Brevet FR2941371A1 — publié le 20100730

Dispositif de préparation extemporanée de préparations médicamenteuses La présente invention concerne un dispositif de préparation 5 extemporanée de préparations médicamenteuses. Elle concerne plus particulièrement un dispositif permettant la préparation de doses thérapeutiques de solution d'ion hypothiocyanite et/ou hypohalite . L'ion hypothiocyanite et/ou hypohalyte est généré notamment in 10 vivo par le système lactoperoxydase selon l'équation ci-dessous : lactoperoxydase H2O2+SCN-(and/or X-) i(JSCN- (and/or OX-) X- = I- , CI- , Br 15 OX- = 0I- , OCI-, OBr Les propriétés pharmacologiques de l'ion hypothiocyanite et des ions hypohalites sont connues notamment leurs propriétés biocides et/ou bactériostatiques et/ou virucides. Mais en raison de l'instabilité de cette espèce chimique dont la demi-vie, en l'absence de 20 peroxydase et/ou de peroxyde d'hydrogène est d'environ 24 heures pour l'hypothiocyanite, les modes d'administration envisagés jusqu'à présent étaient des modes d'administration permettant leur génération in vivo et donc contenant le ou les générateurs enzymatiques que sont les lactoperoxydase et/ou glucose oxydase voire l'administration des 25 espèces précurseurs à savoir les ions thiocyanates ou les halogénures. On connait par exemple de WO2007134180, une composition thérapeutique agissant par action de l'ion hypothiocyanite, comprenant un système enzymatique, une oxydoréductase qui par réduction d'un substrat spécifique par exemple le glucose, produit du 30 peroxyde d'hydrogène, le substrat spécifique, à savoir l'ion thiocyanate (SCN-) et la lactoperoxydase. On comprend la difficulté de formulation de telles compositions thérapeutiques et les effets secondaires susceptibles d'être générés par exemple par la production in vivo, ici dans les voies respiratoires de peroxyde d'hydrogène. Dans US2002/172645, (E.G.CONNER) l'ion thiocyanate est administré seul pour alimenter le système lactoperoxydase endogène et former des ions hypothiocyanites in vivo ou peut être administré en combinaison avec le système lactoperoxydase. Aucune des solutions développées jusqu'à présent n'a permis l'administration de cette espèce chimique très active dans des conditions satisfaisantes. On connait également de WO02097076 un système de production industriel d'ion hypothiocyanite par exemple pour la production de solutions destinées au traitement de denrées alimentaires. Les solutions obtenues ne peuvent cependant pas être utilisées pour la formulation de compositions pharmaceutiques en raison de la demi-vie de l'espèce ionique active. Les ions hypothiocyanite et/ou hypohalite sont obtenus par action d'un agent de catalyse enzymatique, par exemple une enzyme du type peroxydase par exemple la lactoperoxydase, sur un substrat oxydable, halogène ou pseudo halogène en phase aqueuse susceptible de donner l'ion hypothiocyanite et/ou hypohalite, en présence d'un donneur d'oxygène, par exemple le peroxyde d'hydrogène Le donneur d'oxygène peut aussi se présenter sous forme d'un système enzymatique complémentaire qui produit du peroxyde d'oxygène et qui comprend un substrat oxydable et une enzyme par exemple du type oxydoréductase, spécifique de ce substrat, par exemple du glucose en présence de glucose oxydase. La présente invention a pour objectif de résoudre les problèmes ci-dessus cités et permet à un utilisateur sans compétence particulière de réaliser de façon autonome une préparation extemporanée d'une quantité suffisante pour une dose journalière. Ainsi, l'invention concerne un dispositif portable autonome pour le stockage d'au moins deux formulations et pour la préparation extemporanée automatique d'une solution médicamenteuse active par réaction des deux formulations. Selon l'invention, le dispositif portable autonome comprend : un premier compartiment de confinement d'une première formulation en solution, un deuxième compartiment de confinement de la deuxième formulation, une chambre de rétention communicant au moins avec le premier compartiment par au moins un canal de transfert et comprenant moins un canal de sortie de la solution médicamenteuse, des moyens de mélange et d'expulsion à déclenchement manuel adaptés pour, après déclenchement, assurer de manière automatique : ù une mise en contact des deux formulations, - et une expulsion par le canal de sortie d'une partie au moins de la solution médicamenteuse obtenue au terme