Brevet FR2941463A1 — publié le 20100730

SOUCHES DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE A APTITUDES PHYTOSANITAIRES 10 DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention concerne des levures Saccharomyces cerevisiae utiles en tant que microorganismes antagonistes pour protéger les plantes contre divers agents pathogènes, notamment des 15 champignons. L'invention est adaptée au traitement de multiples variétés végétales. ARRIERE-PLAN TECHNIQUE Parmi les agents pathogènes des végétaux, les 20 champignons, responsables des maladies fongiques ou cryptogamiques, sont ceux qui ont le plus grand impact économique. Chaque espèce végétale est sensible à une ou plusieurs maladies principales, susceptibles de réduire fortement sa vigueur, sa croissance, et finalement la 25 quantité ou/et la qualité de la récolte. Divers paramètres influencent le développement des maladies comme les conditions de sol et la fertilisation, la sensibilité variétale, le mode de conduite (rotation, travail du sol, nombre de plantes ou plants par hectare, 30 système de taille...), ou surtout les conditions climatiques. Mais agir sur certains de ces paramètres ne suffit généralement pas à limiter suffisamment les dégâts occasionnés par les maladies. Aussi, pour se prémunir, le praticien souhaitant optimiser et sécuriser son rendement 35 traitera sa culture au moment opportun avec un produit phytosanitaire, souvent préventif. Le plus souvent les produits utilisés sont des produits chimiques, pour la plupart très efficaces, mais pouvant présenter des R: Brevets 29800'29842--090126-te xte_depot_doc- 26 janvier 2009 2 risques sanitaires pour les personnels qui les manipulent, et générant des résidus sur les productions traitées, dans les sols et les eaux. De plus, l'utilisation répétée de certaines matières actives fongicides agissant sur le même site métabolique sélectionne des souches résistantes à ces fongicides. Pour tenter d'y remédier, il est nécessaire de limiter le nombre d'utilisations annuelles de produits chimiques de la même famille, d'alterner les familles chimiques à modes d'action différents, et d'utiliser tous autres moyens défavorables à l'agent pathogène. Dans ce contexte, il existe donc un besoin réel et important de solutions alternatives contre les maladies des plantes. Idéalement, ces solutions doivent agir de manière différente de celle des fongicides chimiques existants, ne pas générer de résidus chimiques dans les récoltes et dans l'environnement, et être plus sûres et saines pour les opérateurs. De tels traitements doivent être utilisés, seuls ou en alternance et / ou combinaison avec les traitements chimiques actuels ou tout autre traitement, pour empêcher l'apparition ou limiter le développement de ces pathogènes, et de leurs souches résistantes, sur les végétaux, et limiter les risques pour l'homme et l'environnement. Dans ce contexte, il est connu d'administrer aux végétaux des microorganismes antagonistes vis-à-vis des agents pathogènes. Par exemple, des microorganismes proposés jusqu'ici en tant que microorganismes antagonistes comprennent la bactérie Bacilles subtilis, les champignons Trichoderma harzanium, Trichoderma viride, Coniothyrium minitans, Streptomyces griseoviridis, les levures Aureobasidium puliulans, Metschnikowia fructicola, Candida oleophila... L'article Biological control of postharvest diseases of fruits and vegetable par El Ghaouth et a1. (Applied Mycology and Biotechnology, vol.2, Agriculture and food production, Elsevier Science B.V., p.219-238) propose une revue des connaissances en matière de contrôle biologique des R:' Brevets 29800 2 9842--090 1 2 6-texte depot_doc- 26 janvier 2009 3 agents pathogènes sur les fruits, et propose plusieurs explications possibles pour le mode d'action des microorganismes antagonistes. Il a été également envisagé d'utiliser des levures Saccharomyces cerevisiae en tant que microorganismes antagonistes. Cependant, en général l'efficacité de ces levures a été jugée comme étant inférieure à celle d'autres microorganismes, voire dans certains cas nulle. A titre d'exemple, on pourra se reporter à l'article Role of competition for sugars in yeasts in the biocontrol if gray mold in apples, par A.B. Filonow (Biocontrol Science and Technology, 8:243-256, 1998), qui enseigne que Saccharomyces cerevisiae n'est pas efficace pour réduire l'infection des pommes par la pourriture grise, à la différence de Cryptococcus laurentii et de Sporobolomyces roseus. Or, les microorganismes antagonistes habituellement considérés comme les plus efficaces sont souvent isolés du milieu naturel, sont peu connus, et peuvent de ce fait exprimer des caractéristiques non souhaitées lors de leur développement ou lors de leur utilisation. On se heurte alors à des difficultés d'industrialisation, voire à des inconvénients vis-à-vis des humains ou de l'environnement. Il existe donc un besoin de mettre au point de nouvelles souches de microorganismes antagonistes, plus fiables d'un point de vue industriel, plus sûres d'un point de vue sanitaire et environnemental, et efficaces pour lutter contre les maladies provoquées par les agents pathogènes chez les végétaux. RESUME DE L'INVENTION L'invention concerne en premier lieu une souche de Saccharomyces cerevisiae, caractérisée en ce qu'elle est choisie parmi la souche n°I-3936 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM (Collection nationale de cultures de microorganismes, Institut Pasteur, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Paris Cedex 15, France), la souche n°I-3937 R: Brevets 2980029842--090126-texte_depa_d°c- 26 janvier 2009 4 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM, la souche n°I-3938 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM et la souche n°I-3939 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM. L'invention concerne également une composition phytosanitaire, comprenant des levures Saccharomyces cerevisiae choisies parmi la souche n°I-3936 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM, la souche n°I-3937 