Brevet FR2904309A1 — publié le 20080201

NOUVELLES COMPOSITIONS D'INOCULA FONGIQUES, LEUR PROCEDE DE PREPARATION ET LEUR APPLICATION A L'AMELIORATION DE LA CROISSANCE DES CULTURES La présente invention concerne de nouvelles compositions d'inocula fongiques, leur procédé de préparation et leur application à l'amélioration de la croissance des cultures. La mycorhization est une association à bénéfice mutuel entre un végétal et un champignon mycorhizien L'importance des champignons mycorhiziens dans les plantations forestières a été mise en évidence pour la première fois en 1910 dans des essais d'introduction de pins exotiques au Kenya. Alors que ces plantations se soldaient généralement par des échecs spectaculaires (plants chlorotiques, mortalité très élevée), sur les conseils du " Royal Botanic Gardens ", du sol de vieilles plantations de pins fut importé d'Afrique du Sud afin d'être utilisé comme substrat de culture en pépinière. En effet, ce sol contenait des mycorhizes qui sont des organes mixtes situés sur les racines des végétaux, formés par la juxtaposition de deux types d'organismes : la plante supérieure et les filaments mycéliens souterrains du champignon. Les champignons vont puiser dans le sol les éléments minéraux, et plus particulièrement les moins mobiles tels que le zinc, le cuivre et le phosphore qu'ils vont procurer à la plante, indispensables au développement de celle-ci. En échange, la plante donne au champignon des sucres et des substances de croissance assurant ainsi sa survie. Les mycorhizes jouent un rôle important dans l'assimilation de certaines formes d'azote ainsi que dans l'absorption de l'eau du sol. Cette technique employant un sol riche en propagules fongiques mycorhiziennes fut rapidement divulguée avec succès dans d'autres pays d'Afrique comme la Tanzanie, Ouganda, Malawi, etc. Depuis, plusieurs techniques de mycorhization ont été développées et celle utilisant des champignons mycorhiziens seuls repose dorénavant sur les étapes suivantes : (i) Isolement et purification de souches fongiques, (ii) sélection de souches en conditions contrôlées de souches fongiques performantes pour un paramètre donné (par exemple : effet de la souche sur la croissance de la plante hôte) et (iii) multiplication de la souche en conditions axéniques et production d'inocula fongiques. 2904309 2 On distingue deux types de champignons mycorhiziens, les champignons ectomycorhiziens qui concerne essentiellement les essences forestières et les champignons endomycorhiziens qui concernent les espèces végétales herbacées. En ce qui concernent les champignons ectomycorhiziens, deux formulations 5 d'inoculum ont été testées et ont montré des effets spectaculaires en pépinière : (i) l'inoculum de type tourbe-vermiculite et (ii) l'inoculum de type billes d'alginate de calcium. Une autre technique utilisant des bactéries mycorhiziennes a également été développée notamment dans le brevet US 5,935,839. Ce brevet décrit des compostions 10 d'inoculum comprenant des souches de bactéries mycorhiziennes (Arthrobacter sp, Pseudomonas fluorescent) pour favoriser la croissance des conifères. Une troisième technique utilisant une association de champignon mycorhizien est également connue. Ainsi le brevet EP 2 678 281 décrit l'utilisation d'un inoculum fongique de type tourbe-vermiculite comprenant un champignon ectomycorhizien (L. 15 lacacata 10% (v :v)) en association avec une bactérie (Bacillus, Pseudomonas fluorescent). Le brevet US 6 133 196 décrit l'utilisation d'un inoculum fongique de type tourbe-vermiculite-perlite comprenant un champignon ectomycorhizien (Heleboma arenosa ou Laccaria bicolor) en association avec une bactérie (Streptomyces, 20 Pseudomonas diminuta). Une dernière technique comprenant une association de champignon mycorhizien avec d'autres composants a aussi été décrite et fait par exemple l'objet du brevet FR 2 865 897 qui concerne la production d'inocula fongiques comprenant un champignon endomycorhizien en association avec un agent stimulant (sorgolactone, 25 déméthylsorgolactone, alectrole, strigole et orbanchole). Le brevet EP 0 209 627 concerne un procédé de préparation de champignons endomycorhiziens en association avec des cultures d'organes de racines sur un support poreux constitué de vermiculite seule ou en association avec de la tourbe. Enfin, une publication de Duponnois R. et al. (FEMS Microbiology Ecology, 30 2006, 56 :292-303) décrit l'utilisation de champignon ectomycorhizien en association avec de la poudre de termitières pour l'amélioration de la croissance des plants forestiers. La composition décrite comprend un champignon ectomycorhizien. Cette composition est utilisée à la dose importante de 1000 ml par graine ou plant. 2904309 Cependant, toutes ces techniques possèdent plusieurs inconvénients dont le principal est la production en grande quantité de l'inoculum qui nécessite du matériel relativement sophistiqué, présentant un coût, par exemple pour des opérations de reboisement, incompatibles avec les budgets généralement alloués pour ce type 5 d'opération et plus particulièrement dans les pays du sud. De plus, l'inoculum fongique de type tourbeùvermiculite ou bille d'alginate est généralement produit dans des bocaux en verre ou des sachets en plastique, qui ont un encombrement important et dont le transport doit être effectué en respectant la chaîne du froid. Un des buts de l'invention est de fournir une composition d'inoculum fongique 10 utilisable en tant qu'agent stimulant la mycorhization de cultures ayant une formulation telle qu'elle puisse être utilisé à des doses nettement inférieures à celles classiquement utilisées. Un autre but de la présente invention, est de fournir des compositions d'inoculum fongique adaptables aux deux types de symbiose mycorhizienne (ectomycorhizienne et 15 endomycorhizienne), ce qui permet la production de plants mycorhizés d'une large gamme d'espèces végétales allant des arbres fruitiers aux plants forestiers, contrairement à l'état de la technique, où les techniques utilisées ne sont valables que pour un type de mycorhization. L'un des autres buts de la présente invention est de fournir des compositions 20 d'inoculum fongique dans lesquelles l'association de deux champignons