Brevet FR2845244A1 — publié le 20040409

l Procédé de fabrication d'un concentré à base d'organismes d'origine marine tels que des mollusques, des échinodermes et des annélides destiné à être utilisé dans le domaine pharmaceutique, alimentaire, cosmétique ou textile La présente invention vise un procédé de fabrication d'un concentré à base d'organismes d'origine marine tels que des mollusques, des échinodermes et des annélides, destiné à être utilisé dans le domaine pharmaceutique, alimentaire, cosmétique ou textile. Il est connu d'utiliser des organismes marins pour obtenir des substances biologiques actives telles que la chitine. Ainsi, le brevet EP-B-0 869 805 décrit un procédé de 30 préparation de substances actives essentiellement non minérales à partir de la nacre pour fabriquer ensuite des médicaments. 2 2845244 On connaît également les travaux de Taylor et al, publiés dans le bulletin du British Museum Suppl. 1.125pp.+29 plates, 1969, concernant la nacre ou l'aragonite issue des coquilles d'organismes marins. Ces deux publications préconisent une extraction mécanique des substances aboutissant à une pulvérisation à partir de laquelle sont extraites diverses substances biologiquement actives par divers procédés chimiques. Ces procédés 10 nécessitent une pulvérisation de la nacre de la coquille de l'organisme marin tel que le bivalve. Avant de passer au stade adulte, de tels organismes marins se présentent sous forme de larves. Ces larves constituent en 15 milieu naturel ce que l'on nomme le zoo plancton. Ce zoo plancton est un aliment dont la richesse justifie, en particulier, les grandes transhumances des grands cétacés. Ces déplacements prouvent en eux-mêmes l'intérêt que les mammifères ont à consommer ce zoo plancton. 20 La présente invention résulte de cette observation et a pour but de proposer un nouveau procédé de fabrication d'un concentré à base d'organismes marins lorsque ceux-ci se trouvent au stade de larve. Ainsi, l'invention objet de la présente demande consiste en un procédé de fabrication d'un concentré à base d'organismes d'origine marine, notamment de mollusques tels que les bivalves et les gastéropodes, d'échinodermes et d'annélides, 30 caractérisé en ce qu'il consiste à élever des larves desdits organismes marins dans un milieu d'élevage, tel que de l'eau de mer, et à récolter lesdites larves d'organismes marins lorsqu'elles se trouvent au stade trochophore, lesdits 3 2845244 trochophores étant ensuite séparés du milieu d'élevage puis conditionnés. Selon une forme de réalisation, on interrompt le processus 5 d'évolution métabolique des larves lorsqu'elles sont au stade trocophore par un abaissement brutal de la température du milieu d'élevage et on récolte lesdits trocophores après leur sédimentation par gravité. Selon une autre forme de réalisation du procédé selon l'invention, les larves arrivées au stade trocophore sont stimulées de manière à nager en surface du milieu d'élevage, un courant circulaire étant généré à la surface du milieu d'élevage pour créer un tourbillon (vortex) dans lequel les 15 trocophores sont concentrés pour collecte. Ainsi, de manière avantageuse, on obtient facilement et sans opération mécanique au contraire de l'état de la technique, un concentré riche en éléments protéiniques, gluicidiques et 20 en éléments minéraux sensiblement équivalent au zooplancton. Une fois, les trochophores collectés, on réalise une filtration tangentielle puis une concentration. L'analyse du concentré obtenu permet de constater qu'il contient des protéines et également un polysaccharide appelé chitine et qu'il présente une forte teneur en DHA (acide déshydroascorbique), éléments d'une valeur intéressante pour une utilisation dans les divers domaines envisagés. 