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM, la souche n°I-3938 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM et la souche n°I-3939 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM et les mélanges de celles-ci. Selon un mode de réalisation, la composition phytosanitaire comprend également un ou plusieurs agents de formulation et / ou au moins un adjuvant actif 15 supplémentaire. Selon un mode de réalisation, la composition phytosanitaire est une composition phytosanitaire concentrée, à formulation sèche solide ou liquide. Selon un mode de réalisation, la composition 20 phytosanitaire est une composition phytosanitaire prête à l'emploi à formulation sèche ou liquide, de préférence liquide. Selon un mode de réalisation, la composition phytosanitaire comprend une quantité de levures 25 Saccharomyces cerevisiae comprise entre 104 et 1011 ufc/mL, de préférence entre 105 et 1010 ufc/mL, de manière plus particulièrement préférée entre 5X105 et 5X109 ufc/mL. L'invention concerne également un procédé de 30 traitement ou de protection de végétaux contre des maladies provoquées par des agents pathogènes, comprenant la mise en contact des végétaux avec des levures Saccharomyces cerevisiae choisies parmi la souche n°I-3936 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM, la souche 35 n°I-3937 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM, la souche n°I-3938 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM et la souche n°I-3939 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM et les mélanges de celles-ci. R:.Brevets 29800 298422--090} 26-teste_depotdoc- 26 janvier 2009 Selon un mode de réalisation, les agents pathogènes sont choisis parmi les champignons, virus, bactéries, mycoplasmes, spiroplasmes, viroïdes et combinaisons de ceux-ci, de préférence parmi les champignons. 5 Selon un mode de réalisation, les agents pathogènes sont choisis parmi les microorganismes des genres Alternaria spp., notamment Alternaria solani et Alternaria alternata, Ascochyta spp., notamment Ascochyta fabae ou Ascochyta pinodella, Aspergillus spp., notamment Aspergillus niger et Aspergillus fumigatus, Botrytis spp., notamment Botrytis cinerea, Bremia spp., notamment Bremia lactucae, Cercospora spp., notamment Cercospora beticola, Cladosporium spp., notamment Cladosporium a11ii-cepae, Colletotrichum spp., notamment Colletotrichum graminicola, Cryptosporiopsis spp notamment Cryptosporiopsis malicorticis, Erysiphe spp., notamment Erysiphe graminis ou necator, Fusarium spp., notamment Fusarium oxysporum et Fusarium roseum, Gloeosporium spp., notamment Gloeosporium fructigenum, Guignardia spp., notamment Guignardia bidwellii, Helminthosporium spp., notamment Helminthosporium tritici-repentis, Marssonina spp., notamment Marssonina rosae, Monilia spp., notamment Monilia fructigena, Mycosphaerella spp., notamment Mycosphaerella brassicicola, Penicillium spp., notamment Penicillium expansum ou Penicillium digitatum, Peronospora spp., notamment Peronospora parasitica, Pezicula spp. notamment Pezicula malicorticis, Phragmidium spp., notamment Phragmidium rubi-idaei, Phytophtora spp., notamment Phytophtora infestans, Plasmopara spp. , notamment Plasmopara viticola, Podosphaera spp., notamment Fodosphaera leucotricha, Pseudocercosporella spp., dont Pseudocercosporella brassicae, Pseudoperonospora spp., notamment Pseudoperonospora cubensis, Pseudopeziza spp., notamment Pseudopeziza medicaginis, Puccinia spp., notamment Puccinia graminis, Pythium spp., Ramularia spp., notamment Ramularia betae, Rhizoctonia spp., notamment Rhizoctonia solani, Rhizopus spp., notamment R:'.Bresets 29800 29892--090126-teste depot_doc- 26 janvier 2009 6 Rhizopus nigricans et Rhizopus stolonifer, Rynchosporium spp., notamment Rynchosporium secalis, Sclerotinia spp., notamment Sclerotinia sclerotiorum, Septoria spp., notamment Septoria nodorum ou Septoria tritici, Sphaerotheca spp., notamment Sphaerotheca macularis, Spilocaea spp notamment Spilocaea pomi, Taphrina spp., notamment Taphrina pruni, Trichothecium spp. notamment roseum, Uncinula spp., notamment Uncinula necator, Ustilago spp., notamment Ustilago tritici, Venturia spp., notamment Venturia inaequalis, et les combinaisons de ceux-ci, lesdits agents pathogènes étant de préférence choisis parmi Penicillium digitatum, Penicillium expansum, Botrytis cinerea et les combinaisons de ceux-ci. Selon un mode de réalisation, les végétaux sont choisis parmi les graminées, les dicotylédones, les plantes annuelles, bisannuelles et pérennes, les plants de légumes ou les légumes récoltés, les plantes ou arbres à fruits ou les fruits récoltés, les plantes ou arbres à fleurs ou les fleurs récoltées, les céréales, les oléagineux, les protéagineux, les plantes ligneuses, les végétaux d'ornement, et sont notamment choisis parmi les plants ou produits issus de pomme de terre, betterave, canne à sucre, tabac, vigne, blé, colza, orge, riz, maïs, sorgho, millet, soja, haricot, tomate, concombre, laitue, fraisier, pommier, poirier ,agrumes, banane, ananas, pêcher, abricotier, cerisier, noyer, et noisetier. Selon un mode de réalisation, le procédé susmentionné comprend : l'application de la composition phytosanitaire prête à l'emploi décrite ci-dessus sur tout ou partie des végétaux ; ou le mélange de la composition phytosanitaire concentrée décrite ci-dessus avec un agent de formulation pour former une composition phytosanitaire finale, suivi de l'application de cette composition phytosanitaire finale sur tout ou partie des végétaux. R: Brevets 29800 29842--090126-texte_depot-doc- 26 janvier 2009 7 Selon un mode de réalisation, l'application de la composition phytosanitaire sur tout ou partie des végétaux consiste en une application sur les feuilles, tiges, fleurs, fruits, tronc et / ou racines ou sur une partie de ceux-ci, de préférence par pulvérisation, l'application sur les racines étant de préférence effectuée par pulvérisation au sol, incorporation mécanique, en mélange avec des engrais, des amendements ou en pré-mix. La présente invention permet de surmonter