Brevet FR2914553A1 — publié le 20081010

UTILISATION D'UN EXTRAIT DE CLEOME SPINOSA DANS DES PREPARATIONS PHARMACEUTIQUES ET COMPOSITIONS COSMETIQUES CONTENANT UN TEL EXTRAIT La présente invention concerne le domaine général des préparations pharmaceutiques ou cosmétiques traitant la chute des cheveux. Cleome spinosa Jacq. qui porte comme synonyme Cleome hassleriana Chodi est une herbacée de la famille des Capparidaceae et est originaire du Sud Est du Brésil et d'Argentine. Elle est très largement cultivée comme plante ornementale et de nombreux cultivars agrémentent terre-pleins et ronds-points de nos villes durant l'été de fin juin à septembre. Elle est parfois appelée communément fleur araignée . Le nom du genre CLEOME aurait pour origine étymologique le mot grec Kleos qui signifie Gloire . Le genre Cleome comprend des herbacées annuelles, des sous arbustes, rarement des lianes. Ils peuvent être inermes ou armés de stipules épineuses, les tiges et les feuilles sont souvent pubescentes avec des poils glandulaires, à odeur forte. Les feuilles sont alternes, digitées de 3 à 9 folioles sur un pétiole allongé, ou unifoliolées et alors sessiles. Les fleurs, bisexuées, sont groupées en racèmes ou solitaires axillaires. Elles sont généralement zygomorphes et composées de 4 sépales libres, 4 pétales spatulés, à disque nectarifère. Les étamines au nombre de 6 sont exsertes. Le fruit cylindrique est une silique déhiscente par 2 valves s'écartant du replum (ou fausse cloison) pour libérer des graines nombreuses, réniformes plus ou moins sphériques. Le genre comprend environ 80 espèces néotropicales dont 19 au Venezuela. L'espèce Cleome spinosa Jacq. se différencie des autres espèces par les dimensions plus importantes de ses organes fructifères : gynophore de 20 jusqu'à 50 mm (contre 2 à 9 mm), fleurs grandes à pétales de 10 à 25 mm de long, blancs ou teintés de pourpre, étamines pourpres. Les feuilles comportent 5 à 7 folioles. Cleome spinosa Jacq. est une plante annuelle dressée de 1 à 2 m de haut, glanduleuse, visqueuse, très épineuse. Fleurs s'épanouissant en été, à pétales plus courts que les étamines. Gynophore séparant les étamines du disque. Fruit linéaire de 6 à 12 cm de long, dressé. L'huile des graines, riche en glucosinolates est utilisée 10 en médecine empirique contre les maux d'oreilles et autres maladies. Les parties aériennes ne font pas l'objet d'utilisation en médecine traditionnelle. Par contre la plante est largement utilisée comme plante ornementale. 15 Cleome spinosa a fait l'objet de très peu d'étude scientifique aussi bien sur le plan chimique que pharmacologique. Une activité du Cleome spinosa comme inhibiteur de collagénase a été décrite ainsi que son utilisation comme anti-âge (JP2001181129). 20 Dwight O. and al. ont travaillé sur le plan phytochimique sur les parties aériennes de Cleome spinosa (Dwight and al.l, J. Nat. Prod. 2004, 67, 179-183). Ils décrivent ainsi en plus d'une flavone, la flindulatine, cinq nouveaux cembranes appartenant à la famille des diterpènes, appelés cleospinol A, B, C, D et 25 l'ester 3'-hydroxy-iso-pentane-l0-oate de cleospinol A. Les graines avaient fait déjà l'objet d'une étude décrivant la présence de glucosinolates, en particulier la glucocapparine [Pagani K. and al. coll, Il Farmaco, Ed. Prat. 22, 553 (1967)]. De façon inattendue et surprenante, la demanderesse a mis 30 en évidence l'utilisation d'un extrait de Cleome spinosa en tant que principe actif pour la préparation d'une composition pharmaceutique ou cosmétique destinée à prolonger la croissance de follicules pileux. La présente invention concerne tout d'abord l'extrait de Cleome spinosa qui présente une teneur globale en soufre comprise entre 0,05 g et 5g pour 100 g de matière sèche de l'extrait. Selon une caractéristique de l'invention, ledit extrait de Cleome spinosa contient des acides aminés