Brevet FR2893130A1 — publié le 20070511

DISPOSITIF D'IMAGERIE POUR BIOPUCE, ET BIOPUCE ASSOCIEE. Le domaine de l'invention est celui des biopuces, telles que les puces ADN ou à protéines ou les capteurs immunologiques et des dispositifs d'imagerie associés. Les biopuces sont un outil biochimique de collection massive d'information sur les acides nucléiques (puces ADN) et les acides aminés (puces à protéines), les antigènes et anticorps (capteurs immunologiques). Associées à des techniques de traitement numérique des informations récoltées, les puces ADN permettent de mener les recherches (détection, séparation, identification, étude) permettant d'accéder directement aux ADN. Les puces à protéines permettent de détecter, identifier, séparer, étudier les protéines et déterminer leurs activités, fonctions, interactions, modifications au cours du temps .... Les capteurs immunologiques basés sur une liaison avec une enzyme permettent de détecter des anticorps/antigènes. D'une manière générale l'invention concerne donc des biopuces, qui se présentent sous forme d'un support solide à la surface duquel des éléments biochimiques sont immobilisés. La position de chaque spot d'éléments biochimiques est connue et éventuellement sa composition. S'agissant d'une puce ADN par exemple, les éléments biochimiques sont par exemple des oligonucléotides (simples brins) spécifiques connus. Leur rôle est de détecter des cibles marquées complémentaires, présentes dans le mélange complexe à analyser. En effet, le principe de détection utilisé dans les puces ADN repose sur les possibilités d'appariement de brins d'ADN avec leurs bases complémentaires. On rappelle que l'ADN et l'ARN ont une forme d'hélice comprenant deux chaînes de nucléotides complémentaires et antiparallèles. Les chaînes nucléotides d'ADN, ou d'ARN sont caractérisées par quatre bases azotées, qui confèrent aux composés biologiques des propriétés capitales. Pour l'ADN, les quatre bases sont l'adénine A, la cytosine C, la guanine G et la thymine T. Pour l'ARN, l'uracile remplace la thymine, les trois autres bases étant communes à l'ADN. Ces bases sont complémentaires deux à deux : A s'apparie avec T ou U et G avec C. C'est cette capacité pour des monobrins d'ADN, ou ADN monocaténaire, de former une double hélice par appariement des bases complémentaires qui est utilisée dans le principe de détection par puce ADN. C'est l'hybridation : les sondes de la biopuce sont mises en contact avec l'échantillon à analyser. Si l'échantillon comporte la séquence complémentaire d'une sonde, il vient s'accrocher sur cette sonde. On obtient une puce hybridée. Il s'agit alors de détecter et de quantifier l'ensemble des cibles recherchées dans le mélange à analyser, par analyse de la puce hybridée. Les puces à protéines et les capteurs immunologiques fonctionnent sur un principe similaire, pour la détection de chaînes d'acides aminés pour les premières, et d'anticorps/antigènes pour les deuxièmes. En pratique, une biopuce comporte un très grand nombre de spots selon une disposition matricielle ordonnée. Les sondes sont soit greffées sur le support, soit synthétisées in situ (unité d'hybridation = spot). La haute densité de spots permet la détection en parallèle de milliers de séquences. La technologie des biopuces permet ainsi de couvrir le génome (puces ADN) ou le protéome (puce à protéine) d'un organisme avec une unique puce. Le support solide est typiquement une lame de verre de taille comparable à une lame de microscope. On trouve aussi des supports silicium ou nylon. Un spot est l'unité d'hybridation de la puce. Si on prend l'exemple d'une puce à ADN, des fragments d'ADN qui constituent une sonde spécifique sont déposés sur chaque spot de cette puce. Dans un exemple, on peut avoir des spots de l'ordre de 100 m et 1000 à 10000 spots par cm2. Ce sont autant de sondes qui permettent d'hybrider des séquences d'ADN complémentaires provenant d'un échantillon biologique à analyser. La position et la composition de la séquence de chaque sonde (sur chaque spot) est connue. On dit que la puce est fonctionnalisée pour détecter des cibles particulières. En pratique, on vient mettre en contact cette sonde avec le mélange complexe à analyser, qui peut se présenter en solution ou sur un substrat solide, de manière à permettre l'appariement par base complémentaire. On vient ensuite laver la puce, pour éliminer ce qui ne s'est pas apparié. On obtient une puce hybridée qu'il faut analyser. Des dispositifs d'imagerie sont utilisés à cet effet, qui permettent de réaliser une cartographie de la biopuce. Selon l'état de l'art, on utilise généralement des marqueurs, de type radioactifs ou fluorescents qui sont ajoutés aux échantillons, pour leur conférer des propriétés émettrices qui sont alors utilisées pour la détection des chaînes, par mesure du signal correspondant, radioémissif ou