Brevet FR2943687A1 — publié le 20101001

La présente invention trouve son application dans le domaine médical. Elle a essentiellement pour objet un procédé de dépistage in vitro de porteurs de mutations TRPM4 associées à l'existence de cardiopathies ou à une prédisposition à des cardiopathies, et en particulier des cardiopathies à risque de mort subite. Les cardiopathies sont des maladies cardiaques responsables de troubles du rythme et/ou de la conduction cardiaque et/ou d'atteinte de la contractilité. Parmi ces cardiopathies, on peut citer par exemple les blocs de conduction cardiaques, le syndrome du QT long, la maladie du noeud sinusal, les cardiomyopathies dilatées, le syndrome de Brugada, la fibrillation auriculaire, etc. Les pathologies du rythme et/ou de la conduction cardiaque peuvent s'avérer difficiles à dépister, du fait notamment de l'intermittence des anomalies à l'électrocardiogramme, et ces conditions gênent considérablement la prise en charge thérapeutique des patients atteints de cardiopathies. De plus, certaines cardiopathies peuvent être associées à un risque de mort subite, comme par exemple les blocs de conduction cardiaques, le syndrome du QT long, la maladie du noeud sinusal, les cardiomyopathies dilatées et le syndrome de Brugada notamment. La mort subite du nouveau-né peut également être due à l'existence d'une cardiopathie. L'existence de pathologies associées à un risque de mort subite nécessite la mise en place d'une surveillance toute particulière, et éventuellement d'une thérapeutique spécifique. Les blocs de conduction cardiaques (BCC) correspondent à un ralentissement ou un arrêt complet de la progression de l'onde de dépolarisation depuis le noeud sinusal du coeur jusqu'aux ventricules. Le rôle du tissu de conduction est de dépolariser les cellules cardiaques de manière organisée et synchronisée. Les BCC sont le plus souvent asymptomatiques mais ils peuvent entraîner des étourdissements ou éventuellement une mort subite. Le diagnostic de BCC est simplement établi par un enregistrement de l'électrocardiogramme (ECG). Il est aussi possible de détecter un BCC intermittent par un enregistrement ECG ambulatoire et il est parfois nécessaire de faire une étude électrophysiologique avec des électrodes guidées dans les cavités cardiaques pour mesurer les intervalles de conduction cardiaque. Un bloc complet ou arrêt de la conduction entre les oreillettes et les ventricules est appelé bloc auriculo-ventriculaire (BAV) complet. Dans ce cas, les ventricules battent à une fréquence très lente (30 à 40/min) grâce à l'automaticité spontanée des cellules des voies de conduction cardiaque située en aval du bloc de conduction. La fréquence de l'automaticité des cellules de voies de conduction cardiaques diminue depuis le noeud auriculo-ventriculaire jusqu'aux cardiomyocytes communs. Jusqu'à ce jour, il n'y a pas de traitement médical qui puisse améliorer ou traiter un bloc de conduction cardiaque. La seule thérapeutique d'un BAV complet permanent consiste à mettre en place un stimulateur cardiaque qui imposera une fréquence cardiaque minimale en stimulant la pointe du ventricule droit par une électrode. Les BCC sont habituellement considérés comme bénins, en particulier le Bloc de Branche Droit (BBD) et les hémiblocs de branche. Cependant, un petit pourcentage de ces BCC � bénins � évolue durant la vie vers un BAV complet avec un risque associé de mort subite. Le problème de santé publique est de déterminer quand un stimulateur cardiaque devrait être mis en place pour prévenir les patients d'une mort subite. Le choix est relativement aisé quand le BCC s'aggrave progressivement. Malheureusement, un BCC apparemment bénin peut parfois évoluer brusquement vers un BAV complet avec mort subite. Les BCC peuvent être isolés ou associés à une malformation cardiaque congénitale, une cardiomyopathie dilatée, une arythmie cardiaque ou une myopathie. La prévalence des BCC est estimée de 0,3 % à 3 % environ pour le BBD chez des enfants normaux de 6 à 20 ans avec une prépondérance masculine et une augmentation de la prévalence avec l'âge. L'Hémibloc de Branche Antérieur Gauche (HBAG) ù un bloc situé après la bifurcation de la branche gauche ù est retrouvé chez 0,9 % à 10 % des enfants de la même étude (Chiu et coll., 2008, J Pediatr, 152 :85-89). Dans une étude de population en 2008, Miller et coll. ont démontré que le BBD et I'HBAG sont les BCC les plus fréquents représentant respectivement 42 % et 26 % des cas de BCC dans une population d'adulte d'âge médian de 64 ans (Miller et coll., 2008, Am J Cardiol, 101 : 102-106). La nature familiale de quelques cas de BCC a été démontrée dans les années 70 quand il est apparu que les apparentés d'un porteur de BCC avaient une prévalence beaucoup plus élevée de BCC que la population générale. De plus, plusieurs formes familiales ont été rapportées confirmant l'existence d'une composante génétique au BCC. Sur ce point, les Inventeurs ont notamment localisé en 1995 une mutation sur le bras long du chromosome 19 sur la bande q19.3 qui est responsable d'un BCC à transmission autosomique dominante. Le syndrome de Brugada a été décrit par Brugada et Brugada (Brugada et Brugada, 1992, J Am Coli Cardiol, 20 : 1391-1396). Le syndrome de Brugada se manifeste par des syncopes et des arrêts cardiaques qui surviennent typiquement au repos ou durant le sommeil. Les premiers symptômes et les arrêts cardiaques surviennent typiquement durant la 3ème et 4ème décade de la vie. Un consensus existe sur les critères ECG de diagnostic de syndrome de Brugada avec 3 types différents observables dans les dérivations précordiales droites. Seul le type 1 est diagnostique de Brugada. Dans ce type 1, on observe une élévation du segment ST d'au moins 2 mm avec une morphologie arrondie et un bloc de branche droit complet ou incomplet suivi par une onde T négative (Figure 1). Le syndrome de Brugada est établi si ce type 1 d'anomalie est observée à l'ECG dans au moins une dérivation précordiale droite (Vi ù V3) en conjonction avec une des conditions suivantes : fibrillation ventriculaire documentée, tachycardie ventriculaire polymorphe, histoire familiale de mort subite avant 45 ans, apparentés avec un ECG de type 1, induction d'une tachycardie ventriculaire par stimulation électrique endocavitaire programmée, syncope ou respiration agonique nocturne. Le syndrome est estimé être responsable d'environ 4 % de toutes les morts subites et jusqu'à 20 % des personnes mourant par mort subite et ayant un coeur normal à l'autopsie. L'étude systématique de population la plus grande dans laquelle la prévalence