Brevet FR2832409A1 — publié le 20030523

DESCRIPTION L'invention concerne des oligopeptides utilisés comme éliciteurs des défenses naturelles des plantes contre les pathogènes fongiques et/ou bactériens et/ou viraux et/ou ravageurs, par application foliaire, racinaire ou par injection, et obtenus par voie de synthèse organique ou enzymatique. Les matières actives des préparations phytosanitaires peuvent avoir une action directe sur les micro-organismes, c'est le cas des molécules inhibant certaines voies métaboliques des cellules ou qui affectent leur organisation. Il s'agit généralement d'un traitement curatif. En lutte biologique, le traitement curatif est assuré par l'utilisation d'un agent antagoniste ou parasitaire. De même, on emploie un micro-organisme très compétitif pour la colonisation de l'espace quand il s'agit un traitement préventif. Les matières actives des préparations phytosanitaires peuvent avoir la propriété d'agir indirectement en activant le système de défense naturel (SDN) de la plante. Ceci se traduit par la sensibilisation de la plante à une éventuelle attaque ultérieure de la part du pathogène. A cette étape, les gènes responsables de la synthèse des protéines de défense et des phyto-alexines se trouvent activés, et les produits correspondants sont synthétisés dès le premier contact entre la cellule végétale et son agresseur. On parle alors d'un traitement curatif par le biais d'éliciteurs. Les réactions de défenses peuvent être localisées au niveau du site d'attaque, il s'agit d'une réaction d'hypersensibilité (HR) qui provoque la mort cellulaire. Elles peuvent se généraliser et aboutir à une résistance systémique acquise (SAR). Globalement, deux mécanismes de défense concourent à freiner la propagation de la maladie. D'une part, sur le site de pénétration du pathogène, les cellules infectées s'autodétruisent pour retarder sa progression (réaction d'hypersensibilité). D'autre part, des signaux d'alertes aux cellules avoisinantes créent une zone de résistance locale acquise où s'accumulent de nombreux composés de défense. Des signaux sont également transmis à la plante entière, aboutissant ainsi à une résistance systémique acquise (SAR). La particularité innovante de cette invention se situe au niveau du nouveau mode d'action qui est préventif. En effet, cette nouvelle classe d'éliciteurs permet de simuler une attaque de pathogènes au niveau des cellules végétales. Ces dernières vont enclencher un mécanisme naturel de défense qui va provoquer une HR mais aussi une SAR, et ce au moins une fois, ce qui permettra de prévenir encore plus efficacement l'attaque. De très faibles quantités d'éliciteurs suffisent pour sensibiliser la membrane cytoplasmique. Ainsi, le seuil de détection des éliciteurs par les plantes peut atteindre une valeur de 10-9 Molaire ou même plus basse (Boller et al. 1995 ; Annu. Rev. Plant Physio. Plant. Mol. Biol.). ELICITEURS Depuis l'introduction du terme éliciteur par Keen et al. (1972, Phytopathology), il a été démontré que plusieurs substances de structures chimiques diverses possèdent la propriété d'activer les systèmes naturels de défense (SDN) des plantes. Ce sont notamment ceux d'origine abiotique et qui sont représentés par les ions mercuriques, cupriques, aluminiques, les acides arachidonique, phosphorique, salycilique, fulvique et humique. Il existe aussi des éliciteurs biotiques dont les plus connus sont : Les oligosaccharides : ils font partie des premiers éliciteurs à être les mieux caractérisés (Darvill and Albersheim (1984, Annu. Rev. Plant. Physiol)]. Ils se composent de 4 classes : oligoglucannes, oligochitine, oligochitosane, oligogalacturonides, d'origine végétale [Côté et al. (1994, Plant Mol. Biol)]. Oligoglucannes : l'hepta-ss-glucoside ramifié en positions (1,3-1, 6) est le plus petit oligoglucoside connu pour son action élicitrice. Il a été isolé à partir de Phytophtora sojae. La chitine : c'est un polymère linéaire de (1, 4) -N-acétyl-ss-glucosamine qui se rencontre chez les champignons supérieurs et représente le constituant majeur de leurs mycella. La partie soluble de la chitine (libérée par l'action des chitinases végétales), provoque