Brevet FR2885538A1 — publié le 20061117

La présente invention est relative à un nouveau procédé n- ettant en oeuvre un réacteur membranaire, qui permet de préparer des particules lipidiques solides, et en particulier des particules de taille nanométrique. Depuis quelques années, les systèmes colloïdaux sont de plus en plus utilisés en agrochimie, en cosmétologie et surtout en pharmacie. Dar s ce domaine, les systèmes dont la taille est inférieure au micron sont utilisés comme systèmes thérapeutiques, tels que les liposomes, les microémulsions et les]ianoparticules. Ces différentes formes ont été développées pour améliorer les performances des médicaments et véhiculer les principes actifs dans l'organisme vers des cellules cibles afin d'améliorer l'effet thérapeutique et/ou de diminuer l'effet toxique. Les nanoparticules lipidiques solides ont été développées dans les années 90, comme une alternative aux nanoparticules constituées de polymères ou de macromolécules naturelles. Les nanoparticules lipidiques solides sont des particules composées d'une matrice lipidique solide. En dispersion aqueuse, elles sont stabilisées par des tensioactifs ou des polymères. Elles associent les avantages des nanoparticules polymériques, des émulsions et des liposomes. Comme les particules polymériques, elles sont constituées d'une matrice solide protégeant les principes actifs incorporés des dégradations chimiques et offrent une grande flexibilité pour modifier le profil de relargage des principes actifs incorporés. Comme les émulsions et les liposomes, elles sont constituées de lipides bien tolérés et biodégradables. La dispersion aqueuse peut être transformée en produit séché par spray drying ou lyophilisation. La présente invention a trait à la préparation de particules lipidiques solides et en particulier de nanoparticules de diamètre inférieur à 1000 nm. La méthode principale de préparation des nanoparticules lipidiques solides est l'homogénéisation haute pression. Le principe d'un homogénéisateur est de pousser le liquide à forte pression (100-200 bar) à travers un étroit conduit (de l'ordre de quelques microns de diamètre). Le fluide accélère sur une très courte distance à grande vitesse (plus de 1000 km/h). Un taux de cisaillement très élevé et les forces de cavitation peiniettent alors la formation de particules de taille submicronique. Deux techniques d'homogénéisation existent: l'homogénéisation à chaud et l'homogénéisation à froid. L'homogénéisation à chaud est réalisée à une température au dessus du point de fusion du lipide et peut donc être considérée comme l'homogénéisation d'une émulsion. Une pré-émulsion du mélange lipidique contenant le principe actif et de la phase aqueuse est réalisée av ec un mélangeur à fort taux de cisaillement. L'homogénéisation haute pression est ensuite réalisée à une température au dessus du point de fusion du lipide. On obtient ainsi une nanoémulsion, qui en solidifiant à température ambiante, forme des nanoparticules lipidiques solides. En ce qui concerne l'homogénéisation à froid, le mélange lipidique contenant le principe actif est refroidi rapidement (par exemple par de la glace ou de l'azote liquide). Le refroidissement rapide favorise la distribution homogène du principe actif dans la matrice lipidique solide. Le mélange lipide-solide est ensuite broyé jusqu'à l'obtention de microparticules, puis dispersé dans une sclution aqueuse. La présuspension est ensuite soumise à l'homogénéisation haute pression à une température égale ou inférieure à la température ambiante. Par exemple, la demande de brevet EP 0506197 décrit la préparation d'une solution aqueuse de nanoparticules lipidiques solides, comprenant au moins un lipide et de façon préférentielle aussi au moins un tensioactif. Les nanoparticules lipidiques solides ainsi obtenues ont un diamètre moyen compris entre 50 et 1000 nm et leur concentration dans la solution est comprise entre 0,01 et 60 % en masse. Une quantité appropriée d'un lipide solide ou un mélange de lipides solides est ajoutée dans une phase aqueuse liquide chauffée. Une agitation vigoureuse permet d'obtenir des gouttelettes de lipides fondus dont le diamètre est compris entre 50 et 1000 mn. Enfin, la dispersion est refroidie jusqu'à ce que les gouttelettes de lipides dispersées se solidifient et qu'une suspension de nanoparticules lipidiques solides soit obtenue. Le brevet US 