Brevet FR2935973A1 — publié le 20100319

B5006FR 1 La présente invention concerne des composés organiques, utilisables comme ligands pour la préparation de complexes, ainsi qu'un procédé pour leur préparation. Les complexes d'ions lanthanides possèdent des propriétés spectroscopiques très particulières qui permettent des applications dans le domaine de la détection par luminescence. Ces complexes possèdent un très large déplacement de Stokes, des raies d'émission très fines, de l'ordre de quelques nm, qui sont caractéristiques de l'ion lanthanide utilisé. Ils peuvent émettre dans le domaine visible ou proche infrarouge, et ils ont un temps de vie de l'état excité extrêmement long, pouvant atteindre la milliseconde. Cette dernière caractéristique est un atout essentiel : elle permet une détection en temps résolu (ce qui permet d'éliminer les signaux de fluorescence parasite) et elle provoque une très forte augmentation de la sensibilité de détection des complexes en microscopie de luminescence ou dans les analyses fluoroimmunologiques. Les complexes luminescents d'ions lanthanides ont par conséquent des applications dans la plupart des domaines de la fluorescence conventionnelle. Cependant, les complexes d'ions lanthanides sont généralement difficiles à obtenir. De nombreuses propriétés du complexe dépendent de la structure du ligand et de l'ion lanthanide, notamment l'efficacité d'excitation du complexe, le degré de stabilité de la complexation des lanthanides (qui doit être élevé pour éviter le relargage des cations), le rendement quantique de luminescence et la possibilité de former des liaisons covalentes avec le matériel à marquer pour les applications biologiques des complexes. Une excitation adéquate des complexes peut être obtenue lorsque le ligand du complexe comprend des groupements hétéroaromatiques qui ont pour but de capter la lumière et de la transférer à l'ion lanthanide qui va réémettre. Ce phénomène est appelé effet d'antenne. Le choix de ces groupements hétéroaromatiques définit de nombreuses propriétés spectroscopiques du complexe final, notamment la gamme spectrale d'excitation et le rendement quantique de luminescence. CN-1811429-A décrit un complexe de Tb3+ et d'un ligand qui a un squelette 30 2,6-dipyrazolylpyridine dans lequel chacun des groupes pyrazolyle porte B5006FR 2935973 2 un groupement -CH2-N(CH2CO2H)2. Ledit complexe est utile pour la détection de l'oxygène singulet. Il est obtenu par un procédé consistant à fixer le groupe anthracène sur une dibromo-aminopyridine, puis à modifier le groupe pyridyle par réaction des atomes de brome avec les réactifs appropriés pour remplacer chaque Br 5 par un groupe pyrazolyle portant un groupe -CH2-N(CH2CO2H)2.. EP-0 770 610 décrit des complexes d'ion lanthanide dans lesquels le ligand est un squelette 2,6-dipyrazolylpyridine dans lequel chacun des groupes pyrazolyle porte un groupement -CH2-N(CHG2CO2H)2, G2 étant H, un halogène, un groupe cyano, un groupe phényle, un groupe alkyle ou un groupe alcoxy. Le procédé de 10 préparation consiste à préparer d'abord un composé 2,6-dipyrazolylpyridine di bromé, puis on le modifie pour obtenir tes deux groupes terminaux -CH2-N(CHG2CO2H)2. Ce procédé ne permet pas d'obtenir des composés dans lesquels le groupe pyridyle porte des substituants choisis pour ajuster les propriétés du complexe de lanthanide dans lesquels lesdits composés constituent le ligand. 15 Le but de la présente invention est de fournir des composés utiles comme ligands pour des complexes de lanthanide, et un procédé pour leur préparation, ledit procédé permettant d'obtenir des ligands portant des substituants variés pour conférer des propriétés particulières aux complexes. Un composé selon la présente invention répond à la formule 20 (L) COOR COOR COOR COOR dans laquelle : chacun des YI et Y2 représente un atome H ou un groupe alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone, ou bien YI et Y2 forment ensemble un biradical 2935973 B5006FR 3 formant un cycle aromatique avec les deux atomes de carbone qui les portent ; A est -C=C-,ùCO-NH-, ou ùCO-O- ; Xest: 5 * H, NH2, un halogène, * un groupe COOR1 dans lequel R' est H, un cation alcalin, un groupe ammonium quaternaire N(R3)4+ dans lequel R3 est H ou une chaîne alkyle linéaire ayant de préférence de 1 à 4 atomes de carbone, un groupe succiimide -N-(CO-CH2-CH2-CO)- ou un groupe 10 pentafluorophényle -C6F5 ; * une fonction biotine (-CO-(CH2)4-05H7N2OS), un groupement polyhétéroaromatique ou un éther couronne, n est 0 ou 1 ; E est un segment de liaison constitué par au moins un groupe choisi parmi 15 -C6H4-, C 10H6-, -CO-NH-, les groupes peptide contenant de 1 à 4 acides aminés, et les groupes alkylène qui ont de 1 à 10 atomes de carbone et qui comprennent éventuellement au moins un hétéroatome dans la chaîne carbonée, chacun des groupes R représente H ou un métal alcalin ou un groupe 20 ammonium quaternaire N(R3)4+ tel que défini précédemment. Les composés L dans lesquels les groupes Y1 et Y2 représentent chacun un atome H, et les composés L dans lesquels les groupes Y' et Y2 font partie d'un cycle aromatique sont particulièrement préférés. Un composé L selon la présente invention peut être préparé à partir d'un 25 composé 5 répondant à la formule 2935973 B5006FR Br CO2R' CO2R' CO2R' CC2R' 5 dans laquelle Y' et Y2 ont la signification donnée précédemment. et R' est un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone. R' peut être : un groupe alkyle linéaire, ayant de préférence de 1 à 6 atomes de carbone, en 5 particulier un groupe éthyle ; un groupe alkyle linéaire comportant un ou plusieurs hétéroatomes (en particulier O, N ou S), ayant de préférence de 1 à 6 atomes de carbone ; un groupe alkyle ramifié, ayant de préférence ce 3 à 6 atomes de carbone, par exemple un groupe t-butyle. 10 Un composé 5 dans lequel les substituants Y' et Y2 sont des groupes séparés (désigné ci-après par 5') peut être préparé par un procédé comprenant les étapes suivantes ; i) on fait réagir la 4-bromo-2,6-difluoropyridine 1 avec un 1H-pyrazole-3- carboxylate d'alkyle portant les groupes Y' et Y2 séparés définis ci-dessus, 15 dans un solvant organique aprotique non nucléophile en présence d'un hydrure de métal alcalin, à une température comprise entre 0 et 60°C ; ii) le composé 2' obtenu à la fin de l'étape i) est :réduit par un agent réducteur dans un solvant organique aprotique ; iii) on fait réagir le composé 3' obtenu à la fin de l'étape ii) avec un agent de 20 bromation (par exemple PBr3) de préférence à une température comprise entre 20 et 60°C; iv) on fait réagir le composé 4' obtenu à la fin de l'étape iii) avec un dialkylester de l'acide iminodiacétique, en présence d'une base dans un solvant organique aprotique. 4 2935973 B5006FR 5 Le procédé de préparation d'un composé 5' peut être représenté par le schéma réactionnel suivant, dans lequel R2 représente un groupe alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone : 5 Un composé 5 dans lequel les substituants Y 1 et Y2 portés par un même groupe pyrazolyle forment un cycle ( désigné ci-après par composé 5") peut être préparé par un procédé analogue au procédé ci-dessus, en remplaçant le 1H-pyrazole-3-carboxylate d'alkyle par l'ester d'alkyle de l'acide indazole-3-carboxylique 10. Le procédé peut-être représenté par le schéma réactionnel suivant, 10 dans lequel R2 représente un groupe alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone : + i \\ i) N HNN F~L N~`F -N N COOR2 10 1 Br OH HO Br Br Br 5" 2935973 B5006FR 6 Dans les différentes étapes du procédé de préparation d'un composé 5, le solvant aprotique peut être THF, Et2O, Et3N, DMF, DMSO, le toluène, CH2C12, ou un de leurs mélanges (par exemple un mélange THF,Et3N). Dans l'étape i) : le 1H-pyrazole-3-carboxylate d'alkyle est de préférence le 1H-pyrazole-3-5 carboxylate d'éthyle pour un composé 5', ou l'ester d'éthyle de l'acide indazole-3-carboxylique pour un composé 5" ; l'hydrure de métal alcalin est de préférence NaH ; la température est de préférence de l'ordre de 0°C pour éviter des réactions parasites. 10 Dans l'étape ii), l'agent réducteur peut être un hydrure mixte, par exemple LiAIH4 ou NaBH4. Dans l'étape iv), la base est un composé non nucléophile, par exemple K2CO3 ou Et3N et le dialkylester de l'acide iminodiacétique est de préférence le diéthylester ou le di-(t-butyl)ester de l'acide iminodiacétique. 15 Plus particulièrement, le procédé de préparation d'un composé L selon l'invention comprend : une 1 ère étape au cours de laquelle le brome du composé 5 est remplacé par un groupe A-Z par réaction avec un réactif approprié, en présence d'un catalyseur organométallique, dans un solvant organique ; 20 - une étape au cours de laquelle les groupes R' sont remplacés par des groupes R, R étant H, un cation alcalin ou un cation tétralkaylammonium tel que mentionné précédemment ; une ou plusieurs étapes pour remplacer Z par (E)n-X, lorsque Z est différent du groupe (E),,-X visé. 25 Le remplacement des groupes R' du type alkyle linéaire par un cation K+, Na+ ou Li+ peut être effectué avec KOH, NaOH ou LiOH respectivement dans un solvant polaire (par exemple un mélange CH3OH/H20), à une température entre 20 et 100°C, par exemple à 60°C. Le groupe COOK, COONa ou COOLi peut ensuite, si nécessaire, être modifié en groupe acide ou en carboxylate d'ammonium 2935973 B5006FR 7 [COON(R3)4+] par réaction avec un acide tel que HC1 dans l'eau ou avec 1'hydroxide d'ammonium N(R3)4OH, respectivement. Le remplacement par H de groupes R' du type alkyle ramifié peut être effectué par réaction avec l'acide trifluoroacéti que (TFA) dans un solvant 5 organique aprotique. Les réactions destinées à remplacer les groupes R' peuvent être effectuées soit sur le produit obtenu après remplacement du brome, soit sur un produit obtenu après la ou l'une des étapes de modification du groupe AZ. Dans les différentes étapes du procédé de préparation d'un composé L, le 10 solvant aprotique peut être THF, Et2O, Et3N, DMF, DMSO, le toluène, CH2C12, ou un de leurs mélanges (par exemple un mélange THF/Et3N). Pour la mise en oeuvre de la lère étape du procédé de préparation d'un composé L, l'atome de brome en position 4 sur le groupe pyridyle du composé 5 peut être soumis à des réactions chimiques variées telles que des couplages de 15 Stille, de Heck, de Sonogashira ou de Suzuki, des réactions de carboalkoxylation ou de carboamidation. Le catalyseur organométallique utilisé dans la l ère étape est de préférence un complexe de Pd et de triphénylphosphine, par exemple [Pd(PPh3)2C12] ou [Pd(PPh3)4]. La température est comprise de préférence entre 20 et 120°C. Le 20 réactif utilisé pour réagir avec le composé 5 dépend de la nature du groupe A du composé L. Dans les réactions de carboamidation (respectivement de carboalkoxylation), A représente ùCO-NH- (respectivement ùCO-O-), le réactif utilisé est une amine (respectivement un alcool) en présence de monoxyde de carbone. Dans les couplages de type Sonogashira, A représente -C=C-, le réactif 25 utilisé comprend un groupe acétylénique vrai, H-C=C-. Lorsque le groupe A du substituant en position 4 sur le groupe pyridyle du composé L est un groupe -C=C-, la 1ère étape du procédé consiste à faire réagir le composé 5 avec un réactif qui a un groupe terminal HCEC-. Le catalyseur organométallique est de préférence un complexe de palladium et de 2935973 B5006FR 8 triphénylphosphine, en particulier Pd(PPh3)2C12 en présence de Cul ou [Pd(PPh3)4]. Trois modes de réalisation peuvent être envisagés. Dans un premier mode de réalisation, on fait réagir le composé 5 avec un réactif HC-C-(E)r,-X pour obtenir le composé 6, puis on remplace les groupes R' 5 par des groupes R définis précédemment, selon les modalités indiquées précédemment pour obtenir un composé L. x x (E)n (E), -1 r CO2R' CO2R' CO2R' OZR' N rv CO2RC O2R Y2 CO2R CO2R Br r-1 r'V~ OZR, CO2R' CO2R' CO2R' 5 6 L La lere étape du schéma réactionnel (qui correspond à la 1ere étape du procédé) est effectuée en présence d'un complexe de Pd et de triphénylphosphine, tel que 10 [Pd(PPh3)2C12] ou [Pd(PPh3)4] et Cul, dans un solvant organique (par exemple un mélange THF/Et3N), à une température entre 20 et 80°C (par exemple à 50°C). Dans un deuxième mode de réalisation, le procédé comprend une étape de modication d'un groupement AZ différent du groupe A-(E)n-X recherché. On fait réagir le composé 5 selon le mode opératoire suivant rùNù1 rryù1 CO2R' CO2R' CO2R' CO2R' Yi CO2R' CO2R' CO2R' CO2R' N ~n r CI o2RC OZR CO2R COZR Y, IIrrN II/ry-1 CO2R' CO2R' CO2R' CO2R' 15 5 7 8 L1 Les différentes étapes sont effectuées dans les conditions suivantes: La 1 ère étape du schéma réactionnel correspond à la 1 ère étape du procédé au cours de laquelle on fait réagir le composé 5 avec le triméthylsilylacétylène (TMSacétylène) en présence d'un catalyseur organométallique dans un 2935973 B5006FR 9 solvant organique aprotique. Cette étape est avantageusement effectuée à température ambiante. Le catalyseur organométallique peut être [Pd(PPh3)2C12] en présence de Cul; La 2ème étape du schéma réactionnel consiste à remplacer le groupe TMS par 5 un atome H, en faisant réagir le composé 7 obtenu à la fin de l'étape précédente, avec un réactif de déprotection, par exemple un fluorure de tétraalkylammonium (en particulier le fluorure de tétrabutylammonium TBAF), un fluorure ou un carbonate de métal alcalin ; la 3ème étape du schéma réactionnel (qui correspond à l'étape de modification 10 de R'), est effectuée selon l'une des modalités indiquées précédemment pour obtenir le composé L1 dans lequel le groupe A-(E)ä-Z est un groupe -C-CH, en fonction du choix fait pour R. Cette étape pourrait bien entendu être effectuée avant la réaction avec TBAF. La 2ème étape est effectuée de préférence dans un solvant aprotique, à une 15 température de 0 à 80°C, par exemple à 0°C Dans un 3ème mode de réalisation, le procédé comprend deux étapes de modification d'un groupe AZ différent du groupe A-(E)ä-X recherché. On fait réagir le composé 8 obtenu en tant qu'intermédiaire de synthèse dans le 2ème mode de réalisation avec un composé F(r)-(E),,-X pour obtenir le composé 6, puis on traite le 20 composé 6 comme indiqué ci-dessus pour remplacer R' par R selon l'un des modes opératoires décrits ci-dessus. Le groupe F(r) peut être 1-1, Cl, Br, 1, -O-SO2-CF3, un groupe acide boronique (B(OH)2), un groupe ester d'acide boronique (B(OAlkyl)2), un groupe trialkyl stannyle ou un trialkyl silyle. Le schéma réactionnel est donné ci-dessous : 2935973 B5006FR H 6 L Lorsque A est ûCO-NH- ou ûCO-O- la 1 ère étape du procédé est effectuée en faisant réagir le composé 5 avec un composé H2N-(E) -X ou HO-(E)n-X respectivement selon le schéma réactionnel suivant : 10 Yi 1 J ~) Y2 / N N \ YZ --~YZ IV N IV Y2 ( n N N N WH N /N \ CO2R CO2R' CO2R' CO2R' r N .