Brevet FR2859995A1 — publié le 20050325

HYDRAZINOPEPTOIDES REDUITS ET LEURS UTILISATIONS DANS LE TRAITEMENT DES CANCERS La présente invention a pour objet de nouveaux composés hydrazinopeptoïdiques réduits, leurs procédés de synthèse, et leur utilisation dans le cadre du traitement des tumeurs. Le cycle cellulaire de la plupart des cellules permet d'augmenter la taille, de doubler la quantité d'ADN, pour assurer la répartition du matériel génétique de manière équitable dans les cellules filles. Le cycle cellulaire est divisé en deux périodes bien distinctes : l'interphase pendant laquelle se produit la réplication de l'ADN et la mitose. Les phases de réplication et de mitose sont contrôlées par des complexes protéiques régulés par leur état de phosphorylation/déphosphorylation et/ou leur dégradation. De nombreuses pathologies neuro-dégénératives et/ou cancéreuses, associées à la présence de protéines incorrectement structurées (aberration dans la structure secondaire et tertiaire de la molécule) ou à la présence de protéines non dégradées à un stade où il est indispensable qu'elles le soient, sont connues actuellement. Le système ubiquitine/protéasome joue un rôle majeur dans la protéolyse intracellulaire, la dégradation d'un certain nombre de protéines associées au bon déroulement du cycle cellulaire. L'inactivation du protéasome par des inhibiteurs spécifiques du site actifpermettra de comprendre la mécanistique du dysfonctionnement de la dégradation des protéines et ainsi d'envisager de nouvelles classes de molécules antitumorales. Il a été observé que des peptides-aldéhydiques inhibiteurs de la calpaïne et du protéasome tel que le N-acétyl-leucinyl-leucinyl-norleucinal (ALLN), le benzyloxycarbonyl leucinyl-leucinyl-leucinal (MG132) et le N-acétyl-leucinyl-valinylphénylalaninal (ALVP), mais pas le N-acétyl-leucinyl-leucinyl-méthioninal (ALLM), ont une action synergique dans la suppression de la prolifération cellulaire et l'induction de l'apoptose dans trois lignées cellulaires tumorales humaines ainsi que dans les adénocarcinomes pulmonaires, les carcinomes de prostate, et les carcinomes du sein (Cusak JC, Liu R, Houston M, Adendroth K, Elliot PJ, Adams J and Baldwin AS Jr (2001) Cancer Res, 61,3535-3540 ; Soligo D, Servida D, Fontanella E, Lamorte G, Caneva L, Fumiatti R, and Lambertenghi Deliliers G (2001) Br J Haematol, 113,126- 135 ; Sun J, Nam S, Lee CS, Li B, Coppola D, Hamilton AD, Dou QP and Sebti SM (2001) Cancer Res, 61, 1280-1284. Les peptides transformés et en particulier les pseudopeptides suscitent un grand intérêt car ils sont capables de se comporter comme des analogues plus efficaces que les peptides eux-mêmes dont les applications thérapeutiques sont toutefois limitées par une biodégradabilité importante, un faible pouvoir de franchissement des barrières physiologiques et par le manque de sélectivité vis-à-vis de la cible. Il est donc nécessaire de concevoir des analogues plus actifs, plus stables et plus spécifiques. Les pseudopeptides pour lesquels la nature chimique du squelette peptidique et de la liaison amide (CO-NH) est modifiée, permettent d'induire une biodisponibilité plus importante que celle des peptides mimés tout en préservant une bonne activité biologique. Cette propriété des pseudopeptides, est liée notamment à la résistance induite vis-à-vis des peptidases, qui dégradent très rapidement tout peptide exogène en coupant le squelette peptidique au niveau des liaisons amide, et dont l'action est alors ralentie par la modification de ces liaisons. Des composés hydrazinopeptoïdes sont décrits notamment dans la demande internationale WO 03/018557. La présente invention découle de la mise en évidence par les Inventeurs du fait que les composés hydrazinopeptoïdes réduits de formule (I), décrits ci-après, ont une action spécifique sur les cellules cancéreuses à induire celles ci à entrer en apoptose selon un mécanisme d'inhibition des activités enzymatiques inhérentes au protéasome. L'invention a pour objet les composés de formule générale (I) suivante : dans laquelle : # Y représente CH2, ou CO, # n représente un nombre entier de 1 à 10, notamment n représente 1 ou 2, sous réserve que lorsque n représente 1, Y représente CH2, et que lorsque n est supérieur à 1, l'un au moins des groupes Y dans la formule (I) représente CH2, ' R1 et R6, indépendamment l'un de l'autre, représentent : o un atome d'hydrogène, o un groupe utilisable dans le cadre de la protection des atomes d'azote en synthèse peptidique, tel que le groupe BOC, FMOC ou Z, o un groupe de formule-COR, ou -CH2COR dans laquelle R représente : > un atome d'hydrogène, sous réserve que lorsque RI est un hydrogène, celui-ci se présente sous forme d'un sel soluble dans les solvants aqueux, tel qu'un sel de trifluoroacétate, un groupe alkyle de 1 à 10 atomes de carbone, le cas échéant substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène, tels que les groupes R représentant -CF3 ou un groupe -CH2X, X représentant un atome d'halogène tel que Cl ou Br, # un groupe -COORa