Brevet FR2938769A1 — publié le 20100528

-1- La présente invention se situe dans le domaine cosmétique et pharmaceutique, et plus particulièrement dans le domaine de la dermatologie. La présente invention a pour objet une composition cosmétique et/ou pharmaceutique, et notamment dermatologique, comprenant, dans un milieu physiologiquement adapté, comme principe actif activateur du cytochrome c, une quantité efficace d'un hydrolysat de feuilles de vigne (Vitis vinifera L.). De préférence, le principe actif est un hydrolysat peptidique de feuilles de vigne et contient principalement des peptides. Ce principe actif peut être utilisé seul ou en association avec au moins un autre principe actif. La présente invention concerne également l'utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif issu de feuilles de vigne (Vitis vinifera L.) pour stimuler les fonctions des mitochondries et augmenter le niveau énergétique cellulaire. L'invention porte encore sur un procédé de traitement cosmétique destiné à protéger la peau et les phanères des agressions extérieures et à lutter contre le vieillissement cutané. Ledit principe actif, activateur du cytochrome c, peut également être utilisé pour préparer des compositions pharmaceutiques destinées à prévenir ou lutter contre les pathologies liées à des dysfonctionnements mitochondriaux ; par exemple, certaines dégénérescences neuromusculaires ou cardiaques, le diabète de type II ou encore certaines pathologies du vieillissement. La peau est un organe vital qui recouvre toute la surface du corps et assure des fonctions protectrices, sensitives, immunitaires, métaboliques ou encore thermorégulatrices. La peau, comme les autres organes, est soumise au vieillissement. Or, un des mécanismes majeurs impliqués dans les processus du vieillissement est l'accumulation de dommages oxydatifs dans des molécules essentielles telles que les lipides membranaires, les protéines, l'ADN et tout particulièrement l'ADN mitochondrial (ADNmt). Les dommages oxydatifs sont provoqués par les radicaux libres, des espèces chimiquement instables et très réactionnelles générées par le métabolisme intracellulaire ou les agressions extérieures. Parmi ces agressions extérieures, on peut citer : les rayonnements UV, les toxines, les polluants atmosphériques, les oxydants alimentaires. Dans la peau, on observe un vieillissement prématuré survenant dans les zones exposées aux rayonnements, caractérisé par des phénomènes d'altérations des macromolécules (péroxydation lipidique, carbonylation des protéines) touchant en particulier l'élastine, le collagène ou la fibronectine. On a également pu montrer un déclin progressif des fonctions mitochondriales -2- avec l'âge, probablement lié à l'accumulation de mutations sur l'ADNmt (K. Singh, Ann. N.Y. Acad. Sci. 1019, 2004). Une des conséquences importantes de l'accumulation des dommages oxydatifs est une réduction de la capacité de la cellule à produire de l'ATP (Porteous et al., Eur J Biochem 1998, 257(1):192-201). Ainsi, le phénomène du vieillissement cellulaire est en relation avec les dommages oxydatifs que subit la cellule mais aussi avec le processus de production d'énergie nécessaire à la cellule pour survivre. L'organisme possède des mécanismes de défense capables de piéger ou de transformer les radicaux libres (enzymes, glutathion, vitamines A et E, coenzyme Q10, etc.). Cependant, ces systèmes de défense antioxydants s'avèrent souvent insuffisants devant les nombreux stress et agressions extérieures auxquels sont soumis les organismes et la peau en particulier. Dans ce contexte, les propriétés particulières du cytochrome c apparaissent comme particulièrement intéressantes : Le cytochrome c est une petite protéine soluble de 15 kDa qui joue un rôle essentiel dans la fonction mitochondriale et dans la survie cellulaire. Le cytochrome c est une molécule hautement conservée chez la plupart des eucaryotes ; on la trouve dans les mitochondries des plantes, des animaux et de nombreux organismes unicellulaires. Le cytochrome c présente une structure protéique organisée autour d'une porphyrine, constituée de quatre noyaux pyrrol, eux-mêmes liés à un atome de fer. Le rôle principal du cytochrome c est d'assurer le transfert d'électrons grâce au changement de valence de l'atome de fer. Le cytochrome c, qui est soluble, transporte ainsi les électrons depuis le complexe III (coenzyme QH2-cytochrome c réductase) jusqu'au complexe IV (cytochrome oxydase). Les électrons, qui sont le substrat de la cytochrome oxydase, sont alors transférés par l'enzyme vers l'oxygène. La recherche de composés pouvant stimuler les mitochondries et augmenter le niveau énergétique cellulaire afin de prévenir ou de lutter contre les signes du vieillissement cutané, ou les dommages causés par les agressions extérieures, telles que les rayonnements UV, les radiations, ou les expositions à des toxines ou à des polluants, est une préoccupation importante de la recherche médicale et de la cosmétique. A cet égard, il a été proposé des solutions telles que l'apport de substances impliquées dans le métabolisme énergétique, et plus particulièrement d'intermédiaires ou de cofacteurs du cycle de Krebs tels que le 2938769 -3- fumarate, le L-malate, l'acétyl CoA (WO 02064129) ou encore le traitement de la peau par des substances capables de diminuer les radicaux libres, telles que la vitamine C (US 2004/0086526) ou la L-ergothionéine (WO 9836748). Par ailleurs, parmi les principes actifs pour la cosmétique extraits de la vigne, on peut 5 trouver des extraits de sarments de vigne riches en resvératrol décrits pour leurs propriétés antivieillissement (FR2898493), utilisés en combinaison avec d'autres agents actifs (FR2896990) ou encore des extraits de cellules de vigne fraiches cultivées in vitro à haute teneur en polyphénols (FR2808682) ou encore une composition cosmétique contenant 5 à 10 % d'extrait total de feuilles de vigne (ES2172475). 