Brevet FR2938766A1 — publié le 20100528

-1- La présente invention se situe dans le domaine cosmétique et pharmaceutique, et plus particulièrement dans le domaine de la dermatologie. La présente invention a pour objet une composition cosmétique et/ou pharmaceutique, et notamment dermatologique, comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, comme principe actif activateur de l'aconitase et protecteur des mitochondries, une quantité efficace d'un hydrolysat de feuilles de vigne (Vitis vinifera L.). De préférence, le principe actif est un hydrolysat peptidique de feuilles de vigne et contient principalement des peptides. Ce principe actif peut être utilisé seul ou en association avec au moins un autre principe actif. La présente invention concerne également l'utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif issu de feuilles de vigne (Vitis vinifera L.) pour stimuler les fonctions des mitochondries et pour augmenter le niveau énergétique cellulaire. L'invention porte encore sur un procédé de traitement cosmétique destiné à protéger la peau et les phanères des agressions extérieures et à lutter contre le vieillissement cutané. Ledit principe actif, activateur de l'aconitase et protecteur des mitochondries, peut également être utilisé pour préparer des compositions pharmaceutiques destinées à prévenir ou lutter contre les pathologies liées à des dysfonctionnements mitochondriaux ; par exemple, certaines dégénérescences neuromusculaires ou cardiaques, le diabète de type II ou encore certaines pathologies du vieillissement. Les mitochondries sont les organites des cellules eucaryotes spécialisées dans la production d'énergie. Elles sont dotées de leur propre ADN (ADNmt). L'énergie produite par la chaîne respiratoire est stockée sous forme d'ATP. Dans certaines conditions de stress cellulaire, les électrons, libérés par la chaîne respiratoire de phosphorylation oxydative, produisent des radicaux libres qui peuvent endommager les structures mitochondriales. Ces facteurs de stress peuvent être intrinsèques ou d'origine extérieure. Parmi ces derniers, on peut citer : les rayonnements UV, les toxines, les radiations, les oxydants alimentaires. Ainsi, on a pu montrer un déclin progressif des fonctions mitochondriales avec l'âge, probablement lié à l'accumulation de mutations sur l'ADNmt (K. Singh, Ann. N.Y. Acad. Sci. 1019, 2004). Ces mutations de l'ADNmt peuvent être induites par des expositions répétées aux rayonnements UV, et seraient même un témoin du photo-vieillissement (M. Berneburg et al., J. of Invest. Dermatol. 122(5), 2004). Les mitochondries jouent également un rôle central dans l'apoptose. Les dégradations mitochondriales peuvent ainsi être un facteur déclenchant de la cascade réactionnelle 2938766 -2- conduisant à l'apoptose dans de nombreux types cellulaires (G. Kroemer et al., FASEB J. 9:1277-87, 1995). Dans les mitochondries, des mécanismes naturels de réparation ont été identifiés. L'aconitase (aconitate hydratase ou Iron Regulatory Protein ; EC 4.2.1.3) s'est ainsi révélée 5 être indispensable au maintien de l'intégrité de l'ADNmt, indépendamment de son activité catalytique. L'aconitase a tout d'abord été identifiée comme une enzyme mitochondriale impliquée dans le cycle de Krebs ; elle catalyse la conversion stéréospécifique du citrate en isocitrate et participe ainsi à la production d'énergie de la cellule. Elle possède un site actif comportant un agrégat fer-soufre (4Fe-4S) à géométrie pseudo-cubique. Récemment, 10 l'équipe du Dr Butow (X. J. Chen et al., Science 307, 2005) a pu montrer que l'aconitase jouait un rôle clé dans la préservation de l'intégrité de l'ADN mitochondrial. Elle interagirait avec l'ADN à l'intérieur de régions régulatrices suggérant un rôle dans le compactage du génome mitochondrial à la manière d'une protéine de la famille de HSP 70. Le passage de la forme liant l'ADN à la forme active de l'enzyme serait basé sur 15 l'assemblage ou le désassemblage du cluster fer-soufre. Grâce à sa double fonctionnalité, l'aconitase établit un lien direct entre l'activité génératrice d'énergie de la mitochondrie et la conservation de l'ADNmt. L'aconitase pourrait ainsi constituer une cible thérapeutique pour prévenir ou lutter contre les pathologies liées à des dysfonctionnements mitochondriaux, par exemple, le diabète de type 20 II, certaines affections neuromusculaires, certaines pathologies du vieillissement. La recherche de composés pouvant stimuler ou protéger les mitochondries est une préoccupation de la recherche médicale et de la cosmétique. Ainsi, afin de lutter contre les pathologies associées à l'altération des mitochondries ou de lutter contre les effets du 25 vieillissement cutané, il a été proposé des solutions telles que l'apport de substances impliquées dans le métabolisme énergétique, et plus particulièrement d'intermédiaires ou de cofacteurs du cycle de Krebs tels que le fumarate, le L-malate, l'acétyl CoA (WO 02064129) ou encore l'apport de substances capables de diminuer les radicaux libres, telles que la vitamine C (US 2004/0086526) ou la L-ergothionéine (WO 9836748). 30 Par ailleurs, parmi les principes actifs pour la cosmétique extraits de la vigne, on peut trouver des extraits de sarments de vigne riches en resvératrol décrits pour leurs propriétés antivieillissement (FR2898493), utilisés en combinaison avec d'autres agents actifs 2938766 -3- (FR2896990) ou encore des extraits de cellules de vigne fraiches cultivées in vitro à haute teneur en polyphénols (FR2808682) ou encore une composition cosmétique contenant 5 à 10 % d'extrait total de feuilles de vigne (ES2172475 ). Néanmoins, l'utilisation d'extraits totaux dans des formulations cosmétiques présente 5 certains inconvénients. La complexité de leur composition les rend difficiles à caractériser chimiquement. Ils peuvent être responsables de certaines réactions d'intolérance ou de réactions allergiques, dues, entre autres, à la présence de certaines protéines natives. De plus, la présence de polyphénols, sensibles à l'oxydation, pose des problèmes particuliers de galénique cosmétique. 