Brevet FR2911779A1 — publié le 20080801

La présente invention concerne une composition cosmétique contenant un extrait d'ambre. Elle concerne également l'utilisation d'un tel extrait en tant qu'agent cosmétique, notamment pour améliorer la fermeté de la peau. Les formulateurs de compositions cosmétiques cherchent généralement à associer des actifs présentant des propriétés complémentaires, au sein d'une même composition cosmétique, de façon à optimiser l'efficacité de cette composition. Ainsi, il est courant de trouver dans une même composition cosmétique des actifs conférant à cette composition des effets complémentaires, par exemple des propriétés d'hydratation de la peau et des propriétés antirides. Il est aussi courant de chercher pour un but visé, par exemple pour raffermir la peau, à associer différents actifs ayant déjà cette activité ou une activité voisine mais connus pour agir par des mécanismes différents de façon à obtenir ainsi un résultat optimum. On sait que l'apparition des rides et de la perte de la fermeté de la peau est généralement reconnue comme une problématique siégeant au niveau du derme essentiellement constitué de protéines de collagènes synthétisées par les fibroblastes, baignant dans une matrice extracellulaire hydratée et maintenues en tension par les fibroblastes. Lors du processus de vieillissement, les protéines de soutien sont moins nombreuses, les systèmes enzymatiques de dégradation sont suractivés et la peau perd en densité ; d'où la nécessité de trouver des actifs nouveaux capables d'agir sur ces principaux paramètres. Au cours d'essais systématiques effectués par les inventeurs de la présente invention pour trouver un agent actif aussi efficace que possible pour agir sur les différents paramètres ci-dessus, dans une composition cosmétique contenant déjà au moins un agent actif améliorant l'état de la peau, et plus particulièrement, au moins un agent actif choisi dans le groupe constitué de : - un extrait de Bertholletia excelsa, en particulier un extrait de péricarpe de fruit, connu pour favoriser la synthèse des collagènes. - un extrait de Potentilla erecta (tormentille), connu pour son action sur la synthèse du collagène, - de l'aspartate de magnésium, connu pour son action sur la cohésion entre le derme et l'épiderme, - un peptide connu pour ralentir la libération des neuromédiateurs et favorisant la contraction musculaire, en particulier l'acétyl hexapeptide 3, plus connu sous le nom commercial argirelline, - un peptide ou un de ses dérivés greffés par un acide gras, en particulier en C16, ou une combinaison de tels peptides destiné à favoriser la synthèse des collagènes, en particulier le palmitoyl oligopeptide penta- peptide 3 ou le palmitoyl tétrapeptide 7, - un hydrolysat de farine de soja, riche en glycoprotéines, connu pour agir sur la synthèse du collagène I et, - les glycopeptides végétaux, en particulier les glycosphingolipides de blé connus pour renforcer la couche cornée. Dans leur recherche pour améliorer l'efficacité de compositions cosmétiques contenant au moins un des actifs cités ci-dessus, avec pour optique d'améliorer la fermeté de la peau, les inventeurs de la présente invention se sont aperçu que les extraits d'ambre constituaient des candidats particulièrement intéressants. Ils ont également pu corréler ces propriétés particulièrement intéressantes des extraits d'ambre avec le résultat de tests qui ont permis de montrer de façon totalement inattendue qu'un extrait d'ambre avait une activité remarquable de modulation du profil d'expression génique des fibroblastes du derme humain cultivés en monocouche, en agissant simultanément à plusieurs niveaux. L'ambre tire son nom de l'arabe aribar. C'est une résine fossilisée issue d'arbres antiques regroupés sous le nom de Pinus Succinifera qui se sont développés dans ce que l'on a appelé "les forêts d'ambres". En effet, il y a environ 45 millions d'années, l'ensemble des territoires de l'Europe centrale était couvert de forêts. On ne connaît pas exactement l'arbre ou les arbres à l'origine de la formation de cet ambre, mais contrairement à ce qui est souvent avancé l'ambre ne proviendrait pas de la sève de pin, mais plutôt du tissu vasculaire des arbres, exsudé en particulier pendant les changements radicaux de climat. Des descriptions génériques de la composition de l'ambre ont été réalisées (voir en particulier C W Beck the chemistry of amber, Est Mus Cienc nat de Alava, 1999, num espec 2, 33-48 et J S Mills, the chemical composition of baltic amber, Chemical geology, 1984,47,15-39). 