Brevet FR2932890A1 — publié le 20091225

B08-1702FR - ODE/EVH Société par actions simplifiée dite : APPLISTICK Dispositif et procédé de test pour la détection d'une substance Invention de : Bertrand Chevalier Dispositif et procédé de test pour la détection d'une substance L'invention concerne la détection ou l'identification de substances sur une surface, dans une solution ou dans un liquide biologique, tel que la salive, le sang ou l'urine. La nature de la détection peut provenir de différentes réactions (par exemple : neutralisation, précipitation, Redox, AC/AG,...) afin d'identifier une ou plusieurs substances (par exemple : agents patogènes, hormones, protéïnes, substances stupéfiantes, ou chimique). On connaît, dans l'état de la technique, des kits de test permettant, notamment, mais de manière nullement limitative, par test immunochromatographique, de détecter de manière qualitative des substances stupéfiantes, telles que des cannabinoïdes. Le test utilisé est basé sur le principe de réactions immunochromatographiques antigène/anticorps sur une bandelette de test. Si une drogue est présente dans un échantillon d'urine, l'antigène, qui, dans ce cas, est présent dans l'échantillon, forme un complexe avec un anticorps monoclonal conjugué de l'antigène à détecter, présent sur la bandelette de test. Le conjugué d'anticorps spécifique à la drogue à détecter est associé à un colorant et est susceptible de migrer le long de la bandelette en des emplacements qui dépendent de la présence ou non de l'antigène dans l'échantillon prélevé. Il est ainsi possible, de la sorte, d'identifier la présence d'une drogue dans un échantillon en constatant visuellement le degré de migration du conjugué coloré d'anticorps sur la bandelette. Ce type de dispositif de test est relativement efficace pour identifier rapidement la présence d'une substance stupéfiante dans un liquide biologique. Elle est toutefois relativement délicate à mettre en oeuvre dans la mesure où elle se présente sous la forme d'un compte-gouttes à usage unique servant à prélever un échantillon et d'un boîtier dans lequel il convient de verser l'échantillon prélevé pour mettre en oeuvre les réactions immunochromatographiques, rendant l'emploi du dispositif relativement contraignant. Le but de l'invention est donc de pallier ces inconvénients et de fournir un dispositif de test permettant de mettre en oeuvre une détection de type immunochromatographique, de manière simple, rapide et à faible coût. L'invention a donc pour objet, selon un premier aspect, un dispositif de test pour la détection d'une substance, comprenant une tige creuse qui est destinée à être emplie d'un produit liquide et qui est munie d'une première extrémité fermée comprenant une zone sécable et d'une deuxième extrémité ouverte entourée d'un embout de prélèvement, la tige creuse étant adaptée pour maintenir le produit dans la tige jusqu'à la cassure de l'extrémité fermée. La tige comprend au moins une zone réactive apte à réagir avec la substance à détecter et vers laquelle migre le produit après cassure de l'extrémité fermée, la zone réactive comprenant des moyens pour indiquer la présence de la substance. Ainsi, le dispositif se présente sous une forme analogue à celle d'un coton-tige. I1 peut ainsi être fabriqué à faible coût et à cadence de fabrication élevée et permet de mettre en oeuvre un test de manière particulièrement rapide et aisée. Selon une autre caractéristique du dispositif selon l'invention, la tige comprend, par exemple, une bandelette de matière absorbante qui s'étend à partir de l'embout de prélèvement en direction de la première extrémité et dans laquelle est formée la zone réactive. Par exemple, dans un autre mode de réalisation, la zone réactive est intégrée à l'embout de prélèvement. Dans un mode de réalisation, la zone réactive comprend un premier réactif apte à réagir avec ladite substance et portant un indicateur, et un deuxième réactif apte à réagir avec ledit premier réactif, le premier réactif étant apte à migrer sur la bandelette en étant entraîné par le produit liquide se propageant dans ladite bandelette absorbante jusqu'à un premier emplacement de la bandelette, ledit deuxième réactif étant fixe sur la bandelette, à un deuxième emplacement de la bandelette. Par exemple, la zone réactive comprend un réactif immunochromatographique de type antigène/anticorps. Par exemple, on peut prévoir que la bandelette de matière absorbante est entourée d'un film protecteur ou d'une seconde tige creuse. On peut également prévoir que la première extrémité fermée est entourée d'un embout. Dans ce cas, l'embout présent au deux extrémités de la tige peut être réalisé en matière fibreuse ou tout matériau absorbant. On peut en outre prévoir que l'embout présent au