\ CO2R CO2R CO2R CO2R N N Y, 5 5 9 L Au cours de la 1ère étape du schéma réactionnel (qui correspond à la 1ère étape du procédé), on fait réagir le composé 5 avec un composé HW-(E)n X dans lequel W est NH ou O, E, n et X ont la signification donnée précédemment, sous une pression de CO (par exemple de 1 atmosphère), en présence d'un catalyseur 10 organométallique (par exemple [Pd(PPh3)2C12]), dans un solvant aprotique (par exemple toluène/Et3N, à une température entre 60 et 120°C (par exemple 100°C). Au cours de la 2ème étape du schéma réactionnel, on remplace les groupes R' du composé 9 selon l'un des modes opératoires décrits précédemment. 2935973 B5006FR 11 Quelques exemples de ligands, auxquels l'invention n'est cependant pas limitée, sont donnés ci-après à titre purement illustratif. Des ligands similaires peuvent être obtenus en remplaçant H ou Na par l'un des autres groupes R définis précédemment. N Il N^N 'N N Ô N \ -1 H N` N Li CO2H CO2H \ L2 O Na COZNa Na OZNa N~-N r CO2H CO2H OH O ONa O O N N Il / N II N \ NON N \ ~N` .~N rN r N- L3 CO2H CO2H CO2HC O2H L4 CO2Na 02Na CO2NaC O2Na O ONa C ONa � O~ 11\ H Il ~ I 1 N N N N N ~ N I N~ r L5 CO2Na CO2Na CO2Na CO2Na L6 CO2Na CO;Na CO2Na CO2Na B5006FR 2935973 12 2o o o- N r L7 CO2Na CO2Na CO2Na CO2Na L8 CO2Na CO2Na CO2Na CO2Na ONa O o fONa O~NH L9 CO2Na CO2Na CO2Na CO2Na L10 I CO2Na CO2Na CO2Na CO2Na ONH L13 NaO ONa ONa L12 2935973 B5006FR 13 Un complexe de lanthanide selon l'invention comprend un ion lanthanide complexé par un ligand tel que défini précédemment. L'ion lanthanide est choisi parmi les ions Eu3+, Tb3+, Dy3+, Sm3+, Er3+, Yb3+, Pr3' et Nd3+ Un complexe de lanthanide peut être obtenu par mélange de quantités 5 équimoléculaires d'un composé L (de préférence sous forme de sel de sodium) avec un sel de lanthanide, chauffage du mélange, refroidissement et neutralisation à pH de 6 à 8, puis récupération du complexe à la température ambiante. Le sel de lanthanide peut être un nitrate, un chlorure, un perchlorate ou un triflate Ln(CF3SO3)3. 10 Dans un mode de réalisation particulier, le composé L et le sel de lanthanide sont mélangés en quantités équimolaires en solution dans l'eau ou dans un mélange MeOH/eau, la solution est chauffée pendant 2 à 3 heures à 60°C, refroidie à température ambiante puis neutralisée si nécessaire à pH 7 par addition de NaOH, d'un hydroxyde d'ammonium quaternaire ou de HC1 dilué dans l'eau. Les 15 complexes formés sont ensuite isolés par concentration des eaux mères et précipitation dans un mélange H20/MeOH/THF/Et2O. Les complexes selon l'invention ont des applications variées, selon la nature des substituants du groupement pyridyle du ligand. Les complexes de l'invention sont utiles pour le marquage de composés qui 20 portent un groupe amine, alcool, thiol, acide carboxylique ou ester activé. Ces composés peuvent être des molécules monomères ou des polymères éventuellement sous forme de billes. Pour cette utilisation, le groupe X du ligand du complexe est de préférence un groupe ùCOOH, un groupe COONa, un ester activé de type ester H H N~/N\ 0 NN N 1 N Nz L11 o ONa ONa NH N B5006FR 14 de NHS ou ester de pentafluorophénol, un Br, un I, ou une amine. Pour cette application particulière, le ligand du complexe peut être choisi parmi les composés L3, L4, L5, L6, L9, L10, L12 et L13. Lorsque le ligand d'un complexe lumir.escent possède un site de reconnaissance électroniquement relié à la structure de complexation du ligand, les propriétés de luminescence du complexe peuvent être perturbées par la présence d'un analyte qui se fixe sur le site de reconnaissance. En couplant électroniquement le site de reconnaissance à la pyridine centrale par des liaisons acétyléniques, l'interaction du site de reconnaissance avec ses substrats induit des perturbations électroniques qui se traduisent par des changements de luminescence des complexes d'ion lanthanide. Les complexes de l'invention sont utiles pour la reconnaissance des cations alcalins, alcalino-terreux et des éléments de transition de la première série lorsque le ligand porte un substituant ûA(E)äX dans lequel X est un ether couronne (L7) ou une terpyridine (L8). La spectroscopie et la microscopie d'absorption à deux photons sont des techniques relativement récentes et qui ont pour intérêt, notamment en microscopie, de permettre une amélioration significative de la résolution spatiale en utilisant des photons de basses énergies. La quasi-totalité des marqueurs luminescents étudiés en absorption à deux photons sont des composés organiques fluorescents de type Rhodamine�. Ces composés organiques présentent de très faibles déplacements de Stokes et des bandes d'émission larges (correspondant à une largeur à mi-hauteur supérieure à 50 nm). Les complexes luminescents d'ions lanthanides selon la présente invention présentent des déplacements de Stokes très élevés et des bandes d'émission étroites. Ils constituent par conséquent des composés particulièrement intéressants pour le marquage et la microscopie biphotonique et des travaux très récents ont démontrés cette possibilité sur des complexes d'Eu et de Tb. [Cf notamment a) Law, G.L.; et al. J. Am. Chem. Soc. 2008, 130, 3714 ; b) Picot, A.; et al., J. Am. Chem. Soc. 2008, 130, 1532.] Cependant, il n'existe pas à l'heure actuelle de sonde à deux photons à base d'ion lanthanide possédant une fonction de greffage pour le marquage covalent. Les complexes de l'invention peuvent être utilisé comme sonde à deux photons possédant une fonction de greffage pour le 2935973 B5006FR 15 marquage covalent. Pour cette application particulière, le ligand du complexe porte de préférence sur le groupe pyridyle, un substituant A-(E)n Z dans lequel A est un groupe C=C, E comprend un groupe phényle et Z est un groupe terminal NaCOO-. On peut citer en particulier les complexes dont le ligand est L5, L6, L12 ou L13. 5 Les complexes de l'invention dans lesquels le groupe terminal X du substituant A-(E)-X du ligand est un groupe biotine sont utiles pour la reconnaissance de l'avidine, de la streptavidine et de la neuravidine. Un exemple d'un tel complexe est un complexe ayant le composé JL11 comme ligand. La présente invention est illustrée par les exemples suivants, auxquels elle 10 n'est cependant pas limitée. Les exemples 1 à 18 concernent la préparation des ligands. Les exemples 19 à 35 concernent la préparation et la caractérisation de complexes de lanthanides. EXEMPLE 1 SYNTHESE D'UN COMPOSE 5-Et 15 Un composé 5-Et a été préparé selon le schéma réactionnel suivant : 1 N" N N N N 5-Et Br HO OH EtO O 2 Br OEt EtO Composé 2 Dans un ballon Schlenk contenant de la DMF distillée (100 mL), du 4- bromo-2,6-difluoropyridine 1 (2,89 g ; 14,9 mmol) et du 1H-pyrazole-3-carboxylate 20 d'éthyle (4,17 g ; 29,8 mmol) sous argon, on ajoute du NaH (60% dans l'huile, 1,32 g ; 32,8 mmol). Le mélange est agité pendant 2 h à 0°C et le solvant est B5006FR 16 évaporé à sec. Le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (100 mL), lavé avec de l'eau (3 x 100 mL) et une solution saturée de NaCl. La phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. Le produit brut obtenu est purifié par chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100/00 à 99,5/0,5). On obtient le composé 2 (3,07 g ; 47%) sous forme d'un solide blanc. 1H RMN (CDC13, 300 MHz): 8 8,55 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 8,28 (s; 2 H); 7,01 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 4,46 (q; J = 7,1 Hz; 4 H); 1,44 (t; J = 7,2 Hz; 6 H). 13C { 1H} RMN (CDC13, 300 MHz): 8 161,7; 149,7; 146,9; 137,4; 128,6; 114,6; 110,7; 61,5; 14,3. IR (cm-1, ATR) : v 1774 (w) ; 1720 (s) ; 1595 (s) ; 1 577 (s) ; 1525 (m) ; 1458 (s) ; 1427 (m). Analyses calculées pour C 17H16BrN5O4 (434.25) : C 47,02; H 3,71; N 16,13; mesurées: C 46,82; H 3,57; N 15,72. EI/MS (solide) m/z: 435,0 ([M+H]+, 100%); 433,0 ([M+H]+, 100%) Composé 3 Dans un ballon Schlenk sous argon contenant le composé 2 (3,07 g; 7,07 mmol) et du THF distillé (130 mL) refroidi à -5°C, est ajouté par petites portions du LiAIH4 (0,54 g ; 14,1 mmol). Après addition complète du LiAIH4, le mélange est agité à -5°C durant 1 h puis hydrolysé avec une solution saturée de NH4C1 jusqu'à obtention de deux phases. Ce mélange est filtré sur vélite� et évaporé à sec, le solide obtenu est chauffé à reflux dans du THF puis filtré à chaud. Le solide résultant de cette filtration est rincé plusieurs fois avec du THF. Le filtrat est évaporé à sec pour donner le composé 3 (1,78 g). Composé 4 Dans un ballon Schlenk sous argon, contenant le composé 3 brut (1,76 g ; 5,03 mmol) obtenu par réduction du composé 2 et de la DMF distillée (100 mL) on ajoute PBr3 (1,42 ml ; 15,1 mmol) à température ambiante. Le mélange est agité à température ambiante durant 14 heures. Le solvant est évaporé à sec. Le résidu obtenu est dissous dans un mélange H2O/CH2C12 et neutralisé avec NaHCO3. La phase aqueuse est extraite avec du dichlorométhane (4 x 200 mL), et les phases 2935973 B5006FR 17 organiques rassemblées sont lavées avec une solution saturée de NaCl, séchées sur Na2SO4, filtrées et évaporées à sec. Le produit brut est purifié par chromatographie sur silice (CH2C12 comme éluant). On obtient le composé 4 (1,45 g ; 60%), sous forme d'un solide blanc. 5 'H RMN (CDC13, 200 MHz): S 8,45 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 8,00 (s; 2 H); 6,56 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 4,54 (s; 4 H). 13C {'H} RMN (CDC13, 200 MHz): S 152,7; 149,5; 140,0; 128,7; 113,0; 108,7; 24,5. IR (cm"', ATR) v 1649 (w); 1608 (m); 1601 (m); 1586 (s); 1525 (s); 1467 (s); 1458 (s). 10 Analyses calculées pour C13H,oBr3N5 (475.97): C 32,80; H 2,12; N 14,71; mesurées: C 32,70; H 1,92; N 14,45. EI/MS (solide) m/z: 473 ([M+H]+; 30%) ; 475,0 ([M+H]+; 100%) ; 477 ([M+H]+; 96%). Composé 5-Et 15 Dans un ballon on mélange sous argon le composé 4 (0,8 g ; 1,68 mmol), l'ester éthylique de l'acide iminodiacétatique (0,66 ml ; 3,70 mmol) et du K2CO3 (0,93 g ; 6,72 mmol) dans un mélange de THF (50 mL)/CH3CN (90 mL) distillé. Le milieu réactionnel est chauffé à 50°C pendant 14 heures puis filtré. Le filtrat est concentré à sec. L'huile résultante est dissoute dans du dichlorométhane (100 mL), 20 lavée avec de l'eau (3 x 100 mL) et une solution saturée de NaCl. Cette phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification par chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 98:2) du produit brut permet d'obtenir le composé 5-Et (1,01 g ; 87%), sous forme d'une huile incolore. 'H RMN (CDC13, 300 MHz): 8 8,44 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 7,97 (s; 2 H); 6,55 (d; J = 25 2,6 Hz; 2 H); 4,18 (q; J = 7,2 Hz; 8 H); 4,04 (s; 4 H); 3,62 (s; 8 H); 1,28 (t; J = 7,2 Hz; 12 H). 13C {'H} RMN (CDC13, 300 MHz): 8 171,0; 153,6; 150,3; 136,4; 128,1; 112,2 ; 108,8; 60,5; 54,6; 51,3; 14,2. IR (cm-1, ATR): v 1733 (s); 1588 (s); 1575 (s); 1538 (m); 1464 (s); 1387 (s). 5 2935973 B5006FR 18 Analyses calculées pour C29H38BrN7O8 (692.57): C 50,29; H 5,53; N 14,16; mesurées: C 49,89; H 5,28; N 13,81. EI/MS (solide) m/z: 693,2 ([M+H]+; 100%); 691,2 ([M+H]+; 100%). EXEMPLE 2 SYNTHESE DU COMPOSE 5-t-Bu Br Nom\(% OtBu On a préparé le composé 5-'Bu à partir du composé 4 préparé selon le mode opératoire de l'exemple 1. Dans un ballon sous argon on mélange le composé 4 (0,18 g ; 0,37 mmol), 10 l'ester tert-butylique de l'acide iminodiacétique (0,20 g ; 0,81 mmol) et K2CO3 (0,20 g ; 1,47 mmol) dans un mélange de THF (10 mL)/CH3CN (20 mL) distillé. Le milieu réactionnel est chauffé à 50°C durant 14 heures, puis filtré. Le filtrat est concentré à sec. L'huile résultante est dissoute dans du dichlorométhane (100 mL), lavée avec de l'eau (3 x 100 mL) et une solution saturée de NaCl. Cette phase 15 organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification par chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 99,7:0,3) du produit brut permet d'obtenir le composé 5-'Bu (0,25 g ; 85%), sous forme d'une huile incolore. 