10 Néanmoins, l'utilisation d'extraits totaux dans des formulations cosmétiques présente certains inconvénients. La complexité de leur composition les rend difficiles à caractériser chimiquement. Ils peuvent être responsables de certaines réactions d'intolérance ou de réactions allergiques, dues, entre autres, à la présence de certaines protéines natives. De plus, la présence de polyphénols, sensibles à l'oxydation, pose des problèmes particuliers de 15 galénique cosmétique. Le but de la présente invention est donc de surmonter ces inconvénients et de proposer une composition cosmétique ou pharmaceutique comprenant un hydrolysat peptidique issu de feuilles de vigne, capable d'activer le cytochrome c. En effet, les peptides, et en particulier les peptides de bas poids moléculaires, ne provoquent pas de réactions 20 allergiques et sont donc très intéressants dans les applications dermato-cosmétiques. La présente invention a pour principal objet une composition cosmétique et/ou pharmaceutique, et notamment dermatologique, comprenant, dans un milieu physiologiquement adapté, en tant que principe actif, une quantité efficace d'un hydrolysat 25 peptidique de feuilles de vigne (Vitis vinifera L.). Ledit principe actif pourra être utilisé seul ou en association avec au moins un autre principe actif. Les inventeurs ont en effet mis en évidence une activité thérapeutique, et plus particulièrement dermatologique et cosmétique, d'un principe actif de nature peptidique issu de l'hydrolyse de protéines de feuilles de vigne, capable d'activer le cytochrome c. Il a notamment été mis en évidence que ces peptides, qui 30 constituent le principe actif, lorsqu'ils sont appliqués sur la peau, stimulent de façon importante les fonctions mitochondriales. Cela a été démontré par une augmentation de l'expression du cytochrome c, une augmentation de l'activité de la cytochrome oxydase et une augmentation de la synthèse d'ATP. Ce nouveau principe actif, stimulateur des 2938769 -4- mitochondries, et plus généralement capable de protéger la peau et les phanères des agressions extérieures, permet ainsi d'ouvrir de nouvelles perspectives thérapeutiques et cosmétiques. Le terme �phanères� selon l'invention englobe l'ensemble des annexes kératiniques 5 présentes à la surface du corps, en particulier les poils, les cils, les sourcils, les ongles et les cheveux. On entend par � hydrolysat peptidique �, un mélange de composés majoritairement représentés par des peptides, ou une préparation isolée, obtenue après hydrolyse de matière végétale. Le terme � peptide � désigne un enchaînement de deux ou plusieurs acides aminés 10 liés entre eux par des liaisons peptidiques ou par des liaisons peptidiques modifiées. On entend par � principe actif capable de protéger la peau et les phanères des agressions extérieures �, toute substance d'origine végétale, et plus particulièrement issue des protéines de feuilles de vigne (Vitis vinifera L.), capable de présenter des propriétés protectrices ou de diminuer l'apoptose dans des cellules ou des tissus soumis à un stress d'origine physico- 15 chimique ou environnementale. On entend par � principe actif capable d'activer le cytochrome c �, toute substance d'origine végétale, et plus particulièrement issue des protéines de feuilles de vigne (Vins vinifera L.), capable d'augmenter l'expression du cytochrome c, soit par l'activation de la synthèse protéique (par modulation directe ou indirecte de l'expression génique du 20 cytochrome c), soit par l'augmentation de l'activité biologique du cytochrome c, soit par d'autres processus biologiques tels que la stabilisation de la protéine cytochrome c ou encore la stabilisation des transcrits d'ARN messager. On entend par � principe actif capable de stimuler les fonctions des mitochondries �, toute substance d'origine végétale, et plus particulièrement issue des protéines de feuilles de 25 vigne (Vitis vinifera L.), capable d'augmenter l'expression ou l'activité des principales molécules actives présentes dans les mitochondries, et plus généralement capable d'augmenter les principales fonctions énergétiques de la mitochondrie ; à savoir, la chaîne de phosphorylation oxydative et la synthèse d'ATP. Il est bien évident que l'invention s'adresse aux mammifères en général et plus 30 particulièrement aux êtres humains. Le principe actif selon l'invention peut être obtenu par extraction de protéines d'origine végétale, suivie d'une hydrolyse contrôlée qui libère des fragments peptidiques biologiquement actifs. 2938769 -5- Par l'expression �biologiquement actif �, on entend �qui possède une activité in vivo ou in vitro caractéristique de l'activité du principe actif selon l'invention �. De très nombreuses protéines présentes dans les plantes sont susceptibles de contenir des fragments peptidiques biologiquement actifs au sein de leur structure. L'hydrolyse 5 ménagée permet de dégager ces fragments peptidiques. Il est possible, mais non nécessaire pour réaliser l'invention, d'extraire soit les protéines concernées d'abord et de les hydrolyser ensuite, soit d'effectuer l'hydrolyse d'abord sur un extrait brut et de purifier les fragments peptidiques ensuite. II est également possible d'utiliser certains extraits hydrolysés sans en purifier les fragments peptidiques correspondant aux peptides biologiquement actifs selon 10 l'invention, mais en s'assurant toutefois de la présence desdits fragments par des moyens analytiques appropriés. Plus particulièrement selon l'invention, on utilise une des nombreuses plantes de la famille des Vitaceae (ou vitacées), du genre Vitis et préférentiellement de l'espèce Vitis vinifera L. 15 Vitis vinifera L. est un arbrisseau sarmenteux dont il existe d'innombrables variétés cultivées, appelées cépages (cabernet, chardonnay, merlot, pinot, sauvignon, etc). Les feuilles à nervure palmée comportent cinq lobes principaux plus ou moins découpés et sont en forme de coeur à la base. Les principaux composants chimiques identifiés de la vigne sont les tannins, la quercétine, la quercitrine, les tartrates, les sucres, les inosites, les acides, la 20 choline et le carotène. Parmi les multiples produits dérivés de la vigne, on peut citer l'huile de pépins de raisin, le rétinol, issu du raisin ou encore le resvératrol, très utilisé depuis peu en cosmétique. La pharmacopée traditionnelle décrit également l'utilisation de la sève de la plante et des feuilles pour leurs propriétés astringentes et anti-inflammatoires. 