Brevet FR2918889A1 — publié le 20090123

La présente invention concerne une nouvelle utilisation de l'éflucimibe, ou d'un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, solvats pharmaceutiquement acceptables ou hydrates, pour la préparation d'un médicament destiné à prévenir ou à traiter un désordre du à un dysfonctionnement des glandes sébacées chez l'homme ou l'animal, comme par exemple l'acné et/ou tout état ou pathologie lié à une surproduction de sébum, comme par exemple la dermite séborrhéique, la peau grasse ou le cuir chevelu gras. La demande de brevet WO 97/19918 décrit une famille de dérivés de 2,3,5-triméthyl-4-hydroxy anilide qui sont des inhibiteurs de l'enzyme ACAT (Acyl CoA : cholesterol O - Acyl transferase). Ces composés sont présentés dans cette demande de brevet comme des composés hypocholestérolémiants et anti-oxydants, qui peuvent être utilisés pour le traitement de l'hypercholestérolémie ou de l'athérosclérose. L'inhibition de l'enzyme ACAT bloque l'estérification du cholestérol libre en esters de cholestérol. Par ailleurs, cette enzyme est exprimée dans les glandes sébacées. Les glandes sébacées sont des glandes holocrines qui secrètent un mélange de lipides connu sous le nom de sébum. Les esters de cholestérol comptent pour 2-3% des lipides du sébum humain. L'excès de sébum est propice à l'apparition de l'acné ou d'autres pathologies dermatologiques, et en tout état de cause donne à la peau un aspect gras et peu esthétique. Les traitements actuels visant à diminuer l'excès de sébum ne sont pas satisfaisants. A titre d'exemple, on peut citer l'isotrétinoïne qui, bien que diminuant de près de 90% la production de sébum, présente des effets secondaires importants. Aucun traitement efficace à base d'un inhibiteur de l'enzyme ACAT n'a pour l'instant été développé. Il a maintenant été démontré que, parmi les inhibiteurs de l'enzyme ACAT décrits dans WO 97/19918, le (S)-2-dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethylphenyl) -2-phenyl-acétanilide, connu sous le nom d'éflucimibe, de formule (I) : CH3 HO CH3 O (I) éventuellement sous forme de sel, de solvate et/ou hydrate pharmaceutiquement acceptable, peut être utilisé pour prévenir ou traiter les désordres dus à un dysfonctionnement des glandes sébacées chez l'homme ou l'animal et/ou tout état ou pathologie lié à une surproduction de sébum. Dans le cadre de l'invention, le composé (I) sera de préférence utilisé sous sa forme énantiomérique (S) pure telle que représentée, mais pourra également être utilisé sous sa forme énantiomérique (R) ou sous forme d'un mélange (racémique) de ces deux composés, en toute proportion. Ainsi, la présente invention a pour objet l'utilisation d'au moins un composé choisi parmi le (S)-2-dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethyl-phenyl) -2-phenylacétanilide (éflucimibe) de formule (I) : CH3 HO CH3 O CH3 CH2) 11 (I) le (R)-2-dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethyl-phenyl) -2-phenyl-acétanilide (énantiomère (R)), leurs sels pharmaceutiquement acceptables et leurs solvates pharmaceutiquement acceptables, pour la préparation d'un médicament destiné à prévenir ou à traiter les désordres dûs à un dysfonctionnement des glandes sébacées chez l'homme ou l'animal ou tout état ou pathologie lié à une surproduction de sébum. L'invention a également pour objet un produit choisi parmi le (S)-2- dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethyl-phenyl)-2-phenyl- acétanilide (éflucimibe) de formule (I) : (I) le (R)-2-dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethyl-phenyl) -2-phenyl-acétanilide (énantiomère (R)), leurs sels pharmaceutiquement acceptables et leurs solvates pharmaceutiquement acceptables, pour son utilisation dans le traitement ou la prévention d'un désordre dû à un dysfonctionnement des glandes sébacées chez l'homme ou l'animal et/ou d'un état ou pathologie lié à une surproduction de sébum. Préferentiellement, le produit choisi parmi le (S)-2-dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethyl-phenyl) -2-phenyl-acétanilide (éflucimibe) de formule (I) : CH3 HO CH3 O (S) S, /CH3 CH2)11 (I) le (R)-2-dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethyl-phenyl) -2-phenylacétanilide (énantiomère (R)), leurs sels pharmaceutiquement acceptables et leurs solvates pharmaceutiquement acceptables, est utilisé dans le traitement ou la prévention de l'acné, la dermite séborrhéique, la peau grasse ou le cuir chevelu gras. L'éflucimibe est décrit à l'exemple 7 de WO 97/19918. Les sels du composé de formule (I) pharmaceutiquement acceptables comprennent ceux avec des bases organiques ou minérales, par exemple les sels des métaux alcalins ou alcalino-terreux, comme les sels de sodium, de lithium, de potassium, de calcium, de magnésium. Les solvates de l'eflucimibe, de son énantiomère (R), ou de leurs sels, représentent les hydrates de tels composés et / ou l'association de tels composés avec un alcool linéaire ou ramifié en Cl-C4 tels que le méthanol, l'éthanol, l'isopropanol, ou le n-propanol. Dans le cadre de l'invention, les inventeurs ont mis en évidence que l'éflucimibe permet de lutter contre les désordres dus à un dysfonctionnement des glandes sébacées chez l'homme ou l'animal et/ou tout état ou pathologie lié à une surproduction de sébum. Par désordres dus à un dysfonctionnement des glandes sébacées, on entend préférentiellement l'acné. En tant qu'état ou pathologie lié à une surproduction de sébum, on entend, notamment, la dermite séborrhéique, la peau grasse ou le cuir chevelu gras. Pour son utilisation en tant que médicament, l'éflucimibe, son énantiomère ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables ou un de ses solvats pharmaceutiquement acceptables, doit être formulé en composition pharmaceutique, de préférence dermatologique. La présente invention a donc également pour objet des compositions pharmaceutiques, de préférence dermatologiques, comprenant, dans un support physiologiquement acceptable, au moins un composé choisi parmi l'éflucimibe, l'énantiomère (R) de l'éflucimibe, leurs sels pharmaceutiquement acceptables, et leurs solvates pharmaceutiquement acceptables, pour le traitement et/ou la prévention de désordres dus à un dysfonctionnement des glandes sébacées et/ou tout état ou pathologie lié à une surproduction de sébum. Par support physiologiquement acceptable, on entend un milieu compatible avec la peau, les muqueuses et/ou les phanères. L'éflucimibe ou sa forme énantiomère (R), éventuellement sous forme de sel pharmaceutiquement acceptable, ou solvate pharmaceutiquement acceptable ou hydrate pourra également être utilisé pour la fabrication de compositions pharmaceutiques, de préférence dermatologiques pour traiter les peaux grasses ou les cuirs chevelus gras. De telles compositions peuvent être destinées, et donc adaptées, à une administration par voie orale, topique, entérale, parentérale, oculaire, sublinguale, inhalée, sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse, transdermique, locale ou rectale. Les formes orales et topiques sont néanmoins préférées. L'éflucimibe ou sa forme énantiomère (R) éventuellement sous la forme d'un sel, ou d'un solvate pharmaceutiquement acceptable, seul ou en association avec un autre principe actif, peut être administré sous une forme unitaire d'administration, en mélange avec des supports ou excipients pharmaceutiques classiques, aux animaux et aux êtres humains. De préférence, la composition pharmaceutique est conditionnée sous une forme convenant à une application par voie orale ou topique. Par voie topique, on entend une application sur la peau et/ou les muqueuses. Les compositions selon l'invention comprennent l'éflucimibe, ou sa forme énantiomère (R), ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables, ou solvates pharmaceutiquement acceptables, en quantité suffisante pour obtenir l'effet prophylactique ou thérapeutique souhaité. La posologie utile varie selon l'âge, le sexe et le poids du patient. Le composé (I), ou sa forme énantiomère (R) ou un de ses sels, ou solvates sera, de préférence, administré à raison de 0,01 à 100 mg/kg et par jour, avantageusement de 0,01 à 50 mg/kg et par jour. Il est également possible d'administrer de telles doses, en 2 à 4 administrations quotidiennes. Bien que ces dosages soient des exemples de situations moyennes, il peut y avoir des cas particuliers où des dosages plus élevés ou plus faibles sont appropriés, de tels dosages appartiennent également à