Brevet FR2888507A1 — publié le 20070119

La présente invention est relative à l'utilisation de la Sertraline avec au moins un alcaloïde pour la préparation de compositions pharmaceutiques ou de produits de combinaison destinées au traitement du cancer, ainsi qu'au traitement et à la prévention des métastases. Le nombre annuel de nouveaux cas de cancers a considérablement augmenté au cours des vingt dernières années. Le traitement des cancers est donc de fait un véritable problème de santé publique. Quel que soit le type de cancer, un traitement par chimiothérapie est généralement préconisé, ne serait-ce qu'en traitement adjuvant. Il existe donc un besoin permanent de développer de nouvelles molécules pour la chimiothérapie. La Sertraline est connue depuis longtemps pour son utilisation comme antidépresseur, notamment grâce à son activité d'inhibition de la recapture de la sérotonine. Plus récemment, la demande de brevet WO 96/22085 a décrit l'utilisation de la Sertraline pour le traitement du cancer. Les inventeurs ont à présent montré, de façon surprenante, que lorsque la Sertraline était utilisée en combinaison avec au moins un alcaloïde, ceci donnait lieu à une potentialisation de son activité cytotoxique à l'encontre des cellules tumorales révélant un effet synergique produit sur ces cellules par ladite combinaison. Un premier aspect de l'invention concerne l'utilisation de la Sertraline en combinaison avec au moins un alcaloïde pour la préparation d'une composition 25 pharmaceutique destinée au traitement du cancer, ainsi qu'au traitement et à la prévention des métastases. Par traitement du cancer ou des métastases, on entend selon la présente invention essentiellement la capacité pour un composé de détruire sélectivement les cellules tumorales sans atteindre sensiblement les cellules saines, étant entendu que cette sélectivité peut être variable en fonction de la condition du patient et du type de cancer traité. Selon la présente invention, ledit cancer est, ou lesdites métastases sont issues d'un cancer choisi dans le groupe constitué par le cancer de la prostate, les ostéosarcomes, le cancer du poumon, le cancer du poumon non à petites cellules, le cancer du sein, le cancer de l'endomètre ou le cancer du côlon, la leucémie chronique ou aiguë, les tumeurs solides de l'enfant, les lymphomes lymphocitaires, le cancer du pancréas, le cancer de la peau, le mélanome cutané ou intraoculaire, le cancer de la tête et du cou, le cancer de l'utérus, le cancer de l'ovaire, les tumeurs gynécologiques, la maladie de Hodgkin, le cancer des os, le cancer du rectum, le cancer de la région anale, le cancer de l'estomac, le cancer de l'oesophage, le cancer de l'intestin grêle, le cancer du système endocrinien, les sarcomes des parties molles, le cancer de l'urètre, le cancer du pénis, le cancer de la vessie, le cancer du rein, le cancer de l'uretère, les tumeurs malignes pédiatriques, et les tumeurs du système nerveux central. Selon un mode de réalisation préférée de l'invention, ledit cancer est, ou lesdites métastases sont issues d'un cancer du sein. Selon un autre mode de réalisation préférée de l'invention, ledit cancer est une leucémie. De manière préférée, l'alcaloïde est un alcaloïde de vinca. De manière plus préférée, l'alcaloïde de vinca est choisi dans le groupe constitué par: la vinblastine, la vincristine, la vindésine, et la vinorelbine, de préférence la vincristine et/ou la vinblastine. Par alcaloïde de vinca on entend désigner selon la présente invention les alcaloïdes de la pervenche, Vinca rosea, et leurs dérivés obtenus par modification chimique. Ils ont pour cible la tubuline du fuseau achromatique de la mitose dont ils inhibent la polymérisation. Cette tubuline constituant aussi les fibres nerveuses, les alcaloïdes de vinca ont une toxicité nerveuse, surtout sensitive, et induisent une tendance dépressive. Un autre aspect de l'invention concerne des produits comprenant de la Sertraline et au moins un alcaloïde, en tant que produits de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie anti-cancéreuse. De manière préférée, l'alcaloïde choisi est un alcaloïde de vinca. De manière plus préférée, l'alcaloïde de vinca est choisi dans le groupe constitué par: la