Brevet FR2932187A1 — publié le 20091211

PROCEDE DE PREPARATION DE SURFACE POUR CONTROLER L'ADHESION DE CELLULES A LA SURFACE DE SUBSTRATS ET DISPOSITIF D'ASSISTANCE AUDIT PROCEDE DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention concerne un procédé de préparation de surface pour contrôler l'adhésion de cellules à la surface de substrats et un dispositif de préparation de surface pour assister ce procédé. Il est précisé que, par � procédé de préparation de surface pour contrôler l'adhésion de cellules à la surface de substrats �, on entend dans le cadre de la présente invention, le procédé de préparation de surface qui permet de contrôler l'adhésion de cellules à la surface d'un substrat en établissant des surfaces ayant diverses affinités d'adhésion pour les cellules, le substrat ayant ces surfaces étant utilisé, par exemple, dans le cas où l'on souhaite faire des analyses fonctionnelles et/ou morphologique de cellules vivant dans certaines conditions particulières, ou bien dans le cas où l'on détermine la cytotoxicité de matières chimiosynthétiques ou naturelles à étudier vis-à-vis de cellules cibles, ou bien dans le cas où l'on a besoin de répartir des cellules en évitant leur coalescence pour une manipulation de cellules telle qu'une injection physique de gènes ou de matières à l'intérieur de ces cellules, ou bien dans le cas où l'on désire fixer des cellules sur des capteurs ou des électrodes fines pour mesurer les propriétés électriques, magnétiques, cinétiques ou dynamiques de ces cellules. Il est également précisé que, par � dispositif d'assistance à ce procédé � ou � dispositif de préparation de surface pour assister ce procédé � ou simplement � dispositif de préparation de surface �, on entend, dans le cadre d'invention, le dispositif de préparation de surface pour assister le procédé de préparation de surface décrit ci-dessus, qui sera intégré dans les procédés industriels de fabrication existants comme le procédé de fabrication à base de la technique de photolithographie pour produire des composants ou dispositifs ayant une plus haute valeur ajoutée tels que les circuits intégrés électroniques et fluidiques dans lesquels sont de plus intégrées des cellules vivantes. ETAT DE LA TECHNIQUE ANTERIEURE On connaît déjà des moyens pour préparer une surface ayant des propriétés d'adhésion vis-à-vis d'êtres vivants comme des cellules, par exemple, par enduction de polyaminoacides, de protéines de matrice extracellulaire, de silanes ayant des groupes fonctionnels biocompatibles, etc., sur la surface d'un substrat. Bien que de tels moyens soient habituellement exploités dans des produits biologiques destinés à la culture de cellules, la surface déjà préparée est difficile à modifier au point de vue des propriétés d'adhésion mentionnées ci-dessus et, donc, elle peut ne pas convenir à des applications privilégiées et désirées. Pour des applications spécifiques, on peut enduire la surface d'un substrat de matières telles que la poly-L-lysine, la fibronectine, la laminine ou la gélatine par manipulations. Toutefois, cette surface enduite montre souvent une hétérogénéité des propriétés d'adhésion décrites ci-avant et, de plus, les mêmes propriétés peuvent ne pas être obtenues de manière homogène. Cela peut être dû à l'imprécision des manipulations pour cette préparation et à des fluctuations de diverses conditions pendant cette préparation. Une telle manipulation répétitive pour une reproduction de ces propriétés d'adhésion aboutit inévitablement à un temps important. Comme autre moyen, on peut aussi utiliser l'aminosilane ou le polyaminosilane pour obtenir des surfaces ayant des aminogroupes sur des substrats, mais les cellules ne sont pas faciles à faire adhérer directement à la surface obtenue du fait de son hydrophobie ou d'autres facteurs superficiels. En outre, il est difficile d'ajuster une densité d'ancrage des molécules de silanes elles-mêmes sur la surface d'un substrat pour modifier leurs propriétés superficielles. Le moyen de faire varier la mouillabilité, telle que l'hydrophobie et l'hydrophilie de la surface d'un substrat (par exemple, voir WO 2005/002743) est envisagé, mais un seul contrôle de mouillabilité n'a pas pour effet d'obtenir une surface ayant une affinité vis-à-vis d'êtres vivants comme des cellules. Dans d'autres moyens connus, après l'ancrage des molécules en forme de chaîne comportant des aminosilanes ou des macromolécules, sur la surface d'un substrat, on injecte des gouttes de solution contenant ces molécules biocompatibles sur la surface d'un substrat (par exemple, voir JP 2002-355026 ou JP 2005-269902) ou bien on trempe le substrat dans une solution contenant des molécules biocompatibles (par exemple, voir JP 2005-269902) pour combiner ces molécules biocompatibles avec les molécules ancrées sur la surface afin de faire varier des propriétés de la surface. Toutefois, on doit au préalable introduire, dans chacune de ces deux sortes de molécules, des groupements chimiques permettant une liaison entre elles et on a besoin d'argent et de temps pour cette introduction, ou bien on a besoin d'acheter une faible quantité de molécules spécifiques coûteuses ayant les groupements chimiques permettant cette liaison. Ces moyens permettent d'établir une surface à laquelle adhèrent les cellules, mais ne peuvent pas établir une surface ayant l'affinité d'adhésion contrôlée pour les cellules, par exemple, leur répartition de façon homogène sur la surface sans phénomène de coalescence. Ils restent donc ainsi limités au domaine où l'exploitation de ces moyens est possible. EXPOSE DE L'INVENTION Par conséquent, l'objectif de la présente invention est de réaliser un procédé de préparation de surface, qui soit facile à mettre en oeuvre et qui ne présente pas les inconvénients des moyens de préparation de surface de l'art antérieur mentionnés ci-dessus, pour contrôler l'adhésion de cellules à la SR 34447 JP/SL 2932187 5 surface de substrats et un dispositif de préparation de surface pour assister ce procédé. Cet objectif est atteint en fournissant, selon l'invention, un procédé de préparation de surface 5 pour contrôler l'adhésion de cellules à la surface de substrats, ce procédé comprenant les opérations suivantes: a) on greffe des chaînes alkyles linéaires sur la surface d'un substrat; 10 b) on réalise une cavité ayant une épaisseur micrométrique sur la surface munie desdites chaînes alkyles linéaires et on remplit ladite cavité d'une solution contenant des substances relatives à l'adhésion de cellules pour former une (des) nappe(s) 15 de ladite solution de sorte que ladite surface soit mise au contact de ladite solution de façon homogène; et c) on expose ladite surface à un rayonnement ultraviolet au travers de ladite solution de façon que 20 tout ou partie desdites substances soit substitué à une partie desdites chaînes alkyles linéaires. Avantageusement, la densité des cellules adhérant à la surface d'un substrat diminue avec l'augmentation de l'épaisseur de la (des) nappe(s) de 25 ladite solution. Avantageusement, la densité des cellules adhérant à la surface d'un substrat augmente avec l'augmentation du temps de ladite exposition. SR 34447 JP/SL 2932187 6 Avantageusement, la densité des cellules adhérant à la surface d'un substrat augmente avec l'augmentation de la concentration de ladite substance dans ladite solution. 5 Avantageusement, la densité des cellules adhérant à la surface d'un substrat est contrôlée par la variation de l'épaisseur de la (des) nappe(s) de ladite solution, du temps de ladite exposition ou de la concentration de ladite substance dans ladite solution, 10 ou d'une combinaison de ceux-ci. Avantageusement, la vitesse d'adhésion des cellules adhérant à la surface d'un substrat est contrôlée par la variation de la concentration de ladite substance dans ladite solution. 15 Avantageusement, en différentiant localement une intensité dudit rayonnement ultraviolet atteignant ladite surface, une pluralité de surfaces ayant une affinité d'adhésion différente pour les cellules sont établies localement sur un seul substrat. 