Brevet FR2943255A1 — publié le 20100924

UTILISATION COSMÉTIQUE D'UN EXTRAIT D'HIPPOPHAE Domaine technique La présente invention se rapporte à l'utilisation d'un extrait lipophile de Hippophae rhamnoides pour la fabrication d'une composition destinée à traiter un état cutané généré par des déséquilibres hormonaux. Dans la description ci-dessous, les références entre crochets ([ ]) renvoient à la liste des références présentée à la fin du texte. État de la technique Le fruit de Hippophae rhamnoides est un akène enveloppé du calice persistant et charnu simulant une drupe ovoïde jaune orangé, et renferme une graine. De ce fruit est extrait un jus très énergétique riche en vitamine C, en acides organiques (essentiellement de l'acide malique), qui contient aussi des vitamines B1, B3, P, des oligo-éléments, des protides et des glucides. Ce jus est riche en pulpe, et cette pulpe est source d'huile contenant des caroténoïdes (essentiellement du f3-carotène), des tocophérols, des acides gras essentiels (acide linoléique et linolénique), de l'acide palmitoléique qui est un acide gras contenu dans le sébum, très rare dans le monde végétal, des stérols, des alcools triterpéniques et des alcools gras. Enfin, de la graine de Hippophae rhamnoides est extraite une huile, plus riche en acides gras essentiels que la précédente, mais dont la teneur en acide palmitoléique est faible. L'art antérieur connaît déjà de nombreuses propriétés des différentes fractions de fruit de Hippophae rhamnoides. Le brevet FR2840809 [1] de la Demanderesse décrit l'utilisation d'une fraction hydrophile du fruit d'argousier (Hippophae rhamnoides) pour la fabrication de composition cosmétique pour la prévention ou le traitement du derme. Cette utilisation vise plus particulièrement l'amélioration de la viabilité et de l'activité métabolique des cellules dermiques, la prévention ou la lutte contre le vieillissement et le photovieillissement liés à la dégradation du derme : la perte d'élasticité et d'hydratation du derme, la perte de la résistance cutanée, formation de rides, ainsi que l'inhibition des protéases du derme telles que métalloprotéase matricielle (MMP), élastase ou collagénase, et hyaluronidase. La demande de brevet JP2212415 [2] décrit une composition pour le bain contenant une solution extraite de fruit de Hippophae rhamnoides. Cette solution est utilisée en raison de ses qualités de dispersion, d'embellissement de la peau et de la sensation agréable que provoque son utilisation sur la peau. La publication de L. Constantino (L. Constantino et al., Composition, superoxide radicals scavenging and antilipoperoxidant activity of edible fruits. Fitoterapia, vol LXV, 1, 1994, 44-47 [3]) décrit une étude du fruit de Hippophae rhamnoides dans le but d'identifier des substances naturelles susceptibles de traiter les pathologies dues aux radicaux libres. Les propriétés antiradicalaires et antilipopéroxydantes de ce fruit sont dues aux polyphénols et aux anthocyanines présents dans la phase méthanolique. De même, la publication de X. Gao (X. Gao et al., J. Agric Food Chem, 2000, 48, 1485-1490 [4]) s'intéresse aux propriétés anti-cancéreuses du fruit de Hippophae rhamnoides et présente l'utilisation de ce fruit dans des traitements anti-cancéreux. Ce document montre que la fraction hydrophile a de bonnes propriétés antiradicalaires. Une autre étude a montré l'activité bactériostatique et cicatrisante en application topique d'un extrait hydrophile d'Hippophae (G. Neatmu et al. Stud Cercet Biochim, 1982, 25, 30-34, in Chem Abst., 1983, 99, 478888e [5]). La demande de brevet JP63145210A2 [6] décrit l'utilisation de l'huile des graines ou de l'huile de la pulpe du fruit de Hippophae rhamnoides, plus particulièrement l'utilisation d'une fraction lipidique de la graine et de la pulpe pour son activité anti-oxydante. Précisément, le document décrit que cette activité est due