10 Le but de la présente invention est donc de surmonter ces inconvénients et de proposer une composition cosmétique ou pharmaceutique comprenant un hydrolysat de nature peptidique issu de feuilles de vigne, capables d'activer l'aconitase et de protéger les mitochondries. En effet, les peptides, et en particulier les peptides de bas poids moléculaire, ne provoquent pas de réactions allergiques et sont donc très intéressants dans les 15 applications dermato-cosmétiques. La présente invention a pour principal objet une composition cosmétique et/ou pharmaceutique, et notamment dermatologique, comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, en tant que principe actif, une quantité efficace d'un 20 hydrolysat peptidique de feuilles de vigne (Vitis vinifera L.). Ledit principe actif pourra être utilisé seul ou en association avec au moins un autre principe actif. Les inventeurs ont en effet mis en évidence que ce principe actif, lorsqu'il est appliqué sur la peau, favorise de façon importante l'activité mitochondriale, démontrée par une activité accrue de l'enzyme aconitase. Les propriétés nouvellement identifiées de ce principe actif activateur de 25 l'aconitase, capable de protéger la peau et les phanères des agressions extérieures, permet ainsi d'ouvrir de nouvelles perspectives thérapeutiques et cosmétiques. Le terme � phanères � selon l'invention englobe l'ensemble des annexes kératiniques présentes à la surface du corps, en particulier les poils, les cils, les sourcils, les ongles et les cheveux. 30 On entend par � principe actif protecteur des mitochondries ou capable de protéger les mitochondries �, toute substance d'origine végétale, et plus particulièrement issue de la feuille de vigne (Vitis vinifera L.), capable de limiter les altérations fonctionnelles ou 2938766 -4- structurales des mitochondries de cellules ou de tissus soumis à un stress physico-chimique ou environnemental. On entend par � principe actif capable d'activer l'aconitase � ou � principe actif activateur de l'aconitase �, toute substance d'origine végétale, et plus particulièrement issue 5 de la feuille de vigne (Vitis vinifera L.), capable d'augmenter l'aconitase cytoplasmique ou mitochondriale, soit par l'activation de la synthèse protéique de l'aconitase (par modulation directe ou indirecte de l'expression génique de l'aconitase), soit par l'augmentation de l'activité enzymatique de l'aconitase, soit par d'autres processus biologiques tels que la stabilisation de la protéine aconitase ou encore la stabilisation des transcrits d'ARN 10 messager. Le terme "hydrolysat ou issu de l'hydrolyse" désigne toute substance ou mélange de substances, ou préparation isolée, obtenue après hydrolyse de matière végétale. On entend par � hydrolysat peptidique �, un hydrolysat essentiellement constitué de peptides. Le terme � peptide � désigne un enchaînement de deux ou plusieurs acides aminés 15 liés entre eux par des liaisons peptidiques ou par des liaisons peptidiques modifiées. On entend par � composés de nature peptidique �, les fragments de protéines, les peptides et les acides aminés libres présents dans le mélange selon l'invention. Il est bien évident que l'invention s'adresse aux mammifères en général et plus particulièrement aux êtres humains. 20 Le principe actif selon l'invention peut être obtenu par extraction de protéines d'origine végétale, suivie d'une hydrolyse contrôlée qui libère des fragments peptidiques biologiquement actifs. Par l'expression �biologiquement actif �, on entend � qui possède une activité in vivo 25 ou in vitro caractéristique de l'activité du principe actif selon l'invention �. De très nombreuses protéines présentes dans les plantes sont susceptibles de contenir des fragments peptidiques biologiquement actifs au sein de leur structure. L'hydrolyse ménagée permet de dégager ces fragments peptidiques. Il est possible, mais non nécessaire pour réaliser l'invention, d'extraire soit les protéines concernées d'abord et de les hydrolyser 30 ensuite, soit d'effectuer l'hydrolyse d'abord sur un extrait brut et de purifier les fragments peptidiques ensuite. Il est également possible d'utiliser certains extraits hydrolysés sans en purifier les fragments peptidiques correspondant aux peptides biologiquement actifs selon 2938766 -5- l'invention, mais en s'assurant toutefois de la présence desdits fragments par des moyens analytiques appropriés. Plus particulièrement selon l'invention, on utilise une des nombreuses plantes de la famille des Vitaceae (ou vitacées), du genre Vitis et préférentiellement de l'espèce Vitis 5 vinifera L. Vitis vinifera L. est un arbrisseau sarmenteux dont il existe d'innombrables variétés cultivées, appelées cépages (cabernet, chardonnay, merlot, pinot, sauvignon, etc.). Les feuilles à nervure palmée comportent cinq lobes principaux plus ou moins découpés et sont en forme de coeur à la base. Les principaux composants chimiques identifiés de la vigne sont 10 les tannins, la quercétine, la quercitrine, les tartrates, les sucres, les inosites, les acides, la choline et le carotène. Parmi les multiples produits dérivés de la vigne, on peut citer l'huile de pépins de raisin, le rétinol, issu du raisin ou encore le resvératrol, très utilisé depuis peu en cosmétique. La pharmacopée traditionnelle décrit également l'utilisation de la sève de la plante et des feuilles pour leurs propriétés astringentes et anti-inflammatoires. 15 Pour réaliser l'extraction selon l'invention, on peut utiliser la plante entière ou une partie spécifique de la plante (feuille, fruit, etc.). De manière préférentielle, on utilise les feuilles. On réalise ensuite l'extraction des protéines de la plante suivant le procédé classique (Osborne, 1924) modifié ; le broyat de plante est mis en suspension dans une solution alcaline contenant un produit adsorbant de type polyvinylpolypyrrolidone (PVPP) insoluble 20 (0,01 -20 %) ; en effet, il a été observé que les opérations d'hydrolyses et de purifications ultérieures étaient facilitées par ce moyen. La concentration des substances de type phénoliques interagissant avec les protéines se trouve ainsi réduite. La fraction soluble est recueillie après des étapes de centrifugation et de filtration, cette solution brute constituant alors une première forme de l'extrait contenant les protéines, les 25 glucides et éventuellement des lipides. Les protéines sont ensuite précipitées en faisant varier la force ionique en acidifiant le milieu, ce qui permet d'éliminer les composants solubles et les acides nucléiques. Le précipité est ensuite lavé à l'aide d'eau, de tampon à pH acide ou d'un solvant organique tel que, par exemple, l'éthanol ou le méthanol, puis le solvant est évaporé par 30 séchage sous vide. Le précipité riche en protéines est remis en solution dans l'eau ou un autre solvant et constitue alors une forme plus purifiée de l'hydrolysat. L'extraction peut également être réalisée en milieu neutre ou acide toujours en présence de polyvinylpolypyrrolidone. Après une étape de filtration, l'étape de précipitation 2938766 -6- s'effectue alors à l'aide d'un agent classique de précipitation tel que les sels (chlorure de sodium, sulfate d'ammonium) ou un solvant organique (alcool, acétone). Le précipité obtenu peut être séparé des agents de précipitation par dialyse après remise en solution dans de l'eau ou un autre solvant. 