Brevet FR2931480A1 — publié le 20091127

ANALOGUES SYNTHETIQUES DES PHOSPHATIDYL-MYO-INOSITOL MANNOSIDES POURVUS D'UNE ACTIVITE INHIBITRICE DE LA REPONSE INFLAMMATOIRE DESCRIPTION Domaine technique La présente invention se rapporte à de nouveaux dérivés synthétiques des phosphatidyl-myo-inositol mannosides (ci-après PIM), leur procédé de préparation et leur utilisation dans la prévention ou le traitement d'une maladie associée à la surexpression de cytokines ou de chimiokines, notamment du TNF et/ou de l'IL-12. L'invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant au moins un dérivé synthétique de PIM. Dans la description ci-dessous, les références entre crochets [ ] renvoient à la liste des références présentée à la fin du texte. Etat de la technique L'inhibition de l'expression des cytokines pro-inflammatoires telles que le TNF et l'interleukine 12 (ci-après IL-12) p40 impliquées dans de nombreuses réponses inflammatoires constitue un réel besoin medical. Les indications liées à l'expression de ces cytokines incluent les maladies inflammatoires, allergiques et autoimmunes dont le polyarthrite rhumatoïde, la maladie de Crohn, la sclérose en plaque, le psoriasis, le diabète mellitus, le lupus erythematosus, le choc sceptique et les inflammations pulmonaires chroniques et aigues. Les molécules classiquement utilisées dans ces indications sont des stéroïdes. Plusieurs agents bloquants le TNF (anticorps ou récepteurs solubles) sont commercialisés depuis 2000. Quatre classes de molécules inhibant la sécrétion d'IL-12 dont des anticorps font l'objet d'un brevet/demande de brevet [1]. 2 Toutefois, les stéroïdes ont des effets secondaires qui en limitent l'application. Les anticorps monoclonaux ou récepteurs solubles sont des protéines coûteuses nécessitant des injections sous-cutanées. De plus, ces anticorps peuvent avoir des effets indésirables sur la résistance aux infections, comme cela a été montré pour les anticorps anti TNF qui peuvent induire la réactivation de la tuberculose latente. Le hyaluronan, décrit comme inhibiteur de la production d'IL-12, a un très haut poids moléculaire, est peu défini moléculairement et difficilement synthétisable [2]. Il subsiste donc un réel besoin médical pour trouver de nouveaux inhibiteurs des cytokines pro-inflammatoires telles que le TNF et l'IL-12 palliant ces défauts. Les phosphatidyl-myo-inositol mannosides (ci-après PIM) sont des précurseurs de lipoglycanes complexes comme, par exemple, les lipoarabinomannanes (LAM) et les lipomannanes (LM), extraits des parois des mycobactéries. Selon leur structure, les PIM peuvent avoir des activités immunomodulatoires différentes. Les PILAM, provenant d'une espèce avirulente à croissance rapide telle que M. smegmatis, sont des molécules pro-inflammatoires stimulant la production du TNF et de IL-12. En revanche, les LAM couverts avec des résidus mannosyle (ManLAM), provenant de myobactéries à croissance lente telles que M. tuberculosis and M. bovis BCG, sont des molécules anti-inflammatoires capables d'inhiber la production d'IL-12 et de TNF et d'augmenter la production d'IL-10 par les cellules dendritiques ou par des lignées de monocytes [8]. Les PILAM stimulent les macrophages par l'intermédiaire de récepteurs Toll-like (TLR)-2, qui sont des récepteurs impliqués dans l'immunité innée, en stimulant la voie de signalisation du NF-kB [9]. Les effets anti-inflammatoires de ManLAM ont été attribués à leur liaison aux récepteurs du mannose [10] ou à DC-SIGN [Il]. Les LM, précurseurs biosynthétiques des LAM, sont composés d'un squelette de carbohydrates comportant un noyau constitué de D-mannane et d'un point d'ancrage de mannosyl-phosphatidylinositol (ci-après PIM) à l'extrémité réduite en mannane dudit noyau. Les LM sont dépourvus de domaine D-arabinane et des coiffes trouvées dans les LAM [12]. Les LM sont pro-inflammatoires mais les inventeurs ont récemment décrit que les LM de différentes origines bactériennes, y compris M. bovis BCG, M. tuberculosis, M. chelonae and M. kansasii, présentent également des propriétés anti-inflammatoires importantes [13]. En particulier, les LM tri- et tetra-acylés de Mycobacterium bovis BCG induisent la stimulation des macrophages et l'expression de cytokines pro-inflammatoires par l'intermédiaire de TLR2, de TLR4 et de la protéine adaptatrice MyD88 [14], alors que les LM di-acylés et, jusqu'à un certain niveau les LM tri-acylés, inhibent la production des cytokines inflammatoires par les macrophages stimulés à travers la voie TLR4, de manière indépendante de TLR2 [15]. Par conséquent, le degré d'acylation influence l'effet modulateur des LM de M. bovis. Les auteurs ont proposé que l'acylation différentielle des LM de la paroi myobactérienne peut représenter un moyen additionnel pour réguler la réponse inflammatoire de l'hôte. Les PIM sont des molécules de faible poids moléculaire (environ 1000-2500) comprenant en général de 1 à 4 chaînes acylées, un résidu phosphatidyl-myo-inositol et 1 à 6 résidus mannose. Ainsi, les PIM naturels peuvent se présenter sous différentes formes avec un nombre variable de résidus mannose et acyle. Parmi les PIM naturels, les phosphatidyl-myo-inositol dimannoside (ci-après PIM2) et phosphatidyl-myo-inositol hexamannoside (ci-après PIM6) sont les plus couramment trouvés chez Mycobacterium bovis BCG et Mycobacterium tuberculosis H37Rv. Un exemple de structure de PIM6 à l'état naturel est représentée dans la Figure 1. On note que dans ces 4 structures naturelles, les résidus mannosyles sont portés par le D-myoinositol en positions 2 et 6. Plusieurs fonctions ont été récemment attribuées aux PIM. Il a été démontré que les PIM sont des agonistes de TLR2 [3] et sont reconnus par les cellules T CD4-CD8- a/13 humaines dans le contexte de cellules présentatrices d'antigènes exprimant CD1 b [4]. L'interaction de haute affinité entre les protéines CD1 b et les chaînes latérales acylées de PIM2 a été établie [5]. La fraction phosphatidyl-inositol semble jouer un rôle central dans le processus de liaison des PIM aux protéines CD1 b. Par 1 o ailleurs, il a été démontré que les PIM2 pouvaient augmenter le recrutement des cellules NKT (Natural Killer T cells), qui jouent un rôle primordial dans la réponse granulomateuse [6], [7]. Il a été trouvé que les souches Mycobacterium bovis BCG, 15 Mycobacterium tuberculosis H37Rv et Mycobacterium smegmatis 607 contenaient essentiellement deux familles de PIM, dimannosylés (PIM2) et hexamannosylatés (PIM6) [7]. PIM1, PIM3, PIM4 and PIM5 ont été observés en faibles quantités suggérant que ce sont des intermediaires biosynthétiques. Les PIM sont synthétisés à partir de phosphatidyl-inositol 20 par addition séquentielle de résidus de mannose à des positions spécifiques. Les trois gènes codant pour les mannosyl transférases impliquées dans l'addition des trois premières unités d'a-Manp sont maintenant connus. L'étape d'initiation, catalysée par l'enzyme pimA [16], consiste à transférer un résidu a-Manp au myo-inositol du phosphatidyl- 25 inositol pour former PIM1. L'addition d'un second résidu a-Manp au myoinositol du phosphatidyl-inositol pour générer PIM2 est catalysée par l'enzyme pimB [17]. L'élongation se fait grâce au pimC [18] pour créer PIM3 par addition d'un troisième résidu a-Manp. Différentes formes acylées de PIM, en particulier des PIM2 et PIM6, 30 ont été purifiés et caractérisées [7]. Quatre formes acylées majeures (mono- au tétra-acylés) ont été décrites pour PIM2 et PIM6 (Aci- à Ac4-PIM2 et PIM6 ; voir Tableau 1). Leur activité biologique consistant à stimuler les macrophages à produire des cytokines a également été mise en évidence. Tableau 1 : Les formes majeures acylées de PIM6 mis en evidence M. bovis BCG. m/z Fragment Gro Acyle Manp Myolns 0/0 1 2 6 3 Ac1PIM6 1543.6 1585.7 C16 C16 C19 C19 Ac2PIM6 1781.8 C16, C16 C16 C16 1823.9 C16, C19 C16 019 Ac3PIM6 2062.1 2016, 019 C16 019 C16 100 Ac4PIM6 2300.3 3016, 019 C16 C19 C16 C16 56 2342.4 2016, 2019 C16 C19 C16 C19 44 L'abondance relative des différentes espèces pour chaque forme 1 o acylée a été déterminée à partir de l'intégration des signaux monoisotopiques correspondants [19]. Les inventeurs ont précédemment montré que PIM2 et PIM6 induisent une activation faible des macrophages pour sécréter TNF par TLR2 et l'adaptateur MyD88, quelque soit leur structure acylée [7],[19]. 15 Toutefois, comme les PIM sont des précurseurs de LM, et en vue de la récente démonstration par les inventeurs selon laquelle le LM di-acylé et tri-acylé possède un effet anti-inflammatoire fort, ils ont déterminé que certains PIM naturels, y compris les PIM6 di- et tri-acylés, sont des inhibiteurs de la libération, par les macrophages, de cytokine pro- 20 inflammatoire. Ce travail fait l'objet de la demande de brevet français no. 06/10136 du 20 novembre 2006 publiée sous le numéro FR 2908658. 