5,250,236 décrit la préparation de micrcsphères lipidiques solides dont le diamètre est inférieur au micron. Un lipide fondu, qui peut contenir un principe actif, est mis en présence d'un mélange constitué d'eau, l'un tensioactif, et si possible un co-tensioactif, préchauffé à une température au moins égale à la température de fusion du lipide. La microémulsion ainsi obtenue est dispersée dans l'eau à une température comprise entre 2 et 10 degré C . Les microsphères lipidiques obtenues peuvent être lavées avec de l'eau par diafiltration, et lyophilisées. Enfin, le brevet US 5,188,837 décrit la préparation de nanoparticules lipidiques solides avec une couche de phospholipide fixée à leur > urface. Le coeur de la particule lipidique est une substance solide à délivrer, ou bii.n une substance à délivrer qui est dispersée dans un composé inerte solide, tel qu'une cire. La substance à délivrer est mélangée, dissoute ou dispersée dans un composé fondu pour former une substance liquide qui peut solidifier sans changement de la substance à délivrer. Le phospholipide est ensuite ajouté à un milieu aqueux à la substance mélangée, à une température supérieure à la température de fusion de la substance pour former une émulsion. Il faut ensuite homogénéiser l'émulsion à une température supérieure à la température de fusion jusqu'à l'obtention d'une préparation homogène, puis refroidir rapidement la préparation à température ambiante ou au dessous du point de fusion du composé fondu. Dispersé dans une solution aqueuse, le produit final est une dispersion de microparticules solides recouvertes d'une ccuche de particules phospholipides, dont le côté hydrophobe est fixé à la surface du coeur solide hydrophobe et le côté hydrophile est en interface avec la solution aqueuse. L'un des objectifs essentiels de la présente invention est de fournir un procédé de préparation de particules lipidiques solides, et en particulier de nanoparticules, qui soit aisé et rentable à mettre en oeuvre à l'échelle industrielle. Un objectif de la présente invention est de proposer une nouvelle méthode de préparation de nanoparticules lipidiques solides qui mette en oeuvre une étape principale et qui soit plus simple que les méthodes de l'art antérieur. Un autre objectif essentiel de la présente invention est de fournir un procédé de préparation de particules lipidiques solides, et en particulier de nanoparticules lipidiques solides, qui soit industrialisable, et qui permette un coni:rôle de la taille des nanoparticules obtenues, et en particulier qui permette l'obtention de nanoparticules d'un diamètre inférieur à 800 nm, préférentiellement à 600 mn, et de préférence compris entre 100 et 500 nm. Dans ce contexte, la présente invention a pour objet un procédé de préparation de particules, et en particulier de nanoparticules, lipidiques solides, à partir d'une première phase A lipidique liquide comportant un lipide ou un mélange de lipides, et une deuxième phase B liquide dans laquelle le lipide ou le mélange de lipides de la première phase A est insoluble ou peu soluble, caractérisé en ce qu'il met en oeuvre un réacteur membranaire comportant une membrane poreuse, dans lequel la deuxième phase B, circule tangentiellement à la membrane, et la première phase A, maintenue avant passage à travers la membrane à une température supérieure au point de fusion du lipide ou du mélange de lipides, traverse les pores de la membrane, pour former des gouttelettes qui viennent rencontrer la deuxième phase B, et se solidifient, éventuellement, après refroidissement. La description qui suit, en référence aux figures annexées va permettre de mieux comprendre l'invention. La figure 1 illustre, schématiquement, le procédé selon l'i ivention au niveau de la membrane poreuse. La figure 2 représente un dispositif de mise en oeuvre du Procédé conforme à l'invention. Le procédé selon l'invention permet la fabrication, en brande quantité, de particules, et en particulier de nanoparticules de nature essentiellement lipidique. Par nanoparticules, on entend des particules de forme généralement sphérique, de diamètre inférieur à 1 microns, en particulier inférieur à 800 nm, préférentiellement à 600 nm, et de préférence compris entre 100 et 500 nm. Dans la suite de la description, on utilisera indifféremment, le terme particule , ou nanoparticule , en sachant que l'invention est plus particulièrement