Brevet FR2908997A1 — publié le 20080530

L'invention se rapporte au domaine de la chimie et plus particulièrement au domaine de la pharmacotechnie. Elle a plus particulièrement pour objet un nouveau procédé d'extraction de principes actifs au départ de plantes riches en flavonoïdes et en diacylphloroglucinols, dont l'oxydabilité présente un inconvénient majeur pour leur conservation au stockage et pour leur utilisation pharmaceutique. L'invention concerne plus spécifiquement un procédé d'extraction et de concentration en principes actifs sous une forme stable et enrichie en un ou plusieurs principes actifs, au départ de sommités florales de Millepertuis (Hypericum perforatum). 15 Le millepertuis est en effet une plante médicinale dont les propriétés tranquillisants et anti-stress sont de mieux en mieux connues en raison de nombreux travaux scientifiques récents, notamment les publications intervenues dans différents pays européens 20 comme il est fréquent en phytothérapie. Selon la littérature (voir notamment USP 6 280 736), l'effet général anti-dépressif du millepertuis ne peut pas être attribué avec certitude à un ou plusieurs composants déterminés, mais il apparaît 25 clairement que parmi ceux-ci, les hyperforines fournissent un apport prépondérant à la mise en place de cette efficacité (cf. EP-A-0599 307) sans doute supérieure à celle des hypéricines de formule (I) : 10 2908997 2 OH O OH OH O OH Il s'agit de molécules très oxydables et facilement labiles. 5 La drogue médicinale brute est formée des parties aériennes d'Hypericum perforatum qui contiennent entre autres des composés du type hypéricine et des composés du type hyperforine (cf. J. Hôlzl et al Pharmazeutische Zeitung 139 (46) 3959-3977 (1994)). Une préparation d'extrait de Millepertuis ayant une teneur plus élevée en hypéricine est décrite dans le brevet allemand DE-1569849 ainsi que dans S. Niesel et H. Schilcher Arch. Pharm. 323 (1990) 755. Cependant le problème de la conservation de ces principes actifs a été posé par R. Berghéfer et J.H8lzl dans Deutsche Apotheker Zeitung 126 (47) (1987) 2569-2573 qui ont constaté que l'hyperforine dans les extraits de Millepertuis, était complètement dégradée après une semaine, bien qu'elle devrait être plus stable dans des extraits obtenus à partir de plantes fraîches. Ces auteurs émettent l'hypothèse que les plantes fraîches contiennent un agent stabilisant pour l'hyperforine mais dont l'efficacité serait de courte durée. C'est pourquoi les auteurs concluent qu'aussi bien dans la drogue que dans les extraits conventionnels de Millepertuis, la teneur en Hyperforine diminue d'une manière spectaculaire allant jusqu'à la disparition de la dite substance en l'espace de quelques mois lors du stockage conventionnel (Marsenbacher P. Thèse de Doctorat (1991), Tubingen). Ces auteurs ont préconisé le stockage de la plante sous argon avec addition d'antioxydants (octyldodecanol, BHT, BHA) pour améliorer la stabilité des extraits. (I) 2908997 3 Les extractions des Millepertuis par des solvants conventionnels comme l'eau et/ou l'alcool, conduisent déjà à des compositions pharmaceutiques qui contiennent moins de 1 0/0 d'hyperforine. Au cours du stockage, cette valeur diminue d'une 5 manière évidente et peut même venir à zéro en fonction des conditions de stockage, par suite de phénomènes d'oxydation qui entraînent la décomposition de l'hyperforine. 1 o Selon le brevet US n 6.280.736, ce problème pourrait être résolu par l'addition aux extraits de Millepertuis, d'agents antioxydants et/ou d'agents stabilisants qui fixent l'oxygène, ou bien encore d'agents réducteurs. Le déposant du dit brevet américain recommande également d'effectuer l'extraction sous atmosphère inerte et/ou à l'abri 15 de la lumière ou encore en procédant à l'extraction à l'aide d'un solvant présentant une teneur réduite en oxygène. Une autre méthode de préservation de l'hyperforine a été 20 décrite par Orth HC, Rentel C. et Schmidt PC. dans J. Pharm. Pharmacol (1999) 51 193-200 qui recommandent l'élimination des peroxydes à chaque étape de l'extraction. Ces auteurs concluent en indiquant que la conservation à 30 C sous atmosphère normale et à - 20 C, 4 C et 20 C sous azote ou encore dans l'azote à -196 C n'a pas 25 donné de résultats différents en ce qui concerne la stabilité de l'hyperforine et que le procédé de conservation à -70 C sous azote fournissait les meilleurs résultats pour un stockage à long terme. 3o Le même problème se pose pour des préparations topiques d'extrait de Millepertuis, notamment sous forme de gels, comme agent cicatrisant ou anti-viral (cf. US publication 2004/0137 088). Le problème de la stabilité des hyperforines a également été envisagé en synthétisant des hyperforines artificielles telles que celles décrites dans 35 le brevet US 6.656.510 (Indena). 