Brevet FR2827597A1 — publié le 20030124

La présente invention concerne des sels de -1, 9diarylheptaméthine, notamment des sels de carboxonium nonacarbonés et des streptocyanines, leur procédé de préparation, et leur utilisation comme marqueurs biologiques. Les méthodes chimiques, chromatographiques ou spectroscopiques ont longtemps été peu adaptées à la détection de molécules dans le domaine des nano et des subnanogrammes, pour des raisons de sensibilité insuffisante. Depuis les années 60, le marquage radio isotopique, et en particulier l'utilisation de l'iode radioactif (1251), semblait être la méthode analytique de choix pour la détection de substances endogènes et exogènes (hormones, bactéries, virus, toxines, etc. ). Cette technique couramment utilisée de nos jours, tend néanmoins à disparaître. De nouvelles techniques de marquage ont été étudiées et l'amélioration technologique des appareillages utilisés dans les méthodes spectroscopiques a entraîné la suppression progressive des méthodes radioactives de marquage. Celles-ci ont été remplacées par des molécules organiques dites fluorophores, notamment par des cyanines. Les cyanin'es sont des composés intéressants pour le couplage avec des molécules biologiques et peuvent être utilisées comme marqueurs du fait de leur triple caractère : chargé positivement, lipophile et fluorescent. Il est connu d'utiliser certaines cyanines comme marqueurs, en association avec des anticorps, l'ADN, des protéines, des polysaccharides et d'autres molécules biologiques, pour le dosage, le suivi in vivo et in vitro de substances actives ou pour le diagnostic de diverses maladies. Pour qu'un composé puisse être utilisé comme marqueur biologique, il doit avoir un domaine d'absorption et d'émission déplacé vers le proche infrarouge afin de ne pas interférer avec la zone d'autofluorescence du substrat. Il doit également pouvoir se greffer sur la molécule cible par liaison covalente ou par complexation. On connaît divers procédés de préparation de cyanines, mais seulement un nombre limité de synthèses permettent l'accès à des cyanines nonacarbonées. Les cyanines sont le plus souvent obtenues en condensant une base hétérocyclique contenant un groupe méthyle activé et un bisaldéhyde ou tout autre équivalent de type base de Schiff en présence ou non d'un catalyseur. La diversité des bases hétérocycliques existantes offre un choix quasi infini pour la préparation de cyanines. Mais on ne connaît à l'heure actuelle que deux types de bisaldéhydes susceptibles d'être utilisés pour la synthèse de cyanines nonacarbonées. Le premier type de bisaldéhyde est un sel de glutaconaldéhyde répondant à la formule : La base de Schiff correspondante répond à la formule : Il permet d'obtenir différents types de cyanines linéaires, sans aucune fonctionnalisation sur la chaîne polyméthine, tel que décrit par exemple par Y. Nagao, et al., ["Synthesis and Reactivities of 3-Indocyanine-green-acyl-1, 3- thiazolidine-2-thione- (ICG-ATT) as a New Near-Infrared Fluorescent-labeling Reagent", Bioorganic and Medicinal Chemistry, 1998,6, 2179-2184] et par A. S. Waggoner, et al., ["Cyanine Dye Labeling Reagents for Sulfhydryl Groups", Cytometry. 1989,10, 3-10]. Le second bisaldéhyde est du type 2-Q-1-formyl-3hydroxyméthylènecyclohexène dans lequel Q est le plus souvent un hydrogène ou un chlore [G. A. Reynolds, et K. H. Drexhage, "Stable Heptamethine Pyrylium Dyes that Absorb in the Infrared", J. Org. Chem. Vol. 42, No. 5, 1977]. Contrairement aux dérivés du sel de glutaconaldéhyde, le dérivé 2-chloro-l-formyl-3-hydroxyméthylènecyclohexène permet une fonctionnalisation de la chaîne polyméthine, mais aussi une rigidification du système [G.'Patonay, et al., "Functionalization of Near-Infrared Cyanine Dyes", J. Heterocyclic Chem., 33,1685, (1996)] ou [N. Narayanan, et al.,"A New Method for the Synthesis of Heptamethine Cyanine Dyes : Synthesis of New Near-Infrared Fluorescent Labels", J. Org. Chem. 1995,60, 2391-2395]. Un autre procédé pour la préparation de cyanines, est décrit par C. Payrastre et al. ["A Synthetic Pathway to Macrocyclic and Optically Active Pentamethinium Salts" Tetrahedron Letters 1994,35 (19), 3059-3062]. Il consiste à faire réagir un sel de carboxonium pentacarboné avec une amine primaire ou une amine secondaire, puis, par