Brevet FR2895680A1 — publié le 20070706

La présente invention concerne le traitement d'une partie superficielle du corps humain ou animal, avec une base nutritive corplexe, en milieu aqueux, autrement appelée base éco-nutritive, en abrégé BNC, telle que définie ci-après, à différentes fins, médicales, thérapeutiques, cliniques, ou cosmétiques. Par "base nutritive complexe", on entend toute composition ou formulation, en milieu aqueux, se distinguant, comme précisé ci-après, d'un milieu de culture cellulaire, en ce qu'elle exclut tout facteur de croissance cellulaire, et/ou tout extrait d'origine animale ou cellulaire, non tracés, et se rapprochant d'un milieu de culture cellulaire, en ce qu'elle permet à elle seule une culture viable in vitro de kératinocytes épidermiques, par exemple humains, en particulier pendant au moins 72 heures, avec prolifération clonale, sans assise nourricière vivante, telle que fibroblastes. De telles BNC ont été décrites dans le document WO/96/21421, qui 15 décrit leur utilisation, seule ou en combinaison avec d'autres composants, en tant que produit actif ou comme excipient. Une BNC telle que considérée selon la présente invention, ne comporte, ni dans sa composition originelle ni dans sa mise en oeuvre, de facteur de croissance d'origine cellulaire, par exemple d'EGF 20 (Epidermal Growth Factor), et/ou d'extrait biologique d'origine animale ou cellulaire Par nature, non seulement ces extraits ont une composition variable, voire indéterminée, avec parfois une origine biologique mal déterminée, et donc non traçable ou non tracée, mais également certains 25 constituants sont indéterminés quant à leur structure chimique, notamment biochimique, exacte. Une BNC telle que considérée selon la présente invention, ne comporte aucun extrait biologique tel que sérum de veau foetal (SVF), ou aucun extrait de tige pituitaire de boeuf, non traçable ou non tracée. 30 Par "tracer" ou "traçable", on entend la caractéristique selon laquelle l'origine puis le traitement d'une matière biologique peuvent être établis et contrôlés. Une BNC selon la présente invention ne comporte par exemple aucun extrait biologique cellulaire, végétal ou animal, traçable ou non, tracé ou 35 non. Une BNC considérée selon la présente invention, ne comporte pas de principe actif médicamenteux, tel qu'un antibiotique. De telles BNC sont constituées, outre le milieu aqueux, par une fraction d'acides aminés, dont certains essentiels, inférieure à 0,5%, préférentiellement à 0,35% en poids, par une fraction de vitamines hydrosolubles inférieure à 0,2%, et préférentiellement à 0,015% en poids, et par une fraction inorganique, dont oligo-éléments et sels métalliques, inférieure à 5%, et préférentiellement à 2% en poids, le solde de la composition étant représenté par de l'eau. Préférentiellement, une BNC selon l'invention est entièrement formulée en phase aqueuse, à partir d'entités chimiques, biochimiques et biologiques, dont la structure de chacune est identifiée, par exemple nomenclaturée ou répertoriée, en sorte que la composition chimique de la BNC est strictement définie. Une BNC selon l'invention résulte d'une action de la main de l'homme, et ne saurait être assimilée de ce fait à tout extrait naturel et/ou biologique, obtenu par exemple par fractionnement d'un matériel biologique, animal ou végétal par exemple. Conformément au document WO 96/21421, une telle base nutritive complexe a, par exemple, la composition suivante, selon Tableau 1 ci-après : 1 Tableau 1 Soit 2808,3 mg ou 0,281% en poids COMPOSANTS Eau Acides aminés L-Alanine L-Arginine HCL L-Asparagine (anhydre Acide L-aspartique .............. L-Cystéine HCl H2O Acide L -glutamique L-Glutamine Glycine ........... L-Histidine HCI. H2O L-Isoleucine L-Leucine L-Lysine HCI ................. L-Méthionine L-Phénylalanine L-Proline L-Sérine L-Thréonine L-TryptoP...h a ne L -Tyrosine 2 Na 2H20 L-Valine Concentration en mg/I q.s.p. 42,0 14,8 1754.4 50,0 6,0 ................................................ 