Brevet FR2837707A1 — publié le 20031003

L'invention concerne l'utilisation de la molécule 8'- hydroxydihydroergotamine (appelée également 8'-OH-DHE) pour la production d'un médicament pour le traitement de l'anxiété. De façon corollaire, l'invention se rapporte également au traitement de la migraine. Plusieurs théories des causes de la migraine ont été proposées. La théorie vaso-dilatatrice envisage que la dilatation des vaisseaux méningés pendant une crise de migraine est à l'origine de la douleur. La théorie neuronale envisage une origine dans une décharge 0 anormale de neurones. La théorie de l'inflammation durale imagine une cause dans l' inflammation de cette membrane qui entoure le cerveau et qui devient hypersensible par relargage de neuropeptides. L'utilisation de la dihydroergotamine (DHE) ou de ses sels est déjà connue depuis de nombreuses années dans le traitement de la migraine. Son action, en tant que "drogue" ou "pro-drogue", notamment par l'intermédiaire de ses métabolites, a déjà été confirmée. Par ailleurs, une certaine corrélation a déjà été établie entre le déclenchement d'une migraine, le stress et une excitabilité neuronale excessive. C'est dans ce contexte que l'invention vise à établir l'action anxiolytique des dérivés de l' ergot de seigle, en l' espèce la molécule 8 '-OH- DHE, non pas après administration à un patient d'un médicament à base de DHE qui a métabolisé et qui contient donc à faible dose (par rapport à la dose d'origine de la DHE), différents métabolites dont le 8'-OH-DHE, mais cette molécule en elle-même en tant que produit actif dans le médicament administré. Il va ainsi être possible de contrôler liefficacité de cette molécule spécifique dans un traitement anti-stress, voire, de façon combinée, également dans un traitement anti-migraineux. Un obj et de l ' invention est au demeurant de révéler les effets générés par un produit actif contenant cette molécule 8'-OH-DHE sur certains récepteurs à la sérotonine, en ciblant donc l'utilisation de cette molécule sur les effets en question, étant précisé que l' on sait aujourd'hui que la sérotonine (5-hydroxytryptamine ou 5-HT) exerce ses effets multiples par l'intermédiaire de différents récepteurs membranaires. o A la connaissance du demandeur, il n'a jusqu'à présent pas été proposé, pour une action anti-stress, d'administrer à un patient un produit actif contenant cette molécule 8'-OH-DHE dans le but d'obtenir les effets ci après présentés vis-à-vis de plusieurs récepteurs à la sérotonine également présentés ci-après. Ainsi, l'invention a pour objet principal l'utilisation de la 8'- hydroxydihydrcergotamine pour la production d'un médicament pour le traitement de l' anxiété, parmi l ' anxiété généralisée, l' anxiété réactionnelle, et celle associée à une affection somatique, par diminution de l'activité électrique des neurones sérotoninergiques, à travers la stimulation de récepteurs 5-HT 1A. Plus précisément, selon deux autres caractéristiques de l' invention, il est avantageusement prévu que l'effet du traitement s'opère: - par effet agoniste de la molécule précitée vis-à-vis de récepteurs 5- HT 1A présynaptiques et par effet agoniste partiel de cette même molécule vis-à-vis de récepteurs 5-HT 1A post-synaptiques (dans ce cas, la concentration de la 8'-OH-DHE devrait avantageusement être telle que ICo compris entre 8 et 11 nM), -- et/ou par effet agoniste de ladite molécule vis-à-vis de récepteurs -HT 2B et 5-HT 2C. Dans le cadre d'un effet combiné du traitement anxiolytique avec un traitement anti-migraineux, il est par ailleurs envisagé dans l'invention d'utiliser cette molécule 8'hydroxydihydroergotamine au sein d'un médicament traitant la migraine par action de ladite molécule vis-à-vis de plusieurs récepteurs à la sérotonine parmi 5-HT 1A, 5-HT 2A, 5-HT 1B, 5-HT 2B, 5-HT 2C, 5-HT 1D et, corrélativement, obtention de plusieurs parmi les effets suivants: -action agoniste vis-à-vis des récepteurs 5-HT 1B et/ou 5-HT 1D induisant une diminution de la vasodilatation des vaisseaux méningés 0 extracérébraux intracrâniens, -- et/ou diminution de la densité des récepteurs 5-HT 2B et/ou 5-HT 2C dans les