Brevet FR2935387A1 — publié le 20100305

HEXADECASACCHARIDES A ACTIVITE ANTITHROMBOTIQUE COMPRENANT UNE LIAISON COVALENTE AVEC UNE CHAINE AMINE La présente invention concerne de nouveaux hexadécasaccharides de synthèse présentant au moins une liaison covalente avec une chaîne amine et possédant les activités pharmacologiques anticoagulante et antithrombotique de l'héparine. La demande de brevet WO 2006/030104 décrit des hexadécasaccharides de synthèse qui présentent une liaison covalente avec la biotine (acide hexahydro-2-oxo-IH- Io thiéno[3,4-d]imidazole-4-pentanoïque) ou avec un dérivé de la biotine. De tels hexadécasaccharides ont une activité antithrombotique qui les rend utilisables en tant qu'agents anticoagulants et possèdent, en outre, l'avantage de pouvoir être rapidement neutralisés par un antidote spécifique, en situation d'urgence. Cet antidote spécifique est I'avidine (The Merck Index, Twelfth edition, 1996, M.N. 920, pages 151-152) ou la 15 streptavidine, deux protéines tétramériques de masses respectives égale à environ 66 000 et 60 000 Da, qui possèdent une très forte affinité pour la biotine. On a maintenant identifié de nouveaux composés hexadécasaccharidiques, de structures analogues à ceux décrits dans la demande de brevet WO 2006/030104 mais 20 qui, à la place de la liaison covalente avec la biotine, présentent une chaîne amine. Ces nouveaux hexadécasaccharides, de façon avantageuse, possèdent des propriétés antithrombotiques comparables à ceux décrits dans la demande de brevet sus-mentionnée. 25 D'une manière générale, l'invention concerne donc des hexadécasaccharides synthétiques à activité antithrombotique présentant au moins une liaison covalente avec une chaîne amine de formule -NH-CO-(CH2)5-NH2. En particulier, la présente invention a pour objet les hexadécasaccharides de formule 30 (I) : (Pe) (I) dans laquelle : - T représente un groupe -NH-CO-(CH2)5-NH2, - R représente un radical (C,-C6)alcoxy, notamment un radical méthoxy ou un 5 radical -OSO3 , - R, représente un radical (C,-C6)alcoxy, notamment un radical méthoxy ou un radical -OSO3, - R2 représente un radical (C,-C6)alcoxy ou un radical -OSO3-, - R3 représente un radical (C,-C6)alcoxy, notamment un radical méthoxy ou un to radical -OSO3-, ou bien R3 constitue un pont -O-CH2-, le groupe -CH2- étant lié à l'atome de carbone porteur de la fonction carboxylique sur le même cycle, - Pe représente un enchaînement saccharidique de formule suivante : (Pe) 15 ainsi que leurs sels pharmaceutiquement acceptables. Les parties polysaccharidiques sont constituées d'unités monosaccharidiques alkylées non chargées et/ou partiellement chargées et/ou totalement chargées. Les unités chargées ou non chargées peuvent être dispersées tout au long de la chaîne ou elles 20 peuvent au contraire être groupées en domaines saccharidiques chargés ou non chargés. Dans la présente description, il a été choisi de représenter les conformations 1C4 pour l'acide-L-iduronique, 4C, pour l'acide D-glucuronique, mais il est notoire que, d'une façon 25 générale, la conformation en solution des unités monosaccharides est fluctuante. Ainsi, l'acide L-iduronique peut être de conformation 4C, 2So ou 4C,. L'invention englobe les hexadécasaccharides sous leur forme acide ou sous la forme de l'un quelconque de leurs sels pharmaceutiquement acceptables. Dans la forme acide, 30 les fonctions -COO- et -SO3- sont respectivement sous forme -COOH et -SO3H. On entend par sel pharmaceutiquement acceptable des polysaccharides de l'invention, un polysaccharide dans lequel une ou plusieurs des fonctions -COO- ou/et -S03 sont liées de façon ionique à un cation pharmaceutiquement acceptable. Les sels préférés selon l'invention sont ceux dont le cation est choisi parmi les cations des métaux alcalins et plus préférablement encore