Brevet FR2932088A1 — publié le 20091211

Utilisation d'un extrait de Lepechinia caulescens comme agent cosmétique, et composition cosmétique le contenant. La présente invention concerne l'utilisation d'un extrait de 5 plantes appartenant au genre Lepechinia, comme agent cosmétique et une composition cosmétique le contenant. Plus particulièrement, l'invention a pour objet l'utilisation d'un extrait de l'espèce végétale Lepechinia caulescens comme agent cosmétique, en tant qu'agent actif dans des compositions cosmétiques, 10 ainsi que les méthodes de soin cosmétique utilisant lesdites compositions. Arrière plan technologique L'apoptose est un processus biologique actif d'élimination par fragmentation, de certaines cellules de l'organisme. Elle constitue une élimination programmée de cellules au 15 niveau des tissus biologiques, et sous contrôle génétique. L'élimination peut être naturelle (cellules surnuméraires dans un tissu) ou induite par différents stress. La cascade biologique de l'apoptose est connue et met en oeuvre nombre d'effecteurs tels que les caspases, notamment les caspases 20 effectrices 3 ou 7, qui vont réaliser le programme d'apoptose, et les caspases initiatrices 8 et/ou 9, qui vont le déclencher. On connaît également un certain nombre d'inhibiteurs de l'apoptose (Deveraux et al, Genes Dev. 13 (1999), pp. 239-254, parmi lesquels la survivine. Ces inhibiteurs régulent donc la survie des cellules 25 participant ainsi à l'homéostasie cellulaire dans les tissus biologiques. La survivine, seule membre de la famille des IAPs (Inhibitor of Apoptosis Protein), est une protéine bi-fonctionnelle, capable à la fois de pondérer l'apoptose des cellules et de réguler leur cycle cellulaire. La survivine inhibe en particulier l'activation de certaines 30 caspases, notamment les caspases 3, 7 et 9. Cette protéine est exprimée dans les tissus embryonnaires à forte croissance, mais ne l'est pas dans les tissus différenciés adultes, excepté dans les tissus ayant un renouvellement cellulaire physiologique et/ou engagés dans un processus de réparation. Ainsi au niveau cutané, elle est tout particulièrement exprimée par les kératinocytes de la couche basale de l'épiderme qui assurent la formation et le renouvellement de ce dernier. C'est dans cette couche basale que se trouvent les kératinocytes souches de l'épiderme, cellules à haut potentiel de régénération de ce tissu dont il a été démontré qu'elles étaient les plus efficaces à former un épiderme complet (JL Xie et al, J Piast Reconstr Aesthet Surg. 2007; 60(9);983-90). Or il a été montré que la survivine est principalement exprimée dans les cellules souches de l'épiderme (Marconi A, Da//ag/io K, Lotti R, Vaschieri C, Truzzi F, Fantini F, Pince/li C, Stem tells 2007: 25: 149-15.5).. A l'inverse une surexpression de la survivine montre une diminution significative du nombre de cellules apoptotiques dans l'épiderme après une exposition aux rayonnements ultraviolets (Grossman et al., 2001 J Clin Invest 108,991û999). Il a aussi été démontré que l'inactivation des intégrines béta-1, abolit complètement l'expression cellulaire de la survivine (MarconiA et al, Stem tells 2007: 25 : 149-155) et conduit les cellules à l'apoptose. Les intégrines béta-1 sont des protéines d'adhésion par lesquelles les kératinocytes de la couche basale épidermique adhèrent aux protéines de la jonction dermo-épidermique. Les intégrines béta-1 sont exprimées plus fortement par les cellules souches de l'épiderme (P Jones, Ce/11993, 73; 713-724, Kaur J Invest Dermatol 2006, 126, 1450-1458) ce qui corrobore l'observation d'une expression plus forte de la survivine dans ces cellules. Or au cours du vieillissement, on observe une baisse de l'expression des intégrines béta-1 dans les kératinocytes (B Le Var/et et a/ > Investig Dermato/ Symp Proc.1998, 3; 172-179) et dans les zones cutanées photoexposées ridées (S Bosset et al Brit/sh J Dermatol 2003, 148; 7770-778). Ainsi les protéines assurant au niveau des cellules basales de l'épiderme le maintien de la survivine, diminuent avec l'âge et l'on observe parallèlement une augmentation de la sensibilité à l'apoptose de ces cellules ainsi qu'une diminution de cellules cyclantes (Zut/an/ et J. Invest. Dermatol, 2004, 123:2, A50, 302), observations convergeant pour indiquer un probable déficit en survivine dans les peaux âgées. Outre son rôle régulateur de l'apoptose, la survivine a été identifiée comme un constituant du � chromosomal passenger complex � qui coordonne les chromosomes avec le cytosquelette au cours de la mitose ( Vader et al EMBO reports 2006 7, 1, 85û92) ; elle joue donc un rôle essentiel dans la division normale des cellules, division altérée au cours du vieillissement avec pour corollaire, un moindre renouvellement de l'épiderme, son affinement, et le développement des rides. La survivine est donc un régulateur de la survie et de la résistance des kératinocytes ; elle agit en modulant la sensibilité à l'apoptose des kératinocytes localisés au niveau de la couche basale de l'épiderme dont les cellules souches. Elle régule aussi leur capacité de renouvellement et de régénération de l'épiderme. Elle permet ainsi d'épargner le capital cellulaire de l'épiderme et 25 de maintenir un renouvellement cellulaire épidermique efficace. État de la technique Le document WO 2006/069192 (GILLfIIE Co) divulgue l'utilisation en cosmétique d'agents inhibiteurs de la survivine pour un effet de réduction de la pousse des poils et des cheveux. 