90 % des gisements mondiaux d'ambre se trouvent concentrés dans une enclave territoriale russe située au nord de la mer Baltique entourée par la Pologne et la Lituanie. Ce sont des extraits d'ambre de cette région qui ont été utilisés dans le cadre de la présente invention et sont désignés ci-après par extraits d'ambre de la Baltique. L'utilisation d'ambre ou d'extraits d'ambre dans des compositions cosmétiques avait déjà été décrite antérieurement à la présente demande. Ainsi, la demande japonaise JP 09-227334 a décrit l'utilisation 25 d'extraits d'ambre obtenus par des solvants organiques pour ses effets antibactériens, antioxydant et déodorant. La demande de brevet chinoise CN 1245052 a décrit l'utilisation d'une poudre d'ambre pour son action antiride. La demande chinoise CN 1325678 a décrit l'utilisation d'un extrait alcoolique d'ambre pour renforcer le bouclier protecteur constitué par la peau et améliorer la microcirculation dans la peau. Ainsi, même si ces différents documents enseignent qu'il était connu, antérieurement à la présente invention d'utiliser de l'ambre en poudre ou un extrait d'ambre dans des compositions cosmétiques, aucun de ces documents ne suggère les activités particulières sur les constituants du derme mis en évidence par les inventeurs de la présente invention et leurs conséquences sur l'efficacité de certaines associations qui font l'objet de la présente demande, efficacité résultant des propriétés simultanées non évidentes mises en évidence par les inventeurs de la présente demande. Ainsi, l'invention concerne selon l'une de ses caractéristiques essentielles une composition cosmétique contenant à titre d'agents actifs : - un premier agent actif constitué d'un extrait d'ambre, - au moins un autre agent actif choisi dans le groupe constitué des extraits de Bertholetia excelsa, des extraits de Potentilla erecta, de l'aspartate de magnésium, des peptides agissant sur la contraction musculaire, en particulier, l'acétyl hexapeptide 3, des peptides et de leurs dérivés greffés par un acide gras, en particulier par un acide gras en C16, favorisant la synthèse des collagènes, en particulier le palmitoyl oligopeptide pentapeptide 3 ou le palmitoyl tétrapeptide 7, des hydrolysats de farine de soja et des glycolipides végétaux, en particulier des glycosphingolipides de céréales, en particulier des glycosphingolipides de blé. Elle concerne également selon une autre caractéristique essentielle l'utilisation d'un extrait d'ambre, notamment d'un extrait d'ambre de la Baltique, comme agent cosmétique agissant sur les protéines de soutien du derme et/ou sur les systèmes enzymatiques de dégradation des protéines du derme et ou des composants essentiels de la matrice extracellulaire de type glycanes, en particulier protéoglycanes, pour améliorer les propriétés biomécaniques essentielles de la peau que sont la fermeté et l'élasticité, dans la préparation d'une composition cosmétique, notamment d'une composition cosmétique contenant au moins un agent actif choisi dans le groupe constitué des extraits de Bertholetia excelsa, des extraits de Potentilla erecta, de l'aspartate de magnésium, des peptides agissant sur la contraction musculaire, en particulier, l'acétyl hexapeptide 3, des peptides et de leurs dérivés greffés par un acide gras, en particulier par un acide gras en C16, favorisant la synthèse des collagènes, en particulier le palmitoyl oligopeptide pentapeptide 3 ou le palmitoyl tétrapeptide 7, des hydrolysats de céréales de farine de soja et des glycolipides végétaux, en particulier des glycosphingolipides végétaux, en particulier des glycosphingolipides de blé. Dans ces deux aspects, l'extrait d'ambre utilisé est avantageusement un extrait d'ambre de la Baltique. Selon une variante particulièrement avantageuse, l'extrait d'ambre est obtenu par extraction au moyen d'un solvant d'extraction alcoolique ou hydroalcoolique comprenant au moins un monoalcool en Cl à C5 et/ou un glycol en C2 à C5. Un tel solvant d'extraction est avantageusement