Brevet FR2924609A1 — publié le 20090612

L'invention concerne une nouvelle utilisation d'un extrait de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera Gaertn.), ainsi que des compositions cosmétiques comprenant ledit extrait et des méthodes de soin cosmétique utilisant ledit extrait. Le Lotus Sacré (Nelumbo nucifera Gaertn.) est une plante aquatique de la famille des Nélumbonacées, qu'on trouve notamment dans le sud-est Asiatique. C'est une plante vivace grâce à sa tige en rhizome spongieux, épais, ramifié, portant des tubercules fixés dans le fond de l'étang, dont les fleurs, de couleur blanc rosé, ont 15 à 30 cm de diamètre et comportent une vingtaine de pétales. On a déjà décrit de nombreuses utilisations cosmétiques des extraits de Lotus Sacré. La présente invention porte cependant sur une nouvelle utilisation 15 cosmétique d'un extrait de Lotus Sacré. La Demanderesse a en effet mis en évidence que les extraits de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera Gaerth) présentent une activité cosmétique significative dans le soin des peaux sensibles ou réactives On caractérise la peau sensible par une tendance à une 20 hyperréactivité cutanée par rapport à une peau normale quand elle est soumise au même stimulus, et en particulier à un stimulus environnemental. Cette hyperréactivité se traduit par des picotements, des rougeurs, des échauffements des fourmillements ou des démangeaisons, parfois accompagnées de rougeurs. 25 Les stimuli environnementaux qui déclenchent ou induisent de telles réactions peuvent être de nature physique (rayonnement UV, températures...), chimique (pollution...) hormonale (cycle menstruel) ou émotionnelle (stress) (Morizot et al. Cosmetics and toiletries, 2000, 115 (11), p. 83-89). 30 Des auteurs ont montré que la CGRP (Calcitonin gene-related peptide) qui est le peptide lié au gène de la calcitonine est un neuromédiateur, qui au niveau des cellules neurosensitives de la peau, est impliqué dans la réaction inflammatoire induite par exemple par une irradiation de la peau par un rayonnement ultraviolet (UV) (Scholzen et al., J 35 Investig. Dermatol. Symp. Proc., 1999 ; 4(1) : 55-60). Il a été montré que le neuropeptide CGRP libéré par les cellules nerveuses de la peau, stimule des cellules endothéliales du derme pour libérer l'interleukine 8 (II-8), un médiateur important de l'inflammation cutanée (Ansel et al., J Investig. Dermatol. Symp. Proc., 1997 ; 2(1) :23-26). Les effets liés au stress s'expriment au niveau cutané souvent plus intensément chez les personnes ayant une peau sensible ou réactive. On définit ici le stress comme la tension qui résulte de l'adaptation de l'organisme face à des situations particulières ou vécues comme telles. Le stress est donc une réalité subjective qui dépend à la fois de la nature et du caractère prévisible ou non de l'élément stressant et de la façon dont l'individu le perçoit et le vit. Des chercheurs ont montré que la perception d'un stress au niveau du système nerveux central se transmet aux organes périphériques tels que la peau, par l'intermédiaire de neurotrophines et de neuropeptides. La CGRP est un des neuropeptides qui participe à la création d'un état d'irritation au niveau cutané, en exacerbant les sensations d'inconfort (tiraillement ou picotements) qu'on retrouve plus particulièrement chez les personnes présentant une peau sensible. En particulier, il a été démontré que chez des rats soumis à un stress, en l'occurrence un stress sonore, le taux de CGRP libérée par les fibres sensitives de la peau est significativement augmenté (Joachim et al., J Mol Med., 2007 Jul 17). La Demanderesse a montré in vitro que de façon surprenante, un extrait de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera Gaertn.) présente un effet favorable d'inhibition de la sécrétion de CGRP (calcitonin gene-related peptide) par les neurones sensitifs. Par ailleurs, une hormone habituellement désignée comme I� Des études ont montré une corrélation entre la mesure de l'activité de l'alpha-amylase salivaire avant, puis juste après, un épisode de stress et l'état mental du sujet sur lequel le test est pratiqué (Yamaguchi, Proceedings of the 25th Annual International Conference of the IEEE, 2003, 4, 3075- 3078). Une étude visant à comparer l'évolution de ces deux marqueurs salivaires, cortisol et alpha-amylase, au cours d'épisodes de stress psychologiques a conclu que l'alpha-amylase salivaire augmentait plus significativement et plus rapidement que le cortisol salivaire, en réaction à un stress psychologique suggérant que cette enzyme est un meilleur indicateur du stress, mais également de la relaxation et de l'apaisement (Takai, Arch. Oral Biol., 2004, 49 (12), 963-968). La Demanderesse a également démontré qu'une composition comprenant au moins un extrait de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera Gaertn.) permet une diminution significative des taux de cortisol salivaire et d'alpha- amylase salivaire chez des sujets sur lesquels ladite composition est appliquée. Ainsi, l'invention fournit des extraits et des compositions cosmétiques permettant à la fois de limiter les effets négatifs sur la peau liés à des facteurs environnementaux tels que le stress, mais également de procurer un effet calmant et apaisant sur la peau dans le cas des manifestations exacerbées desdits facteurs environnementaux, en particulier du stress, sur les peaux dites sensibles. Selon un premier aspect, l'invention concerne l'utilisation d'au moins un extrait d'au moins une partie de la plante Lotus Sacré (Nelumbo nucifera) en tant qu'agent actif cosmétique permettant d'obtenir un effet calmant et apaisant sur la peau. Selon un deuxième aspect, l'invention concerne des compositions cosmétiques qui, en elles-mêmes, constituent des produits industriels nouveaux. De telles compositions cosmétiques comprennent 10 à 50 % en poids d'un extrait aqueux de racines de Lotus Sacré et de 0,1 à 10 % en poids d'un extrait de fleurs de Lotus Sacré. Selon un troisième aspect, l'invention concerne une méthode de soin cosmétique destinée à procurer à la peau soumise aux effets d'un stress, un effet calmant et apaisant et/ou à obtenir progressivement des traits du visage détendus, une peau plus lisse et tonifiée, une peau apaisée et plus douce au toucher, un teint lumineux et éclatant, caractérisée en ce qu'elle comprend l'application sur la partie de la peau du visage ou du corps concernée d'une quantité suffisante et efficace d'un extrait ou d'un mélange d'extraits ou d'une composition cosmétique contenant un tel extrait ou mélange d'extraits, en particulier une composition cosmétique faisant l'objet du deuxième aspect de l'invention. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention ressortiront de la description détaillée qui suit. Dans ce qui suit, sauf indication contraire, on désigne par extrait selon l'invention, l'extrait ou le mélange d'extraits dont l'utilisation fait l'objet du premier aspect de l'invention. Le matériel végétal utilisé peut être la plante entière ou une partie de la plante telle que les feuilles, la tige, les fleurs ou les racines. L'extrait ou une partie de l'extrait de l'invention est préférentiellement obtenu à partir des racines de la plante. Selon le procédé d'extraction mis en oeuvre, le matériel peut être utilisé à l'état frais, c'est-à-dire immédiatement après récolte, ou être séché puis éventuellement broyé. L'extrait de l'invention ou chaque partie constitutive de cet extrait peut être préparé par différents procédés d'extraction connus de l'Homme du Métier, par exemple selon un procédé d'extraction par solvant, par un procédé d'entraînement à la vapeur, ou encore par un procédé à l'aide d'un solvant à l'état critique ou subcritique. L'extrait selon l'invention ou une partie de cet extrait peut être 30 obtenu selon un procédé d'extraction mettant en oeuvre un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. A titre de solvant polaire ou de mélange de solvants polaires utilisable pour l'étape d'extraction, on choisira avantageusement un solvant ou un mélange de solvants choisi parmi l'eau, un alcool en C1-C4, par 35 exemple l'éthanol, un glycol en C2-C6, choisi préférentiellement parmi le glycérol, le butylène glycol et le propylène glycol et leurs mélanges. Selon une mise en oeuvre préférée de l'invention, l'extrait de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera) est un extrait aqueux. Lorsqu'on utilise un procédé un procédé d'extraction par solvant, on met alors le matériel végétal en contact avec le solvant à l'état liquide. Le matériel végétal utilisé pour la mise en oeuvre de ce procédé est avantageusement à l'état sec et broyé. Dans ce cas, le solvant est de préférence l'eau ou un mélange d'eau et de glycol, le glycol préféré étant le butylène glycol et le mélange de solvant comprenant au moins 50% d'eau en volume, et de façon préférée au moins 70% d'eau en volume. Lorsque l'extrait ou une partie de l'extrait de l'invention est préparé selon un procédé d'entraînement à la vapeur, on utilise avantageusement l'eau en tant que solvant. Ce procédé d'entraînement à la vapeur d'eau (indifféremment appelé hydrodistillation dans la présente demande) permet d'extraire en particulier des composés volatiles présents dans la plante et solubles dans l'eau, en particulier des composés aromatiques volatiles, par exemple des huiles essentielles. Pour la