les inconvénients de l'état de la technique. Elle fournit plus particulièrement de nouvelles souches de microorganismes antagonistes, plus fiables d'un point de vue industriel, plus sûres d'un point de vue sanitaire et environnemental, et efficaces pour lutter contre les maladies provoquées par les agents pathogènes chez les végétaux. L'invention repose sur la mise au point par les inventeurs de nouvelles souches de Saccharomyces cerevisiae présentant de très bonnes aptitudes phytosanitaires. Saccharomyces cerevisiae étant une espèce de levure connue et exploitée depuis des siècles par l'homme pour produire du pain ou de l'alcool, y compris à l'échelle industrielle, son utilisation en tant que microorganisme antagoniste est particulièrement avantageuse. Ainsi, une lutte efficace contre les agents pathogènes des végétaux et contre les maladies qu'ils provoquent est rendue possible, et ce à partir de produits pas ou peu nocifs pour l'homme et pour l'environnement, et faciles à produire à une échelle industrielle. Selon des modes de réalisation particuliers, l'invention présente également une, ou de préférence 35 plusieurs, des caractéristiques avantageuses suivantes : l'invention permet une longue durée de protection des végétaux (par exemple supérieure à 1 semaine, à 2 semaines ou à 1 mois) et une RP.Brevets.29800 29842--090126-texte_ depot.doc- 26 janvier 2009 8 action polyvalente vis-à-vis d'une pluralité d'agents pathogènes ; l'invention est particulièrement applicable dans le domaine de l'agriculture biologique ; l'invention permet d'augmenter l'efficacité d'ensemble de la protection phytosanitaire, par la diminution du niveau d'infection et/ou la réduction de rémission d'inoculum ; l'invention permet de limiter la quantité des résidus de produits agrochimiques dans ou sur les produits consommables, dans les sols et les eaux lors du traitement de cultures ou d'une plante. 15 DESCRIPTION DE MODES DE REALISATION DE L'INVENTION L'invention est maintenant décrite plus en détail et de façon non limitative dans la description qui suit. Types de traitement (curatif ou préventif) 20 Comme indiqué précédemment, l'invention concerne des procédés et produits pour lutter, à titre préventif ou curatif, contre les agents pathogènes chez les végétaux. Les végétaux concernés peuvent être tous types de végétaux, et notamment les graminées et dicotylédones, 25 les plantes annuelles, bisannuelles et pérennes, les légumes, les céréales dont le blé, l'orge et le riz, le maïs, le sorgho, le millet, les oléagineux, les protéagineux, les pommes de terre, les betteraves, la canne à sucre, le tabac, les plantes ligneuses, les 30 arbres, fruitiers ou non, les vignes, les végétaux d'ornement... Selon un mode de mise en oeuvre particulier, les végétaux sont des arbres fruitiers, par exemple des arbres fruitiers à pépins en particulier choisis parmi 35 les pommiers, les poiriers et les agrumes. Selon un autre mode de mise en oeuvre, les végétaux sont choisis parmi la vigne, les céréales (notamment le blé), le colza, la betterave, la pomme de terre, le 10 R: Brevets 29800`29842--090126-texte_depot doc- 26 janvier 2009 9 haricot, la tomate, le concombre, la laitue ou encore le fraisier. Le terme de � végétaux � utilisé dans le cadre de la présente invention recouvre à la fois les plantes en tant que telles (par exemple arbres fruitiers...) que des parties isolées de ces plantes, par exemple des fruits ou fleurs récoltés, mais aussi des graines ou semences (matériel de propagation végétale). Selon un mode de réalisation particulier, les 10 végétaux sont des fruits, par exemple des pommes ou des poires ou des agrumes. Dans ce qui suit, lorsqu'il est question de mettre en contact les végétaux avec une composition, il faut entendre que cette mise en contact peut s'effectuer sur 15 la totalité ou une partie seulement de la surface des végétaux. Par exemple, lorsque les végétaux sont des plantes complètes, la mise en contact peut s'effectuer sur la totalité des plantes ou sur une ou des parties seulement de celle-ci, telles que par exemple les 20 feuilles, les tiges, les fleurs, les fruits, le tronc et/ou les racines, ou encore une partie seulement de la surface de ces feuilles, tiges, fleurs, fruits, tronc et/ou racines. Les produits de l'invention permettent de protéger 25 efficacement les végétaux contre des agents pathogènes pendant une période de temps importante, pouvant dépasser un mois, voire plusieurs mois sur fruit conservé à froid. Bien entendu, une application répétée peut être envisagée, à des intervalles à définir par l'utilisateur. 30 L'invention peut être appliquée à la lutte contre tout type d'agents pathogènes, et notamment des champignons, virus, bactéries, mycoplasmes, spiroplasmes ou viroïdes. La lutte contre les champignons est rendue particulièrement efficace par la présente invention. 35 A titre d'exemples particuliers d'agents pathogènes, on peut citer notamment les champignons des genres Alternaria spp., par exemple Alternaria solani et Alternaria alternata, Ascochyta spp., par exemple R:.Brevets 29800' 29842--090126-texte_depot.doc- 26 jan ier 2009 10 Ascochyta fabae ou Ascochyta pinodella, Aspergillus spp., notamment Aspergillus piger et Aspergillus fumigatus, Botrytis spp., par exemple Botrytis cinerea, Bremia spp., par exemple Bremia lactucae, Cercospora spp., par exemple Cercospora beticola, Cladosporium spp., par exemple Cladosporium allii-cepae, Colletotrichum spp., par exemple Colletotrichum graminicola, Cryptosporiopsis spp notamment Cryptosporiopsis malicorticis, Erysiphe spp., par exemple Erysiphe graminis ou Erysiphe necator, Fusarium spp., par exemple Fusarium oxysporum et Fusarium roseum, Gloeosporium spp., par exemple Gloeosporium fructigenum, Guignardia spp., par exemple Guignardia bidwellii, Helminthosporium spp., par exemple Helminthosporium tritici-repentis, Marssonina spp., par exemple Marssonina rosae, Monilia spp., par exemple Monilia fructigena, Mycosphaerella spp., par exemple Mycosphaerella brassicicola, Penicillium spp., par exemple Penicillium