Brevet FR2822704A1 — publié le 20021004

SELS DE CETOACIDES ET D'ACIDES AMINES GASTRORESISTANTS ET LEUR UTILISATION POUR LA PREPARATION DE MEDICAMENTS La présente invention a pour objet des sels de cétoacides et d'acides aminés gastrorésistants ainsi que leur utilisation pour la préparation de compositions pharmaceutiques destinées au traitement des sujets dénutris ou en situation d'hypercatabolisme ainsi qu'au traitement des pathologies dans lesquelles sont impliqués les neurones silencieux telles que définies dans le brevet WO 99/47134. Les sels de cétoacides et d'acides aminés sont décrits dans le brevet WO 99/47134 comme étant actifs sur le modèle de distension du colon préalablement irrité à l'acide acétique 1 % chez le rat dès la dose de 1 mg/kg. Dans ce test, les composés sont administrés par voie orale, dissous dans l'eau. L'a-cétoglutarate de di-ornithine est également utilisé en thérapeutique sous le nom de CETORNAN (brevet français ? 3 533 M) pour améliorer le métabolisme protéique des sujets dénutris. Il est également connu comme stimulant hormonal (hormone de croissance et insuline) et stimulant de la croissance cellulaire. La posologie à laquelle est utilisée ce composé est particulièrement élevée puisqu'il est administré en médecine de ville à la dose de 2 fois 5 g par jour par voie orale, dissous dans un verre d'eau et en médecine hospitalière à la dose de 2 fois 10 g par jour par voie entérale et orale. Cette posologie élevée pour ce type de composé a le désavantage de provoquer des diarrhées du fait d'une osmolalité importante (Pr L. CYNOBER, Dr P. CRENN, Pr B. MESSINE, La Revue du Praticien, NO50, 2000, pp 1593-1599). Un autre désavantage du produit est son mauvais goût en solution. La présente invention découle de la mise en évidence par les inventeurs du fait totalement inattendu que les sels de cétoacides et d'acides aminés susmentionnés ne sont actifs dans le modèle de distension colique et dans un modèle de nutrition qu'à un pH neutre. Ces mêmes sels testés à pH 1 sont totalement inactifs, quelle que soit la dose testée. Ainsi à titre d'illustration, le tableau 1 ci-après fait nettement apparaître que : > l'a-cétoglutarate de di-ornithine est actif à 1, 10 et 20 mg/kg p. o. à pH 6 et totalement inactif à pH 1 (tableau 1 (1)), > l'a-cétoglutarate de mono-ornithine n'est actif qu'à pH 6 et inactif à pH 1 (tableau 1 (2)). Le tableau II ci-après fait apparaître que le mélange des constituants acide a-cétoglutarique et ornithine réalisé à pH 1 puis ramené à pH 6 est inactif (tableau 11 (1)). De même, l'a-cétoglutarate de di-ornithine solubilisé à pH 1 entraînant une dissociation complète du sel, puis ramené à pH 6 est inactif. Une fois dissocié, l'a-cétoglutarate de di-ornithine ne se reconstitue pas. Seuls les constituants salifiés entre eux sont actifs (tableau II (2)). Le tableau VI fait apparaître que l'a-cétoglutarate de di-ornithine testé à 1 et 3 mg/kg dans un modèle de nutrition est actif à pH 6 et inactif à pH 1 (voir également figure 3). Or, lorsqu'un sel de cétoacide et de dérivé aminé est administré par voie orale, celuici passe dans l'estomac à jeun où le pH est environ égal à 1. Par conséquent, il y a dissociation du sel en entités inactives et la posologie doit être augmentée pour qu'une partie du produit non dissociée passe la barrière stomacale et atteigne sa cible pharmacologique. Le tableau V est à ce'titre très représentatif de l'effet du pH. Ainsi, on peut noter que par voie intraduodénale (pH neutre) qui évite l'acidité gastrique, l'a-cétoglutarate de di- ornithine est actif dès la dose de 0,1 mg/kg soit une dose dix fois inférieure à la dose minimum active par voie orale (tableau V (2) et figure 2). La présente invention a pour objet des compositions gastrorésistantes comprenant des composés de formule générale (I) suivante : (X) , Y, (Z) n2 (I) dans laquelle X et Z sont des acides aminés identiques ou différents, naturels ou non, Y est un cétoacide, n, et n2 représentent 0 ou 1, en association avec un véhicule gastrorésistant physiologiquement stable, lesdits composés au sein desdites compositions, étant stables en milieu neutre et à pH inférieur à 6. Avantageusement, les composés au sein des dites compositions sont stables jusqu'à un pH d'environ 1. De préférence, les composés susmentionnés de formule (I) sont tels que lorsque n, = 0 alors n2 = 1 et que lorsque ni = 0 alors n, = 1. . Il est bien entendu que les composés de formule (I) susmentionnée résultent de la formation de liaisons ioniques principalement, et en aucun cas de liaisons covalentes, entre les différents constituants X, Y ou Z. Par conséquent, l'ordre d'apparition de ces différents constituants dans la formule (I) n'a pas de signification particulière, et cette formule (I) doit être comprise comme comprenant aussi bien les composés de formule (X) nl, Y, (Z) n2, que ceux de formule (Z) n2, Y, (X) nl ; (X) nl, (Z) n2, Y ; (Z) n2, (X) ni, Y ; Y, (X) nl, (Z) n2 ; Y, (Z) n2, (X) nu La résistance au milieu acide permet de conserver l'activité par voie orale. A titre d'exemple, le tableau III fait nettement apparaître que la