Brevet FR2861306A1 — publié le 20050429

UTILISATION DU SHIITAKE POUR AUGMENTER LE TAUX D'IMMUNOGLOBULINES LAITIÈRES L'invention concerne le domaine de la protection passive des mammifères et, plus particulièrement, via le lait maternel. Ainsi, la présente invention concerne l'utilisation d'un extrait de Shiitaké pour augmenter le taux d'immunoglobulines laitières. La protection des animaux peut être assurée par l'administration d'antibiotiques, aussi bien pour les animaux de rente que pour les animaux de compagnie. Ces derniers ont une utilisation thérapeutique visant l'éradication d'une infection présente (but curatif), ou la prévention d'une infection possible (but prophylactique). Mais une utilisation d'antibiotique conduit tôt ou tard à la sélection de bactéries résistantes. La conséquence immédiate de la résistance aux antibiotiques en élevage est l'échec thérapeutique. En outre, pour la santé humaine, le risque peut être de deux ordres: risques posés par les résidus dans la viande de consommation et risques dus à la contamination de l'homme par des bactéries zoonotiques résistantes à des antibiotiques utilisés chez l'homme. Par ailleurs, le mammifère nouveau-né n'ayant pas de propre système immunitaire fonctionnel, le seul moyen pour le nouveau-né de survivre à une infection virulente notamment d'origine digestive est assurée par le biais d'une immunité passive lactogène, convoyée de la mère à sa progéniture via les sécrétions mammaires (colostrum et lait). La présente invention vise donc à fournir une composition capable de résoudre les problèmes ci-dessus et notamment en favorisant l'immunité passive des mammifères nouveau-nés et en évitant l'apport d'antibiotiques. Les travaux de la Demanderesse ont permis de mettre en évidence que l'utilisation de Shiitaké permet d'obtenir la composition présentant les propriétés recherchées. Le Shiitaké (Lentinus edodes) est un champignon également connu sous le nom de champignon parfumé chinois, lentin des bois ou lentin des chênes. Ce champignon forestier comestible au Japon est connu dans de nombreux pays asiatiques (Chine, Corée, etc...) comme un des meilleurs champignons pour son goût et son parfum. Le Shiitaké est cultivé sur bois et, dans la plupart des cas, est utilisé séché. Le séchage donne la possibilité de le conserver tout en préservant son arôme et son goût. Les effets pharmacologiques du Shiitaké ont été décrits par le médecin chinois Wu Shui qui a vécu au temps de la dynastie Ming (1364-1644). D'après ce médecin, le Shiitaké augmente la vigueur et la vitalité et est très efficace dans le traitement préventif de l'hémorragie cérébrale. Les propriétés médicales du Shiitaké ont été étudiées et des actions antivirale, antibiotique, antitumorale et hypolipidémique certaines ont pu être mises en évidence. Ainsi, les propriétés fonctionnelles de plusieurs constituants chimiques extraits du Shiitaké sont connues depuis une trentaine d'années. Les bêta glucanes, qui sont des polysaccharides isolés de végétaux dont le Shiitaké, présentent des propriétés immunostimulantes et renforcent préventivement les défenses immunitaires non spécifiques et spécifiques vis-à-vis de plusieurs agents infectieux bactériens, viraux et parasitaires. Des bêta glucanes (1 >3;1-->6) permettent de lutter contre des infections parasitaires causées par des protozoaires telles l'amibiase (Gold et al., 1990, Ann. Trop. Med. Paras., vol 84, pages 573- 80), la leishmaniose (Goldman et al., 1991, Parasite Immunol., vol 13, pages 137-45), la trypanosomiase (Gonzalez et al., 1991, Infect Immunol., vol 59, pages 863-867) ou la coccidiose (Yun et al., 1998, Microbiol. Immunol. , vol 42, pages 457-465). Outre leurs propriétés anti-infectieuses, les bêta glucanes ont été étudiés en raison de leurs propriétés antitumorales. Ainsi, l'administration d'un extrait aqueux des fructifications de Lentinus edodes inhibe le développement des tumeurs expérimentales induites chez la souris (Ikekawa et al., 1969, Cancer Res., vol 29, pages 734-5). Le lentinane, polysaccharide isolé à partir du Shiitaké est également décrit comme doué de propriétés antitumorales (Chihara et al., 1970, Cancer Res., vol 30, pages 2776-81). De façon remarquable, les travaux de la Demanderesse ont permis de mettre en évidence que l'administration par voie