Brevet FR2939043A1 — publié le 20100604

Domaine de l'invention : La présente invention se rapporte à une composition préventive antitumorale apte à prévenir le développement des cancers chez un patient à risque. La présente invention se rapporte également à un procédé permettant de prévenir le développement de cancer chez un mammifère à risque, ainsi qu'un kit de prévention de développement de cancers. Problématique et art antérieur : Les cellules saines, qui sont l'élément de base des tissus, poussent, se divisent et se renouvellent d'une façon ordonnée. Ce processus permet à l'organisme de conserver son équilibre. Il arrive cependant que certaines cellules perdent leur capacité de croissance contrôlée et se mettent à se diviser trop rapidement et à croître de façon désordonnée. Elles peuvent alors être à l'origine de tissu excédentaire (qui formera une tumeur) ou, dans le cas des leucémies, envahir la moelle osseuse, puis circuler dans le sang. Les tumeurs malignes peuvent envahir les tissus et les organes sains avoisinants. De plus, en passant dans le sang ou dans le système lymphatique, elles peuvent se diffuser dans d'autres parties de l'organisme pour y former de nouvelles tumeurs (appelées métastases). Même si une tumeur cancéreuse initiale est éliminée, la maladie peut de ce fait récidiver. Cette capacité de diffusion dans tout l'organisme fait qu'il est essentiel de détecter le plus tôt possible toute tumeur et savoir si elle est maligne. Différents facteurs peuvent altérer l'ADN : des facteurs de risques modifiant le génome telles que les mutations, ou des facteurs de risques externes comme l'alimentation, l'irradiation ou l'induction par un agent infectieux, etc. Un système complexe de contrôle répare cet ADN altéré. Quand une réparation de cet ADN altéré n'est pas possible, celui-ci est détruit. On parle d'apoptose. Toutefois, l'altération de certains gènes du système de contrôle (gènes oncogènes ou antioncogènes) va rendre la cellule immortelle (il n'y a plus d'apoptose). La cellule va alors se reproduire en transmettant ses gènes altérés jusqu'à former une tumeur. D'après l'Association pour la Recherche sur le Cancer (ARC), 5 à 10% des cancers seraient liés à une prédisposition génétique. Comme 2 susmentionné, le cancer est le fruit d'une transformation en plusieurs étapes, où une cellule saine devient maligne après avoir accumulé au fil des ans un certain nombre d'altérations au coeur de ses gènes. Mais dans certaines familles indubitablement plus souvent touchées par le cancer que la population générale, ce quota d'altérations est atteint plus vite. Car le père ou la mère, voire les deux, sont porteurs d'une anomalie favorisant l'apparition du cancer, qu'ils sont susceptibles de transmettre à leurs descendants. Chez ceux qui héritent de cette anomalie, l'une des étapes menant à la maladie est franchie dès la naissance. On parle donc de prédisposition. Une façon connue de traiter le cancer est la chimiothérapie cytotoxique. La majorité des médicaments utilisés dans ce cas peuvent se subdiviser en : agents alkylants, anti-métabolites, alcaloïdes végétaux, inhibiteurs de la topoisomérase, et antibiotiques antitumoraux. Tous ces médicaments affectent à un certain point la mitose ou la synthèse et la fonction de l'ADN. Certains nouveaux agents n'agissent pas directement sur l'ADN. C'est le cas d'un inhibiteur de la tyrosine kinase : mésylate d'imatinib, qui cible directement une anormalité moléculaire dans certains types de cancer (leucémie, cancer du côlon). D'autres médicaments modifient le comportement des cellules tumorales sans pour autant attaquer directement les cellules. Des hormones sont utilisées pour ce genre de thérapie adjuvante. Le dosage de chimiothérapie peut être très difficile : une dose trop faible sera inefficace contre la tumeur, alors qu'à dose excessive la toxicité sera intolérable pour le patient. En général, le dosage est ajusté à la � surface corporelle � du patient, approximée par un calcul à partir de sa taille et de son poids. En