Brevet FR2837388A1 — publié le 20030926

Utilisation d'un polysaccharide comme agent filmoprotecteur, compositions cosmétiques et/ou dermatologiques en contenant et procédé de soins cosmétiques le mettant en oeuvre. La présente invention se rapporte aux domaines des nécessités de la vie et plus particulièrement aux domaines de la cosmétologie et de la dermatologie. La présente invention concerne principalement l'utilisation d'un polysaccharide ramifié dont les unités répétitives sont constituées de résidus D-glucose, L-fucose et acide D-glucuronique comme agent actif filmoprotecteur cosmétique et /ou dermatologique des surfaces kératinisées. Plus spécifiquement, l'invention a pour objet l'utilisation d'un polysaccharide anionique ramifié, totalement désacétylé, dont l'unité répétitive, répétée de 2500 à 3500 fois, est un tétrasaccharide constitué de 2 molécules de D-glucose, d'une molécule de L-fucose et d'une molécule d'acide D-glucuronique, comme agent actif filmoprotecteur des surfaces kératinisées, notamment contre les agents agressants de l'environnement, et plus précisément, vis-à-vis des métaux lourds. La présente invention a en outre pour objet les compositions cosmétiques et/ou dermatologiques incorporant ledit polysaccharide comme agent actif filmoprotecteur des surfaces kératinisées et plus particulièrement des compositions dépourvues de sels ou d'alcool ou contenant moins de 10% d'alcool. L'invention consiste également en un procédé de traitement cosmétique, mettant en #uvre ce polysaccharide et/ou une composition l'incorporant, pour protéger, par application topique, les surfaces kératinisées contre les effets de la pollution notamment les métaux lourds. On sait que la peau, directement en contact avec l'environnement, est l'organe le plus exposé aux agressions chimiques quotidiennes que constituent les gaz d'échappement, les émanations industrielles, les fumées de tabac et les microparticules nocives en suspension. En se fixant sur les kératinocytes et sous l'effet des U. V. quotidiens, ces agents de pollution peuvent générer des toxines et des radicaux libres. En s'accumulant dans l'épiderme, ceux ci saturent les systèmes naturels de défense et de détoxification de la peau et peuvent induire une asphyxie cellulaire. Ceci se traduit au niveau de la peau par des effets immédiats notamment de déshydratation, de sensibilité accrue, d'irritations pouvant aller jusqu'à une réaction inflammatoire. Exposée à long terme, la peau perd de sa souplesse, de son éclat, et vieillit plus vite. Parmi les agents toxiques de l'environnement, on trouve notamment les métaux et les ions métalliques. Si certains d'entre eux sont utiles à dose physiologique, notamment pour la réalisation de cofacteurs métalliques dans les systèmes enzymatiques, immunologiques, structuraux de l'organisme, bon nombre d'entre eux en revanche, à une concentration trop élevée, altèrent ces mêmes fonctions. Par leur accumulation cutanée, ils gênèrent des toxines, se lient aux protéines et peuvent engendrer des réactions immunitaires. Parmi les métaux lourds toxiques de l'environnement, on trouve notamment le cuivre, le cobalt, le manganèse, le nickel, le plomb, le cadmium, le mercure, le chrome, le béryllium, et les composés métalloïdes en comportant. Ils se présentent souvent sous forme adsorbée sur des particules de carbone en suspension dans l'air. La peau peut également être exposée à l'agression des métaux lourds par contact avec des objets variés en contenant, notamment sous forme d'alliage, tels que certains objets de bijouterie, de maroquinerie, des pièces de monnaie ou des produits d'entretien. Dans ce contexte urbain, il est donc nécessaire de protéger efficacement et quotidiennement la peau, les phanères(cils, sourcils, poils, ongles..) et les muqueuses contre les effets néfastes des agents de la pollution et plus particulièrement contre les métaux lourds qui sont actifs à des doses très faibles. De nombreux composés sont utilisés dans les domaines de la cosmétique et/ou de la dermatologie pour leurs propriétés protectrices des surfaces kératinisées contre les agents polluants, en particulier les métaux lourds. On a ainsi décrit l'utilisation de composés à groupements soufrés se comportant comme des séquestrants de métaux lourds, tels que par exemple les métallothionéines décrits dans le brevet EP 0557042 ou les composés aminoacides soufrés décrits dans la demande de brevet EP 0914815 A1. Le brevet FR2809004 décrit également l'utilisation de l'acide ellagique comme agent cosmétique antipollution. Le problème technique que l'invention se propose maintenant de résoudre, réside dans le fait de fournir un seul agent cosmétique qui soit à la fois un protecteur efficace contre les polluants et plus précisément les métaux lourds, et qui soit, en même temps, aisément incorporable dans de nombreuses formulations à usage quotidien tels que les crèmes de jour et les produits