35 65 Les synthèses totales de PIM2 et de PIM6 ont été décrites [20]. Les inventeurs ont déjà réalisé la synthèse des PIM1 di-acylés et ont montré l'inhibition de la libération de cytokines pro-inflammatoires. Comme indiqué précédemment, un réel besoin médical existe pour trouver de nouveaux inhibiteurs des cytokines pro-inflammatoires telles que le TNF et l'IL-12 palliant aux défauts, inconvénients et obstacles des inhibiteurs de l'art antérieur tels que les stéroïdes ou les anticorps monoclonaux. Les dérivés synthétiques de PIM peuvent constituer une alternative intéressante pour répondre à ce besoin. Ainsi, il existe donc un réel besoin de nouveaux dérivés synthétiques des PIM à la fois simple à synthétiser, facile à mettre en oeuvre et de coût réduit, ayant des propriétés inhibitrices de l'expression de cytokines pro-inflammatoires, voire supérieurs, aux inhibiteurs de l'art antérieur. Description de l'invention La présente invention a précisément pour but de répondre à ce besoin en fournissant de nouveaux composés de formule générale (I) : (I) dans laquelle :20 7 ^ RI et R2 représentent, indépendemment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, un radical alkyle en C1-C20, un radical acyle en C1-C20, étant entendu que lorsque l'un des substituants RI ou R2 est un atome d'hydrogène l'autre substituant est différent d'hydrogène ; ^ Zl et Z2 représentent, indépendemment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, au moins un sucre choisi dans le groupe comprenant le mannose, le glucose, le galactose, étant entendu que lorsque l'un des substituants Zl ou Z2 est un atome d'hydrogène l'autre substituant est différent d'hydrogène ; ^ Q représente -OP(0)2O-, -0002-, -NHCO2-, -NHCONH- ; ^ Y représente un atome d'hydrogène, un radical hydroxyl, un radical alkoxy en C1-C6, -(CH2)n-OH avec n est nombre entier égal à 1, 2 ou 3, étant entendu que lorsque Y est un radical hydroxyl, Zl et Z2 ne représentent pas tous les deux un atome d'hydrogène ; ^ A représente ùCH2- ; ^ X représente un atome d'hydrogène ; ^ ou A et X forment ensemble une liaison pour conduire à un cycle à 6 chaînons dans lequel • A représente un ùCH-, • X représente un ùCH2-, -CH(OH)-, un atome oxygène, un ùN R3- dans lequel R3 est un radical alkyle en C1-C6 ou un radical acyle en C1-C20, étant entendu que, lorsque • A et X forment une liaison pour conduire à un cycle à 6 chaînons, • X = -GNON, • Y=-OH,et • Zl et Z2 représentent au moins un sucre, le cycle à 6 membres est de configuration myo-inositol avec Zl ou Z2 en position 1 et représentant un sucre ; ou un de leurs sels pharmaceutiquement acceptables. 8 Dans le cadre de l'invention, on entend par myo-inositol la structure suivante avec la numérotation indiquée selon les recommandations de l'International Union of Biochemistry (1988). OH OH myo-I nositol Selon un mode de réalisation de l'invention, les composés de l'invention peuvent être de formule (Ia) R1 dans laquelle ^ RI et R2, Zl et Z2, Q et Y sont tels que définis précédemment ; ^ A représente un ûCH- ; ^ X représente un ûCH2-, -CH(OH)-, un atome oxygène, un ûNR3- dans 15 lequel R3 est un radical alkyle en Cl-C6 ou un radical acyle en C1-C20, étant entendu que lorsque • X = -GNON, • Y = -OH, et • Zl et Z2 représentent au moins un sucre, 9 le cycle à 6 chaînons est de configuration myo-inositol avec Zl ou Z2 en position 1 et représentant un sucre ; ou un de leurs sels pharmaceutiquement acceptables. De préférence, dans les composés de formule (Ia), ^ RI et R2 représentent, indépendemment l'un de l'autre, un radical acyle en C1-C2o ; ^ Zl représente un atome d'hydrogène ; ^ Z2 représente le mannose ; ^ Q représente -OP(0)2O- ; ^ Y représente un radical hydroxyl ; ^ A représente un ùCH- ; ^ X représente un ùCH(OH)- ; ^ le cycle à 6 chaînons est de configuration myo-inositol avec Z2 en position 1 ; ou un de leurs sels pharmaceutiquement acceptables. Selon un autre mode de réalisation de l'invention, les composés de l'invention peuvent être de formule (Ib) dans laquelle ^ RI et R2, Zl et Z2, Q et Y sont tels que définis précédemment ; ^ A représente ùCH2- ;20 ^ X représente un atome d'hydrogène ; ou un de leurs sels pharmaceutiquement acceptables. De manière tout à fait inattendue, il a été observé que les dérivés synthétiques des PIM conformément à l'invention permettent de séparer la propriété de ces dérivés à agir comme agoniste des récepteurs TLRs impliqués dans la réponse immunitaire, et ainsi de séparer l'activité pro- et anti-inflammatoire de ces nouveaux PIM. Par ailleurs, les dérivés de PIM selon l'invention sont de faibles poids moléculaires (environ 1000). Ils sont bien définis moléculairement et leur synthèse est plus aisée que les PIM naturels. Ils sont en outre, non cytotoxiques. De plus, ces dérivés possédent une activité immunomodulatrice au moins comparable, de préférence supérieure à celle des PIM naturels. 15 On entend par � alkyle � au sens de la présente invention, un radical carboné linéaire, ramifié ou cyclique, saturé ou insaturé, éventuellement substitué, comprenant 1 à 20 atomes de carbone, par exemple 1 à 15 atomes de carbone, par exemple 1 à 6 atomes de carbone. A titre indicatif, 20 on peut citer les radicaux méthyle, éthyle, propyle, butyle, isobutyle, pentyle, hexyle, octyle, nonyle, décyle, undécyle, dodécanyl, tridécanyle, tétradécanyle, pentadécanyle, hexadécanyle, heptadécanyle, octadécanyle octadécanyle, nonadécanyle, eicosanoyle et leurs isomères ramifiés. On entend par � acyle � au sens de la présente invention, un radical 25 ùCOR' dans lequel R' est un radical alkyle tel que défini ci-dessus. Le groupe acyle peut également signifier le groupe tuberculostéaryle. On entend par � alkoxy� au sens de la présente invention, un radical ùOR' dans lequel R' est un radical alkyle tel que défini ci-dessus. Dans le cadre de la présente invention, le terme � sels 30 pharmaceutiquement acceptables � comprend les sels préparés avec des acides ou bases, non toxiques, en fonction des substitituants présents sur 11 les composés. Lorsque les composés de l'invention comportent des fonctions acides, les sels correspondants peuvent être obtenus par addition d'une base organique ou inorganique sur le composé sous forme neutralisée en présence éventuellement d'un solvant de préférence inerte. Des exemples de sel d'addition d'une base peuvent être les sels de sodium, potassium, calcium, ammonium, amino (organique), ou magnésium. Lorsque les composés de l'invention comportent des fonctions basiques, les sels correspondants peuvent être obtenus par addition d'un acide organique ou inorganique éventuellement dans un solvant de 1 o préférence inerte. Des exemples de sels d'addition d'acide inorganique peuvent être les sels hydrochlorique, hydrobromique, nitrique, carbonique, monohydrogencarbonique, phosphorique, monohydrogenphosphorique, dihydrogenphosphorique, sulfurique, monohydrogensulfurique, hydriodique. Des exemples de sels d'addition d'acide organique peuvent 15 être les sels acétique, propionique, isobutyrique, maléique, malonique, benzoïque, succinique, subérique, fumarique, lactique, mandélique, phthalique, benzènesulfonique, p-tolylsulfonique, citrique, tartarique, méthanesulfonique. Sont également couverte par cette invention, des sels d'acides aminés tels que l'arginate, et des sels d'acides organiques tels 20 que les acides glucuronique ou galactunorique. Les composés de formule générale (I), (la) et (lb) peuvent être sous forme racémique ou enrichie en un énantiomère ou enrichie en un stéréoisomère. Un des composés préférés de l'invention est le composé de formule 25 (la) de structure suivante (isoPIMI-C16018) : 12 O C15H31 1 D-myo-inositol a-D-mannopyranose L'invention concerne également le procédé de préparation de composés de formule (I), (Ia) et (Ib), caractérisé en ce que : a) on condense un dérivé di-O-acylé ou di-O-alkylé du glycérol de formule (III) R2N 0 0 G R1 (III) dans laquelle •G=OH ouNH2 • R1 et R2 ont les mêmes définitions que précédemment avec un agent de phosphitylation, de phosphorylation ou de carbonylation pour donner un intermediaire de formule (IV) R2N 0 O J~K/L (IV) dans laquelle 0_\PR0 C1�3s O/ \OH O OH HO HO' OH OH • J=OouNH, • K = P-OBn , P(0)-OBn ou C=O, • L = groupe sortant • RI et R2 ont les mêmes définitions que précédemment ; b) on condense l'intermédiaire (IV) avec un dérivé d'un polyol ou aminopolyol de formule générale (V) Oiz3 G /OR 4 (CH2)n 1 1 (CH2)n Z4 OR4 (V) dans laquelle •G=OH ouNH2 • Z3 et Z4 représentent indépendamment l'un de l'autre un hexopyranose de configuration manno, gluco ou galacto et portant des groupes protecteurs methoxyacétyle, ou un groupement benzyle, étant entendu que l'un au moins des groupes Z3 et Z4 represente un sucre protégé • R4 représente un groupe protecteur choisi dans le groupe compenant un groupe benzyle, radical alkoxy en C1-C6, ou on condense l'intermédiaire (IV) avec un composé cyclique de formule générale (VI) o/Z3 Y2 (VI) dans laquelle • G = OH, NH2 • Z3 et Z4 ont les mêmes définitions que précédemment • Y2 = H ou un groupe -OR4 ou un groupe -(CH2)nOR4 dans lequel R4 a la même définition que précédemment • X2 = -CH2, -CHOR4, -NR3 ou O dans lequel R3 est un radical alkyle en Cl-C6 ou un radical acyle en C1-C20 et R4 represente un groupe protecteur, comme un groupe benzyle, ou radical alkoxy en Cl-C6 éventuellement en présence d'un agent de couplage ; c) on soumet, éventuellement, le composé obtenu à l'étape b) à une réaction d'oxydation, pour donner un composé de formule générale (VII) R 2\O O/Z3 J /OR4 R/O M(CH2)n (CH2)n Z4 OR4 dans laquelle • Jet J' = O ou NH • M = P(0)OBn ou C=0 20 • Z3, Z4, RI, R2, R3, R4 ont les mêmes définitions que précédemment (VIII) dans laquelle •JetJ'=OouNH • M = P(0)OBn ou C=0 • Z3, Z4, RI, R2, R3, R4 ont les mêmes définitions que précédemment d) on soumet le produit de formule générale (VII) ou de formule générale (VIII) à une déprotection en deux étapes qui consiste en ce que l'on les traite d'abord avec une alkylamine choisi dans le groupe comprenant la tbutylamine pour couper sélectivement les groupes méthoxyacétyles puis soumet les produits désacylés à une hydrogénation catalytique pour éliminer les groupements benzyles. Comme exemple d'agent de phosphitylation, on peut citer la chlorobis(diisopropylamino)phosphine, la benzyloxydichlorophosphine, la bis(benzyloxy)-N,N-diethylaminophosphine et composés apparentés. Comme exemple d'agent de phosphorylation, on peut citer le diphenylchlorophosphate, le dibenzyl phosphorochloridate, le xylylenechlorophosphate et composés apparentés. Comme exemple d'agent de carbonylation, on peut citer le carbonyldiimidazole, le triphosgène et les composés apparentés. Par � groupe protecteur � on entend un groupe qui permet la transformation d'un groupe fonctionnel en un groupe qui sera inerte dans les conditions réactionnelles choisies afin d'empêcher des réactions secondaires de se produire dans la suite de la synthèse. A ce titre on peut ou un composé de formule générale (VIII) R2N 0 citer, par exemple, le groupe benzyle, le groupe t-butyldiméthylsilyle, le groupe acétyle ou le groupe