fluorescent. Les images obtenues sont numérisées pour être ensuite traitées par des algorithme de traitement spécifiques de ces données, mis en oeuvre par des moyens informatiques. Un marquage couramment employé est le marquage physico-chimique, par des marqueurs fluorescents, c'est à dire des composés chromophores. Ces systèmes sont très utilisés car ils offrent une bonne sensibilité de détection. Selon le protocole de marquage physico-chimique, les brins des io échantillons sont marqués par des composés chromophores, le plus souvent, du cyanine 3 ou 5. On peut alors procéder par comparaison du marquage d'une cible inconnue avec celui d'une cible de référence en utilisant un marqueur différent pour chacune d'entre elles. Pour générer une image complète de la puce hybridée, il est nécessaire d'acquérir une image 15 correspondant à chaque composé chromophore. On mesure l'intensité du signal fluorescent émis sur les différents spots, dans chaque bande spectrale. Ceci peut se faire au moyen d'un scanner par exemple. II existe dans le commerce des scanners adaptés à cette utilisation. Pour mémoire, le principe de détection est alors le suivant : la puce est placée en chambre 20 noire. Le scanner éclaire la lame au moyen d'un faisceau laser de grande puissance. Par effet de fluorescence, on obtient l'émission d'un faisceau dans une bande spectrale différente, fonction du marqueur, à l'endroit des différents spots sur lesquels des brins se sont appariés, faisceau qui est détecté par le scanner. Une analyse des images permet d'extraire les 25 signaux d'hybridation de chacune des sondes. Les images sont obtenues sous forme numérique. Des traitements de données de ces images permettent alors d'identifier, et de quantifier les analytes dans le mélange analysé, de comparer les résultats obtenus à ceux d'échantillons connus. Les mesures des signaux peuvent être affinées par des techniques 30 d'élimination du bruit de fond, notamment l'auto-fluorescence du support. Cette technique selon l'état de l'art offre une très bonne sensibilité de détection, nécessaire à toute la palette des applications des puces ADN. Ainsi, la technique d'hybridation des puces ADN est-elle combinée étroitement à la technique de marquage fluorescent ou radio-actif, au point 35 d'en être indissociable, ce qui ressort de nombreuses publications. On trouve ainsi dans le glossaire bioinfo-biotechnologies, accédé à la date du 27 octobre 2005 depuis la page d'accueil Infobiogen du centre National de Ressources Informatiques Appliquées à la Génétique (http://www.infobiogen.fr), la définition suivante pour "Puce à ADN -Biopuce û matrice" : "Technique d'hybridation permettant une analyse génomique comparative de l'expression d'un grand nombre de patterns d'ARNm. Immobilisés sur un support solide (matrice), des oligonucléotides (simples brins) spécifiques de différents gènes ou ADNc connus constituent les sondes dont le rôle est de détecter des cibles marquées complémentaires, 1 o présentes dans le mélange complexe à analyser (ARNm extraits de cellules, tissus ou organismes entiers et convertis en ADNc). Les sondes sont soit greffées sur le support, soit synthétisées in situ (unité d'hybridation = plot). Les signaux d'hybridation sont détectés selon le type de marquage, radioactivité ou fluorescence, par mesure radiographique ou par 15 fluorescence, et quantifiés". On trouve encore à cette même date sur le site de l'Institut Pasteur (http://www.pasteur.fr) dans un dossier intitulé "La génomique à l'Institut Pasteur" que s'agissant des biopuces, "Ces outils, dont le concept date de la fin des années 80, servent à rechercher simultanément la présence de milliers de gènes (ou de produits de gènes (ARNm)) donnés 20 dans une solution contenant des séquences d'ADN (ou d'ARN) inconnues. Pour cela, des milliers d' " hameçons " moléculaires (sondes) différents, chacun spécifique d'un gène (ou d'un ARNm) recherché sont fixés sur un support. Ce support est mis au contact d'une solution contenant les séquences à analyser, marquées par fluorescence. Si un gène (ou un 25 ARNm) est au contact d'une sonde qui lui est spécifique, il s'y fixera. Dans le cas contraire, il restera " libre " et sera évacué par rinçage. Au final, des spots fluorescents sur le support indiqueront quelles sont les sondes ayant fixé leur gène (ou ARNm) spécifique, et donc quels gènes (ou ARNm) recherchés étaient présents dans l'échantillon analysé." 