Brevet FR2931362A1 — publié le 20091127

L'OPIORPHINE POUR UNE UTILISATION EN TANT QUE PSYCHOSTIMULANT La présente invention concerne des peptides dérivés de la protéine BPLP (Basic Prolin-rich Lacrimal Protein) humaine codée par le gène Pro/1, notamment l'Opiorphine, pour une utilisation en tant que psychostimulants. L'invention concerne également l'utilisation de tels peptides pour la préparation d'un médicament psychostimulant Les psychostimulants sont des substances psychotropes considérées comme des excitants psychiques, qui accélèrent l'activité du système nerveux et stimulent l'humeur. D'après la classification des psychotropes établie par Delay et Deniker, les psychostimulants comprennent notamment les nooanaleptiques, tels que les stimulants de la vigilance (amphétamines), les thymoanaleptiques antidépresseurs, ainsi que divers stimulants tels que le khat et la caféine. Les psychostimulants agissent en stimulant la neurotransmission. Ils sont utilisés pour traiter divers symptômes incluant la baisse de vigilance, la narcolepsie, l'obésité, le déficit de l'attention et/ou l'hyperactivité chez l'enfant, les TOCs, la dépression, la manie et la maladie bipolaire. Cependant, les psychostimulants sont souvent associés à des effets secondaires tels que la dépendance, la tolérance, la dépression à l'arrêt brutal et l'anxiété. Il existe donc un besoin en psychostimulants présentant des effets secondaires atténués. Un gène régulé par les androgènes, principalement exprimé dans la glande submandibulaire et la prostate de rats adultes, a été identifié en 1988 (Rosinski-Chupin et al. Proc Natl Acad Sci U S A. 1988; 85(22):8553-7 ; EP 0 394 424). Ce gène code pour un précurseur, à savoir la � submandibular rat, protein � (SMR1). Ce précurseur est clivé in vivo au niveau de sites multibasiques, donnant lieu à trois peptides structurellement proches (Rougeot et al., Eur J Biochem. 1994; 219(3):765-73). Il a été établi que le peptide dérivé de SMR1 de séquence QHNPR (SEQ ID NO : 6), appelé sialorphine, est un messager hormonal de la communication intercellulaire. De ce fait, la sialorphine est un peptide hormonal exocrine et endocrine, dont l'expression est régulée par les androgènes et la sécrétion provoquée sous un stress environnemental médié par des signaux adrénergiques (Rougeot et al., Am J Physiol. 1997; 273(4 Pt 2):R1309-20). Le fait que la sialorphine est sécrétée en réponse à un stress environnemental chez les rats mâles adultes a conduit à l'hypothèse que ce peptide pourrait jouer un rôle dans l'intégration de signaux physiologiques et comportementaux liés à la reproduction. Le rôle joué par la sialorphine dans le comportement sexuel a été évalué, et les données expérimentales ont montré que la sialorphine a la capacité de moduler le comportement sexuel de rats mâles en fonction du contexte environnemental. La demande de brevet internationale WO 01/00221 décrit l'utilisation de produits de maturation de SMR1 pour le traitement de désordres mentaux et/ou comportementaux, incluant des désordres sexuels. De plus, il a été découvert que les produits de maturation SMR1 reconnaissent des sites spécifiques dans les organes, lesdits sites étant impliqués dans la concentration en minéraux. La demande de brevet internationale WO 98/37100 décrit l'utilisation thérapeutique de produits de maturation de SMR1 pour le traitement ou la prévention de maladies associées à un déséquilibre des minéraux. Rougeot et al. (froc Natl Acad Sci U S A. 2003; 100(14):8549-54) ont démontré que le récepteur de surface auquel se lie la sialorphine in vivo est l'endopeptidase NEP (Neprilysin ; EC 3.4.24.11). De plus, il a été prouvé que la sialorphine est un ligand et un antagoniste physiologique de l'activité NEP. De ce fait, la sialorphine est le premier inhibiteur physiologique de la NEP enképhalinase à avoir été identifié chez les rongeurs (demande de brevet européen EP 1 216 707). La demande de brevet européen EP 1 577 320 décrit l'homologue fonctionnel humain de la sialorphine. Ce peptide, de séquence SEQ ID NO : 2, est appelé Opiorphine. Les analyses génomiques in silico ont révélé qu'il correspond à un fragment de maturation de la protéine BPLP de séquence SEQ ID NO : 5. La protéine BPLP est aussi appelée � Basic Prolin-rich Lacrimal Protein �, � Prolinerich protein 1 � ou � PRL1 �, et est codée par le gène humain Proll. Il a été montré que l'Opiorphine inhibe la dégradation du substrat physiologique de la NEP, à savoir la substance P et la méthionine enképhaline. La demande de brevet européen EP 1 577 320 indique que l'Opiorphine possède des propriétés analgésiques et qu'il peut notamment être utilisé pour le traitement ou la prévention de douleurs. L'effet analgésique de l'Opiorphine a été confirmé par la suite par Rougeot et Messaoudi (Med Sci (Paris) 2007; 23(1):37-9). Il a également été montré que cet effet analgésique n'est pas accompagné d'un effet anti-péristaltique, contrairement à ce qui se produit avec la morphine qui est l'analgésique le plus puissant utilisé jusqu'à présent (Rougeot C, Proceedings of the 4th international Peptide Symposium; J. Wilce (Editor) on behalf of the Australian Peptide Society, 2007). Les inventeurs ont trouvé que, de manière surprenante, l'Opiorphine possède non seulement des propriétés analgésiques et/ou antalgiques, mais aussi un effet psychostimulant. De plus, cet effet psychostimulant n'est associé à aucun effet secondaire de type amnésie, sédation, hyperactivité ou addiction. Enfin, il a été trouvé que le pouvoir analgésique de l'Opiorphine est aussi puissant que celui de la morphine et que son pouvoir psychostimulant est aussi puissant que celui de l'imipramine. De ce fait, l'Opiorphine et des peptides dérivés peuvent avantageusement être utilisés en tant que psychostimulants pour le traitement ou la prévention de maladies telles que la narcolepsie, l'hypersomnie, la baisse de vigilance, le déficit de l'attention chez l'adulte et chez l'enfant, l'hyperactivité chez l'enfant, les troubles obsessionnels compulsifs (TOCs), et des troubles de l'humeur tels que la dépression, la maladie bipolaire, le trouble dysthymique et le trouble cyclothymique. Peptides selon l'invention L'invention concerne des applications thérapeutiques d'un peptide qui comprend ou consiste en un produit de maturation de la Basic Prolin-rich Lacrimal Protein (BPLP) de séquence SEQ ID NO: 5, appelé peptide ou séquence de référence, ou un dérivé dudit produit de maturation. De tels peptides sont désignés en tant que � peptides selon l'invention � dans le texte de cette demande. Dans le cadre de cette invention, on entend par � peptide � une molécule comprenant une chaîne linéaire d'acides aminés liés les uns aux autres par des liaisons peptidiques. La chaîne peut éventuellement être cyclique, c'est-à-dire que les deux extrémités du peptide linéaire, ou des groupements latéraux d'acides aminés, sont liées par une liaison chimique. Les peptides selon l'invention font moins de 100 acides aminés. De préférence, le peptide consiste en 4 à 40, 4 à 35, 4à30,4à20,4à10,5à40,5à35,5à30,5à20,5à10,5à8ou5à6acides aminés. Par � produit de maturation �, on entend un peptide obtenu par clivage protéolytique sélectif de la protéine précurseur, au niveau de sites consensus de