Brevet FR2883874A1 — publié le 20061006

H N (R,S) CO2CH2R1 CO2CH2R1 L'invention concerne un nouveau procédé de synthèse de l'acide (2S, 3aS, 7aS)-perhydroindole-2-carboxylique et de ses esters, et leur application à la synthèse industrielle du perindopril et de ses sels pharmaceutiquement acceptables. L'acide (2S, 3aS, 7aS)-perhydroindole-2-carboxylique (I) et ses esters de formule CO2H CO2CH2R N N H H (I) H H sont utiles dans la synthèse du perindopril, de formule (VIII) : H (VIII) ainsi que dans celle de ces sels pharmaceutiquement acceptables. Le perindopril et ses sels possèdent des propriétés pharmacologiques intéressantes. Ils permettent principalement l'inhibition de l'enzyme de conversion de l'angiotensine I (ou kininase II), ce qui d'une part empêche la transformation du décapeptide angiotensine I en octapeptide angiotensine II (vasoconstricteur), et d'autre part prévient la dégradation de la bradykinine (vasodilatateur) en peptide inactif. Ainsi, le perindopril est utile dans le traitement des maladies cardiovasculaires, notamment l'hypertension artérielle et l'insuffisance cardiaque. Quelques méthodes de préparation de l'acide (2S, 3aS, 7aS)-perhydroindole2-carboxylique de formule (I) et de ses esters de formule (II) sont déjà connues. La demande de brevet EP 0 037 231 décrit un procédé dans lequel on utilise comme composé de départ l'acide indole 2-carboxylique. Cet acide est soumis à une hydrogénation catalytique sur rhodium pour donner un mélange des deux isomères cis et endo de configurations respectives (2S, 3aS, 7aS) et (2R, 3aR, 7aR). Ce mélange est ensuite séparé par un procédé laborieux: synthèse du dérivé N-benzoylé, cristallisation fractionnée du sel du diastéréoisomère avec la (S)- alpha -phényl-éthylamine, libération des deux dérivés (S, S, S) et (R, R, R) N-benzoylés, puis élimination du groupement benzoyle, suivie d'un passage sur colonne échangeuse d'ions et d'une recristallisation. La demande de brevet EP 0 115 345 décrit un procédé utilisant comme matière première l'acide indole 2-carboxylique et comprenant l'estérification de la fonction acide carboxylique par l'alcool benzylique, la salification de l'amino ester par la N-benzyloxycarbonyl(S)-phénylalanine, la séparation par cristallisation fractionnée de l'isomère (S, S, S), la libération de la fonction aminée optionnellement suivie de la libération du groupement acide carboxylique. Les demandes de brevets EP 0 308 339 et EP 0 308 341 décrivent un procédé de synthèse qui utilise également comme matière première l'acide indole 2carboxylique. Cet acide est dans un premier temps réduit en acide indoline 2-carboxylique (en utilisant le couple étain/acide chlorhydrique) . On obtient alors un mélange d'acide indoline carboxylique 2R et 2S. L'isomère 2S est ensuite séparé par addition audit mélange d'une solution de (+) a méthyl benzylamine dans un alcool aliphatique inférieur. Le précipité de sel de l'acide indoline carboxylique-2(S) avec l'a méthyl benzylamine est récupéré et décomposé pour donner l'acide indoline carboxylique-2(S). L'isomère 2S est ensuite soumis à une hydrogénation catalytique pour conduire au composé désiré. Ces demandes décrivent également la synthèse du perindopril à partir de l'acide (2S, 3aS, 7aS)perhydroindole-2-carboxylique. Le perindopril ayant des activités pharmaceutiques intéressantes, il est important de pouvoir synthétiser l'acide (2S, 3aS, 7aS)-perhydroindole-2carboxylique et ses esters par un procédé de synthèse industrielle performant, permettant l'obtention sélective du diastéréoisomère désiré avec un bon rendement et une excellente pureté, à partir de matières premières bon marché. 