Brevet FR2935096A1 — publié le 20100226

DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention se rapporte au domaine de la fabrication de compositions contenant des polyphénols, destinées à un usage alimentaire, diététique, nutraceutique et cosmétique. ART ANTERIEUR Les polyphénols sont connus depuis longtemps pour leurs activités bénéfiques dans de nombreux domaines, y compris les domaines médical, cosmétique et alimentaire. De manière générale, les polyphénols constituent une large famille de molécules ayant en commun la présence dans leur structure plus ou moins complexe d'une pluralité de groupes phénoliques. Les polyphénols englobent diverses classes moléculaires incluant les acides phénoliques, les flavanones, les tannins, et les anthocyanes. 1s On a décrit dans l'état de la technique de nombreux extraits végétaux enrichis en polyphénols ainsi que leurs procédés de préparation. Les plus représentatifs sont les extraits de marc de raisin, de pellicules de raisin, de pépins de raisin, de thé, d'écorce de pin, d'olive et de romarin (voir les documents de brevet FR 2 643 073, FR 2 372 823, US 4,698,360, EP 348 781, 20 EP 283 349, FR 1 427 100, FR 2 092 743). Chaque classe de polyphénols possède une activité, ou une combinaison d'activités, sur la physiologie d'un organisme qui est spécifique et au moins sensiblement distincte des activités des autres classes. Par exemple, des extraits riches en acide chlorogénique, composé qui est 25 retrouvé en grande quantité dans la pomme, le café ou le thé vert, sont connus pour leurs effets d'inhibition de l'assimilation intestinale du sucre et leurs effets d'inhibition sur la prise de poids. Des extraits enrichis en phloridzine ont été décrits antérieurement pour leurs effets contre le diabète. Toutefois, des études récentes réalisées avec de la 30 phloridzine hautement purifiée montrent que ce polyphénol serait peu actif in vivo chez l'homme. Des extraits enrichis en quercétine, y compris en certains glycosides de la quercétine, ont été décrits pour leurs effets sur le métabolisme du glucose, et pour leurs effets anti-hypertenseurs. Des extraits riches en catéchines ont été décrits pour leurs effets contre les cancers ou encore contre les maladies inflammatoires ou coronariennes. On observe toutefois que les effets in vivo de chaque classe de polyphénols qui ont été décrits dans l'état de la technique ont été obtenus après administration d'extraits enrichis en certains polyphénols et non après administration d'un polyphénol donné sous forme purifiée. Les extraits végétaux enrichis en polyphénols comprennent donc des combinaisons variées de polyphénols, à la fois du point de vue qualitatif et du point de vue quantitatif. Ainsi, les extraits végétaux enrichis en polyphénols comprennent un ou plusieurs io polyphénols quantitativement majoritaires, en combinaison avec une pluralité d'autres polyphénols en quantité minoritaires. Du fait du caractère variable de la constitution qualitative et quantitative en polyphénols de ces extraits végétaux, la contribution réelle d'un type de polyphénol particulier à l'effet qui est observé in vitro ou in vivo est difficile, et dans certains cas impossible, à déterminer. On ne is peut en effet jamais exclure l'existence d'effets de synergie in vitro ou in vivo entre un polyphénol quantitativement majoritaire et un ou plusieurs polyphénols quantitativement minoritaires. De manière générale, selon le type de polyphénol quantitativement majoritaire que l'on désire dans un extrait végétal final, ledit extrait est préparé à 20 partir de végétaux qui sont connus pour contenir naturellement une haute teneur du type de polyphénol d'intérêt. A titre d'exemple, certains fruits à pépins de la famille des Rosaceae, comme la pomme, sont connus pour être naturellement riches en flavanols, et plus particulièrement riches en catéchines et en oligomères et polymères de 25 catéchines, et dans une moindre mesure également riches en acides hydroxycinnamiques y compris en acide chlorogénique. La pomme est aussi connue pour posséder une faible teneur en dihydrochalcones, y compris en phloridzine, notamment dans la partie comestible du fruit. Toutefois, compte tenu de la constitution qualitative et quantitative complexe de la pomme en 30 polyphénols, la contribution de chaque type de polyphénol à ses effets globaux in vitro ou in vivo, par exemple les effets sur la glycémie, ne semble pas aujourd'hui déterminée. De manière générale, on retrouve globalement dans les extraits végétaux, y compris dans les extraits de pomme, les rapports quantitatifs d'un polyphénol à 35 un autre polyphénol qui sont initialement présents dans le fruit. On peut par exemple citer l'extrait polyphénolique de pomme décrit dans le document de brevet EP 657 169, qui contient essentiellement les composés hydrosolubles qui passent facilement dans le jus, à savoir ceux du groupe des acides hydroxycinnamiques (chlorogénique, caféique, p-coumarique) et du groupe des flavanols (catéchines et polymères de catéchine, aussi appelés procyanidols). La quercétine et les dérivés glycosylés de la phlorétine (phloridzine) sont présents en faibles proportions. Dans des cas spécifiques, on recherche à enrichir la composition finale d'extrait, sélectivement en un ou plusieurs types de polyphénols. On peut citer io notamment le document de brevet FR 2 822 466 qui décrit un procédé d'obtention de polyphénols à partir de pomme ainsi que l'extrait produit final du procédé, qui est enrichi en phloridzine. On peut aussi citer le document PCT n ° WO 2007/026101, qui décrit des procédés d'obtention d'extraits polyphénoliques à partir de pomme, et plus is précisément à partir de différents constituants de la pomme tels que la peau, la pulpe ou les pépins, permettant la préparation de compositions finales de constitutions qualitative et quantitative variées en polyphénols. Ce document décrit par exemple un extrait obtenu à partir de pulpe de pomme qui est enrichi en flavanols et qui contient aussi des acides hydroxycinnamiques, des 20 dihydrochalcones et des flavonols. Cet extrait de pulpe de pomme comprend une teneur maximale en catéchines et polymères de catéchines de 10% en poids des polyphénols totaux et une teneur maximale de dihydrochalcones de 10% en poids des polyphénols totaux. On y décrit aussi un extrait enrichi en phloridzine obtenu à partir des pépins entiers de pomme. On y décrit également un extrait 25 enrichi en flavonols ainsi qu'un extrait enrichi en cires, obtenus à partir des peaux de pomme. Il existe toujours un besoin dans l'état de la technique pour de nouvelles compositions contenant des polyphénols, notamment pour une utilisation dans le domaine médical, cosmétique et alimentaire. 30 RESUME DE L'INVENTION La présente invention est relative à une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae comprenant au moins 25 pour cent en poids de polyphénols par rapport au poids total de matière sèche de ladite 35 composition, ladite composition ayant une teneur d'au moins 15 pour cent en poids d'acides hydroxycinnamiques et ladite composition comprenant une combinaison de : - au moins 15 pour cent en poids de flavonols (quercétine), - au moins 10 pour cent en poids de dihydrochalcones (phloridzine), et - au moins 15 pour cent en poids de flavanols (catéchines), les pourcentages en poids des acides hydroxycinnamiques, des flavonols, des dihydrochalcones et des flavanols étant exprimés par rapport au poids total des polyphénols. Cette invention concerne aussi l'utilisation de la composition d'extrait ci-dessus pour la fabrication de compositions pharmaceutiques, cosmétiques, alimentaires, cosméceutiques ou encore nutraceutiques. La présente invention a aussi pour objet des procédés pour la fabrication d'une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae telle que décrite ci-dessus. 15 DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION Le demandeur s'est attaché à définir la constitution qualitative et quantitative optimale en polyphénols pour une composition capable d'exercer une combinaison d'effets bénéfiques pour la santé. 20 Plus précisément, le demandeur a réalisé des travaux de recherche importants afin de mettre au point des compositions d'extraits polyphénoliques obtenues à partir de fruits à pépins appartenant à la famille des Rosaceae, et particulièrement à partir de pommes, et dont la constitution qualitative et quantitative spécifique en polyphénols permet l'obtention d'une combinaison 25 d'effets bénéfiques pour la santé humaine ou animale, incluant les effets suivants : effets anti-oxydants, régulation de la glycémie et régulation du métabolisme des lipides. On fournit selon l'invention une composition comprenant un extrait de pomme enrichi en polyphénols et ayant une teneur minimale et équilibrée en 30 certains polyphénols, ladite composition possédant notamment des activités avantageuses sur la glycémie et le métabolisme des lipides. L'invention a pour objet une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae comprenant au moins 25 pour cent en poids de polyphénols par rapport au poids total de matière sèche de ladite composition, ladite composition ayant une teneur d'au moins 15 pour cent en poids d'acides hydroxycinnamiques et ladite composition comprenant une combinaison de : - au moins 15 pour cent en poids de flavonols (quercétine), - au moins 10 pour cent en poids de dihydrochalcones (phloridzine), et - au moins 10 pour cent en poids de flavanols (catéchines), les pourcentages en poids de des acides hydroxycinnamiques, des flavonols, des dihydrochalcones et des flavanols étant exprimés par rapport au poids total des polyphénols. Dans la présente description les teneurs globales en polyphénols sont io déterminées selon la technique conventionnelle de Folin Ciocalteu. Dans la présente description, les teneurs en chacun des polyphénols de types dihydrochalcones, flavonols, flavanols et acides hydroxycinnamiques est déterminée par la technique conventionnelle de chromatographie en phase liquide à haute pression (HPLC). is Dans la présente description, les teneurs en acides hydroxycinnamiques sont exprimées en équivalent d'acide chlorogénique. Dans la présente description, les teneurs en flavonols sont exprimées en équivalent de quercétine. Dans la présente description, les teneurs en dihydrochalcones sont 20 exprimées en équivalent de phloridzine. Dans la présente description, les teneurs en flavanols sont exprimées en équivalent de catéchines. De manière surprenante, on a montré selon l'invention que la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus, lorsqu'elle est 25 administrée in vivo, possède