Brevet FR2850107A1 — publié le 20040723

La présente invention concerne un procédé de traitement de matériau polymère ainsi que des prothèses biomimétiques. La rupture du ligament croisé antérieur (LCA) du 5 genou est observée chez quatre sujets sur mille. Les thérapeutiques ont beaucoup évolué ces dernières années. A l'heure actuelle, les prothèses en polyéthylène téréphtalate (PET) sont les plus largement utilisées, des traitements chimiques ainsi que le tressage spécifique des 10 fibres ayant permis l'arrivée sur le marché, de ligaments à hautes performances. Pour ce genre de prothèses en PET, on cherche constamment à améliorer la réhabitation fibroblastique, afin d'améliorer in fine la viabilité de l'implant. En 15 effet, le PET est en particulier un matériau synthétique solide et bien toléré biologiquement. Toutefois, des problèmes de rupture de prothèse sont classiquement rencontrés, qui peuvent s'expliquer par une recolonisation incomplète. On recherche aujourd'hui des matériaux 20 biocompatibles, notamment sous forme de fibres, dont la surface est greffée, et est capable de favoriser la repousse fibroblastique et d'améliorer l'organisation du collagène. On a maintenant mis en évidence que certains 25 traitements de surface du matériau polymère appropriés permettent d'obtenir des matériaux biomimétiques, c'est-àdire capables de mimer les matériaux et les systèmes vivants. A cet égard, on connaît déjà des procédés de greffage 30 de polymères fonctionnels à la surface de matériaux polymères. Certains de ces procédés consistent à générer des radicaux peroxydes à la surface du matériau par plasma, irradiation, faisceaux d'électrons ou ozonation, puis à polymériser par voie radicalaire une solution de monomères. 35 La technique d'ozonation est connue pour générer uniformément des peroxydes même si quantitativement le plasma est plus performant. Toutefois, cette technique d'ozonation donne des résultats médiocres sur les surfaces en PET, en comparaison des taux de peroxydes générés dans les mêmes conditions sur une surface en polyuréthane (PU) par exemple. La présente invention a donc pour objet de pallier ces inconvénients en proposant un procédé de traitement de surface d'un matériau polymère permettant de façon notoire et inattendue de greffer avec des rendements performants des polymères ou copolymères bioactifs sur du PET. La 10 surface est prétraitée par ozonation, avant une polymérisation radicalaire d'une solution d'au moins un monomère. Selon une caractéristique essentielle de l'invention, l'ozonation est précédée par une étape de préparation de la 15 surface du matériau polymère consistant en une distension de ladite surface. Cette distension est de préférence obtenue avec un solvant capable de modifier la surface par gonflement. On comprend bien qu'une telle préparation permet d'accroître le taux de peroxydes et ce, quelle que 20 soit la nature du matériau polymère. L'invention concerne également les matériaux biomédicaux, et notamment des prothèses ligamentaires, susceptibles d'être obtenus par mise en oeuvre du procédé de l'invention. En effet, les conditions de polymérisation, 25 le(s) prétraitement(s) réalisé(s) selon l'invention, ainsi que la souplesse de choix des monomères et donc des greffages obtenus par la mise en oeuvre du procédé permettent d'obtenir des matériaux aux propriétés très avantageuses, comme cela apparaîtra dans les exemples. L'invention sera mieux comprise à la lecture de la description détaillée et des exemples ci-dessous et au vu des figures annexées - la figure 1 illustre le greffage obtenu par le procédé de l'invention sur un film de PET semi-cristallin 35 (densité surfacique en motifs monomère greffés) en fonction de la durée de l'ozonation et de la concentration en monomères. - la figure 2 illustre le