cellules exprimant ce(s) récepteur(s), -- et/ou diminution de l'excitabilité neuronale -- et/ou augmentation du seuil de déclenchement d'une crise migraineuse par rapport à ce que serait ce seuil en l' absence d 'un traitement par cette molécule, par l'intermédiaire de la diminution de l'excitabilité, ou l'inactivation, des récepteurs 5-HT 2B et/ou 5-HT 2C et/ou 5-HT 2A. Si en relation avec le traitement anxiolytique, un traitement de fond de la migraine est plus particulièrement visé, 1' invention vise en outre avantageusement: -- une diminution de l'excitabilité de neurones sérotoninergiques du raphé et/ou de neurones pyramidaux de l'hippocampe portant des récepteurs 5-HT 1A, et/ou -- une désensibilisation à la sérotonine de cellules endothéliales de parois vasculaires et/ou de cellules de parois musculaires exprimant les récepteurs 5-HT 2B et/ou 5HT 2C., et/ou -- une action de la 8'-OH-DHE s'opposant à l'augmentation de l'excitabilité neuronale et/ou la dilatation de vaisseaux pie-mériens, par action de blocage de récepteurs neuronaux 5-HT 2B. Dans le cadre de l'invention, l'affinité de la 8'-OH-DHE pour en particulier les récepteurs 5-HT 1A et 5-HT 2B/2C a été déterminée in vitro à partir de la capacité du composé à inhiber la liaison spécifique de radioligands appropriés sur des cellules exprimant ces récepteurs. Des approches électrophysiologiques (tranches de cerveau de rats; 5-HT 1A) et biochimiques (accumulation cellulaire de cGMP cyclique - guanosine monophosphate cyclique; 5-HT 2B/2C) validées ont été utilisées pour établir leur caractère agoniste ou antagoniste. Au vu des résultats obtenus, la 8'-OH-DHE s'avère être effectivement 0 un agoniste 5-HT 1A à haute affinité (ICso 5-20 nM). Cette action se traduit par une diminution de l'excitabilité de neurones centraux. Le composé 8' OH-DHE est aussi un agoniste de 5-HT IB/ 2C à haute affinité (ICso = 5-15 nM), et son action prolongée induit une diminution importante de la densité des récepteurs 5-HT 2B, typique d'une désensibilisation. Ces résultats montrent que dans les conditions d'un traitement chronique, la 8'-OH-DHE réduit l'état d'hyperexcitabilité neuronale et la sensibilité au stress, en activant les récepteurs 5-HT 1A et elle prévient l' action vasodilatatrice de la sérotonine, en désensibilisant les récepteurs 5 HT 2B. Ainsi, pour un traitement auxiolytique associé à un traitement préventif de la migraine, est avérée la stimulation des récepteurs 5-HT 1A associée à la désensibilisation, ou à l'inactivation, des récepteurs 5-HT 2B et/ou 5-HT 2C (auparavant 5-HT 1C), voire une action sur les récepteurs 5 HT2A. Si, toujours en relation avec le traitement anti-stress, un effet complémentaire de traitement d ' une crise migraineuse est recherché, c' est la stimulation des récepteurs 5-HT 1B et 5-HT 1D sur les terminaisons des fibres nerveuses trigéminales périvasculaires, qui est considérée dans l'invention comme déclenchant un frein à la libération de CGRP (peptide en relation avec un gène calcitonite; "calcitonite gene related peptide") et de SP (substance P; algogène) par ces fibres. Au demeurant, dans ce contexte, la molécule 8'- hydroxyhydroergotamine peut avantageusement être utilisée en association avec de la dihydroergotamine, avec une adminiskation par l'une au moins des voies parmi la voie orale, la voie intranasale ou la voie injectable Dans ce qui suit, on va maintenant revenir plus en détail sur différents aspects de l'invention. 1. L'EFFET EN PARTICULIERANTI-STRESS DE LA 8'-OH-DHE o 1.1. Vis-à-vis des récepteurs 5-HT 1A La 8'-OH-DHE en tant que principe actif dans un médicament administré s'avère étre un puissant agoniste des récepteurs 5-HT 1A. En relation avec l'action auxiolytique, ce principe actif tel qu'administré s'avère agir principalement en tant qu'agoniste des récepteurs 5-HT 1A présynaptiques et agonistes partiels des récepteurs 5-HT 1A post- synaptiques. D'ailleurs, aussi bien in vitro, sur des coupes de cerveaux exposées à un radioligand approprié, qu' in vivo, à la suite d' une injection intraveineuse de ce radioligand, on peut noter que la radioactivité se distribue dans les régions cérébrales