30 La chitine est présente dans ce concentré car elle est secrétée par la larve au stade trochophore pour fabriquer la coquille de l'organisme marin. Le procédé de fabrication 4 2845244 selon l'invention permet avantageusement d'obtenir cette chitine sans recourir au broyage des coquilles d'organismes marins comme cela était le cas précédemment. En outre, la chitine est obtenue très pure. Cette chitine est un polymère naturel qui possède une structure très approchante des mucoploysaccharides (héparine, acide hyaluronique) dont la tolérance biologique est démontrée. Le DHA présente également de nombreuses applications, en particulier dans le domaine pharmaceutique et alimentaire puisqu'il est indispensable au bon fonctionnement du cerveau humain. L'invention vise également un concentré d'organismes d'origine marine, notamment de mollusques tels que les bivalves et les gastéropodes, d'échinodermes et d'annélides utile dans l'industrie pharmaceutique, cosmétique et 20 alimentaire, caractérisé en ce qu'il est constitué d'au moins un isolat de larves desdits organismes, au stade trochophore. Le concentré obtenu selon le procédé de l'invention est en particulier riche en protéines, en DHA et en chitine et peut 25 se présenter sous forme d'un sirop, d'une pâte pour l'industrie cosmétique, pharmaceutique ou alimentaire. De préférence, l'élevage s'effectue de la manière suivante. On sélectionne les organismes marins selon leur sexe pour en 30 récolter séparément les ovocytes et le sperme. Les ovocytes sont ensuite dilués dans un volume d'eau de mer de manière que leur concentration soit comprise entre 3 et 30 par millilitre. On utilise de préférence des bacs de 8 à 15 2845244 litres environ pour réaliser la fécondation qui se produit en mélangeant de 10 à 15 millilitres d'eau de mer contenant de 50 à 250 spermatozodes par millilitre. Généralement la taille des spermatozodes étant inférieure de 2 à 7 fois à 5 celle des ovocytes, dans un même volume d'eau, le nombre de spermatozodes sera 2 à 7 fois supérieur à celui des ovocytes. Les bacs sont mis à l'écart environ pendant une période de 10 temps de 1 à 3 heures dans de l' eau de mer à température ambiante, non inférieure à 10 Celsius, pour assurer une fécondation optimale. Après cette période, on sépare les ovocytes fécondés des spermatozodes en tamisant le volume du bac de fécondation sur un tamis dont les trous ne sont pas 15 supérieurs à 25 microns. Un volume d'eau de mer qui constituera le milieu d'élevage pour les ovocytes fécondés, est porté à une température généralement comprise entre 10 et 30 Celsius, de préférence 20 entre 20 et 240Celsius. On disperse les ovocytes fécondés dans le milieu d'élevage et on assure un brassage du milieu d'élevage durant la phase de maturation des ovocytes fécondés. La durée d'évolution pour atteindre le stade trochophore varie entre 4 et 15 heures et elle est 25 conditionnée par la température du milieu d'élevage, diminuant avec son augmentation thermique. Une fois que la température du milieu d'élevage souhaitée est atteinte, le brassage cesse et la température est maintenue stable. Les larves nagent alors librement dans le milieu d'élevage. 30 Entre la 4ème et la 12ême heure, on contrôle l'évolution des larves. Lorsque le stade trochophore est constaté, le processus de récolte est engagé. Ainsi, les larves sont 6 2845244 amenées en surface du milieu d'élevage à l'aide de moyens de stimulation tels qu'un émetteur ultra-son, des micro-bulles ou un courant d'eau placé au fond du bac de maturation. Des jets d'eau orientés mis en place sur le bord du bac de maturation génèrent un courant circulaire créant un tourbillon (vortex) dans lequel les larves sont concentrées pour être collectées dans un décanteur. Selon une variante, un abaissement brutal de la température à environ 150Celsius permet de bloquer l'évolution métabolique des larves. On peut alors laisser les larves se déposer par gravité au 15 fond du bac de maturation o elles sont récoltées dans un décanteur. La concentration peut alors être évaluée par observation de l'opacité et comptage au microscope. Tout autre procédé de récolte approprié peut être utilisé 20 dans le cadre de l'invention. Une fois récoltées, les larves sont conditionnées soit par congélation soit par lyophilisation ou encore elles sont directement diluées dans des préparations avec adjonction 25 notamment de gel et conservateurs. La présente invention a également pour objet un dispositif pour la mise en oeuvre du procédé selon l'invention caractérisé en ce qu'il comporte un bac de maturation propre 30 à recevoir le milieu d'élevage et les ovocytes fécondés, ledit bac étant pourvu de moyens de chauffage, de moyens de stérilisation et de moyens de brassage dudit milieu d'élevage. 