à la présence de tocophérols. Dans l'art antérieur, les extraits lipophiles de Hippophae sont principalement utilisés pour leur activité anti-athérogénique (Basu et al., Antietherogenic effects of seabuckthorn seed oil, Phytomedecine 14(11) 770-777, 2007 [7]), leurs effets de diminution de l'accumulation plaquettaire (Johansson et al., Sea buckthorn berry oil inhibits platalet aggregation, Journal of Nutritional Biochemistry 11(10) 491-495, 2000 [8]) ainsi que pour leurs effets sur les paramètres sanguins (Eccleston et al., Effects of an antioxidant-rich juice on r'sk factors for coronary heart disease in humans, Journal of Nutritional Biochemistry, 13(6), 346-354, 2002 [9]). Il s'avère qu'aucun document ne suggère d'utiliser des extraits lipophiles de Hippophae pour traiter un état cutané généré par des déséquilibres hormonaux. La peau est un organe vital à part entière qui se compose de trois tissus distincts, assumant chacun différents rôles grâce à différents types cellulaires et structures. L'hypoderme, situé en profondeur et constitué en majeure partie de lobules graisseux (adipocytes), assure une fonction de support primaire, de protection mécanique et thermique et joue aussi un rôle de stockage des réserves énergétiques. En position intermédiaire, le derme est aussi un tissu conjonctif investi majoritairement de fibroblastes qui synthétisent les différentes protéines matricielles (collagènes et fibres élastiques) donnant à la peau ses qualités de compressibilité et d'élasticité connues. Au sein de la trame conjonctive, s'intercalent aussi d'autres cellules et structures, tel un important réseau circulatoire et nutritif, constitué des vaisseaux sanguins et des capillaires lymphatiques et les annexes épidermiques (poils, ongles, glandes pilosébacées et glandes sudoripares) qui prennent naissance dans le derme profond. Le tissu le plus exposé est l'épiderme. Cet épithélium pluristratifié (Malpighien) et kératinisant, dont la partie la plus externe est la couche cornée, se compose de différentes cellules associées à de nombreuses fonctions de barrière de protection. Les glandes sébacées sont annexées aux poils, l'ensemble constituant les follicules pilo-sébacés. Elles sont réparties uniformément et abondamment sur la surface du corps à l'exception des paumes des mains et des plantes des pieds. Leur rôle est la production de sébum et son acheminement à la surface de la peau via un canal excréteur qui traverse le derme superficiel et l'épiderme. Le sébum est composé en majeure partie de lipides, comprenant environ 42% de glycérides, 16% d'acides gras libres, 25% de cires et 12% de squalène. II forme un film lipidique qui s'émulsionne avec la sueur pour former le film hydrolipidique protecteur de la peau. Le rôle du sébum est de renforcer l'hydrophobicité et l'imperméabilité de la couche cornée, de protéger la peau grâce à ses propriétés antibactériennes et antifongiques, de donner à la peau un aspect satiné et réflecteur de lumière grâce à ses propriétés lubrifiantes et d'apporter souplesse à la couche cornée. Un excès de sébum entraîne la maladie inflammatoire et bactérienne bien connue de l'acné alors qu'un manque de sébum est la cause principale des peaux sèches et des cheveux secs. Directement dépendante des sécrétions hormonales notamment celle de la testostérone, la sécrétion de sébum, importante à la naissance est faible chez l'enfant. Elle s'active à la puberté, reste stationnaire chez l'adulte puis se ralentit à l'âge mûr, plus précisément au moment de la ménopause chez les femmes. Vers 50 ans, la peau des femmes se modifie de façon inéluctable. La peau devient plus sèche, l'aspect de sa surface plus sec, plus rêche et plus cassant, la luminosité et la radiance s'éteignent et de ce fait, les rides et les stries de déshydratation sont beaucoup plus visibles. La modification de l'aspect de leur peau participe au mal-être