Brevet FR2833609A1 — publié le 20030620

Dispositif de prélèvement cellulaire ou tissulaire en phase active et utilisations La présente invention concerne un dispositif et des méthodes destinés à fournir des implants, des cellules ou des tissus, par exemple pour des greffes ou des cultures in vitro de recherche, de génie tissulaire ou de thérapie cellulaire. L'invention est particulièrement adaptée à la production, en quantité suffisante, de populations cellulaires spécifiques à haut potentiel de prolifération et/ou de différenciation, adaptées à une utilisation en génie tissulaire, en chirurgie ou en thérapie réparatrice, notamment chez l'homme. L'invention concerne également un procédé de préparation d'un tel dispositif et ses utilisations, notamment dans le cadre du traitement d'une perte tissulaire, ainsi que des kits, greffons, tissus ou préparations biologiques. L'utilisation de cellules de mammifères, pour des besoins expérimentaux (études génétiques, études de toxicité, etc.), pharmacologiques ou thérapeutiques (thérapie cellulaire, réparation tissulaire, etc. ) a connu un développement très important. Pour ce faire, différentes méthodes d'obtention de cellules ou tissus ont été mises au point, notamment pour la préparation de cultures primaires de cellules, basées essentiellement sur le prélèvement et le traitement ex vivo d'une biopsie. D'une manière générale, les techniques habituelles de biopsie se caractérisent par le fait que les prélèvements sont réalisés dans des tissus matures. Or ces derniers contiennent beaucoup de matrice inter-cellulaire et souvent peu de cellules. En outre, les cellules contenues dans les prélèvements sont majoritairement quiescentes. Ces cellules ne sont donc pas dans des conditions physiologiques optimales pour des applications de réparation tissulaire. La présente invention propose une nouvelle approche pour la préparation de cellules, greffons, tissus et, plus généralement, de matériel biologique comprenant des cellules de mammifères, en vue notamment de leur implantation in vivo ou de leur utilisation pour des expériences de recherche ou de criblage industriel ou de pharmacogénomique. Plus particulièrement, la présente invention propose de permettre la récupération de cellules activées par un trauma chirurgical contrôlé suivi d'une période de cicatrisation, ainsi que des moyens facilitant de façon surprenante cette récupération. La présente invention a notamment pour objet un dispositif destiné à fournir des implants, cellules ou tissus. Plus particulièrement, l'invention concerne un dispositif tel que défini ci-avant comprenant une paroi en matériau biocompatible délimitant un volume creux, ladite paroi présentant des trous permettant à des cellules de coloniser ledit volume creux. La présente invention concerne également une méthode de préparation d'un implant, tissu ou d'une culture cellulaire, comprenant (i) l'introduction d'un dispositif tel que défini ci-dessus dans le tissu d'un sujet, (ii) le maintien du dispositif pendant une période suffisante pour permettre la colonisation du dispositif par des cellules présentant des propriétés désirées et (iii) l'extraction du dispositif et la récupération des cellules, qui peuvent être mises en culture, stockées, conditionnées et/ou greffées. La présente invention concerne aussi l'utilisation d'un dispositif tel que défini ci-dessus pour la préparation d'un implant, tissu ou d'une culture cellulaire. La présente invention concerne encore l'utilisation d'un dispositif selon l'invention pour la préparation d'une composition destinée à la mise en oeuvre d'une méthode de traitement thérapeutique ou chirurgical du corps humain, notamment d'une méthode de thérapie cellulaire. La présente invention concerne en outre l'utilisation d'un dispositif selon l'invention pour la préparation d'un kit destiné au prélèvement de cellules et/ou tissu in vivo chez un sujet. La présente invention concerne également un kit comportant un dispositif tel que décrit ci-avant. Elle concerne en outre des instruments de chirurgie à usage unique associés à chaque type de dispositif qui peuvent également se présenter sous la forme de kits. La présente invention concerne par ailleurs une culture cellulaire, une préparation cellulaire, un implant ou un tissu comprenant des cellules, obtenus par une méthode ci-avant. Le dispositif et les méthodes selon l'invention permettent de favoriser la prolifération et la différenciation cellulaires, la production de matrice extracellulaire, l'organisation et la maturation tissulaire en autorisant une culture optimale réalisée dans des conditions physiologiques naturelles. Le tissu environnant dans lequel est placé le dispositif assure ainsi une alimentation homogène et adéquate et donc une croissance elle-même homogène du tissu à reconstituer proliférant au sein du volume du dispositif. Description d'un dispositif Comme indiqué, l'invention repose sur une nouvelle approche pour la préparation de matériel biologique. L'invention repose notamment sur des méthodes et dispositifs permettant la récupération in vivo de cellules en phase active, à partir de tissus d'intérêt. L'invention décrit ainsi un dispositif particulier, implantable in vivo, permettant de piéger des cellules d'intérêt. Le dispositif selon l'invention permet en outre de maintenir un espace de prolifération pour les cellules, qui n'est pas écrasé ou réduit par la pression des tissus environnants. Ce dispositif permet également de récupérer facilement le tissu et les cellules qui ont proliféré dans son volume. Plus particulièrement, le dispositif selon l'invention comprend une paroi en matériau biocompatible délimitant un