Brevet FR2941454A1 — publié le 20100730

La présente invention concerne un procédé de synthèse asymétrique du (1 S,2R)-milnacipran ainsi qu'un intermédiaire chloré sous la forme énantiomérique (1S,2R) majoritaire. Le milnacipran est un antidépresseur inhibiteur de la recapture de la sérotonine-noradrénaline préconisé dans le traitement de la dépression (FR 2 508 035). De nombreuses synthèses du composé racémique ont été décrites dans la littérature (EP0377381; EP0200638; EP1757597; EP1767522; EP 1 845 084 ; EP 1 770 084 ; Shuto S. et al., J. Med. Chem. 1995, 38, 2964-2968). Par ailleurs, il a été démontré récemment que l'énantionmère (1S,2R)- milnacipran était plus actif que le mélange racémique (Viazzo P. et al., Tetrahedron Lett. 1996, 37, 26, 4519-4522). Une première méthode pour obtenir cet énantiomère sous forme enrichie a donc été la séparation ou le dédoublement des énantiomères du mélange racémique (Bonnaud B. et al., J. Chromatogr. 1985, 318, 398-403). Cependant, une telle méthode n'est pas rentable au niveau industriel puisqu'il y a une perte d'au moins la moitié du produit. Des synthèses énantiosélectives ont alors été développées pour préparer le milnacipran énantiomériquement enrichi (Doyle M. P. et Hu W. Adv. Synth. Catal. 2001, 343, 299-302 ; Roggen H. et al., Bioorg. Med. Chem. 2007, 17, 2834-2837 ; Shuto S. et al., Tetrahedron Lett. 1996, 37, 641-644 ; Wang X.-Q. et al., Chinese journal of Pharmaceuticals 2004, 35, 259-260 ; WO 2005/118 564). Cependant, la plupart de ces synthèses utilise l'azoture de sodium comme réactif, ce qui est difficilement envisageable au niveau industriel du fait de sa toxicité et de son instabilité pouvant conduire à une explosion. Il existe donc encore un besoin important de nouvelles méthodes de synthèse du (l S,2R)-milnacipran qui soient plus sûres, plus économiques et plus efficaces. La présente invention a ainsi plus particulièrement pour objet un procédé de synthèse d'un sel d'addition d'acide pharmaceutiquement acceptable du (lS,2R)-milnacipran de formule (I) suivante : comprenant les étapes successives suivantes : (a) réaction du phénylacétonitrile et de la (R)-épichlorhydrine en présence d'une base contenant un métal alcalin, suivie d'un traitement basique, puis d'un traitement acide pour donner la lactone de formule (II) suivante : (II) (b) réaction de la lactone (II) obtenue à l'étape (a) précédente avec MNEt2, où M représente un métal alcalin, ou avec NHEt2 en présence d'un complexe acide de Lewis-amine où l'amine est choisie parmi la diéthylamine, la triéthylamine, la diisopropyléthylamine, la N,N-diéthylaniline, la N,N-diméthylbenzylamine, la N-méthylpipéridine, la N-méthylmorpho fine, la N,N'-diméthylpipérazine et l'hexaméthylène tétramine, pour donner l'amide-alcool de formule (III) suivante : OH (III) (c) réaction de l'amide-alcool de formule (III) obtenu à l'étape (b) précédente avec du chlorure de thionyle pour donner l'amide chloré de formule (IV) 20 suivante : NH2 (I) CI (IV) (d) réaction de l'amide chloré de formule (IV) obtenu à l'étape (c) précédente avec un sel de phtalimide, tel que le sel potassique, pour donner le dérivé phtalimide de formule (V) suivante : CN (V) (e) hydrolyse du groupement phtalimide du dérivé phtalimide de formule (V) obtenu à l'étape (d) précédente pour donner le (1S, 2R)-milnacipran, et (f) salification du (lS,2R)-milnacipran obtenu à l'étape (e) précédente dans un système de solvants approprié, en présence d'un acide pharmaceutiquement acceptable. Dans la présente invention, on entend par � pharmaceutiquement acceptable � ce qui est utile dans la préparation d'une composition pharmaceutique qui est généralement sûr, non toxique et ni biologiquement ni autrement non souhaitable et qui est acceptable pour une utilisation vétérinaire de même que pharmaceutique humaine. Par � sel