1H RMN (CDC13, 200 MHz): S 8,42 (d; J = 2,5 Hz; 2 1-1); 8,00 (s; 2 H); 6,55 (d; J = 20 2,6 Hz; 2 H); 4,00 (s; 4 H); 3,48 (s; 8 H); 1,46 (s; 36 H). 136,2; 127,9; 111,9; 13C {1H} RMN (CDCI3, 200 MHz): 8 170,2; 153,7; 150,2; 108,7; 80,8; 55,2; 50,8; 28,0. IR (cm"1, ATR) : v 1732 (s) ; 1589 (s) ; 1575 (s) ; 1539 (m) ; 1465 (s) ; 1391 (s) ; 1367 (s). Analyses calculées pour C37H54BrN7O8 (804.78): C 55,22; H 6,76; N 12,18; 25 mesurées: C 54,92; H 6,57; N 11,68. 2935973 B5006FR 19 EI/MS (solide) m/z: 805,2 ([M+H]+; 100%); 803,3 ([M+H]+; 100%). EXEMPLE 3 SYNTHESE DU COMPOSE L1 On a préparé un composé L1 à partir d'un composé 6 selon le schéma 5 réactionnel suivant : TMS H H Br ~N N --N Na/ 0 CO2tBu CO2tBu CO2tBu ztBu IrN r CO2tBu CO2tBu CO2tBu CO2tBu 5-'Bu 7-tBu 8-`13u L1 Composé 7-`Bu Dans un tube de Schlenk on mélange le composé 5 -/Bu (0,20 g ; 0,25 mmol), du triméthylsilylacétylène (0,04 ml ; 0,31 mmol), [Pd(PPh3)2C12] (10,5 mg ; 0,02 10 mmol), du THF distillé (20 mL) et de la Et3N distillée (15 mL). Ce mélange est dégazé durant 30 min, puis on ajoute Cul (4,80 m; ; 0,03 mmol) à la solution dégazée. Le milieu réactionnel est agité à température ambiante durant 14 heures. Le solvant est concentré à sec et le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (100 mL), lavé avec de l'eau (3 x 100 mL), et une solution saturée 15 de NaCl. Cette phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification par chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 98:2) du produit brut permet d'obtenir le composé 7-`Bu (0,15 g ; 73%), sous forme d'une huile. 1H RMN (CDC13, 200 MHz): S 8,41 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 7,78 (s; 2 H); 6,50 (d; J = 20 2,6 Hz; 2 H); 4,00 (s; 4 H); 3,45 (s; 8 H); 1,43 (s; 36 H); 0,23 (s; 9 H). 13C {IH} RMN (CDC13, 200 MHz): S 170,3; 153,3; 150,0 ; 136,0; 127,7; 111,1; 108,4; 101,5; 100,6; 80,8; 55,2; 50,9; 28,1; 0,51. IR (cm-1, ATR): v 2167 (w; vc_c); 1732 (s); 1610 (s); 1553 (s); 1539 (m); 1464 (s); 1391 (s). B5006FR 2935973 20 Analyses calculées pour C42H63N7O8Si (882.1): C 61,36; H 7,72; N 11,93; mesurées: C 61,28; H 7,64; N 11,89. EI/MS (solide) m/z: 822,3 ([M]+; 100%). Composé 8-'Bu 5 Une solution de TBAF (1M dans du THF ; 0,20 ml ; 0,20 mmol) est ajoutée goutte à goutte sous argon à une solution du composé 7-tBu (0,14 g ; 0,17 mmol) dans du THF distillé (4 mL) refroidie à 0°C. Le milieu réactionnel est agité à cette température pendant 2 h, puis neutralisé avec de l'eau. Le solvant est évaporé à sec. Le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (100 mL), lavé 10 avec de l'eau (3 x 100 mL) et une solution saturée de NaCl. Cette phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. Le produit brut est purifié par chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 99,4:0,6). On obtient le composé 8-'Bu (0,10 g ; 81%). 1H RMN (CDC13, 200 MHz): 8 8,43 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 7,83 (s; 2 H); 6,54 (d; J = 15 2,6 Hz; 2 H); 4,00 (s; 4 H); 3,47 (s; 8 H); 3,35 (s; 1 H); 1,45 (s; 36 H). 13C { 1H} NMR (CDC13, 200 MHz): 8 170,3; 153,6; 150,1; 135,1; 127,8; 111,4; 108,6; 82,4; 80,9; 80,6; 55,3; 51,0; 28,1. IR (cm-1, ATR): v 2112 (w; vcc); 1732 (s); 1608 (s); 1557 (s); 1536 (m); 1465 (s); 1391 (s). 20 Analyses calculées pour C39H55N7O8 (749.9): C 62,46; H 7,39; N 13,07; mesurées: C 62,19; H 7,18; N 12,68. EI/MS (pur) m/z: 749,3 ((Mn 100%). Ligand L1 Le composé 8-'Bu (0,03 g ; 0,04 mmol) est dissous dans du dichlorométhane 25 (1 mL) et du TFA (1 mL), puis le mélange est agité à température ambiante pendant 2 h. Le solvant est évaporé à sec et l'huile résultante est triturée dans du diéthyléther. On obtient le composé L1 avec un rendement quantitatif, sous forme d'un précipité blanc. 1H RMN (D6-DMSO, 300 MHz): 8 8,86 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 7,67 (s; 2 H); 6,57 (d; 30 J = 2,6 Hz; 2 H); 4,80 (s; 1 H) ; 3,94 (s; 4 H); 3,47 (s; 8 H). 2935973 B5006FR 21 t3C {'H} NMR (DMSO, 300 MHz): S 172,7; 154,1; 150,3; 135,5; 129,6; 110,7; 109,3; 80,9; 80,7; 55,3; 51,1. IR (cm'', ATR): v 2111 (w; vc_c); 1609 (s); 1558 (s); 1534 (m); 1465 (s); 1389 (s); 1275 (w). 5 ESIIMS (mode négatif, McOH/H20) m/z: 261,6 ([M-2H+]2-; 80%). EXEMPLE 4 SYNTHESE DU COMPOSE 8-Et On a préparé un composé 8-Et selon le mode opératoire de l'exemple 3, mais en utilisant le composé 5-Et au lieu du composé 5-'Bu TMS H Br O Et CO2Et 0 Et CO2Et r-N---..l CO2Et CO2Et CO2Et CO2Et -\ CO2Et CO2Et CO2Et CO2Et 10 5-Et Composé 7-Et 7-Et 8-Et Dans un tube de Schlenk on mélange le composé 5-Et (0,70 g ; 0,25 mmol), du triméthylsilylacétylène (0,17 ml ; 1,21 mmol), [Pd.(PPh3)2C12] (42,5 mg ; 0,06 mmol), du THF distillé (20 mL) et de la Et3N distillée (10 mL). Ce mélange est 15 dégazé durant 30 min, puis on ajoute du Cul (19,2 mg ; 0,10 mmol) à la solution dégazée. Le milieu réactionnel est agité à température ambiante durant 14 heures. Le solvant est concentré à sec et le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (100 mL), lavé avec de l'eau (3 x 100 mL), et une solution saturée de NaCl. Cette phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La 20 purification par chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 98:2) du produit brut permet d'obtenir le composé 7-Et (0,50 g ; 70%), sous forme d'une huile. 2935973 B5006FR 22 'H RMN (CDC13, 200 MHz): S 8,45 (d; J = 2,5 Hz; 2 H); 7,81 (s; 2 H); 6,53 (d; J-2,6 Hz; 2 H); 4,18 (q; J = 7,2 Hz; 8 H); 4,04 (s; 4 H); 3,62 (s; 8 H); 1,27 (t; J = 7,1 Hz; 12 H); 0,27 (s; 9 H). 13C {'H} RMN (CDC13, 200 MHz): S 171,1; 153,1; 150,0; 136,2; 128,0; 111,3; 5 108,5; 101,5 (2C); 60,5; 54,6; 51,4; 14,2; 0,40. IR (cm"', ATR): v 2162 (w; C=C); 1736 (s); 1610 (s):, 1553 (s); 1464 (s); 1389 (s); 1328 (w). EI/MS (pur) m/z: 709,2 ([M]+; 100%). Composé 8-Et 10 Une solution de TBAF (1M dans du THF ; 0,85 ml ; 0,85 mmol) est ajoutée goutte à goutte sous argon à une solution du composé 7-Et (0,50 g ; 0,17 mmol) dans du THF distillé (15 mL) refroidie à 0°C. Le milieu réactionnel est agité à cette température pendant 2 h, puis neutralisé avec de l'eau. Le solvant est évaporé à sec. Le résidu obtenu est dissous dans du dic1hlorométhane (100 mL), lavé 15 avec de l'eau (3 x 100 mL) et une solution saturée de NaCl. Cette phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. Le produit brut est purifié par chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 98:2) permettant d'obtenir le composé 8-Et (0,37 g ; 83%). 'H RMN (CDC13, 300 MHz): 8 8,45 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 7,85 (s; 2 H); 6,54 (d; J = 20 2,6 Hz; 2 H); 4,18 (q; J = 7,1 Hz; 8 H); 4,04 (s; 4 H); 3,62 (s; 8 H); 3,36 (s; 1 II); 1,27 (t; J= 7,2 Hz; 12 H). 13C {'H} RMN (CDC13, 300 MHz): 6 171,0; 153,3; 150,1; 135,2; 127,9; 111,6; 108,6; 82,5; 80,6; 60,5; 54,6; 51,4; 14,2. IR (cm"', ATR) : v 2111 (w; vcc); 1734 (s); 1609 (s); 1556 (s); 1536 (m); 1465 (s); 25 1389 (s). Analyses calculées pour C3,H39N7O8 (637.7): C 58,39; FI 6,16; N 15,38; mesurées: C 58,03; H 5,95; N 15,20. EI/MS (pur) m/z: 637,2 ([M]+; 100%). B5006FR 2935973 23 EXEMPLE 5 SYNTHESE DU COMPOSE L2 Un composé L2 a été préparé à partir du composé 5-Et selon le schéma réactionnel suivant : rùNù1 rN CO2Et CO2Et CO2Et CO2Et 10 rrv-1 CO2Na CO2Na CO2Na CO2Na L2 N N r--N--I rryù.1 CO2Et CO2Et CO2Et CO2Et 5 5-Et + Composé 10 On dissous 5-Et (120 mg ; 0,173 mmol) et le p-toluylacéthylène (24,2 mg ; 0,208 mmol) dans 10 ml de THF anhydre et 6 ml de triethylamine sous atmosphère d'argon. [Pd(PPh3)2C12] (7,2 mg, 0,010 mmol) est ajouté. La solution est dégazée 10 pendant 30 minutes puis Cul (3,2 mg, 0,017 mmol) est ajouté. La solution est chauffée à 50°C pendant 24 heures. La solution est concentrée sous pression réduite pour donner une huile brune. L'huile résiduelle est dissoute dans 30 ml de CH2C12 et la phase organique est lavée avec 3 x 15 ml d'eau, séchée sur Na2SO4 et évaporée à sec. 10 (80 mg, 63%) est isolé par chromatographie sur colonne (SiO2, 15 CH2C12/MeOH, 99,75/0,25 à 99,5/0,5) sous forme d'huile transparente. 1H RMN (CDC13, 300 MHz) : 8 1,26 (t ; J= 7,2 Hz ; 12H) ; 2,40 (s ; 3H) ; 3,62 (s ; 8H) ; 4,04 (s ; 4H) ; 4,17 (q ;J= 7,2 Hz ; 8H) ; 6,5 (d ; J= 2,5 Hz ; 2H) ; 7,18 (d ;J = 7,9 Hz ; 2H) ; 7,44 (d ; J= 7,9 Hz ; 2H) ; 7,86 (s ; 2H) ; 8,45 (d ; J= 2,5 Hz ; 2H). 13C RMN (CDC13, 300 MHz) : 8 14,1 ; 21,5 ; 51,3 ; 54,5 ; 60,4 ; 86,0 ; 95,2 ; 108,4 ; 20 110,8 ; 118,7 ; 127,9 ; 129,2 ; 131,9 ; 136,6 ; 139,7 ; 149,9 ; 152,9 ; 171,0. IR (ATR, cm-i) : 3126 (w) ; 2981 (w) ; 2936 (w) ; 2228 (w) ; 2207 (w) ; 1738 (s) ; 1606 (s) ; 1553 (s) ; 1538 (m) ; 1513 (w) ; 1464 (s) ; 1389 (s) ; 1299 (w) ; 1259 (w) ; 1188 (s) ; 1153 (s) ; 1096 (w) ; 1028 (s). 2935973 B5006FR 24 Ligand L2 On dissout le composé 10 (80 mg, 0,11 mmol) dans 20 ml d'un mélange méthanol/eau (1/1), et on ajoute NaOH (22 mg, 0,55 mmol). Le mélange est chauffé à 60°C pendant 3 heures. Le solvant est évaporé pour obtenir un résidu jaune pâle. 5 Le résidu est dissous dans 0,5 ml d'eau et 4 ml de méthanol. Du THF est ajouté progressivement pour faire précipiter L2 sous forme d'une poudre blanche (66,5 mg, 86%). 1H RMN (D20, 300 MHz) : S 2,15 (s; 3H); 3,01 (s; 8H); 3,62 (s; 4H); 6,39 (s; 2H); 7,02 (d; J = 7,5 Hz; 2H); 7,26 (d; J = 7,5 Hz; 2H); 7,43 (s; 2H); 8,34 (s; 2H). 10 13C RMN (D20, 300 MHz) : 6 20,8; 25,0; 50,7; 51,3; 57,8; 85,8; 95,5; 109,3; 110,4; 117,7; 127,3; 129,2; 132,0; 136,5; 140,7; 178,9. IR (ATR, cm-1) : 3365 (br); 2926 (w); 2210 (w); 1586 (s); 1553 (s); 1532 (w); 1466 (m); 1405 (s); 1327 (s); 1258 (m); 1211 (w); 1123 (m); 1049 (m); 1021 (m). ESI/MS (mode négatif, McOH/H20) m/z: 680.1 ([M-Na+]-; 70%) ; 211.3 ([M- 15 3Na+]3-; 100%). Analyses calculées pour C30H25N7O8Na4.4H20 : C 46,46; H 4,29; N 12,64; mesurées: C 46,30; H 3,85; N 12,43. EXEMPLE 6 SYNTHESE DU COMPOSE L3 20 Le composé L3 a été préparé à partir du composé 5-Et selon le schéma réactionnel suivant : B5006FR 2935973 25 Br OEt OH rO rO O~ O HOC N O Et CO2Et O Et O2Et L3 5Et CO2H CO2H CO2H CO2H Composé 12 À une solution de 11 (1,77 ml, 30 mmol) dans 80 ml de THF anhydre, sous atmosphère d'argon, on ajoute du NaH (1,32 mg, 60% dans l'huile minérale, 5 33 mmol). La solution est laissée sous agitation pendant 1 heure à température ambiante. Le bromoacétate d'éthyle (4,02 ml, 35 mmol) on ajoute. Le mélange est agité à température ambiante pendant 12 heures. Le solvant est évaporé pour donner une huile jaune. L'huile est dissoute dans 40 ml d'éther éthylique. La phase organique est lavée avec 3 x 20 ml d'eau, puis séchée sur Na2SO4, et concentrée. 12 10 est isolé sous forme d'huile incolore (2 g, 47%) après purification par chromatographie sur colonne (SiO2, Ether de pétrole/diethylether, 100/0 à 96/4), 1H RMN (CDC13, 300 MHz) : S 1,26 (t ; J = 7.1 Hz ; 3H) ; 2.45 (t ; J = 2,4 Hz ; 1H) ; 4,15 (s ; 2H) ; 4,19 (q ; J= 7,1 Hz ; 2H) ; 4,27 (d ; J= 2,4 Hz ; 2H). 13C RMN (CDC13, 300 MHz) : S 14,1 ; 58,2 ; 60,9 ; 66,2 ; 75,5 ; 78,5 ; 169,8. 15 IR (ATR, cm-1) : 3278 (m); 2984 (w); 2909 (w); 2118 (w); 1748 (s); 1448 (m); 1429 (m); 1382 (m); 1370 (m); 1349 (m); 1275 (m); 1249 (m); 1206 (s); 1116 (s); 1025 (s). EI/MS (pur) m/z: 142,0 (M +.; 100%). Analyses calculées pour C7H1003 : C 59,14; H 7,09; mesurées: C 58,78; H 6,84. B5006FR 2935973 26 Composé 13 On dissoust 5-Et (300 mg, 0,43 mmol) et 12 (148 mg, 1,04 mmol) dans 20 ml de THF anhydre et 15 ml de triéthylamine, sous atmosphère d'argon. [Pd(PPh3)2C12] (18 mg, 0,026 mmol) est ajouté, la solution est dégazée pendant 30 5 minutes puis Cul (8,2 mg, 0,043 mmol) est ajouté. La solution est chauffée à 50°C pendant 24 heures. La solution est concentrée sous pression réduite pour donner une huile brune. L'huile résiduelle est dissoute dans 30 ml de CH2C12 et la phase organique est lavée avec 3 x 15 ml d'eau, puis séchée sur Na2SO4, et concentrée. 13 (130 mg, 40%) est isolé par chromatographie sur colonne (SiO2, CH2C12/MeOH, 10 100/0 à 98/2) sous forme d'huile transparente. iH RMN (CDC13, 300 MHz) : 8 1,25 (t ; J = 7,2 Hz ; 12H) ; 1,29 (t ; J = 7,2 Hz ; 3H) ; 3,6 (s ; 8H) ; 4,0 (s ; 4H) ; 4,16 (q ; J = 7,2 Hz ; 8H) ; 4,24 (q ; J = 7,2 Hz ; 2H) ; 4,25 (s ; br ; 2x2H) ; 6,51 (d ; J= 2,6 Hz ; 2H) ; 7,8 (s ; 2H) ; 8,43 (d ; J= 2,6 Hz ; 2H). 15 13C RMN (CDC13, 300 MHz) : b 14,1; 14,2; 51,4; 54,6; 58,7; 60,5; 61,1; 66,5; 84,4; 89,6; 108,6; 111,1; 127,9; 135,4; 150,1; 153,3; 169,7; 171,0. IR (ATR, cm-1) : 3126 (w); 2982 (w); 2935 (w); 2907 (w); 1735 (s); 1610 (m); 1555 (m); 1536 (m); 1464 (m); 1388 (m); 1269 (w); 1188 (s); 1152 (s); 1118 (s); 1027 (s). 20 EI/MS (pur) m/z: 754,2 ([M+H+]; 100%). Analyses calculées pour C36H47N7O11 C 57,36; H 6,28; N 13,01; mesurées: C 56,94; H 5,67; N 12,75. Ligand L3 On dissout le composé 13 (130 mg, 0,17 mmol) dans 20 ml de méthanol. 25 Une solution de NaOH (41 mg, 1,03 mmol) dans 4 ml d'eau est ajoutée. Le mélange est chauffé à 60°C pendant 4 heures. Les solvants sont évaporés pour donner une huile brune. L'huile est dissoute dans 10 ml d'eau et le pH remonté à 4-5 par ajout d'une solution 0,1 M d'HCI, résultant dans la formation d'un précipité, qui est isolé par centrifugation et séché pour donner L3 (67 mg, 64%). B5006FR 2935973 27 'H RMN (d6-DMSO, 300 MHz) : S 3.36 (s; 8H); 3,8 (s; 4H); 4,1 (s; 2H); 4,5 (s; 2H); 6,5 (s; 2H); 7,6 (s; 2H); 8,7 (s; 2H); 12,4 (s; 4H). 