méthoxyacétyle. Par � groupe sortant ou partant �, on entend un groupe susceptible d'être substitué par un réactif nucléophile, comme par exemple, les halogénures ou les tosylates. Dans le cadre de la présente invention, on entend par � agent de couplage ou agent de liaison �, un agent permettant la condensation d'un dérivé d'acide phosphorique ou d'un acide carboxylique avec un alcool ou une amine pour former les liaisons esters ou amides correspondantes. A 1 o ce titre on peut citer, par exemple, la dicyclohexylcarbodiimide (DCC), la N-ethyl N-dimethylamino-propylcarbodiimide (EDCI). Dans un mode de réalisation de l'invention, les composés de formule (I) dans laquelle Q représente -OP(0)20-, peuvent également être préparés selon un procédé dans lequel : 15 a) on condense un dérivé di-O-acylé ou di-O-alkylé du glycérol de formule (IX) R2N O /0 OH R1 (IX) dans laquelle R1 et R2 ont les mêmes définitions que précédemment avec 20 un agent de phosphitylation, pour donner un intermédiaire de formule (X) R2\ O RO 0 L OBn (X) dans laquelle L = groupe sortant b) on condense alors l'intermédiaire (X) avec un dérivé d'un polyol de 25 formule générale (XI) HO (cl-12),-, O R4 O(CH2)n Z4 OR4 (XI) dans laquelle • Z3 et Z4 représentent indépendamment l'un de l'autre un hexopyranose de configuration manno, gluco ou galacto et portant des groupes protecteurs methoxyacétyle, ou un groupement benzyle avec la condition que l'un au moins des groupes Z3 et Z4 represente un sucre protégé • R4 représente un groupe protecteur, comme un groupe benzyle, ou radical alkoxy en Cl-C6 ou avec un composé cyclique de formule générale (XII) O/Z3 (XII) dans laquelle • Z3 et Z4 ont les mêmes définitions que précédemment • Y2 = H ou un groupe -OR4 ou un groupe -(CH2)nOR4 dans lequel R4 a la même définition que précédemment et n peut prendre des valeurs de 1 à 3 • X2 = -CH2, -CHOR4, -NR3 ou O dans lequel R3 et R4 ont la même définition que précédemment en présence d'un agent de couplage choisi dans le groupe comprenantle 1 H-tetrazole, c) on soumet ensuite le phosphite intermédiaire à une réaction d'oxydation, pour donner un composé de formule générale (XIII) R2\O O/Zs O(CH2)n 1 Z4 OR4 (XIII) dans laquelle Z3, Z4, R1, R2, R3, R4 ont les mêmes définitions que précédemment (XIV) dans laquelle Z3, Z4, R1, R2, R3, R4 ont les mêmes définitions que précédemment d) on soumet alors les composés (XIII) et (XIV) obtenus à l'étape c) à une 20 déprotection en deux étapes qui consiste en ce que l'on les traite d'abord avec une alkylamine telle que la t-butylamine pour couper sélectivement ou un composé de formule générale (XIV) R2N O RO O P/O ,,,,-OR4 (CH2)n BnO 0 19 les groupes méthoxyacétyles puis soumet les produits désacylés à une hydrogénation catalytique pour éliminer les groupements benzyles. Un autre objet de la présente invention est une composition pharmaceutique comprenant au moins un composé de formule (I) tel que défini précédemment et tout excipient pharmaceutiquement acceptable. La composition selon l'invention peut comprendre, en outre, des composants bien connus de l'homme du métier dans le domaine 1 o pharmaceutique, comme des agents stabilisants, des agents émulsifiants, des agents de tonicité, des agents conservateurs, des colorants, des excipients, des liants, des lubrifiants notamment. La composition pharmaceutique selon l'invention peut être utilisée 15 pour la prévention ou le traitement de désordres ou de maladies inflammatoires ou autoimmunes. Un autre objet de l'invention consiste en l'utilisation d'une composition telle que décrite précédemment pour la fabrication d'un 20 médicament destiné à la prévention ou au traitement d'une maladie associée à la surexpression de cytokines ou de chimiokines, notamment du TNF et/ou de l'IL-12 chez un sujet. Par sujet, on entend un mammifère, de préférence un humain. La maladie associée à la surexpression cytokines ou de chimiokines, 25 notamment du TNF et/ou de l'IL-12 comprend : A) les maladies immunes ou auto-immunes choisies dans le groupe comprenant la polyarthrite rhumatoïde, le diabète sucré, le lupus érythémateux disséminé ou la maladie de Basedow ; B) le rejet de greffe, 30 C) les infections virales et/ou parasitaires ; D) les chocs résultant d'une infection chronique ou aiguë d'origine bactérienne, virale et/ou parasitaire ; E) les maladies inflammatoires choisies dans le groupe comprenant les maladies inflammatoires chroniques (la sarcoïdose, l'affection abdominale inflammatoire, l'arthrite rhumatoïde, la rectocolite hémorragique, la maladie de Crohn) et les maladies inflammatoires vasculaires (le syndrome de défibrination, l'arhtérosclérose, la maladie de Kawazaki) ; F) les maladies neurodégénératives choisies dans le groupe comprenant les maladies démyélinisantes (la sclérose en plaques et la myélite 1 o transverse aiguë), les maladies extrapyramidales et cérébelleuses (les lésions du système corticospinal ou les désordres des noyaux gris centraux) ; G) les pathologies malignes impliquant des tumeurs sécrétant du TNF ou impliquant le TNF choisies dans le groupe comprenant la leucémie (aiguë, 15 myélocytique, lymphocytique ou myélodispastique chronique), le lymphome (Hodgkin ou malin (Burkitt) et H) l'hépatite induite par l'alcool. De préférence, ledit médicament est destiné à la prévention ou au traitement d'une maladie inflammatoire chez un sujet. 20 Ledit médicament peut être administré par injection (intraveineuse, intramusculaire, sous-cutané, intracutané, etc.), administration nasale, orale, percutanée ou par inhalation. En fonction du mode d'administration, ledit médicament peut être préparé sous forme de solutions, d'émulsions, de cachets, de poudres, d'onguents, de lotions, de gels, de suppositoires 25 ou de sprays. Dans ledit médicament, la concentration en composé de formule (I) ou de son sel pharmaceutiquement acceptable n'est pas limitée et est comprise de préférence entre 0,1 et 100% (p/p) et de manière particulièrement préférée entre 0,5 et 20%. 30 • 2931480 21 D'autres avantages pourront encore apparaître à l'homme du métier à la lecture des exemples ci-dessous, illustrés par les figures annexées, donnés à titre illustratif. 5 Brève description des figures La figure 1 représente une structure de PIM6 naturel comportant trois groupes acyle dont la chaîne alkyle est linéaire et en C16 et un groupe acyle dont la chaîne alkyle est ramifiée et en C19. - La figure 2 représente le schéma synthétique du composé de l'exemple 1, isoPIM1-2C16 (SFPIM91; figure 2a) et du composé de l'exemple 2, isoPIM1-C16C18 (SFPIM219; figure 2b). - La figure 3 représente l'inhibition de l'expression de TNF par les macrophages primaires stimulés avec le LPS en présence de la forme � isomère � de PIM1 isoPIM1-2C16 (SFPIM91), en comparaison avec les PIM naturels Ac2PIM6 et Ac2PIM6 , et le PIM1 synthétique (SFPIM135), titrés à 1, 3 et 10ug/mL. - La figure 4 représente l'absence de cytotoxicité de l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91), les PIM naturels Ac2PIM6 et Ac2PIM6, et le PIM1 synthétique (SFPIM135), titrés à 1, 3 et 10ug/mL. - La figure 5 représente l'inhibition de l'expression d'IL-6 par les macrophages primaires stimulés au LPS, avec ou sans IFNy, en présence de l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91), en comparaison avec les PIM naturels Ac2PIM6 et Ac2PIM6, et le PIM1 synthétique (SFPIM135), à 10ug/mL. - La figure 6 représente l'inhibition de l'expression d'IL-12 p40 par les macrophages primaires stimulés avec le LPS en présence de l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91), en comparaison avec les PIM naturels Ac2PIM6 et Ac2PIM6, et le PIM1 synthétique (SFPIM135), à lug/mL. - La figure 7 représente l'inhibition de l'expression de KC par les macrophages stimulés avec le LPS en présence de PIM1 synthétique 30 (SFPIM135) et de l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91), à 10ug/mL. - La figure 8 représente l'inhibition par le PIM1 synthétique (SFPIM135) et l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91) de la réponse des voies respiratoires à une administration locale d'endotoxine. L'abbréviation � AUC � signifie la zone sous la courbe. - La figure 9 représente l'inhibition par le PIM1 synthétique (SFPIM135) et l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91) du recrutement de cellules inflammatoires, majoritairement des neutrophiles, dans l'espace bronchoalvéolaire en réponse à l'endotoxine. - La figure 10 représente l'inhibition par le PIM1 synthétique (SFPIM135) et l'isoPIM1-2C16(SFPIM91) de la sécrétion de chimiokine KC, qui participe au recrutement des neutrophiles, dans le lavage bronchoalvéolaire en réponse à l'endotoxine. - La figure 11 représente l'inhibition par le PIM1 synthétique (SFPIM135) et l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91) de la sécrétion de TNF dans le 15 lavage broncho-alvéolaire en réponse à l'endotoxine. - La figure 12 représente l'inhibition de l'expression de TNF par les macrophages primaires stimulés avec le LPS en présence de la forme � isomère � de PIM1 isoPIM1-C16C18 (SFPIM219), titré à 1, 3 et 10ug/mL. - La figure 13 représente l'absence de cytotoxicité de l'isoPIM1- 20 C16C18 (SFPIM219), titré à 1, 3 et 10ug/mL. - La figure 14 représente l'inhibition de l'expression d'IL-12 p40 par les macrophages primaires stimulés avec le LPS en présence de la forme �isomère� de PIM1 isoPIM1-C16C18 (SFPIM219), titré à 1, 3 et 10ug/mL. 25 EXEMPLES Solvants et réactifs Le dichlorméthane (CH2Cl2) et le toluène sont distillés, sous atmosphère d'argon, sur CaH2, le tétrahydrofurane (THF) est distillé, sous 30 atmosphère d'argon, sur sodium et benzophénone. Le diéthyl éher est distillé, sous atmosphère d'argon, sur CaH2 et conservé à 0-4°C sous argon sur Tamis moléculaire 4A. Les autres solvants utilisés proviennent du fournisseur Carlo-Erba. Résonance Magnétique Nucléaire (RMN) Les spectres 1H et 13C sont effectués un appareil Bruker DPX250 ou sur un appareil Bruker AV400. Les déplacements