Brevet FR2840808A1 — publié le 20031219

COMPOSITION COSMETIQUE, DERMATOLOGIQUE OU PHARMACEUTIQUE CONTENANT UNE FRACTION HYDROPHILE DE FRUIT DE Hippophae rhamnoides ET SON UTILISATION. L'invention concerne une nouvelle composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique qui permet de lutter contre les effets du vieillissement cutané, contenant une fraction hydrophile de fruit de Hippophae rhamnoides. Le vieillissement cutané est défini par l'ensemble des altérations du revêtement cutané résultant de modifications progressives de ses différents constituants. Ainsi, la modification des fibres d'élastine, entraînant une perte d'élasticité et de tonicité du derme, est le premier signe du vieillissement dermique. Le collagène, qui représente le " ciment " du derme, donne à la peau solidité, résistance et en assure l'hydratation (donc la souplesse). Le vieillissement cutané est provoqué par une diminution de la synthèse de collagène, causant l'apparition de rides et ridules. De plus, l'appauvrissement du derme en acide hyaluronique, responsable de l'hydratation et du gonflement des tissus, provoque une perte de volume et d'hydratation de la peau. Enfin, la sénescence cutanée est marquée par l'apparition d'un certain nombre de troubles pigmentaires (le plus fréquemment, d'une hyperpigmentation), signe du vieillissement du système pigmentaire prédominant dans les zones surexposées. Ceci est dû à une perte du contrôle de la conversion de la tyrosine en mélanine par la tyrosinase. Le fruit de Hippophae rhamnoides est un akène enveloppé du calice persistant et charnu simulant une drupe ovoïde jaune orangé, et renferme une graine. De ce fruit est extrait un jus très énergétique riche en vitamine C, en acides organiques (essentiellement de l'acide malique), qui contient aussi des vitamines Bl, B3, P, des oligo-éléments, des protides et des glucides. Ce jus est riche en pulpe, et cette pulpe est source d'huile contenant des caroténoïdes (essentiellement du 6-carotène), des tocophérols, des acides gras essentiels (acide linoléique et linolénique), de l'acide palmitoléique qui est un acide gras contenu dans le sébum, très rare dans le monde végétal, des stérols, des alcools triterpéniques et des alcools gras. Enfin, de la graine de Hippophae rhamnoides est extraite une huile (plus riche en acides gras essentiels que la précédente mais dont la teneur en acide palmitoléique est faible). L'art antérieur connaît déjà de nombreuses propriétés des différentes fractions de fruit de Hippophae rhamnoides. Une étude a montré l'action photoprotectrice et anti-inflammatoire de l'huile de graine de Hippophae rhamnoides in vivo (A. Hiriscu et al, Farmacia, vol XXXI, nr, 1, 1983, 39-43). Une autre étude a montré l' activité bactériostatique et cicatrisante en application topique (G. Neatmu et al Stud Cercet Biochim, 1982,25, 30-34, in Chem Abst., 1983,99, 478888e). Le brevet HU T068753 décrit l'utilisation de l'huile de pulpe du fruit dans le domaine cosmétique pour des protections solaires. Le brevet JP63145210A2 décrit l'utilisation de l'huile des graines ou de l'huile de la pulpe du fruit de Hippophae rhamnoides, plus particulièrement l'utilisation d'une fraction lipidique de la graine et de la pulpe pour son activité anti-oxydante. Précisément, le document décrit que cette activité est due à la présence de tocophérols. Le brevet JP2212415 décrit une composition pour le bain contenant une solution extraite de fruit de Hippophae rhamnoide. Cette solution est utilisée en raison de ses qualités de dispersion, d'embellissement de la peau et de la sensation agréable que provoque son utilisation sur la peau. La publication de L. Constantino (L. Constantino et al, Fitoterapia, vol LXV, 1,1994, 44-47) décrit l'étude du fruit de Hippophae rhamnoides dans le but d'identifier des substances naturelles susceptibles de traiter les pathologies dues aux radicaux libres. Les propriétés antiradicalaires et antilipopéroxydantes de ce fruit sont dues aux polyphénols et aux anthocyanines