Brevet FR2903906A1 — publié le 20080125

COMPOSITION POUR PRÉVENIR ET/OU POUR TRAITER LES MALADIES ARTICULAIRES DÉGÉNÉRATIVES L'invention a trait au traitement et à la prévention des maladies articulaires dégénératives, et se rapporte plus particulièrement à des compositions destinées à être administrées par voie orale, telles qu'un médicament, un complément alimentaire et/ou un alicament, en vue de préserver la santé des cartilages articulaires notamment à l'égard des inflammations chroniques et/ou aiguës. Le cartilage articulaire est un tissu conjonctif constitué de quatre constituants principaux : l'eau (de l'ordre de 70-80 % en poids), des protéoglycanes (de l'ordre de 10-15 %), le collagène (de l'ordre de 10-15 %) et des cellules (environ 1 %). Parmi les cellules présentes, les chondrocytes sont responsables de la construction et du remaniement constants et perpétuels du cartilage. Résistant et élastique, le cartilage articulaire a pour rôle de diminuer les frictions entre des articulations en mouvement. Egalement, en accumulant du liquide synovial et en le rejetant à bon escient, il remplit la fonction d'amortisseur hydraulique à l'égard de chocs touchant les articulations. Les maladies articulaires dégénératives telles que par exemple l'arthrite rhumatoïde, l'arthrite psoriasis et l'arthrose (ostéoarthrose), sont la cause de profonds désordres dans la structure et dans l'intégrité du cartilage articulaire. En particulier, on constate chez les personnes arthrosiques un déséquilibre entre la synthèse et la dégradation des protéoglycanes du cartilage articulaire, en partie causé par la dépolymérisation des précurseurs glycosaminoglycanes. Les maladies articulaires dégénératives sont le plus souvent causées par des inflammations articulaires chroniques qui aboutissent à une déstructuration chronique et irréversible de l'articulation. Outre la douleur, les symptômes se traduisent également par une rigidité anormale des articulations 2903906 2 (en particulier au réveil) et/ou une tuméfaction au niveau des articulations et/ou une déformation des articulations. Egalement, il est connu que des inflammations aiguës (non chroniques) peuvent induire la destruction du cartilage articulaire en évoluant 5 vers une inflammation chronique, mais ce sont là des cas relativement rares. A l'heure actuelle, on ignore précisément la(les) cause(s) des inflammations chroniques responsables de ces maladies articulaires dégénératives. On ne connaît pas non plus les facteurs qui déterminent la rémission des inflammations aiguës articulaires, ni ceux qui sont responsables de 10 l'établissement d'un état arthrosique. Aujourd'hui encore, les traitements dispensés dans ce type de maladies consistent quasi-exclusivement en la prescription palliative de préparations médicamenteuses qui associent des anti-inflammatoires stéroïdiens (en particulier, des corticostéroïdes) ou non-stéroïdiens, et des composés 15 analgésiques, pour réduire l'inflammation et la douleur des patients. Conjointement à ces traitements palliatifs qui n'ont pour objectif que de soulager la douleur et/ou de freiner la maladie, se sont développées les techniques chirurgicales de reconstruction et de remplacement (par des prothèses) des articulations atteintes. 20 En marge de ces traitements palliatifs peu efficaces et de ces opérations chirurgicales lourdes, sont récemment apparues des compositions de type médicaments, compléments alimentaires ou alicaments, élaborées pour régénérer et/ou pour renforcer structurellement les cartilages articulaires à l'égard des atteintes arthrosiques. 25 US 6,924,273 propose une méthode permettant de stimuler ou d'amplifier la production des protéoglycanes articulaires qui repose sur l'administration par voie orale d'une composition préparée à partir d'acide hyaluronique, et éventuellement complétée par une quantité de glucosamine sulfate et/ou de chondroïtine sulfate et/ou de vitamines (A, C, D et/ou E) et/ou de 30 biotine. L'acide hyaluronique et la glucosamine sont décrits comme des précurseurs de la synthèse des protéoglycanes cartilagineux. 