25 Pour réaliser l'extraction selon l'invention, on peut utiliser la plante entière ou une partie spécifique de la plante (feuille, fruit, etc.). De manière préférentielle, on utilise les feuilles. On réalise ensuite l'extraction des protéines de la plante suivant le procédé classique (Osborne, 1924) modifié ; le broyat de plante est mis en suspension dans une solution alcaline contenant un produit adsorbant de type polyvinylpolypyrrolidone (PVPP) insoluble 30 (0.01 -20 %) ; en effet, il a été observé que les opérations d'hydrolyses et de purifications ultérieures étaient facilitées par ce moyen. La concentration des substances de type phénoliques interagissant avec les protéines se trouve ainsi réduite. 2938769 -6- La fraction soluble est recueillie après des étapes de centrifugation et de filtration, cette solution brute constituant alors une première forme de l'extrait contenant les protéines, les glucides et éventuellement des lipides. Les protéines sont ensuite précipitées en faisant varier la force ionique en acidifiant le 5 milieu, ce qui permet d'éliminer les composants solubles et les acides nucléiques. Le précipité est ensuite lavé à l'aide d'eau, de tampon à pH acide ou d'un solvant organique tel que, par exemple, l'éthanol ou le méthanol, puis le solvant est évaporé par séchage sous vide. Le précipité riche en protéines est remis en solution dans l'eau ou un autre solvant et constitue alors une forme plus purifiée de l'hydrolysat. 10 L'extraction peut également être réalisée en milieu neutre ou acide toujours en présence de polyvinylpolypyrrolidone. Après une étape de filtration, l'étape de précipitation s'effectue alors à l'aide d'un agent classique de précipitation tel que les sels (chlorure de sodium, sulfate d'ammonium) ou un solvant organique (alcool, acétone). Le précipité obtenu peut être séparé des agents de précipitation par dialyse après remise en solution dans de l'eau 15 ou un autre solvant. La fraction protéique isolée selon l'invention est ensuite hydrolysée dans des conditions ménagées pour générer des polypeptides et des peptides solubles. L'hydrolyse se définit comme étant une réaction chimique impliquant le clivage d'une molécule par de l'eau, cette réaction pouvant se faire en milieu neutre, acide ou basique. Selon l'invention, l'hydrolyse 20 est réalisée par voie chimique etlou de façon avantageuse par des enzymes protéolytiques. On peut alors citer l'utilisation des endoprotéases d'origine végétale (papaïne, bromelaïne, ficine) et de micro-organismes (Aspergillus, Rhizopus, Bacillus, etc.). Pour les mêmes raisons que précédemment, lors de cette étape d'hydrolyse ménagée, une quantité de polyvinylpolypyrrolidone est additionnée au milieu réactionnel. Après 25 filtration, la solution obtenue constitue l'hydrolysat actif. L'hydrolysat végétal obtenu selon l'invention est analysé qualitativement et quantitativement pour ses caractéristiques physico-chimiques et sa teneur en composés de nature protéique et peptidique. On entend par � composés de nature peptidique �, les fragments de protéines, les 30 peptides et les acides aminés libres présents dans le mélange. Les peptides, acides aminés et fragments de protéines sont dosés selon les techniques classiques, bien connues de l'homme du métier. 2938769 -7- Ainsi, selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, l'hydrolysat végétal actif, qui constitue le principe actif, a un pH compris entre 4 et 7, et préférentiellement entre 5 et 6, son extrait sec titre de 3 à 8 g/1 et de manière préférée de 4 à 6 g/1, sa teneur en composés de nature peptidique est comprise entre 0,5 et 5g/l, et préférentiellement, entre 1,5 et 3,5 g/1 5 et sa teneur en sucres entre 0,5 et 1,5 g/1. L'hydrolysat actif peut être encore purifié par des étapes de filtration à flux tangentiel, afin d'éliminer les protéines de haut poids moléculaire et de sélectionner les peptides de bas poids moléculaire. L'une quelconque des formes plus ou moins purifiées de l'hydrolysat est alors solubilisée dans de l'eau ou dans tout mélange contenant de l'eau, puis stérilisée par 10 ultrafiltration. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif de nature peptidique est constitué de peptides de bas poids moléculaire, préférentiellement de poids moléculaire inférieur à 10 kDa, et encore plus préférentiellement de poids moléculaire compris entre 2 et 5 kDa. 15 Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif est préalablement solubilisé dans un ou plusieurs solvants cosmétiquement ou pharmaceutiquement adaptés, classiquement utilisés par l'homme de métier, comme l'eau, le glycérol, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, la vaseline, une huile végétale ou 20 tout mélange de ces solvants. Selon encore un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif selon l'invention est préalablement solubilisé dans un vecteur cosmétique ou pharmaceutique comme les liposomes ou adsorbé sur des polymères organiques poudreux, des supports minéraux comme les talcs et bentonites, et plus généralement solubilisé dans, 25 ou fixé sur, tout vecteur cosmétiquement ou pharmaceutiquement adapté. La quantité efficace de principe actif correspond à la quantité nécessaire afin d'obtenir le résultat recherché, à savoir : activer le cytochrome c, stimuler les mitochondries et augmenter le niveau énergétique cellulaire, et plus généralement, protéger la peau et les phanères des agressions extérieures et lutter contre le vieillissement cutané. 30 Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif est présent dans les compositions de l'invention à une concentration comprise entre 0,0001 % et 20 % environ, et préférentiellement à une concentration comprise entre 0,05 % et 5 % environ par rapport au poids total de la composition finale. 