Brevet FR2868315A1 — publié le 20051007

La présente invention concerne un procédé de préparation de composés d'inclusion 5 solubles par la technologie des fluides denses sous pression, en particulier celle du CO2. De nombreuses substances actives, notamment d'intérêt dans le domaine pharmaceutique, présentent une très faible solubilité dans l'eau et par voie de conséquence dans les liquides biologiques. Ceci implique une faible biodisponibilité de ces substances actives et une forte augmentation des doses administrées aux patients pour atteindre l'objectif thérapeutique fixé et donc un accroissement des possibles effets secondaires liés aux traitements médicaux. Les propriétés pharmacocinétiques d'une substance donnée dépendent entre autres de l'affinité de sa surface de contact pour le solvant considéré, à savoir l'eau dans le cas du domaine pharmaceutique. Aussi, la formation de complexes moléculaires composés d'une ou plusieurs substances actives et d'une ou plusieurs molécule hôtes judicieusement choisi(es) pour sa (leur) forte solubilité dans les liquides biologiques peut donc permettre d'accroître la dissolution de la ou des substances actives dans les liquides biologiques. Dans le domaine pharmaceutique, il existe un certain nombre de brevets et publications relatifs à la formation de complexes à base de cyclodextrine, en présence d'un agent d'interaction avec le complexe. Néanmoins, la plupart des documents ne proposent pas de procédés industriels, mais plutôt l'étude de l'amélioration de la solubilité d'un complexe substance active/cyclodextrine par le biais de l'agent d'interaction avec le complexe. Il s'agit en effet d'une énumération d'agents d'interaction avec le complexe testés pour un même principe actif, et des résultats analytiques observés. Par ailleurs, il existe peu de documents proposant une complexation en milieu supercritique. Les documents décrivant des procédés de complexation avec une cyclodextrine par fluide supercritique sont les suivants: Dans le but de fixer des molécules volatiles par inclusion, Kamihira M. et al (J. of Fermentation and Bioengineering, Vol. 69, N 6, 350-353, 1990) décrivent un procédé d'extraction de composés aromatiques volatiles et de piégeage par inclusion dans les cyclodextrines. Le géraniol et l'huile de moutarde sont ainsi extraits par un fluide sous pression, puis vaporisés en mode dynamique dans un second réacteur contenant des cyclodextrines. L'influence des différents paramètres est étudiée par mesure du taux d'inclusion des composés aromatiques dans les cyclodextrines. Toutefois, l'étape d'inclusion est réalisée en mode dynamique et non statique. Par ailleurs, l'application revendiquée par les auteurs est toute autre puisqu'il s'agit de fixation de molécules volatiles par inclusion. Enfin, ce procédé n'est pas mis en oeuvre avec des fluides supercritiques, mais avec des gaz sous pression. Van Hees et al. (Pharmaceutical Research, Vol. 16, N 12, 1999) décrivent dans leur publication un procédé d'inclusion de Piroxicam commercial dans les sscyclodextrines par CO2 supercritique. Le Piroxicam étant un antiinflammatoire non-stéroïdien peu soluble dans l'eau, son inclusion dans les ss-cyclodextrines doit permettre d'augmenter sa solubilité dans l'eau. Le procédé consiste à placer un mélange de Piroxicam et de sscyclodextrines (ratio molaire 1/2,5) dans un autoclave pressurisé, laissé en mode statique. Après dépressurisation le mélange obtenu est broyé et homogénéisé. Le pH du complexe formé est ajusté à 10 par ajout de NH4OH à une solution aqueuse comprenant le complexe. Le complexe est ensuite séché avant caractérisation par: É DSC (Differential Scanning Calorimetry) É Technique de la solubilité différentielle É Méthodes spectroscopiques. Ces analyses permettent de conclure quant au taux de complexation du Piroxicam 30 avec la ss-cyclodextrine. Il n'est pas mentionné l'importance d'un agent d'interaction avec le complexe sur la dissolution du complexe ainsi obtenu. Par ailleurs aucun agent de diffusion n'est utilisé dans l'étape de formation du complexe par CO2 supercritique en mode statique. La