soufrés, en particulier la cystine et la méthionine. Selon une autre caractéristique de l'invention, ledit extrait contient de 0,01 g à 1g de cystine pour 100 g de matière sèche de l'extrait. Selon une autre caractéristique de l'invention, ledit extrait contient de 0,001 g à 0,1 g de méthionine pour 100 g de matière sèche de l'extrait. La présente invention s'étend également aux compositions 15 cosmétiques topiques ou orales contenant un tel extrait de Cleome spinosa. Le cheveu comprend: la tige pilaire (composée essentiellement d'une protéine soufrée "la kératine" et de pigments "la mélanine" qui déterminent sa couleur); et le bulbe 20 pileux (racine même du cheveu), entouré de la zone "péri-bulbaire" où se trouvent en particulier les vaisseaux sanguins qui transmettent tous les éléments nutritifs essentiels. Les cheveux ne poussent pas continuellement mais selon un cycle de croissance pilaire divisé en 3 phases. Les phases de 25 croissance (phase anagène), de régression (phase catagène) et de repos (phase télogène) se succèdent. Pendant cette dernière phase, le cheveu est progressivement délogé par un nouveau cheveu anagène issu du même follicule. Le cheveu natif va provoquer la chute du cheveu mature. 30 La chute de cheveux - diffuse ou localisée - , en tant que désordre capillaire, se caractérise par l'augmentation du nombre de cheveux en phase catagène . La demanderesse a montré qu'un extrait de Cleome spinosa stimule l'élongation de la tige pilaire. Dans le cadre de la présente invention, l'extrait de Cleome spinosa maintient, prolonge la phase anagène du cycle précédemment décrit. Au cours de cette phase de croissance, le cheveu se forme et croît par une division des cellules du follicule pileux. Le follicule est alors implanté dans le tissu hypodermique. La phase anagène est primordiale pour l'élongation de la tige pilaire du cheveu. La composition selon la présente invention destinée à stimuler et à prolonger la croissance de follicules pileux comprend un extrait de Cleome spinosa comme principe actif. Dans le cadre de la présente invention, on entend par désordres capillaires toute modification touchant à la structure ou au fonctionnement du follicule pileux. Plus particulièrement, par désordres capillaires, on entend toute perturbation biologique entraînant la perte occasionnelle ou prolongée des cheveux. Les désordres capillaires peuvent être d'origine occasionnelle ou installée. Les désordres capillaires peuvent avoir différentes causes d'origine interne ou externe. Par origine interne, on entend toute perturbation touchant les processus biologiques impliqués dans la croissance et le maintien du cheveu. On citera par exemple le dérèglement sébacé, l'amplification enzymatique des 5-alpha-réductases (dérèglement hormonal), l'inflammation, les modifications structurales du collagène, l'intervention des facteurs de croissance, des facteurs nerveux ou des facteurs vasculaires et la composante génétique. Par origine externe, on entend l'incidence de la flore locale du cuir chevelu, l'action d'agents chimiques (colorations, permanentes, chimiothérapies), la pollution ou l'hygiène de vie. Tous ces désordres d'origine interne ou externe ciblant le cuir chevelu ont pour conséquence directe la perturbation et la modification du cycle pilaire conduisant à différentes formes d'alopécies. Le terme d'alopécie résume l'ensemble des pathologies atteignant le follicule pileux et le cycle de croissance de la tige pilaire et ayant pour conséquence la perte occasionnelle et réversible ou la chute définitive de tout ou partie des cheveux. On citera les deux types d'alopécies les plus répandus, l'alopécie aerata et l'alopécie androgénique ou chronique. Par "extrait de Cleome spinosa", on entend au sens de la présente invention un extrait de Cleome spinosa contenant de préférence une teneur totale en soufre comprise