Brevet FR2840612A1 — publié le 20031212

POLYMÈRES SOLUBLES DE GLUCOSE HAUTEMENT BRANCHÉS ET LEUR PROCÉDÉ D'OBTENTION L'invention a pour objet des polymères solubles de glucose hautement branchés ayant une teneur en sucres réducteurs inférieure à 1 % et présentant un taux de liaisons glucosidiques a-1,6 remarquablement élevé, supérieur à 10 %, pour une distribution de poids moléculaire très étroite, comprise entre 0,3. 105 et 2 . 105 daltons et une très faible osmolalité, comprise entre 1 et 15 mOsm/kg. Ces polymères solubles de glucose branchés présentent par ailleurs une faible viscosité et une absence de rétrogradation, même après stockage à froid après de longues périodes de temps. L'invention concerne également un procédé de fabrication desdits polymères solubles de glucose hautement branchés. Elle vise encore des compositions comprenant de tels polymères solubles de glucose branchés qu'il est possible d'utiliser dans de nombreuses applications industrielles et notamment dans les industries alimentaires et surtout pharmaceutiques. Les polymères de glucose classiquement accessibles industriellement sont notamment préparés par hydrolyse des amidons naturels ou hybrides et de leurs dérivés. Les hydrolysats d'amidon standard sont ainsi produits par hydrolyse acide ou enzymatique d'amidon de céréales ou de tubercules. Ils sont en fait un mélange de glucose et de polymères du glucose, de poids moléculaires extrêmement variés. Ces hydrolysats d'amidon (dextrines , maltodextrines ...) produits dans l'industrie (avec un certain Degré de Polymérisation ou DP moyen) consistent en une large distribution de saccharides contenant à la fois des structures linéaires (liaisons glucosidiques a-1,4) et branchées (liaisons glucosidiques a-1,6). Ces hydrolysats d'amidon, et notamment les maltodextrines, sont utilisés comme transporteur ou agent de charge, agent texturant, support d'atomisation, agent de remplacement de matières grasses, agent filmogène, agent de contrôle de congélation, agent anti-cristallisant, ou pour leur apport nutritionnel. Il est connu par ailleurs de l'homme du métier que la composition saccharidique des maltodextrines détermine à la fois leurs propriétés physiques et biologiques. C'est ainsi que leur hygroscopicité, leur fermentescibilité dans les produits alimentaires, leur viscosité, leur caractère édulcorant, leur stabilité, leur caractère gélifiant et leur osmolalité sont des critères classiquement déterminés pour leurs différents domaines d'application. Les connaissances de base du comportement physicochimique de ces saccharides conduisent ainsi à les intégrer par exemple dans les boissons pour sportifs, les boissons liquides à solubilité limitée, les liquides parentéraux et entéraux ou dans des aliments pour diabétiques. De ce fait, pour ces différentes applications, diverses propriétés physiques et biologiques sont requises. Il est par exemple connu que le taux d'absorption de ces saccharides est déterminé par le taux de vidange gastrique et le taux d'adsorption intestinal, dont le contrôle est assuré par l'osmolalité desdits saccharides. Au niveau intestinal, les maltodextrines sont hydrolysées par l'a-amylase pancréatique, ce qui conduit à réduire leur taille jusqu'aux dextrines limites, et un certain nombre d'enzymes liées à la muqueuse intestinale (maltase, sucrase et a-dextrinase) continuent à hydrolyser les saccharides linéaires et branchés en glucose. Si le glucose passe facilement la barrière intestinale (diffusion passive), il n'en est pas de même pour les saccharides de faible DP. C'est ainsi que des oligosaccharides linéaires seront adsorbés plus vite que des oligosaccharides branchés, bien que le maltose et le maltotriose soient absorbés plus vite que le glucose. Les bactéries du colon vont fermenter tous les hydrates de carbone qui ne sont pas adsorbés par l'intestin grêle. La fermentation excessive par ces bactéries amènera des désordres intestinaux tels les crampes et la flatulence. Il est également connu que l'osmolalité influence le taux d'absorption/ sécrétion d'eau dans l'intestin grêle. Plus l'osmolalité d'un composé est élevée, plus elle induit une entrée de fluide dans l'intestin et conduit à des dérèglements graves de l'intestin (diarrhée osmotique), avec perte concomitante de fluides et d'électrolytes. L'osmolalité d'une solution est égale à la quantité de moles dissoutes par kg d'eau, impliquant qu'à la même concentration en poids sec, l'osmolalité d'une maltodextrine classique augmente avec l'abaissement de son DP. De manière générale, les maltodextrines sont bien absorbées par le corps humain, mais dans des conditions physiques plus extrêmes, tel que l'exercice sportif ou la maladie, il faut assurer un meilleur apport en hydrates de carbone. Par exemple, chez les sportifs, une boisson consommée pendant une activité physique qui requiert beaucoup d'effort se doit d'apporter instantanément l'énergie et l'eau nécessaire pour compenser la perte de fluide par perspiration. Il résulte de ce qui a été énoncé plus haut qu'une composition équilibrée en hydrates de carbone est essentielle pour obtenir un tel résultat. Une solution classiquement proposée pour la boisson optimale est de choisir de courts oligosaccharides linéaires de DP 3 à 6, puisqu'ils sont absorbés à la fréquence la plus élevée, tout en gardant l'osmolalité à un niveau modéré, empêchant ainsi la perte des fluides et les effets secondaires tels la diarrhée et les crampes. Cependant, ces compositions présentent l'inconvénient de constituer des sources d'énergie trop instantanément assimilables par l'organisme, ce qui se traduit par des difficultés à maintenir un apport énergétique constant sur de longues périodes de temps. Il a ainsi été proposé dans la demande de brevet WO 95/22.562 de .nouveaux dérivés d'amidon destinés à la fourniture d'énergie pour la préparation ou après un effort physique. Il s'agit de dextrines, caractérisées par leur poids moléculaire compris entre 15. 