Brevet FR2830629A1 — publié le 20030411

PROCEDE ET DISPOSITIF DE PRELEVEMENT D'UNE PARTIE D'UN FAISCEAU LUMINEUX, NOTAMMENT POUR APPAREIL D'ANALYSE DE FLUORESCENCE DESCRIPTION DOMAINE TECHNIQUE La présente invention concerne un procédé et un dispositif de prélèvement d'un faisceau lumineux, en particulier d'un faisceau laser. L'invention s'applique notamment à l'analyse- de fluorescence par microscopie et, plus particulièrement, à l'analyse d'images de fluorescence provenant de biopuces ("biochips"), ou de plaques de micro-titration ("microtiter plates"), par exemple en vue de l'analyse d'ADN, d'ARN, de protéines et de cellules. Des applications particulières de l'invention sont ainsi l'analyse cellulaire par fluorescence, la lecture de biopuces, par exemple du genre~MICAM (marque déposée) à 128 ou 8100 électrodes, et les appareils de fluorimétrie utilisant des lasers. ETAT DE LA TECHNIQUE ANTERIEURE Avec un grand nombre d'appareils optiques, en particulier avec les appareils de microscopie à fluorescence, on utilise de préférence des lasers en tant que sources lumineuses, pour des raisons de stabilité et de durée de vie de ces sources. La plupart du temps, on utilise des obturateurs ("shutters") mécaniques pour couper les faisceaux lumineux émis par ces sources. Cependant, la commutation de tels obturateurs n'est pas très rapide, ce qui est particulièrement gênant lorsqu'on utilise deux ou plus de deux sources lumineuses. D'autres problèmes se posent dans ces appareils optiques, à savoir ceux de la régulation de l'intensité lumineuse des sources utilisées et de la surveillance ("monitoring") de l'état de fonctionnement de ces sources, tout particulièrement lorsqu'il s'agit de lasers, ainsi que les problèmes de sécurité occulaire inhérents à l'utilisation de lasers. EXPOSÉ DE L'INVENTION La présente invention a pour but de résoudre les problèmes précédents. Pour ce faire, l'invention utilise un ou une pluralité de modulateurs acousto-optiques, selon qu'une ou une pluralité de sources lumineuses sont utilisées. En effet, lorsqu'un modulateur acousto-optique reçoit un faisceau lumineux, il est capable de fournir un faisceau diffracté d'ordre +1 (ou d'ordre-1), mais seulement lorsqu'il est activé. Ce modulateur acousto-optique peut donc servir d'obturateur vis-à-vis de l'appareil optique auquel est destiné le faisceau lumineux. De plus, le faisceau d'ordre 0, qui est constamment fourni par le modulateur acousto-optique, peut être utilisé en tant que faisceau de référence pour la régulation de l'intensité lumineuse de la source qui émet le faisceau reçu par le modulateur et pour la surveillance de l'état de fonctionnement de cette source, c'est à dire pour savoir si cette dernière est allumée ou éteinte ou si oui ou non l'appareil optique reçoit le faisceau diffracté d'ordre +1 (ou d'ordre-1). En outre, le temps de commutation du modulateur acousto-optique est beaucoup plus court que celui d'un obturateur mécanique-il est de l'ordre de quelques microsecondes-ce qui est particulièrement intéressant lorsqu'on utilise deux sources lumineuses ou plus. De façon précise, la présente invention a pour objet un procédé de prélèvement d'une partie d'au moins un faisceau de lumière fourni par une source de lumière, ce faisceau étant destiné à être utilisé dans un appareil optique, ce procédé étant caractérisé en ce que : on place au moins un modulateur acoustooptique sur le trajet du faisceau de lumière, ce modulateur fournissant ainsi un faisceau d'ordre 0, - on active ce modulateur acousto-optique pour qu'il fournisse aussi un faisceau d'ordre +1 (c'est-à-dire d'ordre +1 ou d'ordre-1), et on envoie ce faisceau diffracté d'ordre +1 dans l'appareil optique, ce dernier ne recevant donc pas ce faisceau diffracté d'ordre 1 lorsque le modulateur acousto-optique n'est pas activé, ce modulateur acousto-optique formant ainsi un obturateur de faisceau vis-à-vis de l'appareil