Brevet FR2896588A1 — publié le 20070727

L'invention concerne une méthode de diagnostic in vitro de réponse immunitaire autoimmune chez un sujet par détection dans un liquide biologique dudit sujet d'anticorps dirigés contre l'antigène pentraxine 3 (PTX3) caractérisée en ce que on détermine dans le sérum du sujet la présence d'anticorps dirigés contre l'antigène PTX3 (anticorps anti-PTX3), ainsi que les kits mettant en oeuvre la 10 méthode. 1. Etat de l'art 1. Les lymphocytes dans la réponse immune a. Les lymphocytes et la réponse immune physiologique anti-soi 15 Les cellules du système immunitaire, et en particulier les lymphocytes (B et T), ont pour rôle de détruire les agents étrangers au soi comme les microorganismes. Les lymphocytes expriment des récepteurs qui reconnaissent les agents microbiens. Ainsi par exemple, les lymphocytes T expriment le récepteur T et les lymphocytes B expriment les immunoglobulines, également appelées anticorps. 20 Lorsqu'ils sont activés, les lymphocytes spécifiques des constituants des microorganismes libèrent des médiateurs qui ont pour fonction de détruire les microorganismes et/ou les cellules infectées par les microorganismes, De façon schématique, ces médiateurs sont, pour les lymphocytes B, des immunoglobulines (ou anticorps). Ces anticorps se fixent aux microorganismes 25 et/ou aux cellules infectées et facilitent leur élimination par d'autres cellules immunitaires telles que les macrophages, les polynucléaires, ou les cellules natural killer également appelées cellules NK. Les médiateurs facilitant l'élimination des microorganismes et produits par les lymphocytes T sont des cytokines et/ou des médiateurs toxiques. Ainsi, la reconnaissance d'un microorganisme, (considéré comme du non-soi), par des lymphocytes spécifiques aboutit généralement à sa destruction par les cellules du système immunitaire. b. Processus auto-immuns et maladies auto-immunes En plus des lymphocytes B et T qui ont des récepteurs qui reconnaissent des constituants du non-soi tels que les microorganismes, il existe chez tous les individus des lymphocytes qui reconnaissent également des constituants du soi. Dans des conditions physiologiques normales, ces lymphocytes ne sont pas activés. Ils sont maintenus, par différents mécanismes, dans un état de non réponse au soi, état appelé tolérance ou anergie. Il peut arriver dans des conditions qui restent mal définies telles que par exemple une infection virale ou une prédisposition génétique, que ces lymphocytes soient activés. Il en résulte alors le développement d'une réponse immune anormale et délétère entraînant des destructions tissulaires. Le système immunitaire, et en particulier les lymphocytes, agissent comme si les cellules et/ou certaines molécules de l'individu étaient étrangères et vont donc mettre en place tout leur arsenal pour les détruire. En conséquence, les lymphocytes spécifiques du soi activés vont agir en libérant des anticorps et/ou des médiateurs toxiques. Cette réaction des lymphocytes contre les constituants du soi caractérise les processus auto-immuns. Si cette réaction aboutit au développement d'une pathologie, on parle de maladie auto-immune. Néanmoins, un désordre de type auto-immun peut également être retrouvé dans de nombreuses autres pathologies telles que par exemple l'inflammation chronique, ou encore les pathologies associées à une lyse cellulaire importante. 2. Les auto anticorps a. Définitions En cas de désordre immunologique de type auto-immun, les lymphocytes B spécifiques des constituants du soi sont activés et produisent des immunoglobulines spécifiques de ces constituants ; ces anticorps sont appelés auto anticorps. Les molécules et/ou structures du soi reconnues par des anticorps sont appelées auto antigènes. Les constituants du soi sont exprimés par les tissus, les cellules ou produites par les cellules de tous les individus. Certaines de ces molécules sont des protéines de structure, d'autres ont une fonction bien déterminée comme par exemple des molécules impliquées dans la coagulation et/ou dans la destruction/ élimination des constituants bactériens. b. Antigènes cibles des auto anticorps Actuellement, une centaine de molécules, cibles d'auto anticorps ont été identifiées. Parmi celles-ci, citons à titre d'exemple : - des anticorps anti-phospholipides qui sont dirigés contre deux protéines plasmatiques liées aux phospholipides anioniques : la 132-glycoprotéine I et la prothrombine, - des anticorps anti-nucléaires solubles dirigés contre les antigènes Sm, Sc170, SSA, SSB, et Jol., - des anticorps anti-polynucléaires neutrophiles qui sont dirigés contre des protéines telles que la myélopéroxydase, la protéinase 3 et, de façon moins fréquente, contre la molécule BIP (bactericidal increasing protein), l'azurocidine, l'élastase, la cathepsine G. c. Rôle physiopathologique des auto anticorps En plus d'un rôle essentiel dans le diagnostic d'un désordre immunitaire, certains auto anticorps peuvent jouer un rôle actif dans la pathogénicité de la maladie. A titre d'exemple, des dépôts d'immuns complexes (complexes auto anticorps / auto antigènes) circulants se déposent au niveau rénal et causent une glomérulonéphrite (inflammation aiguë du rein). Les anticorps anti-nucléosomes générés au cours du lupus érythémateux disséminé (LED) sont également directement impliqués dans le processus lésionnel rénal. Dans certains cas particuliers, la présence d'auto anticorps altère la fonction de l'auto antigène et a des conséquences physiopathologiques. Néanmoins, à l'heure actuelle, bien que l'on soupçonne une corrélation entre la présence et le taux d'auto anticorps et l'atteinte des organes, pour la majorité des auto anticorps de spécificité connue, leur rôle physiopathologique n'est pas connu. d. Diagnostic immunologique permettant de rechercher les auto anticorps Actuellement les techniques les plus utilisées en routine dans les laboratoires de biologie ou d'Immunologie pour mettre en évidence un processus auto-immun consistent à rechercher dans les sérums des patients la présence d'auto anti corps. La présence d'auto anticorps capables de se fixer à différents tissus, humains ou non, à des cellules ou des protéines est analysée. Des tissus non humains sont parfois utilisés quand il a été préalablement démontré que la cible des autoanticorps est conservée à travers les espèces. Les techniques utilisées pour rechercher des auto anticorps lorsque l'on utilise comme source d'auto antigènes des tissus ou des cellules sont respectivement des techniques d'immuno-histochimie et d'immunocytochimie : des coupes de tissus ou des cellules sont mises en présence du sérum testé à différentes dilutions. Après incubation puis lavage, la recherche d'immunoglobulines qui reconnaissent les tissus ou cellules est mise en évidence en utilisant un anticorps anti-immunoglobuline humaine couplé à une molécule qui