Brevet FR2888750A1 — publié le 20070126

CONTEXTE DE L'INVENTION 5 Domaine de l'invention La présente invention concerne une composition et un procédé pour prévenir et traiter les maladies cardiovasculaires et, plus particulièrement, un produit laitier au chrome trivalent qui peut prévenir et traiter une maladie cardiovasculaire d'un receveur et le procédé de fabrication de celui-ci. Description de l'art antérieur En raison du développement économique, du changement de mode de vie et de l'abondance d'aliments riches, l'obésité apparaît progressivement dans tous les groupes d'âge des humains modernes, des enfants et des jeunes aux personnes âgées. La population de personnes obèses continue d'augmenter et, en conséquence, de plus en plus de personnes souffrent de maladies dérivées de l'obésité, telles que l'hypertension, les cardiopathies et l'hyperlipidémie. Par conséquent, il est réellement important pour les humains modernes d'étudier la prévention et le traitement des maladies cardiovasculaires. Normalement, le chrome trivalent absorbé depuis les aliments peut être transféré dans le facteur de tolérance au glucose (GTF) puis distribué dans les tissus du corps humain. Le GTF dans les tissus contribue à ce que les lipides et les composés hydrocarbonés sanguins subissent un métabolisme normal par effet synergique avec l'insuline. Des travaux de recherche ont mis en évidence que la concentration sérique de chrome diminue au cours du vieillissement. A partir de recherches cliniques en 1997, Davies a vérifié que la concentration sérique de chrome diminue de 0,5 ng/ml pendant l'enfance à 0,3 ng/ml à l'âge de 70 ans. L'obésité est une cause du drainage du chrome depuis le corps humain. De plus, la déficience en chrome conduit à des problèmes dans le métabolisme des cellules myocardiques, ce qui cause consécutivement l'infarctus du myocarde et d'autres symptômes cliniques. Le chrome peut être absorbé sous la forme de sel inorganique ou de sel organique à partir de l'alimentation quotidienne. Cependant, le taux d'absorption du chrome inorganique dans le corps humain est très faible, et n'est que dans la plage de 0,4 % à 3 %. La cause fondamentale de cela est que le chrome inorganique a tendance à subir une - 2 - réaction d'olification dans le tube digestif. La réaction d'olification peut produire des composés complexes et volumineux qui perturbent l'absorption dans le tube digestif. Le chrome organique approprié comprend le picolinate de chrome, le nicotinate de chrome, chrome-GTF (facteur de tolérance au glucose), et chrome-extrait de levure. Un complément de chrome organique contribue à guérir la maladie cardiovasculaire causée par une déficience en chrome. Pour les adultes en général, le chrome combiné avec d'autres types de vitamines et de substances minérales peut être considéré comme un complément nutritif personnel. Le brevet U.S. n 4 923 855 décrit un matériau de GTF-chrome synthétique et un procédé pour préparer celui-ci, dans lequel le chrome trivalent est combiné avec l'acide nicotinique pour obtenir un nouveau produit au chrome comprenant un facteur de tolérance au glucose. En 2002, Cefalu et al. ont annoncé que le picolinate de chrome peut diminuer les lipides sanguins d'une souris obèse. RÉSUME DE L'INVENTION La présente invention propose une composition pour prévenir et traiter les maladies cardiovasculaires. Plus particulièrement, la présente invention propose une composition de composé de chrome trivalent et de lactoferrine qui peut prévenir et traiter les maladies cardiovasculaires. La présente invention propose en outre un procédé pour prévenir et traiter les maladies cardiovasculaires d'un receveur. Le procédé consiste à administrer au receveur une quantité efficace d'une composition qui prévient et traite les maladies cardiovasculaires. La composition est constituée de composé de chrome