Brevet FR2918876A1 — publié le 20090123

La présente invention relève du domaine du soin de la peau et des cheveux et, en particulier, de l'amélioration de l'équilibre physiologique de la peau et des cheveux et la prévention et/ou le traitement de leur vieillissement. La présente invention se rapporte plus spécifiquement à l'utilisation d'une source de lumière verte pour activer la L-amino acide oxydase en présence d'au moins un substrat de cette enzyme afin de stimuler le métabolisme énergétique des cellules de la peau, stimuler leur renouvellement et ainsi améliorer l'apparence de la peau et des cheveux, en particulier, prévenir et/ou traiter les signes cutanés du vieillissement de la peau et des cheveux. L'invention se rapporte également à une composition comprenant au moins un substrat de l'enzyme et au moins une substance capable d'émettre de la lumière verte, à un kit comprenant un dispositif de lumière verte et une composition comprenant au moins un substrat de ladite enzyme et à un procédé cosmétique mettant en oeuvre les compositions ou kits selon l'invention. La peau est un organe externe du corps constamment soumis aux agressions de l'environnement extérieur telles que les rayonnements du soleil, les polluants atmosphériques... Ces facteurs extérieurs mais aussi le déclin progressif des différentes fonctions de l'organisme au cours du vieillissement concourent à une accumulation de composants cellulaires endommagés (acide nucléiques, lipides, protéines) dont l'élimination et/ou la réparation devrait être assurée par la cellule. La formation de composants cellulaires endommagés s'effectue principalement par des réactions impliquant des espèces réactives de l'oxygène telles que l'anion superoxyde, le peroxyde d'hydrogène ou le radical hydroxyle. D'autres réactions impliquant la fixation sur les macromolécules de glucides ou d'aldéhydes issus de la péroxydation lipidique y contribuent également (Friguet B. Le vieillissement moléculaire et cellulaire et ses futurs enjeux, Mécanismes biochimiques). Conserver une apparence jeune et/ou une peau saine conduit à la recherche incessante de nouveaux composés et/ou de nouvelles compositions permettant de maintenir ou d'améliorer l'apparence de la peau. C'est ce à quoi est parvenu la Demanderesse en associant l'application d'une composition comprenant au moins un substrat de la L-amino acide oxydase et l'exposition à une lumière verte qui a pour effet d'activer l'enzyme L-amino acide oxydase. Il est connu d'utiliser des rayons lumineux pour le traitement de la peau. A ce titre, on peut citer : - les lasers qui sont des rayonnements électromagnétiques de longueur d'onde 532 nm et qui sont utilisés notamment pour traiter les phénomènes de télangiectasie ou d'hyperpigmentation liés à l'âge (Robert et aL, 2003). Plusieurs travaux ont montré que les lasers émis à la longueur d'onde de 1064 nm améliorent la régénération cutanée. Les lasers appliqués de façon pulsée à 585-595 nm améliorent nettement les rides localisées au niveau de la région périorbitale. - L'IPL (intense pulsed light) : les rayonnements électromagnétiques à large spectre compris entre 500 et 1200 nm (IPL) ont été largement décrits pour améliorer les phénomènes de vieillissement. L'utilisation de filtres spécifiques permet d'isoler des longueurs d'ondes et ne conserver que les rayonnements électromagnétiques adaptés aux types de traitements souhaités. Il a été montré que l'émission simultanée de rayonnements jaunes rouges et infrarouges permet de réguler plusieurs activités biologiques différentes et ainsi de réguler diverses altérations liées au photo vieillissement. - Les rayonnements infrarouges : plusieurs travaux ont montré l'effet d'une irradiation infrarouge à large spectre sur la biologie de la peau. Il a été décrit en particulier que l'absorption des infrarouges par les molécules d'eau du tissu induit une augmentation localisée de chaleur au niveau du derme entraînant une augmentation de synthèse de molécules matricielles et en particulier de collagène. Plus récemment il a été montré qu'une irradiation aux infrarouges protège les fibroblastes du derme de l'effet délétère d'une irradiation aux UV. Dans ces travaux les auteurs montrent que cette protection passe par la régulation d'une protéine mitochondriale, le cytochrome C (Menezes et al., 1998) - De plus en plus d'équipes scientifiques cherchent à déterminer le mécanisme d'action biologique de la LED. Il a été montré en particulier que la LED en ciblant des photorécepteurs (chromophores) active