Brevet FR2861293A1 — publié le 20050429

COMPOSITION POUR PREVENIR OU TRAITER DES AFFECTIONS RESULTANT D'UN PROCESSUS DE MORT CELLULAIRE COMPRENANT UNE LACTONE SESQUITERPENIQUE. La présente invention concerne des compositions comprenant à titre d'agent actif au moins une lactone sesquiterpénique ou au moins un extrait végétal contenant une lactone sesquiterpénique. L'invention concerne aussi l'utilisation d'une lactone sesquiterpénique ou d'un extrait végétal contenant une lactone sesquiterpénique dans les domaines pharmaceutiques, dermatologiques ou cosmétiques, pour traiter et/ou prévenir des états pathologiques ou des troubles esthétiques résultant d'un processus de mort cellulaire par apoptose. L'invention concerne également le domaine nutraceutique. Les lactones sesquiterpéniques sont présentes dans des végétaux, parmi lesquels on peut citer plus particulièrement les Astéracées (ou composées), les Lauracées, les Frullaniacées et les Magnoliacées. On les trouve donc dans tous les produits qui en sont dérivés. Il s'agit aussi de dérivés biosynthétiques de germacranolide de formule (I) et principalement d'eudesmanolides et de guaianolides. Cette structure générale est à l'origine de nombreux dérivés notamment issus d'importants réarrangements structuraux. Parmi les lactones sesquiterpéniques, l'invention envisage tout particulièrement la vulgarine de formule (II) ci-dessous. La vulgarine est une lactone sesquiterpénique du groupe des eudesmanolides décrite pour la première fois en 1961 par Rybalko (Rybalko K.S., Collect. Czech. Chem. Commun., 1961,26, 2909) . Il est connu que cette molécule possède des propriétés hypoglycémiantes (Rodriguez de Vera C., Boll. Chim. Farm., 1976,115, 445), antitumorale (Jeffery B. Harborne and H. Baxter, eds. 1983. Phytochemical Dictionary. A Handbook of Bioactive Compounds from Plants. Taylor & Frost, London. pp 791) et antibactérienne (Pickman A. K., Bioch. Syst. Ecol., 1986, 14, 255) . La vulgarine ainsi que ses dérivés lactones sesquiterpéniques sont essentiellement extraits des plantes de la famille des Astéracées, notamment du genre Artemisia et Achillea. La littérature fait état de nombreuses espèces du genre Artemisia, contenant de la vulgarine et ses dérivés. Un article récent indique ces références (Mansilla H. and Palenzuela J. A., Phytochemistry, 1999,51, 995). Il en est de même pour les plantes du genre Achillea (Glasl S. et al, Phytochemistry, 1995,38, 159 ; Kubelka W. et al, Bioch. Syst. Ecol., 1999,27, 437). Artemisia Sp et Achillea Sp sont des Astéracées largement répandues avec de nombreuses espèces. Elles ont déjà largement été décrites dans la littérature pour diverses propriétés, notamment antibactérienne, antipyrétique, anthelmintique, emménagogue...(Bruneton J., Pharmacognosie, Phytochimie-Plantes médicinales, deuxième édition Technique et Documentation-Lavoisier, 1993). Ces plantes sont décrites pour développer des lactones sesquiterpéniques, notamment des dérivés de la vulgarine. Les travaux de recherche réalisés dans le cadre de la présente invention ont maintenant mis en évidence, de façon surprenante, que les lactones sesquiterpéniques, plus particulièrement la vulgarine, et des extraits végétaux les contenant, agissaient, de manière dose dépendante, comme inhibiteurs de caspases et inhibaient également la production d'interleukines et l'activité des macrophages. Les caspases sont des enzymes appartenant à la famille des cysteinyl aspartarte protéases, essentiellement impliquées dans les processus de mort cellulaire par apoptose. Ce processus a été largement étudié ces dernières années, car il est à l'origine de nombreux intérêts thérapeutiques (Lockshin R.A. et al, Eds, When cells die, Wiley-Liss, New York, 1998) . Actuellement, on dénombre 11 caspases humaines, subdivisées en 3 sous groupes selon leur homologie de séquence et la spécificité des substrats. Les caspases du groupe I, caspases 1,4, 5 et 13, sont impliquées dans les processus inflammatoires, liés à la maturation de multiples cytokines pro-inflammatoires. Les caspases du groupe II, caspases 2,3 et 7, sont impliquées dans le clivage de substrats apoptotiques. Enfin, le groupe III remembre les caspases 6,8 et 