30 A ce jour, il n'a pas été décrit de composés agissant en tant que stimulant de l'expression de la survivine, pour des applications en cosmétique. En ce qui concerne la plante du genre Lepechinia , celui-ci comprend environ 40 espèces, parmi lesquelles Lepechinia caulescens, qui sont essentiellement distribuées au Mexique et en Amérique du sud. Lepechinia caulescens (Syn : Horminum caulescens Ortega) une de ces espèces, est une plante basse pérenne érigée de 30 à 80cm de haut dont le cycle végétatif est dépendant des saisons, qu'on localise au Mexique, Nicaragua et Guatemala à des altitudes comprises entre 1200 et 3900m. Lepechinia caulescens est une espèce reconnue en médecine traditionnelle, en particulier pour son activité sur les diarrhées et vomissements. Il existe des données publiées sur des études visant à isoler des composés chimiques présents dans ces plantes. Des acides di- et triterpénoïdes ont été isolés à partir de parties aériennes de Lepechinia caulescens (Delgado et al., Phytochemistry, 1994, 15 37 (4), 1119-21). Des auteurs ont mis en évidence l'activité vasorelaxante d'un extrait méthanolique de Lepechinia caulescens, activité médiée par la présence d'acide oléanolique et d'acide ursolique, deux acides triterpénoïques isolés à partir de cette plante. 20 D'autres auteurs ont mis en évidence sur un iléum isolé de rat, l'activité spasmolytique d'extrait organique obtenu à partir de la plante entière de l'espèce Lepechinia caulescens, confirmant expérimentalement, l'usage traditionnel de la plante par les population locales mexicaines (Rodriguez-Lopez et al,, Fitoterapia, 2003 74 725-728). 25 Des auteurs ont aussi caractérisé une activité insulinomimétique d'un extrait organique de cette plante (Roman et al, Arch. Mec/. Res. (Mex.), 1992; 23 105). Plus récemment, le document US 6,265,370 a décrit l'utilisation de fleurs fraîches ou séchées de Lepechinia sous forme pulvérisée, en tant 30 qu'agent odorant dans un procédé de préparation de savon. Cependant, à ce jour, il n'existe pas de données concernant l'utilisation d'une espèce végétale du genre Lepechinia, sous la forme du produit d'un quelconque procédé d'extraction, en tant qu'agent actif dans des compositions cosmétiques. Au cours de leurs travaux, les inventeurs de la présente invention ont mis en évidence qu'un extrait obtenu à partir d'un matériel végétal comprenant ou formé par au moins une plante du genre Lepechinia, en particulier de l'espèce végétale Lepechinia caulescens, active ou stimule l'expression de la protéine survivine dans les kératinocytes de la couche basale de l'épiderme, et plus particulièrement dans les cellules souches de ladite couche basale. Ledit extrait joue ainsi un rôle protecteur vis-à-vis des cellules régénératrices de l'épiderme humain et tout particulièrement des cellules souches de la couche basale de l'épiderme. Ces extraits peuvent ainsi être utilisés en tant qu'agent cosmétique ou dermatologique, ou comme agent actif dans des compositions cosmétiques ou dermatologiques, visant notamment à prévenir ou retarder l'apparition des signes du vieillissement cutané ou à en atténuer les effets ou encore à favoriser la longévité cellulaire ou tissulaire ; à favoriser la reconstruction d'un épiderme endommagé ainsi que la cicatrisation de plaies cutanées de la peau normale et des plaies ulcéreuses cicatrisant mal ; à favoriser la repousse des cheveux ou le renforcement capillaire ; à favoriser la croissance des ongles et/ou en renforcer la résistance ; en tant qu'adjuvant prolongateur de cultures de cellules in-vitro à des fins de production d'épiderme de culture (épidermes reconstruits) dans un but thérapeutique, par exemple dans des greffes ou encore dans le maintien de populations purifiées de cellules souches épidermiques ou de follicules pileux in vitro à des fins thérapeutiques ou de recherche.30 Buts de l'invention L'invention a pour but principal de proposer l'utilisation d'un extrait végétal cosmétiquement acceptable obtenu à partir de plantes, comme agent cosmétique. L'invention a également pour but l'utilisation dudit extrait en tant qu'agent cosmétique, ou comme agent actif dans des compositions cosmétiques, et les méthodes de soin cosmétique utilisant lesdites compositions : a) pour prévenir ou retarder l'apparition des signes du vieillissement cutané ou en ralentir les effets ; et/ou b) pour la reconstruction de l'épiderme ou de son stratum corneum lorsqu'il est endommagé, notamment par les rayonnements ultraviolets, et/ou c) pour restaurer le fonctionnement du cycle pilaire, pour prévenir ou ralentir la chute des cheveux, pour accélérer ou favoriser leur repousse, par exemple en cas d'alopécie ou pour renforcer les cheveux fragiles, et/ou d) pour favoriser la croissance de l'ongle et/ou renforcer sa résistance. L'invention a encore pour but principal de fournir une méthode de soin cosmétique, utilisant un extrait végétal cosmétiquement acceptable, notamment pour réaliser les soins cosmétiques indiqués ci-dessus. L'invention a enfin pour but principal de fournir une méthode de culture in-vitro de cellules souches et/ou de cellules à haut potentiel clonogénique à des fins d'études fondamentales ou de production d'épiderme de culture, tel que de l'épiderme reconstruit, dans un but thérapeutique, par exemple, comme dans le cas de greffe, suite à des brûlures ou des plaies ulcéreuses qui cicatrisent mal, comprenant l'utilisation d'un extrait végétal acceptable avec ladite culture de cellules, obtenu à partir de plantes. Description de l'invention: Un premier objet de la présente invention porte sur l'utilisation d'un extrait végétal obtenu à partir d'un matériel végétal formé par, ou comprenant, au moins une plante dont l'espèce appartient au genre Lepechinia, en particulier un extrait obtenu à partir d'un matériel végétal formé par, ou comprenant, au moins une plante de l'espèce végétale Lepechinia caulescens, comme agent cosmétique. Le matériel végétal utilisé peut être la plante entière ou une partie de la plante telle que la racine, le rhizome ou une partie aérienne, notamment la tige, les feuilles, les fleurs les graines ou les boutons floraux. L'extrait est préférentiellement