Brevet FR2844452A1 — publié le 20040319

UTILISATION D'INHIBITEURS SPECIFIQUES DE TYROSINE KINASES POUR L'IMMUNOMODULATION. L'invention concerne l'utilisation d'inhibiteurs de tyrosine kinases pour l'immunomodulation, notamment pour réguler l'activité de cellules immunitaires chez des patients. Elle concerne plus particulièrement l'utilisation d'inhibiteurs spécifiques de tyrosine kinases pour la préparation d'une composition destinée à la prévention ou au traitement d'infections virales, de tumeurs NK sensibles, de maladies immunitaires et/ou du choc septique chez un mammifère. Les inhibiteurs concernés sont plus particulièrement des inhibiteurs des tyrosine kinases c-abl (bcr/abl), c-kit et/ou de la tyrosine kinase associée au récepteur du PDGF. L'invention décrit également des compositions comprenant un tel inhibiteur, en combinaison avec d'autres agents actifs, notamment des agents capables de potentialiser l'effet de l'inhibiteur. L'invention est utilisable de manière préventive ou curative, in vivo ou ex vivo. Les tyrosine kinases sont des enzymes clés du contrôle positif de la multiplication cellulaire. Fréquemment, des mutations de proto-oncogènes en oncogènes sont dues justement à des mutations du domaine kinase rendant l'activité tyrosine kinase constitutive et non régulable. C'est notoirement le cas dans la Leucémie Myéloïde chronique (LMC), où la translocation (9;22) aboutit à l'expression d'une protéine de fusion bcr-abl qui possède une activité tyrosine kinase permanente. Il a été clairement démontré que cette activité tyrosine kinase constitutive est le primum movens de la LMC. Dans les tumeurs stromales gastro-intestinales (GIST), tumeurs originaires de la cellule interstitielle de Cajal (CD34+, c-kit+, desmin-, S-100-), des mutations au niveau du proto-oncogène c-kit (21-88% mutations ponctuelles ou délétions au niveau du domaine juxtamembranaire -exon 11 >exon 9 ou 13-) sont également responsables de la pathogénie moléculaire (Hirota S, Science 279 (1998) 577, Miettinen M, Human Pathol 30 (1999) 1213). Ces mutations entraînent l'activation constitutive de c-kit, indépendante du ligand SCF. Compte tenu du rôle des tyrosine kinases dans le contrôle de la multiplication cellulaire, et de la mise en évidence de cancers liés à la présence d'une mutation dans ces protéines, il a été proposé d'utiliser des inhibiteurs spécifiques de ces enzymes dans le traitement de ces cancers particuliers. Notamment, il a été proposé d'utiliser des inhibiteurs spécifiques des tyrosine kinases c-kit ou c-abl pour traiter les tumeurs présentant une mutation dans les gènes correspondants (CML, GIST). L'inhibiteur le mieux caractérisé est le ST1571 (Novartis), également désigné Gleevec, Glivec ou Imatinib Mesylate. Le STI571 (STI pour Signal Transduction Inhibitor ) est un composé inhibiteur sélectif de certaines protéines tyrosine kinases : récepteur du PDGF, ABL tyrosine kinases (p210, p185, p190) et c-kit (CD117, récepteur du SCF) (Buchdunger E, J Pharmacol Exp Ther 295 (2000) 139 ; Druker BJ, Nat Med. 2 (1996) 561 ; MC, Blood 96 (2000) 925). Ce composé agirait sur les mécanismes de la transduction du signal. Le STI571 est indiqué dans le traitement de la Leucémie Myéloïde Chronique (LMC) à chromosome Philadelphie positif en crise blastique, en phase accélérée ou en phase chronique, en particulier chez des patients intolérants, réfractaires ou en échec au traitement par interféron alfa. Dans la LMC, le STI571 agit en bloquant la fixation de l'ATP sur la tyrosine kinase bcr/abl, inhibant ainsi son activité de phosphorylation du substrat principal CRKL. Cette action inhibitrice repose sur une compétition avec l'ATP au niveau de la poche de liaison de la protéine avec ce dernier. Les phases # et Il du ST1571 dans les GIST (van Oosterom, Lancet 358 (2001) 1421 ; Joensuu H, N Engl. J. Med. 344 (2001) 1052) ont aussi montré plus de 50% de réponses cliniques objectives, dont certaines spectaculaires dans leur rapidité d'installation. Contrairement au modèle de la LMC, dans le GIST, on ne connaît pas le site d'action moléculaire du STI571. Le STI 571 a également démontré in vitro une activité inhibitrice vis-à-vis de tyrosines kinases autres que celles des protéines de la famille abl, notamment vis-à-vis de celles de c-Kit et du PDGF. Kit est un récepteur de facteur de croissance dont un ligand est le Stem Cell Factor (SCF) ou facteur Steel, et possède un rôle capital dans la multiplication de la différenciation des précurseurs précoces hématopoïétiques. La présente demande résulte de la mise en évidence de propriétés immunomodulatrices particulièrement remarquables et inattendues des inhibiteurs de tyrosine kinases. La présente demande montre en particulier que, de manière surprenante, des inhibiteurs spécifiques de tyrosine kinase, tels le ST1571, sont capables d'agir sur l'activité des cellules dendritiques, et de modifier leurs propriétés. L'invention montre notamment que de tels composés permettent de moduler l'activité des cellules dendritiques immatures pour induire l'activation de cellules NK, in vitro et in vivo. L'invention montre aussi que de tels composés sont également capables d'inhiber la maturation des cellules dendritiques induite par le LPS et, de ce fait, de limiter la réponse inflammatoire. Ces résultats sont totalement inattendus dans la mesure où aucune activité immunomodulatrice pour de tels inhibiteurs n'avait été envisagée antérieurement. Cette activité est également très surprenante puisqu'elle est effective sur des cellules ne présentant pas nécessairement une mutation dans un récepteur associé à une tyrosine kinase. Cette activité est également surprenante de par son amplitude, puisque, comme cela est illustré dans les exemples, l'utilisation in vivo de tels composés permet d'aboutir à une activation des cellules NK chez 30 à 56% des malades atteints de GIST. La mise en évidence des propriétés immuno-modulatrices de ces inhibiteurs spécifiques ouvre de nouvelles applications thérapeutiques non envisagées jusqu'à présent pour ces composés, et permet également de potentialiser ou optimiser leurs propriétés. En particulier, les nouvelles propriétés biologiques de ces inhibiteurs permettent, pour la première fois, d'envisager leur utilisation pour traiter de multiples cancers sensibles aux NK, des cancers devenus secondairement résistants aux ST1571, de traiter des cancers qui ne comportent pas la mutation c-abl, c-kit ou PDGF-R, de traiter des maladies infectieuses ou de réduire l'inflammation. En montrant l'action des inhibiteurs sur les cellules dendritiques, l'invention permet également de potentialiser fortement l'effet thérapeutique de ces composés en les combinant par exemple à des facteurs de croissance des cellules dendritiques. La présente invention offre donc de nouvelles approches efficaces dans le traitement de cancers, maladies infectieuses ou immunes, basées sur une modulation originale et efficace de la réponse immune. Un premier objet de l'invention réside ainsi dans l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase pour moduler l'activité de cellules dendritiques in vivo, ex vivo ou in vitro, notamment dans l'utilisation d'un inhibiteur des tyrosine kinases c-abl, bcr/abl, c-kit et/ou de la tyrosine kinase associée au récepteur du PDGF, pour la préparation d'une composition destinée à moduler l'activité des cellules dendritiques chez un mammifère. Un autre objet de l'invention réside dans l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase pour stimuler l'activité de cellules NK in vivo, in vitro ou ex vivo. Un autre objet de l'invention réside dans l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase pour le traitement préventif ou curatif de tumeurs ou d'infections virales, notamment de tumeurs NK sensibles. Un autre objet de l'invention réside dans