Brevet FR2936527A1 — publié le 20100402

Animaux non humains présentant des désordres psychiatriques, leur procédé d'obtention et leur utilisation pour le criblage de médicaments. L'invention concerne des animaux non-humains présentant des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, leur procédé d'obtention et leur utilisation pour le criblage de médicaments susceptibles de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques. L'autisme est une pathologie caractérisée par un repli sur soi et une perte des relations sociales. Dans cette maladie, on parle plutôt d'un syndrome qui inclut une population très hétérogène de patients présentant des troubles du comportement. L'autisme est une maladie qui se manifeste à la petite enfance (généralement entre 2 et 6 ans) et dont le diagnostic est posé par des spécialistes et basé sur l'existence de perturbations comportementales. Même si cette maladie présente une grande diversité dans ses manifestations, les principaux symptômes se situent au niveau socioculturel. Il s'agit principalement d'un retard de langage et de troubles dans les interactions sociales. On constate aussi des comportements néophobiques, des stéréotypies motrices et une anxiété. L'incidence de cette maladie est importante. En France, l'autisme concerne 100 000 personnes et près de 150 000 avec les troubles envahissants du développement selon le Ministère de la Santé et des Solidarités (avril 07). Statistiquement, 1 enfant sur 300 environ (et 1/165 aux USA) est atteint de trouble de type autistique et la croissance estimée est de 4000 nouveaux cas par an en France. Le nombre de malades est de 1,5 million aux USA, autant en Europe avec selon le CDC un taux de croissance de 20% par an. Le taux mondial généralement admis est de 10%. Il est clairement admis que l'étiologie de cette maladie n'est pas psychologique mais organique, ce qui explique la faible efficacité des thérapies actuelles. Toutefois la cause 30 biologique n'est pas encore connue. Des études génétiques montrent que les chromosomes 6,7 et 15 pourraient être impliqués dans certains cas d'autisme. Cependant, lorsqu'une cause génétique est évoquée, la fréquence d'apparition d'une pathologie reste relativement constante d'une génération à l'autre. Toutefois, si certains gènes ou régions chromosomiques sont possiblement associés à cette maladie, l'implication de ces gènes dans la maladie n'est pas démontrée et ils sont actuellement plutôt considérés comme étant des gènes de susceptibilité. D'autre part, l'augmentation impressionnante du nombre des cas ces dernières années suggère fortement l'implication de causes environnementales. De nombreuses hypothèses ont été proposées pour identifier les gènes ou des facteurs environnementaux impliqués dans la maladie mais à l'heure actuelle, aucune étude expérimentale n'en a fait la démonstration. L'étiologie de la pathologie reste à l'heure actuelle encore inconnue et de nombreuses équipes de recherche poursuivent leurs efforts pour l'identifier. De fait, il n'existe aucun marqueur biologique de l'autisme qui ne soit actuellement validé. Les thérapies psychiatriques entreprises jusqu'à maintenant se sont avérées décevantes. Les interventions éducatives, pédagogiques et psychothérapeutiques ont parfois quelques résultats très variables d'un enfant à l'autre et portant seulement sur un faible pourcentage de cas. De même, les thérapies médicamenteuses actuelles de cette maladie sont palliatives et/ou symptomatologiques et ne résolvent aucunement l'atteinte psychiatrique de ces malades. Les interventions thérapeutiques possibles pour lutter contre cette maladie sont donc très limitées. Il n'existe pas de médicaments qui soignent l'autisme. Comme certains symptômes psychiatriques ressemblent à certains rencontrés dans d'autres pathologies, des médicaments actifs et utilisés dans la schizophrénie, l'hyperactivité et/ou l'anxiété sont parfois prescrits avec des résultats modestes et peu reproductibles. Parmi les raisons expliquant cette faiblesse des possibilités thérapeutiques, une des plus importantes est la méconnaissance de l'étiologie. La communauté scientifique est encore à la recherche des agents responsables de la maladie et des modèles fiables d'études permettraient 25 de réaliser des progrès avantageux et significatifs pour la thérapie. Étudier cette maladie et trouver des moyens préventifs ou curatifs suppose de disposer de modèles d'étude. L'autisme est une maladie pour laquelle un modèle animal est particulièrement difficile à obtenir. En effet, les animaux ne peuvent être étudiés pour évaluer 30 des retards de langage, et ne possèdent pas dans leur cerveau des régions comparables à celles qui gèrent la communication verbale chez l'homme. Cependant, la souris Mus musculus qui est le modèle animal murin classique le plus utilisé comme modèle animal expérimental, est une espèce sociale qui possède un haut degré d'interactions et de communications sociales (Poole TB, Morgan HDR. (1976). Social and territorial behavior of laboratory mice (Mus musculus L.) in small complex areas. Anim. Bahavior, 24 : 476-80). Ainsi, les formes non verbales de communication et de relations sociales sont non seulement bien connues et bien documentées chez cette espèce mais aussi peuvent être sujettes à l'analyse quantitative. A l'heure actuelle, il n'existe pas de modèle animal précis qui reproduise fidèlement l'autisme de l'homme (Tordjman S, Drapier D, Bonnot O, Graignic R, Fortes S, Cohen D, Millet B, Laurent C, Roubertoux PL. (2007). Animal models relevant to schizophrenia and autism: validity and limitations. Behav. Genet., 37 : 61-78), même s'il existe des modèles animaux du déficit du jeux social (Bolivar VJ, Walters SR, Phoenix JL. (2006). Assessing autism-like behavior in mice: variations in social interactions among inbred strains. Behav Brain Res., 176 : 21-26). Dans les rares modèles disponibles, les troubles neurocomportementaux décrits sont d'origine génétique (Moy SS, Nadler JJ. (2008). Advances in behavioral genetics: moule models of autism. Mol. Psychiatre., 13 : 4-26). Certains autres modèles décrivent des liens entre un déficit auto-immun et une prédisposition à des troubles neuro-comportementaux proches de ceux de l'autisme (Wills S, Cabanlit M, Bennett J, Ashwood P, Amaral D, Van de Water J. (2007). Autoantibodies in autism spectrum disorders (ASD). Ann. N. Y. Acad. Sei., 1107: 79-91) même si cela reste conjectural. Un modèle animal de l'autisme sera un modèle dans lequel des caractéristiques comportementales typiques de l'autisme pourront être observées avec une analogie conceptuelle suffisante. Un modèle pourra être considéré comme pertinent si plusieurs symptômes de cette maladie peuvent être clairement identifiés. Par contre, certains aspects spécifiques ne pourront pas entrer dans des critères d'évaluation à mesurer chez un modèle animal à cause des trop grandes différences d'espèce. Un des buts de l'invention concerne l'utilisation de composés permettant de préparer des animaux présentant des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques. L'un des aspects de l'invention est de fournir une méthode pour provoquer des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques et de proposer un modèle animal correspondant. L'un des autres aspects de l'invention est de fournir une méthode pour le criblage de composés pouvant présenter un intérêt dans la prévention et/ou le traitement des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques. La présente invention concerne l'utilisation d'au moins un composé de formule I suivante : (I) dans laquelle : * n=0ou 1, * Ra représente -CH2OH, -COOH, ou -NR1R2, avec RI et R2 représentant indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, * Z représente une chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un groupe OH, ladite chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou - CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou en mélange racémique, pour la préparation d'un mammifère non-humain présentant des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques. Par � troubles envahissants du développement � on désigne des troubles mentaux tels 25 que définis par le DSM IV (Diagnostic and Statistical Manual - Revision 4, publié par l'association américaine de psychiatrie en 1994). Ces troubles regroupent les troubles autistiques (autisme de Kanner), le syndrome de Rett, le syndrome désintégratif de l'enfant, le 15 20 syndrome d'Asperger, et les troubles envahissants du développement non spécifiés. Certains de ces troubles sont considérés comme des psychoses précoces par la classification française des troubles mentaux de l'enfant et de l'adolescent. Par � désordres psychiatriques � on désigne les affections qui perturbent la pensée, les sentiments ou le comportement d'une personne de façon suffisamment forte pour rendre son intégration sociale problématique ou pour lui causer souffrance. La présente invention concerne des mammifères non-humains présentant des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, dans lesquels a été administré au moins un composé répondant à la formule (I) suivante : (I) 20 25 dans laquelle : * n=0ou 1, * Ra représente -CH2OH, -COOH, ou -NR1R2, avec RI et R2 représentant indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, * Z représente unc chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un groupe OH, ladite chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou - CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou en mélange racémique, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres. On a trouvé de façon surprenante, que l'administration d'au moins l'un des composés de formule I permet d'obtenir des animaux présentant des troubles du comportement lors des tests suivants : le test du champ ouvert, le test d'émergence, le test de l'objet nouveau et un test révélant les interactions sociales. Ces tests sont habituellement utilisés dans les modèles d'étude des effets de substances toxiques ou pharmacologiques sur les modifications comportementales sur modèle animal. Ces tests permettent de révéler les effets d'une substance sur les activités exploratrices générales, sur les réactions à un contexte nouveau et sur les interactions sociales. Ils permettent aussi d'apprécier les effets anxiogéniques des substances évaluées. Ces tests sont donc bien adaptés pour une première approche d'un possible effet "autistique" des composés de formule I, puisque l'autisme se révèle en partie par une inadaptation des réactions à l'environnement soit physique soit social. Par � modèle animal � on désigne un animal non humain ayant une affection similaire à une affection humaine et servant de modèle pour l'étude de cette affection. Un modèle animal est un modèle permettant l'étude de données de référence sur la biologie ou le comportement, ou chez lequel on peut étudier un processus pathologique spontané ou induit, celui-ci ayant un ou plusieurs aspects communs avec un phénomène équivalent chez l'humain ou d'autres espèces animales. Par � responsable des susdits troubles et/ou désordres � on indique que seul le composé administré est à l'origine des troubles et/ou désordres observés. Sans administration de ce composé, l'animal serait sain et ne présenterait pas les troubles et/ou désordres désignés ci-dessus. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le mammifère non-humain est choisi parmi les canidés, félidés, mustélidés, suidés, primates, rongeurs, préférentiellement parmi le rat, le hamster, la gerbille, le chinchilla, le cobaye, le lapin, le singe, le furet, le cochon, le chien, ou le chat, et est notamment une souris. Selon un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, les troubles envahissants du développement et/ou les désordres psychiatriques appartiennent au groupe comprenant l'autisme, les retards de développement, ou les maladies neurodégénératives telles que la maladie d'Alzheimer ou la maladie de Parkinson. 30 Par � autisme � on désigne un ensemble de signes cliniques qui peuvent relever de plusieurs étiologies et/ou de plusieurs mécanismes pathologiques. L'autisme est caractérisé par des altérations graves du développement dans les trois domaines suivants : la communication verbale et non verbale, les interactions sociales, des comportements, intérêts et activités qui sont restreints et stéréotypés. Par � retard de développement � on désigne une déficience, à divers degrés, de l'intellect, des facultés mentales, de la perception et du comportement. Il peut être associé à d'autres troubles physiques ou mentaux ou survenir isolément. Un retard de développement des facultés mentales peut être lié notamment à une anomalie chromosomique, à un syndrome dysmorphique, à une maladie génétique, à une anomalie morphologique du système nerveux central, à des complications liées à la prématurité, à un retard mental culturel-familial, à des facteurs environnementaux et médicamenteux, ou avoir des causes endocriniennes. Par � maladies neurodégénératives � on désigne une maladie qui affecte le fonctionnement du cerveau ou plus généralement le système nerveux de façon progressive au cours de son évolution. Celle-ci peut être plus ou moins longue (de quelques semaines à plusieurs années). La conséquence pour le malade est une altération progressive souvent irréversible des fonctions nerveuses qui peut conduire à son décès. Citons par exemple la leucoaraiose, les maladies d'Alzheimer, de Parkinson, de Huntington, de Creutzfeldt-Jakob, la sclérose en plaque, les maladies lysosomales et la paralysie supranucléaire progressive. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, dans le mammifère non-25 humain, a été administré au moins un composé répondant à la formule (I) suivante : (I) dans laquelle : * n=0ou1, * Ra représente -COOH, * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, * Z représente une chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un groupe OH, ladite chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou -CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou en mélange racémique, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres. Selon un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, dans le mammifère non-humain, a été administré au moins un composé répondant à la formule (II) suivante : OMe OH dans laquelle n, Ra, et Z sont tels que définis précédemment, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres. Selon autre mode de réalisation avantageux de l'invention, dans le mammifère non-humain, a été administré au moins un composé répondant à la formule (I) ou (II), dans 20 laquelle : 1. n=0ou1, 2. Ra représente -COOH, 3. Z représente - CH2-, -CHOH-, -CHOH-CH2-, -CH2-CHOH-, -CH2-CH2-,-CH2-CO-, ou -CO-NH-CH2-, 25 ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres. Selon autre mode de réalisation avantageux de l'invention, dans le mammifère non-humain, a été administré au moins un composé répondant à la formule (I) ou (II), dans laquelle : * n= 1, * Ra représente -COOH, * Rb représente -CH3, * Z représente -CH2-CHOH- ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres. Selon autre mode de réalisation avantageux de l'invention, dans le mammifère non-humain, a (cté administré au moins un composé de formule (II) choisi parmi l'un des composés suivants : COOH CH2 NH 1 CO COOH CO CH2 OH COOH OMe OH Acide vanillique OMe OH Vanillylglycine OMe Acide vanillylpyruvique COOH CH2 CH2 COOH CHOH CH2 Acide vanillylpropionique Acide vanillyllactique OMe OMe OH OH COOH 1 CH2 CHOH OH Acide 3-méthoxy-4- hydroxyphényl-3-hydroxy- propionique OMe ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres. Selon autre mode de réalisation avantageux de l'invention, dans le mammifère non-humain, a été administré un composé de formule suivante : COOH CH2 CHOH OMe OH (acide 3-méthoxy-4-hydroxyphényl-3-hydroxy-propionique, ou acide vanillylhydracrylique) ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres. Selon autre mode de réalisation avantageux de l'invention, dans le mammifère non-humain, a été administré un composé de formule suivante : COOH OMe OH (acide vanillique) 15 ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres L'invention concerne également un procédé d'obtention d'un mammifère non-humain présentant des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, comprenant une étape d'administration à un mammifère non-humain, d'au moins un composé 20 répondant à la formule (I) suivante : 10 (I) 25 dans laquelle : * n=0ou 1, * Ra représente -CH2OH, -COOH, ou -NR1R2, avec R1 et R2 représentant indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle 5 de 1 à 3 atomes de carbone, * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, * Z représente une chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un 10 groupe OH, ladite chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou - CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou en mélange racémique, 15 ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain obtenu à l'issue de l'étape précédente, et - le susdit mammifère non-humain avant administration du composé, ou 20 - un autre mammifère non-humain sain de la même espèce que celui auquel a été administré le susdit composé, dans lequel aucun composé n'est administré. Par � étape de comparaison � on désigne la mise en rapport d'au moins deux ensembles de données et l'évaluation des écarts observés entre ces ensembles de données. Un composé permettant d'induire des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques est administré à un mammifère non-humain. Afin de vérifier que ledit composé induit effectivement les susdit troubles et/ou désordres chez le susdit mammifère non-humain, on compare le mammifère auquel le composé a été administré avec une référence. Ladite référence peut être le susdit mammifère non-humain avant que le susdit composé ne lui soit administré, ou un autre mammifère de la même espèce auquel le susdit composé n'a pas été administré. La comparaison se fait au moyen de tests ou d'analyses permettant d'obtenir des valeurs caractérisant le comportement du mammifère non-humain et/ou le niveau dudit composé ou de l'un de ses métabolites dans les fluides biologiques du mammifère non-humain. Le composé dosé peut être le susdit composé induisant les troubles et/ou désordres, un métabolite provenant de la dégradation ou de la biotransformation de ce susdit composé induisant les troubles et/ou désordres, ou tout autre composé endogène dont la quantité varie en réponse à l'administration du susdit composé induisant les troubles et/ou désordres. . 15 Lesdits fluides biologiques pouvant être notamment le sang, les urines, le liquide céphalo-rachidien, la salive. Lesdits tests ou analyses peuvent être réalisés avant administration du composé induisant les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques ; ainsi les valeurs obtenues chez le mammifère non-humain avant administration servent de 20 références internes. La référence peut aussi être les valeurs obtenues aux susdits tests et analyses sur un autre mammit°.re sain de la même espèce, il s'agit alors de références externes. En comparant les écarts entre les valeurs obtenues lors des tests et analyses effectuées sur les susdits mammifères non-humains avant et après administration du susdit composé, il 25 est possible de déterminer si le susdit composé administré permet d'induire les susdits troubles et/ou désordres. Selon un mode de réalisation avantageux, dans le procédé de l'invention, le mammifère non-humain est choisi parmi les canidés, félidés, mustélidés, suidés, primates, 30 rongeurs, préférentiellement parmi le rat, le hamster, la gerbille, le chinchilla, le cobaye, le lapin, le singe, le furet, le cochon, le chien, ou le chat, et est notamment une souris. Selon un autre mode de réalisation avantageux, dans le procédé de l'invention le composé est administré au mammifère non-humain par voie digestive, cutanée, rectale, respiratoire, par exemple par inhalation, instillation, ou nébulisation d'un spray sur les muqueuses, préférentiellement par voie parentérale, par exemple par injection intraveineuse, intra-artérielle, intrathécale, intrapéritonéale, épidurale, sous-cutanée, intradermique ou intramusculaire, Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, la quantité de composé administré au mammifère non-humain est de 0,01 mg/kg à 100 mg/kg, notamment 1 mg/kg à 50 mg/kg, la quantité de composé administré préférentiellement étant de 10 mg/kg. Selon les cas, la quantité de composé administré peut être de 1 mg/kg à 50 mg/kg ou de 20 mg/kg à 100 mg/kg, Dans le cas d'une exposition prolongée les doses peuvent être de 0,01 mg/kg à 10 mg/kg notamment 0,1 mg/kg à 5 mg/kg, la quantité de composé administré préférentiellement étant de 1 mg/kg. Le procédé de l'invention concerne en particulier l'obtention d'une souris, présentant des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, lequel procédé comprend éventuellement une étape de comparaison entre : la souris obtenue à l'issue de l'administration de l'acide vanillique et - la souris avant administration de l'acide vanillique, ou - une souris saine dans laquelle aucun composé, en particulier l'acide vanillique, n'est administré. Selon un autre mode de réalisation, le procédé de l'invention concerne en particulier l'obtention d'une souris, présentant des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, lequel procédé comprend une étape d'administration à la souris de 0,01 mg/kg à 100 mg/kg, notamment 5 mg/kg à 50 mg/kg, préférentiellement 10 mg/kg d'acide vanillylhydracrylique, et éventuellement une étape de comparaison entre : la souris obtenue à l'issue de l'administration de l'acide vanillylhydracrylique, et - la souris avant administration de l'acide vanillylhydracrylique, ou une souris saine dans laquelle aucun composé, en particulier l'acide vanillylhydracrylique, n'est administré. Selon un autre mode de réaiisation avantageux, le procédé de l'invention concerne en particulier l'obtention d'une souris, présentant des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, lequel procédé comprend une étape d'administration à la souris de 0,01 mg/kg à 100 mg/kg, notamment 10 mg/kg à 50 mg/kg, préférentiellement 20 mg/kg d'un mélange dans des proportions allant préférentiellement de 1/10 à 10/1 d'acide vanillique et d'acide vanillylhydracrylique, notamment à raison de 10 mg/kg d'acide vanillique et 10 mg/kg d'acide vanillylhydracrylique. et éventuellement une étape de comparaison entre : la souris obtenue à l'issue de l'administration du mélange d'acide vanillique et d'acide vanillylhydracrylique, et - la souris avant administration du mélange d'acide vanillique et d'acide vanillylhydracrylique, ou avec une souris saine dans laquelle aucun composé, en particulier un mélange d'acides vanillique et vanillylhydracrylique, n'est administré. L'invention concerne également l'utilisation d'un mammifère non-humain présentant des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, pour le criblage d'agents thérapeutiques susceptibles de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, dans lequel a été administré - au moins un composé répondant à la formule (I) suivante : (1) dans laquelle : * n=0ou 1, * Ra représente -CH2OH, -COOH, ou -NR1R2, avec R1 et R2 représentant indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, * Z représente une chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un groupe OH, ladite 5 chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou -CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou en mélange racémique, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et 10 - un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, et comprenant éventuellement une étape de comparaison entre : 15 le mammifère non-humain obtenu à l'issue de l'administration du susdit composé et agent thérapeutique. * le susdit mammifère non-humain auquel le susdit composé a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré, ou * un autre mammifère non-humain sain de la même espèce que celui auquel a été 20 administré le susdit composé, auquel le susdit composé a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré. Un mammifère non-humain, auquel a été administré au moins l'un composés induisant des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques est traité avec 25 un agent thérapeutique dont on souhaite évaluer l'effet sur les susdit troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques. Afin de juger de l'efficacité de cet agent thérapeutique, des tests comportementaux, et/ou des tests sur échantillons biologiques, et/ou des prélèvements de matière biologique sont effectués sur le susdit mammifère non-humain. Les résultats obtenus lors des susdits tests 30 et/ou prélèvements sont comparés avec les résultats obtenus pour les mêmes tests et/ou prélèvements obtenus sur un mammifère non-humain servant de référence. Le susdit mammifère non-humain de référence peut être notamment le même mammifère non-humain qui a subi l'administration du susdit composé induisant les susdit troubles et/ou désordres avant administration du susdit agent thérapeutique, il s'agit d'une référence interne. Il peut s'agir d'un autre mammifère non-humain de la même espèce, ayant subi l'administration du composé induisant les susdit troubles et/ou désordres ; il s'agit alors d'une référence externe. Les différences observées lors des susdits tests et/ou prélèvements, entre le mammifère 5 non-humain traité par le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, et le mammifère non-humain servant de référence, permettent de déterminer si l'agent thérapeutique a un effet sur les troubles du comportement induits par le composé. Par � criblage� on désigne l'identification de molécules aux propriétés nouvelles, 10 biologiquement actives. Le criblage désigne un ensemble de techniques qui permettent de vérifier les propriétés biologiques d'un grand nombre de molécules suivant des tests standardisés applicables à une grande quantité d'échantillons. Par � agents thérapeutiques � on désigne l'ensemble des composés propres à lutter 15 contre les maladies, à rétablir, préserver la santé ; tels que par exemple des médicaments, des vaccins. Selon un mode de réalisation avantageux l'invention concerne l'utilisation d'un mammifère non-humain, notamment d'une souris, présentant des troubles envahissants du 20 développement et/ou des désordre psychiatriques, pour le criblage d'agents thérapeutiques susceptibles de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, dans lequel mammifère non-humain, notamment une souris, a été administré - de 0,01 mg/kg à 100 mg/kg, notamment 5 mg/kg à 50 mg/kg, préférentiellement 10 25 mg/kg à 20 mg/kg d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides dans des proportions allant préférentiellement de 1/10 à 10/1, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres 30 psychiatriques, et comprenant éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain, notamment une souris, obtenu à l'issue de l'administration d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides, et du susdit agent thérapeutique, et * le susdit mammifère non-humain, notamment une souris, auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré, ou * un autre mammifère non-humain, notamment une souris, sain de la même espèce que celui auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, auquel l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré. La présente invention concerne un procédé de criblage d'agents thérapeutiques susceptibles de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants 15 du développement et/ou les désordres psychiatriques à partir d'un mammifère non-humain auquel on a administré : - au moins un composé de formule (I) suivante : 10 (I) 20 25 dans laquelle : * n=0ou 1, * Ra représente -CH2OH, -COOH, ou -NR1R2, avec Rl et R2 représentant indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, * Z représente une chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un groupe OH, ladite chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou - CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou 5 en mélange racémique, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et - au moins un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres 10 psychiatriques, comprenant : - au moins l'une des étapes choisie parmi : * une étape de dosage sanguin et/ou urinaire, in vitro, dudit composé ou de l'un de ses métabolites à partir d'un échantillon provenant du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, * une étape d'étude comportementale du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, * une étude tissulaire et/ou cellulaire réalisée sur des organes ou des tissus du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, * une étude sur animal entier par technique d'imagerie. 