Brevet FR2895832A1 — publié le 20070706

L'invention est un procédé de spectrométrie de masse à temps de vol en tandem sans sélection de masse primaire par identification de chaque paire de fragments dissociés. La spectromètrie de masse (MS) consiste à identifier des molécules par la mesure de leur masse après ionisation de ces molécules dans une source d'ions, leur extraction et leur introduction dans un spectromètre de masse. La spectrométrie de masse en tandem (MS-MS) consiste à produire un spectre de masse primaire des molécules ionisées présentes dans l'échantillon à analyser, puis à sélectionner une masse primaire, et fragmenter avec un système de dissociation les ions primaires dont la masse a été l0 sélectionnée par le premier spectromètre de masse, pour produire un spectre de dissociation de cette molécule avec un deuxième spectromètre de masse. La spectrométrie de masse à temps de vol (TOF) consiste à accélérer un paquet d'ions avec un champ électrique appliqué dans le vide et à mesurer leur différence de temps de d'arrivée sur un détecteur d'ions après un parcours sur une distance de temps de vol. La différence de vitesse entre les différents ions 15 dépend de leur différence de rapport masse sur charge (M/Q). Les ions de plus petits rapports (MIQ) arrivent sur le détecteur avant les ions de rapports (M/Q) plus élevés. La spectrométrie de masse à temps de vol permet de mesurer toutes les masses simultanément, ce qui augmente considérablement la sensibilité et la vitesse d'acquisition des systèmes à temps de vol, par rapport aux autres systèmes qui ne peuvent mesurer qu'un canal de masse à la fois et nécessite un balayage, tels que par exemple les 20 quadripolaires. Deux types de spectromètres de masse en tandem (MS-MS) avec sélection de masse primaire utilisent le temps de vol. Les systèmes (MS-TOF) qui utilisent uniquement le temps de vol pour le deuxième spectromètre de masse, et un système à balayage pour le premier spectromètre de masse. Le deuxième type de système utilise deux spectromètres de masse à temps de vol successifs (TOF-TOF) avec 25 une fenêtre temporelle pour la sélection de masse après la dissociation entre les deux spectromètres de masse à temps de vol. Les appareils (MS-MS) utilisant un spectromètre de masse à temps de vol du type réflectron (RTOF) avec dissociation entre la source d'ions et le réflectron avec une sélection de masse temporelle pour produire chaque spectre de dissociation, sont un cas particulier de système (MS-MS) n'utilisant 30 qu'un seul spectromètre de masse à temps de vol. Les réflectrons sont des dispositifs installés entre la source d'ions pulsée et le détecteur d'ions permettant d'améliorer la résolution des spectromètres de masse à temps de vol en compensant dans le temps de vol des ions de même masse la différence provenant de la dispersion d'énergie cinétiques des ions. Un champ électrique constant orienté dans le sens opposé de l'arrivée des ions est appliqué à l'intérieur d'un volume, le réflectron. Les ions pénétrant dans le réflectron 35 sont réflechis, avant d'être refocalisés sur le détecteur d'ions. Les ions ayant une énergie cinétique plus grande, et donc les plus rapides, pénètrent davantage dans le réflectron, et y passent plus de temps, que les ions de même masse mais de plus faible énergie cinétique, et donc plus lents. Ce qui permet de compenser leur différence de temps de vol. Les spectromètres de masse en tandem existants ne peuvent produire qu'un seul spectre de dissociation secondaire à la fois, à cause de la nécessité de la sélection de la masse primaire. Mais l'utilisation du temps de vol a permis de proposer des systèmes de spectrométrie de masse en tandem sans sélection de masse primaire permettant de produire plusieurs spectres de masse de dissociation simultanément. l0 Le premier procédé de spectrométrie de masse à temps de vol sans sélection de masse primaire consiste à mesurer simultanément le temps de vol et l'énergie cinétique de chaque fragment produit {Il. Il a été réalisé {11 avec un appareil constitué d'une source d'ions pulsée produisant des ions avec une énergie cinétique moyenne constante, d'une boite de collision pour fragmenter les ions (ou d'un espace permettant la fragmentation spontanée d'un ion métastable excité dans la source d'ions), d'un secteur 15 électrostatique (ou d'un secteur magnétique) permettant de sélectionner le rapport de l'énergie cinétique des ions sur leur charge électrique (EIq), d'un espace de temps de vol et d'un détecteur d'ions mesurant le temps de vol des ions . Il peut être réalisé avec des ions monochargés et multichargés. Les spectres de masse de dissociation sont obtenus {1 } en sélectionnant tous les rapports énergie cinétique sur charge (E/q) possibles des fragments avec le secteur électrostatique, qui correspond à une 20 masse de fragment qui est différente pour chaque masse primaire parent différente avec E déterminée par: [ I] E = (m/M) [Eo(M,Q)], où m est la masse du fragment dissocié, M et Q sont la masse et la charge de l'ion primaire parent, et [Eo(M,Q)] est l'énergie cinétique de l'ion primaire parent. On produit un spectre de masse à temps de vol à chaque rapport (E/q) sélectionné par le secteur électrostatique, qui correspond à un canal de chaque 25 spectre de dissociation. Cette technique permet de produire l'ensemble des spectres de dissociation sans sélection de masse primaire avec une résolution indépendante de la distribution d'énergie cinétique des ions primaires {11, en produisant un spectre de masse tridimensionnel Il } contenant tous ces spectres de masse de dissociation avec sur un axe les valeurs du temps de vol de chaque fragment détecté, sur un deuxième axe son rapport (E/q), et sur le troisième axe le nombre d'événements correspondant. 30 Cette technique de spectrométrie de masse à temps de vol en tandem ne permet pas de produire simultanément en une seule acquisition l'ensemble des spectres de dissociation complets, mais uniquement un canal de l'ensemble de ces spectres de dissociation par acquisition, correspondant à une valeur de (E/q) sélectionnée par le secteur électrostatique. 