Brevet FR2823765A1 — publié le 20021025

La présente invention concerne, d'une manière générale, le diagnostic, l'évaluation et le traitement de cancers, et plus particulièrement du cancer de la prostate. De manière spécifique, la présente invention a pour objet un procédé d'évaluation de la sensibilité d'un organisme et/ou d'un tissu à un cancer par mesure de l'expression d'un gène ainsi que les kits nécessaires à la mise en oeuvre de ce procédé. Actuellement, le cancer de la prostate est, après le cancer broncho-pulmonaire, le cancer le plus répandu chez l'homme, et plus particulièrement chez l'homme de plus de 50 ans (1, 2,3) [les chiffres en gras, entre parenthèses, renvoient à la liste de références bibliographiques annexée] . Il est difficile non seulement de dépister ce cancer, du fait qu'il n'existe pas de marqueur spécifique du cancer de la prostate à un stade précoce, mais aussi de déterminer précisément l'extension de la tumeur avant toute opération. Dans un passé récent, les seuls tests utilisés pour dépister le cancer de la prostate consistaient soit en un toucher rectal, permettant de détecter les modifications de consistance du tissu prostatique, soit en une échographie prostatique endorectale. Toutefois, aucune de ces techniques n'est pleinement satisfaisante, car la première ne permet de détecter que les tumeurs ayant déjà atteint une grande taille et est très opérateur-dépendante (outre que la plupart des tumeurs prostatiques sont situées dans des zones non accessibles au toucher) et la seconde est trop invasive, coûteuse et imprécise pour servir d'outil de dépistage (1). De nombreux efforts ont été faits ces derniers temps visant à pallier ce manque et à développer des procédés de diagnostic qui soient fiables et peu coûteux. On peut citer, par exemple, FR 00 10934, au nom de la demanderesse, qui décrit un procédé de diagnostic in vitro basé sur le dosage de l'antigène spécifique de la prostate (PSA). Cette technique présente l'avantage d'être ultra- sensible et reproductible, mais reste dépendante de facteurs externes et très limitée quant à une application précoce. Les récents développements de la génétique ont permis de mettre en évidence que l'accumulation d'altérations génétiques représente une cause essentielle de la genèse et du développement des cancers chez l'homme. Cette découverte a permis une nouvelle approche qui consiste à déterminer les anomalies chromosomiques qui seraient responsables du, ou tout du moins impliquées dans le, développement des cancers. FR 00 08266, au nom de la demanderesse, décrit un procédé de diagnostic in vitro du cancer de la prostate, basé sur la mise en évidence d'une perte d'hétérozygotie (LOH, d'après la nomenclature anglaise "Loss Of Heterozygosity") au niveau d'un ensemble de régions chromosomiques déterminé, ladite LOH étant responsable du développement d'une tumeur. Il est également connu d'après EP 01 400715.7, également au nom de la demanderesse, un polypeptide issu du gêne codant pour CHCI-L qui est impliqué dans le développement du cancer de la prostate, ainsi que son utilisation comme agent thérapeutique et de diagnostic. Dans la présente invention, la demanderesse a mis en évidence l'implication dans le développement de cancers, et plus particulièrement du cancer de la prostate, d'un gène codant pour une enzyme, l'aldéhyde déhydrogénase-6, qui jusqu'à présent n'était pas soupçonnée d'être impliquée de quelque manière que ce soit dans la genèse ou le développement de cancers. Les aldéhydes déhydrogénases (ci-après ALDH) représentent un ensemble de plusieurs isoenzymes, connues pour leur rôle dans la détoxification des aldéhydes au sein de différents tissus de l'organisme (4). A ce jour, six isoenzymes de ALDH ont été identifiées et séquencées, et sont