entre 0,05g et 5g pour 100g de matière sèche de l'extrait. L'extrait de Cleome spinosa se caractérise chimiquement par sa teneur en soufre qui prend la forme d'acides aminés soufrés comme la cystine, la méthionine. Le soufre total dosé après minéralisation et dosage par émission plasma présente des teneurs variant selon les solvants et les conditions d'extraction de 0,05 g à 5g pour 100 g de matière sèche de l'extrait. La cystine peut être dosée par Chromatographie Liquide Haute Performance, ses teneurs varient également selon les conditions d'extraction de 0,01 g à 1g pour 100 g de matière sèche de l'extrait. Les teneurs en méthionine sont plus faibles, elles varient selon les conditions d'extraction de 0,001 g à 0,1 g pour 100 g de matière sèche. De façon avantageuse, l'extrait de Cleome spinosa selon la présente invention est obtenu à partir des feuilles, fleurs, fruits, tiges, racines de Cleome spinosa ; et préférentiellement des parties aériennes fleuries sèches. La présente invention concerne l'utilisation d'un tel extrait en tant que principe actif pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée à prolonger la croissance des follicules pileux. Préférentiellement, la composition pharmaceutique ou cosmétique selon la présente invention comprend une quantité d'extrait sec de Cleome spinosa, à titre de principe actif, comprise entre 5 mg et 1 g pour 100 g de ladite composition. Avantageusement, ladite quantité d'extrait sec de Cleome spinosa est comprise entre 10 mg et 500 mg pour 100 g de composition pharmaceutique ou cosmétique. De façon encore plus avantageuse, ladite quantité d'extrait sec de Cleome spinosa est comprise entre 20 mg et 100 mg pour 100 g de composition. Au sens de la présente invention, l'extrait de Cleome spinosa agit comme principe actif pour stimuler et prolonger la croissance de follicules pileux. L'extrait selon la présente invention favorise le développement de la tige pilaire, améliore l'apport des éléments qui rentrent dans la constitution du cheveu, favorise le maintien du cheveu très proche du tissu sous cutané qui caractérise la phase anagène. La phase de croissance active (phase anagène) s'en trouve améliorée, prolongée. La composition selon la présente invention peut contenir en outre d'autres actifs bien connus de l'homme du métier pour le traitement anti-chute des cheveux: on citera de façon non limitative : un extrait de quinquina (FR 2 853 245), le minoxidil ou 2,4-diamino-6-pipéridinopyrimidine-3-oxide, des vitamines telles que les vitamines A, E, B5, B6, C, H, PP, des oligo-éléments tels que le zinc, le cuivre, le magnésium, le silicium, etc, des dérivés protéiques tels que les peptides, les acides aminés soufrés (type méthionine, cystine, cystéine ou dérivés), des huiles essentielles ou des extraits d'origine végétale de nature lipophile ou hydrophile dont la liste n'est pas limitative, des agents antifongiques tels que la piroctonolamine, les dérivés undécyléniques, la ciclopiroxolamine, ou des molécules de synthèse chimique réputées pour leur action spécifique au niveau des récepteurs androgéniques ou sur la synthèse ou l'expression des 5-aréductases. Enfin, ladite préparation peut aussi contenir des excipients pharmaceutiquement acceptables adaptés pour l'administration par voie orale ou par voie topique. Ladite composition se présente de préférence sous forme topique ou orale ; et encore plus préférentiellement sous forme topique. Avantageusement, la forme topique est choisie parmi le groupe constitué d'un shampoing, gel, lotion, mousse, spray, crème. Cette composition peut aussi se présenter sous une forme orale, telle qu'une capsule, comprimé, gélule, poudre pour suspensions buvables. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, la composition selon la présente invention peut être utilisée en tant que complément alimentaire ou composition diététique pour prolonger la croissance de follicules pileux. Ledit extrait de Cleome spinosa selon la présente invention peut être obtenu comme suit : - broyage des parties aériennes fleuries séchées (feuilles et/ou de fleurs et/ou de fruits et/ou de tiges) de Cleome spin osa - au moins une extraction par un solvant qui peut être l'eau, un alcool de Cl à C4, une cétone (méthyl éthylcétone, diméthylcétone, méthylisobutylcétone), un ester (acétate d'éthyle, acétate d'isopropyle) et un mélange en toute proportion miscible de ces solvants. L'extraction est réalisée dans un ratio plante/solvant compris entre environ 1/1 et 1/20 et peut être renouvelée 2 à 3 fois. La température d'extraction peut être égale à la température ambiante jusqu'à la température d'ébullition du solvant d'extraction. La durée de l'extraction peut varier de 30 minutes à 72 heures et peut se faire de façon statique comme sous agitation : séparation solide/liquide par des techniques connues de l'homme du métier. Il peut s'agir d'une opération de filtration ou de centrifugation par exemple. La solution obtenue peut être utilisée comme telle si le solvant d'utilisation est compatible avec son utilisation. Elle peut également être plus ou moins concentrée jusqu'à l'obtention d'un extrait sec. La solution concentrée peut être également utilisée. Un traitement de décoloration peut être entrepris en rajoutant à la solution extraite concentrée ou non un support absorbant comme le charbon actif ou une résine absorbante. Lors de l'étape de séchage, il peut être rajouté un support dans les proportions massiques par rapport à la matière première extraite pouvant varier de 1 à 50 Le support peut être une maltodextrine, un sucre comme le lactose ou de la silice. Lors de l'étape de concentration, on peut également rajouter un solvant à haut point d'ébullition comme la glycérine, le propylène glycol, le butylène glycol, l'hexylène glycol. L'extrait de Cleome spinosa est alors solubilisé dans ce nouveau solvant. Les préparations et les compositions suivantes sont citées à titre d'exemples illustratifs et non limitatifs. EXEMPLES DE PREPARATION DE L'EXTRAIT VEGETAL Exemple 1 100 kg de parties aériennes fleuries séchées et broyées de Cleome spinosa sont extraites par 1500 kg d'alcool 95 % (v/v) sous agitation à reflux pendant 1 heure. Après refroidissement la solution extraite est récupérée par filtration. A cette solution on rajoute 15 kg de charbon actif et on porte à reflux pendant 20 minutes. Le charbon est retiré par filtration. On obtient ainsi une solution limpide jaune clair. Cette solution est concentrée puis séchée. On obtient 10 kg d'extrait sec. Sa teneur en soufre total est de 0,5 g pour 100 g de matière sèche, en cystine de 0,1 g pour 100 g de matière sèche et en méthionine de 0,015 g pour 100 g de matière sèche. Exemple 2 10 kg de parties aériennes fleuries séchées et broyées de Cleome spinosa sont extraits avec 70 kg d'alcool 30 % (v/v) sous reflux pendant 2 heures et sous agitation. Une fois la solution recueillie après filtration, la drogue est de nouveau extraite dans les mêmes conditions que précédemment par 70 kg d'alcool 30 % (v/v). Les solutions obtenues sont jointes. On obtient ainsi 120 kg d'un extrait liquide jaune foncé. La teneur en soufre total est 1 g pour 100 g de matière sèche de l'extrait liquide, en cystine de 0,2 g pour 100 g et de 0,02 g pour 100 g en méthionine. Exemple 3 1 kg de parties aériennes fleuries séchées et broyées de Cleome spinosa est extrait par 10 litres d'eau à 80 C pendant 5 heures et sous agitation. La solution obtenue par filtration est concentrée jusqu'à 2 litres, on ajoute alors 2 1 de propylène glycol et on filtre. On obtient ainsi 4 litres d'un extrait liquide marron clair. Pour 100 g de matière sèche de cet extrait, la quantité de soufre total est de 1 g, en cystine de 0,2 g et en méthionine de 0,02 