forme gastrorésistante de l'a- cétoglutarate de di-ornithine est active à 1 mg/kg. Cette activité est équivalente à la dose de 0,1 mg/kg par voie intraduodénale, et bien supérieure aux microgranules non gastrorésistantes ou au sel administré en solution. Le tableau IV montre bien la supériorité de la forme gastrorésistante puisque celle-ci s'avère active dès 0,25 mg/kg. Un deuxième avantage de l'invention est la suppression des diarrhées induites par les composés du fait de la diminution de la posologie et par conséquent de l'osmolalité. Un autre avantage est le masquage du mauvais goût de par l'enrobage de la microgranule. Avantageusement, les compositions de l'invention sont telles que les composés sous forme de sels contenus dans ces compositions ne se dissocient pas dans l'estomac, en produits de dissociation, ou se dissocient en produits de dissociation susmentionnés dans des proportions inférieures à environ 20%, et de préférence inférieures à environ 10%, ou encore inférieures à 20% à pH 1. Plus particulièrement, les composés susmentionnés des compositions gastrorésistantes de l'invention ne se dégradent pas en produits de dissociation dans un intervalle de pH d'environ 7 à environ 1. Par produits de dissociation susmentionnés, on entend les molécules restantes après scission d'une ou plusieurs des liaisons d'un composé susmentionné, notamment : - les produits correspondant d'une part au sel formé entre le cétoacide Y et un seul des deux acides aminés X ou Z, et, d'autre part, l'autre acide aminé X ou Z non engagé dans le sel susmentionné, - ou les produits correspondant d'une part au cétoacide Y, et, d'autre part, aux acides aminés X et/ou Z, non engagés dans un sel avec Y. A titre d'illustration, les produits de dissociation de l'a-cétoglutarate de di-ornithine, sont l'a-cétoglutarate d'ornithine et/ou l'acide a-cétoglutarique et l'ornithine. La présente invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation de compositions gastrorésistantes telles que définies ci-dessus, comprenant des composés de formule générale (I) dans laquelle : - ni et n2 représentent 0 ou 1, sous réserve que lorsque ni = 0 alors n2 = 1, et que lorsque n2 = 0 alors ni = 1, - X représente un aminoacide naturel, sous réserve que lorsque n2 = 0 alors X représente un aminoacide basique tel que : . l'ornithine, . l'arginine, . la lysine, # ou, l'histidine, - Y représente un cétoacide de formule (II) suivante : R-CO-COOH (II) dans laquelle R représente un groupe alkyle ou acide alcanoïque, substitué ou non, d'environ 1 à environ 10 atomes de carbone, notamment un cétoacide de formule (II) dans laquelle lorsque R représente : .-CH3, ledit cétoacide est l'acide pyruvique, .-CH2-CH3, ledit cétoacide est l'acide a-cétobutyrique, .-CH (CH3) 2, ledit cétoacide est l'acide a-cétoisovalérique, .-CH (CH3)-CH2-CH3, ledit cétoacide est l'acide a-céto p-méthylvalérique, '-CH-CHHg) , ledit cétoacide est l'acide a-cétoisocaproïque, - (CH2) 2-COOH, ledit cétoacide est l'acide a-cétoglutarique, # -(CH2b-COOH, ledit cétoacide est l'acide a-cétoadipique, - Z représente un aminoacide naturel, notamment un aminoacide choisi parmi l'ornithine, l'arginine, la lysine, l'histidine, la proline, ou la glutamine. L'invention a plus particulièrement pour objet les compositions susmentionnées comprenant des composés de formule (I) telle que définie ci-dessus, dans laquelle Y représente un cétoacide choisi parmi l'acide a-cétoglutarique, ou l'acide a-cétobutyrique. L'invention concerne plus particulièrement les compositions susmentionnées, caractérisées en ce que les composés sont choisis parmi ceux de formule (I) dans laquelle : # n1 = 1, et n2 =0 ou 1, - X représente un acide aminé choisi parmi l'ornithine, ou l'arginine, - Y représente un cétoacide choisi parmi l'acide a-cétoglutarique, ou l'acide a- cétobutyrique, - et, lorsque n2 = 1, Z représente un acide aminé naturel, notamment l'ornithine, l'arginine, la proline, ou la glutamine. L'invention a plus particulièrement pour objet les compositions susmentionnées, caractérisées en ce que les composés sont choisis parmi ceux de formule (I) dans laquelle : - ni = 1, et n2 = 0, - X représente l'omithine et Y représente l'acide a-cétoglutarique, à savoir l'a-cétoglutarate de mono-omithine, - X représente l'omithine et Y représente l'acide a-cétobutyrique, à savoir l'a-cétobutyrate de mono-omithine, - X représente l'arginine et Y représente l'acide a-cétobutyrique, à savoir l'a-cétobutyrate d'arginine, - X représente la lysine et Y représente l'acide a-cétobutyrique, à savoir l'a-cétobutyrate de lysine, - X représente l'histidine et Y représente l'acide a-cétobutyrique, à savoir l'a-cétobutyrate d'histidine, - X représente l'arginine et Y représente l'acide a-céto-isocaproïque, à savoir l'a-céto-isocaproate d'arginine, - X représente l'ornithine et Y représente l'acide a-céto-isocaproïque, à savoir l'a-céto-isocaproate d'omithine, - X représente l'omithine et Y représente l'acide a-céto-P méthylvalérique, à savoir l'a-céto-ss méthylvalérate d'omithine, - X représente l'arginine et Y représente l'acide a-céto-ss méthylvalérique, à