choisi dans le groupe constitué de l'éthanol, du butylèneglycol et des mélanges éthanol/eau, butylèneglycol/eau et butylèneglycol/éthanol/eau, de préférence un mélange éthanol/eau comprenant de 40 à 80 % d'éthanol, du butylèneglycol, un mélange butylèneglycol/eau 50/50 ou un mélange butylèneglycol/éthanol 80 : 20 à 60 : 40. On utilisera avantageusement dans le cadre de la présente invention un extrait d'ambre obtenu par un solvant d'extraction alcoolique, dont l'extrait sec est ensuite mélangé dans un solvant glycolique cosmétiquement acceptable, en particulier le butylène glycol. Les extraits dits extraits alcooliques seront obtenus comme suit : on réduit en poudre de l'ambre, en particulier de l'ambre jaune de la Baltique, que l'on extrait à l'aide d'un alcool en CI à C5 ou d'un mélange d'eau et d'alcool en CI à C5, en particulier à l'aide d'éthanol et plus particulièrement à l'aide d'un mélange d'éthanol et d'eau contenant 40 à 80 % en volume d'éthanol. Cette action est obtenue en laissant macérer à froid pendant plusieurs heures la poudre d'ambre dans le mélange hydroalcoolique, par exemple pendant environ 5 h. Le mélange est ensuite chauffé pendant plusieurs heures, par exemple pendant environ 8 heures. Le liquide d'extraction est ensuite recueilli, par exemple après centrifugation et avantageusement filtré pour éliminer les résidus solides. Le solvant est ensuite éliminé, de préférence par évaporation sous vide, conduisant ainsi à un extrait dit extrait alcoolique sous forme de poudre. Cette poudre très fine est ensuite solubilisée ou dispersée dans un solvant cosmétiquement acceptable, en particulier dans un glycol, de préférence le butylèneglycol ou un mélange de tensioactifs. Selon une autre variante, on prépare un extrait dit extrait glycolique. Un tel extrait est également préparé à partir d'ambre, de préférence d'ambre jaune de la Baltique que l'on réduit en poudre puis qu'on laisse macérer à froid dans un solvant glycolique pendant environ 48 h, de préférence sous agitation. On procède ensuite à une extraction à chaud, de préférence pendant environ 6 h. On effectue ensuite une séparation solide-liquide, de préférence par centrifugation, puis on récupère le liquide surnageant que l'on filtre pour éliminer les particules fines qui pourraient se trouver en suspension dans ce liquide. On obtient ainsi un extrait préféré selon l'invention. A titre de solvants glycoliques préférés, on utilise le butylène-glycol, un mélange butylèneglycol/eau 50/50 ou un mélange butylène-5 glycol/alcool 80/20 à 60/40 en volumes. Comme exposé précédemment, le choix des extraits d'ambre pour la préparation des compositions de l'invention résulte de leur intérêt particulier pour améliorer la fermeté de la peau, intérêt qui a été confirmé par des tests biologiques qui ont montré l'effet de ces extraits sur 10 l'expression génique des fibroblastes du derme humain, comme cela ressort des exemples qui montrent clairement l'effet de cet extrait sur : - la collagénase ou métalloprotéinase de type 1 dite MMP1, - la teneur en collagènes majeurs du derme, en particulier en collagènes 1, 3 et 5 et plus particulièrement en collagène 5 qui agit sur 15 l'orientation des fibres du derme, - la dermatopontine connue pour gouverner les relations protéines-matrice extracellulaire du derme, - les petits protéoglycanes du derme riches en leucine (SLRP, Small Leucine Rich Proteglycans), en particulier le biglycane et le 20 versicane qui sont des protéoglycanes impliqués dans la fibrillogénèse, qui joue un rôle fondamental dans le maintient des propriétés biomécaniques de la peau. Les compositions de l'invention contiennent, outre l'extrait d'ambre tel qu'il est défini ci-dessus au moins un autre agent actif choisi 25 dans le groupe constitué des extraits de Bertholetia excelsa, des extraits de Potentilla erecta, de l'aspartate de magnésium, des peptides agissant sur la contraction musculaire, en particulier, l'acétyl hexapeptide 3, des peptides et de leurs dérivés greffés par un acide gras, en particulier par un acide gras en C16, favorisant la synthèse des collagènes, en particulier le palmitoyl oligopeptide pentapeptide 3 ou le palmitoyl tétrapeptide 7, des hydrolysats de farine de soja et des glycolipides végétaux, en particulier des