Brevet FR2837713A1 — publié le 20031003

adhérence à la peau L'invention concerne une poche destinée à la défibrination d'un fluide biologique, un système à poches comprenant une telle poche, des procédés de défibrination ainsi que l'utilisation d'un élément textile pour la défibrination d'un fluide blologique. L'invention s'applique typiquement à l'élimination de la fibrine du sang ou du plasma d'un animal ou d'un humain, de sorte à obtenir un sang dit incoagulable ou un sérum sanguin, c'est-à-dire un plasma défibriné. o Lors d'un prélèvement de sang, il est connu d'ajouter des produits chimiques ou anticoagulants au sang afin d'éviter sa coagulation. De tels anticoagulants, contenus dans la poche destinée à recueillir le sang prélevé, sont par exemple du citrate-phosphate-dextrose (CPD) ou de l'acide-citrate-dextrose (ACD). s En effet, de tels anticoagulants permettent, en complexant les ions calcium, de bloquer la cascade de coagulation du sang dès le début de la chane. Mais l'ajout d'anticoagulant est parfois indésirable. C'est notamment le cas pour la préparation, à partir de sang incoagulable ou de sérum sanguin, des réactifs biologiques utilisés dans le domaine de la culture cellulaire ou dans le domaine médical. Une solution pour éviter la coagulation du sang sans ajout d'anticoagulant est la défibrination, c'est-à-dire l'élimination de la fibrine du sang ou du plasma sanguin. En effet, lors de la coagulation du sang, le fibrinogène, qui est une protéine soluble présente dans le plasma sanguin, se polymérise, sous l'action de la thrombine, en fibrine insoluble. De cette réaction, il résulte la coagulation, c'est à-dire la formation de caillots sanguins qui comprennent notamment des so globules rouges, éventuellement d'autres cellules sanguines et de la fibrine. Par conséquent, la fibrine est le dernier élément de la cascade de coagulation, et son élimination permet donc d'obtenir un sang incoagulable ou un sérum sanguin. La défibrination du sang est habituellement obtenue en laissant naturellement le sang coaguler et en séparant le sérum des caillots par décantation et/ou centrifugation. Mais ce procédé ne permet pas d'obtenir du sang incoagulable. De plus, les caillots formés enferment une quantité non négligeable de sérum, de sorte que le volume de sérum obtenu et donc la quantité de composants utiles à la préparation ultérieure des réactifs sont réduits de façon non négligeable. Enfin, ce p rocédé est d ifficilement envisageable da ns d es cadences de production importantes. Une autre solution pour la défibrination du sang est le " battage " du sang de sorte à obtenir la fibrine en évitant la formation de caillots. Un tel procédé est par exemple décrit dans le document US-4 129 131 dans lequel des billes rigides ou un matériau réticulé sont utilisés. Une telle solution présente l'inconvénient, lors de l'agitation, de solliciter fortement le récipient dans lequel les billes ou le matériau réticulé sont placés. C'est pourquoi, pour éviter une possible rupture de l'enveloppe du récipient, elle doit être conduite dans un dispositif rigide de prélèvement, ce qui la rend peu pratique à mettre en _uvre. En outre, le matériau réticulé présente une capacité de rétention de la fibrine qui est faible, ce qui nécessite la réalisation ultérieure d'une étape de filtration pour séparer la fibrine et le sang. Pour pallier ces inconvénients, I'invention propose notamment un procédé de so défibrination en une seule étape qui permet d'obtenir de façon simple et efficace un sang incoagulable ou un sérum sanguin, le procédé pouvant être mis en _uvre dans une structure de poche classiquement utilisée dans le domaine du prélèvement et du traitement du sang. A cet effet, et selon un premier aspect, I'invention propose une poche destinée à la défibrination d'un fluide blologique tel que le sang ou le plasma sanguin, du type comprenant une enveloppe extérieure formant un volume intérieur pour s ledit fluide, ladite enveloppe étant munie d'au moins un orifice d'entrée et/ou de sortie du fluide, dans laquelle au moins un élément textile apte à