mise en oeuvre de ce procédé, on utilise le matériel végétal à l'état frais et non séché. Selon ce procédé, l'extrait peut être obtenu par un procédé d'hydrodistillation par lequel on amène de la vapeur d'eau exogène qui entraîne les composés volatiles solubles contenus dans la plante. Selon une mise en oeuvre alternative de ce même procédé, l'extrait peut être obtenu par un procédé d'hydrodistillation ne comprenant aucun apport exogène de vapeur d'eau. Selon cette dernière variante du procédé, on vaporise directement l'eau de constitution de la plante par des moyens physiques (ondes, pression, températures). Un tel extrait peut en particulier être obtenu par un procédé d'hydrodistillation par micro-ondes sous vide pulsé (VMHD), par lequel l'eau de constitution de la plante est vaporisée sous pression réduite, à une température généralement inférieure à 80°C. La vapeur d'eau, qui provient exclusivement de la plante elle- même, entraîne les composés volatiles solubles de la plante. La vapeur d'eau collectée enrichie en composés volatiles solubles est ensuite condensée. Le produit de l'étape de condensation est ensuite filtré, puis avantageusement stérilisé de façon à en faciliter la conservation. Selon une autre variante de l'invention, l'extraction peut également être réalisée par un procédé mettant en oeuvre un solvant polaire à l'état subcritique, ledit solvant étant avantageusement l'eau à l'état subcritique. L'extraction peut être complétée par une étape d'élimination partielle ou totale des solvants d'extraction. Dans le premier cas, on concentre généralement l'extrait jusqu'à obtenir un concentré aqueux dépourvu de quantités significatives de solvant organique, dans le second cas on obtient un résidu sec. De façon alternative, le produit de l'étape d'extraction peut être, lyophilisé ou atomisé pour se présenter sous la forme d'une poudre. La poudre peut être utilisée en l'état dans une composition cosmétique selon l'invention ou être redispersée dans un solvant ou un mélange de solvants. De façon générale, le produit de l'étape d'extraction peut être dissous ou dispersé dans un solvant ou un mélange de solvants, pour être utilisé à titre d'agent actif dans les compositions cosmétiques de l'invention. Le solvant ou le mélange de solvants dans lequel l'extrait est dissous ou dispersé peut être identique ou différent de celui ayant servi à l'extraction. L'extrait de l'invention peut également être adsorbé sur un support avantageusement choisi parmi les poudres de nylon, poreuses ou non poreuses et les micas ou toute substance minérale lamellaire. Dans ce cas, l'extrait utilisé est préférentiellement un extrait aqueux. Un extrait préféré pour la mise en oeuvre de l'invention est un extrait aqueux de racines de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera), en particulier un extrait obtenu par hydrodistillation par micro-ondes sous vide pulsé (VMHD) décrit ci-dessus. L'extrait préféré est obtenu à partir de racines fraîches et non séchées de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera). Un exemple d'un tel extrait est l'extrait de racines de Lotus Sacré commercialisé par la société GATTEFOSSE sous la dénomination Extrait Originel� de Lotus. Un autre extrait préféré est un extrait de fleurs de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera) dans un mélange butylène glycol/eau, de préférence un extrait riche en flavonoïdes et anthocyanes. Un tel extrait est par exemple commercialisé par la société C.E.P SOLABIA sous la dénomination Glycolisat BG de Lotus Sacré (fleurs). L'extrait selon l'invention comprend ainsi au moins 95% en poids d'eau en poids, de préférence au moins 99% en poids d'eau, et de façon encore préférée, au moins 99,9% en poids d'eau. L'extrait de l'invention comprend avantageusement de 0,0001 à 5%, de préférence de 0,001 à 2°k en poids d'extrait sec, de préférence encore de 0,01 à 1% en poids d'extrait sec. De façon avantageuse, l'extrait de l'invention comprend ou est constitué d'au moins un extrait obtenu à partir de racines fraîches et non 15 séchées de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera). De préférence, cet extrait de l'invention comprend ou est constitué d'au moins un extrait comprenant des huiles essentielles. Cet extrait, à lui seul, peut constituer une composition cosmétique. Il peut également être utilisé comme agent actif dans une 20 composition cosmétique. La composition cosmétique comprenant l'extrait de l'invention ou constituée de l'extrait de l'invention est ci-après désignée par composition cosmétique de l'invention. La composition cosmétique selon l'invention comprend une quantité efficace d'extrait de l'invention pour obtenir l'effet cosmétique 