conclusion, il subsiste un besoin dans le développement de médicament ou de composition permettant de traiter le cancer de manière préventive, notamment chez les sujets à risque (hérédité, risque de récidive). Un but de la présente invention est de fournir une composition qui évite tout ou partie des inconvénients précités.35 Résumé de l'invention : A cet effet, l'invention concerne une composition préventive antitumorale comprenant une quantité pharmaceutiquement efficace d'au moins un antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine II pour son application comme médicament afin de prévenir le développement de cancers chez un mammifère à risque. Le système rénine angiotensine (SRA) est impliqué dans de nombreuses régulations. Ce système comprend trois composants : la rénine sécrétée par le rein, l'angiotensinogène par le foie et l'enzyme de conversion de l'angiotensine (ECA), permettant la synthèse d'angiotensine II. Cette angiotensine II est un octapeptide qui exerce son action par le biais de deux récepteurs, AT1 et AT2. Des études ont montré que la stimulation de AT1 favorisait la vasoconstriction, la prolifération cellulaire et diminuerait l'apoptose, tandis que la stimulation de AT2 favoriserait au contraire la vasodilatation, la propriété anti-proliférative, la régulation de l'apoptose, ce qui l'opposerait à AT1 (balance fonctionnelle entre la stimulation des récepteurs AT1 et AT2 de l'angiotensine II). En effet, les récepteurs AT2 ne présentent que 32% d'homologie avec les récepteurs AT1. Les récepteurs AT2 se lient avec des sous-unités différentes de protéines G. Ils activent d'autres voies de signalisation intracellulaire expliquant les effets souvent opposés à ceux des récepteurs AT1. Or, les présents demandeurs ont découvert de manière inattendue que le blocage du récepteur AT2 de l'angiotensine II par un antagoniste permettait, non pas la prolifération de cellules cancéreuses, mais au contraire de prévenir, chez un patient à risque, le développement de ces cellules cancéreuses. Par patient à risque, on entend tout sujet ayant une prédisposition 30 génétique à un cancer ou un sujet qui présente des risques de récidive de cancers. En particulier, le demandeur a constaté de manière surprenante que ledit antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine II est apte à retarder l'initiation tumorale de cellules cancéreuses chez ledit 35 mammifère à risque. L'initiation tumorale consiste en un processus irréversible et rapide par lequel une lésion de l'ADN est produite et sera transmise aux cellules filles. Egalement, l'antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine II 5 est apte à inhiber l'angiogénèse. De préférence, l'antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine II est choisi parmi la liste suivante : PD123319, PD13177, PD126055, EXP801, L-159686, L-161638 ou un de leurs mélanges. Plus particulièrement, l'antagoniste du récepteur AT2 de 10 l'angiotensine II est PD123319. Ce composé qui est notamment commercialisé par la société Sigma-Aldrich ou la société Tocris, présente la formule suivante : 20 Avantageusement, le cancer est le cancer de la vessie, la cancer du sein, le cancer de la thyroïde, le cancer de la gorge, le cancer du cerveau, le cancer du colon, le cancer de l'endomètre, le cancer de l'oesophage, le cancer du poumon, le cancer du foie, le cancer colorectal, le cancer de la prostate, le cancer des os, le cancer pancréatique, le 25 cancer de la peau, le cancer ovarien, le cancer rénal, le lymphome, le mélanome, les cancers du col de l'utérus et la leucémie. De manière préférentielle, la composition préventive antitumorale est administrée au mammifère à risque par voie orale et/ou par voie injectable (intraveineuse, intramusculaire ou intra-tumorale) 30 et/ou par voie topique. La composition selon l'invention peut être utilisée pour la prévention de tumeurs chez tout mammifère à risque. En particulier, le mammifère à risque peut être un sujet humain sain, un sujet humain déjà atteint d'une autre forme de cancer, un sujet humain en rémission de 35 cancer ou un sujet humain dont les risques familiaux et génétiques de développer un cancer ont été démontrés. 