greffage obtenu par le procédé de l'invention sur des fibres tissées en PET semicristallin (taux de greffage exprimé en concentration molaire de motifs monomère greffés par unité de surface) en fonction des durées d'ozonation et de polymérisation. - la figure 3 illustre l'adsorption de collagène I dans le cas du PET greffé par les polymères biomimétiques selon l'invention, comparé à du PET non-greffé. A titre de matériau polymère dont on modifie la surface par greffage selon l'invention, on peut utiliser 10 tout type de polymère biocompatible utilisable pour réaliser des articles biocompatibles dont on cherche à améliorer les propriétés de surface en terme d'activités biologiques telles que l'adhérence et la prolifération cellulaires, et en terme de lubrification, d'hydrophilie 15 par exemple. Ainsi, on connaît bien le polyuréthane (PU), le polystyrène (PS), le silicone, le poly(méthacrylate de méthyle) (PMMA) ou les polyesters. En particulier, parmi les polyesters, on peut citer le PET usuellement utilisé pour la fabrication d'implants 20 et de prothèses. Plus particulièrement, on peut utiliser selon l'invention du PET sous forme de fibres, tricotées ou non, ou de ligaments artificiels implantables, notamment à titre de prothèse ligamentaire. Selon une variante de ces prothèses ligamentaires 25 divulguée dans le brevet EP 0.561.710, par exemple, une nappe de polyester, base du ligament, est composée de fibres techniques longitudinales de trame en polyester poly(éthylènetéréphtalate) et d'un fil transversal en polyester texturé. Les fibres techniques longitudinales 30 peuvent être unies par une structure transversale tricotée, une partie des fibres longitudinales pouvant être laissées libres. La forme et les dimensions des ligaments varient selon l'articulation à réparer. Le diamètre du ligament varie en fonction du nombre de fibres longitudinales le 35 constituant, ce nombre variant selon la résistance souhaitée ainsi que selon la corporalité et l'activité du patient à traiter. On peut aussi utiliser du PET sous d'autres formes (pastilles, films) nécessaires à et/ou compatibles avec leur utilisation ultérieure, notamment dans toutes les applications biomédicales des matériaux polymères. De préférence, on utilise selon l'invention du PET 5 semi-cristallin, fibreux ou non et dont le taux de cristallinité est de 35% 10%. Par exemple, on utilise du PET en fibres présentant une température de transition vitreuse à 750C 50C, une température de fusion à 260'C 50C, et un taux de cristallinité de 40% 5%. A titre 10 d'exemple non limitatif, le procédé de l'invention a été appliqué à du PET en film, d'une épaisseur de l'ordre de 200 micromètres, à du PET sous forme de tissu tricoté d'une épaisseur de l'ordre de 1 mm et à du PET sous forme de fibres de diamètre de l'ordre de 25pm. A titre de monomère à greffer sur la surface pour en modifier les propriétés, on peut citer selon l'invention des monomères hydrophiles susceptibles de polymérisation et copolymérisation radicalaire donnant naissance à des polymères biocompatibles greffés à la surface du matériau 20 polymère, ces polymères biocompatibles greffés sont dits bioactifs. De tels monomères, du type carboxylates, phosphates, sulfonates et sulfates sont décrits au brevet US 6,365,692, et ils peuvent être utilisés selon l'invention, seuls ou en 25 mélanges. On peut citer par exemple l'acide méthacrylique et le styrène sulfonate et leurs mélanges. Ce (ou ces) monomère(s) sont selon l'invention mis en solution dans un solvant adéquat pour la réaction de polymérisation radiculaire, par exemple de l'eau, de 30 préférence de l'eau bi-distillée. En ce qui concerne la concentration de monomère(s) dans la solution, selon l'invention, on peut choisir toute concentration compatible avec la mise en oeuvre de la