Brevet FR2900820A1 — publié le 20071116

Utilisation d'extraits de plantes à des fins cosmétiques ou dermatologiques et les compositions contenant ces extraits La présente invention se rapporte au domaine des nécessités de la vie et plus particulièrement 5 au domaine de la cosmétologie et de la dermatologie. La présente invention se rapporte plus particulièrement à l'utilisation d'extraits de plantes à des fins cosmétiques ou dermatologiques. 10 La présente invention a spécifiquement pour objet l'utilisation à des fins cosmétiques ou dermatologiques d'un extrait de Vernonia sublutea et/ou d'un extrait de Kalanchoe linearifolia, pris isolément ou sous forme de mélange. La présente invention a également pour objet la réalisation de compositions cosmétiques ou 15 dermatologiques contenant, à titre de principe actif, au moins un extrait de Vernonia sublutea et/ou au moins un extrait de Kalanchoe linearifolia. La Vernonia sublutea appartient à la famille des Astéracées. Le genre des Vernonia renferme plus de mille espèces à travers les régions tropicales et chaudes, jusqu'en Amérique du Nord. 20 Plusieurs principes actifs contenus par diverses espèces de Vernonia ont déjà été décrits, notamment des sesquiterpène lactones ayant une activité antitumorale ou antihépatotoxique (Babalola O.O. et. al., Afr. J Med. Med. Sci. 2001, 91-93). Des extraits de Vernonia comme Vernonia cinerea ou Vernonia scorpioides ont d'autre part montré une activité anti-inflammatoire ou cicatrisante (Mazumder U.K. et. al., Phytomedicine 2003, 185-188 ; Leite 25 S.N. et. al., Fitoterapia 2002, 73, 496-500). Vernonia sublutea est utilisée en médecine traditionnelle à Madagascar, notamment pour ses propriétés tonifiantes de la peau. 30 Kalanchoe lineurifolia appartient à la famille des Crassulacées. Le genre Kalanchoe comprend approximativement 120 espèces, localisées majoritairement en Afrique, plus particulièrement à Madagascar. Des extraits de Kalanchoe comme Kalanchoe brasiliensis ont déjà montré une activité anti-inflammatoire (Mourâo R.14. et. al., Phytotherapy Research 1999, 352-354). La médecine traditionnelle malgache utilise le jus issu des fleurs fraîches broyées de Kalanchoe linearifolia en application topique, notamment pour le traitement de l'eczema. Bien que certaines espèces apparentées soient connues, aucune littératurc 3pécifiquo ne décrit les propriétés cosmétiques ou dermatologiques de Vernonia sublutea et de Kalanchoe linearifolia. Un composé original, le guaïanolide (lactone sesquiterpénique), isolé des feuilles de Vernonia sublutea a été décrit, sans mentionner d'activité spécifique (Mompon B., Toubiana R., Tetrahedron 1976, 33, 2199-2203). Or, la Demanderesse a constaté que des extraits de Vernonia sublutea et des extraits de Kalanchoe linearifolia présentent des propriétés intéressantes, notamment en terme d'activité anti- inflammatoire et cicatrisante. D'une manière générale, les extraits de Vernonia sublutea et de Kalanchoe linearifolia ont une toxicité très faible ; ils sont aptes à une utilisation cosmétique ou dermatologique. Un objet de la présente invention est l'utilisation d'un extrait de Vernonia sublutea, pur ou sous la forme d'une composition, à des fins cosmétiques ou dermatologiques. Un autre objet de la présente invention est l'utilisation d'un extrait de Kalanchoe linearifolia, pur ou sous la forme d'une composition, à des fins cosmétiques ou dermatologiques. Les utilisations cosmétiques et dermatologiques considérées pour ces extraits de plantes concernent notamment le traitement de l'hypersensibilité cutanée, du vieillissement cutané et 25 la réparation cutanée. Les utilisations cosmétiques comprennent, d'une manière générale et non exhaustive, le traitement préventif et/ou curatif des peaux sensibles et intolérantes, des peaux hyperréactives, des peaux sujettes aux rougeurs et des peaux grasses à imperfections. Elles 30 comprennent également le traitement préventif et/ou curatif des peaux marquées par les signes du vieillissement, tels que l'amincissement de la peau, les rides et ridules, le flétrissement de la peau ou le manque d'élasticité. 