Brevet FR2907455A1 — publié le 20080425

L'invention a pour objet des oligosaccharides cycliques, notamment dérivés de cyclodextrines (en abréviation CDs) et plus particulièrement de cyclodextrines (CDs) amphiphiles. Elle vise également un procédé de préparation de ces oligosaccharides cycliques ainsi que leurs applications dans les mêmes domaines que les cyclodextrines (CDs) et leurs dérivés déjà connus. Elle concerne notamment des dérivés amphiphiles de cyclodextrines (CDs) bis aminées présentant des propriétés d'auto-organisation en milieu aqueux et/ou étant susceptibles de s'incorporer dans des systèmes organisés conduisant à la formation de systèmes mixtes. Les cyclodextrines sont des oligosaccharides cycliques non réducteurs, obtenues industriellement par la dégradation enzymatique de l'amylose (forme linéaire de l'amidon) à l'aide d'une enzyme, la cyclodextrine glucosyltransférase (CGTase), d'origine bactérienne (Bacillus Macerans, Alkalophylic bacillus,... ). Les trois CDs les plus fréquemment rencontrées sont l'a-, la p-et la 'y-CD constituées respectivement de 6, 7 et 8 sous unités D-glucopyranosiques, liées entre elles par des liaisons glycosidiques a(1 •4), tel que montré au schéma 1 : OH HO Schéma 1 2907455 2 Il existe des CDs de plus grande taille, telles que la 8-CD, a s-CD respectivement constituées de 9 et 10 unités, et de taille plus petite, comme la cyclo-a(1-'4)-glucopentaoside à 5 unités, qui ont été isolées ou totalement synthétisées. 5 Différentes nomenclatures sont utilisées dans la littérature pour l'appellation des CDs : 3-dextrin de Shardinger, cyclomaltoheptaose, cycloheptaglucan, cycloheptaamylose, (3-CD, BCD, C7A. Les CDs ont une structure tridimensionnelle en forme de cylindre cônique dont la paroi est constituée par les unités glucoses, en lo conformation chaise 4Cl, tel que montré au schéma 2 : HO OH Ii0 / OH Schéma 2 15 Les hydroxyles secondaires (OH-2, OH-3) sont situés sur le côté le plus grand du tronc cônique alors que les hydroxyles primaires (OH-6) sont localisés sur le petit côté. La présence de ces groupements hydroxyles sur les bords de la couronne confère à la partie extérieure de la CD un caractère hydrophile (surface en contact avec le solvant), alors que l'intérieur de la 20 cavité, tapissée d'atomes d'hydrogène (H-3, H-5, H-6) et de l'oxygène inter- glycosidique (O-4), est hydrophobe. La structure des CDs est stabilisée par une véritable ceinture de liaisons hydrogènes inter-résidus entre les OH-2 d'une unité glucose et les OH-3 de l'unité voisine. Dans le cas de la (3-CD, cette ceinture de liaisons par pont à hydrogène rend sa structure très rigide et peut justifier de sa faible solubilité dans l'eau par rapport aux autres CDs. 2907455 3 En solution aqueuse, la cavité apolaire de la CD est occupée par des molécules d'eau, ce qui est énergétiquement défavorable (interactions polaireûapolaire). Ces molécules d'eau pourront donc être facilement substituées par une "molécule invitée" appropriée, moins polaire que l'eau. 5 II existe bien souvent des différences entre les propriétés physico-chimiques des complexes d'inclusion, ou clathrate, et celles des molécules invitées libres et les CDs libres. Ainsi, et notamment par rapport aux molécules libres, on observe en général une augmentation de la solubilité dans l'eau, une diminution de la diffusion et de la volatilité, une modification des i0 propriétés spectrales et bien souvent des variations de la réactivité. C'est cette propriété remarquable qu'ont les CDs de complexer en milieu aqueux un panel impressionnant de molécules hôtes qui fait que l'on trouve dans la littérature de nombreux domaines d'application dans la formulation de composés actifs. 15 Dans l'industrie, les propriétés des CDs sont largement exploitées dans le milieu pharmaceutique. On peut citer, par exemple, l'utilisation de CDs dans des formulations de diclofénac de sodium, tel que décrites dans les documents US 4,829,088 et US 4,960,799, pour garantir la solubilité du composé actif, ou encore dans une formulation anti-inflammatoire, 20 telle que décrite dans le document US 6,667,056. Les principales CDs utilisées à l'heure actuelle par l'industrie pharmaceutique sont des (3-CD normales ou modifiées. On trouve néanmoins quelques exemples avec l'a-CD et la y-CD. La plupart des médicaments à base de CDs est administrée 25 par voie orale (tablettes, dragées, sirops,...), cependant, il y a lieu de remarquer que toutes les spécialités administrées par voie nasale ou oculaire utilisent de CDs modifiées (Me-13-CD, hydroxypropyl-33-CD) qui mettent à profit des mécanismes de passage transmembranaire. Ce mécanisme est sans doute facilité par le caractère amphiphile que confèrent les groupements 30 alkyles greffés sur les CDs employées. 2907455 4 Le marché des CDs est mondial et les entreprises pharmaceutiques qui commercialisent ces produits sont essentiellement européennes, américaines, japonaises et sud-américaines. Beaucoup de ces médicaments sont utilisés comme anti-inflammatoires, tels que, par exemple, 5 l'anti-inflammatoire connu sous le nom commercial de Piroxicam, mais on trouve d'autres applications. Il existe également beaucoup d'applications dans les domaines de l'agroalimentaire, de la cosmétique, des détergents et aussi du textile. Actuellement, les applications des CDs dans la formulation des lo pesticides restent encore modestes car l'industrie des pesticides est très sensible au prix des matières premières, toutefois, une baisse des coûts de production de la f3-CD pourrait rapidement changer la donne dans ce secteur d'activité. Les applications industrielles faisant appel aux CDs 15 représentent un marché en plein essor. Dans les domaines plus fondamentaux et technologiques, les CDs trouvent aussi de nombreuses applications, comme en chimie analytique, grâce à leur potentiel pour la séparation chirale (HPLC, Electrophorèse Capillaire) ou en catalyse dans la conception d'enzymes artificiels. 20 Depuis plusieurs années, une attention particulière a été portée sur l'utilisation de cyclodextrines modifiées pour le ciblage des médicaments. Le principe consiste à greffer sur la cyclodextrine une ou plusieurs antennes destinées à assurer une fonction de vectorisation vers un site d'action privilégié, la CD jouant le rôle de véhicule moléculaire pour le principe actif. 