2908997 4 Il s'agit des hyperforines correspondant à la formule (II), (H) 5 dans laquelle RI est un radical acyle ou de l'hydrogène. pour laquelle pour l'hyperforine : R = CH3 l'adhyperforine : R = CH2-CH3 Celles-ci sont décrites comme étant plus stables et plus actives dans les tests d'action anti-dépressive. Cette méthode d'hemisynthèse nécessite 10 l'extraction de l'hyperforine à partir de Millepertuis par un gaz supercritique pour obtenir une huile riche en hyperforine. Cependant les rendements d'estérification sont particulièrement faibles. Par ailleurs, l'extraction par fluide supercritique est une opération délicate nécessitant un appareillage résistant aux très hautes pressions et aux 15 températures élevées. On a également décrit en tant qu'alcaloïdes stabilisés, des produits d'hydrogénation de la chaîne allylique des hyperforines. Les composés cétoniques hexahydro et octahydrogénés résultants, 20 s'énolisent pour donner des énolates métalliques ou des esters d'enol (voir brevet PCT n 03/091191 et n 99/64 388). Malgré un intérêt thérapeutique toujours croissant, les extraits de Millepertuis n'ont pas été utilisés jusqu'ici dans une mesure correspondante en raison de la facile décomposition des principes actifs 25 et de la perte d'activité progressive qui en résulte. 2908997 5 Dans la demande française antérieure dont la priorité est revendiquée, 05/ 12908, déposée le 19 décembre 2005 la Société demanderesse a décrit et revendiqué un nouveau procédé d'extraction des principes actifs de plantes à partir de matières premières 5 préalablement hachées. Ces principes actifs du type naphtodianthrones, flavonoïdes, et acylphloroglucinols peuvent être additionnées d'autres principes actifs tels que des sels de magnésium et/ou des médicaments de la sphère gastro-instestinale ou du système nerveux central. On pourra citer à cet égard les acides gras poly 10 insaturés du type omega-3 ou des produits qui agissent sur la motricité intestinale du type antispasmodique. La présente demande de brevet a plus particulièrement pour objet de fournir des précisions supplémentaires sur l'addition de 15 tels principes actifs et en particulier sur l'addition de sels de magnésium. Le procédé selon l'invention vise à améliorer les procédés déjà décrits permettant d'obtenir des extraits de Millepertuis plus 20 stables donc plus actifs. Le procédé selon l'invention vise également à obtenir des extraits plus riches en hyperforines et appauvris en dérivés d'hypericine. L'invention a pour objet un procédé d'extraction de 25 plantes, plus spécialement celles contenant des iridoides, des dérivés quinoléiques et particulièrement des acylphloroglucinols, des flavonoïdes et des naphtodianthrones, comme notamment dans Hypericum perforatum, qui permet d'obtenir des extraits stables et pharmaceutiquement acceptables, enrichis en hyperforine et appauvris si possible en dérivés d'hypéricine. Le procédé d'extraction selon l'invention se caractérise principalement par une recherche du pH des milieux d'extraction où les actifs sont les plus stables et qui permet d'obtenir après séchage par déshydratation sous vide, à basse température, sur zéolites, procédé également appelé zéodratation, des extraits sous la forme d'une poudre cristalline. Ce procédé permet d'augmenter les taux d'hyperforine dans les extraits de plante et de conserver ou même de diminuer les taux de 2908997 6 pseudohypericine et d'hypéricine. Ces extraits sont conservés soit sous forme de poudres cristallines lorsque l'hyperforine est sous forme salifiée par un sel métallique, soit sous forme amorphe lorsqu'elle est sous forme de base en présence ou non d'un acide organique comme par exemple 5 l'acide citrique, soit encore fixée sur des matériaux inertes tels que des sucres comme une maltodextrine ou un support similaire, pour avoir une poudre pharmacotechniquement manipulable. Le choix du procédé d'extraction est effectué parmi ceux déjà 10 décrits, en fonction des taux recherchés et nécessaires d'hyperforine et d'hypéricine ainsi qu'en fonction des quantités nécessaires aux fabrications des formulations pharmaceutiques. L'invention concerne également des préparations 15 pharmaceutiques ou para-pharmaceutiques contenant ces différents extraits obtenus par les procédés de l'invention en vue de l'utilisation pour la santé. Pour certains produits, le pH d'extraction pourra se situer 20 entre 1 et 2 / ou 6,4 et 12 comme pour le Millepertuis en fonction des quantités d'actif à extraire (entre 3 et 5 pour les cas les plus défavorables). Pour d'autres produits contenant des iridoides (Globulaire, etc...), le pH devra se situer entre 6,5 et 8. Dans tous les cas, ce type d'extrait est sensible aux élévations de 25 température, à l'oxydation ou à la lumière, il sera donc déshydraté et séché par déshydratation sous vide à basse température sur zéolites, procédé également appelé zéodratation. On sait que la plante à l'état humide, selon sa provenance, 30 contient selon les différents auteurs, de 2 à 4 % d'hyperforine. Ce taux ne cesse de décroître au fur et à mesure des différentes manipulations comme le temps de macération avant extraction, la concentration des extraits, le temps de stockage des extraits, etc... Il peut devenir très faible. 