expansum ou Penicillium digitatum, Peronospora spp., par exemple Peronospora parasitica, Pezicula spp. notamment Pezicula malicorticis, Phragmidium spp., par exemple Phragmidium rubi-idaei, Phytophtora spp., dont Phytophtora infestans, Plasmopara spp., dont Plasmopara viticola, Podosphaera spp., par exemple Podosphaera leucotricha, Pseudocercosporella spp., dont Pseudocercosporella brassicae, Pseudoperonospora spp., par exemple Pseudoperonospora cubensis, Pseudopeziza spp., par exemple Pseudopeziza medicaginis, Puccinia spp-. dont Puccinia graminis, Pythium spp., Ramularia spp., dont Ramularia betae, Rhizoctonia spp., par exemple Rhizoctonia solani, Rhizopus spp., par exemple Rhizopus nigricans et Rhizopus stolonifer, Rynchosporium spp., comme Rynchosporium secalis, Sclerotinia spp., comme Sclerotinia sclerotiorum, Septoria spp., par exemple Septoria nodorum ou Septoria tritici, Sphaerotheca spp., comme Sphaerotheca macularis, Spilocaea spp notamment Spilocaea pomi, Taphrina spp., par exemple Taphrina pruni, Trichothecium spp. notamment Trichothecium roseum, RABrevets'29800 29842--090126-texte dcpot.do,- 26 janvier 2009 Uncinula spp., par exemple Uncinula necator, Ustilago spp., par exemple Ustilago tritici et Venturia spp., par exemple Venturia inaequalis. Des combinaisons des agents pathogènes ci-dessus peuvent aussi être combattues grâce à l'invention. Penicillium digitatum, Penicillium expansum, Botrytis cinerea sont des espèces contre lesquelles l'invention est particulièrement efficace. Des exemples de bactéries qui affectent les cultures incluent notamment les genres Corynebacterium, Clavibacter, Curtobacterium, Streptomyces, Pseudomonas, Xanthomonas, Erwinia spp. et particulièrement Erwinia amylovora, Erwinia carotovora, Erwinia chrysanthemi. Des exemples de virus affectant les cultures sont par exemple les virus de la mosaïque du tabac, ou le virus Y de la pomme de terre. L'invention propose un procédé de traitement et / ou de protection des végétaux contre les maladies provoquées par les agents pathogènes ci-dessus, par exemple la pourriture grise. Ceci recouvre tout procédé curatif ou préventif, visant à retarder ou empêcher l'apparition de ces maladies, à les éradiquer ou à limiter ou réduire l'ampleur, l'étendue ou les effets de ces maladies. Souches de Saccharomyces cerevisiae en tant que microorganismes antagonistes Par � microorganisme antagoniste �, on entend dans le cadre de la présente invention un microorganisme qui est l'antagoniste d'un agent pathogène, en particulier d'un agent pathogène susceptible de provoquer des maladies chez les végétaux (notamment d'un agent pathogène de la liste ci-dessus). L'invention propose quatre souches de levures Saccharomyces cerevisiae qui sont utiles en tant que 35 microorganismes antagonistes, à savoir : - la souche n°I-3936 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM ; R: Brevets 29800 29842_-090126-texte_ depot.doc- 26 janvier 2009 12 la souche n°I-3937 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM ; la souche n°I-3938 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM ; et la souche n°I-3939 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM. Utilisation des souches de Saccharomyces cerevisiae de l'invention L'invention propose l'utilisation des souches de Saccharomyces cerevisiae susmentionnées pour protéger ou soigner des végétaux contre des maladies provoquées par des agents pathogènes. En particulier, pour ce faire, l'invention fournit une composition phytosanitaire comprenant l'une des souches de Saccharomyces cerevisiae susmentionnées (ou un mélange de plusieurs de ces souches). Par � composition phytosanitaire �, on entend dans le cadre de la présente invention une composition susceptible de protéger des végétaux contre un ou plusieurs agents pathogènes, et / ou de soigner des végétaux infectés par un ou plusieurs agents pathogènes. La composition phytosanitaire selon l'invention peut être sous forme concentrée ou sous forme prête à l'emploi. Ladite composition phytosanitaire peut être sous forme sèche, par exemple sous forme de poudre ou granules, ou sous forme liquide, en particulier aqueuse, par exemple sous forme d'une suspension, d'une dispersion, d'un gel, d'une crème, d'une pâte, ou sous forme solide. Dans le cas de la composition prête à l'emploi, la forme liquide aqueuse est préférée, car cette forme est adaptée à la pulvérisation. En cas de forme sèche, les levures des souches susmentionnées sont de préférence sous forme déshydratée, lyophilisée et / ou encapsulée. Dans la composition phytosanitaire prête à l'emploi, la matière active (levures Saccharomyces cerevisiae des souches susmentionnées) est déjà formulée de manière R: Brevets 2980029842-090126-texte_depot.doc- 26 janvier 2009 adaptée à une utilisation sur les plantes. Ainsi la matière active est par exemple mélangée à un véhicule acceptable, tel que par exemple un liquide pour remplir un pulvérisateur de type spray, un engrais, un substrat de culture sous serre... La composition prête à l'emploi peut être sous forme de poudre, mais la forme liquide est préférée. A la différence de la composition phytosanitaire prête à l'emploi, qui est destinée à être appliquée telle quelle sur les végétaux, la composition phytosanitaire concentrée est destinée à être mélangée avec un agent de formulation (véhicule) par l'utilisateur afin de former une composition finale, prête à l'emploi. De préférence, cet agent de formulation est de l'eau ou une solution aqueuse. Ainsi, typiquement, l'utilisateur dissout des granules (composition phytosanitaire concentrée) dans de l'eau, ou dilue une suspension ou dispersion aqueuse (composition phytosanitaire concentrée) dans de l'eau, afin d'obtenir la composition finale, prête à l'emploi. Si les levures sont sous forme déshydratée dans la composition phytosanitaire concentrée et si la composition finale est sous forme liquide (typiquement aqueuse), les précautions d'usage pour la réhydratation des levures doivent être respectées (8) ; par exemple la température de l'agent de