trivalent et de lactoferrine. La composition pour prévenir et traiter les maladies cardiovasculaires de la présente 30 invention comprend principalement (a) une lactoferrine et (b) un composé de chrome trivalent. La lactoferrine de la présente invention n'est pas limitée, et peut provenir de lactoferrine de lait de vache, de lactoferrine de lait de chèvre, de lait de vache non purifié et de lait de chèvre non purifié. Etant donné que la lactoferrine est principalement présente dans le lactosérum du lait, la lactoferrine de la présente invention peut également être remplacée par des produits de protéine lactosérique ou des produits laitiers. 2888750 - 3 - Le composé de chrome trivalent de la présente invention n'est pas limité non plus. De préférence, il peut être choisi dans le groupe comprenant le chlorure de chrome (III) hexahydraté, le chlorure de chrome (III), l'acétate de chrome (III), le sulfate de chrome (III), le picolinate de chrome, le nicotinate de chrome, un chélate acide aminéchrome, GTF-chrome, levure-chrome, chrome-levure, des sels inorganiques de chrome trivalent, des sels organiques de chrome trivalent, et des combinaisons de ceux-ci. Le sel inorganique de chrome trivalent comprend, par exemple, le chlorure de chrome (III) et le sulfate de chrome (III). Le sel organique de chrome trivalent comprend, par exemple, l'acétate de chrome (III), le picolinate de chrome, le nicotinate de chrome, le chrome chélaté avec un acide aminé, chrome-extrait de levure et chrome-levure. Plus préférablement, le composé de chrome trivalent est le chlorure de chrome (III) hexahydraté, le chlorure de chrome (III), l'acétate de chrome (III), le sulfate de chrome (III), le picolinate de chrome, le nicotinate de chrome, un chélate acide aminé-chrome, GTF-chrome, levure- chrome ou chrome-levure. Généralement, le rapport molaire de la lactoferrine au composé de chrome trivalent de la présente invention n'est pas particulièrement limité. De préférence, le rapport molaire de la lactoferrine au composé de chrome trivalent est dans la plage de 1:200 à 10:1. Plus préférablement, le rapport molaire de la lactoferrine au composé de chrome trivalent est dans la plage de 1:20 à 1:1. La composition de la présente invention peut servir d'additif d'un produit laitier. Le produit laitier peut être du lait frais de mammifères, du lait longue conservation, du lait concentré, du fromage ou du lait en poudre. La composition de la présente invention contenant de la lactoferrine de chrome trivalent peut être absorbée et utilisée efficacement par le corps humain. La prise du produit laitier contenant la composition de la présente invention, non seulement peut réapprovisionner efficacement en chrome organique, mais peut également contrôler le taux de lipides sanguins et de facteurs d'inflammation d'un patient souffrant de maladie cardiovasculaire. La composition de la présente invention contenant de la lactoferrine de chrome trivalent est formée en mélangeant le composé de chrome trivalent avec la lactoferrine, et peut augmenter le métabolisme normal des graisses, des glucides et des protéines. La - 4 - lactoferrine est une glycoprotéine qui est capable de se combiner avec des ions métalliques. Chaque molécule de lactoferrine peut être combinée avec deux ions de chrome trivalent. La composition de la présente invention peut être utilisée pour former un médicament. De plus, elle peut être ajoutée dans un produit laitier, et former ainsi un produit laitier contenant un composé de chrome trivalent et de la lactoferrine, c'est-à-dire, former un aliment ou un nutriment. La composition de la présente invention peut être prise par un patient souffrant de maladie cardiovasculaire parce que la composition peut apporter efficacement un complément de chrome trivalent et augmenter le métabolisme normal des graisses, des glucides et des