Brevet FR2837708A1 — publié le 20031003

molécule vis-à-vis de récepteurs 5-HT 2B et 5-HT 2C. L'invention concerne l'utilisation de la molécule 8' hydroxydihydroergotamine (appelée également 8'-OH-DHE) pour la production d'un médicament pour le traitement de la migraine. Plusieurs théories des causes de la migraine ont été proposées. La théorie vaso-dilatatrice envisage que la dilatation des vaisseaux méningés pendant une crise de migraine est à l'origine de la douleur. La théorie neuronale envisage une origine dans une décharge anormale de neurones. La théorie de l'inflammation durale imagine une cause dans 0 l'inflammation de cette membrane qui entoure le cerveau et qui devient hypersensible par relargage de neuropeptides. L'utilisation de dihydroergotamine (DHE) ou de ses sels est déjà connues depuis de nombreuses années dans le traitement de la migraine. Son action, en tant que "drogue" ou "pro-drogue", notamment par l'intermédiaire de ses métabolites, a déjà été confirmée. L' invention vise à renforcer l i action anti-migraineuse des dérivés de l'ergot de seigle, en l'espèce la molécule 8'-OH-DHE, non pas après administration à un patient d'un médicament à base de DHE qui a été métabolisée et qui contient donc à faible dose (par rapport à la dose d'origine o de la DHE), différents métabolites dont le 8'-OH-DHE, mais cette molécule en elle-même en tant que produit actif dans le médicament administré. I1 va ainsi être possible de contrôler l'efficacité de cette molécule spécifique dans le traitement anti-migraineux. Dans ce contexte, un objet de l' invention est également de révéler les effets générés par un produit actif contenant cette molécule 8'-OH-DHE sur certains récepteurs à la sérotonine, en ciblant donc l'utilisation de cette molécule sur les effets en question. A la connaissance du demandeur, il n'a jusqu'à présent pas été proposé, pour traiter une migraine, d'administrer à un patient un produit actif contenant cette molécule 8'-OH-DHE dans le but d'obtenir les effets ci après présentés vis-à-vis de plusieurs récepteurs à la sérotonine également présentés ci-après. Ainsi, l'invention a pour objet principal l'utilisation de la molécule 8' hydroxydihydroergotamine pour la production d'un médicament pour le traitement de la migraine par action de ladite molécule vis-à-vis de plusieurs récepteurs à la sérotonine parmi 5-HT 1A, 5-HT 2A, 5-HT 1B, 5HT 2B, 5-HT 2C, 5-HT 1D et, corrélativement, obtention de plusieurs parmi les effets suivants: 0 -- action vis-à-vis des récepteurs 5-HT 1B et/ou 5HT 1D induisant une diminution de la vasadilatation des vaisseaux méningés extracérébraux intracrâniens, -- et/ou diminution de la densité des récepteurs 5-HT 2B et/ou 5-HT 2C dans les cellules exprimant ce(s) récepteur(s), -- et/ou une action vis-à-vis des récepteurs 5-HT 1A, 5-HT 2A, 5-HT 2B et/ou 5-HT 2C induisant une diminution de l'excitabilité neuronale. Dans le cadre d'un traitement de fond efficace de la migraine, l'invention fait en outre état avantageusement: -- d'une diminution de l'excitabilité de neurones sérotoninergiques du raphé et/ou de neurones pyramidaux de l'hippocampe portant des récepteurs 5-HT 1A, et/ou -- d'une désensibilisation à la sérotonine de cellules endothéliales de parois vasculaires et/ou de cellules de parois musculaires exprimant les récepteurs 5-HT 2B et/ ou 5-HT 2C, et/ ou -- d'une action de la 8'-OH-DHE s'opposant à l'augmentation de l'excitabilité neuronale et/ou à la dilatation de vaisseaux pie-mériens, par blocage de récepteurs neuronaux 5-HT 2B. Dans l'invention, l'affinité de la 8'-OH-DHE pour en particulier les récepteurs 5-HT 1A et 5-HT 2B/2C a été déterminée in vitro à partir de la capacité du composé à inhiber la liaison spécifique de radioligands appropriés sur des cellules exprimant ces récepteurs. Des approches électrophysiologiques (tranches de cerveau de rats; 5-HT 1A) et biochimiques (accumulation cellulaire de cGMP cyclique - guano sine monophosphate cyclique; 5-HT 2B/2C) validées ont été utilisées pour établir leur caractère agoniste ou antagoniste. Au vu des résultats obtenus, la 8'-OH-DHE s'avère étre effectivement un agoniste 5-HT 1A à haute affinité (ICo: 5-20 nM). Pour les récepteurs hippocampiques, on note ICso compris entre 8 et 11 nM (voir point 3 ci 0 après). Cette action se traduit par une diminution de l'excitabilité de neurones centraux. Le composé 8'-OH-DHE est aussi un agoniste de 5-HT 2B/2C à haute