savoir l'&alpha;-céto-ss méthylvalérate d'arginine, - X représente l'arginine et Y représente l'acide a-céto-isovalérique, à savoir l'a-céto-isovalérate d'arginine, - X représente l'ornithine et Y représente l'acide a-céto-isovalérique, à savoir l'a-céto-isovalérate d'ornithine. L'invention concerne plus particulièrement encore les compositions susmentionnées, caractérisées en ce que les composés sont choisis parmi ceux de formule (I) dans laquelle : - ni=l, etn2=l, - X représente l'ornithine, Y représente l'acide a-cétoglutarique, et Z représente l'ornithine, à savoir l'a-cétoglutarate de di-ornithine, - X représente l'arginine, Y représente l'acide a-cétoglutarique, et Z représente l'arginine, à savoir l'a-cétoglutarate de di-arginine, - X représente l'ornithine, Y représente l'acide a-cétoglutarique, et Z représente la glutamine, à savoir l'&alpha;-cétoglutarate d'ornithine et de glutamine, - X représente l'ornithine, Y représente l'acide a-cétoglutarique, et Z représente la proline, à savoir l'a-cétoglutarate d'ornithine et de proline. De préférence, le composé de formule (I) compris dans les compositions susmentionnées dans le cadre de la présente invention, est l'a-cétoglutarate de di-ornithine. L'invention a également pour objet les compositions susmentionnées comprenant, à titre de composés de formule (I) préférés, ceux choisis dans le groupe constitué par l'acétobutyrate d'arginine, l'a-cétobutyrate de lysine, l'a-cétobutyrate d'histidine, l'a-cétoisocaproate d'arginine, l'a-céto-isocaproate d'omithine, l'a-céto-P-méthylvalérate d'ornithine, l'a-céto-ss-méthylvalérate d'arginine, l'a-céto-isovalérate d'arginine, et l'acéto-isovalérate d'ornithine. L'invention a plus particulièrement pour objet les compositions susmentionnées, comprenant des composés de formule (I) dans laquelle : - ni = 0 ou 1, et nz = 1, - lorsque ni = 1, X représente un aminoacide naturel, tel que l'ornithine, ou l'arginine, - Y représente un cétoacide choisi parmi l'acide a-cétoglutarique, ou l'acide a- cétobutyrique. Avantageusement, les composés tels que décrits ci-dessus se présentent sous forme de sels entre deux constituants Y et Y, ou Y et Z, ou entre les trois constituants X, Y et Z. La proportion en poids des différents constituants est de préférence comprise entre 0,8 et 1,2, de sorte que la somme des proportions de chacun des constituants est égale à 2 dans un sel entre deux constituants X et Y, ou Y et Z, ou est égale à 3 dans un sel entre trois constituants X, Y et Z. Avantageusement, la proportion susmentionnée des différents constituants est comprise entre 0,9 et 1,1. Des composés particulièrement préférés sont ceux au sein desquels les différents constituants X et Y, ou Y et Z, ou X, Y et Z sont dans un rapport équimolaire, c'est-à-dire que chacun des constituants est dans une proportion en poids de 1, de sorte que la somme des proportions de chacun des constituants est égale à 2 dans un sel entre deux constituants X et Y, ou Y et Z, ou est égale à 3 dans un sel entre les trois constituants X, Y et Z. L'invention a également pour objet les compositions susmentionnées, caractérisées en ce que le véhicule gastrorésistant physiologiquement stable est choisi parmi : - les microgranules gastrorésistantes, et plus particulièrement celles choisies parmi les supports neutres à base de saccharose et d'amidon de maïs dont la taille est de préférence inférieure ou égale à 1 p. m, - les microgranules pelliculées gastrorésistantes, et plus particulièrement celles choisies parmi les microgranules définies précédemment sur lesquelles a été pulvérisée une solution d'agent filmogène et/ou plastifiant, - les nanoparticules gastrorésistantes, et plus particulièrement celles choisies parmi les capsules constituées d'un matériel polymérisé capable de retenir les principes actifs par séquestration ou adsorption de taille comprise entre 50 et 300 nm, ou les nanosphères gastrorésistantes, et plus particulièrement celles choisies parmi les nanoparticules susmentionnées de forme sphérique, - les microsphères gastrorésistantes, et plus particulièrement celles choisies parmi les produits solides pleins et sphériques dont la taille est de préférence inférieure à 1250 p. m, - les microcapsules gastrorésistantes, et plus particulièrement celles choisies parmi les produits solides constitués d'une enveloppe elle-même solide contenant un liquide, un solide ou une substance pâteuse, dont la taille est de préférence inférieure à 1250 p. m, - les granulés gastrorésistants, et plus particulièrement ceux choisis parmi les produits solides obtenus à partir de saccharose et/ou lactose dont la masse moyenne est de préférence d'environ 50 mg, - les granulés pelliculés gastrorésistants, et plus particulièrement ceux choisis parmi les granulés définis précédemment sur lesquels a été pulvérisée une solution d'agent filmogène et/ou plastifiant, - les liposomes gastrorésistants, et plus particulièrement ceux choisis parmi les vésicules sphériques dont le centre est occupé par une cavité aqueuse et l'enveloppe constituée de feuillets à base de phospholipides dont la taille