Brevet FR2919059A1 — publié le 20090123

La présente invention a pour objet un procédé de prédiction d'un score représentatif du stress oxydatif d'un patient sur une échelle de 0 à 10. Il est connu que l'oxygène est le carburant des cellules, et il existe dans la littérature de nombreuses publications à ce sujet. Toutefois, certaines formes d'oxygène, notamment les radicaux libres, peuvent être fortement toxiques pour l'organisme et les cellules dans la mesure où elles catalysent des réactions d'oxydation de nature à altérer au hasarcl les molécules biologiques. Il s'agit là du phénomène connu des spécialistes sous le nom de stress oxycatif. Ce phénomène est impliqué dans une large gamme de pathologies, en particulier les hépatites, le cancer, le sida, la maladie d'Alzheimer, la maladie de Parkinson... et correspond en outre au moteur essentiel du vieillissement. Or, le corps médical dispose aujourd'hui de moyens per-mettant d'intervenir sur le stress oxydatif tels qu'à titre d'exemple une amélioration de l'hygiène de vie, une prise en charge nutritionnelle (suivant les recommandations du Programme National Nutrition Santé) ou encore l'administration d'antioxydants naturels ou de synthèse. Il est donc souhaitable de pouvoir évaluer le stress oxydatif dans chaque cas particulier afin de prédire un risque de développement d'une pathologie et de prendre précocement, dès la détection d'une anomalie, toutes les mesures possibles pour y remédier. A cet effet, différents laboratoires proposent actuellement d'explorer ce stress à partir de bilans essentiellement sanguins basés sur le dosage de certains marqueurs biologiques. Il s'agit toutefois là de démarches largement empiriques, ce d'autant plus que les marqueurs utilisés varient largement d'un labora-30 toire à un autre. En conséquence, de tels bilans ne sont pas de nature à permettre une prise en charge du stress oxydatif en médecine courante et leur interprétation qui est particulièrement complexe est l'apanage de quelques spécialistes rodés au stress oxydatif depuis plusieurs années. 35 Plus récemment, et selon le document EP 1 793 230, on a proposé de déterminer à partir de bilans sanguins et de dosages biologiques un score représentatif du stress oxydatif d'un patient, sur une échelle de 0 à 10 (du bilan le moins perturbé au bilan le plus perturbé). Un tel score constitue un outil scientifique offert au corps médical pour effectuer une évaluation du stress oxydatif d'un patient dans la mesure où il est indicatif d'un bilan normal ou plus ou moins anormal. En présence d'un bilan anormal, le médecin doit ensuite faire un travail d'interprétation pour évaluer l'origine de cette anomalie et prescrire au patient les mesures nécessaires pour y remédier. La pertinence de ces mesures (conseils sur l'hygiène de vie, modification du