Brevet FR2903019A1 — publié le 20080104

La présente invention a pour objet l'utilisation d'un composé inhibiteur de l'anhydrase carbonique, pour la préparation d'un médicament destiné à traiter des pathologies correspondant à une dégénérescence du muscle squelettique. Les pathologies correspondant à une dégénérescence du muscle squelettique, peuvent être d'origine génétique ou non. Les myopathies dégénératives (ou atrophies musculaires) d'origine génétique sont des maladies héréditaires dues à des mutations dans des gènes codant pour des protéines musculaires. Il existe plusieurs dizaines de myopathies dégénératives d'origine génétique. Bien que le tableau clinique puisse varier entre deux maladies, elles ont en commun de conduire inexorablement à l'atrophie musculaire des muscles dits squelettiques. Cette atrophie musculaire (aussi appelée fonte musculaire) se traduit par un handicap de plus en plus important pour le patient, qui peut conduire à la mort lorsque les muscles respiratoires sont atteints. La plus connue d'entre les myopathies dégénératives d'origine génétique est la myopathie de Duchenne (DMD). Il n'existe pas à ce jour de traitement efficace contre ces maladies. Les cachexies, myopathies dégénératives (ou atrophies musculaires), non génétiques correspondent aux maladies conduisant à une fonte musculaire, indépendamment de l'atteinte primaire. La cachexie est notamment observée dans la plupart des cancers. Il n'existe pas de traitement efficace contre la cachexie cancéreuse. Il existe donc un besoin pour de nouveaux moyens de traiter ces maladies et pour de nouveaux médicaments adaptés à de tels traitements. Dans ce contexte et de façon totalement inattendue, l'inventeur de la présente demande de brevet a mis en évidence que les inhibiteurs de l'anhydrase carbonique, jusqu'alors connus en général pour leur activité diurétique et leur action positive sur la baisse de la pression intracrânienne et intra-oculaire, permettaient de réduire la fonte des muscles squelettiques. Par conséquent, la présente invention a pour objet l'utilisation d'un composé inhibiteur de l'anhydrase carbonique, pour la préparation d'un médicament destiné à traiter ou prévenir des pathologies correspondant à une dégénérescence musculaire des muscles squelettiques. 2903019 2 Les pathologies visées dans le cadre de l'invention sont dues à une dégénérescence musculaire du muscle squelettique. De telles dégénérescences peuvent être d'origine génétique, comme les myopathies musculaires, ou bien d'origine non génétique, par exemple d'origine cancéreuse, comme les cachexies. 5 En particulier, l'utilisation des composés inhibiteurs de l'anhydrase carbonique est particulièrement adaptée à la préparation de médicaments destinés à traiter les myopathies dégénératives d'origine génétique, et notamment la myopathie de Duchenne. L'anhydrase carbonique est une enzyme qui accélère la transformation du 10 dioxyde de carbone et de l'eau en bicarbonate et inversement. Différentes anhydrases carboniques sont présentes dans le corps humains et sont classées selon leur type (type I, II, III ...). Ces enzymes se rencontrent pratiquement dans le corps entier, mais principalement au niveau de l'oeil et des reins. Pour plus de détails, on pourra se référer à Medicinal Research Reviews, 2005, 25(2), 186-228. 15 L'activité de ces enzymes peut être bloquée par les inhibiteurs de l'anhydrase carbonique. Les inhibiteurs de l'anydrase carbonique appartiennent le plus souvent à la classe des sulfonamides, c'est-à-dire qu'ils comprennent un groupe ùSO2-NH-ou ùSO2-NH2. De tels inhibiteurs sont, le plus souvent connus, en tant que diurétiques de faible puissance et pour leur action sur la baisse de la pression 20 intracrânienne et intra-oculaire. Certains de ces composés sont utilisés en tant que médicament pour traiter le glaucome. La revue Carbonic Anhydrase Inhibitors , Medicinal Research, Reviews, 2003, 23(2), 