d'une durée minimale de réaction. La mise en oeuvre de compartiments de confinement distincts permet d'isoler efficacement la première et la deuxième formulation empêchant leur interaction pendant la période de stockage du dispositif et donc leur réaction. Ainsi, la première et la deuxième formulation peuvent être stockées dans le dispositif selon l'invention dans des formes stables adaptées à une conservation et à un stockage de plusieurs semaines, voire plusieurs mois sans risque que leurs propriétés actives ne soient affectées par ce stockage. De plus, la mise en oeuvre des moyens de mélange et d'expulsion à déclenchement manuel qui assurent, de façon automatique, la mise en contact des deux formulations, puis l'expulsion au terme d'un délai minimal de réaction permet la préparation d'une solution médicamenteuse dans de bonnes conditions en respectant notamment parfaitement la cinétique de réaction de manière à garantir que la solution expulsée présente une quantité suffisante de principe actif pour assurer l'effet thérapeutique recherché. Dans un mode de réalisation la première formulation en solution comprend au moins un substrat oxydable en phase aqueuse susceptible de donner l'ion hypothiocyanite et/ou hypohalité. Lorsque le système donneur d'oxygène est sous forme d'un système enzymatique complémentaire la première formulation en solution comprend en outre au moins un substrat réductible. La deuxième formulation solide comprend au moins un agent de catalyse enzymatique et lorsque le système donneur d'oxygène est sous forme d'un système enzymatique complémentaire, au moins ledit système enzymatique complémentaire. Dans un mode de réalisation particulier, le substrat oxydable est constitué d'au moins des ions thiocyanate ou halogénure et la deuxième formulation comprend au moins une lactoperoxydase. Dans un mode de réalisation, le substrat réductible est du glucose. Dans un mode de réalisation, le système enzymatique complémentaire est une glucose-oxydase. Selon l'invention, le dispositif portable autonome peut être réalisé de différentes manières. Ainsi il peut être envisagé que les deux compartiments destinés au stockage, respectivement de la première et de la deuxième formulation, sont disposés de manière juxtaposée et débouchent parallèlement dans la chambre de rétention, chacun par un canal de transfert correspondant. Les formulations étant alors chacunes expulsées de leur compartiment respectif par un piston propulsé par exemple par un système mécanique ou électromécanique alimenté par un ou plusieurs aliments accumulateur électrique de petite taille. Selon une forme de réalisation, le dispositif portable autonome conforme à l'invention comprend : un corps tubulaire allongé qui comprend au niveau d'une extrémité distale une tête dans laquelle est aménagé le canal de transfert et à l'opposé de la tête au niveau d'une extrémité proximale une ouverture de remplissage, qui délimite en partie au moins le premier compartiment, ù une entretoise ajourée qui est disposée à l'intérieur du corps tubulaire à distance de l'extrémité distale et qui délimite le deuxième compartiment obturé, au niveau de faces opposées de l'entretoise, par deux opercules sécables, et en tant que moyens de mélange et d'expulsion : ù un corps creux qui délimite la chambre de rétention, qui est raccordé à la tête de transfert et comprend à l'opposé de la tête de transfert une tête de sortie dans laquelle est aménagé le canal de sortie, et en tant que moyens de mélange et d'expulsion : un piston qui est mobile en translation dans le corps tubulaire entre une position de repos et une position de travail et qui porte, d'une part, sur une face orientée vers l'entretoise et l'extrémité distale du corps, un doigt perforateur destiné à perforer les opercules du deuxième compartiment, et, d'autre part, sur une face orientée vers l'extrémité proximale, une tige de verrouillage, un ressort qui est interposé entre le piston et une coiffe de maintien solidaire du corps de manière à pousser le piston vers sa position de travail, ù une languette amovible de verrouillage qui est interposée entre la tige de verrouillage et la coiffe de manière à maintenir le piston en position de repos. La mise en oeuvre, en tant que moyens d'expulsion et de mélange, d'un piston actionné par un ressort permet d'obtenir de façon particulièrement simple et peu onéreuse, l'automaticité et l'autonomie du dispositif de