obtenu à partir des parties aériennes de la plante et en particulier des feuilles. Préalablement à l'étape d'extraction elle-même, le matériel 15 végétal peut avoir été séché et/ou broyé. Selon une mise en oeuvre préférée de l'extraction, le matériel végétal se trouve à l'état sec et broyé. Outre des plantes du genre Lepechinia, et en particulier de l'espèce végétale Lepechinia caulescens, le matériel végétal à partir 20 duquel est préparé l'extrait de l'invention peut comprendre une ou plusieurs autres plantes, indifféremment sous forme de plantes entières ou de parties de plante. Ces plantes peuvent être d'un genre différent du genre Lepechinia, ou des plantes d'une autre famille, connues pour avoir des 25 propriétés similaires ou complémentaires à celles mises en évidence pour les plantes du genre Lepechinia. On pourra choisir en particulier des plantes dont les extraits sont connus pour ralentir ou prévenir les effets du vieillissement de la peau, par divers mécanismes tels que le maintien de l'intégrité de la 30 structure de la peau ou une action sur les rides. L'extrait peut être préparé par différents procédés d'extraction connus de l'Homme du Métier. Toutefois, l'extraction est en particulier réalisée par mise en contact du matériel végétal sélectionné avec un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. Selon la présente invention, l'expression � solvant polaire � signifie que le solvant a une valeur d'indice de polarité P' qui est égale ou supérieure à une valeur de 4. L'indice de polarité est une grandeur calculée sur la base de 10 grandeurs thermodynamiques (de solubilité et de changement d'état) qui met en évidence le caractère plus ou moins polaire d'une molécule. On se reportera, pour les indices de polarité des solvants, à l'article de L.R. SNYDER ; Classification of the solvant properties of common liquids; Journal of Chromatography, 92 (1974), 223-230, qui est 15 inclus par référence à la présente demande. A titre de solvant polaire ou de mélange de solvants polaires utilisable pour l'étape d'extraction, on choisira avantageusement un solvant ou un mélange de solvants choisi parmi l'eau, un alcool en C1-C4, choisi préférentiellement parmi l'éthanol ou le butanol, un glycol choisi 20 préférentiellement parmi le glycérol, le butylèneglycol et le propylèneglycol et leurs mélanges. Les mélanges préférés sont des mélanges d'au moins un alcool et d'eau ou d'au moins un glycol et d'eau, comprenant au moins 10% v/v d'alcool ou de glycol, le solde étant constitué d'eau. 25 Parmi ces mélanges de solvant, on préfère un mélange d'eau et d'éthanol dans un rapport 50/50 v/v ou un mélange d'eau et de butylène glycol dans un ratio 50/50 v/v. L'étape d'extraction proprement dite est de préférence réalisée par reflux à chaud, pendant au moins 30 minutes. 30 Selon une autre variante de l'invention, l'extraction peut également être réalisée par un procédé mettant en oeuvre un solvant polaire à l'état subcritique, ledit solvant étant avantageusement l'eau à l'état subcritique. L'extraction peut aussi comprendre, de façon optionnelle, une étape supplémentaire consistant en un traitement du matériel végétal ou de l'extrait végétal, visant à le décolorer partiellement ou complètement, ou à le purifier. Cette étape de décoloration peut, par exemple, consister en un traitement du matériel végétal préalablement à l'extraction elle-même, ou de l'extrait, par une solution d'un solvant ou d'un mélange de solvant apolaires, de préférence en un traitement par un alcane en C6-C7, par exemple l'heptane, ou par un traitement consistant en une mise en contact de l'extrait avec des particules de charbon actif, ou bien encore par un traitement à l'aide du CO2 à l'état supercritique. L'extraction peut être complétée par une étape d'élimination partielle ou totale des solvants d'extraction. Dans le premier cas, on concentre généralement l'extrait jusqu'à obtenir un concentré aqueux dépourvu de quantités significatives de solvant organique, dans le second cas on obtient un résidu sec. De façon alternative, le produit de l'étape d'extraction peut être, lyophilisé ou atomisé pour se présenter sous la forme d'une poudre. La poudre peut être utilisée en l'état dans une composition cosmétique selon l'invention ou être re-dispersée dans un solvant ou un mélange de solvants. De façon générale, le produit de l'étape d'extraction peut être dissous ou dispersé dans un solvant ou un mélange de solvants, pour être utilisé à titre d'agent actif dans les compositions cosmétiques de l'invention. Le solvant ou le mélange de solvants dans lequel l'extrait est dissous ou dispersé peut être identique ou différent de celui ayant servi à l'extraction. L'extrait de l'invention peut également être adsorbé sur un support avantageusement choisi parmi les poudres de nylon, poreuses ou non poreuses et les micas ou toute substance minérale lamellaire. Dans ce cas, l'extrait utilisé est préférentiellement un extrait 5 aqueux. L'invention a encore pour objet l'utilisation d'un extrait végétal d'une plante de l'espèce appartenant au genre Lepechinia, de préférence un extrait de l'espèce végétal Lepechinia caulescens, en tant qu'agent actif dans des compositions cosmétiques. 10 L'invention concerne en particulier l'utilisation de l'extrait dans une composition cosmétique, en tant que l'un des agents cosmétiques ou comme l'un des agents actifs destinés à réaliser les soins cosmétiques précités, notamment pour prévenir ou retarder l'apparition des signes du vieillissement cutané ou à en ralentir les effets; et/ou pour la 15 reconstruction de l'épiderme ou de son stratum corneum endommagé, notamment par les rayonnements ultraviolets, et/ou pour prévenir ou ralentir la chute des cheveux, accélérer ou favoriser leur repousse, notamment en cas d'alopécie ou pour renforcer les cheveux fragiles, et/ou pour favoriser la croissance de l'ongle et/ou renforcer sa résistance. 