103 et 107 daltons, et un degré de branchement glucosidique 1,6 compris entre 2 et 8 %, préférentiellement compris entre 3 et 7 %, qui assurent un renouvellement des réserves énergétiques sous forme de glycogène. Sous leur forme liquide, ces dextrines particulières passent dans l'intestin grêle après une vidange gastrique rapide. Cette voie est par ailleurs contrôlée par l'osmolalité desdites dextrines. Une osmolalité élevée signifie ici que les substances de bas poids moléculaire se lient à l'eau, ce qui rend difficile le transport de l'eau et des nutriments dans la cellule. L'osmolalité du sang est d'environ 300 mOsm/1, et dans le but de faciliter le transport des nutriments, il est souhaitable que l'osmolalité de la substance soit notablement en dessous de cette valeur. Une dextrine selon WO 95/22. 562, d'un poids moléculaire moyen d'environ 720.000 et d'un degré de branchement de 4 % environ, est décrite comme présentant une osmolalité de 20 mOsm/kg sol. Cependant, ces dextrines sont préparées par traitement acide de l'amidon natif, plus particulièrement de la fécule de pomme de terre, dans des conditions de température élevées, i. e. 110 à 140 C et dans un temps de réaction de 1 à 15 heures, ce qui conduit à un degré de branchement 1,6 qui correspond à la fois à des liaisons glucosidiques a-1,6 et -1,6. Ces liaisons glucosidiques atypiques ne sont pas digérées par les systèmes enzymatiques de l'intestin, et peuvent conduire à l'accumulation de résidus non digestibles que certaines bactéries indésirables vont assimiler. Dans un autre domaine d'application, les maltodextrines sont souvent ajoutées aux boissons pour augmenter leur viscosité. Cependant, dans celles renfermant de l'alcool, l'apport de MD de haut DP peut générer des problèmes de stabilité du mélange. Une autre solution qui consiste à ajouter du maltose ou du glucose conduit cependant à apporter une saveur sucrée additionnelle au mélange, ce qui n'est pas toujours souhaité. De plus, ces petits oligosaccharides peuvent servir de substrats de fermentation pour des microorganismes indésirables. Les maltodextrines les plus adaptées à ce domaine d'application doivent donc concilier et équilibrer les paramètres de non sucré , de viscosité et de stabilité. Dans le domaine des solutions parentérales, des solutions nutritives sont conçues pour maintenir un patient en bonne santé et pour lui fournir les nutriments quand il ne peut être alimenté via son système digestif normal. Puisque les solutions sont directement apportées par voie veineuse, elles se doivent d'être isotoniques et l'apport en glucose est limité. Pour fournir une énergie journalière de 10. 000 kJ, il est décrit dans un article de FOOD Science Technology de 1999, pp 345-355 par MARCHAL et al., qu'il serait nécessaire de perfuser 14 litres de solution isotonique de glucose (5 % poids/volume de glucose), ce qui dépasse largement les capacités humaines. L'apport de solutions plus concentrées en glucose ou fructose (10 à 20 % poids/volume) est possible, mais pas pour de longues périodes. Il est possible d'administrer des saccharides linéaires avec un DP compris entre 2 et 5, puisque ces saccharides sont hydrolysés par des maltases dans le rein, et que le glucose libéré est alors réabsorbé. C'est ainsi que l'utilisation de courts oligosaccharides linéaires permet d'apporter suffisamment d'énergie dans une solution isotonique, sans sur-hydrater le patient. Par ailleurs, les oligosaccharides linéaires d'un DP inférieur à 7 étant stables en solution sur de longues périodes de temps, il est classiquement choisi de faire varier le DP entre 2 et 7 pour permettre d'apporter constamment aux patients, sur ces longues périodes, toute l'énergie nécessaire. Mais cette solution n'est pas totalement satisfaisante, et elle n'envisage que l'exploitation de structures glucosidiques linéaires. Quant à la nutrition entérale, elle concerne des boissons qui peuvent être ou bien ingérées oralement, ou administrées par voie tubulaire dans l'estomac ou l'intestin grêle. Pour ces fluides entéraux, le problème majeur est la diarrhée, due à une trop forte osmolalité. En principe, la même solution que celle trouvée pour les sportifs peut également s'appliquer ici. De manière classique, sont donc utilisées des maltodextrines renfermant un mélange complexe de saccharides linéaires et branchés, avec un DE de 10 à 20, mais sans donner toutefois entière satisfaction. Les spécialistes de ces domaines d'applications recherchent la solution de ces problèmes techniques dans l'élaboration de structures ramifiées dérivés de l'amidon. L'amylopectine, principal constituant de l'amidon, s'organise autour de liaisons a-1,4 linéaires et de liaisons a-1,6 qui s'y ramifient. La connaissance des microstructures a mis en évidence que ces deux types de liaisons ne se trouvent pas réparties de manière uniforme, mais que des zones très denses en liaisons a-1,6 y côtoient des zones constituées uniquement de liaisons a-1,4. Il a été proposé, dans le brevet US 4. 