de syndrome de Brugada a été observée a montré une prévalence d'environ 0,12 % to 0,14 % parmi les personnes asymptomatiques (Miyasaka et coll., 2001, J Am Coli Cardiol, 38 : 771-774). Des estimations récentes évaluent la prévalence mondiale entre 0,1 % et 0,23 % (Fowler et coll., 2009, Curr Opin Cardiol, 24 : 74-81). Bien que la maladie soit héritée par transmission autosomique dominante, il y a une différence marquée entre homme et femme avec environ 8 fois plus d'hommes atteints. Les hommes ont, en outre, un risque de mort subite environ 5,5 fois plus élevé que les femmes. Le syndrome de Brugada se manifeste à un âge moyen de 41 +/- 15 ans. Les évaluations les plus récentes suggèrent qu'environ 10 à 15 % des individus cliniquement atteints auront au moins un événement d'arrêt cardiaque avant 60 ans. Outre le sommeil, le repos et le sexe masculin, d'autres facteurs peuvent déclencher des troubles du rythme en particulier l'hyperthermie, des repas copieux, la prise de cocaïne, la consommation d'alcool excessive and des doses élevées d'antidépresseurs tricycliques (Fowler et coll., supra). En cardiogénétique, il est fréquent que les mutations dans un seul gène soient responsables de maladies cardiaques différentes. A titre d'exemple, les mutations dans le gène NKX2.5 peuvent être responsables de BCC et d'une variété de malformations cardiaques et en particulier de communication interauriculaire Schott et coll., 1998, Science, 281 : 108-111 ; Hirayama-Yamada et coll., 2005, Am J Med Genet A, 135 : 47-52 ; Sarkozy et coll., 2005, J Med Genet, 42 : e16). Par ailleurs, les mutations dans le gène SCN5A, la sous-unité alpha du canal sodique cardiaque, peuvent être responsables de syndrome de QT long, de bloc de conduction cardiaque (Schott et coll., 1999, Nat Genet, 23: 20-21), de cardiomyopathie dilatée, de syndrome de Brugada, de la maladie du noeud sinusal et de mort subite du nouveau-né. Cependant, les mutations dans les gènes SCN5A et N10(2.5 ne sont retrouvées que dans un faible pourcentage de cas de BCC. D'un autre côté, une maladie cardiaque bien définie peut être secondaire à la mutation de plusieurs gènes. Par exemple, la cardiomyopathie hypertrophique peut être secondaire à une mutation dans une variété de gènes (plus de 12 gènes). TRPM4 (Canal Cationique Potentiel de récepteur transitoire, sous-famille M, membre 4) est un membre de la superfamille des canaux cationiques potentiels de récepteur transitoire qui ont une grande variété de mécanisme d'activation et de sélectivité. Les canaux TRP fonctionnent comme des intégrateurs de signal. Il y a 7 sous-familles de canaux TRP dont la famille TRP Mélastatine (TRPM) qui comporte 8 membres chez les mammifères. Tous les canaux TRP sont perméables au Cal+ sauf TRPM4 et TRPM5, 2 proches membres de la sous-famille TRPM qui ne sont perméables qu'aux cations monovalents (Venkatachalam et Montell., 2007, Annu Rev Biochem, 76 ; 387-417). Seuls 6 types de courants TRP ont été détectés dans le coeur. Ces courants ont été associés à TRPC1, TRPC3 et TRPC6 (3 canaux de Ca2+ stocké); TRPM6 et TRPM7, qui sont responsables d'un courant cationique inhibé par le Mg2+ (IMIC), et TRPM4. Le gène TRPM4 est situé sur le bras long du chromosome 19 en q13.33. Il n'y a qu'un gène TRPM4 dans le génome humain (ENSG00000130529, gène TRPM4, base de données Ensembl (SEQ ID NO : 1)). Un premier transcrit composé de 25 exons pour 4 053 nucléotides (ENST00000252826, transcrit TRPM4-201 base de données Ensembl (SEQ ID NO : 2)) et 1 214 acides aminés (ENSP00000252826, protéine TRPM4 base de données Ensembl (SEQ ID NO: 3)) a été décrit. Un deuxième transcrit potentien composé du même nombre d'exons avec 4 057 nucléotides (ENST00000355712, transcrit TRPM4-202 base de données Ensembl (SEQ ID NO : 4)) et 1 239 acides aminés (ENSP00000347944, protéine TRPM4 base de données Ensembl (SEQ ID NO : 5)) a également été décrit. Trois isoformes de la protéine TRPM4 ont été décrites et sont présentées dans la base de données Expasy : Q8TD43-1 (SEQ ID NO : 3) qui correspond à la protéine ENSP00000252826 (1 214 acides aminés) issue du transcrit ENST00000252826 de la base Ensembl et deux autres isoformes Q8TD43-2 (SEQ ID NO: 6) (absence des 174 acides aminés du côté N-terminal par rapport à Q8TD43-1) et Q8TD43-3 (SEQ ID NO : 7) (absence des acides aminés 738 à 882 par rapport à Q8TD43-1). La protéine TRPM4 par analogie aux protéines TRP a 6 segments transmembranaires et extrémités intracytoplasmiques. La région du pore est localisée entre les segments transmembranaires 5 et 6 (Figure 2). Basé sur l'homologie avec les pores à sélectivité cationique, un segment de 6 acides aminés (EDMDVA) a été identifié entre les segments transmembranaires 5 et 6 comme filtre potentiel de sélectivité de TRPM4. TRPM4 contient plusieurs sites de phosphorylation par la protéine kinase A et C ainsi que des sites de fixation de la calmoduline. Cette protéine contient aussi des sites consensus pour des cassettes liant IATP. Un canal TRPM4 est formé probablement par plusieurs protéines TRPM4. L'expression tissulaire de TRPM4 n'est que partiellement connue. TRPM4 est exprimé dans divers tissus comme la prostate, l'intestin, le coeur, le muscle squelettique, le placenta, le foie, le rein, le pancréas, le thymus, la rate, les testicules et le cerveau. Dans le coeur de souris, le noeud sinusal et l'oreillette ont une expression forte de TRMP4. Au contraire, les ventricules expriment un taux bas ou pas du tout TRPM4 sauf en cas d'hypertrophie. Le courant cardiaque TRPM4 a une conductance linéaire de canal unique d'environ 25 pS. La probabilité d'ouverture du canal est voltage dépendante, et augmente avec la dépolarisation membranaire. Le canal est également perméable pour les ions Na' et K+ mais non perméable aux ions Cal+ et Cl. -Le calcium intracellulaire active de manière réversible le canal d'une manière dépendante de la concentration avec une concentration de demi-efficacité (ECSO) de 10-20 �M. L'ATP intracellulaire inhibe ce canal dans une fourchette de l'ordre du micromolaire. La protéine kinase C (PKC) a un rôle stimulateur. En fait, la préstimulation des cardiomyocytes par l'ATPyS, un agonistes de récepteurs purinergiques qui est connu pour activer la voie de la protéine kinase C dans le coeur ou par le phorbol 12-myristate 13-acétate (PMA), un activateur de la PKC, augmente le taux de détection du courant des patches de 10 % à 50 %. Des analogues du diacylglycerol (DAG) activent aussi le canal dans les cardiomyocytes même en présence de calphostine C, un bloqueur de la PKC. Cet effet a été identifié sous la forme d'une activation