20 Avantageusement, en formant localement sur ladite surface des nappes ou des filets minces de SR 34447 JP/SL 7 ladite solution d'épaisseur différente et/ou des couches de masques empêchant ledit rayonnement ultraviolet, une pluralité de surfaces ayant une affinité d'adhésion différente pour les cellules sont établies sur un seul substrat. Avantageusement, en différentiant localement une concentration de ladite substance dans ladite solution sur ladite surface, une pluralité de surfaces ayant une affinité d'adhésion différente pour les cellules sont établies sur un seul substrat. Avantageusement, en maintenant un écoulement de ladite solution sur ladite surface pendant ladite exposition, des surfaces ayant une affinité d'adhésion directionnelle pour les cellules sont établies sur un substrat. Avantageusement, ledit substrat a une couche d'oxyde choisie dans le groupe constitué par l'oxyde de silicium, l'oxyde de titane, l'oxyde d'indium, l'oxyde d'indium-étain, l'oxyde de strontium-titane, l'oxyde de zinc, l'oxyde d'étain, l'oxyde de zinc dopé à l'aluminium et l'oxyde d'étain dopé par un dopant choisi dans le groupe constitué par l'antimoine, le platine, le plomb et le cuivre. SR 34447 JP/SL 2932187 8 Avantageusement, lesdites chaînes alkyles linéaires sont choisies dans le groupe constitué par les alkyltrichlorosilanes et les alkyltrialcoxysilanes. Avantageusement, ladite substance est 5 l'ammoniac ou la méthylamine. Avantageusement, ladite substance est choisie dans le groupe constitué par l'aminoéthanol, les aminopropanols et les polyamines linéaires. Avantageusement, ledit rayonnement 10 ultraviolet a une longueur d'onde entre 157 nm et 353 nm. L'objectif est, de plus, atteint en respectant le procédé décrit ci-avant avec un dispositif de préparation de surface comprenant une 15 cavité pour une préparation de surface, ladite cavité étant d'une épaisseur réglable à l'échelle micrométrique, ladite cavité communiquant fluidiquement par au moins deux canaux fluidiques avec un espace extérieur de ladite cavité, ladite cavité communiquant 20 optiquement par au moins une ouverture optique constituée en un matériau qui présente un haut coefficient de transmission par rapport à un rayonnement ultraviolet fourni par au SR 34447 JP/SL 2932187 9 moins une source de lumière, avec ledit espace extérieur, ce dispositif étant caractérisé en ce qu'au moins un substrat destiné à la préparation de surface est monté dans ladite cavité ; en ce qu'une nappe de 5 fluide est formée sur une surface dudit substrat avec un fluide fourni, à partir dudit espace extérieur, par lesdits canaux fluidiques à ladite cavité ; et en ce que ladite surface est exposée au travers de ladite nappe de fluide audit rayonnement ultraviolet fourni, à 10 partir de ladite source de lumière, par ladite ouverture optique à ladite cavité. Avantageusement, ladite cavité est constituée par emboîtement d'une première pièce mâle et d'une seconde pièce femelle ayant un évidement de forme 15 complémentaire qui est apte à coopérer avec une partie mâle de ladite première pièce ou par emboîtement d'une première pièce femelle et d'une seconde pièce mâle ayant une saillie de forme complémentaire qui est apte à coopérer avec une partie femelle de ladite première 20 pièce. Avantageusement, un anneau d'étanchéité est disposé entre ladite première pièce et ladite seconde pièce pour empêcher une fuite de fluide relative à ladite préparation de surface à l'interface entre les deux dites pièces. SR 34447 JP/SL 2932187 10 Avantageusement, ladite première pièce et ladite seconde pièce comprennent ladite ouverture optique respectivement de façon que les deux faces dudit substrat dans ladite cavité soient exposées audit 5 rayonnement ultraviolet. Avantageusement, une pluralité de nappes de fluide sont formées dans ladite cavité. Avantageusement, ce dispositif comporte, de plus, un système d'alimentation de fluide et/ou un 10 système d'évacuation. Le procédé de préparation de surface de l'invention précédemment définie permet de préparer, sur un substrat, des surfaces ayant divers niveaux d'affinité d'adhésion pour les cellules et, de ce fait, 15 permet d'établir des surfaces convenant à des applications privilégiées et désirées d'une manière plus simple que l'art antérieur qui nécessite l'introduction initiale, à l'intérieur de chacune de plusieurs différentes sortes de molécules, des parties 20 relatives à une liaison entre elles et ensuite le couplage séquentiel de ces molécules à partir d'une surface du substrat, ce qui réduit le nombre d'opérations et le temps nécessaires pour munir la surface du substrat de l'affinité d'adhésion pour les 25 cellules. SR 34447 JP/SL 2932187 11 Avec ce procédé, on peut établir, sur le substrat, une surface à laquelle adhèrent les cellules à leur densité désirée au bout du temps déterminé de culture de cellules. En outre, on peut aussi établir, 5 sur le substrat, une surface où les cellules sont réparties de manière homogène sans coalescence. On peut également établir, sur le substrat, une surface à laquelle adhèrent les cellules à une vitesse d'adhésion souhaitée. 10 On peut aussi établir sur un seul substrat une pluralité des surfaces auxquelles adhèrent les cellules à leur densité différente qui présente un écart constant. De ce fait, on peut simultanément obtenir, à des endroits distincts sur le seul substrat, 15 la sécrétion issue de cellules par gradation à proportion de la densité de cellules adhérant à la surface. De tels substrats sont avantageux pour l'analyse de l'activité de cellules. On peut de plus aligner des cellules dans une 20 direction donnée sur la surface du substrat. Cet alignement permet de mettre en place des cellules le long de ou à l'intersection de capteurs ou d'électrodes disposés sur la surface du substrat pour l'analyse ou la manipulation de cellules. D'autre part, cela 25 facilite le positionnement d'une pluralité de capteurs sans encombrement l'un par rapport à l'autre sur une cellule adhérant à la surface et s'allongeant dans la direction déterminée. SR 34447 JP/SL 2932187 12 On peut en outre conférer diverses affinités d'adhésion pour les cellules à des surfaces constituées d'un matériau de base diélectrique, semiconducteur ou conducteur, ce qui est un avantage notable dans le cas 5 de la réalisation de circuits intégrés fluido- électroniques ayant une affinité vis-à-vis de cellules. On peut encore choisir des substances pour la préparation de surface parmi des substances fondamentales facilement disponibles dans le commerce. 10 On peut enfin choisir des sources de lumière aptes à la substitution des substances désirée, conformément à des coûts de réalisation. Le dispositif de préparation de surface de l'invention précédemment définie permet de pallier des 15 fluctuations de diverses conditions relatives à l'optique et fluidique au cours de la préparation de surface, ce qui assure une reproductibilité de surfaces préparées. En outre, il permet de préparer une surface ayant son affinité d'adhésion pour les cellules 20 entièrement sur un substrat ayant une grande superficie tel qu'un substrat de silicium de 6 pouces. Il est particulièrement avantageux dans le cas où il est utilisé dans des processus industriels de fabrication. SR 34447 JP/SL 2932187 13 Avec ce dispositif, on peut empêcher une fuite de fluide lors de la distribution d'un fluide à la cavité du dispositif et une volatilisation de ce fluide distribué, à l'extérieur de la cavité. 5 On peut également préparer simultanément les deux surfaces de part et d'autre du substrat. On peut en outre établir simultanément les surfaces compartimentées ayant leur affinité d'adhésion pour les cellules, sur le seul substrat ayant une 10 grande superficie. On peut encore contrôler un débit du fluide refoulé dans des canaux fluidiques de distribution formés dans la cavité du dispositif, ce qui permet d'établir, sur le substrat, des surfaces ayant leur 15 affinité d'adhésion directionnelle pour les cellules. MEILLEUR MODE DE MISE EN OEUVRE DE L'INVENTION Pour contrôler l'adhésion de cellules à la surface de substrats, on a préparé des surfaces de substrats suivant les trois opérations ci-dessous : 20 1. Greffage de chaînes alkyles linéaires sur la surface d'un substrat ; II. Formation des nappes d'une solution à épaisseur réglable sur la surface ; et III. Exposition de la surface du substrat au 25 travers de la solution à un rayonnement ultraviolet. Selon la mise en oeuvre de ces opérations décrites ci-dessus, il est possible d'établir, sur des substrats, des surfaces ayant divers niveaux d'affinité d'adhésion pour les cellules. Par � surface ayant son affinité plus forte d'adhésion pour les cellules �, on entend, dans le cadre de la présente description, la surface à laquelle adhèrent le plus de cellules, au bout d'un temps déterminé de culture de cellules sur cette surface. Des caractéristiques de l'invention apparaîtront dans la description qui suit et en se référant aux dessins annexés à titre explicatif, mais nullement limitatif. 