Brevet FR2947728A1 — publié le 20110114

COMPOSITION POUR LE TRAITEMENT DE L'INFERTILITE MASCULINE SECONDAIRE A DES PATHOLOGIES TESTICULAIRES IMPLIQUANT UNE HYPDXIE ET/OU UNE ISCHEMIE TISSULAIRE TELLES QUE LA VARICOCELE ET LA TORSION DU TESTICULE La présente invention concerne le traitement thérapeutique de l'infertilité masculine secondaire à des pathologies testiculaires impliquant une hypoxie et/ou une ischémie tissulaire telles que la varicocèle et la torsion du testicule. La varicocèle est une pathologie caractérisée par une stase veineuse chronique avec une hypoxie tissulaire qui génère une pression hydrostatique élevée sur le plexus pampiniforme. L'incidence de la varicocèle est de l'ordre de 35 à 40% chez les hommes stériles et cette pathologie est la principale cause d'infertilité traitée par la chirurgie. La torsion du testicule est une urgence médicale qui nécessite un diagnostic et un traitement immédiats pour éviter le dommage testiculaire consécutif et une éventuelle infertilité. Le principal processus physiopathologique de la torsion testiculaire est la lésion par ischémie - reperfusion, due à la rotation du cordon spermatique et à son relâchement. Divers mécanismes participent au développement de la lésion testiculaire consécutive au processus de torsion et détorsion. Le testicule produit différentes cytokines inflammatoires telles que le facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-a) et l'interleukine 1 beta (IL-1R). De plus, l'ischémie - reperfusion du testicule entraîne une production excessive d'espèces réactives de l'oxygène, elle active la famille des protéines kinases activées par des mitogènes (MAPK) et elle déclenche le processus d'apoptose. En particulier, les MAPK actives sont responsables de la phosphorylation d'un type de protéines effectrices, parmi lesquelles divers facteurs de transcription tels que le facteur nucléaire kappa B (NF-KB), qui se lient ensuite aux éléments régulateurs de gènes inductibles. Cette cascade pathologique est responsable de l'atrophie testiculaire, de la réduction du flux sanguin et de l'altération de la spermatogenèse observée aux stades les plus avancés de la lésion. À ce jour, il n'existe aucune thérapie médicale codifiée pour le traitement des séquelles de ce type de pathologies. L'hypoxie active aussi bien le facteur HIF-1 que le facteur de croissance de l'endothélium vasculaire (VEGF) et ce dernier, en plus de stimuler l'angiogenèse et la formation de nouveaux capillaires et vaisseaux sanguins lors des processus physiologiques normaux, a un rôle protecteur dans la régulation de la fonction testiculaire et spermatogénétique. Le VEGF exerce sa fonction biologique en se liant à deux récepteurs couplés à des tyrosines kinases et appelés VEGFR-1 (ou fit-1) et VEGFR-2 (ou flk/KDR), qui sont également présents sur la surface des cellules de Sertoli et de Leydig. Le VEGF est présent dans l'épithélium prostatique ainsi que dans l'épithélium des glandes séminales du système génital masculin et dans le sperme. Des données expérimentales ont suggéré que le traitement par le VEGF exerce des effets protecteurs dans un modèle expérimental de torsion du testicule. Toutefois, la thérapie avec une telle protéine recombinante se heurte à de nombreuses difficultés à cause de la faible biodisponibilité de cette protéine, de sa demi-vie plasmatique réduite et de son potentiel à induire des effets secondaires graves. Or, les inventeurs ont découvert de manière surprenante que l'administration d'une composition comprenant un mélange de polynucléotides à un patient atteint d'une des pathologies précitées permet d'exercer un effet thérapeutique sur la lésion tissulaire qui se manifeste dans ce type de pathologies, en stimulant la production physiologique de VEGF dans des conditions pathologiques d'hypoperfusion tissulaire et/ou d'hypoxie. En conséquence, un premier objet de la présente invention est une composition pharmaceutique