extension, avec des phosphaimines, des amidines, des guanidines, des hydrazines ou des hydrazones. Le sel de carboxonium pentacarboné est obtenu par réaction d'une arylméthylcétone avec le triéthoxyméthane et l'acide perchlorique. Ce procédé est relativement simple à mettre en oeuvre. Les cyanines obtenues présentent cependant une longueur d'onde sax qui reste inférieure à une valeur de l'ordre de 600 nm, ce qui limite leur utilisation comme marqueur. Le but de la présente invention est de fournir de nouvelles cyanines fonctionnalisées ayant une longueur d'onde d'absorption élevée, utilisables notamment comme marqueurs biologiques. C'est pourquoi l'invention a pour objet des sels dans lesquels le cation comprend un groupe l, 9-diarylheptaméthine, ainsi qu'un procédé pour leur préparation, et leur utilisation comme marqueurs biologiques. Un composé selon l'invention répond à la formule (I) suivante : dans laquelle : * Q- est un anion d'un acide fort, choisi par exemple parmi Bof4-, CF3S03-, ClO', I-, Br-, Cl- ; 'G et G'représentent indépendamment l'un de l'autre un groupe OEt, un groupe amino, un groupe phosphaimino, un groupe amidino, un groupe guanidino, un groupe hydrazino, un groupe hydrazono, ou un radical multivalent relié à au moins l'une de ses autres extrémités à un radical répondant à la formule (I') ci-dessous dans laquelle G"représente un groupe OEt, un groupe amino, un groupe phosphaimino, un groupe amidino, un groupe guanidino, un groupe hydrazino, un groupe hydrazono, ou un radical multivalent ; * Ri à Rg représentent indépendamment les uns des autres un hydrogène, un halogène, un radical alkyle, un radical alkyloxy ayant de 1 à 15 atomes de carbone ou un groupe acétamido CH3C ( O ) HN- ; Z représente H ou un halogène, * Rg et R7 représentent indépendamment l'un de l'autre H, ou bien Re et R7 forment ensemble un biradical à 3 ou 4 chaînons, portant éventuellement un ou plusieurs substituants choisis parmi les groupes méthyle ou ester. Lorsque G, G'ou G"représente un radical multivalent, il est choisi de préférence parmi les groupes-NH-E-NH-dans lesquels E est- (CH2) n-, 3n Une catégorie particulière de composés selon l'invention répond à la formule (II) ci-après : Ces sels de 1, 9-diarylcarboxonium nonacarbonés sont particulièrement intéressants dans la mesure où ils peuvent servir de réactifs pour la préparation d'autres composés comportant un groupe heptaméthine. Un composé (II) selon la présente invention peut être préparé à partir d'une arylcétone ArC (O) R' (désignée ci-après par AC) dans laquelle Ar représente un radical phényle portant les substituants Ri à Rs définis ci-dessus et R'repré- sente un radical alkyle ayant de 1 à 5 atomes de carbone, de préférence un méthyle. Le procédé pour la préparation d'un composé (II) est caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir l'arylcétone (AC) avec un mélange de triéthoxyméthane (TEM) et d'un bisaldéhyde (BA) en présence d'un acide fort, en atmosphère inerte et en milieu anhydre. La température est de préférence entre-5 C et 800C, et les quantités de réac- tifs sont telles que les rapports en moles soien les suivants : 1/6 BA/TEM dans laquelle les substituants Z, R6 et R7 ont la signification donnée ci-dessus. A titre d'exemple, on peut citer le 2- chloro-1-formyl-3-hydroxyméthylènecyclohexène (CFHMCH), le 1- formyl-3-hydroxyméthylènecyclohexène (FHMCH), le 2-chloro-1- formyl-3-hydroxyméthylènecyclopentène (CFHMCP), le 1-formyl- 3-hydroxyméthylènecyclopentène (FHMCP), et un sel du glutaconaldéhyde. Le CFHMC est commercialisé par la société Aldrich (No CAS : 61010-04-6). L'atmosphère inerte est avantageusement obtenue en opérant sous argon. Le procédé est mis en oeuvre de préférence à la température ambiante. Le rapport BA/TEM est de préférence égal à 1/4 et le rapport AC/TEM+BA est de préférence égal à 2/5 pour limiter la formation de sous-produits indésirables. Suivant la nature de l'anion Q, l'acide fort est choisi parmi HBF4, CF3SO3H, HC104, HI, HBr ou HC1. Le composé (II) obtenu dans le milieu réactionnel peut être récupéré par précipitation, filtrage, lavage et séchage. La précipitation peut être effectuée dans un solvant tel qu'un éther, un hydrocarbure ou un solvant non polaire. A titre d'exemple, on peut citer l'éther éthylique, le THF, le pentane, l'hexane, le