dans lequel Ra représente H ou un groupe alkyle, tel qu'un groupe méthyle ou éthyle, > un groupe amine primaire -NH2 ou une amine IIre ou IIIre, # un groupe alkoxy, tel qu'un groupe méthoxy-OMe, ou éthoxy -OEt, # un groupe phényle, # un groupe pyridinium, tel que le groupe de formule # R2, R3, R4 et R5, indépendamment les uns des autres, représentant : o un atome d'hydrogène, o un groupe alkyle de 1 à 10 atomes de carbone, le cas échéant substitué, notamment par un ou plusieurs atomes d'halogène ou par un ou plusieurs groupes amine ou phényle, tels que les groupes méthyle, butyle, isobutyle, -(CH2)4NH2, -CH2Ph, - (CH2)4NHBoc, # ou R1 en association avec R2, ou R6 en association avec R5, représentent un groupe de formule L'invention a plus particulièrement pour objet les composés susmentionnés de formule générale (I) dans laquelle : # Ri représente un groupe protecteur BOC, ou Z, ou un groupe -COCH2X, X représentant un atome d'halogène tel que Cl ou Br, ou R1 représente H, sous réserve que lorsque Ri représente H, celui-ci se présente le cas échéant sous forme de sel, tel qu'un sel de trifluoroacétate de formule CF3C02 , H3N -, # R2 représente H ou un groupe alkyle de 1 à 10 atomes de carbone, tel qu'un groupe isobutyle, # R3 représente H ou un groupe alkyle de 1 à 10 atomes de carbone, tel qu'un groupe isobutyle, ou R3 représente un groupe benzyle, # l'un de R4 ou de R5 représente H, tandis que l'autre représente un groupe alkyle tel que défini ci-dessus, et R6 représente H ou un groupe protecteur BOC ou Z, # n représente 1 ou 2, # Y est tel que défini dans la revendication 1. L'invention concerne plus particulièrement encore les composés susmentionnés de formule générale (I) dans laquelle : # Ri représente un groupe protecteur BOC, ou Z, ou un groupe-COCH2X, X représentant un atome d'halogène tel que Cl ou Br, ou R1 représente H, # R2 représente H, # R3 représente un groupe isobutyle, ou un groupe benzyle, # R4 représente H, ou un groupe méthyle ou isobutyle, # R5 représente H, ou un groupe isobutyle, # R6 représente un groupe protecteur BOC ou Z, # n représente 1, # Y représente CH2. Des composés particulièrement préférés dans le cadre de la présente invention sont ceux de formules suivantes : L'invention concerne également toute composition pharmaceutique comprenant un composé susmentionné de formule (I) en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. Avantageusement, les compositions pharmaceutiques de l'invention sont caractérisées en ce qu'elles se présentent sous une forme administrable par voie intrapéritonéale, notamment à raison d'environ 5 mg/kg/j our. L'invention a également pour objet l'utilisation de composés susmentionnés de formule (I), pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de cancers tels que les cancers du foie, du colon, du sein, des mélanomes, en induisant l'entrée en apoptose des cellules cancéreuses. L'invention concerne également un procédé de préparation d'un composé susmentionné de formule (I), caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : - réaction du composé de formule (1) suivante dans laquelle R1, R2, et R3 sont tels que définisci-dessus, avec du bromoacétate de méthyle bru orme I in ce qui conduit à l'obtention des aza-p3 -amino esters de formule (2) suivante dans laquelle R1, R2, et R3 sont tels que définis ci-dessus, - traitement du composé de formule (2) obtenu à l'étape précédente avec NaBH4 et LiCI, ce qui conduit à l'obtention des aza-p3-amino alcools de formule (3) suivante dans laquelle R1, R2, et R3 sont tels que définis ci-dessus, - traitement du composé de formule (3) obtenu à l'étape précédente par de la triéthylamine, du DMSO, et l'oxydant pyridine sulfure trioxyde, ce qui conduit à l'obtention des aza-p3 -amino aldéhydes de formule (4) suivante dans laquelle R1, R2, et R3 sont tels que définis ci-dessus, - réaction du composé'de formule (4) obtenu à l'étape précédente avec le composé de formule (Ibis) suivante dans laquelle R4, R5, et R6 sont tels que définis ci-dessus, ce qui conduit à l'obtention de composés de formule (5) suivante dans laquelle R1, R2, R3 R4, R5, et R6 sont tels que définis ci-dessus, - le cas échéant, traitement du composé de formule (5) obtenu à l'étape précédente avec de l'acide trifluoroacétique, ce qui conduit à l'obtention de composés de formule (6) suivante dans laquelle R3 R4, Rs, et R6 sont tels que définis ci-dessus, - le cas échéant, réaction du composé de formule (6) obtenu à l'étape précédente avec un composé de formule X-CH2-CO-X dans laquelle X représente un atome d'halogène tel que Cl ou Br, ce qui conduit à l'obtention de composés de formule (7) suivante dans laquelle X, R3 R4, R5, et R6 sont tels que définis ci-dessus. L'invention a également pour objet les composés intermédiaires de synthèse répondant aux formules (2), (3), et (4) susmentionnées, et leur utilisation dans le cadre de la mise en oeuvre dans le procédé de préparation décrit ci-dessus. L'invention sera davantage illustrée dans la description détaillée qui suit la synthèse de composés