Brevet FR2894777A1 — publié le 20070622

COMPOSITION NUTRACEUTIQUE A BASE DE FIBRES DE CACAO ET D'ORANGE ET SES UTILISATIONS. La presente invention concerne une composition nutraceutique comprenant, a titre d'ingredients alimentaires, des fibres de cacao et des fibres d'orange. La presente invention concerne egalement 1'utilisation de cette composition nutraceutique ainsi que 1'utilisation de fibres de cacao et de fibres d'orange, pour capter les graisses alimentaires ingerees. Le fruit du cacaoyer (Theobroma cacao) appele cabosse comprend une enveloppe rigide denommee cortex (aussi appele coque) protegeant les feves de cacao et le mucilage (aussi appele pulpe ou placenta) qui enrobe les feves. Les feves de cacao fraiches contiennent environ 40% d'eau, 30 a 35% de lipides, 4 a 6% de polyphenols ou derives de polyphenols, 1,5% de xanthines, le reste etant essentiellement constitue de proteines, d'amidon, de cellulose et de sucres (Cacao procyanidins : major flavanoids and identification of some minor metabolites, L.J. Porter, Z. Ma et B.G. Chan, Phytochemistry Vol.35, N 5 p.1657-1663, 1991 ; Epicatechin content in fermented and unfermented cocao beans, H. Kim et P.G. Keeney, J. of Food Science Vol.49, p.1090-1092, 1984). Les feves fraichement recueillies servent a la fabrication du cacao. L'utilisation de cacao dans le domaine de la cosmetique est connue de 1'art anterieur. A titre d'exemple, citons la demande de brevet WO 01/82889 qui decrit une lotion cosmetique comprenant 16% a 76% en poids de beurre de cacao utile pour adoucir et hydrater la peau. La demande de brevet JP 2001081037 decrit quant a elle une composition cosmetique comprenant un extrait de feves de cacao. Cette composition est utilisee pour traiter les dermites allergiques de la peau et du cuir chevelu. Le cacao a egalement ete largement utilise pour la preparation de compositions cosmetiques destine-es a prevenir et a traiter les signes de vieillissement cutane comme 1'apparition de rides et la perte d'elasticite de la peau. La demande de brevet FR 2849374 decrit une composition cosmetique et dermatologique a base de pate de cacao et de beurre de cacao. Les demandes de brevet FR 2828379 et WO 2004/071210 decrivent des compositions nutritives elaborees a partir du cortex de la cabosse de cacaoyer et de mucilage ou de jus recueilli par pressage de feves de cacao fraiches. Ces compositions nutritives riches en vitamine E presentent des proprietes anti-oxydantes et anti-radicalaires permettant de lutter contre le vieillissement de la peau. Les demandes de brevet WO 01/95872 et WO 02/14251 decrivent quant a elles des compositions cosmet_ques comprenant un extrait polyphenolique de cacao. Les polyphenols de 1'extrait de cacao conferent a ces compositions des proprietes antiradicalaires. Des extraits de cacao ont egalement ete decrits pour la preparation de compositions cosmetiques amincissantes a application topique. La cafeine et des analogues de cafeine comme la theobromine et la theophylline, extraits a partir de feves de cacao, sont des alcaloides stimulants largement utilises pour la preparation de compositions cosmetiques amincissantes a application topique. La demande de brevet WO 02/14251 decrit quant a elle des compositions cosmetiques comprenant un extrait de cacao contenant des polyphenols, des xanthines et des lipides. Dans ces compositions, les proprietes amincissantes sont conferees par la presence, dans 1'extrait de cacao, de xanthines. L'extrait de cacao compris dans ces compositions est par ailleurs exclusivement obtenu a partir de feves fraiches debarrassees de leur mucilage et de leur cortex. La consommation preferentielle de cereales completes, de legumes et de fruits est preconisee dans le cadre de regimes alimentaires (A diet high in whole and unrefined foods favorably alters lipids, antioxidant