Brevet FR2873208A1 — publié le 20060120

La présente invention concerne un dispositif immunochromatographique à migration latérale pour la détection d'un analyte dans un échantillon liquide. Des dispositifs immunochromatographiques à migration latérale sont par exemple décrits dans le brevet EP 0 284 232. Ces dispositifs mettent en oeuvre un moyen de diffusion capillaire sous la forme d'un support solide poreux au sein duquel l'échantillon et les réactifs migrent par diffusion capillaire. Ces dispositifs intègrent ainsi un support solide poreux (ou immunochromatographique) comportant une première zone portant sous forme lyophilisée ou déshydratée, un réactif de liaison conjugué à un marqueur particulaire et une zone de détection sur laquelle est immobilisé un réactif de capture spécifique de l'analyte. Le réactif conjugué avec le marqueur particulaire est immobile sous forme lyophilisée mais devient mobile dans le support solide à l'état humide. Ainsi, lorsque le support solide est mis en contact avec un échantillon liquide, ce dernier migre par diffusion capillaire dans ce support entraînant le réactif de liaison conjugué au marqueur particulaire. L'échantillon et le réactif de liaison marqué migrent par diffusion capillaire dans le support solide jusqu'à la zone de détection portant le réactif de capture immobilisé. Dans un test sandwich, le réactif de liaison marqué se lie à l'analyte alors que ce dernier est immobilisé sur le support solide par le réactif de capture. La présence ou l'absence de l'analyte dans l'échantillon est ainsi mesurée par la détection du réactif marqué. Les brevets EP 0 291 194, EP 0 560 411 et EP 0 560 410 décrivent des dispositifs dans lesquels le support solide immunochromatographique est incorporé dans un boîtier pourvu d'une ouverture pour le dépôt de l'échantillon et d'une fenêtre d'observation pour la lecture des résultats. En outre, ces brevets décrivent également des dispositifs dans lesquels l'une des extrémités du support solide est saillante de façon permanente par rapport au boîtier pour faciliter le dépôt de l'échantillon liquide. Cette extrémité saillante du support solide peut ainsi être directement mise en contact avec un flux d'urine par exemple. Alternativement, un deuxième moyen de diffusion sous la forme d'un matériau absorbant est saillant par rapport au boîtier et permet le dépôt de l'échantillon. Ce matériau absorbant étant agencé en continuité capillaire avec le support solide poreux portant les réactifs pour permettre le dépôt puis la migration de l'échantillon. Le brevet EP 1 091 808 décrit des dispositifs améliorés comprenant également un support solide poreux intégré dans un boîtier dans lesquels un organe de captation mobile permet une meilleure collecte de l'échantillon. Tous ces dispositifs sont particulièrement adaptés à un usage domestique. En effet, ils sont d'un usage facile et rapide, ne nécessitant que très peu de manipulations puisque tous les réactifs sont intégrés dans le dispositif. Cependant, le dépôt d'échantillons de volume important ou un dépôt d'échantillon mal contrôlé peuvent conduire à l'inondation du dispositif rendant celui-ci inutilisable. Ce problème est par exemple fréquemment rencontré lorsque le dépôt de l'échantillon s'effectue en plaçant la partie saillante du support solide poreux sous un flux d'urine. Il est donc avantageux de disposer séparément d'organes de prélèvement ou de captation de l'échantillon tels que des bâtonnets de prélèvement par exemple. Ces bâtonnets de prélèvement comportent typiquement à l'une de leurs extrémités un matériau absorbant qui peut être directement placé sous un flux d'urine. Le dépôt de l'échantillon sur le dispositif s'effectue ensuite en mettant ce matériau absorbant en contact ou en continuité capillaire avec le support solide poreux portant les réactifs. Un autre problème est que ces dispositifs présentent parfois une reproductibilité insuffisante. Ce manque de reproductibilité est lié aux difficultés rencontrées pour doser de façon précise la quantité de réactif de liaison conjugué à un marqueur déposé sur le support solide poreux qui se présente en général sous la forme d'une bandelette immunochromatographique. Le dosage précis du réactif de liaison conjugué au marqueur sur le support immunochromatographique est possible mais il entraîne alors des coûts de production plus élevés. Alternativement, ce dosage précis du réactif de liaison conjugué à un marqueur particulaire peut être réalisé en déposant ce réactif sur le matériau absorbant de l'organe de prélèvement. WO 98/19164 décrit ainsi des dispositifs comprenant un organe de prélèvement pourvu d'un matériau absorbant sur lequel sont déposés des réactifs. Cependant, lorsque le matériau absorbant de l'organe de prélèvement est placé sous un flux d'urine une fraction du réactif déposé sur ce matériau est perdu par un effet de lavage. Pour remédier à ces inconvénients la présente invention propose des dispositifs dans lesquels l'organe de prélèvement est constitué d'un 2873208 3 support de préhension et d'un moyen de diffusion capillaire comprenant des zones de prélèvement et de transfert de l'échantillon distinctes et opposées. Le réactif de liaison conjugué au marqueur étant déposé en aval de la zone de prélèvement de l'échantillon par rapport à la direction de la diffusion capillaire pour éviter tout effet de lavage lors du prélèvement de l'échantillon. De plus, l'organe de prélèvement s'assemble de façon amovible avec le boîtier comprenant le support immunochromatographique pour permettre un usage domestique facile et