840.807, ou la demande de brevet JP 11/187. 708, d'extraire les seules zones denses en liaisons a-1,6, comme source de glucides à absorption lente, au sens où les liaisons a-1,6 sont plus difficiles à dégrader que les liaisons a-1,4. Deux familles de produits ont ainsi été développées. La première concerne les dextrines limites préparées par la dégradation des zones à liaisons a-1,4 par une a-amylase seule, et les dextrines préparées par la dégradation des zones à liaisons a-1,4 par l'action simultanée d'une aamylase et d'une p-amylase. La résistance de ces dextrines limites aux enzymes digestives humaines permet de les utiliser pour réguler la digestion, mais également pour contrôler la glycémie (application pour l'alimentation des diabétiques). Cet effet est attribué à un retard de la vitesse d'adsorption digestive. Cependant, ces composés ont l'inconvénient de présenter un poids moléculaire très faible (compris entre 10. 000 et 55.000 daltons), ce qui en limite l'exploitation dans d'autres domaines d'applications. De tout ce qui précède, il résulte qu' il y a donc un besoin non satisfait de disposer de polymères de glucose présentant des propriétés remarquables, notamment en terme de stabilité, de solubilité et éventuellement de viscosité, et conférant par là même aux produits qui les contiennent des capacités plus grandes de durée de vie, de digestibilité contrôlée, ce qui en permet l'usage dans des domaines aussi variés que la nutrition entérale ou parentérale, comme inhibiteur de la glycémie, comme apport énergétique lors d'activités physiques et comme régulateur de la digestion. La Société Demanderesse a eu le mérite de concilier tous ces objectifs réputés jusqu'alors difficilement conciliables en imaginant et élaborant, au prix de nombreuses recherches, de nouveaux polymères solubles de glucose hautement branchés. Les polymères solubles de glucose hautement branchés conformes à l'invention, ayant une teneur en sucres réducteurs inférieure à 1 %, sont ainsi caractérisés par le fait qu'ils possèdent un taux de liaisons glucosidiques a- 1,6 supérieur à 10 %, de préférence compris entre 12 et 30%, un Mw déterminé par diffusion de la lumière d'une valeur comprise entre 0,3. 105 et 2. 105 daltons, et une osmolalité, déterminée selon un test A, d'une valeur comprise entre 1 et 15 mOsm/kg. Les polymères solubles de glucose branchés conformes à l'invention présentent une faible teneur en sucres réducteurs. La détermination du pouvoir réducteur des polymères de glucose branchés conformes à l'invention, par toute méthode connue par ailleurs de l'homme du métier, conduit à des valeurs inférieures à 1 %. Le taux de liaisons glucosidiques a-1,6 des polymères solubles de glucose branchés conformes à l'invention est déterminé par analyse RMN du proton. Le taux de branchement est alors exprimé en pour cent, correspondant à la quantité de signal du proton porté par le Cl d'un motif anhydroglucose qui lie un autre motif anhydroglucose par une liaison a-1,6, lorsque l'on a donné une valeur de 100 à l'ensemble des signaux des protons portés par tous les Cl des résidus glucose desdits polymères solubles de glucose. Dans ces conditions, il est déterminé que les polymères de glucose solubles hautement branchés conformes à l'invention présentent un taux de liaisons a-1,6 qui est supérieur à 10 %, de préférence compris entre 12 % et 30 %. Cette teneur en liaisons glucosidiques a-1,6 confère à tout polymère de glucose hautement branché conforme à l'invention une structure particulière, en termes de degré de ramification et/ou de longueurs de chaînes ramifiées par rapport à l'amidon ou au dérivé d'amidon dont il est issu. Cette teneur particulièrement élevée en liaisons glucosidiques a-1,6 rend difficilement digestibles les polymères de glucose hautement branchés selon l'invention, ce qui contribue à pouvoir les utiliser comme agent régulateur de la digestion et comme agent inhibiteur de la glycémie, comme énoncé plus haut. Ils peuvent donc être utilement proposés aux diabétiques ou aux sujets prédisposés, comme aliments, boissons ou adjuvants de nutrition ayant pour fonction d'inhiber l'élévation de la glycémie. Les polymères solubles de glucose hautement branchés conformes à l'invention présentent également une absence de rétrogradation en solution aqueuse et une remarquable stabilité. Cette propriété destine tout naturellement les polymères de glucose branchés conformes à l'invention à des compositions utilisables dans l'industrie alimentaire, qui présentent alors des stabilités élevées au stockage. Un autre avantage de l'invention est de permettre l'obtention d'un produit fini utilisable par exemple comme liant instantané dans des produits réfrigérés ou surgelés. La détermination des masses moléculaires des polymères solubles de glucose branchés conformes à l'invention est réalisée par la mesure des masses moléculaires moyennes en poids (Mw). Cette valeur est obtenue par chromatographie d'exclusion stérique sur colonnes PSS SUPREMA 100 et PSS SUPREMA 1000 montées en série et couplées à un détecteur de diffusion de la lumière. Les polymères de glucose branchés conformes à l'invention présentent alors une valeur de Mw comprise entre 0,3. 105 et 2. 