15 o HO)I" n _N CH3 O NUI N> I~ N.CH3 CH3 • 2CF3CO2H • xH2O La composition préventive antitumorale peut être utilisée seule ou appliquée en association avec une polychimiothérapie anticancéreuse. Les antagonistes d'AT2R peuvent ainsi entrer dans les protocoles de traitement de cancers traités par chimiothérapie et ce, afin de prévenir l'apparition de nouvelles tumeurs ou de ralentir le développement tumoral en agissant sur la prolifération cellulaire et/ou sur l'angiogenèse associée. De préférence, la posologie utilisée pour traiter le mammifère à risque est de l'ordre de 0,4 à 10 mg/kg, de préférence de 1 à 5 mg/kg et 10 encore plus de préférence de 2 à 5 mg/kg La présente invention a également pour objet un procédé pour prévenir le développement de cancers chez un mammifère à risque comprenant l'étape consistant à appliquer un antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine II sur des cellules susceptibles de muter de 15 manière irréversible de sorte à former des cellules cancéreuses. Ledit procédé peut comprendre l'étape préalable consistant à déterminer le profil d'expression du récepteur AT2 de l'angiotensine II, par exemple par PCR quantitative ou dosage protéomique. Ainsi, il est possible d'envisager une méthode de diagnostic 20 d'une prédisposition au cancer chez un mammifère, qui comprend la détermination du profil d'expression du récepteur AT2, la surexpression dudit récepteur AT2 étant une indication d'une prédisposition à développer un cancer, en particulier un cancer du poumon et/ou du colon, comme présenté dans les exemples ci-après. 25 La présente invention se rapporte aussi à un kit de prévention de développement de cancers, comprenant : (i) au moins un contenant comprenant, en une quantité pharmaceutquement efficace, au moins un antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine Il, de sorte à prévenir le développement de cancers 30 chez un mammifère à risque, (ii) éventuellement un support pharmacologiquement acceptable, et (iii) des instructions d'utilisation. Le kit ci-dessus peut également comprendre (iv) des réactifs 35 pour le dosage de l'expression du récepteur AT2. Ces réactifs peuvent être en particulier des enzymes, solutions tampons, nucléotides et sels de magnésium, ou des anticorps, en vue de la réalisation, par exemple respectivement d'une PCR quantitative ou d'un dosage protéornique, sur des tissus susceptibles d'évoluer vers un phénotype malin. Description détaillée de l'invention : L'invention sera mieux comprise et d'autres buts, détails, caractéristiques et avantages de celle-ci apparaîtront plus clairement à la lecture de la description suivante d'exemples de composition pour la prévention de cancers et d'essais expérimentaux, en référence aux figures suivantes : - la figure 1 est un graphique présentant le pourcentage de deux groupes de souris, un de type sauvage appelé � type sauvage � et un groupe déficient en récepteur AT2, appelé � AT2 KO �, présentant une tumeur après administration de 3-méthylcholanthrène (MCA), en fonction du temps en jours ; - la figure 2 est un graphique présentant l'évolution de la taille en 20 volume (mm3) de la tumeur des groupes de souris de la figure 1 en fonction du temps en jours ; - la figure 3 est un graphique présentant l'évolution du volume d'une tumeur, chez deux groupes de souris, un groupe traité avec du NaCl et un groupe traité avec un antagoniste du AT2R, du PD123319, 25 7 jours après inoculation de cellules tumorales LL/2, en fonction du temps ; - la figure 4 est un graphique représentant la masse de la tumeur des groupes de souris de la figure 3 sacrifiées au bout de 14 jours de traitement par PD 123 319; 30 - la figure 5 représente est un graphique présentant le volume d'une tumeur, chez deux groupes de souris, un groupe traité avec du NaCl et un groupe traité avec un antagoniste du AT2R, du PD123319, 14 