pelmet sa détection tel que par exemple un fluorochrome, ou un complexe enzyme-substrat. Lorsque les molécules reconnues par des auto anticorps sont connues, d'autres techniques sont utilisées : ELISA, Immuno-Dot et/ou immunoempreintes. Dans les deux premiers cas, la molécule (auto-antigène) est adsorbée, respectivement, sur une plaque en polystyrène ou sur une membrane. La plaque ELISA ou la membrane sont incubées avec le sérum et les anticorps présents dans le sérum qui se sont fixés sur la cible sont révélés avec un anticorps anti-immunoglobuline humaine couplé à une molécule qui permet sa détection tel que par exemple un fluorochrome, ou un complexe enzyme-substrat. Dans le cas de l'immuno-empreinte, un extrait protéique total issu d'une cellule ou une molécule purifiée migrent dans un gel de polyacrylamide. Les molécules ainsi séparées selon leur poids moléculaire sont ensuite transférées sur une membrane qui subit le même protocole que celui décrit ci-dessus. e. Intérêt diagnostique et pronostique de la détection d'auto anticorps L'intérêt de la mise en évidence d'auto anticorps réside dans l'indication de l'existence d'une dysimmunité, c'est-à-dire d'une réponse immune anormale qu'elle permet. L'identification d'auto anticorps n'a d'intérêt diagnostic que couplé à des informations cliniques. En effet, la génération d'auto anticorps peut précéder les manifestations cliniques. La présence d'auto anticorps contre certains auto antigènes est majoritairement associée à certaines pathologies dites immunitaires telles que par exemple les auto anticorps anti-nucléaire et le LED. Les résultats biologiques sont généralement essentiels en complément du tableau clinique pour faciliter la conduite à tenir en thérapeutique, surtout lorsque ce tableau est atypique, ce qui est souvent le cas lorsque la maladie est détectée précocement. En effet, les traitements actuels tels que les immunosuppresseurs et les corticoïdes sont efficaces mais agressifs. La présence d'auto anticorps, leur spécificité et le taux de ces auto anticorps est donc en général essentiel au clinicien pour évaluer le ratio bénéfice/risque des traitements. f. Intérêt actuel de la recherche de nouvelles cibles des auto anticorps Actuellement, la recherche de nouvelles cibles des auto anticorps apparaît comme une niche de choix dans le domaine des biotechnologies. Les maladies auto immunes représentent la troisième cause de morbidité dans les pays industrialisés. Le vieillissement de la population contribue à cette augmentation. La recherche de nouvelles cibles pennet un diagnostic rapide et précoce d'une réponse immunitaire autoimmune ainsi que de compléter les panels de cibles d'auto antigène utilisés dans les laboratoires. Il existe actuellement une réelle volonté de disposer de tests diagnostiques complémentaires à ceux existants afin de bénéficier d'informations plus précoces et mieux adaptées pour suivre l'évolution de la maladie. En effet, un traitement précoce permet d'éviter les complications et de limiter le coût thérapeutique de ces pathologies chroniques. Notons que des techniques de diagnostique rapide apparaissent également comme essentielles lorsqu'il y a engagement du pronostique vital tel que par exemple lors d'atteinte rénale ou pulmonaire. Ceci est justement l'objet de la présente invention. II. L'invention En effet, les inventeurs ont pu trouver de quoi répondre à cette attente en montrant pour la première fois la présence d'auto-anticorps, dirigés contre la molécule pentraxine 3 (PTX3), également appelée TNF-inducible gene 14 (TSG-14), dans des liquides biologiques de sujets atteints de réponse immunitaire autoimmune. De ce fait, la présente invention concerne une méthode de diagnostic in vitro de réponse immunitaire autoimmune chez un sujet par détection dans un liquide biologique dudit sujet d'anticorps dirigés contre l'antigène pentraxine 3 (PTX3). 1. La pentraxine 3, un médiateur de l'immunité innée a. Les récepteurs de l'immunité innée Les cellules de l'immunité innée sont impliquées dans la reconnaissance rapide des microbes ; leur activation permet de contrôler la propagation 25 des microbes, via notamment la production de médiateurs microbicides ainsi que le développement d'une réponse immune spécifique. Afin d'échapper à la reconnaissance par les cellules immunitaires innées qu'ils rencontrent. les microbes génèrent de nombreuses mutations afin d'augmenter l'hétérogénéité de leurs composants. Afin de contrecarrer cette stratégie 30 d'échappement de reconnaissance, les cellules immunitaires innées ont sélectionné des récepteurs capables de reconnaître des structures fortement20 conservées chez les microorganismes et nécessaires à la physiologie des micro- organismes. Ces structures conservées tels que les lipopolysaccharides, les ARN double brins et les séquences CpG sont regroupées sous le terme de Pathogen-Associated Molecular Pattem ou PAMPs. Par définition, les PAMPs sont distincts du soi, partagés par les grands groupes de pathogènes et sont essentiels à leur survie. Ils constituent de véritables signatures moléculaires des microbes et leur reconnaissance est à l'initiation de la réponse immune anti- microbienne. Les récepteurs impliqués dans la reconnaissance des PAMPs sont appelés récepteurs de l'immunité innée ou Pattern-Recognition Receptors (PRRs). Les PRRs reconnaissent un large spectre de constituants microbiens comme des sucres, des protéines, des lipides et des acides nucléiques (Medzhitov et Janeway, 2000 ; Janeway et Medzhitov, 2002). Les PRRs sont exprimés par les cellules immunitaires innées soit au niveau intracellulaire, membranaire ou dans le milieu extracellulaire. Les PRRs sont distingués selon leur fonction biologique : - les PRRs de reconnaissance, impliqués dans la détection et/ou l'internalisation des micro-organismes par les cellules immunitaires innées et, - les PRRs de signalisation, impliqués dans l'activation des cellules immunitaires par 20 les micro-organismes. Les PRRs de reconnaissance membranaires appartiennent, entre autre, à la famille des récepteurs d'épuration, des récepteurs au mannose, des lectines de type C et de la famille des intégrines. Les PRRs de reconnaissance solubles, encore appelés opsonines, appartiennent à la famille des collectines (van de Wetering et al, 2004), 25 à la famille des ficolines (Matsushita & Fujita, 2002) et à la famille des pentraxines (Garlanda et al, 2005). Les PRRs de reconnaissance solubles ont pour rôle de reconnaître, de se fixer et de favoriser l'élimination des microbes par les cellules phagocytaires. La superfamille des pentraxines (PTX) regroupe des molécules très conservées 30 durant l'évolution caractérisées par la présence d'un domaine pentraxine dans la région C-terminale. Elle comprend plusieurs membres dont : - la protéine C-réactive (C-reactive protein ou CRP, encore appelée PTX1) et le sérum amyloide P (encore