Brevet FR2855939A1 — publié le 20041217

i Procédé de lutte contre des agents pathogènes de plantes agronomiquement utiles à l'aide d'un nouvel éliciteur et composition pour la mise en oeuvre de ce procédé Domaine de l'invention La présente invention concerne un procédé de lutte contre des agents pathogènes et toutes sortes de parasites de plantes (champignon, bactéries, virus, insectes... etc....) à l'aide d'un nouveau stimulateur des défenses naturelles des plantes ou éliciteur et composition pour la mise en oeuvre de ce procédé. La nouvelle composition est active à titre préventif et curatif et comprend un extrait de graines de fenugrec ou Trigonella foenum graecum. Technique antérieure Les plantes subissent en permanence une pression parasitaire de la part de nombreux agents pathogènes comme des virus, des bactéries, des champignons ou des insectes. La résistance de la plante à un agent pathogène résulte soit de la reconnaissance de l'agent pathogène par la plante (relation gène pour gène), soit de la stimulation des défenses sous l'effet de blessures causées par le parasite. Dans le premier cas, la résistance résulte de la reconnaissance de l'agent pathogène porteur d'un gène particulier appelé "gène d'avirulence" par la plante dotée d'un "gène de résistance" correspondant. Dans ce cas, il existe une véritable relation interactive génétiquement programmée entre plante et parasite. Après reconnaissance des deux protagonistes, des mécanismes spécifiques sont alors développés par la plante (cascade d'événements métaboliques, synthèse de signaux messagers de la résistance), lui conférant le caractère de résistance, tandis que l'invasion des tissus hôtes par l'agent pathogène reste très localisée. Dans le second cas, les mécanismes de défense sont induits, lors d'attaques fongiques par exemple, par les oligosaccharides émanant d'une part de la dégradation des parois du champignon sous l'action des hydrolases.de l'hôte, et d'autres part des parois des cellules hydrolysées par les enzymes du champignon. Ces débris de parois servent également de messagers de la résistance. Suite à un premier déclenchement des mécanismes de résistance, les végétaux peuvent développer une résistance accrue face à de nouvelles attaques de parasites, notamment dans les parties non infectées de la plante, et ceci à nouveau grâce à certains "messagers chimiques naturels". Ce mécanisme est appelé "Résistance Systémique Acquise". Lorsqu'une plante est sensible à un agent pathogène, celle-ci est incapable de reconnaître son agresseur, soit par la relation gène pour gène, soit par l'effet "blessure". Celle-ci est alors incapable d'activer de façon efficace ses gènes de défense. Il est alors possible de stimuler les défenses naturelles des plantes en leur fournissant de façon exogène ces "signaux chimiques naturels" de la résistance qu'elles sont incapables de produire dans certains cas vis à vis de certains agents pathogènes. Lorsqu'il y a reconnaissance entre la plante et l'agent pathogène, des mécanismes particuliers sont développés par la plante. Souvent la plante répond par une apparition de nécrose cellulaire sur le site de l'attaque par l'agent pathogène et bloque ainsi sa progression. Cette réaction de défense est presque toujours associée à la mise en oeuvre de mécanisme tels que la biosynthèse de phytalexines (molécules antifongiques), d'enzymes de défense comme les peroxydases ou des protéines en liaison avec la pathogenèse (protéines PR) comme les chitinases ou les f-1,4endoglucanases. Ces enzymes sont capables de lyser les parois fongiques et bactériennes. Lorsqu'il y a résistance, les plantes sont capables de renforcer les parois cellulaires (synthèse de lignine) pour bloquer l'agent pathogène sur son site de pénétration. On connaît un procédé pour la stimulation des défenses naturelles de plantes agronomiquement utiles qui comprend l'application auxdites plantes d'un agent éliciteur ou sensibilisateur qui est capable au contact des plantes de provoquer préventivement dans célles-ci l'activation des gènes de défense sur le site d'application du produit ainsi qu'une résistance systémique acquise. Un tel procédé est plus particulièrement décrit dans la demande de brevet français déposée le 18 juillet 1997 sous le No. 2 766 059 déposée par les Laboratoires GOEMAR. Ce procédé utilise une quantité efficace d'un oligo ó 1-3glucane. Celui- ci est préparé à partir de D 1-3-glucanes d'origine diverses qui sont hydrolysés en oligo 3 1-3-glucanes. Les D 1-3-glucanes proviennent de bactéries, notamment d'Alcaligenes faecalis, de champignons, notamment de Schizophyllum et de Sclerotium glucanium, de levures, notamment de Saccharomyces cerevisae, d'algues et de céréales. Cependant, ce procédé ne permet pas, de provoquer une résistance plusieurs fois de suite du même