volume creux, ladite paroi présentant des trous permettant à des cellules de coloniser ledit volume creux. Ces trous doivent représenter avantageusement une surface suffisante pour que la perméabilité de la paroi du dispositif permette une colonisation rapide. Ils ne doivent pas atteindre une surface excessive afin d'éviter que la rétention dans les tissus ne soit trop grande et que l'extraction du dispositif hors des tissus soit difficile. L'extraction peut en effet provoquer une dilacération du tissu inclus dans le volume interne du dispositif et la perte d'une partie de ce tissu. Le rapport entre la surface cumulée des trous et la surface globale externe de la paroi du dispositif peut varier suivant les tissus et le stade de cicatrisation recherché. Ce rapport est de préférence inférieur à 0,5, notamment compris entre 0,1 et 0,5, typiquement entre 0,1 et 0,4. Un rapport de 0,2 est préféré pour les tissus osseux et ligamentaire par exemple. Les trous ménagés dans la paroi du dispositif peuvent être de forme, de dimension et de disposition variées. Si la forme ronde des trous est adaptée à certains tissus, il peut également être intéressant de choisir des trous allongés ou ovalisés de manière à libérer plus facilement le dispositif d'un tissu fibreux, tel qu'un ligament par exemple, en plaçant le grand axe des trous perpendiculairement aux fibres. La présente invention propose donc des dispositifs dont les perforations peuvent avoir une forme ronde, allongée et/ou ovalisée et/ou toute autre forme adaptée au tissu d'intérêt, en particulier tout autre forme facilitant la colonisation des cellules, la régénération du tissu et/ou l'implantation ou la récupération du piège. Un même dispositif peut comporter des trous de dimensions essentiellement identiques les uns par rapport aux autres et régulièrement répartis. Toutefois, de manière générale, il est possible de réaliser des dispositifs comportant des trous de formes différentes et/ou de dimensions différentes et/ou répartis de manière irrégulière sur la paroi. La paroi du dispositif peut être souple ou plus ou moins rigide selon le tissu à prélever. Le matériau utilisé pour la réalisation du dispositif doit être biocompatible pour ne pas interférer négativement sur la prolifération cellulaire. Le titane, les alliages de titane, des céramiques, les alliages chrome-cobalt, nickel-chrome, les polymères comme le polytétrafluoroéthane ou le polycarbonate peuvent par exemple être envisagés, sans que cette liste soit limitative. Selon un mode de réalisation particulier, la paroi du dispositif de l'invention est donc réalisée dans un matériau biocompatible à base de titane, d'alliages de titane, de céramiques, d'alliages chrome-cobalt, nickel-chrome ou de polymères tels que le polytétrafluoroéthane ou le polycarbonate. Le dispositif selon l'invention peut adopter différentes formes extérieures, selon le tissu dont on cherche à récupérer des cellules. Cette forme est donnée par la paroi du dispositif et peut par exemple être celle d'un cylindre (notamment pour le tissu osseux), celle d'un fuseau (notamment pour les ligaments), celle d'un tronc de cône (notamment pour les alvéoles dentaires), d'une lentille biconvexe (notamment pour le derme, le tissu adipeux ou les aponévroses), d'une lentille uniconvexe (notamment pour le périoste), ou encore toute forme souhaitée. De manière préférée, la paroi donne donc au dispositif une forme extérieure cylindrique, en tronc de cône, en fuseau, en lentille biconvexe ou uniconvexe ou toute autre forme adaptée au tissu dont on cherche à récupérer des cellules. Par volume creux, il faut comprendre un volume délimité par la paroi du dispositif, ce volume pouvant être vide, pouvant contenir un pilier central pour éviter un aplatissement non souhaité de la paroi ou pouvant comprendre un support permettant ou favorisant la culture ou l'adhérence des cellules et/ou susceptible de constituer un implant. La forme de ce support sera adaptée par l'homme du métier en fonction du site receveur de l'implant. Le support ou la paroi interne du dispositif peuvent être fonctionnalisés ou traités pour faciliter la colonisation ou la croissance cellulaire, par exemple par des facteurs biologiques (facteurs de croissance, etc. ) ou matériaux adaptés. De manière préférée, un dispositif selon l'invention possède un volume intérieur creux compris entre 20 et 100 mm3. De préférence, le dispositif possède une longueur comprise entre 2 et 25 mm, de préférence entre 5 et 15 mm, une largeur comprise entre 2 et 10 mm, de préférence entre 3 et 6 mm, et une épaisseur comprise entre 1 et 6 mm, encore plus préférentiellement, entre 2 et 4 mm. Dans un mode de réalisation préféré de l'invention, la paroi ou le dispositif comporte une partie mobile entre une position fermée dans laquelle le volume creux ne communique avec l'extérieur du dispositif qu'à travers les trous, et une position ouverte. En position ouverte, le volume creux communique avec l'extérieur du dispositif par un passage plus important permettant la récupération des cellules ou tissus. Lorsque la paroi du dispositif comporte une partie mobile, celle-ci peut être de forme et de nature variées, selon le type de dispositif. Ainsi, dans le cas d'un dispositif de forme allongée (par exemple cylindrique ou conique), la partie mobile de la paroi peut être constituée par un ou deux embouts amovibles qui se placent aux extrémités du dispositif. Dans le cas d'un dispositif en forme de coquille, par exemple aplati ou en lentille, la partie mobile peut être une moitié du dispositif, c'est-à-dire une demi-coquille, réunie à l'autre moitié par une charnière permettant l'écartement et le