formulation adapté à la dissolution / réhydratation (typiquement eau ou solution aqueuse) est avantageusement comprise entre 20 et 25°C. Que la composition phytosanitaire soit concentrée ou prête à l'emploi, elle comprend en général de toute façon un ou plusieurs agents de formulation, solides ou liquides. Le ou les agents de formulation peuvent être constitués de tout composé ou toute matière inerte permettant de rendre possible, faciliter, ou optimiser le transport, le stockage, la manipulation, l'application et/ou la persistance de la matière active sur les végétaux ou des parties de ceux-ci. De tels agents sont adaptés à l'objectif recherché conservation des R: Brevets2980029842--09U126-texte depot.doc- 26 janvier 2009 substances actives, tenue en suspension des substances actives lors du stockage ou lors de l'utilisation dans la préparation de la bouillie de traitement, anti-mousse, anti-poussière, adhésion aux végétaux, pénétration dans les tissus, et autres. Ce ou ces agents peuvent être solides, liquides, seuls ou en mélange. Le ou les agents de formulation peuvent être choisis notamment parmi les agents tensioactifs, dispersants, conservateurs, mouillants, émulsifiants, agents d'adhésion, tampon-pH, nutriments seuls ou en mélange. La quantité de levures Saccharomyces cerevisiae qui est appliquée aux végétaux est définie par l'homme du métier, en fonction notamment de l'agent ou de la pluralité d'agents pathogènes à traiter, du type de végétal, de la souche ou des combinaisons de souches utilisées... La quantité appliquée est de préférence suffisante pour protéger les végétaux contre un agent pathogène, ou pour limiter ou supprimer le développement et les effets de l'agent pathogène présent. Cette quantité peut être déterminée par exemple par des essais en champ (ou, par exemple lorsque les végétaux sont des fruits, par des essais en laboratoire ou en station fruitière sur ces fruits eux-mêmes). Une composition phytosanitaire prête à l'emploi contient de préférence une quantité de levures des souches susmentionnées comprise entre 104 et 1011 ufc/ml, de préférence entre 105 et 1010 ufc/ml, de manière plus particulièrement préférée entre 5X105 et 5x109 ufc/ml. La composition phytosanitaire décrite ci-dessus, sous sa forme finale (prête à l'emploi), peut être appliquée aux végétaux de différentes manières et selon différents protocoles ou programmes de traitements. Dans un mode préféré de mise en oeuvre, la composition est liquide et est appliquée par pulvérisation, notamment par pulvérisation foliaire ou au sol. Dans un mode particulier, la composition est liquide et est appliquée par pulvérisation à des fleurs ou fruits récoltés. R: Brevets 2980029S42--090126-texte depot.doc- 26 janvier 2009 En variante, il est possible d'appliquer la composition sous forme de mélange à des engrais, supports de culture, à l'eau d'arrosage, ou autre. La composition peut ainsi être administrée aux racines par pulvérisation au sol, incorporation mécanique, en mélange avec des engrais, des amendements, en pré-mix, ou autres. Autres adjuvants actifs possibles Dans le cadre du traitement préventif ou curatif de végétaux contre les maladies provoquées par les agents pathogènes, d'autres adjuvants actifs peuvent être utilisés. Par � adjuvant actif � on entend tout composé (différent des levures Saccharomyces cerevisiae de souches susmentionnées) susceptible de contribuer à la prévention ou au traitement des maladies des végétaux provoquées par des agents pathogènes, ou susceptible de potentialiser l'effet des levures Saccharomyces cerevisiae de souches susmentionnées dans la prévention ou le traitement des maladies des végétaux provoquées par des agents pathogènes. Selon un mode de réalisation, ces autres adjuvants actifs peuvent être inclus dans la composition phytosanitaire selon l'invention. Selon un autre mode de réalisation, ces autres 25 adjuvants actifs peuvent être administrés aux végétaux séparément, sous forme d'un traitement complémentaire (de manière séquentielle ou en alternance). Les autres adjuvants actifs en question comprennent notamment . 30 1) Tout microorganisme antagoniste différent des levures Saccharomyces cerevisiae des souches susmentionnées. On peut utiliser à ce titre tout microorganisme connu en tant qu'antagoniste d'un ou plusieurs agents pathogènes des végétaux. 35 De préférence, les microorganismes antagonistes sont choisis parmi les bactéries, les champignons et les levures, de préférence les levures. R:1Brevels 2980029892ù 090126-teste depot.doc- 26 janvier 2009 16 Les microorganismes antagonistes peuvent en particulier être choisis parmi le groupe constitué de Agrobacterium spp., Ampelomyces spp., Aureobasidium spp., Bacillus spp., Bulleromyces spp., Candida spp., Chaetomium spp., Coniothyrium spp., Cryptococcus spp., Debaryomyces spp., Dekkera spp., Erwinia spp., Exophilia spp., Gliocladium spp., Hansenula spp. Issatchenkia spp., Kluyveromyces spp., Mariannaea spp., Metschnikovia spp., Microdochium spp., Paecilomyces spp, Penicillium spp., Phlebiopsis spp.; Pichia spp., Pseudomonas spp., Pseudozyma spp., Pythium spp., Rhodotorula spp., Saccharomyces spp., Saccharomycopsis spp., Sporobolomyces spp., Streptomyces spp., Talaromyces spp., Trichoderma spp., Ulocladium spp., Verticilium spp., Zygosaccharomyces spp. et leurs mélanges, et plus particulièrement Agrobacterium radiobacter, Aureobasidium pullulans, Bacillus subtilis, Bacillus lichenifonnis, Bacillus pumilis, Candida oleophila, Candida saitoana, Candida sake, Candida tenius, Candida utilis, Candida pelliculosa, Coniothyrium minitans, Cryptococcus albidus, Cryptococcus laurentii, Cryptococcus flavescens, Erwinia carotovora, Gliocladium catenalatum, Gliocladium virens, Hanseniaspora uvarum, Kluyveromyces thermotolerance, Metschnikovia fructicola, Metschnikowia pulcherrima, Metschnikowia reukafii, Microdochium dimerum, Paecilomyces fumosoroseus, Penicillium oxalicum, Phlebiopsis gigantean, Pichia anomala, Pichia guilliermondii, Pseudomonas cepacia, Pseudomonas chlororaphis, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas syringae, Pseudozyma flocullosa, Rhodotorula glutinis, Pythium oligandrum, Rhodotorula mucilaginosa, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomycopsis schoeni, Streptomyces griseoviridis, Talaromyces flavus, Trichoderma atroviride, Trichoderma harzianum, Trichoderma polysporum, Trichoderma viride, Trichoderma asperellum, Trichoderma gamsi, Ulocladium atrum, Verticilium albo-atrum, et leurs mélanges. 