Brevet FR2851919A1 — publié le 20040910

La présente invention concerne la mise en évidence de nouveaux agents inhibiteurs de cathepsines et leurs applications, notamment dans le domaine pharmaceutique et dans le domaine agro-alimentaire. La présente invention concerne la mise en évidence de nouveaux agents inhibiteurs de cathepsines, à savoir les lignanes et plus particulièrement les néolignanes. Les lignanes ou les néolignanes tels qu'ils sont décrits notamment dans le document Lignans. Chemical, biological and clinical properties. D. C. Ayres and J.D. Loike. Cambridge University Press. 1990 sont des composés dont le squelette résulte de l'établissement d'une liaison entre les carbones [3 des chaînes latérales de deux unités dérivées du 1-phénylpropane (liaison 8-8'). Les néolignanes sont également des produits de condensation d'unités phénylpropaniques mais la liaison variable n'implique au maximum qu'un seul carbone P (liaisons 8-3', 8-1', 3-3', 8-0-4', etc. ). On distingue également d'autres lignanes qui sont improprement appelés "oligomères" et qui résultent de la condensation de deux à cinq unités phénylpropaniques et enfin des norlignanes presque tous décrits dans le document cité précédement qui ont un squelette en CI 7. On assimile également aux lignanes hybrides des produits dont la structure est apparentée aux lignanes. Dans ce qui suit, on désignera par le terme "lignane" aussi bien les lignanes vrais que les composés apparentés mentionnés précédemment. Certains de ces produits sont déjà décrits comme des inhibiteurs d'enzymes, en particulier de la phosphodiestérase de la PMC, notamment le matairésinol ou bien comme inhibiteurs spécifiques du PAF, notamment la Kadsurénone (2). La présente invention concerne spécifiquement l'utilisation des composés de formule 1 : dans laquelle # A représente: - soit un groupe - soit un groupe où Ri représente : - un groupe phényle substitué par 1 ou 3 groupe (s) identique(s)oudifférent(s) choisi(s) parmi les groupes hydroxy et méthoxy; - ou un groupe - ou un groupe R5 étant un groupe phényle substitué par 1 ou 3 groupe (s) ou différent(s) choisi (s) parmi les groupes hydroxy et méthoxy; # R2 représente un groupe -CH20H; # R3 représente un groupe ou ou et # R4 représente un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxy, en tant qu'agents inhibiteurs des cathepsines. Les composés I sont optiquement actifs et peuvent exister sous forme de racémates, d'énantiomères purs ou de mélanges d'énantiomères, qui font tous partie de l'invention. Ils peuvent être utilisés sous forme de sels pharmaceutiquement acceptables. Les lignanes selon la présente invention sont en général des produits qui peuvent être obtenus par extraction à partir d'un certain nombre de plantes ou éventuellement par hémisynthèse. Parmi les composés de formule I, il faut plus particulièrement citer les produits obtenus par extraction à partir de graines de Pangium edule, notamment de coques de graines. Ces composés sont décrits notamment dans les exemples ci-après. Certains sont nouveaux, d'autres sont des composés connus, notamment les Américanines, les Américanols et l'Isoaméricanol. D'autres composés de type lignane peuvent être utilisés, il s'agit notamment de l'Eusidérine, du Matairésinol et du Secoisolariciresinol. La présente invention concerne également l'utilisation de fractions riches en lignanes, notamment les fractions alcooliques obtenues