d'addition d'acide pharmaceutiquement acceptable � d'un composé, on entend désigner dans la présente invention des sels qui sont pharmaceutiquement acceptables, comme défini ici, qui possèdent l'activité pharmacologique souhaitée du composé parent et qui sont obtenus par addition d'un acide pharmaceutiquement acceptable sur le composé. Par � acide pharmaceutiquement acceptable �, on entend notamment des acides inorganiques tels que l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide nitrique, l'acide phosphorique et similaires, ou des acides organiques tels que l'acide acétique, l'acide benzènesulfonique, l'acide benzoïque, l'acide camphresulfonique, l'acide citrique, l'acide éthane-sulfonique, l'acide fumarique, l'acide glucoheptonique, l'acide gluconique, l'acide glutamique, l'acide glycolique, l'acide hydroxynaphtoïque, l'acide 2-hydroxyéthanesulfonique, l'acide lactique, l'acide maléique, l'acide malique, l'acide mandélique, l'acide méthanesulfonique, l'acide muconique, l'acide 2-naphtalènesulfonique, l'acide propionique, l'acide salicylique, l'acide succinique, l'acide dibenzoyl-L-tartrique, l'acide tartrique, l'acide p-toluènesulfonique, l'acide triméthylacétique, l'acide trifluoroacétique et similaires. De préférence, il s'agit de l'acide chlorhydrique. Etape (a) : Cette étape correspond à la séquence réactionnelle suivante : CN base (1) contenant un base acide HO OH (4) + ~CI (a1) (3) OH O métal alcalin NC (a2) (a3) (2) Par � base contenant un métal alcalin �, on entend, au sens de la présente invention, une base de formule RM, où : M représente un métal alcalin, et en particulier le sodium (Na), le potassium (K) ou le lithium (Li), et R représente un atome d'hydrogène, un groupement alkyle (tel que butyle ou hexyle), alkoxy (tel que tertiobutyloxy) ou NR'2, avec R' représentant un atome d'hydrogène, un groupe alkyle (tel qu'isopropyle) ou Si(CH3)3. Par � alkyle �, on entend, au sens de la présente invention, une chaîne hydrocarbonée saturée, linéaire ou ramifiée, comprenant 1 à 6 atomes de carbone. Il 25 s'agira en particulier d'un groupe butyle, hexyle ou isopropyle. Par � alkoxy �, on entend, au sens de la présente invention, un groupe alkyle, tel que défini ci-dessus, lié au reste de la molécule par l'intermédiaire d'un atome d'oxygène. Il s'agira en particulier d'un groupement tertiobutyloxy. La base contenant un métal alcalin sera choisie en particulier parmi NaH, NaNH2, l'hexaméthyldisilazane de potassium ou de lithium (KHMDS ou LiHMDS), le butyl lithium, l'hexyl lithium, le tertiobutylate de sodium ou de potassium, ou le diisopropylamide de lithium (LDA). Avantageusement, il s'agira de NaH ou de NaNH2, et de préférence il s'agira de NaNH2. Le traitement basique ultérieur permet d'hydrolyser la fonction nitrile du composé (3) en acide carboxylique pour donner le composé (4). Un hydroxyde de métal alcalin est particulièrement adapté pour ce traitement tel que NaOH ou KOH, et en particulier NaOH. Par ailleurs, le traitement acide permet de cycliser le dérivé hydroxy-acide (4) en lactone (II). Un acide particulièrement adapté pour ce traitement est l'acide 15 chlorhydrique, notamment en solution aqueuse par exemple à 25%. Les étapes (al), (a2) et (a3) seront avantageusement réalisées dans un même réacteur, sans isolation des produits intermédiaires (3) et (4) (procédé qualifié en anglais de � one-pot �). Dans ces conditions, un même et unique solvant sera avantageusement utilisé pour ces 3 étapes, et de préférence sera le toluène, la base et 20 l'acide des étapes (a2) et (a3) étant cependant introduits avantageusement sous forme de solution aqueuse. Etape (b) : Par � métal alcalin �, on entend plus particulièrement le sodium, le potassium 25 et le lithium. MNEt2 peut être obtenu notamment par réaction de NHEt2 avec un alkoxyde de métal alcalin. MNEt2 sera alors avantageusement formé in situ, c'est-à-dire par addition des deux réactifs, NHEt2 et l' alkoxyde de métal alcalin, dans le milieu réactionnel contenant la lactone. 