Brevet FR2895743A1 — publié le 20070706

Composés fluorescents et utilisation de tels composés dans le cadre de procédés ou dispositifs muli,tiphotoniques. L'invention concerne le domaine de la conception et de la réalisation de composés fluorescents ("iluorophores") présentant des propriétés les rendant susceptibles d'être mis en oeuvre dans les procédés et dispositifs multiphotoniques et notamment les procédés et dispositifs biophotoniques. L'étude des grandes fonctions cellulaires telles que par exemple l'expression du génome, le trafic membranaire, l'étude de la mobilité des cellules et de leur organisation en tissus, néces:;itent de localiser, mesurer et quantifier in vivo, à l'échelle microscopique et nanoscopique, les dynamiques et interactions entre molécules d'intérêt biologique (protéines, acides nucléiques, lipides, ions...). La microscopie de fl uorescence classique, qui met en oeuvre des marqueurs (fluorophores) excitables par une excitation monophotonique, même si elle constitue un outil puissant pour l'imagerie du vivant présente toutefois un certain nombre d'inconvénients, qui limite son intérêt dans ce domaine d'application. En premier lieu, elle met souvent en oeuvre des sondes excitables dans le domaine ultraviolet ou dans l a partie bleue du spectre visible. Une telle excitation dans ce domaine peut s'avérer toxique pour les tissus vivants. En second lieu, elle ne permet qu'une observation de profondeur limitée dans 20 les tissus vivants du fait de la diffusion plus importante de la lumière visible que de la lumière infra-rouge, et de l'absorption intrinsèque des biomolécules. En troisième lieu, elle peut induire une fluorescence endogène des tissus vivants gênante pour l'observation. La microscopie multi photonique permet de s'affranchir de ces problèmes grâce 25 à la technique de fluorescence induite par excitation à deux photons (ci-après parfois dénommée "TPEF" ). Cette technique est basée sur le concept selon lequel certains atomes ou molécules peuvent absorber simultanément deux photons. Cette propriété d'absorption à deux photons (ci-après parfois appelée "ADP") de certaines molécules est caractérisée par leur section efficace d'ADP, notée Q2. Ainsi, certaines molécules fluorescentes (fluorophores) excitables par un photon d'énergie hv et de longueur d'onde X sont aussi susceptibles d'être excitées simultanément par deux photons d'énergie hv/2et de longueur d'onde 2X. Une excitation monophotonique dans le domaine UV-partie bleue du spectre visible peut ainsi être remplacée par un excitation biphotonique dans le domaine rouge-proche infrarouge, non toxique pour les tissus vivants et générant moins de fluorescence endogène des échantillons observés. De plus, le caractère non linéaire de l'absorption localise l'excitation, et donc l'émission des fluorophores, au point de focalisation du laser dans l'échantillon à étudier. Ainsi, des images tridimensionnelles de tissus biologiques in vivo peuvent être obtenues avec une résolutior.. de l'ordre du micromètre jusqu'à des profondeurs de 500 m au moins et ce sans provoquer de dommage pour ces tissus. Ce caractère non linéaire de l'absorption permet également une résolution spatiale en trois dimensions fine. En pratique, l'absorption à deux photons observée chez certains atomes ou molécules a permis le développement de nombreuses technologies dans des domaines d'application très variés, tels que la microfabrication en 3 dimensions, le stockage optique des données, la thérapie photodynamique et la limitation optique (c'est-à-dire la protection contre l'agression laser). Le développement de la TPEF a donc ouvert la voie à la mise au point de procédés et de dispositifs performants adaptés au milieu vivant (et donc dits procédés et dispositifs "biophotoniques") dans le domaine de l'imagerie cellulaire (microscopie, imagerie 3D), dans le domaine des outils de diagnostic (sondes fluorescentes, particules absorbantes, biopuces), dans le domaine thérapeutique (photothérapie ou thérapie photodynamique). Or, on constate sur le marché un manque de composés fluorophores spécialement adaptés à ces nouvelles technologies. En effet, les composés fluorophores actuellement