est de préférence inférieure ou égale à litm, - les liposomes pelliculés gastrorésistants, et plus particulièrement ceux choisis parmi les liposomes définis précédemment sur lesquels a été pulvérisée une solution d'agent filmogène et/ou plastifiant, - les lyocs gastrorésistants, et plus particulièrement ceux choisis parmi les produits obtenus par lyophilisation de dispersions de vésicules inférieures ou égales à 1 p. m, - les lyocs pelliculés gastrorésistants, et plus particulièrement ceux choisis parmi les lyocs définis précédemment sur lesquels a été pulvérisée une solution d'agent filmogène et/ou plastifiant, - les pompes osmotiques dans un enrobage gastrorésistant, et plus particulièrement ceux choisis parmi les comprimés enrobés ordinaires constitués d'un noyau osmotiquement actif, d'une membrane semi-perméable et d'un orifice calibré dans la membrane, - les gommes, telles que gomme sterculia, Adragante, xanthane, arabique... Avantageusement, les compositions susmentionnées se présentent sous forme de comprimés, de gélules, de sachets, ou de granulés. Ces différentes formes peuvent être obtenues selon les méthodes décrites dans"Coated Pharmaceutical Dosage Forms", de Bauer, Lehmann, Osterwald et Rothgang, édité par Medpharm Scientific Publishers et dans"Pharmacotechnie Industrielle"de Yves Rossetto. L'invention a également pour objet les adjuvants de nutrition caractérisés en ce qu'ils contiennent une composition gastrorésistante telle que définie ci-dessus, le cas échéant en association avec un véhicule acceptable en alimentation. Avantageusement, les adjuvants de nutrition susmentionnés se présentent sous une forme prête à diluer dans un solvant aqueux. De préférence, les adjuvants de nutrition susmentionnés se présentent sous forme de prise unitaire contenant environ 10 ou 25 mg jusqu'à environ 20 g ou 50 g d'au moins un composé de formule (I) défini ci-dessus. L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation d'un adjuvant de nutrition tel que défini ci-dessus, dans le cadre du traitement : - des sujets dénutris, et plus particulièrement des sujets âgés dénutris, - des sujets anorexiques, - des patients atteints de la gastroparésie, des sujets dont le transit digestif est ralenti, des sujets souffrant de malabsorption digestive, des sujets dialysés, des patients atteints de la maladie d'Alzheimer, 'des personnes en situation d'hypercatabolisme, tels que : 'des personnes atteintes d'insuffisance respiratoire, 'les personnes souffrant d'escarres, 'les patients brûlés, 'les patients cancéreux, 'les patients atteints du SIDA, 'les patients post-opérés, 'les personnes en cours de cicatrisation de la muqueuse intestinale, . les patients polytraumatisés, 'les patients insuffisants cardiaques, ou dans le cadre de la cicatrisation et de la stimulation de l'hormone de croissance, ou de l'insuline. L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susmentionnée d'un adjuvant de nutrition tel que défini ci-dessus, à raison d'une posologie journalière comprise entre environ 50 mg à environ 40 g. L'invention a également pour objet toute composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient une composition gastrorésistante telle que définie ci-dessus, le cas échéant en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. Avantageusement, les compositions pharmaceutiques susmentionnées se présentent sous une forme administrable par voie orale, ou par voie entérale, notamment sous une forme sèche à diluer dans un solvant aqueux lorsqu'elle est sous une forme administrable par voie orale. Suivant le patient et le type et la sévérité de la maladie à traiter, le dosage classique des compositions pharmaceutiques est susceptible de varier entre environ 10 mg et environ 40 g d'ingrédient actif. De préférence, les compositions pharmaceutiques susmentionnées sont administrables par voie orale et entérale, en dose unitaire de 25 mg à 10 g de principe actif (composé de formule (I)) par prise, et de préférence de 100 mg à 5 g, à raison de là 2 prises par jour. L'invention concerne également l'utilisation d'une composition gastrorésistante telle que définie ci-dessus, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement des sujets dénutris susmentionnés. L'invention a également pour objet l'utilisation d'une composition gastrorésistante telle que définie ci-dessus, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de pathologies humaines ou animales dans lesquelles sont impliqués les neurones silencieux, telles que les pathologies du tube digestif, de la vessie et des voies biliaires, et plus particulièrement au traitement symptomatique des douleurs associées à ces pathologies, telles que les douleurs : des troubles du transit et de l'inconfort intestinal liés aux troubles fonctionnels intestinaux (dyspepsies, syndrome de l'intestin irritable, côlon irritable,...), . des voies biliaires, . dans la rectocolite hémorragique, . dans la maladie de Crohn, dans l'ulcère gastrique et duodénal, dans la gastrite chronique, 'dans le cancer colorectal ou gastrique, 'dans la gastroentérite et la grippe intestinale, liées à