Brevet FR2917971A1 — publié le 20090102

L'invention concerne des principes actifs amincissants et un procédé industriel pour préparer de tels principes actifs. ETAT DE L'ART Tout un domaine de la cosmétique et de la pharmacie s'intéresse aux principes actifs amincissants. Ce domaine propose différents principes actifs pour pallier aux problèmes des tissus disgracieux tels que l'aspect peau d'orange provoqué par les adipocytes surchargés en acides gras. 10 La spermine et la spermidine sont des polyamines présentes dans le tissu adipeux et plus particulièrement dans les adipocytes à des concentrations moyennes de 0,16 et 0,30 nmol/mg respectivement (Pedersen et 1989, Mol. Cell. Endocrinol., 62, 161-166). In vitro, ces polyamines ont été démontrées comme stimulant trois 15 enzymes majeures de la lipogénèse, nom donné au processus de stockage des acides gras sous la forme de triglycérides, dans les adipocytes. Ces enzymes sont : - la sn-glycérol-3-phosphate acyltransférase ou GPAT; la 1,2-diacyl-snglycérol acyltransférase ou DGAT ; 20 la Mg2+ phosphatidate phosphohydrolase ou MGPPH En 1996, Jamdar et al. (1996, Enzyme protein, 49, 222-230) découvre chez les rats obèses, une corrélation entre les concentrations de spermine et de spermidine contenues dans les tissus adipeux et l'augmentation des graisses corporelles. Cette augmentation est corrélée à 25 une stimulation forte des enzymes impliquées dans le processus de lipogénése telles que la GPAT, la DGAT ou la MGPPH, ce qui démontre in vivo l'implication forte de ces polyamines dans le processus de stockage des graisses. Une quatrième enzyme, la lipoprotéine lipase (ou LPL) responsable 30 du transport des acides gras de la circulation sanguine vers les adipocytes, présente aussi une stimulation de son activité en présence de spermine et spermidine (Giudicelli et al., 1976, FEBS Lett., 62, 1, 74-76). Enfin, spermine et spermidine ont été identifiées comme agissant comme des facteurs insulin-like sur le métabolisme des adipocytes, c'est-à-dire que ces polyamines facilitent le transport du glucose, favorisent sa conversion en triglycérides via la stimulation de la pyruvate déshydrogenase (Rutter et aL, 1992, Biochem. 3., 285, 435-439) et inhibent les activités lipolytiques adipocytaires (Olefsky et aL, 1979, Horm. Metab. Res., 11, 209-213 ; Lockwood et al., 3. Biol. Chem., 1974, 249, 24, 7717-7722 ; Richelsen et al., Biochem. 3., 1989, 261, 2, 661-665). Enfin, Bethell et (1981, Biochim. Biophys. Res. Commun., 102, 1, 272-278) ont montré que la différenciation des fibroblastes en cellules adipeuses s'accompagne d'une augmentation significative du taux de spermidine. Cette polyamine semble donc jouer un rôle important dans le processus de transformation des fibroblastes en adipocytes. Spermine et spermidine favorisent donc le stockage des graisses dans l'adipocyte (via une stimulation des enzymes impliquées dans le processus de lipogenèse) et inhibent la libération de ces graisses (via une inhibition de la lipolyse). Si on bloque ces deux polyamines, l'effet attendu serait une inhibition du processus de lipogenèse et une stimulation de la lipolyse, d'où un effet amincissant global. A ce jour aucun actif n'est connu comme agissant sur la spermine et/ou sur la spermidine. BUTS DE L'INVENTION L'invention a pour but principal de résoudre le nouveau problème technique consistant en la fourniture d'un procédé industriel pour la préparation de principes actifs amincissants. La présente invention a notamment pour but de résoudre le nouveau problème technique consistant à agir sur la spermine et/ou la spermidine, qui sont des molécules impliquées dans la lipogenèse/lipolyse, notamment au niveau des adipocytes. La présente invention a pour but de résoudre les problèmes techniques énoncés ci-dessus de manière industrielle, reproductible et fiable, aux plus faibles coûts, notamment dans le domaine cosmétique, nutraceutique, et/ou pharmaceutique. DESCRIPTION DE L'INVENTION Il a été découvert de manière surprenante que l'on peut préparer des compositions comprenant un ou plusieurs principes actifs capables de piéger la spermine et/ou la spermidine, et ainsi d'agir sur la lipogenèse et/ou la lipolyse au niveau