25 Différentes approches ont été envisagées dans le choix du vecteur. Celui-ci peut avoir un mode de reconnaissance spécifique pour des récepteurs membranaires (antennes poly saccharidiques ou peptidiques) ou non spécifique, privilégiant le passage transmembranaire et destiné à des applications topiques (antennes de type lipidique). Il existe plusieurs familles de CDs amphiphiles selon la position et le nombre de groupements hydrophobes portés par la CD, on distingue ainsi 2907455 5 la persubstitution sur la face primaire (en 6) (CD "médusa-like"), la persubstitution sur la face secondaire (en 2 et 3) (CD "skirt-shaped"), la persubstitution sur toutes les positions (2, 3 et 6) et enfin la monosubstitution sur un des hydroxyles de la face primaire. 5 Les cyclodextrines persubstituées sur la face primaire, secondaire, ou bien sur les deux côtés ne sont en général pas solubles dans l'eau. Elles ne s'organisent pas de manière spontanée. Les deux types de systèmes organisés obtenus à partir de ces composés sont des films de Langmuir-Blodgett (monocouches ou multicouches) insolubles à l'interface 10 air/eau et des nanoparticules. Ces systèmes sont hétérogènes. De plus l'effondrement des chaînes sur elles-mêmes rend la cavité de ces CDs inaccessible à toute molécule invitée. Contrairement aux dérivés persubstitués, les CDs monosubstituées sont souvent solubles en milieu aqueux, dans lequel elles 15 peuvent s'organiser spontanément. Ainsi par exemple il est connu qu'il y a formation de micelles avec la Chol-DIMEB ( Cholesteryl-Dimethyl-Beta-Cyclodextrin ) représentée sur le schéma 3 : Schéma 3 20 Le faible degré de substitution et la solubilité dans l'eau permettent à la cavité de ces molécules d'être très accessibles aux molécules organiques pour former des complexes d'inclusion. Il semble que la Balance Hydrophile-Lipophile (BHL) des CDs 25 modifiées soit une cause importante de leur caractère amphiphile et qu'elle influence ainsi de manière considérable leurs propriétés physico-chimiques, notamment la solubilité dans l'eau et le type d'organisation. CHMe2 2907455 6 Des CDs amphiphiles ont été préparées à partir de cyclodextrines auxquelles ont été greffés des substituants de natures différentes. Leur caractère plus ou moins hydrophobe et la structure de ces substituants influencent les propriétés d'organisation que le dérivé de CD 5 acquiert. Par exemple, dans le cas des CDs persubstituées, l'introduction de groupements dioxyde d'éthyle à la place des chaînes aliphatiques augmente le caractère amphiphile. Ainsi, Darcy et coll. (Angew. Chem. Int. Ed., 2000, 39, 23, 4324-4326) parviennent à former des vésicules et même des micelles allongées à partir de dérivés persubstitués. Encore une fois, une variation de la 10 BHL des CDs amphiphiles semble pouvoir influer sur le type d'organisation. Récemment, des auteurs ont remplacé les chaînes hydrocarbonées par des chaînes fluorocarbonées (Janshoff et coll., Sensor and Actuators B 2000 70, 243-253) afin de diminuer l'hydrophobie et d'augmenter la rigidité des chaînes. 15 Auzély et coll. (Langmuir 2001, 17, 504-510 et Langmuir 2000, 16, 3727-3734) ont montré l'influence de la nature de la tête polaire sur les propriétés d'organisation. Selon que la partie cyclodextrine soit méthylée ou non, les dérivés cholestéryl-cyclodextrines présentés semblent posséder des propriétés physico-chimiques totalement différentes. Alors que la Chol-R-CD, 20 illustrée sur le schéma 4, est totalement insoluble dans l'eau et s'insère dans des membranes modèles de DMPC, la Chol-DIMEB, se dissout spontanément pour former à très faible concentration des micelles monodisperses. CHMe2 25 Schéma 4 Peu d'applications biologiques ont été décrites dans la littérature à partir des cyclodextrines amphiphiles. Les quelques exemples 2907455 7 portent principalement sur leur capacité à transporter et à faciliter le passage de principes actifs à travers les membranes cellulaires, sous forme de nanoparticules. Un des buts de la présente invention est de fournir des s oligosaccharides cycliques, notamment dérivés de cyclodextrines, présentant de bonnes propriétés de complexation. Un autre but de la présente invention est de fournir des oligosaccharides cycliques qui présentent une plus grande affinité pour les membranes. 10 Un autre but de la présente invention est de fournir des oligosaccharides cycliques qui présentent une meilleure stabilité dans des systèmes biologiques. D'autres buts et avantages de l'invention apparaîtront au cours de la description qui va suivre qui n'est donnée qu'à titre indicatif et qui n'a pas 15 pour but de la limiter. La présente invention concerne des oligosaccharides cycliques, notamment dérivés de cyclodextrines amphiphiles, substituées par un ou plusieurs groupements polycycles naturels, tels que des triterpénoïdes cycliques, caractérisés en ce qu'il est constitué par : 20 - a sous unités saccharidiques indépendantes de type A ,0R3 (A) 25 - b sous unités saccharidiques indépendantes de type B 5 lo 15 2907455 8 (B) dans lesquelles a + b = 6, 7 ou 8 et b = 2, RI, R2 et R3 représentent indépendamment un hydrogène ou une structure organique comportant de 1 à 6 atomes de carbone, E représente un groupement espaceur constitué d'une chaîne organique comportant de 2 à 10 atomes de carbone et au moins un hétéroatome, pCy représente un composé organique polycyclique. La présente invention concerne également un procédé de préparation d'oligosaccharides cycliques, tels que décrits dans la présente invention, caractérisé en ce que le groupement espaceur E comporte un azote et en ce que l'on emploie les composés suivants : - un oligosaccharide cyclique constitué de : - a sous-unités indépendantes de type A, - b sous-unités indépendantes de type B' : 7 NH2 20 B' dans lequel RI et R2 représentent indépendamment un hydrogène ou une structure organique comportant de 1 à 10 atomes de carbone, et dans lequel : 2907455 9 - au moins b composés organiques polycycliques comportant un groupe L3 susceptible de former une liaison covalente carbone-hétéroatome avec un groupe L2, - au moins b composés organiques de liaison comportant un 5 premier groupe LI susceptible de former une liaison covalente avec un NH2 de l'oligosaccharide cyclique et un second groupe L2 susceptible de former une liaison covalente avec un groupe L3, et en ce que pour chacun des b composés de liaison l'on forme d'une part une liaison covalente avec l'un des azotes de l'oligosaccharide à partir de son ~o groupe LI et d'autre part une liaison covalente à partir de son groupes L2 avec un groupe L3 de l'un des b composés polycycliques, - au moins b composés polycycliques comportant un groupe LI, et en ce que l'on forme b liaisons covalentes à partir d'au moins b groupes LI et des azotes de l'oligosaccharide. 