Brevet FR2922460A1 — publié le 20090424

L'invention concerne un dispositif de stimulation d'un tissu vivant par une matrice de microélectrodes. Les matrices de microélectrodes sont utilisées dans des applications neurophysiologiques et pharmacologiques. Ces matrices sont utilisées pour enregistrer les activités électriques d'un tissu vivant (activités cellulaires ou multicellulaires). Elles sont également utilisées pour stimuler électriquement un tissu. Ceci s'applique pour tout type de tissu excitable, notamment tissu nerveux, tissu musculaire, par exemple cardiaque, ou cellules souches. On cherche notamment à pouvoir stimuler un tissu nerveux de manière focale. Une application à terme concerne les neuroprothèses, et vise à mettre au point des microstimulateurs implantés dans le corps (notamment humain, mais également chez l'animal) pour générer des stimulations électriques, afin de compenser des dysfonctionnements des réseaux neuronaux dans le cas d'une maladie ou d'une anomalie d'un organe. Il s'agit par exemple de stimulations profondes du cerveau dans le cas de maladies neurodégénératives (par exemple Parkinson, Alzheimer, démences), de la moelle épinière dans le cas de troubles moteurs ou de traitement de la douleur par exemple, des muscles, ou encore des structures sensorielles comme les nerfs périphériques, la rétine, la cochlée (oreille interne), ou autres relais sensoriels. Pour pouvoir stimuler des neurones vivants, la matrice de microélectrodes doit donc être dimensionnée à l'échelle du tissu vivant à stimuler. Les microélectrodes de stimulation ont habituellement un diamètre de l'ordre de quelques dizaines de micromètres ou moins et un espacement de quelques centaines de micromètres. Cependant, pour la stimulation plus macroscopique du système nerveux central ou périphérique, des électrodes plus grandes (de l'ordre du mm ou du cm) sont utilisées. Les documents [1] à [6] mentionnés ci-dessous décrivent des matrices d'électrodes de stimulation, ainsi que des méthodes pour les 5 utiliser. La matrice peut comporter plusieurs dizaines ou plusieurs centaines de microélectrodes de stimulation. L'un des problèmes rencontrés avec les microélectrodes est d'obtenir une stimulation focale du tissu vivant. En effet, dans la matrice de microélectrodes de stimulation, si l'on envoie un signal de stimulation à 10 l'une des microélectrodes, c'est pour stimuler la zone du tissu nerveux située en vis-à-vis de cette microélectrode. On connaît ainsi les stimulations monopolaires, dans lesquelles la stimulation d'une cellule vivante VIIV s'effectue entre une microélectrode de stimulation 11 parmi les microélectrodes 10 de stimulation de la matrice 1 et 15 une masse distante MD de la matrice 1 de microélectrodes de stimulation, ainsi que cela est représenté à la figure 1. Dans le cas d'une stimulation bipolaire, ainsi que cela est représenté à la figure 2, la stimulation est effectuée entre deux microélectrodes de stimulation 11&12 de la matrice 1. 20 Le document [1] prévoit ainsi une matrice ayant 36 microélectrodes de stimulation et 4 électrodes de référence. Le document [5] prévoit quant à lui que les microélectrodes soient réparties en deux groupes, l'un utilisé pour la stimulation et l'autre utilisé pour l'enregistrement, ce qui double le nombre de microélectrodes. 25 Ces deux types de stimulation ne sont toutefois pas satisfaisants, dans la mesure où, pour une stimulation monopolaire, une électrode loin d'un neurone peut quand même activer ce neurone avec le même courant qu'une électrode proche de ce neurone, et où, pour une stimulation bipolaire, il existe une zone aveugle où des neurones proches des 30 électrodes stimulantes ne sont pas excités. Le document [7] prévoit un procédé de stimulation préférentielle de somas neuraux, prévoyant de positionner au voisinage de la région du tissu neural une électrode de stimulation comprenant une première région intérieure conductrice en forme de disque, entourée par une deuxième région conductrice annulaire, les première et deuxième régions conductrices étant séparées par une région isolante. Le courant de stimulation est délivré entre le conducteur circulaire central et le conducteur annulaire, ce dernier fournissant une boucle de retour de courant. La dispersion latérale du courant dans le tissu neural est contenue dans une zone plus locale qu'avec une stimulation monopolaire, de sorte que le nombre de somas activés par l'électrode est limité, incluant uniquement ceux proches de l'électrode centrale. Ce dispositif présente le double inconvénient de devoir doubler la connectique de l'électrode de stimulation, et de devoir délivrer des courants plus importants pour parvenir à stimuler les cellules locales. L'invention vise à pallier ces inconvénients pour une matrice de microélectrodes de stimulation, disposées selon une configuration déterminée côté à côte et sélectionnables pour l'application d'un signal électrique de stimulation par l'une des microélectrodes. En particulier, le dispositif de stimulation doit pouvoir être généralisé à un grand nombre de microélectrodes de stimulation dans la matrice, tout 20 en étant simple à mettre en oeuvre. A cet effet, l'invention a pour objet un dispositif de stimulation d'un tissu vivant, comprenant