Brevet FR2942408A1 — publié le 20100827

Hydrogel hétérogène hybride et son utilisation thérapeutique. Domaine technique de l'invention L'invention concerne un hydrogel hétérogène hybride . La présente invention concerne également un hydrogel hétérogène hybride pour une utilisation thérapeutique. État de la technique On connaît dans l'art antérieur, des hydrogels polymères dérivés de méthacrylamide N-substitué ou d'acrylamide N-substitué et d'un matériau copolymérisable. Ce dernier est décrit comme étant un dérivé d'un sucre complexe, un dérivé d'un peptide d'adhérence à un tissu ou un dérivé d'un conjugué polymère couplé à des anticorps dirigés contre des dérivés lipidiques. Ces hydrogels polymères hétérogènes, leur procédé de préparation et leurs propriétés ont été divulgués dans la demande de brevet WO98/16266. Ils présentent une structure macroporeuse et une surface spécifique caractéristiques qui favorisent l'accumulation de biomasse et les interactions avec les cellules ou les molécules des différents tissus vivants. Leur champ d'application couvre notamment le domaine médical. Plus particulièrement, ils peuvent être utilisés comme matrice de régénérescence tissulaire pour des applications thérapeutiques notamment pour le traitement de lésions ou de malformations congénitale de zones du cerveau ou de la moelle épinière. Toutefois, leur utilisation reste limitée à certains organes compatibles avec la structure chimique spécifique de l'hydrogel. Par ailleurs, il est connu que les chaînes polyéthers améliorent la biocompatibilité des matériaux. Des hydrogels modifiés par le poly(oxyéthylène) (PEO) sont utilisés pour des applications biomédicales du 2 fait de leur caractère non toxique et non thrombogène. La présence de fonctions terminales hydroxyle des chaînes PEO offre, également, la possibilité de fonctionnaliser aisément l'hydrogel, en particulier, de greffer des molécules thérapeutiquement actives. Le document WO98/18494 décrit, en particulier, un procédé de préparation de macromolécules à structure d'étoile à chaîne Poly(oxyéthylène) (PEO) ayant des groupements susceptibles d'être fonctionnalisés, par exemple, par des molécules biologiquement actives. i0 Le brevet US-B-6184313 divulgue également des dendrimères à base de silane ou carbosilane et leur procédé de préparation. Ces dendrimères ont une structure en étoile avec un noyau central de carbosilane, des branches dendritiques de Poly(oxyéthylène) (PEO) et des groupements réactifs greffés 15 aux extrémités des branches dendritiques. Les auteurs décrivent notamment la synthèse de dendrimères à branches PEO dont une des branches est fonctionnalisée par un radical méthacrylate. La fonction éthylénique du radical méthacrylate peut intervenir dans une réaction de polymérisation. Un copolymère utilisé pour le traitement de surface de polyméthylméthacrylate 20 est, par exemple, obtenu par copolymérisation du méthylméthacrylate avec un monomère dendrimère représenté à la figure 1, comportant quatre branches dendritiques PEO dont une fonctionnalisé par un radical méthylméthacrylate et un noyau central silane à pont hexanol. Ce copolymère favorise, notamment, la biocompatibilité du 25 polyméthylméthacrylate. La structure tétraédrique du silane contribue à créer des architectures en étoile avec un noyau central formé d'un ou de plusieurs silanes comme représenté, à titre d'exemple, à la figure 2 (structure à 13 Si). Plus récemment, Lutz et al., ont décrit dans l'article "Hydrogel networks of 30 poly(ethylene oxide) star-molecules supported by expanded polytetrafluoroethylene membranes : characterization, biocompatibility5 evaluation and glucose diffusion characteristics", (Macromolecular bioscience, 2004, n° 4, P.639-648), un hydrogel obtenu à partir d'un polymère à structure d'étoile ayant un noyau en poly(divinylbenzène) et à branche poly(oxyéthylène). Le procédé de préparation de l'hydrogel