qui contiennent les récepteurs 5-HT 1A, en particulier les noyaux dorsal et médian du raphé o la densité de ces récepteurs est réellement élevée. Les récepteurs 5-HT 1A s'avèrent devoir être considérés comme des autorécepteurs dont la stimulation provoque une diminution de l'activité électrique des neurones sérotoninergiques, à l'origine de l'effet anxiolytique recherché. Au demeurant, la 8'-OH-DHE apparaît comme exerçant une influence inhibitrice sur la décharge de ces neurones, dans des gammes de concentration assurant l'occupation desdits autorécepteurs. D'ailleurs, leur action inhibitrice est entièrement prévenue par un antagoniste sélectif de ces autorécepteurs, démontrant qu'elle résulte bien de l'activation de ces derniers par la 8'-OH-DHE. D'une manière générale, la stimulation des récepteurs 5-HT 1A centraux conduit à une diminution de l'excitatibilité des neurones qui les portent, et une telle action a pu être clairement démontrée dans le cas de la 8'OH-DHE au niveau non seulement des neurones (sérotoninergiques) du raphé, mais également des neurones (pyramidaux) de l'hippocampe. Ainsi, a pu être mis en évidence comment la 8'-OH-DHE, au travers 0 de la stimulation des récepteurs 5-HT 1A, réduit la réactivité au stress, typiquement en liaison avec une réduction de l'excitabilité neuronale, ce qui conduit à faire valoir ici l'action médicamenteuse de la 8'-OH-DHE, en tant que molécule administrée au patient, dans le cadre d'un traitement anxiolytique, voire d'un traitement combiné anxiolytique/anti- migraineux 1.2. Vis-à-vis des récepteurs 5-HT 2 L' exposition prolongée de fibroblastes transfectées exprimant de façon stable soit les récepteurs 5-HT 2B, soit les récepteurs 5-HT 2C, a permis de montrer la capacité de la 8'-OH-DHE à induire un phénomène de désensibilisation neuronale. En particulier, l' exposition prolongée de telles cellules à une concentration saturante (250 M) de 8'-OH-DHE a conduit à une diminution importante de la densité des récepteurs 5-HT 2B dans leur membrane plasmique. Comme aussi bien les antagonistes des récepteurs 5-HT 2B que ceux agissant sur les récepteurs 5-HT 2C s'avèrent avoir des propriétés anxiolytiques, et que d'autre part, les antagonistes des récepteurs 5-HT 2A et/ou 5-HT 2C semblent réellement améliorer la qualité du sommeil chez l'homme, il parat raisonnable de considérer que le blocage et/ou l'inactivation de ces récepteurs par la S'-OH-DHE au sein d'un médicament administré a les mêmes effets anti-stress et apaisants que la molécule en elle- meme. Finalement, il est ici considéré qu'un traitement chronique par la 8'-OH-DHE en tant que principe actif (ou un des principes actifs) d'un médicament administré conduit à une meilleure adaptation au stress et à une diminution de l'excitabilité neuronale, en particulier par la stimulation des récepteurs 5-HT 1A et à la désensibilisation des récepteurs 5-HT 2B et 5-HT 2C, voire par le blocage des récepteurs 5-HT 2A. 2. AUTRES POINTS CONCERNANT, SPECIFIQUEMENT, LA 8' OH-DHE ET LES RECEPTEURS 5-HT 1A Les récepteurs 5-HT 1A se distribuent dans les régions cérébrales, en particulier dans les noyaux dorsal et median du raphé o la densité de ces récepteurs est particulièrement élevée. A ce niveau, les récepteurs 5- HT 1A paraissent être en fait des auto-récepteurs dont la stimulation provoque une diminution de l'activité éleckique des neurones sérotoninergiques, à l'origine d'un effet anxyolitique. En l' occurrence, au moins dans le cas des récepteurs 5-HT 1A, leur stimulation s'est avérée entraîner l'ouverture d'une conductance potassique, conduisant à une hyper-polarisation de la membrane dans leur voisinage immédiat. L' activation de ces récepteurs par la molécule 8'-OHDHE diminuerait effectivement donc de façon sensible l'excitabilité des neurones qui les portent. Comme attendu de composés agonistes, la 8'-OH-DHE paraît par ailleurs excercer une influence inhibitrice sur la décharge de ces neurones, dans des gammes de concentration assurant l' occupation desdits récepteurs -HT 1A. D'ailleurs, leur action inhibitrice paraît entièrement prévenue par un antagonisme sélectif de ces récepteurs, démontrant