rapide sans risque d'inondation du dispositif lors du dépôt de l'échantillon. Avantageusement, ce mode opératoire permet aussi d'augmenter la sensibilité du dispositif avec la possibilité (optionnelle) de laisser l'échantillon et le réactif en contact pendant un certain temps avant de débuter la réaction. Le dispositif de détermination d'un analyte dans un échantillon liquide selon l'invention comprend: - un premier support de préhension (1), - un premier moyen de diffusion capillaire (2) dans une direction de référence (3) solidaire du premier support de préhension (1), comportant d'une part une zone de prélèvement de l'échantillon (4) et d'autre part une zone de transfert (5) de l'échantillon opposée à ladite zone de prélèvement (4), un réactif de liaison conjugué à un marqueur (6) visible et/ou mesurable, immobilisé à l'état sec en aval de la zone de prélèvement (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2), ledit réactif de liaison conjugué à un marqueur étant libre de migrer par diffusion capillaire à l'état humide, un deuxième support de préhension (7), - un deuxième moyen de diffusion capillaire (8) dans une direction de référence (9), solidaire du deuxième support de préhension (7), comportant une zone de collection dudit échantillon (10) situé en amont d'une zone de détection (11), ladite zone de détection étant accessible à une observation directe, - un réactif de capture (12) pour la détection et/ou quantification de l'analyte immobilisé dans la zone de détection (11) du deuxième moyen de diffusion capillaire (8), dans lequel le premier support de préhension (1) possède deux extrémités ouvertes (13) pour le passage d'une part de la zone de prélèvement (4) de l'échantillon et d'autre part de la zone de transfert (5) de l'échantillon du premier moyen de diffusion capillaire (2), le deuxième support de préhension (7) est pourvu d'une ouverture (14) pour l'application de l'échantillon sur la zone de collection (10) du deuxième moyen de diffusion capillaire (8), le premier support de préhension (1) étant adapté à être assemblé de façon amovible dans deux positions inversées par rapport à la direction de référence (3) avec le deuxième support de préhension (7) de sorte que dans la première position la zone de prélèvement (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est insérée dans le deuxième support de préhension (7) par l'ouverture (14) alors que dans la deuxième position la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est insérée dans le deuxième support de préhension (7) par l'ouverture (14) de telle manière que ladite zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est en continuité capillaire avec la zone de collection (10) du deuxième moyen de diffusion capillaire (8). Avantageusement, le deuxième support de préhension (7) a la forme d'un boîtier pourvu d'une ouverture (14) pour l'insertion de la zone de prélèvement (4) ou de la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2), et d'une fenêtre d'observation (15) alignée avec la zone de détection (11) du deuxième moyen de diffusion capillaire (8). Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, le deuxième moyen de diffusion capillaire (8) est serré et maintenu à l'intérieur du boîtier entre des nervures (16) s'étendant parallèlement à la direction de diffusion capillaire. Avantageusement, dans les dispositifs selon la présente invention, le deuxième support de préhension (7) est pourvu de moyens de guidage (17) pour l'insertion de la zone de prélèvement (4) ou de la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2). Typiquement, le deuxième moyen de diffusion capillaire (2) a la forme d'une bandelette immunochromatographique. Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable (6) est immobilisé à l'état sec dans la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2). Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, le premier support de préhension (1) a la forme d'un corps creux pourvu de deux extrémités ouvertes (13) pour le passage du premier moyen de diffusion capillaire (2) . Typiquement, le premier moyen de diffusion capillaire (2) à la forme d'un matériau absorbant allongé selon la direction de diffusion capillaire. De préférence, la zone de prélèvement (4) et la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) sont saillantes par rapport au premier support de préhension (1). Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, le dispositif 5 comprend également un capuchon amovible (18) de protection de la zone de prélèvement (4) ou de la zone de transfert (5) saillantes par rapport au premier support de préhension (1). Avantageusement, le premier moyen de diffusion capillaire (2) est mobile et déplaçable en translation par rapport au premier support de 10 préhension (1) parallèlement à la direction de diffusion capillaire. L'invention a également pour objet un procédé de détection d'un analyte dans un échantillon liquide comprenant les étapes suivantes: a) on dispose d'un dispositif selon l'invention; b) on dépose un échantillon liquide sur la zone de prélèvement (4) du 15 premier moyen de diffusion capillaire (2) ; c) on assemble le premier et le deuxième support de préhension (1,7) pour insérer la zone de transfert du premier moyen de diffusion capillaire (5) dans le deuxième support de préhension (7) de telle sorte que la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est en continuité d'écoulement capillaire avec la zone de collection (10) du deuxième moyen de diffusion capillaire (8) ; d) on attend un temps suffisamment long pour permettre à l'échantillon