des adipocytes, notamment chez un être humain. Ainsi, la présente invention concerne des substances piégeant la spermine et/ou la spermidine. Le piégeage de la spermine et/ou de la spermidine permet de réduire la lipogenèse et donc de diminuer le stockage des graisses, mais également d'augmenter la lipolyse et ainsi de favoriser la dégradation des graisses, ce qui amène doublement à un effet amincissant. Les inventeurs entendent par piégeage de la spermine et/ou de la spermidine l'association de la spermine et/ou de la spermidine à un composé dit substance piégeant la spermine et/ou la spermidine par un moyen quelconque, et de préférence par complexation. Avantageusement, une substance piégeant la spermine et/ou la spermidine de manière efficace est une substance permettant d'inhiber la lipogenèse d'au moins 50% et/ou de stimuler la lipolyse d'au moins 50 %, telle que testée sur des adipocytes humains normaux en suspension. On entend par inhiber la lipogenèse la diminution du stockage des graisses (lipides) dans les adipocytes. On entend par stimuler la lipolyse l'augmentation de la concentration d'acides gras non estérifiés libérés par les adipocytes. Parmi les substances potentiellement actives criblées, les polysaccharides sulfatés appartenant à la famille des galactanes sulfates, comme par exemple des carraghénanes ou des agars, ont montré une efficacité inattendue. En particulier, les polysaccharides sulfatés possédant les meilleurs propriétés sont les structures contenant au maximum 20 unités saccharidiques, et de préférence au maximum 10 unités saccharidiques. On peut avantageusement préparer ces composés par une hydrolyse d'un ou plusieurs polysaccharides sulfatés. Parmi ces polysaccharides ou oligosaccharides préférés, on préfère encore les kappa carraghénanes qui donnent de meilleurs résultats. Deux méthodes sont avantageusement utilisées pour l'hydrolyse des carraghénanes : L'hydrolyse enzymatique qui se pratique à l'aide de carraghénases extraites de Pseudomonas carrageenovora (Knutsen et aL, 2001, 20 carbohydr. res., 331, 101-106) Les hydrolyses chimiques : l'hydrolyse basique est généralement lente et peut aboutir à l'ouverture des cycles. On préfère une réaction à chaud en présence d'acide chlorhydrique (Ekstrôm et al., 1983, carbohydr. Res. 116, 89-94) ou d'acide sulfurique (Rochas et 25 1981, Polym. Bulletin. 5, 81-86). Les oligosaccharides issus de l'hydrolyse des carraghénanes sont composés d'enchaînements d'unités carrabioses, d'unités néocarrabioses et d'unités néocarratétraoses (cf formule 1). Formule 1- carrabiose, néocarrabiose et néocarratétraose En général, il est admis que les hydrolyses enzymatiques des 5 carraghénanes produisent des oligosaccharides composés d'unités néocarrabioses et que les hydrolyses acides permettent l'obtention d'oligosaccharides basés sur des unités carrabioses (Kono et brevet US 4,748,032). Avantageusement, la présente invention concerne un procédé 10 d'hydrolyse amélioré comprenant la mise en solution d'au moins un carraghénane, de préférence pendant une durée et à une température suffisantes pour dissoudre les carraghénanes dans le milieu solvatant, qui est de préférence l'eau. La température est avantageusement supérieure à 30 C. 15 Le procédé d'hydrolyse comprend avantageusement une hydrolyse en milieu acide, en utilisant par exemple un acide minéral tel que l'acide chlorhydrique. Cette hydrolyse est réalisée pendant une durée et à une température suffisantes pour hydrolyser le carraghénane en oligosaccharides. Le pH de la réaction est avantageusement inférieur à 3, 20 et de préférence inférieur à 2. On préfère généralement utiliser une hydrolyse d'un carraghénane par un acide, tel qu'un acide minéral comme l'acide chlorhydrique, pendant une durée supérieure à 5 heures, et de préférence supérieure à 10 heures, encore de préférence supérieure à 15 heures. La réaction est avantageusement arrêtée par un ajout d'une solution basique, en utilisant par exemple une base minérale telle que l'hydroxyde de sodium. Le pH final de la préparation est généralement compris entre et 5. Les inventeurs ont choisi préférentiellement un procédé d'hydrolyse acide à partir du kappa-carraghénane. Ce