la chaîne d'oxydo réduction localisée au niveau de la membrane mitochondriale. Cette stimulation conduirait alors au niveau des fibroblastes à la production de protéines fibrillaires les collagènes et l'élastine et à la diminution de l'expression des métaloprotéinases MMPs (Robert et aL, 2003). Dans une étude récente, il a été montré par Vinck et aL, 2005 que l'irradiation par une source de LED à 570 nm induit une augmentation de la prolifération des fibroblastes. La Demanderesse a découvert, de manière surprenante et inattendue, que l'application sur la peau d'un substrat de la L-amino acide oxydase accompagnée d'une émission de lumière verte conduisait à une activité accrue de cette enzyme et présentait des effets avantageux sur la stimulation et la régulation de l'activité physiologique de la peau. La L-amino acide oxydase (EC 1.4.3.2) appartient à la famille des amino acide oxydases. Les enzymes amino acides oxydases sont présentes dans les différents types cellulaires de la peau. Elles catalysent la transformation des fonctions amines en fonctions cétoniques. La transformation d'un acide aminé par ces enzymes donne donc naissance au composé ceto acide correspondant. La demanderesse a maintenant mis en évidence que la lumière verte avait la propriété d'augmenter l'activité de la L-amino acide oxydase. Les acides aminés sont des combustibles qui, après transformation dans le cytoplasme de la cellule, entrent dans les mitochondries pour y être dégradés. L'alanine, en particulier, peut donner directement naissance au pyruvate par désamination oxydative catalytique avec la L-amino acide oxydase. L-amino acid oxydase L-alanine + H2O + 02 - - L-Pyruvate + NH3 + H2O2 Dans la mitochondrie, le pyruvate est transformé en ATP, principale source énergétique de la cellule. Parmi les composés ceto acides, on compte notamment le pyruvate, ou encore l'acétoacétate. La formation de l'acétoacétate peut aussi être induite par désamination oxydative selon le 25 même principe celui cité ci dessus à partir de l'amino butyrate. L amino acid oxydase a amino butyrate + H2O + 02 --acétoacétate + NH3 + H2O2 L'invention a donc pour objet l'utilisation de lumière verte pour activer la L-amino acide 30 oxydase en présence d'au moins un de ses substrats. Une telle utilisation a pour effet d'augmenter le potentiel de phosphorylation qui active des signaux conduisant à l'expression de gènes et d'activer le métabolisme des cellules de la peau, en particulier, des fibroblastes, des kératinocytes et des mélanocytes, d'activer et de 35 réguler la physiologie de ces cellules notamment en diminuant la formation et en stimulant l'élimination de composants cellulaires endommagés, et particulier des composants résultant du stress oxydatif. 20 Une conséquence de cet effet est d'améliorer le renouvellement des cellules du derme et de l'épiderme et ainsi la régénération cutanée. L'utilisation selon l'invention permet donc de donner à la peau et aux cheveux un aspect sain, c'est-à-dire unifier le teint, raviver son éclat, éviter son aspect jaune ou terne ; prévenir et/ou traiter les taches cutanées ; atténuer les irrégularités visibles et/ou tactiles de la surface de la peau, lui donner un relief plus uniforme et la lisser, prévenir et/ou traiter les rides et ridules ; redonner plus d'épaisseur et d'élasticité à la peau, en particulier, pour des zones où la peau est davantage relâchée, par exemple, sur le contour du visage ou dans le cou. L'utilisation selon l'invention permet encore de lutter contre les altérations de la peau liées au vieillissement, de prévenir et/ou de traiter les signes cutanés du vieillissement de la peau et les signes du vieillissement des cheveux ; d'améliorer la cicatrisation. En particulier, l'utilisation selon l'invention permet d'augmenter la synthèse des macromolécules matricielles du derme (fibrilles de collagène, GAG, fibres élastiques), et d'éviter leur dégradation, elle évite aussi l'altération de l'homéostasie épidermique. Par signes cutanés du vieillissement de la peau, on entend notamment, un relâchement de la peau, l'apparition de rides, de taches cutanées, un jaunissement du teint. Par signes du vieillissement des cheveux, on entend notamment la chute des cheveux, le ralentissement de leur pousse, leur grisonnement, la diminution de leur diamètre, de leur vigueur. 