Brevet FR2901717A1 — publié le 20071207

Procédé de traitement de gouttes dans un circuit microfluidique L'invention concerne un procédé de traitement de gouttes dans un circuit microfluidique qui comprend au moins un microcanal contenant un fluide. On connaît, par la demande de brevet FR-A-2873171 des demandeurs, un circuit microfluidique réalisé en un matériau approprié tel par exemple que du PDMS (poly-dymethylsiloxane) comportant des microcanaux ayant typiquement une largeur d'environ 10011m et une profondeur de 50 m, dans lesquels on peut faire passer des débits très faibles de fluides tels que de l'air, de l'eau, de l'huile, des réactifs, etc. Un faisceau laser dont la longueur d'onde n'est pas absorbée par le matériau constitutif du circuit, est focalisé sur l'interface d'un premier fluide s'écoulant dans un microcanal et d'un second fluide présent au moins localement dans ce microcanal, pour forcer ou pour arrêter l'écoulement du premier fluide dans le microcanal, pour le fractionner en gouttes, pour le mélanger au second fluide, etc, la focalisation du faisceau laser sur l'interface des fluides créant un gradient de température le long de cette interface et provoquant un mouvement des fluides par convection thermocapillaire. La présente invention a pour objet des applications particulières de la technique décrite dans ce document antérieur. Elle propose un procédé de traitement de gouttes dans un circuit microfluidique comprenant au moins un microcanal contenant un premier fluide, caractérisé en ce qu'il consiste à trier des gouttes d'un second fluide contenu dans le premier fluide, ou à fractionner ces gouttes en nanogouttes ou à fusionner ces gouttes quand elles contiennent des fluides différents, par focalisation sur les interfaces desdites gouttes et du premier fluide ou sur les interfaces desdites gouttes entre elles, respectivement, d'un faisceau laser dont la longueur d'onde est choisie pour être absorbée par le second fluide contenu dans les gouttes ou par des fluides différents 2 contenus dans les gouttes, respectivement, le premier fluide et le matériau constitutif du microcanal étant transparents à cette longueur d'onde. L'invention permet, par focalisation d'un faisceau laser sur l'interface de deux fluides, de réaliser de façon simple et efficace des opérations qui n'étaient pas possibles dans la technique antérieure ou qui nécessitaient l'utilisation de moyens lourds et complexes : - trier des gouttes de nature différente, ce que l'on ne savait faire auparavant qu'avec une boucle informatique de reconnaissance des gouttes et de commande d'électrodes implantées dans le circuit, - former des nano-gouttes et fusionner des gouttes contenant des fluides différents et ainsi former des séries de microréacteurs quand les fluides réagissent l'un sur l'autre ou les uns avec les autres, ce qui n'était pas possible avec les moyens de la technique antérieure. Selon une autre caractéristique de l'invention, ce procédé consiste également, pour trier des gouttes du second fluide présentes dans le premier fluide, à focaliser le faisceau laser en amont d'un embranchement en Y dont le sommet comprend une pointe orientée vers l'amont, le point de focalisation du faisceau laser se trouvant entre l'extrémité de cette pointe et la paroi du microcanal opposée à la direction de déviation des gouttes. Ce procédé consiste également, pour trier des gouttes de différents fluides présentes dans le premier fluide en fonction de la sensibilité de la tension de surface de ces différents fluides à la chaleur, à régler l'énergie transmise aux interfaces des gouttes par le faisceau laser pour dévier ou non ces gouttes. On peut ainsi, par exemple, utiliser un faisceau laser dont la puissance est suffisante pour produire un gradient de tension de surface sur une interface eau-air qui va dévier des bulles d'air contenues dans un écoulement d'eau, la puissance du faisceau laser étant toutefois trop faible pour produire un gradient de tension de surface suffisant sur une interface liquide-liquide. 