fixer la fibrine du fluide est disposé dans le volume intérieur. S elon u n d euxième aspect, I' invention propose u n système à poches desti né au o prélèvement et à la défibrination d'un fluide blologique tel que le sang ou le plasma sanguin, du type comprenant une poche primaire de recueil du fluide comprenant une enveloppe extérieure formant un volume intérieur pour ledit fluide, ladite enveloppe étant munie d'au moins un orifice d'entrée auquel des moyens de prélèvement du fluide sont connectés par l'intermédiaire d'une première tubulure, dans lequel au moins un élément textile apte à fixer la fibrine du fluide est disposé dans le volume intérieur. Selon un troisième aspect, I'invention propose un procédé de défibrination d'un fluide blologique tel que du sang ou du plasma sanguin, dans lequel on o recueille le fluide dans le volume intérieur d'une poche à l'intérieur duquel au moins un élément textile apte à fixer la fibrine du fluide est disposé, ladite poche étant agitée pendant une durée permettant d'éliminer sensiblement toute la fibrine du fluide. s Selon u n quatrième aspect, I' invention propose u n procédé de prélèvement et de défibrination d'un fluide biologique tel que du sang ou du plasma sanguin, dans lequel on prélève le fluide et on le recueille dans le volume intérieur d'une poche à l'intérieur duquel au moins un élément textile apte à fixer la fibrine du fluide est disposé, ledit volume ne contenant pas de solution anticoagulante et ladite poche étant agitée pendant une durée permettant d'éliminer sensiblement toute la fibrine du fluide. Selon un cinquième aspect, I'invention propose une utilisation d'un élément textile pour la défibrination d'un fluide biologique tel que le sang ou du plasma sanguin, dans laquelle ledit élément est apte à fixer la fibrine du fluide et est mis en contact avec le fluide dans des conditions eVou un temps permettant la défibrination du fluide. D'autres objets et avantages de l'invention appara^'tront au cours de la description qui suit, faite en référence aux dessins annexés dans lesquels: - la figure 1 représente une vue de face d'une poche selon un premier mode de réalisation de l'invention; - la figure 2 représente une vue en perspective et en coupe transversale suivant la ligne 11-ll de la figure 1; - la figure 3 représente une vue de face d'une poche selon un deuxième mode de réalisation de l'invention; - la figure 4 représente, en vue schématique de face, un système à poches o destiné au prélèvement et à la défibrination du sang. Les figures 1 à 3 représentent une poche 1 destinée à la défibrination du sang ou du plasma sanguin. Dans un exemple particulier, le sang est du sang animal tel que du sang de bovins, ovins, porcins, félins, canins et chevaux. En s particulier, le sang est du sang de mouton. Dans un autre exemple particulier, le sang est du sang humain. Dans les modes de réalisation représentés, la poche 1 est souple et comprend une enveloppe extérieure 2 formée de deux feuilles de matériau plastique o souple, soudable et stérilisable 3 et 3'. Par exemple, les feuilles 3 et 3' peuvent être en PVC, polyoléfine, éthylène-acétate de vinyle (EVA), polyuréthanne ou polyester. s Ces deux feuilles sont assemblées sur leur périphérie 4, par exemple par un cordon de soudure 5, de sorte à définir un volume intérieur 6 pour le sang. La poche souple 1 comprend un orifice d'entrée 7 et un orifice de sortie 8 du s sang. Ces orifices 7 et 8 sont destinés à être connectés à des tubulures souples, typiquement en matière plastique, destinées à permettre respectivement l'introduction et la récupération du fluide dans la poche 1. Selon un autre mode de réalisation, non représenté, I'entrée et la sortie du o fluide peuvent se faire par un seul et même orifice. La poche 1 comprend en outre un élément textile 9 disposé dans le volume intérieur 6, sans compartimenter celui-ci. Sur les figures 1 et 2 (premier mode de réalisation), I'élément textile 9 se déplace librement dans la poche 1. Ainsi, lorsque la poche 1 contient le fluide biologique, I'élément textile 9 " flotte " dans la