Brevet FR2842733A1 — publié le 20040130

La présente invention a pour objet l'utilisation de dérivés céramide et pseudo-céramide comme actifs anti-collagénase. L'invention a également pour objet de nouveaux composés appartenant à la famille des céramides, un procédé pour leur préparation, leurs utilisations, notamment dans le domaine de la cosmétique et de la dermatologie. Le vieillissement cutané entraîne essentiellement des modifications cellulaires, moléculaires et histologiques au sein de l'épiderme et du derme. Des études épidémiologiques ont mis en évidence une diminution de l'épaisseur dermique de 6 % par décennie. Ce phénomène d'atrophie est à mettre en relation, d'une part avec la diminution de l'hydratation cutanée avec l'âge - notamment liée à un ralentissement de la synthèse des lipides épidermiques, particulièrement des céramides - d'autre part avec les importantes modifications du catabolisme et de la biosynthèse des macromolécules de la matrice extracellulaire. Les trousseaux de collagène sont altérés ; la quantité des liaisons inter-chaînes du collagène augmente, provoquant ainsi une réticulation des fibres, qui entraîne une dénaturation architecturale marquée. Les fibres élastiques subissent une élastolyse : elles apparaissent plus nombreuses, épaisses, fragmentées et s'enchevêtrent pour former des amas de matériel amorphe et granuleux. Ces différents types de dénaturation se traduisent cliniquement par une atrophie dermique - perte d'élasticité, accentuation des rides d'expression, aspect citréin marqué - et une fragilité cutanée. Pour limiter la perte d'élasticité de la peau, plusieurs méthodes ont été proposées. Il a d'abord été envisagé d'introduire de l'élastine dans des compositions cosmétiques afin que cette dernière constitue un substrat mobilisant les élastases cutanées. L'application de telles compositions a certes pour effet de ralentir la dégradation de l'élastine endogène, mais elle s'accompagne d'une augmentation de la teneur en fragments d'élastine dans la partie supérieure de l'épiderme qui entraîne une kératinisation excessive. Il a aussi été proposé d'atténuer les rides en appliquant sur la peau des agents favorisant la desquamation ; cependant, l'apparence lisse obtenue par cette méthode reste temporaire. L'application de compositions à base de gel de polymères hydrophiles, afin de combler les rides et les ridules, apporte également une solution éphémère. Il est alors apparu pertinent d'agir sur le processus de vieillissement de la peau en bloquant l'action des élastases. Les inhibiteurs d'élastases connus dans le domaine cosmétique sont soit naturels principalement sous forme d'extraits végétaux (V. Bizot-Foulon, G. Godeau, F. Guessous, E. Lati, G. Rousset, M. Roch-Arveillier and W. Homebeck - Inhibition of human neutrophilelastase by wheat ceramides - Int. J Cosmet. Sci. 1995, 17, 255-264), soit synthétiques (B. M. Ashe and M. Zimmerman - Specific inhibition of human granulocyte elastase by cis-unsaturated fatty acid and activation by the corresponding alcohols Biochem. Biophys. res. Comm. 1977, 75, 194-199). La littérature montre que certains céramides naturels ou synthétiques, outre leurs propriétés restructurantes de la barrière lipidique, possèdent une activité anti- élastase complémentaire. Les céramides de blé ont une activité anti-élastase qui serait liée à leur caractère lipophile singulier. L'élastine fibreuse, possédant une forte affinité envers les composés lipophiles, se fixerait à ces derniers par des liaisons hydrophobes. Ceci empêcherait l'attaque enzymatique par un effet de barrière et protégerait ainsi les fibres élastiques. Une activité anti-élastasique est également connue pour le céramide H03 de SEDERYIA (L. Lacoste, P. Msika, R. Navarro, M. Charveron and E. Perrier - Ceramide greffé à propriété anti-élastase - WO 96/11956, 1996). Toutefois, aucun document de l'art antérieur ne mentionne ni ne suggère l'existence d'une activité anti-collagénase pour des composés de type céramide ou pseudo-céramide. Aussi, c'est avec étonnement que la demanderesse a découvert que les céramides et les pseudo-céramides étaient dotés d'une activité d'inhibiteurs de collagénase. En outre, il subsiste le besoin de composés ayant une action complète sur les facteurs du vieillissement. La demanderesse s'est donc fixé pour objectif la mise au point d'actifs disposant à la fois des propriétés propres aux céramides naturels et d'une activité anti-élastase et anti-collagénase, de tels actifs ayant une action complète sur la prévention et/ou le traitement du vieillissement cutané. L'invention a pour objet de nouveaux composés appartenant à la famille des céramides et caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule (I) ci-dessous : dans laquelle : m est un entier allant de 2 à 14, n est un entier allant de 3 à 15, p est un entier allant de 7 à 25. Préférentiellement m+n est supérieur ou égal à 7 et inférieur ou égal à 23 ; encore plus préférentiellement m+n est supérieur ou égal à 9 et inférieur ou égal à 21 ; de façon encore plus préférée, m+n est supérieur ou égal à 11 et inférieur ou égal à 19 ; avantageusement, m+n est supérieur ou égal à 13 et inférieur ou égal à 17. Selon un mode préféré de réalisation de l'invention, m+n est égal à 15. Préférentiellement m est un entier allant de 4 à 12, encore plus préférentiellement de 5 à 10. De façon avantageuse m est égal à 7 Préférentiellement n est un entier allant de 4 à 12, encore plus préférentiellement de 5 à 10. De façon avantageuse n est égal à 7 Préférentiellement p est un entier allant de 9 à 23, encore plus préférentiellement de 11 à 21, de façon encore préférée, p est un entier allant de 13 à 19. De façon avantageuse p est égal à 15 ou à 17. Les composés préférés conformément à la présente invention sont : - le N-(2,3-dihydroxypropyl)-N-octadécyl-9,10- dihydroxyoctadécanamide, et - le N-(2,3-dihydroxypropyl)-N-hexadécyl-9,10- dihydroxyoctadécanamide. L'invention a également pour objet un procédé de préparation de céramides répondant à la formule (I) ci-dessus. Les céramides selon l'invention sont avantageusement synthétisés par un procédé comportant deux étapes. Le procédé est fondé sur la réaction d'une alkylamine avec le glycidol, afin d'obtenir une amine secondaire suivant le schéma 1 ci-dessous : Schéma 1 dans lequel p a la même définition que dans la formule (I) ci-dessus. Le glycidol, par couplage avec des amines grasses (II), permet d'obtenir un composés de formule (III) comportant les deux fonctions alcools (primaire et secondaire) et une amine secondaire qui est le précurseur du groupement amide