Brevet FR2895877A1 — publié le 20070713

Titre de l'invention Poudre de lait fermenté ou yaourt à haute densité en ferments lactiques Domaine technique La présente demande relève de l'industrie laitière et de l'industrie alimentaire. Elle est relative à une poudre de lait fermenté ou yaourt qui comprend au moins une souche de Streptococus thermophilus et au moins une souche de Lactobacillus bulgaricus, et qui est à haute concentration en ferments lactiques vivants ou viables. Elle est également relative à des moyens pour produire une telle poudre, et plus particulièrement à un procédé pour la production de yaourts ou laits fermentés à haute concentration en ferments lactiques vivants ou viables, à un procédé pour la production de ladite poudre à partir de tels yaourts ou laits fermentés, et aux produits intermédiaires et finaux mis en oeuvre ou obtenus lors de la mise en oeuvre de ces procédés. Elle est en outre relative aux applications de la poudre selon l'invention dans le domaine alimentaire, et plus particulièrement dans le domaine des 20 produits laitiers, des biscuits, et confiseries. Arrière-plan technoloqique De nombreux essais de production de poudre de lait fermenté ou yoghourt 25 ont été réalisés dans l'art antérieur. Les solutions de l'art antérieur ne mettent pas en oeuvre une symbiose S. thermophilus û L. bulgaricus, exercée sur substrat laitier de sorte à ce que ce substrat se transforme en un produit sous forme de poudre qui soit 30 adapté à une consommation humaine, et qui réponde à l'appellation de lait fermenté ou yoghourt, avec une population en ferments lactiques, et notamment en S. thermophilus, au moins égale à 5E8 cfu/g, et/ou avec une population de L. bulgaricus d'au moins 1E4 cfu/g. En effet, les solutions de l'art antérieur décrivent généralement la pulvérisation de milieux qui sont des milieux de culture. Ces milieux de culture ne peuvent conduire à un produit qui réponde à l'appellation de lait fermenté ou yoghourt. Ils sont en outre généralement non administrable à l'homme. io Plusieurs solutions de l'art antérieur préconisent également de concentrer les milieux de culture avant pulvérisation, voire de mélanger ce concentré de milieux de culture à d'autres composés avant de le pulvériser. C'est par exemple le cas des solutions décrites dans les brevets EP 0 924 993 B1 (Société des Produits Nestlé S.A.), qui divulgue un aliment 15 déshydraté qui contient des bactéries lactiques, et du brevet EP 0 818 529 B1, qui divulgue un procédé de séchage par pulvérisation (Société des Produits Nestlé S.A.). Dans les deux cas, les bactéries lactiques sont apportées sous forme de milieu de culture pré-concentré. Le produit alimentaire obtenu en suivant 20 l'enseignement de ce type d'art antérieur est un aliment qui n'est pas un aliment fermenté. La présente invention propose une poudre de lait fermenté ou yaourt qui répond elle-même à l'appellation de lait fermenté ou yaourt, c'est-à-dire une 25 poudre de lait fermenté ou yaourt à haute teneur en S. thermophilus et L. bulgaricus vivants ou viables. La poudre selon l'invention résulte d'une symbiose lactique, et parvient à de hautes teneurs en S. thermophilus et L. bulgaricus, sans qu'il soit nécessaire d'ajouter des ferments lactiques vivants après l'inoculation pour fermentation. 30 La poudre selon l'invention présente des teneurs particulièrement élevées en S. thermophilus et L. bulgaricus : elles sont en fait bien supérieures au seuil légal pour l'appellation de lait fermenté ou yoghourt, et présente de remarquables propriétés de conservation. Résumé de l'invention La présente demande est relative à : un procédé de production de yaourt ou lait fermenté à haute concentration en bactéries lactiques, un procédé de production de poudre de lait fermenté ou yaourt, io ladite poudre étant obtenue à partir d'un yaourt ou lait fermenté à haute concentration en bactéries lactiques, et étant elle-même à haute concentration en bactéries lactiques, un substrat laitier ensemencé, susceptible d'être obtenu comme produit intermédiaire lors de la mise en oeuvre du procédé de 15 yaourt ou lait fermenté selon l'invention et/ou lors de la mise en oeuvre du procédé de production de poudre selon l'invention, un yaourt ou lait fermenté, susceptible d'être obtenu comme produit final du procédé de production de yaourt ou lait fermenté selon l'invention, et/ou comme produit intermédiaire lors de la 20 mise en oeuvre du procédé de poudre selon l'invention, au produit final obtenu à l'issu du procédé de production de poudre selon l'invention, à savoir une poudre de lait fermenté ou yaourt, aux compositions, et plus particulièrement aux aliments, tels que 25 biscuits, confiserie, contenant au moins une poudre selon l'invention. La poudre de lait fermenté ou yaourt selon l'invention est hautement concentrée en ferments lactiques vivants ou viables, et plus particulièrement en S. thermophilus et L. bulgaricus. 30 Elle résulte d'une activité symbiotique entre S. thermophilus et L. bulgaricus : elle ne correspond pas à une juxtaposition de souches qui serait simplement ajoutées dans un milieu puis pulvérisées, mais bien à la pulvérisation conservatrice d'un lait après fermentation lactique symbiotique exercée par S. thermophilus et L. bulgaricus. Le fait que la poudre selon l'invention présente de hautes teneurs en S. thermophilus et L. bulgaricus, et qu'elle résulte de l'exercice d'une symbiose lactique entre S. thermophilus et L. bulgaricus, conduit à ce que la poudre selon l'invention répond elle-même à l'appellation de lait fermenté ou yoghourt. A la connaissance de la Demanderesse, les poudres de l'art antérieur n'ont io pas une composition et des teneurs en ferments lactiques, qui leur conféreraient l'appellation de yaourt ou lait fermenté. En effet, les poudres de yaourt commerciales possèdent le plus souvent une flore lactique résiduelle très faible, ce qui est considéré comme avantageux du point de vue technologique car confère une plus grande stabilité organoleptique. 15 Certaines poudres commerciales possèdent des teneurs en ferments lactiques plus élevés, mais en utilisant un procédé d'enrichissement après séchage. D'autres possèdent des teneurs élevées en S. thermophilus, mais des teneurs à peine mesurables en L. Bulgaricus. Enfin d'autres poudres de yaourt sont déclarées comme contenant des teneurs élevées en 20 ferments lactiques, voire avec une qualité stable pendant 6 mois à température ambiante ; mais les mesures effectuées par la Demanderesse sur ces poudres, détaillées plus loin (cf. exemples 5 et 6 ci-dessous), montrent que la population initiale réelle est inférieure à celle annoncée, et que ces poudres ne présentent pas une stabilité suffisante lors du 25 stockage, ce qui conduit à une diminution significativement de la flore lactique. La poudre selon l'invention présente en outre des propriétés remarquables de conservation, tant à 5 C qu'à 20 C : au bout de 4 mois de conservation, 30 aucune diminution des populations en S.thermophilus et L. bulgaricus vivants ou viables n'est observée. A 35 C, on observe une diminution progressive de la flore lactique, mais avec une vitesse comparable à celle des poudres commerciales conservées à 5 C ou 20 C, conditions de conservation considérées comme idéales par l'homme de l'art. A la connaissance de la Demanderesse, aucun des poudres de l'art s antérieur n'a à la fois : - une teneur en S. thermophilus et L. bulgaricus aussi haute, et - d'aussi bonnes propriétés de conservation, que la poudre selon l'invention (cf. exemples comparatifs 5, 6 ci-dessous). io Brève description des fiqures La figure 1 présente les trois grands types de courbes d'écoulement obtenues par application sur un modèle de lait fermenté d'un gradient croissant puis décroissant de cisaillement: courbe du haut, milieu à forte 15 viscosité (souches lactiques de type filant) ; courbe du milieu, milieu à viscosité moyenne (souches lactiques de type texturant), courbe du bas, milieu à faible viscosité (souches lactiques de type cassant). La figure 2 illustre la détermination de la viscosité d'un modèle de lait 20 fermenté à partir de la partie descendante d'une courbe d'écoulement obtenue par application d'un gradient croissant puis décroissant de cisaillement (viscosité = pente de la droite de régression de la partie descendante de la courbe d'écoulement, avec en abscisse la racine carrée du gradient de cisaillement et en ordonnée la racine carrée de la 25 contrainte). La figure 3 présente un schéma de dispositif d'atomisation douce adapté à la production d'une poudre conforme à l'invention. La figure 4 présente la cinétique d'acidification obtenue par inoculation d'un substrat laitier par une souche de ST à hauteur de 2,7E9 cfu/g et par une souche de LB à hauteur de 1,4E7 cfu/g. La figure 5 illustre les différences de population initiale en ferments (dans cette figure, Danone 1 , Danone 2 et Danone 3 sont des poudres de la présente invention, tandis que Dr. Süwelack M/A 5.4 Active , EPI PY48 sont des poudres de l'art antérieur). io La figure 6 illustre la stabilité des ferments dans les poudres de l'invention conservées à 35 C pendant 2 semaines (en figure 6, DANONE 1 , DANONE 2 et DANONE 3 sont des poudres de la présente invention). 15 La figure 7 présente l'évolution de la constante de vitesse (produit k x Co) en fonction de la température de stockage. En figure 7, DANONE 1 , DANONE 2 et DANONE 3 sont des poudres de la présente invention, tandis que Suwelack (= Dr. Süwelack M/A 5.4 Active ) et EPI PY48 sont des poudres de l'art antérieur. 20 Les figures 8A et 8B présentent l'évolution de la population normalisée en ferments lactiques au cours du temps pour des poudres du commerce, et pour des poudres selon l'invention. Les poudres de l'invention sont DANONE 1 , DANONE 2 et DANONE 3 , tandis que 25 Suw. M/A 5.4 Active (= Dr. Süwelack M/A 5.4 Active ) et EPI PY48 sont des poudres de l'art antérieur. Figure 8A : courbe maîtresse en coordonnées linéaires (ligne continue épaisse = ordre 2 ; lignes pointillées = ordre 2 plus ou moins 20%) Figure 8B : courbe maîtresse en coordonnées logarithmiques (ligne 30 continue épaisse = ordre 2 ; lignes pointillées = ordre 2 plus ou moins 20%) Description détaillée L'invention objet de la présente demande de brevet propose une solution technique pour produire : un lait fermenté ou yaourt à haute concentration en ferments lactiques, sans qu'il soit nécessaire de procéder à un ajout de ferment(s) postérieurement à l'inoculation, et sans qu'il ne soit nécessaire de concentrer la masse fermentée, et io une poudre de lait fermenté ou yoghourt à haute concentration en ferments lactiques, qui peut être obtenue à partir d'un tel lait fermenté ou yaourt à haute concentration en ferments lactiques, et sans ajout de ferment(s) lactique(s) à la poudre. La poudre selon l'invention répond elle-même à l'appellation de lait 15 fermenté ou yoghourt. A cette fin, la présente demande propose : la mise en oeuvre d'au moins une souche de S. thermophilus, et d'au moins une souche de L. bulgaricus pour fermentation d'un substrat 20 laitier, en inoculant ces souches à une hauteur bien supérieure à celle généralement pratiquée pour la fabrication de yaourt, en limitant de préférence le nombre de souches de S. thermophilus et de L. bulgaricus utilisées au minimum, 25 en sélectionnant de préférence les souches de S. thermophilus qui sont des souches cassantes, en incorporant au moins une souche de L. bulgaricus à une hauteur non négligeable, de sorte à développer une symbiose S. thermophilus - L. bulgaricus, 30 en séchant le lait fermenté ou yoghourt obtenu dans des conditions suffisamment douces pour maintenir une population totale de S. thermophilus et de L. bulgaricus qui est d'au moins 1E7 cfulL, préférentiellement d'au moins 5E8 cfu/L, plus préférentiellement d'au moins 1E9 cfu/L, et de préférence, en séchant le lait fermenté ou yoghourt obtenu 5 jusqu'à ce que la poudre obtenue ait une Aw (activité de l'eau) faible, préférentiellement inférieure ou égale à 0,3. Comme décrit ci-dessous plus en détail, et illustré par les exemples comparatifs joints, la poudre de lait fermenté ou yoghourt présente d'exceptionnelles capacités de conservation. 10 Dans la présente demande, les concentrations en bactéries lactiques (cfu/g) sont notées XEY cfu/g, par souci de simplification (par exemple 5E8 cfu/g) : cette notation signifie X.10Y cfu/g (par exemple 5.108 cfu/g). 15 La présente demande est relative à un procédé de production de yaourt ou lait fermenté, qui permet d'obtenir un yaourt ou lait fermenté à haute concentration en ferments lactiques, sans qu'il soit nécessaire de procéder à un ajout de ferment(s) postérieurement à l'inoculation, et sans qu'il ne soit nécessaire de concentrer la masse fermentée. 20 Le procédé de production de yaourt ou lait fermenté selon l'invention comprend : -l'ensemencement d'un substrat laitier, qui a éventuellement subi un traitement thermique au moins équivalent à la pasteurisation, par inoculation d'au moins une souche de Streptococcus thermophilus à haute 25 concentration, avantageusement à une concentration d'au moins 5E8 cfu/g, et d'au moins une souche de Lactobacillus bulgaricus à haute concentration, avantageusement à une concentration d'au moins 1 E6 cfu/g, pour obtenir un substrat laitier ensemencé, - la fermentation lactique du substrat laitier ainsi ensemencé, de sorte à 30 obtenir un lait fermenté ou un yoghourt. La présente demande est également relative à un procédé de production d'une poudre de lait fermenté ou de yoghourt, qui permet d'obtenir une poudre à haute densité en ferments lactiques, sans qu'il soit nécessaire d'ajouter des bactéries lactiques après l'ensemencement initial du substrat laitier liquide. Le procédé selon l'invention comprend : -l'ensemencement d'un substrat laitier, qui a éventuellement subi un traitement thermique au moins équivalent à la pasteurisation, par inoculation d'au moins une souche de Streptococcus thermophilus à haute io concentration, avantageusement à une concentration d'au moins 5E8 cfu/g, et d'au moins une souche de Lactobacillus bulgaricus à haute concentration, avantageusement à une concentration d'au moins 1E6 cfu/g, pour obtenir un substrat laitier ensemencé, - la fermentation lactique du substrat laitier ainsi ensemencé, de sorte à 15 obtenir un lait fermenté ou un yoghourt, - la pulvérisation du lait fermenté ou yoghourt ainsi obtenu. De manière avantageuse, ladite pulvérisation est conduite dans des conditions, et notamment des conditions de température et/ou durée et/ou vitesse, qui permettent d'obtenir des taux de survie de chacune desdites 20 souches de S. thermophilus et L. bulgaricus, tels que la poudre obtenue contient ladite au moins une souche de S. thermophilus et ladite au moins une souche de L. bulgaricus, sous forme vivante ou viable, à une concentration d'au moins 5E8 cfu/g et d'au moins 1E4 cfu/g, respectivement. 