35 Dans l'arsenal des différents moyens connus et utilisés contre ces problèmes d'instabilité, on fait appel aux méthodes classiques comme : 2908997 7 ^ la nature des solvants d'extraction utilisables en pharmacie ^ l'usage d'anti-oxydants sous forme acide, sels ou esters 5 l'abri de la lumière ^ l'usage d'agents réducteurs ^ l'usage d'agents chélateurs ^ l'usage de gaz inerte lors des différentes manipulations ^ l'emploi de basses températures lors des différentes 1 o manipulations. En raison de la structure chimique des dérivés phlorogluciniques et plus particulièrement en raison de la présence de groupes hydroxy-allyliques et cétoniques de l'hyperforine, il est logique 15 de penser à bloquer celles-ci pour apporter une meilleure stabilité à l'ensemble de la molécule. Ceci a été très bien décrit par Chatterjee et coll dans le brevet US 6.444.662 du 3 septembre 2002 qui décrit trois modes de préparation 20 de sels dans des solvants appropriés en fonction des types de metallation utilisés sur le mélange adhyforine et hyperforine, par des alcoolates en milieu anhydre ou en présence d'hydroxydes correspondants. L'objet de l'invention consiste à utiliser un ou des procédés 25 qui améliorent la stabilité des dérivés phlorogluciniques au cours du procédé d'extraction sans altérer les autres constituants de l'extrait et obtenir un produit final pharmaceutiquement -acceptable, enrichi en hyperforines, c'est à dire en contenant de 1 à au moins 10 %, et contenant les autres constituants comme les flavonoïdes, les 30 naphtodianthrones, aux taux habituels comme pour l'hypéricine (de 0,1 à 0,7%). Différents agents d'alcalinisation ou d'acidification peuvent être utilisés pour former un sel (soude, hydroxyde métallique comme 35 l'hydroxyde de magnésium et autres agents alcalins, des bases organiques comme des amines primaires ou secondaires, des amino acides basiques par exemple l'arginine ou la citrulline ou d'autres bases organiques cycliques comme la piperidine ou la morpholine, etc...) et des 2908997 8 acides (tout acide minéral ou organique), dans le procédé selon l'invention. Une étude qualitative a été réalisée à partir d'un même lot de plante pour 5 évaluer l'influence des différents milieux d'extraction tel qu'un milieu basique (la soude) ou un milieu acide (les acides phosphoriques ou/et citrique). Les modes opératoires sont identiques dans tous les cas et ont donné les résultats suivants. 10 Tableau I pH du EtOH Eau NaOH Q :HpF PseudoHpR HpR pH de solvant 1N l'extrait 7.74 60 40 0 550 290 250 4.83 12.21 60 40 1 600 280 196 6.04 12.48 60 40 2 750 240 256 6.80 12.55 60 40 3 850 210 320 7.53 12.67 60 40 4 1000 20 200 8.81 12.71 60 40 5 1050 0 160 8.95 pH du EtOH Eau H3PO4 Q :HpF PseudoHpR HpR pH de solvant l'extrait 3.11 60 40 0.1 % 500 175 80 3.33 pH du EtOH Eau Ac. Q:HpF PseudoHpR HpR pH de solvant Citriq. l'extrait 2.66 60 40 4 % 550 200 130 4.46 HpF = Hyperforine PseudoHp = PseudoHypéricine HpR = Hypéricine On constate que pour un même solvant Ethanol/Eau 60/40, les extractions diffèrent selon le pH utilisé : 15 - aux pH acides, les quantités d'hyperforine extraites sont similaires aux quantités extraites par ce même solvant en milieu neutre mais par contre la pseudo-hypéricine et l'hypéricine ont grandement diminué. Le pH des extraits est légèrement plus acide en fin d'extraction comparé aux pH de l'extraction neutre dont les extractions ont tendance à s'acidifier : 20 pH initial 7,74 pH des extraits 4,83 pH solv + H3PO4 3, 11 pH des extraits 3,33 pH solv + Ac. Citrique 2,66 pH des extraits 4,46 20 35 2908997 9 Pour les extractions en milieu alcalin, les quantités d'extraits s'enrichissent en hyperforine en fonction de la quantité d'agent 5 alcalin utilisée alors qu'en même temps les quantités de pseudohypéricine et d'hypéricine diminuent. Cet enrichissement en hyperforine peut atteindre le double alors que les quantités de dérivés d'hypéricine peuvent diminuer de moitié. 10 Pour mieux évaluer les modes opératoires, on a comparé les extractions alcalines en présence d'un témoin d'extraction sans action alcaline et on a comparé son influence sur la plante humide et/ ou séchée ainsi que la stabilité des extraits obtenus. 15 Le mode opératoire décrit ci-dessus a donné les résultats suivants : À TO : 1) on procède à deux extractions différentes sur 23 g de plante humide (extraction alcaline et extraction neutre). 2) on sèche 150 g de plante humide puis on fait 2 extractions sur le produit séché correspondant à 23 g de plante humide. 3) on met en atmosphère humide contrôlée 60 g de plante 25 humide. À TI : 1) on effectue 2 extractions sur 23 g de plante humide conservée (alcaline et neutre). 30 2) on effectue 2 extractions sur 23 g de plante sèche conservée (alcaline et neutre). Soit au total 4 extractions à TO 4 extractions à T 1 mois Le schéma opératoire I suivant, résume les différentes opérations (Figure 9). 2908997 10 Cette approche a permis d'évaluer et de choisir un procédé qui peut être le milieu alcalin lorsque l'on veut faire croître le taux d'hyperforines dans les extraits et améliorer la stabilité, ou le milieu acide lorsque l'on désire 5 obtenir un extrait standard et stabilisé en diminuant les taux de dérivés d'hypéricine. On sait qu'en milieu acide et hydro-alcoolique, ces dérivés précipitent du fait de leur faible solubilité à ces pH et du fait de la transformation de la pseudo-hypéricine en isopseudo hypéricine. 