maturation, par une pro-hormone convertase qui convertit un précurseur inactif en peptides actifs, tels que par exemple la furine, les PC convertases ou PACE 4. La séquence des sites consensus de maturation suit de préférence le consensus suivant: [H/R/K] û X3 û [R/K] û [R/K] où [H/R/K] signifie que l'acide aminé est H, R ou K, X3 désigne un enchaînement de trois acides aminés, et [R/K] signifie que l'acide aminé est R ou K. Les pro-hormones convertases clivent le motif consensus entre les résidus dibasiques [R/K] û [R/K]. Les pro-hormones convertases sont bien connues de l'homme du métier, et sont notamment décrites par Scamuffa et al. (2006 FASEB J. 20(12):1954-63). L'un des produits de maturation de la Basic Prolin-rich Lacrimal Protein (BPLP) de séquence SEQ ID NO: 5 est le peptide QRFSR de séquence SEQ ID NO : 2. La séquence de la pré-pro-proteine BPLP contient un site concensus de coupure du peptide signal de secretion, dont le clivage génère la pro-protéine QRFSRRX(n). Cette pro-protéine QRFSRRX(n) contient un site dibasique RR et en position -4 du site de coupure entre les 2R, un acide aminé basique. Le peptide QRFSR est généré après action d'une convertase. Les peptides selon l'invention incluent également des dérivés de peptides comprenant ou consistant en des produits de maturation de la Basic Prolin-rich Lacrimal Protein (BPLP) de séquence SEQ ID NO: 5. Par � dérivés de peptides �, on entend des peptides ayant une séquence en acides aminés comprenant une ou plusieurs mutations (substitutions, insertions ou délétions) par rapport aux peptides de référence. De préférence, lesdits peptides comprennent seulement des mutations du type substitution. Les substitutions peuvent être conservatives ou non conservatives. De préférence, lesdits peptides comprennent au plus 1, 2, 3, 4 ou 5 mutations ou substitutions par rapport aux peptides de référence. Dans un mode de réalisation préféré, le peptide selon l'invention diffère de la séquence de référence uniquement par la présence de substitutions conservatives. Les substitutions conservatives sont des substitutions d'acides aminés de même classe, telles que des substitutions d'acides aminés aux chaînes latérales non chargées (tels que l'asparagine, la glutamine, la serine, la cystéine, et la tyrosine), d'acides aminés aux chaînes latérales basiques (tels que la lysine, l'arginine, et l'histidine), d'acides aminés aux chaînes latérales acides (tels que l'acide aspartique et l'acide glutamique), d'acides aminés aux chaînes latérales apolaires (tels que l'alanine, la valine, la leucine, l'isoleucine, la proline, la phénylalanine, la méthionine et le tryptophane). De préférence, le peptide selon l'invention est un peptide isolé. Par peptide � isolé �, on entend ici un peptide isolé du corps humain ou de l'organisme d'un mammifère non humain, de préférence sous forme purifiée. Cependant, le peptide isolé peut par exemple être présent dans une composition pharmaceutique ou dans un kit. De manière préférée, le peptide est présent dans une des compositions pharmaceutiques décrites ci-dessous. Les peptides selon l'invention exercent une activité psychostimulante. Par � peptide exerçant une activité psychostimulante �, on entend un peptide qui : exerce un effet protecteur contre la résignation dans un test du désespoir comportemental (par exemple le test de nage forcée chez le rat); et/ou inhibe l'activité de metallo-ectopeptidases telles que la NEP (Neprilysin; Neutral endopeptidase; EC 3.4.24.11) et/ou l'APN (Aminopeptidase N; EC 3.4.11.2). En effet, sans être limité par une théorie particulière, les inventeurs pensent que les peptides selon l'invention, en inhibant la dégradation des enképhalines par ces deux metallo-ectopeptidases, potentialise leur action physiologique en termes d'amplitude d'action et de durée d'action et ainsi active les récepteurs opioïdes des enképhalines, plus particulièrement les récepteurs �- et 6-opioïdes. L'effet protecteur contre la résignation peut être déterminé par le test de nage forcée chez le rat. Dans ce test, lorsqu'un peptide exerce un effet protecteur contre la résignation, le temps d'immobilité de rats auxquels ledit peptide a été administré est réduit par rapport au temps d'immobilité des rats témoins. Ce test comprend les étapes suivantes : û une session de pré-test, lors de laquelle le rat est déposé dans l'eau pendant un temps déterminé (entre 10 et 20 min, par exemple 15 min), puis retiré de l'eau, séché et remis dans sa cage. quelques heures après (entre 20 et 25 heures après, par exemple 24 heures après), une session de test lors de laquelle le rat est de nouveau déposé dans l'eau pendant un temps déterminé (entre 5 et 8 min, par exemple 5 min), puis retiré de l'eau, séché et remis dans sa cage. Le peptide à tester est administré après la session de pré-test et avant le test. Le temps d'immobilité des rats est enregistré pendant 5 minutes lors du pré-test et du test. Le temps d'immobilité des rats auxquels le peptide a été administré est comparé à celui des rats témoins. L'exemple 3 décrit plus en détail le protocole du test de nage forcée chez le rat. L'inhibition de l'activité de metallo-ectopeptidases telles que la NEP et/ou l'APN peut être mesurée par n'importe quelle technique bien connue de l'homme de l'art. L'une des méthodes décrites dans l'exemple 2 de la demande de brevet européen EP 1 577 320 peut par exemple être employée. Il est par exemple possible de mesurer l'activité inhibitrice de la NEP en mesurant l'inhibition de la dégradation de la substance P dans des préparations de membranes de cellules LNCaP. Ce protocole est décrit en détail dans Rougeot et al. (froc Natl Acad Sci U S A. 2003; 100(14):8549-54). Dans un mode de réalisation particulier, les peptides selon l'invention comprennent ou consistent en un fragment de la séquence SEQ ID NO : 5, ou comprennent ou consistent en un peptide dérivé dudit fragment de la séquence SEQ ID NO : 5. De préférence, les peptides selon l'invention comprennent ou consistent en une séquence X1-X2-Arg-Phe-Ser-Arg (SEQ ID NO : 1), où : X1 représente un atome d'hydrogène, une tyrosine ou une cystéine ; lorsque X1 est un atome d'hydrogène, X2 représente une glutamine ou un pyroglytamate ; - lorsque X1 est une tyrosine ou une cystéine, X2 représente une glutamine ; et - ladite séquence X1-X2-Arg-Phe-Ser-Arg constitue l'extrémité C-terminale dudit peptide. De préférence, le peptide selon l'invention consiste en la séquence X1-X2-Arg-Phe-Ser-Arg (SEQ ID NO: 1). Le peptide selon l'invention peut par exemple consister en la séquence QRFSR (SEQ ID NO: 2), YQRFSR (SEQ ID NO: 3) ou CQRFSR (SEQ ID NO: 4). Alternativement, le peptide selon l'invention peut différer de la séquence SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 ou SEQ ID NO : 4 par des substitutions conservatives. Dans un autre mode de réalisation particulier, les peptides selon l'invention comprennent ou consistent en des produits de maturation d'un variant allèlique de la Basic Prolin-rich Lacrimal Protein (BPLP) de séquence SEQ ID NO: 5. Par mesure de clarté, il est précisé que la Sialorphine de séquence SEQ ID NO : 6 est exclue des peptides selon l'invention. Le peptide selon l'invention peut en outre comporter une ou des modification(s) chimique(s) améliorant