des effets bénéfiques sur la glycémie. Notamment, on a montré dans les exemples que la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus est capable de réguler le taux de glycémie postprandiale, et plus précisément la dernière phase de la glycémie postprandiale, c'est-à-dire environ une heure à deux heures après le 30 repas. De plus, on a montré que la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus possède une cytotoxicité réduite, en comparaison avec la cytotoxicité d'autres extraits polyphénoliques de pomme, en particulier des extraits polyphénoliques ayant des teneurs déséquilibrées en certains polyphénols, y compris un extrait polyphénolique de pomme enrichi en phloridzine. On a aussi montré selon l'invention que la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus possède des activités d'inhibition de la différenciation cellulaire, en particulier une activité d'inhibition de la différenciation des adipocytes. On a également montré que la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus possède d'autres activités en relation avec le métabolisme des lipides, y compris une activité d'inhibition de le lipogenèse et io une activité d'inhibition de l'accumulation des lipides. Il a en particulier été montré que les activités de la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus en relation avec le métabolisme des lipides n'est pas corrélé avec la teneur en dihydrochacones, et en particulier avec la teneur en phloridzine. is Sans vouloir être lié par une quelconque théorie, le demandeur pense que, dans l'effet global de la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus, qui est apporté par la combinaison des différents types de polyphénols que cette composition contient, la teneur minimale en acides hydroxycinnamiques, en particulier d'acide chlorogénique, et la teneur minimale 20 en flavonols, en particulier de quercétine, ont un rôle important. D'ailleurs, la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus possède une constitution originale en ce qu'elle comprend une teneur minimale élevée à la fois en acides hydroxycinnamiques, y compris en acide chlorogénique, en dihydrochalcones, y compris en phloridzine, et en 25 flavonols, y compris en quercétine. On a aussi montré dans les exemples que la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus ne possédait aucun effet pro-inflammatoire. En conséquence, du fait de sa cytotoxicité réduite et de l'absence d'effet 30 pro-inflammatoire, la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus est susceptible d'être administrée sans danger à l'homme ou à l'animal, en particulier les mammifères non humains, puisque peu d'effets indésirables ou même aucun effet indésirable sont susceptibles d'être provoqués. On a aussi montré selon l'invention que la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus entraînait pas ou peu de fluctuations dans l'expression des gènes codant respectivement les isoformes endothéliale (eNOS) et neuronale ou centrale (cNOS) de l'enzyme synthétase de l'oxyde nitrique, ce qui confirme que ladite composition n'est pas susceptible d'entraîner d'effets indésirables. De plus la surexpression, faible et transitoire, de l'isoforme eNOS qui est induite par la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus serait en faveur d'un effet bénéfique potentiel dans le cas d'hypertension ainsi que d'un effet bénéfique potentiel anti- io thrombotique et anti-athérosclérose. De plus, les effets anti-oxydants combinés des différents polyphénols compris dans la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus sont susceptibles de conférer à ladite composition une valeur importante pour réduire la teneur de l'organisme en radicaux libres, y is compris en radicaux libres intracellulaires, qui peuvent être générés dans des situations pathologiques ou non pathologiques, y compris lors de l'entraînement sportif. Ainsi, la composition d'extrait de l'invention est susceptible de favoriser un effet avantageux sur le métabolisme glucidique, la glyconéogénèse, la 20 thermogénèse et les fonctions respiratoires. Sans vouloir être lié par une quelconque théorie, le demandeur pense que les diverses activités avantageuses de la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus pourraient être reliée notamment à la teneur minimale en acides hydroxycinnamiques, qui est significativement 25 supérieure à la teneur en ces composés qui est classiquement retrouvée dans les extraits polyphénoliques de pomme connus. De plus, le demandeur pense que les divers effets avantageux de la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus sont susceptibles d'être liés aux quantités équilibrées de chacun des quatre types 30 importants de polyphénols que cette composition contient, qui, à la connaissance du demandeur, ne sont retrouvées dans aucun autre extrait polyphénolique de pomme ayant ces teneurs minimales en polyphénols. En d'autres termes, le demandeur pense que les divers effets avantageux de la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci- 35 dessus sont dus à la fois (i) au caractère équilibré des teneurs en acides hydroxycinnamiques, en flavonols, en dihydrochalcones et en flavanols et (ii) à la teneur minimale en chacun de ces quatre types de polyphénols, laquelle, sans entraîner de toxicité pour l'individu, est physiologiquement active. On note aussi que la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus comprend une teneur minimale en acides hydroxycinnamiques, y compris en acide chlorogénique, polyphénol connu pour son activité de régulation du métabolisme des sucres, et notamment pour son activité d'inhibition de la glyconéogénèse. On peut également souligner la teneur minimale en flavonols, y compris en quercétine, polyphénols connus pour leur Io acticité d'inhibition de la glycémie. Selon certains modes de réalisation préférés, la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus comprend au moins 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50 ou 55 pour cent en poids d'acides hydroxycinnamiques, par rapport au poids total des polyphénols contenus dans ladite composition. Dans is certains modes de réalisation, ladite composition peut comprendre 60 pour cent en poids d'acides hydroxycinnamiques, par rapport au poids total des polyphénols. Selon certains modes de réalisation préférés, la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus comprend au moins 15, 20, 20 25 ou 30 pour cent en poids de flavonols, y compris de quercétine, par rapport au poids total des polyphénols. Dans certains modes de réalisation, ladite composition peut comprendre 35 pour cent en poids de flavonols, y compris de quercétine, par rapport au poids total des polyphénols. Selon certains modes de réalisation, la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des 25 Rosaceae ci-dessus comprend au moins 15 ou 20 pour cent en poids de dihydrochalcones, y compris de phloridzine, par rapport au poids total des polyphénols. Dans certains modes de réalisation, ladite composition peut comprendre 25 pour cent en poids de dihydrochalcones, y compris de phloridzine, par rapport au poids total des polyphénols. 30 Selon certains modes de réalisation, la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus comprend au moins 15 ou 20 pour cent en poids de flavanols, y compris de catéchines, par rapport au poids total des polyphénols. Dans certains modes de réalisation, ladite composition peut comprendre 25 pour cent en poids de flavanols, y compris de catéchines, par 35 rapport au poids total des polyphénols. Selon un autre aspect, la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus comprend au moins 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70 ou 75 pour cent en poids de polyphénols totaux, par rapport au poids total de matière sèche de ladite composition. Dans certains modes de réalisation, ladite composition peut comprendre 80 pour cent en poids de polyphénols, par rapport au poids total de matière sèche de ladite composition. Dans certains modes de réalisation préférés, la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus comprend au moins 25 pour cent en poids de polyphénols totaux, par exemple de 30 à 80 pour cent en poids Io de polyphénols totaux, par rapport au poids total de matière sèche de la composition, et comprend : - au moins 15 pour cent en poids, par exemple de 30 à 60 pour cent en poids, d'acides hydroxycinnamiques (acide chlorogénique), - au moins 15 pour cent en poids, par exemple de 25 à 35 pour cent en poids, de 15 flavonols (quercétine), - au moins 10 pour cent en poids, par exemple de 20 à 30 pour cent en poids, de dihydrochalcones (phloridzine et autres dérivés de la phlorétine), et - au moins 10 pour cent en poids, par exemple de 15 à 25 pour cent en poids, de flavanols (catéchines), 20 les pourcentages en poids d'acides hydrpxycinnamiques, des flavonols, des dihydrochalcones et des flavanols étant exprimés par rapport au poids total des polyphénols. Selon certains modes de réalisation préférés, la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus comprend une quantité 25 sensiblement équivalente de chacun des quatre types de polyphénols d'intérêt. Ainsi, les compositions d'extrait préférées de l'invention englobent les compositions dans lesquelles les polyphénols d'intérêt sont présents dans les teneurs suivantes : - de 20 à 30 pour cent en poids d'acides hydroxycinnamiques, y compris 30 d'acide chlorogénique, - de 20 à 30 pour cent en poids de flavonols, y compris de quercétine, - de 20 à 30 pour cent en poids de dihydrochalcones, y compris de phloridzine, et - de 20 à 30 pour cent en poids de flavonols, y compris de catéchines, 2935096 l0 les pourcentages en poids étant exprimés par rapport au poids total desdits polyphénols d'intérêt dans la composition. Une composition particulièrement préférée de l'invention comprend une teneur de 25 pour cent en poids de chacun des quatre polyphénols d'intérêt, par 5 rapport au poids total desdits polyphénols d'intérêt dans la composition. Divers procédés ont été mis au point selon l'invention afin d'obtenir directement, à partir d'une matière première du fruit à pépins de la famille des Rosaceae, les compositions d'extraits décrites ci-dessus. Des illustrations spécifiques de ces procédés sont décrits dans les exemples. io Les caractéristiques des divers procédés d'obtention des compositions d'extrait qui sont divulgués dans la présente description ne sont pas nécessairement limitatives. Les procédés qui sont divulgués dans la présente description, et particulièrement les procédés décrits dans les exemples, peuvent être adaptés par l'homme du métier au vu de ses connaissances générales. is Les fruits à pépins de la famille des Rosaceae sont choisis préférentiellement parmi les pommes, les coings, les nèfles, les poires et les cormes. Préférentiellement, une composition d'extrait selon l'invention consiste en une composition d'extrait de pomme, et de manière tout à fait préférée, de 20 pomme à cidre. De manière générale, un procédé d'extraction permettant l'obtention des compositions d'extrait selon l'invention est caractérisé par le fait qu'on utilise des pommes matures ou non matures, des co-produits et sous-produits de transformation des pommes, différents tissus de pomme (peaux, pépins, pulpe). 