destinée à la production de nanoparticules, telles que définies ci-dessus. Par nanoparticules lipidiques solides, on entend des nano 3articules solides à température ambiante, c'est-à-dire à une température voisine de 25 C. Dans le cadre de l'invention, dire qu'un lipide ou mélanp de lipides est peu soluble dans la deuxième phase B signifie que, lorsque le lipide ou mélange de lipides en question est introduit dans la deuxième phase B à 25 C, moins de 10 % de la masse totale de lipide(s) introduit(s) se solubilise dans la deu:dème phase B. De façon avantageuse, la deuxième phase B et le lipide ou les mélanges de lipides seront choisis de façon à ce que le lipide ou les mélanges de lipides soier.t insolubles à 25 C dans la deuxième phase B. La notion de solubilité à laquelle on se réfère est, par exemple, définie dans la PHARMACOPEE EUROPEENNE Sème édition. Les nanoparticules lipidiques solides de l'invention peuvent comprendre un seul lipide solide ou un mélange solide de lipides. Par conséquent, le lipide ou le mélange de lipides destiné à constituer la matrice de la particule, qui correspond à la phase lipidique A, présente de préférence un point de fusion supérieur ou égal à 30 C, de préférence compris entre 30 et 100 C, et préférentiellement entre 40 et 95 C, afin que les particules formées soient solides à température ambiante. Quand un mélange de lipides est utilisé, il peut contenir un ou plusieu-s lipides avec une température de fusion inférieure 30 C ou supérieure à 100 C, l'essentiel étant que le mélange de lipides présente une température de fusion qui est dan:; ces limites. Des exemples de lipides solides à de telles températures sont: les alcools fortement saturés, en particulier les alcools aliphatiques ayant entre 14 et 30 atomes de carbone, tel que l'alcool cétostearilique; les cires, comme la cire de carnauba; les hydrocarbures, comme les paraffines solides; les esters synthétiques, comme le palmitate de cétyl; les acides gras ayant entre 12 et 30 atomes ce carbone, comme l'acide stéarique; les mono-, di- et triglycérides saturés en acides gras ayant entre 10 et 30 atomes de carbone, tels que le glycéryl de trilaurate ou l'huile, de ricin. Les particules selon l'invention sont constituées d'une matrice lipidique dans laquelle peut être répartie au moins une substance S. La mat:-ice lipidique peut également être associée à au moins un tensio-actif. Le principe de l'invention est le suivant. Une première phase lipidique A, constituée d'un lipide ou d'un mélange de lipides auquel est ajoutée, éventuellement une substance d'intérêt S et/ou un tensio-actif, est chauffée;i une température supérieure à son point de fusion, pour se trouver à l'état liquide. La première phase lipidique A est donc constituée essentiellement d'un lipide ou mélange de lipides qui correspond à une valeur comprise de 50 à 99 % du volume total, de préférence de 70 à 98 %, préférentiellement de 85 à 95 % du volume total de la phase lipidique A. Elle est alors mise sous pression pour passer à travers les pores d'une membrane M poreuse, comme cela est illustré figure 1. Une deuxième phase B comportant éventuellement un tensioactif, circule tangentiellement, le long de la membrane M. Après avoir traverser la membrane M, la phase lipidique A, sous la forme de gouttelettes formées par passage à travers les pores de la membrane, vient rencontrer la deuxième phase B. Soit la deuxième phase B est à température inférieure au point de fusion du lipide ou des lipides constitutifs de la première phase A, dans ce cas, les gouttelettes formées se solidifient pour former directement des nanoparticules lipidiques solides. Cette variante est particulièrement avantageuse car la deuxième phase B peut se trouver à température ambiante, c'est-à-dire à une température de l'ordre de 25 C. Soit la deuxième phase B est à une température supérieure au point de fusion du ou des lipides, dans ce cas les gouttelettes formées, par pz ssage de la phase lipidique A à travers les pores de la membrane, forment une émulsion dans la deuxième phase B. Dans ce cas, les nanoparticules lipidiques solides sont formées lors d'un refroidissement ultérieur de l'émulsion A dans B a une température inférieure à la température de fusion du lipide (par exemple, éorrespondant à la température ambiante) ou du mélange de lipides formant les gouttelettes. Le procédé de fabrication de particules lipidiques