35 Le deuxième procédé de spectrométrie de masse à temps de vol {2} permettant de produire les spectres de dissociation sans sélection de masse primaire utilise un réflectron et fonctionne uniquement avec des ions primaires monochargés. Ce procédé consiste à mesurer le temps de vol du fragment chargé et du fragment neutre de chaque événement de dissociation d'un ion primaire parent. Chaque paire de fragments dissociés doit être identifié, ce qui qui nécessite d'utiliser une source d'ions produisant un seul événement par cycle de temps de vol correspondant à une pulsation du faisceau d'ions {2}. Chaque ion primaire dissocié produit un fragment neutre et un fragment chargé entre la source d'ions et le réflectron ayant la même vitesse et la même direction que leur ion primaire parent (l'énergie de dissociation moléculaire est négligeable par rapport à l'énergie cinétique des ions). Le temps de vol des fragments neutres est mesuré par un détecteur positionné après le réflectron, et le temps de vol des fragments chargés associés ainsi que des ions primaires non dissociés sont mesurés par un deuxième détecteur d'ions après réflexion par le réflectron {2}, sans sélection de masse primaire. Deux spectres de masse correspondant à ces deux mesures de temps de vol sont produits simultanément en accumulant les événements de dissociation de toutes les masses primaires présentes dans l'échantillon analysé. Chaque spectre de dissociation correspondant à une valeur de masse primaire est obtenu à partir des deux spectres de masse réalisés précédemment en sélectionnant les événements dans le spectre de masse des fragments chargés associés aux événements sélectionnés dans le pic de masse correspondant aux ions primaires de la masse sélectionnée dans le spectre de masse en temps vol des fragments neutres. Ce qui permet de produire l'ensemble des spectres de dissociation sans sélection de masse primaire. Pour déterminer chaque couple de fragments neutre et chargé correspondant à un événement de dissociation sans ambiguïté, la technique décrite précédemment doit être réalisée avec des sources d'ions monochargés ne produisant qu'un seul ion primaire par cycle de temps de vol correspondant à une pulsation du faisceau d'ions {2}. Elle n'est donc pas compatible avec les sources d'ions pulsées les plus couramment utilisées qui produisent jusqu'à plusieurs centaines d'ions (sources d'ions continues pulsées telles que les sources d'ions à électronébulisation), ou même jusqu'à plusieurs milliers d'ions (telles que les sources à laser pulsées du type MALDI (Matrix-Assisted Laser Desorption-Ionisation)), par cycle de temps de vol correspondant à une pulsation du faisceau d'ions. Le troisième procédé de spectrométrie de masse à temps de vol sans sélection de masse primaire {3} utilise deux spectromètres de masse à temps de vol (linéaire ou du type réflectron) séparés par un système de dissociation (une boite de collision contenant du gaz) où est appliqué un champ électrique d'intensité variable. Il est compatible avec les sources d'ions monochargés et multichargés. Cette technique consiste à décaler les pics de dissociation par rapport à la position des pics de masse primaire parents en appliquant un champ électrique dans le système de dissociation. La vitesse des fragments chargés à la sortie du système de dissociation est modifiée par rapport à celle d'un ion primaire parent non dissociée par le champ électrique appliqué. Il n'est pas possible d'identifier les différents spectres de dissociation correspondant à différentes masses primaires proches, dans des spectres de masse comportant une grande densité de pics primaires avec cette technique de spectrométrie de masse à temps de vol en tandem avec une seule acquisition, car les différents pics de dissociation se mélangent dans le spectre de masse obtenu. Il est donc nécessaire de l'utiliser avec des échantillons comportant un nombre de molécules différentes peu élevé. Le quatrième procédé de spectrométrie de masse à temps de vol sans sélection de masse primaire utilise un réflectron (4}. Il consiste à effectuer deux acquisitions successives en variant la tension appliquée sur le réflectron sans varier la tension d'accélération des ions pour produire deux spectres de masses en temps de vol du même échantillon contenant plusieurs spectres de dissociation sans sélection de masse primaire. Chaque spectre de dissociation est identifié par le mouvement relatif des différents pics de masse à temps de vol caractéristique de chaque spectre de dissociation 141. Comme pour le procédé précédent, il est difficile d'identifier différents spectres de dissociation correspondant à différentes masses primaires, dans des spectres de masse comportant une grande densité de pics primaires avec cette technique de spectrométrie de masse à temps de vol en tandem, car les différents pics de dissociation se mélangent dans le spectre de masse obtenu qui contient tous les spectres de masses de dissociation. On ne peut donc l'utiliser qu'avec des échantillons comportant un nombre de molécules différentes peu élevé. Le cinquième procédé de spectrométrie de masse à temps de vol sans sélection de masse primaire {5} est basé sur la transformation de la différence de temps de vol entre les différentes molécules primaires ionisées, en position. Cette technique de spectrométrie de masse en tandem utilise un spectromètre de masse à temps de vol constitué d'une source d'ions pulsée, d'un système de dissociation d'un deuxième système de pulsation orthogonal, et d'un détecteur d'ions mesurant la position d'arrivée des ions (unidimensionnelle ou bidimensionnelle) et le temps de vol des ions {5). Les ions provenant de la première pulsation du faisceau d'ions primaires sont accélérés suivant une direction, et se séparent en position suivant l'axe parallèle au faisceau d'ions primaires en fonction de leurs différences de rapport masse sur charge (M/Q). Une partie de ces ions primaires est dissociée dans un système de dissociation, et les fragments produits conservent la direction et la vitesse de leur ion primaire parent. A une certaine distance de la source la différence de temps de vol due à la différence de vitesse entre les différents ions correspond à une différence de position suivant l'axe parallèle au faisceau d'ions primaire. Une deuxième pulsation du faisceau d'ions est alors appliquée par des plaques de déflexions dans la direction perpendiculaire à celle du faisceau d'ions primaire avant la dissociation. Les fragments dissociés sont déviés dans cette direction et sont détectés par un détecteur mesurant la position d'arrivée sur le détecteur d'ions dans la direction parallèle à celle du faisceau d'ions primaires avant la déflexion et le temps de vol des ions. La position sur le détecteur dépend de la valeur du rapport masse sur charge (M/Q) de l'ion primaire parent et le temps de vol mesuré par rapport à la deuxième pulsation