utilisés dans les techniques multiphotoniques sont optimisés pour les techniques classiques de fluorescence, c'est-à-dire mettant en oeuvre une excitation monophotonique. Ces composés classiques de l'état de la technique ne sont pas optimisés pour les techniques multiphotonic ues et notamment pas pour les techniques biphotoniques. En pratique, ces composés présentent des propriétés d'ADP médiocres dans la fenêtre spectrale d'intérêt biologique (700 à 1200 nm) et doivent être utilisés à des concentrations susceptibles de perturber le milieu observé. Ainsi, les dipyrrométhènes de bore, couramment désignés dans la littérature par le terme générique "BODIPY", appartiennent à une classe de chromophores fluorescents présentant d,cs propriétés intéressantes : une photoluminescence accordable dans les longueurs d'onde 500-650 nm, c'est-à-dire la gamme de fonctionnement optimale pour les détecteurs performants (photomultiplicateurs et photodiodes à avalanche), un rendement quantique de fluorescence élevé dans des milieux variés (y compris l'eau dans le cas de dérivés solubles dans l'eau), et des temps de déclin de fluorescence suffisamment longs (de l'ordre de 4 à 5 ns). Ces composés ont donc été utilisés comme sondes fluorescentes dans des applications très diverses, par exemple comme senseurs de cations, comme ionofluorophores, comme réactifs dosimétriques, pour le contrôle de la bioactivité (imagerie de NO), pour l'imagerie de cellules vivantes et même pour des tests fluoro-immunologiques. Cependant, ces composés bien que présentant un grand nombre d'avantages en terme de luminescence et de solubilité ont l'inconvénient majeur de montrer des performances d'ADP très médiocres. Ils ne sont donc pas optimisés pour la TPEF. L'objectif principal de la présente invention est de proposer de nouveaux composés fluorescents spécialement adaptés pour être mis en oeuvre dans les techniques biphotoniques. Notamment, un objectif de la présente invention est de décrire de tels composés qui permettent Je garantir l'innocuité des techniques dans le cadre desquelles elles sont utilisées, tout en présentant une sensibilité et une sélectivité élevées. Notamment un objectif de la présente invention est de proposer de tels composés qui présentent à la fois un rendement quantique de fluorescence élevé dans des milieux variés (y compris l'eau dans le cas de dérivés solubles dans l'eau), des sections efficaces d'ADP (a,) optimisées pour la gamme spectrale d'intérêt biologique (700-1200 nm), des temps de déclin de fluorescence élevés, une bonne photostabilité et une faible toxicité, notamment une faible phototoxicité. Egalement un objectif de la présente invention est de proposer une panoplie de tels composés fluorescents susceptibles de s'adresser à des cibles très différentes. Encore un autre objectif de la présente invention est de proposer de tels composés capables de produire des signaux lumineux distinguables par leurs longueurs d'onde d'émissioaa et autorisant ainsi la mise en oeuvre d'un multiplexage (le flux lumineux émanant de l'échantillon marqué par plusieurs fluorophores peut ainsi transporter simultanément plusieurs signaux séparables à l'aide de filtres). Une section efficace d'ADP élevée permet de réduire la concentration en marqueurs moléculaires fluorescents et/ou l'intensité d'excitation, ce qui est hautement désirable pour l'imagerie biologique. Ces objectifs sont atteints grâce à l'invention qui concerne tout composé chimique caractérisé en ce qu'il est constitué d'un coeur présentant des propriétés d'absorption à deux photons lié par des liaisons covalentes distinctes à au moins deux émetteurs de type dipyrromé:hène de bore de formule (-BDP) : R3 R4 R5 --N N ', R1 F B'F R7 dans laquelle l'un de R' à R7 représente une liaison covalente avec ledit coeur, les autres identiques ou différents, désignant chacun un radical choisi dans le groupe constitué par l'hydrogène, les radicaux alkyles (parfois notés Alk dans la suite de la description) en C, à CZ5, préférentiellement C1 à C12, les radicaux aryles (parfois notés Ar dans la suite de la description) ou hétéroaryles. On entend dans la R2 présente description par radicaux aryles , les radicaux aromatiques hydrocarbonés, mono, bi, ou tricyclique de 5 à 14 atomes de carbone, préférentiellement les radicaux phényle, naphtyle, anthryle, fluorényle et par radicaux hétéroaryles , les radicaux aromatiques comprenant un ou plusieurs hétéroatomes, préférentiellement les radicaux pyridyle, quinoléinyle, thiényle, furyle, pyrrolyle. Les composés selon a présente invention sont donc constitués d'un coeur dont les caractéristiques spectrales permettent l'absorption de deux photons et formant ainsi une "antenne à deux photons", lié à au moins deux composants émetteurs situés en périphérie, de type dipyrrométhènes de bore (-BDP), susceptibles d'offrir des propriétés de luminescence accordables". Les composés selon l'invention constituent des systèmes dont la taille varie en fonction de la nature du coeur et des composants émetteurs ainsi qu'en fonction du nombre de ces derniers. Les composés selon la présente invention présentent l'avantage d'autoriser un "découplage" de l'absorption à deux photons et de l'émission. Ainsi, il est possible de s'affranchir des contraintes strictes liées aux inter-relations entre absorption et émission dans les systèmes où l'absorption est exclusivement assurée par le groupe émetteur. Les composés selon la présente invention permettent de tirer avantage des qualités de luminescence (rendement quantique de fluorescence élevé, accordabilité, photostabilité) des motifs dz type dipyrrométhènes de bore tout en disposant d'une section efficace d'absorption à deux photons très élevée. Dans les composés selon la présente invention, le coeur assurant le rôle d'absorption biphotonique est directement relié aux composants émetteurs. On notera par ailleurs que les composés selon la présente invention ne font pas appel à un transfert d'énergie de type Fôrster. En effet, dans les composés de l'invention l'absorption concerne l'ensemble du système (coeur absorbeur à deux photons et émetteurs). Cette absorption implique des états excités d'énergie croissante.Celui de plus basse énergie (responsable de l'absorption monophotonique dans le visible et de la faible absorption à deux photons des BDP vers 1000 nm) est localisé sur les émetteurs BDP. Les états suivants impliquent plus particulièrement le coeur absorbeur à deux photons. La relaxation rapide après excitation ramène toujours à l'état excité de plus basse énergie responsable de l'émission. Dans les composés de l'invention cet état de plus basse énergie est localisé sur les motifs émetteurs de type BDP. L'émission provient Jonc exclusivement des émetteurs et les caractéristiques d'émission de ces motifs BDP sont alors totalement préservées. Par contre l'implication dans l'absorption d'états excités de plus haute énergie (plus spécifiquement localisés sur les coeurs) conduit à des caractéristiques d'absorption à deux photons beaucoup plus marquées dans le proche IR. Cette approche permet notamment d'utiliser des coeurs absorbeurs à deux photons dans lesquels l'extension de la conjugaison ou délocalisation électronique permet d'augmenter significativement l'absorption à un et deux photons sans que cela se traduise par une diminution de la durée de vie naturelle (loi de Strickler-Berg) de fluorescence car celle-ci provient exclusivement des émetteurs de type BDP. Les composés selon la présente invention permettent donc de préserver totalement les caractéristiques d'émission des motifs de type dipyrrométhène de bore tout en donnant une grande flexibilité chimique (via le choix des coeurs absorbeurs à deux photons) pour amplifier la réponse en absorption à deux photons des systèmes. Il est ainsi possible de régler, e n fonction des besoins, les propriétés de luminescence des émetteurs tout en gardant toute latitude pour la conception du coeur absorbeur à deux photons. Une telle approche offre de plus une grande flexibilité en terme de modulation des propriétés de luminescence (couverture du spectre visible via l' accordabilité des émetteurs), de solubilité (élaboration de dérivés solubles dans l'eau et fluorescents intéressants pour l'imagerie biologique en particulier). Selon une variante préférentielle de l'invention, chacun desdits émetteurs