7 2845244 De préférence, le dispositif comporte également des moyens de collecte des larves vers un bac de décantation. On décrira maintenant l'invention plus en détail en référence au dessin dans lequel la figure unique représente une vue schématique en transparence d'un dispositif de mise en oeuvre du procédé selon l'invention. Le dispositif de mise en oeuvre du procédé selon l'invention comporte un bac de maturation 1 qui contient, en tant que milieu d'élevage, de l'eau de mer. Ce bac est pourvu de moyens de chauffage du milieu d'élevage, tels que quatre lampes infra-rouge, des résistances électriques en 15 porcelaine. Ainsi, on met en oeuvre un volume d'eau de mer dans un bac de maturation d'un volume de 1000 litres. Le milieu d'élevage est chauffé à l'aide des quatre lampes infra-rouges 2 de 20 manière à amener le milieu d'élevage à une température de 240Celsius qui optimise le développement des larves. Le bac de maturation 1 est également pourvu de moyens de stérilisation 3 du milieu d'élevage, tels que des rampes UV. 25 Une pompe 4 permet d'alimenter le bac 1 et assure un brassage du milieu d'élevage pendant la phase de chauffage de celuici. Un thermostat permet de maintenir la température du milieu d'élevage. Après sélection des sexes et fécondation dans un volume d'eau de mer, de préférence de 10 litres, à la température de 150Celsius, on filtre les ovocytes fécondés au travers d'un 8 2845244 tamis calibré de préférence à 25ju pour éliminer les spermatozodes en excès. Les ovocytes fécondés sont alors dispersés dans le volume 5 d'eau de mer contenu dans le bac de maturation 1. Les larves nagent librement dans le milieu d'élevage et la division cellulaire s'effectue ainsi jusqu'au stade de trochophore qui survient généralement au bout de 6 heures pour une température donnée de 240Celsius. Une rampe 5 pourvue de jets orientés permet de générer un mouvement circulaire du milieu d'élevage créant un siphon vers un collecteur 6 destiné à acheminer les larves vers un bac de décantation 7. En variante, un refroidissement brutal de la température du milieu d'élevage à l'aide de moyens de refroidissement permet de bloquer l'évolution des trocophores. Ainsi un refroidissement jusqu'à 100C provoque l'arrêt du métabolisme 20 des larves qui cessent donc de nager et peuvent être récoltées par sédimentation dans le bac de décantation 7, le collecteur 6 guidant les trocophores vers ledit bac 7. 9 2845244 REVEND I CAT IONS 1. Procédé de fabrication d'un concentré à base d'organismes d'origine marine, notamment de mollusques tels que les bivalves et les gastéropodes, d'échinodermes et d'annélides, caractérisé en ce qu'il consiste à élever des larves desdits organismes marins dans un milieu d'élevage, tel que de l'eau de mer, et à récolter lesdites larves d'organismes marins lorsqu'elles se trouvent au stade trochophore, lesdits 10 trochophores étant ensuite séparés du milieu d'élevage puis conditionnés. 2. Procédé de fabrication selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'on interrompt le processus d'évolution 15 métabolique des larves lorsqu'elles sont au stade trocophore par un abaissement brutal de la température du milieu d'élevage et on récolte lesdits trocophores après leur sédimentation par gravité. 3. Procédé de fabrication selon la revendication 1, caractérisé en ce que les larves élevées jusqu'au stade trocophore sont, audit stade, stimulées de manière à nager en surface du milieu d'élevage, un courant circulaire étant généré à la surface du milieu d'élevage pour créer un 25 tourbillon (vortex) dans lequel les trocophores sont concentrés pour collecte. 4. Procédé de fabrication selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'on stimule les larves par émission 30 d'ultrasons, ou de bulles ou création d'un courant. 5. Dispositif pour la mise en oeuvre du procédé selon l'une des revendications 1 à 4, 2845244 caractérisé en ce qu'il comporte un bac de maturation (1) propre à recevoir le milieu d'élevage et des ovocytes fécondés, pourvu de moyens de chauffage (2), de moyens de stérilisation (3) et de moyens de brassage (2) dudit milieu d'élevage. 6. Dispositif selon la revendication 5, caractérisé en ce qu'il comporte également des moyens de collecte (6) des larves vers un bac de décantation (7). 7. Concentré à base d'organismes d'origine marine, notamment de mollusques tels que les bivalves et les gastéropodes, d'échinodermes et d'annélides utile dans l'industrie pharmaceutique, cosmétique, alimentaire ou textile, caractérisé en ce que en ce qu'il est constitué d'au moins un isolat de larves desdits organismes d'origine marine, au stade trochophore.