defenses, and colon function, Bonnie B. et al., J. Am. Coll. Nutrition, Vol. 19, No. 1, 61-67, 2000). Les fibres alimentaires contenues dans ces denrees alimentaires induisent des effets de satiete et stimulent le transit gastrointestinal. La demanderesse a maintenant mis en evidence que 1'association specifique de certaines fibres alimentaires permet de capter les graisses alimentaires ingerees. Les travaux de la demanderesse ont notamment permis de mettre en evidence que 1'association de fibres de cacao et de fibres d'orange permet de capter les graisses alimentaires ingerees. L'invention concerne donc une composition nutraceutique comprenant, a titre d'ingredients alimentaires, des fibres de cacao et des fibres d'orange. Les fibres de cacao peuvent etre constituees selon la presente invention de substances pectiques, de cellulose et/ou d'hemicellulose. Les fibres de cacao peuvent etre obtenues selon la presente invention a partir des feves de cacao, du cortex de cabosses de cacaoyers et/ou du mucilage de cabosses de cacaoyers. Selon la presente invention, les fibres de cacao sont avantageusement obtenues a partir du cortex et/ou du mucilage de cabosses de cacaoyers. Les fibres d'orange peuvent etre constituees selon la presente invention de pectine, de cellulose, d'hemicellulose. Selon 1'invention, les fibres d'orange sont majoritairement constituees de pectine, de cellulose et/ou d'hem:icellulose. Les fibres d'orange peuvent etre obtenues selon la presente invention a partir de la peau et/ou de la pulpe d'orange. Selon la presente invention, les fibres d'orange sont avantageusement obtenues a partir de la peau d'orange avec pulpe. La composition selon 1'invention comprend : - de 30 a 50 % en poids, de preference 45 a 50 % en poids et tout preferentiellement 49,5% en poids de fibres de cacao et - de 30 a 50 % en poids, de preference 45 a 50 % en poids et tout preferentiellement 49,5% en poids de fibres d'orange. Les pourcentages en poids sont exprimes par rapport au poids total de la composition. La composition selon 1'invention peut en outre comprendre un ou plusieurs autres agents d'usage connus et classiques dans les compositions nutraceutiques tels notamment des agents conservateurs, des agents stabilisants, des agents emulsionnants, des agents colorants, des vitamines, des oligo- elements, des agents anti-oxydants, etc... Grace a ces connaissances en matiere de compositions nutraceutiques, 1'homme du metier saura quel(s) agent(s) ajouter a la composition de 1'invention et en quelles quantites en fonctior.L des proprietes recherchees. Conformement a la presente invention, la composition est administrable par voie orale, sous forme de gelules, comprimes ou capsules. La composition de 1'invention est avantageusement administrable sous forme de gelules. La composition de 1'invention est ainsi remarquable en ce qu'elle permet par 1'association specifique de fibres de cacao et de fibres d'orange, de capter les graisses alimentaires ingerees. Les graisses alimentaires ainsi captees seront ensuite aisement eliminees par 1'organisme puisque les fibres, de part leur nature, ne sont pas assimilees par 1'organisme, de plus elles stimulent le transit gastro-intestinal. La presente invention concerne aussi 1'utilisation 5 nutraceutique d'une composition selon 1'invention pour capter les graisses alimentaires ingerees. La presente invention concerne enfin 1'utilisation de fibres de cacao et de fibres d'orange pour la preparation d'une 10 composition nutraceutique, notamment amincissante, pour capter les graisses alimentaires ingerees. Les exemples ci-apres sont donnes a titre illustratif et ne sauraient etre interpretes comme limitant la portee de 15 1'invention. Its concernent, d'une part, des exemples de compositions objets de la presente invention, et d'autre part 1'evaluation de 1'efficacite in vitro de capture de graisses alimentaires par le complexe fibres de cacao et fibres d'orange de 1'invention. 