apparemment qu'elle résulterait de l'activation de ces derniers par cette molécule 8'-OH-DHE. Pour mettre en évidence l'action sur ce récepteur 5-HT 1A, deux types de tests ont été menés: -- des mesures de radio-liaison, -- une caractérisation électrophysiologique des propriétés agonistes de la 8'-OHDHE vis-à-vis de cette catégorie de récepteurs. Dans le premier cas, des membranes d'hippocampe de rats ont été préparées et incubées en présence de concentrations nanomolaires de radioligands sélectifs des récepteurs 5HT 1A, ceci avec des concentrations variées de 8'-OH-DHE, jusqu'à l'équilibre de radio-liaison (environ une heure 0 à température ambiante). Par ailleurs, un excès de 5-HT a été ajouté à une autre série d'échantillons afin de déterminer la radio-liaison non spécifique. Au terme de l'incubation, les échantillons ont été rapidement filtrés et la radioactivité retenue sur les filtres a été comptée par spectométrie. Les caractéristiques de l'inhibition de la radio-liaison spécifique de l'agoniste et de l'antagoniste choisis pour le test, par la 8'-OH-DHE: ICso (concentration produisant 50 % d'inhibition) et nH (constante de Hill) ont ensuite été calculées par un logiciel approprié. Dans le second test, des coupes coronales de cerveaux de rats sont obtenues au niveau du raphé dorsal d'une part, et de l'hippocampe dorsal d'autre part. Les cellules concernées sont placées dans une chambre de superfusion et mises en situation pour rétablir le tonus al-adrénergique activateur responsable de la décharge spontanée des neurones in vivo. Un enregistrement extra-cellulaire de l'activité unitaire de neurones sérotoninergiques est également réalisé. La décharge typique de ces neurones est amplifiée, visualisée sur un oscilloscope et intégrée en termes de fréquence. De la 8'-OH-DHE, ainsi qu'un antagoniste sélectif, sont ajoutés à des concentrations variées dans le liquide de superfusion et leurs effets sont appréciés par comparaison de leurs fréquences de décharge avant et après traitement. A été également effectué un enregistrement intracellulaire en condition "courant imposé" pour tester la réaction des neurones sérotoninergiques du noyau raphé dorsal ou des cellules pyramidales de la région CA1 ou CA3 de la corne d'Ammon dans l'hippocampe. Après traitement électronique, lorsque le potentiel de membrane de la cellule enregistrée est stabilisé, des impulsions de courant hyperbolisant sont délivrées afin d'apprécier les éventuels changements de la résistance membranaire lors de la superfusion de l'échantillon testé avec la 8'-OH-DHE, les récepteurs 5-HT concernés et/ou l'antagoniste retenu. 0 En termes de résultats, il a été noté la diminution progressive des liaisons spécifiques de l'agoniste et de l'antagoniste choisis en présence de concentrations croissantes de 8'-OH-DHE, ainsi que l'inhibition par la 8'-OH DHE de la liaison spécifique de chaque radioligand sur les membranes d'hippocampe des rats. Les ICo de la 8'-OH- DHE vis-à-vis de la liaison spécifique de l'agoniste et de l'antagoniste retenus ont en outre été respectivement de 11 et 8 nM, indiquant une bonne affinité de cette molécule pour les récepteurs hippocampiques. Le calcul des coefficients de Hill (nM) a par ailleurs donné des valeurs supérieures à 1, suggérant une interaction de type non compétitif entre l'agoniste et l'antagoniste retenus et les radioligands au niveau des sites de liaison spécifique sur les récepteurs 5-HT 1A. En termes de caractérisation électrophysiologiques, il a été noté, en outre, que la 8'- OH-DHE (1-lOOOnM) exerce un effet inFibiteur sur la décharge des neurones sérotoninergiques avec des concentrations de l'ordre de 5-50 nM. A partir de la concentration 300 nM, cette molécule bloque au demeurant complètement l'activité spontanée des neurones. A noter également l'effet hyperpolarisant de la 8'-OH-DHE sur la membrane des neurones CA1 hippocampiques avec un effet durable, pour une concentration de 8'-OH-DHE de l'ordre de 100 à 1000 nM. L'hyperpolarisation est apparue comme moindre par rapport à celle obtenue avec une concentration saturante de sérotonine (30 I1M). Cette différence évoque