du composé de formule (I). Les amines grasses utilisées sont des amines primaires comportant de 8 à 26 atomes de carbone, préférentiellement 16 ou 18 atomes de carbone. L'ajout d'une quantité molaire de glycidol est effectué de préférence avec un goutte à goutte lent, sous agitation, afin d'ouvrir l'époxyde de manière régiosélective sur le carbone le moins substitué. En fin de réaction, le produit attendu cristallise spontanément dans le milieu. Il est alors récupéré et purifié par tout moyen connu de l'homme du métier, notamment par recristallisation, en particulier dans l'éthanol. Avec ce mode opératoire la purification du produit (III) est simple et efficace, aussi bien pour les essais en laboratoire que pour les manipulations avec des quantités de l'ordre du kilogramme, les rendements de conversion obtenus sont élevés (50 et 60 %). Ces différents arguments rendent ce procédé compétitif et permettent d'envisager une exploitation industrielle. Dans une seconde étape, le composé de formule (III) est acylé par un composé de formule (IV) selon le schéma 2 ci-dessous : Schéma 2 dans lequel les entiers m, n et p ont la même signification que dans la formule (I) ci-dessus et R représente un groupement activateur des acides permettant d'effectuer une acylation de l'amine. De telles réactions sont bien connues de l'homme du métier, on pourra notamment se reporter à Jerry March, Advanced Organic Chemistry, Wiley-Interscience, 3rd Edition, 370-377. Afin d'optimiser la sélectivité, la reproductibilité et la faisabilité industrielle (faible pollution, économie) du procédé, le composé de formule (IV) est avantageusement un ester d'alkyle en C1-C5, linéaire, ramifié ou cyclique, de préférence un ester méthylique. Avantageusement, on choisit une méthode d'acylation sans solvant - susceptible d'être applicable directement dans des conditions industrielles. Cette réaction est catalysée par une base inorganique, telle que la soude ou la potasse..... La potasse est la plus adaptée pour une séparation dans une unité de production et permet d'obtenir de bons rendements (de l'ordre de 70 %). Les composés selon l'invention sont dotés d'une propriété originale d'actif anti-collagénase. En outre, ils sont dotés d'une activité anti-élastase et de propriétés restructurantes de la barrière lipidique. L'invention a également pour objet l'utilisation de composés répondant à la formule (I) ci-dessus comme actifs anti-élastase. L'invention a en outre pour objet l'utilisation d'un composé répondant à la formule (I) ci-dessus comme actif restructurant de la barrière lipidique. L'invention a encore pour objet l'utilisation d'un composé choisi parmi les céramides et les pseudo-céramides, dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition dermatologique, comme actif anti-collagénase, pour prévenir, retarder ou traiter l'action des collagénases. En effet, bien que de nombreux céramides et pseudo-céramides soient connus, leur activité comme actifs anti-collagénase n'avait jusqu'à ce jour été ni mentionnée ni suggérée. En particulier, l'invention a pour objet l'utilisation d'un actif répondant à la formule (V) ci-dessous : dans laquelle R1 et R2, identiques ou différents, sont choisis parmi les chaînes alkyle, linéaires ou ramifiées, saturées ou insaturées, en C1-C30, éventuellement porteuses d'une ou plusieurs fonctions hydroxyle et/ou d'un ou plusieurs ponts éther et/ou d'une ou plusieurs fonctions alkyle ester -O-CO-R3 dans laquelle R3 représente un groupement alkyle en C1C30. linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, éventuellement hydroxylé, et comportant un ou plusieurs ponts éther, dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition dermatologique, comme actif anti-collagénase, pour prévenir, retarder ou traiter l'action des collagénases. Préférentiellement, l'invention a pour objet l'utilisation d'un composé de formule (I) telle que définie ci-dessus , dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition dermatologique comme actif anti-collagénase, pour prévenir, retarder ou traiter l'action des collagénases. Les composés selon l'invention peuvent être utilisés dans des applications diverses, notamment dans des compositions cosmétiques et dermatologiques. Les composés de formule (I) possèdent la propriété de former des vésicules en association avec d'autres lipides lorsqu'ils sont dispersés dans l'eau. La présente invention a donc pour objet l'utilisation des composés de formule (I) dans des émulsions, des dispersions ou dans des lotions. Elle a également pour objet l'utilisation de ces composés, associés à d'autres lipides, pour la formation de sphérules lipidiques. L'invention a également pour objet des compositions cosmétiques et/ou dermatologiques comprenant au moins un composé de formule (I). Un autre objet de l'invention est un procédé de traitement cosmétique de la peau, des cheveux, des ongles ou de cils, consistant à appliquer sur ceux-ci une quantité suffisante d'au moins un composé de formule (1). L'invention a notamment pour objet un procédé de traitement cosmétique destiné à prévenir, retarder ou traiter les effets du vieillissement cutané et/ou à prévenir, retarder ou traiter la perte d'élasticité de la peau et/ou à prévenir, retarder ou traiter l'apparition des rides et/ou à prévenir, retarder ou traiter l'atrophie dermique, consistant à appliquer sur ceux-ci une quantité suffisante d'au moins un composé de formule (I). L'invention a en outre pour objet l'utilisation d'un composé de formule (I) pour la préparation d'une composition dermatologique destinée à prévenir, retarder ou traiter les effets du vieillissement cutané et/ou à prévenir, retarder ou traiter la perte d'élasticité de la peau et/ou à prévenir, retarder ou traiter l'apparition des rides et/ou à prévenir, retarder ou traiter l'atrophie dermique. Les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous forme d'émulsions eau-dans-huile ou huile-dans-eau (lait ou crème), de lotions hydroalcooliques, huileuses ou oléoalcooliques, de gels, de dispersions ou de batonnets solides, de spray ou de mousse aérosol. Les compositions selon l'invention peuvent comporter, outre le véhicule cosmétique ou dermatologique, tout autre composés approprié, tel que : des charges, des tensio-actifs, des corps gras, des anti-oxydants, des conservateurs, des pigments, d'autres actifs cosmétiques et/ou dermatologiques (filtres anti-UV, actifs anti-vieillissement). Préférentiellement, les composés de formule (I) sont présents dans la composition sous forme de vésicules ou de sphérules lipidiques, notamment de liposomes. On entend par vésicules ou sphérules lipidiques des particules formées d'une membrane constituée par un ou plusieurs feuillets concentriques, ces feuillets comportant une ou plusieurs couches bimoléculairesde lipides amphiphiles encapsulant une phase aqueuse. La phase aqueuse peut contenir des substances actives hydrosolubles et les couches bimoléculaires de lipides amphiphiles peuvent contenir des substances actives lipophiles. Ces sphérules ont généralement un diamètre moyen compris entre 10 nm et 5000 nm. De nombreux documents décrivent des procédés permettant de préparer des vésicules ou sphérules lipidiques. On peut notamment se reporter aux documents et références suivants : Demandes de brevet européen n 665 002 et 665 002 ; site http://www.collabo.com/liposome.htm ; A. D. Bangham, M. N. Standish and J.C. Watkins J Mol. Biol. 1965, 13, 138 ; K. Egbaria and K.. Weiner - Advanced Drug Delivery Reviews 1990. 