Brevet FR2833014A1 — publié le 20030606

L'invention a trait aux électrodes organiques élaborées à partir de polymères électroactifs fonctionnalisés par des agents capables d'inter-agir avec des espèces chimiques et de permettre ainsi leur détection, dosage et identification par la mesure de variations sensibles et sélectives des propriétés électrochimiques. Les polymères conjugués tels que polypyrroles, polythiophènes, polyanilines, polyphénylènes et leurs dérivés sont connus pour leur caractère électroactif et des auteurs se sont intéressés à l'utilisation de ces polymères en les fonctionnalisant pour développer des capteurs d'analytes. On connaît par exemple de EP-B-0314009 des thiénylpyrroles greffés en position 3 du noyau pyrrole capable de se lier par covalence à une molécule organique, mais ces produits en raison de leur hydrophobicité ne sont pas adaptés pour la détection en milieu aqueux. De WO-A-95/29199, on connaît un polypyrrol, constitué par des monomères consistant chacun en un noyau pyrrole substitué de manière covalente sur le carbone en position 3 du noyau pyrrole, par un polynucléotide sonde. Le polypyrrol ainsi obtenu est appliqué à la détection, et éventuellement le dosage, de ligands, in vitro ou in vivo. Les variations mesurées sont de type potentiométrique, telle qu'une variation du potentiel d'oxydation du polymère électroactif avant et après interaction, ou de type ampérométrique, telle qu'une variation du courant d'oxydation ou de réduction du polymère avant et après interaction, déterminé à un potentiel déterminé. La capacité à lier des métaux du NTA (nitrilotriacétate) ou de l'IDA (iminodiacétate) a déjà été étudiée avec des métaux bi-ou trivalents. Par exemple la chromatographie d'affinité par métal immobilisé (IMAC) a été utilisée pour purifier des protéines (Porath et al. (1975), Nature 258,598-599) en utilisant l'IDA comme agent chélatant. L'IDA a été chargé avec des ions métalliques, tels que Zn, Cu ou Ni2+ et a été utilisé pour purifier des protéines ou des peptides. L'IDA a seulement trois sites disponibles pour la chélation de métaux et ne peut donc pas fortement lier les métaux. Le NTA est un agent chélatant tétradentate. Quatre des ses six sites de liaison pour un ligand sont utilisés dans la sphère de coordination des ions cuivre ou nickel, ce qui laisse deux sites disponibles pour interagir avec une polyhistidine (6xHis tag). Le NTA lie les ions métalliques de manière plus stable que d'autres résines disponibles pour la chélation. Les métaux ont des potentiels d'oxydation spécifiques, qui sont caractéristiques et permettent leur détection et leur dosage par électrochimie. Cependant l'analyse classique par électrochimie en solution d'un milieu contenant des ions métalliques permet de détecter des quantités d'ions de l'ordre de 10-5 mole par litre. Par ailleurs la limite de détection d'un dispositif de complexation est dépendant de la quantité d'agent complexant utilisé. Une des solutions possibles pour abaisser la limite de détection consiste en le confinement d'espèces ioniques sur l'électrode de mesure, par l'intermédiaire de la fixation d'agents chélatants sur l'électrode. La fixation d'agents chélatants en grand nombre sur une électrode n'est cependant pas aisée, car les agents chélatants classiques comme l'EDTA, ne peuvent pas être déposés sur des électrodes en couche supérieure à des couches monomoléculaires, sous peine d'empêcher la conduction du courant et de nuire à la sensibilité et la fiabilité de la détection car seuls des dépôts de quelques Angstôms sont conducteurs et ils ne permettent donc pas le confinement recherché. La présente invention permet ainsi d'apporter une solution en utilisant un polymère conducteur comme support de ces agents chélatants en conservant même pour des dépôts relativement importants, de l'ordre de la centaine de micromètres, la continuité de la conduction et donc d'abaisser la limite de détection à des seuils de l'ordre de 10-9 à 10-10 molécules par cm2. Cette