2903906 3 Dans le même objectif, WO 98/44929 décrit une composition comprenant des fractions de collagène hydrolysé (de poids moléculaire compris entre 1 et 300 kDa, et de préférence entre 10 et 80 kDa) en combinaison avec de la glucosamine. 5 EP 0 704 216 décrit une composition médicamenteuse se présentant sous la forme d'un gel destiné à être administré par voie orale, comprenant en tant que substance active à l'égard de la synthèse des protéoglycanes cartilagineux, une quantité efficace d'un sel organique ou inorganique de chondroïtine sulfate. 10 L'invention vise à proposer de nouvelles compositions de type médicament, complément alimentaire ou alicament, destinées à prévenir et/ou à enrayer la détérioration du cartilage articulaire caractéristique des maladies articulaires dégénératives. En particulier, l'invention vise à proposer des compositions 15 ayant des effets protecteurs à l'égard des chondrocytes et dont l'activité se traduit par une amélioration de la survie des chondrocytes lorsque ceux-ci sont soumis à un environnement inflammatoire et/ou à un stress mécanique. Pour ce faire, l'invention concerne une composition destinée à être administrée par voie orale pour prévenir et/ou pour traiter des 20 maladies articulaires dégénératives, comprenant, en tant que composants actifs, une quantité efficace d'un mélange de D-glucosamine et de lactoferrine. L'invention résulte du constat selon lequel, dans les maladies articulaires dégénératives, un état inflammatoire chronique et/ou un stress mécanique n'indui(sen)t pas qu'une simple détérioration sévère des 25 composants de la matrice cartilagineuse des articulations (collagènes et protéoglycanes). I1(s) favorise(nt) l'établissement progressif d'un dérèglement du comportement des chondrocytes, cellules quasi-exclusives des tissus cartilagineux et primordiales dans le processus de réparation et de régénération du cartilage. Ce dérèglement du comportement des chondrocytes a pour 30 conséquence un déséquilibre entre la synthèse et la dégradation des composants de la matrice cartilagineuse. 2903906 4 Ainsi, en marge des traitements qui ont pour cible la réduction des inflammations articulaires et/ou le rétablissement de la matrice cartilagineuse, dans lesquels les patients se voient prescrire des anti-inflammatoires et/ou des composés appréciés pour leur effet précurseur et/ou 5 stimulateur du métabolisme des protéoglycanes et/ou du collagène articulaire, les inventeurs ont déterminé qu'il est important de développer des compositions aptes à améliorer la survie et l'intégrité des chondrocytes à l'égard des évènements inflammatoires caractéristiques des arthropathies. L'invention repose sur la mise en évidence des effets 10 protecteurs qu'exercent, en particulier, la D-glucosamine et la lactoferrine à l'égard de l'évolution apoptotique des chondrocytes soumis à un environnement inflammatoire, notamment chronique. Testés isolément l'un de l'autre, ces deux composés ont chacun démontré des effets probants sur la survie des chondrocytes. Mais, 15 lorsqu'ils sont utilisés en combinaison, les inventeurs ont pu mesurer un effet protecteur synergique exceptionnel, apte à prévenir efficacement la détérioration du cartilage articulaire en cas de réaction inflammatoire. Une composition à administration par voie orale conforme à l'invention, qui se caractérise donc par le fait qu'elle comprend une quantité 20 efficace d'un mélange de D-glucosamine et de lactoferrine, peut consister en un médicament ou un complément alimentaire. Une composition conforme à l'invention peut être réalisée sous des formes galéniques et des formulations diverses, notamment : - sous la forme d'un mélange de particules solides et divisées, par 25 exemple une poudre effervescente ou non effervescente, et dont la prise nécessite qu'elle soit mélangée à de l'eau, - sous la forme d'un comprimé effervescent ou non, à avaler avec un peu d'eau, à sucer ou à croquer, - sous forme d'une solution, par exemple, une suspension, un sirop, 30 une composition liquide enrobée dans une capsule dure ou molle. 