demande de brevet WO 03/043604 décrit un procédé de préparation de complexe moléculaire de substance active dans des molécules hôtes. Le procédé met en oeuvre une étape de diffusion moléculaire par mise en contact en mode statique, d'un fluide dense sous pression en présence éventuelle d'un agent de diffusion: l'eau. Toutefois cette étape est suivie par une étape obligatoire de lavage par CO2 supercritique. De plus aucun agent d'interaction avec le complexe n'est utilisé. Différents documents font part de l'amélioration de la solubilité d'une substance active par addition d' agent d'interaction avec le complexe (Redenti, E. et al., J. of Pharmaceutical Sciences, Vol. 89, 1-8, 2000). La solubilité de la substance active seule, de la substance active en présence del' agent d'interaction avec le complexe, du complexe binaire substance active/cyclodextrine et enfin du complexe ternaire substance active/cyclodextrine/agent d'interaction avec le complexe sont étudiés. Toutefois aucun des procédés décrits n'utilise du CO2 supercritique, ni en particulier une étape de diffusion moléculaire en mode statique en utilisant un agent de diffusion. En outre, l'agent d'interaction avec le complexe est ajouté lors de l'étape de formation du complexe et non après. Ainsi, Buvâri-Barcza et al. (J. of Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistey, Vol. 42, 209-212, 2002) étudient la solubilité des complexes acide benzoïque/ 13-cyclodextrine et benzène/ss-cyclodextrine en présence d'acide acétique. La solubilité du complexe benzène/ss-cyclodextrine est indépendante de la concentration en acide acétique alors que celle du complexe acide benzoïque/ sscyclodextrine croît avec la concentration en acide acétique. L'interprétation des auteurs est la suivante: dans le complexe ternaire molécule /ss-cyclodextrine/acide acétique, les liaisons hydrogène potentielles entre la molécule et la cavité intérieure de la cyclodextrine sont promoteurs d'autres interactions à l'extérieur de la cyclodextrine. De même, Mura et al. (J. of Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistry, Vol. 39, 131-138, 2001) mesurent la solubilité de l'éconazole en présence de cyclodextrines (a-, ss-, y-, hydroxypropyl-ss-cyclodextrines) et d'hydroxyacides (acides tartarique, citrique, gluconique, malique et lactique). Les complexes ternaires sont préparés par mélange physique ou broyage des 3 composés, coévaporation ou lyophilisation d'une solution contenant les 3 composés. La formation de complexe ternaire est suivie par DSC. Seul la lyophilisation permet d'obtenir un profil DSC ne présentant plus le pic de fusion de l'éconazole. Les auteurs concluent à l'effet synergique observé dans le complexe ternaire, puisque les solubilités observées sont jusqu'à 20 fois plus élevées que celle d'un complexe binaire éconazole/cylodextrine. Les mêmes auteurs (Int. 1 of Pharmaceutics, Vol.260, 293-302, 2003) ont également étudié les complexes ternaires du type naproxen/hydroxypropylsscyclodextrine/acide aminé. Les complexes cités sont préparés soit par cobroyage, soit par co-évaporation d'une solution eau/éthanol contenant les 3 composés. Piel et al. , (J. of Pharmaceutical Sciences, Vol. 86-4, 475-480, 1997) présentent une étude de solubilité d'un complexe nimesulide/L-Lysine/ss-ou y-cyclodextrine obtenu par spray-drying ou évaporation. La solubilité du complexe ternaire est, selon le pH de la solution, jusqu'à 3600 fois plus importante que le nimesulide seul. Là encore, les auteurs parlent d'un effet synergique de la cyclodextrine et de la L-Lysine. Fenivesy et al. (Proceedings of the 7th international cyclodextrins symposium, 414-418, 1994) s'intéressent à la complexation des substances actives terfénadine, dompéridone et astémizole avec l'hydroxypropyl-sscyclodextrine en présence d'hydroxyacides. Deux brevets (EP 0 991 407 et EP 1 018 340) décrivent la préparation de complexes ternaires substances actives/agent d'interaction avec le complexe/cyclodextrine. Les procédés mis en ouvre sont le malaxage (kneading), le séchage par pulvérisation (spray-drying), l'évaporation ou la lyophilisation. Le procédé consiste soit à préparer le complexe du sel de la substance active, soit à mettre en contact simultanément les 3 composés au cours du procédé. 