glycosphingolipides de céréales, en particulier des glycosphingolipides de blé. On donne ci-après pour chacun de ces autres "agents actifs" l'action particulière conférée et les proportions préférées de cet agent dans la composition de l'invention : 1) extrait de Bertholletia excelsa : Il s'agit de préférence d'un extrait du péricarpe du fruit. Le mode d'action et l'intérêt d'un tel extrait est décrit dans la demande internationale WO 96/25143 ainsi que dans la demande française FR 2 752 527. Il ressort de ces deux demandes de brevet qu'un tel extrait permet de favoriser la synthèse des collagènes et présente une activité antiradicalaire, ce qui permet de l'utiliser pour lutter contre les effets du vieillissement cutané et pour prévenir l'apparition des rides ou en atténuer la profondeur ou pour favoriser le raffermissement cutané. Un tel extrait est avantageusement utilisé dans les compositions de l'invention à une concentration comprise entre 0,1 et 2% en poids, 2) extrait de Potentilla erecta : un tel extrait est décrit en particulier dans le brevet européen EP 0 946 138 d'où il ressort que cet extrait peut être avantageusement utilisé pour favoriser la cohésion entre le derme et l'épiderme par le renforcement de la jonction dermoépidermique mais également qu'il permet de stimuler la formation du collagène VII, ces deux actions concourant pour obtenir un raffermissement de la peau, prévenir ou retarder l'apparition des signes du vieillissement cutané, retarder l'apparition des rides ou diminuer leur profondeur. Dans les compositions de la présente invention, on utilisera de préférence un extrait glycolique de Potentilla erecta, à une concentration comprise entre 0,1 et 2 % en poids, 3) l'aspartate de magnésium : de préférence à une concentration comprise entre 0,01 et 0,5 %, de préférence entre 0,02 à 0,1 % en poids par rapport à la composition, 4) des peptides destinés à ralentir la libération de neuromédiateurs pouvant favoriser la contraction musculaire, en particulier l'acétyl hexapeptide 3 plus connu sous le nom commercial argireline fabriqué par la société Lipotech SA, de préférence à une concentration comprise entre 0,1 et 1 % en poids par rapport au poids de la composition, 5) des peptides ou dérivés de peptides greffés par un acide gras (en particulier en C16) ou combinaison de tels peptides, destinés à favoriser la synthèse de collagènes. On choisira en particulier le palmitoyl oligopeptide pentapeptide 3 ou le palmitoyl tetrapeptide 7, de préférence à une concentration comprise entre 0,1 et 5 % et plus préférentiellement entre 1 à 3 %, en poids par rapport au poids total de la composition. 6) des hydrolysats de farine de soja, riche en glycoprotéines. De tels hydrolysats existent commercialement. On citera en particulier la raffermine commercialisée par la société Silab et décrite pour augmenter la synthèse de collagène I, de fibrilline 1 et de fibronectine. Un tel hydrolysat sera utilisé de préférence à une concentration comprise entre 0,1 et 5 % en poids et de préférence entre 1 à 3,5 % en poids par rapport au poids de la composition cosmétique. 7) glycolipides végétaux, en particulier glycosphingolipides de céréales et notamment des glycosphingolipides de blé. Ces glycolipides et tout particulièrement les glycosphingolipides de blé constituent les constituants préférés utilisés à titre de deuxième agent actif dans la composition. Ils confèrent à la composition des effets optimum en agissant sur les cellules de l'épiderme. Ils seront de préférence utilisés à des concentrations comprises entre 0,01 et 5 % en poids et de préférence entre 0,05 et 0,8 % en poids. Les compositions cosmétiques de l'invention contiendront avantageusement environ 2 % en poids d'extraits glycoliques d'ambre et environ 0,1 % en poids de glycosphingolipides, en particulier de glycosphingolipides extraits de blé. On utilisera de préférence à titre d'extraits contenant les glycosphingolipides des extraits contenant des glycosylcéramides, du digalactosyldiglycéride, des triglycérides et des phospholipides. Ces extraits contiendront avantageusement environ 50 % en poids de glycosylcéramides, 40 % de digalactosyldiglycérides, 0 à 5 % de triglycérides et 5 à 10 % de phospholipides. On utilisera avantageusement des mélanges de glycosphingolipides