optique. Selon un mode de mise en oeuvre particulier du procédé objet de l'invention, on utilise le faisceau d'ordre 0 en tant que faisceau de référence pour surveiller l'état de fonctionnement de la source de lumière ou pour corriger ce fonctionnement, en particulier pour corriger l'intensité du faisceau de lumière. Selon un autre mode de mise en oeuvre particulier, l'appareil optique est destiné à effectuer des mesures et l'on utilise le faisceau d'ordre 0 en tant que faisceau de référence pour corriger ces mesures. La source de lumière peut être un laser, le faisceau de lumière étant alors un faisceau laser. La présente invention concerne aussi'un dispositif de prélèvement d'une partie d'au moins un faisceau de lumière founi par une source de lumière, ce faisceau étant destiné à être utilisé dans un appareil optique, ce dispositif étant caractérisé en ce qu'il comprend : - au moins un modulateur acousto-optique prévu pour recevoir ce faisceau de lumière, ce modulateur acousto-optique fournissant ainsi un faisceau d'ordre 0, et des moyens d'activation de ce modulateur acousto-optique pour qu'il fournisse aussi un faisceau diffracté d'ordre 1, l'appareil optique étant destiné à recevoir ce faisceau diffracté d'ordre +1 et ne recevant donc pas ce dernier lorsque le modulateur acousto-optique n'est pas activé, ce modulateur acousto-optique formant ainsi un obturateur de faisceau vis-à-vis de l'appareil optique. Selon un mode de réalisation préféré du dispositif objet de l'invention, ce dispositif comprend en outre au moins un photodétecteur prévu pour recevoir le faisceau d'ordre 0, ce dernier formant un faisceau de référence, et pour fournir un signal représentatif de ce faisceau de référence, ce signal étant utilisé pour surveiller l'état de fonctionnement de la source de lumière ou pour corriger ce fonctionnement, en particulier pour corriger l'intensité du faisceau de lumière, ou pour corriger des mesures susceptibles d'être effectuées au moyen de l'appareil optique. Selon un mode de mise en oeuvre particulier du dispositif objet de l'invention, l'appareil optique est un appareil d'analyse d'échantillons biologiques par fluorescence et le signal est utilisé pour corriger les mesures effectuées au moyen de cet appareil d'analyse. Le dispositif objet de l'invention peut comprendre une pluralité de modulateurs acoustooptiques prévus pour recevoir respectivement une pluralité de faisceaux de lumière destinés à être utilisés dans l'appareil optique, ces modulateurs acousto-optiques formant ainsi une pluralité d'obturateurs de faisceau vis-à-vis de l'appareil optique. De préférence, le dispositif objet de l'invention comprend une pluralité de modulateurs acousto-optiques, prévus pour recevoir respectivement une pluralité de faisceaux de lumière, et une pluralité de photodétecteurs respectivement associés à ces modulateurs acousto-optiques et prévus pour recevoir les faisceaux d'ordre 0 respectivement fournis par ces modulateurs acousto-optiques. Chaque source de lumière utilisée avec le dispositif objet de l'invention peut être un laser, chaque faisceau de lumière étant alors un faisceau laser. BRÈVE DESCRIPTION DES DESSINS La présente invention sera mieux comprise à la lecture de la description d'exemples de réalisation donnés ci-après, à titre purement indicatif et nullement limitatif, en faisant référence aux dessins annexés sur lesquels : - la figure 1 est une vue schématique d'un mode de réalisation particulier du dispositif objet de l'invention, - la figure 2 illustre schématiquement les diverses tensions que l'on peut obtenir à la sortie du photodétecteur que comporte le dispositif de la figure 1, - la figure 3 est une vue schématique d'un dispositif conforme à l'invention, que l'on utilise avec plusieurs lasers, - la figure 4 est une vue schématique d'un circuit de synchronisation qui est utilisable dans l'invention, - la figure 5 est un