rapprochement des deux demi-coquilles, des moyens de verrouillage (ou fermeture) assurant avantageusement le maintien des deux demi-coquilles l'une contre l'autre. A cet égard, certains trous peuvent être disposés pour permettre la fixation ou le passage d'un fil ou de tout autre moyen adapté (élastique, lame, etc. ), permettant de maintenir la ou les parties de paroi mobiles en position fermée. Si le fil est réalisé dans un matériau déformable tel que du métal, une torsade en sortie peut servir de moyen de verrouillage. Si le fil est non métallique, monobrin et/ou en matériau de synthèse, un noeud peut être réalisé dans le même but. Le moyen de fermeture (ou verrouillage) peut également présenter des formes différentes et être réalisé par exemple par moulage avec l'ensemble du dispositif. La partie mobile de la paroi du dispositif peut être prévue sous toute autre forme adaptée. 1\ peut par exemple s'agir d'une portion de la paroi réunie au reste du dispositif par une ligne de faiblesse mécanique. Ainsi, une capsule que l'on déchire ou que l'on coupe avec un instrument adapté peut constituer la partie mobile de la paroi. Enfin, si la paroi ne comporte pas de partie mobile, une destruction du dispositif permet de l'ouvrir pour en extraire les cellules qui se sont développées dans son volume intérieur. Dans un mode de réalisation préféré, le dispositif de l'invention comporte en outre un moyen de traction destiné à faciliter la récupération du dispositif en lésant le moins possible les tissus environnants. Le moyen de traction permet d'une part d'extraire le dispositif des tissus dans lesquels il est implanté et, d'autre part, de guider l'opérateur pour faciliter le dégagement du dispositif. Il est ainsi possible d'utiliser un bistouri fin pour dégager les tissus adhérents au dispositif, en se servant des moyens de traction comme guide. Le moyen de traction est donc généralement un élément saillant du dispositif, tel qu'un guide, une bandelette, un fil, une lame, etc., permettant la préhension et/ou la localisation du dispositif. Dans un premier mode particulier de réalisation, le moyen de traction comprend un fil accroché au dispositif, par exemple par passage à travers un trou du dispositif. Le fil peut être en matériau déformable ou non, synthétique ou non. Il peut être de nature métallique, naturelle (collagène) ou synthétique (exemple : polymère). Sa longueur est avantageusement adaptée par l'homme du métier, pour qu'une extrémité libre soit accessible après implantation du dispositif in vivo. Le fil de traction peut donc ainsi servir à l'extraction du dispositif une fois le délai passé in vivo. Un prolongement du fil ou, plus généralement, le moyen de traction, peut être laissé à distance du site de prélèvement et peut être stabilisé en sous épithélial par une suture annexe pour être retrouvé facilement lors de l'intervention de récupération. Le fil de traction peut être le même que le fil servant à maintenir le dispositif en position fermée. Le moyen de traction peut être de formes différentes. Ainsi, il peut être moulé avec l'ensemble du dispositif, notamment lorsque celui-ci est en polymère. Dans ce cas, le dispositif de l'invention comporte avantageusement une paroi telle que définie ci-avant et un moyen de traction et/ou de fermeture, lesdits éléments étant réalisés dans un matériau biocompatible, choisi de préférence parmi le titane, des alliages de titane, des céramiques, les alliages chromecobalt, nickel-chrome ou des polymères tels que le polytétrafluoroéthane ou le polycarbonate. Les éléments peuvent être préparés par moulage de l'ensemble, ou par moulages séparés et assemblages. En outre, comme indiqué ci-avant, le moyen de traction et le moyen de fermeture peuvent ne former qu'un seul élément, par exemple un fil. Un dispositif particulier de l'invention comprend un manchon creux constituant l'essentiel de la paroi et un ou des embouts représentant ou constituant chacun une partie mobile de paroi obturant une extrémité du manchon (voir figure 1). Chaque embout s'engage dans le manchon creux de manière à ne pas présenter de partie saillante, pour ne pas gêner la mise en place du dispositif dans les tissus puis son extraction et/ou pour ne pas entretenir une zone d'inflammation par trauma tissulaire. La partie mobile de la paroi constituée par les embouts et obturant le manchon peut être par exemple hémisphérique, en ogive ou plate, selon le tissu à prélever. Elle est de préférence hémisphérique pour un tissu mou et fragile tel que le tissu adipeux, de préférence en ogive pour les tissus dont les éléments constitutifs ont une forme allongée, tels que les ligaments et les muscles, et, de préférence, plate à bords arrondis pour le tissu osseux. Un autre dispositif particulier selon l'invention comprend une lentille biconvexe ou uniconvexe constituant l'intégralité de la paroi, divisée en deux moitiés qui sont réunies par une charnière (voir Figure 6). Avantageusement, un tel dispositif comporte en outre une patte d'extraction, solidaire d'une des deux moitiés. Avantageusement, la patte d'extraction est élastiquement déformable et traverse au repos une fente ménagée dans l'autre moitié de la lentille, empêchant ainsi les deux moitiés de s'écarter l'une de l'autre. La présente invention concerne par ailleurs un kit comportant un dispositif tel que décrit ci-avant et permettant le prélèvement de cellules et/ou tissus in vivo chez un sujet. Elle concerne en outre des instruments de chirurgie à usage unique associés à chaque type de dispositif qui peuvent également se présenter sous la forme de kits. Ils comportent : - un tube de manipulation dont la section interne correspond