2883874 3 Les inventeurs ont mis au point un nouveau procédé de synthèse industrielle de l'acide (2S, 3aS, 7aS)-perhydroindole-2-carboxylique et de ses esters qui permet l'obtention sélective du diastéréoisomère désiré avec un bon rendement et une excellente pureté énantiomérique. La présente invention concerne donc un procédé de synthèse des composés de formule (I) ou (II), ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base minéral(e) ou organique, comprenant les étapes successives suivantes: a) dédoublement par hydrolyse enzymatique, en présence d'une protéase, d'un ester de 10 formule (III) (R,S) CO2CH2R1 (III) dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou alcényle en C1-C6 linéaire ou ramifié, éventuellement substitué par un radical choisi dans le groupe constitué par les radicaux cycloalkyle en C3-C6, hétérocycloalkyle en C3-C6, aryle ou hétéroaryle, pour isoler d'une part un ester de formule (IV) H N CO2CH2R1 (IV) dans laquelle R1 a la même signification que pour la formule (III), et d'autre part un acide de formule (V) CO2H (V) b) saponification ou hydrolyse de l'ester IV obtenu suite à l'étape a) en acide de formule (VI) ; CO2H (VI) c) réduction de l'acide VI obtenu suite à l'étape b) par hydrogénation catalytique pour former le composé de formule (I) H CO2H (I) d) le cas échéant, isolement de l'acide I; e) le cas échéant, estérification de l'acide (I) obtenu suite à l'étape c) pour obtenir le composé de formule (II) CO2CH2R N H H (II) dans laquelle R représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou alcényle en C1-C6 linéaire ou ramifié, éventuellement substitué par un radical choisi dans le groupe constitué par les radicaux cycloalkyle en C3-C6, hétérocycloalkyle en C3C6, aryle ou hétéroaryle; f) éventuel isolement de l'ester II. Dans le cadre de la présente invention, le terme alkyle désigne un résidu hydrocarboné à chaîne droite ou ramifiée contenant de 1 à 6 atomes de carbone, tel que le méthyle, l'éthyle, le propyle, l'isopropyle, le butyle, l'isobutyle, le pentyle, l'hexyle. Dans le cadre de la présente invention, le terme alcényle désigne un résidu hydrocarboné à chaîne droite ou ramifiée contenant de 1 à 6 atomes de carbone et au moins une liaison oléfinique, tel que l'allyle, le vinyle, l'isoprènyle. Comme exemple de radical aryle, on peut notamment citer le phényle et le naphtyle. Comme exemple de radical hétéroaryle, on peut notamment citer l'imidazole, l'indole, le furane, le thiophène, le pyrrole, la pyridine. Dans le cadre de la présente invention, le terme cycloalkyle désigne un groupe alkyle cyclique contenant de 3 à 6 atomes de carbone, par exemple le cyclopropyle, le cyclobutyle, le cyclopentyle et le cyclohexyle, et le terme hétérocycloalkyle désigne un groupe alkyle cyclique contenant de 3 à 6 atomes de carbone, dont un ou plusieurs atomes de carbone peuvent être remplacés par des hétéroatomes choisis dans le groupe constitué par N, O et S. Comme exemple de radical hétérocycloalkyle, on peut notamment citer la pyrrolidine, la pipéridine, le tétrahydrofurane, le pyranne, la morpholine. R1 et/ou R représentent avantageusement un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou alcényle en C1-C6 linéaire ou ramifié, encore plus avantageusement un atome d'hydrogène. L'ester III peut être un mélange d'esters, par exemple un mélange d'ester méthylique et d'ester éthylique. Lors de l'hydrolyse enzymatique de l'ester III en présence d'une protéase (étape a)) l'énantiomère R de l'ester III sera hydrolysé alors que l'énantiomère S ne le sera pas. La protéase utilisée lors de cette étape est caractérisée par sa capacité à orienter d'une manière énantiosélective l'hydrolyse d'un seul des énantiomères (énantiomère R). La protéase utilisée est avantageusement choisie dans le groupe constitué par l'alcalase, la chymotrypsine et la papaïne. Selon une variante avantageuse de l'invention, la protéase utilisée est la subtilisine, appelée communément alcalase. L'étape a) de dédoublement par hydrolyse enzymatique est avantageusement effectuée en milieu aqueux homogène. Selon une variante avantageuse de l'invention, le 15 dédoublement par hydrolyse enzymatique comprend les étapes successives suivantes: i) mélange homogène, à une température comprise entre 10 et 30 C, de l'ester III et d'un