2903906 5 Une composition à administration par voie orale conforme à l'invention, peut également consister en un alicament, c'est-à-dire une composition alimentaire ordinaire, solide et/ou liquide, qui incorpore une quantité efficace d'un mélange de D-glucosamine et de lactoferrine. 5 Quelle que soit la forme dans laquelle se concrétise la présente invention (médicament, complément alimentaire, alicament), outre ledit mélange de D-glucosamine et de lactoferrine, une composition conforme à l'invention peut, de manière classique, nécessiter l'adjonction d'additifs et/ou d'excipients d'ordre pharmaceutique ou d'ordre alimentaire, traditionnels. Ces 10 additifs et/ou excipients, rentrant éventuellement dans la formulation d'une composition conforme à l'invention, sont par exemple des liants, des lubrifiants, des édulcorants, des diluants, des excipients, des agents effervescents, des agents d'enrobage... S'agissant des composés actifs, pour préparer une 15 composition selon l'invention, à titre de D-glucosamine, on peut avantageusement utiliser au moins un sel de glucosamine choisi parmi : le chlorhydrate de glucosamine (notamment sous forme de D-glucosamine HC1), le sulfate de glucosamine (notamment sous forme de sulfate de D-glucosamine 2KC1). 20 De préférence, on utilise exclusivement le chlorhydrate de glucosamine. Avantageusement et selon l'invention, on utilise une D-Glucosamine de poids moléculaire de l'ordre de 215 Da, dérivée de la chitine extraite de la carapace de crustacés. 25 S'agissant de la lactoferrine, on peut utiliser des compositions de lactoferrine provenant du lait animal, préparées en mettant en oeuvre des techniques de purification et d'extraction classiques (telles que des ultrafiltrations, des chromatographies sur colonnes échangeuses d'ions, des chromatographies sur colonnes d'exclusion stérique...). Ces compositions plus ou 30 moins riches en lactoferrine correspondent généralement à des fractions protéiques particulières, purifiées à partir de lait d'origine bovine. 2903906 6 Avantageusement, une composition selon l'invention est préparée en utilisant, à titre de lactoferrine, une composition de lactoferrine de poids moléculaire de l'ordre de 80 kDa. Avantageusement, une composition selon l'invention 5 présente une proportion pondérale lactoferrine/D-glucosamine (en poids effectif de composés actifs) comprise entre 1:40 et 20:1. De préférence, cette proportion est de l'ordre de 1:10. Avantageusement, dans une composition selon l'invention, la D-glucosamine et la lactoferrine sont présentes sous la forme de deux poudres 10 mélangées. La poudre de D-glucosamine est préparée à partir de la chitine extraite de la carapace de crustacés. En terme de poids de matière sèche, elle présente avantageusement une teneur effective en D-glucosamine au moins de l'ordre de 99 %. 15 La poudre de lactoferrine est préparée à partir du lait de vache. En terme de poids de matière sèche, elle présente avantageusement une teneur en lactoferrine au moins de l'ordre de 40 %. De préférence, cette teneur est au moins de 50 %. Typiquement, il s'agit d'une composition de lactoferrine pure au moins à 85 %. 