25 De manière préférée, on utilise des pommes à cidre, et particulièrement des pommes à cidre choisies parmi les variétés couramment exploitées dans l'Ouest de la France, principalement en Normandie et en Bretagne. A titre illustratif, on utilise des pommes à cidre d'une variété choisie parmi les variétés suivantes : Amère nouvelle, Armagnac (aigre), Doux Corier, Marseigna, 30 Normandie Blanc, Pomme du Verger, Blanquette, Dello, Doudazin, Germaine, Maman Lili, Normandie Blanc ; Passe Reine, Peaud'Ane, Pomme du Verger, Poire, Président ou encore Roguet Rouge Judor, Petit Jaune, Binet Rouge, Juliana, Clozette, Avrolles, Dous Moen, Antoinette, Bedan, Dabinett, Douce Coet Ligné, Chevalier Jaune, Jeanne Renard, Kermerrien. Préférentiellement, la composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae ci-dessus se présente sous la forme d'une poudre, par exemple une poudre fine ou bien une poudre granulée. La présente invention est également relative à un procédé d'obtention d'une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae telle que décrite ci-dessus, ledit procédé comprenant les étapes suivantes : a) les matières premières fraîches ou sèches sont broyées à la granulométrie désirée. b) le produit broyé est pressé et/ou extrait à l'eau ou un mélange eau/solvant io organique. Les solutions d'extraction peuvent être rendues acides ou basiques par apport du réactif approprié. Les solvants organiques peuvent être choisis parmi l'éthanol, le méthanol, l'acétone, l'acétate d'éthyle, l'hexane et l'éther de pétrole. De préférence, on utilise des solvants compatibles avec l'alimentation humaine, tel que l'éthanol agricole. 15 c) les résidus de pressage ou d'extraction issus de l'étape b) peuvent subir des extractions supplémentaires avec le même solvant ou un solvant différent. d) les jus de pressage et d'extraction obtenus à l'étape b), et à l'étape c) lorsque l'étape c) est réalisée, sont réunis, éventuellement acidifiés puis clarifiés par centrifugation, filtration, ultrafiltration ou toute autre technique 20 permettant la réalisation de l'opération. e) les jus de pressage et d'extraction peuvent subir une étape de collage visant à éliminer spécifiquement la majeure partie des polymères de catéchines (tanins). f) le jus clarifié obtenus à l'étape d), et/ou à l'étape e) lorsque l'étape e) est 25 réalisée, est éventuellement distillé pour éliminer le solvant d'extraction puis concentré et séché. g) Pour améliorer le taux de polyphénols dans la poudre finale, le jus débarrassé des éventuels solvants organiques obtenu à l'étape f) est préférentiellement passé sur un support type résine adsorbante, résine 30 échangeuse d'ions, polyvinyle propylène (PVP), charbon actif ou tout autre support permettant une adsorption/désorption sélective des polyphénols. Au besoin, on peut adapter les pH d'équilibrage de l'adsorbant et du jus clarifié pour une adsorption/désorption plus sélective des différents groupes de polyphénols. g) le complexe support adsorbant/polyphénols est lavé à l'eau acidulée ou non pour éliminer les composés indésirables (sucres, polysaccharides, acides aminés, acides organiques, protéines, minéraux...). h) l'eau acidulée et les contaminants résiduels retenus dans le volume mort du support adsorbant sont éliminés par lavage à l'eau. i) les polyphénols sont désorbés du support adsorbant par une solution d'éthanol ou tout solvant organique type acétone, méthanol, acétate d'éthyle ou solutions acide/base permettant d'atteindre cet objectif. j) pour une séparation sélective de certains groupes de polyphénols on utilise io préférentiellement des paliers successifs de concentrations croissantes de solvant. k) les phases liquides obtenues, contenant les polyphénols, sont distillées pour récupérer séparément les solvants et les concentrés polyphénoliques. I) les concentrés obtenus sont séchés par atomisation, lyophilisation ou tout is autre procédé de séchage permettant d'obtenir une poudre préservant la qualité des actifs. Dans certains de ses modes de réalisation, le procédé d'obtention d'une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae comprend les étapes suivantes : 20 a) l'extraction à l'eau, au mélange eau/solvant ou au solvant organique b) la distillation de l'extrait pour éliminer le solvant organique c) l'ajustement du pH, la clarification et/ou collage de l'extrait désolvantisé d) la purification et/ou le fractionnement des polyphénols sur support adsorbant permettant leur adsorption/désorption totale ou sélective 25 e) la distillation et la concentration permettant d'éliminer le solvant organique de désorption f) le mélange des concentrés de différents groupes polyphénoliques selon les proportions recherchées. g) le séchage approprié préservant la qualité des polyphénols. 30 Avec le procédé ci-dessus, les conditions d'extraction et de solubilisation optimale des composés polyphénoliques ont rendu possible la fabrication des compositions d'extrait définies dans la présente description. Une caractéristique particulièrement intéressante de certains modes de réalisation du procédé décrit ci-dessus est le fait que l'on utilise le principe de la 35 chromatographie par palier pour séparer les groupes de polyphénols et ainsi écarter majoritairement certains composés comme les procyanidines tout en préservant les autres composants dans le produit final. Comme cela est montré dans les exemples, et en particulier dans les exemples 5 et 6 ci-après, des compositions d'extrait conformes à l'invention peuvent être obtenues par (i) extraction sélective des divers types de polyphénols d'intérêt, puis (ii) mélange des produits d'extraction sélective en des proportions choisies. La présente invention a également pour objet un procédé pour la fabrication d'une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae comprenant les étapes suivantes : a) mise en contact de la matière première de départ en solution dans un solvant approprié sur une résine adsorbante du type styrène-divinylbenzène ; b) élution d'une première fraction enrichie en acides hydroxycinnamiques avec un solvant aqueux comprenant de 15% à 25% en poids d'éthanol, et 1s récupération de ladite première fraction, puis obtention d'une poudre de ladite première fraction par élimination du solvant aqueux, c) élution d'une seconde fraction enrichie en flavanols avec un solvant aqueux comprenant de 35% à 45% en poids d'éthanol, et récupération de ladite seconde fraction, puis obtention d'une poudre de ladite seconde fraction par 20 élimination du solvant aqueux, d) élution d'une troisième fraction enrichie en dihydrochalcones et en flavonols avec un solvant aqueux comprenant de 60% à 80% en poids d'éthanol, et récupération de ladite troisième fraction, puis obtention d'une poudre de ladite troisième fraction par élimination du solvant aqueux, 25 e) préparation d'une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae telle que définie dans la présente description par mélange des poudres obtenues respectivement aux étapes b), c) et d), dans des proportions appropriées. La matière première de départ peut être choisie parmi un marc de pomme, 30 une fraction enrichie en peaux de pomme, des pépins de pomme entiers, des coques de pépins, des amandes de pépins décortiqués, un jus de pomme, ou un mélange de deux, ou plus de deux, des matières premières précitées. Préférentiellement, la matière première de départ consiste en un jus de pomme, par exemple un jus de pomme brut, ou un jus de pommes dans lequel 35 ont été préalablement éliminées les matières solides en suspension. Les matières solides en suspension peuvent être éliminées par des techniques classiques telles que clarification ou collage. Avantageusement, la résine adsorbante utilisée à l'étape a) cinsiste en une résine de type styrène-divinylbenzène ayant un diamètre moyen de pores de 100 Angstrôms. A titre illustratif, on peut utiliser la résine Amberlite� XAD-1600N commercialisée par la société Rohm and Haas (Paris, France). Préférentiellement, le solvant utilisé à l'étape a) est de l'eau. Dans les modes de réalisation du procédé dans lesquels la matière première de départ est un jus de pomme, le solvant eau est déjà contenu dans ladite matière première de départ. Préférentiellement, la matière première en suspension liquide ou en solution est ajustée à un pH allant de 6 à 7,5, préférentiellement à pH 7. Préférentiellement, le solvant utilisé dans les étapes b), c) et d), dans le mélange solvant/éthanol, est de l'eau. A l'étape b), l'élution est réalisée de préférence avec un solvant comprenant 20% en poids d'éthanol. A l'étape c), l'élution est réalisée de préférence avec un solvant comprenant 40% en poids d'éthanol. A l'étape d), l'élution est réalisée de préférence avec un solvant 20 comprenant 70% en poids d'éthanol. A chacune des étapes b), c) et d), l'élimination du solvant est préférentiellement réalisée par distillation, puis éventuellement séchage final, par exemple par séchage dans une tour d'atomisation. Avantageusement, chacune des étapes b), c), d) et e) est suivie d'une 25 étape d'analyse du contenu de la poudre obtenue en polyphénols, et dans tous les cas du contenu en chacune des classes de polyphénols d'intérêt, à savoir les acides hydroxycinnamiques, les flavonols, les dihydrochalcones et les flavanols. A l'étape e), on prépare une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae telle que définie dans la présente description, 30 préférentiellement une composition d'extrait de pomme, en adaptant les quantités de chacune des poudres de la première, seconde et troisième fractions afin d'avoir la teneur désirée en polyphénols dans la composition finale. A la fin de l'étape e), on peut obtenir, si désiré, une composition d'extrait conforme à l'invention comprenant 25% en poids de chaque classe de polyphénols acides hydroxycinnamiques, flavonols, dihydrochalcones et flavanols, par rapport au poids total des polyphénols précités. La présente invention est aussi relative à un procédé pour