13C RMN (d6-DMSO, 300 MHz): S 54,3; 57,1; 58,7; 66,6; 86,4; 90,3; 105,3; 115,1; 130,7; 136,4; 141,8; 151,8; 173,0; 173,2. 5 IR (ATR, cm-l) : 3410 (br); 2923 (w); 2852 (w); 1729 (s); 1611 (s); 1558 (m); 1457 (s); 1388 (s); 1217 (s); 1109 (s); 1055 (s). EI/MS (neat) m/z : 614.1 ([M+H]+; 100%) EXEMPLE 7 SYNTHESE DU COMPOSE L4 10 Le composé L4 a été préparé à partir du composé 5-Et selon le schéma réactionnel suivant : Br N rv -1 C Na CO2Na O Na O2Na N rv 02Et CO2Et O Et O2Et 14 Composé 15 15 L4 Dans un tube de Schlenk on mélange 5-Et (0,14 g ; 0,20 mmol), l'acide-6- 15 heptynoïque 14 (0,03 ml ; 0,24 mmol), [Pd(PPh3)2Ck] (8,40 mg ; 0,01 mmol), du THF distillé (30 mL) et de la Et3N distillée (12 mL). Ce mélange est dégazé durant 30 min, ensuite on ajoute du Cul (3,80 mg ; 0,02 mmol) à la solution dégazée. Le milieu réactionnel est chauffé à 50°C durant 14 heures. Le solvant est concentré à sec et le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (100 mL), lavé avec de 20 l'eau (3 x 100 mL), et une solution saturée de NaCl. Cette phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification par chromatographie B5006FR 2935973 28 sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 98:2) du produit brut permet d'obtenir le composé 15 (0,11 g ; 77%), sous forme d'une huile. 'H RMN (CDC13, 300 MHz): S 8,44 (d; J = 2,4 Hz; 2 H); 7,77 (s; 2 H); 6,51 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 4,21 (q; J = 7,2 Hz; 8 H); 4,05 (s; 4 H); 3,63 (s; 8 H); 2,49 (t; J = 7,2 5 Hz; 2 H); 2,44 (t; J = 7,4 Hz; 2 H); 1,90-1,81 (m; 2 H); 1,75-1,65 (m; 2 H); 1,27 (t; J = 7,1 Hz; 12 H). 13C {'H} RMN (CDC13, 300 MHz): 8 171,2; 171,1; 152,8; 150,0; 137,2; 127,9; 111,3; 108,4; 96,2; 79,0; 60,6; 54,6; 51,3; 33,3; 27,5; 23,9; 19,2; 14,2. IR (cm-I, ATR) : v 2235 (w; vc=c); 1733 (s); 1610 (s); 1536 (m); 1464 (s); 1388 (s); 10 1261 (m). Analyses calculées pour C36H47N7010 (737.8): C 58,60; H 6,42; N 13,29; mesurées: C 58,42; H 6,15; N 12,89. ESI/MS (mode négatif, MeOH/H20) m/z: 736,5 ([M-H `]-; 100%). Ligand L4 15 Une solution aqueuse (4 mL) de NaOH (40 mg ; 1,03 mmol) est additionnée à une solution du composé 15 (0,13 g ; 0,17 mmol) dans du méthanol (20 mL). La solution est chauffée à 60°C durant 3 h. Le solvant est évaporé à sec et le résidu est dissous dans un minimum d'eau et le ligand est précipité par addition de THF, de MeOH puis de Et2O. Le solide est isolé par centrifugation et séché sous vide pour 20 donner le ligand L4 (0,11 g ; 80%), sous forme d'un précipité brun pâle. 'H RMN (D20, 300 MIIz): 8 8,64 (br s; 2 H); 7,72 (s; 2 H); 6,70 (d; J = 2,5 Hz; 2 H); 3,96 (br s; 4 H); 3,30 (br s; 8 H); 2,59 (t; J = 6,9 Hz; 2 H); 2,29 (t; J = 7,1 Hz; 2 H); 1,97-1,71 (m; 4 H). 13C {'H} RMN (D20, 300 MHz): 8 183,9; 179,4; 153,8; 150,1; 138,1; 130,2; 112,2; 25 109,7; 98,9; 78,3; 58,1; 50,8; 37,4; 27,8; 25,3; 19,0. IR (cm'', ATR) : v 2161 (w; vc_c); 1610 (s); 1410 (s); 1327 (m). Analyses calculées pour C28H26N7Na5O10.4H20: C 41,64; H 4,24; N 12,14; mesurées: C 41,52; H 4,02; N 11,79. ESI/MS (Mode négatif, MeOH/H20) m/z: 222,2 ([M-3Na+]3-; 60%). B5006FR 2935973 29 EXEMPLE 8 SYNTHESE DU COMPOSE L5 Le composé L5 a été préparé selon le schéma réactionnel suivant : N iv r- -1 O Et CO2Et O Et CO2Et OEt n ONa 8-Et 16 N "' N O Et CO2Et CO Et CO2Et CO2Na CO2Na CO2Na CO2Na 17 L5 5 Le composé 8-Et a été préparé selon le procédé de l'exemple 4. Composé 17 Dans un tube de Schlenk on mélange 8-Et (60 mg ; 0,09 mmol), du 4-iodobenzoate d'éthyle 16 (30 mg ; 0,09 mmol), du THF distillé (8 mL) et de la Et3N distillée (4 mL). Ce mélange est dégazé durant 30 min et [Pd(PPh3)4] 10 (10,5 mg ; 0,01 mmol) est ajouté à la solution dégazée. Le dégazage est poursuivit pendant 5 min puis la solution est chauffée à 60°C pendant 14 h. Le solvant est évaporé à sec et le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (100 mL), lavé avec de l'eau (3 x 100 mL) et une solution saturée de NaCl. Cette phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification par 15 chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 99:1) du produit brut permet d'obtenir le composé 17 (40 mg ; 55%), sous forme d'huile incolore. 1H RMN (CDC13, 300 MHz): 8 8,48 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 8,07 (d; J = 8,0 Hz; 2 H); 7,91 (s; 2 H); 7,63 (d; J = 8,0 Hz; 2 H); 6,56 (d; J = 2,6 Hz; 2 H) ; 4,40 (q; J = 7,2 Hz; 2 H); 4,18 (q; J = 7,2 Hz; 8 H); 4,06 (s; 4 H); 3,64 (s; 8 H); 1,41 (t; J = 7,1 Hz; 20 3 H); 1,28 (t; J = 7,3 Hz; 12 H). B5006FR 30 13C {1H} RMN (CDC13, 300 MHz): 8 171,0; 153,2; 150,1; 135,8; 131,9; 130,9; 129,6; 128,0; 126,3; 111,0; 108,6; 89,0; 61,2; 60,5; 54,6; 51,4; 14,3; 14,2. IR (cm-', ATR): v 2229 (w; vc-c); 1721 (s); 1608 (s); 1553 (s); 1537 (m); 1464 (s); 1389 (s). EI/MS (solide) m/z: 785,2 ([M]+: 100%). Ligand L5 Une solution aqueuse (2 mL) de NaOH (10 mg ; 0,28 mmol) est ajoutée à une solution du composé 17 (40 mg ; 0,05 mmol) dans du méthanol (5 mL). Le milieu réactionnel est chauffé à 60°C durant 3 h. Le solvant est évaporé à sec et le résidu est dissous dans un minimum d'eau et L5 est précipité par ajout de THF, MeOH et Et20. Le précipité est isolé par centrifugation et séché sous vide pour obtenir L5 (0,03g ; 86%). 'H RMN (D20, 300 MHz): 8 8,58 (br s; 2 H); 7,92-7,65 (m; 6 H); 6,63 (br s; 2 H); 3,88 (s; 4 H); 3,28 (s; 8 H). 13C {'H} RMN (D20, 300 MHz): 8 178,9; 174,5; 153,1; 149,3; 137,2; 136,2; 132,0; 129,6; 128,9; 123,5; 110,7; 109,5; 94,7; 87,5; 58,0; 48,9. IR (cm"', ATR): v 2220 (w; vc_c); 1582 (s); 1550 (s); 1 534 (w); 1465 (m); 1384 (s); 1327 (m); 1260 (w). ESI/MS (mode négatif, MeOH/H20) m/z: 354,4 ([M-2Na+]2-; 80%); 228,5 ([M-20 3Na+]3 25%). EXEMPLE 9 SYNTHESE DU COMPOSE LE Le composé L6 a été préparé selon un procédé correspondant au schéma réactionnel suivant : B5006FR 2935973 31 Br r C-1 0 2 Et 02Et CO Et 02Et 5-Et O^,OEt OOEt CO2Et CO2Et CO2Et CO2EI CO2Na CO2Na CO2Na CO2Na 22 L6 TMS OH OH O~OEt 1 18 TMS 19 Composé 19 Dans un tube de Schlenk on mélange le 4-iodophenol 18 (0,5 g ; 2,27 mmol), du triméthylsilylacétylène (0,4 ml ; 2,72 mmol), du Pd(PPh3)2C12 (95,5 mg ; 5 0,14 mmol), du THF distillé (15 mL) et de la Et3N distillée (8 mL). Le mélange est dégazé durant 30 min, et Cul (43,2 mg ; 0,23 mmol) ajouté à la solution dégazée. Le milieu réactionnel est agité à température ambiante durant 14 heures. Le solvant est concentré à sec et le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (100 mL), lavé avec de l'eau (3 x 100 mL), et une solution saturée de NaCl. Cette phase 10 organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification par chromatographie sur silice (éther de pétrole/CH2C12, f 0:50 à 00:100) du produit brut permet d'obtenir le composé 19 (0,34 g ; 78%), sous forme d'un solide brun. 1H RMN (CDC13, 300 MHz): 8 7,39-7,34 (in; 2 H); 5,78-6,73 (m; 2 H); 6,15 (s; 1 H); 0,27 (s; 9 H). 15 13C {1H} RMN (CDC13, 300 MHz): S 155,6; 133,7; 115,4; 115,3; 105,5; 92,9; 0,05. IR (cm-1, ATR): v 2161 (s; vc_c); 1882 (s); 1608 (s); 1590 (m); 1545 (w); 1507 (s); 1434 (m). Analyses calculées pour C11H14OSi.4H20: C 69,42; H 7,41; mesurées: C 69,13; H 7,22. EI/MS (solide) m/z: 190,1 ([M]+; 100%). B5006FR 2935973 32 Composé 20 A une suspension de NaH (60% dans l'huile ; 0,07 g ; 1,87 mmol) dans du THF distillé (10 mL) refroidie à 0°C, on ajoute sous argon le composé 19 (0,32 g ; 1,70 mmol). A ce mélange on ajoute à température ambiante du 4-bromobutyrate 5 d'éthyle (0,49 ml ; 3,40 mmol) et une quantité catalytique de NaI. La solution est portée à 50°C pendant deux nuits. Le solvant est évaporé à sec et le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (100 mL), lavé avec de l'eau (3 x 100 mL), et une solution saturée de NaCl. Cette phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification par chromatographie sur silice (éther de 10 pétrole/CH2C12, 90:10 à 00:100) du produit brut permet d'obtenir le composé 20 (0,19 g ; 37%), sous forme d'une huile incolore. 1H RMN (CDC13, 300 MHz): 8 7,37 (d; J = 8,8 Hz; 2 H); 6,77 (d; J = 8,8 Hz; 2 H); 4,12 (q; J = 7,1 Hz; 2 H); 3,96 (t; J = 6,0 Hz; 2 H); 2,48 (t; J = 7,3 Hz; 2 H); 2,07 (q; J = 6,7 Hz; 2 H); 1,23 (t; J = 7,1 Hz; 3 H); 0,23 (s; 9 H). 15 13C { 1H} RMN (CDC13, 300 MHz): 8 172,9; 158,9; 133,4; 115,2; 114,2; 105,1; 92,3; 66,6; 60,3; 30,6; 24,4; 14,1; 0,03. IR (cm"1, ATR) : v 2155 (s; vc-c); 1893 (w); 1733 (s); 1605 (s); 1569 (w); 1506 (s); 1473 (m). Analyses calculées pour C17H24O3Si : C 67,06; H 7,95. Mesurées: C 66,75 ; H 7,78. 20 EI/MS (solide) m/z: 305,1 ([M+H]+; 100%). Composé 21 Une solution de TBAF (1M dans du THF), (0,67 ml ; 0,67 mmol) est ajoutée goutte à goutte sous argon à une solution du composé 20 (0,17 g ; 0,56 mmol) dans du THF distillé (5 mL) refroidie à 0°C. Le milieu réactionnel est agité pendant 1 h à 0°C puis durant 2 h à température ambiante, puis neutralisé par de l'eau. Le solvant est évaporé à sec. Le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (100 mL), lavé avec de l'eau (3 x 100 mL) et une solution saturée de NaCl. Cette phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. Le produit brut est purifié par chromatographie sur silice (éther de pétrole/CH2C12, 2935973 B5006FR 33 50:50 à 00:100) permettant d'obtenir le composé 21 (0,13 g) avec un rendement quantitatif, sous forme d'un solide blanc. 1H RMN (CDC13, 300 MHz): S 7,39 (d; J = 8,8 Hz; 2 H); 6,80 (d; J = 8,8 Hz; 2 H); 4,13 (q; J = 7,2 Hz; 2 H); 3,97 (t; J = 6, Hz; 2 H); 3,00 (s; 1 H); 2,49 (t; J = 7,1 Hz; 5 2 H); 2,08 (q; J = 6,7 Hz; 2 H); 1,24 (t; J = 7;1 Hz; 3 H). 13C {1H} RMN (CDC13, 300 MHz): b 172,9; 159,1; 133,4; 114,3; 114,1; 83,5; 75,8; 66,6; 60,3; 30,6; 24,4; 14,1. IR (cm-1, ATR): v 2107 (w; vc-c); 1722 (s); 1607 (s); 1572 (m); 1511 (s); 1470 (s); 1440 (m). 10 Analyses calculées pour C14H16O3 : C 72,39 ; H 6,94. Mesurées: C 72,20 ; H 6,73. EI/MS (solide) m/z: 233,1 ([M+H]+; 100%). Composé 22 Dans un tube de Schlenk on mélange le composé 5-Et (0,19 g ; 0,27 mmol), le composé 21 (0,08 g ; 0,33 mmol), [Pd(PPh3)2C12] (11,4 mg ; 0,02 mmol), du THF 15 distillé (10 mL) et de la Et3N distillé (5 mL). Ce mélange est dégazé durant 30 min, puis Cul (5,20 mg ; 0,03 mmol) est ajouté à la solution dégazée. Le milieu réactionnel est porté à 50°C toute la durant 14 heures. Le solvant est concentré à sec et le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (100 mL), lavé avec de l'eau (3 x 100 mL), et une solution saturée de NaCl. Cette phase organique est 20 séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification du produit brut par chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 98:2) permet d'obtenir le composé 22 (0,12 g ; 53%), sous forme d'huile. 1H RMN (CDC13, 300 MHz): S 8,45 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 7,83 (s; 2 H); 7,47 (d; J = 8,4 Hz; 2 H); 6,87 (d; J = 8,8 Hz; 2 H); 6,52 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 4,21-3,99 (m; 16 25 H); 3,61 (s; 8 H); 2,50 (t; J = 7,2 Hz; 2 H); 2,10 (q; J = 6,7 Hz; 2 H); 1,28-1,20 (m; 15 H). 13C { 1H} NMR (CDC13, 300 MHz): S 173,0; 171,0; 159,7; 152,9; 149,9; 136,7; 133,6; 127,9; 114,6; 113,9; 110,7; 108,3; 95,2; 85,6; 66,8; 60,4; 60,3; 54,5; 51,3; 30,6; 24,4; 14,1. B5006FR 2935973 34 IR (cm-', ATR): v2204 (m; vc-c); 1731 (s); 1599 (s):, 1552 (s); 1538 (m); 1512 (m); 1464 (s). EI/MS (solide) m/z: 843,2 ([M]+; 100%). Ligand L6 5 Une solution aqueuse (2 mL) de NaOH (30,7 mg ; 0,77 mmol) est additionnée à une solution du composé 22 (0,11 g ; 0.13 mmol) dans du méthanol (5 mL). Le milieu réactionnel est chauffé à 60°C durant 3 h. Le solvant est évaporé à sec et le résidu est dissous dans le minimum de H2O. L'addition de THF, de MeOH et de Et20 permet d'obtenir un précipité qui est isolé par centrifugation et séché 10 sous vide pour donner L6 (90,1 mg ; 87%), sous forme d'un précipité. 'H RMN (D20, 300 MHz): S 8,37 (br s; 2 H); 7,37 (s; 2 H); 7,31 (d; J = 7,9 Hz; 2 H); 6,75 (d; J = 7,9 Hz; 2 H); 6,52 (br s; 2 H); 3,74 (s; 4 H); 3,19 (s; 8 H); 2,36 (t; J = 7,4 Hz, 2 H); 2,05-2,00 (m; 2 H); 1,86-1,84 (m; 2 H). 13C {'H} RMN (D20, 300 MHz): S 183,2; 179,6; 159,9; 153,7; 149,6; 137,2; 134,5; 15 130,0; 115,2; 113,9; 110,7; 109,9; 96,3; 86,2; 68,4; 58,6; 51,4; 34,5; 26,1. IR (cm-', ATR): v 2201 (s; vc_c); 1590 (s); 1554 (w); 1511 (m); 1408 (s); 1336 (m); 1248 (m). Analyses calculées pour C33H34N7Na5O14.3H20: C 45,68 ; H 3,95 ; N 11,30. Mesurées: C 45,62 ; H 3,75 ; N 11,20. 20 ESI/MS (mode négatif, MeOH/H20) m/z: 248,0 ([M-3Na]3 100%) ; 180,0 ([M-4Na]4"; 20%). EXEMPLE 10 SYNTHESE DU COMPOSE L7 Un composé L7 a été préparé à partir du composé 8-Et selon le schéma 25 réactionnel suivant : B5006FR N O Et 02Et CO2Et CO2Et rN~ r CO2Na CO2Na CO2Na CO2Na N C Ett O2Et CO Et CO2Et 8-Et Br 23 Composé 24 24 L7 Dans un tube de Schlenk on mélange 8-Et (0,08 g ; 0,13 mmol), 23 (0,06 g ; 0,14 mmol), du toluène distillé (10 mL) et de la Et3N distillée (5 mL). Ce mélange est dégazé durant 30 min et [Pd(PPh3)4] (14,4 mg ; 0,01 mmol) est ajouté à la solution dégazée. La solution est dégazée pendant 5 min puis chauffée à 60°C durant 14 heures. Le solvant est évaporé à sec et le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (100 mL), lavé avec de l'eau (3 x 100 mL) et une solution saturée de NaCl. Cette phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification du brut par chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 99:1 à 95:5) puis sur alumine (CH2C12/MeOH, 100:00 à 99,5:0,5) permet d'obtenir le composé 24 (13,2 mg ; 11%), sous forme d'une huile. 