à la section externe du dispositif à poser, et permettant de porter le dispositif dans le site récepteur souhaité avec le minimum de difficultés de manipulation et de risques de contamination ; le tube sera avantageusement de section ronde pour un dispositif cylindrique et de section aplatie pour un dispositif présentant la même caractéristique ; et/ou - un poussoir adapté au tube qui permet de sortir le dispositif du tube et de le déposer dans le site récepteur, ce poussoir comportant préférentiellement une section en U qui laisse passer le moyen de traction. Le moyen de traction, s'il s'agit d'un fil, peut être préalablement fixé au dispositif et assurer en outre sa fermeture, si cette fonction lui est dévolue, permettant ainsi de le récupérer facilement. Le tube de manipulation et le poussoir peuvent être réalisés en tout matériau adapté, par exemple en matériau polymère, de préférence transparent pour ne pas nuire à la visibilité lors de la manipulation, par exemple en polycarbonate. L'ensemble du dispositif et de ses accessoires de manipulation sont préférentiellement fournis montés et stériles sous double sachets. Préparation de Matériel Biologique La présente invention permet l'utilisation particulièrement avantageuse d'un dispositif tel que décrit ci-avant pour la préparation in vitro ou ex vivo mais également in vivo d'un tissu, d'une culture cellulaire, d'un greffon ou d'un implant. Il peut s'agir d'un tissu de mammifère et en particulier d'un tissu humain. Plus précisément, il peut s'agir, par exemple, d'un tissu osseux, ligamentaire, cartilagineux, musculaire, vasculaire ou épithélio-conjonctif. Le dispositif ou piège à cellules décrit dans la présente demande utilise avantageusement la dynamique biologique, cellulaire et moléculaire d'une cicatrisation au sein du tissu d'intérêt. La présente invention propose notamment un protocole dont l'objectif est d'obtenir, par un trauma chirurgical adapté, un site où un tissu recherché va passer par différentes phases de la cicatrisation et différents états cellulaires et de prélever dans le site les cellules recherchées, dans les meilleures conditions possibles, c'est-à-dire in vivo, au moment choisi. La mise en place d'un dispositif particulier, également objet de la présente demande, constitue le trauma chirurgical initial et permet de piéger les cellules en phases actives, qui colonisent le volume du dispositif, stimulées par la libération de quantités de facteurs de croissance in situ. La cicatrisation d'une lésion, qu'elle soit traumatique, infectieuse, chirurgicale ou thermique, suit le même processus, à partir du moment où l'étiologie est éliminée et n'entretient pas un caractère chronique. Dans le cas d'une lésion chirurgicale ou traumatique, les phénomènes successifs de la cicatrisation peuvent être regroupés en plusieurs phases qui se chevauchent : La première phase correspond à la formation du caillot sanguin. Durant cette étape le flux sanguin dû à l'hémorragie apporte la fibrine (laquelle crée un réseau de fibres entrecroisées) et les plaquettes qui, en s'agrégeant, obturent les vaisseaux sectionnés et permettent l'élaboration d'une matrice provisoire favorisant la migration des cellules. Ces plaquettes sanguines sont des réservoirs de facteurs de croissance et de cytokines. Une fois activées, les plaquettes libèrent en effet ces molécules qui représentent le signal de départ de la réparation de la lésion. Elles vont déclencher le recrutement des cellules inflammatoires vers le site de la lésion, puis l'épithélialisation, la formation du tissu de granulation et l'angiogénèse. La phase inflammatoire précoce, correspondant à la deuxième phase, est représentée par l'arrivée massive des polymorpho-nucléaires neutrophiles sanguins qui viennent, attirés par les cytokines, phagocyter les particules étrangères, les débris et les bactéries. Les neutrophiles neutralisent ces éléments en produisant des enzymes et des radicaux oxygénés qui ont un effet destructeur même à l'égard des tissus environnants. Les neutrophiles libèrent également des cytokines pro-inflammatoires qui attirent et activent les fibroblastes, les kératinocytes du voisinage, ainsi que les autres cellules immunitaires, notamment les monocytes sanguins appelés à devenir notamment des macrophages tissulaires. La phase inflammatoire retardée, comprend la concentration des macrophages, poursuivant d'une part le travail des neutrophiles et phagocytant d'autre part les débris étrangers ou tissulaires et les bactéries. Ils synthétisent et secrètent continuellement des facteurs de croissance et des cytokines et poursuivent donc la production des signaux moléculaires nécessaires au processus de cicatrisation, à la suite des plaquettes et des neutrophiles. Les macrophages nettoient la place de tous les tissus altérés. Une destruction tissulaire se produit ainsi durant ces phases inflammatoires. Lorsqu'un dispositif selon l'invention est mis en place, il est donc généralement préféré d'attendre la fin de ces premières phases de la cicatrisation pour l'extraire et récupérer des tissus ou cellules. En effet, le caillot fibrineux est ensuite progressivement Iysé par des enzymes (plasmin), permettant aux cellules, notamment aux fibroblastes et aux kératinocytes, de migrer. Des protéases provoquent la résorption des éléments de la matrice tissulaire et notamment du collagène, pour faciliter la migration des cellules. Enfin d'autres signaux ont un effet chemo-attractant sur les cellules nécessaires à la réparation. La phase de formation du tissu de granulation commence aux environs du 4e jour, et correspond à une période d'intense prolifération et de différentiation