régime alimentaire, en particulier par augmentation de l'apport en fruits et légumes ou encore supplémentation antioxydante) peut être contrôlée après quelques mois grâce à une nouvelle détermination du score représentatif du stress oxydatif. Un tel procédé de détermination d'un score représentatif du stress oxydatif d'un patient présente toutefois l'inconvénient de nécessiter la prise en compte d'une quinzaine de marqueurs biologiques regroupés en trois catégories, exprimant respectivement des informations différentes pouvant être associées à des stades différents de développement du stress oxydatif et correspondant respectivement à des antioxydants exogènes à des antioxydants endogènes et à des marqueurs de dégâts oxydatifs. Par suite ce procédé est associé à un coût relativement élevé. Il serait par suite souhaitable de mettre en oeuvre avant la détermination de ce score une étape de sondage préalable permettant de prédire la plage dans laquelle il se situera en ne prenant en compte qu'un nombre restreint de marqueurs biologiques présélectionnés de façon à obtenir à moindre coût une prédiction suffisamment précise et fia- ble. Un tel sondage pourrait en effet permettre d'établir un classement préalable des patients en fonction de leur risque de stress oxydatif pour ne soumettre à un bilan complet que les patients pour les-quels un risque de stress oxydatif élevé a été auparavant déterminé. La présente invention a pour objet de proposer un procédé de prédiction d'un score représentatif du stress oxydatif d'un patient sur une échelle de 0 à 10 de nature à satisfaire à cette demande. Selon l'invention, ce procédé est caractérisé par la succession des étapes suivantes : dans une étape d'étalonnage initial : on évalue par dosage, en particulier à partir de prélèvements sanguins, une série de marqueurs biologiques liés au stress oxydatif chez un panel de personnes, puis on calcule en utilisant une for- mule prédéfinie un score de stress oxydatif SO spécifique à chacune de ces personnes de façon à obtenir une base de données, et on effectue une analyse statistique de cette base de données de façon à sélectionner un groupe de marqueurs biologiques particuliè- rement représentatifs du score de stress oxydatif et à déterminer une relation de prédiction permettant de calculer à partir des marqueurs biologiques ainsi sélectionnés un score Sp prédictif du score de stress oxydatif SO, on évalue par dosage les marqueurs biologiques du groupe sélectionné 1 o du patient, et on calcule le score prédictif Sp spécifique au patient en utilisant la relation de prédiction. Le procédé conforme à l'invention a pu être conçu à l'origine, grâce à un travail pluridisciplinaire, médical et mathématique. 