3 Il est également possible, par addition d'un produit tensioactif approprié à un liquide, de modifier la tension de surface du liquide pour agir avec le faisceau laser sur les interfaces de gouttes liquide-liquide, par exemple pour dévier des gouttes de liquide sans dévier des bulles de gaz. Dans une variante de l'invention, ce procédé consiste aussi à déposer sur la surface du microcanal un point d'une matière absorbant le faisceau laser et à diriger le faisceau laser sur ce point au passage des gouttes à trier. Dans ce cas, le tri est actif et nécessite une commande appropriée du faisceau laser. Selon une autre caractéristique de l'invention, le procédé consiste, pour fractionner une goutte en nano-gouttes, à immobiliser la goutte par focalisation du faisceau laser sur son interface aval dans un écoulement du premier fluide contenant un produit tensioactif, et à détacher des nano- gouttes de la goutte précitée au moyen de cet écoulement de fluide. On constate en effet qu'il se forme, sur la goutte immobilisée par le faisceau laser, une pointe très fine qui est dirigée vers l'aval et dont des nano-gouttes peuvent être éjectées lorsqu'il existe un gradient de vitesse suffisant de l'écoulement du premier fluide sur cette pointe. Les nano- gouttes ainsi produites sont entraînées par le premier fluide et peuvent ensuite être dirigées dans un autre microcanal pour des analyses ou des utilisations ultérieures. La grande différence de taille entre les nano-gouttes et les autres gouttes peut être utilisée pour séparer les nano-gouttes à l'extérieur du microcanal par sédimentation, par exemple dans une centrifugeuse. En pratique, la goutte à fractionner peut être transportée dans le premier microcanal par l'écoulement du fluide contenant le produit tensioactif et le point de focalisation du faisceau laser se trouve alors au voisinage immédiat de l'embranchement de ce microcanal et d'un autre microcanal dans lequel sont déviés les nano-gouttes. 4 En variante, la goutte à fractionner peut être formée et immobilisée à la jonction d'un microcanal contenant le second fluide et d'au moins un microcanal dans lequel s'écoule le fluide contenant le produit tensioactif. Selon encore une autre caractéristique de l'invention, ce procédé consiste, pour fusionner deux gouttes contenant des fluides différents, à mettre les gouttes en contact l'une avec l'autre dans un écoulement du premier fluide, puis à focaliser le faisceau laser sur l'interface des deux gouttes. Les fluides différents peuvent être des solutions différentes, formées de solutés différents contenus dans un même solvant. On peut par exemple bloquer le transport d'une première goutte dans le microcanal précité par focalisation du faisceau laser sur l'interface aval de cette goutte et du premier fluide jusqu'à l'arrivée d'une seconde goutte contenant un fluide différent de celui de la première goutte, puis focaliser le faisceau laser sur l'interface des deux gouttes pour les fusionner. Les fluides contenus dans ces gouttes sont miscibles et la focalisation du faisceau laser sur les interfaces des gouttes réalise le mélange de ces fluides. Selon un aspect particulièrement intéressant de l'invention, les fluides contenus dans les gouttes réagissent l'un avec l'autre, les gouttes fusionnées formant des microréacteurs. On peut faire varier la taille des gouttes à fusionner, pour faire varier les quantités des réactifs mélangés lors de la fusion des gouttes. Par ailleurs, au moins une des gouttes à fusionner peut contenir au moins deux fluides différents qui sont mélangés l'un avec l'autre lorsque le faisceau laser est focalisé sur une interface de cette goutte. La réaction des fluides contenus dans les gouttes fusionnées peut être initiée par le faisceau laser focalisé sur les interfaces des gouttes. On peut ensuite surveiller les réactions qui se déroulent dans les 30 gouttes fusionnées en observant au microscope, de façon continue ou discontinue, au moins une partie du trajet parcouru par les gouttes dans le circuit microfluidique. L'invention sera mieux comprise et d'autres caractéristiques, détails et avantages de celle-ci apparaîtront plus clairement à la lecture de la 5 description qui va suivre, faite à titre d'exemple en référence aux dessins annexés dans lesquels : - la figure 1 représente schématiquement le tri de gouttes dans un circuit microfluidique selon l'invention ; - les figures 2, 3 et 4 représentent schématiquement la formation de nano-gouttes dans un circuit microfluidique selon l'invention ; - la figure 5 représente schématiquement différentes phases de la fusion de gouttes dans un circuit microfluidique selon l'invention. Comme indiqué dans la demande de brevet antérieure FR-A-2873171 des demandeurs, le circuit microfluidique utilisé dans l'invention est formé par exemple par une plaque 10 d'un matériau approprié, tel qu'un polymère du type poly-dyméthylsiloxane (PDMS) par utilisation d'une technique courante de lithographie souple. Les microcanaux 12 peuvent être formés à la surface de la