sa stabilité et/ou sa biodisponibilité. Cette modification peut par exemple viser à obtenir un peptide plus stable et plus lipophile que le peptide de départ. Les peptides comportant une ou des modification(s) chimique(s) améliorant leur stabilité et/ou leur biodisponibilité font partie des peptides selon l'invention. De telles modifications chimiques ou enzymatiques sont bien connues de l'homme de l'art. De manière non limitative, on peut par exemple citer les modifications suivantes: û modifications de l'extrémité C-terminale ou N-terminale des peptides tels que la désamination ou l'acylation N-terminale (de préférence l'acétylation), ou tels que l'amidation ou l'estérification C-terminale; modifications de la liaison amide entre deux acides aminés, tels que l'acylation (de préférence l'acétylation) ou l'alkylation au niveau de l'azote ou du carbone alpha ; changements de chiralité, tels que la substitution d'un acide aminé naturel (L-énanthiomère) par le D-énanthiomère correspondant. Cette modification peut éventuellement être accompagnée par une inversion de la chaîne latérale (de l'extrémité C-terminale à l'extrémité N-terminale) ; changements en azapeptides, dans lesquels un ou plusieurs carbones alpha sont remplacés par des atomes azote ; et/ou ù changements en betapeptides, dans lesquels on ajoute un ou plusieurs carbones du coté N-alpha ou du côté C-alpha de la chaîne principale. A ce titre, on peut modifier un ou plusieurs des acides aminés sérine (Ser) et/ou thréonine (Thr) des peptides, notamment en introduisant au niveau du groupe OH de la chaîne latérale de la sérine et/ou de la thréonine, un groupement ester, un groupement éther ou un groupe octanoyl C8. L'estérification, opération simple, peut être réalisée à l'aide d'un acide carboxylique, d'un anhydride, par pontages, etc, pour former par exemple des acétates ou des benzoates. L'éthérification, qui donne des composés plus stables, peut être effectuée à l'aide d'un alcool, d'un halogénure, etc, pour former par exemple un méthyl éther ou un 0-glycoside. On peut par ailleurs aussi ou alternativement modifier un ou plusieurs acides aminés lysine (Lys) des peptides, notamment par : amidation : cette modification est simple à accomplir, la charge positive de la lysine étant substituée par des groupements hydrophobes (par exemple, acétyle ou phénylacétyle) ; amination : par formation d'amides secondaires à partir de l'amine primaire R = (CH2)4-NH3+, par exemple en formant des groupements N-méthyle, N-allyle ou N-benzyle ; et par formation des groupements N-oxyde, N-nitroso, N-dialkyl phosphoryle, N-sulfényle, ou N-glycoside. On peut par ailleurs aussi ou alternativement modifier un ou plusieurs acides aminés glutamine (Gln) par exemple par amidation, en formant des amines secondaires ou tertiaires, notamment avec des groupements de type méthyl, éthyl, fonctionnalisés ou non. On peut par ailleurs aussi ou alternativement modifier un ou plusieurs acides aminés glutamate (Glu) et/ou aspartate (Asp), par exemple : ù par estérification, pour former des méthyl esters substitués ou non, des éthyl esters, benzyl esters, des thiols (esters activés) ; et par amidation, notamment pour former des groupements N,N diméthyle, nitroanilides, pyrrolidinyles. En revanche, il est préférable de ne pas modifier les acides aminés proline, qui participent à la structure secondaire des peptides, sachant en outre que les acides aminés Gly, Ala et Met n'offrent généralement pas de possibilités de modification qui seraient manifestement intéressantes. Des exemples de tels peptides comportant une ou des modification(s) chimique(s) améliorant leur stabilité et/ou leur biodisponibilité sont décrits dans la demande de brevet US61/042922 déposée le 7 avril 2008. Il s'agit notamment des peptides de formules suivantes : NH2-QRFSR-CONH2 ; NH2-QRGPR-COOH; NH2-QHNPR-COOH; NH2-QR(4BromoF)SR-COOH; NH2-QRFPR-COOH; N-(Acetyl)QRFSR-COOH; N-(C8-polyéthylène)QRFSR-COOH; N-(biotine-C6)QRFSR-COOH; NH2-dRdSdFdRdQ-COOH (rétroinversion D-énantiomère); NH2-YQRFSR-COOH; NH2-Y-(C6-polyéthylène)QRFSR-COOH; NH2-Y-(C12-polyéthylène)QRFSR-COOH; N H2-QRF[S-O-C8-polyéthylène] R-COOH; NH2-CQRFSR-COOH; NH2-CQRF[S-O-C8-polyéthylène]R-COOH; NH2-CQRF[S-O-C12-polyéthylène]R-COOH; NH2-C-(C8-polyéthylène)QRFSR-COOH; NH2-C-(C12-polyéthylène)QRFSR-COOH; NH2-C-(C8-polyéthylène)QRF[S-O-C8-polyéthylène]R-COOH; NH2-[Cf32]QRF[S-O-C8- polyéthylène]R-COOH; NH2-C-(C8- polyéthylène)QRFS[133R]-COOH; NH2-C[dQ]RF[S-O-C8- polyéthylène][dR]-COOH; NH2-C-(C8-polyéthylène)QRFS[dR]; NH2-[dC]QRF[S-O-C8-polyéthylène][dR]-COOH; NH2-[C132]QRF[S-O-C8-polyéthylène][133R]-COOH; et [CQRFSR]2 dipeptide formé après oxydation des groupes SH de la cystéine N-terminale et liaison cystine (pont disulfure), en tant que prodrogue ; dans lesquels : C32 remplace le résidu cystéine naturel par une cystéine-132 comprenant un résidu méthyle adjacent au carbone à côté du groupe carbonyle de la cystéine; 133R remplace le résidu Arginine naturel par une Arginine-33 comprenant un résidu méthyle adjacent au carbone à côté du groupe amine de l'Arginine; [S-O-C8-polyéthylène] est [S-O-octanoyl]; et C6, C8 ou C12 polyéthylène correspondent à un groupement espaceur constitué d'une chaîne éthylénique de 6, 8 ou 12 carbones. Lorsque le peptide contient mais ne consiste pas en un produit de maturation de la Basic Prolin-rich Lacrimal Protein (BPLP) de séquence SEQ ID NO: 5, ou contient mais ne consiste pas en un dérivé dudit produit de maturation, le peptide contient des acides aminés supplémentaires à son extrémité N- ou C-terminale. Ces acides aminés supplémentaires peuvent par exemple correspondre à une partie de la séquence de BPLP, ou en une séquence d'acides aminés améliorant sa stabilité et/ou sa biodisponibilité. Toutefois, la taille du peptide ne doit pas excéder, de préférence, 30 à 40 acides aminés. Les peptides selon l'invention peuvent être synthétisés par n'importe quelle méthode bien connue de l'homme du métier. De telles méthodes incluent notamment la synthèse chimique classique (en phase solide ou en phase homogène liquide), la synthèse enzymatique à partir d'acides aminés constitutifs ou de leurs dérivés, ainsi que des procédés de production biologiques par des cellules hôtes recombinantes. La synthèse par voie chimique est particulièrement avantageuse pour des raisons de pureté, de spécificité antigénique, d'absence de produits secondaires non désirés et pour sa facilité de production. La synthèse par voie chimique inclue, entre autres méthodes, la synthèse de type Merrifield et la méthodologie de synthèse peptidique en phase solide Fmoc (voir par exemple �Fmoc solid Phase peptide synthesis, a practical approach�, publié par W.C. Chan et P. D. White, Oxford university press, 2000). Utilisation thérapeutique des peptides selon l'invention Il a été montré que l'Opiorphine exerce un effet anti-dépresseur additionné d'un effet psychostimulant dans un modèle d'analyse du désespoir comportemental chez le rat. De plus, il a été montré que l'effet anti-dépresseur et l'effet psychostimulant de l'Opiorphine sont dépendants de l'activation des récepteurs �- et 6-opioïdes endogènes, mais pas de l'activation des récepteurs K-opioïdes endogènes. De ce fait, l'invention concerne des peptides