affinité (ICo= 5-15 nM), et son action prolongée induit une diminution importante de la densité des récepteurs 5-HT 2B, typique d'une désensibilisation. Ces résultats montrent que dans les conditions d'un traitement chronique, la 8'-OH-DHE réduit l'état d'hyperexcitabilité neuronale et la sensibilité au stress, en activant les récepteurs 5-HT 1A et elle prévient l' action vasodilatatrice de la sérotonine, en désensibilisant les récepteurs 5 HT 2B. o Ainsi est avéré, pour un traitement préventif de la migraine, la stimulation des récepteurs 5-HT 1A associée à une action sur les récepteurs 5 HT 2A et à la désensibilisation, ou à l'inactivation, des récepteurs 5-HT 2B et/ou 5-HT 2C. Pour un traitement de crise de la migraine, la stimulation des récepteurs 5-HT 1B et 5-HT 1D s'oppose à la vasodilatation des vaisseaux méningés et/ou déclenche un frein à la libération de CGRP et de SP (par action sur les terminaisons des fibres nerveuses trigéminales périvasculaires). Toujours pour un traitement de crise de la migraine, la molécule 8' hydroxyhydroergotamine peut avantageusement être utilisée en association avec de la dihydroergotamine notamment, avec une administration par l'une au moins des voies parmi la voie orale, la voie inkanasale ou la voie injectable. Dans ce qui suit, on va maintenant présenter successivement l'action du principe actif concerné, 8'-OH-DHE, tout d'abord dans le traitement de fond de la migraine, puis dans le traitement de crise, puis on détaille les interactions entre la 8'-OH-DHE en tant que principe actif administré et les différents récepteurs mis en cause dans l'invention. Ensuite, sont indiqués successivement une possible action combinée de la 8'-OH-DHE avec au 0 moins une autre molécule, dans le cadre d'un traitement antimigraineux combinant l'effet de plusieurs principes actifs, puis différents modes d'administration et enfin, des informations sur la manière de fabriquer la molécule dont traite l'invention. 1. TRAITEMENT DE FOND Dans ce cadre, ce sont plus particulièrement les récepteurs -HT 1A,5-HT2A, 5-HT 2B, et 5-HT 2C qui sont concernés avec, a priori à titre subsidiaire, les récepteurs 5-HT 1B et/ou 5-HT 1D. En général, l'affinité à la sérotonine des récepteurs de la classe 5-HT 2 est plus faible que celle des récepteurs de la classe 5-HT 1. En effet, les récepteurs de la classe 5-HT 1 (en général) sont caractérisés par leur haute affinité (Kd de l'ordre du nanomolaire) pour la sérotonine et par leur couplage négatif avec l'adénylate cyclase. Ils inter agissent apparemment avec des protéines G (qui jouent le rôle de "transducteurs") pour soit diminuer la synthèse d' AMP cylique, soit modifier la perméabilité d'un canal ionique spécifique dans la membrane lorsqu'ils sont stimulés par un agoniste. Tous les récepteurs de la famille 5-HT 1 sont exprimés dans le système nerveux central et jouent un rôle dans le contrôle de l'excitabilité neuronale. Or, la 8'-OH-DHE s'est avérée être reconnue avec une très bonne affinité par les récepteurs 5-HT 2. A cet égard, lorsqu'ils sont stimulés, les récepteurs 5-HT 2B et 5-HT 2C conduisent à une activation de phospholipase membranaire (phospholipase A2 et C) et à la fermeture d'un canal ionique spécifique du K+. Cette deuxième action provoque apparemment une dépolarisation membranaire, c'est-à-dire une augmentation de l'excitabilité des neurones qui portent au moins les récepteurs précités. Cependant, il semble que ces récepteurs se désensibilisent lorsque leur stimulation se prolonge, ce qui 0 paraît conduire à leur blocage et à l'absence de réponse à une sollicitation ultérieure par la sérotonine ou un autre agoniste. A noter qu'en particulier, les récepteurs 5-HT 2A, 5-HT 2B et 5-HT 2C correspondent à des gênes distincts qui sont tous exprimés dans le système nerveux central. De plus, les récepteurs 5-HT 2A et 5-HT 2B, mais pas les récepteurs 5-HT 2C, sont également exprimés dans les parois de certains vaisseaux, par les cellules musculaires lisses et/ou les cellules endothéliales. Au niveau des vaisseaux pie-mériens, l' activation de la voie des phosphoinositides qui résulte de la stimulation des récepteurs 5-HT 2B conduit à une augmentation de la production locale de monoxyde d'azote (NO) et donc à une vasodilatation. L' implication d' un tel phénomène dans la crise migraineuse nous conduit à penser que les récepteurs 5-HT 2B doivent jouer un rôle déterminant dans son déclenchement. En d'autres termes