de migrer dans le premier moyen de diffusion capillaire (2) depuis la zone de prélèvement (4) jusqu'à la zone de transfert (5), entraînant le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable (6), puis de migrer dans le deuxième moyen de diffusion capillaire (8) depuis la zone de collection (10) jusqu'à la zone de détection (11) ; e) on observe la mesure dans laquelle le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable (6) se lie à la zone de détection (11). Dans un premier mode de réalisation de l'invention, à l'étape e) du procédé, le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable (6) et le réactif de capture (12) permettent la détection de l'analyte dans un test sandwich. Dans un deuxième mode de réalisation de l'invention, à l'étape e) 35 du procédé, le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable (6) et le réactif de capture (12) permettent la détection de l'analyte dans un test compétition. Préférentiellement, on place la zone de prélèvement (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2) sous un flux d'urine à l'étape b) du procédé 5 pour le dépôt de l'échantillon. Par analyte , on entend toute entité chimique, biochimique ou biologique que l'on souhaite détecter dans un échantillon. Parmi les analytes détectés par les dispositifs et les procédés selon la présente invention, on citera notamment les protéines, les peptides, les anticorps, les hormones, les stéroïdes, les antigènes dérivés d'agents infectieux ou de cellules tumorales, les agents infectieux tels que les bactéries, les virus ou les parasites, les acides nucléiques (ADN ou ARN), les molécules thérapeutiques, les drogues ou encore les antibiotiques. Par détecter , on entend la détermination de la présence ou de l'absence d'un analyte dans un échantillon mais aussi la mesure et la quantification d'un analyte dans un échantillon. En effet, les performances des dispositifs et procédés selon l'invention autorisent la réalisation de mesures quantitatives ou semi quantitatives. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, l'analyte est la hCG (hormone choriogonadotropine) ou la LH (hormone luthinisante). Par échantillon liquide , on entend tout échantillon dans lequel l'analyte recherché est en solution ou en suspension. Cet échantillon liquide peut notamment être tout fluide biologique ou corporel. L'échantillon liquide peut également avoir été obtenu directement ou indirectement à partir d'un fluide biologique ou corporel. L'échantillon peut également être un extrait liquide d'un échantillon solide. Typiquement, l'échantillon liquide est de l'urine, du sang total, du plasma ou du sérum. Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, l'échantillon liquide est de l'urine et le dépôt de l'échantillon s'effectue en plaçant la zone de prélèvement de l'échantillon du premier moyen de diffusion capillaire sous un flux d'urine. Les dispositifs selon l'invention sont ainsi particulièrement bien adaptés à un usage domestique puisque seules des manipulations très simples sont nécessaires. Par moyen de diffusion capillaire , on entend un support solide poreux permettant la migration d'un liquide par simple diffusion capillaire. La porosité de ce support permet la diffusion capillaire (ou migration latérale) de l'échantillon et/ou des réactifs à l'état liquide ou humide. De tels moyens de diffusion capillaire sont très largement utilisés dans toutes les techniques d'immunochromatographie à migration latérale notamment. Ainsi, les moyens de diffusion capillaire mis en oeuvre dans les tests immunochromatographiques selon l'invention sont bien connus de l'homme du métier (EP 0 284 232). A titre d'exemple, ces moyens de diffusion capillaire peuvent être constitués de divers supports immunochromatographiques, de cellulose, de nylon, de nitrocellulose, de polyéthylène ou de fibre de verre. Le moyen de diffusion capillaire peut être constitué d'une ou de plusieurs parties distinctes. Les différentes parties du support pouvant être constitués de matériaux différents. Lorsque le moyen de diffusion capillaire est constitué de différentes parties ou de différents matériaux, ces éléments sont disposés de telle façon à permettre la continuité de l'écoulement capillaire dans le moyen de diffusion capillaire. Le premier moyen de diffusion capillaire permet de capter l'échantillon liquide puis de le déposer sur la zone de collection du deuxième moyen de diffusion capillaire. De préférence, le premier moyen de diffusion capillaire est constitué d'un support solide poreux allongé selon la direction de diffusion capillaire. Généralement, le premier moyen de diffusion capillaire est constitué d'un matériau absorbant. Le premier moyen de diffusion capillaire comprend une zone de prélèvement de l'échantillon et une zone de transfert de l'échantillon. La zone de prélèvement et la zone de transfert sont deux zones distinctes et séparées du premier moyen de diffusion capillaire. Ces zones sont disposées de façon à permettre la continuité de l'écoulement capillaire depuis la zone de prélèvement jusqu'à la zone de transfert selon une direction de référence. Typiquement, chacune de ces zones correspond à l'une des extrémités opposées du premier moyen de diffusion capillaire. Le premier moyen de diffusion capillaire est ainsi par exemple constitué d'un matériau absorbant allongé selon la direction de diffusion capillaire présentant une extrémité proximale et une extrémité distale constituant respectivement la zone de prélèvement et la zone de transfert de l'échantillon. La zone de prélèvement du premier moyen