30 Cette technique a pourtant de nombreux inconvénients. Elle rend plus complexe le procédé d'hybridation de la puce, imposant des étapes supplémentaires, coûteuses et sensibles pour réaliser le marquage. Les chromophores utilisés comme marqueurs sont des composés coûteux, et ont une faible durée de vie. Ils introduisent des biais d'incorporation et de 35 lecture, dus à la présence de plusieurs marqueurs par spots, ou dus à la détérioration des propriétés physico-chimiques des brins du fait des marqueurs. Ils présentent des phénomènes de vieillissement, notamment sous l'effet de l'illumination. Dans l'invention, on a cherché un dispositif de détection directe, c'est à dire un dispositif qui ne nécessite pas l'utilisation de marqueurs, mais qui utilise les propriétés optiques intrinsèques des éléments détectés, c'est à dire les caractéristiques d'absorption des rayonnements ultra-violets. Selon le type de biopuce, des longueurs d'onde peuvent être plus particulièrement intéressantes. A titre d'exemple, pour les puces à ADN on s'intéresse plus particulièrement aux caractéristiques d'absorption à 260nm ; à 280nm pour les puces à protéines. Les techniques d'électrophorèse, notamment l'électrophorèse capillaire utilisent ces propriétés optiques, notamment pour doser la pureté des acides nucléiques. L'électrophorèse capillaire utilise un capillaire de silice fondue, qui a comme propriété d'être transparent à 260 nanomètres, les deux extrémités du capillaire formant une anode et une cathode. Le capillaire est rempli d'un gel d'électrophorèse dans lequel est injecté l'échantillon à analyser, à l'extrémité de la cathode. Sous l'effet d'un champ électrique obtenu par application d'une tension électrique appliquée entre anode et cathode, on obtient une migration des molécules vers l'anode. La mobilité efficace des molécules décroît quand le rapport charge/masse décroît. Sur le plan électrique, le support (gel) n'intervient pas. Par contre sa porosité conditionne la vitesse de migration des molécules selon leur taille, à charge égale. Cette propriété permet de déterminer la taille des fragments d'ADN contenus dans un mélange à analyser, après calibrage d'une échelle de taille pour un support d'électrophorèse déterminé, au moyen de fragments de taille connue. Un système d'imagerie associé comprenant par exemple un capteur CCD permet de mesurer l'absorption UV par les différentes molécules directement sur le capillaire, selon un système de détection transmissif : d'un côté du capillaire, la source de rayonnement ultraviolet ; de l'autre, un capteur CCD qui récupère l'image du contraste d'absorption. Les techniques d'électrophorèse et les techniques associées aux biopuces ne sont pas des techniques qui couvrent les même applications, en sorte qu'elles ne sont pas équivalentes. En outre, les techniques d'électrophorèse ont aussi recours à des techniques de marquage, par exemple fluorescent, ou à des techniques d'amplification, par exemple quand il s'agit de distinguer des fragments de même taille, qui ont la même migration dans le capillaire. Dans l'invention, on a cherché à utiliser les propriétés optiques d'absorption aux UV pour la détection des cibles sur les biopuces hybridées. Le problème lié à l'utilisation de ces propriétés optiques d'absorption dans l'ultra-violet est principalement lié à la possibilité d'obtenir un contraste suffisant, par rapport au support notamment. Dans le contexte de l'électrophorèse, le chemin optique du rayonnement ultra-violet est suffisamment important pour obtenir un contraste d'absorption suffisant, permettant la détection avec une bonne sensibilité. De plus, dans ces techniques, ce sont des fragments d'ADN beaucoup plus longs. Dans les biopuces, on a des chaînes d'acides nucléotides qui peuvent comporter moins de 100 bases. En électrophorèse, ce nombre varie d'une centaine à plusieurs centaines de milliers. Le capillaire a des dimensions comprises généralement entre 50 et 100 micromètres pour le diamètre interne. Le trajet optique à travers le capillaire dans les fragments d'ADN est augmenté par l'utilisation d'artifices tels que des cellules en Z ou en bulles, jusqu'à quelques millimètres. Un objet de l'invention est de permettre l'utilisation de la détection par contraste d'absorption UV dans la puce ADN, et plus généralement dans une biopuce, pour obtenir un système d'imagerie par détection directe, qui soit suffisamment sensible mais moins coûteux que les systèmes utilisant les techniques de marquage. La sensibilité de la détection est liée en pratique à la possibilité de révéler un contraste. II faut considérer le support de la biopuce d'une part et les dimensions des éléments biochimiques (de la sonde, ou de la sonde hybridée avec une cible) qui sont immobilisés sur les spots d'autre part. Le support est à l'origine d'un bruit de fond de détection. Et les éléments biochimiques sur la biopuce sont courts : ils peuvent comporter moins de 100 bases, et plus généralement moins de 5000 bases. Ils sont fixés sur le support en fines couches d'épaisseur inférieure à la centaine de nanomètres. On est bien loin des trajets optiques de quelques millimètres obtenus en électrophorèse qui permettent de révéler un contraste suffisant. Le demandeur a cependant pu mettre en évidence, que contre toute attente, et malgré