2) Des sels de calcium, de potassium ou de sodium. R: 13revets 29800 29842--090126-texte_depot.doc-26 janvier 2009 17 Des sels particulièrement efficaces en tant qu'adjuvants actifs sont décrits en détail dans le document WO 2006/032530, auquel il est fait référence. En particulier les sels chlorure, propionate, sulfate, phosphate, carbonate, bicarbonate, acétate, éthanoate, glycérate, glutamate, érythronate, théonate, ribonate, arabinoate, xylonate, lyxonate, allonate, altronate, gluconate, mannoate, gulonate, idonate, galactonate, talonate, alloheptonate, altroheptonate, glucoheptonate, mannoheptonate, guloheptonate, idoheptonate, galactoheptonate, taloheptonate, tartronate, malate, tartrate, citrate, saccharate, mucate, lactate, lactogluconate, ascorbate, isocitrate et citramalate, de sodium ou de calcium ou de potassium (de préférence de calcium) sont préférés, qu'ils soient sous forme anhydre ou hydratée. Le lactate de calcium est particulièrement préféré. Des mélanges des sels ci-dessus sont également possibles. 3) Un agent stimulant choisi parmi le groupe constitué des acides uroniques, des mannanes, du beta- 1,3-glucane, de leurs mélanges et dérivés (sels, hydrates...). L'acide galacturonique et l'acide glucoronique sont préférés, parmi les acides uroniques. 4) Une substance agrochimique fongicide, antivirale et / ou antibactérienne. La substance fongicide peut être choisie par exemple parmi les fongicides agrochimiques organiques ou les fongicides minéraux inorganiques à base de soufre et/ou de cuivre. Des exemples de fongicides agrochimiques organiques actuellement disponibles sont notamment les chloronitriles dont le chlorothalonil, les carbamates dont les dithiocarbamates comme le mancozèbe, les phtalimides dont le captane, les sulfamides, les guanidines, les quinones, les quinoléines, les thiadiazines, les anilides, hydroxyanilides, et phénylamides, les imidazolinones, oxazolidinediones, les R:`Brcvets 29800 29842--090126-texte_depot.doc- 26 janvier 2009 18 strobilurines, les cyanoimidazoles, le fluazinam, le dinocap, le sithiofam, les dicarboximides, le fludioxonil, les organophosphorés, le propamocarbe HC1, la diphénylamine, les pyridylamines, les inhibiteurs de la biosynthèse des stérols (IBS), dont les imidazoles, pyrimidines, les hydroxypyrimidines, les anilinopyrimidines, les triazoles, la spiroxamine, les morpholines et les pipéridines, le fenhexamid, l'hymexazol, le zoxamide, le diéthofencarbe, les benzimidazoles, le pencycuron, le quinoxyfene, l'iprovalicarbe, le cymoxanil, le diméthomorphe, les phosphonates, les triazones... L'invention peut aussi être utilisée en alternance, association ou combinaison avec un ou plusieurs composés éliciteurs de défenses chez les plantes, tels que par exemple l'acide b-aminobutyrique, l'acide 2,6- dichloroisonicotinique, 1'acibenzolar-s-methyl ou certains extraits d'algues. Des exemples de tels composés sont notamment la laminarine et les ulvanes. A cet égard, l'invention propose également un procédé pour prévenir ou freiner le développement de souches de champignons résistantes à une famille d'agents fongicides, caractérisé en ce que les végétaux sont traités avec des levures Saccharomyces cerevisiae de souches susmentionnées, comme décrit ci-dessus, en vue de réduire la pression de sélection des souches résistantes à ladite famille d'agents fongicides, ou en ce que le ou les traitements des végétaux avec une substance de ladite famille d'agents fongicides sont alternés ou combinés avec un ou des traitements des végétaux avec des levures Saccharomyces cerevisiae de souches susmentionnées, comme décrit ci-dessus. L'invention propose également un procédé pour prévenir ou freiner le développement de souches de bactéries résistantes à une famille d'agents antibactériens, caractérisé en ce que les végétaux sont traités avec des levures Saccharomyces cerevisiae de souches susmentionnées, comme décrit ci-dessus, en vue de R: Brevets 2980029842--090126-texte depot.doc- 26 janvier 2009 19 réduire la pression de sélection des souches résistantes à ladite famille d'agents antibactériens, ou en ce que le ou les traitements des végétaux avec ledit agent antibactérien sont alternés ou combinés avec un ou des traitements des végétaux avec des levures Saccharomyces cerevisiae de souches susmentionnées, comme décrit ci-dessus. Toutefois, selon un mode de réalisation particulier, la composition phytosanitaire selon l'invention est dépourvue de toute substance agrochimique fongicide, antivirale et / ou antibactérienne toxique pour les levures Saccharomyces cerevisiae. Selon un autre mode de réalisation particulier, aucun traitement au moyen d'une quelconque substance agrochimique fongicide, antivirale et / ou antibactérienne n'est appliqué à dose toxique pour les levures Saccharomyces cerevisiae avant le traitement par les levures Saccharomyces cerevisiae de souches susmentionnées, sauf en respectant le délai d'attente adéquate. EXEMPLES Les exemples suivants illustrent l'invention sans la limiter. Exemple 1 On teste l'efficacité de la présente invention contre les maladies fongiques de post-récolte, de la manière suivante. On pratique sur des pamplemousses trois blessures par fruit. On applique dans chaque blessure une composition phytosanitaire, on laisse sécher, puis on inocule une composition contenant un agent pathogène. L'agent pathogène utilisé est Penicillium digitatum, à une concentration de 5x104 spores par ml. Au bout de 4 ou 5 jours d'incubation à 20°C, on mesure le diamètre moyen des lésions. On utilise les 4 types de composition phytosanitaire suivants, avec diverses concentrations