vinblastine, la vincristine, la vindésine, et la vinorelbine, de préférence la vincristine et/ou la vinblastine. Les compositions pharmaceutiques et/ou les produits de combinaison selon la présente invention peuvent être administrés par voie orale, intraveineuse, entérale, parentérale, intramusculaire, intranasale, souscutanée ou topique. De façon générale, on préfèrera utiliser les voies injectables, notamment pour le traitement des tumeurs. Les dosages journaliers devront tenir compte de l'état du malade mais également du cancer traité, de son stade et de sa progression. Comme on le constatera dans l'exemple ci-après, la combinaison de composés selon la présente invention présentent une remarquable sélectivité et surtout une très grande capacité de destruction des cellules tumorales, en particulier les résultats se sont révélés particulièrement impressionnants sur des cellules de type leucémique et sur des cellules de cancer du sein. L'exemple ci-dessous n'est mentionné qu'à titre illustratif et ne peut pas être considéré comme limitant l'enseignement de la présente description. LEGENDE DE LA FIGURE: Figure 1: détermination de la synergie de la Sertraline combinée avec 25 la vincristine ou la vinblastine EXEMPLES: Exem lp e 1: quantification de la synergie de la Sertraline combinée avec la vincristine et de la synergie de la Sertraline combinée avec la vinblastine. Des cellules de type leucémique U937 et des cellules de cancer du sein MDA-MB231 ont été traitées pendant une période de 6 jours avec 36 concentrations différentes de la combinaison Sertraline/Vincristine ou de la combinaison Sertraline/Vinblastine. La viabilité des cellules en culture après le traitement a été basée sur la quantification de l'ATP. La quantité d'ATP est directement proportionnelle au nombre de cellules présentes en culture. L'ATP a été quantifié avec le test d'analyse luminescente de viabilité de cellules CellTiter-G1oTM fourni par Promega Corporation. Les résultats sont présentés sous forme de (i) pourcentage d'inhibition, (ii) excédent par rapport à la valeur la plus élevée d'un agent seul (HSA) et (iii) excédent par rapport à l'additivité Bliss . (i) Le pourcentage d'inhibition présente l'inhibition de la croissance avec 36 concentrations différentes de la combinaison de la Sertraline avec la vincristine ou avec la vinblastine comparée à la culture non traitée. Dans la colonne de gauche, le pourcentage d'inhibition de la vincristine ou de la vinblastine seule est indiquée, et dans la rangée du bas, le pourcentage d'inhibition de la Sertraline seule est donnée. (ii) L'excès par rapport à la valeur la plus élevée d'un seul agent actif présente l'augmentation de l'inhibition produite par la combinaison des deux produits par rapport à leur inhibition quand ils sont utilisés comme seul agent actif à la même concentration que dans la combinaison. (iii) Pour différencier l'addition des effets, de la synergie, le pourcentage d'inhibition est exprimé comme un excès par rapport à l'additivité Bliss . Le modèle Bliss prédit une réponse combinée C pour deux agents actifs ayant un effet donné A et B selon la formule: 25 30 C = A + B - AB avec A et B exprimés en fraction entre 0 et 1. Méthode: quantification de la synergie. Des cellules de type leucémique U937 et des cellules de cancer du sein 5 MDA-MB231 sont implantées dans des plaques de 96 puits (fluoronunc 96F Nunclon Delta). Les cellules U937 sont implantées à raison de 100 l/puits à une concentration de 2,5 104 cellules/ml dans un milieu RPMI1640 Cambrex + 10% FBS + 1% L-Glutamine + 40 g/ml de Gentamycine. Les cellules MDA-MB231 sont implantées à raison de 100 l/puits à une concentration de 1,25 104 cellules/ml dans un milieu complet E-MEM Cambrex + 10% FBS, + 1% d'acides aminés non essentiels + 1% Napyruvate + 1% L-Glutamine + 40gg/ml de Gentamycine. Tous les agents actifs ont été dilués dans 1mM de DMSO puis dilués dans un milieu correspondant à celui utilisé pour la lignée cellulaire. La vinblastine, la vincristine et la Sertraline ont toutes été diluées dans une solution 4XC. En diluant 50 l d'agent actif dans un volume final de 2001.11, les concentrations finales suivantes ont été obtenues pour la vinblastine et la vincristine: 4000, 1000, 250, 