du paquet d'ions donne le rapport masse sur charge (m/q) de chaque fragment chargé détecté. Ce qui permet de produire l'ensemble des spectres de masse de dissociation de tous les ions primaires dans la zone où a été appliquée la deuxième pulsation du faisceau d'ions sans sélection de masse primaire. La gamme de masse primaire accessible par cette teclmique de spectrométrie de masse à temps de vol en tandem est limitée car elle dépend de la distance où est est appliquée la deuxième pulsation du faisceau d'ions. Elle est limitée également par la longueur du détecteur utilisé. Le procédé selon l'invention de spectrométrie de masse à temps de vol en tandem permet de produire simultanément en une seule acquisition l'ensemble de tous les spectres de dissociation de toutes les différentes masses primaires présentes dans l'échantillon à analyser sans sélection de masse primaire ni limitation de la gamme de masse primaire, et quel que soit le nombre de molécules différentes présentes dans l'échantillon analysé, par identification de chaque paire de fragments dissociés. Ce procédé consiste à identifier pour chaque ion primaire dissocié son couple de fragments parmi l'ensemble des événements de dissociations d'un cycle de temps de vol correspondant à une pulsation du faisceau d'ions, par la mesure simultanée de leurs temps de vol et de leur positions d'arrivées sur le détecteur d'ions, puis de produire un spectre de masse de corrélation tridimensionnel des temps de vol de chaque paire de fragments contenant l'ensemble de tous les spectres de masse de dissociation de toutes les masses primaires présentes dans l'échantillon analysé. Le spectre de masse primaire peut être réalisé simultanément avec les ions primaires non dissociés. Ce procédé est utilisable avec toutes les sources standards d'ions monochargés ou multichargés pulsées existantes. Les dessins annexés illustrent l'invention: La figure 1 montre le schéma du dispositif de spectrométrie à temps de vol permettant d'utiliser le procédé selon l'invention. X et Y représentent les deux directions perpendiculaires de la mesure de la position de chaque fragment dissocié sur le détecteur d'ions (4). La figure 2 montre la coupe longitudinale schématisée d'un exemple de spectromètre de masse à temps de vol équipé d'un réflectron comme dispositif (3) pour utiliser le procédé selon l'invention. La figure 3 montre la coupe schématisée longitudinale d'un exemple de spectromètre de masse à temps de vol linéaire équipé d'une boite de collision à un potentiel précédée et suivie par 2 grilles à la masse comme dispositif (3), pour utiliser le procédé selon l'invention. La figure 4 est un exemple de spectre de masse tridimensionnel obtenu avec l'appareil de la figure 30 2 utilisant le procédé selon l'invention équipé d'une source d'ions monochargés produisant des couples de fragments neutre et chargé à chaque événement de dissociation. La figure 5 est une projection sur le plan {TOFtx(m.),TOF,,,,(mC)}suivant l'axe donnant la nombre d'événements du spectre de masse tridimensionnel de la figure 4. La figure 6 est un exemple de spectre de masse tridimensionnel similaire à celui de la figure 5 35 obtenu avec l'appareil de la figure 3 utilisant le procédé selon l'invention équipé d'une source d'ions multichargés produisant des couples de fragments chargés à chaque événement de dissociation. En référence à ces dessins le procédé de spectrométrie de masse à temps de vol en tandem sans sélection de masse primaire par identification de chaque paire de fragments dissociés réalisé avec un dispositif schématisé sur la figure 1 constitué sous vide et dans cet ordre suivant la trajectoire des ions: d'une source d'ions pulsée (1), d'un système de dissociation (2), d'un dispositif (3) où est appliqué un champ électrique qui modifie le temps de vol de chaque fragment chargé par rapport à celui qu'aurait son ion primaire parent dans l'espace de temps de vol entre le dispositif (3) et le(s) détecteur(s) d'ions (4), d'un (ou de plusieurs) détecteur(s) d'ions (4) qui mesure(nt) simultanément le temps de vol et la position d'arrivée sur le détecteur de chaque fragment dissocié, est caractérisé en ce que: -Les molécules sont d'abord ionisées dans la source d'ions (1) pulsée et accélérées par un champ électrique avec une vitesse qui varie en fonction de leur rapport masse sur charge. Puis, une partie des ions primaires est fragmentée dans le système de dissociation (2) sans sélection de masse primaire. Chaque paire de fragments produits par la dissociation de chaque ion primaire conservent approximativement la même vitesse et la même direction que leur ion primaire parent au moment de sa dissociation jusqu'à l'entrée du dispositif (3) avec une énergie cinétique donnée par l'équation [1]. Le temps de vol TOF(M) de chaque couple de fragments entre la source d'ions pulsée (1) et le dispositif (3) est identique à celle qu'aurait leur ion primaire parent de masse M et de charge Q, est déterminé par l'équation: [2] TOF(M)2 = L(M)2 [M/2 Eo(M,Q)], où L(M) est la distance du temps de vol des 2 fragments entre la source d'ions pulsée (1) et le dispositif (3) et Eo(M,Q) est l'énergie cinétique de l'ion primaire parent de masse M et de charge Q. -Le temps de vol TOF(m;) dans l'espace de temps de vol entre le dispositif (3) et le détecteur d'ions (4) de chaque fragment chargé de masse mi et de charge q; provenant de la dissociation d'un ion primaire de masse M et de charge Q est ensuite modifié par rapport à celui qu'aurait son ion primaire dans cet espace de temps de vol par le champ électrique du dispositif (3) qui fait varier sa vitesse ou (et) sa trajectoire, pour être de la forme: [3] TOF(mi) = [M/2 Eo(M,Q)] (1') F[( ;/M) (Q/q1)], où F[(m;/M) (Q/q;)] est une fonction du rapport [(m;/M) (Q/q;)] qui dépend du type de dispositif (3) utilisé. Le temps de vol total du fragment chargé de masse m; et de charge q; entre la source d'ions pulsée (1) et le détecteur d'ions (4) est donc: [4] TOFt (m;) = TOF(M)+ TOF(m;) _ [M/2 Eo(M,Q)] ("2) {L(M) + F[(m;/M) (Q/q;)]}, où TOF(M) est donné par l'équation [2], et TOF(m;) par l'équation [3]. Un cas particulier de paires de fragments concerne les dissociations qui produisent un fragment chargé de masse me et de charge qc, et un fragment neutre de masse mn et donc de charge qä=0, provenant de la dissociation d'un ion primaire de masse M et de charge Q. On a donc dans ce cas Q = qe. Ce type de dissociation est produit avec ions monochargés (Q = qç = 1). Le temps de vol de chaque fragment neutre à