20 I. EXEMPLE DE COMPOSITION OBJET DE L'INVENTION. Gelule nutraceutique contenant le melange de fibres de cacao et d'orange nomme Fibrocaptol . Fibres de cacao 49,5% 25 Fibres d'orange Stearate de magnesium 30 Aerosil 49,5% 0,5% 0,5% II. EVALUATION DE L'EFFICACITE IN VITRO DE CAPTURE DE GRAISSES ALIMENTAIRES CONTENUES DANS LE FOIE GRAS, DANS LA GRAISSE DE CANARD ET DANS L'HUILE D'OLIVE, PAR LA COMPOSITION Fibrocaptol . La composition nutraceutique testee est la composition Fibrocaptol decrite dans 1'Exemple du paragraphe I ci-dessus. Denrees alimentaires testees - Foie gras de canard entier du sud-ouest (Marquis de Merignac) -Graisse de canard gras (Labeyrie) - Huile d'olive vierge (Cooper) A. Protocole. 1. Fabrication de la solution d'HCl. Dans une fiole d'1 Litre, introduire de 1'eau distillee jusqu'a la moitie. A 1'aide d'une pipette et d'une pro pipette prelever 8.29mL d'HC1 a 37% (ou peser 9.86g). Introduire 1'HC1 dans la fiole et melanger. Completer au trait de jauge, puis melanger par retournement. 2. Fabrication du tampon Tris. Acide tris : Tris(hydroxymethyl)aminomethane 121g Acide chlorhydrique a 37 C 58g (ou49mL) Eau qsp 200mL Dans une fiole de 200mL, introduire la moitie de 1'acide tris. Puis, ajouter petit a petit 1'HC1 pour dissoudre 1'acide tris. Introduire le reste de 1'acide tris. Finir d'ajouter progressivement 1'HC1 pour que toute la poudre soit dissoute. Completer avec de 1'eau distillee jusqu'au trait de jauge. Il y a un fort degagement de chaleur lors de 1'ajout de 1'HC1 dans la poudre. S'il reste des cristaux non dissous, chauffer legerement jusqu'a dissolution des cristaux. 3. Etapes du protocole. 26 essais ont ete effectues avec le foie gras, 10 essais pour 1'huile et la graisse de canard testes avec le melange cacao- orange, et a 3 essais pour chaque matiere grasse testee avec le 5 produit Lipocontrol de Milical. Verser 12.5m1 d'acide chlorhydrique (10 ml pour les essais avec le Lipocontrol ) 0.1M (voir paragraphe 1. Fabrication de la solution d'HCl ci-dessus) dans chaque tube. 10 Introduire 3g (5g pour les essais avec le Lipocontrol ) : masse M1, de matiere grasse liquide dans chaque tube. Ajouter 300mg de melange Fibrocaptol . (600mg de poudre issue du broyage d'un comprime de Lipocontrol ,) : masse M2, Agiter vigoureusement pendant 30 secondes et incuber 2h a 15 37 C. Ajouter 2.5mL de tampon Tris (voir paragraphe 2. Fabrication du tampon Tris. ci-dessus) dans chaque tube. Agiter pendant 30 secondes et incuber 3h a 37 C. Centrifuger les tubes 5min a 2000 tr/min (670G), maintenir 20 les tubes a 37 C. Replacer les tubes au bain marie et prelever immediatement la partie de graisse liquide surnageante (masse M3). B. Resultats. 25 On exprime la capacite des fibres a fixer les lipides (Cg) par le rapport suivant : Cg = Mlû M3 M2 30 Ml : Masse de lipides introduite M3 : Masse de lipides surnageante M2 : Masse de poudre Fibrocaptol introduite5 Cg : quantite de lipides (g) capturee par gramme de principe actif Resultats bruts melange cacao oranqe • Foie gras de canard Cg moyen = 9,40 Ecart type = 0,22 Masse Introduite (mg) 300,9 305,3 305 301 300 306 305 303 305 300,3 300,2 300,7 300,2 300,9 300,1 300 300 300 300,1 300,3 301,4 300 300,6 302 302 301 Surnageant (mg) 56 73 105 80 86 39 88 97 166 107 185 275 160 182 159 235 200 133 247 289 175 256 251 218 220 219 Cg 9,78 9,59 9,49 9,70 9,71 9,68 9,55 9,58 9,29 9,63 9,38 9,06 9,46 9,37 9,47 9,22 9,33 9,56 9,17 9,03 9,37 9,15 9,15 9,21 9,21 9,24 N tube 10 9 Graisse de canard N tube Masse Introduite Surnageant Cg (mg) (mg) 1 300,2 185 9,38 2 300,7 275 9,06 3 300,2 160 9,46 4 300,9 182 9,37 300,1 159 9,47 6 300 235 9,22 7 300 200 9,33 8 300 133 9,56 9 300,1 247 9,17 