solides, et en particulier de nanoparticules lipidiques solides, selon l'invention utilise donc une membrane poreuse pour l'introduction sous pression de la phase lipidique: A, portée à une température supérieure au point de fusion du lipide ou des lipides qu'elle contient dans une deuxième phase B qui circule de l'autre côté de la membrane, le long de cette dernière comme illustré Fig. 1. La phase lipidique A est far exemple placée dans un récipient ou conteneur sous pression thermostaté assurant son passage à travers les pores de la membrane à la pression et à la température désirée. De façon avantageuse, la deuxième phase B est elle aussi maintenue à une température donnée par un système thermostaté. Par membrane, on entend de préférence un élément poreux homogène sur toute son épaisseur, c'est notamment le cas des membranes de nature polymérique et des supports céramiques. Il pourrait également être envisagé d'utiliser une membrane céramique non homogène sur son épaisseur, constituée d'un support et d'une couche séparatrice. Le diamètre moyen maximum de pores adapté pour la préparation de particules conformes à l'invention est, de préférence, compris encre 1 nm et 10 m, et préférentiellement compris entre 10 nm et 1 m, dans le cas de la préparation de nanoparticules. Dans le cas d'une membrane comportant un suppo -t et une couche séparatrice, c'est le diamètre de pore de la couche séparatrice qui est déterminant. Cette couche séparatrice se trouvera en contact avec la deux ème phase B qui circulera tangentiellement à la surface de cette dernière. Toute forme de membrane peut être envisagée: des merr branes planes, des membranes tubulaires comportant un ou plusieurs canaux de circulation, le long desquels circule la deuxième phase B. Bien qu'il existe des lipides solides pour lesquels une préparation selon l'invention peut être réalisée sans ajout de tensioactif, dans la plupart des cas, il sera préférable, d'utiliser un tensioactif. Aussi, de façon avantageuse. la phase lipidique A et/ou la deuxième phase B, contiendra un tensio-actif. La concentration en tensioactif(s) peut varier avec le type de lipides et de tensioactifs utilisés. Le pourcentage massique de tensioactifs tans la suspension finale de nanoparticules obtenues peut être compris entre 0,01 et 20%, de façon préférentielle entre 0,1 et 10%, plus préférentiellement entre 1 et 5% de la masse totale de la suspension de nanoparticules obtenue. Une grande variété de tensioactifs peut être utilisée, dont le HLB hydrophile/lipophile (de l'anglais HLB : hydrophilic/lipopailic balance) est compris entre 2 et 80. De façon préférentielle, le HLB est comprise entre 8 et 40. Le choix du tensioactif dépend de la phase lipidique solide utilisée. Par exemple, les tensioactifs suivants peuvent être utilisés: les tensioactifs cationiques, tels que le bromide de cétyltriéthylammonium; les tensioactifs anioniques, tels que le lauryl sulfate de sodium; les tensioactifs amphotères, comme l'hydroxyéthyl d'imidazoline (VARINE ); des copolymères, comme le polyoxyéthylènepolyoxypropylène alkyl éther (e.g. PLURONIC F68 ); des tensioactifs non-ioniques, comme les esters de polyoxyéthylène sorbitanne (e.g. TWEEN 20 ), le polyoxyéthylène alkyl éther (e.g. BRIJ 97 et CETOMACROGOL 1000 ), les esters de polyoxyéthylène (e.g. MYRJ 52 ), les esters de sorbitanne (e.g. SPAN 80 ), les esters de sucrose (e.g. WASAG ESTER 7 ); et d'autres tensioactifs adaptés, comme les lecithines, les tensioactifs de silicone, et les esters de polyglycérol. De façon préférentielle, des tensioactifs non-ioniques sort utilisés. De façon plus préférentielle, les tensioactifs sont choisis dans le gro.ipe des éthers de polyoxyéthylène alkyl et des esters de sorbitanne. On utilisera dans la phase lipidique A préférentiellement les tensioactifs dont 5 le HLB est inférieur ou égal à 7, et dans la deuxième phase B qu est, de préférence, aqueuse les tensioactifs dont le HLB est supérieur ou égal à 7. Un mélange de différents tensioactifs peut aussi être utilisé. De façon avantageuse, la deuxième phase B, destinée à constituer la phase continue de la suspension de particules lipidiques solides prépare selon la présente invention, est essentiellement constituée d'eau, ou d'un mélange d'eau et d'un ou plusieurs solvants liquide non-aqueux polaire, par exemple choisis parmi les alcools, tels que l'alcool éthylique, le glycérol, le