Brevet FR2883750A1 — publié le 20061006

COMPOSITIONS TOPIQUES ET LEURS UTILISATIONS La présente invention concerne des compositions pour application topique, lesdites compositions étant aptes à inhiber l'adhésion de microorganismes sur la peau des animaux à sang chaud à pelage. Elle concerne en outre des utilisations de telles compositions dans le domaine vétérinaire. La peau des animaux est constamment agressée par des micro-organismes pathogènes. La couche cornée de l'épiderme, de par son pH, sa teneur relativement faible en eau et la présence de peptides antibiotiques ayant une action bactéricide, joue le rôle de première barrière contre ces micro-organismes pathogènes. Toutefois, des changements dans la structure de l'épiderme, tels qu'une humidité accrue ou des blessures cutanées, favorisent la colonisation et l'infection de la peau par les micro-organismes pathogènes. Les antibiotiques permettent de lutter efficacement contre ces microorganismes pathogènes, grâce à leurs 20 actions bactériostatique et/ou bactéricide. Toutefois, compte tenu de l'utilisation large, et parfois abusive, des antibiotiques, les bactéries ont développé une résistance aux antibiotiques limitant voire annulant leurs effets antibactériens. C'est une des raisons pour lesquelles on a cherché à développer de nouveaux moyens de lutte contre les micro-organismes pathogènes. On sait que la surface de certaines bactéries comporte des lectines, qui leur permettent de reconnaître et se fixer à des radicaux sucrés spécifiques des glycoprotéines et glycolipides situés à la surface des cellules épithéliales. On a mis en évidence, in vitro, qu'en mimant les radicaux sucrés des glycoprotéines et glycolipides des cellules épithéliales, certains saccharides limitent l'adhésion de bactéries telles que Pseudomonas aeruginosa sur des glycoprotéines telle que les fibronectines ("Inhibition of Pseudomonas aeruginosa adhesion to fibronectin by PA-IL and monosacharides: involvement of a lectin-like process", Julie Rebiere-Huët, Patrick Di Martino, and Christian Hulen. Can. J. Microbiol./Rev. Can. Microbiol. 50(5): 303-312 (2004)). Ces propriétés dites anti-adhésives de certains saccharides ont été utilisées chez l'Homme, par exemple dans des déodorants, ainsi que cela est décrit notamment dans les documents publiés sous les numéros US-4,518, 517 et EP-Al-0 561 489. Toutefois, la peau qui recouvre le corps des animaux à sang chaud à pelage se différencie de celle de l'Homme par son épaisseur moins marquée, par l'abondance des poils qui constituent le pelage et par le développement des glandes sébacées, alors que les glandes sudoripares sont très peu représentées. Il n'est donc pas possible d'extrapoler les relations d'interactions entre les bactéries (et plus généralement les pathogènes) et la peau de l'homme à celles existant entre les bactéries et la peau des animaux à sang chaud à pelage. Compte tenu de ce qui précède, un problème que se propose de résoudre l'invention est la mise au point d'une composition pour application topique apte à réduire la présence de micro-organismes, en particulier pathogènes, sur la peau des animaux à sang chaud à pelage. La solution de l'invention à ce problème posé a pour premier objet une composition pour application topique, caractérisée en ce qu'elle comporte au moins un premier mono- ou oligosaccharide apte à inhiber l'adhésion de micro-organismes pathogènes sur la peau d'animaux à sang chaud à pelage. En particulier les micro-organismes pathogènes considérés sont Staphylococcus intermedius, Pseudomonas aeruginosa et Malassezia pachydermatis. En particulier, les animaux à sang chaud et à pelage sont les animaux de compagnies et plus particulièrement les chiens, les chats ou encore les chevaux. Elle a pour second objet l'utilisation d'une telle 10 composition, comme produit cosmétique ou pharmaceutique, à usage vétérinaire. Par ailleurs, elle a pour objet additionnel, une composition comprenant des vecteurs nanoparticulaires chargés, des vecteurs micro- ou micro- ou nanoparticulaires non chargés, lesdits vecteurs comprenant au moins un mono- ou oligosaccharide. De manière surprenante, lorsqu'une composition comprend au moins un monoou oligosaccharide, l'adhérence des micro-organismes pathogènes sur la peau des animaux à sang chaud à pelage est considérablement diminuée. L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description non limitative qui va suivre. La composition selon l'invention comprend au moins 25 un premier mono- ou oligosaccharide. Les monosaccharides sont des molécules