continuité de détection est obtenue grâce à la structure tridimensionnelle des polymères coducteurs sur lesquels sont fixés les agents chélatants. Ainsi l'invention permet d'obtenir des électrodes ayant une excellente limite de détection, tout en conservant la sélectivité assurée par la détection électrochimique permettant l'analyse d'ions en mélange, les variations des propriétés électrochimiques mesurées étant les variations dues à la présence d'ions métalliques complexés. Le signal mesuré est donc le signal électrochimique de l'ion métallique et non celui du polymère conducteur dans ce cas. Ainsi, un premier objet de l'invention est un complexe électroactif, caractérisé en ce qu'il comprend un polymère homopolymère ou copolymère électroactif d'au moins deux monomères, fonctionnalisé par un agent chélatant. Selon l'invention le polymère électroactif est choisi parmi le polypyrrol, le polyacétylène, la polyazine, le poly (p-phénylène), le poly (p- phénylène vinylène), le polypyrène, le polythiophène, le polyfuranne, le polysélénophène, la polypyridazine, le polycarbazole, la polyaniline et l'agent chélatant est choisi parmi l'acide iminodiacétique, l'acide nitrilotriacétique, l'acide éthylène diamine tétraacétique. Le complexe de l'invention tel que défini précédemment présente une structure dans laquelle l'agent chélatant est lié directement au polymère conducteur de manière covalente par l'intermédiaire d'un groupe de liaison. Un groupe de liaison selon l'invention relie, par liaison covalente, deux entités chimiques, l'une au moins ayant été au préalable activée ou activable, en vue de cette interaction, par un groupe activé ou activable. Le groupe de liaison peut donc résulter de la réaction d'undit groupe activé ou activable d'une entité sur une fonction réactive de l'autre entité, et vice-versa, ou de la réaction d'undit groupe activé ou activable d'une entité sur un autre dit groupe activé ou activable de l'autre entité. Par groupe activé, on entend un groupe permettant, par son intermédaire, l'interaction de l'entité sur lequel il est fixé avec une autre entité. A titre d'exemple, il peut s'agir d'un groupe ester activé tel que le groupe-CO- [O-N-phtalimide]. Par groupe activable, on comprend un groupe qui peut être transformé en un groupe activé, par exemple dans certaines conditions réactionnelles ou lors de la mise en contact avec un groupe activé susceptible d'interagir avec lui tel que le groupe -CH2-COOH ou -CH2-CH2-0H. Selon un complexe préféré de l'invention, le polymère électroactif est un polypyrrol constitué d'au moins deux monomères et le chélate est un IDA ou un NTA, ledit chélate étant fixé par une liaison covalente en position 3 du noyau pyrrole par l'intermédiaire d'un reste carboxyméthyl. Un autre objet selon l'invention est une sonde électroactive, constituée par un polymère homopolymère ou copolymère électroactif d'au moins deux monomères fonctionnalisés par un agent chélatant. Le polymère électroactif est choisi parmi le polypyrrole, le polyacétylène, la polyazine, le poly (p-phénylène), le poly (p- phénylène vinylène), le polypyrène, le polythiophène, le polyfuranne, le polysélénophène, la polypyridazine, le polycarbazole, la polyaniline et l'agent chélatant est choisi parmi l'acide iminodiacétique, l'acide nitrilotriacétique et l'acide éthylène diamine tétraacétique. L'invention concerne également un procédé de préparation d'un polymère conducteur fonctionnalisé par un agent chélatant. La fonctionnalisation du polymère conducteur par un agent chélatant peut être effectuée par deux voies, la première par la fonctionnalisation du monomère suivie de la polymérisation et la seconde par fonctionnalisation après formation du film polymérique. Les monomères substitués par un groupe activé sont synthétisés par les méthodes classiques d'estérification par exemple d'un acide carboxylique tel que l'acide 3-pyrrole acétique par de la N-hydroxyphtalimide. Les monomères obtenus sont ensuite polymérisés et déposés par