131,2 54 _ 13,5 10,0.. DTD: .......... ...................................... 34,6..DTD: . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 126,1 24,0 ............................................... 9,3 11 7 70,3 Soit 99,49mg ou 0,0099% en poids Soit 16474,2 mg à 16483,25 mg ou environ 1, 65% en poids La présente invention a pour objet une mise en oeuvre particulière d'une BNC telle que précédemment définie, permettant de nouveaux soins de la peau ou d'autres parties superficielles du corps humain ou animal, à des fins cliniques ou cosmétiques. Au premier chef, l'invention concerne une méthode de traitement, à des fins thérapeutiques, médicales, cliniques, ou cosmétiques, d'une partie superficielle du corps d'un sujet mammifère, par exemple chez l'homme, et dite ci-après partie d'intérêt. Selon cette méthode, de manière générale : a) on dispose d'une fraction sanguine liquide, par exemple d'un sérum ou d'un plasma, de la même espèce que celle du sujet mammifère à traiter, 3 Vitamines d-Biotine Acide folique Nicotinamide D-Ca Pantothénate..DTD: .......................................................................... DTD: ....................... Pyridoxine HCI Riboflavine Thiamine HCI i-Inositol Pyruvate de sodium Thymidine Adénine (HCI) Acide DL-lipoïque Composants inorganiques Chlorure de sodium KCI CuSO4.5H20 Acétate de sodium ...................................................... D-Glucose Hepes...(pipérazine)...._ Phosphoryléthanolam ine Ethanolamine Sulfate de sodium Bicarbonate de sodium FeSOd.7H20 MgC12.6H2O CaCl2.2H20 ZnSO4.7H20 (NH4)6 Mol 024 4H20 Na2SiO3.5H20 MnCl2.4H20..DTD: .......................................................... SnCl2.2H20 NH4 VO3 0,00057 300,0 (anhydre) 120,0 De 13,0 à 22,05 0.144 0,00011 b) on dispose d'une BNC, telle que définie précédemment, c) on mélange la fraction sanguine liquide avec la BNC, pour obtenir une phase liquide active de traitement local et superficiel, d) on met la partie d'intérêt du corps du sujet, à traiter, en contact, 5 avec la phase liquide active. Préférentiellement la fraction sanguine liquide est autologue, et obtenue uniquement à partir d'un échantillon sanguin du sujet mammifère à traiter, par exemple par fractionnement. Selon un premier mode d'exécution de cette méthode, la fraction 10 sanguine liquide est un sérum décomplémenté, obtenu par fractionnements successifs à partir d'un échantillon sanguin, d'abord par coagulation à température ambiante sans anti-coagulant, puis par chauffage, par exemple à 56 C pendant trente minutes ; par exemple la fraction sanguine liquide est un sérum décomplémenté, puis déplété en ses immuno-globulines, par exemple 15 par incubation avec une suspension cellulaire de kératinocytes, ensuite centrifugée avec élimination du culot cellulaire. Selon un deuxième mode d'exécution de cette méthode, la fraction sanguine liquide est un plasma. La partie d'intérêt à traiter appartient à l'épiderme du sujet 20 mammifère, et est notamment une zone dudit épiderme présentant un défaut d'aspect en raison d'un défaut naturel, ou d'une lésion tissulaire superficielle réparée, par exemple une zone cicatricielle. Cette partie superficielle d'intérêt peut résulter de toute plaie, balafre, coupure, écorchure, égratignure, entaille, éraflure, morsure, mutilation, piqûre, brûlure, contusion, escarre, ecchymose, 25 etc..., en cours de réparation, mais laissant subsister un défaut superficiel, morphologique, structurel, fonctionnel, ou d'aspect. Au deuxième chef, l'invention concerne un dispositif de soin superficiel, notamment pansement, du corps d'un sujet mammifère, par exemple chez l'homme, à des fins médicales, ou thérapeutiques, ou 30 cosmétiques, ledit dispositif comprenant : - un support comportant une face active agencée pour venir en contact avec la peau dudit sujet, et un substrat, par exemple de nature textile, susceptible de stocker, par exemple par absorption, un liquide actif de traitement, et diffuser ledit liquide actif sur ladite face active, - des moyens de maintien temporaire du support sur une partie d'intérêt superficielle, à traiter, du corps du sujet, avec ladite face active contre la peau dudit sujet, - et le cas échéant, des moyens de protection temporaire, 5 amovibles ou éliminables, de la face active dudit support. Selon l'invention, le liquide actif de traitement comprend une fraction sanguine liquide, par exemple un sérum de la même espèce mammifère que celle du sujet traité, ainsi qu'une BNC telle que précédemment définie. 