30 Par � alkoxyde de métal alcalin �, on entend, au sens de la présente invention un composé de formule Alk-O-M, où M représente un métal alcalin tel que défini ci- dessus et Alk représente une chaîne hydrocarbonée saturée, linéaire ou ramifiée, comportant de 1 à 6, de préférence de 1 à 4, atomes de carbones. Il s'agira en particulier de MeONa, MeOK, EtONa ou encore EtOK. Lorsque M = Li, LiNEt2 peut être formé par addition d'un lithien, tel que le butyllithium, sur NHEt2. Dans ce cas, LiNEt2 sera de préférence préparé préalablement avant d'être introduit dans le milieu réactionnel contenant la lactone. Par � lithien �, on entend notamment, au sens de la présente invention, un dérivé de formule Alk'Li avec Alk' représentant une chaîne hydrocarbonée saturée, linéaire ou ramifiée, comportant de 1 à 6, de préférence de 1 à 4, atomes de carbones. Il s'agit en particulier du butyllithium. Par � acide de Lewis �, on entend, au sens de la présente invention, une entité chimique capable d'accepter un doublet électronique et donc capable de se complexer à l'oxygène du carbonyle C=0 de la lactone (II). Cela permet d'activer le carbonyle de la lactone et donc de favoriser l'addition du nucléophile (NHEt2) sur cette dernière. En particulier, l'acide de Lewis pourra être A1C13. De préférence, cette étape sera réalisée en présence de diéthylamine et d'un complexe A1C13-NHEt2. Cette étape peut être réalisée notamment dans le toluène comme solvant, y compris dans le cas de l'utilisation de NHEt2 en présence d'un acide de Lewis alors que l'on aurait pu s'attendre à une réaction d'acylation de Friedel-Crafts entre la lactone et le toluène en présence d'un acide de Lewis tel que A1C13. De préférence, cette étape sera réalisée en présence de NHEt2 et A1C13 comme acide de Lewis. Etape (c) : Lors de cette étape de chloration, de l'acide chlorhydrique est formé. Il est important d'éliminer ce composé avant l'étape suivante. L'utilisation d'un solvant comme le toluène permet de faciliter son élimination par concentration du milieu réactionnel. En effet, le toluène permet d'éliminer l'acide chlorhydrique par co- évaporation plus facilement qu'un solvant tel que le chlorure de méthylène, du fait de son point d'ébullition plus élevé. Etape (d) : Cette étape sera avantageusement réalisée avec le sel potassique de phtalimide. La réaction pourra être avantageusement réalisée dans le toluène comme solvant. Etape (e) : Cette étape d'hydrolyse du dérivé phtalimide en amine primaire est avantageusement réalisée par réaction avec de l'hydrazine, une alkylamine telle que la méthylamine, ou une hydroxyalkylamine telle que l'éthano lamine. Par � alkylamine �, on entend, au sens de la présente invention, une amine de formule Alk"NHz avec Alk" représentant une chaîne hydrocarbonée saturée, linéaire ou ramifiée, comportant de 1 à 6, de préférence de 1 à 4, atomes de carbones. Il s'agit en particulier de la méthylamine. Par � hydroxyalkylamine �, on entend, au sens de la présente invention, une hydroxy-amine de formule HO-R2-NH2 avec R2 représentant une chaîne hydrocarbonée saturée, linéaire ou ramifiée, comportant de 1 à 6, de préférence de 1 à 4, atomes de carbones. Il s'agit en particulier de l'éthanolamine. De préférence, cette étape sera réalisée en présence d'éthanolamine. Cette étape pourra avantageusement être réalisée dans un solvant comme le 20 toluène. Cependant, l'hydrazine, l'alkylamine ou l'hydroxyalkylamine pourra être ajoutée sous forme de solution aqueuse. Etape (f) : Cette étape permet de salifier le (1S,2R)-milnacipran obtenu à l'étape (e) 25 précédente et en même temps de purifier et d'isoler le sel d'addition d'acide du (1 