Brevet FR2885048A1 — publié le 20061103

L'invention concerne l'utilisation cosmétique d'huiles essentielles, pour l'obtention d'un effet préventif et/ou curatif d'une déshydratation cutanée. L'eau contenue dans la peau représente environ 10% du poids du corps, soit 6 à 8 litres. Elle est principalement stockée au niveau du derme (70 %) et, bien que présente en relativement faible quantité dans la couche cornée (13%), l'eau est vitale pour les fonctions de la peau, apportant élasticité, souplesse et plasticité. La teneur en eau des couches superficielles de la peau conditionne leurs qualités mécaniques et esthétiques. Le maintien du flux d'eau à travers la peau, des couches profondes vers la surface, est un mécanisme fondamental assurant un apport d'eau régulé aux cellules. La peau déshydratée ne correspond pas à une typologie génétiquement déterminée, mais le plus souvent à un état physiologique passager. Les symptômes (manque d'éclat, de souplesse, de tonicité, de résistance, tiraillements, desquamation et/ou rougeurs....) ont une cause bien précise: ils sont le reflet d'un manque d'eau en surface dû à une rupture dans l'équilibre hydrique de la couche cornée. Elle apparaît lorsque sa teneur en eau est inférieure à 10%. Si cet état s'installe, la peau devient irritable et le processus de vieillissement s'en trouve accéléré. Les origines de la déshydratation sont très diverses et peuvent être liées à plusieurs facteurs qui sont, soit internes (physiologiques: mauvaise rétention du NMF, mauvaise cohésion entre les cornéocytes ou rupture du film hydrolipidique, hormonaux, liés à l'âge...), soit externes (agressions climatiques, chimiques, hygiène excessive...). La conséquence finale de la déshydratation cutanée se traduit par le fait que l'eau n'est plus retenue dans les cellules de la couche cornée, à savoir la couche la plus superficielle (externe) de l'épiderme. De nombreux produits cosmétiques contiennent des huiles essentielles pour leurs caractéristiques olfactives ou pour des propriétés diversement démontrées. Ces huiles peuvent être utilisées seules ou en mélange (voir notamment les documents WO 00/04872, WO 03/018730 et FR 2 837 705). Les inventeurs ont maintenant démontré que les huiles essentielles avaient une action non seulement sur la protection des cellules de la peau contre la déshydratation, mais permettaient également une meilleure réhydratation de la peau. L'objet de l'invention est donc l'utilisation cosmétique d'une ou plusieurs huiles essentielles pour l'obtention d'un effet préventif et/ou curatif d'une déshydratation cutanée, de préférence un effet à la fois préventif et curatif. Plus particulièrement, l'huile essentielle empêche ou traite les 10 dommages que cause un stress hydrique sur les fibroblastes. Les inventeurs ont ainsi montré que l'huile essentielle permet d'obtenir un effet d'augmentation de la viabilité de fibroblastes en culture in vitro, soumis à un stress hydrique. Les huiles essentielles visées par la présente invention comprennent notamment l'huile essentielle de Santal Australien (Santalum spicatum), de Santal Mysore (Santalum album), de Rose Turque (Rosa damascena), de Lavande (Lavandula angustifolia), de Néroli (Citrus amara), de Myrte (Myrtus communis), de Cardamome (Elletaria cardamomum), de Myrrhe (Commiphora myrrha). Les parties des plantes utilisées sont présentées dans le tableau 1 cidessous: Tableau 1: caractéristique des huiles essentielles Huile essentielle Nom Partie de Exemple de fournisseur la plante utilisée Santal Australien Santalum spicatum bois Australian Sandalwood Oil Company Santal Mysore Santalum album bois Charabot Rose turque Rosa damascena fleurs Robertet Lavande Lavandula angustifolia sommités fleuries Laboratoire Monique Rémy Néroli Citrus amara fleurs et Robertet boutons floraux Myrte Myrtus communis feuilles Robertet Cardamome Elletaria cardamomum fruits Robertet Myrrhe Commiphora myrrha gomme oléorésineuse Robertet ( tronc de l'arbre, tiges et branches) Les huiles essentielles sont obtenues classiquement, par exemple par extraction avec un solvant polaire ou par hydrodistillation, ou encore à l'aide d'un fluide d'extraction à l'état supercritique (CO2 par exemple). Avantageusement, l'huile essentielle de Myrrhe est un extrait de Commiphora myrrha obtenu par extraction avec un solvant polaire choisi parmi le groupe composé du