3 2900820 Les utilisations dermatologiques comprennent, de manière non exhaustive, l'usage dans les cas de dermatite atopique (eczema), de psoriasis, de prurit, de rosacée, de dermite séborrhéique, d'acné et pour la cicatrisation des plaies. 5 Un autre objet de la présente invention est la réalisation de compo3itions cosmétiques ou dermatologiques destinées à une application topique, contenant, à titre de principe actif, au moins un extrait de Vernonia jublutea et/ou au moins un extrait de Kalanchoe linearifolia, en association ou en mélange avec au moins un excipient et/ou véhicule approprié. 10 Un extrait de Vernonia sublutea ou de Kalanchoe linearifolia utilisé selon l'invention peut être préparé à partir de matériel végétal issu de la plante entière ou de partie de plante comme les feuilles, les tiges, les fleurs, les pétales, les fruits ou les racines. Selon une forme préférentielle de l'invention, un extrait de Vernonia sublutea ou de 15 Kalanchoe linearifolia est préparé à partir de matériel végétal issu des feuilles et des tiges de la plante. Toute méthode d'extraction connue de l'homme du métier peut être utilisée pour préparer un extrait de Vernonia sublutea ou de Kalanchoe linearifolia utilisé selon l'invention. 20 On peut notamment utiliser les méthodes d'extraction par des solvants comme l'eau, les alcools ou les solvants organiques. On peut également utiliser des mélanges de ces différents solvants, comme par exemple des mélanges hydroalcooliques. Les extractions peuvent notamment avoir lieu à température ambiante ou à une température plus élevée, selon le point d'ébullition du solvant utilise. Préférentiellement, les extractions ont lieu à une température comprise entre 20 et 70 C. Parmi les alcools pouvant être utilisés comme solvant d'extraction, on peut notamment citer 30 l' éthanol. Parmi les solvants organiques pouvant être utilisés comme solvant d'extraction, on peut notamment citer l'acétate d'éthyle, le dichlorométhane et les alcanes comme l'hexane, le cyclohexane, l'heptane ou l'octane. 4 2900820 On peut également réaliser une série d'extractions successives par différents solvants, chaque phase d'extraction étant concentrée et le concentrât étant soumis à une nouvelle extraction par un solvant différent. Cette méthode permet de réaliser plusieurs extraits au contenu 5 spécifique, pouvant présenter des prupi iétés originalcs. Par exemple, on peut effectuer une première extraction du matériel végétal à l'aide d'un solvant alcoolique ou hydroalcoolique comme l'éthanol ou un mélange éthanol/eau, concentrer la phase d'extraction obtenue et effectuer une extraction du concentrât à l'aide 10 d'un solvant organique, comme un alcane ou l'acétate d'éthyle. Cette opération peut être répétée plusieurs fois à l'aide de différents solvants. Selon une forme de l'invention, un extrait de Vernonia sublutea constitue le principe actif des compositions selon l'invention. Selon une autre forme de l'invention, un extrait de Kalanchoe linearifolia constitue le principe actif des compositions selon l'invention. Selon une autre forme de l'invention, le principe actif des compositions selon l'invention est 20 constitué d'une association d'un extrait de Vernonia sublutea avec un extrait de Kalanchoe linearifolia. Selon une autre forme de l'invention, le principe actif des compositions selon l'invention est constitué de l'association d'un extrait de Vernonia sublutea et/ou d'un extrait de Kalanchoe 25 linearifolia avec un ou plusieurs autres composés naturels ou synthétiques, purs ou sous forme d'extraits végétaux, d'action complémentaire, similaire ou synergique. Selon une forme préférentielle de l'invention, le principe actif des compositions selon l'invention est constitué de l'association d'un extrait de Vernonia sublutea et/ou d'un extrait de Kalanchoe linearifolia avec un extrait de Sida acuta. Cette plante tropicale appartient à la famille des Malvacées. Des extraits de cette plante présentent également des propriétés anti-inflammatoires et cicatrisantes. 