Brevet FR2908771A1 — publié le 20080523

L'invention concerne un copolymère chitine-glucane sous forme de poudre de granulométrie fine et contrôlée, en particulier de très fine granulométrie, utilisable notamment dans le domaine de la cosmétique, et particulièrement l'utilisation d'un copolymère entre la chitine et des beta- glucanes pour prévenir ou réduire les signes du vieillissement cutané. L'invention concerne également un tel polymère sous forme de matériaux poreux, notamment pour son utilisation en ingénierie tissulaire. Etat de l'art Il est connu que certains polysaccharides exercent une action hydratante pour les couches supérieures de l'épiderme, ou même permettent de prévenir ou d'atténuer certains des signes du vieillissement cutané. En particulier, les ingrédients à base de beta-glucanes, le schizophyllane, le xyloglucane, l'acide hyaluronique, les galactomannanes, la chitine sont fréquemment employés dans les produits de soin cosmétiques. Ces polysaccharides se distinguent des ingrédients de type alphahydroxyacide, qui agissent en désquamant l'épiderme, ce qui favorise un renouvellement cellulaire rapide mais peut altérer les couches inférieures de i 'épiderme. La plupart des ingrédients anti-âge agissent sur le 1-nouvellement des cellules de la peau ou du collagène. Or un mécanisme 2908771 2 Parmi les polysaccharides à effet anti-âge , les beta-glucanes, issus de levures, de champignons, de céréales, ou de plantes, sont une famille de polysaccharides purs constitués d'unités D-glucose, liées entre elles par des liaisons de type bêta, les carbones étant liés variant selon 5 l'espèce dont ils sont extraits, avec une structure plus ou moins branchée : bêta(1,3)(1,6) pour les beta-glucanes issus de la levure Saccharomyces cerevis/ae; bêta(1,3) pour la chaîne principale (branchée en position bêta(1,6) par des chaînes courtes) du schizophyllane, issu du champignon Schizoph y/lm commune bêta(1,4) pour les beta-glucanes issus de 10 céréales comme l'avoine, l'orge, le blé bêta(1,4) pour la chaîne principale (branchée en position bêta(1,6) par des chaînes courtes) pour le xyloglucane issu de plantes. La solubilité en milieu aqueux des betaglucanes dépend de leur structure, de la longueur des chaînes macromoléculaires et de l'organisation tri-dimensionnelle des chaînes. 15 Les beta-glucanes sont appréciés en cosmétique pour leurs effets (qui diffèrent selon la molécule considérée) revitalisant, anti-inflammatoire, protecteur contre les radiations UV, apaisant, immunostimulant, anti-âge, anti-ride, anti-acné, etc, qui conduisent à une amélioration des symptômes du vieillissement cutané ou de l'acné. Les 20 beta-glucanes recherchés en cosmétique sont généralement hydrosolubles pour pouvoir être incorporés dans la phase aqueuse des émulsions, ce qui limite le choix terme de molécules utilisahles en cosméhnI le Fn effet, c,i_,hl.- nt et a 2908771 D'autre part, des usages cosmétiques des dérivés hydrosolubles de la chitine (carboxyméthylchitine et chitosane principalement) sont connus, par exemple dans des crèmes de soin, comme agent filmogène, hydratant, améliorant l'aspect des peaux sujettes à la cellulite par exemple, ou 5 également pour la préparation de microsphères. Cependant, la chitine à usage cosmétique et ses dérivés sont industriellement obtenus à partir de carapaces de crustacés û crevette, crabe û, les crustacés étant un des principaux responsables d'allergies. Des cas d'allergies à des crèmes contenant des dérivés de chitine ont d'ailleurs été publiés (Cleenewerck 10 MB, Martin P, Laurent D. Allergic contact dermatitis due to a moisturizing body cream with chitin. Contact Dermatitis 31, 196, 1994 ; Pereira F, Pereira C, Lacerda MH. Contact dermatitis due to a cream containing chitin and a carbitol. Contact Dermatitis 38, 290, 1998). 15 A la connaissance des inventeurs, la chitine (le polymère constitué des unités N-acétyl-D-glucosamine) obtenue au départ des carapaces de crustacés ou au départ d'algues microscopiques n'est pas connue comme pouvant prévenir ou réduire les effets du vieillissement cutané. Le chitosane, qui est le polymère dérivé de la chitine, portant des charges 20 cationiques, constitué des unités D-glucosamine/N-acétyl-D-glucosamine, ses dérivés (succinamide) et ses sels (par exempte lactate, ascorbate, 5tvcélate succinate) sont utilisés en cos leurs propriétés 2908771 4 polysaccharides liés entre eux de manière covalente dans un réseau tridimensionnel dénommé chitineglucane . Or ce copolymère chitine-glucane peut être avantageusement produit de manière hautement pure et économiquement rentable par un 5 procédé en étapes successives, comme décrit dans le brevet EP1483299B1 (US 2005/130273 Al ou WO 03068824 Al). On obtient une poudre fine, blanche, non odorante, dont la teneur en copolymère chitine-glucane est supérieure à 90%. Cette poudre n'est soluble dans aucun solvant, ni aqueux, ni organique, ce qui a priori compromet son usage en 10 cosmétique. Différentes applications sont décrites dans les demandes de brevets FR 05 07066 et FR 06 51415. Des usages médicaux de compositions à base d'extraits fongiques contenant la chitine et les beta-glucanes ont été décrits auparavant, en particulier comme actifs cicatrisants de plaies. Cependant ces différentes 15 utilisations, par exemple sous forme de pansements, ne sont a priori pas adaptées pour