g.30 EXEMPLE DE COMPOSITION COSMETIQUE Exemple 4 : lotion antichute Composé Extrait sec Cleome spinosa Extrait quinquina Alcool éthylique 96% Hexylene glycol Vitamine PP Vitamine H Acide Béta glycyrrhetinique Décaméthylcyclopentasiloxane qs Eau purifiée Qsp 100 g EVALUATION PHARMACOLOGIQUE Etude de l'effet d'un extrait de Cleome spinosa sur la croissance de follicules pileux humains en culture. L'exploration de l'impact de différents facteurs sur la croissance pilaire peut être étudiée aussi bien in vivo qu'in vitro. L'établissement de modèles de culture simplifiés représentatifs de tous les aspects du comportement du follicule pileux in vivo est une étape indispensable à l'optimisation des évaluations des produits antichute. La culture de follicule pileux isolé a été développée par Philpott and al. en 1990. Il a montré une croissance des follicules durant 10 jours. Plusieurs équipes ont ensuite utilisé des variantes de ce modèle par l'addition de facteurs de croissance ou d'autres entités moléculaires impliquées dans les mécanismes de contrôle de la croissance pilaire : Buhl Al and al. J Invest Dermatol, 1992, Mars, 98 (3) : 315-319 ; Harmon CS and al., Lymphokine Cytokine Res., 1993, Aug 12 (4) : 197-203 ; Philpott MP and al., J Dermatol Sci. 1994 Jul, 7 suppl : 573-78. Quantité (/ 100g) 20 mg à 100 mg 3 g à 6 g qs 2,5 % 1 0 0,003 % 0,3 % L'extrait de Cleome spinosa obtenu selon l'exemple 1 a été évalué sur la croissance directe de follicules pileux entiers de scalp humain ex vivo durant 14 jours de culture. Le minoxidil, molécule de référence, a été menée en parallèle. Les follicules pileux sont issus de scalp humain provenant du service de chirurgie plastique des hôpitaux ou des cliniques (deux donneurs). La peau est rasée puis lavée dans 6 bains d'antibiotiques. Les follicules en phase anagène reconnaissables car très vascularisés, sont ensuite isolés de la peau sous la loupe binoculaire et débarrassés de la graisse. Il sont ensuite incubés à 37 C dans des boîtes de culture 24 puits dans un milieu de culture adéquat contenant les produits à tester. La croissance de la tige des follicules pileux est mesurée à l'aide de papier millimétré sous loupe binoculaire aux jours 0, 4, 5, 7, 9, 12 ou 14. La détermination des pourcentages de croissance et d'activité de l'extrait hydroalcoolique de Cleome spinosa a été réalisée après 4 ou 5, 7 ou 8, 12 et 14 jours de traitement des follicules pileux en comparaison avec des follicules témoins non traités. On note : Tx le temps x après traitement To le temps 0 début de traitement Le pourcentage de croissance est égal à (mesure TX - mesure To) /mesure To x 100 L'activité du traitement est calculée de la façon suivante : [(mesure traité TX - mesure traité T0) - (mesure contrôle TX - mesure contrôle To)]/(mesure contrôle TX - mesure contrôle T0) x 100 12 Les résultats sont résumés dans le tableau suivant : % activité J4/J5 J8/J7 J12 J14 Minoxidil 55 41 21 17 Extrait de Cleome spinosa 10 pg/ml 40 25 38 48 1 pg/ml 27 34 22 23 0,1 pg/ml 65 31 31 32 On observe une stimulation de la croissance des follicules 5 pileux humains en culture pour toutes les concentrations testées de l'extrait de Cleome spinosa. REVENDICATIONS 1. Extrait de Cleome spinosa présentant une teneur globale en soufre comprise entre 0,05 g et 5g pour 100 g de matière 5 sèche de l'extrait. 2. Extrait de Cleome spinosa selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il contient des acides aminés soufrés, en particulier la cystine et la méthionine. 3. Extrait de Cleome spinosa selon l'une des revendications 1 et 2, caractérisé en ce qu'il contient de 0,01 g à 1g de cystine pour 100 g de matière sèche de l'extrait. 15 4. Extrait de Cleome spinosa selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce qu'il contient de 0,001 g à 0,1 g de méthionine pour 100 g de matière sèche de l'extrait. 