une matrice de microélectrodes, disposées selon une configuration déterminée côte à côte et sélectionnables pour l'application d'un signal électrique de stimulation par l'une des 25 microélectrodes, les microélectrodes étant isolées l'une de l'autre et comportant chacune un conducteur d'envoi d'un signal de stimulation, ayant une section d'application locale au tissu vivant, caractérisé en ce qu'il comporte, en plus des conducteurs des microélectrodes, au moins une surface conductrice supplémentaire 30 d'application en tout ou partie contre le tissu vivant, qui est isolée des conducteurs des microélectrodes, et comporte une pluralité de zones conductrices situées respectivement au voisinage d'une pluralité déterminée de sections d'application locale de microélectrodes de la matrice, des moyens de liaison étant prévus pour assurer une liaison électrique entre les zones conductrices de la surface supplémentaire, la surface conductrice supplémentaire étant reliée en outre à au moins un accès destiné à être relié à un conducteur extérieur de retour au moins partiel du signal de stimulation et étant formée pour assurer une stimulation focale à partir d'au moins une de la pluralité déterminée de microélectrodes. Suivant des modes de réalisation de l'invention : - La surface conductrice supplémentaire est intégrée au même support que celui des microélectrodes. - Ou la surface conductrice supplémentaire est intégrée sur un support différent de celui des microélectrodes. - La surface conductrice supplémentaire est en forme de grille, dont les zones conductrices sont formées par des mailles passant autour de microélectrodes, les moyens de liaison étant formés sur la surface supplémentaire par les intersections des mailles entre elles. - Lesdites mailles passant autour de microélectrodes entourent 20 chacune une seule microélectrode. - La grille est formée par des lignes rectilignes sécantes. - Chacune des mailles de la grille entourant une microélectrode forme un pixel de stimulation restreint à l'espace délimité par cette maille. - La surface conductrice supplémentaire passe entre des 25 microélectrodes. - La surface conductrice supplémentaire entoure des microélectrodes. - La surface conductrice supplémentaire est continue avec des ouvertures de passage des sections d'application locale de 30 microélectrodes. - La surface conductrice supplémentaire comporte des branches électriquement en parallèle entre des microélectrodes et passant chacune au voisinage de plusieurs microélectrodes. - Les moyens de liaison électrique entre les différentes zones 5 conductrices sont situés au moins en partie dans la surface conductrice supplémentaire. - Les moyens de liaison électrique sont situés au moins en partie à l'extérieur de la surface conductrice supplémentaire, à l'intérieur ou à l'extérieur d'un support de la surface conductrice supplémentaire ou dans 10 un circuit électrique extérieur supplémentaire. - La surface conductrice supplémentaire présente une conductivité électrique surfacique d'interface (conductivité d'interface entre l'électrode et le tissu) supérieure ou égale à 100 S/m2 à une fréquence de 100 Hz à 1000 Hz. 15 - La surface conductrice supplémentaire présente une conductivité électrique surfacique d'interface (conductivité d'interface entre l'électrode et le tissu) supérieure ou égale à 1000 S/m2 à une fréquence de 100 Hz à 1000 Hz, et de préférence supérieure ou égale à 40000 S/m2 à une fréquence de 100 Hz à 1000 Hz. 20 - La matrice de microélectrodes possède un pas d'écartement entre microélectrodes, et lesdites zones conductrices de la surface supplémentaire passent à une distance de la pluralité des microélectrodes, inférieure ou égale à cinq fois le pas d'écartement maximum entre microélectrodes, et de préférence à une distance inférieure ou égale au pas 25 d'écartement minimum entre microélectrodes. - Lesdites zones conductrices de la surface supplémentaire passent à une distance de la pluralité des rnicroélectrodes, inférieure ou égale à 500 pm. Le dispositif comporte une multiplicité d'accès électriques aux 30 microélectrodes, qui sont associés respectivement à la multiplicité de microélectrodes de la matrice, l'accès de la surface conductrice (3) supplémentaire étant unique et distinct des accès électriques des microélectrodes. - Le dispositif comporte une multiplicité d'accès électriques aux microélectrodes, qui sont associés respectivement à la multiplicité de 5 microélectrodes de la matrice, l'accès de la surface conductrice supplémentaire étant multiple et distinct des accès électriques des microélectrodes . - Le dispositif comporte une multiplicité d'accès électriques aux microélectrodes, qui sont associés respectivement à la multiplicité de 10 microélectrodes de la matrice, l'accès de la surface conductrice supplémentaire étant unique et distinct des accès électriques des microélectrodes, ceci pour chaque surface conductrice supplémentaire dans le cas de leur pluralité. - Les microélectrodes situées au bord de la matrice délimitent une 15 région d'application contre le tissu vivant et le bord ou l'accès de la surface conductrice supplémentaire est situé à l'extérieur de la région d'application des microélectrodes. . - Le dispositif comporte en outre un premier système