classées selon leurs propriétés physico-chimiques, leurs propriétés enzymatiques, leur distribution tissulaire/subcellulaire ou encore leur séquence nucléotidique (5) . D'une manière générale, on peut distinguer, chez l'homme, ALDH1 cytosolique et ALDH2 mitochondriale qui sont fortement exprimées dans le foie, ALDH3 qui est fortement exprimée dans l'estomac, les poumons, la cornée et les carcinomes du foie (6-9), ALDH4 (10) , ALDHS qui est fortement présente dans de nombreux tissus comprenant le foie, le cerveau, les testicules, l'estomac ou encore la glande surrénale (11), et ALDH6 qui est, quant à elle, fortement présente dans les glandes salivaires (12). En ce qui concerne ALDH6, cette enzyme est codée par un gène localisé sur le chromosome 15q26 dont la séquence a récemment été décrite (12). La demanderesse démontre, de manière inattendue, que ALDH6, principalement localisée dans les glandes salivaires, est impliquée dans le développement de cancers, principalement du cancer de la prostate. Plus particulièrement, la demanderesse a mis en évidence une surexpression du gêne codant pour ALDH6 à la fois chez les cellules tumorales malignes et bénignes. La présente demande de brevet concerne donc un procédé d'évaluation de la sensibilité d'un organisme et/ou d'un tissu à un cancer, caractérisé en ce qu'il consiste à déterminer le niveau d'expression de tout ou partie du gène codant pour l'aldéhyde déhydrogénase-6 (ALDH6). Par "expression", on entend tout mécanisme conduisant, à travers la transcription de l'ADN en différents ARN et la traduction de l'ARNm en protéine, au décodage de l'information génétique contenue dans le matériel héréditaire. Plus particulièrement, le niveau d'expression d'un gène peut s'effectuer au niveau des ARN ou au niveau des peptides/protéines. Par "tout ou partie" il faut comprendre que le gène peut consister soit en l'ensemble de la séquence nucléotidique codant pour ALDH6, soit en une partie seulement de celle-ci, à condition que la séquence conserve la capacité à coder pour ledit gêne (homologue fonctionnel). Par "partie de la séquence", il faut comprendre une région de ladite séquence nuclëotidique dépourvue d'un ou plusieurs nucléotides terminaux. Il peut également s'agir d'une région de la séquence nucléotidique dans laquelle un ou plusieurs nucléotides ont été délétés ou substitués par d'autres nucléotides. La présente invention envisage donc de quantifier tous les produits résultant de l' expression du gêne codant pour ALDH6, comme par exemple les ARN, mais aussi les ARNm ou encore les peptides/protéines. Cependant, de manière spécifique, la surexpression du gène ALDH6 a été quantifiée au travers de la mesure de la quantité d'ARN présente au sein des cellules, et il ressort que ce gêne est surexprimé, à la fois chez les cellules tumorales bénignes et les cellules tumorales malignes, ce environ trois fois par rapport à des cellules de tissu sain. Selon un premier aspect, la présente invention concerne donc un procédé qui consiste à mesurer la quantité d'ARN issu du gêne sauvage codant pour ALDH6 présente dans les cellules d'un échantillon à tester, et à déclarer, comme cellule tumorale bénigne ou maligne, toute cellule présentant une quantité en ledit ARN supérieure ou égale à environ trois fois la quantité en ledit ARN présente dans d'autres cellules de l'échantillon. Par gène sauvage, il faut comprendre, par opposition à un gêne muté, un gêne identique au gène natif, c'est-à- dire n'ayant subi aucune altération génétique telle qu'une addition, une substitution ou encore une délétion d'un ou de plusieurs nucléotide(s). Dans une forme d'exécution préférée, la présente invention concerne aussi un kit pour la mise en oeuvre du procédé décrit plus haut, qui comprend : a) les amorces s'hybridant