la lignification et la production de phytoalexines chez certaines plantes [Pearce et al. (1982, Physio. Plant Pathol), Ren et al. (1992, Plant Physiol)] Les oligogalacturonides : ils sont probablement libérés par la dégradation des homogalacturonanes (polysaccharides pectiques) suite à une attaque du pathogène contre la plante. Ces homogalacturonanes sont composés de résidus de l'acide 1,4- a-D-galactosyluronique et entrent dans la composition des parois cellulaires des plantes supérieures [Côté et al. (1994, Plant Mol. Biol)]. Les enzymes : Boland et al. (1997, FEBS Letters) ont démontré que le traitement de certaines plantes par une cellulase commerciale déclenche la biosynthèse de produits volatils via la voie de signal de l'acide octadécanoïque. Klüsener et al. (1999, FEBS Letters) ont étudié les interactions entre des enzymes cellulolytiques d'une part, et un éliciteur issu d'une culture de levure (Eschscholtzia californica) d'autre part, avec des bicouches lipidiques. Ils sont arrivés à la conclusion que les éliciteurs peuvent dépolariser les membranes cytoplasmiques, influencer les flux ioniques à travers celles-ci et même perturber leurs organisations dans certains cas. Certains éliciteurs n'ont donc pas besoin de réagir avec les protéines intracellulaires pour provoquer des réponses de défense chez la plante. Ceci expliquerait le large spectre de certaines molécules. Les polypeptides et protéines : Certains glycopeptides et/ou oligosaccharides libres dérivés des glycoprotéines sont actifs en terme d'élicitation [Anderson et al. (1989,), Ebel et al. (1995, Can. J. Bot), Boller et al. (1995, Annu. Rev. Plant Physio. Plant. Mol. Biol)]. Dans les glycoprotéines de Colletotrichum lindemuthianum (Coleman et al. 1992, Physiol Mol Plant Pathol) et de Puccinia graminis f. sp. tritici (Kogel et al. 1988, Physiol Mol Plant Pathol), les parties glucidiques sont responsables de l'activité élicitrice. Un groupe de bactéries phytopathogènes de type Gram-négatif produit des protéines élicitrices de la HR chez des plantes non-hôtes. Par exemple, Erwinia amylovara (Wei et al. 1992, Science ; Baker et al. 1993, Plant Physiol) possède le gène hrpN qui code pour la production d'une harpin, et Pseudomonas syringe pv. syringe (He et al. 1993, Cell) sécrète une harpinpssqui est le produit du gène hrpZ. La protéine (HrpN) issue d'Erwinia amylovora stimule le flux extracellulaire des cations K+ et régule ainsi les courants dans les cellules d'Arabidopsis thaliana. Une protéine de 18 kDa sécrétée par une souche de Trichoderma virens a été isolée et caractérisée par Hanson et al. (2000, Phytopatology). Cette protéine est capable d'induire la biosynthèse des produits de types terpenoïdes dans le coton. Benhamou et al. (2000, Plant physiology) décrivent qu'une protéine (oligandrin) de faible poids moléculaire, et issue de Pythium oligandrum, induirait une réaction de défense chez les plants de tomates. Cette réaction limiterait la progression de la maladie causée par l'agent phytopathogène Phytophtora parasitic. La cryptogéine est une protéine sécrétée par le champignon Phytophtora cryptogea (Blein et al. 1997, FEBS Letters) qui s'en sert pour le transport du stérol. Elle est aussi connue pour ses propriétés stimulatrices de la défense des plantes (Ricci et al. 1989, Eur. J. Biochem) Oligopeptides : Le champignon Phytophtora sojae produit une glycoprotéine dont une partie (42 kDa) possède la propriété élicitrice. On a même identifié dans la moitié Cterminalede cette glycoprotéine, un oligopeptid de 13 acides aminés qui serait aussi actif [ (Parker et al. 1991, Mol Plant-Microbe Interact.), (Nûrnberger et al. 1994, Cell), (Sacks et al. 1995, Mol Gen Genet.)]