de l'invention, et l'étude de leurs propriétés biologiques. L'ALLN (inhibiteur des cystéines protéases et du protéasome) possède un aminoaldéhyde C terminal comme groupement électrophile. D'autres inhibiteurs d'activités comparables ont été développés tel que le dipeptide Z-Leu-Norleu-H également représenté sur le schéma ci-dessous. Ac-Leu Leu Norleu-H Z-Leu Norleu-H ALLN Ki= 0,19pM IG= 0, 07M L'ALLN (le N-acétyl-Leucyl-Leucyl-Norleucinal) inhibe la progression du cycle cellulaire en affectant la transition Gl/S et la transition métaphase - anaphase au moment de la mitose. De fortes concentrations d'ALLN (> 50 ug/ml) produisent un arrêt prolongé en mitose tandis que des concentrations plus faibles ont pour conséquence un ralentissement de la mitose. Les cellules peuvent ensuite engager un second cycle. Toutefois, il est bien connu que les amino aldéhydes sont peu stables et se racémisent très rapidement, ce qui entraîne une modification ou perte d'activité. D'où l'idée de synthétiser des analogues ne possédant aucun centre d'asymétrie de configuration fixée afin d'obtenir une activité maximum vis à vis de l'inhibition spécifique de la dégradation des protéines kinases impliquées dans le cycle. L'invention fait converger le développement d'une nouvelle série de pseudopeptides, des hydrazinopeptoïdes réduits de formule générale I, et l'analyse de leur mode d'action sur des cibles biologiques (inhibition de l'activité protéolytique du protéasome in vitro) ainsi que des disfonctionnements de la division cellulaire observée dans certaines pathologies cancéreuses ou neurodégénératives. Le cycle cellulaire est divisé en deux périodes distinctes : (réplication de l'ADN) et la mitose. Les transitions entre les phases du cycle cellulaire des eucaryotes, et la progression au sein de chacune de ces phases sont très fortement contrôlées au niveau moléculaire. Les mécanismes qui contrôlent l'entrée et la sortie de mitose et donc la ségrégation chromosomique sont très mal connus. Un défaut dans une des étapes de ces processus peut conduire à des altérations du caryotype telle que la perte ou le gain d'un chromosome et/ou un changement de ploïdie qui sont fréquemment observés dans les tumeurs. D'une manière générale, les phases sont contrôlées par des complexes protéiques composés d'une sous unité catalytique, une protéine kinase de type cdk (cyclin dépendent kinase) et d'une sous unité régulatrice qui est une cycline. L'interdépendance entre les phases S et M nécessite différents niveaux de régulation. Le système ubiquitine/protéasome qui représente un des mécanismes de dégradation des protéines, intervient dans certains processus cellulaires, tels que la réponse immunitaire des lymphocytes infestés par un virus. Il est également impliqué dans la dégradation de protéines associées au bon déroulement du cycle cellulaire. Le disfonctionnement des processus de dégradation est corrélé à un certain nombre de pathologies telles des pathologies neuro-dégénératives ou cancéreuses. L'inactivation du protéasome par des inhibiteurs spécifiques permettra de comprendre la mécanistique du disfonctionnement de la dégradation des protéines et ainsi d'envisager de nouvelles classes de molécules antitumorales. Le système ubiquitine /protéasome est responsable de la dégradation d'une grande majorité de protéines cellulaires incluant non seulement les protéines régulatrices à courte durée de vie (cyclines, les inhibiteurs de cyclines, certaines protéines kinases) mais également, les protéines incorrectement structurées et/ou de demi-vie longue. Dans les cellules cancéreuses, l'ubiquitination est parfois considérablement augmentée ce qui favorise et amplifie la reconnaissance de celles ci par le protéasome par voie de conséquence, cette modification post-traductionelle accroît le turnover des protéines régulatrices du cycle et contribue ainsi a une dérégulation du cycle cellulaire et l'apparition de mitoses anormales. D'autre part, le protéasome est impliqué dans la dégradation de protéines proapoptotiques, dans les conditions normales de croissance, ces protéines sont dégradées et synthétisées à chaque cycle. Un grand nombre de pathologies neuro-dégénératives et/ou cancéreuses, associées à ces disfonctionnements ont été largement documentées depuis ces dernières années. Par exemple, le fonction onco-suppressive de p53 (protéine impliquée dans la réparation de l'ADN) est altérée dans certains cancers tels que les cancers du col de l'utérus et du colon. Dans une cellule normale, les inhibiteurs du protéasome sont relativement peu actifs. Contrairement les inhibiteurs du protéasome sont plus actifs sur les cellules tumorales induisant la production de protéines apoptotiques et par voie de conséquence l'entrée des cellules tumorales en apoptose. Dans les synthèses réalisées dans le cadre de la présente invention, c'est l'inhibition du protéasome que nous avons ciblé afin de produire des molécules antimitotiques et à plus long terme envisager des nouvelles classes de molécules à visée