25 recherché. La composition selon l'invention comprend ainsi préférentiellement de 0,1% à 99%, de préférence de 0,1% à 50%, en poids d'extrait selon l'invention. Dans une mise en oeuvre préférée de l'invention, la composition 30 comprend un extrait de racines de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera), en particulier un extrait obtenu par hydrodistillation par micro-ondes sous vide pulsé (VMHD). Selon une autre mise en oeuvre de l'invention la composition comprend un mélange d'un extrait de racines et un extrait de fleurs de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera). Cette composition cosmétique contient avantageusement un extrait de racines de Lotus Sacré et un extrait de fleurs de Lotus Sacré. L'extrait de fleur de Lotus Sacré est avantageusement obtenu par extraction au moyen d'un solvant polaire ou d'un mélange de solvants polaires choisi dans le groupe constitué de l'eau, des alcools, en Cl à C4, en particulier l'éthanol, des glycols en C2 à C6, en particulier le glycérol, le butylèneglycol et le propylèneglycol, et de leurs mélanges. Les essais réalisés par les inventeurs ont montré que les propriétés de l'extrait de l'invention peuvent être également obtenues ou améliorées dans des compositions cosmétiques, dans lesquelles l'extrait est associé avec d'autres agents actifs présentant des effets cosmétiques similaires et/ou complémentaires de l'extrait de l'invention. La composition selon l'invention peut également comprendre un ou plusieurs autres agents cosmétiquement actifs. Ces agents actifs peuvent être choisis en particulier dans le groupe comprenant les agents actifs énergisant et revitalisant tels que le polyphosphate de diguanoside ou un extrait en contenant, en particulier un extrait d'Artemia salina, présents de préférence dans une quantité comprise entre 0,5 et 5% en poids de la composition, les agents actifs stimulant la sécrétion de bêta-endorphines, par exemple un dipeptide N-acétyl-Tyr-Arghexadécylester, commercialisé sous la dénomination Calmosensine�, les agents anti-radicalaires tels que l'acide ascorbique ou un de ses dérivés, le tocophérol, en particulier l'alpha-tocophérol sous la forme d'un sel ou d'une base, ou encore un de ses esters, par exemple l'acétate de tocophérol, ou encore les agents anti-inflammatoires tels que l'ascorbyl tocophéryl phosphate de potassium, les agents hydratants, par exemple le glycérol. Selon une mise en oeuvre préférée de l'invention, la composition peut comprendre de 0,1 à 50% en poids de la composition, d'extrait aqueux de racines de Nelumbo nucifera, de 0,1% à 10% en poids d'extrait de fleurs de Nelumbo nucifera, et peut avantageusement comprendre en outre de 0,5 à 5% en poids de polyphosphate de diguanoside ou d'un extrait en contenant, particulièrement un extrait d'Artémia satina, de 0,1% à 5% en poids de Calmosensine�, de 0,01% à2% en poids d'un sel d'ascorbyl tocophéryl phosphate, de 1 à 15% en poids de glycérol. Outre l'extrait de l'invention, ladite composition cosmétique comprend au moins un excipient cosmétiquement acceptable qui peut être choisi parmi des pigments, des nacres, des colorants, des polymères, des agents tensioactifs, des agents de rhéologie, des parfums, des électrolytes, des ajusteurs de pH, des agents anti-oxydants, des conservateurs, et leurs mélanges. La composition cosmétique selon l'invention peut être par exemple un sérum, une lotion, une émulsion, une crème, teintée ou non, ou bien encore un hydrogel, de préférence un masque, ou se présenter sous la forme d'un stick, ou encore d'un patch. Les extraits et les compositions selon l'invention présentent un effet calmant et apaisant particulièrement recherché, et permettent en particulier d'obtenir des traits du visage détendus, une peau plus lisse et tonifiée, une peau apaisée et plus douce au toucher, un teint lumineux et éclatant, lorsqu'on applique ledit extrait ou ladite composition sur la peau du visage ou du corps. La présente invention porte également sur une méthode de soin cosmétique utilisant les extraits ou compositions précédemment décrits en quantité suffisante et efficace pour procurer à la peau soumise aux effets d'un stress, un effet calmant et apaisant et obtenir progressivement des traits du visage détendus, une peau plus lisse et tonifiée, une peau apaisée et plus douce au toucher, un teint lumineux et éclatant, lorsqu'on applique ledit extrait ou ladite composition sur la peau du visage ou du corps. Les extraits ou compositions selon l'invention sont destinés à être appliqués sur tout ou partie de la peau du corps ou du visage et en particulier sur les zones de la peau présentant une sensibilité exacerbée, en particulier sur le visage. La