du canal par des analogues du DAG (voir Guinamard et coll., 2006, Trends Cardiovasc Med, 16 : 245-250 pour revue). Les propriétés décrites ci-dessus dans les cardiomyocytes sont similaires à celles des canaux TRPM4 exprimés après transfection de lignées cellulaires. Jusqu'à ce jour, le rôle exact de TRPM4 dans le coeur n'est pas connu. TRPM4 est crucial pour la migration mais pas pour la maturation des cellules dendritiques dans le processus de l'initiation de la réponse immunitaire. TRPM4 régule les oscillations calciques après l'activation des cellules T entraînant une augmentation de la production de l'interleukine-2. TRPM4 est exprimé dans les cellules bêta du pancréas endocrine. Une augmentation du calcium intracellulaire induit un important courant de dépolarisation membranaire par activation des canaux TRPM4 localisés dans la membrane plasmatique et secondairement par le recrutement de vésicules contenant des canaux TRPM4 vers la membrane plasmatique. Ces observations suggèrent que TRPM4 peut être impliqué dans la sécrétion d'insuline par les cellules bêta du pancréas. Les canaux TRPM4 semblent être impliqués dans la contraction myogénique des artères cérébrales (Earley et coll., 2004, Cir Res, 95 : 922-929). Jusqu'à ce jour, les canaux TRPs ont été impliqués dans 3 maladies : TRPM6 dans l'hypomagnésémie avec hypocalcémie secondaire ; TRPP2 et la protéine associée TRPP1 dans la polykystose rénale autosomique dominante et TRPML1 dans la mucolipidose de type IV. A la connaissance des Inventeurs, aucune pathologie n'a été reliée à ce jour à une mutation dans le gène TRPM4. Les Inventeurs ont découvert, et ceci constitue le fondement de la présente invention, que certains patients atteints de différentes maladies cardiaques, telles que les BCCs et le syndrome de Brugada notamment, sont porteurs de mutations génétiques de TRPM4. L'identification de ces mutations TRPM4 dans des familles indépendantes souffrant de maladies cardiaques différentes démontre l'implication de ces mutations dans les cardiopathies. Ainsi, la détection de ces mutations in vitro sur un échantillon biologique permet de déterminer si un sujet souffre d'une cardiopathie, secondaire à une mutation dans TRPM4, ou possède une prédisposition au développement d'une cardiopathie, ce qui permet d'entreprendre un suivi thérapeutique en conséquence. Selon un premier aspect, la présente invention a donc pour objet un procédé de dépistage in vitro de la présence ou de la prédisposition à des cardiopathies, comprenant les étapes consistant à : - extraire le matériel biologique à partir d'un échantillon susceptible de contenir le gène TRPM4 ou ses produits d'expression (ARN ou protéine), - détecter la présence de mutation(s) dans la séquence TRPM4 dudit matériel biologique à l'aide de réactifs spécifiques de TRPM4, ladite présence étant mise en évidence par comparaison avec la séquence de référence TRPM4. Dans le cadre de la présente invention, on entend par � dépistage de cardiopathies � � dépister une cardiopathie � le fait de déterminer la présence d'une cardiopathie mais également la prédisposition à une cardiopathie. Le procédé selon l'invention permet de dépister n'importe quelle cardiopathie (la présence de ou la prédisposition à). Par exemple, les cardiopathies qui peuvent être dépistées selon l'invention sont notamment le syndrome de QT long, les blocs de conduction cardiaques (BCC), la cardiomyopathie dilatée, le syndrome de Brugada, la maladie du noeud sinusal, la fibrillation auriculaire, etc. Selon une variante particulièrement préférée, la détection de mutations TRPM4 selon le procédé de l'invention permet de mettre en évidence l'existence de ou la prédisposition à des cardiopathies qui peuvent être responsables de mort subite. Parmi les cardiopathies associées à un risque de mort subite, on peut notamment citer le syndrome de QT long, les blocs de conduction cardiaques (BCC), la cardiomyopathie dilatée, le syndrome de Brugada et la maladie du noeud sinusal. La détection de mutations TRPM4 selon le procédé de l'invention peut ainsi permettre de dépister l'existence ou la prédisposition à des cardiopathies à risque de mort subite. A ce titre, le procédé selon l'invention permet également le dépistage de cardiopathies qui peuvent être responsables de la mort subite du nouveau-né. Le dépistage de BCCs et/ou du syndrome de Brugada constitue des variantes particulièrement avantageuses du procédé de la présente invention. Dans le cadre du dépistage des BCCs, la présente invention permet en particulier de dépister des BCCs à risque de mort subite élevé. Dans le cadre de la présente invention, on entend par mutation TRPM4, toute modification de la séquence qui consiste en ou résulte d'une ou plusieurs substitution(s) d'au moins une base, ou bien une ou plusieurs délétion(s), insertion(s), ou remaniement(s) dans la séquence TRPM4. Ainsi, les mutations qui sont détectées dans le cadre de la présente invention peuvent être des modifications de la séquence du gène TRPM4 dans les parties codantes qu'il s'agisse d'une modification ponctuelle (substitution) de type faux-sens (entraînant un changement d'acide aminé) ou de type non sens (entraînant l'apparition d'un codon stop et donc d'une protéine tronquée) ou qu'il s'agisse d'une modification du type délétion, insertion, ou remaniement d'un ou plusieurs nucléotides ou portion(s) de nucléotides. Les modifications peuvent aussi impliquer les parties régulatrices, non- codantes (épissage ou région régulatrice de transcription). En conclusion, ces modifications couvrent toutes les variations de la séquence du gène TRPM4 et de ses produits d'expression, et qui de manière préférée altèrent significativement la quantité ou la qualité du canal TRPM4 synthétisé. L'identification des mutations TRPM4 selon l'invention peut notamment être réalisée après constatation d'une variation de séquence du gène ou de ses produits d'expression par rapport à la séquence de référence, et vérification que cette variation ne correspond pas à un simple polymorphisme û sans conséquence négative û mais bien à une mutation û responsable d'un dysfonctionnement protéique. Pour cela, on vérifie que la même variation n'est pas retrouvée sur des ADN contrôles (de préférence sur environ 150 ADN contrôles), et dans les séquences de TRPM4 chez d'autres espèces. Des études en biologie cellulaire du variant peuvent également être réalisées pour vérifier la modification fonctionnelle du récepteur. Le matériel biologique utilisé pour la présente invention est notamment du matériel nucléotidique ou protéique permettant la détection du gène TRPM4, comme notamment l'ADN génomique, ou de ses produits d'expression, comme l'ARN qui codent TRPM4 ou la protéine TRPM4 elle-même. Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, le matériel utilisé est l'ADN, et en particulier l'ADN génomique. Le procédé d'extraction de ce matériel n'est en aucun cas limitant. L'extraction peut être réalisée par toute méthode standard bien connue de l'homme du métier. L'échantillon utilisé dans le cadre du procédé selon l'invention est un échantillon biologique issu du patient susceptible d'être porteur de mutations TRPM4 et peut être de différente nature. Il contient en particulier du matériel biologique qui permette de détecter le gène TRPM4 ou ses produits d'expression. En particulier, l'échantillon peut être un fluide biologique tel que du sang total, le liquide céphalo- rachidien, des cellules circulantes (nucléées comme par exemple des lymphocytes) ou encore un tissu dans lequel le canal TRPM4 est exprimé, comme par exemple la prostate, l'intestin, le coeur, le muscle squelettique, le placenta, le foie, le rein, le pancréas, le thymus, la rate, les testicules et le cerveau, ou des cellules issues de ces tissus ; du moment que celui-ci contient des noyaux cellulaires donc le matériel biologique qui contient le gène TRPM4 ou bien contient ses produits d'expression, par exemple tels que l'ARN ou la protéine. Dans le cadre du procédé de dépistage selon la présente invention, on préférera tout particulièrement utiliser comme échantillon biologique des lymphocytes isolés à partir du sang, desquels on pourra extraire en particulier l'ADN 35 qui sera utilisé en tant que matériel biologique pour la mise en oeuvre de mutations TRPM4. Selon la présente invention, on entend de préférence par � séquence de référence TRPM4 �, la séquence obtenue par séquençage du matériel biologique (correspondant à celui du matériel biologique choisi pour l'échantillon test : ADN, ARN ou protéine) extrait d'un échantillon biologique issu d'au moins un individu sain, de préférence exempt d'atteinte notamment génétique, et en particulier indemne de tout antécédent de malformation ou de maladie cardiaque héréditaire. Dans ce cas, l'échantillon biologique issu de l'individu de référence est de préférence de même nature (fluide, tissu, cellules etc) que celui de l'échantillon biologique à tester. En outre, on préfèrera utiliser des échantillons biologiques test et de référence issus de personnes du même sexe et/ou d'un âge similaire ou identique et/ou de même origine ethnique. Les séquences disponibles sous les numéros d'enregistrements ENSG00000130529 (gène TRPM4, base de données Ensembl (SEQ ID NO : 1)), ENST00000252826 (transcrit TRPM4-201, base de données Ensembl (SEQ ID NO : 2)) ou ENSP00000252826 (protéine TRPM4, base de données Ensembl également enregistrée sous le numéro Q8TD43-1 dans la base de données Expasy (SEQ ID NO: 3); ces deux dernières références étant identiques) peuvent également constituées la séquence de référence TRPM4 au sens de l'invention. La séquence de référence sera choisie en fonction de la nature du matériel biologique utilisé, à savoir ENSG00000130529 pour du matériel génomique, ENST00000252826 pour du matériel transcriptionnel, et ENSP00000252826 (ou Q8TD43-1) pour du matériel protéique. Les réactifs spécifiques à l'aide desquels des mutations TRPM4 peuvent être détectées sont adaptés au matériel biologique choisi (ADN, ARN ou protéine). A titre d'exemple, on peut notamment utiliser des amorces PCR en tant que réactifs spécifiques lorsque le matériel choisi est l'ADN ou l'ARN. On peut aussi utiliser des oligonucléotides pour utilisation avec des puces de reséquençage ou toute autre méthode de reséquençage. On peut utiliser aussi des anticorps anti-TRPM4, monoclonaux ou polyclonaux, et de préférence monoclonaux. L'homme du métier saura préparer ces réactifs spécifiques ou les choisir parmi ceux qui sont déjà disponibles dans le commerce et les utiliser afin de détecter d'éventuelle(s) mutation(s) dans la séquence TRPM4 selon les pratiques courantes dans le domaine. Par exemple, les réactifs spécifiques mentionnés dans le Tableau 2 (SEQ ID NO : 8 à SEQ ID NO : 63, qui correspondent respectivement aux amorces sens puis anti-sens pour chacun des exons ex01, exO2, ex03a, ex03b, exO4 exO5, exO6, exO7, ex08a, ex08b, exO9, exlO, exila, exllb, ex12, ex13, ex14, exl5, ex16, ex17, ex18, ex19, ex20, ex2l, ex22, ex23, ex24 et ex25) peuvent avantageusement être utilisés dans le cadre de l'invention. Toute méthode permettant de déterminer la séquence nucléotidique ou protéique de TRPM4 et de comparer des séquences entre elles peut être utilisée pour la mise en oeuvre du procédé selon l'invention. On peut notamment citer les méthodes de Maxam et Gilbert, de Sanger ou des méthodes de séquençage à haut débit comme : - l'amplification de l'ADN lié spécifiquement à une bille en émulsion et le pyroséquençage (luminescence par libération de pyrophosphate) (type GS Flex). - l'amplification, l'accrochage-liaison sur puce et l'utilisation de terminateurs de chaîne réversibles marqués par des fluorochromes, (type Solexa) - l'amplification par émulsion et l'hybridation-ligation chimique (type SOLID). Parmi les mutations TRPM4 qui peuvent être identifiées à l'aide du procédé selon l'invention et qui sont associées à l'existence d'une cardiopathie ou à la prédisposition à une cardiopathie, on peut en particulier mentionner une ou plusieurs substitution(s) d'au moins une base, ou bien une ou plusieurs délétions ou insertions, de préférence de plusieurs nucléotides, dans la séquence TRPM4. De manière particulièrement avantageuse, le procédé selon l'invention permet de dépister l'existence d'une cardiopathie ou la prédisposition à une cardiopathie chez un patient par l'identification d'au moins une substitution d'au moins une base dans la séquence du gène TRPM4. De préférence, ces substitutions sont non-silencieuses (c'est-à-dire codent pour un acide aminé différente de celui d'origine). Avantageusement, le procédé de dépistage repose sur l'identification d'une seule substitution d'une seule base dans la séquence du gène TRPM4. La ou les substitution(s) indui(sen)t en particulier une ou des modification(s) d'acides aminés dans la partie N-terminale de la protéine TRPM4 située en amont de la première région transmembranaire et/ou des acides aminés de la partie de la protéine située entre les régions transmembranaires 1 et 2 et/ou 2 et 3 de la protéine TRPM4. Dans ce dernier cas, la ou les substitution(s) est(sont) de préférence localisée(s) à proximité du motif présumé transporteur ABC situé dans