spécifiquement avec les ARN issus du gène sauvage codant pour ALDH6, b) les tampons et enzymes nécessaires aux réactions d'amplification, de marquage et d'hybridation. Par "amorce", il faut comprendre toute séquence oligonucléotidique d'ARN et/ou d'ADN qui s'hybride spécifiquement à une séquence complémentaire d'ADN simple-brin lors de l'initiation d'une réplication. En pratique, la détermination d'amorces s'effectue couramment, à partir de séquences connues, par mise en oeuvre de programmes informatiques bien connus de l'homme de l'art, tel que le programme Oligo 4 (National Biosciences, Inc., Plymouth, MN). En outre, et ce de manière totalement inattendue, il a aussi été mis en évidence par la demanderesse que ledit gène codant pour ALDH6 est surexprimé environ cinq à sept fois chez les cellules tumorales malignes, par rapport aux cellules tumorales bénignes ou aux cellules de tissu sain, et ce sous une forme mutée. Ladite forme mutée peut consister en une séquence qui présente une addition, une délétion ou une substitution d'un ou plusieurs nucléotides. Selon un second aspect, la présente invention concerne un procédé qui consiste à mesurer la quantité d'ARN issu du gêne muté codant pour ALDH6 présente dans les cellules d'un échantillon à tester, et à déclarer, comme cellule tumorale maligne, toute cellule présentant une quantité en ledit ARN supérieure ou égale à environ cinq à sept fois la quantité en ledit ARN présente dans d'autres cellules de l'échantillon. Dans une autre forme d'exécution préférée, la présente invention concerne un kit pour la mise en oeuvre du procédé décrit plus haut, qui comprend : a) les amorces s'hybridant spécifiquement avec les ARN issus du gène muté codant pour ALDH6, b) les tampons et enzymes nécessaires aux réactions d'amplification, de marquage et d'hybridation. Il apparaît donc évident que la présente invention apporte un outil de diagnostic précoce, non seulement rapide et fiable, mais aussi permettant d'identifier la présence de cellules tumorales malignes et/ou bénignes, selon que le gène codant pour ALDH6 est surexprimé sous sa forme sauvage ou sous une forme mutée. Plus particulièrement, l'invention envisage un procédé de diagnostic in vitro du cancer, caractérisé en ce qu'il consiste à : a) mettre en oeuvre le procédé, décrit plus haut, qui consiste à mesurer la quantité d'ARN issu du gène sauvage codant pour ALDH6, et si celui-ci aboutit à déclarer "tumorales" des cellules, à b) mettre en oeuvre le procédé, décrit plus haut, qui consiste à mesurer la quantité d'ARN issu du gène muté codant pour ALDH6. La présente invention concerne aussi un kit de diagnostic pour la mise en oeuvre du procédé précédemment décrit, qui comprend : a) les éléments du kit de dosage des ARN issus du gêne sauvage codant pour ALDH, et b) les éléments du kit de dosage des ARN issus du gêne muté codant pour ALDH. Selon un tout autre aspect, la présente invention concerne un polynucléotide purifié issu du chromosome 15q26, qui comprend une séquence nuclêotidique mutée, ladite mutation consistant en une addition d'une séquence EST à la forme sauvage de ladite séquence nucléotidique, et ladite séquence nuclêotidique mutée étant fortement surexprimée chez les tumeurs malignes. Par "polynucléotide purifié", il faut comprendre tout polyribonucléotide ou polydéoxyribonucléotide, c'est-à-dire tout ADN ou ARN modifié ou non, double ou simple brin, qui a été isolé ou séparé de son environnement naturel, et qui est débarrassé des résidus auxquels il est naturellement associé à environ 60%, de préférence environ 75%, et mieux environ 90%. Les séquences EST (d'après la nomenclature anglaise "Expressed Sequence Tag") sont des fragments courts aléatoires d'ADN. Ces séquences sont isolées à partir de mélange d'ARNm