niveau de la première extrémité fermée comporte des moyens pour indiquer la présence de la zone sécable. L'embout peut ainsi, par exemple, comporter une zone annulaire de section rétrécie, ou être coloré. L'invention a également pour objet, selon un deuxième aspect, un procédé de détection d'une substance au moyen d'un dispositif de test tel que défini ci-dessus. Ce procédé comprend les étapes de : - prélèvement d'une substance au moyen de l'embout de prélèvement ; - rupture de la première extrémité par cassure de la zone sécable ; - écoulement du produit liquide vers l'embout de prélèvement puis migration du liquide vers la zone réactive en entraînant la substance prélevée ; - détection de présence de la substance au moyen de l'indicateur. Selon un troisième aspect, l'invention a encore pour objet l'utilisation d'un dispositif tel que défini ci-dessus pour la détection d'un produit stupéfiant dans un liquide biologique, notamment l'urine, la salive ou le sang. D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description suivante, donnée uniquement à titre d'exemple non limitatif, et faite en référence aux dessins annexés sur lesquels : - la figure 1 est une vue de profil d'un dispositif de test conforme à l'invention ; - les figures 2a à 2c illustrent le principe de détection mis en oeuvre au moyen du dispositif de la figure 1 ; - la figure 3 illustre un exemple de réalisation de l'embout entourant la zone sécable ; - la figure 4 illustre un autre exemple de réalisation de l'embout de la figure 3 ; - la figure 5 est une vue de dessus du dispositif de la figure 1, en présence d'une substance à détecter ; et - la figure 6 montre le dispositif de la figure 1 en l'absence de substance à détecter. Sur la figure 1, on a représenté une vue de profil d'un dispositif de test conforme à l'invention, désigné par la référence numérique générale 1. Ce dispositif 1 est destiné à permettre une détection qualitative d'une substance dans un liquide biologique, tel que le sang, la salive ou l'urine. Mais on notera que l'on ne sort pas du cadre de l'invention lorsque le dispositif 1 est destiné à la détection d'une substance dans un autre milieu ou sur une surface. Ainsi, l'invention concerne, de manière générale, la détection d'une substance par prélèvement d'un échantillon et mise en oeuvre de réactions aptes à permettre la détection de la substance dans l'échantillon prélevé. Toutefois, dans l'exemple de réalisation décrit, le dispositif 1 est utilisé pour la détection d'une drogue, en l'espèce de cocaïne, dans de la salive. Comme on le voit, le dispositif 1 a une forme analogue à celle d'un coton-tige. I1 comporte essentiellement un tube ou tige creuse 2 délimitant intérieurement un volume 3 empli de produit liquide 4 et comportant une première extrémité 5 fermée et une deuxième extrémité 6 ouverte. La première extrémité 5 est pourvue d'une zone sécable 7 destinée à être rompue lors de l'utilisation. La deuxième extrémité 6 est entourée d'un embout de prélèvement 8. La première extrémité 5 est également pourvue d'un tel embout 9. Toutefois, cet embout 9 est optionnel et pourrait être omis dans un mode de réalisation particulier du dispositif 1. Le liquide 4 contenu dans la tige peut être constitué par tout liquide correspondant à l'utilisation ou l'application envisagée. On notera cependant qu'il est de préférence constitué par un liquide réactif ou un solvant dans lequel peut se dissoudre l'échantillon de liquide biologique prélevé. On utilisera à cet égard, par exemple, une solution tampon, de l'eau ou tout solvant approprié. En ce qui concerne le matériau entrant dans la constitution de la tige 2, celle-ci est par exemple réalisée en polypropylène, tout autre matériau compatible avec le liquide pouvant également être utilisé. Les embouts 8 et 9 sont, quant à eux, par exemple réalisés en coton hydrophile. Ils peuvent également être réalisés en viscose et/ou en polyester, mais également en tout autre fibre cellulosique et/ou synthétique ou tout matériau absorbant, tel qu'une mousse, associée, le cas échéant, à des fibres. Dans le cas d'un prélèvement salivaire, l'embout 8 peut être pulvérisé ou pré-imbibé dune solution stimulant la sécrétion de salive, par exemple, le menthol, afin de faciliter la collecte d'échantillon. On notera enfin qu'en ce qui concerne la réalisation du tube 2, l'extrémité 5 est fermée au moyen d'un bouchon 10 formé par exemple par dépôt d'une colle thermofusible. Toutefois, comme on le conçoit, cette obturation pourrait également être effectuée par fusion de l'extrémité à fermer. Par exemple, la longueur de la tige est comprise entre 70 et 200 mm, son diamètre extérieur est compris entre 2 et 6 mm, et son diamètre intérieur est compris entre 1 et 5 mm. Elle peut, le cas