la fabrication d'une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae comprenant les étapes suivantes : a) préparation d'une fraction enrichie en acides hydroxycinnamiques selon un procédé comprenant les étapes suivantes : a1) mise en contact de la matière première de départ en solution dans un solvant approprié et ajustée à un pH acide sur une résine adsorbante du io type styrène-divinylbenzène également ajustée à un pH acide, le pH acide consistant en un pH allant de 2;0 à 3,0, de préférence 2,5, a2) élution d'une première fraction enrichie en acides hydroxycinnamiques avec un solvant aqueux comprenant de 30% à 50% en poids d'éthanol, et récupération de ladite première fraction, puis obtention d'une poudre de is ladite première fraction par élimination du solvant aqueux, b) préparation d'une seconde fraction enrichie en flavanols et d'une troisième fraction enrichie en flavonols et en dihydrochalcones, selon un procédé comprenant les étapes suivantes : b1) mise en contact de la matière première de départ en solution dans un 20 solvant approprié et ajustée à un pH basique sur une résine adsorbante du type styrène-divinylbenzène également ajustée à pH basique, le pH basique consistant en un pH allant de 6,5 à 7,5, b2) élution d'une seconde fraction enrichie en flavanols, avec un solvant aqueux comprenant de 35% à 45% en poids d'éthanol, et récupération de 25 ladite seconde fraction, puis obtention d'une poudre de ladite seconde fraction par élimination du solvant aqueux, b3) élution d'une troisième fraction enrichie en flavonols et dihydrochalcones, avec un solvant aqueux comprenant de 65% à 75% en poids d'éthanol, et récupération de ladite troisième fraction, puis obtention 30 d'une poudre de ladite troisième fraction par élimination du solvant aqueux, c) préparation d'une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae telle que définie dans la présente description par mélange des poudres obtenues respectivement aux étapes a) et b), dans des proportions appropriées. Les conditions générales du procédé ci-dessus, en particulier la nature des matières premières de départ, la nature des solvants utilisés, la nature de la résine adsorbante, etc., sont le mêmes que ceux décrits pour le procédé d'obtention de fractions enrichies en polyphénols qui a été précédemment décrit. A l'étape a1) le pH acide est avantageusement de 2,5. A l'étape a2), on utilise préférentiellement un solvant aqueux comprenant 40% en poids d'éthanol. A l'étape b1) le pH basique est préférentiellement de 7. A l'étape b2), on utilise préférentiellement un solvant aqueux comprenant 40% en poids d'éthanol. A l'étape b3), on utilise préférentiellement un solvant aqueux comprenant 70% en poids d'éthanol. A l'étape c), on prépare une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae telle que définie dans la présente description, is préférentiellement une composition d'extrait de pomme, en adaptant les quantités de chacune des poudres de la première, seconde et troisième fractions afin d'avoir la teneur désirée en polyphénols dans la composition finale. A la fin de l'étape c), on peut obtenir, si désiré, une composition d'extrait conforme à l'invention comprenant 25% en poids de chaque classe de 20 polyphénols acides hydroxycinnamiques, flavonols, dihydrochalcones et flavanols, par rapport au poids total des polyphénols précités. Les extraits selon l'invention sont obtenus par le procédé décrit ci-dessus, de préférence à partir de pommes ou d'autres fruits de la famille des Rosaceae, leurs sous-produits, des fractions spécifiques de tissus (peaux, pulpe, pépins, 25 coques de pépins) ou un mélange approprié de ces fractions. Le but de ce mélange étant d'obtenir un extrait riche et équilibré en les trois composants recherchés que sont l'acide chlorogénique, la quercétine et la phloridzine. Les extraits de plantes de qualité alimentaire ayant les caractéristiques décrites et obtenus selon le procédé décrit dans la présente invention sont 30 utilisables dans des applications orales ou topiques en tant qu'ingrédients alimentaires, compléments alimentaires, nutraceutiques ou cosmétiques. Les extraits riches en acide chlorogénique et équilibrés en quercétine et phloridzine selon l'invention manifestent des propriétés anti-oxydantes, antiradicaux libres, anti-UV. Plus particulièrement, les extraits selon l'invention 35 manifestent des propriétés de régulation de l'assimilation intestinale et cellulaire de nutriments comme les sucres. Ces extraits régulent également la glyconéogenèse hépatique et manifestent globalement des propriétés de contrôle du poids, des effets minceur, anti-cellulite et anti-obésité. De par leur composition et leurs propriétés, les extraits selon l'invention sont également utilisables dans des formulations pour le confort respiratoire et la gestion de l'effort physique. La présente invention a également pour objet des compositions alimentaires, compléments alimentaires, nutraceutiques, cosmétiques comprenant entre autres l'un des extraits riches en acide chlorogénique et io équilibrés en quercétine et phloridzine comme précédemment décrits. Une originalité intéressante des extraits selon la présente invention est qu'ils sont particulièrement appauvris en procyanidines polymères de catéchine. De ce fait, les effets indésirables de ces composés dans les formulations alimentaires et cosmétiques à savoir la couleur, l'amertume, l'astringence, le pouvoir tannant et is complexant des protéines sont sensiblement diminués. Les compositions selon l'invention peuvent être utilisées par voie orale ou topique. Selon le mode d'utilisation, les compositions selon l'invention se présenteront sous l'une des formes habituellement utilisées en ingestion orale ou en cosmétique. Les compositions selon l'invention peuvent notamment être 20 formulées sous forme de gélules, capsules, tablettes, laits, lotions, crèmes, gels, boissons, produits laitiers, confiseries, biscuiterie ou toute autre formulation permettant leur utilisation orale ou topique. Les compositions alimentaires, compléments alimentaires, nutraceutiques ou cosmétiques de la présente invention sont formulées par les procédés et technologies utilisés 25 traditionnellement par le professionnel de l'art suivant les applications auxquelles elles sont destinées. Caractéristiques des compositions comprenant une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae 30 Dans le cas des applications dermatologiques, les compositions selon l'invention peuvent être combinées avec d'autres compositions connues, du type écran solaire, pour gérer efficacement l'état de la peau. Les compositions dermatologiques réalisées selon la présente invention comprennent au moins l'un des extraits de pommes, obtenus selon le procédé de l'invention, ou bien 35 des extraits de pommes obtenus selon l'enseignement de la demande PCT n° WO 2007/026101, à une concentration suffisante permettant d'obtenir les effets recherchés. Pour les extraits riches en polyphénols et/ou acide ursolique, il s'agira d'apporter les quantités suffisantes permettant de neutraliser les radicaux libres et d'observer un effet anti-stress oxydatif, anti-âge, anti-vieillissement. Pour les extraits polyphénoliques particulièrement riches en acide chlorogénique, en quercétine et/ou en phloridzine, en plus de l'action contre les radicaux libres, les compositions pourront apporter les quantités suffisantes pour obtenir des effets bénéfiques au niveau de la régulation des métabolismes lipidique et glucidique, la minceur, l'action anti-cellulite et l'action anti-ostéoporose. En plus des actifs de pomme, les compositions selon la présente invention peuvent comprendre les supports/vecteurs, texturants, colorants, arômes, conservateurs sanitairement et pharmaceutiquement acceptables, connus du professionnel de l'art. Dans le cas des applications nutraceutiques, alimentaires, compléments alimentaires, cosméceutiques, les compositions selon la présente invention sont 1s utilisées seules ou en combinaison avec d'autres actifs bénéfiques, à des concentrations suffisantes pour obtenir les effets recherchés contre, à titre indicatif, l'état de vieillissement du corps, l'ostéoporose, l'obésité, l'excès de poids. A titre indicatif mais non limitatif, les effets recherchés peuvent être la neutralisation des radicaux libres, le rétablissement ou l'augmentation du statut 20 (potentiel) antioxydant plasmatique, la diminution du stress oxydatif, l'amélioration du remodelage tissulaire, particulièrement le remodelage dermique, la diminution de poids, la prévention de l'ostéoporose et des effets indésirables de la ménopause, la prévention ou la diminution de la cellulite. Dans les compositions topiques et/ou orales, selon la présente invention, 25 le ou les extraits de pomme sont incorporés à des taux physiologiquement efficaces compris entre 0,01 et 50%, de préférence entre 0,1 et 10% plus préférentiellement entre 0,2 et 5%. Tout vecteur et/ou support de formulation, texturant, colorant, stabilisant, arôme, conservateur, conformes à l'usage et la réglementation des produits destinés à la consommation ou à l'application 30 topique peut être utilisé dans la réalisation des compositions. Les compositions topiques selon la présente invention peuvent comprendre un ou plusieurs agents hydratants habituellement utilisés pour faciliter l'hydratation de la peau et inhiber ou prévenir la perte cutanée en eau. La composition topique peut aussi comprendre des composants acides exfoliants habituellement utilisés par 35 l'homme de l'art comme par exemple les acides de fruits. Le terme � taux physiologiquement efficace � signifie ici la quantité d'actifs de pomme permettant d'obtenir les bénéfices escomptés dans le management de l'état dermatologique ou l'état général de l'organisme. Il est entendu pour le spécialiste de l'art que cette quantité d'actifs peut varier en fonction de l'individu et de son état cutané. L'importance des doses d'actifs ou le nombre d'utilisations journalières d'une composition donnée dépendra de la sensibilité des personnes et de la voie d'administration. Les doses et leur fréquence peuvent être aussi fonction de l'âge, du poids, de l'état de santé et de la réponse de chaque individu. Pour une administration par voie orale, les taux d'incorporation des actifs de pomme seront entre 5 mg et 1 000 mg, de préférence entre 25 et 500 mg et plus préférentiellement entre 50 et 400 mg. Les voies d'administration des actifs de pomme sont celles généralement recommandées par l'homme de l'art. De préférence, on utilise les voies topique et orale. Les formes de présentation des compositions peuvent être, à