cellulaires, notamment des fibroblastes et des nouveaux capillaires, avec une persistance des macrophages et d'un tissu conjonctif lâche. Le tissu de granulation constitue ainsi un réservoir complexe de cytokines possédant des effets chémo-attractifs, mitogènes, et régulateurs. Il existe à ce stade une interdépendance importante entre les groupes cellulaires : les fibroblastes élaborant une matrice extra-cellulaire qui sert à supporter les cellules et la néo-vascularisation, qui elle-même apporte les nutriments nécessaires aux cellules très activées. Les fibroblastes ont de plus une régulation autocrine, liée au moins en partie à la stimulation fonctionnelle des cellules par les contraintes en tension au sein du tissu. La phase suivante, de remodelage tissulaire, est une phase où les cellules du tissu considéré, qui ont proliféré lors de la phase précédente, se différencient et produisent la matrice extra cellulaire qui répare le tissu lésé et le reconstitue. Les fibroblastes sont toujours présents durant cette phase. Dans le cas du tissu osseux, les ostéoblastes sont activés à ce stade et participent à la réparation du tissu. Le tissu mature progressivement et une régulation réduit le nombre de cellules lorsque la réparation est sur le point de se terminer. Un prélèvement tissulaire donne des résultats très différents selon qu'il est pratiqué dans un tissu intact mature, ou dans un tissu récemment lésé et en cours de cicatrisation, et dans le deuxième cas, selon le délai d'attente après le trauma. Environ sept jours après le trauma (délai variable selon les tissus et les espèces animales) la phase de tissu de granulation passe par son maximum, et un prélèvement à ce stade donnera le plus grand nombre de cellules en phase proliférative. Environ quatorze jours après trauma, la phase de formation de matrice passe par son maximum, et un prélèvement à ce stade donnera le plus grand nombre de cellules différenciées en phase active. Tout prélèvement intermédiaire (ou postérieur aux phases inflammatoires initiales) fournit également des populations cellulaires ayant des propriétés de prolifération et/ou des activités tout à fait avantageuses. Par rapport à ces différentes situations intéressantes, un prélèvement dans un tissu intact mature n'apportera que peu de cellules, peu actives ou quiescentes, enrobées dans une matrice dense, dont elles peuvent avoir des difficultés à se sortir lors d'une mise en culture. Le pourcentage de cellules perdues dans ce type de prélèvement peut être important et atteindre 90 à 95% de la population existante. La présente invention propose donc un procédé de préparation d'un tissu, d'une culture cellulaire ou d'un implant au moyen d'un dispositif tel que décrit ci-avant capable d'exploiter les capacités naturelles de régénération d'un tissu en cours de cicatrisation. Un dispositif selon l'invention peut ainsi être implanté dans un tissu d'intérêt de préférence sain, c'est-à-dire n'ayant pas subi d'autre lésion préalablement à l'implantation, de manière à obtenir une régénération homogène du tissu. Un trauma, par exemple une incision, est ainsi pratiquée dans le tissu d'intérêt à partir duquel on souhaite effectuer un prélèvement de cellules puis, un dispositif selon l'invention, de forme adaptée au tissu d'intérêt, est placé au sein de ce tissu, par exemple à l'aide d'un tube de manipulation et d'un poussoir selon l'invention. Une suture est ensuite réalisée de façon à stabiliser le dispositif au sein du tissu d'intérêt. Selon un mode de réalisation préféré, le moyen de traction éventuellement présent est stabilisé par une suture annexe, à distance du dispositif et donc du site de prélèvement, et permet de localiser facilement ce dernier. Après le retrait du dispositif (par exemple lors d'une seconde intervention chirurgicale), ce dernier est ouvert dans des conditions d'asepsie, et son contenu est : - soit directement utilisé comme greffon pour un autre site opératoire présentant une lésion ou un déficit tissulaire à traiter avec le même type de tissu, - soit placé dans un milieu de culture ou de transport, pour son utilisation dans un processus de thérapie cellulaire, de génie tissulaire ou de recherche. Si le contenu du dispositif est utilisé comme greffon, ce dernier est avantageusement placé dans un site qui a lui-même été préparé à l'avance pour se trouver dans une phase de remodelage tissulaire avec une néovascularisation favorable à la nutrition du tissu greffé. Toutes les conditions seront alors réunies pour obtenir une cicatrisation très rapide et beaucoup plus sûre. Un autre aspect de l'invention concerne l'utilisation avantageuse d'un dispositif tel que décrit pour la préparation d'un tissu ou d'un implant pour le traitement d'une perte tissulaire. Un autre aspect de l'invention concerne une méthode de réparation d'une perte tissulaire ou de traitement d'un sujet, comprenant les étapes suivantes : a) la pratique d'un trauma dans un tissu à partir duquel on souhaite effectuer un prélèvement de cellules et la mise en place du dispositif selon l'invention au sein de ce tissu, (ces deux phases sont généralement concomitantes, la mise en place du dispositif, par exemple par incision, constituant le trauma. La mise en place du dispositif comprend typiquement une étape de suture destinée à maintenir le dispositif dans le tissu considéré) ; b) la récupération du dispositif à un moment déterminé auquel les cellules du tissu possèdent des propriétés recherchées, par exemple entre les jours 5 et 21 inclus, de préférence entre les jours 6 et 14 inclus après mise en place ; et c) la récupération de cellules ou de tissus dans le dispositif et leur greffe, soit