l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase pour augmenter l'activité NK chez des patients atteints de cancer ou d'infection virale. Un autre objet de l'invention réside dans l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase pour réduire la réponse inflammatoire, notamment chez des sujets atteints de pathologies inflammatoires chroniques ou de maladies autoimmunes. Un autre objet de l'invention réside dans l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase pour favoriser la GVL lors de greffes allogéniques. L'invention concerne également des méthodes de traitement préventif ou curatif de pathologies cancéreuses, infectieuses, immunes ou inflammatoires, comprenant l'administration à un patient (i) d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase, seul ou en association avec un ou plusieurs autres principes actifs, ou (ii) de cellules dendritiques (de préférence autologues) traitées avec un tel composé. L'invention concerne aussi une méthode pour moduler l'activité de cellules dendritiques chez un patient, comprenant l'administration, audit patient, d'une quantité efficace d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase. L'invention concerne aussi une méthode pour stimuler l'activité de cellules NK chez un patient, comprenant l'administration, audit patient, d'une quantité efficace d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase ou de cellules dendritiques traitées par un tel inhibiteur. L'inhibiteur de tyrosine kinase peut être utilisé seul ou, de préférence, combiné à un agent potentialisant. A cet égard, l'invention concerne également une composition comprenant un inhibiteur spécifique de tyrosine kinases et un agent potentialisant, choisi de préférence parmi un facteur de croissance des cellules dendritiques et un facteur de (co-)stimulation des cellules NK. Elle concerne également une composition comprenant des cellules dendritiques, notamment immatures, traitées par un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase. Elle concerne également une association thérapeutique entre un inhibiteur spécifique de tyrosine kinases et un agent potentialisant, choisi de préférence parmi un facteur de croissance des cellules dendritiques et un facteur de (co- )stimulation des cellules NK, en vue d'une utilisation séparée, simultanée ou espacée dans le temps. Elle concerne par ailleurs une trousse comprenant un inhibiteur spécifique de tyrosine kinases et un agent stimulant la production de cellules dendritiques. L'invention peut être utilisée dans les domaines de l'immunologie, l'immunothérapie ou de la biotechnologie médicale. Comme indiqué ci-après, l'utilisation de ces inhibiteurs en tant qu'agents immuno-modulateurs est variée. Ils trouvent des applications à la fois in vitro, ex vivo et in vivo, pour contrôler l'activité des cellules dendritiques ou des cellules NK, pour réguler la réponse immune ou inflammatoire dans différents contextes pathologiques. L'invention est utilisable chez tous les mammifères, en particulier chez l'être humain, même si un usage chez l'animal est également possible. Le terme traitement désigne le traitement préventif ou curatif. Inhibiteurs spécifiques de tyrosine kinase La présente demande concerne donc l'utilisation d'inhibiteurs spécifiques de tyrosine kinase comme immuno-modulateurs. Au sens de l'invention, on entend par inhibiteurs spécifiques de tyrosine kinase des composés capables d'inhiber préférentiellement l'activité des tyrosine kinases c-abl, bcr/abl, c-kit et/ou de la tyrosine kinase associée au récepteur du PDGF. L'inhibition peut être partielle ou totale. Il peut s'agir de composés capables d'inhiber l'activité de la forme mutée des tyrosines kinases identifiées ci-dessus, et notamment la forme mutée active de manière constitutive, ou bien d'inhiber la forme non mutée ou surexprimée dans des cellules normales non transformées comme les cellules dendritiques. Les composés sont de préférence sans effet substantiel direct sur d'autres tyrosine kinases. Les composés inhibiteurs préférés de l'invention sont des molécules chimiques de la famille des pyrimidines, telles que les composés décrits dans les demandes ou brevets n W001/64200, W099/03854, EP 0564 409 et US 6,258,812. Il peut également s'agir des composés pyrido[2-3a]-pyrimidine décrits par Wisniewski D. et al. (Cancer. Res. 62 (2002) 4244). Un inhibiteur préféré est un composé de la famille des 2phenylaminopyrimidines, tel que le composé ST1571 ou tout dérivé ou analogue de celui-ci (un exemple de dérivé est le composé AB1003). Le STI571 est un inhibiteur spécifique des protéines tyrosine kinases mentionnées ci-avant, sans effet substantiel sur le récepteur de l'EGF, FLT1 et FLT3. La demi-vie du ST1571 est de 16 heures chez l'homme, et ce composé est métabolisé par le cytochrome P450 (CYP3A4, CYP2D6). Ce composé est globalement bien toléré par l'homme. D'autres inhibiteurs spécifiques des tyrosine kinases peuvent être utilisés dans le cadre de l'invention, même si on préfère ceux ayant une activité sélective pour les tyrosine kinases c-abl, bcr/abl, c-kit et/ou associée au récepteur du PDGF. De même, des inhibiteurs peuvent être identifiés ou sélectionnés in vitro ou en tests cellulaires, en mesurant la liaison ou l'activité de composés test sur la tyrosine kinase isolée ou une cellule la contenant. Activation des Cellules NK - Production de cellules DAK ( DC-Activated Killer ) et effets thérapeutiques Un objet particulier de l'invention réside dans l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase pour la préparation d'une composition destinée à activer les cellules NK d'un sujet. L'invention montre en effet que de tels composés sont capables d'augmenter la fonction NK chez des patients, in vivo, conduisant à une action anti-tumorale ou anti-infectieuse puissante. L'invention montre que cette augmentation est liée à une modulation des cellules dendritiques, leur conférant la capacité d'activer les cellules NK. Les cellules tueuses naturelles ( cellules NK ) sont une population de lymphocytes qui représentent une ligne de défense très précoce contre les virus et les cellules tumorales. Les cellules NK peuvent être caractérisées par la présence des marqueurs CD56 et CD16, et par l'absence du marqueur CD3. Les cellules NK ont notamment été impliquées dans l'immunité anti-tumorale non spécifique d'antigènes, pour la prévention d'établissement de tumeurs primitives ou métastatiques chez l'hôte immunocompétent ou immunosupprimé. Les cellules NK semblent en particulier avoir un rôle clef contre les cellules tumorales ou les variants CMH classe # négatifs. Le rôle des cellules NK dans l'immunosurveillance anti-tumorale a été largement documenté, chez la souris (Diefenbach, Nature 413 (2001) 165) comme chez l'homme (A. Velardi, Science 2002). Le rôle des cellules NK dans la prévention des infections virales est également très documenté, notamment pour les virus du groupe des Herpes Viridae (C. Biron, N.EngI.J.Med. 320 (1989) 1731 ; Welsch et al., J. Exp. Med. 2001). En raison de leurs propriétés cytotoxiques non-spécifiques d'antigène et de leur efficacité, les cellules NK constituent donc une population de cellules effectrices particulièrement intéressante pour le développement d'approches d'immunothérapie adoptive des cancers ou des maladies infectieuses. A cet égard, dans certaines indications comme les patients porteurs de lymphomes malins intensifiés, l'administration de cellules NK associées à de faibles doses d'IL-2 a donné des résultats prometteurs en situation adjuvante. Les cellules NK ont également été utilisées pour le traitement expérimental de différents types de tumeurs et certaines études cliniques ont été initiées (Kuppen et al. Int. J. Cancer. 