25 - et éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain auquel ont été administrés les susdits composé et agent thérapeutique, et * le susdit mammifère non-humain auquel le composé a été administré, mais l'agent thérapeutique n'a pas été administré, ou 30 * un autre mammifère non-humain sain, de la même espèce que celui auquel a été administré le susdit composé, auquel le susdit composé a été administré, niais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré. 15 20 Par � une étape de dosage � on désigne toute série de mesures effectuées sur des échantillons de fluides provenant du susdit mammifère non-humain. Par � échantillon provenant du susdit mammifère non-humain � on désigne une quantité de liquide, par exemple le sang, les urines, le liquide céphalo-rachidien, la salive, prélevée ou récoltée sur le susdit mammifère non-humain. Par � une étape d'étude comportementale � on désigne toute série de mesures effectuées sur le susdit mammifère non-humain, comportant une phase d'évaluation et de cotation d'un ensemble de réactions observables chez le susdit mammifère non-humain placé dans son milieu de vie, ou dans tout autre environnement, et dans des circonstances données. Par � une étude tissulaire � on désigne une observation et une analyse d'un ensemble de tissus afin de caractériser une modification ou une différence entre le tissu observé et un tissu du même type provenant d'un échantillon sain de référence. Par � une étude cellulaire � on désigne une observation et une analyse d'un ensemble de cellules afin de caractériser une modification ou une différence entre les cellules observées et des cellules du même type provenant d'un échantillon sain de référence. Par � étude sur animal entier par technique d 'imagerie � on désigne une observation ou une analyse d'un animal entier par des techniques d'imagerie afin de caractériser une modification ou une différence entre un organisme entier, ou un organe ce cet organisme, et un autre organisme servant de référence, ou un organe de cet autre organisme servant de référence. Dans le cadre des susdites études tissulaires, études cellulaires et études sur animal entier, il est possible de réaliser des études de prolifération, de différentiation, de migration, de synaptogénèse, de remodelage, de réceptologie, d'enzymologie, d'immunocytochimie, d'immunohistochimie, d'imagerie (par électroencéphalographie, par tomodensitométrie, par résonance magnétique nucléaire, par tomographie d'émission monophotonique, par tomographie à émission de positon, par radiographie, par FRET, par scanner, ...), de stéréotaxie, de protéomique, de transcriptomique, d'interactomique, de métabolomique, de neurotransmetteurs, de pharmacologie cellulaire et moléculaire, de messagers intracellulaires, de facteurs de transcription, de biologie moléculaire, d'électrophysiologie, d'effets pro- ou anti-apoptotiques, de plasticité synaptique, d'efficacité et de force de la transmission synaptique ou encore des études physiques (microscopiques, ultrasonographiques, thermographiques, magnétoencéphalographiques, scintigraphiques, ...) ou biochimiques (électrophorèse, Western-blotting, chromatographie, ...). Toutes ces techniques sont classiques et connues de l'homme de l'art. Par � organes � on désigne un ensemble de tissus concourant à la réalisation d'une fonction physiologique. Par � tissus � on désigne un ensemble de cellules pas forcément identiques mais de même origine, regroupée en ensemble fonctionnel, c'est à dire concourant à une même fonction. 15 Selon un mode de réalisation avantageux pour le procédé de criblage de l'invention, on a recours à un mammifère non-humain auquel on a administré : au moins un composé de formule (I) suivante : 10 (I) dans laquelle : * n0ou 1, 20 * Ra représente -CHZOH, -COOH, ou -NR1 R2, avec RI et R2 représentant indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, 25 * Z représente une chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un groupe OH, ladite chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou -CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou en mélange racémique, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et comprenant : l'administration au susdit mammifère non-humain d'au moins un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, et au moins l'une des étapes choisie parmi : * une étape de dosage sanguin et/ou urinaire, in vitro, dudit composé ou de l'un de ses métabolites à partir d'un échantillon provenant du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, * une étape d'étude comportementale du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, * une étude tissulaire et/ou cellulaire réalisée sur des organes ou des tissus du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, * une étude sur animal entier par technique d'imagerie. et éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain auquel ont été administrés le susdit composé et le susdit 25 agent thérapeutique, et * le susdit mammifère non-humain auquel le composé a été administré, mais l'agent thérapeutique n'a pas été administré, ou * un autre mammifère non-humain sain, de la même espèce que celui auquel a été administré le susdit compos, auquel le susdit composé a été administré, 30 mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré. Le susdit composé et le susdit agent thérapeutique peuvent avantageusement être administrés en même temps ou à des temps différents. 10 15 . 20 L'intervalle de temps entre les deux administrations peut varier de 1 seconde à plusieurs semaines, notamment de 1 minute à 1 semaine, préférentiellement 24 heures. L'intervalle de temps entre la dernière des deux administrations et l'étape de dosage, et/ou d'étude tissulaire, et/ou cellulaire, et/ou peut varier de 1 seconde à plusieurs semaines, notamment de 1 minute à 1 semaine, préférentiellement 24 heures. Selon un mode de réalisation avantageux pour le procédé de criblage de l'invention, on a recours à : - l'administration à un mammifère non-humain d'au moins un composé de formule (I) suivante : (I) dans laquelle : * n=0ou 1, * Ra représente -CH2OH, -COOH, ou -NR1R2, avec RI et R2 représentant 15 indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, * Z représente une chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment 20 de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un groupe OH, ladite chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou -CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou en mélange racémique, 25 ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et l'administration au susdit mammifère non-humain d'au moins un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, et - au moins l'une des étapes choisie parmi : * une étape de dosage sanguin et/ou urinaire, in vitro, dudit composé ou de l'un de ses métabolites à partir d'un échantillon provenant du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés les susdits composé et agent thérapeutique, * une étape d'étude comportementale du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés les susdits composé et agent thérapeutique, * une étude tissulaire et/ou cellulaire réalisée sur des organes ou des tissus du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés les susdits composé et agent thérapeutique, * une étude sur animal entier par technique d'imagerie. et éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain auquel ont été administrés les susdits composé et agent thérapeutique, et * le susdit mammifère non-humain auquel le composé a été administré, mais l'agent thérapeutique n'a pas été administré, ou * un autre mammifère non-humain sain, de la même espèce que celui auquel a été administré le susdit composé, auquel le susdit composé a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré. Selon un mode de réalisation avantageux dans le procédé de criblage de l'invention, il a été administré à un mammifère non-humain, notamment à une souris : de 0,01 mg/kg à 100 mg/kg, notamment 5 mg/kg à 50 mg/kg, préférentiellement 10 30 mg/kg à 20 mg/kg d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides dans des proportions allant de 1/10 à 10/1, notamment à raison de 10 mg/kg d'acide vanillique et 10 mg/kg d'acide vanillylhydracrylique, ledit composé ou mélange de composés étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et 15 20 25 au moins un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, lequel procédé comprend au moins l'une des étapes choisie parmi : * une étape de dosage sanguin et/ou urinaire, in vitro, dudit composé ou de l'un de ses métabolites à partir d'un échantillon provenant du susdit mammifère 10 non-humain, notamment une souris, dans lequel sont administrés les susdits composé et agent thérapeutique, * une étape d'étude comportementale du susdit mammifère non-humain, notamment une souris, dans lequel sont administrés les susdits composé et agent thérapeutique, 15 * une étude tissulaire et/ou cellulaire réalisée sur des organes ou des tissus du susdit mammifère non-humain, notamment une souris, dans lequel sont administrés les susdits composé et agent thérapeutique, * une étude sur animal entier par technique d'imagerie. 20 - et éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain, notamment une souris, obtenu à l'issue de l'administration d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides, et du susdit agent thérapeutique, et * le susdit mammifère non-humain, notamment une souris, auquel a été 25 administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré, ou * un autre mammifère non-humain, notamment une souris, sain de la même espèce que celui auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, auquel l'acide 30 vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré. Selon un autre mode de réalisation avantageux dans le procédé de criblage de l'invention, il a été administré à un mammifère non-humain, notamment à une souris :5 de 0,01 mg/kg à 100 mg/kg, notamment 5 mg/kg à 50 mg/kg, préférentiellement 10 mg/kg à 20 mg/kg d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides dans des proportions allant de 1/10 à 10/1, notamment à raison de 10 mg/kg d'acide vanillique et 10 mg/kg d'acide vanillylhydracrylique, ledit composé ou mélange de composés étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et lequel procédé comprend : - l'injection au susdit mammifère non-humain, notamment une souris, d'au moins un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, et - au moins l'une des étapes choisie parmi : * une étape de dosage sanguin et/ou urinaire, in vitro, dudit composé ou de l'un de ses métabolites à partir d'un échantillon provenant du susdit mammifère non-humain, notamment une souris, dans lequel sont administrés les susdits composé et agent thérapeutique, * une étape d'étude comportementale du susdit mammifère non-humain, notamment une souris, dans lequel sont administrés les susdits composé et agent thérapeutique, * une étude tissulaire et/ou cellulaire réalisée sur des organes ou des tissus du susdit mammifère non-humain, notamment une souris, dans lequel sont 25 administrés les susdits composé et agent thérapeutique, * une étude sur animal entier par technique d'imagerie. - et éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain, notamment une souris, obtenu à l'issue de 30 l'administration d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides, et du susdit agent thérapeutique, et * le susdit mammifère non-humain, notamment une souris, auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré, ou * un autre mammifère non-humain, notamment une souris, sain de la même espèce que celui auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, auquel l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré. Selon un autre mode de réalisation avantageux dans le procédé de criblage de l'invention, le procédé comprend : - l'administration de 0,01 mg/kg à 100 mg/kg, notamment 5 mg/kg à 50 mg/kg, préférentiellement 10 mg/kg à 20 mg/kg d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides dans des proportions allant de 1/10 à 10/1, notamment à raison de 10 mg/kg d'acide vanillique et 10 mg/kg d'acide vanillylhydracrylique, ledit composé ou mélange de composés étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, au susdit mammifère non-humain, notamment une souris, et l'injection au susdit mammifère non-humain, notamment une souris, d'au moins un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, et - au moins l'une des étapes choisie parmi : * une étape de dosage sanguin et/ou urinaire, in vitro, dudit composé ou de l'un de ses métabolites à partir d'un échantillon provenant du susdit mammifère non-humain, notamment une souris, dans lequel sont administrés les susdits composé et agent thérapeutique, * une étape d'étude comportementale du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés les susdits composé et agent thérapeutique, * une étude tissulaire et/ou cellulaire réalisée sur des organes ou des tissus du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés les susdits composé et agent thérapeutique, * une étude sur animal entier par technique d'imagerie. et éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain, notamment une souris, obtenu à l'issue de l'administration d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides, et du susdit agent thérapeutique, et * le susdit mammifère non-humain, notamment une souris, auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré, ou * un autre mammifère non-humain, notamment une souris, sain de la même espèce que celui auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, auquel l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré. Selon un autre mode de réalisation avantageux dans le procédé de criblage de 15 l'invention, il a été administré à un mammifère non-humain, notamment à une souris : de 0,01 mg/kg à 100 mg/kg, notamment 5 mg/kg à 50 mg/kg, préférentiellement 10 mg/kg à 20 mg/kg d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides dans des proportions allant de 1/10 à 10/1, notamment à 20 raison de 10 mg/kg d'acide vanillique et 10 mg/kg d'acide vanillylhydracrylique, ledit composé ou mélange de composés étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et au moins un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler 25 substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, ledit procédé comprend : - une étape d'étude comportementale du susdit mammifère non-humain, notamment 30 une souris, dans lequel sont administrés les susdits composé et agent thérapeutique, et éventuellement une étape de comparaison entre : 10 le mammifère non-humain, notamment une souris, obtenu à l'issue de l'administration d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides, et du susdit agent thérapeutique, et * le susdit mammifère non-humain, notamment une souris, auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré, ou * un autre mammifère non-humain, notamment une souris, sain de la même espèce que celui auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, auquel l'acide 10 vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré, Selon un autre mode de réalisation, le procédé de criblage de l'invention, concerne l'évaluation d'une méthode susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement 15 les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, le procédé comprend : - l'administration à un mammifère non-humain, notamment à une souris, d'au moins un composé répondant à la formule (I) suivante : (1) 20 dans laquelle : * n==0ou1, * Ra représente -CH2OH, -0OOH, ou -NR1R2, avec R1 et R2 représentant indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, 25 * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, * Z représente une chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un groupe OH, ladite chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou -CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou en mélange racémique, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et - l'application une méthode susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, ledit procédé comprend éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain obtenu à l'issue de l'administration du composé et de l'application de la méthode, et * le susdit mammifère non-humain auquel le composé a été administré, mais aucune méthode n'a été appliquée, ou * un autre mammifère non-humain sain, de la même espèce que celui auquel a été administré le composé et appliqué la méthode, auquel le composé a été administré, mais aacune méthode n'a été appliquée. Par � évaluation� on désigne toute action visant à apprécier, à estimer, la valeur ou l'efficacité technique d'une méthode. Par � méthode susceptible de prévenir, de réduire ou d 'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques� on désigne toute méthode, administration de composés, procédé de stimulation physique ou mentale, régime alimentaire particulier, vaccination, permettant de prévenir, de réduire ou de supprimer la gêne, la souffrance ou les désordres physiques ou psychiques causés par les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques. Description des figures Figure 1. Test du champ ouvert Ce diagramme de Tuckey décrit six boîtes appariées deux à deux en trois séries verticales suivant l'axe des abscisses. L'axe des ordonnées représente le nombre de déplacements enregistrés par souris lors d'un test de champ ouvert. Chaque série de boîtes comprend une boîte claire représentant les souris dites contrôle, et une boîte foncée 10 représentant les souris auxquelles a été injecté le mélange AV (acide vanillique) +VH (acide vanillylhydracrylique). La première série de 2 boîtes notées J1 représente les résultats au jour 1, la seconde série de boîtes notées J2 représente les résultats au jour 2, la troisième série de boîtes notées J3 représente les résultats au jour 3. Les trois jours sont consécutifs. 15 Chaque boîte représente un écart interquartile (+ ou ù un quartile par rapport à la valeur médiane) pour la mesure représentée, la valeur médiane est indiquée par un trait horizontal à l'intérieur de la boîte. Les prolongements fins aux extrémités de chaque boîte représentent les l ers et 9èmes déciles. 20 Les points situées au dessus et au dessous de chaque boîte représentent les valeurs maximales. Les différences sont significatives pour p 25 Figure 2. Déplacements dans le compartiment clair lors du test de préférence de places Ce diagramme de Tuckey décrit quatre boîtes verticales suivant l'axe des abscisses. L'axe des ordonnées représente le nombre de déplacements enregistrés des souris, dans le compartiment clair lors d'un test de préférence de place. La première boîte notée contrôle 30 représente les résultats pour des souris dites contrôle (aucun produit administré), la seconde boîte notée AV représente les résultats pour des souris dites AV (administration d'acide vanillique). La troisième boîte notée VH représente les résultats pour des souris dites VH (administration d'acide vanillylhydracrylique). La quatrième boîte notée AV+VH représente les résultats pour des souris dites AV+VH (administration d'acide vanillique et d'acide 30 vanillylhydracrylique). Chaque boîte représente un écart interquartile (+ ou ù un quartile par rapport à la valeur médiane) pour la mesure représentée, la valeur médiane est indiquée par un trait horizontal à l'intérieur de la boîte. Les prolongements fins aux extrémités de chaque boîte représentent les 1 er et 9ème déciles. Les points pouvant apparaître au-dessus des boîtes représentent les valeurs maximales. Lorsque ce point n'est pas représenté, cela signifie que le point du décile est superposé au point de la valeur maximale. On note que les souris auxquelles ont été administrés les composés AV et le mélange AV+VH se déplacent moins dans le compartiment clair que les souris dites contrôle. Figure 3. Déplacements total des souris dans le test de préférence de place 15 Ce diagramme de Tuckey décrit quatre boîtes verticales suivant l'axe des abscisses. L'axe des ordonnées représente le nombre de déplacements, par souris, enregistrés dans les deux compartiments clair et sombre lors d'un test de préférence de place. La première boîte notée contrôle représente les résultats pour des souris dites contrôle (aucun produit 20 administré), la seconde boîte notée AV représente les résultats pour des souris dites AV (administration d'acide vanillique). La troisième boîte notée VH représente les résultats pour des souris dites VH (administration d'acide vanillylhydracrylique). La quatrième boîte notée AV+VH représente les résultats pour des souris dites AV+VH (administration d'acide vanillique et d'acide vanillylhydracrylique). 25 Chaque boîte représente un écart interquartile (+ ou ù un quartile par rapport à la valeur médiane) pour la mesure représentée, la valeur médiane est indiquée par un trait horizontal à l'intérieur de la boîte. Les prolongements fins aux extrémités de chaque boîte représentent les 1 er et 9ème déciles. 30 Les points pouvant apparaître au-dessus et en dessous des boîtes représentent les valeurs maximales. Lorsque ce point n'est pas représenté, cela signifie que le point du décile est superposé au point de la valeur maximale. On note que les souris auxquelles ont été administrés les composés AV, VH et le mélange AV+VH ont une activité exploratrice amoindrie par rapport aux souris dites contrôle. Figure 4. Temps de présence des souris dans le compartiment clair lors du test de préférence de place. Ce diagramme de Tuckey décrit quatre boîtes verticales suivant l'axe des abscisses. L'axe des ordonnées représente les temps (en secondes) de présence enregistrés dans le compartiment clair lors d'un test de préférence de place. La première boîte notée contrôle représente les résultats pour des souris dites contrôle (aucun produit administré), la seconde boîte notée AV représente les résultats pour des souris dites AV (administration d'acide vanillique). La troisième boîte notée VH représente les résultats pour des souris dites VH (administration d'acide vanillylhydracrylique). La quatrième boîte notée AV+VH représente les résultats pour des souris dites AV+VH (administration d'acide vanillique et d'acide vanillylhydracrylique). Chaque boîte représente un écart interquartile (+ ou û un quartile par rapport à la 15 valeur médiane) pour la mesure représentée, la valeur médiane est indiquée par un trait horizontal à l'intérieur de la boîte. Les prolongements fins aux extrémités de chaque boîte représentent les 1 er et 9ème déciles. Les points pouvant apparaître au-dessus et en dessous des boîtes représentent les 20 valeurs maximales. Lorsque ce point n'est pas représenté, cela signifie que le point du décile est superposé au point de la valeur maximale. On note que les souris auxquelles ont été administrés les composés AV et le mélange AV+VH passent moins de temps dans le compartiment clair que les souris dites contrôle. Figure 5. Temps de sortie de la tête des souris lors du test d'émergence. Ce diagramme de Tuckey décrit quatre boîtes verticales suivant l'axe des abscisses. 30 L'axe des ordonnées représente les temps (en secondes) de sortie de la tête des souris hors de l'enceinte sombre, enregistrés lors du test d'émergence. La première boîte notée contrôle représente les résultats pour des souris dites contrôle (aucun produit administré), la seconde boîte notée AV représente les résultats pour des souris dites AV (administration d'acide vanillique). La troisième boîte notée VH représente les résultats pour des souris dites VH 25 (administration d'acide vanillylhydracrylique). La quatrième boîte notée AV+VH représente les résultats pour des souris dites AV+VH (administration d'acide vanillique et d'acide vanillylhydracrylique). Chaque boîte représente un écart interquartile (+ ou ù un quartile par rapport à la 5 valeur médiane) pour la mesure représentée, la valeur médiane est indiquée par un trait horizontal à l'intérieur de la boîte. Les prolongements fins aux extrémités de chaque boîte représentent les 1 er et 9ème déciles. Les points pouvant apparaître au-dessus et en dessous des boîtes représentent les 10 valeurs maximales. Lorsque ce point n'est pas représenté, cela signifie que le point du décile est superposé au point de la valeur maximale. Figure 6. Temps de sortie des deux pattes avant des souris lors du test d'émergence 15 Ce diagramme de Tuckeÿ décrit quatre boîtes verticales suivant l'axe des abscisses. L'axe des ordonnées représente les temps (en secondes) de sortie des deux pattes avant des souris hors de l'enceinte sombre, enregistrés lors du test d'émergence. La première boîte notée contrôle représente les résultats pour des souris dites contrôle (aucun produit 20 administré), la seconde boîte notée AV représente les résultats pour des souris dites AV (administration d'acide vanillique). La troisième boîte notée VH représente les résultats pour des souris dites VH (administration d'acide vanillylhydracrylique). La quatrième boîte notée AV+VH représente les résultats pour des souris dites AV+VH (administration d'acide vanillique et d'acide vanillylhydracrylique). 