chronogramme relatif à la synchronisation des images obtenues avec une caméra à transfert de lignes ou à transfert de trames dans un mode de réalisation particulier de l'invention, et - la figure 6 est un chronogramme relatif à la synchronisation des acquisitions de signaux fournis par un photomultiplicateur, une photodiode à avalanche ou une photodiode en silicium, dans un mode de réalisation particulier de l'invention. EXPOSÉ DÉTAILLÉ DE MODES DE RÉALISATION PARTICULIERS La figure 1 illustre schématiquement un dispositif conforme à l'invention, que l'on utilise avec un appareil optique A. Il s'agit d'un appareil d'analyse d'échantillons biologiques par microscopie à fluorescence. Cet appareil est destiné à l'observation d'échantillons 2 disposés dans les puits 4 d'une plaque de micro-titration 6 dont on voit le fond 8 ainsi que les parois 10 délimitant les puits. Les échantillons sont excités par un rayonnement 12 issu d'un laser 14 et fournissent un rayonnement de fluorescence 16 à la suite de cette excitation. Le fond de la plaque de micro-titration est transparent à la lumière issue du laser ainsi qu'à ce rayonnement de fluorescence. La lumière issue du laser est mise en forme grâce à une optique appropriée 18 puis filtrée grâce à un filtre approprié 20 après avoir traversé le dispositif conforme à l'invention D, sur lequel on reviendra par la suite, puis été réfléchie successivement par deux miroirs 21a et 21b. La lumière ainsi filtrée est réfléchie, grâce à un miroir dichroïque 22, en direction de l'objectif 24 du microscope. Elle traverse cet objectif 24 qui la focalise sur l'échantillon étudié. On précise que les échantillons sont étudiés les uns à la suite des autres, la plaque de micro- titration étant pour ce faire disposée sur des moyens de déplacement appropriés, non représentés. On voit aussi sur la figure 1 une caméra 26, par exemple une caméra CCD, qui est prévue pour capter l'image de l'échantillon étudié, grâce au rayonnement de fluorescence 16 émis par cet échantillon. Ce rayonnement de fluorescence 16 traverse également l'objectif 24 du microscope puis le miroir dichroïque 22 (ce dernier étant apte à réfléchir le rayonnement 12 et transmettre le rayonnement 16) et parvient à la caméra 26 après avoir traversé un autre filtre 28 prévu pour éliminer la lumière du laser susceptible de parvenir également à cette caméra. Le dispositif D conforme à l'invention, qui est schématiquement représenté sur la figure 1, comprend un modulateur acousto-optique 30 qui est placé sur le trajet du faisceau issu du laser 14, à la suite de l'optique 18. Ce modulateur acousto-optique comprend une cellule acousto-optique 32 munie d'un transducteur 34. Le dispositif D comprend aussi un circuit de commande ("driver") 36 qui est relié au transducteur 34. A titre purement indicatif et nullement limitatif, on utilise le modulateur acousto-optique commercialisé par la société Automate et Automatisme sous la référence A A. M P. 110/A1. 5-vis. Lorsqu'on applique au modulateur acoustooptique un signal de tension et de fréquence appropriées (typiquement une fréquence de 20 MHz et une tension de 24 V), ce modulateur acousto-optique diffracte le faisceau laser et fournit ainsi, dans l'exemple représenté, un faisceau diffracté 38 d'ordre +1 en plus du faisceau 40 d'ordre 0. On note 8 l'angle d'incidence du faisceau laser, cet angle 8 étant égal à 0, 30 dans l'exemple. Le faisceau dans l'ordre +1 est dévié de l'angle 28 par rapport à ce faisceau incident, tandis que le faisceau d'ordre 0 fait un angle nul avec ce faisceau incident. L'efficacité de diffraction représente le pourcentage d'énergie lumineuse qui est dévié. Ce pourcentage est de l'ordre de 80%. Cela signifie qu'il reste environ 20% d'énergie lumineuse dans le faisceau d'ordre 0. Lorsque le circuit de commande n'est pas activé, seul existe le faisceau d'ordre 0 (faisceau qui n'est pas dévié par rapport au