de maquillage. La Demanderesse a découvert de façon particulièrement surprenante que ce double problème pouvait être remarquablement bien résolu en utilisant un polysaccharide anionique ramifié désacétylé dont l'unité répétitive répétée de 2500 à 3500 fois est un tétrasaccharide constitué de 2 molécules de D-glucose, d'une molécule de L-fucose et d'une molécule d'acide Dglucuronique. Divers polysaccharides d'origine végétale, animale, bactérienne, extraits d'algues ou produits par synthèse présentent la capacité de former des films protecteurs. On a ainsi déjà décrit dans la littérature les propriétés filmogènes de l'acide hyaluronique, des glucosaminoglucanes (chondroïtine sulfates), du chitosane et de nombreux polysaccharides bactériens, utiles dans de nombreux domaines industriels. Le brevet FR2701032 présente ainsi l'utilisation du chitosane pour former des solutions de pelliculage pour la protection des graines et semences. On a également décrit dans le brevet FR 2820313 l'utilisation d'un extrait de légumineuses notamment de céréales et plus spécifiquement un extrait hydroalcoolique de maïs, comme agent anti-pollution piégeur de métaux lourds. Les polysaccharides d'origine bactérienne pouvant être facilement et rapidement obtenus, sont particulièrement intéressants et ont déjà fait l'objet de nombreuses recherches. Le brevet EP0735049 décrit notamment l'utilisation d'un polysaccharide bactérien produit par une souche de Klebsiella oxytoca TMN-3 et constitué des résidus L-rhamnose, D-galactose, Dglucose et acide D-glucuronique comme agent filmogène cosmétique. Plus récemment, un polysaccharide, obtenu par fermentation de Sclerotium rolfsii et constitué de molécules de glucose très fortement liées entre elles lui conférant une configuration particulière de gel, a été commercialisé sous la marque Amigel. La demanderesse a découvert de façon particulièrement surprenante que le biopolymère utilisé dans la présente invention sous forme désacétylée présentait non seulement la faculté de former des films à la surface de la peau, mais avait en outre, du fait de son caractère anionique, la capacité de piéger efficacement les métaux lourds comme par exemple le cadmium, le plomb, le nickel ou le mercure. Ce polysaccharide peut ainsi être qualifié de véritable agent filmoprotecteur, piégeur de métaux lourds. On connaissait déjà ce polysaccharide pour ses propriétés gélifiantes dans certaines conditions particulières. Le brevet US4638059 décrit ainsi des gels thermoréversibles formés par addition de sels dans une solution de polysaccharide. Dans une demande de brevet antérieure (FR0203247 non encore publiée, du 15/02/02), la Demanderesse a déjà décrit que ce polysaccharide peut donner des gels présentant des caractères de thermoréversibilité en présence d'alcools (éthanol, isopropanol, méthanol). Cette propriété, est également conservée quand ce polysaccharide est mis en présence de cations (sodium, potassium, calcium, magnésium ....). De tels solvants ne sont toutefois pas toujours appropriés aux formulations cosmétiques, souvent parce qu'ils entraînent la précipitation d'autres constituants incompatibles ou même parfois du fait qu'ils ne sont pas souhaités dans certaines formes d'applications topiques. Outre les propriétés sus-mentionnées filmoprotectrices, la Demanderesse a également découvert de façon inattendue que ce polysaccharide possédait également la capacité de se gélifier dans d'autres solvants organiques comme par exemple dans les solvants à fonction hydroxyle et plus spécifiquement les glycols. Cette compatibilité avec les glycols dont les propriétés chimiques diffèrent tellement des alcools rend cette observation particulièrement surprenante: Elle a également découvert que, pour son utilisation comme agent filmogène sous forme totalement désacétylée, le polysaccharide peut être incorporé sans problème de compatibilité dans de nombreuses compositions cosmétiques topiques. Elle a en outre constaté que ce polysaccharide confère aux compositions cosmétiques, d'autres propriétés telles que notamment des propriétés texturantes, et des propriétés de fraîcheur à l'étalement. L'utilisation de ce polysaccharide anionique biodégradable est donc d'un grand intérêt comme agent filmoprotecteur efficace et pratique dans les formulations cosmétiques et/ou dermatologiques. La présente invention a donc pour objet l'utilisation d'un polysaccharide anionique ramifié dont l'unité répétitive, répétée de 2500 à 3500 fois, est un tétrasaccharide constitué de 2 molécules de D-glucose, d'une molécule de L-fucose et d'une molécule d'acide Dglucuronique comme agent filmoprotecteur notamment contre les agents polluants et plus particulièrement contre les métaux lourds tels que le cadmium, le nickel, le plomb ou le mercure pour éviter leurs effets cellulaires délétères notamment décrits dans le brevet FR2809004. Plus particulièrement, cet agent cosmétique est