. Une structure spécifique et une longueur minimale de la séquence sont essentielles pour que cet oligopeptid garde son activité intacte. Des phénomènes similaires ont été observés dans le cas de la systemine (Pearce et al. 1993, J. Biol Chem). Plusieurs espèces de Phytophtora sécrètent des protéines extracellulaires de faible poids moléculaire (10 kDa) appelées élicitines [ (Ricci et al. 1992, Plant Pathol), (Kamoun et al. 1994, Appl Environ Microbiol), (Boissy et al. 1996, Structure)]. Ces molécules sont capables de provoquer des réactions d'hypersensibilité ainsi qu'une résistance systémique acquise [ (Ricci et al. 1989, Eur. J. Biochem, 183 (3)), (Kamoun et al. 1993, Mo ! Ptant-Microbe tnteract)]. Le peptide AVR9 Cladosporium fulvum est un éliciteur (Wit et al. 1997, Mol PlantMicrobe Interact) de la réaction d'hypersensibilité chez les plants de tomate possédant le gène de résistance (MM-Cf9). Acides aminés : Siegrist et al. (2000, Physiological and Molecular Plant pathology) ont étudié la capacité de certains aminoacides à déclencher la SAR chez les plants de tabac. En travaillant avec des concentrations de 10 mM, ils ont observé les résultats suivants : l'acide ss-aminobutyrique est actif, l'acide a-aminobutyrique est peu actif, l'acide y-aminobutyrique est totalement inactif. SPECIFICITE DE L'INVENTION La spécificité de l'invention repose sur l'utilisation d'Oligopeptides cycliques ou hélicoïdaux. Les travaux de Boland et ai. (2000, Angew. Chem. In. Ed. ) ont montré que les peptaibols induisent la biosynthèse de produits volatils chez certaines plantes. Ceci serait dû à leur capacité à former des canaux ioniques dans les membranes cellulaires. Ces types d'actions semblent être ceux qui enclencheraient la stimulation de la défense naturelle la plus forte qui soit. Ils seraient dus notamment à une nécrose localisée des cellules touchées qui induisent une alerte généralisée auprès des cellules adjacentes et des tissus. Selon Pedras et al. (1997, Phytochemistry), la destruxine B (oligodepsipeptide cyclique) sécrétée par le champignon Alternaria brassicae lors de l'attaque des crucifères induirait la biosynthèse d'une phytotoxine appelée sinalexine. Bodo et al. (1998, Biochem. et Biophys. Acta) ont étudié l'interaction des peptaibols avec les liposomes [vésicules unilamellaires larges (LUV)].) Ils ont pu montrer que le processus majeur impliqué dans l'échange ionique à travers la membrane serait le mode tout ou rien . La formation de pores suffisamment larges est donc essentielle pour la transition des différents ions. Ceci est assuré par la formation d'un complexe supramoléculaire entre un agrégat de 3 à 4 monomères peptidiques et les molécules lipidiques. Yeo et al. (2000, Tetrahedon Letters) ont démontré l'activité inhibitrice des peptavirines A et B contre le virus de la mosaïque du tabac. Une inhibition de 74 à 79% a été observée en utilisant des concentrations de 10 jg/ml. Ces auteurs parlent d'un mécanisme d'action directe des peptavirines dans l'inhibition du pathogène, mais en aucun cas ils n'évoquent l'action élicitrice de ces peptaibols. L'invention concerne l'obtention d'oligopeptides hélicoïdaux par synthèse peptidique. Les structures hélicoïdales de ces peptides se logent à l'intérieur des membranes cellulaires. Quand plusieurs de ces molécules sont insérées ensembles dans la membrane, elles forment un canal ou un pore, qui altère la perméabilité membranaire (dépolarisation). L'originalité de cette invention est donc de clarifier, optimiser et obtenir ces structures moléculaires qui permettent à coup sûr de former ces pores . SYNTHESE DE POLYMERES D'AMINOACIDES A-Polymères obtenus en mélanqes 1. Obtention de polyaminoacide-alcools : La réaction entre un aminoalcool dérivé d'un acide aminé et d'un NCarboxyanhydride dérivé d'un aminoacide, identique R, =R3 et Rz = R4, ou différent, dans un solvant organique et sous conditions non stoechiométriques, aboutit à la formation d'un mélange d'homopolymères ou d'hétéropolymères respectivement. Le procédé permettant l'obtention de ce type de produits peut être décrit par le schéma réactionnel suivant : R = H, alkyl, alkyl substitué Selon la configuration L ou D des aminoacides utilisés : R1 et R3 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles). R1 et R3 peuvent être identiques. Rs et R4 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles). n est compris entre 3 et 30. Procédé de synthèse : A 20 équivalents de NCA (N-carboxyanhydride) d'aminoacide dissous dans le solvant choisi (dichlorométhane, diméthylformamide, acétonitrile, 20 ml de solvant par équivalent de NCA d'aminoacide), est ajouté 1 équivalent