réaction de polymérisation radicalaire. On préférera 35 toutefois des concentrations proches de la solubilité limite en monomère dans le solvant, le cas échéant comprises entre environ 5% et la solubilité limite en monomère dans le solvant. On préférera ainsi, dans le cas du sulfonate de sodium (NaSS) et celui de l'acide méthacrylique (AM), des concentrations comprises entre 5% et 20% en poids dans l'eau, par exemple de l'ordre de 15% en poids dans l'eau. On préfère selon l'invention opérer avec des solutions de monomères proches de la saturation, ou encore opérer avec des concentrations en monomères dans le solvant telles que le milieu solvant du (ou des) monomère(s) est visqueux. Par proche de la solubilité ou de la saturation, 10 on entend toute concentration inférieure de 1 à 7% en poids à la solubilité limite ou à la concentration de saturation. Selon l'invention, préalablement à la mise en contact du matériau polymère avec la solution de monomère(s), et à la polymérisation radicalaire subséquente, la surface du 15 matériau polymère fait l'objet d'un traitement chimique de modification de surface par ozonation. Selon une caractéristique essentielle de l'invention, la surface du matériau polymère est, préalablement à cette ozonation, traitée par lavage et mise en présence d'un solvant pour 20 débarrasser la surface des graisses et impuretés. Ce prétraitement a également pour fonction et pour effet de distendre la surface du matériau polymère par gonflement. Le matériau polymère incorpore, notamment en surface, les molécules du solvant, il gonfle en surface, ce qui facilite 25 et améliore la fixation des peroxydes issus de l'ozonation pratiquée ensuite, et par conséquent le greffage ultérieur. Selon l'invention, tout solvant éthéré de toxicité compatible avec l'usage du matériau biocompatible final convient, et notamment les solvants du type éthers 30 cycliques et éthers aliphatiques. On préfère selon l'invention les solvants à fortes constantes diélectriques, de préférence supérieures à 30. Parmi les solvants préférés, on peut citer le tétrahydrofuranne (THF), le diméthylsuifoxyde (DMSO), la N,Ndiméthylformamide (DMF), 35 la N,N- diméthylacétamide (DMA), et la Nméthylpyrrolidone (NMP). Le THF est particulièrement préféré. Le prétraitement de distension au solvant est opéré à une température convenable compte tenu du solvant utilisé, par exemple la température ambiante. La durée du prétraitement peut être de l'ordre de 5 min à 1 h environ, de préférence entre environ 10 et 25 minutes. Ainsi, le matériau polymère peut être lavé et gonflé par immersion 5 dans du THF, par exemple, pendant environ 15 min à température ambiante. De façon optionnelle, l'étape de distension est suivie d'un traitement permettant d'éliminer de la surface du matériau polymère les traces d'acides organiques de 10 faible poids moléculaire comme l'acide téréphtalique et les acides oligomères supérieurs résidus de fabrication du PET. Selon cette variante, on traite au moins la surface du matériau polymère à l'aide d'une solution aqueuse de carbonate de sodium à chaud ou d'autres carbonates 15 alcalino-terreux ou alcalins, comme CaCO3 ou K2CO3. Par exemple, afin de neutraliser les traces d'acide ci-dessus mentionnées, on peut traiter la surface pendant environ 10 min avec une solution de Na2CO3 à 5% environ, à une température de 1000C 50C. De façon optionnelle, le matériau polymère est en outre, autant que de besoin, lavé au moins une fois à l'eau, de préférence l'eau bi-distillée, entre les étapes de prétraitement ci-dessus. Par exemple, avant d'être mis en contact avec la solution du (ou des) monomère(s), le 25 matériau polymère traité par ozonation, et éventuellement traité au Na2CO3, ou analogue illustré ci-dessus, peut être lavé plusieurs fois à l'eau, de préférence