5 La fraction protéique isolée selon l'invention est ensuite hydrolysée dans des conditions ménagées pour générer des polypeptides et des peptides solubles. L'hydrolyse se définit comme étant une réaction chimique impliquant le clivage d'une molécule par de l'eau, cette réaction pouvant se faire en milieu neutre, acide ou basique. Selon l'invention, l'hydrolyse est réalisée par voie chimique et/ou de façon avantageuse par des enzymes protéolytiques. 10 On peut alors citer l'utilisation des endoprotéases d'origine végétale (papaïne, bromelaïne, ficine) et de micro-organismes (Aspergillus, Rhizopus, Bacillus, etc.). Pour les mêmes raisons que précédemment, lors de cette étape d'hydrolyse ménagée, une quantité de polyvinylpolypyrrolidone est additionnée au milieu réactionnel. Après filtration, la solution obtenue constitue l'hydrolysat actif. 15 L'hydrolysat végétal obtenu selon l'invention est analysé qualitativement et quantitativement pour ses caractéristiques physico-chimiques et sa teneur en composés de nature protéique et peptidique. Ainsi, selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, l'hydrolysat végétal actif, qui constitue le principe actif, a un pH compris entre 4 et 7, et préférentiellement entre 5 et 20 6, son extrait sec titre de 3 à 8 g/1 et de manière préférée de 4 à 6 g/l, sa teneur en composés de nature peptidique est comprise entre 0,5 et 5g/1, et préférentiellement, entre 1,5 et 3,5 g/1 et sa teneur en sucres entre 0,5 et 1,5 g/1. L'hydrolysat actif peut être encore purifié par des étapes de filtration à flux tangentiel, afin d'éliminer les protéines de haut poids moléculaire et de sélectionner les peptides de bas 25 poids moléculaire. L'une quelconque des formes plus ou moins purifiées de l'hydrolysat est alors solubilisée dans de l'eau ou dans tout mélange contenant de l'eau, puis stérilisée par ultrafiltration. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif de nature peptidique est constitué de peptides de bas poids moléculaire, préférentiellement de poids 30 moléculaire inférieur à 10 kDa, et encore plus préférentiellement de poids moléculaire compris entre 2 et 5 kDa. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif selon l'invention est préalablement solubilisé dans un ou plusieurs solvants cosmétiquement ou 2938766 -7- pharmaceutiquement acceptables, classiquement utilisés par l'homme du métier, comme l'eau, le glycérol, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, la vaseline, une huile végétale ou tout mélange de ces solvants. 5 Selon encore un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif selon l'invention est préalablement solubilisé dans un vecteur cosmétique ou pharmaceutique comme les liposomes ou adsorbés sur des polymères organiques poudreux, des supports minéraux comme les talcs et bentonites, et plus généralement solubilisé dans, ou fixé sur, tout vecteur cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptable. 10 La quantité efficace de principe actif selon l'invention correspond à la quantité nécessaire permettant d'obtenir le résultat recherché, à savoir : activer l'aconitase, protéger les mitochondries et ainsi protéger la peau des agressions extérieures et lutter contre le vieillissement cutané. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif est présent dans 15 les compositions de l'invention à une concentration comprise entre 0,0001 % et 20 % environ, et préférentiellement à une concentration comprise entre 0,05 % et 5 % environ par rapport au poids total de la composition finale. Les compositions selon l'invention pourront être appliquées par toute voie appropriée, 20 notamment orale, parentérale ou topique externe, et leur formulation sera adaptée par l'homme du métier, en particulier pour des compositions cosmétiques ou dermatologiques. Avantageusement, les compositions selon l'invention sont destinées à une administration par voie topique cutanée. Ces compositions doivent donc contenir un milieu cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, c'est-à-dire compatible avec la peau et les phanères, 25 et couvrent toutes les formes cosmétiques ou dermatologiques. Ces compositions comprennent, en outre, tout additif communément utilisé dans le domaine d'application envisagé ainsi que les adjuvants nécessaires à leur formulation, tels que des solvants, des épaississants, des diluants, des antioxydants, des colorants, des filtres solaires, des agents auto-bronzants, des pigments, des charges, des conservateurs, des 30 parfums, des absorbeurs d'odeur, des actifs cosmétiques ou pharmaceutiques, des huiles essentielles, des vitamines, des acides gras essentiels, des tensioactifs, des polymères filmogènes, etc. 2938766 -8- Dans tous les cas, l'homme de métier veillera à ce que ces adjuvants ainsi que leurs proportions soient choisis de manière à ne pas nuire aux propriétés avantageuses recherchées de la composition selon l'invention. Ces adjuvants peuvent, par exemple, représenter entre 0,01 et 20 % du poids total de la composition. Lorsque la composition de 5 l'invention est une émulsion, la phase grasse peut représenter de 5 à 80 % en poids et de préférence de 5 à 50 % en poids par rapport au poids total de la composition. Les émulsionnants et co-émulsionnants utilisés dans la composition seront choisis parmi ceux classiquement utilisés dans le domaine considéré. Par exemple, ils peuvent être utilisés en une proportion allant de 0,3 à 30 % en poids, par rapport au poids total de la composition. 10 Les compositions utilisables selon l'invention peuvent être sous forme de crèmes, émulsions huile-dans-eau, ou eau-dans-huile ou émulsions multiples, solutions, suspensions, gels, laits, lotions, sticks ou encore de poudres, adaptés à une application sur la peau, les lèvres et/ou les phanères. Les compositions utilisables selon l'invention peuvent également consister en une 15 composition pour soins capillaires, et notamment un shampooing, un après-shampooing, une lotion de mise en plis, une lotion traitante, une crème ou un gel coiffant, une lotion restructurante pour les cheveux, un masque, etc. La composition cosmétique selon l'invention peut être utilisée notamment dans les traitements mettant en oeuvre une application qui est suivie ou non suivie d'un rinçage, ou encore sous forme de shampooing. 