plaque 10, sur laquelle est collée une lame de microscope en verre. Typiquement, les microcanaux 12 ont une largeur de 1001,tm environ et une profondeur de 50 m. Ces dimensions peuvent être toutefois être très largement variables entre une échelle nanométrique et une échelle millimétrique. En figure 1, la partie représentée du circuit microfluidique comprend un microcanal 12 parcouru par un écoulement 14 d'un fluide tel que de l'eau, de l'huile, un réactif liquide, etc, contenant des gouttes ou des bulles 16 d'un second fluide et des gouttes ou des bulles 18 d'un troisième fluide qui ont été représentées de façon différente, les unes avec des hachures et les autres avec des pointillés pour être plus facilement distinguées les unes des autres. Pour le tri des gouttes 16 et 18 dans l'écoulement 14, le microcanal 12 se partage en aval en deux microcanaux 20, 22 en formant un 6 embranchement en Y dont le sommet peut comporter une pointe 24 orientée vers l'amont, qui s'étend sensiblement au milieu du microcanal 12 dans le sens orienté à l'opposé de l'écoulement 14. Cette pointe 24 n'est pas indispensable mais facilite la déviation des gouttes. Le tri est réalisé par focalisation d'un faisceau laser approprié 26 sur l'interface d'une goutte 16 ou 18 et du fluide formant l'écoulement 14, ce faisceau laser étant produit par exemple par un générateur à argon ionisé à émission continue ou pulsée avec une fréquence de répétition supérieure à 1 kHz environ, par exemple avec une longueur d'onde de 514nm et une puissance comprise entre 10 et 50mW. On peut également utiliser une diode laser ou un laser du type YAG, par exemple. La tâche du faisceau laser 26 qui correspond à l'impact de ce faisceau sur l'interface d'une goutte 16 ou 18, a un diamètre de l'ordre de 5 à 151am par exemple. La longueur d'onde du faisceau laser est choisie pour ne pas être absorbée par le matériau constitutif du circuit microfluidique, par le fluide formant l'écoulement 14 et par le fluide constituant les gouttes ou les bulles 18. Cette longueur d'onde est par contre absorbée par le fluide formant les bulles ou gouttes 16. Le faisceau laser est focalisé en un point qui est situé en amont de l'extrémité de la pointe 24 séparant les microcanaux 20 et 22, du côté du microcanal 12 qui est opposé à la direction du microcanal 20 dans lequel on veut dévier les bulles ou gouttes 16. La focalisation en ce point du faisceau laser 26 sur l'interface d'une goutte ou bulle 16 et du fluide formant l'écoulement 14, produit un gradient de température le long de cet interface, qui provoque un mouvement du fluide formant la bulle ou goutte 16 par convection thermocapillaire et dévie la bulle ou goutte 16 vers le microcanal 20, cette déviation étant facilitée par la pointe 24. Les bulles ou gouttes 18 de l'autre fluide sont transparentes au faisceau laser et ne sont pas déviées. Elles sont en conséquence transportées par l'écoulement 14 dans le microcanal 22. L'utilisation d'un faisceau laser ayant une longueur d'onde d'environ 514nm permet par exemple de trier des gouttes contenant de la fluorescéine qui absorbe cette longueur d'onde et des gouttes d'eau pure, qui sont transparentes à cette longueur d'onde. Le faisceau laser focalisé sur le trajet de ces gouttes permet de dévier celles contenant de la fluorescéine et de les envoyer dans un autre microcanal que celui qu'elles auraient emprunté normalement. En utilisant un laser ayant une longueur d'onde de l'ordre de 1480nm, on peut dévier des gouttes d'eau et laisser passer des gouttes d'huile. On peut également trier des bulles d'air pour les éliminer d'un 15 écoulement, en utilisant un faisceau laser dont la longueur d'onde est absorbée par l'azote, par exemple. En variante, on peut déposer un point de matière absorbant la longueur d'onde du faisceau laser sur la surface du microcanal 12 pour chauffer localement le fluide qui passe dans ce microcanal, même si ce 20 fluide n'absorbe pas la longueur d'onde du faisceau laser. On peut alors dévier certaines gouttes ou bulles en dirigeant le faisceau laser sur le point de matière absorbante quand ces bulles ou gouttes arrivent au niveau de ce point. On peut également, pour cela, mettre en route et arrêter le générateur laser aux moments voulus. 