25 La mise en oeuvre de l'invention se fait par l'administration simultanée ou décalée d'une composition comprenant au moins un substrat de la L-amino acide oxydase et de la lumière verte sur la zone où ladite composition a été appliquée. Les substrats de la L-amino acide oxydase utilisables selon l'invention sont les amino acides 30 ou une molécule comprenant une fonction amine, le substrat étant tel que qu'il comporte un carbone en alpha du groupe acide et un groupe d'amine primaire, plus particulièrement, il s'agit des L-amino acides. Ledit substrat est choisi parmi la leucine, la sérine, la thréonine, la glycine, l'alanine, la valine, 35 la phénylalanine, la tyrosine, la lysine, l'arginine, la cystéine, l'aspartate, le glutamate, la citruline, l'ornithine, l'acide diaminopimelique, la penicilamine, l'acide oc-amino butyrique.20 De préférence, l'invention est mise en oeuvre avec l'alanine, la glycine, l'acide a-amino butyrique, la lysine, la leucine, la sérine et la thréonine. Les acides aminés pourront être formulés sous forme de sels, tels que les sels sodiques ou alcalino-terreux (par exemple, manganèse ou calcium). Selon un mode préféré, l'invention est mise en oeuvre à l'aide d'une composition topique comprenant au moins un substrat de la L-amino acide oxydase. Par composition topique, on entend une composition destinée à une application locale sur toute surface du corps, incluant, la peau, les muqueuses ou semi-muqueuses, le cuir chevelu. La composition comprend généralement un milieu physiologiquement acceptable, c'est-à- dire compatible avec la peau et/ou ses phanères. Il s'agit de préférence d'un milieu cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui présente une odeur, une couleur et un toucher agréables et qui ne génère pas d'inconforts (picotements, rougeurs, tiraillements) inacceptables, susceptibles de détourner la consommatrice d'utiliser cette composition. La composition topique selon l'invention comprend une quantité efficace de substrat (acide aminé) choisie aussi en fonction de la solubilité de l'acide aminé dans la formule considérée, cette quantité de substrat de la L-amino acide oxydase est préférentiellement comprise entre 0,001 à 10%, de façon encore, préférée entre 0,01 et 1%. Selon la zone du corps visée et l'intensité d'application désirée, l'homme de métier pourra choisir parmi différentes formes de composition : - une composition destinée à restée appliquée sur la peau même après l'exposition à la lumière verte, cette composition peut être une dispersion du type lotion ou gel, une émulsion de consistance liquide ou semi-liquide du type lait, obtenue par dispersion d'une phase grasse dans une phase aqueuse (H/E) ou inversement (E/H), ou une suspension ou émulsion de consistance molle, semi-solide ou solide du type crème ou gel, ou encore des émulsions multiples (E/H/E ou H/E/H), une microémulsion, une dispersion vésiculaire de type ionique et/ou non ionique, ou une dispersion cire/phase aqueuse ; - une composition qui ne reste en contact avec la peau que pendant la durée de l'exposition à la lumière verte, telle qu'un masque, sous forme de crème que l'utilisateur peut appliquer spécifiquement sur les zones à traiter puis retirer ensuite, un patch imbibé d'un substrat ; sous cette forme d'administration, les masques ou patchs doivent être suffisamment transparents pour laisser passer la lumière verte. Dans le cadre de la présente invention, toute source de lumière de couleur verte émettant à une longueur d'onde telle qu'elle active la L-amino-acide oxydase, pouvant être comprise entre 500 et 580 nm, de préférence entre 500 et 560 nm. On peut notamment citer : - les lasers (pour Light Amplification by the Stimulated Emission of Radiation), il s'agit d'une source lumineuse de très haute intensité et monochromatique. A la différence de la lumière blanche (photons de diverses longueurs d'onde émis de façon anarchique à différents instants et dans des directions différentes), la radiation lumineuse émise par un laser est une lumière constituée de photons émis en même temps et dans la même direction. Trois éléments caractérisent les lasers : la longueur d'onde (À) ; le mode d'émission : continu (puissance délivrée constante), pulsé (l'énergie est délivrée par pulses dont la fréquence et la puissance sont modulables), et ultra-pulsé (les pulses ont une durée et une puissance fixe, mais la puissance est considérable et la durée extrêmement brève) ; et la puissance : de quelques mW à des dizaines de milliers de watts. - Il PL : Intense pulse light. La différence fondamentale entre laser et IPL réside dans le fait que IPL peut délivrer des centaines voire des milliers de couleurs à la fois alors que le laser ne