selon l'invention, décrits dans le paragraphe ci-dessus, pour une utilisation en tant que psychostimulants. De tels peptides selon l'invention peuvent être utilisés pour activer une voie opioïdergique dépendante des récepteurs �- et/ou 6-opioïdes. Par ailleurs, les peptides selon l'invention n'activent pas de voies opioïdergiques dépendantes des récepteurs K-opioïdes. Ces peptides peuvent notamment être utilisés pour le traitement ou la prévention de la narcolepsie, l'hypersomnie, la baisse de vigilance, le déficit de l'attention, l'hyperactivité chez l'enfant, le déficit de l'attention chez l'enfant (associé ou pas à l'hyperactivité), les troubles obsessionnels compulsifs (TOCs), et des troubles de l'humeur tels que les états dépressifs et la dépression (� Major Depressive Disorder �), cette dernière incluant notamment la dépression primaire (� Major Depressive Disorder, Single Episode �) et la dépression résistante (� Major Depressive Disorder, Recurrent �), la maladie bipolaire (de type I et de type Il), le trouble dysthymique et le trouble cyclothymique. Dans le cadre du traitement d'une de ces maladies, les peptides selon l'invention sont de préférence administrés à un sous-groupe de patient ayant besoin d'un psychostimulant et/ou de l'activation d'une voie opioïdergique dépendante des récepteurs �- et/ou 6-opioïdes. Les peptides selon l'invention peuvent également être utilisés en combinaison (i.e. par administration simultanée ou séquentielle) avec un second principe actif visant au traitement ou à la prévention de la même maladie. Ce second principe actif peut également avoir un effet psychostimulant, ou avoir un effet antidépresseur, ou encore avoir un effet anxiolytique. Les peptides peuvent par exemple être utilisés en combinaison avec au moins un second principe actif choisi parmi : un antidépresseur tel qu'un imao (iproniazide, moclobémide, etc), un antidépresseur imipraminique (imipramine, clomipramine, amitriptyline, amoxapine, dosulépine, doxépine, maprotiline, trimipramine, etc), un antidépresseur inhibiteur sélectif de la recapture de la sérotonine (citalopram, fluvoxamine, fluoxétine, paroxétine, sertraline, escitalopram, etc) ou un antidépresseur inhibiteur de la recapture de la sérotonine et de l'adrénaline (milnacipran, venlafaxine, mirtazapine, etc) ; un anxiolytique tel qu'une benzodiazépine (alprazolam, clobazam, diazépam, lorazépam, prazépam, etc), le méprobamate, l'hydroxyzine, le buspirone, le captodiame ou l'etifoxine ; et un psychostimulant tel que la morphine, le modafinil, le méthylphénidate, des dérivés du déanol (l'acti 5, cleregil, debrumyl, etc), le cétoglutarate, l'adrafinil ou le sulbutiamine. La plupart de ces principes actifs connus présentent des effets 20 secondaires importants aux doses efficaces. Contrairement aux principes actifs connus, les peptides selon l'invention agissent sur un système de régulation physiologique, et non directement sur des systèmes de transfert ou des récepteurs. L'action des peptides selon l'invention ne sort donc pas du cadre d'un système régulé, et ne peut pas saturer le système. De ce fait, ils ne 25 présentent pas ou très peu d'effets secondaires. Les peptides selon l'invention, en potentialisant l'effet du second principe actif, permet de l'administrer à une concentration inférieure à la dose efficace lorsque le second principe actif est administré seul. De ce fait, un mode de réalisation préféré de l'invention concerne l'utilisation des peptides selon 30 l'invention en combinaison avec au moins un second principe actif, ledit second principe actif étant administré à une concentration inférieure à la dose efficace, en particulier à une dose à laquelle aucun effet secondaire n'est induit. 10 15 Le peptide selon l'invention et le second principe actif peuvent être présents au sein de la même composition pharmaceutique ou dans deux compositions pharmaceutiques séparées. Dans ce second cas, les compositions pharmaceutiques peuvent être administrées au patient soit de manière essentiellement simultanée, soit de manière séquentielle. Les maladies mentionnées ici peuvent être traitées à tout stade de la maladie. Par � traitement �, on entend traitement à titre curatif (visant à au moins soulager, freiner ou stopper le développement de la pathologie). Par � prévention �, on entend traitement à titre prophylactique (visant à réduire le risque d'apparition de la pathologie). Par � psychostimulant �, on entend un composé qui provoque une augmentation de la neurotransmission dopaminergique et noradrénergique. Plus particulièrement, les psychostimulants stimulent les neurotransmetteurs responsables du contrôle de l'attention, de la motivation, de la vigilance, de la concentration. La dopamine et l'adrenaline sont les deux neurotransmetteurs majeurs responsables du contrôle de l'attention, de la motivation, de la vigilance, de la concentration. Le terme � voie opioïdergique dépendante des récepteurs p- et/ou 5-opioïdes � est bien connu de l'homme du métier. Ces voies incluent notamment celles décrites par Henriksen and Willoch (2008 Brain. 131(Pt 5):1171-96). L'homme du métier dispose de plusieurs tests permettant d'évaluer si un composé active une voie opioïdergique dépendante des récepteurs �- et/ou ôopio'ides, tels que ceux décrits dans l'Exemple 2. Par exemple, il est possible de comparer l'effet du composé en présence et en l'absence d'un antagoniste opioïde spécifique des récepteurs �- et/ou b-opioïdes. L'abolition de l'effet du composé en présence de l'antagoniste indique que le composé active la voie opioïdergique étudiée. La présente invention concerne aussi bien l'utilisation in vitro que l'utilisation in vivo des peptides selon l'invention pour activer une voie opioïdergique dépendante des récepteurs �- et/ou b-opioïdes. L'invention porte également sur l'utilisation de peptides selon l'invention pour la préparation : û d'un psychostimulant ; d'un médicament capable d'activer une voie opioïdergique dépendante des récepteurs �- et/ou 6-opioïdes ; et/ou d'un médicament pour prévenir ou traiter une maladie choisie parmi la narcolepsie, l'hypersomnie, la baisse de vigilance, le déficit de l'attention chez l'adulte et chez l'enfant, l'hyperactivité chez l'enfant, les troubles obsessionnels compulsifs (TOCs), et des troubles de l'humeur tels que la dépression, la maladie bipolaire, le trouble dysthymique et le trouble cyclothymique. Par ailleurs, l'invention porte sur une méthode pour le traitement ou la prévention d'une maladie sélectionnée dans le groupe constitué de la narcolepsie, l'hypersomnie, la baisse de vigilance, le déficit de l'attention chez l'adulte et chez l'enfant, l'hyperactivité chez l'enfant, les troubles obsessionnels compulsifs (TOCs), et des troubles de l'humeur tels que la dépression, la maladie bipolaire, le trouble dysthymique et le trouble cyclothymique comprenant l'administration d'un peptide selon l'invention à un individu. De préférence, l'individu est un individu et/ou un patient en ayant besoin. L'individu et/ou le patient a de préférence besoin d'un psychostimulant et/ou de l'activation d'une voie opioïdergique dépendante des récepteurs �- et/ou 6-opioïdes. Compositions pharmaceutiques et posologie Les peptides selon l'invention sont préférentiellement