25 Pour parvenir à produire une poudre à haute concentration en ferments lactiques, le procédé selon l'invention ne requiert pas qu'une bactérie lactique soit ajoutée sans participer à la fermentation lactique. Le procédé selon l'invention ne requiert pas non plus que le lait fermenté ou yaourt soit concentré pour atteindre les hautes teneurs en S. 30 thermophilus et L. bulgaricus souhaitées. i0 Le procédé selon l'invention met en oeuvre au moins un substrat laitier, au moins une souche de S. thermophilus, et au moins une souche de L. bulgaricus. Le terme substrat laitier est, dans la présente demande, entendu comme signifiant lait au sens où l'entend l'industrie laitière, c'est-à-dire un substrat contenant essentiellement du lait et/ou des composants du lait, et dont la composition est telle que la fermentation lactique de ce substrat laitier par des souches de S. thermophilus et L. bulgaricus conduit à un io produit qui peut être destiné à l'alimentation humaine, et plus particulièrement qui répond à l'appellation de lait fermenté ou yoghourt. Le terme substrat laitier couvre ainsi le lait d'origine animale sous toutes ses formes et dans toutes ses variantes de compositions : lait écrémé ou non, lait concentré ou non, lait ultrafiltré ou non, lait frais ou non, 15 lait en poudre ou non, lait reconstitué ou non, lait recombiné ou non, lait enrichi en constituants du lait ou non, lait additionné ou non d'agents utiles à la fabrication ou à la qualité du produit fini, tels que agents de saveur, arômes, sucres, etc. Le terme substrat laitier n'inclut toutefois pas dans sa portée la 20 signification de milieu de culture . En effet, le terme milieu de culture vise un milieu destiné à favoriser et/ou stimuler la croissance de bactéries lactiques, et par là, à produire un inoculum de bactéries lactiques, alors que le terme substrat laitier vise un milieu qui est destiné à subir une transformation par fermentation, pour produire un aliment destiné à une 25 consommation humaine. Ainsi, de nombreux composés qui peuvent être ajoutés dans un milieu de culture pour stimuler et/ou favoriser la croissance des bactéries lactiques, ne peuvent être ajoutés dans un substrat laitier pour l'obtention d'un lait fermenté ou yaourt. C'est notamment le cas : 30 de nombreux agents tensio-actifs et/ou émulsifiants et/ou agents solubilisants et/ou détergents, tels que le polyoxyethylene-sorbitan-20-monooleate (aussi connu sous le nom de polysorbate 80, ou de Tween 80), d'acides de type citrate, acétate, d'extraits de viande, peptones végétales, glycérophosphate. Pour mettre en oeuvre le procédé selon l'invention, au moins une souche de S. thermophilus est inoculée à haute concentration dans le substrat laitier. Avantageusement, elle est inoculée à une concentration d'au moins 5E8 cfulg. De préférence, ladite au moins une souche de S. thermophilus est inoculée dans le substrat laitier à une concentration d'au moins 1E9 cfu/g, plus préférentiellement d'au moins 2E9 cfu/g, plus préférentiellement d'au moins 2,5E9 cfu/g, très préférentiellement d'au moins 2,6E9 cfu/g, encore plus préférentiellement d'au moins 2,7E9 cfu/g. De préférence, ladite au moins une souche de S. thermophilus est inoculée dans le substrat laitier à une concentration comprise entre 1E9 cfu/g et 1 E10 cfu/g (bornes incluses). Pour mettre en oeuvre le procédé selon l'invention, au moins une souche de L. bulgaricus est inoculée dans le substrat laitier. Avantageusement, elle est inoculée dans le substrat laitier à une concentration d'au moins 1E6 cfu/g. De préférence, ladite au moins une souche de L. bulgaricus est inoculée dans le substrat laitier à une concentration d'au moins 1E7 cfu/g, plus préférentiellement d'au moins 1,1E7 cfu/g, plus préférentiellement d'au moins 1,2E7 cfu/g, très préférentiellement d'au moins 1,3E7 cfu/g, encore plus préférentiellement d'au moins 1,4E7 cfu/g. De préférence, ladite au moins une souche de L. bulgaricus est inoculée dans le substrat laitier à une concentration comprise entre 1 E7 cfulg et 5E8 cfu/g (bornes incluses). Une fois que le substrat laitier est ensemencé par une haute concentration de ladite au moins une souche de S. thermophilus et par une haute concentration de ladite au moins une souche de L. bulgaricus, la fermentation lactique est conduite selon les techniques connues de la personne du métier, de sorte à obtenir un produit qui répond à l'appellation de lait fermenté ou yaourt. Le substrat laitier ensemencé est donc maintenu dans des conditions, et notamment des conditions de température, favorables à l'activité de fermentation de ladite au moins une souche de S. thermophilus et de ladite au moins une souche de L. bulgaricus, jusqu'à ce qu'un lait fermenté ou un yaourt soit obtenu. Le pH initial du substrat laitier se situe généralement entre 8 et 6, pour descendre de deux à quatre unités pH environ, et atteindre, en fin de fermentation lactique, un pH final qui est généralement compris entre 5 et 4 (généralement, pH de 4,7-4,6 pour les yoghourts). Dans la présente demande, on donne à tous les termes la portée et la signification qu'ils prennent usuellement dans le domaine de l'industrie laitière et/ou de l'industrie alimentaire. Ainsi, lorsqu'il est fait référence à une fermentation lactique , il s'agit d'une fermentation lactique acidifiante, qui se traduit par une acidification suite à la production d'acide lactique pouvant s'accompagner de production d'autres acides, de dioxyde de carbone, et de diverses substances telles que des exopolysaccharides (EPS) ou des substances aromatiques, par exemple diacétyle et acétaldéhyde. De même, on entend par ferment lactique , un microorganisme ou une souche de microorganismes vivant ou viable, qui est capable de mener une telle fermentation lactique acidifiante sur un substrat laitier. On donne aux termes laits fermentés et yoghourts leurs significations usuelles dans le domaine de l'industrie laitière, c'est-à-dire des produits qui sont destinés à la consommation animale, et plus particulièrement humaine, et qui sont issus de la fermentation lactique acidifiante d'un substrat laitier. Ces produits peuvent contenir des ingrédients secondaires tels que fruits, végétaux, sucres, arômes, etc. L'appellation de lait fermenté et de yoghourts répondent à des normes officielles strictes. On peut ainsi se reporter au Codex Alimentarius (préparé par la Commission du Codex Alimentarius sous l'égide de la FAO et de l'OMS, et publié par la Division Information de la FAO, disponible en ligne sur http://codexalimentarius.net; cf. plus particulièrement, le volume 12 du Codex Alimentarius Normes Codes pour le lait et les produits laitiers , et la norme CODEX STAN A-11(a)-1975 ). On peut plus particulièrement se reporter au Décret français n 881203 du 30 décembre 1988 relatif aux laits fermentés et au yoghourt ou yaourt, publié au Journal Officiel de la République Française du 31 décembre 1988. Le contenu de ce Décret est incorporé par référence dans la présente demande de brevet. Le terme lait fermenté est ainsi réservé dans la présente demande au produit laitier préparé avec un substrat laitier qui a subi un traitement au moins équivalent à la pasteurisation, ensemencé avec des microorganismes appartenant à l'espèce ou aux espèces caractéristiques de chaque produit. La coagulation des laits fermentés ne doit pas être obtenue par d'autres moyens que ceux qui résultent de l'activité des microorganismes utilisés. Le terme yoghourt (ou yaourt ) est quant à lui réservé au lait fermenté obtenu, selon les usages loyaux et constants, par le développement des bactéries lactiques thermophiles spécifiques dites Lactobacillus bulgaricus (également appelée Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus) et Streptococcus thermophilus, qui doivent se retrouver vivantes dans le produit fini, à raison d'au moins 1E7 cfu de bactéries S. thermophilus et L. bulgaricus par gramme de produit, rapporté à la partie lactée de ce produit. Un produit répondant à l'appellation de yoghourt contiendra donc obligatoirement au moins une socuhe de S. thermophilus et au moins une souche de L. bulgaricus sous forme vivante, à raison d'au moins 1E7 cfu/g de partie lactée. La coagulation des yoghourts ne doit pas être obtenue par d'autres moyens que ceux qui résultent de l'activité des microorganismes utilisés. Un lait fermenté ou un yoghourt n'a subi aucun traitement permettant de soustraire un élément constitutif du substrat laitier mis en oeuvre, et notamment n'a pas subi un égouttage du coagulum. Un lait fermenté ou un yoghourt peut être additionné d'un ou plusieurs extraits d'aromates, d'un ou plusieurs arômes naturels, ainsi que, dans la limite de 30 pour 100 en poids du produit fini, d'un ou plusieurs sucres et autres denrées alimentaires conférant une saveur spécifique, voire de céréales. L'incorporation en tant que produits de substitution de matières grasses et/ou protéiques d'origine non laitière est interdite. La quantité d'acide lactique libre contenue dans un lait fermenté ne doit pas être inférieure à 0,6 gramme pour 100 grammes lors de la vente au consommateur, et la teneur en matière protéique rapportée à la partie lactée ne doit pas être inférieure à celle d'un lait normal. La quantité d'acide lactique libre contenue dans un yoghourt ne doit pas être inférieure à 0,7 gramme pour 100 grammes lors de la vente au consommateur. Conformément à la présente invention, le lait fermenté ou yoghourt produit 30 par inoculation de ladite au moins une souche de S. thermophilus et de ladite au moins une souche de L. bulgaricus contiendra ces souches à une concentration légèrement supérieure à celle de leur inoculation. Un lait fermenté ou yoghourt produit conformément à la présente invention pourra donc contenir : s - ladite au moins une souche de S. thermophilus à une concentration d'au moins 5E8 cfu/g, préférentiellement d'au moins 1E9 cfu/g, plus préférentiellement d'au moins 2E9 cfu/g, plus préférentiellement d'au moins 2,5E9 cfu/g, très préférentiellement d'au moins 2,6E9 cfu/g, encore plus préférentiellement d'au moins 2,7E9 cfu/g, et 10 - ladite au moins une souche de L. bulgaricus à une concentration d'au moins 1E7 cfu/g, plus préférentiellement d'au moins 1,1E7 cfu/g, plus préférentiellement d'au moins 1,2E7 cfu/g, très préférentiellement d'au moins 1,3E7 cfu/g, encore plus préférentiellement d'au moins 1,4E7 cfu/g. De préférence, un lait fermenté ou yoghourt produit conformément à la 15 présente invention contiendra : - ladite au moins une souche de S. thermophilus à une concentration comprise entre 1E9 cfu/g et 1 E10 cfu/g (bornes incluses), et - ladite au moins une souche de L. bulgaricus à une concentration comprise entre 1E7 cfu/g et 5E8 cfu/g (bornes incluses). 20 Le lait fermenté ou yoghourt ainsi obtenu par fermentation lactique est ensuite pulvérisé dans des conditions permettant d'obtenir un certain taux de survie de chacune desdites souches de S. thermophilus et L. bulgaricus. 25 La pulvérisation d'un lait fermenté ou d'un yoghourt détruit l'intégrité membranaire, et de manière plus générale, tue une partie des bactéries lactiques présentes dans le lait fermenté ou yoghourt. Dans le même temps, la pulvérisation conduit à une concentration de la teneur en bactéries lactiques, dans la mesure où une poudre est constituée 30 de 95 à 99% de masse sèche, alors que le lait fermenté ou yoghourt est une masse humide, dont la masse sèche ne représente en général que 15 à 20% de sa masse totale. De préférence, ladite pulvérisation est menée de sorte à ce que ladite au moins une souche de S. thermophilus est contenue dans la poudre selon l'invention sous forme vivante ou viable à une teneur d'au moins 5E8 cfu/g, plus préférentiellement au moins 1E9 cfu/g, encore plus préférentiellement au moins 2E9 cfu/g, très préférentiellement au moins 3E9 cfulg. De préférence, ladite pulvérisation est menée de sorte à ce que ladite au moins une souche de S. thermophilus est contenue dans la poudre selon l'invention sous forme vivante ou viable à une teneur comprise entre 1E9 cfu/g et 1E10 cfu/g (bornes incluses). De préférence, ladite pulvérisation est menée de sorte à ce que ladite au moins une souche de L. bulgaricus est contenue dans la poudre selon l'invention sous forme vivante ou viable à une teneur d'au moins 1E4 cfu/g, préférentiellement au moins 2E4 cfu/g, préférentiellement au moins 3E4 cfu/g, plus préférentiellement au moins 8E4 cfu/g, très préférentiellement au moins 1E5 cfu/g, encore plus préférentiellement aumoins 3E5 cfu/g. De préférence, ladite pulvérisation est menée de sorte à ce que ladite au moins une souche de L. bulgaricus est contenue dans la poudre selon l'invention sous forme vivante ou viable à une teneur comprise entre 1E4 et 1E5 cfu/g. Toutes les combinaisons de teneur en S. thermophilus et de teneur en L. bulgaricus sont inclues dans le contenu de la présente demande de brevet. Par exemple, et avantageusement, le lait fermenté ou yoghourt obtenu peut être pulvérisé dans des conditions permettant d'obtenir un taux de survie de chacune desdites souches de S. thermophilus et L. bulgaricus, tel que la poudre obtenue contient ladite au moins une souche de S. thermophilus à une concentration d'au moins 5E8 cfu/g, préférentiellement d'au moins 1E9 cfu/g, et ladite au moins une souche de L. bulgaricus, sous forme vivante ou viable à une concentration d'au moins 1E4 cfu/g, préférentiellement d'au moins 4E4 cfu/g, respectivement. Le taux de survie de ladite au moins une souche de S. thermophilus et de ladite au moins une souche de L. bulgaricus dépend de la nature de ces souches, du type de procédé de pulvérisation mis en oeuvre, et des conditions, plus ou moins douces, sous lesquelles ce procédé est appliqué. La pulvérisation du lait fermenté ou yoghourt peut, conformément à la lo présente invention, être menée par séchage par lyophilisation, par traitement sur lit fluidisé, ou par séchage par atomisation. Cette pulvérisation sera suffisamment douce pour assurer au mieux la conservation de chacun des ferments lactiques inoculés sous forme vivante ou viable. 