délivre qu'une seule longueur d'onde. Ces machines permettent de choisir la longueur d'onde adaptée au problème à traiter, rien qu'en changeant le filtre. On les appelle aussi non coherent light source . Il s'agit d'émission de pulses de lumière de haute intensité globale. Cette technologie peut délivrer un large spectre de longueurs d'onde qui sont absorbées par de multiples chromophores. On peut traiter de grandes surfaces à la fois. - les LED : Light emitting diode (Photomodulation (LED, Light Emitting Diode voir "The newest Medical breakthrough for skin renewal and Shrinking pores (2004)") La LED : la LED émet généralement de la lumière à basse intensité de quelques milliwatt et à une longueur d'onde de 590+1- 10 à 20 nm, on les classe dans la catégorie des lasers à faible puissance (1 à quelques dizaines de mW). La présente invention peut également être mise en oeuvre à l'aide de substances émettant de la lumière verte. Ces substance sont plus particulièrement des métabolites ou actifs émettant de la lumière entre 500 et 580 nm sous exposition aux UV, par exemple, la vitamine B2 qui se dégrade en lumiflavine qui fluoresce dans le vert, la baicailine en milieu acide, la fisetine, le dipyridamole, les pigments phosphorescents verts, les minéraux. Ces sources de lumière verte sont utilisées en quantité ou intensité suffisante pour assurer un flux d'émission de lumière de 1 à quelques dizaines de mV. L'homme du métier adaptera la durée d'exposition à la lumière verte selon les 10 caractéristiques de la source lumineuse et l'effet recherché, à titre purement indicatif, les zones cutanées à traiter pourront recevoir une puissance lumineuse d'au moins 500 à 1500 mJ/cm2, et préférentiellement, comprise entre 500 et 90000 mJ/cm2. La source de lumière verte pourra encore être une substance phosphorescente ou 15 fluorescente verte. Par "pigments phosphorescents verts", on entend les pigments phosphorescents classiques listés ci-après mais aussi toute substance cosmétiquement acceptable qui émet une lumière verte phosphorescente d'une longueur d'onde comprise entre environ 500 et 580 nm. La présence de pigments phosphorescents fournit une source continue de lumière verte à la 20 composition, la phosphorescence est activée par l'exposition aux UV classiquement présent dans la lumière du jour et son effet dure plusieurs heures. Différents composés sont connus pour avoir la propriété de phosphorer dans le vert comprenant sans limitation : - le sulfide de zinc (dopé avec du cuivre et/ou du manganèse), 25 - l'aluminate de strontium - calcite phosphorescent Des oxydes céramiques dopés avec des éléments de terre rare tels que l'yttrium dopé Al, le galium, le terbium dopé Sr ou le dysprosyum (Y3(AI,Ga)SO2, Y2SiO5, SrGa2S4:Eu) - des boro-silicates de zinc (verre) dopés avec du cuivre ou des éléments terreux rares 30 - les oxydes de terre rare. En complément ou en remplacement des sources de lumières phosphorescentes, des sources de lumière fluorescentes dans le vert peuvent être utilisées. Les sources de lumière verte fluorescente préférées sont les minéraux fluorescents. 35 A titre d'exemple et sans caractère limitatif, on peut citer : l'andalousite et la chiastolite (aluminum silicate); amblygonite (lithium aluminium phosphorate basique); phenakite (beryllium silicate); variscite (aluminium phosphate aqueux); serpentine (basic magnésium5 silicate); amazonite (potassium aluminium silicate); améthyste (silicone dioxide); chrysoberyl (l'oxyde beryllium aluminum); turquoise (aluminium phosphate basique comprenant du cuivre); tourmaline incolore, jaune ou rose (borosilicate); ambre (succinite/résines); opale (silicone dioxide aqueux); cerussite (lead carbonate); fuchsite (potassium aluminium silicate); diopside (calcium magnésium silicate); ulexite (sodium calcium borate aqueux); aragonite (calcium carbonate); et willemite (zinc silicate). On peut encore citer les réseaux de polymères qui agissent comme des prismes et ont pour propriété, en choisissant l'indice de réfraction adapté, d'émettre de la lumière verte lorsqu'ils sont éclairés par de la lumière blanche. On peut encore favoriser l'accès de lumière verte au niveau de la peau en appliquant des compositions colorées vertes qui ont pour rôle de filtrer la lumière pour ne laisser passer que la lumière verte, tels que les oxydes de chrome, la chlorophylle, la kermaline, la tourmaline, des poudres de pierres précieuses et semi-précieuses vertes (émeraude...). Ces substances peuvent être utilisées à des concentrations suffisantes