protéines. De plus, le taux sanguin de lipides et de facteurs d'inflammation peut être réduit pour améliorer le confort des personnes souffrant de maladie cardiovasculaire. DESCRIPTION DETAILLEE DES MODES DE REALISATION PREFERES La composition de la présente invention peut être formée en mélangeant la poudre de lactoferrine avec la poudre de composé de chrome trivalent. De plus, de l'eau peut également être ajoutée dans le mélange de lactoferrine et de composé de chrome trivalent pour former une solution mixte. La solution mixte peut être chauffée de manière appropriée de sorte que le mélange puisse être effectué de manière adéquate. La température de chauffage est dans la plage d'environ 37 C à 95 C, et est de préférence dans la plage de 50 C à 80 C. La solution correctement mélangée est ensuite séchée par pulvérisation pour former la composition de la présente invention contenant du chrome trivalent et de la lactoferrine. La matière première de composé de chrome trivalent utilisée dans la présente invention peut être sous la forme de sel inorganique ou de sel organique, tel que le chlorure de chrome (III) hexahydraté, le chlorure de chrome (III), l'acétate de chrome (III), le sulfate de chrome (III), le picolinate de chrome et le nicotinate de chrome. La lactoferrine peut provenir d'une solution ou de poudre sèche de lactoferrine. Etant donné que la lactoferrine est principalement présente dans le lactosérum du lait, la présente invention peut également utiliser un produit de protéine lactosérique non purifié ou un produit laitier pour remplacer la lactoferrine. - 5 - La description détaillée ci-après est faite à titre d'exemple et n'est pas destinée à limiter l'invention uniquement aux modes de réalisation présentement décrits. Exemple 1 Mélanger 5 g de poudre de lactoferrine avec 0,5 g de chlorure de chrome (III) hexahydraté pour former la composition de la présente invention contenant de la lactoferrine de chrome trivalent. Exemple 2 Mélanger 5 g de poudre de lactoferrine avec 0,5 g de chlorure de chrome (III) hexahydraté et 1 litre d'eau pour former une solution. La solution est soigneusement mélangée puis séchée par pulvérisation pour former la composition de la présente invention contenant de la lactoferrine de chrome trivalent. Exemple 3 Mélanger 5 g de poudre de lactoferrine avec 0,5 g de chlorure de chrome (III) hexahydraté et 1 litre d'eau pour former une solution. La solution est soigneusement mélangée, séchée par pulvérisation, puis mélangée avec 10 kg de poudre de lait pour former le produit laitier contenant de la lactoferrine de chrome trivalent. Exemple 4 Mélanger 100 g de protéine lactosérique et 0,5 g de chlorure de chrome (III) hexahydraté avec 3 litres des d'eau pour former une solution. La solution est soigneusement mélangée puis séchée par pulvérisation pour former la composition de la présente invention contenant de la lactoferrine de chrome trivalent. Exemple 5 La procédure de l'exemple 4 est répétée dans un premier temps, puis le produit est mélangé avec 10 kg de poudre de lait pour former le produit laitier contenant de la 35 lactoferrine de chrome trivalent. Exemple 6 - 6 - La procédure de l'exemple 4 est répétée, sauf que la solution mélangée est ajoutée dans 90 kg de lait frais pour former le produit laitier contenant de la lactoferrine de chrome trivalent. Exemple 7 Mélanger 5 g de poudre de lactoferrine avec 0,3 g de chlorure de chrome (III) pour former la composition de la présente invention contenant de la lactoferrine de chrome trivalent. Exemple 8 Mélanger 6 g de poudre de lactoferrine avec 0,5 g d'acétate de chrome pour former la composition de la présente invention contenant de la lactoferrine de chrome trivalent. Exemple 9 Mélanger 5 g de poudre de lactoferrine et 0,35 g de sulfate de chrome avec 1 litre d'eau pour former une solution. La solution est soigneusement