et reconverties en ADNc. La localisation des séquences EST sur le génome est généralement déterminée à l'aide de techniques connues par l'homme de l'art. Comme décrit précédemment, la demanderesse a mis en évidence que ledit polynucléotide est fortement surexprimé, c'est-à-dire environ cinq à sept fois ou plus, chez les cellules tumorales malignes que chez les cellules tumorales bénignes ou chez les cellules saines. Plus particulièrement, ladite séquence EST est localisée dans une région codant pour l'aldéhyde déhydrogénase-6 (ALDH6) du chromosome 15q26. La séquence nucléotidique codant pour le gène sauvage ALDH6 a été décrite et est constituée d'un ensemble de 12 introns et de 13 exons (12). Le gène muté objet de la présente invention se caractérise par une mutation au niveau des exons 9 et 10, et plus particulièrement par l'addition de ladite séquence EST au sein de l'intron 9, qui est compris entre les exons 9 et 10. Selon une forme d'exécution préférée, ladite séquence EST est localisée entre l'exon 9 et l'exon 10 du gène codant pour l'ALDH6. Plus particulièrement, le polynucléotide objet de la présente invention est caractérisé en ce que ladite séquence EST comprend tout ou partie de la SEQ ID : 1. Selon une autre forme d'exécution, le polynucléotide objet de la présente invention comprend tout ou partie de la SEQ ID : 2. Un aspect supplémentaire de l'invention consiste en l'utilisation d'une telle séquence nucléotidique pour la préparation de vecteurs. Selon une forme d'exécution préférée, la présente invention concerne un vecteur recombinant qui comprend tout ou partie du polynucléotide décrit plus haut. Par "vecteur", il faut comprendre tout système d'expression viral ou non viral connu de l'homme de l'art. L'expression "recombinant" fait référence aux résultats de méthodes et manipulations dans lesquelles des acides nucléiques, ou tout autre matériel biologique, sont clivés, synthétisés, combinés ou autrement manipulés in vitro enzymatiquement, chimiquement ou encore biologiquement pour obtenir les produits désirés dans les cellules ou tout autre système biologique. Selon une forme d'exécution préférée, le vecteur recombinant objet de la présente invention consiste, de préférence, en un vecteur de clonage, d'expression ou d'insertion. Un autre aspect de l'invention consiste en un polypeptide recombinant codé par un des polynucléotides objet de la présente invention décrits plus haut. Par "polypeptide", il faut comprendre tout peptide ou protéine constitué d'au moins deux acides aminés liés les uns aux autres par des liaisons peptidiques ou des liaisons peptidiques modifiées. "Polypeptide" se réfère à la fois à (1) des chaînes courtes, ou peptide, oligopeptide et oligomêre et à (2) des chaînes longues, ou protéine. Les polypeptides peuvent être modifiés soit par des procédés naturels, mais aussi par des techniques de modification chimique, bien connues de l'homme de l'art. De tels modifications peuvent se produire n'importe où sur le polypeptide, comme par exemple l'ossature du polypeptide, les chaînes latérales d'acides aminés, ou encore les extrémités terminales. De telles modifications peuvent consister en, par exemple, une acétylation, une acylation, une ADP-ribosylation, une amidation, une fixation covalente de flavine, une fixation covalente d'un motif hème, une fixation covalente d'un nucléotide ou d'un dérivé d'un nucléotide, une fixation covalente d'un lipide ou d'un dérivé d'un lipide, une fixation covalente d'un phosphotidylinositol, une réticulation, une cyclisation, une formation de ponts disulfure, une déméthylation, une formation de réticulations covalentes, une formation de dimères de la cystéine, une formation de pyroglutamate, une formylation, une gamma-carboxylation, une glycosylation, une