coulométrie sous forme de films sur des électrodes, et la fonctionnalisation par l'agent chélatant est effectué ensuite par hydrolyse du groupe activé. L'invention concerne également un procédé sélectif de détection, d'identification et de dosage d'un cation métallique divalent dans un échantillon susceptible de contenir une pluralité de cations métalliques caractérisé en ce que l'on met en oeuvre une sonde selon l'invention et en ce qu'on observe et/ou mesure une différence de potentiel caractéristique du potentiel rédox du ou des cations présents dans l'échantillon. Cette différence de potentiel ou cette variation de courant est observée et/ou mesurée avant complexation et après complexation c'est à dire entre le polymère électroactif fonctionnalisé sans complexe métallique formé et le même polymère après chélation avec un cation métallique. La présente invention a aussi pour objet une électrode dont tout ou partie de la surface de contact avec l'électrolyte est revêtue d'un sonde telle que définie précédemment. A titre d'exemple les dépôts de polymères conducteurs peuvent être effectués par coulométrie en contrôlant la charge de courant à la surface d'une électrode de platine, d'or ou de tout autre métal ou alliage bien connu dans ces techniques. Les différents objets de l'invention sont illustrés dans les exemples de préparation et de mise en oeuvre 1 à 10 et dans les figures 1 à 10 qui sont commentées dans les exemples suivants. Exemple 1 : préparation de films à base de polymères électroconducteurs. Des monomères de pyrrole fonctionnalisés en position 3 par une Nhydroxyphthalimide (NHP) ont été synthétisés et ensuite polymérisés pour obtenir un film polymère Poly (3- (carboxymethylpyrrole) -NHP) portant des groupements ester actifs. Synthèse du monomère : La synthèse du monomère 3-carboxymethylpyrrole-NHP a été exécutée en estérifiant le groupement carboxylique de l'acide 3-pyrrole- acétique avec de la N-hydroxyphthalimide et du dicyclocarboxydiimide comme catalyseur, dans du chloroforme comme solvant, à température ambiante. Le schéma réactionnel est présenté ci-dessous. -- OH/\ L/ r- 0 N /H yD NHP/DCC/ Py-3 Acetic acide NHPIDCCI J r N N 0 0 c'O CHCL3/RT 0 Synthèse du polymère : Une solution de monomère 3-carboxymethylpyrrole-NHP 0,1 M est préparée dans de l'acétonitrile anhydre fraîchement distillé en présence d'un électrolyte (LiC04,0, 5 M). Ce monomère est polymérisé dans une cellule à quatre compartiments, en utilisant une électrode de platine de 0,7 cm2, une électrode auxiliaire de platine et une électrode de calomel saturée comme électrode de référence, au potentiel contrôlé de 0,9 V pour obtenir le film de Poly (3 carboxymethylpyrrole-NHP). Le film obtenu est lavé avec de l'acétone et séché. L'électroactivité est ensuite mesurée dans un milieu d'acétonitrile contenant LiCI04 0, 1 M comme électrolyte après purge avec de l'argon pour enlever l'oxygène. La voltamétrie cyclique est enregistrée à la vitesse de 20 mV/s comme représentée à la figure 1. On obtient un signal électrochimique stable et réversible avec un pic d'oxydation Eox = 317 mV/SCE et confirmation de l'activité électrochimique en milieu organique. Après analyse, l'électrode est lavée avec de l'acétone et séchée. Exemple 2 : greffage de l'acide imino-diacétique (IDA) ou de l'acide N- (5-amino-1-carboxypentyl) imino-diacétique (NT A) sur des films polymères de poly (3-carboxymethylpyrrole-NHP) conducteurs. Une fois le film de Poly (3-carboxymethylpyrrole-NHP) formé et analysé comme décrit dans l'exemple 1, l'électrode est immergée dans une solution aqueuse saturée de NTAou IDA, à température ambiante pendant 12 heures, lavée avec l'eau ultra pure, séchée. La synthèse de Poly (3- carboxyméthylpyrrole-IDA) ou de Poly (3-carboxyméthylpyrrole-NT A) est représentée ci-dessous : 0 OH ~N -AOH 0 NH- (CH2 COOH) 2 0 H "/- 0 RT/F \ Poly (Py-3 NHP) RT H Poly (Py-3-IDA) HO /-=\ 1JOH -NiO H polymerization polymenzation f. , '0)-nH 4 J /N4\ N N n n I Eox 1 Box :) Fr n fI PyNHP Poly (Py-NHP) Poly (Py-NTA) L'électrode obtenue est lavée avec de l'eau ultra pure, séchée et l'electro activité est contrôlée dans un milieu aqueux contenant du NaCI, O, 5M. L'analyse électrochimique est représentée à la figure 2. Le signal électrochimique est stable et réversible en milieu aqueux. Des films de Poly (3-carboxyméthylpyrrole-NHP) de différentes épaisseurs ont été préparés et les films obtenus ont été greffés avec le NTA. La réponse électrochimique enregistrée en milieu aqueux en présence de NaCI, 0, 5 M confirme la présence d'un film électrochimiquement actif en milieu aqueux. La comparaison de la charge de Poly (3-carboxyméthylpyrrole-NHP) déposée au début sur l'électrode et la charge calculée de NTA greffé sur le film, suggère que le rendement de greffage du NTA ou de l'IDA sur le film de 100 %. En d'autres termes, la quantité de NTA ou d'IDA greffée sur le film de poly (3-carboxy) pyrrole dépend de la quantité d'unités de 3carboxymethylpyrrole-NHP présentes sur les électrodes, comme illustré par les courbes de la figure 3. Exemple 3 : Détection de métaux par des films polymères conducteurs modifiés. Complexation du film de Poly (3-carboxymethylpyrrole-NT A) avec le cuivre sur électrode. nu U. EN t /NTA/Cn++ H O L'électrode comportant le film de poly (3-carboxymethylpyrrole-NTA) a été électrochimiquement analysée en milieu aqueux, lavée avec de l'eau déionisée, séchée et elle est ensuite immergée dans une solution aqueuse de CuCI2 en présence de NaCI 0, 5 M, à température ambiante pendant 3 heures. L'électrode est ensuite rincée dans l'eau déionisée, séchée et analysée électrochimiquement dans une solution aqueuse contenant du NaCI 0, 5M. La disparition du signal électrochimique du Poly (3-carboxymethyl pyrroleNTA) et l'apparition d'un pic caractéristique de l'oxydation de Cu en Cu à- 0, 2 V-0, 35 V, qui est stable mais non réversible et électroactif en milieu aqueux, confirme la complexation du cuivre avec le Poly (3carboxymethylpyrrole-NTA) (figure 4). Pour étudier l'effet du NaCI 0, 5 M et de l'eau sur le film de Poly (3carboxymethylpyrrole-NT A) comme film de référence, une autre électrode a été préparée de Poly (3-carboxymethylpyrrole-NHP) ayant la même quantité de charge déposée puis ce film de Poly (3-carboxymethylpyrrole-NHP) a été modifié avec le NTA comme décrit ci-dessus. L'électrode obtenue a ensuite été immergée de nouveau dans une solution aqueuse contenant du NaCI 0, 5M, à température ambiante pendant 3 heures. Les analyses électrochimiques de ces électrodes sont représentées à la figure 4. L'analyse du cycle voitamétrique indique que le film de Poly (3carboxymethylpyrrole-NT A) perd son électroactivité en milieu aqueux par traitement avec du NaCI 0,5 M pendant le même intervalle de temps en raison de la nature hydrophobe du film alors que en complexant le cuivre, le signal du Poly (3-carboxymethylpyrrole-NTA) est non seulement modifié mais également son électroactivité est augmentée en milieu aqueux, le signal restant électrochimiquement stable et réversible. Exemple 4 : Effet de l'épaisseur du film polymère conducteur sur la réponse électrochimique du cuivre Le monomère Poly (3-carboxymethylpyrrole-NHP) est déposé par polymérisation sur deux électrodes avec deux quantités différentes de charges (Q=50mC et 150mC). Il est ensuite électrochimiquement comme décrit précédemment et les électrodes sont immergées dans une solution aqueuse contenant le NTA. Les électrodes sont ensuite immergées dans une solution aqueuse contenant la même concentration de CuCz et de NaCI 0,5 M pendant 3 heures à température ambiante, puis lavées avec de l'eau déionisée, séchée et analysée en milieu aqueux contenant du NaCI 0,5 M. La quantité du cuivre complexé avec le film de Poly (3- carboxymethylpyrrole-NT A) dépend de la quantité de NTA sur le film polymère, qui dépend de la quantité d'unités de monomères pyrrole fonctionnalisées qui ont été polymérisées sur l'électrodes de platine. En d'autres termes, cela signifie que la quantité