10 L'incidence du pH du milieu d'extraction et surtout son effet sur la stabilité de certains composants d'extraits ainsi que la transformation d'autres composés, a permis d'étudier plus profondément les possibilités d'extraction en fonction du pH, de manière à réaliser des 15 procédés industriels. Description des procédés : Une première étude d'extraction a été réalisée au 20 laboratoire à partir d'un même lot de plante afin de comparer l'influence de l'alcalinisation sur le milieu d'extraction par rapport aux extractions classiques réalisées avec des solvants hydro-alcooliques. Description succincte du procédé : 25 Le procédé consiste à mettre en suspension à température ambiante une partie de la plante séchée dans 10 volumes d'une solution hydro-alcoolique à 60 % en alcool éthylique, pendant 24 heures. Après filtration, les solutions sont traitées et concentrées sous vide à 30 l'abri de l'oxygène de l'air ainsi que de la lumière. Les rendements pondéraux dans ces conditions sont voisins de 20 à 25 %. Les extraits secs obtenus sont sous forme d'une poudre fine et cristalline dans le cas de l'extraction en milieu alcalin et de gomme très 35 hygroscopique dans le cas de l'extraction en milieu neutre. 10 2908997 11 Les analyses comparatives de ces deux extraits ont donné les résultats suivants en HPLC aux longueurs d'ondes suivantes (300 et 590 nm) comme montré à la figure 1 et dans les tableaux II, III et IV : 5 - 1) des acylphloroglucinols Tableau II CIO RT a, (nm) aire composé 9.77 300 458908 Hyperforine I 10. 35 300 2964122 Hyperforine II 11.46 300 140894 Hypéricine 13.14 300 174313 XXX 11.46 590 290398 Hypéricine Cl 1 RT X (nm) aire composé 9.64 300 272559 Hyperforine I 10.23 300 1923289 Hyperforine II 11.32 300 83330 Hypéricine 13.00 300 411835 XXX 10.16 590 149666 Pseudohypéricine 11.32 590 173782 Hypéricine Les résultats rassemblés à partir de ces deux extraits montrent que les extraits obtenus par la voie alcaline sont deux fois plus concentrés en hyperforine que ceux réalisés en milieu acide. 15 Par contre les dérivés de l'hypéricine sont présents en quantités comparables. La pseudo-hypéricine rencontrée dans l'extrait Cl 1 à pH neutre a été transformée en hypéricine sous l'effet de l'alcalinité. L'étude des profils des naphtodianthrones est réalisée à partir de ces deux extraits en utilisant la méthode analytique d'extraction acide 20 dans l'hexane. Celle-ci permet de caractériser ces dérivés. Les flavonoïdes peuvent également être caractérisés et identifiés pour une approche plus approfondie du profil chromatographique des extraits. 25 5 10 15 2908997 12 - 2) des naphtodianthrones détermination par HPLC Tableau III C10 C11 RT Composé RT 8.65 isopseudohypéricine 8.70 9.25 flavonoïde 9.32 9.86 protopseudohypéricine 9.92 10.20 pseudohypéricine 10.23 10.82 protohypéricine 10.84 11.33 hypéricine 11.37 3) des flavonoïdes comme montré dans les chromatogrammes selon la figure 3. 20 La caractérisation d'une forme salifiée de l'hyperforine en présence d'autres constituants de l'extrait a été réalisée par un retour en milieu acide de l'extraction pour retrouver la forme lipophile de la molécule avec ses faibles solubilités en milieu aqueux. 25 Le tableau IV montre l'influence du milieu sur la stabilité de l'hyperforine (salification) ainsi que son absence d'effet sur les dérivés naphtodianthrones comme l'hypéricine et ses dérivés Tableau IV hyperforine hypéricine pH TR Aire TR Aire 7.5 9.79 1 812 363 10.9 134 583 6.5 10 1 433 748 11.4 134 503 5.5 10.2 1 371 590 11.5 132 061 4.5 10.5 1 212 085 11.7 136 884 3.5 11.2 1 040 653 11.8 135 194 2.5 13.2 273 355 11.7 137 030 7.5 10 1 089 463 11.3 138 359 30 Ces résultats sont également figurés à la figure III 10 2908997 13 Exemple de dégradation de l'hyperforine non salifiée. 5 Solution à 10 mg/1 dans un solvant apolaire pendant 3 jours. Solution d'hyperforine dans l'hexane 10. mg/l Analyse à t = 0,1 jour et 3 jours jour Aire hyperforine 0 4 231 792 1 3 020 151 3 55 218 La dégradation de l'hyperforine en trois jours est manifeste, donnant naissance à une multiplicité de sous-produits. L'ensemble de ces résultats montre qu'en milieu alcalin, 15 les extraits en poudre contenant un pourcentage plus élevé en hyperforine sont beaucoup plus stables, solubles et salifiés. Ces résultats sont obtenus contrairement aux procédés décrits dans le brevet US 6.444.662 qui utilisent des méthodes 20 chromatographiques pour enrichir les extraits en hyperforine, et en adhyperforine, pour ensuite les salifier par des méthodes chimiques différentes afin d'obtenir des produits stabilisés mais pratiquement exempts d'autres composants (flavonoïdes, naphtodianthrones, etc...) de la plante. Le procédé selon l'invention est basé sur une approche plus 25 pharmaceutique puisqu'elle permet à partir de plantes séchées d'obtenir des extraits stables, dont les principaux paramètres en teneur en flavonoïdes, naphtodianthrones et acylphloroglucinols (soit 1 à 10 %) sont respectés et correspondent classiquement à ceux définis par les méthodes reconnues des pharmacopées et adaptées ici au cas de 30 l'Hypericum perforatum. 15 25 2908997 14 Principales étapes du procédé selon l'invention (selon figure 10) Le procédé selon l'invention se caractérise principalement par : 5 1- l'utilisation d'un solvant d'extraction hydro-alcoolique aux proportions connues, ou d'un solvant entièrement aqueux. 2- la mise en pratique d'un milieu d'extraction permettant d'alcaliniser ou d'acidifier suffisamment, de telle sorte que le pH soit toujours en 10 dehors de la neutralité. 3- l'utilisation d'une méthode de séparation solide/liquide réalisée à l'abri de la lumière et de l'oxygène de l'air (par ex. sous azote, argon ou gaz inerte de même type). 