présentes dans la phase méthanolique. De même, la publication de X. Gao (X. Gao et al, J. Agric Food Chem, 2000,48, 1485-1490) s'intéresse aux propriétés anticancéreuses du fruit de Hippophae rhamnoides et a pour but d'optimiser leur utilisation dans des traitements anticancéreux. Ce document montre que la fraction hydrophile a de bonnes propriétés antiradicalaires. Le Demandeur a mis en évidence que la fraction hydrophile de fruit de Hippophae rhamnoides est, de manière inattendue, capable d'inhiber les protéases destructrices du derme et de l'épiderme, cause du vieillissement cutané, ainsi que l'application en cosmétique d'une telle fraction. La fraction hydrophile trouve ainsi pour la première fois une utilité cosmétique pour prévenir ou traiter le vieillissement cutané. Ainsi, l'effet de la fraction hydrophile de fruit de Hippophae rhamnoides, déjà connue pour être in vitro un inhibiteur de la production des radicaux libres, permet également d'inhiber certaines protéases du derme et de l'épiderme, ce qui aura un double effet pour lutter contre le vieillissement. L'invention a donc pour objet une composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique qui contient comme agent actif une fraction hydrophile de fruit de Hippophae rhamnoides. De manière avantageuse, ladite fraction hydrophile est un pressurat. Avantageusement, ladite fraction hydrophile est un pressurat dépulpé. Avantageusement, ladite fraction hydrophile est un extrait aqueux. Suivant un mode de réalisation particulier de l'invention, la composition peut en outre comprendre une fraction lipophile de fruit de Hippophae rhamnoides. L'invention a également pour objet l'utilisation cosmétique de la composition selon l'invention pour prévenir ou traiter les signes du vieillissement cutané et plus particulièrement ceux choisis parmi : la perte d'élasticité et d'hydratation du derme, les troubles pigmentaires cutanés, la perte de la résistance cutanée. L'invention a encore pour objet l'utilisation d'une fraction hydrophile de fruit de Hippophae rhamnoides comme définie ci-dessus, seule ou associée à une fraction lipophile de fruit de Hippophae rhamnoides, pour la préparation d'une composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique destinée à inhiber l'activité d'au moins une enzyme choisie dans le groupe comprenant une protéase, la tyrosinase, la hyaluronidase, pour la prévention et/ou le traitement d'affections de la peau. Avantageusement, cette protéase est une protéase dermique, plus particulièrement la collagénase et l'élastase. Avantageusement, l'enzyme est une protéase dermique et la composition est utile pour la prévention et/ou le traitement d'une perte d'élasticité et de résistance du derme. Avantageusement, l'enzyme est une tyrosinase et ladite composition est utile la prévention et/ou le traitement des troubles pigmentaires cutanés. Avantageusement, l'enzyme est une hyaluronidase et en ce que la composition est utile la prévention et/ou le traitement de la perte de la résistance cutanée. On comprendra mieux l'invention à l'aide de la description, faite ci-après à titre purement explicatif, d'un mode de réalisation de l'invention. La composition selon l'invention contient comme agent actif une fraction hydrophile de fruit de Hippophae rhamnoides. Cet agent actif est un inhibiteur de protéases contenues dans le derme et dans l'épiderme. Ces protéases sont notamment les protéases du derme (élastase et collagénase), la tyrosinase et la hyaluronidase. Par fraction hydrophile, on entend un pressurat, obtenu par pressage de baies fraîches de fruit de Hipp ophae rhamnoides. Ce procédé d'obtention du pressurat ne nécessite aucune intervention de solvant. Les pressions utilisées pour obtenir ce pressurat sont des pressions standard. Ce pressurat peut être utilisé tel quel ou peut être concentré et séché. Le pressurat peut également être dépulpé par décantation, centrifugation ou par voie enzymatique, notamment à l'aide d'une pectine méthyl estérase. Ce pressurat dépulpé