20 Les compositions utilisables selon l'invention peuvent également se présenter sous forme de teinture ou de mascara à appliquer au pinceau ou au peigne, en particulier sur les cils, les sourcils ou les cheveux. Il est bien entendu que le principe actif selon l'invention peut être utilisé seul ou bien en 25 association avec au moins un autre principe actif qui favorise l'action dudit principe actif. Avantageusement, les compositions selon l'invention comprennent en outre divers principes actifs destinés, notamment, à la prévention et/ou au traitement des désordres liés au photo-vieillissement. Par exemple, il peut être ajouté d'autres principes actifs ayant une action anti-radicalaire ou antioxydante, choisis parmi la vitamine C, la vitamine E, le 30 coenzyme Q10 et les extraits polyphénoliques de plantes. La composition selon l'invention peut encore associer au principe actif selon l'invention, d'autres principes actifs stimulant les synthèses des macromolécules dermiques (laminine, 2938766 -9- fibronectine, collagène), par exemple le peptide de collagène commercialisé sous le nom � Collaxyl° � par la société Vincience. La composition selon l'invention peut également associer au principe actif selon l'invention, d'autres principes actifs stimulant le métabolisme énergétique, comme le 5 principe actif commercialisé sous la dénomination � GP4G°� par la société Vincience. Par ses activités particulières, le principe actif selon l'invention peut être utilisé avantageusement dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique. Ainsi, selon un aspect particulier de l'invention, le principe actif peut être utilisé 10 avantageusement dans une composition cosmétique pour activer l'aconitase et protéger les mitochondries. Dans un autre aspect de l'invention, le principe actif est utilisé dans une composition cosmétique pour protéger la peau et les phanères contre tous les types d'agressions extérieures. L'utilisation du principe actif, ou d'une composition le contenant, permet à la 15 peau et aux phanères d'être protégés et de mieux résister aux stress environnementaux. On entend, par l'expression � agression extérieure �, les agressions que peut produire l'environnement. A titre d'exemple, on peut citer des agressions telles que la pollution, les UV, ou encore les produits à caractère irritant tels que les tensioactifs, les conservateurs ou les parfums. Par pollution, on entend aussi bien la pollution � extérieure �, due par exemple 20 aux particules de diesel, à l'ozone ou aux métaux lourds, que la pollution � intérieure � qui peut être due notamment aux émissions de solvants de peintures, de colles, ou de papier-peints (tels que toluène, styrène, xylène ou benzaldéhyde), ou bien encore la fumée de cigarette. 25 Selon un aspect particulier de l'invention, le principe actif est utilisé dans une composition cosmétique pour protéger la peau et les phanères contre le type particulier d'agressions extérieures que sont les rayonnements ultraviolets (UV). Ainsi, le principe actif selon l'invention peut être avantageusement utilisé dans une composition cosmétique en tant qu'agent photo-protecteur, et plus particulièrement en tant 30 qu'agent photo-protecteur dit � secondaire �. On distingue, en effet, les agents photo-protecteurs primaires des agents photo-protecteurs secondaires. Les agents photo-protecteurs primaires sont des substances qui exercent un pouvoir physique : ils sont en mesure d'absorber les rayonnements UV et de les restituer sous forme de chaleur afin de 2938766 -10- protéger la peau. Les agents photo-protecteurs secondaires sont des substances qui ont généralement un effet biologique ; ce sont, par exemple, les agents capables de limiter les dommages causés à l'ADN et aux membranes par la pénétration des rayonnements UV dans la peau. 5 Selon cet aspect de l'invention la composition peut être une composition solaire, c'est-à-dire une composition aidant à la protection contre le rayonnement solaire. Ainsi, il peut être avantageusement ajouté, à la composition selon l'invention, des actifs aidant à la protection solaire tels que, par exemple, des filtres solaires. Ces compositions pourront notamment se présenter sous forme d'une solution aqueuse, hydroalcoolique ou huileuse ; d'une émulsion 10 huile-dans-eau, eau-dans-huile ou émulsions multiples ; elles peuvent aussi se présenter sous forme de crèmes, de suspensions, ou encore de poudres, adaptées à une application sur la peau, les muqueuses, les lèvres et/ou les phanères. Ces compositions peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une pâte ou d'une mousse. Elles peuvent aussi se présenter sous 15 forme solide, comme un stick, ou être appliquées sur la peau sous forme d'aérosol. Elles peuvent être utilisées comme produit de soin et/ou comme produit de maquillage de la peau. Selon un autre aspect de l'invention le principe actif peut être utilisé pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à prévenir ou à traiter les dommages causés à la 20 peau par une exposition au soleil ou une exposition à des rayonnements ionisants lors de radiothérapies. L'invention se rapporte encore à l'utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif selon l'invention pour prévenir ou traiter les dommages 25 causés à la peau et aux phanères par les radicaux libres. Selon encore un autre aspect de l'invention, ledit principe actif est utilisé avantageusement dans une composition cosmétique destinée à lutter de manière préventive et/ou curative contre les manifestations du vieillissement cutané, et plus spécifiquement, 30 afin de lutter contre et/ou de prévenir le vieillissement photo-induit (photo-vieillissement). Par manifestations cutanées du vieillissement, on entend toutes modifications de l'aspect extérieur de la peau et des phanères dues au vieillissement comme, par exemple, les rides et ridules, la peau flétrie, la peau molle, la peau amincie, le manque d'élasticité et/ou de tonus de la peau, la peau terne et sans éclat ou les taches de pigmentation de la peau, la décoloration des cheveux ou les taches sur les ongles, mais également toute modification interne de la peau qui ne se traduit pas systématiquement par un aspect extérieur modifié comme, par exemple, toute dégradation interne de la peau consécutive à une exposition aux rayonnements ultraviolets (UV). Le principe actif selon l'invention, ou la composition le contenant, permettra de lutter, en particulier, contre la perte