15 Il peut notamment être procédé par atomisation avec une température de sortie inférieure ou égale à 100 C, de préférence inférieure ou égale à 80 C, plus préférentiellement inférieure ou égale à 60 C (cf. exemple 3 ci-dessous, et figure 3). Dans le cadre de la présente invention, la pulvérisation présente de 20 préférence un rendement : d'au moins 20% environ pour ce qui concerne ladite au moins une souche de S. thermophilus, préférentiellement d'au moins 25%, plus préférentiellement d'au moins 30 %, et 25 d'au moins 0,0002% pour ladite souche de L. bulgaricus, préférentiellement d'au moins 0,0005%, plus préférentiellement d'au moins 1%, très préférentiellement d'au moins 5%. La pulvérisation du lait fermenté ou yoghourt est menée dans des conditions de séchage conduisant à une poudre de lait fermenté ou yoghourt qui présente une faible Aw (activité de l'eau). Avantageusement, la pulvérisation du lait fermenté ou yoghourt est menée dans des conditions de séchage conduisant à une poudre de lait fermenté ou yoghourt qui présente une Aw (activité de l'eau) inférieure ou égale à 0,3, préférentiellement comprise entre 0,05 et 0,3 (bornes incluses), plus préférentiellement inférieure ou égale à 0,2, très préférentiellement comprise entre 0,1 et 0,2 (bornes incluses), encore plus préférentiellement comprise entre 0,09 et 0,19 (bornes incluses). La poudre selon l'invention présente de très bonnes propriétés de conservation : le taux de S. thermophilus et de L. bulgaricus qui sont contenus dans la poudre sous forme vivante ou viable reste élevé au cours du temps. La poudre de lait fermenté ou yoghourt selon l'invention conserve au moins 1E7 cfu/g de ferments lactiques vivants ou viables (population totale en ferments lactiques S. thermophilus et L. bulgaricus), après conservation de cette poudre pendant six mois à 20 C, sans qu'il y ait ajout de S. thermophilus ou L. bulgaricus. De manière avantageuse, la poudre selon l'invention ne subit aucune perte détectable en S. thermophilus par rapport au lait fermenté ou yaourt dont elle provient, après une conservation de 4 mois, voire plus, à une température de 20 C. La poudre de lait fermenté ou yoghourt selon l'invention avantageusement conserve : - au moins au moins 5E8 cfu/g, plus préférentiellement au moins 1E9 30 cfu/g, de ladite au moins une souche de S. thermophilus sous forme vivante ou viable, et - au moins 1'4 cfu/g de ladite au moins une souche de L. bulgaricus sous forme vivante ou viable, préférentiellement au moins 4E4 cfu/g de ladite au moins une souche de L. bulgaricus sous forme vivante ou viable, après conservation de cette poudre à 20 C pendant quatre mois, voire plus, sans qu'il y ait ajout de S. thermophilus ou L. bulgaricus exogène. De manière particulièrement remarquable, la poudre selon l'invention présente des propriétés exceptionnelles de conservation, tant à 5 C qu'à 20 C: au bout de 4 mois de conservation, il n'est observé aucune diminution des populations en S.thermophilus et L. bulgaricus vivants ou viables, à tout le moins aucune diminution détectable ou significative. A 35 C, on observe une diminution lente et progressive de la flore lactique avec le temps : au bout de 2 semaines à cette température, les taux de survie sont compris entre 25% et 60% pour les S. thermophilus, c'est-à-dire que l'on obtient à la fin de ce stockage au moins 1,5E8 cfu/g et 1,5E9 cfu/g, ce qui reste élevé. Le taux de survie est plus faible pour les L. bulgaricus est de l'ordre de 2 à 5%, d'où des teneurs comprises entre 2E2 cfu/g et 2E3 gcfu/g. On observe également que la vitesse de mortalité à 35 C de la flore totale des poudres de l'invention est équivalente à celles de poudres de l'art antérieur à 5 C ou 20 C. Le terme significatif est ici entendu dans son sens statistique, et dans la mesure entendue dans le cadre d'une industrie laitière. Le terme "significativement" est ci-dessus employé dans son signification habituelle dans le domaine des statistiques (par exemple, essai de t, essai de z, valeur chi carrée, ratio F, etc.), c.-à-d., pour comparer une valeur mesurée à une autre, et déterminer si ces valeurs mesurées diffèrent de l'une à l'autre. Le terme " significativement " par conséquent englobe le fait que la personne du métier peut tenir compte de l'écart type (si il y en a un), qui mesure la dispersion des données dans une distribution de fréquence. La valeur désirée de p est habituellement placée à un niveau d'alpha de 5%, ou au niveau plus rigoureux d'alpha de 1%. A la connaissance de la Demanderesse, les poudres de l'art antérieur n'ont pas d'aussi bonnes propriétés de conservation (cf. exemples comparatifs 5 et 6 ci-dessous). Des moyens permettant de mesurer le taux de S. thermophilus et de L. bulgaricus qui sont contenus sous forme vivante ou viable dans la poudre io sont connus de la personne du métier. Ils comprennent notamment la méthode officielle FIL 117B : 1997, Yaourt : dénombrement des microorganismes caractéristiques, technique de comptage des colonies à 37 C. La poudre, ou le cas échéant, le fourrage, à analyser peut être préparé pour dénombrement comme décrit en exemple 7 ci-dessous. 15 Lesdites souches de S. thermophilus et L. bulgaricus peuvent être choisies parmi celles connues par la personne du métier comme étant aptes à mener une fermentation lactique sur substrat laitier, de sorte à produire un lait fermenté ou un yoghourt. 20 Un exemple de souche de S. thermophilus est la souche disponible auprès de la C.N.C.M. sous le numéro de dépôt 1-1630. Un exemple de souche de L. bulgaricus est la souche disponible auprès de la C.N.C.M. sous le numéro de dépôt 1-1519. 25 On sélectionne de préférence au moins une souche de S. thermophilus et/ou au moins une souche de L. bulgaricus qui a/ont une capacité de propagation sur substrat laitier telle qu'elle/s permettent de produire des ferments d'inoculation à haute densité, et plus particulièrement des ferments dont la population en S. thermophilus et L. bulgaricus est : égale ou supérieure à 3E10 ufc/g pour S. thermophilus, égale ou supérieure à 1E9 cfu/g pour L. bulgaricus, pour des ferments sous forme congelée, ou - égale ou supérieure à 1E11 ufc/g pour S. thermophilus, égale ou supérieure à 4E9 cfulg pour L. bulgaricus, pour des ferments sous forme lyophilisée. La population de S. thermophilus et celle de L. bulgaricus peuvent être préparées et/ou conditionnées de manière séparée, ou bien être en mélange. Elles peuvent être contenues dans des granules distincts, ou bien être contenus dans un même granule qui apporte les types de deux populations. De manière avantageuse, et contrairement à ce qui est usuellement procédé pour fabriquer un lait fermenté ou yoghourt, seront de préférence choisies au moins une souche de S. thermophilus qui produit peu ou pas d' exopolysaccharides EPS (souche dite de type cassant). De préférence, ladite au moins une souche de S. thermophilus est donc une souche dite de type cassant, qui ne produit pas d'exopolysaccharides (EPS), ou qui n'en produit qu'à des teneurs tellement faibles qu'un milieu à base de lait, après culture de cette souche à une température de 40 C jusqu'à un pH de 4,7, présente une viscosité de Casson à 4 C qui est inférieure ou égale à 500 mPa.s, préférentiellement inférieure ou égale à 400 mPa.s. Un milieu à base de lait approprié pour une telle mesure de viscosité peut être simplement du lait, ou bien un milieu pour lait fermenté modèle, tel que, par exemple, un milieu composé de 120 grammes de poudre de lait écrémé, 1 gramme de peptide N3 (Vitalarmor 950, Armor protéines), et eau permutée QSP IL. L'exemple 8 ci-dessous présente un exemple détaillé de protocole. Des doses classiques d'inoculation de S. thermophilus peuvent être utilisées (par exemple, ensemencement à 10/0 v/v)), telles que celles présentées en exemple 8. Un exemple d'une telle souche de S. thermophilus (S. thermophilus de type cassant) est la souche de S. thermophilus disponible auprès de la C.N.C.M. sous le numéro de dépôt 1-2130. Pour sélectionner une souche de ferment lactique qui ne produit pas ou peu d'exopolysaccharides (EPS), il peut être procédé par tout moyen connu de la personne du métier. Une méthologie adaptée comprend la mesure de la viscosité du lait fermenté obtenu par fermentation d'un substrat laitier à l'aide de la (ou des) souche(s) candidate(s), tel que par exemple un yaourt io produit à l'aide de la(les) souche(s) candidate(s). Une méthode permet de déterminer si la(les) souche(s) mise(s) en oeuvre pour la fermentation du lait donne(nt) un lait fermenté à texture filante (viscosité importante), si elle(s) est(sont) de type texturant (viscosité moyenne), ou bien si elle(s) donne(nt) un lait fermenté à une texture 15 cassante (viscosité faible). Dans le cadre de la présente invention, et contrairement à ce qu'il est procédé dans le cadre de la fabrication de lait fermenté et yaourt qui ne sont pas destinés à être pulvérisés, les souches lactiques préférées sont celles qui donnent un lait fermenté à texture cassante (viscosité faible). 20 La méthode de mesure de viscosité d'un lait fermenté comprend la mise en oeuvre d'un viscosimètre réfrigéré et équipé d'un système permettant d'appliquer un gradient croissant et décroissant de cisaillement au lait fermenté, tel que le viscosimètre Mettler RM 260 réfrigéré et équipé d'un système coaxial de type DIN 145. Ce système rotatif permet d'observer une 25 déstructuration du produit en fonction d'un gradient de cisaillement linéaire, soit une contrainte à un gradient donné. Brièvement, cette méthode comprend : la culture de la (ou des) souche(s) lactique(s) candidate(s) sur un milieu de culture approprié, qu'un milieu à base de lait (lait, milieu pour lait 30 fermenté modèle ; cf. exemple 8), après culture de cette souche à une température de 40 C jusqu'à un pH de 4,7, présente une viscosité de Casson à 4 C qui est inférieure ou égale à 500 mPa.s, préférentiellement inférieure ou égale à 400 mPa.s, [si souhaité, plusieurs lots de laits fermentés peuvent être produits dans des conditions identiques de sorte à disposer de plusieurs exemplaires comparables], - si le(s) lait(s) fermentés) modèle(s) obtenu(s) est(sont) un(des) produit(s) ferme(s), ce(s) lait(s) fermenté(s) est(sont) de préférence agité(s) manuellement à l'aide d'une spatule durant une minute, l'incubation à 4 C pendant 30min du(des) milieu(x) fermenté(s), ou d'au io moins un échantillon prélevé de ce(s) milieu(x) fermenté(s), les mesures de viscosité sont réalisées à 4 C, à l'aide d'un viscosimètre Mettler RM 260 réfrigéré et équipé d'un système coaxial de type DIN 145. Un milieu à base de lait approprié pour une telle mesure de viscosité peut 15 être simplement du lait, ou bien un milieu pour lait fermenté modèle, tel que, par exemple, un milieu composé de 120 grammes de poudre de lait écrémé, 1 gramme de peptide N3 (Vitalarmor 950, Armor protéines), et eau permutée QSP 1L. L'exemple 8 ci-dessous présente un exemple détaillé de protocole. Des doses classiques d'inoculation de S. thermophilus peuvent 20 être utilisées (par exemple, ensemencement à 1% v/v)), telles que celles présentées en exemple 8. Le produit subit un gradient de cisaillement croissant de 0 à 20 s-1 pendant 1 minute. Cette phase correspond à la rampe montante. Puis, il subit un 25 gradient de cisaillement décroissant de 20 à 0 s-1 pendant 1 minute, correspondant à la rampe descendante. Les résultats sont obtenus sous forme d'une courbe d'écoulement en continu, avec rampe montante et rampe descendante entre 0 et 20 s-1. La Figure 1 présente les trois types majeurs de courbes d'écoulement : le type de courbe obtenu à l'aide de la souche 001 010 correspond à une souche qui donne un lait fermenté à texture filante (viscosité importante, courbe du haut), - le type de courbe obtenu à l'aide de la souche 001 098 correspond à une souche qui est de type texturant (viscosité moyenne, courbe du milieu), le type de courbe obtenu à l'aide de la souche TS 10B (société DSM Food specialties Dairy ingredients ; BP 1 ; 2600 MA Delft ; PAYS BAS) correspond à une souche qui donne un lait fermenté à une texture io cassante (viscosité faible, courbe du bas). La tangente en tout point de la courbe d'écoulement en rampe descendante représente la viscosité apparente du milieu fermenté. Cette viscosité apparente varie selon le gradient de cisaillement considéré, et il 15 est de fait préférable d'ajuster la courbe par un modèle mathématique. Divers modèles mathématiques appropriés sont connus de la personne du métier. Le modèle de Casson est un exemple de modèle approprié. La viscosité du lait fermenté (ri) se déduit de la pente de la droite de régression de la partie descendante (gradient descendant de cisaillement) 20 de la courbe d'écoulement obtenue, modifiée pour représenter la racine carrée de la contrainte en fonction de la racine carrée du gradient de cisaillement. Du fait de l'hétérogénéité de certains laits fermentés (cas, notamment, des 25 produits fermes, qui doivent être brassés manuellement), et de la conception de certains viscosimètres, il est parfois nécessaire d'éliminer quelques points incohérents de mesure avant modélisation mathématique, tels que par exemple les points incohérents qui peuvent être obtenus lors d'un éventuel changement de pignon destiné à augmenter la vitesse de 30 cisaillement. II est parfois nécessaire d'éliminer une partie de la courbe ascendante correspondant au régime transitoire de mise en écoulement laminaire du produit au sein de l'entrefer. L'ajustement est donc préférablement effectué sur la courbe descendante, où les artefacts liés à la thixotropie du produit et la mise en régime d'écoulement sont moins importants. Le modèle de Casson est formulé par l'équation suivante (équation 1) : = /'r o + J17 x D (1) r : Contrainte (Pa) ro : Seuil d'écoulement du produit (Pa) [Seuil4] 17 : Viscosité du produit (Pa.$) [V4] D : Gradient de cisaillement (s-1) Cette modélisation est suivie du tracé d'une droite de régression linéaire sur la partie descendante de la courbe ; elle permet de relever deux paramètres importants : - le seuil d'écoulement du produit -ro, correspondant à l'ordonnée à l'origine, 15 - la viscosité de Casson rt du produit, correspondant à la pente de la droite de régression. La Figure 2 illustre la détermination du seuil d'écoulement io et de la viscosité n d'un lait fermenté à l'aide de la souche 001 098, sur la courbe descente d'écoulement modélisée par Casson. 20 Au-delà de 500 mPa.s, il est considéré que la viscosité de Casson du lait fermenté est moyenne ou forte, c'est-à-dire que la(les) souche(s) testée(s) est(sont) de type nettement texturant, ou bien confère(nt) une texture filante. Lorsque la viscosité de Casson mesurée est égale ou inférieure à 500 25 mPa.s, il est considéré que la viscosité de Casson est faible, c'est-à-dire que la(les) souche(s) testée(s) confère(nt) une texture cassante. De préférence, on choisira des souches dont la viscosité de Casson à 4 C est égale ou inférieure à 400 mPa.s. Dans l'art antérieur, pour produire un yaourt de réelle qualité alimentaire, on sélectionne de préférence les souches de S. thermophilus dites texturantes (fortes productrices d'EPS), de sorte à obtenir un yaourt qui ait une texture et un goût satisfaisants pour le consommateur. La présence de souches de S. thermophilus de type cassante sera néanmoins généralement également nécessaire, dans la mesure où la io sécurité sanitaire préconise d'obtenir une acidification du substrat laitier la plus rapide possible. C'est donc en choisissant une combinaison appropriée de souches de S. thermophilus de type cassant et de souches de S. thermophilus texturantes, que peut être produit un yaourt qui soit de réelle qualité 15 alimentaire, tant sur le plan de la texture, que sur celui du goût, et que sur celui de la sécurité sanitaire. Dans la présente invention, on sélectionnera au contraire de préférence les souches de S. thermophilus de type cassant, en évitant la mise en oeuvre de type texturant. 