d'aminoalcool. Le milieu réactionnel est agité à température ambiante pendant 6 à 48 heures, selon l'aminoacide utilisé. Le précipité obtenu est alors filtré. Exemples : Alanininol R1 =CH3 Rz =H NCA de l'alanine : R3 =CH3 R4 =H NCA de l'acide glutamique R3=CH2CH2COOBzl R4=H NCA de la valine R3 =CH (CH3) 2 R4 =H 2-Obtention de polyaminoacides : R = H, alkyl, alkyl substitué Selon la configuration L ou D des aminoacides utilisés : R1 et R3 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles). R1 et R3 peuvent être identiques. R2 et R4 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles). R2 et R4 peuvent être identiques. n est compris entre 3 et 30. Procédé de synthèse : A 20 équivalents de NCA (N-carboxyanhydride) d'aminoacide dissous dans le solvant adéquat (dichlorométhane, diméthylformamide, acétonitrile, 20 ml de solvant par équivalent de NCA d'aminoacide), est ajouté 1 équivalent d'eau. La réaction est agitée à température ambiante pendant 6 à 48 heures. On filtre le précipité obtenu. Exemples : NCA de l'alanine : R3 =CH3 R4 =H NCA de l'acide glutamique R3 =CH2CH2COOBzl R4 =H NCA de la valine R3 =CH (CH3) 2 R4 =H 3. Obtention de polymères acylés : n R = H, alkyl, alkyl substitué Selon la configuration L ou D des aminoacides utilisés : R1 et R3 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles). R1 et R3 peuvent être identiques. R2 et R4 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles). R2 et R4 peuvent être identiques. n est compris entre 3 et 30. Procédé d'acylation : 250 mg de produits à acyler sont placés en suspension dans 30 ml de diméthylformamide. 15 équivalents d'agent acylant (anhydride acétique, anhydride décanoïque, etc...) sont ajoutés. La réaction est agitée à température ambiante (de 16 heures à 48 heures). Après filtration, un solide blanc poudreux est obtenu. B-Polymères obtenus purs et caractérisés 1. Polyaminoacide-alcools : R = H, alkyl, alkyl substitué Selon la configuration L ou D des aminoacides utilisés : R1 et R3 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles). R1 et R3 peuvent être identiques. R2 et R4 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles). R2 et R4 peuvent être identiques. n, compris entre 3 et 30, est défini pour chaque composé. 2. Polyaminoacides : R = H, alkyl, alkyl substitué Selon la configuration L ou D des aminoacides utilisés : R1 et R3 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles). R1 et R3 peuvent être identiques. R2 et R4 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles). R2 et R4 peuvent être identiques. n, compris entre 3 et 30, est défini pour chaque composé. 3. Polymères acétylés : R = H, alkyl, alkyl substitué Selon la configuration L ou D des aminoacides utilisés : Ri et R3 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles). Ri et R3 peuvent être identiques. Rz et R4 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles). R2 et Rt peuvent être identiques. n, compris entre 3 et 30, est défini pour chaque composé. Exemple de procédé de synthèse des composés purs La synthèse des composés 7,8, 9,10, 11,12, 14 et 15 est réalisée en phase solide en stratégie Fmoc. La résine choisie est de type 2-chlorotrityle (Senn, 1,8 mmoles/g). Les couplages sont effectués en présence de HOBT (2.5 équivalents)/HBTU (2. 5équivalents)/DlEA (4 équivalents). Le solvant utilisé pour l'introduction des Fmoc-aminoacides est le diméthylformamide. Le groupe Fmoc est clivé par une solution de pipéridine à 20% dans le diméthylformamide. Greffaqe de l'aminoalcool : La résine est agitée à température ambiante en présence du Fmoc-aminoalcool et de 6 équivalents de pyridine dans un mélange constitué de diméthylformamide et de dichlorométhane (1/1). Après 16 h de réaction, du méthanol est additionné à la résine et le mélange réactionnel est agité pendant 30 minutes. Après filtration, le taux de charge de la résine est déterminé par analyse UV. Les spectres de masse ESI ont été enregistrés sur un spectromètre de masse (Micromass Platform It) en mode electrospray. Exemple de synthèse : Composé 7 Couplage-déprotection : A 1 9 de résine préchargée en alaninol (taux de substitution 0,15 mmol. g-1) en suspension