300,3 289 9,03 Cg moyen = 9,30 Ecart type = 0,18 Huile N tube Masse Introduite Surnageant Cg (mg) (mg) 1 300,3 163 9,45 2 300,5 294 9,00 3 300,5 252 9,14 4 300,3 328 8,90 5 300,1 296 9,01 6 300 304 8,99 7 300,4 320 8,92 8 300 310 8,97 9 300,6 265 9,10 10 300,9 346 8,82 Cg moyen = 9, 03 Ecart type = 0,17 10 R~sultats bruts Lipocontrolm N tube Masse Introduite Surnageant Cg Nature (mg) (mg) 1 600,3 82 8,19 Foie gras 2 600,4 93 8,17 Foie gras 3 600,3 80 8,20 Foie gras 4 600,3 87 8,18 Graisse canard 600,3 94 8,17 Graisse canard 6 600,3 91 8,18 Graisse canard 7 600,5 225 7,95 Huile d'olive 8 600,3 261 7,89 Huile d'olive 9 600,5 263 7,89 Huile d'olive Cg foie gras = 8,19 Cg graisse canard = 8,18 Cg huile d'olive = 7,91 C. Conclusions. Efficacite du melange Fibrocaptol : Pas de difference significative entre la quantite de graisse de canard et de graisse de foie gras capturee (test t de Student, p=20%) Difference significative entre la quantite d'huile capturee avec d'une part la graisse de canard (test t de Student, p=0.2%) et la graisse de foie gras (test t de Student, p=0.003%) d'autre part. Si l'on considere que le foie gras de canard contient 40% de matieres grasses, deux gelules absorbent la totalite des lipides contenus dans 14.1 g de foie gras. 10 5 Deux gelules absorbent donc 50% des lipides contenus dans 28.2 g de foie Comparaison Melange Fibrocaptol - Lipocontrol : Avec de la graisse de foie gras de canard, comme avec de la graisse de canard, les Cg moyens obtenus avec le melange Fibrocaptol sont superieurs a ceux obtenus avec le Lipocontrol , (respectivement 9.4 et 9.3 contre 8.2 et 8.2). Il est a noter que ces resultats ont ete obtenus en comparant 10 le contenu d'une gelule (300mg) au double de masse de poudre de Lipocontrol , (pratiquement la masse du comprime). III. EVALUATION DE L'EFFICACITE IN VITRO DE CAPTURE DE GRAISSES ALIMENTAIRES CONTENUES DANS LE FOIE GRAS PAR LA 15 COMPOSITION FIBROCAPTOL COMPAREE A CELLE D'UN PRODUIT A BASE DE CHITOSAN. L'efficacite de capture des graisses alimentaires contenues dans le foie gras par la composition Fibrocaptol de 1'invention a ete comparee a celle du produit Chitosan de Arkopharma. 20 A. Protocole. Verser 12.5mL d'acide chlorhydrique 0.1M (prepare selon le protocole decrit dans le paragraphe II) dans chaque tube. Placer le foie gras au bain marie a 37 C 25 Recuperer la partie liquide de graisse. Introduire 3g (masse Ml) de cette partie liquide dans chaque tube. Ajouter 300mg (masse M2) du contenu des gelules de Chitosan ou contenant Fibrocaptol . 30 Agiter vigoureusement pendant 30 secondes et incuber 2h a 37 C. Ajouter 2.5mL de tampon Tris (prepare selon le protocole decrit dans le paragraphe II) dans chaque tube. Agiter pendant 30 secondes et incuber 3h a 37 C. Centrifuger les tubes 5min a 2000 tr/min (670G), maintenir 5 les tubes a 37 C. Replacer les tubes au bain marie et prelever immediatement la partie de graisse liquide surnageante (masse M3). B. Resultats. 10 On exprime la capacite des fibres a fixer les lipides (Cg) par le rapport suivant : Cg = Ml- M3 M2 15 Ml : Masse de lipides introduite M3 : Masse de lipides surnageante M2 : Masse de poudre Fibrocaptol introduite Cg : quantite de lipides (g) capturee par gramme de produit actif 20 Les resultats obtenus sont presentes clans la table cidessous. N Fibrocaptol Surnageant Chitosan Surnageant tube (mg) (mg) Cg (mg) (mg) Cg 1 300,9 56 9,78 302 1293 5,72 2 305,3 73 9,59 302 1651 4,50 3 305 105 9,49 301 1416 5,30 4 301 80 9,70 300 1485 5,25 300 86 9,71 302 1341 5,56 6 306 39 9,68 302 1617 4,68 7 305 88 9,55 301 1643 4,54 8 303 97 9,58 301 1364 5,47 9 305 166 9,29 302 1587 4,78 300,3 107 9,63 302 1506 5,25 11 300,2 185 9,38 299 1789 4,12 12 300,7 275 9,06 301 1865 3,84 13 300,2 160 9,46 301 1661 4,75 14 300,9 182 9,37 302 1397 5,47 15 300,1 159 9,47 300 1822 4,13 16 