20 Selon l'invention, l'agent cosmétique, ou l'agent actif précité est plus particulièrement délivré par voie topique sous la forme d'une composition cosmétique le contenant comme l'un de ses agents actifs, en solution ou en dispersion dans au moins un véhicule cosmétiquement acceptable adapté à une application de ladite composition sur la peau du 25 corps ou du visage ou des ongles. Ainsi, la composition cosmétique comprend une quantité efficace d'au moins un agent cosmétique tel que précédemment défini comprenant un extrait de la plante Lepechinia, pour obtenir l'effet recherché. 30 Un autre objet de l'invention est une méthode de soin cosmétique pour prévenir ou retarder l'apparition des signes du vieillissement cutané ou en atténuer les effets, ladite méthode étant caractérisée en ce qu'elle comprend la délivrance sur au moins une zone concernée de la peau du corps ou du visage, d'une quantité efficace d'au moins un agent cosmétiquement acceptable activant ou stimulant l'expression de la survivine comprenant au moins un extrait de la plante du genre Lepechinia tel que précédemment défini ou tel que résultant des exemples, en particulier une plante, de l'espèce Lepechinia caulescens. Selon une première mise en oeuvre de l'invention, ladite méthode de soin cosmétique comprend l'application sur au moins une partie de la peau du visage ou du corps présentant ou susceptible de présenter des signes de vieillissement cutané, d'une composition cosmétique, par exemple une crème ou un sérum, comprenant, comme l'un de ses agents actifs, au moins un agent actif stimulant l'expression de la survivine, comprenant au moins un extrait d'une plante appartenant au genre Lepechinia, en particulier de l'espèce Lepechinia caulescens, en vue d'obtenir un effet antiride, par un phénomène de re-densification cellulaire de l'épiderme, et au creux des rides, et par l'accélération ou le maintien de son renouvellement. On sait que le phénomène de re-densification cellulaire de l'épiderme s'affine avec l'âge tandis que le renouvellement cellulaire de l'épiderme diminue avec l'âge. Selon une autre mise en oeuvre de l'invention, ladite méthode de soin cosmétique comprend l'application d'une composition comprenant comme l'un de ses agents actifs, au moins un extrait activateur ou stimulateur de l'expression de la survivine, comprenant au moins un extrait d'une plante appartenant au genre Lepechinia, en particulier de l'espèce Lepechinia caulescens, sur des zones cutanées exposées au soleil, pour renforcer la résistance des kératinocytes de la couche basale de l'épiderme à l'apoptose de façon à réduire la perte de cellules qui en résulte au niveau basal et limiter ainsi le photo vieillissement. On sait que l'apoptose est induite par les UVB du rayonnement solaire. Encore un autre objet de l'invention porte sur une méthode de soin cosmétique ou dermatologique destinée à la reconstruction de l'épiderme ou de son stratum corneum lorsqu'il est endommagé, notamment par les rayonnements ultraviolets, en vue d'accélérer ou de favoriser la cicatrisation. Cette méthode comprend la délivrance sur la zone de la peau, du corps ou du visage concerné, d'une quantité efficace d'au moins un agent cosmétiquement acceptable stimulant l'expression de la survivine au niveau cutané, ayant un extrait de la plante du genre Lepechinia, en particulier une plante de l'espèce Lepechinia caulescens. Encore un autre objet de l'invention porte sur une méthode de soin cosmétique visant à restaurer le fonctionnement du cycle pilaire, pour prévenir ou ralentir la chute des cheveux, pour favoriser ou accélérer leur repousse, notamment en cas d'alopécie, ou renforcer les cheveux fragiles, la croissance de la tige pilaire résultant d'une multiplication des kératinocytes du bulbe pileux, caractérisée en ce qu'elle comprend la délivrance, sur au moins une partie du cuir chevelu, d'une quantité efficace d'au moins un agent cosmétiquement acceptable activant ou stimulant l'expression de la survivine au niveau du cuir chevelu, comprenant un extrait de la plante du genre Lepechinia , en particulier une plante de l'espèce Lepechinia Caulescens. Encore un autre objet de l'invention porte sur une méthode de soin cosmétique pour favoriser la croissance des ongles et/ou renforcer sa résistance, caractérisée en ce qu'elle comprend la délivrance, sur l'ongle ou au moins une partie de la zone environnante, d'une quantité efficace d'au moins un agent cosmétiquement acceptable activant ou stimulant l'expression de la survivine pour favoriser ladite croissance de l'ongle et/ou renforcer sa résistance, comprenant au moins un extrait végétal d'une plante du genre Lepechinia, en particulier une plante de l'espèce Lepechinia Caulescens. Les essais réalisés par les inventeurs ont montré que les propriétés inattendues de l'extrait de l'invention peuvent être également obtenues ou améliorées dans des compositions cosmétiques, dans lesquelles l'extrait est associé avec d'autres agents actifs présentant des effets cosmétiques similaires et/ou complémentaires de l'extrait de l'invention. En particulier, l'extrait de Lepechinia peut être utilisé en association avec au moins un autre agent actif participant au maintien et à l'intégrité de la structure de la peau. Selon une première mise en oeuvre, la composition comprenant l'extrait selon l'invention peut en outre contenir au moins un autre agent actif notamment activant ou stimulant l'expression de la survivine au niveau cutané, ledit agent pouvant être une molécule isolée ou le produit d'un procédé d'extraction, et étant avantageusement choisi parmi la forskoline ou un extrait en contenant tel qu'un extrait de Co/eus forskalii, ou encore un extrait d'une plante du genre Limnophi/a, en