comporte le dépôt du polymère à structure d'étoile sur un substrat poreux de polytétrafluoroéthylène (EXPTFE) poreux puis la réticulation du polymère à structure d'étoile par irradiation avec un faisceau d'électrons. L'hydrogel ainsi obtenu présente une bonne imperméabilité au glucose qui laisse entrevoir la potentialité d'une application dans la conception de pancréas artificiels. Objet de l'invention L'invention vise à remédier aux inconvénients de l'art antérieur, notamment à améliorer les propriétés biomimétiques de l'hydrogel décrit dans la demande de brevet WO98/16266. L'invention a pour but de proposer un hydrogel hétérogène hybride présentant une structure poreuse spécifique, hautement absorbante et des propriétés mécaniques et chimiques permettant des champs d'applications très étendus notamment dans le domaine médical pour des traitements thérapeutiques du plus grand nombre possible de tissus vivants, d'organes et/ou de cellules. Un autre objet de l'invention est de proposer un hydrogel hétérogène hybride biocompatible capable d'interagir avec des molécules ou des cellules biologiques, nombreuses et variées, tout en conservant son caractère déformable et, une macrostructure et une porosité favorisant l'accumulation cellulaire de biomasse.30 4 Selon l'invention, ce but est atteint par le fait que l'hydrogel hétérogène hybride est un copolymère dérivé des monomères suivants : - un monomère dendrimère comportant un noyau central A, des branches dendritiques macromoléculaires de poly(oxyéthylène) (PEO) et au moins une des branches dendritiques fonctionnalisée par un radical acrylate ou méthacrylate, - un méthacrylamide N-substitué ou acrylamide N-substitué, et - un matériau copolymérisable bioactif choisi parmi le groupe consistant en un dérivé d'un sucre complexe, un dérivé d'un peptide d'adhérence à un tissu et un dérivé d'un conjugué polymère couplé à des anticorps dirigés contre des dérivés lipidiques. Description sommaire des dessins D'autres avantages et caractéristiques ressortiront plus clairement de la description qui va suivre de modes particuliers de réalisation de l'invention donnés à titre d'exemples non limitatifs et représentés aux dessins annexés, dans lesquels : 20 - La figure 1 représente la structure d'un dendrimère à noyau central carbosilane à quatre branches dendritiques PEO selon l'art antérieur. - La figure 2 représente la structure d'un dendrimère à noyau central carbosilane à seize branches dendritiques PEO selon l'art antérieur. 25 - Les figures 3 à 5 représentent une vue microscopique réalisée par MEB d'un hydrogel hétérogène hybride selon l'invention. 30 Description des modes de réalisation particuliers de l'invention L'hydrogel hétérogène hybride est défini comme étant un polymère réticulé insoluble dans les solvants, capable d'absorber une quantité importante d'eau. L'hydrogel hétérogène hybride gonfle dans l'eau et possède, à l'équilibre, une teneur en eau d'au moins 80%. Selon un mode de réalisation particulier, l'hydrogel hétérogène hybride est un copolymère dérivé d'au moins trois monomères : un monomère ~o dendrimère fonctionnalisé par un radical éthylénique, un monomère acrylamide et un matériau copolymérisable bioactif. Le matériau copolymérisable bioactif est choisi parmi le groupe comportant les dérivés, de préférence méthacryloyle ou méthacrylamide, d'un sucre 15 complexe, d'un peptide d'adhérence à un tissu et d'un conjugué polymère couplé à des anticorps dirigés contre des dérivés lipidiques. Le matériau copolymérisable bioactif peut être un dérivé, de préférence méthacryloyle ou méthacrylamide, d'un sucre complexe choisi, par exemple, 20 parmi la glucosamine, la N-acétyl-glucosamine, la N-diglycidyl-glucosamine, la N-acétylgalactosamine, l'acide N-acétylneuraminique (acide sialique) et l'acide polysialique. Le matériau copolymérisable bioactif peut être un dérivé, de préférence 25 méthacryloyle ou