de type dipyrrométhène de bore répond à la formule (-BDP), dans laquelle R4 est une liaison covalente. Comme indiqué ci-dessus, un intérêt de la présente invention est de bénéficier d'une grande latitude quant à la conception du coeur formant antenne à deux photons. Préférentiellement, le coeur sera ainsi choisi de façon telle que les composés selon la présente invention répondent à l'une des formules suivantes. BDP BDP BDP BDP BDP BDP BDP BDP dans lesquelles : BDP représente des émetteurs de type dipyrrométhène de bore, identiques ou différents tels que définis ci-dessus ; n est un entier compris entre 1 et 7 ; 15 R8 et R9, identiques ou différents, désignent un radical choisi dans le groupe constitué par l'hydrogène, les radicaux alkyles linéaires ou ramifiés en C1 à C25, préférentiellement en C1 à C12, (CH2),,,-SO3M ainsi que leurs analogues ramifiés et polyanioniques, (CH2)n,NAlk3+ ainsi que leurs analogues ramifiés et 20 polycationiques, (CH2),,,-(OCH2 CH2)p OH ainsi que leurs analogues ramifiés, M étant un métal alcalin et m étant égal à 0 ou étant un entier compris entre 1 et 12, préférentiellement entre 1 et 6, p étant un entier compris entre 1 et 25. 5 10 Selon des variantes de l'invention, les composés selon celle-ci répondent à l'une des formules suivantes : R10 RI" Rio RI" Rio R11 / \ / z1 z8 z8 Egalement selon une variante de la présente invention, le composé répond à la formule BDP C B -- A dans laquelle BDP z2ùz3 z2ùz3 z2ùz3 / Z' z z z2 \Z3 z,• A c R8 et R9 ayant la même signification que précédemment ; R10 et R", identiques ou différents représentant chacun un radical OH, OAlk, OAr, SH, SAIk, SAr ; Z`, représentant O, S, NH, NAIk, NAr, PH, PA1k ou PAr ; Z2, Z3 représentant chacun CH, CAIk ou N ; Z4 représentant N ou P ; Z5 ,Z6 représentant chacun CH, CAIk ou N ; Z8 représentant O ou S ; q étant un entier compris entre 1 et 7 r étant un entier compris entre 1 et 7 s étant un entier comprise entre 0 et 7 t étant un entier compris entre 1 et 7. Selon une autre variante de l'invention, le composé répond à la formule suivante : ou à la formule suivante : dans lesquelles BDP, p, a, r, s, t, A B C ont la même signification que précédemment et, W étant CH ou B ou N ou P ou PO R8 et R9 ayant la même signification que précédemment ; Z9 représente C, N+ ou P+ ou Si ou Ge ou Sn Encore selon une autre variante de l'invention, le composé répond à la formule suivante : Y B C BDP -t dans laquelle : BDP, B c , r,s,t ont la même signification que précédemment ; u est égal à 0, 1 ,2, 3, 4 , 5 ou 6 ; et, et W ayant la même signification que 10 précédemment. Encore selon unc variante de l'invention, le composé selon celle-ci répond à la formule suivante : dans laquelle n,, n2, n3,114 identiques ou différents sont chacun égaux à 0 ou 3. Encore selon une variante de l'invention, le composé selon celle-ci répond à la formule suivante : o C D B C o c 15 , BDP, n1, n2, n3 et n4 ayant la même B c A signification que précédemment. Encore selon une variante de l'invention, le composé selon celle-ci répond 5 à la formule suivante : L'invention couvre également toute utilisation de tels composés dans tout 10 procédé ou dispositif mettant en couvre une absorption à un mais préférentiellement à deux photons voire trois photons, notamment dans tout procédé ou dispositif biphotonique. Tout particulièrement, la présente invention couvre toute utilisation de tels composés dans le cadre d'un procédé ou d'un dispositif d'imagerie photonique. L'invention sera mieux comprise grâce à la description qui va suivre de plusieurs modes non limitatifs de réalisation de celle-ci donnés en référence aux figures dans lesquels : la figure 1 représente la voie de synthèse de deux composés (LP42 et LP52) selon la présente invention, à coeur respectivement biphényle et triphénylbenzène ; la figure 2 représente la voie de synthèse d'un troisième composé (CL64) selon celle-ci, à coeur triphénylamine ; la figure 3 représente la voie de synthèse d'un quatrième composé (CL108) selon l'invention, à coeur dendrimérique ; les figures 4a et 4b représentent les spectres respectivement d'absorption et d'émission de ces quatre composés et d'un composé de l'art antérieur (CL76) ; la figure 5 représente les spectres d'absorption à deux photons dans le toluène de ces cinq composés. 