utilisés sous forme de composition pharmaceutique comprenant, en tant que principe actif, au moins un peptide selon l'invention avec un ou plusieurs excipients pharmaceutiquement acceptables. Par "excipient' ou "véhicule pharmaceutiquement acceptable", on entend tout solvant, milieu de dispersion, agent retardant l'absorption, etc, qui ne produit pas de réaction secondaire, par exemple allergique, chez l'humain ou l'animal. Le peptide selon l'invention peut correspondre à n'importe lequel des peptides décrits ci-dessus. De préférence, la composition pharmaceutique selon l'invention comprend entre 3 et 100, 5 et 50 ou 10 et 25 mg d'un peptide selon l'invention par dose unitaire de composition pharmaceutique. La composition pharmaceutique peut être accompagnée d'instructions concernant les applications thérapeutiques (par exemple celles mentionnées ci-dessus) et la posologie (de préférence conformes aux posologies mentionnées dans le paragraphe précédent). La dose dépend notamment du principe actif considéré, du mode d'administration, de l'indication thérapeutique, de l'âge, du poids et de l'état du patient. Le dosage initial est généralement choisi de manière à être le plus faible possible (dose minimale efficace). Si nécessaire, le dosage est progressivement augmenté en fonction de la réponse du patient. Etant donné qu'il peut y avoir un délai avant que les effets du principe actif se manifestent, il faut de préférence attendre plusieurs jours à quelques semaines avant d'augmenter le dosage. Dans le cas du peptide selon l'invention, la dose initiale pour un adulte peut par exemple être inférieure ou égale à 75 mg par jour, administré en trois fois. Ce dosage peut progressivement être augmenté jusqu'à 150 mg par jour si nécessaire. Des dosages supérieurs à 200 mg par jour ne sont pas recommandés. Cependant, lors d'une hospitalisation de patients dans un état grave, les dosages peuvent atteindre jusqu'à 250 ou 300 mg par jour. Chez des patients âgés, la dose initiale est par exemple inférieure ou égale à 30 mg par jour et ne doit de préférence pas excéder 100 mg par jour. Chez des enfants, la dose initiale peut par exemple être inférieure ou égale à 10 à 25 mg par jour, et ne doit de préférence pas excéder 75 mg par jour. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent en outre contenir au moins un second principe actif choisi parmi un psychostimulant, un antidépresseur et/ou un anxiolytique. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention peuvent être formulées de manière à être administrées au patient par une unique voie ou par des voies différentes. La composition pharmaceutique peut par exemple être administrée par voie orale, sous-linguale, nasale, buccale, transdermique, intraveineuse, sous-cutanée, intramusculaire et/ou rectale. Dans le cas d'une administration par voie orale ou sous-lingale, les compositions de l'invention se trouvent par exemple sous la forme de gélules, comprimés effervescents, comprimés nus ou enrobés, sachets, dragées, ampoules ou solutés buvables, microgranules ou formes à libération prolongée. Dans le cas d'une administration par voie nasale ou buccale, les compositions de l'invention se trouvent par exemple sous la forme de spray. Dans le cas d'une administration par voie transdermique, les compositions de l'invention se trouvent par exemple sous la forme de patch. Lorsque l'administration par voie parentérale est envisagée, plus particulièrement par injection, les compositions de l'invention comprenant le ou les principes actifs se trouvent sous la forme de solutés et suspensions injectables conditionnées en ampoules ou flacons pour perfusion lente. L'injection peut notamment être réalisée par voie sous-cutanée, intramusculaire ou intraveineuse. Les formes pour l'administration parentérale sont obtenues de façon conventionnelle par mélange du ou des principes actifs avec des tampons, des agents stabilisants, des conservateurs, des agents solubilisants, des agents isotoniques et des agents de mise en suspension. Conformément aux techniques connues, ces mélanges sont ensuite stérilisés (par exemple par filtration) puis conditionnés sous la forme d'injections intraveineuses. A titre de tampon, l'homme du métier pourra utiliser des tampons à base de sels de phosphate organique. Des exemples d'agents de mise en suspension englobent le méthylcellulose, l'hydroxyéthylcellulose, l'hydroxypropylcellulose, l'acacia et la carboxyméthylcellulose sodique. En outre, des stabilisants utiles selon l'invention sont le sulfite de sodium et le métasulfite de sodium, tandis que l'on peut citer le p-hydroxybenzoate de sodium, l'acide sorbique, le crésol et le chlorocrésol en tant que conservateurs. Pour la préparation de solution ou de suspension orale, les principes actifs sont dissous ou mis en suspension dans un véhicule approprié avec un agent dispersant, un agent humectant, un agent de mise en suspension (par exemple la polyvinylpyrrolidone), un conservateur (tel que le méthylparaben ou le propylparaben), un agent correcteur de goût ou un colorant. Pour la préparation de microcapsules, les principes actifs sont combinés à des diluants appropriés, des stabilisants appropriés, des agents favorisant la libération prolongée des substances actives ou tout autre type d'additif pour la formation d'un noyau central qui est ensuite revêtu d'un polymère approprié (par exemple une résine hydrosoluble ou une résine insoluble dans l'eau). Les techniques connues de l'homme du métier seront utilisées à cet effet. Les microcapsules ainsi obtenues sont ensuite éventuellement formulées dans des unités de dosage appropriées. Bien qu'ayant des significations distinctes, les termes � comprenant �, � contenant �, � comportant � et � consistant en � ont été utilisés de manière interchangeable dans la description de l'invention, et peuvent être remplacés l'un par l'autre. Les exemples et figures suivants illustrent l'invention sans en limiter la portée. DESCRIPTION DES FIGURES La Figure 1 illustre l'effet psychostimulant et antidépresseur de l'Opiorphine dans le test de nage forcée, par mesure de la durée d'immobilité au cours du Pré-Test (n=40) et du Test (sec, n=8 rats/groupe) (Moyenne � ESM). Les résultats du test de Mann-Whitney (vs. Véhicule) sont comme suit: T P DESCRIPTION DES SEQUENCES DU LISTAGE DE SEQUENCES SEQ ID NOs : 1, 2, 3 et 4 correspondent à des peptides selon l'invention. Plus particulièrement, SEQ ID NO : 2 correspond à l'Opiorphine. SEQ ID NO : 5 correspond à la séquence de la Basic Prolin-rich Lacrimal Protein (BPLP) humaine. SEQ ID NO : 6 correspond à la sialorphine. EXEMPLES Exemple 1 : Synthèse de l'Opiorphine (i.e. le peptide QRFSR) par Génosphère Biotechnologie (F) & Almac Sciences (UK) Les lots d'Opiorphine ont été synthétisés par Génosphère Biotechnologie (F) & Almac Sciences (UK). Il a été confirmé que ces lots de synthèse protègent, in vitro, de manière dose dépendante : la substance P (substrat physiologique de la NEP) et les substrats fluorogéniques de synthèse [Abz]-dRGL-[EDDnp], [Abz]-RGFK-[DnpOH] (Thermo-Fisher Scientific), de l'endo-protéolyse par la NEP humaine recombinante (concentrations inhibitrices des peptides QRFSR comprises entre 5 et 50 �M) ; et le substrat de synthèse Ala-AMC de l'amino-protéolyse par I'APN humaine recombinante. Exemple 2 : Effet de l'Opiorphine sur les voies de transmission nociceptive Il a été montré dans le modèle d'analyse de la réponse comportementale algique aiguë chez le rat mâle, le �Pin Pain test� (stimulus mécanique) décrit dans Rougeot et al. (froc Natl Acad Sci U S A. 2003; 100(14):8549-54), que l'Opiorphine exerce une activité anti-nociceptive puissante à 1 mg/kg I .V. (P=0,0002, Mann-Whitney U-test, n=8-12 rats/groupe), équivalente à celle de la morphine à 6 mg/kg I.P. (Rougeot et Messaoudi, Med Sci (Paris). 