méthacrylamide, d'un peptide d'adhérence à un tissu choisi parmi des oligopeptides d'adhérence à un tissu contenant des séquences d'acides aminés telles que Arg-Gly-Asp, Ile-Lys-Val-Ala-Val, Ala-His-Ala-Val-Ser-Glu, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, des dérivés oligopeptides de molécules de différenciation tissulaire, par exemple, des protéines 30 morphogénétiques osseuses. Le matériau copolymérisable bioactif peut être un dérivé, de préférence méthacryloyle ou méthacrylamide, d'un conjugué polymère couplé à des anticorps contre la myéline et ses dérivés lipides associés aux axones. Le monomère acrylamide est, avantageusement, un méthacrylamide N-substitué ou acrylamide N-substitué. Le méthacrylamide N-substitué est, de préférence, choisi parmi le groupe consistant en du N-monoalkylméthacrylamide, N,N-dialkylméthacrylamide, ~o N-hydroxyalkylméthacrylamide, préférentiellement le N-(2-hydroxypropyl)méthacrylamide (HPMA), N-alkyl, N-hydroxyalkylméthacrylamide, et le N,N-dihydroxyalkylméthacrylamide. 15 L'acrylamide N-substitué est, de préférence, choisi parmi le groupe consistant en du N-monoalkylacrylamide, N-hydroxyalkylacrylamide, N,N-dialkylacrylamide, N-alkyl,N-hydroxyalkylacrylamide et N, N-dihydroxyalkylacrylamide. 20 Le monomère dendrimère comporte un noyau central A et des branches dendritiques macromoléculaires de poly(oxyéthylène) (PEO). Au moins une des branches dendritiques PEO est fonctionnalisée, avantageusement en position terminale, par un radical éthylénique apte à participer à la copolymérisation. Les autres branches dendritiques sont, de préférence, 25 terminées par une fonction hydroxyle. Elles peuvent également être fonctionnalisées avant copolymérisation par d'autres fonctions comme des fonctions esters ou amide. Le radical éthylénique est, avantageusement, un radical acrylate ou méthacrylate. L'architecture en étoile du dendrimère permet d'introduire dans l'hydrogel une géométrie variable multifonctionnelle 30 pour répondre de façon spécifique aux interactions multiples envisagées avec d'autres matériaux. 7 Les groupements fonctionnels hydroxyle dans l'hydrogel hétérogène hybride peuvent être modifiés en attachant des entités, par exemple, des agents bioactifs tels que des polypeptides, des principes actifs, des ligands, des 5 groupements polymérisables ou des oligosaccharides. Selon un mode de réalisation particulier, le noyau central A est un groupement choisi parmi un carbosilane, un polycarbosilane, un polycarbosilane à architecture d'étoile, ou un groupement répondant à la io formule (1) suivante : -(CH2)nùSiù (CH2)n- (1) où n est un entier compris entre 1 et 20, de préférence égal à 6. 15 Selon une variante, le noyau central A est un poly(divinylbenzène). Selon un mode de réalisation préférentiel, le monomère dendrimère répond à la formule (2) suivante : 20 (CH2 = CR-CO-O-(CH2CH2O)Z),,ù Aù(O-(CH2CH2O)Z,ùH )X (2) Dans laquelle, R est H ou CH3, X et Y sont des entiers compris entre 1 et 100 et la somme X+Y est un 25 multiple de 4, et Z et Z' sont identiques ou différents et compris entre 1 et 100, et A étant, de préférence, un carbosilane, un polycarbosilane, un polycarbosilane à architecture d'étoile, ou un groupement répondant à la formule (1). 30 8 Selon un autre mode de réalisation préférentiel, le monomère dendrimère répond à la formule (3) suivante : .