particulier de l'espèce végétale Limnophi/a conferta ou appartenant à l'une des espèces végétales parmi Nostoc commune, Scenedesmus dimorphus, Curcuma longs, Crocus sativus, ou Daniel/la aliven. L'efficacité d'un agent actif cosmétique selon l'invention sera avantageusement amélioré par des molécules ou extraits stimulant l'expression des protéines d'adhésion telles que les intégrines bêta 1 des kératinocytes épidermiques, et l'adhésion elle même de ces cellules (aspartate de magnésium, sels de manganèse et dérivés, certains peptides reconnus par l'intégrine comme la séquence arginine-glycine-acide aspartique, certains facteurs de croissance tels que le KGF). L'efficacité activatrice d'un agent actif cosmétique selon l'invention pourra également être avantageusement améliorée par des molécules ou extraits inhibant les phosphodiesterases, qui dégradent l'AMPc, telles que les méthylxanthines et en particulier la cafeine, et conduisent à une augmentation du taux intracellulaire d'AMP cyclique. Les compositions comprenant un agent cosmétique tel que décrit précédemment peuvent en outre comprendre un ou plusieurs autres agents actifs pouvant être choisis parmi les substances ayant une activité éclaircissante de la peau ; les substances ayant une activité amincissante ; les substances ayant une activité hydratante ; les substances ayant une activité calmante, apaisante ou relaxante ; les substances ayant une activité stimulant la microcirculation cutanée pour améliorer l'éclat du teint, en particulier du visage ; les substances ayant une activité séborégulatrice pour le soin des peaux grasses ; les substances destinées à nettoyer ou purifier la peau ; les substances ayant une activité antiradicalaire ; les substances destinées à atténuer ou retarder les effets du vieillissement de la peau, en particulier la formation de rides, par une activité visant à favoriser le maintien de la structure de la peau et/ou à limiter la dégradation de la matrice extracellulaire des couches superficielles du derme et de l'épiderme et/ou à obtenir un effet protecteur, correcteur ou restructurant de la peau ; les substances ayant une activité anti-inflammatoire. Outre l'extrait de l'invention, ladite composition cosmétique comprend au moins un excipient cosmétiquement acceptable qui peut être choisi parmi des pigments, des colorants, des polymères, des agents tensioactifs, des agents de rhéologie, des parfums, des électrolytes, des ajusteurs de pH, des agents anti-oxydants, des conservateurs, et leurs mélanges. La composition cosmétique selon l'invention peut être par exemple un sérum, une lotion, une émulsion, par exemple une crème, ou bien encore un hydrogel, de préférence un masque, ou se présenter sous la forme d'un stick, d'un patch ou encore un produit d'hygiène destiné au cuir chevelu tel qu'un shampoing ou un après-shampooing, ou bien encore un produit de maquillage, en particulier une composition destinée à être appliquée sur les ongles, par exemple un vernis à ongle. Les conditions de procédé pour l'obtention de l'extrait végétal de Lepechinia, en particulier d'un extrait de l'espèce Lepechinia caulescens peuvent être les mêmes que celles décrites précédemment ou dans l'exemple 1 ou 2. Selon un mode de réalisation particulier, l'invention concerne une composition cosmétique contenant au moins un extrait selon l'invention tel que précédemment défini seul ou en combinaison avec d'autres extraits, en solution ou en dispersion dans un véhicule cosmétiquement acceptable compatible avec une application topique sur la peau ou les ongles. Selon une autre variante préférée de l'une des méthodes de soin précitées, l'agent cosmétiquement acceptable comprend aussi la forskoline ou un extrait en contenant. Selon l'un quelconque des objets de l'invention précités, l'agent selon l'invention peut être délivré topiquement sous la forme d'une composition cosmétique comprenant, comme l'un de ses agents actifs, ledit agent, ladite composition comprenant en outre au moins un excipient cosmétiquement acceptable, par application de cette composition sur la partie du corps concernée. Enfin, un autre objet de l'invention porte sur méthode de culture in-vitro de cellules souches et/ou de cellules à haut potentiel clonogénique à des fins d'études fondamentales ou à des fins de productions d'épiderme de culture, tel que de l'épiderme reconstruit, dans un but thérapeutique, comme par exemple, dans le cas de greffe suite à des brûlures ou des plaies ulcéreuses qui cicatrisent mal, caractérisée en ce qu'elle comprend l'ajout dans un milieu de culture d'un agent actif comprenant au moins un extrait d'une plante du genre Lepechinia, en particulier une plante de l'espèce Lepechinia caulescens, en une quantité efficace pour le maintien en culture desdites cellules ou pour assurer la production d'épiderme. Selon une variante, la concentration en agent actif ou en extrait est comprise entre 0,001 % et 5 %, en particulier entre 0,01 et 3 % en poids, du milieu de culture. Egalement, pour tout aspect de l'invention, par quantité efficace, on entend une quantité qui est au moins égale à la quantité nécessaire : a) pour prévenir ou retarder l'apparition des signes du vieillissement cutané ou en ralentir les effets ; b) pour la reconstruction de l'épiderme ou de son Stratum corneum endommagé, notamment par les rayonnements ultraviolets, et/ou c) pour restaurer le fonctionnement du cycle pilaire, pour prévenir ou ralentir la chute des cheveux, pour accélérer ou favoriser leur repousse, notamment en cas d'alopécie ou pour renforcer les cheveux fragiles, et/ou d) pour favoriser la croissance de l'ongle et/ou renforcer sa résistance et/ou e) pour le maintien en culture des cellules souches et/ou des cellules à haut potentiel clonogénique, afin de permettre de conserver ces cultures pendant un temps suffisant