et aux bouleversements psychologiques qui accompagnent cette période de la vie des femmes. Il n'existe pas à ce jour de composition efficace permettant de 20 traiter efficacement et spécifiquement la peau des femmes d'âge mûr. Description de l'invention Les inventeurs ont eu l'idée de chercher et d'incorporer un ingrédient actif stimulant la production et la sécrétion de sébum dans une 25 gamme de produits cosmétiques, dermatologiques ou pharmaceutiques à destination des femmes ayant la peau particulièrement sèche ou des femmes d'un âge mûr souffrant des symptômes cutanés de la ménopause. Plus particulièrement, dans ce but, les inventeurs ont constaté après des tests appropriés que l'extrait d'Hippophae avait la propriété d'agir sur le métabolisme 30 de synthèse du sébum. La présente invention a pour objet l'utilisation d'un extrait lipophile d'Hippophae en tant qu'actif cosmétique, dermatologique, ou pharmaceutique visant à stimuler la production de sébum. Ainsi, l'extrait d'Hippophae, seul ou en combinaison avec d'autres ingrédients actifs, peut être incorporé dans une composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique pour traiter un état cutané généré par des déséquilibres hormonaux. Les inventeurs ont mis en évidence que l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides est, de manière inattendue, capable de stimuler l'activité de la 5-alpha-réductase, enzyme stimulant la production et/ou la sécrétion de sébum. L'invention a donc pour objet, l'utilisation d'un extrait lipophile de Hippophae rhamnoides pour la fabrication d'une composition destinée à 10 traiter un état cutané généré par des déséquilibres hormonaux. On entend par � déséquilibres hormonaux �, un dérèglement du niveau normal d'une ou plusieurs hormones dans l'organisme. Par exemple, des déséquilibres hormonaux peuvent être liés à la ménopause. On entend par � état cutané généré par des déséquilibres 15 hormonaux �, les conséquences physiologiques et/ou physiques liées à des déséquilibres hormonaux. Par exemple, un état cutané peut être choisi parmi la sécheresse cutanée, la perte d'éclat de la peau, la perte de satinée de la peau, la perte de velouté de la peau, la perte de brillance des cheveux et plusieurs de ces états combinés. 20 Selon l'invention, l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides ou une composition comprenant cet extrait stimule notamment l'activité de la 5-alpha-réductase (stéroïde 5-alpha-réductase). La 5-alpha réductase est une enzyme qui réduit la liaison alpha-4,5 de la testostérone avec production de la dihydrotestostérone 25 (androstanolone) qui correspond à la forme active de la testostérone et qui est impliquée dans le métabolisme du sébum. L'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides ou une composition comprenant cet extrait permet donc notamment de stimuler la production et/ou la sécrétion de sébum. L'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides peut, par exemple, 30 être présent dans la composition à une concentration comprise entre 0,001% et 100% en poids de la composition, par exemple entre 0,005 et 10% en poids de la composition. Dans le cas où l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides est présent dans la composition à une concentration de 100%, la composition consiste uniquement en un extrait lipophile de Hippophae rhamnoides. L'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides provient, par exemple, des graines de cette plante. Les graines peuvent éventuellement être coupées, réduites en poudre ou broyées. Selon l'invention, cet extrait peut comprendre des acides gras et au moins un stérol. Par exemple, l'au moins un stérol peut être choisi parmi le sitostérol, le delta-5-avenasterol, le stigmastanol, le campestérol, le campestérol, le delta-5-24-stigmastadiénol ou une combinaison de ceux-ci. Par exemple, le sitostérol peut être le bêta