solvant; puis ii) ajustement du pH du mélange à une valeur comprise entre 6,5 et 7, 5; ensuite iii) agitation lente et ajustement de la température entre 30 et 70 C; puis iv) ajout de la protéase audit mélange; enfin v) ajout d'une base forte tout en maintenant la température du mélange entre 10 et 30 C et le pH entre 6,5 et 7,5. Le solvant utilisé lors de l'étape i) est avantageusement de l'eau ou une combinaison d'eau et de solvant organique, notamment un solvant hydrosoluble tel que l'acétone, 1'acétonitrile, le diméthylformamide, l'alcool tertiobutylique. La quantité maximale de solvant organique est avantageusement de 50% en poids, plus avantageusement 10% en poids, encore plus avantageusement 5% en poids, par rapport au poids total du mélange de solvants (solvant organique plus eau). Lors de l'étape ii) le pH est avantageusement ajusté à une valeur de 7 + 0,2. La température lors de l'étape i) ou iv) est avantageusement comprise entre 35 et 60 C. Elle est plus avantageusement de 37 C + 1 C. L'hydrolyse (étape v)) est avantageusement suivie par ajout d'une base forte telle que la soude, à un débit d'addition avantageusement compris entre 20 microlitre/mn et 3 ml/mn. Le débit d'addition est ajusté de telle sorte que le pH du mélange reste compris entre 6,5 et 7,5, avantageusement entre 6,8 et 7,2. L'acide de formule (V) (environ 50% molaire) et l'ester de formule (IV) (environ 50% molaire), qui possède la configuration requise pour aboutir au produit désiré, sont séparés facilement par voie extractive ou par toute autre voie de séparation connue de l'homme du métier. En cas de besoin, l'ester de formule (IV) récupéré pourra être purifié par distillation à court trajet ou par toute autre méthode de purification connue de l'homme du métier. L'acide de formule (V) peut être récupéré, par exemple après ajustage du pH de la solution qui le contient à 3,5 0,2 puis séparation du produit insoluble formé par filtration, et racémisé après formation de son ester par des voies classiques, bien connues de l'homme du métier. Après racémisation, le procédé selon l'invention peut de nouveau être utilisé pour isoler un ester de formule (IV). La réduction de l'acide de formule (VI), lors de l'étape c), s'effectue avantageusement en utilisant un catalyseur, choisi dans le groupe constitué par le nickel, le platine, le palladium et le rhodium, sur un support tel que le charbon. L'ester III est avantageusement obtenu par réduction chimique de l'indoyle-2 carboxylate d'alkyle de formule (VII) CO2CH2R2 (VII) dans laquelle R2 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou alcényle en C1-C6 linéaire ou ramifié, éventuellement substitué par un radical choisi dans le groupe constitué par les radicaux cycloalkyle en C3-C6, hétérocycloalkyle en C3-C6, aryle ou hétéroaryle. R2 représente avantageusement un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou alcényle en C1-C6 linéaire ou ramifié. La réduction peut être effectuée par tout procédé connu de l'homme du métier. Selon une variante avantageuse de l'invention, la réduction est effectuée par ajout de magnésium, avantageusement du magnésium en tournure, en suspension dans le méthanol. La réaction est avantageusement suivie par chromatographie gazeuse qui montre une transestérification en ester méthylique (IIIa) suivie de la réaction de réduction de la double liaison en C2-C3, objet d'une partie de la présente invention. Ainsi, dans cette variante, le radical RI dans les formules (III) et (IV) représente avantageusement un atome hydrogène. Ce procédé de réduction est plus sûr et moins agressif pour le matériel utilisé qu'un procédé de réduction utilisant le couple étain/acide chlorhydrique. En outre, il est réalisé à pression atmosphérique. L'exemple suivant illustre l'invention, mais ne la limite en aucune façon. Exemple: synthèse de l'acide (2S, 3aS, 7aS)-perhydroindole-2-carboxylique et de ses esters: 1 - Synthèse des esters méthylique et éthylique de l'acide (2R, S) dihydro-2,3 