de diffusion capillaire est destinée à être mise en contact avec un flux d'urine par exemple. On choisira donc un matériau absorbant adapté. Ces matériaux sont bien connus de l'homme du métier. Le premier moyen de diffusion capillaire porte le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable. Ce réactif de liaison marqué est immobilisé à l'état sec dans le premier moyen de diffusion capillaire mais il est libre de migrer par diffusion capillaire à l'état humide. Ce réactif est localisé en aval de la zone de prélèvement pour éviter toute perte de réactif par un effet de lavage lors du prélèvement de l'échantillon. Dans un mode de réalisation avantageux de l'invention, le réactif de liaison marqué est immobilisé dans la zone de transfert du premier moyen de diffusion capillaire. Ainsi, la zone de prélèvement du premier moyen de diffusion capillaire est mise en contact avec un échantillon liquide (un flux d'urine par exemple) puis l'échantillon migre par diffusion capillaire jusqu'à la zone de transfert à travers le premier moyen de diffusion capillaire entraînant alors le réactif de liaison conjugué à un marqueur. De préférence, le deuxième moyen de diffusion capillaire des dispositifs selon l'invention est un support solide poreux en forme de bande ou de bandelette immunochromatographique. Le deuxième moyen de diffusion capillaire se présente typiquement 20 sous la forme d'une bandelette immunochromatographique constituée de plusieurs bandelettes superposés ou chevauchantes. Typiquement, le deuxième moyen de diffusion capillaire comporte une zone de collection de l'échantillon et une zone de détection portant le réactif de capture. Ces zones sont disposées de façon à permettre la continuité de l'écoulement capillaire depuis la zone de collection jusqu'à la zone de détection selon une direction de référence. La zone de collection et la zone de détection sont deux zones distinctes et séparées du deuxième moyen de diffusion capillaire. L'échantillon et le réactif de liaison marqué migrent à travers le deuxième moyen de diffusion capillaire depuis la zone de collection jusqu'à la zone de détection. Le deuxième moyen de diffusion capillaire est ainsi par exemple constitué d'une bandelette immunochromatographique dont l'une des extrémités constitue la zone de collection, la zone de détection étant situé à proximité de l'autre extrémité de la bande. Ces zones peuvent par exemple être présentes dans un même plan sur une bande constitué d'un matériau unique. Avantageusement, un matériau spécifique correspond à chaque zone du deuxième moyen de diffusion capillaire. Un matériau absorbant poreux peut par exemple être utilisé pour la zone de collection de l'échantillon. La zone de détection du deuxième moyen de diffusion capillaire peut également comporter un deuxième réactif de capture immobilisé sur le support poreux en aval du premier réactif de capture. Ce deuxième réactif de capture immobilisé permet habituellement de contrôler le bon déroulement du test en vérifiant par exemple la migration du réactif de liaison conjugué au marqueur dans le moyen de diffusion capillaire. Le deuxième réactif de capture est par exemple un anticorps spécifique du réactif de liaison. Le premier et le deuxième moyen de diffusion capillaire sont solidaires respectivement d'un premier et deuxième support de préhension. Ces supports de préhension facilitent la manipulation des moyens de diffusion capillaire et peuvent également protéger ceux-ci notamment de l'humidité. Le support de préhension peut envelopper partiellement ou totalement le moyen de diffusion capillaire. Le support de préhension peut être constitué de matériaux divers tel que du carton, du carton plastifié ou plus préférentiellement de matières plastiques. De façon avantageuse, le support de préhension est constitué d'un matériau rigide et imperméable. Ces supports de préhension ou boîtiers sont notamment décrits dans les brevets EP 0 291 194, EP 0 560 411, EP 0 560 410 et EP1 091 808. Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, le premier support de préhension ne recouvre que partiellement le premier moyen de diffusion capillaire. Le premier support de préhension a la forme d'un corps creux pourvu de deux extrémités ouvertes pour le passage de la zone de prélèvement et de la zone de transfert du premier support de diffusion capillaire. Ces zones sont donc saillantes par rapport au premier support de préhension et sont directement accessibles. La zone de prélèvement peut ainsi directement être mise en contact avec l'échantillon liquide. Le premier support de préhension et le premier moyen de diffusion capillaire forment ainsi un organe de prélèvement ou de captation de l'échantillon. Avantageusement, le dispositif selon l'invention comprend également un capuchon amovible pour la protection des extrémités saillantes du premier moyen de diffusion capillaire. Ce capuchon recouvre l'une ou l'autre des extrémités du premier moyen de diffusion capillaire en fonction de l'assemblage du dispositif dans deux positions inversées. Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, le deuxième moyen de diffusion capillaire est intégré dans un support de préhension. Habituellement, le deuxième support de préhension est en forme de boîtier. Dans les dispositifs de la présente invention, le deuxième support de préhension ou boîtier est pourvu d'une ouverture pour l'application de l'échantillon sur la zone de collection du deuxième moyen de diffusion capillaire. Cette ouverture permet l'insertion des extrémités saillantes du premier moyen de diffusion capillaire dans le boîtier. Typiquement, le deuxième support de préhension est également pourvu d'au moins une fenêtre d'observation pour observer la zone de détection du deuxième moyen de diffusion capillaire. Le premier et le deuxième support de préhension sont adaptés à être assemblés de façon amovible dans deux positions inversées. Typiquement le premier et le deuxième support de préhension peuvent s'emboîter de façon amovible. Les réactifs mis en oeuvre dans les procédés selon la présente invention sont bien connus de l'homme du métier. Le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable et le réactif de capture sont spécifiques de l'analyte recherché dans l'échantillon. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable et le réactif de capture immobilisé dans la zone de détection du deuxième moyen de diffusion capillaire permettent de détecter l'analyte par un test sandwich. Dans un autre mode de réalisation particulier de l'invention, le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable et le réactif de capture spécifique de l'analyte immobilisé dans la zone de détection du deuxième moyen de diffusion capillaire permettent de détecter l'analyte par un test de compétition. Les tests sandwich et les tests par compétition sont bien connus de l'homme du métier. Dans un test sandwich, le réactif de capture spécifique de l'analyte et le réactif de liaison marqué sont prédéterminés pour se lier respectivement et spécifiquement avec l'analyte, par exemple sur deux sites épitopiques, identiques ou différents de l'analyte. Dans un test par compétition, le réactif de liaison marqué est identique ou analogue à l'analyte, pour se lier avec le réactif de capture, en compétition avec l'analyte. Par réactif de capture , on entend toute entité chimique biochimique ou biologique susceptible de se lier spécifiquement avec l'analyte. Dans le cas d'un test par compétition, le réactif de capture se lie également au réactif de liaison. L'analyte et le réactif de capture forment typiquement un couple ligand/anti-ligand, antigène/anticorps, ADN/ARN ou ADN/ADN. Ainsi, si l'analyte est un antigène ou un haptène, le réactif de capture est par exemple un anticorps spécifique de l'analyte. Si l'analyte est un anticorps, le réactif de capture est l'antigène reconnu par l'anticorps ou un anticorps reconnaissant spécifiquement l'analyte. Si l'analyte est un acide nucléique, le réactif de capture est par exemple une sonde ADN complémentaire. Le réactif de capture immobilisé est préférentiellement un anticorps 15 polyclonal ou monoclonal ayant une forte affinité pour l'analyte et plus préférentiellement il s'agit d'un anticorps monoclonal. Le réactif de capture spécifique de l'analyte est immobilisé dans la zone de détection du deuxième moyen de diffusion capillaire selon des techniques connues de l'homme du métier. Ce réactif de capture est immobilisé de telle façon qu'il ne soit pas mobile à l'état humide. Cette immobilisation peut s'effectuer par exemple par absorption ou par un couplage covalent. Lorsque le réactif de capture est un acide nucléique, il est par exemple fixé sur un support de type nitrocellulose par un traitement UV ou par toute autre technique connue de l'homme du métier. Par réactif de liaison , on entend toute entité chimique biochimique ou biologique susceptible de se lier spécifiquement avec l'analyte ou avec le réactif de capture en compétition avec l'analyte. Par lier ou liaison , on entend toute liaison forte, par exemple covalente ou toute liaison faible, par exemple du type antigène/anticorps ou 30 avidine/streptavidine. Le réactif de liaison est par exemple un anticorps, un antigène ou un acide nucléique. Tout autre réactif de liaison connu de l'homme du métier peut être utilisé tel que un (ou des anticorps) monoclonal aux antibiotine, de l'avidine, de la streptovidine, ou de la polytroptavidine. Ces réactifs peuvent être natifs ou recombinants. Dans un test par compétition, le réactif de liaison est par exemple l'analyte lui-même ou un analogue approprié de l'analyte. Par analogue approprié de l'analyte, on entend un analogue se liant de manière spécifique au réactif de capture spécifique de l'analyte. Le réactif de liaison marqué est donc l'analyte conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable ou un analogue de l'analyte conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable. Dans un test de type sandwich, le réactif de liaison se lie de façon spécifique à l'analyte. Le réactif de liaison marqué est donc par exemple un anticorps spécifique de l'analyte conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable. Le réactif de liaison est conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable permettant une mesure ou une observation directe du résultat du test. Le marqueur peut être observé directement à l'oeil nu lorsqu'il est concentré dans la zone de détection du deuxième moyen de diffusion capillaire. La mesure du marqueur peut s'effectuer directement à l'ceil nu ou à l'aide d'un appareil de mesure. Cette mesure se fait par une observation directe ne nécessitant pas de manipulation supplémentaire. Avantageusement, les dispositifs selon la présente invention comprennent un réactif de liaison conjugué à un marqueur particulaire. Typiquement, les marqueurs particulaires sont constitués de particules de petite taille insolubles dans l'eau et qui forment donc des suspensions en phase liquide c'est-à-dire une dispersion de particules solides dans un liquide. Les marqueurs particulaires sont bien connus de l'homme du métier. On connaît notamment les