thérapeutique. Méthodologie de synthèses des hydrazinopeptoïdes réduits : L'invention porte sur la synthèse d'hydrazinopeptoïdes réduits. Les chaînes latérales des monomères, mimant les aminoacides, sont portées par des atomes d'azote qui sont isoélectroniques des CHa ce qui leur conférerait une grande liberté conformationnelle. De plus, ces monomères ne possèdent aucun centre d'asymétrie de configuration fixée. Le positionnement correct de la chaîne peptidique dans un site enzymatique se produirait à la fois par le déplacement d'équilibres conformationnel et configurationnel. On pourrait envisager que l'action d'un tel composé, d'un point de vue stéréochimique, soit équivalente à celle d'un mélange de diastéréoisomères en équilibre rapide, l'interaction avec le site enzymatique déplaçant l'équilibre vers le composé le plus affine. D'autres bénéfices potentiels peuvent également en résulter tels qu'une simplification des méthodes de synthèse (suppression des problèmes stéréochimiques) et une plus grande résistance de tels analogues aux squelettes modifiés vis-à-vis de l'action des peptidases. La méthode de la présente invention permet d'introduire une grande variété des chaînes latérales, protéogéniques ou non protéogéniques, dans des positions choisies. Ceci permet d'une part de mimer la plupart des aminoacides naturels et non naturels et d'autre part d'introduire sur le squelette pseudopeptidique des chaînes latérales susceptibles de moduler ses caractéristiques biophysiques. L'introduction de groupements favorisant le passage de ces analogues à travers les membranes cellulaires (chaînes lipophiles) ou augmentant leur solubilité dans le milieu plasmatique (groupements perfluorés par exemple) permet de moduler, voire, d'optimiser la biodisponibilité de ces composés. Deux voies de synthèse de monomères aza- p3 -amino acides ont été mises au point, selon la nature des chaînes latérales que l'on désire mimer : - Soit par bromoacétylation d'hydrazines N,N'-disubstituées, la déprotection du monomère orthogonalement protégé conduisant à l'aza p3 amino acide désiré avec des rendements de l'ordre de 60-80 %. H Ri O R= tBu Ri 0 P,N.N.R1 BrCH2CO2R GPNNOR CI ou 2H Go nul K2CO3 R= Bz 60-95% H2 Pd/C H N"haa 50-90% 17- R: H CH3 CH(CH3)2 CH2CH(CH3)2 CHzPh (CH2)4NHBoc NahGly NahAla NahVal NahLeu NahPhe NahLys - Soit par amination réductrice de l'acide glyoxylique. GpAr*1 CHO-CO2H GjX0H H NaBH3CN, EtOH, 2N HCI H 60-85% N'haa r1: CH2C02tBu (CH2)2SMe CH2(C6H4)OCH2OC2H5 (CH2)3NHC=(NBoc)NHBoc NahAsp NahMet NahTyr NahArg De la même manière qu'il est aujourd'hui possible de préparer des a-amino aldéhydes à partir du pool des a-amino acides, il nous a été possible à partir des aza ss3amino acides d'obtenir des dérivés alcools et aldéhydiques avec de bons rendements. Les monomères préparés dans le cadre de la présente invention, ainsi que le pool d'hydrazines diversement substituées que nous possédons, constituent un point de départ pour la construction de nouveaux fragments pseudodipeptidiques. Il a ainsi été possible de synthétiser selon le schéma réactionnel suivant des hydrazinopeptoïdes réduits orthogonalement protégés. Après déprotection des extrémités C ou N-terminales, il' a été possible : - soit de fonctionnaliser l'une ou l'autre des extrémités afin d'obtenir des analogues dipeptidiques tels que D, E et F. - soit de coupler une nouvelle unité aza ss3 amino acide sur une des extrémités et fonctionnaliser l'autre extrémité afin d'obtenir des analogues tripeptidiques tel que G ou H. 1 Méthodologie de synthèse I) Monomères aza-p3 -amino acides 1 - Synthèse d'aza-(33-amino esters N-protégés 2 A une solution d'hydrazine 1 (lOmmol, léq) dans 50ml de toluène, 3 équivalents de bromoacétate de méthyle (30mmol) et 1. 5 équivalents de K2C03 (15mmol) sont ajoutés. Le mélange est porté au reflux pendant 18 heures. Le KBr formé est filtré sur papier. Le toluène et bromoacétate de méthyle en excès sont coévaporés avec du chloroforme sous pression réduite. L'aza-p3 -amino méthyl ester 2, obtenu sous forme d'huile jaune, est suffisamment pur pour être utilisé dans les réactions ultérieures. 2a R1 = Boc, R2 = H, R3 =CH2CH(CH3)2 Rdt: 98%; Huile jaune RMN1H (CDC13) 0 (ppm): 0.95 (d, 6H, J=6.6Hz) ; 1.45 (s, 9H) ; 1.72 (m, 1H) ; 2.64 (d, 2H, J=7.5Hz) ; 3. 70 (s, 2H) ; (s, 3H) ; 6. 54 (si, 1H) RMN 13C (CDCl3) #(ppm): 20. 8 (q) ; 26. 8 (d) ; 28. 5 (q) ; 51. 7 (q) ; 58. 1 (t) ; 65. 2 (t) ; 79. 9 (s) ; 155. 4 (s) ; 171. 6 (s) Analyse élémentaire de C12H24N24 Tr. C (55.13), H (9.34), N (10.80), Calc. C (55.36), H (9. 29), N (10.76). 2b R1 = Z, R2 = H, R3 =CH2CH(CH3)2, Rdt : 96% ; Huile jaune RMN1!! (CDCl3) (ppm): 0.97 (d, 6H, J=6.4Hz) ; 1.66 (m, 1H) ; 2.58 (d, 2H, J=7.0Hz) ; 3. 74 (m, 2H+3H) ; 5. 15 (s, 2H) ; 6.76(si, 1 H) ; 7. 27 (s, 5H) RMN13C (CDCl3) # (ppm): 20. 9 (q) ; 26. 9 (d) ; 52. 0 (q) ; 58. 2 (t) ; 65. 3 (t) 67. 3 (t) ; 128. 6 (d) ; 128.8 (d) ; 128. 9 (d) ; 136. 6 (s) ; 156. 0 (s) ;171.6 (s) Analyse élémentaire de C1gH22N24: Tr. C (61.13), H (7.43), N (9.68), Cale. C (61.21), H (7. 53), N (9.52). 