Brevet FR2849218A1 — publié le 20040625

-1 "Tête optique confocale, notamment miniature, à balayage intégré et système d'imagerie confocale mettant en oeuvre ladite tête " La présente invention concerne une tête optique confocale, notamment miniature, comprenant des moyens de balayage de faisceau intégré et un système d'imagerie confocale équipé de ladite tête. Plus précisément, la présente invention vise une tête optique et un système optique correspondant, dans lesquels un champ à imager dans un échantillon est balayé point à point par un signal d'excitation Ce type de système permet d'obtenir, grâce à un traitement informatique, une image 10 confocale construite en temps réel point à point Le caractère confocal est obtenu grâce à un filtrage spatial permettant de détecter un signal de retour provenant uniquement du point excité de l'échantillon empruntant le même chemin optique que le signal d'excitation. Un des domaines d'application visé est celui de l'imagerie confocale 15 haute résolution, permettant d'observer et d'analyser un tissu biologique in vivo in situ en temps réel, notamment accessible via le canal opérateur d'un endoscope ou intégré à l'endoscope L'invention peut également s'appliquer aux domaines de la dermatologie ou de la gynécologie nécessitant une miniaturisation moins poussée de la tête optique Elle peut également encore 20 s'appliquer au domaine de l'électronique par exemple pour le contrôle de semi-conducteurs ou matériaux similaires. Selon un premier type de système, notamment décrit dans la demande de brevet WO 00/161 51, on utilise un guide d'image, constitué d'un faisceau de fibres optiques souples, comportant à son extrémité distale une tête 25 optique de focalisation destinée à venir en contact de l'échantillon à analyser. Les moyens de balayage du faisceau d'excitation sont situés à l'extrémité proximale du guide d'image prévus pour balayer tour à tour les fibres Le caractère confocal réside ici notamment dans le fait que la même fibre optique du guide est utilisée pour véhiculer le signal d'excitation et le signal 30 de retour émis Ce type de système présente l'avantage d'une tête optique simplifiée du point de vue mécanique et comportant ainsi essentiellement des -2 moyens optiques de focalisation pouvant être miniaturisés En revanche, il présente certains inconvénients, liés à l'utilisation d'une matrice de fibres optiques, notamment le problème de l'échantillonnage du tissu (continuité entre les points d'excitation correspondant à l'éclairage d'une fibre), le 5 problème de l'injection des fibres une à une et des réflexions parasites à l'entrée et à la sortie du guide d'image, le traitement sophistiqué informatique de l'image nécessaire pour corriger ensuite le motif des fibres sur l'image, etc. Selon un autre type de système connu, les moyens de balayage du faisceau sont situés dans la tête optique à l'extrémité distale d'un guide 10 d'image comprenant une unique fibre optique souple Le caractère confocal est ici obtenu grâce au fait que la fibre optique est utilisée pour véhiculer le signal d'excitation et de retour émis avec un diamètre de coeur de la fibre approprié. Les inconvénients de ce type de système sont alors essentiellement liés 15 aux difficultés pour miniaturiser la tête, à la reproductibilité et la fiabilité des moyens mécaniques utilisés pour réaliser le balayage du faisceau émergent de la fibre optique. Le document US 6,091,067 décrit un système de balayage dans lequel une fibre optique est fixée à deux cales piézoélectriques bimorphes, I'une des 20 cales est placée dans la direction axiale de la fibre et l'autre dans la direction perpendiculaire à l'axe optique Les cales, pour offrir un débattement approprié par rapport au champ d'observation, doivent présenter une longueur donnée Perpendiculairement à l'axe de la fibre optique, cette contrainte de longueur conduit en fait à un diamètre de tête optique trop important pour les 25 applications in vivo in situ visées selon la présente invention. Plusieurs documents décrivent des têtes optiques miniatures confocales mettant en oeuvre des micro miroirs de type micromécaniques (ME Ms). La demande de brevet US 2002/00182276 décrit un système confocal miniature utilisant une fibre optique La lumière sortant de la fibre est réfléchie 30 sur la partie métallisée d'une lentille Cette lumière vient ensuite se réfléchir sur un micro miroir ME Ms à deux dimensions entourant la fibre La lumière est -3 alors envoyée vers l'échantillon via un système optique La lumière revenant de l'échantillon suit le chemin inverse et repasse par la fibre qui sert de filtrage spatial Le système est miniature, présentant 2 mm de diamètre et 2,5 mm de longueur. Les brevets US 6,154,305, US 6,088,145, US 6,007,208, US 5,907,425 et US 5,742,419, décrivent une