mélangée puis séchée par pulvérisation pour former la composition de la présente invention contenant de la 2 0 lactoferrine de chrome trivalent. Exemple 10 Mélanger 5 g de poudre de lactoferrine et 0,8 g de picolinate de chrome avec 1 litre d'eau pour former une solution. La solution est chauffée et mélangée, puis séchée par pulvérisation pour former la composition de la présente invention contenant de la lactoferrine de chrome trivalent. Exemple 11 Mélanger 5 g de poudre de lactoferrine et 0,8 g de nicotinate de chrome avec 1 litre d'eau pour former une solution. La solution est chauffée et mélangée, puis séchée par pulvérisation pour former la composition de la présente invention contenant de la lactoferrine de chrome trivalent. Exemple expérimental 1 Le produit laitier obtenu dans l'exemple 5 est mélangé dans un aliment pour souris (Modified LabDiet avec 35,5 % de saindoux, PMI Richmond, Indiana, Etats-Unis). A - 7 - l'âge de 13 semaines, des essais de tolérance au glucose (GTT) sont conduits après une nuit à jeun. En fonction des résultats de GTT, les souris KK/H1J sont divisées de manière aléatoire en deux groupes. Le groupe expérimental reçoit un produit laitier contenant 800 ppb par jour de chrome trivalent, le groupe témoin ne reçoit pas le produit. Après 5 semaines de supplémentation de chrome, les souris KK/H1J sont mises à jeun pendant une nuit et les GTT sont conduits à nouveau. Les changements de glucose sanguin durant les GTT sont présentés dans le tableau 1. Au début de l'essai, les taux de glucose sanguin sont similaires dans les deux groupes. Cependant, les taux de glucose sanguin à 30, 60, 120 et 180 minutes sont significativement réduits dans le groupe expérimental après avoir reçu une supplémentation de chrome pendant 5 semaines. Ces résultats suggèrent que la tolérance au glucose est significativement améliorée dans le groupe expérimental. Tableau 1 Avant essai Groupe témoin (N = 12) Omin 163 30 min 335 46 min 365 61 min 287 67 min 215 66 Aire de courbe 876 147 Groupe expérimental (N = 12) 166 20 334 24 356 36 267 67 196 61 841 117 Après supplémentation Groupe témoin Groupe expérimental pendant 5 semaines (N = 12) (N = 12) O min 162 30 141 21 min 311 29 275 35* min 383 30 287 41** min 338 64 210 62** min 246 64 168 67* Aire de courbe 944 104 682 129** * p Exemple expérimental 2 Le produit laitier obtenu dans l'exemple 5 est mélangé dans l'aliment pour souris (Modified LabDiet avec 35,5 % de saindoux, PMI Richmond, Indiana, Etats-Unis). A l'âge de 13 semaines, des essais de tolérance au glucose (GTT) sont conduits après une nuit à jeun. En fonction des résultats de GTT, les souris KK/H1J sont divisées de manière aléatoire en deux groupes. Le groupe expérimental reçoit un produit laitier contenant 800 ppb par jour de chrome trivalent, le groupe témoin ne reçoit pas le produit. Après 7 semaines de supplémentation de chrome, les souris KK/H1J sont mises à jeun pendant une nuit et les taux sanguins de glucose, de triglycérides, de LDL-C (lipoprotéine basse densité-cholestérol), d'insuline, de leptine et d'interleukine 6 (IL-6) sont analysés. Les résultats sont présentés ci-dessous dans le tableau 2. Comme décrit, les taux sanguins de glucose, de triglycérides, de LDL-C, d'insuline, de leptine et de IL-6 sont significativement réduits dans le sérum de souris KK/H1J supplémentées avec un produit laitier au chrome par rapport aux souris KK/H1J témoins. Ces résultats démontrent que la dyslipidémie, l'hyperinsulinémie et l'hyperleptinémie sont significativement améliorées et qu'un marqueur inflammatoire est significativement réduit dans le groupe expérimental. Par conséquent, ces résultats suggèrent que le produit laitier au chrome est bénéfique pour la réduction de marqueurs de risque cardiovasculaire et peut en outre prévenir et traiter une maladie cardiovasculaire. Tableau 2 Groupe