2c R1 = Boc, R2 = H, R3 = CH2Ph Rdt : 94% ; Huile jaune RMN1H (CDCI3) 5 (ppm): 1.64 (s, 9H) ; 3.93 (s, 2H) ; 3.98 (s, 3H) ; 4.36 (s, 2H) ; 7.53-7.63 (m, 5H) ; 6. 95 (si, 1H). Analyse élémentaire de C15H22N24. Tr. C (61.18), H (7.50), N (9.58), Cale. C (61.21), H (7. 53), N (9.52). 2d R1 = Boc, R2 = H, R3 = CH3 Rdt : 90% ; mp : 87 C RMN1 H (CDCI3, 8ppm) : 1.3 (s, 9H); 2.75 (s, 3H); 3.7 (s, 2H); 3.8 (s, 3H); 6.6 (s, 1H). Analyse élémentaire de C9HlgN204. Tr. C (49.48), H (8.23), N (12.79), Cale. C (49.53), H (8.31), N (12.84). 2e RI = Z, R2 = H, R3 = CH3 Rdt : 95% , Huile RMN1H (CDCI3, 5ppm) : 2.7 (s, 3H); 3.7 (s, 2H); 3.72 (s, 3H); 5.1 (s,2H); 6.9 (s large, 1H); . 7.4 (m, 5H). Analyse élémentaire de C12H16N24 Tr. C (57.08), H (6.28), N (11'. 15), Cale. C (57.13), H (6.39), N (11.10). 2-Synthèse d'aza-P -amino alcool 3 A une solution d'aza-p3-amino méthylester 2 (lOmmol, léq) dans 50ml d'éthanol et de tétrahydrofurane (65/35) sont ajoutés 1. 5 équivalents (15mmol) de NaBH4 et 1. 5 équivalents de LiCl (15mmol). Ce mélange est laissé sous agitation à température ambiante pendant une nuit. Le milieu réactionnel est acidifié par HCl 2N puis extrait par deux fois 50ml de dichlorométhane. La phase organique est lavée successivement 2 fois par 50ml d'eau, 50 ml de NaHC03 2N et 50ml d'une solution saturée en NaCl. La phase organique est séchée sur sulfate de sodium, puis évaporée sous pression réduite pour conduire à l'aza-(33-amino alcool 3 qui cristallise lentement. 3a Ri = Boc, R2 = H, R3 =CH2CH(CH3h Rdt:76%;Pf:83 C RMN IH (CDCl3) S (ppm) 1.11 (d, 6H, J=6.5Hz) ; (s, 9H) ; 1.93(m, 1H) ; 2. 28 (d, 2H, J=7Hz) ; 2. 90 (t, 2H, J=4.5Hz) ; 3. 73 (t, 2H, J=4.0Hz) ; 4. 13 (s, 1H) ; 5. 62 (s, 1H) RMN13C (CDCl3) 8 (ppm) 20. 9 (q) ; 26. 8 (d) ; 28. 6 (q) ; 58. 9 (t) ; 61. 0 (t) ; 67. 3 (t) ; 80. 6 (s) ; 156. 9 (s) Analyse élémentaire de C11H24N203: Tr. C (56.77), H (10.32), N (12.21), Cale. C (56.87), H (10.41), N (12.06). 3b Ri = Z, R2 = H, R3 =CH2CH(CH3)2, Rdt : 83%; Huile jaune RMN IH (CDCl3) # (ppm): 1. 13 (d, 6H, J=6.5Hz) ; 1. 95 (m, 1H) ; (d, 2H, J=7.0Hz) ; 2. 93 (large, 2H) ; (t, 2H, J=4.7Hz) ; 4. 21 (s, 1H) ; (s, 2H) ; (s, 1H) ; 7. 52 (s, 5H) RMN13C (CDCl3) 8 (ppm) : 20. 9 (q) ; 26. 7 (d) ; 58. 9 (t) ; 60. 9 (t) ;67.1 (t) ; 67. 5 (t) ; 128. 5 (d) ; 128. 7 (d) ; 128. 8 (d) ; 128. 9 (d) ; 136. 5 (s) ; 157. 6 (s) Analyse élémentaire de C14H22N203. Tr. C (63. 02), H (8. 22), N (10.33), Calc. C (63. 13), H (8.33), N (10.52). 3c R1 = Boc, R2 = H, R3 = CH3 Rdt : 70% ; huile RMN1H (CDCl3, #ppm): 1. 3 (s, 9H, Boc); 2. 55 (s, 3H, CH3); 2. 6 (t, 2H, CH2); 3. 5 (t, 2H, CH2); 4 (s large, 1H, OH); 5. 9 (s, 1H, NH). Analyse élémentaire de C8H18N2O3:Tr. C (50. 42), H (9.45), N (14.63), Calc. C (50.51), H (9. 54), N (14.73). 3d Ri = Z, R2 = H, R3 = CH3 Rdt : 80% ; huile RMN1H (CDC13, #ppm): 2. 7 (s, 3H, CH3); 2. 8 (t, 2H, CH2); 3. 4 (s large, 1H, OH); 3. 6 (t, 2H, CH2); 5.1(s,2H, CH2); 6. 2 (s large, 1H, NH); 7.4 (m, 5H, Ph). Analyse élémentaire de C11H16N2O3 Tr. C (58. 85), H (7. 22), N (12.33), Cale. C (58.91), H (7.19), N (12.49). Masse C11H16N2O3: [M+Na]+ m/z théorique : 247.1059 ; m/z trouvé : 247. 1060 3 - Synthèse d'un aza-p3-amino aldéhyde 4 A une solution d'azap3-amino alcool 3 (lOmmol, léq) dans 30ml de dichlorométhane sont ajoutés 3 équivalents de triéthylamine (30mmol), 3 équivalents de DMSO (30mmol), suivis de 3 équivalents de l'oxydant pyridine sulfure trioxyde (30mmol) à une température de 15 C. On place ce mélange sous agitation à température ambiante pendant 4 heures, la phase organique est ensuite lavée deux fois successivement par 30ml d'eau puis 30ml de NaHC03 2N, et enfin 30ml d'une solution saturée en NaCl. Après séchage sur sulfate de sodium, le solvant organique est évaporé sous pression réduite, on obtient une huile marron qui correspond à l'aza-(33-amino aldéhyde 4. 4a R1 = Boc, R2 = H, R3 =CH2CH(CH3)2 Rdt: 71%, Huile RMN1H (CDCl3) 5 (ppm): 0. 97 (d, 6H, J=6.6Hz) ; (s, 9H) ; 1. 74 (m, 1H) ; 2. 57 (d, 2H, J=7Hz) ; 3.65 (si, 2H) ;6.10 (si, 1H) ; 9. 77 (t, 1H, J=1. 2Hz) RMN 13C (CDCI3) 5 (ppm) : 20.5 (q) ; 26.5 (d) ; 28.3 (q) ; 65.4 (t) ; 67.2 (t) ; 81.5 (s) ; 154.9 (s) ; 201.5 (d). C11H22N2O3, 230. 30 4b R1 = Z, R2 = H, R3 =CH2CH(CH3)2, Rdt :75% RMN'H (CDCl3, # ppm) : 0. 9 (d, 6H); 1. 8 (m, 1H); 2. 55 (d, 2H); 3. 7 (s, 2H); 5. 2 (s, 2H); 6. 9 (s, 1H); 7. 3 (m, 5H); 9. 75 (s, 1H). C14H2oN203, 4c Ri = Boc, R2 = H, R3 = CH3 Rdt : 75% RMN'H (CDCl3, 8 ppm) : 1. 3 (s, 9H); 2. 55 (s, 3H); 3. 6 (d, 2H); 6. 2 (s, 1H); 9. 75 (s, 1H). C8H16N2O3, 188.22 4d Ri = Z, R2 = H, R3 = CH3 Rdt : 80% RMN'H (CDCl3, # ppm) : 2. 8 (s, 3H); 3. 65 (s, 2H); 5. 1 (s, 2H); 6. 8 (s large, 1H); 7. 4 (m, 5H); 9. 75 (s, 1H). C11H14N203> 222.24 II) Dimères réduits orthogonalement protégés A une solution d'aza-33-amino aldéhyde 4 (lOmmol, léq) dans l'éther (10ml) est ajoutée l'hydrazine lbis (12mmol, 1. 2 équivalents), puis le pH est ajusté à 4 par addition de HC1 2N. Après 1 heure d'agitation à température ambiante, l'éther est évaporé et le milieu est dissout dans 10ml d'éthanol. Le cyanoborohydure de sodium (12mmol, 1. 