Brevet FR2883472A1 — publié le 20060929

UTILISATION D'UN ACIDE CHLOROGÉNIQUE EN TANT QU'UN ACTIF AMINCISSANT La présente invention concerne l'utilisation d'au moins un acide chlorogénique et d'une combinaison de caféine et d'au moins un acide chlorogénique dans des compositions amincissantes, ainsi que de telles compositions amincissantes. L'hypoderme ou tissu adipeux joue un rôle central dans le métabolisme des graisses et se localise sous l'épiderme et le derme. Ce tissu adipeux est formé de cellules adipeuses ou adipocytes (environ 50 à 80 milliards) et d'une matrice conjonctive composée de fibroblastes spécialisés ou préadipocytes. Selon le sexe et l'âge, l'importance et la répartition du tissu adipeux sont différentes. Ainsi, s'il représente de 20 à 30% du poids corporel chez la femme, il n'en représente que 10 à 15% chez l'homme; lesquelles proportions augmentent avec l'âge. Chez la femme, le tissu adipeux présente une épaisseur deux fois plus importante et se localise essentiellement au-dessous de la ceinture (région gluteofémorale répartition gynoïde). L'une des caractéristiques de cette graisse accumulée en bas du corps est d'être particulièrement peu mobilisable et de ne pas être associée à un risque vasculaire. Si la fonction essentielle du stockage de cette graisse est d'assurer les besoins énergétiques liés à la reproduction (grossesse, allaitement), il peut toutefois évoluer en une forme plus sévère et anarchique: la cellulite . L'apparition de la cellulite résulte généralement d'un dysfonctionnement au niveau de l'hypoderme: la lipohydrodystrophie. Cette lipohydrodystrophie se traduit d'une part par une accumulation des graisses dans les cellules et d'autre part par une mauvaise circulation sanguine conduisant à une vasoconstriction des vaisseaux sanguins. Deux mécanismes distincts sont impliqués dans la formation de la cellulite: ^ un stockage des triglycérides (esters d'acides gras et de glycérol) dans les adipocytes (dans l'hypoderme) qui peuvent voir leur volume augmenter de façon considérable (facteur 100). Cette accumulation explique l'augmentation des lobules graisseux et l'aspect qualifié de peau d'orange . ^ une augmentation de la viscosité de la substance fondamentale du derme qui se traduit par de la rétention d'eau et une diminution des échanges cellulaires. Ces deux mécanismes ont pour conséquence la compression des vaisseaux sanguins et lymphatiques et une 15 congestion des tissus. Souvent inesthétiques et mal vécus, la cellulite autant que les processus de stockage des triglycérides ont fait l'objet de nombreuses études visant à mieux comprendre les mécanismes impliqués. Il ressort de ces différentes études que l'apparition de la cellulite résulte avant tout d'un déséquilibre entre la lipogenèse, qui regroupe les processus métaboliques concourant à la biosynthèse des lipides, et la lipolyse regroupant les processus d'hydrolyse des graisses. La lipolyse et la lipogenèse mettent en jeu de très nombreuses enzymes différentes qui sont associées à des mécanismes de régulation complexes. Dans le cas de la lipolyse, un des principaux mécanismes de régulation est associé au contrôle de l'état de phosphorylation de la lipase qui permet la dégradation du triacylglycérol en diacylglycérol. Cette lipase n'est active qu'après avoir été phosphorylée par une protéine kinase AMPc dépendante et l'AMPc constitue alors un des principaux effecteurs de la lipolyse. Une augmentation de la concentration de l'AMPc induit une activation de la lipase et donc de la lipolyse. Une diminution de la concentration en AMPc, lequel est transformé en 5'AMP sous l'action de l'AMPc phosphodiestérase, inhibe l'activation de la lipase et donc la lipolyse. Il existe aujourd'hui un besoin important de nouveaux agents activateurs de la lipolyse et/ou inhibiteurs de la lipogenèse afin de lutter contre la cellulite de sorte d'atténuer l'aspect peau d'orange, d'améliorer la fermeté de la peau et surtout de limiter l'épaisseur de la couche adipeuse sous-cutanée cutanée. Les acides chlorogéniques sont des acides-phénols et plus précisément des esters d'acide quinique et d'acide(s) cafféique(s) ou d'acide(s) férulique(s). Les acides chlorogéniques sont présents dans la majorité des plantes où ils sont considérés comme des molécules de défense; leur présence est notamment corrélée avec la résistance des végétaux à des insectes herbivores. On observe ainsi que, dans les radicules de graines de carottes, la teneur en acides chlorogéniques augmente