de R: Brevets 2980029842ù090126-teste depot.doc- 26 janvier 2009 20 microorganismes (obtenues par dilutions en série dans l'eau distillée stérile à partir d'une culture de microorganismes) . A composition contenant la souche n° I-3936 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM. B : composition contenant la souche n°I-3937 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM. C : composition contenant la souche n° I-3938 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM. D : composition contenant la souche n° I-3939 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM. Les souches de levures proviennent de la société Lesaffre International (France). L'agent pathogène est obtenu par isolement à partir de fruits de pamplemousse pourris ; stockage sur de la gélose inclinée de dextrose - pomme de terre à 4°C ; culture dans des boîtes de gélose inclinée de dextrose - pomme de terre à 25°C ; retrait des spores des bords sporulants d'une culture de 2-3 semaines ; suspension dans de l'eau distillée stérile et ajustement de la concentration en spores avec un hémacytomètre. Chaque test est moyenné sur 10 fruits. On mesure l'efficacité des différents traitements préventifs par rapport à un témoin non traité et les résultats sont reportés dans le tableau 1 ci-dessous. Le diamètre des lésions est mesuré à 4 jours, sauf pour les résultats marqués avec un astérisque (*), qui sont obtenus à 5 jours. Tableau 1 - prévention de l'infection par Penicillium digitatum sur des pamplemousses Type de Concentration Diamètre des Efficacité traitement en levures lésions (%) (en ufc/mL) (en mm) Témoin - 77,78* - A 4,08X101 24,07* 69,0 R Brevets 29800 29842ù090126-texte depot.doc- 26 janvier 2009 A 4,08x108 5,56* 92,9 A 4,08x109 0,00* 100,0 Témoin - 79,63 - A 1,10x107 24,07 69,8 A 1,10x108 18,52 76,7 A 1, 10x109 5,56 93,0 B 1,10x10 20,37 74,4 B 1,10x108 25,93 67,4 B 1, 10x109 12,96 83,7 Témoin - 83,33 - C 3,12x108 27,78 66,7 C 3, 12x109 5,56 93,3 C 3,12x1010 0,00 100,0 Témoin - 84,44 D 1, 1Ox10~ 1,85 97,8 D 1,10x108 1,85 97,8 D 1,10x109 0,00 100,0 Témoin - 90,74 - D 1, 08x105 75,93 16,3 D 1,08x106 37,78 58,4 D 1,08x107 7,41 91,8 Exemple 2 On répète le même type d'expérience que utilise l'exemple 1, à la différence près que l'on dans des pommes au Botrytis qu'agents effectuée moyennés lieu de pamplemousses, et que l'on utilise cinerea et Penicillium expansum en tant L'évaluation des lésions est inoculation, les résultats sont chaque fois. pathogènes. 6 jours après sur 15 fruits à Les résultats obtenus contre Botrytis cinerea sont reportés dans le tableau 2 ci-dessous, et les résultats contre Penicillium expansum sont reportés dans le tableau 3 ci-dessous. Tableau 2 - prévention de l'infection par Botrytis cinerea sur des pommes R: Brevets'29800 29842-090126-textedepot.doc- 26 janvier 2009 Type de Concentration Diamètre des Efficacité traitement en levures lésions (%) (en ufc/mL) (en mm) Témoin - 21,4 - A 10' 2,3 89,18 A 106 9,4 55,88 A 105 9,0 57,96 B 10' 6,9 ~ 67,64 B 106 13,2 38,09 B 105 11,6 45,58 C 107 8,4 60,87 C 106 11,2 47,66 C 105 10,9 48,80 Tableau 3 - prévention de l'infection par Penicillium expansum sur des pommes Type de Concentration Diamètre des Efficacité traitement en levures lésions (%) (en ufc/mL) (en mm) Témoin - 16,9 - A 10' 7, 5 55, 51 A 106 7, 3 56, 69 A j 105 12, 3 27, 30 B 10' 12,2 28,08 B 106 13, 0 23, 36 B 105 14,0 17,19 C 10' 6, 6 60, 76 C 106 9,4 44,62 C 105 11,0 34,91 Exemple 3 On répète le même type d'expérience que dans l'exemple 1, à la différence près que l'on utilise du 10 raisin de table au lieu de pamplemousses, et que l'on utilise Botrytis cinerea en tant qu'agent pathogène. En RBre^ets 29800 29442--090126-texte depot.doc- 26 janvier 2009 23 outre, on évalue l'efficacité de la protection par les levures en comptant le nombre de baies de raisin infectées par grappe 7 jours après l'inoculation de l'agent pathogène, de sorte à classer les grappes en 4 catégories : (1) grappe saine ; (2) environ 10 % de la grappe infectée ; (3) environ 25 % de la grappe infectée ; (4) environ 50 % de la grappe infectée ou plus. On attribue la note 0 à la catégorie (1), 0,1 à la catégorie (2), 0,25 à la catégorie (3) et 0,6 à la catégorie (4), de sorte à calculer un dégât moyen. Les résultats obtenus sur des grappes de raisins non blessées sont reportés dans le tableau 4 ci-dessous, et les résultats obtenus sur des grappes de raisins blessées sont reportés dans le tableau 5 ci-dessous. Tableau 4 - prévention de l'infection par Botrytis cinerea sur du raisin de table non blessé Traitet Concentra° (1) (2) (3) (4) Dégât Effic. (ufc/mL) moyen (° ) Témoin - 0 0 2 3 0,46 - B 107 1 0 2 2 0, 34 26, 1 C 10' 0 3 2 0 0, 16 65, 2 _ 10' 1 3 1 0 0, 11 76, 1 D B 106 0 1 4 0 0,22 52,2 C 106 0 0 4 1 1 0, 32 30, 4 D 106 0 1 2 2 0, 36 21, 7 Tableau 5 - prévention de l'infection par Botrytis cinerea sur du raisin de table blessé Traiter Concentra° (1) (2) (3) (4) Dégât Effic. (ufc/mL) moyen (° ) Témoin - 0 0 4 1 0,32 - B 107 0 1 3 1 0, 29 9, 4 C 10' 0 2 3 0 0,19 40,6 D 10' 0 4 1 0 0,13 59,4 R'.Brevets 2980029842--090126-texte depot.doc- 26 janvier 2009 B 106 0 1 3 1 0, 29 9, 4 C 106 0 2 3 0 0,19 40,6 D 106 0 4 1 0 0,13 59,4 R:.Brevets'2980029842--090I26-texte dcpot_doc- 26 janvier 2009 REVENDICATIONS1. Souche de Saccharomyces cerevisiae, caractérisée en ce qu'elle est choisie parmi la souche n°I-3936 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM, la souche n°I-3937 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM, la souche n°I-3938 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM et la souche n°I-3939 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM. 2. Composition phytosanitaire, comprenant des levures Saccharomyces cerevisiae choisies parmi la souche n°I-3936 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM, la souche n°I-3937 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM, la souche n°I-3938 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM et la souche n°I-3939 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM et les mélanges de celles-ci. 3. Composition phytosanitaire selon la 25 revendication 2, comprenant également un ou plusieurs agents de formulation et / ou au moins un adjuvant actif supplémentaire. 