25 Chaque boîte représente un écart interquartile (+ ou ù un quartile par rapport à la valeur médiane) pour la mesure représentée, la valeur médiane est indiquée par un trait horizontal à l'intérieur de la boîte. Les prolongements fins aux extrémités de chaque boîte représentent les 1 er et 9ème déciles. 30 Les points pouvant apparaître au-dessus et en dessous des boîtes représentent les valeurs maximales. Lorsque ce point n'est pas représenté, cela signifie que le point du décile est superposé au point de la valeur maximale. On note que les souris auxquelles le mélange AV+VH a été administré mettent plus de temps à sortir partiellement de l'enceinte que les souris dites contrôle. Figure 7. Temps de sortie complète des souris hors de l'enceinte sombre lors du test d'émergence Ce diagramme de Tuckey décrit quatre boîtes verticales suivant l'axe des abscisses. L'axe des ordonnées représente les temps (en secondes) de sortie complète des souris hors de l'enceinte sombre enregistrés lors du test d'émergence. La première boîte notée contrôle représente les résultats pour des souris dites contrôle (aucun produit administré), la seconde boîte notée AV représente les résultats pour des souris dites AV (administration d'acide vanillique). La troisième boîte notée VH représente les résultats pour des souris dites VH (administration d'acide vanillylhydracrylique). La quatrième boîte (trait horizontal en haut du graphique) notée AV+VH représente les résultats pour des souris dites AV+VH (administration d'acide vanillique et d'acide vanillylhydracrylique). Chaque boîte représente un écart interquartile (+ ou ù un quartile par rapport à la 15 valeur médiane) pour la mesure représentée, la valeur médiane est indiquée par un trait horizontal à l'intérieur de la boîte. Les prolongements fins aux extrémités de chaque boîte représentent les ter et 9ème déciles. Les points pouvant apparaître au-dessus et en dessous des boîtes représentent les 20 valeurs maximales. Lorsque ce point n'est pas représenté, cela signifie que le point du décile est superposé au point de la valeur maximale. On note que les souris auxquelles ont été administrés les composés AV et VH sortent très tardivement de l'enceinte sombre. Les souris auxquelles a été administré le mélange 25 AV+VH ne sortiront pas de l'enceinte sombre. Figure 8. Délai de contact des souris vis-à-vis de l'objet nouveau lors du test de l'objet nouveau Ce diagramme de Tuckey décrit quatre boîtes verticales suivant l'axe des abscisses. L'axe des ordonnées représente le délai (en secondes) de contact des souris vis-à-vis de l'objet nouveau, enregistrés lors du test de l'objet nouveau. La première boîte notée contrôle représente les résultats pour des souris dites contrôle (aucun produit administré), la seconde 30 boîte notée AV représente les résultats pour des souris dites AV (administration d'acide vanillique). La troisième boîte notée VH représente les résultats pour des souris dites VH (administration d'acide vanillylhydracrylique). La quatrième boîte notée AV+VH représente les résultats pour des souris dites AV+VH (administration d'acide vanillique et d'acide vanillylhydracrylique). Chaque boîte représente un écart interquartile (+ ou -. un quartile par rapport à la valeur médiane) pour la mesure représentée, la valeur médiane est indiquée par un trait horizontal à l'intérieur de la boîte. Les prolongements fins aux extrémités de chaque boîte représentent les 1 er et 9ème 10 déciles. Les points pouvant apparaître au-dessus et en dessous des boîtes représentent les valeurs maximales. Lorsque ce point n'est pas représenté, cela signifie que le point du décile est superposé au point de la valeur maximale. 15 On note que les résultats ne sont pas significativement différents quel que soit le traitement. Figure 9. Nombre de contacts des souris avec l'objet nouveau lors du test de l'objet 20 nouveau Ce diagramme de Tuckey décrit quatre boîtes verticales suivant l'axe des abscisses. L'axe des ordonnées représente le nombre de contacts des souris avec l'objet nouveau, enregistrés lors du test de l'objet nouveau. La première boîte notée contrôle représente les 25 résultats pour des souris dites contrôle (aucun produit administré), la seconde boîte notée AV représente les résultats pour des souris dites AV (administration d'acide vanillique). La troisième boîte notée VH représente les résultats pour des souris dites VH (administration d'acide vanillylhydracrylique). La quatrième boîte notée AV+VH représente les résultats pour des souris dites AV+VH (administration d'acide vanillique et d'acide vanillylhydracrylique). 30 Chaque boîte représente un écart interquartile (+ ou ù un quartile par rapport à la valeur médiane) pour la mesure représentée, la valeur médiane est indiquée par un trait horizontal à l'intérieur de la boîte. Les prolongements fins aux extrémités de chaque boîte représentent les 1 er et 9ème déciles. Les points pouvant apparaître au-dessus et en dessous des boîtes représentent les valeurs maximales. Lorsque ce point n'est pas représenté, cela signifie que le point du décile est superposé au point de la valeur maximale. On note que le nombre de contact est très amoindri chez les souris auxquelles ont été administrés les composés AV, VH ou encore le mélange AV+VH. Figure 10. Nombre de contacts des souris avec un congénère nouveau lors du test d'interaction sociale. Ce diagramme de Tuckey décrit quatre boîtes verticales suivant l'axe des abscisses. L'axe des ordonnées représente le nombre de contacts des souris avec un congénère nouveau, enregistrés lors du test d'interaction sociale. La première boîte notée contrôle représente les résultats pour des souris dites contrôle (aucun produit administré), la seconde boîte notée AV représente les résultats pour des souris dites AV (administration d'acide vanillique). La troisième boîte notée VH représente les résultats pour des souris dites VH (administration d'acide vanillylhydracrylique). La quatrième boîte notée AV+VH représente les résultats pour des souris dites AV+VH (administration d'acide vanillique et d'acide vanillylhydracrylique). Chaque boîte représente un écart interquartile (+ ou ù un quartile par rapport à la valeur médiane) pour la mesure représentée, la valeur médiane est indiquée par un trait horizontal à l'intérieur de la boîte. Les prolongements fins aux extrémités de chaque boîte représentent les 1 er et 9ème déciles. Les points pouvant apparaître au-dessus et en dessous des boîtes représentent les valeurs maximales. Lorsque ce point n'est pas représenté, cela signifie que le point du décile est superposé au point de la valeur maximale. On note que le nombre de contact est très amoindri chez les souris auxquelles ont été 30 administrés les composés AV, VH ou encore le mélange AV+VH. Figure 11. Délai de contact des souris vis-à-vis d'un nouveau congénère lors du test d'interaction sociale Ce diagramme de Tuckey décrit quatre boîtes verticales suivant l'axe des abscisses. L'axe des ordonnées représente le délai de contact des souris vis-à-vis d'un nouveau congénère, enregistrés lors du test d'interaction sociale. La première boîte notée contrôle représente les résultats pour des souris dites contrôle (aucun produit administré), la seconde boîte notée AV représente les résultats pour des souris dites AV (administration d'acide vanillique). La troisième boîte notée VH représente les résultats pour des souris dites VH (administration d'acide vanillylhydracrylique). La quatrième boîte notée AV+VH représente les résultats pour des souris dites AV+VH (administration d'acide vanillique et d'acide vanillylhydracrylique). Chaque boîte représente un écart interquartile (+ ou ù un quartile par rapport à la valeur médiane) pour la mesure représentée, la valeur médiane est indiquée par un trait horizontal à l'intérieur de la boîte. Les prolongements fins aux extrémités de chaque boîte représentent les 1 er et 9ème déciles. Les points pouvant apparaître au-dessus et en dessous des boîtes représentent les valeurs maximales. Lorsque ce point n'est pas représenté, cela signifie que le point du décile est superposé au point de la valeur maximale. On note que le nombre de contacts est significativement augmenté chez les souris VH. Partie expérimentale Sur l'animal (en entier ou sur la tête seule), sur le cerveau (en entier ou sur parties isolées, soit fraichement obtenu(e)s ou en culture organotypique), sur coupes tissulaires, sur neurones isolés ou sur neurones en culture cellulaire, il est possible de réaliser des études de prolifération, de différentiation, de migration, de synaptogénèse, de remodelage, de réceptologie, d'enzymologie, d'immunocytochimie, d'immunohistochimie. d'imagerie (par électroencéphalographie, par tomodensitométrie, par résonance magnétique nucléaire, par tomographie d'émission monophotonique, par tomographie à émission de positon, par radiographie, par FRET, par scanner, ...), de stéréotaxie, de protéomique, de transcriptomique, d'interactomique, de métabolomique, de neurotransmetteurs, de pharmacologie cellulaire et moléculaire, de messagers intracellulaires, de facteurs de transcription, de biologie moléculaire, d'électrophysiologie, d'effets pro- ou anti- apoptotiques, de plasticité synaptique, d'efficacité et de force de la transmission synaptique ou encore des études physiques (microscopiques, ultrasonographiques, thermographiques, magnétoencéphalographiques, scintigraphiques, ...), biochimiques (électrophorèse, Westernblotting, chromatographie, ...) ou encore comportementales. Plusieurs exemples permettent d'illustrer ces études. Elles seront réalisées principalement sur des cellules isolées en culture, sur des coupes tissulaires ou encore sur l'animal entier. Il est entendu que les techniques et exemples décrits ci-après sont décrits afin de 25 faciliter la mise en oeuvre de l'invention par l'homme de l'art. Les techniques indiquées ne doivent évidement en aucun cas être considérées comme une limite à la présente invention, dans la mesure où toutes les variantes desdites techniques sont également applicables à la présente invention. 38 I Tests biologiques 1. Matériel biologique 1.1. Culture primaire de neurones. L'hippocampe est un élément clé du système limbique et des processus de mémorisation. Il a été suggéré que cette région du cerveau pourrait être impliquée dans l'autisme. Toutes les procédures et protocoles expérimentaux réalisés sur les animaux suivent les recommandations du comité d'éthique animale. Les hippocampes disséqués sont dissociés avec une solution de papaïne (Worthington) pendant 45 min à 37°C sous agitation douce. Une alternative peut être une dissociation à l'aide d'une solution de trypsine à 0.025% (poids/volume) sous agitation douce. La suspension cellulaire résultante est centrifugée et le culot ressuspendu dans du milieu de culture (par exemple le Neurobasal-A plus B27) et déposé dans des flacons de culture recouverts d'une matrice composée de poly-D-lysine laminine. Le substrat peut être éventuellement de la poly-L-Lysine et le milieu peut contenir des concentrations différentes de K+. Éventuellement, une solution de 0.05% (poids/volume) de DNase peut être préalablement utilisée pour cataboliser l'ADN provenant des cellules mortes. Les neurones sont cultivés dans un incubateur à 5% de CO2 et 36°C. Éventuellement, le lendemain. de la cytosine {alpha}-D-arabinofuranoside (AraC) est ajoutée (à 5 �M) pour empêcher la prolifération des cellules gliales. Le milieu de culture est changé tous les 4 jours. 1.2. Culture tissulaire organotypique. Les hippocampes (ou autre région du cerveau) sont disséqués à partir de souris anesthésiées qui ont été ou non traitées par un composé décrit par le brevet FR2899973. Ils sont ensuite coupés transversalement en tranches épaisses d'environ 400 �m à laide d'un microtome. Les coupes sont ensuite déposées sur une membrane stérile de type Millicell-CM (Millipore) et cultivées dans un incubateur à COZ (5%) et à une température de 36°C. Un milieu de culture (Neurobasal-A plus B27; Invitrogen, Paris) contenant 20% de sérum de cheval est utilisé durant les 4 premiers jours. La concentration du sérum est alors graduellement diminuée pour atteindre 5% en 48 heures. Ensuite après une période d'incubation de 24 h dans du milieu sans sérum, les coupes sont utilisées soit pour des mesures électrophysiologiques, ou pour de l'immunocytochimie, ou encore pour des marquages isotopiques. 39 . Techniques 2.1. Mesures immunocytochimiques. Les coupes ou les cellules en culture qui ont (ou non) été incubées avec les composés mentionnés dans le brevet FR2899973, sont rincées avec du tampon PBS (Phosphate Buffered Saline) et ensuite fixées avec une solution de paraformaldéhvde à 4% contenant 4% de saccharose. Après plusieurs rinçages avec du PBS et ensuite avec du PBS contenant du NH4C1 à 10 mM, les coupes ou les cellules sont incubées pendant 1 h avec une solution de bloquage/perméabilisation (PBS contenant 0.5% de sérum de boeuf et 0,1% de Triton X-100). Ensuite les coupes ou les cellules sont exposées à une solution contenant des anticorps dilués dans la solution de bloquage/perméabilisation. Ces anticorps sont dirigés contre différentes protéines ou récepteurs membranaires ou intracellulaires. Ces récepteurs sont des récepteurs à neurotransmetteurs ou encore des récepteurs de la famille des TRCPs (Transducin Repeat Containing Protein). Les coupes ou cellules sont alors incubées avec une solution contenant un second anti-corps marqué. Ce marquage est soit fluorescent (Rhodamine, Texas Red, FITC, ...) ou enzymatique (phosphatase alcaline, péroxydase, ...) ou encore il peut s'agir d'un marquage à la biotine qui sera révélé par un conjugué avidine ou streptavidine. 