4- l'évaporation du solvant d'extraction en cours de concentration de l'extrait à sec, sous très haut vide et sous gaz inerte à de basses températures. 20 5- l'utilisation d'un procédé de séchage de l'extrait par zéodratation qui consiste à sécher l'extrait dans une enceinte de séchage sous vide extrême, reliée à un groupe d'adsorption contenant des zéolites comme agent déshydratant. Cette technique permet de pratiquer un séchage aux températures négatives si nécessaire. 6- Par l'obtention lors de la production de sels métalliques, d'une poudre cristallisée très peu hygroscopique et facilement utilisable en pharmacotechnie. 30 7- En définitive, par l'obtention d'un extrait aux caractéristiques chromatographiques bien définies qui est représenté par le chromatogramme de la figure V. 8- Par un extrait, qui stocké tel quel ou en mélange, avec des 35 excipients de formulation comme l'acide citrique ou l'acide ascorbique reste stable en utilisant des pourcentages d'excipients n'excédant pas 1 à 8 % et qui de ce fait sont pharmaceutiquement acceptables. 2908997 15 Pour l'obtention de formes non salifiées à partir de l'étape 4, le solvant est acidifié par l'acide correspondant, comme par exemple l'acide citrique, et la solution est évaporée en présence ou non d'un sucre 5 comme une maltodextrine pour favoriser la production d'une forme plus facilement manipulable lors de l'atomisation. L'extrait ainsi obtenu est séché comme à l'étape 5 et conservé en sachet ou fûts scellés à l'abri de l'humidité, de la chaleur et 10 de la lumière. Différents extraits de Millepertuis ont été obtenus à partir de solvants hydro-alcooliques aux proportions variables en alcool et neutralisés par différentes bases, minérales ou organiques, comme 15 principalement l'hydroxyde de sodium, de calcium ou de magnésium, la Triéthanolamine, la triethylamine, la lithine ou par acidification comme, principalement, avec des acides minéraux ou organiques comme l'acide chlorhydrique ; l'acide sulfurique ; les acides phosphoriques, l'acide citrique, l'acide ascorbique, etc ... 20 On décrit ici quelques essais qui ont permis d'obtenir des extraits stables en acylphloroglucinols du type hyperforine. L'invention a également pour objet des extraits de plante et notamment des extraits d'Hypericum perforatum obtenus par le 25 procédé de l'invention additionnés en vue de l'usage thérapeutique d'un ou plusieurs sels de magnésium à une concentration qui peut aller jusqu'au maximum de l'apport nutritionnel de supplément journalier en magnésium. Un tel apport peut aller selon les normes pharmaceutiques jusqu'à 420 mg/jour chez l'homme et jusqu'à 360 mg/jour chez la 30 femme. Pour les personnes âgées, la quantité maximale préconisée est de 400 mg/jour de magnésium élément. Le magnésium sera présent sous forme d'oxyde ou d'hydroxyde de magnésium ou sous forme de sel comme le chlorure de 35 magnésium, le sulfate de magnésium, le phosphate de magnésium, l'acétate de magnésium ou le pyrrolidone carboxylate de magnésium. les sels de magnésium sont peu résorbés par voie digestive mais pour éviter 2908997 16 des troubles digestifs liés à une surcharge saline, la limite de sécurité a été fixée à 840 mg de magnésium élément par jour. Les compositions selon l'invention contiennent ainsi de 5 100 à 500 mg d'un extrait de millepertuis de 1 à 10 % d'hyperforines et de 10 à 400 mg de magnésium élément sous forme de sel de magnésium ou de magnésie. Une formulation préférée est par exemple celle qui se présente sous forme de comprimés ou de sachets de poudres contenant 0,200g d'extrait de millepertuis et de Og250 à Og400 d'oxyde de 10 magnésium. L'oxyde de magnésium comporte l'avantage du fait de sa faible solubilité dans l'eau de ne présenter qu'une faible saveur et ainsi l'acceptabilité de telles préparations est nettement améliorée. A défaut d'oxyde de magnésium, on peut utiliser le phosphate de magnésium qui est également peu soluble dans l'eau -ou tout autre sel de magnésium de 15 faible solubilité dans l'eau comme le carbonate de magnésium ou le thio sulfate de magnésium. Les sels de magnésium utilisés sont de préférence choisis dans le groupe formé de l'acétate, du lactate, du propionate, du benzoate, 20 de l'ascorbate, du pidolate, du citrate, du glucosephosphate ou de tout autre sel de magnésium thérapeutiquement compatible. Les sels de magnésium procurent une meilleure stabilité à l'hyperforine aux concentrations élevées et en outre améliorent l'activité 25 des principes actifs sur le système nerveux central. Ils sont utilisés à une dose pouvant aller jusqu'à la dose maximale préconisée pour les besoins journaliers, comme par exemple de 10 à 260 mg de magnésium élément, et de préférence à une dose de 20 à 180 mg par jour en sel de magnésium et de préférence à la dose de 1 à 12 mg de magnésium 30 élément par milligramme d'hyperforines. Exemple 1 10 kg de plante (Hypericum perforatum) finement hachés sont introduits 35 dans un réacteur en inox de type Colette ou Olsa de 300 litres sous atmosphère d'azote et à l'abri de la lumière. 100 litres d'une solution hydro-alcoolique à 60% en alcool, y sont introduits. 