56 (1994) 574; Lister et al., Clin. Cancer Res. 1 (1995) 607; Rosenberg et al., N. Engl. J. Med. 316 (1987) 889). Il a également été montré que les cellules NK favorisent la GVL dans les greffes de moelle allogénique. En outre, ces cellules peuvent également être utilisées in vitro pour la lyse non spécifique de cellules n'exprimant pas de molécules du CMH de classe-1 et, plus généralement, de toute cellule sensible aux cellules NK. La possibilité d'activer in vivo les cellules NK d'un patient offre donc de multiples avantages et applications thérapeutiques. Les méthodologies d'activation des cellules NK décrites dans l'art antérieur sont essentiellement dépendantes de l'utilisation de cytokines. Les cellules NK sont activables par des cytokines in vitro ou en administration systémique in vivo (IL- 2, IL-12, IFN type 1 ou II, IL-15 en association ou non avec IL-1b, IL-18, IL-21 ou des chemokines). Cependant, le rôle physiopathologique de ces cytokines pour l'activation NK in vivo n'a jamais été démontré. De plus, l'application clinique des cytokines est limitée, notamment en raison des coûts de préparation de ces dernières, du caractère toxique de nombre d'entre elles, qui ne peuvent être utilisées dans des applications in vivo, ou encore du caractère non spécifique de nombreuses cytokines, dont l'emploi in vivo risque de s'accompagner de nombreux effets indésirables. En outre, la fonction natural killing étant souvent altérée chez les patients porteurs de tumeurs, la possibilité de prélever ces cellules en vue de leur activation ex vivo peut être considérablement réduite. Les inventeurs ont précédemment démontré que les cellules dendritiques (CD) étaient des cellules électivement capables d'activer les cellules NK in vitro et in vivo, conduisant à des effets anti-tumoraux (W099/45102, Fernandez et al. Eur. Cyt. Net. 13 (2002) 17-27 ; Zitvogel L . JEM 195 (2002) F9-14). Les inventeurs ont maintenant découvert que, de manière surprenante, les inhibiteurs spécifiques de Tyrosine Kinases, tels le ST1571, induisent in vivo ou in vitro, une modification phénotypique des cellules dendritiques qui leur confère le pouvoir d'activer des cellules NK. Dans ce cadre, les inventeurs ont notamment mis en évidence que l'administration à un mammifère d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase induit une augmentation très prononcée de la fonction et de l'activité des cellules NK. Ils ont par ailleurs observé que des inhibiteurs de tyrosine kinases, de type STI571, sont capables d'activer les fonctions NK chez des patients porteurs de GIST. Ainsi, chez des patients GIST traités par le ST1571, les cellules NK sont activées chez 30 à 56% des patients et ces données biologiques d'activation des NK semblent corréler avec les réponses cliniques obtenues sous STI571 (avec notamment, aucune résistance primaire au STI571 chez les répondeurs biologiques). Ces résultats démontrent donc, in vivo, chez l'homme, que des inhibiteurs de tyrosine kinases, tels que le STI571, présentent des activités immunomodulatrices en plus de leurs fonctions inhibitrices des activités tyrosine kinase déjà décrites. Ces résultats permettent donc d'élargir les applications thérapeutiques de ces molécules et d'optimiser leurs effets. La présente invention concerne ainsi l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase pour la préparation d'une composition destinée à augmenter l'activité NK chez des patients atteints de cancer ou d'infection (virale, bactérienne ou parasitaire). Un objet particulier de l'invention réside dans l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase c-abl, bcr/abl, c-kit et/ou associée au récepteur du PDGF pour la préparation d'une composition destinée à la prévention ou au traitement des infections, notamment virales. Un autre objet particulier de l'invention réside dans l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase c-abl, bcr/abl, c-kit et/ou associée au récepteur du PDGF pour la préparation d'une composition destinée à la prévention ou au traitement des tumeurs NK sensibles non liées à une mutation constitutive dans une tyrosine kinase, ou résistantes au STI571. Elle concerne également l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase pour la préparation d'une composition destinée à induire chez un mammifère une modification phénotypique des cellules dendritiques et permettre ou augmenter l'activation des cellules NK. Elle concerne par ailleurs une méthode pour induire une modification phénotypique des cellules dendritiques et/ou pour activer les cellules NK, comprenant la mise en contact in vitro, in vivo ou ex vivo de cellules dendritiques, seules ou co-cultivées avec des cellules NK, avec un inhibiteur de tyrosine kinase c-abl, bcr/abl, c-kit et/ou associée au récepteur du PDGF. L'invention concerne également une méthode de traitement préventif ou curatif d'un patient atteint d'un cancer ou d'une infection virale, comprenant l'administration d'une quantité d'inhibiteur spécifique de tyrosine kinase efficace pour activer la fonction NK chez le patient. L'invention concerne par ailleurs une méthode pour activer les cellules NK chez un sujet, comprenant l'administration au sujet d'un inhibiteur de tyrosine kinases c-abl, bcr/abl, c-kit et/ou de la tyrosine kinase associée au récepteur du PDGF. Le sujet est de préférence un être humain mais il peut également s'agir d'un animal. L'invention peut être utilisée également pour augmenter la survie de populations lymphocytaires NK, in vitro, ex vivo ou in vivo, ainsi que pour augmenter, le cas échéant, la prolifération de sous-population(s) lymphocytaire(s) NK. Pour la mise en #uvre de l'invention, l'inhibiteur spécifique de tyrosine kinase peut être utilisé seul. Néanmoins, dans une variante préférée et particulièrement efficace, l'inhibiteur est utilisé de façon combinée à un autre agent actif. Cet agent actif peut être de natures diverses, mais il s'agit préférentiellement d'un agent potentialisant l'action de l'inhibiteur, comme notamment un facteur de croissance des cellules dendritiques ou un facteur de (co-)stimulation des cellules NK. En effet, l'invention montre que des inhibiteurs spécifiques de tyrosine kinase peuvent permettre de stimuler in vivo la fonction NK chez des sujets, et que cette stimulation implique une modification phénotypique des cellules dendritiques. En combinant plusieurs agents actifs sur la production, sur la modification des cellules dendritiques et/ou sur l'activation des NK, un effet biologique plus puissant peut donc être obtenu. En particulier, en combinant un facteur de croissance des cellules dendritiques et un inhibiteur selon l'invention, il est possible de produire une stimulation des fonctions NK suffisante pour obtenir un effet thérapeutique, même vis-à-vis de cellules pathologiques résistantes à l'action de l'inhibiteur seul. Dans une variante préférée de l'invention, on utilise donc un inhibiteur tel que défini ci-dessus en combinaison avec un agent potentialisant. Le terme combinaison indique que les deux agents peuvent être utilisés de manière simultanée ou espacée dans le temps, dans la mesure où leurs effets biologiques sont combinés in vivo. Les agents peuvent donc être conditionnés simultanément ou de manière séparée, et administrés de manière concomitante ou décalée dans le temps. Dans un premier mode de réalisation, l'agent potentialisant est capable d'amplifier les cellules dendritiques, c'est-à-dire d'augmenter leur différentiation, leur croissance ou leur activité. Il s'agit préférentiellement d'un facteur de croissance des cellules dendritiques, avantageusement choisi parmi le Flt3Ligand ( Flt3L ) décrit par Lyman S. D. et al. (Blood 83 (1994) 2795-2801) et par Maraskovsky E. et al. (J. Exp. Med. 184 (1996) 1953-1962), le GM-CSF, l'interleukine-4, l'interleukine-13 et leurs dérivés ou analogues. Il peut s'agir notamment de la progénipoiétine (ProGP4, molécule de fusion entre le G-CSF et le