directement soit après culture et/ou conditionnement, au niveau d'un site de réception chez le sujet où une réparation tissulaire est désirée ou permettant de traiter le sujet. Dans une méthode particulière de réparation selon l'invention, le dispositif est récupéré aux environs du quatorzième jour, au cours de la phase de remodelage. La méthode est adaptée à la réparation de tissus osseux, ligamentaire, musculaire, tendineux, conjonctif, vasculaire, etc. Dans un mode de réalisation préféré, les cellules prélevées sont des cellules autologues. Les cellules sont dans ce cas directement prélevées sur le sujet pour lequel on cherche à obtenir une réparation tissulaire. Il peut également s'agir de cellules syngéniques prélevées sur un jumeau identique au sujet à traiter ou de cellules allogéniques provenant d'un autre sujet de la même espèce (apparenté ou non), c'est-à-dire d'un autre être humain dans le cas du traitement d'un patient humain. D'autres aspects et avantages de l'invention apparaîtront à la lecture des exemples qui suivent, qui doivent être considérés comme illustratifs et non limitatifs, ainsi que des dessins sur lesquels : - La figure 1 est une vue éclatée en élévation d'un dispositif cylindrique selon un premier mode de réalisation ; - la figure 2 est une coupe longitudinale selon ! i-) i de la figure 1 ; - la figure 3 est une section longitudinale selon 11-il du dispositif à l'état monté ; - la figure 4 est une vue de côté selon IV de la figure 1 ; - la figure 5 est une vue de côté selon V de la figure 1 montrant la face interne de l'embout ; - la figure 6 représente un dispositif selon un autre mode de réalisation de l'invention, à l'état ouvert ; - la figure 7 est une vue en coupe selon VII-VII de la figure 6 ; - la figure 8 est analogue à la figure 6, le dispositif étant fermé ; et - la figure 9 est une vue en coupe selon IX-IX de la figure 8. Dans le mode de réalisation de la figure 1, le dispositif comprend un manchon cylindrique creux 1 dont la paroi latérale est percée de trous 2 permettant la colonisation cellulaire du volume interne du dispositif. Deux embouts 3 complètent le dispositif. Chaque embout présente un diamètre très légèrement inférieur au diamètre interne du manchon de sorte qu'il peut s'engager en force dans celui-ci et s'y immobiliser. Chaque embout 3 comporte une collerette d'extrémité 4 qui prend appui contre le bord 5 du manchon et prolonge la face externe de ce dernier, lorsque l'embout est en position, par sa forme arrondie reliant sans arête vive la face latérale du manchon à la face externe de l'embout. Ladite face externe est formée par un voile transversal 6 qui constitue, selon l'invention, une partie mobile de la paroi du dispositif. Dans l'exemple illustré, le voile 6 est réalisé d'un seul tenant avec le reste de l'embout. Des trous 7 identiques ou similaires à ceux 2 réalisés dans la paroi latérale du manchon sont ménagés dans le voile transversal de chaque embout, comme on le voit sur les figures 4 et 5. On voit que la partie mobile de la paroi formée par les voiles 6 peut prendre une position fermée, dans laquelle les embouts sont en place sur le manchon. Le volume intérieur du dispositif ne communique alors avec l'extérieur qu'à travers les trous 2,7, et dans une position ouverte dans laquelle les embouts sont retirés. Dans ce dernier cas, le volume intérieur du dispositif est ouvert sur l'extérieur par un passage de la taille de sa section transversale. Sur la figure 3, on a représenté un fil de suture 8 formant une boucle passant par les trous 7 des embouts. En étant torsadé à sa sortie du dispositif, le fil de suture demeure tendu entre les deux embouts 3 et maintient ainsi lesdits embouts solidaires du manchon 1. Le prolongement 9 du fil de suture 8 sert de fil de traction pour retirer le dispositif en fin de période de capture. En variante, le fil peut être noué plutôt que torsadé. Dans le mode de réalisation des figures 6 à 9, le dispositif se présente sous la forme d'une coquille 1 a généralement plate formée de deux demi-coquilles 11, 12 réunies par une charnière souple 13. La paroi de chaque demi-coquille est percée de trous de colonisation 14. Chaque demi-coquille est mobile relativement à l'autre. Par convention, on considère que la demi-coquille 12 constitue la partie mobile de la paroi du dispositif. Conformément à l'invention, la demi-coquille 12 peut prendre une position fermée, représentée sur les figures 8 et 9, dans laquelle le volume intérieur du dispositif ne communique avec l'extérieur qu'à travers les trous 14, et une position ouverte, représentée sur la figure 7, dans laquelle l'intérieur débouche sur l'extérieur sur toute sa section transversale, prise dans son plan principal. Dans son plan principal, qui est celui de la figure 6, la coquille présente une section globalement rectangulaire. Dans un plan perpendiculaire, notamment celui des figures 7 et 9, la section du dispositif est en ogive. L'une 11 des demi-coquilles comporte, opposée à la charnière 13, une patte d'extraction 15 terminée par un orifice de fixation 16 grâce auquel ladite patte peut être suturée en sous épithélial en vue de sa récupération. Comme on le voit sur les figures 7 et 9, la patte de fixation 15 est constituée de deux branches, l'une 15a courte, l'autre 15b longue, perpendiculaires entre elles. La branche courte 15a prend naissance à l'intérieur de la demi-coquille 11 et s'élève perpendiculairement au plan principal de la demi-coquille, le long de son bord 17 opposé à la charnière 13. La branche longue 15b se trouve à faible distance du bord de la demi-coquille et forme un angle droit avec la branche courte 15a. Sur l'autre