un piégeur de métaux lourds. Le polysaccharide, utilisé dans la présente invention, est un polymère ramifié comportant une unité répétitive constitué de D-Glucose, L-fucose, d'acide D-glucuronique respectivement dans un ratio d'environ 2 :1 :1. L'unité répétitive de ce polysaccharide a la séquence suivante de formule I : dans laquelle D-GlcpA est un résidu d'acide D-glucuronique, L-Fucp est un résidu de Lfucose, D-Glcp est un résidu de D-glucose, n étant un nombre entier compris entre 2 500 et 3 500. Ce polysaccharide est anionique et présente un poids moléculaire de l'ordre de 2000kd, l'unité répétitive pouvant être répétée de 2500 à 3500 fois. D'une manière générale, le polysaccharide peut être obtenu par les techniques classiques de production et d'extraction des polysaccharides (synthèse chimique, extraction enzymatique d'exopolysaccharides..). Selon un mode de réalisation avantageux, le polysaccharide est un exopolysaccharide totalement désacétylé et obtenu par fermentation de bactéries en produisant, tels que notamment, (selon la publication L. E FRANZEN et al Carbohydrate Research, 1982,108, 129-138), les bactéries Klebsiella aerogenes type 54 souche A3 ci après dénommées K54 et déposées sous les numéros ATCC 12657 et 12658. Selon M.A. O'NIELL, et al. (Carbohydrate Research, 1986,148, 63-69), ce même polysaccharide est également un produit de fermentation de microorganisme Enterobacter, déposé sous le numéro NCIB 11870 au National Collection of Industria Bacteria (Aberdeen, Ecosse). Les caractéristiques de cette souche sont en outre décrites dans le brevet US 4638059. Ce polysaccharide peut être produit par fermentation aérobie de ces bactéries, notamment de K54, selon les protocoles habituels, à une température de 10 à 39 C, de préférence à environ 35 C, dans un milieu dont le glucose constitue la principale source de carbone, la source d'azote étant un mélange de peptone de féverole(non OGM) et/ou d'un extrait autolytique de levure (Saccharomyces cerevisiae). Le polysaccharide K54 est ensuite désacétylé en soumettant le moût de fermentation à un traitement thermique à 70-120 C en présence de soude à une concentration de 10 à 100mM pendant une durée de 10 minutes à 1 heure environ. Cette étape de désacétylation est indispensable pour révéler les propriétés filmogènes du polysaccharide K54. Il est à noter que le polysaccharide produit par Enterobacter NCIB 11870 n'étant pas acétylé, cette étape de désacétylation n'est pas nécessaire pour révéler ces propriétés. A la suite de ce traitement, le polysaccharide K54 est extrait du moût de fermentation, éventuellement clarifié par filtrations ou centrifugations, par une étape de précipitation par addition d'un liquide organique non-solvant tel que l'acétone ou un alcool inférieur tel que l'éthanol ou le propanol. Après élimination du surnageant par centrifugation ou filtration, le précipité est récupéré et séché. Le polysaccharide ainsi isolé peut être mis en solution, par exemple à une concentration de 1% dans de l'eau déminéralisée, et incorporé dans une composition. On l'utilisera de préférence en milieu aqueux. Par le terme agent filmoprotecteur , on entend selon l'invention un agent qui présente à la fois des propriétés filmogènes et protectrices dues au fait qu'il peut piéger les métaux lourds dans la matrice ainsi formée. Appliqué sur les surfaces kératinisées, il permet de les protéger contre l'adhésion cutanée des agents polluants en particulier les métaux lourds. Au cours de ses recherches, la Demanderesse a en effet pu mettre en évidence, par déshydratation, la capacité de ce polysaccharide sous sa forme désacétylée à se structurer par augmentation de l'effet matrice et à former des films résistants et facilement détachables. Les films sont formés par déshydratation du polysaccharide. Ils peuvent être formés aussi bien à partir du polysaccharide en solution aqueuse que du polysaccharide sous forme gélifiée en présence de sels et /ou d'alcools. Lors des tests présentés en exemple 1, des films ont été obtenus par séchage soit à température ambiante soit à chaud des solutions et/ou des gels à 1% de polysaccharide. Selon une variante de réalisation, le film peut contenir une autre substance compatible d'intérêt cosmétique et/ou dermatologique. Ces molécules complémentaires à l'effet matriciel peuvent notamment permettre d'obtenir une protection cutanée maximale. De préférence, la composition contiendra donc un agent de protection solaire tels que notamment des filtres organiques et/ou minéraux. De même, il est aussi possible d'incorporer des colorants hydrosolubles qui conduisent alors à des films pouvant être de coloration très variées. Des extraits aqueux ou hydroalcooliques obtenus à partir de plantes peuvent aussi être incorporés à la solution ou au gel de polysaccharide. Quelques un des films obtenus sont présentés dans l'exemplel. Il faut remarquer que des résultats identiques