Flt3L), d'une fusion GM-CSF/IL-4, etc. Cet agent peut être utilisé de façon simultanée ou décalée dans le temps par rapport à l'inhibiteur des tyrosines kinases. Dans un autre mode de réalisation, l'agent potentialisant est un facteur de costimulation des cellules NK, et notamment toute lymphokine ou cytokine susceptible d'activer ou de favoriser l'activation des cellules NK. On peut citer par exemple l'IL-2, l'IL-12, l'IL-15, l'interféron de type I, etc. Dans un mode de réalisation particulier, on utilise un inhibiteur tel que défini cidessus en combinaison avec un facteur de croissance des cellules dendritiques et/ou un facteur de co-stimulation des cellules NK. Une combinaison particulièrement préférée comprend l'inhibiteur et le Flt3L (ou un variant ou analogue de celui-ci). A cet égard, un autre objet de l'invention réside également dans une composition comprenant un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase tel que défini ci-dessus et un agent potentialisant, choisi de préférence parmi un facteur de croissance des cellules dendritiques et un facteur de co-stimulation des cellules NK. L'agent potentialisant est choisi à titre spécifique parmi les cytokines ou lymphokines activant les cellules NK ou parmi le Fit 3L, le GMCSF, l'IL-4, l'IL-13 et leurs dérivés ou analogues (ProGP4, GM/IL-4). Les compositions selon l'invention peuvent naturellement comprendre en outre tout véhicule ou excipient acceptable sur le plan pharmaceutique, tel que des solutés isotoniques, tamponnés des solutions salines, agents stabilisants, etc. Les applications des compositions et méthodes de l'invention sont nombreuses, de par le spectre d'action large des cellules NK. Elles incluent préférentiellement la prévention ou le traitement de différentes pathologies telles que les cancers ou les maladies infectieuses, notamment d'origine virale ou résultant d'autres pathogènes, et les immunodéficiences congénitales NK ou apparentées (déficits immunitaires conduisant à une mutation dans le gène IFNy-R, IL-12R...). Pour les applications dans le domaine du traitement des cancers, les compositions ou méthodes selon l'invention sont en particulier utilisables pour retarder ou supprimer la croissance de tumeurs, induire une régression de la taille des tumeurs, ralentir ou prévenir la formation de métastases, etc., notamment des tumeurs exprimant faiblement des molécules de classe 1 du CMH ou possédant des ligands pour des récepteurs activateurs de NK ou d'autres cellules pathologiques. Elles permettent également de prévenir l'établissement de tumeurs primitives ou métastatiques chez un mammifère immunocompétent ou immunosupprimé pour les fonctions lymphocytaires T. L'invention peut être utilisée pour prévenir ou traiter toute tumeur NK sensible, notamment celles choisies parmi les carcinomes, les mélanomes, les leucémies, les lymphomes et les sarcomes. L'invention est particulièrement adaptée au traitement préventif ou curatif des mélanomes, du cancer du rein, des sarcomes du tube digestif, de la leucémie myéloïde chronique (LMC) et des neuroblastomes. Il s'agit plus particulièrement du traitement préventif de cancers ne présentant pas de mutation dans une tyrosine kinase, ou présentant une mutation non constitutive, ou de tumeurs résistantes in vitro au STI571. Dans le cas de tumeurs NK sensibles présentant une mutation dans une tyrosine kinase, l'invention permet d'améliorer l'efficacité thérapeutique en utilisant une thérapie de combinaison avec un agent potentialisant, tel que mentionné ci-avant. A cet égard, l'invention concerne spécifiquement l'utilisation d'un inhibiteur de tyrosine kinase tel que défini ci-avant, en combinaison avec un agent potentialisant, pour la préparation d'une composition destinée au traitement préventif ou curatif de la LMC ou du GIST. Elle concerne également une méthode de traitement correspondante. L'invention concerne également l'utilisation d'un inhibiteur de tyrosine kinase tel que défini ci-avant, en combinaison avec un agent potentialisant, pour la préparation d'une composition destinée au traitement préventif ou curatif d'une tumeur résistante au STI571. Elle concerne également une méthode de traitement correspondante. Dans le domaine des pathologies infectieuses, l'invention peut être utilisée pour prévenir ou traiter en particulier une infection virale causée par un virus du groupe des Herpes Viridae ()'Herpes virus type 1 ou 2, le virus d'Epstein-Barr, le cytomegalovirus, le Kaposi sarcoma-virus, HSV-6, etc.), le VIH, le Vaccinia virus, le MVM, l'ECMV ou le Papilloma Virus. Elle peut également être utilisée pour traiter des infections microbiennes ou parasitaires. L'invention peut également être mise en #uvre en utilisant une population de cellules dendritiques traitées ex vivo par un inhibiteur de tyrosine kinase tel que défini ci-avant. L'injection de cellules dendritiques ainsi traitées, de préférence autologues, permet également d'induire une activation de la fonction NK d'un sujet. Dans ce contexte, l'invention concerne également une composition comprenant des cellules dendritiques traitées par un inhibiteur des tyrosines kinases telles que mentionnées précédemment. Elle concerne également une composition comprenant un inhibiteur de tyrosine kinase tel que défini précédemment et des cellules dendritiques et/ou des cellules NK. Selon un aspect particulier de l'invention, la composition comprend un inhibiteur de tyrosine kinase tel que défini précédemment et des cellules dendritiques. Selon un autre aspect, la composition comprend un inhibiteur de tyrosine kinase tel que défini précédemment, des cellules dendritiques et des cellules NK. Elle concerne également un procédé de préparation ou de traitement in vitro ou ex vivo de cellules dendritiques, comprenant la mise en contact de cellules dendritiques (ou de leurs précurseurs) en présence d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase. Les cellules obtenues peuvent être collectées et conditionnées en vue d'une utilisation immédiate ou future. Les cellules dendritiques sont typiquement traitées par incubation en présence de l'inhibiteur, par exemple en présence de STI571, à raison de 10-6 à 10-8 molaire environ. On préfère utiliser des cellules dendritiques non matures. De manière préférée, des cellules dendritiques humaines CD34+ sont mises en présence de SCF, Flt3L, GM-CSF et TNFa pendant 7 à 15 jours environ (de préférence 12 jours), puis en présence de STI571 pendant 12 à 48 heures environ (de préférence 24h environ). Il est entendu que les conditions précises peuvent être adaptées par l'homme du métier. Les cellules ainsi obtenues présentent la capacité d'activer les cellules NK, et peuvent être conditionnées en vue de leur utilisation thérapeutique, ou utilisées pour activer des cellules NK in vitro ou ex vivo, notamment par co-culture. Dans ce contexte, une activation optimale des cellules NK est observée par exemple après co-culture pendant une période comprise entre 20 à 48 heures environ. Le ratio de co-culture est idéalement d'une cellule dendritique pour 25 à 125 cellules NK environ. Pour une utilisation in vitro ou ex vivo, l'invention peut être mise en #uvre dans tout dispositif approprié à la culture cellulaire, de préférence en conditions stériles. Il peut s'agir notamment de plaques, boites de culture, flasques, fioles, poches, etc. La culture ou la co-culture est par ailleurs réalisée dans tout milieu adapté à la culture des cellules dendritiques et/ou des cellules NK. Il peut s'agir plus généralement de milieux de culture disponibles dans le commerce pour la culture de cellules de mammifères, tels que par exemple le milieu RPMI, le milieu DMEM, le milieu IMDM ou des milieux GBEA (AIMV, X-VIVO), etc. Dans une variante particulière, l'activation des cellules NK est réalisée par coculture in vitro ou ex vivo de cellules