10 Préférentiellement, la fraction sanguine liquide est un sérum autologue du sujet à traiter. Au troisième chef, la présente invention concerne toute composition comprenant, d'une part une fraction sanguine liquide, par exemple sérum, et d'autre part une BNC telle que précédemment définie. 15 Une telle composition peut être utilisée pour obtenir un médicament, par exemple topique. En pareil cas, préférentiellement le médicament est destiné à traiter un sujet mammifère, par exemple l'homme, et la fraction sanguine liquide est obtenue à partir de la même espèce que celle du sujet mammifère à traiter. Par 20 exemple, la fraction sanguine liquide est une fraction autologue du sujet à traiter. Par exemple, un médicament tel que défini précédemment est mis en oeuvre pour le soin des dents ou de la bouche, ou pour la pratique de la chirurgie dentaire ou parodontale. 25 Dans ces indications, un médicament selon la présente invention améliore le maintien en survie et la prise de greffes, notamment en implantologie, lors du forage et de la récupération d'os mandibulaire ou maxilaire, et de la mise en survie dudit os (au cours de l'intervention) en vue de sa réimplantation en tant que matériel vivant de comblement au niveau du 30 collet des implants. Toujours en chirurgie dentaire, ou lors de chirurgies parodontales, un médicament selon l'invention favorise la réalisation de greffes épithéliales et/ou conjonctives, et ce en vue de l'amélioration de la prise de greffons... DTD: Au quatrième chef, l'invention concerne un médicament topique comprenant une composition telle que précédemment définie, et un support adapté à l'administration superficielle dudit médicament. En pareil cas, préférentiellement, le médicament est destiné au traitement d'un sujet mammifère, et la fraction sanguine liquide est une fraction sanguine de la même espèce que celle du sujet mammifère traité. Par exemple la fraction sanguine liquide est une fraction autologue du sujet à traiter. Au cinquième chef, l'invention concerne une préparation cosmétique comprenant une composition telle que précédemment définie, et un support ou véhicule cosmétiquement acceptable. En pareil cas, préférentiellement, la fraction sanguine est une fraction sanguine de la même espèce que celle du sujet mammifère traité. Par exemple, la fraction sanguine liquide est une fraction autologue du sujet à traiter. Au sixième chef, l'invention concerne un procédé de maintien en survie ex vivo d'un tissu ou organe d'un sujet mammifère, selon lequel on met ledit tissu ou organe en contact, par exemple par immersion, avec une composition telle que précédemment définie. En pareil cas, préférentiellement, la fraction sanguine de la composition est obtenue à partir de la même espèce que celle du sujet mammifère dont le tissu ou l'organe est prélevé, et est par exemple une fraction sanguine autologue dudit sujet mammifère. Ainsi, selon l'invention, une composition telle que précédemment définie permet le maintien en survie d'expiants cutanés ou de cuirs chevelus, ainsi que d'épithélium en vue de leur greffe Grâce à la présente invention, on dispose d'une nouvelle approche du soin des parties superficielles du corps, notamment du cuir chevelu, permettant de manière générale d'entretenir ou relancer le métabolisme de greffons et des tissus superficiels comme la peau. La pertinence de la méthode selon l'invention a été évaluée, in vitro, selon les deux essais décrits ci-après : Essai n 1 : évaluation de la croissance de kératinocytes humains normaux, cultivés pendant six jours dans une BNC supplémentée en sérum 10 humain. La BNC mise en oeuvre a la composition décrite par le tableau ci-après : 15 Tableau 2 NBRE DENOMINATION CONCENTRATION LIGNE INTERNATIONALE En mg/I NOMENCLATURE COSMETIQUE INGREDIENT (NOM INCI) 1 EAU q.s.p. (1000mI) 2 CHLORURE DE 6085 SODIUM 3 GLUTAMINE 2043.2 4 SODIUM BICARBONATE 1160 5 GLUCOSE 4500 6 ARGININE HCL 421,4 7 SODIUM ACETATE 300 8 DISODIUM PHOSPHATE 284 9 LEUCINE 131,2 SERINE 136,6 11 CHLORURE DE Mg 120,0 12 CHLORURE DE K 112 13 VALINE 70,3 14 SODIUM PYRUVATE 55 LYSINE HCL 54 16 HISTIDINE HCL 50 17 CYSTEINE HCL 42 18 ADENINE 24 19 THREONINE 24 INOSITOL 18 21 ACIDE GLUTAMIQUE 29,5 22 ASPARAGINE 29,2 23 METHIONINE 13, 5 24 TYROSINE 11,7 PHENYLALANINE 10,0 26 TRYPTOPHANE 9,3 27 ALANINE 18,1 28 GLYCINE 15,1 29 ISOLEUCINE 6,0 ACIDE ASPARTIQUE 17,3 31 SODIUM SULFATE 3, 4 NBRE DENOMINATION CONCENTRATION LIGNE INTERNATIONALE En mg/1 NOMENCLATURE COSMETIQUE INGREDIENT (NOM INCI) 32 SULFATE FERREUX 1,4 33 ACIDE FOLIQUE 1,8 34 THYMIDINE 0,73 CYANOCOBALAMINE 0,41 36 CALCIUM 1,3 PANTOTHENATE 37 THIAMINE HCL 1,3 38 ACIDE THIOCTIQUE 0,3 39 ZINC SULFATE 0,144 SODIUM SILICATE 0,142 _ 41 PYRIDOXINE HCL 1,06 42 NIACINAMIDE _ 1,04 43 RIBOFLAVIN 0,4 44 BIOTIN _ 0,02 SULFATE DE CUIVRE _ 0,003 _ AMMONIUM 0,00120 46 MOLYBDATE 47 AMMONIUM VANADATE 0,003 48 CHLORURE DE Mn _ 0,00002 49 HYALURONATE DE 700 SODIUM _ HYDROXYPROLINE 30 _ 51 PROLINE 46 52 ACIDE ASCORBIQUE 1 53 ADENOSINE 0.1 54 GUANINE 0.1 DEOXYRIBOSE _ 0.1 56 RIBOSE 0.1 57 "MILK PEPTIDE 200 COMPLEX" _ 58 CHOLINE CHLORIDE 1 59 MYO INOSITOL 2 S'agissant du composant intitulé "Milk peptide complex", ou MPC, il s'agit de peptides naturels, ou d'origine naturelle, présents dans des fractions ou extraits obtenus à partir de lait d'origine animale. Cet extrait est l'extrait dit Whey Protein (Lactis Proteinum) ayant pour n CAS 84082-51-9 et r EINECS 281-998-7, fabriqué et vendu par la firme CLR-Chemisches Laboratorium en République Fédérale d'Allemagne. Cet extrait présente à titre d'exemple les données analytiques suivantes : pH 5,0-7,0 (0,5% en poudre MPC dans 1-120) 2,0-6,0% Perte à la dessication (2 h à 102 C) Azote (Kjeldahl) 1,4-1,9% Protéines (Sigma Kit BCA-1) 11,0-16,0% Lactose (Boehringer Kit) 65,0ù71,0% Acide (+) Lactique (Boehringer Kit) 4,5-8,0% Cendres (1000 C) 6,0-9,0% Graisse résiduelle Avec la BNC (avec complexe MPC à la concentration de 0.2 mg/ml), on observe une croissance cellulaire régulière jusqu'au 6ième jour d'expérimentation. 10 > L'ajout de sérum humain entraîne une forte augmentation de la croissance cellulaire; cet effet est dose-dépendant (l'ajout de 10% de sérum humain à la BNC entraîne la croissance cellulaire de plus forte intensité cf. figure 1 bis). > Morphologiquement, les kératinocytes, en milieu avec la BNC 15 supplémentée en sérum humain, présentent un aspect proche de celui observé en milieu standard. Les cellules sont jointives, polyédriques, avec une légère tendance à s'organiser en travées cellulaires. 3. CONCLUSION Dans les conditions expérimentales ainsi définies, il apparaît que 20 l'enrichissement de la BNC en sérum humain entraîne une forte augmentation de la croissance cellulaire, et ce de manière dose-dépendante, avec un effet optimum pour concentration en sérum de 10%. Essai n 2 : études des effets d'une supplémentation en sérum ou en plasma humain sur la croissance de kératinocytes humains normaux in 25 vitro. La BNC étudiée à la même composition que celle identifiée précédemment. Il s'agit d'évaluer l'effet d'une supplémentation de la BNC en sérum ou en plasma humain sur les capacités de croissance in vitro de kératinocytes 30 humains normaux. L'étude est réalisée avec la BNC, dépourvue ou supplémentée en biopeptides de lait (complexe MPC à la concentration de 0.2 mg/ml) et dans laquelle est ajouté extemporanément du sérum ou du plasma humain à la concentration finale de 10 %. L'étude