25 II est également possible de trier des fluides en fonction de la sensibilité de leur tension de surface à la chaleur. La puissance du faisceau laser utilisé peut être réglée pour produire un gradient de tension de surface sur une interface entre deux fluides, qui est suffisant pour dévier une bulle ou une goutte contenant l'un de ces deux fluides, et qui serait trop 30 faible pour produire une déviation d'une interface entre deux autres fluides. On peut par exemple dévier ainsi des bulles d'air contenues dans un 8 écoulement de liquide, en utilisant un faisceau laser dont la puissance est suffisante pour produire un gradient de tension de surface du niveau voulu sur une interface liquide-air et qui n'a pas d'effet de déviation sur une interface liquide-liquide. On peut aussi ajouter dans des liquides des produits tensioactifs appropriés qui vont permettre d'agir avec le faisceau laser sur des interfaces liquide-liquide pour dévier des gouttes de liquide sans dévier des bulles de gaz. La figure 2 représente un mode de formation de nano-gouttes à partir d'un écoulement d'un fluide F1 dans un microcanal 12 du circuit 10 au moyen d'un écoulement d'un autre fluide F2 dans deux microcanaux 30 qui sont alignés et perpendiculaires au microcanal 12 de part et d'autre de celui-ci. Le fluide F2 contient un produit tensioactif et n'est pas miscible avec le fluide F1. Un faisceau laser 26 dont la longueur d'onde n'est pas absorbée par le circuit microfluidique et par le fluide F2 et est absorbée par le fluide F1 est focalisé en un point central du microcanal 12 immédiatement en aval du croisement avec les microcanaux 30 pour former une vanne bloquant l'écoulement du fluide F1 dans le microcanal 12 en aval du croisement précité, comme décrit dans la demande de brevet français antérieure précitée. Le fluide F1 forme une goutte 32 sensiblement au niveau de l'intersection des microcanaux 12 et 30, cette goutte étant retenue par le faisceau laser 26 focalisé à l'interface aval entre cette goutte et le fluide F2. L'écoulement du fluide F2 sur cette goutte produit une pointe très fine 34 dont des très petites gouttes 36 sont détachées par entraînement par le fluide F2, ces petites gouttes 36 ayant une taille typiquement égale à la taille de la pointe 34, c'est-à-dire des dimensions très inférieures à celles de la goutte 32. Typiquement, ces petites gouttes 36 peuvent avoir une taille cent fois inférieure à celle de la goutte 32 et sont appelées nano- gouttes. 9 Dans un exemple de réalisation, le fluide F1 est de l'eau, le fluide F2 de l'huile contenant une faible quantité (2% en masse) d'un tensioactif tel que celui connu sous la dénomination SPAN 80, le faisceau laser 26 utilisé pour bloquer la goutte 32 a une puissance de l'ordre de 20 à 50 mW, le débit d'eau dans le microcanal 12 est de l'ordre de 0,2 microlitre/minute et le débit d'huile et de tensioactif dans les microcanaux 30 est de l'ordre de 0,9 microlitre/minute. Les nano-gouttes 36 produites ont une dimension de l'ordre de 1000nm. Dans la variante de réalisation de la figure 3, le fluide F1 et le fluide F2 s'écoulent en sens opposé l'un de l'autre dans deux microcanaux 12, 30 alignés, qui communiquent à leur jonction avec un troisième microcanal perpendiculaire 40. Le faisceau laser 26 est focalisé sur l'interface d'une goutte 42 du fluide F1 qui est formée au débouché du microcanal 12 et qui est retenue par le faisceau laser. Comme précédemment, il se forme sur l'interface de la goutte 42 une pointe très fine 44 orientée vers l'aval dans le microcanal 40 et dont des nano-gouttes 46 sont détachées par l'écoulement de fluide F2 contenant le produit tensioactif. Dans la variante de la figure 4, une goutte 48 du fluide FI est contenue dans un écoulement du fluide F2 passant dans un microcanal 12 qui se partage en aval en deux microcanaux 50 perpendiculaires au microcanal 12 et opposés l'un à l'autre. La goutte 48 de fluide F1 est déviée dans l'un des microcanaux 50 par focalisation du faisceau laser 26 en un point de son interface avec le fluide F2, du côté situé vers l'autre microcanal 50. II se forme au niveau du point d'impact du faisceau laser 26 une pointe 52 très fine orientée vers l'aval de cet autre microcanal 50 et dont des nano-gouttes 54 sont détachées par l'écoulement du fluide F2. On peut ainsi former des nano-gouttes 36, 46 et 54 qui sont enrobées du produit tensioactif et qui sont destinées par exemple à être analysées, lorsqu'il s'agit de prélèvements effectués sur une goutte du 10 fluide F2, ou qui sont destinées à un autre usage, par exemple à des réactions chimiques. La focalisation d'un faisceau laser de longueur d'onde appropriée sur l'interface de deux gouttes permet par ailleurs de fusionner ces deux gouttes, comme cela a été représenté schématiquement en figure 5. De façon