Brevet FR2871687A1 — publié le 20051223

La présente invention concerne l'utilisation d'extraits végétaux riches en alcools sesquiterpéniques, et un procédé de préparation de ces extraits, qui présentent un intérêt dans les domaines de la cosmétique, de la dermo-cosmétique ou de la pharmacie. L'invention concerne aussi une composition et l'utilisation de cette composition dans le traitement des problèmes de peau, comme les eczémas atopiques, la dermite séborrhéique, les problèmes de pellicules grasses et le psoriasis. La présente invention concerne plus particulièrement la mise au point d'extraits végétaux riches en alcools sequiterpéniques issus du bois de Cadier. Par bois de Cadier, on veut parler du Juniperus oxycedrus , qui est un arbre ou arbuste commun du pourtour Méditerranéen. Ses caractéristiques botaniques sont très précises, elles le distinguent du genévrier commun Juniperus communis également fréquent dans le bassin Méditerranéen. Le bois de cadier jouit depuis l'Antiquité d'une renommée thérapeutique essentiellement basée sur l'utilisation du goudron végétal appelé huile de Cade. Les anciens l'utilisaient déjà comme antiseptique, désinfectant, parasiticide en usage externe et même interne, notamment comme stimulant et antibronchitique. Cette huile était particulièrement appréciée pour des usages vétérinaires très variés. La demanderesse a découvert de manière surprenante et inattendue, que des nouveaux extraits du bois de cadier permettent de résoudre les nombreux problèmes de kératinisation sans avoir les inconvénients des traitements proposés actuellement. C'est le but de la présente invention qui n'avait jamais été réalisée jusqu'à ce jour. L'invention consiste notamment en la mise au point de procédés d'extraction et de séparation ou fractionnement qui n'avaient pas été appliqués à ces matières premières de façon à extraire les molécules actives vis-à-vis de problèmes rencontrés dans les affections de l'épiderme et des phanères. Nous avons effectué l'étude phytochimique de cette plante et avons recherché l'extrait présentant la meilleure activité anti-radicalaire et anti-prolifératrice sur le kératinocyte en culture. 2871687 2 Du bois de cadier sont déjà extraits plusieurs produits actifs bien connus de l'homme de l'art: goudron, huile essentielle, mais aucun selon les caractéristiques de l'invention, dont la description sera donnée par la suite. Les problèmes de la peau et plus généralement les troubles cutanés liés à une différentiation incomplète des cellules sont devenus un centre d'intérêt pour la dermocosmétique et pour la pharmacie, car ils touchent une grande partie de la population. Pour beaucoup d'entre eux, il n'existe pas de traitement cosmétique, pharmaceutique ou dermatologique permettant d'obtenir des résultats satisfaisants. Le psoriasis en particulier apparaît à tout âge, avec une évolution par poussées successives. Actuellement, en l'absence de traitement étiologique, le traitement local est indispensable et essentiel. Les traitements locaux classiques comme les dermocorticoïdes, les goudrons, l'anthraniline, les rétinoïdes, présentent un grand nombre d'inconvénients et d'effets secondaires. Par exemple, les dermocorticoïdes sont responsables de vergetures extensives, d'atrophies cutanées, de dépigmentation et d'effets iatrogènes systémiques classiques, comme l'hypercorticisme. Les goudrons sont critiqués pour leurs effets cancérigènes liés à la présence d'Hydrocarbures Aromatiques Polycyclique (HAP). Le psoriasis est une maladie difficile à traiter qui affecte environ 2 à 3 % de la population mondiale. Cette affection, sans modifier la durée de vie des patients, en altère considérablement la qualité. Les thérapeutiques disponibles à l'heure actuelle sont ciblées sur les facteurs d'amplification responsables de la prolifération et de l'inflammation psoriasique. Le psoriasis, un désordre inflammatoire cutané, est caractérisé par une hyper prolifération accentuée des kératinocytes associée à une vascularisation significativement accrue de la peau, une activation des fibroblastes, une infiltration des fibroblastes, une infiltration de leucocytes, des modifications du métabolisme des eicosanoïdes et de la production des cytokines. Sa définition repose sur des critères cliniques histologiques et évolutifs. Cliniquement, il est caractérisé par la présence de plaques érythémateuses bien limitées, recouvertes de squames épaisses blanchâtres. Le nombre et la localisation des lésions sont variables. Le plus fréquemment, le psoriasis