ceux dont le cation est Na' ou K+. Les composés de la formule (I) ci-dessus comprennent également ceux dans lesquels un ou plusieurs atomes d'hydrogène ou de carbone ont été remplacés par leur isotope radioactif par exemple le tritium ou le carbone C14. De tels composés marqués sont utiles dans les travaux de recherche, de métabolisme ou de pharmacocinétique, dans les essais biochimiques en tant que ligands. Dans le cadre de la présente invention, on entend par � radical (C1-C6)alcoxy � un radical -O-alkyle, le groupe alkyle étant un radical aliphatique, saturé linéaire ou ramifié, présentant une chaîne de 1 à 6 atomes de carbone. A titre d'exemple de radicaux alkyles, on peut citer les radicaux méthyle, éthyle, propyle, isopropylebutyle, isobutyle, tertbutyle. A titre d'exemple de radicaux (C1-C6)alcoxy, on peut citer les radicaux méthoxy, éthoxy, Selon un autre de ses aspects, la présente invention concerne les hexadécasaccharidiques biotinylés de formule générale (I) dans laquelle : - R représente un radical méthoxy ou un radical - OSO3, - R1 représente un radical méthoxy, - R2 représente un radical -OSO3-, et - R3 représente un radical méthoxy. Selon un autre de ses aspects, l'invention concerne les hexadécasaccharidiques suivants : • Méthyl (2,3,4,6-tétra-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(2,3, 6-tri-O-sulfonato-a- D-glucopyranosyl)-(1-->4)-(2,3,6-tri-O-sulfonato-(3-D-glucopyranosyl)-(1ù> 4)-(2,3-di-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù 4)-(2,3,6-tri-O-méthyl-[3-D- g lucopyranosyl)-(1ù.4)-[(2, 3, 6-tri-O-méthyl-a-D-g l ucopyranosyl)-(1ù>4)-O-(2, 3, 6-tri-O-méthyl-[3-D-glucopyranosyl)-(1ù 4)]3-(2-[N-(6-aminohexanoyl)] -2-désoxy-3-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(acide 2,3-di-O-méthyl-6-D- glucopyranosyluronique)-(1ù>4)-(2,3,6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)- (1ù>4)-(acide 2,3-di-O-méthyl-a-L-idopyranosyluronique)-(1ù4)-3-O-méthyl-2, 6-di-O-sulfonato-a-D-glucopyranoside, sel de sodium, • Méthyl (2,3,4,6-tétra-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(2,3, 6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(2,3, 6-tri-O-sulfonato-8-D-glucopyranosyl)-(1ù 4)-(2,3-di-O- méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(2,3,6-tri-O-méthyl- [3-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-[(2,3,6-tri-O-méthyl-a-D-glucopyranosyl)-(1ù 4)-O-(2,3,6-tri-O-méthyl-j3-D-glucopyranosyl)-(1-->4)]3-(2-[N- (6-aminohexanoyl)]-2-désoxy-3-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)- (1ù>4)-(acide 2,3-di-O-méthyl-[3-D-glucopyranosyluronique)-(1 ù*4)-(2,3,6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(acide 2,3-di-O-méthyl-a-L-idopyranosyluronique)-(1ù>4)-2,3, 6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranoside, sel de sodium. Dans son principe, le procédé de préparation des composés selon l'invention utilise des synthons de base di- ou oligosaccharidiques préparés comme précédemment rapporté dans la littérature. On se référera notamment aux brevets ou demandes de brevet EP 0 300 099, EP 0 529 715, EP 0 621 282 et EP 0 649 854 ainsi qu'aux documents C. van Boeckel, M. Petitou, Angew. Chem. /nt. Ed. Engl., (1993), 32, pp.1671-1690. Ces synthons sont ensuite couplés les uns aux autres de façon à fournir un équivalent entièrement protégé d'un hexadécasaccharide selon l'invention. Cet équivalent protégé est ensuite transformé en un composé selon l'invention. L'un des synthons de base évoqués ci-dessus contient une fonction protégée particulière permettant l'introduction ultérieure du groupe -CO-(CH2)5-NH2 (de façon à former la chaîne -NH-CO-(CH2)5-NH2 sur l'hexadécasaccharide), par exemple une fonction amine latente sous forme de groupe azido ou protégée sous forme de N-phtalimido. Dans les réactions de couplage évoquées ci-dessus, un di- ou