la sortie du dispositif de dissociation (2) n'est pas modifié par le champ électrique du dispositif (3). Le temps de vol TOF(mn) de chaque fragment neutre de masse mn entre le dispositif (3) et le détecteur d'ions (4), est celui qu'aurait son ion parent de masse M, et est donné par l'équation: [5] TOF(mn)2 = L(mn)2 [M/2 Eo(M,Q)] , où L(mn) est la distance du temps de vol du fragment neutre de masse mn entre le dispositif (3) et le détecteur d'ions (4). Le temps de vol total du fragment neutre entre la source d'ions pulsée (1) et le détecteur d'ions (4) est donc d'après les équations [2] et [5]: [6] TOF,,,,(mn) = TOF(M)+TOF(mn) = [L(M) + L(mn)] [M/2 Eo(M,Q)] 2 . Dans le cas de paires de fragments neutre et chargé l'équation [3] devient d'après l'équation [5]: 10 [7] TOF(mc) = [M/2 E0(M,Q)] c"> F(mc/M) = [TOF(mn)/L(mn)] F(mc/M), et l'équation [4] devient d'après les équations [6] et [7]: [8] TOF,d(me) = [M/2 E0(M,Q)] (") [L(M) + F(m0M)] = {TOFtd(mn)/[L(M) + L(mn)1} [L(M) + F(m jM)]. -Puis on mesure simultanément avec le(s) détecteur(s) d'ions (4) le temps de vol et la position d'arrivée 15 sur le(s) détecteur(s) (4) suivant une direction (X ou Y) ou bidimensionnellement (X et Y) de chaque fragment dissocié. - La mesure simultanée avec le(s) détecteur(s) d'ions (4) du temps de vol et de la position d'arrivée sur le(s) détecteur(s) (4) de chaque fragment dissocié permet ensuite d'identifier chaque paire de fragments 20 dissociés provenant du même événement de dissociation parmi l'ensemble des événements de dissociation se produisant pendant un cycle de temps de vol correspondant à une pulsation du faisceau d'ions. - L'identification de chaque paire de fragments provenant de la dissociation de chaque ion primaire parent permet finalement de produire simultanément en une seule acquisition l'ensemble de tous les spectres de 25 dissociation sans sélection de masse primaire sous la forme d'un spectre de masse de corrélation tridimensionnel avec sur un axe les valeurs des temps de vol de chaque fragment TOF,,n(ml) et sur un axe perpendiculaire la valeur du temps de vol TOF,o,(m2) du deuxième fragment associé correspondant au même événement de dissociation, et sur le troisième axe perpendiculaire au deux autres le nombre d'événements correspondant. 30 Les maxima du nombre d'événements de chaque pic de masse de dissociation appartenant à un spectre de dissociation correspondant à une valeur de masse primaire sur sa charge (M/Q) sont positionnés sur une ligne de dissociation. La position de chaque ligne de dissociation est caractéristique d'une seule valeur de rapport (M/Q) et deux lignes de dissociation ne se coupent jamais, ce qui permet une identification de chaque spectre de dissociation sans ambiguité et permet de déterminer la valeur de 35 chaque (M/Q) correspondant. Il n'est donc pas nécessaire avec le procédé selon l'invention de produire un spectre de masse primaire avant de produire les spectres de dissociation, car le procédé selon l'invention ne nécessite pas de sélection de masse primaire pour produire les spectres de dissociation. La forme des lignes de dissociation est déterminée par la fonction F[(m,/M) (Q/q;)] des équations [3] et [7](ou [4] et [8]),qui dépend du type de dispositif (3) utilisé. Dans le cas particulier d'ions primaires monochargés produisant des couples de fragments neutres et chargés, d'après les équations [7] et [8], les lignes de dissociation sont des droites parallèles à l'axe des temps de vol des fragments chargés TOFtot(mc), quel que soit le type de dispositif (3) utilisé. Chaque spectre de masse de dissociation bidimensionnel standard correspondant à une valeur primaire (MJQ) avec en abcisse le temps de vol des fragments chargés TOFtä t(m) et en ordonné le nombre d'événements peut être obtenu à partir du spectre de masse tridimensionnel produit par le procédé selon l'invention, en projetant les pics de masse de la ligne de dissociation correspondante sur l'un des axes correspondant au temps de vol d'un des deux fragments dissociés de chaque paire sur le spectre de masse tridimensionnel obtenu avec le procédé selon l'invention. Dans le cas particulier des ions primaires monochargés, chaque spectre de dissociation est obtenu en projetant la ligne de dissociation sur l'axe des temps de vol des fragments chargés TOFtä t(me). Des exemples de spectres de masse tridimensionnels obtenus avec le procédé selon l'invention avec l'appareil schématisé sur la figure 2, sont montrés sur les figure 4 et 5. La figure 4 est un exemple correspondant au cas des paires de fragments neutre et chargé. La figure 5 est le même spectre de masse que celui de la figure 4, mais projeté sur le plan {TOFtot(mn),TOFt t(me)) suivant l'axe donnant la nombre d'événements. La figure 6 est un spectre de masse équivalent à celui de la figure 5 obtenus avec l'appareil schématisé sur la figure 3 équipé d'une source d'ions primaires parents multichargés produisant des paires de fragments chargés. Les lignes de dissociations sont représentées par des lignes pointillées en traits longs sur les exemples des figures 4, 5, et 6. Chaque pic de dissociation est représenté sur les figure 5 et 6 par un trait plein dont la longueur correspond essentiellement à la distribution d'énergie cinétique des ions primaires parents. Des spectres de masse tridimensionnels équivalents à ceux des figures 4, 5 et 6 peuvent être produits en remplaçant TOFto,(m1) et TOF,0,(m2) par TOF(m,) et TOF(m2) ou des fonctions de ces valeurs (par exemple TOFta(m1)2 et TOF,d(ln2)2), sans modifier les caractéristiques des spectres de masse tridimensionnels produits par le procédé selon l'invention décrits précédemment et sans modifier l'esprit du procédé selon l'invention. Le procédé selon l'invention permet de réaliser un spectre de masse primaire par temps de vol avec les ions primaires non dissociés simultanément pendant l'acquisition de l'ensemble des spectres de dissociation composant le spectre de masse tridimensionnel, car il n'utilise pas de sélection de masse primaire. La source d'ions pulsée (1) peut être une source d'ions monochargée ou multichargée à photoionisation par laser, à électronébulisation (ESI) ou nanoélectronébulisation, à ionisation par impact électronique, à bombardement d'une cible par des atomes neutres (FAB) ou chargés (SIMS), ou tout autre type de source d'ions monochargée ou multichargée, sans modifier l'esprit du procédé selon l'invention. Les ions produits par la source d'ions (1) peuvent être stockés avant la pulsation du faisceau d'ions vers