est ici considérée l'action de la molécule 8'-OH- DHE sur en particulier les récepteurs 5-HT 2B des vaisseaux méningés, dans le cadre d'une action effective lors d'un traitement de fond antimigraineux. Pour ce qui concerne a priori tant les récepteurs 5-HT 2B que 5-HT 2C, la stimulation par la 8'-OH-DHE aurait dû constituer une action favorable au déclenchement des crises, puisqu'elle paraît conduire à une augmentation de l'excitabilité neuronale et à une dilatation des vaisseaux pie-mériens, notamment du fait de la production précitée de NO. En fait, lors du traitement de fond, la stimulation chronique de ces récepteurs s'avère, au vu des résultats, provoquer leur désensibilisation, reproduisant ainsi, dans le temps, l' action d'un antagoniste en plus fort. Précisément, dans le cas de la 8-OH-DHE, on prétend ici à la capacité de ce composé à induire le phénomène indiqué de désensibilisation. En particulier, l' exposition prolongée de cellules de fibroblastes transfectés à une concentration saturante (250 M) a conduit à constater une 0 importante diminution de la densité des récepteurs 5-HT 2B dans leur membrane plasmatique. Ainsi, lors d'un traitement de fond par un médicament contenant en tant que principe actif de la 8'-OH-DHE, celle-ci s'avère rendre progressivement insensible à la sérotonine endogène les cellules exprimant les récepteurs précités 5-HT 2B et/ou 5-HT 2C, en l'occurrence les cellules endothéliales des parois vasculaires pour ce qui concerne les récepteurs 5HT 2B et les neurones dans le cas des récepteurs 5-HT 2C. On a donc été amené à considérer qu'au moins les récepteurs 5-HT 2B, 5-HT 2C qui sont normalement responsables d'une action vaso-dilatatrice (5-HT 2B) et/ou neuro-excitatrice (5-HT 2C) de la sérotonine, ont été inactivés par l' administration d'un principe actif à base de 8'-OH-DHE, contribuant ainsi à relever le seuil de déclenchement de la crise migraineuse. De façon combinée, lors d'un traitement chronique par la 8'-OH-DHE en tant que principe actif administré à un patient, il est en outre ici considéré que le blocage des récepteurs 5-HT 2A associé à la désensibilisation des récepteurs 5-HT 2B, et probablement 5-HT 2C, conduit à une meilleure adaptation au stress et de toutes façons à une diminution de l'excitabilité neuronale. Ce dernier effet pourrait être lié à la capacité de la 8'-OH-DHE à s'opposer au phénomène de dépression envahissante ("spreading depression") déclenchée expérimentalement par une dépolarisation excessive au niveau cortical (Barclay et al. 1992) et dont un certain nombre d'auteurs pensent qu'elle pourrait s'apparenter aux troubles neurologiques de l'aura qui précède la crise migraineuse (cf. Lauritzen 1994). 2. TRAITEMENT DE CRISE/DIMINUTION DES CRISES EN TRAITEMENT DE FOND Ainsi, il est ici considéré que l'efficacité thérapeutique de la 8'-OH DHE administrée au patient en tant que principe actif "d'origine", et non pas en tant que résultat de la métabolisation de la DHE dans le corps de ce même o patient, relève, vis-à-vis de la crise migraineuse (et donc dans le cadre d'une prescription du médicament correspondant contenant cette molécule) d'une stimulation des récepteurs 5-HT 1B et 5-HT 1D de la sérotonine dans la paroi des vaisseaux méningés et sur les voies trigéminales, ainsi que paraissent le faire les "kiptans", tandis que liaction prophylactique spécifique (dans le cadre donc d'un traitement de fond anti-migraineux) de cette même molécule 8'-OH-DHE, toujours administrée comme principe actif "d'origine", paraît résulter d' une combinaison unique d' actions multiples sur également d'autres récepteurs de ce même neuromédiateur, et en particulier les récepteurs 5-HT 2B, 5-HT 1A et 5-HT 2C. De fait, l'action anti-stress potentielle du traitement par la 8'-OH DHE en tant que médicament de base, qui paraît résulter de l' activation en particulier des récepteurs 5-HT 1A et de l'inactivation des récepteurs 5HT 2B, voire 5-HT 2C, par la 8'-OH-DHE, paraît réellement contribuer à la diminution notable de la fréquence des crises lors du traitement de fond avec un médicament comprenant cette molécule 8'-OH-DHE. Par ailleurs, comme déjà indiqué, au niveau central, à la fois la stimulation des récepteurs 5-HT 1A et la désensibilisation des récepteurs 5 HT 2C par la 8'-OH-DHE paraissent converger pour diminuer l'excitabilité neuronale, et donc relever le seuil de déclenchement des crises, conduisant ainsi à diminuer leur