la partie de la protéine qui est entre les régions transmembranaires 2 et 3. Selon une mise en oeuvre préférée de l'invention, la ou les substitution(s) concerne(nt) les bases 490 et/ou 1294 et/ou 2209 et/ou 2317 et/ou 2531 dans la séquence du gène TRPM4. La ou les modification(s) de TRPM4 consistent de préférence en la substitution de l'acide aminé Arg en position 164 et/ou Ala en position 432 et/ou Gly en position 737 et/ou Phe en position 773 et/ou Gly en position 844. De manière particulièrement avantageuse, l'acide aminé en question est substitué par un acide aminé de nature différente (charge, polarité, etc). Selon un mode de réalisation avantageux, l'existence d'une cardiopathie ou la prédisposition à une cardiopathie est mise en évidence par la présence d'une seule mutation TRPM4, et en particulier une seule substitution d'une seule base conduisant à la substitution d'un seul acide aminé. La nomenclature des mutations telles que mentionnées dans la présente demande suit les recommandations internationales. La numérotation des bases s'entendent par rapport à la séquence ENST00000252826 du transcrit TRPM4-201, le nucléotide +1 étant la base A du premier codon ATG qui est située en position 73 par rapport au début du transcrit. Les positions des acides aminés sont basées sur la séquence de référence ENSP00000252826 de la base de données Ensembl (ou Q8TD43-1 de la base de données Expasy, ENSP00000252826 et Q8TD43-1 ayant la même numérotation). Les substitutions indiquées dans le tableau 1 ci-dessous, ainsi que toute substitution équivalente en terme fonctionnel sur l'activité du canal TRPM4, représentent des mutations TRPM4 tout particulièrement avantageuses dans le cadre du procédé de dépistage de la présente invention Tableau 1 Position Changement Position Changement base base acide aminé acide aminé 490 C => T 164 Arg => Trp 1294 G => A 432 Ala => Thr 2209 G => A 737 Gly => Arg 2317 T => A 773 Phe => Ile 2531 G => A 844 Gly => Asp Le procédé selon l'invention permet également de dépister l'existence d'une cardiopathie ou la prédisposition à une cardiopathie par l'identification d'au moins une délétion, insertion ou un remaniement, et concerne en particulier au moins 1 nucléotide, au moins 15, au moins 30 nucléotides dans la séquence du gène TRPM4. De préférence, une telle délétion ou insertion entraîne un changement de cadre de lecture lors de la traduction, et/ou la délétion ou l'insertion d'acides aminés. Lorsque le dépistage selon le procédé de l'invention concerne la mise en évidence d'une délétion qui conduit à la suppression d'acides aminés, celle-ci est de préférence située dans la région de la protéine qui est en amont du premier domaine transmembranaire, et en particulier entre le site PKC Thr356 et le premier domaine transmembranaire. Selon une variante particulièrement préférée, le procédé de dépistage repose sur l'identification d'une délétion, et celle-ci intervient de préférence dans l'exon 11 du gène TRPM4. De manière avantageuse, le procédé de dépistage selon l'invention peut reposer sur l'identification d'une seule délétion, de préférence d'une délétion de 36 nucléotides, et de manière encore préférée d'une délétion des nucléotides c.1459-1494 de l'exon 11 du gène TRPM4 qui conduit à la suppression de 12 acides aminés (positions 487-498). Des mutations TRPM4 différentes peuvent être identifiées chez des patients atteints de (ou prédisposés à) la même cardiopathie. A l'inverse, les mêmes mutations TRPM4 peuvent être identifiées chez des patients atteints de (ou prédisposés à des) cardiopathies différentes. Selon une variante de réalisation du procédé de dépistage actuellement préférée, la ou les substitutions des bases 490 et/ou 1294 et/ou 2531 dans la séquence du gène TRPM4 permettent le dépistage de BCCs. Dans ce cas, le dépistage peut de préférence être réalisé à l'aide de l'identification de l'une quelconque de ces substitutions particulières ou équivalentes en terme fonctionnel sur l'activité du canal TRPM4. Selon une autre variante de réalisation du procédé de dépistage actuellement préférée, les substitutions des bases 1294 et/ou 2209 et/ou 2317 et/ou 2531 et/ou la délétion de 36 nucléotides dans l'exon 11 de la séquence du gène TRPM4 permettent le dépistage d'un syndrome de Brugada. Dans ce cas, le dépistage peut de préférence être réalisé à l'aide de l'identification de l'une quelconque de ces substitutions ou de cette délétion particulières ou équivalentes en terme fonctionnel sur l'activité du canal TRPM4. Les mutations TRPM4 associées à l'existence ou à la prédisposition à une cardiopathie, associée ou non à un risque de mort subite, conduisent à une diminution ou à une augmentation du fonctionnement du canal codé par le gène TRPM4, et de manière particulièrement préférée à une augmentation du fonctionnement de ce canal, et en particulier une augmentation d'environ 4 fois plus. Selon un deuxième aspect, la présente invention a pour objet l'utilisation de réactifs spécifiques de détection in vitro de mutations) TRPM4 pour déterminer l'existence d'une cardiopathie ou la prédisposition à une cardiopathie. Dans ce cadre, les réactifs spécifiques à utiliser sont ceux tel que défini précédemment. En particulier, les réactifs spécifiques de TRPM4 mentionnés dans le Tableau 2 peuvent avantageusement être utilisés dans le cadre de l'invention. L'utilisation selon l'invention permet de préférence de dépister la présence ou la prédisposition au syndrome de QT long, aux blocs de conduction cardiaques (BCC), à la cardiomyopathie dilatée, au syndrome de Brugada, à la maladie du noeud sinusal, à la fibrillation auriculaire, etc. De préférence, l'utilisation de réactifs spécifiques pour détecter la présence de mutations TRPM4 permet de mettre en évidence des cardiopathies qui sont associées à un risque de mort subite. Parmi ces cardiopathies, on peut par exemple mentionner le syndrome de QT long, les blocs de conduction cardiaques (BCC), la cardiomyopathie dilatée, le syndrome de Brugada, la maladie du noeud sinusal, etc. La détection de mutations TRPM4 à l'aide de ces réactifs spécifiques permet ainsi de dépister l'existence d'une cardiopathie qui peut être responsable de mort subite chez un nouveau-né ou la prédisposition à une telle cardiopathie. Dans ce cadre particulier, l'utilisation de ces réactifs spécifiques permet donc de mettre en évidence l'existence d'une cardiopathie ou la prédisposition à celle-ci, mais également de déterminer une prédisposition à un risque de mort subite. Selon un mode de réalisation particulièrement avantageux, l'utilisation de ces réactifs spécifiques