à partir de produits contenant les lignanes, par exemple les fractions isolées à partir des coques de graines de Pangium edule utiles comme inhibiteurs des cathepsines. Les cathepsines sont des protéases qui interviennent dans un certain nombre de mécanismes physiologiques chez l'homme, notamment dans le cancer et la formation des métastases, la maladie d'Alzheimer et les phénomènes inflammatoires. Ces cathepsines interviennent également dans les nécroses tissulaires qui peuvent survenir soit sous l'action de privation d'oxygène ou sous l'action de toxiques. Ainsi, les produits selon la présente invention peuvent être utilisés dans le traitement de certaines plaies chroniques ou d'ulcères mais également sous forme purifiée dans les accidents vasculaires cérébraux, les infarctus, de même ils peuvent être utilisés pour la protection du foie contre les effets toxiques de l'alcool et dans le traitement des cancers, notamment dans l'inhibition des métastases. Ces produits sont également actifs dans les nécroses de tissus tels que la chair de poisson mais également celle des organes lors de leur transport, par exemple dans le cas de transplantation. Ainsi, la présente invention concerne les compositions suivantes : - composition pharmaceutique pour le traitement des cancers, notamment l'inhibition des métastases et la protection hépatique contre les toxiques contenant à titre de principe actif un lignane, en particulier un lignane de formule 1 ; - composition destinée au traitement des organes humains ou animaux aux fins de transport ou de conservation contenant au moins un lignane, en particulier un lignane de formule 1 ; - composition destinée à la préservation des produits agro-alimentaires contenant des protéines, cette composition contenant au moins un lignane, en particulier un lignane de formule I. Enfin, les composés selon la présente invention peuvent être utilisés en cosmétologie pour lutter contre le vieillissement et également pour conserver des préparations qui contiennent des protéines. Les exemples ci-après permettront de mieux comprendre la présente invention. EXEMPLE 1 : EXTRACTION DES LIGNANES A PARTIR DES COQUES DE GRAINES DU PANGIUM EDULE 1. Préparation d'un extrait brut de coques de graines de Pangium edule 740 g de coques sont coupées en petits morceaux (afin d'augmenter la surface de contact) que l'on dépose dans 7,4 L d'une solution éthanolique à 50%. Le mélange hétérogène est porté au reflux du solvant pendant 45 minutes, puis tamisé sur 100 microns à température ambiante. Cette opération d'extraction est répétée 3 fois. Les solutions extractives sont réunies puis évaporées sous pression réduite pour conduire à 27,63 g d'extrait sec. 2. Séparation des linanes L'extrait sec obtenu en (1) est placé en solution dans 900 mL d'eau distillée et cette solution aqueuse est extraite trois fois de suite à contre courant par 700 mL d'éther diéthylique dans une ampoule à décanter. Les phases organiques sont regroupées, séchées sur sulfate de sodium puis concentrées sous vide. On obtient 6,50 grammes d'un solide orange. On réalise une colonne de gel de silice (Merck 60A ) de 5 cm de diamètre et 35 cm de long dans un mélange dichlorométhane-méthanol 95/5 (v/v). Le résidu organique est repris par 4 mL de dichlorométhane et élué par un mélange dichlorométhane-méthanol 95/5 (v/v). Les fractions 1 et 2 sont éluées avec ce solvant. On élue ensuite les fractions 3,4 