Brevet FR2940291A1 — publié le 20100625

-1- La présente invention se situe dans le domaine cosmétique et pharmaceutique, et plus particulièrement dans le domaine de la dermatologie. La présente invention concerne des peptides dérivés de l'enzyme 3-hydroxy-3methyl-glutaryl Co-A réductase humaine (HMG-CoA réductase humaine) et plus particulièrement des peptides de formule générale (I) : R1-(AA)r,-X1-Gly-Glu-Leu-Ser-X1-X3_(AA)p-R2. La présente invention concerne également une composition cosmétique ou pharmaceutique, comprenant un peptide de formule générale (I), utilisé seul ou en association avec au moins un autre principe actif, dans un milieu dans un milieu physiologiquement adapté. L'invention est également relative à l'utilisation de ce nouveau peptide, en tant que principe actif activateur de la HMG-CoA réductase humaine, dans une composition cosmétique destinée à renforcer la fonction barrière cutanée et à stimuler la différenciation épidermique. L'invention est également relative à l'utilisation de ce nouveau principe actif pour la réalisation d'une composition pharmaceutique, et notamment dermatologique, destinée à prévenir ou à traiter les dysfonctionnements pathologiques liés à une altération de la fonction barrière. L'invention porte encore sur un procédé de traitement cosmétique destiné à prévenir etlou à lutter contre les agressions extérieures et les manifestations du vieillissement cutané, selon lequel on applique une quantité efficace de principe actif, ou une composition le contenant, sur les zones à traiter. La fonction première de l'épiderme est de constituer une barrière entre l'environnement extérieur et le milieu intérieur. C'est la couche la plus externe de l'épiderme, le stratum corneum, qui assure cette fonction. Il est composé de kératinocytes au stade ultime de leur différenciation, les cornéocytes, scellés les uns aux autre par un épais ciment intercellulaire, à la fois souple et imperméable. On distingue ainsi dans le stratum corneum un compartiment cellulaire, constitué des cornéocytes et un compartiment extracellulaire principalement constitué de lipides, organisés en structures multilamellaires. Le contenu lipidique du stratum corneum humain est estimé à 15% d'ester de cholestérol, 16 % d'acides gras libres saturés à longues chaînes, 32 % de cholestérol, 37 % de céramides, bien que les variations inter-individuelles soient assez importantes (Norlen L. et al. J. Invest. Dermatol. 1999; 112(1) p. 72-77). Ces lipides sont synthétisés 2940291 -2- par les kératinocytes des couches intermédiaires de l'épiderme, et sécrétés dans des organites spécialisés appelés � corps lamellaires � ou corps de Odland. En particulier, l'épiderme est un site très actif pour la synthèse du cholestérol. L'étape limitante de cette synthèse, et la plus finement régulée, est la conversion du 3-hydroxy-3-methylglutaryl- 5 Coenzyme A (HMG-CoA) en mévalonate. Cette étape est catalysée par une enzyme membranaire dénommée HMG-CoA-réductase (E.C. 1.1.1.34). Les données de séquençage du génome humain montrent qu'il existe au moins 2 isoformes de HMG-CoA réductase, codées par un gène unique, localisé sur le chromosome 5 (Luskey et al., J Biol Chem., 1985 260(18), p.10271-7). 10 Dans la peau, le cholestérol joue un rôle dans la fluidité des membranes et en particulier, il semble assurer la mobilité des chaînes hydrocarbonées dans les bicouches lipidiques (Martini M.C., Pathol. Biol. 2003, (51), p. 267-270). Ainsi, en situation physiologique, le cholestérol est synthétisé à un niveau nécessaire pour maintenir une homéostasie. En revanche, à la suite d'une altération brutale de la barrière cutanée, on 15 observe une augmentation importante et rapide de la synthèse de cholestérol, associée à une augmentation de l'expression et de l'activité de la HMG-CoA réductase (Menon G.K. et al., J. Lipid, Res., 1985, (26), P. 418-427). Le rôle clé de l'HMG-CoA réductase en a fait une cible de choix pour moduler l'expression du cholestérol dans l'organisme. On a ainsi développé une classe de 20 composés pharmacologiques destinés à inhiber l'HMG-CoA réductase dans le but d'abaisser le cholestérol circulant, dénommés statines. Cet effet inhibiteur des statines se manifeste également dans la peau humaine. En effet, l'administration expérimentale de statines par voie topique perturbe la fonction barrière de la peau (Proksch E. et al., British J. Dermatol., 1993, (128), p. 473-482). Ces résultats confirment l'importance du 25 cholestérol dans la fonction barrière épidermique et le rôle central de l'HMG-CoA réductase dans la modulation de sa synthèse. Au cours du vieillissement cutané, l'intégrité de la barrière cutanée ainsi que ses capacités de réparation s'altèrent. On observe une déficience globale en lipides, aboutissant à une diminution des multicouches lipidiques du compartiment extracellulaire 30 du stratum corneum. Ces changements fonctionnels sont en corrélation avec une susceptibilité accrue des peaux âgées aux agressions extérieures (Ghadially R. et al., J Clin Invest., 1995 (95 (5), p. 2281-90). 