hydroxylation, une ioduration, une méthylation, une myristolation, une oxydation, une modification protéolytique, une phosphorylation, une- racémisation, une glycolation, une fixation lipidique, une sulfatation, une gamma-carboxylation de résidus d'acide glutamique, une hydroxylation et une ADP-ribosylation, une addition d'un ARN de transfert ou d'acides aminés aux protéines, tel qu'une arginylation, et une ubiquitination. Le polypeptide objet de la présente invention est de préférence obtenu par des techniques de génie génétique, qui sont bien connues de l'homme de l'art. Plus particulièrement, dans une forme d'exécution préférée, le polypeptide objet de la présente invention peut comporter une ou plusieurs substitution(s) et/ou délétion(s) et/ou addition(s) conservative(s). Par "substitution conservative", il faut comprendre tout remplacement d'un ou plusieurs acides aminés par un ou plusieurs autres, sans entraîner de modification de la fonction dudit polypeptide. Par "délétion conservative", il faut comprendre toute suppression d'un ou plusieurs acides aminés, sans entraîner de modification de la fonction dudit polypeptide. Par "addition conservative", il faut comprendre tout ajout d'un ou plusieurs acides aminés, sans entraîner de modification de la fonction dudit polypeptide. De telles modifications peuvent se produire naturellement, comme par exemple du fait d'un changement de l'environnement, ou peuvent être le résultat d'une manipulation. L'invention concerne également des cellules eucaryotes qui renferment un polynucléotide conforme à la présente invention. Elle concerne aussi des cellules eucaryotes qui renferment un vecteur et/ou un polypeptide conforme à l'invention. Elle concerne également tout type de cellule eucaryote qui a été transfectée par un vecteur conforme à la présente invention. Selon encore une autre forme d'exécution, la présente invention concerne une cellule hôte recombinante qui comprend un polynucléotide et/ou un vecteur et/ou un polypeptide tels que décrits dans la présente invention. Selon un dernier aspect, la présente invention concerne aussi tout anticorps monoclonal ou polyclonal qui reconnaît spécifiquement tout ou partie du polypeptide objet de la présente invention décrit plus haut. La présente invention concerne également un procédé de diagnostic in vitro du cancer de la prostate chez un patient, caractérisé en ce qu'il consiste à : a) mettre en contact un échantillon de cellules dudit patient avec un anticorps, tel que décrit plus haut, capable de complexer ledit polypeptide, et b) détecter la présence desdits complexes. Selon une forme d'exécution particulièrement préférée, la présente invention concerne un kit pour la mise en oeuvre du procédé précédemment décrit qui comprend : a) une quantité prédéterminée d'anticorps objet de la présente invention, b) un milieu adapté à une réaction immunologique entre ledit anticorps et le polypeptide objet de la présente invention, et c) des réactifs capables de détecter les complexes formés entre l'anticorps et le polypeptide. La présente invention sera mieux comprise à la lecture de la description des expériences suivantes faisant référence aux figures annexées, dans lesquelles : La figure 1 est une photographie d'un gel d'électrophorèse illustrant une hybridation de type "Southern blot" de p-actine marquée à la fluorescéine, avec 5 l de produits issus de RT-PCR après 25 cycles d'amplification, la figure 2 est une photographie d'un gel d'électrophorèse illustrant une hybridation de type "Southern blot" des produits de l'ALDH6 humaine, marqués à la fluorescéine, issus de la lignée cellulaire PC3, avec 5 l de produits issus de RT-PCR après 35 cycles d'amplification, et la figure 3 est une photographie d'un gel d'électrophorèse illustrant une