méthode de soin cosmétique est particulièrement destinée au soin des peaux sensibles ou réactives. EXEMPLES Exemple 1: procédé d'extraction de racines de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera) On extrait l'eau de racines de racines de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera) fraîchement récoltées, par un procédé d'hydrodistillation par micro-ondes sous vide pulsé (VMHD) à une température avoisinant 50°C et sous vide. Les vapeurs d'eau sont collectées par condensation, le produit collecté étant ensuite filtré puis avantageusement stérilisé. Exemple 2 : Activité d'un extrait de racines de (Nelumbo nucifera) sur la libération de CGRP (calcitonin gene-related peptide) dans un 15 modèle de co-culture de neurones sensitifs et de kératinocytes. Le modèle sélectionné est une co-culture de neurones sensitifs de rats et de kératinocytes humains. Les cultures de neurones sensitifs issus de ganglions rachidiens 20 d'embryons de rats sont choisies du fait que la physiologie de ces neurones est très proche de celle des neurones sensitifs humains. Les effets de cette eau sont évalués en mesurant la libération de CGRP par les neurones sensitifs. La CGRP (calcitonin gene-related peptide) est un neuromédiateur 25 impliqué dans la réactivité cutanée en exacerbant les sensations d'inconfort telles que des tiraillements ou des picotements. En outre, le nombre de corps cellulaires de neurones a été évalué par coloration et marquage. 30 Matériels et méthodes 1. Cellules utilisées Neurones sensitifs 35 - Type : Primo culture de neurones sensitifs préparés selon la technique décrite par Hall et collaborateurs (J Neurosci. 1997;17(8):2775-84) 10 - Milieu de culture : DMEM en poudre (Invitrogen 21331) reconstitué dans de l'eau ultra pure (Merck ) tamponné avec du NaHCO3. L-glutamine 2mM (Invitrogen 25030) Pénicilline 50 UI/ml -Streptomycine 50 pg/ml (Invitrogen 15070) Supplément N2 (17502) 5 ng/ml Nerf Growth Factor (NGF, Invitrogen 13290) 2, 5 ng/ml Neurotrophine 3 (NT-3, Tebu 450-03-b) Kératinocytes Humains - Type: Kératinocytes humains normaux isolés à partir d'une plastie chirurgicale, utilisés au troisième passage (R3 K015). - Milieu: K SFM (Invitrogen 17005) sans complément. 2. Culture et traitement des neurones sensitifs Les ganglions rachidiens sont prélevés sur des embryons de rats de 15 jours. Après dissociation enzymatique et mécanique des ganglions, les cellules en suspensions ont été ensemencées à la densité de 15000 cellules par puits en plaque 96 puits en milieu de culture. Les cellules ont été placées dans une étuve à 37°C et 5% CO2 saturée en humidité. Après 3 jours de culture, les surnageants de culture sont éliminés et remplacés par : • du milieu reconstitué à partir d'un milieu de culture en poudre additionné par 100 % d'eau ultra pure. • du milieu reconstitué à partir d'un milieu de culture en poudre additionné de 25% d'Extrait Originel� de racines de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera), commercialisé par la société GATTEFOSSE et 75 % d'eau ultra pure, • du milieu reconstitué à partir d'un milieu de culture en poudre additionné de 50% du même extrait et 50 % d'eau ultra pure. Tous ces milieux de culture contiennent 5 ng/mL de NGF et 2.5 ng/ml de NT3. La moitié du volume de culture a été changée tous les 2 jours. 3. Co-culture neurones sensitifs-kératinocytes Après 4 jours d'incubation (7 jours de culture des neurones), 10000 kératinocytes ont été ajoutés par puits de culture, et les cellules ont 5 été incubées pendant 4 jours à 37°C et 5% de CO2. 4. Traitement et dosage du CGRP Après 4 jours de co-culture (11 jours de culture de neurones), les 10 surnageants de culture sont éliminés et les cellules sont incubées en présence de l'extrait de racines de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera) contenant ou non de la capsaïcine à 10-6 M pendant 25 minutes dans une étuve à 37°C et 5% CO2 saturée en humidité. Chaque condition expérimentale a été réalisée en quadriplicata. 15 A la fin de ces incubations, les surnageants ont été recueillis et le contenu en CGRP a été mesuré dans les surnageants de culture, par un test ELISA (Rat CGRP enzyme immuno assay Kit A05482) selon le protocole préconisé par le fournisseur. 20 5. Analyse du nombre de corps cellulaires. A la fin de cette dernière incubation (12 jours de culture de neurones), les cellules sont fixées dans une solution d'alcool-acide acétique. Les corps cellulaires des neurones sont marqués par un anticorps 25 dirigé contre la protéine � Microtubule Associated Protein � (MAP 2) qui est un anticorps réagissant avec les corps cellulaires des neurones. Après 2 heures d'incubation, les cellules sont lavées en PBS et les marquages révélés par des conjugués fluorescents (GAR Alexa 568). En parallèle, les noyaux ont été marqués avec une solution de 30 Hoechst. Des saisies d'images (3 images par puits de culture soit 12 photos par condition expérimentale au grossissement x 20) et une analyse du nombre de corps cellulaires ont été effectuées à l'aide d'un système d'imagerie à haute résolution, InCell AnalyzerTM1000 (GE Healthcare). 