1 ) Synthèse du tétrafluoro[p.-[2,2'-[(1,1'-biphényl)-4,4'-diylbis[[4-éthyl-3, 5-diméthyl-2H••pyrrol-2-ylidène-]méthylene]]bis[4-éthyl-3, 5-diméthyl-1H-pyrrolato]]]dibore (LP42). En référence à la figure 1, ce composé a été synthétisé à partir du (1,1'-biphényl)-4,4'dicarboxaldéhyde (2) et de 4 équivalents de 2,4-diméthyl-3-éthylpyrrole (1) selon le Schéma 1 ci-dessous. Sa synthèse nécessite trois étapes : tout d'abord addition d'acide trifluoroacétique (TFA) au mélange d'aldéhyde et de pyrrole pour donner in situ le dipyrrométhane correspondant, puis conversion de ce dernier en dipyrroff éthène par oxydation avec du DDQ, et enfin traitement avec un excès de BF3-Et2O en présence de base pour conduire au complexe de bore correspondant. Plus précisément, à une solution de 2,4-diméthyl-3-éthylpyrrole (367.4 mg, 3 mmol) et de 4,4'-biphényldicarboxaldéhyde (158 mg, 0.75 mmol) dans le dichlorométhane anhydre (95 mL), est ajoutée une goutte d'acide trifluoroacétique. Le mélange est agité pendant 2 h et une solution de DDQ (340.5 mg, 1.5 mmol) dans le dichlorométhane anhydre (45 mL) est ajoutée. Après 1 h d'agitation, de la diisopropyléthylamine (3 mL, 17.2 mmol) puis du BF3-Et2O (3 mL, 23.7 mmol) sont ajoutés. La solution est agitée pendant 1 h et de l'eau (100 mL) est ajoutée. Après filtration de la phase organique sur silice, le solvant est évaporé et le produit est purifié par chromatographie sur colonne de silice (heptane/CH2C12 3:2), peur donner 240 mg (42%) de LP42. 2 ) Synthèse de 1' hexafluoro[ 3-[2,2',2"-[1,3,5-benzènetriyltris[4,1-phénylène [[4-éthyl-3,5.•diméthyl-2H-pyrrol-2-ylidène]méthylène] ]tris[4-éthyl- 3,5-diméthyl-lH-pyrrclato]]]]tribore (LP52). Egalement en référence à la figure 1, ce composé a été préparé en faisant réagir le trialdéhyde 3 avec 6 équivalents de pyrrole 1 en utilisant la même procédure que pour LP42. Plus précisément, à une solution de 2,4-diméthyl-3-éthylpyrrole (491.5 mg, 4 mmol) et de 1,3,5-tris(4-formylphényl)benzène (261.8 mg, 0.67 mmol) dans le dichlorométhane anhydre (95 mL), sont ajoutées deux gouttes d'acide trifluoroacétique. Le mélange est agité pendant 2 h et une solution de DDQ (457 mg, 2 mmol) dans le dichlorométhane anhydre (50 mL) est ajoutée. Après 1 h d'agitation, de la diisopropyléthylamine (4 mL, 22.9 mmol) et du BF3-Et2O (4 mL, 31.6 mmol) sont ajoutés. La solution est agitée pendant 1 h et de l'eau (100 mL) est ajoutée. Après filtration de la phase organique sur silice, le solvant est évaporé et le produit est purifié par chromatographie sur colonne de silice (gradient heptane-CH2Cl2, de 1:1 jusqu'à 0:1)), pour donner 185 mg (23%) de LP52. 3 ) Synthèse du composé CL64 En référence à la figure 2, un troisième composé selon la présente invention, arbitrairement appelé CL64, a également été synthétisé, selon le schéma 2 ci-après, par un triple couplage de Sonogashira entre le trialcyne 4b (obtenu par déprotection de 4a en milieu basique) et 3.5 équivalents du dérivé iodé 5. Plus précisément, à une solution du composé 4a (2.33 g, 4.36 mmol) dans le THF (30 mL) est ajoutée une solution aqueuse de NaOH (1 M, 30 mL), et le mélange est agité vigoureusement à 20 C pendant 18 h. Après évaporation du THF, du dichlorométhane est ajouté. La phase organique est séparée, lavée avec de l'eau et séchée (Na,SO4). Le résidu obtenu après élimination du solvant est purifié par chromatographie sur colonne de silice (heptane/CH2C12 90:10 puis 85:15), pour donner 1.20 g (87%) du composé 4b. L'air est purgé d'une solution du composé 4b (17.9 mg, 0.056 mmol), de composé 5 (100 mg, 0.197 mmol) et de tri-o-furylphosphine (0.52 mg, 2.26 !mol) dans 1.5 mL de toluène/Et3N (5/1) par bullage d'argon pendant 30 min. Puis du Pd2dba3 (0.26 mg, 0.28 mol) est ajouté, et le mélange est agité à 20 C pendant 20 h. Après évaporation du solvant sous pression réduite, le produit brut est purifié par chromatographie sur colonne de silice (heptane/CH2C12 60:40 puis 50:50) pour donner 19 mg (24%) de CL64. 