après inoculation de microorganismes dans les graines. Les acides chlorogéniques possèdent des propriétés anti-oxydantes qui leur permettent de protéger les cellules végétales contre les stress oxydatifs non biotiques. De tels stress sont en effet susceptibles d'entraîner des dommages cellulaires et peuvent consister en des phénomènes de peroxydation ou de production d'espèces d'oxygènes réactives. Cette protection peut aussi intervenir à la suite de blessures physiques dans les tissus végétaux comme c'est le cas chez la patate douce. Différents mécanismes permettent aux acides chlorogéniques de contribuer à la résistance des plantes aux pathogènes ou aux prédateurs, à savoir: ^ Les acides chlorogéniques favorisent la stabilité des parois cellulaires du fait de la formation de ponts moléculaires. Plus généralement, les acides phénoliques forment des ponts moléculaires aux niveaux des parois des cellules végétales. Les acides chlorogéniques permettent ainsi des liaisons lignine-polysaccharides, lignine-pectine, pectine-pectine. Ce renforcement de la paroi cellulaire permet de diminuer la sensibilité des cellules végétales aux toxines microbiennes et de limiter la pénétration cellulaire grâce à une amélioration de la barrière mécanique naturelle. ^ Les acides chlorogéniques permettent la résistance aux phénomènes de réaction hypersensible chez les végétaux. Dans les tissus infectés, les attaques de pathogènes induisent des dommages cellulaires entraînant une production de lipoxygénases qui oxydent les lipides membranaires. Ce phénomène conduit à une réaction en chaîne induisant une mort rapide et étendue des cellules végétales, la réaction hypersensible , accompagnée de dommages sur l'ADN, de l'inactivation de protéines et de la diminution de la viabilité cellulaire. En présence de composés phénoliques tels que les acides chlorogéniques, on observe une protection des lipides membranaires contre l'oxydation qui se traduit par un léger brunissement de la zone infectée et qui permet ainsi de limiter ou de moduler la mort cellulaire. ^ La complexation des acides chlorogéniques avec certains composés, comme des enzymes, et leur fixation à la paroi cellulaire permet de limiter la dégradation enzymatique de la paroi végétale pectocellulosique par certains pathogènes. Chez les végétaux, les acides chlorogéniques se trouvent le plus souvent sous forme complexée. Ils peuvent ainsi être complexés à des protéines de réserves comme par exemple dans la graine de tournesol où on les trouve sous forme de complexes acide chlorogénique-helianthinine. Les acides chlorogéniques peuvent également se complexer avec la caféine et ils pourraient intervenir dans la compartimentation cellulaire de cette molécule (observations sur feuille, suspension cellulaire, protoplaste). Enfin, les acides chlorogéniques, lorsqu'ils se complexent avec des pigments comme les anthocyanines, jouent aussi un rôle en tant que copigments. Traditionnellement, les acides chlorogéniques sont utilisés en pharmacie, cosmétique ou alimentaire pour leurs propriétés anti-oxydantes et antiradicalaires. Ces actions leur confèrent des propriétés en ce qui concerne la protection et la prévention contre les cancers, certaines maladies cardiovasculaires ou encore contre le vieillissement. Ces mêmes propriétés permettent de protéger les membranes cellulaires et de limiter l'inflammation impliquant l'acide arachidonique. L'activité antiinflammatoire des acides chlorogéniques est potentialisée par leur capacité à inhiber la production de cytokines et chémokines. L'utilisation des acides chlorogéniques en tant qu'agents anti-oxydants en dermatologie et en cosmétique est notamment décrite dans la demande EP0706786. Plus spécifiquement, la demande JP8026967 décrit l'utilisation des acides chlorogéniques en tant qu'agent éclaircissant de la peau, agent de prévention du vieillissement ou agent protecteur des cheveux. La demande de brevet FR2734479 décrit en outre l'utilisation des acides chlorogéniques dans des filtres protecteurs contre les rayons UVA et UVB et leur action photoprotectrice contre des rayonnements UV (avec une amélioration de la viabilité cellulaire sur des fibroblastes cultivés in vitro). D'autres propriétés ont également pu être associées aux acides chlorogéniques. Ainsi, la demande de brevet CAl201234 décrit le pouvoir inhibiteur de l'activité uréase des acides chlorogéniques et leur utilisation en tant qu'agents antiperspirant en cosmétique et dermatologie. De façon