procédé comprend une variante innovante préparée par les inventeurs de manière à obtenir une quantité optimale d'unités kappa-carrabioses (cf formule 2) qui comprend une liaison béta-1,4 entre les deux unités saccharides. Cependant, la présente invention n'est pas limitée à un tel procédé. On utilise ainsi dans une autre variante l'hydrolyse à partir de iota et/ou lambda carraghénane. Formule 2 û unité kappa-carrabiose En fonction de la nature et de la concentration de l'acide, de la température et du temps de réaction, les solutions d'oligosaccharides obtenues présentent différentes concentrations en carrabioses et néocarratétraoses. Dans cette invention, les solutions d'oligosaccharides présentant une capacité de piégeage de la spermine et spermidine ont un degré de polymérisation ou dp compris entre 2 (dp 2 = une unité carrabiose) et 20, et de préférence compris entre 2 et 10, et encore de préférence une concentration maximale d'unités dp 2 (ou carrabioses). Avantageusement, suite au procédé d'hydrolyse (chimique ou enzymatique), toutes les parties insolubles sont enlevées du mélange, par centrifugation ou par filtration. Si nécessaire, les solutions d'oligosaccharides peuvent être purifiées par exemple par décoloration sur charbon actif ou résines échangeuses d'ions, ou séparées par exemple sur membranes ou chromatographie sur gel. Les solutions peuvent être par exemple transformées en poudre notamment par lyophilisation, atomisation, cristallisation, etc. La solution d'oligosaccharides sulfatés comprend avantageusement au moins 0,1% de carrabioses, avantageusement au moins 0,2%, et de préférence au moins 0,5 % (p/p), et ne comprend généralement pas plus de 10 %(p/p) de carrabioses, par rapport au poids de la solution totale. La solution d'oligosaccharides sulfatés comprend de préférence moins de 1 Io de carrabioses. Cependant la solution d'oligosaccharides sulfatés peut être lyophilisée, permettant ainsi d'obtenir un pourcentage de carrabiose plus élevé comme par exemple jusqu'à 30, voire 40 % (p/p) ou plus de la composition lyophilisée. Cette solution d'oligosaccharides sulfatés, qui est considérée dans la présente invention comme étant le principe actif, peut-être diluée dans la composition finale. Typiquement la solution d'oligosaccharides sulfatés est utilisée à une concentration comprise entre 0,01 et 10 % en poids de la composition finale. Ainsi la composition finale comprend un pourcentage de carrabiose généralement compris entre 1.10-5 et 10% en poids. La solution d'oligosaccharides sulfatés présente avantageusement un pH inférieur à 7, et de préférence compris entre 3,5 et On entend par solution d'oligosaccharides une composition liquide, 25 éventuellement sous forme de gel ou d'hydrogel, à base d'eau, mais pas uniquement. Cette solution peut être une solution aqueuse, comprenant éventuellement différents types d'ions ou solutés, voir même des composés insolubles ou partiellement solubles. Cette solution peut être également une solution comprenant des solvants autres que l'eau, dans lesquels les oligosaccharides sulfatés sont solubles. Le solvant est avantageusement dermatologiquement acceptable. Les composés selon la présente invention sont utilisés pour la préparation de compositions, notamment topiques ou administrées par voie orale, et notamment sous forme de compositions cosmétiques, nutraceutiques, dermo-pharmaceutiques, ou pharmaceutiques. De ce fait, pour ces compositions, l'excipient contient par exemple au moins un composé choisi parmi le groupe consistant en les conservateurs, les émollients, les émulsifiants, les tensioactifs, les hydratants, les épaississants, les conditionneurs, les agents matifiants, les stabilisants, les antioxydants, les agents de texture, les agents de brillance, les agents filmogènes, les solubilisants, les pigments, les colorants, les parfums et les filtres solaires. Ces excipients sont de préférence choisis parmi le groupe consistant en les acides aminés et leurs dérivés, les polyglycérols, les esters, les polymères et dérivés de cellulose, les dérivés de Lanoline, les phospholipides, les lactoferrines, les lactoperoxidases, les stabilisants à base de sucrase, les vitamines E et ses