constituées de trois éléments chimiques: le carbone, l'hydrogène et l'oxygène. Ils comportent de 3 à 8 atomes de carbone. Parmi les monosaccharides les plus répandus, on trouve les pentoses, tels que l'arabinose, le ribose, le ribulose, le xylose, le xylulose et le lyxose, et les hexoses, tels que l'allose, l'altrose, le fructose, le galactose, le glucose, le gulose, l'idose, le mannose, le rhamnose, le sorbose, le talose et le tagatose. Les oligosaccharides sont des oligomères homogènes ou hétérogènes constitués des monosaccharides précités. En pratique, il s'agit de di-, tri- ou de tétramères de monosaccharides. Selon l'invention, les premiers mono- ou oligosaccharides sont aptes à inhiber l'adhésion de micro-organismes sur la peau d'animaux à sang chaud à pelage, en particulier, sur les kératinocytes de la peau de ces animaux et, plus particulièrement, aux cornéocytes de la peau de ces animaux. A cet effet, ils miment les radicaux sucrés des glycoprotéines et glycolipides, entrent en compétition avec ces glycoprotéines et glycolipides, et empêchent ainsi la fixation des bactéries et des levures. Ainsi, en ciblant les mécanismes d'attachements spécifiques des microorganismes pathogènes aux cellules et tissus de la peau, l'invention permet de limiter le processus de colonisation et d'infection des microorganismes pathogènes sur les animaux à sang chaud à pelage. Parmi les premiers monosaccharides susceptibles d'entrer dans les compositions selon l'invention, on choisira avantageusement les hexoses. A titre d'exemples non limitatifs d'hexoses, on peut citer: le L-fucose, le D-galactose, le D-mannose et le L-rhamnose. Parmi les premiers oligosaccharides susceptibles d'entrer dans les compositions selon l'invention, on choisira avantageusement des oligomères homogènes ou hétérogènes constitués des monosaccharides précités. Les premiers mono- ou oligosaccharides précités montrent tous au moins des propriétés anti-adhésives. La composition selon l'invention comprend en outre des deuxième et/ou troisième mono- ou oligosaccharides. Ces deuxième et/ou troisième mono- ou oligosaccharides sont avantageusement eux-mêmes aptes à inhiber l'adhésion de micro-organismes sur la peau des animaux à sang chaud à pelage. Les premier, deuxième et/ou troisième mono- ou oligosaccharides sont avantageusement aptes à diminuer la production de TNF-a par les kératinocytes de la peau d'animaux à sang chaud à pelage. On notera que cette action sur la production de TNF-a a récemment été mise en évidence, in vitro, sur des kératinocytes canins ( in vitro assays for canine keratinocyte activation: modulation by fucose, arabinose and rhamnose , C. Ibisch, P. Bourdeau, C. Cadiot et H. Gatto. 17th ESVDECVD Congress, Copenhagen 2001). La diminution de la production de TNF-a a un effet immunomodulateur et entraîne une diminution de l'inflammation cutanée. Ainsi, elle a donc un effet anti-irritant. Parmi les deuxième et/ou troisième monosaccharides susceptibles d'entrer dans les compositions selon l'invention, on choisira avantageusement les pentoses et les hexoses. A titre d'exemple non limitatif de pentoses, on peut citer le D-arabinose. A titre d'exemples non limitatifs d'hexoses, on peut citer le D-fucose, le L-fucose, le D-galactose, le D-glucose, le D-mannose et le L-rhamnose. Parmi les deuxième et/ou troisième oligosaccharides susceptibles d'entrer dans les compositions selon l'invention, on choisira avantageusement des oligomères homogènes ou hétérogènes constitués des monosaccharides précités. Les deuxième et/ou troisième mono- ou oligosaccharides précités montrent tous des propriétés anti-adhésives et/ou anti-inflammatoires. De façon avantageuse, le premier mono- ou oligosaccharide de la composition selon l'invention est le L-rhamnose ou un oligomère homogène constitué de L-rhamnose, le deuxième mono- ou oligosaccharide de la composition selon l'invention est le D-galactose ou un oligomère homogène constitué de D-galactose et le troisième mono- ou oligosaccharide de la composition selon l'invention est le D-mannose ou un oligomère homogène constitué de D-mannose. Selon l'invention, les premier, deuxième et/ou troisième mono- ou oligosaccharides selon l'invention sont avantageusement contenus dans des vecteurs micro- ou nanoparticulaires. En pratique, 5 à 90% des mono- ou oligosaccharides sont contenus dans ces vecteurs. Parmi les vecteurs micro- ou nanoparticulaires, on peut utiliser tous les systèmes de vectorisation permettant une libération contrôlée des mono- ou oligosaccharides selon l'invention tels