2868315 5 Un brevet (EP0153998 A2) déposé par Chiesi et al. décrit la préparation de complexes de piroxicam et de béta-cyclodextrine en présence notamment d'une solution ammoniacale. Les deux seuls documents traitant de la préparation de complexe par CO2 supercritique en présence d' agent d'interaction avec le complexe sont les suivants: En suivant la même méthode que celle décrite précédemment (Pharmaceutical Research, Vol. 16, N 12, 1999), Van Hees et al. (Journal of inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistry, N 44, p 271-274, 2002) décrivent l'utilisation d'un agent d'interaction avec le complexe, la Llysine ou le trométamol, dans la préparation d'un complexe Piroxicamlsscyclodextrine par CO2 supercritique. L'utilisation de L-lysine ou de trométamol leur peiinet à la fois d'augmenter le taux d'inclusion du piroxicam dans la béta-cyclodextrine et d'améliorer la dissolution du complexe formé. La caractérisation s'effectue par: É DSC (Differential Scanning Calorimetry) É Technique de la solubilité différentielle É Cinétique de dissolution en milieu tamponné Toutefois, cet agent d'interaction avec le complexe est ajouté dans l'étape de fabrication du complexe, c'est à dire dans l'étape de diffusion moléculaire par CO2 supercritique en mode statique. De plus, aucun agent de diffusion n'est utilisé au cours de cette étape. V. Barillaro et al. (Proceeding of the 6th International Symposium on Supercritical Fluids, Versailles, p 1897-1902, 2003) se sont davantage focalisés sur l'amélioration que pouvait apporter l'ajout d'un agent acide d'interaction avec le complexe pour augmenter le taux d'inclusion du Miconazole dans des cyclodextrines. Différents agents d'interaction avec le complexe (acide malique, maléique, fumarique, citrique) ainsi que différentes cyclodextrines (bétacyclodextrine, HP- béta-cyclodextrine, ycyclodextrine, HP- y-cyclodextrine) ont été utilisées. 2868315 6 Toutefois, l'étape d'inclusion est réalisée en mode dynamique et non statique. De plus 1' agent d'interaction avec le complexe est ajouté lors de cette étape d'inclusion et non après. Dans les deux documents citées ci-dessus, il est donc important de noter que la 5 complexation par fluides supercritiques est effectuée sur le mélange ternaire substance active/agent d'interaction avec le complexe/cyclodextrine. Or les inventeurs ont découverts de façon surprenante que la séparation des étapes de complexation et d'ajout de 1' agent d'interaction avec le complexe permet d'améliorer sensiblement les propriétés physico-chimiques du complexe ainsi obtenu. L'objectif est d'améliorer la dissolution in vivo d'une substance active insoluble dans l'eau, et ce, en incluant la substance active dans un support poreux soluble puis en modifiant les propriétés physico-chimiques du système ainsi formé. La présente invention concerne donc un procédé de préparation d'un composé d'inclusion soluble comprenant une ou plusieurs substances actives peu soluble dans un milieu aqueux incluses dans une ou plusieurs molécules hôtes, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes successives suivantes: a. mise en contact d'une ou plusieurs substances actives avec une ou plusieurs molécules hôtes, b. mise en oeuvre d'une étape de diffusion moléculaire par mise en contact, en mode statique, d'un fluide dense sous pression avec le mélange obtenu à l'étape (a) en présence d'un ou plusieurs agents de 25 diffusion, c. récupération du complexe moléculaire substance active molécule hôte ainsi formé, d. mise en oeuvre d'une étape qui consiste à ajouter et mélanger un agent d'interaction avec le complexe au complexe moléculaire 30 substance active molécule hôte e. récupération du composé d'inclusion soluble ainsi formé. Dans le procédé selon la présente invention, il n'y a pas d'étape de lavage par CO2 supercritique entre les étapes (c) et (d). Dans un autre mode de réalisation avantageux, l'étape (e) est suivie par une étape (f) de séchage du composé d'interaction