témoin Groupe expérimental Glycémie (mg/dl) 173 30 131 13* Triglycérides (mg/dl) 166 35 123 13* Cholestérol total (mg/dl) 145 23 150 14 LDL (mg/dl) 10,7 2,2 7,8 1,5* Insuline (ng/ml) 2,6 1,0 0,7 0,4* Leptine (ng/ml) 28 10 18 7* IL-6 (pg/ml) 32 16 18 15* * p Exemple expérimental 3 Le produit laitier obtenu dans l'exemple 5 est mélangé dans l'aliment pour souris (Modified LabDiet avec 35,5 % de saindoux, PMI Richmond, Indiana, Etats-Unis). A l'âge de 13 semaines, des essais de tolérance au glucose (GTT) sont conduits après une nuit à jeun. En fonction des résultats de GTT, les souris KK/H1J sont divisées de manière aléatoire en deux groupes. Le groupe expérimental reçoit un produit laitier contenant 800 ppb par jour de chrome trivalent, le groupe témoin ne reçoit pas le produit. Après 7 semaines de supplémentation de chrome, les souris KK/H1J sont sacrifiées et leurs coeurs sont collectés. La taille d'infarctus du myocarde est évaluée par coloration au - 9 chlorure de triphényltétrazolium (TTC). Les tailles d'infarctus sont mises en évidence sur le bord externe des coeurs chez les souris témoins. La supplémentation de chrome dans le produit laitier et son administration aux souris expérimentales réduit significativement la taille d'infarctus du myocarde par rapport au groupe témoin (p Tableau 3 Groupe témoin Groupe expérimental Taille d'infarctus du myocarde Taille d'infarctus du myocarde 16,8 7,3 % 3,1 3,5 %* * p Exemple expérimental 4 Le produit laitier obtenu dans l'exemple 5 est mélangé dans l'aliment pour souris (Modified LabDiet avec 35,5 % de saindoux, PMI Richmond, Indiana, Etats-Unis). A l'âge de 13 semaines, des essais de tolérance au glucose (GTT) sont conduits après une nuit à jeun. En fonction des résultats de GTT, les souris KK/H1J sont divisées de manière aléatoire en deux groupes. Le groupe expérimental reçoit une poudre de lait contenant 800 ppb par jour de chrome trivalent, le groupe témoin ne reçoit pas le produit. Après 7 semaines de supplémentation de chrome dans l'alimentation, les souris KK/H1J sont sacrifiées et leurs coeurs sont collectés. Ensuite, les coeurs sont fixés avec une solution de formol neutre à 10 % et inclus avec de la cire de paraffine. Des coupes en série (10 gm d'épaisseur) sont découpées à partir de chaque spécimen et colorées avec de l'hématoxyline et de l'éosine (H&E). Après coloration, les coupes sont analysées par microscopie optique. Des zones de nécrose sur le bord externe du myocarde sont observées chez les souris témoins. Un fort grossissement met en évidence une dégénérescence des myocytes et une infiltration de macrophages dans la zone nécrosée. Cependant, les zones de nécrose sont significativement réduites et les myocytes sont normaux chez les souris expérimentales. Ces résultats suggèrent que la supplémentation du produit laitier au chrome améliore la nécrose myocardique chez les souris expérimentales. La composition de la présente invention contenant de la lactoferrine de chrome trivalent peut être prise par un patient souffrant de maladie cardiovasculaire parce qu'elle peut réduire efficacement des marqueurs de risque cardiovasculaire de celui-ci. A partir du tableau 1, du tableau 2 et du tableau 3, il est prouvé que les maladies cardiovasculaires sont efficacement améliorées après la prise du produit laitier contenant la composition de la présente invention. - 10 - Bien que la présente invention ait été décrite en référence à ses modes de réalisation préférés, il doit être noté que de nombreuses autres modifications et variantes possibles peuvent être réalisées sans s'écarter de la portée de l'invention comme revendiquée ci-après. - 11 - REVENDICATIONS 1. Composition pour prévenir et traiter les maladies cardiovasculaires, comprenant: une lactoferrine, et un composé de chrome trivalent, dans laquelle le composé de chrome trivalent est choisi dans le groupe comprenant le chlorure de chrome (III) hexahydraté, le chlorure de chrome (III), l'acétate de chrome (III), le sulfate de chrome (III), le picolinate de chrome, le nicotinate de chrome, un chélate acide aminéchrome, GTF-chrome, levure-chrome, chrome-levure, des sels inorganiques de chrome trivalent, des sels organiques de chrome trivalent, et des combinaisons de ceux-ci. 2. Composition selon la revendication 1, dans laquelle le rapport molaire de la lactoferrine au composé de chrome trivalent est dans la plage de 1:200 à 10:1. 