dendritiques immatures avec des cellules NK, en présence d'un inhibiteur des tyrosine kinases c-abl, bcr/abl, c-kit et/ou de la tyrosine kinase associée au récepteur du PDGF. Dans un autre mode de réalisation particulier de l'invention, l'activation des cellules NK est réalisée par traitement in vitro ou ex vivo de cellules dendritiques immatures en présence d'un inhibiteur des tyrosine kinases c-abl, bcr/abl, de ckit et/ou de la tyrosine kinase associée au récepteur du PDGF, puis co-culture des cellules dendritiques ainsi obtenues avec des cellules NK. Dans un autre mode de l'invention, l'activation des cellules NK est réalisée par traitement in vitro ou ex vivo de cellules dendritiques immatures en présence d'un inhibiteur des tyrosine kinases c-abl, bcr/abl, de c-kit et/ou de la tyrosine kinase associée au récepteur du PDGF, puis administration des cellules dendritiques ainsi obtenues à un sujet. Lorsque les cellules NK ou les cellules dendritiques ont ainsi été activées, il est possible soit de séparer les cellules NK des cellules dendritiques, soit de récolter directement la co-culture cellules NK/CD. Le terme activation des cellules NK au sens de l'invention désigne plus particulièrement la régulation positive précoce du CD69, surtout sur la population CD56bright des NK (celle qui s'expand chez les patients porteurs de GIST traités par STI571), l'augmentation de la production d'IFNy et/ou de l'activité cytotoxique des cellules NK. Ces trois paramètres peuvent être aisément mesurés selon les techniques connues de l'homme du métier. Le terme cellules NK activées désigne au sens de l'invention des cellules NK présentant au moins une des propriétés mentionnées ci-dessus. Il est aussi possible de détecter une activation NK par la capacité de ces cellules à libérer de façon prolongée de forts taux d'IFNy en présence de " CD immatures " et, éventuellement, en présence de LPS. Dans les compositions selon l'invention qui comprennent des cellules dendritiques et/ou des cellules NK, les populations cellulaires sont préférentiellement autologues, c'est-à-dire issues d'un même organisme. Elles peuvent également être constituées de cellules allogéniques. En outre, il peut également s'agir de cellules dendritiques sensibilisées à un ou plusieurs antigènes ou au contraire de cellules naïves . Ces compositions sont avantageusement constituées de populations cellulaires isolées, c'est-à-dire que chacune des populations cellulaires est composée au moins de 10%, de préférence au moins 30%, notamment au moins 50% du type cellulaire correspondant (NK ou dendritique). Ces compositions peuvent être conditionnées dans tout dispositif adapté tel que poches, fioles, ampoules, seringues, flacons, etc., et peuvent être conservées (au froid) ou utilisées extemporanément, comme décrit plus loin. Avantageusement, ces compositions comprennent de 104 à 109 cellules dendritiques traitées, de préférence de 105 à 108 environ. L'administration de l'inhibiteur ou des cellules (dendritiques ou NK) peut être réalisée par toute technique et toute voie connue, et notamment par injection ou prise orale. Il peut s'agir par exemple d'une injection sous cutanée, systémique (intra-veineuse, intra-artérielle, intra-péritonéale) ou intra-musculaire. Lorsque cela est possible, l'inhibiteur est avantageusement administré par voie orale. L'injection est de préférence une injection locale ou régionale, notamment une injection au site ou proche du site à traiter, notamment proche d'une tumeur. Les injections sont généralement réalisées sur la base de doses de cellules pouvant aller de 104 à 109 cellules dendritiques, de préférence comprises entre 105 et 107 inclus. Il est possible d'effectuer le transfert passif de cellules dendritiques par des administrations répétées, par exemple 1 à 2 administrations par semaine pendant plusieurs mois. Le composé inhibiteur peut être administré à des doses variées, comprises par exemple entre 200 et 800 mg per os/jour, de préférence entre 400 mg et 600 mg per os/jour, notamment en cas d'association avec un agent potentialisant (par exemple Flt3L sc 10-50 ug/kg pendant 10-20 jours). L'utilisation de l'inhibiteur in vitro ou ex vivo sur les cellules dendritiques avant transfert passif est réalisée préférentiellement à la dose de 10-6M ou 10-8M. Des administrations répétées sont bien entendu possibles. En outre, le protocole d'administration peut être adapté par l'homme du métier selon les situations (préventif, curatif, tumeurs isolées, métastases, infection importante ou localisée, etc. ). ACTION ANTI-INFLAMMATOIRE Les demandeurs ont également découvert que des inhibiteurs spécifiques de tyrosine kinase, tels que définis ci-avant, permettaient de bloquer la maturation des cellules dendritiques induite par un agent microbien tel que le LPS ou par un signal Toll-like 4 . Cette propriété immuno-modulatrice des inhibiteurs permet d'envisager une modulation négative de la réponse inflammatoire ou de la réponse immune dans différents contextes pathologiques. En effet, la maturation des cellules dendritiques participe activement au développement de la réaction inflammatoire, et la possibilité de contrôler cette propriété offre donc de nouvelles approches thérapeutiques dans le traitement ou le contrôle de l'inflammation. L'invention concerne donc une méthode pour prévenir ou inhiber la maturation des cellules dendritiques, notamment celle induite par une toxine telle le LPS, comprenant la mise en contact in vitro, ex vivo ou in vivo des cellules dendritiques avec un inhibiteur des tyrosine kinases c-abl, bcr/abl, de c-kit et/ou de la tyrosine kinase associée au récepteur du PDGF. L'invention concerne également l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase tel que défini ci-avant pour le traitement préventif ou curatif des maladies immunitaires et/ou inflammatoires chez un mammifère. L'invention concerne également l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase tel que défini ci-avant pour la préparation d'une composition destinée au traitement de pathologies inflammatoires, notamment chroniques, telles que l'athérosclérose, la maladie de Crohn, l'asthme (chronique), la polyarthrite rhumatoïde, la dermatite (chronique), le choc septique ou endotoxinique, etc. Dans ce contexte, le terme traitement inclut également une réduction de la réponse inflammatoire, même partielle et/ou temporaire, conduisant à une amélioration de la qualité de vie des patients. L'invention concerne également l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase tel que défini ci-avant pour la préparation d'une composition destinée au traitement de pathologies auto-immunes. L'invention concerne également l'utilisation d'un inhibiteur spécifique de tyrosine kinase tel que défini ci-avant pour la préparation d'une composition destinée à la greffe allogénique. L'invention est particulièrement adaptée à l'amélioration des greffes de moelle allogénique. En effet, en stimulant l'activité NK, l'invention permet d'améliorer l'activité GVL ( graft versus Leukemia ), et donc le bénéfice thérapeutique. Mais de plus, en réduisant la maturation des cellules dendritiques et donc, potentiellement, l'activation de lymphocytes T cytotoxiques alloréactifs, l'inhibiteur permet en outre de réduire la GVHD ( Graft Versus Host Disease ) et ainsi d'améliorer la sécurité du traitement. L'invention peut donc être utilisée avantageusement pour traiter un hôte recevant un greffon de moelle allogénique, HLA non compatible. L'invention peut également être utilisée pour prévenir ou traiter des maladies immunitaires congénitales, telles qu'un déficit en récepteur à l'IL-12, un déficit en récepteur à l'IFNy, un déficit en chaîne gamma (IL-2Ry) commune des récepteurs aux cytokines (syndrome SCID). Pour ces différentes applications, les doses administrées et les