une pseudo-obstruction intestinale ou colique, dans l'iléite radique, 'post-opératoires digestives ou viscérales, dans la diarrhée, spasmes, constipations, mégacôlon, le mégarectum, 'des spasmes de la vessie, a de la parésie vésicale. L'invention a plus particulièrement pour objet l'utilisation susmentionnée de compositions gastrorésistantes telles que définies ci-dessus, pour la préparation d'un médicament susceptible d'être administré à raison d'une posologie journalière en principe actif comprise entre environ 1 mg/kg/jour à 1 g/kg/jour, de préférence 20 à 200 mg/kg/jour par voies orale et entérale. L'invention sera davantage illustrée à l'aide de la description détaillée qui suit de la préparation des compositions de l'invention et de leur propriétés analgésiques mesurées sur un modèle de distension colique ainsi que de leur propriétés en tant qu'adjuvant de nutrition mesuré sur un modèle d'hypercatabolisme protéique. 1-Procédé de préparation 1-Matériel utilisé Lit d'air fluidisé Aéromatico de type STREA 1 Pompe péristaltique de type Bioblocke Etuve Memmert Buse 0,8 mm d'ouverture 2-Matières utilisées Identité Fournisseur Microgranules T16-18 SPCI/Mendell PVP K30 BASF Eudragit L30D-55 Rohm Pharma Triéthyl Citrate (TEC) SPCI Eau bi-osmosée 3-Montage Une solution aqueuse (92,4 ml) contenant l'a-cétoglutaratc de di-ornithine (4,80 g) et de la PVPK30 (2,89 g) est pulvérisée sur des microgranules (300,1 g) préchauffées 10 minutes à une température de 30 à 35OC, durant environ 113 minutes, à un débit de 1 ml/min sous une pression de 1 bar. La ventilation est réglée à 4 au début puis augmentée à 5, la température d'entrée étant de 43 C et la température de sortie de 37OC, on obtient 303,37 g de microgranules montées. 4-Pelliculage Le pelliculage a été réalisée en 3 phases : a) 1ère phase Une solution aqueuse (115 ml) contenant 268,6 g d'Eudragit et 8 g de Triéthyl citrate est pulvérisée sur 200 g de microgranules préalablement obtenues durant 189 minutes à un débit de 1,6 ml/min, sous une pression de 1,1 bars. La ventilation est réglée à 4,5 au début puis augmentée à 5, la température d'entrée est de 35 C et la température de sortie de 30oC. On obtient 220 g de microgranules. b) 2" phase Une solution aqueuse (247,8 ml) contenant 462,9 g d'Eudragit, 14,5 g de Triéthyl citrate est pulvérisée sur 200 g de microgranules obtenues à la phase 1 durant 168 minutes, à un débit compris entre 1,8 et 2,6 ml/min sous une pression de 0,8 bar. La ventilation est réglée à 3,5, la température d'entrée est de 36OC, la température de sortie est de 28OC. On obtient 236 g de microgranules. c) 3ème phase Une solution aqueuse identique à la phase 2 est pulvérisée sur 200 g de microgranules obtenues à la phase 2 durant 148 minutes dans les mêmes conditions que précédemment hormis le débit qui est de 2,6 ml/min. On obtient 238 g de microgranules pelliculées qui contiennent chacune 6, 4 jug d'a-cétoglutarate de di-ornithine, 3, 86 jug de PVP, 469, 81 p, g d'Eudragit et 48, 62 jug de Triéthyl citrate. fi-Pharmacologie Distension colique L'activité analgésique a été étudiée sur un modèle de douleur digestive chez le rat vigile. Cette douleur est provoquée par la distension du côlon à l'aide d'un ballonnet. Protocole Les rats mâles Sprague-Dawley d'environ 180 g à jeun depuis la veille sont utilisés. Sous légère anesthésie au fluothane, une sonde intrarectale est introduite à 5 cm de l'anus et 1,5 ml d'acide acétique à 1 % est injecté. Une heure trente après l'irritation, un ballonnet en latex (0 à vide 2 mm, longueur 1 cm) monté sur un cathéter en polyéthylène est introduit dans le côlon sur le site de l'irritation. Le produit à tester ou le véhicule (eau distillée) est administré per os sous un volume de 1 ml, puis le rat est mis en observation dans un cristallisoir. La distension du côlon est réalisée 2h30 après l'irritation. Elle est effectuée sous un volume fixe égale à 1,5 ml d'eau distillée. La distension colique provoque une douleur digestive objectivée par des crampes abdominales dont le nombre reflète l'intensité de la douleur. La distension colique est maintenue pendant 10 minutes au cours desquelles les crampes abdominales sont dénombrées. L'analyse statistique est effectuée à l'aide du test de Dunnett qui compare un même groupe d'animaux véhicule (40) à plusieurs groupes de rats (6 animaux par groupe) ayant reçu les molécules étudiées. Le seuil de signification est fixé à 5 %. Les molécules sont testées par voie orale à 1-10-20 mg/kg. Elles sont solubilisées dans de l'eau distillée. Le véhicule utilisé comme placebo se compose d'eau distillée. Résultats : tableaux I, II, III, IV, V et VI, et figures 1 à 3 Tableau 1 (1) Modèle de douleur viscérale chez le rat Effet de l'a-cétoglutarate de di-ornithine aux doses de 1-10 et 20 mg/kg p. o. testée à pH6 et pHl Nombre de crampes abdominales Moyenne Encart-type Effectif Véhicule 21 4 15 1 mg/kg p. o. pH6 14* 2 4 1 mg/kg p. o. pHl 22 4 6 - ë ≈lOmg/kgp. o. pH6 13* 6 7 'S 'g----------------------------- 10 mg/kg p. o. pHl 20 3 7 20mg/kgp. o. pH6 11* 3 4 20 mg/kg p. o. pHl 19 7 6 * p Tableau 1 (2) Modèle de