S,2R)-milnacipran par cristallisation puis filtration. De préférence, cette étape sera réalisée en présence d'acide chlorhydrique pour former le chlorhydrate de (1S, 2R)-milnacipran. Avantageusement, le système de solvants utilisé pour la salification 30 comprendra du toluène, et de préférence sera un mélange de toluène, d'acétate d'isopropyle et d'isopropanol. De préférence, ce mélange aura la composition suivante, par rapport au volume total des solvants : o à 50%, avantageusement de 30 à 40%, en volume de toluène, 40 à 90%, avantageusement de 50 à 80%, en volume d'acétate d'isopropyle, et 5 à 25%, avantageusement de 10 à 20%, en volume d'isopropanol. En particulier, les étapes (a) à (e) seront avantageusement réalisées dans un milieu réactionnel comprenant un même et unique solvant, tel que le toluène. En effet, l'utilisation d'un même et unique solvant sur l'ensemble des étapes (mis à part la dernière étape de salification) permet de simplifier la procédure de préparation du composé et d'en diminuer le coût dans la mesure où le solvant ne doit pas être changé à chaque étape. Il n'est donc pas nécessaire dans ces conditions d'isoler les intermédiaires réactionnels même si des étapes d'extraction peuvent être réalisées afin d'éliminer certaines impuretés qui pourraient être gênantes pour le bon déroulement des étapes suivantes. Les inventeurs ont ainsi découvert que l'ensemble de la séquence réactionnelle pouvait être réalisée, contre toute attente, avec un même et unique solvant pour les étapes (a) à (e), et de préférence avec le toluène. Dans ces conditions, il sera avantageux de n'isoler aucun des produits intermédiaires obtenus aux étapes (a) à (d), et de préférence (a) à (e), du milieu réactionnel. On entend ainsi que les produits intermédiaires obtenus seront toujours en solution dans le milieu réactionnel, de préférence dans le toluène, et ne seront jamais isolés sous une forme sèche ou quasiment sèche. Des étapes de concentration du milieu réactionnel peuvent être cependant réalisées, en particulier suite à des étapes d'extraction, mais il sera avantageux de ne pas évaporer le milieu réactionnel à sec pour des raisons notamment de coût et de praticité. Cela présente l'avantage supplémentaire d'éviter des pertes de produit supplémentaires lors d'étapes de purification intermédiaires.30 Ainsi, un tel procédé permet d'obtenir le (l S,2R)-milnacipran avec un excès énantiomérique (ee) d'au moins 95%, et de préférence d'au moins 98%, et avntageusement avec un rendement supérieur à 40%, de préférence supérieur à 45%, par rapport à la (R)-épichlorhydrine utilisée comme produit de départ. La présente invention a également pour objet le composé de formule (IV) suivante, sous la forme énantiomérique (1 S,2R) : en particulier comme intermédiaire de synthèse. 10 Ce composé est obtenu avantageusement avec un excès énantiomérique supérieur à 90%, de préférence supérieur à 95%, et encore de préférence supérieur à 98%. La présente invention sera mieux comprise à la lumière des exemples non 15 limitatifs qui suivent. EXEMPLES : Le chlorhydrate de (1 S,2R)-milnacipran, sur une base de 41 kg de produit 20 fini, est synthétisé selon le schéma et le mode opératoire suivant : CI (IV), 1. NaNHZ Toluène 2. NaOH, A 3. HCI 25%, toluène 4. Na2CO3 aq R(-) épichlorhydrine M : 92,52 Lactone (1S,5R) M :174,19 5. AICI3 / NHEt2 / toluène CI M : 117,15 Phénylacétonitrile + CN Amide alcool 1 M : 247,3 Amide phthalimido M : 376,5 OH Amide chloré M: 265,8 Cl 6. SOCI./toluène 7. Phthalimide potassique 7.