1H RMN (CDC13, 300 MHz): S 8,47 (d; J = 2,5 Hz; 2 H); 7,87 (s; 2 H); 7,16 (d; J = 7,7 Hz; 1 H); 7,08 (s; 1 H); 6,86 (d; J = 8,2 Hz; 1 H); 6,54 (d; J = 2,4 Hz; 2 H); 15 4,22-3,64 (m; 40 H); 1,27 (t; J = 7,1 Hz; 12 H). '3C {'H} RMN (CDCI3, 300 MHz): S 171,0; 153,0; 150,4; 150,0; 148,6; 136,7; 127,9; 126,0; 117,0; 114,3; 113,3; 110,8; 108,4; 95,4; 85,6; 71,0; 70,8; 70,7; 69,5; 69,1; 69,0; 60,5; 54,5; 53,4; 51,4; 14,2. EI/MS (solide) m/z: 948,2 ([M]+; 100%). 20 IR (cm-', ATR): 1737 (s) ; 1608 (s) ; 1596 (s) ; 1551 (s) ; 1535 (m) ; 1515 (s). B5006FR 2935973 36 Ligand L7 Une solution aqueuse (2 mL) de NaOH (5,2 mg ; 0,13 mmol) est ajoutée à une solution de 24 (24,7 mg ; 0,03 mmol) dans du méthanol (7 mL). Le milieu réactionnel est chauffé à 60°C durant 3 h. Le solvant est évaporé à sec et le résidu 5 est dissous dans un minimum d'eau et précipité par ajout de THF, de MeOH et de Et2O. Le solide est isolé par centrifugation, puis séché pour donner L7 (0,02 g ; 83%), sous forme d'un précipité jaune. 'H RMN (D20, 400 MHz, tous les pics sont larges): S 8,47 (s; 2 H); 7,49-6,60 (m; 7 H); 3,95 (m; 32 H). 10 ESI/MS (Mode négatif, MeOH/H20) m/z: 285,0 ([M-3Na]3-"; 100%). IR (cm-1, ATR): 2208 (w) ; 1732 (w) ; 1594 (s) ; 1552 (m) ; 1515 (m) ; 1463 (s) ; 1433 (s). EXEMPLE 11 SYNTHESE DU COMPOSE L8 Le composé L8 a été préparé selon le schéma réactionnel suivant : Br N IN Ett 02Et CO Et CO2Et 5-Et 25 + CO2Na CO2Na CO2Na CO2Na L8 rN N rv rù COZEt lr Et COZEt r 26 Composé 26 Dans un tube de Schlenk on mélange 5-Et (0,29 g ; 0,43 mmol), la 4- éthynyl-2,2'-6,2"-terpyridine 25 (0,13 g ; 0,05 mmol), [Pd(PPh3)2C12] (17,9 mg ; 0,03 mmol), du THF distillé (12 mL) et de la Et3N distillée (6 mL). Le mélange est dégazé par bullage d'argon durant 30 min et Cul (8,10 mg ; 0,43 mmol) est ajouté à la solution dégazée. Le milieu réactionnel est chauffé à 50°C durant 14 heures. Le solvant est concentré à sec et le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane B5006FR 2935973 37 (100 mL), lavé avec de l'eau (3 x 100 mL), et une solution saturée de NaCl. Cette phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification par chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 97:3) du produit brut permet d'obtenir le composé 26 (0,12 g ; 32%), sous forme d'huile. 5 1H RMN (CDC13, 300 MHz): 8 8,74 (d; J = 3,9 Hz; 2 H); 8,63-8,61 (m; 4 H); 8,48 (d; J = 2,5 Hz; 2 H); 7,95 (s; 2 H); 7,88 (td; J = 7,7 Hz; J = 1,6 Hz; 2 H) ; 7,39-7,35 (m; 2 H); 6,57 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 4,20 (q; J = 7,2 Hz; 8 H); 4,08 (s; 4 H); 3,66 (s; 8 H); 1,29 (t; J = 7,2 Hz; 12 H). '3C {'H} RMN (CDC13, 400 MHz): 8 170,9; 155,6; 155,2; 153,1; 150,1; 149,1; 10 136,8; 135,2; 131,7; 127,8; 124,0; 122,9; 121,1; 111,1; 108,5; 92,1; 90,0; 60,4; 54,5; 51,3; 14,1. EI/MS m/z: 869,5 ([M+H]+"; 100%). IR (cm-', ATR): 2221 (w) ; 1736 (s) ; 1607 (s) ; 1583 (s) ; 1567 (m) ; 1553 (s) ; 1538 (m). 15 Ligand L8 Une solution aqueuse (2 mL) de NaOH (24,6 mg ; 0,62 mmol) est ajoutée à une solution de 26 (0,11 g ; 0,12 mmol) dans du méthanol (7 mL). Le milieu réactionnel est chauffé à 60°C durant 3 h. Le solvant est évaporé à sec et le résidu est dissous dans un minimum de H2O et L8 est obtenu par précipitation par ajout de 20 THF, de MeOH et de Et2O. Le solide est isolé par centrifugation puis séché sous vide, permettant d'obtenir L8 (0,07 g ; 65%), sous forme d'un précipité beige. 1H RMN (D20, 400 MHz): 8 8,43 (br s; 2 H); 8,17-7,37 (m; 8 H); 7,28 (br s; 4 H); 6,47 (br s; 2 H); 3,76 (br s; 4 H); 3,22 (br s; 8 H). ESI/MS (mode négatif, MeOH/H20) m/z: 399,1 ([M-2Na]2 100%) ; 258,5 ([M-25 3Na]3-.; 20%). IR (cm-1, ATR): 2163 (w) ; 1583 (s) ; 1554 (s) ; 1428 (s) ; 1390 (s) ; 1325 (m) ; 1263 (m). EXEMPLE 12 SYNTHESE DU COMPOSE l.9 30 Le composé L9 a été préparé selon le schéma réactionnel suivant : B5006FR 2935973 38 r-N---i CO2Et CO2Et /rv~ CO2Et CO2Et 0 o r- r CO2Na CO2Na CO2Na CO2Na Br N N 5-Et 27 L9 Composé 27 Un mélange de 5-Et (0,30 g ; 0,43 mmol), d'hydrochlorure de glycine éthylester (0,18 g ; 1,30 mmol), de [Pd(PPh3)2C12] (60,8 mg ; 0,09mmol), de Et3N 5 distillée (10 mL) et de toluène distillé (15mL) est chauffé à 100°C durant 14 heures avec un flux continu de CO à pression atmosphérique. Le précipité formé est filtré. Le filtrat est évaporé à sec et le résidu est dissous dans du dichlorométhane (100 mL), lavé avec de l'eau (3 x 100 mL) et une solution saturée de NaCl. Cette phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. Le produit brut est 10 purifié par chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 95:5) permettant d'obtenir le composé 27 (0,26 g ; 81%). 'H RMN (CDC13, 300 MHz): 8 8,45 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 8,12 (s; 2 H); 7,07 (t; J = 4,9 Hz; 1 H); 6,55 (d; J = 2,6 Hz; 2 H); 4,30û4,14 (m; 12 H); 4,04 (s; 4 H); 3,62 (s; 8 H); 1,34û1,24 (m; 15 H). 15 13C {'H} RMN (CDC13, 300 MHz): 8 171,0; 169,4; 164,7; 153,5; 150,7; 146,7; 128,0; 108,7; 106,8; 61,7; 60,5; 54,6; 51,4; 41,9; 14,2; 14,1. IR (cm"', ATR) : v 1732 (s); 1674 (m); 1618 (m); 1571 (s); 1534 (s); 1463 (s). Analyses calculées pour C34H46N8011 (742.8): C 54,98; H 6,24; N 15,09; mesurées: C 54,70; H 5,95; N 14,65. 20 EI/MS (solide) m/z: 743,0 ([M+H]+; 100%). Ligand L9 Une solution aqueuse (4 mL) de NaOH (0,09 g ; 2,29 mmol) est ajoutée à une solution de 27 (0,28 g ; 0,38 mmol) dans du méthanol (20 mL). Le milieu B5006FR 2935973 39 réactionnel est chauffé à 60°C durant 3 h. Le solvant est évaporé à sec et le résidu est dissous dans un minimum d'eau. Cette phase aqueuse est lavée avec du dichlorométhane (3 x 100 mL). L'addition de THF, de MeOH et de Et2O conduit à la formation d'un précipité qui est isolé par centrifugation et séché pour donner L9 5 (0,26 g ; 94%), sous forme d'un précipité jaune pâle. 'H RMN (D20, 300 MHz): S 8,70 (br s; 2 H); 8,01 (br s; 2 H); 6,71 (br s; 2 H); 4,01 (br s; 2 H); 3,95 (br s; 4 H); 3,29 (br s; 8 H). 13C {'H} RMN (D20, 300 MHz): S 179,9; 177,0; 167,7; 154,4; 150,9; 148,1; 130,6; 110,2; 108,1; 58,6; 51,2; 44,7. 10 IR (cm'', ATR): v 1570 (s); 1531 (s); 1463 (s); 1389 (s); 1326 (s); 1255 (s). Analyses calculées pour C24H21N8Na5O11.3H20 (766.5): C 37,61; H 3,55; N 14,62; mesurées: C 37,42; H 3,25; N 14,41. ESI/MS (mode négatif, MeOH/H20) m/z: 214,2 ([M-3Na+]3 80%). EXEMPLE 13 15 SYNTHESE DU COMPOSE L10 Le composé L10 a été préparé selon le schéma réactionnel suivant : OEt N O Ett O2Et ~IV-1 ~j IV r- -i CO Et COzEt N I ~N CO2Et CO2Et CO2Et CO2Et CO2Na CO2Na CO2Na CO2Na 5-Et 28 L10 Compose 28 On dissout le composé 5-Et (200 mg, 0,29 mmol) et le 4-aminobutyrate 20 d'éthyle hydrochloré (97 mg, 0,58 mmol) dans 10 ml de toluène distillé et 10 ml de triéthylamine. [Pd(PPh3)2C12] (20 mg, 0,029 mmol) est ajouté. La solution est placée à 100°C sous un flux continu de CO à pression atmosphérique pendant 12 heures. 2935973 B5006FR 40 La solution est filtrée sur Célite � puis évaporée à sec pour donner une huile jaune pale. L'huile résiduelle est dissoute dans 30 ml de CH2C12 et la phase organique est lavée avec 3 x 15 ml d'eau, puis séchée sur Na2SO4, et évaporée à sec. 28 (126 mg, 57%) est isolé par chromatographie sur colonne (SiO2, CH2C12/MeOH, 100/0 à 5 98/2) sous forme d'huile incolore. 'H RMN (CDC13, 300 MHz): 6 1,21 (t; J = 7,2 Hz; 3H); 1,22 (t; J = 7,2 Hz; 12H); 1,96 (qt; J = 7,1 Hz; 2H); 2,44 (t; J = 7,1; 2H); 3,50 (q; J = 7,0 Hz; 2H); 3,58 (s; 8H); 3,99 (s; 4H); 4,10 (q; J = 7,2 Hz; 2H); 4,13 (q; J = 7,2 Hz; 8H); 6,48 (d; J = 2,6 Hz; 2H); 8,04 (s; 2H); 8,40 (d; J= 2,6 Hz; 2H). 10 13C RMN (CDC13, 300 MHz) : 6 14,1 (2C); 24,3; 31,7: 39,7; 51,3; 54,4; 60,4; 60,5; 106,7; 108,5; 127,9; 147,5; 150,4; 153,2; 164,6; 170,9; 173,2. IR (ATR, cm-1) : v 3330 (br); 3126 (w); 2981 (w); 2936 (w); 1731 (s); 1671 (m); 1617 (m); 1569 (m); 1534 (m); 1463 (s); 1388 (s); 1304 (w); 1259 (w); 1187 (s); 1154 (s); 1096 (w); 1027 (s). 15 Ligand L10 On dissout 28 (126 mg, 0,16 mmol) dans 40 ml d'une mélange méthanoUeau (1/1). NaOH (39 mg, 0,98 mmol) est ajoutée. Le mélange est laissé à 60°C pendant 3 heures. Le solvant est évaporé et le résidu est solubilisé dans 20 ml d'eau, La phase aqueuse est lavée avec 3 x 10 ml de DCM, puis évaporée à sec pour donner un 20 résidu jaune pâle. Le résidu est dissous dans 0,5 ml d'eau. Du méthanol, du THF et du dicthylether sont ajoutés progressivement conduisant à la formation d'un précipité. Le mélange est trituré, le solide est isolé par centrifugation et séché afin d'obtenir L10 sous forme d'une poudre jaune pâle très fine (113 mg, 95%). 'H RMN (D20, 300 MHz): S 1,91 (qt; J = 7,2 Hz; 2H); 2,29 (t; J = 7,2 Hz; 2H); 3,27 (s; 8H); 3,45 (t; J = 7,2 Hz; 2H); 3,91 (s; 4H); 6,66 (s; 2H); 7,94 (s; 2H); 8,64 (s; 2H). 40,5; 51,3; 58,7; 68,3; 107,3; 110,0; 13C RMN (D20, 300 MHz): S 25,8; 35,4; 130,0; 150,2; 165,0; 167,1; 179,4; 183,1. IR (ATR, cm"'): v 3276 (br); 2934 (w); 1568 (s); 1462 (m); 1403 (s); 1327 (m); 1123 (m); 1051 (m). B5006FR 2935973 41 Analyses calculées pour C26H25N3Na5O11.5H20: C 37,43 ; H 3,96 ; N 13,24 ; mesurées: C 37,60 ; H 4,25 ; N 13,49. ESI (mode négatif, MeOH/H20)/MS m/z: 347,1 ([M-2Na+]2-; 80%) ; 223,6 ([M-3Na+]3 80%). 5 EXEMPLE 14 SYNTHESE D'UN COMPOSE L11 La synthèse d'un ligand L11 est effectuée selon le schéma réactionnel suivant: OEt HO H H1 L11 O ONa Br EtO 29 0 N- H NH EtO 2935973 B5006FR Composé 30 5-Et (100 mg, 0.14 mmol) et 29 (50.3 mg, 0.29 mmol, obtenu selon W. S. Sarari, J. E. Schwering, P. A. Lyle, S. J. Smith, E. L. Engelhardt, J. Med. Chem., 1990, 33, 97) sont dissous dans 10 mL de toluène distillé et 10 mL de triéthylamine 5 distillée. [Pd(PPh3)2C12] (9.8 mg, 0.014 mmol) est ajouté. La solution est chauffée à 100°C sous un flux continu de CO à pression atmosphérique pendant 12 heures. La solution est filtrée sur célite, puis évaporée à sec pour donner une huile jaune pale. L'huile résiduelle est dissoute dans 30 ml de CH2C12 et la phase organique est lavée avec 3 x 15 ml d'eau, séchée sur Na2SO4, et évaporée à sec. 30 (70 mg, 60%) est 10 isolé par chromatographie sur colonne (SiO2, CH2C12/MeOH, 100/0 à 95/5) sous forme d'huile incolore. 1H NMR (CDC13, 300 MHz): 8 1,25 (t; J = 7,2 Hz; 12H); 1,44 (s, 9H); 1,76 (t, J = 7,0 Hz, 2H); 2,16 (broad s, 1H); 3,24 (t, J = 7,0 Hz, 2H); 3,54 (q, J= 7,0 Hz, 2H); 3,61 (s, 8H); 4,02 (s, 4H); 4,16 (q, J= 7,2 Hz, 8H); 6,52 (d, J= 2,6 Hz, 2H); 8,13 (s, 15 2H); 8,45 (d, J= 2,6 Hz, 2H). 13C NMR (CDC13, 300 MHz): 8 14,2; 28,4; 30,0; 37,0; 51,5; 53,4; 54,6; 60,6; 79,6; 106,8; 108,6; 128,1; 147,5; 150,6; 153,3; 156,8; 164,8; 171,1. IR (ATR, cm-1): v 3341 (br); 3126 (w); 3060 (w); 2980 (m); 2934 (m); 1737 (s); 1671 (ni); 1618 (m); 1570 (s); 1533 (s); 1462 (s); 1389 (s); 1366 (s); 1303 (m); 20 1270 (s); 1251 (s); 1188 (s); 1155 (s); 1096 (m); 1027 (s). Analyses calculées pour C38H55N9011 (813,9) : C 56,08:, H 6,81; N 15,49. Mesurées : C 55,73; H 6,51; N 15,58. EI/MS (solide) m/z : 814,2 ([M+H]+, 100%), 712,3 ([(M-05H9O2)+H]+, 35%). Composé 31 25 Le composé 30 (35 mg, 43 �mol) est dissous dans 10 mL de CH2Cl2. Du TFA (20 �L, 0.26 mmol) est ajouté. La solution est agitée à température ambiante pendant 12 heures. Le solvant est évaporé. L'huile résiduelle est dissoute dans 10 mL de CH2Cl2, lavée avec 3 x 10 mL d'eau. La phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et concentrée pour donner 31 (26 mg, 85%). 42 B5006FR 2935973 43 'H NMR (CD3OD, 300 MHz): S 1.18 (t; J = 7.2 Hz; 12H); 2.06 (t, J = 7.0 Hz, 2H); 3.06 (t, J= 7.0 Hz, 2H); 3.54 (t, J= 7.0 Hz, 2H ); 4.18 (s, 8H); 4.25 (q, J = 7.2 Hz, 8H); 4.56 (s, 4H); 6.75 (d, J = 2.0 Hz, 2H); 8.24 (s, 2H); 8.81 (d, J = 2.0 Hz, 2H). 13C NMR (CD3OD, 300 MHz): S 13.0; 27.3; 29.5; 36.6; 37.0; 51.5; 53.8; 61.6; 5 107.3; 109.9; 129.2; 147.6; 148.2; 150.3; 168.0. IR (ATR, cm"'): v 3271 (br); 3060 (br); 2987 (m); 1744 (s); 1672 (s); 1620 (m); 1571 (m); 1531 (m); 1460 (m); 1385 (m); 1301 (w); 1196 (s); 1179 (s); 1132 (s); 1052 (m); 1018 (m). EI/MS (solide) m/z : 714,2 ([M+H]+, 100%). 10 Composé 33 Dans un tube de Schlenk sous argon on ajoute la biotine 32 (100 mg, 0,41 mmol) et 10 mL de DMF distillée. La solution est chauffée à 50°C jusqu'à dissolution complète de la biotine. Apres retour à température ambiante, le NHS (57 mg, 0,50 mmol) et EDCI-HC1 (94 mg, 0,50 mmol) sont ajoutés. La solution est 15 agitée à température ambiante sous atmosphère inerte pendant 12 heures. Le solvant est évaporé pour donner un solide blanc. Le résidu est dissous dans 20 mL de CH2C12. La phase organique est lavée avec 3 x 10 mL d'eau, puis séchée sur Na2SO4, filtrée puis concentrée pour donner 33 (98 mg, 70%) sous forme d'un solide blanc. 20 1H NMR (d6-DMSO, 300 MHz) : b 1,3-1,8 (m, 6H) ; 2,49 (s, 2H) ; 2,50-2,77 (m, 2H) ; 2,8.5 (s, 4H) ; 3,09 (m, 1H) ; 4,14 (m, 1H) ; 4,30 (m, 1H) ; 6,36 (s, 1H) ; 6,42 (s, 1H). 13C NMR (d6-DMSO, 300 MHz) : S 24,8; 25,9; 28,0; 28,3; 30,4; 55,4; 55,7; 59,6; 61,4; 163,1; 169,4; 170,7. 25 IR (ATR, cm-'): v 3341 (br); 3226 (br); 3117 (w); 2940 (w); 2918 (w); 2877 (w); 1818 (m); 1787 (m); 1746 (m); 1728 (s); 1697 (s); 1553 (w); 1464 (m); 1435 (m); 1422 (m); 1368 (m); 1209 (s); 1070 (s); 1061 (s); 1047 (s). EI/MS (solide) m/z : 244,32 ([(M-C4H4O2)+H]+, 100%, 341,1 ([M+H]+, 20%). B5006FR 2935973 44 Composé 34 Le composé 31 (26 mg, 36 �mol) est dissous dans 10 mL de DMF et 30 �L de triéthylamine. 