douleur viscérale chez le rat Effet de l'a-cétoglutarate de mono-ornithine à 10 mg/kg p. o. testé à pH6 et pH1 Nombre de crampes abdominales Moyenne Encart-type Effectif Véhicule 20 4 8 u lOmg/kgp. o. 10* 6 8 "C u ,, le pH6 2 à M) o e'il 0 bJ) 1 2 R ≈lOmg/kgp. o. 17 3 8 Q) S U * p Nombre de crampes abdominales Moyenne Encart-type Effectif Véhicule 17 3 8 + 1 mg/kg p. o. 15 4 8 C1) 6 Tableau H (2) Modèle de douleur viscérale chez le rat Effet de l'a-cétoglutarate de di-ornithine testé par voie orale aux doses de 1-10 et 20 mg/kg p. o. acidifiées à pH1 puis neutralisées à pH6 Nombre de crampes abdominales Moyenne Ecart-type Effectif Véhicule 20 1 5 u - 1 mg/kg p. o. 20 1 6 B CI) e. S e ê 10 mg/kg p. o. 20 4 6 . E'ë bj) 0 1 20 mg/kg p. o. 21 4 6 1 Tableau III Modèle de douleur viscérale chez le rat Effet de l'a-cétoglutarate de di-ornithine à 1 mg/kg p. o. administré dans des micro-granules gastro-résistantes Nombre de crampes abdominales Moyenne Encart-type Effectif Véhicule 19 7 8 Micro-granules neutres 19 3 8 enrobé dans des micro-granules 15 6 8 Q) neutres jazz mg/kg p. o. Enrobé dans des micro-granules 7* 4 8 gastro-résistantes 1 mg/kg p. o. * p Nombre de contractures abdominales Moyenne Ecart-type Effectif D Témoin 18 4 4 Gn rn Q) Q) 0, 1 mg/kg p. o. 21 3 4 R GO 0, 25 mg/kg p. o. 12* 4 3 4 0, 5 mg/kg p. o. 9* 1 mglkg p. o. 7* 3 4 Tableau V (l) Modèle de douleur viscérale chez le rat Effet de l'a-cétoglutarate de di-ornithine testé par voie orale aux doses de 0, 1-1-10 et 20 mg/kg p. o. Nombre de crampes abdominales Moyenne Ecart-type Effectif Véhicule 23 5 6 0, 1 mg/kg p. o. 18 3 7 es "'tj g Img/kgp. o. 14* 2 4 10 mg/kg p. o. 9* 4 6 S òl) 0 1 20 mg/kg p. o. 8* 3 5 * p Nombre de crampes abdominales Moyenne Ecart-type Effectif Véhicule 25 5 4 Pa 0, 01 mg/kgi. d. 14 6 4 5 ----------------------------- 0, 1 mg/kg i. d. il* 2 6 j g g---------------------g Img/kgi. d. 9* 3 6 ≈s0 mg/kgi. d. 9* 5 4 * p Hypercatabolisme protéique Protocole Evolution pondérale L'irritation du côlon à l'acide acétique 4% provoque chez le rat une perte de poids d'environ 10 à 15%. Ce stress chimique constitue un bon modèle d'hypercatabolisme pour rechercher l'activité nutritionnelle des molécules étudiées. Protocole. L'évolution pondérale est enregistrée pendant 12 jours chez des rats femelles Wistar après avoir subi une irritation du côlon à l'acide acétique 4 %. Des rats femelles Wistar d'environ 250g à jeun depuis 48h sont anesthésiées à l'halothane. Le côlon est irrité à l'acide acétique dilué (1. 5ml d'une solution à 4% sont introduits par voie rectale à 5cm de la marge anale). A leur réveil, les animaux répartis 5 par cage sont alimentés et abreuvés ad libitum. Deux jours plus tard, les animaux sont répartis en 3 groupes de rats de poids homogènes (sont exclus de l'étude, les rats dont la perte de poids est inférieure à 5g ou supérieure à 30g). Le produit à tester ou le véhicule (eau distillée) est administré par voie orale (lml) deux fois par jour, entre 8h et lOh le matin et entre 15h et 16h l'après midi. L'évolution pondérale est enregistrée pendant 12 jours. Le poids des animaux est mesuré en grammes à l'aide d'une balance Mettler PM6. L'analyse statistique est effectuée à l'aide du test de Dunnett qui compare un même groupe d'animaux véhicule (50) à plusieurs groupes de rats (effectif compris entre 9 et 19 selon le groupe) ayant reçu l'une des molécules étudiées. Le seuil de signification est fixé à 5 %. Les molécules sont testées par voie orale à 1 et 3mg/kg p. o.. Elles sont solubilisées dans l'eau distillée. Les molécules testées à pH= 1 sont solubilisées en présence d'acide chlorhydrique IN. Le pH de la solution est contrôlée à l'aide d'un pH-mètre WTW Ph537. Le véhicule utilisé comme placebo se compose d'eau distillée. Résultats Dans le groupe de rats véhicule, le poids initial à Jl est égal à 204 llg. Les animaux atteignent 248 20g à J12 (N=50). A J12, le poids des animaux est significativement (p - résultats : tableau VI et figure 3 Tableau VI Modèle de dénutrition chez le rat Evolution pondérale (g) chez le rat Effet de l'a-cétoglutarate de di-ornithine pH6 versus pHI testé aux doses de 1 et 3 mg/kg p. o. Véhicule 1 mg (pH1) 1 mg (PH6) 3 mg (pHI) 3 mg (pH6) Jours Effectif 50 18 19 11 9 il 20411 2048 20910 205 7 20910 J2 20214 203 10 213 16 20611 213 15 J3 205 17 20713 221 19 207 11 21919 J4 21020 213 17 229*18 21014 22620 J5 215 22 219 16 235* 18 215 16 232* : t 18 J8 232 22 241 Il 255* 19 230 21 247* 20 J9 237 21 246 11 259* 19 236 21 251* 19 J10 241 : t 20 248 13 262* 18 239 20 258* 20 J11 245 : t 20 253 11 268* 19 240 : t 21 265* 21 J12 248 : t 20 256 11 274* 18 244 20 271* 21 Poids moyen exprimé en grammes son écart type (SD) * p Légendes des figures - figure 1 : Effet de microgranules gastrorésistantes d'a-cétoglutarate de di-ornithine sur le nombre de contractures abdominales. - figure 2 : Effet de l'a-cétoglutarate de di-ornithine sur le nombre de crampes abdominales. - figure 3 : Effet de l'a-cétoglutarate de di-ornithine sur l'évolution pondérale chez le rat. REVENDICATIONS 1. Composition gastrorésistante comprenant des composés de formule générale (I) suivante : (X) ni, Y, (Z) n2 (I) dans laquelle X et Z sont des acides aminés identiques ou différents, naturels ou non, Y est un cétoacide, n1 et n2 représentent 0 ou 1, en association avec un véhicule gastrorésistant physiologiquement stable, lesdits composés au sein de la composition, étant stables en milieu neutre et à pH inférieur à 6, jusqu'à un pH d'environ 1. 