2 équivalents) est additionné par petites fractions et le mélange est laissé sous agitation pendant 2 heures. Le complexe borylé est hydrolysé à pH 1 par ajout de HC1 2N, puis le pH est réajusté à 7 par addition de NaHC03 2N. 10mL de chloroforme sont ajoutés au milieu et la phase organique est lavée successivement par 2 fois 20ml de HC1 2N, puis 20ml d'eau saturé en NaCl. La phase organique est séchée sur sulfate de sodium et les solvants sont évaporés sous pression réduite. On obtient le dimère 5 sous forme d'huile ou de solide lavé deux fois par 20ml d'éther. Sa RI = Boc, R2 = H, R3 = CH2CH(CH3)2, R4 = CH2CH(CH3)2, R5 = H, Rg = Z Rdt : 80% ; Huile RMN 1H (CDC13) 8 (ppm) 0. 82 (d, 2x6H, J=6.8Hz) ; 1. 34 (s, 9H) ; 1. 64 (m, 2xlH) ; 2. 28 (d, 2H, J=6.3Hz) ; 2. 38 (d, 2H, J=6.3Hz) ; 2. 76 (m, 2x2H) ; 5. 02 (s, 2H) ; 5.89(si, 1H) ; 6. 83 (si, 1H) ; 7. 23 (s, 5H) RMN13C (CDCI3) o(ppm) 21. 2 (q) ; 26. 5 (d) ; 28. 8 (q) ; 55. 4 (t) ; 56. 3 (t) ; 65. 3 (t) ; 66. 7 (t) ; 79. 9 (s) ; 127. 1 (d) ; 127. 5 (d) ; 127. 7 (d) ; 139.9 (s) ; 156.2 (s) ; 157.7 (s) Analyse élémentaire de C23H4oN404: Tr. C (63. 21), H (9. 23), N (12.83), Cale. C (63. 41), H (9.25), N (12.40). Masse C23H40N4O: [M+Na]+ m/z théorique : 459.2947 ; m/z trouvé : 459. 2942 5b RI = Boc, R2 = H, R3 = CH2CH(CH3)2, R4 = H, Rs = CH2CH(CH3)2, Rô = Z Rdt : 80% ; Huile RMN IH (CDCl3) # (ppm) 0. 77-087 (d, 2x6H, J=6.7Hz) ; 1. 36 (s, 9H) ; (m, 1H) ; 1. 95 (m, 1H) ; 2. 19-2.58 (large, 2x2H) ; 2. 85 (m, 2H) ; 3. 14 (t, 2H, J=6.9Hz) ; 3. 89 (si, 1H) ; 5. 0 (s, 2H) ; 6. 43 (si, 1H) ; 7. 27 (s, 5H) RMN 13C (CDCl3) # (ppm) 20. 3 (q) ; 21. 1 (q) ; 26. 8 (d) ; 27. 3 (d) ; 28. 8 (q) ; 47. 6 (t) ; 58. 2 (t) ; 65. 4 (t) ; 67. 8 (t) ; 80. 2 (s) ; 128. 3 (d) ; 128. 5 (d) ; 128. 9 (d) ; 136. 9 (s) ; 155. 4 (s) ; 157. 4 (s) Analyse élémentaire de C23H4oN404: Tr. C (63. 13), H (9. 44), N (12.80), Calc. C (63. 41), H (9. 25), N (12.40). Masse de C23H40N4O4 [M+H]+ m/z théorique : 437.3128 ; m/z trouvé : 437.3119 5c RI = Z, R2 = H, R3 = CH2Ph, R4 = CH2CH(CH3)2, R5 = H, R6 = Boc Rdt : 80% RMN1H (CDCl3, 8 ppm) : 0. 9 (d, 6H, 2xCH3); 1. 4 (s, 9H, Boc); 1. 75 (m, 1H, CH); 2. 35 (d, 2H, CH2); 2. 95 (m, 4H, 2xCH2); 4. 1 (s, 2H, CH2); 5. 2 (s, 2H, CH2); 5. 75 (s, 1H, NH); 6. 9 (s, 1H, NH); 7. 3 (m, 10H, 2xPh). RMN13C (CDC13, 8 ppm) : 21. 1 (q), 26. 7 (d), 28. 5 (q), 56. 1 (t), 56. 6 (t), 58. 9 (t), 67. 2 (t), 80.6 (s), 128. 4 (d), 128. 7 (d), 128. 9 (d), 129. 1 (d), 129.7 (d), 135. 8 (d), 137. 1 (d), 159. 9 (s), 161.2 (s). Masse de C26H38N404: [M+Na]+ m/z théorique : 493.2791 ; m/z trouvé : 493. 2787 5d R1 = Boc, R2 H, R3 = CH2CH(CH3)2, Rt = CH3, R5 = H, R6 = Z Rdt : 84% RMN'H i(CDCl3, # ppm) : 0. 8 (d, 6H, 2xCH3); 1. 35 (s, 9H, Boc); 1. 65 (m, 1H, CH); 2. 25 (m, 2H, CH2); 2. 45 (s, 3H, CH3); 2. 6 (m, 4H, 2xCH2); 5. 1 (s, 2H, CH2); 6. 75 (s, 1H, NH); 7. 4 (m, 5H, Ph). RMN13C (CDC13, 8 ppm) : 20. 5 (q), 21. 0 (q), 26. 4 (d), 28. 5 (q), 47. 6 (q), 55. 3 (t), 56. 9 (t), 62. 1 (t), 66. 2 (t), 82. 1 (s), 128. 4 (d), 128. 7 (d), 128. 9 (d), 136. 8 (d), 158. 3 (s), 161. 2 (s). Masse de C21H36N4O4: [M+Na]+ m/z théorique :; m/z trouvé : 5e R1 = Boc, R2 = H, R3 = CH2Ph, R4 = CH2CH(CH3)2, R5 = H, R6 = Z Rdt : 40% RMN1H (CDC13, # ppm) : 0. 9 (d, 6H, 2xCH3); 1. 4 (s, 9H, Boc); 1. 8 (m, 1H, CH); 2.35(d, 2H, CH2); 2. 95 (m, 4H, 2xCH2); 4. 1 (s, 2H, CH2); 5. 1 (s, 2H, CH2); 6. 4 (s, 1H, NH); 6. 9 (s, 1H, NH); 7.3 (m, lOH, 2xPh). RMN13C (CDC13, 8 ppm) : 21. 2 (q), 26. 6 (d), 28. 6 (q), 56. 2 (t), 56. 7 (t), 58. 9 (t), 67. 2 (t), 80.9 (s), 128. 4 (d), 128. 7 (d), 128. 9 (d), 129. 4 (d), 129. 7 (d), 135. 8 (d), 137. 1 (d), 159. 7 (s), 161.3 (s). Masse de C26H38N404: [M+Na]+ m/z théorique : 493.2791 ; m/z trouvé : 493. 2786 III) Déprotection des hydrazino azapeptoïdes réduits L'hydrazino azapeptoïde réduit 5 (lOmmol, léq) est solubilisé dans un mélange 50/50 (15ml) de dichlorométhane et d'acide trifluoroacétique. Le milieu est laissé sous agitation pendant 3 heures. Le solvant est évaporé et le résidu est solubilisé dans 10ml d'eau. La phase aqueuse est lavée par deux fois 15ml d'éther. Le pH est ensuite ramené à 7 à l'aide de NaHC03 2N et la phase organique est lavée par 2 fois 50ml d'eau. Après séchage sur sulfate de sodium la phase organique est évaporée sous pression réduite. Le produit 6 est obtenu sous la forme d'une huile. 6 NH2-N-/Bu-(CH2)2-N-azaLeu-OBz R3 = CH2CH(CH3)2, R4 = CH2CH(CH3)2, R5 = H, R6 = Z Rdt : 74%, Huile RMN IH (CDCl3) (ppm) 1.15 (d, 2x6H, J=6.6Hz) ; 2. 01 (m, 2H) ; (d, 2H, J=6.8Hz) ; (large, 2H) ; (t, 2H, J=4.3Hz) ; 3. 14 (large, 2H) ; (large, 2H) ; (s, 2H) ; 6. 48 (si, 1H) ; 7. 56 (m, 5H) RMN 13C (CDCl3) # (ppm) 21. 1 (q) ; 26. 2 (d) ; 26. 6 (d) ; 56. 1 (t) ; 58. 3 (t) ; 66. 9 (t) ; 70. 9 (t) ; 128. 4 (d) ; 128. 8 (d) ; 128. 9 (d); 136. 9 (s) ; 156. 9 (s) C18H32N4O2, 336.47 IV)- Refonctionalisation de l'hydrazino azapeptoïde réduit La solution d'hdyrazino N-azapeptoïde 6 déprotégé à l'extrémité N-terminale (2mmol, léq) dans le dichlorométhane distillé (10ml) est refroidie à 0 C dans un bain de glace et de sel. On ajoute la triéthylamine distillée (2. 