2908997 17 On met sous agitation modérée pendant 5 à 10 minutes à température ambiante afin d'avoir une bonne mouillabilité de la plante. On alcalinise par une solution d'hydroxyde de sodium à 50% (#100 mol). Toujours à température ambiante on laisse sous agitation 24 heures puis 5 on sépare la solution d'extraction de l'insoluble par filtration. La solution ainsi filtrée est concentrée sous vide à basse température pour éliminer l'alcool par azéotropie et le résidu est séché par zéodratation afin de ne pas altérer l'extrait. On obtient ainsi entre 2 et 2,5 kg d'extrait sec dont les 10 acylphloroglucinols, qui y sont contenus, sont sous la forme de sels sodiques. Cet extrait est mis en étude de stabilité aux conditions ICH. Il a donné les résultats suivants figurant au Tableau V et à la figure 6. 15 Tableau V Tests To T3mois à 4 C T3mois à 18 C Hypéricines 0.25 % 0.23 070 0.23 % Hyperforine 1.90 % 1.81 % 1.84 % 20 Exemple 2 1kg d'extrait obtenu selon le procédé décrit à l'exemple 1 est mis dans un mélangeur cubique de 10 litres contenant 1,73 grammes d'acide citrique et 36,6 grammes d'acide ascorbique et ce par dilutions successives. Une fois l'extrait introduit, on agite sous gaz inerte à l'abri de la lumière 25 jusqu'à homogénéité du mélange, soit environ 2 heures. Cet extrait ainsi modifié est prêt pour une utilisation en pharmacotechnie en vue de la réalisation de formulations pharmaceutiqueset notamment de comprimés. 3o Profil chromatographique CLHP d'un comprimé à base d'extrait de l'exemple 2, figuré à la figure 7. 2908997 18 Exemple 3 10 kg de plante (Hypéricum perforatum) finement hachée sont introduits dans un réacteur en inox de type Colette ou Olsa de 300 litres sous atmosphère d'azote et à l'abri de la lumière. 5 100 litres d'une solution hydro-alcoolique à 60% en alcool sont introduits dans le réacteur. On met sous agitation modérée pendant 5 à 10 minutes à température ambiante afin d'avoir une bonne mouillabilité de la plante. On alcalinise par une solution d'hydroxyde de sodium à 50% (#100pmol). 10 Toujours à température ambiante on laisse sous agitation 24 heures. On neutralise la solution par de l'acide chlorhydrique jusqu'à pH inférieur à 6. 15 On sépare la solution d'extraction de l'insoluble, par filtration. La solution ainsi filtrée est concentrée sous vide à basse température pour éliminer l'alcool par azéotropie et le résidu est séché par 20 zéodratation afin de ne pas altérer l'extrait On obtient ainsi environ 2 kg d'extrait sec dont les acylphloroglucinols sont sous la forme de base. Cet extrait est mis en étude de stabilité aux conditions ICH et a donné les résultats mis en évidence à la figure 8 (figures 8a et 8b). 25 Cet extrait peut être utilisé tel quel ou en présence d'acides comme il est décrit à l'exemple 2 30 Exemple 4 Préparation d'une formulation à usage thérapeutique avec l'extrait d'Hypéricum p. obtenu comme à l'exemple 2 5 2908997 19 Extrait d'Hypericum perforatum 31,163 kg Croscarmellose sodique 5,200 kg Cellulose microcristalline 14,753 kg Glycérol dibéhénate 0,676 kg Silice colloïdale 0,208 kg Acide ascorbique 1,111 kg Acide citrique 0,52 kg On mélange les poudres et on réalise des comprimés de 520 mg qui 10 contiennent 300 mg d'extrait plus 11,11 mg d'acide ascorbique et 0,52 mg d'acide citrique. Ces comprimés peuvent ensuite être pelliculés par des agents qui les mettront à l'abri de la lumière et de l'humidité comme par exemple l'acide stéarique en présence d'HPMC. 15 Résultats des lots pilotes en stabilité. Les résultats obtenus sont représentés dans le tableau VI ci-après : Dosages To T: 3 mois T: 3 mois T: 3 mois 25 C/60% 30 C/65% 40 C/70% HR HR HR Hypericine et 0.71 0.67 0.64 0.41 pseudohypericine Hyperforine 5.9 5.8 5.7 5.8 Acide ascorbique 9.7 9.7 9.4 4.5 20 Exemple 5 Préparation d'une formulation à usage thérapeutique avec l'extrait d'Hypericum perforatum obtenu comme à l'exemple 2 et un sel de magnésium : 25 Extrait d'Hypericum perforatum 31,163 kg à 2 % d'hyperforine Citrate de magnésium 12,00 kg 2908997 20 Croscarmellose sodique 5,200 kg Cellulose microcristalline 14,905 kg Glycérol dibéhénate 0,676 kg Silice colloïdale 0,219 kg 5 On mélange les poudres et on réalise 100 000 comprimés de 640 mg qui contiennent chacun 300 mg d'extrait plus 11,11 mg d'acide ascorbique 0,52 mg d'acide citrique et 120 mg de citrate de magnésium. Ces comprimés peuvent ensuite être pelliculés par des agents qui les 10 mettent à l'abri de la lumière et de l'humidité comme l'acide stéarique en présence d'HPMC. Le citrate de magnésium peut être remplacé par la quantité équivalente en magnésium d'un autre sel de magnésium tel que le biphosphate de magnésium ou un pidolate de magnésium. 