titre 1s indicatif mais non limitatif, des tablettes, gélules, capsules, ampoules, dispersions, suspensions, solutions aérosols, spray, éponges, cotons applicateurs, patches, pâtes, gels, lotions, sirops, onguents, poudres, granules, crèmes. Les compositions, selon l'invention, peuvent être préparées par l'une ou 20 l'autre des méthodes connues par le spécialiste de l'art. Ces méthodes incluent l'association d'un support/vecteur avec les actifs de pomme, ainsi que les autres ingrédients, additifs et auxiliaires technologiques nécessaires à la réalisation des formules stables adaptées au mode d'utilisation envisagé. Les actifs et autres ingrédients sont formulés grâce aux appareils et dans les ordres habituels de 25 mélanges, agitations, texturation, émulsification, foisonnement, conditionnement... connus du professionnel de l'art. En plus des formes habituelles de formulation et conditionnement, les compositions selon l'invention peuvent être réalisées dans les formulations particulières adaptées pour une protection des actifs, leur transport dans l'organisme et leur libération progressive 30 et contrôlée dans le temps au niveau de la zone cible, telles décrites par exemple dans les brevets US 6,630,163 ;US 5,591,767 ; US 3,536,809 ; US 4,008,719 ; US 5,354,556. Les formes particulières de formulation peuvent comprendre une étape d'encapsulation, de piégeage dans une autre macromolécule ou une structure de complexes moléculaires des types 35 cyclodextrine, liposomes, globule lipoprotéique ou micro-bille gélifiée. Les formes particulières de formulation stabilisée peuvent aussi comprendre une étape de liaison covalente entre les actifs de l'extrait de pomme et une autre molécule de protection ou de transport type ester d'acide gras ou liaison protéique. Les exemples ci-après illustrent les procédés, les extraits et les applications de l'invention sans être limitatifs. EXEMPLES Exemple 1 : Préparation d'une composition d'extrait de pomme io Un volume de 100 Kg de marc sec de pomme sont extraits avec 1400 litres d'eau chauffée à 70°C pendant 1 heure. Le mélange est séparé par filtration sur un tamis de 100 pm pour obtenir 1100 litres de filtrat. Le filtrat est clarifié sur une centrifugeuse à assiettes pour obtenir 1078 litres. Ce volume clarifié est microfiltré sur une installation pilote d'ultrafiltration is équipée de membranes minérales tubulaires pour récupérer 1000 litres de permeat. Le perméat est passé sur une colonne de 15 litres de résine adsorbante XAD-1600 préalablement lavée et équilibrée dans de l'eau. L'éluat décoloré est collecté. Après passage de la totalité du perméat d'ultrafiltration, la colonne est 20 lavée avec 2 volumes d'eau chaude. L'éluat décoloré et l'eau de lavage sont mélangés et acidifiés avec de l'acide citrique 0,5%. Cette préparation contient essentiellement de l'acide chlorogénique non fixé par la résine. De l'éthanol dilué à 25% est passé sur la colonne pour décrocher la majeure partie des catéchines et leurs polymères de 25 procyanidols. L'alcool, les catéchines et leurs polymères résiduels retenus dans le volume mort de la colonne sont éliminés par lavage avec 2 volumes d'eau. La colonne est ensuite équilibrée par 2 volumes de solution d'acide citrique 0,5% dans l'eau. 30 L'éluat décoloré et acidifié issu du passage du perméat UF est repassé sur la colonne pour fixer les acides phénoliques (essentiellement l'acide chlorogénique). Les éléments indésirables (sucres, acide malique, minéraux, acides aminés...) sont éliminés par lavage de la colonne avec 2 volumes d'eau 35 acidulée. L'acide citrique retenu dans le volume mort est éliminé par lavage avec 2 volumes d'eau. Les polyphénols retenus dans la colonne sont élués par passage de 1,5 volumes d'une solution d'éthanol dilué à 70%. L`éthanol et les polyphénols résiduels retenus dans le volume mort de la colonne sont évacués par pousse avec 1,5 volumes d'eau. La totalité de l'extrait alcoolique (45 litres) est distillé et concentré sur évaporateur rotatif pour obtenir 1 Kg de concentré. Le concentré est congelé et lyophilisé pour récupérer 295 g de poudre. L'analyse des polyphénols dans la io poudre donne les résultats suivants 33,4% de polyphénols totaux par dosage colorimétrique au Folin avec de l'épicatéchine comme étalon ou 69,5 avec l'acide chlorogénique comme étalon. 23,46 % de polyphénols totaux par dosage HPLC dont 15 ° 18,5% d'acides hydroxycinnamiques (acide chlorogénique) ° 21,6% de flavonols (quercétine) ° 16,8% de dihydrochalcones (phloridzine) ° 43,1% de flavanols (catéchines et polymères de catéchines) 20 Exemple 2 : Préparation d'une composition d'extrait de pomme Du marc de pomme séché est fractionné pour obtenir 2100 Kg d'une fraction très enrichie en peaux. Les peaux sont extraites pendant 1 heure avec 27900 litres d'eau chauffée à 70 °C. 25 Les solides sont ensuite séparés de la phase liquide par passage sur un décanteur horizontal suivi d'un clarificateur centrifugeuse pour obtenir 24 000 litres. La phase clarifiée est ultrafiltrée sur membranes organiques spirales de 10 000 daltons pour récupérer 22 800 litres de perméat. Le pH du perméat est 30 ajusté à 7 avec de la soude diluée et une colonne de 200 litres de résine adsorbante XAD est également équilibrée à pH neutre. Le perméat neutralisé est passé sur la colonne pour fixer sélectivement les polyphénols basiques ou neutres. Les acides phénoliques non fixés, plus particulièrement les acides hydroxycinnamiques sont collectés dans l'éluat. De l'éthanol 30% dans l'eau est passé sur la colonne pour éliminer la majeure partie des catéchines et procyanidols. La colonne est ensuite acidifiée et équilibrée avec une solution d'acide chlorhydrique (HCI) dilué. L'éluat contenant les acides phénoliques est également acidifiés à pH 2,5 avec de l'acide chlorhydrique dilué. Cette solution acidifiée est repassée sur la colonne pour fixer les acides hydroxycinnamiques. Les éléments indésirables, notamment les sucres sont éliminés par lavage Io de la colonne avec de l'eau acidulée. L'ensemble des polyphénols retenus dans la colonne est récupéré par passage de 1,5 volumes de solution éthanol 70% suivi de 1,5 volumes d'eau. L'ensemble de cet extrait éthanolique (600 litres) est distillé et concentré pour obtenir 42 Kg de concentré. Ce concentré est séché par atomisation. is On récupère ainsi 5,6 Kg de poudre. L'analyse des polyphénols donne les résultats suivants : 36,7% de polyphénols totaux par dosage colorimétrique au Folin avec l'épicatéchine comme standard ou 47,8% avec l'acide chlorogénique comme standard. 20 26,7% de polyphénols totaux par dosage chromatographie HPLC dont 035,5% d'acides hydroxycinnamiques (acide chlorogénique) ° 26,9% de flavonols (quercétine) ° 24,3% de dihydrochalcones (phloridzine) 013,3 % de flavan-3ols (catéchines et polymères de catéchines) 25 Exemple 3 : Préparation d'une composition d'extrait de pomme Un volume de 7 tonnes de pépins de pommes séchés sont décortiquées et séparées pour obtenir 1,4 tonnes de coques. Ces coques sont mélangées à sec avec 0,7 tonnes de fraction peaux de 30 pomme séchées isolées à partir d'un marc sec entier. Le mélange est chargé dans une cuve et extrait avec un volume total de 47900 litres d'eau chaude (60 °C). Le mélange est séparé sur un décanteur horizontal et un clarificateur débourbeur pour obtenir 43 700 litres de jus clair. 35 Le jus est acidifié à pH 2,5 avec une solution d'acide citrique. Le liquide acidifié est ultrafiltré sur une installation de membranes organiques spirales de 50 KD pour récupérer 41 500 litres de perméat. Le perméat est passé sur une colonne de résine adsorbante de 200 litres préalablement équilibrée par passage de 2 volumes (400 litres) d'une solution d'acide citrique 0,5%. La colonne, dans laquelle sont retenus les polyphénols, est lavée avec 2 V de solution acide citrique 0,5%, puis lavée avec 2V d'eau pour éliminer l'acide résiduel. Les polyphénols sont décrochés par passage de 1,5V d'éthanol 70% suivi io d'une pousse avec 1,5V d'eau. Le mélange alcoolique total (600 litres) est distillée pour obtenir 33 Kg de concentré. Le concentré est séché sur une tour d'atomisation simple effet pour récupérer 5,2 Kg de poudre. Les analyses donnent 35% de polyphénols totaux par la méthode de Folin et 30% de polyphénols totaux par dosage chromatographie HPLC dont : 15 - 21,4% d'acides hydroxycinnamiques (acide chlorogénique) - 35% de flavonols (quercétine) - 27,4% de dihydrochalcones (phloridzine) - 15,2% de flavanols (catéchines et polymères de catéchines) 20 Exemple 4 : Préparation d'une composition de pomme On utilise le même mélange de matières premières ainsi que le même mode d'extraction que dans l'exemple 3. Le jus clair issu du clarificateur (centrifugeuse débourbeur) est collé avec de la gélatine à raison de 0,3 g par litre pour éliminer une partie des polymères 25 de procyanidols (tanins). La suspension obtenue est centrifugée pour éliminer l'essentiel du floculat de complexes gélatine/tanins. Le produit centrifugé est acidifié et ultrafiltré pour éliminer les colloïdes résiduels. 30 Le perméat d'ultrafiltration est passé sur la colonne de 200 litres préalablement équilibrée à pH acide. On procède ensuite comme dans l'exemple 3 pour obtenir 4,8 kg de poudre dont l'analyse des polyphénols donne 42% de polyphénols totaux par dosage colorimétrique au Folin et 36% de polyphénols totaux par 35 chromatographie HPLC dont : - 27,8% d'acides hydroxycinnamiques (acide chlorogénique) - 32,5% de flavonols (quercétine) - 33% de dihydrochalcones (phloridzine) - 6,7% de flavanols (catéchines et polymères de catéchines) On notera que pris séparément, les 3 groupes acide chlorogénique, quercétine et phloridzine sont quasiment en quantités équivalentes. Exemple 5 : Cet essai a pour but d'obtenir un extrait très riche en acides io hydroxycinnamiques (acide chlorogénique). Du jus de pomme fortement clarifié et collé de cidrerie est ajusté à pH 7 avec de la soude diluée. L'extrait basique, 100 litres, est passé sur une colonne de trois litres de résine préalablement équilibrée à pH 7. 15 L'éluat riche en acides phénoliques est collecté. La colonne est lavée avec 2 volumes d'eau neutralisée avec de la soude diluée. L'éluat et l'eau de lavage sont collectés mélangés et acidifiés à pH 2,5 avec de l'acide citrique puis passés sur une deuxième colonne de résine adsorbante de 3 litres préalablement acidifiée. 