préparation extemporanée. Afin de garantir le respect de la cinétique de réaction, la compression du ressort en position de repos du piston, la raideur du ressort, la course du piston, la section de passage du canal de transfert et le volume de la chambre de rétention sont adaptés pour que l'expulsion de la solution médicamenteuse intervienne à partir de 5 minutes après le retrait de la languette de verrouillage. Selon une caractéristique de l'invention, le dispositif peut comprendre un filtre disposé dans la chambre de rétention en étant interposé entre les canaux de transfert et de sortie de sorte que le filtre assure une filtration pouvant être qualifiée de frontale. L'utilisation d'un tel filtre est particulièrement avantageuse lorsque l'une et/ou l'autre des deux formulations comprend des particules solides susceptibles de faire obstacle à une utilisation optimale de la solution médicamenteuse obtenue.Selon une caractéristique de l'invention, le filtre peut être adapté pour assurer une ultra filtration inférieure à 70 kD. Le filtre peut ainsi être adapté pour assurer une ultra filtration à 50 kD. Selon une caractéristique de l'invention visant à assurer une filtration optimale, le ressort peut être adapté pour exercer une pression, mesurée niveau de la face interne du filtre, supérieure à 5 bar. Bien entendu, les différentes caractéristiques et formes de réalisation du dispositif portable autonome selon l'invention sont susceptibles d'être associées les unes avec les autres selon diverses combinaisons, dans la mesure où elles ne sont pas incompatibles ou exclusives les unes des autres. Par ailleurs, divers autres caractéristiques et avantages du dispositif portable autonome selon l'invention ressortent de la description ci-dessous, effectué en référence aux dessins qui illustrent une forme non limitative de réalisation d'un dispositif portable autonome selon l'invention. - La figure 1 est une coupe axiale schématique d'un dispositif portable autonome pour la préparation extemporanée automatique d'une solution médicamenteuse à partir de deux formulations, ce dispositif étant conforme à l'invention et illustré dans une position de repos ou de stockage. - La figure 2 est une coupe sensiblement analogue à la figure 1, montrant le dispositif portable autonome selon l'invention en position de travail en fin de la séquence de préparation de la solution médicamenteuse. - La figure 3 est une élévation en vue de dessus d'une entretoise constitutive du dispositif portable autonome tel qu'illustré aux figures 1 et 2. Un dispositif portable autonome pour la préparation extemporanée automatique d'une solution médicamenteuse à partir de formulations tels que la solution A et le formulation B, désignés dans son ensemble par la référence 1 aux figures 1 et 2, comprend un corps tubulaire allongé 2 s'étendant le long d'un axe A. Le corps tubulaire 2 présente une forme générale sensiblement cylindrique de révolution d'axe A et possède au niveau d'une extrémité distale D une tête 3 dans laquelle est aménagé un canal de transfert 4 qui présente une section de passage réduite par rapport à la section de passage du corps tubulaire 2. A l'opposé de son extrémité distale, le corps tubulaire 2 présente, au niveau d'une extrémité proximale P, une ouverture de remplissage 5. Le dispositif 1 comprend également un piston 6 qui est adapté dans le corps 2 de manière à pouvoir coulisser en translation d'axe A. Le piston 6 est, selon l'exemple illustré, équipé de deux joints périphériques 7 et 8 qui coopèrent avec la paroi interne du corps tubulaire, de manière à assurer l'étanchéité entre ce dernier et le piston tout en autorisant la translation. Le piston 6 définit alors en combinaison avec le corps tubulaire 2, un premier compartiment 10 de confinement de la solution A. Le piston 6 porte en outre une tige de verrouillage qui s'étend à l'opposé de l'extrémité distale D au travers de l'ouverture de remplissage 5. La tige 11 présente à distance du piston 6 une rainure périphérique de verrouillage 12 dont la fonction apparaîtra par la suite. Le dispositif 1 comprend également un ressort 13 interposé entre le piston 6 et une coiffe de maintien 14 qui est adaptée sur le corps tubulaire 2 de manière à être immobilisée en translation d'axe A. Afin de maintenir le piston en position de repos ou de stockage R telle qu'illustrée à la figure 1, il est mis en oeuvre une languette amovible de verrouillage 