de complexes de cuivre sur les films polymères dépend de l'épaisseur des films polymère. Ceci est représenté à la figure 5 dans laquelle on observe que deux électrodes d'épaisseurs différentes complexent des quantités différentes de cuivre. Exemples 5 : Effet de la concentration de cuivre sur la réponse électrochimique des films polymère. Cet effet est étudié sur quatre électrodes identiques contenant des films polymère Poly (3-carboxymethylpyrrole-NHP) constitués d'une même quantité de monomères et greffés avec les mêmes quantités de NTA. Trois électrodes identiques ont été immergées dans une solution aqueuse de CuCt2 contenant du NaCI 0, 5 M à différentes concentrations, respectivement de 2 x 10-3 M/L, 2 x 10-6 MIL et 2 x 10-7 M/L de cuivre et la quatrième électrode a été immergée dans une solution aqueuse contenant du NaCI 0,5 M et pas de cuivre, comme électrode de référence, pendant quatre heures à température ambiante. Les électrodes ont été lavées plusieurs fois avec de l'eau, séchées et ensuite analysées en milieu aqueux contenant NaCI 0,5 M. Les résultats sont représentés à la figure 6 qui montre l'effet de la concentration en Cu2+ sur la réponse électrochimique de Cu2+. Le tableau 1 ci-dessous résume l'effet de la concentration de cuivre sur la réponse électrochimique des films polymère. Tableau 1 E (mV) Cu2+ (M/L) 1 (pA) 1-Iref =AI AC 160, 2 0 15,81 0 0 160, 2 2. 10-7 32, 28 16, 47 2. 10-7 158,6 2.10-6 145,7 129,89 2.10-6 158, 6 2. 10-3 248, 1 232, 29 2. 10-3 A ! = variation du courant AC = variation de la concentration de cuivre L'analyse de ces voltamogrames montrent que la sensibilité de l'intensité du courant du signal est en rapport avec la complexation du cuivre sur les films de Poly (3-carboxymethylpyrrole-NTA). Le signal d'intensité du courant minimum est lisible pour une concentration en cuivre de jusqu'à 2. 10-7 M/L dans l'eau par film de Poly(3-carboxymethylpyrrole-NTA). La figure 6 montre que le signal électrochimique est stable et réversible. Exemple 6 : Réversibilité electrochimique des électrodes. Le schéma ci-dessous montre la complexation et la décomplexation du cuivre et du mercure avec le film Poly (3- carboxymethylpyrrole-NTA) sur l'électrode. 0 HO Holz HN /, NTA/Cu-HEDTA Pour confirmer la présence de Cu2+ sur le film polymère de Poly (3carboxymethylpyrrole-NTA) et pour vérifier s'il est possible ou non de remplacer le film Poly (3-carboxymethylpyrrole-NTA) par un film Poly (3- 1 carboxymethylpyrrole-EDTA) les électrodes comportant le film polymère de Poly (3-carboxymethylpyrrole-NT A) complexé avec CU2+ ont été immergées dans une solution à 0,1 M d'EDTA (acide ethylène diamine tétracétique) pendant 15 minutes. Les électrodes sont ensuite rincées avec de l'eau, séchées et analysées. L'analyse des voltamogrames initiaux du Poly (3carboxymethylpyrrole-NTA) montre que le signal électrochimique est réversible et stable. En répétant la même série de recomplexation du film polymère de Poly (3-carboxymethylpyrrole-NTA) avec le Cu+, on observe de nouveau la présence de Cu2+. Ceci confirme la complexation du méta ! bivatent Cu sur le film de Poly (3-carboxymethylpyrrole-NTA), comme montré à la figure 7. L'analyse de la figure 7 confirme la formation de complexes du Poly (3carboxymethylpyrrole-NTA) avec le cuivre et montre que le cuivre ne se dépose pas sur le film. La complexation et la décomplexation du cuivre sur le film de Poly (3-carboxymethylpyrrole-NTA) est réversible et stable dans le système. La même observation a été faite dans le cas de la complexation du Poly (Pyrrole-NTA) avec le mercure, et décomplexation avec l'EDTA. Exemple 7 : Complexation du mercure avec le film Poly (3- carboxymethylpyrrole-NTA) sur l'électrode. La complexation du mercure avec le film de Poly (3- carboxymethylpyrrole-NTA) est représenté sur le schéma ci-dessous. \ HO HO HN /. NTA/Hg++ i-f-IT i 1", N 0 AI I n rT Hg2+ I n /í P. ty (Py-NTA) P.) y (Py-NTA-Hg Après analyse en milieu aqueux, le film de Poly (3- carboxymethylpyrrole-NTA) a