15 On a ainsi préalablement établi une série de bilans de stress oxydatif complets conformément au document EP 1 793 230 et on a fait valider chacun de ces bilans par un expert médical pour éliminer les bilans atypiques. On a ainsi obtenu à partir de 177 bilans de stress oxydatif 20 une base de données très complète qui figure en annexe 1 à titre d'exemple. Les significations des abréviations des différents marqueurs biologiques utilisés, leurs unités et les normes sont précisées en annexe 2. On a ensuite effectué un traitement statistique de cette 25 base de données de façon à sélectionner les marqueurs les plus pertinents d'un point de vue médical et les plus aptes à prédire le score de stress oxydatif. Selon l'invention, le groupe de marqueurs biologiques ainsi sélectionnés peut avantageusement renfermer moins de 6 marqueurs biologiques. Selon une première variante de l'invention, ces marqueurs biologiques sont le cuivre Cu, le zinc Zn, le rapport glutathion réduit/glutathion oxydé(ratio G/G), les protéines thiols (prot th) et le malon dialdéhyde plasmatique (MDA). 35 Selon cette variante de l'invention, il est ainsi proposé d'obtenir une prédiction suffisamment précise et fiable du score oxydatif d'un patient à partir de seulement cinq marqueurs biologiques judicieusement sélectionnés (nécessitant six dosages). Il est à noter que ces marqueurs biologiques appartiennent aux trois catégories de marqueurs biologiques prises en considération dans le cadre du procédé de détermination du stress oxydatif susmentionné, à savoir des marqueurs exogènes (Cu, Zn) des marqueurs endogé- nes (ratio G/G, prot th) et des marqueurs de dégâts oxydatifs (MDA). Le traitement statistique effectué a ensuite consisté à rechercher, à partir des marqueurs biologiques ainsi sélectionnés, la relation de prédiction la mieux adaptée pour prédire avec suffisamment de précision quel sera le score de stress oxydatif d'un patient ou en d'autres termes pour obtenir un score prédictif Sp le plus proche possible du score de stress oxydatif S0. Selon la première variante de l'invention, la relation de pré-diction ainsi déterminée est la relation suivante : Sp = 6.8127106 + 0.5105519xCu/Zn -0.026794xRatio G/G - 0.671527xprot th + 1.5006322xMDA + 0.0001327x(ratio G/G-63.8422)x(ratio G/G-63.8422) - 0.62310lx(MDA-2.03113)x(MDA-2.03113) Selon cette première variante de l'invention il est proposé de classer les scores prédictifs en trois classes de risques. Selon la classe dans laquelle est situé le score prédictif d'un 20 patient, le corps médical peut prendre la décision la plus appropriée pour son suivi, à savoir : classe 1 : note inférieure à 4,5, aucun suivi spécifique du patient, classe 2 : note comprise entre 4, 5 et 5,5, 25 risque moyen ; les patients se trouvant dans cette zone peuvent subir un traitement pendant trois à six mois avant de subir une nouvelle épreuve pour déterminer si leur stress oxydatif a