dans du DMF, est ajoutée une solution de Fmoc-Ala dans le DMF puis une solution d'activation composée d'un mélange équimolaire d'HBTU et HOBt à 0,5 M et de 4 équivalent de DIEA dans le DMF. Le mélange est agité 6 heures puis traité par une solution de pipéridine à 20% dans le DMF. La résine est lavée avec une solution de dichlorométhane puis avec une solution d'éther. Clivage de la résine : La résine est transvasée de la vaisselle de réaction vers un tube à hémolyse auquel on a ajouté 4-5 ml d'une solution de TFA à 50% dans le dichlorométhane. Après 10 minutes sous agitation, la solution est filtrée et la résine lavée au dichlorométhane. Le solvant est évaporé sous vide. Les composé 8 à 15 sont préparés en répétant n fois l'étape couplage-déprotection. 1 : Ac-Alan-Ala-ol (1 4 : Dodécyl-Alan-Ala-ol (1 5 : Ac-Alan-Ala-ol (1 7 : H-Ala1-Ala-ol (MW : 146) ES : [M + H]+ : 147.0 8 : H-Ala2-Ala-ol (MW : 217) ES : [M + Hr : 218.0 ; + NA] + : 240.0 ; [2M + Hr 434. 8 ; [2M + NAr : 457.4 9 : H-Ala3-Ala-ol (MW : 288) ES : [M + Hr : 289.0 10 :H-Ala4-Ala-ol (MW : 359) ES : [M + HF : 360. 2 ; [M + NAp : 382. 2 ; [2M + H : 719. 7 ; [2M + NA] : 741. 5 11 : H-Atas-A ! a-o) (MW : 430) ES : [M + Hr : 431. 4 ; [M + NA] + : 453. 5 ; [2M + Hl' : 861. 3 ; [2M + N] + : 883. 8 12 : H-Atae-A ! a-OH (MW : 501) ES : [M + HF ; 502. 4 ; [M + Nt : 524. 2 13 : H-Alan-Ala-OH (1 Elles participent à la production d'espèces actives de l'oxygène à la fois toxiques pour les agents pathogènes et sont impliquées dans la formation de la réaction hypersensible. Elles interviennent également dans la modification de la paroi cellulaire. Il en résulte une augmentation de la synthèse de la lignine et/ou de subérine (barrières mécaniques). De même, des pontages covalents entre les protéines de la paroi cellulaire sont réalisés. Elles permettent l'oxydation de phénols en quinones très toxiques et l'incorporation des flavonoïdes dans les parois (barrière chimique). Compte tenu du rôle primordial des peroxydases dans la résistance des plantes, nous avons utilisé l'activité peroxydasique comme marqueur de la résistance suite aux traitements par des éliciteurs. Afin de doser les activités peroxydasiques, les feuilles sont broyées en milieu tampon citrate-monohydrogéno-phosphate-disodique. L'extrait est ensuite mis en présence du gaïacol et d'eau oxygénée. Une réaction rapide se produit : le gaïacol est transformé en tétragaïacol. L'apparition du tétragaïacol dans le milieu nous permet de calculer l'activité peroxydasique. Les dosages sont effectués dans ce même tampon en utilisant le gaïacol comme substrat. Les résultats sont exprimés en ADO/mn/g de matière fraîche. b) Mesure de l'activité chitinasique Afin de vérifier que les mécanismes de résistance sont déclenchés, nous avons également dosé une activité enzymatique apparaissant dans les situations de résistance : l'activité chitinasique (enzyme synthétisée dès l'attaque des parasites, qui dégrade la chitine, constituant des parois des champignons phytopathogènes). Réaction colorimétrique utilisée : On utilise un tampon acétate Solution de chitine + extrait enzymatique + tampon acétate qsp 0,5 ml azur à (2 mg/ml) brut 50 mM- (pH5) (100 microlitres) - 7 incubation pendant 30 minutes à 37 C, et sous agitation continue. on arrête la réaction par addition d'une solution d'HCI 1 N - 7 mesure colorimétrique au spectrophotomètre à 550 nm L'activité chitinasique est exprimée en ADO/mn/g de matière fraîche. - Matériel végétal utilisé Toutes les plantes testées sont des jeunes plants obtenus par semis ou par bouturages. On pratique des pulvérisations des formulations obtenues à partir d'oligopeptides. Ces formulations contiennent divers mouillants ou pénétrants capables de véhiculer la matière active (oligopeptides) jusqu'aux cellules. EFFETS ELICITEURS D'OLIGOPEPTIDES Les effets éliciteurs d'oligopeptides de synthèse ont été étudiés chez plusieurs familles de plantes parmi lesquelles on peut citer : courgette, melon, concombre, salade, blé, vigne. Cas de courqettes Des plants de courgette âgés de 3 semaines ont été traités par des oligopeptides. Les résultats obtenus sont résumés dans le tab ! eau ? 