soluble, avantageusement entre 60 C et 5 80 C et de façon avantageuse pendant une nuit. Le procédé est ainsi constitué par l'enchaînement de deux phases qui sont: - la formation d'un complexe d'inclusion entre une substance active et une molécule hôte en milieu supercritique (étapes (a), (b) et (c)) - la fixation de manière non-covalente d'un agent d'interaction avec le complexe sur le complexe obtenu, afin notamment d'améliorer ses propriétés physico-chimiques (étapes (d) et (e). L'invention décrit donc un procédé en cinq étapes. É Les trois premières étapes dites de maturation, consistent essentiellement en une phase de diffusion moléculaire en milieu dense sous pression, et notamment supercritique permettant d'inclure des substances actives dans des molécules hôtes, notamment des cyclodextrines. L'objectif recherché au cours de cette phase de diffusion est de former des complexes d'inclusion entre des substances actives et la molécule hôte. Par complexe d'inclusion ou complexe moléculaire on entend au sens de la présente invention tout complexe associant de manière non-covalente la substance active et la molécule hôte. Avantageusement, il s'agit du complexe issu de l'étape (b) du procédé selon la présente invention. Par composé d'inclusion soluble on entend au sens de la présente invention toute entité formée par l'association de l'agent d'interaction avec le complexe d'une part et du complexe moléculaire d'autre part. Avantageusement, il s'agit du produit final obtenu par le procédé selon la présente invention. Par agent d'interaction avec le complexe , on entend au sens de la présente invention tout agent organique ou minéral améliorant les propriétés physico- chimiques, en particulier les propriétés de solubilisation en milieu aqueux, du complexe moléculaire par interactions sans liaisons covalentes avec la substance active incluse dans la molécule hôte ou directement avec le complexe moléculaire. Avantageusement l'agent d'interaction avec le complexe est un tensioactif par exemple le lauryl sulfate de sodium ou Tween, un acide ou une base. Avantageusement, il s'agit d'un acide ou d'une base. Le choix d'un agent acide ou basique dépendra de la nature acide ou basique de la substance active. Ainsi, préférentiellement, un agent acide sera utilisé avec un complexe moléculaire contenant une substance active basique et un agent basique avec un complexe moléculaire contenant une substance active acide. De façon avantageuse, l'agent d'interaction avec le complexe est choisi parmi un t o acide aminé, un acide carboxylique, un acétate, un carboxylate, une amine ou l'ammoniaque, avantageusement sous forme de solution ammoniacal à 28 %. De façon encore plus avantageuse, il est choisit parmis l'acide acétique, l'acide tartarique, l'acide citrique, l'acide gluconique, l'acide malique, l'acide lactique, l'acide maléique, l'acide fumarique, la L-Lysine, la L-valine, la L-iso-leucine, la Larginine ou l'ammoniaque. Par fluide dense sous pression , on entend au sens de la présente invention tout fluide utilisé à une température ou une pression supérieure à leur valeur critique. Avantageusement il s'agit du CO2 pur ou en mélange avec un solvant organique classiquement utilisé par l'homme du métier. Par substance active peu soluble dans un milieu aqueux , on entend au sens de la présente invention toute substance active peu ou pas soluble dans un milieu aqueux et ayant en particulier une solubilité inférieure à au moins 20 g/ml. En particulier il peut s'agir d'un actif pharmaceutique, (on peut citer à titre d'exemple les analgésiques, les antipyrétiques, l'aspirine et ses dérivés, les antibiotiques, les antiinflammatoires, les antiulcéreux, les antihypertenseurs, les neuroleptiques, les antidépresseurs, les oligonucléotides présentant une activité thérapeutique, les peptides présentant une activité thérapeutique et les protéines présentant une activité thérapeutique), cosmétique ou nutraceutique. Avantageusement il s'agit d'une substance active choisie dans le groupe comprenant les dérivés d'anilide, les dérivés d'épipodophyllotoxine, le minoxidil, le