permet de déterminer la présence ou la prédisposition à un BCC et/ou un syndrome de Brugada. En particulier, l'utilisation de réactifs spécifiques permettant de détecter les substitutions mentionnées dans le Tableau 1 et la délétion particulière de 36 nucléotides dans l'exon 11 définie ci-dessus ou au moins l'une de ces mutations constitue une variante de réalisation particulièrement avantageuse. Selon un troisième aspect, la présente invention a pour objet un kit de dépistage de l'existence de cardiopathies ou de la prédisposition à des cardiopathies, comprenant : - des réactifs spécifiques de la séquence nucléotidique ou protéique de TRPM4 permettant la détection de mutation(s), - les instructions pour effectuer la comparaison avec la séquence de référence, éventuellement des réactifs et/ou dispositifs pour réaliser l'extraction du matériel biologique à partir d'un échantillon biologique susceptible de contenir le gène TRPM4 ou ses produits d'expressions, et éventuellement un échantillon contenant la séquence de référence TRPM4. Les réactifs et/ou dispositifs permettant de réaliser l'extraction du matériel biologique seront bien entendu adaptés au type de matériel biologique considéré (génomique ou protéique notamment). En particulier, le kit selon l'invention comprend avantageusement les réactifs spécifiques de TRPM4 mentionnés dans le Tableau 2. Le kit de l'invention permet de préférence de dépister la présence ou la prédisposition au syndrome de QT long, aux blocs de conduction cardiaques (BCC), à la cardiomyopathie dilatée, au syndrome de Brugada, à la maladie du noeud sinusal, à la fibrillation auriculaire, etc. Selon un mode de réalisation particulièrement avantageux, le kit de l'invention permet de dépister des cardiopathies qui peuvent être responsables de mort subite, telles que par exemple le syndrome de QT long, les blocs de conduction cardiaques (BCC), la cardiomyopathie dilatée, le syndrome de Brugada, la maladie du noeud sinusal, etc. Le kit selon l'invention permet en particulier de déterminer l'existence ou la prédisposition à un BCC et/ou à un syndrome de Brugada. La détection de mutations TRPM4 à l'aide du kit de l'invention permet ainsi de dépister l'existence ou la prédisposition à une cardiopathie qui peut être responsable de mort subite, et en particulier chez un nouveau-né. Dans ce cadre particulier, le kit selon l'invention permet donc de mettre en évidence la présence ou la prédisposition à une cardiopathie, mais également de dépister une prédisposition à un risque de mort subite. Selon un mode de réalisation préféré, le kit selon l'invention contient des réactifs spécifiques de TRPM4 pour détecter les substitutions mentionnées dans le Tableau 1 et la délétion particulière de 36 nucléotides dans l'exon 11 définie ci-dessus ou au moins l'une de ces mutations. La présente invention sera décrite plus en détails dans les exemples non limitatifs qui suivent et qui se réfèrent aux figures annexées dans lesquelles : La Figure 1 représente des exemples d'ECG de diagnostic de syndrome de Brugada de type 1 et de type 2 tels que publiés dans l'article Circulation 2005 ; 111 : 659-670. La Figure 2 est une représentation schématique des différents domaines de la protéine TRPM4. La Figure 3 représente le pédigrée simplifié de la famille libanaise L1 (Figure 3A), de la famille française F1 (Figure 3B) et de la famille française F2 (Figure 3C) dont certains membres sont atteints de BCC. Sur les figures 3A, 3B et 3C, les femmes sont symbolisées par des ronds, les hommes par des carrés. Le symbole correspondant est barré obliquement si la personne est décédée. Sur ces figures, les individus sont représentés avec différentes légendes en fonction du statut par rapport à la maladie (BAV, BBD, HBAG, HBPG pour Hémibloc de Branche Postérieur Gauche ou indéterminé pour les individus dont les données à l'électrocardiogramme sont intermédiaires entre normal et bloc cardiaque). Une étoile ou un rond en haut à droite de chaque symbole indique respectivement les individus porteurs et non-porteurs de mutation TRPM4. La Figure 4 représente l'alignement des séquences peptidiques de TRPM4 chez certains Vertébrés, pour la région contenant la mutation p.Arg164Trp (Figure 4A), la région contenant la mutation p.Ala432Thr (Figure 4B), la région contenant la mutation p.Gly844Asp (Figure 4C), la région contenant la mutation p.Gly737Arg (Figure 4D) et la région contenant la mutation p.Phe773I1e (Figure 4E). EXEMPLES Les études conduisant aux résultats indiqués ci-dessous ont été faites après consentement informé des patients et de leurs apparentés. Les patients ont été évalués par un examen physique et un électrocardiogramme. Les contrôles (anonymes) ont été obtenus de l'Etablissement Français du Sang. EXEMPLE 1 : DETECTION DE MUTATIONS TRPM4 CHEZ DES PATIENTS. ATTEINTS DE BCC Les populations d'individus étudiés sont les suivantes : trois familles dont une famille libanaise L1 et deux familles françaises F1 et F2 dont certains membres sont atteints de BCC (malades), et 20 - des individus sains (contrôles). Des prélèvements sanguins ont été effectués sur chaque individu (malades ou contrôles) après recueil de leur consentement éclairé. Détection de mutations TRPM4 : L'ADN a été extrait à partir de lymphocytes par des méthodes standards. Les 25 amorces PCR ont été choisies avec le programme Primer3 pour amplifier les 25 exons de TRPM4 avec les jonctions introniques. Plusieurs exons ont été amplifiés par amplicons chevauchants. Les échantillons d'ADN ont été amplifiés avec les paires d'amorces du Tableau 2 dans un analyseur Rotor-Gene 6000 (Corbett Life Science). Plusieurs 30 amplicons ont été obtenues avec des programmes utilisant la technique � touchdown � (Tableau 2). Les amplifications ont été réalisées dans un volume final de 20 microlitres contenant 10 ng d'ADN génomique, 100 microM de chacun des dNTP, 0,25 microM de chacune des amorces, du MgCl2 à la concentration indiquée dans le Tableau 2, dans le tampon 10X (200 mM Tris-HCI (pH 8,4), 500 35 mM KCI) ou dans le tampon d'amplification AMP (Invitrogen) (éventuellement complété avec une solution � enhancer � ENH (Invitrogen)) en fonction de l'amplicon considéré. Le cycle comprenait 2 min de dénaturation à 95°C, suivi par 45 cycles de dénaturation à 95°C pendant 10 sec, une extension à 72°C pendant 15 sec. La dernière étape de PCR était une procédure de dénaturation-renaturation comprenant 1 min à 95°C suivi par une diminution de température jusqu'à 40°C à 1°C/sec. Tous les amplicons ont été amplifiés avec la Taq polymérase Platinum et le colorant STYO-9 (Invitrogen), Une