ectomycorhiziens et endomycorhiziens permet de stimuler la croissance des essences ligneuses à croissance rapide des genres Casuarina, Allocasuarina, Eucalyptus et Acacia d'origine australienne. Un autre but de l'invention est de fournir un procédé de stimulation de la 25 mycorhization tel qu'il permette d'éviter les pertes de propagules fongiques habituellement enregistrées dans les techniques classiques de mycorhization. La présente invention concerne l'utilisation d'au moins un inoculum fongique et de poudre de termitières, en tant qu'agent stimulant la mycorhization de cultures notamment forestières, céréalières, fourragères, maraîchères, fruitières ou horticoles, 30 ledit inoculum étant utilisé à une dose par élément unitaire de culture, notamment graine ou plant, d'environ au moins dix fois inférieure à la dose utilisée en l'absence de poudre de termitières. Dans la présente invention, il a été trouvé que l'association de poudre de termitières à un inoculum fongique permet de réduire considérablement les doses 2904309 4 d'inoculum utilisées pour la mycorhization et de favoriser ainsi la reforestation, notamment des zones tropicales et méditerranéennes dans lesquelles la pratique de la mycorhization contrôlée se justifie pleinement (sols carencés et érodés, désertification avancée, conservation de la biodiversité menacée par les activités anthropiques...), en 5 diminuant considérablement le coût de celle-ci. De par la dose utilisée, un premier avantage de la présente invention est de favoriser la reforestation, notamment des zones tropicales et méditerranéennes dans lesquelles la pratique de la mycorhization contrôlée se justifie pleinement (sols carencés et érodés, désertification avancée, conservation de la biodiversité menacée par les 10 activités anthropiques...), en diminuant considérablement le coût de celle-ci. De plus, la faible quantité de poudre de termitières utilisée (1 à 10% v :v) dans la présente invention évite le risque de dépeuplement de régions entières de leurs nids de termites. L'expression élément unitaire de culture désigne ici une graine, semence, grain, fruit, pépin, noyau ou une plante sans ètre limité à ceux-ci permettant d'obtenir 15 une culture forestière, céréalière, fourragère, maraîchère, fruitière ou horticole. La dose habituellement utilisée dans l'état de la technique est de 100 ml à 1000 ml d'inoculum de type tourbe-vermiculite ou alginate de calcium en association on non avec un autre composant, par graine. Par conséquent, la dose utilisée ici est au moins inférieure à 10 ml d'inoculum et de poudre de termitières, par graine. 20 Dans un mode de réalisation préféré de la présente invention, la poudre de termitières utilisée provient de termites du genre Macrotermes et préférentiellement du genre Macrotermes subhyalinus. Selon un mode de réalisation avantageux de la présente invention, l'inoculum fongique comprend au moins un champignon endomycorhizien, du genre Glomus, 25 notamment choisi parmi Glomus mosseae, Glomus fasciculatus, Glomus aggregatum, Glomus intraradices et préférentiellement Glomus intraradices. On entend par champignon endomycorhi.zien, un champignon, dont le mycélium pénètre les cellules racinaires et développe des arbuscules ou des vésicules, lorsqu'il est associé à des racines de plantes. Il ne forme pas de manteau fongique autour de la 30 racine.(Smith, S.E. & Read, D.J. (1997). Mycorrhizal symbiosis. 2' edition, UK, Academic Press.) Selon un autre mode de réalisation avantageux de la présente invention, l'inoculum fongique comprend au moins un champignon ectomycorhizien, du genre Pisolithus, notamment choisi parmi Pisolithus albus, Pisolithus tinctorius, ou du genre 2904309 5 Scleroderma, notamment choisi parmi Scleroderma dyctiosporum, Scleroderma verrucosum et préférentiellement Scleroderma dictyosporum, On entend par champignon ectomycorhizien, un champignon dont le mycélium se développe entre les cellules du cortex racinaires, mais ne pénètre pas dans les cellules 5 vivantes, formant ainsi le réseau intercellulaire de Hartig . Il forme un manteau fongique autour de la racine. (Smith, S.E. & Read, D.J. (1997). Mycorrhizal symbiosis. 2^d edition, UK, Academic Press.) Selon un autre mode de réalisation avantageux de la présente invention l'inoculum fongique comprend un champignon endomycorhizien du genre Glomus, notamment 10 choisi parmi Glomus mosseae, Glomus fasciculatus, Glomus aggregatum, Glomus intraradices et préférentiellement Glomus intraradices et un champignon ectomycorhizien du genre Pisolithus, notamment choisi parmi Pisolithus albus, Pisolithus tinctorius, ou du genre Scleroderma, notamment choisi parmi Scleroderma dyctiosporum, Scleroderma verrucosum et préférentiellement Scleroderma 15 dictyosporum, Cette association de champignon ectomycorhizien et endomycorhizien est plus particulièrement avantageuse pour les essences ligneuses à croissance rapide des genres Casuarina, Allocasuarina, Eucalyptus et Acacia d'origine australienne. Ces espèces forestières sont fréquemment utilisées dans les programmes de 20 reboisement en milieu tropical humide et sec et l'association des deux types de champignons mycorhiziens permet d'obtenir des gains de croissance par rapport à ceux enregistrés quand un type seulement de champignon est inoculé. (Voir figure 1) Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, l'inoculum fongique est préparé par croissance sur un support, d'un champignon endomycorhizien ou d'un 25 champignon ectomycorhizien, la croissance du champignon endomycorhizien ayant lieu sur un support, notamment de type sable, notamment en présence d'une plante mycotrophe, la croissance du champignon ectomycorhizien ayant lieu sur un support de type tourbe-vermiculite ou de billes d'alginate de calcium. S'agissant du champignon endomycorhizien, il se présente par exemple sous 30 forme de racines sèches mycorhizées, coupées en morceaux de 1 mm (comprenant environ 25 vésicules par mm de racines) et mélangées à du sable (stérilisé à 140 C, pendant 40 min) à une dose de 2 g de racines mycorhizées dudit champignon endomycorhizien. 