20 En outre, conformément à la présente invention, il est conseillé, ou à tout le moins il n'est pas nécessaire pour obtenir un produit fini de qualité (produit poudre), de ne pas mettre en oeuvre une combinaison de souches de S. thermophilus, mais au contraire de limiter le nombre de souches de S. 25 thermophilus différentes (une, deux ou trois souche(s) de S. thermophilus), ainsi que le nombre de L. bulgaricus (une, deux ou trois souche(s) de L. bulgaricus). Le procédé selon l'invention permet en effet d'obtenir une poudre de grande qualité en ne mettant en oeuvre qu'une seule souche de S. thermophilus (et bien sûr au moins une souche de L. bulgaricus). Cette 30 souche de S. bulgaricus est de préférence de type cassant. Avantageusement, conformément à la présente invention (procédé de production de yaourt ou lait fermenté, procédé de production de poudre, ferments, substrat laitier ensemencé, lait fermenté ou yaourt obtenu, poudre de lait fermenté ou yaourt obtenu, aliments, tels que fourrage, biscuit, confiserie), il est mis en oeuvre une seule souche de S. thermophilus, qui de préférence est une souche de type cassant, et, de préférence, une seule souche de L. bulgaricus est mise en oeuvre. La poudre selon l'invention peut présenter toute granulométrie adaptée à sa destination. Une distribution granulométrique comprise entre 10 et 300 io micromètres est de préférence choisie pour une application en industrie laitière ou biscuitière ou de confiserie. La présente invention est également relative aux produits de départ, aux produits intermédiaires et aux produits finaux susceptibles d'être mis en 15 oeuvre ou obtenus par mise en oeuvre d'un procédé selon l'invention. Chacune des caractéristiques données dans la présente demande en description du procédé selon l'invention peut venir s'appliquer mutatis mutandis aux produits de départ, aux produits intermédiaires et aux 20 produits finaux de l'invention. Un produit de départ susceptible d'être mis en oeuvre dans un procédé selon l'invention consiste en un ou des ferments concentrés de bactéries lactiques. Le ou les ferments concentrés permettent d'apporter facilement 25 les importantes doses d'inoculum requises par le procédé selon l'invention. Les ferments concentrés selon l'invention comprennent au moins une souche de S. thermophilus, et/ou au moins une souche de L. bulgaricus. Les ferments concentrés selon l'invention peuvent être sous la forme de concentrés congelés, par exemple sous la forme de granules congelés, 30 et/ou sous la forme de concentrés lyophilisés. 28 Les concentrés congelés selon l'invention comprennent au moins une souche de S. thermophilus (vivante ou viable) à une concentration d'au moins 3E10 cfu/g, et/ou au moins une souche de L. bulgaricus (vivante ou viable) à une concentration d'au moins 1E9 cfu/g. Les concentrés lyophilisés selon l'invention comprennent au moins une souche de S. thermophilus (vivante ou viable) à au moins 1E11 cfu/g, et/ou au moins une souche de L. bulgaricus (vivante ou viable) à au moins 4E9 cfu/g. io Les ferments concentrés selon l'invention sont obtenus par inoculation massive d'un substrat qui est un milieu de culture (destiné à la propagation cellulaire). Un exemple de mode de réalisation de concentrés congelés (sous forme de granules) est décrit en exemple 2 ci-dessous. Ce milieu de culture comprend généralement du lait et/ou des composants 15 du lait, mais comprendra généralement également un ou plusieurs agents ou substances destinés à favoriser et/ou stimuler la croissance de la ou des souches inoculées. On trouvera ainsi généralement dans un milieu de culture destiné à la fabrication des ferments concentrés selon l'invention de l'extrait de levure 20 et/ou des levures lysées, et/ou du sulfate de manganèse, et/ou du sulfate de magnésium, et/ou des peptones. Un milieu de culture destiné à la fabrication des ferments concentrés selon l'invention pourra comprendre un ou plusieurs agents tensio-actifs et/ou émulsifiants et/ou agents solubilisants et/ou détergents, tels que le 25 polyoxyethylene-sorbitan-20-monooleate (aussi connu sous le nom de polysorbate 80, ou de Tween 80). Un milieu de culture destiné à la fabrication des ferments concentrés selon l'invention pourra comprendre des composés qui ne sont pas d'origine laitière, tels que par exemple des extraits de viande. 30 De préférence, ladite au moins une souche de S. thermophilus contenue dans un ferment concentré de l'invention est une souche de S. thermophilus dite de type cassante, qui ne produit pas d'exopolysaccharides (EPS), ou qui n'en produit qu'à des teneurs tellement faibles qu'un milieu à base de lait (lait, ou milieu pour lait fermenté modèle ; cf. exemple 8), après culture de cette souche à une température de 40 C jusqu'à un pH de 4,7, présente une viscosité de Casson à 4 C qui est inférieure ou égale à 500 mPa.s, préférentiellement inférieure ou égale à 400 mPa.s. io Un milieu à base de lait approprié pour une telle mesure de viscosité peut être simplement du lait, ou bien un milieu pour lait fermenté modèle, tel que, par exemple, un milieu composé de 120 grammes de poudre de lait écrémé, 1 gramme de peptide N3 (Vitalarmor 950, Armor protéines), et eau permutée QSP IL. L'exemple 8 ci-dessous présente un exemple détaillé de 15 protocole. Des doses classiques d'inoculation de S. thermophilus peuvent être utilisées (par exemple, ensemencement à 1% v/v)), telles que celles présentées en exemple 8. Avantageusement, ladite au moins une souche de S. thermophilus est la souche de S. thermophilus disponible auprès de la C.N.C.M. sous le 20 numéro de dépôt 1-2130. Toute souche de L. bulgaricus que la personne du métier considère appropriée peut être utilisée. Par exemple, la souche disponible auprès de la CNCM sous le numéro de dépôt 1-1519. 25 Le substrat laitier ensemencé, susceptible d'être obtenu comme produit intermédiaire lors de la mise en oeuvre du procédé de yaourt ou lait fermenté selon l'invention, et/ou lors de la mise en oeuvre du procédé de production de poudre selon l'invention, est également l'objet de la présente 30 demande de brevet. Pour mémoire, le terme substrat laitier est, dans la présente demande, entendu comme signifiant lait au sens où l'entend l'industrie laitière, c'est-à-dire le lait d'origine animale sous toutes ses formes et dans toutes ses variantes de compositions. Un substrat laitier conforme à l'invention est donc essentiellement composé de lait, de sorte à être apte à produire par fermentation lactique un produit répondant à l'appellation de lait fermenté ou yoghourt, destiné à l'alimentation humaine. Le terme substrat laitier n'englobe pas la signification de milieu de culture. Le yaourt ou lait fermenté, susceptible d'être obtenu comme produit final du io procédé de production de yaourt ou lait fermenté selon l'invention, et/ou comme produit intermédiaire du procédé de poudre selon l'invention, est également l'objet de la présente demande de brevet. Ce lait fermenté ou yoghourt peut être produit par fermentation lactique du substrat ensemencé objet de la présente invention 15 Plus particulièrement, la présente demande de brevet est relative à un substrat laitier ensemencé par au moins une souche de S. thermophilus à une concentration d'au moins 5E8 cfu/g, et par au moins une souche de L. bulgaricus à une concentration d'au moins 1E6 cfu/g. Naturellement, toutes 20 les teneurs en S. thermophilus et/ou L. bulgaricus décrites dans la présente demande dans le cadre de la description du procédé selon l'invention s'appliquent au produit intermédiaire, substrat laitier ensemencé, en tant que produit ; et toutes les combinaisons de teneurs se trouvent comprises dans le champ de la présente invention. 25 Préférentiellement, le substrat laitier comprend ladite au moins une souche de S. thermophilus à une concentration d'au moins 1E9 cfu/g. De préférence, ladite au moins une souche de S. thermophilus contenue dans un substrat laitier ensemencé de l'invention est une souche de S. 30 thermophilus dite de type cassante, qui ne produit pas d'exopolysaccharides (EPS), ou qui n'en produit qu'à des teneurs tellement faibles qu'un milieu à base de lait (lait, ou milieu pour lait fermenté modèle ; cf. exemple 8), après culture de cette souche à une température de 40 C jusqu'à un pH de 4,7, présente une viscosité de Casson à 4 C qui est inférieure ou égale à 500 mPa.s, préférentiellement inférieure ou égale à 400 mPa.s. Un milieu à base de lait approprié pour une telle mesure de viscosité peut être simplement du lait, ou bien un milieu un milieu pour lait fermenté modèle, tel que, par exemple, un milieu composé de 120 grammes de poudre de lait écrémé, 1 gramme de peptide N3 (Vitalarmor 950, Armor protéines), et eau permutée QSP IL. L'exemple 8 ci-dessous présente un exemple détaillé de protocole. Des doses classiques d'inoculation de S. thermophilus peuvent être utilisées (par exemple, ensemencement à 10/0 v/v)), telles que celles présentées en exemple 8. Avantageusement, ladite au moins une souche de S. thermophilus est la 15 souche de S. thermophilus disponible auprès de la C.N.C.M. sous le numéro de dépôt 1-2130. Toute souche de L. bulgaricus que la personne du métier considère appropriée peut être utilisée. Par exemple, la souche disponible auprès de 20 la CNCM sous le numéro de dépôt 1-1519. Un autre produit susceptible d'être obtenu lors de la mise en oeuvre d'un procédé selon l'invention est un lait fermenté ou yoghourt qui est obtenu par fermentation lactique du substrat laitier ensemencé. 25 Il présente globalement les mêmes caractéristiques que le substrat ensemencé en termes de teneurs et natures en S. thermophilus et L. bulgaricus. Naturellement, le lait fermenté ou yoghourt susceptible d'être obtenu lors de la mise en oeuvre du procédé selon l'invention présente des teneurs en 30 L.bulgaricus et S. thermophilus qui sont légèrement plus fortes que celles du substrat laitier ensemencé dont il provient ; et, suite à la coagulation de caséine qui se produit lors de la fermentation lactique symbiotique, il passera à l'état de gel, comme c'est le cas pour des yaourts classiques. La concentration exceptionnelle en bactéries lactiques constatée en fin de fermentation n'aurait pu être obtenue avec les taux d'ensemencement classiques mis en oeuvre pour les yaourts de l'art antérieur. Plus particulièrement, un lait fermenté ou yoghourt susceptible d'être obtenu comme produit intermédiaire lors de la mise en oeuvre d'un procédé de production de poudre selon l'invention (produit final du procédé de production de yaourt ou lait fermenté selon l'invention) comprend au moins une souche de S. thermophilus à une concentration d'au moins 5E8 cfu/g, et par au moins une souche de L. bulgaricus à une concentration d'au moins 1E7 cfu/g. Naturellement, toutes les teneurs et combinaisons de teneurs en S. thermophilus et/ou L. bulgaricus décrites dans la présente demande dans le cadre de la description du procédé selon l'invention s'appliquent au produit intermédiaire, lait fermenté ou yoghourt, en tant que produit. Préférentiellement, le lait fermenté ou yoghourt comprend ladite au moins une souche de S. thermophilus à une concentration d'au moins 1E9 cfu/g. De préférence, ladite au moins une souche de S. thermophilus contenue dans un lait fermenté ou yoghourt susceptible d'être obtenu comme produit intermédiaire du procédé de production de poudre selon l'invention est une souche de S. thermophilus dite de type cassante, qui ne produit pas d'exopolysaccharides (EPS), ou qui n'en produit qu'à des teneurs tellement faibles qu'un milieu à base de lait (lait, ou milieu pour lait fermenté modèle ; cf. exemple 8), après culture de cette souche à une température de 40 C jusqu'à un pH de 4,7, présente une viscosité de Casson à 4 C qui est inférieure ou égale à 500 mPa.s, préférentiellement inférieure ou égale à 400 mPa.s. Un milieu à base de lait approprié pour une telle mesure de viscosité peut être simplement du lait, ou bien un milieu pour lait fermenté modèle, tel que, par exemple, un milieu composé de 120 grammes de poudre de lait écrémé, 1 gramme de peptide N3 (Vitalarmor 950, Armor protéines), et eau permutée QSP IL. L'exemple 8 ci-dessous présente un exemple détaillé de protocole. Des doses classiques d'inoculation de S. thermophilus peuvent être utilisées (par exemple, ensemencement à 1% v/v)), telles que celles présentées en exemple 8. Avantageusement, ladite au moins une souche de S. thermophilus est la io souche de S. thermophilus disponible auprès de la C.N.C.M. sous le numéro de dépôt 1-2130. Toute souche de L. bulgaricus que la personne du métier considère appropriée peut être utilisée. Par exemple, la souche disponible auprès de 15 la CNCM sous le numéro de dépôt 1-1519. Comme indiqué au chapitre des procédés selon l'invention, on limitera de préférence au minimum le nombre de souches de S. thermophilus et de L. bulgaricus comprises dans les substrats laitiers ensemencés et dans les 20 laits fermentés ou yaourts selon l'invention. Avantageusement, un substrat laitier ensemencé, ou un lait fermenté ou yaourt selon l'invention, comprennent une seule souche de S. thermophilus, qui de préférence est de type cassant, et une seule souche de L. bulgaricus. 25 Un produit final obtenu conformément à l'invention est la poudre de lait fermenté ou de yoghourt. De préférence, ladite au moins une souche de S. thermophilus est 30 contenue dans la poudre selon l'invention sous forme vivante ou viable à une teneur d'au moins 5E8 cfu/g, préférentiellement au moins 1E9 cfu/g, plus préférentiellement au moins 2E9 cfulg, très préférentiellement au moins 3E9 cfu/g. De préférence, ladite au moins une souche de S. thermophilus est contenue dans la poudre selon l'invention sous forme vivante ou viable à une teneur comprise entre 1 E9 cfu/g et 1 E10 cfulg (bornes incluses). De préférence, ladite au moins une souche de L. bulgaricus est contenue dans la poudre selon l'invention sous forme vivante ou viable à une teneur d'au moins 1E4 cfu/g, préférentiellement au moins 2E4 cfu/g, plus préférentiellement au moins 4E4 cfu/g, très préférentiellement au moins 8E4 io cfu/g, encore plus préférentiellement au moins 3E5 cfu/g. De préférence, ladite au moins une souche de L. bulgaricus est contenue dans la poudre selon l'invention sous forme vivante ou viable à une teneur comprise entre 1E4 et 1E5 cfu/g. Toutes les combinaisons de teneur en S. thermophilus et de teneur en L. 15 bulgaricus sont inclues dans le contenu de la présente demande de brevet. Plus particulièrement, une poudre de lait selon l'invention comprend avantageusement au moins une souche de S. thermophilus sous forme vivante ou viable à une concentration d'au moins 5E8 cfu/g, préférentiellement d'au moins 1E9 cfu/g, et au moins une souche de L. 20 bulgaricus sous forme vivante ou viable à une concentration d'au moins 1 E4 cfu/g. Cette forte concentration en S. thermophilus et L. bulgaricus est obtenue sans qu'il ait été nécessaire d'enrichir le yaourt ou lait fermenté à 25 pulvériser. De fait, le procédé de la présente invention propose de produire un yaourt ou lait fermenté qui est déjà lui-même hautement concentré en S. thermophilus et en L. bulgaricus. La poudre conforme à l'invention présente l'avantage de répondre elle-même à l'appellation de yoghourt ou lait fermenté : - elle contient bien plus que la teneur minimale légale en bactéries lactiques vivantes ou viables (cette teneur minimale légale est de 1E7 cfu/g), et - elle résulte d'une symbiose entre S. thermophilus et L. bulgaricus 5 (cf. exemple 3). En sus de l'avantage de constituer en elle-même une source particulièrement riche en L. thermophilus et L. bulgaricus vivants, la poudre selon l'invention a l'avantage de présenter des propriétés de conservation à qui sont particulièrement remarquables. io Dans la poudre selon l'invention, aucune diminution des populations de S. thermophilus et L. bulgaricus vivants ou viables n'est observée au bout de 4 mois de conservation à 5 C ou à 20 C. Par comparaison, les poudres du commerce testées par les inventeurs présentent, dans les mêmes conditions expérimentales, une décroissance 15 de populations qui est détectable à l'échelle du mois. A titre d'exemple, le taux de survie des poudres commerciales est compris entre 47% (Dr Süwelack M/A 5.4 Active) et 74% (EPI PY 48) après 1 mois à 20 C. Ces propriétés et avantages inattendus de la poudre selon l'invention sont 20 illustrés en exemples 5 et 6 ci-dessous. Lorsque la poudre selon l'invention est conservée à 5 C ou à 20 C pendant 6 mois, sa teneur en S. thermophilus et L. bulgaricus vivants ou viables (teneur totale) ne descend pas en dessous de la teneur légale minimale de 1E7 cfu/g. En fait, dans une poudre selon l'invention, la teneur en S. 25 thermophilus et L. bulgaricus vivants ou viables (teneur totale) ne descend pas en dessous de 5E8 cfu/g après 6 mois de conservation à 20 C. La poudre selon l'invention présente des caractéristiques microbiologiques telles qu'elle répond elle-même à l'appellation de yoghourt ou lait fermenté. 