20 Selon une variante préférée de l'invention, outre la D-glucosamine et la lactoferrine, une composition conforme à l'invention comprend également un troisième composé actif : la chondroïtine sulfate. Les inventeurs ont pu constater que la chondroïtine sulfate présentait aussi un effet protecteur sur la survie des chondrocytes soumis à un 25 environnement inflammatoire chronique. La chondroïtine sulfate dans une composition selon l'invention, conduit à en améliorer notablement les effets. Qui plus est, la chondroïtine sulfate permet aussi de renforcer la matrice protéoglycane du cartilage articulaire. Pour la préparation d'une composition conforme à cette 30 variante préférée de l'invention, à titre de chondroïtine sulfate, on peut avantageusement utiliser une chondroïtine sulfate extraite du cartilage de 2903906 7 sélacien. Avantageusement et selon l'invention, cette chondroïtine sulfate a un poids moléculaire de l'ordre de 30-50 kDa. Avantageusement, dans une composition selon l'invention, la chondroïtine sulfate est présente sous la forme d'une poudre qui, en terme de 5 poids de matière sèche, présente une teneur effective en chondroïtine sulfate au moins de l'ordre de 90 %. Avantageusement, dans une composition selon l'invention, la proportion pondérale chondroïtine sulfate/D-glucosamine (en terme de poids effectif des composés actifs) est comprise entre 1:3 et 100:1. Elle est de 10 préférence de l'ordre de 1:2. Selon un mode de mise en oeuvre particulièrement préféré, une composition selon l'invention comprend, en tant que composants actifs, une quantité efficace d'un mélange de D-glucosamine, de lactoferrine et de chondroïtine sulfate, avec une proportion pondérale D-glucosamine/lactoferrine/ 15 chondroïtine sulfate de l'ordre de 10:1:5. Selon ce mode de mise en oeuvre de l'invention, avec cette proportion particulière en agents actifs conformes à l'invention, la quantité efficace du mélange actif est déterminée pour une prise journalière correspondant avantageusement à une dose de D-glucosamine effective de 300-900 mg, de 20 préférence de l'ordre de 550 mg, pour un adulte de l'ordre de 70 kg. L'invention concerne aussi une composition destinée à être administrée par voie orale pour prévenir et/ou traiter des maladies articulaires dégénératives, ainsi que l'utilisation d'un mélange de glucosamine et de lactoferrine, éventuellement complémenté par de la chondroïtine sulfate, pour la 25 préparation d'un médicament destiné à prévenir et/ou à traiter des maladies articulaires dégénératives -notamment l'arthrose-, caractérisées en combinaison par tout ou partie des caractéristiques mentionnées ci-dessus ou ci-après. D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture de la description détaillée qui suit et qui présente des 30 exemples mettant en évidence les effets protecteurs qu'exercent la D-glucosamine et/ou la lactoferrine et/ou la chondroïtine sulfate à l'égard du développement 2903906 8 apoptotique des chondrocytes soumis à un environnement inflammatoire chronique. Les résultats expérimentaux sont notamment présentés sous la forme de représentations graphiques annexées, parmi lesquelles : - la figure 1 est une représentation en bâtonnets relative à 5 des tests montrant la sensibilité des chondrocytes soumis à un environnement inflammatoire, et validant le modèle d'étude in vitro utilisé pour tester les effets potentiels de différents agents actifs sur la survie des chondrocytes cultivés dans un environnement inflammatoire, -la figure 2 est une représentation sous forme de courbes 10 illustrant l'effet dose-dépendant des agents actifs testés, sur la survie des chondrocytes soumis à un environnement inflammatoire, - les figures 3a et 3b illustrent, sous forme de bâtonnets, les résultats de tests mettant en évidence l'effet synergique de la D-glucosamine et de la lactoferrine sur la survie des chondrocytes soumis à un environnement 15 inflammatoire, la figure 4 est une représentation en bâtonnets résumant les mesures comparatives in vitro des effets d'une réduction de l'inflammation propre à l'utilisation de l'ibuprofène, par rapport aux effets de compositions particulières conformes à l'invention, sur la survie