2. Composition gastrorésistante selon la revendication 1, comprenant des composés de formule générale (I) dans laquelle : - ni et n2 représentent 0 ou 1, sous réserve que lorsque n1 = 0 alors n2 = 1, et que lorsque n2 = 0 alors n1 = 1, - X représente un aminoacide naturel, sous réserve que lorsque n2 = 0 alors X représente un aminoacide basique tel que : # l'ornithine, # l'arginine, . la lysine, # ou, l'histidine, - Y représente un cétoacide de formule (II) suivante : R-CO-COOH (II) dans laquelle R représente un groupe alkyle ou acide alcanoïque, substitué ou non, d'environ 1 à environ 10 atomes de carbone, notamment un cétoacide de formule (II) dans laquelle lorsque R représente : .-CH3, ledit cétoacide est l'acide pyruvique, .-CH2-CH3, ledit cétoacide est l'acide a-cétobutyrique, -CH (CH3) 2, ledit cétoacide est l'acide a-cétoisovalérique, .-CH (CH3)-CH2-CH3, ledit cétoacide est l'acide a-céto p-méthylvalérique, '-CH2-CH (CH3) 2, ledit cétoacide est l'acide a-cétoisocaproïque, - 2-COOL, ledit cétoacide est l'acide a-cétoglutarique, - (CH2) 3-COOH, ledit cétoacide est l'acide a-cétoadipique, - Z représente un aminoacide naturel, notamment un aminoacide choisi parmi l'ornithine, l'arginine, la lysine, l'histidine, la proline, ou la glutamine. 3. Composition selon la revendication 1 ou 2, caractérisée en ce que les composés sont choisis parmi ceux de formule (I) dans laquelle : - ni = l, etn2 =0 ou 1, - X représente un acide aminé choisi parmi l'omithine, ou l'arginine, - Y représente un cétoacide choisi parmi l'acide a-cétoglutarique, ou l'acide acétobutyrique, - et, lorsque n2 = 1, Z représente un acide aminé naturel, notamment l'omithine, l'arginine, la proline, ou la glutamine. 4. Composition selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que les composés sont choisis parmi ceux de formule (I) dans laquelle : - ni =1, etn2=0, - X représente l'ornithine et Y représente l'acide a-cétoglutarique, à savoir l'a-cétoglutarate de mono-ornithine, - X représente l'omithine et Y représente l'acide a-cétobutyrique, à savoir l'a-cétobutyrate de mono-omithine, - X représente l'arginine et Y représente l'acide a-cétobutyrique, à savoir l'a-cétobutyrate d'arginine, - X représente la lysine et Y représente l'acide a-cétobutyrique, à savoir l'a-cétobutyrate de lysine, - X représente l'histidine et Y représente l'acide a-cétobutyrique, à savoir l'a-cétobutyrate d'histidine, - X représente l'arginine et Y représente l'acide a-céto-isocaproïque, à savoir l'a-céto-isocaproate d'arginine, - X représente l'ornithine et Y représente l'acide a-céto-isocaproïque, à savoir l'a-céto-isocaproate d'ornithine, - X représente l'ornithine et Y représente l'acide a-céto-ss méthylvalérique, à savoir l'&alpha;-céto-ss méthylvalérate d'ornithine, - X représente l'arginine et Y représente l'acide a-céto-P méthylvalérique, à savoir l'a-céto-P méthylvalérate d'arginine, - X représente l'arginine et Y représente l'acide a-céto-isovalérique, à savoir l'a-céto-isovalérate d'arginine, - X représente l'ornithine et Y représente l'acide a-céto-isovalérique, à savoir l'a-céto-isovalérate d'ornithine. 5. Composition selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que les composés sont choisis parmi ceux de formule (I) dans laquelle : - ni=l, etn2=l, - X représente l'ornithine, Y représente l'acide a-cétoglutarique, et Z représente l'ornithine, à savoir l'a-cétoglutarate de di-ornithine, - X représente l'arginine, Y représente l'acide a-cétoglutarique, et Z représente l'arginine, à savoir l'a-cétoglutarate de di-arginine, - X représente l'omithine, Y représente l'acide a-cétoglutarique, et Z représente la glutamine, à savoir l'a-cétoglutarate d'ornithine et de glutamine, - X représente l'ornithine, Y représente l'acide a-cétoglutarique, et Z représente la proline, à savoir l'a-cétoglutarate d'ornithine et de proline. 6. Composition selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisée en ce que le composé est l'a-cétoglutarate de di-ornithine. 7. Composition selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que les composés se présentent sous forme de sels entre deux constituants X et Y, ou Y et Z, ou entre les trois constituants X, Y et Z. 8. Composition selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que les composés de formule (I) sont tels que la proportion en poids des différents constituants X, Y, ou Z, est de préférence comprise entre 0,8 et 1,2, de sorte que la somme des proportions de chacun des constituants est égale à 2 dans un sel entre deux constituants, ou est égale à 3 dans un sel entre deux constituants. 