oligosaccharide "donneur", activé sur son carbone anomère, réagit avec un di- ou oligosaccharide "accepteur", possédant un hydroxyle libre. La présente invention concerne un procédé pour la préparation des composés de formule (I) caractérisé en ce que : - dans une première étape, on obtient un équivalent complètement protégé de l'hexadécasaccharide de formule (I) désiré, contenant un précurseur pentasaccharidique protégé, portant notamment une fonction amine convenablement protégée pour l'introduction ultérieure du groupe -CO-(CH2)5-NH2. Ce précurseur pentasaccharidique protégé est lui-même prolongé par un précurseur protégé du domaine polysaccharidique Pe , - dans une seconde étape, les groupes chargés négativement sont introduits et/ou démasqués ; - dans une troisième étape, on déprotège la fonction amine sur l'hexadécasaccharide puis on introduit le groupe -CO-(CH2)5-NH2 protégé ; - dans une quatrième étape le groupe NH2 terminal est démasqué. La synthèse du pentasaccharide sur lequel sera greffé le groupe -CO-(CH2)5-NH2 peut être réalisée selon les méthodes décrites en particulier dans les demandes de brevet publiées sous les numéros WO 98/03554 et WO 99/36443, ainsi que dans la littérature sur les polysaccharides. La synthèse de la partie polysaccharidique précurseur de Pe est réalisée selon des réactions bien connues de l'homme de l'art, en utilisant les méthodes de la synthèse d'oligosaccharides (G.J. Boons, Tetrahedron, (1996), 52, pp.1095-1121, WO 98/03554 et WO 99/36443). Typiquement, un oligosaccharide donneur de liaison glycosidique est couplé avec un oligosaccharide accepteur de liaison glycosidique pour conduire à un autre oligosaccharide dont la taille est égale à la somme des tailles des deux espèces réactives. Cette séquence est répétée jusqu'à l'obtention du composé de formule (I) désiré. La nature et le profil de la charge du composé final désiré déterminent la nature des entités chimiques utilisées dans les différentes étapes de la synthèse, selon les règles bien connues de l'homme de l'art. On pourra se référer par exemple à C. van Boeckel, M. Petitou, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. (1993), 32, pp.1671-1690 ou encore à H. Paulsen, � Advances in selective chemical syntheses of complex oligosaccharides � Angew. Chem. Int. Ed. Engl., (1982), 21, pp.155-173. Les composés de l'invention sont obtenus à partir de leurs précurseurs polysaccharidiques complètement protégés en utilisant l'enchaînement suivant de réactions : û les fonctions alcool devant être transformées en un groupe 0-sulfo et les acides carboxyliques sont déprotégés par l'élimination des groupes protecteurs utilisés durant l'élaboration du squelette, û les groupes sulfo sont ensuite introduits, û la fonction amine de l'hexadécasaccharide permettant d'introduire le groupe -CO- (CH2)5-NH2 est déprotégée, û le groupe -CO-(CH2)5-NH2 convenablement protégé est introduit par une réaction classique de couplage amino/acide, puis û le groupe -NH2 terminal est démasqué. Les composés de l'invention peuvent naturellement être préparés en utilisant différentes stratégies connues par l'homme de l'art de la synthèse des oligosaccharides. Le procédé décrit ci-dessus est le procédé préféré de l'invention. Toutefois, les composés de formule (I) peuvent être préparés par d'autres méthodes bien connues de la chimie des sucres décrites par exemple dans � Monosaccharides, Their chemistry and their rotes in natural products �, P.M. Collins et R.J. Ferrier, J. Wiley & Sons, (1995) et dans G.J. Boons, Tetrahedron, (1996), 52, p.1095-1121. Les pentasaccharides Pe peuvent donc être obtenus à partir de synthons disaccharidiques de la façon décrite dans la publication de C. van Boeckel, M. Petitou, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. (1993), 32, 1671-1690. D'une