piroxicam, l'acide valérique, l'acide octanoïque, l'acide laurique, l'acide stéarique, l'acide tiaprofénique, l'oméprazole, l'éconazole, le miconazole, le kétoconazole, l'astémizole, la cyclobenzaprine, la nimésulide, l'ibuprofen, la terfénadine, le dompéridone, le naproxen et l'éflucimibe, avantageusement il s'agit du piroxicam. Par molécule hôte , on entend au sens de la présente invention toute substance apte à capter des substances actives. Avantageusement la molécule hôte est choisie dans le groupe constitué par les polyoses et les oses, notamment les cyclodextrines et leur mélange. De façon avantageuse, il s'agit de la ss-cyclodextrine, de la méthylss-cyclodextrine, de la y-cyclodextrine ou de l'hydroxypropyl-ss-cyclodextrine. Avantageusement, il s'agit de la ss-cyclodextrine. Par agent de diffusion , on entend au sens de la présente invention n'importe quel solvant favorisant une interaction de la substance active avec la molécule hôte. Avantageusement, cet agent de diffusion est choisi dans le groupe constitué par les alcools, les cétones, les éthers, les esters et l'eau avec ou sans agent surfactant et leurs mélanges. De façon encore plus avantageuse, il s'agit de l'eau. Par mode statique on entend au sens de la présente invention une réaction ou un procédé dans lequel tous les réactifs sont mis simultanément en présence et où on laisse la réaction se dérouler. Par exemple, dans l'étape (b) de la présente invention, on met dans un autoclave la ou les substance(s) active(s), de l'eau et du CO2 supercritique et on laisse réagir pendant plusieurs heures. La masse de produit n'évolue pas durant la réaction. A l'inverse, en mode dynamique, les réactifs sont apportés au fur et à mesure de l'évolution de la réaction ou de la production. Souvent dans le cadre d'un mode dynamique, il y a circulation d'un fluide ou agitation. La masse de produit évolue durant la production. Lors de l'étape (a) la substance active et la molécule hôte sont introduites sous foiine solide ou liquide dans un récipient dans lequel lors de l'étape (b) est injecté le fluide dense sous pression et l'agent de diffusion dans des proportions judicieusement choisies. Les conditions de pression et de température ainsi que la durée du traitement sont définies, par toute méthode appropriée, en fonction de la nature de la ou des substances actives et du ou des molécules hôtes. De façon avantageuse, l'étape (b) de diffusion moléculaire du procédé selon la 30 présente invention est réalisée sous agitation. L'agent de diffusion peut être ajouté en continu ou en discontinu dans une quantité comprise entre 1 et 50% en masse, de préférence entre 10 et 25% en masse. Le temps nécessaire à la diffusion moléculaire de l'étape (b) est déterminé par toute méthode appropriée. Cette étape (b) peut être réitérée autant de fois que souhaitée pour obtenir une vitesse de dissolution satisfaisante. Avantageusement, l'étape (b) dure entre environ 1 et 16 heures. Les conditions de pression et de température de l'étape (b) sont choisies de façon à favoriser la diffusion moléculaire. Avantageusement la pression du fluide supercritique est comprise entre 0,5 MPa et 50 MPa et la température entre 0 et 200 C. Avantageusement l'étape (b) du procédé selon la présente invention est mise en 10 oeuvre dans un réacteur fermé, en particulier un autoclave. Le procédé peut être mis en oeuvre en batch ou en continu. De façon avantageuse le procédé selon la présente invention est réalisé en batch. É Les deux dernières étapes ((d) et (e)) consistent à ajouter et mélanger un agent d'interaction avec le complexe au complexe substance active molécule hôte. Cet agent d'interaction avec le complexe interagit selon deux hypothèses plausibles: interactions fortes avec la substance active incluse dans la molécule hôte lors des étapes précédente, et/ou interactions fortes avec le complexe précédemment formé. Ceci permet d'améliorer principalement les propriétés de dissolution du complexe dans les liquides biologiques, et notamment l'eau et/éventuellement d'augmenter le taux d'inclusion de la substance active dans la molécule hôte. L'amélioration