bi-distillée, jusqu'à ce que le pH de l'eau de rinçage soit neutre. De plus, après ce prétraitement, la surface du 30 matériau polymère peut être rincée au solvant éthéré, par exemple au THF, puis séché en étuve à vide. Selon l'invention, l'ozonation préalable à l'application de la solution solvant de monomère est réalisée dans des conditions de durée qui dépendent des 35 quantités d'ozone utilisées. A titre d'exemple, la durée d'ozonation est de l'ordre de 20 à 90 minutes pour des quantités d'ozone de l'ordre de 50 g/m3. Les conditions de polymérisation dépendent de la nature du (ou des) monomère(s) choisis. En ce qui concerne le temps de polymérisation nécessaire, il est selon l'invention comparable au temps de gélification du milieu solvant du (ou des) monomère(s) à la température de 5 réaction. Ainsi, à titre d'exemple, pour le NaSS, le temps de polymérisation du polystyrène sulfonate de sodium (PSSNa) est de l'ordre de lh à 70'C, et de l'ordre de lh30 à 650C. De plus, à la fin de la polymérisation, les matériaux 10 polymères greffés peuvent être lavés, pour éliminer notamment les résidus de monomère(s) qui n'ont pas réagi. Ainsi, on peut prévoir de laver la surface fonctionnalisée plusieurs fois, avec un solvant adéquat du ou des monomères, de l'eau bi-distillée par exemple, et on peut 15 optionnellement finir le lavage avec tout solvant adéquat, de l'éthanol absolu par exemple, afin d'éliminer d'éventuelles traces de polymère non greffé. Selon l'invention, on a ainsi pu obtenir des densités surfaciques de polymère greffé à la surface du matériau 20 polymère, dans le cas du PSSNa sur PET, de l'ordre de 0,4pg/cm2 (soit 2.109moles/cm2) sur un film, et de l'ordre de 20pg/cm2 (soit 107Moles/cm2) sur un tissu tel que décrit ci-dessus. De tels résultats peuvent être obtenus pour des matériaux fibreux ou non, prétraités par immersion dans le 25 THF avant ozonation. Pour des surfaces non prétraitées avec un solvant apte à les distendre, les densités surfaciques sont environ cinq fois inférieures à celles décrites selon l'invention, soit de l'ordre de 0,lpjg/cm2 un film et de 4pg/cm2 pour un tissu constitutif d'un ligament artificiel 30 comme celui du brevet EP 0.561.710. Ce facteur 5 traduit la différence de densité de peroxydes, les conditions de polymérisation étant égales par ailleurs. Comme cela apparaîtra ci après, les matériaux polymères fonctionnarisés permettent de doter les surfaces 35 de propriétés biologiques intéressantes notamment pour des prothèses, et particulièrement des ligaments artificiels. En effet, le choix et le dosage des monomères de fonctionnalisation permettent une adaptation aux conditions biologiques requises par l'utilisation ultérieure du matériau fonctionnarisé. Les applications ne sont toutefois pas limitées aux prothèses ligamentaires, mais s'entendent de tout matériau 5 utilisable pour réaliser tout type de matériel biomédical comme des implants, prothèses, matériel de suture, ou encore des supports de culture cellulaire, supports de tests immunologiques ou de purification protéique par exemple, o des propriétés ci-dessus mentionnées, notamment 10 des propriétés de biocompatibilité, de prolifération cellulaire, d'adhérence et de lubrification sont requises ou souhaitables. Les exemples 1 à 3 donnés ci-après illustrent la mise 15 en òuvre du procédé de traitement selon l'invention, appliqué à des matériaux en PET, tandis que les exemples 4 et 5 permettent de mieux appréhender les performances des matériaux ainsi traités. EXEMPLE 1 1) Pré-traitement Des pastilles de 16 mm de diamètre ont été découpées dans des feuilles de PET commercial semi-cristallin de 0,2 mm d'épaisseur de la Société Bayer (PET Ga). Les pastilles 25 ont été plongées pendant 15 mn dans du THF, puis elles ont été rincées à l'eau bi-distillée, puis