comprenant, en tant que principe actif, un mélange de polynucléotides extraits de sources naturelles ou de synthèse, destinée à être utilisée comme médicament dans le traitement thérapeutique de l'infertilité masculine secondaire à une pathologie testiculaire impliquant une hypoxie et/ou une ischémie tissulaire telle que la varicocèle ou la torsion du testicule, entraînant une hypospermie, une asthénospermie ou une azoospermie. Dans le cadre de la présente description, le terme polynucléotides (PN) désigne une fraction de chaînes polymères d'acides nucléiques tels que l'ADN ou l'ARN, mais de préférence l'ADN, dont la distribution des poids moléculaires se situe de préférence dans la plage de 220 Daltons à 2500 kDaltons. Ladite fraction de chaînes polymères d'acides nucléiques est de préférence obtenue par extraction à partir d'une source naturelle, d'origine animale ou végétale, telle que du sperme de poisson ou des plantes, par un procédé qui comprend de préférence une étape de fragmentation partielle des chaînes d'ADN afin de réduire leur poids moléculaire et une étape de dépurination partielle de l'acide nucléique afin de supprimer sa capacité informationnelle. Le pourcentage préféré de dépurination de l'acide nucléique se situe de préférence dans la plage de 1% à 5% de bases puriques enlevées (c'est-à-dire de sites apuriques), ramené au total des bases puriques initialement présentes. Un pourcentage de dépurination particulièrement préféré est de 2,5%. Comme on le verra plus en détail ci-après, la longueur des chaînes polynucléotidiques adéquate pour l'application, objet de la présente invention, et donc leur poids moléculaire, varie en fonction de plusieurs paramètres, parmi lesquels la voie d'administration choisie. Dans certains modes de réalisation de l'invention, les polynucléotides sont notamment un mélange de polydésoxyribonucléotides (PDRN). À titre d'exemple non limitatif, le mélange de polydésoxyribonucléotides (PDRN) présente une distribution des poids moléculaires qui se situe dans la plage de 50 à 1500 kDaltons. Une composition de polynucléotides utilisable 30 selon l'invention comprend une fraction de chaînes polyribonucléotidiques et/ou polydésoxyribonucléo- tidiques de poids moléculaires différents, obtenues par synthèse ou obtenues à partir de sources naturelles, qui peuvent être d'origine végétale ou animale, par exemple des plantes ou du sperme de poissons destinés à l'alimentation humaine, ce dernier étant la source préférée. Des compositions à base de polynucléotides sont connues et disponibles dans le commerce. FR 2 676 926 décrit des compositions pharmaceutiques contenant des polydésoxyribonucléotides hautement polymérisés, issus de sperme de poisson, qui sont utilisées pour le traitement ou la prévention de déficits immunitaires ; il est décrit des compositions contenant des polydésoxyribonucléotides dans un solvant non ionique, qui peuvent être utilisées par voie parentérale, en particulier par voie intramusculaire et/ou intraveineuse. Des procédés de préparation de polydésoxyribonucléotides issus du placenta de mammifères sont décrits dans EP 0 226 254. Les polynucléotides utilisés dans le cadre de l'invention sont hautement purifiés, ou bien il s'agit d'une fraction de polynucléotides qui est pratiquement dépourvue de protéines ou de peptides pharmacologiquement actifs. Dans un mode de réalisation préféré, la fraction de polynucléotides a de préférence une pureté égale ou supérieure à 95% et plus préférentiellement supérieure à 98%, rapportée à la substance sèche. Les polynucléotides utilisés dans le cadre de l'invention ont de préférence une distribution de leurs poids moléculaires qui se situe dans la plage de 220 Daltons (0,22 kDaltons) à 2500 kDaltons. Les polynucléotides peuvent être obtenus à partir d'une source animale ou végétale riche en ADN ou en ARN, par les procédés décrits dans la littérature précitée. À titre d'exemple, une fraction de polynucléotides