63, et 16 picomolaire (pM) et pour la Sertraline: 25, 13, 6,3, 3,1 et 1,6 micromolaire ( M). Après 6 jours d'incubation, les cellules étant subconfluentes, la quantité de cellules a été déterminée par le test d'analyse luminescente de viabilité de cellules CellTiter-GloTM fourni par Promega Corporation selon les instructions du fournisseur. Les plaques ont été lues sur un lecteur Victor2 fourni par Perkin Elmer et les données ont été relevées comme pourcentages d'inhibition pour chacune des 36 combinaisons d'agents actifs. L'excès par rapport à la valeur la plus élevée d'un seul agent actif et l'additivité Bliss ont été calculés. Résultats L'incubation des cellules MDA-MB231 avec différentes combinaisons de concentrations de Sertraline/Vincristine (Figure 1A) conduit à une synergie entre les deux agents actifs. Ceci peut être observé en utilisant 1000 pM de Vincristine avec la Sertraline à une concentration comprise entre 3,1 et 13 M. Des résultats similaires ont été obtenus quand les cellules leucémiques U937 ont été traitées avec des combinaisons Sertraline/Vincristine (Figure 1B) et Sertraline/Vinblastine (Figure 1C). Une synergie a été observée pour le Vincristine et la Vinblastine lorsqu'elles étaient utilisées à une concentration de 250 pM en combinaison avec de la Sertraline à une concentration comprise entre 3,1 et 6,3 M. Cette synergie conduit à une nette augmentation de 69 et 75 % d'inhibition pour la Vinblastine et la Vincristine respectivement comparée à l'inhibition des agents actifs utilisés comme agents actifs seuls à la concentration donnée. 7 REVENDICATIONS 1. Utilisation de la Sertraline en combinaison avec au moins un alcaloïde pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée au traitement du cancer, ainsi qu'au traitement et à la prévention des métastases. 2. Utilisation selon la revendication 1 caractérisée en ce que l'alcaloïde est un alcaloïde de vinca. 3. Utilisation selon la revendication 2 caractérisée en ce que l'alcaloïde de vinca est choisi dans le groupe constitué par: la vinblastine, la vincristine, la vindésine, la vinorelbine, ou leurs mélanges, de préférence la vincristine et/ou la vinblastine. 4. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que ledit cancer est, ou lesdites métastases sont issues d'un cancer choisi dans le groupe constitué par le cancer de la prostate, les ostéosarcomes, le cancer du poumon, le cancer du poumon non à petites cellules, le cancer du sein, le cancer de l'endomètre ou le cancer du côlon, la leucémie chronique ou aiguë, les tumeurs solides de l'enfant, les lymphomes lymphocitaires, le cancer du pancréas, le cancer de la peau, le mélanome cutané ou intraoculaire, le cancer de la tête et du cou, le cancer de l'utérus, le cancer de l'ovaire, les tumeurs gynécologiques, la maladie de Hodgkin, le cancer des os, le cancer du rectum, le cancer de la région anale, le cancer de l'estomac, le cancer de l'oesophage, le cancer de l'intestin grêle, le cancer du système endocrinien, les sarcomes des parties molles, le cancer de l'urètre, le cancer du pénis, le cancer de la vessie, le cancer du rein, le cancer de l'uretère, les tumeurs malignes pédiatriques,et les tumeurs du système nerveux central. 5. Utilisation selon la revendication 4 caractérisée en ce que ledit cancer est le cancer du sein, ou lesdites métastases sont issues d'un cancer du sein. 6. Utilisation selon la revendication 4 caractérisée en ce que ledit 5 cancer est une leucémie. 7. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 6 caractérisée en ce que la composition pharmaceutique est administrée par voie orale, intraveineuse, entérale, parentérale, intramusculaire, intranasale, souscutanée ou topique. 8. Produit comprenant de la Sertraline et au moins un alcaloïde, en tant que produit de combinaison pour une utilisation simultanée, séparée ou étalée dans le temps en thérapie anti-cancéreuse. 9. Produit selon la revendication 8 caractérisés en ce que l'alcaloïde est un alcaloïde de vinca. 10. Produit selon la revendication 9 caractérisés en ce que l'alcaloïde de vinca est choisi dans le groupe constitué par: la vinblastine, la vincristine, la vindésine, la vinorelbine, ou leurs mélanges, de préférence la vincristine et/ou la vinblastine.