sitostérol. L'au moins un stérol n'a pas d'effet à lui seul sur le traitement d'un état cutané généré par des déséquilibres hormonaux. L'effet obtenu peut être lié soit aux autres composés de l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides, soit de la combinaison de ces composés avec l'au moins un stérol. L'extrait utilisé dans la présente invention peut, par exemple, être obtenu par la technologie du CO2 supercritique. L'extrait utilisé dans la présente invention peut aussi, par exemple, être obtenu par pression, par exemple, à froid du matériel végétal ou par extraction à l'hexane. Alternativement, l'extrait peut être un extrait commercial de la société allemande FLAVEX (Seabuckthorn seed CO2-to extract, référence 041.002) à partir de graines d'argousier sauvage. L'argousier peut également être cultivé, par exemple, en conventionnel ou encore sous le mode certifié agriculture biologique. La composition peut, par exemple, se présenter sous la forme d'une crème, d'une pommade, d'une solution, d'une émulsion, d'une micro-émulsion, d'un sérum, d'un gel, d'une lotion, d'un lait, d'un baume, d'un onguent, d'un beurre, d'une huile, d'un comprimé, d'une gélule, d'une solution à boire. Par ailleurs, la composition peut, par exemple, être placée dans un pot, un flacon-pompe, une lingette, un masque, un dispositif transdermique, un patch, un spray, une capsule, une gélule. L'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides peut, par exemple, être utilisé pour la fabrication d'une composition destinée à traiter un état cutané généré par des déséquilibres hormonaux, en association avec un extrait hydrophile de Hippophae rhamnoides. L'effet de la fraction hydrophile de fruits de Hippophae rhamnoides, déjà connue pour être in vitro un inhibiteur de la production des radicaux libres, permet également d'inhiber certaines protéases du derme et de l'épiderme, ce qui aura un double effet pour lutter contre le vieillissement [1]. Par ailleurs, l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides peut être utilisé, par exemple, en association avec un excipient dermatologicalement acceptable, par exemple, en association avec un excipient pharmaceuticalement acceptable. L'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides peut, par exemple, être utilisé dans une composition cosmétique, une composition dermatologique ou une composition pharmaceutique. EXEMPLES Exemple 1 : Procédé d'obtention de l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides L'extrait testé par les inventeurs est un extrait lipophile de graines d'argousier, obtenu par la technologie du CO2 supercritique. II contient des triglycérides d'acides gras et molécules lipophiles contenues dans l'insaponifiable (caroténoides, stérols, tocophérols). La technologie du CO2 supercritique est basée sur le pouvoir solvant du CO2 qui est modulable à volonté selon les conditions de pression et de température qu'on lui applique. Un procédé d'extraction par CO2 supercritique fonctionne en circuit fermé. Le système d'extraction est composé d'une cuve remplie de CO2 liquide à température ambiante, une pompe permettant d'augmenter la pression et d'aider la circulation des fluides, un extracteur contenant les graines de Hippophae, une valve d'expansion et un séparateur pour collecter l'extrait. Le système comprend également des échangeurs de chaleur pour ajuster les conditions de températures afin d'amener le CO2 au-dessus de son point critique. Dans les conditions supercritiques établies dans l'extracteur, à savoir à une température supérieure à 31,1°C et une pression supérieure à 73,8 bars, le CO2 possède des propriétés de solvant pour les molécules lipophiles. Le fluide obtenu est caractérisé par une grande diffusivité (de l'ordre de celle des gaz), ce qui lui confère une bonne aptitude à la diffusion, et une densité élevée qui le dote d'une capacité de