- 8. Ethanolamine/toluène 9. HCl/Isopropanol/Acétate d'isopropyle Etapes 1 à 4 : 28 kg d'amidure de sodium (682 moles) sont mis en suspension dans 400 1 de toluène puis sous forte agitation 85,5 kg de phénylacétonitrile (729,5 moles) dilué dans 10 1 de toluène sont coulés à une température comprise entre 0 et 5°C. Le milieu M : 282,8 NH2,HCI réactionnel est agité pendant au moins 1 heure à 10°C. 27 kg d' épichlorhydrine chirale (292 moles) en solution dans 20 1 de toluène sont ajoutés en maintenant la température à 10°C. A la fin de la coulée, le milieu est agité pendant 2 heures minimum. L'hydrolyse est effectuée par coulée du milieu réactionnel sur une solution aqueuse de 240 1 en maintenant la température entre 5 et 40°C. Après concentration de la solution obtenue, 115 kg de soude à 30% sont ajoutés et le milieu est chauffé à 95 °C pour permettre l'hydrolyse des fonctions nitrile. Le milieu est lavé deux fois par 190 1 de toluène. Les phases toluèniques sont éliminées et la phase aqueuse récupérée après ajout de 270 1 de toluène est acidifiée par une solution d'acide chlorhydrique à 25 % jusqu'à un pH compris entre 1 et 2. Le milieu est ensuite chauffé à 60 °C pendant 3 heures minimum. Après décantation, la phase toluènique contenant la lactone est lavée par 140 1 d'eau, neutralisée par une solution de carbonate de sodium à 10% jusqu'à un pH compris entre 8 et 9 puis lavée à nouveau par 1401 d'eau. La phase toluènique obtenue est concentrée jusqu'à un volume de 1201 contenant 38 kg de lactone (218 moles). Etape 5 : 34 kg de chlorure d'aluminium (255 moles) sont mis en suspension dans 240 1 de toluène puis 38,3 kg de diéthylamine (523,5 moles) sont ajoutés en maintenant la température entre 15 et 30°C. Le concentrat de lactone (38kg) obtenu précédemment est coulé sur le milieu maintenu à 25°C. Le milieu réactionnel est agité pendant 1 heure 30 minimum. La formation d'un précipité est observée. Ce milieu réactionnel est hydrolysé par 345 1 d'eau puis filtré après ajout d'adjuvant de filtration. Après décantation, la phase organique est lavée deux fois par 235 1 et 175 1 d'eau puis concentrée jusqu'à l'obtention d'un concentrat d'amide alcool de 1101. Etape 6: 24,7 kg de chlorure de thionyle (207moles) sont coulés sur le concentrat en 1 heure à 30 25 °C sous forte agitation. Le milieu réactionnel est concentré sous vide en limitant la température à 50°C. Cette opération de concentration est répétée deux fois après ajout de 2 fois 62 1 de toluène, pour donné un concentrat d'amide chloré. Etape 7 : Le concentrat amide chloré obtenu à l'étape précédente est coulé sur une suspension de phtalimide de potassium (51,9 kg de phtalimide de potassium (280 moles) dans 155 1 de toluène) et le milieu est chauffé à 85°C pendant 3 heures minimum. Le milieu réactionnel refroidi à 45°C est lavé deux fois par 130 1 d'eau. Après décantation, la phase toluènique obtenue contient environ 74 kg d'amide phtalimido (196,5 moles). Etape 8 : 92,4 kg d'éthanolamine (1513 moles) sont introduits sur la solution toluènique d'amide phtalimido sous agitation forte, le milieu est chauffé à 82,5°C pendant 2 heures. Après refroidissement et ajout de 247 1 de toluène, le milieu réactionnel est lavé avec 225 1 d'une solution aqueuse saline à 20% en NaCl. Après 2 contre-extractions de la phase aqueuse avec 52 1 de toluène, les phases toluèniques sont regroupées et lavées deux fois par 225 1 de solution saline à 20% en NaCl. Après décantation, 185 1 d'eau sont ajoutés sur la phase toluènique et le milieu est acidifié à pH compris entre 2 et 3 par de l'acide chlorhydrique 25%. Après décantation, la phase organique acide est extraite de nouveau par 74 1 d'eau. La phase organique est ensuite éliminée. Les phases aqueuses acides regroupées sont extraites deux fois par 370 et 150 1 de toluène après retour à pH basique compris entre 12 et 13 par une solution aqueuse de soude à 20%. Les phases organiques regroupées sont lavées par 801 d'eau puis concentrées. Etape 9 : Sur le concentrat toluènique sont ajoutés 283 1 d'acétate d'isopropyle et 48,4 1 d'isopropanol. Sur cette solution organique est coulée une solution 5N d'acide