33 (15 mg, 44 �mol) est ajouté. La solution est agitée à température ambiante pendant 12 heures. Le solvant est évaporé pour donner un 5 résidu blanc. Le résidu est dissous dans 20 mL de CH2C12, lave avec 3 x 10 mL d'eau. La phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée and concentrée. La purification par chromatographie sur silice (DCM/1vleOH, 99:1 à 95:5) permet d'obtenir 34 (l5mg, 45%) sous forme d'une huile jaune pale. Ligand L11 10 Le composé 34 (12,6 mg, 0.16 mmol) est dissous dans 40 mL d'une solution MeOH/eau (1:1) et NaOH (39 mg, 0.98 mmol) est ajoutée. La solution est agitée à 60 °C pendant 3 heures. Les solvants sont evaporés et le residue est dissous dans 20 mL d'eau puis lavé avec 3 x 10 ml de CH2C12. La phase aqueuse est evaporée. Le residu jaune pale est dissous dans 0.5 mL d'eau et 4 mL de MeOH. L11 (10,0 mg, 15 68%) est precipité sous forme d'une fine poudre jaune pale par addition de THF et diethylether. IR (ATR, cm"'): v 3263 (br); 1567,7 (s); 1538 (s); 1492 (m); 1442 (m); 1396 (s); 1357 (m); 1282 (w); 1258 (w); 1231 (w); 1124 (m); 1070 (m); 1008 (w). EXEMPLE 15 20 SYNTHESE D'UN COMPOSE 5"-Et Un composé 5"-Et a été préparé selon le schéma réactionnel suivant : B5006FR 45 Br Br + F---'e'-F COOEt 35 1 EtOOC 2"-Et COC Et Br Br 4" Composé 2"-Et Dans un ballon Schlenk sous argon, on ajoute le composé 1 (680 mg, 3,5 mmol), le composé 35 (1,46 g, 7,7 mmol, obtenu selon A. Schmidt, L. Merkel, W. Eisfeld, Eur. J. Org. Chem. 2005, 2124-2130) et 30 mL de DMF distillé. La solution est refroidie à 0°C et NaH (60% en masse dans l'huile, 308 mg, 7,7 mmol), est ajouté. La température du mélange est remontée à température ambiante. Le mélange est ensuite chauffé à 40°C durant 5 heures. Apres 5 heures de réaction, un précipité blanc se forme. Le précipité est séparé de la solution par centrifugation. L'addition d'eau sur les eaux-mère donne un second précipité isolé par centrifugation. L'intégralité du précipité est dissoute dans 40 ml d'un mélange DCMIEau (1:1). La phase organique est séparée et la phase aqueuse est lavée avec 3 x 10 ml de DCM. Les phases organiques sont rassemblées, séchées sur Na2SO4, filtrées puis évaporées à sec pour donner le composé 2"-Et sous forme d'une poudre blanche (1,75 g, 94%). 1H RMN (CDC13, 400 MHz) : S 8,64 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,35 (d, J = 8,1 Hz, 2H); 8,31 (s, 2H); 7,56 à 7,45 (m, 4H); 4,62 (q, J= 7,1 Hz, 4H); 1,56 (t, J= 7,1 Hz, 6H). 13C RMN (CDC13, 300 MHz) : ô 14,4; 61,7; 114,7; 115,8; 122,5; 124,8; 125,1; 128,8; 136,5; 139,2; 140,0; 151,9; 162,1. 2935973 B5006FR Composé 4" i) Dans un ballon Schlenk sous argon on ajoute le composé 2"-Et (1,7 g, 3,2 mmol) et 120 ml de THF anhydre. Le mélange est refroidi à -10°C. Du LiAlH4 (240 mg, 6,4 mmol) est ajouté en petite portion. Après addition complète du 5 LiAlH4, le mélange est agité à -10 °C durant 2 heures puis hydrolysé avec un minimum d'une solution saturée de NH4C1 jusqu'à obtention d'un précipité blanc. Ce mélange est filtré sur célite, et le filtrat évaporé à sec pour donner 1,12g d'un solide blanc. ii) Le solide est introduit dans un ballon Schlenk sous argon, contenant de la 10 DMF distillée (50 mL) et on ajoute PBr3 (0,6 mL; 6,3 mmol) à température ambiante. Le mélange est agité à température ambiante durant 14 heures. Le solvant est évaporé à sec. Le résidu obtenu est dissous dans 20m1 de DCM et neutralisé avec 10 ml d'une solution saturée de NaHCO3. La phase aqueuse est extraite avec du dichlorométhane (4 x 20 mL), et les phases organiques rassemblées sont lavées 15 avec une solution saturée de NaCl, séchées sur Na2SO4, filtrées et évaporées à sec. Le produit brut est purifié par chromatographie sur silice (Toluène/éther de pétrole (75:25) comme éluant) permettant d'obtenir le composé 4" (420 mg; 35%), sous forme d'un solide jaune pale. 1H RMN (CDC13, 300 MHz) : 8 8,64 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,04 (s, 2H); 7,92 (d, J = 20 8,1 Hz, 2H); 7,54 à 7,37 (m, 4H); 4,90 (s, 4H). 13C RMN (CDC13, 300 MI Iz) : 8 23,2; 113,8; 115,1; 120,7; 123,4; 124,5; 128,8; 139,1; 140,1; 145,7; 152,3. Composé 5"-Et Dans un ballon on mélange sous argon le composé 4" (0,42 g; 0,73 mmol), 25 l'ester éthylique de l'acide iminodiacétique (0,29 mL., 1,61 mmol) et du K2CO3 (0,40 g; 2,92 mmol) dans un mélange THF (25 mL)/C'H3CN (50 mL) distillé. Le milieu réactionnel est chauffé à 60 °C pendant 15h. puis filtré. Le filtrat est concentré à sec. L'huile résultante est dissoute dans du dichlorométhane (20 mL), lavée avec de l'eau (3 x 10 mL) et une solution saturée de NaCl. La phase 30 organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification par 46 B5006FR 47 chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 98:2) du produit brut permet d'obtenir le composé 5"-Et (322 mg; 56%), sous forme d'un solide blanc. 1H RMN (CDC13, 300 MHz): S 8,62 (d, J = 8,4 Hz, 2H); 8,18 (d, J = 7,7 Hz, 2H); 7,97 (s, 2H); 7,50-7,26 (m, 4H); 4,40 (s, 4H); 4,19 (q, J = 7,0 Hz, 8H); 3,67 (s, 8H); 1,28 (t, J= 7,0 Hz, 12H). 13C RMN (CDC13, 300 MHz) : 14,2; 50,3; 54,7; 60,5; 112,8; 114,5; 121,7; 122,7; 125,6; 128,3; 135,4; 139,7; 146,8; 152,4; 170,9. IR (ATR, cm-l) : 2986 (w), 2905 (w), 1732 (s), 1610 (w), 1586 (w), 1569 (s), 1518 (w), 1438 (s), 1346 (m), 1264 (w), 1236 (w), 1187 (s), 1136 (s), 1070 (s), 1025 (m), 10 981 (m). EXEMPLE 16 SYNTHESE D'UN COMPOSE 5"-tBu On a préparé un composé 5"-`Bu selon le mode opératoire de l'exemple 15. Br 5"'Bu 15 Dans un ballon Schlenck sous argon on mélange le composé 4" (90 mg ; 0,16 mmol), l'ester tertio-butylique de l'acide irninodiacétique (84,2 mg ; 0,34 mmol) et du K2CO3 (43 mg; 0,31 mmol) dans un mélange THF (5 mL)/CH3CN (10 mL) distillé. Le milieu réactionnel est chauffé à 80 °C pendant 14h puis filtré. Le filtrat est concentré à sec. L'huile résultante est dissoute dans du 20 dichlorométhane (50 mL) et lavée avec de l'eau (2 x 25 mL). La phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification par chromatographie sur silice (CH2C12/MeOH, 100:00 à 98:2) du produit brut permet d'obtenir le composé 5"-`Bu (100 mg; 84%), sous forme d'une huile incolore. 2935973 B5006FR 48 'H RMN (CDC13, 200 MHz): S 8,63 (d, J = 8,4 Hz, 2H); 8,21 (d, J = 7,7 Hz, 2H); 7,98 (s, 2H); 7,50 à 7,26 (m, 4H); 4,38 (s, 4H); 3,53 (s, 8H); 1,45 (s, 36H). 13C RMN (CDC13, 200 MHz) : 8 28,2; 51,0; 55,7; 81,2; 112,9; 114,6; 122,0; 122,9; 125,9; 128,4; 135,5; 139,8; 147,3; 152,7; 170,4. 5 EXEMPLE 17 SYNTHESE DU COMPOSE L12 O )OEt Composé 36 On dissout le composé 5"-Et (90 mg, 0,11 mmol) et le 4-aminobutyrate d'éthyle hydrochloré (38 mg, 0,23 mmol) dans 10 ml de toluène distillé et 10 ml de triéthylamine. [Pd(PPh3)2C12] (8 mg, 0,011 mmol) est ajouté. La solution est chauffée à 100 °C sous un flux continu de CO à pression atmosphérique pendant 24 heures. La solution est filtrée sur célite puis évaporée à sec pour donner une huile jaune pale. L'huile résiduelle est dissoute dans 30 ml de CH2C12 et lavée avec 3 x 15 ml d'eau, séchée sur Na2SO4, et évaporée à sec. Le composé 36 (98 mg, 54%) est isolé par chromatographie sur colonne (SiO2, CH2C12/MeOH, 100/0 à 99,4/0,6) sous forme d'huile jaune pale. 'H RMN (CDC13, 300 MHz): S 8,64 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,17 (d, J = 8,1 Hz, 2H); 8,15 (s, 2H); 7,50 à 7,28 (m, 4H); 7,18 (t, J = 5,4 Hz, 11-E); 4,41 (s, 4H); 4,18 (q, J = 7,2 Hz, 10H); 3,68 (s, 8H); 3,62 à 3,55 (m, 2H); 2,47 (t, J= 7,2 Hz, 2H); 2,03 (qt, J = 7,2 Hz, 2H); 1,26 (t, J= 7,2 Hz, 15H). 13C RMN (CDC13, 300 MHz) : S 14,1; 24,5; 31,9; 39,8; 50,6; 54,8; 60,6; 107,6; 114,5; 121,6; 122,7; 125,6; 128,3; 139,7; 146,5; 146,7; 152,8; 165,2; 171,1; 173,5. 2935973 B5006FR Composé L12 On dissout le composé 36 (50 mg, 57 �mol) dans 20 ml d'un mélange méthanol/eau (1/1). NaOH (14 mg, 0,34 mmol) est ajouté. Le mélange est chauffé à 60 °C pendant 4 heures. Le solvant est évaporé et le résidu est solubilisé dans 20 ml 5 d'eau. La phase aqueuse est lavée avec 3 x 10 ml de DCM, puis évaporée à sec pour donner un résidu jaune pâle. Le résidu est dissous dans 0,5 ml d'eau. Du méthanol, du THF et du diethylether sont ajoutés progressivement conduisant à la formation d'un précipité. Le mélange est trituré dans un bain à ultrasons, le solide est isolé par centrifugation et séché afin d'obtenir le composé L12 (24 mg, 50%) sous forme 10 d'une poudre brun pâle très fine. 1H RMN (D20, 300 MHz): 6 8,35 (s, 2H); 7,95 (s, 2H); 7,80 (s, 2H); 7,50-7,36 (m. 4H); 4,08 (s, 4H); 3,27 (m, 10H); 2,30 (m, 2H); 1,88 (ln, 2H). '3C RMN (D20, 200 MHz) : S 25,7; 35,3; 40,4; 49,3; 58,7; 107,7; 114,4; 121,5; 123,4; 125,7; 129,0; 139,0; 145,8; 146,7; 152,0; 166,9; 179,2; 183,0. 15 IR (cm"1, ATR) : v 3390 (s); 1604 (s); 1580 (s); 1555 (w); 1439 (s); 1406 (s); 1328 (w); 1198 (w); 1129 (w); 1069 (w). 49 EXEMPLE 18 SYNTHESE DU COMPOSE L13 ^ ^ /OM O Br 5"-'Bu L13 20 Composé 37 Dans un tube de Schlenk on mélange le composé 5"-'Bu (100 mg; 0,11 mmol), l'acide-6-heptynoïque (17 !IL; 0,13 mmol), [Pd(PPh3)2Cl2] (8,40 mg; 0,01 mmol), du THF distillé (10 mL) et de la Et3N distillée (6 mL). Ce mélange est dégazé durant 15 min et du Cul (3,4 mg; 0,02 mmol) est ajouté à la solution dégazée. Le milieu réactionnel est chauffé à 40 °C durant 72 heures. Le solvant est 2935973 B5006FR 50 concentré à sec et le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (50 mL), lavé avec de l'eau (2 x 50 mL). La phase organique est séchée sur Na2SO4, filtrée et évaporée à sec. La purification par chromatographie sur silice (CH2C121MeOH, 100:00 à 98:5) du produit brut permet d'obtenir le composé 37 (41 mg; 40%), sous 5 forme d'une huile incolore. 1H RMN (CDC13, 200 MHz): S 8,65 (d, J = 8,8 Hz, 2H); 8,16 (d, J = 7,7 Hz, 2H); 7,82 (s, 2H); 7,82 à 7,26 (m, 4H); 4,41 (s, 4H); 3,56 (s, 8H); 2,54 à 2,42 (m, 4H); 1,87 à 1,71 (m, 4H); 1,48 (s, 36H). 13C RMN (CDC13, 200 MHz) : S 8,6; 19,3; 24,5; 27,9; 28,3; 45,0; 50,1; 55,7; 79,3; 10 81,2; 95,7; 112,3; 114,7; 121,7; 122,5; 125,7; 128,1; 136,4; 139,8; 146,4; 152,3; 170,5. Composé L13 Le composé 37 (40 mg, 42 �mol) est dissous clans 3 ml de CH2C12 et 1,5 ml de TFA. Le mélange est agité pendant 4 heures à température ambiante. Le mélange 15 est évaporé à sec et le résidu est dissous dans 0,5 ml de méthanol. Le composé L13 précipite par addition de diéthyle éther. Après sonication, centrifugation, lavage au diéthyle éther et séchage sous vide, le composé L13 (20,8 mg, 52%) est isolé sous forme d'une poudre beige. 1H RMN (CD3OD, 200 MHz): 8 8,47 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 8,02 (d, J = 7,9 Hz, 2H); 20 7,65 (s, 2H); 7,42 à 7,24 (m, 4H); 4,53 (s, 4H); 3,72 (s, 8H); 2,47-2,30 (m, 4H); 1,77-1,63 (m, 4H). 13C RMN (CDC13, 200 MHz) :8, 20,0; 25,5; 29,0; 34,5; 47,9; 55,5; 79,5; 98,0; 114,0; 115,9; 121,6; 124,9; 126,8; 130,0; 138,2; 140,8; 141,3; 153,1; 170,0; 177,5. IR (cm"1, ATR) : v 3390 (s), 1604 (s), 1580 (s), 1555 (w), 1439 (s), 1406 (s), 1328 25 (w), 1198 (w), 1129 (w), 1069 (w). EXEMPLE 19 Synthèse de Na[TbL21 Le ligand L2 (20 mg, 28 �mol) et TbC13.6H20 (10,6 mg, 28 !mol) sont dissous dans 10 ml d'eau. Le mélange est chauffé à 60°C pendant 1 heure. La B5006FR 2935973 51 solution est évaporée a sec et le résidu est dissous dans un minimum de d'eau. Du méthanol, du THF et du diethylether sont ajoutés progressivement conduisant à la formation d'un précipité qui est isolé par centrifugation et séché pour obtenir Na[TbL2] sous forme d'une poudre blanche (21,7 mg, 96%). 5 IR (ATR, cm"): v 3390 (br); 3007 (w); 2987 (w); 2921 (w); 2213 (w); 2020 (w); 1602 (s); 1557 (m); 1533 (m); 1470 (w); 1436 (w); 1393 (s); 1213 (w); 1107 (w). ESI/MS (mode négatif, McOH/H2O) m/z = 770,4 ([TbL2]-, 100%).Analyses calculées pour C30H25N7O8TbNa.4H2O: C 41,63; H 3,84; N 11,33. Mesurées : C 41,41 ; H 3,55 ;N 11,04. 10 EXEMPLE 20 Synthèse de NaFEuL21 Le ligand L2 (13,8 mg, 19,6 �mol) et EuC13.6H2O (7,2 mg, 19,6 �mol) sont dissous dans 10 ml d'eau. Le mélange est chauffé à 60°C pendant 1 heure. La solution est évaporée a sec et le résidu est dissous dans un minimum de d'eau. Du 15 méthanol, du THF et du diethylether sont ajoutés progressivement conduisant à la formation d'un précipité qui est isolé par centrifugation et séché pour obtenir Na[EuL2] (14,1 mg, 91%) sous forme de poudre blanche. IR (ATR, cm-l): v 3390 (br); 2992 (w); 2911 (w); 2221 (w); 2018 (w); 1616 (s); 1603 (s); 1553 (m); 1529 (m); 1470 (m); 1432 (m); 1396 (s); 1354 (m); 1258 (w); 20 1228 (w); 1107 (w). ESI/MS (mode négatif, McOH/H2O) m/z = 764,0 ([EuL2]", 100%), 762,0 ([EuL21-, 80%). Analyses calculées pour C30H25N7O8EuNa.2NaC1: C 39,89; H 2,79; N 10,85. Mesurées : C 39,47 ; H 2,66; N 10,60. 25 EXEMPLE 21 Synthèse de Na TEL Le ligand L3 (30 mg, 49 'mol) et TbC13.6H2O (18,2 mg, 49 �mol) sont dissous dans 10 ml d'eau. Le pH de la solution est emmené à 8 avec une solution de NH4OH à 0,1 M. Le mélange est chauffé à 60°C pendant 4 heures. La solution est B5006FR 2935973 52 évaporée à sec et le résidu est dissous dans un minimum d'eau. Du méthanol, du THF et du diethylether sont ajoutés progressivement conduisant à la formation d'un précipité qui est isolé par centrifugation et séché pour obtenir Na2[TbL3] (30 mg, 77%) sous forme d'un précipité brun clair. R (ATR, cm-1): v 3243 (br); 2922 (s); 5 2338 (w); 2117 (w); 1575 (m); 1534 (m); 1474 (s); 1428 (s); 1393 (m); 1356 (s); 1231 (s); 1103 (m); 1066 (m); 1039 (m). ESI/MS (mode négatif, McOH/H2O) m/z = 790,0 ([NaTbL3]- ; 80%) ; 768.1 ([HTbL3f ; 20%). Analyses calculées pour C26H22N7O11Tb(NH4)2.7H2O: C 33,59; H 4,77; N 13,56. 