((CH2),-O-(CH2CH2O)z-H )x (3) (CH2),-0-(CH2CH2O)z-CO-CR = CH2) Y Dans laquelle : 10 R est H ou CH3, n étant un entier compris entre 1 et 20, de préférence égal à 6, Z et Z' sont identiques ou différents et compris entre 1 et 100, X est égal à 1, 2 ou 3 et, Y répond à la formule Y=4-X. 15 Avantageusement, le monomère dendrimère est fonctionnalisé par un radical méthylméthacrylate et possède quatre branches dendritiques de PEO et un noyau central A silane à pont hexanol c'est-à-dire ayant une structure de formule (3) avec R=CH3, n=6, X=3, Y=1, et Z=Z'. Pour des raisons de clarté, 20 nous identifierons ce monomère dendrimère par la notation Si-PEO4-MMA. La copolymérisation est une copolymérisation radicalaire qui comporte les trois monomères décrits ci-dessus c'est-à-dire le monomère dendrimère, le méthacrylamide N-substitué ou acrylamide N-substitué et le matériau 25 copolymérisable bioactif et avantageusement, un agent de réticulation. La copolymérisation est, avantageusement, réalisée dans un solvant polaire mono ou bi-organique. Le solvant est, de préférence, du diméthylsulfoxyde (DMSO), de l'acétone, de l'éthanol ou un mélange DMSO/acétone ou acétone/éthanol. Avantageusement, la copolymérisation est réalisée dans un 30 mélange acétone/DMSO (93:7 v/v). Si 9 Les quantités et la proportion de chaque monomère peuvent varier selon les propriétés mécaniques et chimiques désirées. Le rapport molaire entre le dendrimère et le méthacrylamide N-substitué ou acrylamide N-substitué est, de préférence, inférieur ou égal à 0,5 %, avantageusement, inférieur ou égal à 1 %. Étant entendu que le rapport molaire est égal à n dend./n(MA ou A) x100, avec n dend correspondant au nombre initial de moles de monomère dendrimère et n(MA ou A) au nombre initial de moles de méthacrylamide N-substitué ou acrylamide N-substitué. Les propriétés mécaniques et chimiques de l'hydrogel peuvent également être ajustées en greffant, sur les terminaisons hydroxyles libres des branches dendritiques, des fonctions aux propriétés spécifiques telles que des propriétés hydrophile, hydrophobe et/ou tensioactive. La fonction hydroxyle est facilement fonctionnalisable du fait du caractère nucléophile de son atome d'oxygène. Cette fonction est connue pour être facilement activée, par exemple, par traitement basique. Les propriétés intrinsèques de l'hydrogel hétérogène hybride peuvent également être modifiées en faisant varier le nombre de monomères dendrimères introduits dans le squelette hydrogel et la nature du noyau central A. Le nombre de branches dendritiques conditionne la solubilité de la macromolécule dans l'eau et les solvants organiques. Un procédé de préparation de l'hydrogel hétérogène hybride décrit ci-dessus, simple, facile à mettre en oeuvre et répondant aux exigences de pureté du domaine médical et chirurgical comporte les étapes successives suivantes : (a) dissolution d'un agent de réticulation et d'un initiateur de polymérisation à radicaux libres dans un solvant polaire pour former une solution, (b) additions successives du méthacrylamide N-substitué ou acrylamide N-substitué puis du matériau copolymérisable bioactif, le méthacrylamide N- substitué ou acrylamide N-substitué et le matériau copolymérisable bioactif étant dissouts préalablement dans un solvant polaire pour obtenir un mélange claire et/ou translucide, (c) addition du monomère dendrimère pour obtenir un mélange réactionnel, (d) polymérisation par chauffage du mélange réactionnel dans un récipient 5 scellé sous atmosphère inerte. L'agent de réticulation peut être un acrylamide comme du bisacrylamide de méthylène (MbisAA), des précurseurs de celui-ci ou des composés divinyliques tels que le divinylbenzène (DVB). L'initiateur de polymérisation à 10 radicaux libres est sélectionné parmi les initiateurs connus comme l'azobisisobutyronitrile (AIBN) ou le peroxyde de benzoyle. Afin d'éviter toute contamination, les étapes sont réalisées, avantageusement, sous atmosphère inerte et le matériel préalablement 15 stérilisé. L'hydrogel ainsi obtenu fournit une matrice de support pour piéger, séparer ou entraîner des molécules. L'hydrogel présente des propriétés élastiques et une macrostructure adaptées à une utilisation pour le traitement et/ou la 20 modification de surface. L'hydrogel trouve une application toute particulière dans le domaine médical pour une utilisation thérapeutique. L'hydrogel forme une matrice ayant des propriétés élastiques et une structure poreuse adaptées pour le traitement et 25 la réparation d'organes et/ou la régénérescence tissulaire. L'hydrogel peut, avantageusement, être utilisé dans l'ingénierie tissulaire pour la réparation d'organes par voie endogène ou exogène, pour le traitement de maladies neurodégénératives, de traumatismes du système nerveux et, plus généralement, des organes mous. Il peut être, notamment, utilisé comme 30 biomatériau implantable dans le cadre d'interventions chirurgicales ou matériau biocompatible d'implants. 