le spectromètre de masse à temps de vol dans une trappe à ions, ou par tout autre système de stockage d'ions, sans modifier l'esprit du procédé selon l'invention. L'accélération des ions produits dans la source d'ions (1) est produite par un champ électrique, et leur extraction de la source d'ions (1) peut être réalisé à énergie constante, à impulsion constante, ou par toute méthode donnant aux ions une vitesse dépendant de leur rapport masse sur charge à leur introduction dans le spectromètre de masse à temps de vol utilisé sans modifier l'esprit du procédé selon l'invention. La pulsation du faisceau d'ions peut être située dans la source d'ions (1) ou entre la source d'ions (1) et le dispositif (3) utilisé sans modifier l'esprit du procédé selon l'invention. La pulsation du faisceau d'ions peut être réalisée par impulsion laser, par balayage du faisceau d'ions continu à travers une fente par un champ électrique variable appliqué entre deux plaques de déflexion, par la technique de l'injection orthogonale en appliquant un champ électrique variable entre deux électrodes dans la direction perpendiculaire au faisceau d'ion , ou tout autre dispositif de pulsation du faisceau d'ions sans modifier l'esprit du procédé selon l'invention. Le système de dissociation (2) peut être une boite de collision contenant du gaz permettant la dissociation par collision induite (CID) à haute énergie cinétique, un espace de temps de vol permettant la dissociation spontanée(PSD) après augmentation de l'énergie interne de la molécule primaire ionisée par absorption de photons dans la source d'ions (1) ou après la source d'ions (1) (photodissociation), ou tout autre méthode de fragmentation des ions primaires sans modifier l'esprit du procédé selon l'invention. Le dispositif (3) peut être un réflectron, deux plaques de déflexion avec un champ électrique appliqué entre les 2 plaques, une boite de collision à un potentiel suivie et précédée de deux électrodes à la masse, une combinaison des dispositifs précédents, ou tout dispositif où est appliqué un champ électrique permettant de modifier le temps de vol des fragments chargés par rapport à celui qu'aurait leur ion primaire parent entre le dispositif (3) et le(s) détecteur(s) d'ions (4) en modifiant leur vitesse et (ou) leur direction, sans modifier l'esprit du procédé selon l'invention. Le(s) détecteur(s) d'ions (4) utilisé(s) peut (peuvent) être une (ou plusieurs) galette(s) de microcanaux associé(s) à des anodes constituées de lignes à retard, une (ou plusieurs) galette(s) de microcanaux équipé(s) d'une anode comportant plusieurs pixels indépendants équipés chacun d'une électronique d'acquisition indépendante, ou tout autre type de détecteur d'ions permettant de mesurer simultanément le temps de vol et la position d'arrivée (unidimensionnelle ou bidimensionnelle) sur le détecteur d'ions (4) de chaque fragment détecté, sans modifier l'esprit du procédé selon l'invention. Deux exemples non limitatitifs de systèmes de spectrométrie de masse à temps de vol utilisant le procédé selon l'invention sont décrits dans les paragraphes suivants. Ces systèmes seront décrits avec une extraction des ions primaires de la source d'ions à énergie cinétique constante, avec donc Eo(M,Q) = Q Vo, (avec M et Q la masse et la charge de l'ion primaire, et Vo est la tension d'accélération des ions). Le premier exemple est un spectromètre de masse à temps de vol équipé d'un réflectron comme dispositif (3). Il est schématisé sur la figure 2 qui représente une coupe longitudinale de l'appareil. L'utilisation de spectromètres de masse équipés de réflectrons avec le procédé selon l'invention sera décrit uniquement dans le cas d'ions primaires monochargés. Ce système est constitué d'une source d'ions pulsée monochargée (1), d'un dispositif de dissociation (2), d'un réflectron (3), d'un détecteur d'ions (4) détectant les fragments neutres permettant de mesurer simultanément le temps de vol et la position d'arrivée de chaque fragment neutre détecté, d'un détecteur d'ions (5) détectant les fragments chargés permettant de mesurer simultanément le temps de vol et la position d'arrivée de chaque fragment chargé détecté. La source d'ions pulsée (1) est une source à laser pulsée MALDI équipée d'un laser du type Nd:YAG émettant à une longueur d'onde de 355 nm, avec des durées de pulsation inférieure à 600 ps et fonctionnant à une fréquence de pulsation d' l kHz, avec une énergie moyenne par impulsion de 15 J. La tension d'accélération des ions appliquée sur la cible MALDI est Vo= 20 kV. Le dispositif de dissociation (2) est une boite de collision contenant du gaz favorisant par CID à haute énergie cinétique la fragmentation métastable spontanée (PSD) des ions primaires dans l'espace de temps de vol entre la source MALDI (1) et le réflectron (3). Les ions primaires se dissociant ont été préalablement excités dans la source MALDI par des impulsions lasers avec des densités de puissances supérieures ou égales à 10' W/m2. Les détecteurs d'ions (4) et (5) utilisé sont chacun constitués de 2 galettes de microcanaux superposées et de deux plans d'anodes superposés constitués chacun d'une ligne à retard, et permettant de mesurer la position d'arrivée bidimensionnelle (X,Y) de chaque ion sur les galettes de microcanaux. Le principe de la mesure de la position d'arrivée pour une direction est le suivant: un ion atteint l'entrée d'un canal de la partie supérieure de la galette de microcanaux où il produit une avalanche d'électrons à sa sortie. Une partie des électrons produits est collectée par la ligne à retard. La position d'arrivée de chaque ion détecté est déterminée en mesurant la différence de temps d'arrivée à chaque extrémité de la ligne à retard par rapport un signal non retardé produit par une partie de l'avalanche d'électrons, par exemple détecté par une grille positionnée avant les plans de lignes à retard. Ce signal non retardé permet également de mesurer le temps de vol de l'ion détecté. Chaque plan de ligne à retard permet de déterminer la position d'arrivée unidimensionnelle de chaque ion. Les deux plans pennettent donc de mesurer la position d'arrivée bidimensionnelle (X,Y) de l'ion sur le détecteur. Chaque ligne à retard est équipée de deux électroniques d'acquisitions identiques mesurant le signal à chaque extrémité de chaque ligne à retard. Un canal électronique d'acquisition supplémentaire est utilisé pour le signal non retardé. Le détecteur est donc équipé au moins de cinq canaux d'électroniques d'acquisitions constitués