Brevet FR2825899A1 — publié le 20021220

l'éventuel complément à cent pour cent de farine est formé de farine de blé. PREPARATION DESTINEE A L'ANIIL, EN PTICULR LA VOLAILLE L'invention concerne une préparation destinée à l'animal, en particulier la volaille. Elle se rapporte également à l'utilisation de ladite préparation pour la fabrication d'une composition destinée au traitement préventif ou curatif des pathologies animales, au cours desquelles une présence sumuméraire de gerrnes du genre Clostridium, notamment du geme ClostridIum pertringens est observée. o Le germe Clostridium pertringens est bien connu pour son implication dans les troubles digestifs, non seulement chez l'homme, mais également chez l'animal. Chez ce dernier, exclusivement concerné par la préparation objet de l' invention, le CIostridium periringens se manifeste dans différentes pathologies. S Parmi les animaux susceptibles d'8tre infectés, on distingue tout d'abord les volailles et en particulier les dindes, poulets, pintades, gibier à plume, perdrix, faisans mais également les porcs, les ruminants (bovins, ovins et caprins) et les lapins s ans p o ur aut ant que c ette li ste so it limitative. Ces animaux développ ent des pathologies en liaison avec les Clostridies en particulier le germe Clostridium perDingens. Chez les volailles tout d'abord, on connait la dysbactériose, qui se manifeste par des troubles digestifs mineurs dus à un déséquilibre de la flore bactérienne, en raison d'une quantité anormale de Clostridium pertringens. Par quantité anormale, on entend tout écart significatif par rapport à une situation normale, qui peut se résumer aux chiffires suivants: Germes totaux d'un poulet adulte: 10 à 2 germe/gr de matière fécale, dont: - 99 % environ de flore non pathogène: lactobacillus, bifidobactérium, bactéroides; - 1 % environ de Echerichia coli, staphylococcus, enterococcus; - moins de 1 % d'autres germes dont Clostridiurn perfringens. Le milieu vétérinaire considère qu'une présence supérieure à 104 germe de Clostridium perfiringens/gr est un signe de dysbactériose. Parmi les différentes pathologies concernées plus particulièrement par l'invention, on connaît également les entérites non spécifiques se manifestant par des diarrLées et les entérites nécrotiques, lesquelles se caractérisent par une o inflammation importante du tractus digestif, pouvant conduire jusqu'à la mort de l'animal. Parmi les entérites, on connaît erfin l'entérite frilositée se développant plus particulièrement chez la pintade, qui se caractérise par une présence de diarrhée et d'une modifcation du comportement des pintades, qui adoptent une attitude prostrée. Les porcs et les ruminants (bovins, ovins et caprins) peuvent étre également infectés par les germes du genre Clostridiurn. On parle dans ce cas d'entérotoxémie. L'entérotoxémie est une pathologie connue pour son évolution fulgurante. La cause principale est un stress quelconque intervenant sur un régime alimentaire très riche, qui favorise un déséquilibre de flore. Les clostridies se développent à très grande vitesse. La production de toxines peut tuer l' anirn al avant l'apparition de symptômes marqués (diarrhée). On conna^t enfin l' entérocolite du lapin, dont on suppose que l' origine est reIiée à la présence d'un virus. Les élevages sont touchés par des mortalités de 15 à 50 % et plus. En déprimant l';mmunité, le virus facilite l'infection du lapin par des gerrnes opportunistes du type Clostridium ou coli, lesquels induisent la mortalité. Un certain nombre de traitements ont été proposés pour éradiquer le Clostridium perfiingens impliqué dans les pathologies se développant chez l'animal. Un premier traitement consiste à administrer à l'animal un antibiotique choisi parmi notamment l'amoxicilline, l'érythromycine ou encore la lincomycine. Si ces antibiotiques permettent d'obtenir de bons résultats 24 heures seulement après la première administration, ils