2007; 23(1):37-9). De manière remarquable, parmi les effets secondaires majeurs, l'effet antipéristaltique de la morphine (inhibition de 80-90% du péristaltisme chez les rats traités par la morphine comparée aux rats contrôles) n'est pas observé chez les rats traités avec l'Opiorphine. Une action analgésique de l'Opiorphine a été ensuite étudiée dans le modèle d'analyse de la réponse comportementale algique liée à une inflammation chronique sous-cutanée (stimulus chimique au niveau de la patte postérieure), le �formalin test� décrit dans Rougeot et al. (froc Natl Acad Sci U S A. 2003; 100(14):8549-54). La substance de référence est la morphine, à la dose de 2 mg/kg. Sur la base des deux variables les plus importantes dans le test de douleur dit de �la formaline�, durée de léchage de la patte et nombre de spasmes, l'Opiorphine a montré un profil antalgique prolongé (la réponse comportementale est enregistrée et analysée en cinétique durant 60 min) avec un effet dose dépendant significatif (P 0,002, Analyse de variance de Kruskal-Wallis, n = 8 rats/groupe) et un pouvoir anti-nociceptif maximum à 1-2 mg/kg I .V. (Test de Mann-Whitney P = 0,036-0,003 vs véhicule). L'étape suivante a été de cerner la spécificité des mécanismes d'action anti-nociceptive de l'Opiorphine et notamment l'implication des récepteurs opioïdes endogènes. L'effet antagoniste des ligands suivants a été analysé : antagonistes opioïdes à large spectre (Naloxone, 3 mg/kg) et sélectifs respectivement des récepteurs �- (CTOP, 0,8 mg/kg), 8- (Naltrindole, 10 mg/kg) et x- (Nor-Binaltorphimine, 5 mg/kg) opioïdes. Tableau 1 Traitement Véhicule Opiorphine Naltrindole Nor- CTAP + + Binaltorphimine Opiorphine Variable (n = 8) (n = 8) Opiorphine + Opiorphine (n = 8) (n = 8) (n = 8) Nombre de 287�31 149�28 176�29 169�26 285�36 spasmes H(ddl=4) = 13,12 ; P Exemple 3 : Effet de l'Opiorphine sur les voies de contrôle des émotions : potentiel anti-dépresseur • Le test du désespoir comportemental (Test de nage forcée ou Forced Swimming Test) Les effets de l'Opiorphine sur le comportement de désespoir ou de résignation ont été étudiés chez le rat mâle adulte. Le test comporte une session de pré-test de 15 minutes et une session de test de 5 minutes, 24 heures après. Lors de la session de pré-test, le comportement du rat est enregistré pendant les 5 premières minutes. A la fin du pré-test, le rat est retiré de l'eau, séché délicatement, traité puis remis dans sa cage d'habitation. Lors du test, le rat est de nouveau déposé dans l'eau et son comportement est enregistré pendant 5 minutes. L'Opiorphine a été administrée par voie I.V., immédiatement après la session de pré-test, puis 300 et 15 minutes avant la session de test à trois doses (0,5, 1 ou 2 mg/kg). La substance de référence était le 8-OH-DPAT (0,5 mg/kg), qui est un agoniste 5-HT1 a, ou l'Imipramine (20 mg/kg). Tableau 2 L'analyse de variance de Kruskal-Wallis a montré que le temps d'immobilité des rats des différents groupes durant le pré-Test n'est pas significativement différent, alors qu'une hétérogénéité significative pour ces mêmes groupes a été observée après traitement (tableau 2 ci-dessus). Le test de Mann-Whitney a montré que le temps d'immobilité des rats des groupes Opiorphine 1 et 2 mg/kg et 8-OH-DPAT est significativement inférieur à celui des rats du groupe témoin. Alors que le temps d'immobilité des rats du groupe Opiorphine 0,5 mg/kg tend à être inférieur à celui des rats du groupe témoin (Figure 1). Le test de Wilcoxon a montré que le temps d'immobilité dans l'eau des rats témoins augmente significativement entre les deux sessions de Test vs Pré-test. En effet, les rats témoins se résignent lors du test, puisqu'ils ont retenu qu'ils allaient bientôt être sortis de l'eau. Contrairement aux rats témoins, le temps d'immobilité des rats des groupes Opiorphine 1 et 2 mg/kg et 8-OH-DPAT diminue significativement entre le Pré-Test et le Test. Ceci indique que les rats traités à l'Opiorphine ne se résignent pas, et donc que l'Opiorphine possède un effet anti- résignation (antidépresseur). De plus, le temps d'immobilité des rats des groupes Opiorphine 1 et 2 mg/kg et 8-OH-DPAT diminue significativement par rapport au Groupe Pré-Test Test de Kruskal-Wallis H(ddl4) = 1,828 P = 0,767 Test Test de Kruskal-Wallis H(ddl4) = 20,046 P = 0,0005 8-OHDPAT 0,5 mg/kg Test de Wilcoxon (Test vs. Re-test) z = 2,24 P = 0,025 z = 1,05 P = 0,293 z = 2,524 P = 0,012 z = 2,313 P = 0,021 z = 2,524 P = 0,012 Véhicule Opiorphine 0,5 mg/kg Opiorphine 1 mg/kg Opiorphine 2 mg/kg groupe contrôle. Ceci indique que l'Opiorphine exerce non seulement un effet antirésignation, mais également un effet psychostimulant. En conclusion, l'Opiorphine, administrée par voie I.V., induit un effet dose dépendant protecteur contre la résignation et exerce ainsi un pouvoir anti- dépresseur maximum à 1 mg/kg dans le test de désespoir comportemental chez le rat mâle adulte. Afin d'exclure un éventuel effet amnésiant ou d'hyper-activité de l'Opiorphine, qui pourrait également expliquer une absence de résignation chez les rats traités, deux tests comportementaux supplémentaires ont été effectués pour vérifier la spécificité de l'effet anti-dépresseur de l'Opiorphine. • Le test d'évitement passif : �Passive Avoidance Test� Le test de l'évitement passif chez le rat permet d'évaluer le degré de mémorisation de l'animal lors de l'application d'un stimulus aversif auquel il ne peut se soustraire. Le dispositif se compose de deux compartiments séparés par une cloison ouverte permettant le passage du rat d'un compartiment à l'autre. Le premier compartiment, où l'on dépose le rat au début du test, est éclairé et communique par une porte guillotine avec un compartiment sombre et dont le plancher comporte une grille électrifiée. Le test d'évitement passif comporte une session de pré-test où l'animal reçoit un choc électrique (2 mA, 2 sec) lorsqu'il entre dans le compartiment obscur et une session de test de 3 minutes, 24 heures après, où le comportement de l'animal est analysé pour sa rétention à long terme de la tâche apprise (la grille du compartiment sombre n'est plus électrifiée dans le test). L'Opiorphine a été administrée (1 mg/kg I.V.) immédiatement après la session du Pré-test. Ce test a permis d'évaluer l'effet amnésiant de l'opiorphine. Le tableau ci-dessous présente le temps de latence pour entrer dans le compartiment sombre (moyenne � ESM, n=8 rats/groupe). Tableau 3 Groupe Véhicule Opiorphine Test U de 1 mg/kg Mann-Whitney (n = 8) (n = 8) Pré-Test 23,1 � 4,7 24,6 � 6,6 U = 31 P = 0,91 Test 171,3� 6,6 158,5 � 20,5 U = 32 P = 0,99 Test de Wilcoxon z = 2,52 z = 2,53 P=0,012 P=0,012 Le test de Mann-Whitney a montré que le temps de latence