de génération de stimulus électriques ou courants de stimulation et de délivrance de ceux- 20 ci au tissu via les microélectrodes, et également d'amplification et de multiplexage des signaux enregistrés avec les microélectrodes. Ce système est relié aux microélectrodes et à l'accès de la surface. Le dispositif comporte également un deuxième système d'acquisition et de contrôle muni d'une interface homme û rnachine pour la commande du premier 25 système afin d'envoyer à au moins l'une présélectionnée des microélectrodes un signal de stimulation prédéterminé sur l'interface homme û machine, et de recueillir l'activité du tissu vivant en réponse ou non au signal de stimulation et la restituer sur l'interface homme û machine. - Les microélectrodes situées au bord de la matrice délimitent une 30 région d'application contre le tissu vivant et l'accès de la surface est situé à l'intérieur de la région d'application des microélectrodes. - Le dispositif est mis en oeuvre au contact d'un tissu vivant, in vivo ou in vitro, une préparation cellulaire, un expiant, un organisme vivant, un système de laboratoire, un organe vivant isolé, une partie d'organe vivant isolé, ou un implant pour un être vivant. s Un deuxième objet de l'invention est un ensemble amovible destiné à être monté dans le dispositif tel que décrit ci-dessus, caractérisé en ce qu'il comporte sur un même module amovible ou répartis sur plusieurs modules amovibles séparés la matrice de microélectrodes, ladite surface supplémentaire, et un circuit d'interface électrique d'entrée-sortie pour la 10 connexion électrique des microélectrodes et de la surface supplémentaire avec l'extérieur, comportant une multiplicité de bornes d'accès électriques à respectivement la multiplicité de microélectrodes de la matrice et une borne d'accès de surface supplémentaire, distincte des bornes d'accès électriques des microélectrodes. 15 Un troisième objet de l'invention est une utilisation du dispositif tel que décrit ci-dessus pour l'enregistrement de signaux émis par un tissu vivant. L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description qui va suivre, donnée uniquement à titre d'exemple non limitatif en référence aux 20 dessins annexés, sur lesquels : - les figures 1 et 2 sont des vues schématiques en perspective d'exemples connus de matrice de microélectrodes, - les figures 3, 5, 6, 7, 8, 9 sont des vues schématiques en perspective de premier, deuxième, troisième, quatrième, cinquième et 25 sixième modes de réalisation d'une matrice de microélectrodes de stimulation suivant l'invention, - la figure 4 est une vue d'un exemple de réalisation d'une matrice linéaire de microélectrodes de stimulation suivant l'invention, -la figure 10 représente un système électronique de mesure et de 30 stimulation pouvant être utilisé avec la matrice de microélectrodes suivant l'invention. - la figure 11 est un diagramme montrant le potentiel électrique en fonction de la distance par rapport à une microélectrode stimulante pour différents types de stimulation, - la figure 12 est un diagramme montrant le potentiel électrique en 5 fonction de la distance par rapport à une microélectrode stimulante pour différentes types configuration, et - la figure 13 est un diagramme montrant le potentiel électrique en fonction de la distance par rapport à une microélectrode stimulante pour différentes conductivité surfaciques. 10 Aux figures 3 à 10, chaque microélectrode 11 de la matrice 1 comporte un conducteur 21 d'application destiné à être appliqué contre un tissu vivant et est apte à servir de microélectrode de stimulation, pour lui envoyer un signal de stimulation. Dans ce conducteur 21 passe donc le courant de stimulation. Ce conducteur est isolé des conducteurs des autres 15 électrodes, et est isolé en partie du tissu vivant. Chaque conducteur 21 de microélectrode comporte une section 210 d'application locale au tissu vivant, qui est sa partie tournée vers le tissu vivant et devant toucher celui-ci, par exemple formée par l'extrémité du conducteur 21 et par exemple circulaire. Chaque conducteur 21 de microélectrode comporte également 20 un accès 13 extérieur, permettant la connexion d'un circuit électrique au support 40 de la matrice 1. Le pas d'écartement entre les microélectrodes 11 peut être fixé à une valeur déterminée pour toute la matrice ou avoir des valeurs différentes pour des régions différentes de la matrice. Une ou plusieurs surfaces conductrices supplémentaires 3 sont 25 disposées à proximité de certaines ou de toutes les microélectrodes 11. Chaque surface 3 et les microélectrodes 11 sont positionnées pour pouvoir être appliquées conjointement contre le tissu vivant, et la surface 3 sert à retourner le courant de stimulation envoyé par une microélectrode voisine en le focalisant à proximité de celle-ci. Les sections 210 et la surface 3 30 sont en général tournées vers un même côté vis à vis du tissu. Les accès 13 aux microélectrodes 11 de stimulation, les conducteurs 21 et les sections 210 sont électriquement isolés de la surface 3, par exemple en passant dans des couches différentes de celle(s) de la surface 3, au-dessus ou au-dessous de celle-ci. Les sections conductrices 210 et la surface conductrice 3 sont nues du côté d'application contre ou