fréquence. A noter également qu'une autre composante paraît tout-à-fait constituée par l'action de la 8'-OH-DHE au niveau des artères méningées. De fait, la désensibilisation des récepteurs 5-HT 2B sur les cellules endothéliales doit permettre à cette molécule 8'-OH-DHE de prévenir toute action vaso dilatatrice éventuelle de la sérotonine, et donc la survenue d'une crise migraineuse. Ainsi, l'analyse des effets pharmacologiques de la 8'-OH-DHE en tant 0 que molécule active dans un médicament laisse à penser que bien plus qu'une action sur une seule cible priviligiée, c' est la convergence d'actions multiples sur plusieurs des récepteurs de la sérotonine révélés dans la présente description qui sous-tend l'efficacité en particulier d'un traitement de fond avec la 8'-OH-DHE, mais également a priori d'un traitement de crise dans le cadre d'une réduction en particulier de la fréquence des crises chez le patient migraineux. 3. AUTRES POINTS CONCERNANT, SPECIFIQUEMENT, LA 8'-OH-DHE ET LES RECEPTEURS 5-HT 1A Les récepteurs 5-HT 1A se distribuent dans les régions cérébrales, en particulier dans les noyaux dorsal et median du raphé o la densité de ces récepteurs est particulièrement élevée. A ce niveau, les récepteurs 5- HT 1A paraissent être en fait des auto-récepteurs dont la stimulation provoque une diminution de l'activité électrique des neurones sérotoninergiques, à l'origine d'un effet anxiolytique. En l'occurrence, au moins dans le cas des récepteurs 5-HT 1A, leur stimulation s ' est avérée entraîner l' ouverture d'une conductance potassique, conduisant à une hyper-polarisation de la membrane dans leur voisinage immédiat.L'activation de ces récepteurs par la molécule 8'-OHDHE diminuerait effectivement donc de façon sensible l'excitabilité des neurones qui les portent. Comme attendu de composés agonistes, la 8'-OH-DHE paraît par ailleurs excercer une influence inhibitrice sur la décharge de ces neurones, dans des gammes de concentration assurant l'occupation desdits récepteurs -HT 1A. D'ailleurs, leur action inhibitrice paraît entièrement prévenue par un antagonisme sélectif de ces récepteurs, démontrant apparemment qu'elle résulterait de l' activation de ces derniers par cette molécule 8 '-OHDHE. 0 Pour mettre en évidence l'action sur ce récepteur 5-HT 1A, deux types de tests ont été menés: -- des mesures de radio-liaison, -- une caractérisation électrophysiologique des propriétés agonistes de la 8'-OH-DHE vis-à-vis de cette catégorie de récepteurs. Dans le premier cas, des membranes d'hippocampe de rats ont été préparées et incubées en présence de concentrations nanomolaires de radioligands sélectifs des récepteurs 5-HT 1A, ceci avec des concentrations variées de 8'-OH-DHE, jusqu'à l'équilibre de radio-liaison (environ une heure à température ambiante). Par ailleurs, un excès de 5-HT a été ajouté à une autre série d'échantillons afin de déterminer la radio-liaison non spécifique. Au terme de l'incubation, les échantillons ont été rapidement filtrés et la radioactivité retenue sur les filtres a été comptée par spectométrie. Les caractéristiques de l'inhibition de la radio-liaison spécifique de l'agoniste et de l'antagoniste choisis pour le test, par la 8'-OH-DHE: ICo (concentration produisant 50 % d' inhibition) et nH (constante de Hill) ont ensuite été calculées par un lo giciel approprié. Dans le second test, des coupes coronales de cerveaux de rats sont obtenues au niveau du raphé dorsal d'une part, et de l'hippocampe dorsal d'autre part. Les cellules concernées sont placées dans une chambre de superfusion et mises en situation pour rétablir le tonus oc1-adrénergique activateur responsable de la décharge spontanée des neurones in vivo. Un enregistrement extra-cellulaire de l'activité unitaire de neurones sérotoninergiques est également réalisé. La décharge typique de ces neurones est amplifiée, visualisée sur un oscilloscope et intégrée en termes de fréquence. De la 8'-OH-DHE, ainsi qu'un antagoniste sélectif, sont ajoutés à des concentrations variées dans le liquide de superfusion et leurs effets sont appréciés par comparaison de leurs fréquences de décharge avant et après traitement. A été également effectué un enregistrement intracellulaire en condition "courant imposé" pour tester la réaction des neurones sérotoninergiques du noyau raphé dorsal ou des cellules pyramidales de la région CA1 ou CA3 de la corne d'Ammon dans lhippocampe. Après traitement