dérivés, les cires naturelles et synthétiques, les huiles végétales, les triglycérides, les insaponifiables, les phytosterols, les esters végétaux, les silicones et ses dérivés, les hydrolysats de protéines, l'huile de Jojoba et ses dérivés, les esters lipo/hydrosolubles, les betaines, les aminoxides, les extraits de plantes, les esters de saccharose, les dioxydes de Titane, les glycines, et les parabénes, et encore de préférence parmi le groupe consistant en le butylène glycol, le stéareth-2, le stéareth-21, le glycol-15 stéaryl éther, le cétéaryl alcool, le 5 phénoxyéthanol, le méthylparabéne, l'éthylparabéne, le propylparabéne, le butylparabéne, le butylène glycol, les tocopherols naturels, la glycérine, le dihydroxycetyl sodium phosphate, l'isopropyl hydroxycétyl éther, le glycol stéarate, le triisononanoin, l'octyl cocoate, le polyacrylamide, l'isoparaffine, le laureth-7, un carbomer, le propylène glycol, le glycérol, le bisabolol, une diméthicone, l'hydroxyde de sodium, le PEG 30-dipolyhydroxystérate, les caprique/caprylique triglycérides, le cétéaryl octanoate, le dibutyl adipate, l'huile de pépin de raisin, l'huile de jojoba, le sulfate de magnésium, l'EDTA, une cyclométhicone, la gomme de xanthane, l'acide citrique, le lauryl sulfate de sodium, les cires et les huiles minérales, l'isostéaryl isostéarate, le dipélargonate de propylène glycol, l'isostéarate de propylène glycol, le PEG 8 Beewax, les glycérides d'huile de coeur de palme hydrogénée, les glycérides d'huile de palme hydrogénée, l'huile de lanoline, l'huile de sésame, le cétyl lactate, le lanoline alcool, l'huile de ricin, le dioxyde de titane, le lactose, le saccharose, le polyéthylène basse densité, une solution isotonique salée. Avantageusement, les compositions précitées sont formulées sous une forme choisie parmi le groupe consistant en une solution, aqueuse ou huileuse, une crème ou un gel aqueux ou un gel huileux, notamment en pot ou en tube, notamment un gel douche, un shampoing ; un lait ; une émulsion, une microémulsion ou une nanoémulsion, notamment huiledans-eau ou eau-dans-huile ou multiple ou siliconée ; une lotion, notamment en flacon de verre, de plastique ou en flacon doseur ou en aérosol ; une ampoule ; un savon liquide ; un pain dermatologique ; une pommade ; une mousse ; un produit anhydre, de préférence liquide, pâteux ou solide, par exemple sous forme de bâtonnet, notamment sous forme de rouge à lèvre. Les termes "application topique", utilisés ici, signifient appliquer ou vaporiser la composition selon la présente invention sur la surface de la peau. Les termes "dermatologiquement acceptable", utilisés ici, signifient que la composition ou les composants de celle-ci sont adaptés à l'utilisation en contact avec la peau humaine sans toxicité, incompatibilité, instabilité, réponse allergique, ou leurs équivalents, indue. De nombreux ingrédients cosmétiques actifs sont connus par 30 l'homme du métier pour améliorer la santé et/ou l'apparence physique de la peau. L'homme du métier sait formuler les compositions cosmétiques ou dermatologiques pour obtenir les meilleurs effets. D'autre part les composés décrits dans la présente invention peuvent avoir un effet de synergie lorsqu'ils sont combinés les uns aux autres. Ces combinaisons sont également couvertes par la présente invention. Le CTFA Cosmetic Ingredient Handbook, Second Edition (1992) décrit différents ingrédients cosmétiques et pharmaceutiques utilisés couramment dans l'industrie cosmétique et pharmaceutique, qui sont en particulier adaptés à une utilisation topique. Des exemples de ces classes d'ingrédients comprennent, sans en être limité les composés suivants: abrasifs, absorbants, composés à but esthétique tels que les parfums, les pigments, les colorants, les huiles essentielles, les astringents, etc. (par exemple: l'huile de clou de girofle, menthol, camphre, l'huile d'eucalyptus, eugenol, menthyl lactate, distillat d'hamélis), les agents anti-acnée, les agents anti-floculants, les agents antimousses, les agents antimicrobiens (par exemple: iodopropyl butylcarbamate), les antioxydants, les liants,, les agents tampons, les agents gonflants, les agents chélatants, les additifs, les agents biocides, les