pour assurer le passage d'une quantité de lumière verte capable d'activer la L-amino acide oxydase, par exemple, comprises entre 0,01% et 20%. L'invention a encore pour objet une composition comprenant au moins un substrat de la L-amino acide oxydase et au moins un composé choisi parmi les actifs émettant de la lumière entre 500 et 580 nm sous exposition aux UV, les substances phosphorescentes ou fluorescentes vertes et les substances filtrant la lumière pour ne laisser passer que la lumière verte, ces composés sont tels que décrits ci-avant. De préférence, il s'agit d'une composition topique telle que décrite ci-avant. L'invention a également pour objet un procédé cosmétique pour améliorer l'apparence de la peau, améliorer l'éclat du teint, atténuer les irrégularités visibles ou tactiles de la surface de la peau, en particulier pour atténuer les rides et ridules et/ou les taches cutanées et/ou lisser la peau et/ou éclaircir le teint, comprenant l'application topique d'une composition comprenant au moins un substrat de la L-amino acide oxydase et l'exposition de la zone sur laquelle ladite composition a été appliquée à une lumière verte de longueur d'onde comprise entre 500 et 580 nm. L'invention a également pour objet un procédé cosmétique pour lutter contre le vieillissement des cheveux, le ralentissement de leur pousse, leur grisonnement, la diminution de leur diamètre, de leur vigueur, comprenant l'application topique d'une composition comprenant au moins un substrat de la L-amino acide oxydase et l'exposition de la zone sur laquelle ladite composition a été appliquée à une lumière verte de longueur d'onde comprise entre 500 et 580 nm. Pour la mise en oeuvre des procédés selon l'invention, la source de lumière verte est choisie parmi les lasers, l'IPL, les LED, les métabolites ou actifs émettant de la lumière entre 500 et 580 nm sous exposition aux UV, les substances phosphorescentes ou fluorescentes vertes. Selon un autre de ses objets, la présente invention se rapporte à un kit comprenant : a. une composition comprenant au moins un substrat d'une enzyme dont l'activité peut être augmentée par une émission lumineuse verte, la L-amino acide oxydase ; b. une source de lumière verte. La mise en oeuvre du procédé peut consister à réaliser les étapes a et b de façon simultanée ou bien décalée dans le temps. En particulier, ledit substrat de la L-amino acide oxydase est choisi parmi leucine, la sérine, la thréonine, la glycine, l'alanine, la valine, la phénylalanine, la tyrosine, la lysine, l'arginine, la cystéine, l'aspartate, le glutamate, la citruline, l'ornithine, l'acide diaminopimelique, la penicilamine, l'acide a-amino butyrique. Ladite composition répond elle aux caractéristiques techniques décrites ci-avant. La source de lumière verte est choisie parmi les lasers, l'IPL, les LED, les métabolites ou actifs émettant de la lumière entre 500 et 580 nm sous exposition aux UV, les substances phosphorescentes ou fluorescentes vertes Ainsi, selon un mode particulier de réalisation du kit, la source de lumière verte est une substance émettant de la lumière verte formulée dans la composition comprenant ledit substrat de la L-amino acide oxydase ou bien dans une autre composition topique destinée à être appliquée de façon décalée (avant ou après). Le kit peut encore être mis en ouvre à l'aide d'un patch, notamment iontophorétique, imbibé d'au moins un substrat de la L-amino acide oxydase et muni de diodes émettant une lumière verte. La mise en oeuvre du procédé selon l'invention pourra en outre comprendre une étape préalable ou concomitante aux étapes a et/ou b de traitement de la peau visant à améliorer la pénétration du substrat, par exemple en refroidissant la peau, par iontophorèse, par un système occlusif. On peut également favoriser la pénétration du substrat en pratiquant un peeling chimique ou mécanique préalable sur la zone à traiter. Exemple 1- activation de la L-amino acide oxydase par de la lumière verte L'exemple suivant mesure l'effet stimulateur de la lumière verte (500-560 nm) sur l'activité du chromophore enzymatique, la L-amino oxydase. L'exposition de cette enzyme à la lumière verte stimule la transformation des acides aminés en cétoacides. Description du protocole Principe générale : Le principe de ces travaux est de comparer l'activité de l'amino acide oxydase avec ou sans exposition préalable sous une source de lumière entre 500-560 nm. Matériels et réactifs - source, avec fibre optique (diamètre interne 3mm) - Photomètre IL-1700 + sonde SED 033 (#6600). - la L-amino acide oxydase : Sigma, réf. A-9253 (lot 064K0773) à 0,39 units/mg solid. - la D-aminoacide oxydase : Sigma, réf. A-5222-1000N (lot 115K1101) à 2,3 units/mg solid. Mode exposition des enzymes L'enzyme (forme poudre déshydratée ou solution d'enzyme) est disposée dans un tube Ependorf conique. La quantité est ajustée de manière à ce que l'ensemble des enzymes soit soumis aux expositions lumineuses (longueur d'ondes comprises entre 490 et 585 nm) par une fibre optique de diamètre 3 mm. L'exposition lumineuse est continue et l'énergie fournie par la lumière est 0.45mW/cm2 (voir figure 1 : schéma de montage et figure 2: caractéristiques de la lumière utilisée dans les tests). Les tubes Ependorf sont mis dans un bac à glace pendant toute la durée de l'exposition afin d'éviter un effet de la température. L'enzyme témoin (non exposée à la lumière entre 500-560 nm) est préparée au même moment, de la même manière et protégée de la lumière par support empêchant l'apport de lumière extérieure (papier aluminium). Mesure d'activité de l'enzyme L'activité de l'enzyme est mesurée par chimiluminescence. Le substrat de l'enzyme (L-Leucine et ou D-Alanine) est incubé différents temps avec l'amino acide oxydase dans un milieu tamponné spécifique. La formation du produit d'hydrolyse H202 est suivie par chimiluminescence en présence de peroxydase et isoluminol selon le protocole de dosage de l'activité de cet enzyme (E.C.1.4.3.2) décrit dans The Worthington manual , Enzymes and related biochemicals û Editor : Charles C. Worthington 1988, pages 35-37). Le produit d'hydrolyse H202 qui en est issu est dosé par chimiluminescence avec le mélange réactionnel présence de peroxydase et isoluminol réactionnel préparé comme suit : Mélange réactionnel de chimiluminescence Peser 34,8 mg d'Isoluminol et les solubiliser sous agitation magnétique dans environ 50 ml de tampon Borate 100 mM. Peser 2 mg de Microperoxydase et les solubiliser sous agitation magnétique dans environ 5 ml de tampon Borate 100 mM. Les deux réactifs sont alors mélangés dans une fiole jaugée de 200 ml dont le volume est ajusté par du tampon Borate (rincer 3 fois chaque bécher avec du tampon). Les 200 ml sont placés dans un flacon de 500 ml. 200 ml de tampon borate y sont alors à nouveau ajoutés. Le mélange réactionnel, dont le volume final est alors de 400 ml est homogénéisé par agitation magnétique puis placé à l'obscurité à température ambiante au moins 24 heures avant emploi. La lecture de luminescence se fait à l'aide du luminomètre Fluoroskan Ascent FL de 20 Thermo Labsystems. Résultats : Activation enzymatique spécifique de la L-amino acide oxydase - Influence de la lumière verte sur la D-amino acide oxydase. D amino oxydase Condition Témoin lumiere verte 25 luminescence 577,5 568,2166667 -Influence de la lumière verte sur la L-amino acide oxydase. L amino acide oxydase Condition Témoin lumiere verte luminescence 342,26667 409,8777778 Conclusion Une exposition prolongée à la lumière verte ne modifie pas l'activité de la D-amino acide oxydase de façon significative. En revanche, il est observé qu'une exposition de 60 minutes induit une activation spécifique de la L amino oxydase. Exemple 2- cinétique d'activation de la L amino acide oxydase Plusieurs mesures sont réalisées après différentes durées d'exposition selon le protocole 10 décrit dans l'exemple 1 et récapitulées dans le tableau suivant : Les résultats figurent dans le tableau ci-dessous et sont représentés en figure 3 (la L-amino acide oxydase sensiblisée est celle exposée à la lumière verte). Temps d'analy Témoin lumière verte 0 0 0,0 10 191,56667 248,0 20 349,66667 420,8 30 502,6 586,5 40 646,46667 735,2 50 756,26667 844,0 60 876,36667 970,9 Conclusion La cinétique d'activation de la L amino acide oxydase est augmentée par une exposition à la lumière entre 500-560 nm. Exemple 3- activation de la L-amino acide oxydase selon le temps d'exposition : effet dose réponse. L'essai est mis en oeuvre dans les mêmes conditions expérimentales que l'exemple 1 en 25 suivant le protocole du forunisseur. Temps de stimulation Témoin lumière verte Ecart 0 0 0,0 0 30 409,9 412,8 0,7 60 349,7 420,8 16,9 120 275,4 361,7 23,8 15 2010 Les résultats figurent dans le tableau ci-dessous et sont représentés en figure 4. Conclusion On constate que plus l'exposition de l'enzyme est longue plus son activité est importante. Le 5 diagramme suivant montre le rapport entre l'activité de l'enzyme exposée et celle de l'enzyme témoin. Exemple 4 - Compositions