15 La présente invention concerne en outre un clathrate formé d'un ou plusieurs oligosaccharides cycliques selon la présente invention et d'une ou plusieurs molécules invitées, ainsi que son utilisation dans le domaine pharmaceutique et/ou agroalimentaire. L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description 20 suivante, accompagnée des dessins en annexe parmi lesquels : - la figure 1 représente les isothermes de compression (en mN/m) de monocouche de Langmuir de diChol-TMBS, DPPC et d'un mélange en fonction de la surface absolue (en cm2) à 25 C (a) ou en fonction de la surface disponible par molécule (en nm2) à 20 C (b). 25 - la figure 2 représente (a) Molécule de DMPC ; (b) Spectres RMN du deutérium de membranes multilamellaires de DMPC d54 pure enregistrés à 37 C (a,e), 25 C (b,f), 22 C (c,g) et 20 C (d,h), en (a-d) il s'agit de spectres de poudre et en (e-h) de spectres déconvolués (DPK), - la figure 3 représente les spectres déconvolués de RMN du 30 deutérium de membranes multilamellaires de DMPC d54 enregistrés en 2907455 10 absence (A) ou en présence (B) de diChol-TMBS à 37 C et entre 30 C et 13 C avec un pas de 1 C entre chaque spectre. La figure 4 représente le premier moment M1 des spectres de poudre de RMN du deutérium ayant conduit aux spectres déconvolués de la 5 figure 2b (a-d). L'invention concerne tout d'abord un oligosaccharide cyclique, notamment dérivé de cyclodextrines amphiphiles, substitué par un ou plusieurs groupement polycycles naturels, tels que des triterpénoïdes cycliques. Selon la présente invention, ledit oligosaccharide cyclique est 10 constitué par : - a sous unités saccharidiques indépendantes de type A /OR3 (A) - b sous unités saccharidiques indépendantes de type B / E-pCy 20 (B) dans lesquelles a + b = 6, 7 ou 8 et b = 2, 15 2907455 Il RI, R2 et R3 représentent indépendamment un hydrogène ou une structure organique comportant de 1 à 6 atomes de carbone, E représente un groupement espaceur constitué d'une chaîne organique comportant de 2 à 10 atomes de carbone et au moins un 5 hétéroatome, pCy représente un composé organique polycyclique. Au sens de l'invention une structure organique correspond à une chaîne carbonée qui peut être éventuellement mono- ou polysubstituée, linéaire, ramifiée ou cyclique, saturée ou insaturée, pontante ou non pontante, io aromatique ou non aromatique, et qui peut être substituée par des hétéroatomes tels que N, O, F, Cl, P, Si, Br ou S. Parmi les chaînes organiques, on peut notamment citer les chaînes aliphatiques comme les groupes méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, tert-butyle et pentyle, les chaînes organiques comportant un 15 ou plusieurs oxygènes comme les éthers, les polyéthers, les alcools et les polyhydroxyles. On peut également citer les groupes alkyles insaturés tels que éthényles, propényles, isopropényles, butényles, isobutényles, tert-butényles, pentényles et acétylényles. 20 Une chaîne organique peut aussi correspondre à une structure carbonée aromatique ou hétéroaromatique, mono- ou polysubstituée, constituée d'un ou plusieurs cycles aromatiques ou hétéroaromatiques comportant chacun de 3 à 8 atomes, le ou les hétéroatomes pouvant être notamment N, O, P ou S. 25 Au sens de la présente invention un composé organique polycyclique est une structure organique comportant au moins deux cycles, de préférence accolés. La structure peut éventuellement être mono- ou polysubstituée, ramifiée, saturée ou insaturée, pontante ou non pontante, le ou les substituants pouvant contenir des groupes alkyles, généralement en CI à 30 Cio, un ou plusieurs hétéroatomes tels que N, O, F, Cl, P, Si, Br ou S. 2907455 12 Typiquement cette structure est lipophile, elle est souvent dérivée de molécules naturelles et peut ainsi également correspondre à leurs métabolites. Le nombre de cycles varie généralement de 2 à 6, de préférence 2 à 4, les cycles peuvent être aromatiques, saturés ou insaturés. Parmi ces 5 composés, les polyterpènes, et notamment les triterpénoïdes cycliques et les dérivés des stéroïdes sont préférés, ainsi le groupe cholestéryle est particulièrement avantageux. II est préférable que le polycyclique soit dérivé d'une substance naturelle. Avantageusement, les composés Organiques (pCy) 10 polycycliques portés par les différentes sous-unités de type B sont identiques. Lorsque b = 2 il est préférable que les différentes sous-unités de type B soient séparées par au moins deux sous-unités de type A. RI, R2 et R3 correspondent généralement à un hydrogène ou un groupement alkyle et notamment un éthyle, plus préférentiellement un 15 méthyle. Il est avantageux que l'ensemble des RI des différentes sous-unités de type A soient identiques entre eux. De la même manière il est avantageux que l'ensemble des R2 des différentes sous-unités de type A soient identiques entre eux. De manière préférée les différents RI et R2 des différentes 20 sous-unités A sont identiques entre eux. De manière encore plus préférée les différents RI et R2 des différentes sous-unités de type A et de type B sont identiques entre eux. Typiquement, le groupement espaceur E correspond à une chaîne organique, contenant de 4 à 7 atomes de carbone, partageant une 25 liaison covalente carbone-hétéroatome avec la structure saccharidique et une liaison covalente avec pCy. Généralement la chaîne organique correspond