2904309 6 La plante mycotrophe grâce au développement de ses racines va multiplier le champignon endomycorhizien. A titre d'exemples de plantes mycotrophes, on peut citer le mil, le sorgho et le maïs. 5 Le délai de croissance à l'aide de la plante mycotrophe est de l'ordre de 4 mois. S'agissant du champignon ectomycorhizien, le support utilisé est du type tourbevermiculite et la souche fongique (un implant fongique prélevé à partir d'une culture mère , à une dose d'environ 10 mg de poids sec de biomasse par implant) se développe et colonise en conditions stériles un mélange de tourbe et de vermiculite 10 (1 :4 ; v :v) et humidifié par une solution nutritive. Selon un mode de réalisation avantageux, après trois mois de culture dans des bocaux à 25 C, l'inoculum fongique est mélangé au substrat de culture à raison de 1 volume d'inoculum pour 9 volumes de sol de culture. Ce mélange est ensuite réparti dans des gaines où est plantée l'essence forestière 15 choisie. Si la production est effectuée dans des planches de pépinière, l'inoculum peut être apporté à raison de 2 litres par m2 de sol où seront semées les graines de l'essence choisie. Dans le cas du support billes d'alginate, selon un mode de réalisation avantageux, le mycélium est multiplié dans un milieu nutritif liquide en fermenteur puis broyé et 20 mélangé à une solution d'alginate de Na. Cette suspension de fragments de mycélium est ensuite versée en goutte à goutte dans une solution de chlorure de calcium. L'alginate polymérise en présence de calcium donnant ainsi des billes d'alginate de calcium de diamètre choisi contenant les propagules fongiques. Ces billes sont ensuite inoculées au sol des planches de pépinière à raison de 1 litre d'inoculum par m2. 25 Selon un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, l'inoculum fongique et la poudre de termitières sont associés à un substrat, notamment choisi paiini le sable, le compost provenant de résidus de culture et préférentiellement de terreau, ou un mélange de sable et de compost L'inoculum fongique utilisé ici et au moment de son utilisation est l'inoculum 30 fongique après croissance, par exemple durant 4 mois pour le champignon endomycorhizien et trois mois, par exemple, dans les bocaux pour le champignon ectomycorhizien. Le terme compost désigne ici un produit obtenu par conversion et valorisation contrôlée des matières organiques (sous produits de la biomasse, déchets organiques 2904309 7 d'origine biologique) en un produit stabilisé, hygiénique et riche en composés humiques. Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, le rapport inoculum fongique: poudre de termitières est compris de 0,1 % (v:v) à 10 % (v:v), préférentiellement 5 0,1%(v:v) à 5% (v:v) et plus préférentiellement de 0,1% (v:v) à 1% (v:v) La faible quantité de poudre de termitières utilisée (0,1% à 10% v :v) dans la présente invention évite le risque de dépeuplement de régions entières de leurs nids de termites. Selon un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, le rapport inoculum 10 fongique : substrat de l'inoculum est compris de 1% (v:v) à 10% (v:v), préférentiellement de 1% (v:v) à 5% (v:v) et vaut plus préférentiellement 1% (v:v) Selon encore un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, le rapport poudre de termitières : substrat de l'inoculum est compris de 1% (v:v) à 10% (v:v) et préférentiellement de 1% (v:v) à 5% (v:v) et vaut plus préférentiellement 1% (v:v). 15 Selon encore un autre mode de réalisation du procédé ci-dessus, le champignon endomycorhizien est utilisé dans des espaces destinés aux cultures, notamment céréalières, fourragères, maraîchères, fruitières ou horticoles et préférentiellement maraîchères, fruitières ou horticoles. Les cultures céréalières comprennent notamment l'orge, l'avoine et le blé, cette 20 liste n'étant pas limitative. Par culture fourragère il faut comprendre les légumineuses telles que le trèfle, la luzerne et le lotier corniculé, et des graminées, comme la fléole des prés, le dactyle pelotonné, cette liste n'étant pas limitative. Les cultures maraîchères comprennent notamment les tomates, les aubergines, les 25 pommes de terre, les carottes, la laitue, le concombre, le melon, le chou, le chou-fleur... Les cultures fruitières comprennent notamment des pommes, poires, pêches, raisin, cerise, prune, agrumes, cette liste n'étant pas limitative. Les cultures horticoles comprennent notamment les fleurs, les plantes ornementales, cette liste n'étant pas limitative. 30 Le terme espaces destinés aux cultures désigne ici tout type de contenant comprenant des éléments appropriés à la culture tels que des pots, bacs, bocaux, plaques alvéolées sans être limité à ceux-ci ainsi que tout type de terrain, pièce de terre, champ, serre.... 2904309 8 Dans un mode de réalisation préféré du procédé décrit ci-dessus, le champignon ectomycorhizien est utilisé dans des espaces destinés aux cultures forestières. Le terme espaces destinés aux cultures a ici la même signification que ci-dessus. Les cultures forestières comprennent notamment les myrtacées, les pinacées, les 5 abiétacées, les fagacées, les liliacées, les ulmacées les salicacées; cette liste n'étant pas limitative. Selon un autre mode de réalisation avantageux de l'invention, un champignon endomycorhizien et un champignon ectomycorhizien sont utilisés dans des espaces destinés aux cultures forestières, notamment les essences ligneuses des genres 10 Casuarina, Allocasuarina, Eucalyptus et Acacia d'origine australienne. Les deux champignons sont utilisés de la même manière que décrit précédemment pour chaque champignon, à savoir que le champignon endomycorhizien mélangé à un support, notamment de type sable et le champignon ectomycorhizien est mis en croissance sur un support de type tourbe-vermiculite ou de billes d'alginate de calcium, 15 par exemple pendant trois mois. L'invention concerne également une composition comprenant : a. un inoculum fongique comprenant au moins un champignon endomycorhizien du genre Glomus, notamment choisi parmi Glomus mosseae, Glomus fasciculatus, Glomus aggregatum, Glomus intraradices et préférentiellement Glomus 20 intraradices, b. de la poudre de termitières, la taille des particules de ladite poudre de termitières étant comprise de 1 m à 1000 m et préférentiellement de 1 m à 500 m, Ce tamis permet seulement d'éliminer les particules grossières de la structure des termitières (type cailloux). 