1. Greffage de chaînes alkyles linéaires sur la surface d'un substrat On a greffé des chaînes alkyles linéaires contenant une structure -C18H37 sur la surface d'un substrat de verre ayant 50,8 mm de diamètre et 700 �m d'épaisseur à l'aide d'un effet d'auto-organisation de façon qu'une monocouche de chaînes alkyles linéaires soit formée sur la surface du substrat. Avant la formation d'une monocouche composée de chaînes alkyles linéaires sur les surfaces de substrats, on a nettoyé les surfaces des substrats. On a trempé les substrats dans une solution aqueuse d'acide phosphorique contenant 1% d'acide phosphorique à 60°C pendant 15 minutes pour enlever une contamination métallique et des résidus organiques sur la surface des substrats. Eventuellement, on peut, de plus, nettoyer les surfaces des substrats au moyen de l'exposition des surfaces à un rayonnement ultraviolet avec une intensité d'irradiation de 15 mW/cm2 pendant 10 minutes sous une atmosphère d'oxygène à l'aide d'une lampe ultraviolet (disponible dans le commerce chez SEN Lights Corporation sous la désignation commerciale � SV11OGS �). Pour la formation de cette monocouche, on a préparé une solution de 1 mM d'octadécyltrichorosilane par un mélange et agitation de 20 �l d'octadécyltrichorosilane et 50 ml de toluène anhydride (tous les deux étant disponibles dans le commerce chez SIGMAALDRICH Corporation) dans un bac en verre sous atmosphère d'argon. On a trempé les substrats nettoyés dans cette solution préparée dans ce bac pendant 1 heure à la température ambiante. Après la formation de cette monocouche, on a enlevé cette solution et on a rincé les substrats avec du toluène anhydride puis du chloroforme. On a nettoyé les substrats dans un bain à ultrasons avec de l'éthanol pendant 10 minutes et avec de l'eau désionisée (18 MQ•cm de résistivité électrique) pendant 10 minutes. On a stocké ces substrats dans un dessiccateur rempli d'argon jusqu'à l'opération suivante. Quant au substrat utilisé, au lieu d'un substrat de verre contenant des matériaux oxydes, on peut utiliser un substrat à la surface duquel une couche d'oxyde est formée de manière naturelle ou à la surface duquel une couche oxyde peut être formée à l'aide d'un moyen tel que l'activation de surface, le dépôt, l'enduction, etc. Par exemple, il peut être un matériau solide tel qu'un silicium, une silice synthétique, un saphir ou un matériau polymère tel qu'un polyéthylène, un polyéthylène téréphtalate (PET), un polyméthylméthacrylate (PMMA). La couche d'oxyde peut être une couche isolante telle qu'une couche en oxyde de silicium (SiO2). Elle peut une couche semiconductrice telle qu'une couche en oxyde de titane (TiO2), en oxyde d'étain (Sn02), en oxyde de zinc (ZnO), en oxyde d'indium (In203) ou en oxyde de strontium-titane (SrTiO3). En outre, elle peut être une couche conductrice telle qu'une couche en oxyde d'indium-étain (ITO), en oxyde de zinc dopé à l'aluminium ou en oxyde d'étain dopé par un dopant choisi dans le groupe constitué par l'antimoine, le platine, le plomb et le cuivre. Le moyen pour former une couche d'oxyde sur le substrat peut être choisi dans les moyens comportant l'activation de surface par rayonnement ultraviolet ou tension à haute fréquence, le dépôt chimique en phase vapeur (CVD) tel que le CVD thermique, le CVD en plasma et le CVD en plasma à pression atmosphérique, le dépôt par pulvérisation cathodique, le dépôt par ablation laser, l'enduction et le traitement thermique suivant cette enduction, etc. L'enduction décrite ci-dessus comprend une pulvérisation, un trempage et une enduction par centrifugation (tournette), au rouleau ou au flux. Par exemple, le matériau utilisé pour la formation d'une couche d'oxyde de silicium par enduction peut être un alkoxylsilane tel que le tetraéthoxysilane ou le tetraméthoxysilane qui est mélangé à de l'éthanol ou du 2-propanol avec une solution aqueuse diluée de chlorure d'hydrogène utilisé comme catalyseur pour préparer une solution hydrolysée comme précurseur de la silice. Un autre matériau disponible peut être le perhydropolysilane dont le mélange avec un solvant organique et avec un catalyseur, disponible dans le commerce chez CLARIANT INTERNATIONAL LTD sous la désignation commerciale � Aquamica �. La combinaison de ces substrats, couches d'oxyde et moyens pour former des couches d'oxyde permet de préparer divers types de substrats utiles pour le greffage de chaînes alkyles linéaires expliqué ci-dessus. Quant à la matière utilisée pour le greffage de chaînes alkyles linéaires sur la surface du substrat comme mentionné ci-dessus, on peut utiliser, en plus de l' octadécyltrichlorosilane, des alkyltrichlorosilanes tels que l'octyltrichlorosilane, etc. Alternativement, on peut utiliser des alkyltrialkoxysilanes tels que l'octadécyl-triméthoxysilane, l'octyltriméthoxysilane, l'octyltriéthoxysilane, etc. Dans ce cas, la formation complète d'une monocouche de ces molécules sur la surface du substrat nécessite beaucoup plus du temps que dans le cas des alkyltrichlorosilanes, même si on ajoute un catalyseur comme la n-butylamine à la solution pour accélérer cette formation. II. Formation des nappes d'une solution à épaisseur réglable sur la surface Après le greffage de chaînes alkyles linéaires sur la surface du substrat, on a réalisé une cavité ayant une épaisseur micrométrique sur cette surface et on l'a ensuite remplie d'une solution contenant des substances relatives à l'adhésion de cellules pour former une (des) nappe(s) de la solution de façon que cette surface soit mise au contact de la solution de façon homogène. Quant à la solution contenant des substances relatives à l'adhésion de cellules, on a utilisé de l'ammoniac en solution aqueuse. On a prépare différentes concentrations d'ammoniac en solution aqueuse par dilution d'une solution aqueuse à 28% d'ammoniac disponible dans le commerce (Fluka, SIGMAALDRICH Corporation) avec de l'eau désionisée de 18 MQ•cm de résistivité électrique. Au lieu de l'ammoniac, on peut choisir d'autres substances ayant des aminogroupes comme substances relatives à l'adhésion de cellules, par exemple la méthylamine, et la mélanger avec un solvant tel que l'eau désionisée, le méthanol ou l'éthanol pour préparer une solution. Alternativement, la substance peut être le 2-aminoéthanol. Alternativement, la substance peut être un aminopropanol choisi dans le groupe constitué par l'amino-2-propanol, le 2-amino-1-propanol et le 3-amino-1-propanol. Alternativement, la substance peut être une polyamine linéaire choisie dans le groupe constitué par la putrescine, la cadavérine, la spermidine et la spermine. Le procédé de préparation de surface selon l'invention peut être assisté par un dispositif de préparation de surface, ce dispositif comprenant une cavité pour une préparation de surface, cette cavité étant à épaisseur réglable à l'échelle micrométrique, cette cavité communiquant fluidiquement par au moins deux canaux fluidiques avec un espace extérieur de la cavité, cette cavité communiquant optiquement par au moins une ouverture optique constituée d'un matériau qui présente un haut coefficient de transmission par rapport à un rayonnement ultraviolet fourni par au moins une source de lumière, avec l'espace extérieur, ce dispositif étant caractérisé en ce qu'au moins un substrat destiné à la préparation de surface est monté dans la cavité ; en ce qu'une nappe de fluide est formée sur une surface du substrat avec un fluide fourni, à partir de l'espace extérieur, par les canaux fluidiques à la cavité ; et en ce que la surface du substrat est exposée au travers de la nappe de fluide au rayonnement ultraviolet fourni, à partir de la source de lumière, par l'ouverture optique à la cavité. Le dispositif de préparation de surface illustré à la figure 1 est de préférence utilisé. Ce dispositif comprend une cavité 40 pour une préparation de surface, constituée par emboîtement d'une première pièce mâle 21 et d'une seconde pièce femelle 31 ayant un évidement de forme complémentaire qui est apte à coopérer avec une partie mâle 22 (voir la figure 2) de la première pièce 21. La cavité ayant son épaisseur réglable est obtenue en déplaçant la seconde pièce 31 par rapport à la première pièce 21 dans une direction verticale à l'échelle micrométrique, par l'intermédiaire d'un arbre de translation 33 solidaire de la seconde pièce 31 et porté dans une douille à bille 34 à l'aide d'un dispositif approprié de translation (non-représenté). La première pièce 21 comporte un port d'entrée 23 connecté à un canal d'alimentation 25 et un port de sortie 24 connecté à un canal d'évacuation 26 de telle sorte que la cavité 40 communique fluidiquement par le canal d'alimentation 25 et le canal d'évacuation 26 avec un espace extérieur 43, extérieur à la cavité 40. La première pièce 21 comporte, de plus, une ouverture optique 27 constituée en un matériau qui présente un haut coefficient de transmission par rapport à un rayonnement ultraviolet 12 fourni par une source de lumière 11, disposée dans un espace supérieur 41, extérieur à la cavité 40, de telle sorte que la cavité 40 communique optiquement par l'ouverture optique 27 avec l'espace supérieur 41. Ce dispositif est caractérisé en ce qu'un substrat 71 destiné à la préparation de surface est monté, dans la cavité 40, parallèle à une face inférieure de l'ouverture optique 27 et mobile dans une direction perpendiculaire à la face inférieure de l'ouverture optique 27 ; en ce qu'une nappe de fluide ayant une épaisseur micrométrique réglable est formée sur une surface du substrat 71 avec un fluide fourni, à partir de l'espace extérieur 43, par le canal d'alimentation 25 à la cavité 40 ; et en ce que la surface du substrat 71 est exposée au travers de la nappe de fluide formée au rayonnement ultraviolet 12 fourni, à partir de la source de lumière 11, par l'ouverture optique 27 à la cavité 40. 