modes d'administration décrits précédemment sont directement applicables. D'autres avantages de la présente invention apparaîtront à la lecture des exemples qui suivent, qui doivent être considérés comme illustratifs et non limitatifs. LEGENDE DES FIGURES Tableau 1 : Corrélation biologique entre STI571 et l'activation des NK. Nous avons étudié une cohorte de patients pris en charge à l'institut Gustave Roussy pour le traitement d'un GIST. Les NK des patients ont été purifiées par sélection négative à partir du sang périphérique. Les fonctions des cellules NK (sécrétion d'interféron gamma et cytotoxicité) ont été analysées après culture avec des cellules dendritiques allogéniques. Dans 14 cas, les prélèvements sont effectués avant l'introduction du STI 571 ;dans 31 cas, les prélèvements sont effectués pendant le traitement par STI 571. Une cohorte de 17 volontaires sains est étudiée selon les mêmes modalités. Les fonctions cytotoxiques sont rapportées en pourcentage de lyse spécifique d'une cible sensible à la lyse NK (K562). Les résultats sont rapportés sous forme d'une moyenne pour chaque groupe étudié. L'analyse des données est réalisée en utilisant des tests exacts de Fisher qui permettent de mettre en évidence les différences statistiquement significatives entre les groupes. Tableau 2 : Corrélation entre effets biologiques et cliniques du STI571. Les cellules NK activées par des cellules dendritiques matures (présence de LPS) ont la capacité de sécréter de l'interféron gamma. Nous avons défini cette production d'interféron gamma comme significative si l'on pouvait mesurer plus de 100 pg/mL dans les surnageants des cocultures. Les patients répondant à ce critère sont définis comme répondeurs biologiques. Une corrélation est établie entre ces patients et l'efficacité clinique du STI 571. La distribution des patients dont la maladie progresse sous STI 571 est étudiée en fonction de la réponse biologique. Aucun patient identifié comme répondeur biologique ne présente une maladie progressive sous STI 571, alors que 5 des 16 patients non répondeurs biologiquement, progressent cliniquement( p=0,042 ;Fisher exact test). Figure 1 : Suivi longitudinal de sept patients GIST sous STI571. Acquisition des fonctions NK. Concernant 7 patients, nous disposons des prélèvements et des mesures de la production d'interféron gamma. La figure 1 rapporte l'étude des fonctions NK avant et pendant le traitement par STI 571. Pour deux patients, nous avons mis en évidence une nette augmentation des cellules NK CD56bright (panel A). Pour les sept patients suivis, les sécrétions d'interféron gamma sont augmentées lors de l'exposition au STI 571 (panel B). Figure 2. Les cellules dendritiques incubées en présence de STI 571 sont capables d'activer les cellules NK. Des cellules dendritiques humaines sont générées à partir de cellules souches hématopoïétiques, en présence de GM-CSF et de TNFa, pendant 12 jours. Ces cellules dendritiques sont ensuite incubées avec du STI 571 pendant 24 heures. Nous rapportons deux expériences représentatives menées sur deux prélèvements différents (A et B). Les fonctions cytotoxiques NK sont étudiées par des tests de lyse utilisant des cibles marquées au chrome 51 et sensibles à la lyse NK (K562). Dans les deux cas, le STI 571 confère aux cellules dendritiques la capacité à activer les cellules NK. Figure 3 : Les cellules dendritiques incubées en présence de STI571 sont capables d'activer les cellules NK. Le STI 571 confère aux cellules dendritiques la capacité d'activer les cellules NK. Des cellules dendritiques d'origine murine, dérivées de moelle osseuse ou de rate sont pré-incubées avec du STI 571 à des doses croissantes puis cultivées avec des cellules NK. L'utilisation du STI 571 permet d'augmenter la sécrétion d'interféron gamma par les NK cultivés en présence de cellules dendritiques. De plus, il existe un effet dose entre les doses de STI 571 utilisées et l'effet biologique observé. L'expérience précédente est renouvelée en présence d'un inhibiteur de phosphorylation non spécifique (AG 957) et du STI 571. Cette expérience révèle que les résultats précédents sont spécifiques du STI 571. Figure 4. L'analogue du STI, AB1003, augmente la capacité des cellules dendritiques à activer les cellules NK. Les expériences précédentes sont reproduites en utilisant un analogue synthétique du STI 571, AB1003. Cette molécule confère également aux cellules dendritiques une fonction activatrice des cellules NK. Figure 5 : Activation in vivo de NK par injection de cellules dendritiques incubées en présence de STI571. Des cellules dendritiques murines sont pré-incubées avec du STI571 puis injectées, par voie sous cutanée, dans les membres inférieurs des souris. Les ganglions drainant sont recueillis et les fonctions des cellules NK analysées après purification. L'utilisation de cellules dendritiques pré-incubées avec du STI 571 permet l'activation in vivo des NK dans le ganglion drainant comme en atteste la présence de CD69 sur la membrane des NK étudiées. Figure 6 : Activation in vivo de NK par injection de STI571 et d'un facteur de croissance des cellules dendritiques. Des souris Nude sont traitées pendant 10 jours par des injections intrapéritonéales de Fit3L. Ceci permet le recrutement et la différenciation de précurseurs dendritiques. Le STI 571 est administré par gavage (per os), du J8 au J12. Les rates et les foies des souris sont ensuite prélevés pour purification des cellules NK. Les tests fonctionnels réalisés montrent une activation des cellules NK dans le groupe traité par l'association Flt3L+STI, au contraire des groupes contrôles(souris traitées par PBS IP, IL2 IP, PBS IP+ gavages de STI 571, Flt3-L IP+ gavages de PBS). Les panels A et B présentent l'analyse par cytométrie en flux de la présence du CD69 (marqueur membranaire d'activation) à la surface des cellules NK (DX5+), dans la rate et le foie des souris. Les panels C et D présentent les capacité de ces cellules NK, purifiées à partir des rates des souris de chaque groupe, à sécréter de l'interféron gamma après une phase de culture avec des cellules dendritiques. Le panel E représente l'étude des fonctions cytotoxiques des cellules NK de ces mêmes groupes, contre une cible NK sensible (YAC1) et selon deux ratios effecteur/cible (200/1 et 50/1). Figure 7 : Le STI571 bloque la maturation des DC par le LPS (Fig. 7A) et prévient le choc endotoxinique in vivo (Fig. 7B). Des cellules dendritiques sont générées à partir de moelle osseuse de souris C57BL6. Ces cellules dendritiques d'origine médullaire sont ensuite testées pour leur capacité à induire une prolifération des lymphocytes allogéniques (panel A). Les cellules dendritiques cultivées en GM-CSF et IL4 (BM-DC), activées par du LPS (BM-DC+LPS) ou par du STI 571 (BM-DC STI) ou par un inhibiteur non spécifique de phosphorylation (BM-DC AG), sont cultivées en présence de lymphocytes allogéniques pendant 5 jours. La prolifération des lymphocytes est évaluée par leur capacité à intégrer de la thymidine tritiée. Le STI ne stimule pas la prolifération des lymphocytes allogéniques. Son effet immunomodulateur s'avère spécifique de la population lymphocytaire NK. Cette capacité d'inhibition des signaux inflammatoires comme le LPS est également testée dans le modèle du choc endotoxinique. Des souris C57BL6 sont traitées par ingestion per os de STI 571 matin et soir (150mg/kg). Les groupes contrôles sont traités de la même manière, par ingestion de PBS. Au décours de 24 heures de traitement, on administre aux souris 1 mg de LPS par voie intrapéritonéale. Les gavages des souris avec du STI 571 ou du PBS sont poursuivis 48 heures. Matériels et Méthodes : Purification des cellules NK Les lymphocytes circulants périphériques (PBL) sont contenus dans la fraction non-adhérente des cellules mononucléées du sang périphérique