tête confocale dans laquelle le balayage du champ d'observation est réalisé par deux micro miroirs ME Ms pivotés électrostatiquement La tête proposée est miniaturisable mais en revanche offre un champ d'observation de 60 x 60 pm trop petit par rapport 10 aux applications visées selon l'invention correspondant à un champ au minimum de 100 x 100 pm pour pouvoir observer par exemple plusieurs noyaux de 5 pm de diamètre espacés en général de plusieurs dizaines de pm. Le nombre d'image par seconde de 5 à 8 est par ailleurs encore insuffisant pour une imagerie en temps réel (nécessitant un minimum de 10 à 12 images 15 par secondes en mode le plus lent de 640 lignes) Par ailleurs encore, le champ d'observation se trouve parallèle à l'axe de la fibre optique, ce qui peut conduire à des difficultés pratiques d'utilisation (positionnement correct de la sonde). Les brevets US 6,172, 789 et US 6,057,952 décrivent une tête optique 20 confocale avec un champ d'observation cette fois dans l'axe de la fibre optique et permettant un réglage de la profondeur du plan d'observation Les moyens de balayage comprennent un miroir mobile et un miroir fixe Le miroir mobile a une ouverture en son centre, et il est de type ME Ms, monté de manière à pouvoir pivoter au moins selon une direction Les surfaces de 25 réflexion des miroirs mobile et fixe sont situées face à face La lumière sortant de la fibre optique passe à travers l'ouverture du miroir mobile, puis est réfléchie par le miroir fixe en direction du miroir mobile On rencontre notamment les inconvénients suivants avec une telle construction de tête: un cot important pour le miroir mobile percé au centre, et également la vitesse 30 de balayage d'un tel miroir ME Ms à deux dimensions qui n'est pas suffisante pour une imagerie en temps réel. -4 D'une manière générale, le changement de direction du faisceau optique par des réflexions successives sur des micro-miroirs entraîne des défauts optiques compliqués à corriger, notamment de la distorsion ou de la courbure de champ. La présente invention a pour but de pallier ces inconvénients et proposer une tête optique qui soit haute résolution, confocale (offrant une résolution optique axiale sensiblement de 1 à 2 pm) et qui comporte des moyens de balayage intégrés d'un faisceau d'excitation Selon d'autres objectifs, la tête optique doit pouvoir être miniaturisée (ne dépassant pas 3 10 mm de diamètre total), permettre la réalisation d'une image en temps réel (au moins 10 images/s) et couvrir un champ à imager de l'ordre au minimum de x 100 pm et de préférence de 150 x 150 pm. Elle propose une tête optique confocale miniature pour un système d'imagerie confocale, notamment endoscopique, ladite tête comprenant 15 une source ponctuelle produisant un faisceau d'excitation; des moyens optiques adaptés notamment à faire converger ledit faisceau optique en un point d'excitation situé dans un plan subsurfacique par rapport à la surface d'un échantillon, ledit plan étant perpendiculaire à l'axe optique de la tête optique; et des moyens de balayage dudit point d'excitation de manière à décrire un champ d'observation dans ledit plan subsurfacique selon deux directions de balayage perpendiculaires, un balayage rapide en ligne et un balayage lent en colonne, caractérisée par des moyens micro systèmes mécaniques ME Ms adaptés à 25 déplacer en translation selon un débattement choisi au moins l'un des moyens optiques qui est mobile selon une direction perpendiculaire audit axe optique de manière à obtenir au moins une desdites directions de balayage. Selon l'invention, un balayage latéral de faisceau est réalisé en déplaçant latéralement par rapport à l'axe optique l'une des optiques de 30 transmission, I'axe optique de la tête optique n'est ainsi modifié que latéralement et non angulairement comme avec des optiques de réflexion. Cela a pour avantages de conserver un éclairage axial de l'échantillon et de minimiser le diamètre de la tête optique. Les moyens micro systèmes mécaniques appartiennent à la famille des micro composants, connus sous le nom générique de ME Ms, permettant de 5 réaliser des balayages, des switches, des déflexions (notamment de miroirs) etc, actionnés sous l'impulsion généralement d'un champ électrique. Les moyens ME Ms pouvant être utilisés selon l'invention sont notamment les suivants: les actionneurs électrostatiques utilisant la force d'attraction entre deux 10 charges; les actionneurs thermiques utilisant un gradient de température ou la différence de coefficient de dilatation thermique entre deux matériaux, un courant électrique créant par exemple l'élévation de température; les actionneurs magnétiques utilisant la force résultante de l'interaction de 15 deux champs magnétiques; généralement, un champ externe et un champ interne au ME Ms sont