rincées à l'alcool absolu. Elles ont alors été séchées à l'étuve à vide pendant 30 mn. 2) Monomère Du styrène sulfonate de sodium (NaSS) été a purifié par recristallisation dans un mélange eau bi-distilléealcool(10/90 en volume), puis dissous à 70'C dans cette solution. Il a été ensuite filtré sous vide avec un disque 35 en verre fritté d'indice de porosité 3, et conservé à 4 C. Les cristaux de NaSS formés ont été récupérés par filtration et le solide obtenu a été séché sous vide à 500C, jusqu'à obtention d'un poids constant. - 9 3) Ozonation Six pastilles de PET ont été placées dans un réacteur tubulaire (500 cm3) contenant de l'eau bi-distillée (100 cm3), muni d'un tube plongeur d'alimentation en ozone. L'ozonation a été réalisée avec un flux gazeux équivalent en ozone à 50 g/m3 d'oxygène. Les pastilles ont été rincées trois fois à l'eau bidistillée, trois fois à l'alcool absolu, et trois fois au THF, puis séchées à l'étuve à vide 10 pendant 30 min, à 25 C. 4) Greffaqe On a préparé une solution à 15 % en poids de NaSS dans de l'eau bidistillée, et introduit la solution dans un 15 récipient o l'on a ajouté les pastilles, et on a éliminé l'oxygène en faisant buller de l'argon. On a fermé hermétiquement le récipient et chauffé au bain-marie à 65 C 10 C pendant 90 minutes. On a récupéré les pastilles à la fin de la réaction et elles ont été lavées plusieurs fois 20 pendant une heure à l'eau bi-distillée, puis rincées trois fois à l'alcool absolu, puis trois fois au THF, puis séchées sous vide pendant une heure. 5) Mise en évidence du greffage par spectroscopie UV 25 visible à la toluidine désorbée. Les groupements sulfonates présents en surface des échantillons greffés, sont complexés avec une solution de bleu de toluidine (5.10-4 M) à un pH = 10 et à une température de 30 C pendant 6h. On chauffe une solution 30 tampon de 2-amino-2-méthyl-propanol (solution tampon qui maintient le pH à une valeur de 10, à 37 C). On introduit 0,2 ml de solution tampon dans une fiole de 50 ml qui contient la solution de bleu de toluidine. On rince les échantillons 20 mn dans une solution de NaOH à pH 9. 35 a) Complexation: Le groupement amine quaternaire de la toluidine se complexe avec les groupements sulfonate greffés en surface du PET, et cette complexation donne une coloration bleue - 10 aux échantillons. b) Décomplexation Les échantillons colorés sont ensuite immergés dans une solution aqueuse d'acide acétique à 50% en volume, afin 5 de décomplexer et d'extraire la toluidine de la couche greffée. La toluidine contient un groupe amine disponible pour la quaternisation par le groupement carboxylique. de l'acide acétique. L'acétate d'amine quaternaire ainsi formé passe alors dans la solution acétique. Ensuite, la concentration en toluidine extraite en solution acétique est évaluée par spectroscopie U.V.Visible à son maximum d'absorption (615 nm). Celle-ci permet de déterminer la concentration en motifs styréniques qui ont été fixés en surface (en faisant l'hypothèse de 15 l'existence d'un complexe 1/1 entre molécule de colorant et motif). Après étalonnage d'un spectromètre Perkin Elmer piloté par le logiciel Lambda 12, les spectres des différents échantillons en solution sont enregistrés. On vérifie que la polymérisation des monomères a eu 20 lieu et on détermine les concentrations de bleu de toluidine adsorbée, et donc de monomères greffés. Les spectres obtenus présentent un pic d'absorption dont le maximum se situe à 615 nm caractérisant la toluidine en solution acétique à 50%. La hauteur de ce pic 25 varie proportionnellement à la concentration de solution de Bleu de Toluidine. On a déterminé le coefficient d'extinction moléculaire, E par la relation de Beer-Lambert, à partir d'une droite d'étalonnage. On a déduit une valeur de s de 5.10-4 L.mol-1.cm-1 pour 