1 (Planche 1/2t D'après les résultats dudit tableau, on remarque que c'est le produit 6 qui possède la plus forte activité élicitrice. En admettant que la valeur de 100% d'activité peroxydasique est représentée par le produit 6, les produits 10 et 12 montrent une activité de 50%. Cette différence d'activité pourrait trouver son explication dans la diversité des structures chimiques de ces produits. A des degrés différents, tous les autres produits ont montré une activité élicitrice. Les résultats obtenus indiquent que parmi les produits testés, les acides aminés libres sont beaucoup moins actifs par rapport aux oligopeptides. l'alaninol est le plus actif des résidus testés, suivi dans l'ordre par l'alanine, l'Aib et enfin le GABA. Ces résultats expriment clairement le pouvoir éliciteur des oligopeptides. Cas de la vigne Des plants de vigne âgés de 3 semaines ont été traités par des oligopeptides. Les résultats obtenus sont résumés dans les tableaux ? ! t,)) t. (Ptanche 1/2) La correspondance entre structure et code des produits synthétisés est communiqué dans le tableau N 0 IV (Planche 2/2). EFFET DE PROTECTION ANTI-PATHOGENIQUE DES OLIGOPEPTIDES Exemple 1 : Effet contre la fusariose du melon La pulvérisation d'oligopeptides formulés sur des plants de melon de sept jours et inoculés de fusarium oxysporum fsp melonis quatre jours avant, permet d'obtenir une protection contre le pathogène. Parallèlement, un lot de plantules témoins a vu ses feuilles pulvérisées avec de l'eau. Dix jours après inoculation, les symptômes apparaissent uniquement chez les plants inoculés traités avec de l'eau. Trois semaine après l'infection, ces jeunes plants infectés se dessèchent et meurent. Les plans inoculés et traités avec les oligopeptides ne présentent pas de symptômes avant six semaines et continuent ensuite à se développer normalement. Ces résultats expriment clairement le pouvoir éliciteur de ces oligopeptides sur la résistance des plants de melon vis-à-vis du fusarium sp. Exemple 2 : Effet contre les maladies aériennes du melon En pulvérisant des oligopeptides sur des jeunes plants de melon, on observe un effet similaire de protection contre l'oïdium. Cinq jours après inoculation du pathogène, les symptômes n'apparaissent que sur les plants traités avec de l'eau. Ceux traités avec les oligopeptides ne présentent que peu ou pas de symptômes et continuent à se développer normalement trois semaines après inoculation. Selon les caractéristiques de base de l'invention, les oligopeptides utilisés comme éliciteurs : - sont obtenus par voie de synthèse organique ou enzymatique ; - ont la particularité d'être des hétéro et/ou homopolymères d'acides aminés, protéiques ou non protéiques, constituant des séquences desdits polymères qui sont choisis pour leur propriété à former des structures des types hélicoïdales ou sous forme de feuillets ss. La composition selon l'invention peut : - comporter au moins un oligopeptid comprenant au moins un acide aminé des types protéique, naturel et/ou synthétique, et/ou non protétique, naturel et/ou synthétique ; - se présenter soit sous la forme liquide, notamment de solution aqueuse, soit sous la forme solide, notamment de poudres, granulés ou en enrobage de semences. Les oligopeptides utilisés peuvent être incorporés à un véhicule utilisé en agriculture de type mouillant et pénétrant. L'utilisation des oligopeptides, selon l'invention, ont pour effet de réduire, lorsqu'ils sont appliqués : - aux céréales, notamment le blé, le maïs et le riz, l'attaque des oïdiums, des septorioses, des rouilles, des fusarioses, des pyricularioses et des maladies bactériennes et virales ; - aux arbres fruitiers, notamment le poirier et le pommier, l'attaque des oïdiums, tavelures, des monilioses, des maladies bactériennes et virales telles que la Sharka ; - à la vigne, l'attaque de l'oïdium, du mildiou, du Botrytis, des maladies du bois, des maladies telluriques et virales telles que le Court-Noué ; - aux gazons et en horticulture, les attaques des pythiacées, champignons à sclérotes, fusarioses, oïdiums, maladies bactériennes et virales ; - aux oléagineux, notamment le soja, le tournesol, le melon, la carotte, le chou-fleur