peut aussi être concentré et séché. En effet, la fraction hydrophile est active en elle-même et ne nécessite pas les composés contenus dans la pulpe pour être active et bénéfique pour la peau. La fraction hydrophile peut aussi être un extrait aqueux, obtenu par des techniques d'extraction comme la macération, la percolation ou l'extraction assistée par micro-ondes à partir de fruits frais ou secs. Ladite composition selon l'invention peut aussi comprendre une fraction lipophile de fruit de Hippophae rhamnoides, et ce de manière à compléter l'activité de ladite fraction hydrophile grâce à un apport de composés apolaires reconnus pour leurs propriétés anti-radicalaires (grâce aux tocophérols et aux caroténoïdes), d'amélioration de la capacité d'hydratation de l'épiderme (grâce aux acides gras essentiels), de stimulation du métabolisme des fibroblastes et amélioration de l'élasticité cutanée par l'apport d'insaponifiables et d'activité protectrice et apaisante (anti-inflammatoire) permettant de faire face aux agressions extérieures. La composition cosmétique dans laquelle la fraction hydrophile est couplée avec la fraction lipophile aura une action améliorée par cette activité anti-radicalaire. Un autre objet de l'invention est l'utilisation d'une composition selon l'invention pour prévenir ou traiter les signes du vieillissement cutané, et plus particulièrement ceux choisis parmi : la perte d'élasticité et d'hydratation du derme, les troubles pigmentaires cutanés, la perte de la résistance cutanée. En effet, cette fraction a une action inhibitrice sur des protéases destructrices de la peau contenues dans le derme et dans l'épiderme. La composition est utilisée pour inhiber l'élastase et la hyaluronidase. En effet, la hyaluronidase intervient lors de phénomènes inflammatoires, d'agression physico-chimiques en déstructurant l'acide hyaluronique, constituant essentiel de la matrice extracellulaire intervenant dans l'hydratation et le gonflement des tissus. L'élastase intervient dans le processus de dégradation des fibres d'élastines qui s'opère au cours du temps. Son action provoque la perte d'élasticité du derme, ce qui est un signe de vieillissement. L'inhibition de ces deux enzymes aura pour conséquence le maintien de l'élastine et de l'acide hyaluronique dans le derme, et donc le maintien de la souplesse et de l'hydratation de la peau. De même, la composition est utilisée pour inhiber la tyrosinase, qui est une enzyme intervenant dans le mécanisme de la mélanogénèse. La tyrosinase contrôle l'hydroxylation de la tyrosine en DOPA et l'oxydation de la DOPA en DOPAquinone. Au cours du vieillissement, le mécanisme de la mélanogénèse n'est plus contrôlé, entraînant une hyperproduction de mélanine se traduisant par l'apparition de tâches brunes. L'inhibition de la tyrosinase entraînera une baisse de la production de mélanine, et empêchera donc l'apparition de tâches brunes sur la peau. Enfin, la composition selon l'invention peut être utilisée pour inhiber la collagénase, protéase détruisant le collagène. Le collagène est une protéine de structure assurant la résistance et la souplesse de la peau. Le vieillissement cutané provoque une diminution de cette protéine dans la peau, et par là même l'apparition de rides et ridules. Ainsi, l'inhibition de la collagénase a pour effet un maintien du collagène dermique, et donc de la structure de la peau. L'invention sera mieux comprise, et ses avantages ressortiront mieux, à la lumière des exemples suivants, qui sont donnés à titre illustratif, et sans limitation. Exemple 1 : crème de jour anti-rides On prépare, de manière classique pour l'homme du métier, une crème de soin ayant la composition décrite ci-dessous. L'extrait C02 Argousier mentionné dans l'exemple est un extrait de baies séchées obtenu par extraction au C02 supercritique : c'est un extrait total qui regroupe la fraction lipidique de la pulpe et la fraction lipidique de la graine. Aqua QS100% Coco-caprylate-caprate 5.000% Butylène glycol 4.000% Dimethicone 4.000% Propylène glycol 3.000% Glyceryl stearate&PEG-100 stearate 3. 