siège sur des régions exposées aux contacts extérieurs et symétriques (coude, genou). D'un point de vue histologique, les squames présentent un aspect hyperkératosique et parakératosique (persistance anormale des noyaux dans les couches superficielles). Elles correspondent à un épaississement très important de l'épiderme avec une kératinisation anormale. Le derme est le siège d'une inflammation plus ou moins intense. De la même façon, l'eczéma atopique, la dermite séborrhéique, les problèmes de pellicules, sont des troubles cutanés, qui affectent une grande partie de la population. Ces dermatoses sont toutes liées à des troubles de la kératinisation et seront grandement améliorées par l'invention, sans avoir aucun effet secondaire négatif. I/ Caractérisation des principes actifs. La présente invention concerne plus particulièrement un extrait naturel de Bois de Cadier, cet extrait naturel est une fraction qui contient en particulier les sesquiterpènes oxygénés, en outre cet extrait est remarquablement exempt de HAP (Hydrocarbures Aromatiques Polycycliques). Parmi les molécules contenues dans cet extrait, on compte notamment: Gleenol, Cubenol, Cubenol épi, T-muurolol alpha, Torreyol, Alcools sesquiterpéniques, 25 Muurolol alpha, Cadinol alpha, Cadalène, Humulène 14-Hydroxy-alpha, Humulène oxoalpha, Muurolène 14-Hydroxy-alpha, Cadinène 14-Hydroxy-delta. II/ Caractérisation des procédés d'extraction des principes actifs. Le procédé selon la présente invention permet d'accéder à l'extrait le plus approprié en vue de traiter les problèmes de peau en général et de kératinisation en particulier et notamment les désordres cutanées liés à la pathologie du psoriasis. L'extraction par un procédé simple sans additif chimique conserve au produit extrait 2871687 4 son caractère naturel. En effet, les nouvelles méthodes de préparation, selon l'invention, se distinguent par l'absence d'opérations complexes. Plusieurs mises en oeuvre du procédé selon l'invention peuvent être envisagées. Exemple 1 Le premier procédé de préparation d'un extrait de Bois de Cadier est tel qu'il comprend une étape dans laquelle le bois de Cade, après avoir subit une première hydro 1 0 distillation, dans le dessein d'extraire l'huile essentielle de bois de cade, est soumis à une deuxième extraction au moyen d'un solvant. Le solvant le plus souvent utilisé pour effectuer l'extraction est un alcool de préférence choisi dans le groupe formé par l'éthanol, le méthanol, l'isopropanol, ou une cétone de préférence choisie dans le groupe formé par l'acétone, la méthyléthylcétone. On peut cependant aussi employer 1 5 l'hexane, le chlorure de méthylène, l'éther isopropylique, l'acétate d'éthyle. L'extraction peut également être réalisé avec d'autres techniques, comme la distillation moléculaire. 100 kg de bois de cadier broyé, sont extraits à reflux pendant 1 heure par 500 litres d'éthanol (EtOH). Le produit obtenu s'appelle l'extrait de bois de Cadier. L'utilisation d'autres alcools comme le méthanol (MeOH), l'isopropanol ou de cétones comme l'acétone ou la méthyléthylcétone pour réaliser l'extraction initiale permettent de préparer des extraits actifs de titres compris entre 0,02 % et 10 % en Cadinol et entre 5 % et 30 % cubénols. Selon une première variante de la mise en oeuvre du procédé, l'extrait actif de bois de Cadier peut également être préparé par extraction à l'aide d'un solvant comme l'hexane, le chlorure de méthylène, l'éther isopropylique, l'acétate d'éthyle. Ce procédé n'est pas aussi avantageux que le premier car il fait intervenir des solvants autres que l'eau et l'éthanol. Il faudra donc rechercher les traces résiduelles de ces solvants organiques. Selon une deuxième variante de la mise en oeuvre du procédé selon l'invention, le Bois de Cadier est extrait par un solvant organique de préférence de l'éthanol. L'extrait obtenu est traité par une méthode appropriée de distillation moléculaire. L'extraction initiale par l'éthanol permet d'obtenir un titre en Cadinol dans le produit fini compris entre 0,01 % et 1 % et un titre en cubénols compris entre 0,01 % et 30 %. L'extraction peut être réalisée par tous les solvants utilisables dans les industries de la pharmacie, des parfums ou des arômes alimentaires du bois du Cadier duquel on a déjà 1 0 extrait l'huile essentielle par hydro distillation. L'extrait selon l'invention contient une teneur intéressante en alcools sesquiterpéniques actifs sur la différentiation des kératinocytes. Cet extrait est bien différent de celui obtenu par distillation