des rats des deux groupes, contrôle et Opiorphine, pour entrer dans le compartiment sombre pendant les 2 sessions de Pré-Test et Test n'est pas significativement différent. Le test de Wilcoxon a montré que le temps de latence des rats pour chacun de ces deux groupes au cours du Test est significativement plus élevé (X6-7) que celui obtenu durant le Pré-Test. Ceci indique que les animaux ont retenu à long terme la tâche apprise. L'Opiorphine, à la dose de 1 mg/kg, I.V., ne montre donc pas d'effet amnésiant dans le test d'évitement passif. • Le test d'activité locomotrice Le dispositif se compose de deux compartiments séparés par une cloison ouverte permettant le passage du rat d'un compartiment à l'autre. Les variables mesurées sont le nombre de redressements (activité verticale) et le nombre de passages dans les 2 compartiments (activité horizontale) durant une période de 3 min. La molécule de référence est l'Imipramine (20 mg/kg). Tableau 4 Groupe Vehicule Imipramine Opiorphine - 20 mg/kg 1 mg/kg (n=8) (n=8) (n=8) Moyenne � SEM 30,13 � 2,56 18,75 � 1,91 35,25 � 2,84 Kruskal-Wallis test: (H(4df)=15,6; P=0,002 U=5 U=21 Mann-Withney test (vs. Vehicule) P=0,008 P=0,25 Significativité Comparé aux groupes contrôles, l'Opiorphine, à la dose de 1 mg/kg, I.V., n'induit pas d'effet sédatif contrairement à l'Imipramine (20 mg/kg I.P.), ni d'effet 20 significatif d'hyperactivité, dans le test d'activité locomotrice chez le rat. Ainsi, dans un modèle d'analyse du désespoir comportemental, il a été montré que l'Opiorphine exerce un effet anti-dépresseur spécifique à 1 mg/Kg, I.V., additionné d'un effet psycho-stimulant, chez le rat mâle. L'étape suivante a été de tester la spécificité de ses mécanismes d'action et notamment l'implication des récepteurs opioïdes endogènes dans le test de nage forcée. Le tableau ci-dessous montre l'effet du traitement dans le test de nage forcée, par mesure de la durée d'immobilité au cours du Pré-Test et du Test (s, n=8/groupe ; Moyenne � ESM). Tableau 5 Groupes Véhicule Imipramine Opiorphine Naltrindole- CTAP- - Opiorphine Opiorphine (n=8) 20 mg/kg 1 mg/kg 10-1 mg/kg 1-1 mg/kg (n=7)# (n=8) (n=8) (n=8) Pre-test 62,9�11,8 97,4�7,8 93,6�15,5 48,8�6,0 71,9�8,9 Test 128,3�21,1 63,9�10,6 53,6�11,4 86,0�15,6 57,6�8,7 KWT: (H(4df)=11,64; P=0,02) U=6 U=10 U=16 U=6 Mann-Whitney test P=0,011 P=0,021 P=0,093 P=0,006 (vs. Véhicule dans le Test) Significativité Wilcoxon test Z=2,52 Z=2,36 Z=2,38 Z=2,52 Z=0,98 (Pre-test vs.Test) P=0,012 P=0,018 P=0,017 P=0,012 P=0,33 Significativité Cette seconde série de tests dans le modèle de désespoir comportemental chez le rat, a confirmé que l'Opiorphine à 1 mg/kg I.V., induit un effet antidépresseur additionné d'un effet psycho-stimulant comparable à celui exercé par la substance de référence, l'Imipramine à 20 mg/kg I.P. Les effets de l'Opiorphine sont abolis en présence de Naltrindole, un antagoniste spécifique des récepteurs b-opioïdes (tableau 5 ci-dessus). Ceci indique que son action de type antidépressive et psychostimulante est médiée par les voies opioïdes endogènes et requiert l'activation spécifique des récepteurs opioïdes de sous-type ô. Exemple 4 : Effet de l'Opiorphine sur les voies de contrôle des émotions : 20 potentiel anxiolytique • Le test d'enfouissement défensif conditionné (Conditioned Defensive Burying Test) Les effets anxiolytiques de l'Opiorphine, administrée par voie intra-veineuse à la dose de 1 mg/kg, ont été évalués dans le test d'enfouissement défensif conditionné chez le rat mâle Wistar. Pour éviter les faux positifs, étant donné que l'Opiorphine exerce un effet antalgique, le test s'est déroulé sur deux sessions : une session de sélection des rats anxieux suivie d'une session de test sous traitement. Le test d'enfouissement défensif conditionné de sélection des rats expérimentaux se déroule dans les premières heures de la phase d'obscurité, phase où les rats sont les plus actifs. Chaque rat est déposé dans le dispositif expérimental du côté opposé à la sonde et un choc électrique unique, de faible intensité (2 mA), est délivré à l'animal au moment où il pose une patte antérieure pour la première fois sur la sonde, puis son comportement est observé pendant 3 minutes. La sciure est changée et égalisée à une hauteur uniforme de 5 cm avant le passage de chaque rat. Seize rats ayant exprimé au moins 25 secondes d'enfouissement de la sonde ont été sélectionnés. Le jour suivant, le rat est traité 15 minutes avant le test et déposé dans le dispositif expérimental dans la partie opposée à la sonde. Dans cette session, le rat ne reçoit pas de choc électrique, la seule vue de la sonde déclenche de l'anxiété chez le rat. Les comportements du rat sont enregistrés pendant 5 minutes. Les variables analysées sont la durée d'enfouissement de la sonde, le nombre d'étirements en direction de la sonde, le nombre d'approches vis-à-vis de la sonde, et le nombre de fuites vis-à-vis de la sonde. Ces différentes variables servent à calculer un score global d'anxiété pour chaque rat. Le tableau ci-dessous montre les résultats obtenus concernant les effets de l'Opiorphine (1 mg/kg, i.v.) sur le score global d'anxiété dans le test d'enfouissement défensif conditionné. Tableau 6 Groupes Véhicule Opiorphine, 1 mg/Kg (n = 8) (n = 8) Moyenne � ESM 25,06 � 2,94 25,94 � 3,74 Test de Mann-Whitney U = 29,50 Significativité P = 0,79 Sur la base du score global d'anxiété, l'Opiorphine, à la dose de 1 mg/kg, i.v., ne montre pas d'activité anxiolytique par rapport au contrôle dans le test d'enfouissement défensif conditionné chez le rat mâle Wistar. Au plan des redressements, les rats traités avec l'Opiorphine montrent une tendance à exprimer moins de redressement que les rats témoins (P = 0,11 vs véhicule, n=8 rats/groupe). Exemple 5 : Effet de l'Opiorphine dans le comportement de pharmacodépendance : potentiel de type addiction • Le test de l'emplacement préférentiel conditionné (Conditioned place preference Test) Le dispositif se compose de deux compartiments séparés par une porte guillotine ouverte lors de la phase d'habituation et le test, permettant le libre passage du rat d'un compartiment à l'autre. Un compartiment est éclairé et le plancher comporte une grille de métal. Ce compartiment est un compartiment aversif non-préférentiel, et le temps passé dans ce compartiment est la variable mesurée. Durant la période de 10 jours de conditionnement (45 min, porte guillotine fermée) le compartiment aversif est associé au produit à tester (contrôle et drogues), alors que le compartiment préférentiel (sombre, litière) est associé au contrôle (véhicule). Le test se déroule sur 3 phases. L'Opiorphine a été administrée à la dose effective analgésique de 1 mg/kg, i.v. et la morphine a été utilisée comme substance de référence administrée à la dose de 2 mg/kg, i.v.. L'analyse de variance de Kruskal-Wallis appliquée sur la base du temps passé dans le compartiment non-préférentiel, respectivement durant la phase 1 (Pré-Test à JO) et durant la phase 3 (Test à J11), a indiqué que les 3 groupes ne diffèrent pas significativement après la phase d'habituation à JO (H(2df)=1,21; P=0,55), alors que ces mêmes groupes sont significativement différents lors du test à J11 après la phase de traitement conditionné (H(2df)=7,91; P=0,02). Dans