indolyle-2 15 carboxylique (réduction): H N Mg en tournure CO2Et Dans un réacteur de 5 litres muni d'un agitateur efficace, on introduit: - 100 g d'indolyle-2 carboxylate d'éthyle, - 200 ml de toluène anhydre, - 200 ml de méthanol anhydre. On agite et on chauffe le mélange obtenu à 60 C (léger reflux) afin d'obtenir une solution. Puis on ajoute en dix fois sur une période de 6 heures, 25 g de magnésium en tournure. L'hydrogène ainsi libéré réduit l'indolyle-2 carboxylate d'éthyle en dérivé (2 R, S) dihydro-2,3 indolyle2 carboxylique sous forme d'ester méthylique majoritaire et d'ester éthylique minoritaire (transestérification). L'évolution de la réaction est suivie par chromatographie en phase gazeuse du mélange réactionnel en fonction du temps. Dès la fin de la réaction, que l'on vérifie par chromatographie en phase gazeuse, on agite à température ambiante pendant 18 heures environ, puis on procède à l'hydrolyse du milieu réactionnel par 300 ml d'une solution d'acide sulfurique obtenue à partir de 50 ml d'acide sulfurique concentré et de 250 ml d'eau ou par une solution d'acide citrique ou acétique. Méthanol CO2Et + CO2Me On sépare la phase toluènique, on lave la phase inférieure avec 200 ml de toluène que l'on ajoute à la phase organique. On évapore le solvant sous vide, puis on distille le résidu obtenu sur un appareil de distillation à court trajet en verre, d'une surface de 0,05 m2. Les conditions de distillation sont: température: 150 C, vide: 3. 102 Pa (3 mbars), débit: 600 ml/h, poids obtenu: 70 g d'une huile jaune paille. 2 - Dédoublement enzymatique par la subtilisine (hydrolyse enzymatique): H + H alcalase ONa H ÉÉ^CO2H 2S 2S CO2Et 2R CO2Me Dans un ballon de 500 ml chauffé à 37 C et muni d'une agitation magnétique, on introduit successivement: - 19,7 g de ((R,S) dihydro-2,3 indolyle-2 carboxylate de méthyle + (R,S) dihydro-2,3 15 indolyle-2 carboxylate d'éthyle), - 5 ml d'acétone, - 100 ml d'eau. Lorsque le mélange est homogène, on ajuste le pH à 7, par de la soude à une concentration de 2 mol/1 (soude 2N). On ajoute ensuite 2 ml d'une solution d'alcalase, et on suit la cinétique de la réaction à l'aide d'un pHstat, tout en maintenant la température à 37 C. Les conditions de l'hydrolyse sélective sont: - soude 2N, - consigne de pH = 7, - plage de régulation = 1, - débit mini = 20 microlitres/mn, débit max = 3 ml/mn. La réaction est arrêtée lorsque la pente du graphe (volume de soude en fonction du temps) montre une cassure nette (20 ml de soude ajoutée). Le milieu réactionnel est rendu alcalin à pH = 9 par de la soude 2N. L'acétone est évaporée sous vide à froid pour éviter tout risque de saponification de l'ester résiduel. Le milieu résiduel est extrait par du chlorure de méthylène (2 x 100 ml). Ce milieu est séché par du sulfate de magnésium, puis le solvant est évaporé sous vide. On obtient ainsi 8,1 g d'une huile légèrement colorée qui est le (2S) dihydro-2,3 indolyle-2 carboxylate de méthyle. Rendement molaire: 83% En cas de besoin, l'énantiomère (S) récupéré pourra être purifié sur un appareil de distillation à court trajet en verre, d'une surface de 0, 05 m2, sous les mêmes conditions de distillation que précédemment (cf 1 ) . La phase aqueuse est acidifiée par de l'acide chlorhydrique 2N jusqu'à un pH voisin de 3,5, auquel précipite l'acide (2R) dihydro-2,3 indolyle-2 carboxylique, que l'on récupère par filtration et que l'on peut racémiser en milieu alcalin, après formation de son ester méthylique ou éthylique par les voies classiques. 