105 daltons. Les polymères de glucose solubles conformes à l'invention présentent également une osmolalité remarquablement faible. Le test A consiste à déterminer l'osmolalité d'une solution renfermant 100 g sec de polymères de glucose hautement branchés conformes à l'invention placés dans 1 kg d'eau. La mesure de l'osmolalité de cette solution est ensuite effectuée sur un osmomètre MARK 3 de FISKE# ASSOCIATES, en suivant les spécifications du constructeur. Les polymères de glucose branchés conformes à l'invention présentent alors une valeur d'osmolalité remarquablement basse comprise entre 1 et 15 mOsm/kg. Il n'existe pas, à la connaissance de la Société Demanderesse, de polymères de glucose qui possèdent une telle valeur d'osmolalité, pour des produits présentant par ailleurs un taux de branchement et un poids moléculaire tels que définis. En effet, des mesures comparatives effectuées sur des maltodextrines classiques présentant un équivalent dextrose (DE) compris entre 5 et 20 montrent des valeurs d'osmolalité comprise entre 25 à 85 mOsm/kg. D'autres mesures, effectuées sur des dextrines limites telles que définies ci-avant par traitement d'amidon liquéfié à l'a-amylase, commercialisées sous le nom BLD 8 par SANMATSU, présentent pour un poids moléculaire compris entre 0,4 et 0,5. 105 daltons et un taux de branchement a-1,6 compris entre 8 et 9 %, une valeur d'osmolalité de plus de 35 mOsm/kg. Cette valeur d'osmolalité très basse confère' ainsi aux polymères solubles hautement branchés conformes à l'invention des propriétés qui leur permettent d'être mis en #uvre dans des préparations destinées aux sportifs, pour renouveler les sources d'énergie dont ils ont besoin pour des efforts physiques sur de longues périodes. Mais également et surtout, ces compositions peuvent être avantageusement utilisées pour des patients qui ne peuvent plus s'alimenter normalement, dans le cadre de nutrition entérale et parentérale. De manière avantageuse, les polymères de glucose hautement branchés conformes à l'invention peuvent être classés en trois sous-familles en fonction de leur osmolalité. La première sous-famille couvre des polymères hautement branchés qui présentent, pour un Mw déterminé par diffusion de la lumière d'une valeur comprise entre 0,5. 105 et 1,5. 105 daltons, une osmolalité, déterminée selon le test A, au moins égale à 1 et inférieure à 2 mOsm/kg. La deuxième sous-famille couvre des polymères hautement branchés qui présentent, pour un Mw déterminé par diffusion de la lumière d'une valeur comprise entre 0,5. 105 et 0,8. 105 daltons, une osmolalité, déterminée selon le test A, au moins égale à 2 et inférieure à 5 mOsm/kg. La Société Demanderesse a en outre trouvé des polymères de glucose branchés appartenant à ces deux sous familles présentant de plus un taux de branchement a-1,6 remarquablement élevé, i. e. compris entre 15 et 30%. La troisième sous-famille couvre des polymères hautement branchés qui présentent un Mw déterminé par diffusion de la lumière compris entre 0,3. 105 et 0,7. 105 daltons et une osmolalité, déterminée selon le test A, au moins égale à 5 et inférieure à 15 mOsm/kg. Pour préparer les polymères solubles de glucose branchés conformes à l'invention, on réalise la succession des étapes suivantes consistant à : a. préparer une suspension aqueuse d'amidon ou une solution de dérivé d'amidon d'une matière sèche au moins égale 1 % en poids, de préférence de 10 à 50 % en poids, b. traiter ladite suspension ou ladite solution avec au moins une enzyme de branchement à une température comprise entre 25 et 80 C pendant une durée de 1 à 24 heures, c. faire agir sur la suspension ou sur la solution ainsi obtenue au moins une enzyme choisie dans le groupe constituée de l'a-amylase, la p-amylase, l'amyloglucosidase et l'a-transglucosidase, d. effectuer un fractionnement à l'aide d'au moins une technique choisie dans le groupe des séparations sur membrane ou des chromatographies, de manière à récupérer les fractions de haut poids moléculaire, e. recueillir les polymères de glucose branchés ainsi obtenus. L'amidon est introduit en suspension, ou les dérivés d'amidon en solution aqueuse, à une matière sèche au moins égale 1 % en poids, de préférence de 10 à 50 % en poids. Le choix d'une origine, ou d'une qualité d'amidon ou de ses dérivés particuliers, ne revêt qu'une importance relative. Il peut donc être choisi l'amidon naturel ou hybride issu de pomme de terre, de pomme de terre à haute teneur en amylopectine (fécule waxy), de pois, de riz, de manioc, de blé, de maïs, de maïs ou de blé riches en amylopectine (maïs ou blé waxy) , de maïs à haute teneur en amylose, de coupes ou de fractions qui peuvent être faites ou obtenues à partir d'amidons, telles que l'amylose, l'amylopectine, les coupes granulométriques connues de l'homme de l'art sous les vocables d'amidon de blé A et amidon de blé B , et les mélanges d'au moins deux quelconques des produits susmentionnés. Les dérivés d'amidon peuvent s'entendre des amidons modifiés issus de la modification enzymatique, chimique et/ou physique, en une ou plusieurs étapes, de cet amidon. Les dérivés d'amidon peuvent notamment être les amidons modifiés par l'une au moins des techniques connues d'éthérification, d'estérification, de réticulation, d'oxydation, de traitement alcalin, d'hydrolyse acide et/ou enzymatique (à l'origine des maltodextrines et dextrines). La Société Demanderesse a trouvé que les polymères de glucose hautement branchés conformes à l'invention sont aisément synthétisables