utilisable dans le cadre de l'invention est obtenue par un procédé qui comprend les étapes suivantes : 1) lyse enzymatique de la matrice organique 2) clarification par filtration de la solution résultante ; 3) précipitation avec des sels d'ammonium quaternaire ; 4) séparation du précipité d'avec le complexe ; 5) sélection moléculaire par des précipitations sélectives avec des mélanges d'eau et alcool ; 6) purification par reprécipitation avec de l'alcool Une composition de polynucléotides utilisable dans le cadre de l'invention est formulée dans une forme de dose quelconque adaptée à la pathologie à traiter. Les formes de dose préférées sont celles qui conviennent pour l'administration par voie systémique, en particulier orale ou intramusculaire, par exemple sous la forme d'une formulation injectable par voie intramusculaire ou sous la forme de comprimés. Le choix et la préparation de la forme d'administration et le dosage à utiliser dans chaque 30, cas rentrent sans problème dans les compétences d'un homme de métier moyen. Dans un mode de réalisation préféré, une composition de polynucléotides utilisable dans l'invention est appropriée pour administrer une dose de polynucléotides allant de 0,01 à 10 mg/kg environ, plus préférentiellement de 0,01 à 5 mg/kg environ et encore plus préférentiellement de 0,07 à 1,25 mg/kg environ, ramenée au poids corporel du patient. Pour un patient humain pesant environ 70 kg, ces doses correspondent à une quantité en poids de polynucléotides allant de 0,7 mg à 700 mg, de préférence de 0,7 mg à 350 mg et plus préférentiellement de 4,9 mg à 87,5 mg. Pour les administrations par voie orale, on utilise plus préférentiellement des poids moléculaires inférieurs (de 220 Daltons à 1000 kDaltons) tandis que, pour les administrations par voie parentérale, on utilise plus préférentiellement des poids moléculaires supérieurs (de 70 kDaltons à 2500 kDaltons). Dans le cadre de la présente description, le terme "patient" est utilisé pour désigner un sujet quelconque, humain ou non humain, qui nécessite un traitement thérapeutique visant à résoudre l'infertilité masculine secondaire à une pathologie impliquant une hypoxie et/ou une ischémie tissulaire au niveau du testicule telle que la varicocèle ou la torsion testiculaire. De préférence, le patient est un être humain. Les exemples ci-après, qui décrivent les modèles animaux de varicocèle et de torsion du testicule utilisés par les inventeurs ainsi que les traitements thérapeutiques expérimentés sur ces modèles, sont donnés à titre purement illustratif et ils ne limitent en aucune façon la visée de l'invention telle qu'elle est définie dans les revendications en annexe. Dans les exemples qui suivent, il est fait spécifiquement référence aux figures annexées, dans 5 lesquelles : La figure 1 est une vue au microscope montrant l'histologie du testicule chez un animal faussement opéré (pseudo-varicocèle) ; La figure 2 est une 10 l'histologie du testicule varicocèle ; La figure 3 est une l'histologie du testicule vue au microscope montrant chez un animal atteint de vue au microscope montrant chez un animal atteint de 15 20 varicocèle et soumis à une au bout de 7 jours) ; La figure 4 est une l'histologie du testicule varicocèle et soumis à une au bout de 14 jours) ; La figure 5 est une l'histologie du testicule varicocèle et traité avecvaricocélectomie (évaluation vue au microscope montrant chez un animal atteint de varicocélectomie (évaluation vue au microscope montrant chez un animal atteint de des polynucléotides (PDRN) (évaluation au bout de 7 jours) ; La figure 6 est une vue au microscope montrant 25 l'histologie du testicule chez un animal atteint de varicocèle et traité avec des polynucléotides (PDRN) (évaluation au bout de 14 jours.) ; La figure 7 est une vue au microscope montrant l'histologie du testicule chez un animal atteint de 30 varicocèle et traité avec la combinaison de polynucléotides (PDRN) et chirurgie (évaluation au bout de 7 jours) ; La figure 8 est une vue au microscope montrant l'histologie du testicule chez un animal atteint de varicocèle et traité avec la combinaison de polynucléotides (PDRN) et de chirurgie (évaluation au bout de 14 jours) ; La figure 9 est un graphique à barres montrant l'expression de l'ARNm du VEGF dans le testicule soumis à ischémie - reperfusion (9A) et dans le testicule controlatéral (9B) après 1, 7 et 30 jours des traitements indiqués dans la légende ; La figure 10 est un graphique à barres montrant l'expression de la protéine VEGF mature dans le testicule soumis à ischémie - reperfusion (10A) et dans le testicule controlatéral (10B) après 1, 7 et 30 jours des traitements indiqués dans la légende ; La figure 11 est une série de vues au microscope de préparations histologiques montrant l'évolution des phénomènes d'oedème, d'ectasie veinulaire et de nécrose de coagulation globulaire après ischémie - reperfusion du testicule et traitement avec le véhicule seul (11A, 11C, 11E), DMPX + PDRN (11G), les PDRN seuls (11B, 11D et 11F) ou la DMPX seule (11H) ; La figure 12 est une série de vues au microscope de préparations histologiques montrant l'expression du VEGF dans les cellules germinales du testicule homolatéral après ischémie - reperfusion et traitement avec le véhicule seul (12A, 12C, 12E), la DMPX + PDRN (12G), les PDRN seuls (12B, 12D et 12F) ou la DMPX seule (12H) ; La figure 13 est une série de vues au microscope de préparations histologiques montrant l'expression du récepteur du VEGF dans les cellules de Leydig du testicule homolatéral après ischémie - reperfusion et traitement avec le véhicule seul (13A, 13C, 13E), la DMPX + PDRN (13G), les PDRN seuls (13B, 13D et 13F) ou la DMPX seule (13H). Exemple 1 : modèle animal de varicocèle Des rats Sprague-Dawley mâles (pesant entre 250 et 300 g) ont subi une ligature partielle de la veine rénale gauche afin de créer un reflux dans la veine spermatique de gauche et provoquer, ainsi, une altération profonde de la spermatogenèse par varicocèle dans le plexus pampiniforme (groupe varicocèle) après anesthésie générale au pentobarbital sodique (50 mg/kg i.p.). La varicocèle a été prolongée pendant 28 jours. Dans le groupe pseudo-varicocèle, les rats ont subi la même intervention chirurgicale que celle réalisée chez les rats atteints de varicocèle, à l'exception de l'occlusion partielle de la veine rénale. Les animaux ont été randomisés pour recevoir, après 28 jours, les traitements suivants : 1) simple varicocélectomie par ligature de la veine spermatique gauche et sacrifice des animaux après 7 ou 14 jours ; 2) maintien de la varicocèle et administration de polydésoxyribo- nucléotides (PDRN) (8 mg/kg i.p.) pendant 7 ou 14 jours ; 3) varicocélectomie et PDRN (8 mg/kg i.p.) après 7 ou 14 jours. Les animaux de chaque groupe ont été sacrifiés respectivement 7 ou 14 jours après la randomisation. Les résultats histologiques illustrés sur les figures 1 à 8 démontrent que, par rapport aux animaux pseudo-varicocèle, la varicocèle se traduit par une altération considérable de l'architecture normale du testicule, caractérisée par un oedème, une ectasie des vaisseaux veineux et lymphatiques et des modifications significatives des cellules de Sertoli et de Leydig (figures 1 et 2). La varicocélectomie réduit significativement ces altérations histologiques évaluées 7 et 14 jours après les interventions chirurgicales (figures 3 et 4). De manière surprenante, l'administration de PDRN permet de protéger, et ce de façon tout à fait comparable à l'intervention chirurgicale, le testicule contre les lésions due à la varicocèle tant à J7 qu'à J14 (figures 5 et 6). Le traitement médical combiné avec PDRN et varicocélectomie ne semble pas apporter de protection supplémentaire contre la lésion due à la varicocèle (figures 7 et 8). D'autre part, la varicocèle a provoqué une altération de la spermatogenèse, comme on peut le voir dans