30 la toluidine en solution acétique à 50%. Spectroscopie Photoélectronique par Rayons X( X.P.S.) Les analyses de spectroscopie photoélectronique par rayons X (XPS) des surfaces greffées ont été réalisées avec un 35 spectromètre "Surface Science X-probe". Une source X filtrée, utilisant la radiation KOE de l'aluminium, a été utilisée pour stimuler la photoémission. L'énergie des électrons émis a été mesurée avec un analyseur - 11 hémisphérique d'énergie, à 50eV pour la haute résolution spectrale et à 150eV pour l'analyse des éléments chimiques. Un logiciel "Service Physics" a été utilisé pour la résolution spectrale ainsi que pour la détermination de la 5 composition élémentaire de la surface. Durant l'acquisition spectrale, la pression dans la chambre d'analyse a été maintenue à 10-9 torr. La taille du spot de la radiation X utilisée a été de 800pm et l'angle d'incidence de 55 , la profondeur de pénétration étant de 50 A. Les énergies de 10 liaison des éléments sont référencées par rapport au carbone ls (C-C et C-H) à son maximum à 285 eV. Trois mesures sont effectuées sur chaque échantillon. 6) Résultats Des pastilles ont été ozonées pendant des durées (d) de 2, 5, 10, 20 et 40 min. Les résultats du taux de greffage, exprimé en densité surfacique de motifs monomère greffés (10-1 pg/cm2) pour des concentrations en monomère de 5% (0) et 15% (o) en poids et des durées d'ozonation 20 variables apparaissent à la figure 1 qui illustre l'influence de la durée d'ozonation et de la concentration en monomère sur le taux de greffage de poly(NaSS) sur des films en PET semi- cristallin (polymérisations radicalaires réalisées à 65 C et arrêtées après 90 min de réaction). Par ailleurs, les résultats d'XPS des différentes pastilles pour des ozonations de durée variable ont montré qu'un taux optimal de polyNaSS greffé est obtenu pour des durées d'ozonation de l'ordre de 30 à 60 min, les taux de soufre et de sodium atomiques étant maximaux. En outre, il 30 a été notamment observé que le taux de carbone C-H (Cls) augmente comme attendu, par suite du greffage de chaînes macromoléculaires hydrocarbonées polystyrènesulfonate de sodium sur le PET. Le taux de C-H Cls passe de 63 % pour le PET brut à 72 % pour le PET greffé par le polyNaSS. Enfin, les résultats obtenus en terme de greffage (quantité surfacique) ont été de l'ordre de 0,4 pg/cm2 pour une concentration de monomère de 15% pds et de l'ordre de 0,025 pg/cm2 pour une concentration de monomère de 5% pds, - 12 pour des durées d'ozonation de 30 min et une durée de polymérisation de lh30, à la température de 65 C. EXEMPLE 2 On a réalisé le même traitement sur des échantillons rectangulaires de tissu tricoté (de 3 cm2 de surface et de 1 mm d'épaisseur) constitué de fibres ligamentaires de PET semi-cristallin du type de celles du brevet EP.0.561.710. Chaque fibre rassemble une cinquantaine de fils de 20 pm de 10 diamètre chacun, présente un taux de cristallinité de 40% + 5% et une température de fusion située à 260 C 5 C. L'ozonation a été réalisée sur six rectangles de tissu dans les mêmes conditions que celles décrites dans l'exemple 1. Les conditions de greffage ont été identiques 15 à celles de l'exemple 1 mais appliquées à la seule concentration en NaSS de 15% en poids. Les résultats obtenus concernant le taux de greffage, exprimé en concentration molaire de motifs monomère greffé par unité de surface (108moles/cm2) pour une concentration 20 en monomère de 15%, en fonction de la durée de polymérisation (d.p.) à 65 C et pour des durées d'ozonation variables (o: 30min; : 60min; : 120min) apparaissent à la figure 2, qui illustre l'influence des durées d'ozonation et de polymérisation. Ces résultats ont montré qu'un optimum est atteint en termes de taux de greffage et de précision des mesures, pour une durée