à une chaîne carbonée, pouvant éventuellement être ramifiée et comporter un ou plusieurs hétéroatomes. La chaîne carbonée est liée par l'une de ses extrémités à la structure saccharidique par l'intermédiaire d'une liaison 30 covalente carbone-hétéroatome et par l'autre extrémité au polycyclique par l'intermédiaire d'une liaison covalente. Les liaisons covalentes, lorsqu'elles sont 2907455 13 de type carbone-hétéroatome peuvent notamment se présenter sous la forme d'une fonction ester, amide, d'un éther, d'un thioether. II est préférable que l'hétéroatome engagé dans la liaison carbone-hétéroatome reliant l'oligosaccharide au groupement espaceur soit un azote. Entre les deux 5 extrémités la chaîne carbonée comportera généralement de 2 à 6 carbones et typiquement un oxygène sous forme d'un éther. Avantageusement les groupements espaceurs portés par les sous-unités de type B sont identiques. Selon un mode de réalisation préféré l'ensemble des sous-unités de type A sont identiques entre elles et l'ensemble des sous-unités de type B sont identiques entre elles. Les oligosaccharide cycliques préférés sont le 61, 61v-(p-Cholesteryl) succinylamido-6',61v-(6-desoxy-per (2,3,6-O-methyl) cycloheptaose (diChol-TMBS), le 61, 61v-(p-Cholesteryl) glutarylamido-6', 61v-(6-desoxy-per 15 (2,3,6-0-methyl) cycloheptaose (diChol-TMBG), 61, 61v-(p-Cholesteryl) 4-oxa glutarylamido-6', 61v-(6-desoxy-per (2,3,6-0-methyl) cycloheptaose (diChol-TMBOG), le 61, 61v-(p-Cholesteryl) 2,2 dimethyl glutarylamido-6',61v-(6-desoxyper (2,3,6-0-methyl) cycloheptaose (diChol-TMBMG), le 61, 61v-(p-Cholesteryl) succinylamido-6',61v-(6-desoxy) cycloheptaose (diChol-BG), le 61, 61v-(p-20 lithocholylamido) -(6-desoxy-per (2,3,6-O-methyl) cycloheptaose. L'invention correspond également à un procédé de préparation d'oligosaccharides cycliques tels que définis ci-dessus et dans lequel le groupement espaceur E comporte un azote. Il s'agit particulièrement d'un procédé de préparation de dérivés de cydodextrine tel que défini ci-dessus. 25 Selon la présente invention on emploie les composés suivants : - Un oligosaccharide cyclique constitué de : - a sous-unités indépendantes de type A, - b sous-unités indépendantes de type B' : 30 2907455 14 7 NH2 B' dans lequel RI et R2 sont tels que définis ci-dessus, et soit - au moins b composés organiques polycycliques 5 comportant un groupe L3 susceptible de former une liaison covalente carbonehétéroatome avec un groupe L2, - au moins b composés organiques de liaison comportant un premier groupe LI susceptible de former une liaison covalente avec un NH2 de l'oligosaccharide cyclique et un second groupe L2 susceptible 10 de former une liaison covalente avec un groupe L3, et en ce que pour chacun des b composés de liaison l'on forme d'une part une liaison covalente avec l'un des azotes de l'oligosaccharide à partir de son groupe LI et d'autre part une liaison covalente à partir de son groupe L2 avec un groupe L3 de l'un des b composés 15 polycyclique, soit - au moins b composés polycycliques comportant un groupe LI, - et en ce que l'on forme b liaisons covalentes à partir d'au moins b groupes LI et des azotes de l'oligosaccharide. 20 Typiquement un composé organique de liaison est constitué d'une structure organique qui peut notamment être une chaîne carbonée qui peut être éventuellement mono- ou polysubstituée, linéaire, ramifiée ou cyclique, saturée ou insaturée, pontante ou non pontante, aromatique ou non aromatique, et qui peut être substituée par des hétéroatomes tels que N, O, F, 25 Cl, P, Si, Br ou S. Les hétéroatomes seront généralement choisis en fonction du type de liaison covalente qu'il est souhaitable d'établir. Plus particulièrement le composé organique de liaison correspondra à une chaîne carbonée linéaire, 2907455 15 comportant à ses extrémités les groupes LI et L2, de 0 à 3 ramifications et un hétéroatome dans la chaîne. De manière avantageuse le composé de liaison est symétrique. Parmi les composés organiques de liaison on peut par exemple s citer les dérivés de l'acide succinique, l'anhydride glutarique ou encore l'anhydride diglycolique. Parmi les composés organiques polycycliques, et en rapport avec la définition qui en a été donnée précédemment, on peut notamment citer le cholestérol ou l'acide lithocholique. L'acide lithocholique, qui comporte une io fonction acide, peut être par exemple couplé directement avec l'oligosaccharide à l'aide de sa fonction acide qui est susceptible de réagir avec des fonctions amines portées par l'oligosaccharide. L'homme du métier est à même de déterminer les groupes LI, L2 et L3 susceptibles de réagir les uns avec les autres. Les liaisons covalentes is peuvent être facilement réalisées par des réactions de substitution nucléophile. Ainsi il est connu que les dérivés d'acide, peuvent être couplés à des fonctions notamment du type alcool ou amine selon les techniques connues de l'homme du métier. Par exemple une fonction amine réagit avec une fonction acide en présence notamment de dicyclohexylcarbodiimide et 20 d'hydroxybenzotriazole (HOBT), une fonction alcool réagira aisément avec un anhydride d'acide. Au titre de groupe LI, il est recommandé d'employer une fonction acide. Au titre de groupe L2 et L3 il est recommandé d'employer des groupes hydroxyles et anhydride d'acide. Le procédé peut être réalisé en une ou plusieurs étapes. Il est 25 possible de protéger les fonctions les plus sensibles de chacun des composés intervenant et le procédé peut alors inclure des étapes de protection et de déprotection. Selon le premier mode de réalisation, qui correspond à l'utilisation d'un composé organique de liaison, le procédé peut être réalisé en 30 deux étapes. La première étape peut ainsi correspondre à la formation d'une 2907455 16 liaison covalente entre le composé organique de liaison avec le polycyclique et la seconde étape au couplage du produit obtenu avec l'oligopolysaccharide. La première étape peut aussi correspondre à la formation d'une liaison covalente entre les b azotes du polysaccharide et les groupes L, 5 des b composés organiques de liaison. Dans ce cas la seconde étape correspondra à la formation d'une liaison covalente entre le produit obtenu et les b composés organiques polycycliques. Selon un autre mode de réalisation le couplage de l'ensemble des composés est réalisé simultanément, il est alors préférable que LI et L2 10 soient identiques et que L3 soit un NH2 ou une fonction présentant une réactivité similaire. L'invention concerne également un clathrate formé d'une ou plusieurs molécules hôtes, correspondant à un oligosaccharide cyclique tel que présenté ci-dessus, et d'une ou plusieurs molécules invitées. 