Brevet FR2825276A1 — publié le 20021206

La présente invention concerne de nouveaux adjuvants pour compositions vaccinales ainsi que leur utilisation pour préparer des compositions vaccinales injectables, lesdites compositions comprenant au moins un antigène, notamment un antigène d'origine virale, bactérienne ou parasitaire et au moins un adjuvant. De très nombreuses substances sont décrites comme améliorant la réponse immunitaire à un antigène. Il y a les sels minéraux insolubles dans l'eau, parmi lesquels l'hydroxyde d'aluminium et le phosphate de calcium sont les plus connus et sont les seuls autorisés à ce jour pour la vaccination humaine. Ils induisent peu de réactions d'intolérance au site d'injection mais leur efficacité est par contre médiocre et leur effet de courte durée. Ils se présentent sous forme de gels. 1/y aussi les huiles injectables utilisées comme adjuvants dans les vaccins vétérinaires. Elles sont très efficaces mais elles induisent parfois des réactions locales. Elles sont mises en oeuvre en mélange avec le milieu antigénique pour former des émulsions fluides injectables. Lorsque ces émulsions sont du type huile-dans-eau (HIE), la protection de l'animal contre la maladie est assurée rapidement, mais seulement pendant une courte durée, de l'ordre de quelques mois. Lorsque ces émulsions sont du type eau-dans-huile (E/H), la protection de l'animal contre la maladie n'est assurée qu'au bout de quelques semaines mais elle dure longtemps, jusqu'à une année ou plus. On pense que cette protection à long terme est due à l'enrobage par l'huile, des gouttes de milieu antigénique. Il y a encore les sels hydrosolubles de cations multivalent associés à un anion organique qui ont été décrits dans les brevets français publiés sous les numéros FR 2 733 151 et FR 2 754 715. Ces sels solubles sont très bien tolérés et assurent une protection rapide, mais de courte durée, lorsqu'ils sont utilisés comme adjuvant unique. Lorsqu'ils sont combinés à des huiles sous forme d'émulsions ou de micro-émulsions (H/E), ils induisent une protection prolongée de durée cependant inférieure à celle conférée par des vaccins de type (E/H). Tous les adjuvants d'immunité de l'état de la technique ne sont disponibles que sous forme liquide ou de gels. Or ceci engendre des problèmes de stabilité au stockage et de contamination. Il n'existe pas aujourd'hui de composition adjuvante solide qui puisse être dispersée aisément dans une phase aqueuse par simple agitation. C'est pourquoi l'invention a pour objet, une composition solide adjuvante de vaccin caractérisée en ce qu'elle comprend un support solide injectable. Par composition solide, on désigne plus particulièrement une composition qui se présente sous la forme d'une poudre ou sous la forme de granulés. Par support solide injectable, on désigne un composé solide sur lequel un liquide est capable d'être absorbé, adsorbé, imprégné ou ancré tout en conduisant à un mélange résultant solide, sans lui donner un aspect pâteux ou fluide. Les poudres ou granulés objet de la présente invention contiennent généralement au plus 5% en poids d'eau, plus particulièrement au plus 4% en poids d'eau et tout particulièrement au plus 3% en poids d'eau. Comme exemples de support solide injectable contenu dans la composition objet de la présente invention, il y a par exemple une silice pyrogénée hydrophile comme l'AEROSIL 200, un sucre injectable et plus particulièrement le lactose, le dextrose ou le mannitol, un polysaccharide et plus particulièrement une dextrine ou une cyclodextrine, un polymère cellulosique et plus particulièrement l'hydroxypropyl méthyl cellulose, la méthyl cellulose ou l'éthyl cellulose, un sel de cation métallique multivalent ou un mélange de sels de cations métalliques multiva- lents ou un mélange de deux ou plusieurs de ces composés. Comme exemples de cations métalliques multivalent, il y a plus particulièrement les cations métalliques divalents ou trivalents et tout particulièrement les cations divalents du calcium, du magnésium, du manganèse ou du zinc ou bien les cations trivalents du fer ou de l'aluminium. Les sels de cations métalliques sont injectables. Il s'agit par exemple d'un hydroxyde, d'un carbonate, d'un citrate, d'un gluconate, d'un glucoheptonate, d'un fructoheptonate, d'un lactate, d'un acétate, d'un propionate, d'un salicylate, d'un chlorure ou d'un glycérophosphate. Comme exemples de sels mis en oeuvre dans la préparation de la composition objet de la présente invention, il y a l'hydroxyde de calcium, le carbonate de magnésium, le carbonate de manganèse, le gluconate de calcium, le gluconate de manganèse, le glycérophosphate de manganèse, le gluconate de zinc, le fructoheptonate de calcium, le salicylate d'aluminium ou l'acétate d'aluminium. Selon un premier aspect particulier de la présente invention, le support solide injectable est un sel de cation métallique multivalent ou un mélange de sels de cations métalliques multivalent et est plus particulièrement un sel de calcium ou un sel de manganèse ou un mélange de ces sels. Selon un deuxième aspect