300 235 9,22 299 1384 5,40 17 300 200 9,33 300 1609 4,70 18 300 133 9,56 304 1446 5,18 19 300,1 247 9,17 303 1437 5,39 20 300,3 289 9,03 304 1246 5,84 21 301,4 175 9,37 301 1639 4,52 22 300 256 9,15 304 1715 4,42 23 300,6 251 9,15 303 1760 4,29 24 302 218 9,21 310 1541 4,77 25 302 220 9, 21 301 1638 4,66 26 301 219 9,24 303 1409 5,35 Cg moyen = 9,40 Ecart type = 0,22Cg moyen = 4,92 Ecart type = 0,54 C. Conclusions. La composition Fibrocaptol possede une capacite de capture presque deux fois superieure a celle du Chitosan (resultats 5 significativement differents au seuil de 0,00001. IV. EVALUATION DE L'EFFICACITE IN VITRO DE CAPTURE DE GRAISSES ALIMENTAIRES CONTENUES DANS LE CHOCOLAT, PAR LA COMPOSITION Fibrocaptol . 10 La composition nutraceutique testee est la composition Fibrocaptol decrite dans 1'Exemple I ci-dessus. Chocolats testes : - chocolat blanc Galak (Nestle) - chocolat noir Poulain noir patissier 15 - chocolat au lait Lindt chocolat au lait A. Protocole. Verser 12.5mL d'acide chlorhydrique 0.1M (prepare selon le protocole decrit dans le paragraphe II) dans chaque tube. 20 Chauffer a 70 C et homogeneiser par agitation un melange a quantites egale chocolat (noir, lait ou blanc) et eau. Ajouter 5ml d'acide chlorhydrique 4M. Centrifuger 10 min a 3000 G. Recueillir sur la partie superieure des tubes l'huile liquide limpide. Placer le produit recueilli au bain marie (37 C). Introduire 3g (masse Ml) de ce produit dans chaque tube. Ajouter 300mg (masse M2) du contenu des gelules. Agiter vigoureusement pendant 30 secondes et incuber 2h a 37 C. Ajouter 2.5mL de tampon Tris (prepare selon le protocole decrit dans le paragraphe II) dans chaque tube. Agiter pendant 30 secondes et incuber 3h a 37 C. Centrifuger les tubes 2min a 300G, et maintenir les tubes a 37 C. Replacer les tubes au bain marie et prelever immediatement la partie de graisse liquide surnageante (masse M3). B. Resultats. On exprime la capacite des fibres a fixer les lipides (Cg) selon la formule de calcul decrite dans le paragraphe II ci-15 dessus. Les resultats obtenus n'ont pas montre de difference de capture entre ces trois types de chocolat. Les resultats obtenus sont presentes dans la table ci-dessous. N tube Masse Introduite Surnageant Cg (mg) (mg) 1 306 150 9,31 2 308 130 9,32 3 301 140 9,50 4 304 5 9,85 5 300 121 9,60 6 300 200 9,33 7 300 300 9,00 8 300 190 9,37 9 300 477 8,41 10 301 160 9,44 11 301 200 9,30 12 301 135 9,52 13 299 170 9,46 14 301 380 8,70 301 209 9,27 16 301 205 9,29 17 301 211 9,27 18 299 278 9,10 19 301 139 9,50 20 301 480 8,37 21 302 94 9,62 22 300 190 9,37 23 301 280 9,04 24 299 100 9,70 25 300 500 8,33 26 302 222 9,20 27 299 460 8,49 28 299 450 8,53 29 300 467 8,44 30 303 53 9,73 31 304 168 9,32 32 300 222 9,26 Cg moyen = 9,19 Ecart type = 0,43 C. Conclusions. La quantite moyenne capturee par deux gelules contenant Fibrocaptol est de 6.04 g de lipides provenant de chocolat (noir blanc ou au lait). Si lion considere que la teneur moyenne en lipide du chocolat noir est de 33%, du chocolat blanc 37% et du chocolat au lait 32%, deux gelules contenant Fibrocaptol absorbent la totalite des lipides contenus dans 18g de chocolat noir dans 16g de chocolat blanc et dans 19g de chocolat au lait. V. EVALUATION DE L'EFFICACITE IN VITRO DE CAPTURE DE GRAISSES ALIMENTAIRES CONTENUES DANS LE TOURON, PAR LA COMPOSITION FIBROCAPTOL . La composition nutraceutique testee est la composition Fibrocaptol decrite dans 1'Exemple I ci-dessus. Touron teste : Touron de JIJONA (Calidad suprema) plaquettes de 150g. A. Protocole. Verser 12.5mL d'acide chlorhydrique 0.1M (prepare selon le protocole decrit dans le paragraphe II) dans chaque tube. Placer le touron au bain marie a 37 C. Centrifuger a 3000 g pendant 1 heure. Recuperer la partie liquide. Introduire 3g (masse Ml) de cette partie liquide dans