faisceau laser incident) et, dans ce cas, la quasi-totalité de l'énergie lumineuse du faisceau laser incident se trouve dans ce faisceau d'ordre 0. Typiquement, pour un faisceau laser dont le diamètre est de l'ordre de 1 mm à 2 mm et la puissance de l'ordre de 10 mW, environ 8 mW se retrouvent dans le faisceau diffracté d'ordre +1 et environ 2 mW subsistent dans le faisceau d'ordre 0. Comme on l'a vu, lorsque le circuit de commande ne fournit aucun signal au modulateur acousto-optique, quasiment toute l'énergie lumineuse se trouve dans le faisceau d'ordre 0. Le circuit de commande 36 est simplement commandé par un signal TTL de 0 à 5V (figure 2). Lorsque ce signal TTL est à OV, tout le faisceau laser se trouve dans l'ordre 0 et, lorsqu'il est à 5V, environ 80% de ce faisceau laser est dévié dans l'ordre +1. Pour l'appareil optique A, le modulateur acousto-optique 30 joue le rôle d'un obturateur de faisceau, alors qu'il est traditionnellement utilisé en tant que modulateur de lumière. On voit aussi sur la figure 1 un photodétecteur qui est par exemple constitué par une photodiode 42 et destiné à recevoir le faisceau dans l'ordre 0. Cette photodiode est donc susceptible de fournir trois tensions de sortie différentes (figure 2) : 1) OV lorsqu'il n'y a pas de faisceau laser (laser arrêté), 2) une tension Vl lorsque le laser et le modulateur acousto-optique fonctionnent, environ 80% de l'énergie lumineuse se trouvant alors dans le faisceau diffracté d'ordre +1, 3) une tension V2 supérieure à VI lorsque le laser fonctionne mais le modulateur acousto-optique est arrêté, quasiment toute l'énergie lumineuse se trouvant alors dans le faisceau d'ordre 0. Grâce au photodétecteur 42, on peut utiliser le faisceau dans l'ordre 0 en tant que faisceau de référence, par exemple pour surveiller l'état de fonctionnement du laser 14 ou pour corriger ce fonctionnement, en particulier pour corriger l'intensité du faisceau émis par ce laser 14. On peut aussi utiliser ce faisceau de référence pour corriger les mesures effectuées au moyen de l'appareil d'analyse A, comme on le verra mieux par la suite. On voit aussi sur la figure 1 des moyens électroniques de traitement 44 prévus pour traiter les images fournies par la caméra CCD 26 sous la forme de signaux électriques, ces moyens électroniques de traitement étant pourvus de moyens d'affichage 46 permettant de visualiser les images fournies par la caméra. En outre, les moyens électroniques de traitement 44 sont prévus pour fournir le signal TTL mentionné précédemment au circuit de commande 36. On précise que la tension de sortie'du photodétecteur 42 est envoyée à une carte d'acquisition (non représentée) d'un calculateur et que sa valeur est proportionnelle à l'intensité du faisceau laser incident. Le montage que l'on voit sur la figure 1 est extensible à deux ou plus de deux lasers, à condition de disposer d'un modulateur acousto-optique et d'un photodétecteur par laser. Ceci est schématiquement illustré par la figure 3 sur laquelle on voit un autre mode de réalisation particulier du dispositif objet de l'invention. Le dispositif qui est schématiquement représenté sur cette figure 3 comprend trois lasers 48, 50 et 52 prévus pour émettre des rayonnements d'excitation d'échantillons, ces lasers ayant des longueurs d'ondes différentes (par exemple 488 nm, 532 nm et 633 nm). Chacun de ces lasers 48,50 ou 52 est successivement suivi par un ensemble optique 54,56 ou 58 de mise en forme du faisceau fourni par ce laser, un miroir 60,62 ou 64 et un modulateur acousto-optique 66,68 ou 70, chaque miroir 60,62 ou 64 étant prévu pour envoyer le faisceau laser, qu'il reçoit par l'intermédiaire de l'ensemble optique 54,56 ou 58, sur le modulateur acousto-optique correspondant, suivant un angle d'incidence approprié. Les modulateurs acousto-optiques 66,68 et 70 sont respectivement commandés par des circuits de commande ( drivers ) 72,74 et 