21 A l'inverse du cas décrit ci-dessus, la première pièce peut comporter une partie femelle et la seconde pièce peut comporter une partie mâle. Dans un autre mode de réalisation, la seconde pièce peut avoir l'ouverture optique, en plus de la première pièce ayant l'ouverture optique. Dans ce cas, la première pièce et la seconde pièce sont montées de manière mobile à indépendamment, par établissement de deux l'une par rapport à l'échelle micrométrique, rapport au substrat. Cet ouvertures optiques opposées l'autre permet l'exposition simultanée de deux surfaces du substrat avec une pluralité de sources de lumière. Ce dispositif de préparation de surface comporte deux espaces cylindriques 41 et 42, de part et d'autre de la cavité 40, l'espace supérieur 41 étant formé par une culasse 15, une paroi cylindrique 16 et une gorge périphérique 17 en un acier inoxydable et l'espace inférieur 42 étant, de la même façon, formé par une culasse 35, une paroi cylindrique 36 et une gorge périphérique 37 en un acier inoxydable. Ce dispositif est démontable, comme illustré à la figure 2, et peut être séparé en trois corps : un corps de source de lumière 10, un corps de canaux opta- fluidiques 20 et un corps de coordination axiale 30. Le corps de source de lumière 10 sert à générer le rayonnement ultraviolet 12 à l'aide de la source de lumière 11, cette source de lumière étant refroidie par un flux d'air 61 circulant dans l'espace supérieur 41 au moyen d'un ventilateur de soufflage d'air 13 par une buse d'admission 14 et une buse d'évacuation 18 (voir la figure 3). Le corps de canaux opto-fluidiques 20 sert à refouler les fluides nécessaires pour la préparation de surface à une surface du substrat 71 par le port d'entrée 23 et le canal d'alimentation 25 et à les expulser de ladite surface par le canal d'évacuation 26 et le port de sortie 24. Il sert, de plus, à transmettre le rayonnement ultraviolet 12 à travers l'ouverture optique 27 vers la surface du substrat 71. Le corps de coordination axiale 30 sert à déplacer la seconde pièce 31 par l'entremise de l'arbre de translation 33 dans une direction axiale de telle manière à régler une distance entre la surface supérieure du substrat 71 fixé sur la seconde pièce 31 par des butées 32 et la face inférieure de l'ouverture optique 27. L'ouverture optique 27 est constituée d'un verre de silice synthétique de forme circulaire similaire à la forme du substrat 71. Mais on peut choisir le verre de silice synthétique d'une autre forme, par exemple une forme rectangulaire, conformément à la forme d'un substrat utilisé pour la préparation de surface. Un anneau d'étanchéité 51, qui est fixé sur la périphérie de la partie mâle 22 de la première pièce 21 et qui est situé entre la première pièce 21 et la seconde pièce 31 lors de l'emboîtement de ces deux pièces, comme le montre la figure 1, empêche une fuite de fluide par l'interface entre ces deux pièces 21 et 31 lors de l'injection d'un fluide dans la cavité 40 et une volatilisation de ce fluide de la cavité 40 pendant la préparation de surface. L'anneau d'étanchéité 51 est de préférence en caoutchouc de silicone. Un anneau d'étanchéité 52 isole l'espace supérieur 41 (voir la figure 1) de l'espace extérieur 43 pour empêcher une fuite de l'air avec l'ozone généré par la source de rayonnement ultraviolet 11 à partir de l'espace supérieur 41, tandis que des anneaux d'étanchéité 53 et 54 isolent un espace inférieur 42 (voir la figure 1) d'un espace extérieur 43 lorsqu'on dispose le corps de canaux opto-fluidiques 20 sur le corps de coordination axiale 30, ce qui empêche une fuite accidentelle des fluides par l'interface entre la première pièce 21 et la seconde pièce 31 et restent dans l'espace inférieur 42. Des bouchons 28 qui sont arrangés pour faciliter le façonnage des canaux d'alimentation 25 et d'évacuation 26 dans la première pièce 21 ferment une partie de ces canaux 25 et 26 après leur perforage dans la première pièce 21 de manière de séparer fluidiquement ces canaux fluidiques 25 et 26 et l'espace supérieur 41 (voir la figure 1). La première pièce 21 est constituée en un acier inoxydable. Elle peut être aussi constituée en un matériau aluminium qui est plus facile à façonner. La source de lumière 11 est celle qui émet un rayonnement ayant une longueur d'onde entre 157 nm et 353 nm. Cette source de lumière est, de préférence, une lampe à rayonnement ultraviolet, par exemple, celle disponible dans le commerce chez SEN Lights Corporation sous la désignation commerciale � SV11OGS �, ladite lampe ayant les longueurs d'onde de 185 nm et 254 nm, dont l'intensité d'irradiation est d'environ 15 mW/cm2 à la distance de 4 cm sous cette lampe. Au lieu de la lampe, cette source peut être un laser à excimère avec un appareil d'expansion de faisceau. L'ouverture optique 27 est constituée d'un verre de silice synthétique qui présente un haut coefficient de transmission par rapport au rayonnement ultraviolet fourni par la source de lumière 11. Le dispositif de préparation de surface selon l'invention peut comporter, de plus, un système d'alimentation de fluide 200 et un système d'évacuation 300, comme représenté à la figure 3, et en outre une cellule de préparation de surface (le dispositif de préparation de surface) 100 comme expliqué ci-dessus. Le système d'alimentation de fluide 200 sert à refouler par une ligne d'alimentation 231, le port d'entrée 23 et le canal d'alimentation 25 à la cavité 40 de la cellule de préparation de surface 100, des fluides provenant des sources de solution 211 et 212 comprenant respectivement une solution relative à la préparation de surface et une solution de lavage et d'une source de gaz 213 comprenant de l'argon ou de l'air. Les sources 211 et 212 de solution sont, de préférence, des pompes de seringue faciles à manipuler et permettant d'ajuster un débit de fluide, mais elles peuvent être des pompes d'injection d'autres formes motrices. Les valves 221 sont destinées au passage ou à l'interruption de fluides provenant des sources de solution 211 ou 212 vers la ligne d'alimentation 231. Les valves 222 et 223 servent à ajuster un débit de gaz provenant de la source de gaz 213 vers la ligne d'alimentation 231. Eventuellement, on peut ajouter d'autres sources de solution et de gaz à la ligne d'alimentation 231. Lorsqu'on désire des opérations séquentielles comportant l'étape du greffage mentionnée précédemment et l'étape présente de la formation des nappes de la solution, on peut établir une autre ligne d'alimentation et un autre port d'entrée et ajouter, à cette ligne d'alimentation, des sources de solution et de gaz nécessaires pour cela. Le fluide restant dans la cavité 40 est expulsé par le port de sortie 24 en refoulant l'argon ou l'air de la source de gaz 213. Alternativement, il peut être aspiré à l'aide d'un aspirateur 311 en ouvrant une valve 224 dans le système d'alimentation de fluide 200. Le fluide restant dans l'espace inferieur 42, issu d'une fuite de fluide accidentelle par l'interface entre la première pièce 21 et la seconde pièce 31, est expulsé par un aspirateur 321 via une ligne d'évacuation 322. Lorsqu'on sort le substrat 71 en séparant le corps de canaux opto-fluidiques 20 du corps de coordination axiale 30, une valve 38 est ouverte pour faire entrer l'air extérieur par un conduit d'admission 39 dans l'espace inférieur 42, ce qui facilite cette séparation. On revient à la description sur le procédé de préparation de surface. Pour former une nappe de la solution aqueuse d'ammoniac comme solution contenant des substances relatives à l'adhésion de cellules sur la surface du substrat munie des chaînes alkyles linéaires, on a effectué les opérations suivantes