3 - Acide (2S) dihydro-2,3 indolyle-2 carboxylique (saponification) : H H N CO2Me + CO2Et Dans un réacteur de 250 ml muni d'un système d'agitation magnétique, on introduit: - 7,7 g de ((2S) dihydro-2,3 indolyle-2 carboxylate de méthyle + (2S) dihydro-2,3 indolyle-2 carboxylate d'éthyle) , - 40 ml de soude 2N, - 32 ml d'éthanol. On agite à 20 C pendant 18 heures. Puis on évapore l'éthanol sous vide, et on ajuste le pH à 3,5 avec de l'acide chlorhydrique 4N, ce qui permet de faire précipiter l'acide attendu. On obtient ainsi 6,6 g d'un produit cristallisé blanc qui est l'acide (2S) dihydro-2,3 indolyle-2 carboxylique, caractérisé par les spectres de RMN et de masse, son pouvoir rotatoire et le profil chromatographique de l'amide formé avec le (S)-(-) a-méthylbenzylamine. Rendement molaire: 92% COOH 4 - Acide (2S, 3aS, 7aS) perhydroindole-2 carboxylique (hydrogénation catalytique): H CO2H Dans un autoclave de 250 ml, on introduit 2,9 g d'acide (2S) dihydro-2,3 indolyle-2 carboxylique préalablement dissous dans 32 ml de méthanol, puis 18 ml d'eau et 6 g de 5 rhodium sur charbon. On hydrogène la solution obtenue sous 30 bars à 60 C pendant 24 heures. Après: - filtration du mélange obtenu sur Clarcel, - évaporation des solvants sous vide, - ajout de 30 ml de dioxane et d'eau, afin d'obtenir une solution limpide à 90 C. On laisse refroidir le milieu, et on recueille les cristaux obtenus par filtration; le poids obtenu est de 2,7 g (16,2 mmoles). Rendement molaire: 90% Analyse du produit obtenu: On a analysé le produit obtenu par résonance magnétique nucléaire (RMN 'H et RMN 13C). RMN 1H 400 MHz, D2O (ôppm) : 1,16-1,75 (8H, m, -CH2-), 1,88 (1H, m, -CH2CH-), 2,15-2,28 (2, m, -CH2-CaH-), 3,58 (1H, ddd, 3J=1,75 Hz, 3J= 6, 5 Hz, 3J= 12 Hz, -NH-CH-), 3,99 (1H, dd, 3J= 6,75 Hz, 3J= 9,5 Hz, -C H-) RMN 13C 100 MHz, D20 (Sppm) : 22,5 et 23,0 (2C, 2s, -CH2-CH2-), 26,0 et 26,7 (2C, 2s, - CH-CH2-), 33,9 (1C, s, -CH2- 38,5 (1C, s, -CH2- CaH-), 60, 9 et 61,3 (2C, 2s, CH- CH2-), 177,1 (1C, s, -COOH). ^ On a aussi analysé le produit obtenu par spectrométrie de masse (Impact électronique à 70eV (6750kJ)). m/z calculé 169 (C9H15NO2) ; m/z (%) :124 (PM-COOH, 100), 170 (PM, 4) ^ On a enfin déterminé la pureté énantiomérique de l'acide (2s) dihydro-2, 3 indolyle-2 25 carboxylique 1) Pouvoir rotatoire: (concentration 10 mg/ml d'eau) [a]D25 = -45,9 2) Synthèse d'un amide diastéréoisomérique avec la R-l-phényléthylamine: Principe: Le but est de pouvoir doser la pureté énantiomérique de l'indoline acide après 30 dédoublement enzymatique. Le principe de ce dosage est donc de former des diastéroisomères pour pouvoir ensuite les séparer facilement sur une colonne HPLC (High Performance Liquid Chromatography = chromatographie liquide haute performance) classique. La préparation de l'échantillon va donc consister à dériver l'acide (2S) dihydro-2,3 indolyl-2 carboxylique avec la R-1-Phényléthylamine pour former l'amide R,R éventuellement présent et l'amide R, S qui seront ensuite analysés en HPLC. Préparation de l'échantillon: Dans un ballon de 50 ml, on introduit environ: - 20 mg de R-1-Phényéthylamine - 10 ml CH2C12 mg de l'acide à analyser mg HOBT (1-Hydroxybenzotriazole) mg DCC (dicyclohexylcarbodiimide) On agite ce mélange pendant 2 heures, on filtre sur seringue avec un filtre en PTFE (poly-15 tetrafluoroéthylène), on évapore le solvant, on ajout 10 ml de méthanol puis on injecte 10 l de ce mélange en HPLC. Conditions HPLC Appareil utilisé : détecteur barette de diodes Colonne: phase stationnaire apolaire (C18) Eluant: H2O acide / MeOH: 50/50; Débit: 1 ml/min; Détection: 238 nm Résultats: le profil chromatographique de l'amide de l'acide 2(S) dihydro-2,3 indolyle-2 carboxylique (amide R, S) est donné sur la figure 1. Figure 1: Pureté diastéréoisomérique de l'amide de l'acide 2(S) dihydro-2, 3 indolyle-2 carboxylique, obtenu par dédoublement enzymatique, avec la R1 phényl éthylamine. Pureté > 99 %. Le pic observé à 28,057 minutes correspond à l'amide de l'acide 2(S) dihydro-2,3 indolyle-2 carboxylique. Le profil chromatographique de l'amide de l'acide 2(R) dihydro-2,3 indolyle-2 carboxylique (amide R, R)est donné sur la figure 2. Figure 2: Pureté diastéréoisomérique de l'amide de l'acide 2(R) dihydro-2, 3 indolyle-2 carboxylique, obtenu par dédoublement enzymatique, avec la R1 phényl éthylamine. Le pic observé à 25,376 minutes correspond à l'amide de l'acide 2(R) dihydro-2,3 indolyle-2 carboxylique. Conclusion: l'acide (2S) dihydro-2, 3 indolyle-2 carboxylique est donc obtenu avec une pureté énantiomérique supérieure à 99 %. 