30 De préférence, ladite au moins une souche de S. thermophilus contenue dans la poudre selon l'invention est une souche de S. thermophilus dite de type cassante, qui ne produit pas d'exopolysaccharides (EPS), ou qui n'en produit qu'à des teneurs tellement faibles qu'un milieu à base de lait (lait, ou milieu pour lait fermenté modèle ; cf. exemple 8), après culture de cette souche à une température de 40 C jusqu'à un pH de 4,7, présente une viscosité de Casson à 4 C qui est inférieure ou égale à 500 mPa.s, préférentiellement inférieure ou égale à 400 mPa.s. Un milieu à base de lait approprié pour une telle mesure de viscosité peut io être simplement du lait, ou bien un milieu pour lait fermenté modèle, tel que, par exemple, un milieu composé de 120 grammes de poudre de lait écrémé, 1 gramme de peptide N3 (Vitalarmor 950, Armor protéines), et eau permutée QSP 1 L. L'exemple 8 ci-dessous présente un exemple détaillé de protocole. Des doses classiques d'inoculation de S. thermophilus peuvent 15 être utilisées (par exemple, ensemencement à 1% v/v)), telles que celles présentées en exemple 8. Avantageusement, ladite au moins une souche de S. thermophilus est la souche de S. thermophilus disponible auprès de la C.N.C.M. sous le numéro de dépôt 1-2130. 20 Toute souche de L. bulgaricus que la personne du métier considère appropriée peut être utilisée. Par exemple, la souche disponible auprès de la CNCM sous le numéro de dépôt l-1519. 25 Comme indiqué au chapitre des procédés selon l'invention, on limitera de préférence au minimum le nombre de souches de S. thermophilus et de L. bulgaricus comprises dans la poudre selon l'invention. Avantageusement, une poudre selon l'invention comprend une seule souche de S. thermophilus, qui de préférence est de type cassant, et une 30 seule souche de L. bulgaricus. Avantageusement, la poudre de lait fermenté ou de yoghourt selon l'invention présente une Aw (activité de l'eau) à température ambiante (température comprise entre 20 et 26 C environ, par exemple envirion 25 C) qui est inférieure ou égale à 0,3, préférentiellement comprise entre 0,05 et 0,3 (bornes incluses), plus préférentiellement inférieure ou égale à 0,2, très préférentiellement comprise entre 0,1 et 0,2 (bornes incluses), encore plus préférentiellement entre 0,09 et 0,19 (bornes incluses). L'Aw d'une poudre selon l'invention ou d'un aliment comprenant une poudre selon l'invention, tel qu'un fourrage selon l'invention, peut être io mesurée à l'aide d'un hygromètre à point de rosée, tel que l'hygromètre de marque Aqualab , commercialisé par la société DECAGON DEVICES, Pullman, Washington, USA. La présente demande est également relative à toute composition ou 15 produit, contenant au moins une poudre selon l'invention. La présente demande est plus particulièrement relative à tout produit alimentaire contenant au moins une poudre selon l'invention. La poudre de yoghourt produite selon l'invention peut être incorporée 20 aisément dans une formulation de fourrage anhydre. En tant que produit alimentaire, la présente demande vise plus particulièrement un fourrage alimentaire qui contient au moins une poudre selon l'invention. Les inventeurs ont observé que lorsque la poudre selon l'invention est 25 dispersée et/ou incorporée dans un fourrage alimentaire gras et essentiellement anhydre, le taux de survie des souches de ferments lactiques présentes n'est pas significativement différent de celui observé lorsque la poudre est conservée seule (poudre pure, hors de tout mélange). Le fourrage alimentaire de l'invention est donc préférentiellement un 30 fourrage essentiellement anhydre. Par fourrage essentiellement anhydre, on entend une suspension concentrée de poudres et particules solides dans une phase continue composée de matières grasses plus moins cristallisées. Le terme "fourrage" englobe notamment les différents types de chocolats (noir, blanc et au lait) et les pâtes à glacer. Un exemple avantageux de fourrage essentiellement anhydre est un fourrage gras. Un fourrage gras et essentiellement anhydre est constitué de poudres hydrophiles dispersées dans une phase continue composée d'un mélange de matières grasses plus ou moins cristallisées. La quantité d'eau io dans un fourrage anhydre est uniquement celle associée aux poudres hydrophiles mises en oeuvre. Cette teneur est inférieure à environ 2 à 3%, mais non totalement nulle, d'où l'expression de fourrage gras et essentiellement anhydre. 15 Un fourrage conforme à l'invention peut être contenu dans et/ou sur un produit alimentaire, par exemple un biscuit, une confiserie. La texture d'un fourrage dépend de : 1) l'état physique de la phase continue (matières grasses fondues ou au 20 contraire cristallisées), 2) de la fraction volumique occupée par les particules, 3) de leur distribution granulométrique et 4) de la présence éventuelle d'émulsifiants, molécules tensio-actives lubrifiant les interactions entre les particules solides. 25 Quand la teneur en matières grasses est supérieure à 40% et que la granulométrie des poudres est largement supérieure au micron, le premier facteur est prédominant. L'état physique de la phase continue est fonction de la nature des matières grasses (et notamment leur teneur en 30 triglycérides saturés) et de la température. Ainsi, il est possible de formuler 20 un fourrage se présentant sous la forme d'un liquide fluide à 40 C et d'un solide dur et cassant à 20 C. Ce changement d'état du fourrage induit par la température permet 5 d'obtenir une grande diversité dans les applications, qui peuvent se décliner en 3 grandes catégories : 1. application en "sandwich", c'est-à-dire sous forme d'une couche déposée entre deux bases céréalières au sens large, telles que : Io 1.1. des biscuits secs, dont la forme peut être ronde comme les Prince de Lu, rectangulaire comme les Petit Ecolier de Lu ou encore carrée 1.2. des gaufrettes, auquel cas plusieurs fine couches de fourrage et de base céréalière sont superposées de façon à obtenir le produit 15 final. Une formulation typique pour ce type d'application est la suivante : Tableau 1 : Ingrédient % mis en oeuvre dans le fourrage (% w/w) Matière grasse végétale (coprah hydrogéné 43,9% 32) Dextrose 7,2% Sucre glace 37,2% Lactosérum doux 1,5% Poudre de yoghourt selon l'invention 10,2% TOTAL 100% Les matières grasses végétales sont un mélange de palme, coprah hydrogéné et palmiste hydrogéné dans des proportions variant entre 0 et 100%. Un procédé typique de réalisation est le suivant : Le fourrage est réalisé par dispersion des poudres dans un mélangeur de type Hobbart de matières grasses partiellement cristallisé à une température d'environ 30 C. Un temps de mélange de 5 minutes à forte io vitesse est suffisant pour obtenir un mélange homogène de consistance relativement fluide. Ce fourrage est ensuite convoyé à l'aide de conduites thermostatées vers une doseuse de type Manifold. Un volume donné de fourrage est déposé à la surface d'un biscuit, un second biscuit est ensuite positionné à la surface du fourrage. Le sandwich passe ensuite dans un 15 tunnel de refroidissement où il subit un refroidissement à environ 1 C/min jusqu'à une température de sortie de l'ordre de 18 C : le sandwich est alors suffisamment soudé et cohésif pour être conditionné. 2. application sous forme de couche uniforme à la surface d'un produit 20 céréalier : 2.1. le fourrage peut par exemple être déposé au centre du produit céréalier, qui peut prendre la forme d'une tartelette ronde de type Mini Rollos de Lu, d'un biscuit carré de type Milk Break de 25 Lu, ou d'une génoise de type Barquette de Lu. On obtient comme dans le cas précédent un dépôt central de fourrage, mais davantage visible. 2.2. Alternativement, le produit céréalier peut être "bottomé" c'est-à-dire 30 recouvert sur sa face inférieure d'une couche de fourrage, par un 41 procédé de trempage à l'état liquide suivi d'un refroidissement destiné à figer à la couche de fourrage. 2.3. Une autre application possible consiste en un enrobage complet du produit céréalier par une couche de fourrage. Cette couche uniforme est obtenue en faisant passer le produit céréalier sous un "rideau" de fourrage liquide, qui recouvre le haut et les côtés du produit d'une couche de fourrage, l'enduction de la face inférieure étant assurée par un "bottomage" comme décrit en 2.2. Io 2.4. La couche uniforme de fourrage peut également être moulée : le fourrage liquide est déposé dans un moule, puis refroidi afin de réaliser une coque solide, qui peut ensuite être associée avec une barre céréalière. Ceci permet de réaliser un produit avec un 15 excellent état de surface (lisse) et rend possible un marquage en surface. La formule de fourrage donnée dans l'application 1 convient pour ces applications. Une autre formule possible est donnée dans le tableau 2 ci-20 dessous. Dans ce second exemple de formulation de fourrage, la poudre de yoghourt est ajoutée directement à une pâte à glacer commerciale (Blanche référence G-PR3040-105 de Barry-Callebaut). Tableau 2 : % mis en oeuvre dans le INGREDIENT fourrage (% w/w) Matière grasse végétale 30% Sucre glace 40% Poudre de yoghourt selon l'invention 30% TOTAL 100% 25 3. application sous forme de "décor" en surface ou dans la masse du produit : Le fourrage peut être déposé sous forme de fils ou de stries à la surface du produit. La technologie de dépose est très similaire au cas 2.3., à l'exception que la dépose "feuille" (sheeting) ou "queue de carpe" générant un rideau continu est remplacée par des buses produisant des filaments de fourrage. lo Les différentes applications fourrage, et plus généralement biscuits, confiserie, de la poudre selon l'invention ont notamment en commun les points suivants : • De préférence, la poudre est dispersée dans un milieu anhydre, dont la teneur en eau est très faible (uniquement eau ajoutée par les poudres). 15 Les évaluations de viabilité détaillées dans l'exemple 6 ci-dessous confirment que la survie des ferments est comparable dans un milieu de ce type à celle observée pour la poudre initiale. • De préférence, le fourrage est combiné au produit céréalier après cuisson. L'élevation de température à laquelle sont soumis les ferments 20 ne dépasse pas une température de l'ordre de 35 C à 40 C, pendant une durée de l'ordre de quelques heures au maximum. La bonne stabilité thermique des poudres de l'invention a été validée après plus de deux semaines (soit 340 h) à 35 C. L'impact du procédé d'incorporation de la poudre dans le fourrage sur la viabilité des 25 ferments est donc négligeable. • De préférence, le fourrage est combiné à un produit céréalier de faible humidité résiduelle, tel que des biscuits secs, gaufrettes ou flocons/particules de céréales. Les échanges d'eau entre fourrage anhydre et produit céréaliers sont donc limités, ce qui garantit une 30 bonne survie des ferments. • Du fait de la richesse en ferments des poudres, le produit de biscuiterie ou confiserie obtenu au final possède un "équivalent yoghourt" (en terme de flore lactique) compris entre 1 et 10 : par exemple, le produit fini peut contenir 35% de fourrage à 10% de poudre de yoghourt, soit 3,5% de poudre de yoghourt à 3.109 ferments, ce qui représente 108 ferments/g. Pour un produit fini de 15g, cela représente 1,5 109 ferments, soit l'équivalent de la quantité de ferments contenue dans un yoghourt (=1,25 109 ferments). - par exemple, le produit fini peut contenir 67% de fourrage à 30% de io poudre de yoghourt, soit 6.108 ferments. Pour une barre de 22g, le même calcul donne 10 "équivalent yoghourt", c'est-à-dire 10 fois la quantité de ferments contenus dans un yoghourt classique. La présente demande est plus particulièrement relative à un biscuit qui 15 comprend au moins une poudre selon l'invention, et/ou au moins un fourrage selon l'invention. Par biscuit, on entend dans la présente demande les produits de cuisson céréaliers comprenant une pâte obtenue à partir d'un mélange comprenant en proportions variables une ou plusieurs farines de céréales ou de 20 légumineuse, ou de fractions de céréales ou de légumineuse, de la matière grasse ainsi qu'un ou plusieurs sucres, ces derniers pouvant cependant n'être qu'en quantités négligeables ou nulles pour certaines variétés de produits tels que crackers ou biscottes. 25 La poudre selon l'invention peut également être utilisée dans la fabrication d'une confiserie. La présente demande vise donc une confiserie qui comprend au moins une poudre selon l'invention, et/ou au moins un fourrage selon l'invention. Dans la présente demande, toutes les teneurs en bactéries lactiques qui sont données sont les teneurs de ces bactéries lactiques sous forme vivante ou viable. Dans la présente demande, le terme "comprenant", avec lequel "incluant" ou "contenant" est synonyme, est un terme ouvert, et n'exclut pas la présence d'un ou plusieurs élément(s), ingrédient(s) ou étape(s) de méthode additionnel(s) qui ne serait(seraient) pas explicitement indiqué(s), tandis que le terme "consistant" ou "constitué" est un terme fermé, qui io exclut la présence de tout autre élément additionnel, étape, ou ingrédient qui ne serait pas explicitement exposé. Le terme "consistant essentiellement" ou " essentiellement constitué" est un terme partiellement ouvert, qui n'exclut pas la présence d'un ou plusieurs élément(s), ingrédient(s) ou étape(s) additionnel(s), dans la mesure où ce(s) 15 élément(s), ingrédient(s) ou étape(s) additionnel(s) n'affecte(nt) pas matériellement les propriétés de base de l'invention. Par conséquent, le terme "comprenant" (ou "comprend(comprennent)") inclut les termes "consistant", "constitué", aussi bien que les termes "consistant essentiellement" et " essentiellement constitué". 20 Dans la présente demande, la CNCM ou C.N.C.M. est la Collection Nationale de Cultures de Microorganismes ; Institut Pasteur ; 25 rue du Docteur Roux ; F-75724 PARIS Cedex 15 ; France. 25 Exemples Dans les exemples qui suivent, ST signifie Streptococcus thermophilus,, et LB signifie Lactococcus bulgaricus. 