2938769 -8- Les compositions selon l'invention pourront être appliquées par toute voie appropriée, notamment orale, parentérale ou topique externe, et leur formulation sera adaptée par l'homme du métier, en particulier pour des compositions cosmétiques ou dermatologiques. Avantageusement, les compositions selon l'invention sont destinées à une administration par 5 voie topique cutanée. Ces compositions doivent donc contenir un milieu cosmétiquement et/ou dermatologiquement adapté, c'est-à-dire compatible avec la peau et les phanères, et couvrent toutes les formes cosmétiques ou dermatologiques. Ces compositions comprennent, en outre, tout additif communément utilisé dans le domaine d'application envisagé ainsi que les adjuvants nécessaires à leur formulation, tels 10 que des solvants, des épaississants, des diluants, des antioxydants, des colorants, des filtres solaires, des agents auto-bronzants, des pigments, des charges, des conservateurs, des parfums, des absorbeurs d'odeur, des actifs cosmétiques ou pharmaceutiques, des huiles essentielles, des vitamines, des acides gras essentiels, des tensioactifs, des polymères filmogènes, etc. 15 Dans tous les cas, l'homme de métier veillera à ce que ces adjuvants ainsi que leurs proportions soient choisis de manière à ne pas nuire aux propriétés avantageuses recherchées de la composition selon l'invention. Ces adjuvants peuvent, par exemple, représenter de 0,01 à 20 % du poids total de la composition. Lorsque la composition de l'invention est une émulsion, la phase grasse peut représenter de 5 à 80 % en poids et de 20 préférence de 5 à 50 % en poids par rapport au poids total de la composition. Les émulsionnants et co-émulsionnants utilisés dans la composition seront choisis parmi ceux classiquement utilisés dans le domaine considéré. Par exemple, ils peuvent être utilisés en une proportion allant de 0,3 à 30 % en poids, par rapport au poids total de la composition. Les compositions utilisables selon l'invention peuvent être sous forme de crèmes, 25 émulsions huile-dans-eau, ou eau-dans-huile ou émulsions multiples, solutions, suspensions, gels, laits, lotions, sticks ou encore de poudres, adaptés à une application sur la peau, les lèvres et/ou les phanères. Les compositions utilisables selon l'invention peuvent également consister en une composition pour soins capillaires, et notamment un shampooing, un après-shampooing, une 30 lotion de mise en plis, une lotion traitante, une crème ou un gel coiffant, une lotion restructurante pour les cheveux, un masque, etc. La composition cosmétique selon l'invention peut être utilisée notamment dans les traitements mettant en oeuvre une application qui est suivie ou non suivie d'un rinçage, ou encore sous forme de shampooing. 2938769 -9- Les compositions utilisables selon l'invention peuvent également se présenter sous forme de teinture ou de mascara à appliquer au pinceau ou au peigne, en particulier sur les cils, les sourcils ou les cheveux. 5 Il est bien entendu que le principe actif selon l'invention peut être utilisé seul ou bien en association avec au moins un autre principe actif qui favorise l'action dudit principe actif. Avantageusement, les compositions selon l'invention comprennent en outre divers principes actifs destinés, notamment, à la prévention et/ou au traitement des désordres liés au photo-vieillissement. Par exemple, il peut être ajouté d'autres principes actifs ayant une 10 action anti-radicalaire ou antioxydante, choisis parmi la vitamine C, la vitamine E, le coenzyme Q10 et les extraits polyphénoliques de plantes. La composition selon l'invention peut encore associer au principe actif selon l'invention, d'autres principes actifs stimulant les synthèses des macromolécules dermiques (laminine, fibronectine, collagène), par exemple le peptide de collagène commercialisé sous le nom 15 � Collaxyl� � par la société Vincience. La composition selon l'invention peut également associer au principe actif selon l'invention, d'autres principes actifs stimulant le métabolisme énergétique, comme le principe actif commercialisé sous la dénomination � GP4G� � par la société Vincience. 20 Par ses activités particulières, le principe actif selon l'invention peut être utilisé avantageusement dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique. Ainsi, selon un aspect particulier de l'invention, le principe actif peut être utilisé avantageusement dans une composition cosmétique pour activer le cytochrome c et stimuler 25 les mitochondries. Dans un autre aspect de l'invention, le principe actif est utilisé dans une composition cosmétique pour protéger la peau et les phanères contre tous les types d'agressions extérieures. L'utilisation du principe actif, ou d'une composition le contenant, permet à la 30 peau et aux phanères d'être protégés et de mieux résister aux stress environnementaux. On entend, par l'expression � agression extérieure �, les agressions que peut produire l'environnement. A titre d'exemple, on peut citer des agressions telles que la pollution, les UV, ou encore les produits à caractère irritant tels que les tensioactifs, les conservateurs ou 2938769 -10- les parfums. Par pollution, on entend aussi bien la pollution � extérieure �, due par exemple aux particules de diesel, à l'ozone ou aux métaux lourds, que la pollution � intérieure � qui peut être due notamment aux émissions de solvants de peintures, de colles, ou de papier-peints (tels que toluène, styrène, xylène ou benzaldéhyde), ou bien encore la fumée de 5 cigarette. Selon un aspect particulier de l'invention, le principe actif est utilisé dans une composition cosmétique pour protéger la peau et les phanères contre le type particulier d'agressions extérieures que sont les rayonnements ultraviolets (UV). Ainsi, le principe actif selon l'invention peut être avantageusement utilisé dans une 10 composition cosmétique en tant qu'agent photo-protecteur, et plus particulièrement en tant qu'agent photo-protecteur dit � secondaire �. On distingue, en effet, les agents photo-protecteurs primaires des agents photo-protecteurs secondaires. Les agents photo-protecteurs primaires sont des substances qui exercent un pouvoir physique : ils sont en mesure d'absorber les rayonnements UV et de les restituer sous forme de chaleur afin de 15 protéger la peau. Les agents photo-protecteurs secondaires sont des substances qui ont généralement un effet biologique ; ce sont, par exemple, les agents capables de limiter les dommages causés à l'ADN et aux membranes par la pénétration des rayonnements UV dans la peau. Selon cet aspect de l'invention la composition peut être une composition solaire, c'est-à- 20 dire une composition aidant à la protection contre le rayonnement solaire. Ainsi, il peut être avantageusement ajouté, à la composition selon l'invention, des actifs aidant à la protection solaire tels que, par exemple, des filtres solaires. Ces compositions pourront notamment se présenter sous forme d'une solution aqueuse, hydroalcoolique ou huileuse ; d'une émulsion huile-dans-eau, eau-dans-huile ou émulsions multiples ; elles peuvent aussi se présenter 25 sous forme de crèmes, de suspensions, ou encore de poudres, adaptées à une application sur la peau, les muqueuses, les lèvres et/ou les phanères. Ces compositions peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse. Elles