les faibles dimensions des éléments biochimiques à détecter sur les puces, une bonne sensibilité est obtenue avec un système de détection directe, qui utilise une source de lumière et/ou un détecteur spécifique à la gamme spectrale du rayonnement à détecter, combiné à un support permettant d'exacerber le contraste. De cette façon toute étape supplémentaire liée au marquage est supprimée. Les coûts associés sont supprimés. L'invention concerne donc un système d'imagerie d'une biopuce, la biopuce comprenant un support sensiblement plan, présentant sur une face supérieure, une pluralité de spots, sur lesquels sont disposés des éléments biochimiques, ledit système comprenant une source d'un faisceau lumineux pour éclairer ladite face supérieure de la biopuce et un dispositif de détection d'un rayonnement émis par ladite face supérieure, caractérisé en ce que ladite source et/ou ledit dispositif de détection présentent une grande sélectivité à au moins une longueur d'onde d'intérêt comprise dans une bande de rayonnement ultra-violet, et en ce que ledit support présente un coefficient de réflectivité ou de transmission à ladite longueur d'onde d'intérêt dont une limite basse est de l'ordre de 10 pour cent. Avantageusement le détecteur de rayonnement sélectif est un dispositif semi-conducteur à réponse sélective à la longueur d'onde d'intérêt. II peut s'agir d'une couche active donnant une réponse à partir de la longueur d'intérêt et éclairée à travers une couche fenêtre filtrant les longueurs d'ondes plus faibles. Un tel détecteur permet alors l'utilisation d'une source blanche du commerce comme source d'éclairage de la biopuce. Selon un perfectionnement de l'invention, la face supérieure de la biopuce comporte des motifs sur lesquels sont disposés les spots, lesdits motifs étant tels que le chemin optique du faisceau lumineux à travers les éléments biochimiques est augmenté. L'invention concerne aussi une biopuce comprenant un support avec de tels motifs. Une biopuce ayant cette caractéristique permet d'améliorer la réponse du système d'imagerie. Selon un premier mode de réalisation, ces motifs sont des motifs géométriques protubérants, en sorte que la densité d'éléments biochimiques 35 sur chaque spot est augmentée. Selon un deuxième mode de réalisation, ces motifs sont des porosités, le support comprenant au moins trois couches, une première couche poreuse, dont des porosités forment les spots sur lesquels sont immobilisés des éléments biochimiques, et une couche de part et d'autre, l'une au moins également poreuse, lesdites couches de part et d'autre présentant une face réfléchissante vers ladite première couche poreuse, en sorte que le chemin optique est augmenté par effet de réflexion dans cette couche poreuse. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront plus clairement à la lecture de la description qui suit, faite à titre indicatif et non io limitatif de l'invention et en référence aux dessins annexés, dans lesquels : -la figure 1 illustre un premier exemple de réalisation d'un dispositif d'imagerie par détection directe d'un contraste d'absorption selon l'invention; -la figure 2 illustre un deuxième exemple de réalisation d'un dispositif d'imagerie selon l'invention permettant une analyse multi-spectrale ; 15 -la figure 3 illustre un autre exemple de réalisation d'un dispositif d'imagerie selon l'invention, fonctionnant sur le mode transmissif ; -la figure 4 illustre les propriétés spectrales d'un support de puces utilisé dans un dispositif d'imagerie selon l'invention, -la figure 5 illustre les réponses spectrales d'un détecteur avec couche 20 active sur couche fenêtre filtrante; -la figure 6 est un schéma d'une mise en oeuvre d'un dispositif d'imagerie selon l'invention avec filtrage spectral de la source à l'aide d'un spectroscope; -les figures 7a à 7f montrent des images obtenues avec un dispositif 25 d'imagerie selon l'invention, utilisé avec une puce ADN; et -les figures 8a à 8c illustrent des exemples de réalisation d'un support de puce perfectionné, permettant d'améliorer la sensibilité d'un dispositif d'imagerie selon l'invention. Un dispositif d'imagerie par détection directe d'un contraste 30 d'absorption, selon l'invention comprend, comme illustré sur la figure 1 : -une biopuce 10, comprenant principalement un support planaire 11, typiquement une lame, comportant sur sa face supérieure 11 a une pluralité de spots sur lesquels sont immobilisés des éléments biochimiques 12. La lame d'une puce à ADN a en pratique une longueur d'une dizaine de 35 centimètres sur une largeur de quelques centimètres. -une source d'éclairage 20 fournissant un faisceau lumineux à une longueur d'onde d'intérêt X;, avec une optique de focalisation de ce faisceau sur la face supérieure de la biopuce, selon un axe 40 de focalisation. -un dispositif de détection semi-conducteur 30 sensible à au