000% Glycerin 2.000% Glycerin searate 2.000% Stearyl alcohol 1.200% Butyrospermum parkii 1.000% Cyclopentasiloxane and dimethiconol 1.000% Paraffinum liquidum 1.000% Jus d'argousier 0.500% Parfum 0.500% Preservatives 0.400% Ethyl linoleate 0.300% Xanthan gum 0.200% Retinyl palmitate 0.105% Tocopheryl acetate 0. 100% Acrylates/C10-30 Alkyl acrylate crosspolymer 0. 050% Tetrasodium EDTA 0.025% Sodium hydroxide 0.010% C02 Argousier 0.010% Ascorbyl palmitate 0.001% Exemple 2 : Crème de nuit On prépare, de manière classique pour l'homme du métier, une crème de soin ayant la composition cidessous. Aqua QS100% Zea mays & Triticum vulgare 6.000% Buxus chinensis 5.000% Glyceryl stearate 5. 000% Cyclopentasiloxane & Cyclohexasiloxane 3.000% Glycerin 3.000% Cetyl alcohol 2.000% PPG-2 Myristyl ether propionate 2.000% PEG-8 stearate 1.900% Jus d'argousier 1.500% PEG-100 stearate 1. 500% Butylene glycol 1.100% Dimethicone 1.000% Glycine soja 1.000% Stearic acid 1.000% Ceteh-20 0.600% Exemple 3 : anti-hyaluronidase d'un extrait de pressurat dépulpé de fruit de Hipp opha e rhamnoides a) Principe du dosage : Après un contact entre l'enzyme (hyaluronidase) et le substrat (acide hyaluronique) à 37 C, des sucres sont formés en milieu alcalin à partir des groupements N-acétyle glucosamine libérés lors de la réaction enzymatique. Ces sucres, en solution acide, sont ensuite transformés en dérivés furannes qui réagissent avec le p-diméthyle benzaldéhyde pour former un complexe coloré. Le taux de N-acétyle glucosamine libéré par unité de temps est une mesure de l'activité antihyaluronidase. b) Préparation des réactifs La hyaluronidase utilisée pour le dosage (réf. H 3 506 Sigma) est extraite de testicules de taureau. Son pH optimal est de 4 et sa température optimale de 37 C. Pour réaliser les expérimentations décrites dans cet exemple, on utilise un pressurat de fruit de Hippophae rhamnoides dépulpé par décantation, qui contient encore quelques résidus solides qui ont tendance à décanter dans le temps. On prépare 24 heures avant le jour de l'expérimentation la solution substrat qui est une solution d'acide hyaluronique 25 mg dans 10 ml de tampon acétate de sodium 9.103 M (solubilisée ensuite à 4 C sous agitation pendant 12 heures au moins). Le jour de l'expérimentation, on prépare : une solution enzymatique de hyaluronidase 22 mg dans 10 ml de tampon (conservée à 4 C), une solution de Borax 1,22 mg dans 5 ml de tampon (solubilisation par chauffage doux), une solution de p. diméthyl amino benzaldéhyde 10 g dans 100 ml d'un mélange acide acétique/acide chlorhydrique (88- 12) et une solution d'héparine (inhibiteur de référence) : 0,135% dans du tampon pH4 (conservée à 4 C). Le mélange réactionnel est préparé dans des tubes à hémolyse et ce à 10 C. Chaque tube contient 1200 jJl de solution substrat d'acide hyaluronique, 450 l de solution enzymatique de hyaluronidase, de 10 à 300 l de pressurat de fruit de Hippophae rhamnoides dépulpé à tester et du tampon pH4 précédemment préparé (2250 (il QSP). c) Mode opératoire On place les tubes dans un bain-marie à 37 C pendant 45 min. La réaction colorimétrique se déroule dans des tubes en verre sur 500 l du mélange réactionnel. Puis on ajoute à froid dans chaque tube de 500 l à 100 (il de la solution de Borax précédemment préparée. Les tubes sont placés au bain-marie à 100 C 3 min, puis refroidis. On ajoute enfin à froid sous agitation et à intervalles de temps réguliers (30 secondes) 3 ml de solution de 4 diméthyl benzaldéhyde. Après avoir laissé la coloration se développer à froid pendant 30 min, on lit toutes les 30 secondes chaque tube l'un après l'autre à 585 nm. d) Résultats : Les valeurs des CI 50 sont déduites à partir du volume de demi inhibition, mesuré graphiquement. CI 50=C(%) x*vol (ml)/vol total, le volume total du mélange réactionnel étant de 2250 L, soit 2,25 ml. - Pourcentage d'inhibition de 100 l de pressurat dépulpé testé : 64,5%. - Calcul de l'activité