cyclohexane, le cyclopentane ou le tétrachlorure de carbone. La réaction est illustrée par le schéma suivant, correspondant au cas particulier de la 4-méthylacétophénone et du CFHMCH, en présence d'acide tétrafluoroborique : La mise en oeuvre du procédé de préparation d'un composé (II) décrit ci-dessus en faisant réagir la 4-méthylacétophénone et le CFHMCH), mais en omettant l'utilisation de triéthoxyméthane, n'a pas permis d'obtenir le composé (II) attendu. Il se forme en particulier un composé dicétonique répondant à la formule (II') suivante Un composé selon l'invention peut en outre être une streptocyanine répondant à la formule (III) ci-après : dans laquelle : * Ri à R7, Q et Z ont la signification donnée précédemment ; * Rs, Rg, Rio et Ru sont choisis indépendamment les uns des autres parmi : - H ; - les radicaux alkyles ayant de 1 à 12 atomes de carbone ; - les radicaux phényles portant éventuellement des substi- tuants choisis indépendamment les uns des autres parmi H, les halogènes, les radicaux alkyle ou alkyloxy ayant de 1 à 15 atomes de carbone ou le groupe acétamido CH3C (O) HN ; - les groupes-N=CHA'et-NHA'dans lesquels A représente un groupe phényle portant éventuellement un ou plusieurs substituants alkyloxy ou dialkylamine, étant entendu que lorsque Rg (respectivement Rio) est un-N=CHA'et-NHA', Rg (respectivement Rll) est un groupe méthyle. ou bien Rg et Rg et/ou Rio et Ru forment ensemble un cycle aliphatique, comprenant éventuellement un atome d'oxygène. Les streptocyanines (III) sont symétriques lorsque les paires de substituants (Rg, Rg) et (Rio, Rll) sont identiques. Un composé de l'invention peut également être une streptocyanine répondant à la formule (IV) suivante : dans laquelle : * Ri à R7, Q et Z ont la signification donnée précédemment ; * X et X'représentent indépendamment l'un de l'autre R"3P, R"2N (R') C, (R"2N) 2C ou NR"2, R" représentant un alkyle ayant de préférence de 1 à 4 atomes de carbone, ou un phényle. Les streptocyanines (IV) sont symétriques lorsque les substituants X et X'sont identiques. Un composé de la présente invention peut également être un composé dicationique macrocyclique répondant à la formule (V) suivante : dans laquelle Ri à R7r Q et Z ont la signification donnée précédemment, et E est un groupe espaceur choisi de préférence parmi- (CHn- avec n = 3 à 9 ou- (CH2) 20 (CH2) 20 (CH2) 2-. Un composé selon l'invention peut être un sel de 1, 9diaryl hémicarboxonium nonacarboné répondant à la formule (VI) suivante : dans laquelle les divers substituants ont les significations données précédemment. Un composé selon l'invention peut en outre être un sel de l, 9-diaryl hémicarboxonium nonacarboné répondant à la formule (VII) suivante : dans laquelle les divers substituants ont les significations données précédemment. Un composé selon l'invention peut aussi être un composé polycationique non macrocyclique lorsque l'un des substituants G ou G'est un groupe multivalent relié à chacune de ses extrémités à un groupe répondant à la formule (I') définie précédemment. Le procédé de préparation d'une streptocyanine (III) symétrique de l'invention consiste à faire réagir un sel nonacarboné (II) avec un composé azoté, en utilisant au moins deux équivalents de composé azoté pour un équivalent de sel, ledit composé azoté étant choisi parmi les amines, les hydrazines et les hydrazones. Le procédé de préparation d'une streptocyanine (IV) symétrique de l'invention consiste à faire réagir un composé (II) avec un composé azoté, en. utilisant au moins deux équivalents de composé azoté pour un équivalent de sel, ledit composé azoté étant choisi parmi les guanidines, les phosphaimines et les amidines. Un composé dicationique macrocyclique (V) est obtenu en faisant réagir un composé (II) avec une diamine H2N-E-NH2, en utilisant un rapport molaire (II) /diamine de 1/1. Le procédé de préparation d'un sel d'hémicarboxonium heptacarboné (VI) ou (VII) consiste à faire réagir un composé (II) avec un composé azoté, en utilisant un équivalent de composé azoté pour un équivalent de composé (II). Le composé azoté est choisi parmi les amines, les hydrazines, les hydrazones pour un composé (VI) ou parmi les guanidines, les phosphaimines et les amidines pour les composés (VII). Un sel d'hémicarboxonium (VI) peut être utilisé