particulier de la présente invention, le support solide injectable est un mélange d'un ou plusieurs sels de cations métalliques multivalent avec un ou plusieurs sucres injectables. Selon un troisième aspect particulier de la présente invention, le support solide injectable est de la silice pyrogénée hydrophile comme l'AEROSIL 200 ou un mélange d'AEROSIL 200 avec un ou plusieurs sucres injectables. Selon un quatrième aspect particulier de la présente invention, le support solide injectable est un mélange d'un ou plusieurs sels de cations métalliques multivalent et de silice pyrogénée hydrophile. La composition telle que définie précédemment peut comprendre en outre un agent tensioactif ou un mélange d'agents tensioactifs. Cet agent tensioactif ou ce mélange d'agents tensioactifs a de préférence un nombre HLB global compris entre 5 et 15. Au sens de la présente invention, le nombre HLB est calculé par la formule : HLB = 20 dans laquelle Is représente l'indice de saponification et la, l'indice d'acide dudit tensioactif ou dudit mélange d'agents tensioactifs. Ces deux indices, de saponification et d'acide, sont déterminés par des méthodes décrites dans la Pharmacopée européenne. Le ou les agents tensioactifs sont principalement choisis parmi les corps gras modifiés et de préférence parmi les corps gras modifiés ayant un nombre HLB global compris entre 6 et 14. Les corps gras modifiés utilisés de la présente invention, peuvent être d'origine minérale végétale ou animale. Comme corps gras modifiés d'origine minérale, il y a les huiles d'origine pétrolière. Comme corps gras modifiés d'origine végétale, il y a les huiles végétales modifiées, par exemple les huiles modifiées d'arachide, d'olive, de sésame, de soja, de germes de blé, de pépins de raisin de tournesol, de ricin, de lin, de soja, de maïs, de coprah, de palme, de noix, de noisettes ou de colza. Comme corps gras modifiés d'origine animale, il y a par exemple le squalane modifié, le squalène modifié, l'huile modifiée de spermaceti ou l'huile modifiée de suif. Par corps gras modifiés, on désigne notamment les dérivés alcoxylés de corps gras et plus particulièrement les dérivés alcoxylés d'huiles ou les dérivés alcoxylés d'esters alkyliques d'huiles et plus particulièrement, les dérivés éthoxy- lés et/ou propoxylés d'huiles ou les dérivés éthoxylés et/ou propoxylés des esters méthylique, éthylique, propyliques linéaire ou ramifié ou butyliques, linéaire ou ramifiés, desdites huiles. L'invention a plus spécifiquement pour objet une composition telle que définie précédemment, dans laquelle le corps gras modifié est choisi parmi les dérivés éthoxylés d'huiles ayant un nombre d'OE, compris entre 1 et 60. L'invention a particulièrement pour objet, une composition telle que définie précédemment, dans laquelle le corps gras modifié est un dérivé alcoxylés d'huile de maïs ou un mélange de dérivés alcoxylés d'huile de maïs, ayant un nombre HLB global compris entre 10 et 14 ou une composition telle que définie précédemment, dans laquelle le corps gras modifié est un dérivé éthoxylé d'huile de ricin ou un mélange de dérivés alcoxylés d'huile de ricin, ayant un nombre HLB global compris entre 7 et 10. Comme exemples de telles compositions, il y a la composition dans laquelle le corps gras modifié est choisi parmi les dérivés éthoxylés d'huile de maïs ayant un nombre d'OE compris entre 20 et 40 ou la composition dans laquelle le corps gras modifié est un mélange de dérivés éthoxylés d'huile de ricin ayant un nombre d'OE égal à 7 et de dérivés éthoxylés d'huile de ricin ayant un nombre d'OE égal à 60. Selon un cinquième aspect particulier de la présente invention, celle-ci a pour objet une composition telle que définie précédemment, dans laquelle le ou les agents tensioactifs sont choisis parmi les dérivés alcoxylés d'esters d'acides gras et de polyols ou les dérivés alcoxylés d'éthers d'alcools gras et de polyols et plus particulièrement, les triglycérides d'acides gras alcoxylés, les esters alcoxylés de polyglycérol d'acides gras, les dérivés alcoxylés d'esters d'acides gras avec un hexol, tel que par exemple le sorbitol ou le mannitol ou les dérivés alcoxylés d'esters d'acides gras avec un anhydride d'hexot, comme le sorbitane ou le mannitane. Comme acides gras appropriés à la préparation de ces esters modifiés il y a plus particulièrement, ceux comportant de 12 à 22 atomes de carbone, avantageusement un acide gras liquide à 20 C, tels que par exemple, ceux comportant de 16 à 18 atomes de carbone, comme l'acide oléique, l'acide ricinoléique ou l'acide isostéarique. La composition, telle que définie ci-dessus, contient notamment, un ou plusieurs dérivés éthoxylés d'esters d'acides gras et de polyol ou dérivés éthoxylés d'éthers d'alcools gras et de polyols, ayant un nombre d'OE, compris entre 1 et 60. L'agent tensioactif ou le mélange d'agents tensioactifs de cette composition telle que définie ci-dessus, a plus particulièrement un nombre HLB global compris entre 10 et 14 et de préférence entre 12 et 13,5. La composition telle que définie précédemment peut aussi