à partir d'amidons, ou de leurs dérivés, qui présentent déjà un taux de branchement au moins égal à 1 %. Cette suspension d'amidon, ou cette solution de dérivés d'amidon, peut être éventuellement soumise ensuite à un traitement par cuisson particulier, qui consiste à la traiter à une température supérieure à 130 C, de préférence comprise entre 140 et 150 C, sous une pression de plus de 3,5 bars, de préférence comprise entre 4 à 5 bars, pendant 30 secondes à 15 minutes, de préférence pendant 1 à 5 minutes. Ce traitement est avantageusement réalisé dans un cuiseur tubulaire à double enveloppe chauffé par fluide thermique, équipement qu'il est aisé à l'homme du métier de se procurer. La deuxième étape du procédé conforme à l'invention consiste à traiter ladite suspension d'amidon ou ladite solution de dérivé d'amidon avec une enzyme de branchement. De façon avantageuse, on utilise de 50. 000 à 500. 000 U d'enzyme de branchement purifiée pour 100 g sec d'amidon ou de dérivé d'amidon, à une température comprise entre 25 et 95 C, de préférence à une température comprise entre 70 et 95 C, pendant une durée de 1 à 24 heures. Par enzymes de branchement, on entend au sens de l'invention les enzymes de branchement choisies dans le groupe constitué par les enzymes de branchement du glycogène, les enzymes de branchement de l'amidon et les mélanges quelconques de ces enzymes. Plus particulièrement, ces enzymes de branchement sont extraites d'organismes et/ou de micro-organismes choisis dans le groupe constitué par les enzymes de branchement du glycogène, les enzymes de branchement de l'amidon et les mélanges quelconques de ces enzymes. La Société Demanderesse préfère, pour effectuer ce traitement avec une enzyme de branchement, suivre l'enseignement de sa demande de brevet WO 00/18.893. Cette étape conduit à produire des polymères de glucose solubles branchés, mais avec une teneur en liaisons glucosidiques a-1,6 au mieux égale à 10 %. Pour augmenter cette valeur et atteindre des taux de liaisons a-1,6 jusqu'à 30 %, la société Demanderesse a trouvé qu'il faut réaliser un traitement enzymatique complémentaire, et c'est ce qui constitue la troisième étape du procédé d'obtention des polymères de glucose solubles hautement branchés conformes à l'invention. Cette troisième étape consiste à faire agir sur la suspension ou la solution traitée avec une enzyme de branchement ainsi obtenue, au moins une enzyme choisie dans le groupe constitué de l'a-amylase, la P-amylase, l'amyloglucosidase et l'a-transglucosidase, Les conditions d'action (température et pH) des différentes enzymes mises en oeuvre dans le procédé conforme à l'invention sont choisies parmi les suivantes (les quantités sont fixées en regard du substrat considéré, comme il sera exemplifié ci-après): - a-amylase : de type LYSASE 2000 de GENENCOR, à une température de 55 à 65 C, pH de 6,5 à 6,7, pendant 30 minutes à 1 heure. - (3-amylase . de type SPEZYME BBA de GENENCOR, à une température de 40 C, pH de 4,9 à 5, pendant 1 h 30 à 2 heures. - amyloglucosidase : soit de type OPTIDEX L300 A de GENENCOR à une température de 55 C, pH de 4,7 ; de type A-7420 de SIGMA à une température de 50 C à 60 C, pH de 4,7 à 4,9 ; 1 h 30 à 2 heures. - a-transglucosidase : de type a-TGase de L-AMANO à une température de 55 C, pH de 5 à 5,2, pendant 1 heure. Les enzymes utilisées peuvent être d'origine bactérienne ou fongique. Au terme de ce traitement complémentaire, les polymères de glucose hautement branchés solubles sont obtenus en mélange avec leurs produits de dégradation enzymatiques, majoritairement constitués de glucose, de maltose et/ou d'isomaltose, comme il sera exemplifié ciaprès . La quatrième étape du procédé consiste à effectuer un fractionnement à l'aide d'une technique choisie dans le groupe des séparations sur membrane et des chromatographies, de manière à récupérer les fractions de haut poids moléculaire et les fractions de bas poids moléculaire. Les fractions de haut poids moléculaire correspondent aux polymères de glucose hautement branchés conformes à l'invention, tandis que les fractions de bas poids moléculaire permettent d'obtenir, avec un excellent rendement, des compositions enrichies en maltose et/ou isomaltose. De manière avantageuse, on choisit une technique de fractionnement dans le groupe constitué par la technique de séparation sur membrane d'ultrafiltration et par la technique de séparation chromatographique sur support de type gel. Dans un premier mode de réalisation de cette quatrième étape du procédé, le fractionnement est conduit à l'aide d'une technique de séparation sur membrane d'ultrafiltration, en utilisant une membrane ayant un seuil de coupure au moins égal à 3000 daltons, de préférence au moins égal à 5000 daltons. Les fractions de haut poids moléculaire correspondant aux polymères de glucose hautement branchés, égales au rétentat de l'ultrafiltration, représentent alors environ 60 % de la matière sèche mise en #uvre. Dans un second mode de réalisation de cette quatrième étape du procédé, le fractionnement est conduit à l'aide d'une technique de chromatographie effectuée sur une résine de type gel. Les profils obtenus permettent la séparation des fractions renfermant les polymères de glucose hautement branchés avec un rendement optimal compris entre 40 et 45 %. Quelle que soit la méthode mise en #uvre, les profils obtenus permettent la séparation de la fraction polysaccharidique