dénaturants, les analgésiques externes, les matériaux formant des films, les polymères, les agents opacifiants, les ajusteurs de pH, les agents réducteurs, les agents dépigmentants ou éclaircissants (par exemple : l'hydroquinone, l'acide kojique, l'acide ascorbique, le magnésium ascorbyl phosphate, l'ascorbyl glucosamine), les agents de conditionnement (par exemple : les humectants), les agents calmants pour la peau et/ou les agents cicatrisants (par exemple : le panthenol et ses dérivés (par exemple :ethyl panthenol), l'aloe vexa, l'acide pantothenique et ses dérivés, l'allantoine, le bisabolol, et le dipotassium de glycyrrhizinate), les épaississants, et les vitamines, et les dérivés ou équivalents de ceux-ci. Une variante avantageuse de la présente invention comprend l'ajout d'au moins un autre principe actif amincissant, tel que la caféine et/ou la théophylline, ainsi que différents extraits végétaux utilisés classiquement par les formulateurs dans des formulations amincissantes comme par exemple un extrait de racine de co/eus Forskoh/14 un extrait d'écorce de cecroea obtusa ou un extrait de laitue de mer (u/va lactuca). Il est particulièrement intéressant de combiner les actifs de la présente invention avec la caféine. La présente invention concerne ainsi une méthode de soin cosmétique amincissant comprenant l'utilisation d'au moins un principe actif, ou d'une composition cosmétique comprenant un tel principe actif, cité ci-dessus ou ci-après. Ce soin cosmétique comprend l'application du principe actif par voie topique sur les zones cutanées à traiter. Ce soin cosmétique peut se présenter sous la forme d'une composition nutraceutique (administration orale). La présente invention concerne également une méthode de traitement thérapeutique pour diminuer la quantité de lipides stockés par les adipocytes, comprenant notamment l'administration ou application topique d'au moins un principe actif, ou d'une composition cosmétique comprenant un tel principe actif, cité ci-dessus ou ci-après. Ce traitement combine avantageusement à la fois une diminution de la lipogenèse et une augmentation de la lipolyse. D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront clairement à l'homme de l'art suite à la lecture de la description explicative qui fait référence à des exemples qui sont donnés seulement à titre d'illustration et qui ne sauraient en aucune façon limiter la portée de l'invention. Les exemples font partie intégrante de la présente invention et toute caractéristique apparaissant nouvelle par rapport à un état de la technique antérieure quelconque à partir de la description prise dans son ensemble, incluant les exemples, fait partie intégrante de l'invention dans sa fonction et dans sa généralité. Ainsi, chaque exemple a une portée générale. D'autre part, dans les exemples, tous les pourcentages sont donnés en poids, sauf indication contraire, et la température est exprimée en degré Celsius sauf indication contraire, et la pression est la pression atmosphérique, sauf indication contraire. EXEMPLES Exemple 1 : Préparation d'oligosaccharides 10 38,5 mL d'eau pure de laboratoire sont chauffés à 60 C. 0,49 g de chlorure de sodium sont ajoutés ainsi que 1,67 g de kappacarraghénanes. La solution est laissée sous agitation, à 60 C pendant 25 minutes. réaction d'hydrolyse est initialisée par l'ajout de 8,33 g d'une solution 15 d'acide chlorhydrique 1 N et le mélange est maintenu à 60 C durant l'ensemble du processus. Au temps d'hydrolyse désiré, la réaction est ensuite stoppée par l'ajout de 9 mL d'une solution d'hydroxyde de sodium IN Le pH de la préparation est alors compris entre 4 et 4,5. 20 La solution est ensuite filtrée sur 500 nm puis des conservateurs ainsi qu'un gélifiant peuvent être ajoutés à la préparation. Dans la plupart des exemples suivants, les expérimentations ont été effectuées sur le filtrat (sans conservateur et sans gélifiant). 