2.2. RT-PCR. Des coupes tissulaires ou des aliquotes de cellules en culture sont analysées par RTPCR (Reverse Transcription Polymerisation Chain Reaction) en utilisant des kits commerciaux et des techniques classiques de biologie moléculaire connues par l'homme de l'art (Molecular cloning : a laboratory manual. par T. Maniatis, E. F. Fritsch, J. Sambrook (1982) Cold Spring Harbor, N.Y. : Cold Spring Harbor Laboratory Press). L'expression de récepteurs à neurotransmetteurs ou de récepteurs de la famille des TRCPs peut par exemple être recherchée. 2.3. Mesures de la viabilité cellulaire. Les cellules en culture sont incubées avec des concentrations variables et/ou des temps variables avec un ou des composés cités dans le brevet FR2899973 en combinaison ou non avec des antagonistes ou d'autres effecteurs pharmacologiques et comparées avec des cellules de contrôle non traitées. À la fin du traitement, la viabilité cellulaire est évaluée en utilisant des tests classiques de viabilité cellulaire connus de l'homme de l'art (Basic cell culture 40 protocols, (Methods in molecular biology), (3rd Ed.) ; JW Pollard et JM Walker, Eds, Humana Press). 2.4. Détermination des variations des concentrations intracellulaires de calcium. Cette mesure fait intervenir des marqueurs fluorescents qui sont par exemple de type Fluo, Indo ou Fura (Handbook of Fluorescent Probes and Research Products, Molecular Probes, RP Haugland). Le principe est une incubation de cellules avec un marqueur fluorescent perméant dans un tampon équilibré contenant éventuellement du Pluronic qui facilite l'incorporation des sondes fluorescentes. Après la période d'incubation (généralement 30 min), les cellules sont rincées avec du PBS et exposées à des effecteurs dans du milieu de culture ou dans une solution saline, à 37°C. Les variations d'intensité de fluorescence sont visualisées à l'aide d'une caméra et d'un microscope à fluorescence aux longueurs d'onde d'excitation et d'émission caractéristique des sondes fluorescentes utilisées. Les effecteurs utilisés peuvent être soit des neurotransmetteurs, des molécules apparentées, les composés décrits dans le brevet FR2899973 ou encore des antagonistes potentiels. Cette variation d'intensité de fluorescence est convertie en variations intracellulaires de calcium grâce à la formule de Tsien et coll. (Tsien RY, Pozzan T, Rink TJ. Calcium homeostasis in intact lymphocytes: cytoplasmic free calcium monitored with a new, intracellularly trapped fluorescent indicator. J. Cell. Biol. 1982 ; 94(2) : 325-334.) après avoir ajouté un ionophore à Calcium (A23187 ou ionomycine) et ensuite de l'EGTA (Ethylene Glycol Tetraacetic Acid). Ces variations intracellulaires de calcium démontrent le couplage du récepteur avec un système calcique intracellulaire servant de messager secondaire et montrant 1) la présence d'un récepteur primaire de l'effecteur testé et 2) que le calcium est un messager secondaire à ce récepteur. 2.5. Mesures de l'activité enzymatique de la calpaïne. Les calpaïnes sont des protéases à cystéine, non-lysosomiales, dont l'activité, de type papaïne, est dépendante du calcium. Ces enzymes sont responsables de la protéolyse neutre calcium-dépendante dans un environnement réducteur. Il s'agit d'une famille de protéines souvent associées avec des inhibiteurs cellulaires qui jouent un rôle clé dans plusieurs fonctions cellulaires et en particulier dans la plasticité synaptique et l'apoptose. Ces protéines semblent associées à certaines pathologies neurodégénératives comme la maladie d'Alzheimer et de Parkinson (Vosler PS, Brennan CS, Chen J. Calpain-mediated signaling mechanisms in neuronal injury tard neurodegeneration. Mol. Neurobiol. 2008 38(1):78-100) et probablement aussi dans l'autisme. En fait, dans ces maladies, l'activation des ces calpaïnes pourrait être due à des taux élevés de calcium et conduit à une hydrolyse de certaines protéines voire à leur dégradation totale. L'activité de la calpaïne est déterminée à l'aide d'un kit commercial (Axxora, Calpain Activity Assay Kit, ref : BV-K240-100). Le principe du dosage est la détection fluorométrique de l'hydrolyse d'un substrat fluorogénique mesuré avec un fluorimètre. 2.6. Electrotransfert. .tg de solution protéique (provenant de lysat cellulaire ou tissulaire) sont soumis à 10 électrophorèse dans un gel de polyacrylamide en présence de SDS (Sodium Dodecyl Sulfate) et ensuite électrotransférés (Western-Blott) sur une membrane de nitrocellulose dans un tampon de transfert (par exemple : 39 mM de glycine, 48 mM de Tris, et 20% de méthanol). Après saturation de la membrane avec une solution enrichie en protéines (lait, sérum, ...) celle-ci est exposée à une solution d'anticorps primaires qui sont ensuite révélés avec une solution d'anticorps secondaires marqués. Cette technique permet de visualiser les protéines d'intérêt en particulier des récepteurs membranaires ou encore des protéines impliquées dans la signalisation intracellulaire. 2.7. Production et/ou sécrétion de glutamate. Les neurotransmetteurs (notamment le GABA (Gamma Amino Butyric Acid) et le glutamate) sont à la fois des messagers de la communication entre neurones et des acteurs essentiels de la construction du cerveau. Ils pourraient être impliqués dans certains cas d'autisme (Collins AL, Ma D, Whitehead PL, Martin ER, Wright HH, Abramson RK, Hussman JP, Haines JL, Cuccaro ML, Gilbert JR, Pericak-Vance MA. Investigation of autism and GABA receptor subunit genes in multiple ethnie groups Neurogenetics. 2006; 7(3):167-174.) Les quantités de glutamate relarguées dans le milieu de culture ou dans le milieu de survie tissulaire sont déterminées à l'aide d'un kit commercial (par exemple le kit �Amplex Red glutamic acid/glutamate oxydase assay kit � de Molecular Probes). Le principe est une mesure fluorométrique faisant intervenir le fluorochrome Amplex Red, la glutamate oxydase, la glutamate pyruvate transaminase, l'alanine et de la peroxydase. Après incubation à 37°C, la fluorescence du milieu réactionnel est mesurée (longueur d'onde d'émission : 590 nm et longueur d'onde d'excitation : 555 nm). 2.8. Techniques d'électrophysiologie. Ces techniques permettent de mesurer les comportements électriques de tissus ou de cellules nerveuses lors de leur stimulation ou lors de l'adjonction de différentes molécules. Ces techniques classiques et connues de l'homme de l'art sont très utilisées pour la recherche en Neurobiologie (The Neuronal Microenvironment. Editor(s): Alan A. Boulton, Gien B. Baker, Wolfgang Walz ,University of Saskatchewan, Saskatchewan Canada, Springer). 2.9. Cytologie et histologie. Les organes étudiés (en particulier le cerveau) sont pris sur l'animal après anesthésie et fixés avec une solution de fixation (par exemple 4% de paraformaldéhyde dans du PBS) et ensuite inclus en paraffine. Ils sont découpés en tranches fines de quelques microns. Ces coupes sont alors colorées (par exemple par un mélange d'hématoxyline et d'éosine) et étudiées morphologiquement avec un système d'analyse d'image. Selon une autre alternative ces coupes sont préparées et observées par des techniques de microscopie électronique, en utilisant des techniques classiques de cytologie et d'histologies connues par l'homme de l'art (Neurons : Methods and Applications for the Cell Biologist. Publié par Peter J. Hollenbeck et James R. Bamburg. Academic Press, 2003, Amsterdam). 2.10. Imagerie 3D du cerveau. Les techniques d'imagerie non invasive appliquées au petit animal (microRMN, Tomographie d'Emission de Positons (TEP), scanner, ...) sont à l'heure actuelle des technologies de choix dans l'exploration de diverses pathologies humaines, en particulier dans le domaine cérébral. En raison du caractère non invasif de l'exploration et du développement croissant de nouvelles molécules radiomarquées, ces techniques revêtent un intérêt particulier pour des études de neurobiologie comportant l'utilisation de ligands appropriés. En particulier, ces techniques diverses d'imagerie sont utilisées pour déterminer les zones cérébrales cibles des composés décrits dans le brevet FR2899973 et étudier l'effet d'antagonistes pharmacologiques potentiels.30 II Tests comportementaux 1. Définitions 1.1. Souris dites contrôle Souris auxquelles est injectée par voie intrapéritonéale une solution composée d'un tampon physiologique. Ce tampon (PBS) est de composition suivante : NaCl 135 mM, NaHPO4/Na2HPO4 10 mM, pH 7,4. Cette solution sert à la fois de contrôle d'injection, et de solution pour dissoudre les composés d'intérêt testés. 1.2. Souris VH Souris auxquelles est injectée par voie intrapéritonéale une solution (100 microL) composée d'un tampon physiologique contenant de manière dissoute l'acide vanillylhydracrylique (VH) à la concentration de 10 mg/kg. 1.3. Souris AV Souris auxquelles est injectée par voie intrapéritonéale une solution (100 microL) composée d'un tampon physiologique contenant de manière dissoute de l'acide vanillique (AV) à la concentration de 10 mg/kg. 20 1.4. Souris AV+VH Souris auxquelles est injectée par voie intrapéritonéale une solution (100 microL) composée d'un tampon physiologique contenant de manière dissoute à la fois de l'acide vanillylhydracrylique (VH) et de l'acide vanillique (AV), tous les deux à la concentration de 25 10 mg/kg. 2. Description des tests Quatre tests ont été effectués : le test du champ ouvert, le test d'émergence, le test de 30 l'objet nouveau et un test révélant les interactions sociales. Ces tests sont habituellement utilisés dans les modèles d'étude des effets de substances toxiques ou pharmacologiques sur les modifications comportementales sur modèle animal. Ces tests permettent de révéler les effets d'une substance sur les activités exploratrices générales, sur les réactions à un contexte nouveau et sur les interactions sociales. Ils permettent aussi d'apprécier les effets 4415 anxiogéniques des substances évaluées. Ces tests sont donc assez bien adaptés pour une première approche d'un possible effet "autistique" de composés puisque l'autisme se révèle en partie par une inadaptation des réactions à l'environnement soit physique soit social. Ces tests visent à déterminer les répercussions comportementales possibles de l'acide vanillylhydracrylique (VH) et de l'acide vanillique (VA) en prenant comme modèle des souris SWISS blanches mâles RjOrl(cd-1) âgées de 4-5 semaines. Les produits sont dilués dans un tampon phosphate salin et administrés par voie intrapéritonéale (100�L) chez les souris à des concentrations de 10mg%kg pour chaque produit. Les souris sont observées 30 minutes après l'injection. Afin d'établir un éventuel effet cumulatif, les souris sont soumises à une injection quotidienne pendant trois jours et analysées consécutivement sur crue durée de 3 jours. Quatre cohortes de souris sont traitées soit par un placebo (du tampon phosphate salin), soit par le composé VH, soit avec de l'acide vanillique seul ou encore avec les deux composés, le VH et l'acide vanillique. Des groupes de 10 souris par essais (AV, VH ou VH+VA) sont analysés et comparés au groupes de 10 souris traitées par le placebo. En pratique, le 1e` jour et le 2'd jour on effectue le test du champ ouvert et le test d'émergence. Puis le 3eme on effectue le test du champ ouvert, le test de l'objet nouveau et 20 celui de l'interaction sociale. L'appareillage pour le test du champ ouvert, de l'objet nouveau et de l'interaction sociale se compose d'une boîte (en plastique) carrée, de 37 cm d'arrête et de 17 cm de hauteur qui contient 16 carrés de dimension égale dessinés sur le fond de la boîte. Celle-ci est éclairée 25 par la luminosité ambiante. 2.1. Le test de champ ouvert Les souris sont placées individuellement au centre de la boîte et leurs déplacements et mouvements sont suivis durant 5 min et cela pendant 3 jours de suite. On quantifie le nombre 30 de carrés totaux (mesure d'activité exploratoire) et centraux traversés (zone la moins anxiogène). On note également le nombre de redressements sur les deux pattes arrières, le nombre de toilettage et de grattage (scratching), la durée des moments de fixité, ainsi que le nombre de crottes et d'urines (critères exprimant aussi un possible sentiment d'anxiété). 2.2. Le test de l'objet nouveau Ce test est effectué uniquement le 3eme jour immédiatement après le test du champ ouvert en laissant la souris dans la boîte. Ceci permet de conditionner la souris au paradigme de la boîte ouverte (champ ouvert) avant d'y placer l'objet nouveau. L'objet est un cylindre métallique de 6,5 cm de diamètre et de 7 cm de hauteur, placé à distance de la souris et en dehors de son champ visuel. Il faut veiller à placer l'objet sur un carré adjacent à un carré limitrophe de la boîte. Ainsi l'objet est placé sur un carré central mais à proximité du bord de la boîte. La latence avant le 1e1 contact avec l'objet ainsi que le nombre de contacts avec celui-ci sont quantifiés durant une période de 5 minutes sous lumière ambiante. 2.3. Le test d'interaction sociale Ce test est effectué juste après le test précédent et aussi uniquement le 3eme jour. Une 2ème souris du même sexe est placée au centre de la boîte à distance et hors du champ visuel de la souris testée ; les interaction sont alors suivies durant 5 min. Un contact est considéré comme positif si le nez de la souris étudiée est à une distance inférieure à 2 mm de l'autre souris. Tous les types de contacts sont pris en considération. 