sèche et constitue une invention. La demanderesse a optimisé ou combiné ces techniques pour maximiser l'efficacité, réduire la couleur et améliorer l'odeur des extraits obtenus. Par solvants utilisés dans les industries de la pharmacie, des parfums ou des arômes alimentaires la demanderesse entend: - Tous types de solvants polaires apolaires - Tous types de solvants à squelette hydrocarboné aliphatique, aromatiques 20 - Halogénés ou non - Saturés ou insaturés Elle couvre l'utilisation: - de solvants à fonctions oxygénées tels: alcools cétones esters - du CO2 à l'état supercritique - des techniques de séparation applicable après cette extraction distillation moléculaire, rectification sous vide, redistillation, transformation en concrète et absolue Exemple 2 L'eau obtenue après hydro distillation est filtrée de façon à éliminer les particules en suspension. La solution ainsi produite est ensuite concentrée par évaporation de façon à ajuster la concentration en sesquiterpènes (matière active: les sesquiterpènes oxygénés). L'intérêt est de préparer des extraits actifs à une concentration comprise entre 0,02 % et 10 % en Cadinol et entre 5 % et 30 % cubénols. III/ Résultats Le principe actif selon la présente invention agit plus particulièrement sur les facteurs 1 0 importants de contrôle de la division cellulaire. L'extrait selon la présente invention préparé à partir du bois de Cadier, associe les avantages d'un anti-radicalaire et d'un inhibiteur de prolifération des kératinocytes humain. Les deux activités pharmacologiques sont nécessaires pour traiter 1 5 efficacement le psoriasis comme nous l'avons vu dans la description de cette maladie. Le principe actif selon la présente invention agit comme: 1. Ralentisseur de l'activité mitotique 2. Protecteur de l'agression des radicaux libres (lipopéroxydes) qui génèrent des problèmes d'inflammation. 3. Stimulateur des mécanismes de différentiation cellulaire pour favoriser la maturation kératinique. L'activité de l'extrait original de bois de cadier sur la régulation de la prolifération des 25 kératinocytes est confirmée sur des cultures en monocouche. 11 L'activité anti-prolifératrice Une étude est réalisée sur des cultures de kératinocytes humains en présence d'extrait actif de Cade. La quantification de la population cellulaire est réalisée au Coulter Counter. L'extrait actif de Cade présente une activité antiprolifératrice significative de 20 % à la concentration 5 mg/I. 2 / L'activité anti-radicalaire Par ailleurs, l'extrait de bois de Cadier selon la présente invention a également une activité anti-radicalaire, confirmée par une étude réalisée sur un modèle cellulaire de kératinocytes humains. Une réaction inflammatoire est créée in vitro par l'addition de ionophore calcique A23187: l'afflux d'ions Ca++ intracellulaire déclenche la stimulation de la cascade de l'acide arachidonique et la synthèse des médiateurs 1 0 inflammatoires, prostaglandines et leucotriènes. L'activité antiradicalaire de l'extrait de bois de Cadier est évaluée sur un des métabolites majeurs produits par le kératinocyte, la prostaglandine 6KF1 (PG KF1) qui est le métabolite stable de la prostacycline (PGI2). La PG 6KF est mesurée par dosage immuno enzymatique (ELISA) dans les surnageants de culture. L'extrait actif de bois de Cadier est évalué aux concentrations non cytotoxiques 0,1 pg/mI, 1 pg/ml et 10 pg/ml. Cet extrait présente une activité inhibitrice significative sur la production de PG6KF induite par A23187: 12 % à la concentration 2 pg/ml et 26 % à la concentration 5 pg/ml. Cette étude démontre les propriétés anti-radicalaires de notre extrait de bois de Cadier. 3 / Expression de l'involucrine Après traitement, la technique suivie pour mettre en évidence l'expression intracellulaire de l'involucrine par les kératinocytes est similaire à celle utilisée pour mettre en évidence l'expression intracellulaire des intégrines par les kératinocytes (Technique du Western Blot). Après trois jours de traitement, les résultats montre que l'extrait actif n'a pas d'effet significatif sur l'expression intracellulaire de l'involucrine. L'extrait actif respecte la différenciation cellulaire par l'absence d'inhibition sur l'expression de l'involucrine. 