9, impliquées dans l'activation des caspases du groupe II. Il semble que certaines caspases puissent avoir des fonctions redondantes étant donné la forte homologie des substrats clivés (Nicholson D. W. and Thornberry N.A., Trends Biochem. Sci., 1997,22, 299) . Toutefois, certains inhibiteurs sélectifs commencent à être mis en évidence (Lee D. et al, J. Med. Chem., 2001,44, 2015). Les travaux de cristallographie ont permis d'accéder à la connaissance structurale de certaines caspases, ce qui a facilité la recherche de zones structurales permettant la sélectivité (Mittl P. R.E. et al, J. Biol. Chem., 1997,272, 6539 ; Rotonda J., Nat. Struct. Biol., 1996, 3, 619). Les caspases sont exprimées dans le cytosol de nombreux type cellulaire, y compris les cellules de la peau comme les mélanocytes, les kératinocytes, etc... ainsi que dans les cellules du cartilage comme les chondrocytes. Elles apparaissent également dans les cellules du tissus cérébral, où elles deviennent la cible de maladies neurodégénératives (Lee D., Apoptotic caspase inhibitors : Progress towards identifying therapeutic agents , communication oral). Un article récent décrit que la caspase 3 est impliquée dans les processus de clivage d'un facteur de fragmentation de l'ADN qui induit la destruction de l'ADN (Boulares A.H. et al, J. Biol. Chem., 2001, sous presse). Un autre article scientifique mentionne que l'identification de ligands bloquant ces cibles auraient des vertus protectrices des mélanocytes et des fibroblastes (Zhang X. D. et al, FEBS Lett., 2000,482, 193). Par ailleurs, il a été montré que de tels ligands favoriseraient la protection des réseaux de collagène et empêcheraient la mort cellulaire des cellules du cartilage (Lee D. et al, J. Biol. Chem., 2000,275, 16007). Enfin, des propriétés anti-inflammatoires sont revendiquées étant donné l'implication de certaines caspases dans les processus de libération de cytokines pro-inflammatoires (Nicholson D. W. and Thornberry N.A., Trends Biochem. Sci., 1997,22, 299). Les actions combinées anti-inflammatoire et de protection cellulaire et moléculaire d'inhibiteurs de caspases permettent de suggérer des applications thérapeutiques dans les troubles articulaires (Lee D. et al, J. Biol. Chem., 2000,275, 16007). La présente invention vise précisément à offrir de nouvelles compositions pharmaceutiques, nutraceutiques, dermatologiques ou cosmétiques capables d'inhiber les caspases et notamment la caspase 3, et donc tout particulièrement utile pour le traitement ou la prévention de pathologies ou de troubles esthétiques résultant d'un processus de mort cellulaire par apoptose. Ce but est atteint grâce à des compositions pharmaceutiques, nutraceutiques, dermatologiques ou cosmétiques comprenant comme agent actif au moins une lactone sesquiterpénique, ou un dérivé ou analogue de celle-ci ou encore au moins un extrait végétal contenant au moins une lactone sesquiterpénique, ledit agent actif étant associée avantageusement dans la composition avec un véhicule compatible et approprié au mode d'administration choisie. L'invention envisage tout particulièrement comme agent actif dans les compositions ci-dessus la vulgarine, un dérivé ou analogue de celle-ci ou encore un extrait végétale la contenant. On entend par dérivé ou analogue de lactone sesquiterpénique ou de vulgarine selon la présente invention, un composé dont la formule dérive des formules (I) ou (II) et qui présente une activité inhibitrice de caspase conformément au test rapporté dans la partie expérimentale donnée plus loin. Il peut aussi s'agir de sels ou complexes acceptables. Des exemples de tels sels comprennent, mais ne se limitent pas à, des sels formés avec des acides inorganiques, comme ceux choisis dans le groupe comprenant les acides chlorhydrique, bromhydrique, sulfurique, phosphorique, nitrique ou équivalent, ou des sels formés avec des acides organiques tels que les acides acétique, oxalique, tartrique, succinique, malique, fumarique, maléique, ascorbique, benzoique, tannique, alginique, polyglutamique, naphtalène sulfonique, naphtalène disulfonique et polygalacturonique. On entend tout particulièrement par extrait végétal un extrait d'Artemisia Sp ou