avantageusement pour la préparation de cyanines (III) dissymétriques, par réaction d'un équivalent de composé (VI) avec un équivalent d'un composé azoté choisi parmi les amines, les hydrazines, les hydrazones différent de celui utilisé pour la préparation dudit composé (VI) à partir du composé (II). Un sel d'hémicarboxonium (VII) peut être utilisé avantageusement pour la préparation de cyanines (IV) dissymétriques, par réaction d'un équivalent de composé (VII) avec un équivalent d'un composé azoté choisi parmi les guanidines, les phosphaimines et les amidines différent de celui utilisé pour la préparation dudit composé (VII) à partir du composé (II). Un sel d'hémicarboxonium (VI) peut en outre être utilisé pour la préparation de composés dicationiques non macrocycliques, par réaction de deux équivalents de sel (VI) avec un équivalent d'une diamine. D'une manière analogue, des composés tri-, tétra-ou polycationiques peuvent être obtenus en faisant réagir trois, quatre ou n équivalents (n > 4) de sel (VI) respectivement avec une triamine, une tétramine ou une polyamine. Les sels d'hémicarboxonium (VI) peuvent être greffés sur un substrat portant des fonctions azotées, par l'intermédiai- re de la fonction OEt. Les streptocyanines de l'invention dans lesquelles Z est un halogène peuvent être fonctionna'lisées en remplaçant l'atome d'halogène par un groupement-M- (p-A. Le composé répond alors à la formule dans laquelle M peut être un atome d'oxygène ou de soufre, et A peut être-NHz ou un groupement isothiocyanato-N=C=S. Les streptocyanines de la présente invention répondant aux formules (III), (IV), (VI) ou (VII) peuvent être utilisées avantageusement comme marqueurs pour diverses molécules biologiques telles que par exemple les anticorps, l'ADN, les protéines, les polysaccharides. Un autre objet de la présente invention est un procédé de marquage de molécules biologiques, caractérisé en ce qu'il utilise une streptocyanine selon la présente invention. La présente invention est illustrée plus en détails à l'aide de quelques exemples auxquels elle n'est cependant pas limitée. Le bisaldéhyde utilisé est le 2-chloro-1-formyl-3- hydroxyméthylènecyclohexène CFHMCH. Il a été préparé selon le procédé décrit par G. A. Reynolds, K. H. Drexhage, J. Org. Chem. 1977,42, 885. Il s'agit d'une réaction simple, rapide, et mettant en oeuvre le DMF, le dichlorométhane, la cyclohexanone et l'oxyde de trichlorophosphore qui sont tous des réactifs commerciaux. Le schéma de synthèse se résume de la façon suivante : Le bisaldéhyde CFHMCH se présente sous forme d'une poudre cristalline jaune orangée. Ses caractéristiques sont les suivantes : RMN H (250 MHz, DMSO-d6, 25 C) 8 (ppm), J (Hz) : 1, 58 (q, 2H, CH2-CH2-CH2 J= 6) ; 2,37 (t, 4H, CH2-CH2-CH2 J= 6) ; 10,85 (s, 1H, CHO) ; RMN 13C (62 MHz, DMSO-d6, 25 C) 8 (ppm) : 19,9 CH2-CH2-CH2 ; 23,6 CH2-CH2-CH2 ; 146 (C-Cl) ; Masse (DCI/NH3) : [MH+] = 173, [MNH4= 190, [MN2H/]= 207. Exemple 1 Synthèse d'un composé 1, 9-diarylcarboxonium nonacarboné (IIA) Dans un bicol de 250 ml, on introduit un équivalent de bisaldéhyde (1,235 g/7,15 mmol), 4 équivalents de tri- éthoxyméthane (4,75 ml/28,6 mmol), ainsi qu'environ 4 ml de diéthyléther anhydre. Le mélange quasi homogène est agité magnétiquement sous un flux d'argon. On ajoute alors goutte à goutte un mélange de deux équivalents d'acétophénone (1, 91 ml/14, 3 mmol) et d'un équivalent d'acide tétrafluoroborique à 54 % dans l'éther (0,98 ml/7,15 mmol) Le milieu réactionnel change de couleur au fur et à mesure de l'addition, passant du rouge au bleu, puis au vert. Au bout de quelques minutes, le milieu réactionnel prend en masse, et l'on ajoute alors environ 200 ml de diéthyléther anhydre. Le milieu réactionnel est alors laissé sous agitation de 5 à 10 minutes, puis filtré sous argon sur un fritté n 3. Le précipité rouge violet aux reflets métalliques est lavé avec 200 ml de diéthyléther anhydre. On obtient après séchage sous vide 2,80 g d'une poudre dont la composition, déterminée par RMN du proton, correspondant à un mélange constitué par 86% en mole du composé (IIA) attendu, et de 14% en mole du composé dicétonique (IIA') répondant à la formule suivante : Les caractéristiques du composé (IIA) sont les suivantes : RMN 1H (250 MHz, Cd13, 25 OC) 8 (ppm), J (Hz) : 1, 54 (t, 6H, J=6,9, CH3CH20) ; 