dans le tissu vivant. La surface 3 comporte donc des zones conductrices 31 localisées au voisinage de certaines sections 210 d'application de microélectrodes, qui sont reliées entre elles pour être sensiblement équipotentielles. La surface 3 sert de moyen de focalisation en commun pour plusieurs sections 210 d'application de microélectrodes 11 différentes. Dans le mode de réalisation représenté à la figure 3, la surface supplémentaire est formée par une grille conductrice 3 insérée entre les microélectrodes 11 tout en entourant celles-ci. La grille 3 comporte des mailles 31 formant les zones conductrices entourant les microélectrodes 11, ces zones 31 étant reliées de manière conductrice les unes aux autres par les noeuds et branches 32 de la grille 3. La grille 3 comporte des mailles 31 disposées dans l'espace situé entre des microélectrodes voisines 11. Dans le mode de réalisation des figures 3, 4, 5, 6 et 7, chaque maille 31 ou ouverture 36 entoure une seule microélectrode 11 associée. Chaque maille peut toutefois entourer une pluralité de microélectrodes. Chaque microélectrode 11 de stimulation et son conducteur 21 associé sont isolés électriquement de la surface 3. Dans les modes de réalisation des figures 3, 4, 5, 6, et 8, la surface 3 ne nécessite qu'un seul conducteur extérieur 35 pour le retour du signal de stimulation envoyé par l'une des microélectrodes 11 de stimulation au tissu vivant et une seule borne d'accès 33 pour relier la surface 3 au conducteur 35 extérieur de retour. Par conséquent, on se dispense de devoir insérer un conducteur d'accès supplémentaire entre les microélectrodes 11 de stimulation pour le retour du signal de stimulation. La matrice de microélectrodes 11 de stimulation munie de la surface 3 et de leurs accès 13 et 33 peut être prévue dans un module autonome amovible 1, ayant dans son circuit 16 d'interface électrique d'entrée-sortie avec l'extérieur les accès électriques 13 aux microélectrodes 11 et la borne d'accès 33 à la surface 3. Ce module autonome 1 peut être monté sur un réceptacle 4 comportant des bornes 41 de connexion électrique respectivement aux accès 13 des microélectrodes 11 de stimulation et la borne 35 de connexion électrique à l'accès 33. Ce module 1 peut également contenir lui-même tout ou partie de l'électronique d'enregistrement et de stimulation, notamment dans le cas d'implants. On obtient ainsi une stimulation à la fois focale et homogène spatialement du tissu vivant autour de la microélectrode 11 stimulante. Le problème de la focalisation des stimulations est résolu de manière technologiquement très simple avec une seule contre-électrode formée par la surface 3 assurant le retour du courant, même si plusieurs microélectrodes 11 stimulent simultanément. L'invention permet ainsi d'introduire la notion de pixel de stimulation restreint à chaque microélectrode 11 de stimulation, ce qui pourra être d'une importance capitale dans la construction d'implants rétiniens, où chaque zone de la rétine doit être stimulée localement de manière non corrélée aux autres régions. De plus, l'invention permet de s'affranchir des stimulations multipolaires qui nécessitent de multiplier le nombre d'électrodes stimulantes, qui nécessitent davantage de courant pour activer les cellules, et qui créent des zones de stimulations non homogènes. Les microélectrodes 11 ont par exemple une disposition régulière, comme par exemple en lignes et en colonnes orthogonales à la figure 3, la grille 3 pouvant alors être formée de lignes rectilignes orthogonales passant dans les espaces entre les microélectrodes 11 de stimulation. Bien entendu, les microélectrodes 11 et la grille 3 pourraient avoir toute autre disposition. Les microélectrodes 11 de stimulation sont réparties dans une région 14 d'application du dispositif de stimulation contre le tissu vivant, cette région d'application 14 étant délimitée par les microélectrodes 15 de 3o stimulation situées au bord de la matrice 1. L'accès 33 à la surface 3 se trouve en général à l'extérieur de la région 14 d'application des microélectrodes 11, sans passer entre les microélectrodes 11 de stimulation, contrairement aux dispositifs décrits ci-dessus de l'état de la technique. Cependant un accès direct à la surface 3 est envisageable hors plan des microélectrodes 11, par exemple à travers l'épaisseur du support des microélectrodes. Bien entendu, une masse distante des microélectrodes 11 de stimulation et de la surface 3 peut être prévue en plus de la surface 3 pour le retour du courant de stimulation. Cependant, si la conductivité de la masse distante est plus élevée que celle de la surface 3, la stimulation pourra être moins focale qu'en absence de la masse distante. Les sections 210 21 d'application des microélectrodes 11 de stimulation ainsi que la surface 3 peuvent être inscrites dans toute forme, par exemple plane, mais également courbe. La surface 3 peut éventuellement être insérée sur un support différent de celui des microélectrodes 11, par exemple dans le cas d'applications 3D in vivo. Dans le mode de réalisation de la figure 4, la surface 3 est en forme de grille selon la figure 3, avec des sections 210 d'application de microélectrodes 11 de stimulation alignées suivant une ligne horizontale, chaque section 210 