présentant une répartition en acides gras voisine de 50 à 65 0/0 d'acide linoléique, 15 à 20 % d'acide palmitique et 10 à 15 % d'acide oléique. Les compositions de l'invention peuvent également contenir d'autres agents actifs, en particulier : - des protecteurs de la mitochondrie en particulier de I 'ADN mitochondrial tel que l' hexapeptide 11, à une concentration généralement comprise entre 0, 1 et 5 % en poids, de préférence entre 0,5 et 2 % en poids ou le gentisate de tocophérol, à une concentration généralement comprise entre 0,01 et 2 % en poids. - le tocotriénol et ses dérivés, généralement à une 25 concentration en poids comprise entre 0,01 et 5 %, de préférence comprise entre 0,02 et 0,5 % en poids, - un extrait de Rumex crispus, à une concentration généralement comprise entre 0,1 et 5 % en poids, de préférence entre 0,5 et 2 0/0, - un extrait de rhizome de Glycyrrhiza glabra, à une concentration généralement comprise entre 0,01 et 1 % en poids, - les dérivés triterpéniques, glycosylés ou non, extraits de Centella asiatica, en particulier le madécassoside, l'asiaticoside, l'acide asiatique ou l'acide madécassique seuls ou en combinaison, à des concentrations généralement comprises entre 0,1 et 5 % en poids, - le tocophérol et ses dérivés, en particulier le phosphate ou l'acétate de tocophérol, entre 0,1 et 0,5 % en poids, - l'acide ascorbique ou vitamine C connu en particulier pour favoriser la synthèse d'élastine. Son action sur la synthèse de l'élastine est décrite dans le brevet français FR 2 737 971. L'acide ascorbique est introduit dans les compositions de l'invention à une concentration préférentielle comprise entre 0,1 et 5 % en poids, de préférence entre 1 et 2 % en poids. - l'acide hyaluronique ou ses sels de sodium : de préférence à une concentration comprise entre 0,1 et 5 % en poids, - le D-xylose dont l'utilisation est décrite dans le brevet européen EP 1 028 705 est avantageusement compris dans les compositions de la présente invention à une concentration comprise entre 0,1 et 1 % en poids, - des glycols, en particulier le butylène glycol et la glycérine, à des concentrations comprises entre 1 et 5 % en poids, l'acide rétinoique, à une concentration comprise entre 0,01 et 1 % en poids ou le rétinol ou ses esters tel que le propionate de rétinol, à une concentration généralement comprise entre 1500 et 2500 UI, - des hydrolysats d'ADN, en particulier résultant de la transformation d'extraits de semence de poisson, entre 0,01 et 1 % en poids, - des ecdystéroides d'origine végétale, à des concentrations entre 0,1 et 2 % en poids, - une oxazolidone, en particulier le 4 décyloxazolidin-2-one, avantageusement à une concentration comprise entre 0,1 et 5 % en poids, -des protéines végétales ou des hydrolysats de protéines végétales possédant une action de tension à la surface de la peau, en particulier les protéines de blé et/ou les protéines d'avoine. Ces protéines sont avantageusement utilisées dans des compositions de l'invention à des concentrations entre 0,1 et 5 % en poids. Dans toutes ces compositions, l'extrait d'ambre est avantageusement à une concentration comprise entre 0,01 et 5 % en poids. De manière préférée, la concentration en extrait d'ambre est comprise entre 0,01 et 0,1 % en poids lorsqu'il s'agit d'un extrait alcoolique, et entre 0,5 et 5 % en poids, de préférence entre 1 et 2,5 % en poids lorsqu'il s'agit d'un extrait glycolique tel que défini précédemment. Parmi les agents actifs complémentaires cités ci-dessus, on choisira de préférence un extrait de Rumex crispus, un extrait de rhizome de Glycyrrhiza glabra, un dérivé triterpénique glycosylé ou non, un extrait de centella asiatica, en particulier le madécassoside, l'asiaticoside, l'acide asiatique ou l'acide madécassique seul ou en combinaison, un hydrolysat d'ADN, en particulier obtenu à partir d'un extrait de semence de poisson, une oxazolidone, en particulier le 4 décyloxazolidin-2-one, ces différents agents étant employés de préférence dans les proportions indiquées ci-dessus et de préférence dans des compositions qui contiennent un extrait de sphingolipides de blés à titre de deuxième agent actif cosmétique. Selon une variante avantageuse, l'extrait d'ambre est incorporé dans un système vecteur permettant une libération programmée