2 volumes de solution acide 20 citrique sont passés pour éliminer les éléments indésirables. Les deux colonnes sont lavées séparément avec 1,5V d'eau chacune. Les polyphénols de la colonne basique sont récupérés séparément avec deux paliers de solutions alcooliques 1,5 V d'alcool 40% suivi de 1,5 V d'eau puis 1,5 V d'alcool 70% suivi de 1,5V d'eau. 25 Les polyphénols de la colonne acide sont collectés en une seule fois avec 1,5V de 20% de solution alcoolique suivi de 1,5V d'eau. Les différents extraits alcooliques sont distillés, concentrés, congelés et séchés séparément par lyophilisation pour obtenir un extrait riche en acides hydroxycinnamiques, un extrait riche en catéchines et procyanidols et un 30 troisième extrait riche en phloridzine et quercétine. L'analyse des polyphénols révèle que l'extrait hydroxycinnamique (polyphénols acides) contient 25% de polyphénols totaux dont 66% d'acide chlorogénique par dosage HPLC. Le premier extrait de polyphénols basiques (extrait à 40% d'alcool) contient 35% de polyphénols totaux dont 54% de flavan-3ols (catéchines et procyanidols). Le deuxième extrait de polyphénols basiques (70% d'alcool) contenait 18% de polyphénols totaux dont 69% de dihydrochalcones (phloridzine). Un mélange de différentes proportions de ces extraits permet d'obtenir, de façon désirée et maîtrisée, différentes préparations riches et équilibrés en acide chlorogénique, quercétine, phloridzine et dérivés de catéchines. On peut ainsi obtenir des extraits très riches en chacun des groupes io polyphénoliques comme on peut obtenir des formules dans lesquelles les 4 groupes peuvent être repartis de façon équivalente 14, Exemple 6: Préparation d'une composition d'extrait de pomme, par séparation des types de polyphénols par chromatoqraphie et élution is sélective par paliers Dans cet exemple, l'élution par palier consiste à faire passer le jus de pomme sur la colonne adsorbante pour fixer la totalité des polyphénols, puis à décrocher progressivement les différents groupes homogènes en passant des solutions croissantes de solvants. 20 Un volume de 50 litres de jus à cidre non clarifié sont mélangés en batch dans une bassine de 70 litres avec 3 litres de résine adsorbantes XAD. Le pH de la suspension est contrôlé et ajusté à 2,5 avec une solution d'acide citrique. Le mélange résine/jus est maintenu en agitation lente pendant 30 minutes. L'agitation est ensuite stoppée et la suspension est laissée au repos pendant 10 25 minutes pour que le complexe résine/polyphénols se dépose au fond de la bassine. Le maximum de surnageant est éliminé et de l'eau acidulée est ajoutée pour une deuxième phase d'agitation lente suivie de la décantation statique. Ces étapes en batch permettent d'éliminer les éléments colloïdaux pouvant colmater 30 une colonne de chromatographie (levures de fermentation, débris cellulaires, protéines, polysaccharides...). Cette étape d'agitation en batch peut être évitée en clarifiant le jus acidifié par filtration, microfiltration ou ultrafiltration. Après élimination du deuxième surnageant la suspension pâteuse de résine est chargée dans une colonne en verre de 3 litres équipée à sa base d'un fritté poreux. La colonne de résine est lavée et stabilisée avec 6 litres (2V) d'eau acidulée, puis 2V d'eau. Les différents groupes polyphénoliques sont élués par le passage alterné de concentrations croissantes d'éthanol (5%, 10%, 20%, 40%, 70%) et lavages à l'eau. Les volumes d'alcool dilué et d'eau correspondent à 2 volumes de résine (6 litres). Les éluats alcooliques sont collectés séparément pour identifier leur composition polyphénolique. Les analyses par chromatographie HPLC montrent que les extraits à 5, 10 et 20% d'éthanol renferment majoritairement de l'acide io chlorogénique (environ 50% des polyphénols totaux) et sont dépourvus de flavonols (quercétine) et dihydrochalcones (phloridzine). L'extrait à 40% d'éthanol est constitué à plus de 76% de catéchines et procyanidines. L'extrait obtenu avec 70% d'éthanol est constitué à plus de 84%, des is seuls dihydrochalcones et flavonols dont plus de 59% en dihydrochalcones et plus de 25% en flavonols. Les extraits à 5, 10, 20 et 70% d'éthanols peuvent être mélangés selon les proportions d'acide chlorogénique, quercétine et phloridzine recherchées dans le mélange final. Ainsi, on peut obtenir un extrait très riche en acide chlorogénique 20 comme on peut arriver à constituer des formules très équilibrées de l'ordre de 1A par substance comme dans l'exemple 6. Exemple 7: Evaluation d'une composition d'extrait de pomme sur la glycémie postprandiale 25 Dans la pratique médicale, le test au glucose est l'administration orale du glucose afin de déterminer à quelle vitesse il est libéré dans le sang. A. Protocole Le test de tolérance au glucose est pratiqué durant une matinée (07h û 30 08h) étant donné que la tolérance au glucose présente un rythme diurne avec une diminution sensible dans l'après-midi. Les volontaires doivent être à jeun pendant la nuit précédente de 8-14 heures (l'eau est autorisée). A jeun, au temps zéro avant ingestion du glucose test, une mesure de glycémie (taux de sucre sanguin) est effectuée. Le volontaire ingère ensuite une solution de glucose dans les 5 minutes. La glycémie est alors mesurée à intervalles réguliers. Les produits testés sont une solution témoin de 75 g de glucose pure dans 300 ml d'eau, ainsi qu'une solution test de 300 ml contenant 75 g de glucose et 896 mg de polyphénols totaux. Sur la base de ces polyphénols totaux, l'extrait de pomme testé était équilibré en acide chlorogénique, quercétine et phloridzine avec 17,4% d'acides hydroxycinnamiques (chlorogénique), 20,8% de dihydrochalcones (phloridzine), 17,7% de flavonols (quercétine). Le reste des composés phénolique est constitué de 44,1% de flavan-3-ols (catéchines et leurs polymères). Onze candidats volontaires ont participé au test. En fin de test et en fonction des résultats, deux volontaires ont été écartés pour leurs résultats trop discordants liés probablement à des activités physiques trop importantes durant les 3 heures de tests. Les résultats analysés portent donc sur 9 personnes. B. Résultats Profil des courbes d'évolution de la glycémie Les résultats montrent peu de différences entre les glycémies mesurées pour chacun des volontaires. Durant les 90 premières minutes, l'évolution de la courbe de glycémie est semblable pour les deux produits testés (placebo et test). Pour le produit témoin (glucose seul) et au bout de 3 heures, la courbe redescend au niveau du taux à jeun de départ. Dans le cas du produit test contenant les polyphénols, la courbe ne redescend pas au niveau de la glycémie à jeun même après 3 heures suivant l'ingestion. Vitesse d'utilisation du glucose A partir de 90 minutes après ingestion des boissons, l'extrait de pomme testé semble limiter la vitesse d'utilisation du glucose. Cela se traduit par une diminution de 33% de la vitesse de disparition du sucre sanguin postprandial. Comparaison des aires sous les courbes d'évolution de la glycémie On constate que pour la dose d'extrait de pomme testée en rapport avec 75 g de glucose ingéré, il n'y a pas d'effet significatif sur la glycémie pendant les 90 premières minutes de la cinétique postprandiale. Cependant, étant donné que l'extrait de pomme diminue la vitesse d'utilisation du glucose au-delà de 90 minutes, les aires et les quantités relatives de glucose restent plus élevées pour les périodes 90-120 minutes et 120-180 minutes. Donc, d'une façon globale, on constate que la glycémie est plus élevée pour les périodes les plus éloignées de l'heure d'ingestion du produit. On sait que même en période postprandiale, le métabolisme du glucose est géré par un ensemble coordonné de réponses physiologiques. Les deux paramètres importants sont en premier lieu la régulation de la libération du sucre alimentaire dans le pool sanguin avec comme résultante un taux maximum d'absorption du sucre (pic de glycémie) et en deuxième lieu, le taux io d'assimilation ou mise à disposition du glucose dans les tissus. Ainsi, jusqu'à 30 minutes après ingestion de l'aliment, l'augmentation du glucose sanguin peut être globalement attribuée à une augmentation de sa libération dans le sang suite à l'augmentation de l'absorption intestinale. Une fois le pic maximum atteint, le métabolisme périphérique du glucose joue un rôle de plus en plus important. is Les livraisons dans les muscles et les tissus adipeux ainsi que le métabolisme hépatique vont alors avoir un effet significatif sur la concentration totale plasmatique. De ce fait, les taux observés au-delà du pic maximum de glycémie (au-delà de 30 minutes) ne peuvent pas être uniquement attribués au seul phénomène d'absorption intestinale. 20 Les résultats obtenus ici sont particulièrement spécifiques et différents de ceux observés avec d'autres extraits de plantes réputés pour réguler la glycémie. Ainsi, les études sur les extraits de café donnent des résultats souvent contradictoires. La consommation élevée de café ou l'ingestion de caféine pure auraient tendance à augmenter le taux de glucose sanguin et ce dès les 25 premières minutes de la période postprandiale (Battram et al. 2006, J. Nutr. 136 : 1276-1280 ; Robinson et al. 2004, J. Nutr. 134: 2528-2533 ; Lane et al. 2004, Diabetes Care, Vol. 27, N ° 8, 2047-2048). Par contre le café décaféiné donnerait une baisse de la courbe de glycémie et des volumes de sucre total sanguin plus faibles (Battram et al. 2006, J. Nutr. 136 : 1276-1280). 30 Les résultats de la présente étude se rapprochent plus de ceux obtenus dans certaines études avec des extraits de thé. Globalement, la consommation de l'extrait ne donne pas de différences significatives par rapport au témoin durant la première heure après ingestion du produit. Par contre, au-delà de l'heure (dans la zone de 60 à 70 minutes) on peut observer un fléchissement de 35 la courbe de glycémie en dessous du témoin suivi d'une remontée au dessus au- delà de 120 minutes (Bryans et al. 2007, Journal of American College of Nutrition, Vol. 26, N° 5, 471-477). Cette étude montre que l'extrait de pomme régule particulièrement la dernière phase de la glycémie postprandiale c'est-à-dire au moment ou interviennent les métabolismes périphériques (métabolisme hépatique, utilisations musculaires, accumulation lipidique dans les tissus graisseux). Ainsi, l'effet favorable de l'extrait ne s'expliquerait pas par la seule inhibition de l'absorption intestinale du sucre. Cette régulation se manifeste probablement au niveau de la sécrétion de l'insuline par les B-cellules pancréatiques et l'action des hormones du type digestif telles que GIP (glucose- io dependent insulinotropic-polypeptide) et GLP-1 (glucagon-like peptide-1). Cet effet tardif de l'extrait pourrait être lié au temps nécessaires aux actifs de l'extrait ou leurs métabolites pour être absorbés. On sait par exemple que certains composés phénoliques comme les catéchines apparaissent dans le sang 30 minutes après leur ingestion et le pic maximum est atteint aux environs de 60 ls minutes. Il est intéressant de noter que le maintien d'un taux plus élevé de glucose circulant durant la dernière phase de glycémie pourrait être bénéfique dans le cadre d'efforts intenses et prolongés nécessitant un apport prolongé d'énergie. 