146-189, à la quelle on pourra se référer, décrit différents inhibiteurs de l'anhydrase carbonique pouvant être utilisés dans le cadre de l'invention. Les 25 inhibiteurs de l'anhydrase carbonique décrits dans la revue Carbonic anhydrases : current state of the art, therapeutic applications and future prospects , Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry, June 2004, 19(3), 199-229, peuvent également être utilisés dans le cadre de l'invention. De façon avantageuse, on utilisera un composé choisi parmi les inhibiteurs 30 de l'anhydrase carbonique suivants, leurs sels, solvats et/ou hydrates pharmaceutiquement acceptables : 2903019 3 N-(5-sulfamoyl-1,3,4-thiadiazol-2-yl)éthanamide, également nommé acetazolamide (numéro CAS : 59-66-5), en particulier sous la forme d'un sel de sodium (numéro CAS : 1424-27-7) -4,5-dichlorobenzene-1,3-disulfonamide, également nommé dichlorophenamide, 5 dichlorphenamide ou diclofenamide (numéro CAS : 120-97-8) -N-(3-méthyl-5-sulfamoyl-1,3,4-thiadiazole-2-ylidène)éthanamide, également nommé méthazolamide (numéro CAS : 554-57-4) - acide 4-chloro-2-(2-furylméthylamino)-5-sulfamoyl-benzoique, également nommé furosemide (numéro CAS : 54-31-9) 10 -6-chloro-3,4-dihydro-2H-1,2,4-benzothiadiazine-7-sulfonamide-1,1-dioxyde, également nommé hydrochlorothiazide (numéro CAS : 8049-49-8) -6-éthoxy-2-benzothiazole-2-sulfonamide, également nommé ethoxyzolamide (numéro CAS : 452-35-7) - 4-(1,1-dioxothiazinan-2-yl)benzenesulfonamide, également nommé sultiame 15 (numéro CAS : 61-56-3) -4-chlorobenzene-1,3-disulfonamide, également nommé clofénamide (numéro CAS : 671-95-4) -2-ethylamino-4-methyl-5,5-dioxo-5À6,7-dithiabicyclo[4.3.0]nona-8, 10-diene-8-sulfonamide, également nommé dorzolamide (numéro CAS : 120279-96-1), en 20 particulier sous forme chlorhydrate. Dans le cadre de l'invention, on utilisera, de préférence, un inhibiteur de l'anhydrase carbonique humaine de type II (hCA II) correspondant à une forme cytosolique. A titre d'exemple de test permettant de vérifier si un composé inhibe la hCA II, on peut citer, à titre d'exemple, le test décrit dans J. Med. Chem., 2003, 25 46, 2197-2204. Selon une variante de l'invention, les composés utilisés dans le cadre de l'invention présenteront sur le test ci-dessus, un KI inférieur à 10 M, de préférence inférieur ou égale à 1 M et préférentiellement inférieur ou égal à 100 nM et, encore préférentiellement inférieur à 50 nM. 30 Les composés listés précédemment sont en général des médicaments commercialisés et pourront être administrés selon des formes pharmaceutiques connues pour d'autres pathologies. Les composés sont conditionnés en mélange 2903019 4 avec un ou plusieurs excipients pharmaceutiquement acceptables et les composés peuvent se trouver sous la forme de sels, solvats ou hydrates pharmaceutiquement acceptables. Ces compositions pharmaceutiques sont préparées selon les techniques classiques bien connues de l'homme de l'art. Les 5 excipients pharmaceutiques sont choisis selon la forme pharmaceutique et le mode d'administration souhaité, par exemple, administration orale, sublinguale, sous-cutanée, intramusculaire, intra-veineuse, topique ... A titre d'exemple d'excipients pharmaceutiquement acceptables, on peut citer la silice colloïdale anhydre, glycérol, lactose, magnésium stéarate, amidon de maïs, acide stéarique, 10 talc, hypromellose, polymère de vinylpyrrolidone et vinylacétate, cellulose microcristalline, macrogol 8000, povidone K 30, saccharose, dispersion de fer rouge oxyde dans le dioxyde de titane, titane dioxyde, saccharine sodique, mannitol, sorbitol, anis arôme, menthe arôme, sodium stéarylfumarate... Les compositions pharmaceutiques pour l'administration orale, sublinguale, 15 sous-cutanée, intramusculaire, intra-veineuse, topique, intratrachéale, intranasale, transdermique, rectale ou intraoculaire, comprenant le composé actif, peuvent être administrées sous formes unitaires d'administration, en