de chondrocytes soumis à un 20 environnement inflammatoire. Exemple 1 : Reconstitution de milieu de culture reproduisant les effets d'une inflammation Au cours d'une réaction inflammatoire articulaire, les cellules du pool inflammatoire et immunitaire produisent un grand nombre de 25 cytokines tels que le TNFa (tumor necrosis factor a), l'IL-1 (interleukine-1) et l'INFy (interféron y). Ces cytokines agissent de manière concomitante et sont responsables du développement de l'inflammation qui contribue activement à la destruction de la matrice articulaire, notamment en induisant la mort des chondrocytes. 30 Les inventeurs ont reconstitué, in vitro, une culture de chondrocytes affectées d'une réaction inflammatoire. Ce milieu de culture 2903906 9 comprend du DMEM complémenté avec 10 % de sérum de veau, de la pénicilline et de la streptomycine (100 g/ml). Selon un premier mode opératoire, l'état inflammatoire est mimé en ajoutant au milieu standard précédemment exposé, une quantité de 5 CYTOMIX , un cocktail de cytokines comprenant, entre autres, du TNFa, de l'IL-1 et de l'INFy. Pour ce faire, par millilitre de milieu standard, on ajoute 60 ng de Cytomix . Selon un deuxième mode opératoire, l'état inflammatoire est mimé grâce à la présence, dans le milieu standard, de macrophages ayant été 10 préalablement activés par des exotoxines bactériennes. Cette approche complémentaire de la précédente permet de reproduire in vitro, l'interconnexion entre les chondrocytes de la matrice articulaire et les cellules du pool inflammatoire, et de reproduire ainsi des conditions proches de celles rencontrées in vivo. 15 Les chondrocytes sont cultivés dans ces différents milieux de culture pendant 48 heures avant d'apprécier la proportion de cellules mortes par apoptose : - un milieu standard (st.), - un milieu standard contenant des macrophages à l'état inactivé 20 (st./Mac ), - un milieu standard complémenté par le CYTOMIX (st./Cytom.), - un milieu standard avec des macrophages activés (st./Mac+). Le processus dégénératif des chondrocytes a été évalué par une mesure de la mort par apoptose, en utilisant un kit APOPTAG . Ce kit permet 25 de visualiser les cassures d'ADN et de quantifier, par une lecture au microscope à fluorescence, le pourcentage de cellules en apoptose. Les résultats obtenus sont résumés dans le tableau 1 ci-après, et sont également présentés sous la forme de bâtonnets à la figure 1. 5 2903906 10 Chondrocytes morts par apoptose après 48 heures de culture (%) Milieu standard 10,41 0,852 Milieu standard 22,06 2,04 ~_ _ ~ + Macrophages non activés Milieu standard + Cytomix 80 Milieu standard 75,27 7,57 + Macrophages activés 10 Tableau 1 Dans des conditions standard (culture des chondrocytes dans un milieu sans stress inflammatoire), l'apoptose des chondrocytes se produit pour environ 10 % des cellules, après 48 heures. Ce taux est de l'ordre de 22 %, lorsque les chondrocytes sont mis en co-culture avec des macrophages (non 15 activés). Sous l'effet d'une inflammation simulée par la présence de CYTOMIx dans le milieu de culture, ou par la présence de macrophages activés, les chondrocytes meurent par apoptose après 72 heures. Environ 80 % des chondrocytes meurent en moins de 48 heures. 20 D'une part, ces résultats permettent de confirmer qu'une réaction inflammatoire a pour effet d'induire l'apoptose des chondrocytes. D'autre part, ils démontrent que la complémentation d'un milieu de culture par le CYTOMIX permet de reproduire in vitro, les effets in vivo d'une réaction inflammatoire sur les chondrocytes et ce, de façon 25 relativement similaire. Ce milieu de culture pro-inflammatoire peut être avantageusement utilisé comme modèle d'étude pour tester les effets potentiels de différents agents et substances sur la survie des chondrocytes cultivés dans un environnement inflammatoire. Exemple 2 : Etude de l'effet protecteur