4 ) Synthèse du composé CL108 En référence à la figure 3, un quatrième composé selon la présente invention, arbitrairement appelé CL108 et présentant un coeur dendrimérique a 20 également été synthétis, selon le schéma 3 ci-après. Plus précisément, le composé N,N-bis(4-iodophényl)-4-[(triméthylsilyl) éthynyl]benzènamine (6b) a d'abord été synthétisé. L'air est purgé d'une solution de composé 6a (1. 00 g, 1.605 mmol) dans 8 mL de toluène/Et3N (5/1) par bullage d'argon pendant 20 min. Puis du Cul (12 25 mg, 0.063 mmol), du Pd(PPh3)2C12 (22.5 mg, 0.032 mmol) et du triméthylsilylacétylène (0.227 mL, 1.605 mmol) sont ajoutés, et le mélange est agité à 40 C pendant 3 h. Après évaporation du solvant sous pression réduite, le produit brut est purifié par chromatographie sur colonne de silice (heptane) pour donner 352 mg (37%) (le composé 6b. Le dendron 8a a ensuite été réalisé. L'air est purgé d'une solution de composé 6b (200 mg, 0.337 mmol), de composé 7 (341 mg, 0.843 mmol) et de tri-o-furylphosphine (23 mg, 0.099 mmol) dans 15 mL de toluène/Et3N (5/1) par bullage d'argon pendant 30 min. Puis du Pd2dba3 (12.3 mg, 0.013 mmol) est ajouté, et le mélange est agité à 20 C pendant 15 h. Après évaporation du solvant sous pression réduite, le produit brut est purifié par chromatographie sur colonne de silice (heptane/CH2C12 30:70) pour donner 280 mg (73%) du dendron 8a. Le dendron 8b a ensuite été synthétisé. Pour ce faire, à une solution de composé 8a (200 mg, 0.174 mmol) dans le THF (75 mL) est ajoutée une solution aqueuse de NaOH (1 M, 50 mL), et le mélange est agité vigoureusement à 20 C pendant 24 h. Du dichlorométhane est ajouté, puis la phase organique est séparée, lavée avec de l'eau et séchée (Na2SO4). Le résidu ,Dbtenu après élimination du solvant est purifié par chromatographie sur colonne de silice (heptane/CH2Cl2 25:75), pour donner 98 mg (52%) du dendron 8b. Enfin, on a procédé à la synthèse du composé CL108 selon la présente invention. Dans ce but, l'air a été purgé d'une solution de composé 6a (11.1 mg, 17.8 mol) et du dendron 8b (67 mg, 62.4 mol) dans 1.8 mL de toluène/Et3N (5/1) par bullage d'argon pendant 25 min. Puis du Pd(PPh3)2C12 (0.50 mg, 0.71 mol) et du Cul (0.27 mg, 1.42 E1,mol) sont ajoutés, et le mélange est agité à 40 C pendant 16 h. Après évaporation du solvant sous pression réduite, le produit brut est purifié par chromatographie sur colonne de silice (heptane/CH2C12 20:80) pour donner 15 mg (25%) de CL108. Les caractéristiques d'absorption et de photoluminescence des 4 composés dont les synthèses ont été décrites ci-dessus ont été évaluées. Dans ce cadre, les spectres d'absorption et d'émission de fluorescence de ces composés ont été efrectués et sont représentées sur la figure 4. En référence à (elle-ci, tous les composés présentent dans le toluène une bande d'absorption fine et intense à 527-528 nm, caractéristique du chromophore dipyrrométhène de bore. Les coefficients d'extinction molaires augmentent avec l'augmentation du nombre d'émetteurs cle type dipyrrométhène de bore. Mais ces composés présentent aussi une seconde bande d'absorption située entre 300 et 400 nm. On observe que cette bande est sensiblement plus large et intense pour les multichromophores LP42 et LP52 que pour le composé modèle CL76 ([4-éthyl-2-[(4-éthyl-3,5-diméthyl-2H-pyrrol-2-ylidène)phénylméthyl]-3, 5-diméthyl- lH- pyrrolato]difluorobore, décrit dans l'article de Kollmannsberger et al., Angew. Chem., int. Ed. Engl.1997, 36, 1333-1335). Cette bande peut être attribuée à l'absorption des coeurs biphényle et triphénylbenzène. Avec les composés CL64 et CL76, la seconde bande gagne beaucoup en intensité, en accord avec l'augmentation de la taille du coeur antenne ; parallèlement, le maximum de cette seconde bande est déplacé vers le rouge. En émission, les composés présentent tous une seule bande, de largeur et de structure vibronique semblables, avec un maximum qui varie très peu (de 539 nm pour le modèle CL76 à 544 nm pour le dendrimère CL108). Les spectres d'ADP des quatre composés synthétisés (LP42, LP52, CL64 et CL108) ainsi que du dipyrrométhène de bore de référence CL76 ont également été déterminés dans le proche-infrarouge (700-1000 nm) en étudiant leur fluorescence par excitation à deux photons (TPEF), et sont représentés