25 Ces particules sont reprises puis de nouveau broyées. En général, plus de 95% (en volume) de la termitière peut être broyée et réduite en poudre. Si la poudre n'est pas broyée, les particules sont trop grossières et les structures de termitières ne peuvent être réparties de manière homogène dans le substrat. le rapport inoculum fongique : poudre de termitières étant compris de 0,1 % (v:v) à 10 30 % (v:v), préférentiellement 0,1 (v:v) à 5% (v:v) et plus préférentiellement de 0,1 (v:v) à 1% (v :v) La composition décrite ci-dessus permet de stimuler la mycorhization notamment des cultures céréalières, fourragères, maraîchères, fruitières ou horticoles. 2904309 9 Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, l'inoculum fongique ci-dessus comprend : i. au moins un champignon endomycorhizien ii.un support de type sable. 5 iii.une plante mycotrophe L' inoculum fongique provient par exemple de la croissance d'une dose de 2g de racines mycorhizées de champignon endomycorhizien. Cette dose est aussi celle utilisée dans l'invention. Selon un autre mode de réalisation de l'invention, la susdite composition 10 comprend : a. un inoculum fongique comprenant au moins un champignon endomycorhizien b. de la poudre de termitières, c. un substrat choisi parmi le compost provenant de résidus de culture et préférentiellement de terreau, le sable, ou un mélange de sable et de compost, 15 le rapport poudre de termitières : substrat étant compris de 1% (v:v) à 10% (v:v ) et préférentiellement de (v:v) à 5% (v:v) et vaut plus préférentiellement de 1% (v:v) et le rapport inoculum fongique : substrat étant compris de 1% (v:v) à 10% (v:v) préférentiellernent de 1% (v:v) à 5%(v:v) et valant plus préférentiellement 1% (v:v). 20 Le terme compost utilisé ici a la même signification que ci-dessus. L'invention concerne également une composition comprenant : a. un inoculum fongique, comprenant au moins un champignon ectomycorhizien, du genre Pisolithus, notamment choisi parmi Pisolithus albus, Pisolithus tinctorius, ou du genre Scleroderma, notamment choisi parmi Scleroderma 25 dyctiosporum, Scleroderma verrucosum et préférentiellement Scleroderma dictyosporum, b. de la poudre de termitières, la taille des particules de ladite poudre étant comprise de 1 m à 1000 m préférentiellement de 1 m à 500 m, c. un substrat choisi parmi le sable, le compost provenant de résidus de culture et 30 préférentiellement de terreau, ou un mélange de sable et de compost, le rapport inoculum fongique : poudre de termitières étant compris de 0,1% (v:v) à 10% (v:v), préférentiellement de 0,1% (v:v) à 5% (v:v) et plus préférentiellement de 0,1% (v:v) à 1% (v:v), et 2904309 10 le rapport inoculum fongique : substrat étant compris de 1% (v:v) à 10% (v:v) préférentiellement de 1% (v:v) à 5% (v:v) et valant plus préférentiellement 1% (v:v), et le rapport poudre de termitières : substrat étant compris de 1% (v:v) à 10% (v:v) 5 et préférentiellement de 1% (v:v) à 5% (v:v) et valant plus préférentiellement 1% (v:v) sous réserve que l'un moins des deux rapports, inoculum fongique : substrat ou poudre de termitières : substrat, soit inférieur à 10 A (v :v) et préférentiellement que l'un au moins des deux susdits rapports soit compris de 1% (v :v) à 5% (v :v). 10 La composition décrite ci-dessus permet de stimuler la mycorhization des cultures notamment forestières. Selon un autre mode de réalisation de l'invention, l'inoculum fongique de la composition ci-dessus, comprend: i. au moins un champignon ectomycorhizien 15 ii. un support de type tourbe-vermiculite (1 :4, v:v) ou billes d'alginate de calcium. L'inoculum fongique provient par exemple de la croissance d'une dose de 10 mg de poids sec de biomasse de champignon ectomycorhizien. L'invention concerne également une composition comprenant : a. un inoculum fongique comprenant un champignon endomycorhizien du genre 20 Glomus, notamment choisi parmi Glomus mosseae, Glomus fasciculatus, Glomus aggregatum, Glomus intraradices et préférentiellement Glomus intraradices et un champignon ectomycorhizien du genre Pisolithus, notamment choisi parmi Pisolithus albus, Pisolithus tinctorius, ou du genre Scleroderma, notamment choisi parmi Scleroderma dyctiosporum, 25 Scleroderma verrucosum et préférentiellement Scleroderma dictyosporum, b. de la poudre de termitières, la taille des particules de ladite poudre étant comprise de 1 m à 1001) m et préférentiellement de 1 m à 50011m, le rapport inoculum fongique : poudre étant compris de 0,1 % (v:v) à 10 % (v:v), préférentiellement 0,1 % (v:v) à 5 % (v:v), et plus 30 préférentiellement de 0,1 % (v:v) à 1% (v :v). La composition décrite ci-dessus permet de stimuler la mycorhization des cultures forestières, notamment les essences ligneuses des genres Casuarina, Allocasuarina, Eucalyptus et Acacia d'origine australienne. 2904309 11 Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, l'inoculum fongique de la composition ci-dessus comprend : i. au moins un champignon endomycorhizien et un champignon ectomycorhizien, 5 ii. un support de type sable en présence d'une plante mycotrophe pour le champignon endomycorhizien et un support de type tourbe-vermiculite (1 :4, v:v) ou billes d'alginate de calcium pour le champignon ectomycorhizien. L' inoculum fongique provient par exemple de la croissance d'une dose de 2g de racines mycorhizées de champignon endomycorhizien et par exemple de la croissance 10 d'une dose de 10 mg de poids sec de biomasse de champignon ectomycorhizien. Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, la composition comprend : a. un inoculum fongique, b. de la poudre de termitières, c. un substrat choisi parmi le compost provenant de résidus de culture et 15 préférentiellement de terreau, le sable., ou un mélange de sable et de compost, le rapport poudre de termitières : substrat étant compris de 1% (v:v) à 10% (v:v ) et préférentiellement de 1% (v:v) à 5% (v:v) et valant plus préférentiellement 1% (v:v) et le rapport inoculum fongique : substrat étant compris de 1% (v:v) à 10% (v:v) préférentiellement de 1% (v:v) à 5% (v:v) et valant plus préférentiellement 1% (v:v) 20 Selon un mode de réalisation préféré, dans toutes les compositions décrites ci-dessus, la poudre de termitières provient de termites du genre Macrotermes et préférentiellement du genre Macrotermes subhyalinus. L'invention concerne également un procédé de stimulation de la mycorhization dans des espaces destinés aux cultures, dans lesquelles un mélange d'inoculum 25 fongique et de poudre de termitières, éventuellement broyée, ont été introduits, l'inoculum fongique étant préparé par croissance d'au moins un champignon endomycorhizien avec un support ou par croissance d'au moins un champignon ectomycorhizien sur un support et ledit inoculum étant utilisé à une dose par élément unitaire de culture, notamment graine ou plant, d'environ au moins dix fois inférieure 30 à la dose utilisée en l'absence de poudre de termitières. L'expression élément unitaire de culture désigne ici une graine, semence, grain, fruit, pépin, noyau ou une plante sans être limité à ceux-ci permettant d'obtenir une culture forestière, céréalière, fourragère, maraîchère, fruitière ou horticole. 2904309 12 Selon un mode de réalisation préféré du procédé ci-dessus, la dose d'inoculum fongique par élément unitaire de culture est comprise de 0,01 à 1 ml et préférentiellement de 0.01 à 0.1 ml. Selon un autre mode de réalisation préféré de l'invention, l'inoculum utilisé 5 dans le procédé ci-dessus est un inoculum fongique spécifique de l'endomycorhization comprenant au moins un champignon endomycorhizien du genre Glomus, notamment choisi parmi Glomus mosseae, Glomus fasciculatus, Glomus aggregatum, Glomus intraradices et préférentiellement Glomus intraradices. Selon encore un autre mode de réalisation préféré de l'invention, l'inoculum 10 utilisé dans le procédé ci-dessus est un inoculum fongique spécifique de l'ectomycorhization comprenant au moins un champignon ectomycorhizien du genre Pisolithus, notamment choisi parmi Pisolithus albus, Pisolithus tinctorius, ou du genre Scleroderma, notamment choisi parmi Scleroderma dyctiosporum, Scleroderma verrucosum et préférentiellement Scleroderma dictyosporum. 15 Dans un autre mode de réalisation, l'inoculum fongique est un inoculum comprenant au moins un champignon endomycorhizien du genre Glomus, notamment choisi parmi Glomus mosseae, Glomus fasciculatus, Glomus aggregatum, Glomus intraradices et préférentiellement Glomus intraradices et au moins un champignon ectomycorhizien du genre Pisolithus, notamment choisi parmi Pisolithus albus, 20 Pisolithus tinctorius, ou du genre Scleroderma, notamment choisi parmi Scleroderma dyctiosporum, Scleroderma verrucosum et préférentiellement Scleroderma dictyosporum. Selon un mode de réalisation préféré du procédé ci-dessus, la taille des particules de ladite poudre est comprise de 1 m à 1000 m et préférentiellement de 1 m à 500 25 m. Selon un autre mode de réalisation préféré, la poudre de termitièresprovient de termites du genre Macrotermes et préférentiellement du genre Macrotermes subhyalinus. Selon encore un autre mode de réalisation du procédé ci-dessus, un mélange 30 d'inoculum fongique et de poudre de termitières, éventuellement broyée, en association avec un substrat ont été introduits, l'inoculum fongique et la poudre de termitières ayant été mélangés avec un substrat et ledit inoculum fongique étant préparé par croissance d'un champignon mycorhizien sur un support. 2904309 13 Selon un mode de réalisation préféré, le rapport inoculum : poudre de termitières est compris de 0,1 Vo (v:v) à 10 /b (v:v), préférentiellement 0,1 (v:v) à 5% (v:v) et plus préférentiellement de 0,1% (v:v) à 1% (v:v). Selon un autre mode de réalisation préféré, l'inoculum fongique est préparé par 5 croissance d'au moins un champignon endomycorhizien à la dose d'environ 2g de racines mycorhizées dudit champignon endomycorhizien sur un support constitué de sable en association avec une plante mycotrophe ou par croissance d'au moins un champignon ectomycorhizien à la dose d'environ 10 mg de poids sec de biomasse de champignon ectomycorhizien sur un support constitué de tourbe/vermiculite (1 :4, v:v) 10 ou de billes d'alginate de calcium. Selon encore un autre mode de réalisation préféré, l'inoculum fongique et la poudre de termitières sont mélangés avec un substrat, ledit substrat étant choisi parmi le sable, le compost provenant de résidus de culture et préférentiellement de terreau, ou un mélange de sable et de compost, 15 le rapport inoculum fongique : substrat étant compris de 1% (v:v) et 10% (v:v) et préférentiellement 1% (v:v) et 5% (v:v) et valant préférentiellement 1% (v:v) et le rapport poudre de termitières : substrat étant compris de 1% (v:v) et 10% (v:v) et préférentiellement 1% (v:v) )à 5%(v:v) et valant préférentiellement 1% (v :v) Selon un mode de réalisation préféré, le procédé comporte une étape 20 d'introduction d'un élément unitaire de culture dans des espaces destinés aux cultures contenant préalablement l'inoculum fongique et la poudre de termitières, ledit élément unitaire de culture étant notamment une graine ou un plant. La graine ou le plant sont introduits dans un espace contenant déjà l'inoculum fongique. 25 Selon un autre mode de réalisation, le procédé comprend les étapes suivantes : a. préparation de l'inoculum fongique par croissance d'au moins un champignon endomycorhizien et croissance d'au moins un champignon ectomycorhizien sur un support, b. mélange de la poudre de termitières, éventuellement broyée, et de l'inoculum 30 fongique avec un substrat, c. introduction du mélange obtenu à l'étape précédente dans des espaces destinés aux cultures à la dose par élément unitaire de culture de 0,01 à 1 ml d'inoculum fongique et: préférentiellement de 0.01 à 0.1 ml d'inoculum fongique, 2904309 14 d. introduction d'un élément unitaire de culture, notamment d'une graine à cultiver ou d'un plant, dans les espaces destinés aux cultures contenant le mélange. Ce procédé comporte une étape de pré-inoculation des plants en terrine dans un volume de sol 5 réduit ce qui procure l'avantage d'éviter les pertes de propagules fongiques habituellement enregistrées dans les techniques classiques de mycorhization. PARTIE EXPERIMENTALE Exemple 1 : Préparation de l'inoculum fongique endomycorhizien 10 Le champignon endomycorhizien se présente sous forme de racines sèches mycorhizées, coupées en morceaux de 1 mm