une formulation cosmétique. Buts de l'invention L'invention a pour but principal de résoudre le nouveau problème 20 technique consistant en la fourniture d'un copolymère chitine-glucane présentant une forme adaptée é une utilisation cosmétique, et en narticalier en de mncoÇmitique n dermatologie, et/ou adaptée à une 2908771 La présente invention a notamment pour but de fournir une composition dermocosmétique pour réaliser un soin du corps et/ou du visage, comme un soin hydratant, raffermissant, protecteur, ou anti-rides. La présente invention a également pour but de résoudre les 5 problèmes techniques mentionnés ci-dessus en fournissant une substance d'origine naturelle qui présente innocuité, tolérance cutanée et oculaire, une très bonne hypoallergénicité, tout en étant aisément disponible en grand volume, et à un coût compatible avec l'usage comme ingrédient cosmétique. 10 La présente invention a également pour but d'optimiser une composition de complément alimentaire favorisant la biodisponibilité et les effets sur la santé du copolymère chitine-glucane. La présente invention a également pour but de fournir une poudre de chitine-glucane permettant d'ajuster et d'optimiser ses propriétés 15 physico-chimiques et biologiques selon l'application envisagée, comme composition dermocosmétique et dermatologique, composition de complément alimentaire, composition d'aliment fonctionnel, auxiliaire de technologie pour le traitement des boissons, composition pour des dispositifs médicaux comme par exemple des produits cicatrisants. 20 L'invention a également pour but de fournir une substance naturelle (l'origine non animale, d'excellente pureté, bien caractérisée, obtenue par un procédé (l prnril in, nui narantit reproductibilite et traçabl!itA. La p but ance able E 2908771 6 parfaitement homogène et dont les qualités sensorielles (viscosité, texture, toucher) sont excellentes. L'invention a pour but de proposer un actif cosmétique permettant de prévenir ou de réduire les effets du vieillissement cutané, d'hydrater la 5 peau de manière durable, de la tonifier, et/ou de la raffermir, de lui rendre un aspect homogène et lisse, de diminuer l'état squameux, de la protéger contre les agressions extérieures comme la sécheresse et/ou pollution par les métaux lourds, de lui permettre de restaurer sa fonction barrière. L'invention a pour but de proposer également un ingrédient cosmétique 10 ayant un pouvoir de rétention d'eau et un pouvoir viscosifiant important. L'invention a également pour but de fournir un matériau poreux utilisable en l'ingénierie tissulaire. L'invention a également pour but de fournir des substances dérivées du copolymère chitine-glucane, obtenues par modification 15 chimique ou enzymatique selon les voies de synthèse connues pour les polysaccharides, notamment par couplage de substances actives, par couplage de substances modulant le comportement, par oxydation, ou par hydrolyse, dans le but de moduler les propriétés physico-chimiques (comme la solubilité) et les performances du copolymère chitine-glucane. 20 Résumé de l'Invention Afin résoudre les problèmes ter partis _ nés ci-Hessi iq 2908771 7 Les inventeurs ont cependant découvert de manière surprenante que l'on pouvait résoudre les problèmes techniques mentionnés ci-dessus en utilisant une poudre de granulométrie très fine et contrôlée d'un copolymère chitine-glucane. Cette solution est tout à fait surprenante dans 5 la mesure où l'homme du métier s'attendrait à ce que les particules finement broyée de ce copolymère soient également insolubles et qu'elle se présenteraient de la même manière que les beta-glucanes non solubles, c'est-à-dire sous forme de particules dures et irritantes pour la peau. 10 Les inventeurs ont pu de manière surprenante d'une part préparer des suspensions stables de chitine-glucane, en particulier dans l'eau sans additif, et d'autre part, préparer des émulsions stables contenant notamment des concentrations élevées en chitine-glucane. En particulier l'invention concerne un polysaccharide d'origine 15 fongique comprenant majoritairement un copolymère chitine-glucane, ledit polysaccharide ayant une granulométrie fine. L'invention concerne également une poudre finement broyée d'un extrait fongique comprenant au moins un copolymère chitine-glucane finement broyé. 20 Avantageusement, les particules de granulométrie fine ont au moins 70% en poids des particules une taille inférieure à 500 microns (pm), et de préférence inférieure à 355 microns (pm). Encore de préférence moins 50%, de rréfér-! des particules ont une ta ! iférieure à 2908771 Un mode de réalisation permet d'obtenir au moins 50% en poids des particules d'une taille inférieure à 65 mesh (environ 149 pm), et de préférence inférieure à 100 mesh (environ 230 pm). La granulométrie est avantageusement contrôlée en choisissant, 5 notamment après tamisage ou classification, une fraction de taille particulière en fonction des besoins. Avantageusement, le copolymère de chitine-glucane comprend un rapport entre les unités N-acétyl-D-glucosamine de la chitine et les unités D-glucose des beta-glucanes compris entre 95:5 et 15:85. 