chaque tube. Ajouter 300mg (masse M2) du contenu des gelules. Agiter vigoureusement pendant 30 secondes et incuber 2h a 37 C. Ajouter 2.5mL de tampon Tris (prepare selon le protocole decrit dans le paragraphe II) dans chaque tube. Agiter pendant 30 secondes et incuber 3h a 37 C. Centrifuger les tubes 5min a 2000 tr/min (670G), maintenir les tubes a 37 C. Replacer les tubes au bain marie et prelever immediatement la partie d'huile liquide surnageante (masse M3). B. Resultats. On exprime la capacite des fibres a fixer les lipides (Cg) selon la formule de calcul decrite dans le paragraphe II cidessus. Les resultats obtenus sont presentes dans la table ci-20 dessous. N Huile touron Fibrocaptol Surnageant Cg tube (mg) (mg) (mg) 1 3010 300 1880 3,77 2 3000 301 1976 3,40 3 3050 300 1922 3,76 4 3010 302 1825 3,92 5 3010 302 1830 3,91 6 3020 301 1758 4,19 7 2970 301 1831 3,78 8 2990 301 1816 3,90 9 3000 302 1660 4,44 10 3020 302 1776 4,12 11 2970 301 1831 3,78 12 2990 301 1816 3,90 13 3000 302 1660 4,44 14 3020 302 1776 4,12 15 3020 300 1743 4,26 16 3040 301 1991 3,49 17 3020 302 2260 2,52 18 3020 300 2184 2,79 19 3080 301 1958 3,73 20 3030 303 1264 5,83 21 3040 305 1203 6,02 22 3020 309 1346 5,42 23 3020 302 1695 4,39 24 3020 303 1786 4,07 25 3020 305 1807 3,98 26 3090 303 1617 4,86 27 3010 303 1784 4,05 28 3010 300 1876 3,78 29 3010 302 1717 4,28 30 3010 305 1702 4,29 31 3010 303 1900 3,66 32 3010 302 1793 4,03 33 3010 303 1910 3,63 34 3010 300 1834 3,92 35 3000 306 1863 3,72 36 3000 302 1689 4,34 37 3000 302 1829 3,88 38 3020 301 1823 3,98 39 3010 303 1830 3,89 40 3030 300 1975 3,52 41 3010 300 1723 4,29 Cg moyen = 4,05 Ecart type = 0,64 C. Conclusions. La capacite de capture du Fibrocaptol sur 1'huile issue du touron est deux fois inferieure a celle obtenu avec de la graisse de foie gras. Ce resultat s'explique par la viscosite de 1'huile obtenue a partir du touron (essentieliement de 1'huile d'amande douce), tres inferieure a celle de la graisse de foie gras. Si on considere que le touron contient 25% d'huile, 2 gelules captureraient donc la totalite de 1'huile contenue dans 11 g de touron.15 VI. EVALUATION DE L'EFFICACITE IN VITRO DE CAPTURE DE GRAISSES ALIMENTAIRES CONTENUES DANS LA CREME FRAICHE, PAR LA COMPOSITION FIBROCAPTOL . La composition nutraceutique testee est la composition 5 Fibrocaptol decrite dans 1'Exemple I ci-dessus. Creme testee : Creme Yoplait 30% a de matieres grasses. A. Protocole. Chauffer la creme fraiche a ebullition au bain marie avec 10 agitation par barreau magnetique pendant 30 minutes. Centrifuger 60 minutes a 3000 G. Recueillir sur la partie superieure des tubes 1'huile liquide. Recuperer la partie inferieure et eliminer le petit lait . Chauffer a ebullition la partie inferieure au bain marie avec agitation par barreau pendant 30 minutes. 15 Centrifuger 30 minutes a 3000 G. Recueillir sur la partie superieure des tubes 1'huile liquide. Ajouter cette huile recueillie a celle obtenue apres la premiere centrifugation. Placer le produit recueilli au bain marie (37 C). Verser 12.5mL d'acide chlorhydrique O.1M (prepare selon le protocole decrit 20 dans le paragraphe II) dans chaque tube. Introduire 3g (masse Ml) de ce produit dans chaque tube. Ajouter 300mg (masse M2) du contenu des gelules. Agiter vigoureusement pendant 30 secondes et incuber 2h a 37 C. Ajouter 2.5mL de tampon Tris (prepare selon le protocole decrit dans le paragraphe II) dans chaque tube. Agiter 25 pendant 30 secondes et incuber 3h a 37 C. Centrifuger les tubes 2min a 300G, et maintenir les tubes a 37 C. Replacer les tubes au bain marie et prelever immediatement la partie de graisse liquide surnageante (masse M3). 