et mélangées à du sable (stérilisé à 140 C, pendant 40 min) à la dose utile de 2g de racines mycorhizées, en présence d'une plante mycotrophe. Ce mélange est laissé croître pendant 4 mois. 15 Exemple 2 : Préparation de l'inoculum fongique ectomycorhizien a. support tourbe-vermiculite Le champignon ectomycorhizien est introduit à la dose de 10 mg de poids sec de biomasse champignon ectomycorhizien dans des bocaux remplis par un substrat 20 tourbe:vermiculite (1 :4 ; v :v) et humidifié par une solution nutritive permettant à la souche fongique de coloniser le milieu. Après 3 mois d'incubation à 28 C et à l'obscurité, le substrat colonisé par le champignon sera soigneusement mélangé et homogénéisé pour être ultérieurement apporté au sol de culture (Duponnois & Garbaye, Annales des Sciences Forestières, 1991 ; 48, 239-251), 25 b. Support billes d'alginate de calcium Le mycélium ectomycorhizien est introduit à la dose de 10 mg de poids sec de biomasse champignon ectomycorhizien est multiplié dans un milieu nutritif liquide en fermenteur puis broyé et mélangé à une solution d'alginate de sodium 30 Cette suspension de fragments de mycélium est ensuite versée goutte à goutte dans une solution de chlorure de calcium. L'alginate polymérise en présence de calcium donnant ainsi des billes d'alginate de calcium de diamètre choisi contenant les propagules fongiques. 2904309 15 Exemple 3 : Préparation de la poudre de termitières Des structures biogéniques de termitières de Macrothermes subhyalinus sont prélevées sur le terrain, séchées à l'air ambiant puis réduites en poudre à l'aide d'un pilon puis tamisée sur un tamis de 500 m (Duponnois et al., Geoderma, 2005 ; 124: 5 349-361.). Exemple 4 : Préparation des mini-mottes. Des terrines de dimensions 30 x 20 x 10 cm sont remplies par un sol sableux carencé en phosphore et en azote, préalablement stérilisé. Ce sol est mélangé avec 10 l'inoculum fongique à différentes doses (10, 5, 1 et 0%, v : v) et avec la poudre de termitières à raison de 10, 5, 1 et 0% (v : v) pour réaliser les différentes combinaisons inoculum fongique / poudre de termitières. L)es graines de Acacia holosericea sont préalablement désinfectées en surface avec de l'acide sulfurique concentré (36 N) pendant 30 min puis lavées et immergées dans de l'eau distillée stérile pendant 12 15 heures. Les graines ainsi préparées sont ensuite plantées dans les mélanges sol / inoculum fongique / poudre de 'termitières à raison de 400, 200 et 100 graines par terrine. Les terrines de semis ainsi, préparées sont placées en serre selon un dispositif en randomisation totale. 20 Exemple5 : Transfert des plants Après 1, 2 et 3 mois de culture dans les terrines, 10 plants par traitement sont prélevés au hasard dans chaque traitement et transférés dans des gaines de 1 litre remplies par le même sol sableux stérilisé ou par un substrat de culture généralement utilisé dans les pépinières forestières (mélange de sable non stérilisé et de compost 25 organique). Les plants sont élevés en serre pendant une durée totale de 4 mois (culture en terrine et culture en gaine), période requise en pépinière forestière avant leur transfert au champ lors de la mise en place de la plantation. Les plants sont ensuite dépotés, leurs biomasses (aérienne et racinaire) pesées et les taux de mycorhization déterminés. Les résultats sont comparés à ceux obtenus sur des plants ayant été élevés selon les 30 techniques classiques dans des gaines de 11 remplies par un sol stérilisé ou par un mélange sable/compost et un amendement en inoculum fongique à 10% (v :v) (Duponnois et al., Forest Ecology & Management, 2005 ; 207: 351-362.). REVENDICATIONS 1. Utilisation d'au moins un inoculum fongique et de poudre de termitières, en tant qu'agent stimulant la mycorhization de cultures notamment forestières, céréalières, fourragères, maraîchères, fruitières ou horticoles, ledit inoculum étant utilisé à une dose par élément unitaire de culture, notamment graine ou plant, d'environ au moins dix fois inférieure à la dose utilisée en l'absence de poudre de termitières. 2. Utilisation selon la revendication 1, dans laquelle la poudre de termitières provient de termites du genre Macrotermes et préférentiellement du genre Macrotermes subhyalinus. 3. Utilisation selon l'une des revendications 1 ou 2, dans laquelle l'inoculum fongique comprend au moins un champignon endomycorhizien, du genre Glomus, notamment choisi parmi Glomus mosseae, Glomus fasciculatus, Glomus aggregatum, Glomus intraradices et préférentiellement Glomus intraradices. 4. Utilisation selon l'une des revendications 1 ou 2, dans laquelle l'inoculum fongique comprend au moins un champignon ectomycorhizien, du genre Pisolithus, notamment choisi parmi Pisolithus albus, Pisolithus tinctorius, ou du genre Scleroderma, notamment choisi parmi Scleroderma dyctiosporum, Scleroderma verrucosum et préférentiellement Scleroderma dictyosporum, 5. Utilisation selon l'une des revendications 1 ou 2, dans laquelle l'inoculum fongique comprend un champignon endomycorhizien du genre Glomus, notamment choisi parmi Glomus mosseae, Glomus fasciculatus, Glomus aggregatum, Glomus intraradices et préférentiellement Glomus intraradices et un champignon ectomycorhizien du genre Pisolithus, notamment choisi parmi Pisolithus albus, Pisolithus tinctorius, ou du genre Scleroderma, notamment choisi parmi Scleroderma dyctiosporum, Scleroderma verrucosum et préférentiellement Scleroderma dictyosporum, 6. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 5, dans laquelle l'inoculum fongique est préparé par croissance d'un champignon endomycorhizien sur un support, notamment 2904309 17 en présence d'une plante mycotrophe, notamment de type sable, ou croissance d'un champignon ectomycorhizien sur un support de type tourbe-vermiculite ou de billes d'alginate de calcium. 5 7. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 6, dans laquelle l'inoculum fongique et la poudre de termitières sont associés à un substrat, notamment choisi parmi le sable, le compost provenant de résidus de culture et préférentiellement de terreau, ou un mélange de sable et de compost. 10 8. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 7, dans laquelle le rapport inoculum : poudre de termitières est compris de 0,1 % (v:v) à 10 % (v:v), préférentiellement 0,1%(v:v) à 5% (v:v) et plus préférentiellement de 0,1% (v:v) à 1% (v:v) 9. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 8, dans laquelle le rapport inoculum 15 fongique : substrat de l'inoculum est compris de 1% (v:v) à 10% (v:v), préférentiellement de 1% (v:v) à 5% (v:v) et vaut plus préférentiellement 1% (v:v) 10. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 9, dans laquelle le rapport poudre de termitières : substrat de l'inoculum est compris de 1% (v:v) à 10% (v:v) et 20 préférentiellement de 1% (v:v) à 5% (v:v) et vaut plus préférentiellement 1% (v:v). 11. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3 et 6 à 10, notamment de champignon endomycorhizien, dans des espaces destinés aux cultures, notamment céréalières, fourragères, maraîchères, fruitières ou horticoles et préférentiellement maraîchères, 25 fruitières ou horticoles. 12. Utilisation selon l'une des revendications 1 ou 2 et 4 à 10, notamment de champignon ectomycorhizien, dans des espaces destinés aux cultures forestières. 30 13. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 10, notamment de champignon endomycorhizien et ectomycorhizien, dans des espaces destinés aux cultures forestières, notamment les essences ligneuses des genres Casuarina, Allocasuarina, Eucalyptus et Acacia d'origine australienne. 2904309 18 14. Composition comprenant : a. un inoculum fongique comprenant au moins un champignon endomycorhizien du genre Glomus, notamment choisi palmi Glomus mosseae, Glomus fasciculatus, Glomus aggregatum, Glomus intraradices et préférentiellement 5 Glomus intraradices, b. de la poudre de termitières, la taille des particules de ladite poudre de termitières étant comprise de 1 m à 1000 m et préférentiellement de 1 m à 500 m, le rapport inoculum fongique : poudre de termitières étant compris de 0,1 % (v:v) à 10 10 % (v:v), préférentiellement 0,1 (v:v) à 5% (v:v) et plus préférentiellement de 0,1 (v:v) à 1% (v :v) 15. Composition selon la revendication 14, dans laquelle l'inoculum fongique, comprend: i. au moins un champignon endomycorhizien résultant par exemple de la 15 croissance d'une dose d'environ 2g de racines mycorhizées dudit champignon endomycorhizien, ii. un support de type sable, iii. une plante mycotrophe 20 16. Composition selon l'une des revendications 14 ou 15, comprenant : a. un inoculum fongique comprenant au moins un champignon endomycorhizien, b. de la poudre de termitières, 25 c. un substrat choisi parmi le compost provenant de résidus de culture et préférentiellement de terreau, le sable, ou un mélange de sable et de compost, le rapport poudre de termitières : substrat étant compris de 1% (v:v) à 10% (v:v ) et préférentiellement de 1% (v:v) à 5% (v:v) et vaut plus préférentiellement de 1% (v:v) et le rapport inoculum fongique : substrat étant compris de 1% (v:v) à 30 10% (v:v) préférentiellement de 1% (v:v) à 5%(v:v) et valant plus préférentiellement 1% (v:v). 17. Composition comprenant: 2904309 19 a. un inoculum fongique, comprenant au moins un champignon ectomycorhizien, du genre Pisolithus, notamment choisi parmi Pisolithus albus, Pisolithus tinctorius, ou du genre Scleroderma, notamment choisi parmi Scleroderma dyctiosporum, Scleroderma verrucosum et préférentiellement Scleroderma 5 dictyosporum, b. de la poudre de termitières, la taille des particules de ladite poudre étant comprise de 1 m à 1000 m préférentiellement de 1 m à 500 m, 10 c. un substrat choisi parmi le sable, le compost provenant de résidus de culture et préférentiellement de terreau, ou un mélange de sable et de compost, le rapport inoculum fongique : poudre de termitières étant compris de 0,1 % (v:v) à 10% (v:v), préférentiellement de 0,1% (v:v) à 5% (v:v) et plus préférentiellement de 0,1% (v:v) à 1% (v:v), et 15 le rapport inoculum fongique : substrat étant compris de 1% (v:v) à 10% (v:v) préférentiellement de 1% (v:v) à 5% (v:v) et valant plus préférentiellement 1% (v:v), et le rapport poudre de termitières : substrat étant compris de 1% (v:v) à 10% (v:v) et préférentiellement de 1% (v:v) à 5% (v:v) et valant plus préférentiellement 1% 20 (v:v) sous réserve qu'au moins l'un des deux rapports, inoculum fongique : substrat ou poudre de termitières : substrat, soit inférieur à 10% (v :v) et préférentiellement que l'un au moins des deux susdits rapports soit compris de 1% (v :v) à 5% (v :v). 25 18. Composition selon la revendication 17, dans laquelle l'inoculum fongique, comprend: i. au moins un champignon ectomycorhizien, résultant par exemple de la croissance d'une dose de 10 mg de poids sec de biomasse de champignon ectomycorhizien. ii. un support de type tourbe-vermiculite (1 :4, v:v) ou billes d'alginate de 30 calcium. 19. Composition comprenant : a. un inoculum fongique comprenant un champignon endomycorhizien du genre Glomus, notamment choisi parmi Glomus mosseae, Glomus fasciculatus, Glomus aggregatum, Glomus intraradices et préférentiellement Glomus 2904309 20 intraradices et un champignon ectomycorhizien du genre Pisolithus, notamment choisi parmi Pisolithus albus, Pisolithus tinctorius, ou du genre Scleroderma, notamment choisi parmi Scleroderma dyctiosporum, Scleroderma verrucosum et préférentiellement Scleroderma dictyosporum, 5 b. de la poudre de termitières, la taille des particules de ladite poudre étant comprise de 1 .im à 1000 m et préférentiellement de 1 m à 500 m, le rapport inoculum fongique : poudre étant compris de 0,1 % (v:v) à 10 % (v:v), préférentiellement 0,1 % (v:v) à 5 % (v:v), et plus 10 préférentiellement de 0,1 % (v:v) à 1% (v :v). 20. Composition selon la revendication 19, dans laquelle l'inoculum fongique, comprend: i. au moins un champignon endomycorhizien résultant par exemple de la croissance d'une dose d'environ 2g de racines mycorhizées dudit champignon endomycorhizien et un champignon ectomycorhizien résultant par exemple de la croissance d'une dose de 10 mg de poids sec de biomasse de champignon ectomycorhizien, ii. un support de type sable en association avec une plante mycotrophe pour le champignon endomycorhizien et un support de type tourbe-vermiculite (1 :4, v:v) ou billes d'alginate de calcium pour le champignon ectomycorhizien. 