d'élasticité et de fermeté de la peau. Selon encore un autre aspect de l'invention, ledit principe actif peut être formulé pour atténuer une pathologie liée à des dysfonctionnements mitochondriaux. Ainsi, l'invention consiste encore en l'utilisation d'une quantité efficace dudit principe actif pour préparer une composition pharmaceutique destinée à prévenir ou à lutter contre les dysfonctionnements mitochondriaux, tels que les dégénérescences neuromusculaires, les dégénérescences cardiaques, le diabète de type II. L'invention consiste encore en un procédé de traitement cosmétique destiné à stimuler les défenses et à protéger la peau et les phanères des agressions extérieures et à lutter contre le vieillissement cutané, caractérisé par l'application topique, sur la peau ou les phanères à traiter, d'une composition comprenant une quantité efficace de principe actif selon l'invention. L'invention consiste encore en un procédé de traitement cosmétique destiné à prévenir ou traiter les manifestations cutanées du vieillissement et/ou du photo-vieillissement, caractérisé par l'application topique, sur la peau ou les phanères à traiter d'une composition comprenant une quantité efficace de principe actif selon l'invention. Des modes de réalisation particuliers de ce procédé de traitement cosmétique résultent également de la description précédente. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront mieux à la lecture des exemples donnés à titre illustratif et non limitatif. 2938766 -12- Exemple 1 : Préparation de principe actif à partir de feuilles de vigne (Vitis vinifera L.) Dans une première étape, 1 kg de feuilles fraîches de vigne est mis en suspension dans une solution aqueuse alcaline (dilution au 1/10) pH 10 contenant 1 % de 5 polyvinylpolypyrrolidone (Polyclar V ISP). Les feuilles sont broyées avec un broyeur de type ultra Turrax. Ce mélange est maintenu sous agitation pendant un temps suffisamment long pour permettre la solubilisation des fractions solubles. La température d'extraction est variable (comprise entre 4 et 80°C), préférentiellement l'opération est réalisée à froid. Après cette phase d'extraction, le milieu est clarifié par centrifugation puis filtré sur filtre à plaque. 10 Ce filtrat qui contient les fractions solubles de feuilles de vigne est ensuite soumis à une précipitation des protéines en faisant varier la force ionique en milieu acide (pH 3,5). Cette opération permet d'éliminer en grande partie les composants glucidiques solubles, les polyphénols et les acides nucléiques. Le surnageant est éliminé et le précipité est ensuite lavé à l'eau. 15 A ce stade, le précipité constitue l'extrait protéique brut, qui se présente sous forme d'une pâte de couleur brune dont l'extrait sec est caractérisé par : - Protéines : 50 à 80 % - Glucides : 10 à 30 % 20 Le précipité riche en protéines est remis en solution dans l'eau. L'extrait protéique brut est alors soumis à une série d'hydrolyses ménagées et sélectives consistant en des hydrolyses chimiques et enzymatiques en présence de 0,5 % de PVPP (Polyclar V) et d'endopeptidases à cystéine (Bromélaïne). Après réaction, l'hydrolysat est filtré sur plaque puis sur cartouche stérilisante (0,21,tm). 25 On obtient alors un hydrolysat de couleur ambrée, titrant de 25 à 35 g/1 d'extrait sec, qui est alors dilué de telle sorte que la concentration en composés de nature peptidique, déterminée par la méthode de Lowry, soit comprise entre 0,5 et 5g/l. L'analyse physico-chimique de l'hydrolysat végétal, qui constitue le principe actif, montre que son pH est compris entre 4 et 7, et préférentiellement entre 5 et 6, l'extrait sec titre de 3 à 8 g/1 et de manière préférée de 4 30 à 6 g/1, sa teneur en composés de nature peptidique est comprise entre 0,5 et 5g/l, et préférentiellement, entre 1,5 et 3,5 g/1 et sa teneur en sucres entre 0,5 et 1,5 g/l. 2938766 -13- Une variante du protocole ci-dessus consiste à réaliser la même séquence d'hydrolyses enzymatiques ménagées et sélectives, en présence de 0,5 % de PVPP. On obtient alors un hydrolysat de couleur ambrée titrant de 25 à 35 g/1 d'extrait sec après filtration stérilisante. 5 La nature protéique de cet extrait est mise en évidence par électrophorèse sur gel de polyacrylamide. Pour cette analyse, on utilise les gels NuPAGE�-Tricine 16 % (Invitrogen). L'extrait protéique est chauffé à 70°C pendant 10 minutes dans des conditions réductrices dénaturantes, dans un tampon de préparation d'échantillon NuPAGE� LDS. Une solution de NuPAGE� antioxydante est ajoutée dans la cuve inférieure (cathode) pour éviter que les 10 protéines réduites se réoxydent durant l'électrophorèse. La migration des protéines est réalisée à l'aide du tampon de migration NuPAGE� MES avec les standards Mark 12 et/ou Sharp comme marqueur de poids moléculaire. La coloration des protéines est effectuée à l'aide du kit de coloration à l'argent SilverXpress� (Invitrogen). Dans ces conditions, on observe des protéines ayant des poids moléculaire compris entre 70 kDa et moins de 3 kDa. 15 Cette solution est alors purifiée en éliminant les protéines de haut poids moléculaire par une filtration à flux tangentiel. On procède à une ultrafiltration de la solution sur une cartouche de filtration à travers un support Pellicon� équipé de cassette Pellicon�2 Biomax 50 kDa. Ce ter filtrat est récupéré pour être ensuite filtré à travers une seconde cassette Pellicon Biomax 30 kDa. Après cette étape, on obtient un second filtrat qui est encore élué à travers 20 une dernière cassette Pellicon� 2 Biomax 5 kDa. En fin de purification, on obtient un extrait végétal de feuilles de vigne de couleur ambrée, brillant et limpide. Il est caractérisé par un poids sec de 15 à 20 g/1, une teneur en protéines de 12 à 15 g/1 et une concentration en sucres inférieure à 0,5 g/1. L'extrait est alors dilué de telle sorte que la concentration en composés de nature peptidique, déterminée par la 25 méthode de Lowry, soit comprise entre 0,5 et 5 g/l, et préférentiellement, entre 1,5 et 3,5 g/1 et sa teneur en sucres inférieure à 0,5 g/1. Cette solution est alors analysée en chromatographie liquide haute pression à l'aide d'un appareil HP1100 piloté par le logiciel ChemStation. La colonne utilisée lors de l'élution de l'extrait protéique est une Nucleosil� 300-5 C4 MPN (125 x 4 mn). Cette colonne permet de 30 chromatographier, selon un gradient de solvants approprié, des protéines ayant des poids moléculaires de 0,2 à 25 kDa. Dans ces conditions chromatographiques, plusieurs fractions peptidiques ont été isolées. Ces diverses