façon générale, les groupes protecteurs utilisés dans le procédé de préparation des composés de formule I sont ceux couramment utilisés dans la chimie des sucres, tels que décrits par exemple dans � Protective Groups in Organic Synthesis �, (1981), TW Greene, John Wiley & sons, New-York. Les groupes protecteurs peuvent par exemple être choisis parmi les groupes acétyles, halogénométhyles, benzoyles, lévulinyles, benzyles, benzyles substitués, trityles éventuellement substitués, tétrahydropyranyles, allyles, pentenyles, tert-butyldiméthylsilyles (tBDMS) ou triméthylsilyléthyles. Les groupes activateurs sont ceux classiquement utilisés en chimie des sucres selon par exemple G.J. Boons, Tetrahedron, (1996), 52, pp.1095-1121. Ces groupes activateurs sont choisis par exemple parmi les imidates, les thioglycosides, les penténylglycosides, les xanthates, les phosphites ou les halogénures. Notamment, l'introduction du groupe -CO-(CH2)5-NH2 sur la fonction amine libre de l'hexadécasaccharide, selon le procédé décrit ci-dessus, peut être réalisée à l'aide d'un réactif de type Act-CO-(CH2)5-NH-Pg, dans lequel "Act" représente un groupe activateur d'une fonction acide (tel qu'un imide, par exemple un dérivé de succinimide, ou encore un anhydride mixte, ou bien tout autre agent activateur connu en chimie peptidique pour les réactions de couplage amino/acide) et "Pg" représente un groupe protecteur de fonction amine (tel qu'un groupe benzyloxycarbonyle). Le procédé décrit ci-dessus permet d'obtenir les composés de l'invention sous forme de sels. Pour obtenir les acides correspondants, les composés de l'invention sous forme de sels sont mis en contact avec une résine échangeuse de cations sous forme acide. Les composés de l'invention sous forme d'acides peuvent être ensuite neutralisés par une base pour obtenir le sel souhaité. Pour la préparation des sels des composés de formule (I), on peut utiliser toute base minérale ou organique, donnant avec les composés de formule (I), des sels pharmaceutiquement acceptables. On utilise de manière préférentielle comme base l'hydroxyde de sodium, de potassium, de calcium ou de magnésium. Les sels de sodium et de calcium des composés de formule (I) sont les sels ~o préférés. L'invention sera mieux comprise à l'aide des exemples détaillés qui suivent, relatifs à la préparation de composés selon l'invention. Ces exemples ne sont pas limitatifs et ne font qu'illustrer la présente invention. 15 Exemple 1 : préparation du composé 1 Méthyl (2,3,4,6-tétra-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1û>4)-(2,3, 6-tri-O-sulfonatoa-D-glucopyranosyl)-(1û*4)-(2, 3, 6-tri-O-sulfonato-fi-D-glucopyranosyl)-(1--4)-(2, 3-di-O-méthyl-6-O-su/fonato-a-D-glucopyranosyl)-(1û>4)-(2, 3, 6-tri-O-méthyl-/3-D- 20 glucopyranosyl)-(1û*4)-f(2,3,6-tri-O-méthyl-a-D-glucopyranosyl)-(1û>4)-O- (2,3,6-tri-O-méthyl-l3-D-glucopyranosyl)-(1û>4)]3-(2-fN-(6-aminohexanoyl)] -2-désoxy-3-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1û>4)-(acide 2,3-di-O-méthyl-l3-D-glucopyranosyluronique)-(1-- 4)-(2,3,6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1-->4)-(acide 2,3-di-O-méthyl-a-L-idopyranosyluronique)-(1û>4)-2,3, 6-tri-O-sulfonato-a-D- 25 glucopyranoside, sel de sodium 1.1 : Préparation du 6-(benzyloxycarbonylamino)hexanoate de succinimidyle A une solution d'acide 6-(benzyloxycarbonylamino) hexanoïque (1.00 g, 3.77 mmol) dans du diméthylformamide (20 mL), on ajoute du triéthylamine (0.63 mL, 4.52 mmol) et 30 on laisse agiter le mélange à température ambiante et sous argon pendant 30 minutes. On refroidit la solution à 0°C et on ajoute goutte à goutte du chloroformiate d'éthyle (0.43 mL, 4.52 mmol). Après deux heures à température ambiante, on ajoute du N-hydroxysuccinimide (0.52 g, 4.52 mmol) et on laisse agiter le mélange pendant la nuit à température