peuvent aussi se présenter sous forme solide, comme un stick ou être appliquées sur la peau sous forme d'aérosol. Elles 30 peuvent être utilisées comme produit de soin et/ou comme produit de maquillage de la peau. Selon un autre aspect de l'invention le principe actif peut être utilisé pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à prévenir ou à traiter les dommages causés à la 2938769 -11- peau par une exposition au soleil ou une exposition à des rayonnements ionisants lors de radiothérapies. L'invention se rapporte encore à l'utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif selon l'invention pour prévenir ou traiter les dommages 5 causés à la peau et aux phanères par les radicaux libres. L'invention se rapporte encore à l'utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif selon l'invention pour augmenter la synthèse d'ATP intracellulaire des cellules de la peau. Selon encore un autre aspect de l'invention, ledit principe actif est utilisé avantageusement dans une composition cosmétique destinée à lutter de maniere preventive et/ou curative contre les manifestations du vieillissement cutané, et plus spécifiquement, afin de lutter contre et/ou de prévenir le vieillissement photo-induit (photo-vieillissement). 15 Par manifestations cutanées du vieillissement, on entend toutes modifications de l'aspect extérieur de la peau et des phanères dues au vieillissement comme, par exemple, les rides et ridules, la peau flétrie, la peau molle, la peau amincie, le manque d'élasticité et/ou de tonus de la peau, la peau terne et sans éclat ou les taches de pigmentation de la peau, la décoloration des cheveux ou les taches sur les ongles, mais également toute modification 20 interne de la peau qui ne se traduit pas systématiquement par un aspect extérieur modifié comme, par exemple, toute dégradation interne de la peau consécutive à une exposition aux rayonnements ultraviolets (UV). Le principe actif selon l'invention, ou la composition le contenant, permettra de lutter, en particulier, contre la perte d'élasticité et de fermeté de la peau. 25 Selon encore un autre aspect de l'invention, ledit principe actif peut être formulé pour atténuer une pathologie liée à des dysfonctionnements mitochondriaux. Ainsi, l'invention consiste encore en l'utilisation d'une quantité efficace dudit principe actif pour préparer une composition pharmaceutique destinée à prévenir ou à lutter contre les dysfonctionnements 30 mitochondriaux, tels que les dégénérescences neuromusculaires, les dégénérescences cardiaques, le diabète de type II. 10 2938769 -12- L'invention consiste encore en un procédé de traitement cosmétique destiné à stimuler les défenses et à protéger la peau et les phanères des agressions extérieures et à lutter contre le vieillissement cutané, caractérisé par l'application topique, sur la peau ou les phanères à traiter d'une composition contenant une quantité efficace de principe actif selon l'invention. Des modes de réalisation particuliers de ce procédé de traitement cosmétique résultent également de la description précédente. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront mieux à la lecture des exemples donnés à titre illustratif et non limitatif. 10 Exemple 1 : Préparation de principe actif à partir de feuilles de vigne (Vitis vinifera L.) Dans une première étape, 1 kg de feuilles fraîches de vigne est mis en suspension dans une solution aqueuse alcaline (dilution au 1/10) pH 10 contenant 1 % de polyvinylpolypyrrolidone (Polyclar V ISP). Les feuilles sont broyées avec un broyeur de 15 type ultra-Turrax. Ce mélange est maintenu sous agitation pendant un temps suffisamment long pour permettre la solubilisation des fractions solubles. La température d'extraction est variable (comprise entre 4 et 80°C), préférentiellement l'opération est réalisée à froid. Après cette phase d'extraction, le milieu est clarifié par centrifugation puis filtré sur filtre à plaque. Ce filtrat qui contient les fractions solubles de feuilles de vigne est ensuite soumis à une 20 précipitation des protéines en faisant varier la force ionique en milieu acide (pH 3,5). Cette opération permet d'éliminer en grande partie les composants glucidiques solubles, les polyphénols et les acides nucléiques. Le surnageant est éliminé et le précipité est ensuite lavé à l'eau. A ce stade, le précipité constitue l'extrait protéique brut, qui se présente sous forme d'une 25 pâte de couleur brune dont l'extrait sec est caractérisé par : - Protéines : 50 à 80 % - Glucides : 10 à 30 % Le précipité riche en protéines est remis en solution dans l'eau. 30 L'extrait protéique brut est alors soumis à une série d'hydrolyses ménagées et sélectives consistant en des hydrolyses chimiques et enzymatiques en présence de 0,5 % de PVPP (Polyclar V) et d'endopeptidases à cystéine (Bromélaïne). Après réaction, l'hydrolysat est filtré sur plaque puis sur cartouche stérilisante (0,2�m). 5 2938769 -13- On obtient alors un hydrolysat de couleur ambrée, titrant de 25 à 35 g/1 d'extrait sec, qui est alors dilué de telle sorte que la concentration en composés de nature peptidique, déterminée par la méthode de Lowry, soit comprise entre 0,5 et 5g/1. L'analyse physico-chimique de l'hydrolysat végétal, qui constitue le principe actif, montre que son pH est compris entre 4 et 5 7, et préférentiellement entre 5 et 6, l'extrait sec titre de 3 à 8 g/1 et de manière préférée de 4 à 6 g/l, sa teneur en composés de nature peptidique est comprise entre 0,5 et 5g/l, et préférentiellement, entre 1,5 et 3,5 g/1 et sa teneur en sucres entre 0,5 et 1,5 g/1. Une variante du protocole ci-dessus consiste à réaliser la même séquence d'hydrolyses 10 enzymatiques ménagées et sélectives, en présence de 0,5 % de PVPP. On obtient alors un hydrolysat de couleur ambrée titrant de 25 à 35 g/1 d'extrait sec après filtration stérilisante. La nature protéique de cet extrait est mise en évidence par électrophorèse sur gel de polyacrylamide. Pour cette analyse, on utilise les gels NuPAGE�-Tricine 16 % (Invitrogen). 