4 / Activité stimulante L'extrait actif favorise le détachement des cellules de la lame basale et régule la prolifération cellulaire en modulant l'expression de sous unités d'intégrines. L'extrait actif et les compositions dermatologiques et cosmétologiques en découlant, objets de la présente invention, sont proposés dans le traitement des syndromes inflammatoires et prolifératifs cutanés et les troubles de la différentiation cutanée. D'autres indications thérapeutiques sont revendiquées comme les troubles de la kératinisation de la peau et du cuir chevelu, les parakératoses, la dermatite atopique, les xéroses, les diskératoses, les ichtyoses. La présente invention concerne une composition dermatologique ou cosmétique et l'utilisation de cette composition en particulier pour le traitement du psoriasis. Les préparations galéniques qui suivent illustrent l'invention sans en limiter la portée. EXEMPLES D'UTILISATION Des exemples concrets, mais nullement limitatifs, illustrant l'invention, vont maintenant être donnés en utilisant l'extrait de bois de Cadier dont le nom de marque déposée INPI est iniprole. 0,5 à 6 % Exemple 1: Crème antidesquamante. Stéarate de sucrose Distéarate de sucrose 0,5 à 6 % Triglycéride caprylique/caprique 3 à 15 % Huile de jojoba 2 à 5 % Triglycéride caprylique/caprique/succinique 3 à 15 % Iniprole (Extrait de bois de Cadier selon l'invention) 0,50 % Acétate de tocophéryle 0,05 à 1 % Xylitol et Glycérine 0,5 à 2 % 30 Acide citrique 0,1 à 0,5 % Citrate trisodique 0,5 à 1,5 % Hyaluronate de sodium 0,5 à 3 % Sorbate de potassium 0,2 à 0,5 % Gomme sclerotium 0,1 à 0,5 % Eau gsp.100 % Phenonip 0,5 %. Exemple 2: Crème hydratante adaptée aux épidermes Psoriatiques. Iniprole (Extrait de bois de cadier selon l'invention) 1,5 % Céramide 3 0, 1 % 1 5 Palmitate de vitamine E 0,15 % 7 déhydrocholestérol 0,01 % Stéareth-20 0,2 % Methyl paraben 0,25 % Eau gsp.100 % Stéareth-2 1 à 3 % Alcool cétyl stéarylique 2 à 4 % Myristate de myristyle 2 à 4 % Myristate d'isopropyle 4 % Glycérine 1 % Dimethicone 0,5 % Alcools lanoliniques 0,5 % Propyl paraben 0,25 % Exemple 3: Crème antirides, Iniprole (Extrait de bois de cadier selon l'invention) 0,5 % Oléate de sorbitane 3,5 % Polysorbate 80 2 à 4 % Huile de germe de blé 3 % Huile d'amandes douces 5 % Myristate d'isopropyle 1 2 % Polyacrylamide & C14_13 isoparaffine & laureth-7 2 à 3,5 % Palmitate de vitamine A 0,1 % Tocopherol 0,05 % Hyaluronate de sodium 0,1 % Eau gsp. 100 % Conservateurs qsp Exemple N 4: Shampoing. Sodium lauroyl oat aminoacids 5.00% Sodium coceth sulfate/PEG-40 glyceryl cocoate 17.00% 1 5 Alcool benzylique 0.20% Dimethicone copolyol 2,00% Iniprole (Extrait de bois de cadier selon l'invention) 0,30 % Acrylates copolymere 3.00% Conservateurs qsp NaOH qsp pH =7.2 Eau qsp 100% Exemple N 5: Huile de bain aux Huiles Essentielles, Huile essentielle de Lavande 18.00% Iniprole (extrait de bois de cadier selon l'invention) 5,00 % Decyl glucoside 36.00% Glycerine 53.00% Conservateur 0.50% Extrait de Fleurs de jasmin 0.10% REVENDICATIONS 1. Préparation à base d'extraits végétaux caractérisée par une richesse en alcools sesquiterpéniques telle que ces extraits soient essentiellement exempts d'Hydrocarbures Aromatiques Polycycliques (HAD). 2. Extraits selon la revendication 1 tels que parmi les composés présents le titre de Cadinol soit compris entre 0,02 % et 10 % . 3. Procédé de préparation d'un extrait de bois de Cadier (Iniprole) selon la revendication 1 caractérisé par une étape dans laquelle le Bois de Cadier est soumis à une extraction au moyen d'un solvant. 1 5 4. Procédé selon la revendication 2 tel que le solvant utilisé pour effectuer l'extraction à partir du bois de cadier soit la vapeur d'eau qui permette d'obtenir un extrait de bois de cadier (Iniprole). 5. Compositions dermatologiques ou cosmétiques telles qu'elles comprennent un extrait selon la revendication 1, ou un extrait obtenu par un procédé selon la revendication 2. 6. Compositions pour le traitement des troubles de la kératinisation de la peau et du cuir chevelu, pour le traitement du psoriasis, les parakératoses, la dermatite atopique, les xéroses, les diskératoses, les ichtyoses, l'acné, la dermite seborrhéique. 7. Compositions cosmétiques pour limiter la desquamation cutanée, caractérisées en ce qu'elles comprennent au moins pour une part le principe actif selon une des revendications 1 et 2, pouvant contenir d'autres principes actifs appropriés à l'amélioration de la pathologie visé par les traitements. 2871687 12 8. Procédé pour lutter contre la desquamation cutanée, caractérisé par la disposition sur la peau ou les cheveux d'une composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications, comprenant entre 0,001 et 50 % de principe actif, préférentiellement entre 0,01 et 5 % du complexe décrit selon l'invention.