2940291 -3- Indépendamment du vieillissement intrinsèque ou photo-induit, des altérations de la barrière cutanée peuvent se produire lors d'agressions extérieures. On entend par l'expression � agression extérieure �, les agressions que peut produire l'environnement. A titre d'exemple, on peut citer des agressions telles que la 5 pollution, les UV, ou encore les produits à caractère irritant tels que les tensioactifs, les conservateurs ou les parfums, les agressions mécaniques, telles que les abrasions, le rasage ou l'épilation. Par pollution, on entend aussi bien la pollution � extérieure � due par exemple aux particules de diesel, à l'ozone ou aux métaux lourds, que la pollution � intérieure � qui peut être due notamment aux émissions de solvants de peintures, de 10 colles, ou de papier-peints (tels que toluène, styrène, xylène ou benzaldéhyde), ou bien encore la fumée de cigarette. La sècheresse de l'atmosphère est également une cause importante d'agression cutanée. Ces agressions extérieures aboutissent à une altération de la fonction barrière qui se traduit par un inconfort cutané, des phénomènes sensoriels désagréables, tels que des tiraillements ou des démangeaisons, voire des fragilités 15 excessives et des rougeurs. Dans ce contexte, il est souhaitable de chercher à prévenir l'altération ou à rétablir la fonction barrière de l'épiderme. Dans ce domaine particulier, l'apport direct de substituts lipidiques, tels que les céramides (EP 1272148, US2007576937) ou certains dérivés du cholestérol (FR 2 789 312) a largement été décrit. D'autre part, l'utilisation 20 d'huiles végétales pour activer la synthèse des lipides cutanés a également été décrite (EP 1 707 189). Dans le domaine de la cosmétique, le ciblage moléculaire de l'HMG-CoA réductase a déjà été exploité mais dans le but d'inhiber cette enzyme-clé, par exemple en utilisant des statines, déjà connues pour leurs propriétés inhibitrices de HMGCOA, dans le but d'obtenir un effet antivieillissement, (EP 0738510). Toutefois, à ce jour, aucun 25 document ne décrit ou ne suggère qu'un peptide dérivé de la HMG-CoA réductase humaine peut avoir des propriétés intéressantes pour renforcer la fonction barrière cutanée et pour stimuler la différenciation épidermique. Il a maintenant été envisagé d'activer l'HMG-CoA réductase dans le but de renforcer la fonction barrière et la différenciation de l'épiderme. Il est également possible d'améliorer par cette action certains 30 dysfonctionnements pathologiques liés à la fonction barrière (peaux hypersensibles, irritées, ou réactives, eczéma atopique). 2940291 -4- La présente invention a pour principal objectif de fournir un nouveau principe actif, capable de renforcer la fonction barrière cutanée, de stimuler la différenciation épidermique et de prévenir ainsi les manifestations du vieillissement cutané ou de protéger la peau des agressions extérieures. Les inventeurs ont en effet mis en évidence 5 une activité cosmétique et thérapeutique, notamment dermatologique, de peptides dérivés de la HMG-CoA réductase humaine. Il a en particulier été mis en évidence que ces peptides, lorsqu'ils sont appliqués sur la peau, renforcent la fonction barrière de l'épiderme et stimulent la différenciation 10 épidermique. Ces propriétés ont été démontrées par une meilleure protection du tissu cutané vis-à-vis des agressions extérieures et une augmentation de la production de lipides constitutifs de la couche cornée. On entend par � principe actif activateur de la HMG-CoA réductase ou capable d'activer la HMG-CoA réductase humaine�, tout peptide ou dérivé biologiquement actif 15 capable d'augmenter l'activité de la HMG-CoA réductase, soit par l'augmentation de la synthèse protéique de la HMG-CoA réductase (par modulation directe ou indirecte de l'expression génique de la HMG-CoA réductase), soit par l'augmentation de l'activité enzymatique de la HMG-CoA réductase, soit par d'autres processus biologiques tels que la stabilisation de la protéine HMG-CoA réductase ou encore la stabilisation des transcrits 20 d'ARN messager. On entend par peau, l'ensemble des tissus de recouvrement constituant la peau et les muqueuses. On entend par � application topique �, le fait d'appliquer ou d'étaler le principe actif selon l'invention, ou une composition le contenant, à la surface de la peau. 25 On entend par � physiologiquement acceptable � que le principe actif selon l'invention, ou une composition le contenant, est approprié pour entrer en contact avec la peau sans provoquer de réactions de toxicité ou d'intolérance. Ainsi, l'invention a pour objet premier un peptide dérivé de la HMG-CoA réductase 30 humaine. L'expression � peptide dérivé de la HMG-CoA réductase humaine� désigne tout fragment peptidique biologiquement actif dont la séquence en acides aminés est, 2940291 -5- entièrement ou partiellement analogue ou homologue de la séquence peptidique de la HMG-CoA réductase humaine. Préférentiellement, selon la présente invention, ledit peptide dérivé de la HMG-coA réductase, ou son dérivé biologiquement actif, est un peptide dont le nombre d'acides 5 aminés est compris entre 4 et 15. Par l'expression �biologiquement actif �, on entend � qui possède une activité in vivo ou in vitro caractéristique de l'activité du principe actif selon l'invention �. Selon une méthode particulièrement avantageuse de réalisation de l'invention, le peptide possède une séquence qui répond en tout ou en partie à la formule générale (I) 10 R1-(AA)n-X1-GIy-Glu-Leu-Ser-X--X3_(AA)p-R2 Dans laquelle, XI est l'alanine, la valine, l'isoleucine ou aucun acide aminé, X2 est la leucine, l'isoleucine ou aucun acide aminé, 15 X3 est la méthionine, la sérine, l'alanine ou aucun acide aminé, AA représente un acide aminé quelconque, ou un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers compris entre 0 et 4, RI représente la fonction amine primaire de l'acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupement protecteur pouvant être choisi parmi un groupement 20 acétyle, un groupement benzoyle, un groupement tosyle ou un groupement benzyloxycarbonyle, R2 représente le groupe hydroxyle de la fonction carboxyle de l'acide aminé C-terminal, libre ou substitué par un groupement protecteur pouvant être choisi parmi une chaîne alkyle de Cl à C20, ou un groupement NH2, NHY ou NYY avec Y représentant 25 une chaîne alkyle de CI à C4. Selon une méthode de réalisation de l'invention tout particulièrement préférée, le peptide biologiquement actif est de séquence : (SEQ ID n°1) Met-Ala-Gly-Glu-Leu-Ser-Leu-Met-Ala-Ala 