propylène glycol; et les pyrrolidones, comme le N-méthyl pyrrolidone et le 2-pyrrolidone. La phase lipidique A contient, avantageusement, une substance S en solution ou en suspension dans le lipide ou mélange de lipides. La substance à incorporer S peut être n'importe quelle substance soluble ou dispersible dans le lipide ou le mélange de lipides choisis. La substance S peut être une substance biologiquement active, par exemple une molécule utilisable comme principe actif de médicament ou comme précurseur d'un principe actif de médicament, ou encore un produit de contraste ou un réactif biologique. La substance S peut également être un pigment, une encre, un lubrifiant, un agent de traitement de surface. On peut également utiliser en tant que substance S un mélange des substances ci- dessus. La quantité de substance S est fonction de sa solubilité dans la phase lipidique. En tant que substances pouvant être incorporées à la phase lipidique A, on peut citer comme exemple de vitamine, la vitamine A, comme exemple d'agent anti-inflammatoire, l'indométhacine; comme exemple d'agent antioxydant la vitamine E. Au final, la concentration des nanoparticules lipidiques solides obtenues dans la solution, selon le procédé de l'invention, est comprise entre 0,0let 80%, de façon préférentielle entre 5 et 45%, plus préférentiellement entre 10 et 30% (pourcentage massique des nanoparticules par rapport à la masse totale nanoparticules + phase continue). La taille des particules obtenues est contrôlée par un choix approprié des paramètres liés à la membrane et des paramètres du procédé. En particulier, l'homme du métier sera à même de choisir, en fonction de la dimension souhaitée, d'un part le matériau de la membrane mis en oeuvre et d'autre part sa porosité et son diamètre de pores. Différents types de membranes peuvent être utilisées: des membranes céramiques, membranes minérales ou organiques par exemple. Egalement, une large gamme de diamètre de pores peut être utilisée: des membranes de nanofiltration qui présentent un diamètre de pores inférieur à 1nm, des membranes d'ultrafiltration qui présentent un diamètre de pores compris entre 1 et 100 nm ou des membranes de microfiltration qui présentent un diamètre de pores compris entre 0.1 et 10 m. Le choix des membranes mises en oeuvre va jouer sur la taille (d) des particules et sur le flux (.1) de la phase lipidique A. Bien entendu, afin d'obtenir des particules de taille homogène, on utilisera des membranes dont le diamètre de pores est le plus homogène possible. Il est également possible, pour contrôler la taille des part cules obtenues, de jouer sur les paramètres du procédé qui sont la pression (P) de la phase lipidique A et la vitesse tangentielle (U) de la deuxième phase B. Une large gamme de pression et de vitesse tangentielle peut être envisagée. Typiquement, une pression de 0,1 bar à bar, de préférence de 0, 3 à 15 bar, pour la phase lipidique sera utilisée. En général, une vitesse tangentielle de 0,001 à 20 m.s'l, de préférence de 0,01 à 10 m.s- 1, pour la deuxième phase B sera utilisée. Par ailleurs, il est possible de jouer sur la longueur de la membrane, ou plus généralement sur la surface membranaire traversée par la phase lipidique A, pour augmenter le rendement de production. Il est également possible de disposer plusieurs réacteurs ou modules membranaires en parallèle. Au vu de ce qui précède, il apparaît que le procédé selon l'invention, malgré sa simplicité, est adapté à la préparation de différents types de particules lipidiques solides. De plus, il permet de préparer des volumes importants en continu et il est donc parfaitement adapté à une industrialisation. Le procédé selon l'invention présente une très bonne adaptabilité, il permet d'ajuster la taille des particules. Par exemple, pour changer la taille des particules obtenues, on pourra modifier la formulation, et/ou changer la pression à appliquer sur la phase lipidique A, et/ou changer la vitesse tangentielle de circulation de la deuxième phase B. Les exemples qui suivent permettent d'illustrer l'invention mais n'ont aucun caractère limitatif. Exemple 1 Le montage expérimental utilisé dans cet exemple est représenté sur la Figure 2. Il comprend: - un premier récipient pressurisé 1 contenant la phase lipidique A, et relié à une bouteille 2 d'azote et équipé d'un manomètre 3; ce récipient 1 est chauffé à une température