pour réaliser la culture dans de bonnes conditions, ainsi que pour réaliser la production d'épiderme, lorsqu'il y a lieu. En pratique, cette quantité efficace est aisément déterminable par l'homme de l'art. Généralement, la concentration en agent comprenant un extrait de Lepechinia, ou en extrait seul, sera comprise entre environ 0,001 % et 5 % en poids, en particulier entre 0,01 et 3 en poids de la composition ou du milieu de culture. S'agissant de l'extrait, pour tout aspect, la concentration sera exprimée en poids d'extraits secs par rapport au poids de la composition ou du milieu de culture. Comme démontrés par des essais spécifiques qui ont été réalisés et rapportés aux exemples 1 et 2, l'agent cosmétique selon l'invention est efficace notamment en stimulant de manière inattendue l'expression de la survivine au niveau des cellules souches de la couche basale du derme ou de l'épiderme. D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront clairement à partir de la description explicative qui va suivre faite en référence à plusieurs exemples de réalisation de l'invention donnés simplement à titre d'illustration et qui ne sauraient en aucune façon limiter la portée de l'invention. Dans les exemples, la température est en degrés Celsius, la pression est la pression atmosphérique, les quantités ou les pourcentages sont donnés en poids, sauf indication contraire. EXEMPLES MATERIEL ET METHODES 1) Culture cellulaire 10 Les kératinocytes humains normaux sont cultivés en flasques 75 cm2, dans un incubateur à 37°C sous une atmosphère humide contenant 5% CO2, dans du milieu pour kératinocytes sans sérum et complémenté d'EGF (Epidermal Growth Factor) et de BPE (Bovine Pituitary Extract) (KSFMc) (Gibco ref: 17005-034 + 37000-015). Les cellules sont 15 ensemencées (jour 30) dans des microplaques 48 puits à raison de 50 000 cellules dans 500 pL de milieu par puits. Après 24 heures d'incubation (jour 31), les cellules sont devenues adhérentes et l'étape de traitement est alors réalisée. Le milieu d'ensemencement est retiré et le milieu de traitement, contenant chacun 20 un extrait à évaluer en solution dans un solvant (par exemple le DMSO) aux différentes concentrations, est alors ajouté dans chaque puits de culture. On prépare également un témoin à l'aide de ce même solvant et dans les mêmes proportions. Un pic d'expression de la survivine par les cellules est observé 25 après 16 heures de traitement. Les puits sont alors rincés au PBS. La moitié des puits de la microplaque est utilisée pour lyser les kératinocytes et doser la survivine intracellulaire. L'autre moitié des puits de la microplaque est utilisée pour doser les protéines totales par la méthode BCA, ce qui permet de ramener la quantité de survivin dosée à une 30 quantité unitaire de protéine.5 Une phase de mesure de cytotoxicité de chaque extrait végétal testé est préalablement nécessaire pour être en mesure d'évaluer ensuite l'effet de l'extrait à des doses non cytotoxiques. A cette fin, on détermine la dose cytotoxique de l'extrait par le test XTf (réf : Cell Proliferation Kit II, Roche Diagnostic). Le sel de tétrazolium (réactif )(T) est transformé en formazan par les déshydrogénases localisées au niveau de la chaîne respiratoire mitochondriale. Seules les cellules vivantes dont la chaîne respiratoire est fonctionnelle sont capables de produire le Formazan, composé orange détecté à 450 nm. Chaque extrait testé est dilué pour préparer une gamme de dilution de raison 2 sur une microplaque, la concentration en extrait des échantillons à tester allant de 50 mg/mL à 0,195 mg/mL. Chaque dilution préalablement préparée est finalement diluée au 1000ème dans le milieu KSFM-C et mise alors au contact des kératinocytes pendant 48h, moment auquel s'effectuera le test de cytotoxicité. 2) Dosage de la survivine On évalue l'activité d'extraits végétaux de plantes de l'espèce végétale Lepechinia caulescens vis-à-vis de l'expression de la survivine. Le dosage de la survivine est réalisé par un test immunoenzymatique ELISA (ref : Duoset Survivin ELISA de chez R&D Systems) sur des cultures de kératinocytes humains normaux. Le dosage des protéines totales est effectué par un test colorimétrique BCA (référence : BC Assay Kit, Uptima Interchim), par mesure d'absorbance à 570 nm. Pour le dosage ELISA de la survivine après 16 h de traitement, on effectue un rinçage des puits au PBS puis un ajout de 100 pl/puits de tampon de lyse incubé 10 minutes sous agitation douce. Ce tampon contient des anti-protéases, qui empêchent la dégradation des protéines dont la survivine lors de la lyse des cellules, On prépare la microplaque ELISA (référence Clear Microplate R&D systems DY992). Une gamme d'étalonnage avec la survivine humaine est préparée de 0 à 2000 pg/mL dans les mêmes conditions qu'avec les lysats cellulaires. Après blocage de la réaction enzymatique par de l'acide sulfurique, la quantification de la survivine est réalisée par mesure de l'absorbance à 450 nm. Exemple 1: préparation d'extrait de feuilles de Lepechinia caulescens et détermination de son activité vis-à-vis 10 de l'expression de la survivine. Le matériel végétal, formé de feuilles de Lepechinia caulescens à l'état sec, est broyé extemporanément à l'aide d'un broyeur-mixeur de laboratoire, à une granulométrie moyenne de l'ordre de 0,1 à 1 mm. 15 On introduit 10 g de végétal broyé dans un ballon de 250 ml dans lequel on ajoute 150 ml d'un solvant ou mélange de solvant parmi ceux listés ci-dessous. 