et 5 par le solvant 90/10 (v/v). Les cinq fractions sont analysées en HPLC sur une colonne ODS2 5 m 3X250 mm en présence d'un solvant selon le gradient A = eau-acide acétique 1%, B = acétonitrile- acide acétique 1% avec 95% de A à 25% de A en 45 min. La détection est réalisée en UV 240 nm. On constate que la fraction 1 contient deux composants distincts alors que les autres fractions correspondent à des produits purs. La fraction 1 est chromatographiée sur plaque préparative (Analtech ref. 02013, 20X20 cm, épaisseur 1 mm) avec le solvant acétate d'éthyle-dichlorométhane 80/20 (v/v). Les deux composants de la fraction 1 migrent au Rf 0,39 et Rf 0,50. Ils sont prélevés sur la plaque par grattage et extraction de la silice par le dichlorométhane. On obtient les fractions 1.1et 1. 2. 3. Caractérisation et identification des fractions éluées Fraction 1.1 : 4-[3-hydroxyméthyl-7-(3-hydroxy-propényl)-2,3-dihydro-benzo[l,4]dioxin-2-yl]-2- méthoxy-phénol. On a obtenu 19,5 mg d'une poudre beige, soit 0,3 % de rendement. , 4' O a Y OH a,fl10A|0CH3 HO y, 5 OH RMN 1H (400 MHz, CD30D) : 6,97 (1H, d, H2'), 6,91 (1H, dd, 8Hz et 2Hz, H6'), 6,89 (2H, m, H5', H5), 6,76 (1H, m, H6), 6,61 (1H, d, 8Hz, H[alpha]), 6,42 (1H, d, 16Hz, Ha), 6,19 (1H, dt, 16Hz, Hp'), 4,17 (1H, dd, Hy), H, dd, H2), 4,07 (1H, dt, H[gamma]'), 4,04 (1H, m, Hp), 3,79 (3H, s, OCH3). RMN 13C (100 MHz, CD30D) : 149,3 (C3), 145,0 (C3'), 144,5 (C4', Cl'), 137,1 (C4), 131,3 (Ca'), 128,5 (Cl), 128,1 (Cp'), 120,9 (C6'), 117,9 (C5'), 117,3 (C5), 115,6 (C2'), 105,9 (C2), 104,3 (C6), 78,1 (Cp), 76,1 (Ca), 63,7 (Cy'), 60,1 (Cy), 56,2 (OCH3). Spectrométrie de Masse : APCI : C19H2006 344 (M+), 711 (2M+Na). Fraction 1.2 : 4-[3-hydroxyméthyl-7-(3-hydroxy-propényl)-2,3-dihydro-benzo[ 1,4]dioxin-2-yl]-2,6- diméthoxy-phénol. On a obtenu 26 mg d'une poudre beige, soit 0,4 % de rendement. 71 6 I 4 O Y OH OCH3 HO IR [5 Un OCH3 RMN 1H (400 MHz, CD30D) : 6,97 (1H, d, H2'), 6,91 (1H, dd, 8Hz et 2Hz, H6'), 6,89 (1H, dd, H5'), 6,72 (1H, dd, 8Hz, H6-H2), 6,48 (1H, d, 8Hz, H[alpha]'), 6,42 (1H, d, 16Hz, Ha), 6,19 (1H, dt, 16Hz, Hp), 4,17 (1H, dd, Hy), 4,07 (1H, dt, H[gamma]'), 4,04 (1H, m, Hp), 3,85 (6H, s, OCH3). RMN 13C (100 MHz, CD30D) : 149,3 (C3), 149,1 (C5), 145,0 (C3'), 144,5 (C4', Cl'), 137,1 (C4), 131,3 (Ca'), 128,5 (Cl), 128,1 (Cp'), 120,9 (C6'), 117,9 (C5'), 115,6 (C2'), 105,9 (C6, C2), 78,1(Cp), 76,1 (Ca), 63,7 (Cy'), 60,1 (Cy), 56,8 (OCH3). Spectrométrie de Masse : APCI : C20H2207 374 (M+), 771 (2M+Na). Fraction 2 : Américanin D On a obtenu 130 mg d'une poudre beige, soit 2 % de rendement. Point de fusion : 195 C (littérature : 197-200 C). OH 5 oH 6'1.51 4' 4 0 C, 1 Y' 10' l 2' 3'0y OH H./P' 0 RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) : 9,58 (1H, s, CHO), 7,50 (1H, d, 16Hz, Hp'), 6,80-7,75 (5H, massif, H aromatique), 6,44 (1H, dd, 16Hz, Ha), 4,50 (1H, m, Ha), 3,55 (4H, m, CH20H), 2,91 (1H, m, Hp). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) : 193,5 (C[gamma]'), 154,5 (Cp'), 149. 2 (C4'), 145,20 (C4, C3), 141. 0 (C3'), 132,90 (C5'), 129,6 (Cl), 127,4 (Cl'), 125,9 (Ca'), 117,1 (C2'), 116,1 (C6', C6), 113,8 (C2), 115,87 (C5), 53,8 (Cp), 86,65 (Ca), 62,87 (C[gamma]). Spectrométrie de masse : APCI : C18H16O6 328 (M+), 679 (2M+Na) Fraction 3 : Américanin B On a obtenu 110 mg d'une poudre beige claire, soit 1,70 % de rendement. Point de fusion : 257-261 C (littérature : 258-260 C). 