15 Exemple 6 Préparation d'une formulation à usage thérapeutique avec l'extrait d'Hypericum perforatum contenant 4 % d'hyperforine 20 Extrait d'Hypericum perforatum 30,000 kg Citrate de magnésium 12,00 kg Croscarmellose sodique 5,200 kg Cellulose microcristalline 14,905 kg Glycérol dibéhénate 0,676 kg 25 Silice colloïdale 0,219 kg Acide ascorbique 1,111 kg Acide citrique 0,052 kg On mélange les poudres et on réalise des comprimés de 640 mg qui 30 contiennent 300 mg d'extrait plus 11,11 mg d'acide ascorbique, 0,52 mg d'acide citrique et 120 mg de citrate de magnésium. Ces comprimés sont oblongs avec une barrette de sécabilité, ce qui permet d'avoir des comprimés modulables en posologie, allant de 6 mg d'hyperforine pour un demi-comprimé, à 12 mg d'hyperforine pour un 35 comprimé entier. Ces comprimés peuvent ensuite être pelliculés par des agents qui les mettront à l'abri de la lumière et de l'humidité comme l'acide stéarique en présence d'HPMC. 5 10 15 30 35 2908997 21 Exemple 7 Préparation d'une formule à usage thérapeutique avec l'extrait d'Hypericum perforatum contenant 4 % d'hyperforine Extrait d'Hypericum perforatum 30,000 Kg à 4 % d'hyperforine 17,70 Kg Carbonate de magnésium Croscarmellose sodique 6,10 Kg Cellulose microcristalline 5,197 Kg Glycérol dibéhénate 0,80 Kg Silice colloïdale 0,24 Kg Acide ascorbique 1,111 Kg Acide citrique 0,052 Kg pour 100 000 comprimés On mélange les poudres et on réalise des comprimés de 612 mg qui contiennent chacun 300 mg d'extrait plus 11,11 mg d'acide ascorbique et 0,52 mg d'acide citrique et 177 mg de carbonate de magnésium. 20 Ces comprimés peuvent ensuite être pelliculés par des agents qui les mettront à l'abri de la lumière et de l'humidité comme l'acide stéarique en présence d'HPMC. Exemple 8 25 Préparation d'une formulation à usage thérapeutique avec l'extrait d'Hypericum perforatum contenant 4 % d'hyperforine Extrait d'Hypericum perforatum 30,000 kg Citrate de magnésium 20,69 kg Croscarmellose sodique 7,15 kg Cellulose microcristalline 4,944 kg Glycérol dibéhénate 0,845 kg Silice colloïdale 0,26 kg Acide ascorbique 1,111 kg On mélange les poudres et on réalise 100.000 comprimés de 650 mg qui contiennent chacun 300 mg d'extrait plus 11,11 mg d'acide ascorbique et 206,9 mg de citrate de magnésium. 2908997 22 Ces comprimés peuvent ensuite être pelliculés par des agents qui les mettront à l'abri de la lumière et de l'humidité comme l'acide stéarique en présence d'HPMC. 5 Exemple 9 Comprimés gastro-résistants Préparation d'une formule à usage thérapeutique avec l'extrait obtenu selon l'exemple 1 pour 100.000 noyaux de 510 mg par forme unitaire. Extrait d'Hypericum perforatum 30,000 Kg Croscarmellose sodique 5,200 Kg Cellulose microcristalline 14,905 Kg Glycérol dibéhénate 0,676 Kg Silice colloïdale 0,219 Kg 15 Les noyaux sont pelliculés par une première couche de Sépifilm LP avec un dépôt d'environ 25 mg par noyau puis ensuite d'une couche d'une suspension préparée à l'avance d'Eudragit L30 D 55, talc et Triéthyl citrate pour un dépôt d'environ 40 à 45 mg. On obtient ainsi un 20 comprimé fini d'un poids moyen après enrobage voisin de 580 mg. Exemple 10 Comprimés gastro-résistants Préparation obtenue avec l'extrait obtenu selon l'exemple 1 contenant 4 25 % d'hyperforine, pour 100 000 noyaux de 510 mg par forme unitaire Extrait d'Hypericum perforatum 30,000 Kg Croscarmellose sodique 5,200 Kg Cellulose microcristalline 14,905 Kg 30 Glycérol dibéhénate 0,676 Kg Silice colloïdale 0,219 Kg pour 100 000 comprimés gastro résistants Les noyaux sont pelliculés par une première couche de Sépifilm LP avec 35 un dépôt d'environ 25 mg par noyau puis ensuite d'une couche d'une suspension préparée à l'avance d'Eudragit L30 D 55, talc et Triéthyl citrate pour un dépôt d'environ 40 à 45 mg. On obtient ainsi un comprimé fini d'un poids moyen après enrobage voisin de 580 mg. 10 10 15 35 2908997 23 Ces comprimés contiennent 12 mg d'hyperforine. Exemple 11 Comprimés orodispersibles 5 Préparation d'une formule à usage thérapeutique avec l'extrait obtenu selon l'exemple 1, contenant 4 % d'hyperforine, pour 100 000 comprimés orodispersibles de 4 g par forme unitaire. Extrait d'Hypericum perforatum 40,000 kg (à 4 % d'hyperforine) Bicarbonate de sodium 174,000 kg Acide citrique 100,000 kg Acide tartrique 50,00 kg Glycine 10,000 kg Povidone 1,000 kg Amidon de blé 25,000 kg Silice colloïdale 0,219 kg pour 100 000 comprimés 20 La quantité d'acide citrique et d'acide tartrique d'une part et de bicarbonate d'autre part, permet d'avoir un mélange effervescent dont le pH doit être voisin de 5 plutôt que 7 ou proche de 8 à 8,5. Ceci permet d'avoir des comprimés orodispersibles permettant une posologie de 16 mg d'hyperforine par comprimé. 25 Exemple 12 Comprimés orodispersibles Préparation d'une formule à usage thérapeutique avec l'extrait obtenu selon l'exemple 1, mais contenant 2 % d'hyperforine, pour 100 000 30 comprimés de 3,652 g par forme unitaire Extrait d'Hypericum perforatum 30,000 kg (à 2 % d'hyperforine) 174,000 kg Bicarbonate de sodium Acide citrique 100,000 kg Acide tartrique 50,00 kg Glycine 10,000 kg 35 2908997 24 Povidone 1,000 kg Silice colloïdale 0,219 kg pour 100 000 comprimés 5 La quantité d'acide citrique et d'acide tartrique permet d'avoir un mélange effervescent dont le pH doit être voisin de 5 plutôt que 7, quand il n'y a que de l'acide citrique ou de l'acide tartrique ou proche de 8 à 8,5 lorsqu'il y a présence de bicarbonate de sodium. Ceci permet d'avoir des comprimés orodispersibles assurant une to posologie de 6 mg d'hyperforine par comprimé. Exemple 13 Comprimé sécable sans magnésium Préparation obtenue avec l'extrait obtenu selon l'exemple 1 mais 15 contenant 4 % d'hyperforine, pour 100 000 noyaux de 510 mg par forme unitaire Extrait d'Hypericum perforatum 30,000 Kg Croscarmellose sodique 5,200 Kg 20 Cellulose microcristalline 14,905 Kg Glycérol dibéhénate 0,676 Kg Silice colloïdale 0,219 Kg Ces comprimés sont oblongs avec une