35 • Résultats La quantité de CGRP libérée par les neurones est rapportée au nombre de neurones (quantité de CGRP/moyenne du nombre de neurones 5 par condition) dans chacune des conditions testées. Les résultats sont indiqués dans le tableau ci-dessous : Conditions de culture Moyenne (SD) Milieu contrôle 100% eau ultra pure 11.2 (1,0) Extrait de racines de Nelumbo 8.6 (0,8) nucifera dilué à 25% dans l'eau Extrait de racines de Nelumbo 8.1 (1,2) nucifera dilué à 50% dans l'eau Ppdt S (p Après 7 jours d'incubation, dans les conditions basales en 15 présence d'extrait de racines de Nelumbo nucifera à 25 % et 50 %, la quantité de CGRP libérée par neurone est significativement inhibée par rapport au milieu servant de témoin. 4. Conclusions 20 Les neurones sensitifs au repos, en milieu de culture contenant l'extrait de racines de Nelumbo nucifera préparé selon l'exemple 1, libèrent significativement moins de CGRP que les neurones des cultures témoin. L'extrait testé inhibe l'activité basale rapportée au nombre de 25 neurones, des neurones sensitifs, et dans les deux conditions (25% et 50%). L'extrait n'altère cependant pas le fonctionnement des neurones qui gardent leur capacité physiologique de stimulation par la capsaïcine (extrait de pigment, excitateur des fibres sensitives présentes dans la peau). 30 Ces résultats démontrent l'intérêt d'utiliser un tel extrait de racines de Lotus Sacré en tant qu'agent calmant et apaisant dans des compositions 13 cosmétiques. Exemple 3 : lotion apaisante pour peaux sensibles La lotion est préparée selon la formule suivante (% exprimés en poids) : 50,0 Extrait aqueux de racines de Nelumbo nucifera à 0,1% Glycérol 10,0 Excipients solubles dans l'eau, conservateurs et parfums qsp 100% La lotion est appliquée sur les zones cutanées sensibilisées du corps ou du visage et présente un effet apaisant. Exemple 4 : Crème cosmétique pour le soin du visage La crème dont la formule est indiquée ci-dessous (% exprimés en poids) est une émulsion huile-dans-eau : Eau purifiée 32,8 Extrait aqueux de racines de Nelumbo nucifera à 0,1% 25,0 Calmosensine� 3,0 Glycérol Végétal 2,0 Extrait d'Artemia salina 1,0 Extrait de fleurs de Nelumbo nucifera 0,1 Ascorbyl tocophéryl phosphate de potassium (Sepivital�) 0,05 Excipients émulsionnés, parfums et conservateurs qs 100% L'émulsion huile-dans-eau est préparée selon les méthodes classiques bien connues de l'Homme du métier. La crème ainsi préparée est destinée à être appliquée sur le visage. Exemple 5: Activité in vivo d'une composition à base d'extraits de Lotus Sacré sur la sécrétion salivaire de cortisol. On mesure l'effet cosmétique in vivo de application sur le visage de la composition selon l'exemple 4, comprenant un extrait de racines de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera) tel qu'obtenu selon l'exemple 1, et un extrait de fleurs de Nelumbo nucifera obtenu par extraction à l'aide d'un mélange de solvants butylène glycol/eau. L'objet de l'étude est de mesurer les taux salivaires de cortisol et d'alpha-amylase par un dispositif spécifique de collecte, et un dosage par une méthode spectrophotométrique. • Protocole de l'étude Les sujets doivent ne pas avoir pris de caféine, d'alcool ou de nicotine la veille du test salivaire et éviter la prise de vitamine C le jour du test. Durant l'heure précédant la collection salivaire, les sujets ne doivent pas s'être laver les dents ni pris de nourritures. De plus, si les sujets prennent des hormones, s'assurer qu'une période de 12 heures avant le prélèvement a bien été respectée. Les participants sont tout d'abord au repos pendant au moins les 10 minutes précédant la collecte de salive, en position assise, dans une pièce dont l'humidité (50%�10%) et la température (22°C�2°C) sont contrôlées. Un échantillon unique de salive est collecté avant application sur le visage de la composition selon l'exemple 3. Pour la collecte de l'échantillon de salive, le sujet mâche un rouleau dentaire de coton stérile (salivette�, Sarstedt) pendant 2 à 3 minutes. Après collecte, le prélèvement salivaire est placé dans un tube adapté puis conservé à - 20°C jusqu'à l'analyse On collecte à nouveau leur salive 10 minutes après application, sur la totalité du visage, de la composition selon l'exemple 3. • Dosage salivaire