5. 287. EXEMPLES I- Synthèse des molécules : 1- Synthèse du N-(2, 3-dihvdroxypropyl)-N-hexadécylamine : 50 g de N-hexadécylamine 1 (0,207 mol., 2 eq.) [Réf. Aldrich : 44,531-2] sont dissous dans 200 ml d'éthanol absolu. Le glycidol 2 (6,53 ml ; 98 mmol., 1 eq.) [Réf. Aldrich : G580-9] est alors ajouté goutte à goutte au mélange placé sous agitation magnétique à température ambiante. Le milieu réactionnel est placé au reflux pendant seize heures. Le ballon est ensuite laissé sous agitation à température ambiante pendant six heures. La solution précipite alors sous la forme d'un solide blanc pâteux. Celui-ci est filtré sous vide (fritté n 2) puis lavé deux fois avec 50 ml d'éthanol absolu. Le solide blanc obtenu est recristallisé dans 400 ml d'éthanol, puis séché. Le produit 3 (N-(2, 3dihydroxypropyl)-N-hexadécylamine) est isolé avec 50 % de rendement (littérature : 51,3 %). CCM : Eluant chloroforme/ méthanol (10/3 v/v) Rf (3) = 0,47 Révélation : Acide phosphomolybdique, chauffage 2 minutes à 120 C. Température de fusion = 81,5 C (littérature = 79 C) Infrarouge (cm-1) : 3341, 3273, 2918,2852, 1472,1037 (conforme à la littérature). Afin de confirmer la structure, une analyse RMN - proton et carbone - est effectuée dans du chloroforme deutéré à 50 C. Les résultats, présentés dans le tableau 1, sont conformes à ceux décrits dans la littérature (P. Critchley, D.B. Hagen, S. E. Kirsch, D. T. Parrot, A. V. Rawlings and I.R. Scott - Cosmetic composition - EP 0 482 860 Al, 1991). Schéma 3 : du produit 3 "'7 ...r-. C2 ...: :,; c3"j C ~, c2a C4' "';1,1T; cls.=: cs é'ihz. .: :-S:' .".,i.,y ,'\3 @ 52,5 69,9 65,8 50 7,6 - 29,3 - 29,5 22,6 14 29,6 - 31,9 # H1 H2 H3 H1' H2' H3' à H15' H16' (ppm) ################################################ 2,51 à 3,58 3,58 à 3,75 3,58 à 3,75 2,51 à 3,58 1,46 1,28 0,92 @ (m) (m) (m) (m) (m) (s large) (t) Tableau 1 : Déplacements chimiques 13C et 1H du produit 3 2- Synthèse du N-(2,3-dihydroxypropyl)-N-octadécylamine : Une synthèse est effectuée avec l'octadécylamine [Réf. Aldrich - 30,539- 1] dans les conditions expérimentales décrites ci-dessus. Le produit 4 est obtenu avec un rendement de 49 % (littérature : 59,6 %). CCM : Eluant chloroforme/ méthanol (10/3 v/v) Rf (4) = 0,48 Révélation : Acide phosphomolybdique, chauffage 2 minutes à 120 C. Température de fusion = 86 C (littérature = 89 C) Infrarouge (cm-1) : 3340,3290, 2940,2860, 1475, 1385 (conforme à la littérature). L'analyse RMN 1H et 13C est présentée dans le tableau 2 Schéma 4 : du produit 4 ci , C2 y:,.,-r; C3 4'1:::%4f:'A" 27,3 - 29,3 - 29,5 52.5 69,9 65,8 50 22,6 13,9 29,6 - 30,1 - 31,9 # H1 H2 H3 H1' H2 H3' à H17' H18' (ppm) 2.56 à 2,91 3,54 à 3,76 3,54 à 3,76 2,56 à 2,91 1.50 1,27 0,90 (m) (m) (m) (m) (m) (s large) (t) Tableau 2 : Déplacements chimiques 13C et 1H du produit 4 3- Synthèse du N-(2,3-dihydroxypropyl)-N-hexadécy1-9,10dihydroxyoctadécanamide : L'amine 3 (5 g, 15,8 mmol., 1 eq) et le dihydroxystéarate de méthyle 5 (5,22 g, 15,8 mmol., 1 eq) sont introduits dans le milieu sous vide, chauffé à 90 C. Lorsque les deux solides sont fondus, 0,125 g (2,22 mmol., 0,14 eq) de potasse est alors ajouté. Le système est laissé sous vide pendant vingt heures et la température du milieu réactionnel est maintenue constante à 90 C. Des traces d'ester et d'amine sont encore présentes. Une chromatographie liquide sur silice (230/400 mesh ASTM, 60 m) est effectuée afin d'isoler le produit de réaction. L'éluant utilisé est un mélange de chloroforme et de méthanol dans un rapport 10 pour 1 en volume. Le produit est isolé sous forme d'un solide blanc, le (N-(2,3-dihydroxypropyl)-N-hexadécyl-9,10-dihydroxyoctadécanamide) - 6 avec 71% de rendement. CCM :Eluant chloroforme/ méthanol (10/1 v/v) Rf (6) = 0,54 ; Rf (5) = 0,8 ; Rf (3) = 0,07 Révélation : Acide phosphomolybdique, chauffage 2 minutes à 120 C. L'analyse RMN H1 et C13 est présentée dans les tableaux 3 et 4. Schéma 5 : du produit 6 i'a-'tS y?---"-'''-"' io c ' |cr*4lr \cr ' # \c9"'/cio" C-7:"-. C C3 49,9 71 63,7 49 175,4 74,7/74,8 .; /a ?'ë& % %- , "' 3,18à3,28 3,70 à 3,78 3,41à3,62 3,40à3,55 Y...' Tableau 4 : Déplacements chimiques 'H du produit 6 4- Synthèse du N-(2.3-dihvdroxvpropyl)-N-octadécvl-9.10- dihydroxvoctadécanamide : Le protocole opératoire, présenté ci-dessus, est appliqué au dihydroxystéarate de méthyle 5 en présence de l'amine 4. Le point de fusion du produit 7 (N-(2,3-dihydroxypropyl)-Noctadécyl-9,10-dihydroxyoctadécanamide) obtenu est de 56 C. Le rendement de la réaction est de 27 %. CCM :Eluant chloroforme/méthanol (10/1 v/v) Rf (7) = 0,6 ; Rf (5) = 0,8 ; Rf (4) = 0,09 Révélation : Acide phosphomolybdique, chauffage 2 minutes à 120 C. L'analyse RMN H1et C13est présentée dans les tableaux 5 et 6 y""''"- TeS'' t9 ;"Î,çj7r;;;;'- 49.9 71 64,1 49 753 74,7/74,8 C2f C16VC2" C16" C17' 7' et CI 7" C18' C18" 8 (ppm"" 4j . 25,) - 26,2 - 26.8 - 27,1 - 28.9 - 29 - 29.1 22.7 14.1 '"""''.