chimiques (8) des spectres RMN 1H sont calibrés selon le témoin Triméthylsilyl (TMS) ayant pour valeur de 8 0.00PPM. Les 8 des spectres de RMN 13C sont calibrés sur la valeur de référence du solvant tel que décrit dans l'article Gottlieb et al, J. Org. Chem., 1997, 62, 7512. Les 8 des spectres RMN 31P sont réalisés sur un appreil Bruker AV400 et sont calibrés selon une référence externe contenant 80% d'acide phosphorique (H3PO4) (8 = 0.00 ppm). Les mesures sont effectuées à 25°C dans des tubes de 5 mm de diamètre. Le spectres sont effectués dans des solvants deutérés provenant des fournisseur Aldrich ou SDS. Chromatographie Les chromatographies sur couche mince (CCM) sont réalisées sur des plaques d'aluminium � TLC Silica gel 60F254 � de Merck . Les composés sont révéles sous lampe UV ou/et sont trempé dans le révélateur à l'acide phosphomolybdique dans l'acide sulfurique et l'éthanol suivi d'un chauffage avec un décapeur thermique. Les colonnes chromatographiques sont réalisée avec un gel de silice (Silica gel 60 (40-63 pm) de Merck. Spectrométrie de masse Masse ESI : Les échantillons sont analysés sur un spectromètre Perkin Elmer Sciex API 300 dans des solvant de qualité � pour Analyse �. Masse haute résolution : les échantillons sont analysé au centre de mesures physique de l'un30 EXEMPLE 1 : 1) Synthèse de l'iso PIM,- 2C16 SFPIM91) : Diméthyl acétal du L-camphre (composé 2, figure 2a) 5 SFPIM-97 Préparation selon Lindberg et al. Tetrahedron, 2002, 58, 1387-1398 [24]. De l'acide sulfurique (H2SO4) (194 pL) est ajouté à une solution de L-camphre commercial (>95%, Fluka) (20 g, 0.131 mol) dans un mélange de triméthyl orthoformate (95 mL, 0.908 mol, 6.9 éq) et de méthanol (20 mL). 1 o Après 48h d'agitation, le mélange est neutralisé par ajout de méthoxide de sodium (NaOMe) (400 mg) et les solvants sont évaporés. Le résidu est collecté par distillation sous un vide (25 mbar) à 125°C pour donner le composé 2 (21 g, 81%) sous forme d'un liquide incolore. Spectre de 1HRMN conforme. 15 1,2-0-(L-1,7,7-triméthylbicyclo[2,2,1]hept-6-ylidène)-D-myo-inositol (composé 3, figure 2a) SFPIM-10 Préparation selon Lindberg et al. Tetrahedron, 2002, 58, 1387-1398 20 [24]. De l'acide sulfurique H2SO4 (173 pL) est ajouté à une solution de composé 2 (8.06 g, 0.041 mol, 2.4 éq) et de myo-inositol commercial >99% (Aldrich) (3.1 g, 0.017 mol) dans du diméthylsulfoxide (DMSO) (34 mL). Le mélange résultant est agité 3h à 75°C, puis neutralisé par addition de Et3N (1 mL) et concentré sous vide à 80°C. Au résidu sont ajoutés du DMSO (3 25 mL), du chloroforme (CHCI3) (52 mL), du méthanol (MeOH) (3.2 mL), de l'eau (H2O) (1 mL), et de l'acide p-toluène sulfonique (APTS) (11.6 mg). Le mélange réactionnel est agité 18h puis neutralisé par addition de Et3N (0.4 mL). Le précipité ainsi formé est filtré sur verre fritté et lavé avec du CHCI3 (2 x 40 mL). Le produit brut est recristallisé dans du méthanol (MeOH) 24 (contenant 0.1% NEt3) pour donner le composé 3 (1.738 g, 32%) sous forme d'un solide blanc. Spectre de 1H-RMN conforme. 3,4,5,6-Tétra-O-benzyl-1,2-0-(L-1,7,7-triméthylbicyclo[2,2,1]hept-6- ylidène)-D-myo-inositol (composé 4, figure 2a) SFPIM-72 De l'hydrure de sodium (NaH) (1.16 g, 0.048 mol, 12 eq, 60% en dispersion dans l'huile minérale) est ajouté, sous atmosphère d'argon, à une solution précédemment refroidie à 0°C de composé 3 (1.266 g, 4.02 mmol) dans du DMF anhydre (30 ml). Après 15 min d'agitation à 0°C, du bromure de benzyle (2.9 mL, 0.024 mmol, 6 éq) est ajouté goutte à goutte, puis le mélange réactionnel est agité 24h à température ambiante. Il est ensuite refroidit à 0°C, puis l'excès de NaH est détruit par addition de MeOH (3 mL) et le milieu est dilué avec du toluène (250 mL). La phase organique est lavée avec de l'eau (100 mL), puis avec une solution de NaCl saturée (3 x 100 mL), puis séchée sur MgSO4. Les solvants sont évaporés et une purification par colonne chromatogaphique sur gel de silice (Hexane/éther diéthylique 8/1) conduit au composé 4 (2.15 g, 80%) sous forme d'un solide blanc. C44HSOO6 (M = 674.89 g/mol). RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 8 0.86 (s, 3H, CH3), 0.87 (s, 3H, CH3), 1.09 (s, 3H, CH3), 1.22-1.33 (m, 3H), 1.34-1.45 (b, 1H), 1.47 (s, 0.5H), 1.50 (s, 0.5H), 1.68-1.76 (m, 2H), 1.9-2.02 (m, 2H), 3.44 (dd, 1 H, H5, J5.6 = 8.2 Hz, J4.5 = 9.6 Hz), 3.74 (dd, 1H, H4, J4.3 = 7.2 Hz), 3.77 (t, 1H, H1, J1.2 = 4.2 Hz), 3.84 (dd, 1H, H6, J1.6 = 8.4Hz), 3.96 (dd, 1H, H3, J2.3 = 6.2 Hz), 3.44 (dd, 1 H, H5, J5.6 = 8.2 Hz, J4.5 = 9.6 Hz), 4.30 (dd, 1 H, H2), 7.20-7.45 (m, 20H, 4Ph). RMN 13C (100 MHz, CDCI3) 8 10.27 (CH3), 20.52 (CH3), 20.75 (CH3), 27.76 (CH2), 29.89 (CH2), 45.08 (CH2), 45.31 (CH), 48.08 (Cq), 51.67 (Cq), 72.55 (CH2, CH2Ph), 73.19 (CH, C2), 74.00 (CH2, CH2Ph), 75.08(CH2, CH2Ph), 75.25 (CH2, CH2Ph), 76.32 (CH, C3), 77.50 (CH, Cl), 80.86 (CH, C6), 82.22 (CH, C5), 83.31(CH, C4), 117.77 (Cq), 127.55-128.44 (CH, Ph), 138.55-138.89 (Cq, Ph, 4 fines). SM-IS : M calculée 674.36 ; trouvée : [M+H]+ 675.5, [M+NH4]+ 692.5, [M+Na]+ 697.5, [M+K]+ 713.5. 3,4,5,6-Tétra-O-benzyl-D-myo-inositol (composé 5, figure 2a) SFPIM-17 Le composé 4 (1.53 g, 2.26 mmol) est mis en suspension dans une solution aqueuse d'acide acétique à 80% (75 mL) et le milieu est agité à 100°C pendant 4h. Les solvants sont évaporés sous vide puis coévaporés avec du toluène. Le résidu est purifié par colonne chromatogaphique sur gel de silice (toluène/acétone 35/1 avec un gradient jusqu'à 10/1) pour conduire au composé 5 (1.029 g, 84%) sous forme d'un solide blanc. C34H36O6 (M = 540.66 g/mol). RMN 1H (400 MHz, CDC13) 8 2.53 (d, 1H, OH-1, J1.OH = 4.8 Hz), 2.64 (s, 1H, OH-2), 3.42-3.51 (m, 3H, H3, H1, H5), 3.83 (dd, 1H, H6, J6.5 = 9.6 Hz, J1.6 = 9.6 Hz), 3.97 (dd, 1H, H4, J3.4 = 9.6 Hz, J4.5 = 9.6 Hz), 4.17 (dd, 1H, H2, J2_3 = 2.8 Hz, J2_1 = 2.8 Hz), 4.65-4.96 (m, 8H, 4 CH2Ph), 7.25-7.4 (m, 20 H, 4x5 CHAr). RMN 13C (100 MHz, CDC13) 8 69.33 (CH, C2), 71.87 (CH, Cl), 72.84 (CH2, CH2Ph), 75.71 (CH2, CH2Ph), 75.82 (CH2, CH2Ph), 76.07 (CH2, CH2Ph), 80.11 (CH, C3), 81.45 (CH, C6), 81.74 (CH, C4), 83.33 (CH, C5), 127.73-128.67 (CH, Ph, 9 lines), 137.89 (Cq, Ph), 138.62 (2Cq, Ph), 138.73 (Cq, Ph). MS-IS : M calculée 540.25; trouvée : [M+H]+ 541.5, [M+NH4]+ 558.5, [M+Na]+ 563.5, [M+K]+ 579.5. 3,4,5,6-Tétra-O-benzyl-1-O-p-méthoxybenzyl-D-myo-inositol (composé 6, figure 2a) SFPIM104 Une suspension de composé 5 (301 mg, 0.557 mmol) et d'oxide de dibutylétain (139 mg, 0.557 mmol, 1 éq) dans du toluène (5 mL) est chauffée 18h à 140°C sous argon en utilisant un piège de Dean-Stark pour capter l'eau formée. Le milieu est concentré sous vide et le résidu est dissout dans du DMF anhydre contenant du fluorure de césium (CsF) (172 mg, 1.11 mmol) et du chlorure de 4-méthoxybenzyle (76 pL, 0.557 mmol, 1 éq). La réaction est agitée 7h30 et les solvants sont ensuite évaporés à sec pour laisser un résidu solide blanc qui est partiellement dissout dans 1 o de l'acétate d'éthyle (20 mL). Le solide résiduel est retiré par filtration sur verre fritté et le filtrat est évaporé à sec. Le résidu est purifié par colonne chromatogaphique sur gel de silice (éther de pétrole/acétate d'éthyle 7/3) pour conduire au composé 6 (262 mg, 71 %) sous forme d'un solide blanc. C42H44O7 (M = 660.81 g/mol). 15 RMN 1H (400 MHz, CDC13) 8 2.43 (s, 1H, OH), 3.27 et 3.28 (2 dd, 2H, H1 et H3, J1-6 = J3-4 = 9.6 Hz, J1-2 = J2-3 = 2.8 Hz), 3.36 (dd, 1H, H5 , J5-6 = J5-4 = 9.2 Hz), 3.69 (s, 3H, CH3), 3.89 et 3.91 (2 dd, 2H, H4 et H6), 4.09 (dd, 1 H, H2, J2.3 = J2-1 = 2.8Hz), 4.53 (s, 2H, CH2Ph), 4.61 (s, 2H, CH2Ph), 4.72-4.83 (m, 63H, 3 x CH2Ph), 6.74 et 6.76 (2s, 2H, CHAT PMB), 7.1-7.3 (m, 20 23H, CHAr). RMN 13C (100 MHz, CDC13) 8 55.33 (CH3), 67.59 (CH, C2), 72.44 (CH2), 72.76 (CH2), 75.95 (CH2), 75.98 (2xCH2), 79.55 et 79.86 (2 CH, Cl et C3), 81.27 et 81.29 (2 CH, C4 et C6), 83.26 (CH, C5), 127.61-129.59 (CHAT, 8 lines), 130.10 (Cq), 138.05 (Cq), 138.77 (Cq), 138.83 (Cq), 138.88 (Cq), 25 159.42 (Cq). 3,4,5,6-Tétra-O-benzyl-1-O-(2,3,4,6-tétra-acetyl-a-D-mannopyranosyl) -D-myo-inositol (composé 7, figure 2a) SFPIM63 30 Une solution du compose 6 (457 mg, 0.69 mmol, 1 éq) dans du CH2C12 (10 mL) est cannulée sous argon sur une solution du composé 1 (845 mg, 2.08 mmol, 3 éq) dans du CH2Cl2 (10 mL). Le mélange réactionnel est agitéen présence de tamis moléculaire 4A pendant 20 min, puis est refroidit à -20°C. Le triflate d'argent est ajouté (1.066 g, 4.15 mmol, 6 éq) et le milieu réactionnel est agité en laissant remonter la température à 20°C pendant 1h. La réaction est neutralisée par addition de triethylamine (1 mL), puis diluée avec CH2Cl2. La phase organique est lavée avec une solution saturée de NaHCO3 (30 mL) puis de NaCl (30 mL) et est séchée sur MgSO4. Le solvant est évaporé sous vide et le résidu est purifié par colonne chromatogaphique sur gel de silice (éther de 1 o pétrole/acétate d'éthyle 3/1) pour conduire au composé 7 (309 mg, 21 %). C48H54O15 (M = 870.96 g/mol). RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 8 7.38-7.20 (m, 20H, CHAr), 5.43 (dd, 1H, H3', J3'-2' = 2.6Hz, J3'_4' = 10 Hz), 5.34 (dd, 1H, H2', J2'_1= 1 Hz), 5.27 (dd, 1H, H4', J4'_5, = 10 Hz), 5.07 (d, 1H, H1', J1.2, = 1 Hz), 4.86 (s, 4H, 2 CH2Ph), 15 4.85, (d, 1H, CH2Ph, J = 10.8 Hz), 4.80 (d, 1H, CH2Ph, J = 10.8 Hz), 4.75 (d, 1H, CH2Ph, J = 11.2Hz), 4.68 (d, 1H, CH2Ph, J = 11.2 Hz), 4.29 (m, 3H, H2, H5', H6A'), 4.03 (m, 2H, H6B', H4 or H6), 3.95 (dd, 1H, J5.4 = J5.6 = 9.6 Hz), 3.54 (dd, 1H, H1 or H3, J = 2.8 et 10 Hz), 3.45 (dd, 1H, H4 or H6), 3.43 (dd, 1H, H3 or H1), 2.08 (s, 3H, CH3 Ac), 2.06 (s, 3H, CH3 Ac), 2.03 20 (s, 3H, CH3 Ac), 2.00 (s, 3H, CH3 Ac). RMN 13C (100 MHz, CDCI3) 8 170.74, 169.94, 169.91, 169.72, 138.68, 138.64, 138.33, 137.87, 128.65-127.75, 99.85 (Cl'), 83.12, 81.27, 81.07, 80.42, 80.13, 76.28, 76.07, 76.01, 73.15, 69.64 (02'), 69.54 (05'), 69.20 (C3'), 68.92 (C2), 66.65 (C4'), 63.16 (C6'), 20.86, 20.78. 25 MS-IS : M calculée 870.35 ; trouvée 888.5 [M+NH4]+, 893.5 [M+Na]+, 909.0 [M+K]+. 