un effet de type agoniste partiel pour la 8'-OH-DHE, propriété confirmée lorsquen présence de 8-OH-DHE (100 nM), la 5-HT (30 I1M) n'a plus eu d'effet hyperpolarisant et lorsque, en présence de l'antagoniste retenu à dose de 100 nM, la 8'-OH-DHE n'a plus provoqué d'hyperpolarisation membranaire. En conclusion, il est considéré que la stimulation des récepteurs 5-HT 1A centraux par administration d'un médicament contenant comme principe 0 actif cette molécule 8'-OH-DHE conduit spécifiquement à une diminution de des neurones sérotoninergiques du raphé et des neurones pyramidaux de l'hippocampe. A noter que la 8'-OHDHE est apparue active à des concentrations faibles, de l'ordre de 10-100 nM vis-à-vis des autorécepteurs 5-HT 1A dans le noyau raphé dorsal. Au niveau de l'hippocampe, la reconnaissance par les mêmes récepteurs a été notée pour des concentrations également faibles de l'ordre de 5 à 100 nM. Quant aux études électrophysiologiques présentées ci avant, elles ont bien montré l'activité agoniste partielle de la 8-OH-DHE vis à-vis des récepteurs 5-HT 1A postsynaptiques. Du fait de la persistance de la 8'-OH-DHE dans les tissus, on peut au demeurant conclure à une activation effective des récepteurs 5-HT 1A centraux, et donc une diminution de l'excitabilité neuronale (au moins donc dans le noyau raphé dorsal et dans l'hippocampe). Par ailleurs, en stimulant les auto-récepteurs 5-HT 1A somato :5 dendritiques dans le noyau raphé dorsal, la 8'-OH-DHE paraît effectivement exercer une action de type anxiolytique, étant précisé que cette propriété paraît en outre à mêmede contribuer efficacement à l'action prophylactique d'un traitement anti-migraineux utilisant comme principe actif de la 8'-OH DHE. 3. ACTION DE LA 8'-OH-DHE, EN TANT QUE PRINCIPE ACTIF ADMINISTRE, SUR LES RECEPTEURS 5-HT 2B ET 5-HT 2C En relation avec l' invention, a été testée l'affinité de cette molécule sur des membranes de cellules transfectées exprimant sélectivement un récepteur de la sérotonine et il a été vérifié que cette molécule agissait comme agoniste vis-à-vis d'un effecteur potentiellement relié à la migraine, la production de cGMP. 3.a. Test d'affinité de la 8'-OH-DHE sur des membranes de cellules Des lignées de cellules recombinantes exprimant des niveaux voisins 0 (environ 200 fmoles/mg prot) des récepteurs humains 5HT 2B ou 5-HT 2C ont été obtenus, pour le test. Elles ont été utilisées pour appréhender l'affinité de la 8'-OH-DHE pour chacun de ces récepteurs, par compétition vis-à-vis d'un ligand sélectif HT 2, le [25I] DOI. De manière surprenante, la 8'-OH-DHE reconnaît ces récepteurs suivant plusieurs modes (courbes de compétition biphasiques). Au demeurant, l'affinité de la 8'-OH-DHE apparait beaucoup plus importante que la DHE pour ces récepteurs, et beaucoup plus importante (de l'ordre nanomolaire) pour le récepteur 5-HT 2B, en particulier. Les cellules utilisées pour un des tests menés, fibroblastes de souris (LMTK), n'ont exprimé de manière endogène aucun récepteur connu de la sérotonine. Après transfections, ces cellules exprimaient spécifiquement le récepteur 5-HT 2B (205+2 fmoles/mg de protéines, Kd moyen 12 nM) ou le récepteur 5-HT 2C (195+3 fmoles/mg de protéines, Kd moyen 42 nM), mesuré par liaison de [25I]DOI. 3.b.Activité agoniste vis-à-vis du cGMP intracellulaire Des cellules exprimant sélectivement les récepteurs humains 5-HT 2B ou 5-HT 2C ont aussi été utilisées pour déterminer si la 8'-OH-DHE a effectivement des activités agonistes vis-à-vis du cGMP, pour ces récepteurs. Or, ce composé se comporte effectivement comme un agoniste, puisque le cGMP est produit en réponse à ce composé, pour les deux récepteurs précités. Les concentrations efficaces semblent correspondre aux sites de haute affinité décrits précédemment, la concentration efficace (pEC50) de la 8'-OH-DHE étant apparue comme égale à environ 8,30 pour le récepteur 5- HT 2B (en particulier 8, 32 + 0,06)et environ 7,80 pour le récepteur 5-HT 2C. De plus, la 8'-OH-DHE s'est avérée comme se comportant effectivement comme un agoniste partiel vis-à-vis du récepteur 5-HT 2C, le 0 niveau maximal de cGMP atteint n'étant qu'à peine 50 % de celui produit par la stimulation du récepteur 5-HT 2B. Après lavage des cellules recombinantes en milieu frais sans sérum, celles-ci ont été incubées pour différentes périodes à 37 C en présence de 100 mM isobutylmethylxanthine et des agents à tester. La réaction a ensuite été stoppée. Après une heure à 4 C, la phase éthanolique a été collectée et Iyophilisée. Le cGMP a été quantifié grâce à un kit de radio immunologie essai iodiné (cGMP RIA kit RPA 525, Amersham). 