fractions ont été analysées par spectrométrie de masse afin d'identifier leurs pics moléculaires. Dans ces conditions, on observe uniquement 2938766 -14- des peptides de bas poids moléculaire, préférentiellement des peptides de poids moléculaire inférieur à 10 kDa, et encore plus préférentiellement des peptides de poids moléculaire compris entre 2 et 5 kDa. 5 Une autre variante consiste à effectuer une purification de l'extrait, obtenu selon l'un des protocoles ci-dessus, par chromatographie d'échange d'ions, sur une colonne TSK gel (TosoHaas) avec un tampon phosphate pH 7. Exemple 2 : Mise en évidence de l'effet activateur du principe actif selon l'exemple 1 sur l'activité enzymatique de l'aconitase 10 Le but de cette étude est de déterminer l'influence du principe actif selon l'exemple 1 sur l'activité enzymatique de l'aconitase. Pour cela l'activité enzymatique totale (cytoplasmique et mitochondriale) et l'activité enzymatique mitochondriale de l'aconitase ont été mesurées. Protocole : Des fibroblastes humains normaux sont traités avec une solution à 1 %, du 15 principe actif selon l'exemple 1, pendant 48 heures, puis soumis à une irradiation par des UVB à 100mJ/cm2. Après l'irradiation, les cellules sont traitées dans les mêmes conditions pendant encore 24 heures. Des contrôles négatifs sont réalisés dans les mêmes conditions mais en l'absence de principe actif selon l'exemple 1. Pour évaluer l'activité enzymatique de l'aconitase, les fibroblastes sont ensuite récoltés 20 et centrifugés dans du tampon PBS. Une partie des cellules est ensuite traitée pour réaliser le dosage de l'activité enzymatique totale, une autre partie est utilisée pour isoler la fraction mitochondriale selon le protocole suivant : Les cellules sont lysées à l'aide d'un homogénéisateur de type Dounce et l'homogénat est centrifugé à froid, à 10000 g pendant 10 minutes. Le culot, riche en mitochondries, est 25 lavé avec du tampon TES (10 mM Tris, 1 mM EGTA, 0,25 M sucrose) et resuspendu dans du tampon 0,2 mM citrate trisodique avant d'être utilisé pour le dosage enzymatique. Le dosage de l'activité enzymatique de l'aconitase est réalisé à l'aide du Kit �OXIS Bioxytech Aconitase-340 assay � (Oxys International), selon le principe suivant : l'aconitase provoque l'isomérisation du citrate en isocitrate. L'isocitrate est ensuite transformé en alpha- 30 ketoglutarate par l'enzyme isocitrate déshydrogénase. Cette deuxième réaction s'accompagne de la transformation de NADP+ en NADPH. C'est la formation de NADPH qui est quantifiée par spectrophotométrie à 340 nm. Dans les conditions expérimentales 2938766 -15- choisies, la vitesse de formation du NADPH est proportionnelle à la quantité d'aconitase. L'analyse de la cinétique d'apparition du NADPH permet de calculer la concentration en aconitase de l'échantillon (en mU/ml). Résultats : Les dosages de l'activité enzymatique totale de l'aconitase montrent une 5 augmentation de plus de 55 % de l'activité dans les cellules traitées par le principe actif selon l'exemple 1 comparées aux cellules contrôle non traitées. Lorsque les cellules sont irradiées par les UVB, on observe au contraire une diminution de plus de 30 % de cette activité. Le traitement, préalable et postérieur à l'irradiation UVB, par le principe actif selon l'exemple 1, permet de limiter la diminution observée dans les cellules contrôle non traitées. 10 Les dosages de l'activité enzymatique de l'aconitase mitochondriale montrent des résultats comparables. Conclusions : Le principe actif selon l'exemple 1 stimule fortement l'activité enzymatique des aconitases cytoplasmiques et mitochondriales des cellules cutanées. L'action du principe actif selon l'exemple 1 protège les cellules et les mitochondries vis à 15 vis d'un stress par les UVB. Exemple 3 : Evaluation de l'effet protecteur du principe actif selon l'exemple 1 sur les cellules cutanées soumises à des rayonnements ultraviolets (UVB) Le but de cette étude est de déterminer l'effet protecteur du principe actif selon l'exemple 1 vis-à-vis de fibroblastes dermiques soumis à un stress par des rayonnements 20 UVB. Pour cela, des tests de viabilité cellulaire ont été réalisés par la technique au MTT. Protocole : Les fibroblastes dermiques humains sont traités avec une solution à 1 % du principe actif selon l'exemple 1, pendant 24 heures, irradiés par des UVB (de 25 à 100 mJ/cm2) puis cultivés encore 24 heures en présence de la même concentration de principe actif selon l'exemple 1. Des contrôles non traités et non irradiés et des contrôles 25 non traités mais irradiés sont réalisés dans les mêmes conditions. A la fin de l'expérimentation, les cellules sont incubées dans une solution contenant 0,1 mg/ml de MTT (344, 5-diméthylthiazol-2-yl]-2, 5-diphényltétrazolium, bromure). Ce composé est absorbé par les cellules vivantes puis métabolisé par les enzymes mitochondriales en un composé bleu violet, le formazan, qui sera dosé par spectrophotométrie à 540 nm. La densité optique 30 (D.O.) est alors directement proportionnelle à l'activité enzymatique mitochondriale ainsi qu'au nombre de cellules vivantes. 2938766 -16- Résultats : L'évaluation de la viabilité cellulaire par la technique du MTT montre, d'une part, que le principe actif selon l'exemple 1, indépendamment de tout rayonnement UVB, augmente la viabilité cellulaire et d'autre part, que les irradiations par les UVB ont eu un effet cytotoxique dose-dépendant sur les fibroblastes humains, mais que cet effet 5 cytotoxique ne se manifeste pas en présence de 1 % de principe actif selon l'exemple 1. Conclusions : Le principe actif selon l'exemple 1 augmente la viabilité cellulaire et d'autre part, protège efficacement les cellules cutanées contre les effets cytotoxiques des rayonnements UVB. Exemple 4 : Evaluation de l'effet protecteur du principe actif selon l'exemple 1 sur les 10 cellules cutanées soumises à un stress oxydatif Le but de cette étude est de déterminer l'effet protecteur du principe actif selon l'exemple 1 vis-à-vis de fibroblastes dermiques soumis à un stress oxydatif provoqué par de l'eau oxygénée (H2O2) à 4 mM ou 5 mM. Pour cela, des tests de viabilité cellulaire ont été réalisés par la technique au MIT. 15 Protocole : Les fibroblastes dermiques humains sont traités avec une solution à 1 % du principe actif selon l'exemple 1, pendant 24 heures, soumis à un stress oxydatif provoqué par de l'H202 à 4 mM ou 5 mM, pendant 30 minutes puis cultivés encore 24 heures en présence de la même concentration de principe actif selon l'exemple 1. Des contrôles non traités