76. On voit aussi sur la figure 3 un appareil d'analyse de fluorescence A destiné à être éclairé par l'un quelconque des faisceaux diffractés d'ordre +1 issus de modulateurs acousto-optiques 66,68 et 70. Cet appareil A comporte une caméra CCD (non représentée) qui fournit des images sous la forme de signaux électriques. Ceux-ci sont traités par les moyens électroniques de traitement 78 qui sont pourvus de moyens d'affichage (non représentés) permettant de visualiser ces images. En outre, ces moyens électroniques de traitement sont prévus pour fournir, aux circuits de commande 72,74 et 76, des signaux TTL du genre de ceux qui ont été mentionnés plus haut. On voit aussi sur cette figure 3 les faisceaux 80,82 et 84 d'ordre 0, correspondant respectivement aux modulateurs acousto-optiques 66,68 et 70, les faisceaux diffractés 86,88 et 90 d'ordre +1, correspondant respectivement à ces modulateurs 66,68 et 70, ainsi que les photodétecteurs 92,94 et 96 respectivement prévus pour recevoir les faisceaux 80, 82 et 84 d'ordre 0. Les signaux électriques fournis par ces photodétecteurs 92,94 et 96 sont envoyés à une carte d'acquisition (non représentée) d'un calculateur. Il convient de noter que le chronogramme de la figure 2 est valable pour chacun de ces photodétecteurs. Les modulateurs acousto-optiques 66,68 et 70 forment encore des obturateurs de faisceau vis-à vis de l'appareil optique A. Le dispositif de la figure 3 comprend aussi des miroirs 98,100 et 102 qui sont associés respectivement aux modulateurs 66,68 et 70 et sont prévus pour envoyer à l'appareil A, par l'intermédiaire d'un autre miroir 104, le faisceau diffracté d'ordre +1 issu du modulateur acousto-optique que l'on a activé. Les dispositifs conformes à l'invention des figures 1 et 3 présentent divers avantages mentionnés ci-après. Chacun de ces dispositifs permet de contrôler chacun des faisceaux laser : avec chaque photodétecteur, on peut savoir si le laser correspondant est arrêté ou allumé et si le faisceau diffracté d'ordre 1 correspondant est émis ou non. Le dispositif de la figure 3 permet une commutation rapide d'un faisceau laser à l'autre en contrôlant le modulateur qui est en fonctionnement : si par exemple le laser 48 est allumé et le modulateur 66 est activé, le photodétecteur 92 fournit la tension VI et si le photodétecteur 94 fournit la tension V2 c'est que le faisceau du laser 50 n'est pas envoyé à l'appareil optique A. De plus, le temps de commutation est très court : il suffit d'un temps d'environ 1 microseconde à 10 microsecondes pour passer du faisceau que l'on envoie à l'appareil optique à un autre faisceau. Les dispositifs des figures 1 et 3 garantissent la sécurité des utilisateurs vis-à-vis des lasers. Si par exemple un utilisateur intervient sur l'appareil optique A, on n'active alors aucun modulateur acoustooptique de sorte qu'aucun faisceau laser n'est envoyé à l'appareil optique. S'il se produit une panne électronique, les circuits de commande ne reçoivent aucun signal, il n'y a donc aucune déflexion de faisceau laser et aucun faisceau laser n'est donc envoyé vers l'appareil optique. De plus, si un laser est en panne, par exemple le laser 48, le photodétecteur correspondant 92 fournit une tension nulle, indiquant ainsi qu'il n'y a pas de faisceau laser. Les dispositifs des figures 1 et 3 permettent de contrôler la puissance laser comme on l'explique ciaprès. Aucune source n'est stable à moins de quelque pour cent (typiquement 5%). Il est délicat et coûteux de stabiliser une source de lumière, en particulier une source laser. La fluorescence de l'objet éclairé par un laser fluctue donc au même rythme que l'excitation laser c'est-à-dire 5%. L'énergie lumineuse diffractée étant une fraction (environ 80%) de l'énergie lumineuse incidente, le signal fourni par chaque photodétecteur suit strictement les fluctuations du laser correspondant. Les tensions Vl et V2 suivent donc les