l'invention. Les compositions selon l'invention comprennent un support physiologiquement acceptable choisi selon la forme pharmaceutique et préférentiellement dermatologique souhaitée et le mode d'administration choisis. Ledit support comprend au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable. Pour une administration par voie orale, la composition pharmaceutique, de préférence dermatologique, peut se présenter sous la forme de comprimés, de gélules, de dragées, de pilules, de sirops, de suspensions, de solutions, de poudres, de granulés, d'émulsions, de capsules, de microsphères ou nanosphères ou vésicules lipidiques ou polymériques permettant une libération contrôlée. Par voie parentérale, la composition peut se présenter sous forme de solutions ou suspensions pour perfusion ou pour injection. Pour obtenir une composition solide pour administration orale, le principe actif pourra être mélangé avec au moins un diluant inerte, tel que le sucrose, le lactose ou l'amidon. En général, d'autres additifs, tel qu'un lubrifiant comme le stéarate de magnésium, pourront être ajoutés. Dans le cas de capsules, comprimés ou pilules notamment, un tampon pourra être ajouté. Dans le cas des compositions liquides orales, un diluant inerte tel que de l'eau pourra être utilisé. Par voie topique, la composition pharmaceutique selon l'invention est plus particulièrement destinée au traitement de la peau et des muqueuses et peut se présenter sous forme d'onguents, de crèmes, de laits, de pommades, de poudres, de tampons imbibés, de syndets, de solutions, de gels, de sprays, de mousses, de suspensions, de lotions, de sticks, de shampoings, ou de bases lavantes. Elle peut également se présenter sous forme de suspensions de microsphères ou nanosphères ou vésicules lipidiques ou polymériques ou de patches polymériques et d'hydrogels permettant une libération contrôlée. Cette composition par voie topique peut se présenter sous forme anhydre, sous forme aqueuse ou sous la forme d'une émulsion. L'éflucimibe (I), ou sa forme énantiomère (R) ou un de ses sels ou solvates, lorsqu'il est administré par voie orale est administré à raison de 0,01 à 100 mg/kg et par jour, avantageusement de 0,01 à 50 mg/kg et par jour. L'éflucimibe (I), ou sa forme énantiomère (R) ou un de ses sels ou solvates, lorsqu'il est administré par voie topique est utilisé à une concentration généralement comprise entre 0,001 et 10% en poids, de préférence entre 0,01 et 5% en poids, par rapport au poids total de la composition. On peut également utiliser, pour le traitement des désordres dus à des dysfonctionnements des glandes sébacées, l'éflucimibe, ou sa forme énantiomère (R) ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables ou un de ses solvats pharmaceutiquement acceptables ou hydrates, en association avec un autre principe actif. Les compositions pharmaceutiques, de préférence dermatologiques telles que décrites précédemment peuvent donc contenir des additifs inertes, ou même pharmacodynamiquement actifs, ou des combinaisons de ces additifs, et notamment : - des agents mouillants ; - des agents d'amélioration de la saveur ; - des agents conservateurs tels que les esters de l'acide parahydroxybenzoïque ; - des agents stabilisants ; - des agents régulateurs d'humidité ; - des agents régulateurs de pH ; - des agents modificateurs de pression osmotique ; - des agents émulsionnants ; - des filtres UV-A et UV-B ; - des émollients ; - des agents hydratants comme le glycérol, le PEG 400, la thiamorpholinone, et ses dérivés ou l'urée. Bien entendu, l'homme du métier veillera à choisir le ou les éventuels composés à ajouter à ces compositions de telle manière que l'effet sur les désordres dus à des dysfonctionnements des glandes sébacées désiré ne soit pas, ou substantiellement pas altéré par l'addition envisagée. Les compositions ci-dessous sont données à titre illustratif : 15 Exemple 1 : COMPOSITIONS A- VOIE ORALE Comprimé de 0,2 g - Eflucimibe 0,001 g -Amidon 0,114 g 20 - Phosphate bicalcique 0,020 g - Silice 0,020 g -Lactose 0,030 g - Talc 0,010 g - Stéarate de magnésium 0,005 g 25 B- VOIE TOPIQUE (a) Onguent - Eflucimibe 0,30 g qsp 100 g - Vaseline blanche codex 30 (b) Lotion - Eflucimibe 0,10 g - Polyéthylène glycol (PEG 