2mmol, l.léq) et le bromure de bromoacétyle (2.2mmol, l.léq) dans le dichlorométhane (10ml) est additionné goutte à goutte en une heure. Le mélange est ensuite laissé sous agitation à température ambiante pendant 5 heures, puis lavé 3 fois par 20ml d'eau. La phase organique est séchée sur sulfate de sodium et le solvant est évaporé sous pression réduite. L'analogue réduit 7 est obtenu sous la forme d'un solide qui précipite lentement à froid dans l'éther et est recristallisé dans l'éther. 7BrCH2CO-NHN*Bu-(CH2)2-N-aza-Leu-OBz R3 = CH2CH(CH3)2, R4 = CH2CH(CH3)2, R5 = H, R6 = Z m.p. , Rdt : 55%, RMN 1 H (CDCI3) 8 (ppm) 0. 96 (d, 2x6H, J=6.6Hz) ; 1. 78 (m, 2x1 H) ; 2. 47 (d, 2H, J=7Hz) ; 2. 56 (d, 2H J=7Hz) ; 2. 91 (large, 2H) ; 2. 97 (large, 2H) ; 3.79 (s, 2H) ; (s, 2H) ; 5. 90 (si, 1H); 7. 03 (si, 1H) ; 7.38 (m, 5H) RMNI3C (CDCI3) 5 (ppm) 18. 7 (q) ; 19. 6 (q) ; 28. 5 (d) ; 29. 5 (d) ; 55. 5 (t) ; 61. 75 (t) ; 62. 27 (t) ; 66. 44 (t) ; 127. 6 (d) ; 128. 4 (d) ; 128. 6 (d) ; 136. 8 (s) ; 159. 0 (s) ; 175. 7 (s) Analyse élémentaire de C2oH33N403Br: Tr. C (52. 52), H (7. 27), N (12.25); Cale. C (52.48), H (7.27), N (12.32). II Activité Biologique des composés réduits Dans les cellules eucaryotes la grande majorité des protéines impliquées dans la régulation du cycle cellulaire est dégradée par le protéasome Cette voie de dégradation est très précisément régulée et est très sélective à la fois dans le choix des protéines à dégrader et dans le choix du moment de la phase du cycle cellulaire où la protéine sera dégradée. Le système ubiquitine-protéasome joue également un rôle très important dans le contrôle de la division cellulaire Une activité trop importante du protéasome peut donc être à l'origine de la présence d'un taux anormalement bas de protéines impliquées dans la limitation de la prolifération cellulaire comme les suppresseurs de tumeur. De même, une activité réduite du protéasome peut être à l'origine de la présence d'une quantité anormalement élevée de protéines impliquées dans la stimulation de la prolifération cellulaire comme les oncogènes. Le protéasome joue également un rôle très important dans l'entrée en apoptose des cellules. Certains inhibiteurs du protéasome peuvent provoquer une inhibition de l'apoptose et d'autres une activation de l'apoptose. Une hypothèse actuelle est que certaines protéines contrôlant l'entrée en apoptose sont continuellement synthétisées mais continuellement dégradées par le protéasome. Ce serait une des raisons pour laquelle une inhibition du protéasome aurait pour conséquence directe une induction de l'apoptose. Les inhibiteurs du protéasome ont donc un très sérieux potentiel anticancéreux et les nombreuses études cliniques actuellement en cours pour évaluer leur rôle comme adjuvant dans des protocoles de chimiothérapie témoignent de cette importance. Effet antiprolifératif des composés sur des lignées cancéreuses Les inventeurs ont étudié l'effet des pseudopeptides comparativement sur des lignées cellulaires normales et tumorales ceci afin de déterminer la spécificité cellulaire d'action des composés. Ils ont analysé la croissance cellulaire ainsi que la viabilité des cellules sous l'effet du pseudo peptide réduit 7 sur les lignées suivantes. Skov3 : cancer de l'ovaire (humain) OvCar3 : cancer de l'ovaire (humain) L1210 : Leucémie de souris Action antiproliférative des pseudodipeptides sur les différentes lignées tumorales La cytotoxicité des pseudopeptides est évaluée par la capacité des cellules viables à réduire le bromure de 3- (4,5-diméthylthiazol-2-yl)-2,5-diphényltétrazolium MTT, produit jaune soluble dans l'eau) en cristaux de formazan, produit insoluble dans l'eau, mais soluble dans le DMSO (de couleur violette) via les déshydrogénases mitochondriales. La quantité de cellules viables est donc proportionnelle à la quantité de cristaux formés. Un grand nombre d'inhibiteurs du protéasome se sont révélés avoir une action antiproliférative sur des lignées cancéreuses. L'action antiproliférative des composés a donc été regardée sur plusieurs lignées cancéreuses. Skov3 OvCar3 L 1210 7 5,551,29 1,970,15 3,21,0 Testé sur les différentes lignées citées, le composé 7 s'est avéré être un très bon composé antiprolifératif pour les 3 lignées tumorales. REVENDICATIONS 1. Composés de formule générale (I) suivante : dans laquelle : # Y représente CH2, ou CO, # n représente un nombre entier de 1 à 10, notamment n représente 1 ou 2, sous réserve que lorsque n représente 1, Y représente CH2, et que lorsque n est supérieur à 1, l'un au moins des groupes Y dans la formule (I) représente CH2, # R1 et R6, indépendamment l'un de l'autre, représentent : o un atome d'hydrogène, o un groupe utilisable dans le cadre de la protection des atomes d'azote en synthèse peptidique, tel que le groupe BOC, FMOC ou Z, o un groupe de formule-COR, ou-CH2COR dans laquelle R représente : # un atome d'hydrogène, sous réserve que lorsque R1 est un hydrogène, celui-ci se présente le cas échéant sous forme d'un sel soluble dans