de l'échantillon : L'activité de l'échantillon, exprimée en unité d'absorbance, est calculée par rapport à l'inhibiteur de référence : Activité hyaluronidase=Ci 50 (référence)/Ci 50 (essai)*100 Il y a bien inhibition de l'activité enzymatique en présence de l'extrait de pressurat dépulpé de fruit de Hippophae rhamnoides. La CI 50 de l'extrait testé est de 3,55%. L'activité anti-hyaluronidase mesurée pour l'extrait est de 0,113 UA. L'extrait testé présente donc bien une activité inhibitrice de la hyaluronidase. Exemple 4 : Activité anti-tyrosinase d'un extrait de pressurat dépulpé de fruit de Hipp ophae rhamnoides La tyrosine est une enzyme qui contrôle l'hydroxylation de la tyrosine en DOPA et l'oxydation de la DOPA en DOPAchrome, détectable au spectrophotomètre (max= 475 nm). Pour réaliser la cinétique décrite dans cet exemple, on utilise un pressurat de fruit de Hippophae rhamnoides dépulpé par décantation, qui contient encore quelques résidus solides qui ont tendance à décanter dans le temps. Le mélange réactionnel contient : 1560 l de tampon phosphate 0,1M pH7 contenant du phosphate monosodique et du phosphate disodique, 200 l de pressurat dépulpé de fruit de Hippophae rhamnoides à tester et 40 l de solution d'enzyme (1 unité/mL de tampon). La détermination de l'activité est effectuée par rapport à la pente de la cinétique obtenue avec le blanc : % Inhibition = 100- (E*100)/B Avec . B : pente de la cinétique pour le blanc E : pente de la cinétique pour l'échantillon à tester. Il y a bien inhibition de l'activité enzymatique en présence de l'extrait de pressurat dépulpé de fruit de Hippophae rhamnoides. La CI 50 de l'extrait pour l'activité antityrosinase est de 5,44 mg/ml. Le pourcentage d'inhibition d'une dilution au 20ième de l'échantillon de pressurat dépulpé à tester est de 43,4%. L'extrait testé est bien inhibiteur de la tyrosinase. Exemple 5 : Activité anti-élastase d'un extrait de pressurat dépulpé de fruit de Hippophae rhamnoides a) Principe L'activité anti-élastase est déterminée sur un substrat de synthèse spécifique et hydrosoluble : N-Succinyl-Ala-Ala-Pro-Leu-p. Nitroanilide. Le substrat réagit avec l'enzyme pour former un acylenzyme (intermédiaire réactionnel) et libérer le p. Nitroaniline qui absorbe à 386 nm. L'activité enzymatique est définie par rapport à la pente de la cinétique de libération du p. Nitroaniline. b) Réactifs La solution de substrat, qui contient 50 mg de N-Succinyl-Ala-Ala-Pro-Leu-p. Nitroanilide solubilisés dans 1 ml de N méthylpyrrolidone est diluée au 100ième dans du tampon Tris-HCl pour la réaction enzymatique. La solution d'élastase contient 56 unités/ml diluées dans du tampon. La solution élastatinal, qui sera utilisée comme référence (1 mg/ml) est diluée au 50ième pour la réaction enzymatique. c) Mode opératoire La solution témoin activité contient 2000 (il de substrat, 1000 l de tampon et 10 (il d'enzyme. La solution essais contient 2000 (IL de substrat, (1000 l - 30 l d'une dilution de pressurat dépulpé à tester) de tampon et 10 (IL d'enzyme. Ainsi, le dosage est réalisé avec différentes dilutions de pressurat dépulpé à tester. d) Résultats Le pourcentage d'inhibition de 30 (IL d'une dilution au lOième de l'échantillon de pressurat dépulpé testé est de 20,9%. Il y a bien inhibition de l'activité enzymatique en présence de l'extrait de pressurat dépulpé de fruit de Hippophaé rhamnoides. La CI 50 de l'extrait de pressurat dépulpé de fruit de Hippophaé rhamnoides est de 22,6 mg/ml. Exemple 6 : activité anti-collagènase d'un extrait de pressurât dépulpé de fruit de Hipp ophae rhamnoides. a) Principe L'activité de la collagènase est déterminée sur un substrat de synthèse, spécifique et hydrosoluble : p-Phénylazo - Benzyloxycarbonyl - L Propyl-L Leucyl - Glycyl - L Propyl - D Arginine. La collagènase scinde la molécule de substrat entre Leucyl et Glycyl, libérant ainsi : 4 Phénylazo Benzyloxycarbonyl - L Propyl - L Leucine (liposoluble, absorbe à 320 nm) et Glycyl - L Propyl - D Arginine, hydrosoluble. L'activité enzymatique est déterminée par rapport à la quantité de 4 Phénylazo - Benzyloxycarbonyl L Propyl - L Leucine libérée en un temps donné. b) Réactifs La collagènase utilisée est une collagènase 470 unités/ mg SIGMA C - 9891, dont 1 mg est solubilisé dans 1 ml de tampon. 