à l'aide du dispositif de préparation de surface selon l'invention. Après avoir fixé le substrat 71 muni des chaînes alkyles linéaires sur la seconde pièce 31 avec les butées 32, on a disposé le corps de canaux optofluidiques 20 sur le corps de coordination axiale 30. Pour le repérage d'une position verticale initiale de la surface supérieure du substrat 71 par rapport à la surface inférieure de l'ouverture optique 27, on a mis le substrat 71 légèrement en contact avec l'ouverture optique 27 comme point d'origine et on l'a ensuite descendu en déplaçant, par l'arbre de translation 33, la position de la seconde pièce 31 à l'aide du dispositif de translation approprié (non représenté). Il en résulte la formation de la cavité 40 ayant sa distance prédéterminée entre le substrat 71 et l'ouverture optique 27, autrement dit d'une épaisseur déterminée. Cette distance ou épaisseur est comprise dans la sphère entre 1 �m et 1 mm et ajustée, de préférence, entre 20 �m et 300 �m pour la préparation de surface selon l'invention. On a ensuite injecté la solution décrite ci- dessus à partir de la source de solution 211, par le canal d'alimentation 25, dans la cavité 40. Du fait que la surface du substrat 71 est hydrophobe et que la cavité réalisée sur cette surface a son épaisseur micrométrique, la solution injectée est distribuée rapidement sous l'action des forces capillaires de manière à être mise en contact avec la surface de façon homogène, ce qui entraîne la formation d'une nappe de la solution sur la surface. On peut voir le passage et la distribution de la solution à travers l'ouverture optique 27 d'une vue de dessus. La nappe de la solution formée sur la surface du substrat sert à fournir les substances relatives à la préparation de surface aux chaînes alkyles linéaires greffées sur cette surface et de plus à ajuster une intensité de rayonnement ultraviolet atteignant la surface lors de l'exposition de la surface au rayonnement ultraviolet de l'étape ultérieure. Cette intensité se trouve atténuée par une augmentation de l'épaisseur de la nappe de la solution. Selon un autre mode de réalisation, on a formé des nappes de la solution décrite ci-dessus à des endroits locaux sur la surface du substrat munie des chaînes alkyles linéaires. Après avoir agencé des lames de verre sur le substrat 71 fixé sur la seconde pièce 31 de manière à former des canaux fluidiques, on a disposé le corps de canaux opto-fluidiques 20 sur le corps de coordination axiale 30. On a ensuite mis la face supérieure de ces lames de verre agencées en contact avec la face inférieure de l'ouverture optique 27 en déplaçant verticalement la seconde pièce 31 par l'intermédiaire de l'arbre de translation 33 pour ménager des canaux fluidiques de distribution 81 compartimentés par les lames de verre 82 comme les montre la figure 4 (a). Ces canaux fluidiques de distribution 81 ménagés dans la cavité 40 communiquent fluidiquement avec le canal d'alimentation 25 et le canal d'évacuation 26. Enfin, des nappes compartimentées de la solution ont été formées par injection de la solution dans ces canaux fluidiques de distribution de sorte que la surface du substrat soit mise localement au contact de la solution. Dans ce cas, une épaisseur de ces nappes de la solution formées est égale à celle de ces lames de verre 82. Les lames de verre 82 servent non seulement à former les nappes de la solution compartimentées mais également de couches de masques qui empêchent l'exposition de la surface au rayonnement ultraviolet du fait de leur faible coefficient de transmission vis-à-vis du rayonnement ultraviolet. Alternativement, on peut ménager les canaux fluidiques de distribution quelconques sur un verre de silice synthétique supplémentaire comme fenêtre à canaux fluidiques en mettant à profit la technique connue de photolithographie avec un matériau polymère tel que le polydiméthylsiloxane (PDMS). Comme le représente la figure 4 (b), la fenêtre à canaux fluidiques 80 est fixée sous l'ouverture optique 27 avec des butées appropriées de manière que la face de ces canaux fluidiques de distribution 81, compartimentés par des couches de masques 83 constituées du matériau polymère, soit en regard de la surface du substrat 71. De la même manière que précédemment, après la disposition du corps de canaux opto-fluidiques 20 sur le corps de coordination axiale 30 et la mise en contact de la face inférieure de la fenêtre à canaux fluidiques 80 avec la face supérieure du substrat 71 par déplacement de la seconde pièce 31 via l'arbre de translation 33, on injecte la solution dans les canaux fluidiques de distribution 81 pour former des nappes de la solution compartimentées. Alternativement, on peut préparer une fenêtre à canaux fluidiques 85 ou un substrat 72 muni(e) des canaux fluidiques de distribution 81 ayant leur profondeur différente, comme montré à la figure 4 (c) ou (d) respectivement. Les couches de masques 83 peuvent être des couches minces en un matériau polymère comme expliqué ci-dessus, ou des couche minces de verre ou d'or déposées. Par remplissage de la solution dans ces canaux décrits ci-dessus, on peut former des nappes de la solution ayant leur épaisseur différente à des endroits distincts sur la surface du substrat, autrement dits localement sur la surface du substrat, ce qui permet de produire localement des intensités différentes de rayonnement ultraviolet sur la surface lors de l'exposition de la surface au rayonnement ultraviolet expliquée ultérieurement. Au lieu des nappes de la solution, on peut éventuellement former des filets minces de la solution en formant des canaux fluidiques plus étroits sur la fenêtre à canaux fluidiques 80, 85 ou le substrat 72 au moyen de la technique conventionnelle de photolithographie. Dans le cadre de l'invention, on entend que le filet mince est une forme ayant la section droite où le rapport entre sa largeur et sa profondeur est inférieur à un, par exemple la forme ayant 50 �m de largeur et 150 �m de profondeur, ce rapport étant de l'ordre d'un tiers. III. Exposition de la surface du substrat au travers des nappes de la solution à un rayonnement ultraviolet Après la formation des nappes de la solution contenant des substances relatives à l'adhésion de cellules sur la surface du substrat munie des chaînes alkyles linéaires, on a exposé cette surface à un rayonnement ultraviolet pendant un temps déterminé au travers de ces nappes de manière à substituer tout ou partie de ces substances à une partie de ces chaînes alkyles linéaires. Le rayonnement ultraviolet émis par la source de lumière 11 utilisée pour cette exposition a des longueurs d'onde principales de 185 nm et 254 nm. Ces longueurs d'onde permettent de couper temporairement une liaison unique entre des atomes de carbone (son énergie de liaison étant de l'ordre de 83 kcal/mol correspondant à une longueur d'onde de 342 nm environ) de ces chaînes alkyles linéaires greffées sur la surface du substrat et/ou ces substances contenues dans la solution, ce qui permet la substitution mentionnée ci-dessus. Dans le cas où l'on a préparé la surface du substrat avec de l'ammoniac en solution aqueuse, la mesure au moyen de la spectrométrie de photoélectrons induits par rayons X a révélé des pics de structures contenant des atomes d'azote. Par exemple, le rapport entre ces pics et celui de la liaison unique de carbone-carbone était de l'ordre d'un quart. Après l'exposition, on a nettoyé la surface du substrat dans la cavité 40 avec de l'eau désionisée fournie de la source de solution 212, on l'a séchée par un jet de gaz argon fourni par la source de gaz 213 et on l'a sortie du dispositif de préparation de surface. On peut contrôler l'adhésion des cellules à une surface en réalisant des modes ultérieurs dans le procédé de préparation de surface expliqué précédemment. Quant à ce contrôle, il comprend celui de la densité de cellules adhérant à la surface et celui de la vitesse d'adhésion de cellules adhérant à la surface, mais ils sont choisis à titre d'exemples dans la présente description. Dans un mode de réalisation, dans le procédé de préparation de surface selon l'invention, on peut contrôler l'adhésion de cellules à la surface d'un substrat en faisant varier l'épaisseur de la(les) nappe(s) de la solution à l'aide du dispositif de préparation de surface selon l'invention. On peut aussi faire varier l'épaisseur de la(les) nappe(s) de la solution localement sur la surface du substrat. Par l'augmentation de cette épaisseur, l'intensité du rayonnement ultraviolet qui atteint la surface du substrat munie des chaînes alkyles linéaires lors de l'exposition de la surface au rayonnement ultraviolet s'affaiblit