à la figure 5. Les mesures ont été réalisées dans des solutions de toluène 10-4 M, en 25 utilisant un laser titane: saphir en mode-locké délivrant des impulsions de -80 fs à 80 MHz. La dépendance quadratique de l'intensité de fluorescence avec l'intensité d'excitation a été vérifiée pour chaque point de mesure. La calibration est faite par rapport aux sections efficaces de TPEF de la fluorescéine dans l'eau (pH = 11), qui ont été déterminées de manière absolue dans la littérature antérieure dans la gamme 690-1000 nm. Cette méthode donne accès aux sections efficaces de TPEF (a2), à partir desquelles sont déduites les sections efficaces d'ADP (a2) correspondantes. Les valeurs à 700 et à 990 rim pour les 4 composés synthétisés et pour le composé de référence sont données dans le Tableau 1 ci-après. Les données de la littérature pour le composé PM556 y ont été ajoutées pour comparaison. Dans ce tableau 7bbs représente la longueur d'onde maximale d'absorption du composé, /lem sa longueur d'onde maximale d'émission, ' son rendement quantique de fluorescence, déterminé relativement à la fluorescéine dans NaOH 0.1N, a2 sa section efficace d'ADP (en GM, avec 1 GM = 10-50 cm4.s.photon i); les mesures de TPEF ont été réalisées avec un laser titane:saphir en mode-locké délivrant des impulsions de -80 fs à 80 MHz, en calibrant avec la fluorescéine), r sa durée de vie de fluorescence (appelée aussi temps de déclin de fluorescence). Tableau 1 Âabs e Âem r a, (GM) Composé (nm; (M-'.cm (nm) (ns) à 700 nm à 990 nm CL76a 527 76180 539 0.75 20 20 LP42a 527 161900 542 0.72 4.76 57 48 LP52a 527 244300 542 0.69 4.78 82 75 CL64a 528 144000 543 0.59 4.02 190 45 CL108a 528 223000 544 0.67 280 16 PM556b 491 98600 519 0.83 4.23 - 9 (20`)d a Dans le toluène. b Dans l'eau. Section efficace ,J'ADP à 920 nm. d Données de la littérature (Xu, C.; Webb, W.W.J. Opt. Soc.Am. B 1996, 13, 481-491) Les sections efficaces d'ADP du composé LP42 et du composés LP52 sont 5Sespectivement de 48 et de '75 GM à 990 nm, ce qui correspond à 2.5 et 3.75 fois plus que celle du modèle CL76 à la même longueur d'onde. L'invention permet donc d'augmenter la section efficace du maximum de plus basse énergie. Avec les composés CL64 et CL108, ce maximum semble se décaler vers le 1(j)roche-rouge (et n'a par conséquent pu être déterminé).Plus important, on observe une augmentation encore plus marquée de la bande d'ADP située dans la région proche du rouge confirmant l'implication d'états excités de plus haute énergie liés à la présence des coeurs. Ainsi, à 700 nm, les sections efficaces de LP42 et LP52 sont respectivement 3 et 4 fois plus élevées que celle du 15nodèle CL76. Ce phénomène prend encore de l'ampleur avec les systèmes dérivés de triphénylamines CL64 et 1CL108, avec des sections efficaces d'ADP à 700 nm respectivement 9 et 14 fois plus élevées que celles du dipyrrométhène modèle (CL76). On observe que les rendements quantiques et les durées de vie de fluorescence varient peu d'un composé selon l'invention à l'autre. Ceci démontre que l'énergie d'excitation est bien localisée sur les motifs dipyrrométhènes de bore et que l'émission a lieu à partir de ces unités, ce qui permet de conserver leurs excellentes propriétés de iahotoluminescence. On observe aussi avec les composés CL64 et CL108 un élargissement marqué de la bande de plus haute énergie vers le proche infrarouge (et ce jusqu'à plus de 850 nm), ce qui a pour effet d'élargir la gamme d'activité en ADP de ces systèmes comme on peut le voir sur la Figure 2. 10 Cette bande d'excitation de plus haute énergie, responsable de l'exaltation d'ADP entre 700 et 850 nm, est bien liée à la présence dans les systèmes multichromophoriques d'un coeur jouant le rôle d'antenne à deux photons. L'approche multichromophorique basée sur l'association de plusieurs fluorophores de type dipyrrométhènes de bore avec des coeurs capables d'exalter n 'absorption à deux photons est donc une stratégie efficace pour l'amélioration des propriétés d'ADP. Cette approche vers des nouvelles sondes TPEF offre différents avantages, puisqu'elle permet de conserver les excellentes caractéristiques de fluorescence et de robustesse des dipyrrométhènes