chloroforme, d'un alcool inférieur en C1-C6, en particulier l'éthanol, le méthanol, l'acétate d'éthyle ou un mélange de ces solvants entre eux, ou encore un mélange hydroalcoolique de ces solvants. Avantageusement les huiles essentielles de Santal Australien, Santal Mysore, Rose Turque, Lavande, Néroli, Myrte et cardamome sont obtenues à partir de l'extrait correspondant par procédé d'hydro-distillation. Celuici consiste à faire passer de la vapeur d'eau dans le matériel végétal (intact ou préalablement broyé), et à recueillir les vapeurs entraînées dans un essencier après condensation dans un réfrigérant. L'huile essentielle est alors recueillie par différence de gravité avec l'eau dans le décanteur. Les principaux constituants de l'huile essentielle de rose sont les suivants dans l'ordre décroissant d'importance quantitative: citronellol, géraniol, paraffine, nérol, alcool phényl ethylique, eugénol, linalol, géranial, néral. Les principaux constituants de l'huile essentielle de lavande sont les suivants dans l'ordre décroissant d'importance quantitative: acétate de linalyle, linalol, ocimène, (3-caryophylène, acétate de lavandulyle, lavandulol, bornéol, a-terpinéol, 1-8 cinéol, acétate de géranyle, acétate de néryle, limonène, camphre, géraniol. Les principaux constituants de l'huile essentielle de Néroli sont les suivants dans l'ordre décroissant d'importance quantitative: linalol, 13pinène, 2885048 4 limonène, acétate de linalyle, cis et trans -ocimène, aterpinéol, acétate de géranyle, géraniol, nérolidol, acétate de néryle, farnésol. Les principaux constituants de l'huile essentielle de Myrte sont les suivants dans l'ordre décroissant d'importance quantitative: a-pinène, 18 cinéole, acétate de myrtényle, limonène, a-terpinéol, linalol, acétate de géranyle, géraniol. Les principaux constituants de l'huile essentielle de Cardamome sont les suivants dans l'ordre décroissant d'importance quantitative: acétate de terpényle, 1-8 cinéol, acétate de linalyle, sabinène, linalol, limonène, myrcène, a-pinène, a-terpinéol, géranial, farnésol. Les principaux constituants de l'huile essentielle de Myrrhe sont les suivants dans l'ordre décroissant d'importance quantitative: lindestrène, curzérène, germacrone, f3-élémène, épi-a-cadinol, 3-germacrène, asélinène, abractylone, trans-y-cadinène, ô-cadinène, b et y-élémène, bgermacrène, caryophyllène. Les principaux constituants de l'huile essentielle du Santal Mysore sont les suivants dans l'ordre décroissant d'importance quantitative: a et F3santalol, trans-bergamotol, lancéol, a et R-santalène, épi-p-santalène, F3-bisabolol, acétate de santalol, curcumène, t3-curcumène, trans-abergamotène. Les principaux constituants de l'huile essentielle du Santal australien sont les suivants dans l'ordre décroissant d'importance quantitative: asantalol, nuciférol, F3-curcumène-12-ol, épi-a-bisabolol, farnesol, (3bisabolol, nérolidol, trans-a-bergamotol, lancéol, I3-santalol, dendrolasine, 13-curcumène, R-santalène, santalène. Les profils chromatographiques de ces huiles sont présentés aux figures 2 à 9. Parmi ces huiles, l'huile extraite du bois du Santal Australien (Santalum spicatum) est particulièrement préférée. Il est également avantageux de combiner l'huile essentielle de Santal Australien à l'huile essentielle de Myrrhe et à l'huile essentielle de Néroli. Les huiles essentielles peuvent être utilisées pures, c'est-à-dire en tant que telles, ou formulées au sein de compositions cosmétiques. De manière préférentielle, ces compositions peuvent comprendre de 0,0001 à 5 % de l'huile essentielle exprimée en poids par rapport au poids total de la composition. Des exemples de combinaisons sont donnés ci-après (en poids par rapport au poids total de la composition: - Santal Australien (0,1%), Myrrhe (0, 1%), Néroli (0,01%) ; notamment dans une crème hydratante visage ou corps; Myrrhe (0,1%), Lavande (0,1%), Rose (0,002%) ; notamment dans 10 un masque hydratant visage ou corps; - Lavande (0,1%), Rose (0,002%), Cardamome (0,1%) ; notamment dans une lotion hydratante visage ou corps; - Myrrhe (0,2%), Santal Australien (0,2%), Néroli (0,2%), Myrte (0,2%), Lavande (0,2%) ; notamment dans un sérum hydratant visage ou corps; - Rose (0,002%), Myrrhe (0,1%) ; notamment dans un spray hydratant visage ou corps; - Lavande (0,1%), Néroli (0,01%), notamment dans une lingette hydratante visage ou corps. Ces