moins la longueur d'onde d'intérêt X et une optique de focalisation 31 du rayonnement réfléchi par la lame sur la surface sensible du détecteur. II permet de recueillir une image de l'absorption par la puce à la longueur d'onde d'intérêt, par déplacement latéral relatif de la biopuce par rapport à l'axe 40 de focalisation du rayonnement optique de façon à balayer la surface de la 1 o biopuce. Le dispositif de détection peut comporter une simple barrette de transducteurs (photodiodes). C'est suffisant pour recueillir toute l'image d'une puce à ADN, par balayage, compte-tenu de ses dimensions habituelles, de l'ordre de quelques centimètres carrés. Il peut aussi comporter une matrice 15 (à deux dimensions) de transducteurs. L'intérêt d'utiliser une matrice avec balayage est de limiter les effets de pixels défectueux, de bénéficier des traitements statistiques sur plusieurs colonnes (binning) et de réaliser une image hyper-spectrale si une dispersion optique est utilisée. Une matrice peut également permettre d'imager une puce sans déplacement mais avec 20 une résolution limitée par le nombre de pixels de celle-ci. La longueur d'onde d'intérêt X est en pratique 260 nanomètres, pour les puces ADN, correspondant au maxima d'absorption des bases azotées. Pour les puces à protéines, la longueur d'onde d'intérêt Xi est 280 nanomètres. Il faut que l'un au moins des dispositifs d'éclairage et de 25 détection soit sélectif autour de la longueur d'onde d'intérêt de la biopuce, soit intrinsèquement, ou au moyen d'un filtre très sélectif. On peut ainsi utiliser une source d'éclairage ultra-violet sélective à 260 nanomètres, qui est le maxima d'absorption des bases azotées. La source sera alors typiquement une source laser, ou une diode électroluminescente, éventuellement 30 associée à un filtre. On peut aussi utiliser une source blanche (lampe à Xénon ou au Deutérium) associée à un monochromateur. Le dispositif détection 30 est de préférence un détecteur semi- conducteur à bande spectrale étroite autour de la longueur d'onde d'intérêt X1. Un tel détecteur comprend une couche active sur une couche fenêtre 35 filtrante. Un filtrage est naturellement réalisé par la couche fenêtre pour les longueurs d'onde inférieures à 260nm et par la bande interdite de la couche active pour les longueur d'onde supérieures. Ces détecteurs offrent ainsi une forte réponse dans la bande 260-290 nanomètres des ultraviolets tout en rejetant de plusieurs ordres de grandeur leur réponse de part et d'autre de cette bande. En particulier les détecteurs à bandgap AIGaN sensibles dans la bande 260-280 nanomètres sont particulièrement adaptés à un dispositif d'imagerie selon l'invention. La réponse d'un tel détecteur est illustrée par la courbe de la figure 5. La courbe reliant les points rectangles noirs, représente la réponse obtenue avec un éclairage par la face avant ("front i o side illumination' et celle reliant les cercles représente la réponse avec un éclairage par la face arrière à travers la couche fenêtre ("back side illumination"). En ordonnée on a la réponse du détecteur et en abscisse, les longueurs d'onde en micromètres. Une configuration avantageuse comprend alors une source blanche 15 pour éclairer la biopuce et à un détecteur à bande étroite éclairé par la face arrière, à travers la couche fenêtre. De cette façon, on n'a pas besoin de filtre propre à la source de lumière, car le détecteur travaille dans une bande spectrale étroite. Cette solution est avantageuse car les sources UV puissantes et les filtres passe-bande sont coûteux et le rejet des longueurs 20 d'onde indésirables se fait au détriment de la transmission à la longueur d'onde d'intérêt. En utilisant un détecteur à bandgap AIGaN, on peut utiliser dans le dispositif de détection une source d'éclairage large bande du commerce, sans filtre, tout en bénéficiant d'une grande sensibilité de détection. 25 Dans une variante, illustrée sur la figure 2, le dispositif d'imagerie utilise plusieurs longueurs d'onde d'intérêt, dans l'exemple illustré ? et Xi à des fins de fonctions de dispersion spectrale, autour du maxima d'absorption. De telles fonctions sont intéressantes, notamment dans le cas des puces à protéines à des fins d'identification spectrale. Le dispositif de détection sera 30 alors une matrice si l'on veut mesurer simultanément les contrastes d'absorption à différentes longueurs d'onde. L'usage d'une barrette nécessiterait de repositionner le dispositif optique pour chaque longueur d'onde étudiée. Le dispositif d'imagerie comprend alors une source d'éclairage 50 et un dispositif de détection 51, couvrant une plage spectrale comprenant au moins les longueurs d'onde d'intérêt. Dans un exemple pratique, le spectre d'émission de la source 50 5 correspond à la bande UV B 240-290 nanomètres, et le détecteur a une sensibilité spectrale dans cette même plage. Le dispositif d'imagerie est alors conçu pour mesurer la réponse de la puce 10 à au moins deux longueurs d'onde d'intérêt situées dans la bande B des ultra-violets, typiquement 240û290 nanomètres. Ceci s'applique aussi io bien aux puces ADN qu'aux puces à protéine. On prévoit alors une source d'éclairage et un dispositif de détection correspondants. Ainsi comme illustré sur la figure 2, la source d'éclairage aura au moins un spectre d'émission correspondant, c'est à dire dans la bande UV B 240-290 nanomètres, et un détecteur sensible dans cette plage. 