de la D-glucosamine 30 et/ou de la lactoferrine et/ou de la chondroïtine sulfate 2903906 11 Les chondrocytes sont mis en culture dans un milieu standard additionné de CYTOMIX , éventuellement en présence des différentes substances à tester : D-glucosamine, lactoferrine et chondroïtine sulfate. Après une période de culture de 48 heures, la proportion de 5 cellules mortes par apoptose est évaluée en utilisant un kit APOPTAG . Dans un premier temps, la D-glucosamine, la lactoferrine et la chondroïtine sulfate ont été étudiées individuellement pour leurs effets sur la survie des chondrocytes, en fonction de leur concentration dans le milieu de culture. 10 Les études ont été menées notamment avec une D-Glucosamine dérivée de la chitine extraite de la carapace de crustacés. Cette D-glucosamine, de poids moléculaire de l'ordre de 215 Da, est commercialisée notamment sous forme de poudre qui, en terme de poids de matière sèche, présente une teneur effective en D-glucosamine au moins de l'ordre de 99 %. 15 S'agissant de la lactoferrine, son effet a été testé avec deux types de compositions de lactoferrine : 1) une composition de lactoferrine (Lf) pratiquement pure, sous forme de poudre ; cette composition de lactoferrine contient au moins 97 % (en poids de matière sèche) de protéines provenant du lait de vache, et dont au moins 20 90 % correspond à une lactoferrine native de poids moléculaire de l'ordre de 80 kDa ; 2) un co-isolat (co-Is.), également sous forme de poudre, qui renferme au moins 90 % (en poids de matière sèche) des protéines provenant du lait de vache, et dont 45-60 % correspond à une lactoferrine native de poids 25 moléculaire de l'ordre de 80 kDa (la partie protéique restante est essentiellement représentée par les autres protéines du lait telles que la lactoperoxydase, la f3-lactoglobuline et la lactalbumine). S'agissant de la chondroïtine sulfate, les tests ont été notamment réalisés avec une chondroïtine sulfate de poids moléculaire de l'ordre 30 de 30-50 kDa, extraite de cartilages de sélaciens. Cette chondroïtine sulfate est disponible dans le commerce sous la forme d'une poudre qui, en terme de poids 2903906 12 de matière sèche, présente une teneur effective en chondroïtine sulfate au moins de l'ordre de 90 %. Les compositions de D-glucosamine, de lactoferrine et de chondroïtine sulfate précédemment évoquées sont notamment commercialisées 5 par la société BIO SERRE, France. Le tableau 2 ci-après présente les résultats recueillis, exprimés en pourcentage de cellules mortes par apoptose, après 48 heures de culture dans un environnement inflammatoire, en fonction de la concentration des facteurs testés (exprimé en microgrammes de la composition de facteur) par 10 millilitre de milieu de culture. Tableau 2 Les résultats correspondants sont également représentés, à 15 la figure 2 sous la forme de courbes effet-dose. Au vu de cette première série de résultats, on constate que la D-glucosamine (D-gluco.) présente un effet protecteur des chondrocytes qui est fonction de sa dose. Cet effet est mesurable dès la concentration de 0,001 gg/ml, pour atteindre un effet maximal aux alentours de 10 g/ml. 20 Dans les mêmes conditions, la lactoferrine, utilisée sous la forme d'une composition fortement concentrée (Lf), présente également un effet protecteur des chondrocytes. En comparaison avec la D-glucosamine, son effet est néanmoins plus limité. Concentration D-glucosamine Lactoferrine (pg.ml 0 80,0 4,3 0,001 60,2 3,2 0,010 53,3 2,7 0,1 35,1 1,9 10 15,4 0,5 80,0 4,3 75,3 2,2 71,6 3,8 73,0 3,2 71,6 4,1 80,0 4,3 80,0 4,3 70,4 3,8 78,5 3,8 61,8 3,3 74,4 3,8 54,7 3,3 70,2 3, 2 51,9 2,3 64,6 3,4 2903906 13 Testé avec une composition de concentration moindre, en l'occurrence le co-isolat (co-Is.), l'effet protecteur de la lactoferrine n'est pas significatif dans les conditions d'expérimentation, lorsque cette substance est testée isolément d'autres agents actifs ou potentiellement actifs. 