-'i 25,3 - 26,2 - 26.8 - 27,1 - 28,9 - 22.7 14,1 '"' -29,2- 29.6 - 29,7 - 29.8 -31- 1,3- 31.9 - 32.9 Tableau 5 : Déplacements chimiques 13C du produit 7 Schéma 6 : du produit 7 - >, rSs 112 \H3 H9"IJJTO" 3,16 à 3,28 à 3,76 ' ),41 à 3,61 ).40 à 3,55 3,52/3,60 3,52/3,60 (m) (m) (m) : 4 H2fàH17r-H2"àH17" ' * # 1118 ëthl 8 1ii;iJi.">:: ;:; ;]:';::": Tableau 6 : Déplacements chimiques 1H du produit 7 La spectroscopie de masse (FAB+) réalisée sur les composés 6 et 7 donne les pic moléculaires attendus (MH+) à 601 m/z et à 629 m/z. II- Evaluation de l'activité biologique des céramides : 1 - Préparation et mise en survie des explants : Les explants ont été préparés à partir de plasties abdominales ou mammaires de peau humaine conservées dans un Milieu Essentiel Minimun (MEM) dont la composition est donnée ci-dessous : - Sels organiques, qui apportent les ions nécessaires aux cellules (maintien de la pression osmotique, rôle tampon, échanges membranaires,...) - Acides aminés, éléments de base nécessaires à la synthèse protéique - Vitamines, cofacteurs nécessaires aux réactions métaboliques - Autres composants : # D-glucose : substrat métabolique et énergétique. # Rouge de phénol : indicateur de pH. # Succinate de sodium acide succinique : source d'énergie. Les plasties sont alors préparées (élimination de l'hypoderme) en vue de réaliser des explants de 12 mm de diamètre. Les explants sont placés dans un milieu de culture où la concentration en antibiotiques a été doublée afin d'éviter toutes contaminations bactériologiques. Chaque explant est ensuite déposé sur une grille en acier inoxydable disposée dans des boîtes de 6 puits. Le milieu de survie est alors ajouté en quantité appropriée afin que l'épiderme reste en contact avec l'air (conditions physiologiques). La mise en survie se réalise dans un incubateur à 37 C et à 5% de CO2. Suivant l'étude à effectuer, les explants sont traités pendant un ou plusieurs jours (application du produit, irradiations UV...). Tous les 2 jours, la moitié du milieu de culture est renouvelée. Le volume non renouvelé permet de conserver une partie des éventuels facteurs de croissance synthétisés par les explants et le milieu neuf apporte de nouveaux substrats métaboliques et énergétiques. Les explants sont alors préparés pour l'étude histologique. Cette technique requiert plusieurs étapes successives : fixation, inclusion, coupe, coloration, montage. La fixation a pour but de conserver les biopsies. L'inclusion permet de préparer les prélèvements afin de pouvoir en réaliser des coupes fines et régulières de 2 à 5 m d'épaisseur. Les coupes sont montées sur des lames et des colorations sont ensuite effectuées pour accentuer les contrastes et se placer dans les conditions optimales pour visualiser les structures ou les composants des tissus à étudier. Elles sont ainsi prêtes à être observées au microscope optique. Le protocole expérimental détaillé de l'histologie est présenté ci-dessous. Certains tests sont effectués directement sur des coupes transversales de peau issues de plasties congelées. Protocole de préparation des coupes de peau humaine : Le système de microtomie motorisé est placé dans une enceinte réfrigérée. Il permet de réaliser des coupes de façon manuelle ou automatique de peau congelée. La température de la chambre est réglable et choisie en fonction du type de prélèvement histologique à couper (-10 C pour du cartilage ; -15 C pour de la peau sans graisse et -25 C pour de la peau avec graisse). Les coupes obtenues (de 5 m) sont recueillies directement sur une lame de verre, à laquelle elles adhèrent spontanément. Protocole expérimental de préparation des explants : Protocole de traitement de la plastie : La plastie est sortie du flacon de transport et maintenue en tension avec des épingles stériles (épiderme vers le bas) sur une plaque de liège recouverte d'un plan de découpe en carton-polystyrène stérile. Le tissu adipeux est ensuite éliminé à l'aide de ciseaux courbes et d'un scalpel. La peau ainsi dégraissée est retournée (épiderme vers le haut) et maintenue à l'aide d'épingles en exerçant une tension uniforme et modérée. La peau dégraissée est partagée en deux parties. Sur la première, des explants de peau sont réalisés à l'aide d'un bistouri emporte-pièces de 12 mm de diamètre. La seconde fraction est congelée, en vue d'éventuels contrôles histologiques (TO en congélation). Les explants sont placés dans le milieu de culture où la concentration en antibiotiques à été doublée. Ils sont conservés, dans des conditions physiologiques, à l'intérieur d'un incubateur en atmosphère humide enrichie de 5% de CO2, pendant une heure à 37 C. Mise en survie des explants : Chaque explant est ensuite déposé sur une grille en acier inoxydable disposée dans des boites de 6 puits. Pour chaque explant, nous ajoutons 2 ml du milieu de survie (ou Defined Keratinocyte-SFM, DK-SFM), quantité suffisante pour qu'une partie du derme plonge dans le milieu et pour que l'épiderme soit en contact avec l'air (conditions physiologiques). La mise en survie se réalise dans un incubateur. Le DK-SFM est un milieu complémenté, sans sérum, conçu pour l'isolation et l'expansion optimale des kératinocytes humains. Du calcium - pour une meilleure stratification des kératinocytes - des antibiotiques - pour inhiber la prolifération bactériologiques - et des antifongiques - pour éviter le développement de champignons et de levures - sont ensuite ajoutés. La composition du milieu est donc totalement définie et constante. Traitement des explants : Suivant le test à effectuer, les explants sont traités pendant un ou plusieurs jours (application du produit, irradiations UV...). Tous les 2 jours, la moitié du milieu de culture est renouvelé. Le volume non renouvelé permet de conserver une partie des éventuels facteurs de croissance synthétisés par les explants et le milieu neuf ajouté apporte de nouveaux substrats métaboliques et énergétiques. Prélèvements des explants : A la fin du traitement, les explants sont sortis de l'incubateur, séparés de leur grille et coupés en 2. Une moitié est fixée dans du Bouin en vue de l'étude histologique en paraffine et l'autre moitié est congelée à-80 C comme témoin. Préparation du Bouin ordinaire : Une solution composée d'eau distillée (750 ml) et de formaldéhyde (250 ml) est saturée par de l'acide picrique à chaud. Après retour à température ambiante, 50 ml d'acide acétique cristallisable sont alors ajoutés. La préparation est alors filtrée. Histologie en paraffine : Fixation au Bouin ordinaire : Après traitement et survie, les biopsies destinées à l'histologie, sont fixées dans du Bouin ordinaire pendant 24 heures. Le rôle du Bouin ordinaire est de figer les structures cellulaires et tissulaires dans l'état dans lequel elles se trouvent initialement. Son action légèrement décalcifiante contribue également à ramollir la peau et à faciliter sa coupe. Mise en cassette : Les biopsies fixées au Bouin sont placées dans des cassettes histologiques en plastique, annotées de la référence du prélèvement. Déshydratation et imprégnation en paraffine : A l'aide d'un automate d'imprégnation LEICA TP 1020, les pièces sont traitées par différents solvants qui permettent de remplacer l'eau intra et intercellulaire par le milieu d'inclusion : la paraffine. Les cassettes placées dans le panier de l'automate vont plonger dans des bains d'éthanol de degrés croissants (cycle de