5 - Esters de l'acide (2S, 3aS, 7aS) perhydroindole-2 carboxylique: H H CO2 R L'acide (2S, 3aS, 7aS) perhydroindole-2 carboxylique peut ensuite être estérifié par les procédés classiques. On peut par exemple estérifier l'acide (2S, 3aS, 7aS) perhydroindole-2 carboxylique en ester de l'alcool (R-OH) souhaité en utilisant comme agent de couplage le dicyclohexyl carbodiimide en présence de DMAP qui accélère la réaction. Revendications 1. Procédé de synthèse des composés de formule (I) ou (II) : H CO2H CO2CH2R (I) dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C1-C6 linéaire ou ramifié, ainsi que leurs sels d'addition à un acide ou à une base minéral(e) ou organique, comprenant les étapes successives suivantes: a) dédoublement par hydrolyse enzymatique, en présence d'une protéase, d'un ester de 10 formule (III) (III) dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou alcényle en C1-C6 linéaire ou ramifié, éventuellement substitué par un radical choisi dans le groupe constitué par les radicaux cycloalkyle en C3-C6, hétérocycloalkyle en C3-C6, aryle ou hétéroaryle, pour isoler d'une part un ester de formule (IV) H N CO2CH2R1 (IV) dans laquelle R1 a la même signification que pour la formule (III), et d'autre part un acide de formule (V) CO2H (V) b) saponification ou hydrolyse de l'ester IV obtenu suite à l'étape a) en acide de formule (VI) ; H N (R,S) CO2CH2R1 CO2H c) réduction de l'acide VI obtenu suite à l'étape b) par hydrogénation catalytique pour former le composé de formule (I) CO2H (I) d) le cas échéant, isolement de l'acide I; e) le cas échéant, estérification de l'acide (I) obtenu suite à l'étape c) pour obtenir le composé de formule (II) CO2CH2R N H H (II) dans laquelle R représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou alcényle en CI-C6 linéaire ou ramifié, éventuellement substitué par un radical choisi dans le groupe constitué par les radicaux cycloalkyle en C3-C6, hétérocycloalkyle en C3-C6, aryle ou hétéroaryle; f) éventuel isolement de l'ester II. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'étape a) de dédoublement 15 enzymatique comprend les étapes successives suivantes: i) mélange homogène, à une température comprise entre 10 et 30 C, de l'ester II et d'un solvant; puis ii) ajustement du pH du mélange à une valeur comprise entre 6,5 et 7,5; ensuite iii) agitation lente et ajustement de la température entre 30 et 70 C; puis iv) ajout de la protéase audit mélange; enfin v) ajout d'une base forte tout en maintenant la température du mélange entre 10 et 30 C et le pH entre 6,5 et 7,5. 3. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la 25 protéase utilisée lors de l'étape a) est choisie dans le groupe constitué par l'alcalase, la chymotrypsine et la papaïne. 4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que la protéase utilisée lors de l'étape a) est l'alcalase. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la réduction de l'acide, lors de l'étape c), s'effectue en utilisant un catalyseur choisi dans le groupe constitué par le nickel, le platine, le palladium et le rhodium, sur un support tel que le charbon. 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que l'ester III est obtenu par réduction chimique de l'indoyle-2 carboxylate d'alkyle de formule (VII) CO2CH2R2 (VII) dans laquelle R2 représente un atome d'hydrogène, un radical alkyle ou alcényle en C1-C6 linéaire ou ramifié, éventuellement substitué par un radical choisi dans le groupe constitué par les radicaux cycloalkyle en C3-C8, hétérocycloalkyle en C3-C8, aryle en C6-C11 ou hétéroaryle en C5- C11. 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que R1 représente un atome d'hydrogène. 8. Procédé selon la revendication 7, caractérisé en ce que la réduction s'effectue par ajout de magnésium, avantageusement du magnésium en tournure, en suspension dans le méthanol.