3.c. Désensibilisation DE LA 8'-OH-DHE Les cellules obtenues pour le test, exprimant sélectivement les récepteurs humains 5-HT 2B (ou 5-HT 2C), ont aussi permis d'évaluer le traitement chronique de ces cellules par la 8'OH-DHE, en tant que principe actif contenu dans un médicament administré, sur l'expression de ces récepteurs, en termes de désensibilisation. La variation du nombre de sites récepteurs indique un comportement différent de ces deux récepteurs. Le récepteur 5-HT 2B est apparu comme étant seul sensible à une stimulation chronique par la 8'-OH- DHE. En effet, après une heure de traitement, les niveaux de récepteurs restent pratiquement inchangés pour le récepteur 5-HT 2C, alors qu'après environ quinze minutes, la quantité de récepteurs 5-HT 2B est significativement réduite, la demi-vie du récepteur 5-HT 2B n'étant que d'environ soixante minutes en présence de 8'-OH-DHE (à comparer aux plus de trois heures en présence de DHE). Des fibroblastes de souris LMTK, transfectées de manière stable ont été exposés à une concentration saturante (250,uM) de 8'-OH-DHE pendant des temps variables (1, 5,10, 30, 60 minutes) et la variation du nombre de sites de récepteurs dans les extraits membranaires a été déterminée pharmacologiquement (Bmax) mesuré par liaison de [25I]DOI (agoniste 5-HT 2 spécifique). o Les résultats qui précèdent ont donc amené à effectivement considérer que le blocage et/ou l'inactivation des récepteurs 5-HT 2B et 5-HT 2C en particulier, consécutivement à la délivrance de 8'-OH-DHE en tant que principe actif d'un médicament administré, a généré un effet anti-stress, tout en concourant à diminuer la fréquence de crises migraineuses. 4. DETAILS COMPLEMENTAIRES CONCERNANT L'ACTION COMBINEE ANXIOLYTIQUE/ANTI-MIGRAINEUSE DE LA 8'-OH-DHE 4.1. Dans le cadre d'un traitement de fond de la migraine Ce sont ici plus particulièrement les récepteurs 5-HT 2B, 5-HT 1A et -HT 2C qui sont en cause avec, a priori à titre subsidiaire, les récepteurs 5 HT 1B et/ou 5-HT 1D. En général, l'affinité à la sérotonine des récepteurs de la classe 5-HT 2 est plus faible que celle des récepteurs de la classe 5-HT 1. En effet, les récepteurs de la classe 5-HT 1 (en général) sont caractérisés par leur haute affinité (Kd de l'ordre du nanomolaire) pour la sérotonine et par leur couplage négatif avec l'adénylate cyclase. Ils inter agissent apparemment avec des protéines G (qui jouent le rôle de "transducteurs") pour soit diminuer la synthèse d'AMP cylique, soit modifier la perméabilité d'un canal ionique spécifique dans la membrane lorsqu'ils sont stimulés par un agoniste. Tous les récepteurs de la famille 5-HT 1 sont exprimés dans le système nerveux central et jouent un rôle dans le contrôle de l'excitabilité neuronale. Or, la 8'-OH-DHE s'est avérée être reconnue avec une très bonne affinité par les récepteurs 5-HT 2. A cet égard, lorsqu'ils sont stimulés, les récepteurs 5-HT 2B et 5-HT 2C conduisent à une activation de phospholipase membranaire (phospholipase A2 et C) et à la fermeture d'un canal ionique spécifique du K+. Cette deuxième action provoque apparemment une dépolarisation membranaire, c'est-à-dire une augmentation de l'excitabilité des neurones 0 qui portent au moins les récepteurs précités. Cependant, il semble que ces récepteurs se désensibilisent lorsque leur stimulation se prolonge, ce qui paraît conduire à leur blocage et à l'absence de réponse à une sollicitation ultérieure par la sérotonine ou un autre agoniste. A noter qu'en particulier, les récepteurs 5-HT 2A, 5-HT 2B et 5-HT 2C correspondent à des gênes distincts qui sont tous deux exprimés dans le système nerveux central. De plus, les récepteurs 5-HT 2A et 5-HT 