25 Exemple 2: Evolution de la composition des préparations d'oligosaccharides en fonction du temps de l'hydrolyse Des solutions d'oligosaccharides sulfatés ont été préparées selon l'exemple 1, avec des temps d'hydrolyse de 2, 5 et 16h.5 Ces solutions ont ensuite été analysées par HPLC (Waters Alliance 2695, colonne TSK gel 3000 PWXL) équipée d'un détecteur réfractométrique. Une gamme étalon de glucose est analysée en parallèle ce qui permet ainsi de connaitre la composition de notre mélange en carrabiose et en néocarratétraose. Les résultats, présentés dans le tableau 1, montre que plus le temps d'hydrolyse est long plus la concentration en carrabiose est importante. 10 Tableau Temps hydrolyse (h) % carrabiose % néocarratétraose 2 0,106 0,228 0,365 0,180 16 0,890 0,043 % de carrabiose ou néocarratétraose indiqué en 0/0 massique par rapport à la masse totale du filtrat ramené à un pH entre 4 et 4,5. Exemple 3: Mise en évidence in vitro de l'efficacité des 15 oligosaccharides sur le piégeage de la spermine et de la spermidine Principe : Si la spermine et la spermidine sont mises en présence d'acide désoxyribonucléique (ADN), on observe alors une précipitation de l'ADN et la densité optique du mélange, lue à 600 nm, augmente alors très fortement. Si on ajoute préalablement à la solution de spermine ou spermidine un composé qui piége la polyamine , aucun précipité n'apparaît lors de 'ajout de la solution d'ADN. On peut alors calculer un pourcentage de protection apporté par l'actif testé vis à vis de la précipitation de l'ADN induite par les polyamines. Protocole : 0.4 g d'ADN de poisson (Sigma) sont ajoutés à 160 g d'un tampon 5 phosphate pl-16 (0.06 M phosphate de potassium et 0.001 M phosphate de sodium). Dans chaque puits d'une plaque 96 puits sont déposés 10 pL d'une solution aqueuse à 50 mM de spermine (Sigma) : Sont ensuite déposés : 10 - 90 pL d'une solution d'oligosaccharides sulfatés (Actif) ou d'une solution aqueuse d'adénosine triphosphate 150 mM (ou ATP, Sigma) ou 90 pL d'eau pure de laboratoire ( dans les puits contrôle ou puits 100% ) La plaque est laissée sous agitation pendant 5 minutes à température 15 ambiante puis 100 pL de la solution d'ADN sont ajoutés dans l'ensemble des puits. Après une agitation manuelle de 5 secondes, la densité optique de chaque puits est lue à 600 nm. Le pourcentage de protection apporté par l'actif vis-à-vis de la précipitation 20 de l'ADN en présence de spermine est donné par : % protection = 100 - [(DO Actif ou ATP / DO 100%) x 100] DO Actif ou ATP signifiant la densité optique du puits comprenant l'ADN, la spermine ou la spermidine, et de l'Actif ou de l'ATP après réaction. DO 100% signifiant la densité optique du puits ayant de l'ADN et de la spermine, ou la spermidine, après précipitation. Plus le pourcentage de protection est important, plus la spermine est piégée par l'actif et moins l'ADN précipite. La même expérience peut être effectuée en remplaçant la solution de spermine 50 mM par une solution aqueuse de spermidine 300 mM (Sigma). Des solutions d'oligosaccharides ont été réalisées selon l'exemple 1, avec des temps d'hydrolyse de 2, 5 et 16 heures. Après dilution à 10% dans de l'eau pure de laboratoire, les différentes solutions sont testées. Les résultats sont donnés dans le tableau 2 ci-dessous : Tableau 2 Temps hydrolyse % protection spermine %protection spermidine 2 3.9 29.9 5 4.5 28.2 16 10.3 34.3 Plus le temps d'hydrolyse est long, plus la solution d'oligosaccharides est riches en unité carrabiose et plus le piégeage de la spermine et de la 15 spermidine est important. Ainsi on préfère des principes actifs contenant au moins 0,2% de carrabiose, et encore de préférence au moins 0,5%, en poids de la solution d'oligosaccharides sulfatés. Exemple 4 Comparaison du taux de carrabioses après hydrolyse de différents galactanes sulfatés Des solutions d'oligosaccharides sulfatés ont été préparées à partir de kappa, iota et lambda carraghénanes et d'agar selon l'exemple 1, avec un temps d'hydrolyse de 16h. Les extraits sont ensuite analysés par HPLC selon la technique décrite dans l'exemple 2, sauf l'hydrolysat d'agar qui ne peut être analysé dans les mêmes conditions (unités agarobioses). Après dilution à 3 k dans de l'eau pure de laboratoire, un test de piégeage 5 de la spermidine est réalisé, selon le protocole décrit dans l'exemple 3. Tableau 3 : Galactanes hydrolysés % piégeage % carrabiose % néocarratétraose Kappa-carraghénanes 16,1% 0,878 0,155 Iota-carraghénanes 13,1% 