30 Exemple 1 : fabrication d'une poudre de yaourt conforme à l'invention 1. Préparation du substrat laitier pour la fabrication de la masse yoghourt ou lait fermenté à haute concentration cellulaire : On prépare un substrat laitier dont la fermentation permettra de produire la 5 masse yoghourt ou lait fermenté souhaitée. Par exemple, pour produire un yoghourt, on peut préparer un mix laitier (= substrat laitier) comme suit : - incorporation de poudre de lait écrémé dans du lait 0% de matière grasses de sorte à obtenir un extrait sec de 20% (par exemple, pour un lo lait écrémé à 8,8% d'extrait sec, incorporer 12,8% de poudre à 96,2 0/0 d'extrait sec) ; laisser le mix se réhydrater 30 minutes à 4 C sous agitation douce ; - pasteurisation du mix à 95 C avec un chambrage de 10 minutes ; - refroidissement de la masse jusqu'à 38 C. 15 2. Réalisation du ferment nécessaire à la fabrication de la masse yoqhourt ou lait fermenté, à haute concentration bactérienne : Pour réaliser un produit répondant à l'appellation yoghourt, il est nécessaire 20 de sélectionner au moins une souche de ST, et au moins une souche de LB, à titre de ferments lactiques. On sélectionne alors de préférence au moins une souche de ST et au moins une souche de LB qui ont une capacité de propagation sur substrat laitier telle qu'elles permettent de produire un/des ferment/s d'inoculation à 25 haute densité, et plus particulièrement des ferments dont la population en ST ou le cas échéant en LB, ou bien un ferment dont chacune des populations en ST et LB, est : - égale ou supérieure à 3E10 ufc/g pour S. thermophilus, égale ou supérieure à 1E9 cfu/g pour L. bulgaricus, pour des ferments sous forme 30 congelée, ou égale ou supérieure à 1E1 1 ufc/g pour S. thermophilus, égale ou supérieure à 4E9 cfu/g pour L. bulgaricus, pour des ferments sous forme lyophilisée. Pour réaliser la masse yoghourt ou lait fermenté qui, conformément à l'invention, est destinée à être pulvérisée, sont sélectionnées parmi les souches de bactéries lactiques adaptées à la fabrication du yoghourt ou lait fermenté souhaité, celles qui, de préférence, produisent peu ou pas d'exopolysaccharides (EPS). io Un critère de sélection complémentaire ou alternatif peut ainsi consister à sélectionner au moins une souche de ST et/ou au moins une souche de LB qui produit(produisent) peu ou pas d'exopolysaccharides (EPS). Ce critère de faible production d'EPS s'applique plus particulièrement au cas des souches de ST. 15 Des exemples de souches de ST et LB appropriées comprennent par exemple : pour ST, la souche accessible auprès de la C.N.C.M sous le numéro de dépôt 1-2130, pour LB, la souche accessible auprès de la C.N.C.M sous le numéro de 20 dépôt 1-1519. Si nécessaire et/ou souhaité, la(les) souche(s) de bactérie(s) lactique(s) sélectionnée(s) est(sont) revivifiée(s), par repiquage(s) sur milieu de culture. 25 Dans le cadre d'une production industrielle, la ou les souches lactiques sélectionnées sont ensuite de préférence conditionnées sous forme de ferment lyophilisé, ou sous forme de ferment congelé (par exemple, en suivant le protocole de production de granules congelés décrit ci-dessous 30 en exemple 2). Pour sélectionner une souche de ferment lactique qui ne produit pas ou peu d'exopolysaccharides (EPS), une méthologie adaptée comprend la mesure de la viscosité du lait fermenté obtenu par fermentation d'un substrat laitier à l'aide de la (ou des) souche(s) candidate(s), tel que par s exemple un yaourt produit à l'aide de la(les) souche(s) candidate(s). La méthode de mesure de viscosité dans le cadre de l'industrie laitière permet de déterminer si la(les) souche(s) mise(s) en oeuvre pour la fermentation du lait donne(nt) un lait fermenté à texture filante (viscosité importante), si elle(s) est(sont) de type texturant (viscosité moyenne), ou io bien si elle(s) donne(nt) un lait fermenté à une texture cassante (viscosité faible). La méthode de mesure de viscosité d'un lait fermenté comprend la mise en oeuvre d'un viscosimètre réfrigéré et équipé d'un système permettant d'appliquer un gradient croissant et décroissant de cisaillement au lait 15 fermenté, tel que le viscosimètre Mettler RM 260 réfrigéré et équipé d'un système coaxial de type DIN 145. Ce système rotatif permet d'observer une déstructuration du produit en fonction d'un gradient de cisaillement linéaire, soit une contrainte à un gradient donné. Brièvement, cette méthode comprend : 20 - la culture de la (ou des) souche(s) lactique(s) candidate(s) à une température de 40 C jusqu'à un pH de 4,7 sur un milieu de culture approprié, tel que le milieu pour lait fermenté modèle composé de 120 grammes de poudre de lait écrémé, 1 gramme de peptide N3 (Vitalarmor 950, Armor protéines), et eau permutée QSP IL, [si 25 souhaité, plusieurs lots de laits fermentés peuvent être produits dans des conditions identiques de sorte à disposer de plusieurs exemplaires comparables], [Des doses classiques d'inoculation de S. thermophilus peuvent être utilisées (par exemple, ensemencement à 1% v/v)), telles que celles présentées en exemple 8], si le(s) lait(s) fermenté(s) modèle(s) obtenu(s) est(sont) un(des) produit(s) ferme(s), ce(s) lait(s) fermenté(s) est(sont) de préférence agité(s) manuellement à l'aide d'une spatule durant une minute, l'incubation à 4 C pendant 30min du(des) milieu(x) fermenté(s), ou d'au moins un échantillon prélevé de ce(s) milieu(x) fermenté(s), les mesures de viscosité sont réalisées à 4 C, à l'aide d'un viscosimètre Mettler RM 260 réfrigéré et équipé d'un système coaxial de type DIN 145. Le produit subit un gradient de cisaillement croissant de 0 à 20 s-1 pendant Io 1 minute. Cette phase correspond à la rampe montante. Puis, il subit un gradient de cisaillement décroissant de 20 à 0 s-1 pendant 1 minute, correspondant à la rampe descendante. Les résultats sont obtenus sous forme d'une courbe d'écoulement en continu, avec rampe montante et rampe descendante entre 0 et 20 s-1. 15 La Figure 1 présente les trois types majeurs de courbes d'écoulement : - le type de courbe obtenu à l'aide de la souche 001 010 correspond à une souche qui donne un lait fermenté à texture filante(viscosité importante), le type de courbe obtenu à l'aide de la souche 001 098 correspond à 20 une souche qui est de type texturant (viscosité moyenne), le type de courbe obtenu à l'aide de la souche TS 10B (société DSM Food specialties Dairy ingredients ; BP 1 ; 2600 MA Delft ; PAYS BAS) correspond à une souche qui donne un lait fermenté à une texture cassante (viscosité faible). 25 Les mesures obtenues sont ajustées par application du modèle mathématique de Casson, de sorte à obtenir la viscosité de Casson. Le modèle de Casson est formulé par l'équation suivante (équation 1): ,lz = + .JJ]x D (1) r : Contrainte (Pa) ip : Seuil d'écoulement du produit (Pa) [Seuil4] 17: Viscosité du produit (Pa.$) [V4] D : Gradient de cisaillement (s-1) Cette modélisation est suivie du tracé d'une droite de régression linéaire sur la partie descendante de la courbe ; elle permet de relever deux paramètres importants : - le seuil d'écoulement du produit to, correspondant à l'ordonnée à l'origine, - la viscosité ri du produit, correspondant à la pente de la droite de io régression. La Figure 2 illustre la détermination du seuil d'écoulement -co et de la viscosité rl d'un lait fermenté à l'aide de la souche 001 098, sur la courbe descente d'écoulement modélisée par Casson. 15 3. Fabrication de la masse yoghourt à haute concentration bactérienne : La masse yoghourt ou lait fermenté est fabriquée par inoculation du substrat réalisé en 1. à l'aide de la ou des souches de bactéries lactiques sélectionnées en 2., et conduite de la fermentation lactique. 20 Par exemple, pour produire une masse yoghourt : - ensemencer le mix élaboré en 1. avec 20g/L de ferments concentrés préparés en 2. en suivant la composition suivante : 95% de concentrés congelés présentant une population de ST à au moins 3E10 cfu/g, plus 25 5% de concentré de LB à au moinslE9 cfu/g ; fermenter à 38 C pendant 3h à 4h pour un arrêt de fermentation à pH = 4,8 +1- 0,2 unité pH ; arrêt de la fermentation par refroidissement et lissage sur une plateforme type SRI 0 ; stockage de la masse à 4 C jusqu'à 10 jours maximum. s 4. Fabrication de la poudre de lait fermenté ou yoghourt : La masse yoghourt ou lait fermenté obtenue à l'issue du point 3. ci-dessus est séchée en conditions douces, de sorte à : - atteindre une Aw (mesurée à température ambiante, c'est-à-dire à Io une température comprise entre 20 et 26 C environ, par exemple à environ 25 C) qui soit inférieure ou égale à 0,3, préférentiellement comprise entre 0,05 et 0,3 (bornes incluses), plus préférentiellement inférieure ou égale à 0,2, très préférentiellement comprise entre 0,1 et 0,2 (bornes incluses), encore plus préférentiellement entre 0,09 et 0,19 (bornes incluses), 15 - tout en maintenant le maximum de cellules de ST et LB vivantes ou viables (c'est-à-dire limiter au maximum la perte en cellules vivantes ou viables). Les mesures d'Aw ( water activity ) sont réalisées conformément à la pratique de la personne du métier pour des produits alimentaires. L'Aw 20 peut par exemple être mesurée à l'aide d'un hygromètre à point de rosée, tel que l'hygromètre de marque Aqualab , commercialisé par la société DECAGON DEVICES, Pullman, Washington, USA. Un échantillon de quelques grammes de poudre (ou, le cas échéant, de fourrage comprenant une poudre selon l'invention) est introduit dans une 25 coupelle de mesure. La coupelle est ensuite positionnée dans une chambre de mesure thermostatée. L'humidité de l'air surmontant la poudre (ou, le cas échéant, le fourrage) est analysée en quelques minutes, puis comparée automatiquement avec l'humidité surmontant l'eau pure à la température de mesure. Le ratio des deux humidités relatives, appelé 30 Activité de l'eau (Aw), est ensuite affiché par l'appareil au bout des quelques minutes nécessaires à l'équilibration de l'enceinte. Des exemples de procédés de séchage doux appropriés comprennent le séchage par lyophilisation, le traitement sur lit fluidisé, et le séchage par atomisation douce, par exemple une atomisation avec une température de s sortie inférieure ou égale à 100 C, de préférence inférieure ou égale à 80 C, plus préférentiellement inférieure ou égale à 60 C. Un exemple de procédé de séchage par atomisation douce est décrit en exemple 3 ci-dessous. 10 Le procédé de séchage utilisé ne doit pas ajouter à la poudre des produits non utilisables en alimentation humaine, et/ou non utilisables pour une appellation de yoghourt. La liste de tels produits non désirés peut varier selon la législation des pays concernés. Pour une poudre destinée à une consommation en France ou en Espagne sous l'appellation de yoghourt, le 15 procédé ne doit pas ajouter de maltodextrines à la poudre produite. On obtient une poudre selon l'invention, qui a une très forte teneur en bactéries lactiques vivantes ou viables, et plus particulièrement dans le cas de la masse yoghourt décrite, une très forte teneur en ST et LB vivants ou 20 viables, et qui n'est pas contaminée par des germes non désirés en alimentation humaine. La poudre produite conformément à l'invention à partir d'une masse yoghourt répond alors elle-même à l'appellation de yoghourt. 25 La poudre ainsi obtenue présente l'exceptionnelle capacité de pouvoir être conservée pendant plusieurs mois à température ambiante sans perte significative en bactéries lactiques vivantes ou viables, ou à tout le moins sans perte significative en ST et de LB vivants ou viables. Plus particulièrement, la poudre selon l'invention présente l'exceptionnelle 30 capacité de pouvoir être conservée pendant plusieurs mois à température ambiante (environ 20 C), sans que sa teneur en LB et/ou ST vivants ou viables ne descende au-dessous du seuil minimal en ST+LB requis par l'appellation yoghourt, à savoir sans descendre à une population en ST+LT vivants ou viables qui serait inférieure à 10E7 ufc/g. A 35 C, on observe une diminution lente et progressive de la flore lactique s avec le temps : au bout de 2 semaines à cette température, les taux de survie sont compris entre 25% et 60% pour les S. thermophilus, c'est-à-dire que l'on obtient à la fin de ce stockage entre 1,5E8 cfu/g et 1,5E9 cfu/g, ce qui reste élevé. Le taux de survie est plus faible pour les L. bulgaricus, de l'ordre de 2 à 5%, d'où des teneurs entre 2E2 cfu/g et 2E3 cfu/g. On observe io également que la vitesse de mortalité à 35 C de la flore totale des poudres de l'invention est équivalente à celles de poudres de l'art antérieur à 5 C ou 20 C, conditions de conservation considérées comme idéales par l'homme de l'art. 15 La poudre produite présente une granulométrie appropriée à sa destination (reconstitution de yaourt répondant à l'appellation de yaourt, utilisation comme ingrédient pour la fabrication d'un fourrage alimentaire, ou plus généralement comme ingrédient pour la fabrication d'un produit alimentaire). Elle peut par exemple présenter une granulométrie de 10 à 20 500 micromètres, de préférence entre 10 et 300 micromètres. Exemple 2 : fabrication de concentrés congelés à haute densité en ferment lactique (ST et/ou LB à chacun au moins 5E10 cfulq) 25 1. Préparation de l'inoculum : - sélectionner au moins une souche de LB et/ou au moins une souche de ST faible(s) ou non productrice(s) d'EPS, par exemple la souche C.N.C.M. 1-2130 de ST et/ou la souche 1-1519 de LB, 30 - revivifier la ou les souche(s) sélectionnée(s) par trois repiquages successifs sur un milieu de culture adapté aux bactéries lactiques, tel que lait plus extrait de levure (poudre de lait écrémé de 90 à 140g plus extrait de levure en poudre de 0,5 à 3g QSP 1 kg avec de l'eau distillée, stérilisation 121 C 15 minutes) : - ensemencement à 1%, incubation à 40 C pour une ou les s souche(s) de ST, à 44 C pour la ou les souche(s) de LB, - arrêt des repiquages par refroidissement (4 C) après la prise (gélification du lait) ; - ensemencer à l'aide du dernier repiquage (1%), 200ml de M17 (bouillon commercialisé par Biokar Diagnostics, référence BK 0888HA) à 40 C (pour io ST), 200m1 de MRS (bouillon commercialisé par Serlabo, référence BD-288130 (0881-17)) à 44 C (pour LB) ; - faire un suivi de densité optique sur un spectrophotomètre à 660 nanomètres - arrêt de la croissance bactérienne de l'inoculum par le froid (4 C) après 15 obtention de la fin de phase exponentielle de croissance (environ 4h à 4h30 dans de bonnes conditions). 2. Préparation du fermenteur (Exemple : Type BIOSTAT ED) : 20 Choix de la normalité de la base de régulation - ST : solution de NaOH 6N, - LB : solution de NaOH 2N, Stérilisation en autoclave 121 C 15 minutes : 25 - système d'admission de base et d'inoculation, - solution de base, - rotor et bol de la centrifugeuse, - connexions du fermenteur vers la centrifugeuse, -connexions pour récupérer le surnageant stérile vers un flacon, 30 -connexion de la bouteille de concentré stérile vers l'azote (tuyaux+aiguille). lo 15 Etalonnage de la sonde pH ; Stérilisation du fermenteur : - le remplir d'eau ultra pure, - programmer un cycle de stérilisation in situ (121 C 20 minutes). 3. Préparation du milieu de culture : - utilisation d'eau distillée, - peser les différents composés du milieu (voir recettes ci-dessous), - hydratation 30 min sous agitation, -stérilisation en autoclave (121 C 15 minutes), - refroidissement à 4 C : 40 C (ST), 44 C (LB), - transfert du milieu de culture dans le fermenteur de façon aseptique. 