15 5 2900820 Un extrait de Sida acuta utilisé selon l'invention peut être préparé à partir de matériel végétal issu de la plante entière ou de partie de plante comme les feuilles, les tiges, les fleurs, les pétales, les fruits ou les racines. 5 Selon une forme préférentielle de l'invention, un extrait de Sida ueutu cst préparé à partir de matériel végétal issu des feuilles et des tiges de la plante. Toute méthode d'extraction connue de l'homme du métier peut être utilisée pour préparer un extrait de Sida acuta utilisé selon l'invention, notamment les méthodes décrites ici pour la 10 préparation d'extraits de Vernonia sublutea ou de Kalanchoe linearifolia. Un extrait de Vernonia sublutea etlou un extrait de Kalanchoe linearifolia ou une composition contenant l'un au moins de ces extraits, sont utilisés selon l'invention en application topique sur la peau et/ou les ongles et/ou les cheveux et/ou les muqueuses 15 externes. La quantité d'extrait utilisable selon l'invention peut varier dans une large mesure en fonction de l'effet recherché. 20 Pour donner un ordre de grandeur, on peut utiliser l'extrait à l'état pur en une quantité représentant de 0,0001 à 20% du poids total de la composition, et préférentiellement en une quantité représentant de 0, 01 à 10% du poids total de la composition. Les compositions selon l'invention comprennent un support cosmétiquement ou 25 dermatologiquement acceptable, en association ou en mélange avec le principe actif. Elles peuvent renfermer les adjuvants couramment utilisés dans les domaines cosmétiques et dermatologiques, comme par exemple des agents émollients ou adoucissants, des gélifiants, des antioxydants, des solvants, des filtres, des conservateurs, des pigments ou des parfums. Elles peuvent se présenter sous une forme compatible avec une application topique, comme 30 les solutions aqueuses, hydroalcooliques ou huileuses, les dispersions, les suspensions, les émulsions huile dans eau ou eau dans huile, les gels aqueux ou huileux, les crèmes, les laits, les pommades, les lotions, les pâtes, les poudres, les mousses, les sticks ou les aérosols. 6 2900820 Les propriétés pharmacologiques, notamment anti-inflammatoires et cicatrisantes des compositions selon l'invention, conduisent à des utilisations cosmétiques telles que le traitement préventif et/ou curatif des troubles de la peau, comme par exemple les peaux sensibles et intolérantes, les peaux hyper-réactives, les peaux sujettes aux rougeurs et/ou les 5 peaux grasses à imperfections, amsi que le traitemenl piéveiitif ct/ou curatif des peaux marquées par les signes du vieillissement, comme la peau amincie, les rides et ridules, la peau flétrie ou manquant d'élasticité. Les propriétés notamment anti-inflammatoires et cicatrisantes des compositions selon 10 l'invention conduisent à des utilisations dermatologiques telles que l'usage dans les cas de dermatite atopique (eczema), de psoriasis, de prurit, de rosacée, de dermite séborrhéique, d'acné et pour la cicatrisation des plaies. De manière préférée, les compositions selon l'invention destinées principalement à un usage 15 anti-inflammatoire, contiennent au moins un extrait de Kalanchoe linearifolia, éventuellement associé à un extrait de Vernonia sublutea et/ou de Sida acuta, De manière préférée, les compositions selon l'invention destinées principalement à un usage cicatrisant, contiennent au moins un extrait de Vernonia sublutea, éventuellement associé à un 20 extrait de Sida acuta et/ou de Kalanchoe linearifolia. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter : Exemple 1 : Réalisation d'un extrait de plante utilisé selon l'invention 25 Ces méthodes peuvent être appliquées aussi bien à la réalisation d'un extrait de Vernonia sublutea qu'à la réalisation d'un extrait de Kalanchoe linearifolia ou de Sida acuta. La matière végétale utilisée est issue des feuilles et des tiges de la plante. Exemple 1.1 : Réalisation de l'extrait brut (fraction fl) de Vernonia sublutea 30 1100 g de matière végétale séchée sont dispersés dans 5 L d'éthanol à 70 . Le mélange cst agité durant 1 heure à 50 C, puis filtré sur entonnoir, le résidu solide étant rincé par 2 L d'éthanol. La phase alcoolique est concentrée sous pression réduite. Le résidu est repris dans 1,5 litre d'eau et lyophilisé. 