2.4. Le test d'émergence Ce test est effectué les deux 1e` jours : une petite boîte sombre (8 x 8 cm), ne comportant qu'une petite ouverture est placée au centre d'une boîte plus grande, différente de celle utilisée pour le test de champ ouvert (afin d'éviter toute reconnaissance par la souris de son environnement). La souris est placée dans la petite boîte et l'on note le temps qu'elle met pour en sortir. On quantifie les temps de passage de la tête, des 2 pattes antérieures, puis des quatre pattes sur une durée maximale de 5 min. 2.5. Le test de préférence de place Dans ce test, les souris sont mises en présence de 2 compartiments, l'un clair, l'autre sombre, séparés par une porte guillotine. Chaque compartiment (30x30 cm et 17 cm de hauteur) est divisé en 9 carrés dessinés sur le sol. Le nombre de carrés traversés par compartiment est compté, ainsi que le nombre de passages entre les deux compartiments et le temps passé dans chaque compartiment sur une durée totale de 5 minutes. L'ensemble est éclairé par la luminosité ambiante. III Exemples Les études comportementales décrites dans les exemples ont été réalisées dans des conditions standardisées de laboratoire. Ainsi les principaux symptômes caractérisant les 5 sujets autistes et pouvant être étudiés chez l'animal ont été sélectionnés : les capacités d'exploration spatiale, la néophobie, l'anxiété et enfin, les interactions sociales. 1. Exemples des effets biologiques en administration ponctuelle 10 Ces mesures visent à déterminer les répercussions biologiques possibles des composés impliqués dans la présente invention, et en particulier de l'acide vanillylhydracrylique (VH) et de l'acide vanillique (VA) en prenant comme modèle des souris SWISS blanches mâles RjOrl(cd-1) âgées de 4-5 semaines après une administration unique chez les souris. Les produits sont dilués dans un tampon phosphate salin et administrés par voie 15 intrapéritonéale (100�L) chez les souris à des concentrations de 10mg/kg pour chaque produit. Les souris sont étudiées 60 minutes après l'injection. Quatre cohortes de souris sont traitées soit par un placebo (du tampon phosphate salin), soit par le composé VH, soit avec de l'acide vanillique seul ou encore avec les deux composés, le VH et l'acide vanillique. Des groupes de 10 souris par essais (AV, VH ou VH+VA) sont analysés et comparés au groupes 20 de 10 souris traitées par le placebo. 60 minutes après l'injection, les souris sont euthanasiées, et le cerveau rapidement prélevé est immédiatement broyé en présence d'un tampon phosphate salin (PBS) contenant des inhibiteurs de protéases (Sigma). Le broyat est alors centrifugé (10 000 rpm, 10 minutes) et le surnageant est récupéré pour doser : 25 1) la concentration de protéines par la technique de Bradford car tous les résultats sont exprimés par mg de protéines, 2) l'activité de la calpaïne, 3) la concentration de glutamate, 4) la concentration des composés qui ont été injectés aux souris. 30 2. Exemples des effets biologiques en administration chronique Ces mesures visent à déterminer les répercussions biologiques possibles des composés impliqués dans la présente invention, et en particulier de l'acide vanillylhydracrylique (VH) et 47 de l'acide vanillique (VA) en prenant comme modèle des souris SWISS blanches mâles RjOrl(cd-l) âgées de 4-5 semaines après une administration chronique chez les souris. Les produits sont dilués dans un tampon phosphate salin et administrés par voie intrapéritonéale (100�L) chez les souris à des concentrations de 10mg/kg pour chaque produit. Quatre cohortes de souris sont traitées soit par un placebo (du tampon phosphate salin), soit par le composé VH, soit avec de l'acide vanillique seul ou encore avec les deux composés, le VH et l'acide vanillique. Des groupes de 10 souris par essais (AV, VH ou VH+VA) sont analysés et comparés au groupes de 10 souris traitées par le placebo. Les souris sont sujettes à trois injections successives sur trois jours consécutifs et ensuite à trois autres injections successives sur trois semaines consécutives. Les souris sont étudiées 60 minutes après la dernière injection. Les souris sont alors euthanasiées, et le cerveau rapidement prélevé est immédiatement broyé en présence d'un tampon phosphate salin (PBS) contenant des inhibiteurs de protéases (Sigma). Le broyat est alors centrifugé (10 000 rpm, 10 minutes) et le surnageant est récupéré pour doser : 1) la concentration de protéines par le technique de Bradford car tous les résultats sont exprimés par mg de protéines, 2) l'activité de la calpaïne, 3) la concentration de glutamate, 4) la concentration des composés qui ont été injectés aux souris. 20 3. Exemples des effets comportementaux en administration ponctuelle Exemple 1 : Test du champ ouvert Dans cet exemple l'effet de trois injections sur trois jours consécutifs des composés 25 VH, AV ou de mélange AV+VH a été déterminé. Les différentes observations comportementales ont été effectuées 30 min après l'injection. Le test du champ ouvert montre une différence significative du nombre de carrés totaux traversés par AV+VH par rapport aux souris dite contrôle (figure 1). Par contre, aucune 30 différence n'est retrouvée pour les souris VH ou les souris AV. De plus, il a été constaté que les souris dites contrôle explorent leur environnement alors que les souris VH, AV ou encore AV+VH cherchent plutôt à le fuir. Ainsi, les aptitudes exploratrices des souris sont modifiées par une administration d'un mélange des deux composés AV et VH. Exemple 2 : Test d'émergence Le test d'émergence permet de déterminer un effet anxiogène potentiel d'un composé. 1) Après une première administration, les souris dites contrôle sortent la tête de l'enceinte sombre après 6 +/-5 sec, le buste après 11+/- 7 sec et sortent complètement après 14 +/- 9 sec. A la suite de quoi elles poursuivent leur comportement exploratoire de leur nouvel environnement. Les souris AV sortent la tête après 2,2 +/- 1,2 sec, le buste après 5,4 +/- 4,4 sec et le corps complet après 11,2 +/- 5,4sec. Les souris VH sortent la tête après 4,6 +/- 3,2 sec, le buste après 8,6 +/- 4,2 sec et le corps complet après 18 +/- 15sec. Les souris AV+VH sortent la tête après 3,0 +/- 1,8 sec, le buste après 6,4 +/- 4,8 sec et le corps complet après 9,2 +/- 3,2 sec. Aucune différence significative n'est retrouvée entre les souris dites contrôle et les souris traitées. 2) Après la deuxième administration (le lendemain), les souris dites contrôle sortent la tête de l'enceinte sombre après 1,8 +/-0,2 sec, le buste après 3.0 +/- 0,4 sec et sortent complètement après 5 +/- 1,2 sec. Ce temps plus court que la veille de ces trois paramètres s'explique par le fait que les souris connaissent déjà cet environnement. ce qui montre ainsi leur capacité rapide à l'habituation, leur capacité de mémorisation de leur environnement et à la diminution de la crainte générée par une situation connue. Les souris AV sortent la tête après 2,6 +/- 0.8 sec, le buste après 12,2 +/- 7,0 sec et le corps complet après 14,0 +/- 5,2sec. Aucune variation comportementale notable n'est observée par rapport aux souris après une seule administration. Les souris VH ont sorti la tête après 7,4 +/- 4,2 sec, le buste après 10,4 +/- 4,8 sec ; par contre elles ne sont jamais sorties complètement de leur enceinte sombre. Les souris AV+VH sortent la tête après 7,2 +/- 4,2sec, le buste après 93 +/- 66 sec et ne sortent pas non plus de l'enceinte sombre. Ce test montre un net effet des deux composés AV et VH, cet effet semblant additif. Ces effets sont différents : le composé AV empêche l'habituation alors que le composé VH est nettement anxiogène. Exemple 3 : Test de l'objet nouveau Ce test est basé sur la tendance spontanée des rongeurs à explorer préférentiellement un objet nouveau. Les souris dites contrôle réagissent rapidement à l'introduction de l'objet dans leur environnement puisque le premier contact s'effectue après 5,4 +/- 2,4sec et pendant30 les 5 min de l'expérience elles ont 24 +/- 5,2 contacts avec celui-ci. Le délai de premier contact des souris AV avec l'objet nouveau est plus long (14,8 +/- 7,6sec) et le nombre de contacts un peu moindre (20,6 +/- 5,2). Les souris VH présentent aussi un délai plus long de premier contact (15,0 +/- 8,2sec) mais un nombre de contacts inchangé (25,2 +/- 5,8). Par contre, le temps de premier contact est plus long chez les souris AV+VH (25 +/- l2sec) et le nombre de contact significativement réduit (7,8 +/- 3,4). Dans ce test, les augmentations des délais avant le premier contact avec l'objet nouveau ainsi qu'une diminution du nombre de contacts est révélateur d'un effet anxiogène des composés administrés. Cet effet est additif lorsque les composés AV et VH sont administrés ensemble. 4. Exemples des effets comportementaux en administration chronique Dans ces exemples, les composés ont été administrés aux souris durant trois jours consécutifs et ensuite trois autres fois trois semaines consécutivement. Deux semaines plus tard, les tests de préférence de place, d'émergence, de l'objet nouveau et d'interaction sociale, ont été effectués. Exemple 1. Test de préférence de place Les souris auxquelles les composés AV, VH ou le mélange AV+VH ont été administrés explorent beaucoup moins un environnement nouveau au contraire des souris dites contrôle. Cette diminution de l'exploration des souris injectées ne se manifeste plus lorsque celles-ci sont remises dans leur cage d'origine, c'est-à-dire dans leur environnement habituel. Dans ces dernières conditions, leur comportement moteur et/ou exploratoire est identique à celui des souris dites contrôle. Par contre, lorsque qu'elles sont sorties de leur cage et déposées sur le sol, à la différence des souris dites contrôle qui se déplacent spontanément, les souris injectées ont soit un comportement de fuite, soit elles restent immobiles. Cette modification comportementale a été quantifiée par le test de préférence de place. Ce test repose sur la tendance spontanée des rongeurs à explorer leur environnement et à éviter la lumière (photophobie). Le dispositif est constitué de deux compartiments, un clair, l'autre sombre, séparés par une porte guillotine. Placés dans cette enceinte bicolore du test de préférence de place, dispositif destiné à quantifier à la fois le comportement exploratoire des animaux et l'anxiété que cette exploration génère, les souris dites contrôle explorent leur environnement nouveau. Dans ce test, les déplacements dans chaque compartiment, le nombre de passage d'un compartiment à l'autre ainsi que les temps respectifs passés dans chaque compartiment sont mesurés. Les données sont reportées dans les figures 2 à 4. La mesure du nombre total de déplacements montre que les composés diminuent l'activité exploratrice des souris et que la combinaison des deux produits possède un effet additif. Le calcul du nombre de déplacements effectués dans le compartiment clair et du temps passé dans ce compartiment est un indice de crainte par rapport à un environnement considéré comme plus hostile (les souris sont des animaux nocturnes craignant naturellement les endroits éclairés). On constate que les souris auxquelles les composés ont été administrés craignent plus un environnement considéré comme hostile que les souris témoins Exemple 2. Test d'émergence Le test d'émergence est un autre test révélateur d'un éventuel effet anxiogène d'un produit. Les souris sont introduites dans une petite enceinte sombre placée dans une plus grande enceinte claire. Les temps de sortie de la tête, des deux pattes avant et enfin du corps entier sont notés. Dans ces conditions expérimentales, les souris sont soumises à un choix, celui de la sécurité de l'enceinte sombre et celui de la curiosité de découvrir un environnement nouveau mais incertain. Les figures 5 à 7 montrent que les souris dites contrôle ne restent pas très longtemps dans l'enceinte sombre, elles en sortent complètement après 10 sec. Les souris auxquelles les composés ont été administrés sortent la tête et les deux pattes avant à des temps proches de ceux des souris dites contrôle. Cela signifie qu'elles ont similairement pris conscience de la présence d'un environnement extérieur mais à la différence des souris dites contrôle. elles ne vont pas l'explorer ou alors que très tardivement. Ce résultat montre un effet anxiogène des composés administrés. Exemple 3. Test de l'objet nouveau Dans ce test, le temps de latence avant le premier contact et le nombre de contacts sont notés. Les figures 8 et 9 montrent les résultats obtenus. Les souris auxquelles les composés ont été administrés entrent deux fois moins en contact avec l'objet nouveau que les souris dites contrôle. Ces résultats montent soit une diminution importante de la curiosité naturelle des souris, soit un effet anxiogène des produits. Exemple 4. Test d'interaction sociale Dans ce test, les souris sont mises en présence, dans l'enceinte du champ ouvert, d'une autre souris non-congénère provenant d'une autre cage, et à qui du Calmivet (0,25 mg/kg, Laboratoire Vétoquinol) a été administré. Il s'agit d'un tranquillisant neuroplégique utilisé parfois comme anesthésiant. Les souris traitées avec le Calmivet à cette dose ne perdent que très peu leur activité exploratrice, mais montrent un désintérêt total vis-à-vis soit d'un congénère nouveau. Ainsi, le temps de contact et le nombre de contacts mesurés dans ce test proviennent uniquement de l'initiative des souris testées. Le nombre de contacts diminue significativement chez les souris auxquelles les composés ont été administrés (figure 10). Le temps de premier contact est aussi augmenté chez les souris VH (figure 11). II ne l'est pas significativement chez les souris AV et chez les souris AV+VH. La nature des contacts est par contre très différente chez les souris auxquelles les composés ont été administrés. En aucun cas les souris dites contrôle n'ont présenté des signes d'agressivité vis-à-vis de la souris nouvelle. Ce n'est pas le cas des souris AV, VH et AV+VH. Celles-ci ont toutes eu un comportement agressif c'est-à-dire elles battent leur queue (signe d'agressivité chez les souris), et systématiquement attaquent et mordent l'autre souris à l'approche. Des signes de prostration accompagnent souvent ce comportement agressif, elles se placent dans un angle du champ ouvert et n'en bougent plus. Les comportements des souris VH, dans les situations expérimentales décrites ci-dessus, ressemblent à ceux de sujets autistes : néophobie et exploration appauvrie, évitement des interactions sociales. Les résultats de cette étude montrent que les souris à qui les composés testés ont été administrés peuvent être utilisées comme modèle animal de l'autisme. 