présentent cependant l'inconvénient de ne pas être spécifiques et de conduire outre à la destruction recherchée du Clostridium pertringens, à celle du reste de la flore dIgestive. Le spectre d'activité large des antibi ctiques fragilis e donc la flore di gestive, rend ant ainsi l e s animaux fragile s et candidats aux rechutes. En outre, on obsene de plus en plus des phénomènes de résistance de ce germe, aux antibiotiques. Un autre traitement décrit dans le document WO 99/59430 consiste à administrer des substances naturelles à l'animal, incorporées directement dans la nourriture ou dans la boisson. Plus précisément, ce document décrit l'utilisation d'une composition à base de thymol pour la fabrication d'un additif alimentaire destiné au traitement curatif ou préventif des pathologies dans lesquelles est impliqué le Clostridi,m periringens. Le problème que se propose de résoudre l'invention est de proposer une nouvelle composition contenant au moins une substance naturelle susceptible d'inhiber le développement des germes du genre Clostridium, en particulier du gerrne Clostridiurn perfringens chez l'animal. Un autre objectif de l'invention est de proposer un produit qui soit efficaces dans des quantités les plus faibles 2s possible. Or, le Demandeur a constaté que de manière tout a fait inattendue, le cinnamaldéhyde inhibait le développement, chez l'animal des gennes du genre Clostridium, notam nent celui du gerrne Clostridium peririgens. L' invention a donc pour objet une préparation destince à l'animal, qui se caractérise en ce qu'elle contient du cinnamaldéhyde. Bien entendu, le cinnamaldéhyde peut être obtenu par synthèse, mais également par extraction végétale, en particulier à partir de cannelle, dont on sait qu'elle contient une telle substances. En d'autres termes et selon une prernière caractéristique de l'invention, la source de cinnamaldéhyde est un extTait de cannelle. En pratique, la cannelle est de la cannelle de Chine, connue sous la dénomination latine cinnamomum cassia. Pour obtenir un extrait le plus concentré to possible en cinnarnaldéhyde, l'exkait utilisé se présente sous la forme d'une huile essentielle. Ainsi et selon une autre caractéristique, l'huile essentielle de canelle contient enke 50 et 90 % en poids de cinnamaldéhyde, avantageusement entre 70 et 85 % en poids. Ladite huile essentielle contient en outre du methoxycinnamaldéhyde, en pratique à raison de 1 à 20% en poids. Bien entendu, I'huile essentielle de cannelle peut étre obtenue par toutes les techniques connue de l'homme du métier, en particulier par enkaînement à la vapeur. Pour rendre l'huile essentielle administrable par voie orale, la préparation de l' invention se présente, selon un prernier mode de réalisation, sous forme d' une émulsion stabilisée, dans laquelle l'huile essentielle est dispersce dans une phase aqueuse en présence d'un agent dispersant. Préférentiellement, l' agent dispersant est un dispersant alimentaire, notamment choisi parmi les saponines ou les tweens. En pratique, les tweens, quand ils sont utilisés, représentent entre 20 et 40 % de l'huile essentielle, avantageusement 30 %. S'agissant des saponines, celles-ci représentent en pratique enke 0,5 et 5 %, avantageusement 1,5 % en poids de l'huile essentielle. Dans un autre mode de réalisation, la préparation se présente sous forme d'une poudre sur laquelle est adsorbée l'huile essentielle. En pratique, la poudre est constituée de silice ou issue de remoulage, en particulier de blé. Dans un troisième mode de réalisation, l'huiIe essentielle peut être micro- encapsulée, en particulier par des,B-cyclodextrines, procédé conduisant cependant lo à augmenter de manière importante le. coût de la préparation. Selon une autre caractéristique de l'invention, la préparation est administrée comme déjà dit par voie orale. Elle peut étre incorporce soit dans l'alimentation soit dans l'eau de boisson. Dès lors, l'invention a