est réalisée en comparaison avec une culture effectuée dans un milieu de culture standard de kératinocytes, le KSFM (InVitrogen), avec ou sans facteurs de croissance cellulaire (EGF, BPE) et en comparaison avec une culture effectuée dans la même BNC dépourvue de sérum ou de plasma, et supplémentée en complexe MPC à la concentration de 0.2 mg/ml. 1. PROTOCOLE ^ Récupération et préparation du sérum sanguin Le sérum est la partie du plasma qui reste limpide et liquide après 10 coagulation. Il est obtenu en laissant coaguler un prélèvement sanguin recueilli sur tube sec, quelques heures à température ambiante. La coagulation terminée, le sérum est récupéré à l'aide d'une pipette. II est ensuite décomplémenté par chauffage à 56 C pendant 30 min. Afin de limiter les risques d'incompatibilité entre donneurs (et de 15 rejet par réaction immunitaire), on réalise une déplétion partielle du sérum humain en ses immunoglobulines. Cette procédure consiste à faire incuber, pendant 30 minutes à 37 C, le sérum avec une suspension cellulaire de kératinocytes humains normaux (les immunoglobulines contenues dans le sérum se fixent alors sur les kératinocytes). La suspension cellulaire est 20 ensuite centrifugée 10 minutes à 1400 tours par minute et le culot cellulaire éliminé. ^ Récupération du plasma sanguin Le plasma représente la fraction liquide du sang qui constitue 55% 25 de son volume et dans laquelle baignent les autres composants majeurs du sang (globules rouges, globules blancs et thrombocytes). Dans le plasma se trouve aussi une protéine en dissolution : le fibrinogène, capable de se polymériser en fibrine. Le sérum sanguin n'est autre que du plasma débarrassé de son fibrinogène. 30 Le plasma est obtenu en récupérant le prélèvement sanguin dans un tube contenant un additif anticoagulant (tube de coagulation au citrate de sodium dans ce cas). Le plasma est récupéré après centrifugation du prélèvement sanguin pendant 15 minutes à 2000 tours par minute. ^ Traitements cellulaires Les kératinocytes humains normaux (KHNP TI) sont ensemencés à faible densité en plaques 96 puits, en milieu de culture standard spécifique (KSFM). Après 24h et adhésion complète, les cellules sont placées dans les 5 différents milieux de culture étudiés : - KSFM complet (avec facteurs de croissance : EGF et BPE) - KSFM - (déplété en facteur de croissance) - KSFM - (déplété en facteur de croissance) + sérum humain à 10% 10 - Tampon PBS + sérum humain à 10% - BNC, sans complexe MPC + sérum humain à 10% - BNC, sans complexe MPC + plasma humain à 10% - BNC, avec complexe MPC (0.2 mg/ml) - BNC, avec complexe MPC (0.2 mg/ml) + sérum humain à 10% 15 - BNC, avec complexe MPC (0.2 mg/ml) + plasma humain à 10% Chaque condition est réalisée en quadruplicate. La densité cellulaire est évaluée juste avant le "switch" dans les 20 différentes conditions d'étude (= TO) puis la croissance des kératinocytes est évaluée à T 1j, T 3j et T 6 jours après le "switch", par la méthode de conversion du WST-1 (lecture à 450 nm). 2. RESULTATS La croissance cellulaire est objectivée par la mesure de la viabilité cellulaire à différents temps de l'expérimentation. La morphologie cellulaire est étudiée par observations microscopiques et photographiée au terme de l'expérimentation (T6j). 30 La figure 2 présente les résultats obtenus pour la culture des kératinocytes dans l'ensemble des conditions étudiées. La figure 2bis constitue une simplification graphique de la précédente, ne présentant que les résultats concernant la culture des 35 kératinocytes avec BNC +1- sérum ou plasma humain versus milieu de culture standard (KSFM complet). 