30 (SEQ ID n°2) Gly-Val-Gly-Glu-Leu-Ser-Ile-Ser-Ala (SEQ ID n°3) Ile-Gly-Glu-Leu-Ser-Leu-Ala-Ala (SEQ ID n°4) Ala-Gly-Glu-Leu-Ser (SEQ ID n°5) Ala-Gly-Glu-Leu-Ser -NH2 2940291 -6- (SEQ ID n°6) Ile-Gly-Glu-Leu-Ser (SEQ ID n°7) Ile-Gly-Glu-Leu-Ser -NH2 (SEQ ID n°8) Gly-Glu-Leu-Ser-Leu (SEQ ID n°9) Gly-Glu-Leu-Ser-Leu-NH2 5 (SEQ ID n°10) Gly-Glu-Leu-Ser-NH2 Selon un mode de réalisation particulièrement intéressant, le peptide biologiquement actif correspond à la séquence SEQ ID n°4. Selon un autre mode de réalisation particulièrement intéressant, le peptide 10 biologiquement actif correspond à la séquence SEQ ID n°5. L'invention concerne aussi des formes homologues de ces séquences. Le terme � homologue � désigne, selon l'invention, toute séquence peptidique identique à au moins 50%, ou de préférence au moins 80%, et encore plus préférentiellement à au moins 90% 15 de ladite séquence peptidique, choisie parmi les séquences SEQ ID n° 1 à SEQ ID n° 10. Par � séquence peptidique identique à au moins X% �, on entend désigner un pourcentage d'identité entre les résidus d'acides aminés des deux séquences à comparer, obtenu après l'alignement optimal des deux séquences. L'alignement optimal est obtenu à l'aide d'algorithmes d'homologies locales tels que ceux utilisés par les logiciels informatiques 20 BLAST P ou T BLAST N disponibles sur le site NCBI. Le terme � homologue � peut également désigner un peptide qui diffère de la séquence d'un peptide de séquence SEQ ID n° 1 à SEQ ID n° 10 par la substitution d'acides aminés chimiquement équivalents, c'est-à-dire par la substitution d'un résidu par un autre possédant les mêmes caractéristiques. Ainsi, les substitutions classiques se font 25 entre Ala, Val, Leu et I1e ; entre Ser et Thr ; entre les résidus acides Asp et Glu ; entre Asn et Gln ; et entre les résidus basiques Lys et Arg ; ou entre les résidus aromatiques Phe et Tyr. Dans l'invention, le terme � acide aminé � se réfère ici à tout acide organique naturel ou non naturel ayant la formule : 30 ùNHR-CR-C(0)-O- où chaque -R est indépendamment sélectionné entre un hydrogène et un groupement alkyl ayant entre 1 et 12 atomes de carbone. Préférentiellement, au moins un groupement -R de chaque acide aminé est un hydrogène. Par le terme � alkyl �, on entend ici une chaîne 2940291 -7- carbonée pouvant être linéaire ou ramifiée, substituée (mono- ou poly-) ou non-substituée ; saturée, mono-saturée (une double ou triple liaison dans la chaîne) ou polyinsaturée (deux ou plusieurs doubles liaisons, deux ou plusieurs triples liaisons, une ou plusieurs doubles liaisons et une ou plusieurs triples liaisons dans la chaîne). 5 Le terme � peptide � désigne un enchaînement de deux ou plusieurs acides aminés liés entre eux par des liaisons peptidiques ou par des liaisons peptidiques modifiées. Par �peptide �, il faut entendre le peptide naturel ou synthétique de l'invention tel que décrit ci-dessus, ou au moins l'un de ses fragments, qu'il soit obtenu par protéolyse ou de manière synthétique, ou encore tout peptide naturel ou synthétique dont la séquence 10 est totalement ou partiellement constituée par la séquence du peptide précédemment décrit. De façon à améliorer la résistance à la dégradation, il peut être nécessaire d'utiliser une forme protégée du peptide selon l'invention. La forme de protection doit évidemment être une forme biologiquement compatible et doit être compatible avec une utilisation 15 dans le domaine des cosmétiques ou de la pharmacie. De nombreuses formes de protection biologiquement compatibles peuvent être envisagées. Elles sont bien connues de l'homme du métier comme, par exemple, l'acylation ou l'acétylation de l'extrémité amino-terminale, ou l'amidation ou l'estérification de l'extrémité carboxy-terminale. Ainsi, l'invention concerne une 20 composition telle que définie précédemment, caractérisée par le fait que le peptide de séquence SEQ ID n° 1 à SEQ ID n°10 est sous forme protégée ou non. On peut utiliser une protection basée sur une substitution sur l'extrémité amino-terminale par un groupement acétyle, un groupement benzoyle, un groupement tosyle ou un groupement benzyloxycarbonyle. De préférence, on utilise une protection basée sur l'amidation de la 25 fonction hydroxyle de l'extrémité carboxy-terminale par un groupement NYY avec Y représentant une chaîne alkyle de C, à C4, ou l'estérification par un groupement alkyle. Il est également possible de protéger les deux extrémités du peptide. Les dérivés de peptides concernent aussi les acides aminés et les peptides reliés entre eux par une liaison pseudo-peptidique. On entend par � liaison pseudo-peptidique �, tous 30 les types de liaisons susceptibles de remplacer les liaisons peptidiques � classiques �. Dans le domaine des acides aminés, les molécules ont une géométrie telle, qu'elles peuvent théoriquement se présenter sous la forme d'isomères optiques différents. Il existe ainsi une conformation moléculaire de l'acide aminé (AA) qui dévie à droite le plan de 2940291 -8- polarisation de la lumière (conformation dextrogyre ou D-aa), et une conformation moléculaire de l'acide aminé (aa) qui dévie à gauche le plan de polarisation de la lumière (conformation lévogyre ou L-aa). Les acides aminés naturels sont toujours de conformation lévogyre, en conséquence, un peptide d'origine naturelle ne sera constitué 5 que d'acides aminés de type L-aa. Cependant, la synthèse chimique en laboratoire permet de préparer des acides aminés ayant les deux conformations possibles. A partir de ce matériel de base, il est possible d'incorporer lors de la synthèse de peptide aussi bien des acides aminés sous forme d'isomères optiques dextrogyre que lévogyre. Ainsi, les acides aminés constituant le peptide selon l'invention peuvent être sous configuration L- et D- ; 10 de manière préférentielle, les acides aminés sont sous forme L. Le peptide selon l'invention peut donc être sous forme L-, D- ou DL-. Le peptide de formule générale (I) selon l'invention peut être obtenu soit par synthèse chimique classique (en phase solide ou en phase homogène liquide), soit par synthèse enzymatique (Kullman et al., J. Biol. Chem. 1980, 225, 8234), à partir d'acides aminés 15 constitutifs ou de leurs dérivés. Le peptide selon l'invention peut être d'origine naturelle ou synthétique. Préférentiellement selon l'invention, le peptide est obtenu par synthèse chimique. Selon l'invention, le principe actif peut être un peptide unique, un mélange de peptides ou de dérivés peptidiques etlou constitués de dérivés d'acides aminés. 