de haut poids moléculaire correspondant aux polymères de glucose branchés solubles conformes à l'invention, des fractions oligosaccharidiques de bas poids moléculaire, constituées pour l'essentiel de glucose et de maltose et/ou d'isomaltose. La dernière étape du procédé conforme à l'invention consiste donc à collecter d'une part les fractions de haut poids moléculaire correspondant aux polymères de glucose hautement branchés, et d'autre part les fractions de bas poids moléculaire enrichies en glucose et isomaltose et/ou en maltose. Les produits de haut poids moléculaire peuvent être rassemblés en tant que tels, ou précipités par 3 volumes d'éthanol, purifiés et séchés sous vide pendant 24 heures, ou encore atomisés, par toute technique connue de l'homme du métier. Leurs caractéristiques physico-chimiques particulières, permettent leurs applications dans les industries notamment du Papier-Carton, du Textile, de la Cosmétique, et en particulier de la Pharmacie et de l'Alimentaire, et plus particulièrement encore dans les domaines de la nutrition entérale et parentérale, comme agent inhibiteur de la glycémie, comme apport énergétique lors d'activités physiques et comme agent régulateur de la digestion. Quant aux compositions enrichies en maltose et/ou isomaltose, caractérisées en ce qu'elles comprennent les fractions de bas poids moléculaire de l'étape d du procédé conforme à l'invention, elles pourront être utilisées en tant que telle, ou hydrogénées par toute technique d'hydrogénation connues par ailleurs de l'homme du métier. D'autres caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture des exemples non limitatifs décrits ci-dessous. Exemple 1 On prépare une solution de dérivés d'amidon d'une teneur en matière sèche de 25 % en poids, par chauffage à 80 C sous agitation lente et continue. Il s'agit en l'occurrence ici de deux maltodextrines commercialisées par la société Demanderesse sous le nom de GLUCIDEX 2 (substrat A) et GLUCIDEX 6 (substrat B) à 250 g/1. Cette solution est refroidie à 30 C, et le pH est ramené à 6,8 par NaOH IN. On traite ensuite ces solutions par de l'enzyme de branchement du glycogène purifiée, extraite du microorganisme B. stearothermophilus. On ajoute l'enzyme de branchement à raison de 1600 U/g de substrat, et amène progressivement la température à 65 C. L'incubation est réalisée sous agitation modérée pendant 4 heures. La réaction est ensuite stoppée par abaissement du pH à une valeur de 5 et par ébullition pendant 6 minutes. Le tableau 1 ci-après rassemble, pour les deux substrats testés, les résultats obtenus en termes de teneurs en liaisons glucosidiques a-1,6, de valeurs des Mw, de teneurs en sucres réducteurs et d'osmolalité pour les produits obtenus (produit C à partir du substrat A et produit D à partir du substrat B). Tableau I % de Mw % en sucres Osmolalité liaisons 105 daltons réducteurs mOsm/kg a-1,6 A 5,9 4,88 2 16 C 8,7 1,19 1,5 12 B 5,4 0,9 3,8 25 D 8 0 ,61 4,3 25 La teneur en liaisons glucosidiques a-1,6 est sensiblement augmentée, mais n'atteint pas encore les valeurs souhaitées. La Société Demanderesse a donc trouvé qu'un traitement complémentaire devait être mené, par l'action d'enzymes hydrolysant spécifiquement les liaisons glucosidiques a-1,4 (telles l'a-amylase, la (3-amylase ou l'amyloglucosidase), ou par l'utilisation d'enzymes qui complètent le branchement en liaisons a-1,6 (telle l'atransglucosidase), et ce, de la manière suivante. Pour les traitements enzymatiques complémentaires, les solutions des maltodextrines branchées C et D sont tout d'abord amenées à la température et au pH de l'enzyme choisie. 1) Pour le traitement complémentaire à l'a-amylase (LYSASE 2000 à 2444 UBR/g d'extrait enzymatique), lesdites solutions de C ou de D sont amenées à la température de 60 C et au pH de 6,5 à 6,7, et on ajoute 6 U d'a-amylase par g de substrat. L'incubation est réalisée pendant 30 minutes, et la réaction est stoppée par ébullition 6 minutes. 2) Pour le traitement complémentaire à la (3-amylase (BBA SPEZYME de GENENCOR) , lesdites solutions de C ou de D sont amenées à la température de 40 C et au pH de 4, 9 à 5, et on ajoute 30 U de (3-amylase par g de substrat. L'incubation est réalisée pendant 2 heures, et la réaction est stoppée par ébullition 6 minutes. 3) Pour le traitement complémentaire à l'amyloglucosidase (AMG de SIGMA AA-7420 d'A. niger, à 40 U/mg de protéines), lesdites solutions de C ou de D sont amenées à la température de 55 C et au pH de 4 , 7 à 4,9, et on ajoute 20 U de l'AMG par g de substrat. L'incubation est réalisée sous agitation modérée pendant 2 heures, et la réaction est stoppée par ébullition 6 minutes. 