supérieur, au point de fusion du lipide, par exemple grâce à un bain 11 dont la température est régulé par un thermostat 12, - un deuxième récipient 4, contenant la deuxième phase B, et équipé d'un agitateur 5 et relié à une pompe 6; ce deuxième récipient 4 est maintenu à une température constante, par exemple grâce à un bain 41 dont la température est régulée par un thermostat 4:, - un module de filtration de tangentielle 7 équipé de leux manomètres 8 et 9 et d'une vanne 10, relié au premier et au deuxième récipient de façon à ce que la deuxième phase B s'écoule tangentiellement à la membrane et la phase lipidiqueA traverse la membrane pour rejoindre la deuxième phase B. Le montage est réalisé en circuit fermé, c'est-àdire qu'en sortie de la membrane, la suspension colloïdale est remélangée à la deuxième phase B. Il pourrait également être envisagé de réaliser le montage en circuit ouvert et de mettre en sortie de la membrane un circuit d'évacuation vers un autre récipient, l'écoulement pouvant être contrôlé par une vanne. La membrane utilisée est une membrane Kerasep (Orelis, France) de diamètre de pores 0,1 m. La surface membranaire utile est de 7,5 10-3 m. La vitesse tangentielle est égale 1,68 m.s-1 pour la deuxième phase B et la pression transmembranaire égale à 6 bar pour la phase lipidique A. La préparation est évaluée en terme de diamètre moyen de particules, mesuré sur un Zetas zer (France), et du flux de phase lipidique. Différentes formulations ont été testées. Pour ces différentes formulations, la composition de la phase lipidique A et de la deuxième phase aqueuse B sont les suivantes: Formulation 1 Phase lipidique A =300 g de Gelucire à la température de 65 C Phase aqueuse B =1,2 L eau + 2,04 g Tween 20 à la température ce 60 C Formulation 2 Phase lipidique A =300 g Gelucire à la température de 65 C Phase aqueuse B =1,2 L eau +2,04 g Tween 20 +2,04 g 13pikuron 200 à la température de 60 C Formulation 3 Phase lipidique A =300 g Gelucire + 3 g Span 80 à la température de 65 C Phase aqueuse B =1,2 L eau +2,04 g Tween 20 à la température de 60 C Formulation 4 Phase lipidique A =300 g Gelucire +31,25 g Lipoid S100 (2%) a la température de 65 C Phase aqueuse B =1,2 L eau +31,25 g Tyloxapol (2%) à la température de 60 C Les résultats obtenus sont reportés dans le Tableau 1. Le flux de phase lipidique est élevé (jusqu'à 0,27 m3/h.m2), ce qui confirme les potentialités de ce procédé pour une application industrielle. Le diamètre moyen des particules peut être modifié par le choix de la formulation (diamètre moyen entre 175 et 260 nrn).T ableau 1 Taille de particules (nm) Flux phase.ipidique Formulation 1 175 0,2 Formulation 2 180 0,25 Formulation 3 215 0,25 Formulation 4 260 0,27 Exemple 2 Le montage expérimental est représenté sur la Figur( 2. La membrane utilisée est une membrane Kerasep (Orelis, France) de diamètre c e pores 0,1 m. La surface membranaire utile est de 7,5 10 m2. La vitesse tangentielle est égale 1,68 m.s-I pour la phase aqueuse B et la pression transmembranaire é,;ale à 6 bar pour la phase lipidique A. La phase lipidique contient 300 g de Gelucire à la température de 65 C, et la phase aqueuse 1,2 L eau et 2,04 g Tween 20 à la température de 60 C. La préparation est évaluée en terme de diamètre moyen de partie zles, mesuré sur un Zetasizer (France), et du flux de phase lipidique. Tableau 2 Température de la Taille de particules Flux phase lipidique phase aqueuse ( C) (nrn) (m3.IL.-I.m2) 125 0.26 175 0.21 190 0.20 70 0.20 80 0, 20 Les résultats obtenus sont reportés dans le Tableau 2. Les flux de phase lipidique sont de nouveau élevés (jusqu'à 0,26 m3/h.m2). Le diamètre moyen des particules peut être modifié par le choix de la température de la phase aqueuse (diamètre moyen entre 70 et 190 nm). DBF 05 04 883 Réponse à la notification du 03.08.05 REVENDICATIONS: 1 - Procédé de préparation de particules, et en particulier de nanoparticules, lipidiques solides, à partir d'une première phase A lipidique liquide comportant un lipide ou un mélange de lipides, et une deuxième phase B liquide dans laquelle le lipide ou le mélange de lipides de la première phase A est insoluble ou peu soluble, caractérisé en ce qu'il met en oeuvre un réacteur membranaire comportant une membrane poreuse, dans lequel la deuxième phase B, circule tangentiellement à la membrane, et la première phase A, maintenue avant passage à travers la membrane à une température supérieure au point de fusion du lipide-bu du mélange de lipides, traverse les pores de la membrane, pour former des gouttelettes qui viennent rencontrer la deuxième phase B, et se solidifient, éventuellement, après refroidissement. 