le tableau 1, qui récapitule l'évaluation de la spermatogenèse, exprimée par le score de Johnsen (P L'administration de PDRN a amélioré la spermatogenèse (tableau 1). Globalement, ces résultats démontrent que l'administration de PDRN exerce une action thérapeutique surprenante et inattendue en cas de varicocèle. Exemple 2 : modèle animal de torsion testiculaire Des rats Sprague-Dawley mâles (pesant de 250 à 300 g) ont subi, après anesthésie générale au pentobarbital sodique (50 mg/kg i.p.), une ischémie - reperfusion du testicule (TI/R) ou une pseudo-ischémie (pseudo-TI/R). La TI/R a été induite par une torsion de 720° du testicule et du cordon spermatique gauche de façon à provoquer une occlusion totale du flux pendant 1 heure. Le même testicule a ensuite été détordu. Les animaux pseudo-varicocèle ont subi la même intervention chirurgicale que les animaux TI/R, à l'exception de l'occlusion testiculaire. Les animaux ont ensuite été randomisés pour recevoir les traitements suivants, immédiatement après la détorsion : 1) PDRN (8 mg/kg i.p.) ; 2) DMPX (3,7-diméthyl-1-propargylxanthine 0,1 mg/kg i.p.) ; 3) PDRN (8 mg/kg i.p.) + DMPX (0,1 mg/kg i.p.) simultanément ; 4) véhicule (1 ml/kg de NaCl à 0,9%). La DMPX est un antagoniste sélectif des récepteurs de l'adénosine A2A. Les PDRN, la DMPX et le véhicule ont respectivement été injectés par voie intrapéritonéale pendant 30 jours. Les animaux de chaque groupe ont été sacrifiés 1, 7 ou 30 jours après l'ischémie - reperfusion. L'ARNm de même que l'expression de la protéine du VEGF-A ont été étudiés 7 et 30 jours après la lésion dans les deux testicules. La lésion histologique a également été analysée à Ji, J7 et J30. Enfin, l'analyse immunohistochimique du VEGF-A et de son récepteur VEGFR2, ainsi que l'analyse de l'activité spermatogénétique, ont été effectuées à J1, J7 et J30. L'ischémie - reperfusion du testicule a produit une augmentation de l'ARN messager ou de la protéine du VEGF dans les deux testicules. Le traitement aux PDRN a augmenté de manière significative aussi bien l'ARN messager du VEGF (figures 9A et 9B) que sa protéine mature (figures 10A et 10B). Par contre, l'administration combinée avec la DMPX a annulé l'effet protecteur des PDRN (figures 9A et 9B ; 10A et 10B). Aucune modification significative n'a été mise en évidence pour les paramètres évalués chez les animaux pseudo-TI/R traités tant avec le véhicule qu'avec les différentes substances. L'ischémie - reperfusion du testicule a provoqué un oedème, une ectasie veinulaire et une nécrose de coagulation globulaire 1, 7 et 30 jours après la reperfusion (figures 11A, 11C, 11E et tableau 1). Le tableau 2 montre les scores histologiques des testicules ayant subi une ischémie - reperfusion (TI/R) des rats traités aux PDRN (8 mg/kg i.p.) ou à la DMPX (0,1 mg/kg i.p.) ou à la DMPX + PDRN ou avec le véhicule (1 ml/kg/ i.p.). Chaque groupe comprend 7 animaux. La notation du score histologique a été effectuée sur la base des critères suivants : 0 (absent), 1 (faible), 2 (modéré), 3 (grave). Le traitement aux PDRN a réduit les altérations histologiques dans le testicule homolatéral (figures 11B, 11D, 11F et tableau 2). En revanche, l'administration combinée avec la DMPX a supprimé les effets protecteurs des PDRN (figures 11G et H, tableau 2). Des résultats comparables ont été obtenus dans le testicule controlatéral d'animaux ayant subi une ischémie - reperfusion et traités soit avec le véhicule, soit avec les différentes substances. En outre, l'ischémie - reperfusion du testicule a provoqué une altération de la spermatogenèse, surtout 30 jours après la reperfusion, comme le montre le tableau 3, qui récapitule l'évaluation de la spermatogenèse, exprimée par le score de Johnsen (P L'administration de PDRN a amélioré spermatogenèse (tableau 3). L'analyse immunohistochimique a révélé en outre une expression modeste du VEGF dans les cellules germinales du testicule homolatéral chez les