comprendre un ou plusieurs corps gras. Par corps gras, on entend dans le cadre de la présente invention, un composé ou un mélange de composés choisis les huiles d'origine minérale, végétale ou animale, les esters alkyliques desdites huiles, les esters alkyliques d'acides gras ou les éthers alkyliques d'acides gras, les esters d'acides gras et de polyols ou les éthers d'alcools gras et de polyols. Comme exemples d'huile d'origine minérale, il y a les huiles d'origine pétrolière, comme les huiles blanches minérales telles que le MARCOL 52. Comme exemples d'huiles d'origine végétale, il y a l'huile d'arachide, l'huile d'olive, l'huile de sésame, l'huile de soja, l'huile de ger- mes de blé, l'huile de pépins de raisin, l'huile de tournesol, l'huile de ricin, l'huile de lin, l'huile de soja, l'huile de maïs, l'huile de coprah, l'huile de palme, l'huile de noix, l'huile de noisette, l'huile de colza ou encore le squalane ou le squalène d'olive. Comme exemples d'huiles d'origine animale, il y a l'huile de spermaceti, l'huile de suif, le squalane ou le squalène extraits des foies de poissons. Comme exemples d'esters alkyliques d'huiles, il y a les esters méthyliques, éthylique, pro- pyliques linéaire ou ramifié ou butyliques, linéaire ou ramifiés, desdites huiles. Comme acides gras appropriés à la préparation des esters cités ci-dessus, il y a plus particulièrement, ceux comportant de 12 à 22 atomes de carbone, tels que par exemple, l'acide myristique, l'acide palmitique, l'acide oléique, l'acide ricino- léique ou l'acide isostéarique et avantageusement un acide gras liquide à 20oC. Comme exemples d'esters d'acides gras, il y a les esters alkyliques d'acides gras, tels que, l'oléate d'éthyle, l'oléate de méthyle, le myristate d'isopropyl ou le pal- mitate d'octyle, les esters d'acides gras et de polyols, et plus particulièrement, les monoglycérides d'acides gras, les diglycérides d'acides gras, les triglycérides d'acides gras, les esters d'acides gras avec un polyglycérol ou les esters d'acides gras et de propylèneglycol, les esters d'acides gras avec un hexol, tel que par exemple le sorbitol ou le mannitol, les esters d'acides gras avec un anhydride d'hexol, comme le sorbitane ou le mannitane. Au sein d'un même produit commercial, l'huile est parfois associée avec un ou plusieurs agents tensioactifs non ioniques. Comme exemples d'agents tensioactifs que l'on peut associer à une huile dans une même phase adjuvante, il y a ceux décrits précédemment, comme ayant intrinsèquement des propriétés adjuvantes. De façon plus générale, il y a les tensioactifs non ioniques des familles des esters ou éthers d'acides gras et de sucre comme le sorbitol, le mannitol, le saccharose ou le glucose, les esters d'acides gras et de glycérol ou de polyol, des dérivés hydrophiles de ces esters obtenus par greffage de fonctions alcool, éther-oxyde, carboxylique, amine ou amide, des lécithines, des acides ou alcools gras éthoxylés et ou propoxylés, des chaînes grasses de ces tensioactifs comportant de 8 à 22 atomes de carbone. Parmi ces agents tensioactifs, on préfère ceux ayant une chaîne grasse comportant de 14 à 20 atomes de carbone et plus particulièrement, les acides oléique, ricinoléique, cétostéarique et leurs dérivés et tout particulièrement les oléates de mannitol et les dérivés de oléates de mannitol obtenus par greffage de fonctions hydrophiles telles que par exemple les fonctions amide, amine, alcool, polyol, carboxylique ou de radicaux éthoxy, propoxy et/ou butoxy ou les oléates de mannitane ou leurs dérivés ; ils sont obtenus par anhydrisation de la chaîne carbonée polyhydroxylée du mannitol qui se cydise alors en 1-4 ou en 2-6. De façon générale lorsqu'un agent tensioactif non ionique ou un mélange d'agents tensioactifs non ioniques est présent dans une composition vaccinale, associé à une huile pour exprimer ses propriétés émut- sionnantes, sa concentration est comprise entre 0,01 mg / ml et 500 mg/ml et de préférence entre 0,1 mg/ml et 200 mg/ml. Comme exemples d'association d'huiles avec un agent tensioactif non ionique, il y a les produits commercialisés sous le nom MONTANIDETM, dont les caractéristiques sont exposées dans le tableau suivant Nom Composition Emulsion produite après Conductivité Viscosité dispersion dans l'eau à 25 C (mPa. s) (type ; % de phase (luS cm~') aqueuse en poids) MONTANIDETM Huile minérale + H/E 5000 20 ISA 25 esters de manni-75 % tol MONTANIDE Huile minérale + HIE 5000 20 ISA 25A esters de manni-75 % tol + avridine MONTANIDETM Huile minérale + H/E 1000 25 ISA 28 esters de manni-75 % toi + oléate d'éthyle MONTANIDETM Huile minérale + E/H/E 1000 50 ISA 206 esters de manni-50 % toi + PEG 500* MONTANIDETM Huile minérale + E/H 1 200 ISA 50 esters de manni-50 % toi MONTANIDETM Huile végétale + E/H 1 70 ISA 708 esters de 30% mannitol * PEG : polyéthylèneglycol selon un aspect particulier de la présente invention, elle comprend une association comprenant : de 50 % à 95 % en poids d'oléate de mannitane éthoxylé ayant un nombre d'OE compris entre 5 et 15, et, de préférence, entre 7 et 11 et de 5 % à 50% en