demi-coquille, une fente 18 est ménagée le long du bord 19 opposé à la charnière 13, sur une longueur légèrement supérieure à la largeur de la patte d'extraction 15. La patte d'extraction, comme d'ailleurs le reste du dispositif, est réalisée en matière plastique souple. Elle est suffisamment déformable pour pouvoir être recourbée élastiquement sur elle-même de manière à présenter son extrémité libre, munie de l'orifice de fixation 16, sur le trajet de la fente 18 lors du rapprochement des deux demi-coquilles par rotation autour de la charnière 13. Lorsque la patte rencontre la fente, elle s'y engage et la fermeture du dispositif se poursuit jusqu'à application complète des deux demi-coquilles l'une contre l'autre. Juste avant la fermeture du dispositif, la fente franchit l'angle droit formé par les deux branches de la patte. La patte de fixation reprend ensuite sa position de repos pour maintenir le dispositif fermé, comme représenté sur la figure 9. L'ouverture ultérieure du dispositif pour en extraire les cellules après colonisation s'effectue par un mouvement inverse, en facilitant l'écartement des deux demicoquilles par une action sur la patte visant à la déformer. Pour éviter l'écrasement du dispositif à l'état fermé, l'une 11 des deux demicoquilles comporte un pilier central 20 qui prend appui contre la face interne de l'autre demi-coquille, comme on le voit également à la figure 9. EXEMPLES Exemple 1-Prélèvement de cellules osseuses. Une incision d'accès, d'au moins 4 centimètres, est réalisée au niveau d'un os accessible, par exemple, de la crête édentée d'un maxillaire ou du bord antéromédial du tibia. Un décollement muco-périosté est ensuite réalisé. A 1 cm d'une extrémité, un forage progressif est effectué, de 2 à 5 mm de diamètre, par mm, sous irrigation, et pour une profondeur de 10 mm, aux dimensions du piège à cellules . Celui-ci est placé avec le porte-piège dans l'alvéole préparée, et le fil de retrait est plaqué contre la surface osseuse jusqu'à l'autre extrémité de l'incision. Des sutures cutanées ou muqueuses sont réalisées, la dernière fixant en sous cutané ou muqueux une boucle terminant le fil d'extraction du piège. Une membrane de régénération tissulaire guidée peut éventuellement être placée par-dessus l'ouverture de l'alvéole, le piège et le fil, contre la surface osseuse, débordant d'au moins 5 mm de chaque côté de l'alvéole pour éviter que les tissus mous ne l'envahissent. Les différentes phases de la cicatrisation du tissu osseux vont se produire, avec la libération de facteurs de croissance et les activations cellulaires. Le piège peut être retiré 14 jours après sa mise en place pour en extraire une population cellulaire issue du tissu osseux environnant et différenciée en ostéoblastes. Ces cellules peuvent ensuite être mises en culture in vitro, de façon beaucoup plus favorable que s'il fallait attendre la sortie des cellules à partir d'explants de tissu osseux. Le tissu peut également être greffé à un endroit qui en a besoin. Exemple 2-Prélèvements de fibroblastes tendineux ou ligamentaires. Un piège cylindrique de petite taille (longueur= 8 mm, diamètre= 3 mm) avec des extrémités ogivales, est choisi. Il est placé dans un tendon ou un ligament, après incision cutanée et dissection progressive. Une suture le stabilise à l'intérieur du ligament. Le fil de traction est lui aussi stabilisé et fixé en sous cutané par une autre suture. La suture cutanée est ensuite réalisée. Le prélèvement par retrait du piège à cellules peut se faire après 14 jours, de manière à retirer le plus grand nombre de cellules différenciées qui auront colonisé l'intérieur du piège. Des ouvertures assez larges (18) dans les embouts du piège peuvent favoriser une stimulation fonctionnelle au sein de ce dernier et améliorer ainsi la différentiation cellulaire. Une fois le piège retiré, les sutures sont refaites. Comme pour l'os, les cellules ainsi obtenues n'ont pas à se dégager d'une matrice dense avant de pouvoir être cultivées, ce qui accélère considérablement la culture in vitro. Ces cellules peuvent également être placées contre une lésion ligamentaire pour obtenir sa réparation. Exemple 3-Prélèvements de cellules du ligament parodontal. Suite à une extraction dentaire, un piège de forme tronconique peut être placé dans l'alvéole dentaire afin de récupérer les cellules du ligament parodontal. En effet, ces dernières prolifèrent rapidement à la surface de la cavité alvéolaire après toute extraction, à condition que la cavité n'ait pas été curetée. Après un délai d'une semaine, ces cellules peuvent se différencier en ostéoblastes. Le temps de maintien en place du piège détermine la nature des cellules récupérées. Après la mise en place du piège dans une alvéole d'extraction, un lambeau muqueux doit venir recouvrir et fermer l'alvéole pendant toute la période. Les principes de suture sont les mêmes et le fil de traction est reporté à environ 3 cm du piège . Exemple 4-Prélèvement de cellules de périoste. Un piège plat uniconvexe est préféré. Le site de prélèvement est une surface osseuse accessible (tibia, palais). Une incision d'accès suivie d'un décollement du périoste sur 4 cm sont nécessaires pour glisser le piège dans la poche réalisée. Il est important que le contact osseux soit bien obtenu. Les plans (aponévrose + peau) sont resuturés en stabilisant la boucle terminant le fil d'extraction à l'autre bout de l'incision. Un délai de 14 à 21 jours est nécessaire pour obtenir une population cellulaire suffisante d'ostéoblastes. Puis le piège est retiré en se guidant à l'aide du fil d'extraction. REVENDICATIONS 1. Dispositif destiné à fournir des implants, cellules ou tissus, comprenant une paroi en matériau biocompatible délimitant un volume creux, ladite paroi présentant des trous (2,7, 14) permettant à des cellules de coloniser ledit volume creux. 