plant. Une seule pulvérisation est possible. Ce procédé est donc essentiellement préventif et limité dans le temps. On a décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique délivré le 2 novembre 1999 à EDEN Bioscience sous le No. 5 977 060, un procédé de lutte contre les insectes sur des plantes. Dans ce brevet, on cite de nombreuses références concernant les éliciteurs pour des systèmes défensifs des plantes contre les insectes auxquelles on peut se reporter. Ce procédé est un procédé de lutte contre les insectes pour les plantes qui consiste à appliquer un éliciteur polypeptide ou protéine à une plante ou une graine dans des conditions efficaces pour lutter contre les insectes. L'éliciteur (polypeptide, ou protéine) causant la réponse hypersensible, correspond à celui obtenu à partir d'un agent pathogène choisis dans le groupe constitué par Erwinia, Pseudomonas, Xanthomonas, Phyrophtora et leurs mélanges. Dans un mode de réalisation l'éliciteur peut être appliqué aux plantes en appliquant une bactérie contenant des gènes capables de sécréter ou d'exporter le polypeptide ou la protéine. La bactérie ne provoque pas la maladie et a été transformée (par exemple de manière recombinante) par des gènes encodant un polypeptide ou une protéine éliciteur de réponse hypersensible. Ce document décrit donc un procédé de lutte contre les insectes et non contre les agents pathogènes dans leur ensemble. Par ailleurs, ce document fait référence à des manipulations génétiques qui sont très mal perçues par le public. On connaît par ailleurs des graines de fenugrec qui sont utilisées dans l'industrie agroalimentaire comme épice et dans l'industrie pharmaceutique. Le fenugrec ou Trigonelle foenum graecum ou encore Sénégré est une légumineuse de la famille des papilionacées. Le fenugrec contient une huile essentielle constituée de 40 composés différents dont la 3-hydroxy-4,5-diméthyl-oxolane-2-one semble être le composant aromatique le plus important. Parmi les composants non volatils qu'il contient, on a identifié des furostanol glycosides et des stérols et des saponines stéroïdiques (ayant un intérêt potentiel pour l'industrie pharmaceutique). On a décrit dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique délivré le 7 décembre 1999 à la société Emerald Seed Products Ltd. sous le No. 5 997 877, un procédé d'extraction de fractions valables commercialement de graines de fenugrec. Les graines de fenugrec contiennent un noyau central jaune, qui est le cotylédon et le germe entouré de l'endosperme blanc et semi-transparent et du tégument. Cet endosperme contient des gommes de galactomannane et est entouré d'une écorce brun foncé. Le procédé de récupération des gommes ou oléorésines consiste à humidifier les graines de fenugrec dans une plage de 14% à 20% d'humidité; à broyer les graines de fenugrec; à mélanger les graines broyées avec. un solvant pendant une période de contact à une certaine température de manière que certains composants des graines soient absorbés par le solvant; à séparer l'extrait du solvant. Ce procédé a pour inconvénient d'utiliser un solvant qui est un alcool polaire. Un autre procédé est décrit dans ce brevet U.S. No. 5 997 877 qui consiste à récupérer les fibres solubles. A cet effet, on broie les graines, on les tamise et on récupère la partie lourde constituée du tégument et du mucilage (enveloppe). Cette partie lourde est ensuite traitée par de l'eau chaude, ce qui permet de récupérer les fibres solubles. Les gommes se trouvant dans la partie légère sont ensuite récupérées à, I'aide d'un solvant. L'état de la technique évoqué ci-dessus présente l'inconvénient que l'éliciteur est obtenu par une extraction au moyen d'un solvant alcool qui n'est pas neutre sur le produit final et qui peut avoir des effets toxiques sur la plante. C'est le cas notamment de l'état de la technique constitué par les documents DE 197 266, EP 0 493 670 ou DATABASE N 199484121 ou XP 002 194 376 ou Chimical Abstract Vol 119 N 11 (1993-913) Krata. Une avance technologique qui est constituée par le brevet FR 0 107 898 des mêmes demandeurs qui consiste à utiliser la graine de Trigonella foenum graecum dont sont obtenu des extraits par broyage des graines, séparation de la protection de la fraction cotylédon et germe, et extraction des composants de l'éliciteur de cette fraction germe et cotylédon par de l'eau au cours d'une opération de filtration. Résumé de l'invention La présente invention a pour objet de lutter contre des agents pathogènes et toutes sortes de parasites de plantes (champignons, virus, bactéries, insectes...etc....) à l'aide d'un nouveau produit éliciteur, ce dernier permettant une action préventive et également curative. Encore un autre objet de la présente invention est de fournir un procédé de préparation d'un nouvel éliciteur, ce. procédé