ou non diminué, classe 3 : note supérieure à 5,5 risque élevé ; les patients se trouvant dans cette zone doivent subir un 30 bilan complet de stress oxydatif ou d'autres explorations. Selon une seconde variante de l'invention les marqueurs biologiques sélectionnés sont le cuivre Cu, le zinc Zn, les protéines thiols (prot th) le malon dialdéhyde plasmatique (MDA) et les T-Bars, c'est-à-dire les substances qui réagissent avec l'acide thio-barbiturique. 35 Il est à noter que les T-Bars correspondent à un marqueur de type 3 (dégâts oxydatifs majeurs). Selon cette seconde variante, en vue d'éviter le dosage du Ratio G/G, nécessitant des précautions particulières lors du prélèvement et principalement lors du stockage des échantillons (congélation à -80 C), il a été décidé d'évaluer un modèle alternatif en l'absence de ce dosage. Le traitement statistique effectué a conduit à déterminer le score prédictif Sp' à partir de la relation de prédiction suivante Sp' = 3.0818+0.27018xCu/Zn -0.64301xprot th + 0.91474xMDA + 1.16677xT-Bars+0.99643x(Cu/Zn-1.52488)x(MDA-2.03113)+0.9099x (Cul Zn-1.52488)x(T-Bars-2.91639)+0.29203x(prot th-5.9951)x(MDA-2.03113) Il est à noter que selon cette seconde variante de l'invention 10 les classes de score prédictif sont un peu décalées par rapport aux classes définies selon la première variante ; en effet : - la classe 1 correspond à une note inférieure à 4, la classe 2 correspond à une note comprise entre 4 et 6, - la classe 3 correspond à une note supérieure à 6. 15 Pour vérifier la représentativité du score prédictif du stress oxydatif obtenu par la mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention on a calculé chez un panel de patients : - d'une part le score de stress oxydatif conformément au document EP 1 793 230, et. 20 - d'autre part le score prédictif conformément aux deux variantes de l'invention. Les résultats obtenus sont rassemblés sur les schémas figurant en annexe 3 sur lesquels le score prédictif est porté en abscisse alors que le score de stress oxydatif est porté en ordonnée. 25 Les cercles noirs correspondent à des patients appartenant à la classe 1 tandis que les cercles clairs correspondent à des patients appartenant à la classe 2 et les carrés noirs à des patients appartenant à la classe 3. Ces résultats sont clairement de nature à prouver la qualité 30 des scores prédictifs obtenus conformément aux deux variantes de l'invention. Il est à noter que d'un point de vue purement statistique, ces travaux ont fait appel aux techniques et méthodes suivantes : - Analyses en Composantes Principales, 35 Régressions Linéaires Multiples (moindres carrés) et Régressions PLS (Partial Least Squares), Classification Hiérarchique et Analyse de Tableaux de Contingence (Test du Khi2 et Indice Kappa). Il est à noter que la prédiction du score