des propriétés physico-chimiques, notamment en terme de dissolution du système formé peut avoir pour origine - Une interaction non covalente de l'agent d'interaction avec le complexe avec la substance active, la molécule hôte ou les deux (complexation, salification...). - Une variation locale du pH du milieu de dissolution - L'obtention d'un système présentant un eutectique - Une modification de l'interface entre le système et son milieu de dissolution 30 (effet surfactant, changement granulométrie) Avantageusement, l'étape (d) du procédé est mise en oeuvre en milieu semi- solide, le complexe n'étant pas dissous dans un milieu aqueux avant l'ajout de l'agent d'interaction avec le complexe. Cet agent va donc simplement humidifier le complexe ou former une pâte avec le complexe. Avantageusement, l'étape (d) est réalisée sous agitation. Avantageusement, l'étape (b) du procédé selon la présente invention est mis en oeuvre dans un réacteur fermé éventuellement agité, alimenté par le fluide dense et la solution de substance active le cas échant, en continu. La présente invention concerne également un composé d'inclusion soluble comprenant une ou plusieurs substances actives peu soluble dans un milieu aqueux incluses dans une ou plusieurs molécules hôtes, susceptible d'être obtenu par le procédé selon la présente invention. Avantageusement le taux d'inclusion de la substance active dans le composé d'inclusion soluble selon la présente invention est supérieur à 95% calculé par analyse DSC telle que décrite ci-après. Les exemples suivants sont donnés à titre indicatif non limitatif. Les différents exemples proposés ont été réalisés avec du piroxicam comme 20 substance active, la bêta cyclodextrine comme molécule hôte, l'ammoniaque comme agent d'interaction avec le complexe et l'eau comme agent de diffusion. Analyse: Le taux d'inclusion de la substance active dans la molécule hôte est évalué par analyse thermique différentielle (DSC). Dans le cadre d'une DSC, on applique une rampe de température sous flux d'azote au produit à tester, à l'aide d'un appareil DSC 7 Perkin Elmer. Le rendement de complexation est évalué par mesure de la réduction (ou disparition) du pic thermique relatif à la fusion du principe actif resté libre sous forme cristalline. Pour mesurer les propriétés de dissolution de la poudre, on dissout l'équivalent de 4g de piroxicam dans une solution aqueuse, à 37 C. Au bout de 15 min, on effectue un prélèvement, puis on mesure par HPLC la quantité de piroxicam dissoute, le résultat est exprimé en grammes de piroxicam dissous par litre d'eau. Selon cette méthode la solubilité du piroxicam pur dans l'eau est inférieure à 0,2 g/l. Exemple 1: Résultats obtenus en utilisant le procédé selon la présente invention 8 grammes de piroxicam, 76 grammes de béta-cyclodextrine, 25,2 g d'eau sont mélangés et introduits dans un réacteur de deux litres. Le dioxyde de carbone est par la suite introduit dans le réacteur sous une pression de 200 bar et sous une température de 150 C. L'ensemble est maintenu dans ces conditions opératoires pendant une durée de deux heures. Après l'étape dite de maturation, une partie de la poudre collectée (12 g) est mélangée à 2,11 g d'une solution ammoniacale à 28%, puis placée dans une étuve ventilée à 60 C, durant une nuit. L'analyse DSC révèle un taux d'inclusion du piroxicam dans la cyclodextrine de 20 99%, la dissolution du piroxicam est de 3,019 g/1. Exemple comparatif 2: Résultats obtenus après l'étape de maturation sans aiout d'agent d'interaction avec le complexe 4 grammes de piroxicam, 38 grammes de béta-cyclodextrine, 8,95 grammes d'eau sont mélangés et introduits dans un réacteur de deux litres. Le dioxyde de carbone est par la suite introduit dans le réacteur sous une pression de 150 bar et sous une température de 150 C. L'ensemble est maintenu dans ces conditions opératoires pendant une durée de deux heures. Après détente du milieu une partie de la poudre collectée est placée dans une étuve ventilée à 60 C, durant une nuit. L'analyse DSC révèle un taux d'inclusion du piroxicam dans la cyclodextrine de 80 %, la dissolution