jours après inoculation de cellules tumorales LL/2, en fonction du temps ; - la figure 6 est un graphique représentant la masse de la tumeur des groupes de souris de la figure 5 sacrifiées au bout de 14 jours de traitement par PD123319; - les figures 7 et 8 sont des graphiques montrant l'expression de AT2R dans une lignée cellulaire murine LL/2 après ajout de PD123319 ou de CGP42112A, agoniste d'AT2R par rapport à un contrôle au bout de 24 heures (figure 7) ou au bout de 72 heures (figure 8) de traitement ; - la figure 9 présente l'effet des agoniste (CGP42112A) et antagoniste (PD123319) d'AT2R sur le profil d'expression du gène ptpn6 (figure 9A) et du profil d'expression de la protéine SI P-1 (figure 9B) au bout de 24 heures de traitement ; - la figure 10 présente l'effet des agoniste (CGP42112A) et antagoniste (PD123319) d'AT2R sur le profil d'expression du gène ptpn6 (figure 10A) et du profil d'expression de la protéine SHP-1 (figure 10B) au bout de 72 heures de traitement ; - la figure 11 est un graphique montrant les moyennes du nombre de cellules LL/2 et CT26 dans différentes conditions de traitements � SEM (n=6), c'est-à-dire avec ajout de PD123319, CGP42112A ou sans ajout (contrôle) au bout de 24h et de 72 h ; - la figure 12 est un graphique représentant le taux de prolifération cellulaire proportionnel à la densité optique à 570 nm en fonction du temps en heure (test MTT), des cellules LL/2 traité avec PD123319 ou CGP42112A ou non traitées ; - la figure 13 est un graphique représentant le taux de prolifération cellulaire proportionnel à la densité optique à 570 nm en fonction du temps en heures (à 24 et 72h) (test MTT), des cellules CT26 non traitées ou traitées avec PD123319 ou CGP42112A ; - la figure 14 est un graphique représentant la moyenne des rapports pAkt/Akt (n=6) � SEM (*p Les cellules LL/2 sont des cellules tumorales issues de carcinome pulmonaire murin, obtenues auprès de l'American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA). Ces cellules ont été cultivées dans du DMEM (Life Technologies) contenant 10% de sérum de veau foetal, 1% de L-glutamine, 100UI/mL d'un mélange de pénicilline et de streptomycine, dans un incubateur à 37°C sous 5% de CO2. Les cellules CT26 sont des cellules tumorales de carcinome du colon murin. Elles ont été obtenues auprès de l'American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA) et ont été cultivées dans du RPMI 1640 (Life Technologies, Bedford, MA) contenant 10% de sérum de foetus bovin, 1% de L-glutamine, 100UI/mL d'un mélange de pénicilline et de streptomycine, dans un incubateur à 37°C sous 5% de CO2. Les souris proviennent des Laboratoires Charles River (L'Arbresle, France). Les études ci-dessous faisant intervenir les souris ont été approuvées par le Comité Régional d'éthique en matière d'expérimentation animale. Essai 1 : L'absence de récepteur AT2, dit pour la suite de la description � AT2R �, protège les souris du développement de fibrosarcomes On injecte par voie sous-cutanée et sur le flanc droit, à des souris de type sauvages et à des souris déficientes pour le gène AT2R, dit � AT2 KO � (six par groupe), 20 �g de 3-MCA (3-méthylcholanthrène) dilué dans 2001_1L d'huile d'arachide. Le développement des tumeurs est observé chaque semaine à partir du 28ème jour. La croissance tumorale est évaluée par mesure du volume des tumeurs selon la formule V=L x 12 x 0.52 où L est le grand diamètre et 1 le petit. Les résultats présentés sur les figures 1 et 2 correspondent aux moyennes des volumes tumoraux (en mm3) � SEM. Les différences significatives sont déterminées par un test de Student (**p Cette expérience a été menée afin de vérifier si l'activation d'AT2R pouvait être associée au développement de tumeurs induites par un carcinogène chimique, ici le 3-MCA qui est apte à induire le développement de fibrosarcomes. Ce dernier est injecté à forte dose (20mg/kg). Le résultat est le suivant : 66% des souris de type sauvages (groupe témoin) développent des tumeurs après 28 jours, alors que la même