15 L'extrait protéique est chauffé à 70°C pendant 10 minutes dans des conditions réductrices dénaturantes, dans un tampon de préparation d'échantillon NuPAGE� LDS. Une solution de NuPAGE� antioxydante est ajoutée dans la cuve inférieure (cathode) pour éviter que les protéines réduites se réoxydent durant l'électrophorèse. La migration des protéines est réalisée à l'aide du tampon de migration NuPAGE� MES avec les standards Mark 12 et/ou 20 Sharp comme marqueur de poids moléculaire. La coloration des protéines est effectuée à l'aide du kit de coloration à l'argent SilverXpress� (Invitrogen). Dans ces conditions, on observe des protéines ayant des poids moléculaire compris entre 70 kDa et moins de 3 kDa. Cette solution est alors purifiée en éliminant les protéines de haut poids moléculaire par une filtration à flux tangentiel. On procède à une ultrafiltration de la solution sur une cartouche 25 de filtration à travers un support Pellicon� équipé de cassette Pellicon� 2 Biomax 50 kDa. Ce ter filtrat est récupéré pour être ensuite filtré à travers une seconde cassette Pellicon� 2 Biomax 30 kDa. Après cette étape, on obtient un second filtrat qui est encore élué à travers une dernière cassette Pellicon° 2 Biomax 5 kDa. En fin de purification, on obtient un extrait végétal de feuilles de vigne de couleur ambrée, 30 brillant et limpide. II est caractérisé par un poids sec de 15 à 20 g/l, une teneur en protéines de 12 à 15 g/1 et une concentration en sucres inférieure à 0,5 g/1. L'extrait est alors dilué de telle sorte que la concentration en composés de nature peptidique, déterminée par la 2938769 -14- méthode de Lowry, soit comprise entre 0,5 et 5g/1, et préférentiellement, entre 1,5 et 3,5 g/1 et sa teneur en sucres inférieure à 0,5 g/1. Cette solution est alors analysée en chromatographie liquide haute pression à l'aide d'un appareil HP1100 piloté par le logiciel ChemStation. La colonne utilisée lors de l'élution de 5 l'extrait protéique est une Nucleosil� 300-5 C4 MPN (125 x 4 mn). Cette colonne permet de chromatographier, selon un gradient de solvants approprié, des protéines ayant des poids moléculaires de 0,2 à 25 kDa. Dans ces conditions chromatographiques, plusieurs fractions peptidiques ont été isolées. Ces diverses fractions ont été analysées par spectrométrie de masse afin d'identifier leurs pics moléculaires. Dans ces conditions, on observe uniquement 10 des peptides de bas poids moléculaire, préférentiellement des peptides de poids moléculaire inférieur à 10 kDa, et encore plus préférentiellement des peptides de poids moléculaire compris entre 2 et 5 kDa. Une autre variante consiste à effectuer une purification de l'extrait, obtenu selon l'un 15 des protocoles ci-dessus, par chromatographie d'échange d'ions, sur une colonne TSK gel (TosoHaas) avec un tampon phosphate pH 7. Exemple 2 : Mise en évidence de l'effet stimulant du principe actif selon l'exemple 1 sur la synthèse d'ATP intracellulaire Le but de cette étude est de déterminer l'influence du principe actif selon l'exemple 1 20 sur la synthèse d'ATP, produit par les mitochondries. Protocole : Cette étude s'effectue à l'aide d'un Kit � ATP Bioluminescence Assay Kit HS II � (Roche Applied Science). Des fibroblastes dermiques sont traités avec une solution à 1 %, de principe actif selon l'exemple 1, pendant une période allant de 1 à 3 heures. A la fin de l'incubation, les puits sont rincés avec 2 ml de PBS froid avant d'ajouter 250 �l d'un 25 tampon de lyse fourni par le kit. Les cellules de chaque puits sont ensuite grattées puis récoltées dans des tubes de 14 ml. Chaque puits est rincé avec 2 x 500 �l PBS froid et le tout est de nouveau récolté dans les tubes respectifs. A partir de ces échantillons, une dilution est réalisée au 1/12000'ème dans du PBS froid avant chaque lecture. Le dosage d'ATP est réalisé sur ces échantillons : 50 �l de cette dilution sont déposés dans une luma- 30 cuvette et 50 gl de luminol sont ajoutés. Après 10 secondes, la lecture de la luminescence est déclenchée. Les valeurs sont standardisées par rapport à la quantité de protéines pour 2938769 -15- chaque échantillon. Les mesures sont effectuées à l'aide d'un appareil : le Biocounter M2010A LUMAC�/3M. Résultats : Les dosages d'ATP montrent qu'il y a une augmentation importante de la quantité d'ATP intracellulaire après 1 heure et 3 heures, dans des cellules traitées par le 5 principe actif selon l'exemple 1, en comparaison des cellules non traitées. Conclusions : Le principe actif selon l'exemple 1 augmente sensiblement le niveau énergétique de cellules cutanées telles que les fibroblastes, et plus généralement stimule les fonctions mitochondriales. Exemple 3 : Mise en évidence de l'effet activateur du principe actif selon 10 l'exemple 1 sur l'expression de cytochrome c Le but de cette étude est de déterminer l'influence du principe actif selon l'exemple 1 sur l'expression du cytochrome c. Pour cela, la quantité de cytochrome c a été évaluée par la technique de l'immuno-transfert (ou western blot). Protocole : Des fibroblastes dermiques humains sont traités avec une solution à 1 % de 15 principe actif selon l'exemple 1, pendant 72 heures. Les cellules sont ensuite lysées et homogénéisées par sonication, puis centrifugées 10 minutes à 1000 g. Les échantillons, standardisés pour leur concentration en protéine (dosage kit BCA , Pierce), sont soumis à une électrophorèse sur gel Bis-TRIS 4-12 % (InvitroGen). Après électro-transfert, les membranes sont incubées pendant une nuit avec un anticorps anti-cytochrome c, dilué au 20 1/500 (Mouse monoclonal anti cytochrome c, TEBU). Un anticorps secondaire, couplé à la peroxydase et dilué au 1/5000 est ensuite utilisé (peroxydase conjugated F(ab')2, Goat antimouse, Immunotech). Le signal chimio-luminescent est ensuite quantifié à l'aide du kit Supersignal West Femto Trial kit et lu dans une chambre de lecture (Multilmage light Cabinet, Alpha Immunotech Corporation). La quantification est réalisée après intégration de 25 l'aire sous la courbe (AUC) et standardisée par rapport au nombre de cellules observées. Résultats : On observe une augmentation de l'expression du cytochrome c de 81,9 % dans les fibroblastes traités par le principe actif selon l'exemple 1. Conclusions : Le principe actif selon l'exemple 1 stimule fortement l'expression du cytochrome c dans les cellules cutanées, et plus généralement les fonctions mitochondriales. 