déshydratation), puis dans des bains de butanol (phase de clarification où l'éthanol est remplacé) et enfin des bains de paraffine (phase d'imprégnation, la paraffine pénètre dans le tissu). Dans les bains de paraffine où la fonction vide de l'automate est enclenchée, la paraffine remplace le butanol qui s'évapore. Succession des différents bains : Ethanol à 70 C (2 bains) Ethanol à 95 C (3 bains) Butanol (5 bains) Paraffine (2 bains) Mise en bloc : La mise en bloc se fait à l'aide de la station d'enrobage JUNG LEICA. Le demi-explant imprégné de paraffine est inclus dans un bloc de paraffine, confectionné à l'aide d'un moule. Coupe au michrotome : La réalisation des coupes se fait à l'aide du michrotome LEICA RM 2125 RT. Des coupes de 5 m sont effectuées à partir des blocs de paraffine. Formation du ruban de coupes : A chaque tour, une nouvelle coupe se fixe à la précédente. Un ruban de coupes est récupéré et disposé sur une plaque de liège. Collage à l'eau gélatinée : Sur une lame porte-objet, sont versées quelques gouttes d'eau gélatinée (composition annexe), sur lesquelles sont déposées trois coupes. La lame est alors déposée sur une platine chauffante, ce qui permet aux coupes de se déplisser. L'eau gélatinée est ensuite éliminée. Après un égouttage de quelques minutes, la lame est mise à sécher dans une étuve à 45 C pendant une nuit minimum. Coloration des coupes : La coloration a pour but de révéler l'aspect général de la peau : stratum corneum, épidémie et derme. Les étapes décrites précédemment sont communes à tous les tests qui nécessitent l'utilisation d'explants en survie. L'étape de traitement et les colorations sont modulées en fonction de l'activité recherchée. 2- Préparation des formules : Les céramides sont tout d'abord formulés sous forme de liposomes. Afin d'obtenir une texture applicable sur la peau, les suspensions de liposomes devront ensuite être gélifiées. a- Protocole préparatoire général : Les liposomes sont préparés selon la méthode de nanoprécipitation. Les étapes de préparation sont les suivantes : Dissolution des composants lipidiques (phospholipide - lipoid E 80 pseudo-céramide ou céramide, cholestérol - lab. Cooper - et vitamine E - Aldrich) dans l'éthanol à 35 C pendant 5 minutes sous agitation magnétique, Injection à faible débit de la phase organique ainsi formée dans la phase aqueuse sous agitation magnétique (étape de nanoprécipitation qui dure 5 minutes), Evaporation à pression réduite (50 mbar 10) pendant 15 minutes, Addition de 10 ml d'eau distillée et évaporation dans les mêmes conditions pendant 10 minutes pour extraire la totalité de l'éthanol, Addition de 10 ml d'eau distillée et évaporation dans les mêmes conditions. b- Préparation des formules : Les liposomes sont préparés en respectant les compositions données dans le tableau 7, à partir des pseudo-céramides dont la synthèse a été détaillée plus haut. CERAMIDE FORMULé CI6H33n/oh c 16H 33'N A OH 1 c 17H 35 0 C'3H"-N-Y0H 37-N OH 1 C'7H3502 '-':0 Phospholipides 170 mg Pseudocéramides 110 mg Cholestérol 20 mg Ethanol 25 ml Eau 100 mil Tableau 7 : Composition des liposomes Les caractéristiques des liposomes sont présentées dans le tableau 8. lv de" la\ Taille moyenne des - préparation liposomes (nm) . *'-''""', F9 101,2 Pour toutes les préparations finales, les pourcentages massiques de chacun des constituants sont identiques : céramides : 1,6 % phospholipides : 2,5 % cholestérol : 0,3 % Ces préparations, pour être appliquées lors des tests d'évaluation, nécessitent d'être gélifiées. c- Gélification des préparations de liposomes : Le gélifiant choisi est l'hydroxy-éthyl-cellulose (HEC) avec lequel a été préparé un gel à 3,8 %. Ce gel est mélangé à la suspension de liposomes (proportions 1/3) sous agitation magnétique vigoureuse pendant une heure. De cette manière, une formulation applicable à l'aide d'un doigtier sur la peau peut être obtenue. 3- Evaluation de l'activité antiélastase : a- Principe du test : Ce test a pour but d'évaluer l'activité antiélastase de pseudocéramides vectorisés sous forme de liposomes, au niveau du derme papillaire et réticulaire. L'étude est réalisée sur des coupes en paraffine en présence de préparations pures à tester, en comparaison avec trois témoins : le témoin tampon, une solution de HgCl2 (contrôle positif) et une solution d'élastase. Le protocole opératoire détaillé est présenté ci-dessous. Les formules testées pour cette activité sont F9, F10 et P3. '#e .CER,4ltÎD z:;:::; .Âa=,>,:,~.- .$ FORMUZE 5, 16 " N f OH 16 33'N A Oh 1 F9 CsH3yOH C nH3s0 O OH F10 PLACEBO P3 L'histologie réalisée pour ce test permet de visualiser, pour chaque coupe, les fibres oxytalanes du derme papillaire et les fibres élaunines du derme réticulaire. La coloration des fibres élastiques est effectuée avec de l'orcéine qui permet leur visualisation au microscope optique. Chaque coupe est transversale ; les figures représentent le derme, l'épiderme se trouvant au-dessus de la zone visualisée sur les figures. Les résultats obtenus sont qualitatifs. L'interprétation est fondée sur la comparaison de coupes de peau ayant subies différents traitements. Nous regardons quelles peuvent être les similitudes et les différences entre : Une coupe témoin, sans élastase et sans produit ajouté Une coupe avec de l'élastase, sans produit Une coupe avec l'élastase et l'inhibiteur d'élastase HgCl2 Une coupe avec de l'élastase et le produit à tester. Par coloration à l'orcéine, seules les fibres d'élastine sont observables, elles apparaissent sous forme de filaments rouges. La coloration diminue fortement en présence d'élastase qui détruit l'élastine. L'objectif étant de comparer le taux d'élastine de chaque coupe, il suffit de comparer le volume colorimétique des diverses figures. b- Mode opératoire du test d'activité anti-élastase : Ce test est réalisé sur des coupes de paraffine de 5 m provenant d'une femme de 67 ans. Quatre coupes sont placées sur une lame histologique. Chaque lot est testé sur une lame. Les produits à tester sont mélangés avec une solution d'élastase pour obtenir une concentration finale de 7 g/ml. Les coupes sont recouvertes des produits ou solutions à tester puis, mises à incuber pendant 2 h à 37 C en chambre humide. Les produits ou solutions sont éliminés par rinçages au tampon. Une coloration à l'orcéine fait apparaître les fibres élastiques sous forme d'un réseau de fines fibres allongées. L'examen est réalisé à l'aide d'un microscope optique (x 40). c- Résultats : c-1Effet sur le derme papillaire : La figure 1 représente une coupe de référence qui n'a reçu aucun traitement. Cette coupe est