après deux heures d'adhérence. Les cellules NK ont été isolées des PBL par sélection négative magnétique (MACS, NK cell isolation kit, Miltenyi biotec) utilisant des anticorps anti-CD3, anti-CD19, anti-CD14 , anti-CD36, anti-IgE couplés à un haptène, puis un marquage secondaire par un anticorps anti-haptène couplé à une microbille. La fraction négative a été obtenue après passage sur une colonne magnétique MidiMACS de type LS+NS+ (Miltenyi biotec ). La pureté de la fraction ainsi déplétée est évaluée par cytométrie de flux. Le phénotypage après purification des NK comprend les anticorps anti CD45, anti CD3, anti CD56. La pureté des NK CD45+ / CD3- / CD56 +, ainsi sélectionnés varie de 85 à 95%. Co-cultures DC/NK La méthode utilisée a initialement été décrite par Fernandez et al [18]. Les NK purifiés par sélection négative sont placés en culture dans des plaques 96 puits (105 NK/100 L/puits), fond U pendant 48 heures, selon 4 conditions : - seuls en milieu RPMI A' [Gibco, 10% de serum AB, 1% de sodium pyruvate 100mM (Gibco-BRL, France), 0,5% de pénicilline-streptomycine 10000Ul/mL-10000 g/mL (Gibco-BRL, France) et 1% de L-glutamine 200mM (100X, Gibco-BRL, France)]. seuls en milieu RPMI A' contenant 1000UI/ml d'interleukine 2. en coculture avec des cellules dendritiques (ratio de coculture DC/NK de 1/1, 1/10, 1/25 ou 1/125 selon). Evaluation de l'activation et des fonctions NK : Les fonctions NK (cytotoxicité, sécrétion d'IFNy, régulation positive du CD69) peuvent s'évaluer directement à partir du sang frais après purification sur colonnes, ou préférentiellement après réactivité avec des cellules dendritiques standardisées allogéniques en présence ou non de LPS 10 g/ml. Fonctions Cytotoxiques Les cellules NK sont utilisées comme effecteurs dans un test de cytotoxicité contre Daudi ou K562. Les cellules cibles sont marquées par du chrome 51 (100 Ci/106cellules) pendant 1 heure, puis lavées 2 fois. Elles ont ensuite été réparties à 2000 cellules par puits dans des plaques 96 puits à fond V. La libération maximale de chrome 51(Cr5i) est obtenue par l'adjonction de cétrimide (Sigma). Les cellules effectrices sont distribuées selon différents ratios effecteurs/cibles et maintenues à 37 C pendant 4 heures. Les surnageants sont prélevés. La cytotoxicité est évaluée par la libération prolongée spécifique de chrome 51 dans les surnageants (lecture par un compteur de radiation gamma : Topcount, Packard) : libération spécifique de Cr51=[libération de Cr51 de l'échantillon-libération spontanée de Cr51 par les cibles]/[libération maximale de Cr51-libération spontanée des cibles]. Sécrétion de cytokines Certaines cellules NK activées sécrètent de l'interféron y (IFNy). De même, les cellules dendritiques immatures allogéniques (batchs standardisés), mises en présence de cellules NK préalablement activées (par une cause classique (IL-2, IL-12, matures DC) ou non (GIST sous STI571)) sécrètent des ng de TNFa. Afin de doser ces cytokines, les surnageants des cocultures DC/NK sont analysés en dosage ELISA (Enzyme Linked Immunoabsorbant Assay- kit OptEIA IFNy et TNFa humain- Pharmingen). Les anticorps anti-IFNy et anti-TNFa sont ensuite incubés pendant une nuit à 4 C sur une plaque 96 puits maxisorb. Après lavage et saturation des anticorps par une solution d'Assay diluent , les échantillons sont incubés pendant 2 heures. La plaque est ensuite lavée en PBS/tween 20,0,05%. Un anticorps de détection dirigé contre un second épitope de l'IFNy ou du TNFa, couplé à la biotine permet de détecter ces cytokines. La révélation est effectuée par une réaction streptavidine biotine. La lecture de la densité optique est réalisée à 450 nm. Une correction est réalisée à 550 nm. Une gamme d'IFNy et de TNFa standardisée permet la conversion de la densité optique en pg/mL. Etude phénotypique des marqueurs d'activation Lorsque les cellules NK sont activées, elles peuvent exprimer à leur surface la molécule CD69 (lectine de type C). Afin d'évaluer la présence de ce marqueur d'activation, 5x104 à 1x105 cellules NK sont marquées pour analyse en cytométrie de flux. Les anticorps utilisés sont les anti-CD56, anti-CD3, anti CD69. Les contrôles isotypiques sont réalisés pour chaque manipulation. Mise en évidence de l'amplification élective de sous populations NK in vivo chez les GIST traités Après purification des NK périphériques des patients, un immunomarquage est effectué avec les Anticorps anti-CD3, CD56 et CD16. L'augmentation de la sous population CD16dim, CD56bright est mise en évidence, passant de 5% (pré-STI) à éventuellement 18% sous STI571. Exemple 1 : Mise en évidence de l'activation des cellules NK chez les patients GIST traités par STI571. Le sang et les tumeurs ont été obtenus auprès du CCPPRB, chez des patients GIST en phase Il placés sous STI 571. La fonction des cellules NK fraîchement extraites par déplétion négative (méthode Miltenyi) du sang circulant des patients porteurs de GIST traités (n=31) ou non (n=14) par STI571 (400 ou 600 mg/j depuis 2-4 ou 6 mois) ou de volontaires sains VS (n=17) a été évaluée. Les cellules NK ont été soumises à une incubation avec des cellules dendritiques immatures allogéniques standardisées en présence ou non de 10 g/ml LPS. Après 48hrs, un test de lyse des K562, DAUDI ou des CD immatures à divers ratios effecteurs/cibles ainsi qu'à un dosage d'IFNy et TNFa dans les surnageants de coculture (selon les procédés proches de ceux suggérés dans Gerosa et al. (JEM 195 (2002) 327) ou Piccioli et al. (JEM 195 (2002) 335). De façon intéressante, dans 30 à 55% des cas, les cellules NK des patients GIST sous STI571 présentent la capacité de produire l'IFNy et de déclencher l'activation des CD immatures (sécrétion de TNFa ng/ml) in vitro, au contraire des cellules NK de volontaires sains (VS) ou de patients GIST non traités (Tableau 1, Fig. 1). De telles activations NK après coculture avec les CD sont aussi reflétées en capacité lytique. L'étude longitudinale sur 7 patients montre par ailleurs clairement l'acquisition de l'activation NK après administration de ST1571 (Fig. 1). La corrélation entre l'effet biologique immunomodulateur et l'effet clinique du ST1571 est illustrée dans le Tableau 2, qui démontre que tous les patients répondant au traitement présentent des cellules NK activées. Dans une série préliminaire impliquant une quarantaine de cas, les inventeurs ont ainsi observé que le STI571 active les fonctions NK en présence de GIST et possède donc une activité immunomodulatrice en plus de ses fonctions inhibitrices des activités tyrosine kinases. Exemple 2 : Mise en évidence d'une action du STI571 sur les cellules dendritiques, pouvant rendre compte de l'activation des cellules NK Puisque les cellules dendritiques sont, au contraire des macrophages, des précurseurs myéloïdes ou lymphoïdes électivement capables d'activer les NK au repos, nous avons testé les capacités du STI571, administré à raison de 10-6 M, 10-8 M et 10-10 M, à moduler cette propriété. Les cellules dendritiques humaines dérivées des CD34+ en SCF, GM-CSF, TNFa qui n'activent pas les NK humaines, acquièrent fortement cette capacité lorsqu'elles sont incubées 24 heures de J12 à J13 avec le STI571 à 10-6M (Fig 2). Dans un système murin, la sécrétion d'IFNy par les NK est augmentée de 2 à 3 fois à un ratio CD : NK de co-culture de 1 :1. En revanche, alors qu'à un ratio de co-culture CD : NK de 1 :10, les CD non traitées n'activent plus les NK, la CDSTI571 possède encore fortement cette propriété. De plus, seul le ST1571 et non l'AG957 (Tyrphostin, un inhibiteur non spécifique des tyrosine kinases) induit l'activation des NK via les CD in vitro (Fig. 3). Ces données peuvent être reproduites en utilisant un analogue structural du STI 171, le AB1003 (Fig. 4). Ainsi, les cellules dendritiques ou précurseurs, humaines ou murines, sont la cible potentielle