transport et d'extraction importante. Sous les conditions du séparateur dans sa forme gazeuse (30°C, 60 bars), le CO2 ne possède pas de propriétés de solvant. Dans cet exemple, la température est de 32°C, la pression est de 74 bars. Les graines de Hippophae sont placées dans l'extracteur traversé d'un flux de CO2 supercritique. Le fluide se charge en composé extrait, puis il est détendu, passe en phase gazeuse et se sépare du composé extrait. Ce dernier est recueilli dans le séparateur. Après extraction, l'extrait est précipité dans le séparateur et le CO2 sous forme gazeuse est récupéré et recyclé. Le CO2 repasse ensuite dans le condenseur et est liquéfié par refroidissement pour permettre un prochain cycle d'extraction. L'extrait récupéré subi une ou plusieurs étapes de post-extraction consistant en une décantation de l'eau, une homogénéisation, une filtration, une centrifugation ou une standardisation. Les extraits CO2 sont plutôt lipophiles : les molécules solubles dans le CO2 supercritique, donc extractibles, sont en effet des composés peu polaires de faible masse moléculaire, tels que les composés aromatiques, des alcools, des esters (triglycérides), de nombreux pigments, les stérols, les oligomères, etc. Dans les exemples qui suivent, les inventeurs décrivent des tests d'efficacité sur cellules humaines, réalisés avec l'extrait commercial flavex (Seabuckthorn seed CO2-to extract, référence 041.002). Ils ont constaté, de manière inattendue, que l'extrait d'Hippophae présente une action au niveau de la peau et plus précisément au niveau de la production de sébum, en particulier chez les femmes d'âge mûr. Exemple 2 : Stimulation de l'activité 5-alpha-réductase (test cellulaire) Dans cette expérience, le finastéride provient de Sigma (ref F1293). Les fibroblastes humains transformés (Hs68) proviennent de ATCC (ref CRL-1635). La DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) provient de Invitrogen (ref 31053028). Le SVF (Sérum de Veau Foetal) provient de In~~'itrogen (ref 1070098). In vitro, sur des cultures de fibroblastes, il est possible de quantifier la présence et la transformation de la testostérone et donc d'en déduire l'activité de l'alpha-5-réductase et ses modifications. Le finastéride est un agent qui bloque la conversion de la testostérone en 5-hydroxytestostérone et donc qui inhibe l'activité de la 5-alpha-reductase. C'est donc le témoin interne négatif aux manipulations. Des cultures de fibroblastes humains transformés (Hs68) ont été réalisées en conditions classiques (DMEM + 10% en volume/volume de SVF) et traitées pendant 24h avec l'extrait d'Hippophae (concentration définie comme non cytotoxique, 50pg/mL) avant l'adjonction de testostérone marquée au 14C. À l'issue de 24 heures supplémentaires, les stéroïdes (testostérone et 5-alpha-déhydrotestostérone) des surnageants sont quantifiés grâce à la radioactivité après une séparation par chromatographie couche mince. Les valeurs de déhydrotestostérone radioactive (dpm) sont exprimées en % des stéroïdes totaux et sont corrigées par le taux de protéines cellulaires (Tableau 1). Des cultures ont aussi été traitées avec le finastéride (20pM), considéré comme le contrôle témoin interne de l'expérience. Tableau 1 : Effet de l'extrait d'Hippophae sur l'activité de la 5-alpha- réductase Milieu seul Finastéride Hippophaé/ Argousier Déhydrotestostérone (%) 6,71 2,95 9,07 Déhydrotestostérone/mg 33,22 14,44 46,20 protéines (%) Activité 5-alpha-réductase 100 43,5 139,1 En présence de finastéride, l'activité de l'enzyme est inhibée de 56,5%. De manière totalement inattendue, les résultats montrent une augmentation significative de plus de 39% de l'activité 5-alpha-réductase des cellules, lorsque celles-ci sont incubées avec l'extrait d'Hippophae/Argousier. Exemple 3 : Synthèse et maturation de collagène de type I par des fibroblastes humains normaux (Synthèse MEC) Dans