Crème de régénération épidermique (émulsion huile dans eau) Ammonium Polyacryldimethyltauramide 1.00% (Hostacerin AMPS de Clariant) Cyclohexasiloxane 5.0% Glycerin 1.70% Stearyl alcohol 0.30% Glycerylstearate / PEG-100 stearate 0.70% Dimyristyl tartrate / cetearyl alcohol / C12-15 0.50% pareth-7 / PPG-25 laureth-25 Gomme de Xanthan 0,20 0/0 L-Alanine 0.5% Conservateurs 0.50% Eau gsp100 Crème de régénération épidermique (émulsion huile dans eau) Ammonium Polyacryldimethyltauramide 1.00% (Hostacerin AMPS de Clariant) Cyclohexasiloxane 5.0% Glycerin 1.70% Stearyl alcohol 0.30% Glyceryl stearate / PEG-100 stearate 0.70% Dimyristyl tartrate / cetearyl alcohol / C12-15 0.50% pareth-7 / PPG-25 laureth-25 Gomme de Xanthan 0,20 0/0 L-Leucine 0.5% Conservateurs 0.50% Eau qsp 100 Ces crèmes sont appliquées sur le visage et/ou sur le corps juste avant une exposition prolongé (30 mn à 1h30) sous un rayonnement de longueur d'onde comprise entre 500 et 560 nm. Patch iontophorétique Un patch de référence commercial lontopatchTM (Travanti Pharma, Mendota Heights, MN, USA) est appliqué sur une zone préalablement traitée avec l'une des crèmes ci-dessus. Il est ensuite relié à un courant électrique pour délivrer un courant galvanique généré par une différence de potentiel de 1V et comportant deux électrodes, une anode en Zn et une cathode en AgCI et est exposé sous une source de lumière verte. Ce traitement est réalisé à raison d'une fois par jour pendant 30 à 45 minutes. Masque vert Phase huileuse : Octyl dodecanol 6% Huile de noyau d'abricot 6% Triglycerides 5% Kaolin 3% Alcool cétylique 2% Acetate de vitamine E 0.5% Huile de palm hydrogénée 6% Fraction liquide de beurre de Karité 5% Phase aqueuse: Gomme de Xanthane 0.4% Cocoate de sucrose/stearate de de sorbitan(melande vendu par la société ICL sous la 35 denomination Arlaton 21121 5.5% Glycerine 3% Dipyridamole 0.30% Cuivre Chlorophyllin 0.20% Ethanol 5% L Alanine 0.5% Parfum 0.3% Conservateur qs Eau gsp100 Ce masque est appliqué sur les zones de la peau à traiter, puis le sujet est placé sous une source de lumière blanche (naturelle ou électrique) pendant 45 minutes à 1 heure. REVENDICATIONS 1. Utilisation non-thérapeutique d'une lumière verte de longueur d'onde comprise entre 500 et 580 nm pour activer la L-amino acide oxydase en présence d'au moins un de ses substrats. 2. Utilisation non-thérapeutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit substrat est un amino acide ou une molécule comprenant une fonction amine, tel que qu'il comporte un carbone en alpha du groupe acide et un groupe d'amine primaire. 3. Utilisation non-thérapeutique selon la revendication 2, caractérisée en ce que ledit substrat est choisi parmi la leucine, la sérine, la thréonine, la glycine, l'alanine, la valine, la phénylalanine, la tyrosine, la lysine, l'arginine, la cystéine, l'aspartate, le glutamate, la citruline, l'ornithine, l'acide diaminopimelique, la penicilamine, l'acide a-amino butyrique. 4. Utilisation non-thérapeutique selon la revendication 3, caractérisée en ce que ledit substrat est présent à une concentration comprise entre 0,001 et 10%. 5. Utilisation non-thérapeutique selon l'une quelconque des revendications précédentes, 20 caractérisée en ce que ledit substrat est formulé dans une composition topique. 6. Utilisation non-thérapeutique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la source de lumière verte est choisie parmi les lasers, l'IPL, les LED, les métabolites ou actifs émettant de la lumière entre 500 et 580 nm sous exposition aux UV, 25 les substances phosphorescentes ou fluorescentes vertes. 7. Utilisation non-thérapeutique selon la revendication 6, caractérisée en ce que lesdits métabolites ou actifs émettant de la lumière entre 500 et 580 nm sous exposition aux UV sont choisis parmi la vitamine B2, la baicailine en milieu acide, la fisetine, le dipyridamole, les 30 pigments, les minéraux. 8. Utilisation non-thérapeutique selon la revendication 6, caractérisée en ce que ladite source de lumière verte produit une puissance lumineuse comprise entre 500 et 90000 mJ/cm2. 15 35 9. Utilisation non-thérapeutique selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour activer le métabolisme des cellules de la peau, en particulier, des fibroblastes, des kératinocytes et des mélanocytes et/ou activer et/ou réguler la physiologie de ces cellules. 10. Utilisation non-thérapeutique selon la revendication 9, pour diminuer la formation et/ou en stimuler l'élimination de composants cellulaires endommagés. 