du cortisol et de l'alpha-amylase. Kit salivaire de dosage immunoenzymatique du cortisol (Sa/imetrics, référence 1-3012) La méthode utilise des anticorps monoclonaux du cortisol. Le dosage est réalisé sur l'échantillon salivaire ainsi que sur un standart cortisol. Le cortisol est mis en compétition avec du cortisol lié à une peroxydase. On dose la fraction de cortisol-peroxydase liée aux anticorps par réaction colorimétrique avec un substrat tetramethylbenzidine (TMB). La densité optique est mesurée à 450 nm. La quantité de cortisol-peroxydase est inversement proportionnelle à la quantité de cortisol présente Kit de dosage de l'alpha-amylase salivaire (Sa/imetrics1 de référence 1-1902) La méthode utilise un substrat chromogénique, le 2-chloro-pnitrophenol lié au maltotriose. L'action enzymatique de l'alpha-amylase libère le 2-chloro-p- nitrophenol, dosé par spectrophotométrie à 405 nm. L'activité de l'alpha-amylase présente dans l'échantillon est directement proportionnelle à l'augmentation de l'absorbance mesurée à 405 nm. • Synthèse des résultats Cortisol Avant Après P** application TO Application T1 1.27 1.00 NSlim (p=0.11) Augmentation du cortisol salivaire 1.17 2.02 NSlim (p=o.os) (Ng/ml) (n=6: 25% des sujets) Diminution ou stabilité du cortisol 1.29 0.97 S (=0.02 salivaire (pg/ml) (n=18 : 75% des sujets) * Trois individus ont été retirés du panel à cause des résidus jugés trop élevés lors de l'analyse statistique.25 Sur 21 sujets, le cortisol a tendance à diminuer (p=0.11). 75% des sujets soit 18/24, présentent une diminution significative du cortisol. Alpha amylase Avant application TO 26.1 Après application TI 22 .2 Panel total n=21* P* S (=0.05) j * Trois individus ont été retirés du panel à cause des résidus jugés trop élevés lors de l'analyse statistique. Sur 21 sujets, le taux d'alpha-amylase salivaire diminue de façon significative après application de la composition cosmétique selon l'exemple 5. 15 Conclusion Les taux salivaires de cortisol et d'alpha-amylase diminuent après application de la composition cosmétique comprenant un mélange de racines et de fleurs de Nelumbo nucifera. 20 Cette diminution indique un état d'apaisement et de relaxation se traduisant au niveau de la peau par une amélioration des symptômes courant des états de stress tels que la peau sensible, et au niveau cosmétique par un effet calmant, apaisant sur la peau du visage. 25 Exemple 6 : Effets cosmétiques d'une composition à base d'extraits de Lotus Sacré. 1. Evaluation de l'effet hydratant après 24 heures. 30 On détermine l'effet hydratant par cornéométrie (n = 10 sujets) durant 24 heures suivant une application de la composition selon l'exemple 3, sur la totalité du visage. 10 Action hydratante + 51 % après 2 heures + 51% après 4 heures + 49 après 6 heures + 37% après 24 heures. La composition présente un effet hydratant significatif jusqu'à 24 heures après l'application. 2. Evaluation de l'effet lissant immédiat des rides. On détermine l'effet lissant sur les rides du contour de l'oeil, par mesure avant et 1 heure après application de la composition selon l'exemple 3 (n = 15 sujets). On réalise une prise d'empreinte et on procède également à une analyse d'images par ombre portée. Les résultats obtenus sont les suivants : -nombre de rides : - 12% Profondeur moyenne corrigée : - 13% - Longueur totale : - 20% L'effet lissant de la composition sur les rides du contour de l'oeil est significatif. 3. Evaluation de l'effet anti-radicalaire La composition est appliquée 4 fois à intervalle de deux heures d'intervalle pour chacune des applications. On évalue l'activité anti-radicalaire par une méthode ex-vivo (mesure de stripping D-squame) par dosage du taux de peroxydes par fluorimétrie. La mesure est réalisée 24 heures après la première application de la composition testée, en comparant le résultat avec celui obtenu pour une zone témoin non traitée. On observe une diminution significative, de 28%, des espèces 35 oxygénées réactives présentes à la surface de la peau. 18 REVENDICATIONS 1. Utilisation d'au moins un extrait d'au moins une partie de la plante Lotus Sacré (Nelumbo nucifera) en tant qu'agent actif cosmétique permettant d'obtenir un effet calmant et apaisant sur la peau. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit agent comprend ou est constitué d'un extrait de racines. 3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que ledit agent comprend ou est constitué d'au moins un extrait obtenu selon un procédé d'extraction mettant en oeuvre un solvant polaire ou un mélange de solvants polaires. 4. Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que ledit procédé d'extraction met en oeuvre l'eau ou un mélange de solvants polaires comprenant au moins 50% d'eau, 5. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que ledit agent comprend ou est constitué d'au moins un extrait obtenu par un procédé d'entraînement à la vapeur au moyen d'un solvant polaire. 6. Utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce que ledit procédé d'entraînement à la vapeur est un procédé d'hydrodistillation. 7. Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que ledit procédé d'hydrodistillation est un procédé d'hydrodistillation par micro-ondes sous vide pulsé (VMHD). 8. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que ledit agent comprend ou est constitué d'au moins un extrait aqueux. 9. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que ledit agent comprend ou est constitué d'au moins un extrait comprenant de 0,0001 à 5% en poids d'extrait sec, de préférence de 0,001 à 2%, de préférence encore de 0,01 à 1% en poids d'extrait sec. 10. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisée en ce 30 que ledit agent comprend ou est constitué d'au moins un extrait obtenu à partir de racines fraîches et non séchées de Lotus Sacré (Nelumbo nucifera). 11. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisée en ce que ledit agent comprend ou est constitué d'au moins un extrait comprenant des huiles essentielles. 12. Utilisation selon l'une des revendications 5 à 7, caractérisée en ce que ledit extrait ou mélange d'extraits est compris dans, ou constitue une composition cosmétique. 13. Utilisation selon la revendication 12, caractérisée en ce que ladite composition comprend de 0,1 à 99% en poids dudit extrait ou mélange d'extraits, de préférence de 0,1 à 50 % en poids. 14. Utilisation selon la revendication 12 ou 13, caractérisée en ce que ladite composition cosmétique contient un extrait de racines de Lotus Sacré et un extrait de fleurs de Lotus Sacré. 15. Utilisation selon la revendication 14, caractérisée en ce que ledit extrait de fleurs de Lotus Sacré est obtenu par extraction au moyen d'un solvant polaire ou d'un mélange de solvants polaires choisi dans le groupe constitué de l'eau, des alcools, en Cl à C4, en particulier l'éthanol, des glycols en C2 à C6, en particulier le glycérol, le butylèneglycol et le propylèneglycol, et de leurs mélanges. 16. Utilisation selon la revendication 14 ou 15, caractérisée en ce que ledit extrait de fleurs de Lotus Sacré est obtenu à partir de fleurs séchées et de façon optionnelle, broyées. 17. Utilisation selon l'une des revendications 12 à 16, caractérisée en ce que ladite composition cosmétique contient, en outre, au moins : un agent actif à activité énergisante ou revitalisante , de préférence le polyphosphate de diguanoside ou un extrait en contenant, en particulier un extrait d'Artemia salina, et/ou un agent actif stimulant la sécrétion des bêta-endorphines, de préférence un dipeptide N-acétyl-Tyr-Arg-hexadécylester, et/ou un agent anti-radicalaire tel que l'acide ascorbique ou un de ses dérivés, le tocophérol, en particulier l'alpha-tocophérol sous la forme d'un sel ou d'une base, ou d'un de ses esters, par exemple l'acétate de tocophérol, et/ou - un agent anti-inflammatoire tel que l'ascorbyl tocophéryl phosphate de potassium, et/ou - un agent hydratant par exemple le glycérol. 18. Composition cosmétique, caractérisée en ce qu'elle comprend de 10 à 50 % en poids d'un extrait aqueux de racines de Lotus Sacré et de 0, 1 à 10 % en poids d'un extrait de fleurs de Lotus Sacré. 19. Composition cosmétique selon la revendication 18, caractérisée en ce qu'elle comprend, en outre, de 0,5 à 5 % en poids de polyphosphate de diguanoside ou d'un extrait en contenant, en particulier d'un extrait d'Artémia satina, de 0,1 à 5 % en poids du dipeptide N-Acétyl-Tyr-Arg-hexadécylester, de 0,01 à 2% en poids d'un sel d'ascorbyl tocophéryl phosphate et de 1 à 15 % en poids de glycérol. 20. Méthode de soin cosmétique destinée à procurer à la peau soumise aux effets d'un stress, un effet calmant et apaisant et/ou à obtenir progressivement des traits du visage détendus, une peau plus lisse et tonifiée, une peau apaisée et plus douce au toucher, un teint lumineux et éclatant, caractérisée en ce qu'elle comprend l'application sur la partie de la peau du visage ou du corps concernée d'une quantité suffisante et efficace d'un extrait ou d'un mélange d'extraits tel que défini dans l'une des revendications 1 à 11, éventuellement inclus dans une composition telle que définie dans l'une des revendications 12 à 17, ou d'une composition telle que définie dans l'une des revendications 18 ou 19. 21. Méthode de soin cosmétique selon la revendication 20, caractérisé en ce qu'elle est destinée au soin des peaux sensibles ou réactives.30