analyse � High Resolution Melting � (HRM) a été réalisée sur l'analyseur Rotor-Gene 6000 (Corbett Life Science). Les courbes de fusion ont été générées pour une rampe entre 70°C et 99°C avec une progression de 0,1°C/sec. Les courbes de fusion ont été normalisées et analysées grâce à une fonctionnalité automatique de groupage fournie par le logiciel du Rotor-Gene 6000. Une fois normalisées, les courbes de fusion ont été analysées manuellement pour distinguer le bruit de fond de vraies variations. Les produits de PCR ayant un profil de fusion divergeant des contrôles ont été purifiés avec le � MultiScreen-PCR Plates � (Millipore, Bedford, MA) et séquencés directement sur les 2 brins avec le kit de séquençage BigDye Teminator v.3.1 Cycle Sequencing Kit (Applied Biosystems, Forster City, CA). Les produits de séquençage ont été purifiés avec le kit � Montage SEQ96 Sequencing Reaction Clean Up � (Millipore) et chargés sur un séquenceur automatique ABI 3100 (Applied Biosystems). La détection des mutations chez les apparentés et les contrôles a été réalisée par PCR suivie de digestion enzymatique. La mutation p.Arg164Trp (CGG>TGG) fait disparaître un site de restriction Eagl. La mutation p.Ala432Thr (GCC>ACC) fait disparaître un site de restriction Hgal. La mutation p.Gly844Asp (GGC>GAC) fait disparaître un site de restriction Apal. Après amplification de la région correspondante, l'ADN amplifié a été purifié par précipitation à l'éthanol et resuspendu dans le tampon approprié pour digestion par l'enzyme de restriction ad hoc. Les échantillons d'ADN ont ensuite été soumis à une électrophorèse sur gel à 1,2% d'agarose dans un tampon TAE. llalalo e316 6 6100x161 626610616222613360 alall000l300 55 2 6 2 216 6261011616o616a5me5 1ao2616e2313a261aoo6 oea paaaa161a10166et 22265 el.5252oo555516 1611a1636611aa1111e3 13162222335ee3a61612 10130612262661361111 le 66111e62666661610 016103x1233011031021 101003226121a1333331 116162336616616610 031201063132233133 161101x12000 611000 21 0100100016426e36ea14 62661266661162662x2 01001016123331a6e310 1661e611e61a31331361 22166e666125p662223 25262122660316615156 131aa613oo3010101116 161613001030331613 1623361611032666262 2261ea62662aelalaaaa 131x33666610226202 26626616222661066213 SZxa i7zxa �Zxa ZZxa T Zxa OZxa 6Txa gTxa LTxa 9Txa STxa LTxa LTxa Zlxa gTTxa 211x0 OTxa 60x0 g80xa e80xa LOxa 90xa 50x0 70xa gLOx0 2�OXa ZOxa T 0xa SUaS aDJOwe Sa3.JOwe amanbas WON z nealgel W21H 89 XOT � 6t'Z 8T 62aaeoo66223266223 OZ W2iR 89 dNV � L-P Z OZ oeoble5e66p66e62a22 8T kW H SS-S9 dKI V � L9T OZ 26201612266266512266 OZ Mi H 89 dNV � 00� 8T D52a110a613332652D OZ Wei H 09-0L dNV � Z8Z OZ 0013111212100oo166aa OZ Wei H S9 dWd � L6Z IZ 626261201626220116666 OZ W2i H �9 X0T � SLZ OZ e56262ape5262ae6666 6T W2i H SS-S9 dNV � 8�Z 6T 0a1612100011p33a20 OZ a5e5uanbas+2iDd 9S dNV � 98S 6T 6261266226620666162 OZ W2iH 09-OL dklV � 11Z OZ 61022610o1612a2o661a OZ Wei H 09-0L dNd � 8TZ OZ a626peee6e65ee55ea6 61 [Ali H 09 d Wti � OSZ OZ e3a16262000110212a00 OZ WUH 09 dNV � 9-PZ 6T 1010333312aea611626 OZ NU H 09 d VIV L 9�Z 61 a 612555eoe662221x06 8T NUH 09-0L dNV L 08Z OZ 001221612613a312aaaa 8T W2i H 89 X0T L Z6Z 81 662111100000106206 OZ W2UH S9 dk`d L 9ZZ OZ 01001000161262a62o11 OZ W2iH �9 X01 � 81Z OZ 21x16165ee 552006620 6T W2iH Z9 d Wb' � 9TZ OZ le 55eDpeompJDll6 OZ W2i H 89 X0T L 00� 6T 6200113161626eoa665 OZ W2i H 09 d LAI d L 01Z OZ 1266ea6622e262a16a23 OZ W2iH 89 dNV � 16� 6T 161166616x166616116 OZ W2iH 89 dNV L Pfi� OZ le22225b66epaa6e6De OZ W2i H 09-0L dWb' L 86Z 8T 16al6eaeaaaeaa5625 8T W2i H SS-S9 HNG+dWV S'b 00� OZ 612666eae52eaa626262 6T W2i H Z9 d hW � 8ZZ 6T 0120662163313106200 OZ Wei H S9 &IV � 8ZZ 6T 6226666122662001626 6T a525uanbas+2{Dd 99 XOT � �6� OZ 12130161a116200a2066 OZ (Do) uog2ppgAq,p (wu) uoD!Idw2 SUa5-1U2 ODJOW2 sapoLI9 a.inl2aadwal uodwel [?IJ6W] al el 011121 aauan bas 011!21 Lî Dans la famille L1, une mutation faux-sens a été trouvé dans l'exon 11 (c.1294 G>A) changeant une Alanine en Thréonine en position 432. Cette mutation a été trouvée chez tous les membres de la famille atteints de BCC (Figure 2A) et chez plusieurs individus avec un ECG normal. Par contre, cette mutation n'a pas été trouvée sur 150 ADN contrôles soit 300 chromosomes normaux de même origine ethnique. Cet acide aminé Alanine est très conservé parmi les vertébrés comme il est montré sur la Figure 4A. Deux mutations faux-sens ont été trouvées, une dans la famille F1 dans l'exon 5 (c.490 C>T, p.Arg164Trp) et dans la famille F2 dans l'exon 17 (c.2531 G>A, p.Gly844Asp). Ces mutations hétérozygotes ont été trouvées chez tous les patients atteints de chaque famille et chez plusieurs apparentés ayant un ECG normal (Figures 3B et 3C). Les acides aminés Arg164 et Gly844 sont conservés chez les vertébrés (Figures 4B et 4C). Il est important de noter que Gly844 est situé dans un segment de TRPM4 qui n'a pas d'équivalent dans les autres TRPMs y compris TRPM5 qui est le plus proche membre de TRPM4 dans la famille TRPM. La mutation de l'acide aminé Arg164 observée dans les familles françaises n'a été trouvée dans 150 ADN contrôles soit 300 chromosomes d'origine ethnique identique. En revanche, la mutation de l'acide aminé Gly844 a été retrouvé dans 1 ADN contrôle parmi 265 contrôles testés. En conséquence, ces résultats démontrent que la présence de mutations TRPM4 est impliquée dans les BCC isolés. EXEMPLE 2 : DETECTION DE MUTATIONS TRPM4 CHEZ DES PATIENTS ATTEINTS DU SYNDROME DE BRUGADA Une cohorte de 30 patients avec un syndrome de Brugada a été analysée à la recherche de mutation(s) dans le gène TRPM4, comme indiqué à l'exemple 1. Une délétion hétérozygote de 36 nucléotides a été détectée dans l'exon 11 de TRPM4 chez un patient de sexe masculin. Bien que la délétion ne change pas le cadre de lecture, elle diminue la séquence de la protéine TRPM4 de 12 acides aminés. Cette délétion génomique n'a jamais été observée sur 300 chromosomes contrôles. Deux mutations ont été observées chez un 2ème patient atteint du syndrome de Brugada. Il s'agit des mutations faux-sens hétérozygotes p.Gly737Arg (c.2209 G>A) et p.Phe773I1e (c.2389 T>A). La GIy737 est très conservée parmi les mammifères. L'arginine est chargée positivement et polaire contrairement à la glycine. La Phe773 est conservée seulement chez Pan troglodytes mais le changement d'un acide aminé aromatique par un acide aminé aliphatique est drastique. Aucune de ces deux mutations n'a jamais été observée sur les 150 ADN contrôles soit 300 chromosomes. Sur la base de ces résultats, la prévalence de mutations TRPM4 dans le syndrome de Brugada peut être estimée dans une gamme de 5 à 10 %, et plus particulièrement aux environs de 10 %. Des résultats complémentaires montrent par ailleurs que les mutations des bases 1294 et 2531 qui conduisent respectivement aux modifications d'acides aminés suivantes : Ala432Thr et Gly844Asp, sont également retrouvées chez des patients atteints du syndrome de Brugada. Ces résultats sont en accord avec le fait qu'un BDD est souvent observé dans le syndrome de Brugada. L'ensemble de ces données, issues d'études réalisées sur plusieurs familles dont certains membres souffrent de maladies cardiaques différentes, démontrent que la présence de mutations TRPM4 entraîne des anomalies cardiaques telles que des BCCs ou un syndrome de Brugada, qui sont dangereuses puisqu'elles sont notamment associées à un risque de mort subite. En particulier, ces résultats suggèrent que parmi les nombreux cas de BCCs dont l'évolution est en générale bénigne, un sous-groupe correspondant à une mutation de TRPM4 est associé à un risque de mort subite. Ces résultats permettent ainsi de définir la présence de mutations TRPM4 comme un facteur génétique de prédisposition à la mort subite. Par conséquent, la détection de mutations TRPM4 selon l'invention permet de dépister par un simple test in vitro la présence de cardiopathies ou d'une prédisposition à des cardiopathies, dont certaines peuvent également être responsables de mort subite. La prise en charge de ces personnes est ainsi facilitée, ce qui permet de pouvoir mettre en place un suivi basé sur des examens cardiologiques et éventuellement une thérapeutique. De plus, dans le cas particulier de cardiopathies qui peuvent être responsables de mort subite, le dépistage selon le procédé de l'invention permet en outre de pouvoir mettre en place les mesures de prévention du risque de mort subite de manière précoce. REVENDICATIONS1. Procédé de dépistage in vitro de la présence ou de la prédisposition à des cardiopathies, comprenant les étapes consistant à - extraire le matériel biologique à partir d'un échantillon susceptible de contenir le gène TRPM4 ou ses produits d'expression, - détecter la présence de mutation(s) dans la séquence TRPM4 dudit matériel biologique à l'aide de réactifs spécifiques de TRPM4, ladite présence étant mise en évidence par comparaison avec la séquence de référence TRPM4. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il permet de dépister l'existence de ou la prédisposition à des cardiopathies qui peuvent être responsables de mort subite. 3. Procédé selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisé en ce qu'il permet de dépister le syndrome de QT long, les blocs de conduction cardiaques (BCC), la cardiomyopathie dilatée, le syndrome de Brugada, la maladie du noeud sinusal, une cardiopathie qui peut être responsable de la mort subite du nouveau-né. 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il permet de dépister des blocs de conduction cardiaques (BCC) et/ou un syndrome de Brugada. 5. Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que les mutations qui sont détectées consistent en ou résultent d'une ou plusieurs substitution(s) d'au moins une base, ou bien une ou plusieurs délétion(s), insertion(s), ou remaniement(s) dans la séquence TRPM4. 6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que la ou les substitution(s) indui(sen)t une ou des modifications) d'acides aminés dans la partie N-terminale de la protéine TRPM4 située en amont de la première région transmembranaire et/ou des acides aminés de la partie de la protéine située entre les régions transmembranaires 1 et 2 et/ou 2 et 3 de la protéine TRPM4. 7. Procédé selon l'une des revendications 5 et 6, caractérisé en ce que la ou les substitution(s) concerne(nt) les bases 490 et/ou 1294 et/ou 2209 et/ou 2317 et/ou 2531 dans la séquence du gène TRPM4. 8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que la ou les modification(s) d'acides aminés consistent en la substitution de l'acide aminé Arg en position 164, et/ou Ala en position 432, et/ou Gly en position 737 et/ou Phe en position 773 et/ou Gly en position 844. 9. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que la ou les délétion(s), insertion(s) ou remaniement(s) concernent au moins 1, au moins 15, au moins 30 nucléotides dans la séquence du gène TRPM4, 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce qu'il permet de dépister un BCC par la présence de substitution(s) de base 490 et/ou 1294 et/ou 2531 dans la séquence du gène TRPM4. 11. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé en ce qu'il permet de dépister un syndrome de Brugada par la présence de substitution(s) de base 1294 et/ou 2209 et/ou 2317 et/ou 2531 et/ou par la présence d'une délétion de 36 nucléotides dans l'exon 11 de la séquence du gène TRPM4. 12. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le type de matériel biologique utilisé est choisi parmi l'ADN génomique, l'ARN et les protéines. 13. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que l'échantillon est un fluide biologique tel que du sang, ou un tissu. 14. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que les réactifs spécifiques utilisés sont ceux indiqués dans le Tableau 2. 15. Utilisation de réactifs spécifiques de détection in vitro de mutation(s) TRPM4 pour déterminer l'existence d'une cardiopathie ou la prédisposition à une cardiopathie. 16. Utilisation selon la revendication 15, caractérisée en ce qu'elle permet le dépistage de cardiopathies associées à un risque de mort subite. 17. Utilisation selon l'une des revendications 15 et 16, pour déterminer la présence ou la prédisposition à un BCC et/ou à un syndrome de Brugada. 18. Utilisation selon l'une des revendications 15 à 17, caractérisée en ce que les réactifs spécifiques utilisés sont ceux indiqués dans le Tableau 2. 19. Kit de dépistage de l'existence de cardiopathies ou de la prédisposition à des cardiopathies, comprenant : des réactifs spécifiques de la séquence nucléotidique ou protéique de TRPM4 permettant la détection de mutation(s), - les instructions pour effectuer la comparaison avec la séquence de référence, - éventuellement des réactifs et/ou dispositifs pour réaliser l'extraction du matériel biologique à partir d'un échantillon biologique susceptible de contenir le gène TRPM4 ou ses produits d'expressions, etéventuellement un échantillon contenant la séquence de référence TRPM4. 20. Kit selon la revendication 19, pour déterminer l'existence ou la prédisposition à un BCC et/ou àun syndrome de Brugada. 21. Kit selon l'une des revendications 19 et 20, caractérisé en ce que les réactifs spécifiques sont ceux indiqués dans le Tableau 2.