10 Avantageusement, le polysaccharide d'origine fongique comprend plus de 70 % de copolymère chitine-glucane en masse par rapport à la masse totale de l'extrait d'origine fongique, de préférence supérieure à 85 %. Avantageusement, les enchaînements entre les unités D-glucose 15 sont majoritairement de type bêta(1,3). De préférence l'extrait fongique est issus du mycelium d'un champignon du type Ascomycète, et en particulier de Aspergillus niger , et/ou d'un champignon Basidiomycète, et en particulier Lentinula edodes (shiitake) et/ou Agaric-us bisporus 20 Avantageusement, au moins 85 % de la partie chitine du copolymère crut ne-glucane sont des unités N-acétyl-D-glucosamine, et qu'au plus tID % sont des unités D-glucosamine. 2908771 9 Avantageusement, la composition est une composition cosmétique, en particulier dermocosmétique ou dermatologique. De préférence le polysaccharide de l'extrait fongique de granulométrie fine est utilisé à une concentration comprise entre 0,01 et 5 10%, et de préférence entre 0,05 et 5%, en poids de la composition totale. L'invention concerne également l'utilisation d'une composition telle que définie ci-dessus pour exercer un soin cosmétique, de préférence dermocosmétique ou dermatologique, caractérisée en ce que le soin est 10 choisi parmi le groupe consistant en un soin du corps ou du visage, pour améliorer, notamment de manière durable et significative l'hydratation de la peau, augmenter le pouvoir de rétention de l'eau de la peau notamment à long terme, améliorer la fonction barrière de la peau, améliorer la protection de la peau et/ou les activités de défense de la peau, 15 notamment contre les agressions extérieures telles que les rayonnements, la sécheresse, la pollution, notamment par les métaux lourds, les radicaux libres, améliorer l'aspect de la peau, améliorer l'homogénéité de la peau, notamment en la rendant plus lisse, plus homogène, plus douce, plus saine, améliorer fa fermeté et la tonicité de la peau, et favoriser 20 l'accrochage de l'épiderme au derme. L'invention concerne également une composition telle que définie ci-dessus pour citmtnuer la profondeur les es ou ralentir ou prévenir 2908771 10 du système immunitaire, hypoglycémique, notamment dans le cas de diabète, et un effet de prévention et/ou de traitement, et/ou de lutte contre une pathologie choisie parmi le groupe consistant en la dyslipidémie, l'athérosclérose, l'obésité, d'une maladie liée à l'obésité, une 5 maladie cardiovasculaire, le syndrome métabolique, le diabète, et l'hyperuricémie. De préférence dans cette composition de complément alimentaire, le copolymère de l'extrait fongique de granulométrie fine est utilisé comme principe actif. 10 L'invention concerne également une composition pharmaceutique comprenant à titre de principe actif au moins un copolymère ou un extrait d'origine fongique, tel que défini précédemment. L'invention concerne notamment l'utilisation en l'ingénierie tissulaire d'un matériau poreux obtenu à partir du polysaccharide ou extrait 15 d'origine fongique selon la présente invention, et concerne donc également matériau poreux obtenu à partir du polysaccharide ou extrait d'origine fongique selon la présente invention. Ce matériau poreux peut être obtenu notamment par lyophilisation. L'invention concerne également l'utilisation d'au moins un 20 polysaccharide ou un extrait d'origine fongique, tel que défini précédemment comme excipient d'une composition, notamment d'une composition cosmétique, de préférence dermatologique ou 25 2908771 11 b) des étapes, simultanées, ou séparées indépendamment de leur ordre, de filtration, de séchage, de broyage, et de classification des particules, au départ du chitine-glucane sec ou solvaté, permettant d'obtenir une poudre de chitine-glucane de granulométrie dont au moins 70% en poids des 5 particules des particules obtenues ont une taille inférieure à 500 microns (pm), et de préférence inférieure à 355 microns (pm). De préférence l'étape b) du procédé de préparation de l'extrait fongique de granulométrie permet d'obtenir au moins 50%, de préférence 60%, et encore de préférence 70%, en poids des particules totales 10 obtenues, ayant une taille inférieure à 250 microns, de préférence inférieure à 125 pm. On peut ainsi à l'étape b) mettre en oeuvre une étape simultanée de filtration, de séchage, et de broyage, puis une étape séparée de classification. 15 L'invention concerne également le dispositif que nous appareillage pour mettre en oeuvre le procédé selon la présente invention. Description détaillée de l'invention 20 Les compositions selon l'invention permettent d'obtenir des formulations avec un toucher agréable et doux, ce qui est très avantageux dans le domaine de la cosmétique notamment. i po,- 1J:F 2908771 12 La solution proposée par les inventeurs est d'autant plus avantageuse dans la mesure où un copolymère chitine-glucane purifié issu de sources fongiques, notamment mais pas exclusivement, de type Ascomycète est disponible en grande quantité en tant que sous-produit 5 industriel. Il est notamment préféré d'utiliser comme source fongique le mycelium d'Aspergillus nier. Selon l'invention, le copolymère chitine-glucane extrait du mycelium de champignons de type Ascomycète peut être formulé aisément, bien 10 que non hydrosoluble, notamment sous forme d'une composition cosmétique. Les inventeurs ont découvert de manière surprenante que quand le composé chitine-glucane issu des sources de champignons se présente sous la forme d'une poudre de granulométrie fine, il est tout à fait adapté 15 à la préparation