15 La source d'éclairage 50 sera alors de préférence une source de rayonnement large bande, ou blanche, typiquement une lampe au Xénon ou au Deutérium. Le dispositif de détection 51 peut être un scanner classique du commerce, c'est à dire un détecteur de rayonnement ultra-violet en bande B 20 [240-290] nanomètres. De préférence, le dispositif de détection 51 est un détecteur semi-conducteur à bande spectrale étroite, notamment du type AIGaN, de grande sensibilité dans le domaine de réponse spectrale des biopuces, et dont a vu plus haut, qu'il permet lorsqu'il est éclairé par sa face arrière, de travailler 25 dans une bande spectrale étroite même lorsque la biopuce est éclairée au moyen d'une source blanche du commerce. Le dispositif d'imagerie illustré à la figure 2 comprend alors côté détection : une optique de collimation 52 ; une optique de dispersion 53 ; et une optique de focalisation 54 du faisceau réfléchi permettant de collecter les 30 images différenciées en longueur d'onde. L'optique de collimation 52 est de préférence réflective pour ne pas pâtir de la dispersion d'indice présente de 240 à 290nm. Dans un dispositif d'imagerie à bas coût, elle sera réalisée plus simplement par des lentilles. L'optique de dispersion 53 comprend par exemple un prisme, ou un réseau 35 de diffraction. L'optique de collimation 52 et l'optique de focalisation 54 sont chacune réalisée de manière classique par une lentille. Tous ces éléments d'optiques sont bien connus de l'homme de l'art de la détection de faisceaux lumineux. Les deux dispositifs représentés sur les figures 1 et 2 fonctionnent en réflexion. La surface 11 du support sur laquelle sont disposés les spots, présente un coefficient de réflexion le plus fort possible. Quelques dizaines de pour cent seulement sont nécessaires. L'angle d'incidence du faisceau émis par la source sur la surface 11 est par exemple de l'ordre de 45 degrés. Le dispositif peut fonctionner en transmission. Une variante "transmissive" du dispositif réflectif de la figure 1 est illustrée sur la figure 3. Le support doit alors avoir un coefficient de transmission suffisant de l'ordre de 10 pour cent au moins. Il peut s'agir de silice fondue, de CaF2, de saphir, de PDMS (Polydimethyl siloxane ) jusqu'à 260nm. Il est alors possible de placer le détecteur 31 en contact direct avec l'arrière du support. Cependant l'utilisation d'une optique de focalisation 32 permet d'optimiser la collection du flux transmis et de préserver la propreté et la surface du détecteur. Un dispositif d'imagerie selon l'invention a été réalisé, dont la configuration est détaillée sur la figure 6. La source 60 comporte une lampe à Xénon 61 suivi d'un monochromateur 62 qui ne laisse passer ensortie que la longueur d'onde d'intérêt 1; (ou une fenêtre comprenant les longueurs d'onde d'intérêt), et de l'optique de focalisation 63. La biopuce 65 est montée sur un élément 66 permettant sa translation dans le plan, relativement à un axe 64 de focalisation de la source 60. On peut ainsi balayer l'ensemble de la lame sur toute sa longueur par le faisceau démission. Le détecteur semi-conducteur 67, est de type AIGaN à bande spectrale étroite, comprenant une barrette de plusieurs centaines de pixels, et comprend une optique de focalisation 68 associée, c'est à dire une lentille. Dans l'expérience la biopuce est une puce ADN dont le support est une lame de verre dont la face supérieure présente un coefficient de réflexion de 30% à 260 nanomètres. Les brins d'ADN immobilisés sur les spots ont de 500 bases à 5000 bases de long. Les spots ont une taille de l'ordre de 300 micromètres. La lentille 68 réalisant l'image sur la barrette permet de réaliser une image sans agrandissement. Pour une barrette de 300 pixels et 26 micromètres de large, la largeur de la zone scannée sur la lame est de 8 millimètres. Chaque spot est ainsi susceptible d'apparaître sur une dizaine de pixels avec une résolution satisfaisante. Les images illustrées sur les figures 7a et 7b, ont été réalisées avec des illuminations à 260 nanomètres et 280 nanomètres, sur une biopuce à oligonucléotides, dont les brins ont une longueur de 70 bases. Dans ces images noir et blanc, la gamme de couleur correspond à un contraste variant de 0.95 à 1.05. Les spots sont observables aux deux longueurs d'onde mais le contraste est