2B, mais pas les récepteurs 5-HT 2C, sont également exprimés dans les parois de certains vaisseaux, par les cellules musculaires lisses et/ou les cellules endothéliales. Au niveau des vaisseaux pie-mériens, l'activation de la voie des phosphoinositides qui résulte de la stimulation des récepteurs 5-HT 2B conduit à une augmentation de la production locale de monoxyde d'azote (NO) et donc à une vasodilatation. L' implication d 'un tel phénomène dans la crise migraineuse nous conduit à penser que les récepteurs 5-HT 2B doivent jouer un rôle déterminant dans son déclenchement. En d'autres termes est ici considérée l'action de la molécule 8'-OH DHE sur en particulier les récepteurs 5-HT 2B des vaisseaux pie-mériens, dans le cadre d'une action effective lors d'un traitement de fond anti mlgrameux. Pour ce qui concerne a priori tant les récepteurs 5-HT 2B que 5-HT 2C, la stimulation par la 8'-OH-DHE aurait dû constituer une action favorable au déclenchement des crises, puisqu'elle paraît conduire à une augmentation de l'excitabilité neuronale et à une dilatation des vaisseaux pie-mériens, notamment du fait de la production précitée de NO. En fait, lors du traitement de fond, la stimulation chronique de ces récepteurs s'avère, au vu des résultats, provoquer leur désensibilisation, reproduisant ainsi, dans le temps, l' action d' un antagoniste en plus fort. Précisément, dans le cas de la 8'-OH-DHE, on prétend ici à la capacité de ce composé à induire le phénomène indiqué de désensibilisation. En particulier, l' exposition prolongée de cellules de fibroblastes transfectés à une concentration saturante (250 M) a conduit à constater une importante diminution de la densité des récepteurs 5-HT 2B dans leur membrane plasmatique. Ainsi, lors d'un traitement de fond par un médicament contenant en tant que principe actif de la 8'-OH-DHE, celle-ci s'avère rendreprogressivement insensible à la sérotonine endogène les cellules exprimant les récepteurs précités 5-HT 2B et/ou 5-HT 2C, en l'occurrence les cellules endothéliales des parois vasculaires pour ce qui concerne les récepteurs 5HT 2B et les neurones dans le cas des récepteurs 5-HT 2C. On a donc été amené à considérer qu'au moins les récepteurs 5-HT 2B, 5-HT 2C qui sont normalement responsables d'une action vaso-dilatatrice (5-HT 2B) et/ou neuro-excitatrice (5-HT 2C) de la sérotonine, ont été inactivés par l' administration d'un principe actif à base de 8'-OH-DHE, contribuant ainsi à relever le seuil de déclenchement de la crise migraineuse. 4.2. Traitement de crise/Diminution des crises migraineuses en traitement de fond Ainsi, il est ici considéré que l'efficacité thérapeutique de la 8'-OH- DHE administrée au patient en tant que principe actif "d'origine", et non pas en tant que résultat de la métabolisation de la DHE dans le corps de ce même patient, relève, vis-à-vis de la crise migraineuse (et donc dans le cadre d'une prescription du médicament correspondant contenant cette molécule) d'une stimulation des récepteurs 5-HT 1B et 5-HT 1D de la sérotonine dans la paroi des vaisseaux méningés et sur les voies trigéminales, ainsi que paraissent le faire les "triptans", tandis que l'action prophylactique spécifique (dans le cadre donc d'un traitement de fond anti-migraineux) de cette même molécule 8'-OH-DHE, toujours administrée comme principe actif "d'origine", paraît résulter d 'une combinaison unique d' actions multiples sur également 0 d'autres récepteurs de ce même neuromédiateur, et en particulier les récepteurs 5-HT 2B, 5-HT 1A et 5-HT 2C. De fait, l'action anti-stress potentielle du traitement par la 8'-OH- DHE en tant que médicament de base, qui paraît résulter de l'activation en particulier des récepteurs 5-HT 1A et de l'inactivation des récepteurs 5-HT 2B, voire 5-HT 2C, par la 8'-OH-DHE, paraît réellement contribuer à la diminution notable de la fréquence des crises lors du traitement de fond avec un médicament comprenant cette molécule 8'-OH-DHE. Par ailleurs, comme déjà indiqué, au niveau central, à la fois la stimulation des récepteurs 5-HT 1A et la désensibilisation des récepteurs 5 o HT 2C par la 8'-OH-DHE paraissent converger pour