appelée PTX2). CRP et SAP sont des protéines de la phase aiguë produites par le foie en réponse à des stimuli pro-inflammatoires comme IL-6. CRP et SAP se lient à une grande variété de molécules incluant le soi (composante Clq du complément) (Agrawal & Volanakis, 1994 ; le soi modifié (les cellules apoptotiques) (Gershov et al, 2000 ; Bijl et al, 2003) et le non-soi (bactéries et virus) (Hind et al, 1984); cependant, les fonctions de CRP et SAP restent mal connues, la molécule PTX3, encore appelée TSG-14 (TNF-stimulated gene 14) a été identifiée comme une molécule dont la synthèse est fortement augmentée dans les fibroblastes et les cellules endothéliales en réponse à une stimulation par le TNFa ou l'IL- l(3 (Breviario et al, 1992 ; Lee et al, 1993). PTX3 est le prototype des pentraxines longues : le domaine C-terminal de PTX3 est homologue (17% d'identité) à CRP entier et contient un domaine N-terminal complémentaire sans homologie avec aucune autre molécule (Garlanda et al, 2005). b. La molécule PTX3 La molécule PTX3 est produite par de nombreux types cellulaires tels que les cellules endothéliales, les fibroblastes, les chondrocytes, les myocytes, les phagocytes rnononucléés, les cellules dendritiques et les cellules épithéliales en réponse à un stimulus pro-inflammatoire ou à un composant microbien (Breviario et al, 1992 ; Abderrahim-Ferkoune et al, 2003 ; Alles et al, 1994 ; Doni et al, 2003 ; Goodman et al, 2000 ; Vouret-Craviari et al, 1997 ; Nauta et al, 2005 ; Garlanda et al, 2005). La molécule PTX3 est produite sous forme d'un multimère constitué de 10 à 20 sous-unités (Bottazzi et al, 1997). Au contraire de CRP et SAP, de nombreuses fonctions ont été décrites pour la molécule PTX3: - PTX3 se lie à la composante Clq du complément ; cette fixation peut soit activer ou inhiber la voie classique du complément en fonction de la structure soluble ou immobilisée de Clq (Nauta et al, 2003), - PTX3 se lie aux cellules apoptotiques et favorise leur élimination par les cellules phagocytaires (Rovere et al, 2000), - PTX3 se fixe à certains pathogènes comme Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa et Aspergillus furnigatus, facilitant leur ingestion par les cellules phagocytaires (Garlanda et al, 2002 ; Diniz et al, 2004). Les souris transgéniques surexprimant PTX3 ont une survie augmentée dans un modèle d'endotoxémie (Dias et al, 2001). Au contraire, les souris déficientes en PTX3 présentent une sensibilité accrue à une aspergillose pulmonaire (Garlanda et al, 2002). L'ensemble de ces données montre que la molécule PTX3 se comporte comme un PRR soluble jouant un rôle essentiel dans la reconnaissance du soi modifié et du non soi. II. Description de l'invention Un premier aspect de la présente invention concerne une méthode de diagnostic in vitro de réponse immunitaire autoimmune chez un sujet par détection dans un liquide biologique dudit sujet d'autoanticorps dirigés contre l'antigène pentraxine 3 (PTX3) caractérisée en ce que on détermine dans les liquides biologiques du sujet la présence d'anticorps dirigés contre l'antigène PTX3 (anticorps anti-PTX3) et qu'on en conclue l'existence d'une réponse immunitaire autoimmune chez le sujet. Par réponse immunitaire autoimmune, on entend désigner l'existence de lymphocytes B producteurs d'anticorps dirigés contre des molécules du soi. Par anticorps anti-PTX3 , on entend désigner selon la présente invention toute molécule comprenant un paratope capable de se lier spécifiquement à la protéine PTX3. Par anticorps anti-PTX3 , on entend également désigner selon la présente invention une population homogène de molécules comprenant toutes le même paratope capable de se lier spécifiquement à la protéine PTX3. On entend par paratope le site de combinaison antigénique compris dans le fragment Fab d'un anticorps qui est localisé dans les régions hypervariables ou CDR des domaines variable VH et VL de la chaîne lourde et de la chaîne légère d'une immunoglobuline. Selon la présente invention, on détermine dans un liquide biologique du sujet le taux d'anticorps dirigés contre l'antigène PTX3 et en le comparant avec le taux d'anticorps dirigés contre l'antigène PTX3 de référence défini à partir de sérums de sujets sains, on détermine l'existence d'une réponse immunitaire autoimmune chez le sujet. De manière préférée selon la présente invention, la présence et/ou le taux d'anticorps dirigés contre PTX3 est déterminé par la mise en évidence d'une liaison entre l'antigène PTX3 et l'anticorps anti-PTX3. La réaction de liaison antigène - anticorps est due à l'interaction entre les épitopes de l'antigène et les paratopes de l'anticorps. Elle fait intervenir quatre types de liaisons non covalentes (des liaisons hydrogènes, des liaisons électrostatiques, des liaisons hydrophobes et les forces de Van der Waals). Selon la présente invention, la mise en évidence d'une liaison entre l'antigène PTX3 et l'anticorps anti-PTX3 est réalisée préférentiellement par immobilisation de l'antigène PTX3 sur un support solide, par réactions de précipitation en milieu liquide et/ou immunoprécipitation, et/ou par réaction de précipitation en gel. 20 Par réaction de précipitation en milieu liquide, on entend désigner selon la présente invention une réaction qui consiste à répartir des quantités égales d'une solution d'antigène PTX3 avec des dilutions croissantes d'un liquide biologique, de préférence un sérum immun. 25 La zone d'équivalence (qui est le point où la courbe atteint son maximum) correspond à la formation d'une liaison antigène-anticorps. La fixation d'un antigène PTX3 selon l'invention sur un support solide peut être réalisée par des techniques bien connues de l'homme du métier. Le support peut se 30 présenter sous des formes diverses, y compris sous forme de bandes ou de particules telles que des billes. La surface du support peut être polyfonctionnelle ou susceptible d'être polyfonctionnalisée de manière à fixer l'antigène PTX3 via 15 des interactions covalente ou non covalente qui peuvent être spécifiques ou non spécifiques. A titre illustratif, le support sur lequel est immobilisé l'antigène PTX3 peut être un matériau insoluble dans l'eau poreux ou non poreux. Le support peut être hydrophile ou susceptible d'être rendu hydrophile et comprend les poudres inorganiques telles que la silice, le sulfate de magnésium et l'aluminium ; les matériaux polymères naturels, en particulier les matériaux cellulosiques et les matériaux dérivés de la cellulose ; des polymères naturels ou synthétiques tels que la nitro cellulose, l'acétate de cellulose, le poly (chlorure de vinyle), le polyacrylamide, le dextran réticulé, l'agarose, le polyacrylate, le polyéthylène, le polypropylène, le poly(4-méthylbutène), le polystyrène, le polyméthacrylate, le poly (téréphtalate d'éthylène), le Nylon, le poly (butyrate de vinyle), certains types de verre tels que le Bioglass, ou