électronique, lorsque le potentiel de membrane de la cellule enregistrée est stabilisé, des impulsions de courant hyperbolisant sont délivrées afin d'apprécier les éventuels changements de la résistance membranaire lors de la superfusion de l'échantillon testé avec la 8'-OH-DHE, les récepteurs 5-HT concernés et/ou l'antagoniste retenu. En termes de résultats, il a été noté la diminution progressive des liaisons spécifiques de l'agoniste et de l'antagoniste choisis en présence de concentrations croissantes de 8-OH-DHE, ainsi que l'inhibition par la 8'OH- DHE de la liaison spécifique de chaque radioligand sur les membranes d'hippocampe des rats. Les ICo de la 8'-OH-DHE vis-à-vis de la liaison spécifique de l'agoniste et de l'antagoniste retenus ont en outre été respectivement de 11 et 8 nM, indiquant une bonne affinité de cette molécule pour les récepteurs hippocampiques. Le calcul des coefficients de Hill (nM) a par ailleurs donné des valeurs supérieures à 1, suggérant une interaction de type non compétitif entre l'agoniste et l'antagoniste retenus et les radioligands au niveau des sites de liaison spécifique sur les récepteurs 5-HT 1A. En termes de caractérisation électrophysiologiques, il a été noté, en outre, que la 8'-OH-DHE (1-1000 nM) exerce un effet inhibiteur sur la décharge des neurones sérotoninergiques avec des concentrations de l'ordre de 5-50 nM. A partir de la concentration 300 nM, cette molécule bloque au demeurant complètement l'activité spontanée des neurones. A noter également l'effet hyperpolarisant de la 8'-OH-DHE sur la membrane des neurones CA1 hippocampiques avec un effet durable, pour 0 une concentration de 8'-OH-DHE de l'ordre de 100 à 1000 nM. L'hyperpolarisation est apparue comme moindre par rapport à celle obtenue avec une concentration saturante de sérotonine (30 M). Cette différence évoque un effet de type agoniste partiel pour la 8'-OH-DHE, propriété confirmée lorsqu'en présence de 8'-OH-DHE (100 nM), la 5-HT (30,uM) n'a plus eu d'effet hyperpolarisant et lorsque, en présence de l'antagoniste retenu à dose de 100 nM, la 8'-OH-DHE n'a plus provoqué d'hyperpolarisation membranaire. En conclusion, il est considéré que la stimulation des récepteurs 5-HT 1A centraux par administration d'un médicament contenant comme principe actif cette molécule 8'-OH-DHE conduit spécifiquement à une diminution de des neurones sérotoninergiques du raphé et des neurones pyramidaux de l'hippocampe. A noter que la 8'-OH- DHE est apparue active à des concentrations faibles, de l'ordre de 10-100 nM vis-à-vis des autorécepteurs 5-HT 1A dans le noyau raphé dorsal. Au niveau de l'hippocampe, la reconnaissance par les mêmes récepteurs a été notée pour des concentrations également faibles de l'ordre de 5 à 100 nM. Quant aux études électrophysiologiques présentées ci avant, elles ont bien montré l'activité agoniste partielle de la 8'-OH-DHE vis à-vis des récepteurs 5-HT 1A postsynaptiques. Du fait de la persistance de la 8'-OH-DHE dans les tissus, on peut au demeurant conclure à une activation effective des récepteurs 5-HT 1A centraux, et donc une diminution de l'excitabilité neuronale (au moins donc dans le noyau raphé dorsal et dans l'hippocampe). Par ailleurs, en stimulant les auto-récepteurs 5-HT 1A somato-dendritiques dans le noyau raphé dorsal, la 8'-OH-DHE paraît effectivement exercer une action de type anxiolytique. Ces propriétés peuvent donc, de l'avis du demandeur, être à même de contribuer efficacement à l'action prophylactique d'un traitement anti migraineux utilisant comme principe actif de la 8'-OH-DHE. 4. LA 8'-OH-DHE ET LES RECEPTEURS 5-HT 1B ET 5-HT 1D, EN PARTICULIER Une autre approche de la crise migraineuse consiste à considérer qu'elle commence, au moins dans certains cas, par une excitation des fibres nerveuses trigéminales au contact des vaisseaux méningés. Les neuropeptides vaso-actifs contenus dans ces fibres, le CGRP (peptide en relation avec le gène calcitonine; "calcitonine gene related peptide") et la SP (substance P; algogène), sont alors libérés, provoquant respectivement la vasodilatation et l'extravasion locales. Du fait de ces phénomènes, des substances algogènes (bradykines, sérotonine, prostaglandines, histamine, etc.) envahissent les territoires méningés voisins qui excitent les fibres trigéminales périvasculaires qui s'y trouvent, celles-ci, à leur tour, libérant alors ces mêmes neuropeptides vaso actifs. Le phénomène d' inflammation neurogène