été a été lavé avec de l'eau déionisée, séché et l'électrode a été immergée dans une solution aqueuse saturée (eau déionisée) de HgCI2 contenant du NaCI 0,5 M, à température ambiante pendant 3 heures. L'électrode a ensuite été analysée dans une solution aqueuse qui contient du NaCI 0,5 M. La disparition du signal électrochimique du Poly (3carboxymethylpyrrole-NTA) et l'apparition d'un pic caractéristique de l'oxydation de Hg+ en Hg2+ à -0, 1 Vet + 0,02 V, stable, réversible et électroactif en milieu aqueux, confirme la complexation du mercure avec le Poly (3- carboxymethylpyrrole-NTA). Pour étudier l'effet du NaCI 0,5 M et de l'eau sur le film Poly (3-carboxymethylpyrrole-NT A), une autre électrode de Poly (3carboxymethylpyrrole-NHP) ayant la même quantité de charge de déposée sur le film, modifiée par le NTA, a été immergée dans la solution aqueuse contenant uniquement du NaCI 0,5 M, rincée avec de l'eau, séchée et analysée électrochimiquement. Les résultats sont présentés à la figure 9 et montrent la formation de complexes du Poly (3-carboxymethylpyrrole-NT A) avec le mercure par la modification du signal électrochimique, qui est réversible et stable en milieu aqueux. Exemple 8 : Effet de la concentration en mercure sur la réponse électrochimique des films polymère. Pour étudier l'effet de concentration du mercure sur les films polymère Poly (3-carboxymethylpyrrole-NTA), et les modifications électrochimiques, quatre électrodes identiques contenant des films polymère Poly (3-carboxymethylpyrrole-NHP) ayant la même quantité de monomères et greffés avec la même quantité de NTA ont été étudiées électrochimiquement. Trois électrodes sont immergées dans une solution aqueuse de HgCI2 0, 5 M à différentes concentrations en mercure, respectivement de 2 x 10-3 MIL, 2 x 10-6 MIL et 2 x 10-7 MIL de mercure contenant du NaCI et la quatrième électrodes a été immergée dans une solution aqueuse contenant uniquement du NaCI 0, 5 M. Le traitement a été effectué pendant trois heures à température ambiante. Les électrode sont ensuite lavées plusieurs fois à l'eau, séchées et ensuite analysées dans une solution aqueuse contenant du NaCI 0, 5M. Les résultats sont présentés dans le tableau 2 ci-dessous qui résume l'influence de la concentration en mercure. Tableau 2 - -- E (mV) Hg2+(M/L # ( A) # - #ref = # # # C 125. 6 0 06. 68 0 0 125. 2 2.10-7 19.31 12.63 2.10-7 126. 2 2. 10-6 52. 07 45. 39 2. 10-6 126.7 2.10-3 91.59 84.91 2.10-3 A ! = variation du courant AC = variation de la concentration du mercure Hg2+ L'analyse des voltamogrames montre que la sensibilité de l'intensité du courant du signal est en rapport avec la concentration du mercure complexé sur les films de Poly (3-carboxymethylpyrrole-NTA). L'intensité de courant minimale du signal lisible correspond à la concentration en mercure 2. 10-7 MIL dans l'eau par film de Poly (3-carboxymethylpyrrole-NTA). Exemple 9 : Sélectivité des électrodes. Le cuivre est caractérisé par des potentiels redox pour les transitions Cu11/Cu1 et Cu1/Cu0 Les métaux ont chacun leur potentiel spécifique d'oxydation. Les potentiels d'oxydation donnés par la littérature pour différents métaux sont résumés dans le tableau 3 ci-dessous. Tableau 3 Métal Eox (V) /SCE Fe3+/Fe2+ 0, 5018 CU2+/CU±0, 1102 Cu+/Cu+ 0,072 Co2+ ICo + 0, 0118 Mn2/Mn -1, 2972 Ni2 +/Ni-0, 4982 Zn2+/Zn -1, 031 Hg/Hg 0, 100 Ainsi, pour détecter électrochimiquement ces métaux il est possible de le faire en comparant la valeur standard de potentiel avec celle du pic d'oxydation observé lors de l'analyse électrochimique de l'électrode, après complextaion avec un cation métallique. Par exemple, pour le cuivre, le pic caractéristique d'oxydation pour Cu2+/Cu+ est-0, 1 V/SCE, tandis que pour le mercure pour Hg2+/Hg+ il est de 0,1 V/SCE par électrode de film Poly (3- carboxymethylpyrrole-NT A). Ceci confirme que ces électrodes peuvent être sélectives pour la détection de Cuou Hg. Exemple 10 : Limite de détection pour le cuivre et le mercure pour une électrode modifiée par des polymères conducteurs fonctionnalisés par des chélates. Pour déterminer la limite de détection pour le cuivre et le mercure, une analyse électrochimique d'une solution contenant la quantité minimale de cuivre et de mercure détectable par les électrodes de Poly (3- carboxymethylpyrrole-NT A) a été effectuée. La figure 10 met en évidence la réponse électrochimique pour le film Poly (3-carboxyméthylpyrrole-NT A) complexé avec le cuivre à une concentration en cuivre de 2. 