2. Dispositif selon la revendication 1, caractérisé en ce que le rapport entre la surface cumulée des trous (2,7, 14) et la surface globale externe de la paroi est inférieur à 0,5, notamment compris entre 0,1 et 0,5, typiquement entre 0,1 et 0,4. 3. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que la paroi comporte une partie mobile (3,12) entre une position fermée dans laquelle le volume creux ne communique avec l'extérieur du dispositif qu'à travers les trous (2,7, 14) et une position ouverte. 4. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce qu'il comporte un moyen de traction (9,15). 5. Dispositif selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que la paroi donne au dispositif une forme extérieure cylindrique, en tronc de cône, en fuseau, en lentille biconvexe ou uniconvexe ou toute autre forme adaptée au tissu dont on cherche à récupérer des cellules. 6. Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que la paroi et le moyen de traction sont réalisés dans un matériau biocompatible à base de titane, d'alliages de titane, de céramiques, d'alliages chrome-cobalt, nickel-chrome ou de polymères tels que le polytétrafluoroéthane ou le polycarbonate. 7. Dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisé en ce que les trous (2,7, 14) ont une forme ronde, allongée et/ou ovalisée et/ou toute autre forme adaptée au tissu. 8. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce qu'il possède un volume intérieur creux compris entre 20 et 100 mm3, pour une longueur comprise entre 2 et 25 mm, de préférence entre 5 et 15 mm, une largeur comprise entre 2 et 10 mm, de préférence entre 3 et 6 mm, et une épaisseur comprise entre 1 et 6 mm, encore plus préférentiellement, entre 2 et 4 mm. 9. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que certains trous (7) sont disposés pour permettre la fixation du moyen de traction. 10. Dispositif selon l'une des revendications 4 à 9, caractérisé en ce que le moyen de traction est un fil (8) qui maintient la partie de paroi mobile (6) en position fermée en passant par plusieurs trous (7). 11. Dispositif selon l'une des revendications 4 à 10, caractérisé en ce que le moyen de traction est prévu pour être laissé à distance du site de prélèvement et stabilisé en sous épithélial par une suture annexe pour être retrouvé facilement. 12. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce qu'il comprend un manchon creux (1) constituant l'essentiel de la paroi, et un ou des embouts (3) constituant chacun une partie mobile de paroi (6) obturant une extrémité du manchon. 13. Dispositif selon la revendication 12, caractérisé en ce que chaque embout (3) s'engage dans le manchon creux (1) de manière à ne pas présenter de partie saillante, pour ne pas gêner la mise en place du dispositif dans les tissus et son extraction. 14. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 12 et 13, caractérisé en ce que la partie mobile de la paroi (6) constituée par les embouts est hémisphérique pour un tissu mou et fragile tel que le tissu adipeux, en ogive pour les tissus dont les éléments constitutifs ont une forme allongée, tels que les ligaments et les muscles, et plate à bords arrondis pour le tissu osseux. 15. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce qu'il comprend une lentille biconvexe ou uniconvexe constituant l'intégralité de la paroi, divisée en deux moitiés (11,12) qui sont réunies par une charnière (13) ainsi que, de préférence, une patte d'extraction (15) solidaire d'une des deux moitiés. 16. Dispositif selon la revendication 15, caractérisé en ce que la patte d'extraction (15) est élastiquement déformable et traverse au repos une fente (18) ménagée dans l'autre moitié en empêchant ainsi les deux moitiés de s'écarter l'une de l'autre. 17. Utilisation d'un dispositif selon l'une quelconque des revendications précédentes pour la préparation in vitro ou ex vivo d'un tissu, d'une culture cellulaire ou d'un implant. 18. Utilisation d'un dispositif selon l'une des revendications 1 à 16, pour la préparation d'un kit destiné au prélèvement de cellules et/ou tissu in vivo chez un sujet. 19. Utilisation d'un dispositif selon l'une des revendications 1 à 16, pour la préparation d'une composition destinée à la mise en oeuvre d'une méthode de traitement thérapeutique ou chirurgical du corps humain, notamment d'une méthode de thérapie cellulaire. 20. Utilisation selon l'une des revendications 17 à 19, pour la préparation d'un tissu de mammifère et en particulier d'un tissu humain. 21. Utilisation selon la revendication 20, caractérisée en ce que le tissu de mammifère est un tissu osseux, ligamentaire, cartilagineux, musculaire, vasculaire ou épithélio-conjonctif. 22. Kit caractérisé en ce qu'il comporte un dispositif selon l'une des revendications 1 à 16. 23. Kit selon la revendication 22, caractérisé en ce qu'il comporte, outre le dispositif selon l'une des revendications 1 à 16 : (i) un tube de manipulation dont la section interne correspond à la section externe du dispositif à poser et permettant de porter ledit dispositif dans un site récepteur, et/ou (ii) un poussoir adapté au tube (i) qui permet de sortir ledit dispositif du tube et de le déposer dans le site récepteur, ce poussoir comportant préférentiellement une section en U qui laisse passer le moyen de traction. 24. Kit selon la revendication 22, caractérisé en ce que le tube de manipulation et le poussoir sont en matériau polymère, de préférence transparent, par exemple en polycarbonate.