que les microcapsules, les microsphères, les complexes macromoléculaires, les nanosphères, les nanocapsules, les latex ou les vésicules. A titre d'exemples non limitatif de vecteurs micro- ou nanoparticulaires, on peut citer les vésicules multilammellaires commercialisées par la société NOVAVAXTM sous la dénomination NovasomesTM, les vésicules multilammellaires sphériques à structure en oignon dénommées SphérulitesTM, les microcapsules à base de polyuréthane, de résine de polyurée, de résine de polyamide, de résine de polyamide-polyurée, de résine de polycarbonate, de résine de polysulfonate et de résine de polysulfonamide. En particulier, les SphérulitesTM peuvent encapsuler des molécules hydrophiles ou hydrophobes avec des rendements d'encapsulation de l'ordre de 90%. Les molécules qu'elles encapsulent sont libérées de façon progressive. La libération des composés encapsulés peut être régulée de façon cinétique ou thermodynamique. Les vecteurs micro- ou nanoparticulaires selon l'invention ont un diamètre compris entre O,Olpm et 150pm. Dans le cas où ces vecteurs sont des vecteurs nanoparticulaires, leur diamètre est préférentiellement compris entre 0,lpm et 0,5pm et, dans le cas où ces vecteurs sont des vecteurs microparticulaires, leur diamètre est préférentiellement compris entre 1pm et 50pm. Par ailleurs, les vecteurs micro- ou nanoparticulaires selon l'invention sont chargés ou non chargés. Lorsque ces vecteurs sont chargés, ils sont avantageusement cationiques. Dans ce cas, grâce à leur charge positive, ces vecteurs se fixent non seulement sur la peau des animaux mais aussi sur les poils de leur pelage. Ils assurent une libération régulière et contrôlée des mono-ou oligosaccharides à la surface de la peau et sur les poils. Ainsi, même après une action mécanique, par exemple de nettoyage de l'animal, les bénéfices de la composition selon l'invention sont conservés. Cet effet de relargage progressif permet un maintient dans le temps de l'action des mono- ou oligosaccharides sur l'adhérence des bactéries. Lorsque les vecteurs micro- ou nanoparticulaires selon l'invention ne sont pas chargés, ils sont dits non ioniques. Dans ce cas, en plus de l'effet de relargage prolongé précité, leur présence favorise la diffusion des mono- ou oligosaccharides au travers de la peau. Aussi, lorsque les monoou oligosaccharides présents dans les vecteurs ont un effet inhibiteur sur l'activation des kératinocytes et sur la sécrétion de TNF-a, les effets de diminution de l'inflammation cutanée sont améliorés. En outre, comme les micro-organismes pathogènes adhèrent plus facilement sur des peaux enflammées que sur des peaux saines, la diffusion des mono- ou oligosaccharides, favorisée par la présence des vecteurs micro- ou nanoparticulaires non ioniques, à travers la peau, permet la réduction de l'inflammation de la peau et, de facto, limite de façon indirecte l'adhésion des bactéries, souvent elle-même cause de l'inflammation. Dans un mode de réalisation avantageux, la composition selon l'invention comporte à la fois des vecteurs micro- ou nanoparticulaires cationiques et des vecteurs micro- ou nanoparticulaires non ioniques. Dans ce cas l'intérêt réside dans la contribution respective de chaque type de vecteur à la diminution de l'adhérence des bactéries. Tout d'abord, les mono- ou oligosaccharides libres (non vectorisés) ont une action directe et immédiate sur l'adhérence des bactéries. Ensuite, les vecteurs micro- ou nanoparticulaires cationiques de la composition permettent une action directe et prolongée des mono- ou oligosaccharides sur l'adhérence des bactéries alors que les vecteurs micro-ou nanoparticulaires non ioniques exercent par ailleurs un effet anti-irritant qui diminue l'inflammation de la peau et réduit l'adhésion des bactéries. Ainsi, la composition selon l'invention présente à la fois un effet immunomodulateur amélioré par une meilleure diffusion des mono- ou oligosaccharides encapsulés dans des vecteurs micro- ou nanoparticulaires non-ioniques à travers la peau, mais également une action anti-adhésive prolongée par la présence de mono- ou oligosaccharides encapsulés dans des vecteurs micro- ou nanoparticulaires cationiques. On notera que la composition selon l'invention peut comporter en outre des agents antiseptiques, des agents chélateurs, des agents kératolytiques, kératorégulateurs, antiséborrhéiques et des agents nettoyants ou émolliants. A titre d'exemples non limitatifs d'agents antiseptiques pouvant entrer dans la composition selon l'invention, on peut citer la