d'Achillea Sp. Il s'agit plus spécialement d'un extrait de cellules d'Artemisia Sp ou d'Achillea Sp et tout spécifiquement d'un extrait de cellules d'au moins un végétal du genre Artemisia Sp ou Achillea Sp de la famille des Astéracées. Ce matériel cellulaire peut être obtenu par culture in vi tro ou in vivo. Par culture in vitro, on entend l'ensemble des techniques connues de l'homme du métier qui permettent de manière artificielle l'obtention d'un végétal ou d'une partie d'un végétal. Par culture in vivo, on entend l'ensemble des techniques de cultures qui permettent d'obtenir un végétal ou une partie d'un végétal. Ainsi, l'extrait peut être un extrait d'organe (racine, tige, feuille, écorce), voire de cellules d'organe, d'au moins une plante du genre Artemisia Sp ou Achillea Sp de la famille des Astéracées, ou encore un extrait de cellules indifférenciées d'au moins une telle plante. Ces extraits sont enrichis dans des proportions variables selon le type d'extrait, en lactones sesquiterpéniques. Ces extraits purifiés présentent ainsi l'avantage d'être affranchis de tout problème de toxicité par rapport à l'extrait brut. Plus particulièrement, trois formules d'extraction purification peuvent être envisagées : (i) un extrait total de la plante, (ii) un extrait visant à concentrer les lactones sesquiterpéniques et enfin, (iii) l'obtention de lactones sesquiterpéniques pures. Toute méthode d'extraction ou de purification connue de l'homme du métier peut être utilisée selon l'invention. On peut en particulier citer les extraits alcooliques (notamment méthanoliques, éthanoliques), aqueux ou des extraits utilisant des solvants tels que les cétones, les esters, les éthers, les polyols, les solvants chlorés et les mélanges d'au moins deux des solvants précités, comme les extraits hydroalcooliques. A titre d'exemple de préparation d'extraits d'Artemisia Sp ou d'Achillea Sp et de lactones sesquiterpéniques purifiées selon l'invention, on peut citer les protocoles suivants : - Extrait total : Dans une première étape, on broie le matériel végétal frais, congelé ou sec dans une solution aqueuse à froid, dans une seconde étape, on filtre la solution aqueuse qui est finalement stérilisée. Cette solution aqueuse correspond à l'extrait. Cet extrait peut ensuite être séché (évaporation, lyophilisation). Dans une variante de ce procédé, on utilise dans la première étape une solution méthanolique, éthanolique ou hydroalcoolique. L'extrait ainsi obtenu peut être évaporé à sec, le résidu étant utilisé tel quel ou après purification. Extrait enrichi en lactones sesquiterpéniques : Le matériel végétal est traité comme indiqué ci-dessus pour obtenir un extrait total hydroalcoolique qui est évaporé à sec. Cet extrait total est ensuite retraité par des solutions Hexane/acétate d'éthyle dans des proportions variables afin de concentrer les lactones sesquiterpéniques. Cette solution est filtrée et permet d'obtenir l'extrait enrichi en lactones sesquiterpéniques. Cet extrait peut également être séché par évaporation. - Molécules pures : Les extraits, totaux ou enrichis en lactones sesquiterpéniques, peuvent être fractionnés par chromatographie afin de séparer les différentes lactones sesquiterpéniques, comme la vulgarine, la 4-épivulgarine ou encore la 2,3-dihydrovulgarine. Ces fractions permettent d'extraire des composés purs à partir de matériel végétal. Ces composés peuvent aussi être utilisés dans les préparations dermocosmétiques et pharmaceutiques pour les propriétés revendiquées précédemment. Des dérivés synthétiques et/ou hémisynthétiques peuvent également être revendiqués pour ces mêmes propriétés. De tels dérivés synthétiques et hémisynthétiques retrouvent tout leur intérêt dans le cas de maladies neurodégénératives où la molécule doit être optimisée afin de franchir certaines barrières naturelles. Ces trois modes de préparation font partie intégrante de l'invention. Ces extraits et composés purs peuvent être utilisés tels quels sous forme liquide ou en poudre après séchage par atomisation, évaporation ou lyophilisation, ou encapsulée dans des liposomes ou autres vecteurs et supports pour une meilleure homogénéité de la composition et une meilleure