ce dernier cas, le test de Mann-Whitney a montré une différence significative entre les rats traités à la morphine et ceux traités par le véhicule (U=1; P=0,001). Par contre il n'y avait pas de différence significative entre les rats conditionnés avec l'Opiorphine et les contrôles conditionnés avec le véhicule (U=31; P=0,92). Après conditionnement avec l'Opiorphine, les rats n'ont pas développé de préférence de place pour le compartiment établi initialement lors du pré-test comme non-préférentiel. En effet, après conditionnement avec l'Opiorphine, ces rats passent autant de temps dans le compartiment non-préférentiel que lors de la phase initiale de pré-test (Wilcoxon test: z=1,54; P=0,12). A l'opposé, après conditionnement avec la morphine, les rats ont développé un emplacement préférentiel significatif pour le compartiment initialement établi comme non-préférentiel lors du pré-test (z=2,52; P=0,012). Aux doses analgésiques efficaces dans le � Formalin Test �, l'Opiorphine ne provoque donc pas de pharmacodépendance significative, au contraire de la morphine. L'administration répétée d'Opiorphine à la dose de 1 mg/kg n'induit pas d'effet secondaire significatif de type addiction dans le test de l'emplacement préférentiel conditionné. Exemple 6 : Conclusion Les données expérimentales ci-dessus démontrent donc que l'Opiorphine exerce à 1 mg/kg I.V. une activité anti-nociceptive puissante et tonique, via l'activation des voies opioïdergiques dépendantes des récepteurs �-opioïdes endogènes, et ce dans deux modèles d'analyse de la réponse comportementale algique chez le rat, le � Pin pain Test � (douleur mécanique aiguë) et le � Formalin Test � (douleur inflammatoire chimique chronique). L'Opiorphine est capable d'induire l'effet analgésique maximal induit par la morphine (2-6 mg/kg I.P.) dans ces 2 tests, sans induire un des effets secondaires majeurs de la morphine, à savoir l'effet anti-péristaltique (Rougeot C, Proceedings of the 4th international Peptide Symposium; J. Wilce (Editor) on behalf of the Australian Peptide Society, 2007). De plus, l'effet analgésique spécifique (non anti-inflammatoire) et prononcé de l'Opiorphine dans le test de douleur chimique chronique est en faveur d'une action anti-nociceptive potentielle de l'Opiorphine dans les douleurs neuropathiques sévères. De plus, dans un modèle d'analyse du désespoir comportemental, chez le rat mâle, les Inventeurs avons montré que l'Opiorphine exerce un effet anti- dépresseur spécifique à 1 mg/Kg, I.V. additionné d'un effet psycho-stimulant via l'activation des voies opioïdergiques dépendantes des récepteurs 6-opioïdes endogènes. L'effet de l'Opiorphine dans ce test est spécifique puisque les rats traités à la même dose ne développent aucune réponse de type amnésique, sédatif ou hyperactif dans divers tests comportementaux appropriés. Les effets anti-douleur, anti-dépresseur et psychostimulants de l'Opiorphine sont dépendants de l'activation des récepteurs �- et 6-opioïdes endogènes qui transmettent le potentiel d'action des enképhalines endogènes libérées en réponse au stimulus (douleur, stress, émotions...). Deux mécanismes d'action de l'Opiorphine sont envisageables : protection et potentialisation des effets des enképhalines endogènes et/ou activation directe des récepteurs �- et 6-opioïdes endogènes. Par ailleurs, l'Opiorphine, à la dose de 1 mg/kg, i.v., n'a pas montré d'activité anxiolytique dans le test d'enfouissement défensif conditionné chez le rat mâle. Enfin, dans le test de l'emplacement préférentiel conditionné et aux doses analgésiques efficaces dans le formalin-test, l'Opiorphine ne provoque pas de pharmacodépendance significative. L'administration répétée de 1 mg/kg d'Opiorphine n'induit pas d'effet secondaire de type addiction significatif, à l'inverse de la morphine. REVENDICATIONS1. Peptide pour une utilisation en tant que psychostimulant, où ledit peptide: comprend un produit de maturation de la Basic Prolin-rich Lacrimal Protein (BPLP) de séquence SEQ ID NO: 5 ou un dérivé dudit produit de maturation ; et exerce une activité psychostimulante. 2. Peptide pour l'activation d'une voie opioïdergique dépendante des récepteurs p- et/ou 6-opioïdes, où ledit peptide: û comprend un produit de maturation de la Basic Prolin-rich Lacrimal Protein (BPLP) de séquence SEQ ID NO: 5 ou un dérivé dudit produit de maturation ; et û exerce une activité psychostimulante. 3. Peptide selon la revendication 1 ou 2, où ledit peptide comprend la séquence X1-X2-Arg-Phe-Ser-Arg (SEQ ID NO : 1), où : û XI représente un atome d'hydrogène, une tyrosine ou une cystéine; û lorsque XI est un atome d'hydrogène, X2 représente une glutamine ou un pyroglytamate ; û lorsque XI est une tyrosine ou une cystéine, X2 représente une glutamine ; et û ladite séquence X1-X2-Arg-Phe-Ser-Arg constitue l'extrémité C-terminale dudit peptide. 4. Peptide selon la revendication 3, où ledit peptide consiste en la séquence XI-X2-Arg-Phe-Ser-Arg. 5. Peptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, où ledit peptide 30 consiste en une séquence choisie parmi les séquences QRFSR (SEQ ID No: 2), YQRFSR (SEQ ID No: 3) et CQRFSR (SEQ ID No: 4). 25 6. Peptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dont la séquence diffère d'une séquence choisie parmi les séquences SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 et SEQ ID NO: 4 par des substitutions conservatives. 7. Peptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans lequel ledit peptide comporte une modification chimique améliorant sa stabilité et/ou sa biodisponibilité. 8. Peptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, pour le traitement ou la prévention d'une maladie sélectionnée dans le groupe constitué de la narcolepsie, l'hypersomnie, la baisse de vigilance, le déficit de l'attention chez l'adulte et chez l'enfant, l'hyperactivité chez l'enfant, les troubles obsessionnels compulsifs (TOCs), la dépression, la maladie bipolaire, le trouble dysthymique et le trouble cyclothymique. 9. Peptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, destiné à être administré à un adulte à une dose inférieure ou égale à 75 mg par jour. 10. Peptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, destiné à être administré à un enfant à une dose inférieure ou égale à 25 mg par jour. 11. Peptide selon la revendication 9 ou 10, destiné à être administré trois fois par jour. 12. Peptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, destiné à être administré par une voie choisie parmi la voie orale, transdermique, nasale, sous-linguale et intraveineuse. 13. Peptide selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, destiné à être administré en combinaison avec un second principe actif sélectionné dans le groupe constitué d'un psychostimulant, un antidépresseur et un anxiolytique. 14. Utilisation d'un peptide tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 7 pour la préparation d'un médicament pour traiter ou prévenir une maladie choisie parmi la narcolepsie, l'hypersomnie, la baisse de vigilance, le déficit de l'attention chez l'adulte et chez l'enfant, l'hyperactivité chez l'enfant, les troubles obsessionnels compulsifs (TOCs), la dépression, la maladie bipolaire, le trouble dysthymique et le trouble cyclothymique.