6TTOxi H H Y' a' 1) a, 3, O a 1 Î 3 ce l' ZC 6LVoAL/0H 1 !) T 5" S,OH 27, 3- 4" OH RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) : 9,54 (1H, s, CHO), 7,55 (1H, d, 16Hz, Hp'), 6,60-7,40 (9H, massif, H aromatique), 6,58 (1H, dd, 8Hz et 16Hz, Ha'), 5,98 (2H, m, Hp, Hp"), 4,10 (2H, m, Ha, Ha"), 3,55 (4H, m, CH2OH). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) : 194,6 (Cy'), 153,78 (Cp'), 145,68 (C4', C4", C2"), 145,95 (C4), 145,51 (C3', C3), 132,96 (Ca'), 129,64 (Cl), 127,94 (CI', Cl"), 123,53 (C6'), 120,31 (C6), 119,00 (C6"), 117,22 (C5'), 116,68 (C5, C2', C2), 115,87 (C5"), 114,95 (C2"), 78,2 (CpCp"), 77,65 (Ca, Ca"), 61,87 (Cy, C[gamma]''). Spectrométrie de Masse : APCI : C27H2409 492 (M+). Fraction 4 : Isoaméricanol A : On a obtenu 795 mg d'une poudrejaune claire, soit 12,35 % de rendement. Point de fusion : 159-160 C (littérature : 157-159 C). 5 6, A4>CL /OH HO 81 1 3 OH HO 9' 8' , l' 1 :3' 0 91 2' - 0 11 4 6 5 OH RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) : 6,96 (d, 1H, 2Hz, H2'), 6,93 (dd, 1H, 8Hz et 2Hz, H6'), 6,87 (d, 1H, 8Hz, H7'), 6,70 (dd, 1H, 8Hz et 2Hz, H6), 6,42 (d, 1H, 16Hz, H7), 6,20 (dt, 1H, 16Hz et 5Hz, H8'), 4,81 (d, 1H, H2), 4,07 (t, 1H, H9'), 4,03 (m, 1H, H8), 3,51 - 3,32 (dd, 2H, 12,3Hz et 5Hz, H9). Spectrométrie de Masse : APCI : C18H18O6 330 (M+), 683 (2M+Na). Fraction 5 : On a obtenu 455 mg d'une poudre jaune claire, soit 7 % de rendement. Il y a une ambiguïté sur la position du cycle furannique, ce qui explique les deux hypothèses de structure : 4-{3-hydroxymethyl-6-[3-hydroxymethyl-6-(3-hydroxy-propenyl)-2,3-dihydrobenzofuran-2-yl] 2,3-dihydro-benzo [1,4]dioxin-2-yl}-benzene-1,2-diol. OH 6 I 5 / 4 O a. 1 . I 6\ 5" p hypothèse A RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) : 7,0-6,60 (9H, massif, H aromatique), 6,59 (1H, m, Ha'), 6,19 (1H, m, Hp'), 4,79 (1H, dt, Ha"), 4,62 (1H, m, Ha,), 4,12 (1H, m, Hy), 4,07 (1H, dd, Hy' ), 4,05 (1H, m, Hp"), 3,71 (1H, m, Hss), 3,52 (1H, m, (1H, d, Hy"). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) : 146,41 (C4'), 145,83 (C4'), 145,13 (C3"), 144,83 (C3), 144,5 (C3'), 144,0 (C4), 131,32 (Ca), 129,84 (C6"), 129,54 (Cp), 129,4 (Cl), 121,78 (C6'), 120,42 (C6), 118,87 (CI'), 117,25 (C5'), 116,35 (C2'), 116,24 (C2), 115,79 (C5), 115,64 (C2"), 115,55 (C5"), 87,39 (Ca), 77,58 (Css"), 77,20 (C[alpha]"), 62,06 (C[gamma], C[gamma]"), 59,8 (C[alpha]'), 55,37 (Css). 4-{3-hydroxyméthyl-[3-hydroxyméthyl-7-(3-hydroxy-propényl)-2,3-dihydro-benzo [ 1,4]dioxin-2-yl-2,3-dihydro-benzofuran-2-yl} -benzène-1,2-diol. 6-1 'Il 1-OH L.) y" l' /3, O a 1 3 OH l' 6 I / 4 OH 4 OH RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) : 7,0-6,60 (9H, massif, H aromatique), 6,59 (1H, m, Ha), 6,19 (1H, m, Hss'), 4,79 (1H, m, H[alpha]), 4,62 (1H, dt, H[alpha]"), 4,12 (1H, m, H[gamma]"), 4,07 (1H, dd, H[gamma]'), 4,05 (1H, m, Hp), 3,71 (1H, m, Hss"), 3,52 (1H, m, (1H, d, Hy). EXEMPLE 2 : ESSAIS SUR LA CONSERVATION DU POISSON DES DIFFERENTES MOLECULES EXTRAITES DE PANGIUM EDULE Le processus de putréfaction des aliments fait intervenir deux grandes phases. Les enzymes lysosomiales (cathepsines en particuliers) sont libérées dans les tissus dès la mort cellulaire et digèrent progressivement les protéines structurales. Cette digestion aboutit à la création d'un environnement propice à la croissance des bactéries endogènes (présence de substrats, température et degré d'oxygène). Une chaîne trophique est alors mise en place et aboutit