appliqués, par exemple une bobine créant un champ externe lorsqu'un courant électrique la traverse. Les ME Ms présentent un temps de réponse compatible avec le déplacement d'une optique, notamment une lentille, sur une distance 20 correspondant, au grandissement près, à la dimension du champ à imager visée selon l'invention, à savoir de l'ordre de 150 pm, et à une vitesse permettant au choix un balayage lent compris sensiblement entre 10 et 15 Hz, correspondant au balayage en colonne du champ à imager, ou rapide sensiblement de 4 k Hz, correspondant au balayage en ligne du champ Les 25 ME Ms ont par ailleurs des dimensions compatibles avec une miniaturisation de la tête optique, de l'ordre de 2 à 3 mm de diamètre total, comme le montre la description détaillée donnée plus loin Ils permettent d'imprimer un mouvement stable et répétable des optiques De préférence, dans ce sens, les moyens ME Ms utilisés selon l'invention sont constitués de moyens de 30 déplacement, par exemple des paires de peignes électrostatiques, disposés de manière diamétralement opposée et actionnés selon différents modes, -6 simultanément ou en alternance Il existe également d'autres systèmes de ME Ms en forme d'anneau dans l'ouverture duquel une lentille peut être assujettie et fonctionnant également en alternance pour imprimer un mouvement en translation en va et vient. La source ponctuelle peut être fibrée, et donc déportée,: I'extrémité d'une fibre optique souple connectée à une source laser est assujettie à la tête optique La source peut également être constituée d'un composant VCSEL (" Vertical-Cavity Semiconductor Emitting laser " en langue anglaise) qui est une source laser quasiment ponctuelle ayant une cavité dont la sortie 10 mesure quelques microns de diamètre Dans les deux cas, la dimension de la source (diamètre de coeur de la fibre optique ou diamètre de sortie de la cavité du composant VCSEL) est choisie pour pouvoir servir de trou de filtrage du signal rétro-émis et réaliser une image confocale Si l'on utilise une source VCSEL, un détecteur est placé juste derrière la cavité pour construire la voie 15 de détection Par ailleurs, I'ouverture numérique de la source, fibrée ou VCSEL, est choisie pour collecter le maximum de photons émis par chaque spot d'excitation, typiquement comprise entre 0,2 et 0,4. Les moyens optiques utilisés dans la tête optique comprennent généralement des premiers moyens optiques, placés à une distance focale 20 choisie de la source ponctuelle, adaptés à transformer le faisceau d'excitation sortant de la source, qui est divergent du fait de l'ouverture numérique de la source, en un faisceau parallèle ou légèrement divergent Ces moyens optiques sont constitués d'une lentille ou d'un jeu de lentilles réfractives (standards ou à gradient d'indice) et/ou diffractives Les lentilles diffractives 25 présentent l'avantage d'être plus petites et plus légères Des deuxièmes moyens optiques placés à une distance focale choisie des premiers moyens optiques ont pour fonction ensuite de focaliser le faisceau optique en un point d'excitation situé dans le plan subsurfacique d'observation Ces moyens optiques peuvent également être constitués d'une lentille ou d'un jeu de 30 lentilles réfractives et/ou diffractives. -7 De préférence, des moyens ME Ms sont mis en oeuvre selon l'invention pour déplacer les premiers moyens optiques plutôt que les seconds moyens optiques et à une fréquence permettant de réaliser le balayage en colonne lent Le balayage des seconds moyens optiques entraînerait des aberrations 5 optiques supplémentaires du fait de leur grande ouverture numérique sur l'échantillon. Pour ce qui est du balayage rapide en ligne, selon l'invention, celui-ci peut être réalisé soit en déplaçant la source, à l'aide par exemple de moyens piézo-électriques adaptés, soit avec une source fixe et un déplacement des 10 deuxièmes moyens optiques également à l'aide de moyens ME Ms appropriés et selon une direction perpendiculaire au déplacement des premiers moyens optiques. Un balayage supplémentaire en z, pour modifier la profondeur de visualisation, peut en outre être prévu dans la tête optique selon l'invention, 15 par exemple_à l'aide de moyens ME Ms adaptés à déplacer l'un des moyens optiques mobiles selon l'axe optique de la tête optique, ou à l'aide de moyens adaptés à modifier le rayon de courbure de l'un des moyens optiques, de préférence celui le plus proche de l'échantillon Un tel balayage permet avantageusement de recréer par traitement informatique une image en 3 D. La présente invention propose également un système d'imagerie confocale mettant en oeuvre une tête optique telle que définie ci-dessus. Selon un premier exemple, le système comprend une source fibrée Selon un second exemple, il comprend une source de type VCSEL associée à