échéant, comporter une partie renflée délimitant un volume de réception de liquide. Elle peut également comporter une partie souple pour faciliter la distribution du liquide. Toutefois, en raison des dimensions particulières de la tige 2, c'est-à-dire du faible diamètre interne de la tige et de sa longueur relativement importante, et en raison de la tension superficielle du liquide, lors du stockage, le liquide emplissant la tige est maintenu à l'intérieur du volume 3 et ce, jusqu'à ce que l'extrémité fermée 10 soit rompue le long de la ligne sécable 7, mettant de la sorte le volume 3 en communication avec la pression atmosphérique. Toutefois, afin d'éviter une évaporation du liquide, un bouchon de liquide 11 réalisé par exemple en huile ou en paraffine, isole le liquide de l'atmosphère. Dans le but de mettre en oeuvre le test de détection qualitatif de la substance à détecter, le dispositif 1 comporte encore une bandelette 12 de matière absorbante, cette bandelette portant au moins une zone réactive apte à réagir avec la substance à détecter et vers laquelle migre le produit 4 après rupture de la zone sécable 7. Comme on le voit, cette bandelette s'étend à partir de l'embout 8 de prélèvement avec lequel elle est en contact, de sorte que, après rupture de l'extrémité fermée, le liquide 4 s'écoule vers l'embout puis est absorbé par la bandelette 12. On notera cependant que dans certains cas, l'embout de prélèvement peut aussi servir de zone réactive. L'ensemble est recouvert d'un film protecteur, par exemple en polymère, tel que du polypropylène ou du polyéthylène. Ce film comportant des informations, pouvant être transparent ou partiellement opaque afin de faciliter la lecture du test. On pourrait toutefois, en variant, utiliser un autre tube creux concentrique au tube 6. En se référant aux figures 2a, 2b, 2c et 2d, la réaction mise en oeuvre ici est basée sur une réaction immunochromatographique, telle qu'une réaction antigène/anticorps. Ainsi, le test est ici basé sur l'utilisation d'un anticorps spécifique de l'antigène synthétisé par l'organisme suite à une consommation de cocaïne, c'est-à-dire, en d'autres termes, sur un anticorps conjugué de l'antigène à détecter. Mais on pourrait également directement utiliser, en variante, un anticorps conjugué de la drogue éventuellement présente dans l'échantillon prélevé, selon le type de drogue à détecter. En se référant tout d'abord à la figure 2a, la bandelette absorbante 12 comporte un premier réactif 14, situé au voisinage d'une première extrémité 15 de la bandelette 12 en contact avec l'embout 8 correspondant, ce premier réactif étant apte à réagir avec la substance à détecter, en l'espèce l'antigène AG. Le premier réactif 14 est ici constitué par un anticorps monoclonal conjugué de l'antigène de la cocaïne. I1 est associé à un indicateur 18 constitué par un colorant. I1 est en outre incorporé à la bandelette 12 de manière à pouvoir migrer en direction de l'extrémité 19 opposée de la bandelette en étant entraîné par le liquide déversé à partir du volume 3. Elle comporte encore un deuxième réactif 16, disposé à un emplacement médian 20 de la bandelette 12 et apte à réagir avec le premier réactif. Le deuxième réactif 16 est prévu de manière fixe sur le deuxième emplacement 20. I1 est ici constitué par un conjugué de l'anticorps 14, en l'espèce un antigène de la cocaïne. Ainsi, en se référant à la figure 2b, en présence d'un antigène de la cocaïne, celui-ci vient se fixer au niveau du premier réactif 14 pour former, avec ce premier réactif 14, un complexe 21, lequel migre, par la suite, vers l'extrémité 19 (figure 2c). Au contraire, en l'absence de cocaïne, l'anticorps 14 vient se fixer sur le deuxième réactif 16, pour former un complexe 23 qui reste localisé au niveau du site médian 20 (figure 2d). Le dispositif qui vient d'être décrit s'utilise ainsi de la façon suivante. Pour la détection d'une substance dans la salive, il convient tout d'abord de frotter l'embout de prélèvement 8 contre la muqueuse de la bouche, de manière à prélever un échantillon de salive. I1 convient ensuite de casser la zone sécable 7 de manière à mettre le volume interne 3 du tube 2 à pression atmosphérique. On notera à cet égard que la présence de l'embout 9 autour de la zone sécable 7 est avantageuse dans la mesure où elle évite tout risque de blessure de l'utilisateur lors de la rupture du tube 2. En outre, elle permet de maintenir l'extrémité cassée avec le reste du tube, le dispositif restant alors un ensemble unitaire qui peut être jeté simultanément sans former de rebut séparé. Par ailleurs, dans le but de faciliter l'identification de l'extrémité pourvue de la zone sécable 7, l'embout 9 correspondant est avantageusement pourvu de moyens d'identification permettant d'indiquer