1,96 (quint, 2H, J=5,7, Cl2 (5')) ; 2,43 (s, 6H, (2-8)) ; 2,76 (t, 4H, J=5, 7, CH2 (4'-6')) ; 4,50 (q, 4H, J=6,9, CH3Ar) ; 6,52 (d, 2H, J=13, CH CH3CH2O) ; 7,30 7,48 (syst. AB, 8H, J=8,2, CHarom) ; 8,24 (d, 2H, J=13, 0, Cl (3-7 ; RMN 1H (63 MHz, CDCl, 25 C) S (ppm), J (Hz) : 14, 4 (CH3CH20) ; 20, 4 (CHz)) ; 21, 8 ( (Ar) ; 26, 9 (CH2 (4'-5')) ; 69, 3 (CH3CH20) ; 108, 0 (C-) ; 129, 6 (CHH) ; 130, 6 (C4-6) ; 130, 8 (CHarom) ; 133, 6 (Cio-io,) ; 144, 6 (C (ll-n')) ; 156, 4 (Go- ?)) ; 160, 1 (Cs) ; 182, 6 (f. (1-9)) ; Les caractéristiques du composé dicétonique (IIA') sont les suivantes : RMN 1H (400 MHz, CDCl, 25 C) 8 (ppm), J (Hz) : 1, 82 (quint, 2H, J=6, 2, CHs ;) ; 2, 39 (s, 6H, CAr) ; 2, 52 (quint, 4H, J=6, 2, CH2-)) ; 3, 85 (d, 2H, J=7, 2, CH2 (8)) ; 6, 63 (t, 1H, J=7, 2), Cl (7) ; 7, 00 (d, 1H, J=15, 6, CH (2)) ; 7, 25 et 7, 83 (syst. AB, 8H, J= 8, 2, CHarom) ; 8, 18 (d, 1H, J=15, 6, CH (3)) ; RMN C (100 MHz, CDCl, 25 C) 8 (ppm) : 21, 4 (Cs') ; 21, 8 (CHsAr) ; 27, 3 et'27, 4 (C-g') ; 38, 7 (Cg) ; 124, 0 (C2) ; 124, 8 (C) ; 128, 6 et 128, 8, et 129, 4 et 129, 6 (CHarom) ; 131, 8 ( () ; 134, 2 (C (io-io-)) ; 135, 8 (Ce) ; 138, 2 (Cs-Cl) ; 142, 2 (cl) ; 143, 6 et 144, 4 (C (l1-l1'd ; 190, 5 (Ci) ; 196, 5 (Cg) SM (DCI/NHs) : [MH+] = 405 IR (KBr) v (cm-1) 1651 et 1680 (C=O) Exemple 2 Synthèse de la cyanine (IIIA) : Dans un ballon de 100 ml, on a dissous 399,6 mg du produit obtenu selon le procédé de l'exemple 1, c'est-à-dire 0,728 mmol de sel de carboxonium (IIA), dans environ 50 ml d'acétonitrile sec sous argon, à température ambiante. Ensuite on a ajouté 0,150 ml, c'est-à-dire 1,45 mmol, de diéthylamine, la proportion des réactifs étant ainsi de 1 équivalent de composé (IIA) pour deux équivalents de diéthylamine. Après une nuit d'agitation, la solution a été filtrée sur fritté n 3 afin de séparer la cyanine (IIIA) de la dicétone (IIA') (introduite dans le milieu réactionnel en même temps que le composé (IIA)) qui précipite. L'acétonitrile du filtrat a alors été évaporé et le résidu lavé à l'éther, puis recristallisé dans l'éthanol. La cyanine (IIIA) (0,263 g) a ainsi été isolée sous forme de paillettes vertes, ce qui correspond à un rendement de 82%. Les caractéristiques de (IIIA) sont données ci-après RMN H (400 MHz, CDC13, 25 C) 8 (ppm), J (Hz) : 1,19 (m, 12H, ( (CH3-CH2) 2N) ; 1, 78 (quint, 2H, J=6, 0, Cl2 (5'2, 35 (s, 6H, CH3-Ar) ; 2, 46 (t, 4H, J=6, 0, CH2 (4'-6')) ; 3, 46 (m, 8H, ( (CH3-CH2) 2N) ; 5, 98 (d, 2H, j=13, 2, H2-s) ; 7,03 (partie A d'un syst. AB,'4H, J=8,2, CHarom) ; 7, 05 (d, 2H, 3J=13, 2, Ci (3 -7)) ; 7,21 (partie B d'un syst. AB, 4H, J=8,2, CHarom) ; RMN 13C (100 MHz, CDC13, 25 C) 8 (ppm) : 13, 4 (CH3-CH2N) ; 21, 1 (CH2 )) ; 21, 6 (CH3-Ar) ; 27, 0 (CH2 (4'-6')) ; 47, 7 (CH3-CH2N) ; 106, 0 (CH-) ; 124, 4 (C-) ; 128, 5 (CH (cc'-dd')) ; 129, 6 (CH (aa'-bb')) ; 130, 6 (C (lo-io')) ; 140, 3 (C i-ii.)) ; 150, 0 (CH (3-7)) ; 150, 7 (Cs) ; 167, 8 (C (1-9))' SM (Spectrométrie de masse) : nébullisation électronique [M+] 515 ANALYSE ELEMENTAIRE pour CBCiFNz (M=602, 99 g. mors) % théoriques : C : 67,72 H : 7, 35 N : 4,65 % expérimentaux : C : 67,84 H : 7,15 N : 4,55 UV-Visible : (23 C) CH2C12 : #max = 695 nm #= 240000 mol-1.l.cm-1 FLUORESCENCE (CH2Cl2, T = 23 C #exc=686 nm/#émission = 719 nm IR : (Pastille de KBr) v (cm-l) : VBF = 1080 Point de fusion : Pf = 235-237 C (décomposition) La figure 1 représente le spectre UV (4au= 695 nm), le spectre d'émission (#= 719 nm), et le spectre d'excitation (#= 686 nm), dans le dichlorométhane. Exemple 3 Synthèse de la cyanine (IIIB) : Dans un ballon de 100 ml sous argon, à température ambiante, on a dissous 340,5 mg du produit obtenu selon le procédé de l'exemple 1, c'est-à-dire 0,620 mmol de sel de carboxonium (IIA) dans environ 50 ml d'acétonitrile sec. Ensuite, on a ajouté 0,11 ml c'est-à-dire 1,24 mmol de morpholine, la proportion des réactifs étant ainsi de 1 équivalent de composé (IIA) pour deux équivalents de morpholine. Le milieu réactionnel a été conservé sous agitation pendant une nuit, puis la solution a été filtrée sur fritté 25 C) afin de séparer le sel (IIIB) de la dicétone (IIA'). Le filtrat a été évaporé et le résidu lavé à l'éther, puis recristallisé dans l'éthanol. Le sel (IIIB), répondant à la formule précédante, a ainsi été isolé sous forme d'une fine poudre cristalline