barrette de sécabilité, ce qui 25 permet d'avoir des comprimés modulables en posologie allant de 6 mg d'hyperforine pour un demi-comprimé à 12 mg d'hyperforine pour un comprimé entier. Les noyaux sont pelliculés par une couche de Sépifilm LP avec un dépôt d'environ 30 mg par comprimé. On obtient ainsi 100 000 comprimés finis 30 d'un poids moyen après enrobage voisin de 540 mg. Exemple 14 Capsules molles 250 mg Extrait d'Hypericum perforatum Polyéthylène glycol 600 35 mg Huile de bourrache à 30 100 mg d'acides gras non saturés Silice colloïdale 45 mg 2908997 25 Cremophor EL 7 mg Emulsion lipidique du type Intralipid 650 mg QS pour une capsule molle de 5 Les extraits végétaux selon l'invention peuvent encore être additionnés d'autres principes actifs et notamment de principes actifs manifestant des propriétés antispasmodiques sur la sphère gastro-intestinale ou tranquillisantes sur le système nerveux central. On pourra citer à cet égard des acides gras polyinsaturés du type Oméga-3 qui agissent sur 10 l'anxiété comme les concentrés d'acide aùlinolénique ; Ces principes actifs additionnels peuvent être contenus à des doses variant de 5 à 100 mg par prise unitaire. 15 Les extraits de Millepertuis ainsi obtenus sont utilisés aux doses de 100 à 500 mg par prise unitaire. Les acides gras polyinsaturés sont introduits sous forme d'huile ou de concentré d'huile contenant de tels acides gras 20 polyinsaturés comme l'huile d'Onagre, l'huile de Bourrache, l'huile de caméline, l'huile de lin, l'huile de pépins de cassis ou encore l'huile de pépins de kiwi. Leur présence exprimée en milligrammes par prise unitaire s'échelonne de 10 à 100 mg selon les besoins nutritionnels journaliers. 25 REVENDICATIONS 1. Compostions pharmaceutiques ou parapharmaceutiques renfermant à titre de principe actif une poudre ou un extrait de plante du genre Hypericum titrant de 1 à 10% d'hyperforines, dans un excipient ou un véhicule inerte non toxique, physiologiquement acceptable. 2. Compositions pharmaceutiques ou parapharmaceutiques selon la to revendication 1 contenant à titre de principe actif de l'extrait sec d'Hypericum perforatum (Millepertuis) renfermant de 1 à 10%d'hyperforines. 3. Compositions pharmaceutiques ou parapharmaceutiques selon la 15 revendication 1 ou la revendication 2, contenant de 100 à 500 mg d'extrait sec d'Hypericum perforatum. 4. Compositions pharmaceutiques ou parapharmaceutiques selon l'une des revendications 1 à 3, dans laquelle l'extrait ou la poudre 20 d'Hypericum est additionné d'un ou plusieurs sels minéraux thérapeutiquement actifs. 5. Compositions pharmaceutiques ou parapharmaceutiques selon l'une des revendications précédentes, dans lesquelles les sels 25 minéraux sont un dérivé du magnésium choisi parmi l'oxyde , l'hydroxyde, les sels minéraux de magnésium, les sels organiques de magnésium et les complexes de magnésium. 6. Compositions pharmaceutiques ou parapharmaceutiques selon 30 l'une des revendications précédentes dans lesquelles les extraits d'Hypericum perforatum sont additionnés d'un ou plusieurs sels de magnésium à une concentration pouvant aller jusqu'au maximum de l'apport de supplément journalier. 35 7. Compositions pharmaceutiques ou parapharmaceutiques selon l'une des revendications précédentes dans lesquelles le magnésium est présent sous forme d'oxyde, d'hydroxyde de magnésium ou sous forme de sel choisi parmi le chlorure, le sulfate, le phosphate, l'acétate et le pyrrolidone-carboxylate de magnésium. 40 8. Compositions pharmaceutiques ou parapharmaceutiques selon l'une des revendications précédentes qui contient de 100 à 500 mg d'extrait de millepertuis contenant de 1 à 10% d'hyperforines, et de 10 à 400 mg de magnésium élément sous forme de sel de 45 magnésium. 2908997 27 9. Compositions pharmaceutiques ou parapharmaceutiques renfermant outre l'extrait de millepertuis, un acide gras polyinsaturé du type oméga 3. 5 10. Procédé d'obtention d'un extrait sec de plante du genre Hypericum stabilisé et concentré en principes actifs du type acylphloroglucinols caractérisé en ce qu'on procède à une extraction des plantes au moyen d'un solvant hydro-alcoolique dans une zone de PH comprise entre 1 et 2 ou entre 6,4 et 12, puis to évapore l'alcool par azeotropie et sèche le résidu sous très haut vide et sous gaz inerte à basse température pouvant aller jusqu'à des valeurs négatives et obtient un extrait sec dont les principes actifs du type acylphloroglucinol sont sous forme de sels métalliques, stables, bien cristallisés, peu hygroscopiques, 15 présentant une teneur en hyperforines comprise entre 1 et 10% et une teneur en hypericines comprises entre 0,1 et 0.7%. 11. Procédé d'obtention d'extrait sec de plante du genre Hypericum selon la revendication 10, caractérisée en ce qu'on 20 soumet une plante du genre Hypericum à une extraction hydroalcoolique, on ajuste le PH dans une zone alcaline par addition d'une base minérale ou organique, on sépare l'alcool par distillation azeotropique, on sèche le résidu par zéodratation pour obtenir un extrait sec de plante du genre Hypericum dans lesquel 25 les principes actifs du type acylphloroglucinol, sont sous forme de sels. 12. Procédé selon les revendications 10 et 11 dans lequel la plante traitée est le Millepertuis ( Hypericum perforatum). 30