marqueurs particulaires colorés ou fluorescents. A titre d'exemple, on citera l'or colloïdal, les particules de latex colorées, les particules de latex fluorescentes et les particules conjugués à l'avidine ou à la streptavidine. Parmi les marqueurs permettant une observation directe à l'oeil nu on citera aussi les marqueurs de type dextran (Hansen T.M., IVD Technology 4, 35-40, 2003). Le réactif de liaison est alors conjugué à une chaîne de dextran (dérivé de polysaccharide) portant des fluorophores. Le réactif de liaison est conjugué au marqueur visible et/ou mesurable selon des techniques connues. L'invention est décrite plus en détail par référence aux figures suivantes: Figure 1 La figure 1 représente en perspective un dispositif selon un mode de réalisation particulier de l'invention. Le premier et le deuxième supports de préhension ainsi que le capuchon ne sont pas assemblés. Figure 2 La figure 2 représente le dispositif de la figure 1. Le 5 premier et le deuxième support de préhension ainsi que le capuchon sont assemblés. Fiqure 3 La figure 3 représente une vue de dessus du premier support de préhension. Figure 4 La figure 4 représente une vue en coupe transversale du 10 premier support de préhension. Figure 5 La figure 5 représente une vue éclatée en perspective du dispositif représenté à la figure 1. Figures 6-10 Les figures 6-10 représentent les différentes étapes du procédé d'utilisation du dispositif de la figure 1. Par référence à la figure 1, un dispositif, selon un mode de réalisation particulier de l'invention, comprend: - un premier support de préhension (1) ayant la forme d'un corps creux pourvu de deux extrémités ouvertes (13) pour le passage des deux extrémités saillantes du premier moyen de diffusion capillaire (2), ce corps creux est pourvu de moyens d'assemblage (19) pour l'assemblage amovible avec le capuchon (18) et avec le deuxième support de préhension (7) ; un premier moyen de diffusion capillaire (2) ayant la forme d'un support solide poreux en matériau absorbant allongé selon la direction de diffusion capillaire présentant une extrémité proximale et une extrémité distale opposée formant respectivement la zone de prélèvement de l'échantillon (4) et la zone de transfert de l'échantillon (5) ; la zone de transfert de l'échantillon (5) est située en aval de la zone de prélèvement (4) par rapport à la direction de référence (3) de diffusion capillaire; ce premier moyen de diffusion capillaire (2) est solidaire du premier support de préhension (1) ayant la forme d'un corps creux de telle sorte que la zone de prélèvement (4) et la zone de transfert (5) sont saillantes; un réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable (6) immobilisé à l'état sec dans le premier moyen de diffusion capillaire (2) en aval de la zone de prélèvement (4) par rapport à la direction de référence de diffusion capillaire (3) plus particulièrement dans la zone de transfert de l'échantillon (5) ; un capuchon amovible (18) de protection de l'une des extrémités saillantes du premier moyen de diffusion capillaire (2) pourvu de moyens d'assemblage (20) pour l'assemblage amovible avec le premier support de préhension (1); un deuxième support de préhension (7) ayant la forme d'un boîtier creux comprenant à une extrémité une ouverture (14) pour le passage de l'une ou de l'autre des extrémités saillantes du premier moyen de diffusion capillaire (2), ce boîtier étant muni d'une fenêtre d'observation (15) pour la lecture directe du résultat du test de diagnostic, et de moyens d'assemblage (21) pour l'assemblage amovible avec le premier support de préhension (1). La figure 2 représente le même dispositif assemblé. Le corps creux du 1 er support de préhension (1) peut être assemblé avec le boîtier du deuxième support de préhension (7) dans deux positions inversées. Dans la première position, le corps creux est assemblé avec le boîtier de telle sorte que la zone de prélèvement de l'échantillon (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est insérée dans le boîtier par l'ouverture (14) alors que le capuchon amovible (18) protège la zone de transfert de l'échantillon (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2). Dans la deuxième position, le corps creux est assemblé avec le boîtier, de telle sorte que la zone de transfert de l'échantillon (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est insérée dans le boîtier par l'ouverture (14) alors que le capuchon amovible (18) protège la zone de prélèvement de l'échantillon (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2). Dans cette deuxième position, la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est en continuité capillaire avec la zone de collection (10) du deuxième moyen de diffusion capillaire (8). La figure 3 représente une vue de dessus du premier support de préhension (1) ayant la forme d'un corps creux pourvu de deux extrémités ouvertes (13) et de moyens d'assemblage (19) pour l'assemblage amovible avec le capuchon (18) d'une part et le boîtier d'autre part. La figure 4 représente une vue en coupe transversale du premier support de préhension (1) ayant la forme d'un corps creux. Des nervures (21) permettent de maintenir et d'immobiliser le premier moyen de diffusion capillaire (2) par serrage. Avantageusement, le premier moyen de diffusion capillaire (2) peut être mobile et déplaçable en translation par rapport au corps creux. Le déplacement du premier moyen de diffusion capillaire (2) s'effectue sous la pression exercée sur le capuchon amovible lors de l'assemblage du dispositif. Par référence à la figure 5, le