1s Une molécule invitée est souvent une molécule d'intérêt thérapeutique qui est généralement peu soluble en milieu aqueux. Typiquement un seul oligosaccharide cyclique tel que présenté est suffisant pour former un clathrate avec une unique molécule invitée. L'utilisation des composés définis précédemment est un autre 20 aspect de l'invention. Les composés selon l'invention peuvent être utilisés notamment dans les domaines pharmaceutiques et/ou agroalimentaires. Ainsi il est particulièrement intéressant d'employer les composés selon l'invention pour la vectorisation de molécules d'intérêt thérapeutique en mettant à profit la formation de clathrate. Les composés 25 exposés précédemment ont un intérêt particulier du fait de leur affinité importante et non destructive pour les membranes de type biologique, i.e. composées de lipides. En effet, en présence d'une membrane biologique, les composés selon l'invention s'y plantent de manière non déstabilisante. Il est ainsi possible de garantir une biodisponibilité pour des molécules invitées ou 30 simplement pour des molécules traversant l'espace libre aménagé dans la 2907455 17 membrane. L'invention concerne ainsi particulièrement l'application des composés selon l'invention comme composant de membrane. Cette incorporation dans des systèmes organisés est destinée à permettre le transport de molécules hydrophobes, par exemple un principe 5 actif, en particulier par voie transmembranaire. Cette incorporation dans des systèmes organisés peut également permettre l'utilisation de telles molécules comme détergents membranaires en particulier de protéines. Pour pouvoir établir des relations entre la structure et les propriétés physico-chimiques des cyclodextrines amphiphiles, il est primordial 10 de déterminer parfaitement la structure de ces composés. II y a quelques années, les techniques de caractérisation ne permettaient pas d'élucider facilement la structure de ces macromolécules complexes (en particulier en ce qui concerne le nombre et la position des substituants greffés sur la CD). Aujourd'hui, des techniques puissantes telles que la Résonance Magnétique ts Nucléaire (RMN) à haut champ et Spectrométrie de Masse haute résolution (FABMS) sont des instruments indispensables à la caractérisation complète de cyclodextrines modifiées. Ainsi ces différentes techniques ont été mises à profit pour valider la structure des molécules qui sont présentées, les données nécessaires pour parvenir à leur isolation sont indiquées. 20 Différents composés ont été préparésselon le procédé exposé précédemment. II a été décidé d'illustrer l'invention avec des dérivés de 13-cyclodextrine disponibles dans le commerce ou préparés à partir de tels composés par des réactions décrites dans la littérature. Les composés polycycliques choisis correspondent à des composés naturels, il s'agit du 25 cholestérol et de l'acide lithocholique. La préparation des composés a été réalisée en deux étapes : le composé organique de liaison a tout d'abord été greffé au composé polycyclique puis le produit obtenu a été couplé à un oligosaccharide cyclique. Dans un premier temps de l'hémi glutarate de [3-cholestérol, du 30 4-oxa hémi glutarate de [3-cholestérol et du 2,2-dimethyl hémi glutarate de R-cholestérol ont été préparés. 2907455 18 hémi glutarate de [3-cholestérol Un mélange de cholestérol (1,00 g ; 2,59 mmol) et d'anhydride 5 glutarique (886 mg ; 7,8 mmol) est agité et chauffé à 150 C en présence d'acide camphosulfonique (60mg) (ou camphre sulfonique), catalyseur usuel dans ce genre de manipulation, jusqu'à l'obtention d'un mélange liquide jaunâtre, la réaction a été suivie par chromatographie sur couche mince. Le mélange a ensuite été refroidi puis purifié par chromatographie sur gel de silice 10 (éluée au CH2Cl2/MeOH ; 95/5) et l'hémi glutarate de 13-cholestérol a été obtenu sous forme d'une cire blanche avec un rendement de 77%. 4-oxa hémi glutarate de [3-cholestérol ,OH o 15 Un mélange de cholestérol 95% (400 mg ; 1,036 mmol) et d'anhydride diglycolique (360 mg ; 3,108 mmol) sont introduits dans un ballon 20 et le mélange est ensuite agité et chauffé à 150 C jusqu'à l'obtention d'une solution liquide jaunâtre ; la réaction a été suivie par chromatographie sur couche mince. Le mélange réactionnel a ensuite été refroidi puis purifié par chromatographie sur gel de silice (éluée au CH2Cl2/MeOH ; 95/5 puis 90/10). Le 4-oxa hémi glutarate de [3-cholestérol a été obtenu sous forme d'une poudre 25 blanche (459 mg) avec un rendement de 88%. 2,2 dimethyl hémi qlutarate de 13-cholestérol 30 OH 2907455 19 Un mélange de cholestérol 95% (400 mg ; 1,036 mmol), d'anhydride 3,3-dimethylglutarique (441 mg ; 3,108 mmol) et d'acide camphre sulfonique (23 mg ; 0,104 mmol) est agité jusqu'à l'obtention d'un mélange 5 liquide jaunâtre ; la réaction a été suivie par chromatographie sur couche mince. Le mélange a ensuite été refroidi puis purifié par chromatographie sur gel de silice (élué au CH2Cl2/MeOH ; 95/5). Le 2,2 dimethyl hémi glutarate de (3-cholestérol a été obtenu sous forme d'une poudre blanche (468 mg) avec un rendement de 85%. lo Ces trois composés ont été préparés avec de bons rendements, ils ont été utilisés pour la suite du procédé tels qu'obtenus à l'issu de la chromatographie. Un couplage a ensuite été réalisé entre ces composés et des oligosaccharides cycliques : la (3-diamino(6',61v)cyclodextrine ainsi que sa 15 forme per méthylée. 