cette étude, les fibroblastes humains normaux 5 proviennent de plastie abdominale et le TGF-beta provient de R&D system (ref 240-B-010). Des cultures de fibroblastes sont réalisées dans le même milieu que celui de l'exemple 2, complémenté de Vitamine C (Sigma ref A8960) et de TGF-beta pour servir de témoin positif interne de l'expérience. Une partie des 10 cultures est traitée par l'extrait de Hippophae. On réalise un immunomarquage de façon classique sur l'ensemble des cultures par un anticorps spécifique fabriqué chez le lapin et dirigé contre le collagène I (Tebu 600-401-103-05) et révélé en fluorescence par un anticorps GAR couplé alexa (Invitrogen, A11008 GAR-ALEX 488). 15 Tableau 2 : Effets de l'extrait d'Hippophae sur la production de collagène de type I Les données sont exprimées en pourcentages de production de 20 collagène I par mesure de la surface marquée rapportée au nombre de cellules par rapport au témoin négatif (milieu seul) fixé arbitrairement à 100. L'extrait CO2 d'argousier stimule de manière significative, en outre de l'activité de la 5-alpha-réductase, la production de collagène I par les fibroblastes/cellules dermiques. 25 Plus particulièrement, en présence de 8.106% d'extrait CO2 d'argousier augmente de manière significative la synthèse de collagène I par les fibroblastes/cellules dermiques à hauteur de 41%. Traitement Témoin (milieu seul) % fluorescence après marquage collagène I 100 Extrait CO2 graines argousier à 8.10- 6% v/v(1) 141 (en % par rapport au témoin) Cette augmentation entraîne plus de matière dans le derme, plus de fermeté et plus de volume. Ceci présente un avantage certain dans la mesure où le collagène disparaît en fonction de l'âge et/ou des irradiations UV. Exemple 4 : Synthèse glycosaminoglycanes (GAG) totaux par des fibroblastes humains normaux (Synthèse MEC) L'étude d'un extrait de Hippophae sur la synthèse des GAG totaux donne une indication directe sur la synthèse de l'acide hyaluronique qui est le principal GAG. Les cultures de fibroblastes humains normaux sont réalisées pendant 72h dont 24h en présence de 3H glucosamine pour suivre l'incorporation de ce motif dans tous les GAG d'une part et en présence de 35Sulfate pour doser les GAG sulfatés (dermatane, chondroïtine, héparine...). L'acide hyaluronique est le seul GAG non sulfaté ; l'impact du traitement sur sa synthèse sera donc accessible par complémentarité. Tableau 3 : Effet de l'extrait d'Hippophae sur la production d'acide hyaluronique Concentrations % GAG % GAG % acide testées sulfatés totaux hyaluronique Témoin milieu seul 100 100 - Extrait CO2 0,0002 110 120 +10% graines argousier (en % par rapport au témoin) 0,0010 110 177 +67% L'extrait CO2 de graine d'argousier présente une forte activité au niveau de la synthèse des GAG totaux, mais pas des GAG sulfatés. Ce qui indique plus particulièrement une action au niveau de la synthèse de l'acide hyaluronique. En présence de 0,001 % d'extrait CO2 de graine d'argousier, la 25 synthèse d'acide hyaluronique augmente de manière significative à hauteur de 67%. Cette augmentation entraîne plus de matière, plus d'hydratation, plus de fermeté, plus de volume et plus de rétention de molécule d'eau. Ceci présente un avantage certain dans la mesure où le 5 collagène disparaît en fonction de l'âge et/ou des irradiations UV. Exemple 5 : Synthèse intégrines par des kératinocytes humains normaux (adhérence JDE) Dans cette étude, les kératinocytes humains normaux proviennent de plastie abdominale. - Synthèse ARNm des intégrines alpha2 alpha3 et alpha6 (a2, a3, a6) (RTPCR) Les cultures de kératinocytes sont réalisées et traitées pendant 24 heures avec l'extrait CO2. Les ARNm de chaque culture sont ensuite extraits 15 et subissent une réaction de RT-PCR (appareil Light Cycler (marque de commerce), Roche molecular syst Inc.) (Bar M. et al., Selection and validation of candidate housekeeping genes for studies of human keratinocytes--review and recommendations, J Invest Dermatol. 