dispositif représenté à la figure 1 comprend également: un deuxième moyen de diffusion capillaire (8) sous la forme d'une bandelette immunochromatographique intégrée dans le boîtier; cette bandelette comporte une zone de collection (10) de l'échantillon accessible à l'extérieur par l'ouverture (14) dans le boîtier pour le dépôt de l'échantillon par l'intermédiaire du premier moyen de diffusion capillaire (2) ; la zone de détection (11) est située en aval de la zone de collection (10) par rapport à la direction de référence (9) de diffusion capillaire; la zone de détection (11) est positionné dans le boîtier de telle sorte qu'elle est alignée avec la fenêtre d'observation (15) pour la lecture directe du résultat du test; un réactif de capture (12) immobilisé dans la zone de détection (11) de la bandelette immunochromatographique; des nervures (16) à l'intérieur du boîtier creux pour serrer et immobiliser la bandelette immunochromatographique; des moyens de guidage (17) situés à l'intérieur du boîtier creux pour le passage et l'insertion de l'une des extrémités saillantes du premier moyen de diffusion capillaire (2) dans le boîtier. Le fonctionnement du dispositif selon l'invention est décrit en référence aux figures 6-10. Le mode de fonctionnement de ce dispositif convient bien à un usage domestique. Les manipulations sont simples et les possibilités d'erreurs de la part de l'utilisateur sont restreintes. Au départ l'utilisateur dispose d'un dispositif assemblé tel que représenté à la figure 2 de telle sorte que la zone de prélèvement de l'échantillon (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est insérée dans le boîtier creux, alors que le capuchon amovible (18) protège la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) (figure 6). Le premier support de préhension (1), le boîtier creux et le capuchon (18) sont assemblés de façon amovible. Pour le prélèvement de l'échantillon, l'utilisateur sépare le premier support de préhension (1) du boîtier creux (7). La zone de prélèvement de l'échantillon (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2) saillante par rapport au premier support de préhension (1) devient alors accessible. Typiquement, la zone de prélèvement (4) du premier moyen de diffusion capillaire (1) constituée de matériau absorbant est alors placée sous un flux d'urine ou trempée dans un liquide. Etant donné que le boîtier est séparé de l'organe de prélèvement de l'échantillon (corps creux et premier moyen de diffusion capillaire) tout risque d'inondation du boîtier est écarté (figure 7). A l'étape suivante, l'utilisateur sépare le capuchon amovible (18) et le déplace sur la zone de prélèvement (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2). La zone de transfert de l'échantillon (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) saillante par rapport au premier support de préhension (1) devient alors accessible (figure 8). Ensuite l'utilisateur insère la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) dans le boîtier à travers l'ouverture (14) prévue à cet effet de telle manière que la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est en continuité d'écoulement capillaire avec la zone de collection (10) de la bandelette immunochromatographique (8). Le premier moyen de préhension (1) est alors assemblé avec le boîtier (7) en position inversée par rapport à l'assemblage initial (figure 9 et 10). Le test immunochromatographique à migration latérale se déroule alors sans autre intervention de l'utilisateur (figure 10). L'échantillon liquide migre par diffusion capillaire dans la direction de référence (3) depuis la zone de prélèvement (4) jusqu'à la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) constitué d'un matériau absorbant. L'échantillon entraîne alors le réactif de liaison marqué (6) qui est mobile à l'état humide. L'échantillon et le réactif de liaison marqué (6) migrent ensuite depuis la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) dans la zone de collection (10) de la bandelette immunochromatographique (8), puis au sein de cette bandelette dans la direction de référence (9) jusqu'à la zone de détection (11) portant le réactif de capture (12) immobilisé. Les réactions s'effectuent et le résultat est directement lisible à l'ceil nu par la fenêtre d'observation (15). Le dispositif étant à usage unique il peut ensuite être jeté par l'utilisateur. REVENDICATIONS 1) Dispositif de détermination d'un analyte dans un échantillon liquide, 10 comprenant: a) un premier support de préhension (1) ; b) un premier moyen de diffusion capillaire (2) dans une direction de référence (3) solidaire du premier support de préhension (1), comportant d'une part une zone de prélèvement de l'échantillon (4) et d'autre part une zone de transfert (5) de l'échantillon opposée à ladite zone de prélèvement (4) ; c) un réactif de liaison conjugué à un marqueur (6) visible et/ou mesurable, immobilisé à l'état sec en aval de la zone de prélèvement (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2), ledit réactif de liaison conjugué à un marqueur étant libre de migrer par diffusion capillaire à l'état humide; d) un deuxième support de préhension (7) ; e) un deuxième moyen de diffusion capillaire (8) dans une direction de référence (9), solidaire du deuxième support de préhension (7), comportant une zone de collection dudit échantillon (10) située en amont d'une zone de détection (11), ladite zone de détection étant accessible à une observation directe; f) un réactif de capture (12) pour la détection et/ou quantification de l'analyte immobilisé