par le principe actif ni par de l'H202 et des contrôles de traitement avec le principe 20 actif seul sont réalisés dans les mêmes conditions. A la fin de l'expérimentation, les cellules sont incubées dans une solution contenant 0,1 mg/ml de MTT (3-[4, 5-diméthylthiazol-2-yl]-2, 5-diphényltétrazolium, bromure), selon le protocole décrit dans l'exemple 4. Résultats : L'évaluation de la viabilité cellulaire par la technique du MTT montre, d'une part, que le principe actif selon l'exemple 1, indépendamment d'un stress oxydatif, 25 augmente la viabilité cellulaire, et d'autre part, qu'un stress oxydatif provoqué par de l'H202 à 4 mM ou 5 mM pendant 30 minutes, a eu un effet cytotoxique dose-dépendant sur les fibroblastes humains, mais que cet effet cytotoxique ne se manifeste pas en présence de 1 de principe actif selon l'exemple 1. Conclusions : Le principe actif selon l'exemple 1 augmente la viabilité cellulaire et 30 protège efficacement les cellules cutanées contre les effets cytotoxiques d'un stress oxydatif. 2938766 -17- Exemple 5 : Evaluation de l'effet cytoprotecteur du principe actif selon l'exemple 1 sur les cellules cutanées soumises à des rayonnements ultraviolets (UVB) Une étude de l'effet cytoprotecteur du principe actif selon l'exemple 1 a été réalisée en évaluant les dommages provoqués au niveau de l'ADN. Cette étude a été réalisée grâce au 5 test des comètes (ou � Single Cell Gel Electrophoresis �), une technique microélectrophorétique courte et sensible qui permet de visualiser et de quantifier les cassures de l'ADN sur des cellules individuelles. Protocole : Des fibroblastes humains primaires sont ensemencés dans des boîtes de diamètres 100. Lorsque les cellules ont atteint 70 % de confluence, elles sont traitées avec 10 une solution à 1 % de principe actif selon l'exemple 1, pendant 24 heures. Les cellules sont ensuite soumises à une irradiation UVB à 100 mJ/cm2, puis cultivées en présence du principe actif pendant encore 24 heures. Des boîtes non traitées par le principe actif servent de contrôle. Une suspension cellulaire à 100 000 cellules/mi est ensuite réalisée, 500 �l sont prélevés, inclus dans une solution d'agarose et coulés entre lame et lamelle. Les cellules sont 15 lycées à froid. L'ADN est ensuite dénaturé par un tampon alcalin puis soumis à une courte électrophorèse (250 mA pendant 30 minutes) et mis en évidence par une coloration à l'iodure de propidium. Les lames sont alors observées au microscope à fluorescence. Une cellule altérée voit son ADN s'étirer vers l'anode proportionnellement au nombre de cassures présentes dans l'ADN et forme � une comète �. L'ADN fortement dégradé se trouve dans la 20 � queue � de la comète. Une cellule intacte reste ronde et son ADN est alors compacté au niveau de la � tête � de la comète. L'évaluation des cassures de l'ADN s'effectue à l'aide d'un logiciel analyseur d'image qui permet de déterminer le pourcentage de dégradation de l'ADN, par l'évaluation quantitative du � Tail Moment �, un paramètre se définissant comme le produit de la longueur de la 25 comète par le pourcentage d'ADN dans sa partie distale. Résultats : Les résultats obtenus montrent que les cellules soumises à une irradiation UVB, en l'absence du principe actif selon l'exemple 1 (contrôle UVB), présentent le � Tail Moment � le plus important, c'est-à-dire la condition où l'ADN est le plus endommagé. Au contraire, les cellules traitées avec le principe actif selon l'exemple 1, ont un � Tail 30 Moment �, c'est à dire des dommages à l'ADN, diminué de 25 %. Conclusion : Le principe actif selon l'exemple 1 joue un rôle important dans la protection de l'ADN des cellules cutanées soumises à une irradiation par les UVB. Exemple 6 : Préparation de compositions 1 - Crème protection solaire: Noms commerciaux I Noms INCI I % massique PHASE A Eau déminéralisée Aqua (Water) qsp Pemulen TRI Acrylates/C10-30 Alkyl Acrylate 0,40 Crosspolymer Glycerine Glycerin 3,00 Nipastat Sodium Sodium Methylparaben (and) Sodium 0,15 Ethylparaben (and) Sodium Butyl paraben (and) Sodium Propylparaben (and) Sodium Isobutylparaben PHASE B Parsol MCX Ethylhexyl Methoxycinnamate 7,50 Eusolex 4360 Benzophenone-3 3,00 Parsol 1789 Butyl Methoxydibenzoylmethane 2,00 Myritol 318 Caprylic/Capric Triglyceride 4,00 Emulgade SEV Hydrogenated Palm Glycerides (and) 5,00 Ceteareth-20 (and) Ceteareth-12 (and) Cetearyl Alcohol Propylparaben Propylparaben 0,15 Nacol 16-98 Cetyl Alcohol 1.00 PHASE C TEA I Triethanolamine 0,20 PHASE D Principe actif selon l'exemple 1 3,00 Parfum Parfum (Fragrance) qsp Colorant qsp Les constituants de la phase A et de la phase B sont chauffés séparément entre 70°C et 75°C. La phase B est émulsionnée dans la phase A sous agitation. La phase C est ajoutée, à 45°C, en augmentant l'agitation. La phase D est ensuite additionnée lorsque la température se situe en dessous de 40°C. Le refroidissement est poursuivi jusqu'à 25°C sous vive agitation. -18- ûLait après-soleil : Noms commerciaux Noms INCI I % massique 1 PHASE A Montanov L C 14-22 Alcohols (and) C 12-20 Alkyl 3,00 Glucoside Waglinol 2559 Cetearyl Isononanoate 4,00 Tegosoft TN C12-15 Alkyl Benzoate 3,00 Huile de Noyaux d'Abricot Prunus Armeniaca (Apricot) Kernel 2,00 Oil Huile d'Avocat Persea Gratissima (Avocado) Oil 1,00 Abil 350 Dimethicone 1,00 PHASE B Eau déminéralisée Aqua (Water) qsp PHASE C Simulgel EG Sodium Acrylate/Acryloyldimethyl 0,4 Taurate Copolymer (and) Isohexadecane (and: Polysorbate 80 Copolymer (and) Polysorbate 80 PHASE D Phenonip Phenoxyethanol (and) Methylparaben 0,30 (and) Ethylparaben (and) Butylparaben (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Ethylparaben and Propylparaben and Buthylparaben Germail 115 Imidazolidinyl Urea 0,20 PHASE E Principe actif selon l'exemple 1 0,10 -19- 2938766 -20- Préparer la phase A sous agitation. Incorporer la gomme xanthane progressivement, sous agitation défloculeuse. Les phases C et D seront incorporées une fois le gel terminé. La phase E, préparée préalablement jusqu'à parfaite dissolution de la DHA, sera rajoutée ensuite. Ajuster le pH si nécessaire à 4 - 4,5. Colorer et parfumer. 