0,292 0,344 Lamda-carraghénanes 13,5% 0,179 0,197 agar 8,9% Non applicable Non applicable 0 Les hydrolysats de carraghénanes (kappa, iota et lambda) présentent la meilleure efficacité vis-à-vis du piégeage de la spermidine. Ce piégeage est corrélée au pourcentage de carrabioses présent dans le produit 15 Exemple 5 : Mise en évidence de l'efficacité des oligosaccharides sur l'inhibition de la lipogenèse dans des adipocytes humains normaux. L'activité d'inhibition ex vivo de la lipogenèse a été évaluée dans des suspensions d'adipocytes humains isolés à partir d'un prélèvement effectué sur une plastie abdominale d'une femme de 42 ans. La suspension d'adipocytes a été incubée pendant 1 heure à 37 C avec 3 ou 5% d' une solution d'oligosaccharides sulfatés préparée selon l'exemple 1 (temps d'hydrolyse : 16h) , ou des solutions de référence de l'étude (théophylline ou caféine 1mM) ou en l'absence de ces solutions (contrôle). Chaque essai a été réalisé en triplicate. Un marqueur radioactif, le [2-14C] acétate est ensuite ajouté aux différents essais à la concentration de 2.5 pCi/mL. Après 4 heures d'incubation à 37 C, les lipides sont extraits par un mélange méthanol/chloroforme/eau puis déshydratés. La radioactivité, exprimée en coup par minute (cpm) est ensuite quantifiée par scintigraphie liquide (LKB 1210 Rackbeta). Les résultats sont donnés dans le tableau 4 ci-dessous. L'analyse statistique a été effectuée suivant le test Dunnett's de comparaison multiple. Tableau 4 Traitement Concentration cpm Ecart % contrôle p dans l'eau type Contrôle - 472253 4474 100 - Théophylline 1 mM 27225 6195 6 P L'activité de stimulation de la lipolyse a été évaluée dans des suspensions 5 d'adipocytes humains isolés à partir d'un prélèvement effectué sur une plastie abdominale d'une femme de 34 ans. La suspensiond'adipocytes a été incubée pendant 2 heures à 37 C avec 3 ou 5% d' une solution d'oligosaccharides sulfatés préparée selon l'exemple 1 (temps d'hydrolyse 16 heures) en pourcentage en poids total du milieu de 10 culture, ou avec des solutions de référence de l'étude (théophylline ou caféine 1mM) ou en l'absence de ces solutions (contrôle). Chaque essai a été réalisé 6 fois. A la fin de la période d'incubation, les Acides Gras Non Estérifiés (AGNE) présents dans les milieux d'incubation ont été mesurés avec des kits de 15 dosage commercialement disponibles (OXOID 46 551). Les résultats sont donnés dans le tableau 5 ci-dessous. Tableau 5 Traitement Conc. 1AGNEI en IJM Ecart % contrôle p tY6Pe Contrôle _ 96 100 Théophylline 1 mM 537 45 560 P Formulation 7a : Eau qsp 100 Butylene Glycol 2 Glycerine 3 Sodium Dihydroxycetyl 2 Phosphate, Isopropyl Hydroxycetyl Ether Glycol Stearate SE 14 Triisononaoin 5 Octyl Cocoate 6 Butylene Glycol, 2 Methylparaben, Ethylparaben, Propylparaben, pH ajusté à 5,5 Produits de l'invention 0,01 ù 10 % Formulation 7b : A Eau Butylene Glycol Glycerine Polyacrylamide, Isoparafin, 2 Laureth-7 Butylene Glycol, 2 Methylparaben, Ethylparaben, Propylparaben ; 2 Phenoxyethanol, Methylparaben, Propylparaben, Butylparaben, Ethylparaben Butylene Glycol B D qsp 100 2 3 D Produits de l'invention 0,01ù10% Formulation 7c : A Carbomer 0,50 Propylene Glycol 3 Glycerol 5 Eau qsp 100 Octyl Cocoate 5 Bisabolol 0,30 Dimethicone 0,30 C 1 Sodium Hydroxide 1,60 D Phenoxyethanol, 0,50 Methylparaben, Propylparaben, Butylparaben, Ethylparaben E Parfum 0,30 Produits de l'invention 0,01 ù 10 % IO Exemple 8 : Utilisation des produits de l'invention dans une formulation de type eau dans huile A PEG 30 ù dipolyhyd roxystearate Capric Triglycerides Cetearyl Octanoate Dibutyl Adipate Grape Seed Oil Jojoba oit Phenoxyethanol, Methylparaben, Propylparaben, Butylparaben, Ethylparaben B Glycerine 3 Butylene Glycol 3 Magnesium Sulfate 0,5 EDTA 0,05 Eau qsp 100 4 3 5 0,5 Cyclomethicone Dimethicone Parfum Produits de l'invention 0,01ù 10 % Exemple 9: Utilisation des produits de l'invention dans une formulation de type shampoing ou gel douche A Xantham Gum 0,8 Eau qsp 100 Butylene Glycol, 0,5 Methylparaben, 0,5 Ethylparaben, Propylparaben Phenoxyethanol, 10 Methylparaben, Propylparaben, Butylparaben, Ethylparaben C I Citric acid 0,8 D Sodium Laureth Sulfate 40,0 E Produit