étant entourée par une maille 31, la grille 3 pouvant comporter d'autres mailles 32 n'entourant aucune microélectrode. Dans le mode de réalisation représenté à la figure 5, la surface 3 supplémentaire conductrice est continue dans la région 14 avec des ouvertures 36 de passage des sections 210 des microélectrodes 11, séparées d'une distance déterminée de celle-ci et par exemple de forme correspondant à celles-ci. Dans les modes de réalisation représentés aux figures 6 et 7, les zones conductrices 31 au voisinage des sections 210 entourent chacune une section 210 à distance de celle-ci. Les zones conductrices 31 sont par exemple de forme correspondant à celle des sections 210, par exemple annulaire pour des sections 210 circulaires. Dans le mode de réalisation représenté à la figure 6, les zones 31 au voisinage des sections 210 sont reliées les unes aux autres par des pattes également conductrices 37, par exemple suivant deux directions sécantes dans la région 14, ces pattes 37 faisant partie de la surface 3 pour être appliquées ou non contre le tissu vivant et pouvant être rectilignes ou non. Dans le mode de réalisation représenté à la figure 7, les zones 31 au voisinage des sections 210 sont reliées les unes aux autres par des conducteurs extérieurs 38 à la surface 3 et non appliqués contre le tissu vivant lorsque la matrice 1 et la surface 3 sont appliquées. Les conducteurs extérieurs 38 sont reliés à l'accès 33. Dans le mode de réalisation représenté aux figures 8 et 9, les zones 31 au voisinage des sections 210 comportent des branches 39 s'étendant entre des sections 210 suivant un chemin continu déterminé passant à proximité de plusieurs sections 210 successives situées du même côté, par exemple entre plusieurs rangées de sections 210. Les branches 39 sont électriquement en parallèle en étant reliées les unes aux autres, par exemple par une traverse 50, cette traverse 50 faisant partie de la surface 3 pour être appliquée contre le tissu vivant et pouvant être rectilignes ou non et/ou des moyens de liaison 52 similaires aux conducteurs 38 peuvent être prévus. Les branches 39 sont par exemple rectilignes et physiquement parallèles entre elles. Dans le mode de réalisation représenté à la figure 9, au moins une des branches 39 comporte de plus des extensions transversales 51 entre deux sections 210 successives situées du même côté de la branche 39. Ces extensions 51 sont par exemple alternes le long de la branche 39. Ces extensions. Dans l'exemple représenté, lorsque plusieurs branches 39 sont prévues, les extensions 51 d'une branche 39 ne touchent pas les autres branches 39 et en plus alternent d'une branche 39 à la branche voisine. Bien entendu, ce qui est indiqué ci-dessus pour la surface 3 peut être prévu pour tout (ainsi que représenté) ou pour un sous-ensemble de microélectrodes 11 de la matrice 1. A la figure 10, le dispositif 8 de stimulation comporte un système 4 de génération de stimuli, par exemple formé par un circuit intégré à application spécifique (ASIC), relié d'une part aux bornes 13 d'accès aux microélectrodes 11 de la matrice 1 et à la borne 33 d'accès à la surface 3 et d'autre part à un système 5 d'acquisition, de stimulation et de contrôle muni d'une interface homme û machine 6, par exemple formée par un ordinateur. La matrice 1 est appliquée par sa région 14, laquelle comprend les sections 210 des microélectrodes 11 de stimulation et la surface 3, contre le tissu vivant T ayant des neurones N in vitro. On envoie à la matrice 1, par l'intermédiaire du système 4 sous la commande du système 5, des signaux de stimulation, ayant été prédéterminés sur l'interface 6, ainsi que représenté par les flèches verticales dirigées vers le haut à la figure 7. La matrice 1 peut également prélever l'activité du tissu vivant T en réponse ou non aux signaux de stimulation, qui est transmise au système 4, puis au système 5 pour pouvoir être restituée sur l'interface 6, ainsi que représenté par les flèches verticales dirigées vers le bas à la figure 7. Bien entendu, la matrice 1 de microélectrodes suivant l'invention pourrait également servir d'électrode de référence pour mesurer les variations de potentiels dans un tissu vivant reflétant les activités électriques de cellules excitables composant ce tissu. La matrice peut également être appliquée sur un tissu in vivo, pour la réhabilitation fonctionnelle notamment (audition, vision, maladies neurodégénératives ou cardiaques, par exemple) ou pour l'exploration du système nerveux central ou d'autre types de systèmes (recherche fondamentale). La focalisation d'une stimulation extracellulaire est directement liée à la raideur du champ de potentiel autour de l'électrode de stimulation : plus ce champ est raide (i.e., croît vite avec la distance), plus il faut de courant pour stimuler à une grande distance. Ainsi, focaliser une stimulation revient à focaliser le champ de potentiel autour de l'électrode de stimulation. Les figures 11, 12, 13 montrent l'évolution du champ de potentiel pour différentes configurations d'électrodes. La figure 11 montre l'évolution du potentiel V (en valeur absolue) sur une ligne passant 50 microns au-dessus des électrodes, pour des stimulations monopolaire (courbe Cl), bipolaire (courbe C2), et tripolaire (courbe C3). Une stimulation monopolaire consiste à faire passer le courant entre une électrode et une masse distante, une stimulation bipolaire consiste à faire passer le courant entre deux électrodes voisines, et une stimulation tripolaire consiste à injecter un courant dans une électrode et faire revenir la moitié du courant dans deux électrodes situées de part et d'autre. Dans la figure 11, les trois disques gris Dl, D2, D3 indiquent les positions à 0 pm, -50 pm et + 50 pm des électrodes alignées suivant l'axe x des abscisses dans le cas tripolaire. Dans le cas monopolaire, seule l'électrode centrale Dl est utilisée. Dans le cas bipolaire les deux électrodes de gauche Dl et D2 sont utilisées. En monopolaire, l'évolution Cl du potentiel est peu raide et donc peu focale. En bipolaire, la courbe C2 est plus raide, mais présente une zone proche des électrodes où le potentiel est très bas (zone aveugle ZA). De même en tripolaire, la courbe C3 est encore plus raide mais cette fois, on observe deux zones aveugles ZA proches des électrodes. Ainsi, les configurations multipolaires sont plus focales mais le champ n'est pas homogène autour des électrodes et présente notamment des zones aveugles où les cellules, pourtant proches des électrodes, ne seront pas stimulées. Dans un mode de réalisation de l'invention, on utilise une grille (ou un plan = grille remplie, plus généralement surface) qui passe autour de toutes les électrodes de la matrice et qui assure le retour de tout ou partie du courant de stimulation quelle que soit l'électrode qui stimule. Le potentiel de cette surface est de préférence maintenu au potentiel de la masse, bien que ceci ne soit pas une nécessité. La figure 12 montre l'évolution du potentiel V pour 3 types de configurations, en fonction de la distance x en abscisse par rapport à une microélectrode stimulante située à x = 0 pm : - courbe Cl dans la première configuration monopolaire de la figure 11, - courbe C4 dans une deuxième configuration selon le brevet US-A-5 411 540, dans laquelle il est prévu une seule électrode, formée par un disque intérieur conducteur de diamètre 10 microns, entouré par un anneau conducteur de diamètre extérieur 25 microns et de largeur radiale 3 microns centré sur le disque, - courbe C5 dans une troisième configuration de la présente invention, avec une surface 3 comme en figure 5 dont les ouvertures 36 ont un diamètre de 25 microns et les électrodes centrales 11 sont des disques de diamètre 10 microns, centrés sur ces ouvertures. Le potentiel obtenu par la courbe C5 est continu et monotone en fonction de la distance par rapport à la microélectrode stimulante. Dans la deuxième configuration, lorsque, l'anneau est au même potentiel qu'une masse distante, le champ de potentiel est identique à celui Cl généré en configuration monopolaire et la focalité de la stimulation n'est pas améliorée. Dans la deuxième configuration selon la courbe C4, lorsque l'anneau assure le retour complet du courant sans qu'aucun aucun courant ne revienne par une masse distante, la stimulation est plus focale qu'en monopolaire, mais pour un même courant délivré, le potentiel électrique est beaucoup plus bas et donc moins efficace. La présente invention avec une grille de masse selon la courbe C5 donne une stimulation très focale, et une amplitude du potentiel très proche de l'amplitude obtenue en monopolaire à proximité de l'électrode de stimulation. De plus, pour une distance supérieure à 200 microns, la grille de masse focalise mieux le potentiel que l'anneau de la deuxième configuration: l'atténuation de la courbe C5 est plus importante que celle de la courbe C4. Cette solution présente donc trois avantages par rapport à la deuxième configuration: 1) de ne pas dédoubler le nombre d'électrodes, 2) de nécessiter moins de courant pour une amplitude identique du potentiel proche de l'électrode, ce qui est important au regard du fait qu'il est difficile de concevoir des électrodes de faible taille qui ne se dégradent pas pour des courants élevés, et 3) une meilleure focalisation du potentiel à partir de quelques centaines de microns. Une autre caractéristique de l'invention concerne la conductivité surfacique de l'interface entre la grille de masse ou plus généralement la surface 3 et l'électrolyte, étant précisé que l'on ne considère pas la conductivité du métal qui constitue la grille de masse, mais bien de la conductivité de l'interface électrochimique métal/liquide physiologique ou métal/tissu. Les conductivités surfaciques sont considérées pour des fréquences de signal comprises entre 10 et 100000 Hz et notamment de 100 Hz à 1000 Hz, la fréquence standard étant de 1000 Hz. La figure 13 montre l'évolution du potentiel V en fonction de la distance x en abscisse par rapport à une microélectrode stimulante située à x = 0 microns pour différentes conductivités surfaciques de la grille de masse : 40 S/m2 (courbe C51), 400 S/m2 (courbe C52), 4000 S/m2 (courbe C53), 40000 S/m2 (courbe C54), conductivité infinie (courbe C55). Plus la conductivité surfacique de la grille de masse est grande, plus la stimulation est focale. En pratique, on peut prendre des valeurs >1000 S/m2 qui sont supérieures à celles des électrodes en platine, et qui peuvent être obtenues par exemple avec d'autres matériaux ou des surfaces rugueuses, poreuses, ou fonctionnalisées (par exemple platine noir). II est entendu que le type de conductivité considéré ici est la conductivité par unité de surface géométrique et non de surface réelle. En effet, une interface rugueuse ou poreuse aura une surface réelle (déployée/développée) plus grande qu'une même surface géométrique lisse. Des valeurs de conductivité de l'ordre de 400 S/m2 sont obtenues par exemple par des parties conductrices en platine brut blanc. Des valeurs de conductivité de l'ordre de 40000 S/m2 sont obtenues par exemple par des parties conductrices en platine traité noir. Liste des references citées : [1] Microelectrode arrays for stimulation of neural slice preparations. 