d'un amplificateur, d'un discriminateur à fraction constante et d'un convertisseur digital temporel (TDC). La résolution en position du détecteur dépend des caractéristiques des TDCs utilisés. Les résolutions en position obtenues avec ce type de détecteurs sont inférieures à 100 m. Ils sont capable de fonctionner en comptage individuel d'ions jusqu'à des taux de comptage de 1 MHz. Le dispositif (3) utilisé dans cet exemple est un réflectron. Tous les types de réflectrons sont compatibles avec le procédé selon l'invention. Dans cet exemple il sera détaillée avec un réflectron à un étage. La longueur de pénétration D[Eo(M,Q)] de chaque ion primaire dans la volume du réflectron (3) dépend de son énergie cinétique Eo(M,Q) = Q Vo, où Q est la charge électrique de l'ion, et de la tension maximale Ni, appliquée sur le réflectron (3), et du type de réflectron (3) utilisé. La distance de pénétration D(E) dans le volume du réflectron (3) d'un fragment chargé de masse mc et d'énergie cinétique E provenant de la dissociation d'un ion primaire de masse M est: [9] D(E) = (m ./M) D[Eo(M,Q)], Les ions primaires pénétrent dans l'espace de temps vol entre la source d'ions (1) et le réflectron (3) avec une énergie cinétique moyenne Eo(M,Q) = Q Vo, où Q est la charge de l'ion primaire de masse M. Une partie de ces ions primaires sont dissociés dans le dispositif de dissociation (2). Les fragments neutres et chargés produits conservent la vitesse et la direction de leur ion primaire parent jusqu'à l'entrée du réflectron (3). Les fragments neutres conservent également conservent la vitesse et la direction de leurs ions primaires parents entre l'entrée du réflectron (3) et le détecteur d'ions (4) où ils sont détectés. Le temps de vol total du fragment neutre de masse mä entre la source d'ions pulsée (1) et le détecteur d'ions (4) est d'après l'équation [6]: [10] TOF1d(mn) = TOF(M)+TOF(mn) = [L1(M) + L1(mn)] (M/2 Q Vo) '21, où L1(M) est la distance du temps de vol du fragment neutre de masse mn entre la source d'ions (1) et 25 l'entrée du réflectron (3), et L1(mn) est la distance du temps de vol du fragment neutre de masse mn entre l'entrée du réflectron (3) et le détecteur d'ions (4). En pénétrant dans le réflectron (3) le fragment chargé de masse mc associé provenant de la dissociation du même ion primaire parent de masse M est repoussé par son champ électrique vers le détecteur d'ions (5) où il est détecté. Son temps de vol entre la source d'ions (1) et le détecteur d'ions (5) 30 est d'après les équations [8], [9], et [10]: [Il] TOFt, (me) = TOF(M) + TOF(mm) = [M/(2 Q V0)] '2 [Lt(M) + L1(mc)+ 4 D(E)] = {TOFm(mn)i[11(M) + L1( t)]} {L1(M) + L1(m) + 4(mc/M) D[Eo(M,Q)]}, où L1(mc) est la distance du temps de vol du fragment chargé de masse m, de la sortie du réflectron (3) au détecteur d'ions (5), et E est l'énergie cinétique du fragment chargé . On déduit de l'équation [1l] : 35 [12] TOF(mc) _ [TOF(mn)/L1(mn)] {L1(mc) + 4 (mc/M) D[Eo(M,Q)]} et que la fonction F(mj/M), de l'équation [7] dans cette application du procédé selon l'invention est: [13] F(mc/M) = [L1(mc) + 4 D(E)] = ).Li(me) + 4 (mc/M) D[Eo(M,Q)]). L'identification de chaque couple de fragments neutre et chargé s'effectue d'abord par la mesure du temps de vol et de la position d'arrivée sur le détecteur d'ions (4) de chaque fragment neutre. Le temps de vol de chaque fragment neutre permet de déterminer à la fois sa vitesse et donc celle de l'ion primaire parent, et la vitesse de son fragment chargé associé à l'entrée du réflectron (3). La mesure de la position d'arrivée sur le détecteur d'ions (4) de chaque fragment neutre détermine sa trajectoire et la position de son fragment chargé associé à l'entrée du réflectron (3). La position d'arrivée de chaque fragment chargé dépend de son énergie cinétique, par la longueur de pénétration dans le volume du réflectron (3). La connaissance de la position d'entrée du fragment chargé associé à chaque fragment neutre détecté à l'entrée du réflectron et de sa vitesse, avec la mesure de la position d'arrivée sur le détecteur d'ions (5) de chaque fragment chargé, et de son temps de vol, permet d'identifier chaque paire de fragment neutre et chargé provenant du même événement de dissociation parmi l'ensemble des événements de dissociation se produisant pendant un cycle de temps de vol correspondant à une pulsation du faisceau d'ions, en déterminant la trajectoire de chaque fragment chargé compatible avec ces différentes valeurs. On peut alors produire en une seule acquisition, en utilisant le procédé selon l'invention, un spectre de masse tridimensionnel équivalent à ceux des exemples des figures 4 et 5, contenant l'ensemble des spectres de masse de dissociation de toutes les différentes molécules présentes dans l'échantillon analysé. Le deuxième exemple de système utilisant le procédé selon l'invention est un spectromètre de masse à temps de vol linéaire. La figure 3 montre une coupe schématisée longitudinale de cet appareil. La source d'ions pulsée (1) utilisée dans cet exemple est une source d'ions monochargés et multichargés continue à électronébulisation (ESI) (6) couplée à un dispositif de refroidissement collisionnel (7), et à un dispositif de pulsation du faisceau d'ions par injection orthogonale (8). Le dispositif de refroidissement collisionnel (7) est constitué d'un guide d'onde multipolaire radiofréquence contenant du gaz pour thermaliser la vitesse des ions émis par la source d'ions ESI (6). La technique de l'injection orthogonale consiste à produire un champ électrique pulsé dans la direction perpendiculaire à la direction initiale du faisceau d'ions en appliquant une tension pulsée entre deux électrodes après avoir thermalisé la vitesse des ions par la technique du refroidissement collisionnel et les avoir réaccélérés. La tension d'accélération pulsée Vo des ions est donc appliquée dans la direction perpendiculaire à celle du faisceau d'ions initial. Le dispositif de dissociation (2) équipant cet appareil est une boite de collision (2) contenant du gaz pour fragmenter les ions primaires par CID à haute énergie cinétique, positionnée entre le dispositif de pulsation du faisceau d'ions par injection orthogonale (8) et le détecteur d'ions (4). Le dispositif (3) équipant cet appareil est également la boite de collision (2)(3), soumis à une haute tension Ve inférieure à la tension d'accélération Vo des ions , précédée et suivie par 2 grilles à la masse (3). Le détecteur d'ions (4) mesurant simultanément, le temps de vol et la position d'arrivée