d'ozonation de 60min et des durées de polymérisation de 90 min. Dans ces conditions, la densité surfacique de polymère greffé a été de 20pg/cm2 pour une 30 durée d'ozonation de 60 min et de 12pg/cm2 pour une durée d'ozonation de 30 min. EXEMPLE 3 On a réalisé le même traitement que celui décrit dans 35 l'exemple 2 sur des échantillons rectangulaires de tissu tricoté de fibres de mêmes dimensions et de mêmes caractéristiques que celle précédemment mentionnées dans l'exemple 2. - 13 On a utilisé les mêmes conditions d'ozonation et les mêmes conditions de greffage mais appliquées cette fois à une solution aqueuse d'un mélange équipondéral de styrène sulfonate de sodium à 15% en poids et d'acide méthacrylique 5 distillé (AM) à 15% en poids, soit une composition AM/NaSS de 70/30 moles pour cent. Dans ces conditions, les résultats obtenus ont montré que la concentration molaire en motifs monomères greffés est de 1,6.10-7 moles/cm2. En admettant qu'un copolymère 10 statistique AM-NaSS de même composition que celle du mélange monomère (c'est-à-dire 70/30 moles pour cent en AM/NaSS) a été formé, la densité surfacique de copolymère greffé a été de 19,5 gg/cm2. EXEMPLE 4: caractéristiques d'adsorption de molécules de collagène de type I sur films et sur fibres de PET Du collagène de type I de rat (Sigma C7661) a été utilisé pour toutes les expériences; il a été radiomarqué avec de l'I(125)-Na (Amersham) en utilisant la méthode de 20 la chloramine T. Des disques en PET et PET modifié (diamètre 6 mm) ou des fibres ont été incubés une heure avec différentes concentrations de collagène en solution. Les disques ou les fibres ont ensuite été lavés avec du milieu de culture 25 (DMEM, Gibco), afin d'éliminer toutes les molécules de collagène non adsorbées, et la radioactivité émise par les molécules de collagène I adsorbées sur le copolymère a été mesurée à l'aide d'un compteur. Les résultats d'adsorption de molécules de 30 collagène I radiomarquées à l'iode 125 sur des surfaces à base de PET: Collagène I adsorbé (C.A.) (mole/L)/Collagène I introduit (C.I.) (mole/L) (* : disque en PET; O: disque en PET-NaSS) qui apparaissent à la figure 3 montrent que l'adsorption de collagène I est nettement supérieure dans 35 le cas du PET greffé par les polymères biomimétiques. L'analyse des résultats selon le modèle de Langmuir a permis de déterminer Ka et Bmax suivantes. - 14 - Ka(M-) Bmax(M) Bmax(mg/cm2) PET 3,3.107 l, 6.l10-' 424 PET-NaSS 2,7.10 2, 3.10-9 610 Les résultats montrent que l'adsorption dé collagène 1 est nettement supérieure sur le PET greffé par le PSSNa (610ig/cm2) comparée à l'adsorption sur le PET non greffé 5 (424uIg/cm2) puisqu'elle correspond à une augmentation de 43%. EXEMPLE 5 - Adhérence et prolifération de fibroblastes humains sur les surfaces de PET modifiées. Les cellules FHPA utilisées pour ces expériences proviennent d'une culture primaire de fibroblastes humains. Afin de préserver une expression phénotypique homogène, ces cellules sont utilisées entre le 5ème et le lOème passage. Elles sont cultivées dans le milieu de culture complet 15 (DMEM supplémenté de 10% de SVF, 1% de L-Glutamine et 1% d'antibiotique). Des films de PET et de PET greffés de PSSNa ont été placés au fond des puits de culture-plaques de 24 puits (Costar). Les cellules FHPA ont été ensemencées (10 000 20 cellules par puit) dans un milieu de culture complet. Le nombre de cellules sur les différents supports a été déterminé tous les jours (de 1 à 10 j. de culture) après détachement enzymatique, par comptage direct au microscope optique à l'aide d'un compteur de particules (Coulter). Les 25 paramètres de prolifération des cellules FHPA sont alors calculés: temps de doublement, temps de latence, nombre de cellules à confluence. Les valeurs obtenues, nombre de cellules à confluence