2009 Mar;129(3):770-3 [10]; Balogh A. et al., Reference genes for quantitative real time PCR in UVB irradiated 20 keratinocytes, J. Photochem Photobiol B. 2008 Dec 11;93(3):133-9. Epub 2008 Aug 14 [Il]; Minner F. et Poumay Y., Candidate housekeeping genes require evaluation before their selection for studies of human epidermal keratinocytes, J Invest Dermatol. 2009 Mar;129(3):770-3. Epub 2008 Aug 21 [12]). 25 Tableau 4 : Effets de l'extrait d'Hippophae sur la transcription des intégrines par les kératinocytes Traitements Concentration a2 a3 a6 Témoin négatif Milieu seul 100 100 100 Extrait CO2 graines argousier 8.10"5% (1) 121 116 101 (en % v/v par rapport au témoin, GAPDH constante) 1,6.10"5% (1) 123 104 115 10 L'extrait CO2 d'argousier stimule la transcription d'intégrines par les kératinocytes, et plus particulièrement celle des alpha2. - Synthèse protéique des intégrines Les cultures de kératinocytes sont réalisées et traitées en chambre de culture et subissent, après démontage du système, une révélation immunohistochimique des intégrines a2 et a3. Tableau 5 : Effets de l'extrait d'Hippophae sur l'expression des intégrines 10 en présence d'une couche protéique (� coating �) au collagène IV Dans ce tableau, le signe � = � signifie : non significativement différent, le signe � 71 � signifie : augmente de manière significative La couche protéique est déposée de manière classique par une 15 étape de mise en contact et de séchage. L'extrait CO2 d'argousier à 1,6.10-5% (v/v) présente une augmentation de l'expression des alpha3-betal (a3bl) en présence du � coating � au collagène IV ou un léger effet sur les intégrines alpha2-betal (a2bl) avec un � coating � à la laminine. 20 L'extrait de Hippophae possède, en outre des effets précités, un effet stimulateur de la synthèse des intégrines, permettant une meilleure adhésion kératinocytes/kératinocytes et kératinocyte/membrane basale et donc une meilleure adhésion au niveau de la jonction dermo-épidermique. La stimulation de la synthèse des intégrines a pour effet un meilleur 25 conditionnement de tous les processus épidermiques, par exemple, la division cellulaire, par exemple, la biosynthèses cellulaires et membranaires, par exemple, la sécrétions extracellulaires. Cette stimulation procure des bénéfices sur l'éclat de la peau et sur la protection de celle-ci par une amélioration de la fonction barrière de la 30 peau. Témoin (0 pg/cm2) 3 pg/cm2 a2bl a3bl a2bl a3bl Extrait CO2 graines argousier à 1,6.10"5 % (v/v) (données qualitatives) 71 5 Exemple 6 : Exemple de formule : Crème visage jour On prépare, par mélange des différents composants, une crème ayant la composition décrite dans le tableau 6 ci-dessous. Tableau 6 : Exemple de composition sous forme de crème de jour pour visage. INGREDIENT % EAU 43.8% SILANOL 8.0% HUILE DE PEPIN DE RAISIN 7.0% GLYCERINE 100% VEG 6.0% EMOLLIANT 5.0% PROPYLENE GLYCOL 4.1% EAU DE BLEUET 4.0% ACIDE STEARIQUE 3.0% ALCOOL GRAS 3.0% DIMETHICONE 3.0% HUILE HYDROGENEE 3.0% AGENT NETTOYANT 2.0% AMIDON DE MAIS 2.0% ÉMULSIONNANT 2.0% BEURRE DE KARITE 1.0% HYDROLYSAT DE SOJA 1.0% ARGOUSIER EXTRAIT HYDROPHILE 0.7% CONSERVATEUR 0.6% VITAMINE F 0.3% ALLANTOINE 0.1% GOMME TARA 0.1% GOMME XANTHANE 0.1% VITAMINE A 0.1% VITAMINE E 0.1% ARGOUSIER EXTRAIT LIPOPHILE 0.1% 10 Listes des références 1. FR2840809 2. JP2212415 3. L. Constantino et al., Fitoterapia, vol LXV, 1, 1994, 44-47 4. X. Gao et al., J. Agric Food Chem, 2000, 48, 1485-1490 5. G. Neatmu et al. Stud Cercet Biochim, 1982, 25, 30-34, in Chem Abst., 1983, 99, 478888e 6. JP63145210A2 7. Basu et al., Anti-etherogenic effects of seabuckthorn seed oil, Phytomedecine 14(11) 770-777, 2007 8. Johansson et al., Sea buckthorn berry oil inhibits platalet aggregation, Journal of Nutritional Biochemistry 11(10) 491-495, 2000 9. Eccleston et al., Effects of an antioxidant-rich juice on risk factors for coronary heart disease in humans, Journal of Nutritional Biochemistry, 13(6), 346-354, 2002 10. Bir M. et al., Selection and validation of candidate housekeeping genes for studies of human keratinocytes--review and recommendations, J Invest Dermatol. 