20 Selon l'invention, ledit peptide ou mélange de peptides peut être utilisé à titre de médicament. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif selon l'invention est préalablement solubilisé dans un ou plusieurs solvants physiologiquement 25 acceptables, classiquement utilisés par l'homme du métier, comme l'eau, le glycérol, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, la vaseline, une huile végétale ou tout mélange de ces solvants. Selon encore un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif 30 selon l'invention est préalablement solubilisé dans un vecteur cosmétique ou pharmaceutique comme les liposomes, ou adsorbé sur des polymères organiques poudreux, des supports minéraux comme les talcs et bentonites, et plus généralement solubilisé dans, ou fixé sur, tout vecteur physiologiquement acceptable. 2940291 -9- L'invention a pour second objet une composition cosmétique, pharmaceutique, et notamment dermatologique, comprenant, dans un milieu physiologiquement adapté, un peptide de formule générale (I), en tant que principe actif, seul ou en association avec au 5 moins un autre principe actif. Il est bien évident que l'invention s'adresse aux mammiferes en général, et plus particulièrement aux êtres humains. Selon un mode de réalisation avantageux de l'invention, le principe actif selon l'invention est présent dans les compositions de l'invention à une concentration comprise 10 entre 0,0005 et 500 ppm (parties par million) environ, et préférentiellement à une concentration comprise entre 0,01 et 5 ppm environ par rapport au poids total de la composition finale. La composition utilisable selon l'invention peut en particulier consister en une 15 composition pour soins capillaires, et notamment un shampooing, un après-shampooing, une lotion traitante, une crème ou un gel coiffant, une lotion restructurante pour les cheveux, un masque, etc. La composition cosmétique selon l'invention peut être utilisée notamment dans les traitements mettant en oeuvre une application qui est suivie ou non d'un rinçage, ou encore sous forme de shampooing. Ainsi, le principe actif selon 20 l'invention pourra avantageusement être utilisé dans les soins antipelliculaires du cuir chevelu. Elle peut également se présenter sous forme de teinture ou de mascara à appliquer au pinceau ou au peigne, en particulier sur les cils, les sourcils ou les cheveux. 25 Il est bien entendu que le principe actif selon l'invention peut être utilisé seul ou bien en association avec au moins un autre principe actif, dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition pharmaceutique et/ou dermatologique. Avantageusement, les compositions utilisables selon l'invention contiennent en outre divers principes actifs protecteurs ou antivieillissement, destinés, notamment, à la 30 prévention et/ou au traitement des désordres liés au vieillissement. Les compositions selon l'invention pourront être appliquées par toute voie appropriée, notamment orale, parentérale ou topique externe, et leur formulation sera adaptée par 2940291 -10- l'homme du métier, en particulier pour des compositions cosmétiques ou dermatologiques. Avantageusement, les compositions selon l'invention sont destinées à une administration par voie topique cutanée. Ces compositions doivent donc contenir un milieu physiologiquement acceptable, c'est-à-dire compatible avec la peau et les 5 phanères, et couvrent toutes les formes cosmétiques ou dermatologiques. Ces compositions pourront notamment être sous forme de crèmes, émulsions huile-dans-eau, ou eau-dans-huile ou émulsions multiples, solutions, suspensions, gels, laits, lotions. sticks ou encore de poudres, et adaptées à une application sur la peau, les lèvres et/ou les phanères. Ces compositions comprennent les excipients nécessaires à leur formulation, 10 tels que solvants, épaississants, diluants, tensioactifs, antioxydants, colorants, conservateurs, parfums. Selon une autre forme de l'invention, les compositions seront appropriées à une administration orale pour un usage pharmaceutique. Ainsi, les compositions pourront notamment se présenter sous forme de comprimés, capsules, gélules, pâtes à mâcher, 15 poudres à consommer telles quelles ou à mélanger extemporanément avec un liquide, sirops, gels, et toute autre forme connue de l'homme du métier. Elles contiendront des excipients de formulation appropriés, tels que colorants, édulcorants, aromatisants, agents de charge, liants, conservateurs. Ces compositions pourront notamment se présenter sous forme d'une solution 20 aqueuse, hydroalcoolique ou huileuse ; d'une émulsion huile-dans-eau, eau-dans-huile ou émulsions multiples; elles peuvent aussi se présenter sous forme de crèmes, de suspensions, ou encore de poudres, adaptées à une application sur la peau, les muqueuses, les lèvres et/ou les phanères. Ces compositions peuvent être plus ou moins fluides et avoir l'aspect d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'un sérum, d'une pommade, d'un gel, d'une 25 pâte ou d'une mousse. Elles peuvent aussi se présenter