verte, avec un rendement de 30%. Les caractéristiques de (IIIB) sont données ci-après : RMN H (400 MHz, CDC13, 25 C) 8 (ppm), J (Hz) : 1, 79 (quint, 2H, J=6, 0, CHs) ; 2, 36 (s, 6H, CHs-Ar) ; 2, 53 (m, 4H, J=6, 0, Cl2 (4'-6' 3, 54 (t, 8H, J=4, 5, CHzN), 3, 78 (t, 8H, J=4, 5, Cl20), 6, 23 (d, 2H, J=13, 2, CH-) ; 7, 13 (partie A d'un syst. AB, 4H, J=7, 8, CHarom) ; 7, 21 (d, 2H, J=13, 2, CHz-s) ; 7, 23 (partie B d'un syst. AB, 4H, 3J=7, 8, r'H CHarom) ; RMN 13C (100 MHz, CDC13, (CH2 (5')) ; 21,6 (CH3-Ar) ; 26,9 (CH2 (4' -6')) ; 50, 8 (ppm) : 21, 1 n 3 9 (CHzN) ; 66, 8 (CH2O) ; 108, 0 (CH (2-8)) ; 127, 5 (C -) ; 129, 5 (CH (cc'-dd')) ; 129, 8 (CH (-bb')) ; 130, 1 (C (io-io')) ; 141, 2 (C (li-11')) ; 149, 5 (CH (3-7)) ; 150, 1 (C5) ; 168, 1 (C (l-9)) ; SM (Spectrométrie de masse) : [M+]=543 ANALYSE ELEMENTAIRE pour C34H40BClF4N202. 0,5 H20 (M=630,96g. mol-1) % théoriques : C : 63,81 H : 6,46 N : 4,36 % expérimentaux : C : 63,63 H : 6,00 N : 4,25 UV-Visible : (23 C) CHzCIs : Amax = 706 nm s= 186000 mol-1. l. cm-l FLUORESCENCE (CHCis, T = 23 C) exc=649 nm/émission = 743 nm La figure 2 représente le spectre UV (max= 706 nm), le spectre d'émission (= 740 nm), et le spectre d'excitation (#= 649 nm), dans le dichlorométhane. IR : (Pastille de KB r) y (cm -1) : VBF = 1080 Point de fusion : Pf = 255-257 C (décomposition) La figure 3 donne la structure du composé (IIIA) telle que déterminée par les rayons X. Exemple 4 Synthèse de la cyanine (IVA) : Dans un ballon de 100 ml sous argon, à température ambiante, on a dissous 368,8 mg de produit obtenu selon le procédé de l'exemple 1, c'est-à-dire 0,513 mmol de sel (IIA), dans environ 50 ml d'acétonitrile sec. On a ensuite ajouté 168 mg c'est-à-dire 1,26 mmol de p-méthoxyphényl-diméthylhydrazone ainsi qu'un peu de triéthylamine (10 l) . La proportion des réactifs est ainsi de 1 équivalent de composé (IIA) pour deux équivalents d'hydrazone.-La réaction a été laissée sous agitation pendant une nuit. La solution est alors filtrée sur fritté n 3, afin de séparer le sel (IVA) de la dicétone (IIA') qui précipite. Le filtrat a ensuite été évaporé, puis le résidu lavé à l'éther,. et séché sous vide. Le solide obtenu a été recristallisé dans l'acétonitrile. Le sel (IVA) a ainsi été isolé sous forme d'une fine poudre verte avec un rendement de 10%. Les caractéristiques de (IVA) sont les suivantes : RMN IH (250 MHz, DMSO-d6, 25 C) 5 (ppm), J (Hz) : 1, 86 (m, 2H, CH2 (5')) ; 2, 40 (s, CHAr) ; 2, 63 (m, CH2 (4'-6')) ; 3, 42 (s, 6H, NACH3) ; 3, 81 (s, 6H, LOCH3) ; 6, 96- 7, 09 (m, 6H, CHarom et CHz-s) ; 7, 22-7, 30 (m, 10H, CHarom et CH3-7) ; 7, 70 (m, 4H, CHarom) ; 8, 30 (s, 2H, CHN) ; RMN 13C (100 MHz, CDCl, 25 C) 5 (ppm) : 20, 5 (CH2 (s')) ; 21, 0 (CH-Ar) ; 26, 3 (CHs (4'-6')) ; 37, 5 (CHsN) ; 55, 1 (CHO) ; 110, 2 (CHg) ; 114, 3 (chrom) ; 126, 0 (Cquat, C4-6) ; 127, 4 (Cquat, C-Ci-g) ; 129, 0 (chrom) ; 129, 3 (CHarom) ; 129, 4 (Cquat, C-OCH ; 129, 7 (CHarom) ; 140, 3 (Cquat, C-CH3) ; 147, 5 (CH3-7) ; 147, 9 (CHN) ; 148, 8 (Cquat, Cs) ; 161, 7 (Cquat, C-CHN) ; 163, 8 (Cquat, Cl-9) ; SM (Spectrométrie de masse) : [M+]= 697 ANALYSE ELEMENTAIRE pour C44H46BClF4N4O2 .0, 5 Hz M=784, 333g. mol-1 % théoriques : C : 66,55 H : 5,97 N : 7, 05 % expérimentaux : C : 65,99 H : 5,82 N : 6, 85 UV-Visible : (23 C) CH2C12 : xmas = 822 nm #= 210000 mol-l. l. cm-l FLUORESCENCE (CHCl T = 23 C) #exc=827 nm/#émission = 843 nm Exemple 5 Synthèse de la cyanine (IVB) : Dans un ballon de 100 ml sous argon, à température ambiante, on a dissous 551,9 mg du produit obtenu selon le procédé de l'exemple 1, c'est-0, 767 mmol de sel (IIA), dans environ 50 ml d'acétonitrile sec. On a ensuite ajouté 271,8 mg c'est-à-dire 1,534 mmol p-diméthylaminophényl- diméthylhydrazone, ainsi qu'un peu de triéthylamine (10 p. l). La proportion des réactifs est ainsi de 1 équivalent de composé (IIA) pour deux équivalents d'hydrazone. La réaction a été laissée sous agitation pendant une nuit. La solution a ensuite été filtrée sur fritté n"3, afin de séparer le sel (IVB) de la dicétone (IIA') qui précipite. Le filtrat a été évaporé, puis le résidu lavé à l'éther, et séché sous vide. Le solide obtenu a été recristallisé dans l'acétonitrile. Le sel (IVB) a ainsi été isolé sous forme d'une fine poudre rouge avec un rendement de 15%. Les caractéristiques de (IVB) sont les