diffusion du produit actif notamment sur la peau. Comme indiqué précédemment, la Demanderesse a mis en évidence que les lactones sesquiterpéniques, et plus particulièrement la vulgarine, permettent de prévenir, de retarder ou de traiter les processus de mort cellulaire par apoptose en inhibant les caspases. En conséquence, les compositions de l'invention trouvent des applications dans les domaines pharmaceutiques, dermatologiques et cosmétiques, pour traiter et/ou prévenir des états pathologiques ou des troubles esthétiques résultant de la mort cellulaire par apoptose. Les lactones sesquiterpéniques, plus particulièrement la vulgarine, et les extraits végétaux les contenant, peuvent être associés dans les compositions de l'invention avec d'autres composés présentant des propriétés diverses. Ainsi, il a été observé que l'activité anti-inflammatoire des lactones sesquiterpéniques ou des extraits végétaux les contenant peut encore être amélioré en association avec des substances augmentant la protection cutanée. A titre d'exemple mais de manière non limitative, on peut citer les associations avec des mucopolysaccharides, des vitamines, des céramides, des substances antiradicalaires, des filtres U.V. De même, l'activité réparatrice des lactones sesquiterpéniques ou des extraits végétaux les contenant est particulièrement intéressante quand ils sont associés avec des substances ayant un effet cicatrisant comme des protéines, l'acide hyaluronique, des acides aminés, ou avec des substances anti-inflammatoires. L'activité protectrice des lactones sesquiterpéniques ou des extraits les contenant vis-à-vis des radicaux libres et des UV est également très intéressante dans le domaine capillaire, notamment dans le cas d'association avec des substances facilitant le bon état du cuir chevelu et de celui du cheveu, comme des minéraux, des vitamines, des céramides, des extraits protéiques, des mucopolysaccharides, des acides de fleurs ou de fruits. Ainsi, les compositions de l'invention sont tout particulièrement adaptées à une application topique pour prévenir et/ou traiter de nombreuses altérations cutanées résultant du processus de mort cellulaire par apoptose (Contet-Audonneau J. -L. et al, IFSCC, 2001,4, 115-123). L'invention a donc tout particulièrement pour objet l'utilisation cosmétique d'une lactone sesquiterpénique, et plus particulièrement de vulgarine, ou d'un extrait végétal les contenant, comme agent protecteur et réparateur de la peau et du système pileux comme les cheveux, notamment pour lutter contre les agressions externes liées à la pollution, au soleil, au stress oxydatif, au vieillissement, en contrecarrant les processus apoptotique et inflammatoire, conditionnés par les caspases. Une application directe des compositions de l' invention concerne la lutte contre le vieillissement et la mort cellulaire induites par les UV. L'invention se rapporte aussi à l'une utilisation de ces compositions en tant que prolongateur de bronzage. Pour une utilisation cosmétique, les compositions de l'invention peuvent se présenter sous la forme de crèmes, gels, lotions, laits, émulsions H/E et E/H, solutions, onguents, pulvérisateurs, huiles corporelles, lotions capillaires, shampooings, lotions après-rasage, savons, bâtons protecteurs des lèvres, bâtons et crayons pour maquillage. Sous la forme de gel, elles comprennent des excipients appropriés tels que les esters de cellulose ou d'autres agents gélifiants, tels que le carbopol, la gomme guar, etc... Ces compositions cosmétiques peuvent aussi prendre la forme de lotion ou solution dans laquelle les extraits et/ou molécules sont sous forme encapsulée, par exemple dans des microsphères. Ces microsphères peuvent par exemple être constituées de corps gras, d'agar et d'eau. Les agents actifs peuvent être aussi incorporés dans des vecteurs de type liposomes, glycosphères, dans des chylomicrons, des macro-, micro-, nano-particules ainsi que les macro-, micro- et nanocapsules et aussi être adsorbés sur des polymères organiques poudreux, les talcs, bentonites et autres supports minéraux. Ces émulsions jouissent d'une bonne stabilité et peuvent être conservées pendant le temps nécessaire pour l'utilisation