10-7 M/L et la comparaison avec un voltamograme de référence d'une électrode de Poly (3- carboxymethylpyrrole-NT A) sans complexation avec le cuivre, qui met seulement en évidence l'effet de NaCI 0,5 M dans l'eau sur le film polymère. L'effet de la concentration en métaux bivalents sur la réponse électrochimique a permis de montrer que la sensibilité de ces électrodes est de l'ordre du 2uA/2. 10~7 MIL de Cu2+ en solution, ce qui correspond à 3. 10-8 uA/ML pour Cu2+ dans la solution aqueuse. En d'autres termes, la limite de détection pour CU2+ est de 4 PPB en solution aqueuse. Pour le mercure, la sensibilité des électrodes est de l'ordre de 0.3 pA/2. 10-7 MIL en solution, ce qui correspond à 1. 10-8 uA/ML de Hg2+ dans la solution aqueuse. La limite de détection pour Hg2+ est de l'ordre de 4 PPB en solution aqueuse. REVENDICATIONS 1. Complexe électroactif, caractérisé en ce qu'il comprend un polymère homopolymère ou copolymère électroactif d'au moins deux monomères, fonctionnalisé par un agent chélatant. 2. Complexe selon la revendication 1, caractérisé en ce que le polymère électroactif est choisi parmi le polypyrrol, le polyacétylène, la polyazine, le poly (p-phénylène), le poly (p-phénylène vinylène), le polypyrène, le polythiophène, le polyfuranne, le polysélénophène, la polypyridazine, le polycarbazole, la polyanilin. 3. Complexe selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'agent chélatant est choisi parmi l'acide iminodiacétique, l'acide nitrilotriacétique, l'acide éthylène diamine tétraacétique. 4. Sonde électroactive, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un polymère homopolymère ou copolymère électroactif d'au moins deux monomères fonctionnalisés par un agent chélatant. 5. Sonde selon la revendication 4, caractérisée en ce que le polymère électroactif est choisi parmi le polypyrrol, le polyacétylène, la polyazine, le poly (p-phénylène), le poly (p-phénylène vinylène), le polypyrène, le polythiophène, le polyfuranne, le polysélénophène, la polypyridazine, le polycarbazole, la polyanilin. 6. Sonde selon la revendication 4, caractérisée en ce que l'agent chélatant est choisi parmi l'acide iminodiacétique, l'acide nitrilotriacétique, l'acide éthylène diamine tétraacétique. 7. Procédé de préparation d'un polymère conducteur fonctionnalisé par un agent chélatant caractérisé en ce qu'il comprend les étapes suivantes : a) synthèse des monomères substitués par un groupe activé, par les méthodes classiques d'estérification, b) polymérisation et dépôt par coulométrie sous forme de films sur des électrodes, c) fonctionnalisation par l'agent chélatant par hydrolyse du groupe activé. 8. Procédé sélectif de détection, d'identification et de dosage d'un cation métallique divalent dans un échantillon susceptible de contenir une pluralité de cations métalliques caractérisé en ce que l'on met en oeuvre une sonde selon l'une quelconque des revendications 4 à 6, et en ce qu'on quantifie une différence de potentiel caractéristique du potentiel rédox du ou des cations présents dans l'échantillon. 9. Procédé caractérisé en ce que la détection et/ou le dosage dudit cation métallique est effectué par observation et/ou mesure d'une diférence de potentiel ou d'une variation du courant entre le polymère électroactif fonctionnalisé sans complexe metallique formé et le même polymère après chelation avec un cation métallique. 10. Electrode dont tout ou partie de la surface est revêtue d'une sonde telle que définie selon l'une quelconque des revendications 4 à 6.