proportion de souris déficientes en AT2R ne développe des tumeurs qu'après 56 jours (figure 2). De même, un décalage de 28 jours est observé dans le développement tumoral entre les souris déficientes en AT2R, c'est-à-dire le groupe AT2 KO et les souris de type sauvages (figure 1). Les tumeurs ne sont visibles au bout de 56 jours pour AT2 KO et 28 jours pour les souris de type sauvage. En conclusion, l'absence d'AT2R retarde significativement l'initiation de tumeurs induites par un puissant carcinogène, le 3-méthylcholantFirène (3-MCA). Essai 2 : Le blocage pharmacologique par PD123319 ralentit le développement tumoral Afin de confirmer le rôle d'AT2R dans le développement tumoral, on injecte en sous-cutané à des souris femelles appelée 15 C57/BL6 de six semaines, 2.5 x 105 de cellules LL/2. Au bout de sept jours (Figures 3 et 4) ou quatorze jours (Figures 5 et 6) jours après l'inoculation des cellules tumorales LL/2, ces souris sont soit traitées quotidiennement par un antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine II : PD123319, soit par du NaCl (groupe témoin). Pour 20 cela, des mini-pompes délivrant PD123319 (20mg/kg/jour) ou NaCl sont implantées sur le dos de l'animal. Les cellules tumorales LL/2 induisent des tumeurs observables sept jours après leur injection (figures 3 à 6). Pour les essais ci-dessous, la croissance tumorale est évaluée par mesure du volume des tumeurs 25 selon la formule V=L x 12 x 0.52 où L est le grand diamètre et 1 le petit. Les résultats présentés correspondent aux moyennes des volumes tumoraux (en mm3) � SEM. Les différences significatives sont déterminées par un test de Student (***p Essai 3: Etude du profil d'expression in vitro d'AT2R dans des modèles de cellules tumorales. 20 Afin de déterminer l'impact de diverses molécules sur l'expression d'AT2R, les cellules LL/2 et CT26 sont traitées par un agoniste spécifique d'AT2R, CGP42112A (10-7M) ou un antagoniste, PD123319 (10-6M) durant 24 ou 72 heures (figures 7 et 8). L'expression d'AT2R a d'abord été évaluée dans les lignées 25 cellulaires LL/2 et CT26. Puis, des extraits protéiques ont été récupérés et analysés par immunoprécipitation suivie d'un western blot révélé par l'anticorps anti-AT2R (Santa Cruz Biotechnology Inc). Les résultats sont normalisés par rapport aux cellules non traitées et les moyennes � SEM sont représentées graphiquement (*p Essai 5: Influence du blocage pharmacologique d'AT2R sur la prolifération cellulaire. Alors que les études in vivo suggèrent qu'AT2R interviendrait dans le développement tumoral, l'analyse de la prolifération et de la viabilité cellulaire a été réalisée par numération cellulaire après coloration au bleu Trypan de la membrane plasmique des cellules vivantes. Les cellules LL/2 et CT26 ont été ensemencées en plaque, mises 10 au repos durant 24h puis traitées pendant 24 ou 72h par PD123319 ou CGP42112A. Ainsi, les cellules LL/2 sont incubées durant 24 ou 72h (figure 11, résultat pour LL/2), en présence de PD123319 (10-6M) ou de CGP42112A (10-' M). 15 Comme le montre la figure 11, la numération cellulaire permet d'observer une diminution de prolifération de 30 et 50% respectivement à 24 et 72h pour les cellules traitées par l'antagoniste d'AT2R (PD123319), alors que les résultats obtenus avec l'agoniste CGP42112A ne sont pas significatifs . 20 Afin de confirmer que les résultats obtenus ne sont pas dépendants de la lignée cellulaire étudiée, une seconde lignée murine de carcinome du côlon (cellules CT26), est incubée selon le même protocole et durant les mêmes périodes. De la même manière, une diminution significative de la prolifération cellulaire est observée lorsque 25 les cellules sont traitées par PD123319 (figure 11, résultat pour CT26). De manière à confirmer les précédentes observations, un test MTT (numérisation de cellules vivantes et de leur activité métabolique en présence de sel de tétrazolium (bromure de 3-(4,5-diméthyl thioazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium)), dont l'intensité de couleur varie