10 g d'un solide brun sont obtenus. Dans les exemples suivants, cet extrait sera dénommé fraction fl . 7 2900820 Les molécules suivantes ont été identifiées dans l'extrait fl de Vernonia sublutea : OH ~OH HO OH O HO COOH O HO" 0 OH 1 OH OH Lutéoline [491-70-3] (Flavonoïde) Acide chlorogénique [327-97-9] (Acide phénolique) HO HO Acide 3,5-dicafféolyquinique (Acide phénolique) OH OH HO HO 13 -Amyrine [5 59-7 0-6] 5 (Triterpène) Lupéol [545-47-1] (Triterpène) OH OH HO OH O HO OH O Kaempférol [520-18-3] (Flavonoïde) Rutine [153-18-4] (Flavonoïde) 10 La fraction fl de Kalanchoe linearifolia est obtenue de manière similaire. 8 2900820 Exemple 1.2 : Réalisation de l'extrait à l'aide de solvants peu polaires (fraction f2) de Vernonia sublutea La fraction fl précédemment obtenue est mise en solution dans 500 mL d'éthanol. La solution 5 est extraite par 3 x 200 mL d'hexane. Les phases hexaniqucs sont rassemblées puis concentrées. 2,9 g d'un produit visqueux sont obtenus. Dans les exemples suivants, cet extrait sera dénommé fraction f2 . La fraction f2 de Kalanchoe linearifolia est obtenue de manière similaire. 10 Exemple 1.3 : Réalisation de l'extrait à l'aide d'un solvant de polarité intermédiaire (fraction 13) de Vernonia sublutea La phase éthanolique de l'étape précédente est concentrée sous pression réduite et reprise dans 500 mL d'eau. Cette solution aqueuse est extraite par 3 . 200 mL d'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont rassemblées puis concentrées. 1,1 g d'un produit visqueux sont 15 obtenus. Dans les exemples suivants, cet extrait sera dénommé fraction f3 . La fraction f3 de Kalanchoe linearifolia est obtenue de manière similaire. Exemple 1.4 : Réalisation d'un extrait hydrosoluble (fraction f4) de Vernonia sublutea La phase aqueuse de l'étape précédente est lyophilisée. 13,8 g d'un solide brun sont obtenus. 20 Dans les exemples suivants, cet extrait sera dénommé fraction f4 . La fraction f4 de Kalanchoe linearifolia est obtenue de manière similaire. Exemple 1.5 : Réalisation d'un extrait (fraction f5)de Vernonia sublutea 100 g de matière végétale séchée sont dispersés dans 2, 5 L d'heptane. La suspension est 25 soumise à une extraction au soxhlet à reflux du solvant pendant 4 heures. Après filtration sur entonnoir, la matière végétale est récupérée et ajoutée à I L d'éthanol à 70 . Le mélange est agité durant 7 heures au reflux du solvant, puis filtré sur entonnoir. Le résidu solide est ajouté à 1 L d'éthanol à 70 et le mélange est laissé au repos durant 3 jours. Après filtration, les phases alcooliques sont rassemblées et concentrées sous pression réduite. Le résidu est repris 30 dans 1,5 litre d'eau et lyophilisé. 6 g d'un solide brun sont obtenus. La composition de cet extrait est très proche de celle de la fraction O. La fraction f5 de Kalanchoe linearifolia est. obtenue de manière similaire. 9 2900820 Exemple 2 : Evaluation de l'activité anti-inflammatoire d'extraits de Vernonia sublutea et d'extraits de Kalanchoe linearifolia 1- OBJECTIFS 5 Il s'agit de tester les fractions de Vernonia sublutea (VSU) et de Kalanchoe linearifolia (KLN) dans un test discriminatoire anti-inflammatoire. Les fractions VSU fl, f2, f3, f4 et les fractions KLN fl, f2, f3, f4 ont été étudiées. 2-CONDITIONS EXPERIMENTALES 10 L'inflammation est provoquée par injection intra-péritonéale d'une solution d'acide acétique 0,6% qui provoque une inflammation du réseau mésentérique chez la souris Swiss. Cet état inflammatoire se traduit par une augmentation de la perméabilité capillaire de la paroi endothéliale avec pour conséquence un chimiotactisme accru. Le témoin de cette augmentation de la perméabilité, est le Bleu Evans, colorant injecté au préalable par voie 15 intraveineuse dans la veine caudale des souris. Une substance à caractère anti-inflammatoire réduit cette perméabilité et par conséquent 1'invasivité par le colorant de la cavité abdominale (mesure par D.O.) 3-METHODOLOGIE 20 3.1-Plan expérimental 1 dose unique a été testée dans cette étude: 1 g/kg (n = 6) la concentration en Bleu Evans (BE) sera déterminée par une méthode colorimétrique. Le produit de référence utilisé pour évaluer les extraits est la phénylbutazone (PNB) à la dose de 100 mg/kg. 25 3.2-Critère d'évaluation La réduction de l'inflammation se traduit par une diminution du passage du colorant (Bleu d'Evans) dans la cavité abdominale donc de sa concentration dans l'exsudat. 