du piroxicam est de 0,246 g/1. Exemple comparatif 3: Résultats obtenus si l'agent d'interaction avec le complexe est présent au cours de l'étape de maturation (b) 2 g de piroxicam, 19 g de béta-cyclodextrine, 3,75 g d'eau et 1,5 g de solution ammoniacale à 28% sont mélangés et introduits dans un réacteur de deux litres. Le dioxyde de carbone est par la suite introduit dans le réacteur sous une pression de 200 bar et sous une température de 160 C. L'ensemble est maintenu dans ces conditions opératoires pendant une durée de deux heures. Après détente du milieu, la poudre collectée est placée dans une étuve ventilée à 60 C, durant une nuit. L'analyse DSC révèle un taux d'inclusion du piroxicam dans la cyclodextrine de 50 %, la dissolution du piroxicam est de 1,075g/1. Exemple comparatif 4: Résultats obtenus si l'on tente de fixer l'agent d'interaction à la molécule hôte avant l'étape de maturation (b) 19 g de béta-cyclodextrine et 2,11 g de solution ammoniacale à 28% et 3, 15 g d'eau purifié sont mélangés et placés dans une étuve ventilée à 60 C, durant une nuit. On ajoute ensuite 2 g de piroxicam et 6,57 g d'eau. Le mélange est ensuite introduit dans un réacteur de deux litres. Le dioxyde de carbone est par la suite introduit dans le réacteur sous une pression de 200 bar et sous une température de 160 C. L'ensemble est maintenu dans ces conditions opératoires pendant une durée de deux heures. L'analyse DSC révèle un taux d'inclusion du piroxicam dans la cyclodextrine de 92 %, la dissolution du piroxicam est de 0,227g/1. Exemple comparatif 5: Résultats obtenus si l'on tente de fixer l'agent d'interaction à la substance active avant l'étape de maturation (b) 2 g de piroxicam et 2 g de solution ammoniacale à 28% sont mélangés et placés dans une étuve ventilée à 60 C, durant une nuit. On ajoute ensuite 14,3 g de bétacyclodextrine et 3,3 g d'eau. Le mélange est ensuite introduit dans un réacteur de deux litres. Le dioxyde de carbone est par la suite introduit dans le réacteur sous une pression de 150 bar et sous une température de 150 C. L'ensemble est maintenu dans ces conditions opératoires pendant une durée de deux heures. L'analyse DSC révèle un taux d'inclusion du piroxicam dans la cyclodextrine de 56 %, la dissolution du piroxicam est de 1,370g/1. Exemple 6: Résultats en utilisant le procédé selon la présente invention sur des 15 lots de taille semi-industrielle: 12,5 kg 1,1 kg de piroxicam, 10,6 kg de béta-cyclodextrine, 1,3 kg d'eau sont mélangés et introduits dans un réacteur de 50 litres. Le dioxyde de carbone est par la suite introduit dans le réacteur sous une pression de 150 bar et sous unetempérature de 100 C. L'ensemble est maintenu dans ces conditions opératoires pendant une durée de deux heures. Une partie de la poudre est placée dans une étuve à 80 C pendant une nuit. L'analyse DSC révèle un taux d'inclusion du piroxicam dans la cyclodextrine de 89 %, la dissolution du piroxicam est de 1,937g/1. La poudre collectée (12,6 kg) est mélangée à 2,6 kg d'une solution ammoniacale à 28%, puis placé dans une étuve ventilée à 60 C. L'analyse DSC révèle un taux d'inclusion du piroxicam dans la cyclodextrine de 100 %, la dissolution du piroxicam est largement supérieure à 3 g/1. 2868315 15 Résumé des résultats obtenus Le tableau 1 ci-dessous rassemble les résultats des différents exemples indiqués ci-dessus et permet de constater la valeur ajoutée du procédé selon la présente invention. Tableau 1: Procédé / Matières / Ex.1 Ex. Ex. Ex. Ex. Ex. 6 Comp. Comp. Comp. Comp. 2 3 4 5 Matières engagées: É Piroxicam X X X X X X É Piroxicam préalablement mélangé avec l'agent d'interaction avec le complexe É f3-cyclodextrine É ss-cyclodextrine préalablement mélangé avec l'agent d'interaction avec le complexe X X X X X X X 1 ere phase: Complexation en X X X X X milieu CO2 supercritique 2eme phase: ajout de l'agent X X d'interaction avec le complexe 1 seule phase: X Complexation avec l'agent d'interaction avec le complexe en milieu CO2 supercritique Taux de complexation / 99% 80% 50% 92% 56% 100 (DSC) % Dissolution (gll) Revendications 1 Procédé de préparation d'un