fluctuations de ce laser. La connaissance de la tension Vl permet donc de corriger les fluctuations de l'image de fluorescence en temps réel, en surveillant, pour chaque acquisition d'image, la puissance laser reçue par le photodétecteur pendant la phase d'acquisition de l'image, ce qui nécessite un circuit de synchronisation commun à l'acquisition réelle de l'image et à l'acquisition d'un signal lumineux par le photodétecteur, comme le montre schématiquement la figure 4. Sur cette figure 4, qui est relative au photodétecteur 42 de la figure 1, mais qui s'applique aussi à chaque photodétecteur de la figure 3, on voit un amplificateur 106 destiné à amplifier le signal électrique fourni par ce photodétecteur et un circuit de synchronisation 108 qui reçoit le signal ainsi amplifié et qui est prévu pour suivre les fluctuations de puissance du laser : on voit que le circuit de commande ("driver") 36 reçoit les impulsions S qui sont des impulsions de commande d'adressage du laser et sont fournies par le calculateur (non représenté). La sortie du circuit de synchronisation 108 est reliée au calculateur. De plus, la rapidité de la commutation d'un faisceau laser par un modulateur acousto-optique permet d'utiliser, pour la prise d'image, des caméras à transfert de lignes ou à transfert de trames de telle sorte que, pendant la phase de lecture des charges et de numérisation du signal, on peut commencer une phase de cumul d'images ou de signaux comme le montre la figure 5. Le signal II indiquant que le laser est actif (adressé) permet de générer la synchronisation de la caméra (signal III) : la période T est ainsi la période entre images. Si l'on utilise un détecteur du type photodiode ou photomultiplicateur, on utilise le signal laser pour piloter un système PING/PONG (figure 6), pour l'intégration du signal (ce signal étant fourni par chaque photodétecteur susceptible d'être utilisé dans l'invention et consistant par exemple en le courant de sortie d'un photomultiplicateur ou d'une photodiode à avalanche ou d'une photodiode en silicium) ou un système formé par deux compteurs pour un comptage de photons. Revenons aux figures 5 et 6. La figure 5 est un chronogramme relatif à la synchronisation des images que l'on obtient avec une caméra CCD à transfert de lignes ou à transfert de trames. Les lignes I à V de la figure 5 montrent respectivement les impulsions correspondant au cumul d'image (ligne I), les impulsions correspondant à l'état actif du laser données par la photodiode de référence (ligne II), les synchronisations de transfert de ligne ou de trame (ligne III), les impulsions relatives à la lecture des charges dans la caméra CCD (ligne IV) et le signal relatif à la numérisation et à la mémorisation des images (ligne V), la période T que l'on voit sur la ligne V étant la période entre images. La figure 6 est, quant à elle, un chronogramme relatif à la synchronisation des acquisitions de signaux founis par un photodétecteur tel qu'un photomultiplicateur ou une photodiode à avalanche ou une photodiode en silicium. Les lignes I à V de la figure 6 montrent respectivement les impulsions correspondant à l'état actif du laser au moyen duquel on obtient les images (ligne I), les impulsions correspondant aux signaux fournis par le photodétecteurs considéré ci-dessus (ligne II), le signal intégré PING (ligne III), le signal intégré PONG (ligne IV), et les impulsions correspondant à la numérisation alternée PING/PONG. Bien entendu, il est possible d'utiliser, dans un dispositif conforme à l'invention, le faisceau diffracté d'ordre-1, au lieu du faisceau diffracté d'ordre +1, pour envoyer ce faisceau à un appareil optique A. REVENDICATIONS 1. Procédé de prélèvement d'une partie d'au moins un faisceau de lumière fourni par une source de lumière (14 ; 48,50, 51), ce faisceau étant destiné à être utilisé dans un appareil optique (A), ce procédé étant caractérisé en ce que : on place au moins un modulateur acoustooptique (32 ; 54,56, 58) sur le trajet du faisceau de lumière, ce modulateur fournissant ainsi un faisceau d'ordre 0 (40 ; 80,82, 84), - on active ce modulateur acousto-optique pour qu'il fournisse aussi un faisceau d'ordre +1 (38 ; 86, 88,90), et on envoie ce faisceau d'ordre +1 dans l'appareil optique, ce dernier ne recevant donc pas ce faisceau diffracté d'ordre 1 lorsque le modulateur acousto-optique n'est pas activé, ce modulateur acousto-optique formant ainsi un obturateur de faisceau vis-à-vis de l'appareil optique. 