caractéristique d'un peau saine puisqu'elle comporte une grande quantité de fibres fines d'élastine (filaments rouges). Cette figure est à comparer avec celles correspondant aux coupes traitées. La figure 2 représente une coupe traitée avec de l'élastase. On observe la disparition de la majorité des fibres élastiques. Cette figure tient également lieu de référence car l'activité inhibitrice des produits de l'invention est testée avec la même quantité d'élastase (7 ug/ml). La coupe traitée avec l'inhibiteur d'élastase HgCl2 représentée sur la figure 3 met en évidence l'efficacité de ce composé dans la protection des fibres. En effet, par comparaison avec la figure 1, on remarque que les filaments conservent leur couleur et leur aspect. Les coupes traitées par l'élastase et les produits F9, F10 et P3 sont respectivement représentées par les figures 4,5 et 6. La figure 4 établit, en comparaison avec les figures 1 et 2, que le produit F9 est assez peu efficace, quant à sa propriété protectrice. En effet, les fibres oxytalanes sont en nombre restreint et ont perdu leur aspect filandreux. La figure 5 prouve que le produit F10 est nettement plus efficace que le produit F9 puisque la colorimétrie est plus contrastée et que quelques filaments sont conservés. Le produit P3 n'a aucune activité. La figure 6 s'apparente à la figure 2. Ce résultat était attendu puisque cette formule est un placebo. c-2 Effet sur le derme réticulaire : La démarche est la même que précédemment, les coupes traitées avec les produits F9, F10 et P3 seront comparées à la coupe non traitée, à celle traitée à l'élastase et à celle traitée à l'élastase plus HgCl2. La différence majeure entre les clichés suivants et ceux précédemment traités est l'aspect des fibres. Elles apparaissent maintenant sous forme de rubans car les fibres d'élaunine présentes dans le derme réticulaire sont plus larges que les fibres oxytalanes. La figure 7 correspond à la coupe de référence où les fibres d'élastine sont largement présentes. Cette figure sera comparée à celles effectuées avec les coupes traitées. La figure 8 représente une coupe traitée avec de l'élastase. De même que sur la figure 2, les fibres élastiques ont disparu. Comme pour l'analyse du derme papillaire, cette figure tient lieu de référence. De même que pour la figure 3, la coupe traitée avec l'inhibiteur, représentée sur la figure 9, met en évidence l'efficacité des produits de l'invention pour la protection des fibres d'élaunine. Les coupes traitées par l'élastase et les produits F9, F10 et P3 sont respectivement représentées par les figures 10, 11et 12. Les conclusions obtenues pour le derme réticulaire sont les mêmes que pour le derme papillaire. Le produit F10 reste le plus efficace. Les fibres élaunines sont clairement visibles et ont conservé leur structure initiale. 4- Evaluation de l'activité anti-collagénase : a- Principe du test : L'activité anti-collagènase de la série de pseudocéramides selon l'invention est évaluée sur coupes de peau humaine. L'étude est réalisée sur les préparations pures F9 et F10 en comparaison avec le témoin tampon, une préparation à 2,5 % de phénanthroline (contrôle positif) et une solution de collagénase en suivant le mode opératoire décrit ci-dessous : L'histologie effectuée pour ce test permet de visualiser, pour chaque coupe, les faisceaux de collagène du derme. La coloration des faisceaux est effectuée avec du picro-sirius qui permet leur visualisation au microscope optique. Comme pour l'étude d'activité antiélastase, les résultats obtenus sont qualitatifs. L'interprétation est fondée sur la comparaison de coupes de peau ayant subies différents traitements. On relève les similitudes et les différences entre : Une coupe témoin, sans collagénase et sans produit ajoutés Une coupe avec de la collagénase, sans produit Une coupe avec la collagénase et l'inhibiteur de collagénase : la phénanthroline Une coupe avec de la collagénase et le produit à tester. Par coloration au picro-sirius, les faisceaux de collagène apparaissent en rouge. La coloration disparaît ou diminue fortement en présence de collagénase, car elle détruit les collagènes. De même que dans l'étude de l'activité anti-élastase, l'objectif étant de comparer le taux de collagène de chaque coupe, il suffit de comparer le volume colorimétique des diverses figures pour connaître l'activité anti-collagénase de chaque préparation. b- Mode opératoire du test d'activité anticollagénase Des coupes congelées de 5 m, provenant d'une plastie mammaire d'une femme de 54 ans, sont placées sur des lames histologiques (4 coupes par lame). Chaque lot est testé sur une lame. Les produits à tester sont mélangés (vol/vol) avec une solution de collagénase, afin d'obtenir une concentration finale de 30 g/ml. Les coupes sont recouvertes des produits ou solutions à tester, puis, mises à incuber pendant 2 h à 37 C en chambre humide. Les produits ou solutions sont éliminés par rinçages répétitifs et les coupes sont colorées au picro-sirius. L'examen microscopique est réalisé avec l'objectif de 2,5. c- Résultats : La figure 13 correspond à la coupe de référence. Le collagène sain apparaît sous forme de réseaux enchevêtrés ressemblant à une empreinte digitale révélée en rouge vif. Cette figure est comparée à celles effectuées avec les coupes traitées. La figure 14 représente une coupe traitée avec de la collagénase. On remarque que le réseau s'est déstructuré. Les faisceaux ont quasiment disparu : la couleur rouge vif est remplacée par des tâches blanchâtres. Cette figure tient également lieu de référence car l'activité inhibitrice des produits de l'invention est testée avec la même quantité de collagénase (30 U/ml). La coupe traitée avec l'inhibiteur illustrée par la figure 15 met en évidence l'efficacité de la protection des faisceaux. On retrouve les caractéristiques de la figure 13. Les coupes traitées par la collagénase et les produits F9, F10 et P3 sont respectivement représentées par les figures 16,17 et 18. Les préparations F9 et F10 ont une activité anti-collagénase significative. Les réseaux sont encore présents même si leur coloration est moins intense. Comme pour l'étude de l'activité anti-élastase, la formule P3 n'a aucune activité. La figure 18 s'apparente à la figure 14, puisque cette formule est un placebo. 