compositions sont appliquées par voie topique. Elles peuvent se présenter sous forme de crème, d'huile, de lait, de solution, de gel, de spray, de lotion, de suspension, de lingette, de patch, etc. De manière encore plus préférée, il s'agit de compositions cosmétiques sous la forme d'émulsion huile-dans-eau ou eau-dans-huile ou d'émulsion multiple, de microémulsion, de gel aqueux ou hydroalcoolique, de crème, d'huile, de lotion aqueuse ou hydroalcoolique. Les exemples et les figures illustrent l'invention sans en limiter la portée. La figure 1 montre l'effet des huiles essentielles (3,6.10-3 pl/ml) sur la viabilité des fibroblastes humains (FDHN) en culture, soumis à un stress hydrique d'une durée de 3 heures ou de 5 heures. La figure 2 est un essentielle de rose. La figure 3 est un essentielle de lavande. La figure 4 est un essentielle de Néroli. La figure 5 est un essentielle de Myrte. La figure 6 est un essentielle de Cardamome. La figure 7 est un profil chromatographique (par HPLC) d'huile essentielle de Myrrhe. La figure 8 un profil chromatographique (par HPLC) d'huile essentielle de Santal Mysore. La figure 9 un profil chromatographique (par HPLC) d'huile essentielle de Santal Australien. EXEMPLES: Les huiles essentielles utilisées sont celles du tableau 1, obtenues auprès des fournisseurs indiqués. Exemple 1: Protection préventive par les huiles essentielles des fibroblastes 25 dermiques humains normaux contre la déshydratation. A/ protocole Les fibroblastes (FDHN) sont ensemencés dans des plaques 24 puits (Greiner, réf. 662160) à raison de 50 000 cellules/puits et incubés pendant 24 heures dans un incubateur à 37 C, 5 % de CO2 et 95% d'humidité. Le milieu de culture est composé de Dulbecco's Modified Eagle Medium, sans rouge de phénol, contenant 4,5 g/I de glucose (Invitrogen, réf. 31053028), 10 % de profil chromatographique (par HPLC) d'huile profil chromatographique (par HPLC) d'huile profil chromatographique (par HPLC) d'huile profil chromatographique (par HPLC) d'huile profil chromatographique (par HPLC) d'huile sérum de veau nouveau né (SVNN, Invitrogen, réf.16010159, lot 40F1420D), 2 mM de L-glutamine (Invitrogen, réf. 25030024), 1 % d'une solution d'acides aminés non essentiels (Invitrogen, réf. 11140035) et 1 % d'une solution de pyruvate de sodium (Invitrogen, réf. 11360039). Les cellules sont traitées pendant 24 heures avec les huiles essentielles diluées dans le milieu de culture (1 % SVNN) à 3,6.10"3 pl/ml. Pour valider le protocole, deux références internes sont réalisées: une référence positive, une solution de tréhalose (Sigma, réf. T5251, lot 38H3781) à 0,3 % dans le milieu de culture à 1 % SVNN, et une référence négative, le milieu témoin à 1 % SVNN. Les cellules sont ensuite rincées par une solution de HBSS (Hank's Balanced Sodium Salt) puis mises en conditions de stress hydrique. Pour cela, le milieu est retiré des puits et les cellules sont incubées 3 heures ou 5 heures dans un incubateur, de façon à mimer les conditions d'aridité. Afin de valider l'expérience, un témoin non déshydraté est réalisé (milieu de culture à 1 0/0 SVNN). Après le stress hydrique, la protection des fibroblastes est évaluée par quantification de l'activité métabolique des déshydrogénases mitochondriales des cellules par mesure d'hydrolyse du MTT (Methylthiazoletetrazolium). La solution de MU est incubée pendant 3 heures à 37 C. Le MU est ensuite éliminé et du diméthylsulfoxide (DMSO, Prolabo, réf. 23500.297) est déposé dans chaque puits. Après 5 minutes d'agitation, la lecture de densité optique est réalisée à 570nm. B/ résultats Tableau 2: Effet préventif sur les FDHN: Préventif 3H Tréhalose Préventif 5H Tréhalose préventif 3H préventif 5H Santal Australien 140 131 140 141 Santal Mysore - 115 267 205 Rose Turque 196 131 121 141 Lavande 151 131 117 141 Néroli 127 115 240 205 Myrte 130 131 120 141 Cardamome 127 115 269 205 Myrrhe 117 115 304 205 Les huiles essentielles Santal Australien, Santal Mysore, Rose Turque, Lavande, Néroli, Myrte, Cardamome et Myrrhe, aux concentrations de 3,6.103 pl/mi permettent aux FDHN de mieux prévenir la déshydratation cellulaire. En effet, les FDHN ont des viabilités respectives nettement supérieures à celle du témoin non traité (milieu 1 % SVNN), fixé arbitrairement à 100 %, lorsqu'ils subissent une déshydratation de 3 heures ou 5 heures après 24 heures de traitement, résultats