permettant d'obtenir un éliciteur qui ne soit pas agressif par rapport aux plantes traitées et à l'environnement. Les inventeurs de la présente demande ont découvert après des essais en laboratoire, que des extraits issus de fenugrec avaient la propriété de stimuler fortement différentes activités enzymatiques impliquées dans les mécanismes de défense des végétaux contre les agents pathogènes et toutes sortes de parasites de plantes (champignon, bactéries, virus, insectes... et...). Les inventeurs se sont aperçus après des essais en laboratoire que les mêmes effets étaient obtenus si l'on broyait en poudre la fraction cotylédon et germe de la dite graine et qu'on la mélangeait à de l'eau pour obtenir une solution qui sera projetée sur les plantes. Ce procédé présente l'avantage de passer par une étape de produit sec qui permet de commercialiser une poudre qui ne sera mise en solution qu'au moment de l'emploi, I'extraction des principes actifs se réalisant donc au moment de l'emploi. Autre avantage, le broyage permet de conserver les saponines et les dextrines contenues dans la fraction germe et cotylédon est dans la poudre obtenue. Les saponines ont un effet mouillant sur les feuilles de plantes ce qui accroît l'efficacité de l'éliciteur et les dextrines ont un effet collant qui fixe la solution et ses composés actifs sur la plante couramment en agriculture. Les plantes supportent la répétition des traitements par l'éliciteur et les mécanismes de défense de la plante sont stimulés à chaque traitement. L'extrait de graines de Trigonella foenum graecum est obtenu par un procédé consistant à broyer les graines, à séparer la fraction cotylédon et germe, de la fraction tégument et mucilage. La faction cotylédon et germe est rebroyée de manière à obtenir une poudre de granulométrie de préférence inférieur à 200 Pm. Les particules obtenues par broyage et par un tamisage ou une micronisation peuvent aller de 5 à 500 microns. La présente invention sera maintenant décrite plus en détail à l'aide des exemples suivants, qui ne sont en aucun cas destinés à limiter le cadre de la présente invention. Exemples Exemple 1 - Procédé d'extraction du nouvel éliciteur On utilise des graines de fenugrec qui sont broyées de façon à obtenir une poudre. On sépare la fraction de cotylédon et de germe de la fraction tégument et mucilage par un procédé de densitométrie. La fraction cotylédon et germe est éventuellement rebroyée de manière à obtenir une poudre de granulométrie de préférence inférieure à 200 Pm. On mélange entre 1 et 100 grammes, mais préférentiellement 5 grammes de cette poudre avec 1 litre d'eau et on pulvérise cette solution sur les plantes Exemple 2 Traitement de plantes maraîchères et ornementales par l'extrait de fenugrec On pulvérise l'extrait préparé dans l'exemple 1 ci-dessus sur les plantes suivantes, et on teste la résistance de différentes plantes à différents parasites. A titre d'exemple, on a obtenu des effets très significatifs lors de traitements préventifs et curatifs sur: melon / oïdium melon I bactériose; melon / Thrips; melon I aleurodes; vigne / oïdium vigne / mildiou...etc.... On compare ces plantes traitées avec des plantes non traitées. Dans le cas de traitement préventifs, les plants traités sont peu ou pas attaqués par les parasites (contrairement aux plants non traités), à condition de renouveler le traitement régulièrement. Dans le cas de traitement curatifs, les plantes traitées voient les symptômes des infections diminuer au bout de quelques jours dès.le premier traitement avec l'extrait de fenugrec. Le traitement peut avoir lieu sur jeunes plantes, sur boutures, ou sur plantes adultes, en fait quelque soit le stade végétatif des plantes. Revendications: 1. Procédé de préparation d'un nouvel éliciteur à appliquer aux plantes agronomiquement utiles sans la lutte contre les agents pathogènes; le dit éliciteur étant préparé à partir de graines de Trigonella foenum graecum caractérise en ce qu'il consiste à: - Séparer la fraction germe et cotylédon de la graine. - A la broyer pour réaliser une poudre. - A solubiliser la dite poudre dans l'eau avant pulvérisation de la solution obtenue sur la ou les plantes à traiter. 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la fraction germe et cotylédon est tamisée pour obtenir des particules comprises entre 5 microns et 500 microns 3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la fraction germe et cotylédon est transmise pour obtenir des particules inférieures à 200 microns. 4. Procédé de lutte contre les agents pathogène des plantes mettant en oeuvre le nouvel éliciteur selon les revendication 1 à 3 caractérisé en ce que la poudre obtenue par broyage de la fraction germe et cotylédon de la graine de Trigonella foenum graecum est apportée aux plantes par voie humide.