ambiante. On évapore à sec avant de reprendre le résidu dans de l'eau à 35 laquelle on ajoute de l'acétate d'éthyle. Les phases sont séparées et la phase aqueuse est extraite par de l'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont réunies, séchées sur sulfate de sodium, filtrées et évaporée à sec avant purification sur une colonne de gel de silice avec un mélange d'acétate d'éthyle / pentane (75/25 v/v) comme éluant. Les fractions une fois évaporées donnent 1.13 g de 6-(benzyloxycarbonylamino)hexanoate de succinimidyle sous forme d'huile. CCM : Rf= 0.22 sur plaque de gel de silice avec un mélange n-heptane/acétate d'éthyle (30/70 v/v) comme éluant. 1.2 : Préparation du composé 1' to Le greffage de la chaîne amine est réalisée sur l'hexadécasaccharide 43, ou méthyl (2, 3,4,6-tétra-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù4)-(2,3, 6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù 4)-(2,3,6-tri-O-sulfonato-(3-D-glucopyranosyl)-(1ù4)-(2, 3-di-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(2,3, 6-tri-O-méthyl-(3-D- glucopyranosyl)-(1 -4)-[(2,3,6-tri-O-méthyl-a-D-glucopyranosyl)-(1 -4)-O-(2,3,6-tri-O- 15 méthyl-(3-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)]3- (2-amino-2-désoxy-3-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1-->4)- (acide 2,3-di-O-méthyl-[3-D-glucopyranosyluronique)-(1-p4)-(2,3, 6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù*4)-(acide 2,3-di-O-méthyl-a-L-idopyranosyluronique)- (1-->4)-2,3,6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranoside, sel de sodium, dont la préparation est décrite dans la demande de brevet WO 2006/030104. 20 Le composé 43 (200 mg, 40,6 �mol) est dissout dans un mélange de N,N-diméthylformamide (3 mL) et d'eau (0.5 mL). On y ajoute goutte à goutte une solution de 6-(benzyloxycarbonylamino)hexanoate de succinimidyle (66 mg, 0,18 mmol) dans le N,N-diméthylformamide (0.7 mL). Après 48h d'agitation à température ambiante, le 25 volume réactionnel est réduit à 1 mL par évaporation sous vide et ajouté goutte à goutte à du tert-butylméthyléther (30 mL). La suspension est agitée 1h et filtrée pour donner un produit solide (190 mg), correspondant au composé 1'. Il s'agit du composé 1 dans lequel la fonction amine du groupe -NH-CO-(CH2)5-NH2 est protégée par un groupement benzyloxycarbonyle. 30 RMN du proton à 200 MHz dans l'eau deuteriée : la structure du produit attendu est confirmée, du fait que le spectre obtenu est identique à celui effectué sur un produit synthetisé conformement à l'exemple 2 de la demande de brevet WO 2006/030104, sans les signaux dus aux atomes de la partie biotine, mais avec des signaux de 5.2 à 5.3 35 et 7.4 à 7.5 ppm dus au groupement benzyloxy. 1.3 : Préparation du composé 1 Le produit 1' obtenu à l'issue de l'étape précédente (190 mg) est solubilisé dans de l'eau deutériée (6 mL). On ajoute du palladium sur charbon à 30% (19 mg) et on laisse agiter la solution à température ambiante pendant 36h sous atmosphère d'hydrogène. Après filtration, la solution est ajoutée goutte à goutte à 30 mL de tert-butylméthyléther et la suspension est agitée pendant 1h et filtrée pour donner 140 mg du composé 1. CCM : Rf = 0.8 sur gel de silice, en utilisant des plaques HPTLC du fournisseur Merck to greffées en phase nitrile, avec un éluant acétonitrile/eau/éthanol [5/4/1 (v/v/v)]. Infra Rouge sur solide par méthode de réflexion totale : 998,28 ; 1026,30 ; 1227,37 ; 1630,25 ; 2942,25 ; 3472,20 cm-1. 15 RMN du proton à 600 MHz dans l'eau deuteriée : la structure du produit attendu est confirmée, du fait que le spectre obtenu est identique à celui effectué sur un produit synthétisé conformément à l'exemple 2 de la demande de brevet WO 2006/030104, sans les signaux dus aux atomes de la partie biotine. 