à des températures comprises entre 0 et 50 C sans qu'il y ait sédimentation des constituants ou séparation des phases. Les compositions cosmétiques de l'invention comprennent de l'ordre de 0,01 à 5% en poids, préférentiellement entre 0,1 et 2,5% d'agents actifs lorsqu'elles sont sous forme de poudre et de l'ordre de 0,01 à 25%, préférentiellement entre 0,5 et 10% lorsqu'elles sont sous forme encapsulée. Pour la préparation de ces compositions, la lactone sesquiterpénique, et plus particulièrement la vulgarine, ou un extrait végétal, sont mélangés aux excipients généralement employés en cosmétique. Les compositions cosmétiques de l'invention peuvent aussi contenir des additifs ou des adjuvants usuels en cosmétologie, comme par exemple des agents antibactériens ou des parfums mais aussi des lipides d'extraction et/ou de synthèse, polymères gélifiants et viscosants, tensio-actifs et émulsifiants, principes actifs hydro ou liposolubles, extraits de plantes, extraits tissulaires, extraits marins, actifs de synthèse. L'utilisation cosmétique ou dermocosmétique d'extraits et/ou molécules comprend tous les soins du corps et de la peau y compris les produits solaires, protecteurs et bronzants, les produits anti-âge, anti-seborrhéïques, toniques, les produits assurant l'amélioration de l'aspect de la peau y compris le traitement acnéique, les rougeurs cutanées, le traitement du cuir chevelu et celui de la chute des cheveux. Les compositions cosmétiques de la présente invention peuvent aussi comprendre d'autres principes actifs complémentaires choisis pour leur action, par exemple pour la protection solaire, l'effet anti-rides, l'activité antiradicalaire et antioxydante, l'activité anti-irritante, la nutrition cellulaire, la respiration cellulaire, l'hydratation et la régénération cellulaire, les traitements anti-séborrhéïques, ainsi que d'autres principes actifs ayant une action sur la tonicité cutanée, la protection du cheveu. Les compositions cosmétiques de la présente invention sont de préférence à utiliser quotidiennement en les appliquant une ou plusieurs fois par jour. Les compositions cosmétiques de la présente invention sont très bien tolérées, elles ne présentent aucune phototoxicité et leur application sur la peau, pour des périodes de temps prolongées, n'implique aucun effet systémique. L'invention concerne aussi l'utilisation d'une lactone sesquiterpénique, et plus particulièrement la vulgarine, ou un extrait végétal les contenant pour la préparation de compositions dermocosmétiques présentant une activité anti-inflammatoire et dermoprotectrice. Ces compositions sont utiles pour prévenir et/ou traiter notamment des maladies dermatologiques liés à des activités séborrhéiques, acnéiques ou inflammatoires. Ces compositions dermocosmétiques se présentent sous forme liquide, de poudre, de pâte ou d'émulsion, seule ou en combinaison avec d'autres substances. Elles comprennent de l' ordre de 0,01 à 25% en poids de lactone sesquiterpénique, et plus particulièrement de vulgarine, ou d'un extrait végétal les contenant. Pour les préparations de ces compositions dermocosmétiques, les extraits et/ou lactones sesquiterpéniques issus des genres Artemisia et/ou Achillea sont mélangés à des excipients. En conséquence, de manière générale, l'invention se rapporte à l'utilisation d'une lactone sesquiterpénique, plus particulièrement de vulgarine, ou d'un extrait végétal les contenant, pour la préparation d'une composition pharmaceutique, nutraceutique, dermatologique ou cosmétique destiné à prévenir et/ou traiter les pathologies et désordres résultant : - de la sénescence des cellules de la peau et des articulations, comme dans le cas des pathologies articulaires liées au vieillissement et à la dégénérescence du cartilage, notamment dans le cas d'arthrose et de polyarthrite et autres affections inflammatoires du cartilage, - d'une neurodégénérescence, - d'états inflammatoires des systèmes cutanés, pileux et articulaires, induisant des démangeaisons, irritations, rougeurs chroniques, irritations et démangeaisons persistantes et des troubles fonctionnels de la fragilité capillaire - d'un dysfonctionnement cellulaire du pancréas. Une composition