3-O-Benzyl-1,2-O-dipalmitoyl-sn-glycérol (composé, 8 figure 2a) SFPIM77 30 Le chlorhydrate de [(dimethylamino)propyl]carbodiimide (EDCI) (847 mg, 4.42 mmol, 3 éq) et la DMAP (54 mg, 0.44 mmol, 0.3 éq) sont ajoutés, 29 sous atmosphère d'argon, à une solution de 3-O-benzyl-sn-glycerol (268 mg, 1.47 mmol, 1 éq) et d'acide palmitique (943 mg, 3.68 mmol, 2.5 éq) dans du CH2Cl2 anhydre (20 mL). Le mélange réactionnel est agité 18h à température ambiante puis dilué avec du CH2Cl2 (100 mL). La phase organique est lavée avec une solution d'HCI 1N (50 mL), de l'eau (50 mL), puis une solution de NaCl saturée (50 mL) et séchée sur MgSO4. Le solvant est évaporé sous vide et le résidu est purifié par colonne chromatogaphique sur gel de silice (éther de pétrole/acétate d'éthyle 6/1) pour conduire au composé 8 (909 mg, 93%) sous forme d'un solide blanc. C42H74O5 (M = 659.06 g/mol). RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 8 0.88 (t, 3H, CH3), 1.25 (b, 48H, 24 CH2), 1.59 (b, 4H, 2x2H3"), 2.28 (t, 2H, J=7.5Hz), 2.32 (t, 2H, J=7.5Hz), 3.59 (d, 2H, 2H3a), 4.19 (dd, 1H, H1 aA, J1aA_laB = 12Hz, J1A_2a = 6.4Hz), 4.35 (dd, 1H, H1 aB, J1aB_2a = 3.6Hz), 4.53 (AB, 2H, CH2Ph, J = 12.2Hz), 5.24 (m, 1H, H2a), 7.32 (m, 5H, CHAr). MS-IS : M calculée 658.55 ; trouvée : 660.0 [M+H]+, 677.0 [M+NH4]+, 682.0 [M+Na]+. 1,2-O-Dipalmitoyl-sn-glycérol (composé 9, figure 2a) SFPIM82 Le composé 8 (890 mg, 1.35 mmol) est dissout dans un mélange CH2Cl2/EtOH (1/1.5, 25 mL). Un large excès de palladium sur charbon (Pd/C 10%) est ajouté et la réaction est agitée 4h à température ambiante sous pression atmosphérique d'hydrogène (ballon de baudruche). Le mélange réactionnel est chauffé à 40°C pour une meilleure dissolution du produit attendu puis le catalyseur est retiré par filtration sur membrane millipore. Le solide est rincé 3 fois avec 20 mL de mélange CH2Cl2/EtOH (1/1) précédemment chauffé à 40°C. Les solvants résiduels sont évaporés sous vide pour conduire au composé attendu 9 (757 mg, 99%) sous forme de solide blanc. C35H68O5 (M = 568.93 g/mol). 30 RMN 1H (250 MHz, CDCI3) 8 0.88 (t, 6H, 2 CH3, J = 6.8 Hz), 1.26 (m, 48H, 24 CH2), 1.62 (m, 4H, 2H3"), 1.99 (t, 1H, OH, J = 6.5 Hz), 2.32 (t, 2H, J = 7.7Hz), 2.35 (t, 2H, J = 7.5Hz), 3.73 (dd, 2H, 2H3a, J = 5 et 6.2 Hz), 4.23 (dd, 1H, H1 aA, J1aA-1aB = 12 Hz, J1A-2a = 5.5 Hz), 4.35 (dd, 1H, H1 aB, J1aB-2a = 4.5Hz), 5.08 (m, 1 H, H2a). MS ùIS : M calculée, 568.51; trouvée : 570.0 [M+H]+, 587.0 [M+NH4]+ 592.0 [M+Na]+. (S)-2,3-Dipalmitoyloxypropyl benzyl (N,N-diisopropylamino)phos- 1 o phoramidite (composé 11, figure 2a) SFPIM83 Le composé 9 (200 mg, 0.352 mmol), précédemment séché 18h sous vide sur P2O5, est dissout dans du CH2Cl2 anhydre (15 mL) et une solution de bis(N,N-diisopropylamino)benzyloxyphosphine (0.84M, 938 pL, 15 0.788 mmol, 2.24 éq) (composé 10) y est ajoutée. Le mélange réactionnel est refroidi à 0°C et du 1 H-tétrazole solide (32 mg, 0.458 mmol, 1.3 éq) est ajouté. Après 1 h30 d'agitation, le solvant est évaporé sous vide et le résidu est purifié par colonne chromatographique sur gel de silice (éther de pétrole/acétate d'éthyle 9/1 contenant 3% de Et3N) pour conduire au 20 composé 11 (259 mg, 92%) sous forme d'un sirop incolore. C48H88N06P (M = 806.21 g/mol). RMN 1H (250 MHz, CDCI3) 8 0.88 (app t, 6H, 2CH3), 1.16-1.30 (m, 60H, 24 CH2, 4xCH3 isopropyl), 1.60 (m, 4H, 2CH2), 2.29 (t, 4H, 2CH2, J = 7.5 Hz), 3.55-3.85 (m, 4H, 2CH isopropyl, 2H3a), 4.17 (ddd, 1H, H1 aB, J1aB-1aA 25 = 12 Hz, J1aB_2a = 6.3Hz, J1aB-p = 3Hz), 4.34 (ddd, 1H, H1 aA, J1aA-2a = J1aA-P = 4.5Hz), 4.71 (m, 2H, CH2Ph), 5.19 (m, 1H, H2a), 7.2-7.4 (m, 5H, 5CHAr). 3,4,5,6-Tétra-O-benzyl-1-O-(2,3,4,6-tétra-O-acetyl-a-D-mannopyranosyl) -2-0-[((S)-2,3-d ipaim itoyloxypropyl)(benzyl)phosphoryl]-D-myo- 30 inositol (composé 12, figure 2a) SFPIM87 31 Le composé 11 (259 mg, 0.321 mmol, 2.8 éq) et le composé 7 (100 mg, 0.115 mmol) sont coévaporés ensemble avec du toluène anhydre (2 x 10 mL) puis séchés 30 min sous vide poussé avant d'être dissous, sous atmosphère d'argon, dans du CH2Cl2 anhydre (12 mL). Du 1H-tétrazole solide (26 mg, 0.368 mmol, 3.2 éq) est ajouté à 0°C puis après 1 h30 d'agitation à température ambiante, le mélange réactionnel est refroidi à ù 40°C. Une solution d'acide m-chloroperbenzoique (m-CPBA) (50%, 79 mg, 0.230 mmol, 2 éq) dans du CH2Cl2 (5 mL) est ajouté goutte à goutte. Après 2h d'agitation en laissant remonter le milieu réactionnel à température 1 o ambiante, la réaction est stoppée par addition d'une solution aqueuse à 10% de Na2S2O3 (65 mL) et le mélange est extrait avec du diéthyl éther (Et2O) (130 mL). La phase organique est lavée avec une solution aqueuse à 5% de NaHCO3 (3 x 65 mL) puis séchée sur MgSO4. Le solvant est évaporé sous vide et le résidu est purifié par colonne chromatogaphique 15 sur gel de silice (éther de pétrole/acétate d'éthyle 4/1) pour donner une fraction du premier P-stéréoisomère du composé 12 (42 mg), une fraction de mélange d'isomères (23 mg) et une fraction du deuxième isomère du composé 12 (38 mg) (rendement global 56%). C90H127O22P (M = 1591.88 g/mol). 20 RMN 13C (100 MHz, CDCI3) 8 173.36, 172.97, 170.72, 170.15, 169.89, 169.53, 138.36, 138.33, 137.90, 137.30, 136.00 (d), 135.67 (d), 128.82-172.08, 83.22, 81.12, 80.89, 78.75 (d), 76.11, 76.07, 76.01, 75.91, 72.99, 69.90, 69.82, 69.39, 69.33, 69.16, 67.45, 67.39, 65.91, 65.43, 62.89, 62.28, 34.33, 34.16, 32.06, 29.84, 29.79, 29.65, 29.50, 29.46, 29.28, 25 29.27, 24.98, 22.82, 20.96, 20.83, 20.74, 14.25. 3,4,5,6-Tétra-O-benzyl-1-O-a-D-mannopyranosyl-2-O-[((S)-2, 3-dipaimitoyloxypropyl)(benzyl)phosphoryl]-D-myo-inositol (composé 13, figure 2a) 32 SFPIM90 Une solution d'hydroxide de sodium à 0.1 M fraîchement préparée (1 mL, 0.1 mmol, 4 éq) est ajoutée à une solution de composé 12 (40 mg, 0.025 mmol) dans le tétrahydrofurane (THF) (3 mL). Le mélange réactionnel est agité 4h à température ambiante puis il est dilué avec du CH2Cl2 (10 mL). La phase organique est lavée avec H2O puis séchée sur MgSO4. Le solvant est évaporé pour conduire au composé attendu 13 (36 mg, 100%) Les spectres RMN du produit brut indiquent la présence d'environ 30% de produit encore acétylé. I -O-a-D-mannopyranosyl-2-O-[((S)-2,3-d ipalm itoyloxypropyl) phosphoryl]-D-myo-inositol (composé 14, figure 2a) SFPIM91 Le composé 13 (36 mg, 0.025 mmol) obtenu ci-dessus est dissout dans un mélange de CH2Cl2/EtOH/acide acétique (4/5/0.5 mL). Un large excès de palladium sur charbon (Pd/C 10%) est ajouté et la réaction est agitée 6h à température ambiante sous pression atmosphérique d'hydrogène (ballon de baudruche). Le catalyseur est retiré par filtration sur membrane millipore et rincé 3 fois avec 20 mL de mélange CH2Cl2/EtOH (1/1). Les solvants résiduels sont évaporés sous vide pour conduire au composé 14 (25 mg, 100%) sous forme de solide blanc. 2) Préparation des cultures primaires de macrophaqes : Des cellules murines de moelle osseuse ont été obtenues à partir de fémurs de lignées de souris sauvages. Les cellules obtenues ont été cultivées (106/ml) pendant 7 jours dans un milieu DMEM (Dulbecco's modified Eagle's medium) complémenté avec 20% de sérum de cheval et 30% de milieu cellulaire conditionné L929 [22]. Trois jours après renouvellement du milieu, la préparation cellulaire comprend une population homogène de macrophages. 33 3) Stimulation des macrophaqes de souris sauvaqes par le LPS en présence et en l'absence d'isomère de PIM isoPlMi-2Ci6 SFPIM911 Les macrophages dérivés de la moelle osseuse de souris sauvages ont été cultivés sur des plaques de culture 96 puits à raison de 105 cellules par puits puis stimulés par du LPS (100 ng/ml, Escherichia. coli, sérotype 0111:84, SIGMA) avec ou sans PIM analogue (1-10 �g/ml). Toutes les préparations de PIM analogue lyophilisées utilisées sont solubilisées dans du DMSO et additionnées aux cultures à une concentration finale maximale non cytotoxique de 1 %. 1 o Après une stimulation de 24 heures, les surnageants de culture ont été collectés et analysés pour leur contenu en cytokines TNF-a, IL-6, IL-12p40 et KC par ELISA (DUOSET R&D) et pour leur contenu en nitrite par la réaction de Griess. Les résultats montrent que la forme � isomère � de PIM1 isoPIM1- 15 2016 (SFPIM91) inhibe fortement la synthèse de TNF-a induite chez les macrophages stimulés au LPS, en comparaison avec les PIM naturels Ac2PIM6 et Ac2PIM6 , et le PIM1 synthétique (SFPIM135) (figure 3). Des résultats similaires ont été obtenus pour le NO. Un test de cytotoxicité MTT réalisé sur les mêmes macrophages en présence des différentes fractions 20 de PIM a permis de montrer l'absence de cytotoxicité des différentes préparations pour les cellules (figure 4). L'expression de l'IL-6 par les macrophages stimulés au LPS en présence ou en absence d'Interféron y est aussi inhibée (figure 5). La sécrétion d'IL-12p40 en réponse au LPS est déjà fortement inhibée à des concentration de lug/mL de PIM ou d'isoPIM 25 (figure 6). De même, la production de chimiokine KC, impliquée dans le recrutement des cellules inflammatoires comme les neutrophiles, est aussi fortement réduite en présence de PIM1 (SFPIM135) ou plus fortement d' isoPIM1-2016 (SFPIM91) (figure 7). Dans la mesure où des préparations de PIM2 et de PIM6 ont été identifiées initialement comme étant des stimulateurs de la sécrétion de TNF et d'IL-12p40 par des cultures primaires de macrophages, les préparations d'isomère de PIM ont été testées pour leur capacité à induire une réponse pro-inflammatoire à des concentrations jusqu'à 20 pg/ml. Les résultats obtenus n'ont montré aucune stimulation de la réponse inflammatoire (TNF-a et IL-12p40) des cultures primaires de macrophages induite par les préparations d'isomère de PIM. 4) Activité anti-inflammatoire in vivo des dérivés synthétiques de PIM Modèle in vivo de détresse respiratoire Les souris C57BL/6 ont reçu le véhicule seul (saline avec 1.25% DMSO) ou du LPS (1 pg par souris) d'Escherichia coli (serotype O111:B4; Sigma, St Louis, MO, USA) en l'absence ou en