selon le 30 pourcentage de cellules encore viables dans le milieu, est réalisé. Les résultats obtenus pour les cellules LL/2 (figure 12) et CT26 (figure 13) montrent une diminution significative de la prolifération cellulaire en présence de PD123319 et une augmentation lors d'un traitement par CGP42112A. 35 Essai 6 : Evaluation du profil d'expression de marqueurs de survie, de migration et de prolifération cellulaire Quelques marqueurs de survie (pAkt/Akt), et de prolifération cellulaire (pErk/Erk) ont été étudiés. Profil d'expression de pAkt/Akt L'analyse de l'expression du couple pAkt/Akt donne des informations sur la survie cellulaire. Ainsi, les cellules LL/2 sont traitées durant 24 ou 72h avec les différents agents pharmacologiques et les protéines extraites sont analysées par western blot. Des derniers confirment une absence de modification de l'expression d'Akt lorsque les cellules sont incubées en présence de PD123319, aussi bien à 24h qu'à 72h. de plus, aucune différence significative n'est observée pour la forme phosphorylée d'Akt quelque soient les traitements et le temps d'incubation, ce qui explique l'absence de variations significatives du rapport pAkt/Akt selon les conditions de traitement (figures 14, 15 et 16). Ces résultats confirment que les traitements considérés ne modifient pas la survie cellulaire. Profil d'expression de pErk/Erk Pour l'essai montré aux figures 17 à 19, les cellules LL/2 ont été traitées pendant 24 (figure 17) ou 72h (figure 18) par PD123319 ou CGP42112A. L'analyse des protéines a été effectuée par western blot. La voie MAPKIErk fait partie d'un réseau de signalisation intracellulaire qui permet de transmettre des signaux de la membrane jusqu'au noyau afin d'induire différentes réponses cellulaires de division cellulaire ou de différenciation. C'est pourquoi, l'étude de l'expression de cette protéine apportera des informations complémentaires à celles présentées jusqu'alors. L'expression de Erk ne se trouve pas modifiée par les différents traitements aussi bien à 24h, qu'à 72h. Une diminution du rapport est confirmée en présence d'angiotensine II et de PD123319. Ceci se retrouve sur les graphiques (figure 19) représentant les rapports pErk/Erk puisqu'ils présentent des valeurs significativement diminuées pour les cellules incubées en présence de l'antagoniste d'AT2R en particulier pour de faible concentration d'angiotensine II. Ainsi, le blocage pharmacologique d'AT2R inhibe l'activité de Erk et donc la prolifération cellulaire, confirmant les résultats obtenus au cours de l'essai 5. Essai 7 : Le blocage pharmacologique d'AT2R ou l'absence de ce 5 récepteur inhibe l'angiogenèse induite dans un modèle d'anneaux aortiques ex vivo. La croissance tumorale s'explique généralement par une augmentation de la prolifération cellulaire et une vascularisation incontrôlée à l'origine du processus de métastases. Aussi, afin de vérifier 10 l'influence d'AT2R dans l'angiogenèse, l'influence du blocage pharmacologique d'AT2R ou de son absence sur la formation de tubules dans un modèle ex vivo d'anneaux aortiques inclus dans du Matrigel� a été testée. Les anneaux prélevés sur les souris ont été déposés debout dans du Matrigel� et cultivés dans un milieu complet pendant cinq jours, 15 afin de stimuler la formation de tubules. Après cinq jours de traitement, les anneaux sont observés en microscopie optique (figure 20A) et l'on observe la présence de néovaisseaux dont l'intensité varie suivant le type de traitement. Ainsi, les anneaux d'aortes provenant de souris déficientes en AT2, tout comme 20 ceux provenant de souris sauvages et traités par PD123319, présentent des néovaisseaux en très faible quantité, et localisés préférentiellement en périphérie de l'anneau. Les anneaux provenant de souris sauvages exprimant AT2 présentent des néovaisseaux en grande quantité, localisés en périphérie et qui s'étendent bien au-delà, couvrant une surface 25 importante de la boîte de culture (photo de gauche û figure 20A). De plus, afin de comprendre l'influence