20 Exemple 2 : préparation du composé 2 Méthyl (2,3,4,6-tétra-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(2,3, 6-tri-O-sulfonatoa-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(2,3, 6-tri-O-sulfonato-l3-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(2, 3-di-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1-->4)-(2,3, 6-tri-O-méthyl-/3-D-glucopyranosyl)-(1ù>4) f(2,3,6-tri-O-méthyl-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-O-(2,3,6-tri- 25 O-méthyl-f3-D-glucopyranosyl)-(1ù 4)J3-(2 fN-(6-aminohexanoyl) J-2-désoxy-3-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(acide 2,3-di-O-méthyl-p-D-glucopyranosyluronique)-(1ù+4)-(2,3, 6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(acide 2,3-di-O-méthyl-a-L-idopyranosyluronique)-(1ù>4)-3-O-méthyl-2, 6-di-O-sulfonato-a-D-glucopyranoside, sel de sodium 30 On procède comme décrit dans l'exemple 1, en partant de l'hexadécasaccharide 42, ou méthyl (2,3,4,6-tétra-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù 4)-(2,3,6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù4)-(2,3, 6-tri-O-sulfonato-[3-D-glucopyranosyl)-(1ù 4)-(2,3-di-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1 -4)-(2,3,6-tri-O-méthyl-[3-D- 35 glucopyranosyl)-(1ù>4)-[(2,3,6-tri-O-méthyl-a-D-glucopyranosyl)-(1ù4)-042, 3,6-tri-O-10 méthyl-f3-D-glucopyranosyl)-(1ù*4)]3- (2-amino-2-désoxy3-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù*4)- (acide 2,3-di-O-méthyl-(3-D-glucopyranosyluronique)-(1ù 4)-(2,3,6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(acide 2,3-di-O-méthyl-a-L-idopyranosyluronique)- (1ù>4)-3-O-méthyl-2,6-di-O-sulfonato-a-D-glucopyranoside, sel de sodium, dont la préparation est décrite dans la demande de brevet WO 2006/030104. On obtient 109 mg du composé 2. CCM : Rf = 0.8 sur gel de silice, en utilisant des plaques HPTLC du fournisseur Merck greffées en phase nitrile, avec un éluant acétonitrile/eau/éthanol [5/4/1 (v/v/v)]. Infra Rouge sur solide par méthode de réflexion totale : 997,79 ; 1025,99 ; 1226,97 ; 1634,37 ; 2937,94 ; 3468,92 cm-1. RMN du proton à 600 MHz dans l'eau deuteriée : la structure du produit attendu est 15 confirmée, du fait que le spectre obtenu est identique à celui effectué sur un produit synthétisé conformément à l'exemple 1 de la demande de brevet WO 2006/030104, sans les signaux dus aux atomes de la partie biotine. Composés 42 et 43 : Composé 1 (exemple 1) : o H2 Composé 2 (exemple 2) : Les composés selon l'invention ont fait l'objet d'études biochimiques et pharmacologiques. L'activité pharmacologique de ces produits a notamment été étudiée dans un modèle in vitro d'inhibition du facteur Xa de la coagulation, en présence d'antithrombine (activité anti-facteur Xa dépendante de la présence d'antithrombine), tel que décrit par J.-M. Herbert et al., Blood, 1998, 91, 4197-4205. Dans ce modèle, on confirme les propriétés antithrombotiques des composés selon l'invention. Grâce à leur activité biochimique et pharmaceutique, les oligosaccharides de la présente invention constituent des médicaments très intéressants. Leur toxicité est parfaitement compatible avec cette utilisation. Ils sont également très stables et sont donc particulièrement appropriés pour constituer le principe actif de spécialités pharmaceutiques. Ils peuvent être utilisés dans diverses pathologies consécutives à une modification de l'homéostasie du système de la coagulation apparaissant en particulier lors des troubles du système cardio-vasculaire et cérébro-vasculaire comme les troubles thromboemboliques associés à l'arthérosclérose et au diabète tels que l'angine instable, l'attaque cérébrale, la resténose après angioplastie, l'endartérectomie, la pose de prothèses endovasculaires ; ou les troubles thromboemboliques associés à la rethrombose après thrombolyse, à l'infarctus, à la démence d'origine ischémique, aux