chlorhexidine, l'hexachlorophène, le parachlorométaxylenol, la piroctone olamine et le triclosan, pris seuls ou en mélange. A titre d'exemples non limitatifs d'agents chélateurs pouvant entrer dans la composition selon l'invention, on peut citer le diéthylène triamine pentaacétique et l'éthylènediaminetétracétate, pris seuls ou en mélange. A titre d'exemples non limitatifs d'agents kératolytiques, kératorégulateur ou antiséborrhéiques pouvant entrer dans la composition selon l'invention, on peut citer l'acide lactique, l'acide salicylique, l'argent nitrate, le soufre et l'urée, le lactate d'ammonium, le gluconate de zinc, pris seuls ou en mélange. Enfin, à titre d'exemples non limitatifs d'agents nettoyants ou émollients pouvant entrer dans la composition selon l'invention, on peut citer l'acide linoléique, le cocoglucoside, le decyl glucoside, le disodium cocoamphodiacétate, le disodium laureth, le docusate de sodium, le sodium stéarate et le sulfosuccinate, pris seuls ou en mélange. En pratique, les compositions topiques selon l'invention sont plus particulièrement destinées au traitement de la peau et des muqueuses et peuvent se présenter sous forme d'onguents, de crèmes, de laits, de pommades, de tampons imbibés, de syndets, de solutions, de gels, de sprays, de mousses, de suspensions, de lotions, de shampooings, ou de bases lavantes. Ces compositions sont utilisées comme produits cosmétiques ou pharmaceutiques, à usage vétérinaire. Plus particulièrement, elles sont utilisées pour l'hygiène des animaux à sang chaud à pelage, pour l'aide au contrôle ou pour le traitement des dermatites irritatives, de la dermatite atopique, du syndrome keratoséborrhéique, des otites externes, de la pyodermite ou de la dermatite à Malassezia des animaux à sang chaud à pelage. L'invention concerne donc l'utilisation de mono- ou oligosaccharides pour la préparation d'une composition topique pour l'aide au contrôle ou pour la préparation d'un médicament pour le traitement des dermites irritatives, de la dermatite atopique, du syndrome keratoséborrhéique, des otites externes, de la pyodermite ou de la dermatite à Malassezia des animaux à sang chaud à pelage ainsi que des méthodes pour le traitement de ces affections cutanées des animaux à sang chaud à pelage mettant en oeuvre l'utilisation d'une composition contenant des mono- ou oligosaccharides. Bien entendu, le choix des mono- ou oligosaccharides présents dans la composition, du nombre de mono- ou oligosaccharides présents, d'une encapsulation éventuelle dans des vecteurs, est déterminé par l'utilisation finale de la composition selon l'invention. Dans un exemple particulièrement adapté à l'aide au contrôle de la dermatite atopique du chien, la composition selon l'invention est une lotion comportant au moins deux monosaccharides spécifiques, le L-fucose et le L-rhamnose, ces monosaccharides étant contenus dans des vecteurs de type SphérulitesTM. Dans un autre exemple, cette fois particulièrement adapté aux otites externes du chien, la composition selon l'invention est une solution comportant trois monosaccharides, le L-rhamnose, le Dmannose et le D-galactose. La présente invention va maintenant être illustrée au moyen de l'exemple suivant: Exemple Une étude comparant l'inhibition, par des monosaccharides, de l'adhérence de trois souches différentes de Pseudomonas, Pl, P2, P3, a été menée sur des cornéocytes canins. Les trois monosaccharides étudiés sont respectivement le D-galactose, le D-mannose et le L-rhamnose. Les trois souches de Pseudomonas ont été prélevées sur des chiens atteints d'otite infectieuse. Des cornéocytes ont été prélevés sur six chiens sains différents à l'aide de disques adhésifs de marque D-squameTM, commercialisés par la société CuDermTM On a réalisé des suspensions bactériennes contenant chacune une des trois souches Pl, P2 ou P3, et du PBS (tampon phosphate salé) avec ou sans monosaccharides à deux concentrations (0,05% et 0,1%). Ces suspensions ont chacune été placées sur une couche de cornéocytes. Ces couches ont fait l'objet d'une incubation dans une chambre humide. Après incubation, les cornéocytes ont été lavés et colorés. Les Pseudomonas adhérents ont ensuite été quantifiés par analyse d'image assistée par ordinateur. Le pourcentage d'adhérence des souches en présence de monosaccharides est ensuite calculé par rapport au pourcentage d'adhérence des souches sans monosaccharides (contrôle positif). Les pourcentages d'adhérence sont comparés pour les trois souches Pl à P3 par rapport au contrôle positif (100%). Le pourcentage