sur le détecteur d'ions (4) de chaque ion primaire, et chaque fragment dissocié est du même type que les détecteurs d'ions (4) (5) utilisés dans l'exemple précédent. Dans cette description on néglige le temps de vol des ions primaires dans l'espace de temps de vol compris entre la première grille à la masse et l'entrée de la boite de collision (2) (3). On néglige également le temps de vol entre la sortie de la boite de collision (2) (3) et la deuxième grille à la masse (3). Les ions primaires pulsés par le système d'injection orthogonale (8) atteignent la première grille à la masse (3) avec l'énergie cinétique moyenne Eo(M,Q) = Q Vo, où Q est la charge de l'ion primaire. Les ions primaires sont ralentis par le champ électrique produit par la tension appliquée sur la boite de collision (2) (3), et pénétrent dans la boite de collision (2) (3) avec une énergie cinétique moyenne E'o(M,Q) = Q (Vo - Vç), où une partie de ces ions primaires est dissociée. Les fragments produits conservent la vitesse et la direction de leur ion primaire parent jusqu'à la deuxième grille à la masse (3). En pénétrant dans l'espace de temps de vol entre la deuxième grille à la masse (3) et le détecteur d'ions (4) chaque fragment chargé de masse mi et de charge qi provenant de la dissociation d'un ion primaire parent de masse M et de charge Q est réaccéléré par la tension Vc appliquée sur la boite de collision (2) (3). Son temps de vol entre la deuxième grille à la masse (3) et le détecteur d'ions (4) est d'après l'équation [3]: [14] TOF(mi) = {L2(mi) [M/(2 Q Vo)] (u2>}/{ 1+ (Vc/Vo) [(M/mi) (q/Q) - 1]) (il2), où L2 (mi) est la distance du temps de vol du fragment chargé de masse mi et de charge qi de la deuxième grille à la masse (3) au détecteur d'ions (4). Le temps de vol entre le dispositif d'injection orthogonale (8) et le détecteur d'ions (4) de chaque fragment chargé de masse m; et de charge q; provenant de la dissociation d'un ion primaire parent de masse M et de charge Q est d'après l'équation [4] et l'équation [14]: [15] TOFt0t(mi) = TOF(M) + TOF(ni ) ={L2(M)[M/(2QVo)](in)}+ {12(M)[MI(2Q(Vô Vc))} "2) }+{ [L2(mi)(MJ(2QVo))w21/{ 1+ (VjVo)[(M/m)(gi/Q) - 1)]}(1/2)}, où L2(M) est la distance du temps de vol du fragment chargé de masse mi et de charge qi du dispositif d'injection orthogonale (8) à la première grille à la masse (3), et où 12(M) est la longueur de la boite de collision (2) (3). On déduit d'après les équations [14] et [15] que la fonction F[(mi/M) (Q/qi)J de l'équation [3] dans cette application du procédé selon l'invention est: [16] F[(mi/M) (Q/qi)] = [L2(mi)/{ 1+ (Vyo) [(M/rn) (qi/Q) - 1]) gf2r]. On peut alors produire en une seule acquisition, en utilisant le procédé selon l'invention, un spectre de masse tridimensionnel similaire à celui de l'exemple de la figure 6 pour des couples de fragments chargés provenant de la dissociation d'ions primaires multichargés, contenant l'ensemble des spectres de masse de dissociation de toutes les différentes molécules présentes dans l'échantillon analysé. La forme des lignes de dissociation pour cette application est déterminée par la fonction F[(m/M) (Q/qi)] de l'équation [16]. Dans le cas où la dissociation produit des couples de fragments neutre de masse mn et chargé de masse mn, le temps de vol du fragment neutre provenant de la dissociation d'un ion primaire de masse M et de charge Q entre le dispositif d'injection orthogonale (8) et le détecteur d'ions (4) est d'après l'équation [6]: [17] TOF,,,(mn) = TOF(M)+TOF(mn) = {L2(M)[M/(2QVo)](2)}+{ 12(M)[Mi(2Q(Vô Vo))] ' } + L2(m,,,){M/[2 Q (Vo -Vn)]}(Ir2) où L2(mn) est la distance du temps de vol du fragment neutre de masse mä de la deuxième grille à la masse (3') au détecteur d'ions (4). On en déduit que l'équation [14] dans ce cas devient à partir de l'équation [7]: [18] TOF(me) = TOF(mn) {L2(mc)1L2(mn)} ([(Vo - Vo)/ Vo]/(1+ (V jVo) [(M/mn) - 1]} } n), et que l'équation [15] devient à partir de l'équation [7]: [19]TOF, (mn)={TOF,,x(mn)/[L2(M)+L2(m,1)]}[L2(M)+{L2(m0)[(Vô VG)/Vo] i,2>/{ l+(Ve/Vo)[(M/mc)- 1]}(U2)}]. On déduit de l'équation [18] que la fonction F(m0IM) de l'équation [7] est dans cette application du procédé selon l'invention: [20] F(mn/M) = {L2(m,,) [(Vo - V0.)/ Vo] 0'2)/ { 1+ (vivo) [(M/n) - 1])(12)}. On peut alors produire en une seule acquisition, en utilisant le procédé selon l'invention, un spectre de masse tridimensionnel similaire à celui des exemples des figures 4 et 5 , contenant l'ensemble des spectres de masse de dissociation de toutes les différentes molécules présentes dans l'échantillon analysé. L'identification de chaque couple de fragments correspondant à un événement de dissociation dans cet exemple est effectué en utilisant l'information sur la trajectoire des fragments, car le dispositif (3) utilisé dans cette application du procédé selon l'invention modifie la vitesse des fragments chargés, mais ne modifie pas leurs trajectoires après la dissociation si la trajectoire des fragments est parallèle au champ électrique appliqué à la sortie du dispositif (3) utilisé. Après la dissociation, les deux fragments conservent donc la trajectoire de leur ion parent. Les deux fragments vont donc être détectés à des positions proches l'un par rapport à l'autre sur le détecteur d'ions (4), mais à des temps de vol différents. Pour identifier sans ambiguité chaque couple de fragments correspondant à un événement de dissociation il faut qu'entre chaque cycle de temps de vol correspondant à une pulsation du faisceau d'ions aucun ion primaire, ou autre paire de fragments, soit détecté sur le détecteur d'ions (4) dans le cercle de diamêtre égal à la distance maximale possible entre deux fragments provenant du même événement de dissociation. Ce qui est réalisé en controlant l'intensité du faisceau d'ions produits par la source d'ions (1) pour qu'entre chaque pulsation du faisceau d'ions par le dispositif d'injection orthogonale, sans dissociation, le nombre d'ions primaires atteignant chaque pixel du détecteur d'ions correspondant au cercle de diamètre égal à la distance maximale possible entre deux fragments provenant du même événement de dissociation soit inférieur ou égal à 1. Dans le cas particulier d'ions monochargés, il est nécessaire d'identifier dans chaque paire de fragments produit par événement de dissociation, quel est le fragment neutre et quel est le fragment chargé. Etant donné que Nin Les spectromètres de masse à temps de vol utilisant le procédé selon l'invention sont particulièrement destinés aux recherches biologiques en protéomique. Le procédé selon l'invention est, par exemple, bien adapté aux systèmes (MS-MS) utilisant la chromatographie liquide (LC), car contrairement 15 aux systèmes de spectrométrie de masse en tandem avec sélection de masse, les systèmes utilisant le procédé selon l'invention sont capables de produire tous les spectres de dissociation de toutes les différentes masses présentes avec un débit compatible avec la vitesse de défilement des molécules de l'échantillon analysé dans une ligne chromatographique. 