à ceux obtenus avec le polysaccharide en solution ont été observés lorsque le polysaccharide est sous sa forme gélifiée en présence de sels et/ou d'éthanol. Cet effet filmogène a également été testé en présence de différents cations qui permettent la gélification du polysaccharide : sodium, potassium, calcium, cadmium, magnésium. Ce test montre que les propriétés filmogènes du polysaccharide désacétylé ne sont pas altérées par la présence de nombreux composants et confirme en outre que les deux propriétés filmogène et gélifiant sont indépendantes dans ce polysaccharide. Par cette faculté à former des films à la surface de la peau et du fait de son caractère anionique, ce polysaccharide s'est révélé capable de piéger les cations, les métaux lourds comme par exemple le cadmium, le plomb ou le mercure. Cette nouvelle propriété présente ainsi un grand intérêt dans le domaine de la cosmétique et/ou de la dermatologie. Les tests ont notamment permis de valider cet effet protecteur cutané vis à vis des métaux lourds. L'effet protecteur de ce polysaccharide vis à vis de la cytotoxicité du cadmium sur un épiderme reconstruit est démontré dans l'étude présentée en exemple 2. L'invention a également pour objet l'utilisation dudit polysaccharide dans une composition cosmétique et/ou dermatologique comme principe actif filmoprotecteur, destinée à être appliquée sur des surfaces kératinisées du corps. Par application topique, on entend selon l'invention l'application sur toute surface corporelle kératinisée en contact avec les substances toxiques, telle que notamment la peau y compris des lèvres et du cuir chevelu, les muqueuses, les cils, les sourcils, les poils, les ongles. L'invention a également pour objet l'utilisation du polysaccharide comme actif filmoprotecteur excipient dans une composition cosmétique et/ou dermatologique. La demanderesse a en effet également découvert que ce polysaccharide présentait une compatibilité avec bon nombre de solvants. Ces travaux ont aussi montré que l'incorporation de colorants et de pigments aux solutions et gels du polysaccharide, ne perturbait pas la formation de ces films. Les compositions selon l'invention peuvent contenir de 0. 001 à 5% dudit polysaccharide comme agent filmoprotecteur, et de préférence de 0. 01 à 1%. De préférence on utilisera le polysaccharide sous forme préalablement Les compositions conformes à l'invention se présentent sous une forme appropriée à l'application sur les surfaces kératinisées telle que gel, lotion, notamment lotion capillaire, émulsion notamment de type huile-dans-eau ou eau-dans-huile, dispersion ou sous la forme d'une émulsion multiple, à cristaux liquides ou non. Elles peuvent également être sous la forme de solution aqueuse, de lotion, de lait, de crème notamment crème de mascara, de masque, de mousse, d'onguent, de lait, de bâtons (stick), notamment sous forme coulée de baume à lèvres, rouge à lèvres. Il est également possible de les utiliser sous la forme de patches. Selon l'invention, la composition peut contenir, en outre, des agents de protection solaire notamment pour la réalisation de soins solaires. On pourra alors employer, à titre d'agent de protection solaire, des filtres organiques et/ou minéraux connus, tels que, par exemple, les particules micronisées d'oxyde métallique, notamment d'oxyde de titane, de fer, de cérium, d'aluminium, etc.....ou de particules de silicates métalliques. Les caractéristiques physicochimiques du filtre utilisé et sa concentration sont dictées par le choix de la consistance finale désirée de la composition, conforme à l'invention. Selon l'invention, la composition peut en outre comporter les excipients habituels pharmaceutiques et/ou cosmétiques acceptables appropriés. Parmi ces excipients, on peut notamment citer des agents de protection solaire notamment pour la réalisation de soins solaires, des agents gélifiants hydrophiles ou lipophiles, des actifs hydrophiles ou lipophiles, des gommes, des résines, des agents tensioactifs, des solvants, des charges telles que l'amidon de riz, des pigments, des agents conservateurs, des huiles essentielles, des agents antioxydants, des colorants, des pigments, des nacres, des paillettes, des parfums, des absorbeurs d'odeur, des agents régulateurs de pH ou des agents neutralisants, des agents pénétrants, des agents épaississants, tels que ceux habituellement utilisés. Le choix et/ou la quantité des ingrédients complémentaires à la composition seront naturellement déterminés par le choix des propriétés physiques et de la consistance souhaitée pour la composition conforme à l'invention. On emploie les différents adjuvants dans des proportions classiquement utilisées dans le domaine de la cosmétique, à savoir par exemple de 0. 