25 >Milieu KSFM : la déplétion du milieu de culture standard KSFM en facteurs de croissance n'entraîne pas de ralentissement de la croissance cellulaire des kératinocytes humains normaux sur les 6 jours de culture. L'ajout de sérum humain à 10% entraîne un léger ralentissement de la croissance cellulaire (figure 3). Morphologiquement, en présence de sérum humain, les kératinocytes présentent un aspect polyédrique et s'organisent en travées cellulaires. >Tampon PBS (Ca2+, Mq2+) + sérum humain à 10% : l'ajout de sérum humain au milieu tampon PBS permet la croissance des kératinocytes humains normaux in vitro (figure 3). Néanmoins, l'observation microscopique montre des cellules présentant des signes de souffrance cellulaire. >BNC avec complexe MPC à la concentration de 0.2 rnq/ml : on observe une bonne croissance cellulaire, régulière jusqu'au hème jour d'expérimentation. D'un point de vue morphologique, les cellules présentent un aspect arrondi, régulier, identique à celui observé en conditions standard de culture. L'ajout de sérum humain à 10% stimule la croissance cellulaire, qui est de faible intensité à T3j, puis fortement accélérée, conduisant ainsi à une densité cellulaire proche de celle obtenue en milieu standard (figure 3 bis). Morphologiquement et en présence de sérum humain à 10%, les cellules présentent un aspect plus jointif. L'ajout de plasma humain à 10% stimule également la croissance cellulaire mais de façon moins intense qu'en présence de sérum humain. Morphologiquement, les cellules apparaissent plus petites et plus denses. >Milieu BNC, sans complexe MPC: l'ajout de sérum humain à 10% entraîne une forte augmentation de la croissance cellulaire, dès le 3ème jour de culture et ce, jusqu'au terme de l'expérimentation. La croissance cellulaire est identique à celle obtenue en milieu standard KSFM (figure 3bis). Morphologiquement, les cellules ont un aspect plus différencié. L'ajout de plasma humain à 10% entraîne également une stimulation de la croissance cellulaire. Celle-ci est néanmoins moins importante au terme de l'expérimentation que celle obtenue en présence de sérum humain à la même concentration. Morphologiquement, les cellules apparaissent très arrondies et sont légèrement vacuolisées. . CONCLUSION Dans les conditions expérimentales ainsi définies, il apparaît que l'enrichissement de la BNC en sérum humain à la concentration de 10% entraîne une forte augmentation de la croissance cellulaire, permettant d'obtenir une croissance et une morphologie cellulaire identiques à celles obtenues dans des conditions standard de culture (milieu KSFM). Ce résultat est obtenu aussi bien avec la BNC dépourvue de complexe MPC, qu'avec la BNC supplémentée en complexe MPC à la concentration de 0.2mg/ml. L'enrichissement de la BNC en plasma humain à la concentration de 10% s'accompagne également d'une augmentation de la croissance cellulaire (mais cette dernière est d'intensité plus faible qu'en présence de sérum humain à la même concentration). L'ajout de sérum humain à la concentration de 10% au milieu de culture standard KSFM (sans EGF et sans BPE) ne stimule pas la croissance des kératinocytes/ qui présentent dès lors des signes de différenciation cellulaire marqués (kératinocytes organisés en travées). Cet effet peut être lié à un apport en calcium (par le sérum) trop important dans le milieu de culture, conduisant à une différenciation trop précoce des kératinocytes. L'ajout de sérum humain à la concentration de 10% au tampon PBS permet d'obtenir une croissance cellulaire, mais l'observation 25 morphologique des cellules montre des signes de souffrance cellulaire. 14 REVENDICATIONS 1. Méthode de traitement non thérapeutique, d'une partie d'intérêt superficielle du corps d'un sujet mammifère, notamment chez l'homme, 5 caractérisée en ce que : a) on dispose d'une fraction sanguine liquide, de la même espèce que celle du sujet mammifère à traiter, b) on dispose d'une base nutritive complexe en milieu aqueux, dite BNC, se distinguant d'un milieu de culture cellulaire, en ce qu'elle exclut tout 10 facteur de croissance cellulaire, et/ou tout extrait biologique d'origine animale ou cellulaire, non tracés, et se rapprochant d'un milieu de culture cellulaire, en ce qu'elle permet à elle seule une culture viable in vitro d'un inoculum de kératinocytes épidermiques, avec