poche 1. L'élément textile 9 est inséré entre les deux feuilles 3 et 3' lors de la fabrication o de la poche 1, avant de réaliser la soudure par exemple. Sur la figure 3 (deuxième mode de réalisation), I'élément textile 9 est fixé localement à l'intérieur de la poche 1. Typiquement, au moins un des bords de l'élément textile 9 est maintenu dans une partie du cordon de soudure 5. Ainsi, I'élément textile 9 est empêché de se replier sur luimême eVou de gêner l'écoulement du fluide en bloquant les orifices d'entrée 7 et/ou de sortie 8 de la poche 1. Dans les modes de réalisation représentés sur les figures 1 à 3, I'élément textile o 9 comprend une feuille formée d'au moins une couche de tricot, de tissé ou de non tissé. Le matériau formant l'élément textile 9 est choisi parmi les polymères ou les copolymères à base de polyéthylène, polypropylène, polyester, polyamide, polyuréthanne et leurs dérivés ou tout autre polymère compatible avec le sang. L'élément textile 9 est apte à retenir la fibrine. Lors du prélèvement, le fibrinogène se transforme en fibrine sous l'action de la tUrombine. Cette fibrine est sous forme de filament. Lorsque les filaments de fibrine entrent en contact avec l'élément textile 9, ils s'enchevêtrent dans les fils eVou fibres de l'élément 9 et restent ainsi bloqués dans l'élément textile 9. En outre, la porosité et la o mouillabilité de l'élément textile 9 permettent d'améliorer la pénétration et la rétention de la fibrine dans celui-ci. Dans les modes de réalisation représentés, I'élément textile 9 est formé d'une feuille placoe à l'intérieur de la poche 1 de sorte que la surface de la feuille est parallèle à la surface des feuilles 3 et 3'. Ainsi, I'épaisseur et le volume de la poche 1 contenant l'élément textile 9 sont sensiblement inchangés par rapport à l'épaisseur et au volume de la même poche sans élément textile 9. La configuration plane de la feuille assure une surface de contact importante o entre la fibrine du sang et l'élément textile 9, et ce sans modifier de façon sensible le volume intérieur 6 de la poche 1. La surface de l'élément textile 9 est par exemple inférieure à la surface des feuilles 3 et 3' qui forment l'enveloppe 2. Cependant, I'élément textile 9 peut également être plissé ou ondulé, par exemple dans le cas o sa surface est supérieure à celle des feuilles 3 et 3'. Afin d'augmenter la probabilité de rencontre entre l'élément textile 9 et le fluide, la surface de cet élément peut représenter plus de 50% de la surface des feuilles 3 et 3'. A titre d'exemple, I'élément textile 9 est constitué d'une feuille rectangulaire de polyester sous forme d'une couche de non-tissé d'une épaisseur d'environ 400 um et ayant une taille de pore moyenne d'environ 40 um. s En variante, une autre forme eVou un nombre différent d'élément textile 9 peut être prévu en fonction notamment de la forme de la poche eVou de la quantité de fluide à défibriner. On décrit à présent, en relation avec la figure 4, un mode de réalisation o particulier d'un système à poches destiné au prélèvement et à la défibrination du sang en circuit clos, ce système comprenant une poche souple 1 telle que décrite ci-dessus. La poche 1, dit poche primaire de recueil, est reliée par l'intermédiaire d'une première tubulure 10 et au niveau de l'un des ses orifices d'entrée 7 à des moyens de prélèvement 11. Le système comprend en outre une poche 12, dite poche secondaire, destinée à recevoir le sang défibriné qui est reliée à la poche 1 par l'intermédiaire d'une deuxième tubulure 13 et au niveau de l'un de ses orifices de sortie 8. La poche secondaire 12 est en matière plastique souple, soudable et stérilisable. Dans un mode de réalisation particulier, les moyens de prélèvement 11 sont une aiguille de prélèvement. Le système à poches comprend en outre un filtre capable de retenir les micro-caillots 14 disposé entre la poche primaire 1 et la poche secondaire 12 sur la deuxième tubulure 13. Ce filtre 14 est constitué d'une chambre o compte-gouttes 15 en matière plastique comprenant un élément poreux 16 ayant un diamètre de pore d'environ 