poids d'oléate de mannitane. La composition selon l'invention, peut comporter un agent stimulant immunitaire conventionnel tel l'Avridine&commat;, la N, N-dioctadecyl-N', N'-bis (2-hydroxyéthyl) propanediamine, les dérivés du MDP (muramyl dipeptide), notamment le thréonylMDP, les dérivés de l'acide mycolique ou les dérivés du Lipide A. La composition telle que définie précédemment, comprend généralement entre 10 % et 90 % en poids de support solide injectable, et entre 10 % et 90 % en poids de tensioactif ou entre 10 % et 90% en poids d'un mélange constitué d'un ou plusieurs corps gras et d'un ou plusieurs tensioactifs. Selon un sixième aspect particulier de la présente invention, la composition telle que définie précédemment, comprend au plus 30 % en poids de support solide injectable, lorsque ce support solide injectable est de la silice pyrogénée hydrophile comme l'AEROSIL 200, un mélange de silice pyrogénée hydrophile avec un ou plusieurs sucres injectables ou un mélange d'un ou plusieurs sels de cations métalliques multivalent et de silice pyrogénée hydrophile. Selon un septième aspect particulier de la présente invention, la composition telle que définie précédemment, comprend au moins 50% en poids de support solide injectable, lorsque ce support solide injectable est un sel de cation métallique multivalent ou un mélange de sels de cations métalliques multivalent ou un mélange d'un ou plusieurs sels de cations métalliques multivalent avec un ou plusieurs sucres injectables. La composition selon l'invention peut aussi comprendre entre 1% et 10% en poids d'agent dispersant injectable. Comme agent dispersant injectable, il y a par exemple les sels de sodium ou d'ammonium des acides citrique, glycolique, lactique, phosphorique, tartrique ou acétique. La composition solide, objet de la présente invention peut être formulée sous forme de poudres ou sous formes de granulés. L'invention a aussi pour objet un procédé de préparation de la composition telle que définie précédemment, comprenant les étapes suivantes : (a) si nécessaire, la préparation d'un mélange de tous les éléments constitutifs du support solide injectable avec ajout éventuel de l'agent dispersant, (b) l'addition sous agitation, des tensioactifs, et éventuellement des corps gras liquides, au mélange préparé à l'étape (a), ou à la poudre de support solide injectable, dans un mélangeur pour former une poudre soit dans un mélangeurgranulateur pour former des granulés. Selon un autre aspect de la présente invention, celle-ci a pour objet, l'utilisation de la composition telle que définie précédemment, comme phase adjuvante d'une composition vaccinale. Le vaccin ainsi formé est destiné à la vaccination humaine ou vétérinaire. L'invention a aussi pour objet un procédé de préparation d'une composition injectable comprenant l'adjonction à une phase antigénique comme adjuvant d'immunité, d'une quantité efficace de la composition telle que définie précédemment. La phase antigénique contient un ou plusieurs antigène ou générateurs in vivo de composés comprenant une séquence d'acides aminés. Par antigène ou au moins un générateur in vivo d'un composé comprenant une séquence d'acides aminés, on désigne soit des micro-organismes tués, tels que les virus, les bactéries ou les parasites, soit des fractions purifiées de ces micro-organismes, soit des micro-organismes vivants dont le pouvoir pathogène a été atténué. Comme exemples de virus pouvant constituer un antigène selon la présente invention, il y a le virus de la rage, les herpès virus, tels que le virus de la maladie d'Aujeszky, les orthomixovirus tels que Influenzae, les picornavirus tels que le virus de la fièvre aphteuse ou les rétrovirus tels que les VIH. Comme exemples de micro-organisme du type bactérien pouvant constituer un antigène selon la présente invention, on peut citer E. Coli, et ceux des genres Pasteurella, Furonculosis, Vibriosis, Staphylococcus et Streptococcus. Comme d'exemples de parasites, il y a ceux des genres Trypanosoma, Plasmodium et Leishmania. On peut aussi citer les virus recombinants notamment les virus non enveloppés, tels que les adénovirus, le virus de la vaccine, le virus Canarypox, les herpès virus ou les baculovirus. On désigne aussi un vecteur recombinant viral non enveloppé vi- vant, dont le génome contient, insérée de préférence dans une partie non essen- tielle pour la réplication du virus enveloppé correspondant, une séquence codant pour une sous-unité antigénique induisant une synthèse d'anticorps et/ou un effet protecteur contre le susdit virus enveloppé ou micro-organisme pathogène ; ces sous-unités antigéniques peuvent être par exemple, une protéine, une gly- coprotéine, un peptide ou une fraction peptidique et/ou protectrice contre une infection par un micro-organisme vivant tel un virus enveloppé, une bactérie ou un parasite. Le gène exogène inséré dans le micro-organisme peut être, par exem- ple, issu d'un virus Aujeszky ou HIV. On peut citer notamment un plasmide recombinant constitué d'une séquence de nucléotides, dans laquelle est insérée une séquence