de l'actif, en particulier dans une vésicule lamellaire de type liposome. Les avantages de la composition de l'invention apparaîtront 5 mieux au vu des exemples qui sont donnés ci-dessous. EXEMPLE 1 Préparation d'un extrait éthanolique d'ambre On prend de l'ambre jaune de la Baltique que l'on réduit en poudre, on 10 l'extrait avec un mélange éthanol/eau à 60 % en volume (rapport 1:10 v / v par rapport à l'ambre), en laissant macérer à froid pendant 5 heures puis en chauffant pendant 8 heures. On effectue une centrifugation, on récupère le liquide d'extraction, on le filtre pour éliminer les plus petits grains. L'extrait ainsi obtenu peut être utilisé. 15 EXEMPLE 2 On procède comme pour l'exemple 1 et on réduit à sec par évaporation sous vide l'extrait alcoolique. On obtient une poudre très fine soluble ou dispersable dans des solvants cosmétiquement acceptables tels 20 que des glycols ou des systèmes tensioactifs. On mélange ici 0,5 % en poids d'extrait sec dans du butylène glycol, le tout pouvant être formulé à 2% en poids de la composition finale. EXEMPLE 3 25 Préparation d'un extrait glycolique d'ambre de la Baltique On prend de l'ambre jaune de la Baltique que l'on réduit en poudre, on laisse macérer à froid dans le butylène glycol pendant 48 heures sous agitation puis on extrait à chaud pendant 6 heures. On effectue une séparation solide liquide par centrifugation, on récupère le 14 liquide d'extraction par pompage du surnageant, on le filtre pour éliminer les plus petits grains et on récupère l'extrait glycolique, objet de l'invention. EXEMPLE 4 Mise en évidence de l'action d'un extrait d'ambre sur l'expression génique des fibroblastes dermiques humains cultivés en monocouche 1) Matériel et méthodes a) Culture cellulaire Des fibroblastes humains normaux (FHN), sont décongelés puis ensemencés en flasque de 75 cm' à raison de 106 cellules par flasque en milieu DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) contenant 10% (v/v) de sérum de voeux foetal (SVF). Une fois à confluence, les cellules sont traitées par une solution de trypsine, puis 8 flasques sont ensemencées. Lorsque la confluence est atteinte, les FHN sont rincés 3 fois avec un tampon phosphate (Phosphate Buffer Saline, PBS), puis incubés pendant 18 h en milieu DMEM sans SVF. b) Traitement par l'ambre Après 18 h de culture sans sérum les cellules sont traitées suivant différentes conditions : - extrait d'ambre à 2 % selon l'exemple 1 (v/v) - solvant (Butylène Glycol) 2 % (v/v) - DMEM seul (témoin positif). Après 4 heures de culture, les ARN totaux sont extraits. 15 c) Extraction des ARN totaux Après incubation les milieux de cultures sont éliminés puis les cellules sont placées sur un lit de glace, sans rinçage préalable. Sous hotte chimique, les cellules sont grattées et lysées dans 1 mL de RNAplus (vendu par la société Qbiogene Inc) puis l'ensemble est récupéré dans un tube eppendorff de 1,5 mL. Suite à cela, les ARN totaux sont dosés à l'aide d'un analyseur de type Agilent 2100 analyser. d) Amplification des ARN et marquage Avant de procéder à l'étape d'hybridation, une étape d'amplification des ARN est nécessaire. Celle-ci est réalisée suivant un protocole déjà décrit par Eberwine (Eberwine,J. (1996) Amplification of mRNA populations using aRNA generated from immobilized oligo(dT)-T7 primed cDNA. Biotechniques, 20, 584-591). Les différents échantillons d'ARN amplifiés (ci- après désignés par aARN) sont ensuite quantifiés par spectrophotométrie (Bioanalyser 2001, Agilent). lpg d'aARN des échantillons non traités et traités par l'extrait d'ambre sont marqués par transcription inverse à l'aide des fluorophores Cy5 et Cy3 respectivement. Ces échantillons marqués d'ADN complémentaire (ciaprès désignés par aADNc) sont alors hybridés sur une biopuce, spécifique des gènes exprimés dans la peau, afin de mettre en évidence les gènes modulés modulés par l'extrait d'ambre. Une biopuce PIQORTM Microarrays (Référence 160-000-681) a été utilisée ici. e) Hybridation et analyse de données Une hybridation est réalisée pendant 16 heures à l'aide d'une station d'hybridation, puis une analyse de données est réalisée comme décrit en détail par Bosio et collaborateurs (Bosio, A., Knorr, C., Janssen, 16 U., Gebel, S., Haussmann, H.J. and Muller, T. (2002). Kinetics