200,um, I'élément poreux 16 étant par exemple en Nylon. Ce filtre 14 permet d'éliminer les derniers filaments de fibrine et les micro-caillots éventuellement présents dans le sang ou le sérum. Dans un autre mode de réalisation non représenté, le système à poches ne s contient pas de filtre capable de retenir les micro-caillots. Dans ces deux modes de réalisation du système à poches, d'autres poches, dites poches satellites (non représentées) peuvent éventuellement être connectées de façon stérile à la poche primaire 1 eVou secondaire 12. C'est le o cas, par exemple, lorsque le sang défibriné ou le sérum doit subir d'autres traitements tel qu'une centrifugation. Le système à poches de l'invention est stérilisable et clos, de sorte que le risque d'une contamination bactérienne est limité. On décrit maintenant deux procédés de prélèvement et de défibrination mettant en _uvre le système à poches représenté sur la figure 4. Dans une première étape des deux procédés, on prélève le fluide et on le o recueille dans le volume intérieur 6 de la poche 1, ledit volume ne contenant pas de solution anticoagulante et ladite poche 1 étant agitée pendant une durée suffisante pour éliminer sensiblement toute la fibrine du fluide. Dans la deuxième étape du premier procédé on transfert le sang défibriné dans la poche secondaire 12. Le transfert du sang défibriné est réalisé via le filtre 14 capable de retenir les m icro-ca il lots. o La poche 12 contenant du sang défibriné peut ensuite être traitée de façon classique par décantation eVou centrifugation pour préparer du sérum sanguin. Typiquement, on laisse décanter le sang défibriné contenu dans la poche 12 de façon à obtenir une couche supérieure contenant le sérum et une couche inférieure contenant le sang sans sérum. On sépare ensuite le sérum du sang, puis, éventuellement, on centrifuge à nouveau le sérum de façon à obtenir un surnageant de sérum sensiblement pur, c'est-à-dire dépourvu de composants cellulaires. En variante, on centrifuge immédiatement le sang défibriné contenu dans la poche secondaire 12 de façon à obtenir une couche supérieure contenant du o sérum pratiquement pur et une couche inférieure contenant le sang sans sérum. Il est alors avantageux d'utiliser un système à poches selon la figure 4 qui comporte en plus au moins une poche satellite en communication fluidique avec s la poche secondaire 12 pour recueillir le sérum sanguin. Dans la deuxième étape du deuxième procédé, après la défibrination du sang, I'agitation de la poche est interrompue de sorte à laisser décanter le sang défibriné dans ladite poche 1 jusqu'à séparation du sérum sanguin et des o éléments cellulaires du sang. Ensuite le sérum est transféré en circuit clos dans la deuxième poche 12. Le transfert du sérum est réalisé via un filtre 14 capable de retenir les s micro-caillots, préférentieliement à l'aide d'une presse. La poche 12 contient alors du sérum sanguin qui peut éventuellement être centrifugé de façon à obtenir un sérum sensiblement pur acellulaire. o 11 est alors avantageux d'utiliser un système à poches selon la figure 4 qui comporte en plus au moins une poche satellite en communication fluidique avec la poche secondaire 12 pour recueillir le sérum sanguin pur. Pendant l'étape de recueil du sang, on agite la poche 1 afin d'améliorer la mise en contact entre les filaments de fibrine et l'élément textile 9. La poche est en position horizontale et l'agitation peut se faire manuellement ou à l'aide d'un agitateur automatique. Dans un exemple particulier, la poche est posée à plat s sur le plateau de l'agitateur automatique en fonctionnement. Lors de cette agitation, I'élément textile 9, du fait de sa souplesse, ne risque pas d'endommager la poche 1. o Dans un exemple particulier, le rapport du volume de sang prélevé sur le volume totai de la poche est inférieur à 1/2, notamment égale à 1/3. Ainsi, la couche de sang contenu dans la poche 1 posée à plat est mince et la surface de contact entre le sang et l'élément textile 9 est étendue. Selon une réalisation, la deuxième tubulure 13 est sécable et soudable afin de pouvoir dissocier du système à poches la poche secondaire 12 contenant le sang défibriné ou le sérum. t REVENDICATIONS 1. Poche (1) destinée à la défibrination d'un fluide blologique tel que le sang ou le plasma sanguin, du type comprenant une enveloppe extérieure (2) formant un volume intérieur (6) pour ledit fluide, ladite enveloppe (2) étant munie d'au moins un orifice d'entrée (7) eVou de sortie (8) du fluide, caractérisée en ce qu'au moins un élément textile (9) apte à fixer la fibrine du fluide est disposé dans le volume intérieur (6). 