à la putréfaction totale. Cette putréfaction s'accompagne de libération d'amines responsable des odeurs caractéristiques. La dégradation des tissus donne un aspectjaunâtre et mou au tissu. Des morceaux de poisson (lieu noir chair / 350 à 390 mg) sont incubés à 37 C pendant 48 h en présence ou non des produits à tester (25 à 40 mg). Après 48h, une analyse qualitative de l'odeur est réalisée. Les produits les plus actifs sont ceux qui préservent une odeur proche de celle du poisson frais. Les résultats sont exprimés du produit qui conserve le plus l'odeur initiale du poisson à celui qui n'a pas d'effet (=témoin) Fraction 5 = fraction 2 (Americanin D) = fraction 3 (Americanin B) > fraction 1. 2 = fraction 4 ( IsoAmericanol A) > Fraction 1.1>Témoin. Ainsi, les fractions 5,2 et 3 sont les produits les plus actifs. EXEMPLE 3 : ESSAI SUR LES CATHEPSINES Les cathepsines sont des protéases cellulaires largement répandues dans les différents compartiments cellulaires et dans les tissus et au travers des espèces. Ces protéases sont impliquées dans la dégradation des protéines lors de processus pathologiques comme les nécroses, l'inflammation, etc, et les maladies dégénératives comme la maladie d'Alzheimer et les cancers. Ces protéases sont de plus libérées lors de processus invasifs comme les blessures. On les retrouve enfin très impliquées dans les premières étapes des processus de putréfaction où elles libèrent des amino-acides et des micronutriments qui sont métabolisés par les bactéries responsables des étapes ultérieures de la putréfaction. Le test consiste à faire réagir la cathepsine B et la cathepsine L sur un substrat artificiel, le chlorhydrate de Z-Phe-Arg-7-amido-4-méthylcoumarine. L'enzyme libère la méthyl-coumarine qui est dosée par fluorescence. Dans ce test, on a évalué l'effet inhibiteur des molécules extraites de Pangium edule et de trois lignanes disponibles dans le commerce, l'Eusiderine, le Matairesinol et le Secoisolariciresinol 3. 1 Mode opératoire : Les produits utilisés sont disponibles commercialement auprès des sociétés suivantes : Sigma/Aldrich : Sodium Acétate (S7670) ; Acetic Acid glacial (A0808) ; EDTA (ED). Acros : DTT (165680050). Calbiochem : B Human Liver (219362) ; substrat : Z-Phe-Arg-7-amido-4-Methylcoumarin,hydrochlorid (03-32-1501) ; cathepsin inhibitor I (219415). Thermolabsystem : 96 puits (9502867); fluoroscan Ascent FL. Fluka BiochemiKa : (60372) ; Matairesinol (40043) Volume réactionnel : 87 l tampon : 340 nM d'acétate de sodium ; 60 mM d'acide acétique ; 8 mM DTT ; mM EDTA, pH6,8. 3 l de substrat (0,6 M final) 10 l d'enzyme (72,27.10-4 g / l) A ce volume réactionnel sont rajoutés 2 M d'inhibiteur spécifique ou 10 ug/ml des produits à tester. Incubation/mesure : plaques 96 puits ; 37 C ; 30 mesures toutes les 30 secondes ; excitation 355 nm et émission 460 nm. Les valeurs obtenues sont comparées au témoin (cinétique enzymatique sans inhibiteur) et exprimées en pourcentage d'inhibition. 3. 