plus, ce qui diminue le pouvoir de substituer tout ou partie des substances contenues dans la solution à une partie de ces chaînes alkyles linéaires. Dans un autre mode de réalisation, dans le procédé de préparation de surface selon l'invention, on peut contrôler l'adhésion de cellules à la surface d'un substrat en faisant varier le temps de l'exposition. On peut aussi varier le temps d'exposition localement sur la surface du substrat. L'augmentation du temps de l'exposition vers la surface du substrat munie des chaînes alkyles linéaires produit l'augmentation de la fréquence de substitution de tout ou partie des substances contenues dans la solution à une partie de ces chaînes alkyles linéaires. Dans un autre mode de réalisation, dans le procédé de préparation de surface selon l'invention, on peut contrôler l'adhésion de cellules à la surface d'un substrat en faisant varier la concentration de la substance dans la solution. On peut aussi faire varier la concentration de la substance dans la solution localement sur la surface du substrat. Plus la concentration de la substance dans la solution est élevée, plus le taux de rencontre de la substance avec ces chaînes alkyles linéaires greffées sur la surface est élevé, ce qui augmente le taux de substitution de tout ou partie des substances contenues dans la solution à une partie de ces chaînes alkyles linéaires. Dans un autre mode de réalisation, dans le procédé de préparation de surface selon l'invention, on peut contrôler l'adhésion de cellules à la surface d'un substrat en combinant des variations de l'épaisseur de la (les) nappe(s) de la solution, du temps de l'exposition et de la concentration de la substance dans la solution. Dans le cas où on désire établir une pluralité de surfaces ayant leur affinité d'adhésion différente pour les cellules sur un seul substrat, on différentie localement l'intensité du rayonnement ultraviolet atteignant la surface du substrat munie des chaînes alkyles linéaires, dans le procédé de préparation de surface selon l'invention. Autrement dit, on produit différentes intensités du rayonnement ultraviolet à des endroits distincts sur la surface. De préférence, on forme, localement sur la surface du substrat munie des chaînes alkyles linéaires, des nappes ou des filets minces de la solution ayant leur épaisseur différente et/ou des couches de masques empêchant le rayonnement ultraviolet. A l'endroit où les nappes ou filets minces de la solution ont été formés, l'intensité du rayonnement ultraviolet atteignant la surface est différentiée lors de l'exposition. Cette intensité s'affaiblit plus à l'endroit de l'épaisseur plus importante de la solution par atténuation du rayonnement ultraviolet dans la solution, ce qui entraîne moins de substitution de tout ou partie des substances à une partie des chaînes alkyles linéaires. A l'endroit où les couches de masques ont été formées, le rayonnement ultraviolet vers la surface est coupé complètement, donc les chaînes alkyles linéaires restent inchangées. Pour cette mise en oeuvre, on peut utiliser la fenêtre à canaux fluidiques 85 ou le substrat 72 comme montré (e) à la figure 4 (c) ou (d) respectivement. Dans un autre mode de réalisation, dans le procédé de préparation de surface selon l'invention, on différentie une concentration de la substance dans la solution, localement sur la surface du substrat munie des chaînes alkyles linéaires. A l'endroit où se trouve une concentration plus élevée de la substance dans la solution, la substance rencontre beaucoup plus de chaînes alkyles linéaires greffées sur la surface du substrat, il y a donc plus de substitution de tout ou partie des substances à une partie des chaînes alkyles linéaires au cours de l'exposition de la surface au rayonnement ultraviolet. Pour cette mise en oeuvre, on injecte des solutions ayant une concentration différente dans chacun des canaux fluidiques comme montrés à la figure 4 (a) ou (b). Dans le cas où l'on désire établir une surface ayant son affinité d'adhésion directionnelle pour les cellules sur un seul substrat, on maintient l'écoulement de la solution sur la surface du substrat munie des chaînes alkyles linéaires pendant l'exposition dans le procédé de préparation de surface selon l'invention. Pour cela, une source de solution 211 telle qu'une pompe de seringue automatique et contrôlable est utilisée pour continuer à refouler, pendant l'exposition, la solution dans les canaux fluidiques de distribution 81 tangents à la surface du substrat à préparer comme expliqué à la figure 4. L'invention n'est pas limitée aux modes de réalisation décrits et représentés ici et est susceptible d'être réalisée dans d'autres variantes sans sortir du cadre de l'invention. EXEMPLES DE REALISATION DE L'INVENTION Exemple de réalisation 1 : Contrôle de l'adhésion de cellules à la surface d'un substrat par variation de l'épaisseur de la nappe de la solution : contrôle d'une densité de cellules On a contrôlé l'adhésion de cellules à la surface du substrat en préparant une surface par variation de l'épaisseur de la nappe d'une solution contenant des substances relatives à l'adhésion de cellules, dans le procédé de préparation de surface selon l'invention, à l'aide du dispositif de préparation de surface selon l'invention. On a d'abord greffé des chaînes alkyles linéaires sur la surface de deux substrats de verre ayant un diamètre de 2 pouces et une épaisseur de 700 �m simultanément dans les conditions mentionnées ci-avant avec l'octadécyltrichlorosilane. On a ensuite préparé la surface de chacun de ces deux substrats en exposant la surface à un rayonnement ultraviolet pendant 30 minutes au travers d'une nappe d'une solution aqueuse à 28% d'ammoniac, ayant une épaisseur de 40 �m et 300 �m respectivement. Après la préparation des surfaces, chacun de ces substrats a été morcelé en pièces rectangulaires de 1,5 cm x 1,0 cm comme échantillons destinés à l'observation de l'adhésion de cellules à la surface. Ces échantillons ont été nettoyés avec de l'eau désionisée (résistivité électrique: 18 MQ•cm), puis rincés avec de l'eau désionisée et séchés sous un jet d'argon gazeux. Pour constater l'affinité d'adhésion pour les cellules que possèdent les surfaces préparées dans des conditions différentes, on a cultivé des cellules sur ces échantillons simultanément dans les mêmes conditions de culture, puis on a compté le nombre de cellules qui adhéraient à une superficie déterminée de la surface de chaque échantillon et on a fait des comparaisons du nombre de cellules par superficie déterminée parmi ces échantillons. Quant aux cellules, on a utilisé des cellules HeLa qui sont des cellules adhérentes. On a stérilisé ces échantillons préparés sous les conditions différentes à l'aide de lampes de stérilisation disposées dans la hotte de protection biologique, pendant 15 minutes. On les a ensuite déposés sur le fond plat de chaque puits dans une plaque de 6 puits (BD Falcon) à l'intérieur de cette hotte et on a laissé un puits de cette plaque comme puits de contrôle. On a laissé cette plaque pourvue des échantillons dans cette hotte jusqu'au démarrage de la culture de cellules. Pour la culture des cellules, on a préparé le milieu de culture complet par un mélange de 500 ml de D-MEM (Dulbecco Modified Eagle Medium) muni de L-glutamine (GIBCOTM, disponible dans le commerce chez Invitrogen Corporation), 50 ml de sérum de veau foetal décomplémenté par un traitement thermique à 56°C pendant 30 minutes et 5 ml d'antibiotique 100x concentré contenant 10.000 unités/ml de pénicilline et 10.000 �g/ml de streptomycine. On a cultivé les cellules HeLa avec 12 ml du milieu complet dans une flasque T75 à 37°C, 5% de CO2, 100% d'humidité dans un incubateur. Suite à la confluence des cellules dans la flasque, on a décollé les cellules de la flasque avec une solution de trypsine-EDTA (disponible dans le commerce chez Sigma-Aldrich Corporation) et on les a récoltées avec le milieu. On a isolé ces cellules par centrifugation et on a ajusté la densité de cellules à 1,2 x 105 cellules/ml. On a réparti 2,5 ml du milieu de cellules dans les puits contenant l'échantillon et dans un puits sans échantillon comme puits de contrôle. On a continué à cultiver les cellules dans l'incubateur et on a observé à des temps déterminés l'adhésion de cellules à la surface de chaque échantillon. L'acquisition d'images de cellules a été effectuée par un microscope de DMIRBE (disponible dans le commerce chez LEICA) pourvu d'un thermostat avec une caméra Cool SNAPTM ES (disponible dans le commerce chez ROPER SCIENTIFIC) et un logiciel MetaVue version 6.2r6 (disponible dans le commerce chez Universal Image Corp.). On a