20 - butylène glycol/eau 50/50 (v/v) On met le ballon surmonté d'un réfrigérant à boules sous 25 agitation magnétique dans un bain thermostaté, puis on chauffe jusqu'au reflux de solvant. Le reflux est maintenu 30 minutes sous agitation. Une fois le chauffage arrêté, on laisse refroidir le ballon à température ambiante hors du bain. 30 Le mélange est ensuite filtré sous vide sur Büchner avec un filtre GF/F Whatman 70pm et une fiole tarée ; obtient ainsi le filtrat 1. Le - eau 90/10 (v/v) - butanol, - éthanol/eau - propanol, 50/50 (v/v) - éthanol/eau gâteau est lavé sur le Büchner avec 50 ml du solvant d'extraction ; on obtient le filtrat 2. Les deux filtrats ont été réunis, pesés. Le filtrat ainsi obtenu est introduit dans un ballon préalablement taré, puis concentré à sec à l'évaporateur rotatif sous vide dans un bain d'eau à une température maximale de 50°C. Le résidu sec est quantifié pour déterminer le rendement massique d'extraction, exprimé en masse d'extrait sec obtenu pour 100 g de matière végétale à l'état broyé sec de départ. Les rendements massiques d'extraction obtenus pour chaque procédé mis en oeuvre avec un solvant ou mélange de solvants parmi ceux listés ci-dessus, sont indiqués dans le tableau I ci-dessous Tableau 1 Solvant d'extraction Ratio (v/v) Rdt massique (%) Eau 100 28 % Ethanol/eau 50/50 29 % Ethanol/eau 90/10 21 % Ethanol 100 10 % Butanol 100 12 % Butylène glycol/eau 50/50 ù 24 Exemple 2 : activité d'extraits végétaux de Lepechinia caulescens vis-à-vis de l'expression de la survivine 20 Les extraits secs préparés à l'exemple 1 sont chacun dilués à la concentration de 3,125 mg/ml dans le DMSO. Lors du traitement sur cellules, chaque extrait est ajouté dans le milieu de culture afin d'obtenir une concentration finale de 0,1% v/v,15 soit 3,125 pg/ml. On prépare également un témoin solvant (DMSO) de concentration finale 0,1% v/v. Le tableau Il ci-dessous indique l'activité de chacun des extraits de feuilles de Lepechinia caulescens testés vis-à-vis de la survivine, par rapport au niveau basal d'expression, représenté par le témoin solvant, qui constitue le 100% : Tableau II Solvant d'extraction % d'activation Eau 100% 0 Ethanol/eau 50/50 +37% Ethanol/eau 90/10 +30% Ethanol + 6% Butanol +15% BG/eau 50/50 +23% Conclusion : hormis l'extrait aqueux, tous les extraits augmentent significativement l'expression de la survivine intrakératinocytaire, par rapport au niveau basal d'expression de la protéine (témoins). Les extraits obtenus à partir d'un mélange d'eau et d'un solvant polaire alcoolique ou glycolique sont ceux qui stimulent le plus fortement l'expression de la survivine par les kératinocytes. Exemple 3: composition cosmétique comprenant un extrait de feuilles de Lepechinia caulescens L'extrait sec obtenu après extraction par un mélange de solvant éthanol/eau (50/50 v/v) est solubilisé à 1% massique dans un mélange éthanol/eau.20 On obtient une solution à 1% massique d'extrait sec qui est utilisée dans la composition cosmétique ci-dessous : Extrait végétal de Lepechinia caulescens - Tensio actif (Arlacel� 165 VP) - Alcool cétylique 95% Alcool stéarylique - Cire d'abeille Huile (Perleam�) - Tri caprate/caprylate glycerides - Huile silicone (diméthicone 100 CS) Polymère (Keltrol�) Soude - EDTA tetrasodique poudre - Conservateurs 15 - Eau 0,1 % 5% 1% 1% 1,5 8,5 °la 3% 1% 0,35 % 0.04 % 0,1 % 0,5 % qsp 100% 10 La composition cosmétique est préparée de manière habituelle, bien connue de l'homme de l'art, par mélange des divers composants en une ou plusieurs étapes. Cette composition peut être appliquée sur la peau ou le cuir 20 chevelu ou encore les ongles journellement pendant plusieurs semaines pour obtenir les effets cosmétiques précédemment indiqués. Exemple 4 : Lotion tonique anti-rides comprenant un extrait de Lepechinia cau/escens L'extrait sec obtenu après extraction par un mélange de solvant éthanol/eau (50/50 v/v) est solubilisé à 1% massique dans un mélange éthanol/eau. On obtient une solution à 1% massique d'extrait sec qui est 30 utilisée dans la composition cosmétique ci-dessous : 25 23 - Extrait végétal de Lepechinia caulescens 2 % Butylène glycol 3 0/0 EDTA 0,1 0/0 Solubilisant 1 °le Concentré de parfum 0,3 0/0 - Ethanol 5 0/0 Filtre UV (benzophénone-4) 0,13 - Eau qsp 100 0/0 La composition cosmétique est préparée de manière habituelle, 10 bien connue de l'homme de l'art, par mélange des divers composants en une ou plusieurs étapes. Cette composition peut être appliquée sur les zones de la peau comprenant des rides journellement pendant plusieurs semaines pour obtenir un effet d'atténuation ou de disparition complète desdites rides. 15 Exemple 5 : Crème de jour anti-rides sous forme d'une émulsion comprenant un extrait de Lepechinia caulescens L'extrait sec obtenu après extraction par un mélange de solvant 20 éthanol/eau (50/50 v/v) est solubilisé à 1% massique dans un mélange éthanol/eau. On obtient une solution à 1% massique d'extrait sec qui est utilisée dans la composition cosmétique ci-dessous : Extrait végétal de Lepechinia caulescens 2 25 - Steareth-21 (Brij 721) 2,5 % - Glycéryl stéarate (Tegrin) 1,1 0/0 - Alcool stéarylique 5 % - Tricaprat / caprilate glycérol 12,5 % - Butylène glycol 3 °Io 30 Glycérine 2 0/0 - Conservateur 0,5 %5 Concentré de parfum 0,5 % Filtre UV (méthoxycinnamate d'octyle) 7,5 0/0 - Eau qsp 100 0/0 La composition cosmétique est préparée de manière habituelle, 5 bien connue de l'homme de l'art, par mélange des divers composants en une ou plusieurs étapes. Cette composition peut être appliquée sur les zones de la peau comprenant des rides journellement pendant plusieurs semaines pour obtenir un effet d'atténuation ou de disparition complète desdites rides. 10 REVENDICATIONS1. Utilisation d'un extrait végétal obtenu à partir d'un matériel végétal formé par, ou comprenant, au moins une plante dont l'espèce 5 appartient au genre Lepechinia, comme agent cosmétique. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'extrait est obtenu à partir d'une plante de l'espèce végétale Lepechinia caulescens. 