surprenante et inattendue, la Demanderesse a maintenant mis en évidence que les acides chlorogéniques présentent également une activité activatrice de la lipolyse et une activité inhibitrice de la lipogenèse. Un premier objet de l'invention consiste donc en l'utilisation d'au moins un acide chlorogénique en tant qu'actif amincissant dans une composition cosmétique. Ledit acide chlorogénique permet de lutter contre la cellulite ou la peau d'orange et contre l'augmentation et/ou l'accumulation de tissu adipeux sous-cutané. Par acide chlorogénique, on entend un ester d'acide quinique et d'acide cafféique ou d'acide férulique qui présente la formule (I) suivante: OR1 COOH (formule I) OH OR2 OR3 dans laquelle R1r R2 et R3, identiques ou différents, sont choisis parmi un atome d'hydrogène, un groupement de formule (II) suivante: C CH CH O OH (formule II) et, un groupement de formule (III) suivante: OCH3 C CH CH- OH (formule III) 0 et dans laquelle au moins l'un des groupements R1r R2 ou R3 n'est pas un atome d'hydrogène. Selon un premier mode de réalisation préféré de l'utilisation selon l'invention, ledit acide chlorogénique présente une formule (1), dans laquelle R1r R2 et R3, identiques ou différents, sont choisis parmi un atome d'hydrogène, un groupement de formule (II) et dans laquelle au moins l'un des groupements R1r R2 ou R3 n'est pas un atome d'hydrogène. Selon un deuxième mode de réalisation préféré de l'utilisation selon l'invention, ledit acide chlorogénique présente une formule (1), dans laquelle R1r R2 et R3, identiques ou différents, sont choisis parmi un atome d'hydrogène, un groupement de formule (III) et dans laquelle au moins l'un des groupements R1r R2 ou R3 n'est pas un atome d'hydrogène. À titre d'exemple d'acides chlorogéniques, on peut citer l'acide caffeoylquinique, l'acide dicaffeoylquinique, l'acide tricaffeoylquinique, l'acide feruloylquinique, leurs isomères ou un mélange de ceux-ci. De préférence, ledit acide chlorogénique est l'acide caffeoylquinique et de manière particulièrement préférée l'acide 3-caffeoylquinique. Avantageusement, ledit acide chlorogénique se présente sous la forme d'un extrait végétal purifié. En fonction de l'extrait végétal utilisé, la concentration des acides chlorogéniques et, dans une moindre mesure, leur composition varient. À titre d'exemple d'extrait végétal utilisable, on peut citer l'extrait de café vert (de 3 à 10% dans les grains de Coffea sp. en particulier C. robusta, C. arabica, C. canephora, C. tipica), de cassis (de 0.2 à 4% dans les feuilles et fruits de Ribes nigrum), de tournesol (0.2 à 2% dans les graines de Helianthus annus), d'artichaut (0.5 à 2% dans les feuilles de Cynara scolymus), de chèvrefeuille (2 à 3% dans les fleurs de Lonicera japonica), de prune (0.1 à 1% dans les fruits de Prunus domestica), de pomme (0.1 à 0.5% dans les fruits de Malus sp.), de pomme de terre (0.02 à 0.1% dans les bulbes de Solanum tuberosum), de patate douce (0.2 à 1% dans Ipomoea batatas), de myrtille (0.1 à 0.4% dans les fruits de Vaccinium corrymbosum), d'arnica (0.2 à 0.4% dans les sommités fleuries Arnica chamissonis) ou de rosier de Damas (1 à 2% dans le pollen de Rosa damascena). De préférence, l'extrait végétal utilisé est un extrait de café vert. Différents procédés d'extraction et de purification des acides chlorogéniques sont connus de l'homme du métier. Un procédé couramment utilisé consiste en l'utilisation de plusieurs solvants successifs. À titre d'exemple d'un tel procédé, on peut citer le procédé décrit dans la demande de brevet FR2734479. Dans ce procédé, la matière végétale est mise en contact avec un premier solvant, par exemple chloroforme ou chlorure de méthylène, qui permet de dissoudre les graisses et la caféine. La matière végétale dégraissée est ensuite mise en contact avec un second solvant qui est constitué d'un mélange solvant polaire / eau, par exemple un mélange méthanol / eau, qui permet de dissoudre les acides chlorogéniques. Le surnageant est mis en contact, après élimination du solvant polaire, avec un troisième solvant organique qui n'est pas miscible dans l'eau et qui permet de dissoudre les acides chlorogéniques, par exemple l'acétate d'éthyle. La solution organique obtenue est alors séchée pour obtenir un extrait sec, lequel extrait est repris dans de l'eau, puis de nouveau séché par nébulisation et lyophilisation. À partir de grains de café vert, ce procédé permet d'obtenir des concentrations en acides chlorogéniques supérieures à 60%. Un