présence de PIM1 (SFPIM135) ou d'isoPlM1-2C16 (SFPIM91) (501.1g/souris), appliqués par instillation nasale dans un volume de 40 pL sous une anesthésie légère à la kétamine-xylasine. La résistance des voies respiratoires a été évaluée par la plethysmographie non-invasive sur une période de 3 heures après l'application de LPS. Des souris vigiles ont été placées dans des chambres de plethysmographie (EMKA Technologies, Paris, France). L'augmentation de la pause respiratoire (Penh) en tant que mesure d'inconfort respiratoire a été enregistrée et analysée en utilisant le logiciel "Datanalyst Software (EMKA Technologies, Paris, France) et exprimée en moyenne � SEM de Penh de n=2-3 souris individuelles par groupe [23]. Lavaqe bronchoalvéolaire (BAL) Le fluide BAL est collecté en canulant la trachée et en lavant les poumons quatre fois avec 0.5 mL de PBS froid. Après centrifugation à 400 x g pendant 10 min à 4°C, le surnageant du premier lavage est conservé à -70°C pour l'analyse des cytokines. Des pools de culots cellulaires sont comptés au bleu Trypan (Sigma) dans une cellule haematocytométrique. Pour le comptage différentiel, les cellules sont marquées avec Diff-Quik Staining (Merz & Dade AG., Dudingen, Switzerland). Deux fois cent cellules sont comptées. Détermination des cytokines Les concentrations de TNF et de KC ont été évaluées par enzyme- linked immunosorbent assay (ELISA) conformément aux instructions du fabricant (R&D Duoset, Minneapolis, MO). Résultats Le TNF est essentiel pour le dysfonctionnement respiratoire aigu induit par le LPS comme cela a été montré chez les souris déficientes en TNF [23]. Afin de déterminer leur activité potentielle in vivo, le PIM1 (SFPIM135) et l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91) ont été testés pour leur activité inhibitrice dans un modèle murin d'inflammation pulmonaire aigue et de détresse respiratoire induites par l'application intranasale de LPS (1 �g/souris). Les souris C57BL/6 ont reçu une application par voie intranasale de 1 �g de LPS et Penh a été enregistré pour 200 minutes utilisant la plethysmographie non-invasive. Le graphique de la figure 11 représente l'aire sous la courbe (de 70 à 175 min). Les valeurs représentent la moyenne � SEM de n=2-3 souris par groupe. Typiquement, les souris recevant une application intranasale de LPS développent une augmentation aiguë de Penh (accroissement de la pause repiratoire ou enhanced respiratory pause), mesure du dysfonctionnement respiratoire, débutant 90 minutes après l'application de LPS (figure 8). L'addition de PIM1 (SFPIM135) cause une réduction partielle dans l'accroissement de Penh induit par le LPS. Cette inhibition est encore plus prononcée après l'addition de l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91) (figure 8). Le LPS provoque un recrutement des cellules inflammatoires dans les voies respiratoires, mesuré en nombre total de cellules dans le fluide bronchoalvéolaire (BAL) des souris traitées par le LPS. Ici, le nombre de cellules inflammatoire détecté dans le BAL 18 heures après l'application de LPS, est partiellement réduit en présence d'isoPIM1-2C16 (SFPIM91), et moins en présence de PIM1 (SFPIM135) (figure 9). Les neutrophiles constituent la plupart des cellules inflammatoires recrutées après exposition au LPS . Les macrophages sont essentiellement inchangés. Dans cette première expérience une réduction du nombre des neutrophiles jusqu'à 50 ou 70 % est observée dans 2 souris sur 3 ayant reçu le PIM1 (SFPIM135) ou l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91), respectivement. Le recrutement des neutrophile dépend de différents facteurs dont la chimiokine KC, même s'il n'est pas dépendant de manière critique du TNF [23]. Dans la figure 10, les souris traitées sont sacrifiées 24 heures après l'application intranasale de 1 �g de LPS et le fluide bronchoalvéolaire est analysé pour déterminer le contenu en chimiokine KC. La sécrétion de KC dans l'espace broncho-alvéolaire est fortement diminuée par la co- administration de PIM1 (SFPIM135) ou d'isoPIM1-2C16 (SFPIM91) (figure 10). De même, le relargage de TNF dans l'espace broncho-alvéolaire est diminuée par la co-administration de PIM1 (SFPIM135) ou plus fortement par l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91) (figure 11). Les valeurs représentent la moyenne � SEM de n=3 souris par groupe, d'une expérience représentative de 3 expériences indépendantes. Des expériences complémentaires indiquent que l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91) cause une diminution d'expression de plusieurs autres cytokines et chimiokines inflammatoires dans les poumons exposés aux 3o endotoxines. Dans ces expérience l'isoPIM1-2C16 (SFPIM91) cause une inhibition marquée de l'inflammation pulmonaire et de la résistance des voies respiratoires en réponse aux endotoxines locales. EXEMPLE 2 : 1) Synthèse du composé 25 (IsoPIM1-C16C18) (Figure 2b) Per-O-méthoxyacétyl-D-mannopyranose (composé 15, figure 2b) SFPIM-93 1 o Le chlorure de méthoxyacétyle (660 pl, 7.22 mmol, 6.5 éq) est ajouté goutte à goutte à une solution de D-Mannose (200 mg, 1.11 mmol) dans de la pyridine (6 ml) à température ambiante et le mélange est agité 18h. Les solvants sont évaporés et le résidu est dilué dans de l'acétate d'éthyle (30 mL). La solution est ensuite lavée avec une solution aqueuse de HCI 15 1 N (10 mL), puis une solution de NaCl saturée (10 mL) et séchée sur sulfate de magnésium (MgSO4). Les solvants sont évaporés et une purification par colonne chromatographique sur gel de silice (éther de pétrole/acétate d'éthyle 2/1 puis 1/1) conduit au composé 15 pur (518 mg, 86%) sous forme d'un sirop jaune. 20 C21H32O16 (M = 540.47 g/mol). RMN 1H (250 MHz, CDCI3) 8 3.41 (s, 6H), 3.45 (s, 3H), 3.49 (s, 6H), 3.85-4.26 (m, 14H), 5.25-5.53 (m, 3H), 6.21 (s, 1 H) ; RMN 130 (62.9 MHz, CDCI3) 8 59.34, 59.42, 59.50, 61.83, 65.50, 68.35, 68.82, 69.14, 69.26, 69.37, 70.44, 90.49, 167.61, 169.08, 169.22, 169.33, 25 169.90. MS IS : M calculée 540.17 ; trouvée : [M+NH4]+ 558.5, [M+Na]+ 563.5, [M+K]+ 579.5. 2,3,4,6-Tétra-O-méthoxyacétyl-D-mannopyranose (composé 16, figure 30 2b) SFPIM-114 De l'acétate d'hydrazine (500 mg, 5.48 mml, 1.6 éq) est ajouté à une solution du composé 15 (1.850 g, 3.4 mmol) dans du diméthyl formamide (DMF) (15 mL) précédemment refroidit à -20°C. Après 1h d'agitation à ù 20°C, le mélange est dilué avec de l'acétate d'éthyle (150 mL), puis lavé avec une solution de NaCl saturée (5 x 50 mL), séché sur MgSO4 et concentré sous vide pour donner le composé 16 (1.331 g, 83%) sous forme d'un sirop jaune. C18H28O14 (M = 468.42 g/mol). RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 8 3.34 (s, 3H,), 3.35 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 3.41 (s, 3H)(4 OMe), 3.87 (AB, 2H, CH2OMe), 3.95 (s, 2H, CH2OMe), 4.02 (s, 2H, CH2OMe), 4.08 (AB, 2H, CH2OMe), 4.2-4.35 (m, 3H, H5', H6'A, H6'B), 5.19 (d, 1H, H1', J1.2 = 1.8 Hz), 5.27 (t, 1H, H4', J4.3 = 10 Hz), 5.3 (dd, 1H, H2', J2.3 = 3.2 Hz), 5.49 (dd, 1H, H3'). RMN 13C (100 MHz, CDCI3 ) 8 59.45 (CH3), 59.48 (CH3), 59.50 (CH3), 62.62 (C6'), 66.53 (CH2, C4'), 68.00 (CH, C5'), 69.29 (CH, C3'), 69.34 (CH2), 69.4 1(CH2), 69.49 (CH2), 69.52 (CH2), 70.50 (CH, C2'), 91.98 (CH, Cl'). 2,3,4,6-Tétra-O-méthoxyacetyl-1-O-trichloroacétimidoyl-a-D-mannopyranose (composé 17, figure 2b) SFPIM-125 Du trichloroacétonitrile (1.28 mL, 12.80 mmol, 12 éq) est ajouté à un mélange de composé 16 (500 mg, 1.067 mmol) et de 1,8- diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ène (DBU)(45 pL, 0.299 mmol, 0.28 éq) dans du dichlorométhane (CH2Cl2) anhydre (10 mL) à température ambiante sous une atmosphère d'argon. Après 10 min d'agitation, le mélange réactionnel est purifié par colonne chromatographique sur gel de silice (éther de pétrole/acétate d'éthyle 1/2 contenant 0.2% de triéthylamine (Et3N)) et conduit ainsi au composé 17 (479 mg, 73%) sous forme d'un sirop jaune. C2OH28O14NC13 (M = 614.81 g/mol). RMN 1H (250 MHz, CDCI3) 8 3.41 (s, 3H, CH3), 3.42 (s, 3H, CH3), 3.45 (s, 3H, CH3), 3.50 (s, 3H, CH3), 3.95 (dd, 2H, CH2OMe), 4.03 (s, 2H, CH2OMe), 4.08 (s, 2H, CH2OMe), 4.19 (dd, 2H, CH2OMe), 4.22-4.33 (m, 2H, H5',H6'A), 4.40 (dd, 1H, J = 5.3 et 13.3 Hz, H6'B), 5.45 (t, 1H, J = 9.8 Hz, H4'), 5.55 (dd, 1H, J = 5.2 et 10.0 Hz, H3'), 5.59 (dd, 1H, H2'), 6.32 (d, 1H, J = 1.5 Hz, H1'), 8.84 (s, 1H, NH). 3,4,5,6-Tétra-O-benzyl-1-O-(2,3,4,6-tetra-méthoxyacetyl-a-D- mannopyranosyl)-D-myo-inositol (composé 18, figure 2b) SFPIM-203 Le composé accepteur 6 (940 mg, 1.42 mmol, 1 éq) et le composé donneur 17 (1.16 g, 1.89 mmol, 1.3 éq) sont rassemblés dans un même ballon et sont placés sous vide, sur P2O5 pendant 18h. Le mélange est ensuite placé sous argon et du tamis 4A y est ajouté. Le ballon est laissé sous flux d'argon pendant 10 min, puis du CH2Cl2 anhydre (7 mL) est ajouté. Après 30 min supplémentaires d'agitation sous argon, le milieu réactionnel est refroidit à 0°C et le TMSOTf (68 pL, 0.38 mmol) est ajouté goutte à goutte. Après 5 min d'agitation à 0°C et 1h à température ambiante sous atmosphère d'argon, le mélange réactionnel est refroidit à 0°C et la réaction est stoppée par addition de Et3N (1 ml). Le tamis est filtré sur verre fritté, les solvants sont évaporés sous vide et le résidu est purifié par colonne chromatogaphique sur gel de silice (éther de pétrole/acétate d'éthyle 1/1) pour conduire au composé 18 (296 mg, 21%). (On isole également une fraction de 350 mg du composé 18 en mélange avec l'isomère initialement attendu ayant perdu le PMB mais glycosylé en position 2 de l'inositol). C52H62O19 (M = 991.06 g/mol). RMN 1H (400 MHz, CDCI3) 8 2.89 (m, 1H, OH), 3.34 (s, 3H, CH3), 3.41 (s, 3H, CH3), 3.42 (s, 3H, CH3), 3.44 (s, 3H, CH3), 3.41-3.48 (m, 2H, 2CH;ns), 3.45 (dd, 1H, CH;ns, J = 2.4, 6.0 Hz), 3.86-4.16 (m, 8H, 4CH2OMe), 4.15 (dd, 1 H, H6'A, J6'A-5' = 2.4 J6'A-6'B = 12 Hz), 4.29 (br s, 1 H, H2), 4.34 (dd, 1 H, H6'B, J6'B_5' = 4.8 Hz), 4.43 (ddd, 1H, H5'), 4.65-4.91 (m, 8H, 4CH2Ph), 5.07 (d, 1H, H1', = 2 Hz), 5.31 (t, 1H, H4', J4'_3' = J4'_5' = 10.0 Hz), 5.41 (dd, 1H, H2', J2'_3' = 3.2 Hz), 5.56 (dd, 1H, H3'), 7.15-7.4 (m, 20H, 4x5CHAr). RMN 13C (62.9 MHz, CDCI3 ) 8 59.42, 59.48, 59.52, 63.12 (06'), 66.65 (4'), 68.83 (C5'), 69.26 (C2), 69.38 (C3'), 69.46 (2CH2OMe), 69.49 (CH2OMe), 69.74 (CH2OMe), 69.87 (C2'), 73.17 (CH2Ph), 76.0(CH2Ph), 76.03(CH2Ph), 76.28(CH2Ph), 80.27, 80.31, 81.15, 81.53 et 83.12 (CHins), 99.47 (Cl'), 127.69-128.62 (11 pics, CHAr), 137.88, 138.26, 138.57, 138.63, 169.25 (CO), 169.31 (CO), 169.49 (CO), 169.86 (CO). 