suivantes : RMN H (250 MHz, DMSO-d6, 25 C) 8 (ppm), J (Hz) : 1, 82 (m, 2H, CH2 (5')) ; 2, 41 (CHsAr) ; 2, 62 (C-i (4'-S')) 3, 01 (N (CH3) 2) ; 3, 43 (CH3N) ; 6, 79 (partie A d'un syst. AB, 4H, J=8, 06, CHarom) ; 7, 05 (d, 2H, J=13, 0, Cl28) ; 7, 15 (d, 2H, J=13, 0, CH3-7) ; 7, 29 et 7, 38 (syst. YZ, 8H, J=7, 52, CHarom) ; 7, 64 (partie B d'un syst. AB, 4H, J=8,06, CHarom) ; 8,30 (s, 2H, CHN) ; RMN 13C (100 MHz, CDCl3, 25 C 5 (ppm) : 20,6 (CH2 (5')) ; 21,0 (CH3-Ar) ; 26,3 (CH2(4'-6')) ; 37 7 (CH3N) ; 39,6 ( (CH3) 2N) ; 109,8, 111,8, 120,6 (Cquat) ; 126,4 (Cquat) ; 129,1, 129,5, 129,7, 129,8 (Cquat) ; 140, 0 (Cquat) ; 145, 7, 146,6 (Cquat) ; 149,0, 152,2 (Cquat) ; 162,5 (Cquat) ; SM (Spectrométrie de masse) : Electrospray [M+] = 723 ANALYSE ELEMENTAIRE pour C46H52BClF4N6. 0,5 H2O (M = 810, 397g. mol-1) % théoriques : C : 67,36 H : 6,51 N : 10,25 % expérimentaux : C : 67,15 H : 6,30 N : 10,15 UV-Visible : (23 C) CH2C12 : Amax = 863 nm s= 160000 mol-1. l. cm-l FLUORESCENCE (CH2C12, T = 23 C) émission = pas de fluorescence Revendications 1. Composé répondant à la formule (I) dans laquelle : a Q est un anion d'un acide fort ; a G et G'représentent indépendamment l'un de l'autre un groupe OEt, un groupe amino, un groupe phosphaimino, un groupe amidino, un groupe guanidino, un groupe hydrazino, un groupe hydrazono, ou un radical multivalent relié à au moins l'une de ses autres extrémités à un radical répondant à la formule (I') dans laquelle G"représente un groupe OEt, un groupe amino, un groupe phosphaimino, un groupe amidino, un groupe guanidino, un groupe hydrazino, un groupe hydrazono, ou un radical multivalent ; * Ri à R5 représentent indépendamment les uns des autres un hydrogène, un halogène, un radical alkyle, un radical alkyloxy ayant de 1 à 15 atomes de carbone, ou un groupe acétamido CH3C (O) HN- ; Z représente H ou un halogène, * Re et R7 représentent indépendamment l'un de l'autre H, ou bien R6 et R forment ensemble un biradical à 3 ou 4 chaînons, portant éventuellement un ou plusieurs substituants choisis parmi les groupes méthyle ou ester. 2. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce que Q- est choisi parmi BF4-, CF3SO3-, C104-, I-, Br'et Cl-. 3. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il répond à la formule (II) 4. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il répond à la formule (III) dans laquelle 'Rg, Rg, RIo et Ru sont choisis indépendamment les uns des autres parmi : - H ; - les radicaux alkyles ayant de 1 à 12 atomes de carbone ; - les radicaux phényles portant éventuellement des substi- tuants choisis indépendamment les uns des autres parmi H, les halogènes, les radicaux alkyle ou alkyloxy ayant de 1 à 15 atomes de carbone ou le groupe acétamido CH3C (O) HN ; - les groupes-N=CHA et-NHA dans lesquels A représente un groupe phényle portant éventuellement un ou plusieurs substituants alkyloxy ou dialkylamino, étant entendu que lorsque Rg (respectivement Rio) est-N=CHA et NHA, Rg (respectivement Ru) est un groupe méthyle. e ou bien Rg et R9 et/ou Rio et Ru forment ensemble un cycle aliphatique, comprenant éventuellement un atome d'oxygène. 5. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il répond à la formule (IV) dans laquelle X et X'représentent indépendamment l'un de l'autre R"3P, R"2N (R') C, (R"2N) 2C ou NR"2, R"représentant un alkyle ou un phényle. 6. Composé selon la revendication 5, caractérisé en ce que R"est un alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone. 7. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il répond à la formule (V) dans laquelle E est un groupe- (CHn" avec n = 3 à 9, ou - (CH2) 20 (CH2) 20 (CH2) 2-' 8. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il répond à la formule (VI) dans laquelle * Rg et Rg sont choisis indépendamment les uns des autres parmi : - H ; - les radicaux alkyles ayant de 1 à 12 atomes de carbone ; - les radicaux phényles portant éventuellement des substi- tuants choisis indépendamment les uns des autres parmi H, les halogènes, les radicaux alkyle ou alkyloxy ayant de 1 à 15 atomes de carbone ou le groupe acétamido CH3C (O) HN ; - les groupes-N=CHA et-NHA dans lesquels A représente un groupe phényle portant éventuellement un ou plusieurs substituants alkyloxy ou dialkylamine, étant entendu que lorsque Rg est-N=CHA et-NHA, Rg est un groupe méthyle. ou bien Rg et Rg forment ensemble un cycle aliphatique, comprenant éventuellement un atome d'oxygène. 9. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il répond à la formule (VII) dans laquelle X'représente R"3P, R"2N (R') C, (R"2N) 2C ou NR"2r R"représentant un alkyle ou un phényle. 10. Composé selon la revendication 1, caractérisé en ce 1 que l'un des substituants G ou G'est un groupe multivalent relié à chacune de ses extrémités à un groupe répondant à la formule (I') 11. Procédé de préparation d'un composé (II) selon la revendication 3, caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir une arylcétone ArC (O) R' dans laquelle Ar représente un radical phényle portant les substituants Ri à Rs et R'repré- sente un radical alkyle ayant de 1 à 5 atomes de carbone avec un mélange de triéthoxyméthane (TEM) et d'un bisaldéhyde (BA) en présence d'un acide fort, en atmosphère inerte et en milieu anhydre, les quantités de réactifs étant telles que les rapports en moles soient les suivants : 1/6 12. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que la réaction est effectuée à une température entre-5 C et 80 C. 13. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que le rapport BA/TEM est égal à 1/4 et le rapport AC/TEM+BA est égal à 2/5. 14. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que le bisaldéhyde répond à la formule 15. Procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce que le bisaldéhyde est choisi parmi le 2-chloro-l-formyl- 3-hydroxyméthylènecyclohexène, le 1-formyl-3-hydroxyméthylè- necyclohexène, le 2-chloro-l-formyl-3-hydroxyrnéthylènecyclo- pentène, le l-formyl-3-hydroxyméthylènecyclopentène, et un sel du glutaconaldéhyde. 16. Procédé selon la revendication 11, caractérisé en ce que l'acide fort est choisi parmi HBF4, CF3SO3H, HC104, HI, HBr ou HCl. 17. Procédé de préparation d'une streptocyanine (III) symétrique, caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir un sel (II) avec un composé azoté, en utilisant au moins deux équivalents de composé azoté pour un équivalent de sel (II), ledit composé azoté étant choisi parmi les amines, les hydrazines et les hydrazones. 18. Procédé de préparation d'une streptocyanine (IV) symétrique, caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir un sel (II) avec un composé azoté, en utilisant au moins deux équivalents de composé azoté pour un équivalent de sel (II), ledit composé azoté étant choisi parmi les guanidines, les phosphaimines et les amidines. 19. Procédé de préparation d'un composé dicationique macrocyclique (V), caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir un sel (II) avec une diamine H2N-E-NH2, en utilisant un rapport molaire sel (II) /diamine de 1/1. 20. Procédé de préparation d'un sel d'hémicarboxonium heptacarboné (VI) ou (VII), caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir un sel (II) avec un composé azoté, en utilisant un équivalent de composé azoté pour un équivalent de sel (II), ledit composé azoté étant choisi parmi les amines, les hydrazines, les hydrazones pour obtenir un composé (VI) ou parmi les guanidines, les phosphaimines et les amidines pour obtenir un composé (VII). 21. Procédé de préparation d'une cyanine (III) dissymétrique, caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir un équivalent de sel d'hémicarboxonium (VI) avec un équivalent d'un composé azoté choisi parmi les amines, les hydrazines et les hydrazones et différent de celui utilisé pour la préparation dudit composé (VI) à partir du composé (II). 22. Procédé de préparation d'une cyanine (IV) dissymétrique, caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir un équivalent de sel d'hémicarboxonium (VII) avec un équivalent d'un composé azoté choisi parmi les guanidines, les phosphaimines et les amidines et différent de celui utilisé pour la préparation dudit composé (VII) à partir du composé (II). 23. Procédé de préparation d'un composé polycationique non macrocyclique selon la revendication 10, caractérisé en ce qu'il consiste à faire réagir n équivalents de sel (VI) avec un équivalent d'une polyamine ayant n groupes amino, n 3. 24. Procédé pour le marquage de molécules organiques, caractérisé en ce qu'il consiste à utiliser comme marqueur, une streptocyanine selon l'une des revendications 4 à 10.