11. Utilisation non-thérapeutique selon la revendication 9, pour stimuler le renouvellement des cellules de l'épiderme et la régénération cutanée. 12. Utilisation non-thérapeutique selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour donner à la peau et aux cheveux un aspect sain, en particulier, unifier le teint, raviver son éclat, éviter son aspect jaune ou terne ; prévenir et/ou traiter les taches cutanées ; atténuer les irrégularités visibles et/ou tactiles de la surface de la peau, lui donner un relief plus uniforme et la lisser, prévenir et/ou traiter les rides et ridules ; redonner plus d'épaisseur et d'élasticité à la peau. 13. Utilisation non-thérapeutique selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, pour lutter contre les altérations de la peau liées au vieillissement, prévenir et/ou traiter les signes cutanés du vieillissement de la peau et les signes du vieillissement des cheveux. 14. Utilisation non-thérapeutique selon la revendication 13, pour prévenir et/ou traiter le relâchement de la peau, l'apparition de rides, de taches cutanées, un jaunissement du teint. 15. Utilisation non-thérapeutique selon la revendication 13, pour prévenir et/ou traiter la chute des cheveux, le ralentissement de leur pousse, leur grisonnement, la diminution de leur diamètre, de leur vigueur. 16. Utilisation non-thérapeutique selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, pour améliorer la cicatrisation de la peau. 17. Composition comprenant au moins un substrat de la L-amino acide oxydase et au moins un composé choisi parmi les actifs émettant de la lumière entre 500 et 580 nm sous exposition aux UV, les substances phosphorescentes ou fluorescentes vertes et les substances filtrant la lumière pour ne laisser passer que la lumière verte. 18. Composition selon la revendication 17, caractérisée en ce que ledit substrat est choisi parmi la leucine, la sérine, la thréonine, la glycine, l'alanine, la valine, la phénylalanine, la tyrosine, la lysine, l'arginine, la cystéine, l'aspartate, le glutamate, la citruline, l'ornithine, l'acide diaminopimelique, la penicilamine, l'acide a-amino butyrique. 19. Composition selon la revendication 17 ou 18, caractérisée en ce que les actifs émettant de la lumière entre 500 et 580 nm sous exposition aux UV, les substances phosphorescentes ou fluorescentes vertes sont choisis parmi la vitamine B2, la baicailine en milieu acide, la fisetine, Le dipyridamole, les pigments, les minéraux. 10 20. Procédé cosmétique pour améliorer l'apparence de la peau, améliorer l'éclat du teint, atténuer les irrégularités visibles ou tactiles de la surface de la peau, en particulier pour atténuer les rides et ridules et/ou les taches cutanées et/ou lisser la peau et/ou éclaircir le teint, comprenant l'application topique d'une composition comprenant au moins un substrat 15 de la L-amino acide oxydase et l'exposition de la zone sur laquelle ladite composition a été appliquée à une lumière verte de longueur d'onde comprise entre 500 et 580 nm. 21. Procédé cosmétique pour lutter contre le vieillissement des cheveux, le ralentissement de leur pousse, leur grisonnement, la diminution de leur diamètre, de leur vigueur, 20 comprenant l'application topique d'une composition comprenant au moins un substrat de la L-amino acide oxydase et l'exposition de la zone sur laquelle ladite composition a été appliquée à une lumière verte de longueur d'onde comprise entre 500 et 580 nm. 22. Procédé selon la revendication 20 ou 21, caractérisé en ce que la source de ladite 25 lumière verte est choisie parmi les lasers, l'IPL, les LED, les métabolites ou actifs émettant de la lumière entre 500 et 580 nm sous exposition aux UV, les substances phosphorescentes ou fluorescentes vertes. 23. Kit comprenant : 30 a. une composition comprenant au moins un substrat de la L-amino acide oxydase ; b. une source de lumière verte. 24. Kit selon la revendication 23, caractérisé en ce que ledit substrat est choisi parmi la leucine, la sérine, la thréonine, la glycine, l'alanine, la valine, la phénylalanine, la tyrosine, la 35 lysine, l'arginine, la cystéine, l'aspartate, le glutamate, la citruline, l'ornithine, l'acide diaminopimelique, la penicilamine, l'acide a-amino butyrique.5 25. Kit selon la revendication 23 ou 24, caractérisé en ce que ladite source de lumière verte est choisie parmi les lasers, l'IPL, les LED, les métabolites ou actifs émettant de la lumière entre 500 et 580 nm sous exposition aux UV, les substances phosphorescentes ou fluorescentes vertes.5