diminuer l'excitabilité neuronale, et donc relever le seuil de déclenchement des crises, conduisant ainsi à diminuer leur fréquence. A noter également qu'une autre composante paraît tout-à-fait constituée par l'action de la 8'-OH-DHE au niveau des artères méningées. De fait, la désensibilisation des récepteurs 5-HT 2B sur les cellules endothéliales doit permettre à cette molécule 8'-OH-DHE de prévenir toute action vaso- dilatatrice éventuelle de la sérotonine, et donc la survenue d'une crise migraineuse. Ainsi, l'analyse des effets pharmacologiques de la 8'-OH-DHE en tant que molécule active dans un médicament laisse à penser que bien plus qu'une action sur une seule cible priviligiée, c'est la convergence d' actions multiples sur plusieurs des récepteurs de la sérotonine révélés dans la présente description qui sous-tend l'efficacité en particulier d'un traitement de fond avec la 8'-OH-DHE, mais également a priori d'un traitement de crise dans le cadre d'une réduction en particulier de la fréquence des crises chez le patient migraineux. 5. MODE D'ADMINISTRATION 0 L'une des trois voies suivantes est conseillée: voie orale, voie intranasale, voie injectable. 6. PROCEDE DE FABRICATION L' administration de DHE sous la forme de l'un de ses métabolites, en l'espèce la 8'-OH-DHE, a été décrite dans US-A- 4 916 132. Des détails concernant cette administration et les conditions de fabrication du principe actif y sont précisés. On se référera en particulier au passage de la description de cette demande colonne 3, ligne 24 à colonne 4, ligne 53, ainsi qu'aux exemples 12 et 13. A cet égard, il est noté que, dans l'invention comme dans cette demande de brevet publiée, une fabrication de la 8'-OH-DHE par voie biologique est possible. Ont en l'espèce été utilisés pour cela des rats que l'on a traités afin d'induire les P 450 3A impliqués dans la formation des métabolites monohydroxylés de la DHE (cf. Delaforge et al. "Xenoblotica" 1989, vol.19, N 11, 1285-1295). Les foies des rats ont été extraits et on y a généré la formation de métabolites de la dihydroergotamine, et en particulier de la 8' OH-DHE. Pour cela, les microsomes des foies récupérés et dilués dans une solution ont été incubés, en présence de DHE (concentration comprise entre et 150,uM) et d'un système générateur de NADPH. Une fois la réaction conduite par le système générateur, cette réaction a été arrétée par précipitation des protéines microsomales et le surnageant d'incubation a été injecté directement sur une colonne HPLC. Pour cela, la phase organique a été exkaite de la composition avec un solvant organique que l'on a ensuite évaporé. Les résidus ont été solubilisés et injectés sur la colonne HPLC, seuls les métabolites monohydroxylés ayant été collectés et repurifiés dans la colonne, après quoi en particulier la 8'-OH-DHE a été extraite et conservée. A noter également (dans Maurer et al. 1984) différentes informations concernant la biotransformation de la DHE in vivo chez 0 l'homme à partir d'urine de plasma et, in vitro, sur des microsomes hépatiques humains, les résultats obtenus montrant que l'oxydation primaire de la DHE conduit de manière majoritaire à un dérivé hydroxylé sur la proline de la partie peptidique de la molécule. REVENDICATIONS 1. Utilisation de la 8'-hydroxydihydroergotamine pour la production d'un médicament pour le traitement de l'anxiété, parmi l'anxiété généralisée, l'anxiété réactionnelle, et celle associée à une affection somatique, par diminution de l'activité électrique des neurones sérotoninergiques, à travers la stimulation de récepteurs 5-HT 1A. 2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'effet du traitement s'opère par effet agoniste de la molécule vis-à-vis de récepteurs 5- HT 1A présynaptiques et par effet agoniste partiel de cette même molécule 0 vis-à-vis de récepteurs 5-HT 1A post-synaptiques. 3. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la concentration de la 8'-hydroxydihydrocrgotamine est telle que ICo est compris entre 8 et 11 nM 4. Utilisation selon la revendication 1 ou la revendication 2, caractérisée en ce que l'effet du traitement s'opère par effet agoniste de la