générale, il est difficile, voire impossible, dans la technique antérieure de fusionner des gouttes contenant des fluides différents et qui sont transportés par un troisième fluide, car non seulement les flux des trois fluides interagissent de façon dynamique, mais de plus le troisième fluide forme un film de séparation entre les gouttes contenant les premier et deuxième fluides. Selon l'invention, la focalisation d'un faisceau laser sur l'interface entre deux gouttes permet de produire un écoulement qui dégage le film du troisième fluide séparant les deux gouttes et qui permet ainsi leur fusion. Dans l'exemple de réalisation de la figure 5, un premier fluide FI est contenu dans une goutte 60 transportée par un écoulement de fluide F3 dans un microcanal 12, dans lequel débouche un microcanal 62 parcouru également par un écoulement du fluide F3 et contenant des gouttes 64 d'un autre fluide F2 (le microcanal 62 pouvant en variante être parcouru par un écoulement du fluide F2), les fluides F1 et F2 étant miscibles. En figure 5a, la focalisation d'un faisceau laser 26 sur l'interface d'une goutte 64 du fluide F2 sortant du microcanal 62, légèrement en aval du débouché de ce microcanal dans le premier microcanal 12, permet de bloquer la goutte 64 jusqu'à l'arrivée d'une goutte 60 du fluide F1. Quand cette goutte 60 percute la partie de la goutte 64 de fluide F2 qui se trouve dans le microcanal 12 comme représenté en figure 5b, les deux gouttes 60 et 64 commencent à avancer ensemble dans le microcanal 12 jusqu'à ce que leur interface de contact traverse le faisceau laser 26 comme représenté en figure 5c. A ce moment, l'écoulement induit par le chauffage de l'interface par le faisceau laser provoque la fusion des deux gouttes en une goutte unique 11 66 comme représenté en figure 5d et le mélange des fluides F1 et F2 à l'intérieur de cette goutte unique. Ensuite, comme représenté en figure 5e, la goutte unique 66 est entraînée par l'écoulement du fluide F3 dans le microcanal 12. Cette goutte unique 66 forme un microréacteur lorsque les fluides FI et F2 mélangés réagissent l'un avec l'autre. La réaction peut être surveillée par observation de la goutte 66 au microscope, le long de son trajet dans le microcanal 12. Eventuellement, ce trajet peut être déterminé pour que la goutte 66 reste dans le champ d'observation du microscope ou repasse à intervalles réguliers dans ce champ d'observation. On comprend que l'on peut faire varier à volonté les tailles des gouttes 60 et 64 contenant les fluides F1 et F2 et donc faire varier à volonté les quantités de ces fluides qui réagissent l'un avec l'autre dans la goutte unique 66. Cela permet d'effectuer très rapidement des séries de réactions avec des concentrations variables de réactifs. L'action du faisceau laser 26 à l'intérieur de la goutte 66 permet également, par chauffage, d'initier la réaction entre les fluides FI et F2. Cette action a également pour effet de produire un mélange de ces fluides à l'intérieur de la goutte unique 66. On peut également prévoir qu'une des gouttes 60 et 64 contienne, non pas un fluide unique mais deux fluides différents, qui peuvent être mélangés par action du faisceau laser 26 sur la goutte qui les contient. Les gouttes 66 qui forment des microréacteurs ont typiquement des volumes de l'ordre du nanolitre ou même du picolitre. On voit que, de façon générale, le faisceau laser agissant sur l'interface d'une goutte ou d'une bulle de fluide peut être utilisé comme un actionneur intelligent ayant un nombre important de fonctions telles que le blocage de la goutte, la déviation de la goutte, la formation de nano- gouttes, la fusion de la goutte avec une autre goutte, le mélange du ou des 12 fluides contenus dans la goutte, et le déclenchement d'une réaction chimique dans la goutte. REVENDICATIONS 1. Procédé de traitement de gouttes dans un circuit microfluidique comprenant au moins un microcanal (12) contenant un premier fluide, caractérisé en ce qu'il consiste à trier des gouttes (16, 18) d'un second fluide contenu dans le premier fluide, ou à fractionner ces gouttes en nanogouttes (36, 46, 54) ou à fusionner ces gouttes quand elles contiennent des fluides différents, par focalisation sur l'interface desdites gouttes et du premier fluide ou sur l'interface desdites gouttes entre elles, respectivement, d'un faisceau laser (26) dont la longueur d'onde est choisie pour être absorbée par le second fluide contenu dans les gouttes ou par les fluides différents contenus dans les gouttes, respectivement, le premier fluide et le matériau constitutif du microcanal (12) étant transparents à cette longueur d'onde. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que, pour trier des gouttes (16, 18) du second fluide présentes dans le premier fluide, il consiste à focaliser le faisceau laser (26) en amont d'un embranchement en Y dont le sommet comprend une pointe (24) orientée vers l'amont, le point de focalisation du faisceau laser (26) se trouvant entre l'extrémité de cette pointe et la paroi du microcanal (12) opposée à la direction de déviation des gouttes. 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce qu'il consiste à trier des gouttes (16, 18) de différents fluides présentes dans le premier fluide (14) en fonction de la sensibilité de la tension de surface de ces différents fluides à la chaleur, par réglage de l'énergie transmise aux interfaces des gouttes par le faisceau laser (26). 4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'il consiste à modifier les tensions de surface desdits fluides par addition à ces fluides de produits tensioactifs appropriés. 5. Procédé selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce qu'il consiste à déposer sur la surface du microcanal un point de 14 matière absorbant le faisceau laser (26) et à diriger le faisceau laser sur ce point au passage des gouttes (16, 18) à trier. 6. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que, pour fractionner une goutte (32) en nano-gouttes, il consiste à immobiliser la goutte par focalisation du faisceau laser (26) sur son interface aval dans un écoulement d'un autre fluide (F2) contenant un produit tensioactif, et à détacher des nano-gouttes (36, 46, 54) de la goutte précitée au moyen de cet écoulement de fluide (F2). 7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que la goutte (48) à fractionner est transportée dans un microcanal (12) par l'écoulement du fluide (F2) contenant le produit tensioactif et le point de focalisation du faisceau laser (26) est au voisinage immédiat de la jonction de ce microcanal (12) et d'un autre microcanal (50) dans lequel sont déviées les nano-gouttes (54). 8. Procédé selon la revendication 6 ou 7, caractérisé en ce qu'il consiste à former et à immobiliser la goutte (42) à fractionner à la jonction d'un microcanal (12) contenant le fluide (FI) formant cette goutte et d'au moins un microcanal (30) dans lequel s'écoule le fluide (F2) contenant le produit tensioactif. 9. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que, pour fusionner deux gouttes (60, 64) contenant des fluides (FI, F2) différents, il consiste à mettre les gouttes en contact l'une avec l'autre dans un écoulement d'un autre fluide (F3), puis à focaliser le faisceau laser (26) sur l'interface des gouttes (60, 64). 10. Procédé selon la revendication 9, caractérisé en ce qu'il consiste à bloquer le transport d'une goutte (64) dans le microcanal (12) par focalisation du faisceau laser (26) sur l'interface aval de cette goutte et du fluide de transport (F3) jusqu'à l'arrivée d'une autre goutte contenant un fluide (F1) différent de celui de la première goutte (64), puis à focaliser le faisceau laser (26) sur l'interface des deux gouttes. 15 11. Procédé selon la revendication 9 ou 10, caractérisé en ce que les fluides (F1, F2) contenus dans les gouttes sont miscibles. 12. Procédé selon l'une des revendications 9 à 11, caractérisé en ce que les fluides (F1, F2) contenus dans les gouttes (60, 64) réagissent l'un avec l'autre et en ce que les gouttes fusionnées (66) forment des microréacteurs. 13. Procédé selon la revendication 12, caractérisé en ce qu'il consiste à faire varier la taille des gouttes (60, 64) à fusionner, pour faire varier les quantités des réactifs mélangés lors de la fusion des gouttes. 14. Procédé selon l'une des revendications 9 à 13, caractérisé en ce qu'au moins une des gouttes à fusionner contient au moins deux fluides différents, qui sont mélangés l'un avec l'autre lors de la focalisation du faisceau laser (26) sur la goutte. 15. Procédé selon l'une des revendications 12 à 14, caractérisé en ce que la réaction des fluides (FI, F2) contenus dans deux gouttes fusionnées est initiée par le faisceau laser focalisé sur ces gouttes. 16. Procédé selon l'une des revendications 12 à 15, caractérisé en ce qu'il consiste à surveiller la réaction des fluides (F1, F2) dans les gouttes fusionnées par observation au microscope de ces gouttes, de façon continue ou discontinue, sur au moins une partie du trajet parcouru par ces gouttes dans le circuit microfluidique.