25 D.A. Borkholder, J. Bao, N.I. Maluf, E.R. Perl, G.T.A. Kovacs, Journal of Neuroscience Methods 77 (1997) 61-66. [2] Fabrication of microelectrode arrays for neural measurements from retinal tissue. W. Cunningham, K. Mathieson, F.A. Mc Ewan, A. Blue, R. 30 McGeachy, J.A. McLeod, C. Morris-Ellis, V.O'Shea, K. M. Smith, A. Litke, M. Rahman, ournal of Physics D : Applied Physics 34 (2001) 2804-2809. [3] Sheet conductor moclel of brain slices for stimulation and recording with planar electronic contacts. P. Fromherz, Eur Biophys J (2002) 31 : 228-231. [4] Effective parameters for stimulation of dissociated cultures using 5 multi-electrode arrays. Daniel A. Wagenaar, Jerome Pine, Steve M. Potter, Journal of Neuroscience Methods 138 (2004) 27-37. [5] Multi-electrode stimulation and recording in the isolated retina. Andrew E. Grumet, John L. Wyatt, Joseph F. Rizzo, Journal of 10 Neuroscience Methods 101 (2000) 31-42. [6] A three-dimensional multi-electrode array for multi-site stimulation and recording in acute brain slices. Marc Olivier Heuschkel, Nlichael Fejtl, Mario Raggenbass, Daniel Bertrand, Philippe Renaud, Journal of Neuroscience Methods 114 (2002) 15 135-148. [7] brevet US-A-5 411 540. REVENDICATIONS 1. Dispositif de stimulation d'un tissu vivant, comprenant une matrice (1) de microélectrodes (11), disposées selon une configuration déterminée côte à côte et sélectionnables pour l'application d'un signal électrique de stimulation par l'une des microélectrodes, les microélectrodes étant isolées s l'une de l'autre et comportant chacune un conducteur (21) d'envoi d'un signal de stimulation, ayant une section (210) d'application locale au tissu vivant, caractérisé en ce qu'il comporte, en plus des conducteurs (21) des microélectrodes, au moins une surface conductrice (3) supplémentaire 10 d'application en tout ou partie contre le tissu vivant, qui est isolée des conducteurs (21) des microélectrodes, et comporte une pluralité de zones conductrices (31) situées respectivement au voisinage d'une pluralité déterminée de sections (210) d'application locale de microélectrodes (11) de la matrice, 15 des moyens (32, 37, 38, 50, 52) de liaison étant prévus pour assurer une liaison électrique entre les zones (31) conductrices de la surface supplémentaire (3), la surface conductrice supplémentaire (3) étant reliée en outre à au moins un accès (33) destiné à être relié à un conducteur extérieur (35) de 20 retour au moins partiel du signal de stimulation et étant formée pour assurer une stimulation focale à partir d'au moins une de la pluralité déterminée de microélectrodes (11). 2. Dispositif suivant la revendication 1, caractérisé en ce que la surface conductrice (3) supplémentaire est intégrée au même support que 25 celui des microélectrodes (11). 3. Dispositif suivant la revendication 1, caractérisé en ce que la surface conductrice (3) supplémentaire est intégrée sur un support différent de celui des microélectrodes (11). 4. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications 30 précédentes, caractérisé en ce que la surface conductrice (3)supplémentaire est en forme de grille, dont les zones conductrices sont formées par des mailles (31) passant autour de microélectrodes (11), les moyens de liaison étant formés sur la surface supplémentaire par les intersections (32) des mailles (31) entre elles. 5. Dispositif suivant la revendication 4, caractérisé en ce que lesdites mailles (31) passant autour de microélectrodes (11) entourent chacune une seule microélectrode (11). 6. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications 4 et 5, caractérisé en ce que la grille (3) est formée par des lignes rectilignes 10 sécantes. 7. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications 4 à 6, caractérisé en ce que chacune des mailles (31) de la grille (3) entourant une microélectrode (11) forme un pixel de stimulation restreint à l'espace délimité par cette maille (31). 15 8. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la surface conductrice (3) supplémentaire passe entre des miicroélectrodes (11). 9. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la surface conductrice (3) 20 supplémentaire entoure des microélectrodes (11). 10. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la surface conductrice (3) supplémentaire est continue avec des ouvertures (36) de passage des sections (210) d'application locale de microélectrodes (11). 25 11. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la surface conductrice (3) supplémentaire comporte des branches (39) électriquement en parallèle entre des microélectrodes (11) et passant chacune au voisinage de plusieurs microélectrodes (11). 30 12. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce que les moyens (32, 37, 50) de liaison électrique entre lesdifférentes zones conductrices (31) sont situés au moins en partie dans la surface conductrice (3) supplémentaire. 13. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce que les moyens (38, 52) de liaison électrique sont situés au moins en partie à l'extérieur de la surface conductrice (3) supplémentaire, à l'intérieur ou à l'extérieur d'un support de la surface conductrice (3) supplémentaire ou dans un circuit électrique extérieur supplémentaire. 14. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la surface conductrice (3) supplémentaire présente une conductivité électrique surfacique d'interface avec le tissu vivant supérieure ou égale à 100 S/m2 à une fréquence de 100 Hz à 1000 Hz. 15. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la surface conductrice (3) supplémentaire présente une conductivité électrique surfacique d'interface avec le tissu vivant supérieure ou égale à 1000 S/m2 à une fréquence de 100 Hz à 1000 Hz, et de préférence supérieure ou égale à 40000 S/m2 à une fréquence de 100 Hz à 1000 Hz. 16. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la matrice de microélectrodes (11) possède un pas d'écartement entre microélectrodes, et lesdites zones conductrices (31) de la surface supplémentaire (3) passent à une distance de la pluralité des microélectrodes (11), inférieure ou égale à cinq fois le pas d'écartement maximum entre microélectrodes, et de préférence à une distance inférieure ou égale au pas d'écartement minimum entre microélectrodes. 17. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que lesdites zones conductrices (31) de la surface supplémentaire (3) passent à une distance de la pluralité des microélectrodes, inférieure ou égale à 500 pm. 18. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il comporte une multiplicité d'accès électriques (13) aux microélectrodes (11), qui sont associés respectivement à la multiplicité de microélectrodes (11) de la matrice (1), l'accès (33) de la 5 surface conductrice (3) supplémentaire étant unique et distinct des accès électriques (13) des microélectrodes (11). 19. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications 1 à 17, caractérisé en ce qu'il comporte une multiplicité d'accès électriques (13) aux microélectrodes (11), qui sont associés respectivement à la multiplicité 10 de microélectrodes (11) de la matrice (1), l'accès (33) de la surface conductrice (3) supplémentaire étant multiple et distinct des accès électriques (13) des microélectrodes (11). 20. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que les microélectrodes (15) situées au 15 bord de la matrice (1) délimitent une région (14) d'application contre le tissu vivant et l'accès (33) de la surface (3) est situé à l'extérieur de la région (14) d'application des microélectrodes (11). 21. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications 1 à 19, caractérisé en ce que les microélectrodes (15) situées au bord de la matrice 20 (1) délimitent une région (14) d'application contre le tissu vivant et l'accès (33) de la surface (3) est situé à l'intérieur de la région (14) d'application des microélectrodes (11). 22. Dispositif suivant l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il comporte en outre un premier système 25 (4) de génération de stimulus électriques, d'amplification et de multiplexage des signaux enregistrés avec les microélectrodes, relié aux microélectrodes (11) et à l'accès (33) de la surface (3), un deuxième système (5) d'acquisition et de contrôle muni d'une interface homme ù machine (6) pour la commande du premier système (4) afin d'envoyer à au moins l'une 30 présélectionnée des microélectrodes (11) un signal de stimulation prédéterminé sur l'interface homme ù machine (6), et de recueillir laréponse du tissu vivant au signal de stimulation et la restituer sur l'interface homme û machine (6). 23. Utilisation in vitro du dispositif suivant l'une quelconque des revendications précédentes, pour la mise en oeuvre en contact avec une préparation cellulaire, un expiant, un organisme vivant, un système de laboratoire, un organe vivant isolé, une partie d'organe vivant isolé. 24. Ensemble amovible destiné à être monté dans le dispositif suivant l'une quelconque des revendications 1 à 22, caractérisé en ce qu'il comporte sur un même module amovible ou répartis sur plusieurs modules amovibles séparés la matrice (1) de microélectrodes, ladite surface (3) supplémentaire, et un circuit (16) d'interface électrique d'entrée-sortie pour la connexion électrique des microélectrodes (11) et de la surface (3) supplémentaire avec l'extérieur, comportant une multiplicité de bornes d'accès électriques (13) à respectivement la multiplicité de microélectrodes (11) de la matrice (1) et une borne d'accès (33) de surface (3) supplémentaire, distincte des bornes d'accès électriques (13) des microélectrodes (11). 25. Utilisation du dispositif suivant l'une quelconque des revendications 1 à 22 pour l'enregistrement de signaux émis par un tissu 20 vivant.