Brevet FR2869413A1 — publié le 20051028

La présente invention concerne un nouveau dispositif et un nouveau procédé permettant de réaliser des lames de cytologie, c'est-à-dire des préparations cellulaires effectuées à partir d'un prélèvement humain et déposées sur lames de verre porte-objet pour étude au microscope. Ce prélèvement peut-être soit liquidien, soit non liquidien mais mis en suspension dans un milieu liquide conservateur. Un examen cytologique permet de rechercher des cellules anormales, cancéreuses ou pré-cancéreuses, contenues dans des prélèvements d'origine variée: col utérin, corps utérin, expectoration, lavage bronchique et alvéolaire, aspiration bronchique, ponction d'organe à l'aiguille, urines, liquide pleural ou péritonéal. L'examen cytologique le plus fréquent est le frottis du col utérin (environ 5.000.000 de frottis/an en France). La recherche de cellules cancéreuses, pré-cancéreuses ou, éventuellement, le diagnostic d'infection est réalisé par examen au microscope de lames de verre sur lesquelles sont déposés puis colorées les éléments cellulaires prélevés. La qualité de la technique employée est essentielle pour éviter les faux-négatifs ou les faux-positifs. Pour améliorer la qualité des résultats cytologiques, de nouvelles technologies se sont développées ces dernières années, en particulier la cytologie en milieu liquide à la place du frottis classique avec étalement sur lame. - Dans les années 50, Papanicolaou avait proposé d'étaler le prélèvement cellulaire directement sur une lame de verre avant de le colorer et de l'examiner au microscope. - La cytologie en milieu liquide consiste, dans un premier temps, à mettre le prélèvement cellulaire dans un milieu liquide conservateur puis à concentrer les cellules et à les déposer sur une lame en verre porteobjet pour pouvoir effectuer un examen au microscope après coloration. Les techniques de cytologie en milieu liquide sont variées: centrifugation, sédimentation, aspiration ou filtration au travers d'un filtre de porosité variable, ... . Ces nouvelles méthodes permettant des étalements cellulaires en couche fine à partir de milieu liquide sont coûteuses et longues, ce qui, par exemple en France, empêche leur développement. Le procédé que nous proposons est simple, innovant, économique et rapide (une soixantaine d'examens/heure). Le dispositif comprend une plaque supérieure (1) contenant une ou plusieurs chambres de sédimentation (de surface et de hauteur variables) (2) reposant sur une lame de verre porte-objet (4) supportée par une plaque inférieure (3) avec, entre le rebord du pourtour inférieur de la chambre et la lame de verre, interposition d'un matériau absorbant (5) présentant la même ouverture. Le matériau absorbant (papier absorbant, buvard, matériau synthétique, éponge, tissu) est tenu entre le bord de la chambre et la lame soit par simple pression, soit par collage, soit par un adhésif double face, ce qui assure l'étanchéité du dispositif, d'une part entre la chambre et l'absorbant, d'autre part entre l'absorbant et la lame de verre. La faible épaisseur du matériau absorbant, sa compression et le colmatage partiel par quelques cellules jouent un rôle de filtre et ne laissent passer latéralement que le liquide conservateur exempt de cellules. La surface du matériau absorbant est proportionnelle à la quantité de liquide à absorber. Ce matériau absorbant peut être plié latéralement pour être engagé de façon perpendiculaire dans les 2 fentes situées de chaque coté des chambres de sédimentation. Ce système permet donc l'absorption latérale du milieu liquide conservateur (6), une sédimentation rapide des cellules et le dépôt direct sur la lame porte-objet (4) des cellules (7) contenues dans le liquide conservateur. Ce dispositif peut être soit à usage unique, soit réutilisable en ne changeant que le 20 matériau absorbant. Des racks de plusieurs chambres de sédimentation juxtaposées peuvent être réalisés pour techniquer des séries de prélèvements. Les dessins annexes illustrent l'invention: La figure 1 représente, en coupe, le dispositif de l'invention avec 2 chambres de 25 sédimentation La figure 2 représente plus précisément le dispositif de l'invention, en coupe, avec 1 chambre de sédimentation La figure 3 représente une vue d'ensemble de l'invention avec une plaque supérieure comportant 2 chambres de sédimentation juxtaposées et une plaque inférieure supportant 30 2 lames de verre. La figure 4 représente, à titre d'exemple non limitatif, un matériau absorbant replié. En référence aux dessins, le dispositif comporte une plaque supérieure (1) avec chambre de sédimentation (2), une plaque inférieure (3) avec lame de verre porte-objet (4), l'absorbant (5), le liquide conservateur (6) et les cellules déposées sur la lame (7). 10 15 20 25 30 4 REVENDICATIONS 1) Dispositif pour réaliser des examens cytologiques en milieu liquide caractérisé par le fait qu'il comprend une plaque supérieure (1) contenant une ou plusieurs chambres de sédimentation (2), une plaque inférieure (3) sur laquelle reposent une ou plusieurs lames de verre porte-objet (4), avec interposition entre le rebord du pourtour inférieur de chaque chambre de sédimentation (2) et chaque lame de verre (4) d'un matériau absorbant (5) présentant la même ouverture que la chambre. 2) Dispositif selon la revendication 1 caractérisé en ce que le matériau absorbant est mis en contact avec la partie supérieure de la lame de verre porte-objet et3 est comprimé entre les deux plaques ou adhérent, à la fois, à la plaque supérieure et à la lame de verre pour éviter toute fuite de liquide conservateur. 3) Dispositif selon la revendication 2 caractérisé par le fait que le matériau absorbant joue le rôle de filtre au niveau de sa tranche de section et d'absorbant du liquide 15 conservateur proportionnellement à sa surface 4) Dispositif selon la revendication 2 et la revendication 3 caractérisé par le fait que le matériau absorbant peut être plié latéralement pour être engagé perpendiculairement dans les deux fentes situées de chaque coté de la chambre de sédimentation 5) Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes en ce que la chambre de sédimentation et le matériau absorbant ont la même ouverture, de dimension variable en fonction de la surface du spot cellulaire à obtenir. 30