d'une composition permettant de résoudre les problèmes techniques mentionnés ci-dessus. La poudre de chitine-glucane avantageusement obtenue selon le procédé décrit dans la demande de brevet PCT W003/068824, ou dans la demande de brevet français FR 0507066 est préparée de manière à 20 obtenir une granulométrie fine et contrôlée notamment par des procédés de filtration, de broyage, de séchage et/ou de classification des particules. Lorsqu'une granulométrie fine est recherchée, on sélectionne un procédé 25 2908771 13 De préférence, on met en oeuvre un procédé de préparation de la poudre de chitine-glucane de manière à obtenir majoritairement des particules ayant une taille inférieure à 250 microns, Avantageusement, les particules selon la présente invention sont 5 constituées essentiellement de particules ayant une taille inférieure à 125 pm, voire 90 pm, et notamment sont obtenue après classification pour obtenir une distribution étroite. Il est possible de mettre en oeuvre le procédé de préparation de la poudre par l'une quelconque des techniques connues de l'homme du 10 métier. Il est avantageux de sélectionner une technique permettant de contrôler au mieux la granulométrie et de manière bien définie. Par granulométrie on entend la forme, plus ou moins sphérique, la taille et la distribution de taille des particules de la poudre de chitineglucane. Ce paramètre qui caractérise l'ingrédient en poudre influence 15 d'une part la manière dont on peut le formuler, c'est-à-dire l'incorporer dans une composition solide ou liquide comme une matrice alimentaire, une crème cosmétique, un liquide alimentaire ou cosmétique, un dispositif médical ou pharmaceutique. Selon la granulométrie obtenue, et notamment selon l'aspect ou la forme finale désirée, la composition 20 obtenue sera plus ou moins homogène. La granulométrie et la distribution de taille des particules sont caractérisées par les techniques classiques telles r3ue a diffnrton. de ,-iu 1 r `,te ', wa 2908771 14 homogène contenant le copolymère chitine-glucane. Cela permet notamment d'incorporer ce copolymère après formation d'une émulsion, même à une concentration élevée (par exemple 2%), et atteindre une texture parfaitement homogène et dont les qualités sensorielles (viscosité, 5 texture, toucher) sont excellentes. On utilise donc avantageusement les la fraction des particules ayant la taille la plus faible. Lorsque la taille des particules est plus importante, l'ingrédient n'apporte plus ces qualités sensorielles, le produit forme des grains palpables à l'étalement de la crème, et/ou la formulation n'est pas stable 10 dans le temps, ce qui n'est pas désiré dans le cas d'une composition topique, et notamment dans une crème de soin. Avantageusement, une poudre de granulométrie fine et contrôlée peut être utilisée pour la préparation d'aliments dits fonctionnels, comme des biscuits, pâtes, confiseries, barres diététiques, pains, boissons, 15 beurres, margarines, etc... Avantageusement, la poudre de granulométrie fine peut être mise en oeuvre sous la forme d'une dispersion aqueuse, et entrer dans la composition de dispositifs médicaux comme des systèmes cicatrisant et/ou hémostatiques. De manière surprenante, le chitine-glucane de 20 granulométrie fine peut être mise en oeuvre sous la forme d'un matériau poreux cohésif, présentant une bonne stabilité mécanique, et de porosité supérieure à 80%, de préférence supérieure à 90%, par des techniques Jnnees hornree eetie 2908771 15 obtenus est fonction des paramètres de formulation, notamment de la granulométrie du chitine-glucane, de la composition du mélange, de la concentration de la dispersion de départ, ainsi que des paramètres de mise en oeuvre de la dispersion. 5 Pour la préparation de produits dermocosmétiques et dermatologiques, le chitine-glucane de granulométrie fine, avec des particules de taille étant de préférence inférieure à 125 pm, possède avantageusement une bonne affinité à la fois avec des composantes présents en phase aqueuse et en phase huileuse, ce qui favorise le 10 procédé d'incorporation. La poudre de chitine-glucane de granulométrie fine peut être produite industriellement selon divers procédés, en fonction de la granulométrie visée, soit au départ du chitine-glucane en poudre sèche, soit au départ du chitine-glucane solvaté en milieu aqueux ou organique, 15 ou encore au départ du chitine-glucane incorporé dans un milieu plus complexe comme une émulsion huile dans eau ou eau dans huile. Les inventeurs entendent par procédés de préparation de poudre de granulométrie fine tous les procédés solide-liquide et solide-solide de filtration, de séchage, de broyage, d'homogénéisation, de réduction de 20 taille des particules, et de classification des particules, appliqués aux solides, aux solides solvatés, et aux milieux complexes solvatés tels que les émulsions, les suspensions colloïdales, etc. (- ho[ FJ 2908771 16 fragmentation pour obtenir des poudres de granulométrie fine et contrôlée peuvent être appliqués sur le produit totalement ou partiellement séché, ou sur le produit solvaté, comme par exemple les procédés de broyage à fléaux, à marteaux, à galets, à couteaux, à lames, à disque, à contre-jet 5 d'air, et les procédés de désintégration, par exemple aux ultrasons et de micronisation. Les différents procédés industriels de séparation des poudres peuvent être employés pour diminuer la largeur de la distribution de taille ou sélectionner une taille spécifique, comme par exemple avec des équipements de tamisage et de classification dynamique et statique. 