nucléotidique exogène, provenant d'un micro-organisme ou d'un virus pathogène. Cette dernière séquence nucléotidique a pour but de permettre l'expression d'un composé comprenant une séquence d'acides aminés, ce composé ayant lui-même pour but de déclencher une réaction immune dans un organisme hôte. Par générateur "in vivo" d'un composé comprenant une séquence d'acides aminés, on désigne tout produit biologique capable d'exprimer ledit composé dans l'organisme hôte dans lequel on a introduit ledit générateur in vivo. Le composé comprenant la séquence d'acides aminés, peut être une protéine, un peptide ou une glycoprotéine. Ces générateurs in vivo sont généralement obtenus par des procédés issus du génie génétique. Plus particulièrement, ils peuvent consister en des micro-organismes vivants, généralement un virus, jouant le rôle de vecteur recombinant, dans lequel est insérée une séquence nucléotidique, notamment un gène exogène. Ces composés sont connus en tant que tels et utilisés notamment comme vaccin sous unitaire recombinant. A cet égard, on peut se référer à l'article de M. ELOIT et al., Journal of virology (1990) 71,2925-2431 et aux demandes internationales de brevet publiées sous les numéros WO-A-91/00107 et WO-A-94/16681. Les générateurs in vivo selon l'invention peuvent aussi consister en un plasmide recombinant comprenant une séquence nucléotidique exogène, capable d'exprimer dans un organisme hôte un composé comprenant une séquence d'acides aminés. De tels plasmides recombinants et leur mode d'administration dans un organisme hôte ont été décrits en 1990, par LIN et al., Circulation 82 : 2217,2221 ; COX et al., J. of VIROL, Sept. 1993,67, 9,5664-5667 et dans la demande internationale publiée sous le numéro WO 95/25542. Selon la nature de la séquence nucléotidique comprise dans le générateur in vivo, le composé comprenant la séquence d'acides aminés qui est exprimé au sein de l'organisme hôte, peut : (i) être un antigène, et permettre le déclenchement d'une réaction immune, (ii) avoir une action curative vis-à-vis d'une maladie, essentiellement une maladie d'ordre fonctionnel, qui s'est déclenchée chez l'organisme hôte. Dans ce cas, le générateur in vivo permet un traitement de l'hôte, du type thérapie génique. A titre d'exemple, une telle action curative peut consister en une synthèse par le générateur in vivo de cytokines, comme les interleukines, notamment l'interleukine 2. Celles-ci permettent le déclenchement ou le renforcement d'une réaction immune visant à l'élimination sélective des cellules cancéreuses. Une composition selon l'invention comprend une concentration en antigène qui dépend de la nature de cet antigène et de la nature du sujet traité. Il est toutefois particulièrement remarquable qu'un adjuvant selon l'invention, permette de diminuer notablement la dose habituelle d'antigène requise. La concentration adéquate d'antigène peut être déterminée de manière classique par l'homme du métier. Généralement, cette dose est de l'ordre de 0, 1 ug/cm à 1 g/cm3 plus généralement comprise entre 1 g/cm et 100 mg/cm3. La concentration dudit générateur in vivo dans la composition selon l'invention dépend, là encore, notamment de la nature dudit générateur et de l'hôte dans lequel il est administré. Cette concentration peut être aisément déterminée par l'homme du métier, sur la base d'expérience de routine. A titre indicatif, on peut toutefois préciser que lorsque le générateur in vivo est un micro-organisme recombinant, sa concentration dans la composition selon l'invention peut être comprise entre 102 et 1015 microorganismes/cm3, de préférence entre 105 et 1012 microorganismes/cm3. Lorsque le générateur in vivo est un plasmide recombinant, sa concentration dans la composition selon l'invention peut être comprise entre 0,01 g/dm3 et 100 g/dm3. Le vaccin tel que défini précédemment, est préparé en mélangeant la phase adju- vante et la phase antigénique, en ajoutant éventuellement de l'eau ou un milieu diluant injectable. La présente invention a aussi pour objet, une composition solide constituée d'un mélange de la composition adjuvante solide telle que définie précédemment et d'un Iyophilisat de phase antigénique. La présente invention a encore pour objet, un procédé de préparation d'un vaccin, par dispersion dans un milieu aqueux injectable, d'une quantité efficace d'un mélange constitué de la composition adjuvante solide telle que définie précédemment et d'un Iyophilisat de phase antigénique. La présente invention a enfin pour objet, une forme pharmaceutique injectable constituée de deux contenants contenus dans un même emballage, caractérisée en ce que : le premier contenant contient un mélange constitué de la composition adjuvante solide telle que définie précédemment et d'un Iyophilisat de phase antigénique et en ce que : le deuxième contenant contient un milieu aqueux injectable. Selon les constituants mis en oeuvre, une telle forme pharmaceutique est destinée à la vaccination humaine ou vétérinaire. Ces derniers objets de la présente invention présentent plus particulièrement des