autre procédé couramment utilisé consiste en l'adsorption des acides chlorogéniques, à partir d'extraits aqueux ou hydro-alcooliques de matières végétales, sur un support solide ne retenant pas les minéraux et plus particulièrement les cations. L'étape d'adsorption permet de séparer les acides chlorogéniques des minéraux et des enzymes qui leur sont associés. A titre d'exemple d'un tel procédé, on peut citer le procédé décrit dans la demande de brevet EP1405566. Des supports appropriés pour la purification des acides chlorogéniques sont bien connus de l'homme du métier. À titre d'exemple de tels supports, on peut citer la polyvinylpyrrolidone (pvp). Dans un tel procédé, on effectue une première étape d'extraction de la matière végétale à l'eau chaude, par exemple à 80 C, ou avec un mélange eau-alcool. Dans une seconde, le liquide d'extraction obtenu est introduit dans une colonne de pvp. Un lavage de la résine est alors effectué avec une percolation d'eau de sorte qu'il n'y a plus alors dans la colonne qu'un complexe "pvp-acide chlorogénique". Dans une troisième étape, les acides chlorogéniques sont désorbés sélectivement à l'aide d'un solvant hydroalcoolique, comme par exemple un mélange éthanol / eau / acide chlorhydrique (70/30/1). L'acide chlorogénique est finalement purifié par une resolubilisation dans de l'eau chaude, suivie d'une précipitation à 4 C. Les cristaux d'acides chlorogéniques sont alors séchés, dans une étuve sous vide ou par atomisation ou lyophilisation, ceci afin d'obtenir une poudre. Dans le cas où la pureté des acides chlorogéniques obtenus serait insuffisante, une nouvelle resolubilisation dans l'eau peut être effectuée pour obtenir la pureté souhaitée. Avantageusement, la concentration en acides chlorogéniques utilisés dans ladite composition cosmétique est comprise dans l'intervalle allant de 0, 005% à 10% du poids total de la composition, de préférence de 0,01 à 5%, préférentiellement de 0,05 à 2% et de manière particulièrement préférée de 0,1 à 1%. L'utilisation d'un acide chlorogénique en tant qu'actif amincissant peut se faire dans tout type de composition cosmétique, notamment dans des compositions destinées à une administration orale ou à une administration topique. Selon un mode de réalisation particulier de l'utilisation selon invention, ledit acide chlorogénique est utilisé en tant qu'actif amincissant dans une composition destinée à une administration topique. De telles compositions à usage topique sont bien connues de l'homme du métier. À titre d'exemple de telles compositions, on peut citer, à titre non-limitatif, les crèmes, les gels, les baumes, les huiles, les laits, les lotions, les gels, les masques, sans aucune restriction galénique particulière autre que celles pour l'application sur la peau. Ledit acide chlorogénique peut en outre être associé dans de telles compositions à des substances couramment utilisées dans les produits cosmétiques pour la peau. À titre d'exemple de telles substances, on peut citer, à titre non-limitatif, les conservateurs, les huiles, les charges, les tensio-actifs, les humectants, les filtres UV, les antiinflammatoires, les glycols, les bactéricides, les antiseptiques, les pigments, les vasodilatateurs, les parfums et les extraits végétaux. Selon un deuxième mode de réalisation particulier de l'utilisation selon invention, ledit acide chlorogénique est utilisé en tant qu'actif amincissant dans une composition destinée à une administration orale. De telles compositions destinées à une administration orale sont bien connues de l'homme du métier. À titre d'exemple de telles compositions, on peut citer, à titre non-limitatif, les gélules, les compléments alimentaires, les comprimés ou les boissons. Ledit acide chlorogénique peut en outre être associé à des substances couramment utilisées pour de telles compositions. À titre d'exemple de telles substances, on peut citer, à titre non-limitatif, les saccharides, les arômes, les émulsifiants, les protéines, les arômes, les stabilisants, les colorants, les acidifiants, les matières grasses, les céréales ou les gommes de base. Selon un troisième mode de réalisation préféré de l'utilisation selon invention, ledit actif amincissant est un agent inhibiteur de la lipogenèse. Par agent inhibiteur de la lipogenèse, on entend un agent capable d'inhiber la synthèse et donc l'accumulation des triglycérides, de préférence un agent capable d'inhiber la différenciation des préadipocytes en adipocytes. Selon un quatrième mode