10 mg du substrat de synthèse p-Phénylazo Benzyloxycarbonyl - L Propyl-L Leucyl - Glycyl - L Propyl - D Arginine SIGMA P - 8383 sont solubilisés par 20 ml de méthanol. Enfin, le témoin d'inhibition, la berberine, inhibiteur enzymatique de la collagènase, est préparé en en solublisant 15 mg de berberine 95% SIGMA B - 3412 dans 10 ml d'eau. c) Mode opératoire Le mélange réactionnel contient : - 2000 l de substrat, - 10 }il à 50 l de pressurat dépulpé de baies de Hippophae rhamnoides à tester pour son activité inhibitrice de la collagènase (concentration massique connue), - 100 (il de collagènase. Le dosage est réalisé avec différents volumes de pressurat dépulpé. On prépare aussi un témoin "activité" dépourvu de substance à tester et donc dans lequel l'activité inhibitrice de collagènase sera nulle. Enfin, on prépare plusieurs solutions témoins "inhibition" qui contiendront, à la place du pressurât dépulpé à tester, différentes concentrations de solution de berberine. La densité optique de la phase organique est mesurée au spectrophotomètre à 320nm. d) Résultats Le pourcentage d'inhibition de 10 l de pressurat dépulpé à tester est de 29,1 %, et celui de 50 l est de 87,5 %. Il y a bien inhibition de l'activité enzymatique en présence de l'extrait de pressurat dépulpé de fruit de Hippophae rhamnoides. La CI 50 de l'extrait de pressurat dépulpé de fruit de Hippophae rhamnoides est de 7,83 mg/ml. REVENDICATIONS 1) Composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle contient comme agent actif une fraction hydrophile de fruit de Hippophae rhamnoides. 2) Composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite fraction hydrophile est un pressurat. 3) Composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite fraction hydrophile est un pressurat dépulpé. 4) Composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique selon la revendication 1, caractérisée en ce que ladite fraction hydrophile est un extrait aqueux. 5) Composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce qu' elle comprend en outre une fraction lipophile de fruit de Hipp ophae rhamnoides. 6) Utilisation cosmétique d'une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 5 pour prévenir ou traiter les signes du vieillissement cutané et plus particulièrement ceux choisis parmi : la perte d'élasticité et d'hydratation du derme, les troubles pigmentaires cutanés, la perte de la résistance cutanée. 7) Utilisation d'une fraction hydrophile du fruit de Hippophae rhamnoides comme définie dans l'une quelconque des revendications 1 à 4, seule ou associée à une fraction lipophile de fruit de Hippophae rhamnoides pour la préparation d'une composition cosmétique, dermatologique ou pharmaceutique destinée à inhiber l'activité d'au moins une enzyme choisie dans le groupe comprenant une protéase, la tyrosinase, la hyaluronidase, pour la prévention et/ou le traitement d'affections de la peau. 8) Utilisation selon la revendication 7, caractérisée en ce que ladite protéase est une protéase dermique et plus particulièrement la collagénase et l'élastase. 9) Utilisation selon l'une quelconque des revendications 7 ou 8, caractérisée en ce que ladite enzyme est une protéase dermique et en ce que ladite composition est utile pour la prévention et/ou le traitement d'une perte d'élasticité et de résistance du derme. 10) Utilisation selon la revendication 7, caractérisée en ce que ladite enzyme est une tyrosinase et en ce que ladite composition est utile dans la prévention et/ou le traitement des troubles pigmentaires cutanés. 11) Utilisation selon la revendication 7, caractérisée en ce que ladite enzyme est une hyaluronidase et en ce que ladite composition est utile dans le traitement de la perte d'hydratation du derme.