21. Composition selon l'une des revendications 19 ou 20, comprenant : a. un inoculum fongique, 25 b. de la poudre de termitières, c. un substrat choisi parmi le compost provenant de résidus de culture et préférentiellement de terreau, le sable, ou un mélange de sable et de compost, le rapport poudre de termitières : substrat étant compris de 1% (v:v) à 10% (v:v ) et 30 préférentiellement de 1% (v:v) à 5% (v:v) et valant plus préférentiellement 1% (v:v) et le rapport inoculum fongique : substrat étant compris de 1% (v:v) à 10% (v:v) préférentiellement de 1% (v:v) à 50/0 (v:v) et valant plus préférentiellement 1% (v:v) 15 20 2904309 21 22. Composition selon l'une des revendications 14 à 21, dans laquelle la poudre de termitières provient de termites du genre Macrotermes et préférentiellement du genre Macrotermes subhyalinus. 5 23. Procédé de stimulation de la mycorhization dans des espaces destinés aux cultures, dans lesquelles un mélange d'inoculum fongique et de poudre de termitières, éventuellement broyée, ont été introduits, l'inoculum fongique étant préparé par croissance d'au moins un champignon endomycorhizien avec un support ou par croissance d'au moins un champignon ectomycorhizien sur un support et ledit 10 inoculum étant utilisé à une dose par élément unitaire de culture, notamment graine ou plant, d'environ au moins dix fois inférieure à la dose utilisée en l'absence de poudre de termitières. 24. Procédé selon la revendication 23, dans lequel la dose d'inoculum fongique par 15 élément unitaire de culture est comprise de 0,01 à 1 ml et préférentiellement de 0.01 à 0.1 ml. 25. Procédé selon l'une des revendications 23 ou 24, dans lequel l'inoculum fongique est un inoculum fongique spécifique de l'endomycorhization comprenant au moins un 20 champignon endomycorhizien du genre Glomus, notamment choisi parmi Glomus mosseae, Glomus fasciculatus, Glomus aggregatum, Glomus intraradices et préférentiellement Glomus intraradices 26. Procédé selon l'une des revendications 23 ou 24, dans lequel l'inoculum fongique est 25 un inoculum fongique spécifique de l'ectomycorhization comprenant au moins un champignon ectomycorhizien du genre Pisolithus, notamment choisi parmi Pisolithus albus, Pisolithus tinctorius, ou du genre Scleroderma, notamment choisi parmi Scleroderma dyctiosporum, ,Scleroderma verrucosum et préférentiellement Scleroderma dictyosporum. 30 27. Procédé selon l'une des revendications 23 ou 24, dans lequel l'inoculum fongique est un inoculum comprenant au moins un champignon endomycorhizien du genre Glomus, notamment choisi parmi Glomus mosseae, Glomus fasciculatus, Glomus aggregatum, Glomus intraradices et préférentiellement Glomus intraradices et au 2904309 22 moins un champignon ectomycorhizien du genre Pisolithus, notamment choisi parmi Pisolithus albus, Pisolithus tinctorius, ou du genre Scleroderma, notamment choisi parmi Scleroderma dyctiosporum, Scleroderma verrucosum et préférentiellement Scleroderma dictyosporum. 28. Procédé selon l'une des revendications 23 à 27, dans lequel la taille des particules de ladite poudre est comprise de 1 gm à 1000 gm et préférentiellement de 1 gm à 500 m. 10 29. Procédé selon l'une des revendications 23 à 28, dans lequel la poudre de termitières provient de termites du genre Macrotermes et préférentiellement du genre Macrotermes subhyalinus. 30. Procédé de stimulation de la mycorhization dans des espaces destinés aux cultures 15 selon l'une des revendications 2.3 à 29, dans lequel un mélange d'inoculum fongique et de poudre de termitières, éventuellement broyée, en association avec un substrat ont été introduits, l'inoculum fongique et la poudre de termitières ayant été mélangés avec un substrat et ledit inoculum fongique étant préparé par croissance d'un champignon mycorhizien sur un support. 31. Procédé selon l'une des revendications 23 à 30, dans lequel le rapport inoculum : poudre de termitières est compris de 0,1 % (v:v) à 10 % (v:v), préférentiellement 0,1 (v:v) à 5% (v:v) et plus préférentiellement de 0,1% (v:v) à 1% (v:v). 25 32. Procédé selon l'une des revendications 30 à 31, dans lequel l'inoculum fongique est préparé par croissance d'au moins un champignon endomycorhizien à la dose utile d'environ 2g de racines mycorhizées sur un support constitué de sable en association avec une plante mycotrophe ou par croissance d'au moins un champignon ectomycorhizien à la dose utile d'environ 10 mg de poids sec de biomasse de 30 champignon ectomycorhizien sur un support constitué de tourbe/vermiculite (1 :4, v:v) ou de billes d'alginate de calcium. 33. Procédé selon l'une des revendications 30 à 32, dans lequel l'inoculum fongique et la poudre de termitières sont mélangés avec un substrat, ledit substrat étant choisi parmi 5 20 .2904309 23 le sable, le compost provenant de résidus de culture et préférentiellement de terreau, ou un mélange de sable et de compost, le rapport inoculum fongique : substrat étant compris de 1% (v:v) et 10% (v:v) et préférentiellement 1% (v:v) et :5% (v:v) et valant préférentiellement 1% (v:v) et 5 le rapport poudre de termitières : substrat étant compris de 1% (v:v) et 10% (v:v) et préférentiellement 1% (v:v)à 5%(v:v) et valant préférentiellement 1% (v :v) 34. Procédé selon l'une des revendications 30 à 33, comportant une étape d'introduction d'un élément unitaire de culture dans des espaces destinés aux cultures contenant 10 préalablement l'inoculum fongique et la poudre de termitières, ledit élément unitaire de culture étant notamment une graine ou un plant. 35. Procédé selon l'une des revendications 30 à 34, comprenant les étapes suivantes : 15 a. préparation de l'inoculurn fongique par croissance d'au moins un champignon endomycorhizien et d'au moins un champignon ectomycorhizien sur un support, b. mélange de la poudre de termitières, éventuellement broyée, et de l'inoculum 20 fongique avec un substrat, c. introduction du mélange obtenu à l'étape précédente dans les espaces destinés aux cultures à la dose par élément unitaire de culture de 0,01 à 1 ml d'inoculum fongique et préférentiellement de 0.01 à 0.1 ml d'inoculum 25 fongique, d. introduction d'un élément unitaire de culture, notamment d'une graine à cultiver ou d'un plant, dans des espaces destinés aux cultures contenant le mélange.