2 Résultats : Les résultats sont exprimés selon deux critères : l'inhibition de la vitesse initiale (pente) et l'inhibition de l'hydrolyse maximale du substrat (plateau) Cathepsine B : Inhibiteur spécifique : 31 % (plateau ) 44,5 % (pente) IsoAméricanol A : 17 % (plateau) 26,1 % (pente) Fraction 6 : 24,6% (plateau ) 30,2 % (pente) Américanin D : 11,9 % (plateau) 2,1 % (pente) Fraction 5 :18 % (plateau) 28,5 % (pente) Fraction 4 : 5 % (plateau) 32,5 % (pente) Américanin B : % (plateau) 26,2 % (pente) Secoisolariciresinol : 15,7 % (plateau), 21,1 % (pente) Matairesinol : 10 % (plateau) 4,1 % (pente) Eusidérine A : 11.6 % (plateau) 8,8 % (pente) Cathepsine L Inhibiteur spécifique : 77 % (plateau ) 71,4% (pente) IsoAméricanol A : 5 % (plateau) 5,8 % (pente) Fraction 6 : 9,1 % (plateau ) pente (0 %) Américanin D : 17,7 % (plateau) 4,8 % (pente) Fraction 5 :14,2 % (plateau) 4,8 % (pente) Fraction 4 : 11,7 % (plateau) 1,7 % (pente) Américanin B : % (plateau) 22,9 % (pente) Secoisolariciresinol : 1,9 % (plateau), 2,5 % (pente) Matairesinol : 7,1 % (plateau) 10 % (pente) Eusidérine A : 15,8 % (plateau) 18,2 % (pente) 3. 3 Conclusions On constate que les différents lignanes ont des efficacités très variables selon la cathepsine considérée. Les lignanes du commerce ont des efficacités comparables à certains lignanes extraits de Pangium edule. REVENDICATIONS 1) Utilisation de lignanes et de néolignanes comme agents inhibiteurs de cathepsines. 2) Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que les lignanes répondent à la formule 1 : dans laquelle # A représente: - soit un groupe - soit un groupe où R1 représente : - un groupe phényle substitué par 1 ou 3 groupe (s) identique(s)oudifférent(s) choisi (s) parmi les groupes hydroxy et méthoxy; - ou un groupe - ou un groupe R5 étant un groupe phényle substitué par 1 ou 3 groupe (s) ou différent(s) choisi(s) parmi les groupes hydroxy et méthoxy; # R2 représente un groupe -CH20H; # R3 représente un groupe ou ou et # R4 représente un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxy. 3) Composé de formule 1 : dans laquelle # A représente: - soit un groupe - soit un groupe où R1 représente : - un groupe phényle substitué par 1 ou 3 groupe (s) identique(s)oudifférents) choisi (s) parmi les groupes hydroxy et méthoxy; - ou un groupe - ou un groupe R5 étant un groupe phényle substitué par 1 ou 3 groupe (s) ou différent(s) choisi (s) parmi les groupes hydroxy et méthoxy; # R2 représente un groupe -CH20H; # R3 représente un groupe ou ou et # R4 représente un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxy. 4) Composés de formule I en tant que médicament. 5) composition pharmaceutique pour le traitement des cancers, notamment l'inhibition des métastases et la protection hépatique contre les toxiques, caractérisée en ce qu'elle contient à titre de principe actif un lignane, en particulier un lignane de formule I. 6) composition destinée au traitement des organes humains ou animaux aux fins de transport ou de conservation, caractérisée en ce qu'elle contient au moins un lignane, en particulier un lignane de formule I. 7) composition destinée à la préservation des produits agro-alimentaires contenant des protéines, caractérisée en ce qu'elle contient au moins un lignane, en particulier un lignane de formule I. 8) Utilisation des lignanes et des néolignanes selon la revendication 1 pour la préparation d'un médicament ou d'une composition cosmétique destinés à inhiber les cathepsines. 9) Utilisation selon la revendication 8, caractérisée en ce que le lignane est choisi parmi l'eusidérine, le matairesinol, le secoisolariciresinol, les américanines, les américanols, l'isoaméricanol et les composés de formule I. 10) Utilisation selon la revendication 9, caractérisée en ce que les lignanes et les néolignanes sont obtenus par extraction à partir des graines de Pangium edule.