3-O-Benzyl-1-O-octadécanoyl-sn-glycerol (composé 19, figure 2b) SFPIM1 La (diméthylamino)pyridine (DMAP) (5.6 mg, 0.05 mmol, 0.1 éq) puis le dicyclohexylcarbodiimide (DCC) (190 mg, 0.92 mmol, 2 éq) sont ajoutés à une solution, précédemment refroidie à 0°C, d'acide stéarique (130 mg, 0.46 mmol) et de 3-O-benzyl-sn-glycerol (100 mg, 0.55 mmol, 1.2 éq) dans du dichlorométhane anhydre (CH2C12) (5 mL). Le mélange réactionnel est agité 1h à 0°C puis 18h à temperature ambiante puis est filté sur cotton afin de retirer une partie de la dicyclohéxylurée formée. Le solvant est évaporé sous vide et le résidu est purifié par colonne chromatogaphique sur gel de silice (éther de pétrole/acétate d'éthyle 6/1) pour conduire au composé 19 (129 mg, 63%) sous forme d'un solide blanc. C28H48O4 (M = 448.69 g/mol) RMN 1H (250 MHz, CDCI3) 8 0.88 (t, 3H, CH3, J = 6.5 Hz), 1.25 (b, 28H, 14CH2), 1.60 (m, 2H, 2H3"), 2.31 (t, 2H, 2H2", J = 7.5 Hz), 2.64 (d, 1H, OH, J = 3.5 Hz), 3.48 (dd, 1 H, H3aA, J3aA-3aB = 9.75Hz, J3aA-2a = 6 Hz), 3.55 (dd, 1H, H3aB, J3aB_2a = 4.5 Hz), 4.02 (m, 1H, H2a), 4.12 (dd, 1H, H1 aA, J1aA-2a 4.8 Hz), 4.19 (dd, 1H, H1aB, J1aB_1aA = 11.5Hz, J1aB_2a 5 Hz), 4.55 (s, 2H, CH2Ph), 7.33 (m, 5H, CHAr). 41 RMN 130 (62.9 MHz, CDCI3 ) 8 14.22 (CH3), 22.19 (CH2), 25.00 (CH2, C3"), 29.23, 29.36, 29.46, 29.66, 29.71, 29.76, 29.80 (7 CH2), 32.02 (CH2), 34.24 (CH2, C2"), 65.43 (CH2, Cl a), 68.80 (CH, C2a), 71.00 (CH2, C3a), 73.58 (CH2Ph), 127.82 (CHAr), 127.94 (CHAr), 128.54 (CHAr), 137.77 (CqAr), 174.01 (Cq, Cl"). MS-IS : calculée 448.36 ; trouvée : [M+H]+ 449.5, [M+NH4]+ 466.5, [M+Na]+ 471.5. 3-O-Benzyl-2-O-hexadecanoyl-1-O-octadécanoyl-sn-g lycerol (composé 20, figure 2b) SFPIM34 Le chlorhydrate de (dimethylamino)propylcarbodiimide (EDCI) (662 mg, 3.45 mmol, 2.5 éq) et la DMAP (34 mg, 0.28 mmol, 0.2 éq) sont ajoutés à une solution du composé 19 (620 mg, 1.38 mmol) et d'acide palmitique (708 mg, 2.76 mmol, 2 éq) dans du CH2C12 anhydre (25 mL). Le mélange réactionnel est agité 18h à température ambiante puis dilué avec CH2C12 (100 mL). La phase organique est lavée avec une solution d'HCI 1 N (40 mL), de l'eau (40 mL), puis une solution de NaCl saturée (40 mL) et séchée sur MgSO4. Le solvant est évaporé sous vide et le résidu est purifié par colonne chromatogaphique sur gel de silice (éther de pétrole/acétate d'éthyle 6/1) pour conduire au composé 20 (899 mg, 95%) sous forme d'un solide blanc. 044H78O5 (M = 687.11 g/mol) RMN 1H (250 MHz, CDCI3) 8 0.88 (t, 3H, CH3, J = 6.5 Hz), 1.26 (m, 52H, 26CH2), 1.60 (m, 4H, 2H3', 2H3"), 2.27 (t, 2H, J = 7.5 Hz) et 2.31 (t, 2H, J = 7.5 Hz)(2H2' et 2H2"), 3.59 (d, 2H, 2H3a, J = 5 Hz), 4.19 (dd, 1H, H1 aA, J1aA_1aB = 11.75 Hz, J1A_2a = 6.3 Hz), 4.35 (dd, 1H, H1 aB, J1aB_2a = 3.8 Hz), 4.53 (AB, 2H, CH2Ph, J = 12.2Hz), 5.24 (quint., 1H, H2a), 7.32 (m, 5H, CHAr). RMN (100 MHz, CDCI3) 8 14.23 (CH3), 22.82 (CH2), 25.01 et 25.08 (2CH2, C3', C3"), 29.22-29.83 (CH2, 8 lines), 32.06 (CH2), 34.23 et 34.44 (2CH2), 62.16 (CH2, Cl a), 68.38 (CH2, C3a), 70.12 (CH, C2a), 73.42 (CH2Ph), 127.72 (CHAr), 127.87 (CHAr), 128.51 (CHAr), 137.83 (CqAr), 173.16 (Cq, CO), 173.45 (Cq, CO). SM-IS M calculée : 686.58 ; trouvée : [M+H]+ 687.5, [M+NH4]+ 704.5, [M+Na]+ 709.5. 2-O-Hexadecanoyl-1-O-octadécanoyl-sn-glycerol (composé 21, figure 2b) SFPIM29 Le composé 20 (250 mg, 0.36 mmol) est dissout dans un mélange CH2Cl2/EtOH (1/2.5, 14 mL). Un large excès de palladium sur charbon (Pd/C 10%) est ajouté et la réaction est agitée 4 h à température ambiante sous pression atmosphérique d'hydrogène (ballon de baudruche). Le mélange réactionnel est chauffé à 40°C pour une meilleure dissolution du produit attendu et le catalyseur est retiré par filtration sur membrane millipore. Il est rincé 3 fois avec 20 mL de mélange CH2Cl2/EtOH (1/1) précédemment chauffé à 40°C. Le solvants résiduels sont évaporés sous vide pour conduire au composé 21 (215 mg, 99%) attendu sous forme de solide blanc. C44H78O5 (M = 687.11 g/mol). RMN 1H (250 MHz, CDCI3) 8 0.88 (t, 6H, 2CH3), 1.26 (m, 52H, 26CH2), 1.62 (m, 4H), 1.99 (s très large, 1H, OH), 2.32 (t, 2H, J = 7.7 Hz), 2.34 (t, 2H, J = 7.5 Hz), 3.73 (d, 2H, 2H3a, J = 5 Hz), 4.23 (dd, 1H, H1 aA, J1aA-laB = 11.75 Hz, J1A-2a = 5.75 Hz), 4.35 (dd, 1H, H1 aB, J1aB-2a = 4.5 Hz), 5.08 (quint, 1H, H2a, J = 4.5 Hz). RMN 13C (62.9 MHz, CDCI3) 8 14.27 (CH3), 22.84 (CH2), 25.04 et 25.09 (2CH2), 29.25-29.85 (CH2, 8 lines), 32.08 (CH2), 34.26 et 34.44 (2CH2), 61.68, 62.16, 72.25, 173.57 (Cq, CO), 173.93 (Cq, CO). (S)-2-O-Hexadecanoyloxy-1-O-octadécanoyloxypropyl benzyl (N,N-diisopropylamino)phosphoramidite (composé 22, figure 2b) SFPIM47 Du 1H-tetrazole solide (11 mg, 0.151 mmol, 0.6 éq) et le composé 21 sont séparément séchés sous vide sur P2O5 pendant 1h avant d'être rassemblés et dissous dans le CH2Cl2 anhydre (2 mL). La solution stock de composé 10 (0.84M, 358 pL, 0.301 mmol, 1.2 éq) est ajoutée et après 30 min d'agitation à température ambiante, le mélange réactionnel est dilué avec du CH2Cl2 (50 mL), refroidi à 0°C et la phase organique est lavée avec une solution à 0°C saturée de NaHCO3 (10 mL), puis séchée sur MgSO4. Le solvant est évaporé et une purification rapide sur colonne 1 o chromatographique de gel de silice (éther de pétrole/acétate d'éthyle 6/1 contenant 1% Et3N) permet d'obtenir le composé attendu 22 (100 mg, 48%) sous forme d'une huile incolore. C50H92NO6P (M = 834.27 g/mol). RMN 1H (400 MHz, CDC13 ) 8 0.88 (t, 6H, 2CH3), 1.18 (d, 6H, CH3 15 isopropyl), 1.19 (d, 6H, CH3 isopropyl), 1.25 (m, 52H, 26 CH2), 1.60 (m, 4H, 2CH2), 2.29 (2t, 4H, 20H2),3.56-3.9 (2 m, 4H, 2CHMe2, 2H3a), 4.17 (ddd, 1H, Hl aB, J = 4.8, 6.4 et 12 Hz), 4.34 (ddd, 1H, Hl aA, J = 4, 8 et 12 Hz), 4.65 et 4.66 (2 dd, 1H, POCHAPh, JA,B = 12.4 Hz, JA,P = 8.4 Hz), 4.732 et 4.735 (2 dd, 1H, POCHBPh, JA,B = 12.4 Hz, JA,P = 8.4 Hz), 5.19 (m, 1H, 20 H2a), 7.3-7.4 (m, 5H, 5CHAr). 31P NMR (162 MHz, CDC13) 8 148.70, 148.80. 3,4,5,6-Tétra-O-benzyl-1-O-(2,3,4, 6-tetra-O-methoxyacetyl-a-D-mannopyranosyl)-2-0-[((S) -2-O-hexadecanoyl-3-O-octadécanoyl- 25 propyl)(benzyl)phosphoryl)-D-myo-inositol (composé 23, figure 2b) SFPIM214 Le composé 22 (290 mg, 0.348 mmol, 3 éq) et le composé 18 (115 mg, 0.116 mmol) sont coévaporés ensembles avec du toluène anhydre (2 x 10 mL) puis séchés 30 min sous vide poussé avant d'être dissous, sous 30 atmosphère d'argon, dans du CH2Cl2 anhydre (8 mL). Le 1H-tetrazole solide (41 mg, 0.58 mmol, 5 éq) est ajouté à 0°C puis après 1 h30 d'agitation à température ambiante, le mélange réactionnel est refroidi à û 40°C. Une solution d'acide m-chloroperbenzoique (m-CPBA) (50%, 120 mg, 0.348 mmol, 3éq) dans le CH2Cl2 (8 mL) est ajoutée goutte à goutte. Après 2h d'agitation en laissant remonter le milieu réactionnel à température ambiante, la réaction est stoppée par addition d'une solution aqueuse à 10% de Na2S2O3 (50 mL) et le mélange est extrait avec du diéthyl éther (Et2O) (100 mL). La phase organique est lavée avec une solution aqueuse à 5% de NaHCO3 (3 x 50 mL) puis séchée sur MgSO4. Le solvant est évaporé sous vide et le résidu est purifié par colonne 1 o chromatogaphique sur gel de silice (éther de pétrole/acétate d'éthyle 2/1 avec un gradient jusqu'à 1/1) pour donner une fraction d'un premier P-stéréoisomère du composé 23 (55 mg) et une fraction de mélange d'isomères (76 mg contenant environ 30% du premier isomère) (rendement global 65%). 15 C96H139O26P (M = 1740.14 g/mol). SM-IS M calculée : 1738.92 ; trouvée : [M+H]+ 1740.5, [M+Na]+ 1763.5. 3,4,5,6-Tétra-O-benzyl-1-O-a-D-mannopyranosyl-2-O-[((S) -2-0-hexadecanoyl-3-O-octadécanoyl-propyl)(benzyl)phosphoryl)-D-myo- 2 0 inositol (composé 24, figure 2b) SFPIM218 Le composé 23 (129 mg, 0.074 mmol) est dissout dans un mélange de CHCI3/MeOH (4/1, 1 mL). Le mélange réactionnel est refroidi à 0°C et de la t-butylamine (160 pL) y est ajoutée. Après 10 min d'agitation à 0°C 25 puis 1h en laissant le milieu réactionnel remonter à temperature ambiante, les solvants sont évaporés sous vide poussé à temperature ambiante et le résidu est purifié par deux colonnes chromatogaphique successives sur gel de silice (CH2Cl2/MeOH 20/1) avec une grande quantité de silice pour donner le composé attendu 24 (67 mg, 63%) sous forme d'un solide blanc 30 homogène (RMN : présence des deux P*-stéréoisomères). C84H123O18P (M = 1415.85 g/mol). 1-O-a-D-Mannopyranosyl-2-O-[((S)-2-O-hexadecanoyl-3-O-octadécanoylpropyl) phosphoryl]-D-myo-inositol (composé 25, figure 2b) SFPIM219 Le composé 24 (63 mg, 0.043 mmol) est dissout dans un mélange de CH2Cl2/EtOH (0.6/1, 16 mL). Un large excès de palladium sur charbon (Pd/C 10%) est ajouté et la réaction est agitée 18h à température ambiante sous pression atmosphérique d'hydrogène (ballon de baudruche). Le catalyseur est retiré par filtration sur membrane millipore et rincé 3 fois avec un mélange CH2Cl2/EtOH (1/1)(20 ml). Les solvants résiduels sont évaporés sous vide pour conduire au composé 25 (43 mg, 100%) sous forme de solide blanc très homogène (RMN). C49H93O18P (M = 1001.25 g/mol). RMN 1H (400 MHz, CD3OD/CDCI3 0.7/0.3 mL) 8 0.88 (t, 6H, 2CH3), 1.26 (m, 52H, 26 CH2), 1.60 (m, 4H), 2.32 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 2.35 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 3.22 (t, 1H, H5, J4-5 = J5-6 = 8.8Hz), 3.52 (br d, 1H, H3), 3.55 (t, 1H, H4', J4'_5' = 10.0 Hz), 3.56 (t, 1H, H4, J4.3 = 8.8 Hz), 3.66 (m, 1H, H1), 3.67-3.72 (m, 2H, H6, H6'A), 3.81 (dd, 1H, H3', J3'_4' = 9.4, J3'_2' = 3.2 Hz), 3.83 (m, 1 H, H5'), 3.89 (dd, 1 H, H6'B , J6'B_5' = 2, J6'B_6'A = 11.6 Hz), 3.97 (dd, 1 H, H2', J2'_1' = 1.6 Hz), 4.16-4.23 (m, 3H, H3aA et 2H l a), 4.42 (dd, 1H, H3aB, J3aB-2a = 3.2, J3aB-3aA = 12 Hz), 4.75 (ddd, 1 H, H2, J2.3 10, J2_1 = 2.2 Hz), 5.16 (d, 1H, H1', J = 1.2 Hz), 5.26 (m, 1H, H2a). RMN 13C (100 MHz, CD3OD/CDCI3 0.7/0.3 mL) 8 14.40 (CH3), 23.43, 25.67, 25.70, 29.90, 29.93, 30.15, 30.16, 30.33, 30.36, 30.44, 30.46, 30.48, 32.74, 34.75, 34.88, 62.83 (06'), 63.23 (C3a), 65.87 (d, Cl a), 68.77 (C4'), 70.89 (d, C2a), 71.48 (C3 et C2'), 73.58 (C4), 73.96 (C6), 74.70 (C5'), 75.79 (C5), 76.37 (d, Cl), 81.37 (d, Cl), 102.95 (C1'), 174.43 (CO), 174.81 (CO). 