30 B. Resultats. On exprime la capacite des fibres a fixer les lipides (Cg) selon la formule de calcul decrite dans le paragraphe II cidessus. Les resultats obtenus sont presentes dares la table ci-dessous. N tube Masse Introduite Surnageant Cg (mg) (mg) 1 301 90 9,67 2 302 6 9,91 3 300 52 9,83 4 301 0 9,97 300 0 10,00 6 300 0 10,00 7 301 0 9,97 8 301 0 9,97 9 301 3 9,96 299 207 9,34 11 302 5 9,92 12 300 17 9,94 13 303 49 9, 74 14 302 6 9,91 300 33 9,89 16 301 2 9,96 17 300 9 9,97 18 302 47 9,78 19 302 24 9,85 301 11 9,93 21 300 9 9,97 22 300 0 10,00 23 302 0 9,93 24 300 55 9,82 301 48 9,81 26 ! 301 21 9,90 27 300 0 10,00 28 301 0 9,97 29 302 0 9,93 302 5 9,92 Cg moyen = 9,89 5 Ecart type = 0,13 C. Conclusions. La quantite moyenne capturee par deux gelules de Fibrocaptol est de 6.32g de lipides provenant de creme fraiche. Si l'on 10 considere que la teneur moyenne en lipide de la creme fraiche est de 30%, deux gelules de Fibrocaptol absorbent la totalite des lipides contenus dans 21g de Creme fraiche. VII. EVALUATION DE L'EFFICACITE IN VITRO DE CAPTURE DE 5 GRAISSES ALIMENTAIRES CONTENUES DANS LA SAUCE AIOLI, PAR LA COMPOSITION FIBROCAPTOL . La composition nutraceutique testee est la composition Fibrocaptol decrite dans 1'Exemple I ci-dessus. Sauce Aloli testee : Sauce Aloli Benedicta 10 A. Protocole. Chauffer 1'aIoli a 80 C au bain marie avec agitation par barreau magnetique pendant 10 minutes. Centrifuger 5 minutes a 3000 G. Recueillir sur la partie superieure des tubes 1'huile 15 liquide. Verser 12.5mL d'acide chlorhydrique 0.1M (prepare selon le protocole decrit dans le paragraphe II) dans chaque tube. Introduire 3g (masse Ml) de ce produit a 25 C dans chaque tube. Ajouter 300mg (masse M2) du contenu des gelules Fibrocaptol . Agiter vigoureusement pendant 30 secondes et incuber 2h a 37 C. 20 Ajouter 2.5mL de tampon Tris (prepare selon le protocole decrit dans le paragraphe II) dans chaque tube. Agiter pendant 30 secondes et incuber 3h a 37 C. Centrifuger les tubes 2min a 300G, et maintenir les tubes a 37 C. Replacer les tubes au bain marie et prelever immediatement la partie de graisse liquide 25 surnageante (masse M3). B. Resultats. On exprime la capacite des fibres a fixer les lipides (Cg) selon la formule de calcul decrite dans le paragraphe II ci-30 dessus. Les resultats obtenus sont presentes darts la table cidessous. N Masse Introduite Surnageant Cg tube (mg) (mg) _ 1 303 586 7,97 2 302 425 8,53 3 300 0 10,00 4 299 0 10,03 299 20 9,97 6 301 110 9,60 7 301 216 9,25 8 302 283 9,00 9 299 280 9,10 302 0 9,93 11 299 40 9,90 12 301 170 9,40 13 303 0 9,90 14 301 39 9,84 305 100 9,51 16 301 0 9,97 17 304 50 9,70 18 304 260 9,01 19 303 188 9,28 302 260 9,07 21 301 388 8,68 22 301 240 9,17 23 302 182 9,33 24 301 169 9,41 305 209 9,15 26 307 200 9,12 27 301 170 9,40 28 301 150 9,47 29 303 151 9,40 300 380 8,73 Cg moyen = 9,36 Ecart type = 0,49 C. Conclusions. 5 La quantite moyenne capturee par deux g~lules contenant Fibrocaptol est de 6.24g de lipides provenant de 1'aioli. Si lion considere que la teneur moyenne en lipide de la sauce aloli est de 75%, deux gelules de Fibrocaptol absorbent la totalite des lipides contenus dans 8,3 g (= une cuilleree a cafe) de 10 sauce aloli non allegee en matieres grasses et 16g de sauce aloli a 30% de matieres grasses. VIII. EVALUATION DE L'EFFICACITE IN VITRO DE CAPTURE DE GRAISSES ALIMENTAIRES CONTENUES DANS LA GARNITURE DE PIZZAS 4 FROMAGES, PAR LA COMPOSITION FIBROCAPTOL . La composition nutraceutique testee est la composition 5 Fibrocaptol decrite dans 1'Exemple I ci-dessus. Pizza testee : Pizza quatre fromages contiennant 9% de lipides, la moitie de ces lipides provenant d'huile de tournesol et 1'autre moitie de la garniture. 