pharmaceutique selon l'invention comprend outre au moins un agent actif comme défini précédemment, un vecteur, ou un excipient pharmaceutiquement acceptable. La synthèse et l'hémisynthèse de ces dérivés lactones sesquiterpéniques peuvent permettent d'augmenter les qualités biophysico-chimiques de tels composés afin de les rendre plus perméables aux différentes barrières biologiques de l'organisme. C'est le cas par exemple du passage de la barrière hémato-encéphalique dans le cas de revendications des propriétés de protection du système nerveux central. Toutes formulations cosmétiques intégrant de telles substances sont revendiquées pour les mêmes propriétés. Dans le cadre d'une application nutraceutique, les compositions selon l'invention sont destinées à offrir une lactone sesquiterpénique, un dérivé ou analogue de celle-ci ou encore au moins un extrait végétal contenant au moins une lactone sesquiterpénique, avantageusement la vulgarine, à titre de nutriments pour les applications thérapeutiques et prophylactiques indiquées précédemment. D'autres avantages et caractéristiques de l'invention apparaîtront des exemples qui suivent concernant la préparation d'agents actifs à base de lactones sesquiterpéniques, l'activité de la vulgarine dans des tests apoptotiques et sa toxicité. Il sera fait référence dans ces exemples aux dessins en annexe dans lesquels : - La figure 1 représente le pourcentage de cellules JURKAT en apoptose après 12 heures d'incubation avec des quantités variables de vulgarine. - La figure 2 représente le pourcentage de cellules JURKAT en apoptose après 24 heures d'incubation avec des quantités variables de vulgarine. Exemple 1 : Réalisation de l'extrait total, de l'extrait purifié et purification des principes actifs. La partie aérienne d'Artemisia Sp ou d'Achillea Sp de la famille des Astéracées a été utilisée. La partie aérienne a été séchée puis broyée en une poudre. On a extrait la poudre avec un mélange eau/éthanol (5/95 en volume) à raison de 10 parties pour 1 partie de végétal, à température ambiante. Après 5 heures d'agitation, on a filtré et/ou centrifugé, puis évaporé le filtrat et/ou mis le surnageant, à sec. Le rendement est bien entendu fonction de la plante traitée. L'extrait total hydroalcoolique sec 1 ainsi obtenu peut être utilisé pour ses propriétés revendiquées. Un protocole analogue cité dans la littérature (Breton J.L. et al, Tetrahedron, 1985,41, 3141) peut être appliqué. Afin d'amplifier le rapport activité biologique/matière, il est possible de concentrer les molécules actives, c'est-à-dire les lactones sesquiterpéniques dans notre cas. L'extrait total sec 1, précédemment obtenu, peut alors être repris dans un mélange de solvants hexane/acétate d'éthyle (1:4 v/v). Cet extrait 2 enrichi en lactones sesquiterpéniques peut alors être évaporé, séché et conservé sous atmosphère inerte (azote ou argon). Une alternative serait d'extraire par ce même solvant hexane/acétate d'éthyle, les lactones sesquiterpéniques directement à partir des parties aériennes du végétal. Cet extrait 2 enrichi en lactones sesquiterpéniques peut alors être utilisé pour ses propriétés revendiquées. La purification des différentes lactones sesquiterpéniques peut être réalisée à partir des extraits 1 et/ou 2 par des mélanges hexane/acétate d'éthyle dans des proportions de polarité croissante (par exemple 4 :1, 1 :1, et 1:4 v/v). Les différentes fractions obtenues ont été chromatographiées avec un gradient hexane/acétate d'éthyle, puis regroupées selon leur profil chromatographique. Les lactones sesquiterpéniques pures obtenues sont fonction de la plante traitées. Ces différentes lactones pures peuvent être employées seules ou en associations qualitatives et/ou quantitatives entre elles, pour leurs propriétés biologiques revendiquées. Exemple 2 : Réalisation des tests apoptotiques 1 - Evaluation de l'activité de la vulgarine et de ses dérivés. Les tests apoptotiques ont été réalisés sur des cellules de type Jurkat. La lignée cellulaire Jurkat (Clone E6-1, ATCC TIB 152), dérivée de cellule T humaine de leucémie aiguë, a été décrite dans la littérature (Weiss A. et al, Journal of Immunology, 1984,133, 123). Les cellules ont