animaux ayant subi une ischémie - reperfusion et traités avec le véhicule (figures 12A, 12C, 12E). Le traitement aux PDRN a mis en évidence une forte réactivité du VEGF 1, 7 et 30 jours après la reperfusion (figures 12B, 12D, 12F). L'administration combinée avec la DMPX n'a provoqué aucune modification significative de l'expression du VEGF (figures 12G et 12H). Des résultats comparables ont été obtenus dans le testicule controlatéral des animaux ayant subi une ischémie - reperfusion et traités soit avec le véhicule, soit avec les différentes substances. Enfin, l'analyse immunohistochimique a mis en évidence une expression modérée du récepteur du VEGF dans les cellules de Leydig du testicule homolatéral, 1 jour après la reperfusion (figure 13A). Le traitement aux PDRN a augmenté la réactivité du récepteur du VEGF (figure 13B). En revanche, une forte immunoréactivité pour le récepteur du VEGF a été mise en évidence 7 jours après la reperfusion chez les animaux traités avec le véhicule comme chez ceux traités aux PDRN (figures 13C et 13D), tandis qu'une expression modérée était observée après 30 jours (figures 13E et 13F). L'administration combinée avec la DMPX n'a provoqué aucune modification significative des l'expression du récepteur du VEGF (figures 13G et 13H). Des résultats comparables ont été obtenus dans le testicule controlatéral des animaux ayant subi une ischémie - reperfusion et traités soit avec le véhicule, soit avec les différentes substances. Exemple 3 : évaluation de la plage thérapeutique chez l'homme Pour évaluer la plage thérapeutique des PDRN chez l'homme, des expériences ont été réalisées chez le rat en utilisant comme critère d'évaluation, la lésion histologique 24 heures après la reperfusion et en essayant des quantités croissantes de PDRN exprimées en doses humaines équivalentes (HED ; tableau 3 et figure 14). Le tableau 4, en particulier, concerne l'étude dose/plage effectuée avec les PDRN dans le but d'identifier la dose thérapeutique chez l'homme. Le critère retenu dans l'étude était la lésion histologique à 24 heures. Le score histologique a été évalué dans les testicules de rats ayant subi une ischémie - reperfusion (TI/R).Le score histologique a été noté sur la base des critères suivants 0 (absent), 1 (faible), 2 (modéré), 3 (grave). Pour convertir ces doses, on a utilisé la formule suivante : HED = dose chez l'animal en mg/kg x (poids de l'animal en kg/poids de l'homme en kg). Les résultats indiqués dans le tableau 4 et sur la figure 14 démontrent que les PDRN exercent un effet protecteur optimal dans une plage de dose qui varie d'environ 5,4 mg à environ 87,3 mg chez un homme de 70 kg. En conclusion, les résultats obtenus indiquent 1) que les polynucléotides (PDRN) protègent le testicule contre la lésion hypoxique/ischémique par le biais de la production de VEGF et 2) qu'ils peuvent représenter une approche nouvelle et innovante de la thérapie de l'infertilité chez les patients atteints de torsion du testicule ou de varicocèle. Tableau 1 : Évaluation de la spermatogenèse dans le modèle de varicocèle expérimental Groupes expérimentaux Score de Johnsen Pseudo-varicocèle 9,33 � 0,22 Varicocèle 2,63 � 0,46 Varicocèle + chirurgie 8,22 � 0,54 (7 jours) Varicocèle + chirurgie 8,66 � 0,33 (14 jours) Varicocèle + PDRN (7 jours) 8,42 � 0,37 Varicocèle + PDRN (14 jours) 8,78 � 0,41 Varicocèle + PDRN + chirurgie 8,48 � 0,40 (7 jours) Varicocèle + PDRN + chirurgie 8,83 � 0,48 (14 jours) 15 Tableau 2 : Score histologique dans le modèle d'ischémie - reperfusion du testicule (TI/R). Groupes îdème Ectasie Nécrose de Atrophie expérimentaux extra- veinulaire coagulation tubulaire globulaire Pseudo-varicocèle 0 0 0 0 TI/R + véhicule 3 3 3 0 (1 jour) TI/R + PDRN 0 1 1 0 (1 jour) TI/R + véhicule 3 3 3 0 (7 jours) TI/R + PDRN 1 0 0 0 (7 jours) TI/R + véhicule 2 2 2 3 (30 jours) TI/R + PDRN 1 0 0 0 (30 jours) TI/R + DMPX + PDRN 3 2 3 (30 jours) TI/R + DMPX 3 3 2 1 (30 jours) Tableau 