4) Pour le traitement complémentaire à l'[gamma]- transglucosidase (a-TGase L-AMANO, activité de 27,7 moles en glucose), lesdites solutions de C ou de D sont amenées à la température de 55 C et au pH de 5 à 5,2, et on ajoute 2 U de l'a-TGase par g de substrat. L'incubation est réalisée pendant 1 heure, et la réaction est stoppée par ébullition 6 minutes. On détermine ensuite les caractéristiques physicochimiques : - des produits E et F (obtenus par traitement complémentaire à l'a-amylase des produits respectivement C et D), - des produits G et H (obtenus par traitement complémentaire à la P-amylase des produits respectivement C et D), des produits I et J (obtenus par traitement complémentaire à l'AMG des produits respectivement C et D) et - des produits K et L (obtenus par traitement complémentaire à l'a-TGase des produits respectivement C et D) Tableau II % de Mw % en Osmolalité liaisons 105 daltons sucres mOsm/kg a-1,6 réducteurs E 8,3 0,72 3,8 29 G 8,4 0,76 22,5 132 I 9 0,49 55 320 K 9,6 1,2 22 153 F 7,4 0,44 "~" 8,7 52 H 7,2 0,51 23,8 141 J 7,8 0,47 50,5 301 L 12 0,69 28 192 L'osmolalité et la teneur en sucres réducteurs qui augmentent, traduisent ici la production concomitante principalement de glucose, de DP2(maltose et isomaltose), qu'il est donc nécessaire d'éliminer pour obtenir les polymères de glucose hautement branchés conformes à l'invention. Il est choisi d'utiliser un fractionnement par ultrafiltration sur membrane avec un seuil de coupure de 5000 daltons (membrane 5K AMICON). Les résultats obtenus pour les produits d'ultrafiltration M, 0, Q, S des composés respectivement E, G, I et K d'une part (donc issus de la GLUCIDEX# 2), et des produits d'ultrafiltration N, P, R, T des composés respectivement F, H, J et L (donc issus de la GLUCIDEX# 6), sont présentés dans le tableau III suivant. Tableau III % de Mw % en sucres Osmolalité liaisons 105 daltons réducteurs mOsm/kg a-1,6 M 10,2 0,89 0,42 1 0 15 0,75 0,3 1 Q 18,8 0,57 0,37 2 S 12,1 1,22 0,33 1 N 10,9 0,69 0,54 2 P 14,4 0,51 0,8 3 R 18,1 0,55 0,5 5 T 12,2 0,72 0,6 3 Ces résultats traduisent le fait que les polymères de glucose hautement branchés ainsi obtenus présentent le parfait équilibre entre taux de liaisons glucosidiques a- 1,6 remarquablement élevé (jusqu'à 18%), pour des produits qui présentent une telle valeur de Mw et une valeur aussi basse d'osmolalité. Ces polymères de glucose hautement branchés peuvent être utilisés en tant que tels dans des compositions destinées à réguler la digestion, pour la nutrition parentérale et entérale, pour des compositions destinées aux diabétiques, ou encore en boissons liquides pour reconstituer les réserves d'énergie pour sportifs durant un effort physique de longue durée. Il est à noter qu'outre ces polymères de glucose hautement branchés, le procédé permet également de rassembler les fractions enrichies en maltose et/ou isomaltose. Par exemple, dans le cas de la préparation des produits S et T (issus du traitement combinés avec l'enzyme de branchement et avec l'a-TGase), l'isomaltose et le glucose sont les seuls co-produits fabriqués (aux concentrations respectives de 25 à 30 g/1 et 75 à 80 g/1. De la même façon, dans le cas de la préparation des produits 0 et P (issus du traitement combiné avec l'enzyme de branchement et la (3-amylase), le maltose est le seul coproduit fabriqué (à la concentration de 130 g/1). Ces fractions de bas poids moléculaire peuvent donc constituer des sources avantageuses de compositions riches en maltose et/ou isomaltose. Exemple 2 Les polymères de glucose hautement branchés conformes à l'invention peuvent être également préparés à partir d'amidon de maïs standard. Pour cela, on remet en suspension 110 g sec d'amidon dans un litre d'eau à température ambiante et sous agitation lente et continue. On amène le pH de 6,8 à 7 et laisse dans ces conditions pendant 15 minutes, en rectifiant le pH si nécessaire. On ajoute l'enzyme de branchement du glycogène purifiée de B. stearothermophilus à raison de 4000 U/g de substrat, en amenant progressivement la température à 72 à 75 C. L'incubation se fait ensuite sous agitation modérée pendant 30 minutes, puis refroidissement à une température de 65 à 68 C. La réaction enzymatique est menée pendant 4 heures. La réaction est ensuite stoppée par abaissement du pH à une valeur de 4,5 à 5, puis portée à ébullition pendant 6 minutes. Comme dans l'exemple 1, la réaction est complétée par traitements à la P-amylase ou à l'amyloglucosidase, puis par une étape d'ultrafiltration sur membrane d'un seuil de coupure de 5000 daltons dans les conditions données dans l'exemple 1. Le tableau IV rassemble les résultats obtenus. L'amidon de maïs standard est référencé U ; le produit de traitement à l'enzyme de branchement V, ceux traités en complément par la P-amylase : W, par l'AMG : X ; Les produits finaux ultrafiltrés : Y et Z. Tableau IV % de Mw % en sucres Osmolalité liaisons 105 daltons réducteurs mOsm/kg a-1,6 U 3,6 110 0,01 Nd V 8,8 1,75 0,2 2 W 8,9 1,31 20,5 117 Y 16,3 1,38 0,1 2 X 7,9 0,55 55 357 Z 24,2 0,45 0,4 2 Les produits Y et Z obtenus présentent les mêmes profils équilibrés que ceux décrits à l'exemple 1, et donc peuvent être avantageusement mis en #uvre dans les mêmes domaines d'applications. Exemple 3 Deux autres polymères de glucose hautement branchés sont préparés à partir de deux variétés d'amidon riche en amylopectine, dans des conditions industrielles. Il s'agit de deux échantillons d'amidon de maïs waxy fluidifié acide avec un niveau de fluidification WF d'environ 90, commercialisés également par la Société Demanderesse sous le nom de marque CLEARGUM CB 90. Le tableau V présente les conditions opératoires mises en #uvre pour parvenir aux polymères de glucose hautement branchés conformes à l'invention. Tableau V Base CLEARGUM CB90 CLEARGUM CB90 Solubilisation Cuiseur continu labo à 25% MS Cuiseur continu labo à 25% MS 1ère Enzyme Enzyme de branchement 50. 000 U/ml - Enzyme de branchement 50. 