de l'invention 0,01 ù 10 % 15 Exemple 10,: Utilisation des produits de l'invention dans une formulation de gels aqueux A Eau qsp 100 Carbomer 0, 5 Butylene Glycol 15 B Phenoxyethanol, Methylparaben, 0,01 ù 10 % Propylparaben, Butylparaben, Ethylparaben Produits de l'invention C D E 21 1 Exemple 11: Utilisation des produits de l'invention dans une formulation de type émulsion triple Emulsion primaire Wl/O A PEG 30 ù 4 dipolyhydroxystearate Capric Triglycerides 7.5 Isohexadecane 15 PPG-15 Stéarul ether 7.5 B Produit de l'invention 0.01-10% Eau Qsp 65.3 C Phenoxyethanol, 0,7 Methylparaben, Propylparaben, Butylparaben, Ethylparaben Emulsion secondaire W1/O/W2 A Emulsion primaire 60 B Poloxamer 407 2 Phenoxyethanol, 0.3 Methylparaben, Propylparaben,2-bromo- 2nitropropane-1,3 diol eau qsp 100 C Carbomer 5 D Triethanolamine PH 6.0-6.5 Exemple Préparation de formulations pharmaceutiques 15 contenant le produit de l'invention Formulation 12a : préparation de comprimés Excipients Lactose Saccharose En g par comprimé 0,359 0,240 A B Produits de l'invention* 0,001 -0,1 *Le produit de l'invention est obtenu, par exemple, selon le procédé d'extraction décrit à l'exemple 1 (temps d'hydrolyse 16h) suivi d'une étape 5 de séchage. Formulation 12b : préparation d'une pommade Excipients Polyéthylène basse densité 5,5 Paraffine liquide qsp 100 Produits de l'invention* 0,001 -0,1 produit de l'invention est obtenu, par exemple, selon le procédé d'extraction décrit à l'exemple 1 (temps d'hydrolyse 16h) suivi d'une étape de séchage. 15 Formulation 12c : préparation d'une formule injectable A Excipient Solution isotonique salée Produits de l'invention* 0,001 -0,1 g produit de l'invention est obtenu, par exemple, selon le procédé 20 d'extraction décrit à l'exemple 1 (temps d'hydrolyse 16h) suivi d'une étape de séchage. B 10 REVENDICATIONS 1. Utilisation d'une préparation comprenant des oligosaccharides sulfatés piégeant la spermine et/ou la spermidine, comme principe actif amincissant 5 dans une composition cosmétique ou nutraceutique. 2. Utilisation, selon la revendication caractérisée en ce que les oligosaccharides sont constitués d'au maximum 20 unités galactoses. 10 3. Utilisation d'une préparation d'oligosaccharides sulfatés, selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la préparation d'oligosaccharides sulfatés est obtenue par un procédé comprenant une étape d'hydrolyse d'un polysaccharide de préférence issu de la famille des galactanes sufatés, et préférentiellement appartenant à la 15 famille des carraghénanes. 4. Utilisation, selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la préparation comprend majoritairement parmi les oligosaccharides sulfatés présents au moins un oligosaccharide basé sur o deux unités saccharidiques (carrabiose et néocarrabiose) et éventuellement au moins un oligosaccharide basé sur quatre unités saccharidiques néocarratétraose Utilisation, selon l'une quelconque des revendications précédentes, 25 caractérisée en ce que la préparation d'oligosaccharides sulfatés est compris entre 1.10-5 et 10 % en poids de la composition totale. 6. Composition cosmétique amincissante comprenant une préparation d'oligosaccharides sulfatés piégeant la spermine et/ou la spermidine,comme principe actif amincissant, éventuellement en association avec un autre principe actif amincissant, telle la caféine ou la théophylline. 7. Composition nutraceutique amincissante comprenant une préparation _ d'oligosaccharides sulfatés piégeant la spermine et/ou la spermidine, comme principe actif amincissant, éventuellement en association avec un autre principe actif amincissant, telle la caféine ou a théophylline. 8. Utilisation d'une préparation d'oligosaccharides sulfatés telle que définie 10 selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, éventuellement en association avec un autre principe actif amincissant, tel la caféine ou la théophylline, pour la préparation d'une composition pharmaceutique à effet amincissant, notamment pour lutter contre une surcharge pondérale. 15 9. Méthode de soin cosmétique amincissant comprenant l'application topique ou l'administration par voie orale d'une composition cosmétique selon la revendication 6 ou 7.