et la pomme de terre, l'attaque des oïdiums, des mildious, des pythiacées (Phytophtora, Pythium), des champignons à sclérotes (Rhizoctonia, Sclerotinia, Pyrenochefa), des champignons vasculaires (Fusarium, Verficillium), des maladies bactériennes et virales. REVENDICATIONS 1-Ungopepttdes utthses comme éliciteurs des défenses naturelles des plantes contre les pathogènes fongiques et/ou bactériens et/ou viraux et/ou ravageurs par application foliaire, racinaire ou par injection ; caractérisés en ce qu'ils sont obtenus par voie de synthèse organique ou enzymatique ; en ce qu'ils ont la particularité d'être des hétéro et/ou homopolymères d'acides aminés protéiques et/ou non protéiques et en ce que lesdits acides aminés constituent des séquences desdits polymères qui sont choisis pour leur propriété à former des structures des types hélicoïdales ou sous forme de feuillets ss. 2-Oligopeptides, selon la revendication 1, caractérisés en ce qu'ils présentent la formule suivante : R = H, alkyl, alkyl substitué ; selon la configuration L ou D des aminoacides utilisés : R1 et R3 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles) : R1 et R3 pouvant être identiques ; R2 et R4 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles) : R2 et R4 pouvant être identiques ; n étant compris entre 3 et 30. 3-Oligopeptides, selon la revendication 1, caractérisés en ce qu'ils présentent la formule suivante : dans laquelle R = H, alkyl, alkyl substitué ; selon la configuration L ou D des aminoacides utilisés : Ri et R3 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles) : R1 et R3 pouvant être identiques ; R2 et R4 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles) : R2 et R4 pouvant être identiques ; n étant compris entre 3 et 30. 4-Oligopeptides, selon la revendication 1, caractérisés en ce qu'ils présentent la formule suivante : R = H, alkyl, alkyl substitué ; selon la configuration L ou D des aminoacides utilisés : R1 et R3 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles) : R1 et R3 pouvant être identiques ; R2 et R4 = H, alkyl, alkyl substitué ou chaîne latérale des acides aminés naturels ou non naturels (protégée dans le cas de chaînes fonctionnelles) : R2 et R4 pouvant être identiques ; n étant compris entre 3 et 30. 5-Composition caractérisée en ce qu'elle comporte au moins un oligopeptid obtenu selon l'une quelconque des revendications précédentes et comprenant au moins un acide aminé des types protéique, naturel et/ou synthétique, et/ou non protétique, naturel et/ou synthétique. 6-Composition, selon la revendication 5, caractérisée les oligopeptides utilisés sont incorporés à un véhicule utilisé en agriculture de type mouillant et pénétrant. 7 - Composition, selon la revendication 6, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme liquide, notamment de solution aqueuse. 8-Composition, selon la revendication 6, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme solide, notamment de poudres, granulés ou en enrobage de semences. 9-Utilisation des oligopeptides, tels que définis dans l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisés en ce qu'ils ont pour effet de réduire, lorsqu'ils sont appliqués : - aux céréales, notamment le blé, le maïs et le riz, l'attaque des oïdiums, des septorioses, des rouilles, des fusarioses, des pyricularioses et des maladies bactériennes et virales ; - aux arbres fruitiers, notamment le poirier et le pommier, l'attaque des oïdiums, tavelures, des monilioses, des maladies bactériennes et virales telles que la Sharka ; - à la vigne, l'attaque de l'oïdium, du mildiou, du Botrytis, des maladies du bois, des maladies telluriques et virales telles que le Court-Noué ; - aux gazons et en horticulture, les attaques des pythiacées, champignons à sclérotes, fusarioses, oïdiums, maladies bactériennes et virales ; - aux oléagineux, notamment le soja, le tournesol, le melon, la carotte, le chou-fleur et la pomme de terre, l'attaque des oïdiums, des mildious, des pythiacées (Phytophtora, Pythium), des champignons à scié rotes (Rhizoctonia, Sclerotinia, Pyrenocheta), des champignons vasculaires (Fusarium, Verticillium), des maladies bactériennes et virales.