d'inhibition moyen pour les trois souches de pseudomonas est de 25,6% pour le D-galactose, de 19,4% pour le D-mannose et de 30,8% pour le L-rhamnose. Il apparaît que chacun des trois monosaccharides inhibe l'adhérence de Pseudomonas sur les cornéocytes. Lorsque les trois monosaccharides sont utilisés en combinaison, on observe, de manière surprenante, un pourcentage d'inhibition moyen de 53, 4%. Il y a donc une conjugaison d'action lorsque, selon l'invention, une pluralité de mono- ou oligosaccharides, ayant chacun des propriétés antiadhésives sont présents dans la composition. C'est à tout le moins le cas, lorsque la composition selon l'invention comprend trois mono- ou oligosaccharides présentant ces propriétés. 13 REVENDICATIONS 1. Composition pour application topique, caractérisée en ce qu'elle comporte au moins un premier mono- ou 5 oligosaccharide apte à inhiber l'adhésion de micro- organismes sur la peau d'animaux à sang chaud à pelage. 2. Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle comporte en outre un deuxième mono- ou 10 oligosaccharide. 3. Composition selon la revendication 2, caractérisée en ce qu'elle comporte en outre un troisième mono- ou oligosaccharide. 4. Composition selon l'une des revendications 2 ou 3, caractérisée en ce que le deuxième et/ou le troisième mono- ou oligosaccharide est apte à inhiber l'adhésion de micro-organismes sur la peau d'animaux à sang chaud à pelage. 5. Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le premier, le deuxième et/ou le troisième mono-ou oligosaccharide est apte à diminuer la production de TNF-a par les kératinocytes. 6. Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le premier mono- ou oligosaccharide est choisi parmi le L- fucose, le D- galactose, le D-mannose, le L-rhamnose et leurs oligomères. 7. Composition selon l'une des revendications 35 précédentes, caractérisée en ce que le deuxième et le troisième mono- ou oligosaccharides sont choisis parmi le D-arabinose, le D-fucose, le L- fucose, le D-galactose, le D-glucose, le D-mannose et le L-rhamnose et leurs oligomères. 8. Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que le premier mono- ou oligosaccharide est le L-rhamnose, le deuxième mono- ou oligosaccharide est le D-galactose et le troisième mono- ou oligosaccharide est le D-mannose. 9. Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que les premier, deuxième et/ou troisième mono- ou oligosaccharides sont contenus dans des vecteurs micro- ou nanoparticulaires. 10. Composition selon la revendication 9, caractérisée en ce que les vecteurs micro- ou nanoparticulaires sont chargés. 11. Composition selon la revendication 10, caractérisée en ce que les vecteurs micro- ou nanoparticulaires sont cationiques. 12. Composition selon la revendication 9, caractérisée en 25 ce les vecteurs micro- ou nanoparticulaires sont non ioniques. 13. Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comporte à la fois des vecteurs micro- ou nanoparticulaires chargés, en particulier cationiques, et des vecteurs micro- ou nanoparticulaires non ioniques et en ce que les premier, deuxième et/ou troisième mono- ou oligosaccharides sont contenus dans ces vecteurs microou nanoparticulaires. 14. Composition selon l'une des revendications 9 à 13, caractérisée en ce que 5 à 90% des mono- ou oligosaccharides présents dans la composition sont contenus dans les vecteurs micro- ou nanoparticulaires. 15. Composition selon l'une des revendications 9 à 14, caractérisée en ce que les vecteurs micro- ou nanoparticulaires sont choisis parmi les microcapsules, les microsphères, les complexes macromoléculaires, les nanosphères, les nanocapsules, les latex et les vésicules. 16. Composition selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle est une crème, un gel, une lotion, une mousse, une pommade, un shampooing ou un spray. 17. Utilisation d'une composition selon l'une des revendications précédentes, comme produit cosmétique à usage vétérinaire. 18. Utilisation de mono- ou oligosaccharides pour la préparation d'un médicament pour le traitement des dermites irritatives, de la dermatite atopique, du syndrome keratoséborrhéique, des otites externes, de la pyodermite ou de la dermatite à Malassezia des animaux à sang chaud à pelage. 19. Utilisation de mono- ou oligosaccharides pour la préparation d'une composition topique pour l'aide au contrôle des dermites irritatives, de la dermatite atopique, du syndrome keratoséborrhéique, des otites externes, de la pyodermite ou de la dermatite à Malassezia des animaux à sang chaud à pelage.