des moyens de détection intégrés dans la tête optique et des moyens de liaison 25 souple entre ladite tête et les moyens de traitement informatique de signal. La présente invention sera mieux comprise et d'autres avantages apparaîtront plus clairement à la lumière de la description qui va suivre d'exemples de réalisation, description faite en référence aux dessins annexés sur lesquels: la figure 1 est un schéma général d'un exemple de système d'imagerie confocale fibrée mettant en oeuvre la tête miniature selon l'invention; -8 la figure 2 est une vue en coupe de côté d'une tête miniature selon un premier exemple de réalisation; la figure 3 est un schéma optique de la tête miniature de la figure 2; et la figure 4 est une vue similaire à la figure 2 illustrant un deuxième mode de réalisation possible. La figure 1 représente schématiquement un système d'imagerie confocale fibrée pouvant inclure une tête miniature selon l'invention. Le système comprend une source 1, par exemple une source laser, 10 adaptée à émettre un signal d'excitation à une longueur d'onde capable de générer dans un échantillon un signal de retour de fluorescence ou de rétrodiffusion, ledit signal étant transporté par une première fibre optique monomode 2 a jusqu'à des moyens de couplage 3, par exemple un coupleur 50/50 de fibre, prévus pour diriger le signal d'excitation provenant de la 15 source 1 dans une fibre optique monomode 2 b au bout de laquelle se trouve la tête optique miniature 4 selon l'invention et pour diriger le signal de retour provenant du site excité vers des moyens de détection 5, par exemple un photodétecteur, à l'aide d'une troisième fibre optique monomode 2 c Le système comprend des moyens 6 électroniques de contrôle, de commande et 20 de synchronisation, permettant de piloter la source 1, les moyens de balayage de la tête optique 4 et les moyens de détection 5, de manière synchronisée, afin notamment de connaître l'emplacement du signal dans l'échantillon pour permettre la construction d'une image en temps réel Le système comprend en outre des moyens 7 électroniques d'amplification, de mise en forme et de 25 conversion A/N du signal détecté par les moyens de détection 5, des moyens 8 informatiques comprenant une carte d'acquisition et une carte graphique et des moyens d'affichage 9 des images obtenues. Ce système fonctionne globalement de la manière suivante: la tête optique miniature 4 est mise au contact d'un échantillon à analyser, par 30 exemple via le canal opérateur d'un endoscope La source 1 envoie un signal d'excitation à une longueur d'onde choisie dans la portion de fibre 2 a Le -9 coupleur 3 dirige le signal d'excitation dans la portion de fibre 2 b conduisant le signal dans la tête optique 4 o il est balayé et focalisé sur une surface d'analyse (ou champ d'analyse) dans un plan de l'échantillon perpendiculaire à l'axe optique défini par la fibre optique 2 b, à une profondeur donnée dans 5 I'échantillon Un signal de retour issu de la surface balayée dans l'échantillon suit le chemin inverse du signal d'excitation jusqu'au coupleur 3: il est capté par les moyens optiques de la tête optique 4, recouplé dans la portion de fibre 2 b, puis dirigé par le coupleur 3 dans la portion de fibre 2 c vers le détecteur 5 Le signal détecté est amplifié et converti en un signal numérique, puis 10 traité de manière informatique pour constituer pour finir un élément d'image affichée en temps réel. La tête miniature selon l'invention est maintenant décrite en détails en référence à l'exemple de réalisation choisi et représenté à la figure 2. La tête comprend, dans une structure de support mécanique 15, des moyens de type piézoélectriques 11 auxquels est assujettie la portion terminale de la fibre optique 2 b, adaptés à déplacer cette partie terminale de fibre optique, et donc le faisceau optique sortant de celle-ci, sensiblement en translation en va et vient selon un débattement choisi DL, sensiblement perpendiculaire à l'axe optique A défini par la fibre optique, et 20 correspondant à un débattement sur une ligne de champ à imager (ces moyens piézoélectriques sont décrits plus loin en détails); des premiers moyens optiques 12 adaptés à convertir le faisceau sortant de la fibre 2 b qui est divergent en un faisceau parallèle ou légèrement divergent, et à capter le faisceau de retour issu de l'échantillon; ces moyens 25 optiques sont selon l'invention mobiles en translation, de manière à déplacer le faisceau optique selon un débattement choisi, schématisé selon la double flèche Dc, perpendiculairement au débattement DL, et correspondant à un débattement sur une colonne de champ à imager; des moyens micro-mécaniques de type ME Ms, 14 a et 14 b, adaptés à 30 déplacer en va et vient les moyens optiques 12 selon le débattement DL (ces moyens sont décrits