mélange avec des supports pharmaceutiques classiques, aux animaux et aux êtres humains pour la prophylaxie ou le traitement des dégénérescences des muscles squelettiques. Les 20 formes unitaires d'administration appropriées comprennent les formes par voie orale telles que les comprimés, les gélules, les poudres, les granules et les solutions ou suspensions orales, les formes d'administration sublinguale, buccale, intratrachéale, intranasale, les formes d'administration sous-cutanée, intramusculaire ou intraveineuse et les formes d'administration rectale. Pour 25 l'application topique, on peut utiliser les composés selon l'invention dans des crèmes, pommades, lotions ou collyres. La dose sera adaptée à l'effet prophylactique ou thérapeutique souhaité, à rage et au poids du patient à traiter. De préférence, la dose journalière sera comprise entre 10 et 500 mg/kg/jour et répartie en 1 à 3 prises. Afin d'obtenir 30 l'effet prophylactique ou thérapeutique désiré, chaque dose unitaire peut contenir de 1 à 500 mg, de composé actif en combinaison avec un support 2903019 5 pharmaceutique. Cette dose unitaire peut être administrée 1 à 5 fois par jour de façon à administrer un dosage journalier permettant d'obtenir l'effet souhaité. Lorsqu'on prépare une composition solide sous forme de comprimés, on mélange l'ingrédient actif principal avec un véhicule pharmaceutique, tel que la 5 gélatine, l'amidon, le lactose, le stéarate de magnésium, le talc, la gomme arabique ou analogues. On peut enrober les comprimés de saccharose, d'un dérivé cellulosique, ou d'autres matières appropriées ou encore on peut les traiter de telle sorte qu'ils aient une activité prolongée ou retardée et qu'ils libèrent d'une façon continue une quantité prédéterminée de principe actif. 10 On obtient une préparation en gélules en mélangeant l'ingrédient actif avec un diluant et en versant le mélange obtenu dans des gélules molles ou dures. Les compositions pharmaceutiques contenant un composé de l'invention peuvent aussi se présenter sous forme liquide, par exemple, des solutions, des émulsions, des suspensions ou des sirops. Les supports liquides appropriés 15 peuvent être, par exemple, l'eau, les solvants organiques tels que le glycérol ou les glycols, de même que leurs mélanges, dans des proportions variées, dans l'eau. Une préparation sous forme de sirop ou d'élixir ou pour l'administration sous forme de gouttes peut contenir l'ingrédient actif conjointement avec un 20 édulcorant, acalorique de préférence, du méthylparaben et du propylparaben comme antiseptique, ainsi qu'un agent donnant du goût et un colorant approprié. Les poudres ou les granules dispersibles dans l'eau peuvent contenir l'ingrédient actif en mélange avec des agents de dispersion ou des agents mouillants, ou des agents de mise en suspension, comme la polyvinylpyrrolidone, de même qu'avec 25 des édulcorants ou des correcteurs de goût. Pour une administration rectale, on recourt à des suppositoires qui sont préparés avec des liants fondant à la température rectale, par exemple du beurre de cacao ou des polyéthylèneglycols. Pour une administration parentérale, on utilise des suspensions aqueuses, des solutions salines isotoniques ou des 30 solutions stériles et injectables qui contiennent des agents de dispersion et/ou des mouillants pharmacologiquement compatibles, par exemple le propylèneglycol ou le butylèneglycol. Le principe actif peut être formulé également sous forme de 2903019 6 microcapsules, éventuellement ave un ou plusieurs supports ou additifs, ou bien avec des matrices telles qu'un polymère ou une cyclodextrine (patch, formes à libération prolongée). Certains des composés inhibiteurs de l'anhydrase carbonique précédemment 5 cités, font déjà l'objet de médicaments commercialisés et pourront donc être utilisés sous des formulation pharmaceutiques déjà connues pour d'autres indications. L'acetazolamide est commercialisée, notamment, sous le nom de Defiltran ou Diamox . 