3 ûCrème anti-âge : Noms commerciaux Noms INCI J % massique Phase A Montanov 68 Cetearyl Alcohol (and) Cetearyl Glucoside 6.00 Squalane Squalane 3,00 Cetiol SB 45 Butyrospermum Parkii ( Shea Butter) 2,00 Waglinol 250 Cetearyl Ethylhexanoate 3,00 Amerchol L- 101 Minerai Oil (and) Lanolin Alcohol 2,00 Abil 350 Dimethicone 1,50 BHT BHT 0,01 Coenzyme Q10 Ubiquinone 0,10 Phase B Huile d'Avocat Persea Gratissima (Avocado) Oil 1,25 Phenonip Phenoxyethanol (and) Methylparaben (and) 0,75 Ethylparaben (and) Butylparaben (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Phase C Eau déminéralisée Aqua (Water) qsp Butylene Glycol Butylene Glycol 2,00 Glucam E10 Methyl Gluceth-10 1,00 Allantoin Allantoin 0,15 Carbopol Ultrez 10 Carbomer 0,20 Phase D 2938766 -21- Noms commerciaux Noms INCI % massique TEA Triethanolamine 0,18 Phase E Principe actif selon l'exemple 1 0,50 GP4G Water (and) Artemia Extract 1,50 Collaxyl Water (and) Butylene Glycol (and) Hexapeptide- 3,00 9 Phase F Parfum Parfum (Fragrance) qsp Colorant qsp Préparer et fondre la phase A à 65-70°C. Chauffer la phase C à 65-70°C. La phase B est ajoutée à la phase A juste avant d'émulsionner A dans B. A environ 45°C, le carbomer est neutralisé par addition de la phase D. La phase E est ensuite additionnée sous légère 5 agitation et le refroidissement est poursuivi jusqu'à 25°C. La phase F est alors additionnée si souhaité. 4 ûCrème protectrice de jour : Noms commerciaux Noms INCI % massique Phase A Emulium Delta Cetyl alcohol (and) Glyceryl Stearate (and) 4,00 PEG-75 Stearate (and) Ceteth-20 (and) Steareth-20 Lanette O Cetearyl Alcohol 1,50 D C 200 Fluid/100cs Dimethicone 1,00 DUB 810C Coco Caprylate/Caprate 1,00 DPPG Propylene Glycol Dipelargonate 3,00 DUB DPHCC Dipentaerythrityl 1,50 Hex ac apryl ate/Hex acaprate 2938766 -22- Cegesoft PS6 Vegetable Oil 1,00 Vitamine E Tocopherol 0,30 Phenonip Phenoxyethanol (and) Methylparaben (and) 0,70 Ethylparaben (and) Butylparaben (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Phase B Eau déminéralisée Aqua qsp 100 Glycerine Glycerin 2,00 Carbopol EDT 2020 Acrylates/C 10-30Alkyl Acrylate 0,15 Crosspolymer Keltrol BT Xanthan Gum 0,30 Phase C Sodium Hydroxide (sol.à Sodium Hydroxide 0,30 10%) Phase D Eau déminéralisée Aqua 5,00 Stay-C 50 Sodium Ascorbyl Phosphate 0,50 Phase E Butylene Glycol Butylene Glycol 2,00 Dekaben CP Chlorphenesin 0,20 Phase F GP4G Water (and) Artemia Extract 1,00 Principe actif selon l'exemple 1 5,00 Préparer la phase A et chauffer à 75°C sous agitation. Préparer la phase B en dispersant le carbopol, puis la gomme xanthane sous agitation. Laisser reposer. Chauffer à 75°C. A température, émulsionner A dans B sous agitation rotor-stator. Neutraliser avec la phase C 5 sous agitation rapide. Après refroidissement à 40°C, additionner la phase D, puis la phase E. Le refroidissement est poursuivi sous agitation légère et la phase F rajoutée. REVENDICATIONS1. Composition cosmétique ou pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend en tant que principe actif activateur de l'aconitase et protecteur des mitochondries, dans un milieu physiologiquement acceptable, un hydrolysat peptidique de feuilles de vigne (Vitis vinifera L.), utilisé seul ou en association avec au moins un autre principe actif. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit principe actif, contient entre 0,5 et 5 g/1, et préférentiellement entre 1,5 g/l et 3,5 g/1 de composés de nature peptidique. 3. Composition selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que les composés de nature peptidique contenus dans ledit principe actif sont des peptides de poids moléculaire inférieur à 10 kDa. 4. Composition selon la revendication 3, caractérisée en ce que les composés de nature peptidique contenus dans ledit principe actif sont des peptides de poids moléculaire compris entre 2 et 5 kDa. 20 5. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le principe actif est utilisé en une quantité représentant de 0,0001 % à 20 % du poids total de la composition, et préférentiellement en une quantité représentant de 0,05 % à 5 % du poids total de la composition. 25 6. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle se présente sous une forme adaptée à l'application par voie topique comprenant un milieu cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable. 7. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce 30 qu'elle comprend en outre, au moins un autre principe actif favorisant l'action dudit principe actif. 2938766 -24- 8. Composition selon la revendication 7, caractérisée en ce que l'autre principe actif est choisi parmi les principes actifs antioxydants et/ou les principes actifs stimulant la synthèse de la matrice extracellulaire, et/ou les principes actifs stimulant le métabolisme cellulaire énergétique. 5 9. Procédé de préparation d'une composition caractérisé en ce que ledit principe actif est préalablement solubilisé dans un ou plusieurs solvants cosmétiquement ou pharmaceutiquement acceptables, comme l'eau, le glycérol, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, 10 les polyols cycliques, la vaseline, une huile végétale ou tout mélange de ces solvants. 10. Utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif, tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 4, pour protéger la peau et les phanères contre tous les types d'agressions extérieures. 11. Utilisation selon la revendication 10 caractérisée en ce que les agressions extérieures sont les rayonnements UV. 12. Utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif 20 tel que défini dans l'une des revendications 1 à 4, pour prévenir ou traiter les dommages causés à la peau et aux phanères par les radicaux libres. 13. Utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de principe actif, tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 4, pour prévenir ou traiter les 25 manifestations cutanées du vieillissement et/ou du photo-vieillissement. 14. Utilisation d'une quantité efficace de principe actif, tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 4, pour préparer une composition pharmaceutique destinée à prévenir ou à lutter contre les dysfonctionnements mitochondriaux, tels que les 30 dégénérescences neuromusculaires, les dégénérescences cardiaques, le diabète de type II. 15 5 2938766 -25- 15. Procédé de traitement cosmétique destiné à stimuler les défenses et à protéger la peau et les phanères des agressions extérieures, caractérisé en ce que l'on applique topiquement sur la peau ou les phanères à traiter, une composition comprenant une quantité efficace de principe actif tel que défini selon l'une des revendications 1 à 4. 16. Procédé de traitement cosmétique destiné à prévenir ou traiter les manifestations cutanées du vieillissement et/ou du photo-vieillissement, caractérisé en ce que l'on applique topiquement sur la peau ou les phanères à traiter, une composition comprenant une quantité efficace de principe actif tel que défini selon l'une des revendications 1 à 4.