orale à des femelles allaitantes d'un extrait de Shiitaké favorise la production des immunoglobulines (Ig) et, plus particulièrement, les immunoglobulines A (IgA) par la glande mammaire. Par conséquent, la présente invention concerne l'utilisation d'un extrait de Shiitaké pour la préparation d'une composition destinée à augmenter les immunoglobulines laitières. Les anticorps du lait maternel sont des protéines groupées en cinq classes appelées IgA, IgM, IgD, IgE et IgG. Dans le lait, on trouve des IgA sécrétoires. Une IgA sécrétoire est formée de deux molécules d'IgA reliées par une protéine ou chaîne J qui protège contre la digestion. Ces IgA luttent contre les microorganismes, inhibent l'adhérence virale et bactérienne aux cellules épithéliales. De plus, le rapport entre les classes 5 d'immunoglobulines change lorsque l'on passe du colostrum au lait. A titre d'exemple, chez la truie, - dans le colostrum, les IgG sont prépondérantes et dérivent du sérum à partir d'un processus de concentration sélective tandis que les IgA sont synthétisées à 60% dans la mamelle, les 40% restant étant issus du sérum. - dans le lait, les IgA sont les immunoglobulines majoritaires et sont synthétisées à 80% dans la mamelle. La composition de la présente invention contient un extrait de Shiitaké. De façon avantageuse, cet extrait est hydrosoluble et contient entre 5 et 20% en poids de polymères glucidiques de masse molaire supérieure à 10 kD. Plus particulièrement, l'extrait utilisé comprend: É des polymères glucidiques de masse molaire supérieure à 10kD (assimilable à du lentinane ou analogues) . entre 5 et 20% et, de préférence, 8,9%, É des polymères glucidiques de 1 à 10 kD: entre 0 et 5% et, de préférence, 1,2%, É des monosaccharides: entre 8 et 12% et, de préférence, 9,5% É des alditols: entre 40 et 60% et, de préférence, 46,3%, É d'autres constituants non glucidiques tels que des minéraux et de la matière azotée: entre 30 et 40% et, de préférence, 34,1%. 2861306 5 L'extrait de Shiitaké utilisé dans le cadre de l'invention est avantageusement utilisé entre 0,05 et 5 pour mille, de façon préférée entre 0,25 et 2,5 pour mille et de façon encore plus préférée entre 0,25 et 1 pour mille en poids sec dans la ration alimentaire. De par le type d'utilisation décrite dans le cadre de la présente invention, il est évident que, par ration alimentaire , on considère la ration alimentaire des mammifères femelles gestantes ou allaitantes. De façon avantageuse, la composition objet de la présente invention contient entre 5 et 50% d'extrait de Shiitaké et, de préférence, 10%. La présente invention envisage trois formes de mise en uvre préférées à savoir: - l'utilisation de l'extrait de Shiitaké dans la boisson des mammifères femelles gestantes ou allaitantes, l'extrait de Shiitaké étant avantageusement hydrosoluble, - l'utilisation de l'extrait de Shiitaké avec les autres éléments de la ration alimentaire des mammifères femelles gestantes ou allaitantes pour préparer un aliment composé, - l'utilisation de l'extrait de Shiitaké mélangé de façon extemporanée avec la ration alimentaire des mammifères femelles gestantes ou allaitantes. L'homme du métier connaît différents procédés pour l'extrait de Shiitaké utilisable dans le cadre de l'invention. On peut citer, par exemple, les procédés décrits par Hirashama et al. (Int. J. antimicriol. Agents, 1999, vol. 11, pages 151-7) et dans le brevet US 4207312. L'extrait de Shiitaké utilisé dans le cadre de l'invention est avantageusement obtenu selon le procédé suivant: (a) récolte et lavage des fructifications de Shiitaké, (b) mélange et broyage desdites fructifications avec de l'eau, (c) chauffage entre 90 et 100 C du mélange broyé ainsi obtenu, (d) élimination des produits insolubles par filtration, (e) concentration du surnageant par évaporation sous vide. La composition utilisée dans le cadre de la présente invention peut en outre contenir au moins un élément choisi parmi le groupe constitué par les actifs lactogènes, les actifs antiseptiques, les actifs immunomodulateurs, les vitamines, les probiotiques, les acidifiants organiques, d'autres extraits de champignons et des oligoéléments. Un actif lactogène préféré dans le cadre de la présente invention est l'acide galacturonique, dérivé de la pectine de carotte. Les actifs