of gene expression profiling in Swiss 3T3 cells exposed to aqueous extracts of cigarette smoke. Carcinogenesis 23: 741-748). Brièvement, la capture d'image et la quantification des signaux de fluorescence sont réalisées à l'aide de l'appareil ScanArrayLite (Packard Bioscience, Billerica, mA, Etats-Unis) et du logiciel ImaGene logiciel 4,1 (BioDiscovery, Los Angeles, CA, les Etats-Unis). Le bruit de fond local a été soustrait du signal pour en obtenir l'intensité nette, le rapport Cy5/Cy3 peut alors être déterminé. Ensuite les moyennes des fluorescences des 4 spots correspondant au même aADNc sont calculées puis normalisées par régression linéaire (méthode de normalisation de LOWESS). Suite à cela, seuls les gènes montrant une intensité nette 2 fois plus importante que le bruit de fond sont conservés pour l'analyse. 2) Résultats Les résultats obtenus suite à l'analyse des différentes biopuces, mettent en évidence un effet significatif de l'extrait d'ambre sur la modulation de l'expression de certains gènes exprimés par les FHN dans la peau. En effet, l'analyse des biopuces met en évidence une variation significative, en réponse à l'extrait d'ambre : - sur l'expression de la collagénase-1 ou MMP-1 : on observe en effet, par rapport au témoin, un effet d'inhibition de l'expression de la collagénase par les FHN, la quantité exprimée étant de 60% (contre 100% pour le témoin), - sur la synthèse des collagènes de types I, III et V : on observe plus précisément les activations suivantes, par rapport au témoin (100%) - collagène I -chaîne alpha 1 : 175%, 17 -collagène I -chaîne alpha 2 : 250%, - collagène III : 221% par rapport au témoin, - collagène V -chaîne alpha 1 : activation de 200% par rapport au témoin, - collagène V -chaîne alpha 2 : activation de 220% par rapport au témoin, - sur l'expression de la dermopontine, on observe un effet d'activation de l'ordre de 210% par rapport au témoin, - sur l'expressiondu biglycane et du versicane : on observe des 10 activations respectives de 200% et 300% par rapport au témoin. EXEMPLE 5 Compositions selon l'invention Dans les compositions exemplifiées ci-dessous, les teneurs en 15 extrait d'ambre indiquées sont en pourcentage en poids. a) Gel raffermissant : Extrait d'ambre (butylène glycol selon exemple 3) : 4 Glycosphingolipides de blé : 0,2 20 (Wheat cerasomes vendu par E.P.I France) Glycérine: 2 Conservateurs et parfums : 0,3 Excipient qsp 100 25 b) Lotion raffermissante Extrait d'ambre (éthanol selon exemple 1) : 0,1 Glycosphingolipides de blé : 0,15 (Wheat cerasomes vendu par E.P.I France) Conservateurs et parfums : 0,3 Excipient qsp 100 c) Crème raffermissante : Extrait (butylène glycol selon l'exemple 3) d'ambre : 2 Extrait de Bertholletia : 1 Extrait glycolique de Potentilla erecta : 0,5 Palmitoyl oligopeptide pentapeptide 3 : 3 Glycosphingolipides de blé : 0,2 (Wheat cerasomes vendu par E.P.I France) Acétate de tocophérol : 0,2 Glycérine : 2 4 decyloxazolidin-2-one : 1 Conservateurs et parfums : 0,3 Excipient qsp 100 Cette émulsion s'emploie 1 à 2 fois par jour sur le visage dont elle retend progressivement les traits d) Sérum tenseur pour le bas du visage et le décolleté : Extrait (butylène glycol selon l'exemple 3) d'ambre : 3 Extrait de Bertholletia : 1 Extrait glycolique de Potentilla erecta : 0,5 Protéines d'avoine : 2 Palmitoyl oligopeptide pentapeptide 3 : 3 Glycosphingolipides : 0,2 Extrait de glycyrrhiza glabra : 0,1 Acétate de tocophérol : 0,2 18 Oxyde de titane micronisé : 0,5 4 decyloxazolidin-2-one : 1 Conservateurs et parfums : 0,3 Excipient qsp 100 Ce sérum tenseur à appliquer le matin associe un effet immédiat à un effet soin de fond e) Film patch : 10 Extrait (butylène glycol selon l'exemple 3) d'ambre : 1,5 Extrait de Bertholletia : 1 Aspartate de magnésium : 0.1 Extrait glycolique de Potentilla erecta : 0,5 15 Palmitoyl oligopeptide pentapeptide 3 : 3 Glycosphingolipides : 0,2 Extrait de glycyrrhiza glabra : 0,1 Polymères : 2 Acétate de tocophérol : 0,2 20 Glycérine : 1 4 décyloxazolidin-2-one : 0,8 Conservateurs : 0,2 Excipient parfumé qsp 100 25 Ce film patch s'applique sur le bas du visage et le décolleté le soir au repos f) Ampoules de soin : 195 Extrait (butylène glycol selon l'exemple 3) d'ambre : 5 Extrait de Bertholletia : 1 Extrait glycolique