01 à 20 % du poids total de la composition, le complément étant-constitué par un véhicule tel que l'eau ou un mélange eau-alcool ou un polyalkylèneglycol. Selon la présente invention, des exemples d'agents gélifiants hydrophiles appropriés sont les polymères carboxyvinyliques (carbomère), les polysaccharides, les polyacrylamides, les copolymères d'acrylates/alkylacrylates, les gommes naturelles et les argiles. Selon la présente invention, des exemples d'agents gélifiants lipophiles appropriés sont les polyéthylènes, les sels métalliques d'acide gras et les argiles modifiés tels que les bentones. Selon la présente invention, des exemples d'actifs hydrophiles ou lipophiles sont les polyols tels que le glycérol, le propylèneglycol, les vitamines, d'autres agents hydratants tels que le Laurydone(UCIB), les émollients, les agents exfoliants tels que la poudre de coco ou la poudre d'abricot, les agents de protection anti radicalaire tel que le P-carotène et l'allantoïne, les agents anti-inflammatoires tels que des acides carboxyliques dérivés de l'acide anthranilique, des agents apaisants et leurs mélanges. Quand la composition selon l'invention est sous forme d'émulsion, elle contient des émulsionnants et des coémulsionnants habituellement utilisés par l'homme du métier. Selon la présente invention, des exemples d'émulsionnants et coémulsionnants appropriés sont des esters d'acides gras et de glycérol tel que le stéarate de glycéryle, des esters d'acides gras et de polyéthylèneglycol tels que le stéarate de PEG-20. De manière avantageuse, la concentration en émulsionnant et en coémulsionnant est comprise entre 0. 3 et 30% par rapport au poids total de la composition, de préférence, entre 0. 5 et 5%. Comme colorants utilisables selon l'invention, on peut citer notamment les colorants liposolubles tels que le (3-carotène, le brun Soudan, le DC Red 17, le jaune de quinoléine. Comme nacres utilisables selon l'invention, on peut notamment citer les micas recouverts d'oxydes et de pigments naturels, ou des esters de cholestérol. Comme pigments utilisables selon l'invention, on peut notamment citer les pigments minéraux tels que les oxydes de zinc, de fer, de cérium et les pigments organiques tels que le noir de carbone et les laques habituellement utilisées. Les compositions peuvent contenir des sels et/ou des alcools mais ceux ci ne sont pas indispensable pour que les compositions présentent des propriétés filmoprotectrices. Il est ainsi tout à fait possible d'utiliser des compositions dépourvues de sels et/ou contenant une quantité inférieure à 10% d'alcool, de préférence de 0 à 9%. Les compositions peuvent contenir en outre un autre agent filmogène, tel que par exemple la gomme arabique, l'hydroxyethyl cellulose, les polyvinylpyrrolidones tels que le PVP, les PVP/eicosene copolymères ou PVP/ hexadecene copolymères, des protéines hydrolysées de blé. Les compositions peuvent être additionnées en outre d'un composé di-hydroxylé tel que le butylèneglycol, le propylèneglycol, le monopropylène glycol, l'éthylèneglycol ou les polyéthylèneglycols. Ces mélanges confèrent au gel ainsi formé un caractère de plasticité remarquable et une sensation de fraîcheur tout à fait agréable. Les propriétés d'un tel gel sont présentées à l'exemple 3. Ce gel physique présent l'intérêt d'être résistant aux variations de pH. L'effet gélifiant a en effet été conservé à des pH allant de 4 à 12. Les compositions selon l'invention peuvent être réalisées de manière usuelle, selon les procédés connus dans le domaine de la cosmétologie ou de la dermatologie De telles compositions forment ainsi un film doux, protecteur, résistant, homogène sur les surfaces sur lesquelles elles sont appliquées. Dans le domaine cosmétique, de telles compositions conviennent donc particulièrement pour le soin quotidien et/ou le traitement et/ou la protection de la peau du corps et/ou du visage et/ou des phanères (ongles, cheveux..). De telles compositions sont notamment destinées aux soins, traitements, maquillage, hygiène, protection solaire de la peau du visage et du corps, masques, toniques, nettoyants, dépilatoires, patchs, soins des ongles, soins capillaires gainants ou coiffants. Selon un mode préféré de l'invention, la composition peut être utilisée pour le maquillage de la peau, des lèvres, des muqueuses et/ou des phanères (cils, sourcils..) notamment sous la forme de rouge à lèvres, fard à paupières, crème de mascara,.... L'invention a également pour objet un procédé cosmétique destiné à obtenir une protection des surfaces kératinisées contre les effets de la pollution, caractérisé en ce qu'il consiste à appliquer sur la peau, les phanères et/ou les muqueuses une quantité cosmétiquement efficace de polysaccharide, tel que précédemment défini, éventuellement en association avec des excipients ou véhicules cosmétiques appropriés. De préférence, le polysaccharide sera appliqué sous forme d'une des compositions précédemment définies. Par quantité efficace, on entend une concentration d'au moins 0.001% de polysaccharide dans un excipient approprié notamment l'eau. Les