représentatif du stress oxydatif d'un patient SO et l'affectation à la classe de risque associée sont actuellement réalisables de façon interactive grâce à un utilitaire développé sous Microsoft Exel dans sa version 2003 professionnelle sous la forme d'une macro commande. Pour l'ensemble des traitements statistiques, le logiciel Jmp dans sa version 6.0.2 (Statical Discovery TM from SAS - Copyright 2006 SAS Institute Inc) a été utilisé.10 ANNEXE1 Annexe I - Base de données Patient Vil C Alpha Gamma Vil C/E 05H Sel Cu Zn Cu/Ln MDA 'Mars Oxyscale TOLU tncn.h Patient 1 54 22.5 1.71 2.400 771 1. 14 15.80 9.4 1.680 3.11 3.7 6.64 Patient 2 1: 15 11 11 1.34 20.00 16 1.250 I 2 4.73 flattent 3 1 72 1.32 17.00 11.2 1.518 3.04 2.81 6,27 12 Patient 4 79 26.4 1.37 2992 915 1.33 19.50 10.5 1.857 2.18 3.17 4.91 Patient 5 86.4 46.8 3.12 1.850 792 1.75 26.60 9.8 2.710 2.25 3 5.18 Patient 6 32.2 23 1.33 1.400 723 1.09 16.80 1 1 1.530 2.01 2.75 4.55 Patienl7 44 25 0.35 1 760 652 1.12 18.00 14.1 1.280 1.96 2.49 5.73 Patient 8 93.2 31 4 2.02 2.968 790 5 58.00 395 5.8 205 1.36 19.20 11.2 1.714 2.46 3.44 4.91 Patient 9 70.3 33.8 1.3 2.080 603 12 50.25 430 6.8 284 1.09 18.60 12.4 1.500 1.86 2.19 4.27 Patient 10 81 27.3 2.04 2.970 1054 1,11 13.40 14 0.960 1.36 2. 08 2.36 Patient Il 54 29.1 2.17 1.860 887 15.9 55.79 407 5.97 169 1.42 19.20 8.5 2.260 1.78 3.19 6.00 Patient 12 121.4 28.4 0.5 4.270 896 22 41.67 429 6.33 184.4 t 1.5 19.40 11.80 1.640 2 3.07 5.27 Patient 13 22.5 26.4 112 0.850 714 11.4 62.63 448 5.46 416.5 0.75 14.60 14.8 0.990 1.86 3.18 6.09 Patient 14 61.4 20.2 0.86 3.040 1090 7.5 45.33 372 7.39 211 1.22 18.40 11.7 1.573 1.44 2.78 2.09 Patient 15 87 25.5 0.8'4 3.410 1025 0.97 15.40 13.2 1.170 1.69 2.87 4.27 Panel t 16 59.4 35.2 1.'.7 1.690 842 1.67 16.20 13.5 1.200 2.75 3.65 3.82 Patient 17 59 30.8 2.43 1.916 714 • 4• 1.39 20.80 10.5 1.981 2.41 3.11 6.36 Patient 18 48 24.6 1.76 1.951 1108 1.5 15.50 9.8 1.582 2.12 2.8 5.45 Patient 19 61.4 21.5 1.22 2.856 900 1 1.25 15.80 13.2 1.197 1.57 2.3 2.45 Patient 20 78 21.6 1.2.6 3.610 1295 1.29 17.00 9.2 1.850 2.44 2.65 4.45 Patient 21 79.1 22.4 0.98 3.530 1146 .~ • 1.86 17.00 11.2 1.520 1.65 2.77 4.00 Patient 22 179 35.7 0.86 5.010 1004 1.51 19,40 13.4 1.450 2.31 2.94 5,27 Patient 23 2.14 1.740 0.82 17.80 11.6 1.530 1.06 2.31 2.18 Patient24 0.95 j 5.160 0.9 18.20 14.3 1.270 1.51 2.75 3.45 Patient 25 43 28.5 1.281 1.510 1042 1.36 18.20 12.4 1.470 1.67 2.44 4.91 Patient 26 73 11.7 2 6.240 878.2 t: 1.28 20.00 14 1.430 2.16 2.54 5.36 Patient 27 64 35.9 1.1 1.780 863 1,58 15.80 10.5 1.500 1.82 2.95 6.27 Patient 28 86.4 31.3 2.49 2.760 830 t 1.51 19. 80 14.2 1.390 2.16 2.72 5.73 Patient 29 64.2 21.3 1.36 3.010 935 • 0. 