3.3-Pertinence de la méthode Ce test est très utilisé pour évaluer un nouvel anti-inflammatoire en première intention. II a 30 été décrit par Whittle pour la première fois en 1964 et est encore largement utilisé en screening d'évaluation. 10 2900820 3.4-Déroulement de l'essai 3.4.1 Race de souris utilisée Des souris des deux sexes, de race Swiss pesant entre 27 et 30 g ont été utilisées. Dix huit heures avant l'expérience, les animaux ont été mis à jeun, tout en ayant un accès 5 libre à l'eau. Les animaux ont été répartis par lot de 6 souris, un lot ayant reçu uniquement de l'eau distillée, a servi de lot témoin. 3.4.2 Voie d'administration des extraits Ces extraits ont été administrés par voie orale, par gavage. Ils ont été dilués dans de l'eau 10 distillée à la dose de 1 g/kg. 4 lots de traités sont ainsi constitués. La phénylbutazone (PNB) a été utilisée à la dose de 100 mg/kg comme produit de référence. 3.5 -Protocole expérimental 3.5.1 Perméabilité capillaire 45 minutes après l'administration des extraits, une solution de colorant (du bleu d'Evans : BE) à 15 la concentration de 0.5% préparée dans une solution physiologique de NaCl (0.9%) a été injectée par voie intraveineuse dans la veine caudale des souris à raison de 10 ml/kg de poids corporel. 15 minutes après l'injection du BE, une solution d'acide acétique (0.6%) a été injectée par voie intra-péritonéale à raison de 10 ml/kg. 20 Après 30 minutes, les animaux ont été sacrifiés et leur cavité abdominale a été rincée avec 5 ml d'eau distillée contenant 500 UI d'héparine. L'eau de rinçage a été quantitativement collectée et centrifugée à la vitesse de 2000 t/min La concentration en BE dans le surnageant a été déterminée à l'aide d'un spectrophotomètre à la longueur d'onde de 620 nm (Whittle, 1964). 25 L'activité inhibitrice des extraits de plantes ainsi que celle de la substance de référence a été exprimée en pourcentage de la perméabilité capillaire chez les animaux traités par rapport au témoin. 3.5.1 Calcul du pourcentage d'inhibition Pourcentage d'inhibition = 1 - (DO2/DO1 x 100) 30 Où: DO1= la moyenne de la densité optique du BE chez les animaux témoins DO2 = 1 a moyenne de la densité optique du BE chez les animaux traités. Les activités des différents extraits ont été comparées à celle du PNB. 11 2900820 4- RESULTATS ET DISCUSSION : VSU Le tableau 1 ci-dessous montre les variations individuelles de l'inhibition de la perméabilité capillaire provoquée par l'acide acétique injecté par voie i.p. chez la souris, après 5 administration per os de différentes fractions. Chaque valeur est la moyenne de 6 observations. EXTRAIT PNB (0,1 g) VSU VSU VSU VSU Excipient n = 6 fl f2 f3 f4 % Inhibition 58,75 21,7 17,7 25,2 2,5 -1,9 Moyenne f s.e.m. +11,6 f3 +2,1 3,6 +5,6 +0,98 `t '//témoins P Les fractions VSU fl et f3 testées dans cet essai témoignent d'une activité anti-inflammatoire dans 10 le cadre de ce test de screening, à la dose élevée de lg/kg (extraits bruts non connus quant à leur teneur en actifs). Dans ce test, le PNB à la dose de 0.1 g/kg provoque une inhibition de l'inflammation à l'acide acétique à la valeur de 58,75% par rapport au groupe d'animaux témoins non traités. L'effet anti-inflammatoire des fractions fl et f3 est modéré ruais réel. Les fractions f2 et f4 15 doivent être considérées comme inactives. Conclusion : L'activité anti-inflammatoire de VSU est confirmée, surtout en ce qui concerne la fraction f3. Cette propriété est toutefois rnodérée. 