compositions selon l'invention ne présentent aucune toxicité et n'entraînent aucune intolérance locale. Elles ne sont pas non plus allergisantes. Les exemples et les préparations suivants illustrent l'invention sans la limiter aucunement. Dans les exemples et les préparations, les proportions indiquées sont des pourcentages en volume/volume. Exemple 1 : de l'effet filmogène ; # Méthode : La préparation utilisée pour illustrer cette propriété est une solution aqueuse contenant 2 à 10 g/1 du polysaccharide secrété par la souche Klebsiella aerogenes type 54 souche A3. Ce polysaccharide a été préalablement soumis à une étape de désacétylation totale selon des procédés connus de l'homme du métier Environ 5 à 10 g de solution ou de gel sont déposés dans une capsule d'aluminium, la quantité de produit déposée étant ajustée de façon à couvrir toute la surface de la capsule d'aluminium. Le produit est ensuite séché soit à température ambiante soit à chaud dans une étuve de façon à obtenir un film détachable. # Résultats : On a obtenu par séchage de 5 g de solution à 1% de polysaccharide, réalisé à 100 C pendant 3 heures, un film transparent facilement détachable. En ajoutant à la solution de polysaccharide un oxyde de titane (0.1à 10% par exemple), on a pu obtenir un film blanc, opalescent facilement détachable et présentant une propriété de filtre solaire.. De la même manière, l'incorporation d'oxyde de fer a conduit à un même type de film mais de couleur jaune. L'incorporation des colorants hydrosolubles conduit à des films pouvant être de colorations très variées et n'altèrent pas les capacités filmogènes. Des extraits aqueux ou hydroalcooliques obtenus à partir de plantes ont également été incorporés au polysaccharide en solution ou gélifié sans altération du pouvoir filmogène. Une quantité de 1 à 5 % d'un extrait hydroalcoolique de prêle a ainsi pu être incorporé au polysaccharide en solution. Environ 10 g de cette solution déposé dans une coupelle et séché à l'étuve ont permis d'obtenir à obtenir un film détachable. Le même test a été réalisé avec le polysaccharide sous sa forme gélifiée en présence de sels et (ou) d'éthanol. Cet effet filmogène a également été testé en présence de différents cations qui permettent la gélification du polysaccharide : sodium, potassium, calcium, cadmium, magnésium. Dans toutes ces conditions, un film a été obtenu. Ce test montre ainsi que les propriétés filmogènes du polysaccharide désacétylé ne sont pas altérées par la présence de nombreux composants. Les mêmes résultats ont été obtenus avec un polysaccharide sous forme de solution ou de gel ce qui montre que les deux propriétés sont indépendantes. Exemple 2 : Etudes des effets filmoprotecteur vis à vis du Cadmium # Protocole: Une série de 15 épidermes reconstitués est traitée par application topique de 100 l d'une dilution à 5% d'une solution aqueuse de polysaccharide à 1%. Une deuxième série de 15 épidermes est traitée de la même manière avec 100 l d'une solution de chlorure de sodium à 0,9%. Les épidermes ainsi traités sont ensuite incubés pendant 2 heures à 37 C en présence de 5% de CO2. Après incubation, les épidermes sont lavés puis traités par application topique de 1001 d'une solution de chlorure de cadmium (10 mM, 5 mM, 2mM et 1 mM) ou d'une solution de chlorure de sodium à 0,9 % (témoins). Après incubation pendant 18 heures à 37 C en présence de CO2, la viabilité des épidermes a été évaluée.et la concentration de cadmium inhibitrice calculée. # Evaluation de la viabilité des épidermes -Principe : Les épidermes traités sont lavés, et incubés pendant 3 heures dans un milieu contenant un sel de MTT (bromure de 3-(4,5-diméthyl thiazol-2-yl)-2,5 diphényltétrazolium). Le MTT est réduit par la succinate déhydrogénase mitochondriale des cellules vivantes, cette réaction produit un précipité de formazan qui se redissout dans l'isopropanol . Le dosage du formazan, proportionnel à la quantité de cellules vivantes et est effectué par lecture de la densité optique (DO) par spectrophotométrie à 540 nm. La viabilité est ensuite calculée selon la formule suivante : % viabilité = (Do échantillon/ Do témoin) x 100 -Résultats : Les résultats obtenus sont présentés dans les tableaux suivants Résultats obtenus avec les témoins (chlorure de sodium) : Concentration de Cadmium appliquée en mM 0 1 2 5 10 Densité optique moyenne lue à 540 nm 0,754 0,749 0,578 0,362 0,076 Viabilité moyenne en % 100 99 77 48 10 Résultats obtenus avec les polysaccharides : Concentration de Cadmium appliquée en mM 0 1 2 5 10 Densité optique moyenne lue à 540 nm 0,737 0,723 0,659 0,554 0,085 Viabilité moyenne en % 100 98 89 75 12 -Interprétation : Ces résultats montrent un effet protecteur significatif du polysaccharide vis à vis du cadmium appliqué dés 2mM et très significativement pour une concentration en cadmium allant jusqu'à 5 mM. En effet, la viabilité moyenne a été améliorée lorsque le polysaccharide a été préalablement appliqué à ces concentrations . Cet effet protecteur ne suffit toutefois plus pour assurer la viabilité des cellules de l'épiderme pour des concentrations cytotoxiques trop élevées de cadmium. # Calcul de la concentration inhibitrice de cadmium : Par les courbes issues des résultats expérimentaux, on a pu déterminer la concentration inhibitrice 50 (IC50) du cadmium : Cadmium seul : IC 50 = 4. 