prolifération clonale de ces derniers, sans assise nourricière vivante, ladite base étant constituée, outre le milieu aqueux, 15 par une fraction d'acides aminés inférieure à 0,5%, et préférentiellement à 0,35% en poids, et par une fraction de vitamines hydrosolubles inférieure à 2%, et préférentiellement à 0,015% en poids, et par une fraction inorganique, dont oligo-éléments et sels métalliques, inférieure à 5%, et préférentiellement à 2% en poids, 20 c) on mélange la fraction sanguine liquide avec la BNC, pour obtenir une phase liquide active de traitement local et superficiel, d) on met la partie d'intérêt du corps du sujet, à traiter, en contact, avec la phase liquide active. 2. Méthode selon la revendication 1, caractérisée en ce que la 25 fraction sanguine liquide est autologue, et obtenue uniquement à partir d'un échantillon sanguin du sujet mammifère à traiter, par exemple par fractionnement. 3. Méthode selon la revendication 1, caractérisée en ce que la fraction sanguine liquide est un sérum décomplémenté, obtenu par 30 fractionnements successifs à partir d'un échantillon sanguin, d'abord par coagulation sans anti-coagulant, puis par chauffage, par exemple à 56 C pendant trente minutes. 4. Méthode selon la revendication 3, caractérisée en ce que la fraction sanguine liquide est un sérum décomplémenté, puis déplété en ses 35 immuno-globulines, par exemple par incubation avec une suspension cellulaire de kératinocytes, ensuite centrifugés avec élimination du culot cellulaire. 5. Méthode selon la revendication 1, caractérisée en ce que la fraction sanguine liquide est un plasma. 6. Méthode selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que la partie d'intérêt à traiter appartient à l'épiderme du sujet mammifère, et est notamment une zone dudit épiderme présentant un défaut d'aspect en raison d'un défaut naturel, ou d'une lésion tissulaire superficielle réparée, par exemple une zone cicatricielle. 7. Dispositif de soin superficiel, notamment pansement, du corps d'un sujet mammifère, par exemple chez l'homme, à des fins médicales ou thérapeutiques, ou cosmétiques, ledit dispositif comprenant : - un support comportant une face active agencée pour venir en contact avec la peau dudit sujet, et un substrat, par exemple de nature textile, susceptible de stocker, par exemple par absorption, un liquide actif de traitement, et diffuser ledit liquide actif sur ladite face active, - des moyens de maintien temporaire du support sur une partie d'intérêt superficielle, à traiter, du corps du sujet, avec ladite face active contre la peau dudit sujet, - et le cas échéant, des moyens de protection temporaire, amovibles ou éliminables, de la face active dudit support, caractérisé en ce que le liquide actif de traitement comprend une fraction sanguine liquide, par exemple un sérum de la même espèce mammifère que celle du sujet traité, ainsi qu'une base nutritive complexe en milieu aqueux, dite BNC, se distinguant d'un milieu de culture cellulaire, en ce qu'elle exclut tout facteur de croissance cellulaire, et/ou tout extrait biologique d'origine animale ou cellulaire, non tracés, et se rapprochant d'un milieu de culture cellulaire, en ce qu'elle permet à elle seule une culture viable in vitro d'un inoculum de kératinocytes épidermiques humains, avec prolifération clonale de ces derniers, sans assise nourricière vivante, ladite base étant constituée, outre le milieu aqueux, par une fraction d'acides aminés inférieure à 0,5%, et préférentiellement à 0,35% en poids, et par une fraction de vitamines hydrosolubles inférieure à 2%, et préférentiellement à 0,015% en poids, et par une fraction inorganique, dont oligo-éléments et sels métalliques, inférieure à 5% en poids, et préférentiellement à 2% en poids. 8. Dispositif selon la revendication 7, caractérisé en ce que la fraction sanguine liquide est un sérum autologue du sujet à traiter. 