des cellules tumorales et de leur production de facteurs de croissance durant leur prolifération, une étude de co-culture d'anneaux aortiques de souris et de cellules tumorales LL/2 est réalisée. Il a été constaté que la prolifération des 30 cellules malignes augmente significativement le développement de vaisseaux néo-formés ou de tubules dans le Matrigel� en comparaison avec les anneaux cultivés en absence de cellules tumorales (cf. figure 20B). Néanmoins, les anneaux aortiques issus de souris déficientes en récepteurs AT2R présentent une diminution de formation de tubules par 35 rapport aux anneaux issus de souris sauvages. Ces résultats confirment que l'absence ou le blocage pharmacologique d'AT2 retarde significativement le développement de l'angiogénèse. Ces expériences montrent donc que AT2R module l'angiogenèse dans un modèle ex vivo, suggérant un rôle délétère dans l'angiogenèse 5 tumorale. Les coupes de tumeurs ont été analysées par immunomarquage CD31 (marqueur de cellules endothéliales mettant en évidence la présence de nouveaux vaisseaux), et confirment qu'un traitement par PD123319 débuté à J7 diminue significativement la vascularisation 10 tumorale. De plus, lorsque le traitement par PD123319 est initié à J14, aucune différence n'est observée avec les tumeurs provenant des souris traitées par NaCl. (Figure 20C). Les études présentées dans les essais 1 à 7 ci-dessus montrent 15 que le blocage d'AT2R par un antagoniste de AT2R de l'angiotensine II retarde l'initiation tumorale et permet également de diminuer la croissance tumorale en inhibant la prolifération de cellules malignes et l'angiogénèse associée. Les compositions mises en oeuvre, à la fois antitumorales et anti- 20 angiogéniques, peuvent ainsi être utilisées en association avec d'autres molécules ayant un rôle thérapeutique, et également en tant qu'adjuvants complémentaires, par exemple lors de polychimiothérapie, et ceci sans effets secondaires majeurs. 25 Composition 1 selon l'invention administrable par voie orale Une composition convenant pour être administrable par voie orale chez un sujet adulte peut renfermer, outre un antagoniste de AT2R de l'angiotensine II, selon une posologie de 0,1 à 10 mg/Kg, par exemple un antifolique tel que du méthotrexate (0,1 mg/Kg), ou un antipurique tel 30 que la 6-mercaptopurine (100 mg/m2) et l'azathioprine (3 à 5 mg/Kg), ou un inhibiteur de la ribonucléotide réductase tel que de l'hydroxyurée (10 à 50 mg/Kg), ou des dérivés des moutardes à l'azote, telles que du chlorambucil (0,1 à 0,2 mg/Kg) ou des nitroso-urées, tel que la lomustine (75 à 130 mg/m2), ou un mélange de plusieurs de ces molécules (les 35 chiffres entre parenthèses sont des exemples de posologie). Composition 2 selon l'invention administrable par voie veineuse Une composition convenant pour être administrable par voie veineuse peut renfermer, outre un antagoniste de AT2R de l'angiotensine II (selon une posologie de 0,1 à 10 mg/Kg), par exemple un antipurique tel que la cladribine (90 mg/Kg/jour), la fludarabine (25 mg/m2/jour), des analogues des bases pyrimidiques tels que le 5-fluorouracile (200 à 500 mg/m2/ jour selon le protocole envisagé), la 5-cytarabine (10 mg/m2/jour), la gemcitabine (1g/m2), des inhibiteurs de topoisomérases I ou II , tels que le topotécan (1,5 mg/m2), l'irinotécan (350 mg/m2), des dérivés du platine, tels que le cisplatine (20 à 100 mg/m2/jour), le carboplatine (300 à 400 mg/m2), l'oxaliplatine (130 mg/m2), ou des alcaloïdes de pervenche, tels que la vinblastine (10 mg/m2), la vincristine (50 à 150 mg/Kg) ou encore des taxanes comme le docétaxel (100 mg/m2) et le paclitaxel (175 mg/m2), ou un mélange de plusieurs de ces molécules (les chiffres entre parenthèses sont des exemples de posologie). Les composants de ces exemples des compositions 1 et 2 sont des cytotoxiques utilisés dans des protocoles particuliers suivant les types de tumeurs. Ces molécules pourront aussi être associées à des antiangiogéniques tels que le bevacizumab, notamment dans les formes