10 Mesurées : C 33,45 ; H 4,60; N 13,44. EXEMPLE 22 Synthèse de Na Ezl uL31 Le ligand L3 (10 mg, 17 �mol) et EuC13.61-12O (6,2 mg, 17 !mol) sont dissous dans 10 ml d'eau. Le pH de la solution est emmené à 8 avec une solution de 15 NaOH à 0,1 M. Le mélange est chauffé à 60°C pendant 4 heures. La solution est évaporée à sec et le résidu est dissous dans un minimum d'eau. Du méthanol, du THF et du diethylether sont ajoutés progressivement conduisant à la formation d'un précipité qui est isolé par centrifugation et séché pour obtenir Na2[EuL3] (12,6 mg, 92%) sous forme d'une poudre brune. 20 IR (ATR, cm-1): v 3390 (br); 3007 (w); 2990 (w); 2;161 (w); 2023 (w); 1594 (m); 1533 (s); 1446 (s); 1427 (s); 1393 (m); 1360 (s); 1275 (m); 1260 (m); 1231 (s); 1178 (s); 1101 (s); 1071 (s). ESI/MS (mode négatif, McOH/H2O) m/z = 784,0 ([NaEuL3]-, 100%) ; 782,0 ([NaEuL3]-, 20%) ; 381,0 ([EuL3]2 35%) ; 380,4 ([EuL3]2 30%). 25 EXEMPLE 23 Synthèse de Na TbL4 On dissout le composé L4 (0,06 g ; 0,08 mmol) et TbC13.6H2O (33,5 mg ; 0,09 mmol) dans H2O (100 mL). Le mélange est agité pendant 2 h à 50°C puis filtré à chaud. Le filtrat est concentré au minimum. L'addition de THF, de MeOH et de 2935973 B5006FR 53 Et2O conduit à la formation d'un précipité, qui est isolé par centrifugation puis séché sous vide pour donner Na2[TbL4] (0,05 g ; 75%), sous forme d'un précipité blanc. IR (cm-1, ATR) : v 2228 (w; vc_c); 1594 (s); 1532 (s); 1478 (w); 1439 (m); 1390 5 (s); 1356 (s). Analyses calculées pour C28H26N7Na2OloTb.2C4H80: C 44,59; H 4,37; N 10,11; mesurées: C 44,28; H 4,61; N 12,76. ESI/MS (mode négatif, MeOH/H20) m/z: 389,4 ([TbL5]2" 80%). EXEMPLE 24 10 Na EuL4 Le ligand L4 (15,0 mg ; 19 !mol) dans H2O (10 mL) est ajouté à EuC13.6H20 (8,2 mg ; 0,02 mmol) dissous dans H2O (5 mL). Le mélange est agité pendant 2 h à 50°C puis filtré à chaud. Le filtrat est concentré au minimum. L'addition de THF, de MeOH et de Et2O conduit à la formation d'un précipité, qui 15 est isolé par centrifugation puis séché sous vide pour donner Na2[EuL4] (16,7 mg), sous forme d'un précipité. IR (cm"1, ATR) : v 2160 (w; vc_c); 1603 (s); 1553 (m); 1530 (w); 1434 (w); 1388 (s). ESI/MS (mode négatif, MeOH/H20) m/z: 387,0 ([EuL4]2 30%); 386,4 ([EuL4]2"; 20 100%); 385,4 ([EuL4]2 80%). EXEMPLE 25 Synthèse de Na EuLS Le ligand L5 (15,0 mg ; 20 �mol) dans H2O (10 mL) est ajouté à du EuC13.6H20 (8,0 mg ; 0,02 mmol) dissous dans H2O (5 mL). Le mélange est agité 25 pendant 2 h à 50°C puis filtré à chaud. Le filtrat est concentré au minimum. L'addition de THF, de MeOH et de Et2O conduit à la formation d'un précipité, qui est isolé par centrifugation puis séché sous vide pour donner Na2[EuL5] (17,3 mg) sous forme d'un précipité. 2935973 B5006FR 54 IR (cm'l, ATR) : v 2161 (w; vc_c) ; 1587 (s) ; 1551 (w) ; 1532 (m) ; 1384 (s) ; 1253 (w). EXEMPLE 26 Synthèse de Naz[EuL61 5 Dans un ballon contenant une solution du ligand L6 (0,03 g ; 0,04 mmol) dans H2O (10 mL) on ajoute EuC13.6H20 (14,9 mg ; 0,04 mmol) dissous dans H2O (5 mL). Le mélange est agité pendant 2 h à 50°C puis filtré à chaud. Le filtrat est concentré au minimum. L'addition de THF, de MeOH et de Et2O conduit à la formation d'un précipité, qui est isolé par centrifugation puis séché sous vide pour 10 donner Na2[EuL6] (35,2 mg) sous forme d'un précipité. IR (cm"', ATR): v 2204 (w; vc_c); 1595 (s); 1509 (w); 1466 (m); 1388 (s); 1248 (m). EXEMPLE 27 Synthèse de Na E] uL91 15 Le ligand L9 (0,03 g ; 0,04 mmol) dans H2O (20 mL) est ajouté à du EuC13.6H20 (17,0 mg ; 0,05 mmol) dissous dans H2O (5 mL). Le mélange est agité pendant 2 h à 50°C puis filtré à chaud. Le filtrat est concentré au minimum. L'addition de THF, de MeOH et de Et2O conduit à la formation d'un précipité, qui est isolé par centrifugation puis séché sous vide pour donner Na2[EuL9] (0,03 g ; 20 92%), sous forme d'un précipité. IR (cm-', ATR): v 2172 (w; vc=c); 1599 (s); 1568 (w); 1532 (m); 1444 (w); 1393 (s); 1358 (w). ESI/MS (mode négatif, MeOH/H20) m/z: 375,2 ([EuL9]2-; 100%). EXEMPLE 28 25 Synthèse de NaIEuL71 Dans un ballon contenant une solution du ligand 7 (10,2 mg; 0,01 mmol) dans H2O (10 mL) est ajouté EuC13.6H20 (4,0 mg; 0,01 mmol) dissous dans H2O (5 mL). Le mélange est agité pendant 2 h à 50 °C puis filtré à chaud. Le filtrat est B5006FR 2935973 55 concentré au minimum. L'addition de THF, de MeOH et de Et20 conduit à la formation d'un précipité, qui est isolé par centrifugation puis séché sous vide pour donner Na[EuL7] (7,0 mg; 63%). IR (cm-1, ATR) v 2208 (w; CC); 1596 (s); 1551 (ni); 11531 (m); 1515 (m); 1444 5 (m); 1390 (s); 1355 (m). ESI/MS (mode négatif, MeOH/H20) m/z: 1009,2 ([NaEuL7+H]+; 100%); 1008,2 ([NaEuL7]+.; 65%); 1007,2 ([NaEuL7+Hr; 80); 1005,2 (80%); 258,5 (20%). EXEMPLE 29 Synthèse de Na TbL9 10 Le ligand L9 (0,10 g ; 0,14 mmol) dans HO (90 mL) est ajouté à du TbC13.6H20 (57,5 mg ; 0,15 mmol) dissous dans H2O (10 mL). Le mélange est agité pendant 2 h à 50°C puis filtré à chaud. Le filtrat est concentré au minimum. L'addition de THF, de MeOH et de Et2O conduit à la formation d'un précipité, qui est isolé par centrifugation puis séché sous vide pour donner Na2[EuL9] (0,09 g ; 15 81%), sous forme d'un précipité jaune pâle. IR (cm-1, ATR): v 1587 (s); 1570 (s); 1535 (s); 1478 (m); 1443 (m); 1389 (s); 1355 (s). Analyses calculées pour C24H21C1N8Na2O11Tb.NaC1.H20: C 32,80; H 2,64; N 12,75; mesurées: C 32,41; H 2,34; N 12,34. 20 ESI/MS (mode négatif, MeOH/H20) m/z: 378,1 ([TbL912-; 80%). EXEMPLE 30 Synthèse de Na;jTbL101 Le ligand L10 (29 mg, 39,1 �mol) et TbC13.6H20 (14,6 mg, 39,1 �mol) sont dissous dans 10 ml d'eau. Le mélange est chauffé à 60°C pendant 1 heure. La 25 solution est évaporée a sec et le résidu est dissous dans un minimum de d'eau. L'addition de THF, de MeOH et de Et2O conduit à la formation d'un précipité, qui est isolé par centrifugation puis séché sous vide pour donner Na2[TbL1O] (27,4 mg, 84%) sous forme d'une poudre blanche. B5006FR 2935973 56 IR (ATR, v 3355 (br); 2953 (w); 1586 (m); 1'.568 (m); 1537 (m); 1392 (m); 1356 (m); 1282 (s); 1259 (s); 1232 (w); 1124 (s); 1060 (s); 1039 (s); 1008 (w). ESI/MS (mode négatif, MeOH/H20) m/z = 807,0 ([NaTbL10]' ; 70%) ; 392,1 ([TbL10]2" ; 100%). 5 EXEMPLE 31 Synthèse de Na2IEuL10.1 L10 (15 mg, 20,2 �mol) et EuC13.6H2O (7,4 mg, 20,2 �mol) sont dissous dans 10 ml d'eau. Le mélange est chauffé à 60°C pendant 1 heure. La solution est évaporée a sec et le résidu est dissous dans un minimum de d'eau. L'addition de 10 THF, de MeOH et de Et2O conduit à la formation d'un précipité, qui est isolé par centrifugation puis séché sous vide pour donner Nat [EuL10] (13,5 mg, 81%) sous forme d'une poudre blanche. IR (ATR, cm"): 3363 (br); 2960 (w); 1587 (m); 1567 (m); 1537 (m); 1391 (m); 1355 (m); 1282 (s); 1257 (s); 1230 (w); 1124 (s); 1067 (s); 1037 (s); 1009 (w). 15 Analyses calculées pour C26H25N8Na2O>>Eu.6H2O: C 33,52 ; H 4,00 ; N 12,03. Mesurées: C 33,28 ; H 3,73 ; N 11,72. ESI/MS (mode négatif, MeOH/H20) m/z: 800,2 ([NaEuL10] 20%) ; 801,0 ([NaEuL10] 100%) ; 388,5 ([EuL10]2" ; 40%). EXEMPLE 32 20 Synthèse de Na2[TbL11]L11 (9 mg, 9,6 �mol) et TbC13.6H2O (3,9 mg, 9,6 �mol) sont dissous dans 6 ml d'eau. Le mélange est chauffé à 60 °C pendant 3 heures. La solution est évaporée a sec et le résidu est dissous dans un minimum de d'eau. Du méthanol, du THF et du diethylether sont ajoutés progressivement et le mélange est trituré afin d'obtenir un précipité qui est isolé par centrifugation sous 25 forme d'une poudre blanche (2,5 mg, 26%). EXEMPLE 33 Synthèse de Na21TbL121 L12 (10 mg, 11,9 �mol) et TbC13.6H2O (4,44 mg, 11,9 �mol) sont dissous dans 10 ml d'eau. Le mélange est chauffé à 60 °C pendant 3 heures. La solution est B5006FR évaporée à sec et le résidu est dissous dans un minimum d'eau. L'addition de THF, de MeOH et de Et2O conduit à la formation d'un précipité, qui est isolé par centrifugation puis séché sous vide pour donner Na2[TbL12] (8,6 mg, 78%) sous forme d'une poudre blanche. IR (cm-1, ATR) : v 3374 (br), 2937 (w), 1589 (s), 1562 (s), 1532 (m), 1436 (m), 1400 (s), 1342 (m), 1274 (w), 1214 (w), 1196 (w), 1111 (m), 1070 (m), 1012 (w). EXEMPLE 34 Synthèse de NalJEuL12t L12 (7,7 mg, 8,8 �mol) et TbC13.6H2O (3,24 mg, 8,8 !mol) sont dissous dans 10 ml d'eau. Le mélange est chauffé à 60 °C pendant 3 heures. La solution est évaporée à sec et le résidu est dissous dans un minimum de d'eau. L'addition de THF, de MeOH et de Et2O conduit à la formation d'un précipité, qui est isolé par centrifugation puis séché sous vide pour donner Na2[TbL12] (7,9 mg, 97%) sous forme d'une poudre blanche. EXEMPLE 35 Synthèse de Na,JTbL13j L13 (10 mg, 10,5 !mol) est dissous dans 10 ml d'eau. La solution est rendu basique (pH = 8) par addition d'une solution aqueuse de soude à 0,1 M. Le TbC13.6H2O (3,9 mg, 10,5 �mol) est ajouté. Le mélange est chauffé à 60 °C pendant 3 heures. La solution est évaporée à sec, le résidu est dissous dans un minimum de méthanol et du THF est ajouté pour faire précipiter le complexe. Na3[EuL13] est isolé par centrifugation sous forme d'une poudre jaune (6,7 mg, 72%). IR (cm-1, ATR) : v 2330 (w; vc_c); 1610 (s); 1435 (m); 1342 (w); 1204 (w); 1106 (m); 1074 (m). Les spectres d'émission des complexes d'europium et de terbium étant très peu influencés par l'environnement du au ligand dans une série ou le site de complexation est le même, ils sont très similaires d'un composé à l'autre. A titre d'exemples, les spectres d'absorption et d'émission des complexes TbL4 et EuL6 dans l'eau sont présentés respectivement sur les figures 1 et 2. Sur chacune des 2935973 B5006FR 58 figures, la courbe de gauche représente le spectre d'absorption et la courbe de droite représente le spectre d'émission. La longueur d'onde est donnée en abscisse, et l'ordonnée représente le coefficient d'extinction molaire (E, en M'.cm-1) pour le spectre d'absorption et l'intensité relative d'émission (en unités arbitraires) pour le 5 spectre d'émission. Les spectres ont été effectués sur des solutions aqueuses des deux complexes en milieu tamponné (TRIS/HCI, 0,01 M, pH = 7,0). L'ensemble des propriétés d'absorption et d'émission des complexes d'europium et de terbium synthétisés est résumé dans le tableau suivant : Composé Absorption 01120 21120 0D20 TD2o Xmax/nm (s !M"'.cm-') % m.s % ms Q TbL2 318 (19200) 280 (26000) 3,4 1,3 6,1 2,2 1,3 273 (25500) EuL2 318 (20300) 280 (18300) 15 1,3 32 2,4 0 273 (18500) TbL3 318 (6800) 278 (15400) 19 2,5 22 3 0 269 (17500) EuL3 318 (6500) 278 (13600) 4,5 1,4 6,2 2,4 0 269 (15700) TbL4 328 (9030) 277 (20400) 42 2,6 60 3,0 0 265 (39700) EuL4 328 (7450) 277 (18100) 8 1,2 22 2,4 0,2 265 (33200) 314 (23500) EuL5 280 (23600) 15 1,1 45 2,3 0,3 272 (23800) EuL6 334 (22800) 277 (20600) 14 1,1 30 2,3 0,3 267 (22800) 325 (9950) TbL9 278 (23700) 100 2,5 3,1 0 271 (23300) 328 (8670) EuL9 278 (21200) 8 1,3 12 2,4 0,1 271 (21100) 2935973 B5006FR 59 Composé Absorption (Px20 TE-120 tD2o TD20 Q Xmax/nm (s /M-'.cm-') % ms % ms TbL10 327 (6900) 279 (16500) 94 2,6 100 3,1 0,2 271 (16000) EuL10 327 (6600) 279 (16300) 12 1,4 32 2,5 0,1 271 (16000) TbL11 - 54 2,4 68 2,9 0 TbL12 309 (12700) 25 0,7 46 1,1 - 360 (11400) EuL12 320 (11400) 16 1,15 34 1,84 0 360 (10700) TbL13 309 (11400) 35 0,9 55 1,35 1,3 360 (8800) Les paramètres 0x20, (PD2o, Tx20, zD20 et q représentent respectivement les rendements quantiques de luminescence dans l'eau et dans D20, les temps de vie de luminescence dans l'eau et dans D20 et le nombre d'hydratation des complexes. On constate que la gamme spectrale d'absorption des complexes couvre un 5 large domaine qui s'étend jusqu'au visible pour certains composés (EuL6 et EuL7). La souplesse du procédé de préparation permet de modifier la délocalisation électronique sur le ligand et donc de moduler les propriétés d'absorption. On constate également que les propriétés spectroscopiques de certains complexes sont excellentes avec des rendements quantiques quasi-quantitatifs (TbL9 et TbL10). 