3 : Evaluation de la spermatogenèse lors d'une ischémie - reperfusion du testicule (TI/R) Groupes expérimentaux Score de Johnsen Pseudo-varicocèle 9,81 � 0,15 TI/R + véhicule (1 jour) 5,47 � 1,21 TI/R + PDRN (1 jour) 8,83 � 0,20 TI/R + véhicule (7 jours) 1,21 � 0,04 TI/R + PDRN (7 jours) 9,00 � 0 40 TI/R + véhicule (30 jours) 1,73 � 0,08 TI/R + PDRN (30 jours) 8,92 � 0,30 TI/R + DMPX + PDRN (30 jours) 1,75 � 0,06 TI/R + DMPX (30 jours) 2,36 � 1,0 Tableau 4 : Identification de la dose thérapeutique 5 optimale chez l'homme (6 animaux par expérience) Groupe HED de Dose de îdème îdème Ectasie PDRN PDRN extra- intra- veinulaire (mg/jour) (mg) tubulaire tubulaire Pseudo- 97,3 8 0 0 0 varicocèle TI/R + 3 3 3 véhicule TI/R + PDRN 5,4 0,5 2 2 2 TI/R + PDRN 10,9 1 1 1 1 TI/R + PDRN 21,8 2 0 0 1 TI/R + PDRN 43,6 4 0 0 1 TI/R + PDRN 87,3 8 0 0 1 REVENDICATIONS1. Composition pharmaceutique comprenant comme principe actif, un mélange de polynucléotides, extraits d'une source naturelle ou de synthèse, destinée à être utilisée comme médicament dans le traitement thérapeutique de l'infertilité masculine secondaire à une pathologie testiculaire impliquant une hypoxie et/ou une ischémie tissulaire. 2. Composition selon la revendication 1, 10 dans laquelle la pathologie testiculaire est la varicocèle ou la torsion du testicule. 3. Composition selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle ledit mélange de polynucléotides est 15 partiellement dépuriné. 4. Composition selon la revendication 3, dans laquelle ledit mélange de polynucléotides présente un pourcentage de dépurination allant de 1% à 5% de 20 bases puriques enlevées, ramené au total des bases puriques initialement présentes. 5. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans laquelle ledit mélange de 25 polynucléotides est une fraction de chaînes polymères d'acide nucléique dont la distribution des poids moléculaires va de 220 Daltons à 2500 kDaltons. 6. Composition selon la revendication 5,dans laquelle ledit mélange de polynucléotides est une fraction de chaînes polymères d'acide nucléique dont la distribution des poids moléculaires va de 220 Daltons à 1000 kDaltons. 7. Composition selon la revendication 5, dans laquelle ledit mélange de polynucléotides est une fraction de chaînes polymères d'acide nucléique dont la distribution des poids moléculaires va de 70 kDaltons à 2500 kDaltons. 8. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, dans laquelle ledit mélange de polynucléotides peut être obtenu par extraction à partir d'une source naturelle, par un procédé comprenant une étape de fragmentation partielle des chaînes polynucléotidiques de l'acide nucléique et une étape de dépurination partielle de l'acide nucléique. 9. Composition selon la revendication 8, dans laquelle ladite source naturelle est du sperme de poisson ou un végétal. 10. Composition selon l'une quelconque des 25 revendications 1 à 9, dans une forme de dose adaptée à l'administration par voie orale. 11. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, dans une forme de dose adaptée à 30 l'administration par voie parentérale. 12. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, dans laquelle les polynucléotides sont des polydésoxyribonucléotides (PDRN). 13. Utilisation d'une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 12 pour préparer un médicament destiné au traitement thérapeutique de l'infertilité masculine secondaire à une pathologie testiculaire impliquant une hypoxie et/ou une ischémie tissulaire. 14. Utilisation selon la revendication 13, dans laquelle la pathologie testiculaire est la 15 varicocèle ou la torsion du testicule. 15. Utilisation selon la revendication 13 ou 14, dans laquelle le traitement thérapeutique s'effectue en administrant une dose journalière de 20 principe actif allant de 0,01 à 10 mg/kg, de préférence de 0,01 à 5 mg/kg et plus préférentiellement de 0,07 à 1,25 mg/kg, ramenée au poids corporel du patient.