2009 Mar;129(3):770-3 11. Balogh A. et al., Reference genes for quantitative real time PCR in UVB irradiated keratinocytes, J. Photochem Photobiol B. 2008 Dec 11;93(3):133-9 12. Minner F. et Poumay Y., Candidate housekeeping genes require evaluation before their selection for studies of human epidermal keratinocytes, J Invest Dermatol. 2009 Mar;129(3):770-3 REVENDICATIONS1. Utilisation d'un extrait lipophile de Hippophae rhamnoides pour la fabrication d'une composition destinée à traiter un état cutané généré par des déséquilibres hormonaux. 2. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides stimule l'activité de la 5-alpha-réductase. 3. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides stimule la production et/ou la sécrétion de sébum. 4. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle les déséquilibres hormonaux sont liés à la ménopause. 5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans laquelle l'état cutané généré par des déséquilibres hormonaux est choisi parmi la sécheresse cutanée, la perte d'éclat de la peau, la perte de satiné de la peau, la perte de velouté de la peau, la perte de brillance des cheveux et à plusieurs de ces états. 6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans laquelle l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides est présent dans la composition à une concentration comprise entre 0.001% et 100% % en poids de la composition 7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans laquelle l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides est présent dans la composition à une concentration comprise entre 0.005% et 10% % en poids de la composition 8. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, dans laquelle l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides provient des graines de cette plante. 9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, dans laquelle l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides comprend des acides gras et au moins un stérol. 10. Utilisation selon la revendication 9, dans laquelle l'au moins un stérol est le sitostérol, le delta-5-avenasterol, le stigmastanol, le campestérol, le delta-5-24-stigmastadiénol ou une combinaison de ceux-ci. 11. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, dans laquelle l'extrait est obtenu par la technologie du CO2 supercritique. 15 12. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, dans laquelle la composition se présente sous la forme d'une crème, d'une pommade, d'une solution, d'une émulsion, d'une micro-émulsion, d'un sérum, d'un gel, d'une lotion, d'un lait, d'un baume, d'un onguent, d'un beurre, d'une 20 huile, d'un comprimé, d'une gélule, d'une solution à boire. 13. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, dans laquelle la composition est placée dans un pot, un flacon-pompe, une lingette, un masque, un dispositif transdermique, un patch, un spray, une 25 capsule, une gélule. 14. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, dans laquelle l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides est utilisé en association avec un extrait hydrophile de Hippophae rhamnoides 15. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 14, dans laquelle l'extrait lipophile de Hippophae rhamnoides est utilisé en association avec un excipient dermatologicalement ou pharmaceuticalement acceptable. 30 16. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 15, où la composition est choisie dans le groupe comprenant une composition cosmétique, une composition dermatologique et une composition 5 pharmaceutique.