15 qui est engagée dans la rainure 12 en étant interposée entre la tige et la coiffe 14. La languette 15 fait l'obstacle à la translation du piston 6 sous l'effet du ressort 13 qui se trouve dans un état comprimé. Le dispositif comprend en outre une entretoise 20 qui est disposée à l'intérieur du premier compartiment 10 en étant située à distance de l'extrémité distale D et du piston 6 lorsque ce dernier est en position de repos R. Comme le montre plus particulièrement la figure 3, l'entretoise 20 est ajourée et présente en son centre un tube sensiblement cylindrique 21 d'axe A. Le tube 21 est obturé au niveau de faces supérieure et inférieure de l'entretoise par des opercules sécables 22 et 23 de manière à définir un second compartiment 21 de confinement pour le formulation B. Afin d'assurer la perforation des opercules 22 et 23, comme cela apparaîtra par la suite, le piston 6 comprend au niveau de sa face orientée vers l'extrémité distale D, un doigt perforateur 25 d'axe A et aligné avec le tube 21. Le dispositif 1 comprend également un corps creux 30 qui délimite une chambre de rétention 31 communicant avec le premier compartiment 10 par le canal de transfert 4. Selon l'exemple illustré, le corps creux 30 est adapté de manière amovible sur la tête 3 par l'intermédiaire d'un collier tubulaire 32. Le corps creux 30 comprend également, à l'opposé de la tête de transfert 3, une tête de sortie 33 dans laquelle est aménagée un canal de sortie 34. Selon l'exemple illustré, le dispositif comprend enfin un tube de recueil 40, adapté de manière amovible sur la tête de sortie 33. Le tube 40 est destiné comme cela apparaîtra par la suite à recueillir la solution médicamenteuse expulsée au niveau du canal de sortie 34. Le dispositif portable autonome 1 selon l'invention, tel qu'ainsi constitué, est mis en oeuvre de la manière suivante. Tout d'abord, la formulation B est mise en place dans l'entretoise au niveau du tube 21 qui est obturé par les opercules 22 et 23. Dans le cadre de la préparation d'une solution d'un hypothiocyanite, il sera stocké dans le tube 21 formant le deuxième compartiment, environ 15 mg de poudre de lactoperoxydase et d'une glucose-oxydase. Ensuite, l'entretoise est adaptée à l'intérieur du corps tubulaire 2 de manière à se trouver sensiblement au centre du premier compartiment 10. La tête de transfert 3 est par ailleurs obturée au moyen d'un bouchon non représenté. Le premier compartiment est alors rempli d'un volume de formulation A suffisant pour que l'entretoise soit complètement baignée dans la solution lorsque l'axe A du dispositif est orienté verticalement. Selon l'exemple illustré, il sera stocké dans le premier compartiment environ 25 ml de la solution A qui est une solution saline : comprenant du glucose, du thiocyanate de sodium et un tampon pH 6,8 (50 mM KH2PO4 NaOH 1M). Selon l'exemple illustré, le premier compartiment 10 n'est qu'en partie rempli de solution A, de sorte qu'il existe un volume de gaz tel que de l'air ou un gaz neutre entre la surface libre de solution et le piston 6. Par ailleurs, la coiffe de maintien 14, le piston 6 et sa tige 11 ainsi que la languette 15 sont assemblés avec le ressort 13 dans un état comprimé et maintenu dans cet état par l'engagement de la languette 15 dans la rainure 12. Cet ensemble qui forme des moyens de mélange et d'expulsion à déclenchement manuel est alors adapté sur le corps tubulaire 2 qui présente à cet effet deux ergots 41 destinés à coopérer avec des rainures de verrouillages non représentées de la coiffe de maintien 14 selon un système de verrouillage à baïonnette. Une fois cet assemblage réalisé, le dispositif est dans un état prêt à l'emploi dans lequel il peut être stocké avant usage sans risque d'altération des formulations A et B. Lorsque la solution médicamenteuse doit être obtenue, le bouchon de la tête de transfert 3 est retiré et le corps 30 est adapté sur cette dernière. le tube de recueil 40 est en outre adapté sur la tête de sortie 33. Le dispositif 1 peut alors être posé sur un support au niveau du fond du tube 40 qui présentera une taille suffisante pour assurer la stabilité du dispositif 1. La languette 15 est ensuite retirée, de sorte que la tige 11 est libérée permettant au ressort 13 d'appliquer un effort sur le piston 6 de manière à le pousser vers une position de travail T, telle qu'illustrée à la figure 2. Sous l'effet de la pression exercée par le ressort 