10 Ainsi, la présente invention concerne un procédé pour obtenir une poudre de chitine-glucane d'origine fongique insoluble dans l'eau ou un solvant organique, ayant une granulométrie fine, pour préparer les particules du copolymère chitine-glucane stables dans une solution aqueuse ou organique notamment pour préparer une suspension ou 15 émulsion. L'étape permettant d'obtenir la poudre de granulométrie fine est réalisée avant ou après la préparation de l'émulsion ou de la suspension. Cette suspension ou émulsion contient des substances généralement utilisées dans le domaine la cosmétique et permettent 20 avantageusement la formulation d'une composition cosmétique. Des compositions cosmétiques contiennent généralement de 0,01 à 10% en poids des compositions selon h présente invention, notamment pport ::s-r,z)en sien ,01 sä. 2908771 17 La présente invention concerne en particulier un polysaccharide d'origine fongique comprenant un polymère comprenant des chaînes bêtaglucane, lesdites chaînes de bêta-glucane consistant essentiellement d'enchaînements d'unités D-glucose via des liaisons en position (1,3), et 5 de préférence comprenant au moins 80% en masse de chaînes bêtaglucane dont l'enchaînement de D-glucose est en position (1,3) par rapport au pourcentage de la masse total de bêta-glucane, notamment pour la fabrication d'une formulation cosmétique. Un copolymère chitine-glucane peut être avantageusement obtenu 10 selon le procédé décrit dans la demande de brevet PCT W003/068824, et la demande de brevet français FR 0507066 déposée par KitoZyme S.A. le 4 juillet 2005. Ce procédé est décrit en particulier dans la demande FR 0507066 pages 18, ligne 14 et suivantes. On utilise de préférence Aspergillus nier comme source fongique dans ce procédé. 15 L'enchaînement des unités D-glucose et la proportion entre les chaînes alpha(1,6)-chitine et beta-glucanes dépendent du champignon et de la souche. Par exemple, il a été montré par les inventeurs qu'un mycelium d'Aspergillus niger contient le copolymère chitine-glucane avec un rapport massique entre chitine et bêta-glucane entre 30:70 et 60:40, 20 avec un enchaînement des unités D-glucose principalement du type Péta( Le cop lv ère se présente généralement sous Forme d'une itur 2908771 18 La présente invention concerne un extrait, avantageusement purifié, de source fongique, et préférentiellement du mycellum de champignons de type Ascomycète comme d'Aspergillus piger. Les hydrolysats des extraits purifiés, c'est-à-dire les copolymères de chitine et 5 bêta-glucane de masse moléculaire inférieure, font également partie de l'invention. La disponibilité et la qualité en particulier d'Aspergillus r2/ger, qui est un co-produit de la production industrielle d'acide citrique à destination de l'industrie alimentaire et pharmaceutique, en font une matière première de 10 choix pour les usages en cosmétique. D'autres sources fongiques contenant les polysaccharides chitine et bêta-glucane peuvent également être exploitées, comme par exemple les Basidiomycètes, notamment les champignons Lentinula edodes (shiitake) et Agaricus bisporus. Les inventeurs entendent par polysaccharides d'origine 15 fongique les extraits purifiés de parois cellulaires de champignons composés majoritairement de polysaccharides de chitine et de bêtaglucane, sous forme de copolymères, et leurs dérivés. Les extraits purifiés comprennent une teneur de préférence en chitine-glucane supérieure à 70% en masse par rapport à la masse totale de l'extrait, de préférence 20 supérieur à 80%, de préférence supérieure à 85% et encore de préférence supérieure à 90%. s inventeurs entendent par chitine-glurane un ronolymère pur E !Hal plg ~cn 2908771 19 Il est généralement admis que les polysaccharides des parois cellulaires des champignons sont séparés en deux groupes selon leur solubilité en milieu alcalin, et que le squelette des parois cellulaires est insoluble. Il est également connu que la fraction insoluble est constituée 5 de polymères de chitine et de bêta-glucane, en proportions variables selon les espèces, que les unités bêta-glucane sont liées par des enchaînement de structure variable, et que la liaison entre les chaînons chitine et bêtaglucane est stable comme montré par exemple par Siestma Wessels pour Saccharomyces cerevLsiae (Zygomycete), Neurospora crassa 10 (Ascomycete), Aspergillus nidulans (Ascomycete) et Coprinus cinereus (Basidiomycete) [Siestma 3H & Wessels 3G. (1981) Solubility of (1,3)-beta-D-(1,6)-beta-D-glucane in fungal walls : importance of presumed linkage between glucan and chitin. (1981) Gen. Microbiol. 