gagne ainsi, de proche en proche, l'ensemble des méninges, entraînant une forte excitation des fibres trigéminales, et donc l'activation des circuits de la douleur céphalique depuis le ganglion trigéminal jusqu'au thalamus et au cortex cérébral, en passant par le relais que constitue le noyau spinal caudal du trijumeau. Plusieurs étapes-clé apparaissent dans cette séquence, en particulier (i) la vasodilatation et l'extravasion plasmatique à l'origine de la génération et de la propagation de l'influx dans les fibres trigéminales, et (ii) la libération des neuropeptides vaso-actifs, SP et CGRP. De fait, on considère ici que la 8'-OH-DHE, en tant que molécule active capable de stopper la crise migraineuse, agit à ces deux niveaux: -- en stimulant les récepteurs 5-HT 1B sur les cellules musculaires lisses dans la paroi des vaisseaux, c ' est à la vasodilatation et à l' exkavasion plasmatique qu'elle s'oppose, et -- en stimulant les récepteurs 5-HT 1B et 5-HT 1D sur les terminaisons des fibres nerveuses trigéminales périvasculaires, cette même molécule déclenche un frein à la libération de CGRP et de SP par ces fibres. 5. ACTION DE LA 8'-OH-DHE, EN TANT QUE PRINCIPE ACTIF ADMINISTRE, SUR LES RECEPTEURS 5-HT 2B ET 5-HT 2C En relation avec l'invention, a été testée l'affinité de cette molécule sur des membranes de cellules transfectées exprimant sélectivement un récepteur de la sérotonine et il a été vérifié que cette molécule agissait comme agoniste vis-à-vis d'un effecteur potentiellement relié à la migraine, la production de cGMP. 5.a. Test d'affinité de la 8'-OH-DHE sur des membranes de cellules Des lignées de cellules recombinantes exprimant des niveaux voisins (environ 200 fmoles/mg prot) des récepteurs humains 5HT 2B ou 5-HT 2C ont été obtenus, pour le test. Elles ont été utilisées pour appréhender l'affinité de la 8'-OH-DHE pour chacun de ces récepteurs, par compétition vis-à-vis d'un ligand sélectif HT 2, le [125I] DOI. De manière surprenante, la 8'-OH-DHE reconnaît ces récepteurs suivant plusieurs modes (courbes de compétition biphasiques). Au demeurant, l'affinité de la 8'-OH-DHE apparait beaucoup plus importante que la DHE pour ces récepteurs, et beaucoup plus importante (de l'ordre nanomolaire) pour le récepteur 5-HT 2B, en particulier. Les cellules utilisées pour un des tests menés, fibroblastes de souris (LMTK), n'ont exprimé de manière endogène aucun récepteur connu de la sérotonine. Après transfections, ces cellules exprimaient spécifiquement le récepteur 5-HT 2B (205+2 fmoles/mg de protéines, Kd moyen 12 nM) ou le récepteur 5-HT 2C (195+3 fmoles/mg de protéines, Kd moyen 42 nM), mesuré par liaison de [25I]DOI. 0 5.b.Activité aoniste vis-à-vis du cGMP intracellulaire Des cellules exprimant sélectivement les récepteurs humains 5-HT 2B ou 5-HT 2C ont aussi été utilisées pour déterminer si la 8'-OH-DHE a effectivement des activités agonistes vis-à-vis du cGMP, pour ces récepteurs. Or, ce composé se comporte effectivement comme un agoniste, puisque le cGMP est produit en réponse à ce composé, pour les deux récepteurs précités. Les concentrations efficaces semblent correspondre aux sites de haute affinité décrits précédemment, la concentration efficace (pEC50) de la 8'OH-DHE étant apparue comme égale à environ 8,30 pour le récepteur 5 HT 2B (en particulier 8, 32 + 0,09) et environ 7,80 pour le récepteur 5-HT 2C (en particulier 7,83 + 0,06). De plus, la 8'-OH-DHE s'est avérée comme se comportant effectivement comme un agoniste partiel vis-à-vis du récepteur 5-HT 2C, le niveau maximal de cGMP atteint n'étant qu'à peine 50 % de celui produit par la stimulation du récepteur 5-HT 2B. Après lavage des cellules recombinantes en milieu frais sans sérum, celles-ci ont été incubées pour différentes périodes à 37 C en présence de 100 mM isobutylmethylxanthine et des agents à tester. La réaction a ensuite été stoppée. Après une heure à 4 C, la phase éthanolique a été collectée et lyophilisée. Le cGMP a été quantifié grâce à un kit de radio immunologie essai iodiné (cGMP RIA kit RPA 525, Amersham). 