13, le piston 6 descend et le doigt perforateur 25 détruit l'opercule supérieur 23, ce qui contribue à mettre en contact le contenu du deuxième compartiment 21 avec celui du premier compartiment 10, de sorte que la réaction entre la formulation A et le formulation B peut commencer. Il est à noter que la section de passage du canal de transfert 4 et le ressort 13 sont alors dimensionnés en relation avec les autres éléments du dispositif, de manière que l'écoulement au travers du canal de transfert 4 s'effectue à une vitesse donnée. Ainsi, sous l'effet de la translation du piston 6, la formulation A mélangée à la formulation B en cours de réaction, s'écoule dans la chambre de rétention 31 qui, selon l'exemple illustré, comprend, en outre, un filtre 45 interposé entre le canal de transfert 4 et le canal de sortie 34. Le filtre 45 agit donc selon un mode de filtration frontal dans la mesure où il s'étend sensiblement perpendiculairement à l'axe A du canal de transfert et au sens de l'écoulement du mélange des formulations A et B. La chambre de rétention 31 est alors dimensionnée pour que le liquide résultant du mélange de la solution A et de la formulation B ne s'écoule par le canal de sortie 34, qu'après une certaine translation du piston et donc une durée minimale de réaction entre la formulation A et la formulation B. Dans le cadre de la réalisation d'une solution d'ions hypothiocyanites, la course du piston 6, la force du ressort 13, les dimensions du canal de transfert 4 et de la chambre de rétention 31 sont choisis pour que la solution médicamenteuse ne commence à s'écouler par le canal 34, qu'à partir d'une durée supérieure à 5 min. Il doit être noté que le filtre 45 contribue également à la maîtrise de la cinétique d'écoulement de la solution médicamenteuse. Selon l'exemple illustré, le filtre 45 est un filtre frontal d'ultrafiltration inférieur à 70 kD et par exemple de l'ordre de 50 kD. Afin de permettre la filtration au travers d'un tel filtre, le ressort 13 est de préférence adapté pour que la pression du mélange, mesurée au niveau de la face interne du filtre 45 à l'intérieur de la chambre 31, soit supérieure à 5 bar ou 5.105 pa. Au terme de la translation du piston 6, ce dernier a atteint sa position de travail T, telle qu'illustrée à la figure 2 dans laquelle il est en appui contre l'entretoise 20. Lorsque le piston a atteint sa position de travail T, après un temps de translation de 20 min environ, il a été recueilli au niveau du tube 40 un volume de solution médicamenteuse de l'ordre de 5 ml qui peut alors être utilisé pour un traitement journalier. Par ailleurs, afin d'augmenter l'efficacité de cette solution médicamenteuse, il peut également être envisagé de disposer dans le tube 40, un volume d'une solution C qui viendra se mélanger à la solution médicamenteuse recueillie. Dans le cas présent, il est mis en oeuvre une solution de Lactoferrine. Ainsi, après mise en action du dispositif on obtient une préparation médicamenteuse prête à être administrée comprenant 250 pM d'ion OSCN-,2,4 mM d'ion SCN- et 2,6 mM de lactoferrine. La préparation ne contient ni glucose oxydase, ni lactoperoxydase ni peroxyde d'hydrogène. Bien entendu, le dispositif selon l'invention peut être utilisé pour la préparation d'autre type de solution médicamenteuse que celle décrite ci-dessus. REVENDICATIONS1. Dispositif portable autonome pour le stockage d'au moins deux formulations et pour la préparation extemporanée automatique d'une solution médicamenteuse à partir des deux formulations, dispositif comprenant : ù un premier compartiment (10) de confinement d'une première formulation en solution, ù un deuxième compartiment (21) de confinement d'une deuxième 10 formulation, ù une chambre de rétention (31) communicant au moins avec le premier compartiment par au moins un canal de transfert (4) et comprenant moins un canal de sortie (34) de la solution médicamenteuse, 15 ù des moyens (11, 13, 15, 25) de mélange et d'expulsion à déclenchement manuel adaptés pour, après déclenchement, assurer de manière automatique : une mise en contact des deux formulations, et une expulsion par le canal de sortie (34) d'une partie au moins 20 de la solution médicamenteuse au terme d'une durée minimale de réaction. 2. Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comprend : ù un corps tubulaire (2) allongé qui comprend au niveau d'une 25 extrémité distale (D) une tête (3) dans laquelle est aménagé le canal de transfert (4) et à l'opposé de la tête (3) au niveau d'une extrémité proximale une ouverture de remplissage (5), et qui délimite en partie au moins le premier compartiment (10), ù une entretoise ajourée (20) qui disposée à l'intérieur du corps 30 tubulaire (2) à distance de l'extrémité distale (D) et qui délimite le ,14 deuxième compartiment (21) obturé, au niveau de faces opposées de l'entretoise (20) , par deux opercules sécables (22, 23), un piston (6) qui est mobile en translation dans le corps tubulaire (2) entre une position de repos (R) et une position de travail (T) et qui porte, d'une part, sur une face orientée vers l'entretoise (20) et l'extrémité distale du corps, un doigt perforateur (25) destiné à perforer les opercules (22, 23) du deuxième compartiment (21), et, d'autre part, sur une face orientée vers l'extrémité proximale, une tige de verrouillage (11), ù un ressort (13) qui est interposé entre le piston (6) et une coiffe de maintien (14) solidaire du corps (2) de manière à pousser le piston (6) vers sa position de travail (7), ù une languette amovible de verrouillage (15) qui est interposée entre la tige de verrouillage (11) et la coiffe (14) de manière à maintenir le piston (6) en position de repos (R), ù un corps creux (30) qui délimite la chambre de rétention (31), qui est raccordé à la tête de transfert (3) et comprend à l'opposé de la tête de transfert une tête de sortie (33) dans laquelle est aménagé le canal de sortie (34). 3. Dispositif selon la revendication 2 caractérisé en ce que la raideur du ressort (13) et la compression du ressort (13) en position de repos (R) du piston (6), la course du piston, la section de passage du canal de transfert (4) et le volume de la chambre de rétention (31) sont adaptés pour que l'expulsion de la solution médicamenteuse intervienne à partir de 5 min après le retrait de la languette de verrouillage. 4. Dispositif selon l'une des revendications précédente, caractérisé en ce qu'il comprend un filtre (45) disposé dans la chambre de rétention (31) en étant interposé entre les canaux de transfert (4) et de sortie (34) de manière à assurer une filtration frontale. ,15 5. Dispositif selon la revendication 4, caractérisé en ce que le filtre 45 est adapté pour assurer une ultra filtration inférieure à 70 kD. 6. Dispositif selon la revendication 5, caractérisé en ce que le filtre est adapté pour assurer une ultra filtration à 50 kD. 7. Dispositif selon l'une des revendications 4 à 6, caractérisé en ce que le ressort est adapté pour exercer une pression mesurée de la face interne du filtre supérieure à 5 bar. 8. Dispositif selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que le premier compartiment (10) est partiellement rempli. 9. Dispositif selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce qu'il comprend un tube amovible de recueil de la solution médicamenteuse adapté au niveau du canal de sortie. 10. Ensemble ou kit pour le stockage d'au moins deux formulations en solution et pour la préparation extemporanée automatique d'une solution médicamenteuse à partir des deux formulations, caractérisé en ce qu'il comprend un dispositif selon l'une des revendications précédentes et que la première formulation en solution comprend au moins un substrat oxydable en phase aqueuse susceptible de donner l'ion hypothiocyanite et/ou halogénocyanite. 11. Ensemble ou kit selon la revendication 10 caractérisé en ce que la deuxième formulation solide comprend au moins un agent de catalyse enzymatique. 12. Ensemble ou kit selon l'une des revendications 10 à 11 caractérisé en ce que la deuxième formulation solide comprend en outre un 25 système enzymatique complémentaire. 13. Ensemble ou kit selon la revendication 12 caractérisé en ce que la première formulation en solution comprend en outre au moins un substrat réductible. 14. Ensemble ou kit selon l'une des revendications 10 à 13 caractérisé 30 en ce que le substrat oxydable est constitué d'au moins des ions thiocyanate ou halogénure.,16 15. Ensemble ou kit selon l'une des revendications 10 à 14 caractérisé en ce que la deuxième formulation comprend au moins une lactoperoxydase. 16. Ensemble ou kit selon l'une des revendications 13 à 15 caractérisé 5 en ce que le substrat réductible est du glucose. 17. Ensemble ou kit selon l'une des revendications 12 à 16 caractérisé en ce que le système enzymatique complémentaire est une glucose-oxydase. 10