11 Exemple 1 : PHPMA-PEO-Si 0,1% Un hydrogel noté PHPMA-PEO-Si 0,1% est obtenu par copolymérisation dans un solvant acétone/DMSO (93:7 v/v) d'un monomère dendrimère Si-PEO4-MMA ayant un poids moléculaire de 6220 g/mol c'est-à-dire ayant la structure de la formule (3) dans laquelle n=6, R=CH3; z=z'=32,5, X=3 et Y=1, du N-(2-hydroxypropyl)méthacrylamide (HPMA) avec un rapport molaire n de"d./n(MA 00A) x100 de 0,1% et du N-méthacryloyl-glucosamine. Pou obtenir un mélange réactionnel MR, on dissout dans un mélange acétone/DMSO (93:7 v/v), 1,2% en poids d'AIBN /poids d'HPMA (1,8mole%), 1,1% en poids de bisacrylamide de méthylène /poids d'HMPA (1 mole%) et 30% en poids de N-(2-hydroxypropyl)méthacrylamide (HPMA)/poids du mélange réactionnel. On ajoute ensuite une solution de 5% en poids de N-méthacryloyl-glucosamine /poids de l'HMPA dissoute dans du DMSO. Puis, on ajoute 1,28 % en poids de Si-PEO4-MMA /poids de l'HMPA, dissout dans du DMSO. On solubilise par agitation à 35°C ou, avantageusement, par sonication pour obtenir une solution claire et/ou translucide. La formation d'agrégats lors de la polymérisation, appelé également phénomène de "pop-corn" est ainsi évitée. On ajuste le poids final du MR avec de l'acétone pour obtenir 30% en poids de HMPA et un rapport volumique acétone/DMSO de 93:7. Le mélange réactionnel MR est homogénéisé délicatement, en agitant doucement ou par sonication. Le mélange est, de préférence, clair et/ou translucide. Le mélange réactionnel est ensuite injecté dans une ampoule de 2 ml par l'intermédiaire d'une seringue. Après avoir purgé le mélange avec de l'azote, on scelle l'ampoule à la flamme puis on immerge l'ampoule scellée dans un bain-marie à 50°C pendant 24 heures. Les produits résiduaires peuvent être éliminés selon la même procédure décrite dans la demande de brevet WO98/16266, par lavages des xérogels dans de l'éthanol ou un mélange éthanol/eau. Exemple 2 : PHPMA-PEO-Si 0,5% Un hydrogel noté PHPMA-PEO-Si 0,5% est obtenu par copolymérisation dans un solvant acétone/DMSO (93:7 v/v) selon le même procédé que l'exemple 1, avec le monomère dendrimère Si-PEO4-MMA ayant un poids moléculaire de 6220 g/mol et un rapport molaire de 0,5%. Exemple 3 : PHPMA-PEO-Si-acé 0,1% Un hydrogel noté PHPMA-PEO-Si-acé 0,1% est obtenu par copolymérisation dans un solvant acétone selon le même procédé que l'exemple 1, avec le monomère dendrimère Si-PEO4-MMA ayant un poids moléculaire de 6220g/mol et un rapport molaire de 0,1%. Exemple 4 : PHPMA-PEO-Si-0,5%MbisAA Un hydrogel noté PHPMA-PEO-Si-acé 0,5% est obtenu par copolymérisation dans un solvant acétone/DMSO (93:7 v/v) selon le même procédé que l'exemple 2, avec 0,55% en poids de MbisAA/poids de HMPA (0,5 mole%). Analyses des hydrogels PHPMA-PEO-Si 0,1%, PHPMA-PEO-Si 0,5%, PHPMA-PEO-Si-acé 0,1% et PHPMA-PEO-Si 0,5% -0,55MbisAA Analyse ESCA ("electron spectroscopy for chemical analysis") Les analyses ESCA ont été effectuées sur des échantillons PHPMA-PEO-Si lyophilisés avec un spectromètre ESCA commercialisé par la société KRATOS. Les résultats d'analyse ESCA de deux hydrogels sont répertoriés dans le tableau (1). Les résultats ESCA confirment le greffage du monomère dendrimère avec une diminution de la raie de carbone et d'hydrogène en faveur d'une augmentation des raies de silicium et d'oxygène. TABLEAU 1 Raie (%) PHPMA-PEO-Si 0,1% PHPMA-PEO-Si 0,5% Si 0,16 0,54 C 76,7 73,5 N 7,1 6,2 0 16 19,6 