61, 6'v-(3-Cholesteryl) succinylamido-6',61v-(6-desoxy-per (2,3,6-0-methyl) cycloheptaose (diChol-TMBS) OMz O O 20 25 L'hemisuccinate de cholesteryl (147 mg, 0.30 mmol, 2,2 eq.) a 3o été additionné à une solution de R-diamino(6',61v)-per-(2,3,6-0-methyl)cyclodextrine (220 mg, 0,14 mmol) dans la diméthylformamide (DMF) 2907455 20 (2,0 ml) avec du dicyclohexylcarbodiimide (DCC) (56 mg, 0,27 mmol, 2 eq.) et de l'hydroxybenzotriazole (37 mg, 0,27 mmol, 2 eq.). Le mélange réactionnel a ensuite été agité à température ambiante sous atmosphère inerte pendant 3 h. après évaporation du solvant de réaction sous pression réduite, le résidu 5 solide a été dissout dans du CH2Cl2 avant d'être lavé avec une solution aqueuse saturée de NaHCO3. La phase organique a ensuite été séchée sur MgSO4, le solvant évaporé et le résidu solide purifié par chromatographie sur gel de silice utilisant un gradient CH2Cl2-MeOH (100:1 à 20:1). Le diChol-TMBS a été obtenu avec un rendement de 78%. L'interprétation des analyses to effectuées sont les suivantes : 1H NMR (spectre de résonnance magnétique nucléaire du 1H) (400 MHz, CDCI3): 8 6.25 (m, 2 H, NHCO), 5.38 (d, 2 H, J4' 5' = 4.0 Hz, CH alkene), 5.20 (m, 3 H, H-1), 5.16 (d, 1 H, J1,2 = 3.3 Hz, H-1), 5.14 (d, 1 H, J1,2 = 3.4 Hz, H-1), 5.13 (d, 1 H, J1,2 = 3.8 Hz, H-1), 5.12 (d, 1 H, J1,2 = 3.4 Hz, H-1), 15 4.61 (m, 2 H, CHOCO), 3.86 (m, H, 2 x H-5, 10 x H-6, 2 x CHNHCO), 3.71-3.60 (m, 26 H, 5 x H-5, 7 x MeO), 3.60-3.49 (m, 9 H, 7 x H-3, 2 x CHNHCO), 3.60-3.34 (m, 39 H, 12 x MeO), 3.41-3.34 (m, 7 H, 7 x H-4), 3.20 (7 H, 7 x H-2), 2.65 (m, 4 H, CH2CONH), 2.49 (m, 4H, CH2CO), 2.32 (bd, 4 H, J1',2' = 7.8 Hz, CH2CHOCO), 1.03 (s, 6 H, CH3), 0.94 (d, 6 H, CH3), 0.89 (d, 6 H, JH,H = 1.8 Hz, 20 Me2CH), 0.88 (d, 6 H, JH,H = 1.8 Hz, Me2CH), 0.70 (s, 6 H, CH3). 13C NMR (100.6 MHz, CDCI3): 172.2 (CO amide), 171.4 (CO ester), 139.5 (C alkene), 122.6 (CH alkene), 99.0-98.3 (C-1), 94.4 (C-1'), 82.2-81.4 (C-2, C-3) 81.0-79.2 (C-4), 74.3 (CHOCO), 71.4-70. 9 (C-5), 71.2-70.9 (C-6), 70.1, 70.0 (C-5 amide), 61.5-61.1 (MeO), 59.5-58. 2 (MeO), 40.2, 40.1 (C-6 25 amide), 38.0 (CH2CHOCO), 31.1 (CH2OOO), 29.9 (CH2CONH), 22.7, 22.5 (Me2CH), 19.2 (CH3), 18.7 (MeCH), 11.8 (MeCH). MALDI-TOF m/z (spectre de masse): m/z 2360.75 (100, [M + Na]+). 30 2907455 21 61, 61v-([3-Cholesteryl) cilutarvlamido-6', 61v-(6-desoxy-per (2,3,6-0-methyl) cycloheptaose (diChol-TMBG) N 5 Io De l'hémi glutarate de [3-cholestérol (147 mg, 0.30 mmol, 2,2 eq.) a été additionné à une solution de 3-diamino(61,61v)-per-(2,3,6-0-methyl)cyclodextrine (220 mg, 0,14 mmol) dans la DMF (2,0 ml) avec du 15 dicyclohexylcarbodiimide (56 mg, 0,27 mmol, 2 eq.) et de l'hydroxybenzotriazole (37 mg, 0,27 mmol, 2 eq.). Le mélange a ensuite été agité à température ambiante sous atmosphère inerte pendant 3 h. Après évapooration du solvant de réaction sous pression réduite le résidu solide a été dissout dans du CH2Cl2 puis lavé avec une solution aqueuse saturée de 20 NaHCO3. La phase organique a ensuite été séchée sur MgSO4 et le solvant évaporé pour conduire à un résidu solide qui a été purifié par chromatographie de gel de silice en utilisant un gradient CH2Cl2-MeOH. Le diChol-TMBG a été obtenu avec un rendement de 75%. MALDI-TOF m/z (spectre de masse): m/z 2403.9 (100, [M + K]+) 25 61, 61v-U3-Cholesteryl) 4-oxa glutarylamido-6', 61v-(6-desoxy-per (2,3,6-0-methyl) cycloheptaose (diChol-TMBOG) t)Me I_I nM, 30 2907455 22 Un mélange de [i-diamino(6',61v)-per-(2,3,6-0-methyl)cyclodextrine (0,220 mg, 0,140 mmol), de 4-oxa hémi glutarate de [3-cholestérol (0,210 mg ; 420 mmol), de DCC (0,056mg ; 0,280 mmol) et de hydroxybenzotriazole (HOBT) (0,037 mg ; 0,280 mmol) a été dissout dans 5 2,00 ml de DMF anhydre et agité pendant 3 heures sous atmosphère inerte. Après évaporation du solvant sous pression réduite, le produit brut a été repris dans du CH2Cl2 et lavé trois fois à l'eau puis une fois avec une solution aqueuse de HCI 1M et enfin une fois avec une solution aqueuse de NaHCO3 saturée. La phase organique a ensuite été séchée sur MgSO4, puis, elle a été 10 filtrée et évaporée sous pression réduite. Le produit brut a été purifié par chromatographie de gel de silice (élué avec AcOEt/MeOH ; 9/1) et le diChol-TMBOG a été obtenu sous forme d'une huile avec 68% de rendement. Rapport frontal (Rf): 0,50 (AcOEt/MeOH ; 9/1) MALDI-TOF : m/z 2393.0 (100, [M + H+Na]+) 15 61, 61v-(l3-Cholesteryl) 2,2 dimethyl glutarylamido-6',61v-(6-desoxy-per (2,3,6-0-methyl) cycloheptaose (diChol-TMBMG) OMc 20 25 Un mélange de R-diamino(6',61v)-per-(2,3,6-0-methyl)cyclodextrine (0,220 mg, 0,14 mmol), de 2,2 dimethyl hémi glutarate de p-cholestérol (0,210 mg ; 42 mmol), de DCC (0,056mg ; 0,28 mmol) et de hydroxybenzotriazole (HOBT) (0,037 mg ; 0,280 mmol) a été dissout dans 2,00 30 ml de DMF anhydre et agité pendant 24 heures à température ambiante. Après évaporation du solvant le produit brut a été repris dans du dichlorométhane, 2907455 23 lavé trois fois à l'eau puis une fois avec une solution aqueuse de HCI 1M et enfin une fois avec une solution aqueuse saturée de NaHCO3. La phase organique a été séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée sous pression réduite. Le produit brut a été purifié par chromatographie sur gel de silice (100% 5 d'acétate d'éthyle (AcOEt) puis quand la totalité du dérivé cholestérol est passé AcOEt/MeOH : 9/1) et le diChol-TMBMG a été obtenu sous forme d'une huile avec 78% de rendement. Rf = 0,38 (CH2Cl2/MeOH ; 95/5) [a]25D +82 (C=14,0 CHCI3) lo Le produit et l'excès de cholestérol forment un adduit (ou complexe) stable. Il est possible de les séparer en éluant le mélange sur colonne chromatographique de gel de silice avec 100% AcOEt pour libérer le cholestérol de la cyclodextrine. MALDI-TOF: M+ H+Na : C129H218N2O39Na : 2445,1 15 Afin de montrer les étonnantes propriétés des composés objets de l'invention, différentes mesures qui ont été effectuées sont présentées pour le diChol-TMBS. Dans un premier temps, pour illustrer le caractère amphiphile prononcé des composés, des monocouches de Langmuir ont été réalisées sur 20 cuves de Langmuir dans l'eau pure et la pression de surface a été mesurée à l'aide d'une balance de Wilhelmy. Le caractère amphiphile du diChol-TMBS se manifeste par la formation d'une monocouche moléculaire compressible à la surface de l'eau. Ainsi que l'illustre la figure 1, l'isotherme de compression