu à une température comprise entre 36 et 38C ; l'appareil permettant la mesure de la viscoélasticité du mélange à l'étape d effectue une déformation sinusoïdale comprise entre 0,01% et 1% de prélèienee 0,1 %, et une fréquence de 0,01 Hz à 10 Hz, de préférence 1Hz. 10 15. Méthode selon la revendication 13, comprenant les étapes suivantes lorsque le bol devient viscoélastique en phase intestinale: a. Broyage de l'aliment jusqu'à obtention de particules de taille moyenne comprise entre 5 p.m et 3 mm. b. Préparation d'une solution modélisant le fluide gastrique comprenant 15 de l'eau maintenue à un pl-t acide compris entre 1 et 4 et une enzyme protéolytique par exemple de type pepsine, ladite enzyme étant présente en une teneur allant de 0,025 à 2,5 ''!4) en poids de la solution de fluide gastrique ; Mélange sous agitation de l'aliment obtenu en a, à la solution obtenue en b. dans la cuve d'un réacteur couplé à un appareil de mesure de la 20 viscosité, pendant une durée allant de 30 minutes à 4 heures, ledit réacteur étant maintenu à une température comprise entre 36 et 380C ; d. Ajustement du pli dans le réacteur jusqu'à une valeur comprise entre 5 et 7,5 et ajout de 0,03 a 3 % en poids, de sels biliaires et de 0,04 à 4 % en poids . . . poids de pancréatine, ne, ce pourcentages étant exprimés . en ldpar rapport au 25 poids du mélange contenu dans la cuve d'un réacteur, et maintient du mélange sous agitation jusqu'à obtention d'un mélange homogène, e. Mesure de la viscoélasticité du mélange, l'appareil permettant la mesure de la viscosité du mélange à l'étape c étant muni d'un agitateur permettant d'homogénéiser le mélange et d'en mesure la viscosité de 30 manière simultanée et permet la mesure de la viscoélasticité du mélange à l'étape e en effectuant unedélbrmation sinusoïdale comprise entre 0,01% et 1%, de préférence 0,1%, et une fréquence de 0,01 Hz à 10 Hz, de préférence 1Hz.16. Méthode in vitro modélisant la consistance générée in vivo par un aliment au cours de sa digestion selon la revendication 1, comprenant les étapes suivantes : a. Broyage de 20 à 200g d'aliment sec jusqu'à obtention de particules de taille moyenne de 500 ton; b. Préparation d'une solution modélisant le fluide gastrique comprenant de 250 à 450ml.. d'eau maintenue à un pl-1 acide compris entre 1 et 4 et une enzyme protéolytique par exemple de type pepsine, ladite enzyme étant présente en une teneur d'environ 0,25 % en poids de la solution de fluide gastrique 10 Mélange sous agitation de l'aliment obtenu en a. à la solution obtenue en b. dans la cuve d'un réacteur couplé à un rhéomètre, pendant une durée allant de l'ordre de 70 minutes, ledit réacteur étant maintenu à une température de l'ordre de 370C d. Ajustement du pl-1 dans le réacteur jusqu'à une valeur d'environ 6,3 et 1.5 ajout de 0,3 Vo en poids, de sels biliaires et de 0,4 % en poids de pancréatine, ces pourcentages étant exprimés en poids par rapport au poids du mélange contenu dans la clave du réacteur, et maintien du mélange sous agitation pendant une durée d'environ 90 minutes, le rhéomètre étant équipé d'un agitateur de géométrie hélicoïdale permettant 20 d'homogénéiser le mélange et d'en mesurer la viscosité de manière simultanée. 1.7. Méthode de mesure en continu de la consistance d'un mélange caractérisée en. ce que l'appareil de mesure de :la viscosité est équipé d'un agitateur tel que défini à. l'une des revendications 7 à..1 18. Rhéomètre équipé d'un agitateur tel que défini à l'une des revendications 7 à 11. 19. Appareil permettant la mesure in vitro modélisant la consistance générée in 30 vivo par un aliment au. cours de sa digestion, comprenant un rhéomètre selon la revendication 18. 25