10 A. Protocole. Verser 12.5mL d'acide chlorhydrique O.1M (prepare selon le protocole decrit dans le paragraphe II) dans chaque tube. Chauffer a 80 C 4 fromages en quantite egale (fourme d'Ambert, emmental, coulommiers et fromage de chevre fermier). Recueillir 15 et peser la partie liquide surnageante. Ajouter une quantite egale d'huile de tournesol. Introduire 3g (masse Ml) de ce melange dans chaque tube. Ajouter 300mg (masse M2) du contenu des gelules Fibrocaptol Agiter vigoureusement pendant 30 secondes et incuber 2h a 37 C. Ajouter 2.5mL de tampon Tris (prepare selon le 20 protocole decrit dans le paragraphe II) dans chaque tube. Agiter pendant 30 secondes et incuber 3h a 37 C. Centrifuger les tubes 5min a 2000 tr/min (670G), maintenir les tubes a 37 C. Replacer les tubes au bain marie et prelever immediatement la partie de graisse liquide surnageante (masse M3). 25 B. Resultats. On exprime la capacite des fibres a fixer les lipides (Cg) selon la formule de calcul decrite dans le paragraphe II cidessus. 30 Les resultats obtenus sont presentes dans la table cidessous. N tube Masse Introduite Surnageant Cg (mg) (mg) 1 305 36 9,72 2 315 93 9,23 3 300 90 9,70 4 303 182 9,30 302 161 9,40 6 306 45 9,66 7 314 163 9,04 8 301 32 9,86 9 303 101 9,57 303 132 9,47 11 300 45 9,85 12 301 128 9,54 13 302 57 9,75 14 301 39 9,84 300 65 9,78 16 301 36 9,85 17 302 27 9,84 18 300 30 9,90 19 300 16 9,95 300 29 9,90 21 300 50 9,83 22 301 24 9,89 23 300 29 9,90 24 299 19 9,97 303 21 9,83 26 300 23 9,92 27 301 30 9,87 28 301 26 9,88 29 300 46 9,85 302 60 9,74 Cg moyen = 9,73 Ecart type = 0,23 C. Conclusions. La quantite moyenne capturee par deux gelules de 5Fibrocaptol est de 6.4 g de lipides provenant de garniture de pizzas quatre fromages. Si l'on considere qu'une pizza 4 fromages contient 9% de lipides, deux gelules de Fibrocaptol absorbent la totalite des lipides contenus dans 71,4g de pizza 4 fromages. Deux gelules absorbent donc 50% des lipides contenus 10 dans 143g de pizza 4 fromages. REVENDICATIONS 1) Composition nutraceutique caracterisee en ce qu'elle comprend a titre d'ingredients alimentaires des fibres de cacao 5 et des fibres d'orange. 2) Composition selon la revendication 1, caracterisee en ce que les fibres de cacao sont constituees de substance pectiques, de cellulose et/ou d'hemicellulose. 10 3) Composition selon la revendication 1 ou 2, caracterisee en ce que les fibres de cacao sont obtenues a partir des feves de cacao, du cortex de cabosses de cacaoyers et/ou du mucilage de cabosses de cacaoyers et de preference a partir du cortex 15 et/ou du mucilage de cabosses de cacaoyers. 4) Composition selon la revendication 1, caracterisee en ce que les fibres d'orange sont constituees de pectine, de cellulose, d'hemicellulose. 5) Composition selon la revendication 4, caracterisee en ce que les fibres d'orange sont majoritairement constituees de pectine, de cellulose et/ou d'hemicellulose. 25 6) Composition selon 1'une quelconque des revendications 1, 4 ou 5, caracterisee en ce que les fibres d'orange sont obtenues a partir de la peau et/ou de la pulpe d'orange, et de preference a partir de la peau d'orange. 30 7) Composition selon 1'une quelconque des revendications precedentes, caracterisee en ce qu'elle comprend : - de 30 a 50 % en poids, de preference 45 a 50 % en poids et tout preferentiellement 49,5% en poids de fibres de cacao, et 20- de 30 a 50 % en poids, de preference 45 a 50 % en poids et tout preferentiellement 49,5% en poids de fibres d'orange. 8) Composition selon 1'une quelconque des revendications 1 a 7, caracterisee en ce qu'elle comprend en outre un ou plusieurs agents choisis parmi le groupe suivant : agents conservateurs, agents stabilisants, agents emulsionnants, agents colorants, vitamines, oligo-elements et agents anti-oxydants. 9) Utilisation nutraceutique d'une composition selon 1'une quelconque des revendications 1 a 8, pour capter les graisses alimentaires ingerees. 10) Utilisation de fibres de cacao et de fibres d'orange pour 15 la preparation d'une composition nutraceutique pour capter les graisses alimentaires ingerees.