bien meilleur à 260 nanomètres. En particulier, pour les spots offrant le plus fort contraste, l'absorption à X1=280 nm s'élève à 3% et l'absorption à 2^,;=260 nm 1 o s'élève à 5%. Les images illustrées sur les figures 7c et 7d, résultent de l'analyse des spots de plus forts contrastes sur les images des figures 7a et 7b. Elles montrent que l'absorption à 260nm (figure 7d) et 280 nm (figure 7c) peut être évaluée à 5 et 2 pour cent. Les images sur les figures 7e et 7f sont des 15 images réalisées avec une biopuce, avec des simples brins d'ADN longs de 500 à 5000 bases. La première image (figure 7e) correspond à une illumination à X=260 nm, et la deuxième image (figure 7f), correspond à une illumination à X;=280 nm. La gamme du contraste varie sur ces images de 0.94 à 1.1. On observe une absorption des plots de l'ordre de 4 à 5 % à 20 260nm. Dans ces images, la biopuce ADN est présentée en sorte que la longueur est donnée par la verticale et la largeur par l'horizontale. Par convention, les spots sont disposés en lignes (horizontales) et en colonnes (verticales). La lame est balayée par la source d'éclairage de haut en bas. Le 25 profil d'intensité le long d'une ligne horizontale h tracée sur l'image est illustré sur les figures 7e et 7f sous la référence I. Le profil d'absorption le long d'une colonne de spots est donnée sur les images sous la référence A. Ces images confirment que le contraste obtenu a bien comme origine l'absorption intrinsèque des bases des éléments biochimiques, et non des 30 effets de rugosité parasite comme par exemple des poussières. A 280 nanomètres, l'absorption des spots est quasiment masquée par le bruit à cette longueur d'onde, et ne dépasse pas 1%. En pratique, en prenant l'image obtenue avec différentes illuminations allant de 260 à 280 nm, on a pu vérifier que la poussière apparaît sur toutes les images avec le même 35 contraste d'absorption. La figure 4 illustre les propriétés optiques d'un support de biopuce de type réflectif utilisé dans l'invention. Ce support comporte un substrat sur lequel est réalisée une structure multicouche de matériaux, en sorte de former un miroir ayant un coefficient de réflexion non négligeable dans la gamme de longueurs d'onde autour de la longueur d'onde d'intérêt, soit typiquement autour de 260 nanomètres dans le cas des biopuces de type puces ADN, et 280 nanomètres dans le cas de biopuces de type puces à protéines. Dans un exemple, le coefficient de réflexion peut être améliorée au moyen d'un multicouche diélectrique (Oxyde de titane et d'aluminium) ou d'un dépôt métallique. La réflectivité peut être ajustée en fonction de la longueur d'onde d'intérêt (260 ou 280 nm) en réglant les épaisseurs et la nature du multicouche diélectrique recouvrant le support. Un support comportant une couche métallique de forte réflexion à 260nm, recouverte d'une couche diélectrique de protection, sur laquelle sont disposés les spots convient à l'application peut s'avérer plus économique. Dans un perfectionnement de l'invention, un système d'imagerie selon l'invention utilise une biopuce dont la face supérieure 11 présente une texture telle que le signal d'absorption généré par les éléments biochimiques immobilisés sur les spots se trouve amplifié. La réponse du système est améliorée. Selon un premier mode de réalisation d'une biopuce perfectionnée, particulièrement bien adaptée à un système d'imagerie selon l'invention, on développe une forte rugosité de la surface de la biopuce quitte à la rendre légèrement poreuse à l'échelle de quelques dizaines à quelques centaines de nanomètres. On augmente ainsi la surface de greffage effective. La densité des éléments biochimiques immobilisés sur chaque spot est augmentée. On amplifie ainsi l'absorption. Selon un autre mode de réalisation illustré sur les figures 8a et 8b, la face supérieure 71 comporte des motifs géométriques protubérants. Ils ont pour effet d'augmenter la densité d'éléments biochimiques immobilisés sur chaque spot. Si on reprend l'exemple de la puce ADN, on augmente par cet artifice, le nombre de brins sur chaque spot. Cela revient à augmenter l'épaisseur de l'élément biochimique, et donc à augmenter le chemin optique parcouru par le faisceau incident. On amplifie ainsi l'absorption. La face supérieure 71 du support 70 comprend ainsi des motifs sur lesquels sont disposés les spots. Ces motifs sont des motifs géométriques protubérants, présentant au moins un plan incliné 74 (figure 8a) ou vertical 75 (figure 8b) par rapport à la surface du support. Les éléments chimiques 76 étant immobilisés sur ce plan. L'angle d'incidence a de l'illumination avec la surface du support est choisi pour correspondre à l'angle que forme le plan supportant les spots avec la surface, par exemple 45 degrés, pour les plans inclinés 74, 90 degrés pour les plans verticaux 75 . De cette façon, la densité d'éléments