3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce 10 qu'il s'agit d'un extrait de la plante entière ou d'une partie de ladite plante, telle que la racine, le rhizome ou une partie aérienne, notamment la tige, les feuilles, les fleurs, les graines ou les boutons floraux. 4. Utilisation selon la revendication 1 à 3, caractérisée en ce que l'extrait est obtenu à partir des parties aériennes de la plante et en 15 particulier des feuilles. 5. Utilisation selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'extrait est obtenu par mise en contact du matériel végétal avec un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. 6. Utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce que le 20 solvant polaire ou le mélange de solvants polaires utilisé(s) pour l'extraction est choisi parmi l'eau, un alcool en C1-C4, choisi préférentiellement parmi le l'éthanol ou le butanol, un glycol choisi préférentiellement parmi le glycérol, le butylène glycol et le propylène glycol ou leur mélange. 25 7. Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que les mélanges préférés sont des mélanges d'au moins un alcool et d'eau ou du moins un glycol et d'eau, comprenant au moins 10% v/v d'alcool ou de glycol, le solde étant constitué d'eau. 8. Utilisation selon la revendication 7, caractérisée en ce que le 30 mélange de solvant comprend un mélange d'eau et d'éthanol dans un 2932088 FR 08 53795 - Revendications modifiées /e 02.12.08 26 rapport 50/50 v/v ou un mélange d'eau et de butylène glycol dans un ratio 50/50 v/v. 9. Utilisation selon la revendication 8, caractérisée en ce que l'extrait se présente sous la forme d'une poudre après lyophilisation ou atomisation du produit de l'étape d'extraction dans le solvant ou mélange de solvant précité. 10. Utilisation d'un extrait selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'extrait de la plante peut être absorbé sur un support avantageusement choisi parmi les poudres de nylon� , poreuses ou non poreuses et les micas ou toute substance minérale lamellaire. 11. Utilisation de l'extrait tel que défini dans l'une quelconque des revendications précédentes, dans une composition cosmétique, en tant que l'un des agents cosmétiques ou agents actifs, ledit agent étant destiné à prévenir ou à retarder les signes de vieillissement cutané ou à en atténuer les effets ; et /ou au soin de l'épiderme ou de son stratum corneum endommagé, notamment par les rayonnements ultraviolets, et/ou à prévenir ou ralentir la chute des cheveux, accélérer ou favoriser leur repousse, renforcer les cheveux fragiles, et/ou à favoriser la croissance des ongles et/ou renforcer leur résistance. 12. Composition cosmétique contenant au moins un agent cosmétique comprenant un extrait d'une plante de l'espèce végétale du genre Lepechinia, en solution ou en dispersion dans un véhicule cosmétiquement acceptable compatible avec une application topique sur la peau ou les ongles, ledit extrait étant en particulier tel que défini selon l'une quelconque des revendications 1 à 11. 13. Composition selon la revendication 12, caractérisée en ce que l'extrait de Lepechinia est utilisé en association avec au moins un autre agent actif participant au maintien et à l'intégrité de la structure de la peau.FR 08 53795 - Revendications modifiées /e 02.12.08 27 14. Composition selon l'une des revendications 12 à 13, caractérisée en ce que l'extrait précité est contenu dans ladite composition une concentration comprise entre 0,001% et 5 % en poids sec d'extrait par rapport à la composition. 15. Méthode de soin cosmétique destinée à prévenir ou retarder l'apparition les signes du vieillissement cutané ou à en atténuer les effets, caractérisée en ce qu'elle comprend la délivrance sur les zones de la peau, du corps ou du visage concernées, d'une quantité efficace d'au moins un agent cosmétiquement acceptable comprenant au moins un extrait de la plante du genre Lepechinia, en particulier une plante de l'espèce Lepechinia Cau/escens. 16. Méthode de soin cosmétique destinée au soin de l'épiderme ou de son stratum corneum endommagé, notamment par les rayonnements ultraviolets, caractérisée en ce qu'elle comprend la délivrance sur la zone de la peau, du corps ou du visage concerné, d'une quantité efficace d'au moins un agent cosmétiquement acceptable comprenant au moins un extrait de la plante du genre Lepechinia, en particulier une plante de l'espèce Lepechinia cau/escens 17. Méthode de soin cosmétique visant à restaurer le fonctionnement du cycle pilaire, pour prévenir ou ralentir la chute des cheveux, pour accélérer ou favoriser leur repousse ou renforcer les cheveux fragiles, caractérisée en ce qu'elle comprend la délivrance, sur au moins une partie du cuir chevelu, d'une quantité efficace d'au moins un agent cosmétiquement acceptable comprenant au moins un extrait de la plante du genre Lepechinia, en particulier une plante de l'espèce Lepechinia caulescens. 18. Méthode de soin cosmétique pour favoriser la croissance des ongles et/ou renforcer leur résistance, caractérisée en ce qu'elle comprend la délivrance, sur l'ongle d'au moins une partie de la zone environnante, d'une quantité efficace d'au moins un agent cosmétiquement acceptable comprenant au moins un extrait de la plante 2932088 FR 08 53795 - Revendications modifiées le 19.11.08 28 du genre Lepechinia, en particulier une plante de l'espèce Lepechinia caulescens. 19. Méthode selon l'une des revendications 15 à 18, caractérisée en ce que l'agent précité est délivré topiquement sous la 5 forme d'une composition cosmétique comprenant ledit agent comme l'un de ses agents actifs , ladite composition comprenant en outre au moins un excipient cosmétiquement acceptable, par application de cette composition sur la partie du corps ou des ongles concernée. 20. Méthode selon l'une des revendications 15 à 19, 10 caractérisée en ce que la concentration en agent(s) actif(s) est comprise entre 0.001% et 5 % en poids de la composition.