95 16.20 12.1 1.340 1.61 2.28 3.91 Patient 30 64 33.3 1.82 1.920 898 1.53 18.20 13.2 1.380 2.16 3.09 5.73 Patient 31 54.4 24.2 1.25 2.250 564 0,78 22.20 10 2.220 1.15 2.46 6.00 Patient 32 60.4 31.7 2.66 1.910 825 1,21 20.60 12 1.720 1.36 2.63 2.18 Patient 33 65.5 29.4 1.91 2.230 916 1.01 21.50 12.8 1.680 2.18 3.44 6.64 Patient 34 60.4 24.7 1.54 2.450 938 1.01 17.80 9.6 1.850 0.96 2.13 3.00 Patient 35 71 27.3 1.31 2.601 1093 1.33 19.50 11.1 1.757 2,53 3.15 5.36 Patient 36 72.8 53.9 1.17 1.350 748 1.8 15.80 17 0.930 1.47 2.78 4.27 Patient 37 84 40.9 1.71 2.050 1047 1.6 14, 18 15.4 0.920 1.64 3,04 4.64 Patient 38 98.1 30.7 1_24 3.200 950 1.63 17.20 12.2 1.410 2,74 3,59 4.82 Patient 39 79.2 21.3 0.41 3.718 1032 1.39 15.80 9.2 1.717 1,57 2.36 2.18 Patient 40 32 38.2 1.39 0.840 851 1.32 17.00 10. 4 1.630 2.19 3.06 5.64 Patient 41 64.8 29.4 2,66 2.200 1001 1.12 22.40 9.7 2.310 1.77 3.07 5.91 Patient 42 80 52.4 1.75 1.530 1.35 20.20 9.9 2.040 2.29 2.89 6.45 Patient 43 81 27.5 0.69 2.950 1068 1.3 42.80 11.3 3.790 2.04 3.34 6.09 Patient 44 72 6 25.4 0.89 2.860 583 I.4 26.50 13.5 1.960 1.85 2.75 5.45 Patient 45 66 31.9 126 2.070 687 2 14.30 12.4 1.150 1.84 2.83 5.64 Patient 46 51.3 32.5 2.13 1.578 814 0.96 17.70 10.1 1.752 1.76 2.46 2.64 Patient 47 78 35.2 0.95 1016 ,~ • 1.41 17.00 10.7 1.589 2.39 3.04 4.00 Patient 48 1.12 i 1.88 17.60 15.5 1.140 2.5 3,89 5.09 Patient 49 1.08 1.6 19.40 11.7 1.660 1.6 2.69 4.82 Patient 50 62 35 2.69 1.770 849 :. 1.08 17.00 11.4 1.490 3.27 2.81 5.27 Patient 51 86 31.3 2.1 2.750 884 1.4 16.20 1 ] 1.470 2.36 2.65 7.64 Patient 52 89.5 33.5 0.69 2.670 872.8 2.02 18.20 12.7 1.430 1.549 2.46 4.82 Patient 53 78.2 39.3 2.38. 1.990 936 • t 1,25 16.20 13 1.250 1.95 3.21 5.73 Patient 54 12 21.1 0.93 0.570 959 1.04 15.40 13.4 1.150 1.4 2.02 3.18 7 Patient 55 52.6 22.9 195 2.300 743 13.5 55.04 389 6.35 400 1.3 12.80 12 ,070 2,66 3.14 5.18 Tient 56 50.4 34.4 2.71 1.470 781 14.5 53.86 415 3.7 318 1.65 21.40 12.4 .730 2.51 3.24 6.27 Patient 57 52.6 229 1.95 2.300 743 13.5 55,04 389 6.35 400 1.3 12.80 12 .070 2.66 3.14 5.18 Patient 58 68.5 26.9 2.49 2.546 1038 6 173.00 470 5.7 386.8 0.97 22.20 10.9 2.037 1.83 3 3.18 Patient 59 74 17.4 1,09 0.000 1108 26 42.62 703 5.96 328 2.1 13.50 12 ,130 0.95 2.16 4.45 Patienl60 47.1 29.3 2.33 1.610 797 19.6 40.66 363 6.77 321 1.75 17. 40 12.6 1.380 2,16 2.87 5,82 Patient 63 58.4 25.5 1.58 2.290 882 19 46.42 447 7.05 424 1.28 13.50 12.E 1.050 3.2 4.02 4.73 Patient 62 112 18.2 0.24 6.150 1558 16.3 95.58 260 6.69 243.9 1.46 16.00 13.2 1.210 1.44 2.53 355 Patient 63 68.5 27.1 0.81 2.528 904 8 113.00 470 6.07 270 1.65 16.40 11.9 1.378 2.89 3.16 4.36 Patient 64 8 ] 38.4 2 2.110 937 19.5 48.05 367 5.8 285 1.11 1940 .13.7 1.420 2.63 3.79 6.55 Patient 65 62.7 27.6 1.36 2.270 1044 8 130.50 278 5.26 335 0,74 6.40 9.4 1.740 1.79 2.93 4.09 Patienl66 62.7 33.6 1.27 1.870 813 18.5 43.95 519 6.78 280 1.56 1980 .15.4 1.290 3.05 3.08 5,18 Patient 67 76.9 34.5 1.08 2.230 944 18 52.44 488 6.22 190 1.49 18.00 11.7 1.540 2.19 2.82 5.27 Patient 68 61.2 33.7 1.23 1.820 836 37 22,59 422 6.35 404 2.1 16.20 12.6 ,290 2,34 2.98 6.18 Patient 69 20.7 23.6 1.59 0.880 980 13.2 74,24 332 5.49 3991.11 18.40 11.2 1.640 1.64 2. 