de réalisation préféré de l'utilisation selon l'invention, ledit actif amincissant est un agent activateur de la lipolyse. Par agent activateur de la lipolyse, on entend un agent capable d'activer la dégradation des triglycérides. Avantageusement, ledit agent activateur de la lipolyse permet d'induire par phosphorylation l'activation de la lipase, de préférence, cette induction résulte de l'augmentation de la concentration en AMPc due à l'inhibition de l'AMPc phosphodiestérase. De façon surprenante et inattendue, la Demanderesse a également mis en évidence qu'une combinaison d'acides chlorogéniques et de caféine (rapport 1: 30) montre une activité amincissante améliorée. En effet, on observe que la combinaison d'acides chlorogéniques et de caféine présente une synergie en termes d'activité amincissante par rapport à chacun de ces composés pris séparément. Un deuxième objet de l'invention consiste donc en une composition cosmétique caractérisée en ce qu'elle comprend de la caféine et un acide chlorogénique, et en ce que la concentration en caféine dans ladite composition cosmétique est telle que le rapport entre la concentration en acides chlorogéniques sur la concentration en caféine dans la composition est compris dans l'intervalle allant de 1: 1 à 1: 500, de préférence de 1: 2 à 1: 100 et de manière particulièrement préférée de 1: 5 à 1: 50. Par acide chlorogénique, on entend un ester d'acide 20 quinique et d'acide cafféique ou d'acide férulique qui présente la formule (I) telle que décrite précédemment. À titre d'exemple d'acides chlorogéniques, on peut citer l'acide caffeoylquinique, l'acide dicaffeoylquinique, l'acide tricaffeoylquinique, l'acide feruloylquinique, leurs isomères ou un mélange de ceux-ci. De préférence, l'acide chlorogénique est l'acide caffeoylquinique et de manière particulièrement préférée l'acide 3-caffeoylquinique. Avantageusement, ledit acide chlorogénique se présente sous la forme d'un extrait végétal purifié. À titre d'exemple d'extrait végétal utilisable, on peut citer l'extrait de café vert, de cassis, de tournesol, d'artichaut, de chèvrefeuille, de prune, de pomme, de pomme de terre, de patate douce, de myrtille, d'arnica ou de rosier de Damas. De préférence, l'extrait végétal utilisé est un extrait de café vert. La concentration en acides chlorogéniques dans ladite composition cosmétique est comprise dans l'intervalle allant de 0,005% à 10% du poids total de la composition, de préférence de 0,01 à % 5%, préférentiellement de 0,05 à 2% et de manière particulièrement préférée de 0,1 à 1%. Avantageusement, la caféine est purifiée à partir d'un extrait végétal, de préférence, l'extrait végétal utilisé 10 est un extrait de café vert ou de thé vert. La composition selon l'invention peut prendre la forme d'une composition destinée à une administration orale ou à une administration topique. Selon un mode de réalisation particulier, la composition selon l'invention est destinée a une administration topique. De telles compositions à usage topique sont bien connues de l'homme du métier. À titre d'exemple de telles compositions cosmétiques, on peut citer à titre non-limitatif les crèmes, les gels, les baumes, les huiles, les laits, les lotions, les gels, les masques, sans aucune restriction galénique particulière autre que celles pour l'application sur la peau. Dans de telles compositions, la combinaison d'au moins un acide chlorogénique et de caféine peut en outre être associée à des substances entrant couramment dans la composition des produits cosmétiques pour la peau. À titre d'exemple de telles substances, on peut citer, à titre nonlimitatif, les conservateurs, les huiles, les charges, les tensio-actifs, les humectants, les filtres UV, les anti-inflammatoires, les glycols, les bactéricides, les antiseptiques, les pigments, les vasodilatateurs, les parfums et les extraits végétaux. Selon un deuxième mode de réalisation particulier, la composition selon l'invention est destinée à une administration orale. De telles compositions sont bien connues de l'homme du métier. À titre d'exemple de telles compositions, on peut citer, à titre non-limitatif, les gélules, les compléments alimentaires, les comprimés ou les boissons. Ledit acide chlorogénique et la caféine peuvent en outre être associés dans les compositions selon l'invention à des substances couramment utilisées dans de telles compositions. À titre d'exemple de telles substances, on peut citer à titre non-limitatif les saccharides, les arômes, les