sous forme solide, comme un stick, ou être appliquées sur la peau sous forme d'aérosol. Elles peuvent être utilisées comme produit de soin et/ou comme produit de maquillage de la peau. Ces compositions comprennent, en outre, tout additif communément utilisé dans le domaine d'application envisagé ainsi que les adjuvants nécessaires à leur formulation, tels 30 que des solvants, des épaississants, des diluants, des anti-oxydants, des colorants, des filtres solaires, des agents auto-bronzants, des pigments, des charges, des conservateurs, des parfums, des absorbeurs d'odeur, des actifs cosmétiques ou pharmaceutiques, des 2940291 -11- huiles essentielles, des vitamines, des acides gras essentiels, des tensioactifs, des polymères filmogènes, etc. Dans tous les cas, l'homme de métier veillera à ce que ces adjuvants ainsi que leurs proportions soient choisis de manière à ne pas nuire aux propriétés avantageuses 5 recherchées de la composition selon l'invention. Ces adjuvants peuvent, par exemple, correspondre à 0,01 à 20 % du poids total de la composition. Lorsque la composition de l'invention est une émulsion, la phase grasse peut représenter de 5 à 80 % en poids et de préférence de 5 à 50 % en poids par rapport au poids total de la composition. Les émulsionnants et co-émulsionnants utilisés dans la composition seront choisis parmi ceux 10 classiquement utilisés dans le domaine considéré. Par exemple, ils peuvent être utilisés en une proportion allant de 0,3 à 30 % en poids, par rapport au poids total de la composition. L'invention a pour troisième objet l'utilisation, dans une composition cosmétique, d'une quantité efficace de peptide de formule générale (I), en tant que principe actif 15 activateur de la HMG-CoA réductase humaine. La quantité efficace de principe actif correspond à la quantité nécessaire pour obtenir le résultat recherché, à savoir, activer la HMG-CoA réductase, dans le but d'améliorer la fonction barrière de l'épiderme et de stimuler la différenciation épidermique. On entend par � renforcer la fonction barrière cutanée et stimuler la différenciation 20 épidermique �, l'amélioration de la capacité de protection de la couche cornée et l'augmentation de l'expression de marqueurs biologiques de différenciations, tels que les kératines. Ainsi, ledit principe actif, grâce à ses propriétés particulières, pourra être utilisé dans une composition cosmétique destinée à renforcer la fonction barrière cutanée et à stimuler 25 la différenciation épidermique. D'autre part, le peptide de formule générale (I) pourra être utilisé avantageusement, en tant que principe actif, dans une composition cosmétique destinée à lutter de manière préventive etlou curative contre les signes du vieillissement cutané, et plus 30 particulièrement le vieillissement photo-induit (photo-vieillissement). Par manifestations cutanées du vieillissement, on entend toutes modifications de l'aspect extérieur de la peau et des phanères dues au vieillissement comme, par exemple, les rugosités superficielles de la couche cornée, les rides et ridules, mais également toute modification interne de la 2940291 -12- peau qui ne se traduit pas systématiquement par un aspect extérieur modifié comme, par exemple, l'amincissement du derme ou toute autre dégradation interne de la peau consécutive à une exposition aux rayonnements ultraviolets (UV). 5 Selon un autre aspect de l'invention, le peptide de formule générale (I) pourra être utilisé avantageusement, en tant que principe actif, dans une composition cosmétique destinée à protéger la peau contre tous types d'agressions extérieures. En particulier, l'invention a pour objet l'utilisation d'une composition cosmétique comprenant une quantité efficace de peptide selon l'invention pour prévenir ou traiter les 10 dommages causés à la peau par des traitements mécaniques tels que le rasage ou l'épilation. En particulier, l'invention a pour objet l'utilisation d'une composition cosmétique comprenant une quantité efficace de peptide selon l'invention, pour prévenir ou traiter les dommages causés à la peau par des conditions climatiques extrêmes ou des variations 15 brutales de températures et d'hygrométrie. L'invention consiste encore en l'utilisation de peptide selon l'invention pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à prévenir ou traiter les pathologies caractérisées par une altération de la fonction barrière, telles que les peaux 20 hypersensibles, irritées, ou réactives et l'eczéma atopique. L'invention consiste encore en un procédé de traitement cosmétique destiné à prévenir et/ou à lutter contre les agressions extérieures, selon lequel on applique une composition comprenant une quantité efficace de peptide selon l'invention sur les zones à traiter. L'invention consiste encore en un procédé de traitement cosmétique destiné à prévenir et/ou à lutter contre les signes cutanés du vieillissement et/ou du photo-vieillissement, selon lequel on applique une composition comprenant une quantité efficace de peptide selon l'invention sur les zones à traiter. Des modes de réalisation particuliers de ce procédé de traitement cosmétique résultent également de la description précédente. D'autres avantages et caractéristiques de 25 30 2940291 -13- l'invention apparaîtront mieux à la lecture des exemples donnés à titre illustratif et non limitatif. Exemple 1 : Etude ultrastructurale des corps lamellaires dans des kératinocvtes humains traités par le peptide SEO ID n°5 5 Le but de cette étude est d'étudier de manière ultrastructurale, en microscopie électronique à transmission, des kératinocytes traités par le peptide SEQ ID n°5 à 0,5 ppm. Protocole : Des kératinocytes humains normaux en culture sont traités avec une solution à 1% 10 d'une solution mère à 50 ppm du peptide SEQ ID n°5 pendant 48 heures (le