20 {1} J.D. Pinston et al, Rev. Sci.Instrum., 57 (4), (1983), p.583. {2} C. G. Enke et al, US Patent 4,472,631 (1984). S. Della-Negra and Y. Leybec, Anal. Chem., 57 (Il), (1985), p. 2035. 25 30 {3} K.G. Standing et al, Anal. Instumen., 16, (1987), p; 173. R.J. Conzemius US patent 4,894,536 (1990). Alderdice et al, US patent 5,206, 508 (1993). {4} R.H. Bateman, J. M. Brown, D. J. Kenny, US patent 2005/0098721 Al (2005). {5 } C. G. Enke, patent PCT/US2004/008424. 35 REVENDICATIONS 1) Procédé de spectrométrie de masse à temps de vol en tandem sans sélection de masse primaire par identification de chaque paire de fragments dissociés réalisé avec un dispositif constitué sous vide et dans cet ordre suivant la trajectoire des ions, d'une source d'ions pulsée (1), d'un système de dissociation (2), d'un dispositif (3) où est appliqué un champ électrique qui modifie le temps de vol de chaque fragment chargé par rapport à celui qu'aurait son ion primaire parent dans l'espace de temps de vol entre le dispositif (3) et le(s) détecteur(s) d'ions (4), d'un (ou de plusieurs) détecteur(s) d'ions (4) mesurant simultanément le temps de vol et la position d'arrivée sur le détecteur de chaque fragment détecté, caractérisé en ce que: - on commence par dissocier une partie des ions primaires émis par la source d'ions pulsée (1) dans le système de dissociation (2) sans sélection de masse primaire en conservant pour les fragments dissociés la vitesse et la direction de leur ion primaire parent au moment de la dissociation jusqu'au dispositif (3), -puis on modifie le temps de vol TOF,o,(mi) entre la source d'ions pulsée et le(s) détecteur(s) d'ions (4) de chaque fragment chargé dissocié produit de masse mi et de charge qi provenant de la dissociation d'un ion primaire de masse M et de charge Q, par rapport au temps de vol qu'aurait son ion primaire parent, avec le champ électrique du dispositif (3) qui fait varier sa vitesse ou (et) sa trajectoire dans l'espace de temps de vol entre le dispositif (3) et le(s) détecteur(s) d'ions (4), pour être de la forme: [3] TOF,o,(mi) = TOF(M) + TOF (mi) = [M/2 Eo(M,Q)] "' {L(M) + F[(mi/M) (Q/q,)] }, où TOF(M) est le temps de vol du fragment chargé entre la source d'ions pulsée (1) et le dispositif (3), TOF (mi) est le temps de vol du fragment chargé entre le dispositif (3) et le(s) détecteur(s) d'ions (4), Eo(M,Q) est l'énergie cinétique de l'ion primaire parent, L(M) est la distance du temps de vol du fragment chargé entre la source d'ions pulsée (1) et le dispositif (3), et F[(rn/M) (Q/qi)] est une fonction du rapport [(m;/M) (Q/qi)] qui dépend du type de dispositif (3) utilisé, -puis on mesure simultanément avec le(s) détecteur(s) d'ions (4) le temps de vol et la position d'arrivée sur le(s) détecteur(s) (4) de chaque fragment dissocié, - la mesure simultanée avec le(s) détecteur(s) d'ions (4) du temps de vol et de la position d'arrivée sur le(s) détecteur(s) d'ions (4) de chaque fragment dissocié permet ensuite d'identifier chaque paire de fragments dissociés provenant du même événement de dissociation parmi l'ensemble des événements de dissociation se produisant pendant un cycle de temps de vol correspondant à une pulsation du faisceau d'ions,-l'identification de chaque paire de fragments provenant de la dissociation de chaque ion primaire parent permet finalement de produire simultanément en une seule acquisition, l'ensemble des spectres de dissociation de toutes les différentes masses primaires présentes dans l'échantillon analysé avec les temps de vol de l'ensemble des paires de fragments dissociés, sous la forme d'un spectre de masse de corrélation tridimensionnels avec sur un axe les valeurs des temps de vol TOFtd(mi) d'un des deux fragments de chaque paire dissociée et sur un deuxième axe perpendiculaire au premier les valeur des temps de vol TOFtot(m2) du deuxième fragment dissocié de chaque paire dissocié correspondant au même événement de dissociation, et sur le troisième axe perpendiculaire au deux autres le nombre d'événements correspondant. 2) Procédé selon la revendication 1 caractérisé en ce que les positions du maximun du nombre d'événements de chaque pic de masse de dissociation appartenant au même spectre de dissociation d'une molécule primaire sont reliés dans le plan {TOF(ml),TOF(m2)} du spectre tridimensionnel par une ligne de dissociation dont la position dans le plan {TOF(m1),TOF(m2)} est unique pour chaque valeur de rapport masse sur charge (M/Q) de l'ion parent, et qui ne coupe jamais une autre ligne de dissociation, ce qui permet d'identifier sans ambiguité chaque spectre de dissociation et déterminer chaque valeur de rapport masse sur charge (M/Q). 3) Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le spectre de masse primaire peut être réalisée simultanément avec l'ensemble des spectres de dissociation avec les ions primaires non dissociés par le dispositif de dissociation (2) car le procédé est réalisé sans sélection de masse primaire. 4) Procédé selon les revendications 1, 2, et 3, caractérisé en ce que dans le cas où les ions primaires de rapport (M/Q) sont monochargés et produisent des paires de fragments dissociés neutre et chargé le temps de vol TOFto,(mc) de chaque fragment chargé de masse me devient à partir de l'équation [3]: [8] TOFtot(me) = [M/2 Eo(M,Q)] ("2) [Lou) + F(mc/M)] = {TOFI(, (mä)/[L(M) + L(mä )] } [L(M) + F(mc/M)], où TOF,.,t(mn) est le temps de vol du fragment neutre demasse mä entre la source d'ions pulsée et le(s) détecteur(s) d'ions (4), et L(mn) est la distance du temps de vol du fragment neutre de masse mä entre le dispositif (3) et le détecteur d'ions (4). 5) Procédé selon les revendications 1 et 4, caractérisé en ce que dans le cas d'ions primaires monochargés les lignes de dissociation du spectre de masse tridimensionnel produit par le procédé selon l'invention sont des droites parallèles à l'axe des temps de vol des fragments chargés TOFtät(mc) quel que soit le type de dispositif (3) où est appliqué un champ électrique utilisé.