5 La même constatation est faite avec la chondroïtine sulfate, lorsqu'elle est testée isolément d'autres agents actifs ou potentiellement actifs. Dans un deuxième temps, les effets protecteurs des mélanges binaires suivants ont été testés : -D-glucosamine + lactoferrine, 10 - D-glucosamine + chondroïtine sulphate, - D-glucosamine + lactoferrine (sous la forme d'une composition Lf ou co-Is) , ainsi que l'effet protecteur du mélange ternaire : -Dglucosamine + lactoferrine + chondroïtine sulfate. 15 Les tableaux 3 et 4 ci-après présentent les résultats obtenus. Tableau 3 Les représentations graphiques en bâtonnets des figures 3a 20 et 3b, élaborées à partir de données numériques sélectionnées du tableau 3, illustrent l'effet synergique entre la D-glucosamine et la lactoferrine. Lactofernne Lactoferrine Témoin D-glucos. Lf (0,01 pg/ml) coqs (0,1 pg/ml) (10 pg/ml) D-glucos. D-glucos. (0,01 pg/ml) (0,01 + Lf. (0,1 pg/ml) pg/ml) + co-ls (10 Ng/ml) Milieu standard + Cytomix Milieu standard + Cytomix + Chondr. suif. (1 pg/ml) 9, 6 1,2 11,3 1,1 7,2 0,9 10,1 1,2 80,3 8,2 58,2 5,9 60,1 6,0 72,3 7,2 49 4,8 55,1 5,3 69,2 6,9 2903906 14 Rapport Apoptose (%) Apoptose (%) Milieu standard Milieu standard + Cytomix + Macrophages activés - 80 2 75 2 4 20 1 12 1 10 25 3 19 2 40 32 2 25 3 ................... .................... 1 50 4 23 2 2 62+3 31 2 3 63 4 28 1 5 21+2 21 1 10 30 3 31 2 20 40 2 32 2 Tableau 4 5 Exemple 3 : Étude comparative des effets d'une réduction de l'inflammation générée par l'ibuprofène et des effets de compositions particulières conformes à l'invention, sur la survie des chondrocytes soumis à un environnement inflammatoire L'ibuprofène est un anti-inflammatoire non stéroïdien aux 10 propriétés également analgésiques, antipyrétiques. L'ibuprofène est largement prescrit dans le cadre du traitement des arthropathies, malgré ses effets indésirables potentiels : gastrite, stomatite, douleur abdominale, ulcération du tube digestif, jaunisse, céphalée, somnolence... Il est également assorti de nombreuses contre-indications, par 15 exemple en cas d'antécédent d'ulcère gastrique ou duodénal, en cas d'insuffisance gastrique ou rénale, en cas de grossesse ou d'allaitement... Les inventeurs ont comparé les effets d'une réduction de l'inflammation provoquée par l'ibuprofène avec les effets chondroprotecteurs de différentes compositions conformes à l'invention, sur la survie des chondrocytes 20 cultivés dans un environnement inflammatoire. Témoin D-glucos. / Lactoferrine (Lt) D-glucos. / Lactoferrine (co-Is D-glucos. / Chondr. sulfate 2903906 15 A cet effet, les chondrocytes ont été mis en co-culture avec des macrophages préalablement activés par des exotoxines bactériennes, dans différents milieux de culture : 1) un milieu standard contenant de l'ibuprofène à une 5 concentration molaire de 1 M, 2) des milieux standard comprenant de la D-glucosamine (0,01 g/ml) et/ou de la lactoferrine (0,001 g/ml) et/ou de la chondroïtine sulfate (1 g/ml). La proportion de cellules mortes a été appréciée après 10 48 heures de culture. Les résultats obtenus sont résumés dans le tableau 5 ci-après, et sont également présentés, sous forme graphique, à la figure 4. Apoptose (%) Ecartype Contrôle (st./Mac+) 75 2 Ibuprofène (10pM) 17 3 D-gluco. (0,01 pg/ml) 32 2 Lf (0,001 pg/ml) 50 2 CS (1 pg/ml) 73 4 D-gluco, (0,01 pg/ml) + Lf (0,001 pg/ml) 20 1 D-gluco, (0,01 pg/ml) + Lf (0,001 pg/ml) 8 1 + CS (1 pg/ml) Tableau 5 Les résultats obtenus montrent que la D-glucosamine, la 20 lactoferrine et la chondroïtine sulfate, lorsqu'elles sont testées seules (à la concentration indiquée) ne présentent pas une efficacité loin d'être comparable à celle d'une réduction de l'inflammation générée par l'ibuprofène. Cependant lorsque ces substances sont utilisées en association, conformément à l'invention, les effets sont au moins comparables. 