avantages en matière de stockage et de conservation des vaccins et notamment des vaccins atténués vivants. Ils permettent aussi de diminuer le risque de contamination des sujets soumis à la vaccination grâce à la préparation dudit vaccin juste avant son injection dans le sujet. Les exemples suivants illustrent l'invention sans toutefois la limiter. Exemple 1 1-On prépare les compositions adjuvantes solides Ai à A7 suivantes, en mélangeant les ingrédients en poudres dans les proportions indiquées dans le ta- bleau suivant (pourcentage pondéraux) : Ai A2 A3 A4 As A6 A7 Lactose 9% 29% 29% 14% 14% 9,5% 0% GIMn 89% 69% 59% 69% 69% 69, 5% 100% CtNa 2% 2% 2% 2% 2% 2% 0% GICa 0% 0% 10% 15% 0 9,5% 0% LaspCa 0% 0% 0% 0% 15% 9,5% 0% Total 100 % 100 % 100 % 100 % 100 % 100 % 100 % sa : gluconate de calcium ; UtNa : citrate de sodium ; LaspUa : L aspartate de calcium 2-On prépare des solutions aqueuses des compositions solides A1 à A7, dosées à 100 mg par cm3 de gluconate de manganèse. 3-On prépare les solutions injectables V1 à V7 en mélangeant 0,2 cm3 de chacune des solutions respectives de A1 à C7 avec de 1, 8 cm3 de sérum et 20 ut d'une solution mère d'ovalbumine dosée à 10 mg par cm3. Les solutions ainsi for- mées contiennent donc 10 mg par cm3 de gluconate de manganèse et 0,1 mg. par cm3 d'ovalbumine. On prépare aussi une solution témoin T contenant 0,1 mg. par cm3 d'ovalbumine sans adjuvant. 4-On prépare 8 groupes G1 à Gs de cinq souris femelles, souche OF1, d'un poids moyen de 18 à 20 g. On injecte 100 ut de solution V1 à chacune des souris du groupe G1, 100 ut de solution Vz à chacune des souris du groupe Gs, 100 pl de solution V3 à chacune des souris du groupe G3, 100 ut de solution V4 à chacune des souris du groupe G4, 100 ut de solution V5 à chacune des souris du groupe Gs, 100 ut de solution V6 à chacune des souris du groupe G6, 100 ut de solution V7 à chacune des souris du groupe G7 et 100 pi de solution T à chacune des souris du groupe Gg Une vaccination de rappel est faite après 28 jours. Les prélèvements sont effectués J = 14 jours, 28 jours, 42 jours, 56 jours et 90 jours. les dosages des IgG1 et IgG2a sont réalisés par la technique ELISA. Les résultats sont consignés dans le tableau suivant : V1 V2 V3 V4 V5 V6 V7 T IgG1 J = 14j 400 800 2 400 1 600 3 200 800 2 400 100 J = 28j 600 3 200 2 400 1 600 6 400 1 600 6 400 100 J = 42j 96 000 128 000 192 000 192 000 256 000 128 000 256 000 1000 J = 56j 96 000 128 000 192 000 192 000 192 000 128 000 256 000 2000 J = 90 j 32 000 64 000 128 000 128 000 96 000 64 000 128 000 1000 IgG2a J = 14 j 100 100 100 100 100 100 100 100 J = 28 j 100 100 100 100 100 100 100 100 J = 42j 4 000 1 000 32 000 8 000 1 000 12 000 8 000 1000 J 56j 2000 1 500 24000 4000 2000 8000 8000 1000 J 90j 2000 2000 12000 3000 4000 6000 4000 1000 Exemple 2 1-On prépare par simple mélange, des constituants sous agitation douce les phases grasses suivantes : dz dz 4 > 3 C4 KROVOL (% en poids) 80 60 30 0 oléate de mannitane 10 10 10 10 (% en poids) oléate de mannitane 10 30 60 90 éthoxylé (8 OE) (% en poids) HLB 7 12,3 11,7 11,1 KROVOL TM : huile de maïs éthoxylée (40 OE) 2-On prépare les compositions adjuvantes solides B, à B4 suivantes, en mélangeant les poudres de sels de cations multivalents et de support solide injectable dans un mélangeur Diosna LP3, en ajoutant sous agitation et en granu- lant, les phases grasses préparées au paragraphe précédent. On obtient des granulés blancs, poudreux et homogènes de composition suivante (% pondéraux) : B, 82 Bs 84 AEROSIL 200 24 24 24 24 Glen 6 6 6 6 #1 70 0 0 0 #2 0 70 0 0 c00700 c4 00 0 70 AEROSIL 200 : silice pyrogenee hydrophile ; GIMn : gluconate de manganèse, 3-On prépare des solutions aqueuses des compositions solides B1 à B4, dosées à 100 mg par cm3 de gluconate de manganèse : 4-On prépare les solutions injectables W1 à W4 en mélangeant 0,2 cm3 de chacune des solutions respectives de Bi à B4 avec de 1,8 cm3 de sérum et 20 pl d'une solution mère d'ovalbumine dosée à 10 mg par cm3. Les solutions ainsi formées contiennent donc 10 mg par cm3 de gluconate de manganèse et 0,1 mg. par cm3 d'ovalbumine. On prépare aussi une solution témoin T1 contenant 0,1 mg. par cm3 d'ovalbumine et 10 mg par cm3 de gluconate de manganèse et aussi une so- lution témoin T2. contenant 0,1 mg. par cm3 d'ovalbumine sans adjuvant. 