31P NMR (162 MHz, CD3OD/CDC130.7/0.3 mL) 8 -1.71 ppm. 30 2) Stimulation des macrophaqes de souris sauvaqes par le LPS en • résence d'isomère de PIM1 isoPlMi-C16C18 SFPIM219 Un nouvel isomère de PIM, l'i50PIM1C16C18 (SFPIM219) a été testé pour son activité inhibitrice sur les macrophages stimulés par du LPS (figure 12). Les macrophages dérivés de la moelle osseuse de souris sauvages ont été cultivés sur des plaques de culture 96 puits à raison de 105 cellules par puits puis stimulés par du LPS (100 ng/ml, Escherichia. coli, sérotype 0111:84, SIGMA) avec l'i50PIM1C16C18 (SFPIM219) (1-10 �g/ml) ou un contrôle DMSO. La préparation de SFPIM219 lyophilisée utilisée est solubilisée dans du DMSO et additionnée aux cultures à une concentration finale maximale non cytotoxique de 1%. Après une stimulation de 24 heures, les surnageants de culture ont été collectés et analysés pour leur contenu en cytokines TNF-a ou IL-12 p40 par ELISA (R&D Duoset, Minneapolis, MO). Les résultats correspondent à la moyenne +SD de n=2 souris par génotype. L'i50PIM1C16C18 (SFPIM219) inhibe fortement la sécrétion de TNF (figure 12). Un test de cytotoxicité MTT réalisé sur les mêmes macrophages incubés en présence d'isoPIM1C16C18 (SFPIM219) a permis de montrer son absence de cytotoxicité sur les macrophages (figure 13). La sécrétion d'IL-12p40 en réponse au LPS est déjà fortement inhibée à des concentration de lug/mL d'isoPIM1C16C18 (SFPIM219) (figure 14).25 Listes des références [1] Anticorps anti IL-12 : US2003228311(WO 9816248) ; Hyaluronan : US 2004097465 ; inhibiteurs IL-12 : US 2005049262 (WO 030475) ; anti sense RNA : US 2004241843 [2] Keane J. (2005). TNF-blocking agents and tuberculosis: new drugs illuminate an old topic. Rheumatology (Oxford) ; Keane J., Gershon S., Wise R. P., Mirabile-Levens E., Kasznica J., Schwieterman W. D., Siegel J. N., and Braun, M. M. (2001), Tuberculosis associated with infliximab, a tumor necrosis factor alpha-neutralizing agent. N. Engl. J. Med. 345, 1098-1104 ; Mohan A. K., Cote T. R., Block J. A., Manadan A. M., Siegel J. N., and Braun M. M. (2004), Tuberculosis following the use of etanercept, a tumor necrosis factor inhibitor, Clin. Infect. Dis. 39, 295-299 [3] Jones B. W., Means T. K., Heldwein K. A., Keen M. A., Hill P. J., Belisle J. T., and Fenton M. J. 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Tetrahedron, 2002, 58, 1387-1398 REVENDICATIONS1 Composé de formule générale (I) : (I) dans laquelle : ^ RI et R2 représentent, indépendemment l'un de l'autre, un atome 1 o d'hydrogène, un radical alkyle en C1-C20, un radical acyle en C1-C20, étant entendu que lorsque l'un des substituants RI ou R2 est un atome d'hydrogène l'autre substituant est différent d'hydrogène ; ^ Zl et Z2 représentent, indépendemment l'un de l'autre, un atome d'hydrogène, au moins un sucre choisi dans le groupe comprenant le 15 mannose, le glucose, le galactose, étant entendu que lorsque l'un des substituants Zl ou Z2 est un atome d'hydrogène l'autre substituant est différent d'hydrogène ; ^ Q représente -OP(0)2O-, -0002-, -NHCO2-, -NHCONH- ; ^ Y représente un atome d'hydrogène, un radical hydroxyl, un radical 20 alkoxy en C1-C6, -(CH2)n-OH avec n est nombre entier égal à 1, 2 ou 3, étant entendu que lorsque Y est un radical hydroxyl, Zl et Z2 ne représentent pas tous les deux un atome d'hydrogène ; ^ A représente ûCH2- ; ^ X représente un atome d'hydrogène ;5 52 ^ ou A et X forment ensemble une liaison pour conduire à un cycle à 6 chaînons dans lequel • A représente un ùCH-, • X représente un ùCH2-, -CH(OH)-, un atome oxygène, un ùN R3- dans lequel R3 est un radical alkyle en Cl-C6 ou un radical acyle en C1-C20, étant entendu que, lorsque • A et X forment une liaison pour conduire à un cycle à 6 chaînons, • X = -GNON, • Y = -OH, et • Zl et Z2 représentent au moins un sucre, le cycle à 6 membres est de configuration myo-inositol avec Zl ou Z2 en position 1 et représentant un sucre ; ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 2. Composé selon la revendication 1, de formule (Ia) R1 dans laquelle ^ RI et R2, Zl et Z2, Q et Y sont tels que définis à la revendication 1 ; ^ A représente un ùCH- ;^ X représente un ùCH2-, -CH(OH)-, un atome oxygène, un ùNR3- dans lequel R3 est un radical alkyle en Cl-C6 ou un radical acyle en C1-C20, étant entendu que, lorsque • X = CHOH •Y=OH • Zl et Z2 représentent au moins un sucre, le cycle à 6 chaînons est de configuration myo-inositol avec Zl ou Z2 en position 1 et représentant au moins un sucre ; ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 3. Composé selon a revendication 1, de formule (Ib) dans laquelle ^ RI et R2, Zl et Z2, Q et Y sont tels que définis à la revendication 1 ; ^ A représente ùCH2- ; ^ X représente un atome d'hydrogène ; ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 4. Composé selon la revendication 2, caractérisé en ce que ^ RI et R2 représentent, indépendemment l'un de l'autre, un radical acyle en C1-C20 ;^ Zl représente un atome d'hydrogène ; ^ Z2 représente le mannose ; ^ Q représente -OP(0)20- ; ^ Y représente un radical hydroxyl ; ^ A représente un ùCH- ; ^ X représente un ùCH(OH)- • le cycle à 6 chaînons est de configuration myo-inositol avec Z2 en position 1 ; ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables. 5. Procédé de préparation de composés de formule (I), (Ia) et (Ib) tels que définis à l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que : a) on condense un dérivé di-O-acylé ou di-O-alkylé du glycérol de formule (III) (III) dans laquelle • G = OH ou NH2 • RI et R2 ont les mêmes définitions que dans la revendication 1 avec un agent de phosphitylation, de phosphorylation ou de carbonylation pour donner un intermediaire de formule (IV) R2N O dans laquelle• J=OouNH, • K = P-OBn , P(0)-OBn ou C=0 • L = groupe sortant • RI et R2 ont les mêmes définitions que dans la revendication 1 ; b) on condense l'intermédiaire (IV) avec un dérivé d'un polyol ou aminopolyol de formule générale (V) o-z3 G /OR 4 (CH2)n 1 1 (CH2)n Z4 OR4 (V) dans laquelle •G=OH ouNH2 • Z3 et Z4 représentent indépendamment l'un de l'autre un hexopyranose de configuration manno, gluco ou galacto et portant des groupes protecteurs methoxyacétyle, ou un groupement benzyle, étant entendu que l'un au moins des groupes Z3 et Z4 represente un sucre protégé • R4 represente un groupe protecteur choisi dans le groupe comprenant un groupe benzyle, un radical alkoxy en C1-C6, ou on condense l'intermédiaire (IV) avec un composé cyclique de formule générale (VI)Y2 (VI) dans laquelle • G = OH, NH2 • Z3 et Z4 ont les mêmes définitions que précédemment • Y2 = H ou un groupe -OR4 ou un groupe -(CH2)nOR4 dans lequel R4 a la même définition que précédemment • X2 = -CH2, -CHOR4, -NR3 ou O dans lequel R3 est un radical alkyle en Cl-C6 ou un radical acyle en C1-C20 et R4 represente un groupe protecteur choisi dans le groupe comprenant un groupe benzyle, ou radical alkoxy en Cl-C6 éventuellement en présence d'un agent de couplage ; c) on soumet, éventuellement, le composé obtenu à l'étape b) à une réaction d'oxydation, pour donner un composé de formule générale (VII) R 2\O O/Z3 JMJ' /OR4 RO \(CH2)n (CH2)n Z4 OR4 (VII) dans laquelle • Jet J' = O ou NH • M = P(0)OBn ou C=0 • Z3, Z4, RI, R2, R3, R4 ont les mêmes définitions que précédemment(VIII) dans laquelle • Jet J' = O ou NH • M = P(0)OBn ou C=0 • Z3, Z4, RI, R2, R3, R4 ont les mêmes définitions que précédemment ; d) on soumet le produit de formule générale (VII) ou de formule générale (VIII) à une déprotection en deux étapes qui consiste en ce que l'on les traite d'abord avec une alkylamine choisi dans le groupe comprenant la tbutylamine puis soumet les produits désacylés à une hydrogénation catalytique. 6. Composé de formule (I) tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 4 comme médicament. 7. Composition pharmaceutique comprenant au moins un composé de formule (I) tel que défini à l'une quelconque des revendications 1 à 4 et tout excipient pharmaceutiquement acceptable. 8. Utilisation d'un composé de formule (I) pour la fabrication d'un médicament destiné à la prévention ou au traitement d'une maladie associée à la surexpression de cytokines ou de chimiokines, notamment du TNF et/ou de l'IL-12, ladite maladie comprenant : ou un composé de formule générale (VIII) R2N 0 29,31480 'J 58 A) les maladies immunes ou auto-immunes choisies dans le groupe comprenant la polyarthrite rhumatoïde, le diabète sucré, le lupus érythémateux disséminé ou la maladie de Basedow ; B) le rejet de greffe, 5 C) les infections virales et/ou parasitaires ; D) les chocs résultant d'une infection chronique ou algue d'origine bactérienne virale et/ou parasitaire ; E) les maladies inflammatoires choisies dans le groupe comprenant les maladies inflammatoires chroniques et les maladies inflammatoires 10 vasculaires ; F) les maladies neurodégénératives choisies dans le groupe comprenant les maladies démyélinisantes, les maladies extrapyramidales et cérébelleuses ; G) les pathologies malignes impliquant des tumeurs sécrétant du TNF ou 15 impliquant le TNF choisies dans le groupe comprenant la leucémie, le lymphome ; et H) l'hépatite induite par l'alcool. 9. Utilisation selon la revendication 8, caractérisée en ce que le 20 médicament est destiné à la prévention ou au traitement d'une maladie inflammatoire.