3. Composition selon la revendication 1, dans laquelle le rapport molaire de la lactoferrine au composé de chrome trivalent est dans la plage de 1:20 à 1:1. 4. Composition selon la revendication 1, dans laquelle la lactoferrine provient de lait non purifié ou de protéine lactosérique. 5. Composition selon la revendication 1, dans laquelle la lactoferrine provient du groupe comprenant la lactoferrine de lait de vache, la lactoferrine de lait de chèvre, le lait de vache non purifié, le lait de chèvre non purifié, et des combinaisons de ceux- ci. 6. Composition selon la revendication 1, dans laquelle le composé de chrome trivalent est choisi dans le groupe comprenant le chlorure de chrome (III) hexahydraté, le chlorure de chrome (III), l'acétate de chrome (III), le sulfate de chrome (III), le picolinate de chrome, le nicotinate de chrome, un chélate acide aminé-chrome, GTF-chrome, levure- chrome ou chrome-levure, et des combinaisons de ceux-ci. 7. Composition selon la revendication 1, dans laquelle la composition sert d'additif d'un produit laitier, qui est choisi dans le groupe comprenant le lait frais de mammifères, le lait longue conservation, le lait concentré, le fait fermenté, le fromage ou le lait en poudre. - 12 - 8. Procédé pour prévenir et traiter les maladies cardiovasculaires d'un receveur, comprenant l'administration d'une quantité efficace d'une composition pour prévenir et traiter les maladies cardiovasculaires au receveur, dans lequel la composition comprend: une lactoferrine, et un composé de chrome trivalent, dans laquelle le composé de chrome trivalent est choisi dans le groupe comprenant le chlorure de chrome (III) hexahydraté, le chlorure de chrome (III), l'acétate de chrome (III), le sulfate de chrome (III), le picolinate de chrome, le nicotinate de chrome, un chélate acide aminé-chrome, GTF-chrome, levure-chrome, chrome-levure, des sels inorganiques de chrome trivalent, des sels organiques de chrome trivalent, et des combinaisons de ceux-ci. 9. Procédé selon la revendication 8, dans lequel le rapport molaire de la lactoferrine au composé de chrome trivalent est dans la plage de 1:200 à 10:1. 10. Procédé selon la revendication 8, dans lequel le rapport molaire de la lactoferrine au composé de chrome trivalent est dans la plage de 1:20 à 1:1. 11. Procédé selon la revendication 8, dans lequel la lactoferrine provient de lait non purifié ou de protéine lactosérique. 12. Procédé selon la revendication 8, dans lequel la lactoferrine provient du groupe comprenant la lactoferrine de lait de vache, la lactoferrine de lait de chèvre, le lait de 25 vache non purifié, le lait de chèvre non purifié, et des combinaisons de ceux-ci. 13. Procédé selon la revendication 8, dans lequel le composé de chrome trivalent est choisi dans le groupe comprenant le chlorure de chrome (III) hexahydraté, le chlorure de chrome (III), l'acétate de chrome (III), le sulfate de chrome (III), le picolinate de chrome, le nicotinate de chrome, un chélate acide aminé-chrome, GTF-chrome, levure-chrome et chromelevure. 14. Procédé selon la revendication 8, dans lequel la composition sert d'additif d'un produit laitier, qui est choisi dans le groupe comprenant le lait frais de mammifères, 35 le lait longue conservation, le lait concentré, le fait fermenté, le fromage ou le lait en poudre.