plus loin en détails); des second moyens optiques fixes 13 adaptés à faire converger ledit faisceau parallèle pour le focaliser en un point ou spot S dans un plan P de l'échantillon E examiné situé à une profondeur donnée et sensiblement perpendiculaire à l'axe optique A. Les moyens piézoélectriques 1 1 et les moyens ME Ms 14 a et 14 b permettent ainsi conjointement de réaliser le balayage du faisceau focalisé sur le champ à imager, les moyens piézoélectriques 11 servant à réaliser un balayage rapide en ligne et les moyens ME Ms 14 a et 14 b servant à réaliser un balayage lent en colonne. La structure de support mécanique 15 est constituée d'un corps creux 16, par exemple un porte-optiques tubulaire, avec à une extrémité un hublot d'étanchéité 17, destiné à venir au contact de l'échantillon E, adapté à être traversé par les signaux d'excitation et en retour de rétrodiffusion ou de fluorescence, et avec à son autre extrémité un passage 18 pour la portion 15 terminale de la fibre optique 2 b et également pour les moyens piézoélectriques 11 Une paroi de côté 19 entoure le passage 18 pour fermer la tête optique de manière étanche Les moyens optiques fixes 13 sont fixés et centrés par rapport à l'axe optique A à l'intérieur du corps 16, et les moyens optiques mobiles 12 sont reliés à la face intérieure du corps 16 via 20 les moyens ME Ms 14 a et 14 b comme cela est expliqué plus loin en détails. La fibre optique 2 b couplée à la tête optique est de préférence monomode, permettant une illumination de l'échantillon la plus homogène possible L'ouverture numérique de la fibre est choisie pour être la plus grande possible pour permettre une collecte optimisée de photons, et pour permettre, 25 conjointement avec un diamètre de coeur approprié, un couplage du signal de retour dans la fibre, et donc un filtrage spatial, qui soit le meilleur possible. Typiquement, I'ouverture numérique est de 0,4 et le diamètre de coeur compris entre 1 et 2 pm Ce choix de caractéristiques pour la fibre optique, conjointement avec les caractéristiques des moyens optiques 12 et 13, 30 permettent de réaliser un filtrage spatial du signal de retour assurant la confocalité du système. Selon l'exemple choisi, les moyens piézo-électriques 11 sont constitués d'une cale piézo-électrique présentant une surface sur laquelle est assujettie, par exemple par collage, la partie terminale de la fibre optique 2 b avec une portion d'extrémité de la fibre dépassante Cette cale 11 est double, appelée 5 aussi bimorphe, ayant la particularité de se déformer lorsqu'on lui applique une tension électrique cela permet de déplacer la fibre optique entre une position non excitée ou de repos de la cale et une position excitée correspondant à l'excitation de la cale La cale 11 est choisie de manière à présenter un débattement entre ces deux positions correspondant, au 10 grandissement près, à la largeur du champ que l'on veut imager dans l'échantillon En outre, la cale 11 est choisie de manière à pouvoir être excitée à une fréquence permettant de réaliser le balayage rapide souhaité en ligne de l'échantillon En outre, pour une cale de longueur donnée, compatible au maximum avec une miniaturisation, une amplitude de balayage maximum, 15 peut être obtenue en excitant la cale à sa fréquence de résonance. Typiquement, une cale de 7,5 mm de longueur, excitée avec une tension sinusodale d'excitation de + 60 V, permet d'atteindre une fréquence de résonance de 4 k Hz, permettant de réaliser un balayage ligne à une vitesse appropriée à l'imagerie en temps réel (au moins 10 images / s), sur un champ 20 imagé de 150 pm de largeur (avec un grandissement unitaire) Cette longueur est compatible avec la dimension totale maximale pour la tête de sensiblement 30 mm La largeur de la cale (dimension perpendiculairement à la fibre optique) n'influe pas sur la résonance, ni sur l'amplitude de balayage. Typiquement, la largeur de la cale peut être de quelques centaines de 25 microns, ne dépassant pas le diamètre total maximal extérieur prévu pour la tête, sensiblement de 2 à 3 mm Pour tenir compte d'un grandissement supérieur à 1, pour une dimension de champ imagé donné, on peut choisir une cale piézo-électrique de plus grande longueur pour avoir un débattement plus grand et possédant une plus grande tension d'excitation ( + 100 V à 30 + 120 V) Le système comprend en outre les moyens de sécurité nécessaires à l'utilisation de tensions électriques de cet ordre pour des applications in vivo. Les moyens ME Ms 14 a et 14 b servent à déplacer latéralement les moyens optiques mobiles 12 dans une direction perpendiculaire à celle du mouvement de la fibre imparti par les moyens piézo-électriques Plus particulièrement selon l'exemple choisi et représenté sur les figures, les 5 moyens optiques mobiles 12 étant constitués