compté le nombre de cellules qui adhéraient à la surface de chaque échantillon ainsi qu'au fond du puits de contrôle à partir des images prises avec un grandissement x10. La figure 5 représente des images de surfaces auxquelles adhèrent les cellules HeLa au bout de 24 heures de culture, (a) la surface préparée à l'aide de la nappe de la solution aqueuse d'ammoniac de 40 �m d'épaisseur selon l'invention, (b) la surface préparée à l'aide de la nappe de ladite solution de 300 �m d'épaisseur selon l'invention et (c) la surface du fond d'un puits utilisé comme contrôle. La densité des cellules représentées sur l'image (a) était de 1.816 cellules/mm2, celle des cellules représentées sur l'image (b) de 237 cellules/mm2, celle des cellules représentées sur l'image (c) pour le puits de contrôle de 686 cellules/mm2. Sur l'image (a), on voit la confluence et la coalescence des cellules. Lorsqu'on augmente l'épaisseur de la nappe de la solution aqueuse d'ammoniac de 40 �m à 300 �m dans le procédé de préparation de surface selon l'invention, la densité des cellules adhérant à la surface du substrat diminue comme représenté sur l'image (b) et il en résulte que la coalescence des cellules est évitée. Plus l'épaisseur de la nappe de la solution lors de la mise en oeuvre du procédé de préparation de surface selon l'invention est importante, moins forte est l'affinité d'adhésion pour les cellules que possède la surface préparée. Exemple de réalisation 2 : Contrôle de l'adhésion de cellules à la surface d'un substrat par variation du temps d'exposition : contrôle d'une densité de cellules On a contrôlé l'adhésion de cellules à la surface du substrat en préparant une surface par variation du temps d'exposition au rayonnement ultraviolet dans le procédé de préparation de surface selon l'invention, à l'aide du dispositif de préparation de surface selon l'invention. On a d'abord greffé des chaînes alkyles linéaires simultanément sur la surface de cinq substrats de verre ayant la même dimension que dans l'exemple de réalisation 1, dans les mêmes conditions que celle de l'exemple de réalisation 1. On a ensuite préparé la surface de chacun de ces cinq substrats en exposant la surface au rayonnement ultraviolet pendant 5, 15, 30, 45 et 60 minutes respectivement au travers d'une nappe d'une solution aqueuse à 10% d'ammoniac, ayant une épaisseur de 150 �m. La préparation des échantillons destinés à l'observation par morcellement des substrats après la préparation des surfaces, la stérilisation des échantillons, la culture des cellules et l'observation de l'adhésion des cellules à la surface de chaque échantillon ont été effectuées de la même manière que dans l'exemple de réalisation 1. La figure 6 représente des images de surfaces auxquelles adhèrent les cellules HeLa au bout de 24 heures de culture, (a) la surface préparée pendant 5 minutes du temps d'exposition au rayonnement ultraviolet, (b) la surface préparée pendant 30 minutes du temps d'exposition et (c) la surface préparée pendant 60 minutes du temps d'exposition, respectivement selon l'invention. Lorsqu'on augmente le temps de l'exposition, le nombre de cellules adhérant à la surface de l'échantillon augmente. Plus le temps de l'exposition lors de la mise en oeuvre du procédé de préparation de surface selon l'invention est important, plus l'affinité d'adhésion pour les cellules que possède la surface préparée est forte. La figure 7 représente la densité des cellules adhérant à la surface au bout de 24 heures de culture en fonction du temps d'exposition de la surface au rayonnement ultraviolet au cours de la préparation de surface. Lorsqu'on augmente le temps d'exposition, il se produit une augmentation de la densité des cellules adhérant à la surface. On peut mettre à profit cette courbe et sa tendance pour restituer l'affinité d'adhésion des cellules afin d'obtenir la densité de cellules désirée. Exemple de réalisation 3 : Contrôle de l'adhésion de cellules à la surface d'un substrat par variation de la concentration de la substance relative à l'adhésion de cellules : contrôle d'une densité de cellules et contrôle d'une vitesse d'adhésion de cellules On a contrôlé l'adhésion de cellules à la surface du substrat en préparant une surface par variation de la concentration de la substance relative à l'adhésion de cellules dans le procédé de préparation de surface selon l'invention, à l'aide du dispositif de préparation de surface selon l'invention. On a d'abord greffé des chaînes alkyles linéaires simultanément sur la surface de deux substrats de verre ayant la même dimension que dans l'exemple de réalisation 1, dans les mêmes conditions que celles de l'exemple de réalisation 1. On a ensuite préparé la surface de chacun de ces deux substrats en exposant la surface au rayonnement ultraviolet pendant 45 minutes au travers d'une nappe d'une solution aqueuse respectivement à 10% et 28% d'ammoniac, ayant une épaisseur de 300 �m. La préparation des échantillons destinés à l'observation par morcellement des substrats après la préparation des surfaces, la stérilisation des échantillons, la culture des cellules et l'observation de l'adhésion des cellules à la surface de chaque échantillon ont été effectuées de la même manière que dans l'exemple de réalisation 1. La figure 8 représente une évolution de la densité des cellules adhérant à la surface en fonction du temps de culture des cellules, l'une de ces surfaces étant préparée avec une solution aqueuse à 10% d'ammoniac selon l'invention et l'autre étant préparée avec une solution aqueuse à 28% d'ammoniac selon l'invention. Lorsqu'on augmente la concentration d'ammoniac de 10% à 28%, la densité des cellules adhérant à la surface augmente. Pour une durée de temps de culture inférieure à 6 heures, la pente de la courbe de la concentration à 28% est supérieure à celle de la courbe de la concentration à 10% à chaque point de temps de culture. La pente de la courbe à chaque point du temps représente la vitesse d'adhésion des cellules à la surface préparée. La vitesse d'adhésion des cellules à la surface correspondant à une durée de 6 heures de temps de culture est d'environ 77 cellules/heure et environ 35 cellules/heure pour les surfaces préparées avec les solutions de concentration à 28% et 10% respectivement. Plus la concentration d'ammoniac comme substance relative à l'adhésion de cellules lors de la mise en oeuvre du procédé de préparation de surface selon l'invention est importante, plus l'affinité d'adhésion pour les cellules que possède la surface préparée est forte. Exemple de réalisation 4 : Etablissement de surfaces ayant une affinité d'adhésion différente pour les cellules sur un seul substrat On a établi, sur un même substrat, des surfaces ayant une affinité d'adhésion différente pour les cellules en formant localement des nappes de la solution contenant des substances relatives à l'adhésion de cellules dans le procédé de préparation de surface selon l'invention, à l'aide du dispositif de préparation de surface selon l'invention. On a d'abord greffé des chaînes alkyles linéaires sur la surface d'un substrat de verre ayant la même dimension que dans l'exemple de réalisation 1, dans les mêmes conditions que celles de l'exemple de réalisation 1. On a formé un canal fluidique ayant une longueur de 40 mm, une largeur de 5 mm et une épaisseur de 150 en disposant des lames de verre en contact entre l'ouverture optique 27 et le substrat 71 dans le dispositif de préparation de surface. Au préalable, on a ménagé des rainures sur la face opposée à la surface à préparer du substrat de manière à pouvoir distinguer l'emplacement du canal fluidique et celui hors du canal fluidique lors du morcellement ultérieur du substrat. Après la formation du canal fluidique dans la cavité 40, on a rempli ce canal d'une solution aqueuse à 10% d'ammoniac pour produire localement une nappe de la solution sur la surface du substrat. On a préparé la surface de ce substrat en exposant la surface au rayonnement ultraviolet pendant 45 minutes. La préparation des échantillons destinés à l'observation par morcellement du substrat après la préparation de surface, la stérilisation des échantillons, la culture des cellules et l'observation de l'adhésion des cellules à la surface de chaque échantillon ont été effectuées de la même manière que dans l'exemple de réalisation 1. La figure 9 montre des images de surfaces préparées selon l'invention, au bout de 24 heures de culture de cellules, (a) la surface qui était dans le canal fluidique lors de l'exposition et (b) la surface qui était hors du canal fluidique lors de l'exposition. La surface à l'image (a) représente les propriétés d'adhésion