400) 69,90 g - Ethanol à 95% 30,00 g L'étude des propriétés de l'éflucimibe a montré que l'éflucimibe, ainsi que son énantiomère (R), ses sels, ou solvates pharmaceutiquement acceptables ne sont pas toxiques, et permettent de réduire la production de sébum par les glandes sébacées. EXEMPLE 2 : RESULTATS BIOLOGIQUES Mesure de l'activité d'ACAT/SOAT Le but de ce test est de visualiser l'activité de l'enzyme ACAT/SOAT en mesurant la synthèse des esters de cholestérol. Le test est inspiré de la publication suivante : Identification of ACAT1- and ACAT2-specific inhibitors using a novel, cell based fluorescence assay : individual ACAT 15 uniqueness , J.Iipid.Res (2004) vol 45, pages 378-386. Le principe de ce test est basé sur l'emploi du NBD-Cholestérol, un analogue du cholestérol dont la fluorescence dépend de son environnement. Quant celui-ci se trouve dans un environnement polaire, il est faiblement fluorescent alors que dans 20 un environnement non polaire, il est fortement fluorescent. Le NBD-Cholestérol libre se localise dans les membranes cellulaires et est faiblement fluorescent dans cet environnement polaire. Quand le NBD-Cholestérol est estérifié par ACAT, l'ester de NBD-Cholestérol se localise dans les gouttelettes lipidiques non polaires et est alors fortement fluorescent. 25 Méthode : Les cellules HepG2 sont incubées en présence de NBD-cholestérol (1 pg/ml) et du produit à tester dans des plaques 96 puits noires à fond transparent à raison de 30000 cellules par puits. Après incubation 6h à 37 C, 5% CO2 le milieu est éliminé 30 par retournement et les cellules sont lavées par 2 fois 100 pl de PBS. Après addition de 50 I de tampon de lyse (NaPO4 10 mM, Igepal 1 %) les plaques sont agitées 5 min et lues en fluorescence (excitation 490 nm, émission 540nm) sur le FUSION (Perkin Elmer). L'éflucimibe dans ce test inhibe puissamment la synthèse des esters de cholestérol avec une IC50 de 4 nM. Evaluation de l'activité de l'éflucimibe sur la taille des glandes sébacées chez le rat Fuzzy femelle par administration topique Le but de l'étude inspirée de la publication de Uno et Kunata, 1993, JID, 101, 143S-147S. Fang Ye et al. 1997, est d'évaluer la capacité de l'éflucimibe à modifier la taille des glandes sébacées chez le rat Fuzzy femelle. Méthode : Après administrations topiques quotidiennes d'un volume de 100 L de produit à tester ou de véhicule pendant 25 jours dans le véhicule approprié, on évalue la taille des glandes sébacées sur split épidermique. 6 animaux par groupe sont traités par administrations orales quotidiennes d'un volume de 10ml/Kg de produit à tester ou de véhicule. Des biopsies de 8mm sont prélevées sur chaque animal en vue de l'évaluation de la taille des glandes sébacée sur split épidermique. Après un temps d'incubation de trois jours dans le milieu DMEM à 4 C, les biopsies sont transférées dans une plaque 12 puits contenant chacun 1 ml de bromure de sodium 1M pendant 2 heures à 37 C. Le derme est séparé délicatement de l'épiderme et une image est acquise à la loupe binoculaire puis analysée grâce au logiciel TINA afin d'identifier la taille des glandes sébacées. Les résultats ont montré que la réduction de 50% de la taille des glandes sébacées est obtenue à la concentration de 0.00089% du composé selon l'invention. Cette valeur d'EC50 démontre une activité très forte de l'éflucimibe. Inhibition de la synthèse des esters de cholestérol dans des sébocytes préputiaux de rat en culture primaire Les sébocytes de glandes préputiales de rat sont un modèle reconnu pour l'étude de l'activité de composés sur la production de sébum et la synthèse lipidique dans des sébocytes.30 Le principe général repose sur le prélèvement de glandes préputiales, la séparation et la culture des sébocytes, puis le traitement de ces cultures cellulaires par les composés à tester. Ces molécules sont supplémentées en substrats radioactifs devant entrer dans la composition des lipides du sébum (acétate, acides gras, alcools cireux ou cholestérol marqués au Carbone 14). Une analyse de la radioactivité contenue dans le surnageant après lyse cellulaire, par chromatographie en couches minces et lecture de la radioactivité indique la perte de radioactivité après traitement par les composés étudiés