20 Milieu de propagation ST - Eau distillée - Perméat d'ultrafiltration 50g/L - Extrait de levure 10g/L - Sulfate de manganèse 0,1 g/L - Poudre de lait écrémé 10g/L pH de départ 6,5 Milieu de propagation LB - Eau distillée -Perméat d'ultrafiltration 50g/L - Extrait de levure 15g/L - Sulfate de manganèse 0,1 g/L - Tween 80 pH de départ 6, 5 25 30 4. Lancement de la propaqation : - ensemencement du fermenteur avec l'inoculum à raison de 100mI pour 6 litres - lancement du programme fermenteur permettant de réguler la température, réguler le pH via les solutions de soude, agiter le milieu de culture, enregistrer le pH, la température et le volume de soude délivré. . Arrêt de la propagation : Les données sur le volume de soude délivré durant la fermentation pour réguler le pH, sont traitées pour obtenir une courbe du cumul du volume de soude consommé en fonction du temps, puis pour obtenir une courbe de vitesse de consommation de soude en fonction du temps. Le point maximum de cette dernière courbe correspondant au moment où l'on doit arrêter la propagation par refroidissement du fermentat. i0 6. Centrifugation à froid (exemple : Rotor a flux continu 8575) : - prélèvement du fermentat par pompe péristaltique, et alimentation du bol de la centrifugeuse, 15 - vitesse : 13 000 rpm (ST), 10 000 rpm (LB), -récupération d'une partie du surnageant dans un flacon stérile, - après centrifugation, diluer le culot obtenu avec du surnageant, jusqu'à ce qu'il soit pipetable, le transférer dans une bouteille stérile préalablement refroidi (travailler sous hotte à flux laminaire, maintenir le concentré à des 20 températures inférieures à 10 C ), 7. Congélation (travailler sous hotte à flux laminaire, manipulation aseptique, maintenir le concentré à des températures inférieures à 10 C) : 25 - raccordement de la bouteille de culot dilué à une pompe péristaltique à l'aide d'un tuyau souple de petite section dont l'autre extrémité est reliée à un système permettant la connexion avec plusieurs aiguilles de seringue, - disposer un bac isotherme rempli d'azote liquide sous les aiguilles, - démarrer la pompe péristaltique et régler le débit pour obtenir un gouttage 30 régulier du concentré dans l'azote liquide, 55 -récupérer et conditionner les granulés stérilement puis les conserver à û 80 C ; 7. Contrôle des granulés concentrés congelés : Après avoir fait fondre rapidement des granulés, effectuer un dénombrement (ST ou LB : Méthode FIL117A:1988). Un granulé congelé de S. thermophilus et/ou L. bulgaricus présente une population égale ou supérieure à 3E10 cfulg pour ST, à 1E9 cfu/g pour LB, io respectivement. Exemple 3 : exemple de procédé de séchage doux En Figure 3, est présenté un schéma de dispositif d'atomisation douce 15 adaptée à la fabrication d'une poudre conforme à l'invention. Une pompe haute pression 1 amène le concentré jusqu'aux buses d'atomisation. Par leur faible diamètre de passage, celles-ci génèrent la pulvérisation du produit en un nuage de fines gouttelettes. L'air chaud (dont la température sera préférablement comprise entre 190 et 210 C) est 20 amené lui aussi en haut de la chambre de séchage 2. Le produit et l'air descendent ainsi à co-courant dans l'enceinte et c'est durant ce cheminement qu'a lieu le principal transfert d'eau du produit vers l'air. Pour ces températures d'air, la température du produit n'excédera de préférence pas 80 C au cours du séchage. De par la symétrie de la chambre de 25 séchage, l'air remonte le long des parois, entraînant avec lui les particules de produit de faible diamètre, appelées fines. L'air ainsi chargé en eau et en fines est extrait en haut de la chambre (sa température est alors comprise entre 80 et 90 C) puis traverse une série de cyclones 3, qui du fait de leur géométrie, assurent la séparation air-fines. L'air ainsi 30 débarrassé des fines est extrait et rejeté à l'extérieur par un ventilateur. Un 20 dernier filtre garantit souvent une purification finale de l'air de manière à limiter au maximum les rejets de matière organique dans l'environnement. Les fines quant à elles sont récupérées et réincorporées dans le produit 4, soit au niveau de la chambre de séchage, soit au sommet de la chambre, soit au niveau du lit vibrant externe. Ce choix de niveau de réinjection sera orienté par la granulométrie souhaitée par le producteur. En bas de la chambre de séchage, les granulés rencontrent un air 5 de température moyenne (entre 60 et 80 C) qui assure deux fonctions : la constitution d'un lit fluidisé et la poursuite du séchage. Les granulés, à la lo température de l'air du lit fluidisé, sont extraits de la chambre et cheminent dans un lit vibrant externe 6, qui assure l'achèvement du séchage et le refroidissement de la poudre (jusqu'à une température de 30 C environ) avant son conditionnement. Généralement, un tamis 7 est mis en place à la sortie de ce lit vibrant de 15 manière à écarter les petits blocs formés au cours du séchage. Le produit peut alors être stocké ou conditionné dans la foulée. Exemple 4 : cinétique de fermentation avec ensemencement massif conformément à la présente invention Un mix laitier préparé comme décrit au point 1. de l'exemple 1 ci-dessus est inoculé par une souche de ST (souche CNCM 1-2130) et une souche de LB (CNCM 1-1519). 25 La souche de ST et celle de LB sont ensemencées sous forme de granulés congelés préparés comme décrit à l'exemple 2 ci-dessus. Chaque granulé congelé contient au moins 3E10 cfu/g de ST, et/ou au moins 1E9 cfu/g de LB. Les granulés congelés de ST et LB sont apportés dans le mix laitier, de 30 sorte à y apporter 2,7E9 cfu/g de ST et 1,4E7 cfu/g de LB. Ces doses d'ensemencement sont 10 à 1 000 fois supérieures à celles qui seraient classiquement utilisées lors de la fabrication traditionnel d'un yoghourt ou lait fermenté (de 0,01 g/L à 1g/W. Le pH est mesuré au cours du temps. s La figure 4 présente la cinétique d'acidification obtenue. L'acidification du lait se déroule sur une plus courte période que celle qui serait observée lors de la fabrication d'un yaourt ou lait fermenté classique (c'est-à-dire avec des doses standards d'inoculation), mais la cinétique d'acidification correspond tout à fait à une cinétique de fabrication de io yoghourts ou laits fermentés traditionnels (cinétique de la symbiose ST+LB). La croissance des ferments lactiques est plus faible que celle qui serait observée dans le cadre d'un procédé traditionnel de fabrication de yoghourt ou lait fermenté, mais la population finale en ferments lactiques est bien 15 supérieure. Exemple 5 : comparaison d'une poudre selon l'invention avec des poudres du commerce 20 Les capacités de conservation de la poudre selon l'invention ont été comparées à celles de poudres actuellement disponibles dans le commerce. Une poudre selon l'invention a été produite comme décrit en exemple 1 ci-dessus. 25 Les performances de la poudre selon l'invention ont été comparées à celles des poudres du commerce suivantes : - la poudre M/A 5.4 Active commercialisée par Dr. Otto Süwelack (Joseph-Süwelack Strasse, D-48727 Billerbeck, Allemagne), et la poudre de yaourt maigre 48, commercialisée par EPI (Z.I. de 30 l'Hermitage ; B.P. 108 ; F-44153 Ancenis Cedex ; France). i0 Dans une première série de tests, la survie des ferments lactiques des poudres de yoghourts commerciales et selon l'invention a été évaluée dans différentes conditions de conservation : poudre seule ou incorporation dans un fourrage anhydre, température variant entre 5 et 35 C et temps compris entre 3 jours et 4 mois Le fourrage alimentaire testé est composé de : Tableau 3 : % mis en oeuvre dans le INGREDIENT fourrage (% wlw) Matière grasse végétale (coprah hydrogéné 43,9% 32*) Dextrose 7,2% Sucre glace 37,2% Lactosérum doux 1,5% Poudre de yoghourt selon l'invention 10,2% TOTAL 100% * Coprah hydro 32 = coprah totalement hydrogéné avec un point de fusion de 32 C 15 La mesure du % de LB et/ou ST vivants ou viables a été réalisée selon la méthode FIL officielle. la méthode de mesure des ferments dans le fourrage est strictement la même que les poudres (on prélève 5g dans les 2 cas et on la dilue dans un milieu, comme décrit en exemple 7 ci-dessous). 20 Les résultats sont illustrés par les tableaux 4 et 5 ci-dessous, et par les figures 5 et 6. Tableau 4 : Poudre Suwelack Poudre EPI Poudre selon invention M/A 5.4 Active PY 48 Population 2,9 0.7 10' 1,6 0.2 10' Danone 1 initiale (cfu/g) 8,7 4 109 écart-type Danone 2 : 3,7 1.8 109 Danone 3 : 5,8 3.2 109 Log(population) 7,5 7,2 Danone 1 : 9.9 Danone 2 : 9.6 Danone 3 : 9.8 Tableau 5 : Poudre Dr Poudre EPI PY Poudre selon Süwelack M/A 48 invention 5.4 Active Population 1,4. 10' 1,2 10' Danone 1 résiduelle 8,7 4 109 à 4 C et 1 mois Danone 2 : 3,7 1,8 109 Danone 3 : 5,8 3,2 109 % survie 47 7% 74 18% Danone 1 : 100% à 4 C et 1 mois Danone 2 : 100% Danone 3 : 100% Population 8,7 106 Danone 1 résiduelle 8,7 4 109 à 20 C et 1 Danone 2 : 60 mois 3,7 1,8 109 Danone 3 : 5,8 3,2 109 % survie Danone 1 : 100% à 20 C et 1 30 2% - Danone 2 : 100% mois Danone 3 : 100% Population Danone 1 : 2,5 109 résiduelle 103 4,4 103 Danone 2 : 2,1 109 à 35 C et 2 Danone 3:1,4 109 semaines % survie Danone 1 : 29 8% à 35 C et 2 0,004% 0,4% Danone 2 : 58 4% semaines Danone 3 : 24 5% Exemple 6 : comparaison d'une poudre selon l'invention avec des poudres du commerce A la suite des tests décrits en exemple 5, ont été comparées les évolutions cinétiques des populations de ferments. Trois types de poudres ont été comparées : la poudre poudre M/A 5.4 Active commercialisée par Dr. Otto Süwelack (Joseph-Süwelack Strasse, D-48727 Billerbeck, Allemagne), les poudres EPI PY48 et EPI 905 (société EPI, Z.I. de l'Hermitage ; B.P. 108 ; F-44153 Ancenis Cedex ; France), des poudres selon l'invention, qui sont désignées DANONE 1, DANONE 2, DANONE 3 (trois teneurs différentes en ST+LB). Les poudres selon l'invention ont été produites comme décrit en exemple 1 ci-dessus. Les fourrages ont la même composition que ceux décrits en exemple 5. Les capacités de conservation de ces poudres ont été comparées comme décrit en exemple 5 ci-dessus (% de survie). 1. Comparaison de l'évolution cinétique des populations de 5 ferments : Les populations de Streptococcus thermophilus et Lactobacillus bulgaricus ont été mesurées en fonction du temps et de la température de conservation. La poudre de yoghourt pure, ou le cas échéant, le fourrage anhydre, est io analysée à l'aide de la méthode officielle FIL (cf. exemple 7 ci-dessous). L'évolution des populations est ensuite représentée en fonction du temps, et ajustée (à l'aide d'un solveur Excel ) par un modèle cinétique d'ordre 2, tel que décrit par l'équation (2) : C(t) = Co 1+k•C0•t (2) 15 où C(t) est la population en ferments à l'instant t (g-1), Co est la population initiale (g-1) en ferments, k la constante de vitesse (g.jour-1) et t le temps (jour). Cet ajustement peut être réalisé à la fois sur la population totale (St+Lb), ou sur les populations correspondantes. Cependant, dans la mesure où les 20 poudres du commerce ont une très faible teneur en Lactobacillus, seule l'analyse sur la flore totale a permis une comparaison objective de toutes les poudres. Le tableau 6 suivant montre les résultats obtenus. Dans ce tableau 6, et indiquent les valeurs moyennes des populations initiales et constantes de vitesse respectivement trouvées par 25 l'ajustement de différentes séries de données. Dans le tableau 6 ci-dessous, la notation signifie une valeur moyenne de plusieurs mesures. 63 Tableau 6 : Poudre T( C) ecart-type Log(Co) écart-type Produit k.co Dr Süw. M/A 5.4 5 2,7 1.5 10"10 9,6 10" Dr Süw. M/A 5.4 20 2,9 0.7 10' 7,5 1,4 0.6 10- 4,9 10"2 Dr Süw. M/A 5.4 35 4,4 4 10-6 1,6 102 EPI PY48 5 1,6 0.2 10 7,2 5,7 0.6 10-1â 9,0 10-3 Danone 1 5 - a Danone1 20 - 8,7 4 109 9,9 7,2 10"12 6,2 10 2ùr Danone 1 30 Danone 1 35 1,210"11 1,1 10"1 Danone 2 5 - Danone 2 20 - Danone 2 30 3,7 1.910e 9,6 1,010-12 3,7 10"~- Danone 2 35 1,1.10"11 4,2 10 Danone 3 5 - Danone 3 20 - 5,8 3 109 9,9 9,5 10"12 5,5 10"2-- Danone 3 30 Danone 3 35 3,1 1,8 10"1 Les populations initiales ont déjà été montrées dans la figure 5 et discutées en exemple 5. Les constantes de vitesse reflètent la vitesse de disparition des germes vivants ou viables, donc la cinétique de mortalité. Le facteur dictant cette cinétique est le produit kxCo, qui est multiplicatif du temps dans l'équation (2). La figure 7 montre l'évolution de ce produit en fonction de la température de stockage et pour différentes poudres commerciales et selon l'invention. On retrouve sur la figure 7 que les stabilités des poudres selon l'invention io sont bien supérieures à celles des poudres de l'art antérieur. En particulier, la stabilité à 35 C des poudres selon l'invention est (quasiment) comparable à celles des poudres de l'art antérieur entre 5 C et 20 C, donc dans des conditions de conservations jugées optimales pour l'homme de l'art. 15 De fait, les résultats obtenus sur une poudre seule sont suffisamment comparables à ceux obtenus sur cette même poudre incorporée dans le fourrage ; c'est pourquoi les deux types de résultats sont, lorsqu'ils sont disponibles, présentés en un seul et même groupe de résultat. Ces résultats apportent deux commentaires : • On constate une forte différence dans les populations initiales de ferments : 25 Les concentrations mesurées dans les poudres du commerce sont au moins 100 fois plus faibles que celles mesurées dans une poudre selon l'invention dans les mêmes conditions. La figure 5 illustre les différences de population initiale en ferments (dans cette figure, DANONE 1, DANONE 2 et DANONE 3 sont des poudres de la présente invention, tandis que Dr. 30 Süwelack , EPI PY48 sont des poudres de l'art antérieur). 