composé d'inclusion soluble comprenant une ou plusieurs substances actives peu soluble dans un milieu aqueux incluses dans une ou plusieurs molécules hôtes, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes successives suivantes: a. mise en contact d'une ou plusieurs substances actives avec une ou plusieurs molécules hôtes, b. mise en oeuvre d'une étape de diffusion moléculaire par mise en contact, en mode statique, d'un fluide dense sous pression avec le mélange obtenu à l'étape (a) en présence d'un ou plusieurs agents de diffusion, c. récupération du complexe moléculaire substance active molécule hôte ainsi formé, d. mise en oeuvre d'une étape qui consiste à ajouter et mélanger un agent d'interaction avec le complexe au complexe moléculaire substance active molécules hôtes e. récupération du composé d'inclusion soluble ainsi formé. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la molécule hôte est choisie dans le groupe constitué par les oses ou polyoses ou leur mélanges, de préférence parmi les cyclodextrines et leur mélange. 3. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé en ce 25 que l'agent d'interaction avec le complexe est un acide ou une base. 4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que l'agent d'interaction avec le complexe est un acide aminé, un acide carboxylique ou l'ammoniaque. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce 30 que le fluide dense sous pression est le dioxyde de carbone. 2868315 18 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que la substance active est un actif pharmaceutique, de préférence choisi dans le groupe comprenant les analgésiques, les antipyrétiques, l'aspirine et ses dérivés, les antibiotiques, les anti-inflammatoires, les antiulcéreux, les antihypertenseurs, les neuroleptiques, les antidépresseurs, les oligonucléotides présentant une activité thérapeutique, les peptides présentant une activité thérapeutique et les protéines présentant une activité thérapeutique, un actif cosmétique ou nutraceutique. 7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que la substance active est choisie dans le groupe comprenant les dérivés d'anilide, les dérivés d'épipodophyllotoxine, le minoxidil, le piroxicam, l'acide valérique, l'acide octanoïque, l'acide laurique, l'acide stéarique, l'acide tiaprofénique, l'oméprazole, l'éconazole, le miconazole, le kétoconazole, l'astémizole, la cyclobenzaprine, la nimésulide, l'ibuprofen, la terfénadine, le dompéridone, le naproxen et 1'éflucimibe, avantageusement il s'agit du piroxicam. 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que la pression du fluide dense est comprise entre 0,5 MPa et 50 MPa et la température entre 0 et 200 C. 9. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que l'agent de diffusion est choisi dans le groupe constitué par les alcools, les cétones, les éthers, les esters et l'eau avec ou sans agent surfactant et leurs mélanges, avantageusement de l'eau. 10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que l'étape (b) de diffusion moléculaire est réalisée avec agitation. 11. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisé en ce que l'agent de diffusion est ajouté en continu ou en discontinu dans une quantité comprise entre 1 et 50 % en masse, de préférence entre 10 et 25 % en masse. 12. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce 30 que l'étape (b) du procédé est mise en oeuvre dans un réacteur fermé éventuellement agité, alimenté par le fluide dense et la solution de substance active le cas échant, en continu. 13. Composé d'inclusion soluble comprenant une ou plusieurs substances actives peu soluble dans un milieu aqueux incluses dans une ou plusieurs molécules hôtes, caractérisés en ce qu'il est susceptible d'être obtenu par le procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 12. 14. Composé selon la revendication 13 caractérisé en ce que son taux d'inclusion en substance active est supérieur à 95%. 15. Composé selon l'une quelconque des revendications 13 ou 14 caractérisé en ce que la substance active est le piroxicam et la molécule hôte est la bétacyclodextrine.