5.c. Désensibilisation dela 8'-OH-DHE Les cellules obtenues pour le test, exprimant sélectivement les récepteurs humains 5-HT 2B (ou 5-HT 2C), ont aussi permis d'évaluer le traitement chronique de ces cellules par la 8OH-DHE, en tant que principe actif contenu dans un médicament administré, sur lexpression de ces récepteurs, en termes de désensibilisation. La variation du nombre de sites récepteurs indique un comportement différent de ces deux récepteurs. Le récepteur 5-HT 2B est apparu comme étant seul sensible à une stimulation chronique par la 8'-OH DHE. Eneffet, après une heure de traitement, les niveaux de récepteurs restent pratiquement inchangés pour le récepteur 5-HT 2C, alors quaprès environ quinze minutes, la quantité de récepteurs 5-HT 2B est significativement réduite, la demi-vie du récepteur 5-HT 2B n'étant que denviron soixante minutes en présence de 8-OH-DHE (à comparer aux plus de trois heures en présence de DHE). Des fibroblastes de souris LMTK, transfectées de manière stable ont été exposés à une concentration saturante (250 M) de 8'-OH-DHE pendant des temps variables (1, 5,10, 30, 60 minutes) et la variation du nombre de sites de récepteurs dans les extraits membranaires a été déterminée pharmacologiquement (Bmax) mesuré par liaison de [25I]DOI (agoniste 5-HT 2 spécifique). 6. ACTION COMBINEE DE LA 8'-OH-DHE AVEC AU MOINS UNE AUTRE MOLECULE 6.1. Traitement de crise Différents auteurs ont déjà fait valoir que les actions de la DHE (dihydroergotamine) au niveau des différents récepteurs de la sérotonine (5 HT 1B, 5-HT 1D, voire 5-HT 1F), couplées (a priori dans une moindre mesure) avec une action au niveau de récepteurs dopaminergiques et/ou x- adrénergiques, seraient à l'origine de la réduction des crises migraineuses. AUssi une caractéristique de l'invention prévoit-elle l'utilisation bénéfique d'une action combinée de la 8'-OH-DHE avec l'un au moins parmi: la DHE, les triptans, un ou plusieurs antalgiques simples, antalgiques opiacés, anti-inflammatoires stéroïdiens et caféine, en tant que principes actifs complémentaires dans une composition pharmaceutique à administrer. 6.2. Traitement de fond o Dans ce cadre, compte tenu des effets précités sur les récepteurs spécifiques des familles 5-HT 1 et 5- HT 2, l'invention propose, selon une caractéristique complémentaire, l'utilisation combinée de la 8'-OH-DHE avec l'un au moins parmi les principes actifs suivants: bêtabloquants, anti dépresseurs, méthysergide, oxétorone, pizotifène, flunarizine, indoramine et acide acétylsalicylique 7. MODES D'ADMINISTRATION Il s'agit d'administrer un ou plusieurs principes actifs combinés. Deux groupes de mode d'administration sont conseillés, suivant qu'il s'agit d'un traitement anti-migraineux de fond, ou de crise. Dans le premier cas, l' invention conseille d'utiliser soit la voie orale, soit la voie transdermique. Dans le second cas, l'une des trois voies suivantes est conseillée: voie orale, voie intranasale, voie injectable. 8. PROCEDE DE FABRICATION L' administration de DHE sous la forme de l ' un de ses métabolites, en l'espèce la 8-OH-DHE, a été décrite dans US-A- 4 916132. Des détails concernant cette administration et les conditions de fabrication du principe actif y sont précisés. On se référera en particulier au passage de la description de cette demande colonne 3, ligne 24 à colonne 4, ligne 53, ainsi qu'aux exemples 12 et 13. A cet égard, il est noté que, dans l'invention comme dans cette demande de brevet publiée, une fabrication de la 8'-OH-DHE par voie blologique est possible. Ont en l'espèce été utilisés pour cela des rats que l'on a traités afin d'induire les P 450 3A impliqués dans la formation des métabolites monohydroxylés de la DHE (cf. Delaforge et al. "Xenoblotica" 1989, vol. 19, N 11, 1285-1295). Les foies des rats ont été extraits et on y a généré la 0 formation de métabolites de la dihydroergotamine, et en particulier de la 8'- OH-DHE. Pour cela, les microsomes des foies récupérés et dilués dans une solution ont été incubés, en présence de DHE (concentration comprise entre et 150 M) et d'un système générateur de NADPH. Une fois la réaction conduite par le système générateur, cette réaction a été arrétée par précipitation des protéines microsomales et le surnageant d'incubation a été injecté directement sur une colonne HPLC. Pour cela, la phase organique a été extraite de la composition avec un solvant organique que l'on a ensuite évaporé. Les résidus ont été solubilisés et injectés sur la colonne HPLC, seuls les métabolites monohydroxylés ayant été collectés et repurifiés dans la colonne, après quoi en particulier la 8'-OH-DHE a été extraite et conservée. A noter également (dans Maurer et al. 1984) différentes informations concernant la biotransformation de la DHE in vivo chez l'homme à partir d'urine de plasma