20 • Les constantes de vitesse sont également très différentes : Avec les poudres de l'art antérieur, la décroissance des populations de ferments est détectable à l'échelle du mois pour des températures de 5 C à 20 C. A 35 C, pour les poudres M/A 5.4 Active de Dr Süwelack, on observe une décroissance quasi-totale des ferments en 2 semaines. Les poudres selon l'invention montrent une stabilité plus importante des populations : à 5 C ou 20 C, aucune diminution significative des populations n'est observée sur une échelle de 4 mois ce qui rend impossible la détermination de la constante k du modèle cinétique. La io figure 6 illustre ce point en montrant l'évolution des populations à 20 C dans les 3 poudres selon l'invention. Les barres d'erreur correspondent à l'incertitude de la mesure qui est de 0,3 log. Une situation similaire est observable à 5 C. 15 A 30 C et 35 C, une légère décroissance des populations contenues dans la poudre selon l'invention est mesurable à l'échelle de la semaine. Les valeurs de constante de vitesse restent néanmoins largement inférieures à celles observées pour les poudres de l'art antérieur, ce qui montre la stabilité très supérieure des ferments dans les poudres générées par 20 l'invention. Ces résultats sont illustrés par la figure 7. En figure 7, DANONE 1, DANONE 2 et DANONE 3 sont des poudres selon l'invention, tandis que Suwelack et EPI sont des poudres de l'art antérieur. La différence de stabilité thermique des flores lactiques peut être quantifiée 25 en considérant le produit de la constante de vitesse k et de la population initiale Co (tableau 2) : en effet, dans le modèle cinétique, le temps est multiplié par le produit kxCo, qui reflète donc bien la vitesse avec laquelle la flore meurt au cours du temps du stockage. La figure 7 montre l'évolution du produit kxCo en fonction de la température de stockage pour les 30 différentes poudres : on observe en particulier que la vitesse de mortalité des ferments dans les poudres Danone à 35 C est quasiment équivalente à celle des poudres commerciales à 5 C (pourtant considérées comme d'excellentes conditions de conservation par l'homme de l'art). On voit qu'à une température équivalente, les poudres selon l'invention présentent une conservation nettement meilleure que celle des poudres de l'art antérieur. Les figures 8A et 8B présentent l'évolution de la population "normalisée" (c'est-à-dire le rapport entre la population à un instant t sur la population initale) en ferments lactiques au cours du temps pour des poudres de l'invention, et pour des poudres selon l'invention. L'échelle de temps correspond aux données des poudres du Dr. Süwelack de l'art antérieur (carrés rouges), ainsi que l'ajustement selon le modèle d'ordre 2 (ligne continue épaisse). Pour toutes les autres séries de points, les données ont été translatées sur l'échelle de temps des données de l'art antérieur à l'aide d'un facteur multiplicatif : par exemple, quand la température augmente, la flore lactique décroît plus rapidement, ce qui peut être compensé graphiquement par l'utilisation d'un facteur multiplicatif supérieur à 1 (exemple, si la population décroît 2 fois plus vite, le facteur "a" vaut 2). Ce facteur multiplicatif est corrélé au produit kxCo montré sur la figure 7. Les données ainsi superposées forment des "courbes maîtresses". On voit ainsi que, quelle que soit la vitesse de décroissance des populations, toutes les séries de données suivent la même évolution cinétique d'ordre 2. Exemple 7: exemple de préparation des échantillons pour dénombrement microbiologique (% de ST et LB vivants ou viables). La poudre selon l'invention, ou le cas échéant le fourrage selon l'invention, peuvent être préparés comme suit, pour mise en oeuvre de la méthode de comptage des souches lactiques présentes. 5 io 15 20 Cette méthode a été développé afin d'optimiser la technique de réhydratation des poudres de yaourt en vu d'un dénombrement des bactéries lactiques présentes. II est également possible d'utiliser cette méthode pour une application sur les fourrages gras. PRINCIPE Réhydratation d'une poudre de yaourt sous sa forme de granulés ou de poudre fine en favorisant l'homogénéisation, le temps de contact avecle diluant, la température d'incubation, afin d'être dans des conditions optimales pour réhydrater la poudre sans faire évoluer la population initiale de ferment lactique contenu dans la poudre de yaourt. REACTIFS Diluant Le Tryptone sel est utilisé pour réaliser des dilutions. MATERIEL - Sac stomacher stérile avec clips de fermeture - Portoir de pesée -Balance précision 0.01g - Cuillère stérile - Stomacher ou homogénéisateur - Bain marie thermostaté et agité - Pipette stérile de 1 ml 25 MODE OPERATOIRE Pesée de l'échantillon Utiliser un sac stomacher stérile sur un portoir de pesée et une balance de précision 0.01g. Peser environ 5 grammes de poudre, noter la quantité exacte. Ajouter 45 grammes de diluant tryptone sel, noter la quantité exacte. Fermer le sac stomacher avec des clips. Homogénéisation préliminaire Homogénéiser le sac au stomacher pendant 10 secondes. Cette étape permet de mettre en suspension la poudre dans le diluant. Incubation Placer les sacs dans un bain marie agité et chauffé à 37 C, pendant 15 exactement 30 minutes. Cette étape permet de chauffer légèrement la poudre qui va naturellement se dissoudre dans le liquide. Homogénéisation 20 Homogénéiser de nouveau le sac au stomacher pendant 2 minutes. Cette étape permet de casser les dernières particules restantes en suspension et de bien mélanger la dilution. Vous obtenez alors une dilution au 1/10ème de l'échantillon. 25 Dénombrement des bactéries lactiques de la poudre de yaourt réhydratée. Appliquer la norme officielle pour le dénombrement des bactéries lactiques : FIL 117B : 1997, Yaourt : Dénombrement des microorqanismes caractéristiques, Technique de comptaqe des colonies à 37 C. 68 EXPRESSION DU RESULTAT Se référer à la norme FIL 117B : 1997 (paragraphe 9) pour l'expression des résultats. Prendre en compte la dilution initiale de l'échantillon dans le sac stomacher. Exemple 8: exemple de préparation de milieu pour mesure de viscosité (sélection de souches de type cassant) io Fabrication des laits fermentés pour les mesures de viscosités : 1. Préparation du mix laitier : - 120 g. de poudre de lait écrémé - 1 g. de peptide N3 (Vitalarmor 950, Armor protéines) pour 1 litre de mix 15 - 930 ml d'eau permutée Laisser 30 minutes le mix à température ambiante, le temps que la poudre de lait se réhydrate. Répartir le mix par volume d'un litre dans des bouteilles, puis les incuber dans le bain-marie une fois l'eau en ébullition. Laisser 35 minutes, 20 le temps d'atteindre 95 C à coeur dans les bouteilles. Régler la température à 95 C et laisser 10 minutes, ce temps correspondant à la pasteurisation du lait. Refroidir les bouteilles en les laissant dans l'eau froide pendant 30 minutes, puis les placer à 4 C pendant une nuit. 25 2. Préparation de l'Inoculum Repiquage de la souche TS10B (société DSM Food specialties Dairy ingredients ; BP 1 ; 2600 MA Delft ; PAYS BAS) au moins 2 fois dans du lait stérilisé plus extrait de levure : 69 - Milieu de repiquage : 135 g de poudre de lait écrémé + 2 g d'extrait de levure (BIOSPRINGER code 180) + 930 ml d'eau permutée, autoclavage 115 C 20' -Ensemencement à 1% - Fermentation à 44 C pendant 3 heures 3. La fermentation Incuber les 4 bouteilles d'un litre de mix à 43 C pendant 45 minutes. Ensemencement : io - répartir les 4 litres de mix dans 2 bouteilles de 2 litres + 0,02 ml de formiate/L de mix - ensemencer les 2 L de mix à 1% (v/v) avec le ferment (voir exemple 2 pour la préparation de ferments concentrés) bien homogénéiser 15 - mettre en pots : 16 pots par produits et les placer à l'étuve à 40 C pour la fermentation • Arrêt de la fermentation à pH 4,70 (possibilité d'utiliser 3 pots) en les plaçant à 4 C pendant une nuit. Les pots de lait fermentés sont stockés à 10 C pendant une semaine. 20 Les mesures de texture ont été réalisées à J8. Revendications 1. Procédé de production d'une poudre de lait fermenté ou de yoghourt, 5 permettant d'obtenir une poudre à haute densité en ferments lactiques sans apport exogène de ferment, ledit procédé comprenant : - l'ensemencement d'un substrat laitier, qui a éventuellement subi un traitement thermique au moins équivalent à la pasteurisation, par io inoculation d'au moins une souche de Streptococcus thermophilus à une concentration d'au moins 5.108 cfu/g, et d'au moins une souche de Lactobacillus bulgaricus à une concentration d'au moins 1.106 cfu/g, pour obtenir un substrat laitier ensemencé, - la fermentation lactique du substrat laitier ainsi ensemencé, de sorte à 15 obtenir un lait fermenté ou un yoghourt, - la pulvérisation du lait fermenté ou yoghourt ainsi obtenu dans des conditions permettant d'obtenir un taux de survie de chacune desdites souches de S. thermophilus et L. bulgaricus, tel que la poudre obtenue contient ladite au moins une souche de S. thermophilus et ladite au moins 20 une souche de L. bulgaricus, sous forme vivante ou viable, à une concentration d'au moins 5.108 cfu/g et d'au moins 1.104 cfu/g, respectivement. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que ladite au moins 25 une souche de S. thermophilus est inoculée dans le substrat laitier à une concentration d'au moins 1.109 cfu/g. 3. Procédé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce que ladite au moins une souche de L. bulgaricus est inoculée dans le substrat laitier à 30 une concentration d'au moins 1.10' cfu/g. 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que ladite poudre de lait fermenté ou yoghourt obtenue comprend ladite au moins une souche de S. thermophilus sous forme vivante ou viable, à une concentration d'au moins 1.109 cfu/g. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que ladite poudre de lait fermenté ou yoghourt obtenue comprend ladite au moins une souche de L. bulgaricus sous forme vivante ou viable, à une concentration d'au moins 1E4 cfu/g, préférentiellement au io moins 2E4 cfulg, préférentiellement au moins 3E4 cfu/g, plus préférentiellement au moins 8E4 cfu/g, très préférentiellement au moins 1E5 cfu/g, encore plus préférentiellement au moins 3E5 cfu/g. 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, 15 caractérisé en ce que ladite pulvérisation du lait fermenté ou yoghourt est menée par lyophilisation, par traitement sur lit fluidisé, ou par atomisation. 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que ladite pulvérisation du lait fermenté ou yoghourt est 20 menée par atomisation avec une température de sortie inférieure ou égale à 80 C. 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que ladite pulvérisation du lait fermenté ou yoghourt est 25 menée dans des conditions de séchage conduisant à une poudre de lait fermenté ou yoghourt qui présente une Aw (activité de l'eau) inférieure ou égale à 0,3. 9. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, 30 caractérisé en ce que ladite pulvérisation du lait fermenté ou yoghourt est menée dans des conditions de séchage conduisant à une poudre de laitfermenté ou yoghourt qui présente une Aw (activité de l'eau) inférieure ou égale à 0,2. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que ladite poudre de lait fermenté ou yoghourt obtenue ne subit aucune perte en S. thermophilus et L. bulgaricus vivants ou viables, après conservation de cette poudre pendant quatre mois à 20 C, sans qu'il y ait apport de S. thermophilus ou L. bulgaricus exogène. io 11. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que ladite au moins une souche de S. thermophilus est une souche de S. thermophilus dite de type cassante, qui ne produit pas d'exopolysaccharides (EPS), ou qui n'en produit qu'à des teneurs tellement faibles qu'un milieu pour lait fermenté modèle composé de 120 grammes 15 de poudre de lait écrémé, 1 gramme de peptide N3, et eau permutée QSP IL, après culture de cette souche à une température de 40 C jusqu'à un pH de 4,7, présente une viscosité de Casson à 4 C qui est inférieure ou égale à 500 mPa.s, préférentiellement inférieure ou égale à 400 mPa.s. 20 12. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que ladite au moins une souche de S. thermophilus est la souche de S. thermophilus disponible auprès de la C.N.C.M. sous le numéro de dépôt 1-2130. 25 13. Produit intermédiaire susceptible d'être produit au cours de la mise en oeuvre du procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, caractérisé en ce qu'il est constitué : - de substrat laitier ensemencé par au moins une souche de S. thermophilus à une concentration d'au moins 5.108 cfu/g, et par au moins 30 une souche de L. bulgaricus à une concentration d'au moins 1.106 cfu/g, ledit substrat laitier étant essentiellement composé de lait, de sorte à êtreapte à produire par fermentation lactique un produit répondant à l'appellation de lait fermenté ou yoghourt, destiné à l'alimentation humaine, ou - d'un lait fermenté ou yoghourt qui contient au moins une souche de 5 S. thermophilus à une concentration d'au moins 5.108 cfu/g, et au moins une souche de L. bulgaricus à une concentration d'au moins 1.10' cfu/g. 14. Produit intermédiaire selon la revendication 13, caractérisé en ce que ladite au moins une souche de S. thermophilus à une concentration d'au lo moins 1.109 cfu/g. 15. Produit intermédiaire selon la revendication 13 ou 14, caractérisé en ce que ladite au moins une souche de S. thermophilus est une souche de S. thermophilus dite de type cassante, qui ne produit pas 15 d'exopolysaccharides (EPS), ou qui n'en produit qu'à des teneurs tellement faibles qu'un lait fermenté modèle composé de 120 grammes de poudre de lait écrémé, 1 gramme de peptide N3, et eau permutée QSP IL, après culture de cette souche à une température de 40 C jusqu'à un pH de 4,7, présente une viscosité de Casson à 4 C qui est inférieure ou égale à 500 20 mPa.s, préférentiellement inférieure ou égale à 400 mPa.s. 16. Produit intermédiaire selon l'une quelconque des revendications 13 à 15, caractérisé en ce que ladite au moins une souche de S. thermophilus est la souche de S. thermophilus disponible auprès de la C.N.C.M. sous le 25 numéro de dépôt 1-2130. 17. Poudre de lait fermenté ou de yoghourt, susceptible d'être obtenue par le procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 12, caractérisée en ce qu'elle contient au moins une souche de S. thermophilus sous forme 30 vivante ou viable à une concentration d'au moins 5.108 cfu/g, et au moinsune souche de L. bulgaricus sous forme vivante ou viable à une concentration d'au moins 1.104 cfu/g. 18. Poudre de lait fermenté ou de yoghourt selon la revendication 17, 5 caractérisée en ce qu'elle contient ladite au moins une souche de S. thermophilus à une concentration d'au moins 1.109 cfulg. 19. Poudre de lait fermenté ou de yoghourt selon la revendication 17 ou 18, caractérisée en ce que ladite au moins une souche de S. thermophilus est 10 une souche de S. thermophilus dite de type cassante, qui ne produit pas d'exopolysaccharides (EPS), ou qui n'en produit qu'à des teneurs tellement faibles qu'un milieu pour lait fermenté modèle composé de 120 grammes de poudre de lait écrémé, 1 gramme de peptide N3, et eau permutée QSP 1 L, après culture de cette souche à une température de 40 C jusqu'à un pH 15 de 4,7, présente une viscosité de Casson à 4 C qui est inférieure ou égale à 500 mPa.s, préférentiellement inférieure ou égale à 400 mPa.s.. 20. Poudre de lait fermenté ou de yoghourt selon l'une quelconque des revendications 17 à 19, caractérisée en ce que ladite au moins une souche 20 de S. thermophilus est la souche de S. thermophilus disponible auprès de la C.N.C.M. sous le numéro de dépôt l-2130. 21. Poudre de lait fermenté ou de yoghourt selon l'une quelconque des revendications 17 à 20, caractérisée en ce qu'elle présente une Aw (activité 25 de l'eau) inférieure ou égale à 0,3. 22. Poudre de lait fermenté ou de yoghourt selon l'une quelconque des revendications 17 à 21, caractérisée en ce qu'elle présente une Aw (activité de l'eau) inférieure ou égale à 0,2. 30FR 06/00130 76 23. Produit alimentaire, caractérisé en ce qu'il contient au moins une poudre selon l'une quelconque des revendications 17 à 22. 24. Produit alimentaire selon la revendication 23, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un fourrage alimentaire. 25. Produit alimentaire selon la revendication 24, caractérisé en ce que ledit fourrage alimentaire est un fourrage essentiellement anhydre. 26. Produit alimentaire selon la revendication 23, caractérisé en ce qu'il s'agit d'un biscuit, qui comprend ladite poudre dans un fourrage essentiellement anhydre.