maladies artérielles périphériques, à l'hémodialyse, aux fibrillations auriculaires ou encore lors de l'utilisation de prothèses vasculaires de pontages aorto-coronariens. Ces produits peuvent par ailleurs être utilisés pour le traitement ou la prévention de pathologies thromboemboliques d'origine veineuse telles les embolies pulmonaires et la thrombose veineuse profonde. Ils peuvent être utilisés ou pour prévenir ou pour traiter les complications thrombotiques observés par exemple à la suite d'opérations chirurgicales, de développements tumoraux ou de dérèglements de la coagulation, induits par des activateurs bactériens, viraux, ou enzymatiques. Dans le cas de leur utilisation lors de la pose de prothèses, les composés de la présente invention peuvent recouvrir des prothèses et les rendre ainsi hémocompatibles. En particulier, ils peuvent être fixés à des prothèses intravasculaires (stents). Dans ce cas, ils peuvent éventuellement être modifiés chimiquement par introduction à l'extrémité non réductrice ou réductrice d'un bras approprié, comme décrit selon EP 649854. Les composés de la présente invention peuvent également être utilisés comme adjuvants lors d'endartérectomie réalisée avec des ballonnets poreux. Les composés selon l'invention peuvent être utilisés pour la préparation de médicaments 5 destinés à traiter les maladies ci-dessus. Selon un autre de ses aspects, la présente invention a donc pour objet une composition pharmaceutique contenant, en tant que principe actif, un polysaccharide de synthèse selon l'invention ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, éventuellement en 10 association avec un ou plusieurs excipients inertes et appropriés. Lesdits excipients sont choisis selon la forme pharmaceutique et le mode d'administration souhaités : orale, sublinguale, sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse, transdermique, transmuqueux, locale ou rectale. Le principe actif peut être également présenté sous forme de complexe avec une 15 cyclodextrine, par exemple a, 13 ou y cyclodextrine, 2-hydroxypropyl-(3-cyclodextrine ou méthyl-R-cyclodextrine. Le principe actif peut également être libéré par un ballonnet le contenant ou par un extenseur endovasculaire introduit dans les vaisseaux sanguins. L'efficacité pharmacologique du principe actif n'est ainsi pas affectée. 20 Dans chaque unité de dosage, le principe actif est présent dans les quantités adaptées afin d'obtenir l'effet prophylactique ou thérapeutique désiré. Chaque unité de dosage peut contenir de 0,1 à 100 mg de principe actif, de préférence 0,5 à 50 mg. 25 Les composés selon l'invention peuvent également être utilisés en association avec un ou plusieurs autres principes actifs utiles pour la thérapeutique souhaitée tels que par exemple des antithrombotiques, des anticoagulants, des antiagrégants plaquettaires tels que par exemple le dipyridamole, l'aspirine, la ticlopidine, le clopidogrel ou des antagonistes du complexe de la glycoprotéine IIb/IIIa. 30 REVENDICATIONS1. Hexadécasaccharides de formule générale (I) : R (Pe) '~)/\ oSO- (I) OOC OS03 o -00C O p O dans laquelle : - T représente un groupe -NH-CO-(CH2)5-NH2110 - R représente un radical (C,-C6)alcoxy, notamment un radical méthoxy ou un radical -OS03-, - R, représente un radical (C,-C6)alcoxy, notamment un radical méthoxy ou un radical -OS03 , - R2 représente un radical (C,-C6)alcoxy ou un radical -OS03-, 15 - R3 représente un radical (C,-C6)alcoxy, notamment un radical méthoxy ou un radical -OS03, ou bien R3 constitue un pont -O-CH2-, le groupe -CH2- étant lié à l'atome de carbone porteur de la fonction carboxylique sur le même cycle, - Pe représente un enchaînement saccharidique de formule suivante : 20 (Pe) ainsi que leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 2. Hexadécasaccharides selon