antiseptiques avantageusement utilisés dans le cadre de la présente invention sont l'huile essentielle d'eucalyptus et/ou l'huile essentielle d'échinacée. Les actifs immunomodulateurs avantageusement utilisés dans le cadre de la présente invention sont l'huile essentielle de mélèze, l'huile essentielle de thym, l'huile essentielle de cannelle, l'huile essentielle de perilla, l'huile essentielle de lemon grass, l'huile essentielle de menthe poivrée et/ou l'huile essentielle d'ail. Les vitamines avantageusement utilisées dans le cadre de la présente invention sont la vitamine C et/ou la vitamine E. D'autres extraits de champignons utilisables dans le cadre de la présente invention sont un extrait de Maitaké et/ou un extrait de Reishi. Les oligoéléments avantageusement utilisés dans 5 le cadre de la présente invention sont le zinc et/ou le sélénium. Tous ces éléments que la composition utilisée dans le cadre de la présente invention peut contenir sont des éléments bien connus de l'homme du métier et disponibles commercialement. La présente invention concerne également l'utilisation d'un extrait de Shiitaké tel que défini ci- dessus pour la préparation d'une composition destinée à augmenter les immunoglobulines laitières et, plus particulièrement, les IgA. De préférence, les immunoglobulines et, plus particulièrement, les IgA sont augmentées dans le colostrum. La présente invention s'applique à tout type de mammifères aussi bien des mammifères utilisés dans les élevages comme les porcins, les ovins, les caprins, les bovins, les lapins qu'aux animaux de compagnie tels que chiens et chats qu'à l'homme. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront à la lecture des exemples qui suivent concernant l'étude de l'effet d'un extrait de Shiitaké sur la composition en immunoglobulines du lait de truie et sur les porcelets alimentés par ledit lait. Ces exemples sont donnés à titre illustratif et ne sauraient être interprétés comme limitant la portée de l'invention. 1. Conditions expérimentales. I.1. Dispositif expérimental. Cet essai concerne les truies de la fin de la 5 gestation jusqu'au sevrage. De ce fait, les truies séjournent en salle gestante puis en maternité. La salle gestante présente des places réparties en rangées de cases (truies bloquées), sur caillebotis intégral en béton et ne disposent pas d'abreuvoir (l'abreuvement est assuré par la soupe). L'alimentation en soupe est réalisée en trois repas par jour en automatique suivi de deux repas d'eau dans la journée. La salle est ventilée mais non chauffée. Les salles-maternité sont constituées de cases individuelles sur caillebotis fil et béton, reparties autour d'un couloir central. Les truies disposent d'auges individuelles et l'alimentation est manuelle: deux repas par jour suivi de deux repas d'eau. Les porcelets disposent dès l'âge de sept jours d'une augette afin d'y recevoir une alimentation premier âge et ceci jusqu'au sevrage. Un abreuvoir est installé pour chaque portée. La ventilation par dépression est assurée par une entrée d'air neuf préchauffé dans le faux plafond et une extraction basse. I.2. Animaux. Pour chaque régime, 8 truies non primipares de race LW*LR (Large White * LandRace) et d'historique sanitaire similaire sont utilisées. L'allotissement est réalisé le jour précédent la date de début d'essai (date d'incorporation de l'extrait de Shiitaké dans l'alimentation) et trois semaines avant la date de mise bas prévue. Les truies sont introduites et alloties en maternité 5 jours avant la mise bas. La mise bas est provoquée 24 heures avant la date prévue. Chaque truie est suivie individuellement et les éventuels traitements notés sur les fiches portée. Les porcelets issus d'un même groupe de truies (essai ou témoin) pourront être adoptés afin d'obtenir des portées homogènes le cas échéant. Les porcelets issus de ces truies sont bouclés et suivis individuellement. Les porcelets seront conduits de façon identique à la conduite hors essai (injection d'antibiotique, coupe des queues et épointage des dents à la MB). I.3. Les aliments expérimentaux. L'extrait de Shiitaké est dilué dans de l'eau et distribué en 1 fois par jour dans les repas d'eau pour les truies en salle gestation et maternité (2gr pour 100 ml d'eau soit par kg d'aliment). Les quantités d'additif distribuées seront