4. Composition phytosanitaire selon la revendication 2 ou 3, qui est une composition phytosanitaire concentrée, à formulation sèche solide ou liquide. 5. Composition phytosanitaire selon la revendication 2 ou 3, qui est une composition phytosanitaire prête à l'emploi à formulation sèche ou liquide, de préférence liquide. 10 15 20 30 35 R: Brevets 29800 29842--090126-texte_ depot.doc- 26 janvier 2009 26 6. Composition phytosanitaire selon la revendication 5, comprenant une quantité de levures Saccharomyces cerevisiae comprise entre 104 et 1011 ufc/mL, de préférence entre 105 et 1010 ufc/mL, de manière plus particulièrement préférée entre 5X105 et 5x109 ufc/mL. 7. Procédé de traitement ou de protection de végétaux contre des maladies provoquées par des agents pathogènes, comprenant la mise en contact des végétaux avec des levures Saccharomyces cerevisiae choisies parmi la souche n°I-3936 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM, la souche n°I-3937 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM, la souche n°I-3938 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM et la souche n°I-3939 déposée le 4 mars 2008 auprès de la CNCM et les mélanges de celles-ci. 8. Procédé selon la revendication 7, dans lequel les agents pathogènes sont choisis parmi les champignons, virus, bactéries, mycoplasmes, spiroplasmes, viroïdes et combinaisons de ceux-ci, de préférence parmi les champignons. 9. Procédé selon la revendication 7, dans lequel les agents pathogènes sont choisis parmi les microorganismes des genres Alternaria sPP•, notamment Alternaria solani et Alternaria alternata, Ascochyta spp., notamment Ascochyta fabae ou Ascochyta pinodella, Aspergillus spp., notamment Aspergillus piger et Aspergillus fumigatus, Botrytis spp., notamment Botrytis cinerea, Bremia spp., notamment Bremia lactucae, Cercospora spp., notamment Cercospora beticola, Cladosporium spp., notamment Cladosporium allii-cepae, Colletotrichum spp., notamment Colletotrichum graminicola, 35 R: Bre'ets 29800 29542--090126-texte_depot.dnc- 26 janvier 2009 27 Cryptosporiopsis spp notamment Cryptosporiopsis malicorticis, Erysiphe spp., notamment Erysiphe graminis ou necator, Fusarium spp., notamment Fusarium oxysporum et Fusarium roseum, Gloeosporium spp., notamment Gloeosporium fructigenum, Guignardia spp., notamment Guignardia bidwellii, Helminthosporium spp., notamment Helminthosporium tritici-repentis, Marssonina spp., notamment Marssonina rosae, Monilia spp., notamment Monilia fructigena, Mycosphaerella spp., notamment Mycosphaerella brassicicola, Penicillium spp., notamment Penicillium expansum ou Penicillium digitatum, Peronospora spp., notamment Peronospora parasitica, Pezicula spp. notamment Pezicula malicorticis, Phragmidium spp., notamment Phragmidium rubi-idaei, Phytophtora spp., notamment Phytophtora infestans, Plasmopara spp., notamment Plasmopara viticola, Podosphaera spp., notamment Podosphaera leucotricha, Pseudocercosporella spp., dont Pseudocercosporella brassicae, Pseudoperonospora spp., notamment Pseudoperonospora cubensis, Pseudopeziza spp., notamment Pseudopeziza medicaginis, Puccinia spp., notamment Puccinia graminis, Pythium spp., Ramularia spp., notamment Ramularia betae, Rhizoctonia spp., notamment Rhizoctonia solani, Rhizopus spp., notamment Rhizopus nigricans et Rhizopus stolonifer, Rynchosporium spp., notamment Rynchosporium secalis, Sclerotinia spp•, notamment Sclerotinia sclerotiorum, Septoria spp., notamment Septoria nodorum ou Septoria tritici, Sphaerotheca spp., notamment Sphaerotheca macularis, Spilocaea spp notamment Spilocaea pomi, Taphrina spp., notamment Taphrina pruni, Trichothecium spp. notamment roseum, Uncinula spp., notamment R: Brevets 29800 29842ù090126-texte depot.doc- 26 janvier 2009 10 15 20 25 30 35 28 Uncinula necator, Ustilago spp., notamment Ustilago tritici, Venturia spp., notamment Venturia inaequalis, et les combinaisons de ceux-ci, lesdits agents pathogènes étant de préférence choisis parmi Penicillium digitatum, Penicillium expansum, Botrytis cinerea et les combinaisons de ceux-ci. 10. Procédé selon l'une des revendications 7 à 9, dans lequel les végétaux sont choisis parmi les graminées, les dicotylédones, les plantes annuelles, bisannuelles et pérennes, les plants de légumes ou les légumes récoltés, les plantes ou arbres à fruits ou les fruits récoltés, les plantes ou arbres à fleurs ou les fleurs récoltées, les céréales, les oléagineux, les protéagineux, les plantes ligneuses, les végétaux d'ornement, et sont notamment choisis parmi les plants ou produits issus de pomme de terre, betterave, canne à sucre, tabac, vigne, blé, colza, orge, riz, maïs, sorgho, millet, soja, haricot, tomate, concombre, laitue, fraisier, pommier, poirier ,agrumes, banane, ananas, pêcher, abricotier, cerisier, noyer, et noisetier. 11. Procédé selon l'une des revendications 7 à 10, comprenant . - l'application de la composition phytosanitaire prête à l'emploi selon la revendication 5 ou 6 sur tout ou partie des végétaux ; ou - le mélange de la composition phytosanitaire concentrée selon la revendication 4 avec un agent de formulation pour former une composition phytosanitaire finale, suivi de l'application de cette composition R: Brevets 29800 29842--090126-texte_depot.doc- 26 janvier 2009 10 15 20 25 30 35 29 phytosanitaire finale sur tout ou partie des végétaux. 12. Procédé selon la revendication 11, dans lequel l'application de la composition phytosanitaire sur tout ou partie des végétaux consiste en une application sur les feuilles, tiges, fleurs, fruits, tronc et / ou racines ou sur une partie de ceux-ci, de préférence par pulvérisation, l'application sur les racines étant de préférence effectuée par pulvérisation au sol, incorporation mécanique, en mélange avec des engrais, des amendements ou en pré-mix. R: Brevets 29800 29842 -090126-texte_ depot doc- 26 janvier 2009