10 Ainsi, si l'on compare à des composés apparentés de l'art antérieur (notamment ceux décrits dans EP-0770610-A 1) les complexes de la présente invention montrent une amélioration significative de la brillance, définie comme le produit du rendement quantique de luminescence par le coefficient d'extinction molaire au maximum d'absorption (O20x Emax), avec des valeurs de 9950 et 6490 pour une 15 valeur de 4050 dans le meilleur des cas des composés apparentés précédemment décrits. Il est également noté que le nombre d'hydratation q, calculé selon la méthode de Horrocks (Horrocks, W.D.W. Jr, Sudnick, D.R. Acc. Chem. Res. 1981, 14, 384) est quasiment constant dans la série et proche de zéro, ce qui signifie que le site de B5006FR 2935973 60 complexation permet une très bonne protection des ions lanthanides vis-à-vis des interactions avec les molécules d'eau. EXEMPLE 36 LUMINESCENCE PAR EXCITATION A DEUX PHOTONS 5 Les propriétés biphotoniques des composés EuL6 et EuL7 ont été testées en soumettant une solution aqueuse de EuL6 (c = 5x 10"5 M) et une solution aqueuse de EuL7 (c = l x l O-4 M) à un rayonnement laser à 705 mn (Ti :Sapphire laser, Tsunami 3960, Specra Physics, à 80 MHz, filtre UV à 630 nm). La figure 3 représente les spectres d'émission après excitation à 705 nm 10 obtenu pour les EuL7 (courbe supérieure) et pour EuL6 (courbe inférieure). L'axe des abscisses représente les longueurs d'onde X (en nanomètre), l'axe des ordonnées représente l'intensité d'émission le (unité arbitraires). La figure 4 représente les courbes de l'intensité émise (Logle,, en unités arbitraires u.a.) en fonction de la puissance d'irradiation (Log P en mW) pour les 15 échantillons suivants : Courbe • solution de fluorescéine dans l'eau (c = I.,27x 10-4 M, pH = 11) utilisée comme référence ; Courbe • eau Courbe ^ solution aqueuse de EuL6 (c= 5x 10"5 M) 20 Courbe • solution aqueuse de EuL7, (c= 10-4 M) Les coubes montrent une relation parfaitement linéaire entre l'intensité d'émission et la puissance du faisceau laser avec une pente de 2, ce qui démontre que le phénomène d'émission est du à une absorption biphotonique. Le calcul de la section efficace d'absorption à deux photons à 705 nm, 6705, a été effectué selon les 25 méthodes décrites par Rumi, M, et al., [J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 9500] en utilisant la fluorescéine comme référence (x705 = 32.5 GM selon Xu, C Bioimaging 1996, 4, 198-207), et donne des valeurs de 6705 de 28,6 GM pour EuL6 et 27,1 GM pour EuL7, qui démontre l'efficacité d'émission des complexes après absorption à deux photons. B5006FR EXEMPLE 37 DETECTION DE CATIONS EN SOLUTION Lorsqu'un complexe luminescent possède un site de reconnaissance électroniquement relié au site de complexation, les propriétés de luminescence du complexe peuvent être perturbées par la présence d'un analyte qui se lie sur le site de reconnaissance. Cette propriété a été étudiée pour le complexe Na[EuL7] de l'exemple 28. La figure 5 représente l'évolution de l'intensité d'émission de Na[EuL7] en solution dans l'eau tamponnée (TRIS/HC1, 0.01 M, pH 7.0) en fonction de la quan- tité relative de cuivre ajoutée à la solution, pour une longueur d'onde d'excitation Xexc de 350 nm. La courbe montre que le complexe qui se forme est un adduit con-tenant un atome de cuivre par complexe Na[EuL7]. La courbe inférieure correspond à l'intensité d'émission à 585 nm et la courbe supérieure à une émission à 614 nm. La figure 6 représente l'évolution de l'intensité relative d'émission du 15 complexe Na[EuL7] en fonction de différents cations étudiés et pour différentes valeurs des concentrations d'ions ajoutés. L'intensité relative est représentée sur l'axe z, l'axe y correspond aux quatre cations étudiés (respectivement Cul+, Zn2+. Mg2+, K+ et Na+ de bas en haut) et l'axe des x représente l'évolution pour les quan- tités ajoutés mentionnées dans les légendes. Cette figure montre que les complexes 20 de l'invention ont une très bonne sensibilité et une sélectivité vis-à-vis du cuivre. A l'exception du cuivre, l'addition de cations métalliques ne conduit qu'à de faibles variations de l'intensité d'émission. Dans la série des cations alcalins et alcalino-terreux, les variations restent faibles, même lorsque les concentrations en cations sont très élevées (jusqu'à 100 équivalents de NaCI). Seul le cuivre(II) 25 conduit à une très forte diminution de la luminescence, due probablement à un transfert de charge intramoléculaire lors de la complexation du cuivre . Cet exemple montre la sélectivité de détection de Na[EuL7] vis-à-vis du cuivre et une forte sensibilité de la détection dès l'ajout de 1 équivalent. REVENDICATIONS1. Composé répondant à la formule 7N~ 'N I I N N---- (j,) ICOOR COOR COOR COOR dans laquelle : chacun des Y' et Y2 représente un atome H ou un groupe alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone, ou bien Y' et Y2 forment ensemble un biradical formant un cycle aromatique avec les deux atomes de carbone qui le portent ; A représente -CC-,ùCO-NH-, ou ùCO-O- ; Xest: * H, NH2, un halogène, * un groupe COOR' dans lequel R' est H, un cation alcalin, un groupe ammonium quaternaire N(R3)4+ dans lequel R3 est H ou une chaîne alkyle linéaire, un groupe succiimide -N-(CO-CH2-CH2-CO)-, ou un groupe pentafluorophényle -C6F5 ; * une fonction biotine (-CO-(CH2)4-05H7N2OS), un groupement polyhétéroaromatique ou un éther couronne, - n est 0 ou 1 ; E est un segment de liaison constitué par au moins un groupe choisi parmi -C6H4-, C,oH6-, -CO-NH-, les groupes peptide contenant de 1 à 4 acides aminés, et les groupes alkylène qui ont de 1 à 10 atomes de carbone et qui comprennent éventuellement au moins un hétéroatome dans la chaîne carbonée, - chacun des groupes R représente H ou un métal alcalin ou un groupe ammonium quaternaire N(R3)4+. 2935973 B5006FR 63 2. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que chacun des groupes Y' et Y2 représente H. 3. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le groupe A est un groupe -C=C-. 5 4. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le groupe A est un groupe ûCO-NH-, 5. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le groupe A est un groupe ûCO-O- ; 6. Complexe d'un ion lanthanide choisi parmi les ions Eu3+, Tb3+, Dy3+, 10 Sm3+, Er3+, Yb3+, Pr3+ et Nd3+ et d'un ligand choisi parmi les composés selon l'une des revendications 1 à 5. 7. Complexe selon la revendication 6, dans lequel le groupe X du ligand du complexe est Br, I, une amine, ou un groupe COOR' dans lequel R' est H, Na, un groupe succiimide -N-(CO-CH2-CH2-CO)-, ou un groupe pentafluorophényle - 15 C6F5 ; 8. Complexe selon la revendication 6, dans lequel le groupe X du substituant ûA-(E)ä-X du ligand est un ether couronne ou une terpyridine. 9. Complexe selon la revendication 6, dans lequel le ligand porte un groupe ûA-(E)ä-X dans lequel A est un groupe C--C, E comprend un groupe 20 phényle et A est un groupe terminal NaCOO-. 10. Complexe selon la revendication 6, dans lequel le groupe terminal X du substituant ûA-(E)n-X du ligand est un groupe biotine. 11. Procédé de préparation d'un composé L selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comprend : - une 1 ère étape au cours de laquelle on fait réagir un composé 5 répondant à la formule 2935973 B5006FR B CO2R' CO2R' CO2R' CO,R' 5 dans laquelle les groupes R' représentent chacun un groupe alkyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone, et chacun des groupes Yl et Y2 représente un atome H ou un groupe alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone, ou bien Y1 et Y2 5 forment ensemble un biradical formant un cycle aromatique avec les deux atomes de carbone qui le portent ; avec un réactif approprié, en présence d'un catalyseur organométallique, dans un solvant organique, pour remplacer le brome par un groupe A-Z dans lequel A est un groupe -CC-,ùCO-NH-, ou ù CO-O- ; 10 - une étape au cours de laquelle les groupes R' sont remplacés par H, un métal alcalin ou un groupe ammonium quaternaire N(R3)4+ dans lequel R3 est H ou une chaîne alkyle linéaire ; une ou plusieurs étapes pour remplacer le groupe Z par un groupe (E)ä-X, lorsque Z est différent d'un groupe (E)n-X dans lequel : 15 * X estt H ; NH2 ; un halogène ; un groupe COOR1 dans lequel R1 est H, un cation alcalin, un groupe ammonium quaternaire N(R3)4+, un groupe succinimide -N-(CO-CH2-CH2-CO)-, ou un groupe pentafluorophényle -C6F5 ; une fonction biotine (-CO-(CH2)4-05H7N2OS) ; un groupement polyhétéroaromatique ou un éther 20 couronne, * nest0ou l ; * E est un segment de liaison constitué par au moins un groupe choisi parmi -C6H4-, -C10H6-, -CO-NH-, les groupes peptide contenant de 1 à 4 acides aminés, et les groupes alkylène qui ont de 1 à 10 atomes de 64 2935973 B5006FR 65 carbone et qui comprennent éventuellement au moins un hétéroatome dans la chaîne carbonée. 12. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que l'étape de remplacement des groupes R' du type alkyle linéaire par un cation de métal alcalin 5 Na+, K+ ou Li+ est effectué par réaction avec NaOH, KOH ou LiOH respectivement, dans un solvant polaire à une température entre 20 et 100°C. 13. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce qu'il comprend une étape supplémentaire consistant à faire réagir le produit obtenu avec un acide fort dans l'eau ou avec un hydroxyde d'ammonium N(R3)40H pour remplacer le 10 cation de métal alcalin respectivement par H ou par N(R3). 14. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que l'étape de remplacement des groupes R' du type alkyle ramifié est effectué par réaction avec l'acide trifluoroacétique (TFA) dans un solvant organique. 15. Procédé selon l'une des revendications 11 à 13, caractérisé en ce que 15 l'étape de remplacement de R' est effectuée sur un produit portant le groupe A-(E)r,-X final, ou sur un produit intermédiaire obtenu à la fin de la 1 ère étape. 16. Procédé selon la revendication 1l, pour la préparation d'un composé L dans lequel A est un groupe ùCO-NH- ou un groupe --CO-O-, caractérisé en ce que le réactif utilisé lors de la lèCe étape est une amine X.-(E)ä-NH2, respectivement un 20 alcool X-(E)ä-OH, en présence de monoxyde de carbone gazeux, et en ce que : * X est H ; NH2 ; un halogène ; un groupe COORI dans lequel R1 est H, un cation alcalin, un groupe succinimide -N-(CO-CH2-CH2-CO)-, ou un groupe pentafluorophényle (-C6F5) ; une fonction biotine -CO-(CH2)4-05H7N2OS ; un groupement polyhétéroaromatique ou un éther couronne, 25 * n est 0 ou 1 ; * E est un segment de liaison constitué par au moins un groupe choisi parmi -C6H4-, C 1 OH6-, -CO-NH-, les groupes peptide contenant de 1 à 4 acides aminés, et les groupes alkylène qui ont de 1 à 10 atomes de carbone et qui comprennent éventuellement au moins un hétéroatome dans la chaîne 30 carbonée. 2935973 B5006FR 66 17. Procédé selon la revendication 11, pour la préparation d'un composé L dans lequel A est un groupe C=C, caractérisé en ce que le réactif utilisé pour la réaction avec le composé 5 dans la lère étape porte un groupe terminal HC=C-, et la réaction est effectuée en présence d'un complexe de Pd et de triphénylphosphine. 5 18. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce que l'on fait réagir le composé 5 avec un réactif HC=C-(E)ä-X pour obtenir le composé 6, selon le schéma réactionnel Br Y1 I Yi N^N^N N C.02R' CO2R' CO2R' CO2R' Y, N" N N N N O2R'O2R' R' CO2R' H 5 6 la réaction étant effectuée en présence d'un complexe de Pd et de triphényl-10 phosphine, dans un solvant organique, à une température entre 20 et 80°C. 19. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes représentées par le schéma réactionnel suivant TMS H Br R' O2R' C R' CO2R' _N_ /rv~ CO2R' CO2R' CO2R' CO2R' CO2R' CO2R' CO2R CO2R' Y, 5 7 8 dans lequel : B5006FR 2935973 67 La lere étape consiste à faire réagir le composé 5 avec le triméthylsilylacétylène en présence d'un catalyseur organométallique dans un solvant organique aprotique ; La 2ème étape du schéma réactionnel consiste à faire réagir le composé 7 5 obtenu à la fin de l'étape précédente, avec un agent de déprotection dans un solvant aprotique, à une température entre 0 et 80°C.. 20. Procédé selon la revendication 17, caractérisé en ce que : il comprend une étape consistant à faire réagir un composé 8 répondant à la formule H y, / C 02R' CO2R' CO2R' CO2R' 10 8 dans laquelle R' représente un groupe alkyle linéaire ou ramifié ayant de 1 à 6 atomes de carbone, avec un composé F(r)-(E),,-X, puis une étape consistant à remplacer les groupes R' par des groupes R choisis parmi H, les cations alcalins et les sels d'ammonium quaternaires N(R3)4+, 15 le groupe F(r) est H, Cl, Br, I, -O-SO2-CF_, un groupe acide boronique (B(OH)2), un groupe ester d'acide boronique (B(O-Alkyle)2), un groupe trialkyl stannyle ou un trialkyl silyle ; X est H ; NH2 ; un halogène ; un groupe COOR' dans lequel R' est H, un cation alcalin, un groupe succinimide -N-(CO-CH2-CH2-CO), ou un groupe 20 pentafluorophényle (-C6F5) ; une fonction biotine (-CO-(CH2)4-05H7N20S) ; un groupement polyhétéroaromatique ou un éther couronne, n est 0 ou 1 ; B5006FR 2935973 68 E est un segment de liaison constitué par au moins un groupe choisi parmi -C6H4-, -C10H6-, -CO-NH-, les groupes peptide contenant de 1 à 4 acides aminés, et les groupes alkylène qui ont de 1 à 10 atomes de carbone et qui comprennent éventuellement au moins un hétéroatome dans la chaîne 5 carbonée. 21. Procédé de préparation d'un complexe selon l'une des revendications 6 à 10, caractérisé en ce qu'il consiste à mélanger en quantités équimoléculaires un ligand choisi parmi les composés selon l'une des revendications 1 à 5 et un sel de lanthanide, à chauffer le mélange, puis à le neutraliser à un pH entre 6 et 8 après 10 refroidissement. 22. Procédé selon la revendication 21, caractérisé en ce que le sel de lanthanide est choisi parmi les nitrates, les chlorures, les perchlorates et les trifluorométhylsulfonates. 23. Utilisation d'un complexe selon la revendication 7, pour le marquage 15 de molécules qui portent un groupe amine, alcool, thiol, acide carboxylique ou ester activé. 24. Utilisation d'un complexe selon la revendication 8, pour la détection de cations métalliques en solutions. 25. Utilisation d'un complexe selon la revendication 9, comme marqueur 20 luminescent pour l'absorption a deux photons 26. Utilisation d'un complexe selon la revendication 10, pour la reconnaissance de l'avidine, de la streptavidine et de la neuravidine.