au moins identiques, pour la plupart, à ceux obtenus avec le tréhalose à 0,3 % (voir Figure 1). Exemple 2: Protection curative par les huiles essentielles des fibroblastes dermiques humains normaux soumis à la déshydratation Al protocole Les fibroblastes (FDHN) sont ensemencés dans des plaques 24 puits (Greiner, réf. 662160) à raison de 50 000 cellules/puits et incubés pendant 24 heures dans un incubateur à 37 C, 5 % de CO2 et 95 % d'humidité. Le milieu de culture est composé de Dulbecco's Modified Eagle Medium, sans rouge de phénol, contenant 4,5 g/I de glucose (Invitrogen, réf. 31053028), 10 % de sérum de veau nouveau né (SVNN, Invitrogen, réf.16010159, lot 40F1420D), 2mM de L-glutamine (Invitrogen, réf. 25030024), 1 % d'une solution d'acides aminés non essentiels (Invitrogen, réf. 11140035) et 1 % d'une solution de pyruvate de sodium (Invitrogen, réf. 11360039). Les cellules sont ensuite rincées par une solution de HBSS (Hank's Balanced Sodium Salt) puis mises en conditions de stress hydrique. Pour cela, le milieu est retiré des puits et les cellules sont incubées 3 heures ou 5 heures dans un incubateur, de façon à mimer les conditions d'aridité. Afin de valider l'expérience, un témoin non déshydraté est réalisé (milieu de culture à 1% SVNN). Après le stress hydrique, les cellules sont traitées pendant 24 heures avec les huiles essentielles diluées dans le milieu de culture (1 % SVNN) à 3,6.10"3 pl/mi. Pour valider le protocole, deux références internes sont réalisées: une référence positive, une solution de tréhalose (Sigma, réf. T5251, lot 38H3781) à 0,3% dans le milieu de culture à 1% SVNN, et une référence négative, le milieu témoin à 1% SVNN. La protection des cellules est évaluée par quantification de l'activité métabolique des déshydrogénases mitochondriales des cellules par mesure 10 d'hydrolyse du MU. La solution de MU est incubée pendant 3 heures à 37 C. Le MU est ensuite éliminé et du diméthylsulfoxide (DMSO, Prolabo, réf. 23500.297) est déposé dans chaque puits. Après 5 minutes d'agitation, la lecture de densité optique est réalisée à 570nm. B/ résultats Tableau 3: effet curatif sur les FDHN Curatif 3H Tréhalose Curatif 5H Tréhalose curatif 3H curatif 5H Santal Australien 169 168 253 170 Santal Mysore 344 400 401 439 Rose Turque 191 168 125 170 Lavande 191 168 162 170 Néroli 346 400 419 439 Myrte 172 168 227 170 Cardamome 291 400 389 439 Myrrhe 188 400 169 439 Les huiles essentielles de Santal Australien, Santal Mysore, Rose Turque, lavande, Néroli, Myrte, Cardamome et Myrrhe, aux concentrations de 3,6.10-3 pl/mi, permettent aux FDHN de mieux lutter contre les dommages créés par le stress hydrique. En effet, les FDHN ont des viabilités respectives nettement supérieures à celle du témoin non traité (milieu 1 % SVNN), fixé arbitrairement à 100 %, lorsqu'ils subissent une déshydratation de 3 heures ou 5 heures avant 24 heures de traitement, résultats au moins identiques, pour la plupart, à ceux obtenus avec le tréhalose à 0,3 % (voir figure 1). REVENDICATIONS, 1. Utilisation cosmétique d'une ou plusieurs huiles essentielles pour l'obtention d'un effet préventif et/ou curatif d'une déshydratation cutanée. 2. Utilisation selon la revendication 1, pour l'obtention d'un effet à la fois préventif et curatif d'une déshydratation cutanée. 3. Utilisation selon la revendication 1 ou 2, pour empêcher et traiter les dommages que cause un stress hydrique sur les fibroblastes. 4. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 3, dans laquelle l'huile essentielle permet d'obtenir un effet d'augmentation de la viabilité de fibroblastes, en culture in vitro, soumis à un stress hydrique. 5. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 4, dans laquelle l'huile essentielle est choisie parmi l'huile essentielle de Santal Australien (Santalum spicatum), de Santal Mysore (Santalum album), de Rose Turque (Rosa damascena), de Lavande (Lavandula angustifolia), de Néroli (Citrus amara), de Myrte (Myrtus communis), de Cardamome (Elletaria cardamomum), de Myrrhe (Commiphora myrrha). 6. Utilisation selon la revendication 5, dans laquelle l'huile essentielle est une huile extraite du bois de Santal Australien (Santalum spicatum). 7. Utilisation selon la revendication 6, dans laquelle l'huile essentielle de Santal Australien est combinée à l'huile essentielle de Myrrhe et à l'huile essentielle de Néroli.