été incubées dans un milieu de culture en présence 1 L d'arséniate de sodium. La concentration finale en arséniate de sodium dans le milieu de culture est de 5 M. Afin de tester l'inhibition de l'apoptose induite par l'arséniate de sodium, les cellules ont été cultivées soit en absence (témoin) soit en présence de vulgarine 2,6 M ou d'un de ses dérivés. L'apoptose a été quantifiée par cytometrie en flux. Les cellules sont rendues perméables et leurs noyaux sont teintés avec de l'iodure de propidium en présence de ribonucléase. Un minimum de 3000 cellules ont été analysées afin de quantifier l'apoptose cellulaire (Hotz M.A. et al, Cytometry, 1994,15, 237). Dans ces conditions expérimentales, le pourcentage d'inhibition de l'apoptose, en présence de 2,6 uM de vulgarine, est voisin de 100%. Il en est de même pour la 4-épivulgarine. Quant aux extraits, ils montrent des niveaux d'inhibition variables selon leur teneur en lactones sesquiterpéniques. Ainsi, l'apoptose cellulaire est levée par les lactones sesquiterpéniques de manière dose dépendante. Ces lactones sesquiterpéniques ont donc un rôle protecteur au niveau cellulaire et moléculaire. Exemple 3 : Réalisation des tests apoptotiques 2 - Evaluation de l'activité de la vulgarine. La lignée cellulaire humaine T Jurkat a été incubée avec l'ionophore A23187, inducteur d'apoptose, en présence ou absence de vulgarine en concentrations croissantes (de O.OOluM à 10 M). Les populations cellulaires sont alors analysées par cytométrie en flux après marquage fluorescent (AnnexinV pour révéler les phosphatidylesérines en surface cellulaire = premier signes de l'apoptose - Iodure de Propidium pour révéler l'ADN des cellules nécrotiques) et différentiées en sous populations : cellules normales non marquées, cellules apoptotiques (marquage AnnexinV simple), cellules nécrotiques (marquage double AnnexinV et IP). Exemple 4 : Evaluation de la toxicité pour la vulgarine et ses dérivés. Le test de viabilité cellulaire est décrit ciaprès. Les tests ont été réalisés sur des PBMCs (lymphocytes et monocytes) ou du sang total de donneurs sains humains. Tous les prélèvements ont été réalisés au Service d'Hépato-Gastroentérologie et d'Assistance Nutritive des Hôpitaux Universitaires de Strasbourg (Hôpital de Hautepierre), après approbation du protocole d'étude concernant les effets du célastrol par le CCPPRB n 1 d'Alsace. Chez des volontaires sains, 20 ml de sang veineux périphérique sont prélevés le matin à jeun sur héparine. Le sang est ensuite dilué au demi dans de la solution saline équilibrée de Hank's dépourvue en Ca2+ et en Mg2+ (HBSS-CMF, Gibco BRL, Cergy, France) additionnée de 100 UI/ml de streptomycine (Biochrom KG, Berlin, Allemagne) et de 100 UI/ml de pénicilline (Biochrom KG). Les PBMCs (lymphocytes et monocytes) sont alors séparées par centrifugation sur Ficoll-Histopaque de densité 1,076 (Sigma, L'Isle d'Abeau-Chesnes, France) (30 min à 400 g) puis, après deux lavages dans du HBSS-CMF additionné d'antibiotiques (10 min à 250 g), resuspendues dans du milieu RPMI 1640 (Gibco BRL) additionné de 10 % (volume/volume) de sérum f#tal de veau (SFV) inactivé à la chaleur (56 C, 30 min, Gibco BRL) et d'antibiotiques. Après comptage à la cellule de Malassez, les cellules sont incubées à raison de 2 x 105 cellules/puits de 1 ml dans des plaques de 24 puits (Corning Inc., New York, USA) à 37 C dans un incubateur humidifié (air 95 % - CO2 5 %) , en présence ou en absence des molécules étudiées préparées dans du DMSO (diméthyl sulfoxyde, Sigma ; maximum : 1 % (v/v) par puit), avec ou sans activation par du lipopolysaccharide de Salmonella abortus equi (LPS, 5 ug/ml) (Sigma) et de la phytohémagglutinine (PHA, 1 ug/ml) (Sigma) ajoutés à T0. Après 24 heures d'incubation, les plaques sont centrifugées (15 min à 200 g), et les surnageants prélevés puis congelés à -80 C jusqu'au dosage. La technique est basée sur le clivage par la déshydrogénase mitochondriale d'un sel de tétrazolium de couleur jaune en formazan de couleur orange. Les culots cellulaires (PBMCs et sang total) contenus dans les plaques de culture sont resuspendus dans du RPMI 1640 additionné d'hydroxide 2,3-bis-(2-méthoxy-4-nitro-5-sulfophényl)-5- [(phénylamino)carbonyl]-2H-tétrazolium (XTT, 1 mg/ml, Sigma), et de méthosulfate de phénazine (1,25 mM, Sigma), catalyseur de la réaction. Les plaques sont incubées 4 à 24 heures, puis lues en absorbance à 450 nm (filtre de référence : 620 nm) . La viabilité cellulaire est estimée par rapport au témoin de cellules activées. Les résultats obtenus sont rapportés dans tableau 1 ci-dessous. Tableau 1 Pourcentage de viabilité cellulaire Concentratio Vulgarine 4- 2,3n ( M) épivulgarine dihydrovulgarine 30 102 100 105 10 104 103 108 1 119 99 105 0,1 102 103 104 0,01 112 105 110 Ces résultats montrent que ces dérivés de la vulgarine ne présentent aucun effet toxique de 0,01 M à 30 M. REVENDICATIONS 1) Composition pharmaceutique, nutraceutique, dermatologique ou cosmétique comprenant comme agent actif au moins une lactone sesquiterpénique, ou un dérivé ou analogue de celle-ci ou encore au moins un extrait végétal contenant au moins une lactone sesquiterpénique. 2) Composition selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite lactone sesquiterpénique, dérivé ou analogue de celle-ci ou extrait végétal est capable d'inhiber une caspase, notamment la caspase 3. 3) Composition selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce qu'elle comprend de la vulgarine, un dérivé ou analogue de celle-ci ou encore un extrait végétale la contenant. 4) Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'extrait végétal est un extrait de plante de la famille des asteracae. 5) Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'extrait végétal est un extrait d'Artemisia Sp ou d'Achillea Sp. 6) Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'il s'agit d'une composition pour traiter et/ou prévenir des états pathologiques ou des troubles esthétiques résultant d'un processus de mort cellulaire par apoptose. 7) Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un composé choisi dans le groupe comprenant des mucopolysaccharides, des vitamines, des céramides, des substances antiradicalaires, des filtres U.V. 8) Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un composé choisi dans le groupe comprenant des protéines, l'acide hyaluronique, des acides aminés. 9) Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce qu' elle comprend en outre une substance anti-inflammatoire. 10) Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un composé choisi dans le groupe comprenant des minéraux, des vitamines, des céramides, des extraits protéiques, des mucopolysaccharides, des acides de fleurs ou de fruits. 11) Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend un ou plusieurs véhicules ou excipients adaptés à une application topique. 12) Utilisation cosmétique d'une lactone sesquiterpénique, d'un dérivé ou analogue de celle-ci ou d'un extrait végétal les contenant, comme agent protecteur et réparateur de la peau et du système pileux. 13) Utilisation cosmétique selon la revendication 12, caractérisée en ce que ladite lactone sesquiterpénique est la vulgarine. 14) Utilisation d'une lactone sesquiterpénique, d'un dérivé ou analogue de celle-ci ou d'un extrait végétal les contenant, pour la préparation d'une composition dermatologique utile pour prévenir et/ou traiter des maladies liés à des activités séborrhéiques, acnéiques ou inflammatoires. 15) Utilisation selon la revendication 14, caractérisée en ce que ladite lactone sesquiterpénique est la vulgarine. 16) Utilisation d'une lactone sesquiterpénique, d'un dérivé ou analogue de celle-ci ou d'un extrait végétal les contenant, pour la préparation d'une composition pharmaceutique, dermatologique ou cosmétique destiné à prévenir et/ou traiter les pathologies et désordres choisis dans le groupe comprenant des pathologies articulaires liées au vieillissement et à la dégénérescence du cartilage, notamment dans le cas d'arthrose et de polyarthrite et autres affections inflammatoires du cartilage, les neurodégénérescences, les états inflammatoires des systèmes cutanés, pileux et articulaires, induisant des démangeaisons, irritations, rougeurs chroniques, irritations et démangeaisons persistantes et des troubles fonctionnels de la fragilité capillaire, les dysfonctionnements cellulaires du pancréas.