du STI571 in vivo chez les patients GIST sous ST1571. En effet, les demandeurs ont démontré que le STI571 n'active pas directement les NK in vitro. Exemple 3 : L'injection in vivo de cellules dendritiques traitées avec du STI571 induit une activation des cellules NK L'administration de CD in vivo permet de moduler l'activation des cellules NK des organes lymphoïdes (ganglions drainant si injectées en sous cutané, rate si injectées en intra veineuse). L'incubation pendant 24 heures des CD différenciées avec le STI571 avant l'injection in vivo permet de potentialiser le recrutement et l'activation NK in vivo (pourcentage de cellules Dx5+/CD3acquérant le CD69) (Fig. 5). Les expériences chez la souris démontrent que le STI571 augmente d'un facteur 10-30 la capacité des CD à entraîner la sécrétion d'IFNy par les NK au repos in vitro et à activer les NK in vivo. Exemple 4 : L'injection in vivo de STI571 et d'un facteur de croissance des CD induit une activation des cellules NK Les inventeurs ont combiné le STI571 au Flt3L (facteur de croissance hématopoïétique des CD in vivo) dans le but de tester si cette association pouvait conduire à l'activation des cellules NK, et à l'éradication de tumeurs NK sensibles, indépendamment d'une mutation c-kit, abl ou du récepteur au PDGF. Les fonctions NK des foies et rates des animaux traités ont été évaluées de diverses façons (%CD69 sur les CD3-/Dx5+, activités lytiques directes des foies et rates sur YAC-1, sécrétion d'IFNy des organes lymphoïdes traités in vitro 24hrs par IL-2). Les activités lytiques spontanées des splénocytes de souris Nude traitées par l'association Flt3L+STI571 se sont révélées, de façon surprenante, supérieures à celles des souris Nude traitées par Flt3L seul, STI571 seul ou PBS (Fig. 6). L'augmentation du CD69 sur les NK est claire avec la combinaison Flt3L+STI, alors qu'elle ne l'est pas avec chacun des composants pris isolément. La production d'IFNy est surtout visible dans les cultures de ganglions provenant des animaux ayant reçu Flt3L+STI571 (Fig6). La combinaison STI571 - Flt3L permet donc d'induire in vivo une activation importante de l'activité des cellules NK, permettant la lyse efficace de cellules pathologiques in vivo. Exemple 5 : Le STI571 bloque la maturation des CD induite par le LPS et prévient le choc septique Les cellules dendritiques dérivées de moelle osseuse ( BM-DC ) de souris H- 2b (par culture en présence de GM-CSF, IL-4 à J7 de culture, selon la méthode décrite dans Fernandez et al. Nat. Med. 5 (1999) 405) sont incubées 24 heures en présence de 10 g/ml LPS. Elles surexpriment ainsi I-Ab, CD40, CD80, CD86 de façon très significative. Elles stimulent de façon spectaculaire la prolifération de splénocytes totaux alloréactifs (H-2d) à divers ratios E : T (réaction de type MLR). La co-incubation de STI571 (et non de AG957) avec les BM-DC en concommittante présence de LPS prévient la maturation LPS induite et les alloproliférations (Figure 7A). La propriété de ces inhibiteurs de tyrosine kinases à inhiber les signaux inflammatoires tels le LPS a également été investiguée in vivo, dans le modèle murin du choc endotoxinique (Fig.7B). Des souris C57BL6 ont été traités par ingestion per os de STI 571 (150mg/Kg/12h) ou par PBS. Au décours des 24 premières heures du traitement, on induit un choc endotoxinique au moyen d'une injection intrapéritonéale de LPS (1 mg, sérotype 026 :B26 ;SIGMA). Les traitements par STI 571 ou PBS sont poursuivis pendant 48 heures supplémentaires. Nos résultats préliminaires permettent d'observer une réduction de la mortalité dans le groupe traité par STI 571 (45% vs. 17,6%). Tableau 1 Sécrétion Sécrétion de Lyse Spécifique d'interferon y * TNF a * de K562 Conditions de - LPS + LPS - LPS - LPS + LPS Culture ** GIST avant STI 0% 16,7% 0% 15,4% 38,5% 571 (N=14) GIST pendant 30%* 56,7%*'il 21,7%* 45,8% 62,5% STI 571 (N=31) Volontaires sains 11,1% 11,1% 10% 30,8% 42,9% (N=17) Significatif avec un intervalle de sécurité de 95% selon la methode exacte de Fisher, comparé au GIST avant STI 571 5 v Significatif avec un intervalle de sécurité de 95% selon la méthode exacte de Fisher, comparé aux volontaires sains *Seuil de positivité défini à 100 pg/ml ** Les fonctions des cellules NK sont évaluées après incubation de cellules NK CD3- /CD56+ du sang périphérique avec des cellules dendritiques immatures allogéniques en 10 présence ou en l'absence de LPS. Tableau 2 Maladies progressives Maladies stabilisées ou en réponse Patients biologiquement 0 16 sensibles au STI 571 Patients biologiquement non sensibles au STI 571 5* 11 15 *Test exact de Fisher : p=0,042. 1. Utilisation d'un inhibiteur des tyrosine kinases c-abl, bcr/abl, c-kit et/ou de la tyrosine kinase associée au récepteur du PDGF, pour la préparation d'une composition destinée à moduler l'activité des cellules dendritiques chez un mammifère. 2. Utilisation selon la revendication 1, pour induire une modification phénotypique des cellules dendritiques et permettre l'activation des cellules NK. 3. Utilisation selon la revendication 2, pour le traitement préventif ou curatif des infections virales. 4. Utilisation selon la revendication 2, pour le traitement préventif ou curatif des tumeurs NK sensibles non liées à une mutation constitutive dans une tyrosine kinase. 5. Utilisation selon la revendication 1, pour le traitement préventif ou curatif des maladies immunitaires et/ou inflammatoires chez un mammifère. 6. Utilisation selon la revendication 5, pour le traitement préventif ou curatif des maladies auto-immunes. 7. Utilisation selon la revendication 5, pour le traitement préventif ou curatif des maladies inflammatoires chroniques, notamment de l'athérosclérose, la maladie de Crohn, l'asthme, la polyarthrite rhumatoïde, la dermatite et le choc septique ou endotoxinique. 8. Utilisation selon la revendication 5, pour le traitement préventif ou curatif des maladies immunitaires congénitales. 9. Utilisation d'un inhibiteur des tyrosine kinases c-abl, bcr/abl, c-kit et/ou de la tyrosine kinase associée au récepteur du PDGF pour augmenter l'activité NK chez des patients atteints de cancer. 10. Utilisation selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que le mammifère est un être humain. 11. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisée en ce que l'inhibiteur est un composé de la famille des pyrimidines. 12. Utilisation selon la revendication 11, caractérisée en ce que l'inhibiteur est la 2-phénylaminopyrimidine (STI571) ou un dérivé ou analogue de celui-ci. 13. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'inhibiteur est utilisé de façon combinée à un agent potentialisant. 14. Utilisation selon la revendication 13, caractérisée en ce que ledit agent potentialisant est choisi parmi un facteur de croissance des cellules dendritiques et un facteur de (co-)stimulation des cellules NK. 15. Utilisation selon la revendication 14, caractérisée en ce que ledit agent est choisi parmi le Flt3L, le GM-CSF, le ProGP-4 et leurs dérivés ou analogues. 16. Utilisation selon l'une des revendications 13 à 15, caractérisée en ce que ledit agent est utilisé de façon simultanée ou différée dans le temps par rapport à l'inhibiteur. 17. Composition caractérisée en ce qu'elle comprend un inhibiteur des tyrosine kinases c-abl, bcr/abl, c-kit et/ou de la tyrosine kinase associée au récepteur du PDGF et un agent potentialisant. 18. Composition selon la revendication 17, comprenant du ST1571 et un facteur de croissance des cellules dendritiques ou un facteur de (co- )stimulation des cellules NK. 19. Composition comprenant des cellules dendritiques traitées par un inhibiteur des tyrosine kinases c-abl, bcr/abl, c-kit et/ou de la tyrosine kinase associée au récepteur du PDGF. 20. Composition selon la revendication 19, caractérisée en ce que les cellules dendritiques sont immatures.