hybridation de type "Southern blot" des produits de l'ALDH6 humaine, marqués à la fluorescéine, issus d'échantillons de tissus, figure dans laquelle : A : 5 l de produits issus de RT-PCR après 25 cycles d'amplification [oligonuclêotides 738-757 (Exon 7 de l'ALDH6 humaine) + 1432-1451 (Exons 11 et 12 de l'ALDH6 humaine)], B : 10 l de produits issus de RT-PCR après 25 cycles d'amplification (oligonucléotides 738- 757 + 1432-1451) C : 6 l de produits issus de RT-PCR après 35 cycles d'amplification [oligonucléotides 772-792 (Exon 7 de l'ALDH6 humaine) + 155-175 (Intron 9 de l'ALDH6 humaine)]. MATERIEL ET METHODE Préparation des sondes d'ADNc Les ARN totaux ont été extraits respectivement à partir de trois patients présentant un cancer de la prostate et de trois patients présentant une tumeur bénigne en utilisant le procédé à l'acide-phénol de guanidium (13). Les ARN issus d'une prostate humaine saine consistent en un ensemble (n=47) vendu par Clontech (Clontech Laboratories, California, USA) . Pour la lignée cellulaire PC3, les ARN poly(A) ont été préparés en utilisant le kit de purification d'ARNm QuickPrep (Amersham Pharmacia Biotech) . La qualité des échantillons d'ARN a été contrôlée par électrophorèse sur gel d'agarose et coloration au bromure d'éthidium. Les quantités d'ARN totaux et d'ARN poly(A) ont été quantifiées par spectrophotométrie. Pour la transcription inverse, les ARN totaux (1 g) ou les ARN poly (A) (0, 6 g) ont été mélangés avec 25 pmol d'amorces oligo(dT) (Amersham Pharmacia Biotech) dans 8 l d'eau traitée au DEPC. A cette solution, chauffée à 65 C pendant 5 minutes, sont ajoutés 4 l de tampon reverse à la concentration 5x (Life Technologies Inc.), 10 mM de DTT, 12,5 M de chaque dNTP, 1 1 d'inhibiteur de la Rnase (4 OU ; Promega) , et 1 l de transcriptase reverse Superscript II (200U ; Life Technologies Inc.), jusqu'à un volume final de 20 [il. Après que le mélange ait été incubé à 42 C pendant 1 heure, il a été dilué 2 fois (ARN totaux) ou 6 fois (Poly(A)} par addition d'eau traitée avec du DEPC. Finalement, le mélange a été stocké à -20 C jusqu'à utilisation. Synthèse par PCR d'un variant de l'ALDH6 humaine Chaque mélange de PCR contenait 2 [il d'ADNc, 25 pmol d'amorce sens, 25 pmol d'amorce anti-sens, 300 M de dNTPs, 1 mM de MgSO, une solution d'amplification IX PCRx (Life Technologies Inc.) et 1,25 unité d'ADN polymérase Pfx Platinum (Life Technologies Inc.). La réaction a été effectuée pendant 25 ou 35 cycles en utilisant un thermocycler à ADN (PTC 200 M. J. Research) . Chaque cycle comprenait une étape de dénaturation à 96 C pendant 30 secondes, suivie par une étape d'accrochage des amorces à 52 C pendant 30 secondes puis une étape d'extension de la chaîne d'ADN pendant 1 minute. Séquences des amorces: 738-757 5' TGG TGA ACA TTG TGC CAG GA 3' 1432-1451 : 5' AGT TGA TCC AGA CCG TTC CA 3' 772-792 5' GGG AGC AGC AAT TTC TTC TCA 3' 155-175 5' CCC AAA CTC ATC CTC CAG AGA 3' Quantification des produits de la PCR Cinq l des produits de la PCR ont été transférés sur des membranes de Nylon chargées positivement (Schleider & Schuell) puis fixés sur ces membranes à l'aide de rayons UV. Un marquage non radioactif des sondes d'ADNc codant pour l'ALDH6 humaine et la 0-actine a été effectué en utilisant le système de marquage par amorçage aléatoire ECF (Amersham Pharmacia Biotech). La détection de la fluorescence a été effectuée selon les recommandations du fournisseur en utilisant un anticorps anti-fluorescéine dilué au 1:10000 conjugué à la phosphatase alcaline et le module de détection ECF (Amersham Pharmacia Biotech). Les membranes ont été scellées dans des sacs en plastique et elles ont été scanées dans un Phosphor imager (Storm 860, Molecular Dynamics). Les résultats concernant l'ALDH6 humaine sont regroupés