des céramiques. Le support solide pour l'immobilisation de l'antigène PTX3 est préférentiellement de type plastique ou polypropylène pour un dosage ELISA ou RIA, de type membrane pour un dosage Western blot ou Dot blot, de type billes ou de type mousse. Par ELISA (Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay), on entend désigner selon la présente invention est un test immunologique destiné à détecter et/ou doser les anticorps anti-PTX3 dans un liquide biologique, par marquage immunoenzymatique. Par RIA (Rad.ioimmunology assay) on entend désigner selon la présente invention un test radio immunologique destiné à détecter et/ou doser les anticorps anti-PTX3 dans un liquide biologique sur le même principe que l'ELISA, mais par marquage radioimmunologique. Par dosage fluorimétrique, on entend désigner selon la présente invention la numération de particules, par exemple des billes, présentant à leur surface l'antigène PTX3, et auquel se seront liés des anticorps anti-PTX3 éventuellement présents dans un échantillon à tester. Les anticoprs anti-PTX3 fixés seront détectés à l'aide d'anticorps anti-immunoglobulines humaines couplées à un fluorochrome. La mesure de la quantité d'anticorps anti-PTX3 est fonction de l'intensité de fluorescence. Ceci est réalisé à l'aide d'un analyseur de fluorescence ou d'un analyseur de cellules : cytomètre de flux ou FACS (fluorescence activated cell sorter). Par Western blot, ou immunotransfert, on entend désigner selon la présente invention une technique où l'antigène PTX3 est séparé par électrophorèse sur gel de polyacrylamide, puis transféré électrophorétiquement sur une membrane (de nitrocellulose, par exemple). Le dépôt sur la membrane de l'échantillon de liquide biologique à tester permet alors de lier des anticorps anti-PTX3, qui seraient présents dans l'échantillon, à l'antigène PTX3, suivi d'une détection par un second Anticorps marqué par un isotope, un fluorochrome ou une enzyme. Par Dot blot on entend désigner selon la présente invention une technique d'absorption qui consiste à déposer des protéines sur une membrane de nitrocellulose sous forme de points puis à effectuer les étapes d'un immunobuvardage classique. De plus, la présence et/ou le taux des anticorps anti-PTX3 est déterminée selon la présente invention en utilisant un substrat chromogène, par chimioluminescence, par fluorescence, ou par radiomarquage. 25 Par substrat chromogène, on entend désigner le substrat chromogène d'une enzyme qui permet d'obtenir en final, une réaction colorée qui est détectée à l'aide d'un spectrophotomètre. A titre d'exemple, on peut citer X-gal/OPTG et salmon- gluc/O-Me-b-Gluc, OPD, ABTS. 30 Par chimiolurninescence on entend désigner une réaction chimique accompagnée d'une émission lumineuse, la mesure de la lumière émise permettant de quantifier l'un des réactifs, si la quantité de l'autre réactif est connue. A titre d'exemple on20 peut citer l'oxydo-réduction du luminol (3-aminophthalhydrazide) avec l'eau oxygénée, par exemple, ou un quelconque hydroxyde. Par fluorescence on entend désigner l'utilisation d'une molécule fluorescente telle que les molécules décrites par ICHINOSE et al. (1991) ou encore des dérivés d'isothiocyanate fluorescents, la phycoerithrine,l'isothiocyanate de rhodamine, le chlorure de dansyle ou encore le composé XRITC, la protéine GFP (Green Fluorescent Protein ) du poisson Aequorea Victoria et ses nombreux dérivés, ou encore la protéine YFP( Yellow Fluorescent Protein ) ainsi que la protéine luciférase. Par radiomarquage on entend désigner un marquage par substance radioactive. La substance radioactive peut être marquée, par exemple par un isotope choisi parmi[3H], [-P] et['25 I]. Selon la présente invention, le dosage ELISA ou RIA permet de quantifier le taux d'anticorps a.nti-PTX3 et le dosage de type Dot blot ou Western blot permet de déceler des taux d'anticorps anti-PTX3 plus élevés par rapport au taux d'anticorps anti-PTX3 de référence. Par taux d'anticorps anti-PTX3 de référence on entend désigner selon la présente invention le taux d'anticorps anti-PTX3 obtenu à partir du sérum d'un sujet sain, d'un ensemble de sérum de sujets sains ou défini de façon arbitraire. 25 Par sujet sain, on entend désigner selon la présente invention un sujet ne présentant pas de réponse immunitaire autoimmune. Par taux d'anticorps anti-PTX3 défini de façon arbitraire , on entend désigner selon la présente invention tous moyens qui permettront de reproduire la valeur 30 moyenne obtenue avec un pool de sujets sains. 20 De manière encore préférée, la réaction de précipitation en gel est choisie parmi les réactions de type immunodiffusion radiale, immunodiffusion double d'Ouchterlony, immunoélectrophorèse et électrophorèse en fusée. Par Immunodiffusion radiale, également appelée technique de Mancini, on entend désigner selon la présente invention une réaction de précipitation en gel qui consiste à incorporer une solution d'antigène PTX3 dans la gélose et à déposer un liquide biologique susceptible de contenir des anticorps anti-PTX3 dans des puits. A l'équilibre il se forme un anneau de précipitation dont le carré du diamètre est proportionnel à la concentration des anticorps anti-PTX3. La concentration est exprimée par référence à une courbe standard avec un anticorps anti-PTX3 de concentration connue. Par immunodiffusion double d'Ouchterlony on entend désigner selon la présente invention une réaction de précipitation en gel réalisée de la façon suivante : les solutions d'antigène PTX3 et d'anticorps anti-PTX3 sont déposées dans des puits percés à distance les uns des autres dans un gel d'agarose. Les molécules diffusent dans le gel en fonction de leur taille et forment des lignes de précipitation pour chaque système d'antigène et d'anticorps. Chaque ligne de précipitation correspond à la zone d'équivalence respective, c'est-à-dire à la formation d'une liaison antigène-anticorps. Cette méthode permet l'analyse d'un liquide biologique et l'identification d'anticorps anti-PTX3. Par immunoéléctrophorèse, on entend désigner selon la présente invention une réaction de précipitation en gel qui met en jeu une séparation des protéines par électrophorèse dans un gel d'agarose suivie d'une double diffusion contre des anticorps spécifiques selon une direction perpendiculaire à l'axe de migration électrophorétique. Chaque zone d'équivalence correspond à un précipité antigène- anticorps qui se traduit par un arc de précipitation. L'immunoélectrophorèse permet de caractériser ou d'identifier des anticorps anti-PTX3 mais ce n'est pas une méthode quantitative. Par électrophorèse en fusée on entend désigner selon la présente invention une réaction de précipitation en gel dans laquelle l'antigène PTX3incorporé dans le gel d'agarose est immobile (grâce au pH du gel), et l'anticorps anti-PTX3 chargé négativement migre sous l'action d'un champ électrique. L'arc de précipitation résultant à la forme d'une fusée dont la hauteur est proportionnelle à la concentration de l'anticorps anti-PTX3. Par liquide biologique on entend désigner selon la présente invention le sang, le sérum, le plasma, la lymphe, l'urine, la salive, le liquide céphalorachidien 10 préférentiellement le sérum. Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, la méthode de diagnostic selon la présente invention est un dosage ELISA et elle comprend les étapes suivantes : incuber le sérum du sujet avec les antigènes PTX3 fixés sur un support solide laver les anticorps du sérum non fixés aux antigènes PTX3 du support solide ajouter des anticorps anti-immunoglobuline couplés à un marqueur, lesdits anticorps anti-immunoglobuline étant capables de reconnaître les anticorps du sérum laver les anticorps anti-immunoglobuline non fixés au support solide détecter et/ou quantifier le marqueur lié au support solide et corréler avec la présence et/ou la quantité d'anticorps du sérum. 25 La concentration est variable, et est à déterminer suivant le support et la source de PTX3. Les antigènes PTX3 selon la présente invention sont choisis parmi la PTX3 entière d'origine humaine, animale, ou synthétique, un ou plusieurs fragments de PTX3 30 d'origine humaine, animale ou synthétique, et une molécule homologue à PTX3, préférentiellement de la famille des pentraxines, et/ou présentant des homologies de séquences primaires, secondaires ou tertiaires importantes. 15 a) 20 b) c) d) e) 20 15 Les antigènes PTX3 selon la présente invention sont obtenus à partir d'un système recombinant procaryote par exemple dans une souche d'Escherichia coli, d'un système recombinant eucaryote, de préférence des cellules CHO et la lignée N50, de la purification à partir des cellules, tissus, ou liquides biologiques humains ou animaux, ou par synthèse chimique, de préférence synthèse peptidique. Par synthèse peptidique, on entend désigner selon la présente invention la synthèse en phase solide de peptides de PTX3. Les anticorps anti-immunoglobuline selon la présente invention sont sélectionnés dans le groupe comprenant des anti immunoglobuline G, des anti immunoglobuline A, des anti immunoglobuline M, des anti immunoglobuline D, et des anti immunoglobuline E. Dans ce mode de réalisation préféré de l'invention, le support solide consiste en des microbilles ou en des plaques de microtitre, tel que les plaques ELISA. et le marqueur est sélectionné dans le groupe comprenant les marqueurs fluorescents, chimioluminescents, enzymatiques et radioactifs. Plus particuFièrement, dans ce mode de réalisation préféré de l'invention le support solide est une plaque ELISA et comprend les étapes suivantes : incuber le sérum du sujet avec les antigènes PTX3 fixés sur la plaque ELISA laver les anticorps du sérum non fixés aux antigènes PTX3 de la plaque ELISA ajouter des anticorps anti-immunoglobuline couplés à une enzyme, lesdits anticorps anti-immunoglobuline étant capable de reconnaître les anticorps du sérum laver les anticorps anti-immunoglobuline non fixés à la plaque ELISA ajouter le substrat soluble correspondant à l'enzyme 25 a) b) 30 c) d) e) f) lire les valeurs d'absorbances des puits de la plaque ELISA dans un lecteur ELISA, à une longueur d'onde appropriée et corréler avec la présence et/ou la quantité d'anticorps du sérum. De plus, les enzymes et les substrats solubles correspondant selon ce mode de réalisation préféré de l'invention sont sélectionnés dans le groupe comprenant : - La phosphatase alcaline et le substrat soluble 4-NitroPhényl Phosphate (PNPP) - La peroxydase et le substrat soluble orthophenylène diamine (OPD) - La (3-galactosidase et le substrat soluble 2-nitrophenyl (3-galactoside (ONPG) - La glucose 6-phosphate dehydrogenase et le substrat soluble glucose-6-phosphate (G6P). - La biotine et le substrat soluble streptavidine couplé à la peroxydase et le substrat ABTS ou OPD de la peroxydase. Selon la présente invention, le sujet est préférentiellement un mammifère, encore plus préférentiellement un être humain. 20 Selon la présente invention, les anticorps anti-immunoglobuline sont préférentiellement des anticorps anti-immunoglobuline humaine. Selon la présente invention, le diagnostic d'une réponse immunitaire autoimmune peut être associé à l'existence ou à la prédiction d'une maladie auto-immune chez 25 le sujet. De manière préférée, les maladies auto-immunes sont sélectionnées dans le groupe comprenant le syndrome de Gougerot-Sjdgren, le diabète de type 1, la gammapathie monoclonale, la granulomatose de Wegener, le lupus érythémateux disséminé, la maladie athéromateuse, la maladie de Crohn, la maladie de Horton, la maladie de Reiter (syndrome conjonctivo-urétro-synovial), la polyarthrite 30 rhumatoïde, la rectocolite hémorragique, le rhumatisme psoriasique, la sarcoïdose, la sclérodermie, la sclérose en plaques, et les dermatites bulleuses auto-immunes, la maladie de Basedow (hyperthyroïdie), la thyroïdite chronique de Hashimoto 15 (hypothyroïdie), le symdrôme de Goodpasture, le pemphigus, la myasthénie, le diabète par insulinorésistance, l'anémie hémolytique auto-immune, la purpura thrombocytopénique auto-immun, polymyosite et dermatomyosite, l'anémie de Biermer, la glomérulonéphrite, certaines stérilités, la périartérite noueuse et le syndrome de Churg et Strauss, la maladie de Still, la polychrondite atrophiante, la maladie de Behçet, la spondylarthrite. La méthode de diagnostic d'une réponse immunitaire autoimmune associé à l'existence d'une maladie auto-immune chez un sujet selon un aspect de la présente invention peut également comprendre la détection et/ou quantification dans le sénim dudit sujet d'anticorps dirigés contre d'autres auto-antigènes et préférentiellement l'antigène myeloperoxydase (MPO) et/ou l'antigène protéinase 3 (PR3) et/ou élastase et/ou BPI et/ou cathépsine G et/ou des antigènes nucléaires. Selon la présente invention, le diagnostic d'une réponse immunitaire autoimmune peut également être associé une pathologie caractérisée par une souffrance tissulaire chez le sujet. Dans ce cas, et de manière préférée, la souffrance tissulaire chez le sujet est due à une nécrose, particulièrement un infarctus, une inflammation chronique ou une infection chronique. La souffrance tissulaire est appréciée en mesurant la concentration dans différents fluides biologiques de molécules libérées lorsque les cellules souffrent (ces molécules peuvent être des enzymes telle que les transaminases ou des protéines de l'inflammation). Un deuxième aspect de la présente invention concerne un kit de diagnostic pour la détection et/ou la quantification dans un liquide biologique d'anticorps dirigés contre l'antigène PTX3, comprenant a) un support solide caractérisé en ce que l'antigène PTX3 est fixé sur le support 30 solide. Les caractéristiques du kit (support solide, antigène PTX3...) selon