du produit pur se 25 caractérise par une lente montée jusqu'à des pressions élevées et un pseudoplateau apparaît vers 30 mN/m. II s'agit d'un comportement probablement spécifique de la cyclodextrine qui n'était jusqu'alors pas connu des dérivés de cyclodextrine polysubstitués. Un mélange à 10% molaire de diChol-TMBS avec un 30 phospholipide modèle, la dipalmitoyl phosphatidyl choline (DPPC), a ensuite été préparé et étudié sur cuve de Langmuir, pour monter le comportement 2907455 24 inhabituel des composés de l'invention en présence de membranes phospholipidiques. Contrairement au comportement classique des dérivés méthylés de cyclodextrines, le diChol-TMBS s'insert dans la membrane de 5 DPPC. En effet, ainsi que l'illustre la figure 1, la monocouche qui est formée s'avère stable jusqu'aux pressions de surface élevées, i.e. supérieures à 40mN/m. Une proportion de 10% molaire de diChol-TMBS avec la DPPC suffisent à modifier profondément l'isotherme de la DPPC puisque le plateau de pression disparaît presque complètement, par ailleurs, cet effet s'accroît lo avec la température. La dimension de la tête polaire explique le décalage de l'isotherme vers les aires/molécules plus fortes. Dans un second temps un modèle de membrane biologique a été employé pour montrer les possibilités d'interaction entre les composés selon l'invention et les membranes des systèmes biologiques. Ainsi le 15 comportement de la diChol-TMBS en présence d'une membrane de 1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (dimyristoyl phosphatidylcholine ou DMPC) a été étudié par résonance magnétique nucléaire (RMN). La DMPC, telle que montrée à la figure 2a, est un phospholipide synthétique couramment utilisé dans la préparation de systèmes 20 modèles de la bicouche lipidiques comme les liposomes uni- ou multilamellaires (Structure of lipid bilayers (2000) J. F., Nagle & S., Tristram-Nagle, Biochim. Biophys. Acta, 1469, 159-195). L'utilisation de la RMN du deutérium a permis l'étude de l'organisation des membranes lipidiques par la mesure directe des paramètres 25 d'ordres des groupements CD des chaînes hydrocarbonées des lipides préalablement deutérés. Les spectres RMN enregistrés à partir de membranes bicouches en phase fluide, au-dessus de la température de transition de la DMPC (Tc 21 C) se caractérisent par une distribution d'écarts quadrupolaires bien résolus, typiques des phospholipides en phase liquide 30 cristalline, tel que montré à la figure 2b(a-c). 2907455 25 Le protocole suivi pour préparer l'échantillon est connu dans le domaine (Davies et al., 1983, Biochimica et Biophysica Acta, 737, 1, 117-171). Une solution de la DMPC deutérée, ou DMPC d54, et du diChol-TMBS dans un mélange Choroforme/Methanol 9 :1 (vol : vol) a tout d'abord été préparée, puis, s les solvants sont évaporés et le résidu dispersé dans 1 ml d'eau distillée ajustée à pH 7 puis il a été lyophilisé. Le lyophilisat obtenu a été suspendu et 100-200 pl de tampon Tris 50 mM, préparé dans de l'eau appauvrie en deutérium et ajusté à pH 7.5 (40 mM Nacl, EDTA 1mM (sel disodique de l'acide éthylènediaminotétraacétique)) ont été ajoutés. io Après déconvolution (DePakeing) on peut mesurer individuellement les écarts quadrupolaires associés aux différents groupements CD2 de la chaine acide gras deutérée, pour en obtenir leur paramètre d'ordre respectif, comme montré à la figure 2b(e-g). En phase gel, au-dessous de la température de transition, les raies de résonances sont considérablement 15 élargies, conduisant à des spectres peu résolus où les écarts quadrupolaires ne sont plus mesurables, à l'exception de celui du groupement methyle terminal, comme montré à la figure 2b(d, h). Ce changement de forme spectral est caractéristique de la transition de l'état fluide à l'état gel que l'on observe dans les membranes lipidiques à leur température de transition Tc. 20 Les résultats obtenus par RMN du deutérium avec des membranes multilammellaires de DMPC d54 en présence de dérivé diChol-TMBS, montrent que ce composé s'insère dans les membranes, sans toutefois en perturber l'ordre moyen de la région hydrophobe en phase fluide, comme il est possible de le voir sur les spectres des chaînes lipidiques enregistrés en 25 présence de 10% (mole : mole) de ce dérivé à la figure 3. En dessous de la température de transition, les spectres restent caractéristiques d'une membrane en phase fluide. Ce résultat témoigne d'un effet fluidifiant du dérivé diChol-TMBS qui permet aux membranes de DMPC d54 de rester à l'état fluide à basses températures, où les lipides purs sont normalement à 30 l'état gel. Une part importante des lipides reste dans cet état fluide intermédiaire jusque vers 7 C, température au-delà de laquelle, on observe un 2907455 26 passage de l'ensemble de la membrane vers l'état gel. Une analyse quantitative est possible par la mesure du premier moment M1 des spectres non déconvolués, comme montré à la figure 2b(a-d), qui permet une estimation du paramètre d'ordre moyen des groupements CD2 de la chaîne acide gras 5 montré à la figure 4. Les courbes obtenues en phase fluides en absence ou en présence de diChol-TMBS sont quasiment superposables, on observe une légère diminution du paramètre d'ordre moyen à haute température induite par ce dérivé, soulignant que la bicouche lipidique n'est que faiblement perturbée. lo La déstabilisation de l'état gel, apparaît par contre clairement au travers de l'importante réduction du paramètre d'ordre moyen observée entre 20 C et 10 C en présence de diChol-TMBS. Naturellement, d'autres modes de mise en oeuvre, à la portée de l'homme de l'art, auraient pu être envisagés sans pour autant sortir du cadre 15 de l'invention. REVENDICATIONS 1. Oligosaccharide cyclique, notamment dérivé de cyclodextrines, amphiphiles, substituées par un ou plusieurs groupements 5 polycycles naturels, tels que des triterpénoïdes cycliques, caractérisé en ce qu'il est constitué par : - a sous unités saccharidiques indépendantes de type A OR3 10 (A) - b sous unités saccharidiques indépendantes de type B z E-pCy 15 (B) dans lesquelles a + b = 6, 7 ou 8 et b = 2, RI, R2 et R3 représentent indépendamment un hydrogène ou 20 une structure organique comportant de 1 à 6 atomes de carbone, E représente un groupement espaceur constitué d'une chaîne organique comportant de 2 à 10 atomes de carbone et au moins un hétéroatome, 2907455 28 pCy représente un composé organique polycyclique. 2. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, caractérisé en ce que les composés organiques polycycliques pCy sont identiques. 3. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, caractérisé en ce que les sous-unités de type B sont séparées par au moins deux sous unités de type A. 4. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1 caractérisé en ce que RI, R2 et R3 correspondent à un hydrogène. 5. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1 caractérisé en ce que RI, R2 et R3 correspondent à un groupement alkyle. 6. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 5, caractérisé en ce que le groupement alkyle correspond à l'éthyle. 7. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 5, caractérisé en ce que le groupement alkyle correspond au méthyle. 8. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'ensemble des RI des différentes sous-unités de type A sont identiques entre eux. 9. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, 20 caractérisé en ce que l'ensemble des R2 des différentes sous unités de type A sont identiques entre eux. 10. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'ensemble des RI et des R2 des différentes sous-unités de type A sont identiques entre eux. 25 11. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'ensemble des R, et des R2 des différentes sous unités de type A et de type B sont identiques entre eux. 12. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, caractérisé en ce que la chaîne organique du groupement espaceur E partage 30 une liaison covalente carbone-hétéroatome avec la structure saccharidique et 2907455 29 une liaison covalente carbone-carbone avec le composé organique polycyclique pCy. 13. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 12, caractérisé en ce que l'hétéroatome de la liaison covalente carbone- 5 hétéroatome est l'azote. 14. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, caractérisé en ce que les groupements espaceurs E portés par différentes sous-unités de type B sont identiques. 15. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, io caractérisé en ce que les sous-unités de type A sont identiques entre elles et les sous-unités de type B sont identiques entre elles. 16. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, caractérisé en ce que le dérivé est le 61, 61v-(13-Cholesteryl) succinylamido-6', 61v-(6-desoxy-per (2,3,6-0-methyl) cycloheptaose (diChol-TMBS). 15 17. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, caractérisé en ce que le dérivé est le 61, 61v-(J3-Cholesteryl) glutarylamido-6', 61v-(6-desoxy-per (2,3,6-0-methyl) cycloheptaose (diChol-TMBG). 18. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, caractérisé en ce que le dérivé est le 61, 61v-(p-Cholesteryl) 4-oxa glutarylamido-6', 61v-(6-desoxy-per (2,3,6-0-methyl) cycloheptaose (diChol-TMBOG). 19. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, caractérisé en ce que le dérivé est le 61, 61v-(j3-Cholesteryl) 2,2 dimethyl glutarylamido-6',61v-(6-desoxy-per (2,3,6-0-methyl) cycloheptaose (diChol-TMBMG). 20. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, caractérisé en ce que le dérivé est le 61, 61v-(p-Cholesteryl) succinylamido-6a,61v-(6-desoxy) cycloheptaose (diChol-BG). 21. Oligosaccharide cyclique selon la revendication 1, 30 caractérisé en ce que le dérivé est le 61, 61v-((3-lithocholylamido) -(6-desoxy-per (2,3,6-0-methyl) cycloheptaose. 2907455 22. Procédé de préparation d'oligosaccharides cycliques selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que le groupement espaceur E comporte un azote et en ce que l'on emploie les composés suivants : un oligosaccharide cyclique constitué de : - a sous-unités indépendantes de type A, - b sous-unités indépendantes de type B' : z NH2 B' dans lequel RI et R2 représentent indépendamment un hydrogène ou une structure organique comportant de 1 à 10 atomes de carbone, et dans lequel : au moins b composés organiques polycycliques 15 comportant un groupe L3 susceptible de former une liaison covalente carbonehétéroatome avec un groupe L2, au moins b composés organiques de liaison comportant un premier groupe LI susceptible de former une liaison covalente avec un NH2 de l'oligosaccharide cyclique et un second groupe L2 susceptible de former une 20 liaison covalente avec un groupe L3, et en ce que pour chacun des b composés de liaison l'on forme d'une part une liaison covalente avec l'un des azotes de l'oligosaccharide à partir de son groupe LI et d'autre part une liaison covalente à partir de son groupe L2 avec un groupe L3 de l'un des b composés polycyclique, 25 - au moins b composés polycycliques comportant un groupe 5 10 LI, 2907455 31 et en ce que l'on forme b liaisons covalentes à partir d'au moins b groupes LI et des azotes de l'oligosaccharide. 23. Procédé selon la revendication 22, caractérisé en ce que le composé de liaison est symétrique. 5 24. Procédé selon la revendication 22, caractérisé en ce qu'il est réalisé en deux étapes. 25. Procédé selon la revendication 24, caractérisé en ce que la première étape correspond à la formation d'une liaison covalente entre le composé organique de liaison avec le polycyclique et là seconde étape au 10 couplage du produit obtenu avec l'oligopolysaccharide. 26. Procédé selon la revendication 24, caractérisé en ce que la première étape correspond à la formation d'une liaison covalente entre les b azotes du polysaccharide et les groupes LI des b composés organiques de liaison et la seconde étape correspond à la formation d'une liaison covalente 15 entre le produit obtenu et les b composés organiques polycycliques. 27. Clathrate formé d'un ou plusieurs oligosaccharides cycliques selon l'une quelconque des revendications 1 à 21 et d'une ou plusieurs molécules invitées. 28. Utilisation d'un clathrate selon la revendication 27 dans le 20 domaine pharmaceutique et/ou agroalimentaire.