125 :209]. Il est connu que les chaînons chitine et bêta-glucane de la fraction insoluble 15 d'Aspergillus niger sont liés entre eux de manière covalente, comme cité par exemple par Stagg CM et Feather MS [Biochim. Biophys. (1973) Acta 320:64]. Des méthodes de détermination de la nature du lien covalent entre les chaînons chitine et bêta-glucane ont été décrites par exemple par Fontaine et al. pour Aspergillus fumigatus [Fontaine T, Simenel C, 20 Dubreucq G, Adam 0, Delepierre M, Lemoine J, Vorgias CE, Diaquin M Latgé 3P. (2000) Molecular organization of the alkali-insoluble fraction of Asperrii/us furn/gatus cell mall, J. Bk). Chem. 275:275941, et par K.P11er et 2908771 20 de ceux-ci. Ladite source de champignons doit être choisie de manière à permettre l'extraction d'un polysaccharide tel que défini ci-dessus et ci-après. Il existe des sources de champignons qui comprennent des bêtaglucanes, mais ces unités sont solubles dans l'eau notamment, ou ne 5 comprennent pas ou peu de chaînes de structure chitine, et ne permettent donc pas d'obtenir le polysaccharide de la présente invention. La présente invention couvre l'ensemble des champignons qui permettent d'obtenir le polymère chitine-glucane défini dans la présente demande. Le rapport entre la chitine et le bêta-glucane est compris entre 95:5 10 et 5:95, de préférence entre 70:30 et 10:90 (m/m). La partie chitine du copolymère chitine-glucane est composée de préférence d'au moins 85% d'unités N-acétyl-D-glucosamine et d'au plus 15% d'unitésD-glucosamine, préférentiellement d'au moins 90% d'unités N-acétyl-D-glucosamine et d'au plus 10% d'unités D-glucosamine. 15 L'invention concerne en particulier une suspension comprenant un solvant et au moins un copolymère de granulométrie fine selon la présente invention. Cette suspension est réalisée selon les méthodes classiques. L'invention concerne également une émulsion comprenant le 20 copolymère de granulométrie fine selon la présente invention. Cette émulsion est réalisée selon les méthodes classiques, avec soit l'eau soit l'huile comme phase continue. Aviln La qe useme'-s)olym a-g1 2908771 21 Les composés selon la présente invention sont préparés notamment sous forme de compositions cosmétiques ou pharmaceutiques, de préférence sous forme topique. De ce fait, pour ces compositions, l'excipient contient par exemple au moins un composé choisi parmi le 5 groupe consistant en les conservateurs, les antioxydants, les stabilisants, les conditionneurs, les hydratants, les émollients, les émulsifiants, les tensioactifs, les épaississants, les agents matifiant, les agents de texture, les agents de brillance, les agents filmogènes, les solubilisants, les pigments, les colorants, les parfums, et les filtres solaires. Ces excipients 10 sont de préférence choisis parmi le groupe consistant en les acides aminés et leurs dérivés, les polyglycérols, les esters, les polymères et dérivés de cellulose, les dérivés de lanoline, les phospholipides, les stabilisants à base de sucrase, les cires naturelles et synthétiques, les huiles végétales, les triglycérides, les insaponifiables, les silicones et ses dérivés, les 15 hydrolysais de protéines, les esters lipo/hydrosolubles, les betaines, les aminoxides, les glycines, et les parabens. Comme huiles utilisables dans la composition de l'invention, on peut citer par exemple: les huiles hydrocarbonées d'origine animale, telles que le perhydrosqualène; les huiles hydrocarbonées d'origine végétale, telles 20 que les triglycérides liquides d'acides gras comportant de 4 à 10 atomes de carbone comme les triglycérides des acides heptanoïque ou octanoïque ou encore, par exemple les huiles de tournesol, de maïs, de soja, de C ii "." S!r :eSal 2908771 22 gras; les huiles fluorées partiellement hydrocarbonées et/ou siliconées; les huiles de silicone comme les polyméthylsiloxanes (PDMS) volatiles ou non à chaîne siliconée linéaire ou cyclique, liquides ou pâteux à température ambiante, notamment les cyclopolydiméthylsiloxanes (cyclométhicones); 5 les silicones phénylées; et leurs mélanges. Différents excipients sont illustrés dans les exemples de formulations, Les autres corps gras pouvant être présents dans la phase huileuse sont par exemple les acides gras comportant de 8 à 30 atomes de carbone, comme l'acide stéarique, l'acide laurique, l'acide palmitique et 10 l'acide oléique; les cires comme la lanoline, la cire d'abeille, les cires de paraffine, ou les cires micro-cristallines, les cires synthétiques les résines de silicone; et les élastomères de silicone. Avantageusement, les compositions précitées sont formulées sous une forme choisie parmi le groupe consistant en une solution, aqueuse ou 15 huileuse, une crème ou un gel aqueux ou un gel huileux, notamment en pot ou en tube, notamment un gel douche, un shampoing ; un lait ; une émulsion, une microémulsion ou une nanoémulsion, notamment huile- dans-eau ou eau-dans-huile ou multiple ou siliconée ; une lotion, notamment en flacon de verre, de plastique ou en flacon doseur ou en 20 aérosol ; une ampoule ; un savon liquide ; un pain dermatologique ; une pommade . une mousse ; un produit anhydre, de préférence liquide, pâteux ou solide, par exemple sous forme de bâtonnet, notamment sous ,=r e 2908771 23 pathologie choisie parmi le groupe consistant en la dyslipidémie, l'athérosclérose, l'obésité, une maladie liée à l'obésité, une maladie cardio-vasculaire, le syndrome métabolique, le diabète, et l'hyperuricémie. Le contrôle de la granulométrie de la poudre de chitine-glucane, notamment 5 l'obtention d'une poudre de granulométrie fine, permet avantageusement une meilleure biodisponibilité du produit. L'invention concerne également une composition pharmaceutique ou de complément alimentaire comprenant à titre de principe actif au moins un polysaccharide ou un extrait d'origine fongique, tel que défini 10 précédemment La présente invention concerne également une