milieu en présence de l'actif est changé tous les 24 heures). Les cellules sont lavées au PBS, puis sont fixées par la fixation hypertonique de Karnosky (4% Paraformaldéhyde, 5% glutaraldéhyde dans un tampon 0,08M Phosphate) 1 heure à température ambiante puis 24 heures à 4°C. Les cellules sont détachées du support par grattage, centrifugées 15 5 minutes à 1000 rpm. Le surnageant est éliminé et un tampon de 1M sodium cacodylate est déposé sur le culot. Les cellules sont mélangées à 2 % d'agar puis post-fixées par le tétroxyde d'osmium 1 heure. Les spécimens sont alors déshydratés par passages successifs dans une séries d'alcool (de 50 à 100 %). Les cellules sont ensuite enrobées dans une résine. La polymérisation s'effectue pendant environ 12 heures à 60°C. Des 20 coupes semi fines de 0,5 �m sont réalisées à l'ultra-microtome. Les coupes sont déposées sur une lame collée à la chaleur puis colorée au bleu de toluidine. Les lames sont ensuite déshydratées de nouveau et montées dans un milieu adéquat. Après avoir choisi la zone d'étude optimale, le bloc est retaillé à la taille désirée et des coupes ultrafines sont alors réalisées, seules les coupes qui ont une couleur � gris-argent � et une taille adéquate sont 25 montées sur la grille de microscopie électronique doublement marquée par de l'uranyl acétate et du citrate de plomb, et sont examinées au microscope à transmission à 60 ou 80 KV. Résultats : L'étude ultrastructurale montre que l'appareil de Golgi est sensiblement plus développé que dans les cellules témoins. Cette augmentation est liée à une 30 surproduction des corps lamellaires (ou corps d'Odland) qui est le signe d'une augmentation de la synthèse lipidique. 2940291 -14- Conclusions : Le peptide SEQ ID n° 5 à 0,5 ppm est capable d'induire une augmentation de la synthèse lipidique dans les kératinocytes humains normaux. Exemple 2 : Etude ultrastructurale des � caveolae � dans des fibroblastes humains traités par le peptide SEO ID n°4 5 Le but de cette étude est d'étudier au niveau ultrastructural les cavéoles dans les fibroblastes dermiques humains. Protocole : Des fibroblastes dermiques humains normaux en culture sont traités avec une solution à 1 % d'une solution mère à 50 ppm du peptide SEQ ID n°4 pendant 48 heures (le milieu contenant l'actif est changé tous les 24 heures). 10 Résultats : l'étude ultrastructurale montre une augmentation importante des cavéoles dans les cellules traitées par le peptide SEQ ID n°4, en comparaison des cellules témoins non traitées. Ces résultats sont le signe d'un effet positif du principe actif, puisque les cavéoles sont des invaginations de la membrane plasmique qui permettent l'externalisation de molécules telles que le cholestérol. 15 Conclusions : Le peptide SEQ ID n°4 à 0,5 ppm provoque l'augmentation des structures membranaires d'externalisation du cholestérol. Exemple 3 : Etude de la différenciation des kératinocytes humains traités par le peptide SEO ID n°5 Le but de cette étude est de déterminer l'influence du peptide SEQ ID n°5 sur la 20 différenciation épidermique. Protocole : Des kératinocytes humains normaux en culture sont traités avec une solution à 1 % d'une solution mère à 50 ppm du peptide SEQ ID n° 4 pendant 48 heures (le milieu en présence de l'actif est changé tous les 24 heures). Les cellules sont ensuite lavées, fixées au méthanol froid pendant 4 minutes à 4°C. Les cellules sont incubées en 25 présence d'un anticorps anti cyto-pankératines monoclonal au 1/200eme pendant 1 heure à température ambiante puis révélées par un second anticorps au 1/50eme pendant 1 heure à température ambiante, couplées à un marqueur fluorochrome � alexa 488 �. Après montage dans un milieu ad hoc, les lames sont observées au microscope à épifluorescence. 30 Résultats : L'actif augmente l'expression des pankératines dans les cellules traitées. 2940291 -15- Conclusions : Le peptide SEQ ID n°5, à 0,5 ppm augmente l'expression des pankératines dans les kératinocytes humains normaux. En présence de peptide SEQ ID n°5, les cellules sont stimulées et en voie de différenciation. Exemple 4 : Etude de l'effet protecteur du peptide SEO ID n°5 sur les cellules 5 cutanées soumises à des rayonnements ultraviolet (UVB) Le but de cette étude est de déterminer l'effet protecteur du peptide SEQ ID n°5 vis-à-vis de kératinocytes humains normaux soumis à un stress par des rayonnements UVB. Pour cela, des tests de viabilité cellulaire ont été réalisés par la technique au MIT. Protocole : Les kératinocytes humains normaux sont traités avec une solution à 1 %, 10 d'une solution à 50 ppm de peptide SEQ ID N°5, pendant 24 heures, irradiés par des UVB (50 mJ/cm2) puis cultivés encore 24 heures en présence de la même concentration de peptide SEQ ID n°5. Des contrôles non traités et irradiés sont réalisés dans les mêmes conditions. A la fin de l'expérimentation, les cellules sont incubées dans une solution contenant 0,1 mg/ml de MTT (3-[4, 5-diméthylthiazol-2-yl]-2, 5-diphényltétrazolium, 15 bromure). Ce composé est absorbé par les cellules vivantes puis métabolisé par les enzymes mitochondriales en un composé bleu violet, le formazan, qui sera dosé par spectrophotométrie à 540 nm. La densité optique (D.O.) est alors directement proportionnelle à l'activité enzymatique mitochondriale ainsi qu'au nombre de cellules vivantes. 20 Résultats : L'évaluation de la viabilité cellulaire par la technique du MTT montre que le peptide SEQ ID n°5, augmente la viabilité cellulaire après irradiation par les UVB de 16 %. Conclusions : Le peptide SEQ ID n°5, à la concentration de 0,5 ppm, augmente la viabilité cellulaire et protège efficacement les cellules cutanées contre les effets 25 cytotoxiques des rayonnements UVB. Exemple 5 : Etude de l'expression de la HMG-CoA réductase dans des biopsies de peau, en présence du peptide SEO ID n°5 Le but de cette étude est de déterminer l'influence du peptide SEQ ID n°5 sur l'expression de la HMG-CoA réductase. 