2. Poche selon la revendication 1, caractérisée en ce que l'élément textile (9) comprend au moins une couche de tricot, de tissé eVou de non-tissé. 3. Poche selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que l'élément textile (9) est réalisé à partir d'un polymère ou d'un copolymère à base de polyéthylène, polypropylène, polyester, polyamide, polyuréthanne et leurs dérivés. 4. Poche selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisée en ce o que l'enveloppe extérieure (2) est formée de deux feuilles (3,3') de matériau plastique souple qui sont assemblées sur leur périphérie. 5. Poche selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que l'élément textile (9) est fixé localement sur une partie de la périphérie (4) du volume intérieur (6). 6. Système à poches destiné au prélèvement et à la défibrination d'un fluide biologique tel que le sang ou le plasma sanguin, du type comprenant une poche (1) primaire de recueil du fluide comprenant une enveloppe extérieure (2) o formant un volume intérieur (6) pour ledit fluide, ladite enveloppe (2) étant munie d'au moins un orifice d'entrée (7) auquel des moyens de prélèvement (11) du fluide sont connectés par l'intermédiaire d'une première tubulure (10), ledit système étant caractérisé en ce qu'au moins un élément textile (9) apte à fixer la fibrine du fluide est disposé dans le volume intérieur (6). 7. Système selon la revendication 6, caractérisé en ce qu'il comprend en outre au moins une deuxième poche (12) de recueil du fluide défibriné qui est reliée à un orifice de sortie (8) de ladite poche (1) par l'intermédiaire d'une deuxième tubulure (13). 8. Système à poches selon la revendication 7, caractérisé en ce qu'un filtre o (14) apte à retenir les micro-caillots est prévu sur la deuxième tubulure (13). 9. Procédé de défibrination d'un fiuide blologique tel que du sang ou du plasma sanguin, dans lequel on recueille le fluide dans le volume intérieur (6) d'une poche (1) à l'intérieur duquel au moins un élément textile (9) apte à fixer la fibrine du fluide est disposé, ladite poche (1) étant agitée pendant une durée permettant d'éliminer sensiblement toute la fibrine du fluide. 10. Procédé de prélèvement et de défibrination d'un fluide biologique tel que du sang ou du plasma sanguin, dans lequel on prélève le fluide et on le recueille o dans le volume intérieur (6) d'une poche (1) à l'intérieur duquel au moins un élément textile (9) apte à fixer la fibrine du fluide est disposé, ledit volume (6) ne contenant pas de solution anticoagulante et ladite poche (1) étant agitée pendant une durée permettant d'éliminer sensiblement toute la fibrine du fluide. s 1 1. Procédé selon la revendication 10, dans lequel le fluide défibriné est ensuite transféré en circuit clos dans une deuxième poche (12) qui est reliée de façon étanche et stérile à la poche (1). 12.Procédé selon la revendication 10, dans lequel le fluide est du sang et, so après défibrination du sang, I'agitation de la poche (1) est interrompue de sorte à laisser décanter le sang défibriné dans ladite poche (1) jusqu'à séparation du sérum sanguin et des éléments cellulaires du sang. 13. PcAdA salon la vendicadon 12, dans lequel serum est ensure tenses en emus dos dens une deuxme poche 2) qui est else de muon Atanche sterile la poche (1). 14.UtHisadon d'un AlAment textile (O) pour la dAbEnadon d'un Duide blologique PI que le sang ou du plasma sanguine, dens laqueMe lade Moment (9) em am mar [bane du Dude ma en _c le Dude dens den Indians emu une dude pedant dbdnion du Dude.