20 Exemple 8 : Essai comparatif des activités d'une composition d'extrait de pomme de l'invention avec une composition d'extrait de pomme enrichie en phloridzine L'objet de ce test était montrer que la phloridzine n'est pas le composant dominant apportant les effets recherchés sur la glycémie, la lipogenèse et le 25 risque de prendre du poids. Il s'agissait d'évaluer les effets de deux extraits de compositions différentes, particulièrement en terme de taux de phloridzine, sur la différenciation de cellules souches en adipocytes. On sait que l'une des conséquences indésirables de l'assimilation excessive de sucres par les cellules est son stockage à travers la synthèse et l'accumulation des lipides. La 30 résultante logique de cette accumulation lipidique est la constitution de couches importantes de tissus adipeux, la prise de poids et l'obésité. Le résultat attendu dans ce test est donc de vérifier que les extraits de pomme sont capables de bloquer la synthèse et l'accumulation des lipides et que l'importance de cette inhibition est liée à la composition de l'extrait. Plus particulièrement, le test vise à 35 montrer que les extraits les plus riches en phloridzine ne donnent pas forcement les meilleurs résultats. Les paramètres étudiés sont la morphologie des cellules et l'accumulation lipidique. A. Matériels et Méthodes On a réalisé un suivi morphologique de la différenciation et l'accumulation lipidique intracellulaire. Cellules utilisées Les cellules utilisées en culture sont des cellules souches poïétiques io mésenchymiales humaines (hMSC). Un test de cytotoxicité est réalisé au préalable sur les cellules non différenciées afin de sélectionner les concentrations tolérées et donc à tester. Conditions de culture cellulaire Les cellules ont été cultivées dans un incubateur pour culture is cellulaire dans une atmosphère de 5% de CO2 à la température de 37°C et à 95% d'humidité relative. Les cellules ont été ensemencées dans 3 plaques de culture cellulaire de 96 puits, à raison de 20 000 cellules hMSC par puits, en milieu de croissance. [Référence du milieu, SVP] 20 Après incubation pendant 3 jours à 37 °C, le milieu de culture a été éliminé et remplacé par un milieu de différenciation des cellules hMSC en adipocytes [Référence du milieu, SVP]. Ce milieu de différenciation contenait ou non les extraits de pomme testés. Après le temps de culture, la différenciation morphologique en adipocytes 25 est suivie sur les tapis cellulaires des plaques à l'aide d'un marqueur fluorescent spécifique des lipides intracellulaires. Pour une observation aisée, des clichés représentatifs ont été réalisés à l'aide d'une camera du type NIKON� DX-1200. Constitution qualitative et quantitative de la composition testée 30 Extrait 1 : riche et équilibré en l'ensemble des quatre groupes de composés phénoliques de la pomme Cet extrait en poudre contenait 41 % de polyphénols totaux dosés par colorimétrie selon la méthode de Folin. En dosage par chromatographie HPLC on obtient la répartition ci-après : 15% de flavanols (catéchines et leurs polymères procyanidols), soit 36,6% des polyphénols totaux 8,5% de flavonols (quercétine), soit 23,4% des polyphénols totaux 8,7% d'acides hydroxycinnamiques (acide chlorogénique), soit 21,2% des polyphénols totaux 5% de dihydrochalcones (phloridzine), soit 12,2% des polyphénols totaux Extrait 2 : très enrichi en phloridzine Cet extrait en poudre contenait 42% de polyphénols totaux par colorimétrie et 35% de dihydrochalcones (phloridzine) par chromatographie HPLC. Cela indique que la phloridzine représente 83,3% des polyphénols totaux de cet extrait. On notera que cet extrait est quasiment dépourvu d'acide chlorogénique, quercétine et dérivés de catéchines. B. Résultats Cytotoxicité préalable Les résultats de cytotoxicité et l'observation morphologique des cellules en fonction des concentrations des deux extraits ont montré que les cultures étaient plus stables en présence de l'extrait 1 équilibré en différents composés phénoliques, comparativement à l'extrait 2 fortement enrichi en phloridzine. La forte concentration en phloridzine semble donc apporter une toxicité plus marquée. Cela est peut-être lié à la propriété de dépolarisation des membranes cellulaires par la phloridzine. Ces observations ont conduit à la sélection des concentrations utilisées pour la suite du test, à savoir 0,04 mg/ml de l'extrait 1 équilibré et 0,02 mg/ml de l'extrait 2 riche en phloridzine. A noter que malgré ces deux concentrations différentes, l'extrait 2 testé à 0,02 mg/ml apporte beaucoup plus de phloridzine (7 mg/ml) comparativement à la quantité (2 mg/ml) apportée par 0,04 mg/ml de l'extrait 1. Globalement l'extrait 2 apporte 3,5 fois plus de phloridzine. Adipogenèse Comparativement au témoin différencié, les cultures cellulaires de 11 jours montrent que les deux extraits testés sont capables de réguler la modification morphologique des cellules et surtout d'inhiber la différenciation en adipocytes ainsi que l'accumulation des lipides intracellulaires. Cependant, l'extrait 1 riche en acide chlorogénique et équilibré en différents composés phénoliques est celui qui donne le meilleur résultat. Ces résultats montrent que l'inhibition de la différenciation cellulaire, de la lipogenèse et de l'accumulation des lipides n'est pas corrélée à une forte concentration de l'extrait en phloridzine. Les autres composés phénoliques, notamment l'acide chlorogénique et la quercétine, semblent jouer un rôle prépondérant. Ces résultats confirment donc clairement que la phloridzine n'est pas le composant actif essentiel et n'est donc pas le seul io élément à prendre en compte dans l'explication des effets de la pomme ou ses extraits, notamment sur l'assimilation cellulaire des sucres, la synthèse et l'accumulation lipidique. Une action synergique des différents composés semble plus appropriée. is Exemple 9 : Effet d'une composition d'extrait de pomme sur l'activité des différentes isoformes de synthétases de l'oxyde nitrique L'oxyde nitrique (NO) est l'un des médiateurs cellulaires des processus physiologiques et pathologiques. NO est synthétisé à partir de l'arginine par les enzymes synthétases de l'oxyde nitrique (NOS). On en compte trois 20 isoformes dites endothéliale (eNOS), neuronale ou centrale (nNOS ou cNOS) et inductible (iNOS). Les deux premiers sont constitutifs dans l'organisme, alors que le troisième (iNOS) est une enzyme inductible fortement exprimée par le processus inflammatoire. Alors que de faibles quantités de NO issus des isoformes constitutifs (eNOS et cNOS) sont essentielles au bon fonctionnement 25 de l'organisme, une augmentation significative du NO synthétisé par iNOS participe au déclenchement et l'amplification du processus inflammatoire. Les composés capables de réguler la synthèse de NO par les trois isoformes et plus particulièrement d'inhiber la synthèse de NO par iNOS, sont de plus en plus étudiés pour leurs effets anti-inflammatoires. De même, les substances 30 favorisant la production modérée de NO par les eNOS et nNOS, plus particulièrement par eNOS, constituent des moyens potentiels de protection de l'organisme. L'oxyde nitrique endothélial (eNO) et l'enzyme qui synthétise cette molécule (eNOS) sont importants pour la vasodilatation, la réduction de la pression sanguine, la meilleure circulation de l'oxygène, les réductions de 35 l'hypertension et des risques de maladies cardioasculaires. L'objet de ce test est 30 donc d'évaluer les effets de différentes concentrations de l'extrait testé sur l'expression des gènes des différentes NO synthétases c'est-à-dire l'oxyde nitrique synthétase I dite centrale (cNOS), l'oxyde nitrique synthétase Il dite inductible (iNOS) et l'oxyde nitrique synthétase III dite endothéliale (eNOS). A. Protocole Le produit testé est l'extrait 1 de l'exemple 8. Le test est réalisé sur des cultures de fibroblastes dermiques humains normaux âgés et sénescents. La méthode des DNA arrays simplifié � à thème io anti-âge � a été utilisée. Un test de cytotoxicité préalable a été réalisé pour déterminer les doses d'extrait tolérables et utilisables pour le test d'efficacité sur l'expression génique. Les analyses sont faites sur des cultures cellulaires de 6 heures et 24 heures. Les résultats sont exprimés en unités relatives d'expression (RE) par is rapport à un gène témoin. B. Résultats Le test préalable de cytotoxicité a permis de sélectionner les concentrations suivantes pour la suite de l'étude : 0,01 mg/ml ; 0,005 mg/ml et 20 0,0005 mg/ml Les résultats, en termes de taux d'expression des gènes des 3 isoformes, sont résumés dans le tableau 1 ci-dessous par rapport au témoin (100) 25 Tableau 1 ISOFORME CONCENTRATION DE L'EXTRAIT DE POMME 0,01 mg/ml 0,005 mg/ml 0,0005 mg/ml 6H 24H 6H 24H 6H 24H cNOS 77 63 98 49 72 69 1NOS 100 100 100 100 100 100 35 eNOS 164 133 147 107 106 111 Les résultats montrent que, quelle que soit la durée de culture cellulaire (6 ou 24 heures) et la concentration d'extrait de pomme, l'expression de la NO synthétase inductible (iNOS) est rigoureusement stable. Il est intéressant de noter que l'expression du gène de cette enzyme impliquée dans le processus inflammatoire n'est pas du tout influencée par la présence de l'extrait de pomme dans le milieu de culture. Ce qui indiquerait que l'extrait est potentiellement non inflammatoire. On constate que le gène de la NO synthétase centrale (cNOS) est réprimé io par la présence de l'extrait de pomme. Mais cette inhibition est très modérée et n'est pas corrélée à la concentration de l'extrait de pomme. L'inhibition est plus accentuée par la durée des cultures cellulaires. A 6 heures de culture on ne note que 17,7% de taux moyen d'inhibition contre 40% à 24 heures. Le gène de la NO synthétase endothéliale (eNOS) est le plus sensible à la is présence et la concentration de l'extrait de pomme. Les résultats observés dépendent également de la durée des cultures cellulaires. A 6 heures de culture cellulaire, on constate que le gène est surexprimé et que cette augmentation est corrélée à la concentration de l'extrait de pomme. Ainsi, on observe respectivement 6%, 47% et 64% d'augmentation pour 0,0005mg/ml, 0,005 mg/mi 20 et 0,01 mg/mi d'extrait de pomme. A 24 heures de culture cellulaire, on n'observe plus qu'une faible surexpression du gène eNOS. De plus, cette légère surexpression n'est plus corrélée à la concentration d'extrait de pomme, et seule la plus forte concentration d'extrait de pomme donne un résultat notable. Il est intéressant de noter que parmi les trois isoformes NOS évalués, 25 seule la eNOS impliquée dans la synthèse de l'oxyde nitrique endothéliale utilisé dans la vasodilatation et la réduction de pression sanguine et donc de l'hypertension est surexprimée. De plus, cette surexpression du gène eNOS reste relativement modérée. Ce qui va dans le sens des observations d'autres auteurs soulignant qu'il faut une synthèse modérée de eNO, car une production 30 excessive de NO aboutirait au contraire à des effets toxiques. Exemple 10 : Composition pour application topique La composition pour application topique consiste en un gel dermatologique amincissant anti-cellulite. 