émulsifiants, les protéines, les arômes, les stabilisants, les colorants, les acidifiants, les matières grasses, les céréales ou les gommes de base. Un troisième objet de l'invention consiste en l'utilisation d'une combinaison d'au moins un acide chlorogénique et de caféine en tant qu'actifs amincissants dans une composition cosmétique. Ladite combinaison d'acides chlorogéniques et de caféine permet de lutter contre la cellulite ou la peau d'orange et contre l'augmentation ou l'accumulation de tissu adipeux sous-cutané. Selon un premier mode de réalisation préféré de l'utilisation selon invention, lesdits actifs amincissants sont des agents inhibiteurs de la lipogenèse. Par agents inhibiteurs de la lipogenèse, on entend des agents capables d'inhiber la synthèse et donc l'accumulation des triglycérides. Selon un deuxième mode de réalisation préféré de l'utilisation selon l'invention, lesdits actifs amincissants sont des agents activateurs de la lipolyse. Par agents activateurs de la lipolyse, on entend des agents capables d'activer la dégradation des triglycérides. Avantageusement, lesdits agents activateurs de la lipolyse permettent d'induire par phosphorylation l'activation de la lipase, de préférence cette induction résulte de l'augmentation de la concentration en AMPc dû à l'inhibition de l'AMPc phosphodiestérase. Un quatrième objet de l'invention consiste en l'utilisation d'au moins un acide chlorogénique pour potentialiser l'activité amincissante de la caféine dans une composition cosmétique. Selon un premier mode de réalisation préféré de l'utilisation selon invention, ledit acide chlorogénique permet de potentialiser l'inhibition de la lipogenèse par la caféine dans une composition cosmétique. Selon un deuxième mode de réalisation préféré de l'utilisation selon l'invention, ledit acide chlorogénique permet de potentialiser l'activation de la lipolyse par la caféine dans une composition cosmétique. Un cinquième objet de l'invention consiste en l'utilisation de la caféine pour potentialiser l'activité amincissante d'un acide chlorogénique dans une composition cosmétique. Selon un premier mode de réalisation préféré de l'utilisation selon invention, la caféine permet de potentialiser l'inhibition de la lipogenèse par un acide chlorogénique dans une composition cosmétique. Selon un deuxième mode de réalisation préféré de l'utilisation selon l'invention, la caféine permet de potentialiser l'activation de la lipolyse par un acide chlorogénique dans une composition cosmétique. D'autres caractéristiques de l'invention apparaîtront dans les exemples qui suivent, sans pour autant que ceux-ci ne constituent une quelconque limitation de l'invention. EXEMPLES Exemple 1 Dosage des triglycérides en présence d'acide chlorogénique (inhibition de la lipogenèse) Principe La différenciation des préadipocytes, isolés à partir de tissu adipeux humain, est induite à partir d'un mélange d'insuline, de dexaméthasone, d'indométhacine et de 3Isobutyl- 1- methylxanthine (IBMX). Cette différenciation cellulaire entraîne la formation de gouttelettes lipidiques et l'accumulation de triglycérides intracellulaires qui sont visibles en microscopie optique. La quantification des gouttelettes lipidiques formées, qui est effectuée à l'aide d'un colorant spécifique (Nile Red), permet une caractérisation plus fine de la différenciation cellulaire. Protocole Des préadipocytes humains (Cambrex, PT-5020) ont été ensemencés à raison de 10 000 cellules/puits/100pl sur des plaques noires 96 puits (Corning). Les cellules ont ensuite été mises en culture pendant trois jours, jusqu'à confluence, dans un milieu de prolifération (PT8000, CAMBREX) et dans une étuve à 37 C / 5% de CO2. Le milieu de culture a alors été éliminé et remplacé par un milieu de différenciation [PT8000, CAMBREX; complété d'insuline (10pg/ml), de dexaméthasone (lpM), d'indométhacine (200pM) et d'IBMX (500pM)] contenant différentes concentrations d'acides chlorogéniques purifiés à partir d'extraits de café vert (0, 1.32 x 10-4%, 4 x 10-4% et 4 x 10-3% (p/v)) et/ou de caféine (4 x 10-3% (p/v))É À titre de contrôle négatif et positif, le milieu de culture de certaines cellules a été remplacé soit par du milieu de prolifération, soit par un milieu de différenciation additionné de 20pM de baïcaléine (EXTRASYNTHESE) respectivement. Après 11 ou 14 jours de culture, l'accumulation des triglycérides intracellulaires a été dosée dans les différentes conditions de culture en utilisant le réactif AdipoRedTM (CAMBREX) selon les instructions du fabricant. La mesure de la fluorescence a été effectuée à 590nm (émission à 485 nm) à l'aide d'un lecteur de fluorescence FL-600c (BIOTEK) relié au logiciel KC4. Les résultats ont été normalisés par la mesure de lafluorescence obtenue en l'absence de cellules. Résultats Les pourcentages d'inhibition de l'accumulation des triglycérides obtenus dans les différentes conditions de culture testées, lesquels correspondent aux pourcentages d'inhibition de la différenciation des préadipocytes dans les mêmes conditions, sont présentés dans le tableau I. Les valeurs présentées correspondent à la moyenne de quatre expériences. L'accumulation obtenue de triglycérides pour les cellules cultivées avec le milieu de différenciation seul sert de référence (0% d'inhibition). 18 Tableau I Traitements Pourcentage d'inhibition de l'accumulation des triglycérides par rapport au milieu de différenciation seul (référence 0%) J11 J14 Résultats A: Témoins d'inhibition milieu de prolifération 98 % 98 0/0 Témoin positif: milieu de différenciation et 96 % 94 % baïcaléine (20 NM) Résultats B: Effet-dose des Acides Chlorogéniques milieu de différenciation et 68% 80% Acides Chlorogéniques à 4.10-3 % (p/v) milieu de différenciation et 37 % 40 % Acides Chlorogéniques à 4.104 % (p/v) milieu de différenciation et 30% 26% Acides Chlorogéniques à 1,32.10 % (p/v) Résultats C: Acides Chlorogéniques et Caféine comparés à dose équivalente milieu de différenciation et 68 % 80 % Acides Chlorogéniques à 4.10-3 % (p/v) milieu de différenciation et 14% 8% Caféine à 4.10-3 % (p/v) Résultats D: Association Acides Chlorogéniques et Caféine milieu de différenciation et 14% 8% Caféine à 4.10-3 % (p/v) milieu de différenciation et 30% 26% Acides Chlorogéniques à 1,32.104 % (p/v) milieu de différenciation et 51 % 59 % Acides Chlorogéniques à 1,32.104 % (p/v) + Caféine à 4.10-3 % (p/v) Les résultats montrent une inhibition de l'accumulation des triglycérides dans différentes conditions (baïcaléine, caféine et acides chlorogéniques), laquelle correspond à une inhibition de la différenciation des préadipocytes. De façon inattendue, l'inhibition de l'accumulation des triglycérides obtenue en présence d'acides chlorogéniques est bien supérieure à celle obtenue en présence de caféine (cf. inhibition obtenue avec 4.10-3 % (p/v) ) Les résultats montrent également que la combinaison d'acides chlorogéniques et de caféine permet d'obtenir une forte inhibition de l'accumulation des triglycérides; le pourcentage d'inhibition obtenu est alors bien supérieur à la somme des pourcentages d'inhibition obtenus indépendamment avec la caféine et les acides chlorogéniques. Il semble donc que l'utilisation simultanée de la caféine et des acides chlorogéniques permet de potentialiser leur action réciproque d'inhibition de l'accumulation des triglycérides. Des expériences contrôles ont permis de montrer que l'inhibition de l'accumulation des triglycérides ne résulte pas des solvants utilisés avec les différents actifs (expériences avec solvants seuls), pas plus que d'un effet des différents actifs sur la prolifération cellulaire (expériences utilisant du milieu de prolifération avec les différents actifs). Exemple 2: Inhibition de la phosphodiestérase par l'acide chlorogénique (activation de la lipolyse) Principe L'adenosine monophosphate cyclique (AMPc) est transformée en 5'AMP par l'AMPc phosphodiestérase. Le 5'AMP formé est décomposé très rapidement par une phosphodiestérase pour libérer du phosphore inorganique. Celui-ci forme, en présence de molybdate d'ammonium et en milieu acide, un complexe non réduit qui absorbe à 340 nm. Protocole L'AMPc Phosphodiestérase (0.011 unités/ml, SIGMA) a été incubée à 35 C dans un tampon réactionnel (Tris 15.4 mM, acetate de magnésium 3. 85 mM, chlorure de calcium 0.385 mM, (3-mercaptoéthanol 0.77 mM, pH 8/HCL 0.1N) en présence d'AMPc (0.675 mM, SIGMA), de phosphodiestérase I (0.173 unité/pl, type IV, Crotalus atrox, SIGMA) et de l'extrait testé (acides chlorogéniques ou caféine) dans une gamme de 0. 