2940291 -16- Protocole : Des échantillons de peau humaine sont mis en culture à l'interface air/liquide. Une solution à 1 %, d'une solution mère à 50 ppm de peptide SEQ ID n°5 est appliquée topiquement, puis les échantillons sont incubés durant 24 heures ou 48 heures. Ces échantillons de peau sont ensuite fixés avec du formaldéhyde puis inclus dans la 5 paraffine. Des coupes de 2 à 3m sont alors réalisées. L'immunomarquage est effectué après démasquage des sites spécifiques par traitement micro-onde puis incubation dans de la trypsine. L'immunomarquage est réalisé à l'aide d'un anticorps polyclonal de lapin spécifique de la HMG-CoA réductase (Millipore, Upstate), puis d'un anticorps secondaire, couplé à un marqueur fluorescent. Les coupes de peau sont alors examinées 10 au microscope à Epi-fluorescence (Nikon Eclipse E600 microscope). Résultats : Les observations microscopiques montrent une fluorescence plus forte dans les peaux traitées par le peptide SEQ ID n°5, dans les couches supérieures de l'épiderme, par rapport au contrôle non traité. Conclusions : Le peptide SEQ ID n°5, à la concentration de 0,5 ppm, stimule 15 l'expression de la HMG-CoA réductase, dans les couches supérieures de l'épiderme. Exemple 6 : Etude de l'expression de la HMG-CoA réductase dans kératinocvtes humains normaux, en présence du peptide SEO ID n°4 Le but de cette étude est de déterminer l'influence du peptide SEQ ID n°4 sur l'expression de la HMG-CoA réductase dans les kératinocytes humains normaux. 20 Protocole : Des kératinocytes humains normaux en culture sont traités avec une solution à 1% d'une solution mère à 50 ppm du peptide SEQ ID n°4 pendant 24 ou 48 heures (le milieu contenant l'actif est changé toutes les 24 heures). Les cellules sont ensuite lavées, fixées au méthanol froid pendant 4 minutes à 4°C. Les cellules sont incubées en présence d'un anticorps polyclonal de lapin spécifique de la HMG-CoA 25 réductase (Millipore, Upstate), puis d'un anticorps secondaire, couplé à un marqueur fluorescent. Les cellules sont alors examinées au microscope à Epi-fluorescence (Nikon Eclipse E600 microscope). Résultats : Les observations microscopiques montrent une fluorescence cytoplasmique plus intense dans les cellules traitées par le peptide SEQ ID n°4. 30 Conclusions : Le peptide SEQ ID n°4, à la concentration de 0,5 ppm, stimule l'expression de la HMG-CoA réductase, dans les kératinocytes humains normaux. -17- Exemple 7 : Préparation de compositions 1 - Crème protection solaire: Noms commerciaux I Noms INCI % massique PHASE A Eau déminéralisée Aqua (Water) qsp Pemulen TRI Acrylates/C10-30 Alkyl Acrylate 0,40 Crosspolymer Glycerine Glycerin 3,00 Nipastat Sodium Sodium Methylparaben (and) Sodium 0,15 Ethylparaben (and) Sodium Butyl paraben (and) Sodium Propylparaben (and) Sodium Isobutylparaben PHASE B Parsol MCX Ethylhexyl Methoxycinnamate 7,50 Eusolex 4360 Benzophenone-3 3,00 Parsol 1789 Butyl Methoxydibenzoylmethane 2,00 Myritol 318 Caprylic/Capric Triglyceride 4,00 Emulgade SEV Hydrogenated Palm Glycerides (and) 5,00 Ceteareth-20 (and) Ceteareth-12 (and) Cetearyl Alcohol Propylparaben Propylparaben 0,15 Nacol 16-98 Cetyl Alcohol 1,00 PHASE C TEA I Triethanolamine 0,20 PHASE D Peptide SEQ ID n° 4 3 ppm Parfum Parfum (Fragrance) qsp Colorant qsp Les constituants de la phase A et de la phase B sont chauffés séparément entre 70°C et 75°C. La phase B est émulsionnée dans la phase A sous agitation. La phase C est ajoutée, à 45°C, en augmentant l'agitation. La phase D est ensuite additionnée lorsque la température se situe en dessous de 40°C. Le refroidissement est poursuivi jusqu'à 25°C sous vive agitation.10 ûCrème anti-âge : Noms Noms INCI % commerciaux massique Phase A Montanov 68 Cetearyl Alcohol (and) Cetearyl Glucoside 6,00 Squalane Squalane 3,00 Cetiol SB 45 Butyrospermum Parkii ( Shea Butter) 2.00 Waglinol 250 Cetearyl Ethylhexanoate 3,00 Amerchol L- 101 Minerai Oil (and) Lanolin Alcohol 2,00 Abil 350 Dimethicone 1,50 BHT BHT 0,01 Coenzyme Q10 Ubiquinone 0,10 Phase B Huile d'Avocat Persea Gratissima (Avocado) Oil 1,25 Phenonip Phenoxyethanol (and) Methylparaben (and) Ethylparaben 0,75 (and) Butylparaben (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben Phase C Eau déminéralisée Aqua (Water) qsp Butylene Glycol Butylene Glycol 2,00 Glucam E 10 Methyl Gluceth-10 1,00 Allantoin Allantoin 0,15 Carbopol Ultrez 10 Carbomer 0,20 Phase D TEA Triethanolamine 0,18 Phase E Peptide SEQ ID n°4 0,5 ppm -18- 2940291 -19- Noms Noms INCI % commerciaux massique GP4G Water (and) Artemia Extract 1.50 Collaxyl Water (and) Butylene Glycol (and) Hexapeptide-9 3,00 Phase F Parfum Parfum (Fragrance) qsp Colorant qsp Préparer et fondre la phase A à 65-70°C. Chauffer la phase C à 65-70°C. La phase B est ajoutée à la phase A juste avant d'émulsionner A dans B. A environ 45°C, le carbomer est neutralisé par addition de la phase D. La phase E est ensuite additionnée sous légère agitation et le refroidissement est poursuivi jusqu'à 25°C. La phase F est alors additionnée si souhaité. 3 ûCrème protectrice de jour : Noms commerciaux Noms INCI % massique Phase A Emulium Delta Cetyl alcohol (and) Glyceryl Stearate (and) PEG- 4,00 75 Stearate (and) Ceteth-20 (and) Steareth-20 Lanette O Cetearyl Alcohol 1,50 D C 200 Fluid/100cs Dimethicone 1,00 DUB 810C Coco Caprylate/Caprate 1,00 DPPG Propylene Glycol Dipelargonate 3,00 DUB DPHCC Dipentaerythrityl Hexacaprylate/Hexacaprate 1,50 Cegesoft PS6 Vegetable Oil 1,00 Vitamine E Tocopherol 0,30 Phenonip Phenoxyethanol (and) Methylparaben (and) 0,70 Ethylparaben (and) Butylparaben (and) Propylparaben (and) Isobutylparaben 2940291 -20- Phase B Eau déminéralisée Aqua qsp 100 Glycerine Glycerin 2,00 Carbopol EDT 2020 Acrylates/C10-30Alkyl Acrylate Crosspolymer 0,15 Keltrol BT Xanthan Gum 0,30 Phase C Sodium Hydroxide (sol.