10 L'hydrochlorothiazide est, par exemple, commercialisée sous le nom de Esidrex . La furosemide est, par exemple, commercialisée sous le nom de Furosemide ou Lasilix . Pour plus de détails sur ces compositions, on pourra consulter le VIDAL dans 15 son Edition 2006. L'activité de ces composés et leur action sur la fonte des muscles squelettiques ont été mises en évidence, par l'inventeur, dans un test effectué chez les nématodes qui jouent le rôle de modèle pour les myopathies dégénératives (Gaud A. et al. Prednisone reduces muscle degeneration in 20 dystrophin-deticient Caenorhabditis elegans, Neuromuscul. Disord. 2004, 14, 365-70). Les résultats ci-après sont donnés à titre d'illustration. Tests sur le modèle animal Caenorhabditis elegans 25 a) Méthode Les composés ont été testés sur une souche de nématode dépourvue de dystrophine (Gieseler et Current Biology, 2000, vol. 10, p1092-1097) et (Ségalat, Neuromuscular Disorders, 2002, Suppl: S105-9). Cette souche est utilisée comme modèle de myopathie dégénérative. Dans cette souche, jusqu'à 30 30% des cellules musculaires servant à la locomotion (muscles longitudinaux) dégénèrent à l'état adulte (7 jours à 15 C), ce qui se traduit par une paralysie progressive des animaux. 2903019 7 Les composés sont administrés par mélange avec la gélose sur laquelle sont cultivés les animaux. Ils pénètrent par diffusion à travers la cuticule des animaux. L'effet des composés sur la dégénérescence musculaire est évalué par 1) l'observation du phénotype des animaux (paralysie), et 2) par l'examen 5 cytologique de la dégénérescence musculaire au moyen de marqueurs musculaires : rodamine-phalloidine et anticorps anti-myosine. Cet examen permet de compter le nombre de cellules musculaires en dégénérescence ou mortes (Gieseler et a/. , 2000, supra). b) Résultats 10 Le tableau suivant donne les résultats obtenus en ce qui concerne la locomotion et la dégénérescence des animaux après 7 jours de culture à 15 C. Chacun des composés diminue la proportion d'animaux paralysés et la dégénérescence musculaire comme le montre le tableau ci-dessous. Nom de la molécule Concentration Diminution de (mg/ml) la dégénérescence en % acetazolamide 0,5 mg/ml 58 diclorophenamide 0,1 mg/ml 71 methazolamide 0,2 mg/ml 73 hydrochlorothiazide 0,1 mg/ml 44 ethoxyzolamide 0,5 mg/ml 51 Non traité - 0 15 Note : les concentrations figurant dans ce tableau sont les concentrations dans la gélose de culture. Les concentrations à l'intérieur de l'animal sont inconnues, car la méthode ne permet pas de les mesurer précisément. Les concentrations à l'intérieur de l'animal sont estimées à 100 à 1000 fois inférieures à celles du milieu de la gélose. 20 REVENDICATIONS 1 - Utilisation d'un composé inhibiteur de l'anhydrase carbonique, pour la préparation d'un médicament destiné à traiter ou prévenir des pathologies correspondant à une dégénérescence musculaire des muscles squelettiques. 2 - Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce le composé est un inhibiteur de l'anhydrase carbonique humaine de type II. 3 - Utilisation selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que le composé inhibiteur de l'anhydrase carbonique est une sulfonamide. 4 - Utilisation selon la revendication 3, caractérisée en ce que le composé inhibiteur de l'anhydrase carbonique est choisi parmi les composés suivants : acetazolamide, dichlorophenamide, methazolamide, furosemide, hydrochlorothiazide, ethoxyzolamide, sultiame, clofénamide, dorzolamide, leurs sels, solvats ou hydrates pharmaceutiquement acceptables. 5 - Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que le médicament est destiné au traitement ou à la prévention des myopathies musculaires d'origine génétique, et notamment la myopathie de Duchenne. 6 - Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que le médicament est destiné au traitement ou à la prévention des cachexies.