à l'utilisateur le côté à rompre. Par exemple, en se référant à la figure 3, ces moyens d'identification peuvent être réalisés sous la forme d'une zone annulaire 24 entourant la zone sécable 7 ou, comme visible sur la figure 4, formés par une zone colorée 25 prévue sur tout ou partie de l'embout 9. Comme on le conçoit, après rupture de l'extrémité fermée, le liquide 4 s'écoule dans l'embout de prélèvement 8 puis, par capillarité, se propage le long de la bandelette 12 en entraînant, de la sorte, les substances prélevées. I1 se crée alors des réactions immunochromatographiques sur la bandelette 2, selon le principe décrit précédemment en référence aux figures 2a à 2d. En d'autres termes, lorsque le test est positif, on obtient une bandelette chromatographique au voisinage de l'extrémité 19 de la bandelette (figure 5). Au contraire, lorsque le test est négatif, la bandelette chromatographique est localisée au niveau de la zone médiane 20 de la bandelette. Comme on le conçoit, l'invention qui vient d'être décrite permet de mettre en oeuvre de manière particulièrement aisée et à faible coût, un test de dépistage permettant de détecter de manière fiable la présence d'une substance dans un échantillon prélevé. REVENDICATIONS1. Dispositif de test pour la détection d'une substance, caractérisé en ce qu'il comprend une tige creuse (2) qui est destinée à être emplie d'un produit liquide (4) et qui est munie d'une première extrémité fermée (5) comprenant une zone sécable (7) et d'une deuxième extrémité ouverte (6) entourée d'un embout (8) de prélèvement, la tige creuse étant adaptée pour maintenir le produit dans la tige jusqu'à la rupture de l'extrémité fermée, et en ce que la tige comprend au moins une zone réactive (14, 16) apte à réagir avec la substance à détecter et vers laquelle migre le produit après rupture de l'extrémité fermée, la zone réactive comprenant des moyens pour indiquer la présence de la substance à détecter. 2. Dispositif selon la revendication. 1, caractérisé en ce que la tige comprend une bandelette (12) de matière absorbante qui s'étend à partir de l'embout de prélèvement (8) en direction de la première extrémité (5) et dans laquelle est formée la zone réactive. 3. Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce que la zone réactive est intégrée à l'embout de prélèvement. 4. Dispositif selon l'une des revendication 2 et 3, caractérisé en ce que la zone réactive comprend un premier réactif (14) apte à réagir avec ladite substance, et un deuxième réactif (16) apte à réagir avec ledit premier réactif, ledit premier réactif étant susceptible de migrer sur la bandelette en étant entraîné par le produit liquide se propageant dans ladite bandelette absorbante, jusqu'à un premier emplacement (22) de la bandelette, ledit deuxième site réactif étant fixe sur la bandelette, à un deuxième emplacement (20) de la bandelette. 5. Dispositif selon la revendication 4, caractérisé en ce que la zone réactive comprend un réactif immunochromatographique, notamment de type antigène/anticorps. 6. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 2 à 5, caractérisé en ce que la bandelette de matière absorbante est entourée d'un film (13) protecteur ou d'une seconde tige creuse. 7. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que la première extrémité fermée (5) est entourée d'un embout (9). 8. Dispositif selon la revendication 7, caractérisé en ce que les premier et deuxième embouts sont réalisés à partir d'une matière fibreuse ou tout matériau absorbant. 9. Dispositif selon l'une des revendications 7 et 8, caractérisé en ce que l'embout prévu au niveau de la première extrémité fermée comporte des moyens (24) pour indiquer la présence de la zone sécable. 10. Dispositif selon la revendication 9, caractérisé en ce que l'embout prévu au niveau de la première extrémité formée comprend une zone annulaire (24) de section rétrécie. 11. Dispositif selon l'une des revendications 9 et 10, caractérisé en ce que l'embout (9) prévu au niveau de la première extrémité formée est coloré. 12. Procédé de détection d'une substance au moyen d'un dispositif de test selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes de : - prélèvement d'une substance au moyen de l'embout (8) de prélèvement ; - rupture de la première extrémité (5) par cassure de la zone sécable (7) ; - écoulement du produit liquide vers l'embout de prélèvement (8) puis propagation du liquide vers la zone réactive en entraînant la substance prélevée ; et - détection de la présence de la substance au moyen dudit l'indicateur. 13. Utilisation d'un dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, pour la détection de substances, notamment d'un produit stupéfiant, dans un liquide biologique, tel que l'urine, la salive ou le sang.