2938769 -16- Exemple 4: Mise en évidence de l'effet activateur du principe actif selon l'exemple 1 sur l'activité enzymatique de la cytochrome oxydase Le but de cette étude est de déterminer l'influence du principe actif selon l'exemple 1 sur l'activité mitochondriale. Pour cela, l'activité enzymatique totale (mitochondriale) de la 5 cytochrome oxydase a été mesurée. Protocole : Des fibroblastes humains normaux sont traités avec une solution à 1 %, de principe actif selon l'exemple 1, pendant 3 heures et 24 heures. Les cellules sont récoltées, rincées puis lysées par sonication. Une première centrifugation est réalisée pour éliminer les principaux débris cellulaires et le surnageant est ensuite centrifugé de nouveau à 10 000 g 10 pendant 10 min. L'activité enzymatique est dosée dans le surnageant et/ou dans le 2eme culot, par une méthode biochimique, à l'aide de kit Cytocox 1 (Sigma), puis standardisée pour la teneur en protéines (dosée par le kit BCA, Pierce). Résultats : Les dosages montrent qu'il y a une augmentation très importante de l'activité enzymatique de la cytochrome oxydase après 3 heures et 24 heures d'application du 15 principe actif selon l'exemple 1, en comparaison des cellules non traitées. L'augmentation observée est de 750 % après 24 heures de traitement. Conclusion : Le principe actif selon l'exemple 1 stimule très fortement l'activité enzymatique de la cytochrome oxydase, et plus généralement l'activité mitochondriale, dans les cellules cutanées. 20 Exemple 5: Mise en évidence de l'effet protecteur du principe actif selon l'exemple 1 sur le potentiel de membrane mitochondriale Le but de cette étude est de déterminer l'effet protecteur du principe actif selon l'exemple 1, vis-à-vis des mitochondries de fibroblastes dermiques soumis à un stress 25 oxydatif, provoqué par de l'eau oxygénée (H202) ou à une irradiation UVB. On utilise pour cela un marqueur du potentiel de membrane des mitochondries (JC-1). Le JC-1 est un marqueur qui émet une fluorescence différente selon le niveau de polarisation de la membrane mitochondriale. Protocole : Les fibroblastes dermiques humains sont traités avec une solution à 1 % de 30 principe actif selon l'exemple 1 pendant 96 heures, puis soumis à un stress oxydatif, provoqué par de l'H202 à 2 mM pendant 30 minutes, ou à une irradiation par des UVB à 50 mJ/cm2. Des contrôles non traités par le principe actif selon l'exemple 1 ou par de l'H202 2938769 -17- ou non irradiés sont réalisés dans les mêmes conditions. A la fin de l'expérimentation, les cellules sont lavées, fixées et soumises à un marquage par une solution de JC-1 (Molecular Probes) à 0,2 tg/ml, afin de révéler le potentiel de membrane des mitochondries. Résultats : Dans les fibroblastes traités par le principe actif selon l'exemple 1, les 5 mitochondries présentent une fluorescence rouge (JC-1 agrégé), signe d'un potentiel de membrane élevé, plus important que dans les cellules contrôle. Les fibroblastes irradiés ou soumis à un stress oxydatif ont des mitochondries qui fluorescent peu dans le rouge, et principalement dans le vert (JC-1 monomérique), signe d'une altération du potentiel de membrane mitochondrial. Dans ces dernières conditions, l'application du principe actif 10 selon l'exemple 1 permet d'observer une fluorescence rouge plus marquée. Conclusions : L'application du principe actif selon l'exemple 1 provoque une augmentation du potentiel de membrane des mitochondries. D'autre part, le principe actif selon l'exemple 1 protège efficacement les mitochondries des cellules cutanées soumises à un stress oxydatif ou à une irradiation par des UVB. 15 Exemple 6 : Préparation de compositions 1 - Crème protection solaire: Noms commerciaux [ Noms INCI % massique PHASE A Eau déminéralisée Aqua (Water) qsp Pemulen TRI Acrylates/C 10-30 Alkyl Acrylate 0,40 Crosspolymer Glycerine Glycerin 3,00 Nipastat Sodium Sodium Methylparaben (and) Sodium 0,15 Ethylparaben (and) Sodium Butyl paraben (and) Sodium Propylparaben (and) Sodium Isobutylparaben PHASE B Parsol MCX Ethylhexyl Methoxycinnamate 7,50 Eusolex 4360 Benzophenone-3 3,00 Parsol 1789 Butyl Methoxydibenzoylmethane 2,00 Myritol 318 Caprylic/Capric Triglyceride 4,00 Emulgade SEV Hydrogenated Palm Glycerides (and) 5,00 Ceteareth-20 (and) Ceteareth-12 (and) Cetearyl Alcohol 2938769 -18- Noms commerciaux Noms INCI % massique Propylparaben Propylparaben 0,15 Nacol 16-98 Cetyl Alcohol 1,00 PHASE C TEA 1 Triethanolamine 0.20 PHASE D Principe actif de l'exemple 1 3,00 Parfum Parfum (Fragrance) qsp Colorant qsp Les constituants de la phase A et de la phase B sont chauffés séparément entre 70°C et 75°C. La phase B est émulsionnée dans la phase A sous agitation. La phase C est ajoutée, à 45°C, en augmentant l'agitation. La phase D est ensuite additionnée lorsque la température 5 se situe en dessous de 40°C. Le refroidissement est poursuivi jusqu'à 25°C sous vive agitation. 2 ûLait après-soleil : Noms commerciaux I Noms INCI % massique I PHASE A Montanov L C 14-22 Alcohols (and) C 12-20 3,00 Alkyl Glucoside Waglinol 2559 Cetearyl Isononanoate 4,00 Tegosoft TN C 12-15 Alkyl Benzoate 3,00 Huile de Noyaux d'Abricot Prunus Armeniaca (Apricot) Kernel 2,00 Oil Huile d'Avocat Persea Gratissima (Avocado) Oil 1,00 Abil 350 Dimethicone 1,00 PHASE B Eau déminéralisée Aqua (Water) J qsp PHASE C 2938769 -19- Noms commerciaux Noms INCI % massique Simulgel EG Sodium Acrylate/Acryloyldimethyl 0,4 Taurate Copolymer (and) Isohexadecane (and) Polysorbate 80 Copolymer (and) Polysorbate 80 PHASE D Phenonip Phenoxyethanol (and) 0,30 Methylparaben (and) Ethylparaben (and) Butylparaben (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Ethylparaben and Propylparaben and Buthylparaben Germall 115 Imidazolidinyl Urea 0,20 PHASE E Principe actif de l'exemple 1 I I 0,1 Préparer la phase A sous agitation. Incorporer la gomme xanthane progressivement, sous agitation défloculeuse. Les phases C et D seront incorporées une fois le gel terminé. La phase E, préparée préalablement jusqu'à parfaite dissolution de la DHA, sera rajoutée 5 ensuite. Ajuster le pH si nécessaire à 4 - 4,5. Colorer et parfumer. 