chlorhydrique dans l'isopropanol jusqu'à un pH compris entre 3 et 4 (environ 30 1 de solution) à une température de 30°C. Durant l'introduction de la solution acide, le chlorhydrate précipite, le milieu est refroidi à 10°C et maintenu pendant 2 heures minimum à cette température. La suspension est filtrée, lavée 3 fois avec 56 1 d'acétate d'isopropyle. Le produit obtenu est séché sous vide à 70°C. 41 kg de chlorhydrate de (1 S,2R)-milnacipran (145 moles) sont obtenus, soit un rendement de 49,6% par rapport à l'épichlorhydrine chirale. REVENDICATIONS1. Procédé de synthèse d'un sel d'addition d'acide pharmaceutiquement acceptable du (1 S,2R)-milnacipran de formule (I) suivante : comprenant les étapes successives suivantes : (a) réaction du phénylacétonitrile et de la (R)-épichlorhydrine en présence d'une base contenant un métal alcalin, suivie d'un traitement basique, puis d'un traitement acide pour donner la lactone de formule (II) suivante : 10 " (II) (b) réaction de la lactone (II) obtenue à l'étape (a) précédente avec MNEt2, où M représente un métal alcalin, ou avec NHEt2 en présence d'un complexe acide de Lewis-amine où l'amine est choisie parmi la diéthylamine, la triéthylamine, la diisopropyléthylamine, la N,N-diéthylaniline, la N,N- 15 diméthylbenzylamine, la N-méthylpipéridine, la N-méthylmorpholine, la N,N'-diméthylpipérazine et l'hexaméthylène tétramine, pour donner l'amide-alcool de formule (III) suivante : NH2 (I) OH(c) réaction de l'amide-alcool de formule (III) obtenu à l'étape (b) précédente avec du chlorure de thionyle pour donner l'amide chloré de formule (IV) suivante : CI (IV) (d) réaction de l'amide chloré de formule (IV) obtenu à l'étape (c) précédente avec un sel de phtalimide, tel que le sel potassique, pour donner le dérivé phtalimide de formule (V) suivante : (e) hydrolyse du groupement phtalimide du dérivé phtalimide de formule (V) obtenu à l'étape (d) précédente pour donner le (1S, 2R)-milnacipran, et (f) salification du (lS,2R)-milnacipran obtenu à l'étape (e) précédente dans un système de solvants approprié, en présence d'un acide pharmaceutiquement acceptable. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que les étapes (a) à (e) sont réalisées dans un milieu réactionnel comprenant un même et unique solvant. 3. Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que le solvant est le toluène. 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé en ce qu'aucun des produits intermédiaires obtenus aux étapes (a) à (d), et de préférence (a) à (e), n'est isolé du milieu réactionnel.20 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que l'étape (b) est réalisée en présence de NHEt2 et de A1C13 comme acide de Lewis. 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que l'étape d'hydrolyse (e) est réalisée par réaction avec l'hydrazine, une alkylamine telle que la méthylamine, ou un hydroxyalkylamine telle que l'éthano lamine. 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que l'étape de salification (f) est réalisée en présence d'acide chlorhydrique pour 10 donner le chlorhydrate de (1 S,2R)-milnacipran. 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que l'étape de salification (f) est réalisée dans un système de solvants comprenant du toluène. 9. Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que le système de solvants est un mélange de toluène, d'acétate d'isopropyle et d'isopropanol. 10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce que le système de solvants 20 a la composition suivante, par rapport au volume total des solvants : 0 à 50%, avantageusement de 30 à 40% en volume de toluène, 40 à 90%, avantageusement de 50 à 80%, en volume d'acétate d'isopropyle, et 5 à 25%, avantageusement de 10 à 20%, en volume d'isopropanol. 11. Composé de formule (IV) suivante sous la forme énantiomérique (1S,2R) : 15 25 CI