88 5.18 Patient 70 61.2 16.0 1.07 3.643 974 18 54.11 339 6.36 377 0.98 11,00 12 0.917 1.74 2.26 3.09 Patient 71 64.8 25.9 0.82 2.502 794 28 28.36 549 6.15 219 1.31 21.00 11.5 1.826 2.05 2.43 6.36 Patient 72 67.5 26.2 1.13 ' 2.580 722 19 38.00 457 5.07 404 1.37 20.50 11.1 1.850 2 2.96 5.91 Patient 73 75.4 30.9 1.61 2.440 660 33.7 19.58 352 6.1 299 1.78 14.80 13, I 1.130 1,33 2.62 5.18 Patin' 74 98.2 24.5 0.68 4.010 818 20.3 40.30 417 5.21 318 1.29 6.00 14.8 1.080 1.47 2.73 4.73 Patient 75 75.5 22.5 0.77 3.360 847 24.3 34.86 436 5.11 271 1,31 17.20 12.6 1.370 1.72 2.84 5.27 Peut 76 18.9 26.7 1.58 0.708 982 19 51,68 503 6.01 456 1,23 9.80 11.9 0.824 2.42 2.4 5.18 Patient 77 37.5 22.4 0.87 1.670 701 19.5 35.95 405 5.41 315 1.34 5. 40 11.5 1.340 1.83 2.64 6.45 Panent 78 55.1 36.7 1.14 1.500 762 10.9 69,91 466 5.36 188 1.21 24.00 15.4 1.560 2.54 3.35 6.18 Patient 79 77 31.7 1.6 2.430 861 16.1 53,48 439 6.6 224 1.05 4.80 13.1 1.130 1.47 2.8 2.82 Patient 80 57.6 22.7 0.83 2.540 792 23.7 33.42 363 5.87 215 1.1 16.40 12. 7 1.290 1.52 2.55 5,18 Patient 81 57 22 0 0.000 792 23 0.00 363 5 215 1 16.00 12 0.000 1 2 4.73 Patient82 72.3 33 2.07 2.191 1023 13.5 75.78 413 6.84 235 1.27 18.40 9 2.044 1.86 2.62 4.00 Patient 83 60.8 34.6 1.76 1. 757 802 4 200,50 474 6.38 411 1.45 17.40 10.8 1.611 1.98 2.64 2.64 Patient 84 101 25.4 0.9 3.980 1031 31 33.26 482 6.4 138 1.69 15.40 11.8 1.310 0.92 1.95 4.36 Patient 85 68.2 25.2 1.3 2.710 880 10 88.00 309 6.8 198 0.9 18.80 11.6 1.620 1.37 2.36 1.73 Patient 86 69.3 29.5 2.26 2.350 754 15.8 47.72 470 6.07 251 1.3 18.20 10.4 1.750 1.7 2.99 5.36 Patient 87 62.2 25. 2 3.3 2.470 991 8.7 113,91 512 6.7 241 1.23 17.00 12 1.420 2.35 2.9 3.91 Patient 88 83.3 29.6 1.69 2.810 996 42 23.71 509 6.56 234 1.63 21.50 14.8 1.450 1.73 2.87 5.36 Patient 89 70.2 30.5 1.08 2.300 1077 1.53 34.19 508 5.88 409 1.83 2.30 13.3 1.530 2.42 3.56 5,36 Patient 90 72.6 33.5 1.95 2.170 702 10.5 66.86 522 5.81 475 1.89 16.20 8.4 1.930 4.16 3.99 5.45 Patient 91 64 31.1 4.09 2.060 723 12.2 59,26 411 6.4 167 1.57 18.40 11.9 1.550 2.14 3.03 5.27 Patient 92 48 25.4 0.66 1.890 824 15 54.93 296 5.15 327.2 0.82 14.50 12.4 1.170 1.79 2.8 3,91 Patient 93 58.5 22.4 2.2__ 2. 612 891 19.5 45.69 375 6.01 547.4 1.15 16.20 12.3 1.317 2.26 3.25 5.64 Patient 94 71.3 28.5 2.72^_ 2.502 642 39 16.46 393 5.81 307 1.14 18.40 12.3 1.496 2.43 3.68 7.45 Patient 95 _ 99 33 1.23_ 3.000 948 26.5 35.77 500 6.17 187 2.28 21,80 10 2.180 3.88 4.45 6.82 Patient 96 66.5 23.4 1.06 2.840 621 113 5.50 465 6.37 282 1.38 16.20 14.4 1.130 2.1 3.09 6.55 Petits)! 97 155 31. 