07% à 2% p/v. La réaction a été arrêtée au bout de 20 minutes par l'ajout du réactif de coloration (molybdate d'ammonium, 4.1 g/1; TWEEN 20; 4.9 g/1; H2SO4, 5N). La lecture de l'absorbance a été effectuée à 340 nm après 6 minutes et a permis de déterminer la quantité de phosphore inorganique libérée par la transformation d'AMPc en 5'AMP sous l'action de l'AMPc phosphodiestérase. La concentration de chaque extrait testé et nécessaire à l'inhibition de 50% de l'activité de l'AMPc phosphodiestérase a été déterminée. Résultats Les résultats ont montré que la caféine inhibe l'activité de la phosphodiestérase et, par voie de conséquence, la lipogénèse. De façon surprenante, les résultats ont montré d'une part que les acides chlorogéniques inhibent également l'activité de la phosphodistérase et d'autre part que cette inhibition est supérieure à celle obtenue avec la caféine. La CI50 de 0.12% pour les acides chlorogéniques est en effet nettement inférieure à celle de la caféine (1%). Les acides chlorogéniques constituent donc de bons inhibiteurs de la lipolyse, lesquels sont supérieurs à la caféine. Exemple 3: compositions cosmétiques 5 Composition 1 Ingrédients Acides chlorogéniques de café vert Agents hydratants Alcool Alcool cétéarylique Allantoïne Aminométhyl propanol Cocoate d'éthylhexyle Diméthicone Distéarate de glycol Eau EDTA tetrasodique Gomme Xanthane Parfum PEG-2 stearate Sodium lactate méthysilanol Sodium mannuronate méthylsilanol Squalane Tocophéryl acétate Transpolymère d'acrylates et d'acrylates d'alkyle en C10-30 Triglycéride caprylique/caprique Cette composition peut comprendre d'autres ingrédients d'origine végétale tels que de la caféine (ajoutée à 3%) ou un extrait de Vitis vinifera (ajouté à 1%). Proportion en % de poids total de la composition 0.1% 10% 14.3 0/0 3% 10% 0.3% 3% 5% 1% Qsp 100 % 0.1% 2% Composition 2 Ingrédients Proportion en % de poids total de Acide stéarique la composition 0.5% Acides chlorogéniques de café vert 0.1 % Agents hydratants 9% Alcool 14% Alcool cétéarylique et Ceteareth-33 1% Allantoïne 0.1% Carbomère 0.3% Diméthicone 9% Eau Qsp 100 % EDTA tetrasodique 0.02% Gomme Xanthane 0.1% Hydroxyde de sodium 0.02% Parfum 0.6% Steareth-50 2% Tocophéryl acétate 0. 1% Cette composition peut comprendre d'autres ingrédients d'origine végétale comme des extraits de Ruscus aculeatus 5 (1.5%), d'Aesculus hyppocastanum (0.3%) ou de Macadamia ternifolia (0.07%). REVENDICATIONS 1. Utilisation d'au moins un acide chlorogénique en tant qu'actif amincissant dans une composition cosmétique. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit acide chlorogénique est un ester d'acide quinique et d'acide cafféique ou d'acide férulique de formule (I) suivante: dans laquelle R1r R2 et R3, identiques ou différents, 10 sont choisis parmi un atome d'hydrogène, un groupement de formule (II) suivante: OR1 COOH (formule I) OH OR2 OR3 C CH=CH OH (formule II) O et un groupement de formule (III) suivante: OCH3 C CH=CH OH (formule III) et dans laquelle au moins l'un des groupements R1r R2 ou R3 n'est pas un atome d'hydrogène. 3. Utilisation selon la revendication 2, caractérisée en ce que ledit acide chlorogénique est l'acide caffeoylquinique, de préférence l'acide 3caffeoylquinique. 4. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que ledit acide chlorogénique se présente sous la forme d'un extrait végétal purifié, lequel extrait végétal est choisi dans le groupe comprenant les extraits de café vert, de cassis, de tournesol, d'artichaut, de chèvrefeuille, de prune, de pomme, de pomme de terre, de patate douce, de myrtille, d'arnica et de rosier de Damas. 5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que la concentration en acides chlorogéniques est comprise dans l'intervalle allant de 0,005% à 10% du poids total de la composition, de préférence de 0,01 à % 5%. 6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que ladite composition cosmétique est destinée à une administration orale ou à une administration topique. 7. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que ledit actif amincissant est un agent inhibiteur de la lipogenèse. 8. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que ledit actif amincissant est un agent activateur de la lipolyse. 9. Composition cosmétique caractérisée en ce qu'elle comprend de la caféine et au moins un acide chlorogénique, et en ce que la concentration en caféine dans ladite composition cosmétique est telle que le rapport entre la concentration en acides chlorogéniques sur la concentration en caféine dans la composition est compris dans l'intervalle allant de 1: 1 à 1: 500, de préférence de 1: 2 à 1: 100. 10. Utilisation d'une combinaison d'au moins un acide chlorogénique et de caféine en tant qu'actifs amincissants 5 dans une composition cosmétique. 11. Utilisation d'au moins un acide chlorogénique pour potentialiser l'activité amincissante de la caféine dans une composition cosmétique.