000 U/ml - 1ml / 100gsec 1ml / lOOgsec 1er traitement 70 C pH 6,8 70 C pH 6,8 enzymatique 22 h puis désactivation 22 h puis désactivation 1 h à 90-95 C 1 h à 90-95 C 2ème Enzyme Amyloglucosidase OPTIDEX L300A (3-amylase 0,08ml / lOOgsec + 0,08ml / 100g sec SPEZYME BBA après 1h30 0,2ml/ / 100g sec 2ème traitement 55 C pH4,7 - 2 h et 3 h puis 40 C pH 5 2 h puis désactivation 1 h à enzymatique désactivation lh à 90-95 C 90-95 C Purification Filtration sur 8 puis 0,22 m- Ajustement du pH à 3,5 durant 18h - Ultrafiltration sur membranes Centrifugation 5000 tr/min 10min - PCI Membrane Systems Filtration sur terre filtrante puis 8 mES209 (9000Da) - Traitement Noir Ultrafiltration sur membranes NORIT SX+ 5% c/s pH5 70 C lh- PCI Membrane Systems ES209 Ajustement du pH à 5,8 et filtration sur (9000Da) - Traitement Noir NORIT 8 puis 0,22 m SX+ 5% c/s pH5 70 C 1h-Filtration sur 8 puis 0,22 m Récupération Concentration à sec au rotavapor sous Concentration à sec au rotavapor sous vide vide Le tableau VI présente les résultats obtenus en termes de teneurs en liaisons glucosidiques a-1,6, de valeurs des Mw, de teneurs en sucres réducteurs et d'osmolalité pour les produits obtenus : - a concerne le produit issu de CLEARGUM# CB 90, après traitement avec l'enzyme de branchement et l'amyloglucosidase et - b concerne le produit issu de CLEARGUM# CB 90, après traitement avec l'enzyme de branchement et la ssamylase. Tableau VI % de Mp % en Osmolalité liaisons 105 daltons sucres mOsm/kg a-1,6 réducteurs a 19,4 0,33 1 12 b 14,3 0,68 0,7 6 Ces résultats montrent bien que le procédé mis en #uvre permet d'obtenir des polymères de glucose hautement branchés conformes à l'invention quelle que soit la base amidon ou dérivé d'amidon choisie. REVENDICATIONS 1. Polymères solubles de glucose hautement branchés ayant une teneur en sucres réducteurs inférieure à 1 %, caractérisés par le fait qu'ils présentent : - un taux de liaisons glucosidiques a-1,6 supérieur à 10 %, de préférence compris entre 12 et 30 %, - un Mw, déterminé par diffusion de la lumière, d'une valeur comprise entre 0,3. 105 et 2. 105 daltons, - une osmolalité, déterminée selon un test A d'une valeur comprise entre 1 et 15 mOsm/kg. 2. Polymères selon la revendication 1, caractérisés par le fait qu'ils présentent : - un Mw déterminé par diffusion de la lumière d'une valeur comprise entre 0,5. 105 et 1,5. 105 daltons, - une osmolalité, déterminée selon un test A, au moins égale à 1 et inférieure à 2 mOsm/kg. 3. Polymères selon la revendication 1, caractérisés par le fait qu'ils présentent : - un Mw, déterminé par diffusion de la lumière d'une valeur comprise entre 0,5. 105 et 0,8. 105 daltons. - une osmolalité, déterminée selon un test A, au moins égale à 2 et inférieure à 5 mOsm/kg, 4. Polymères solubles de glucose hautement branchés selon l'une ou l'autre des revendications 2 et 3, caractérisés par le fait qu'ils présentent entre 15 et 30 % de liaisons glucosidiques a-1,6. 5. Polymères selon la revendication 1, caractérisés par le fait qu'ils présentent : - un Mw, déterminé par diffusion de la lumière d'une valeur comprise entre 0,3. 105 et 0,7. 105 daltons, - une osmolalité, déterminée selon un test A, au moins égale à 5 et inférieure à 15 mOsm/kg. 6. Procédé de préparation des polymères selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé par le fait que l'on : - prépare une suspension aqueuse d'amidon ou une solution de dérivé d'amidon d'une matière sèche au moins égale 1 % en poids, de préférence de 10 à 50 % en poids, - traite ladite suspension ou ladite solution avec au moins une enzyme de branchement à une température comprise entre 25 et 80 C pendant une durée de 1 à 24 heures, - fait agir sur la suspension ou sur la solution ainsi obtenue au moins une enzyme choisie dans le groupe constituée de l'a-amylase, la (3-amylase, l'amyloglucosidase et l'a-transglucosidase, - effectue un fractionnement à l'aide d'au moins une technique choisie dans le groupe des séparations sur membrane ou chromatographies, de manière à récupérer les fractions de haut poids moléculaire et celles de bas poids moléculaire, - recueille les polymères de glucose hautement branchés correspondants aux fractions de haut poids moléculaire ainsi obtenues. 7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé par le fait que l'enzyme de branchement est choisie dans le groupe constitué par les enzymes de branchement du glycogène, les enzymes de branchement de l'amidon et les mélanges quelconques de ces enzymes. 8. Procédé selon l'une ou l'autre des revendications 6 et 7, caractérisé par le fait que la technique de fractionnement est choisie dans le groupe constitué par la technique de séparation sur membrane d'ultrafiltration et par la technique de séparation chromatographique sur support de type gel. 9. Compositions destinées à être utilisées dans les industries notamment du Papier-Carton, du Textile, de la Cosmétique, et en particulier de la Pharmacie et de l'Alimentaire, caractérisées en ce qu'elles renferment les polymères de glucose hautement branchés selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 ou susceptibles d'être obtenus par le procédé selon l'une des revendications 6 à 8. 10. Compositions selon la revendication 9, destinées à être utilisées dans les domaines de la nutrition entérale et parentérale, comme agent inhibiteur de la glycémie, comme apport énergétique lors d'activités physiques et comme agent régulateur de la digestion. 11. Compositions enrichies en maltose et/ou isomaltose, caractérisées en ce qu'elles comprennent les fractions de bas poids moléculaire de l'étape de fractionnement du procédé selon l'une des revendications 6 à 8.