79 mM Test polysaccharide : IC 50 = 6,87 mM Il ressort donc de ce test que le polysaccharide produit par la souche Klebsiella aerogenes type 54 souche A3 N ATCC 12657 et 12658 appliqué sur un épiderme reconstruit montre un effet protecteur contre les concentrations toxiques du cadmium. Cet effet protecteur peut être attribué à une diminution de la pénétration du cadmium dans l'épiderme, le cadmium étant piégé par le film formé par le polysaccharide à la surface de l'épiderme. Plus généralement, ce film est donc capable de protéger l'épiderme de la même manière contre d'autres métaux lourds polluants. Exemples 3 : Etude de l'effet gélifiant du polysaccharide en présencede différents solvants : # Méthode: Une quantité initiale de 50 grammes d'une solution aqueuse à 1% de polysaccharide (solution A) a été ajoutée à différente quantité en poids de glycérine, butylène glycol, monopropylène glycol et pluriole 400 (PEG-8). gélification et l'écoulement ont été ainsi observés. La thermoréversibilité a été plus spécifiquement étudiée pour deux de ces produits. Ainsi, les échantillons contenant le polysaccharide et du PEG-8 ou du monopropylèneglycol ont été testés. La liquéfaction a été observée lors d'un chauffage jusqu'à 75 C environ puis lors du refroidissement. Cette étude a été complétée par une étude des variations de la viscosité de différentes compositions cosmétiques de bases dans lesquelles ont été ajoutés différents composants : le polysaccharide, NaCl, PEG-8, Monopropylèneglycol, # Résultats de gélification : Les résultats obtenus sont résumés dans le tableau ci-après : gélification obtenue Composant testé Poids en g écoulement observé 100 non glycérine ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~ 150 non 23. 29 début de gélification butylèneglycol 57. 73 gélification très forte, gel glissant gel moins homogène 96. 73 écoulement plus faible 57. 82 début de gélification 111. 61 gélification Monopropylène 126.42 gel très homogène 126.42 gel très homogène glycol ############ ########################## viscosité augmentée 173. 24 écoulement faible 29. 55 très forte gélification Pluriole 400= PEG-8 38. 06 très forte gélification encore augmentée 45. 99 très forte gélification encore augmentée On observe que la glycérine ne provoque pas de gélification de la solution. En revanche, une gélification particulièrement bonne est obtenu avec les trois autres glycols. # Résultats de thermoréversibilité: Observations Observations Composition testée lors de la chauffe lors du refroidissement Gel -Liquéfaction partir -écoulement initial retrouvé à partir 45. 99 Peu-8-Liquéfaction à partir de 45 C de 55 C 45. 99 de PEG-8-Ecoulement et viscosité plus-retour à l'état initial à 40 C +50g de la solution A faibles à 60 C Gel 2 -Perte très importante de - à 55.3 C : écoulement et viscosité i7' :oArr. l'écoulement dés 37 à 45 C très différent de l'état initial 173.24 g de- à 46.6 C : début de gélification monopropylèneglycol de surface avec formations de ,-chute de la viscosité morceaux de gel opaque +50g de la solution A à45-50 C - retour à sa forme initiale à 38.9 C # Résultats de viscosité : L'ajout de polysaccharide seul a parfois provoqué une augmentation de viscosité, parfois une diminution. Ainsi, une composition ayant une viscosité de 6000 cPs à 22 C est passée à une viscosité de 7410 cPs. L'ajout ensuite de monopropylèneglycol a augmenté nettement cette viscosité à 12780cPs. En revanche, une autre composition ayant une viscosité de 6010 cPs à 21 C est passée à une viscosité de 3415 cPs. L'ajout ensuite de monopropylèneglycol a légèrement augmenté cette viscosité à 4450 C. L'ajout de NaCI à une composition contenant le polysaccharide provoque souvent une légère augmentation de gélification, mais beaucoup moins importante que celle observée lors de l'ajout de PEG-8 ou de monopropylèneglycol. Exemples 4 : de formulations cosmétiques selon l'invention. Ces préparations ont été obtenues par simple mélange des ingrédients. Gelée hydratante anti-pollution Phase A : Eau déminéralisée qsp 100% Dihydrogenoéthylènediamine tetraacétate disodique 0,2% Urée 3,00% PEG 1,50% Carbomer 1,00% Solution à 1% du Polysaccharide K54 désacétylé 2,00% conservateurs qsp triéthanolamine eqs PhaseB : Mélange de PCA* de Sodium, de Magnésium, de Zinc et de Manganèse 1,00% Polysorbate 20 3,00% Parfum 0,15% Lait solaire protecteur PhaseA : PEG-30 Dipolyhydroxystearate 2,00% Isohexadecane 8,00% Octylmethoxycinnamate 5,00% Huile de monoï 4,00% Butyl