9. Composition selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisée en ce que les composés de formule (I) sont tels que les différents constituants X et Y, ou Y et Z, ou X, Y et Z sont dans un rapport équimolaire, c'est-à-dire que chacun des constituants est dans une proportion en poids de 1, de sorte que la somme des proportions de chacun des constituants est égale à 2 dans un sel entre deux constituants X et Y, ou Y et Z, ou est égale à 3 dans un sel entre les trois constituants X, Y et Z. 10. Composition selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que le véhicule gastrorésistant physiologiquement stable est choisi parmi : - les microgranules gastrorésistantes, - les microgranules pelliculées gastrorésistantes, - les nanoparticules, ou nanosphères, gastrorésistantes, - les microsphères gastrorésistantes, - les microcapsules gastrorésistantes, - les granulés gastrorésistants, - les granulés pelliculés gastrorésistants, - les liposomes gastrorésistants, - les liposomes pelliculés gastrorésistants, - les lyocs gastrorésistants, - les lyocs pelliculés gastrorésistants, - les pompes osmotiques dans un enrobage gastrorésistant, - les gommes. 11. Composition selon l'une des revendications 1 à 10, caractérisée en ce qu'elle se présente sous forme de comprimés, de gélules, de sachets, ou de granulés. 12. Adjuvant de nutrition caractérisé en ce qu'il contient une composition gastrorésistante selon l'une des revendications 1 à 11, le cas échéant en association avec un véhicule acceptable en alimentation. 13. Adjuvant de nutrition selon la revendication 12, caractérisé en ce qu'il se présente sous une forme prête à diluer dans un solvant aqueux. 14. Adjuvant de nutrition selon la revendication 12 ou la revendication 13, caractérisé en ce qu'il se présente sous forme de prise unitaire contenant environ 25 mg à environ 20 g d'au moins un composé de la composition. 15. Utilisation d'un adjuvant de nutrition selon l'une des revendications 12 à 14, dans le cadre du traitement : des sujets dénutris, et plus particulièrement des sujets âgés dénutris, des sujets anorexiques, des patients atteints de la gastroparésie, : des sujets dont le transit digestif est ralenti, 'des sujets souffrant de malabsorption digestive, des sujets dialysés, *des patients atteints de la maladie d'Alzheimer, 'des personnes en situation d'hypercatabolisme, tels que : * des personnes atteintes d'insuffisance respiratoire, * les personnes souffrant d'escarres, 'les patients brûlés, * les patients cancéreux, 'les patients atteints du SIDA, * les patients post-opérés, 'les personnes en cours de cicatrisation de la muqueuse intestinale, * les patients polytraumatisés, * les patients insuffisants cardiaques, ou dans le cadre de la cicatrisation et de la stimulation de l'hormone de croissance, ou de l'insuline. 16. Utilisation d'un adjuvant de nutrition selon l'une des revendications 12 à 15, à raison d'une posologie journalière comprise entre environ 25 mg à environ 40 g. 17. Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient une composition gastrorésistante selon l'une des revendications 1 à 11, le cas échéant en association avec un véhicule pharmaceutiquement acceptable. 18. Composition pharmaceutique selon la revendication 17, caractérisée en ce qu'elle se présente sous une forme administrable par voie orale, ou par voie entérale, notamment sous une forme sèche à diluer dans un solvant aqueux lorsqu'elle est sous une forme administrable par voie orale. 19. Composition pharmaceutique selon la revendication 17 ou la revendication 18, caractérisée en ce qu'elle est administrable par voie orale sous forme de prise unitaire contenant environ 25 mg à environ 20 g de composé de la composition. 20. Utilisation d'une composition gastrorésistante selon l'une des revendications 1 à 11, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement des sujets dénutris listés dans la revendication 15. 21. Utilisation d'une composition gastrorésistante selon l'une des revendications 1 à 11, pour la préparation d'un médicament destiné au traitement de pathologies humaines ou animales dans lesquelles sont impliqués les neurones silencieux, telles que les pathologies du tube digestif, de la vessie et des voies biliaires, et plus particulièrement au traitement symptomatique des douleurs associées à ces pathologies, telles que les douleurs : des troubles du transit et de l'inconfort intestinal liés aux troubles fonctionnels intestinaux (dyspepsies, syndrome de l'intestin irritable, côlon irritable,...), 'des voies biliaires, 'dans la rectocolite hémorragique, dans la maladie de Crohn, dans l'ulcère gastrique et duodénal, dans la gastrite chronique, dans le cancer colorectal ou gastrique, dans la gastroentérite et la grippe intestinale, liées à une pseudo-obstruction intestinale ou colique, dans l'iléite radique, a post-opératoires digestives ou viscérales, dans la diarrhée, spasmes, constipations, mégacôlon, le mégarectum, *des spasmes de la vessie, e de la parésie vésicale. 22. Utilisation selon la revendication 20 ou 21, pour la préparation d'un médicament susceptible d'être administré à raison d'une posologie journalière en principe actif comprise entre environ 1 mg/kg/jour à 1 g/kg/jour.