à Sodium Hydroxide 0,30 10%) Phase D Eau déminéralisée Aqua 5,00 Stay-C 50 Sodium Ascorbyl Phosphate 0,50 Phase E Butylene Glycol Butylene Glycol 2,00 Dekaben CP Chlorphenesin 0,20 Phase F GP4G Water (and) Artemia Extract 1,00 Peptide SEQ ID n°5 5 ppm Préparer la phase A et chauffer à 75°C sous agitation. Préparer la phase B en dispersant le carbopol, puis la gomme xanthane sous agitation. Laisser reposer. Chauffer à 75°C. A température, émulsionner A dans B sous agitation rotor-stator. Neutraliser avec la 5 phase C sous agitation rapide. Après refroidissement à 40°C, additionner la phase D, puis la phase E. Le refroidissement est poursuivi sous agitation légère et la phase F rajoutée. REVENDICATIONS1. Peptide dérivé de la HMG-CoA réductase humaine, de formule générale (I) R1-(AA)ä-X1-Gly-Glu-Leu-Ser-X2-X3_(AA)p R2 Dans laquelle, X1 est l'alanine, la valine, l'isoleucine ou aucun acide aminé, X2 est la leucine, l'isoleucine ou aucun acide aminé, X3 est la méthionine, la sérine, l'alanine ou aucun acide aminé, AA représente un acide aminé quelconque, ou un de ses dérivés, et n et p sont des nombres entiers compris entre 0 et 4, R1 représente la fonction amine primaire de l'acide aminé N-terminal, libre ou substituée par un groupement protecteur pouvant être choisi parmi un groupement acétyle, un groupement benzoyle, un groupement tosyle ou un groupement benzyloxycarbonyle, R2 représente le groupe hydroxyle de la fonction carboxyle de l'acide aminé C- terminal, libre ou substitué par un groupement protecteur pouvant être choisi parmi une chaîne alkyle de C1 à C20, ou un groupement NH2, NHY ou NYY avec Y représentant une chaîne alkyle de C1 à C4, ladite séquence de formule générale (I) étant constituée de 4 à 15 résidus d'acides aminés, ladite séquence de formule générale (I) pouvant comprendre des substitutions des acides aminés X1 à X3 par d'autres acides aminés chimiquement équivalents. 2. Peptide selon la revendication 1 caractérisé en ce qu'il correspond à une des séquences suivantes : (SEQ ID n°1) Met-Ala-Gly-Glu-Leu-Ser-Leu-Met-Ala-Ala (SEQ ID n°2) Gly-Val-Gly-Glu-Leu-Ser-Ile-Ser-Ala (SEQ ID n°3) Ile-Gly-Glu-Leu-Ser-Leu-Ala-Ala (SEQ ID n°4) Ala-Gly-Glu-Leu-Ser (SEQ ID n°5) Ala-Gly-Glu-Leu-Ser -NH2 (SEQ ID n°6) Ile-Gly-Glu-Leu-Ser (SEQ ID n°7) Ile-Gly-Glu-Leu-Ser -NH2 (SEQ ID n°8) Gly-Glu-Leu-Ser-Leu (SEQ ID n°9) Gly-Glu-Leu-Ser-Leu-NH2(SEQ ID n°10) Gly-Glu-Leu-Ser-NH2 3. Peptide selon la revendication 2 caractérisé en ce qu'il correspond à la séquence SEQ ID n°4. 4. Peptide selon la revendication 2 caractérisé en ce qu'il correspond à la séquence SEQ ID n°5. 5. Peptide selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce qu'il est 10 solubilisé dans un ou plusieurs solvants physiologiquement acceptables, comme l'eau, le glycérol, l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, les diglycols éthoxylés ou propoxylés, les polyols cycliques, la vaseline, une huile végétale ou tout mélange de ces solvants. 15 6. Peptide selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il est utilisé à titre de médicament. 7. Composition cosmétique ou pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle comprend, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins un peptide tel que défini dans 20 l'une quelconque des revendications 1 à 5, en tant que principe actif, utilisé seul ou en association avec au moins un autre principe actif. 8. Composition cosmétique ou pharmaceutique selon la revendication 7, caractérisée en ce que ledit peptide est présent à une concentration comprise entre 0,0005 et 500 ppm 25 environ, et préférentiellement à une concentration comprise entre 0,01 et 5 ppm. 9. Composition cosmétique ou pharmaceutique selon l'une des revendications 7 ou 8, caractérisée en ce qu'elle est destinée à une administration par voie topique. 30 10. Utilisation, dans une composition cosmétique selon l'une des revendications 7 à 9, d'une quantité efficace de peptide, tel que défini dans l'une des revendications 1 à 5, en tant que principe actif activateur de la HMG-CoA réductase humaine. -22- 2940291 -23- 11. Utilisation selon la revendication 10 pour obtenir une composition cosmétique destinée à renforcer la fonction barrière de l'épiderme et à stimuler la différenciation épidermique. 5 12. Utilisation selon la revendication 10 pour obtenir une composition cosmétique destinée à prévenir et à lutter contre les signes cutanés du vieillissement et du photo-vieillissement. 13. Utilisation selon la revendication 10 pour obtenir une composition cosmétique destinée à protéger la peau des agressions extérieures. 14. Utilisation d'une quantité efficace de peptide, tel que défini dans l'une des revendications 1 à 6, en tant que principe actif, utilisé seul ou en association avec au moins un autre principe actif, pour préparer une composition pharmaceutique destinée à prévenir ou à traiter les pathologies caractérisées par une altération de la fonction barrière, telles que les peaux hypersensibles, irritées, ou réactives et l'eczéma atopique. 15. Procédé de traitement cosmétique destiné à prévenir et/ou à lutter contre les agressions extérieures, caractérisé en ce que l'on applique topiquement sur la peau à traiter une composition comprenant une quantité efficace de peptide, tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 5. 16. Procédé de traitement cosmétique destiné à prévenir et/ou à lutter contre les signes cutanés du vieillissement et du photo-vieillissement caractérisé en ce que l'on applique topiquement sur la peau à traiter une composition comprenant une quantité efficace de peptide, tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 5.