9. Composition caractérisée en ce qu'elle comprend, d'une part une fraction sanguine liquide, par exemple un sérum, et d'autre part une base nutritive complexe, en milieu aqueux, dite BNC, se distinguant d'un milieu de culture cellulaire, en ce qu'elle exclut tout facteur de croissance cellulaire, et/ou tout extrait biologique d'origine animale ou cellulaire, non tracés, et se rapprochant d'un milieu de culture cellulaire, en ce qu'elle permet à elle seule une culture viable in vitro d'un inoculum de kératinocytes épidermiques humains, avec prolifération clonale de ces derniers, sans assise nourricière vivante, ladite base étant constituée, outre le milieu aqueux, par une fraction d'acides aminés inférieure à 0,5%, et préférentiellement à 0,35% en poids, et par une fraction de vitamines hydrosolubles inférieure à 2%, et préférentiellement à 0,015% en poids, et par une fraction inorganique, dont oligo-éléments et sels métalliques, inférieure à 5%, et préférentiellement à 2% en poids. 10. Médicament caractérisé en ce qu'il comprend une composition comprenant elle-même, d'une part une base nutritive complexe, en milieu aqueux, dite BNC, se distinguant d'un milieu de culture cellulaire, en ce qu'elle exclut tout facteur de croissance cellulaire, et/ou tout extrait biologique d'origine animale ou cellulaire, non tracés, et se rapprochant d'un milieu de culture cellulaire, en ce qu'elle permet à elle seule une culture viable in vitro d'un inoculum de kératinocytes épidermiques humains, avec au moins une prolifération clonale de ces derniers au premier passage, sans assise nourricière vivante, ladite base étant constituée, outre le milieu aqueux, par une fraction d'acides aminés inférieure à 0,5%, et préférentiellement à 0,35% en poids, et par une fraction de vitamines hydrosolubles inférieure à 2%, et préférentiellement à 0,015% en poids, et par une fraction inorganique, dont oligo-éléments et sels métalliques, inférieure à 5%, et préférentiellement à 2% en poids, et d'autre part une fraction sanguine liquide, par exemple un sérum. 11. Médicament selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'il est destiné à traiter un sujet mammifère, par exemple l'homme, et la fraction sanguine liquide est obtenue à partir de la même espèce que celle du sujet mammifère à traiter. 12. Médicament selon la revendication 11, caractérisé en ce que la fraction sanguine liquide est une fraction autologue du sujet à traiter. 13. Médicament topique, selon l'une quelconque des revendications 10 à 12 comprenant un support adapté à l'administration superficielle dudit médicament. 14. Médicament selon la revendication 13, destiné au traitement d'un sujet mammifère, caractérisé en ce que la fraction sanguine liquide est une fraction sanguine de la même espèce que celle du sujet mammifère traité. 15. Médicament selon la revendication 14, caractérisé en ce que la fraction sanguine liquide est une fraction autologue du sujet à traiter. 16. Médicament selon l'une quelconque des revendications 13 à 15, pour le soin des dents ou de la bouche, ou la chirurgie dentaire ou parodontale. 17. Préparation cosmétique comprenant une composition selon la revendication 9, et un support ou véhicule cosmétiquement acceptable. 18. Préparation selon la revendication 16, caractérisée en ce que la fraction sanguine est une fraction sanguine de la même espèce que celle du sujet mammifère traité. 19. Préparation selon la revendication 17, caractérisée en ce que la fraction sanguine liquide est une fraction autologue du sujet à traiter. 20. Procédé de maintien en survie ex vivo d'un tissu ou organe d'un sujet mammifère, caractérisé en ce que l'on met ledit tissu ou organe en contact, par exemple par immersion, avec une composition selon la revendication 9. 21. Procédé selon la revendication 20, caractérisé en ce que la fraction sanguine liquide de la composition est obtenue à partir de la même 25 espèce que celle dudit sujet mammifère. 22. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que la fraction sanguine liquide est une fraction autologue dudit sujet mammifère.