5- Evaluation de l'activité restructurante de la barrière lipidique : a- Principe du test : Cette étude est réalisée sur explants et rend compte de l'activité restructurante de la barrière lipidique cutanée après application topique des pseudocéramides selon l'invention, vectorisés sous forme liposomiale. Les marqueurs de maturation observés sont la filaggrine et la transglutaminase membranaire. Produits testés : les formules F9 et F10. Les produits à tester sont appliqués sur des explants délipidés et laissés en contact pendant trois heures. Après le traitement des explants, les évolutions qualitatives de filaggrine et de transglutaminase sont observées. La protéolyse de la filaggrine produit, entre autre, de très nombreux acides aminés qui rentrent dans la composition des facteurs naturels d'hydratation (NMF Natural Moisturizing Factors). Ces NMF maintiennent une quantité minimum d'eau au sein des cornéocytes (eau moyennement liée ) ; cependant, lors d'une atteinte à la perméabilité de la membrane (délipidation) une fuite des NMF est observée ; elle conduit par conséquent à un dessèchement du stratum comeum. De plus, il a été récemment montré que la conservation de l'eau moyennement liée dépend de l'intégrité des lipides intercellulaires . La filaggrine représente un excellent marqueur de différenciation terminale car elle n'apparaît qu'à partir de l'assise granuleuse et est absente de l'épithélium non kératinisé ; sa présence in vitro signale une bonne maturation des cultures et constitue le reflet de l'intégrité de la structure lipidique. L'histologie réalisée permet de visualiser la filaggrine. Après immunomarquage ; la filaggrine apparaît sous forme de filaments de couleur verte. Les coupes représentent l'épiderme. Les kératinocytes ressortent sous forme de granules de couleur rouge foncé. Les résultats sont qualitatifs et leur interprétation est fondée sur la comparaison de coupes issues, à deux temps différents, d'explants ayant subi des agressions et des traitements distincts. La transglutaminase membranaire a un rôle actif dans la formation de l'enveloppe cornée. Cette enzyme génère la formation de liaisons covalentes particulièrement résistantes, ce qui confère à l'enveloppe cornée ses propriétés de résistance et d'insolubilité. La transglutaminase est un des marqueurs de la différenciation épidermique terminale. L'immunomarquage effectué pour l'histologie permet de visualiser la transglutaminase. Celle-ci apparaît en vert sur les figures. Les coupes représentent l'épiderme. Les kératinocytes ressortent sous forme de granules de couleur rouge foncé. Les résultats sont qualitatifs et leur interprétation est fondée sur la comparaison de coupes issues, à deux temps différents, d'explants ayant subi des agressions et des traitements distincts. b- Mode opératoire : b-1 Préparation des explants et délipidation Sur une plastie cutanée dégraissée, un mélange de éther/acétone (volume/volume) est appliqué sur une zone définie. Sur cette zone, 30 explants sont prélevés et répartis en 10 lots de trois explants. Dans la zone non délipidée, 9 autres explants sont prélevés. b-2 Application des produits Les produits à tester sont appliqués en topique sur les explants dès leur réalisation à raison de 10 mg par explant et laissés en contact durant 3 heures. Les lots témoins ne reçoivent aucun traitement. Au temps TO, dès la fin de la délipidation, trois explants témoins sont prélevés et fixés (Bouin ordinaire et congélation). 3 heures après le début du traitement, les explants restants sont prélevés et fixés comme précédemment. b-3 Etude histologique Sur les coupes en congélation les immunomarquages suivants sont réalisés : Pour la filaggrine avec l'anti-corps monoclonal anti-filaggrine (clone CKTB1) révélé en FITC avec les noyaux contre-colorés à l'iodure de propidium. Pour la transglutaminase membranaire avec l'anti-corps monoclonal antiTGM. (clone B.Cl)avec les noyaux contre-colorés a l'iodure de propidium. c- Résultats : c-1 Expression de la filaggrine : Sur la coupe d'un explant à TO n'ayant subi aucune agression extérieure, le marquage de la filaggrine est continu et régulier. Il est présent sur 3 à 4 assises cellulaires à la base du stratum corneum. Sur une coupe issue du même explant trois heures après, on remarque que l'expression de la filaggrine reste stable au cours du temps. Lorsqu'on observe l'expression de la filaggrine d'une peau venant d'être délipidée (TO), le marquage est similaire à celui observé pour une peau normale. Après trois heures, une coupe issue du même explant délipidé montre un marquage plus faible et irrégulier de la filaggrine qui, de plus, est présente sur un nombre inférieur d'assises cellulaires. Suite au stress occasionné par l'agression chimique, la peau a initié un mécanisme de défense destiné à restructurer la barrière lipidique. Pour cela, la filaggrine s'est en partie transformée en NMF, ce qui explique son expression moindre. L'évaluation de l'activité restructurante des formules F9 et F10 est réalisée après 3 heures sur une peau initialement délipidée. Les formules F9 et F10 présentent une activité analogue. Sur les coupes correspondantes, l'expression de la filaggrine est régulière sur 3 à 4 assisses cellulaires. L'expression de la filaggrine est semblable à celle discernée pour une peau normale. Les formules F9 et F10 ont donc rapidement apporté au stratum corneum les éléments nécessaires à la reconstitution du ciment inter-cellulaire. Les produits selon l'invention sont donc actifs dans la restructuration de la barrière lipidique c-2 Expression de la transglutaminase membranaire Sur la coupe d'un explant à TO n'ayant subi aucune agression extérieure, le marquage de la transglutaminase est continu, fin et régulier. Il est présent sur 2 à 3 assises cellulaires à la base du stratum corneum. Sur une coupe issue du même explant trois heures plus tard, on remarque que l'expression de la transglutaminase reste la même au cours du temps. Lorsqu'on observe l'expression de la transglutaminase d'une peau venant d'être délipidée (TO), le marquage est similaire à celui observé pour une peau normale. La révélation effectuée après trois heures, à partir d'une coupe issue du même explant délipidé montre une nette évolution de la transglutaminase par rapport au temps initial. En effet, la transglutaminase apparaît sous forme de petites structures très localisées, de densité très faible et très irrégulière. La forte diminution de l'expression de la transglutaminase est l'image de l'altération de l'enveloppe cornée suite à l'agression chimique réalisée. La peau a initié un mécanisme de défense : les transglutaminases membranaires ont réagi afin de reformer les ponts protéiques constituant l'enveloppe cornée. L'évaluation de l'activité restructurante des formules F9 et F10 est réalisée après trois heures sur une peau initialement délipidée. Les formules F9 et F10 présentent une activité