la présente invention sont telles que définies précédemment pour la méthode de diagnostique. Par liquide biologique on entend désigner selon la présente invention le sang, le 5 sérum, le plasma, la lymphe, l'urine, la salive, le liquide céphalorachidien préférentiellement le sérum. De manière optionnelle, le kit selon la présente invention comprend une solution contenant une ou des protéines de saturation qui saturent les sites réactifs du 10 support solide. De manière optionnelle, le kit selon la présente invention comprend en outre b) une solution contenant des anticorps anti- immunoglobuline conjugués avec un marqueur Selon la présente invention,les anticorps anti- immunoglobuline utilisés dans le kit sont préférentiellement sélectionnés dans le groupe comprenant des anti immunoglobuline G, des anti immunoglobuline A, et des anti immunoglobuline M, des anti immunoglobuline D, et des anti immunoglobuline E. De manière optionnelle, le kit selon la présente invention comprend en outre c) une solution de lavage Par solution de lavage, on entend désigner selon la présente invention une solution 25 saline tamponnée contenant une faible concentration d'agent détergent et ou une protéine de saturation, préférentiellement de type sérum albumine bovine ou gélatine. Par protéine de saturation , on entend désigner une protéine qui sature les sites 30 réactifs du support solide. 15 20 De manière préférée, le support solide utilisé dans le kit selon la présente invention est une plaque ELISA et le marqueur est une enzyme. De manière optionnelle, le kit selon la présente invention comprend en outre 5 d) une solution contenant le substrat soluble correspondant à l'enzyme Un troisième aspect de la présente invention concerne l'utilisation d'un antigène PTX3 pour le diagnostic d'une maladie auto-immune chez un être humain. 10 De manière préférée un test ELISA est utilisé pour le diagnostic. Un quatrième aspect de la présente invention concerne l'utilisation de la méthode de diagnostic ou du kit selon la présente invention pour identifier, avant l'apparition des signes cliniques, les sujets à risques de réponse immunitaire 15 autoimmune. De manière préférée, la méthode de diagnostic ou le kit selon la présente invention sont utilisés pour suivre l'évolution de la réponse immunitaire autoimmune, prévoir les poussées évolutives de la maladie et/ou suivre l'efficacité du traitement. 20 Par poussées évolutives , on entend désigner une agravation des signes cliniques. Légende des figures : 25 Figure 1 : Mise en évidence d'anticorps anti-PTX3 chez des sujets présentant une immuno-fluorescence indirecte (IFI) positive, associée à des auto-anticorps anti-MPO ou à des auto-anticorps anti-PR3 Figure 2 : Mise en évidence d'anticorps anti-PTX3 chez des sujets présentant une 30 IFI positive, en l'absence d'autoanticorps anti-MPO ou à des autoanticorps anti- PR3 Exemples : 1. Utilisation d'un test diagnostique permettant de rechercher des auto anticorps anti-PTX3 dans les sérums de patients. a. Description du test ELISA permettant de rechercher des anticorps 5 anti-PTX3. Des plaques ELISA 96 puits (Maxisorb ; Nunc, Roskilde, êanemark) sont incubées ou non une nuit à 4 C avec 100 L de PTX3 à 10 g/mL en tampon carbonate/bicarbonate pH=9,6. Les puits sont ensuite vidés et incubés pendant 1 heure et 30 minutes avec 300 L dune solution de sérum 10 albumine bovine (BSA) à 1% dans du tampon phosphate salin (Phosphate saline buffer) 10 mM, pH=7,4. Les sérums de patients et de sujets sains sont dilués au 1/400 dans un tampon PBS contenant 0,5% de BSA (w:v) et 0,05% de Tween 20 (w:v) et 100 L de cette dilution sont déposés, pour chacun des sérums, dans un puit coaté avec la PTX3 et dans un puits non coaté (qui 15 permettra de déterminer le bruit de fond pour chaque sérum). Après une incubation de 2 h à 37 C, les plaques sont lavées 4 fois avec 200 L de PBS contenant 1% de Tween 20 (w:v) puis incubées pendant 1 h 30 à 37 C avec 100 L d'un anticorps anti-immunoglobuline (G, A et M) humaine couplé à la biotine (Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). Après 4 lavages avec 20 200 aL de PBS contenant 1% de Tween 20 (w:v), 100 aL d'une solution de streptavidine couplée à la peroxydase est incubée pendant 1 heure à 37 C (solution commerciale diluée au 1/1000 ; BD Pharmingen, San José, CA). Après 4 lavages en PBS contenant 1% de Tween 20 (w:v), les anticorps fixés sont détectés en utilisant le substrat ABTS (Sigma, St Louis, CA) préparé 25 extemporanément. La lecture de la plaque ELISA se fait à l'aide d'un fluoromètre (X=405 nm avec une référence à X =620 nm) ; les résultats sont exprimés en valeur de densité optique (DO). Un exemple de résultats bruts obtenus après lecture est présenté ci-dessous. La reproductibilité des résultats a été vérifiée par la réalisation de manipulations 30 successives. De façon générale, les résultats ont été analysés de la façon suivante : -Pour chaque plaque ELISA, 20 à 30 sérums de sujets sains ont été testés en parallèle avec 20 à 30 sérums de patients. - Pour chaque sérum, la valeur de DO obtenue sur le puits non coaté (bruit 5 de fond BSA) a été soustraite à la valeur de DO obtenue avec puits coaté avec la molécule PTX3 afin d'obtenir une DO spécifique, - Les valeurs de DO spécifiques obtenues avec les sérums de sujets sains ont été additionnées afin de déterminer la moyenne et la déviation standard. Une valeur seuil définie comme la moyenne plus 2 déviations standard est 10 calculée pour chaque plaque ELISA (mean + 2 s.d.), - Les valeurs de DO spécifiques des sérums de patients sont considérées comme positives lorsqu'une valeur de DO supérieure à la valeur seuil moyenne + 2 sd est obtenue. Dans les exemples suivants, des anticorps anti-PTX3 ont été recherchés 15 chez des patients présentant des auto anticorps anti-neutrophiles (IFI+, correspondant à des ANCA+) ; 3 populations ont été analysées : - des patients ANCA+, MPO+ (PR3-) exemple a et Figure 1 schéma de droite - des patients ANCA+ PR3+ (MPO-) exemple b et Figure 1 schéma de gauche - des patients ANCA+ PR3-MPO- exemple c et Figure 2. 