de Potentilla erecta : 0.5 Glycosphingolipides : 0,2 Acide ascorbique stabilisé : 0,5 Solution d'acide hyaluronique : 2 Hydrolysat de protéines : 1 Système solubilisant : 1,5 10 Ce soin présenté en ampoules se fait en cure de 21 jours pour une action en profondeur de remise en tension des tissus. REVENDICATIONS 1. Composition cosmétique contenant à titre d'agents actifs : - un premier agent actif constitué d'un extrait d'ambre, - au moins un autre agent cosmétiquement actif choisi dans le groupe constitué des extraits de Bertholletia excelsa, des extraits de Potentilla erecta, de l'aspartate magnésium, des peptides agissant sur la contraction musculaire, en particulier, l'acétyl hexapeptide 8, des peptides et de leurs dérivés greffés par un acide gras, en particulier par un acide gras en C16, favorisant la synthèse des collagènes, en particulier le palmitoyl oligopeptide pentapeptide 3 ou le palmitoyl tétrapeptide 7, des hydrolysats de farine de soja et des glycolipides végétaux, en particulier des glycosphingolipides de céréales, en particulier des glycosphingolipides de blé. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit extrait d'ambre est obtenu par extraction à partir de l'ambre, notamment de l'ambre jaune de la Baltique au moyen d'un solvant d'extraction alcoolique ou hydroalcoolique comprenant au moins un monoalcool en CI à Cs et/ou un glycol en C2 à C5. 3. Composition selon la revendication 2, caractérisée en ce que ledit solvant d'extraction est choisi dans le groupe constitué de l'éthanol, du butylèneglycol et des mélanges éthanol/eau, butylèneglycol/eau et butylèneglycol/éthanol/eau, de préférence un mélange éthanol/eau comprenant de 40 à 80 % d'éthanol, du butylèneglycol, un mélange butylèneglycol/eau 50/50 ou un mélange butylèneglycol/éthanol 80 : 20 à 60 : 40. 4. Composition cosmétique selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce qu'elle comprend de 0,01 à 5 % en poids dudit extrait d'ambre. 5. Composition selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce qu'elle contient un extrait d'ambre et au moins des glycosphingolipides, de préférence des glycosphingolipides de blé. 6. Composition selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisée en ce qu'elle contient de 0,01 à 5 % en poids, de préférence de 0,05 à 0, 8 % de glycosphingolipides, de préférence de glycosphingolipides de blé. 7. Composition selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un extrait de Rumex crispus, un extrait de rhizome de Glycyrrhiza glabra, un dérivé triterpénique glycosylé ou non, un extrait de centella asiatica, en particulier le madécassoside, l'asiaticoside, l'acide asiatique ou l'acide madécassique seul ou en combinaison, un hydrolysat d'ADN, en particulier obtenu à partir d'un extrait de semence de poisson, une oxazolidone, en particulier le 4 décyloxazolidin-2-one. 8. Composition selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que l'extrait d'ambre est incorporé dans un système vecteur permettant une libération programmée de l'actif, en particulier dans une vésicule lamellaire de type liposome. 9. Utilisation d'un extrait d'ambre, notamment d'un extrait d'ambre de la Baltique, comme agent cosmétique agissant sur les protéines de soutien du derme et/ou sur les systèmes enzymatiques de dégradation des protéines du derme et ou des composants essentiels de la matrice extracellulaire de type glycanes, en particulier protéoglycanes, pour améliorer les propriétés biomécaniques essentielles de la peau que sont la fermeté et l'élasticité, dans la préparation d'une composition cosmétique, notamment d'une composition cosmétique contenant au moins un agent actif choisi dans le groupe constitué des extraits de Bertholetia excelsa, des extraits de Potentilla erecta, de l'aspartate demagnésium, des peptides agissant sur la contraction musculaire, en particulier, l'acétyl hexapeptide 8, des peptides et de leurs dérivés greffés par un acide gras, en particulier par un acide gras en C16, favorisant la synthèse des collagènes, en particulier le palmitoyl oligopeptide pentapeptide 3 ou le palmitoyl tétrapeptide 7, des hydrolysats de céréales de farine de soja et des glycolipides végétaux, en particulier des glycosphingolipides végétaux, en particulier des glycosphingolipides de blé.