S 0,16 Analyse de porosimétrie au mercure Les analyses de porosimétrie au mercure ont été réalisées avec un porosimètre PoreSizer 9329, Micromeritics. Les mesures sont réalisées entre 0,1 Mpa et 206Mpa ce qui permet d'atteindre des tailles de pore comprises entre 6nm et 300�m. Les résultats de porosimétrie des quatre hydrogels sont répertoriés dans le tableau (2). TABLEAU 2 PHPMA-PEO-Si PHPMA-PEO-Si PHPMA-PEO-Si-acé PHPMA-PEO-Si- 0,1% 0,5% 0,1 % 0,5%MbisAA Surface 42 53,5 30 42 spécifique (m '/g) Diamètre 22 10 18 22,5 moyen de pores (�m) Densité du 1,2 1,7 1,0 1,3 squelette (g/ml) Porosité (%) 91 89 86 92 14 Les résultats de porosité montrent des caractéristiques poreuses similaires à celles des hydrogels décrits dans la demande de brevet WO98/16266 avec une surface spécifique d'au moins environ 50 m2/g correspondant aux domaines macroporeux (300-50 �m) et mésoporeux (50-0,006 �m) de l'hydrogel, un diamètre moyen de pores compris entre 10 �m et 35 �m et une porosité supérieure à 80%. De même, 50% du volume poreux des hydrogels correspond aux pores ayant des tailles de pore comprises entre 10 �m et 30�m. Par ailleurs, les résultats obtenus pour l'hydrogel PHPMA-PEO-Si-0,5%MbisAA montrent que la diminution du pourcentage molaire d'agent de réticulation permet d'obtenir des caractéristiques de pores similaires à celles de PHPMA-PEO-Si-0,1% et de compenser ainsi les effets induits par l'augmentation du rapport molaire. Analyse en microscopie électronique à balayage (MEB), Les mesures sont réalisées avec un appareil de MEB Jeol T300. Les images obtenues par MEB pour les hydrogels PHPMA-PEO-Si 0,1% (grossissement x480), PHPMA-PEO-Si 0,5% (grossissement x1500) et PHPMA-PEO-Si-acé 0,1% (grossissement x480), sont représentées respectivement aux figures 3, 4 et 5. On constate, au niveau macroscopique, que les hydrogels PHPMAPEO-Si 0,1% et PHPMA-PEO-Si-acé 0,1% se présentent sous forme de billes avec un aspect très similaire aux hydrogels décrits dans la demande de brevet WO98/16266. L'hydrogel PHPMA-PEO-Si 0,5% présente une structure poreuse également sous forme de billes mais plus petites de l'ordre de 0,1 �m. Son aspect est plus dense que le PHPMA-PEO-Si 0,1%. Ces résultats conduisent aux conclusions que les hydrogels polymères 30 hétérogènes de l'invention ont des propriétés mécaniques et une structure poreuse proches des hydrogels décrits dans la demande de brevet 15 WO98/16266. L'introduction d'une structure dendrimère pour un rapport molaire inférieur ou égal à 0,5%, de préférence inférieur ou égal à 0,1 %, affecte peu la structure poreuse de l'hydrogel et ses caractéristiques mécaniques. Par ailleurs, l'hydrogel présente l'avantage d'être multifonctionnel c'est-à-dire porteur de groupements réactifs pouvant être fonctionnalisés de façon contrôlée par différents radicaux. Ces radicaux peuvent, par exemple, provenir de peptides à courtes séquences tels que des oligopeptides d'interaction avec les récepteurs intégrines des cellules, par exemple, Arg-Gly-Asp, (RGD), Arg-Gly-Asp-Ser (RGDS), Ile-Lys-Val-Ala-Val (IKVAV), le neuropeptide NPY, peptide de 36 acides aminés ayant un effet neuroprolifératif sur les cellules embryonnaires et les cellules souches nerveuses ou à séquences d'hydrate de carbone comportant en position terminale un ou plusieurs acides sialiques. On peut, de même, envisager l'introduction d'oligomères conjugués à un ou plusieurs acides sialiques, par exemple du sialyllactose (Neu5Ac-a2,3-Gal-(31,4-Glc), ainsi que des oligosaccharides sulfatés comme le HNK1 (SO4-3-GIcA81-4GalI31-4GIcNac-R) ou des oligosaccharides fucosylés, par exemple le Fuc a(1-2)Gal. Ces radicaux peuvent également être choisis parmi des facteurs de croissance comme le BDNF ("Brain Derived Neurotrophic Factors"), FGF ("Fibroblast Growth Factors"), EGF ("Epidermal Growth Factor), IGF ("Insuline-like Growth Factor"), PDGF ("Platelet-derived Growth Factor"), VEGF ("Vascular