5. Utilisation d'un extrait de Cleome spinosa selon l'une 20 des revendications 1 à 4, en tant que principe actif pour la preparation d'une composition pharmaceutique destinée à prolonger la croissance des follicules pileux. 6. Utilisation selon la revendication 5, caractérisé en ce 25 que la composition comprend une quantité d'extrait sec de Cleome spinosa comprise entre 5 mg et 1g pour 100 g de ladite composition. 7. Utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce 30 que la composition comprend une quantité d'extrait sec de Cleome spinosa comprise entre 10 mg et 500 mg pour 100 g de ladite composition. 10 8. Utilisation selon la revendication 5, caractérisée en ce que la composition comprend une quantité d'extrait sec de Cleome spinosa comprise entre 20 mg et 100 mg pour 100 g de ladite composition. 9. Utilisation selon l'une des revendications 5 à 8, caractérisée en ce que la composition contient en outre un ou plusieurs autre(s) principe(s) actif(s) choisi(s) parmi un extrait de quinquina, le minoxidil ou 2,4-diamino-6- pipéridinopyrimidine-3-oxide, des vitamines telles que les vitamines A, E, B5, B6, C, H, PP, des oligo-éléments tels que le zinc, le cuivre, le magnésium, le silicium, des dérivés protéiques tels que les peptides, les acides aminés soufrés du type méthionine, cystine, cystéine ou dérivés, des huiles essentielles ou des extraits d'origine végétale de nature lipophile ou hydrophile, des agents antifongiques tels que la piroctonolamine, les dérivés undécyléniques, la ciclopiroxolamine, ou des molécules de synthèse chimique réputées pour leur action spécifique au niveau des récepteurs androgéniques ou sur la synthèse ou l'expression des 5-aréductases. 10. Composition cosmétique pour prolonger la croissance des follicules pileux, caractérisée en ce qu'elle contient, outre un excipient cosmétologiquement acceptable, à titre de principe actif un extrait de Cleome spinosa tel que défini à l'une des revendications 1 à 4. 11. Composition cosmétique selon la revendication 10, caractérisée en ce qu'elle contient en outre un ou plusieurs autre(s) principe(s) actif(s) choisi(s) parmi un extrait de quinquina, le minoxidil ou 2,4-diamino-6-pipéridinopyrimidine-3-oxide, des vitamines telles que les vitamines A, E, B5, B6, C, H, PP, des oligo-éléments tels que le zinc, le cuivre, lemagnésium, le silicium, des dérivés protéiques tels que les peptides, les acides aminés soufrés du type méthionine, cystine, cystéine ou dérivés, des huiles essentielles ou des extraits d'origine végétale de nature lipophile ou hydrophile, des agents antifongiques tels que la piroctonolamine, les dérivés undécyléniques, la ciclopiroxolamine, ou des molécules de synthèse chimique réputées pour leur action spécifique au niveau des récepteurs androgéniques ou sur la synthèse ou l'expression des 5-a-réductases. 12. Composition cosmétique selon l'une des revendications 10 et 11, caractérisée en ce que l'excipient cosmétologiquement acceptable est choisi pour permettre une administration orale de ladite composition. 13. Composition cosmétique selon l'une des revendications 10 et 11, caractérisée en ce que l'excipient cosmétologiquement acceptable est choisi pour permettre une administration topique de ladite composition. 14. Composition cosmétique selon l'une des revendications 10 et 11, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'un shampoing, gel, lotion, mousse, spray ou crème. 25 15. Composition cosmétique selon la revendication 12, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'une capsule, comprimé, gélule, poudre ou suspension buvable permettant son administration par voie orale. 30 16. Procédé cosmétique pour prolonger la croissance de follicules pileux, caractérisé en ce qu'il implique l'utilisation par voie orale ou topique d'un extrait de Cleome spinosa tel que défini à l'une des revendications 1 à 4. 20