20 5- RESULTATS ET DISCUSSION : KLN Le tableau 2 ci-dessous montre les variations individuelles de l'inhibition de la perméabilité capillaire provoquée par l'acide acétique injecté par voie i.p. chez la souris, après administration per os de différentes fractions. Chaque valeur est la moyenne de 6 observations. 25 12 2900820 EXTRAIT PNB (0,1 g) KLN KLN KLN KLN Excipient n = 6 fl f2 f3 f4 témoins % Inhibition 71,9 53,9 17,7 61,3 33 -3,1 Moyenne d:9,3 2,9 4,7 X6,5 6,6 1,22 s.e.m. t'//témoins P Exemple 3 : Evaluation de l'activité cicatrisante d'extraits de Vernonia sublutea et de Kalanchoe linearifolia 1- OBJECTIFS 20 Evaluer comparativement in vivo chez la souris la potentialité accélératrice de la néoformation de tissus dermiques et épidermiques au moyen des fractions de Vernonia sublutea (VSU) et de Kalanchoe linearifolia (KLN) fl, f2, f3, f4, en comparaison avec : un groupe recevant un produit de référence (TECA 1% - principe actif du Madécassol ROCHE-NICHOLAS), 25 un groupe traité uniquement par l'excipient des extraits, un groupe neutre ne recevant aucun traitement. 13 2900820 2-CONDITIONS EXPERIMENTALES Les plaies ont été obtenues par excision de la peau après une légère anesthésie à l'éther. La surface initiale des plaies est de 12,5 mm2, délimitées avec un tampon d'encre de diamètre égal à 4mm. 5 Les extraits ont été préparés sous foiiiie d'onguent, avec pour excipient, un mélange de lanoline-vaseline-eau (40 / 50 / 10), à un concentration de 10% pour les extraits fl. L'extrait fl est expérimenté à 10%, les fractions f2 à f4, à 5% et le TECA à 1%. 3-METHODOLOGIE 10 3.1- Plan expérimental - Période de préparation des animaux en expérience (10 jours) Préparation des onguents (2 jours) -Durée prévue de l'expérimentation (4 semaines) - Exploitation des résultats (1 semaine). 15 3.2 ù Critères d'évaluation - Durée de la cicatrisation totale Evolution de la surface des plaies 3.3 - Pertinence de la méthode L'évaluation de l'effet d'un cicatrisant dans le processus réparatoire naturel, peut être faite 20 avec une méthode telle que l'excision linéaire. Toutefois, le choix s'est porté sur la technique de la plaie circulaire qui présente l'avantage d'une meilleure précision de mesure, du fait de la continuité du processus de reconstitution jusqu'au stade de fermeture totale de la plaie 3.4 - Déroulement de l'essai 3.4.1-Manipulation des animaux 25 Par série de manipulations, les extraits ont été évalués systématiquement par rapport au produit de référence, le TECA, et les deux groupes témoins évoqués en 1. Après rasage, les animaux sélectionnés (Souris Swiss : 4 mâles et femelles n = 8 d'un poids de 23 grammes +/-3) sont légèrement anesthésiés à l'éther, puis les excisions de la peau sont faites avec une paire de ciseaux chirurgicaux. 30 Les plaies sont pratiquées au niveau de l'omoplate, région non accessible au grattage. Chaque animal est placé dans une cage individuelle, où il reçoit de la nourriture granulée et de l'eau à volonté, durant tout le traitement jusqu'à la cicatrisation totale. Les applications ont débuté 24 heures après l'excision. 3.4.2-Evaluation de la cicatrisation 14 2900820 Avant chaque mesure, les croûtes sont humidifiées avec de l'eau distillée et enlevées pour la précision des mesures. Les extraits (ou le produit de référence) sont appliqués sur les plaies quotidiennement (7/7 jours), par étalement en couche fine et continue de l'onguent au moyen d'une spatule. 5 Le relevé de la surface des plaies a été fait par planimétrie directe sur un papier millimétré semi-transparent. 3.5 û Analyse des résultats Les résultats obtenus ont été analysés statistiquement par analyse de variance suivi d'un "t" test de Student. Le degré de signification a été fixé pour S à une valeur de P maximum selon ce protocole, La comparaison de ces 2 groupes montre une différence non significative. 4.2 - Comparaison de l'activité des fractions avec le produit de référence VSU (5%), l'extrait brut fl a témoigné d'une activité cicatrisante moyenne mais significative 5 (raccourcissement du temps de 26,6% confie 50% pour le TECA). La fraction la plue active est f3, qui permet une cicatrisation complète en 19 jours. 