6 2.133 4.910 951 16.3 58.34 427 5.74 148.8 1.08 20.60 12.9 1.600 2.01 3,16 6.18 Patient 98 166 25.6 0.64_ 6.480 954 22.2 42.97 275 5.97 327.2 1.25 13.60 1 1.8 1.150 1.52 2.61 4.27 Paticnl99 79.2 31.7 0.74 2.500 776 15 51.73 581 5.23 285.6 1.48 21.80 14.4 1.510 2.04 2.52 5.82 Paticttl 100 73 35.4 1.09 2.060 769 16.5 46.6] 397 ' 5.6 214 1.68 13.80 12.9 1.070 2.2 3.82 6.55 Patient 101 89.9 23.3 0.63 3.860 707 41.7 16.95 523 5.46 250 2.18 22.40 12.1 1.850 2.86 3,65 8.09 Patient 102 70.5 35.5 1,33 1.990 715 57.9 12.35 380 5.77 272 1,51 17,20 13.5 1.270 3.96 4.3 7.55 Patient 103 59 26.4 _ 0.9 2.235 881 12 73.42 371 6.14 319 1.26 17,60 8.5 2.071 1.9 3.11 3.64 Patient 104 76.6 28 2,49 2.740 600 22.2 27.03 , 600 5 263 1.63 28.20 12.8 2.200 1.89 3.32 8.18 Patient 105 69.1 26.5 0.87 2.610 1063 8.5 125. 06 456 6.18 181 1.28 19.40 12.3 1.580 1.89 2.41 3.45 Patient 106 73.4 28.1 2.47 2.612 1271 9.5 133.79 502 6,42 198 1.58 15.00 10.3 1.456 2.4 3.06 4.91 Patient 107 92.8 20.2 0,43 4.590 960 5 192.00 317 6.12 96 1.47 21.80 9.1 2.400 1.78 2.15 2.82 Patient 108 70.5 17.4 0.67 4.052 839 15.5 54.13 356 5.07 300 1.03 18.60 10.1 1.842 1,55 2.22 4.00 Patient 109 42.1 25.7 1.42 1.638 884 38 23.26 678 6.35 342 1,57 18.40 9.8 1.878 3.07 3.97 6.36 Patient 110 54.8 35.8 2.S8 1.531 989 15.5 63.81 472 6.59 332 1.38 13.50 11.6 1.164 2.73 2.88 4.36 Patient 111 61.6 27.7 0.84 2.224 1149 8 143.63 429 5.78 348 1.28 12.70 l l 1.155 2.39 2.52 4.82 Patient 112 77.4 26.8 1,81 2.888 1001 24.5 40,86 499 6.29 238 1.33 17.50 10.7 1.636 1.61 2.58 4.45 Patient 113 i 90.2 55 1,38 1.640 817 6.5 125.69 554 6.33 122 1.3 17.40 10.1 1.723 1.79 2.54 3.18 69'17 ZL'Z 61 01Z1 6SI OZ'61 CO 1 8LZ VS'9 ZL 9Z'8S 1OZ ILIf 06'Z V90 9'8Z 6'8 OLIU !W1 [617 b' SOE 19'1 E6 00'51 99'1 9SZ 569 9Zb L9 >8 S'OI 688 [L61 LS'I 6' IV 9'Z8 6911ua!lgd [6 [C C S0'Z 0È1 V'ZI 05'9[ Pb l 99E LS'9 E04 V8'S8 101 L98 ObLV SS'I L'9Z 9'921 891 19911q b9'Z fZZ Z I 065'1 L6 Of'SI ZO LEE l 615 SZ'01 Z'ZI 6851 OEOZ 88'0 9'VZ OS L91199!1ed 69'5 ZO'C Z 06E'1 OS'Zf 04'L1 S0'1 [SZ L9 OIS ZE'IV OZ 9'VE8 0017 Z 98'1 '1E SL 991 11191% LZ'9 I [ Z 0L8'1 OL'01 00'OZ V8'1 VEZ EE'S 8SZ 117'98 91 088 098Z Z"1 4'S Z'101 S91 Iu911gd S6'b IL'Z Z b94'I 08'1 0Z'OZ 911 08 Zl('S 6E17 ZZ'08 VI 80[ 9E91 ZLI 1'9Z L'ZV 691 Ilwlgd 81'9 60E Z 059'1 05'ZI 09 OZ LOI 8EZ 13'5 9E S8 9 9Z L176 0S9'Z 17'1 [ CZS 91 u1a!1ed LZ'9 9L' 0E17 OZ'ZI Ob'LI 61 1 SSI 9'9 698 668Z Z 199 OZO' Z' Z'LI ZS 911ua!Ied LES L4' 06Z'1 01'ZI 09'81 8'1 16Z 17 9 L66 fZ'89 Vf 696 001'Z L9'1 OE 9 191lua!Igd 60L E E 000'Z 00'01 00 OZ 11 04Z 9 096 000E OZ 009 000"E S'Z 0Z 09 091 1991lud Z8'S E9' Z VVZ'Z OZ'8 04'8I 81'1 [SE 96'8 11v 6Z'ZL 81 69Z1 SZS'Z [L'I S'9Z 6'99 65111191led 16'17 6'E Z 501'Z OS'6 00'0Z EI'I 91Z bS"S 096 00'10[ O( 0101 SZ8'[ Cl L'SZ 6'96 BSl lua!lgd_ Sb'E LS'Z 1 008'1 0011 08'61 60'1 ZbZ 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