les solvants aqueux, tel qu'un sel de trifluoroacétate, # un groupe alkyle de 1 à 10 atomes de carbone, le cas échéant substitué par un ou plusieurs atomes d'halogène, tels que les groupes R représentant -CF3 ou un groupe -CH2X, X représentant un atome d'halogène tel que Cl ou Br, > un groupe -COORa dans lequel Ra représente H ou un groupe alkyle, tel qu'un groupe méthyle ou éthyle, > un groupe amine primaire-NH2 ou une amine IIre ou IIIre, > un groupe alkoxy, tel qu'un groupe méthoxy -OMe, ou éthoxy -OEt, > un groupe phényle, un groupe pyridinium, tel que le groupe de formule Br- ' R2, R3, R4 et R5, indépendamment les uns des autres, représentant : o un atome d'hydrogène, o un groupe alkyle de 1 à 10 atomes de carbone, le cas échéant substitué, notamment par un ou plusieurs atomes d'halogène ou par un ou plusieurs groupes amine ou phényle, tels que les groupes méthyle, butyle, isobutyle, -(CH2)4NH2, -CH2Ph, - (CH2)4NHBoc, # ou R1 en association avec R2, ou R6 en association avec R5, représentent un groupe de formule 2. Composés selon la revendication 1, de formule générale (I) dans laquelle : # Ri représente un groupe protecteur BOC, ou Z, ou un groupe -COCH2X, X représentant un atome d'halogène tel que Cl ou Br, ou R1 représente H, sous réserve que lorsque RI représente H, celui-ci se présente le cas échéant sous forme de sel, tel qu'un sel de trifluoroacétate de formule CF3C02 , H3N -, # R2 représente H ou un groupe alkyle de 1 à 10 atomes de carbone, tel qu'un groupe isobutyle, # R3 représente H ou un groupe alkyle de 1 à 10 atomes de carbone, tel qu'un groupe isobutyle, ou R3 représente un groupe benzyle, # l'un de R4 ou de R5 représente H, tandis que l'autre représente un groupe alkyle tel que défini ci-dessus, et R6 représente H ou un groupe protecteur BOC ou Z, # n représente 1 ou 2, # Y est tel que défini dans la revendication 1. 3. Composés selon la revendication 1 ou 2, de formule générale (I) dans laquelle : # Ri représente un groupe protecteur BOC, ou Z, ou un groupe -COCH2X, X représentant un atome d'halogène tel que Cl ou Br, ou R1 représente H, # R2 représente H, # R3 représente un groupe isobutyle, ou un groupe benzyle, # R4 représente H, ou un groupe méthyle ou isobutyle, # R5 représente H, ou un groupe isobutyle, # R6 représente un groupe protecteur BOC ou Z, # n représente 1, # Y représente CH2. 4. Composés selon l'une des revendications 1 à 3, de formules suivantes : 5. Composition pharmaceutique comprenant un composé selon l'une des revendications 1 à 4 en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. 6. Composition pharmaceutique selon la revendication 5, caractérisée en ce qu'elle se présente sous une forme administrable par voie intrapéritonéale, notamment à raison d'environ 5 mg/kg/jour. 7. Utilisation de composés selon l'une des revendications 1 à 4, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de cancers tels que les cancers du foie, du colon, du sein, des mélanomes, en induisant l'entrée en apoptose des cellules cancéreuses. 8. Procédé de préparation d'un composé selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : - réaction du composé de formule (1) suivante dans laquelle R1, R2, et R3 sont tels que définis dans la revendication 1, avec du bromoacétate de méthyle zone O ce qui conduit à l'obtention des aza-p3-amino esters de formule (2) suivante dans laquelle R1, R2, et R3 sont tels que définis ci-dessus, - traitement du composé de formule (2) obtenu à l'étape précédente avec NaBH4 et LiCI, ce qui conduit à l'obtention des aza-(33-amino alcools de formule (3) suivante dans laquelle R1, R2, et R3 sont tels que définis ci-dessus, - traitement du composé de formule (3) obtenu à l'étape précédente par de la triéthylamine, du DMSO, et l'oxydant pyridine sulfure trioxyde, ce qui conduit à l'obtention des aza-ss3-amino aldéhydes de formule (4) suivante dans laquelle R1, R2, et R3 sont tels que définis ci-dessus, - réaction du composé de formule (4) obtenu à l'étape précédente avec le composé de formule (lbis) suivante dans laquelle R4, R5, et R6 sont tels que définis dans la revendication 1, ce qui conduit à l'obtention de composés de formule (5) suivante dans laquelle Ri, R2, R3 R4, R5, et R6 sont tels que définis ci-dessus, - le cas échéant, traitement du composé de formule (5) obtenu à l'étape précédente avec de l'acide trifluoroacétique, ce qui conduit à l'obtention de composés de formule (6) suivante H2N --N R4 --N1--l6 R H2NN/NN/ R3 R (6) dans laquelle R3 R4, R5, et R6 sont tels que définis ci-dessus, - le cas échéant, réaction du composé de formule (6) obtenu à l'étape précédente avec un composé de formule X-CH2-CO-X dans laquelle X représente un atome d'halogène tel que Cl ou Br, ce qui conduit à l'obtention de composés de formule (7) suivante dans laquelle X, R3 R4, R5, et R6 sont tels que définis ci-dessus. 9. Composés intermédiaires de synthèse répondant aux formules (2), (3), et (4) indiquées dans la revendication 8, suivantes : dans lesquelles Ri, R2, et R3 sont tels que définis dans la revendication 1.