et, in vitro, sur des microsomes hépatiques humains, les résultats obtenus montrant que l'oxydation primaire de la DHE conduit de manière majoritaire à un dérivé hydroxylé sur la proline de la partie peptidique de la molécule. REVENDICATIONS 1. Utilisation de la molécule 8'-hydroxydihydroergotamine pour la production d'un médicament pour le traitement de la migraine par action de ladite molécule vis-à-vis de plusieurs récepteurs à la sérotonine parmi 5-HT lA,5-HT2A,5-HTlB,5-HT2B,5-HT2C,5-HTlD et, corrélativement, obtention de plusieurs parmi les effets suivants: -- action vis-à-vis des récepteurs 5-HT1B et/ou 5-HT1D induisant une diminution de la vasodilatation des vaisseaux méningés extracérébraux intracrâniens, 0 -- et/ou diminution de la densité des récepteurs 5-HT2B et/ou 5-HT 2C dans les cellules exprimant ce(s) récepteur(s), -- et/ou une action vis-à-vis des récepteurs 5-HT1A,5-HT2A,5-HT 2B et/ou 5-HT2C induisant une diminution de l'excitabilité neuronale. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée par l'effet obtenu pour un traitement de fond de la migraine par diminution de l'excitabilité de neurones sérotoninergiques du raphé et/ou de neurones pyramidaux de l'hippocampe portant des récepteurs 5-HT1A. 3. Utilisation selon la revendication 2, caractérisée en ce qu'en relation avec les récepteurs 5-HT1A, la concentration de la 8' hydroxydihydroergotamine est telle que ICo est compris entre 8 et 11 nM. 4. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée par l'effet obtenu pour un traitement de fond de la migraine par désensibilisation à la sérotonine de cellules endothéliales de parois vasculaires et/ou de cellules de parois musculaires exprimant les récepteurs 5-HT2B et/ou 5-HT2C. 5. Utilisation de la 8'-hydroxydihydroergotamine selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la concentration efficace de la 8'-hydroxydihydroergotamine (pEC50) est d'environ 8,30 pour les récepteurs 5-HT 2B. 6. Utilisation de la 8'-hydroxydihydroergotamine selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la concentration efficace de la 8'-hydroxydihydroergotamine (pEC50) est d'environ 7,80 pour les récepteurs 5-HT 2C. 7. Utilisation de la 8'-hydroxydihydroergotamine selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour le traitement de fond de la migraine par action s'opposant à l'augmentation de l'excitabilité neuronale o et/ou la dilatation de vaisseaux méningés, par action de blocage de récepteurs neuronaux 5-HT 2B. 8. Utilisation de la 8'-hydroxydihydroergotamine selon l'une quelconque des revendications précédentes pour un traitement préventif de la migraine, par stimulation des récepteurs 5-HT 1A associée à son action sur les récepteurs 5-HT 2A et à la désensibilisation, ou à l' inactivation, des récepteurs 5-HT 2B et/ou 5-HT 2C. 9. Utilisation de la 8'-hydroxydihydrcergotamine selon l'une quelconque des revendications précédentes pour le traitement de fond de la migraine par action combinée de cette molécule en association avec au moins zo un principe actif parmi des bêtabloquants, anti-dépresseurs, le méthysergide, l' oxetorone, le pizotifène, la flunarizine, l ' indoramine et l' acide acétylsalicylique. 10. Utilisation de la 8'dihydroxydihydroergotamine pour le traitement de fond de la migraine, selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le médicament fabriqué est administré par l'une au moins des voies parmi la voie orale et la voie transdermique. 11. Utilisation de la 8'-hydroxydihydroergotamine selon la revendication 1, pour un traitement de crise de la migraine par action agoniste vis-àvis des récepteurs 5-HT 1B et 5-HT 1D vasculaires et/ou neuronaux, en s'opposant à la vasodilatation des vaisseaux méningés et/ou en déclenchant un frein à la libération de CGRP et de SP. 12. Utilisation de la 8'-dihydroxydihydroergotamine pour le traitement de crise de la migraine selon la revendication 11, caractérisée en ce que la molécule 8'-hydroxyhydroergotamine est utilisée en association avec l'un parmi les produits suivants: dihydroergotamine, triptans, antalgiques simples, antalgiques opiacés, anti-inflammatoires non stéroïdiens, caféine. 13. Utilisation de la 8'-hydroxydihydroergotamine selon la o revendication 11 ou la revendication 12, pour le traitement de crise de la migraine, caractérisée en ce que le médicament fabriqué est administré par l'une au moins des voies parmi la voie orale, la voie intranasale ou la voie