métastasées. Les associations cytotoxiques/antiangiogéniques pourront être en outre couplées à des antagonistes d'AT2R potentialisant ainsi les effets à l'encontre de la prolifération cellulaire ainsi que sur l'angiogenèse tumorale. Bien que l'invention ait été décrite en relation avec un mode de réalisation particulier, il est bien évident qu'elle n'y est nullement limitée et qu'elle comprend tous les équivalents techniques des moyens décrits ainsi que leurs combinaisons si celles-ci entrent dans le cadre de l'invention. REVENDICATIONS1. Composition préventive antitumorale comprenant une quantité pharmaceutiquement efficace d'au moins un antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine II pour son application comme médicament afin de prévenir le développement de cancers chez un mammifère à risque. 2. Composition préventive antitumorale selon la revendication 1, dans laquelle l'antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine II est apte à retarder l'initiation tumorale de cellules cancéreuses chez ledit mammifère à risque. 3. Composition préventive antitumorale selon la revendication 1, dans laquelle l'antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine II est apte à inhiber l'angiogénèse. 4. Composition préventive antitumorale selon la revendication 1, dans laquelle l'antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine II est choisi parmi la liste suivante : PD123319, PD13177, PD126055, EXP801, L-159686, L-161638 ou un de leurs mélanges. 5. Composition préventive antitumorale selon l'une des revendications précédentes, dans laquelle le cancer est le cancer de la vessie, la cancer du sein, le cancer de la thyroïde, le cancer de la gorge, le cancer du cerveau, le cancer du colon, le cancer de l'endomètre, le cancer de l'oesophage, le cancer du poumon, le cancer du foie, le cancer colorectal, le cancer de la prostate, le cancer des os, le cancer pancréatique, le cancer de la peau, le cancer ovarien, le cancer rénal, le lymphome, le mélanome, les cancers du col de l'utérus et la leucémie. 6. Composition préventive antitumorale selon l'une des revendications précédentes, apte à être administrée au mammifère à risque par voie orale et/ou par voie injectable et/ou par voie topique. 7. Composition préventive antitumorale selon l'une des revendications précédentes, dans laquelle le mammifère à risque est un sujet humain sain, un sujet humain atteint d'un cancer, un sujet humain en rémission de cancer ou un sujet humain dont les risques familiaux et génétiques de développer un cancer ont été démontrés. 8. Composition préventive antitumorale selon l'une des 35 revendications précédentes, caractérisé en ce qu'elle est appliquée en association avec une polychimiothérapie anticancéreuse. 9. Composition préventive antitumorale selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que la posologie utilisée pour traiter le mammifère à risque est de l'ordre de 0,4 à 10 mg/kg, de préférence de 1 à 5 mg/kg et encore plus de préférence de 2 à 5 mg/kg. 10. Procédé pour prévenir le développement de cancers chez un mammifère à risque comprenant l'étape consistant à appliquer un antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine II sur des cellules susceptibles de muter de manière irréversible de sorte à former des cellules cancéreuses. 11. Procédé selon la revendication 10 comprenant l'étape préalable consistant à déterminer le profil d'expression du récepteur AT2 de l'angiotensine II desdites cellules. 12. Kit de prévention de développement de cancers, comprenant : (i) au moins un contenant comprenant, en une quantité pharmaceutiquement efficace, au moins un antagoniste du récepteur AT2 de l'angiotensine II, de sorte à prévenir le développement de cancers chez un mammifère à risque, (ii) éventuellement un support pharmacologiquement acceptable, 20 et (iii) des instructions d'utilisation. 13. Kit de prévention selon la revendication 12, caractérisé en ce qu'il comprend également (iv) des réactifs, pour le dosage de l'expression du récepteur AT2. 25