20 - exemple d : parmi les patients PR3et MPO-, nous avons ré-analysé les résultats précédents (exemple c) en fonction de la présence d'auto anticorps dirigés contre d'autres spécificités - présentant des auto anticorps divers b. Présence d'anticorps anti-PTX3 chez les patients IFI + MPO+ 25 (PR3-) Les sérums de 22 sujets présentant des auto anticorps anti-polynucléaires (IFI+) et des anticorps anti-MPO et de 23 sujets sains ont été testés comme décrit ci-dessus. La valeur seuil (mean + 2 s.d.) est de 0.037 - 9 sérums de patients sont supérieurs à la valeur seuil. Les résultats obtenus sont présentés 30 dans la Figure 1 A. c. Présence d'anticorps anti-PTX3 chez les patients IFI + PR3+ (MPO-) Les sérums de 22 sujets présentant des auto anticorps-polynucléaires (IFI+) et des anticorps anti-PR3 et de 23 sujets sains ont été testés comme décrit ci-dessus. La valeur seuil (mean + 2 s.d.) est de 0.04 - 11 sérums de patients sont supérieurs à la valeur seuil. Les résultats obtenus sont présentés dans la Figure I B. d. Présence d'anticorps anti-PTX3 chez les patients IFI + MPOPR3- Les sérums de 21 sujets présentant des auto anticorps-polynucléaires (IFI+) et de 23 sujets sains ont été testés comme décrit ci-dessus. La valeur seuil (mean + 2 s.d.) est de 0.3 - 9 sérums de patients sont supérieurs à la valeur seuil. Les résultats obtenus sont présentés dans la Figure 2. e. Analyse de la fréquence d'anticorps anti-PTX3 chez les 15 patients ANCA+ MPOPR3-Chez les patients IFI+ MPO- et PR3- (n = 131), la recherche d'auto anticorps dirigés contre d'autres spécificités (Bactericidal permeability increasing protein [BPI]), cathepsine G et élastase) a été réalisée en utilisant un kit ELISA commercial (ANCAprofil, Euroimmun, XX). En 20 parallèle, la présence dans ces sérums d'anticorps anti-PTX3 a été recherchée par ELISA, comme décrit précédemment. Les résultats obtenus sont schématisés ci-dessous. Ils montrent que 72 % des patients ayant une IFI+ qui ne peut être confirmée à l'heure actuelle par des kits commerciaux utilisés en routine (permettant de détecter la présence d'auto anticorps 25 contre les antigènes suivants : MPO, PR3, BPI, cathepsine G et élastase) présentent des anticorps anti-PTX3. 30 Sérums PTX3 - /ùIr 95/13 1 (72%) Sérums IFI+ MPO- PR3- n=131 Sérums PTX3+ - autre spécificité positive 36/131(28%) 10/36(27%) aucune autre spécificité 10 positive 26/36 (72 %) f. Anti-PTX3 chez les sujets présentant des auto anticorps dirigés contre différents auto antigènes La recherche d'auto anticorps anti-PTX3 a été recherchée par ELISA comme décrit 15 précédemment dans les sérums de patients présentant différentes pathologies auto immunes (et en particulier des pathologies systémiques). Les sérums testés ont été définis sur la base de la présence : d'auto anticorps anti-SSA : ces auto anticorps sont dirigés contre l'antigène nucléaire SSA ; ils sont retrouvés dans le syndrome de Gougerot-Sjdgren (syndrome sec), isolé 20 ou associé à une autre connectivité. d'un test de :FARR positif : qui signe la présence d'anticorps anti-ADN natif. Ces anticorps sont présents dans 90% des lupus érythémateux disséminé (LED) d'auto anticorps antipeptide cyclique citrulliné (anti-CCP) : les anticorps anti-CCP sont un outil diagnostic très spécifique de la polyarthrite rhumatoïde, 25 d'anticorps anti-Saccharomvices cerevisiae (ASCA) : les ASCA sont dirigés contre un épitope de structure (Mana 1,2Man) äa1-3Man, n ù ou > 1 et sont reconnus comme associé à la maladie de Crohn. 30 25 2896588 Les résultats obtenus ont été résumés dans le tableau I. Caractéristiques Nombre Nombre de Fréquence des sérums : de sérums de sérums présence de sérums présentant présentant testés : des anticorps des anti-PTX3 anticorps anti-PTX3 Anti-SSA. 11 2 2/11 Anti-ADN natif 10 4 4/10 ASCA 10 3 3/10 Anti-CCP 10 1 1/10 Tableau I : Les sérums présentant des autoanticorps (anti-SSA, anti-ADN natif, anti-5 Saccharomyces cerevisiae [ASCA], anti-CCP) ont été dilués au 1/400 comme décrit précédemment et testé en ELISA parallèlement à des sérums de sujets sains. Bibliographie -Abderrahim-Ferkoune A, Bezy O, Chiellini C, Maffei M, Grimaldi P, Bonino F, Moustaid-Moussa N, Pasqualini F, Mantovani A, Ailhaud G, Amri EZ. Characterization of the long pentraxin PTX3 as a TNFalpha-induced secreted protein of adipose cells. J Lipid Res. 2003, 44:994-1000. -Agrawal A, Volanakis JE. Probing the Clq-binding site on human C-reactive protein by site-directed mutagenesis. J Immunol. 1994, 152:5404-10. -Alles VV, Bottazzi B, Peri G, Golay J, Introna M, Mantovani A. 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Méthode de diagnostic in vitro d'une réponse immunitaire autoimmune chez un sujet par détection dans un liquide biologique dudit sujet d'anticorps dirigés contre l'antigène pentraxine 3 (PTX3) caractérisée en ce que on détermine dans le sérum du sujet la présence d'anticorps dirigés contre l'antigène PTX3 (anticorps anti-PTX3) et qu'on en conclue l'existence d'une réponse immunitaire autoimmune chez le sujet. 2. Méthode selon la revendication 1 caractérisée en ce que on détermine dans un liquide biologique du sujet le taux d'anticorps dirigés contre l'antigène PTX3 et qu'en le comparant avec le taux d'anticorps dirigés contre l'antigène PTX3 de référence, on détermine l'existence d'une réponse immunitaire autoimmune chez le sujet. 3. Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2 caractérisée en ce que la présence et/ou le taux d'anticorps dirigés contre PTX3 est déterminé par la mise en évidence d'une liaison entre l'antigène PTX3 et l'anticorps anti-PTX3. 4. Méthode selon la revendication 3 caractérisée en ce que la mise en évidence d'une liaison entre l'antigène PTX3 et l'anticorps anti-PTX3 est réalisée par immobilisation de l'antigène PTX3 sur un support solide, par réactions de précipitation en milieu liquide et/ou immunoprécipitation, et/ou par réaction de précipitation en gels. 5. Méthode selon la revendication 4 caractérisée en ce que le support solide pour l'immobilisation de l'antigène PTX3 est de type plastique ou polypropylène pour un dosage ELISA ou RIA, de type membrane pour un dosage Western blot ou Dot blot, de type billes ou de type mousse. 6. Méthode selon la revendication 5 caractérisée en ce que la présence et/ou le taux des anticorps anti-PTX3 est déterminée en utilisant un substrat chromogène, par chimioluminescence, par fluorescence, ou par radiomarquage. 7. Méthode selon la revendication 5 caractérisée en ce que pour quantifier le taux d'anticorps anti-PTX3 la méthode comprend un dosage ELISA ou RIA et pour déceler des taux d'anticorps anti-PTX3 plus élevés par rapport au taux d'anticorps anti-PTX3 de référence la méthode comprend un dosage de type Dot blot ou Western blot . 8. Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 7 caractérisée en ce que le taux d'anticorps anti-PTX3 de référence est le taux d'anticorps anti- PTX3 obtenu à partir du sérum d'un sujet sain, d'un ensemble de sérum de sujets sains ou défini de façon arbitraire par tous moyens qui permettront de reproduire la valeur moyenne obtenue avec un pool de sujet sains. 9. Méthode selon la revendication 4 caractérisée en ce que la réaction de précipitation en gel est choisie parmi les réactions de type immunodiffusion radiale, immunodiffusion double d'Ouchterlony, immunoélectrophorèse et électrophorèse en fusée. 10. Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 9 caractérisée en ce que le liquide biologique est un sérum. 11. Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 7 et 10 caractérisée en ce qu'il s'agit d'un dosage ELISA et qu'elle comprend les étapes suivantes: a) incuber le sérum du sujet avec les antigènes PTX3 fixés sur un support solideb) laver les anticorps du sérum non fixés aux antigènes PTX3 du support solide c) ajouter des anticorps anti-immunoglobuline couplés à un marqueur, lesdits anticorps anti-immunoglobuline étant capable de reconnaître les anticorps du sérum d) laver les anticorps anti-immunoglobuline non fixés au support solide e) détecter et/ou quantifier le marqueur lié au support solide et corréler avec la présence et/ou la quantité d'anticorps du sérum. 12. Méthode selon l'une quelconque des revendications 4 à 11 caractérisée en ce que les antigènes PTX3 sont choisis parmi la PTX3 entière d'origine humaine, animale, ou synthétique, un ou plusieurs fragments de PTX3 d'origine humaine, animale ou synthétique, et une molécule homologue à PTX3, préférentiellement de la famille des pentraxines, et/ou présentant des homologies de séquences primaires, secondaires ou tertiaires importantes. 13. Méthode selon la revendication 12 caractérisée en ce que les antigènes PTX3 sont obtenus à partir d'un système recombinant procaryote, d'un système recombinant eucaryote, de préférence des cellules CHO et la lignée NSO, de la purification à partir des cellules, tissus, ou liquides biologiques humains ou animaux, ou par synthèse chimique, de préférence synthèse peptidique. 14. Méthode selon l'une quelconque des revendications 11 à 13 caractérisée en ce que les anticorps anti-immunoglobuline sont sélectionnés dans le groupe comprenant des anti immunoglobuline G, des anti immunoglobuline A, des anti immunoglobuline M, des anti immunoglobuline D, et des anti immunoglobuline E. 15. Méthode selon l'une des revendications 11 à 14 caractérisée en ce que le support solide consiste en des microbilles ou en des plaques de microtitre, tel que les plaques ELISA. 16. Méthode selon l'une des revendications 11 à 15 caractérisée en ce que le marqueur est sélectionné dans le groupe comprenant les marqueurs fluorescents, chimioluminescents, enzymatiques et radioactifs. 17. Méthode selon la revendication 16 caractérisée en ce que le marqueur est enzymatique et en ce que les enzymes et les substrats solubles correspondant sont sélectionnés dans le groupe comprenant : - La phosphatase alcaline et le substrat soluble 4-NitroPhényl Phosphate (PNPP) La peroxydase et le substrat soluble orthophenylène diamine (OPD) La 5-galactosidase et le substrat soluble 2-nitrophenyl (3-galactoside (ONPG) La glucose 6-phosphate dehydrogenase et le substrat soluble glucose-6-phosphate (G6P). - La biotine et le substrat soluble streptavidine couplé à la peroxydase et le substrat ABTS ou OPD de la peroxydase.18. 19. 20. 21. 22. Méthode selon l'une des revendications 1 à 17 caractérisée en ce que le sujet est un mammifère Méthode selon la revendication 18 caractérisée en ce que le sujet est un être humain. Méthode selon la revendication 19 caractérisée en ce que les anticorps anti-immunoglobuline sont des anticorps anti-immunoglobuline humaine. Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 20 caractérisée en ce que le diagnostic d'une réponse immunitaire autoimmune est associé à l'existence ou à la prédiction d'une maladie auto-immune chez le sujet. Méthode selon la revendication 21 caractérisée en ce que les maladies auto-immunes sont sélectionnées dans le groupe comprenant le syndrome deGougerot-Sjôgren, le diabète de type 1, la gammapathie monoclonale, la granulomatose de Wegener, le lupus érythémateux disséminé, la maladie athéromateuse, la maladie de Crohn, la maladie de Horton, la maladie de Reiter (syndrome conjonctivo-urétro-synovial), la polyarthrite rhumatoïde, la rectocolite hémorragique, le rhumatisme psoriasique, la sarcoïdose, la sclérodermie, la sclérose en plaques, et les dermatites bulleuses auto-immunes, la maladie de Basedow (hyperthyroïdie), thyroïdite chronique de Hashimoto (hypothyroïdie), le symdrôme de Goodpasture, le pemphigus, la myasthénie, le diabète par insulinorésistance, l'anémie hémolytique auto-immune, la purpura thrombocytopénique auto-immun, polymyosite et dermatomyosite, l'aménie de Biermer, la glomérulonéphrite, certaines stérilités, périartérite noueuse et le syndrome de Churg et Strauss, la maladie de Still, la polychrondite atrophiante, la maladie de Behçet, la spondylarthrite. 23. Méthode selon l'une des revendications 1 à 22 caractérisée en ce qu'elle comprend également la détection et/ou quantification dans le sérum dudit sujet d'anticorps dirigés contre l'antigène myeloperoxydase (MPO) et/ou l'antigène protéinase 3 (PR3) et/ou élastase et/ou BPI et/ou cathepsine G et/ou des antigènes nucléaires. 24. Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 20 caractérisée en ce que le diagnostic d'une réponse immunitaire autoimmune est associé à une pathologie caractérisée par une souffrance tissulaire chez le sujet due à une nécrose, particulièrement un infarctus, une inflammation chronique ou une infection chronique. 25. Kit de diagnostic pour la détection et/ou la quantification dans un liquide biologique d'anticorps dirigés contre l'antigène PTX3, comprenant : a) un support solide caractérisé en ce que l'antigène PTX3 est fixé sur le support solide. 26. Kit de diagnostic selon la revendication 25 caractérisé en ce que le liquide biologique est un sérum. 27. Kit de diagnostic selon l'une des revendications 25 ou 26 caractérisée en ce qu'il comprend en outre b) une solution contenant des anticorps anti- immunoglobuline conjugués avec un marqueur 28. Kit de diagnostic selon la revendication 27 caractérisé en ce que les anticorps anti- immunoglobuline sont sélectionnés dans le groupe comprenant des anti immunoglobuline G, des anti immunoglobuline A, des anti immunoglobuline M, des anti immunoglobuline D, et des anti immunoglobuline E. 29. Kit de diagnostic selon l'une des revendications 25 à 28 caractérisé en ce qu'il comprend en outre c) une solution de lavage 30. Kit de diagnostic selon l'une des revendications 25 à 29 caractérisé en ce que le support solide est une plaque ELISA et le marqueur est une enzyme. 31. Kit de diagnostic selon la revendication 30 caractérisé en ce que qu'il comprend en outre d) une solution contenant le substrat soluble correspondant à l'enzyme 25 32. Utilisation d'un antigène PTX3 pour le diagnostic d'une maladie auto-immune chez un être humain. 33. Utilisation selon la revendication 32 caractérisé en ce que un test ELISA est utilisé pour le diagnostic. 34. Utilisation de la méthode de diagnostic selon les revendications 1 à 24 ou du kit selon les revendications 25 à 31 pour identifier, avant l'apparition des 30signes cliniques, les sujets présentant un risque de développer une maladie autoimmune. 35. Utilisation de la méthode de diagnostic selon les revendication 1 à 24 ou du kit selon les revendication 25 à 31 pour suivre l'évolution du réponse immunitaire autoimmune, prévoir les poussées évolutives de la maladie et/ou suivre l'efficacité du traitement.