35 L'extrait utilisé dans cet exemple est celui obtenu dans l'exemple 2. La constitution qualitative et quantitative de la composition est décrite ci-dessous. INGREDIENTS PROPORTIONS (%) PHASE 1 Eau déminéralisée 65,33 Carbopol Ultrez 21 00,50 Sodium hydroxyde (solution 20%) 00,04 PHASE 2 Ethoxydiglycol oleate 16,00 Phenonip 00,60 Vitamine E acétate 00,30 PHASE 3 Eau déminéralisée 10,00 Extrait de l'exemple 2 05,00 PHASE 4 Novemer EC-1 01,00 Huile de pépins de pomme 00,50 PHASE 5 Yellow 6 00,20 Fragrance 00,40 Sodium hydroxyde (20%) 00,13 Procédé de préparation de la composition - préparer la solution de NaOH dans de l'eau déminéralisée - préparer les phases 2, 3 et 4 - saupoudrer le Carbopol dans l'eau (les 65,33 g), lorsqu'il est bien hydraté, le mélange à faible vitesse - neutraliser avec NaOH 15 - Ajouter la phase 2 à la phase 1 - Ajouter la phase 3 en agitant lentement jusqu'à uniformisation - Ajouter la phase 4 en agitant jusqu'à uniformisation - Ajouter les ingrédients de la phase 5 dans l'ordre en agitant jusqu'à s uniformisation Exemple 11 : Composition pour administration orale sous forme de complément alimentaire La composition pour administration orale consiste en des capsules io amincissantes anti-cellulite. L'extrait utilisé est celui de l'exemple 2 La constitution qualitative et quantitative de la composition est décrite ci-dessous. INGREDIENTS PROPORTIONS Extrait de l'exemple 2 135,00 mg Vitamine D (cholécalciférol) 70,00 IU 20 Magnésium stéarate 0,5 mg Pomelite (fibres de pomme) QSP 400 mg Exemple 12: Composition pour administration orale sous forme de boisson 25 La composition pour administration orale consiste en une eau minérale aromatisée à effet minceur. L'extrait utilisé est celui dans la fraction polyphénols acides de l'exemple 4 La constitution qualitative et quantitative de la composition est décrite ci-dessous. 30 INGREDIENTS PROPORTIONS Extrait acide de l'exemple 4 00,40 Carotène (poudre 10%) 00,15 Vitamine C (poudre) 00,20 35 Acide citrique 00,25 Vitamine E (poudre 50%) Concentré jus de pomme (70 Brix) Colorant anthocyane P Arôme pomme (poudre) Arôme citron (poudre) Eau QSP00,10 07,00 00,01 00,02 00,01 100 g Exemple 13: Composition pour administration orale sous forme de boisson pour sportif io La composition pour administration orale consiste en une boisson destinée à la gestion de l'énergie et à la protection contre le stress oxydatif provoqué par l'effort musculaire, spécialement prévue pour les sportifs. Cette composition peut être ingérée avant, pendant ou après l'effort musculaire. La constitution qualitative et quantitative de la composition est décrite cils dessous. INGREDIENTS PROPORTIONS Jus de pomme 20 Jus concentré Maltodextrines Pomeline (oligosaccharides de pomme) Pomelite (polysaccharides de pomme) Pectine HM 25 Pomactiv Shape (polyphénols de pomme) Arome ananas Vitamine C Vitamine E Caféine 30 Niacine Vitamine B-6 Vitamine B-2 Vitamine B-1 Vitamine B-12 35 237,624 g 027,000 g 012,000 g 009,000 g 009,000 g 003,000 g 001,500 g 000,600 g 000,150 g 000,050 g 000,045 g 000,025 g 000,0025 g 000,002 g 000,002 g 000,008 mg TOTAL 300,000 30 REVENDICATIONS1. Composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae comprenant au moins 25 pour cent en poids de polyphénols par rapport au poids total de matière sèche de ladite composition, ladite composition ayant une teneur d'au moins 15 pour cent en poids d'acide chlorogénique et ladite composition comprenant une combinaison de : - au moins 15 pour cent en poids de flavonols (quercétine), - au moins 10 pour cent en poids de dihydrochalcones (phloridzine), et Io - au moins 10 pour cent en poids de flavanols (catéchines), les pourcentages en poids de l'acide chlorogénique, des flavonols, des dihydrochalcones et des flavanols étant exprimés par rapport au poids total des polyphénols. 15 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50 ou 55 pour cent en poids d'acide chlorogénique, par rapport au poids total des polyphénols contenus dans ladite composition 3. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisée en 20 ce qu'elle comprend au moins 15, 20, 25 ou 30 pour cent en poids de flavonols, y compris de quercétine, par rapport au poids total des polyphénols. 4. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins 15 ou 20 pour cent en poids de dihydrochalcones, 25 y compris de phloridzine, par rapport au poids total des polyphénols. 5. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins 15 ou 20 pour cent en poids de flavanols, y compris de catéchines, par rapport au poids total des polyphénols 6. Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70 ou 75 pour cent en poids de polyphénols totaux, par rapport au poids total de matière sèche de ladite composition. 35 7. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins 25 pour cent en poids de polyphénols totaux, par exemple de 30 à 80 pour cent en poids de polyphénols totaux, par rapport au poids total de matière sèche de la composition, et comprend : - au moins 15 pour cent en poids, par exemple de 30 à 60 pour cent en poids, d'acides hydroxycinnamiques (acide chlorogénique), - au moins 15 pour cent en poids, par exemple de 25 à 35 pour cent en poids, de flavonols (quercétine), - au moins 10 pour cent en poids, par exemple de 20 à 30 pour cent en poids, de Io dihydrochalcones (phloridzine et autres dérivés de la phlorétine), et - au moins 10 pour cent en poids, par exemple de 15 à 25 pour cent en poids, de flavanols (catéchines), les pourcentages en poids de l'acide chlorogénique, des flavonols, des dihydrochalcones et des flavanols étant exprimés par rapport au poids total des 15 polyphénols. 8. Composition selon la revendication 1, dans laquelle les polyphénols d'intérêt sont présents dans les teneurs suivantes : - de 20 à 30 pour cent en poids d'acide chlorogénique, 20 - de 20 à 30 pour cent en poids de flavonols, y compris de quercétine, - de 20 à 30 pour cent en poids de dihydrochalcones, y compris de phloridzine, et - de 20 à 30 pour cent en poids de flavonols, y compris de catéchines, les pourcentages en poids étant exprimés par rapport au poids total desdits 25 polyphénols d'intérêt dans la composition. 9. Composition alimentaire, diététique, cosmétique, nutraceutique ou cosméceutique comprenant une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae selon l'une des revendications 1 à 8, en combinaison avec 30 un ou plusieurs véhicules physiologiquement compatibles. 10. Procédé pour la fabrication d'une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae, comprenant les étapes suivantes : a) mise en contact de la matière première de départ en solution dans un 35 solvant approprié sur une résine adsorbante du type styrène-divinylbenzène ;b) élution d'une première fraction enrichie en acides hydroxycinnamiques avec un solvant aqueux comprenant de 15% à 25% en poids d'éthanol, et récupération de ladite première fraction, puis obtention d'une poudre de ladite première fraction par élimination du solvant aqueux, c) élution d'une seconde fraction enrichie en flavanols avec un solvant aqueux comprenant de 35% à 45% en poids d'éthanol, et récupération de ladite seconde fraction, puis obtention d'une poudre de ladite seconde fraction par élimination du solvant aqueux, d) élution d'une troisième fraction enrichie en dihydrochalcones et en flavonols avec un solvant aqueux comprenant de 60% à 80% en poids d'éthanol, et récupération de ladite troisième fraction, puis obtention d'une poudre de ladite troisième fraction par élimination du solvant aqueux, e) préparation d'une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, par mélange des is poudres obtenues respectivement aux étapes b), c) et d), dans des proportions appropriées. 11. Procédé pour la fabrication d'une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae comprenant les étapes suivantes : 20 a) préparation d'une fraction enrichie en acides hydroxycinnamiques selon un procédé comprenant les étapes suivantes : a1) mise en contact de la matière première de départ en solution dans un solvant approprié et ajustée à un pH acide sur une résine adsorbante du type styrène-divinylbenzène également ajustée à un pH acide, le pH acide 25 consistant en un pH allant de 2;0 à 3,0, a2) élution d'une première fraction enrichie en acides hydroxycinnamiques avec un solvant aqueux comprenant de 30% à 50% en poids d'éthanol, et récupération de ladite première fraction, puis obtention d'une poudre de ladite première fraction par élimination du solvant aqueux, 30 b) préparation d'une seconde fraction enrichie en flavanols et d'une troisième fraction enrichie en flavonols et en dihydrochalcones, selon un procédé comprenant les étapes suivantes : b1) mise en contact de la matière première de départ en solution dans un solvant approprié et ajustée à un pH basique sur une résine adsorbante dutype styrène-divinylbenzène également ajustée à pH basique, le pH basique consistant en un pH allant de 6,5 à 7,5, b2) élution d'une seconde fraction enrichie en flavanols, avec un solvant aqueux comprenant de 35% à 45% en poids d'éthanol, et récupération de ladite seconde fraction, puis obtention d'une poudre de ladite seconde fraction par élimination du solvant aqueux, b3) élution d'une troisième fraction enrichie en flavonols et dihydrochalcones, avec un solvant aqueux comprenant de 65% à 75% en poids d'éthanol, et récupération de ladite troisième fraction, puis obtention io d'une poudre de ladite troisième fraction par élimination du solvant aqueux, c) préparation d'une composition d'extrait de fruits à pépins de la famille des Rosaceae selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, par mélange des poudres obtenues respectivement aux étapes a) et b), dans des proportions appropriées. 15