ajustées à la consommation journalière des truies à raison de 2kg/tonne d'équivalent aliment. L'aliment truies gestante et allaitante reste inchangé. L'aliment porcelet reste inchangé. II. Dosages réalisés et variables testées. II.1. Dosage immunologique. Deux prélèvements de lait ont été réalisés par truie: à la Mise bas (TMB) et après 7 jours d'allaitement (T7). Les échantillons de lait sont centrifugés. Les IgA sont dosées dans le lait de truies par technique ELISA (pig IgA ELISA Quantification, Bethyl Laboratories, réf E100). II.2. Les variables zootechniques. a. Les variables mesurées et répertoriées sur les porcelets sont. - le poids à la mise bas, à 7, 14 et 21 jours (au 5 sevrage), - les pathologies et les décès (causes), b. Les variables calculées sur les portées et les porcelets sont: - les GMQ (Gain Moyen Quotidien) de portée et individuels (0-21j; 0-7j; 7- 14j; 14-21j), - les paramètres de gestion technique tels que le nombre de porcelets nés vifs, de porcelets sevrés, de porcelets morts à la naissance, de porcelets morts durant 15 le sevrage, etc... - la fréquence des pathologies. III. Résultats. Concernant la teneur du lait en IgA à la mise bas, les truies traitées présentent des taux supérieurs à ceux des truies témoins au seuil de 10%, alors que les taux sériques des IgA restent inchangés entre truies traitées et truies témoins. Le tableau 1 ci-dessous présente les dosages des IgA dans le lait des truies témoins et des truies traitées exprimés en mg/ml de lait à la mise bas (MB). Tableau 1 Truies témoins Truies traitées IgA lait MB 6,38 7,88 Les portées des truies traitées présentent des pathologies moins nombreuses et ce après 7 jours et 21 jours d'allaitement. Il est important de noter que plus de 95% des pathologies sont digestives (diarrhées). Les portées issues des truies traitées présentent une variabilité de poids qui tend à diminuer au cours de l'allaitement comparativement au témoin. Les GMQ de portée ou individuel en période 14 jours sevrage sont également supérieurs pour les animaux traités. Le tableau 2 ci-dessous présente les moyennes des portées des truies témoins et des truies traitées à la mise bas (MB), 7 jours après la mise bas (7j), 14 jours après la mise bas (14j) et 21 jours après la mise bas (21j). Lesdites moyennes concernent le poids des porcelets, le gain moyen quotidien (GMQ) de la portée calculé de la MB à 7 jours (0-7j), de 7 jours à 14 jours (7-14j), de 14 jours à 21 jours (14-21j) et de la MB à 21 jours (0-21j) et le pourcentage de porcelets souffrant d'une pathologie (Patho) 7 jours après la mise bas (7j), 14 jours après la mise bas (14j) et 21 jours après la mise bas (21j). Tableau 2 Truies témoins Truies traitées Poids MB (kg) 11 12,15 Poids 7j (kg) 24 24, 4 Poids 14j (kg) 39 42,4 Poids 21j (kg) 55 60,4 GMQ 0-7j (g/j) 1603 1743 GMQ 7-14j (g/j) 2306 2576 GMQ 14-21j (g/j) 2260 2575 GMQ 0-21j (g/j) 2040 2298 Patho 7j (%) 15 0 Patho 14j (%) 25 19 Patho 21j (%) 21 4 REVENDICATIONS 1) Utilisation d'un extrait de Shiitaké pour la préparation d'une composition destinée à augmenter les 5 immunoglobulines laitières. 2) Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que ledit extrait de Shiitaké est hydrosoluble. 3) Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que ledit extrait de Shiitaké contient entre 5 et 20% en poids de polymères glucidiques de masse molaire supérieure à 10 kD. 4) Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que ledit extrait de Shiitaké est utilisé entre 0,05 et 5 pour mille en poids sec dans la ration alimentaire. 5) Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que ladite composition contient entre 5 et 50% d'extrait de Shiitaké et, de préférence, 10%. 6) Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que ladite composition contient au moins un élément choisi parmi le groupe constitué par les actifs lactogènes, les actifs antiseptiques, les actifs immunomodulateurs, les vitamines, les probiotiques, les acidifiants organiques, d'autres extraits de champignons et des oligoéléments. 7) Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que les immunoglobulines laitières augmentées sont les IgA. 8) Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que les immunoglobulines laitières augmentées sont les immunoglobulines présentes dans le colostrum.