méthode de traitement, de prévention, ou de lutte contre une pathologie, notamment celle mentionnée ci-dessus, comprenant l'administration par voie orale d'une quantité efficace un sujet en ayant besoin d'une composition 15 comprenant au moins un polysaccharide tel que défini dans la description ci-dessus et ci-après. La présente invention concerne également une méthode pour diminuer la masse ou prévenir ou lutter contre la prise de masse d'un être humain ou un animal, et de préférence un mammifère. Cette méthode 20 concerne notamment un soin esthétique. La présente invention concerne également une méthode de soin ro.métIque, notamment du corps ou du visage ces soins son ISenn insi 2908771 24 utilise avantageusement en cosmétique ou en pharmaceutique une quantité efficace comprise entre 0,01 et 10% du polysaccharide d'origine fongique selon la présente invention en poids de la composition totale, De préférence on utilise 0,05 à 5%, et encore de préférence de 0,1 à 2% en 5 poids de la composition totale. Par application topique, une à deux applications par jour est avantageuse. On utilise une quantité efficace généralement comprise entre 0,001 et 100% en poids du produit selon la présente invention par rapport au poids total de la composition à administrer sous forme de complément 10 alimentaire. Si les produits sont administrés sous forme de gélules, granules, ou comprimés, ils peuvent être utilisés purs ou à toute autre concentration, accompagnés d'autres composants actifs ou d'excipients. S'ils sont incorporés dans des aliments, la concentration en produit est inférieure à 15%, et de préférence inférieure à 10%. Il est avantageux 15 d'administrer entre 1 et 30 g du par jour par personne produit selon l'invention en fonction du poids de la personne. Sur les figures : 20 La figure 1 représente les conditions d'enregistrement du spectre de resoriance magnétique nucléaire du carbone 13 (13C-RMN) en phase solide d'l copnl\/mère de chitine-gîucane. polym 2908771 25 La figure 4 représente une photographie par microscopie électronique à balayage des particules selon la présente invention (lot L32), après séchage par un procédé d'atomisation (grossissement x 750). La figure 5 représente un graphique de profilométrie optique, 5 portant la hauteur des sillons (Rz) en fonction de la distance sur la peau, obtenus après 16 semaines sur 1 sujet (avant-bras gauche : crème T1,5 à base de chitine-glucane ; avant-bras droit : crème TO placébo). Les graphiques montrent que les microreliefs sont significativement atténués (valeur moyenne Rz 7.0 pm avec chitine-glucane versus 9.6 pm avec le 10 placébo) et que la peau est plus tendue. La figure 6 représente deux photographies par microscopie électronique à balayage d'un matériau poreux de chitine-glucane. La figure 7 représente une photographie par microscopie électronique à balayage d'un matériau poreux mixte de chitine-glucane et 15 de chitosane (chitine-glucan/chitosane 10:90, m/m) en coupe longitudinale. D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront clairement à l'homme de l'art suite à la lecture de la 20 description explicative qui fait référence à des exemples qui sont donnés seulement à titre d'illustration et qui ne sauraient en aucune façon limiter la portée rie l'inventî oie- r-H ,r -ist 2908771 26 D'autre part, dans les exemples, tous les pourcentages sont donnés en poids, sauf indication contraire, et la température est exprimée en degré Celsius sauf indication contraire, et la pression est la pression atmosphérique, sauf indication contraire. 5 EXEMPLES Le procédé d'obtention des copolymères chitine-glucane obtenus ci-dessous est décrit dans les demandes de brevets WO 03/068824 et FR 10 05.07066. EXEMPLE 1- Préparation d'un copolymère chitine-glucane à partir du mycelium d'Aspergillus niger 15 Une masse de 50 kg (poids sec) de mycelium d'Aspergillus ni'ger humide est mise en suspension dans une solution d'acide chlorhydrique 0.5 N, puis filtrée. La matière solide est ensuite mise en suspension dans une solution d'hydroxyde de sodium 1 N, puis filtrée. La matière solide est lavée 4 fois à l'eau, puis filtré à l'aide d'un filtre-presse et séchée à l'aide 20 dans un sécheur conique (conical dryer). Elle est ensuite mise en suspension dans l'éthanol, puis filtrée et séchée On obtient environ 15 kg de chitin-glucane (lot t25 , rées ble d 2908771 27 déterminée à partir de l'aire des quatre bandes de résonance suivantes : 104 ppm (carbone 1 de la chitine et du bêta-glucane), 23 ppm (carbone CH3 de la chitine), 55 ppm (carbone 2 de la chitine) et 61 ppm (carbone 6 de la chitine et du bêta-glucane), en prenant comme référence la chitine pure. Par exemple, on peut effectuer le calcul selon la Formule 1, où est l'aire des signaux des carbones, et où [ 'CG indique la valeur du rapport pour le chitine-glucane analysé et [ k pour la chitine de référence. CI est le carbone 1 de la chitine et du bêta-glucane et C2 est le carbone 2 de la chitine. [1' (C2)'CG Le rapport massique chitine/glucane des 8 lots de chitine-glucane du tableau 1 est en moyenne de 39:61 2 (m/m). La proportion d'unités D-glucosamine (NGIc), exprimée en Io molaire de la partie chitine, peut être estimée à partir du spectre RMN, 15 comme décrit par Heux et al. [Heux L, Brugnerotto J, Desbrières J, Versali MF & Rinaudo M. (2000) Solid state NMR for determination of