également pour objet aliment et une eau de boisson destinés à l'animal, incorporant Ia préparation ci-avant décrite. Lors qu' il s ' agit d' une eau de boisson, la préparation est incorporée à raison de 0.1 à 3 ml, arantageusement de 0.35 à 1 ml par litre d'eau de boisson. Comme déjà dit, la préparation peut étre utilisce dans toutes les pathologies animales dans lesquelles les germes du genre Clostridium, en particulier Clostridiurn perfringens est impliqué. Dès lors l'invention concerne également l'utilisation de la préparation décrite ci-avant pour la fabrication d'une composition destinée au kaitement préventif ou curatif des pathologies animales 2s au cours desquelles une présence surnuméraire des germes du genre Closkidium, en particulier le germe Clostridium perfringens est observée. Selon une première caractéristique, les pathologies et animaux concernés par la préparation de l' invention comprennent les dysbactérioses, les entérites non spécifiques, les entérites nécrotiques, mais également des entérites frilositées se développant chez les volailles (en particulier, les dindes, poulets, pintades, gibier à plurne, perdrix, faisans). Lorsque la source de cinnamaldéhyde est constituée d'une huile essentielle de cannelle et que la préparation est utilisée dans le cadre d'un traitement préventif, la quantité d'huile essentielle administrée est comprise entre 30 et 150 ppm dans l'aliment et 50 à 200 ppm dans l'eau de boisson. En revanche, lorsqu'il s'agit d'un traitement curatif, la quantité d'huile essentielle admnistrée est comprise entre 50 et 200 ppm dans l' aliment et 1 00 à 300 ppm dans l'eau de boisson. Selon une autre caractéristique, la préparation de l'invention peut également étre utilisée pour la fabrication d'une composition destinée au traitement préventif is des entérotoxémies, lesquelles se développent plus particulièrement chez le porc et les ruminants (ovins, bovins et caprins). Enfin, la préparation de l'invention peut être utilisée pour la fabrication d'une composition destinée à limiter le dévéloppement des clostridies chez les lapins atteints d'entérocolite. L'invention et les avantages qui en découlent ressortiront rnieux des exemples de réalisation ci-après. EXEMPLE 1 Dans cet exemple, on étudie l'activité inhibitrice d'une huile essentielle de cannelle vis-à-vis du germe Clostridium perfiingens isolé du tube digestif de poule. Préparation de l'inoculum On réalise un piquage sur GTS (Gélose Tryptone Soja) d'une culture de Clostridium peringens isolée du tube digestif de poule. La culture est identifiée sous le numéro CIP99344. On incube 24 heures à 37 C en anacrobiose. On prélève ensuite sur le rlieu gélosé une ou plusieurs colonies pour préparer une suspension dans un tube à essai stérile contenant du STS (Solution Tryptone Sel). On mélange ensuite soigneusement au Vortex et on ajuste l' absorbance à 620 nm + 20 nm avec le STS et ce, afin d'obtenir une suspension contenant environ 108 cellules/ml. A partir de cette suspension, on effectue une série de dilutions jusqu'à 106 avec le STS et ce, pour obtenir une suspension finale contenant environ 102 cellulesiml. Préparation de la solution mére (huile essentielle de cannelle) On prépare une solution mère correspondant à dix fois la plus forte concentration à tester. A partir de cette solution mère, on réalise une gamme de dilution dans des tubes de bouillon Thioglycolate pour que les concentrations correspondent à dix fois les concentrations à tester. Préparation du témoin croissance On prépare ensuite un témoin croissance comme suit. Dans un tube 2s contenant 8 ml de Thioglycolate, on aoute: - 1 ml de Thioglycolate - et 1 ml de la suspension bactérienne contenant environ 105 cellules/ml. On agite au Vortex. On incube pendant 24 à 48 heures à une température comprise entre 30 et 35 C. On visualise ensuite le trouble du milieu au bout du temps d'incubation. s Préparation essai Parallèlement, on