la revendication 1, dans lesquels : - R représente un radical méthoxy ou un radical -OS03-, 25 - R, représente un radical méthoxy, - R2 représente un radical -OS03, et - R3 représente un radical méthoxy, 3. Hexadécasaccharides selon la revendication 1 ou la revendication 2, choisis parmi : 30 • Méthyl (2,3,4,6-tétra-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù4)-(2,3, 6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù*4)-(2,3,6-tri-O-sulfonato- 3-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(2, 3-di-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(2, 3,6-tri-O-méthyl-[3-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-[(2,3, 6-tri-O-méthyl-a-D-glucopyranosyl)-(1 -4)-O-(2,3,6-tri-O-méthyl-[3-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)]3-(2-[N- (6-amino-hexanoyl)]-2-désoxy-3-O-méthyl-6- O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1 >4)-(acide 2,3-di-O-méthyl-[3-D-glucopyranosyluronique)-(1ù4)-(2, 3,6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1-->4)-(acide 2, 3-di-O-méthyl-a-L-idopyranosyluronique)-(1-->4)-3-O-rriéthyl-2, 6-di-O-sulfonato-a-D-glucopyranoside, sel de sodium • Méthyl (2,3,4,6-tétra-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1--4)-(2,3, 6-tri-O-sulfonato-a- D-glucopyranosyl)-(1ù4)-(2,3,6-tri-O-sulfonato-R-D-glucopyranosyl)-(1ù44)- (2,3-di-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù*4)-(2,3, 6-tri-O-méthyl-R-D-glucopyranosyl)-(1-->4)-[(2,3, 6-tri-O-méthyl-a-D-glucopyranosyl)-(1 -4)-O-(2,3,6-tri-O-méthyl-[3-D-glucopyranosyl)-(1ù4)]3-(2-[N- (6-amino-hexanoyl)]-2-désoxy-3-O-méthyl-6-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)- (1-->4)-(acide 2,3-di-O-méthyl-[3-D- glucopyranosyluronique)-(1 -*4)-(2,3,6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranosyl)-(1ù>4)-(acide 2, 3-di-O-méthyl-a-L-idopyranosyluronique)-(1ù>4)-2, 3,6-tri-O-sulfonato-a-D-glucopyranoside, sel de sodium 4. Médicaments, caractérisés en ce qu'ils comprennent un hexadécasaccharide selon 20 l'une quelconque des revendications 1 à 3. 5. Compositions pharmaceutiques contenant, en tant que principe actif, un hexadécasaccharide selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, ainsi qu'un ou plusieurs excipients inertes et appropriés. 25 6. Utilisation des hexadécasaccharides selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 pour la préparation d'un médicament destiné au traitement et à la prévention des pathologies consécutives à une modification de l'homéostasie du système de la coagulation apparaissant lors des troubles du système cardio-vasculaire et cérébro- 30 vasculaire comme les troubles thromboemboliques associés à l'arthérosclérose et au diabète tels que l'angine instable, l'attaque cérébrale, la resténose après angioplastie, l'endartérectomie, la pose de prothèses endovasculaires, ou les troubles thromboemboliques associés à la rethrombose après thrombolyse, à l'infarctus, à la démence d'origine ischémique, aux maladies artérielles périphériques, à l'hémodialyse, 35 aux fibrillations auriculaires, lors de l'utilisation de prothèses vasculaires de pontages aorto-coronariens, dans le traitement ou la prévention de pathologies thromboemboliques d'origine veineuse telles les embolies pulmonaires et la thrombose 5veineuse profonde, pour prévenir ou pour traiter les complications thrombotiques observés à la suite d'opérations chirurgicales, de développements tumoraux ou de dérèglements de la coagulation, induits par des activateurs bactériens, viraux, ou enzymatiques. 7. Utilisation des hexadécasaccharides selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 pour recouvrir des prothèses. 8. Utilisation des hexadécasaccharides selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 10 comme adjuvants lors d'endartérectomies réalisées avec des ballonnets poreux.