Endothelial Growth Factor"), PIGF ("Placental Growth Factor"), NGF ("Nerve Growth Factor") et le TGF ("Transforming Growth Factor") ou des oligonucléotides. Les hydrogels dérivés acquièrent alors des propriétés biomimétiques 30 proches des propriétés des matrices extracellulaires naturelles des organes. Les interactions moléculaires et cellulaires sont ainsi favorisées notamment 16 avec les cellules d'organes et les cellules souches résidentes, en faveur de la réparation tissulaire. Le procédé permet de conserver les propriétés intrinsèques de l'hydrogel hétérogène hybride de la demande de brevet WO98/16266, inhérentes notamment à sa structure poreuse, tout en augmentant les potentialités de fonctionnalisation de l'hydrogel. 20 25 30 Revendications1. Hydrogel hétérogène hybride caractérisé en ce que ledit hydrogel est un copolymère dérivé des monomères suivants : - un monomère dendrimère comportant un noyau central A, des branches dendritiques macromoléculaires de poly(oxyéthylène) et au moins une des branches dendritiques fonctionnalisée par un radical acrylate ou méthacrylate, - un méthacrylamide N-substitué ou acrylamide N-substitué, et - un matériau copolymérisable bioactif choisi parmi le groupe consistant en un dérivé d'un sucre complexe, un dérivé d'un peptide d'adhérence à un tissu et un dérivé d'un conjugué polymère couplé à des anticorps dirigés contre des dérivés lipidiques. 2. Hydrogel selon la revendication 1, caractérisé en ce que le noyau central A est un groupement choisi parmi un carbosilane, un polycarbosilane, un polycarbosilane à architecture d'étoile ou un groupement répondant à la formule (1) suivante : -(CH2)nùSiù (CH2)n- (1) où n est un entier compris entre 1 et 20. 3. Hydrogel selon la revendication 1, caractérisé en ce que le noyau central A est un poly(divinylbenzène). 4. Hydrogel selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce le monomère dendrimère répond à la formule (2) suivante : ( CH2 = CR-CO-O-(CH2CH2O)z)vùAù(O-(CH2CH2O)zùH )X (2) dans laquelle, 17 18 R est H ou CH3, X et Y sont des entiers compris entre 1 et 100 et la somme X+Y est un multiple de 4, et Z et Z' sont compris entre 1 et 100. 5. Hydrogel selon la revendication 4, caractérisé en ce que le monomère dendrimère répond à la formule (3) suivante : 10 Si ((CH2)n-0-(CH2CH2O)2-H )X (3) ((CH2),-0-(CH2CH2O)Z,ùCO-CR = CH2) Y dans laquelle : R est Hou CH3, 15 n étant un entier compris entre 1 et 20, Z et Z' sont compris entre 1 et 100, X est égal à 1, 2 ou 3 et, Y répond à la formule Y=4-X. 20 6. Hydrogel selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que ledit méthacrylamide N-substitué est choisi parmi le groupe consistant en : - N-monoalkylméthacrylamide, - N-hydroxyalkylméthacrylamide, N-(2-hydroxypropyl)méthacrylamide (HPMA), 25 - N,N-dialkylméthacrylamide, - N-alkyl,N-hydroxyalkylméthacrylamide, - N,N-dihydroxyalkylméthacrylamide. 7. Hydrogel selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en 30 ce que ledit acrylamide N-substitué est choisi parmi le groupe consistant en : - N-monoalkylacrylamide, 15 19 - N-hydroxyalkylacrylamide, - N,N-dialkylacrylamide, - N-alkyl,N-hydroxyalkylacrylamide et, - N,N-dihydroxyalkylacrylamide. 8. Hydrogel selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que le monomère dendrimère et le méthacrylamide N-substitué ou acrylamide N-substitué ont un rapport molaire n dend./n(MA o,A) x100 inférieur ou égal à 0,5 °/0, n dend étant le nombre initial de moles de monomère dendrimère et n(MA 0,A) étant le nombre initial de moles de méthacrylamide N-substitué ou acrylamide N-substitué. 9. Utilisation thérapeutique d'un hydrogel hétérogène hybride, selon l'une quelconque des revendications 1 à 8. 10. Utilisation d'un hydrogel hétérogène hybride, selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, comme matrice pour le traitement et la réparation d'organes et/ou la régénérescence tissulaire. 20