et donc la réduction de synthèse lipidique. Les glandes sont prélevées stérilement et mises dans une solution de DMEM + antibiotiques 1% + Vancomycine 100 g/ml. Un premier lavage au PBS est effectué, puis le tissu conjonctif de toutes les glandes est enlevé avant un second lavage. Les glandes découpées sont diluées dans une solution de collagénase 1 mg/mL à raison de 1 glande / mL de solution. La culture est agitée au bain-marie 37 C pendant 15 minutes. Après traitement à la trypsine puis une séquence de centrifugations-prélèvements, les cellules sont diluées dans un volume de DMEM complet de façon à obtenir une concentration égale à 1.106 cellules/mL. Les sébocytes obtenus sont ensemencés dans les puits en présence de cellules 3T3 mitomycinées décongelés extemporanément et les plaques sont incubées à 37 C + 5%CO2 pendant 3 jours. A J+3 après la mise en culture, le milieu est enlevé. Les cellules sont rincées avec PBS. Le PBS est enlevé et le milieu Cellgro sans sérum est ajouté ainsi que les solutions des composés à tester dans le DMSO. A J+6, le milieu Cellgro est de nouveau ajouté ainsi que les molécules à tester dans les mêmes conditions qu'à J+3. A J+8-9, le substrat radiomarqué 14C-acétate (équivalent de 2iCi / puits) est ajouté et le milieu est incubé entre 18 et 24H à 37 C + 5% CO2 puis le milieu est prélevé, les cellules rincées avec du PBS(-). La lyse des cellules est réalisée avec un mélange trypsine-EDTA, incubation de 30 min à 37 C. Le contenu de chaque puits est prélevé et un mélange 2/1 dichlorométhane / méthanol est ajouté, puis les échantillons sont déposés sur plaque de silice à l'aide d'un automate pipetteur - déposeur. Elution : 1 ère migration heptane 9cm, 2nde migration toluène 8,5cm, 3ème migration mix 5,75cm (heptane, ether éthylique, acide acétique 70/30/1).L'analyseur d'images après séchage a lieu sur un Phosphorimager STORM associé à un logiciel TINA pour analyser l'image. Dans ce modèle, l'éflucimibe inhibe la synthèse d'esters de cholestérol dans les 5 sébocytes préputiaux de rats avec une inhibition de 83% et une IC50 de 625 nM. REVENDICATIONS 1. Utilisation d'au moins un composé choisi parmi le (S)-2-dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethyl-phenyl) -2-phenyl-acétanilide de formule (I) : CH3 HO CH3 O (I) le (R)-2-dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethyl-phenyl) -2-phenyl-acétanilide, leurs sels pharmaceutiquement acceptables et leurs solvates pharmaceutiquement acceptables, pour la préparation d'un médicament destiné à prévenir ou à traiter un désordre dû à un dysfonctionnement des glandes sébacées chez l'homme ou l'animal et/ou tout état ou pathologie lié à une surproduction de sébum. 2.Utilisation selon la revendication 1 caractérisée en ce que le désordre du à un dysfonctionnement des glandes sébacées chez l'homme ou l'animal est l'acné. 3.Utilisation selon la revendication 1 caractérisée en ce que l'état ou la pathologie lié à une surproduction de sébum chez l'homme ou l'animal est la dermite séborrhéique, la peau grasse ou le cuir chevelu gras. 4.Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3 caractérisée en ce que le médicament est adapté pour une administration orale. 5.Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3 caractérisée en ce que le médicament est adaptée pour une administration topique. 6 - Utilisation selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que les sels du (S)-2-dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethyl-phenyl) -2-phenyl-acétanilide ou du (R)-2-dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethyl-phenyl) -2-phenylacétanilide sont les sels de ces composés avec des métaux alcalins ou alcalino-terreux. 7. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que les solvates du (S)-2-dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethyl-phenyl) -2-phenylacétanilide ou du (R)-2-dodécylsulfanyl-N-(4-hydroxy-2,3,5-trimethyl-phenyl) -2-phenyl-acétanilide sont les hydrates de ces composés. 8. Utilisation selon la revendication 5 caractérisée en ce que le médicament se présente sous la forme d'un onguent, crème, lait, pommades, poudre, tampons imbibé, syndet, solution, gel, spray, mousse, suspension, lotion, stick, shampoing, ou base lavante.