analogue. L'expression de la transglutaminase membranaire est plus importante que celle observée pour la peau normale. En effet, le marquage est net, régulier et continu sur 3 à 4 assises cellulaires. Les formules F9 et F10 ont donc rapidement apporté au stratum corneum les composants nécessaires pour rééquilibrer la composition des enveloppes cornées. Les produits de l'invention sont donc reconnus comme étant actifs dans la restructuration des enveloppes cornées. III- Conclusions : Toutes les activités testées pour les produits selon l'invention sont significatives. En effet, les formules F9 et F10 possèdent à la fois une activité antiélastase et une activité anticollagénase. De plus, ces deux pseudocéramides ont une nette activité restructurante, comme le prouvent les résultats des tests de marquage de filaggrine et de transglutaminase. Ces actifs constituent une approche innovante et pertinente du traitement du vieillissement cutané : ils peuvent intervenir à la fois sur la régulation hydrique du stratum comeum, sur la limitation de l'élastolyse et sur l'altération des collagènes. REVENDICATIONS 1. Utilisation d'un composé choisi parmi les céramides et les pseudocéramides dans une composition cosmétique ou pour la préparation d'une composition dermatologique destinée à prévenir, retarder ou traiter l'effet des collagénases. 2. Utilisation selon la revendication 1 d'un composé répondant à la formule (V) ci-dessous : dans laquelle R1 et R2, identiques ou différents, sont choisis parmi les chaînes alkyle, linéaires ou ramifiées, saturées ou insaturées, en C1-C30, éventuellement porteuses d'une ou plusieurs fonctions hydroxyle et/ou d'un ou plusieurs ponts éther et/ou d'une ou plusieurs fonctions alkyle carboxylate -O-CO-R3 dans laquelle R3 représente un groupement alkyle en C1-C30, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, éventuellement hydroxylé, et comportant un ou plusieurs ponts éther. 3. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2, d'un composé de formule (I). dans laquelle : m est un entier allant de 2 à 14, n est un entier allant de 3 à 15, p est un entier allant de 7 à 25. 4. Utilisation selon la revendication 4, caractérisée en ce que le composé est choisi parmi : - le N-(2.3-dihydroxypropyl)-N-octadécyl-9,10dihydroxyoctadécanamide. et - le N-(2,3-dihydroxypropyl)-N-hexadécyl-9,10dihydroxyoctadécanamide. 5. Composé caractérisé en ce qu'il répond à la formule (I) : dans laquelle : m est un entier allant de 2 à 14, n est un entier allant de 3 à 15, p est un entier allant de 7 à 25. 6. Composé selon la revendication 5, caractérisé en ce que m+n est supérieur ou égal à 7 et inférieur ou égal à 23. 7. Composé selon la revendication 5 ou la revendication 6, caractérisé en ce que m+n est égal à 15. 8. Composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 7, caractérisé en ce que m est un entier allant de 4 à 12, encore plus préférentiellement de 5 à 10. 9. Composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 8, caractérisé en ce que n est un entier allant de 4 à 12, encore plus préférentiellement de 5 à 10. 10. Composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 9, caractérisé en ce que p est un entier allant de 9 à 23, encore plus préférentiellement de 11 à 21, de façon encore préférée, p est un entier allant de 13à 19. 11. Composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 10, caractérisé en ce que p est égal à 15 ou à 17. 12. Composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 11, caractérisé en ce qu'il est choisi parmi : - le N-(2,3-dihydroxypropyl)-N-octadécyl-9,10dihydroxyoctadécanamide, et - le N-(2,3-dihydroxypropyl)-N-hexadécyl-9,10dihydroxyoctadécanamide. 13. Procédé de préparation d'un composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 12, caractérisé en ce que l'on fait réagir un composé de formule (III) avec un composé de formule (IV) selon le schéma 2 : Schéma 2 dans lequel les entiers m, n et p ont la même signification que dans la formule (I) et R représente un groupement activateur des acides permettant d'effectuer l'acylation de l'amine. 14. Procédé selon la revendication 13, caractérisé en ce que R représente un alkyle en C1-C5, de préférence un méthyle. 15. Procédé selon la revendication 13 ou la revendication 14, caractérisé en ce que l'amine (III) est préparée par réaction d'une alkylamine (II) avec le glycidol, suivant le schéma 1 : Schéma 1 dans lequel p a la même définition que dans la formule (I). 16. Composition caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un composé de formule (I) selon l'une quelconque des revendications 5 à 12 dans un support cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable. 17. Composition selon la revendication 16, caractérisée en ce que les composés de formule (I) sont présents sous forme de vésicules ou de sphérules lipidiques. 18. Composition selon la revendication 17, caractérisée en ce que les composés de formule (I) sont présents sous forme de liposomes. 19. Procédé de traitement cosmétique de la peau, des cheveux, des ongles ou des cils, consistant à appliquer sur ceux-ci une quantité suffisante d'au moins un composé de formule (I) selon l'une quelconque des revendications 5 à 12. 20. Procédé selon la revendication 16, caractérisé en ce qu'il est destiné à prévenir, retarder ou traiter les effets de l'élastase. 21. Procédé selon la revendication 16, caractérisé en ce qu'il est destiné à restructurer la barrière lipidique. 22. Procédé selon l'une quelconque des revendications 19 à 21, caractérisé en ce qu'il est destiné à prévenir, retarder ou traiter les effets du vieillissement cutané et/ou à prévenir, retarder ou traiter la perte d'élasticité de la peau et/ou à prévenir, retarder ou traiter l'apparition des rides et/ou à prévenir, retarder ou traiter l'atrophie dermique. 23. Utilisation d'un composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 12 pour la préparation d'une composition dermatologique destinée à prévenir, retarder ou traiter les effets de l'élastase. 24. Utilisation d'un composé selon l'une quelconque des revendications 5 à 12 pour la préparation d'une composition dermatologique destinée à restructurer la barrière lipidique. 25. Utilisation d'un composé de formule (I) selon l'une quelconque des revendications 5 à 12 pour la préparation d'une composition dermatologique destinée à prévenir, retarder ou traiter les effets du vieillissement cutané et/ou à prévenir, retarder ou traiter la perte d'élasticité de la peau et/ou à prévenir, retarder ou traiter l'apparition des rides et/ou à prévenir, retarder ou traiter l'atrophie dermique.