the degree of acetylation of chitin and chitosan. Biomacromolecules 1:746]. La proportion d'unités D-glucosamine est déterminée par titrage potentiométrique par l'hydroxyde de sodium, en suspension dans un excès 20 d'acide chlorhydrique lu chi Ilucane (lot L26' et les d erre a hogènE e le [ I' (C1) [ I' (C1) 10 Glucane (mol%) I C2) C 1 00 mol%) = (formule 1) I(C1) 25 2908771 28 Tableau 1- Caractéristiques moléculaires et composition de différents lots de copolymère chitine-glucane L25 L26 27 2 29 0 L31 Rapport NGIc Cendres Protéine . Métaux chitine-glucane (titrage) Lapide lourds mol% o PPm) 41:59 4* 0 4,2 0,5 25 REVENDICATIONS 1. Polysaccharide d'origine fongique comprenant majoritairement un copolymère chitine-glucane, ledit polysaccharide étant sous forme de particules micrométriques dont au moins 70% en poids des particules ont une taille inférieure à 500 microns (pm), et de préférence inférieure à 355 microns (pm). 2. Polysaccharides, selon la revendication caractérisé en ce que le copolymère de chitine-glucane comprend un rapport entre les unités N-acétyl-D-glucosamine de la chitine et les unité D-glucose des betaglucanes compris entre 95:5 et 15:85. 3. Extrait fongique comprenant au moins un copolymère chitine-glucane sous forme de particules micrométriques dont au moins 70% des particules en poids ont une taille inférieure à 500 microns (pm), et de préférence inférieure à 355 microns (pm). 4. Extrait fongique, selon la revendication 3, caractérisé en ce que le polysaccharide d'origine fongique comprend plus de 70 % de copolymère chitine-glucane en masse par rapport à la masse totale de l'extrait d'origine fongique, de préférence supérieure à 85 ('lc) Ktrait fongique, s(- ndicat actérisé 65 2908771 66 6. Extrait fongique, selon l'une quelconque des revendications 3 à 5, caractérisé en ce que l'extrait fongique est un hydrolysat du copolymère chitine-glucane. 7. Extrait fongique, selon l'une quelconque des revendications 3 à 6, caractérisé en ce que le rapport entre la chitine et les bêta-glucanes est compris entre 95:5 et 15:85 (m/m), 8. Extrait fongique, selon l'une quelconque des revendications 3 à 7, 10 caractérisé en ce que les particules micrométriques ont au moins 50% en poids des particules ont une taille inférieure à 250 microns (pm), de préférence inférieure à 150 microns (pm). 9. Composition comprenant un polysaccharide tel que défini à la 15 revendication 1 ou 2 ou un extrait fongique tel que défini à l'une quelconque des revendications 3 à 8. 10. Composition, selon la revendication 9, caractérisée en ce que la composition est une composition cosmétique, en particulier 20 dermocosmétique ou dermatologique. 11. Composition, selon la revendication 9 ou 10, caractérisée en ce que le polysaccharide ou xtrait fongique est_ une concentration 0,01 )'/o, et de pl ncE et 5%, po 2908771 67 ou 2 ou au moins un extrait fongique tel que défini à l'une quelconque des revendications 3 à 8. 13. Utilisation d'une composition telle que définie selon l'une quelconque 5 des revendications 9 à 12, pour exercer un soin cosmétique, de préférence dermocosmétique ou dermatologique, caractérisée en ce que le soin est choisi parmi le groupe consistant en un soin du corps ou du visage, pour améliorer, notamment de manière durable et significative l'hydratation de la peau, augmenter le pouvoir de rétention de l'eau de la peau notamment 10 à long terme, améliorer la fonction barrière de la peau, améliorer la protection de la peau et/ou les activités de défense de la peau, notamment contre les agressions extérieures telles que les rayonnements, la sécheresse, la pollution, notamment par les métaux lourds, les radicaux libres, améliorer l'aspect de la peau, améliorer l'homogénéité de la peau, 15 notamment en la rendant plus lisse, plus homogène, plus douce, plus saine, améliorer la fermeté et la tonicité de la peau, et favoriser l'accrochage de l'épiderme au derme 14. Utilisation d'une composition telle que définie selon l'une quelconque 20 des revendications 9 à 12, pour diminuer les rides ou ralentir ou prévenir l'apparition des rides. UfiPatlOrI 'U composition t ~e que définie se l""ne quelconque me composition de c mentE 2908771 68 l'athérosclérose, l'obésité, d'une maladie liée à l'obésité, une maladie cardiovasculaire, le syndrome métabolique, le diabète, et l'hyperuricémie. 16. Composition de complément alimentaire comprenant à titre de principe actif au moins un polysaccharide tel que défini à la revendication 1 ou 2, ou un extrait d'origine fongique, tel que défini à l'une quelconque des revendications 3 à 8. 17. Composition pharmaceutique comprenant à titre de principe actif au 10 moins un polysaccharide tel que défini à la revendication 1 ou 2, ou un extrait d'origine fongique, tel que défini à l'une quelconque des revendications 3 à 8. 18. Utilisation d'une composition telle que définie selon l'une quelconque 15 des revendications 9 à 12, comme excipient d'une composition, notamment d'une composition cosmétique, de préférence dermatologique de dermocosmétique. 19. Procédé de préparation d'un extrait fongique comprenant : 20 a) l'extraction et la purification d'un copolymère chitine-glucane à partit- d'une biomasse fongique, ledit copolymère de cet extrait fongique étant insoluble dans l'eau ou un solvant organique, étapes.. ire ltanées, -)u éparées Mpen(jarrirrien _ rie 25