chimiques sur chaque spot est augmentée et l'angle d'incidence de l'illumination est choisi pour atteindre tous ces éléments chimiques. Le signal d'absorption de chaque spot se trouve augmenté. Dans un autre mode de réalisation illustré sur la figure 8c, ces motifs sont tels qu'ils favorisent des réflexions du faisceau incident, en sorte que le signal d'absorption se trouve amplifié. Dans l'exemple illustré, le support comporte une couche poreuse 80 vis à vis des éléments biochimiques à immobiliser sur les spots. Par exemple, il s'agit d'une couche de silice fondue, partiellement attaquée à l'acide, en sorte de former des porosités (des puits), Un spot peut recouvrir une large surface poreuse. Les éléments biochimiques sont donc immobilisés dans cette couche. Deux couches 81 et 82 sont situées de part et d'autre de cette couche, l'une au moins étant également poreuse. Dans l'exemple la couche 82 disposée sur la couche 80 est poreuse. Elle laisse passer les éléments biochimiques des échantillons à analyser. Ces couches 81 et 82 de part et d'autre présentent une face réfléchissante vers la première couche poreuse 80. Le faisceau d'éclairage traverse ainsi les couches 82 et 80, et dans la couche 81 subit de multiples réflexions dues aux parois réfléchissantes des couches 82 et 81. Le chemin optique est ainsi augmenté par effet de réflexion dans la couche 80, amplifiant ainsi le signal d'absorption dans les éléments biochimiques. REVENDICATIONS 1. Système d'imagerie d'une biopuce, la biopuce (10) comprenant un support sensiblement plan, présentant sur une face supérieure (11), une pluralité de spots, sur lesquels sont disposés des éléments biochimiques (12), ledit système comprenant une source (20) d'un faisceau lumineux pour éclairer ladite face supérieure de la biopuce et un dispositif de détection (30) d'un rayonnement émis par la dite face supérieure, caractérisé en ce que ladite source et/ou ledit dispositif de détection présentent une grande sélectivité à au moins une longueur d'onde d'intérêt (X;) comprise dans une bande de rayonnement ultra-violet, et en ce que ledit support présente un coefficient de réflectivité ou de transmission à la dite longueur d'onde d'intérêt dont une limite basse est de l'ordre de 10 pour cent. 2. Système selon la revendication 1, caractérisé en ce que la source et/ou le système de détection sont sensibles à une fenêtre de longueur d'onde comprenant ou égale à une bande 240-290 nanomètres. 3. Système selon la revendication 2, caractérisé en ce que ledit dispositif de détection (51) est un dispositif semi-conducteur à bande spectrale étroite. 4. Système selon la revendication 3, caractérisé en ce que la source est une source de lumière blanche (50) disposée pour éclairer la puce par la face arrière dudit dispositif de détection. 5. Système selon la revendication 2, caractérisé en ce que la source est une source blanche associé à un filtre de sélection d'un domaine spectral étroit autour de ladite longueur d'onde d'intérêt (X;). 6. Système selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que la face supérieure (11) de la biopuce (10) présente une texture telle que le signal d'absorption généré par les éléments biochimiques immobilisés sur les spots est amplifié. 7. Système selon la revendication 6, caractérisé en ce que la face supérieure (11) de la biopuce présente une forte rugosité de surface permettant d'augmenter la surface apparente de la biopuce. 8. Système selon la revendication 6, caractérisé en ce que la face supérieure (11) de la biopuce comporte des motifs sur lesquels sontdisposés les spots, lesdits motifs étant tels que le chemin optique du faisceau lumineux à travers les éléments biochimiques est augmenté. 9. Système selon la revendication 8, caractérisé en ce que lesdits motifs sont des motifs géométriques protubérants (74, 75), en sorte que la densité d'éléments biochimiques sur chaque spot est augmentée. 10. Système selon la revendication 9, caractérisé en ce que lesdits motifs comportent un plan incliné ou vertical sur lequel sont fixés lesdits éléments biochimiques, et en ce que le faisceau lumineux a un angle d'incidence (a) sur la surface (11) de la biopuce correspondant à l'angle formé par ledit plan des motifs avec ladite surface (11). 11. Système selon la revendication 8, caractérisé en ce que lesdits motifs sont des porosités, le support comprenant au moins trois couches, une première couche poreuse (80), dont des porosités forment des spots sur lesquels sont immobilisés des éléments biochimiques, et une couche de part et d'autre (81, 82), l'une au moins également poreuse en sorte de permettre une hybridation, lesdites couches de part et d'autre présentant chacune une face réfléchissante vers ladite première couche poreuse (80), en sorte que le chemin optique est augmenté par effet de réflexion dans ladite première couche poreuse (80).