dans la zone de détection (11) du deuxième 30 moyen de diffusion capillaire (8) ; caractérisé en ce que le premier support de préhension (1) possède deux extrémités ouvertes (13) pour le passage d'une part de la zone de prélèvement (4) de l'échantillon et d'autre part de la zone de transfert (5) de l'échantillon du premier moyen de diffusion capillaire (2), le deuxième support de préhension (7) est pourvu d'une ouverture (14) pour l'application de l'échantillon sur la zone de collection (10) du deuxième moyen de diffusion capillaire (8), le premier support de préhension (1) étant adapté à être assemblé de façon amovible dans deux positions inversées par rapport à la direction de référence (3) avec le deuxième support de préhension (7) de sorte que, dans la première position la zone de prélèvement (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est insérée dans le deuxième support de préhension (7) par l'ouverture (14), alors que dans la deuxième position la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est insérée dans le deuxième support de préhension (7) par l'ouverture (14), de telle manière que ladite zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est en continuité capillaire avec la zone de collection (10) du deuxième moyen de diffusion capillaire (8). 2) Dispositif selon la revendication 1 caractérisé en ce que le deuxième support de préhension (7) a la forme d'un boîtier pourvu d'une ouverture (14) pour l'insertion de la zone de prélèvement (4) ou de la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2), et d'une fenêtre d'observation (15) alignée avec la zone de détection (11) du deuxième moyen de diffusion capillaire (8). 3) Dispositif selon la revendication 2 caractérisé en ce que le deuxième moyen de diffusion capillaire (8) est serré et maintenu à l'intérieur du boîtier entre des nervures (16) s'étendant parallèlement à la direction de diffusion capillaire (9). 4) Dispositif selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que le deuxième support de préhension (7) est pourvu de moyens de guidage (17) pour l'insertion de la zone de prélèvement (4) ou de la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2). 5) Dispositif selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que le deuxième moyen de diffusion capillaire (8) a la forme d'une bandelette immunochromatographique. 6) Dispositif selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable (6) est immobilisé à l'état sec dans la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2). 7) Dispositif selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que le premier support de préhension (1) a la forme d'un corps creux pourvu de deux extrémités ouvertes (13) pour le passage du premier moyen de diffusion capillaire (2). 8) Dispositif selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que le premier moyen de diffusion capillaire (2) à la forme d'un matériau absorbant allongé selon la direction de diffusion capillaire (3). 9) Dispositif selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que la zone de prélèvement (4) et la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) sont saillantes par rapport au premier support de préhension (1). 10) Dispositif selon la revendication 9 caractérisé en ce qu'il comprend également un capuchon amovible (18) de protection de la zone de prélèvement (4) ou de la zone de transfert (5) saillantes par rapport au premier support de préhension (1). 11) Dispositif selon l'une des revendications 9 ou 10 caractérisé en ce que le premier moyen de diffusion capillaire (2) est mobile et déplaçable en translation par rapport au premier support de préhension (1) parallèlement à la direction de diffusion capillaire (3). 12)Procédé de détection d'un analyte dans un échantillon liquide caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes: a) on dispose d'un dispositif selon l'une des revendications 1-11; b) on dépose un échantillon liquide sur la zone de prélèvement (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2) ; c) on assemble le premier et le deuxième support de préhension (1,7) pour insérer la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) dans le deuxième support de préhension (7), de telle sorte que la zone de transfert (5) du premier moyen de diffusion capillaire (2) est en continuité d'écoulement capillaire avec la zone de collection (10) du deuxième moyen de diffusion capillaire (8), d) on attend un temps suffisamment long pour permettre à l'échantillon de migrer dans le premier moyen de diffusion capillaire (2) depuis la zone de prélèvement (4) jusqu'à la zone de transfert (5), entraînant le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable (6), puis de migrer dans le deuxième moyen de diffusion capillaire (8) depuis la zone de collection (10) jusqu'à la zone de détection (11) ; e) on observe la mesure dans laquelle le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable (6) se lie à la zone de détection (11). 13) Procédé selon la revendication 12 dans lequel à l'étape e) le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable (6) et le réactif de capture (12) permettent la détection de l'analyte dans un test sandwich. 14) Procédé selon la revendication 12 dans lequel à l'étape e) le réactif de liaison conjugué à un marqueur visible et/ou mesurable (6) et le réactif de capture (12) permettent la détection de l'analyte dans un test compétition. 15) Procédé selon l'une des revendications 12 à 14 dans lequel à l'étape b) on place la zone de prélèvement (4) du premier moyen de diffusion capillaire (2) sous un flux d'urine.