de bore, tout en tirant parti des coeurs-antennes pour exalter et moduler l'ADP. 20 REVENDICATIONS 1. Composé chimique caractérisé en ce qu'il est constitué d'un coeur présentant des propriétés d'absorption à double photon lié par des liaisons covalentes distinctes à au moins deux émetteurs de type dipyrrométhène de bore de formule (-BDP) : R3 --N,,N RI F B'F R7 dans laquelle l'un de R` à R7 représente une liaison covalente avec ledit coeur, les autres identiques ou différents, désignant chacun un radical choisi dans 10 le groupe constitué par l'hydrogène, les radicaux alkyles en C, à C25, préférentiellement C, à C12, les radicaux aryles ou hétéroaryles. 2. Composé selon la revendication 1 caractérisé en ce que chacun desdits émetteurs de type dipyrrométhène de bore répond à la formule (-BDP), dans 15 laquelle R4 est une liaison covalente. 3. Composé selon la revendication 1 ou 2, caractérisé en ce qu'il répond à l'une des formules suivantes : R4 BDP BDP BDP BDP BDP BDP BDP 20 BDPdans lesquelles : BDP représente des émetteurs de type dipyrrométhène de bore, identiques ou différents répondant à la formule selon la revendication 1 ; n est un entier compris entre 1 et 7 ; R8 et R9, identiques ou différents, désignent un radical choisi dans le groupe constitué par l'hydrogène, les radicaux alkyles linéaires ou ramifiés en C1 à C25, 10 préférentiellement en C, à C12, (CH2)mSO3M ainsi que leurs analogues ramifiés et polyanioniques, (CH2),,,NAlk3+ ainsi que leurs analogues ramifiés et polycationiques, (CH2)n,-(OCH2-CH2)p-OH ainsi que leurs analogues ramifiés, M étant un métal alcalin e m étant égal à 0 ou étant un entier compris entre 1 et 12, préférentiellement entre 1 et 6, p étant un entier compris entre 1 et 25. 15 4. Composé selon la revendication 3 caractérisé en ce qu'il répond à la formule : 20 5. Composé selon la revendication 3 caractérisé en ce qu'il répond à la formule : 24 5 6. Composé selon la revendication 3 caractérisé en ce qu'il répond à la formule : 7. Composé selon l'une des revendications 1 ou 2 caractérisé en ce qu'il répond à la formule suivante : 10 BDP BDP 26dans laquelle, L L R8 et R9 ayant la même signification que précédemment ; R10 et R", identiques ou différents représentant chacun un radical OH, OAlk, OAr, SH, SAlk, SAr ; Z', représentant O, S,1\ H, NAlk, NAr, PH, PAIk ou PAr ; Z2, Z3 représentant chacun CH, CAlk ou N ; Z4 représentant N ou P ; Z5 ,Z6 ,Z' représentant chacun CH, CAlk ou N ; Z8 représentant O ou S ; q étant un entier compr..s entre 1 et 7 ; r étant un entier compris entre 1 et 7 ;s étant un entier compris entre 0 et 7 ; t étant un entier compris entre 1 et 7. 8. Composé selon l'une des revendications 1 ou 2 caractérisé en ce qu'il répond à la formule suivante : BDP t C ou à la formule suivante : 27A dans lesquelles BDP, p, q, r, s, t, même signification que précédemment et, B ont la w Il5W étant CH ou B ou N ou P ou PO R8 et R9 ayant la même signification que précédemment ; Z9 représente C, N+ ou 1' ou Si ou Ge ou Sn 9. Composé selon l'une des revendications 1 ou 2 caractérisé en ce qu'il répond à la formule suivante : dans laquelle : BDP, B c , r,s,t ont la même signification que précédemment ; uestégalà0, 1,2,3,4,5ou6;et, A (u=3) (u = 4) (u=5) (u = 6)et W ayant la même signification que A 10 précédemment. 10. Composé selon l'une des revendications 1 ou 2 caractérisé en ce qu'il répond 5 à la formule suivante : dans laquelle n,, n2, n3, n4 identiques ou différents sont chacun égaux à 0 ou 3. 11. Composé selon l'une des revendications 1 ou 2 caractérisé en ce qu'il répond à la formule suivante : B D B - D ~- B C - D B - C - D -BOP B , BDP, n1, n2, n3 et n4 ayant la même 15 signification que précédemment. 20 12. Composé selon la revendication 11 caractérisé en ce qu'il répond à la formule : 10 13. Utilisation d'un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 12 5 dans tout procédé ou dispositif mettant en oeuvre une absorption à un ou deux ou trois photons. 14. Utilisation selon la revendication 13 dans le cadre d'un procédé ou d'un dispositif biphotonique. 15. Utilisation selon la revendication 13 ou 14 dans le cadre d'un procédé ou d'un dispositif d'imagerie photonique.