d'une lentille simple, les moyens ME Ms comprennent deux paires de peignes 14 a et 14 b, diamétralement opposées, chaque paire de peigne comprend un peigne assujetti à ladite lentille 12 et un peigne assemblé avec le corps 16 Les peignes sont des filaments de semi-conducteur qui sont alignés et les deux 10 peignes d'une paire ont leurs filaments qui se chevauchent Le mouvement de la lentille 12 est obtenu en décalant un peigne par rapport à l'autre grâce à un effet électrostatique Le mouvement transversal réalisé grâce aux paires de peignes est perpendiculaire à l'axe de la fibre Il est réalisé à une fréquence lente (typiquement de 10 à 15 Hz) et permet de réaliser une taille de champ 15 imagé de 1 50 pjum en choisissant l'amplitude de balayage appropriée. L'optique mobile 12 a pour fonction de transformer le faisceau divergent émergent de la fibre optique 2 b en un faisceau parallèle ou divergent Elle doit répondre à des contraintes de dimensions: son diamètre doit être compatible avec une miniaturisation de la tête qui doit présenter un 20 diamètre total extérieur de 2 à 3 mm maximum Elle doit répondre à des contraintes mécaniques et être suffisamment solide et résistante pour pouvoir être solidaire des moyens ME Ms 14 et actionnée en translation Elle doit répondre également à des contraintes optiques: son diamètre doit être suffisamment grand par rapport au diamètre du faisceau projeté pour le 25 champ imagé que l'on veut obtenir (on risque sinon d'observer des défauts en bord de champ (notamment du vignettage)) ; I'ouverture numérique de l'optique 12 doit être au moins égale ou de préférence supérieure à l'ouverture numérique de la fibre pour conserver la confocalité de la tête et une optimisation du nombre de photons détecté au cours du balayage Un 30 diamètre minimum d'optique de lmm peut être obtenu avec une ouverture numérique supérieure à 0,4 (ON de la fibre optique 2 b), ce qui est compatible avec une tête miniature de 2 à 3 mm de diamètre extérieur et l'intercalage des moyens ME Ms 14 A titre d'exemple, selon un mode le plus simplifié, cette optique 12 est une lentille classique mais pourrait aussi être un doublet de lentilles ou tout autre optique usuelle permettant de conserver une taille et 5 un poids compatibles avec les objectifs recherchés A titre d'exemple d'optiques plus sophistiquées, on peut utiliser une lentille diffractive utilisant la diffraction pour décomposer le front d'onde du faisceau incident sur différentes zones et qui après recombinaison permet d'obtenir le front d'onde recherché En outre, ces optiques présentent les avantages d'une grande 10 ouverture numérique, un faible encombrement, un faible poids et un faible cot. Les moyens optiques fixes 13 doivent permettre de focaliser le faisceau balayé en un spot S à une certaine profondeur dans l'échantillon dans un plan de focalisation et de collecter un maximum de photons provenant de chaque spot dans ce même plan de focalisation Les caractéristiques de ces moyens optiques (notamment le grandissement et l'ouverture numérique) sont définies en tenant compte des spécifications de la fibre optique et des moyens optiques mobiles 12 afin d'assurer la confocalité à l'ensemble du système et également pour minimiser les aberrations optiques qui pourraient être 20 engendrées par le balayage (distorsion, instabilité, décalage des moyens optiques mobiles par rapport à l'axe optique, etc). Le hublot de sortie 17 est la dernière interface située entre la têteoptique et l'échantillon Il a pour fonction de protéger les optiques, et également de faire une adaptation d'indice entre la tête et l'échantillon, 25 notamment grâce à un traitement de sa face externe par exemple pour un indice de 1,33 égal à celui de l'eau Le hublot peut également en variante être constitué d'une lentille ayant une fonction de vergence sur le faisceau optique. Sur la figure 3 est représenté un schéma optique de la tête qui vient 30 d'être décrite selon un exemple particulier possible, illustrant notamment le balayage en ligne de l'échantillon, sur lequel la fibre 2 b est représentée classiquement dans sa position de repos I et dans deux positions latérales extrêmes Il et III. Les spécifications optiques sont les suivantes champ balayé 2 Ax = 400 pm diamètre de coeur de la fibre 2 b: coeur = 1,3 pm ouverture numérique de la fibre 2 b: ON = sin (oc 1) = 0,4 lentille 12: diffractive focale de la lentille mobile 12 f 12 = 1,83 mm diamètre total de la lentille 12 012 = 2 mm 10 lentille 13: diffractive focale de la lentille fixe 13: f 13 = 0, 73 mm diamètre total de lentille 13 013 = 1,6 mm grandissement du système optique = G = 2,5 champ imagé = 26 x objet = 160 pm ouverture numérique objet = ON objet = N sin (" 2) = 1 (dans l'eau n = 1,33) diamètre de chaque spot S focalisé dans l'échantillon