2 - Procédé de préparation selon la revendication 1 caractérisé en ce que le lipide ou le mélange de lipides constitutif de la phase lipidique A présente un point de fusion supérieur ou égal à 30 C, de préférence un point de fusion compris entre 30 et 100 C, et préférentiellement compris entre 40 et 95 C. 3 - Procédé de préparation selon la revendication 2 caractérisé en ce que le lipide ou les lipides de la phase lipidique A sont choisi parmi: les alcools aliphatiques ayant entre 14 et 30 atomes de carbone, tel que l'alcool cétostearilique; les cires, comme la cire de carnauba; les hydrocarbures, comme les paraffines solides; les esters synthétiques, comme le palmitate de cétyl; les acides gras ayant entre 12 et 30 atomes de carbone, comme l'acide stéarique; les mono-, di- et triglycérides saturés en acides gras ayant entre 10 et 30 atomes de carbone, tels que le glycéryl de trilaurate ou l'huile de ricin. 4 - Procédé de préparation selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que la deuxième phase B est aqueuse. - Procédé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que la deuxième phase B est essentiellement constituée d'eau, ou d'un mélange d'eau et d'un ou plusieurs solvants liquide non-aqueux polaire, par exemple choisis parmi les alcools, tels que l'alcool éthylique, le glycérol, le propylène glycol; et les pyrrolidones, comme le N-méthyl pyrrolidone et le 2-pyrrolidone. DBF 05 04 883 Réponse à la notification du 03.08.05 6 - Procédé de préparation selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que la deuxième phase B est maintenue à une température inférieure à la température de fusion du lipide ou mélange de lipides constitutifs de la phase lipidique A, de façon à ce que les gouttelettes de phase lipidique A formées, se solidifient au contact de la deuxième phase B. 7 -Procédé de préparation selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que la température de la deuxième phase B correspond à la température ambiante, de l'ordre de 25 C. 8 - Procédé de préparation selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que la deuxième phase B est maintenue à une température supérieure à la température de fusion du lipide ou mélange de lipides constitutifs de la phase lipidique A, de façon à ce que les gouttelettes de phase lipidique A formées, forment une émulsion dans la deuxième phase B, et en ce que les gouttelettes formées se solidifient, lors d'une étape ultérieure de refroidissement de l'émulsion formée. 9 - Procédé de préparation selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce qu'au moins un tensioactif est contenu dans la phase lipidique A et/ou la deuxième phase B. - Procédé de préparation selon la revendication précédente caractérisé en ce que au moins un tensio-actif non-ionique, par exemple choisi dans le groupe des éthers de polyoxyéthylène alkyl et des esters de sorbitanne, est utilisé. 11 - Procédé de préparation selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que la phase lipidique A contient une substance S en solution ou en suspension dans le lipide ou mélange de lipides, de préférence choisie parmi un principe actif de médicament, un produit de contraste, un réactif biologique, un pigment, une encre, un lubrifiant, un agent de traitement de surface. 12 - Procédé de préparation selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que les particules formées présentent un diamètre inférieur à 600 nm, préférentiellement à 500 nm, et de préférence compris entre 200 et 350 nm 13 - Procédé de préparation selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce que la membrane utilisée présente un diamètre de pores compris entre 1 nm et 10 m, de préférence compris entre 10 nm et 1 m. 14 - Procédé de préparation selon l'une des revendications précédentes caractérisé en ce qu'une pression de 0,1 bar à 50 bar, de préférence de 0, 3 à 15 bar, est appliquée sur la phase lipidique A. -Procédé de préparation selon l'une des revendications précédentes caractérisé 5 en ce que la deuxième phase B circule le long de la membrane, à une vitesse tangentielle de 0,001 à 20 m.s- i, de préférence de 0,01 à 10 m.s- 1.