5-On prépare 6 groupes H1 à H6 de cinq souris femelles, souche OF1, d'un poids moyen de 18 à 20 g. On injecte 100 ut de solution W1 à chacune des souris du groupe H1, 100 pl de solution W2 à chacune des souris du groupe H2, 100 pl de solution W3 à chacune des souris du groupe H3, 100 ut de solution W4 à chacune des souris du groupe H4, 100 pl de solution T1 à chacune des souris du groupe H5 et 100 nul de solution T2 à chacune des souris du groupe H6 Une vaccination de rappel est faite après 28 jours. Les prélèvements sont effectués J = 14 jours, 28 jours, 42 jours, 56 jours et 90 jours. Les dosages des IgG1 et IgG2a sont réalisés par la technique ELISA. Les résultats sont consignés dans le tableau suivant : W1 Wz Ws W4 Ti Tz IgG1 J = 14j 4 000 2 000 3 000 4 000 500 100 J = 28j 24 000 8 000 8 000 8 000 2 000 100 J = 42 j 1 024 000 512 000 1 024 000 512 000 256 000 100 J = 56 j 256 000 192 000 256 000 128 000 96 000 100 J = 90j 256000 64000 128000 64000 48000 100 IgG2a J = 14j 100 100 100 100 100 100 J = 28j 100 100 100 100 100 100 J = 42 j 64 000 48 000 64 000 24 000 128 000 100 J = 56 j 96 000 48 000 64 000 24 000 128 000 100 J = 90j 16 000 8 000 32 000 8 000 24 000 100 Exemple 3 1-On prépare par simple mélange des constituants sous agitation douce, les phases grasses suivantes : dz #6 #7 #8 #9 #10 KROVOLTM 0 0 0 0 100 0 MARCOL 52 50 50 0 0 0 0 oléate de mannitane 2,5 5 28 2,5 0 0 oléate de mannitane 47,5 0 0 47,5 0 100 éthoxylé (8 OE) TCM 0 0 36, 35 0 0 0 AAB2 0 0 0 50 0 0 SIMULSOL 2599 0 45 0 0 0 0 SIMULSOL 1292 DF 0 0 35,65 0 0 0 KROVOL : huile de maïs éthoxylée (40 OE) ; MARCOL TM 52 : huile blanche minérale mélange purifié d'hydrocarbures saturés ayant un nombre moyen d'atomes de carbone autour de 19, 7 ; SIMULSOL 1292DF : huile de ricin hydrogénée éthoxylée ; SIMULSOL 2599 : acide oléique éthoxylée ; AAB2 ; huile blanche minérale mélange purifié d'hydrocarbures saturés ayant un nombre moyen d'atomes de carbone autour de 23,6 ; TCM : Triglycérides à chaînes moyennes. 2-On prépare les compositions adjuvantes solides C1 à C6 suivantes, en introduisant la poudre de gluconate de manganèse dans un mélangeur DiosnaTM LP3, en ajoutant sous agitation et en granulant, les phases grasses préparées au paragraphe précédent. On obtient des granulés, poudreux et homogènes de composition suivante (% pondéraux) : C1 C2 C3 C4 Cg Ce GIMn 80 80 80 80 80 80 2000000 #6 0 20 0 0 0 0 #7 0 0 20 0 0 0 #8 0 0 0 20 0 0 (fla0000200 0 0 00 0 20 GIMn : gluconate de manganèse. 3-On prépare des solutions aqueuses de compositions solides Ci à C6 dosées à 30 mg par cm3. 4-On prépare les solutions injectables Xi à X6 en mélangeant 1,0 cm3 de chacune des solutions respectives de Ci à C6 avec de 0,98 cm3 de sérum et 20 ut d'une solution mère d'ovalbumine dosée à 10 mg par cm3. Les solutions ainsi formées contiennent donc 12 mg par cm3 de gluconate de manganèse et 0,1 mg. par cm3 d'ovalbumine. On prépare aussi une solution témoin T3 contenant 0,1 mg. par cm3 d'ovalbumine et 12 mg par cm3 de gluconate de manganèse et aussi une so- lution témoin T4 contenant 0,1 mg par cm3 d'ovalbumine sans adjuvant. 5-On prépare 8 groupes 11 à 18 de cinq souris femelles, souche OF1, d'un poids moyen de 18 à 20 g. On injecte 100 ut de solution Xi à chacune des souris du groupe 11, 100 ut de solution X2 à chacune des souris du groupe l2, 100 ut de sotution Xs à chacune des souris du groupe 13, 100 1-11 de solution X4 à chacune des souris du groupe 14, 100 pi de solution Xs à chacune des souris du groupe ts, 100 1-11 de solution X6 à chacune des souris du groupe 16, 100 1-11 de solution Ts à chacune des souris du groupe t ? et 100 1-11 de solution T4 à chacune des souris du groupe Is. Une vaccination de rappel est faite après 28 jours. Les prélèvements sont effectués J = 14 jours, 28 jours, 42 jours, 56 jours et 90 jours. Les dosages des IgG1 et IgG2a sont réalisés par la technique ELISA. Les résultats sont consignés dans le tableau suivant : X1 X2 X3 X4 X5 X6 T3 T4 IgG1 14j 300 600 600 400 1 600 100 28j 1 600 64 00 1 600 6 400 3 200 1 200 6 400 100 42j 64 000 192 000 128 000 256 000 192 000 128 000 192 000 1000 56j 48 000 64 000 96 000 128 000 128 000 64 000 96 000 1000 90j 8000 16000 8000 32000 48000 32000 16000 1000 IgG2a 14j 100 100 100 100 100 100 100 100 28 j 100 100 100 100 100 100 100 100 42j 64 000 4000 8 000 24 000 12 000 2 000 12 000 100 56j 16000 1000 2000 2000 1000 1000 1500 1000 90j 3 000 1 000 1 000 1 000 1 000 1 000 1 000 1 000 Revendications 1. Composition solide adjuvante de vaccin caractérisée en ce qu'elle comprend un support solide injectable. 2. Composition telle que définie à la revendication 1, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'une poudre ou sous la forme de granulés. 3. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 ou 2, caractérisée en ce que la poudre ou les granulés contiennent au plus 5% d'eau. 4. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 3 caractérisée en ce que le support solide injectable est choisi parmi une silice pyrogénée, un sucre injectable et plus particulièrement le lactose, le dextrose ou le mannitol, un polysaccharide et plus particulièrement une dextrine ou une cyclodextrine, un polymère cellulosique et plus particulièrement l'hydroxypropyl méthyl cellulose, la méthyl cellulose ou l'éthyl cellulose, un sel de cation métallique mul- tivalent ou un mélange de sels de cations métalliques multivalent ou un mélange de deux ou plusieurs de ces composés. 5. Composition telle que définie à la revendication 4, caractérisée en ce que les cations métalliques multivalent, sont des cations métalliques divalents ou trivalents et sont plus particulièrement choisis parmi les cations divalents du calcium, du magnésium, du manganèse ou du zinc ou bien parmi les cations trivalents du fer ou de l'aluminium. 6. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 4 ou 5, caractérisée en ce que les sels de cations métalliques sont choisis parmi les hydroxyde, carbonate, citrate, gluconate, glucoheptonate, fructoheptonate, lactate, acétate, propionate, salicylate, chlorure ou glycérophosphate. 7. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 4 à 6, caractérisée en ce que les sels de cations métalliques sont choisis parmi l'hydroxyde de calcium, le carbonate de magnésium, le carbonate de manganèse, le gluconate de calcium, le gluconate de manganèse, le glycérophosphate de manganèse, le gluconate de zinc, le fructoheptonate de calcium, le salicylate d'aluminium ou l'acétate d'aluminium. 8. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que le support solide injectable est un sel de cation métallique multivalent ou un mélange de sels de cations métalliques multivalent et est plus particulièrement un sel de calcium ou un sel de manganèse ou un mélange de ces sels. 9. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que le support solide injectable est un mélange d'un ou plusieurs sels de cations métalliques multivalents avec un ou plusieurs sucres injectables. 10. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que le support solide injectable est de la silice pyrogénée hydrophile ou un mélange de silice pyrogénée hydrophile avec un ou plusieurs sucres injectables. 11. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que le support solide injectable est un mélange d'un ou plusieurs sels de cations métalliques multivalent et de silice pyrogénée hydrophile. 12. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un agent tensioactif ou un mélange d'agents tensioactifs. 13. Composition telle que définie à la revendication 12, dans laquelle l'agent tensioactif ou le mélange d'agents tensioactifs a un nombre HLB global compris entre 5 et 15. 14. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 13, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre un ou plusieurs corps gras. 15. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 12 à 14, caractérisée en ce qu'elle comprend une association comprenant : de 50% à 95% en poids d'oléate de mannitane éthoxylé ayant un nombre d'OE compris entre 5 et 15, et, de préférence, entre 7 et 11 et de 5 % à 50% en poids d'oléate de mannitane. 16. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 12 à 15, caractérisée en ce qu'elle comprend entre 10 % et 90 % en poids de sup- port solide injectable, et entre 10 % et 90 % en poids de tensioactif ou entre 10 % et 90% en poids d'un mélange constitué d'un ou plusieurs corps gras et d'un ou plusieurs tensioactifs. 17. Composition telle que définie aux revendications 10, 11 et 16, caracté- risée en ce qu'elle comprend au plus 30 % en poids de support solide injectable. 18. Composition telle que définie aux revendications 8,9 et 16, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins 50% en poids de support solide injectable. 19. Composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 18, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre entre 1% et 10% en poids d'au moins un agent dispersant injectable. 20. Composition telle que définie à la revendication 19, caractérisée en ce que l'agent dispersant injectable, est choisi parmi les sels de sodium ou d'ammonium des acides citrique, glycolique, lactique, phosphorique, tartrique ou acétique. 21. Procédé de préparation de la composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 12 à 20, comprenant les étapes suivantes : (a) si nécessaire, la préparation d'un mélange de tous les éléments constitutifs du support solide injectable avec ajout éventuel de l'agent dispersant, (b) l'addition sous agitation, des tensioactifs, et éventuellement des corps gras liquides, au mélange préparé à l'étape (a), ou à la poudre de support solide injectable, dans un mélangeur pour former une poudre soit dans un mélangeurgranulateur pour former des granulés. 22. Utilisation de la composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 20, comme phase adjuvante d'une composition vaccinale. 23. Procédé de préparation d'une composition injectable comprenant l'adjonction à une phase antigénique, d'une quantité efficace de la composition telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 20. 24. Composition solide constituée d'un mélange de la composition adjuvante solide telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 20 et d'un Iyophilisat de phase antigénique. 25. Procédé de préparation d'un vaccin, par dispersion dans un milieu aqueux injectable d'un mélange constitué de la composition adjuvante solide telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 20 et d'un Iyophilisat de phase antigénique. 26. Forme pharmaceutique injectable, constituée de deux contenants contenus dans un même emballage, caractérisée en ce que le premier contenant contient un mélange constitué de la composition adjuvante solide telle que définie à l'une quelconque des revendications 1 à 20 et d'un Iyophilisat de phase antigénique et en ce que le deuxième contenant contient un milieu aqueux injectable.