dans le tableau 1, alors que les résultats concernant la p-actine sont, quant à eux, regroupés dans le tableau 2. Tableau 1 Valeurs corrigées Valeurs non corrigées par rapport par rapport à la à la p actine ss actine Nom ALDH6 échant.S/ ALDH6 échant.M échant.S/ êchant.M/ humaine Clontech humaine /Clontech Clontech Clontech (S) (S) (M) (M) (S) (M) Clontech 4861838 1464747 T28 13890866 2,86 6738912 4,601 2,36 3,8 T29 14064067 2,89 12221416 8,344 2,27 6,56 T48 14490758 2,98 9400831 6,418 2,22 4,79 BPH6 12477668 2,57 833985 -0,569 1,6 0,35 BPH8 13321035 2,74 490983 0,335 1,78 0,21 BPH13 13033501 2,68 3337380 2,278 1,75 1,49 S : sauvage M : mutée Tableau 2 Nom -actine ss-actine dans échantillons par rapport à la P-actine Clontech Clontech 11567472,3 T28 13989293,8 1,21 T29 14664614,6 1,27 T48 15522635,4 1,34 BPH6 18501250,8 1,60 BPH8 17768965,9 1,54 BPH13 17734637,3 1,53 REFERENCES 1. Cuzin B. & Thoral JE., "Opportunité d'un dépistage systématique du cancer de la prostate par le dosage de l'antigène spécifique de la prostate", Document de l'Agence Nationale d'Accréditation et d'Evaluation en Santé (ANAES), 121 pages (1998) 2. Grosclaude P., Menegoz F., Schaffer P., Macé Lesec'h J., Avreux P., Lemab G. & al, "Dépistage du cancer de la prostate (II) . Le cancer de la prostate est-il un problème de santé publique ? Actualisation des chiffres d'incidence et de mortalité en France de 1982 à 1990", Progrès Urol., 7/647-54 (1997) 3. World Health Organization, International Agency for Research on Cancer & International Association of Cancer Registries, "Age-standardized and cumulative incidence : rates and standard errors. Prostate (ICD- 9 185)", IARC, pp 970-1 (1992) 4. Pietruszko R, l'Aldehyde dehydrogenase isoenzymes", Isozymzes : Curr. Topics Biol. Med. Res., 8 : 195-217 (1983) 5. Yoshida A., Hsu L.C. & Yasunami M., "Genetics of human alcohol-metabolizing enzymes", Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 40 : 255-287 (1991) 6. Yin S.J., LIAO C.S., Wang S.L., Chen Y.J. & Wu C.W., "Kinetic evidence for human liver and stomach aldéhyde dehydrogenase-3 representing a unique class of isoenzymes", Biochem. Genet., 27 : 321-331 (1989) 7. Wang S.L., Wu C.W., Cheng T.C. & Yin S.J., "Isolation of high-Km aldéhyde dehydrogenase isoenzymes from human gastric mucosa", Biochem. Int., 22 : 199-204 (1990) 8. Hsu L. C. , Chang W.C., Shibuya A. & Yoshida A. , "Human stomach aldéhyde dehydrogenase : DNA and genomic cloning primary structure, and expression in Escherichia coli", J. Biol. Chem., 267 : 3030-3037 (1992) 9. King G. & Holmes R. S., "Human corneal aldéhyde dehydrogenase : purification, kinetic character- ization and phenotypic variation", Biochem. Mol. Biol. Int., 31 : 49-63 (1993) 10. Forte-McRobbie C.M. & Pietruszko R., "Purification and characterisation of human liver high-Km aldéhyde dehydrogenase and its identification as glutamic-semialdehyde dehydrogenase", J. Biol. Chem., 261 : 2154-2163 (1986) 11. Hsu L.C. & Chang W.C., "Cloning and characterization of a new functional human aldéhyde dehydrogenase gene", J. Biol. Chem., 266 : 12257-12265 (1991) 12. Hsu L.C., Chang W.C., Hiraoka L. & Hsieh C.L., "Molecular cloning, genomic organization, and chromosomal localization of an additional human aldéhyde dehydrogenase gène, ALDH6", Genomics, 24 : 333-341 (1994) 13. Chomczynski & Sacchi N., "Single-step method of RNA isolation by acid guanidium thiocyanate-phenol- chloroform extraction", Anal. Biochem., 162 (1) : 156- 9. , (1987) REVENDICATIONS 1. Procédé d'évaluation de la sensibilité d'un organisme et/ou d'un tissu à un cancer, caractérisé en ce qu'il consiste à déterminer le niveau d'expression de tout ou partie du gène codant pour l'aldéhyde déhydrogénase-6 (ALDH6) - 2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il consiste à. mesurer la quantité d'ARN issu du gène sauvage codant pour ALDH6 présente dans les cellules d'un échantillon à tester, et à déclarer, comme cellule tumorale bénigne ou maligne, toute cellule présentant une quantité en ledit ARN supérieure ou égale à environ trois fois la quantité en ledit ARN présente dans d'autres cellules de l'échantillon. 