limité par la diffraction sur tout le champ imagé. Dans l'exemple qui vient d'être décrit, les moyens de balayage rapide 20 en ligne du spot d'excitation sont réalisés à l'aide d'une cale piézoélectrique sur laquelle est fixée l'extrémité de la fibre optique Selon une variante de réalisation possible, la fibre optique est fixe et la lentille 1 3 est mobile, des moyens ME Ms, similaires aux moyens 14 a et 14 b, étant utilisés pour déplacer la lentille optique 13 selon une direction perpendiculaire au mouvement de 25 translation de l'optique mobile 12 et selon une fréquence compatible avec un balayage rapide en ligne ( 4 Khz) En variante encore, inversement le balayage rapide peut être réalisé en déplacçant la lentille 12 et le balayage lent la lentille 13. Sur la figure 4, est représentée une variante encore de réalisation de la 30 tête optique de la figure 2, les moyens identiques portant les memes références qu'à la figure 2 Dans cette variante, des moyens 16 a et 16 b, fixés d'un coté au tube porte optiques 15 et de l'autre à la lentille 13, sont utilisés pour déplacer ladite lentille 13 selon l'axe optique A de la tête, permettant de régler la profondeur de visualisation dans l'échantillon, sensiblement sur quelques dizaines de pum, schématisé par la double flèche Z. 5 Cela permet avantageusement de réaliser des reconstructions en trois dimensions de l'échantillon que l'on observe: on fait différentes acquisitions de données en deux dimensions à différentes profondeurs et l'on peut ensuite reconstruire le volume observé par traitement de données Dans d'autres cas, le réglage de la profondeur de visualisation peut permettre de s'adapter 10 avantageusement à l'échantillon observé, à la profondeur optimale de visualisation de l'échantillon Le déplacement de l'optique 1 3 dans la direction axiale de la tête permet de faire converger le faisceau à une distance différente Les moyens 16 a, 16 b sont de type Mems ou piézo-électriques En variante de réalisation encore, la tête optique peut comprendre à la 15 place de la fibre optique 2 b une source ponctuelle de type VCSEL associée à un détecteur placé juste derrière la cavité du VCSEL A titre d'exemple, en référence à la figure 3, les spécifications optiques suivantes peuvent être données: champ balayé 26 x = 400 600 pm diamètre de l'ouverture de la cavité VCSEL: O Cavit = 2-4,um ouverture numérique de la cavité VCSEL ON = sin ( O v) = 0,25 (dans l'air) lentille 12: diffractive focale de la lentille mobile 12: f 12 = 3 mm 25 diamètre total de la lentille 12: 012 = 2 mm lentille 13: diffractive focale de la lentille fixe 13: f 13 = 1,17 mm diamètre total de lentille 13: 013 = 1,6 mm grandissement du système optique: G = 3 30 champ imagé = 2 Ax objet = 160-240,pm ouverture numérique objet = ON objet = N sin (" 2) = 0 75 (dans l'eau N = 1,33) diamètre de chaque spot S focalisé dans l'échantillon: limité par la diffraction sur tout le champ imagé. Revendications 1 Tête optique confocale miniature ( 4) pour un système d'imagerie confocale, notamment endoscopique, ladite tête comprenant: une source ponctuelle ( 2 b) produisant un faisceau d'excitation des moyens optiques ( 12,13) adaptés notamment à faire converger ledit faisceau optique en un point d'excitation (S) situé dans un plan subsurfacique (P) par rapport à la surface d'un échantillon, ledit plan étant perpendiculaire à 10 l'axe optique (A) de la tête optique; et des moyens de balayage dudit point d'excitation de manière à décrire un champ d'observation dans ledit plan subsurfacique selon deux directions de balayage perpendiculaires, un balayage rapide en ligne et un balayage lent en colonne, caractérisée par des moyens micro systèmes mécaniques ME Ms ( 14 a-b) adaptés à déplacer en translation selon un débattement choisi (Dc) au moins l'un des moyens optiques ( 12,13) qui est mobile selon une direction perpendiculaire audit axe optique (A) de manière à obtenir au moins une desdites directions de balayage. 2 Tête optique selon la revendication 1, caractérisée en ce que le balayage lent correspond à une fréquence sensiblement de 10 à 15 Hz et le balayage rapide à une fréquence sensiblement de 4 k Hz, de manière à réaliser une image en temps réel. 3 Tête optique selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que les 25 moyens ME Ms ( 14 a-b) sont adaptés à coopérer avec le moyen optique mobile ( 12,1 3) de manière diamétralement opposée et en alternance. 4 Tête optique selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que le faisceau optique produit par la source ( 2 b) est divergent, les moyens optiques ( 12,13) comprenant successivement des premiers moyens ( 12) 30 adaptés à transformer ledit faisceau divergent en un faisceau parallèle ou légèrement divergent et des seconds moyens optiques ( 13) adaptés à former le point de focalisation subsurfacique (S). Tête optique selon la revendication 4, caractérisée en ce que le premier moyen optique ( 12) est mobile, adapté à réaliser le balayage lent en colonne du faisceau optique. 