53 Revendications1) Utilisation d'au moins un composé de formule I suivante : (I) dans laquelle : * n=0ou1, * Ra représente -CH2OH, -COOH, ou -NR1R2, avec RI et R2 représentant indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, * Z représente une chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un groupe OH, ladite chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou - CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou en mélange racémique, pour la préparation d'une composition destinée à créer des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques chez un mammifère non-humain, auquel a été administré ladite composition. 2) Utilisation-selon la revendication 1, dans laquelle le mammifère non humain est choisi parmi le rat, le hamster, la gerbille, le chinchilla, le cobaye, le lapin, le singe, le furet, le cochon, le chien, ou le chat, et est notamment une souris. 3) Utilisation selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle les troubles envahissants du développement et/ou les désordres psychiatriques appartiennent au groupe comprenant25l'autisme, les retards de développement, ou les maladies neurodégénératives telles que la maladie d'Alzheimer ou la maladie de Parkinson. 4) Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, dans laquelle ledit composé répond à la formule (I) suivante : (I) dans laquelle : * n=0ou1, * Ra représente -COOH, * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, * Z représente une chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un groupe OH, ladite chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou -CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou en mélange racémique, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres. 5) Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, dans laquelle ledit composé répond à la formule (II) suivante :OMe OH dans laquelle n, Ra, et Z sont tels que définis dans la revendication 1 ou 4, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres. 6) Utilisation selon l'une des revendications 1 à 5, dans laquelle ledit composé répond à la formule (I) ou (II), dans laquelle : * n=0ou1, * Ra représente -COOH, * Z représente - CH2-, -CHOH-, -CHOH-CH2-, -CH2-CHOH-, -CH2-CH2-,-CH2-10 CO-, ou -CO-NH-CH2-, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres. 7) Utilisation selon l'une des revendications 1 à 5, d'au moins un composé répondant à la formule (I) ou (II), dans laquelle : 15 * n= 1, * Ra représente -COOH, * Rb représente -CH3, * Z représente -CH2-CHOH- pour préparer une composition destinée à créer des troubles envahissants du développement 20 et/ou des désordres psychiatriques chez un mammifère non-humain. 8) Utilisation selon la revendication 5, d'au moins un composé de formule (II) choisi parmi l'un des composés suivants :COOH CO OH Acide vanillylpyruvique COOH 1 ÇH2 CHOH OH Acide 3-méthoxy-4- hydroxyphényl-3-hydroxy- propionique pour préparer une composition destinée à créer des troubles envahissants du développement 10 et/ou des désordres psychiatriques chez un mammifère non-humain. 9) Utilisation selon la revendication 5, d'un composé de formule suivante : Vanillylglycine COOH CH2 0H2 OH COOH CH I 2 NH CO OH OMe OMe OH OMe OMe COOH OMe OMe Acide vanillylpropionique Acide vanillyllactiqueCOOH CH2 CHOH OMe OH (acide 3-méthoxy-4-hydroxyphényl-3-hydroxy-propionique, ou acide vanillylhydracrylique) pour préparer une composition destinée à créer des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques chez un mammifère non-humain. 10) Utilisation selon la revendication 5, d'un composé de formule suivante : COOH OMe OH (acide vanillique) pour préparer une composition destinée à créer des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques chez un mammifère non-humain. 11) Utilisation d'un mammifère non-humain présentant des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, pour le criblage d'agents thérapeutiques susceptibles de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, dans lequel a été administré - au moins un composé répondant à la formule (I) suivante :(I) dans laquelle : * n=0ou1, * Ra représente -CH2OH, -COOH, ou -NR1R2, avec Rl et R2 représentant indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle de 1 5 à 3 atomes de carbone, * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, * Z représente une chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un groupe OH, ladite 10 chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou -CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou en mélange racémique, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et 15 - un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, et comprenant éventuellement une étape de comparaison entre : 20 le mammifère non-humain obtenu à l'issue de l'administration du susdit composé et du susdit agent thérapeutique * le susdit mammifère non-humain auquel le susdit composé a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré, ou * un autre mammifère non-humain sain de la même espèce que celui auquel a été 25 administré le susdit composé, auquel le susdit composé a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré. 12) Utilisation selon la revendication 1l d'un mammifère non-humain, notamment d'une souris, présentant des troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, pour le criblage d'agents thérapeutiques susceptibles de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, dans lequel mammifère non-humain, notamment une souris, a été administré - de 0,01 mg/kg à 100 mg/kg, notamment 5 mg/kg à 50 mg/kg, préférentiellement 10 mg/kg à 20 mg/kg d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides dans des proportions allant de 1/10 à 10/1, ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et - un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, et comprenant éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain, notamment une souris, obtenu à l'issue de l'administration d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides, et du susdit agent thérapeutique, et * le susdit mammifère non-humain, notamment une souris, auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré, ou * un autre mammifère non-humain, notamment une souris, sain de la même espèce que celui auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, auquel l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré. 13) Procédé de criblage d'agents thérapeutiques susceptibles de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou les désordres 30 psychiatriques à partir d'un mammifère non-humain auquel on a administré : - au moins un composé de formule (I) suivante : 25(I) dans laquelle : * n=0ou1, * Ra représente -CH2OH, -COOH, ou -NR1R2, avec R1 et R2 représentant indépendamment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle 5 de 1 à 3 atomes de carbone, * Rb représente un groupe alkyle de 1 à 3 atomes de carbone, de préférence un groupe -CH3, * Z représente une chaîne hydrocarbonée de 1 à 3 atomes de carbone, notamment de 1 ou 2 atomes de carbone, le cas échéant substituée par un 10 groupe OH, ladite chaîne comprenant le cas échéant un groupe -NH- et/ou - CO-, * lesdits composés étant le cas échéant sous forme de sels ou lorsqu'il y a présence d'au moins un carbone asymétrique, sous forme d'isomères seuls ou en mélange racémique, 15 ledit composé étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et - au moins un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, comprenant : - au moins l'une des étapes choisie parmi : * une étape de dosage sanguin et/ou urinaire, in vitro, dudit composé ou de l'un de ses métabolites à partir d'un échantillon provenant du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, 20 25* une étape d'étude comportementale du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, * une étude tissulaire et/ou cellulaire réalisée sur des organes ou des tissus du susdit mammifère non-humain dans lequel sont administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, * une étude sur animal entier par technique d'imagerie, et éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain auquel ont été administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, et * le susdit mammifère non-humain auquel le composé a été administré, mais l'agent thérapeutique n'a pas été administré, ou * un autre mammifère non-humain sain, de la même espèce que celui auquel a été administré le susdit composé, auquel le susdit composé a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré. 14) Procédé de criblage selon la revendication 13, d'un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou les désordres psychiatriques, à partir d'un mammifère non-humain, notamment une souris, auquel ont été administrés : - de 0,01 mg/kg à 100 mg/kg, notamment 5 mg/kg à 50 mg/kg, préférentiellement 10 mg/kg à 20 mg/kg d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides dans des proportions allant de 1/10 à 10/1, notamment à raison de 10 mg/kg d'acide vanillique et 10 mg/kg d'acide vanillylhydracrylique, ledit composé ou mélange de composés étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et - au moins un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, comprenant - au moins l'une des étapes choisie parmi :* une étape de dosage sanguin et/ou urinaire, in vitro, dudit composé ou de l'un de ses métabolites à partir d'un échantillon provenant du susdit mammifère non-humain, notamment une souris, dans lequel sont administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, * une étape d'étude comportementale du susdit mammifère non-humain, notamment une souris, dans lequel sont administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, une étude tissulaire et/ou cellulaire réalisée sur des organes ou des tissus du susdit mammifère non-humain, notamment une souris, dans lequel sont administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, une étude sur animal entier par technique d'imagerie, et éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain, notamment une souris, obtenu à l'issue de 15 l'administration d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides, et du susdit agent thérapeutique, et * le susdit mammifère non-humain, notamment une souris, auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré, ou 20 * un autre mammifère non-humain, notamment une souris, sain de la même espèce que celui auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, auquel l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré. 25 15) Procédé de criblage selon la revendication 13, d'un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou les désordres psychiatriques, à partir d'un mammifère non-humain, notamment une souris, auquel ont été administrés : 30 - de 0,01 mg/kg à 100 mg/kg, notamment 5 mg/kg à 50 mg/kg, préférentiellement 10 mg/kg à 20 mg/kg d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides dans des proportions allant de 1/10 à 10/l, notamment à raison de 10 mg/kg d'acide vanillique et 10 mg/kg d'acide vanillylhydracrylique, * *ledit composé ou mélange de composés étant responsable des susdits troubles et/ou désordres, et - au moins un agent thérapeutique susceptible de prévenir, de réduire ou d'annuler substantiellement les troubles envahissants du développement et/ou des désordres psychiatriques, comprenant : - une étape d'étude comportementale du susdit mammifère non-humain, notamment une souris, dans lequel ont été administrés le susdit composé et le susdit agent thérapeutique, et éventuellement une étape de comparaison entre : le mammifère non-humain, notamment une souris, obtenu à l'issue de l'administration d'acide vanillique ou d'acide vanillylhydracrylique ou d'un mélange de ces deux acides, et du susdit agent thérapeutique, et * le susdit mammifère non-humain, notamment une souris, auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré, ou * un autre mammifère non-humain, notamment une souris, sain de la même espèce que celui auquel a été administré l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides, auquel l'acide vanillique ou l'acide vanillylhydracrylique ou un mélange de ces deux acides a été administré, mais le susdit agent thérapeutique n'a pas été administré,25