identique 1.105/puit sur PET greffé et non greffé, montrent que la surface de PET modifiée ne 30 présente pas d'effet cytotoxique, ni d'effet inhibiteur vis à vis des cellules FHPA. L'adhérence des cellules FHPA a été étudiée sur les surfaces de PET greffées, préalablement ou non adsorbées de collagène I. Après une incubation d'une durée de 20 à 40 35 minutes à 370C, les cellules nonadhérées ont été éliminées - 15 par renouvellement du milieu de culture. Une force physique a ensuite été appliquée aux cellules qui sont placées sous agitation orbitale (60tr/mn) pendant 10 min. Les résultats de ces expériences montrent qu'après 5 40 min d'adhérence, l'application d'une force orbitale n'a pas induit le détachement des cellules, quel que soit le type de.protéines préadsorbées sur le PET., En absence de collagène préadsorbé, les forces d'adhérence sur PET greffé sont sensiblement (5 à 8 fois) 10 plus importantes que sur PET non greffé. - 16 REVENDICATIONS 1 - Procédé de traitement de surface d'un matériau polymère par greffage de polymères ou copolymères bioactifs, procédé dans lequel la surface est prétraitée 5 par ozonation, avant une polymérisation radicalaire d'une solution d'au moins un monomère, caractérisé en ce que l'ozonation est précédée par une étape de préparation de la surface du matériau polymère consistant en une distension de ladite surface. 2 - Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que la distension est obtenue avec un solvant capable de modifier la surface par gonflement. 3 - Procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce que le solvant est du type éther cyclique ou 15 aliphatique. 4 - Procédé selon la revendication 2 ou 3, caractérisé en ce que le solvant à une constante diélectrique supérieure à 30. - Procédé selon l'une des revendications 2 à 4, 20 caractérisé en ce que le solvant est choisi parmi le tétrahydrofuranne (THF), le diméthylsulfoxyde (DMSO), la N,N-diméthylformamide (DMF), la N,Ndiméthylacétamide (DMA), et la N-méthylpyrrolidone (NMP). 6 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, 25 caractérisé en ce que la solution de monomère a une concentration en monomère(s) proche de la saturation en monomère(s) dans la solution du ou des monomère(s). 7 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que le monomère est du type carboxylate 30 ou sulfonate. 8 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que le monomère est du styrène sulfonate de sodium. 9 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 8, 35 caractérisé en ce que le matériau polymère est du polyéthylène téréphtalate. - Procédé selon la revendication 8, caractérisé en - 17 ce que le polyéthylène téréphtalate est semi-cristallin. 11 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisé en ce que le matériau polymère est fibreux. 12 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 11, 5 caractérisé en ce que le matériau polymère est traité par extraction de traces d'acides organiques de faible poids moléculaire avant la polymérisation radicalaire. 13 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 12, caractérisé en ce que le matériau polymère est traité par 10 une solution aqueuse de carbonate alcalin ou alcalinoterreux, notamment de carbonate de sodium. 14 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 13, caractérisé en ce que la durée de l'ozonation est de l'ordre de 20 à 90 min. 15 - Procédé selon l'une des revendications 1 à 14, caractérisé en ce que l'ozonation est réalisée à des teneurs en ozone de l'ordre de 50g/cm3. 16 - Matériel biomédical comportant un matériau polymère greffé susceptible d'être obtenu selon l'une des 20 revendications 1 à 15. 17 - Prothèse ligamentaire comportant un matériau polymère greffé susceptible d'être obtenu selon l'une des revendications 1 à 15.