3 ùCrème anti-âge : Noms Noms INCI % massique commerciaux Phase A Montanov 68 Cetearyl Alcohol (and) Cetearyl Glucoside 6,00 Squalane Squalane 3,00 Cetiol SB 45 Butyrospermum Parkii (Shea Butter) 2,00 Waglinol 250 Cetearyl Ethylhexanoate 3,00 Amerchol L- 101 Minerai Oil (and) Lanolin Alcohol 2,00 -20- Noms Noms INCI % massique commerciaux Abil 350 Dimethicone 1,50 BHT BHT 0,01 Coenzyme Q10 Ubiquinone 0,10 Phase B Huile d'Avocat Persea Gratissima (Avocado) Oil 1,25 Phenonip Phenoxyethanol (and) Methylparaben (and) Ethylparaben 0,75 (and) Butylparaben (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Phase C Eau déminéralisée Aqua (Water) qsp Butylene Glycol Butylene Glycol 2,00 Glucam E10 Methyl Gluceth-10 1,00 Allantoin Allantoin 0,15 Carbopol Ultrez 10 Carbomer 0,20 Phase D TEA Triethanolamine 0,18 Phase E Principe actif de 0,5 l'exemple 1 GP4G Water (and) Artemia Extract 1,50 Collaxyl Water (and) Butylene Glycol (and) Hexapeptide-9 3,00 Phase F Parfum Parfum (Fragrance) qsp Colorant qsp Préparer et fondre la phase A à 65-70°C. Chauffer la phase C à 65-70°C. La phase B est ajoutée à la phase A juste avant d'émulsionner A dans B. A environ 45°C, le carbomer est 2938769 -21- neutralisé par addition de la phase D. La phase E est ensuite additionnée sous légère agitation et le refroidissement est poursuivi jusqu'à 25°C. La phase F est alors additionnée si souhaité. 4 ûCrème protectrice de jour : Noms commerciaux Noms INCI % massique Phase A Emulium Delta Cetyl alcohol (and) Glyceryl Stearate (and) PEG- 4,00 75 Stearate (and) Ceteth-20 (and) Steareth-20 Lanette O Cetearyl Alcohol 1,50 D C 200 Fluid/100cs Dimethicone 1,00 DUB 810C Coco Caprylate/Caprate 1,00 DPPG Propylene Glycol Dipelargonate 3,00 DUB DPHCC Dipentaerythrityl Hexacaprylate/Hexacaprate 1,50 Cegesoft PS6 Vegetable Oil 1,00 Vitamine E Tocopherol 0,30 Phenonip Phenoxyethanol (and) Methylparaben (and) 0,70 Ethylparaben (and) Butylparaben (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Phase B Eau déminéralisée Aqua qsp 100 Glycerine Glycerin 2,00 Carbopol EDT 2020 Acrylates/C 10-30Alkyl Acrylate Crosspolymer 0,15 Keltrol BT Xanthan Gum 0,30 Phase C Sodium Hydroxide (sol.à Sodium Hydroxide 0,30 10%) 2938769 -22- Phase D Eau déminéralisée Aqua 5,00 Stay-C 50 Sodium Ascorbyl Phosphate 0,50 Phase E Butylene Glycol Butylene Glycol 2,00 Dekaben CP Chlorphenesin 0,20 Phase F GP4G Water (and) Artemia Extract 1,00 Principe actif de l'exemple 1 5,00 Préparer la phase A et chauffer à 75°C sous agitation. Préparer la phase B en dispersant le carbopol, puis la gomme xanthane sous agitation. Laisser reposer. Chauffer à 75°C. A température, émulsionner A dans B sous agitation rotor-stator. Neutraliser avec la 5 phase C sous agitation rapide. Après refroidissement à 40°C, additionner la phase D, puis la phase E. Le refroidissement est poursuivi sous agitation légère et la phase F rajoutée. REVENDICATIONS1. Composition cosmétique ou pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend en tant que principe actif activateur du cytochrome c, dans un milieu physiologiquement adapté, un hydrolysat peptidique de feuilles de vigne (Vitis vinifera L.), utilisé seul ou en association avec au moins un autre principe actif. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit principe actif contient entre 0,5 et 5 g/1, et préférentiellement entre 1,5 g/1 et 3,5 g/1 de composés de nature 10 peptidique. 3. Composition selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que les composés de nature peptidique contenus dans ledit principe actif sont des peptides de poids moléculaire inférieur à 10 kDa. 4. Composition selon la revendication 3, caractérisée en ce que les composés de nature peptidique contenus dans ledit principe actif sont des peptides de poids moléculaire compris entre 2 et 5 kDa. 20 5. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le principe actif est utilisé en une quantité représentant de 0,0001 % à 20 % du poids total de la composition, et préférentiellement en une quantité représentant de 0,05 % à 5 % du poids total de la composition. 25 6. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle se présente sous une forme adaptée à l'application par voie topique comprenant un milieu cosmétiquement ou dermatologiquement adapté. 7. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce 30 qu'elle comprend, en outre, au moins un autre principe actif favorisant l'action dudit principe actif. 15 2938769 -24- 8. Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce que l'autre principe actif est choisi parmi les principes actifs antioxydants et/ou les principes actifs stimulant la synthèse de la matrice extracellulaire, et/ou les principes actifs stimulant le métabolisme cellulaire énergétique. 5 9. Procédé de préparation d'une composition caractérisé en ce que ledit principe actif est préalablement solubilisé dans un solvant cosmétiquement ou pharmaceutiquement adapté, comme l'eau, le glycérol, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, la vaseline, une huile végétale ou tout mélange de ces solvants. 10. Utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif tel que défini dans l'une des revendications 1 à 4, pour stimuler et/ou protéger les mitochondries. 11. Utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif tel que défini dans l'une des revendications 1 à 4, pour protéger la peau et les phanères contre tous les types d'agressions extérieures. 20 12. Utilisation selon la revendication 11, caractérisée en ce que les agressions extérieures sont les rayonnements UV. 13. Utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif tel que défini dans l'une des revendications 1 ou 4, pour prévenir ou traiter les 25 dommages causés à la peau et aux phanères par les radicaux libres. 14. Utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif tel que défini dans l'une des revendications 1 à 4, pour augmenter la synthèse d'ATP intracellulaire des cellules de la peau. 15. Utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif tel que défini dans l'une des revendications 1 à 4, pour prévenir ou traiter les manifestations cutanées du vieillissement et/ou du photo-vieillissement. 30 2938769 -25- 16. Utilisation d'une quantité efficace de principe actif tel que défini dans l'une des revendications 1 à 4, pour préparer une composition pharmaceutique destinée à prévenir ou à lutter contre les dysfonctionnements mitochondriaux, tels que les dégénérescences neuromusculaires, les dégénérescences cardiaques, le diabète de type II. 5 17. Procédé de traitement cosmétique destiné à stimuler les défenses et à protéger la peau et les phanères des agressions extérieures, et/ou à lutter contre les manifestations cutanées du vieillissement, caractérisé en ce que l'on applique topiquement sur la peau ou les phanères à traiter, une composition comprenant une quantité efficace de principe actif tel 10 que défini selon l'une des revendications 1 à 4.