25..FT: COMPOSITION POUR PREVENIR ET/OU TRAITER LES MALADIES ARTICULAIRES DEGENERATIVES. REVENDICATIONS 1/ - Composition destinée à être administrée par voie orale pour prévenir et/ou pour traiter des maladies articulaires dégénératives, comprenant, en tant que composants actifs, une quantité efficace d'un mélange de D-glucosamine et de lactoferrine. 2/ - Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite D-glucosamine consiste en au moins un sel de glucosamine choisi parmi, le chlorhydrate de glucosamine et le sulfate de glucosamine. 3/ - Composition selon l'une des revendications 1 ou 2 10 caractérisée en ce que ladite D-glucosamine est exclusivement le chlorhydrate de glucosamine. 4/ - Composition selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que ladite D-glucosamine a un poids moléculaire de l'ordre de 215 Da. 5/ - Composition selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que ladite lactoferrine correspond à une fraction protéique particulière purifiée à partir de lait d'origine bovine. 6/ - Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce que ladite lactoferrine a un poids moléculaire de l'ordre de 80 kDa. 7/ - Composition selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisée en ce qu'elle présente une proportion pondérale lactoferrine/ D-glucosamine comprise entre 1:40 et 20:1. 8/ - Composition selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée en ce qu'elle présente une proportion pondérale lactoferrine/ 25 D-glucosamine de l'ordre de 1:10. 9/ -Composition selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisée en ce qu'elle comprend de la chondroïtine sulfate. 10/ - Composition selon la revendication 9, caractérisée en ce que ladite chondroïtine sulfate est extraite du cartilage de sélacien. 15 20 2903906 17 11/ - Composition selon l'une des revendications 9 ou 10, caractérisée en ce que ladite chondroïtine sulfate a un poids moléculaire de l'ordre de 30-50 kDa. 12/ -Composition selon l'une des revendications 9 à 11, 5 caractérisée en ce qu'elle présente une proportion pondérale chondroïtine sulfate/D-glucosamine comprise entre 1:3 et 100:1. 13/ - Composition selon l'une des revendications 9 à 12, caractérisée en ce qu'elle présente une proportion pondérale chondroïtine sulfate/D-glucosamine de l'ordre de 1:2. 14/ - Composition selon l'une des revendications 1 à 13, caractérisée en ce qu'elle comprend, en tant que composants actifs, une quantité efficace d'un mélange de D-glucosamine, de lactoferrine et de chondroïtine sulfate, avec une proportion pondérale D-glucosamine/lactoferrine/ chondroïtine sulfate de l'ordre de 10:1:5. 15/ - Composition selon la revendication 14, caractérisée en ce que la quantité efficace dudit mélange de D-glucosamine, de lactoferrine et de la chondroïtine sulfate est déterminée pour une prise journalière correspondant à une dose de D-glucosamine effective comprise entre 300 et 900 mg, pour un adulte de l'ordre de 70 kg. 16/ - Composition selon la revendication 14, caractérisée en ce que la quantité efficace dudit mélange de D-glucosamine, de lactoferrine et de la chondroïtine sulfate est déterminée pour une prise journalière correspondant à une dose de D-glucosamine effective de l'ordre de 550 mg, pour un adulte de l'ordre de 70 kg. 25 17/ - Composition selon l'une des revendications 1 à 16, caractérisée en ce qu'il s'agit d'une préparation choisie parmi : un médicament, un complément alimentaire, un alicament. 18/ - Utilisation d'une composition conforme à l'une des revendications 1 à 17 pour la préparation d'un médicament destiné à prévenir 30 et/ou à traiter des maladies articulaires dégénératives. 15 20 2903906 18 19/ - Utilisation d'une composition conforme à l'une des revendications 1 à 17 pour la préparation d'un médicament destiné à prévenir et/ou à traiter l'arthrose.