prépare l'essai comme suit. Dans 5 tubes contenant 8 ml de Thioglycolane, on ajoute: 0 - 1 ml de la solution mère à la concentration à tester, - 1 ml de la suspension bactérienne contenant environ 105 cellules/ml. On agite au Vortex. On incube pendant 24 à 48 heures à une température comprise entre 30 et 35 C. On visualise le trouble ou non du milieu au bout du temps d'incubation. On réalise un dénombrement sur milieu GTS sur les tubes limites présentant ou non un trouble. Les résultats figurent dans le tableau ci-après. Concentration % 0, 11 0,055 0,0367 0,0275 0,022 0,01 83 Trouble Témoin Trouble Essai Dénombrement une concentration 0,0275 %. EXEMPLE 2 A/Fabricatior: de la préparation de l'invention sous forn?e d'ccne émulsion s On prépare la composition suivante: Huile essentielle de cannelle: 14 % Tween: 80 % Eau: 9sp 0 Pour former une émulsion, on soumet les kois constituants à une agitation violente. B. Fabrication de la préparation de l'inventcon sous for ne d'une poudre On prépare un prémélange duile essentielle de cannelle et de silice dans un rapport 1/3. On dilue ensuite le produit obtenu sur remoulage à hauteur de 6 %. REVENDICATIONS 1/ Préparation destinée à l'animal, caractérisée en ce qu'elle contient du cIrmamaldéhyde. s 2/ Préparation selon la revendication 1, caractérisée en ce que la source de cinnamaldéhyde est un extrait de caneIle. 3I Préparation selon la revendication 2, caractérisée en ce que l'extrait se présente sous la forme d'une huile essentielle. 4/ Préparation selon la revendication 3, caractérisée en ce que 1'huile essentielle contient entre 50 et 90 % en poids de cinnamaldéhyde, avantageusement entre 70 et 85 % en poids. / Préparation selon l'une des revendications 3 ou 4, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la fome d'une émulsion stabilisée dans laquelle l'huile essentielle est dispersce dans une phase aqueuse, en présence d'un agent dispersant. 6/ Préparation selon l'une des revendications 3 ou 4, caractérisée en ce qu'elle se présente sous la forme d'une poudre sur laquelle est adsorbée l'huile essentielle. 7/ Alrment destiné à l'animal, incorporant la préparation objet de l'une des revendications 1 à 6. 8/ Eau de boisson destinée à l' animal, incorporant la préparation objet de l'une des revendications 1 à 6. 9I Eau de boisson selon la revendication 8, caractérisce en ce qu'elle contient de 0.1 à 3 ml, avantageusement de 0.35 à 1 ml par litre d'eau de boisson de la préparation. 10/ Utilisation de la préparation objet de l'une des revendication 1 à 6, pour la fibrication d'une composition destinée au traitement préventif ou curatif des pathologies animales au cours desquelles une présence sumuméraire des germes du genre Clostridium est observée. o 11/ Utilisation selon la revendication 10, caractérisée en ce que le germe est le Clostridium peréringens. 12/ Utilisation selon l'une des revendications 10 ou 11, caractérisée en ce que les pathologies comprennent les dysbactérioses, les entérites non spécifiques, les entérites nécrotiques, et les entérites Dilositées se développant chez les volailles. 13/ Utilisffion selon la revendication 12, caractérisce en ce que, lorsque la source de cinnamaldéhyde est constituée d'une huile essentielle de cannelle et que la préparation est utilisce dans le cadre d'un traitement préventif, la quantité d'huile essentielle administrée est comprise entre 30 et 150 ppm dans l'aliment et à 200 ppm dans l'eau de boisson. 14/ IJtilisation selon la revendication 12, caractérisée en ce que, lorsque la 2s source de cinnarnaldéhyde est constituce d'une huile essentielle de cannelle et que la préparation est utilisée dans le cadre d'un traitement préventif, la quantité d'huile essentielle administrée est comprise entre 50 et 200 ppm et 100 à 300 ppm dans l'eau de boisson. 13/ tlion salon [uDe des n=dicions 10 ou 11, c1s60 on ce Me 1a pboloje est l'etox6e du pow at du nunint (ovals, boons, cats) ma_