2. Procédé selon la revendication 1, dans lequel on utilise le faisceau d'ordre 0 en tant que faisceau de référence pour surveiller l'état de fonctionnement de la source de lumière (14 ; 48,50, 52) ou pour corriger ce fonctionnement, en particulier pour corriger l'intensité du faisceau de lumière. 3. Procédé selon la revendication 1, dans lequel l'appareil optique (A) est destiné à effectuer des mesures et l'on utilise le faisceau d'ordre 0 (40 ; 80,82, 84) en tant que faisceau de référence pour corriger ces mesures. 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans lequel la source de lumière est un laser (14 ; 48,50, 52), le faisceau de lumière étant alors un faisceau laser. 5. Dispositif de prélèvement d'une partie d'au moins un faisceau de lumière fourni par une source de lumière (14 ; 48,50, 52), ce faisceau étant destiné à être utilisé dans un appareil optique (A), ce dispositif étant caractérisé en ce qu'il comprend : - au moins un modulateur acousto-optique (32 ; 54,56, 58) prévu pour recevoir ce faisceau de lumière, ce modulateur acousto-optique fournissant ainsi un faisceau d'ordre 0 (40 ; 80,82, 84), et - des moyens (36 ; 72,74, 76) d'activation de ce modulateur acousto-optique pour qu'il fournisse aussi un faisceau diffracté d'ordre jl (38 ; 86,88, 90), l'appareil optique étant destiné à recevoir ce faisceau diffracté d'ordre 1 et ne recevant donc pas ce dernier lorsque le modulateur acousto-optique n'est pas activé, ce modulateur acousto-optique formant ainsi un obturateur de faisceau vis-à-vis de l'appareil optique. 6. Dispositif selon la revendication 5, comprenant en outre au moins un photodétecteur (42 ; 92, 94,96) prévu pour recevoir le faisceau d'ordre 0, ce dernier formant un faisceau de référence, et pour fournir un signal représentatif de ce faisceau de référence, ce signal étant utilisé pour surveiller l'état de fonctionnement de la source de lumière ou pour corriger ce fonctionnement, en particulier pour corriger l'intensité du faisceau de lumière, ou pour corriger des mesures susceptibles d'être effectuées au moyen de l'appareil optique. 7. Dispositif selon la revendication 6, dans lequel l'appareil optique est un appareil d'analyse d'échantillons biologiques par fluorescence (A) et le signal est utilisé pour corriger les mesures effectuées au moyen de cet appareil d'analyse. 8. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 5 à 7, comprenant une pluralité de modulateurs acousto-optiques (66,68, 70) prévus pour recevoir respectivement une pluralité de faisceaux. de lumière destinés à être utilisés dans l'appareil optique, ces modulateurs acousto-optique formant ainsi une pluralité d'obturateurs de faisceau vis-à-vis de l'appareil optique. 9. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 6 et 7, comprenant une pluralité de modulateurs acousto-optiques (66,68, 70), prévus pour recevoir respectivement une pluralité de faisceaux de lumière, et une pluralité de photodétecteurs (92,94, 96) respectivement associés à ces modulateurs acoustooptiques et prévus pour recevoir les faisceaux d'ordre 0 (80,82, 84) respectivement fournis par ces modulateurs acousto-optiques. 10. Dispositif selon l'une quelconque des revendications 5 à 9, dans lequel chaque source de lumière est un laser (14 ; 48,50, 52), chaque faisceau de lumière étant alors un faisceau laser.