Methoxydibenzoylmethane 1,50% conservateurs qsp PhaseB : Eau déminéralisée qsp 100% Disodium Dihydrogenoethylenediamine tetraacetate 0,2% Glycérol 1,50% Sulfate de magnésium heptahydrate 0,70% Solution à 1% du Polysaccharide K54 désacétylé 1,00% conservateurs qsp Phase C : Eau déminéralisée 15,00% Acide Phenylbenzimidazole Sulfonique 1,50% Soude qs pH Phase D : Fucogel 1000 / Polysaccharide riche en fucose 4,00% Phase E : Silica Dimethyl Silylate 0,30% * : PCA=acide pyrrolidone-carboxylique REVENDICATIONS : 1. Utilisation d'au moins un polysaccharide anionique ramifié totalement désacétylé dont l'unité répétitive, répétée de 2500 à 3500 fois, est un tétrasaccharide constitué de 2 molécules de D-glucose, d'une molécule de L-fucose et d'une molécule d'acide D- glucuronique, comme agent filmoprotecteur des surfaces kératinisées. 2. Utilisation selon la revendication 1 caractérisée en ce que l'unité répétitive de ce polysaccharide a la séquence suivante de formule 1 : dans laquelle D-GlcpA est un résidu d'acide D-glucuronique, L-Fucp est un résidu de L-fucose, D-Glcp est un résidu de D-glucose, n étant un nombre entier compris entre 2 500 et 3 500. et en ce que le polysaccharide est utilisé en milieu aqueux. 3. Utilisation dudit polysaccharide selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce qu'il sert d'agent filmoprotecteur des surfaces kératinisées contre les agents de pollution. 4. Utilisation dudit polysaccharide selon la revendication 3, caractérisée en ce qu'il sert d'agent filmoprotecteur des surfaces kératinisées contre les métaux lourds. 5. Utilisation dudit polysaccharide selon la revendication 4, caractérisée en ce qu'il sert d'agent filmoprotecteur des surfaces kératinisées contre un composé choisi parmi le cadmium, le plomb, le nickel, et/ou le mercure, éventuellement sous forme d'alliage. 6. Utilisation dudit polysaccharide selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisée en ce qu'il est le produit de fermentation d'une bactérie Klebsiella aerogenes type 54 souche A3, déposée sous les numéros ATCC 12657 et 12658. 7. Utilisation dudit polysaccharide selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisée en ce qu'il est le produit de fermentation du microorganisme Enterobacter, déposé sous le numéro NCIB 11870. 8. Utilisation du polysaccharide tel que défini selon l'une des revendications précédentes dans une composition cosmétique et/ou dermatologique à des concentrations allant de 0. 001 à 5%. 9. Utilisation dudit polysaccharide selon la revendication 8, caractérisée en ce que ladite composition contient entre 0. 01 et 1% dudit polysaccharide. 10. Utilisation dudit polysaccharide selon l'une des revendications 8 ou 9, caractérisée en ce que la composition contient en outre au moins une autre substance active d'intérêt cosmétique et/ou dermatologique. 11. Utilisation dudit polysaccharide selon l'une des revendications 8 à 10, caractérisée en ce que la composition contient en outre au moins un agent protecteur cutané, de préférence un agent de protection solaire. 12. Utilisation dudit polysaccharide selon l'une des revendications 8 à 11, caractérisée en ce que la composition contient en outre au moins un autre agent filmoprotecteur. 13. Utilisation dudit polysaccharide selon l'une des revendications 8 à 11, caractérisée en ce que la composition contient en outre au moins un pigment et/ou une nacre et/ou des paillettes. 14. Composition cosmétique et/ou dermatologique, caractérisée en ce qu'elle contient au moins un polysaccharide selon l'une des revendications 1 à 9 comme agent filmoprotecteur des surfaces kératinisées. 15. Composition cosmétique et/ou dermatologique selon la revendication 14 caractérisée en ce qu'elle ne contient pas d'alcool ni de sels. 16. Composition cosmétique et/ou dermatologique selon la revendication 15 caractérisée en ce qu'elle contient moins de 10% d'alcool. 17. Composition cosmétique et/ou dermatologique selon l'une des revendications 14 à 15 caractérisée en ce qu'elle est sous forme de gel plastique contenant au moins un glycol. 18. Composition cosmétique et/ou dermatologique selon la revendication 17 caractérisée en ce que le glycol est choisi dans le groupe constitué du butylène glycol, du monopropylène glycol et de PEG. 19. Procédé cosmétique destiné à obtenir une protection des surfaces kératinisées contre les effets de la pollution, caractérisé en ce qu'il consiste à appliquer sur la peau, les phanères et/ou les muqueuses une quantité cosmétiquement efficace de polysaccharide selon l'une des revendications 1 à 7, en association avec des excipients ou véhicules cosmétiques appropriés. 20. Procédé cosmétique destiné à obtenir une protection des surfaces kératinisées contre les effets de la pollution, caractérisé en ce qu'il consiste à appliquer sur la peau, les phanères et/ou les muqueuses une quantité cosmétiquement efficace d'une composition selon l'une des revendications 14 à 18.