3. Kit pour la mise en oeuvre du procédé selon la revendication 2, caractérisé en ce qu'il comprend : a) les amorces s'hybridant spécifiquement avec les ARN issus du gène sauvage codant pour ALDH6, b) les tampons et enzymes nécessaires aux réactions d'amplification, de marquage et d'hybridation. 4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il consiste à mesurer la quantité d'ARN issu du gène muté codant pour ALDH6 présente dans les cellules d'un échantillon à tester, et à déclarer, comme cellule tumorale maligne, toute cellule présentant une quantité en ledit ARN supérieure ou égale à environ cinq à sept fois la quantité en ledit ARN présente dans d'autres cellules de l'échantillon. 5. Kit pour la mise en oeuvre du procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce qu'il comprend : a) les amorces s'hybridant spécifiquement avec les ARN issus du gène muté codant pour ALDH6, b) les tampons et enzymes nécessaires aux réactions d'amplification, de marquage et d'hybridation. 6. Procédé de diagnostic in vitro du cancer, caractérisé en ce qu'il consiste à : a) mettre en oeuvre le procédé selon la revendication 2, et si celui-ci aboutit à déclarer "tumorales" des cellules, à b) mettre en oeuvre le procédé selon la revendication 4. 7. Kit de diagnostic pour la mise en oeuvre du procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce qu'il comprend : a) les éléments du kit selon la revendication 3, et b) les éléments du kit selon la revendication 5. 8. Polynucléotide purifié, issu du chromosome 15q26, comprenant une séquence nucléotidique mutée, ladite mutation consistant en une addition d'une séquence EST à la forme sauvage de ladite séquence nucléotidique, caractérisé en ce que ladite séquence EST comprend tout ou partie de la SEQ ID : 1 et/ou de la SEQ ID : 2. 9. Polynucléotide selon la revendication 8, caractérisé en ce que ladite séquence EST est localisée dans une région codant pour l'aldéhyde déhydrogénase-6 (ALDH6) du chromosome 15q26. 10. Polynucléotide selon la revendication 8 ou 9, caractérisé en ce que ladite EST est localisée entre l'exon 9 et l'exon 10 du gène codant pour l'ALDH6. 11. Vecteur recombinant, caractérisé en ce qu'il comprend tout ou partie du polynucléotide selon l'une quelconque des revendications 8 à 10. 12. Polypeptide recombinant, caractérisé en ce qu'il est codé par un polynucléotide selon l'une quelconque des revendications 8 à 10. 13. Cellule hôte recombinante, caractérisée en ce qu'elle comprend un polynucléotide selon l'une quelconque des revendications 8 à 10 et/ou un vecteur selon la revendication 11 et/ou un polypeptide selon la revendication 12. 14.' Procédé de diagnostic in vitro du cancer de la prostate chez un patient consistant à mettre en évidence la présence du polypeptide selon la revendication 12, caractérisé en ce qu'il consiste à : a) mettre en contact un échantillon de cellules dudit patient avec un anticorps capable de complexer ledit polypeptide, et b) détecter la présence desdits complexes. 15. Kit pour la mise en oeuvre du procédé selon la revendication 14, caractérisé en ce qu'il comprend : a) une quantité prédéterminée d'anticorps capable de complexer le polypeptide selon la revendication 12, b) un milieu adapté à une réaction immunologique entre ledit anticorps et ledit polypeptide selon la revendication 12, et c) des réactifs capables de détecter les complexes formés entre l'anticorps et le polypeptide.