6 Tête optique selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que deux des moyens optiques ( 12,13) sont mobiles, adaptés à être déplacés chacun selon une direction perpendiculaire à l'axe optique de manière à définir chacun une direction de balayage. 7 Tête optique selon l'une des revendications 1 à 5 caractérisée en ce que la source ( 2 b) est mobile, assujettie à des moyens de type piézoélectriques ( 11) adaptés à déplacer le faisceau d'excitation émis par ladite source avec un débattement choisi (DL) de manière à définir la deuxième direction de balayage. 8 Tête optique selon la revendication 7, caractérisée en ce que la deuxième direction de balayage et les caractéristiques des moyens piézoélectriques ( 11) correspondent à un balayage rapide en ligne. 9 Tête optique selon la revendication 8, caractérisée en ce que les moyens piézo-électriques comprennent une cale piézoélectrique bimorphe ( 1 1) 20 s'étendant en longueur selon l'axe optique (A) de la tête, ladite source ( 2 b) étant fixée sur l'une des faces de ladite cale à l'extrémité avant de la cale en regard des moyens optiques ( 12,13). Tête optique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comprend des moyens pour modifier la profondeur 25 du plan subsurfacique d'observation (P) dans l'échantillon. 11 Tête optique selon la revendication 10, caractérisée en ce que les moyens pour modifier la profondeur du plan subsurfacique d'observation (P) dans l'échantillon comprennent des moyens micro-mécaniques ME Ms ( 16 ab) adaptés à déplacer certains des moyens optiques ( 13) selon l'axe optique de 30 la tête optique. 12 Tête optique selon la revendication 11, caractérisée en ce que les moyens ME Ms ( 1 6 a-b) sont adaptés à déplacer les deuxièmes moyens optiques de focalisation ( 13) pour réaliser le déplacement (Z) selon l'axe optique du faisceau optique. 13 Tête optique selon la revendication 10, caractérisée en ce que les moyens pour modifier la profondeur du plan subsurfacique d'observation (P) comprennent des moyens pour modifier le rayon de courbure de l'un des moyens optiques. 14 Tête optique selon l'une quelconque des revendications précédentes, 10 caractérisée en ce qu'elle comprend la partie terminale d'une fibre optique ( 2 b) adaptée à conduire le signal d'excitation depuis une source extérieure, le faisceau émergent de la fibre constituant la source ponctuelle. Tête optique selon la revendication 14, caractérisée en ce que la fibre optique est monomode avec un diamètre de coeur permettant un filtrage 15 spatial du signal de retour et donc assurant la confocalité de la tête, la fibre optique présentant une ouverture numérique la plus grande possible. 16 Tête optique selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, caractérisée en ce que la source est de type VCSEL, présentant une ouverture numérique et un diamètre de sortie de cavité compatible avec un système 20 confocal, et associée à un détecteur placé derrière la cavité du VCSEL. 17 Tête optique selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'elle comporte un hublot d'étanchéité ( 17) à la sortie de la tête optique destiné à venir au contact de l'échantillon et à réaliser une adaptation d'indice. 18 Tête optique selon la revendication 17, caractérisée en ce que le hublot a une fonction de vergence sur le faisceau optique focalisé. 19 Tête optique selon l'une des revendications précédentes, caractérisée en ce que les moyens optiques ( 12,13) présentent une ouverture numérique au moins égale à l'ouverture numérique de la source. 30 20 Système d'imagerie confocale comportant: une tête ( 4) optique confocale de focalisation à balayage de faisceau intégré; une source ( 1,2 a,2 b) adaptée à émettre un faisceau d'excitation des moyens de détection ( 5) d'un signal émis; des moyens électroniques et informatiques de commande et de traitement du signal ( 6-9) émis adaptés à reconstruire une image confocale d'un champ imagé, caractérisé en ce que la tête optique ( 4) est selon l'une des revendications précédentes. 21 Système selon la revendication 20, caractérisé par une fibre optique ( 2 a) reliée à une source laser ( 1) et des moyens de couplage ( 3) pour coupler ladite fibre ( 2 a) avec la fibre optique de transport ( 2 b) jusqu'à et depuis la tête optique ( 4) et une fibre de transport ( 2 c) du signal émis jusqu'aux moyens de détection. 22 Système selon la revendication 20, caractérisé en ce que, la tête optique comprenant une source VCSEL et un détecteur intégré, le système comprend des moyens de liaison souple entre la tête optique et les moyens de traitement de signal.