pour les cellules et la surface à l'image (b) représente les propriétés de répulsion pour les cellules. Par établissement de canaux fluidiques sur la surface du substrat lors de la mise en oeuvre du procédé de préparation de surface selon l'invention, le substrat se trouve muni de surfaces ayant une affinité d'adhésion différente pour les cellules. Exemple de réalisation 5 : Etablissement d'une surface ayant une affinité d'adhésion directionnelle pour les 10 cellules On a établi, sur un substrat, une surface ayant son affinité d'adhésion directionnelle pour les cellules en maintenant l'écoulement d'une solution contenant des substances relatives à l'adhésion de 15 cellules sur la surface du substrat, dans le procédé de préparation de surface selon l'invention, à l'aide du dispositif de préparation de surface selon l'invention. On a d'abord greffé des chaînes alkyles linéaires sur la surface d'un substrat de verre ayant 20 la même dimension que dans l'exemple de réalisation 1, dans les mêmes conditions que celles de l'exemple de réalisation 1. On a formé un canal fluidique ayant la même dimension que dans l'exemple de réalisation 4 sur la 25 surface du substrat, de la même manière que dans l'exemple de réalisation 4. On a ensuite rempli ce canal d'une solution aqueuse à 28% d'ammoniac. On a préparé la surface de ce substrat en continuant à faire s'écouler la solution dans le canal 30 fluidique au cours de l'exposition de la surface au rayonnement ultraviolet pendant 90 minutes. La préparation des échantillons destinés à l'observation par morcellement du substrat après la préparation de surface, la stérilisation des échantillons, la culture de cellules et l'observation de l'adhésion de cellules à la surface de chaque échantillon ont été effectuées de la même manière que dans l'exemple de réalisation 1. La figure 10 représente des images des surfaces au bout de 24 heures de culture des cellules, (a) la surface étant préparée sous l'écoulement de la solution dans le procédé de préparation de surface selon l'invention et ayant des propriétés d'adhésion directionnelle pour les cellules et (b) la surface du fond de puits utilisé comme contrôle. Sur l'image (a), à la différence de l'image de contrôle (b), il se produit des alignements de cellules tels que montrés par les flèches. Par établissement de l'écoulement de la solution sur la surface du substrat lors de la mise en oeuvre du procédé de préparation de surface selon l'invention, le substrat se trouve muni de la surface ayant son affinité d'adhésion directionnelle pour les cellules. POSSIBILITE D'EXPLOITATION INDUSTRIELLE Le procédé de préparation de surface selon l'invention est un procédé de préparation de surface relativement simple, basé sur une réaction photochimique entre des substances comportant des structures fondamentales en profitant de leurs caractéristiques fluidique et optique ; il permet de contrôler l'adhésion de cellules à la surface du substrat. Le dispositif de préparation de surface selon l'invention permet le contrôle fluidique et optique nécessaire pour la réaction mentionnée ci-dessus. Ce dispositif confère à ce procédé mentionné ci-dessus une grande efficacité dans la préparation simultanée d'une surface compatible avec les cellules comme mentionnée ci-dessus sur un substrat ayant une grande superficie comme le substrat de silicium de 6 pouces et, de plus, la mise en place de surfaces compartimentées ayant une affinité d'adhésion différente pour les cellules sur ledit substrat. Cela permet la création de circuits intégrés fluidiques et/ou électroniques dotés d'une compatibilité pour des cellules. En outre, ce dispositif peut être intégré dans le processus de production de produits semiconducteurs et/ou fluidiques de l'art antérieur, puisqu'il ne nécessite qu'un encombrement relativement faible et que sa structure est simple. Des surfaces obtenues en mettant en oeuvre l'invention peuvent avoir diverses affinités d'adhésion pour les cellules, ce qui apporte l'ensemble des applications suivantes. Lors qu'on désire recueillir des matières sécrétées par des cellules adhérentes telles que des cellules CHO (Chinese Hamster Ovary) à des densités différentes, par exemple à gradation de densité, il est avantageux d'utiliser un tel substrat de sorte que les cellules adhèrent à différents endroits du substrat à des densités différentes en une seule utilisation d'une suspension de cellules de concentration constante. Par exemple, il permet d'acquérir simultanément la lactate déshydrogénase à gradation de densité à partir d'endroits différents du substrat par une seule utilisation d'une solution contenant des matières cytotoxiques à une certaine concentration, ce qui ne nécessite pas de nombreuses manipulations ou opérations pour diluer la suspension de cellules et la solution contenant les matières cytotoxiques. Lorsqu'on désire manipuler des cellules adhérentes sur le substrat au moyen de manipulateurs ou capteurs à l'échelle micrométrique, il est avantageux d'utiliser un substrat à la surface duquel adhèrent les cellules en faible densité. Cela facilite l'échantillonnage et la manipulation des cellules du fait du large écartement entre les cellules adhérant à la surface. Lors qu'on désire mesurer des signaux électriques autogènes de cellules, il est avantageux d'utiliser un substrat à la surface duquel adhèrent les cellules en s'allongeant et/ou s'alignant dans une direction déterminée, car cela facilite la mise en place des cellules de manière qu'elles s'adaptent à la forme des électrodes disposées sur le substrat. D'autre part, cela facilite le positionnement d'une pluralité de capteurs sans encombrement supplémentaire l'un par rapport à l'autre sur des cellules du fait de l'arrangement linéaire de ces cellules sur la surface. BREVE DESCRIPTION DES FIGURES La figure 1 montre une vue en coupe verticale d'un dispositif de préparation de surface selon l'invention. La figure 2 montre une vue en coupe verticale du dispositif de préparation de surface selon l'invention, ce dispositif étant séparé en trois corps. La figure 3 montre une vue de montage du dispositif de préparation de surface selon l'invention, ce dispositif comportant, de plus, le système d'alimentation de fluide et le système d'évacuation. La figure 4 (a) montre une vue en coupe de canaux fluidiques de distribution ménagés dans la cavité du dispositif de préparation de surface selon l'invention. La figure 4 (b) montre une vue en coupe de canaux fluidiques de distribution ménagés dans la cavité du dispositif de préparation de surface selon l'invention. La figure 4 (c) montre une vue en coupe de canaux fluidiques de distribution ménagés dans la cavité du dispositif de préparation de surface selon l'invention. La figure 4 (d) montre une vue en coupe de canaux fluidiques de distribution ménagés dans la cavité du dispositif de préparation de surface selon l'invention. La figure 5 représente des images de surfaces auxquelles adhèrent des cellules HeLa au bout de 24 heures de culture, (a) la surface préparée à l'aide de la nappe d'une solution aqueuse d'ammoniac de 40 �m d'épaisseur selon l'invention, (b) la surface préparée à l'aide de la nappe de ladite solution de 300 �m d'épaisseur selon l'invention et (c) la surface du fond d'un puits de contrôle. La figure 6 représente des images de surfaces auxquelles adhèrent des cellules HeLa au bout de 24 heures de culture, (a) la surface préparée pendant 5 minutes du temps d'exposition au rayonnement ultraviolet, (b) la surface préparée pendant 30 minutes du temps d'exposition et (c) la surface préparée pendant 60 minutes du temps d'exposition, respectivement selon l'invention. La figure 7 représente la densité des cellules adhérant à des surfaces au bout de 24 heures de culture en fonction du temps d'exposition des surfaces au rayonnement ultraviolet au cours de la préparation de surface. La figure 8 représente l'évolution de la densité des cellules adhérant à des surfaces en fonction du temps de culture des cellules, l'une de ces surfaces étant préparée avec une solution aqueuse à 10% d'ammoniac et l'autre étant préparée avec une solution aqueuse à 28% d'ammoniac, respectivement selon l'invention. La figure 9 représente des images de surfaces préparées selon l'invention, au bout de 24 heures de culture des cellules, (a) la surface adhérente pour les cellules et (b) la surface répulsive pour les cellules. La figure 10 représente des images de surfaces au bout de 24 heures de culture des cellules, (a) la surface préparée selon l'invention et ayant des propriétés d'adhésion directionnelle pour les cellules et (b) la surface du fond d'un puits utilisé comme contrôle.