4.3 - Cinétiques de cicatrisation La cicatrisation est progressive aussi bien en qui concerne le TECA, que la fraction f3 de VSU. C'est entre le 7ème et le 15è' jour que le TECA distance VSU dans la 10 phase de comblement. Dans la phase tardive de reconstitution du l'épiderme, les cinétiques sont comparables. Conclusion : L'activité cicatrisante de VSU est confirmée, surtout en ce qui concerne la fraction f3. 15 5- RESULTATS ET DISCUSSION : KLN Les résultats obtenus après application journalière des préparations d'extraits ainsi que de l'excipient sont résumés dans le Tableau 4 : durée moyenne de lacicatrisation à 100% des plaies provoquées par excision de la peau chez la souris (moyenne écart standard à la moyenne, n = 8). Produit TECA KLN KLN KLN KLN Excipient Neutre fl f2 f3 f4 Moyenne 14 24 21 23 24 25 28 (jours) s.e.m. 0,75 0,78 0,93 0,75 1,02 1,27 1,05 `t' Student // p maximum selon ce protocole. La comparaison de ces 2 groupes montre une différence non significative. 5.2 - Comparaison de l'activité des fractions avec le produit de référence KLN (5%), l'extrait brut fl n'a témoigné d'aucune activité cicatrisante significative. 5 Aucune des tractions f2 à f4 n'est différentiellernenl aetive. 5.3 - Cinétiques de cicatrisation La cicatrisation est progressive aussi bien en qui concerne le TECA, que la fraction f3 de KLN. C'est entre le 7eme et le 15eme jour que le TECA distance KLN dans la phase de comblement. Dans la phase tardive de reconstitution du l'épiderme, les 10 cinétiques sont comparables. Conclusion : L'activité cicatrisante de KLN n'est pas significative. Exemple 4: Composition cosmétiques et dermatologiques contenant des extraits de Vernonia sublutea et de Kalanchoe linearifolia 15 Réalisation d'un onguent : Dénomination INCI Concentration (%) Petrolatum 25 û 75 Paraffinum liquidum 15 û 30 Polydecene 5 û 20 Dipentaerythrityl pentahydroxystearate / 1 û 3 isostearate Glycerin 1 û 10 Vernonia sublutea 0,1 û 5 Kalanchoe linearifolia 0,1 û 5 TOTAL Qsp 100 17 2900820 Réalisation d'une émulsion : Dénomination INCI Concentration (%) Caprylic/capric triglyceride 5 ù 15 Stearalkonium hectorite / propylene carbonate 1 ù 10 Myristyl myristate 1 ù 5 Hexyl decyl stearate 5 ù 15 1 Isostearyl diglyceryl succinate 1 ù 10 Vernonia sublutea 0,1 ù 5 Kalanchoe linearifolia 0,1 ù 5 Aqua Qsp 100 Les extraits de plantes utilisés ici sont les fractions f5. 5 REVENDICATIONS 1. Compositions cosmétiques ou dermatologiques destinées à l'application topique, caractérisées en ce qu'elles renferment, à titre de principe actif, au moins un extrait de Vernonia sublutea, en association ou en mélange avec un excipient ou véhicule approprié. 2. Compositions cosmétiques ou dermatologiques selon la revendication 1, caractérisées en ce qu'elles renferment en outre un extrait de Kalanchoe linearifolia 3. Compositions cosmétiques ou dermatologiques selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisées en ce qu'elles renferment en outre un extrait de Sida acuta. 15 4. Compositions cosmétiques ou dermatologiques selon l'une des revendications précédentes, caractérisées en ce que l'extrait ou les extraits sont obtenus selon un procédé impliquant une étape d'extraction de la plante ou d'une partie de la plante séchée, à l'aide d'un solvant alcoolique ou hydroalcoolique. 20 5. Compositions cosmétiques ou dermatologiques selon l'une des revendications précédentes, caractérisées en ce que la quantité de l'extrait ou de chacun des différents extraits est comprise entre 0,0001 et 20% du poids total de la composition. 6. Compositions cosmétiques ou dermatologiques selon l'une des revendications 25 précédentes, caractérisées en ce que la quantité de l'extrait ou de chacun des différents extraits est comprise entre 0,01 et 10% du poids total de la composition. 7. Compositions cosmétiques ou dermatologiques selon l'une des revendications précédentes, caractérisées en ce qu'elles renferment en outre un ou plusieurs principes 30 actifs complémentaires.10